LU86062A1 - 7-oxomitosanes substitues - Google Patents

Description

V. *

Domaine de l'invention.

r’ La présente invention concerne de nouveaux analogues de la mitomycine contenant un radical disul-? fure (classe 260f. sous-classe 325.24) et des procédés pour les préparer. Ces composés sont des analogues de la mitomycine A dont le radical 7-alcoxy porte un ' substituant organique comprenant un radical disulfure. La présente invention concerne aussi un procédé pour produire la mitomycine A et ses dérivés (classe 260, sous-classe 326.24). La mitomycine est un antibiotique d'utilité reconnue et les analogues 7-0-substitués du mitosane ont une utilité semblable.

La dénomination systématique de la mitomycine ;A suivant Chemical Abstracts, sur base de la révision récente £Shirhata et al., J. Am. Chem. Soc., 105, 7199 ~ (1983)7 est : £ laS-(lap,8/i,8aot,8b/i) J-9-£( (aminocarbonyl)oxy)mé-: thyl7”6,8a-diméthoxy-l,la,2,8,8a,8b-hexahydro-5-mé- thylarizino/" 2 ' , 3 ' ,4 7pyrrolo7 1,2-a 7indole-4,7-dione le système cyclique azirinopyrroloindole étant dès lors numéroté de la façon suivante s t X 8

6 lOr^V

I >-\8b N Π-1 4 \^^· 2 la

Chemical Abstracts

Le système cyclique ci-dessus portant différents des substituants caractéristiques des mitomycines est appelé mitosane suivant la nomenclature systématique courante dans la littérature relative aux mito- /

-·. CD.YM.F - 2 - SY-1740-A

mycines.

10 5 0 CH2OCONH2 7 1 5 ïi^TSnAa ch3^y^\ y o y«

Mitosane

Conformément à ce système, la mitomycine A est le 7,9a- .diméthoxymitosane et la mitomycine C est le 7-amino-9a- * méthoxymitosane. Lorsque les produits de l'invention 5 sont identifiés par le terme "mitosane" ou par la formule de structure, leur configuration stéréochimique r est celle de la mitomycine A ou C.

o ch2oconh2 Κ|ΪΓ%^

ΙΓ ^NH O

Mitomycine A R=Ri=OCH3 Mitomycine C R=NH2, Ri=OCH3

La mitomycine C est un antibiotique produit par fermentation actuellement commercialisé pour le traitement de l'adénocarcinome disséminé de l'estomac ou du pancréas dans des combinaisons éprouvées avec d'autres agents chimiothérapeutiques reconnus et pour le traitement palliatif lorsque d'autres thérapeutiques

—. CD.YM.F - 3 - SY-1740-A

v * ont échoué (Mutamycine ® Bristol Laboratories, „ Syracuse, New York 13221, Physicians' Desk Reference, 37ème édition, 1983, pages 747 et 748). La mitomycine C et sa production par fermentation font l'objet du brevet E.U.A. n® 3.660.578, 2 mai 1972, basé sur des ' demandes de brevets antérieures, notamment du 6 avril ( 1957 au Japon.

Les structures des mitomycines A, B et C et de la profiromycine ont été publiées pour la première fois par J.S. V7ebb et al. de la Société Lederle Laboratories Division American Cyanamid Company, J. Am. Chem. Soc., 84, 3185-3187 (1962). L'une des transformations chimiques effectuées pour cette étude de structure visant à ; établir la relation entre la mytomycine A et la mito- * . . . , Λ mycine C est la conversion du premier compose, le 7,9a- diméthoxymitosane, par réaction avec l'ammoniac en le second composé, le 7-amino-9a-méthoxymitosane. Le déplacement du radical 7-méthoxy de la mitomycine A s'est révélé être une réaction d'un intérêt considérable pour la préparation des dérivés antitumoraux de la mitomycine C. Récemment, les configurations stéréochi-miques aux positions 1, la^ 8a et 8b se sont révélées .être celles indiquées ci-dessus suivant la nomenclature de Chemical Abstracts £ Shirhata et al., J. Am. Chem. Soc., 105, 7199-7200 (1983)J. La littérature anté rieure fait référence à l'énantiomère.

Les articles et brevets ci-après traitent, entre autres, de la conversion de la mitomycine A en un dérivé de 7-(amino substitué)-mitomycine C ayant une activité antitumorale. Le but de la· présente recherche a été de préparer des dérivés plus actifs et, en particulier, moins toxiques que la mitomycine C :

Matsui et al., J. Antibiotics, XXI, 189-198 (1968);

Konishita et al., J. Med. Chem., 14, 103-109 CD.YM.F - 4 - SY-1740-A

f * (1971);

Iyengar et al., J. Med. Chem., 24, 975-981 (1981); > Iyengar,.Sami, Remers et Bradner, Abstracts o£

Papers, 183ème Annual Meeting of the American Chemical Society, Las Vegas, Nevada, mars 1982, Abstracts n° MEDI 72;

Cosulich et al., brevet E.U.A. ne 3.332.944, 25 juillet 1967;

Matsui et al., brevet E.U.A. n° 3.420.846, 7 janvier 1969;

Matsui et al., brevet E.U.A. ne 3.450.705, 17 juin 1969;

Matsui et al., brevet E.U.A. n° 3.514.452, 26 mai 1970;

Nakano et al., brevet E.U.A. n° 4.231.936, 4 novembre 1980; - Remers, brevet E.U.A. n° 4.268.676, 19 mai 1981.

Les demandes de brevets ci-après concernent la préparation de dérivés de 7-(amino substitué)-mitomycine dont le substituant comprend un , radical disulfure.

Kono et al., demande de brevet européen n° 116.208 (1984);

Vyas et al., demande de* brevet anglais n° 2.140.799 (1984).

Les 7-alcoxy-mitosanes apparentés par leurs structure à la mitomycine A sont décrits comme étant d'utiles antibiotiques qui manifestent de l'activité contre les tumeurs expérimentales chez les animaux dans un article de Urakawa et al., J. Antibiotics, 23, 804-809 (1980).

La mitomycine C est la mitomycine principale produite par fermentation et est la forme commer-

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cialisée. Les techniques courantes de conversion de la mitomycine C en mitomycine A exposent à divers inconvénients. L'hydrolyse de la mitomycine C en le 7-hydroxy-9a-méthox.ymitosane correspondant et la méthylation ultérieure de ce dernier font utiliser le diazo-méthane, qui est dangereux à manipuler à l'échelle industrielle, et le 7-hydroxy-intermédiaire, qui est fort instable £ Matsui et al., J. Antibiotics, XXI, 189-198 (1968) J. Pour essayer d'éviter ces inconvé nients, on a utilisé les 7-acyloxymitosanes (Kyowa Hakko Kogyo KK brevet japonais ne J5 6073-085, Farmdoc n° 56227 D/31). L'alcoolyse de la mitomycine A telle qu'elle est décrite par Urakawa et al., J. Antibiotics, 23, 804-809 (1980) est limitée à la préparation de certains 7-alcoxy-dérivés spécifiques par la disponibilité et la réactivité des alcools de départ.

v APERCU DE L'INVENTION.

La" présente invention concerne un groupe d'analogues de la mitomycine A portant un dithio-substituant organique dans le radical alcoxy à la position 7. Ces composés répondent à la formule générale suivante : ï ° CH2OCNH2 1 !Os4 ,

O

où r2 représente un radical organique, en l'occurrence le radical constitutif d'un thiol organique de formule R2SH, et Alk2 et Ri ont les significations indiquées ci-après. Ces composés peuvent aussi être représentés

- CD.YM.F - 6 - SY-1740—A

I.

* par les formules II et III.

B

o ch2ocnh2

R3-Alk- -SS-Alk0--Ovs/''*\^A II

1 2 j | yoc^ <:Η3"ΛχΐΤ^Ν\ 1>r1 0 \ 0 ° 5 C^oc^

R -SS-Alk,-Q ____\ III

Il Tk3 chîsv/^'Nk ^»-R1 OÙ A1^i représente un radical alcoylène en chaîne droite ou ramifiée de 1 à 6. atomes de carbone, lorsque K3 lui est uni par un atome de carbone de ce dernier et de 2 à 6 atomes de carbone lorsque R3 lui est uni par un atome de soufre, d'oxygène ou d'azote de ce dernier, et R3 et -SS- sont, dans ce cas, unis à des atomes de carbone différents, A11C2 représente un radical alcoylène en chaîne droite ou ramifiée de 2 à 6 atomes de carbone portant éventuellement un substituant A, où les atomes de soufre et d'oxygène qui lui sont liés et tout substituant A éventuel qui lui est lié par de l'oxygène, du soufre ou de l'azote sont unis à des atomes de carbone différents de ΑΠ<2, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux (C.l-6)-alcoyle, (C.l-6)-

J

__ · CD.YM.F - 7 - SY-1740-A

ί * alcanoyle, (C.l-6)-alcoxy, halogéno, (C.l-6)-alcoxycarbonyle, cyano, (C.l-6)-alcoylamino, (C.l-6)-dialcoylamino, (C.l-6)-alcanoylamino et (C.l-6)-alcoxycarbonyle,.

Allci et Alk2 peuvent contenir une double liaison, R1 représente un atome d'hydrogène ou radical alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, benzoyle ou benzoyle substitué dont le substituant est un radical alcoxy inférieur, halogéno, amino ou nitro, R 3 représente un radical halogéno, carboxyle, alcanoyloxy de 1 à 7 atomes de carbone, hydroxyle dont l'atome d'oxygène est uni à Alk^ comptant 3 à 6 atomes ; de carbone, alcoylamino ou dialcoylamino de 1 à 12 ato-* 1 mes de carbone, N-alcoxyalcoylamino de 2 à 7 atomes de carbone, alcanoylamino de 1 à 7 atcwnes de carbone, benzoylamino ou benzoylamino B-substitué, naphtoylamino ou naphtoylamino B-substitué, phénylamino ou phényl-amino B-substitué, cycloalcoyle ou cycloalcoyle B-substitué chacun de 3 à 8 chaînons en cycle, cycloalcé-nyle ou cycloalcényle B-substitué chacun de 5 à 8 chaînons en cycle, phênyle ou phényle B-substitué, ^aphtyle .ou naphtyle B-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéro-alicycliques à 1 ou 2 cycles, de 3 à 8 chaînons dans chaque cycle et de 1 ou 2 hétêroatomes choisis entre l'oxygène, l’azote et le soufre dans chaque cycle, pyridylainino ou thiazolylamino, alcoxy ou alcoylthio chacun de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxycarbonyle ou alcoylaminocarbonyle chacun de 2 à 7 atomes de carbone, aminocarbonyle, phénoxycarbonyle ou phénoxycarbonyle B-substitué, phénoxy ou phénoxy B-substitué, naphtoxy ou naphtoxy B-substitué, alcoxycarbonylamino de 2 à 6 atomes de carbone, uréido (-NHCONH2)' N” alcoyluréylène (-NHCONHalcoyle) de 2 à 7 atomes de

— . CD.YM.F - 8 - SY-1740-A

I l carbone, N3-haloalcoyluréylène de 3 à 7 atomes de carbone, N3-haloalcoyl-N3-nitrosouréylène de 3 à 7 atomes de carbone, dialcoylaminocarbonyle de 3 à 13 atomes de carbone, dialcoylaminoalcoxy de 4 à 13 atomes de carbone, alcanoylaminoalcoxy de 3 à 7 atomes de carbone et hydroxyalcoylamino ou N,N-dihydroxyalcoylami.no chacun de 2 â 8 atomes de carbone, où le substituant B est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halogéno, amino, carboxyle, hydroxyle et nitro, et R4 représente un radical alcoyle de 1 à 12 atomes de carbone, alcényle ou alcynyle chacun de 3 • à 12 atomes de carbone, cycloalcoyle ou cycloalcoyle B-substitué chacun de 3 à 8 chaînons en cycle, cyclo-alcényle ou cycloalcênyle B-substitué chacun de 5 à 8 chaînons en cycle, phényle ou phényle B-substitué, naphtyle ou naphtyle B-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques à 1 ou 2 cycles de 3 â 8 chaînons dans chaque cycle et de 1 ou 2 hétêroatomes choisis entre l'oxygène, l'azote et le soufre dans chaque cycle, avec la restriction que le radical hétérocyclique est lié par un atome de carbone qui est uni à au moins un autre atome de carbone (c'est-à-dire que l’atome de carbone uni à -SS- ne peut lui-même être uni à deux autres hétêroatomes ), où le substituant B est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halogéno, amino, carboxyle, hydroxyle et nitro, et R4 et l'atome de “ soufre adjacent constituent conjointement un radical S- cystéinyle, lequel radical S-cystéinyle peut être : estérifié, salifié ou combiné dans un peptide non toxique et non allergisant, qui peuvent exister sous forme de sels non toxiques r

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3 Λ pharmaceutiquement acceptables.

Les composés de la présente invention sont des inhibiteurs des tumeurs expérimentales chez les animaux. En particulier, les composés obtenus dans les exemples 17, 20 et 21-34 sont nouveaux. Ils sont utilisés comme la mitomycine C. Les doses administrées i sont ajustées en proportion de leur toxicité rapportée à celle de la mitomycine C. Lorsque le nouveau composé est moins toxique, la dose administrée est plus élevée.

Suivant un autre aspect, la présente invention a pour objet un nouveau procédé de production de mitosanes des formules II et III. Ce nouveau procédé comprend la réaction d'un mitosane de formule IV : 11 0

o II

jj CH2OCNïï2 OCH_

I I 3 IV

N \-RX 0 \ avec un triazène de formule .y ou VI :

Ar-N=N-NH-Alk2“SS-Alk1-R3 Ar-N=N-NH-Alk2“SS-R4

V .VI

où Rl, r3, R4, Alk^ et Alk2 sont tels que définis ci-dessus et Ar représente le reste organique d'une amine aromatique diazotable.

Suivant une variante, la présente invention a pour objet un autre procédé de production de mitosanes des formules II et III. Ce procédé comprend la réaction d'un thiol de formule Vil ou VIII :

A

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\

R3Alk!SH R4SH

VII . VIII

avec un dérivé de mitosane de formule IB :

ÖX ÇH duH

ES-Alk--C> Vv.__I * h if \ OCH- I I Ib *1

Les mitosanes comprenant un radical disulfure qui répondent à la formule Ib sont préparés par le procédé au triazène ci-dessus. Plus spécifiquement, le mitosane de formule Ib où Alk2 représente un radical éthylène et R1 représente un atome d’hydrogène et décrit dans l’exemple 20.

Suivant un autre aspect, la présente invention a pour objet un procédé perfectionné de préparation des composés de formule IX : 0 n 11 0 CH2OCNH2 ,0CHa

I IX

N lî—R5

T

où R5 représente un atome d’hydrogène ou radical (C.1-6)-alcoyle, et

R6 représente un radical (C.1-12)-alcoyle ou __ CD.YM.F - 11 - ’ SY-1740-A

, 1 (C.l-12)-alcoyle substitué, (C.3-12)-cycloalcoyle ou (C.3-12)-cycloalcoyle substitué dont l'atome de carbone qui est lié à l'atome d'oxygène en position 7 du mitosane porte 1 ou 2 atomes d'hydrogène et les substi- ? tuants sont choisis parmi les radicaux halogéno, (C.l-6)-alcoxy, (C.l-6)-alcanoyle, (C.6-14)-aroyle, cyano, trihalométhyle, amino, (C. 1-6 )-monoalcoylamino, (C.2- 12)-dialcoylamino, (C.6-12)-aryle, (C.6-12)-aryloxy, (C.l-6)-alcanoyloxy, (C.7-14)-aroyloxy, hétérocyclo à 1 ou 2 cycles et de 5 à 12 atomes en cycle comprenant jusqu'à 4 hétéroatomes choisis entre l'azote, l’oxygène et le soufre, et où chacun de ces radicaux alcoxy, alcanoyle, aroyle, aryle, aryloxy, alcanoyloxy, aroyl-• oxy et hétérocyclo porte éventuellement 1 ou 2 substituants choisis parmi les radicaux halogéno, (C.l-6)-alcoxy, (C.l-6)-alcanoyle, cyano, trihalométhyle, amino, (C.1-6)-alcoylamino et (C.2-12)-dialcoylamino.

Beaucoup des composés de formule IX sont des composés connus exerçant une activité inhibitrice contre les tumeurs expérimentales chez les animaux in vivo. Un certain nombre de nouveaux composés de formule IX ont aussi été préparés suivant ce procédé et «r> t font l'objet de l’invention. En particulier, les composés obtenus dans les èxemples 14, 15, 16 et 19 sont nouveaux et manifestent aussi une activité antitumorale à l'égard des tumeurs expérimentales chez les » animaux. Ces composés font l'objet de l'invention. Ils sont utilisés comme la mitomycine C. Les doses administrées sont ajustées en proportion de leur toxicité rapportée à celle de la mitomycine C. Lorsque le nouveau composé est moins toxique, la dose administrée est plus élevée.

; Le nouveau procédé de préparation des composés de formule IX comprend la réaction d'un mitosane de formule X ï

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s 0 «

1 Λ II

0 CH2OCNH2 HOv ^\^OCH3 N ^-R5 avec un triazène de formule XI :

Ar-N=N-NH-R6 XI

où R5 et R6 sont tels que définis ci-dessus et Ar ; représente le reste organique d'une amine aromatique * diazotable.

Par radicaux "alcoyle inférieur", "alcoxy inférieur" et "alcanoyle inférieur", on entend aux fins de l'invention (sauf indication contraire du contexte) des radicaux alcoyle, alcoxy ou alcanoyle en chaîne droite ou ramifiée de 1 à 6 atomes de carbone, comme méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, iso-butyle, t-butyle, amyle, hexyle, etc. De préférence, .ces radicaux comptent 1 à 4 atomes de carbone et plus avantageusement 1 ou 2 atomes de carbone. Sauf indication contraire dans le cas particulier, par "halogène" on entend aux fins de l'invention le chlore, le fluor, le brome et l'iode. Par "sel non toxique pharmaceuti-quement acceptable" on entend les sels des composés des formules I et II avec un acide ou une base non toxique pharmaceutiquement acceptable quelconque. De tels acides sont bien connus et sont notamment 1'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide sulfamique, l'acide phosphorigue, l'acide nitrique, l'acide maléique, l'acide fumarique, l'acide succinique, l'acide oxalique, l'acide benzoïque,

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t •ί i l'acide méthanesulfonique, l'acide tartrique, l'acide citrique, l'acide camphosulionique, l'acide lévulini-que, etc. De telles bases sont bien connues et donnent, par exemple, des. sels avec les métaux non toxiques, comme le sodium, le potassium, le calcium et le magnésium, le sel d'ammonium et les sels avec des amines non toxiques, comme les trialcoylamines, la procaïne, la dibenzylamine, la pyridine, la N-méthylmorpholine, la N-méthylpipéridine, etc. Les sels sont préparés suivant des procédés classiques.

DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION.

L'invention a pour objet un nouveau procédé de préparation de composés de formule IX qui comprend la réaction d'un mitosane de formule X avec un triazène de , / * formule XI, comme illustre au schéma 1.

Schéma 1 0 11 0 CH2OCNH2 OCH3 I ] + Ar“N*NH-R6 ^Î-R5 XI , »

IX

où r5 et R6 sont tels que définis ci-dessus et Ar représente le reste organique d'une amine aromatique diazotable.

Les 3-aryltriazènes 1-substitués de formule XI et plus spécifiquement les 1-alcoyl—3-aryltriazènes

I . CD.YM.F - 14 - SY-1740-A

j.

* ft constituent une classe de réactants d'utilité connue pour la réaction avec les acides carboxyliques conduisant aux esters alcoyliques inférieurs correspondants.

- Le l-méthyl-3-(-4-méthylphényl) triazène peut être préparé suivant les procédés généraux décrits par E.H. White et al., dans Org. Syn., 48, 102-105 (1968), de même que comme décrit dans le mode opératoire 1. Toutefois, ce mode opératoire ne donne de bons résultats qu'avec les amines hydrosolubles et un second mode opératoire, décrit par E.H. VThite et al., Tetrahedron Letters, n° 21, 761 (1961) de même qu'au mode opéra toire 2 ci-après, convient mieux pour préparer les triazènes d'amines non solubles dans l'eau.

Le l-méthyl-3-(4-méthylphényl)triazène préparé de la façon ci-dessus a été utilisé antérieurement pour , préparer des esters méthyliques d'acides carboxyliques tels que l'acide 2,4-dinitrobenzoîque /"E.H. White et al., Org. Syn., 48., 102-105 (1968)_7 et des acides céphalosporaniques conduisant au Δ ^-composé souhaité sans isomérisation en le Δ 2-isomère £Mangia, Tetrahedron Letters, n" 52, pages 5219-20 (1978)J. Ce réactant a été utilisé au s si., pour produire un dérivé de 3- méthoxycéphalosporine par réaction avec le 3-hydroxy- 4- céphème-4-carboxylate correspondant en solution benzénique à la température de reflux (Wiederkeher et al., brevet E.U.A. n° 4.069.324 - 17.janvier 1978).

D'autres l-(alcoyl inférieur)-3-aryltriazènes .de formule XI peuvent être préparés de même par réaction d'autres alcoylamines inférieures avec des sels d1aryldiazonium de manière semblable. Toute arylamine de 6 à 12 atomes de carbone qui forme aisément un sel de diazonium convient comme source de la partie aryle du triazène 1,3-disubstitué. Divers triazènes produits de la sorte et utilisés aux fins de l'invention sont, par exemple :

I CD.YM.F - 15 - SY-1740-A

le l-(n-butyl)-3-(4-méthyl)triazène; - le l-(l-méthyléthyl)-3-(4-méthylphényl)triazène; le 1- ( 4-méthylphény1 ) - 3-/" 2- ( 4-morpholinyl ) éthyl J-v triazène; le l-(4-méthylphényl)-3-/” 2- ( 2-pyridyl ) éthyl J-triazène; le 1-(2-benzylthioéthyl)-3-(4-méthylphény1)triazène; le 1-(4-chlorophényl)-3-(2-méthoxyéthyl)triazène; le 1-(4-chlorophényl)-3-(1,3-dioxol-2-ylméthyl)-triazène; le 1-(4-chlorophényl)-3-(tétrahydrofuranne-2-ylmé-thyl)triazène.

D'autres triazènes déjà décrits sont des •réactants utiles pour préparer suivant l'invention des mitosanes 7-(alcoxy)-substitués de formule IX. Ceux décrits par T.A. Daniels et al., Can. J. Chem., 55, 3751-3754 (1977) en sont des exemples.

N=N-NH-CH2-Y

a X = H, Y = CN b X = N02, Y = CN c X = C02Me, Y = CN d X = Ac, Y = CN e X = N02, Y - C02Et f X = C02Me, Y = C02Et g X = C02Me, Y = COPh h X = N02, Y = -CH(PCH3)2 D'autres triazènes de départ de formule XI convenant aux fins de l’invention sont, par exemple, les suivants : le 1- (n-butyl ) -3- (o<-naphtyl ) triazène, le l-(n-hexyl)-3-phényltriazène, le l-éthyl-3-(2,4-diméthylphényl)triazène, le 1-(1-mêthyléthyl)-3-(4-méthoxyphényl)triazène.

! s i j

1 _ CD.Yfl.F - 16 - SY-1740-A

*

Pour la préparation de là mitomycine A, la Demanderesse préfère utiliser le 3-méthyl-l-(4-méthyl-phényl)triazène comme réactif de méthylation. On prend * de préférence au -moins deux proportions moléculaires du triazène par proportion moléculaire de 7-hydroxy-9a-méthoxymitosane et on exécute la réaction de préférence dans un liquide organique qui est un solvant du 7-hydroxy-9a-méthoxymitosane de départ. Les solvants préférés sont les alcanols inférieurs, les esters alcoyliques inférieurs d'acides alcanoïques inférieurs, | les éthers dialcoyliques inférieurs, les éthers alipha- j tiques cycliques et les hydrocarbures aliphatiques inférieurs polyhalogénés. Ces solvants comptent jusqu'à ! 6 atomes de carbone, mais ceux bouillant au-dessous de 100°C sont préférés. Des solvants préférés spécifiques sont le chlorure de méthylène, le méthanol, l'éther | diéthylique, l'acétate d'éthyle et leurs mélanges. La | réaction peut être exécutée à la température de reflux du mélange de réaction ou jusqu’à environ 60cC. Aux températures plus élevées, le mitosane tend à se décomposer, ce qui fait baisser le rendement. Il est préféré d'exécuter la réaction à la température ambiante ou à une température inférieure (par exemple < de 0 à 25°C.

La chromatographie en couche mince est un moyen commode d'évaluation de l'avancement de la réaction. La mitomycine A est de nuance pourpre foncé et peut être discernée aisément du composé de départ et des sous-produits. Dans le système chlorure de méthylène ïmêthanol (90/10), la mitomycine A a un Rf de 0,36. La chromatographie sur alumine neutre convient pour purifier le produit.

Les conditions et précautions de réaction ci-dessus sont généralement applicables à la préparation d'autres 7-R6o-mitosanes de formule IX par le procédé o '

· CD.YM.F - 17 - SY-1740-A

de l'invention.

2- Le nouveau procédé de l'invention au moyen de 3-aryltriazènes 1-substitués permet aussi de préparer des composés de .formule II ou III par réaction d'un mitosane de formule IV avec un triazène de formule V ou VI comme illustré au schéma 2.

Schéma 2 O Alk2-SS-Alki-R3

'9 ch2ocnh2 HN-N=N-AR V

^OCH- I 1 + ou 3 Π \ X* Alk2-SS-R4

HN-N=N-AR VI IV

II OU.JII

où R^, R3, R4, Alkx et Alk2 sont tels que définis ci- dessus et Ar représente le reste organique d'une amine aromatique diazotable.

Les aryltriazènes de formule V ou VI peuvent être préparés d'une façon analogue à celle indiquée ci-dessus pour la préparation des aryltriazènes de formule XI, sauf que les alcoylamines sont remplacées par les aminodisulfures de formule XII : R2-SS-Alk2NH2 XI1 représentés aussi par les formules XIII et XIV : o

CD.Yîl.F - 18 - SY-1740-A

3-Alk1-SS-Alk2NH2 et R4-SS-Alk2"NH2

XIII · XIV

Les aminodisulfures des formules XIII et XIV sont des composés connus qui peuvent être préparés suivant différents procédés. Par exemple, ils peuvent être obtenus par réaction du thiol approprié RsAlk^SH ou R4SH avec un sel de Bunte de formule :

NH2Alk2SS03Na XV

;ou avec un thiocarbonate de sulfényle de formule : * 0

II

NH2Alk2SSCOCH3 XVI

Klayman et al., J. Org. Chem., 29, 3737-3738 (1964) ont préparé les composés suivants par le procédé au sel de Bunte : le disulfure de 2-aminoéthylç, et de n-butyle, le disulfure de 2-aminoéthyle et de n-hexyle, le disulfure de 2-aminoéthyle et de n-octyle, le disulfure de 2-aminoéthyle et de n-décyle, le disulfure de 2-aminoéthyle et de pfrényle, le disulfure de 2-aminoéthyle et de benzyle.

Le mêthanol s'est révélé être le solvant préféré pour la réaction du sel de Bunte avec le thiol. Les températures de réaction de 0 à -10 °C se sont révélées préférables avec ce solvant. Des températures plus élevées sont nécessaires avec d'autres solvants. L'inconvénient principal de ce mode opératoire est la formation des disulfures symétriques apparaissant comme sous-produits, probablement par dismutation du disul-

CD.YM.P - 19 - SY-1740-A

» fure mixte recherché.

= Les disulfures mixtes de départ des for mules XIII et XIV sont de préférence préparés par s réaction du thiol approprié avec un thiocarbonate de sulfényle de formule XVI. C'est le procédé de S.J. Brois et al., J. Am. Chem. Soc., 92, 7629-7631 (1970). Normalement, suivant ce mode opératoire, le thiol est ajouté à une solution méthanolique du thiocarbonate d'aminoalcoylsulfényle de formule XVI et la réaction est conduite à une température de 0 à 25 °C. Suivant le thiol particulier, la réaction peut être virtuellement instantanée ou durer quelques heures. L'avancement de la réaction peut être suivi par détection du thiol inchangé dans le récipient de réaction.

*

Au cas où la réaction est lente, une quantité catalytique de triéthylamine peut être ajoutée comme accélérateur.

Les l-(disulfure substitué)-3-aryltriazènes de formule V ou VI sont obtenus par réaction des ami no-disulfures de formule XII avec des sels d*aryldiazonium comme décrit ci-dessus à propos de la préparation des aryltriazènes de formule XL» Toute arylaminei de 6 à 12 atomes de carbone qui forme aisément un sel de diazonium convient comme source de la partie aryle du triazène-1,3-disubstitué. Des disulfure-triazènes préparés de la sorte et utilisés suivant l'invention sont, par exemple î le l-£ 2-(2-acétamidoéthyldithiol)éthyl_7-3-(4-méthyl-phényl)triazène, le l-£2-(3-nitro-2-pyridylthio)éthyl J-3-(4-méthyl-phényl)triazène.

D'autres triazènes de départ de formule V ou VI convenant aux fins de l'invention sont, par exemple, les suivants : le 1-jT 2-(3-nitro-2-pyridylthio)éthyl J7“3-(4-chloro- :>

^ CD.YM.F - 20 - SY-1740-A

î % phényl)triazène, le l-£2-(3-nitro-2-pyridyldithio)propyl_7-3-(4-mé-thylphényl)triazène, le l-/~2-(2-pyridyldithio)éthyl .7-3-(4-méthy lphényl )-triazène, le 2-(phényldithio)éthyl J-3- (4-méthylphényl)- triazène, le 1-C2-(butyldithio)éthyl J7“3-(4-méthylphényl)-triazène, le l-/~ 2-(4-mêthoxyphényldithio)éthyl_7-3-(4-méthyl-phényl)triazène; le 1-C 2- (4-nitrophényldithio) éthyl _7~3- ( 4-méthy lphényl) triazène, • le 1-^2-/- ( 2-benzoylaminoéthyl)dithio_7éthylj·-3-(4-méthylphényl)triazène, ' le l-/~2-(4-chloro-2-naphtyldithio)éthyl J7-3-(4-mé-thylphényl)triazène, le 1-Z" 2-(cÿclopropylméthyldithio)éthyl _7-3-(4-méthyl-phényl)triazène, le 1-^2-/”(2-phénoxyéthyl)dithio_7éthyl^-3-(4-méthyl-phényl)triazène.

Suivant une forme de réalisation préférée, la présente invention a pour objet un autre procédé de préparation des disulfure-mitosanes de formule la : P ch2ocnh2 R-SS-CH,CH,0 _____\ T Ia

IhlH

où r2 représente un radical organique, en l’occurrence le radical constitutif d'un thiol de formule r2sh,

J

,_, CD.YM.F - 21 - SY-1740-A

représenté en variante par R^Alkj ou R^, où r3, r4 et Alki sont tels que définis ci-dessus.

Pour la préparation des disulfure-mitosanes de formule la, il est préféré de soumettre le 9a-méthoxy- 7-£’2-(3-nitro-2-pyridyldithio)éthoxyJ7nii't-osane <3e formule XVII à un échange de radical thiol avec un thiol organique approprié de formule R^sH comme illustré au schéma de réaction 3. Le potentiel chimique favorisant la formation des disulfures de formule la est la stabilité du sous-produit, à savoir la 3-nitro-2-mercaptopyridine, qui n'existe que sous la forme de la thione XVIII.

Schéma 3 fi --^°2 0 CH2OCNH2

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2 X T2^2 R -SS-CH-CH-0 T Tl VX3 3 T \^y

la XVIII

En variante, pour préparer des mitosanes de formule II ou III, où Alk2 représente un radical autre

—- CD.YM.F - 22 - SY-1740-A

qu'éthylène, par exemple triméthylène ou propylène, on utilise le triazène approprié de formule V ou VI dans le mode opératoire du schéma 2 afin d'obtenir les disulfure-mitosanes de formule Ib ·.

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/ΓΛ ,v A 9¾0°0¾ (/ ')-SS-Alk,-0_X\^-\ Ib \=/ Τι ιΓ/ζ* CH3'\/^-N ^j-r1 où Alk2 et R1 sont tels que définis ci-dessus.

Deux modes opératoires généraux de synthèse sont décrits pour préparer les mitosanes tant lipo-philes qu’hydrophiles de formule la. Le mode opératoire général A est appliqué à la préparation des disulfures lipophiles ou modérément solubles de formule la et le mode opératoire général B est appliqué pour les disulfures hydrosolubles de formule la qui sont de préférence isolés à l’état de sels de sodium ou sous forme zwitterionique. De préférence, on utilise au moins un équivalent du mercaptan R^SH par équivalent du mitosane de formule XVII et on exécute la réaction en présence d’environ un équivalent de base par équivalent de mercaptan R2sH. Les bases préférées sont les amines tertiaires, par exemple la triéthylamine, la N- méthylmorpholine, la N-méthylpipéridine, la pyridine, la 2,6-lutidine, et les bases inorganiques, par exemple le carbonate de sodium, le carbonate de potassium, le bicarbonate de potassium, etc. Des solvants inertes convenant pour la réaction des composés de départ de formule XVII et r2sH sont les alcanols inférieurs, les

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esters alcoyliques inférieurs d'acides alcanoïques inférieurs, les cétones aliphatiques inférieures, les éthers aliphatiques cycliques, les hydrocarbures aliphatiques inférieurs polyhalogénés et l'eau. Les solvants organiques comptent jusqu'à 8 atomes de carbone, mais ceux bouillant au-dessous de 100eC sont préférés. Les solvants préférés spécifiques sont le chlorure de méthylène, le méthanol, l'acétone, l'eau et leurs mélanges. La réaction peut être exécutée à la température de reflux du mélange de réaction ou jusqu'à environ 60°C. Il est préféré de mener la réaction à la température ambiante ou à une température plus basse, par exemple de 0 à 25°C.

Les conditions et précautions de réaction ci-dessus sont généralement applicables à la préparation d'autres disulfure-mitosanes de formule la et Ib suivant le mode opératoire général du schéma 3.

On trouvera ci-après une énumération de thiols représentatifs de formule R^ÀlkiSH ou R^SH qui peuvent être convertis par réaction avec le sel de Bunte XV ou le thiocarbonate de sulfênyle XVI en les intermédiaires de formules XIil et XIV, qui à leur tour peuvent être ·*» t convertis en les produits de 1 ' invention de la façon décrite. Dans la forme de réalisation préférée, les thiols représentatifs peuvent être utilisés pour la réaction avec les mitosanes de formule la ou Ib pour v donner les produits conformes à l’invention. Toutefois, les seules limitations à la méthodologie de la présente invention tiennent à l'utilisation de thiols contenant des alcoylamines primaires terminales qui peuvent conduire à un mélange de produits et à l'utilisation de thiols hétêroaromatiques qui peuvent ne pas réagir avec les composés des formules la ou Ib.

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CD.YM.F - 24 - SY-1740-A

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CD.YM.F - 26 - SY-1740-A

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CD.YH.F - 27 - SY-1740-A

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CD.YM.F - 31 - SY-1740-A

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CD.YK.F - * SY-1740-A

t L'utilité des composés des formules I et IX dans les procédés de traitement antinéoplasiques de l'invention est démontrée par les résultats d'expériences de débrouillage in vivo au cours desquelles les composés sont administrés en différentes doses à des souris chez lesquelles la leucémie P-388 ou le mélanome B16 ont été induits.

Les composés conformes à l'invention ont, croit-on, une activité antibactérienne contre les micro-organismes Gram-positif et Gram-négatif d'une manière analogue à celle observée sur les mitomycines naturelles et sont donc potentiellement utiles comme agents thérapeutiques pour le traitement des infections • par les bactéries chez l'être humain et les animaux. Activité contre la leucemie P-388 chez la souris.

Le tableau I contient les résultats d'expériences de laboratoire sur des souris CDFj porteuses, par implantation intrapéritonéale, d'un inoculum tumoral de 106 cellules d'ascite de la leucémie P-388 de la souris et qui ont reçu différentes doses d'un composé expérimental de formule I ou II ou de mitomycine C. Les composés ont été administrés par injec- *" l .tion intrapéritonéale. Des groupes de six souris ont été pris pour chaque dose et les animaux ont reçu une dose unique du composé le jour de l’inoculation. Un groupe de dix souris de contrôle recevant de la solution physiologique salée a été inclus dans chaque série expérimentale. Les souris recevant la mitomycine C ont constitué le contrôle positif. On a choisi une durée d'expérience de 30 jours, avec détermination du temps de survie moyen en jours pour chaque groupe de souris et du nombre de survivants au terme des 30 jours. Les souris ont été pesées avant le traitement et à nouveau au sixième jour. Le changement de poids a été considéré comme mesure de la toxicité du médicament. On a utilisé

CD.YM.F- - 34 - SY-1740-A

des souris d'un poids de 10 g et une perte de poids atteignant à peu près 2 g n'a pas été envisagée comme excessive. Les résultats ont été exprimés en % T/c, c'est-à-dire 100 fois le rapport du temps de survie moyen dans le groupe traité au temps de survie moyen dans le groupe de contrôle recevant la solution physiologique salée. Les animaux de contrôle recevant la solution physiologique salée sont habituellement morts dans les neuf jours. L*"effet maximum" indiqué au tableau est exprimé en % T/C et la dose exerçant cet effet est indiquée. Les valeurs entre parenthèses sont celles relevées sur la mitomycine C comme contrôle positif au cours de la même expérience. Il est donc possible d’estimer l'activité relative des composés de l'invention en comparaison de la mitomycine C. 5 On considère qu'un effet minimum exprimé par % T/C est de 125. La dose exerçant l'effet minimum mentionnée au tableau ci-après est celle conduisant à un % T/C d'à peu près 125. Les deux valeurs indiquées dans chaque cas dans la colonne intitulée "changement moyen de poids" sont respectivement le changement moyen de poids par souris à la dose efficace maximale à la dose

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CD.YM.F - 35 - SY-1740-A

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GD.YM.F - 38 - SY-1740-A

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Activité contre le mélanome B16

Le tableau II comprend les résultats d'expériences antitumorales sur le mélanome B16 chez la souris. On a utilisé des souris BDFi ayant reçu l’implant tumoral en inoculation sous-cutanée. La durée de l'expérience a été de 60 jours. On a pris des groupes de dix souris pour chaque dose et on a déterminé le temps de survie moyen dans chaque groupe. Les animaux de contrôle inoculés comme les animaux expérimentaux et recevant une injection du véhicule sans médicament ont eu un temps de survie moyen de 24 jours. Le temps de survie comparé à celui des contrôles (% Τ/c) permet d'évaluer l'efficacité et on a déterminé la dose - d'effet maximal et la dose d'effet minimal pour chaque composé expérimental. La dose d'effet minimal est définie comme étant celle conduisant à une valeur de 125 pour % T/C. Pour chaque dose, les animaux ont reçu le composé expérimental aux jours 1, 5 et 9 par voie intraveineuse.

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En raison de l'activité antitumorale observée sur les tumeurs expérimentales chez les animaux, l'invention a aussi pour objet l'administration des composés conformes à l'invention pour inhiber les tumeurs chez les mammifères. A cet effet, ils sont administrés par voie systémique au mammifère porteur d'une tumeur en une dose antitumorale efficace sensiblement non toxique.

Les composés de l’invention se prêtent principalement à une administration par injection sensiblement comme la mitomycine C et dans certaines des mêmes indications. Des doses un peu plus fortes ou plus faibles peuvent être administrées suivant la sensi-bilité particulière de la tumeur. Les composés sont aisément présentés sous la forme de compositions pharmaceutiques sèches contenant des diluants, tampons, stabilisants, solubilisants et constituants conférant de bonnes propriétés pharmaceutiques. Ces compositions sont alors diluées avec un liquide injectable immédiatement avant d'être administrées. Des liquides injectables appropriés sont notamment l'eau, la solution physiologique salée isotonique, etc. ,

Description de formes de réalisation spéciques

Dans les modes opératoires et exemples ci-après, toutes les températures sont en degrés Celsius et les points de fusion ne sont *pas corrigés. Les spectres de résonance magnétique nucléaire du proton (1h RMN) sont ceux relevés sur un spectromètre Varian XL100, Joel FX-90Q ou Bruker Ï7M 360 dans la pyridine-d5 ou le D2O, comme il est indiqué. Lorsque la pyridine-d^ est le solvant, la résonance de la pyridine à 0= 8,57 sert d'étalon interne, tandis que lorsque 1*20 est le solvant, le TSP sert d'étalon interne. Les déplacements chimiques sont explicités en unités et les constantes de couplage en Hertz. Les multiplicités z>

CD.YM.F - 41 - SY-1740-A

sont exprimées sous la forme s = singulet, â = doublet, t = triplet , q = quadruplet, m = multiplet, si = singulet large, dd = doublet de doublet et dt = doublet de triplet. Les spectres infrarouges sont relevés sur un spectromâtre Beckman modèle 4240 ou Nicolet 5DX FT—IR et sont explicités en centimètres réciproques. Les spectres ultraviolets (UV) sont relevés sur un spectro-mètre Cary modèle 290 ou Hewlett Packard 8450A avec détecteur à diodes multiples. La chromatographie en couche mince (CCM) est effectuée sur des plaques de gel de silice GF Analtech de 0,25 mm. La chromatographie ' éclair est exécutée sur de 1'alumine neutre de Woelm (qualité DDC) ou du gel de silice de Woelm (32-63J*-m) avec les solvants indiqués. Toutes les évaporations, de solvants sont effectuées sous pression réduite au-dessous de 40°C.

, Les l-alcoyl-3-aryltriazènes sont des réac-tants d'utilité reconnue pour former les esters alcooy-liques inférieurs des acides carboxyliques. Le 1-mêthyl-3-(4-méthylphényl)triazène peut être préparé comme décrit ci-dessous.

Mode opératoire 1 ” / B.H. White et al., Org. Syn., 48, 102-195 (1968).

l-Méthyl-3-p-tolyltriazène.

On introduit de la p-toluidine (50,2 g, 0,47 mole) dans un ballon de 2 litres muni d'une ampoule à robinet de 200 ml et d'un agitateur efficace et on immerge le ballon dans un bain de glace et de sel à environ -10°. On introduit dans l'ampoule une solution de 46,8 g (0,55 mole) de nitrite de potassium dans ! 150 ml d'eau et, sous agitation, on ajoute un mélange J de 250 g de glace pilée et de 140 ml d'acide chlorhy- i - i drique concentré à la p-toluidine. On ajoute lentement la solution de nitrite de potassium sous agitation ininterrompue .en 1 à 2 heures jusqu'à ce que le test à —- CD. YM. F _ An o\r inAn » .

1'amidon-iodure de potassium soit positif (note 1) et on agite le mélange pendant encore une heure pour assurer la réaction de toute la toluidine.

On amène, ensuite la solution de chlorure de p-toluènediazonium à pH 6,8-7,2 à 0° au moyen de carbonate de sodium aqueux concentré froid, la solution virant alors du rouge à l'orangé, tandis qu'une petite quantité de substance rouge se dépose. On transvase la solution neutre froide dans une ampoule à robinet et on 1'ajoute lentement à un mélange vivement agité de 150 g de carbonate de sodium, de 300 ml de méthylamine aqueuse à 30-35% (note 2) et de 100 g de glace pilée dans un ballon de 3 litres. On maintient le mélange de ! réaction à environ -10 e pendant l'addition qui néces- * site une durée d'environ 45 minutes (note 3). On extrait la solution avec 3 aliquotes de 1.000 ml d'éther. On sèche les extraits éthérés sur du sulfate de sodium anhydre et on les évapore â 1'évaporateur rotatif à la température ambiante pour obtenir 65 g de l-méthyl-3-p-tolyltriazène brut (note 4). On introduit ce dernier dans un appareil de sublimation refroidi par eau et on fait sublimer le., triazène à 50° (^L mm Hg)

pour obtenir 43,3 g (0,29 mole ou 62%) d'un sublimé cristallin jaune, P.F. 77-80° (note 5). On peut recristalliser le sublimé dans l'hexane pour obtenir le triazène en aiguilles blanches, P..F. 80,5-81,5°. De façon plus commode, on le dissout dans la quantité minimale d'éther et on dilue la solution avec 2 volumes d'hexane, puis on la refroidit à 0° pour obtenir des plaquettes plates d'un produit à reflet légèrement jaune, P.F. 79-81°. La production de triazène pur est de 33-37 g (47-53%) (note 6). s NOTES

1. Les divers tests avec le papier à 1'amidon-iodure de potassium doivent être effectués 1 à T4

CD.YM.F - 43 - SY-1740-A

« 2 minutes après la fin de l'addition du nitrite de potassium.

2. La méthylamine aqueuse à 40% convient aussi.

3. La réaction est achevée lorsqu'une goutte de solution ne donne plus de coloration rouge avec une solution de -naphtol dans le carbonate de sodium aqueux.

4. L'impureté principale est le 1,5-di-p-to-lyl-3-méthyl-l,4-pentazadiazène (P.F. 148°). Celui-ci peut être séparé par cristallisation fractionnée, mais il est plus commode de sublimer le triazène hors du mélange de réaction.

; 5. Le sublimé contient une trace de 1,3-di-p- tolyltriazène que la chromatographie en couche mince met en évidence. La recristallisation donne le 1-méthyl-3-p-tolyltriazène pur.

6. Ce mode opératoire ne donne de bons résul-. tats qu'avec les amines hydrosolubes. Le mode opératoire 2 ci-après convient mieux pour préparer les triazènes d'amines insolubles dans l'eau.

Mode opératoire 2 E.H. White et al., Tetrahederon Letters, ne 21, p. 761 (1961).

l-n-Butyl-3-p-chlorophényltriazène

On ajoute lentement une solution d'hexafluoro-phosphate de p-chlorobenzènediazonium (recristallisé .dans 1'acétone-méthanol) (2,87 g, 10,1 millimoles) dans du diméthylformamide (exempt de diméthylamine) a un mélange agité de n-butylamine (0,73 g, 10,0 millimoles), de carbonate de sodium en poudre (15 g) et de diméthylformamide (30 ml) qu'on maintient à -5°. On ' peut utiliser la solution du sel de diazonium à la température ambiante, mais on obtient d'habitude un produit plus pur lorsqu'on prépare la solution de sel :>

CD.YM.F - 44 - SY-1740-A

» * de diazonium et qu'on la débite au moyen d'une ampoule à décantation refroidie à environ -50°. On réchauffe le mélange jusqu'à 0° et on l'agite jusqu'à obtenir un test négatif avec le 2-naphtol (quelques minutes suffisent habituellement). On ajoute de l'éther et on filtre le mélange, puis on lave le filtrat soigneusement à l'eau et on le sèche. (Le triazène peut être isolé à ce moment et recristallisé dans le pentane à basse température).

Mode opératoire 3 7-Hydroxy-9a-méthoxymitosane

On dissout de la mitomycine C (2,2 g, 6,6 millimoles) dans 140 ml de NaOH méthanolique 0,1N (50%) et •on agite le mélange de réaction à la température ambiante pendant 30 heures. On ajuste la solution ensuite à environ pH 4,0 avec du HCl IN et on l'extrait à l'acétate d'éthyle (4 x 500 ml). On sèche le mélange des extraits dans 1 ' acétate d ' éthyle (Na2S04.) et on l’évapore sous pression réduite à environ 30-35° pour obtenir un résidu solide donnant, après dissolution dans l'éther et addition d'un excès d'hexane, un précipité pourpre. On recueille le précipité et on le t sèche à l'air pour obtenir, sous la forme d'une fine poudre pourpre, le composé annoncé au titre (1,4 g, 63%).

!h RMN (pyridine-d5, 6 ·. 2,05 (s,3H)., 2,14 (sl,lH), 2,74 (si,1H), 3,13 (d,lH), 3,24 (s,3H), 3,56 (d,lH), 4,00 (dd,lH), 4,37 (d,lH), 5,05 (t,lH), 5,40 (dd,lH), 5,90 (si,2H).

Mode opératoire 4 Mitomycine A

On dissout 100 mg (0,30 millimole) de 7-hydro-- xy-9a-méthoxymitosane et 100 mg (0,67 millimole) de 3- méthy 1-1-p-tolyltriazène dans 2 ml de chlorure de méthylène et 10 ml d'éther diéthylique. Après chauffage

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au reflux modéré pendant 6 heures, on agite la solution , à la température ambiante pendant 18 heures. La CCM

(chlorure de méthylène:méthanol (90:10)) révèle l'apparition d'une tache pourpre foncée à Rf=0,36 et d'une trace d'impureté à Rf=0,41. On concentre le mélange de réaction à siccité et on le chromatographie sur de l'alumine neutre de Woelm en prenant du chlorure de méthylène et du chlorure de méthylènerméthanol (30:1) comme solvants d'élution. On rassemble les fractions contenant le composant à Rf=0,36 et on les concentre à siccité. Par précipitation du résidu sec à partir de chlorure de méthylène et d'hexané, on obtient, sous la forme d'une fine poudre amorphe pourpre, le composé -annoncé au titre (25 mg, 24%), P.F. 161e.

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Analyse pour C^gHig^Og

Calculé : C, 54,96; H, 5,44; N, 12,02%

Trouvé : C, 53,96; H, 5,37; N, 11,99% IR(KBr), \?max, cm"1; 3400, 3300, 2950, 1700, 1630, 1575, 1200, 1060.

XH RMN (pyridine-d5, 6 ); 1,82 (s,3H), 2,74 (dd,lH), 3,12 (d,lH), 3,24"(s,3H), 3,54 (dd,lH), 3,96 (dd,lH), 4,02 (s,3H), 4,22 (d,lH), 4,84 (sl,2H), 5,02, (t,lH), 5,38 (dd,lH).

On porte le rendement du mode opératoire 4 à 63% en prenant du chlorure de méthylène comme solvant de réaction à la température ambiante avec une durée de réaction de 24 heures.

Mode opératoire 5

On introduit dans un ballon à fond rond de 250 ml à col unique, du Na2C03 solide, une solution aqueuse à 35% d'amine (même quantité qu'au mode opératoire 1) et de la glace et on agite la suspension à -5° (bain de sel et de glace). On ajoute goutte à goutte à cette suspension, une suspension froide d’hexafluoro-phosphate de p-chlorobenzènediazonium (Aldrich Chemical

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Co.) dans de la glace, de l'eau et du Na2CC>3 (solution . à environ pH 7 ). Au terme de 1 ' addition, on extrait le mélange de réaction à l'éther diéthylique. On soumet le mélange des extraits dans 1'éther diéthylique à l'extraction en retour avec de l'eau, on le sèche (Na2S04) et on le concentre. On purifie le résidu jaunâtre solide par chromatographie sur une colonne d'alumine de Woelm en prenant comme solvant d'élution de l'hexane:chlorure de méthylène (1:1) (observation par spectre RMN).

EXEMPLES 1-10

On prépare les triazènes 1-7 du tableau III ci-après suivant le mode opératoire 1 décrit ci-dessus •qui concerne le triazène de l'exemple 1. On purifie les triazènes par chromatographie sur une colonne d'alumine de Woelm.

On prépare les triazènes 8-10 du tableau III suivant le mode opératoire 5 ci-dessus.

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•ψ EXEMPLE 11.- 1~Ε 2-(3-Nitro-2-pyridyldithio)éthyl J7~3~(4-méthyl-phényl)triazene

On prépare une solution de chlorure de 4-mé-thylphênyldiazonium à partir de p-toluidine comme décrit dans le mode opératoire 1 et on l'ajuste à pH 6/8-7,2 à 0°, comme décrit dans ce mode opératoire. On prépare de cette façon 45 ml de solution qui contiennent 21,15 millimoles du sel de diazonium et qu’on introduit dans une ampoule à robinet adaptée à un ballon à fond rond de 250 ml à 3 cols contenant 5/34 g (20/0 millimoles) de 2-(3-nitro-2-pyridyldithio)-éthylamine, 7 g de carbonate de sodium et 150 ml de • dioxanne qu'on a introduits dans cet ordre dans le Λ ballon. On ajoute au contenu du ballon 6 ml d'une solution aqueuse saturée de carbonate de sodium et 10 g de glace. On refroidit le ballon au bain de glace et on en agite mécaniquement le contenu. On ajoute ensuite la solution du sel de diazonium goutte à goutte en 1 heure au moyen de l'ampoule à robinet. Au terme de l’addition, on laisse le mélange de réaction se réchauffer jusqu'à la température ambiante, puis on l'entrait à trois reprises avec 400 ml d'éther. Par séchage et évaporation des extraits, on obtient le produit recherché qu'on purifie par chromatographie sur une colonne d'alumine d'un diamètre de 25 mm et*d'une longueur de 250 mm en utilisant de l'hexane: chlorure de méthylène (4;1), de l'hexane: chlorure de méthylène (3:2), de 1'hexane:chlorure de méthylène (1:4) et enfin du chlorure de méthylène contenant 1% d'éthanol pour le développement et l'élution de la colonne. On combine les fractions appropriées (identifiées par CCM) et on les évapore pour recueillir 2,5 g du composé annoncé au titre.

CD.YM.F - 50 - SY-1740-A

* 9 EXEMPLES 12-19.-

Mode opératoire général de préparation des 7-alcoxy-9a-méthoxymitosanes (12-19)

On ajoute une solution du triazène (2,4 équivalents) dans du chlorure de méthylène:méthanol (4:1) à une solution de 7-hydroxy-9a-méthoxymitosane (préparé suivant le mode opératoire 3) dans du chlorure de méthylènesméthanol (4:1). On agite le mélange de réaction à la température ambiante et on surveille 1'avancement de la réaction par chromatographie en couche mince (10% de méthanol dans du chlorure de méthylène). Le 7-alcoxy-9a-méthoxymitosane for/né apparaît sous la forme d'une tache pourpre foncé à la i CCM. On chromatographie le mélange de réaction sur de 1'alumine de Uoelm quand la réaction apparaît achevée d'après la CCM et on recueille le 7-alcoxy-9a-méthoxy-mitosane sous la forme d'un solide amorphe. Les produits obtenus sont identifiés par le numéro des exemples 12 à 19 au tableau IV.

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i f * EXEMPLE 20.- 9a-Méthoxy-7-/ 2-(3-nitro-2-pyridyldithio)éthoxy /-xnitosane (20)

On introduit 580 mg (1,73 millimole) de 7-hy-droxy-9a-méthoxymitosane dans un ballon à fond rond et on opère la dissolution dans 60 ml de chlorure de méthylène. On ajoute à peu près 2,5 g (5,7 millimoles) du triazène de l’exemple 11 à la solution contenue dans le ballon et on agite le mélange à 5° pendant 14 heures, puis à la température ambiante pendant 8 heures. On surveille l'avancement de la réaction par CCM sur silice avec du chlorure de méthylène:méthanol (9:1). On conserve le mélange de réaction à la tempé- rature ambiante encore 26 heures, puis on achève ,les opérations par chromatographie sur une colonne d’alumine d'un diamètre de 8,5 mm et d'une longueur de 305 mm. Pour le développement et l'élution, on utilise successivement comme solvants, chacun en un volume de 200 ml, du chlorure de méthylène, 0,5% de méthanol dans du chlorure de méthylène, 1,0% de méthanol dans le chlorure de méthylène, 1,5% de méthylène dans du chlorure de méthylène, 2% dè méthanol dans du«chlorure de méthylène et 4% de méthanol dans du chlorure de méthylène. On combine les fractions appropriées et on les évapore pour recueillir 470 mg de composé annoncé au titre.

Analyse pour C22H23N5O8S2 (avec correction pour 0,5 mole % de CH2CI2)

Calculé : C, 45,65; H, 4,09, N, 11,82%

Trouvé : C, 45,74; H, 4,14; N, 11,61% IR (KBr), max, cm-lj 3440-3200, 3060, 2930, 1720, 1570, 1510, 1395, 1335, 1210, 1055.

iH RMN (pyridine-d5, <5 ): 1,81 (s,3H), 2,00 (sl,lH), 2,61 (si,1H), 2,98 (sl,lH), 3,08 (s,3H), 3,20 (m,2H), 3,39 (d,1H), 3,83 (dd,lH), 4,07 (d,lH), 4,59-4,89 . ^ t -----^ m.VM P ce: _ pvr n *7 Λ r._7\ < * (m,3H), 5,21 (dd,lH), 7,16 (dd,lH), 8,31 (dd,lH), 8,71 (dd,1H).

En adaptant les modes opératoires des exem-; pies 11 et 20 pour d'autres U -(3-nitro-2-pyridyldi- thio)alcoylamines comptant 2 à 6 atomes de carbone dans le radical alcoyle, on peut préparer les dérivés de mitosane de la formule suivante : n fî N O CH2OCNH2 (ί <CR2>n'°

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n = 2-6 R1 = H, ou (C.1-6)-alcoyle.

EXEMPLES 21-34.-

On prépare les 7-alcoxydithio-9a-méthoxymito-sanes 21-34 du tableau V suivant le mode opératoire général A ou B ci-après, comme il est indiqué au tableau V. Les propriétés physiques des mitosanes 21-34 sont détaillées au tableau VI ci-après.

Mode opératoire A

Sous atmosphère d'argon, on ajoute sous agitation à une solution désoxygénée du mitosane de l'exemple 20 (<v0,l millimole) dans de l'acétone (3- 5 ml) de la triéthylamine (ru 1,1 équivalent), puis goutte à goutte ou peu à peu un mercaptana (1 équivalent) dans de l'acétone (1-2 ml). Dans la plupart des casb, on surveille l'avancement de la réaction par chromatographie en couche mince sur gel de silice (10% de méthanol dans le chlorure de méthylène). L'achèvement de la réaction se traduit par la disparition de la tache correspondant au composé de départ et l'appa-/ o " CD.YM.e - aa _ cv_i72in_a * < a rition de celle correspondant au produit. A ce moment, on concentre le mélange de réaction sous pression réduite (α>30β) et on chromatographie le résidu sur une colonne d'alumine neutre de Woelm (6 mm x 254 mm) garnie en dispersion, au moyen de 2-5% de méthanol dans le chlorure dé méthylène. Ce mode opératoire sépare le mitosane recherché de la pyridylthione qui est le sous-produit qui reste dans la colonne. On soumet le produit ainsi élué avec 2-5% de méthanol dans du chlorure de méthylène à une purification soigneuse complémentaire I par chromatographie éclair sur du gel de silice avec 5- \ ; 7% de méthanol dans le chlorure de méthylène comme solvant d'élution. On isole la bande principale corres- ! pondant au produit et on y caractérise le 7-alcoxydi-* ^ thio-9a-méthoxymitosane amorphe.

a) Lorsque le mercaptan de départ est impur, il faut j plus d’un équivalent du thiol.

b) Lorsque le mitosane de l'exemple 20 et le produit ont des Rf très proches en CCM, on surveille la réaction par chromatographie liquide à haute pression (HPLC) sur une colonne (yu-Bondapak-C^g).

Mode opératoire B

On ajoute à une solution du mitosane de l'exemple 20 (hJ0,l millimole) dans 2 à 5% d'acétonea dans le méthanol (10 ml) une solution aqueuse saturée de NaHC03^ (<V 6 gouttes), puis le jnercaptan (1 équivalent) dans du méthanolc (1 ml). On surveille l'avancement de la réaction par CCM (gel de silice, 10% de méthanol dans le chlorure de méthylène). Au terme de la réaction, on dilue le mélange de réaction avec de l'eau (15 ml), puis on le concentre à environ 10 ml sous pression réduite à environ 30°. On chromatographie la solution résultante sur une colonne C-18 à inversion de phase par élution à gradients progressifs (100%â d'eau ; jusqu'à 80% de méthanol dans l'eau). On recueille le | ! ^ *

CD.YM.F - 57 - SY-1740-A

* * produit élué sous la forme d'une bande rouge majeure et on le concentre pour obtenir le 7-alcoxydithio-9a-mé-thoxymitosane qui est un solide amorphe. Si une purification plus poussée est nécessaire, on répète la chromatographie ci-dessus.

a) Le chlorure de méthylène convient aussi, mais l'acétone est préférée.

b) Lorsque le mercaptan est la L-cystéine, on n'utilise pas cette base.

c) On utilise de l'eau si le thiol de départ est hydrosoluble.

d) L'élution à l'eau sépare la pyridylthione jaune qui est le sous-produit hors du produit, lequel reste 1 dans la colonne.

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CD.YM.F - 58 - SY-1740-A

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TABLEAU V

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Claims (39)

1.- Composé de formule II ou III :

0 CH2OCNH2 R3-Alk.-SS-Alk-KK/^^A jf ]T 0 O I =¾0^ R -SS-Alk,-Û ___\ Il y/!“3 111 U’-R1

2,- Composé suivant la revendication 1, où Alk2 représente un radical éthylène et R1 représente un atome d'hydrogène.

3.- Composé suivant la revendication 2 de formule II, où Alkj représente un radical éthylène et r3 représente un radical acétylamino.

3 T \J* où Alki représente un radical alcoylène en chaîne droite ou ramifiée de 1 à 6 atomes de carbone lorsque R 3 lui est uni par un atome de carbone de ce dernier et de 2 à 6 atomes de carbone lorsque R»3 lui est uni par un atome de soufre, d'oxygène ou d'azote de ce dernier, et R3 et -SS- sont, dans ce cas, unis â des atomes de carbone différents, Alk2 représente un radical alcoylène en chaîne droite ou ramifiée de 2 à 6 atomes de carbone portant éventuellement un substituant A, où les atomes de soufre et d'oxygène qui lui sont liés et tout substituant A éventuel qui lui est lié par de l'oxygène, du soufre ou de l'azote sont unis à des atomes de carbone i / ; - CD.YM.F - 6S - SY-1740-A Ιτ * différents de Alk2, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux (C.1-6)-alcoyle, (C.l-6)-alcanoyle, (C.l-6)-alcoxy, halogéno, (C.l-6)-alcoxycarbonyle,· cyano, (C.1-6)-âlcoylamino, (C.l-6)-dialcoylamino, (C.l-6)-alcanoylamino et (C.l-6)-alcoxycarbonyle, Alkj et Alk2 peuvent contenir une double liaison, R1 représente un atome d'hydrogène ou radical alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, benzoyle ou benzoyle substitué dont le substituant est un radical alcoxy inférieur, halogéno, amino ou nitro, R3 représente un radical halogéno, carboxyle, ^ alcanoyloxy de 1 à 7 atomes de carbone, hydroxyle dont 11 atome d1 oxygène est uni à Alk^ comptant 3 à 6 atomes de carbone, alcoylamino ou dialcoylamino de 1 à 12 atomes de carbone, N-alcoxyalcoylamino de 2 à 7 atomes de carbone, alcanoylamino de 1 .à 7 atomes de carbone, benzoylamino ou benzoylamino B-substitué, naphtoylamino ou naphtoylamino B-substitué, phénylamino ou phényl-amino B-substitué, cycloalcoyle ou cycloalcoyle B-substitué chacun de 3 à 8’chaînons en cycle» cyclo-alcényle ou cycloalcényle B-substitué chacun de 5 à 8 chaînons en cycle, phényle ou phényle B-substitué, naphtyle ou naphtyle B-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques à 1 ou 2 cycles de 3 à 8 chaînons dans chaque cycle et de 1 ou 2 hétéroatomes choisis entre l’oxygène, l’azote et le soufre dans chaque cycle, pyridylamino ou thiazolylamino, alcoxy ou alcoylthio chacun de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy-carbonyle ou alcoylaminocarbonyle chacun de 2 à 7 atomes de carbone, aminocarbonyle, phénoxycarbonyle ou phénoxycarbonyle B-substitué, phénoxy ou phénoxy B-sübstitué, naphtoxy ou naphtoxy B-substitué, alcoxycar- ——— CD.YM.P — 7Π - CV-1 7ΛΠ-1 Il bonylamino de 2 à 6 atomes de carbone, uréido (-NHCONH2)» N-alcoyluréylène (-NHCONHalcoyle) de 2 à 7 atomes de carbone, N3-haloalcoyluréylène de 3 â 7 atomes de carbone, N^-haloalcoyl-N^-nitrosouréylène s.. de 3 à 7 atomes de carbone, dialcoylaminocarbonyle de 3 à 13 atomes de carbone, dialcoylaminoalcoxy de 4 à 13 atomes de carbone, alcanoylaminoalcoxy de 3 à 7 atomes de carbone et hydroxyalcoylami.no ou N,N- dihydroxyalcoylamino chacun de 2 à 8 atomes de carbone, où le substituant B est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halogéno, amino, carboxyle, hydroxyle et nitro, et R4 représente un radical alcoyle de 1^ à 12 atomes de carbone, alcényle ou alcynyle chacun de 3 à 12 atomes de carbone, cycloalcoyle ou cycloalcoyle B-substitué chacun de 3 à 8 chaînons en cycle, cyclo-alcényle ou cycloalcényle B-substitué chacun de 5 à 8 chaînons en cycle, phényle ou phényle B-substitué, naphtyle ou naphtyle B-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hêtéroalicycliques à 1 ou *2 cycles de 3 à 8 chaînons dans chaque cycle et de 1 ou 2 hétéroatomes choisis entre 1’oxygène, l'azote et le soufre dans chaque cycle, avec la restriction que le radical hétérocyclique est lié par un atome de carbone qui est uni à au moins un autre . atome de carbone, où le substituant B est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halogéno, amino, carboxyle, hydroxyle et nitro, et r4 et l'atome de soufre adjacent constituent conjointement un radical S-cystéinyle, lequel radical S-cystéinyle peut être estérifié, salifié ou combiné dans un peptide non toxique et non allergisant, ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable de „ fin.VM P _ -71 _ CV_1 1Λ Ice composé.

4.- Composé suivant la revendication 2 de formule II, où Alk^ représente un radical éthylène et r3 représente un radical acétyloxy.

5- Composé suivant la revendicaton 2 de formule II, où Alkj représente un radical méthylène et représente un radical 1,2-dihydroxyéthyle.

6,- Composé suivant la revendication 2 de * formule II, où Alk^ représente un radical éthylène et r3 représente un radical carboxyle, ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable de ce composé.

7,- Composé suivant la revendication 2 de formule II, où Alk^ représente un radical méthylène et R3 représente un radical 1-carboxyaminométhyle, ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable de ce composé. " /

8.- Composé suivant la revendication 2 de formule II, où Alkl représente un radical méthylène et représente un radical l-méthylimidazol-2-yle.

9.- Composé suivant la revendication 2 de formule II, où Alk^ représente un radical éthylène et R3 représente un radical diméthylamino.

10,- Composé suivant la revendication 2 de formule III, où R^ représente un radical phényle.

11.- Composé suivant la revendication 2 de formule III, où R^ représente un radical 4- nitrophényle.

12.- Composé suivant la revendication 2 de formule III, où R^ représente un radical 4- ~ CD.YM.F - 72 - SY-1740-A < ► méthoxyphényle. t ,

13. Compose suivant la revendication 2 de formule III, où R4 représente un radical 4- aminophényle.

14. Composé suivant la revendication 2 de formule III, où R4 représente un radical 2- carboxyphényle, ou un sel non toxique pharmaceutique-ment acceptable de ce composé.

15. Composé suivant la revendication 2 de formule III, où R4 représente un radical 4-nitro-3-carboxyphényle, ou un sel non toxique pharmaceutique-ment acceptable de ce composé.

16. Composé suivant la revendication 2 de formule III, où R4 représente un radical 4-pyridyle.

17. Composé suivant la revendication 2, de formule : nü2 0 ho2cchch2ch2conh O ch2ocnh2 CHCH-SSCH^CH^O J ho2cch2nhco | J “>λτ O5"· . b ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable de ce composé.

18. Composé suivant la revendication 1 de formule Ib : - / ^ f :) CD.YM.F - 73 - SY-1740-A 4 * N02 Û VL A ÇH °Lh \=/ j il/-!3 CH3 'j^-R1 où R1 et Alk2 sont tels que définis dans la revendication 1.

19. Composé suivant la revendication 2 de formule : flO- fi /-( 2 0 CH2OCNH2 \ ss1CH2CH2ä°%/^Ssvy^\v >DCH. XVII vu N j j

20. Procédé pour inhiber la croissance d’une tumeur chez un mammifère, caractérisé en ce qu’il comprend une administration systémique d’un composé de formule I, en dose sensiblement non toxique antitumorale efficace, à un mammifère porteur d’une tumeur.

21. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu’elle comprend un composé suivant la revendication 1 en association avec un solvant, diluant, adju- N. vant ou excipient pharmaceutiquement acceptable.

22. Procédé de préparation d’un composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu’il comprend la réaction d’au moins un équivalent d’un CD.YM.F - 74 - SY-1740-Ά * * triazène de formule V ou VI : ( ÿ . Ar-N=N-NH-Alk2-SS-Alki-R3 Ar-N=N-NH-Alk2~SS-R4 V VI avec un équivalent d'un mitosane de formule IV : 0 O 11 ~ CH2OCNH2 H hiT^VC3 IV CH3 J>-Rl où R1, R3, R4, Alki et Alk2 sont tels que définis dans la revendication 1 et Ar représente le reste organique d'une amine aromatique diazotable, dans des conditions de réaction dans un solvant organique inerte à une température d'environ 0 à 60 °C jusqu'à obtention d'une quantité appréciable du produit de formule II ou III.

23. Procédé suivant la revendication 22, caractérisé en ce que le triazène de formule VI est le 1-Γ2-(3-nitro-2-pyridyldithio)éthyl J/3-(4-métîiy lphé-nyl)triazène.

24, - Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu’il comprend la réaction d'au moins un équivalent d'un thiol de formule : R3AlkiSH ou R4SH avec un équivalent d'un mitosane de formule Ib : / 1 CD.YM.F - 75 - SY-1740-À · s NO, η ^ ί/-0 ^ j ΓΚ: «νγ^ î>-r1 où R1, r3# r4# Alki et Alk2 sont tels que définis dans la revendication 1 et éventuellement en présence d'au moins un équivalent d'une base dans un solvant inerte à -une température d'environ à à 60°C jusqu'à obtention d'une quantité appréciable du produit de formule II ou III.

" 25.- Procédé suivant la revendication 24, caractérisé en ce que Alk2 représente un radical éthylène et Rl représente un atome d'hydrogène.

26. Procédé suivant la revendication 24 ou 25, caractérisé en ce qu’on utilise un équivalent de base pour la réaction. - ,

27. Procédé suivant la revendication 24 ou 25, caractérisé en ce qu’on utilise comme milieu de réaction un alcanol inférieur, un ester alcoylique inférieur d'acide alcanoïque inférieur, une cétone aliphatique inférieure, un éther aliphatique cyclique ou un hydrocarbure aliphatique inférieur polyhalogéné comptant jusqu'à 8 atomes de carbone ou de l'eau.

28. Procédé de préparation d'un composé de formule IX : ; / J CD - YM * F - 76 - QV-1 7ΛΠ-Ζ. Iw + * P ο ch2ocnh2 I IX N J^î-R5 0 où R5 représente un atome d'hydrogène ou radical (C.l-6)-alcoyle, et ! R6 représente un radical (C.1-12)-alcoyle^ou (C.1-12)-alcoyle substitué, (C.3-12)-cycloalcoyle ou (C.3-12)-cycloalcoyle substitué dont l'atome de carbone -r qui est lié à l'atome d'oxygène en position 7 du mitosane porte 1 ou 2 atomes d'hydrogène et les substituants sont choisis parmi les radicaux halogéno, (C.l-6)-alcoxy, (C.1-6)-alcanoyle, (C.6-14)-aroyle, cyano, * trihalométhyle, amino, (C.l-6)-monoalcoylamino, (C.2-12)-dialcoylamino, (C.6-12)—aryle, (C.6-12)-^ryloxy, {C.l-6)-alcanoyloxy, (C.7-14)-aroyloxy, hétérocyclo à 1 ou 2 cycles et de 5 à 12 atomes en cycle comprenant jusqu'à 4 hétéroatomes choisis entre l'azote, l'oxygène et le soufre, et où chacun de ces radicaux alcoxy, alcanoyle, aroyle, aryle, aryloxy, alcanoyloxy, aroyl-oxy et hétérocyclo porte éventuellement 1 ou 2 sübsti-• tuants choisis parmi les radicaux halogéno, (C.l-6)-alcoxy, (C.1-6)-alcanoyle, cyano, trihalométhyle, - amino, (C.l-6)-alcoylamino et (C.2-12)-dialcoylamino, ? caractérisé en ce qu'il comprend la réaction d ' un mitosane de formule X s CD.YM.P - 77 - RV-l 7ΔΠ-1 i Ο II * Ο CH2OCNH2 OCH, ΧΪΧ^ 5 avec un triazène de formule XI : Ar-N=N-NH-R6 XI où r5 et r6 sont tels que définis ci-dessus et Ar * représente le reste organique d'une amine aromatique diazotable.

« 29. Procédé suivant la revendication 28, caractérisé en ce que le triazène de formule XI est le 3-méthyl-l-(4-méthylphényl ) triazène.

30. Procédé suivant la revendication 27 ou 28, caractérisé en ce qu'on utilise au moins deux proportions moléculaires du··* triazène, par rapport au mitosane de formule X.

31. -Procédé suivant la revendication 27 ou 28, caractérisé en ce qu'on utilise comme milieu de réaction un liquide organique inerte qui* est un solvant du mitosane de formule X.

32. Procédé suivant la revendication 27 ou 28, caractérisé en ce qu'on utilise comme milieu de réaction un alcanol inférieur, un ester alcoylique inférieur d'acide alcanoïque inférieur, un éther î dialcoylique inférieur, un hydrocarbure aliphatique inférieur polyhalogéné ou un éther aliphatique cyclique comptant jusqu'à 8 atomes de carbone.

33. Procédé suivant la revendication 27 ou / CD.YM.F - 78 - RY-17/Ln-A 4 · %* 28, caractérisé en ce qu'on utilise comme milieu de réaction le chlorure de méthylène, le méthanol, l'éther diéthylique, l'acétate d'éthyle ou un mélange de deux ou plusieurs d'entre eux.

34. Procédé suivant la revendication 27 ou 28, caractérisé en ce que la température de réaction est de 0 à 60 °C.

35. Procédé suivant la revendication 27 ou 28, caractérisé en ce que la température de réaction est de 0 à 25°C.

36. Composé suivant la revendication 28, où r6 représente un radical 2-(benzylthio)éthyle et représente un atome d'hydrogène.

37. Composé suivant la revendication 28, ^où représente un radical 2-(2-pyridyl)éthyle et représente un atome d'hydrogène.

38. Composé suivant la revendication 28, où R® représente un radical 2-( 4-morpholinyl )éthyle et R^ représente un atome d'hydrogène.

39.- Composé suivant la revendication 28, où R6 représente un radical (1,3-dioxolane-2-yl)méthyle et R5 représente un atome d'hydrogène. , ' \ I i ; V V V. \ h - & ’j CD.YM.P - 79 - SY-1740-A