BE899380A - Aminodisulfures. - Google Patents

Abstract

L'invention concerne des analogues de la mitomycine contenant un radical disulfure de formule (I). Ce sont des dérivés de la mitomycine C dont le radical 7-amino porte un substituant organique comprenant un radical disulfure. Ces composés sont des inhibiteurs des tumeurs expérimentales chez les animaux. Des composés préférés sont le 7-(2-(phényldithio)éthyl-amino)-9a-méthoxymitosane, le 7-(2-(2-hydroxyéthyl-dithio)éthylamino)-9a-méthoxymitosane et le 7-(2-(2-pyridyldithio)éthylamino)-9a-méthoxymitosane.

Description

  Aminodisulfures

  
La présente invention concerne des analogues de la mitomycine contenant un radical disulfure (classe
260, sous-classe 326.24). Ces composés sont des dérivés de la mitomycine C dont le radical 7-amino porte un substituant organique comprenant un radical disulfure. Ces composés sont des inhibiteurs de tumeurs expérimentales chez les animaux.

  
En conformité avec Chemical Abstracts, la mi-tomycine C est appelée en nomenclature systématique:

  
 <EMI ID=1.1> 

  
dione

  
avec la numérotation ci-après pour le système cyclique d'azirinopyrroloindole:

  

 <EMI ID=2.1> 


  
(Chemical Abstracts)

  
Suivant une nomenclature courante dans la littérature relative à la mitomycine, le système cyclique ci-dessus portant plusieurs des substituants caractéristiques des mitomycines est appelé mitosane.

  

 <EMI ID=3.1> 


  
Mitosane

  
Ce système est utilisé dans le présent mémoire,où Nla désigne l'atome d'azote du radical azirino et N désigne l'atome d'azote du radical amino du cycle. Lorsque les produits de l'invention sont identifiés par le terme "mitosane" ou par la formule de structure, il convient d'entendre que leur configuration stéréochimique est

  
la même que celle de la mitomycine C. 

  
La mitomycine C est un antibiotique produit par fermentation et actuellement commercialisé, aux Etats-Unis d'Amérique avec l'approbation de la Food

  
and Drug Administration, pour le traitement de l'adénocarcinome disséminée de l'estomac ou du pancréas

  
dans des combinaisons éprouvées avec d'autres agents chimiothérapeutiques reconnus, de même que pour le traitement palliatif lorsque d'autres mesures ont échoué

  
 <EMI ID=4.1> 

  
13201, Physicians' Desk Reference 35e édition, 1981, pages 717 et 718). La mitomycine C et sa production par fermentation font l'objet du brevet des Etats-Unis d'Amérique n[deg.] 3.660.578 du 2 mai 1972 fondé notamment sur une demande de brevet déposée au Japon le 6 avril
1957.

  
Les structures des mitomycines A, B, C et celle de la porfiromycine ont été publiées par J.S.Webb et al. de la société Lederle Laboratories Division American Cyanamid Company dans J. Amer. Chem. Soc. 84,
3185-3187 (1962). L'une des transformations chimiques intervenant dans cette étude de structure pour établir la relation entre la mitomycine A et la mitomycine C

  
 <EMI ID=5.1> 

  
tosane, par réaction avec l'ammoniac, en la seconde

  
ou 7-amino-9o(-méthoxymitosane. Le déplacement du radical 7-méthoxy de la mitomycine A s'est révélé être une réaction d'un intérêt considérable pour la préparation de dérivés de la mitomycine C qui manifestent

  
de l'activité contre les tumeurs. Les articles et brevets ci-après concernent chacun la conversion de

  
la mitomycine A en une 7-(amino substitué)mitomycine C manifestant de l'activité contre les tumeurs. L'objet de cette recherche a été la préparation de dérivés plus actifs et en particulier moins toxiques que la mitomycine C : 

  
Matsui et al. "The Journal of Antibiotics", XXI, 189-

  
198 (1968).

  
Kinoshita et al. J. Med. Chem. 14, 103-109 (1971). Iyengar et al. J. Med. Chem. 24, 975-981 (1981).

  
Iyengar, Sami, Remers et Bradner, Abstracts of Papers
183rd Annual Meeting of the American Chemical Society, mars 1982, n[deg.] MEDI 72.

  
Iyengar, et al. J. Med. Chem. 1983, 26, 16-20.

  
lyengar, et al. Abstracts of Papers, 185th Annual

  
Meeting of the American Chemical Society, mars 1983,

  
n[deg.] MEDI 82.

  
Les brevets ci-après concernent la préparation de 7-(amino substitué)mitosanes par réaction de

  
la mitomycine A , de la mitomycine B ou d'un dérivé N -substitué de celles-ci avec une amine primaire

  
ou secondaire:

  
Cosulich et al. brevet E.U.A. 3.332.944 (25 juillet 1967). Matsui et al. brevet E.U.A. 3.420.846 (7 janvier 1969). Matsui et al. brevet E.U.A. 3.450.705 (17 juin 1969). Matsui et al. brevet E.U.A. 3.514.452 (26 mai 1970). Nakano et al. brevet E.U.A. 4.231.936 (4 novembre 1980). Remers, brevet E.U.A. 4.268.676 (19 mai 1981).

  
Remers, brevet belge 893.162 (12 mai 1982).

  
Les dérivés de la mitomycine C portant en position 7 un radical amino substitué ont aussi été préparés par biosynthèse directe,c'est-à-dire par addition de différentes amines primaires à des bouillons de fermentation et par conduite de la fermentation pour la mitomycine de la manière classique (C.A. Claridge et al. Abst. of the Annual Meeting of Amer. Soc. for Microbiology 1982, Abs. 028).

  
La mitomycine C est la principale mitomycine produite par fermentation et est la forme commercialisée. La technique habituelle pour convertir la mitomycine C en la mitomycine A utilisée dans la production d'analogues semi synthétiques de la mitomycine C comprenant un radical amino substitué dont il est question dans les publications et brevets ci-dessus consiste à hydrolyser la mitomycine C en le 7-hydroxymitosane correspondant, qui est un composé hautement instable,et à méthyler ensuite celui-ci à l'aide de diazométhane qui est fort dangereux à manipuler.

  
Pour éviter la méthylation par le diazométhane, on

  
a essayé d'utiliser des 7-acyloxymitosanes pour la synthèse des analogues de la mitomycine (Kyowa Hakko Kogyo KK brevet japonais n[deg.] J5 6073-085, Farmdoc

  
n[deg.] 56227 D/31).

  
La présente invention concerne un groupe d'analogues de la mitomycine C portant sur l'atome d'azote de la fonction amino en position 7,un radical dithio organique. Ces composés sont représentés par la formule suivante

  

 <EMI ID=6.1> 


  
où R9 représente un radical organique, à savoir celui apporté par un thiol organique de formule R9SH, et Alk2 et R ont les significations indiquées ci-après. Ces composés peuvent en variante être représentés par les formules I et II
 <EMI ID=7.1> 
 
 <EMI ID=8.1> 
 <EMI ID=9.1> 

  
ou ramifiée comptant 1 à 6 atomes de carbone lorsque R lui est uni par un atome de carbone qu'il comprend

  
 <EMI ID=10.1> 

  
par un atome de soufre, d'oxygène ou d'azote qu'il comprend et R et -SS- sont dans ce cas unis à des atomes de carbone différents,

  
Alk2 représente un radical alcoylène en chaîne droite ou ramifiée comptant 2 à 6 atomes de carbone portant

  
 <EMI ID=11.1> 

  
qui lui est uni par un atome d'oxygène, de soufre ou d'azote sont unis à des atomes de carbone différents de Alk2 ,

  
 <EMI ID=12.1> 

  
R représente un atome d'hydrogène ou radical alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, benzoyle ou benzoyle substitué dont le substituant est un radical alcoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino ou nitro,

  
 <EMI ID=13.1> 

  
alcoylamino ou dialcoylamino comptant 1 à 12 atomes

  
de carbone, alcanoylamino, benzoylamino ou benzoylamino A-substitué, naphtoylamino ou naphtoylamino A-substitué, cycloalcoyle ou cycloalcoyle A-substitué comptant chacun 3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcényle ou cycloalcényle A-substitué comptant chacun 5 à 8 chaînons de cycle, phényle ou phényle A-substitué, naphtyle ou naphtyle A-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques comptant 1 ou 2 cycles, 3 à 8 chaînons

  
de cycle dans chaque cycle et 1 à 4 hétéroatomes choisis entre l'oxygène, l'azote et le soufre, un radical alcoxy ou alkylthio comptant chacun 1 à 6 atomes de carbone, carboxyle, alcoxycarbonyle comptant 1 à 7 atomes de carbone, phénoxycarbonyle ou phénoxycarbonyle A-substitué, phénoxy ou phénoxy A-substitué, naphtoxy ou naphtoxy A-substitué, alcoxycarbonylamino comptant

  
2 à 6 atomes de carbone, guanidino, uréido (-NHCONH2), N-alcoyluréylène (-NHCONHalcoyle) comptant 2 à 7 ato-

  
 <EMI ID=14.1> 

  
atomes de carbone, N<3>-haloalcoyl-N<3>-nitrosouréylène comptant 3 à 7 atomes de carbone et dialcoylaminocarbonyle comptant 3 à 13 atomes de carbone, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino, hydroxyle et nitro, et

  
 <EMI ID=15.1> 

  
atomes de carbone, alcényle ou alcynyle comptant chacun 3 à 12 atomes de carbone, cycloalcoyle comptant

  
3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcoyle A-substitué comptant 3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcényle comptant 5 à 8 chaînons de cycle, phényle, phényle A-substitué, naphtyle, naphtyle A-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques comptant 1 ou 2 cycles,

  
3 à 8 chaînons de cycle dans chaque cycle et 1 à 4 hétéroatomes choisis entre l'oxygène, l'azote et le soufre, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino, hydroxyle et nitro, et R8 et l'atome de soufre adjacent constituent ensemble un radical S-cystéinyle, lequel radical S-cystéinyle peut être estérifié, salifié ou uni dans une liaison peptidique.

  
Les composés de l'invention sont des inhibiteurs des tumeurs expérimentales chez les animaux. Ils sont préparés par réaction d'un aminodisulfure de formules III ou IV

  

 <EMI ID=16.1> 


  
avec un mitosane de formule V

  

 <EMI ID=17.1> 


  
où Y représente un radical facile à éliminer par réaction avec une amine primaire, pour donner un dérivé

  
de mitomycine C N -substitué. Ces dérivés du mitosane sont notamment la mitomycine A et ses homologues de formule V où Y représente un radical alcoxy inférieur comptant 1 à 6 atomes de carbone. Un autre est le dérivé de formule V où Y représente le radical amidino de formule VI

  

 <EMI ID=18.1> 


  
où R5 représente un atome d'hydrogène (qui est préféré) ou radical alcoyle inférieur, phényle, alcoyl(inférieur)phényle, alcoxy(inférieur)phényle, halophényle, aminophényle ou nitrophényle et

  
R et R représentent indépendamment un radical alcoyle inférieur ou ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont unis,un radical pyrrolidine, 2-, ou 3-alcoyl(inférieur)pyrrolidine, pipéridine, 2-,3-, ou 4-alcoyl(inférieur)pipéridine, 2,6-dialcoyl(inférieur)pipéridine, pipérazine, pipérazine 4-substituée (dont

  
le substituant en position 4 est un radical alcoyle ou carbalcoxy comptant chacun 1 à 8 atomes de carbone, phényle, méthylphényle, méthoxyphényle, halophényle, nitrophényle ou benzyle), azépine, 2-,3-,4-, ou 5alcoyl(inférieur)azépine, morpholine, thiomorpholine,

  
 <EMI ID=19.1> 

  
étant entendu que chacun des radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur et alcoxy inférieur précités compte 1 à 6 atomes de carbone.

  
Ces derniers composés sont des amidines dérivant de la mitomycine C et font l'objet de la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique n[deg.] 385.149 du

  
4 juin 1982.

  
La réaction entre le mitosane de formule V

  
et l'aminodisulfure de formule III ou IV est exécutée dans un milieu de réaction organique liquide anhydre

  
à une température d'environ -15 à +50[deg.]C. Une température de 0 à 20[deg.]C est préférée. Tout milieu de réaction organique liquide anhydre peut être utilisé,à la condition qu'il soit stable dans les conditions de réaction et ne participe pas à la réaction de façon nuisible. L'aminodisulfure de formule III ou IV est pris en quantité de 1 à 4 proportions molaires par proportion molaire du mitosane de formule V. De préférence, les quantités des deux réactants sont équimolaires. La durée de réaction est de plusieurs heures et de préférence d'environ 8 à 50 heures. Le produit est recueilli par chromatographie, en l'occurrence avantageusement par évaporation du milieu de réaction organique liquide, puis chromatographie du résidu.

  
Les aminodisulfures de formules III et IV sont des composés connus qui peuvent être préparés

  
de différentes façons. Par exemple, ils peuvent être

  
 <EMI ID=20.1> 

  

 <EMI ID=21.1> 
 

  
ou avec un thiocarbonate de sulfényle de formule

  

 <EMI ID=22.1> 


  
Klayman et al. [Journal of Organic Chemistry
29, 3737-3738 (1964)] ont préparé les composés ci-après par le procédé au sel de Bunte.

  
disulfure de 2-aminoéthyle et de n-butyle disulfure de 2-aminoéthyle et de n-hexyle disulfure de 2-aminoéthyle et de n-octyle disulfure de 2-aminoéthyle et de n-décyle disulfure de 2-aminoéthyle et de phényle

  
disulfure de 2-aminoéthyle et de benzyle

  
Le méthanol s'est révélé être le solvant

  
de réaction préféré pour faire réagir le sel de Bunte avec le thiol. Les températures de réaction de 0 à
-10[deg.]C se sont révélées préférables avec ce solvant. Des températures plus élevées sont nécessaires avec d'autres solvants. L'inconvénient principal de,ce mode opératoire est la formation de disulfures symétriques apparaissant comme sous-produits, probablement par dismutation du disulfure mixte souhaité.

  
Les disulfures mixtes de départ des formules III et IV sont préparés de préférence par réaction du thiol approprié avec un thiocarbonate de sulfényle de formule VIII. C'est le procédé de S. J. Brois et al. Journal of the American Chemical Society 92, 7269-
7270 (1970). Normalement, pour ce procédé de préparation, on ajoute le thiol à une solution méthanolique du thiocarbonate d'amino-alcoylsulfényle de formule VIII et on laisse la réaction progresser à une température de 0 à 25[deg.]C. La durée de réaction s'échelonne de virtuellement instantanée à quelques heures suivant la nature du thiol utilisé. L'avancement de la réaction peut être observé par mesure de la quantité de thiol inchangé dans le récipient de réaction. Une quantité catalytique de triéthylamine peut être ajoutée comme accélérateur lorsque la réaction est lente.

  
On trouvera ci-après une énumération de

  
 <EMI ID=23.1> 

  
qui peuvent être convertis par réaction avec le sel

  
de Bunte de formule VII ou le thiocarbonate de sulfényle de formule VIII en les intermédiaires de formules III et IV conduisant à leur tour aux composés conformes à l'invention de la manière décrite. Dans le cas des aminothiols mentionnés ci-après, il est généralement souhaitable de les convertir d'abord en une

  
 <EMI ID=24.1> 

  
silyl)éthoxycarbonylaminé, avant la conversion en les intermédiaires de formules III ou IV et la réaction avec le mitosane de formule V. Le radicale-(triméthylsilyl)éthoxycarbonylamino peut être ensuite décomposé par réaction avec le fluorure de tétraéthylammonium dans l'acétonitrile (L.A. Carpino et al., J.C.S. Chem. Comm., 358 (1978)) pour dégager le composé aminé libre de formule I ou II recherché.

  

 <EMI ID=25.1> 
 

  

 <EMI ID=26.1> 
 

  

 <EMI ID=27.1> 
 

  

 <EMI ID=28.1> 
 

  

 <EMI ID=29.1> 
 

  

 <EMI ID=30.1> 
 

  

 <EMI ID=31.1> 
 

  

 <EMI ID=32.1> 
 

  

 <EMI ID=33.1> 
 

  

 <EMI ID=34.1> 
 

  

 <EMI ID=35.1> 


  
Le tableau I rassemble les résultats d'expériences

  
 <EMI ID=36.1> 

  
auxquelles a été administré par voie intrapéritonéale un inoculum de 106 cellules d'ascites de la leucémie P-388 murine et ayant reçu différentes doses d'un composé expérimental de formule I ou II ou bien de mitomycine C. Les composés sont administrés par injection intrapéritonéale. Les souris sont groupées par six pour chaque dose et reçoivent une dose unique du composé le jour de l'inoculation. Un groupe de dix souris de contrôle recevant de la solution physiologique salée est inclu dans chaque série d'expériences.Les souris recevant la mytomycine C constituent les groupes de contrôle positifs. L'observation est effectuée sur 30 jours avec déter-mination du temps de survie moyen en jours dans chaque groupe de souris, ainsi que du nombre des survivants au terme des 30 jours. Les souris sont pesées avant le traitement et aussi au sixième jour.

   L'évolution du poids est considéré comme indiquant la toxicité du médicament. on utilise des souris pesant chacune 20 g et une perte de poids s'élevant jusqu'à environ

  
2 g n'est pas envisagée comme excessive. Les résultats sont exprimés par le paramètre % T/C qui est le rapport du temps de survie moyen dans le groupe traité au temps de survie moyen dans le groupe de contrôle recevant la solution physiologique salée, que multiplie le facteur 100. Les animaux de contrôle recevant la solution physiologique salée meurent habituellement dans les 9 jours. L'effet maximum est exprimé au tableau ci-après sous la forme % T/C et la dose assurant cet effet est indiquée. Les valeurs entre parenthèses sont celles observées avec la mitomycine C dans le groupe de contrôle positif lors de la même expérience. Par conséquent, il est possible d'estimer l'activité relative des composés de l'invention en comparaison de la mitomycine C. Un effet minimum exprimé par % T/C est considéré comme étant de 125.

  
La dose efficace minimale indiquée au tableau ciaprès est celle conduisant à une grandeur % T/C d'environ 125. Les deux valeurs précisées dans chaque cas dans la colonne "évolution moyenne du poids" sont respectivement l'évolution moyenne du poids par souris à la dose efficace maximale et à la dose efficace minimale. 

TABLEAU I

  
Inhibition de la leucémie P-388 murine

  

 <EMI ID=37.1> 


  
mg/kg de poids du corps

  
<2> g par souris aux jours 1-6 aux doses efficaces maximale. et minimale T ABLEAU I Supplément

  
Inhibition de la leucémie P-388 murine<3>

  

 <EMI ID=38.1> 


  
<1> mg/kg de poids du corps

  
<2> g par souris aux jours 1-7 aux doses efficaces

  
maximale et minimale

  
 <EMI ID=39.1> 

  
Le tableau II rassemble les résultats d'expériences contre le mélanome B16 chez la souris. On

  
 <EMI ID=40.1> 

  
sous-cutanée un implant de la tumeur. La durée d'observation est de 60 jours. Les souris sont groupées par dix pour chaque dose essayée et le temps de survie moyen est mesuré dans chaque groupe. Les animaux de contrôle inoculés comme les animaux de test et recevant en injection le véhicule, mais pas le médicament ont un temps de survie moyen de 24,5 jours. Le temps de survie par rapport à celui des contrôles (% T/C) permet d'exprimer l'efficacité et de déterminer la dose efficace maximale et la dose efficace minimale pour chaque composé expérimental. La dose efficace minimale est définie comme étant celle conduisant à une grandeur % T/C de 125. Pour chaque dose, les animaux de test reçoivent le composé expérimental aux jours 1, 5 et 9 par voie intraveineuse. 

TABLEAU II

  
Inhibition du mélanome B16

  

 <EMI ID=41.1> 


  
mg/kg de poids du corps

  
<2> g par souris aux jours 1-15 aux doses efficaces

  
maximale et minimale

  
<3> administration aux jours 5, 9 et 13

  
On évalue également l'efficacité du composé n[deg.] 3 (BL-6796) contre le mélanome B16 chez la souris

  
 <EMI ID=42.1> 

  
tumeur par voie intrapéritonéale et on injecte le composé expérimental également par voie intrapéritonéale. On effectue les traitements aux jours 1,5 et 9 comme précédemment et on détermine de même les temps de survie moyens. A nouveau, la dose efficace minimale est considérée comme celle conduisant à une grandeur

  
% T/C de 125. A une dose de 1 mg par kg du composé

  
n[deg.] 3, 6 animaux sur 10 survivent au terme des 60 jours d'observation (% T/C = 235) et manifestent une évolution moyenne du poids de +0,1 g au jour 5. A une dose de 0,5 mg/kg, le temps de survie moyen est de
42,0 (% T/C = 165) ce qui indique que la dose efficace minimale est inférieure à 0,5 mg/kg. Lors de la même expérience, la mitomycine C conduit à un paramètre

  
% T/C de 165 à la dose de 3 mg/kg. Ceci est la dose efficace maximale de la mitomycine dans cette expérience. Il est donc évident que le composé n[deg.] 3 est plusieurs fois plus puissant que la mitomycine C oontre le mélanome B16 chez la souris.

  
On détermine les effets des composés 1
(BL-6787) et 3 (BL-6796) sur les formules leucocytaires totales et différentielles chez la souris. Les deux composés se réuèlent myélosuppresseurs, mais apparemment moins que la mitomycine C. Les résultats sont rassemblés au tableau III. Les données relatives au composé 1 et à la mitomycine C résultent de la même expérience et permettent ainsi la comparaison directe. Le composé 1 est quelque peu moins myélosuppresseur. Les données relatives au composé 3, collectées au cours d'une expérience distincte, suggèrent une myélosuppression encore plus faible, mais

  
la comparaison directe avec les deux autres composés n'est pas possible. 

  

 <EMI ID=43.1> 


  

 <EMI ID=44.1> 
 

  

 <EMI ID=45.1> 


  

 <EMI ID=46.1> 
 

  
En raison de l'activité antitumorale observée sur les tumeurs expérimentales chez les animaux et en raison de l'absence d'activité myélosuppressive gênante en comparaison avec la mitomycine C, l'invention s'applique aussi à l'administration des composés de l'invention pour inhiber les tumeurs chez les mammifères. A cette fin, les composés sont administrés

  
par voie systémique à un mammifère porteur d'une tumeur, en une dose sensiblement non toxique et efficace contre la tumeur.

  
Les composés de l'invention sont à administrer principalement par injection de la même façon que la mitomycine C dans certaines des mêmes indications.

  
Les doses peuvent être quelque peu plus élevées ou plus faibles suivant la sensibilité particulière de

  
la tumeur. Les composés sont présentés aisément sous forme de compositions pharmaceutiques sèches contenant des diluants, des tampons, des stabilisants, des solubilisants et des constituants accessoires. Ces compositions sont alors addition-nées extemporénament d'un liquide injectable. Des liquides injectables appropriés sont notamment l'eau, la solution physiologique salée isotonique etc.

  
Dans les techniques expérimentales ci-après, toutes les températures sont données en degrés Celsius. Les spectres de résonance magnétique des protons

  
 <EMI ID=47.1> 

  
rian XL 100 ou bien Jeol FX-90Q (90 MHz) dans la pyridine-d5, sauf indication contraire. Les spectres infrarouges (IR) sont relevés au spectrophotomètre

  
 <EMI ID=48.1> 

  
cm . Les chromatographies en couche mince (CCM) sont exécutées sur des plaques de gel de silice E. Merck

  
de 0,25 mm (60F-254) visualisées en lumière ultraviolette et/ou avec de la vapeur d'iode. La chromato-graphie instantanée (J. Org. Chem. 14, 2923, 1978) est exécutée sur de la silice Woelm (32-63/um).

  
Les solvants sont évaporés sous pression réduite au-dessous de 50[deg.]C.

  
Mode opératoire 1

  
7-[2-(Benzyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane
(Composé 1)

  
par la mitomycine A

  
On ajoute 99 mg (28,3 millimoles) de mitomycine A dans du méthanol (10 ml) à 0-4[deg.]C à une solution de 200 mg (0,28 millimole) de S-benzyldithioéthylamine dans 2 ml de méthanol contenant 300 mg de triéthylamine. On agite la solution résultante à
20[deg.]C pendant 2,5 heures. On observe l'avancement

  
de la réaction par CCM avec du méthanol-chloroforme
10:90 v/v comme système solvant. On concentre le mélange de réaction sous pression réduite en un résidu solide sec donnant à la chromatographie instantanée (35 g de gel de silice), au moyen de méthanoldichlorométhane 7:93 v/v (800 ml) comme éluant, le composé annoncé au titre (87 mg, 59%) se présentant sous la forme d'un solide amorphe pur.

  
 <EMI ID=49.1> 

  
(m, 3H), 3,16 (d, 1H, J=6Hz), 3,24 (s, 3H), 3,40-4,20
(m, 6H), 4,04 (s, 2H), 4,56 (d, 1H, J=14 Hz), 5,08
(t, 1H, J=12 Hz), 5,40 (dd, 1H, J=6, 12 Hz), 7,44
(sl, 5H) .

  
 <EMI ID=50.1> 

  
1720, 1635, 1560, 1325, 1060.

  
Analyse pour C24H28N405S2

  
calculé C, 55,80; H, 5,46; N, 10,84; S, 12,41% trouvé C, 55,08; H, 5,31; N, 10,52; S, 12,10% Mode opératoire 2

  
N-[2-(2-Aminoéthyldithio)éthyl]acétamide (composé 2) a. Procédé au sel de Bunte On agite pendant 10 minutes à la température ambiante,puis on refroidit à 0[deg.] une solution de 695 mg d'acide 2-aminoéthanethiosulfuriquè (4,59 millimoles) dans 7 ml de méthanol contenant 318 mg (7,95 millimoles)d'hydroxyde de sodium. On ajoute à cette solution 357 mg (3,43 millimoles) de N-acétylcystéamine et on agite la solution pendant encore 10 minutes.

  
On dilue la solution trouble résultante à environ

  
60 ml avec du méthanol et on acidifie cette solution ensuite par addition prudente de chlorure d'acétyle
(624 mg, 7,95 millimoles). On évapore la solution limpide en un solide cireux qu'on utilise directement pour la conversion en composé 3.

  
b. Procédé au thiocarbonate de sulfényle

  
On applique le procédé de S.J. Brois et al.
(loc. cit.). On ajoute de l'acétylcystéamine à 0[deg.]C

  
à une solution de chlorhydrate de thiocarbonate de méthyl-2-aminoéthylsulfényle dans du méthanol. La réaction est pratiquement instantanée en l'absence

  
de triéthylamine qui est un accélérateur.

  
Mode opératoire 3

  
7-[2-(2-Acétylaminoéthyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane

  
(Composé 3)

  
On ajoute à environ 0[deg.] une solution d'environ 400 mg du composé 2 dans 2 ml de méthanol à une solution de 100 mg (0,29 millimole) de mitomycine A dans 4 ml de méthanol contenant 200 mg (198 millimoles) de triéthylamine. On sépare par filtration

  
le précipité qui se forme et on laisse le filtrat limpide reposer pendant 4 heures à la température ambiante. On évapore la solution en un résidu sec qu'on soumet à la chromatographie instantanée sur

  
gel de silice (10 g) en appliquant la technique de l'élution à gradient (4 jusqu'à 8% de méthanol dans le chlorure de méthylène). Le produit recherché constitue la zone bleue la plus mobile qu'on isole sous la forme d'un solide amorphe en quantité de 45 mg
(31,5%). On recueille un échantillon analytique en triturant le solide dans de l'hexane additionné de

  
5% de chlorure de méthylène et en séchant le solide.

  
 <EMI ID=51.1> 

  
2,10 (s, 3H), 2,76 (si, 1H), 2,80-3,20 (m, 5H), 3,24
(s, 3H), 3,60 (dd, 1H, J=12 et 2Hz), 3,70-4,10 (m, 5H), 4,54 (d, 1H, J=12 Hz), 5,04 (t, 1H, J=10 Hz), 5,38

  
(dd, 1H, J=4 et 10 Hz).

  
 <EMI ID=52.1> 

  
calculé C, 49,26; H, 5,67; N, 13,68; S, 12,51% trouvé C, 49,33; H, 6,04; N, 13,20; S, 11,48% Mode opératoire 4

  
 <EMI ID=53.1> 

  
(Composé 4)

  
par l'amidino-9a-méthoxymitosane 7-substitué

  
On ajoute 139 mg (0,54 millimole) de chlorhydrate de 2-(octyldithio)éthylamine à une solution de 60 mg (0,15 millimole) de 7-(diméthylaminométhylène)amino-9a-méthoxymitosane dans du méthanol (1 ml) contenant de la triéthylamine (0,2 ml). On laisse reposer la solution à 0-4[deg.]C pendant 48 heures. La chromatographie en couche mince avec du méthanol-chlorure de méthylène 10:90 v/v révèle ensuite que le composé de départ de couleur verte est consommé et qu'une zone bleu importante (RF = 0,6) est visible.

  
On concentre la solution sous pression réduite en

  
un résidu solide qu'on soumet à la chromatographie instantanée sur gel de silice (12 g) avec du chlorure de méthylène-méthanol 20:1 v/v comme solvant d'élution. On obtient le composé annoncé au titre sous la forme d'un solide amorphe (27 mg, 34%) dont le

  
 <EMI ID=54.1> 

  
Modes opératoires 5-22

  
Utilisation de différentes dithio-amines

  
On peut faire réagir les amines identifiées au tableau IV comme décrit dans les modes opératoires 1, 3 ou 4 pour obtenir les composés des formules I

  
et II repris au tableau.

  
Les données analytiques et spectroscopiques pour certains des composés ci-dessus et certains composés identifiés au tableau IV sont rassemblées au tableau V. 

  

 <EMI ID=55.1> 


  

 <EMI ID=56.1> 
 

  

 <EMI ID=57.1> 


  

 <EMI ID=58.1> 
 

  

 <EMI ID=59.1> 


  

 <EMI ID=60.1> 
 

  

 <EMI ID=61.1> 


  

 <EMI ID=62.1> 
 

  

 <EMI ID=63.1> 


  

 <EMI ID=64.1> 
 

  

 <EMI ID=65.1> 


  

 <EMI ID=66.1> 
 

  

 <EMI ID=67.1> 


  

 <EMI ID=68.1> 
 

  

 <EMI ID=69.1> 


  

 <EMI ID=70.1> 
 

  

 <EMI ID=71.1> 


  

 <EMI ID=72.1> 
 

  

 <EMI ID=73.1> 


  

 <EMI ID=74.1> 


  

 <EMI ID=75.1> 

Claims (22)

REVENDICATIONS

1 - Composé de formule: <EMI ID=76.1>

où Alk2 représente un radical alcoylène en chaîne droite ou ramifiée comptant 2 à 6 atomes de carbone <EMI ID=77.1>

de soufre et d'azote qui lui sont unis et le radical

<EMI ID=78.1>

R représente un atome d'hydrogène ou radical alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, benzoyle ou benzoyle substitué dont le substituant est un radical alcoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino ou nitro,

<EMI ID=79.1>

alcoylamino ou dialcoylamino comptant 1 à 12 atomes

de carbone, alcanoylamino, benzoylamino ou benzoylamino A-substitué, naphtoylamino ou naphtoylamino A-substitué, cycloalcoyle ou cycloalcoyle A-substitué comptant chacun 3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcényle ou cycloalcényle A-substitué comptant chacun 5 à 8 chaînons de cycle, phényle ou phényle A-substitué, naphtyle ou naphtyle A-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques comptant 1 ou 2 cycles, 3 à 8 chaînons

de cycle dans chaque cycle et 1 à 4 hétéroatomes choisis entre l'oxygène, l'azote et le soufre, un radical alcoxy ou alkylthio comptant chacun 1 à 6 atomes de carbone, carboxyle, alcoxycarbonyle comptant 1 à 7 atomes de carbone, phénoxycarbonyle ou phénoxycarbonyle A-substitué, phénoxy ou phénoxy A-substitué, naphtoxy ou naphtoxy A-substitué, alcoxycarbonylamino comptant 2 à 6 atomes de carbone, guanidino, uréido (-NHCONH2), N-alcoyluréylène (-NHCONHalcoyle) comptant 2 à 7 atomes de carbone, N<3>-haloalcoyluréylène comptant 3 à 7 atomes de carbone, N -haloalcoylN -nitrosouréylène comptant 3 à 7 atomes de carbone

et dialcoylaminocarbonyle comptant 3 à 13 atomes de carbone, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino, hydroxyle et nitro, et

R9 représente un radical organique.

2-, 3-, 4- ou 5-alcoyl(inférieur)azépine, morpholine, thiomorpholine, thiomorpholine-1-oxyde ou thiomorpholine-l,l-dioxyde,

étant entendu que chacun des radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur et alcoxy inférieur précités compte 1 à 6 atomes de carbone

dans des conditions de réaction, dans un liquide organique inerte à l'égard de la réaction, à une température d'environ -15 à +50[deg.]C pendant une durée suffisante pour la formation d'une quantité appréciable

du produit de formule I ou de formule II.

2 - Composé de formule I ou de formule II

<EMI ID=80.1>

<EMI ID=81.1>

ou ramifiée comptant 1 à 6 atomes de carbone lorsque <EMI ID=82.1>

est uni par un atome de soufre, d'oxygène ou d'azote qu'il comprend et R et -SS- sont dans ce cas unis à des atomes de carbone différents,

<EMI ID=83.1>

droite ou ramifiée comptant 2 à 6 atomes de carbone

<EMI ID=84.1>

de soufre et d'azote qui lui sont unis et le radical R éventuel qui lui est uni par un atome d'oxygène, de soufre ou d'azote sont unis à des atomes

<EMI ID=85.1>

R représente un atome d'hydrogène ou radical alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, benzoyle ou benzoyle substitué dont le substituant est un radical alcoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino ou nitro,

R représente un radical hydroxyle, halo, amino, alcoylamino ou dialcoylamino comptant 1 à 12 atomes

de carbone, alcanoylamino, benzoylamino ou benzoylamino A-substitué, naphtoylamino ou naphtoylamino A-substitué, cycloalcoyle ou cycloalcoyle A-substitué comptant chacun 3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcényle

ou cycloalcényle A-substitué comptant chacun 5 à 8 chaînons de cycle, phényle ou phényle A-substitué, naphtyle ou naphtyle A-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques comptant 1 ou 2 cycles, 3 à 8 chaînons de cycle dans chaque cycle et 1 à 4 hétéroatomes choisis entre l'oxygène, l'azote et le soufre, un radical alcoxy ou alcoylthio comptant chacun 1 à

3 - Composé suivant la revendication 2

de formule I, où Alk2 représente un radical éthylène et R représente un atome d'hydrogène.

3 à 8 chaînons de cycle dans chaque cycle et 1 à 4 hétéroatomes choisis entre l'oxygène, l'azote et le soufre, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino, hydroxyle et nitro, et R8 et l'atome de soufre adjacent constituent ensemble un radical S-cystéinyle, lequel radical S-cystéinyle peut être estérifié, salifié ou uni dans une liaison peptidique.

3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcoyle A-substitué comptant 3 à 8 chaînons de cycle, cycloalcényle comptant 5 à 8 chaînons de cycle, phényle, phényle A-substitué, naphtyle, naphtyle A-substitué, un radical hétérocyclique choisi parmi les radicaux hétéroaromatiques et hétéroalicycliques comptant 1 ou 2 cycles,

4 - Composé suivant la revendication 3,

<EMI ID=86.1>

5 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(2-aminoéthyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane.

6 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(2-acétylaminoéthyldithio)éthylamino]9a-méthoxymitosane.

6 atomes de carbone, carboxyle, alcoxycarbonyle comptant 1 à 7 atomes de carbone, phénoxycarbonyle ou phénoxycarbonyle A-substitué, phénoxy ou phénoxy A-substitué, naphtoxy ou naphtoxy A-substitué, alco-xycarbonylamino comptant 2 à 6 atomes de carbone, guanidino, uréido (-NHCONH2), N-alcoyluréylène (-NHCONHalcoyle) comptant 2 à 7 atomes de carbone, N<3>-haloalcoyluréylène comptant 3 à 7 atomes de carbone, N -haloalcoyl-N<3>-nitrosouréylène comptant 3 à 7 atomes de carbone et dialcoylaminocarbonyle comptant 3 à 13 atomes de carbone, où le substituant A est choisi parmi un ou deux radicaux alcoyle inférieur, alcanoyle inférieur, alcoxy inférieur, halo, amino, hydroxyle

et nitro, et

R8 représente un radical alcoyle comptant 1 à 12 atomes de carbone, alcényle ou alcynyle comptant chacun 3 à 12 atomes de carbone, cycloalcoyle comptant

7 - Composé suivant la revendication 2

<EMI ID=87.1>

et R représente un atome d'hydrogène.

8 - Composé suivant la revendication 7 où R8 représente un radical alcoyle.

9 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(octyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane.

10-Composé suivant la revendication 2 , qui est le 7-[2-(n-butyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane.

11 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(benzyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane.

12 - Procédé pour inhiber la croissance d'une tumeur chez un mammifère, caractérisé en ce qu'on administre par voie systémique à un mammifère porteur d'une tumeur un composé suivant la revendication 2 en une dose sensiblement non toxique antitumorale efficace.

13 - Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce qu'on met 1 à 4 proportions moléculaires d'une amine de formules III ou IV

<EMI ID=88.1>

en contact avec 1 proportion moléculaire d'un mitosane de formule V <EMI ID=89.1> <EMI ID=90.1>

dans la revendication 2 et Y représente un radical alcoxy inférieur comptant 1 à 6 atomes de carbone ou un radical de formule VI

<EMI ID=91.1>

où R représente un atome d'hydrogène ou radical

<EMI ID=92.1>

alcoxy(inférieur)phényle, halophényle, aminophényle

ou nitrophényle,

R et R représentent indépendamment un radical alcoyle inférieur ou ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont unis un radical pyrrolidine, 2- ou 3-alcoyl(inférieur)pyrrolidine, pipéridine, 2-, 3-

ou 4-alcoyl(inférieur)pipéridine, 2,6-dialcoyl(inférieur)pipéridine, pipérazine, pipérazine 4-substituée (dont le substituant en position 4 est un radical alcoyle ou carboalcoxy comptant chacun 1 à 8 atomes de carbone, phényle, méthylphényle, méthoxyphényle, halophényle, nitrophényle ou benzyle), azépine,

14 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(phényldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane.

15 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(2-hydroxyéthyldithio)éthylamino]-9améthoxymitosane.

16 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(2-pyridyldithio)éthylamino]-9a-méthoxymitosane.

17 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(4-méthoxyphényldithio)éthylamino]9a-méthoxymitosane.

18 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(4-nitrophényldithio)éthylamino]-9améthoxymitosane.

19 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(2-nitrophényldithio)éthylamino]-9améthoxymitosane.

20 - Composé suivant la revendication 2,

<EMI ID=93.1>

9a-méthoxymitosane.

21 - Composé suivant la revendication 2, qui est le 7-[2-(3-nitro-2-pyridyldithio)éthylamino]9a-méthoxymitosane.

22 - Composé suivant la revendication 2,

<EMI ID=94.1>

9a-méthoxymitosane.