KR900008570B1

KR900008570B1 - 치환 7-옥소미토산 및 그의 제조방법

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Publication number: KR900008570B1
Application number: KR1019850006404A
Authority: KR
Inventors: 모한랄 바이아스 돌라트라이; 윌리암 도일 테렌스; 에이. 파티카 리차드
Original assignee: 브리스톨-마이어즈 스퀴브 컴페니; 아이삭 자아코브스키
Priority date: 1984-09-04
Filing date: 1985-09-02
Publication date: 1990-11-24
Also published as: DE3531453A1; ES8702408A1; DE3531453C2; IE58720B1; SE8504093L; GB8521816D0; FR2569696A1; SE9004157D0; CA1254892A; JPS61112078A; DK169478B1; FI853338A0; AT394723B; ES546687A0; IE852174L; KR900008840B1; IT8522059A0; HU195658B; PT81083B; NL8502383A

Abstract

내용 없음.

Description

치환 7-옥소미토산 및 그의 제조방법

본 발명은 이황화물기를 포함하는 신규의 미토마이신동족체 및 그의 제조방법에 관한 것이다. 이들 화합물들은 7-알콕시기에 이황화물기가 결합된 유기치환체를 갖는 미토마이신 A 동족체들이다. 또한 본 발명은 미토마이신 A 및 그 유도체의 제조방법에 관한 것이다. 미토마이신 A는 항생제로서의 용도를 지니며 7-O-치환 미토산 동족체는 이와 유사한 용도를 갖는다.

최근 개정된 명명법을 기초로한 미토마이신 A에 대한 체계적 화학초록명[Shirhata et al., J.Am.Chem.Soc., 105, 7199(1983)]은 아지리노피롤로인돌환계를 다음 구조식과 같이 번호를 정함으로써 [laS-(1aβ,8β,8aα,8bβ)]-8-[((아미노카르보닐)옥시)메틸]-6,8a-디메톡시-1,1a,2,8,8a,8b-헥사히드로-5-메틸아리지노[2',3',3,4]피롤로[1,2-a]인돌-4,7-디온으로 명명된다.

[화학초록]

미토마이신 문헌에서 널리 사용되는 통상 명칭은 미토산과 같은 특수한 미토마이신 치환체를 다수 포함하는 상기 환계물질임이 확인되었다.

이 방법에 따라서, 미토마이신 A는 7,9a-디메톡시미토산이고 미토마이신 C는 7-아미노-9a-메톡시미토산이다. 본 발명의 생성물의 입체화학적 형상으로서 기본명 "미토산" 또는 구조식에 의하여 이들을 확인할 때 미토마이신 A 또는 C와 동일한 입체형상을 갖고 있음을 확인하였다.

미토마이신 A R=R₁=OCH₃

미토마이신 C R=NH₂, R₁=OCH₃

미토마이신 C는 발효법에 의하여 생산되는 항생제이며 현재 시행하고 있는 기타 적합한 화학요법제와 혼합시켜서 위 또는 췌장에 감염된 선암(腺癌)을 치료하는데 있어 기타 요법이 실패했을 때 일시적 치료제로서 식품 및 의약국의 승인하에 판매되고 있다(Mutamycin

Bristol Laboratories, Syracuse, New York 13221, Physicians' Desk Reference 37th Edition, 1983, PP. 747 and 748). 미토마이신 C 및 발효법에 의한 생산방법은 1957년 4월 6일자 일본국에 출원된 것을 우선권을 주장하여 1972년 5월 2일자 특허등록된 미국 특허 제3,660,578호의 명칭이다.

미토마이신 A, B, C 및 포르피로마이신의 구조는 Lederle Laboratories Division American Cyanamid Company, J.Am.Chem.Soc., 84, 3185-3187(1962) 제이. 에스. 웨브의 공동연구자들에 의하여 최초로 공개되었다. 미토마이신 A와 미토마이신 C에 관련된 구조연구에 사용된 화학적 전위법중의 한가지는 전자인 7,9a-디메톡시미토산을 암모니아와 반응시켜서 후자인 7-아미노-9a-메톡시미토산으로 전환시키는 것이다. 미토마이신 A의 7-메톡시기의 전이는 미토마이신 C의 종양활성 유도체를 제조하는 데에 상당히 흥미있는 반응이라는 사실이 증명되었다. 최근 위치 1, 1a, 8a 및 8b의 입체화학적 배치가 화학초록 명명법에 대하여 언급한 것과 같은 것으로 나타났다[Shirhata et al., J.Am.Chem.Soc., 105, 7199-7200(1983)]. 이전의 문헌에는 에난티오머라고 기재하였다.

다음 자료들과 특허들은 미토마이신 A를 항종양 활성을 갖는 7-치환 아미노 미토마이신 C 유도체로 전환시키는 것에 관한 것이다.

J.Antibiotics, XXI, 189-198(1968)의 마트수이외 공동연구보고, J.Med.Chem., 14, 103-109(1971)의 코니시타외 공동연구보고, J.Med.Chem., 24, 975-981(1981)의 이옌가외 공동연구보고, 미국 네바다주 라스베가스에서 1982년 3월 미국 화학회 183차 연차회의의 논문초록지 No.MEDI 72의 이엔가, 사미, 레머스 및 브라드너씨의 논문초록, 코술리크외 공동발명자들에 의하여 1967년 7월 25일자 등록된 미국특허 제3,332,944호, 마트수이외 공동발명자들에 의하여 1969년 1월 7일자 등록된 미국특허 제3,420,846호, 마트수이외 공동발명자들에 의하여 1969년 6월 17일자 등록된 미국특허 제3,450,705호, 마트수이외 공동발명자들에 의하여 1970년 5월 26일자 등록된 미국특허 제3,514,452호, 마까노외 공동발명자들에 의하여 1980년 11월 4일자 등록된 미국특허 제4,231,936호, 레머스에 의하여 1981년 5월 19일자 등록된 미국특허 제4,268,676호.

다음의 특허출원들은 치환체가 이황화물 결합을 갖는 7-치환 아미노 미토마이신 C 유도체의 제조방법에 관한 것이다.

고노외 공동발명자의 유럽 특허출원 제116,208호(1984), 바이아스외 공동발명자의 영국 특허출원 제2,140,799호(1984).

미토마이신 A와 구조적으로 관계가 있는 7-알콕시 치환 미토산에 관해서는 J.Antiboitics, 23, 804-809(1980)에서 우라가와외 공동연구자들의 논문에서 동물 종양시험에 활성을 지닌 유용한 항생제라고 기재되어 있다.

미토마이신 C는 발효법에 의하여 생산된 기본 미토마이신이며 산업적으로 이용할 수 있는 형태이다. 미토마이신 C로부터 미토마이신 A로 전환시키는 현대의 기술이 거의 존재하지 않는다. 미토마이신 C를 대응하는 7-히드록시-9a-메톡시-미토산으로 가수분해시켜 메틸화시키는데는 디아조메탄이 필요하며 이것은 제조시에 취급하기가 매우 불편하며 7-히드록시 중간체는 매우 불완전하다[마트수이외 공동연구자 J.Antibiotics XXI, 189-198(1968)]. 이와 같은 문제점들을 해결하기 위하여 7-아실옥시미토산을 사용하였다(교와 하꾜 고교 가부시끼가이사의 일본특허 제J5 6073-085, Farmdoc No.56227D/31).참조). J.Antibiotics, 23, 804-809(1980)에 의하여 우라가와외 공동연구자들에 의하여 기술된 미이토마이신 A의 알코올 분해반응은 알코올 출발물질의 이용성 및 반응성에 의하여 특수한 7-알콕시 구조형을 생산하는데 한정된다.

본 발명은 7-위치의 알콕시기에 결합된 디티오 유기치환체를 가진 미토마이신 A 동족체에 관한 것이다. 이들 화합물은 하기 일반식(Ⅰ)로 나타낼 수 있다.

상기 식에서, R²는 주로 일반식 R²SH의 유기티올의 구성성분인 유기기이며, Alk₂및 R¹에 대해서는 다음에 정의한다. 이들 화합물들은 다음의 일반식(Ⅱ) 및 (Ⅲ)과 같이 나타낼 수도 있다.

상기 식중, Alk₁은 R³가 그의 탄소원자를 통하여 그것에 결합될 경우에는 탄소원자수가 1-6개이고, R³가 그의 황, 산소 또는 질소원자를 통하여 그것에 결합되어 있고, R³와 -SS-가 서로 다른 탄소원자에 결합되어 있는 경우에는 탄수원자수가 2-6개를 가진 직쇄 또는 측쇄 알킬렌기이고, Alk₂는 A 치환체를 임의로 포함하는 탄소원자 수가 2-6개인 직쇄 또는 측쇄 알킬렌기이며, (이것에 연결된 황 및 산소원자와 산소, 황 또는 질소를 통하여 이것에 연결된 임의의 A 치환체는 Alk₂의 상이한 탄소원자에 결합되어 있고, 여기서 상기 A 치환체는 1 또는 2개의 C_1-6알킬, C_1-6알카노일, C_1-6알콕시, 할로겐, C_1-6알콕시카르보닐, 시아노, C_1-6알킬아미노, C_1-6디알킬아미노, C_1-6알카노일아미노 및 C_1-6알콕시카르보닐 중에서 선택된 것이다).

Alk₁및 Alk₂는 이중결합 상태를 가질 수 있다.

R¹은 수소, 저급알킬, 저급알카노일, 벤조일 또는 치환벤조일이다(여기서, 치환체는 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐, 아미노 또는 니트로임).

R³는 할로겐, 카르복시, 탄소원자수가 1-7개인 알카노일옥시, 탄소원자수가 1-12개인 알킬아미노 또는 디알킬아미노, 탄소원자수가 2-7개인 N-알콕시-알킬아미노, 탄소원자수가 1-7개인 알카노일아미노, 벤조일아미노 또는 B-치환 벤조일아미노, 나프토일아미노 또는 B-치환 나프토일아미노, 페닐아미노 또는 B-치환 페닐아미노, 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알킬(각각 3-8원환을 가짐), 시클로알켄일 또는 B-치환 시클로알켄일(각각 5-8원환을 가짐), 페닐 또는 B-치환 페닐, 나프틸 또는 B-치환 나프틸, 1-2개의 고리(환)을 갖고 각 고리에 3-8원환을 가지며 각 고리에 산소, 질소 및 황에서 선정된 1-2개의 헤테로원자를 가진 헤테로 방향족 헤테로 지환기(脂環基) 중에서 선정된 복소환기, 피리딜아미노 또는 티아조릴아미노, 탄소원자수가 각각 1-6개인 알콕시 또는 알킬티오, 탄소원자수가 각각 2-7개인 알콕시카르보닐 또는 알킬아미노 카르보닐, 아미노카르보닐, 페녹시카르보닐 또는 B-치환 페녹시카르보닐, 페녹시 또는 B-치환 페녹시, 나프톡시 또는 B-치환 나프톡시, 탄소원자수가 2-6개인 알콕시카르보닐아미노, 유레이도(-NHCONH₂), 탄소원자수가 2-7개인 N-알킬유레일렌(-NHCONH-알킬), 탄소원자수가 3-7개인 N³-할로알킬유레일렌, 탄소원자수가 3-7개인 N³-할로알킬-N3-니트로소우레일렌, 탄소원자수가 3-13개인 디알킬아미노카르보닐, 탄소원자수가 4-13개인 디알킬아미노알콕시, 탄소원자수가 3-7개인 알카노일아미노알콕시 및 탄소원자수가 2-8개인 히드록시알킬아미노 또는 N,N-디히드록시알킬아미노기이고, 상기 B치환체는 1 또는 2개의 저급알킬, 저급알카노일, 저급알콕시, 할로겐, 아미노, 카르복시, 히드록시 및 니트로기 중에서 선택된 것이다.

R⁴는 탄소원자수가 1-12개인 알킬, 탄소원자수가 각각 3-12개인 알켄일 또는 알킨일, 3-8원환을 가진 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알킬, 각각 5-8원환을 가진 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알켄일, 페닐 또는 B-치환 페닐, 나프틸 또는 B-치환 나프틸, 1-2개의 고리를 갖고 각 고리에 3-8원환 및 각 고리에 산소, 질소 및 황에서 선정된 1-4개의 헤테로원자를 가진 헤테로 방향족 및 헤테로 지환기중에서 선정된 복소환기 [이 복소환기는 최소한 또 한 개의 탄소원자에 결합되어 있는 탄소원자를 통하여 연결되며(즉, -SS-에 연결된 탄소원자는 그 자체가 2개의 다른 헤테로원자에 결합되어 있지 않을 수 있다). 여기서 B치환체는 1 또는 2개의 저급알킬, 저급알카노일, 저급알콕시, 할로겐, 아미노, 카르복시, 히드록시 또는 니트로기 중에서 선정된 것이고, R 및 인접된 황원자는 S-시스테인일을 구성한다(여기서, S-시스테인일기는 비독성 및 비알레르기성 펩티드, 약리학적으로 허용되는 비독성염내에 에스테르화, 염화 또는 결합될 수 있다).]중에서 선정된다.

본 발명의 화합물은 동물내의 실험적 종양의 억제제이다. 특히 다음의 실시예(12), (13) 및 (14)-(27)의 화합물로서 확인된 물질은 신규의 물질이다. 이들은 미토마이신 C와 유사한 방법으로 사용된다. 투여량은 미토마이신 C의 독성에 따른 이들의 독성비율로 조절된다. 신규 화합물이 독성이 약한 경우에는 투여량을 증가시킬 수 있다.

본 발명의 다른 목적은 일반식(Ⅱ) 및 (Ⅲ)의 미토산의 새로운 제조방법을 제공하는 것이다. 이 신규방법은 하기 일반식(Ⅳ)의 미토산을 하기 일반식(V) 또는 일반식(Ⅵ)의 트리아젠과 반응시키는 것을 특징으로 한다.

상기 식중 R¹, R³, R⁴, Alk₁및 Alk₂는 위에서 정의한 것과 같으며, Ar는 디아조화될 수 있는 방향족아민의 유기잔기이다.

본 발명을 변화시켜서 일반식(Ⅱ) 및 (Ⅲ)의 미토산을 제조하는 별도의 방법(양자 택일의 방법)을 제공한다. 이 방법은 하기 일반식(Ⅶ) 또는 (Ⅷ)의 티올을 하기 일반식(Ⅰb)의 미토산 유도체와 반응시키는 것을 특징으로 한다.

상기 일반식(Ⅰb)의 이황화 미토산은 본 명세서에 기재된 트리아젠 방법에 의하여 제조한다. 특히 Alk₂가 에틸렌이고 R¹가 수소인 일반식(Ⅰb)의 미토산에 대하여 실시예(13)에서 기술할 것이다.

본 명세서에서 사용된 "저급알킬", "저급알콕시" 및 "저급알칸오일"이란 말은(문맥을 달리 표현하지 않는한) 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸, 아밀, 헥실등과 같은 탄소원자수가 1-6개인 직쇄 또는 측쇄 알킬, 알콕시 또는 알카노일기들을 의미한다. 이들 기중에 바람직한 것은 탄소원자수가 1-4개인 것이며, 가장 적합한 것은 탄소원자수가 1 또는 2개인 것이다. 특수한 예를 제외하고 "할로겐"이란 염소, 불소, 브롬, 요오드를 포함하는 것을 말한다. "약리학적으로 허용되는 비독성염"이란 약리적으로 허용되는 비독성산 또는 염기와 일반식(Ⅰ) 및 (Ⅱ)의 화합물과 염들을 포함하는 것이다. 이와 같은 산들은 공지되어 있으며 염산, 브롬산, 황산, 술팜산, 인산, 질산, 말레산, 푸마르산, 숙신산, 옥살산, 벤조산, 메탄술폰산, 타르타르산, 시트르산, 캠포술폰사, 레불린산 등이 있다. 상기 염기들도 공지되어 있는데 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘과 같은 비독성 금속염, 암모늄염 및 비독성 아민기를 가진 염, 예컨대, 트리알킬아민, 프로케인, 디벤질아민, 피리딘, N-메틸모르폴린, N-메틸피페리딘 등이다. 이들 염들은 공지의 기술에 의하여 제조한다.

1-치환-3-아릴트리아젠을 사용하는 본 발명의 신규의 방법은 다음 반응식에서와 같이 일반식(Ⅳ)의 미토산을 일반식(Ⅴ)의 트리아젠과 반응시키는 것을 특징으로 하는 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 화합물을 제조하는데 사용할 수 있다.

[반응식 1]

상기 식중, R¹, R³, R⁴, Alk₁및 Alk₂는 위에서 정의한 것과 같으며, Ar는 디아조화할 수 있는 방향족 아민의 유기잔기이다.

일반식(Ⅴ) 또는 (Ⅵ)의 아릴트리아젠은 다음 일반식(XII)의 아미노디술파이드를 이용하여 제조한다.

R²-SS-Alk₂NH₂(XII)

이것은 다음 일반식 XIII 및 XIV로도 표시할 수 있다.

R³-Alk₁-SS-Alk₂NH₂및 R⁴-SS-Alk₂NH₂

(XIII) (XIV)

일반식 XIII 및 일반식 XIV의 아미노디술파이드는 공지의 화합물이며 여러 가지 방법으로 제조할 수 있다. 예를들면 이들은 적당한 티올 R³Alk₁SH 또는 R⁴SH를 하기 일반식 XV의 번트염(Bunte salt) 또는 하기 일반식의 술페닐 티오카르보네이트와 반응시켜서 제조할 수 있다.

NH₂Alk2SSO₃Na (XV)

(XVI)

J.Org.Chem.29, 3737-3738(1964)에서 크레이만외 공동연구자는 번트염법에 의하여 다음의 화합물들을 제조하였다.

2-아미노에틸 n-부틸 디술파이드, 2-아미노에틸 n-헥실 디술파이드, 2-아미노에틸 n-옥틸 디술파이드, 2-아미노에틸 n-데실 디술파이드, 2-아미노에틸 페닐 디술파이드, 2-아미노에틸 벤질 디술파이드,

메탄올은 번트염을 티올과 반응시키는데 적합한 유기용매라는 사실을 발견하였다. 반응온도가 0°∼-10℃인 것이 이 용매를 사용하는데 적합하다는 사실을 알았다. 이보다 반응온도가 높으면 다른 용매를 필요로 한다. 이 방법의 제일 결점은 부산물로서 대칭 이황화염(요망되는 혼합 이황물의 균형을 이루지 못하는 것으로 추출할 수 있음)을 형성시키는 것이다.

일반식 XIII 및 XIV의 혼합 이황화물 출발물질은 적당한 티올을 일반식 XVI의 술페닐티오카르보네이트와 반응시켜 제조하는 것이 좋다. 이것은 J.Am.Chem.Soc., 92, 7629-7631에 에스.제이 브로이스외 공동연구자에 의하여 기술된 방법이다. 대표적인 제조방법은 일반식 XVI의 아미노-알킬술페닐티오카르보네이트의 메탄올 용액에 티올을 첨가시키고 0°-25℃에서 반응을 진행시키는 것이다. 반응시간은 사용되는 특수한 티올에 따라서 순식간에서 수시간까지 소요될 수 있다. 반응의 진행도는 반응용기내에 미반응 티올의 잔존량을 측정하므로서 알 수 있다. 만약 반응이 활발하지 않다면 트리에틸아민의 촉매량을 반응촉진제로서 첨가시킬 수 있다.

일반식(Ⅴ) 또는 (Ⅵ)의 1-(치환 이황화물)-3-아릴트리아젠은 일반식(XII)의 아미노디술파이드를 아릴디아조늄염과 반응시켜서 제조한다. 디아조늄염을 쉽게 형성하는 탄소원자수가 6-12개인 어떠한 아릴아민도 1,3-디치환 트리아젠의 아릴부분의 소재로 사용될 수 있다. 이 방법으로 제조하는 본 발명에 사용되는 이황화 트리아젠에 대한 예를 들면 다음과 같다.

1-[2-(2-아세트아미드에틸티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-[2-(3-니트로-2-피리딜디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠.

본 발명에 사용되는 일반식(Ⅴ) 또는 (Ⅵ)중의 적합한 트리아젠 출발물질에 대한 예를 들면 다음과 같다.

1-[2-(3-니트로-2-피리딜디티오)에틸]-3-(4-클로로페닐)트리아젠; 1-[2-(3-니트로-2-피리딜디티오)프로필]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-[2-(2-피리딜디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-[2-(페닐디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-[2-(부틸디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-(2-(4-메톡시페닐디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-(2-(4-니트로페닐디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-[2-[(2-벤조일아미노에틸)디티오]에틸]-3-(4-메틸페닐)-트리아젠; 1-[2-(4-클로로-2-나프틸디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)-트리아젠; 1-[2-(시클로프로필 메틸티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠; 1-[2-[2-(페녹시에틸)디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠.

본 발명의 구체적인 실시상태로 하기 일반식(Ⅰa)으로 표시되는 이황화 미토산을 제조하는 다른 대체방법을 제공한다.

상기 식중, R²는 유기기로서 R³Alk₁또는 R⁴(여기서 R³, R⁴및 Alk₁은 위에서 정의한 것과 같다)에 의하여 별도로 설명되는 일반식 R²SH의 유기 티올의 구성성분이다.

상기 일반식(Ⅰa)의 이황화 미토산을 제조하는데는 반응식(3)에서와 같이 일반식 R2SH의 적합한 유기 티올로서 티올 교환방법에서 일반식 XVIII의 9a-메톡시-7-[2-(3-니트로-2-피리딜디티오)에폭시]미토산을 사용하는 것이 좋다.

일반식(Ⅰa)의 이황화물의 생성 후의 추진력은 주로 티온 XVIII으로 존재하는 부산물인 3-니트로-2-메르캅토피리딘의 안정성과는 일치한다.

[반응식 2]

별법으로, 만약 Alk₂이 에틸렌 외에 트리메틸렌 또는 프로필렌과 같은 것이 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 미토산을 제조할 필요가 있다면, 일반식(Ⅴ) 또는 (Ⅵ)의 적당한 트리아젠을 반응식 1에서 설명한 방법에 사용하여 하기 일반식(Ⅰb)의 이황화 미토산을 제조한다.

상기 식중, Alk₂및 R₁은 위에서 정의한 것과 같다.

상기 일반식(Ⅰa)의 친수성 미토산은 물론 친지방성 미토산을 제조하는 데는 2가지 일반적인 방법이 있다. 그중 방법(A)는 일반식(Ⅰa)의 친지방성 또는 보통의 가용성 이황화물을 제조하는데 이용된다. 방법(B)는 나트륨염 또는 양이온 형태로 단리되는 일반식(Ⅰa)의 수용성 이황화물에 사용된다. 바람직하게는 일반식 XVII의 미토산 1당량에 대하여 최소한 메르캅탄 R₂SH 1당량 이상을 사용하며 반응은 메르캅탄 R₂SH 1당량당 염기 약 1당량의 존재하에 수행할 수 있다. 적합한 염기는 3급아민류, 예컨대, 트리에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피페리딘, 피리딘, 2,6-루티딘과 무기염기류, 예컨대, 중탄산나트륨, 탄산칼륨, 중탄산나트륨 등과 같은 것이다. 일반식 XVII의 출발물질과 R²SH의 반응에 사용되는 적당한 비반응성 용매는 저급알칸올, 저급알카노, 저급알킬에스테르, 저급지방족 탄화수소 및 물이다. 유기용매는 탄소원자수가 8개 미만인 것이다. 그러나 100℃ 이하의 비점을 갖는 것이 적합하다. 특히 적합한 용매는 염화메틸렌, 메탄올, 아세톤, 물 및 이들의 혼합물이다. 반응은 반응혼합물의 환류온도 또는 약 60℃ 미만에서 수행된다. 이 반응은 실온 또는 그 이하의 온도 예컨대 0-25℃에서 수행하는 것이 바람직하다. 전술한 반응조건들이 반응식(2)에 언급된 일반적인 방법에 의하여 일반식(Ⅰa) 및 (Ⅰb)의 기타 이황화 미토산을 제조하는 데에 일반적으로 적용될 수 있다.

다음에 번트염 XV 또는 술페닐티오카르보네이트 XVI과의 반응에 의하여 중간체 일반식 XIII 및 XIV로 전환시킬 수 있는, 다시말하면 상기 본 발명의 생성물로 전환시킬 수 있는 일반식 R3Alk1SH 또는 R4SH의 대표적인 티올을 열거한다. 구체적인 실시상태에서 대표적인 티올은 본 발명의 생성물을 제조하기 위한 일반식(Ⅰa) 또는 (Ⅰb)의 미토산과의 반응에 사용될 수 있다. 그런데 본 발명의 방법에만 한정되는 것은 생성물의 혼합물로 유도되는 말단 일급 알킬아민류를 함유하는 티올을 사용하는 것과 일반식(Ⅰa) 또는 (Ⅰb)의 화합물과 반응될 수 없는 헤테로 방향족 티올을 사용하는 것이다.

본 발명의 항신생물 치료법에 일반식(Ⅰ)의 화합물의 유용성은 P-388 백혈병 또는 B16흑종 상태가 유발되는 생쥐에 여러 가지 투여량으로 화합물을 투여하는 생체내의 스크린법을 수행한 결과에 의하여 나타났다.

본 발명의 화합물들은 자연발생 미토마이신에 대하여 관찰한 것과 유사한 방법으로 관찰한 결과 그람양성군 및 그람음성군에 대한 항균작용을 갖는다는 사실을 믿게 되었다, 그래서 인체 및 동물에 세균의 감염을 치료하는데 치료제로서 사용된다.

[p-388 쥐의 백혈병에 대한 활성]

다음표(Ⅰ)은 P388 쥐의 백혈병의 10⁶복수증세포의 종양 접종물로써 복강 내에 이식하고 시험화합물을 투여 처리한 CDF₁생쥐에 대하여 실험실에서 실험한 결과를 나타낸 것이다. 상기 화합물들은 복강내에 주사하여 투여하였다. 6마리의 쥐를 1군으로 하여 각 투여량 단위로 사용하였으며 접종한 일자에 상기 화합물의 단위 투여량을 처리하였다. 식염수를 투여한 생쥐 10마리로된 대조군을 실험에 포함시켰다. 미토마이신 C를 처리한 군을 정대조군으로 포함시켰다. 30일간의 병력기록표에는 각 생쥐건에 대하여 측정한 평균 생존일 수 및 상기 30일째 되는 날에 생존한 수를 기록하였다. 이 쥐들에 대하여 시험전과 시험후 6일째 되는 날에 체중을 측정하였다. 체중의 변화를 약품의 독성치로서 나타내었다. 각 생쥐의 체중이 20g인 것을 이용하였으며 체중이 약 2g 미만으로 감소하는 것은 과도한 손실로 생각하지 않았다. 이 결과는 %T/C(처리한 군의 평균생존기간과 염수를 투여한 대조군의 평균생존기간 100에 대한 비율) 기간으로 측정한 것이다. 통상적으로 염수처리 대조군 동물은 9일내에 죽었다. 다음표에서 "최대효과"는 %T/C로 표시하였으며 또한 이러한 효과를 나타내는 투여량을 나타내었다. 괄호내의 값은 같은 실험에서 정대조군으로 미토마이신 C로써 얻은 값이다. 그래서 본 발명의 물질과 미토마이신 C의 상대 활성도의 값을 추정할 수 있다. % T/C의 관점에서 최저효과는 125인 것으로 생각되었다. 다음표에 나타낸 최저효과 투여량은 %T/C가 약 125인 투여량이다. "평균중량변화"란에 각각 주어진 2가지 값은 각각 최대효과 투여량 및 최저효과 투여량으로 각각 생쥐에 대한 평균체중변화를 나타낸 것이다.

[표 1]

[P-388 쥐의 백혈병의 억제]

1. ㎎/㎏(체중)

2. 최대 및 최저효과를 위한 평균투여량(g/day)

[B16 흑종에 대한 활성]

다음표(Ⅱ)는 생쥐에 성장하는 B16 흑종을 이용하여 종양시험한 결과를 나타낸 것이다. BDF₁생쥐를 사용하여 종양 이식물로써 피하접종하였다. 60일간 병력기록표에 기록하였다. 시험할 각 투여량에 대하여 10마리의 생쥐를 1군으로 사용하여 각 군에 대한 평균생존기간을 측정하였다. 대조 동물들에 대하여 시험동물과 같은 방법으로 접종하여 주사용 담체를 투여하였으며 약품을 투여하지 않은 것은 평균생존기간이 24일로 나타났다. 대조군에 관한 생존기간은 (%T/C)효능의 척도로 사용하였으나, 각 시험 화합물에 대한 최대효과를 나타내는 투여량 및 최저효과를 나타내는 투여량을 측정하였다. 최저효과 투여량을 %T/C값이 125로 나타내는 투여량으로 정의한다. 각 투여량에 따라 시험동물의 정맥내에 시험 화합물을 1일, 5일, 9일 간격으로 투여하였다.

[표 2]

[B16 흑종]

1. ㎎/㎏(체중)

2. 최대 및 최저효과를 위한 평균투여량(g/day)

3. 괄호내의 수치는 미토마이신 C에 대하여 같은 방법으로 시험한 것이다.

실험적 동물종양에 관찰된 항종양 활성제에 관련하여, 본 발명의 포유동물의 종양을 억제하기 위한 본 발명의 화합물의 용도를 포함한다. 이러한 목적을 달성하기 위하여 실질적으로 비독성으로 항종양에 효과적인 투여량 종양을 가진 포유동물의 조직에 투여하였다.

본 발명의 화합물은 주로 미토마이신 C와 같은 방법 및 같은 목적으로 주사에 의한 용도로 사용된다. 특수한 종양의 감지도에 따라서 약간 더 양이 많거나 또는 양을 적게 사용할 수 있다. 이들 화합물은 제약 특성을 살리기 위하여 희석제, 완충제, 안정제, 용해제 및 제약 특성을 부여하는 성분을 함유하는 건성 의약 조성물로 조제할 수 있다. 이들 조성물은 사용하기 바로전에 즉흥적으로 주사액 매질과 혼합한다. 적합한 주사액은 물, 등 침투성 염수등이 있다.

다음의 제조공정 및 실시예에서, 모든 온도는 섭씨 온도이며 융점은 부정확한 것이다. 양자핵자기 공명(1H NMR)스펙트럼은 표시된 것과 같이 피리딘 -

₅또는 D₂O에 바리안(Varian) XL100, 조엘(Joel) FX-90Q 또는 부루커 WM360 분광기에 기록하였다. 피리딘 -

₅을 용매로 사용할 경우 δ=8.57에서의 피리딘 공명을 자체 참고자료로 사용되며 용매로서 D₂O를 사용하면 TSP를 자체 참고자료로 사용된다. 화학적 변화는 헤르츠(Hertz)의 δ단위 및 카플링 항수에 기록되어 있다. 분열형태는 다음과 같이 표시된다.

s : 단일, d : 2중, t : 3중, q : 4중, m : 다중, bs : 광범위신호, dd : 2중의 2중. 적외선 스펙트럼은 벡크만 모델 4240분광기 또는 니콜레트 5DX FT-IR분광기로 측정하여 역 ㎝로 나타내었다. 자외선 스펙트럼(UV)는 멀티다이오드 장치 검출기를 설치한 휴리트 팩카드 8450A분광기 또는 캐리모델 290분광기로 측정하였다. 박층크로마토그래피(TLC)는 0.25아날테크 실리카겔 GF판상에서 수행되었다. 플래쉬 크로마토 그래피법은 웰름 중성 알루미나(DCC급) 또는 웰름 실리카겔(32-63㎛) 및 지적된 용매로서 실시하였다. 감압하의 40℃이하의 온도에서 용매를 모두 증발시켰다.

1-알킬-3-아릴트리아젠은 카르복실산과 반응시켜서 반응하는 저급알킬 에스테르를 형성하는데 사용되는 공지의 시약을 만든다.

[방법 1]

[Org. Syn., 48, 102-195(1968)에서 이. 에이치. 화이트외 공동연구자의 방법]

1-메틸-3-p-토릴트리아젠

p-톨루이딘(50.2g, 0.47몰)을 20㎖들이 적가 깔때기와 교반기를 설치한 2L들이 플라스크에 가하고 이 깔때기를 약 -10℃의 얼음-소금조에 침지시켰다. 물 150㎖중에 아질산칼륨 46.8g(0.55몰)의 용액을 적가 깔때기에 넣고 분쇄한 얼음 250g과 진한 염산 140㎖의 혼합물을 교반하면서 가하였다. 아질산칼륨 용액을 양성 전분-요오드화 칼륨이 생성될 때까지(주의 1) 1-2시간동안 계속해서 교반하면서 첨가시키고, 이 혼합물을 모든 톨루이딘이 반응할 수 있도록 1시간 더 교반하였다.

그 다음 p-톨루엔디아조늄 클로라이드 용액을 냉각 농축시킨 탄산나트륨액으로 pH 6.8-7.2로 조절하면 이 용액은 적색 내지 오렌지색으로 변화되며 소량의 적색물질이 침전된다. 냉각 중성용액을 적가 깔때기에 옮기고 3L들이 플라스크에서 탄산나트륨 150g, 30-35% 메틸아민액(주의 2) 및 분쇄한 얼음(100g)의 혼합물을 격렬하게 혼합시킨 것에 서서히 가하였다. 이 반응혼합물을 약 45분간(주의 3) 첨가시키는 동안 약 -10℃로 유지시켰다. 이 용액을 에테르 1L로써 3차례 추출하였다 에테르 추출물을 무수 황산나트륨으로써 건조시키고 실온에서 회전식 증발기로 증발시켜 조생성물 1-메틸-3-p-토릴트리아젠 565g(주의 4)을 얻었다. 이것을 물-냉각 승화기에 넣고 트리아젠을 50℃(1㎜)에서 승화시켰다. 황색 결정성 승화물질 43.3g(0.29몰, 62%)(융점 77-80℃)이 생성되었다(주의 5). 이 승화물질을 헥산중에서 재결정시켜 백색 침상 결정체인 트리아젠(융점 80.5-81.5℃)을 얻었다. 더 편리하게 소량의 에테르에 용해시켜 그 용액을 헥산 2배 용적으로 희석시키고 0℃로 냉각시켜 약간 황색조를 띈 판상결정체를 얻었다(융점, 79-81℃). 순수한 트리아젠의 수율은 33-37g(47-53%)였다(주의 6).

[주의]

1. 전분-요오드화 칼륨지로써 행하는 각 개의 시험은 아질산 칼륨을 첨가시킨 후 1-2분 내에 행한다.

2. 40%메틸아민 수용액으로 대체시킬 수 있다.

3. 탄산나트륨액 중의 β-나프톨의 용액을 1방울 적가했을 때 더 이상 적색을 띄지 않으면 반응이 완결된 것이다.

4. 불순물의 주성분 1,5-디-p-토릴-3-메틸-1,4-펜타자디엔(융점 148℃). 이것은 분류 결정화에 의하여 제거시킬 수 있다. 그러나 반응혼합물로부터 트리아젠을 승화시키는 것이 더 쉽다.

5. 승화물은 반응 크로마토그래피에 나타난 것과 같이 미량의 1,3-디-p-토릴트리아젠을 포함한다.

6. 이 방법에는 수용성 아민만이 사용될 수 있다.

다음의 방법(2)는 수불용성 아민의 트리아젠을 제조하는데에 더 적합하다.

[방법 2]

[Tetrahederon Letters No. 21, p.761(1961)의 이. 에이치. 화이트외 공동연구자의 방법]

1-n-부틸-3-p-클로로페닐트리아젠

디메틸포름아미드(디메틸아민-없음)중의 p-클로로벤젠디아조늄 헥사플루오로인산염(아세톤-메탄올)(2.87g, 10.1밀리몰)의 용액을 n-부틸아민(0.73g, 10.0밀리몰), 탄산나트륨 분말(15g) 및 디메틸포름아미드(30㎖)을 교반한 혼합물에 서서히 가하고, -5℃로 유지시켰다. 디아조늄염 용액은 실온에서 사용될 수 있다. 그러나, 만약 디아조늄염 용액을 제조하여 약 -50℃로 유지되는 냉각분리 깔때기로부터 이송시킨다면 더 순수한 생성물이 얻어진다. 이 혼합물을 0℃로 가온하고 2-나프톨로써 음성반응 시험물이 얻어질 때까지 교반하였다(단 몇분이 소요됨). 에테르를 가하고, 이 혼합물을 여과하여 여과물을 물로써 수세하여 건조하였다(트리아젠은 이 시험에서 단리시켜 저온의 펜탄중에서 재결정시킨다).

[방법 3]

7-히드록시-9a-메톡시미토산

미토마이신(2.2g, 6.6밀리몰)을 0.1N 메탄올 NaOH액(50%) 140㎖중에 용해시키고, 이 반응 혼합물을 실온에서 30시간동안 교반하였다. 그 다음 이 용액을 1N HCl로써 약 pH 4.0로 조절하고 에틸 아세테이트(4×500㎖)로써 추출하였다. 혼합 에틸 아세테이트 추출물을 건조시키고(Na₂SO₄) 약 30°-35℃에서 감압하여 증발시켜 고상의 잔사를 얻었는데 이것을 용해시키고 과잉량의 헥산을 처리하여 진홍색 침전물을 얻었다. 이 침전물을 수집하여 공기 건조시킨 결과 진홍색 분말의 표제의 화합물을 얻었다(1.4g, 63%)

1H NMR(피리딘-

₅,δ) : 2.05(s, 3H), 2.14(bs, 1H), 2.74(bs, 1H), 3.13(d, 1H), 3.24(s, 3H), 3.56(d, 1H), 4.00(dd, 1H), 4.37(d, 1H), 5.05(t, 1H), 5.40(dd, 1H), 5.90(bs, 2H).

[방법 4]

미토마이신 A

7-히드록시 9a-메톡시미토산 100㎎(0.30밀리몰)과 3-메틸-1-p-토릴트리아젠의 100㎎(0.67밀리몰)을 메틸렌 클로라이드 2㎖와 디에틸에테르 10㎖중에 용해시켰다. 6시간동안 약하게 환류시킨후 이 용액을 실온에서 18시간동안 교반하였다. TLC[메틸렌 클로라이드 : 메탄올(90 : 10)]은 R_f=0.36에서 진홍색 반점과 R_f=0.41에서 극소량의 불순물을 나타냈다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고 용출액으로서 메틸렌 클로라이드와 메틸렌 클로라이드 : 메탄올(30 : 1)을 사용하여 웰름 중성 알루미나 상에서 크로마토그래피하였다. R_f=0.36에서 그 성분을 함유하는 유분을 붓고 농축 건조시켰다. 메틸렌 클로라이드와 헥산으로부터 고상의 잔사를 침전시켜 미세 무정형 진홍색 분말인 표제의 화합물을 얻었다(25㎎, 24%), 융점 161℃.

C₁₆H₁₉N₃O₆에 대한 분석치 :

계산치 : C ; 54.96, H ; 5.44, N ; 12.02

실측치 : C ; 53.96, H ; 5.37, N ; 11.99

IR(KBr), υmax, ㎝^-1: 3400, 3300, 2950, 1700, 1630, 1575, 1200, 1060.

1H NMR(피리딘-

₅,δ) : 1.82(s, 3H), 2.74(dd, 1H), 3.12(d, 1H), 3.24(s, 3H), 3.54(dd, 1H), 3.96(dd, 1H), 4.02(s, 3H), 4.22(d, 1H), 4.84(bs, 2H), 5.02(t, 1H), 5.38(dd, 1H).

방법(4)의 수율은 반응용매로서 메틸렌 클로라이드를 사용하고 실온에서 24시간 동안 수행하면 63%로 상승된다.

[방법 5]

250㎖들이 1몰 둥근 플라스크에 고상 Na₂CO₃, 아민 35% 수용액(방법 1에서와 같은 양)과 얼음을 넣고 이 현탁액을 -5℃(얼음-소금조)에서 교반하였다. 이 현탁액에 얼음, 물, Na₂CO₃중의 p-클로로벤젠디아조늄 헥사플루오로 포스페이트(Aldrich Chemical Co.)의 냉각 현탁액(용액의 pH 약4)을 적가하였다. 완전히 가한 다음 이 반응 혼합물을 디에틸에테르로써 추출하였다. 혼합 디에틸에테르 추출물을 물로써 재 수세하고 건조(Na₂SO₄)하여 농축시켰다. 황색고체 잔사는 용출액으로서 헥산-메틸렌 클로라이드(1 : 1)을 사용하여 웰름 알루미나 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의하여 정제하였다(¹H NMR기록).

[실시예 1-10]

다음의 표(Ⅲ)의 트리아젠 1-7은 실시예 1의 트리아젠을 예를 들어 설명된 일반적인 방법(1)에 따라 제조한 것이다. 트리아젠은 웰름 알루미나 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의하여 정제하였다. 다음표(Ⅲ)의 트리아젠(8-10)은 상기 일반적인 방법(5)에 의하여 제조하였다.

[표 3]

[실시예 11]

[1-[2-(3-니트로-2-피리딜티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)-트리아젠]

4-메틸페닐디아조늄 클로라이드의 용액은 p-톨루이딘을 사용하여 방법(1)에서와 같이 제조하여 그 방법에서 같이 0℃에서 pH 6.8-7.2로 조절하였다. 용액 45㎖중에 디아조늄염 21.15밀리몰을 함유하는 용액을 이와 같은 방법으로 제조하여 2-(3-니트로-2-피리딜디티오)에틸아민 5.34g(20.0밀리몰), 탄산나트륨 7g 및 디옥산 150㎖(같은 종류의 플라스크내에 들어 있었음)가 들어있는 적가 깔때기를 장치한 250㎖들이 3목 둥근 플라스크에 넣었다. 이 플라스크를 얼음조에서 냉각시켜 내용물을 기계적으로 교반하였다. 그후 디아조늄염 용액을 적가 깔때기를 사용하여 1시간동안 적가하였다. 완전히 첨가시킨다음 이 혼합물을 실온으로 가온하고 에테르 400㎖로써 3차례 추출하였다. 추출물을 건조 및 증발시켜 요망되는 생성물을 얻은 다음 알루미나 충전칼럼(지름 1인치, 길이 10인치)을 사용하여 크로마토그래피에 의하여 정제하였다. 이때 헥산 : 메틸렌 클로라이드(4 : 1), 헥산-메틸렌 클로라이드(3 : 2), 헥산-메틸렌 클로라이드(1 : 4) 및 1%메탄올을 함유하는 메틸렌 클로라이드를 칼럼의 전개 및 용출용으로 사용하였다. 적합한 유분(TLC에 의해 확인됨)을 수집하여 증발시킨 결과 표제의 화합물 2.5g이 얻어졌다.

[실시예 12]

CH₂Cl₂: 메탄올(4 : 1)중의 트리아젠(2.4당량)의 용액을 CH₂Cl₂: 메탄올(4 : 1)중의 7-히드록시-9a-메톡시미토산(방법 3에서 제조한 것)의 용액에 첨가시켰다. 이 반응 혼합물을 실온에서 교반하고 반응의 진행 상태를 박층 크로마토그래피(TLC)(CH₂Cl₂중의 10% MeOH)에 의하여 검사하였다. 생성물은 TLC상에서 진홍색 반점으로 나타난다. 이 반응 혼합물은 반응이 TLC를 기초로하여 완결되었다고 판단되면 웰름 알루미나 상에서 크로마토그래피를 실시하여 무정형 고체로서 얻었다. 이 생성물은 다음 표 (Ⅳ)의 실시예 12와 같이 확인되었다.

[표 4]

[7-알콕시-9a-메톡시미토산]

[실시예 13]

[9a-메톡시-7-[2-(3-니트로-2-피리딜디티오)에톡시]미토산(13)]

7-히드록시-9a-메톡시미토산 580㎎(1.73밀리몰)을 둥근 플라스크에 넣고 메틸렌 클로라이드 60㎖에 용해시켰다. 실시예 11의 트리아젠 약 2.5g(5.7밀리몰)을 상기 용액에 첨가하고 이 혼합물을 5℃에서 14시간동안 교반한 다음 실온에서 8시간동안 교반하였다. 반응의 진행상태를 메틸렌 클로라이드 : 메탄올(9 : 1)을 사용한 실리카 TLC에 의하여 검사하였다. 이 반응을 실온에서 26시간 더 유지시킨다음 알루미나로 충진시킨 1/3인치 폭과 12인치 길이의 컬럼 크로마토그래피로 작업하였다. 전해 및 용출에 사용되는 용매는 메틸렌 클로라이드, 메틸렌 클로라이드 중의 0.5% 메탄올, 메틸렌 클로라이드 중의 1.0% 메탄올, 메틸렌 클로라이드 중의 1.5% 메탄올, 메틸렌 클로라이드 중의 2% 메탄올 및 메틸렌 클로라이드 중의 4% 메탄올을 각각 200㎖를 사용하였다. 적합한 유분을 수집하여 증발시킨 결과 표제의 화합물 470㎎을 얻었다.

C₂₂H₂₃N₅O₈S₂에 대한 분석치 : (CH₂Cl₂0.5몰 %로 계산)

이론치 : C ; 45.65, H ; 4.09, N ; 11.82

실측치 : C ; 45.74, H ; 4.14, N ; 11.61

IR(KBr), υmax, ㎝^-1: 3440-3200, 3060, 2930, 1720, 1570, 1510, 1395, 1335, 1210, 1055

1H NMR(피리딘-

₅,δ) : 1.81(s, 3H), 2.00(bs, 1H), 2.61(bs, 1H), 2.98(bs, 1H), 3.08(s, 3H), 3.20(m, 2H), 3.39(d, 1H), 3.83(dd, 1H), 4.07(d, 1H), 4.59-4.89(m, 3H), 5.21(dd, 1H), 7.16(dd, 1H), 8.31(dd, 1H), 8.71(dd, 1H).

알킬기내에 탄소원자수가 2-6개를 가진 다른 -(3-니트로-2-피리딜디티오)알킬 아민에 실시예 11 및 13의 방법을 적용시켜 하기 일반식의 미토산 유도체를 제조할 수 있다.

상기 식중, n=2-6

R¹=H 또는 C_1-6알킬기

[실시예 14-27]

다음의 표(Ⅴ)의 7-알콕시디티오-9a-메톡시미토산(14-27)은 다음에 설명하는 일반적인 방법 A 또는 B와 표(Ⅴ)에 나타낸 것에 따라서 제조하였다. 미토산 화합물(14-27)에 대한 물리적 데이터는 다음표(Ⅵ)에 나타낸다.

[방법 A]

아세톤(3-5㎖)중의 실시예(20)의 미토산의 데옥시화 용액에 아르곤 기류내에서 트리에틸아민(∼1.1당량)을 가한 다음 아세톤(1-2㎖)중의 메르캅탄_a(1당량)을 적가하였다. 대부분의 반응 과정에 대한 반응의 진행상태를 실리카겔 박층 크로마토그래피에 의하여 검사하였다(CH₂Cl₂중의 10% CH₃OH).

a) 출발 메르캅탄이 순수하지 않는 경우에는 1당량 이상의 티올이 필요하다.

b) 실시예(20)의 출발 미토산과 생성물이 TLC상에서 R_f값이 매우 접근한 경우에는 고압 액상 크로마토그래피(HPLC) 검사방법(μBondapak-C₁₈column)이 적용된다. 반응의 완결은 출발물질에 해당하는 점은 사라지고 생성물의 점이 나타나므로 알 수 있다. 이 점에서 반응 혼합물은 감압(∼30℃에서) 농축시켜 잔사는 CH₂Cl₂중의 2-5% CH₃OH로써 충전시킨 중성 웰름 알루미나칼럼(1/4"×10")슬러리에서 크로마토그래피 실시하였다. 이 방법은 칼럼에 잔존하는 피리딜티온 부산물로부터 요망되는 미토산 생성물을 분리시킨다. 그래서 CH₂Cl₂중의 2-5% CH₃OH를 사용하여 용출시킨 생성물을 용출액으로서 CH₂Cl₂중의 5-7% CH₃OH를 사용하여 플래쉬 실리카겔 크로마토그래피하여 조심스럽게 정제하였다. 생성물에 해당하는 주밴드를 단리시킨 결과 무정형 7-알콕시디티오-9a-메톡시미토산의 특성이 나타났다.

[방법 B]

메탄올(10㎖)과 2-5% 아세톤a의 혼합액에 실시예(13)의 미토산(∼0.1밀리몰)의 용액에 포화 NaHCO₃수용액(∼6방울)를 첨가시킨 다음 메탄올c(1㎖)중의 메르캅탄(1당량)을 첨가시켰다. 반응의 진행상태는 TLC(실리카겔, CH₂Cl₂중의 10% CH₃OH)에 의하여 검사하였다. 반응이 완결되었을 때 반응 혼합물을 물(15㎖)로써 희석시켜 30℃에서 감압하에 약 10㎖로 농축시켰다. 이와 같이 생성된 용액은 단계적 용출액(100%_dH₂O대 H₂O중의 80% CH₃OH)으로 역상 C-18칼럼에서 크로마토그래피 실시하였다. 주적색 밴드 상태의 생성물을 수집하고 농축시켜 무정형 고상인 7-알콕시디티오-9a-메톡시미토산을 얻었다. 만약 더 정제할 필요가 있다면 상기 크로마토그래피 공정을 반복 시행한다.

a) 또한 메틸렌 클로라이드를 사용할 수 있다. 그러나 아세톤이 적합하다.

b) 메르캅탄이 L-시스테인인 경우에는 이 염기는 사용되지 않는다.

c) 만약 출발티올이 수용성이라면 물이 사용된다.

d) 물을 함유한 용출액은 칼럼에 잔류하는 생성물로부터 황색 피리딜 티온을 분리시킨다.

[표 5a]

[7-알콕시디티오-9a-메톡시미토산]

[표 5b]

[표 6a]

[1-알콕시디티오-9a-메톡시미토산]

[표 6b]

a) D₂O는 실시예 17과 26의 미요산에 사용된다.

Claims

하기 일반식(Ⅴ) 또는 일반식(Ⅵ)로 표시되는 트리아젠 1당량 이상과 하기 일반식(Ⅳ)로 표시되는 미토산 1당량을 약 0℃-60℃의 비반응성 유기용매 중에서 반응시킴을 특징으로 하는 하기 일반식(Ⅱ) 또는 일반식(Ⅲ)으로 표시되는 화합물의 제조방법.

상기 식중, Alk₁은 R³가 그의 탄소원자를 통하여 그것에 결합될 경우에는 탄소원자수가 1-6개이고, R³가 그의 황, 산소 또는 질소원자를 통하여 그것에 결합되어 있고, R³와 -SS-가 서로 다른 탄소원자에 결합되어 있는 경우에는 탄소원자수가 2-6개를 가진 직쇄 또는 측쇄 알킬렌기이고, Alk₂는 A치환체를 임의로 포함하는 탄소원자수가 2-6개인 직쇄 또는 측쇄 알킬렌기이며, (이것에 연결된 황 및 산소원자와 산소, 황 또는 질소를 통하여 이것에 연결된 임의의 A치환체는 Alk₂의 상이한 탄소원자에 결합되어 있고, 여기서 상기 A치환체는 1 또는 2개의 C_1-6알킬, C_1-6알카노일, C_1-6알콕시, 할로겐, C_1-6알콕시카르보닐, 시아노, C_1-6알킬아미노, C_1-6디알킬아미노, C_1-6알카노일아미노 및 C_1-6알콕시카르보닐 중에서 선택된 것이다).

Alk₁및 Alk₂는 이중결합 상태를 가질 수 있다. R₁은 수소, 저급알킬, 저급알카노일, 벤조일 또는 치환 벤조일이다(여기서, 치환체는 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐, 아미노 또는 니트로임).

R₃는 할로겐, 카르복시, 탄소원자수가 1-7개인 알카노일옥시, 탄소원자수가 1-12개인 알킬아미노 또는 디알킬아미노, 탄소원자수가 2-7개인 N-알콕시-알킬아미노, 탄소원자수가 1-7개인 알카노일아미노, 벤조일아미노 또는 B-치환벤조일아미노, 나프토일아미노 또는 B-치환나프토일아미노, 페닐아미노 또는 B-치환페닐아미노, 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알킬(각각 3-8원환을 가짐), 시클로알켄일 또는 B-치환 시클로알켄일(각각 5-8원환을 가짐), 페닐 또는 B-치환 페닐, 나프틸 또는 B-치환 나프틸, 1-2개의 고리(환)를 갖고 각 고리에 3-8원환을 가지며 각 고리에 산소, 질소 및 황에서 선정된 1-2개의 헤테로원자를 가진 헤테로방향족 헤테로지환기 중에서 선정된 복소환기, 피리딜아미노 또는 티아조릴아미노, 탄소 원자수가 각각 1-6개인 알콕시 또는 알킬티오, 탄소원자수가 각각 2-7개인 알콕시카르보닐 또는 알킬아미노 카르보닐, 아미노카르보닐, 페녹시카르보닐 또는 B-치환 페녹시카르보닐, 페녹시 또는 B-치환 페녹시, 나프톡시 또는 B-치환 나프톡시, 탄소원자수가 2-6개인 알콕시카르보닐 아미노, 유레이도(-NHCONH₂), 탄소원자수가 2-7개인 N-알킬유레일렌(-NHCONH-알킬), 탄소원자수가 3-7개인 N³-할로알킬유레일렌, 탄소원자수가 3-7개인 N³-할로알킬-N³-니트로소우레일렌, 탄소원자수가 3-13개인 디알킬아미노카르보닐, 탄소원자수가 4-13개인 디알킬아미노알콕시, 탄소원자수가 3-7개인 알카노일아미노알콕시 및 탄소원자수가 2-8개인 히드록시알킬아미노 또는 N,N-디히드록시알킬아미노기이고, 상기 B치환체는 1 또는 2개의 저급알킬, 저급알카노일, 저급알콕시, 할로겐, 아미노, 카르복시, 히드록시 및 니트로기 중에서 선택된 것이다.

R⁴는 탄소원자수가 1-12개인 알킬, 탄소원자수가 각각 3-12개인 알켄일 또는 알킨일, 3-8원환을 가진 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알킬, 각각 5-8원환을 가진 시클로알켄일 또는 B-치환 시클로알켄일, 페닐 또는 B-치환 페닐, 나프틸 또는 B-치환 나프틸, 1-2개의 고리를 갖고 각 고리에 3-8원환 및 각 고리에 산소, 질소 및 황에서 선정된 1-2개의 헤테로원자를 가진 헤테로방향족 및 헤테로지환기 중에서 선정된 복소환기[이 복소환기는 최소한 또한개의 탄소원자에 결합되어 있는 탄소원자를 통하여 연결되며, 여기서 B치환체는 1 또는 2개의 저급알킬, 저급알카노일, 저급알콕시, 할로겐, 아미노, 카르복시, 히드록시 또는 니트로기 중에서 선정된 것이고, R 및 인접된 황원자는 S-시스테인을 구성한다(여기서, S-시스테인일기는 비독성 및 비알레르기성 펩티드, 약리학적으로 허용되는 비독성염 내에 에스텔화, 염화 또는 결합될 수 있다]중에서 선정되며, Ar는 디아조화될 수 있는 방향족 아민의 유기잔기이다.
제1항에 있어서, 일반식(Ⅵ)의 트리아젠이 1-[2-(3-니트로-2-피리딜디티오)에틸]-3-(4-메틸페닐)트리아젠인 것이 특징인 방법.
일반식 R³Alk₁SH 또는 일반식 R⁴SH의 티올 1당량 이상과 하기 일반식(Ⅰb)의 미토산 1당량을 약 0°-60℃의 비반응성 유기용매 중에서 임의로 1당량 이상의 염기의 존재하에 일반식(Ⅱ) 또는 (Ⅲ)의 화합물이 인식가능한 양만큼 생성될 때까지 반응시킴을 특징으로 하는 제1항의 일반식(Ⅱ) 및 일반식(Ⅲ)의 화합물의 제조방법.

상기 식중, R¹, R³, R⁴, Alk₁및 Alk₂는 제1항에서 정의한 것과 같음.
제3항에 있어서, Alk₂가 에틸렌이고 R¹이 수소인 것이 특징인 방법.
제3항 또는 제4항에 있어서, 염기 1당량을 반응에 첨가시킴을 특징으로 하는 방법.
제3항 또는 제4항에 있어서, 반응매질로서 탄소원자수가 8개 미만인 저급알칸올, 저급알카노 저급알킬 에스테르, 저급지방족 케톤, 환식지방족 에테르 또는 저급 폴리할로겐화 지방족 탄화수소 또는 물을 사용함을 특징으로 하는 방법.
하기 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 일반식(Ⅲ)의 화합물 중에서 선택된 화합물.

상기 식중, Alk₁은 R³가 그의 탄소원자를 통하여 그것에 결합될 경우에는 탄소원자수가 1-6개이고, R³가 그의 황, 산소 또는 질소원자를 통하여 그것에 결합되어 있고, R³와 -SS-가 서로 다른 탄소원자에 결합되어 있는 경우에는 탄소원자수가 2-6개를 가진 직쇄 또는 측쇄 알킬렌기이고, Alk₂는 A치환체를 임의로 포함하는 탄소원자수가 2-6개인 직쇄 또는 측쇄 알킬렌기이며, (이것에 연결된 황 및 산소원자와 산소, 황 또는 질소를 통하여 이것에 연결된 임의의 A치환체는 Alk₂의 상이한 탄소원자에 결합되어 있고, 여기서 상기 A치환체는 1 또는 2개의 C_1-6알킬, C_1-6알카노일, C_1-6알콕시, 할로겐, C_1-6알콕시카르보닐, 시아노, C_1-6알킬아미노 및 C_1-6디알킬아미노, C_1-6알카노일아미노 및 C_1-6알콕시카르보닐 중에서 선택된 것이다).

Alk₁및 Alk₂는 이중결합 상태를 가질 수 있다. R₁은 수소, 저급알킬, 저급알카노일, 벤조일 또는 치환 벤조일이다(여기서, 치환체는 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐, 아미노 또는 니트로임).

R³는 할로겐, 카르복시, 탄소원자수가 1-7개인 알카노일옥시, 탄소원자수가 1-12개인 알킬아미노 또는 디알킬아미노, 탄소원자수가 2-7개인 N-알콕시-알킬아미노, 탄소원자수가 1-7개인 알카노일아미노, 벤조일아미노 또는 B-치환벤조일아미노, 나프토일아미노 또는 B-치환나프토일아미노, 페닐아미노 또는 B-치환페닐아미노, 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알킬(각각 3-8환원을 가짐), 시클로알켄일 또는 B-치환 시클로알켄일(각각 5-8환원을 가짐), 페닐 또는 B-치환 페닐, 나프틸 또는 B-치환 나프틸, 1-2개의 고리(환)을 갖고 각 고리에 3-8원환을 가지며 각 고리에 산소, 질소 및 황에서 선정된 1-2개의 헤테로 원자를 가진 헤테로방향족 헤테로지환기 중에서 선정된 복소환기, 피리딜아미노 또는 티아조릴아미노, 탄소 원자수가 각각 1-6개인 알콕시 또는 알킬티오, 탄소원자수가 각각 2-7개인 알콕시카르보닐 또는 알킬아미노 카르보닐, 아미노카르보닐, 페녹시카르보닐 또는 B-치환 페녹시카르보닐, 페녹시 또는 B-치환 페녹시, 나프톡시 또는 B-치환 나프톡시, 탄소원자수가 2-6개인 알콕시카르보닐 아미노, 유레이도(-NHCONH₂), 탄소원자수가 2-7개인 N-알킬유레일렌(-NHCONH-알킬), 탄소원자수가 3-7개인 N³-할로알킬유레일렌, 탄소원자수가 3-7개인 N³-할로알킬-N³-니트로소우레일렌, 탄소원자수가 3-13개인 디알킬아미노카르보닐, 탄소원자수가 4-13개인 디알킬아미노알콕시, 탄소원자수가 3-7개인 알카노일아미노알콕시 및 탄소원자수가 2-8개인 히드록시알킬아미노 또는 N,N-디히드록시알킬아미노기이고, 상기 B치환체는 1 또는 2개의 저급알킬, 저급알카노일, 저급알콕시, 할로겐, 아미노, 카르복시, 히드록시 및 니트로기 중에서 선택된 것이다.

R⁴는 탄소원자수가 1-12개인 알킬, 탄소원자수가 각각 3-12개인 알켄일 또는 알킨일, 3-8원환을 가진 시클로알킬 또는 B-치환 시클로알킬, 각각 5-8원환을 가진 시클로알켄일 또는 B-치환 시클로알켄일, 페닐 또는 B-치환 페닐, 나프틸 또는 B-치환 나프틸, 1-2개의 고리를 갖고 각 고리에 3-8원환 및 각 고리에 산소, 질소 및 황에서 선정된 1-2개의 헤테로원자를 가진 헤테로방향족 및 헤테로지환기 중에서 선정된 복소환기[이 복소환기는 최소한 또한개의 탄소원자에 결합되어 있는 탄소원자를 통하여 연결되며 여기서 B치환체는 1 또는 2개의 저급알킬, 저급알카노일, 저급알콕시, 할로겐, 아미노, 카르복시, 히드록시 또는 니트로기 중에서 선정된 것이고, R 및 인접된 황원자는 S-시스테인을 구성한다(여기서, S-시스테인일기는 비독성 및 비알레르기성 펩티드 약리학적으로 허용되는 비독성염 내에 에스테르화, 염화 또는 결합될 수 있다)]중에서 선정되며, Ar는 디아조화될 수 있는 방향족 아민의 유기잔기이다.
제7항에 있어서, Alk₂이 에틸렌이고 R¹이 수소인 화합물.
제8항에 있어서, Alk₂이 에틸렌이고 R³이 아세틸아미노인 일반식(Ⅱ)의 화합물.
제8항에 있어서, Alk₁이 에틸렌이고 R³가 아세틸옥시인 일반식(Ⅱ)의 화합물.
제8항에 있어서, Alk₁이 메틸렌이고 R³가 1,2-디히드록시에틸인 일반식(Ⅱ)의 화합물.
제8항에 있어서, Alk₁이 에틸렌이고 R³이 카르복시인 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 약리학적으로 허용되는 그의 비독성염.
제8항에 있어서, Alk₁이 메틸렌이고 R³이 1-카르복시아미노메틸인 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 약리학적으로 허용되는 그의 비독성염.
제8항에 있어서, Alk₁이 메틸렌이고 R³가 1-메틸이미다졸-2-일인 일반식(Ⅱ)의 화합물.
제8항에 있어서, Alk₁이 에틸렌이고 R³가 디메틸아미노인 일반식(Ⅱ)의 화합물.
제8항에 있어서, R⁴가 페닐인 일반식(Ⅲ)의 화합물.
제8항에 있어서, R⁴가 4-니트로페닐인 일반식(Ⅲ)의 화합물.
제8항에 있어서, R⁴가 4-메톡시페닐인 일반식(Ⅲ)의 화합물.
제8항에 있어서, R⁴가 4-아미노페닐인 일반식(Ⅲ)의 화합물.
제8항에 있어서, R⁴가 2-카르복시페닐인 일반식(Ⅲ)의 화합물.
제8항에 있어서, R⁴가 4-니트로-3-카르복시페닐인 일반식(Ⅲ)의 화합물 또는 약리학적으로 허용되는 그의 비독성염.
제8항에 있어서, R⁴가 4-피리딜인 일반식(Ⅲ)의 화합물.
제8항에 있어서, 다음 구조식을 가진 화합물 또는 약리학적으로 허용되는 그의 비독성염.
제7항에 있어서, 다음 일반식(Ⅰb)를 가진 화합물.

상기 식에서 R¹과 Alk₂는 제7항에서 정의한 것과 같다.
제8항에 있어서, 다음 구조식 XVII을 가진 화합물.
제7항의 화합물에 약리학적으로 허용되는 용매, 희석제, 보조제 또는 담체를 혼합시킨 항종양 항생제 조성물.