JPH02501800A - 組換dna産物及び方法 - Google Patents

組換dna産物及び方法

Info

Publication number
JPH02501800A
JPH02501800A JP63507366A JP50736688A JPH02501800A JP H02501800 A JPH02501800 A JP H02501800A JP 63507366 A JP63507366 A JP 63507366A JP 50736688 A JP50736688 A JP 50736688A JP H02501800 A JPH02501800 A JP H02501800A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
antibody molecule
molecule
vector
chain
molecules
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP63507366A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2675380B2 (ja
Inventor
ボドマー,マーク ウィリアム
アデアー,ジョン ロバート
ウィットル,ナイジェル リチャード
リヨンス,アラン ハワード
オーウェンズ,レイモンド ジョン
Original Assignee
セルテク セラピューティクス リミティド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by セルテク セラピューティクス リミティド filed Critical セルテク セラピューティクス リミティド
Publication of JPH02501800A publication Critical patent/JPH02501800A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP2675380B2 publication Critical patent/JP2675380B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3015Breast
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/801Drug, bio-affecting and body treating compositions involving antibody or fragment thereof produced by recombinant dna technology
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/867Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody produced via recombinant dna technology

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 組換DNA産物及び方法 本発明は、ヒンジ領域中に変更された数のシスティン残基を有する変更され抗体 分子(altered antibody molecule ; AAM)、 及び組換DNA技法を用いるその製造方法に関する。
本出願において: r MAbJなる語はモノクローナル抗体を示すために用いられ; 「組換抗体分子J (RAM)なる語は、組換DNA技仇を用いる任意の方法に より生産される抗体を記載するために用いられ、天然免疫グロブリンの任意の類 似体又はその断片を包含し;そして 「ヒト化抗体分子J (humanised antibody molecu le ; HAM)なる語は、ヒト以外の種の免疫グロブリンに由来する抗原結 合部位を有し、分子の残りの免疫グロブリン由来部分がヒトの免疫グロブリンに 由来する分子を記載するために用いられる。該抗原活性部位は定常ドメインに融 合した完全な可変ドメインであってもよく、又は可変ドメイン中の適切なフレー ムワーク領域に移植された(grafted)相補性決定領域(comple− mentarity determining region ; CDR)の みであってもよい。
本明細書において、多くの刊行物に番号をもって言及する。
これらの刊行物は本明細書の末尾に番号順に記載する。
天然免疫グロブリンは多年にわたり、その種々の断片、例えばFab、(Fab ’ )2及びFc断片、を有するものとして知られており、これらは酵素的開裂 により誘導され得る。天然免疫グロブリンは一般に各アームの末端に抗原結合部 位を有するY形天然免疫グロブリン及びその断片は診断において、そしてより限 定された範囲では治療において使用されている。
しかしながら、この様な使用、特に治療における使用は、天然免疫グロブリンの ポリクローナル性により障害されている。
療法例として免疫グロブリン可能性の実現への有意な段階は定義された抗原特異 性のモノクローナル抗体の発見であった(1)。はとんどのMAbは誓歯動物の 牌細胞と誓歯動物の骨髄腫細胞との融合により生産される。従ってこれらは本質 的に誓歯動物MAbである。ヒ) MAbの生産の報告はほとんど無い。
ヒトにおいて抗原性の低い非−ヒ) MAbを製造する提案がなされている。こ の様な技法を一般にMAbを「ヒト化する」(humanize)と称すること ができる。これらの技法は一般に抗体分子のポリペプチド鎖をコードするDNA 配列を操作する組換DNA技法の使用を含む。
この様な方法を実施するための幾つかの初期の方法がBP−A−0171496 (Res、new、Corp0日木、EP−A−0173494(スタッフォー ド大学) 、EP−A−0194276(セルチック・リミテッド)、及びWO −A−8702671(Int、 Gen、Eng、 Inc、 )に記載され ている。
EP−A−87302620,7(Winter)に記載されテイル他ノ方法ニ オいて、マウスMAbの相補性決定領域(CDR)が、長いオリゴヌクレオチド を用いる部位特定変異誘発によりヒト免疫グロブリンの可変ドメインのフレーム ワーク領域に移植(graft)された。
免疫グロブリン、そして特にMAbが癌の診断及び治療において潜在的に非常に 有用であり得ることが広く示唆されている(2 、3)。従って、癌特異抗原に 対して向けられた免疫グロブリン又はMAbの製造を試みる多くの活動が存在す る。
今まで、種々のヒト癌に対して向けられた100を超えるMAbが腫瘍の診断又 は治療の種々の観点において使用されている(4)。
本発明者らの同時に出願された出願Nα(PA 149)には、可変ドメインの 少なくとも相補性決定領域(CDR)がマウスモノクローナル抗体872.3  (872,3MAb)に由来しそしてHAMの残りの免疫グロブリン由来部分が ヒト免疫グロブリンに由来する。抗原結合部位を有するヒト化抗体分子(HAM ) 、及びその製造方法が記載されている。
872.3 MAbは、乳癌のヒト肝臓転移癌の膜富化抽出物に対して生じたI gG1−カッパー型のマウスMAbである(5)。
872.3MAbは多数の研究室において広範に研究されている。
このものは、分子量約101′のムチン(mucin)様分子である腫瘍関連糖 蛋白質TAG−72を認識することが示されている(6)。
免疫組織化学的研究が示すところによれば、B72.3 MAbは直腸結腸癌の 約90%、乳癌の85%及び卵巣癌の95%を認識する。しかしながら、それは 広範囲の正常ヒト組織と交叉反応性を示さない(7〜10)。
療法剤又は診断剤としての免疫グロブリン分子の効力を増加せしめるため、それ にエフェクター又はレボター分子を共有結合により連結すべきことが提案されて いる。しかしながら、これは常に実施できるとは限らない。例えば、結合の可能 性ある部位はチオール基である。チオール基は蛋白質中にシスティン残基として 自然に存在する。しかしながら、この様な残基は比較的に一般的ではなく、しば しば分子の内側に存在しそしてしばしば蛋白質分子内又は蛋白質分子間のジスル フィド橋の形成に関与する。従って、もし天然に存在するシスティン残基を結合 の部位として使用すれば蛋白質の正常なフォルディング及び安定化が妨害される であろうという危険が存在する。
従って、蛋白質分子」二の他の側鎖を修飾してチオール基を生成せしめることが 提案されている。例えば、リジン残基を化学的に修飾してそれらの側鎖上にチオ ール基を生成せしめることができる。しかしながらこの方法は、多数の又はすべ てのこの様な利用可能なりジン残基上にチオール基を生成せしめるであろう。従 って、多数の可能性ある結合部位が存在し、このため結合がどこに生ずるかをあ らかじめ決定することが不可能となるであろう。さらに、多数の結合は蛋白質の 生物学的活性を妨害するであろう。さらに、多数の余分なチオール基のため、新 たなチオール基が鋼量又は領内ジスルフィド結合を形成し、この結合が蛋白質の コンフィグレーション及び機能を変化せしめる可能性がある。
さらに、免疫グロブリンの炭水化物成分の特異的標識化によりエフアクタ−又は レポーター分子を付加することが提案されている(11)。これは一般に、糖残 基の過ヨウ素酸酸化により活性アルデヒドを生成せしめることを含む。しかしな がら、この方法は、蛋白質鎖中のアミノ酸を酸化が変形せしめるという点で不利 である。例えば、メチオニン残基は容易に酸化される。さらに、炭水化物成分は すべて免疫グロブリン分子のFc部分に位置する。従って、Fab又は(Fab ’ )、を標識するためにこの方法を用いることは不可能である。
従って、エフェクター又はレポーター分子を免疫グロブリン分子に再現性よく且 つ効果的に、部位特異的に結合せしめることができる方法を提供することが望ま しいであろう。
本発明の第一の観点に従えば、分子上の表面ポケット中の残基をシスティン残基 に変えることによって該表面ポケット中にチオール基が導入されている変更され た抗体分子を提供する。
あらゆる蛋白質分子がその自然状態において折りたたまれたコンフィグレーショ ンを採用することは当業者により理解されよう。従って、幾つかのアミノ酸残基 の側鎖は折りたたまれた蛋白質の内側にあり、そして幾つかは外側にある。外側 にあるものの内規つかは凸状表面上に位置し、幾かは平な表面上に位置し、そし て幾つかは凹状表面上に位置する。凹状表面はポケットとしても記載される。
平らな又は凸状の表面上の残基の側鎖はおそらく蛋白質の残りの部分上に突出し ていると、当業者は認識するであろう。
従って、この様な残基がシスティン残基に変えられたならそのチオール基はエフ ェクター又はレポーター分子への結合のために利用可能であると予想されよう。
驚くべきことに、そしてこの予想に反して、チオール基がこの様な部位に導入さ れた場合それらはその様な結合のために利用されないことが見出された。さらに 、ポケット中のアミノ酸上の側鎖として導入されたチオール基はその様な結合の ために利用可能でないと予想されよう。しかしながら、驚くべきことに、そして この予想に反して、この様なチオール基は利用可能であり、そして抗体分子にエ フェクター及びレポーター分子を結合せしめるために使用され得ることが見出さ れた。さらに、この様なチオール基の導入が蛋白質の巨大分子構造を大きく変化 せしめることが予想された。再び、驚くべき且つ予想外のことには、それは起ら ないことが見出される。
本発明の変更された抗体分子は、完全な長さの重鎮及び軽鎖を有する完全な抗体 分子;その断片、例えばFab断片又は(Fab’ ) 2断片;あるいは軽鎖 又は重鎮の二量体を含むことができる。但し、特定の部位に導入されており且つ 結合のために利用可能なチオール基をこの様な分子が有することを条件とする。
この発明に関して、「結合するJ (bonding)とは、システィン残基の チオール基に共有結合を形成することを意味する。
変更された抗体分子は常用のペプチド合成によって製造することができることが 予想される。しかしながら、変更された抗体分子を組換DNA技法により製造す るのが好ましい。
本発明の第二の観点に従えば、組換抗体分子の1つの鎖の結合能力を変えるため の方法が提供され、この方法は、(1)前記1つの釦をコードするオペロンを含 有するがしかし該鎖の表面ポケット中に位置するあらかじめ選択されたアミノ酸 残基をコードする配列がシスティン残基をコードする配列に変えられている発現 ベクターを生成せしめる:ことを含んで成る。
所望により、単一のポリペプチド鎖中02個以上のアミノ酸残基を変えることが でき、あるいは2本の鎖のそれぞれに存在する1個又は複数個のアミノ酸残基を 変えることができる。
好ましくは、配列の変更は部位特異的変異誘発によって行われる。
本発明のこの観点の本質的特徴は、変更されるべきアミノ酸残基の位置の事前選 択である。エフェクター又はレポーター分子をRAMに結合せしめる(atta ch)ことを可能にするためにシスティン残基の側鎖としてチオール基を導入す ることが望ましいから、次のことが望ましい。
(i)変更されるべきアミノ酸の側鎖はシスティン残基に類似する大きさを有す べきであり; (ii)変更されるべき残基との領内水素結合が存在せず:(iii)システィ ン残基と共に生成するかもしれない領内水素結合が存在せず: (iv)該チオール基はRAMの他の部分と相互作用すべきではなく、又は該部 分により隠されるべきではなく;そして(v)該システィン残基は小分子、例え ば直径約(113nmの分子によってのみ接近されることができそしてより大き なサイズの分子、例えば直径0.5 nmより大きい分子によっては接近され得 ない。従って、システィン残基はエフェクター又はレポーター分子への結合のた めにのみ利用可能であり、そして同一の鎮又は他の鋼上の類似のシスティン残基 への結合のためには利用可能でない。
最初の3つの条件は、新たなアミノ酸残基への変更がRAMのコンホーメーショ ン及び安定性になんらの不都合な効果を有しないことを可能な限り保証するであ ろう。第二の2つの規準は、チオール基がエフェクター又はレポーター分子゛の みへの結合のために利用可能でありそして他の同様に変異された鎖への結合のた めには利用可能でなく、従ってジスルフィド結合による架橋を回避することを可 能な限り保証する。
(i)の要件を満足する残基はスレオニン及びセリンを包含する。従って、変更 される残基は免疫グロブリン分子の表面ポケット中のセリン又はスレオニン残基 である。
この様な変更を行うための好ましい部位はCH1ドメインである。なぜなら、こ こでの変更及びここへの分子の結合は抗原の結合、及び変更された抗体分子のF c部分(もし存在するとすれば)のエフェクター機能を妨害しないらしいからで ある。好ましくは、変更されるC)+1ドメイン中の残基は5er156又はT hr173 [Kabat等(14)に記載されている番号付与系による〕であ る。しかしながら、変更のための好ましい部位は抗体分子の任意のドメイン中に 見出し得る。
好ましくは、本発明の第二の観点の方法は、(b)前記ベクターによりセルライ ンをトランスフェクトし;そして (C)該トランスフェクトされたセルラインを培養して結合能力の変化した組換 抗体分子を生産せしめる;段階を含んで成る。
所望により、変更されるべき抗体は、前記の方法のいずれかにより製造される「 ヒト化されたJ (humanised)抗体である。
本発明の第二の観点の方法において、ベクターが単一の抗体ポリペプチド鎖のみ をコードする場合、この方法の生成物は二量体分子であろう。天然免疫グロブリ ンの様に四量体分子が要求される場合、2つの代替可能な方策の1つを用いるこ とができる。
第一の方法においては、セルラインをさらに第二のベクターにより形質導入し、 第一のベクターは重鎮由来のポリペプチドをコードしそして第二のベクターは相 補的軽鎖由来のポリペプチドをコードする。好ましくは、各ポリペプチドが同程 度に発現されることを可能な限り保証するために、コード配列及び選択マーカー に関する場合を除き、ベクターは同一である。
第二の方法においては、相補的軽鎖由来のポリペプチド及び重鎮由来のポリペプ チドをコードする配列を含む。
ベクターが重鎮ポリペプチドのみをコードする場合、相補的軽鎖を天然に分泌す る宿主細胞を用いることにより組換抗体分子を製造することが可能である。
本発明はまた、本発明の方法において使用されるクローニングベクター及び発現 ベクター並びに形質導入されたセルライン、本発明の変更された分子を含んで成 る療法用及び診断片組成物、並びに療法及び診断におけるこの様な組成物の使用 を含む。
レポーター又はエフェクター分子は変更された抗体分子に任意の常法により結合 せしめることができる。例えば、放射能標識を抗体に結合せしめる方法は本発明 者等の先の英国特許出願Nα8800843及びNα8812257に記載され ている。
ベクターを作製するだめの一般的方法、形質導入法、及び培養方法はそれ自体よ く知られており、そして本発明の部分を構成しない。これらの方法は例えば参照 文献(12)及び(13)において示されている。
本発明をここに、例により、添付図面に言及しながら記載する。これらの図は、 ヒト化B 72.3抗体分子のB72.3 )IAMC)11ドメインのDNA 及びアミノ酸配列を、部位特定変異誘発のために使用される8種類のオリゴヌク レオチドブライマーの配列と共に示している。
上に言及した本発明者らの係属中の出願Nα(PA 149)において、種々の ヒトIgG重鎮ドメインを有するヒト化B72.3 MAbの製造が記載されて いる。その出願はまた、ヒト化872.3F (ab’ ) 2断片の製造を示 している。本発明書で後記する結果は、該係属中の出願に示されているようなヒ ト化B72.3 MAbの使用により得られた。
ヒト化872.3分子のCHIドメインのヌクレオチド配列及びアミノ酸配列は 図に示されており、今これに言及する。ヒト化872.3抗体分子が共有結合を 介してエフェクター又はレポーター分子に結合されることを可能にするために、 表面ポケット中に位置しそして前に(i)〜(v)として記載した規準を満足さ せるセリン又はスレオニン残基の探索を行った。
比較のため、すべての規準に合致しない他のセリン又はスレオニン残基をも選択 した。
872.3分子のCHIドメインはヒト抗体KOLのそれとかなりの配列相同性 を示す。KOL抗体はKabat等(14)により記載されている。KOL抗体 の結晶構造はX−線結晶写真(crystal=1ography)により決定 されている。必要なアミノ酸置換を行うため、KOLCHl、ドメインの構造に 基いてB72.3C)11ドメインの構造を推定することが可能である。
この推定に基いて多くのセリン残基及びスレオニン残基を選択した。すべてがヒ ト化872.3分子の表面上に位置することが推定されたが、しかしながら幾つ かはポケット中にあり、幾つかは平らな表面上にあり、そして幾つかは凸状表面 上にあることが推定された。標的残基はThr153 、5er156 、5e r163 。
Thr167 、5er168 、 Thr173 、 Thr205、及びT hr217と同定された。
ここで用いられる番号付与はKabat等(14)により記載されているそれに 相当する。
ギヤyプドーデコプレックス軸apped−duplex)法(15)に従う部 位特定変異誘発実験において使用するためのオリゴヌクレオチドブライマーを調 製した。これらは図に示しである。
各場合において、上記のスレオニン残基又はセリン残基の1つをシスティン残基 に変えるように設計された。ここで変更されたDNAベクターを生成せしめ、そ してチェインターミネーション法(16)により配列決定した。
次に、すべての変更された遺伝子断片を、哺乳類細胞系での発現のためにプラス ミドPEE6. HCMV (i7)に再クローン化した。このプラスミドはヒ ト・サイトメガロウィルスからの強力なプロモーター/エンハンサ−転写制御要 素を含有する(17)。もとの8個の提案されたシスティン変異体の内5個、す なわちNα1,3,4.6、及び7をこの段階で採用した。
変更されたヒト化B 72.3抗体の合成及び集成をCO3細胞での一時的(t ransient)発現により分析した(17)。5種類の重鎮変異体遺伝子の それぞれを、ヒト化B 72.3軽鎖遺伝子と共に該細胞にトランスフェクトし た。細胞上清をELISA測定を用いて872.3抗原結合活性について測定し た。免疫グロブリンの分泌及び集成をさらに、トランスフェクトされたCOS細 胞の生合成標識化及び免疫沈澱により評価した。両タイプの分析の結果が示すと ころによれば、5種類すべてのチオール変異体遺伝子が十分に集成された4量体 抗体分子を生産し、その抗原結合性は変更されていないヒト化B 72.3分子 と区別できなかった。どの変異体も凝集した分子を生成しないようであった。
この一時的発現系は、さらに詳細な生化学的特徴付けのために十分な量の抗体を 生産しなかった。従って、変更された8 72、3抗体を発現する安定なセルラ インを樹立した。変異体重鎮遺伝子を、ヒト化B 72.3軽鎮をすでに生産す るチャイニーズ・ハムスター卵JK(CIIO)セルラインに、工゛レクトロポ レ−ジョンによりトランスフェクトした。トランスフェクトされたセルラインを pEE6.l(CMVプラスミドに導入された薬剤耐性マーカーを用いて選択し 、そして変更された872.3抗体を生産する細胞をクローン化しそして拡張し た。
組換抗体(変更されていないもの及びチオール変異体の両者)をCll0細胞上 清から、プロティンA−セファロース上でのアフィニティークロマトグラフィー により精製しそして限外濾過により濃縮した。精製された抗体は十分に集成され ておりそして凝集していないことが5OS−ポリアクリル゛アミドゲル電気泳動 及びゲル濾過HPLCにより示され、一時的発現の実験の結果が確認された。抗 原結合がELISAにより証明された。まとめると、これらの結果が示すところ によれば、重鎮のC)IIドメインの表面の単一システィン残基の置換は変更さ れた抗体の合成、集成、及び抗原結合活性に影響を与えなかった。分析されたす べての変異体が同じ挙動を示したから、これは導入されたチオール基の地理的位 置とは無関係のようである。
各免疫グロブリン分子は2本の重鎮を含有するから、システィンが還元型のまま であれば変更された抗体は2個の遊離チオールを有するはずである。表面システ ィンの酸化還元状態を4.4′−ジチオジピリジンを用いるタイトレージョン( t 1trat 1on)により測定した。抗体サンプル(0,5mg/ ml )を4.4′−ジチオピリジンに加え(最終濃度0.5mM)、そして遊離チオ ール基との反応を324nmにおける吸光度の増加によりモニターした。結果を 下記の表に要約する。
聚 ヒト化B72.3チオール変異体上の遊離−3H基の1 ポケット 0.97 3 凸状部 0.30 4 平面 0.30 6 ポケット 1.10 7 平面 0.30 872.3 対照 0.30 変異体3.4及び7は、遊離チオールの数について、変更されていないヒト化8 72.3対照とおよそ同じ値を有し、導入されたシスティンが結合のために利用 可能でないことを示している。これらは、同じようにして、例えば生体内又は生 体外でのグルタチオーンとの反応によりブロックされている可能性が最も高いと 推定される。他方、変異体1及び6は抗体分子当り少なくとも1個の遊離チオー ル基に相当する、対照より実質的に高い、タイトレージョンレベルを与えた。こ れと、分子当り2個のチオールの予想される値との喰い違いは、チオールの幾ら かの酸化が生じたことを示唆した。
しかしながら、この結果が示すところによれば、平らな表面(変異体4及び7) 又は凸状表面(変異体3)に存在する、すなわち比較的高い接解表面接近性を有 する、システィンは、それらのチオール基がブロックされているらしく、そのた め部位特異的結合のためには適当でないようである。これに対して、ポケット部 位に位置する2個のシスティンは抗体分子当り少なくとも1個の遊離チオールの 程度で結合のために利用可能な形態のままであった。
遊離チオール基を有することが示された変異体をエフェクター又はレポーター分 子の部位特異的結合のために使用することができるか否かを調るため、チオール 特異的リンカ−を合成した。チロシンアミド[0,5M PIPBS緩衝液(p H6,8)中0.1 mM)をN−サクシニミジル−3−マレイミドプロピオネ ート(1,4〜ジオキサン中0.015mM)と反応せしめることにより2−、 (3−N−7レイミジル)−N−プロピルアミド−3−(4−ヒドロキシ)フェ ニルプロパノアミドを得た。
このリガンドをチロシンマレイミドと称し、これを、クロラミンTを用いて+2 5ヨウ素により標識した。この放射性化合物を逆相HPL(:’により精製した 。チオール変異体の1つ(Nα6)をヨウ素化プローブと共にインキュベートし た(p)!5.5、室温にて1時間)。標識された抗体を未導入リガンドからゲ ル濾過又はプロティンA−セファロース沈澱により分離し、そして5O5−ポリ アクリルアミドゲル電気泳動/オートラジオグラフィーにより分析した。ヒト化 マウスB72゜3及びハイブリドーマ由来マウス872.3の両者を陰性対照と して含めた。
リジン残基にチオール基を非選択的に導入する2−イミノチオランと反応したヒ ト化872.5を標識化法のための陽性対照として使用した。この分析の結果は 、予想通り、チオール特異的リガンドであるチロシンマレイミドがチオール変異 体872、3の重鎮のみを標識したことを示した。これに対して、非特異的に、 変形されたヒト化872.3は重鎮及び軽鎖の両者上で標識され、そしてさらに 多数の凝集した分子を生じさせた。従って、部位特異的に標識された抗体はより 均一な生成物を生成した。
前記の方法が示すところによれば、システィン残基を抗体分子の重鎮に、レポー ター分子が該抗体分子に導入されたチオールを介して部位特異的に結合され得る ような位置に、置換することができる。チオール基がエフェクター又はレポータ ー分子に効果的に結合することができるためには、該チオール基は表面ポケット に導入されなければならないことをそれは示している。
抗体分子の重鎮又は軽鎖の異るドメインに対して同じ方法を行うことができるこ とが予想されよう。適切なア、ミノ酸残基をその中に有する適当な表面ポケット が存在することが必要なすべてである。
本発明は例示的にのみ上に記載され、そして本発明の範囲を逸脱することなく詳 細な点の変更を行うことができることは明らかであろう。
参考文献 John Wiley & 5ons、 New York、 1906゜3、  Levy & Miller、 Ann、RevoMed、、 34.107 −116.1983゜4、 Schlom & Weeks、 Importa nt Advances in Oncology。
170−192. Wippincott、 Ph1ladelphia、 1 985゜11、 0’5hannessy & ロuarles、J、Immu nol、Methods、99. 153−161、1987゜ 12、 Maniatis等、 Mo1ecular Cloning、 Co ]d Spring t(arbor。
New York、 1982゜ 13、 Primrose及びOld、 Pr1nciples of Gen e Manipulation。
Blackwell、 0xford、 1980゜14、 Kabat等、  5equences of Proteins of Immunologic alInterest、 Fourth Edition、 Ll、S、Dep t、of Health and)1uman 5ervices、 1987 ゜ ”17、 Whittle等、 Prot、Eng、、 1.6.499− 530.1985゜311% CTGAGTTCCAGCACACCGTCAC ボケ゛ソト*3HTGCACGCCGCAGGTCAGGGCG 凸 状(CG TI NOTCCACGACACGCACACCGGTTCG 平 面[GTJ *5)l CACGCCGC了GCAC,!、GGにCGCCT 凸 状+GT l *6m AGCCGGGAAGCAGτGCACGCCG ポケット(GTJ *7x GCAGGτGTAGCACTTCGTGCCC平 面手続補正書(方 式) %式% 1、 事件の表示 PCT/GB8 B100729 2、 発明の名称 組換DNA産物及び方法 3、補正をする者 事件との関係 特許出願人 名称 セルチク リミティド 4、代理人 住所 〒105東京都港区虎ノ門−丁目8番10号6、補正の対象 (1)特許法第184条の5第1項の規定による書面の「特許出願人の代表者」 および「発明の名称」の欄 (2)明細書の翻訳文第1頁の「発明の名称」の欄(3)明細書及び請求の範囲 の翻訳文 (4)委任状 7、補正の内容 (1)(2)(4) 別紙の通り (3)明細書、請求の範囲の翻訳文の浄書(内容に変更なし) 8、添付書類の目録 (])訂正した特許法第184条の 5第1項の規定による書面 1通 (2)明細書の翻訳文第1頁 1通 (3)明細書及び請求の範囲の翻訳文 各1通(4)委任状およびその翻訳文  各1通国際調査報告

Claims (11)

    【特許請求の範囲】
  1. 1.分子上の表面ポケット中の残基をシステイン残基に変えることにより該表面 ポケット中にチオール基が導入されている、変更された抗体分子。
  2. 2.組換DNA技法により生産される請求項1に記載の変更された抗体分子。
  3. 3.完全な抗体分子、Fab断片、又はF(ab′)2断片である、請求項1又 は2に記載の変更された抗体分子。
  4. 4.前記変更がCH1ドメイン中に存在する、請求項1〜3のいずれか1項に記 載の変更された抗体分子。
  5. 5.前記変更される残基がSer156又はThr173である、請求項4に記 載の変更された抗体分子。
  6. 6.組換抗体分子の1つの鎖の結合能力を変更する方法であって、 (a)前記1つの鎖をコードするオペロンを含有するが、該鎖の表面ポケット中 に位置するあらかじめ選択されたアミノ酸をコードする配列がシステイン残基を コードする配列に変えられている発現ベクターを調製することを含んで成る方法 。
  7. 7.前記変化が部位特定変異誘発により行われる、請求項6に記載の方法。
  8. 8.(b)前記ベクターによりセルラインをトランスフェクトし;そして (c)該トランスフェクトされたセルラインを培養して変化した結合能力を有す る組換抗体分子を生成せしめる;段階をさらに含んで成る方法。
  9. 9.前記セルラインがさらに第二のベクターによりトランスフェクトされ、第一 のベクターが重鎖由来のポリペプチドをコードしており、そして第二のベクター が相補的軽鎖由来のポリペプチドをコードしている、請求項8に記載の方法。
  10. 10.前記発現ベクターが、相補的軽鎖由来のポリペプチド及び重鎖由来のポリ ペプチドをコードする配列を含有する、請求項8に記載の方法。
  11. 11.請求項2又はそれに従属する請求項に記載の変更された抗体分子を製造す るための、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法。
JP63507366A 1987-09-04 1988-09-05 組換dna産物及び方法 Expired - Lifetime JP2675380B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB878720833A GB8720833D0 (en) 1987-09-04 1987-09-04 Recombinant dna product
GB8720833 1987-09-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH02501800A true JPH02501800A (ja) 1990-06-21
JP2675380B2 JP2675380B2 (ja) 1997-11-12

Family

ID=10623277

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP63507366A Expired - Lifetime JP2675380B2 (ja) 1987-09-04 1988-09-05 組換dna産物及び方法
JP63507237A Pending JPH02501191A (ja) 1987-09-04 1988-09-05 組換え抗体及び方法
JP63507236A Expired - Lifetime JP2761012B2 (ja) 1987-09-04 1988-09-05 組換dna産物及び方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP63507237A Pending JPH02501191A (ja) 1987-09-04 1988-09-05 組換え抗体及び方法
JP63507236A Expired - Lifetime JP2761012B2 (ja) 1987-09-04 1988-09-05 組換dna産物及び方法

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5219996A (ja)
EP (3) EP0347433B1 (ja)
JP (3) JP2675380B2 (ja)
AT (2) ATE102254T1 (ja)
AU (3) AU614303B2 (ja)
CA (2) CA1337640C (ja)
DE (2) DE3888172T2 (ja)
DK (3) DK215889D0 (ja)
FI (3) FI892137A0 (ja)
GB (1) GB8720833D0 (ja)
WO (3) WO1989001782A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011509675A (ja) * 2008-01-18 2011-03-31 メディミューン,エルエルシー 部位特異的コンジュゲーションのためのシステイン操作抗体

Families Citing this family (216)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU625856B2 (en) * 1987-07-15 1992-07-16 United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The Second generation monoclonal antibodies having binding specificity to tag-72 and human carcinomas and methods for employing the same
GB8720833D0 (en) * 1987-09-04 1987-10-14 Celltech Ltd Recombinant dna product
JP3095168B2 (ja) * 1988-02-05 2000-10-03 エル. モリソン,シェリー ドメイン‐変性不変部を有する抗体
KR0161525B1 (ko) * 1988-10-19 1998-12-01 리챠드 지. 워터맨 암치료를 위한 신규의 고친화성 변형된 항체군
US5162218A (en) * 1988-11-18 1992-11-10 The Regents Of The University Of California Conjugated polypeptides and methods for their preparation
US5215889A (en) * 1988-11-18 1993-06-01 The Regents Of The University Of California Catalytic and reactive polypeptides and methods for their preparation and use
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
IL162181A (en) * 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
GB8903021D0 (en) * 1989-02-10 1989-03-30 Celltech Ltd Chemical compounds
US5714149A (en) * 1989-02-10 1998-02-03 Celltech Therapeutics Limited Crosslinked antibodies and processes for their preparation
GB8903022D0 (en) * 1989-02-10 1989-03-30 Celltech Ltd Chemical compounds
US5354554A (en) * 1989-02-10 1994-10-11 Celltech Limited Crosslinked antibodies and processes for their preparation
GB8905669D0 (en) * 1989-03-13 1989-04-26 Celltech Ltd Modified antibodies
CA2018248A1 (en) * 1989-06-07 1990-12-07 Clyde W. Shearman Monoclonal antibodies against the human alpha/beta t-cell receptor, their production and use
GB8916400D0 (en) * 1989-07-18 1989-09-06 Dynal As Modified igg3
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
EP0438310A1 (en) * 1990-01-19 1991-07-24 Merck & Co. Inc. Method for producing recombinant immunoglobuline
US5185433A (en) * 1990-04-09 1993-02-09 Centocor, Inc. Cross-linking protein compositions having two or more identical binding sites
US5976531A (en) * 1990-04-19 1999-11-02 The Dow Chemical Company Composite antibodies of human subgroup IV light chain capable of binding to tag-72
US6495137B1 (en) 1990-04-19 2002-12-17 The Dow Chemical Company Humanized anti-tag-72 monoclonal antibodies using human subgroup 4 kappa light chains
GB9009548D0 (en) * 1990-04-27 1990-06-20 Celltech Ltd Chimeric antibody and method
GB9009549D0 (en) * 1990-04-27 1990-06-20 Celltech Ltd Recombinant antibody and method
GB2276169A (en) * 1990-07-05 1994-09-21 Celltech Ltd Antibodies specific for carcinoembryonic antigen
GB9014932D0 (en) * 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
GB9022543D0 (en) * 1990-10-17 1990-11-28 Wellcome Found Antibody production
US5958413A (en) * 1990-11-01 1999-09-28 Celltech Limited Use of antibodies to TNF or fragments derived thereof and xanthine derivatives for combination therapy and compositions therefor
WO1994004679A1 (en) * 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US6800738B1 (en) 1991-06-14 2004-10-05 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
EP1400536A1 (en) 1991-06-14 2004-03-24 Genentech Inc. Method for making humanized antibodies
AU654563B2 (en) * 1991-07-24 1994-11-10 Imperial Chemical Industries Plc Proteins
EP0861893A3 (en) * 1991-09-19 1999-11-10 Genentech, Inc. High level expression of immunoglobulin polypeptides
WO1993012231A1 (en) * 1991-12-13 1993-06-24 Dow Chemical (Australia) Limited Composite antibodies of human subgroup iv light chain capable of binding to tag-72
US5869619A (en) * 1991-12-13 1999-02-09 Xoma Corporation Modified antibody variable domains
US5766886A (en) * 1991-12-13 1998-06-16 Xoma Corporation Modified antibody variable domains
US5824307A (en) 1991-12-23 1998-10-20 Medimmune, Inc. Human-murine chimeric antibodies against respiratory syncytial virus
JPH07505767A (ja) 1992-02-06 1995-06-29 シェリング・コーポレーション ヒトインターロイキン−5に対するヒト化モノクローナル抗体の設計,クローン化および発現
US6056957A (en) * 1994-08-04 2000-05-02 Schering Corporation Humanized monoclonal antibodies against human interleukin-5
GB9422383D0 (en) * 1994-11-05 1995-01-04 Wellcome Found Antibodies
US5811524A (en) * 1995-06-07 1998-09-22 Idec Pharmaceuticals Corporation Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof
US7569674B2 (en) * 1998-05-04 2009-08-04 Innexus Biotechnology International Limited Autophilic antibodies
US20040185039A1 (en) * 2002-08-30 2004-09-23 Heinz Kohler Therapeutic applications of noncovalent dimerizing antibodies
US20050033033A1 (en) * 1998-05-04 2005-02-10 Heinz Kohler Trans-membrane-antibody induced inhibition of apoptosis
US6365124B1 (en) * 1998-02-06 2002-04-02 Biocrystal, Ltd. Compositions for detecting and surgically removing lymphoid tissue involved in tumor progression
US20090208418A1 (en) * 2005-04-29 2009-08-20 Innexus Biotechnology Internaltional Ltd. Superantibody synthesis and use in detection, prevention and treatment of disease
GB9812545D0 (en) 1998-06-10 1998-08-05 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
US6818749B1 (en) 1998-10-31 2004-11-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Variants of humanized anti carcinoma monoclonal antibody cc49
ES2349348T3 (es) * 2000-01-27 2010-12-30 Medimmune, Llc Anticuerpos neutralizantes de rsv de ultra alta afinidad.
US7153701B1 (en) * 2000-02-17 2006-12-26 Hamamatsu Photonics K.K. Method for quantitatively detecting antigen
CA2401652A1 (en) * 2000-03-01 2001-09-07 Medimmune, Inc. High potency recombinant antibodies and method for producing them
WO2001081401A1 (fr) 2000-04-21 2001-11-01 Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. Nouvelles collectines
US6855493B2 (en) 2000-11-28 2005-02-15 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US7179900B2 (en) * 2000-11-28 2007-02-20 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US7396917B2 (en) * 2000-12-05 2008-07-08 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Rationally designed antibodies
US20040253242A1 (en) * 2000-12-05 2004-12-16 Bowdish Katherine S. Rationally designed antibodies
ATE414720T1 (de) * 2000-12-05 2008-12-15 Alexion Pharma Inc Rationell entworfene antikörper
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030133939A1 (en) 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
WO2002096948A2 (en) 2001-01-29 2002-12-05 Idec Pharmaceuticals Corporation Engineered tetravalent antibodies and methods of use
WO2002062850A2 (en) * 2001-02-02 2002-08-15 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Hybrid antibodies and uses thereof
AU2002248571B2 (en) * 2001-03-07 2007-01-18 Merck Patent Gmbh Expression technology for proteins containing a hybrid isotype antibody moiety
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
AU2003248744C1 (en) 2002-06-28 2009-12-24 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Humanized anti-TAG-72 CC49 for diagnosis and therapy of human tumors
MXPA05004677A (es) 2002-10-31 2005-11-17 Genentech Inc Metodos y composiciones para aumentar la produccion de anticuerpos.
GB0309126D0 (en) 2003-04-17 2003-05-28 Neutec Pharma Plc Clostridium difficile focussed antibodies
KR101412271B1 (ko) 2003-05-09 2014-06-25 듀크 유니버시티 Cd20-특이적 항체 및 이를 이용한 방법
EP1641826A2 (en) * 2003-06-27 2006-04-05 Biogen Idec MA Inc. Use of hydrophobic-interaction-chromatography or hinge-region modifications for the production of homogeneous antibody-solutions
AU2004255216B2 (en) 2003-07-01 2010-08-19 Immunomedics, Inc. Multivalent carriers of bi-specific antibodies
GB0315457D0 (en) * 2003-07-01 2003-08-06 Celltech R&D Ltd Biological products
GB0315450D0 (en) * 2003-07-01 2003-08-06 Celltech R&D Ltd Biological products
US7989594B2 (en) 2003-07-01 2011-08-02 Celltech R & D Limited Modified antibody fab fragments
JP4818917B2 (ja) * 2003-08-08 2011-11-16 イミューノメディクス、インコーポレイテッド 腫瘍および罹患細胞のアポトーシスを誘発するための二重特異性抗体
US7589181B2 (en) 2003-08-29 2009-09-15 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Minimally immunogenic variants of SDR-grafted humanized antibody CC49 and their use
GB0325836D0 (en) * 2003-11-05 2003-12-10 Celltech R&D Ltd Biological products
AU2004292393C1 (en) 2003-11-21 2011-08-04 Ucb Pharma S.A. Method for the treatment of multiple sclerosis by inhibiting IL-17 activity
GB0329825D0 (en) * 2003-12-23 2004-01-28 Celltech R&D Ltd Biological products
WO2005103086A1 (en) 2004-04-23 2005-11-03 Bundesrepublik Deutschland letztvertreten durch das Robert-Koch-Institut vertreten durch seinen Präsidenten Method for the treatment of t cell mediated conditions by depletion of icos-positive cells in vivo
US20100111856A1 (en) * 2004-09-23 2010-05-06 Herman Gill Zirconium-radiolabeled, cysteine engineered antibody conjugates
CA2580141C (en) 2004-09-23 2013-12-10 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
CA2585891A1 (en) * 2004-10-29 2006-05-11 Medimmune, Inc. Methods of preventing and treating rsv infections and related conditions
WO2006074399A2 (en) * 2005-01-05 2006-07-13 Biogen Idec Ma Inc. Multispecific binding molecules comprising connecting peptides
BRPI0607486B8 (pt) 2005-03-03 2021-05-25 Immunomedics Inc anticorpo humanizado l243 contra hla-dr presente nas células hladr+,composição farmacêutica, kit e uso dos referidos anticorpos.
US20100104564A1 (en) * 2005-03-29 2010-04-29 Genevieve Hansen Altered Antibody Fc Regions and Uses Thereof
USRE47223E1 (en) 2005-06-20 2019-02-05 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
GB0514779D0 (en) * 2005-07-19 2005-08-24 Celltech R&D Ltd Biological products
UA97469C2 (uk) 2005-07-25 2012-02-27 Емерджент Продакт Дівелопмент Сіетл, Елелсі Гуманізована специфічна до cd37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну
JP2009507980A (ja) * 2005-09-14 2009-02-26 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム 櫛形ポリマー
PT1960430E (pt) 2005-12-09 2015-01-05 Ucb Pharma Sa Moléculas de anticorpo com especificidade para il-6 humana
NZ569988A (en) 2006-02-01 2011-09-30 Cephalon Australia Pty Ltd Domain antibody construct which binds to human TNF-alpha and contains a modified hinge region sequence and a truncated CH1 domain
NZ573646A (en) 2006-06-12 2012-04-27 Wyeth Llc Single-chain multivalent binding proteins with effector function
GB0614780D0 (en) 2006-07-25 2006-09-06 Ucb Sa Biological products
GB0619291D0 (en) 2006-09-29 2006-11-08 Ucb Sa Altered antibodies
GB0620729D0 (en) 2006-10-18 2006-11-29 Ucb Sa Biological products
ES2523915T5 (es) 2006-12-01 2022-05-26 Seagen Inc Agentes de unión a la diana variantes y usos de los mismos
CN103214577B (zh) 2007-03-22 2015-09-02 生物基因Ma公司 特异性结合cd154的包括抗体、抗体衍生物和抗体片段在内的结合蛋白及其用途
AU2008251608B2 (en) 2007-05-08 2014-03-27 Genentech, Inc. Cysteine engineered anti-MUC16 antibodies and antibody drug conjugates
EP1997830A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 AIMM Therapeutics B.V. RSV specific binding molecules and means for producing them
JP2010528664A (ja) * 2007-06-08 2010-08-26 ダウ グローバル テクノロジーズ インコーポレイティド Ch1ドメインの切断による可溶性抗体断片の発現
US8865875B2 (en) 2007-08-22 2014-10-21 Medarex, L.L.C. Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with C-terminal extensions
GB0717337D0 (en) 2007-09-06 2007-10-17 Ucb Pharma Sa Method of treatment
NZ584514A (en) 2007-10-19 2012-07-27 Genentech Inc Cysteine engineered anti-tenb2 antibodies and antibody drug conjugates
BRPI0819063A2 (pt) 2007-11-27 2020-08-18 The University Of British Columbia método para tratamento de artrite, anticorpo, hibridoma, antagonista de 14-3-3, usos de um antagonista de 14-3-3, composições farmacêuticas, método para redução da expressão de mmp no sinóvio de um paciente e usos de uma composição farmacêutica
EP2220117A2 (en) 2007-11-30 2010-08-25 Kalobios Pharmaceuticals, Inc. Antibodies to the pcrv antigen of pseudomonas aeruginosa
US20110044894A1 (en) 2008-03-26 2011-02-24 Cellerant Therapeutics, Inc. Immunoglobulin and/or Toll-Like Receptor Proteins Associated with Myelogenous Haematological Proliferative Disorders and Uses Thereof
NZ603059A (en) 2008-04-11 2014-07-25 Emergent Product Dev Seattle Cd37 immunotherapeutic and combination with bifunctional chemotherapeutic thereof
GB0807413D0 (en) 2008-04-23 2008-05-28 Ucb Pharma Sa Biological products
JP5782385B2 (ja) 2009-02-17 2015-09-24 ユーシービー ファーマ ソシエテ アノニム ヒトox40に対する特異性を有する抗体分子
GB0904214D0 (en) 2009-03-11 2009-04-22 Ucb Pharma Sa Biological products
CA2758964A1 (en) 2009-04-16 2010-10-21 Abbott Biotherapeutics Corp. Anti-tnf-.alpha. antibodies and their uses
UA104626C2 (ru) 2009-06-17 2014-02-25 Эббви Биотерапеутикс Инк. Анти-vegf антитело и его применение
EP2475682B1 (en) 2009-09-10 2018-01-31 UCB Biopharma SPRL Multivalent antibodies
GB0916630D0 (en) 2009-09-22 2009-11-04 Secr Defence Antibody
US8568726B2 (en) 2009-10-06 2013-10-29 Medimmune Limited RSV specific binding molecule
PT2488551T (pt) 2009-10-16 2018-10-31 Inst Nat Sante Rech Med Anticorpos monoclonais contra a progastrina e suas utilizações
US9234037B2 (en) 2009-10-27 2016-01-12 Ucb Biopharma Sprl Method to generate antibodies to ion channels
GB0922435D0 (en) 2009-12-22 2010-02-03 Ucb Pharma Sa Method
JP6095368B2 (ja) 2009-10-27 2017-03-15 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム 機能改変するNav1.7抗体
GB0922434D0 (en) 2009-12-22 2010-02-03 Ucb Pharma Sa antibodies and fragments thereof
TW201122101A (en) 2009-10-28 2011-07-01 Facet Biotech Corp Anti-EGFR antibodies and their uses
GB0920127D0 (en) 2009-11-17 2009-12-30 Ucb Pharma Sa Antibodies
GB0920324D0 (en) 2009-11-19 2010-01-06 Ucb Pharma Sa Antibodies
US8937159B2 (en) 2009-12-16 2015-01-20 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-HER2 antibodies and their uses
GB201000467D0 (en) 2010-01-12 2010-02-24 Ucb Pharma Sa Antibodies
CN102892786B (zh) 2010-03-11 2016-03-16 Ucb医药有限公司 Pd-1抗体
TW201134488A (en) * 2010-03-11 2011-10-16 Ucb Pharma Sa PD-1 antibodies
CN106432474A (zh) 2010-03-12 2017-02-22 艾伯维生物医疗股份有限公司 Ctla4蛋白和其用途
TR201903279T4 (tr) 2010-03-25 2019-03-21 Ucb Biopharma Sprl Disülfür stabilize edilmiş DVD-IG molekülleri.
GB201005064D0 (en) 2010-03-25 2010-05-12 Ucb Pharma Sa Biological products
CA2799540A1 (en) 2010-06-08 2011-12-15 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
GB201014033D0 (en) 2010-08-20 2010-10-06 Ucb Pharma Sa Biological products
RS56298B1 (sr) 2011-01-14 2017-12-29 Ucb Biopharma Sprl Antitelo koje vezuje il-17a i il-17f
EP2758432B1 (en) 2011-09-16 2019-03-06 UCB Biopharma SPRL Neutralising antibodies to the major exotoxins tcda and tcdb of clostridium difficile
UA112203C2 (uk) 2011-11-11 2016-08-10 Юсб Фарма С.А. Злитий білок біоспецифічного антитіла, який зв'язується з ox40 людини та сироватковим альбуміном людини
WO2013078455A2 (en) 2011-11-23 2013-05-30 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Proteomic identification of antibodies
GB201203071D0 (en) 2012-02-22 2012-04-04 Ucb Pharma Sa Biological products
GB201203051D0 (en) 2012-02-22 2012-04-04 Ucb Pharma Sa Biological products
GB201208370D0 (en) 2012-05-14 2012-06-27 Ucb Pharma Sa Antibodies
US20140154255A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-vegf antibodies and their uses
GB201223276D0 (en) 2012-12-21 2013-02-06 Ucb Pharma Sa Antibodies and methods of producing same
DK2953976T3 (da) 2013-02-08 2021-06-21 Novartis Ag Specifikke modificeringssteder i antistoffer til fremstilling af immunkonjugater
JP6449229B2 (ja) 2013-03-15 2019-01-09 アッヴィ・バイオセラピューティクス・インコーポレイテッド Fc変異体
EP2970489A2 (en) 2013-03-15 2016-01-20 AbbVie Biotechnology Ltd Anti-cd25 antibodies and their uses
CN105377892A (zh) 2013-03-15 2016-03-02 艾伯维生物技术有限公司 抗cd25抗体及其用途
GB201315487D0 (en) 2013-08-30 2013-10-16 Ucb Pharma Sa Antibodies
WO2015035044A2 (en) 2013-09-04 2015-03-12 Abbvie Biotherapeutics Inc. Fc VARIANTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-MEDIATED CYTOTOXICITY
GB201320066D0 (en) 2013-11-13 2013-12-25 Ucb Pharma Sa Biological products
US9067998B1 (en) 2014-07-15 2015-06-30 Kymab Limited Targeting PD-1 variants for treatment of cancer
US8986694B1 (en) 2014-07-15 2015-03-24 Kymab Limited Targeting human nav1.7 variants for treatment of pain
US8992927B1 (en) 2014-07-15 2015-03-31 Kymab Limited Targeting human NAV1.7 variants for treatment of pain
US9045545B1 (en) 2014-07-15 2015-06-02 Kymab Limited Precision medicine by targeting PD-L1 variants for treatment of cancer
US9914769B2 (en) 2014-07-15 2018-03-13 Kymab Limited Precision medicine for cholesterol treatment
ES2916825T3 (es) 2014-01-20 2022-07-06 UCB Biopharma SRL Procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica
EP4190809A1 (en) 2014-02-11 2023-06-07 Seagen Inc. Selective reduction of proteins
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
EP2944962A1 (en) 2014-05-14 2015-11-18 UCB Biopharma SPRL Method for determining antibody specificity
GB201411320D0 (en) 2014-06-25 2014-08-06 Ucb Biopharma Sprl Antibody construct
US9139648B1 (en) 2014-07-15 2015-09-22 Kymab Limited Precision medicine by targeting human NAV1.9 variants for treatment of pain
US10077318B2 (en) 2014-09-12 2018-09-18 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
US10035823B2 (en) 2014-09-29 2018-07-31 The Regents Of The University Of California Compositions for expanding regulatory T cells (TREG), and treating autoimmune and inflammatory diseases and conditions
PL3221346T3 (pl) 2014-11-21 2021-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Przeciwciała ze zmodyfikowanym regionem stałym łańcucha ciężkiego
NZ731633A (en) 2014-11-21 2022-01-28 Bristol Myers Squibb Co Antibodies against cd73 and uses thereof
EP3237432B1 (en) 2014-12-22 2023-09-06 UCB Biopharma SRL Protein manufacture
SG11201706659WA (en) 2015-03-06 2017-09-28 Csl Behring Recombinant Facility Ag Modified von willebrand factor having improved half-life
GB201506869D0 (en) 2015-04-22 2015-06-03 Ucb Biopharma Sprl Method
GB201506870D0 (en) 2015-04-22 2015-06-03 Ucb Biopharma Sprl Method
TW201702271A (zh) 2015-04-30 2017-01-16 哈佛大學校長及研究員協會 治療代謝病症之抗-ap2抗體及抗原結合劑
GB201508180D0 (en) 2015-05-13 2015-06-24 Ucb Biopharma Sprl Antibodies
EA039951B1 (ru) 2015-05-27 2022-03-31 Юсб Биофарма Спрл Ингибитор активности csf-1r, предназначенный для лечения или профилактики эпилепсии или болезни паркинсона, и фармацевтическая композиция на его основе
UA124616C2 (uk) 2015-07-06 2021-10-20 Юсб Біофарма Срл Зв'язуюче тау-білок антитіло
AU2016304764C1 (en) 2015-08-07 2023-06-01 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to target molecules
WO2017030156A1 (ja) 2015-08-19 2017-02-23 国立研究開発法人理化学研究所 非天然アミノ酸導入抗体
US11352426B2 (en) 2015-09-21 2022-06-07 Aptevo Research And Development Llc CD3 binding polypeptides
MX2018005031A (es) 2015-10-27 2018-06-13 Ucb Biopharma Sprl Metodos de tratamiento con anticuerpos anti interleucina 17a/17f (il-17a/f).
US20180271998A1 (en) 2015-12-04 2018-09-27 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Disulfide-stabilized fabs
GB201522394D0 (en) 2015-12-18 2016-02-03 Ucb Biopharma Sprl Antibodies
EP3184544A1 (en) 2015-12-23 2017-06-28 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Glycoprotein v inhibitors for use as coagulants
GB201602414D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Nascient Ltd Biological materials and uses thereof
RS61412B1 (sr) 2016-03-17 2021-03-31 Tillotts Pharma Ag Anti-tnf alfa-antitela i njihovi funkcionalni fragmenti
US10759852B2 (en) 2016-03-17 2020-09-01 Numab Innovation Ag Anti-TNF-alpha-antibodies and functional fragments thereof
SG11201808041UA (en) 2016-03-17 2018-10-30 Numab Innovation Ag ANTI-TNFa-ANTIBODIES AND FUNCTIONAL FRAGMENTS THEREOF
US10787508B2 (en) 2016-03-17 2020-09-29 Numab Innovation Ag Anti-TNFα-antibodies and functional fragments thereof
DK3219726T3 (da) 2016-03-17 2020-12-07 Tillotts Pharma Ag Anti-TNF-alfa-antistoffer og funktionelle fragmenter deraf
GB201610198D0 (en) 2016-06-10 2016-07-27 Ucb Biopharma Sprl Anti-ige antibodies
JP2020500834A (ja) 2016-08-26 2020-01-16 エージェンシー フォー サイエンス,テクノロジー アンド リサーチ マクロファージ刺激タンパク質受容体(又はRON(Recepteur d′Origine Nantais))抗体及びその使用
GB201616596D0 (en) 2016-09-29 2016-11-16 Nascient Limited Epitope and antibodies
WO2018083248A1 (en) 2016-11-03 2018-05-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
GB201621635D0 (en) 2016-12-19 2017-02-01 Ucb Biopharma Sprl Crystal structure
WO2018147960A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
JP7337698B2 (ja) 2017-02-28 2023-09-04 シージェン インコーポレイテッド コンジュゲート化のためのシステイン突然変異抗体
US20200165347A1 (en) 2017-06-30 2020-05-28 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd Method of treatment using il-13r antibody
CA3084687C (en) 2017-12-05 2024-01-02 Progastrine Et Cancers S.A R.L. Combination therapy between anti-progastrin antibody and immunotherapy to treat cancer
GB201802486D0 (en) 2018-02-15 2018-04-04 Ucb Biopharma Sprl Methods
AU2019228339A1 (en) 2018-02-27 2020-09-10 Ecs-Progastrin Sa Progastrin as a biomarker for immunotherapy
GB201811368D0 (en) 2018-07-11 2018-08-29 Ucb Biopharma Sprl Antibody
MX2021004351A (es) 2018-10-16 2021-05-31 UCB Biopharma SRL Metodo para el tratamiento de miastenia grave.
AU2020247175A1 (en) 2019-03-26 2021-10-14 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd Treatment employing anti-IL-13R antibody or binding fragment thereof
AU2020342910A1 (en) 2019-09-04 2022-04-07 Pierre Fabre Medicament Anti-VSIG4 antibody or antigen binding fragment and uses thereof
GB201919058D0 (en) 2019-12-20 2020-02-05 Ucb Biopharma Sprl Multi-specific antibodies
GB201919061D0 (en) 2019-12-20 2020-02-05 Ucb Biopharma Sprl Multi-specific antibody
GB201919062D0 (en) 2019-12-20 2020-02-05 Ucb Biopharma Sprl Antibody
GB202001447D0 (en) 2020-02-03 2020-03-18 Ucb Biopharma Sprl Antibodies
WO2022122652A1 (en) 2020-12-07 2022-06-16 UCB Biopharma SRL Antibodies against interleukin-22
MX2023006650A (es) 2020-12-07 2023-06-21 UCB Biopharma SRL Anticuerpos multiespecificos y combinaciones de anticuerpos.
WO2022186772A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd TREATMENT OF ATOPIC DERMATITIS EMPLOYING ANTI-IL-13Rα1 ANTIBODY OR BINDING FRAGMENT THEREOF
WO2022186773A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd TREATMENT OF ATOPIC DERMATITIS EMPLOYING ANTI-IL-13Rα1 ANTIBODY OR BINDING FRAGMENT THEREOF IN AN ALLERGIC POPULATION
KR20230156727A (ko) 2021-03-03 2023-11-14 피에르 파브르 메디카먼트 항-vsig4 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 용도
TW202309088A (zh) 2021-04-30 2023-03-01 法商皮爾法伯製藥公司 新的穩定抗vista抗體
IL308100A (en) 2021-05-03 2023-12-01 UCB Biopharma SRL Antibodies
GB202111905D0 (en) 2021-08-19 2021-10-06 UCB Biopharma SRL Antibodies
WO2023048650A1 (en) 2021-09-27 2023-03-30 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd TREATMENT OF PRURITIS EMPLOYING ANTI-IL13Rα1 ANTIBODY OR BINDING FRAGMENT THEREOF
WO2023048651A1 (en) 2021-09-27 2023-03-30 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd Method for treatment of moderate to severe atoptic dematitis
TW202333784A (zh) 2021-10-29 2023-09-01 新加坡商亞獅康私人有限公司 抗il13r抗體調配物
WO2023140780A1 (en) 2022-01-24 2023-07-27 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd. Method of treating inflammatory disease
TW202337905A (zh) 2022-02-23 2023-10-01 新加坡商亞獅康私人有限公司 抗il13r抗體之糖基化形式
WO2024043837A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd High concentration anti-il13r antibody formulation
WO2024054157A1 (en) 2022-09-06 2024-03-14 Aslan Pharmaceuticals Pte Ltd Treatment for sleep loss or sleep disturbance in patients with dermatitis
WO2024121380A1 (en) 2022-12-08 2024-06-13 Pierre Fabre Medicament Vaccinal composition and adjuvant

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8334102D0 (en) * 1983-12-21 1984-02-01 Searle & Co Interferons with cysteine pattern
JPS6147500A (ja) * 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) * 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) * 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
DE3689123T2 (de) * 1985-11-01 1994-03-03 Xoma Corp Modulare einheit von antikörpergenen, daraus hergestellte antikörper und verwendung.
GB8607679D0 (en) * 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
IL84285A (en) * 1986-10-27 1993-03-15 Int Genetic Engineering Chimeric antibody with specificity to human tumor antigen
GB8720833D0 (en) * 1987-09-04 1987-10-14 Celltech Ltd Recombinant dna product

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011509675A (ja) * 2008-01-18 2011-03-31 メディミューン,エルエルシー 部位特異的コンジュゲーションのためのシステイン操作抗体

Also Published As

Publication number Publication date
CA1337641C (en) 1995-11-28
ATE84973T1 (de) 1993-02-15
GB8720833D0 (en) 1987-10-14
JPH02501190A (ja) 1990-04-26
EP0347433B1 (en) 1994-03-02
EP0329755A1 (en) 1989-08-30
JP2675380B2 (ja) 1997-11-12
DK172630B1 (da) 1999-03-22
FI892135A (fi) 1989-05-03
DE3877955T2 (de) 1993-07-22
AU614303B2 (en) 1991-08-29
ATE102254T1 (de) 1994-03-15
DK215889A (da) 1989-05-03
WO1989001782A1 (en) 1989-03-09
EP0347433A1 (en) 1989-12-27
DK216189D0 (da) 1989-05-03
AU2421888A (en) 1989-03-31
FI892136A0 (fi) 1989-05-03
CA1337640C (en) 1995-11-28
AU2301688A (en) 1989-03-31
EP0348442A1 (en) 1990-01-03
WO1989001974A1 (en) 1989-03-09
AU2301388A (en) 1989-03-31
EP0348442B1 (en) 1993-01-27
US5219996A (en) 1993-06-15
DK215889D0 (da) 1989-05-03
JP2761012B2 (ja) 1998-06-04
DK216089A (da) 1989-05-03
FI892137A (fi) 1989-05-03
DK216189A (da) 1989-05-03
DE3888172D1 (de) 1994-04-07
AU611202B2 (en) 1991-06-06
AU617367B2 (en) 1991-11-28
JPH02501191A (ja) 1990-04-26
DK216089D0 (da) 1989-05-03
WO1989001783A3 (en) 1989-04-20
DE3888172T2 (de) 1994-06-30
WO1989001783A2 (en) 1989-03-09
FI892135A0 (fi) 1989-05-03
DE3877955D1 (de) 1993-03-11
FI892136A (fi) 1989-05-03
FI892137A0 (fi) 1989-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPH02501800A (ja) 組換dna産物及び方法
US20240182542A1 (en) Multi-Specific Molecules
JP5681482B2 (ja) 二重特異性抗体およびその作製方法
JP2023100903A (ja) 多価メディトープ、メディトープ結合性抗体およびそれらの使用
US20030105294A1 (en) Enhancing the circulating half life of antibody-based fusion proteins
WO2005112564A2 (en) Germline and sequence variants of humanized antibodies and methods of making and using them
JPH05502384A (ja) 抗体の調製
JP2002505086A (ja) 抗体ベースの融合タンパク質の循環半減期の増強
AU2011201880A1 (en) Use of Hydrophobic-Interaction-Chromatography or Hinge-Region Modifications for the Production of Homogeneous Antibody-Solutions
JP2008509656A (ja) Tag−72に対するヒト化モノクローナル抗体
JPH05502587A (ja) Cdrグラフト抗―cea抗体およびその製造方法
BG60462B1 (bg) Хуманизирани антитела
WO2022166728A1 (zh) 双特异性抗体
CN114127117B (zh) 用于偶联的多肽复合物及其应用
JP2002542773A (ja) キメラ免疫グロブリンまたは免疫グロブリン断片の新規安定化方法、および安定化された抗EGP−2scFv断片
CN114786720A (zh) TriAx抗体的组合物及其制备和使用方法
WO2022152289A1 (en) An engineered antibody and antibody-drug conjugates comprisign same
JP5102612B2 (ja) B細胞疾患の標的
Zettlitz et al. Humanization of a mouse monoclonal antibody directed against a cell surface-exposed epitope of membrane-associated heat shock protein 70 (Hsp70)
CN1842538B (zh) 包含连接肽的修饰的结合分子
JP2022519338A (ja) 切断多価多量体
US20240101680A1 (en) Antibodies Targeting Integrin Beta-2
MXPA00008312A (es) Metodos para mejorar la vida media en circulacion de proteinas de fusion a base de anticuerpo

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20070718

Year of fee payment: 10

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080718

Year of fee payment: 11

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080718

Year of fee payment: 11

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090718

Year of fee payment: 12

EXPY Cancellation because of completion of term
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090718

Year of fee payment: 12