JP5977743B2 - 磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 - Google Patents
磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5977743B2 JP5977743B2 JP2013520506A JP2013520506A JP5977743B2 JP 5977743 B2 JP5977743 B2 JP 5977743B2 JP 2013520506 A JP2013520506 A JP 2013520506A JP 2013520506 A JP2013520506 A JP 2013520506A JP 5977743 B2 JP5977743 B2 JP 5977743B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substance
- measurement target
- target substance
- silica particles
- magnetic silica
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
- G01N33/5434—Magnetic particles using magnetic particle immunoreagent carriers which constitute new materials per se
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y30/00—Nanotechnology for materials or surface science, e.g. nanocomposites
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B33/00—Silicon; Compounds thereof
- C01B33/113—Silicon oxides; Hydrates thereof
- C01B33/12—Silica; Hydrates thereof, e.g. lepidoic silicic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B33/00—Silicon; Compounds thereof
- C01B33/113—Silicon oxides; Hydrates thereof
- C01B33/12—Silica; Hydrates thereof, e.g. lepidoic silicic acid
- C01B33/18—Preparation of finely divided silica neither in sol nor in gel form; After-treatment thereof
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic
- G01N33/552—Glass or silica
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic
- G01N33/553—Metal or metal coated
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2004/00—Particle morphology
- C01P2004/60—Particles characterised by their size
- C01P2004/64—Nanometer sized, i.e. from 1-100 nanometer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2006/00—Physical properties of inorganic compounds
- C01P2006/42—Magnetic properties
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Composite Materials (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
- Soft Magnetic Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
超常磁性金属酸化物の平均粒子径は、後述の超常磁性金属酸化物作製時の金属イオン濃度を調節することにより制御することができる。また、通常の分級等の方法によっても超常磁性金属酸化物の平均粒子径を所望の値にすることができる。
磁性シリカ粒子の平均粒子径は、後述の水中油型エマルションを作製する際の混合条件(せん断力等)を調節して水中油型エマルションの粒子径を調整することにより制御することができる。また、磁性シリカ粒子製造時の水洗工程の条件変更又は通常の分級等の方法によっても平均粒子径を所望の値とすることができる。
(アルキル)アルコキシシランの加水分解反応及び縮合反応後、遠心分離及び磁石により固液分離し、水又はメタノールで洗浄して乾燥することにより磁性シリカ粒子が得られる。
上記及び以下において、(アルキル)アルコキシシランとは、アルキルアルコキシシラン又はアルコキシシランを意味する。
炭素数2〜30の脂肪族ポリカルボン酸(シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、プロパン−1,2,3−トリカルボン酸、クエン酸及びドデカン二酸等の飽和ポリカルボン酸並びにマレイン酸、フマール酸及びイタコン酸等の不飽和ポリカルボン酸等)、炭素数8〜30の芳香族ポリカルボン酸(フタル酸、イソフタル酸、テレフタル酸、トリメリット酸及びピロメリット酸等)及び炭素数5〜30の脂環式ポリカルボン酸(シクロブテン−1,2−ジカルボン酸、シクロペンテン−1,2−ジカルボン酸、フラン−2,3−ジカルボン酸、ビシクロ[2,2,1]ヘプタ−2−エン−2,3−ジカルボン酸及びビシクロ[2,2,1]ヘプタ−2,5−ジエン−2,3−ジカルボン酸等)等。
炭素数1〜30の脂肪族ポリスルホン酸(メチオン酸、1,1−エタンジスルホン酸、1,2−エタンジスルホン酸、1,1−プロパンジスルホン酸、1,3−プロパンジスルホン酸及びポリビニルスルホン酸等)、炭素数6〜30の芳香族ポリスルホン酸(m−ベンゼンジスルホン酸、1,4−ナフタレンスルホン酸、1,5−ナフタレンジスルホン酸、1,6−ナフタレンジスルホン酸、2,6−ナフタレンジスルホン酸、2,7−ナフタレンジスルホン酸及びスルホン化ポリスチレン等)、ビス(フルオロスルホニル)イミド及び炭素数2〜10のビス(パーフルオロアルカンスルホニル)イミド[ビス(トリフルオロメタンスルホニル)イミド、ビス(ペンタフルオロエタンスルホニル)イミド、ビス(ノナフルオロブタンスルホニル)イミド、ペンタフルオロエタンスルホニルトリフルオロメタンスルホニルイミド、トリフルオロメタンスルホニルヘプタフルオロプロパンスルホニルイミド、ノナフルオロブタンスルホニルトリフルオロメタンスルホニルイミド等]等。
炭素数2〜30のスルホカルボン酸(スルホ酢酸及びスルホコハク酸等)及び炭素数7〜30のスルホ芳香族モノ又はポリカルボン酸(o−、m−又はp−スルホ安息香酸、2,4−ジスルホ安息香酸、3−スルホフタル酸、3,5−ジスルホフタル酸、4−スルホイソフタル酸、2−スルホテレフタル酸、2−メチル−4−スルホ安息香酸、2−メチル−3,5−ジスルホ安息香酸、4−プロピル−3−スルホ安息香酸、4−イソプロピル−3−スルホ安息香酸、2,4,6−トリメチル−3−スルホ安息香酸、2−メチル−5−スルホテレフタル酸、5−メチル−4−スルホイソフタル酸、5−スルホサリチル酸及び3−オキシ−4−スルホ安息香酸等)等。
炭素数1〜30の脂肪族飽和モノカルボン酸(ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ベラルゴン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸及びベヘニン酸等)、炭素数3〜30の脂肪族不飽和モノカルボン酸(アクリル酸、メタクリル酸、オレイン酸等)、炭素数3〜30のヒドロキシ脂肪族モノカルボン酸(グリコール酸、乳酸及び酒石酸等)、炭素数4〜30の脂環式モノカルボン酸(シクロプロパンカルボン酸、シクロペンタンカルボン酸及びシクロヘキサンカルボン酸等)、炭素数7〜30の芳香族モノカルボン酸(安息香酸、ケイ皮酸及びナフトエ酸等)、炭素数7〜20のヒドロキシ芳香族モノカルボン酸(サリチル酸及びマンデル酸等)及び炭素数2〜20のパーフルオロカルボン酸(トリフルオロ酢酸、ウンデカフルオロヘキサン酸、トリデカフルオロヘプタン酸、パーフルオロオクタン酸、ペンタデカフルオロオクタン酸、ペプタデカフルオロノナン酸及びノナデカフルオロデカン酸等)等。
炭素数1〜30の脂肪族モノスルホン酸(メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、プロパンスルホン酸、ブタンスルホン酸、ヘキサンスルホン酸、デカンスルホン酸、ウンデカンスルホン酸及びドデカンスルホン酸等)、炭素数6〜30の芳香族モノスルホン酸(ベンゼンスルホン酸、p−トルエンスルホン酸、o−トルエンスルホン酸、m−トルエンスルホン酸、4−ドデシルベンゼンスルホン酸、4−オクチルベンゼンスルホン酸及びナフタレンスルホン酸等)及び炭素数1〜20のパーフルオロアルカンスルホン酸(トリフルオロメタンスルホン酸等)等。
R1 (4−n)Si(OR2)n (1)
一般式(1)中、R1及びR2は、アミノ基、カルボキシル基、水酸基、メルカプト基又はグリシジルオキシ基で置換されていてもよい炭素数1〜10の1価の炭化水素基を表す。
(アルキル)アルコキシシランは、1種類を単独で用いても2種以上を併用してもよい。
これらの内、磁性シリカ粒子の粒子径の均一性の観点から、炭素数1〜4のアルコールが好ましい。
水溶性有機溶媒は、1種類を単独で用いても2種以上を併用してもよい。
加水分解用触媒の使用量は、(アルキル)アルコキシシランの重量に対して、0.01〜100重量%、特に0.2〜50重量%が好ましい。
アルデヒド基を有するグルタルアルデヒド及びカルボキシル基を有するビオチンは、アミノ基を有するアルキルアルコキシシランが表面に結合した磁性シリカ粒子と反応させることで、磁性シリカ粒子の表面に結合させることができる。また、アミノ基を有するアルブミン及びストレプトアビジン並びにカルボジイミド基を有するカルボジイミドは、カルボキシル基を有するアルキルアルコキシシランが表面に結合した磁性シリカ粒子と反応させることで、磁性シリカ粒子の表面に結合させることができる。
また、B/F分離工程は標識複合体の形成後には必須の工程であるが、磁性シリカ粒子表面に測定対象物質結合物質と測定対象物質との複合体を形成させた後においても実施することができる。
これらの内、感度等の観点から、酵素、蛍光性物質が好ましく、更に好ましいのはアルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ及びグルコースオキシダーゼであり、特に好ましいのはペルオキシダーゼである。
これらの緩衝液中の緩衝剤の濃度は、1〜500mMが好ましく、更に好ましくは5〜300mM、特に好ましくは10〜200mMである。
上記及び以下において、mMは25℃での濃度(ミリモル/リットル)を表す。
磁性シリカ粒子の量は、特に限定されず、用いられる測定対象物質結合物質又は測定対象物質の類似物質の種類、測定対象物質の種類等により適宜選択できる。
本発明の試薬は、本発明における磁性シリカ粒子が緩衝液に分散された形態であることが好ましい。
これらの内、ルミノール、イソルミノール、N−アミノヘキシル−N−エチルイソルミノール(AHEI)、N−アミノブチル−N−エチルイソルミノール(ABEI)及びこれらの金属塩(アルカリ金属塩等)が好ましく、更に好ましいのはルミノール及びその金属塩、特に好ましいのはルミノールのナトリウム塩である。
これらの内、化学発光増強効果等の観点から、フェノールが好ましく、更に好ましいのはP−ヨードフェノール、4−(シアノメチルチオ)フェノール及び4−シアノメチルチオ−2−クロロフェノール、特に好ましいのは4−(シアノメチルチオ)フェノールである。
これらの内、化学発光増強効果及び保存安定性等の観点から、3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸/水酸化ナトリウム緩衝液、2−ヒドロキシ−3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸・1水和物/水酸化ナトリウム緩衝液及びピペラジニル−1,4−ビス(2−ヒドロキシ−3−プロパンスルホン酸)・2水和物/水酸化ナトリウム緩衝液が好ましく、更に好ましいのは3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸/水酸化ナトリウム緩衝液及び2−ヒドロキシ−3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸・1水和物/水酸化ナトリウム緩衝液、特に好ましいのは3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸/水酸化ナトリウム緩衝液である。
これらの緩衝液における緩衝剤の含有量は、化学発光増強効果及び保存安定性等の観点から、1〜500mMが好ましく、更に好ましくは5〜300mM、特に好ましくは10〜200mMである。
これらの内、化学発光増強効果及び保存安定性等の観点から、4配位キレート剤が好ましく、更に好ましいのはエチレンジアミン四酢酸(EDTA)及びその塩(エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸三ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸四ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸二カリウム及びエチレンジアミン四酢酸三カリウム等)並びにトランス−1,2ジアミノシクロヘキサン−N,N,N’,N’−四酢酸(CyDTA)、特に好ましいのはエチレンジアミン四酢酸(EDTA)及びその塩である。
これらの内、保存安定性等の観点から、過酸化水素水溶液、過ホウ酸ナトリウム水溶液及び過ホウ酸カリウム水溶液が好ましく、更に好ましいのは過酸化水素水溶液である。
キレート剤としては、上述の第1液に含むことができるキレート剤として例示したものと同様のものが挙げられ、好ましいものも同様である。
キレート剤を含有する場合、その含有量は、化学発光増強効果及び保存安定性の観点から、酸化剤の重量に基づいて、0.2〜100重量%が好ましく、更に好ましくは0.5〜20重量%、特に好ましくは1〜10重量%である。
化学発光試薬第2液は、酸化剤、水及び必要によりキレート剤を均一混合することにより容易に得られる。
反応容器に塩化鉄(III)6水和物2.7部、塩化鉄(II)4水和物1.0部及び水375部を仕込んで溶解させて50℃に昇温し、攪拌下温度を50〜55℃に保持しながら、25%アンモニア水3.8部と水100部を混合した溶液を1時間かけて滴下し、滴下後1時間攪拌し、オレイン酸10.5部加え、2時間攪拌を継続した。室温に冷却後、デカンテーションにより固液分離して得られたオレイン酸が吸着したマグネタイト粒子を水50部で洗浄する操作を3回行った。得られたオレイン酸が吸着したマグネタイト粒子を容器に仕込み、デカン5.7部及びテトラエトキシシラン2.2部を加えて混合し、分散液(A2−1)を調製した。
反応容器に25%アンモニア水溶液39.0部、イソプロパノール55.4部、ソルビタンモノオレエート2.9部(三洋化成工業社製「イオネットS−80」)及びポリオキシエチレン(付加モル数20モル)アルキル(C16〜18)エーテル(三洋化成工業社製「エマルミン200」)2.0部を加えてクリアミックス(エムテクニック社製)を用いて混合し、50℃に昇温後、クリアミックスの回転数6,000rpmで攪拌しながら、上記分散液(A2−1)を1時間かけて滴下後、50℃で1時間反応させた。反応後、2,000rpmで5分間遠心分離して微粒子の存在する上清を除いた。得られた固相に水50部を加えて粒子を分散させて1,000rpmで10分間遠心分離後、微粒子の存在する上清を除く操作を10回行った。続いて、得られた固相に水50部を加えて粒子を分散させて500rpmで5分間遠心分離することにより、大きな粒子径の粒子を沈降させて目的とする粒子径を有する粒子を含有する上清(1)を回収した。残った固相に水50部を加えて500rpmで5分間遠心分離後、上清(2)を回収する操作を2回行い、固相中に存在する目的とする粒子径を有する粒子を回収した。次に、上清(1)及び(2)について、磁石を用いて粒子を集磁し、集磁された粒子を80℃で8時間乾燥させて磁性シリカ粒子(S1)を得た。
乳化の際のクリアミックスの回転数を6,000rpmから7,500rpmに代えた以外は、製造例1と同様にして磁性シリカ粒子(S2)を得た。
テトラエトキシシランの仕込量を2.2部から0.5部に代えた以外は、製造例1と同様にして磁性シリカ粒子(S3)を得た。
乳化の際のクリアミックスの回転数を6,000rpmから7,500rpmに代えた以外は、製造例3と同様にして磁性シリカ粒子(S4)を得た。
マグネタイト粒子作製時における25%アンモニア水3.8部と混合する水の量を100部から33.8部に代えた以外は、製造例1と同様にして磁性シリカ粒子(S5)を得た。
乳化の際のクリアミックスの回転数を6,000rpmから7,500rpmに代えた以外は、製造例5と同様にして磁性シリカ粒子(S6)を得た。
テトラエトキシシランの仕込量を2.2部から0.5部に代えた以外は、製造例5と同様にして磁性シリカ粒子(S7)を得た。
乳化の際のクリアミックスの回転数を6,000rpmから7,500rpmに代えた以外は、製造例7と同様にして磁性シリカ粒子(S8)を得た。
マグネタイト粒子作製時における25%アンモニア水3.8部と混合する水の量を100部から55部に代え、テトラエトキシシランの仕込量を2.2部から1.2部に代えた以外は、製造例2と同様にして磁性シリカ粒子(S9)を得た。
テトラエトキシシランの仕込量を0.5部から8.0部に代えた以外は、製造例4と同様にして磁性シリカ粒子(H1)を得た。
テトラエトキシシランの仕込量を1.2部から12.5部に代えた以外は、製造例9と同様にして磁性シリカ粒子(H2)を得た。
テトラエトキシシランの仕込量を1.2部から8.0部に代え、乳化の際のクリアミックスの回転数を7,500rpmから6,000rpmに代えた以外は、製造例9と同様にして磁性シリカ粒子(H3)を得た。
100部の硫酸第一鉄を1,000部の水に溶解し、攪拌下、水500部に水酸化ナトリウム28.8部を溶解した水溶液を1時間かけて滴下後、攪拌しながら、85℃まで昇温して空気を懸濁液に吹き込み8時間酸化し、遠心分離することにより得られたマグネタイト粒子2.2部をデカン5.7部及びテトラエトキシシラン2.2部と混合して分散液(R−1)を得た。分散液(A2−1)を分散液(R−1)に代えた以外は、製造例2と同様にして磁性シリカ粒子(H4)を得た。
テトラエトキシシランの仕込量を2.2部から12.5部に代えた以外は、比較製造例4と同様にして磁性シリカ粒子(H5)を得た。
平均粒子径50nmのマグネタイト粒子(シグマ アルドリッチ ジャパン社製)2.2部をデカン5.7部及びテトラエトキシシラン2.2部と混合して分散液(R−2)を得た。分散液(A2−1)を分散液(R−2)に代える以外は、製造例1と同様にして磁性シリカ粒子(H6)を得た。
以下の操作により、磁性シリカ粒子を含有する試薬(抗AFP抗体結合磁性シリカ粒子試薬)、標識試薬(POD標識抗AFP抗体試薬)、化学発光試薬第1液及び化学発光試薬第2液から構成される本発明の試薬を得た。
磁性シリカ粒子を含有する試薬の作製:
1重量%γ−アミノプロピルトリエトキシシラン含有アセトン溶液40mLの入った蓋付きポリエチレン瓶に製造例1で作製した磁性シリカ粒子(S1)40mgを加え、25℃で1時間反応させ、ネオジウム磁石で磁性シリカ粒子を集磁後、液をアスピレーターで吸引除去した。次いで脱イオン水40mLを加えて蓋をし、ポリスチレン瓶をゆっくりと2回倒置攪拌した後、ネオジウム磁石で磁性シリカ粒子を集磁後、液をアスピレーターで吸引除去して磁性シリカ粒子を洗浄した。この洗浄操作を3回行った。次いで、この洗浄後の磁性シリカ粒子を2重量%グルタルアルデヒド含有水溶液40mLの入った蓋付きポリエチレン瓶に加え、25℃で1時間反応させた。そして、脱イオン水40mLを加えて蓋をし、ポリスチレン瓶をゆっくりと2回倒置攪拌したのち、ネオジウム磁石で磁性シリカ粒子を集磁後、液をアスピレーターで吸引除去して磁性シリカ粒子を洗浄した。この洗浄操作を3回行った。更にこの洗浄後の磁性シリカ粒子を抗AFPモノクローナル抗体(ダコジャパン社より購入)を20μg/mLの濃度で含む0.02Mリン酸緩衝液(pH8.7)40mLの入った蓋付きポリエチレン瓶に加え、25℃で1時間反応させた。反応後、ネオジウム磁石で磁性シリカ粒子を集磁後、抗AFP抗体含有リン酸緩衝液を除去し、抗AFP抗体結合磁性シリカ粒子を作製した。これを1%の牛血清アルブミン含有の0.02Mリン酸緩衝液(pH7.0)で、抗AFP抗体結合磁性シリカ粒子濃度として0.5mg/mLの濃度に希釈し、磁性シリカ粒子を含有する試薬を調製し、冷蔵(2〜10℃)で保存した。
抗AFPポリクローナル抗体(ダコジャパン社より購入)、西洋ワサビ由来POD(東洋紡社製)を用い、文献(エス・ヨシタケ、エム・イマガワ、イー・イシカワ、エトール;ジェイ.バイオケム,Vol.92,1982,1413−1424)に記載の方法でPOD標識抗AFP抗体を調製した。これを1%の牛血清アルブミン含有の0.02Mリン酸緩衝液(pH7.0)で、POD標識抗AFP抗体濃度として200nMの濃度に希釈し、標識試薬を調製し、冷蔵(2〜10℃)で保存した。
ルミノールのナトリウム塩[シグマ アルドリッチ ジャパン社製]0.7g及び4−(シアノメチルチオ)フェノール0.1gを1,000mLメスフラスコに仕込んだ。3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸/水酸化ナトリウム緩衝液(10mM、pH8.6)を溶液の容量が1,000mLになるように仕込み、25℃で均一混合して化学発光試薬第1液を調製した。測定に用いるまで冷蔵(2〜10℃)保存した。
過酸化水素[和光純薬工業社製、試薬特級、濃度30重量%]6.6gを1,000mLメスフラスコに仕込んだ。脱イオン水を溶液の容量が1,000mLになるように仕込み、25℃で均一混合して化学発光試薬第2液を調製した。測定に用いるまで冷蔵(2〜10℃)保存した。
磁性シリカ粒子(S1)を磁性シリカ粒子(S2)〜(S9)又は(H1)〜(H6)に代える以外は実施例1と同様にして、本発明の又は比較用の磁性シリカ粒子を含有する試薬、標識試薬、化学発光試薬第1液及び化学発光試薬第2液から構成される本発明の試薬を得た。
磁性シリカ粒子を含有する試薬0.025mLと1重量%の牛血清アルブミンを含有したリン酸緩衝液で調製したAFP濃度が2ng/mLの標準AFP液0.025mLを試験管に入れて混合し、試験管中で37℃で3分間反応させ、抗AFP抗体結合磁性シリカ粒子/AFP複合体を形成させた。反応後、試験管の外側からネオジウム磁石で磁性シリカ粒子を10秒間集め、試験管中の液をアスピレーターで除き、ネオジウム磁石を側面から十分に離し、生理食塩水0.5mLを加えて磁性シリカ粒子を分散させて集磁後、アスピレーターで液を除く洗浄操作を3回行った。
最後に、化学発光試薬第1液0.07mLと化学発光試薬第2液0.07mLとを同時に加え、37℃で43秒間発光反応させ、化学発光試薬を添加後43〜45秒の平均発光量を発光検出器[Lumat LB9507(ベルトールドジャパン社製)]で測定した。尚、AFP濃度が2ng/mLの標準AFP液の代わりにAFP濃度が0ng/mLの標準AFP液を使用して上記と同様の操作を行いバックグラウンドとして用いた。
○:10,000cps未満
△:10,000cps以上かつ30,000cps未満
×:30,000cps以上
感度については、AFP濃度が0ng/mLと2ng/mLの標準溶液を用いた免疫測定を行った場合の発光量の差から以下の基準で判定した。
○:25,000cps以上
△:10,000cps以上かつ25,000cps未満
×:10,000cps未満
任意の200個の超常磁性金属酸化物について、走査型電子顕微鏡で観察して粒子径を測定し、その平均値を平均粒子径とした。
<磁性シリカ粒子の平均粒子径の測定方法>
任意の200個の磁性シリカ粒子について、走査型電子顕微鏡で観察して粒子径を測定し、その平均値を平均粒子径とした。
<磁性シリカ粒子中の超常磁性金属酸化物の含有量の測定方法>
任意の20個の磁性シリカ粒子について、走査型電子顕微鏡で観察し、エネルギー分散型X線分光装置により超常磁性金属酸化物の含有量を測定してその平均値を含有量とした。
1.0mgの磁性粒子シリカ粒子を2mLのイオン交換水に分散させ、口内径×胴径×全高=φ10.3mm×φ12.0mm×35mmのガラス容器に入れ、1cm×1cm×1cmのネオジウム磁石を側面につけ、初期吸光度が20%となるまでの時間を測定し、以下の基準で判定した。
○:15秒未満
△:15秒以上かつ30秒未満
×:30秒以上
1.0mgの磁性粒子シリカ粒子を2mLのイオン交換水に分散させ、口内径×胴径×全高=φ10.3mm×φ12.0mm×35mmのガラス容器に入れ、1cm×1cm×1cmのネオジウム磁石を側面につけて、磁性シリカ粒子を完全に集磁し、上清を除去し、ネオジウム磁石を側面から十分に離し、2mLのイオン交換水を磁性シリカ粒子に噴きつけながら加え、3回のピペッティングにより混合した後、10秒以内に顕微鏡で観察し、視野内の全粒子数に対する凝集した粒子数の割合を算出して以下の基準で再分散性を判定した。
○:凝集粒子が5%未満
△:凝集粒子が5%以上かつ20%未満
×:凝集粒子が20%以上
3回のピペッティングによる混合後、顕微鏡で観察するまでの時間を10秒以内から5分に代える以外は上記再分散性の評価方法と同様にして、視野内の全粒子数に対する凝集した粒子数の割合を算出して以下の基準で判定した。
○:凝集粒子が5%未満
△:凝集粒子が5%以上かつ20%未満
×:凝集粒子が20%以上
Claims (16)
- 平均粒子径が1〜15nmの超常磁性金属酸化物を60〜95重量%含有するシリカ粒子の表面に、測定対象物質、測定対象物質の類似物質、又は、測定対象物質と特異的に結合する物質が固定化された磁性シリカ粒子を用いて試料中の測定対象物質を下記(1)、(2)及び(3)のうちいずれか一つの方法により測定することを特徴とする測定対象物質測定方法。
(1)前記磁性シリカ粒子が、測定対象物質と特異的に結合する物質(測定対象物質結合物質)をその表面に固定化しているものであって、前記測定対象物質を含む試料と、前記磁性シリカ粒子と、標識物質により標識された測定対象物質結合物質(標識測定対象物質結合物質)とを接触させて、前記磁性シリカ粒子上に前記測定対象物質結合物質と前記測定対象物質と前記標識測定対象物質結合物質との複合体(標識複合体)を形成させ、前記標識複合体を担持した磁性シリカ粒子をB/F分離して、前記標識複合体中の標識物質量を測定し、その結果に基づいて前記試料中の測定対象物質を測定する。
(2)前記磁性シリカ粒子が、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質をその表面に固定化しているものであって、前記測定対象物質を含む試料と、標識物質により標識された測定対象物質と特異的に結合する物質(標識測定対象物質結合物質)と、前記磁性シリカ粒子とを接触させて、前記磁性シリカ粒子上に前記測定対象物質又は測定対象物質の類似物質と前記標識測定対象物質結合物質との複合体(標識複合体)を形成させ、前記標識複合体を担持した磁性シリカ粒子をB/F分離して、前記標識複合体中の標識物質量を測定し、その結果に基づいて試料中の測定対象物質を測定する。
(3)前記磁性シリカ粒子が、測定対象物質と特異的に結合する物質(測定対象物質結合物質)をその表面に固定化しているものであって、前記測定対象物質を含む試料と、標識物質により標識された測定対象物質又は測定対象物質の類似物質(標識測定対象物質又はその類似物質)と前記磁性シリカ粒子とを接触させて、前記磁性シリカ粒子上に前記測定対象物質結合物質と前記標識測定対象物質又はその類似物質との複合体(標識複合体)を形成させ、前記標識複合体を担持した磁性シリカ粒子をB/F分離して、前記標識複合体中の標識物質量を測定し、その結果に基づいて試料中の測定対象物質を測定する。 - 前記B/F分離が、磁性シリカ粒子の磁性を利用してなされるものである、請求項1記載の測定方法。
- 前記磁性シリカ粒子の平均粒子径が1〜5μmである、請求項1又は2記載の測定方法。
- 前記超常磁性金属酸化物が酸化鉄である請求項1〜3の何れか記載の測定方法。
- 前記酸化鉄がマグネタイト、γ−ヘマタイト、マグネタイト−α−ヘマタイト中間酸化鉄及びγ−ヘマタイト−α−ヘマタイト中間酸化鉄からなる群から選ばれる少なくとも1種の酸化鉄である請求項4記載の測定方法。
- 前記測定対象物質、前記測定対象物質の類似物質、又は、前記測定対象物質と特異的に結合する物質が固定化される前の前記磁性シリカ粒子の表面にグルタルアルデヒド、アルブミン、カルボジイミド、ストレプトアビジン、ビオチン及び官能基を有するアルキルアルコキシシランからなる群から選ばれる少なくとも1種の有機化合物を結合させてなる、請求項1〜5の何れか記載の測定方法。
- 前記アルキルアルコキシシランが有する官能基が、アミノ基、カルボキシル基、水酸基、メルカプト基及びグリシジルオキシ基からなる群から選ばれる少なくとも1種の官能基である、請求項6記載の測定方法。
- 前記測定対象物質と特異的に結合する物質が、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質に対する抗体、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質が結合する抗原、或いは、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質に結合するタンパク質である、請求項1〜7の何れか記載の測定方法。
- 前記磁性シリカ粒子は、シリカのマトリックス中に前記超常磁性金属酸化物が分散されてなる請求項1〜8の何れか記載の測定方法。
- 平均粒子径が1〜15nmの超常磁性金属酸化物を60〜95重量%含有するシリカ粒子の表面に、測定対象物質、測定対象物質の類似物質、又は、測定対象物質と特異的に結合する物質が固定化された磁性シリカ粒子を含有することを特徴とする、請求項1〜9の何れか記載の測定方法用試薬。
- 前記磁性シリカ粒子の平均粒子径が1〜5μmである請求項10記載の試薬。
- 前記超常磁性金属酸化物が酸化鉄である請求項10又は11記載の試薬。
- 前記酸化鉄がマグネタイト、γ−ヘマタイト、マグネタイト−α−ヘマタイト中間酸化鉄及びγ−ヘマタイト−α−ヘマタイト中間酸化鉄からなる群から選ばれる少なくとも1種の酸化鉄である請求項12記載の試薬。
- 測定対象物質、測定対象物質の類似物質、又は、測定対象物質と特異的に結合する物質が固定化される前の前記磁性シリカ粒子の表面にグルタルアルデヒド、アルブミン、カルボジイミド、ストレプトアビジン、ビオチン及び官能基を有するアルキルアルコキシシランからなる群から選ばれる少なくとも1種の有機化合物を結合させてなる請求項10〜13の何れか記載の試薬。
- 前記アルキルアルコキシシランが有する官能基が、アミノ基、カルボキシル基、水酸基、メルカプト基及びグリシジルオキシ基からなる群から選ばれる少なくとも1種の官能基である請求項14記載の試薬。
- 前記測定対象物質と特異的に結合する物質が、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質に対する抗体、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質が結合する抗原、或いは、測定対象物質又は測定対象物質の類似物質に結合するタンパク質である請求項10〜15の何れか記載の試薬。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013520506A JP5977743B2 (ja) | 2011-06-15 | 2012-05-31 | 磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2011133104 | 2011-06-15 | ||
JP2011133104 | 2011-06-15 | ||
PCT/JP2012/064219 WO2012173002A1 (ja) | 2011-06-15 | 2012-05-31 | 磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 |
JP2013520506A JP5977743B2 (ja) | 2011-06-15 | 2012-05-31 | 磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2012173002A1 JPWO2012173002A1 (ja) | 2015-02-23 |
JP5977743B2 true JP5977743B2 (ja) | 2016-08-24 |
Family
ID=47356993
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013520506A Active JP5977743B2 (ja) | 2011-06-15 | 2012-05-31 | 磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9157911B2 (ja) |
EP (1) | EP2722672B1 (ja) |
JP (1) | JP5977743B2 (ja) |
KR (1) | KR101614196B1 (ja) |
CN (1) | CN103597353B (ja) |
WO (1) | WO2012173002A1 (ja) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5844195B2 (ja) * | 2012-03-29 | 2016-01-13 | 三洋化成工業株式会社 | 磁性シリカ粒子並びにこれを用いた免疫測定法及び免疫測定用試薬 |
JP5802237B2 (ja) * | 2013-04-18 | 2015-10-28 | 三洋化成工業株式会社 | 磁性粒子及びその製造方法 |
JP6734011B2 (ja) * | 2014-06-06 | 2020-08-05 | 古河電気工業株式会社 | 生体分子検出用試験キット、及びこれを用いた生体分子の検出方法、並びにこれらに用いられる生体分子検出用試験片及び生体分子検出用標識試薬 |
JP6773402B2 (ja) * | 2014-11-04 | 2020-10-21 | 三洋化成工業株式会社 | 磁性シリカ粒子を用いた対象物質の分離方法 |
JP6182520B2 (ja) * | 2014-12-01 | 2017-08-16 | 三洋化成工業株式会社 | 磁性シリカ粒子、該磁性シリカ粒子を用いた測定対象物質測定方法及び測定対象物質測定用試薬 |
CN105403693B (zh) * | 2015-10-27 | 2018-07-10 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种磁微粒化学发光试剂的制备方法 |
KR101864375B1 (ko) * | 2016-04-14 | 2018-07-13 | 고려대학교 세종산학협력단 | 바이오 실리카를 이용한 물질의 검출, 분리 또는 정제 |
JP6636072B2 (ja) * | 2017-03-13 | 2020-01-29 | 三洋化成工業株式会社 | 免疫測定用試薬、免疫測定用キット及び免疫測定方法 |
CN107478844B (zh) * | 2017-07-27 | 2019-04-23 | 江南大学 | 一种检测刀额新对虾特异性免疫球蛋白e方法 |
CN107643404B (zh) * | 2017-09-04 | 2019-05-17 | 江南大学 | 一种检测中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白e方法 |
EP3733782A4 (en) | 2017-12-28 | 2021-09-22 | Sekisui Chemical Co., Ltd. | METAL COMPLEX PARTICLES AND IMMUNOLOGICAL ASSAY REAGENT USING THESE LATEST |
US20210041460A1 (en) | 2018-03-19 | 2021-02-11 | Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation | Method for judging psychiatric disorder |
CN108982835A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-12-11 | 湖南远璟生物技术有限公司 | 一种雌二醇磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法 |
US11913862B2 (en) | 2018-06-14 | 2024-02-27 | Sanyo Chemical Industries, Ltd. | Core-shell particles, and method for separating and purifying substance to be separated using core-shell particles |
US20210123918A1 (en) | 2018-06-26 | 2021-04-29 | Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation | Pancreatic cancer determination marker |
CN109085338B (zh) * | 2018-09-13 | 2021-07-13 | 武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司 | Ecl底物液及其制备方法和应用 |
CN114341642A (zh) * | 2019-09-30 | 2022-04-12 | 富士胶片株式会社 | 免疫层析法 |
JPWO2021070934A1 (ja) | 2019-10-11 | 2021-04-15 | ||
CN114729937A (zh) | 2019-11-15 | 2022-07-08 | 富士胶片株式会社 | 辅助诊断大肠癌的方法、试剂盒及生物标志物 |
CN111007248A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-04-14 | 迪瑞医疗科技股份有限公司 | 一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒 |
JP7257556B2 (ja) * | 2020-01-31 | 2023-04-13 | 富士フイルム株式会社 | イムノクロマトグラフィー |
CN111721799B (zh) * | 2020-07-22 | 2022-03-18 | 西南石油大学 | 一种通过黏土矿物催化稠油裂解成焦装置及方法 |
EP4325210A1 (en) | 2021-04-16 | 2024-02-21 | FUJIFILM Corporation | Composition, stabilization method, method for measuring amount of luminescence, and stabilizer for luminescent substrate |
Family Cites Families (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU558939B2 (en) | 1982-03-03 | 1987-02-12 | British Technology Group Limited | Enhanced luminescent and luminometric assay |
GB8303820D0 (en) | 1983-02-11 | 1983-03-16 | Secr Social Service Brit | Enhanced luminescent/luminometric immunoassay |
US4554088A (en) | 1983-05-12 | 1985-11-19 | Advanced Magnetics Inc. | Magnetic particles for use in separations |
US4672040A (en) | 1983-05-12 | 1987-06-09 | Advanced Magnetics, Inc. | Magnetic particles for use in separations |
JP3030043B2 (ja) | 1989-02-14 | 2000-04-10 | 和光純薬工業株式会社 | 化学発光増強法 |
CA2003942A1 (en) | 1989-09-26 | 1991-03-26 | Julie Lia Rudolph | Solid assay support systems |
JPH04168360A (ja) * | 1990-10-31 | 1992-06-16 | Sanyo Chem Ind Ltd | 抗体の免疫測定法 |
JPH0782019B2 (ja) | 1991-09-05 | 1995-09-06 | 三洋化成工業株式会社 | 免疫測定法及び免疫測定試薬 |
JPH08261943A (ja) | 1995-03-27 | 1996-10-11 | Sanyo Chem Ind Ltd | 安定化された化学発光法、化学発光試薬およびそれらを用いた酵素免疫測定法 |
JPH0975099A (ja) | 1995-09-12 | 1997-03-25 | Sanyo Chem Ind Ltd | 改良された化学発光試薬 |
JP3839133B2 (ja) | 1997-05-14 | 2006-11-01 | 三洋化成工業株式会社 | 安定化された化学発光試薬 |
JP2000040608A (ja) | 1998-07-21 | 2000-02-08 | Tosoh Corp | 磁性シリカ粒子及びその製造方法 |
JP2000256388A (ja) | 1999-03-10 | 2000-09-19 | Jsr Corp | 核酸結合用磁性シリカ粒子および核酸単離方法 |
JP2000279196A (ja) | 1999-03-30 | 2000-10-10 | Sanyo Chem Ind Ltd | 化学発光法および化学発光試薬 |
US6562209B1 (en) | 2001-04-19 | 2003-05-13 | Northrop Grumman Corporation | Automated computer controlled reporter device for conducting imunnoassay and molecular biology procedures |
JP2003279489A (ja) | 2002-03-26 | 2003-10-02 | Sanyo Chem Ind Ltd | ペルオキシターゼ測定用化学発光試薬 |
ES2208121B1 (es) | 2002-11-29 | 2005-08-16 | Consejo Sup. Investig. Cientificas | Anticuerpos y antigenos inmovilizados sobre particulas magneticas de silice como biosensores. |
ES2301296B1 (es) | 2005-09-16 | 2009-05-29 | Consejo Superior Investig. Cientificas | Manoparticula biosensora, procedimiento de elaboracion y sus aplicaciones. |
CN100441677C (zh) * | 2005-10-20 | 2008-12-10 | 上海师范大学 | 免疫磁性纳米粒子细菌分离器及其制法和应用 |
JP5183905B2 (ja) * | 2006-11-01 | 2013-04-17 | バンドー化学株式会社 | 担体、担体の製造方法、およびその利用 |
CN100449656C (zh) * | 2006-12-14 | 2009-01-07 | 复旦大学 | 一种三重核壳结构的磁性纳米粒子及其制备方法 |
CN101306841B (zh) * | 2007-05-16 | 2010-11-10 | 台湾圆点奈米技术开发有限公司 | 超顺磁性粒子及其制造方法 |
US7868145B2 (en) * | 2007-07-11 | 2011-01-11 | Industrial Technology Research Institute | Magnetic particles containing a copolymer core, magnetic layer and silicon layer |
CN101256864B (zh) | 2008-01-07 | 2012-07-25 | 吉林大学 | 一种超顺磁性介孔二氧化硅复合球及其制备方法 |
KR101053023B1 (ko) | 2008-02-14 | 2011-08-01 | (주)바이오니아 | 구형 실리카 자성입자 및 이의 제조방법 |
JP2010032283A (ja) * | 2008-07-28 | 2010-02-12 | Fujifilm Corp | 免疫学的測定方法 |
CN101865919A (zh) * | 2010-04-29 | 2010-10-20 | 上海师范大学 | 一种快速检测筛选阪崎肠杆菌的方法 |
-
2012
- 2012-05-31 JP JP2013520506A patent/JP5977743B2/ja active Active
- 2012-05-31 WO PCT/JP2012/064219 patent/WO2012173002A1/ja active Application Filing
- 2012-05-31 US US14/123,299 patent/US9157911B2/en active Active
- 2012-05-31 EP EP12801178.0A patent/EP2722672B1/en active Active
- 2012-05-31 CN CN201280028852.0A patent/CN103597353B/zh active Active
- 2012-05-31 KR KR1020137032450A patent/KR101614196B1/ko active IP Right Grant
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPWO2012173002A1 (ja) | 2015-02-23 |
KR101614196B1 (ko) | 2016-04-20 |
WO2012173002A1 (ja) | 2012-12-20 |
CN103597353B (zh) | 2016-03-02 |
EP2722672A1 (en) | 2014-04-23 |
US20140154713A1 (en) | 2014-06-05 |
US9157911B2 (en) | 2015-10-13 |
KR20140038448A (ko) | 2014-03-28 |
EP2722672B1 (en) | 2019-02-20 |
CN103597353A (zh) | 2014-02-19 |
EP2722672A4 (en) | 2015-01-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5977743B2 (ja) | 磁性シリカ粒子を用いた測定方法及び該測定方法用試薬 | |
JP6182520B2 (ja) | 磁性シリカ粒子、該磁性シリカ粒子を用いた測定対象物質測定方法及び測定対象物質測定用試薬 | |
JP5844195B2 (ja) | 磁性シリカ粒子並びにこれを用いた免疫測定法及び免疫測定用試薬 | |
JP5350516B2 (ja) | 磁性粒子及びその製造方法 | |
JP6773402B2 (ja) | 磁性シリカ粒子を用いた対象物質の分離方法 | |
WO2013100137A1 (ja) | 気泡吸着抑制方法 | |
JP5104622B2 (ja) | 磁性粒子を用いた測定対象物質の濃度測定法 | |
JP6635985B2 (ja) | 免疫測定用試薬、免疫測定用キット及び免疫測定方法 | |
JP2023133205A (ja) | 免疫学的測定方法、免疫学的測定用キット及び固相担体試薬 | |
JP7211748B2 (ja) | 免疫測定用試薬、免疫測定用キット及び免疫測定方法 | |
JP7269906B2 (ja) | 免疫測定用試薬、免疫測定用キット及び免疫測定方法 | |
JP2016136130A (ja) | 免疫測定用試薬及び免疫測定方法 | |
JP6636072B2 (ja) | 免疫測定用試薬、免疫測定用キット及び免疫測定方法 | |
JP2019052905A (ja) | 免疫測定方法、免疫測定用試薬及びこれを含む免疫測定用キット | |
JP6672353B2 (ja) | 免疫測定方法及びそれに用いられる免疫測定用キット | |
JP6636070B2 (ja) | 免疫測定方法及び免疫測定用キット | |
JP7191913B2 (ja) | 免疫測定方法及び免疫測定用キット | |
US11913862B2 (en) | Core-shell particles, and method for separating and purifying substance to be separated using core-shell particles | |
JP6767452B2 (ja) | 免疫測定用試薬、免疫測定用キット及び免疫測定方法 | |
JP7431711B2 (ja) | 免疫測定方法及び免疫測定用キット | |
JP2023124359A (ja) | 免疫測定方法及び洗浄剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150512 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150701 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160105 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160223 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160712 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160722 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5977743 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |