JP2021076615A5

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Publication number: JP2021076615A5
Application number: JP2021022510A
Authority: JP
Filing date: 2021-02-16
Publication date: 2021-08-05

Claims

被分析物上に存在する複数のマーカーを識別するための方法であって、前記方法は、
（ａ）複数の微小空洞または複数のマイクロパッチを含む基板上で複数の被分析物を流動させることによって、前記複数の被分析物を分割することであって、複数の微小空洞または複数のマイクロパッチの大部分は、多くても１つの被分析物を含有するように構成されており、前記複数の微小空洞または前記複数のマイクロパッチは、マイクロ流体デバイスの中に配置されている、ことと、
（ｂ）前記複数の微小空洞または複数のマイクロパッチにおいて、前記複数の被分析物のうちの１つの被分析物を、第１のマーカーに結合するように構成されている第１の構造に接触させることであって、前記第１の構造は、第１のタグに接続されている、ことと、
（ｃ）前記第１のタグから信号を検出することと、
（ｄ）前記第１のタグの前記信号のレベルを低減させることと、
（ｅ）前記被分析物を、第２のマーカーに結合する第２の構造に接触させることであって、前記第２の構造は、第２のタグに接続されている、ことと、
（ｆ）前記第２のタグを検出することと
を含む、方法。
ステップ（ｂ）の前記接触させることは、前記複数の微小空洞または前記複数のマイクロパッチと流体連通しているチャネルを通して、前記第１の構造を含む流体を流動させることを含む、請求項１に記載の方法。
ステップ（ｂ）の前記接触させるステップに続いて、前記方法は、前記被分析物を洗浄緩衝剤に接触させることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
前記方法は、前記複数の微小空洞または前記複数のマイクロパッチにおいて、単離された複数の被分析物上で行われる、請求項２に記載の方法。
前記第１のタグの前記信号のレベルを低減させることは、前記第１のタグの前記信号のレベルを５０％超低減させることを含む、請求項１に記載の方法。
前記複数の被分析物のうちの少なくとも１つの被分析物は、細胞である、請求項１に記載の方法。
前記複数の被分析物のうちの１つの被分析物は、流体流動によって生成される力、重力、または、接着力によって、前記複数の微小空洞内の固定位置で保持される、請求項１に記載の方法。
前記複数の被分析物のうちの１つの被分析物は、分子相互作用を通して前記複数の微小空洞または前記複数のマイクロパッチのうちの１つの微小空洞または１つのマイクロパッチに接続される、請求項１に記載の方法。
前記複数の被分析物のうちの１つの被分析物は、非共有結合を通して微小空洞に接続される、請求項１に記載の方法。
前記非共有結合は、ファン・デル・ワールス相互作用、静電結合、疎水結合、または、非特異的吸着から選択される、請求項９に記載の方法。
被分析物上に存在する複数のマーカーを検出するための方法であって、前記方法は、
微小空洞またはマイクロパッチを含む基板上で流体を流動させることによって、前記微小空洞において、または、前記マイクロパッチにおいて、被分析物を単離することであって、前記流体は、前記被分析物を含む、ことと、
前記被分析物を第１のタグに接触させることであって、前記被分析物は、第１のマーカーを含み、前記第１のタグは、前記第１のマーカーに対する親和性を有する、ことと、
前記第１のタグによって発せられる第１の信号を検出することであって、前記第１の信号の存在は、前記第１のマーカーの存在を示す、ことと、
前記第１の信号の強度を低減させることと、
前記被分析物を第２のタグに接触させることであって、前記被分析物は、第２のマーカーを含み、前記第２のタグは、前記第２のマーカーに対する親和性を有する、ことと、
前記第２のタグによって発せられる第２の信号を検出することであって、前記第２の信号の存在は、前記第２のマーカーの存在を示す、ことと
を含む、方法。
前記被分析物を第１のタグに接触させることは、前記微小空洞または前記マイクロパッチと流体連通しているチャネルを通して、前記第１のタグを含む流体を流動させることを含む、請求項１１に記載の方法。
前記被分析物を第１のタグに接触させることに続いて、前記方法は、被分析物を洗浄緩衝剤に接触させることをさらに含む、請求項１１に記載の方法。
前記方法は、前記複数の微小空洞または前記複数のマイクロパッチにおいて、単離された複数の被分析物上で行われる、請求項１１に記載の方法。
前記複数の被分析物のうちの少なくとも１つの被分析物は、細胞である、請求項１４記載の方法。
前記第１のタグの前記信号の強度を低減させることは、前記第１のタグの前記信号の強度を５０％超低減させることを含む、請求項１１記載の方法。
前記被分析物は、流体流動によって生成される力、重力、または、接着力によって、前記微小空洞内の固定位置で保持される、請求項１１に記載の方法。
前記被分析物は、分子相互作用を通して微小空洞またはマイクロパッチに接続される、請求項１１に記載の方法。
前記被分析物は、非共有結合を通して微小空洞に接続される、請求項１１に記載の方法。
前記非共有結合は、ファン・デル・ワールス相互作用、静電結合、疎水結合、または、非特異的吸着から選択される、請求項１９に記載の方法。