JP2020015672A - 皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 - Google Patents
皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020015672A JP2020015672A JP2018138405A JP2018138405A JP2020015672A JP 2020015672 A JP2020015672 A JP 2020015672A JP 2018138405 A JP2018138405 A JP 2018138405A JP 2018138405 A JP2018138405 A JP 2018138405A JP 2020015672 A JP2020015672 A JP 2020015672A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- aging
- agent
- gene
- dna
- skin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 92
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title claims abstract description 61
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 51
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims abstract description 25
- 230000009471 action Effects 0.000 claims abstract description 22
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 19
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims abstract description 17
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 61
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 50
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 50
- 235000020712 soy bean extract Nutrition 0.000 claims description 46
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 36
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 27
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 claims description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 18
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 13
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims description 13
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 claims description 12
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 claims description 12
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 claims description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 10
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 claims description 10
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 101710197056 Hyaluronan synthase 2 Proteins 0.000 claims description 7
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 claims description 4
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 claims description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 4
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims description 3
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 claims description 3
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 abstract description 5
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 abstract description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 abstract description 4
- 238000007665 sagging Methods 0.000 abstract description 3
- 230000036558 skin tension Effects 0.000 abstract description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 73
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 67
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 67
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 53
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 37
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 29
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 25
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 25
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 25
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 102100040203 Hyaluronan synthase 1 Human genes 0.000 description 13
- 102100040206 Hyaluronan synthase 2 Human genes 0.000 description 13
- 101710199679 Hyaluronidase-1 Proteins 0.000 description 13
- 102100039283 Hyaluronidase-1 Human genes 0.000 description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 11
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 11
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 11
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 11
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 10
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 10
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 10
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 10
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 6
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 101710197057 Hyaluronan synthase 1 Proteins 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 5
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 5
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 5
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 4
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 4
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 4
- 108090000320 Hyaluronan Synthases Proteins 0.000 description 4
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 4
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 4
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 4
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 4
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 101001013150 Homo sapiens Interstitial collagenase Proteins 0.000 description 3
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 3
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- UCDLBNQQNRQANR-UHFFFAOYSA-N 4-(4-amino-3-methylphenyl)-2,6,6-trimethylcyclohexa-2,4-dien-1-amine Chemical compound CC1(C)C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 UCDLBNQQNRQANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 101000962530 Homo sapiens Hyaluronidase-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000003918 Hyaluronan Synthases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N cadaverine Chemical compound NCCCCCN VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000037373 wrinkle formation Effects 0.000 description 2
- HEAUFJZALFKPBA-JPQUDPSNSA-N (3s)-3-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[2-[[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 HEAUFJZALFKPBA-JPQUDPSNSA-N 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 206010014970 Ephelides Diseases 0.000 description 1
- 239000004230 Fast Yellow AB Substances 0.000 description 1
- 241000276438 Gadus morhua Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001066129 Homo sapiens Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101001037191 Homo sapiens Hyaluronan synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000009015 Human TaqMan MicroRNA Assay kit Methods 0.000 description 1
- 101710128038 Hyaluronan synthase Proteins 0.000 description 1
- 208000003351 Melanosis Diseases 0.000 description 1
- 101800000399 Neurokinin A Proteins 0.000 description 1
- 235000002233 Penicillium roqueforti Nutrition 0.000 description 1
- 102100024304 Protachykinin-1 Human genes 0.000 description 1
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 description 1
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000003212 astringent agent Substances 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 229940096422 collagen type i Drugs 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- -1 etc. Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000014106 fortified food Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- YQOKLYTXVFAUCW-UHFFFAOYSA-N guanidine;isothiocyanic acid Chemical compound N=C=S.NC(N)=N YQOKLYTXVFAUCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000047486 human GAPDH Human genes 0.000 description 1
- 102000055973 human HAS1 Human genes 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 239000007934 lip balm Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000007427 paired t-test Methods 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000014493 regulation of gene expression Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000010079 rubber tapping Methods 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 241001507086 salmonid fish Species 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 210000002374 sebum Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M sodium;(2r)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]oxirane-2-carboxylate Chemical compound [Na+].C=1C=C(Cl)C=CC=1OCCCCCC[C@]1(C(=O)[O-])CO1 RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M 0.000 description 1
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
- A61K8/606—Nucleosides; Nucleotides; Nucleic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
- A61K8/987—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/13—Nucleic acids or derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/204—Animal extracts
- A23V2250/2042—Marine animal, fish extracts
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
(2)抗老化が真皮線維芽細胞の機能賦活であって、該機能賦活が真皮線維芽細胞の増殖促進作用、I型コラーゲン産生促進作用及びヒアルロン酸産生促進作用よりなる群から選ばれる少なくとも1種の作用である、(1)に記載の抗老化用剤。
(3)特殊低分子化DNAの含有量が0.001〜1質量%であり、大豆抽出物の含有量が0.001〜1質量%である、(1)又は(2)に記載の抗老化用剤。
(4)特殊低分子化DNAと大豆抽出物とを有効成分として含み、前記特殊低分子化DNAが、動植物から抽出したDNAの加水分解処理物であり、前記大豆抽出物が大豆の種子、胚芽及び芽からなる群より選ばれる少なくとも1種の抽出物であることを特徴とする皮膚の抗老化関連遺伝子発現調節用剤。
(5)抗老化関連遺伝子発現調節が、I型コラーゲン合成酵素遺伝子、ヒアルロン酸合成酵素1遺伝子及びヒアルロン酸合成酵素2遺伝子よりなる群から選ばれる少なくとも1種の遺伝子発現促進、又は、コラーゲン分解酵素遺伝子及び/若しくはヒアルロン酸分解酵素遺伝子の遺伝子発現減少である、(4)に記載の抗老化関連遺伝子発現調節用剤。
(6)特殊低分子化DNAの含有量が0.001〜1質量%であり、大豆抽出物の含有量が0.001〜1質量%である、(4)又は(5)に記載の抗老化関連遺伝子発現調節用剤。
(7)(1)〜(3)のいずれかに記載の抗老化用剤、又は(4)〜(6)のいずれかに記載の抗老化関連遺伝子発現調節用剤を含んでなる化粧品。
・I型コラーゲン合成酵素遺伝子(Human Collagen Type1 Alpha 1;COL1A1)
・コラーゲン分解酵素遺伝子(Human Matrix Metallopeptidase 1;MMP1)
・ヒアルロン酸合成酵素1遺伝子(Human Hyaluronan Synthase 1;HAS1)
・ヒアルロン酸合成酵素2遺伝子(Human Hyaluronan Synthase 2;HAS2)
・ヒアルロン酸分解酵素遺伝子(Human Hyaluronidase 1;HYAL1)
さらに、前記した真皮線維芽細胞の機能賦活とは、真皮線維芽細胞における上記遺伝子発現促進又は上記遺伝子発現減少であってもよい。
1 試験の目的及び概要
皮膚内のコラーゲンやヒアルロン酸は皮膚の張り、皮膚の柔軟性や潤いに重要な役割を果たしていると考えられている。そこで、真皮線維芽細胞の増殖作用やコラーゲン・ヒアルロン酸産生促進作用により、被験物質(特殊低分子化DNAと大豆抽出物)の相乗効果を評価した。
2−1 細胞
ヒト新生児由来の真皮線維芽細胞株NB1RGB細胞(RIKEN BRC,Japan)を用い、CO2インキュベータ(CO2濃度5%、37℃)内で培養した。
0.1%(v/v) Fetal Bovine Serum(FBS,Hyclone,UK)及び1.0%(v/v)抗真菌剤(Invitrogen,USA)を含むEagle’s Minimal Essential Medium(EMEM、Wako,Japan)を用いた。
(1)特殊低分子化DNA
日生バイオ株式会社製の加水分解DNA−Na(粉末)を用いた。本品は、前記した方法により、サケ科魚類の精巣(白子)からDNAのNa塩を抽出し、それを加水分解することにより調製したものである。
東洋紡社製のファイトポリアミン(登録商標)−SP(品番:SPA−308、配合割合:大豆芽エキス約70%、クエン酸Na約30%)を用いた。
30μM L−アスコルビン酸(CAS No.50-81-7,Wako,Japan)及び0.1%FBS含有EMEMによって、0.39mg/mL、0.81mg/mL及び1.53mg/mLの被験物質(SPA−308)を用事調製した(終濃度は0.13mg/mL、0.27mg/mL及び0.51mg/mL)。
上記した2種の被験物質を用いた。
30μM L−アスコルビン酸(CAS No.50-81-7,Wako,Japan)及び0.1%FBS含有EMEMによって、0.81mg/mLに調整したSPA−308含有EMEMにより、3.0mg/mLに調整した加水分解DNA−Naを公比10で連続希釈して計2濃度(0.03mg/mL,0.3mg/mL)に用時調製した[SPA−308の終濃度は0.27mg/mL、加水分解DNA−Naの終濃度は0.01mg/mL、0.1mg/mL]。
細胞増殖、コラーゲン産生及びヒアルロン酸産生の算出には1つの処理群につき3ウェルの平均値を用いた。また、1プレートにつき被験物質群、操作対照群をそれぞれ1群設けて試験を実施した。被験物質調製を含め、試験に関わる操作は特に記載のないかぎり室温で実施した。
(1)細胞培養
96ウェルプレート(Lot.3595,Corning,USA)に1ウェルあたり2.0×104cells/200μLのNB1RGB細胞を播種し、CO2インキュベータ内で24時間培養した。また、培養時の乾燥を防ぐため、試験に用いないウェルにPhosphate buffer saline(PBS(-),Lot.198601,Nissui,Japan)を200μL加えた。
24時間後、96ウェルプレートに被験物質及び陰性対照を100μL添加し、CO2インキュベータ内で48時間培養した。陰性対照には30μM L−アスコルビン酸及び0.1%FBS含有EMEMを用いた。
真皮線維芽細胞の増殖に及ぼす被験物質の効果を次のとおり評価した。
培地を除去した96ウェルプレートの各ウェルを37℃に加温したPBS(−)300μLで静かに2回洗浄した。続いて、0.5mg/mLの3-(4,5-dimethylthiazol-2-ul)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT,CAS No.298-93-1,Sigma-Aldrich,USA)溶液を1ウェルあたり100μL加え、CO2インキュベータ内で2時間培養した。
陰性対照のOD570を100%とした被験物質投与群のOD570を細胞増殖率(%)として算出した。陰性対照と被験物質添加の細胞増殖率(%)を対応のない2群の検定(Student's t-test)で有意差検定を行った。検定はいずれも両側で有意水準を5%未満とした(p<0.05, p<0.01, p<0.001)。
肌に張りや弾力を与えると言われているI型コラーゲンの産生量に対する被験物質の効果を競合ELISAで次のとおり評価した。
200μLのWash bufferによりコラーゲン固相化マイクロタイタープレートを3回洗浄し、50μLのビオチン標識コラーゲン抗体を含有した標準液と培養上清を加え、約270rpmで1時間振とうした。
陰性対照のコラーゲン産生量を100%として、被験物質のコラーゲン産生率(%)を算出した。陰性対照と被験物質添加のコラーゲン産生率(%)を対応のない2群の検定(Student's t-test)で有意差検定を行った。検定はいずれも両側で有意水準を5%未満とした(p<0.05, p<0.01, p<0.001)。
コラーゲンやエラスチンの間で水分を抱え込むと言われているヒアルロン酸の産生量に対する被験物質の効果をサンドイッチELISAで次のとおり評価した。
陰性対照のヒアルロン酸産生量を100%として、被験物質のヒアルロン酸産生率(%)を算出した。陰性対照と被験物質添加のヒアルロン酸産生率(%)を対応のない2群の検定(Student's t-test)で有意差検定を行った。検定はいずれも両側で有意水準を5%未満とした(p<0.05, p<0.01, p<0.001)
3−1 特殊低分子化DNA
(1)細胞増殖作用
陰性対照の細胞増殖量(OD570)を100%として算出したときの被験物質(加水分解DNA−Na)0.01mg/mL及び0.1mg/mLの細胞増殖率±標準偏差は、それぞれ、101.3±6.8%及び102.6±3.3%であった。
陰性対照のコラーゲン産生量を100%として算出したときの被験物質(加水分解DNA−Na)0.01mg/mL及び0.1mg/mLのコラーゲン産生率±標準偏差は、それぞれ、126.4±7.9%(p<0.01)及び134.0±3.6%(p<0.01)であった。
陰性対照のヒアルロン酸産生量を100%として算出したときの被験物質(加水分解DNA−Na)0.01mg/mL及び0.1mg/mLのヒアルロン酸産生率±標準偏差は、それぞれ、102.2±5.0%及び102.9±7.5%であった。
(1)細胞増殖作用
陰性対照の細胞増殖量(OD570)を100%としたときの被験物質(SPA−308)0.13mg/mL、0.27mg/mL及び0.51mg/mLの細胞増殖率±標準偏差は、それぞれ、111.6±1.0%(p<0.01)、123.7±2.4%(p<0.01)及び137.0±6.9%(p<0.01)であった。
陰性対照のコラーゲン産生促進作用を100%として算出したときの被験物質(SPA−308)0.13mg/mL、0.27mg/mL及び0.51mg/mLのコラーゲン産生促進率±標準偏差は、それぞれ、135.1±1.3%(p<0.01)、174.1±6.3%(p<0.01)及び199.9±11.8%(p<0.01)であった。
陰性対照のヒアルロン酸産生量を100%として算出したときの被験物質(SPA−308)0.13mg/mL、0.27mg/mL及び0.51mg/mLのヒアルロン酸産生率±標準偏差は、それぞれ、113.1±4.7%(p<0.01)、123.3±3.8%(p<0.01)及び137.8±10.3%(p<0.01)であった。
(1)細胞増殖作用
陰性対照の細胞増殖量(OD570)を100%として算出した被験物質(加水分解DNA−Na+SPA−308)0.01mg/mL+0.27mg/mL及び0.1mg/mL+0.27mg/mLの細胞増殖率±標準偏差は、それぞれ、133.0±4.8%(p<0.01)及び140.8±5.7%(p<0.01)であった。
陰性対照のコラーゲン産生量を100%として算出したときの被験物質(加水分解DNA−Na+SPA−308)0.01mg/mL+0.27mg/mL及び0.1mg/mL+0.27mg/mLのコラーゲン産生率±標準偏差は、それぞれ、178.1±5.5%(p<0.01)及び230.6±9.9%(p<0.01)であった。
陰性対照のヒアルロン酸産生量を100%として算出したときの被験物質(加水分解DNA−Na+SPA−308)0.01mg/mL+0.27mg/mL及び0.1mg/mL+0.27mg/mLのヒアルロン酸産生率±標準偏差は、それぞれ、132.7±7.6%(p<0.01)及び139.8±2.9%(p<0.01)であった。
1 試験の目的及び概要
皮膚内のコラーゲンやヒアルロン酸は皮膚の張り、柔軟性や潤いに重要な役割を果たしており、特に真皮内のヒアルロン酸量の減少が皮膚の弾力の低下やシワ形成に関与していることが知られている。そこで本実施例では、真皮線維芽細胞によるヒアルロン酸の合成や分解など、抗老化に関わる遺伝子の発現に対する被験物質(特殊低分子化DNAと大豆抽出物)の効果を、リアルタイムPCR法により評価した。
2−1 細胞
実施例1の2−1と同様の細胞を同様の条件で培養して用いた。
FBS(Fetal Bovine Serum)の含有量を10.0%(v/v)に変えた以外は、実施例1の2−2と同じ組成の培地(EMEM)を用いた。
(1)特殊低分子化DNA溶液
実施例1の2−3−(1)と同様の特殊低分子化DNA(加水分解DNA−Na)を用いた。
10%FBS含有EMEMによって、1mg/mLに調整した被験物質(加水分解DNA−Na)を公比10で連続希釈して計2濃度に用時調製した(終濃度は0.01mg/mL、0.1mg/mL)。
実施例1の2−3−(2)と同様の大豆抽出物(SPA−308)を用いた。
10%FBS含有EMEMによって、2.7mg/mLに調整した被験物質(SPA−308)を公比10で連続希釈して計2濃度に用時調製した(終濃度は0.027mg/mL、0.27mg/mL)。
上記した2種の被験物質を用いた。
10%FBS含有EMEMによって、0.27mg/mLに調整したSPA−308含有EMEMにより、1mg/mLに調整した加水分解DNA−Naを、公比10で連続希釈して計2濃度に用事調製した(SPA−308の終濃度は0.27mg/ml、加水分解DNA−Naの終濃度は0.01mg/mL、0.1mg/mL)。
TaqMan Assay(Applied Biosystems,USA)を用いて次の酵素をコードする遺伝子について発現解析を実施した。
・ヒアルロン酸合成酵素1(Human Hyaluronan Synthase 1(HAS1),Assay ID.Hs00758053_m1)
・ヒアルロン酸合成酵素2(Human Hyaluronan Synthase 2(HAS2),Assay ID.Hs00193435_m1)
・ヒアルロン酸分解酵素(Human Hyaluronidase 1(HYAL1),Assay ID.Hs00201046_m1)
遺伝子発現量の解析には、1つの処理群につき3枚の35mmディッシュ(Cat No.150318,Thermo Scientific,USA)の平均値を用いた。被験物質調製を含め、試験に関わる操作は特に記載のないかぎり室温で実施した。
(1)細胞培養及び被験物質添加
35mmディッシュに5.0×105cells/2mLのNB1RGB細胞を播種し、CO2インキュベータ内で24時間培養した。24時間後、35mmディッシュの培地を除去して被験物質及び陰性対照含有培地を加え、CO2インキュベータ内で24時間培養した。
PureLinkTM RNA Mini Kit(Cat No.12183018A,Invitrogen,USA)を用いて、RNA抽出・精製を次の通り行った。
RNA濃度(μg/mL)=A×K×0.3(光路長:cm)×25(希釈倍率)
A:陰性対照又は被験物質のOD260
K:K=40、RNAの吸光係数
SuperScriptTM IV VILOTM Master Mix with ezDNase(Cat No.11766050,Invitrogen,USA)を用いて、RNAの逆転写を次の通り行った。
3−1 特殊低分子化DNA
(1)ヒアルロン酸合成酵素1遺伝子(HAS1)発現
陰性対照のHAS1発現量を1としたときの被験物質(加水分解DNA−Na)0.01mg/ml及び0.1mg/mLのHAS1発現量±標準偏差は、それぞれ、1.11±0.04及び1.02±0.07であった。
陰性対照のHAS2発現量を1としたときの被験物質(加水分解DNA−Na)0.01mg/mL及び0.1mg/mLのHAS2発現量±標準偏差は、それぞれ、1.25±0.09(p<0.05)及び1.49±0.05(p<0.001)であった。
陰性対照のHYAL1発現量を1としたときの被験物質(加水分解DNA−Na)0.01mg/mL及び0.1mg/mLのHYAL1発現量±標準偏差は、それぞれ、1.06±0.12及び1.34±0.14であった。
(1)ヒアルロン酸合成酵素1遺伝子(HAS1)発現
陰性対照のHAS1発現量を1としたときの被験物質(SPA−308)0.027mg/mL及び0.27mg/mLのHAS1発現量±標準偏差は、それぞれ、1.03±1.2及び0.99±0.16であった。
陰性対照のHAS2発現量を1としたときの被験物質(SPA−308)0.027mg/mL及び0.27mg/mLのHAS2発現量±標準偏差は、それぞれ、1.88±0.46(p<0.05)及び1.50±0.11(p<0.01)であった。
陰性対照のHYAL1発現量を1としたときの被験物質(SPA−308)0.027mg/mL及び0.27mg/mLのHYAL1発現量±標準偏差は、それぞれ、0.97±0.08及び0.84±0.06であった。
(1)ヒアルロン酸合成酵素1遺伝子(HAS1)発現
陰性対照のHAS1発現量を1としたときの被験物質(加水分解DNA−Na+SPA−308)0.01mg/mL+0.27mg/mL及び0.1mg/mL+0.27mg/mLのHAS1発現量±標準偏差は、それぞれ、0.99±0.08及び1.51±0.26(p<0.05)であった。
陰性対照の(HAS2)発現量を1としたときの被験物質(加水分解DNA−Na+SPA−308)0.01mg/mL+0.27mg/mL及び0.1mg/mL+0.27mg/mLの(HAS2)発現量±標準偏差は、それぞれ、1.41±0.10(p<0.01)及び1.54±0.07(p<0.001)であった。
陰性対照の(HYAL1)発現量を1としたときの被験物質(加水分解DNA−Na+SPA−308)0.01mg/mL+0.27mg/mL及び0.1mg/mL+0.27mg/mLの(HYAL1)発現量±標準偏差は、それぞれ、0.58±0.11(p<0.01)及び0.93±0.05であった。
Claims (7)
- 特殊低分子化DNAと大豆抽出物とを有効成分として含み、
前記特殊低分子化DNAが、動植物から抽出したDNAの加水分解処理物であり、
前記大豆抽出物が大豆の種子、胚芽及び芽からなる群より選ばれる少なくとも1種の抽出物である
ことを特徴とする皮膚の抗老化用剤。 - 抗老化が真皮線維芽細胞の機能賦活であって、該機能賦活が真皮線維芽細胞の増殖促進作用、I型コラーゲン産生促進作用及びヒアルロン酸産生促進作用よりなる群から選ばれる少なくとも1種の作用である、請求項1に記載の抗老化用剤。
- 特殊低分子化DNAの含有量が0.001〜1質量%であり、大豆抽出物の含有量が0.001〜1質量%である、請求項1又は2に記載の抗老化用剤。
- 特殊低分子化DNAと大豆抽出物とを有効成分として含み、
前記特殊低分子化DNAが、動植物から抽出したDNAの加水分解処理物であり、
前記大豆抽出物が大豆の種子、胚芽及び芽からなる群より選ばれる少なくとも1種の抽出物である
ことを特徴とする皮膚の抗老化関連遺伝子発現調節用剤。 - 抗老化関連遺伝子発現調節が、I型コラーゲン合成酵素遺伝子、ヒアルロン酸合成酵素1遺伝子及びヒアルロン酸合成酵素2遺伝子よりなる群から選ばれる少なくとも1種の遺伝子発現促進、又は、コラーゲン分解酵素遺伝子及び/若しくはヒアルロン酸分解酵素遺伝子の遺伝子発現減少である、請求項4に記載の抗老化関連遺伝子発現調節用剤。
- 特殊低分子化DNAの含有量が0.001〜1質量%であり、大豆抽出物の含有量が0.001〜1質量%である、請求項4又は5に記載の抗老化関連遺伝子発現調節用剤。
- 請求項1〜3のいずれかに記載の抗老化用剤、又は請求項4〜6のいずれかに記載の抗老化関連遺伝子発現調節用剤を含んでなる化粧品。
Priority Applications (12)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018138405A JP6555674B1 (ja) | 2018-07-24 | 2018-07-24 | 皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 |
RU2020113255A RU2744251C1 (ru) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | Средство для замедления старения кожи и регулятор экспрессии гена, связанного с замедлением старения |
MX2020004602A MX2020004602A (es) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | Agente anti-envejecimiento para la piel y regulador de la expresion genica relacionada con el anti-envejecimiento. |
PCT/JP2019/027998 WO2020022131A1 (ja) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | 皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 |
CN201980001839.8A CN110573138B (zh) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | 皮肤抗衰老剂以及抗衰老相关基因表达调节剂 |
KR1020207009269A KR102366340B1 (ko) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | 피부의 항노화용제 및 항노화 관련 유전자 발현 조절용제 |
EP19840073.1A EP3677248A4 (en) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | ANTI-AGING AGENT FOR THE SKIN AND ANTI-AGING ASSOCIATED GENE EXPRESSION REGULATOR |
US16/652,778 US11554092B2 (en) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | Anti-aging agent for skin and anti-aging-related gene expression regulator |
BR112020006113-1A BR112020006113A2 (pt) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | agentes para ativação de uma função de um fibroblasto da derme e para regular a expressão de gene de um fibroblasto da derme |
MYPI2020001651A MY194768A (en) | 2018-07-24 | 2019-07-17 | Anti-aging agent for skin and anti-aging-related gene expression regulator |
TW108125848A TWI747011B (zh) | 2018-07-24 | 2019-07-22 | 真皮纖維母細胞之功能活化劑及真皮纖維母細胞之基因表現調控劑 |
PH12020550395A PH12020550395A1 (en) | 2018-07-24 | 2020-04-02 | Anti-aging agent for skin and anti-aging-related gene expression regulator |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018138405A JP6555674B1 (ja) | 2018-07-24 | 2018-07-24 | 皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP6555674B1 JP6555674B1 (ja) | 2019-08-07 |
JP2020015672A true JP2020015672A (ja) | 2020-01-30 |
Family
ID=67539789
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018138405A Active JP6555674B1 (ja) | 2018-07-24 | 2018-07-24 | 皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11554092B2 (ja) |
EP (1) | EP3677248A4 (ja) |
JP (1) | JP6555674B1 (ja) |
KR (1) | KR102366340B1 (ja) |
BR (1) | BR112020006113A2 (ja) |
MX (1) | MX2020004602A (ja) |
MY (1) | MY194768A (ja) |
PH (1) | PH12020550395A1 (ja) |
RU (1) | RU2744251C1 (ja) |
TW (1) | TWI747011B (ja) |
WO (1) | WO2020022131A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP7458207B2 (ja) * | 2019-05-10 | 2024-03-29 | 花王株式会社 | 毛髪処理方法 |
CN110632303A (zh) * | 2019-08-27 | 2019-12-31 | 广州市华代生物科技有限公司 | 一种基于酶学系统组合多种体外模型评价皮肤抗衰老功效的方法 |
JP7433685B1 (ja) | 2023-06-09 | 2024-02-20 | 日生バイオ株式会社 | 真皮線維芽細胞の機能賦活用剤及びそれを含んでなる化粧品 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008063315A (ja) * | 2006-08-09 | 2008-03-21 | Nissei Bio Kk | 皮溝密度を改良する化粧品用配合剤及び化粧品 |
JP2009234938A (ja) * | 2008-03-26 | 2009-10-15 | Toyobo Co Ltd | 植物由来ポリアミン含有抽出物を含有する化粧品組成物 |
KR20120063646A (ko) * | 2010-12-08 | 2012-06-18 | 김보라 | 연어 정소를 이용한 화장품용 항노화 및 항산화 기능성 수액의 제조방법 |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100471372B1 (ko) | 2001-12-04 | 2005-03-08 | 주식회사 태평양 | 피부 탄력 향상용 화장료 조성물 |
JP2005245394A (ja) | 2004-03-08 | 2005-09-15 | Nissei Bio Kk | 魚類白子からの二本鎖dnaの抽出・精製方法 |
JP2007021062A (ja) * | 2005-07-21 | 2007-02-01 | Taneaki Futagami | 血栓症予防クッション |
JP5025253B2 (ja) | 2006-03-31 | 2012-09-12 | 日生バイオ株式会社 | 基礎化粧品用配合剤及び基礎化粧品 |
JPWO2007148737A1 (ja) * | 2006-06-22 | 2009-11-19 | 東洋紡績株式会社 | 植物抽出物の調製方法、並びに植物抽出物及びその用途 |
US20080153741A1 (en) | 2006-12-21 | 2008-06-26 | Nissei Bio Co., Ltd. | Compounding ingredients for cosmetic formulation for improving skinditch density and cosmetic |
US20080161229A1 (en) | 2006-12-21 | 2008-07-03 | Nissei Bio Co., Ltd. | Compounding ingredients for basic cosmetics and basic cosmetics |
CN101371918B (zh) * | 2007-08-24 | 2013-03-20 | 天津天狮生物发展有限公司 | 鱼精多肽中的抗氧化二肽的新用途 |
JP2009234940A (ja) | 2008-03-26 | 2009-10-15 | Toyobo Co Ltd | 植物抽出物を含有する化粧品組成物 |
KR101476381B1 (ko) * | 2010-08-09 | 2014-12-24 | 정래준 | 어류 정액 또는 알로부터 분리된 dna 중합체 단편복합체를 포함하는 세포활성 강화용 조성물, 및 얼굴 또는 피부 충진제 |
JP5578160B2 (ja) | 2011-11-29 | 2014-08-27 | 東洋紡株式会社 | 植物由来の賦活化剤及び細胞外マトリックス産生促進剤 |
FR2987998B1 (fr) * | 2012-03-19 | 2014-04-25 | Isp Investments Inc | Composition cosmetique comprenant un systeme activateur de la proteine trf2 a action synergique constitue d'une association d'un extrait peptidique de soja et de levure et ses utilisations |
RU2657439C2 (ru) * | 2016-06-06 | 2018-06-13 | Часайэ Байэутекнолэджи Коп. | Экстракт семян сои, способ его получения, композиция экстракта семян сои, способ стимуляции пролиферации нейронов, лечения заболеваний головного мозга и лечения нейродегенеративных заболеваний (варианты) |
JP6836874B2 (ja) | 2016-10-05 | 2021-03-03 | 株式会社ディーエイチシー | 育毛剤組成物、及び血管内皮細胞増殖因子産生促進剤 |
-
2018
- 2018-07-24 JP JP2018138405A patent/JP6555674B1/ja active Active
-
2019
- 2019-07-17 RU RU2020113255A patent/RU2744251C1/ru active
- 2019-07-17 EP EP19840073.1A patent/EP3677248A4/en active Pending
- 2019-07-17 MY MYPI2020001651A patent/MY194768A/en unknown
- 2019-07-17 US US16/652,778 patent/US11554092B2/en active Active
- 2019-07-17 KR KR1020207009269A patent/KR102366340B1/ko active IP Right Grant
- 2019-07-17 WO PCT/JP2019/027998 patent/WO2020022131A1/ja unknown
- 2019-07-17 MX MX2020004602A patent/MX2020004602A/es unknown
- 2019-07-17 BR BR112020006113-1A patent/BR112020006113A2/pt unknown
- 2019-07-22 TW TW108125848A patent/TWI747011B/zh active
-
2020
- 2020-04-02 PH PH12020550395A patent/PH12020550395A1/en unknown
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008063315A (ja) * | 2006-08-09 | 2008-03-21 | Nissei Bio Kk | 皮溝密度を改良する化粧品用配合剤及び化粧品 |
JP2009234938A (ja) * | 2008-03-26 | 2009-10-15 | Toyobo Co Ltd | 植物由来ポリアミン含有抽出物を含有する化粧品組成物 |
KR20120063646A (ko) * | 2010-12-08 | 2012-06-18 | 김보라 | 연어 정소를 이용한 화장품용 항노화 및 항산화 기능성 수액의 제조방법 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
DAY SERUM SPF 15,ID 2339544,MINTEL GNPD[ONLINE],2014年3月,[検索日2019.01.07], JPN6019000721, ISSN: 0004010938 * |
MOISTURE BB CREAM,ID 2256382,MINTEL GNPD[ONLINE],2013年12月,[検索日2019.01.07], JPN6019000724, ISSN: 0004010939 * |
MOISTURE CREAM,ID 1684051,MINTEL GNPD[ONLINE],2011年12月,[検索日2019.01.07], JPN6019000726, ISSN: 0004010940 * |
草間勇雄, FRAGRANCE JOURNAL(1990),VOL.18, NO.4,P.88-91, JPN6019000728, ISSN: 0004010941 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR112020006113A2 (pt) | 2021-02-09 |
EP3677248A1 (en) | 2020-07-08 |
US11554092B2 (en) | 2023-01-17 |
KR20200044934A (ko) | 2020-04-29 |
TW202015654A (zh) | 2020-05-01 |
RU2744251C1 (ru) | 2021-03-04 |
KR102366340B1 (ko) | 2022-02-23 |
JP6555674B1 (ja) | 2019-08-07 |
TWI747011B (zh) | 2021-11-21 |
MX2020004602A (es) | 2020-08-06 |
MY194768A (en) | 2022-12-15 |
PH12020550395A1 (en) | 2021-03-08 |
EP3677248A4 (en) | 2020-11-18 |
US20200237636A1 (en) | 2020-07-30 |
WO2020022131A1 (ja) | 2020-01-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6670166B2 (ja) | 化粧料 | |
JP4456796B2 (ja) | コラーゲン産生増強剤の製造方法とその用途 | |
JP6338561B2 (ja) | 皮膚化粧料、頭髪化粧料および飲食品 | |
JPWO2015083630A1 (ja) | コラーゲンペプチド、エラスチンペプチドおよびプロテオグリカンを含む組成物 | |
WO2020022131A1 (ja) | 皮膚の抗老化用剤及び抗老化関連遺伝子発現調節用剤 | |
KR101737446B1 (ko) | 피부 보습용 화장료 조성물 | |
KR102194315B1 (ko) | 락토바실러스 람노서스 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항산화용 또는 피부 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 | |
JP2007320891A (ja) | 経口用皮膚美容促進組成物 | |
KR20130088997A (ko) | 생캐비어 추출물 및 발효추출물을 이용한 육모, 발모, 탈모방지 및 두피 개선용 화장료 조성물 | |
TW202145996A (zh) | 包含半乳寡醣或半乳寡醣和膠原蛋白三肽以改善免疫功能及皮膚狀況的功能性食品組合物和化妝品組合物 | |
KR101835799B1 (ko) | 프로폴리스를 유효성분으로 함유하는 화장품 조성물 및 상기 조성물을 포함하는 화장품 | |
JP7153899B2 (ja) | 美白剤及び皮膚化粧料 | |
KR101777544B1 (ko) | 요놀(Ionol) 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 피부주름 개선, 보습, 탄력증진, 각질제거, 홍반억제 또는 피부광노화 개선용 조성물 | |
KR101853299B1 (ko) | 세포모방복합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR101578403B1 (ko) | 생물전환기법으로 추출한 해마, 해삼 및 전복 혼합추출물을 함유하는 피부보습용 화장료 조성물 | |
JP6824746B2 (ja) | 抗酸化剤及び抗酸化/uvケア化粧料 | |
CN110573138B (zh) | 皮肤抗衰老剂以及抗衰老相关基因表达调节剂 | |
CN107006864B (zh) | 多肽白藜芦醇制剂及其制备方法和应用以及包含其的保健品或药物组合物 | |
JP5955631B2 (ja) | ヒアルロン酸産生促進剤 | |
JP4698934B2 (ja) | 皮膚コラーゲン産生促進剤 | |
JP6375100B2 (ja) | 抗老化剤、美白剤、皮膚化粧料および飲食品 | |
JP2019202967A (ja) | 抗老化用組成物、抗老化用皮膚化粧料および抗老化用飲食品 | |
JP2024060053A (ja) | 糖化に起因した保湿機能低下の抑制剤、皮膚化粧料および飲食品 | |
KR20230098055A (ko) | 난각막 미세분말을 포함하는 피부 상태 개선용 조성물 | |
KR20230111062A (ko) | 피부 항노화 및 보습용 식품 조성물 및 화장료 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180803 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20181108 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20181108 |
|
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20181206 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20181210 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20181210 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190117 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190318 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190404 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190523 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190603 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190701 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20190701 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6555674 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |