KR102525595B1 - 피쉬 콜라겐 함유 건강 식품 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 피쉬 콜라겐 및 아미노산을 포함하는 피부 개선용 식품 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 상세하게는 저분자 피쉬 콜라겐에 글리신, L-글루타민, L-시스테인, L-라이신, 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎 추출물을 혼합하여 피부 탄력, 피부 주름, 피부 염증 등의 피부 개선 효과를 가지는 식품 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 피쉬 콜라겐 및 아미노산을 포함하는 피부 개선용 식품 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 상세하게는 저분자 피쉬 콜라겐에 글리신, L-글루타민, L-시스테인, L-라이신, 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎 추출물을 혼합하여 피부 탄력, 피부 주름, 피부 염증 등의 피부 개선 효과를 가지는 식품 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
콜라겐(Collagen)이란 신체 구성 성분 중 가장 많이 차지하고 있는 단백질 중 하나로서, 동물의 뼈, 연골, 피부 외에 물고기의 비늘 등을 구성한다. 콜라겐은 섬유상 고체로 존재하고, 물, 묽은 산, 묽은 알칼리에 녹지 않지만 끓이면 젤라틴이 되어 용해되며, 콜라게나아제(Collagenase)의 작용을 받는다. 콜라겐을 구성하는 아미노산으로는 프롤린, 옥시프롤린, 글리신, 글루탐산 등이 있으며, 그 중에서도 다른 단백질에 존재하지 않는 옥시프롤린의 함량이 높은 것이 특징이다.
인체의 콜라겐은 피부, 근육, 혈관, 장기, 눈, 치아, 세포, 뼈, 관절, 연골의 주성분이며, 망상 조직, 세포막, 머리카락, 태반 등의 주성분으로 족발, 사골국물, 닭발, 돼지껍데기, 도가니탕, 어류나 그 껍질 등에 많이 포함되어 있다. 콜라겐은 20대가 지나면서 점차 감소하기 시작하여 40대에 들어가면 그 절반수준으로 감소하는데 특히 여성들은 폐경 후 5년 사이에 30%가 감소된다. 이는 여성호르몬인 에스트로겐 분비가 떨어져 콜라겐의 합성을 돕지 못하기 때문이다.
콜라겐이 부족하면 피부탄력, 혈관탄력이 떨어지고, 퇴행성관절염이나 각종 만성질환을 유발할 수 있으며, 머리카락이 가늘어지고 탈모의 요인이 된다. 동물, 어류, 식물로부터 콜라겐을 추출하여 경구로 섭취시 피부의 주름개선, 보습증진, 탄력증가에 유효하며, 모발과 손톱, 발톱의 강화에 도움이 된다는 연구가 보고되면서 콜라겐을 섭취할 수 있는 식품 또는 화장품 등의 개발이 이루어지고 있다.
동물 유래 콜라겐은 돼지껍질, 족발, 닭발, 닭날개, 달걀흰자 등에서 주로 추출하며, 분자가 큰 동물 유래 콜라겐으로서 함량이 2%에 불과하다. 어류 유래 콜라겐은 피쉬 콜라겐(fish collagen)이라고도 불리며, 주로 북어껍질, 장어, 상어, 꽁치, 가자미, 새우, 자라, 홍어, 연어, 해삼, 소라 등으로부터 추출한다. 어피(fish skin)나 어린(fish scale)으로부터 얻이진 콜라겐은 인체의 구조와 흡사하여 그 흡수율이 84%에 달하고 시중에서 쉽게 구할 수 있으며, 동물 유래 콜라겐에 비해 분자량이 작아 인체 흡수량을 상대적으로 높일 수 있는 장점을 가진다. 그럼에도 불구하고 콜라겐의 분자량 자체가 커서, 체내에서 소장으로 흡수되어 피부까지 도달할 수 있는 흡수율이 현저히 낮아, 분자량을 1,000~5,000Da 정도까지 저분자화시킨 피쉬 콜라겐이 개발되고 있다.
피쉬 콜라겐의 분자량을 낮추기 위한 방법으로 기존에는 어류 껍질을 원료로 산 또는 가열 등의 처리 공정으로 연화시키고, 단백질 가수분해 효소로 분해한 후 여과하는 방법이 사용되고 있다. 그러나 상기와 같은 피쉬 콜라겐은 분자랑 5kDA 초과하는 크기의 펩티드를 다량 포함하여 콜라겐 입자의 크기가 커서 피부에 도입하기에 적합할 정도로 저분화되지 않고, 미세한 이취가 잔존하는 문제가 있다.
피쉬 콜라겐의 이취를 제거하기 위해 고순도 정제를 진행하기도 하나, 고순도 정제를 위한 공정 단계로 인하여 콜라겐 소재의 단가가 상승하는 단점이 있기에 이를 대체하여 어류의 비린취를 저감시킬 수 있는 마스킹(masking) 소재를 처리하는 방법에 대한 개발이 활발히 이루어지고 있다.
한국공개특허 제10-2013-0098729호는 어류 유래 저분자 콜라겐 펩티드 제조방법을 개시하고 있으며, 특히 어류에서 나온 어린을 전처리한 후 가수분해하여 여과, 정제 공정을 거쳐 제조된 피쉬 콜라겐 펩티드(fish collagen peptide)의 제조방법을 개시한다. 기존 동물 유래 콜라겐에 비해 저분자 분포가 높고, 콜라겐의 주요 지표성분인 하이드록시 프롤린(hydroxyl proline)의 함량이 증진된 것을 특징으로 하며, 제품에 적용이 용이하도록 색도 및 비린취 성분이 크게 저감된 피쉬 콜라겐 펩티드의 제조방법을 개시한다.
체내 흡수율을 높이는 방법 외에도, 콜라겐을 함유한 식품 또는 화장품의 기능성을 향상시키기 위한 연구도 진행되고 있으며, 한국공개특허 제10-2018-0052980호에서는 산자나무 종자 오일 및 콜라겐을 포함하는 복합 분말 및 이를 포함하는 화장료 조성물을 개시한다. 산자나무 종자에 함유된 다양한 필수 지방산, 비타민, 카로티노이드 등의 성분이 자외선을 흡수하여 피부건강 증진 효과를 가진다.
건강과 미용에 대한 관심이 지속적으로 증가하는 가운데, 콜라겐을 적용한 식품, 화장품을 찾는 사람들은 지속적으로 증가하고 있어, 이에 따라 효능을 높이기 위해 체내 흡수율을 높일 수 있는 공정 기술, 기능성을 높이기 위한 기술, 소비자들의 기호성을 높일 수 있는 연구에 필요성은 증가하고 있다.
본 발명의 목적은 피쉬 콜라겐, 아미노산 4종(글리신, L-글루타민, L-시스테인, L-라이신) 및 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎 추출물을 포함하는 식품 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물을 통해 피부 개선 효과를 높이고, 저분자 피쉬 콜라겐의 이취를 최소화하여 소비자의 기호도를 높인 식품 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 측면은 분자량 500 내지 3,000 Da의 분자량을 가지는 피쉬 콜라겐, 복합 아미노산 및 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 식품 조성물로서, 상기 복합 아미노산은 글리신(glycine), L-글루타민(L-glutamine), L-시스테인(L-cysteine) 및 L-라이신(L-lysine)을 포함하는 것인, 피부 상태 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
상기 콜라겐은 세포와 세포 사이에 접착제의 역할을 하고, 피부 탄력 유지, 노화 방지에 효능이 있는 성분으로, 인체를 구성하는 단백질 중 30 내지 40% 비율로 포함되며, 장기, 관절, 연골, 눈의 각막, 뼈와 피부 등에 주로 분포하고, 특히 칼슘 접착 기능과 주름의 원인이 되는 진피층의 구성요소이다.
상기 콜라겐은 돼지 등의 동물 유래 콜라겐 또는 어류 유래 콜라겐인 피쉬 콜라겐(fish collagen)을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 동물 유래 콜라겐에 비해 분자량이 작고, 하이드록시 프롤린(hydroxyl proline)의 함량이 높은 피쉬 콜라겐일 수 있다.
상기 피쉬 콜라겐은 일반적인 길이가 대략 300 nm 이상으로, 동물 유래 콜라겐보다 부피가 작더라도 피부 도입 또는 체내 흡수가 쉽지 않다. 이에 본 발명에서는 피쉬 콜라겐의 저분자화 공정을 통해 500 내지 3,000 Da의 분자량을 가진 저분자 피쉬 콜라겐을 이용할 수 있다.
상기 저분자 피쉬 콜라겐은 하이드록시 프롤린 등과 같은 아미노산의 체내 흡수되는 양이 증가하여 진피층의 섬유아세포에서 프로콜라겐의 합성을 증진시키고, 체내 콜라겐의 합성을 촉진시켜 피부 탄력을 증진시키는 역할을 할 수 있다.
상기 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎은 꿀풀과(Lamiaceae) 용머리속(Dracocephalum)에 속하는 초본으로, 중국, 러시아, 미국 등에 자생 또는 분포되어 있다.
상기 드라코세팔룸 몰다비카는 중앙아시아에서 관상동맥, 심장질환, 심폐기능 치료에 사용되어왔으며, 여러 플라보노이드 성분을 풍부하게 함유하고 있어 항산화, 노화방지에 효능이 있다고 알려져 있다.
상기 아미노산은 신체를 구성하는 단백질 조직의 주요 성분으로, 구조에 따라 20여가지로 분리된다. 신체의 조직 중 가장 큰 부분을 차지하는 피부 조직 중 각질층도 일정 성분비율의 아미노산을 가지고 있으며 각질층의 보호 또는 활성화되어 피부보습 및 탄력있는 피부가 유지되기 위해서는 각질층이 일정량의 독립된 아미노산을 함유하여야 한다. 이러한 작용을 나타내기 위하여 본 발명에서는 복합 아미노산을 포함하여 피부 각질층의 아미노산 비율로 복합물을 제조하여 피부 개선 효과를 제공하고자 한다.
상기 글리신은 체내에서 합성할 수 있는 비필수 아미노산의 일종으로 불면증을 개선하는 효과를 가진다. 상기 글리신은 콜라겐을 구성하는 아미노산으로 피부의 탄력을 유지하는 역할을 하며 신경전달 물질로써의 역할 등 신체에서 여러 중요한 기능에 기여하고 있는 성분 중 하나이다.
상기 L-글루타민은 2-글루타람산을 의미하며, 준-필수 아미노산, 비-대전된 극성 및 친수성 아미노산 중 하나로서, 다수 문헌을 통해 약리학적 특성들이 개시되어 있다. 상처 치유 또는 회복을 위한 경구 보충제, 정맥 영양제로 활용되고 있다. 또한 각질 세포의 이동에 기초하여 피부 재생에 기여하며 피부에 대한 생물학적 활성을 가진다.
상기 L-시스테인은 아미노산의 한 종류로 글루타치온 생성을 도와 피부 미백 및 피부 재셍에 효과를 가지는 성분 중 하나이다. 글루타치온은 주로 간과 피부세포에 분포하여 멜라닌 색소의 생성을 억제해 피부 미백과 피부 재생에 도움을 주는 성분이다.
상기 L-라이신은 필수 아미노산 중 하나로서, 지방산을 에너지로 변환하고, 콜레스테롤 수치를 낮추는 카르니틴 생성에 중요한 역할을 한다. 피부, 힘줄, 뼈 등 연결 조직을 구성하는 구조 단백질 콜라겐과 엘라스틴 유지에 도움을 주는 아미노산 중 하나이다.
상기 식품 조성물의 함량은 피쉬 콜라겐 85~90 중량부, 복합 아미노산 8~15 중량부, 드라코세팔룸 몰다비카 잎 추출물 0.01~0.2 중량부이며, 상기 복합 아미노산은 글리신, L-글루타민, L-시스테인 및 L-라이신을 8~12 : 3~6 : 2~4 : 0.5~2의 비율로 혼합된 것일 수 있다. 구체적으로 글리신, L-글루타민, L-시스테인 및 L-라이신은 10 : 4.9 : 2.5 : 1인 것이 바람직할 수 있다.
상기 식품 조성물은 모과분말 0.01~0.05 중량부 및 레몬분말 0.01~0.05 중량부로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
상기 피부 상태 개선은 피부 재생, 피부 보습, 피부 탄력 개선, 피부 주름 개선, 피부 염증 개선 또는 외부 자극에 의한 손상 피부 장벽 개선인 것을 특징으로 한다.
상기 피부 재생 및 피부 탄력은 진피 내의 콜라겐의 함량과 연관성이 있다. MMP(Matrix metalloproteinase)는 콜라겐 분해 효소로서, MMP의 활성이 증가하면 콜라겐의 분해가 촉진된다. MMP의 발현이 증가하면 콜라겐의 분해를 증가시키며, 진피층의 구조를 손상시켜 궁극적으로 피부의 주름(노화)을 유발시키게 된다.
본 발명의 일 실시예에서는 세포 수준에서 MMP-1 저해활성을 측정한 결과, 본 발명의 식품 조성물이 MMP-1 억제 효과가 높게 나타나며, 콜라겐 발현을 유도함으로써 피부 탄력, 피부 주름 개선에 효과가 있음을 확인하였다(표 4 및 표 5).
본 발명에서 “염증개선(완화)” 효과라 함은 염증을 억제하는 것을 말하며, 염증은 자극에 대한 생체조직의 방어반응의 하나로 조직 변질, 순환 장애와 삼출, 조직 증식의 세가지를 병발하는 복잡한 병변을 말한다. 염증반응에서는 초기단계 면역반응을 맡고 있는 백혈구들이 몰려들어 사이토카인을 발현한다. 따라서 세포내 사이토카인의 발현양이 염증반응 활성화의 지표가될 수 있다. 상기 염증반응 활성화와 관련되는 사이토카인은 IL-1a, IL-6, IL-12 등이 있다.
상기 염증과 관련한 피부질환은 아토피 피부염, 접촉성 피부염, 지루성 피부염, 건선, 알레르기에 의한 가려움증 등이 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 염증과 관련된 피부질환의 증상으로는 홍반, 구진 수포, 과도한 각질형성, 가려움증 등이 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 피부 상태 개선용 식품 조성물은 아토피 피부염 개선 용도를 추가로 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서 진피에 피부자극물질을 주어 피부염증이 일어난 상태와 유사한 환경을 만들어준 후 본 발명의 식품 조성물을 처리한 결과, IL-1a의 방출량이 현저히 감소됨을 확인하여, 피부염증 또는 외부 자극에 의한 손상 피부 장벽 개선에 효과가 있음을 확인하였다(표 6).
본 발명의 다른 측면은 (a) 피쉬 콜라겐에 녹차 추출물을 1 : 0.01 내지 1 : 0.1 중량비로 혼합하는 단계; 및 (c) 상기 피쉬 콜라겐에 글리신, L-글루타민, L-시스테인 및 L-라이신을 8~12 : 3~6 : 2~4 : 0.5~2의 비율로 혼합한 복합 아미노산 및 드라코세팔룸 몰다비카 잎 추출물을 첨가하는 단계;를 포함하는 피부 상태 개선용 식품 조성물 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 일 실시예에서 상기 (a) 및 (b) 단계의 피쉬 콜라겐은 녹차 추출물을 혼합하여 어린으로부터 유래할 수 있는 이취를 제거에 효과가 있음을 확인하였다(도 2).
본 발명의 피부 상태 개선용 식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품은 건강기능성 보조식품, 비타민 복합제, 차, 음료수, 각종 스프, 낙농제품, 껌류, 라면, 기타 면류, 피자, 과자류, 캔디류, 스낵류, 초콜릿류, 빵, 소시지 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 젤, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다.
본 발명의 피부 상태 개선용 식품 조성물은 법률상기능상의 구분에 있어서 제조유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띌 수 있다. 예컨대 한국 『건강기능식품에관한법률』에 따른 건강기능식품이거나, 한국 『식품위생법』의 식품공전(식약처 고시 『식품의 기준 및 규격』)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 다류, 음료류, 특수용도 식품 등일 수 있다.
상기 식품의 종류는 구체적으로 건강기능식품일 수 있다. 상기 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제, 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 점증제, pH 조절제, 안정화제, 보존제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 조성물 전체 중량당 0.001 내지 50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
상기 건강기능식품은 식품의 생체 조절 기능을 강조한 식품으로 물리적, 생화학적, 생물공학적인 방법을 이용하여 특정 목적에 작용 및 발현하도록 부가가치를 부여한 식품이다. 이러한 건강기능 식품의 성분은 생체 방어와 신체 리듬의 조절, 질환의 방지 및 회복에 관계하는 신체 조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발휘하도록 설계하여 가공하게 되며, 식품으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제, 감미료 또는 기능성 원료를 함유할 수 있다.
상기 건강기능식품은 정제, 과립, 분말, 캡슐, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 구체적으로 상기 정제 형태의 건강기능식품은 피부 상태 개선용 식품 조성물, 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 고미제 등을 함유할 수 있으며, 필요에 따라 적당한 제피제로 제피할 수도 있다.
상기 캡슐 형태의 건강기능식품 중 경질캡슐제는 통상의 경질캡슐에 피부 상태 개선용 식품 조성물 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물 또는 그의 입상물 또는 제피한 입상물을 충진하여 제조할 수 있다. 연질캡슐제는 피부 상태 개선용 식품 조성물 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물을 젤라틴 등 캡슐기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질캡슐제는 필요에 따라 글리세린 또는 솔비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
상기 환 형태의 건강기능식품은 피부 상태 개선용 식품 조성물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 적당한 제피제로 전분, 탈크 또는 적당한 물질로 환의를 입힐 수도 있다.
상기 과립 형태의 건강기능식품은 피부 상태 개선용 식품 조성물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 고미제 등을 함유할 수 있다.
상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 고미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 것으로 그 기능 등의 동일 내지 유사한 것들을 포함할 수 있다.
또한, 상기 식품의 종류는 식품 첨가제일 수 있으며, 상기 식품 첨가제는 식품의 제조, 가공 또는 보존을 위해 식품에 첨가, 혼합, 침윤 기타의 방법에 의해 사용되는 물질을 의미한다. 상기 식품 첨가제는 천연물과 합성품이 있으며, 기능과 용도에 따라 분류할 수 있다. 현재 한국에 식품첨가물로 허가되어 있는 품목은 화학적 합성품 370여종, 천연첨가물 50여종이며, 주로 용도에 따라 보존료, 살균제, 산화방지제, 착색료, 발색제, 표백제, 조미료, 감미료, 착향료, 팽창제, 강화제, 개량제, 유화제, 증점제(호료) 및 안정제, 피막제, 껌 기초제, 소포제, 용제, 이형제, 방충제, 품질개량제와 기타 식품제조용 첨가제 등으로 분류되어 쓰이고 있다.
상기 식품첨가제의 형태는 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 액상 형태를 포함할 수 있으나, 상기 형태에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 피부 상태 개선용 식품 조성물을 사용할 경우, 상기 피부 상태 개선용 식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용하고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 피부 상태 개선용 식품 조성물의 혼합량은 그의 사용 목적(예방, 건강개선 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 피쉬 콜라겐을 함유하는 식품 조성물은 피부 탄력, 피부 재생에 효과가 있으며, 콜라겐, 아미노산 및 드라코세팔룸 몰다비카 잎 추출물의 조합에 따라 염증 개선 및 피부 항산화에도 탁월한 효과가 있다.
아울러 저분자 피쉬 콜라겐 함유로 체내 흡수율이 우수하며, 피쉬 콜라겐의 저분자화 과정에서 염기 처리를 최소화함으로써 섭취 시 안전하여 어린아이부터 노인까지 다양한 연령층의 섭취가 가능하다.
본 발명의 효과는 상기 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
도 1은 피부 상태 개선용 식품 조성물의 제조 공정도를 나타낸 것이다.
도 2는 이취 성분 함량 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 이취 성분 함량 측정 결과를 나타낸 것이다.
이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 관하여 상세히 서술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다
실시예 1.
1-1. 피쉬 콜라겐 분말의 준비
시중에서 구입한 피쉬 콜라겐(젤텍, 500 내지 3,000 Da)을 준비하였다. 상기 피쉬 콜라겐과 녹차 추출물을 1 : 0.01의 중량비로 혼합한 후 상온에서 30분 식힌 피쉬 콜라겐 수용액을 농축, 건조 및 분말화하여 피쉬 콜라겐 분말을 제조하였다.
1-2. 드라코세팔룸 몰다비카(
Moldavian dragonhead
) 잎 추출물의 제조
시중에서 구입한 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎(이하 '몰다비카 잎' 이라고 함)을 깨끗하게 세척하였다. 세척한 몰다비카 잎은 약 400~500 um 크기로 분쇄하고, 약 10배 부피인 30%(w/v) 에탄올을 용매로 하여 상온에서 7일 동안 침적 추출하였다. 상기 추출물을 각각 여과지 (150 mm, Adventee, Osaka, Japan)로 여과한 뒤 감압농축(EYELA, Tokyo, Japan) 및 동결건조(Ilshin BioBase, Dongducheon, Korea)하여, 추출물의 고형분을 수득하였다.
1-3. 피쉬 콜라겐을 포함하는 복합 분말의 제조
상기 실시예 1-1에서 준비한 피쉬 콜라겐 분말에 글리신, L-글루타민, L-시스테인 및 L-라이신을 8~12 : 3~6 : 2~4 : 0.5~2의 비율로 포함하는 복합 아미노산과 실시예 1-2에서 제조한 몰다비카 잎 추출물을 혼합하였다. 이때 상기 혼합물은 피쉬 콜라겐 85~90 중량부, 복합 아미노산 8~15 중량부, 몰다비카 잎 추출물 0.01~0.1 중량부 비율로 포함한다. 이의 함량은 표 1에 자세히 나타내었다.
이후 분무 건조기(Spray Dray, Niro atomizer, Copenhagen, Denmark)를 이용해 분무 건조하여 피쉬 콜라겐 복합 분말을 제조하였다. 분무 건조는 7,000rpm, 송풍온도 150℃, 배풍온도 90℃, 사입량 40rpm이며, 제조된 분말을 80~100 메쉬(mesh)로 제조하였다.
실시예 2.
실시예 1에서 복합 아미노산, 몰다비카 잎 추출물 혼합 시 전체 분말의 중량 대비 모과분말 0.01~0.05 중량부, 레몬분말 0.01 내지 0.05 중량부를 첨가하였다.
비교예 1.
피쉬 콜라겐 제조과정에서 녹차 추출물과 1 : 0.01의 중량비로 혼합하는 단계를 생략하고, 그 외 복합 분말의 제조공정은 동일하다.
비교예 2.
실시예 1과 제조방법은 동일하다. 다만, 몰다비카 잎 추출물을 제조 및 첨가하는 단계는 생략하였다.
비교예 3.
실시예 1과 제조방법은 동일하다. 다만, 몰다비카 잎 추출물 대신 유사한 형태의 꿀풀과 용머리속(Dracocephalum)의 용머리 꽃 추출물을 첨가하였다.
시중에서 구입한 용머리 꽃을 깨끗하게 세척하였다. 세척한 용머리 꽃을 약 400~500 um 크기로 분쇄하고, 약 10배 부피인 80%(w/v) 에탄올을 가한 후, 10분간 교반하여 균질화하였다. 상기 균질화된 용머리 꽃을 60 내지 80℃가 되도록 유지시키면서 초음파 추출기(Power sonica, 화신테크)를 이용하여 3시간동안 지속적으로 교반하면서 추출하였다. 상기 추출물을 각각 여과지 (150 mm, Adventee, Osaka, Japan)로 여과한 뒤 감압농축(EYELA, Tokyo, Japan) 및 동결건조(Ilshin BioBase, Dongducheon, Korea)하였다.
| 구분 | 함량(mg) | ||||
| 실시예 1 | 실시예 2 | 비교예 1 | 비교예 2 | 비교예 3 | |
| 콜라겐 | 15,000 | 15,000 | 15,000 | 15,000 | 15,000 |
| 녹차 분말 | 150 | 150 | - | 150 | 150 |
| 몰다비카 잎 | 10 | 10 | 10 | - | - |
| 용머리 꽃 | - | - | - | - | 10 |
| 글리신 | 1,000 | 1,000 | 1,000 | 1,000 | 1,000 |
| L-글루타민 | 490 | 490 | 490 | 490 | 490 |
| L-시스테인 | 250 | 250 | 250 | 250 | 250 |
| L-라이신 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 모과분말 | - | 5 | - | - | - |
| 레몬분말 | - | 5 | - | - | - |
제조예 1. 저분자 피쉬 콜라겐을 포함하는 젤리
실시예 1, 2 및 비교예 1 내지 3의 피부 개선용 식품 조성물 26 중량부, 플락토올리고당 10 중량부, 구연산 0.9 중량부, 구연산나트륨 0.3 중량부, 젖산칼슘 0.5 중량부, 푸드겔(겔화제) 1.7 중량부, 카라기난 0.1 중량부, 스테비올라배당체 0.15 중량부 및 정제수 59.65중량부의 중량비율로 혼합하여 탱크에 투입하였고, 85℃의 온도에서 30분 동안 교반하였다.
이어서, 상기 교반된 재료들을 충진기에 충진한 후 27℃의 온도에서 냉각하여 피쉬 콜라겐을 함유한 젤리를 제조하였다.
실험예 1. 이취 제거 효능
상기 실시예 1 및 비교예 1, 2에서 제조된 식품 조성물의 이취 성분의 함량을 분석하였다. 이취 성분은 특정한 성분으로 정의되지 않기에 피쉬 콜라겐 제품 내 전체 향기 성분의 함량을 측정하였다. 향기 성분 함량은 headspace extraction 방법을 이용하여 추출하였고, 추출된 향기 성분은 SPME fiber에 흡착시킨 후 기체크로마토그래프/질량 분석기(GC/MS; Agilent Technologies/7890A GC/5975C MSD)를 통해 정량 분석하였다. 실시예 및 비교예의 조성물을 20 mL 바이알(vial)에 3 g을 담고, 60℃에서 20분간 가열한 후, headspace에 추출하였다. 추출된 향기 성분은 SPME fiber (Supelco; 65um PDMS/DVB blue plain (CAT No. 57311))를 사용하여 60℃, 30분간 fiber에 흡착시키고, GC주입구에 splitless mode로 주입하여 탈착한 후 GC/MS를 활용하여 향기 성분을 정량하였다. 향기성분의 정량분석은 TIC (Total Ion Current) 모드로 분석하였다. 분석 결과는 도 2에 나타내었다.
그 결과 피쉬콜라겐에 녹차 추출물과 혼합하여 이취성분 제어 효율이 향상되고, 몰다비카 잎 추출물을 처리함으로써 어린으로부터 유래할 수 있는 이취 성분을 상당 부분 제어할 수 있음을 확인하였다.
실험예 2. 관능평가
상기 실시예 1, 2 및 비교예 1, 2의 조성물을 첨가한 젤리(제조예 1)의 맛, 향, 색상 및 전반적인 기호도에 대한 관능적인 품질평가를 실시하였다. 본 식품의 관능적 식별 능력이 있는 20세 이상의 성인 10명을 선정하였으며, 관능적 품질의 평가 척도는 9점 채점법(9점: 아주좋다, 7점: 좋다, 5점: 보통이다, 3점: 조금 나쁘다, 1점: 아주 나쁘다)으로 하였다.
| 구분 | 맛 | 향(냄새) | 색상 | 전반적 기호도 |
| 실시예 1 | 8.4 | 7.9 | 8.3 | 8.6 |
| 실시예 2 | 8.8 | 8.4 | 8.5 | 8.9 |
| 비교예 1 | 6.8 | 7.0 | 7.8 | 5.5 |
| 비교예 2 | 4.7 | 6.8 | 7.7 | 5.0 |
그 결과, 몰다비카 잎 추출물을 첨가하지 않은 비교예 2의 경우 색상에서 관능평가의 차이는 미미하게 나타났으나, 맛과 전반적인 기호도에서 현저히 점수가 낮게 나타났다. 상기 표 2의 결과를 통해 몰다비카 잎 추출물을 첨가함에 따라 피쉬 콜라겐 특유의 이취 및 비린맛을 마스킹(masking)하는 효과를 가지며, 맛과 전반적인 기호도에서 소비자들의 선호도를 높일 수 있음을 확인하였다. 나아가 모과 및 레몬 분말을 첨가함으로써 맛, 향 등이 모두 개선되고, 전반적 기호도에서도 우수한 평가를 받음을 알 수 있었다.
실험예 3. 세포 수준에서 피부 개선 효능 확인
3-1. 항산화 효능
실시예 및 비교예의 조성물을 정제수에 현탁하여 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging activity)을 평가하였다. DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 540nm에서 흡광도를 측정하는 방법이다. 대조군은 비타민 C를 이용하였고, 라디칼 DPPH의 50% 소거하는 농도(SC50)를 측정하고, 이를 양성대조군과 비교하였다. 이때 SC50값이 낮을수록 DPPH 자유라디칼의 소거 활성이 높은 것을 의미한다.
| 구분 | SC50 (ug/mL) |
| 실시예 1 | 127.9 |
| 비교예 1 | 142.3 |
| 비교예 2 | 145.6 |
| 비교예 3 | 133.3 |
| 양성대조군 | 8.7 |
그 결과, 실시예 1의 식품 조성물은 비교예 1 내지 3과 비교하여 항산화 효과가 우수함을 확인하였다. 특히 몰다비카 잎 추출물을 함유하지 않은 비교예 2와 차이가 크게 나타났으며, 몰다비카 잎 추출물 대신 용머리 꽃 추출물을 사용한 비교예 3과 비교하더라도 실시예 1에서 4% 이상 낮은 SC50값을 보이면서, 항산화 활성이 우수함을 확인하였다.
3-2. 피부 탄력 증가 효능 평가
실시예 1, 2 및 비교예 1 내지 3의 조성물을 정제수에 현탁하여 1.0%의 농도로 조성한 후, 콜라겐을 분해하는 MMP-1의 억제 효과를 측정하였다. Human Normal Fibroblast 세포를 24 well plate에 1X105 cell//well 접종하여 24시간 배양한 후, 적외선을 조사하여 MMP-1 발현을 증가시키고, 실시예 및 비교예 조성물을 농도별로 처리하여 MMP-1 억제 양상을 확인하였다. MMP-1 억제 효과는 하기 수학식 1을 통하여 평가하였으며, 콜라겐 생성 효능의 비교를 위한 양성대조군으로서 리테놀(비타민 A)을 사용하였다.
[수학식 1]
MMP-1 저해활성(%) = 추출물 처리시 흡광도/추출물 미처리시 흡광도X100
| 구분 | MMP-1 inhibition activity (%) |
| 실시예 1 | 57.0 |
| 실시예 2 | 57.2 |
| 비교예 1 | 54.7 |
| 비교예 2 | 50.2 |
| 비교예 3 | 54.1 |
| 양성대조군(1mg/mL) | 59.3 |
그 결과, 실시예 1 및 2의 시료는 비교예 1 내지 3 대비 MMP-1 저해 활성이 우수하게 나타남을 확인하였다. 피쉬 콜라겐을 녹차 추출물과 혼합함에 따라 MMP-1 억제 효과가 향상되고, 특히 몰다비카 잎 추출물의 첨가에 따라 MMP-1 억제 효과가 약 13% 이상 증가됨을 확인하여 실시예 1, 2의 조성물이 피부탄력 및 주름개선에 효과적임을 입증하였다.
3-3. 콜라겐 생성 효능 평가
인간 유래 섬유아세포(Fibroblast)를 배양하기 위해 DMEM과 10% FBS를 혼합한 것을 기본 배지로 하였다. 피부 섬유아세포를 48-well plate에 2~5x104 cells/ml의 농도로 분주하여 24시간 배양하였다. 성장 요인이 있는 기본 배지를 제거하고 실시예 1, 2 및 비교예 1 내지 3을 배치하고 24시간 배양하였다. 콜라겐 합성을 유도하는 TGF-B로 5 ng/ml이 되도록 처리하였다. 세포배양액을 취하여 Human procollagen1a1 duoset ELISA Kit(R&D Systems사)와 분광 광도계를 이용하여 합성된 콜라겐을 측정하였다. 분리 정제된 콜라겐을 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 ng/ml의 농도에서 측정하여 검량선을 작성하였고 이를 바탕으로 실시예 1, 2, 비교예 1 내지 3, 음성대조군, 양성대조군의 콜라겐(Type I collagen) 생성량을 계산하였다. 메탄올로 처리된 군(음성대조군)에 비해 생성된 콜라겐 양을 콜라겐 생성율(%)로 계산하였으며, 실험은 3회 수행한 후 평균값을 계산하였다.
[수학식 2]
콜라겐 생성율(%)=(각 실시예/비교예로 처리된 군의 콜라겐 생성량 = 메탄올 처리된 군의 콜라겐 생성량)/(메탄올로 처리된 군의 콜라겐 생성량) * 100
| 구분 | 콜라겐 생성율(%) |
| 실시예 1 | 23.5 |
| 실시예 2 | 23.9 |
| 비교예 1 | 19.3 |
| 비교예 2 | 15.5 |
| 비교예 3 | 21.9 |
| 양성대조군 | 32.1 |
그 결과, 실시예 1 및 2에서 충분한 콜라겐 증진효과가 있음을 확인하였다.
3-4. 항염증 효능 평가
콜라겐 매트릭스(Bioland, Korea)와 5배로 농축된 DMEM(Dubelcco's Modified Eagle Medium, GIBCO BRL, USA), 2.2% 탄산수소나트륨, 200mM HEPES, 0.05N 수산화나트륨으로 제조된 완충용액을 7:2:1로 섞어 만든 인간 섬유아세포 cell line(ATCC, Cat, No. CRL-2076)을 밀도 1X105 세포/ml로 혼합한 뒤 직경 10 mm의 인써트에 각각 200 ul의 섬유아세포가 혼합된 콜라겐 용액을 넣어 진피를 제조하였다. 이후, 10% FPS를 함유하는 DMEM를 2일마다 교체하여 7일 동안 배양하였다. 배양된 진피 위에 피부자극물질인 SLS(sodium lauryl sulfate)를 10 ul 투여하고 4시간 뒤 실시예 1 및 비교예 1 내지 3을 각각 10 ul로 추가한 후 37℃, 5% CO2에서 24시간 동안 배양하였다. 이후 Human IL-1 assay kit(Endogen Inc. Boston, MA, USA) 및 ELISA-reader(enzyme-linked immunosorbent assay)를 이용하여 IL-1a의 방출량을 측정하였다.
| 구분 | IL-1a 방출량(pg/ml) |
| 실시예 1 | 68 |
| 비교예 1 | 85 |
| 비교예 2 | 83 |
| 비교예 3 | 81 |
| 음성대조군 | 26 |
| 양성대조군(SLS처리) | 241 |
그 결과, 표 6에 나타난 바와 같이 음성대조군에 비하여 SLS를 처리한 양성대조군에서 IL-1a의 방출이 현저하게 증가하였고, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3과 비교하여 IL-1a의 방출이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 이는 본 발명의 식품 조성물이 고함량의 저분자 피쉬 콜라겐을 첨가함으로써 어느 정도 항염증 효과를 가지는 것으로 판단된다. 나아가 저분자 피쉬 콜라겐에 녹차 추출물의 처리 및 몰다비카 잎 추출물, 복합 아미노산과의 조합에 따라 IL-1a의 방출 효과를 현저히 개선시킨 것으로 판단된다. 전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (6)
- 분자량 500 내지 3,000 Da의 분자량을 가지는 피쉬 콜라겐, 복합 아미노산, 드라코세팔룸 몰다비카(Moldavian dragonhead) 잎 추출물 및 과일맛 분말을 포함하는 피부 상태 개선용 식품 조성물로서,
상기 복합 아미노산은 글리신(glycine), L-글루타민(L-glutamine), L-시스테인(L-cysteine) 및 L-라이신(L-lysine)을 포함하고,
상기 식품 조성물의 함량은 피쉬 콜라겐 85~90 중량부, 복합 아미노산 8~15 중량부, 드라코세팔룸 몰다비카 잎 추출물 0.01~0.1 중량부이며,
상기 피쉬콜라겐은 피쉬 콜라겐과 녹차 추출물을 1 : 0.01의 중량비로 혼합한 것이고,
상기 복합 아미노산은 글리신, L-글루타민, L-시스테인 및 L-라이신을 8~12 : 3~6 : 2~4 : 0.5~2의 비율로 혼합된 것이며,
상기 과일맛 분말은 모과분말 0.01~0.05 중량부 및 레몬분말 0.01~0.05 중량부로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상이고,
상기 피부 상태 개선은 피부 재생, 피부 보습 개선, 피부 탄력 개선, 피부 주름 개선, 피부 염증 개선 또는 외부 자극에 의한 손상 피부 장벽 개선인 것을 특징으로 하는 것인, 피부 상태 개선용 식품 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 피부 상태 개선용 식품 조성물은 아토피 피부염 개선 용도를 추가로 더 포함하는, 피부 상태 개선용 식품 조성물. - (a) 피쉬 콜라겐에 녹차 추출물을 1 : 0.01 내지 1 : 0.1 중량비로 혼합하는 단계; 및
(b) 상기 피쉬 콜라겐 85~90 중량부에 복합 아미노산 8~15 중량부 및 드라코세팔룸 몰다비카 잎 추출물 0.01~0.1중량부를 첨가하는 단계; 및
(c) 7,000rpm, 송풍온도 150℃, 배풍온도 90℃, 사입량 40rp 조건에서 분무건조하여 80~100메쉬(mesh)의 분말화 하는 단계;를
포함하고,
상기 복합 아미노산은 글리신, L-글루타민, L-시스테인 및 L-라이신을 8~12 : 3~6 : 2~4 : 0.5~2의 비율로 혼합한 것인, 피부 상태 개선용 식품 조성물 제조방법.
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| KR1020220115968A KR102525595B1 (ko) | 2022-09-15 | 2022-09-15 | 피쉬 콜라겐 함유 건강 식품 조성물 |
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Citations (6)
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|---|---|---|---|---|
| JP2003183120A (ja) * | 2001-12-17 | 2003-07-03 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 活性酸素消去剤又は化粧料組成物 |
| JP2013034478A (ja) * | 2006-11-15 | 2013-02-21 | Meiji Co Ltd | コラーゲンペプチド組成物及びこれを含有する飲食品 |
| KR20180052980A (ko) | 2016-11-11 | 2018-05-21 | 주식회사 뷰티콜라겐 | 산자나무 종자 오일 및 콜라겐을 포함하는 복합 분말, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물 |
| KR20190047354A (ko) * | 2017-10-27 | 2019-05-08 | 주식회사 가인화장품 | 화장료 조성물 |
| KR102301069B1 (ko) | 2021-01-12 | 2021-09-13 | 정향훈 | 콜라겐 대추즙 및 그 제조방법 |
| KR102358623B1 (ko) * | 2020-11-16 | 2022-02-07 | 주식회사 미스케이 | 콜라겐 펩타이드를 포함하는 피부 개선용 식품 조성물 |
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Patent Citations (6)
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|---|---|---|---|---|
| JP2003183120A (ja) * | 2001-12-17 | 2003-07-03 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 活性酸素消去剤又は化粧料組成物 |
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| KR20180052980A (ko) | 2016-11-11 | 2018-05-21 | 주식회사 뷰티콜라겐 | 산자나무 종자 오일 및 콜라겐을 포함하는 복합 분말, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물 |
| KR20190047354A (ko) * | 2017-10-27 | 2019-05-08 | 주식회사 가인화장품 | 화장료 조성물 |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Wandrey F, Pickel C, Jongsma E, Ewald CY, Grothe T (2021) Evaluation of the collagen-boosting effects of a Moldavian dragonhead extract. J Comm Med and Pub Healthttps://doi.org/10.38207/jcmphr20210102 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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