JP2016538826A5 - - Google Patents

Claims (22)

1. トリグリセリド油を生成するための方法であって、該方法は、
   ａ．Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ属またはＣｈｌｏｒｅｌｌａ属の組換え細胞を提供する工程であって、該細胞が、内因性脂肪アシル−ＡＣＰチオエステラーゼＡ（ＦＡＴＡ）遺伝子のノックアウトまたはノックダウンおよびオレオイル選択的リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ（ＬＰＡＡＴ）をコードする外来性ＬＰＡＡＴ遺伝子を含む、工程と、
   ｂ．該細胞を培養して、該油を生成する工程と、
   ｃ．該油を単離する工程と
   を含む、方法。
2. 前記外来性ＬＰＡＡＴ遺伝子が、配列番号９２または９３と少なくとも９０％の配列同一性を有するか、または前記外来性ＬＰＡＡＴ遺伝子が、配列番号１５７と少なくとも９０％のアミノ酸同一性を有するＬＰＡＡＴをコードする、請求項１に記載の方法。
3. 前記細胞が、内因性のステアロイル−ＡＣＰデサチュラーゼ（ＳＡＤ）遺伝子または脂肪酸デサチュラーゼ（ＦＡＤ）遺伝子のノックダウンまたはノックアウトをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
4. 前記細胞が、ケトアシルシンターゼ（ＫＡＳ）をコードする外来性遺伝子をさらに含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
5. 前記外来性遺伝子が、配列番号１６０または配列番号１６１と少なくとも９０％のアミノ酸同一性を有するＫＡＳをコードする、請求項４に記載の方法。
6. 前記細胞が、オレオイル選択的ＦＡＴＡ遺伝子をコードする外来性遺伝子をさらに含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
7. 前記オレオイル選択的ＦＡＴＡ遺伝子をコードする外来性遺伝子が、配列番号１５２と少なくとも９０％の同一性を有するか、または配列番号１５６と少なくとも９０％のアミノ酸同一性を有するＦＡＴＡをコードする、請求項６に記載の方法。
8. 前記トリグリセリド油が、少なくとも６０％のステアリン酸−オレイン酸−ステアリン酸を含む、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
9. 前記トリグリセリド油が、少なくとも８０％のステアリン酸−オレイン酸−ステアリン酸を含む、請求項８に記載の方法。
10. 前記細胞が、Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ ｍｏｒｉｆｏｒｍｉｓである、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
11. 請求項１〜１０のいずれかに記載の方法によって生成される油。
12. Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ属またはＣｈｌｏｒｅｌｌａ属の組換え細胞であって、該細胞が、内因性脂肪アシル−ＡＣＰチオエステラーゼＡ（ＦＡＴＡ）遺伝子のノックアウトまたはノックダウンおよびオレオイル選択的リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ（ＬＰＡＡＴ）をコードする外来性ＬＰＡＡＴ遺伝子を含む、細胞。
13. 前記外来性ＬＰＡＡＴ遺伝子が、配列番号９２または９３と少なくとも９０％の配列同一性を有するか、または前記外来性ＬＰＡＡＴ遺伝子が、配列番号１５７と少なくとも９０％のアミノ酸同一性を有するＬＰＡＡＴをコードする、請求項１２に記載の細胞。
14. 前記細胞が、ステアロイル−ＡＣＰデサチュラーゼ（ＳＡＤ）遺伝子または脂肪酸デサチュラーゼ（ＦＡＤ）遺伝子のノックダウンまたはノックアウトをさらに含む、請求項１２または１３に記載の細胞。
15. 前記細胞が、ケトアシルシンターゼ（ＫＡＳ）をコードする外来性遺伝子をさらに含む、請求項１２〜１４のいずれかに記載の細胞。
16. 前記外来性遺伝子が、配列番号１６０または配列番号１６１と少なくとも９０％のアミノ酸同一性を有するＫＡＳをコードする、請求項１５に記載の細胞。
17. 前記細胞が、オレオイル選択的ＦＡＴＡ遺伝子をコードする外来性遺伝子をさらに含む、請求項１２〜１６のいずれかに記載の細胞。
18. 前記オレオイル選択的ＦＡＴＡ遺伝子をコードする外来性遺伝子が、配列番号１５２と少なくとも９０％の同一性を有するか、または配列番号１５６と少なくとも９０％のアミノ酸同一性を有するＦＡＴＡをコードする、請求項１７に記載の細胞。
19. 前記トリグリセリド油が、少なくとも６０％のステアリン酸−オレイン酸−ステアリン酸を含む、請求項１２〜１８のいずれかに記載の細胞。
20. 前記トリグリセリド油が、少なくとも８０％のステアリン酸−オレイン酸−ステアリン酸を含む、請求項１９のいずれかに記載の細胞。
21. 前記細胞が、Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ ｍｏｒｉｆｏｒｍｉｓである、請求項１２〜２０のいずれかに記載の細胞。
22. 請求項１２〜２０のいずれかに記載の細胞によって生成される油。