JP2009545604A - ミツガシワ(Menyanthestrifoliata)の葉抽出物を含む老化防止組成物とその使用方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、老化防止スキンケア組成物及び方法に関する。特に本発明は、ミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の葉の抽出物を含む新規な老化防止組成物、及び加齢による老化又は早期老化の徴候を治療する方法に関する。
フリーラジカル損傷
ヒトの皮膚細胞中の腐食性の反応酸素種(ROS)の産生が正常な細胞機能の結果として起こるが、細胞は本来フリーラジカルを低下させる抗酸化物質を含み、従って細胞への損傷を防止するか又は制限することはよく知られている。多くのROSが同定されており、これらにはヒドロキシルラジカル、過酸化水素、過酸化物、一重項酸素、スーパーオキシド、及び酸化窒素などがある。反応酸素種の病的な産生(酸化的ストレスとしても知られている)はまた、ヒトの皮膚細胞でも起き、その際、細胞中の抑制されないレベルのROSが、細胞成分を損傷し、細胞機能を損なう。充分に損傷された細胞は、エネルギー産生の低下、老化、ミトコンドリアDNAの突然変異、細胞膜機能の変化、及びアポトーシス機構の欠陥を示すことがある。最終的には、こうして損傷された細胞は周囲組織(すなわち皮膚)中に蓄積し、組織及び個体に悪影響を与える。特に皮膚組織は、自身を治癒又は修復する能力が低下し、コラーゲン産生が大きく低下することがある。最終的にこれらの影響が、外見に線、しわ、しみ、及び老化の他の徴候として現れるかもしれない。
皮膚の細胞外マトリックス(ECM)は皮膚に強度と完全性を付与する。マトリックスメタロプロテイナーゼ(MMP)は、ペプチド結合を分解し、それによってECMの主要な成分であるコラーゲンを分解することができるプロテアーゼである。MMPは、皮膚の自己メンテナンスの一部として正常な分解とリモデリングにおいて役割を果たす。しかしMMPの過剰活性化は病的状態を引き起こすか又はこれを悪化させて、組織機能及び/又は構造を喪失させる。種々のタイプのMMPがあるが、最近、皮膚細胞外マトリックス、創傷治癒、炎症、酸化的ストレス(UV曝露に関連する酸化的ストレスを含む)のリモデリングの分野で特定のMMPの役割が注目されている(例えば“Metalloproteinase Inhibitors” Thibodeau, A., Cosmetics & Toiletries, 2000; 115: 75-80参照)。MMP-1、MMP-2、及びMMP-9として特定される3種のMMPが皮膚の細胞外マトリックスに特に関連しており、正常な及び病的な組織のリモデリングにおいて役割を果たしている。2つの理由のためにMMP-1、2、及び9は特に興味深い。第1に、これらのMMPが作用する基質は、皮膚のまさに構造成分であるからであり、そして第2に、皮膚はこれらのMMPの病的状態を誘発させる因子(すなわち、炎症、酸化的ストレス、及びUV曝露)に連続して曝露されるからである。従って、これら3種のMMPの選択的阻害が有益で、かつメタロプロテイナーゼの一般的な標的化と比較してより効率的であることが分かる。
上記2種の反応酸素種(スーパーオキシド及び酸化窒素)は、病理的状態下で反応して、それ自体強力な反応種であるペルオキシ亜硝酸を生成する。ペルオキシ亜硝酸は制限されないと、細胞内で多くの有害作用を引き起こすことが知られている。これらには、DNA損傷、細胞増殖の阻害、及び高濃度では細胞毒性がある。これらのペルオキシ亜硝酸の悪影響には、ペルオキシ亜硝酸がMMPとproMMPとを活性化するという所見(in vitro)が加えられる(“Enhanced Vascular Permeability In Solid Tumor Involving Peroxynitrite And Matrix Metalloproteinases” Wu et al., Jpn J Cancer Res, 2001; 92: 439-51を参照)。
ミツガシワ(Menyanthes trifoliata)(ボグビーン、バックビーン、ビターワーム(bitter worm)などとしても知られている)は、ヨーロッパの沼地や湿地で一般的であるが、浅水で栽培することもできる。これは、肝臓、胆嚢、血液産生の機能不全、ならびに頭痛、リウマチ、壊血病、発熱、三叉神経痛、胃炎、及び全身疲労を治療するための経口サプリメントとして使用されている。ミツガシワは消化液や胆汁流量に対する顕著な刺激作用を有することが報告されている。従ってこれは、消化の停滞、消化不良、並びに肝臓及び胆嚢の問題に起因する衰弱状態に役立つ。味が苦いが、ミツガシワはまた、消化不良や肝臓の機能低下を治療するためのお茶としても使用される。ミツガシワはまた、腺腫脹を解消するための外用剤としても推奨されている。しかし不思議なことに、局所塗布が炎症及びうっ血を引き起こすことが報告されている。その使用は、かすみ目及び発熱を伴う頭痛を引き起こすことが報告されている。
本発明は、ミツガシワの葉抽出物の皮膚有効量を含む老化防止組成物を含む。この抽出物は、マトリックスメタロプロテイナーゼ-1、2、及び9の活性を阻害するのに有効な及び/又はペルオキシ亜硝酸を除去するのに有効な量の特定の活性物質を含んでいる。これらの活性物質として、特に限定されないが、特定のフェノール、クマリン、及びフラボノイドなどが挙げられる。
実施例や比較例を除いて、又は特に明記されなければ、反応の物質量もしくは物質比、反応条件、物質の物理的性質及び/又は使用を説明する記載中のすべての数は、「約」という単語で修飾されるものと理解すべきである。特に明記しない場合は、すべての量は最終組成物の重量である。
製剤はまた、製剤の担体及び/又は使用目的に応じて選択される成分をさらに含んでもよい。追加の成分には、特に限定されないが、抗酸化剤、キレート剤、乳化安定化剤、保存剤、芳香剤、着香剤、湿潤剤、防水剤、水溶性塗膜形成要素、油溶性塗膜形成要素、保湿剤、例えばコレステロール、カチオン性ポリマー、アニオン性ポリマー、ビタミン、噴射剤などが挙げられる。
本明細書に記載の方法は、本発明の組成物の皮膚有効量を投与又は局所塗布することを含んでいる。塗布される組成物の量及び皮膚への局所塗布の頻度は、個体のニーズ及び所望の調節レベルにより大きく変化することがある。皮膚の老化の徴候を美容上又は薬学上治療するための好適な方法は、この新規組成物の皮膚有効量の習慣的な局所塗布による。患者のニーズに従って医薬用量を調節することは、当業者(例えば、皮膚科医又は他の医療提供者)の技術範囲内である。本発明の方法は、毎日使用するのに適している。
以下の抽出スキームは、ミツガシワの葉抽出物の性質を研究するのに有用であった。第1の工程で、乾燥した葉にアルコール溶媒が適用された。その後、溶媒の極性は、最も極性が低いヘキサンからジクロロメタン、酢酸エチル、そして最も極性が高いブタノールまで増加する。最終的には、MMP-1、2、及び9阻害に関与する成分はアルコール抽出物中に残る。しかし後述の追加の抽出を行って、有効成分をさらに単離した。これらの抽出物のいくつか(具体的には酢酸エチル及びジクロロメタン)は、適切なレベルの有効成分を有することがわかった。したがって、多くの溶媒を使用して、MMP-1、2、及び9を阻害するミツガシワの葉抽出物を得ることができる。これらの抽出物(アルコール、酢酸エチル、又はジクロロメタン)のいずれも、本発明の組成物及び方法に適している。
ミツガシワの葉からの数種の抽出物及び細画分を、Sephadex LH20ゲルろ過カラム(実施例1を参照)で液液分配及び分画により調製し、特異的抗MMP活性について評価した。MMP-2及びMMP-9活性のin vitro特異的阻害を、Biomol(登録商標)製のアッセイキットを用いて評価した。組換えヒトMMP-1酵素は任意の業者から入手できる。表1では、MMP阻害はIC50値(すなわち測定されたシグナルの50%低下を引き起こす抽出物の濃度)として表される。従ってより低い値は、より強いMMP阻害を示す。
MMP-1、2、及び9阻害活性にどの物質が寄与しているかをさらに理解するために、ミツガシワ抽出物で同定された異なるフェノール酸、フラボノイド、及びクマリンの標準物質を、MMP-1、2、及び9のin vitro阻害について試験した。MMP-2及びMMP-9活性のin vitro特異的阻害は、Biomol(登録商標)製のアッセイキットで評価した。組換えヒトMMP-1酵素は任意の業者から得られる。結果を表4に要約する。
ミツガシワ抽出物で同定された異なるフェノール酸及びフラボノイドの標準物質を、in vitroペルオキシ亜硝酸除去活性について試験した。アッセイはPholasin(登録商標)を備えるABEL(登録商標)ペルオキシ亜硝酸抗酸化剤試験キットを用いて行った。結果を表6に要約する。
Claims (20)
- 以下を含む化粧品組成物:
ミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の葉で同定される活性物質の皮膚有効量、ここで該活性物質は、MMP-1、2、又は9の1種以上の阻害物質である及び/又はペルオキシ亜硝酸の除去物質である;及び
美容上許容し得るビヒクル。 - 活性物質は、クエルセチン、イソクエルセチン、ルチン、及びこれらの混合物よりなる群から選択されるフラボノイドである、請求項1記載の組成物。
- 活性物質は、フェルラ酸、プロトカテク酸、及びこれらの混合物から選択されるフェノール酸である、請求項1記載の組成物。
- 活性物質は、スコパロン、スコポレチン、及びこれらの混合物よりなる群から選択されるクマリンである、請求項1記載の組成物。
- 0.001重量%〜15重量%の活性物質を含む、請求項1記載の組成物。
- 水溶性日焼け止め剤、油溶性日焼け止め剤、無機日焼け止め剤、及び有機日焼け止め剤よりなる群から選択される日焼け止め剤をさらに含む、請求項1記載の組成物。
- 以下を含む化粧品組成物:
ミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の葉抽出物の皮膚有効量、ここで該抽出物は、MMP-1、2、又は9の1種以上を阻害する及び/又はペルオキシ亜硝酸を除去する;及び
美容上許容し得るビヒクル。 - 0.001重量%〜20重量%の1種以上のミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の葉抽出物を含む、請求項7記載の組成物。
- 1種以上の抽出物の少なくとも一部は、アルコール抽出物、酢酸エチル抽出物、ジクロロメタン抽出物、又はこれらの混合物である、請求項8記載の組成物。
- ミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の抽出物は皮膚有効量のフェノール酸、フラボノイド、及びクマリンを含む、請求項9記載の組成物。
- フラボノイドは、イソクエルセチン、ルチン、及びこれらの混合物よりなる群から選択される、請求項10記載の組成物。
- フェノール酸はフェルラ酸及びプロトカテク酸から選択される、請求項10記載の組成物。
- クマリンはスコパロン及びスコポレチンから選択される、請求項10記載の組成物。
- 水溶性日焼け止め剤、油溶性日焼け止め剤、無機日焼け止め剤、及び有機日焼け止め剤よりなる群から選択される日焼け止め剤をさらに含む、請求項7記載の組成物。
- 以下を含む組成物を塗布する工程を含む、皮膚の光老化の徴候を低下させる方法:
ミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の葉で同定される活性物質の皮膚有効量、ここで該活性物質は、MMP-1、2、又は9の1種以上の阻害物質である及び/又はペルオキシ亜硝酸の除去物質である;及び
美容上許容し得るビヒクル。 - 活性物質は、イソクエルセチン、ルチン、及びこれらの混合物よりなる群から選択されるフラボノイドである、請求項15記載の方法。
- 活性物質は、フェルラ酸及びプロトカテク酸から選択される、請求項15記載の方法。
- 活性物質はスコパロン及びスコポレチンから選択されるクマリンである、請求項15記載の方法。
- 組成物は0.001重量%〜15重量%の活性物質を含む、請求項15記載の方法。
- 組成物は0.001重量%〜20重量%のミツガシワ(Menyanthes trifoliata)の葉抽出物を含む、請求項15記載の方法。
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