HU230800B1 - Új probiotikumok hobbiállat-eledel kompozíciókhoz - Google Patents

Új probiotikumok hobbiállat-eledel kompozíciókhoz Download PDF

Info

Publication number
HU230800B1
HU230800B1 HU0301939A HUP0301939A HU230800B1 HU 230800 B1 HU230800 B1 HU 230800B1 HU 0301939 A HU0301939 A HU 0301939A HU P0301939 A HUP0301939 A HU P0301939A HU 230800 B1 HU230800 B1 HU 230800B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
strains
strain
dogs
food
bile
Prior art date
Application number
HU0301939A
Other languages
English (en)
Inventor
Ralf Zink
Robert Reniero
Florence Rochat
Christoph Cavadini
Thierry Von Der Weid
Eduardo Schiffrin
Jalil Benyacoub
Virginie Rousseau
Pablo Perez
Original Assignee
Societe des Produits Nestlé S.A
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Societe des Produits Nestlé S.A filed Critical Societe des Produits Nestlé S.A
Publication of HUP0301939A2 publication Critical patent/HUP0301939A2/hu
Publication of HUP0301939A3 publication Critical patent/HUP0301939A3/hu
Publication of HU230800B1 publication Critical patent/HU230800B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/40—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for carnivorous animals, e.g. cats or dogs
    • A23K50/42—Dry feed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/40—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for carnivorous animals, e.g. cats or dogs
    • A23K50/48—Moist feed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/23—Lactobacillus acidophilus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00—Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/805—Pet food for dog, cat, bird, or fish

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

A jelep itdábnány ói fetsavbaktériasmkrs és: kaiöRösen a foieföbaeilfos, BiítdöbauteriutB és Síreptoooceus tEoteroeoectts) nemzetségébe tartozó mtknmrganíztnusökra vonatkozik, amelyeket szolálítmk, és prohkitikús hátasuk alapján szelektáltunk.. A jelen találmány ezek felhasználására bobbiáltattik egészségesek növelésére szolgáló: állateleáel kotupözforők előállhásábzu, továbbá az ezeket tartalmazó kompozíciókra is vonatkozik. A találmány a bobbiállatok ilyen núkrootgímizntnsokkíd történő etetésén keresztül a bobbiállatok egészségének megőrzésére és javítására szolgáié eljárásokat is rendelkezése boesát.
A háziállatok jó állapota szoros összefüggésben áll a táplálásukkal, A megfelelő táplálás erős és egészséges ijobbiáliatoí eredméttyez. A. lápérlék biztosítása melleit az állatefedpl befolyásolja az iuteszttuáíss fbélrertdszeri) msfcroilora egyensúlyát, és gaszlrofoteszhnális: Igyotnof-bélresuSszer) S rendellenességekhez vezethet vagy megelőzheti azokat. Ezért az egészséges állatok, gaszítöiateszíiaális traktusának és emésztési folyamatafoak Ismerete a praktikus táplálási gyakorsat megértéséhez alapvető fontosságú. A húsevőket, mist például a macskákat és kátyúkat rövid ernészíőtraktus és sz ételadag gyors áíjulási sebessége jellemzi.
A tnaesksk es kutyák gaszízösotesztióális urikeofiörájúnak összetevői között a Baeferoíáes sg., fefostődfom sp., Enterobaaíeriaeeae, Blftdobaoíerísm sp„ Laelobaenlus sp., Strepíocoeens »o.. Staphyloeoceus sp, és élesztőgombák -áléihatók meg,
Ezen endogén flóra mennyisége és összetételé ntegleheiősen állandónak tinik, habár az életkor és kisebb mértékben a táplálék módosíthatja. Az ember és ínás emlősök vékonybelében a bskféőurallóra szabályozásában a gyomor savassága, az epe, a bél- perss/tmnka és. a helyi immurntási faktorok fontos szerepel: játszanak.
Λ kuna’.eiék tCsunnci es messkablek síeltx-s gns/uomtes/ím&lis. mudelienessegm gsakrats a buklenahs felnövekedéssel és a paíogéu bakternrook a.tal rarmeii c-nterotoxlnok képződésével állnak osszeőlggésbeö.
Az elmúlt évek során ti. kutatás néhány értékes teisavlmktériam-fórzsre és ezek prebloílku» szerként történő lehetséges felhasználására összpontesifeít. A probiotifonnök élel;képes/csíraképes: mikroblálls készítményeknek fekintendök, amelyek s bélben ® természetes mikronéra. megőrzésével hozzájárulnak az emlős: egészségéhez, A problöílkttmokről ismert, hogy a bélnyálkahártyához kötődnek, a őéltrakinst kolonizálják, és ezáltal megelőzik az árlsíratss rnikrtxu'ganizurusek meglapadásáí. listásukhoz szükséges: követelményhogy a hémyáikaháítyát megfelelő és életképes formában érjék eh és tse bontofianak le a gyomorban uralkodó alacsony pH hatására. A macskák és kutyák emésztő traktusának Ijziolőgsáia különbözik az emberétől. Például a gyomor átlagos pH értéke a kutyák bao 5,4 és a mueskákbarí 4,2.
Hartetnisk, fe és Eombouís, FAI jfoomparison of ntedia for tbe deteetfou. oí biŐdobaeteria, laemiracilü and totál anaerobes feorn foeéal smnplssfo .íournal of Mieroblolögleal ifefetbods, 3ó. ISI-192 (1999jj mifcrobiális tbizsek detektálására és jellemzésére ídkfoínazutt fepközegekkeí foglalkozik.
Ftdlsawa, T, éa Mlsuoka, T, cikke bJ-lomofertneutatlve LttUfo species ntedomloastly isöisíed írom oanlne leces*'. ksarnal oí Veicrmary kisdfeal Sofence, 5§jŐ): 591-593 (i:99Őíj kutyák székletéből származó I.acmbaedfos törzsek izolálását ismerteti,
A 1103922375 sz. szabmfefom csecsemő székletéből származó bifjdőbakiérlum Izolálását ismerteti, valamint élelmiszerek kiegészítését ezzel a törzzsel. Ebben a dokumestumhan az állati táplálékot egészítik ki emberből izolált probiotikus törzzsel.
A WÖ96Ö8261 sz, nemzetközi közzétételi irat pfobfolrkas mikroorganizmusok hozzáadását; Ismerteti, va97941-3077A.Sö ktedrít állati élelmiszertermékekben alkaimazhsto höníazöí isHs>ertet, oly módod, hogy » mlkroerganízmnssk elérik a vastagbelet és ott száportxiítek, A kereskoáehtn íórgaíőíftbste elérhető tejryészetg-yüjteméayekből vagy emberi székieíízoiáUimökból hozzáérhető probK>tikHs míkröorgaijtzmysokkai egerek;; es sértést cicinek.
A sz, nemzetközi közzétételt mát dmrast Ismertet t ant’kSa iertozes megelőzésére sagy kezelésére állati. pa>b:ot:ko$ törzs beadásával. Az itt alkalmazod grofeíoriluís torzsok számos forrásból származnak, beleértve a jrsghmtol, huatan vagy állati székletet es mézet termelő rsélteket.
Végül, az CS-5 968 569 számé szabadalmi leírás a prohíotikus nrikröözgsnlzmosök höbhiáííat gabonaeledéiben történő felhasználását Ismerteti, sem ez, sem a többi elérhető b-odafesmmem nyújt Iníbrmseíőt a hobbiállatok egészségét: spéci li kasait Szolgáló törzsekre venítóknzőao.
Sövetkezésképgets szükség van oiyatt áfj bskténnmtörzsekrej,amelyek külőítösen hebbíállatek eledeléhez: alkalmazhatók, és amelyeket a Itebbiáliatök egészségére előnyös probiotikss írdajdooságásk rniaö választottank ki, és szükség van ezen íot, sek hsbbíállátok eledelébe történő beépítésére.
A találmány tékái - e!-o -.zempomja szerint - tejsavhakterínmok közé tartozó új probícrikns míkroorganizmnst bocsát: rendelkezésre, amelyet egy hobbíáilat gasztróinföszímálss traktusában túlélési és kolonizáló képessége es a bobbiállat egészségére kifejten előnyös probiödkas hatása a; apján szelektál tank.
A. probiotikas törzset & laetöbaeiltesok, blriáobaktérmínc'k vagy erleroooceasok Sózni vateszshaijnk kt.
A prohiotikas törzset az alábbiakat tartalmazó csoportból választhayak ki. I aetohaerilm: reuten, LactobadilítS: acldöpöilöSs Lacíobaerllns anlmaits, Laetöbaeiilns rurnims, Lactohaciites juhoson», Lamobaeilius zasei, Lactoh&eillus paracaseí. 1 uetehicrite·' rhaemosas, L&eíöfessifc férmeotíjm és Bíridohactermm spp„ Enteroeoeeas íaeeíort; és l· ntciococcüs spg.,
Egy előnyős kiviteli mödhats a grobiottkas törzset az alábbiakat tertalrte/ö vsoportbol vtéasztjuk m
244S), Eaetöbaesfe mmer; t\CC2SQ2, CNCM I-244Ó), I.actobactlitis reuter; t\CÍ2óú\ CNCM }, Lactehaeilbú acíáóphilus (\CC2s>28. CNCM 1-2-15
Laetohacilias matert (NCC258I; CNCM l-l Laclöhaeiilös rbtímnosas <NC€258Ó; CNCM Eáetobaellias renten «\»Υ2όΙ3; CNCM 1-2452 Enlerococcus laecimn >11>8 tNCIMB 10415).
2450b
2451).
- W>
Az éj bakteriumtor/s naponta állatonként kb. I.IIEÖN - - l,ÖÍ'b 12 cin. előnyösen kb. 1,01-.-05- 1,ÖlCli eíh, legelőnyösebben feöEvö? — 1 ,ΟΒΜ ίΙ efa tartományba ess bármely menoyiségbea alkalmazható,
A jelen találmány - egy tovább; szemponttá szerint - a fent leírt baktenamtörzs ielbaszstálására vonatkozik egy készítmény előállításában, amely a nobb-áiktR v gaszböímeszfmáíis traktosástak patogé» mikroorgamzmssokkal történő kokmizáeiójávai össze függésben álló rendellenességek kezelésére es/vagy megelőzésére szolgál.
Egy még további szermroní szerint a találmány a fent leírt hskíéríatmötzs Elhasználására vonatkozik a hobbtállaíok immnnváhisz&mk: szabályozására szolgáló készítmény előállításában. Az immunválasz „szabályozásá· kifejezés azt jelenti, hogy a lent megadott hakléríamtörzsek képesek a hobbíáliatok egészségében lantos, bizonyos ímmnriíhnkcíökaí stimulálni vagy egyéb hpmnnfenkeiőkaí módosítani, áoreíyek imtítoRtésdellen&sségekben, mint pl. gyulladás, allergia stb. potenciálisait részt vehetnek. Ezen umnu nőm kelők stimuláiását vagy mődesiiásáí a fent megadott baktériumtörzseknek különböző komhioáeioi fölhasználásával érhetjük el.
A taláimány továbbá egy hobbiáilaí gasztKdnteszíináiis traktusának, bőrének és/vagy lmudájának. vagy Imimmrendszerének egészségét, megőrző vagy javító eljárásra v<®nikoz.ík, amely magabnn foglalja a bohbiállaí legalább sgy, fent ismertetett, izolált törzset tartalmazó hebbiáliaí-eiedei: kompozícióval történő táplálását.
Továhhá a találmány szériát a hobhíállaíok gasztroiaíesztmál;» írsktgsának paíogén jnjkroerganizmtis97941-3877A/SO okkal történő :kölori!záe.íóiávns összeftiggéslíen álló rendélfenességek kezelésére és/vagy megelőzésére szolgáló ohm ást is elvágezbeígsk, amely magában foglalja, a hőbb Iá Hat legalább egy. jelen találmány szerinti, izolált terísel mrialmazó hobbiáldt-eledeliei történő táplálását.
A mlálmány szerint továbbá az immanválasz szabályozására szolgáló eljárást is elvégezbetnnfe amely magában foglalja a hobhiállat legalább egy, jeles dlátmány szerinti, izolált törzsei tartalmazó hohbíálfaieledellei történő táplálását.
A találmány szerint még továbbá sz öregedés hatásnísak enyhítésére vagy csökkentésére szolgáló eljárást is clvégezhetfofe egy hobbiéi Iákban, amely magában foglalja a: hobbsállat legalább egy, jelen találmány szériáit, izolált törzset tartalmazó höbbiáiláf-eladeilel történő táplálását.
Á kiválasztott jnlkroorgsmszamsok különösen előnyös hatást fejtenek ki a bobbldllat gászminlesziinálís ímkíasáfean, a borén és vaey tmadáiérs, az hanianreadszerén és az öregedésre.
Különösen. elemes hatással rendélksznek az íntesztinális patogénekíe, rmm pl Salmrmella íyphímntinm, Eselterielrta eoil, Sidedla d\ senfertaea vagy 'más paíogéa: Idterobaeterieceas c-dadd; tartozó kolonizáló bakiérntamk vagy paraziták, mint pl, bélférgek {Toxoeasa xpp.j, profozooaok tCmptosporidntm spp,, öíardla spp., Fentaifiebomonas homsnls, Entamoebs brstolyílen, Toxoplasma gotxlil,... s vagy élesztőgombák.
őzen mfersorgatííztmisök táplálékkal kombinálva előnyös pröbfetikas hatásaikat különösen az ízletességre, emésztésre és a bél egészségi állapotára, az imomnmdkődésíe és a higiéniai vlsztatyokra fejtik ki, az. ntöhbira azáltal, hogy elősegítik az örüfek térfogatának csökkenését és a krnyák ürülékének legalább részleges szagtalanítását. Ezért a találmány második szempontja szerint: egy bobbiállat-efedoire vonatkozik, amely az azt elfogyasztó bobbláliatokban nagy proksotskas hatással rendelkező és & hobbiállat gasatroimesztksálls irakínsáfeas túlélésre és kölosizáetőra képes erikroorgadzomsl tartalmaz, következésképpen a találmány hobbiáilatok gasztröintesztináils traktssának egészségét:szolgáló hobbíállat-eledelre vostnikeztk, amely legalább egy psohlotiksís, fest megadodák szerint izolált törzsei tartalmazza. egy emészthető segédanyaggal vagy gyógyszerészeit mátrixszal együtt,
A találmány továbbá bohbtállsiek: bmmsnváfaszának szabályozására szolgáló hobhlállai-eledelre vonatkozik, amely legalább egy problotikns, font megstdoítak szerint izolált törzset tartalmazza egy emészthető: segédanyaggal vagy gyógyszerészeti mátrixszal együtt,
A találmány továbbá hobhiáilaSokbon az öregedés hatásainak enyhítésére vagy csökkentésére szolgáló höbbiátib-eleáelre vonatkozik, amely legalább egy probiotikas, fent megadottak szerint Izolált törzset és/vagy tenyészetének foinhfszoiái és/vagy ezek meíaboiisját tartalmazza egy emészthető kiséroanyaggal vagy gyógyszerészeit mátrixszal együtt
Végül a találmány hobbiáliaíok bőrének és/vagy hnnáajáfiak egészségét szolgáló hobbláSfot-eiedőlre vonatkozik, amely legalább egy prohlotiktss, fent megadottak szerint izolált törzset és/vagy a tenyészet folalószóját és/vagy ezek métáimé it tát tartalmazza egy emész.tbető hssfdözöany&ggal vagy gyógyszerészeti mátrixszal együtt.
Egyik kiviteli módban az emészthető segédanyag egy táplálkozási szempontból kiegyensúlyozott alap hobbiéi lat-eledel. Az említett eledel előnyösen az izolált törzsnek, a tenyészet íelülószöjának és/vagy ezek meíaboliijának elegendő mennyiségét tartalmazza ahhoz, hogy hatásos legyen az említett proíslsktlkns haías kifojlssébets, antikor a készítményt a hohösállaífol egy kotssgfeti étkezésként megetetjük.
Az alábbi leírásban a efo („oolony-árrmíng-nnh) rövidítés agat- lemezeken végzett mikrobiológiai számolás során kapott hákférfemsejt-számot jelöli.
97941-3fo?7A/SÖ
Továbbá az „Mí.'C rövidítés a Nestlé-Cnlinré tlóileeiioa-t jelöli íNestié fesera-ch Center, Vers-cfeez-IesB isse. Caasanne, Svájc).
A. Jelen találmány első t&tgyát íeSnnfve, 20 iac-oba,» est es IS btítdobafctériumot különítettünk el macska és kstya tlrtőékbök ezeket szhrinelíök, es a technológiai e& Szsologiai pamméíetek szerint: szelektábuk.
Az első szlcríáeíésí a potenciális prefcioílkss felhasználásra is vitt© ki vitetettük (lásd 1. és 2. példa): növekedési tulajdonságok, tofersscia sgyöíoorssvva;i szemben különböző pH -értékeken, valamint a dtteemímban jelenlévő epetek különböző koneenbáeiólnál, basoalóan a macskákban és kutyákba» Snlálhatóskhoz.
Továbbá a fagyasztva szárított sejtek jő töiele képességéi két különböző kriop.roiekóv közegben egyén íelmiíen htzotsyt-otíuk: 4'-C-on és 2S°C-O8 egy gyorsított tárolási teszitek
Ezek a toszsek az: alábbiakkal jellemezhetők; rövid generációs idő, nagy sejtszám (nagyobb,. teát i Attete cterrd) a staclonáris fázisban és áilásááság a nagy sejíszánshan 8 és 24 órával az. ínoknlálást követően, állandóság a tágyaszlvts szárítás során és ezt követő egyéb tárolási körblrriérsyck között, a duedézmtnban található íteolőgisl epe-koncentrációkkal (2%) szembeni rezisztencia és kis tnértékő gátöltság, amikor 4%-ig terjedő epe-koncentráció jelenlétében növekednek. Ezenkívül a DNS-amdlzisböi szástnazö eredményeket vettük figyelembe althoz;, hogy ki válasszak a vizsgált divcrzilást képviselő bakiért ssmokai,
A macskák és kutyák egészségének védelmére használandó íSm,ek legalább 1 ,DE-dió cötetl mértékben képesek növekedni mén 2.0% epesö jelenlétében is, Kb. 5,4 és kb. 4,2 kozott t pH ériéken való taAozkodás után kb, 2 órával a törzsek ugyancsak képesek legalább ló* etetni mértekben nőni,
A találmány széria· 1 baktériumtörzseket az alábbi csoportból választhatjuk ki; Lactobaeillus renieri, Lactobacihns acidophilus, Laetobaeillas anlmálte Laetobaeilies rn-ninis, k&etobmáihrs jobnsonsi, t.actobaelllus essek bneíobaeilbts paraeasel, Lactobacsllns rhamnosns, Laetebacillus fermentnm,. Bihdehaeters um sp., Eníerscocens iaeeium, Entermo^ es sp.
A I.actöbsedlrís reuieri N« 'C Λ*ΊΗ. LaoíEsbaóillns rbamnosas NCC25O, Eaelobsetlfe reuteri NCC2592, Eactebíteíte zenien NCC26Ö3, Lactobaeiiins rs.nterr Μ.Ό613 és Laefobaeilius aeidophlte NCC2Ő2& törzseket s Bndapesti Szerződés szerint helytzmk te etbe a Colleetion Natipnale de Calture bde hbcro-orgasisntes (25 tus db dnéiatir Ikouk. 75724 Farié, Ffa ‘etuo s etéieményes szervnél 2000. április 19-én az alábbi: letéti számokon; CNCM 1-2448, C«M 1-2449, CACAí ’-245ö, CNC.M H245I , CNCM 1-245.2 es OvCM 1-2453. Ezen letétek felhasználhatóságát tekintve minden hortátozte ipeguzűrik ^nnek a bejHenítenck vagy más bejelentésnek, melynek igény pontjai ezen bejelentem eKóbteegewi rendelkeznek, ebe kozzéietek-vel
A Kik ÁI .ÁSZTO1T TORZSOK BIOKÉMIAI 'ΠÜ.AJOONSÁOAl
Lartöbacilhts mrteri C.NCM 1-2445
- örant-pezihv mikroorganizmus, csillája nincs, nem spóraképzö
- ntegleheiősen tövid és vastag pálcikák
- mikroaerohi mikroorganizmus beSerolsrsneatstiv meíabohzmussal, L(te és öl-)-tesav termelés,
- kataláz (- i, CO2 termelés, glükózból, argtutn hidrolízis -- MH3 termelés
- növekedés 5 só-n.Ztérf.% és ló íöm..'tát'i'.% N'aCI-dal
- cukrok fermentációja; L-ambinóz, galaktóz, D-glŐkóz, lakiőz, szacharóz, Ö-ratTméz
Lactobadllus rhasmmsMs CNÍ. M 1-2449
- Gram-pozhry tekroorgarn zárás,, csiilója nincs, n«m »pöraképző
- meglehetősen rövid és vastag pálcikák
97941-5Ö77A/SG
- mikroaerofil míkröorgaaizímss heterofemssmstsv nrtet&boKzBwssal, L{+)-tej$av termelés
- ksíaíéz <χ>,
- összes cukor fermemációja jellemző axtfe. dwaaosas-ra
Laetebíieilhss reateri CNCM §-24511
- Cirrnn-pozitiv mikroorganizmus, csillája odocs, ne® spóráképzo
- meglehetősen rövid és vastag pálcikák
- mtkmaero:!)! niikiZiOígaaiziruis betererfermeiitítíiv melaböltemassal, L(-t> és DO-iejsav termetes,
- ksí&iáz {-), CO2 tertnelés glukózból, atginia hidrolízis ~ NÍTl termelés
- növekedés 5% és 1-0¾ NaCMal
- cukrok fermentációja: L-rmfeiné^^tótássi. Ö-glukóz,
D-xilóz, iaktéz, szacharóz, D-rtrffiaöz
LseiohaeiEus reaterí CNÍ.M 1-2451
- (unta-pozitiv mikroorganizmus, eslllőjtí nioes, -nem spőráképzo
- meglehetősen rövid és vastag pálcikák
- mikroacroíií ínikfo^^aizamv kteföíarmetslntív metibxdizmussai, MM és:fí<-Hejsav termelés,
- kanalaz CO2 termelésgkí»e, bál, ságiam hútóizís ~ NEffi lermetss
- növekedés 5% és lÖ%Naöktó
- összes cukrok termeuíáeteja, amely jellemző LE. renteri-m
Laeíohsscílíos resten CNCM 1-2452
- Gratn-pozitiv tuttewgamzmus, esdlója nincs, nem spómkepző
- tneglehelősesr rövid és vastag pálcikák
- nttkroaerofil mifcmmgamzsnM keieröfenttersíaliv ssetabotlzntassal, Lfo)- és B(-)~tegsav termelés,
- kaialáz í-), CO2 termetes glükózból, arginin hidrolízis ~ AÍH3 termelés
- növekedés 5% és 10% NaCI-dal
- eakrök íerteera:átiója; L-arahiaóz, l>-gluköz, szacharóz, D-míímőz
Lsetolhsdlltjs resten CNCM Í-24S3
- Grua:~;xízrbv ntikrííorganizmns, cslllöja umcs, nem spóraképzo
- meglehetősen rövid és vas tag pálcikák
- asiSífoaeeetll iuitexxízgaaizörus taxKofememativ nteíahohsmussal, 1 {-1- rv lX-)-te'<u>\ termelés,
- kotalázte),
- cukrok Icrjnentáclótai D-glakóz. iakíóz, szacharóz, D-raiímőz,
A továbbiakban három, macskákból szoláb laetob&cillast (NOC2584, NCC2S42, NCC2S83>, három, kutyákból testált laelobacillöst (N€'C2r>03, Xi'CZol 1, \C( 2öz§), egy macskákból izolált biíidobííkteriumol. (NCC2í)2?l és: egy kutyákból izolált biíidubakterntínoí (N.CClftS?) íeszíettmsk poteuctátls probsotiktss hatásukra hobhléiiatit.kban (lásd 3. és 4, példát).
Egy további kivitess móőbttn a jelen taiáltnány a fent ismertetett baktértnmtőrzsek felhasznaidsám vönatköztk a hobbiéilatok egészségét megőrző és javító itöböiáiiai-etedel előáll írásában.
A törzsek lélhasznáihaiók életképes tbntegakhas, makísváii termájukban, a tenyészet léltllöszőlakénl vagy ennek terkciől fertnájáhtm, mmt pl. sejlödsk, pepíidö-glskán, mtephtzsua, Sísztitetl proteinek, ítmksiouáiis metzbelliök, hteaktiv molekulák.
9794Í-3Ö77A/SÍ1 ő
Előnyösen kb, Í.ÖEvÖáeth/g-kis. Ι,δΕόΙΙ eíh/g, meg előnyösebbe» l,öE-rf)5 ekálg-kb. EöEvlO eia/g, iegelóayösebbon EltEtŐő cibfg - EöEvtÖ cíu/g mennyiségben atotozzak őket.
Egy előttyös kiviteli módhatt a tömekef táplálék-ktegészlíőkéni: hasznáíhaijtík fel a bobbiOaf-deáeí minőségének javítására kb, 1,ÖE-UI4 eiuíg - kb. l$EiU cflEg nsenoytségbsn. Táplál A-kiegészííökkést kapszulázhatják vagy' por formájában alkalmazhatjuk, és a fő eledellel együtt vagy aítőt elkülönítve csomagtdltatj&k, nedves vagy száraz témában. Példaképpé» a tsláltuátty szerinti kiváhisztolt jnlkreíírganlztsusokaí tartalsnazé port .zacskókba csomagolhattak vagy gélben vagy Hptdbon vagy·' más alkalmas ItotŐozöaríyagbso szerelhetők sl. Ezek u szeparált egységcsömagok egy fő eledellel együtt.. vagy pedig egy több egységet tartalmazó csomagban a fő eledellel egyelt használhatók tél a gyártő utasításai szerint, Egy másik példában a prahloíikas törzsek egy több-kamrás csomagolási egységben kerülnek kiszerelésre egy második emészthető komponenssel együtt, például egy vizes vagy nedves közeget tartalmazó darabos eledel vagy egy szárfioit durva darálók étkezési-mérete adagja egy He\íí »s /a -Avban kiszerelve, A zacskóban az első: 'kosra tartalmazhatja a probiotikus tömet és egy második, -zepantlt lezárt kamra a második emészthető köorponertsi.
Ezek a kiválasztott mikrííntgatuzzansok különösen előnyős hatásúak hobbiáliatokban a gasztrointesztsziáiia traktusra, bőrre ésivsgy bundára, inmíomendszsrre, a tógák vagy száj egészségi állapotára, a csontokra és az öregedés hatásaira.
Ugyancsak javítják az eledel Ízletességét, az emésztést, az. immanfunkeiókat és a higiéniai viszonyokat (ürülék térfogatának csökkentése és a kutyák iírülékének részleges szagitdanhásaj hobbiáliatekóas,
A. jelen találmány tehát hofebláitaiok egészségének megőrzésére és javítására szolgáló hobbíáliai-eledelre vonatkozik, amely legalább egy, a lenti tulajdonságokkal rendelkező pmbioiikas törzset tartalmaz egy emészthető hordozóanyaggal vagy gyógyszerészeti mátrixszal együtt,
A legalább egy, felit! fel&jdonságokkal rendelkező baktériumtörzset beadhatják a hohbiáliathák a/nortaá-. li.s étrend: ktegésrtiőjekénivsgy atáplálkozásllsg teljes hohbiállat-eieáel összetevőjeként.
A találmány szerinti tápkálkozásiiag teljes hehőiállaí-eleáel leltet pontot!, szárítóit lórrnábtm sagj nedves, fagyasztóit vagy önmagában stabil IrohbiáÜat-efedel termék, Ezek a hoőbiáílaöeledeiék az írouakmthut ismert módos előállíthatok, azzal a. feltétellel, hogy ahol a míkroörganizinns aktivitása megkívánt., megfelelő őáaőgyeléssel bízíosigttk a mikroorganizmus túlélését, A feskíértumtörzsőn és/vagy fermentált médiumon kivid ezen hohbiállat-eiedelsk taftslmazluíinak egy vagy több keraényiiő&rtást, lekérjeforrást és lipidforrásí,
Alkalmas komén, hőforráséin.t péklakétu szolgáinak a gabonafélék és hüvelyesek, mint pl, kakoriea, rizs. l'it/ji, .»:u zab, -zo;a es e/A keveseket.
Az alkalmas feherseforrasokat bármely megfelelő állati vs®y növényi fehétjeforrás közül kiválaszthatjuk·, példáid hás és liszt, szárnyusííszl, halliszt, szója&hétje-koncenlráPrm, tejfehérjék, ghttén és hasonlók. Öregebb állatok esetében :elSnyős< ha a fehérjeforrás magas minőségű fehérjét tartalmaz.
Alkalmas Epidforrásokra példaként szolgái a Írás, állati zsiradék és növényi zsiradék,
A keményítő-, fehérje- és lípídförrások kiválasztását nagyssériékhet· meghatározzák az állat: tápanyagigényei, ízletességi meglóotolások és az alkalmazott termek típusa. Öregebb hobbtállatok eselébtm a böbhtállaíeledet előnyösen: viszonylag kevesebb zsiradékot: tartalmaz, rolót a fiatalabb hobblállttfök esetében. Továbbá a kcményítőierrásük egyet vagy többet tartaíroazh&tosk a rizs, árpa, búza és kukorica közűt..
Ezen túlmenően ktdösiéle irtás összetevők, pl. cukor, só, fűszerek, fzeshőunyagok, vitaminok, ásványt anyagok, zaroatsnyagok, zsírok, és hasonlók. szittttm beépíthetők s hobbiállat-eledelge, ha szükséges.
97Wí-567WSÖ
Szárított hobbíáílat-dedeí eloáilfiásáísoz sikálmas őJjátás. »2 extfödáfo főzés, habár o sütés és más alkalmas eljárások is alktúmazbatók. Amikor az extraáálő főzést alkalmazzak, a szárlfestí bobfeláílat-eledeit rendszerint durva darálók formájáW kapjuk meg- Ha egy prebtoílktis szénhidrátot baszuairntk, a grebíotifcumot az akarást megelőzőéit a száraz fotbbíáílal-eietfel többi összetevőjével összekoverhstjtík, Aikaltnas .«Sjáfást toertetaek az ElMáSÖŐ© számú szabadalmi leírásba®. Ha egy probiodkus miktöörganiz.nmst alkalmaznak és a végső termékben az aktivitás megkívánt, az orgonízemst leginkább bevonalként rávíszztik a szárított hobhiállst eledelre vagy beletölfjúk. Áfkadnas efjárást ismertet az Ι·Ρ-08δ28δ3 számú szabadalmi leírás. Antikor a mikroorganizmus túlélése m szükséges, hsszzáadbatjnk az exírmláfás elotís keverékhez a miksoorgauizmust, a. tenyészetének felülúszőjaí vagy mctabolitiát, ahogy megkívánt.
Nedves eledelhez az US--4 78 ; 939 és ;az l.iŐ-5 I 32 I.3?számú leiráshaa sstoerieteh: eljárások alkabnazhatők szimulált hústermékek előállításához. Más eljárások a darabos típusú termékek eiőáiliíásáimz ugyancsak felhasználhatok; pl. főzés gőzben. Eljárhatunk úgy is, hogy tömb (loal) íipostí terítékek Höáíiíútsához sgy megfelelő hussnyagói emldgeálunk, aikaknas géfcxiiőszerí ódnak hozzá, és á húsenmizlót a konzervdobozokba vagy inás tartályokba történő betöltést megelőzően: hőkezeljlík, Mint a szárított Imbbtállaí-eledel előállításúnak esetében, «hol a kiválasztott probloílkus fejek túlélése Mt szúkségszern, a főzést vagy hőkezelést megelőzően vagy sz előállítási eljárás bárníely megfelelő vagy alkalmas szakaszában hozzáadhatok az elegybez,
A prebiofeknm mennyisége a hobbiálfat-eiedefbeo előnyösen kevesebb, mint kb. 26 tömeg*·» és még előnyösebben kevesebb, mint kb. 10 tömeg%. Példán! o hobbiállat-eledel preblotikumtarfelma kb. Ö, t tőmegőá-fől kb. 5 tömegők-lg terjedhet. Prebiotikumkéní eikőtsát totíairmiző hebhíáiiat-eleáefek estében az eledel kb. is,5 tSt®eg% ~ lő iőmeg%: cikóriát, még előnyösebben kh. 1 tÖmeg% - S tomegfe, mennyiséget tartalmazhat.
A bobbiálkst-eiedei tovább; hatóanyagokat, például hosszú szénlátteú zsírsavakat is tartalmazhat. Alkalmas hosszá széídát-eú zsírsavakra példákéi·! szolgálnak alla-hnolénsav, gamma-linoiéusav. iinolénsav, eikozspentánsav és dokozabexánsav. Az eikozapestánsav és a doközithexánsav alkalmas forrásai a haloiajpk, Sorágő olaj, fekefeszedermag-ní.sj es hgefszépe-olaj: alkalmas fonásai a gammaőifiolénsavmrk. Eórsáfrány·· olajok, napraforgő-olajok. kssk-ífuaoiajuh es szójobub-oktjolc alkalmas formai a línoiéusavnak.
Ha szükséges, a bobhiásfai-efedel kiegészíthető ásványi anyagokkal és vkanthmkksi, így tápanyagok szempontjából teljessé válik.
Továbbá, ha szükséges, a baktériumtörzs kapszuíazba-ó; például cakormáínxba, zsomátrisba vagy pebszaeharsd mátrixba. Be is vonható, amint azt az EP-SÓ2SŐ3: számú szabadalmi leírásba® Ismertetik,
Az új probiotikns törzset előnyösen: úgy alkalmazzak, hogy a hobbíállat-eieáei előnyösen a. probfoílkus mikroorganizotos kb. Ι,ΟΕΗΜ - kb, 1,91610 sejtjét tartalmazza. graiumonkétfe teég előnyösebben kb. feóE+dő - kb. l,öE+ffe sejtet: grammonként, A hobblálfat-eleilei Ith. Ö.ÖÖS - ÍÖ tőmegká probioíikus rmkröorgaraztímsi tartalmazhat. Előnyösen kb. 0,02 - 6 tÖmeg%~öt és legelőnyösebben kb, 1 - ő íőmegőfeot tartalmaz,
A hobhiiállat-eiéde! mennyisége, hogy egy előnyős hatást kapjunk, a bobbíáliat méretétől, az áliaf toposától és az állat korától függ. Azonban a hobhiállat-eledel azon mennyisége rnegteielő általában, amellyoi legalább egy tejsov bakteriam törzs és/vagy ekvivalens fersrenfáelos tápközeg kb. kóE ΗΗ-Ι,ΟΒΉΑ eőr napi mennyiségét elérjük. Kátyúk esetében kb, LöE,+f>9 - l,ŐEt ll clh/nap vagy a macskák esetében 1,01-607 - 1,S&-18 efa/nap mennyiségei adnak be.
A találmány szerinti: kompozíció jelentős prohíetikus hatással rendelkezik és/vagy különösen hatékonynak falóitok az egészséges essfesztő funkciók fokozásába® és/vagy megőrzésélten hobbíáHatokban és a
9?941-<O?7A/SÖ
8ί g&sztromtesztíoális {{aktus,, a bőr és/vagy a bíátda és/vagy az fennunrerulxzer áíbipotássiak: brvsíásábats és roegőrzéséiten hobbiáiks-okban.
Az alábbiakban ismertetett kív jU·. módok w korlátozzák a jeles taláhnásry oltalmi koréi,
A. példák előtt xövídepi íswrL'.júk az ábrákat, abol
- az 1. áhm A kutyák perifériás vér snenonakleásis s^tjebek (MBC) iíimtöcita prolíleráeiöjia mliogéríekkel vagy íorbel-észierekkel történő Berkeníési követően. 4 béíen áf L aeidöplnlius N€€2ő2.§~vul (fekete oszlop) vagy aaélkáli (fehér oszlop) etetett íéhfett kutyákból szátmazö PMBC-t külössiböző mítogéstókkel simruláltuők a grabkonoís jelzett dózásokbsrs (pgbölk A. fuitogióf sek PHA (Pisyíobesnagitfen), Con A (Coneanavalín A), PWA4 ÍPofcev/eed OHíogóa} ós & tőrbol-észter PMA/toso ffeifbol-oslriszíái-aeerát és: kávanyci») voltak. *~P<i),85, Studcat-féle teszi;
- a 2. ábra: Kutyák: lenkodtájs által termelt eítokineket különböző probiotskns törzsekkel serkentettük. Normál feistőít. kutyákból. származó feokoeUákat különböző hobbi állatból izolált lasiofeasílfes törzzsel serkenseítök IX Órást át, A líoofeöll tenyészetek egyedit! táptalajt (negatív kontroll) vagy barnán lactobacíiins szolátunsot §T1 5 (pozitív kontroll) tariaboaziak. A eiiokmek azonosítását RT-PCR.-rel kiviteleztük, A kvandílkáiásakat etidirsm-breísistádal megfestett agarózgél szkeunelésóvel végeztsk, és az egyes sávok relatív kepe lesn enekiképposrtjának meghatározását NIH istiage szoltver felhasználásával: végeztük, Az eredményeket, mint két inggetfes kísérlet állagát, tetszőleges egységekben fejeztük kb (A) 1L-12, (B) l.L-58, (Cl IFNy, (©) TGF8,
PÉLDÁK
í. pébfe: Törzsek és tenyésztési körslmésyek
Számos törzsei. (bes/un-zve a Nes-fe Cukoré Coiiecnon-tól -- NCCí szkrínehönk sr-acskákban és kutyákban töriénő polenelábs probi.obfa.is alkalmazásukra. Különösen a növekedési potenciáit, a fagyasztva szárítással, és ezt követő tárolással szesnbeoi rezisztenciát, a gyosnor savasságával szemfeesd toleranciái és a macskák ós kslyák gaszüomíeszíioális traktusában található epesók kíllöabözo kooeeutrá-clölval szesnbeas toleranciát értékeltük ki a snaeska- és kutyaürülékből izolált 2b iaeiohaesllas és 1b htbdoh&kteriöm törzsben, melyeket az 1. táblázatban mulatunk be,
Ltáblázat
A vizsgálat: mödszemfcimz: kiválasztott baktériörnok kódjai és tsrtejdonságín: I,aetnbacsP«s«k:
NCC- kód CNCM- kőd Ksál Á.lfet-fej eredet Eledel slpss- sa NM3argí- i «feltol Ύφ sav APISSCH-vai azonosított
2$?§ - 1,8 i-t macska kevert - 1, 1... smímaiís./íominif;
: '2581 1-2448 1..B1-2 macska kevert : h· n/i. tcuteri
2S.S3 1-2449 LK4-1 macska kevert - D?L L. rbaomosas
: 2586 - i,K;-2 macska &©¥«« ; -í- D/L L. reuíen
2SÜÖ - 1,142-1 oiaeskts száraz Dd. 1,. aeldopiülas
2592 1-24511 LRf-i srtaeska kavatt ; A. Dl.. L temen
2594 - LS1-I macska keveri - 1, L. anbnaiis/rumfeis
259? - ί..·?Υ2~5 kutya nedves - L !.·. asdmalis
2680 - LC2-5 kutya nedves - 1.)/1., !,, fernsestum/renterí :
2ŐÖ3 5-2454 1,552-5 kutya nedves - 1, L. renters
2otlö - 1,1-2-6 kutya száraz .... D/'t L reuteri
9794 5-3877A/SD
2689 1.112-6 kutya száraz -i- i dl. L. reateri
; 2613 1-2452 1442-7 kutya száraz 4- i Ϊ-^λΪα- 1... retderi:
: 2616 14-4-1 kutya kevert 1 D/L L. Feaien/fermentat
í 2619 - Lt-4-2 kutya kevert - tel. L, acidonhiius
: 262! - 14- 5-2 kutya kevert - 1. L, antmaiss/níntinis
2625 - 1.7-1-3 kutya kevert - L L, soiotelísrt-ttteists
2628 1-2453 LAI-5 kutya kevert: - tel. t, aeidophilas
2632 - LA!-6 kutya kevert -r tel. ·... reuteri/fértneniutn
2636 - IBI-5 kutya kevert > í. b. aniinaiis-'r-uínf-is
Bsístlnbalrt éri«inuk;
SCC-kód Kőd Állatfaj eredet Eledel típusa Fajok
2623 ('02-5 macska száraz Bif-ikíbaeíeriuni
2627 (02-5 macska száraz 8ií. adoieseenks
2638 C112-5 macska száraz I3;f. séolescsníis
2633 CE3-! macska száraz Bií. aőöfescesíjs
2835 CCf-5 macska kever; Blf. íongnnustás
2637 CE4-Í macska SZÚÍUZ Bif, adolsscentis
2648 (433-5 macska száraz 8if. addésöteíiis
2643 ( 1 2 -6 macska száraz Bi f, adoleseentis
2647 05-3-5 kutya nedves Bif. aőoíesceads
265! D8-3-6 kutya sz&r&z Bif. animal IsAactis
2654 D9-3-7 kutya száraz 8i f. ansmaiisAaeíls
2657 06-3-6 kutya száraz Bitidobacteríurr;
2668 1)7-3-5 kutya száraz Bifídobacienum
2663 D83-; kutya szársz Bifúlobaoierínar
2667 Df 3-1 kutya száraz Biíídobaeiermro
267Í DAI-.s kutya kevert .814. amrn&lls.dacíis
2674 ΟΛ34 kutya száraz Biíidobartertnm
2877 DD3--J kutya száraz Bi I'. adolesceads
A 28 teeíőbsc idust és 15 birtáohakíériumot különböző étrenden tartott macskákból és kutyákból izolál· luk, amint azt az I. íáfelázitiban Az eis# azzmosítás mortblőgíai és 6ziaiőgiái tulíddörtságek alapján tórténí. A.BÍ-SC-CII és .F.aptá4T332A rendszert. löioMérscux.! áíkaintaztunk a lauíobatállusokhoz, illetve a bífíáobakíértnmokboz, A tiszte íörzseket lolágyasstdtlak, és -S8aC-on a Nesíle Gubare €olk?clies-ual (NCC) letétbe helyezték.
A vizsgálati möászerefehez az összes baktériumot tótewsstáptaiajon íenyész;etíük. Mindegyik regenerált törzsből egy «urnái -8t»'C-,x. t ad krmproéekéiv táptalajon tároltunk (48% g.ticerohéÖ% 14...!. A tenyészetei másodlagos tenyésztéssel tartottak lenn egy -gyengén báztsos 1% inokuluín 18 ml nővesztő-táptalajba történő beoltásával és 37^--00 történő anaerob InknbSlásávak
A laetobaeillasokat WS-bcs 12 öíáttat szaporitöttuk. A bsbd&baktsrtuteökat vagy 22 órán: sí MRS 48215 iőtsAérfe% L^oiszteín-biárokfertőbas (MRS-Cfe vagy 48 órán át BíM -* 8,85 tömátérbík L-eiszteiítbid’VÁloridbsn (Biíl-Cj növesztettük, óz 5 ÉumAléri'% iookulmnnteí történő beoltástól számítva..
A teuyészeíetet: -MA'-on tároltuk: a kSlbnbőzö szállítások közben, Az: fökigén-meates köruyszetbez áita9794Í-3Ö77A/SCÍ iában toidrogémszén-dioxíö: anaereb resxisaer alkalmazásával (GasPak, Beesőn Dk&ingo®, GSA) jotööMnk. A bibdobaktériumoknt mindig ilyen edéóyekhen íárteímk á tárolási periódus alatt,
2, példa; fektennmtörxsek kiválasztása
Ez az is vltro szkrínelés & termelő taiajdonságoko» alapul az; életképes sejfek ipari alksirnazbatöságásak és aw képességének felmérésére, hogy íátélrkse a: gáttó és káros gaszöomteszémál is kórabríéayeket, valamint geoomlális sokfelesegíík fdiveraítáa) vizsgálatára, A nem-jetleínzeb törzsek dlverztóisát vírgy gesmmiáíis: basom lőságát veduk .ssómMsba RAPD-t ás rlbodpszálásí attmazva.
Assvagsík és íSiudszerek
Sakfersdntotivekedés
Azon törzseket, amelyek. oagyszásnö sejt gyors tenndé&áse képesek, azonosítani ML Az ilyen baktérfnEkek irővekedésí elkinsa az alábbiakkal jelien;ezhetö: rövid lag-fázls, rövid generációs Idővel nagy maximál is sejtszám és bősszé stacioner fázis. Ezért a törzseké; bárom váhozó sajátságok alapján itnsonbtoímk össze; .a lagfázis bossznfega. a generációs idő (érában) és a maximális sejtszám, amely aleglóntosahb jellemzőnek bizonyult,
Laeiobatíllus esetében;
2ÖÖ cet 37C-os ptenrkobáit MRS húsleves-táptalajt t% friss sztíbknltúr£ív»i hmkuládunk. Minden órába® 1 ml muttákat. gyóltöttönk az bök mádét követő 8 órán át, Az ntolső mintst .24 óra mófv® vettük, Mindegyik nsiuia 1 mf-áhol TS-ben tízszeres sorozzthigltásí fcéssiíetfltók a. számláláshoz. A tenyészetet MAS agarban fepour-platlsg” technika) anaerob módon, 3?X2-<m, 48 omo át szsgodioiotk. A 3S és 35ö közötti kolóniaszí rana! rendelkező lemezeket regisztráltak kötónh-képző egység {eía),4eoyészet-rni lármába®, és a számlálásrtál fjgseUo'he vetítik,
Biödobakféntsm esetén (MfeS-CHsem
Előzetes vizsgálatokban az összes törzset megszórnia Iliik 24 ént: tenyésztés áfán MfeS-C és WYő hssíeves-tágíabje®. Az eredményeket cffeml-ben fejeztük ki. A növekedést görbéket a sejiszám meghatározásával vettük fel, amikor MPS-lLtáptainioö növesztettük 0,: 4,12, .24,32 és 48 éra «ián, u faetobaeillos esetésen ismertetett protokoll szerint,.Abból acélból, hogy meghatározzék s szubtenyésztö iápkőzeg befolyásai és a növesztő tápközeg optimális gázmesnesílését, az alábbi vizsgálati módszert valósítottak meg:
- szobkífirárábói, 48 érts® ál 4®<Xsn tárolt BKí~€~ben és MRS-C-bo moktdáiva
- sznb&íslíúrábók 48 órán át 4X2-0® tárolt: Bf8~€~öes és MRS-C gázmeniesífett lyukba mókáiéivá (az oxigén eltávolítását égy optimál izéitok, hogy a táptalajt kétszer antoklávoziúk és közvetlenül anaerob edénybe» tároltak) friss szabkukmaból. MRS-ben és MRS-C gázmenfesitett lyukba inoknlálva és anaerob körülmények között tárolva a kísérletei megelőzően.
97941 -3Ö77AfSG
2. táblázata A bafctéviéfis ttősmkedcsbez vizsgák íápkbzegek
taesobscíiltts
Szubsztrát Összetétel pH Referencia
MRS MRS énkor nélkül (Dí fent Glükóz Desztillált víz 35 gő 29 gd KlOŐml 6,5 De Mao és al. (1960)
Mdabaetefm
Szubsztrát Összetétel pH Re fes t ne in
MRS-C MRS cukor nélkttl (Dtfeoi Glükóz L-oisztsindfCl (Pinka) Deszdiiait \ íz 35 gél 20 gd (bőgd 1080 mi 6,0 Paeher és tettei lel (199ói
TPVG (Ttypticase Pepiooe Yeast Extráét) Ínpílka/ iiUK | Pepion (Difeo) Yeast exíttict D'de.o) Glükóz (Merek L-cisz.tem- liCI (Fiukat Desztillált víz 50 §4 5 g.4 20 g4 4gd 1 ,§o KlGÍPml 7,0
ölte» Esető agar (15 gditer) ImzzáadásávaS szilárd táptalajhoz jmottunk. A tápizlsjt léteG-on 15 percig aotoklávozsok A hifidobsáttédömböz használt folyékony táptalajt anaerob körhlmények között tároltuk vagy a felhasználást megelőzően gázníeniesitetlük.
Gyomor pifesül és epével szembeni reziszteneia
Amikor a isikroorganiziuitsökat leme’lk lel kell élőtök a gyomorban és duodéonmisím tévő körühuényékét, hogy képesek Jegyesek előnyös hataó kite teái az állat gaszb-oieíesAhtáife traktusában. A gyomor pH-ja és sz epesófc a bakiériumíMta szabályozásáért istetős iö komproaepseL fezért a törzsek savassággal ás epével szembeni rezisztenciájának fokát vizsgálati otőászerekkcl vizsgálat keik
A macskák és kutyák emésztő traktusának fiziológiája ksiőnbözik az emberétől. Az átlagom pH köiyákhao és órácskákban 3,4, illetve 4,2, Egy refaorstitítáli höhbiáilat epét ajánlottak a vizsgálati módszerekhez (4. tablaott). Az epe-koncentráció <1,5 és 2% közötti tariománybajs változik, amikor az étéi a vékonybélben emésztődik.
Maeskákbaa és kutyákban talált kiugró pki értékek szerint az életképes szám pHó2,6 értéken Ki pere után, píi~3,4 értéken (kutyákból izolált törzsek) vagy pfl~4,2 érieken (macskákból izolált törzsek) két óra elteltével nemlehet Ι,ΟΕΑίό eftiúttJ-nél kisebb.
Gyomor pH-v&i szembesít reziszieam
Az összes iaeiobaeillusf feiKS hásisves-iápí&iajba ínoknlálínk 1%-feao, és 37Α~’-οο anaerob ötödön egy éjszakán át szaporítottuk. Az 5%-ban BHl-C-bs itiokuláh btődobaktértnmokaí: 3?uC-ím anaerob körülméoyete között 48 órán át növesztettük. A tenyészeteket 2 ml-es kémcsövekbe i trpenderfi szétosztottuk és centrífugál97941-3877A/SG tűk (3S88xg, 38 perc. 2:8°Cj. A sejtekéi Ki nger-oldattal háromszor mostuk. A gyomor savas körülményeivel szembeni rezisztenciát in vitro három, szimulált, hifi-lel (Merek} pH--2,6, ?,4 es -1,2 értékre iseáliitot· gyomorseavben vizsgáltok, A szűrése» slsritizációboz egyszer használatos szűrőt (Nalgene) alkalmaztunk. .Az egyes baktóriuttrszuszpenziők életképességét ügy vizsgátok, hogy belőlük 1 nd-t hozzáadtunk egy szimulált gyomoraedv-söFözsü (különböze pH-júl 5 ml-ebez, melyet 1,5 ml
0,5 töm..óérf.%-os NaCi oldattal egészítettünk ki
A mintákat 3?*C-on inkubálink, ás sz életképes organizmusokat megszámoltuk a::
-8,, 1., 5., 18. percben pH;-2,6 gyomai-nedvben
-6,, 1,, 38., 68., 128., 1 kft. percben pB~2,4 (kutyákból izolált törzsek esetében) vagy :pH~4,2 {macskákból Izolált törzsek esetében) gyoniöínedvben.
,A ntoíáhstí iösstot-gotorben hlgltösufk teli 7,öi, MRSA) agarta rélegeztük és megszámoltuk.
3. táblázat; Szimulált gynnmmedv
j Sztthszirá· név Összetétel pH
J öyomornedv t 6,3 tőm..dért?h< sertés gépszínt Sigma) Ο 5 töm rt-tí'% Hat : HCI (Merek; pH beállításhoz 2,1,3,4 vagy 4,2
Epesáktoi szembeni rezisztencia
Meghatároztak rekortsítoált hobhiáilat epe különböző koneentráeioinak jelenlétében a B étán át tenyésztett taeíobaeiliusok életképes számának ki lei tolásét.
A két életképes szzlmot véltünk szignifikánsan különbözőnek, amikor a lo§18 értékük szórása 8,25 felett volt. Mindegyik törzs két változó értékkel leile-nezheto:
- a vizsgáit maximális epesö-koneeuttáetó, alsói nincs lényeges eltérés a koafeölltol
- az életká;pesség csökkenésének mértéke, amikor az epekoneeníráció a tenyésztő közegben, no.
.Azokat a törzseket A ki mertük az epére érzékenynek, amelyek életképes szántuknak lóg ló értékét tekintve kisebb különbséggé »t llet rezhetofc, amikor az epakooeeníráciot
1%-onkéM növeltük. A csökkenő különbség 1 logló érteket tekintve a 8 és 2% epe jelenlétében tenyésztett sejtek, valamim 1 lóg i 11 értékét tekintve a további 1% epejelenlétében t>2% tölött) tenyésztett sejtek között iekhrtbe.ío iéllrasználhaíónak. Ezen üibnenöen csak azokat a törzseket kell kiválasztani, amelyek több, adat :,1)-00 cfoímt mértékben teremtődnek, amikor iegi'eiiebb 2% epeső jelenlétében tenyésztjük okét, hogy kifejtsék hat ásukat a gasz; ;-oi ts teszi iná i i s traktusban.
Macskákból es kutyákból rekoasfihiáit állat epét készítettünk, amint a 4. táblázatban: hemnlatjuk, és szűréssel sterilizáltuk a félhasználást megelőzően. Az első vizsgálatban láetöbaesllusokat növesztettünk anaerob modort 24 órást át MRS húslevesben 37°C-o», és átvitíttk friss, Ó, 8,1, 8,3, 8,5, 8, 1, 2 és 4% steril rekonsttoált állat epével kiegészített MKS húsleves-táptalajra további 18 órás tenyésztésre, A mintákból 18-szeressorozafhfgrtásl készítenünk TS-be» a számláláshoz. Az 1..0E-Ö3 és l:s8E-85 htgiiássUt MRS agarra rétegeztűk egy WASP alkalmazásával („Whiíley Amomadc Spirál Fiaterik Don Whitley Sclesmtk I untod, Erigtend), Antikor szárítottak, a lemezekeí: megíórditoták és 48 órán át 37*13-00 anaerob edényekben ioknhátok,.
Éledt és munkatársai (1972) a. gátlást szignifikánsnak határozták üteg akkor, amikor « növekedés legalább 2 jog-egységgel csökken a teszt-esőben a kontrolihoz viszonyítva, Ennek alapján az összes lastohaeilius §7041-3873 A(SÖ érzékeny az. epe-konccntráclókra az: első vizsgálntban:, és: két. 4% epére rezis:Aens laetöljactllust vizsgáltunk feásontóképpe» 0, í, IA 2» 24» 3- és 4% epe. jetenlétében, A második tesztet a megismételhetőség es megalapozottság céljából kivueiezíuk, amikor az életképes baktériumok száma a növekvő epe-koncentrációval drámaian lecsökkent.
Másrészről kimutattuk, hogy ezen törzsek epe-rezisztensek a 18 őrás periódus· alatt. Felvettük a növekedési görbéket epesék jelenlétében, begy rnegbatárözzuk, vajon a íag-fázist és a növekedés mértékét helblyásídják-e vagy nem. A vizsgálatokat í%. rekenstltuált hobbíálfot epével kiegészített. MRS táptalajon Isctöbaeiiiusokksl kiviteleztak, a korábbi növekedési mérésüknél ismertetett protokollok alapiás,
A birídobakíérlumökat szubteuyészíetíök éa 32 érán át 37T~on anaerob módos növesztettük MRS-C táptalajon, melyet 0, 1, 2, 3 és 4% rekotssbínáit bobblállat epével egészítettünk ki. Ugyanazt a számolás-, módszert alkalmazd! k 1,0 S -03. 1, ÖB-04 és 1 ,00-05 hlgltásokífel, mmt a lactobae (Húsokra.
4. táblázat.- Rekon-Uituáb bobbiáílaí epe
Vegyületek gttKií/tni mg· mi össz%
faurodezos kólát t Sigma) 14,00 7,00 18,0:
Inurskoiát (Sigma) 50,00 30,40 74, Ö
Kólái (klnka) 0,14 S56 0,2
íánrakenodezoxikeiát (Sigma) 6,00 3,45 8.0
Laetobaeilbís törzsek tőteless képessége fagyasztva szárítással szemben es ezt követő íárolés során
A túlélés fejlődését kiértékeltük, A I ök-HlS cluönknéi kisebb értékű életképes számot: tekintettük: tiki alacsonynak.
Az egyes törzseket 2Ö0 ml MRS húsleves-táptalajba inokuláltuk 3% friss szubkahúrával. A tenyészeteket l ő órán át 3?°C~ön növesztettük. Légmemestieb körűim esve k (lezárt konténerek) léttyegchen anaerobnak tekinthetők. Az életképes «ejíeke: megszámoltuk n lombban lein „pour-plating módszert használva.
Λ umes?v’eb.í.r uontnt. gAassal t X00 k»d'pere - Ά , 20 peul R( A \>n„Sí In- sut unt cerm i-ígában összegyűjtöttük, és két különböző krioprotektiv közeg 10 mi-eben. reszuszpezidáitok. Minden, egyes törzse- két különböző krioprötefciiv anyagban reszaszpcm-iálloítk, A koncentfált bakfeciális szuszpsnziőkst nregsAtsláííuk jpoor-piating módszer) és ampsüláköa szétosztottuk i0,5 ml ampullánként), A mintákat: folyékony: nitrogénbe» HlőAAst lefogyasAotíuk, és 18 órán át szárítottak, A fagyasztva szárítás «tán akrögént vezefttlak át. a fagyasztva szárított anyag légsuesiesrísséíe, és az összes asnpnllát légmentesen lezártak. Az ampullákat -MX-on és riÖ’ÓH-on hat hónapig: tároltak. Az életképes sejtek számát az egyes ampullákban (az összes baktériumra és szaszpenziós közegre) havonta határoztuk meg.
Eredmények
A macskák és kutyák, potenciális probiollkamái kiválasztásának kereté» belül ennek a 20 iacíobaeillosnak és 18 hlfídobí-ktéríuntnak az m vitro szkríneiésében kapott eredmények a növekedést potenciáljukon,, a fogyasztva szárítással és ezt ktheió tájolással szesrtbsní: rezásztenciájakem, a gyomor pld-jávat és sz epekmtcentráeiövsí szembeni rezlsztcjmi^ukou alapulnak, melyeket s macskák es kutyák gssztromíesztmális trakíusőban: találtunk, és az S, táblázásban mutálunk be,
A 20 laetöbaesiínst azon kritériumok alapján osztályoztuk, hogy megsélelnek-e a jeléit vizsgálatokban. Négy törzs jó eredményeket. mutatott a növekedési jellemzőkre, a gyomor pH-vai szembeni ösztöne iára> eperezisztenciára és felélésükre vonatkozóan a fogyasztva szárítást kővető tárolás során: 1„ reuforí 04432581 9?foH:-3077A/SG «C\CM L2-U8), í . !CUÍCJ, MVW 5-?4S0k 1 <vue>i XCf'téOv tCKCM {-24tr, A l rnt'ien \< C 2oH vCV'X! i-?-to2) Azaiaöhi teltételeket tebesueítek:
- a generációs Idő rövidebb volt, adat egy óra, amikor MBS-ben tenyészíettök
-- a tag fázis rövid «öli t kevesebb, mto 2 óm) ~ a bsfctcriumszásn magas volt {nagyobb, mint í .ÖB+ttb CFPMÍ) a növekedési ciklus stacioner lazisa során és áilándo a sec'· u'aetot LocfŐ &. és 24. órában
- « t 't·/^ k sub?U* > o,t.t\ a lagyaszívti szárítás: során és ezt követő 6 höttapos tárolás során. 4’C-on és 28’C-ön
- a törzsek rezisztensek vollak kiugró cpekoscentráelőval szemben í2%), amely a macskák és kutyák gaszírosttteszdnáíis traktusában valószínűleg elölotdul
- sínes jelentős gátlás egészes 4% epekoneentíáclóig a táptalajban a .törnek azt matttbák, hogy tolerálják a pH 2,6 éréket legalább 14 percig és 1,44+68 CLHónf-nél magasabb szintes tudnak maradói
- a törzsek mzlsziensek voltak az átlagos gyomor pH-ra legalább két ásás kérésztől.
Ezért két, macskából izolált IsmobíivíSus tor/sel il mater. \CC258I es j reuien NCC2592)és két, kutyából izolált laetobaetibis törzsei ÍL. reuxn \CC260' es L, reater, \'VC26B) saki»/urttmk ki a potenciális probiotikus hatás tttnalatáayozásárn. Az \Ct. 2581, bt C?592„ M'OtB es \Π. 2<M5 törzseket L, műtermek azonosítottuk ALI S4CH megjelöléssel. Azonban a ríbobplzáiás teltedre,, hogy az NCC2SS1 és MCC2592 törzs nagyon közeli mintázattal rendelkezik, ahogy az HHCkóÖá és NÜC2Ó 1.3 is, ami egy vslószmu közeli kapcsolatra enged következtetek Az NCC2SSI törzs nagyon jó növekedési telajámtságokkal: rendelkezik, és az NCC2Ö03 szépével szemben jobb rezisztenciái tnotai, tnbtt az NCC26I3.
A maesksik'iíiékbol Izolált nyele hf Sdobakiérism törzsre- vonatkozó eredmények lehelévé tették az alábbi funkciókban történő szelekciót: növekedési tulajdonságok, a gyomor pH-val szentben; rezisztencia és az epével szembeni érzékenység. A NCC2623 törzs a kívánt tolajdosságök: egyikével sem rendelkezik, és ezért Iovábbi vizsgálaíokbííz. nem javasoltuk. Másrészről a NÜC2&2? törzs az összes kívánalomnak megtelek
- a generációs ideje rövidebb volt, mist egy óra, amikor MRb-€-hsa növekszik
- g lag-lázís olyan rövid volt, műd a iaetöhaeíílusok esetében
- a növekedési ciklus stacioner fázisa alatt a bákíérsumszás» magas és állandó volt
- a törzs reziszíet’.s volt a macskák és kníyák gaszttoiniesztináiis teakiusáhati valősAtmleg előforduló rettdkivliíi epeko'.tttentracioval t ?.%) szentbe!',
- sínes jelentős gátlás 4% epe jelen létében a táptalaj bán
-a törzsről kimutattuk:, hogy' pH 2,6 értéket tolerálja legalább 10 percig, és I ,ÖE--öb efe/ml-uéi magasabb szmíen képes fefomtaradpl
- a törzs reziszfetts volt az átlagos gyomor pH-vH szembest legalább két órán át.
A HCC262? törzs reziszíensebh volt, mint az MÜC2Ó23 és NLC2435, mivel esnék s bárom: törzsnek rokon a mlslózato rlbotlplzalássai vizsgálva, ezért ez egy valószínű közeli kapcsolatra enged következtetni {emésztés két restrikciós enzimntel: Ecttlil és EcoRVj.
A kutyákból izolált tíz biSdrsbaktértum csupán két kulöabözö fulptázaioí mutatott, amikor rihodpizálással jelientezttik Fzest uz epe rezisztons vizxgálstt módszereket csupán négy törzzsel kiviteleztük {keltő minden csoportból)' \t t '2t>5?, MCC26Ö9, MöMt és bi€C26?7. Ezen négy törzs mindegyike reztszteöS volt
9294I-3Ö77AISC a2 epe »n vívó megtalálható maximális könecatmclójávaí (2% épé) szemben, és a NCC266Ö és NCC2657 törzs életképes sejtszámáb-m nem történt csökkenés, amikor sz epe 4%-os maximális értékére vizsgáltuk. Következtelésképpen a katyaíírülékbőí izolált összes^ bhídobaktérinm to .>neg»eW>se*5 rezisztens a magas epeköncsfitrásiókkal szemben.
A növekedési Inlaísoaságökat iefclnive, ez a tíz baktérium az alábbi kél: csoportba ©szíható:
- az epével szemben reziszteas és jó növekedési íúiajdonságtAkal rendelkező törzsek; NCC26S7. NCC26ŐÍ, NCC26Ó3 ésN€C266?
- az epével szemben rezíszíens, de óban növekedési Inlajskmságokktd rendelkező torzak. amelyeket az ipari termeléshez optimalizálni keit.- NCC266Ö, NCC2671, NCC2677, NCC2647, N( C2654 es NCC2674,
A macskák és kutyák emésztése során talált rendkívüli gyornor pll-val szembeni rezisztencia leijes eredményei lehetővé kell, hogy tegy ék a törzsek jobb meghatározását:, amelyeket a. további vizsgálatokhoz választunk: ki. Csupán a N13C2Ö51 törzs nem tett eleget s gbi rezisztencia szelekciós kritériumnak.
5. táblázni: Összefoglalás
NCC kód Köti Növekedési kritérium Gyonmraedv- rezsszleneta Epe-rezisz- tencia Söslsslstás fagyasztva szárítás után
257S LBl-i : -r -
2501 1,81-2 :--4- 4-
2583 I.Ks-i 4 A -
25 8b LK1-2 - 4 -
2398 1,1-12-1 : J.. 4- 4-
:2542 1,88-4 -4 4- 4-
2594 1..S1-1 4· -
2597 1,42-5 A ' ΐ' 4-
26110 LC2-5 - - '4
2682 8.E2-5 V 4- -4 A
2ő0b LE2-6 - A : -T
2689 1,142-6 4- A '4·
2613 8,112-7 4 4-
2616 1.1 -1 -1 - 4- : -4 -
: 2619 1,1-1-2 A 4- -
2621 13-1-2 '4 4- A
í 2625 1,7-1-3 4- •f'· - 4 :
2625 LAÍ-5 •r -V· 4 -
2632 ; LAl-6 - 4 •4 -
2Ó.36 1,81-5 - A A 4-
A jelenlegi eredményeket tekintve, egy macskákból izolált feílldöhakterittm törzsei és: három, kutyábból izolált biíidtíbakléiSum törzsei }\'Cf 2627, ibetveNCC2U57,'NCC2663 és NCC26Ó7) tadtonk: szelektálni.
97941-38?7AíSG ló
6. iá biázst: 11 Iglló közegek
Anyag Összoléiel pH
Foszfát-paífer K5PO4 KB2PO4 Desztillált víz: 72 gd 48 gö löltö mi 7,0
Ringer-oldat Hat3l Desztillált váz 9 tol 1000 mi 7,1)
TSiTryptone NáCl Rágd 7,0
Saline) Tripíoti Desztillált víg 1 il i 1000 ml
ml-es adagokat szétozztoítítnk csövekbe, és 12l'Á5-on 15 percig autokláveztok.
Végül a 53 törzsből nyolest kiválasztottnak a további vizsgálatokhoz (lásd 3. példa): három macskákból izolált iactobaedias t \C( 2531, NCC2592, bKX'SSko), három kutyákból izoiáll lactohacillns (NGC2Ő03, NCt2oll, NCG2ó2s>, egy macskákból izolált bifideöakíérínm ÍNCG2Ő27) és egy kutyákból Izolált biSdohaktenum {\t «'2o*?) torzsot.
Ezek a törzsek az alábbiakkal jellemezhetők: rövid generációs idő, nagy sejlszám (nagyobb, miül 1,9150-08 slhiod)« steiooer fázisban és állandóság a nagy sehszámösn 8 és 24 órával az Inokttiálást követően, stabilitás a íágyasziva sza tus -.os an és ezt követő tárolási körülmények közölt, a daodénambart található rendkívüli epekoüccaüáefevid:(?.%} szembeni rezsszlenola és kis: mértékű gátollság 4%-ig terjedő epekonconlráeiö jelenlétében történő növekedéskor. Továbbá a DtdS-umaitzisböl származó eredményeket vetítik figyelembe ahhoz, hogy kiválasszuk a vizsgált dlverzilásí képviselő baktériumokat.
3, példa: 4 kutenizáeíó hatékonysága macskákba»
Λ 1 toijíed VCt j svon?! MCt 35’kg j rhanmosns NCC2583 és Ertidobactesiem sp. \tV2ft27 törzseket etetési kísértetekben teszteltük túlélési képességük: kiértékelésére macskák: gaszíroiníeszZitrálls traktusán történő áthaladáskor.
hím- és nőnemű, amennyire lehetséges azonos macskái 3 napig Frísfcies Grand étrendhez (bogul) szoktattoftk. Ax etetési protokoll az atábinakhét állt: 7 napig: „Eriskies Grand Menü- és 7 napig egy font megadott törzset, pl. L, reuíeri MCC25Ü1 (A diétái, !.,. rentoti: 5032592 (E diéta), L. rhamoesus NCC2S8? íC diéta! és Siődoh&eíeriam sp \CC2»27 (B diéta) Sartabnazó „Friskles Graud Menü”. Az étrend beosztása az alábbi volt?;
Maeska szúrna 1: 2 3 4 5 6 7 8 9 1Ö 11 12 13 14 13 lő
1, periódus A 13 C ö 13 A 4 C B Á 8 G E 1) C D
2. pertöáus 8 A O Λ G C D .4 C 8 C 13 í> A 8 B
A nyolc különböze baktériumtörzs felhasználásához az említett törzseket elégséges mennyiségben és stabil líoSIzált formában állítottuk elő, tekintetbe véve a törzs lűléíési képességét a teszteli állni gaszirolntesztinátis traktusában, Áz Összes törzset 4 g nvbálózzal összekevertük azért, hogy elegendő nienayiségs hordozóanyagot adjunk az előállított törzsek és az állatoknak szánt etéi-mátríx elegyítéséhez. .4 baktériumtörzsekéi különálló muauyag csövekben állítottuk elő: (LÖE+Ű9 etudnlmap), és naponta, az éíel egy részéhez adtuk, hogy biztosítsuk, begy az állat a telje» bakíértnmmennyiséget megeszi.
97941-W7Á/SÖ i?
Friss Üríik-kmitisákat vettünk, hogy atializáljnk a bakrérinmpopniáeió számát és összehasonlítsuk az alapértekkel (bozzándott b;s kícrs un $ né-kü;;
Az ürülékeket az alábbi napokon gyűjtöttük:
7. és 8. taiapértékg 14. ás. I5.; 21. ás 22. (akspériékk 28. és 29.
Egy steril rektális szondái baszxsáitenk legalább 0,1 g ürülék minta kinyerésére. Ezen mintákat pontosan lemértük és 8,1 g-t 18 ml 18% glicerint tartalmazó fiziológiás: oldattal jfeingerl elegyítettük. Ezt az oldatot ezm.án 1 mbes krtoesövekbe átvittük és folyékony nitrogénben telágyasztetftsk, tttttjd sz összes mintát -488*0-0® tároltok az analízisig.
A Eactobactlik Eaoterosdos, Enterobaoteriaoene, Erntorococck Blfldísbnetctra nemzetségek és Cksstridinm: perülngens endogetí popnbfciöját megszámoltak,. A baktériumokat szelektív vagy féi-szefekti'y táptalajon áetekíálíük. Százszoros szérrabigstást készítettünk 8,5% csszíemí fartahmotA Rtager-okiaíltart, -2: - -8 tartományba eső kigiíásokből, Különböző szelékísv táptalajt tartalmazó Beto-osészéket inokoiáltnnk és Inkabálfank (lásd az alábbi: táblázatot).
feaktériom 'Tápközeg r (3ct SsiŐ {érts) Atnmszférst
Imterobaeteriaceae Örigalski tSanotl fsíagnosttos Pasteur, 37 24 Aetob
fíilidöbaoteria Francé) 37 48 Anaerob
Laotobaesíij : Eísgors Tomato* .37 4® Anaerob
Cl. perí'ritrgens MKSifoiíco, Ml. USA}·;· 37 48 .Anaerob
Baeteroldes tÁsíikionkumok** MN Agár*** Seisaedler Neo-Vrmeo (BioMértOiis, Marey- PEtolle, Erazteel 37 48 Anaerob
: Wadswortit: Anserofeio Eaeteriology Manónk V. Sittet·, í> Cünm es S. F inogok; Ibim cd, : Pbospbomyeme (78,5 mg/S) x Sniiámetbovazofe (8,93 tng/í) 4· Irlmetlmprime (5 mgöi :: NM agar Lovrhury és Líiiy-töl, 1995
Eredmények:; A háktérturnszámot tizes alapú logarilmashatt fejezzük ki és a 7. táblázatban adjak meg, 7. táblázat: Ürülék bairtérmt» száma macskákban (átlag a= Sídev, rs~8)
A't. C 2581 MX 2592 ACÍ: 2583 M3C2O7
Elésre Alatta Élésre Ainttss Előtte Akstéa Előtte .Alatta
t.iserobaeslll 6,3%2,25 %63zl,23 · 6,12x2,45 7,82x1,58 5,31x2,84 7,47x1,23 6,9x1,44 7.654 1,45
Bifidnbaoí. 7,17; 1,82 7.6440,42 7,57X1,68 ő,31 *2,26 0,43x2,25 0,88x2,19 K84X1:,03 6,87X2,32
Esnerobaet- 4,25x1 ,71 4,27X1,28 : 4,3744.35 4,58x4,45 5,99x1,58 4.48x8,63 4.5941,42 3,04X0,64
Ssseteröírles 6,854 1,38 5,5440,49 5,94*0,09 8,15x1,43 6,19x8,97 5,52x8,46 6,80X1,11 : 5,484<í,58
C. perfr, 4,89X1,22 5.84*1,80 3,61:48,5? 3,38X0,88 4,16X1,64 3,54x8. í 1 3,8448.89 5.5740,56
A kezelés alatt az ürülék: lacfobaeilürs számáisan növekedést Egyelőink meg az említett probiot ikns baktérium lenyelésének köszönhetően. Az Eníerebaeteriaeeae számbari nem Egyeltünk meg drasztikus növekedési, atal: azt tükrözi, hogy a kiválasztott problotiknmok alkalmazásáyál összeiliggésben nem történik károsodás az
9704Í.-3877A/SG rti inteszílnális: öfcoszisAémában:.
példa: A knlonizámá hatékonysága kutyákfean
A L, reuteri MÜC26Ö3, L. restes'; NCC2ő:S3,l.„ acídopblins Nt'.'C262k és Bíűuobaeteríum sp. \< 'C26S7 törzseket etetést Kísérletekben teszteltük, azon képességük kiértékelésére, hogy a kutyák gssziromteszíináiis írakiusán tdnem atbaiadaskor éleiben maradnak-e.
Tíz, 5 bnu- es 5 ssmtenm 4-7 éves kutyát egy specifikus klsérfeísek vetettük alá. .Az: etetési protokoll az alábbiakból állt: 5 napig „Frlskles Vííaiity” wfe cikória étrendhez történő szoktatás és 5 napig „Frlskles Vitailty w-'t> cikória étrenddel történő: tesztelés és 3 napos szoktatás, 5 napos tesztelés „Frtskies Vitailty’' φ cikória * baktérium étrenddel· L. retked NCC2603 (E diéta), E. reuteri NCC26I3 (F diéta), L, aeidöpbilus NCC2628 (G diéta) és Bitidobíseterlom sp. NCC2657 (H diéták A diéta beosztása az alábbi volt;
Kutya száma 1 2 3 4 :5 6 7 8 8 18
1. periódus £ E II E E E F F : F F
: 2. periódus G G Ö G G FI H H : H II
A nyolc külöttbőző bakfertumtörzs felhasználásához az említeti: törzseket elégséges mennyiségheu és stabil Isotillzált termában állítottak elő tekintettel a törzs túlélési: képességére a tesztelt állat gssztföisüsszitnáils traktusában, Az összes tómét 4 §: irebalőzzal összekevertük azért, hogy elégséges mennyiségű hordozóanyagot adjunk az előállított törzs és az. állatoknak szánt étel-máírix elegyítéséhez, A baktériumtörzseket különálló műanyag csövekben állítottuk: elő (5,812*09 clubul), es naponta az étel egy részéhez. adtak, hogy biztosak tehessünk altiam, hogy a teljes baktérium mennyiség lenyelésre keral.
Friss ürülék on; A i u lók a bakiét; uropiípslácm íuutendasásn és alapvonallal (hözzáaskítí baktérium nélkül) történő össaéh il a a
Az ürülékeket:az alábbi napokon gyűjtöttük; 7, és 8. (alapérték)· 14..és 15,: 2i..és22.{aiíípértékh:2teás29,
Egy·· steril rektál!s: szondát baszsáltank legalább 8,1 g drülékmmta kinyerésére. Ezen mintákat pontosít» lemértük, és 8,1: g-t 18 mi 18 íérfóá glicerint tartalmazó rtzíotógiás eddaítel (IGoger) elegyítettük. Ezt követően: az: oldalié 1 ml-cs krio-csövefebs átvittük, és tolyékony nitrogénben ieiágyusziuituk, majd az összes mintát -WC-on tároltuk tsz analizálásig. A bíiktériunutkaí ugyanazokon a táptalajokon számláltok, amelyeket a 3. példában ismertettünk.
Eredmények:: A baktériumszámot tizes alapú logaritmusban fejezzük ki és a S. táblázatban ismertetjük, te táblázat: Erűtek bafeíeríususzásms kntyskbsn (átlag ά Stdcv, 0--5)
NGC 2á03 NCC 2613 ACG 2628 NCC 2657
Előtte Alatta Előtte .Alatta Előtte Alatta Előtte Alatta
Eacíobíícíth 5,25*4 34 3,82*1,05 4,00*1.56 5,4(k:ö.2í 7.93*4,75 8,38*0,99 6,47*1.27 7.88*1,35
BifKloími. 7,32*2.08 4,48*2,64 6,09*2,10 4,55*2,79 7,78*2,57 7,20*2.57 5.72:.3,51 6,78*2,39
Enterobaet, 4,10*0,89 4,62*0.61 3,62*8,72 4,39*8.94 4.5a* 1,54 4,04*8.76 4.51*1.51 4.85*1,45
Baeterrnides 7,82*0,53 6,78*1,2$ 6,92*1,37 6,69*1,19 ?,8H*4,13 7,53*8,61 7,92*8.63 7.66*8,H6
C. perié. 3,70*0,39 3,84*0.87 3,50*8,45 3,38*0,88 5,78*8,62 3,30*8,08 3,93*1.2$ 3,7iA0,89
A kezelés alatt sz ürülék laetobaedlos számában: jelentős növekedést nent Egyeltünk meg a kiválasztott probionkos baktériumok bevétele miatt, kivéve az L. aeidophiius NCC2Ö23 törzs esetében. A tesztelt kös'ülmé97941-3877A?SÖ:
nyék között a C. perlrlngestsre kifejteit gátló hutása nem volt jelentős, mivel a C. perirlsgetts alapszintje nagyon alacsony volt. Az Eufeiobaotei'iaeeae számban nem ligyébánk meg jelentős növekedést, ami azt tükrözi, hegy a kiválasztott píobfetikumok alkalmazásával Összelüggősben nem történik károsodás az imesztinálís ökoszisztémábaít..
5. példa; A k.sícínimesiins ős meíssőolitjawiak Íratása a Csardia mtesíúraOs életképességére
Kutyákból és macskákból izolált Laetobaeiltns törzsek tenyészetének szórt fsiüiászőjst tanulmányoztak.
Anyagok és eljárások
Haktértam törzsek ős tenyészetek: a Laetobaeillns nemzetségbe tartozó raiktoörgantzssusöteí a Nestlé Cultnre Coifeeíion-íől szeresük be. A baktériumokat: blTVI táptalajon íenyésztettök, A i;mtöhaelllasok tnemboiiiiais tartalmazó fed Iliászokat pH~é értékre semlegesítettük, és szűréssel: sterilizáltuk,
A kon-roil vizsgálatot ágy kiviteleztük, hogy a MT VI táptalaj pli-ját tejsavval a baktérium tenyészetével megegyező értőkre savanyiíottuk. k?! ón dóén a pH-t
8,1 mol/l-es NsOH-val d-os értékre beálilsöttnk, A vizsgáit törzsek eredetét, a iéiülöszőfe és a kontrollok pbígát a 9, táblázatban ismertetjük..
9, táblázat
Törzs Származás kelfüúszé pH Kontroli pH
L. remeri NCC2581 Macska 6.Ő3 ö,63
L. rhaumosus NCC2583 Macska Ő,5Ö 5,97
t.reníeri NCC2592 Macska 6,84 5,98
L. remeri NCC2693 Kutya 6,04 5,99
L. remeri NCC2613 Kutya 6,07 5,95
U. aeidopbíius NCC2628 Kutya 6,01 5,93
Paraziták: öi&rdia iníesítnalls törzset WŐ (ATOC 38957) az American Type Cnltme Coliöeíieu-íot (Roekville, US Aj szereztük be. A tropbozoitákaKeister módosítóit TV1-S-33 tápkozégben növesztettük, amely literenként az alábbiakat tartalmazd: 28 g kazei) kuo iát iDIfeög ló g élesztő ezíraktum (BBL); lő g dézltóz (Met<.ki. ü.75 g -omvasmarha epe (Uileo); 2 g bal »Merek); 2 g L-eiszteis-ílCI (Sigmag
8,2 g aszkörblnsav nátrium-só (Flakag 11,6 g 14211704 (Merek); 22,8 g vas-ammóniam-clíréí (Sigma); 188 ml felnőtt szarvasmarha szórtan. (Slgma); 15 ml ^máeiilm/'strepmmyem (ölben, 108(1 RJ/mt 1088 pe'mi). A pH-t SN? NaOH-vsil 6.9 értékre beállfeáíuk a szűréssel történő sterilizációt megelőzően (0,22 pírt pórtísátmém}:,
A. paráznákat polismire-l szövet-tenyésztő lombikokban (LUX, .Miies Laboratories, iné. Napervdle 15.. .68548) tenyésztettük, amulyéket 48 mi tenyésztő tapközeggel töltöttünk tneg, A szublenyésztést agy: krvrteseztnk, hogy a ielütószóí a nem-kapcsolödott parazitákkal «tíáveláotmk, 5 mi jeglusfeg tenyésztő tápkozeget adtunk hozzá, lő percig jégferdőbea Ínkubáltuk az adberens tmpfeoziták leválasztásain../, és a kapott szuszperszíoból 8,2 rnl-í friss tápkőzsgbe mokuiálíunk. Az inkaháiáxt 37öC-nn, sötétben végeztük.
Prölíferáeíős vizsgálati módszerek.· 289 mikrolíter ítophozotls szuszpeazíót (1,4 s 195 parazita'ml! idő U folmuszova’ \agx korám! ,d , egt túrtatok es 1 t.Ct U1 it mőms adta m hozza k m utakat '7 (’-ou 24 o~an at 9ő~!yákú szös et-ear és/só lemezen (Aktáé Brasd Frodueís j Ínkubáltuk. Ezt kővetően parazitákat ősszcgymfeítlik, és , nud o repülést kiértékeltük.
97941-3977A/SÖ
Eredmények
Á 'ttmiáíB-feeépüjás) a 10 táblázatba» amíntink be. A bátyából izolált NCC262X törzs erős gátlást fejtéit ki a WB feizs pmlíieráeiojára (91 %). A többi vizsgák törzs sem gátolta a t-rípbozolta növekedési,
10. táblázat
A ieísyászeíek szőrt Őílíteöszátek hatása Giardia mtjsímsjlís törzs proliferáehijára
Törzs tjjmlv 'f ísxiin.’hs piob'e -)0(0 »'PM be i
1, reuteti N.CC 25$ 1 1720
Kontroll 2ÖÖ0
L, ihamnosns NCC 2SA3 2500
Kontroll 1720
L. materi NCC 2502 1800
Kontíoil 1970
E, restért NCC2ÓS3 2100
Kontroll 190Ö
1. remén NO' 2ol .< 25 IÖ
Kontroli 1950
t, aekiophiteo: NüC 2Ö2S ISO
Köníroll 1610
M'l'Yi 1070
Ebben a kísérletben: látható., hogy sz E. aeidöpbiteís NCC.2OR törzs növekedése során keletkezeit fenkesonálls ineísholhok nagyon erős gátló hatással rendelkeznek a Gísröia imestinalis növekedésére.
á~K példa; Á találmány szerinti laetobaeslhss törzsek gátié hálásé az Intesztlnáhs patngén bakteri«mohra
Hogy azonosítsak a vékonybél kórokozóival szembeni erős aotagomsía tulajdonságokkal rendelkező törzseket, egyöít-tönyósztésl kísérteteket végeztelek a katyák vékonybelében találhaio korai-nényekei szimuláló nxideiheedszerbon (pIT epe-összetétel és -koncentráció., nyál, paakreatmk A k atyák vékonybélnedvét szsmalálö modell a következőkéi iariabnazta: rekonsBtiköt lintyaepe(Ö,545 gő iaoíokeno-ílezosikel&k Stigma; 0,7 gíl iaaroilezoxikolái, Sigma;
3,04 g/l tamokoiáí, Slgrna; fe,Öi)ó g/l .kólát Elska), sejtés- nyalka (1,9 g/l Sigsi&b sertés pankreaim (2,42 g/l, Sígma) és elektrolit-oldatai: <5 g/t Ráül, ő.ó g/i KC1,0,25 g/l CaCI2, mindegyik Merck GmbH). A. nedv pBját 0,1 snokl-es NaöH-vsl ό,όνίΐ,ό ériekre áiktcitesk be.
Törzsek és tenyésztési khrölsnésyek
Vékonybél patögéaek
Megy potenciális patogs® (kórokozó) törzset váiasztoitask ki: S. íypbimnrinm SE 1344, E, coli EífiC ÖÓ:H9 és B. coll ÖMíkfekk (kórokozó kutya-izötáínm) és az.Sh. dysenteríae klmíkai izoláiamái (barnán -eredetei, rendelkezésre bocsátja a Centre Höspi tallér Eaíversitaire Vaudoise·—CkIBV .Laassnne, Svájc), A Boris Bertán! höslcves-fept&íigon tenyésztett S, typbhaín mm Sí 1 <44 Kivételével az összes 1 merolsmíeríaceae-t Emin Héárt. Inlbsionfeáafcves-táptslajor! aöveszíotiük (Hiiéo, USA) 37’C-ob tázaiás közben j?-»<i to» \ xu >
97941 -3Ö77A/SC ·\ -ί
TcjsavSrskl ért « ntek
A kutya- és macska-eredetit laetebaeiilusek széles körét beleért vo 1,. acidephilns NCQfóS (CNCM'12453). 1... rbamnosus NCÜ2S8? (CNCM í-2449), L. remeri NCC258Í (CNCM 1-2443 i, L. reuterí NCC2592 íC\CM KM5ö,> törzse;, talas/tottek ki a Nestíe {'«sínre t oíiectiotj-bol tSt C, \e»;e< Svív i es -/kríneltdk a kutyák vékonybél modelljében a túlélési képességet, a fiziológiai aktivitást é-s & fent megadott vékonybél kórokozókra kslcjíert gsilő festési Λ 1 Si?k<b£tctíb4 anaerob módim tenyészteöak (anaeroeeii, Gxoid, Angiid) Mae Rögöse Sharp linsleves-tápfalaten >Thfee, 1 s-\)3't -oá.
É fel képes sejtek szátnáníik mt-gbalárnsása
A arlstákaí sierii ksszlát-partérrel íbiaH2FÖ4, pH 7, 8,2 mobl) bígitöttuk. és ngar-iemezsken a következek felületére zétegeziük tízszeres hígításba®: MBS: agar (Difeo, OSA) a lacíobaciiii-hoz, Salmenclla-Sbigella agar (Oxold, Anglia) a S. iyphli®«nuar és Sfe ávseaisrias-hoz és Serfeítol Mae Conksy agar fOxostl, Angiin) az £. coll-boz. Az agar lemezeket a laeíobaciifes esetében 44 ésán át SrtC-oa asraereb ntódos, az Etiterobaoterlaeeae esetében pedig 24 órán át 37A3~on inkubáltuk. Áz együit-íenyésztési kísérletekhez az Enterebactertaeeae növekedését az MSS agaron pöilsrtíxín hozzáadásával gátoltak: (Öxoid, Anglia).
Egyötl-tenyészsesi kssérietek a íejsav baktériumok (kAB) és patogéstefe idfeört
Az egy 88-smb e\ nest kísérletekei a poieneialis pröbioíiksts LÁB es a patogén törzsek közeit 37“C-o® 28 m-l (Falcon csövek) kuíyák vékonybélnedvét szinmlálö modellben kivitelezínk, melyei különböző széniörrásekkai Icakor, hebblailat-eledel) dásltettoak, begy elősegítsük a tenyészet motabolikas sktivitássk A L.AB-ot 1 &E4&8 efeártl-sél és a patogánefeet Í8E-M12 cin/rtd-nél:, 18:84-04 cíu/tnl-nél és lÖBőfe ofe/ml-nel innkniáltnk. Az inokulálás után 4 óráig különböző idöponlókban mintákat vettünk, és az életképe» sejtek számát meghatarozfttk tízszeres hígítások rétegrésevei az illető tápközeg felületére.
Az egyött-tenyé-zíesi kísérleteket különböze körttlssésyek között kiviteleztük, beleértve a kutya véfesnybélnodvéi szinttdslő modell dexlrózzal toríénS dúsítását (S gd) és a kereskedelemben beszerezhető e.Widált száraz bobbiáll&t eledéi különböző koneenirtfeiöít (5, 25 vagy 180 g.4; krlskies ALPÖ Cemplete, VSA). Az utóbbit bentogenlzálrttk (Stotsaeher Láb Blender) és elektrolit-öklatban sziíszpendátiuk. Az összes kísérletet kétszer hapotüík végre.
ő, példa
A négy laetobacíiius és sí négy potenciális kerekező törzs: E. coli ETEC 88:kÖ>, M. coli 0)49:08, S-, lypbúnnrium SLI344 és Sh ilyscnteríae közölt; együtt-lenyészíési kísérleteket 5 g-Ί öextréxzal (Difco) dúsított, kiáya shaxlentslis nedvét szhnuíáléí modellben kiviteleztük. A laefebscüht»; IOV+08 ctuímiés a ötaín-negatív intiikáíör törzseket 188-Í-02 cíuönl egységben Ínektíláltsk. Az eredntenyeket all. stbíázatban adjuk meg.
il. táblázat
LA8- és psrteaciálísjiu patogén takíénmniőrzsek egyittMenyészkése dssrtézzsd dúsított, sztstnSáfe knlya vékonybéinedvben
Poöhioííkas Balogén
E. coli 8ΓΕΙΑ)3·Η9 E, coli 0;4<>;R8k S. iypbiirüífian-i Sb, áysentenas
L.acidopbylns NCC2628 (CNCM 1-2453) -H-4- 4--4--:- -.·: . .t 1 > T
9784I-3077A3SÖ
i... rhamrmsos Né C25k3 (CNCM 1-2449} tv V Á.. T A C
L t'eaíeri NCC25S1 (CNCM I-244H) Nincs gátlás 4ssj., Nincs gátlás v i “
L. retiteri NCC2592 í'CNCMN245Ö} Nincs gátlás NM· Nincs gátlás ...................'4-1...................
+ Növekedés gátlása
Ή Növekedés gátlása és részleges inaktívácié +♦* Növekedés gádása és ieíjev ínakti vádé
Mind a négy vizsgák laeiobaetlkis mikröbaeiienas aktivitási mmaíötl, de csak az L, acldopbrlns NGC2Ö2S (CNCIti I-24S3 s és L. rbattmosus NCC2583 (CNCM 1-2449} amtáioít nagy aktivitást az összes teszisit kórokozóval szemben. A két törzs »eta csupán a növekedést képes gátiba, de a tesztrendszerben levő Rórököznkst is képes teljes tnártékben tnakttválnt yntnes visszamaradó életképes sejt).
A példa
Az. egyCní-tenyésztési kísérteteket taetobaeilias RL. aeidophikís NCC2Ó2Ö ÍCNCM 1-2455}, L. rhamnosas NCC2583 tCNCM' 1-24491} és S. typhimnriam ÖL 1344 között kutyák daöáénmnnedvét szimulálő modellben kiviteleztük, amelyet a kereskedelembon beszerezhető extrádéit száraz hobbinkat-eledellel dösitotttmk (5,.25 vagy 109 g/k Eriskles ALFÖ Nompieíe, USA).. A iactobactllos törzseket kÖBHlS e&kml-nél és a Gmm-nsgadv indikátor törzset IÖENI2 cbtémi-néi isnköiálíak. Az eredményieket a 12, íáblázaíban ismertetjük.
52. táblázat
LÁB és peieneiábsats ptriegén öaktérbtúíörzsek ggyiiB-testyésztése száraz állateledeBel dnsltott, szánmlsí B kssíya vékíinybélssedvöes
Patogén BóBlás áilateledeílei S. -ypbinnroum SL1344
Probloiikas
L. acidopby íös NCC2Ö2Ö fCNCMí-2453} 5 t>/i ;· ί >
25 gd
Illő gÖ .v >> ;. 'TT .
L. Aaescas NCC2583 (€N€M 1-2449} 5 gd Nincs gátlás
2ág)i <
10» g3 ·ί·ν
+ Növekedés gátlása •μ Növekedés gátlása és részleges maktsváeló i-s-í· Növekedés gátlása es teljes ínakiivácsö
A2 eredmények különösen az L. aeidophtbs NCC2S2S <CNí 'M 1-2453} nagy öatékonyságát igazolták a vékonybél kótokozók növekedésének ga!Sasára, sőt teljes makittalasára nagyon gyakorlat! körülményes között, urrnl pl.. sziímááit vékonybélnedv és. hobbsállal-eledd elegyében Az 1... acidopbtlns NCC2628 mikröbaeiíenes aktivitása Igen snagas volt még a kereskedelemben beszerezhető hobbiál lat-eledel kis mennyiségénél is, amely az otgamzmnsök számára a femteniálhatö cakoriötrás szerepét tölti be. Ezzel, az L. aoidopböus Nk'C2ö2á esetében történt meg ügye léssé t szemben az L, rhssmesos NCC2583 {GNC.M .1-2449} hatékonysága a hozzáadott 07‘M1-3077A.-SG
Ssobbiéltsí-etedel .szlní|éíót dtgg, mivel a tesztrendszerhez adott hohbláliat-eledel mennyiségének növelésével egy növekvő mlkróhaelleaes aktivitást Egyeltünk üteg.
N példa acidophdns \l.'<'2o?S iCNCM 1 -2-451) iöt/zvcl és S. typhírourinrn SL.534-? különböze· inokulácíós szintiéivé: végzett egyust~ten>ésítesi kísérletesét kutyák duodénumnedvét szimuláló modellben kiviteleztük, amelyet dexítézzsl gél. öii'co) dúsítottunk. Az L, neideptnlus NCC2Ő2S iCNCM 1-24531 törzset löt/AŐk dtati-nél és « S. SyphűiKS'iswn SL 1544 törzset lŐE-t-82 eEdníl-néi, JÖE-HM efn/nri-oét & 1 Ól · í>6 edknsl-tril Inököláltök. Az eredményeket a 13. táblázatban mutatlak he.
Lt táblázat
L, aodophyius NCC262S (CNCM 1-2453) és k»tt>itóő mokubteiós szintit S. typhimoriustr SL1344 egyiltt-enyésztése
Fatogén A pategén htuknláeiós szintje S. typbámurinm SL1344
INobioukus
L. acidophylus NCC2Ó28 í CNC.M 10453) 1 öl; : ((2 cfn/rol
ÍÖINÖ4 cfu.rol .1. ’ .· t ’ ’
101;: (íö ctu/snl
+ Növekedés gátlása
Ή· Növekedés gátlása és részleges Inakdváeíó •i-ev Növekedés gátlása és teljes Inaktiváetó
VI < ·„ d-pb I r- V t 2''2k p'\« Μ 1 2 ’Ui avkrobad v ovLst dog tdoen n gax\dt ,d No h hogy az S. typbsnuirlam Sí. 1344 kezdet! magas konceotráelóiáí inaktlválja.
9, példa; ía-vivo immunstimutálás kutyákban ,5 probiotikus, hobbmliatbol izedéit törzsek hnrounsítnmtáló potenciálját klinikai vizsgálatban teszteltük L, aeldöphlltss NCC262S törzs lélbasznalásával,
Módszerek:
Kutya perifériás vér mroumukleáris sejt (P8MC) prolíferáelö különböző mitogénekkeí lérséoő sfrmtsbdás hatására;
Ebbe a. vizsgálatba 2.8 4-7 éves kutyái. vontunk be. A táplálási protokoll egy hetes ..Priskles: Vltalsty” W/ö cikóriával történő szoktatást és 4 hetes ,J-nskies Vital«y’! w/o cikória -e L. aeidopbiltts NCC2ö2k baktériummal történő tesztelés; foglalt snagában.
A, 1.. aciőophilns NCC2628· törzsei elégséges mennyiségben és -fobil iiottilzáh fontában állítottuk elő, se\ nteuN a K'ro. tmleo kepesseszere a o.~, k-u allat gaszüou ás/i-oalss traktusában. A baktériumot 4 g trehalőzzal összekevertük, hogy elégséges mennyiségű hordozóanyagot adjunk az előállítod baktérium és az: állatoknak szánt étel-mátrix elegyítéséhez. A baktériunt törzset különálló műanyag csövekben állítottuk elő (EölsNdd du/mbnsp), és naponta az eledel égy részéhez adtuk, hogy biztosak lehessünk abban, hogy a teljes baktérnnUmeunyiség bevételre kerül,
A kutyákból vért gyűjtöttünk a négy bélen át tartó probioiiktmt adagolásit kővetően, A vért egy VaeeniaroetTkí oszlopon írakeionálíuk (Beden Osekdison, Nlöóruain Vievv, Í'A.).. A ESNIÍ'-t a gyártók. uíastíá97Ö4I-W7A/S:Ö
SS! szerint kinyertük,
A sejteket különböző röhögésekkel vagy fbrboi-ésrterckke! stimuláltak, amelyek a T-sejtek [coocanavaőn A. íermA),őíohemnggínilnin (PHA)(, a.S-sejtek (Fokmvseá mrtogéu (PWMjj és az összes sejt (Ihrbol fo-rx/í n-Keíái/ioíwoyeia {PMA/lonoJj jelentős ptdIterációját okozzák. Lyukanként 185 sejtet ntítogéneki>e! \jtg> íorbol-ész-sfekke! ifikubáiimrk (a megfelelő dózisokat sz 1. ábrán jeleIjökj 288 pl végső térfogain magzab borja szérummal és tmtifefotiknmmol kiegészített &PMf~i 648 táptalajon, eSZ 7Ó-ly«kd lopostéoekő tenyésztő lemezen (N'wX
A sejteket párásítód 5% CÖ2. airooszlerábaa 37°C-on órán áf fonntaríotrak, A sejteket ! nC { rt 1 ntldinnei (Amershatn Pharraacta Sisfoeh Sx άρ.; imp&lzus-jelöltök mvaebl IS órás át. Ezt kovelőeo a xx-geksi aítrocellolóz szűrön (Faefcard) összeg) npörtok, es a kötött IdHj-tinsídini szcfaőiláeiós számlálóval i ί op« x irt; Eaekard, Svájc) mértük. A sejtprobféráesöí őgy számoltok ke ram a harmas mérések &i!aga: jbeaiés-szám perc re pm; \ t j-Spr,
Eredmények:
1. ábra: Az összes ndtogéore reagálva a sejt-pröliíéoácíébs·; „gs es eksű növekedés figyelhető meg az L, aeiifophllas NCC2628 törzzsel íspláü kutyák csoportjában ősszeb -<mrt v í.j kontroll csoportod 1 z a növekedés jelentős a forbol-észter DMA + íooomyc lnnél stimulált tenyészetekben, Ez az adat azt mutatja, hogy a probiotíkarmnal táplált kutyákból szársnaző karibid sejtek sokkal reaktívabbak az la vrtro aktiválás· hatására. és feltételezhető, hogy a probiotlkníamal táplált kutyák imnomrendszere stímuiálódik.
!8, példa; Az rtnnrnnfunkeiók fn vitro módosbása bortfolölfofokböi: izolált iaetobarílios törzsekkel
A különböző, leni ismertetett, bobhiállatböl izolált iaetobaetl.ias törzset la vitro szfcrírsekSk az intmaaíaodosífó poteeeiáljak meghaíán υην-a Ezért a pro-gyxÜadásos eltókíneksí (11,-12, tFbty) és/vagy antígyútlaáásos eiíökloeket (1É-18, 3ul-p» befolyásoló: képességüket mértük [Ananá A.C., Adva CM: Trón, Össttoeníerol. 28(3), 97-töó (1999); őpellberg B., Edwards .l.EJr..: Cila. fofocí. Dis. 32(1), 7Ó-1Ö2 (28Öt)j. Esnek célja erős «ntitMiogétt vagy rákeileses nssneatekeióvsl es a kutyák sntesziatális korképeivel, miat pl, allergia és gyulladás tgralladásox hélhetegségek) szembeni aníagonista (aukciósat rendelkező potenciális jelölt törzsek kiválasztása volt. További, csak táptalajt (negatív kontroll), Esíeroeoeeos íaeeisnj törzset SE68 (NOMfi 10415, Gerbioe-Pbarma, Svájc) és humán laciobaccjln» izolátonoi ST11 (NEC 24ŐLCNCM 1-21 tő) (pozitív kontroll): tísrtalmazó tenyészeteket készífetíltnk,
Módszer
Eőlnshőző probkrtikus törzsekkel befolyásolt irtok in-profilok kotyák teoöoertálban:
Normál lelnősi kutyákból· származó vert. 5 percig ACE lizáló ptdTerre! .kezeltSok szobobömorseklotea (150 smnol/l NH-1G1, 1 ormok! KHCO3 és Ő,! romold N&2EDTA H2O-baa, píf-7,4). A leokoeiíákaí RÉM! íápközeggel (aotfbiotikmx nélkül) kétszer mossuk, és 2xlöó sejt/nsl koaceatfációbau
24-íyoka tenyésztő lemezes; szétesztcítiík, 1 nö löő cin··!tartahisaző baktérium szxszpcaziót (fest ísmerteseís) adtunk mindegyik lyukhoz.
A kontroli-kezelésre a íeukoertákhoz csak tápközeget adtunk. A. mintákat 18 órán át: 37’5C-sn. és S% CÖ2-ben tnkobálmk. Ezt követően a leakoesiákat összegyűjtöttük, FSS-ben mostak és eenlritagálink, A setípelletet 588 μ! Trtzoi-reagensse! (Gibco SS!,) lizsltak. A sejtes lizátutabö! az SNS-í Őioeleospin RNS kit (Maeherey-Nágel) alkalmazásával extraháltak. A macska oiíekía irntplipkálásám az RT-FüR-t AH gén kit (Merekj mthaszöálásóval kiviteleztük. A printerekre vonatkozó reteronciákat (az. összes gyártója a Mrerosyfttli)
97941-307? AAG sz alábbi táblázatban adjak meg. Á ECR-sávok denzstosuetríás analíziséi etidium-bromldd»! festett agaróz gélekben végeztük a MR Image soövet alkalmazásával. Az összes sávot sz egyes mintákkal kapott, a megfelelő β-aktin ECR-termék sáviéval normalizáitak, és az ersdsnányekai: tetszőleges egységekben fejeztük ki, melyek minden egyes eitokln FCR-termék sávjának csúcs dsnzitására reflektálnak (2. ábrái.
- A baktériumok: előállítása; a különböző faetöbaeiihis törzseket MR.S tápközegben növesztettük körülbelül 8 órán át, amíg azonos sűrűséget (denzáás) nem érlek el. A baktérinmokaí sniibioíikam nélküli RPM3 tápközegber: idő CfU/roi végkoneeíiirációig hígítottuk.
- Acítekin-RT-PCR-okhoz az alábbi táblázatba·} szereplő prisnerekci használtuk;
Ciiokinek Referenciák
Íl,-12p4ü Isilífner M. et al.; Gytokbe l(i(4i, 214-8, 1998
IFNy Büttner M. et al.; Cytokine 10(4 i. 241-8, 19**8
TGF8I Gröue A. et ah: Vet. Immuno). Immunopaíbo). 65, 11 -2?, 1998
11.-10 Finelíe E, etah: Vet. immuno). hínnunopaihoi. 69. 121-126, 1999
Eredmények:
ab»~ az adatok azt ututatják, hagy a laeíobaelllssok által indukált diokin-profikA íőrzs-fSggöek, így példát}· } \< 't te te törzs magas IL-1 8 és TGb-β szintet munkált, rávilágítva az adott: törzs hatására a gyulladásos rendellenességek, mint pl. allergia, és gyidiudásos hélbetegseg inumsustiódos-.usábas, Ezzel szentben .sz NCC2785 törzs magas ILbiy és li.,-12 színiét okozott, amely ezt ti törzset kiváló teioitté teszt az amígategéu vagy ráké’ ύκ* akíivltásm.
Három szárított feohöiállat-eledelt használtunk a vizsgálatban, amelyekre A, Ί3 és (T'-ként hivatkozónk. Az A* hüfebteílsi-eledel táplálkozásllag teljes, szárítod bofebiállaí-eiedel, amely ALPÖ márkanéven beszerezhető (az ALFÖ ő.SGQETB LtES FRÖDtlTTS NESTEE S.A., Svájc regisztrált védjegye).
A B hobPiáHat-eledel agyam® a tápiálkozásdág teljes, szárított hőbb; állat-eledel, mint az A'', áe zacskóból adagolt. lilválasztííti pröbíöíikns mtkroorgántzmusek: porított keverékével ki van egészítve. A keverék lényegében egyenlő mennyiségű 1... acidophilus NCC2Ö28 és B-f-öobseíerimn sp, NCC2657 törzset tartalmaz, Ezt minden eteiésnél tászórpík az eledelre, az alkalmazott dózis kb.
i ,ΟΒ-ϊ-8 eiWo&p.
A ''C'·' hobbiállat-eledel táplálkozásdag telics, száíltott hohldálSai-elcdei, amely alapjában véve megegyezik az ’Ά” hobbiál lat-eledellel, azonban 1.2 t% 1 merocoeeus taeciurn SF68 INCÍkíB 18415} tenyészet szárított fel ö tőszóI át í artaimsz/a.
A kísérletet 30 kutyán végeztük. A kutyákat 8 heten át A hobbiálhtí-eiedelid elo-eteíítík. Ezt követően a kutyákat bárom A, 8 és C-vel .lelőtt csoportba osztottuk, nuudagyikhen 18 kutyával, és & héten át a ínegfölclőao nevezett diétával etetőik őket.
A kotyákat naponta egyszer etettük és korlátlanul tőgyaszthattak vizet. A bundában a korpa/hámpskkely prevaleueiájái egy1 3Ö-íagú kiértékelő btzotisággai a kezdeti időpontba® és 7 héttel később meghatározzuk,
A vizsgálaihsm résztvevők n kutyákat n kiértékelést megeiőzőes kiketéiik és a jegyzeteiket nem hasonlítják össze a kiértékelés alatt.
Ebben a kiértékelésben a kutyákat mindegyik különálló résztvevőnek 28 különböző párosításban nrntei97941-30770/00:
tok be, A részíve vöket snegkérttík, hegy pontozó topjaikon jelöljék, hogy a bemutatott párok közül melyik kutya srtotat í 1 ) kevesebb korpát, (2) fényesebb bundát és (3) enyhébb bunda szagot.
Az összes kutya: miaáesife ktterjedotoíisgo bnnda állapota láthatólag ós tapintbatolag jó, smirtt az a normái, egészséges kutyáknál elvárható. Azonban a C diétával etetett kutyákról azt találtuk, hogy erzékeihetöen kevesebb korpával rendalksznek, mist az Á diétával etetett kontTollok, Λ B diétával etetett kutyáknak érzékelhetően fényesebb a bundájuk és enyhébb bunda szagot: árasztanak, mint az: A diétával táplált állatok. Ezen tulajdonságok statisztikailag nem külö nböztek jelentősen, amikor a 8 esoport kutyáival bssonlltottuk: össze.
12, pálda:
Egy tápke veteket készítettünk az alábbi összetevőkből: kb. 58 tőmegők kukorica, kb, S íötnag% kukorica giuíétt, kb, 23 tömegiÁ bús és a maradék liszt, só, ystarolnék és ásványi anyagok.
A tápkeveréket egy prekondteítatálöhá helyeztük és benedvestsettük, Ebhez a keverékhez az alábbi huctobaeiilos törzseket tártul mázó port adtuk: l..aetobaejil«s rissnnosus NCC2583 tCMCM 1-2449), kactobacillns acidnplulm WC? «28 t<'\CM 1-2-lr 1) és Eaíerococeus faeelum SF68 (MCÍMB 1:841 $). A keverés során a pun homogénre fe-cp-rcáitok í zt követően a nedvesített eiedeikevetéket egy extrudáiö tózöhe töltöttük és: z-elatioízaltuk Λ .o-etotintoáh ntóttuo! &z extrádéiból ehávoíiíva egy matricán {slaksajíolóns átpréseltük és evtrudáituk. Az ex-rndátomot a kutyák etetésére alkalmas darabokra vágtok, :118*C-on kb. 28 percig szárítottak és lehütöííük, hogy pesteteket képezzen, Az esímdáít darabokban a hozzáadott törzsek bakteriális aktivitását leellenőriztük, egyik sem volt detektálható.
13, példa
A vizsgálatot 24 kun an végezték, amelybe fiatalabb és idősebb kutyák is beletartoztak, az utohbtok 8-12 évesek. A kiválasztott nioscbh kúp. ak Izületi gyulladás külső jeleit mutatták a korukkal arányosan, és a mozgásúkban időnként némi nehézséget tapasztaltunk, BizÍmyes ntozgásök fájdalutosusk tűntek. Ezek a tünetek gyakran megfigyelhetők idősebb kutyákban, és úgy gondoljuk, hogy izületi gyulladásos állapotos? vannak összefüggésben..
Bárom A, 8 és C-vel jelölt szárított hobblálkú-eledelí használtunk a vizsgálatban. Az A” hobhiáiiaieledel táplálkozásiiag teljes, szárított bobbtollat-etedel (AEPÖ Beeiy Dómért. Ez a kontroll eledel,
Miud a 24 kiválasztott kutyát ü bélen át A” bobluállat-eiedeilel elő-etsttuk. Ezt követően a kutyákat három A, B ós C-vel jelölt csoportba osztottuk, mindegyikben S, egyenlő szánté fiatal és idős k utyával. Mindegy ik csoportei az alábbi megfelelő diétával etettük 8 héten ál:
itobbiáilateeledellel, de amely 2 tömeg% bevonattal rendelkezik, amely az Bníeroeőeeas iaeetum SF68 (NCIMS 184 iá) törzset tufialmazza. Mindegyik kutya napi eledel mennyiségét az egyéni testtömeg szerint számítottak ki, igy a dózis l.8G-ri)9 ciu/nap.
A ffC hobbiáilat-eiedel a fenti 12. példában előállított extrádéit durva darálékot fertohnazza. Mindegyik kutya napi eledelroennyiségét az egyéni testtömeg szerint szátrotottók ki, úgy hogy a mikroorgasizmus dózisa.
97941-3877A/SG
1,012+()9 etbZtsap.
A kutyákat naponta egyszer etettük, és koríátiaout fogyaszthattak vizet, Mindegyik kotya gallérjához csatoltunk egy akíivtíásm.éröf és naponta végeztünk méréseket, A. kutyákat vizuálisan is kiértékeksk a hatásra a ksüyaíenyészf ő telep dolgozóival.
Az összes kutya állapota láthatólag és íapmihatoiag jő, amint az s normál, egészséges kutyáknál elvárható, Azonban a δ és C diétát: kapó osoprtríba tartozó kutyák érzékelhetően aktívabbak voltak, mint az A diétával etetett párjaik· Az aktivbásmérő leolvasások alátámasztották ezeket a saegíjgyelésekel.
Továbbít a & és C csoportban lévő idősebb kutyák a kisét leit periódusban B és C diétává! történő etetését követően úgy tünk begy a helyi izületi gyulladás kevesebb külső jelét mutatják, Továbbá ágy hint, hegy a kutyák fizika! mozgáskor kevesebb Íájdahsaí tapasztalnak, és. sokkal szabadabbat! tnozögnak, mint előtte. Levoanatjuk a következtetést, hogy B és € diéta az öregedés bizonyos jeléit képes enyhítem, és az idősebb hobbíálíatok mozgékonyságá· javítani.
14, példa: Száraz macskaeledel
Egy sapkavereket készítettünk az alahb-akhob kb.
tömegtte Kukorica, kb. 6 tömeg«, Kukonea glateti, kb. 23 tömegéá csirkehús és a maradék so, vitaminok és ásvány! anyagok.
A tápkeveréket prekunőietöuáiöba helyeztük és heaedveshetiük^ Ezt követően a nedvesített eledelkeveféfceí egy exírudálő fozőbe töltöttük és zsslatinizáltuk, A zsefetsarzáit mátrixot az extruderhől eltávoliíva egy matricát; (alaks^totóe) átpréseltük és extradákek, Az extrudátumot a macskák etetésére alkalmas darabokra vágtuk, 1 iiHC-on kh. 2ö percig szártotfok és iehtiíöSSnk, hogy pétieteket képezzen. fizeti a ponton az: alábbi .kaetobaciSlns fajokból egy vagy több törzset tartalmazó linfiiízáh port adtunk a péketekhez; tetotobaciihía rhamnnsm, \( > Μςι Μ Μ 1 MEA í e.nfoacdms orndoph b - \í C2t2k s \f V» -24- , es ímerra.teteo fseeíum SF'óS fNOMB 10415). Az elégséges por-mennyiség macskák esetében, atnely tt megfelelő bevitelt biztosítja, körülbelül 1,0E fö? és 1,012+9 eih/nap közötti mettnyiaég:. A por egy részét belekevertük azelsö pellet tömegbe és becsontagoliuk, A por másik részét kimértük, és egy fipsd hordozóval elegyiteirök, aoteiyci ezt követően a második pétiét tömegre porlasztonank. A bevonatot hagytuk kellőképpen uiegszáradhi SO-ölEC-on üéhény percig, majd a pótlóiéi csomagoltuk,
15, példa; Konzerv hnbhíá Has-eledel és kiegészítő
Egy tápkeveréket készítettünk az alábbiakból:
tőmegök kizsigerelt baromi;, sertés tüdő és máj íd'U'áb), 16 fomeg% búzaliszt, 2. tömegéi festék, vitaminok és sze“vetle« sók. A tápkeveiékes. 12A3-on en ola^rbuk és puding állagúvá extrtsdáltök, amelyet ezt követően WC hetuersékleters főztünk. Ezt 5öA3~ra bötötíuk es tömbökre vágtok. 45 tö.ínegfo-nys tömb mennyiségek amely 98 tfecg’e siziroi, I tömegé·;, festékből és 1 íőmegők guár-gumlhól készült, 55 töntegbk-uyi szósszal összekevertük. Ezt ónnal hovooí: kouzcrvdelxízokba töltöttük, és 123A3-Ö® 4Ö percig sterilizáltuk. thohíctifens kiegészítőkéül, amefve· az etetés eiőtt a hebhíáííat-eiedelhez keverünk, további csomagolásokat zacskókban szerehüok ki, .atnelyet az alábbi haoíohaetllus törzsekből készítettük: Eaetobaetlsus rhaamosns Nt:C25S? (t'NtM 1-2-Mü!. (.nctobacilios acidopbílns NCC2628 (<’NCM 1-2453) vagy Ensemeoccus faréban 5F6S (NC1MB 10415). A bobbíáliat számara megfelelő mennyiség kh. 106-1012 efaúsap, ez lugg a fizikai íákíoroktői, mint pl. testtömeg és tűtől, hogy nzaeska vagy kutya esetében alkalmazzuk. Ezt a kiegészítőt ebávob'tbatőon kapcsoljuk a konzervhez, etetési útmutatással együtt.

Claims (3)

  1. k A kővetkező pröákíbsbss törzsek bás-gielylkeáek góiatgiszáse; ÁoíXéboAfeí mbm 'NCCZSSl syO„t'a-u-. -n«Y IW ÍAb . \ , «λ χ , vx' ' Μ. '.-ne,, χ .r- j x'kCVi 1
    Atxsf;:AöKfd»á .xte»m$s&: AkX223á3, nyilváístöfSási szásas; ÜbiCM 142449, /zaáöbáeídiív Zéaíasz 14CC2öi>3: ayilVáí&zbád szátöá: C'ÁÖM I424S1, Í.ggki44<if/öss zaggyz K222ál2 gyílyáB&eíási szagáé 0M€&< 1-2432.
    OS \ > · , X X ' X \ X ' Ά Λ X i3 >h x>t df V'V í 'ei ' '«X, \x\xXS x»3>l«» XI 'X x!
    tariáss szám; NOMB 104 is macskákban és/vagy kátyákhss immnnl^kcíáks^iwlálásaésA^y twíkslákku ötján az igásságfeádszáí· szabályozására szánt készitssésiy előállítására.
  2. 2, Az: í, SgébypíKft szerigíi. alkalmazás, amelyben a törzs a kászílsZiégybég 3 öM $·’·’ ¢17¾.
    x* iiebbutkii'íkMd kvnmríx <X' mokxik e«Vxigs keiSxik ímnnirmhtereaxö' s.\5Kihxi#x'kí<7 nnnninfunkciók i.iíí53«hM;bi3x?;?i és/vagy gsöüak'iiáxávak amely a köveikezök közti! legalább egy íö saséi inrsalmz: /.;'!<ϊ<·>.ϊ.;ο<'ί7Λζΐ' f«« NCC25&Í gyslvaágátíksi szám: CNCM 1-2.448; /.ονίοΛοί'ΐ&χΖ rea/m NCC25Ö2 nyiiván,il ,ix x,xS I3x! íVM 1 ?e>' ,<χ'χ>/χχ >',<'1'' Xx. \< í 'x\3. x\ \ $!,s 3''&X! X ,3'Ύ C\\'M ?41’t
    Í.ncíoáöí'ídwí fi-aza?·; NCX2603 nyilváni&ftáó száma: CNCM 1-2431. íz.>éáJáne/tf«xZ xera'm NC<??,612 nyílváníxüta-' -zárná <'\i'\i 5 ,Β\;, As .,-. ,.í p>> Ut \Ct 2e24 s\.!xántYin( ^aau ; Χ>\ íö.gvzi.v'opt'gs· /bíStsW? SF 62 nyílvá»taiZá:>} szám: NC1MB 104IS, és amely tegysszahsaé botdozóval és/vagy gSCliVaSZxlx' SixSsSxíSÖÍ ix,'P,'i'-P«S.!
    1 Ö ' Ί. t X' i'x XZx ' i'xti ki Xx -3 Px <*}, xi l'íÖx W χ! x«x 3ΐ.ί ,Sx'4 'χχ'! >x kx'Xx’ ÍfüflPW'! ? 4 ' ' $ .'tá g ísieBgyiságixai sögi jelen.
    ö. A 3, vagy 4. Igény poniszéfáiti késztigiény, ainaly pfsbisáíkénéA A taftaígáiz:, áx A 2-3, igiksypeeiök bármelyike szerinti keszigngáy, amely a kőyeikazö Ikgsgák bármelyikében van je>
    len:
    A ixipixi k-'tx Xxg'gpxs soka ivSj'x l'x'?'!3Üx3! ιΐχχΐχ'1 ^'oi-sii „'éröon t\ m'ösex, íaann \,ig\ «.pbxibx'n'eí sékkstöis sltüí bísiiő ^nsábtm. vagy ϊ íj átenl -k í égé sziát lözgiás ásais,
  3. 7. A íi, 1·κέηνρόηί szétlőtt éírasgi kísérő vagy -klegésAtÖ a Imbhnbiöi -el. áehel együtt egy io ábFi esetwgelásbas, «BnySsea aaeskőban.· .4 S> .ss'ix-í'-x· íx Sx χ X<>'v'x χ3 i x''xi:''xx''k 6--:: A u-ivib ,x' χ Ax'-ö-xx 'i„Y'! V C';7 nx.k smO ι xv.ma 5 '\ι Ο i 14-V, >,«(! .„„,ά - \< ι\'χ4.' nx<ix jaiaiusi s.'xí-í\; C\x'\t l'.OG \ k; xibNéX’áSás, ayilvásiaóssi szánté: CNCM' 4-2444, önpfaöiaülöa íyhísA 00202002 aydváigas'iási széma; €A€M 1-2441, ágögÁsagÁií ízaba·/ MX2bö i3y4lváasá4ás.i sáfea: CNCAl 1-2432, geákydií/íss HCillOk gyílváígaízásí szagai. CACM 1-2433.
HU0301939A 2000-05-25 2001-05-22 Új probiotikumok hobbiállat-eledel kompozíciókhoz HU230800B1 (hu)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP00201867.9 2000-05-25
EP00201867 2000-05-25
EP01201503.8 2001-04-25
EP01201503 2001-04-25
PCT/EP2001/006039 WO2001090311A1 (en) 2000-05-25 2001-05-22 Novel probiotics for pet food applications

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0301939A2 HUP0301939A2 (hu) 2003-09-29
HUP0301939A3 HUP0301939A3 (en) 2004-04-28
HU230800B1 true HU230800B1 (hu) 2018-06-28

Family

ID=26072297

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0301939A HU230800B1 (hu) 2000-05-25 2001-05-22 Új probiotikumok hobbiállat-eledel kompozíciókhoz

Country Status (24)

Country Link
US (5) US7189390B2 (hu)
EP (2) EP1290136B1 (hu)
JP (2) JP4343477B2 (hu)
KR (1) KR100796963B1 (hu)
CN (1) CN100396769C (hu)
AR (1) AR029100A1 (hu)
AT (1) ATE325864T1 (hu)
AU (2) AU2001278432B2 (hu)
BR (1) BR0111275B1 (hu)
CA (1) CA2409286C (hu)
DE (2) DE60127731T2 (hu)
EA (1) EA006428B1 (hu)
ES (2) ES2262667T3 (hu)
HU (1) HU230800B1 (hu)
IL (2) IL152695A0 (hu)
MX (1) MXPA02011595A (hu)
MY (1) MY138070A (hu)
NO (1) NO330276B1 (hu)
NZ (1) NZ523010A (hu)
PE (1) PE20020232A1 (hu)
PL (1) PL207930B1 (hu)
UY (1) UY26734A1 (hu)
WO (1) WO2001090311A1 (hu)
ZA (1) ZA200210302B (hu)

Families Citing this family (124)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020035071A1 (en) * 1997-07-08 2002-03-21 Josef Pitha Mimicking the metabolic effects of caloric restriction by administration of glucose antimetabolites
US8563522B2 (en) 1997-07-08 2013-10-22 The Iams Company Method of maintaining and/or attenuating a decline in quality of life
US20060116330A1 (en) * 1997-07-08 2006-06-01 The Iams Company Methods of mimicking the metabolic effects of caloric restriction by administration of mannoheptulose
US7608291B2 (en) * 2000-03-10 2009-10-27 Mars, Inc. Treatment of infection in animals
PL207930B1 (pl) * 2000-05-25 2011-02-28 Nestle Sa Zastosowanie wyizolowanego probiotycznego szczepu bakterii kwasu mlekowego o aktywności probiotycznej, kompozycja pokarmowa i izolowany szczep bakterii kwasu mlekowego
US20040028665A1 (en) 2002-01-08 2004-02-12 Garner Bryan E. Compositions and methods for inhibiting pathogenic growth
US7291326B2 (en) 2003-01-06 2007-11-06 Nutrition Physiology Corporation Compositions and methods for reducing the pathogen content of meat and meat products
GB0212975D0 (en) 2002-06-06 2002-07-17 Mars Uk Ltd Mammalian animal composition
US8168170B2 (en) * 2002-10-03 2012-05-01 The Procter And Gamble Company Compositions having an inner core and at least three surrounding layers
US20040197304A1 (en) * 2003-04-01 2004-10-07 The Procter & Gamble Company And Alimentary Health, Ltd. Methods of determining efficacy of treatments of inflammatory diseases of the bowel
BRPI0411830A (pt) 2003-06-20 2006-08-08 Nutrinia Ltd método de proteção de compostos bio-ativos e composições contendo os mesmos
US20050100559A1 (en) * 2003-11-07 2005-05-12 The Procter & Gamble Company Stabilized compositions comprising a probiotic
US20050118234A1 (en) * 2003-12-01 2005-06-02 The Iams Company Methods and kits related to administration of a fructooligosaccharide
US20050119222A1 (en) * 2003-12-01 2005-06-02 The Iams Company Compositions comprising fermentable fiber which are adapted for use by a companion animal and kits and methods of their use
MXPA06006394A (es) * 2003-12-04 2007-01-25 Biofilms Strategies Inc Metodos y composiciones para prevenir formaciones de biopeliculas, reducir biopeliculas existentes y para reducir poblaciones de bacterias.
US20050152884A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-14 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria globosum
US8877178B2 (en) * 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050158294A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
US8894991B2 (en) * 2003-12-19 2014-11-25 The Iams Company Canine probiotic Lactobacilli
US7785635B1 (en) 2003-12-19 2010-08-31 The Procter & Gamble Company Methods of use of probiotic lactobacilli for companion animals
JP2005224108A (ja) * 2004-02-10 2005-08-25 Yamahisa:Kk ペット用スナックフード
GB0406654D0 (en) * 2004-03-24 2004-04-28 Mars Inc Foodstuff
WO2005115473A2 (en) 2004-05-24 2005-12-08 Nutrinia Ltd. Nutritional food and feed, composition, processing and method of use
KR100595528B1 (ko) * 2004-08-21 2006-07-03 전덕영 내산성, 내산소성 및 내염성이 우수한 비피도박테리움 아니말리스 ｄｙ－６４ 및 이를 함유한 식품
EP1634948A1 (en) 2004-09-10 2006-03-15 Basf Aktiengesellschaft Means and methods for preventing and/or treating caries
DE602004013441T2 (de) * 2004-09-21 2009-06-04 Nestec S.A. Verbesserung der Lebensdauer alter Katzen
US20060228448A1 (en) * 2005-04-11 2006-10-12 The Iams Company Pet food compositions comprising two components
US20100233312A9 (en) * 2005-04-11 2010-09-16 The Procter & Gamble Company Compositions comprising probiotic and sweetener components
AU2011202947B2 (en) * 2005-05-31 2011-11-03 Alimentary Health Ltd Feline probiotic lactobacilli
AU2006253006B8 (en) * 2005-05-31 2011-09-15 Alimentary Health Ltd Feline probiotic Lactobacilli
AU2006253007B2 (en) * 2005-05-31 2012-12-20 Alimentary Health Ltd Feline probiotic Bifidobacteria
ITMI20051137A1 (it) * 2005-06-17 2006-12-18 Ista S P A Metodo per prevenire l'inattivazione da parte di batteriofagi specifici di miscele di ceppi probiotici utilizzati negli allevamenti animali
KR100720025B1 (ko) * 2005-09-27 2007-05-21 (주)바이오토피아 프로바이오틱 유산균 및 이를 포함하는 조성물
US20070280964A1 (en) * 2005-10-06 2007-12-06 Ruth Knorr Compositions and methods useful for modulating immunity, enhancing vaccine efficacy, decreasing morbidity associated with chronic FHV-1 infections, and preventing or treating conjunctivitis
US20070098744A1 (en) * 2005-10-06 2007-05-03 Nestec S.A. Probiotic enterococci for improved immunity
JP4897426B2 (ja) * 2005-10-18 2012-03-14 花王株式会社 ペットフード
BRPI0617479A2 (pt) * 2005-10-19 2016-11-08 Hills Pet Nutrition Inc método e composição útil para manter ou melhorar a saúde gastrintestiinal de um animal, kit, meio para comunicação de informações ou instruções, e, uso de uma composição
ATE541469T1 (de) * 2005-12-29 2012-02-15 Hills Pet Nutrition Inc Verfahren zum modifizieren der darmflora bei tieren
PL2004201T3 (pl) * 2006-03-29 2019-02-28 Nestec S.A. Suplementy diety zawierające probiotyki
WO2007138993A1 (ja) * 2006-05-31 2007-12-06 Meiji Dairies Corporation 免疫調節活性の高い乳酸菌の培養法
FR2903574B1 (fr) * 2006-07-13 2008-09-05 Gervais Danone Sa Granules de cysteine et leurs utilisations a titre d'activateurs de croissance de bifidobacterium animalis lactis.
KR100720024B1 (ko) * 2006-12-20 2007-05-18 (주)바이오토피아 프로바이오틱 비피도박테리움 보움 ｒ5 균주 및 이를포함하는 조성물
JP5799299B2 (ja) 2007-02-01 2015-10-21 ザ・アイムス・カンパニーＴｈｅ Ｉａｍｓ Ｃｏｍｐａｎｙ ブドウ糖代謝拮抗物質、アボカド又はアボカド抽出物を使用する、哺乳動物における炎症及びストレスの低下方法
US7910127B2 (en) * 2007-03-02 2011-03-22 Biogaia Ab Use of lactic acid bacteria for improving food lysine absorption of pet animals
HUE052691T2 (hu) * 2007-08-29 2021-05-28 Mars Inc Eljárás egyadagos macskaeledel elõállítására
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
US9232813B2 (en) * 2008-07-07 2016-01-12 The Iams Company Probiotic supplement, process for making, and packaging
BRPI0922511B1 (pt) 2009-01-02 2018-07-10 Nestec S.A. Composição alimentícia
WO2010096550A2 (en) 2009-02-18 2010-08-26 University Of Florida Research Foundation, Inc. Lactobacillus supplement for alleviating type 1 diabetes
US20100233347A1 (en) 2009-03-13 2010-09-16 Uhrhan Richard B Food compositions having a realistic meat-like appearance, feel, and texture
DE102009032712A1 (de) * 2009-05-22 2010-11-25 Growth Finance Plus Ag Tierfutter
US20110027417A1 (en) * 2009-07-31 2011-02-03 Patrick Joseph Corrigan Process for Dusting Animal Food
US20110027420A1 (en) * 2009-07-31 2011-02-03 Haile Mehansho Moisture migration reduction layer for a food product
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
US9173423B2 (en) * 2009-07-31 2015-11-03 The Iams Company Animal food kibble with electrostatically adhered dusting
US8691303B2 (en) * 2009-07-31 2014-04-08 The Iams Company Dusted animal food
US9210945B2 (en) * 2009-07-31 2015-12-15 The Iams Company Animal food having low water activity
FI122247B (fi) 2009-08-12 2011-10-31 Vetcare Oy Probioottinen valmiste koiran maha- ja suolistokanavassa ilmenevien häiriöiden ennaltaehkäisemiseksi tai hoitamiseksi
AU2010317423C1 (en) 2009-11-11 2015-01-22 Alimentary Health Limited A bifidobacterium strain
RU2533024C2 (ru) 2009-12-18 2014-11-20 Хилл`С Пет Ньютришн, Инк. Композиции кормовых продуктов для домашних животных, включающие пробиотики, способы их получения и применение
JP5901618B2 (ja) 2010-05-26 2016-04-13 ネステク ソシエテ アノニム カタラーゼの産生又は活性を増大させる方法
WO2012039745A1 (en) * 2010-09-23 2012-03-29 Nestec S.A. Methods and compositions for preventing or treating osteoarthritis
WO2012060884A1 (en) * 2010-11-04 2012-05-10 Nestec S.A. Methods and compositions for preventing and treating osteoarthritis
EP2449887B1 (en) * 2010-11-05 2016-01-06 Nestec S.A. Method for preparing pet food containing probiotic micro-organisms
EP2449890A1 (en) * 2010-11-05 2012-05-09 Nestec S.A. Powdered cereal compositions comprising non-replicating probiotic microorganisms
EP2452576A1 (en) * 2010-11-11 2012-05-16 Nestec S.A. Extruded non-replicating probiotic micro-organisms and their health benefits
MX2013007191A (es) * 2010-12-21 2013-07-12 Nestec Sa Metodos y composiciones para prevenir y tratar la osteoartritis.
RU2597793C2 (ru) 2011-01-25 2016-09-20 Нестек С.А. Способы и композиции для лечения, ослабления или предотвращения ухудшения зрительной системы животных
AU2012231351B2 (en) 2011-03-18 2016-03-10 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods useful for ameliorating age related maladies
EP2898923A3 (en) 2011-04-15 2015-10-07 Nestec S.A. Isoflavones for regulating sirtuin gene expression
CN102250799B (zh) * 2011-06-22 2013-09-11 南京农业大学 草酸降解菌njode1及其应用
US20130045185A1 (en) * 2011-08-18 2013-02-21 Dupont Nutrition Biosciences Aps Strains and methods useful for mycotoxins
US9113653B2 (en) 2011-08-19 2015-08-25 Steven J Maranz Methods of administering probiotic organisms that synthesize carotenoid compounds in situ to enhance human health and nutrition
CN102399733B (zh) * 2011-12-14 2014-07-09 北京大北农科技集团股份有限公司 约氏乳杆菌及其菌剂、应用和预混料
CN102578415B (zh) * 2012-02-23 2016-01-20 北京大北农科技集团股份有限公司 约氏乳杆菌在制备提高禽类产蛋性能和蛋品质饲料中的应用
US9585925B1 (en) * 2012-05-04 2017-03-07 Vetnique Labs LLC Pet food supplement
JP6452607B2 (ja) * 2012-09-25 2019-01-16 アキロン セイエレ エセ．エレ． プロバイオティクス組成物及びプレバイオティクス組成物
US10413577B2 (en) * 2013-02-22 2019-09-17 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for promoting growth of beneficial microbes to treat or prevent disease or prolong life
CN104286408B (zh) * 2014-06-13 2017-10-24 杨雄 一种嗜酸乳杆菌xd13r制备的生物制剂在减少宠物体内抗药性细菌比例的应用方法
BR112017009267B1 (pt) 2014-11-25 2022-08-23 Société des Produits Nestlé S.A. Usos para preservar a massa corporal magra e promover a perda de gordura durante a perda de peso
CA2965246A1 (en) 2014-11-25 2016-06-02 Nestec S.A. Methods and compositions for promoting lean body mass and minimize body fat gain and managing weight
WO2016130498A1 (en) 2015-02-10 2016-08-18 Massachusetts Institute Of Technology Isolated mucins and different microoorganisms, and methods of use
EP3256004A1 (en) 2015-02-13 2017-12-20 Mars, Incorporated Pet food feeding system
WO2016133909A1 (en) 2015-02-16 2016-08-25 Mars, Incorporated Interlocking kibble
MX2017013715A (es) 2015-04-28 2018-03-02 Mars Inc Proceso de preparacion de un producto de alimento para mascotas humedo esterilizado.
GB201520497D0 (en) * 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
RS57471B1 (sr) 2015-12-17 2018-09-28 Institut Za Molekularnu Genetiku I Geneticko Inzenjerstvo Univerzitet U Beogradu Nova probiotička starter kultura za humanu i animalnu primenu
US20170173138A1 (en) * 2015-12-22 2017-06-22 Nestec Sa Immune health for companion animals
BR112018013052A2 (pt) * 2015-12-24 2018-12-04 Dairy A Day Inc composições e métodos de uso de novas cepas de lactobacillus fermentum
US10046032B2 (en) 2016-03-24 2018-08-14 Nutrinia, Ltd. Use of insulin for promoting gastric emptying
EP3596223B1 (en) * 2017-03-15 2023-06-07 Société des Produits Nestlé S.A. Branched alpha glucans
US11357803B2 (en) 2017-09-22 2022-06-14 Iowa State University Research Foundation, Inc. Probiotic compositions for production of dopamine
CN107821753A (zh) * 2017-11-20 2018-03-23 江苏雅博动物健康科技有限责任公司 一种宠物用益生菌颗粒制剂及其制备方法
CN112020308A (zh) * 2017-12-14 2020-12-01 纯文化2020股份有限公司 用于预防和治疗动物病症的益生菌和发酵代谢物
FI128916B (en) 2018-02-05 2021-03-15 Vetcare Oy Health-promoting composition and method for its preparation
KR102079794B1 (ko) * 2018-09-18 2020-02-20 전북대학교산학협력단 신규한 엔테로코커스 패시움 균주 및 이의 용도
US20220007685A1 (en) 2018-10-18 2022-01-13 Hill's Pet Nutrition, Inc. Pet Food Compositions
WO2020121145A1 (en) 2018-12-13 2020-06-18 Societe Des Produits Nestle Sa Methods for enhancing metabolic health in an animal
WO2020121146A1 (en) 2018-12-13 2020-06-18 Societe Des Produits Nestle Sa Methods for increasing fat oxidation or energy expenditure or satiety in an animal
CN111172055B (zh) * 2019-03-14 2022-06-10 南京农业大学 副干酪乳杆菌lhz-1及其在去除脱氧雪腐镰刀菌烯醇中的应用
WO2020243705A1 (en) * 2019-05-30 2020-12-03 New York University Probiotic compositions and methods of use
US20220233612A1 (en) * 2019-05-31 2022-07-28 South Dakota Board Of Regents Technology Transfer Office Probiotics to inhibit enteric pathogens
US20230063695A1 (en) * 2019-09-13 2023-03-02 Aquilon Cyl S.L. Fermented milk product for administration in canids such as dogs, and uses thereof
CL2019003739A1 (es) * 2019-12-18 2020-06-19 Univ Concepcion Cepas probióticas de lactobacillus sp. y de pediococcus sp. y su uso en la elaboración de una formulación probiótica para prevención de diarreas causadas por patógenos bacterianos que afectan a perros y gatos.
WO2021123970A1 (en) 2019-12-19 2021-06-24 Societe Des Produits Nestle Sa Compositions and methods for providing a health benefit to a growing animal
CN115243567A (zh) * 2020-03-06 2022-10-25 学校法人麻布兽医学园 含有乳酸菌的组合物
CN115666260A (zh) 2020-05-29 2023-01-31 雀巢产品有限公司 用于动物消化健康的组合物和方法
US12011468B2 (en) 2020-06-03 2024-06-18 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods for digestive health in an animal
CN116096245A (zh) 2020-09-03 2023-05-09 雀巢产品有限公司 用于提供动物健康有益效果的组合物和方法
EP4171540A1 (en) 2020-09-04 2023-05-03 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods for providing health benefits in an animal
CN112266876A (zh) * 2020-11-02 2021-01-26 湖南海路生物科技有限公司 用于分离粪便中菌群的智能分离系统
KR102554078B1 (ko) * 2020-12-08 2023-07-10 건국대학교 산학협력단 애완동물을 위한 대사체 전환능 기반 유산균 조합 정보 제공 장치 및 방법
CN116568151A (zh) 2020-12-11 2023-08-08 雀巢产品有限公司 用于宠物食物的组合物和方法
CN114437959B (zh) * 2021-11-29 2022-11-18 内蒙古普泽动保生物技术有限公司 一种动物双歧杆菌及其在抗氧化和提升免疫中的应用
US20230165277A1 (en) 2021-11-29 2023-06-01 Société des Produits Nestlé S.A. Methods and compositions for providing a health benefit in an animal
US20230165281A1 (en) 2021-11-29 2023-06-01 Société des Produits Nestlé S.A. Methods and compositions for providing a health benefit in an animal
WO2023104887A1 (en) * 2021-12-09 2023-06-15 Société des Produits Nestlé S.A. Lactobacillus acidophilus to increase agmatine production by microbiota
CN114292779A (zh) * 2021-12-22 2022-04-08 清远西周生物医药科技有限公司 一种副干酪乳杆菌冻干粉、其应用及制备方法
WO2023247472A1 (en) * 2022-06-22 2023-12-28 Cerbios-Pharma Sa Probiotic for use in the treatment of inflammatory alterations of the intestinal mucosa, particularly obesity
WO2024057113A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Societe Des Produits Nestle Sa Methods for providing and determining an efficacious weight loss diet for a canine
WO2024057117A1 (en) 2022-09-14 2024-03-21 Societe Des Produits Nestle Sa Compositions and methods utilizing southern ocean mackerel oil for providing health benefits in an animal
KR102554206B1 (ko) * 2022-12-01 2023-07-13 (주)에이앤바이오 구강 항산화 증진을 통한 반려동물 치석 제거, 구취 개선, 잇몸 보호에 도움을 주는 카탈라아제 함유 반려동물 구강 건강 증진용 조성물
CN116333922A (zh) * 2023-02-10 2023-06-27 宁波希诺亚海洋生物科技有限公司 一株来源于深海大鱿鱼的鼠李糖乳杆菌菌株及其应用
KR102625196B1 (ko) * 2023-04-19 2024-01-15 박종호 기호도가 우수한 반려동물용 유산균 영양제 조성물

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4160038A (en) * 1976-08-09 1979-07-03 Microlife Technics, Inc. Lactic acid fermentate flavored pet food
JPH07194317A (ja) * 1993-12-29 1995-08-01 Nichinichi Seiyaku Kk ペットフード
AUPM823094A0 (en) * 1994-09-16 1994-10-13 Goodman Fielder Limited Probiotic compositions
EP0862863B9 (en) * 1997-01-09 2009-08-12 Societe Des Produits Nestle S.A. Cereal product containing probiotics
US5986569A (en) * 1997-03-20 1999-11-16 Micron Communications, Inc. Radio frequency identification system, radio frequency identification device package, and method of use of radio frequency identification device
WO1999017788A1 (en) * 1997-10-06 1999-04-15 Abbott Laboratories Composition of treatment of candidiasis
US5902743A (en) * 1998-03-20 1999-05-11 Wisconsin Alumni Research Foundation Probiotic bifidobacterium strain
JP4227690B2 (ja) * 1998-10-29 2009-02-18 株式会社バイオテックジャパン ペットフード
RO121700B1 (ro) * 1999-03-11 2008-02-28 Societe Des Produits Nestle S.A. Bacterii lactobacillus capabile să prevină diareea cauzată de bacterii patogene şi rotavirusuri
EP1034787A1 (en) * 1999-03-11 2000-09-13 Société des Produits Nestlé S.A. Lactobacillus strains preventing diarrhea caused by pathogenic bacteria
PL207930B1 (pl) * 2000-05-25 2011-02-28 Nestle Sa Zastosowanie wyizolowanego probiotycznego szczepu bakterii kwasu mlekowego o aktywności probiotycznej, kompozycja pokarmowa i izolowany szczep bakterii kwasu mlekowego

Also Published As

Publication number Publication date
PE20020232A1 (es) 2002-04-16
DE60127731D1 (de) 2007-05-16
US20080171106A1 (en) 2008-07-17
AR029100A1 (es) 2003-06-04
DE60127731T2 (de) 2007-08-16
UY26734A1 (es) 2001-11-30
PL207930B1 (pl) 2011-02-28
US20100266549A1 (en) 2010-10-21
ES2262667T3 (es) 2006-12-01
JP2003534003A (ja) 2003-11-18
MY138070A (en) 2009-04-30
CA2409286C (en) 2012-05-15
US20070178079A1 (en) 2007-08-02
EP1541673B1 (en) 2007-04-04
AU2001278432B2 (en) 2007-08-30
CA2409286A1 (en) 2001-11-29
US8124070B2 (en) 2012-02-28
DE60119515T2 (de) 2007-05-24
BR0111275A (pt) 2003-06-10
NO20025528D0 (no) 2002-11-18
EP1541673A1 (en) 2005-06-15
EA006428B1 (ru) 2005-12-29
IL152695A (en) 2010-02-17
CN1444647A (zh) 2003-09-24
HUP0301939A2 (hu) 2003-09-29
AU7843201A (en) 2001-12-03
CN100396769C (zh) 2008-06-25
KR100796963B1 (ko) 2008-01-22
NZ523010A (en) 2004-06-25
DE60119515D1 (de) 2006-06-14
US8771675B2 (en) 2014-07-08
IL152695A0 (en) 2003-06-24
US20050106133A1 (en) 2005-05-19
EA200201284A1 (ru) 2003-06-26
US20030190309A1 (en) 2003-10-09
NO20025528L (no) 2002-12-18
US7381406B2 (en) 2008-06-03
US7189390B2 (en) 2007-03-13
ES2284089T3 (es) 2007-11-01
JP4343477B2 (ja) 2009-10-14
MXPA02011595A (es) 2003-03-27
KR20030010633A (ko) 2003-02-05
PL359182A1 (en) 2004-08-23
WO2001090311A1 (en) 2001-11-29
US7771982B2 (en) 2010-08-10
HUP0301939A3 (en) 2004-04-28
EP1290136A1 (en) 2003-03-12
NO330276B1 (no) 2011-03-21
EP1290136B1 (en) 2006-05-10
BR0111275B1 (pt) 2013-06-18
JP4456649B2 (ja) 2010-04-28
JP2009096811A (ja) 2009-05-07
ATE325864T1 (de) 2006-06-15
ZA200210302B (en) 2004-03-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU230800B1 (hu) Új probiotikumok hobbiállat-eledel kompozíciókhoz
CN104396869B (zh) 一种山猪的饲养方法
CN108366582A (zh) 饲料添加剂组合物
KR19990082623A (ko) 동물 사료
JP2003520038A (ja) ペットのヘリコバクター種治療用ペットフード組成物
JP4073922B2 (ja) ビフィズス菌増殖促進成分を含有する飼料組成物とその使用方法
CN104206859A (zh) 一种无抗生素育肥猪饲料及其制备方法
RU2708161C1 (ru) Кормовая комплексная биологически активная добавка для животных и птиц
CN102885202A (zh) 一种新型禽用微生态制剂及其制备方法
KR20070072419A (ko) 클로렐라를 포함하는 개 사료 및 이의 제조방법
CN106689705A (zh) 一种改善适口性抗疾病犊牛精补料及其制备方法与应用
CN107629981B (zh) 一种改善雏鸡肠道功能的复合益生菌剂及其制备方法
Abdul-Malik et al. Role of prebiotic, probiotic and symbiotic diets on bacterial proliferation in feed and intestine of African (Clarias gariepinus) catfish
JP2009209057A (ja) 免疫活性剤およびその製造方法、並びにその免疫活性剤を配合した人用食品、動物・家畜用飼料、植物用免疫活性剤及び化粧品原材料
KR20190020883A (ko) 굼벵이 사육용 사료 조성물 및 굼벵이 사육 방법
CN104304169A (zh) 有机富硒肉猪的养殖方法
KR100839038B1 (ko) 유기대사물 함유 생균복합제 및 그 제조방법
Bohstedt Mineral and Vitamin Requirements of Pigs: With Special Reference to the Effect of Diet on Bone Development
CN100546492C (zh) 家畜饲料添加剂
CN108740497A (zh) 一种提高蛋鸡肠道健康状态的饲料添加剂及其制备方法
CA2224568A1 (en) Nutritional supplement
Ogorodnichuk et al. Productivity and killing quality of rabbits under the action of complex probiotic enzyme additive" celozyme-probiol"
CN106472820A (zh) 一种饲料及其制备方法
JP2009132642A (ja) 免疫活性剤およびその製造方法、並びにその免疫活性剤を配合した人用食品、動物・家畜用飼料、植物用免疫活性剤及び化粧品原材料
KR102590678B1 (ko) 2가지 이상의 곤충 원료를 이용한 동물사료의 제조방법 및 이에 따라 제조된 동물사료