HU228937B1 - Compositions for treating inflammatory response - Google Patents

Description

A találmány gyulladást keltő aktivitás következtében jelentkező szövetsérülés megelőzésére alkalmas készítményekre vonatkozik.

A találmány szerinti vegyületek az (I) általános képlettel írhatók le, amely képletben

R jelentése mindegyik előfordulási helyén egymástól függetlenül hidrogénatom, alkil-, cikíoalkil-, fenil- vagy fenilalkil-csoport;

X jelentése -CH₂OH, -CO₂R², -OC(O)OR² vagy -C(O)NR³R⁴ képletű csoport, ahol

R², R³ és R⁴ jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom; aikilcsoport; aikilcsoport, amely 1 és 3 közötti számú alkoxi-, cikíoalkil-, alkiltio-csoporttal, halogénatommal, hidroxil-, amino-, mono(alkil)amino-, di(alkil)amino- vagy arilcsoporttal van helyettesítve, amely ariiosoport 1 és 3 közötti számú helyettesítővel, mégpedig halogénatommal, alkil-, hidroxil-, amino-, mono(alkil)amino- vagy di(alkil)amino-csoporttal lehet helyettesítve; ariiosoport vagy ariiosoport, amely 1 és 3 közötti számú helyettesítővel, mégpedig halogénatommal, hidroxil-, amino-, mono(alkil)amino-, di(alkil)amino- vagy alkílcsoporttal helyettesített; és

Z és Ζ' jelentése egymástól függetlenül aikílesoport, amely adott esetben 1 és 3 közötti számú kénatommal és/vagy nem-peroxid típusú oxigénatommal van megszakítva vagy hiányzik és n értéke 1 és 3 közötti szám, továbbá gyógyászatílag elfogadható sója.

*

WOMDAFÍi-DÁW

GYULLADÁSOS VÁLASZ KEZELÉSÉRE ALKALMAS KÉSZÍTMÉNYEK

A találmány gyulladást keltő aktivitás .következtében jelentkezőszövetsérülés megelőzésére alkalmas készítményekre vonatkozik,

A gyulladásos válasz célja az ártalmas anyagok testből történő eltávolítása. Sokféle kórokozó támadása indíthat be gyulladásos választ, ilyenek a fertőzés, ailergének, autoimmun stimulánsok, átültetett szövetre adott immunválasz, egészségre ártalmas vegyszerek és tox ínok, isémiaAeperfúzíó, blpoxia, mechanikus és hőmérsékleti trauma. A gyulladás általában egy nagyon jói lokalizált hatás, amely elősegíti az eltávolítást, hígítással enyhíti a panaszt és a károsító anyag izolálásával elősegít! a sérült szövet izolálását. Azonban a test válasza betegség okozójává válik, amikor a célba vett anyag eltávolítására Irányuló vagy a Iraumás sérülésre adott válasz folyamatéban a gazda szövetei nem-kivánt módon sérülnek.

A gy ulladás például érrendszeri betegség vagy sérülés patogenézís komponense. Ilyenek például a kővetkezők;

isémi&Yeperfúziós sérülés (Frangogiamtis, N, G. és munkatársai, Myoeazdial Isohemía; Mechamsms, Repertusion, Rrötection, Karmazyn, M. szerk., Bbkba&er Kiadó 23Ő-284 (I99ó); Sharma, H. 5. és munkatársai, Med. of inflamm, 6, 175 (1987)], ateroszkierózis (Ross, R.; Natúré, 362, 80í (1993)], gyulladásos aorta aneurizmus (Girardi N. és munkatársai, Ann. Tbor. Smg., 64, 251 (1997); Walker, D, 1. és munkatársai. Brit. 3. Surg., Sg, ÓŐ9 (1972); PenneB, R, L. és munkatársai, L Vasé. Sarg,, 2, S59 (1985)] és ballonos angsoplaszísát követő reszíenózis (Ross, R, fent hivatkozott szűkeikké). A gyulladásban résztvevő sejtek például leukocíták (azaz immunrendszert sejtek — neutrofilek, eozmofiiek, límfoeiták, mosódták, hazoülek, makrofsgok, dendrit sejtek és hízósejtek), az éresdoíéiíem, érsimaizom-sejtek, flbroblasztok és míoeiták.

A gyulladást okozó citokmek, mint a tumor rtekrözis faktor-alfa (TTNFa), leukocíták által történő felszabadítása egy olyan eszköz, amely által az immunrendszer legyőzi a patogének behatolását, beleértve a fertőzéseket Á TNFot stimulálja a leukémiákon és az endutélium sejteken tsz adhéziós faktorok expresszálódását és aktiválódását, beindítja a neutrofilek szekunder stimulánsokra adott fokozott gyulladásos válaszát, és növeli a megkötődő neetrofd oxidatív aktivitását, ahogy ezt Shartsa és munkatársai fent említett szakcikkükben ismertették. Ezen túlmenően a makroíágok/dendrií sejtek a limfocíták számára antigént termelő kisegítő sejtként működnek. A iímíbcíták viszont stimulálödnak és gyulladást kiváltó citotoxikus sej tekként hatnak.

Általában a eítokmek arra stimulálják a neutrofrieket, hogy növeljék az oxidatív (például szuperoxíd és szekunder termékek} és g nem-oxídatív (például mteloperoxldáz és más enzimek) gyulladási keltő aktivilásukaL A eitokínek nem megfelelő vagy túlzott felszabadulása ellenkező irányú felerősített pategén hatást okozhat szővetkárositó oxidatív és rtem-oxidativ· teonékek felszabadításával (Tracey, K, G. és munkatársai, 3. Exp, Med. 1Ó7, 1211 (1988); és Mömtel, D.K és munkatársat, Rév. ínfetí. Dis,, 9. (5, kiegészítés) őÖ2-ó0ő ( 1987)}, Például a TNFet OcutFoSleket indukálhat,. amelyek a véredények falához tapadnak, és a véredényeken át a sérülés helyére migrálnafe, majd oxidatív és nem-oxídatív gyulladást okozó termékeiket olt felszabadítják,

Habár a monoesíák megfelelő körülmények között lassan gyeinek fel a gyulladás helyén, a monoeiták a hosszú időtartamú rezidens kiegészítő sejtekké és a makrofágokká fejlődnek. Gyulladást okozó szerrel történő stimulalás hatására a moneeíták/makroiágök szintén egy sor eltokioí {betótve a TNFo.«t), komplemsutumot, sipidet, reaktiv oxígénfajtákat, proteázokal és növekedési faktorokat termelnek és választanak ki, amelyek álala« « ♦ ♦Μ

Rttják a szövetet és szabályozzák a környező szövetek működését.

A gyulladást kiváltó dtókinek patogénnek bizonyultak például a következő betegségekben: anntisz (DtnareHo, C, A. Sémire, Immunoi, 4, 133 (1992)}; isémia [Seekamp, D. M. és munkatársai, Ageats-Aetions-Supp., 91, 137 (1993)); szeptikus sekk (Mdnnol, D. N. és munkatársai, Kev. iaföct Dis,, 9, (5, kiegészítés) S6Ö2-S606 (198?)}; asztma fCembtzynska, K M. és munkatársai, Am. Rév. Respir. .Dis., 147,29í (1993)]; szerv trans2piantátum kilökődése (Imagawa. D. K, és munkatársai, Transplantation, 5h 57 (1991)]; szkíerőzis multiplex [Hartung, H. P„ Aaa, NatreL, 33, 591 (I993)];AH3S (Matsuyama, Ti. és munkatársai, AIDS, 5, 1905 (1991)]; és lögmarásos szem {Miyamoto, F. és munkatársai, Opthakmc Res„ 30, 168 (1997)). A isukocitákbím a szuperősid képződést kapcsolatba hozták a humán immunbtány vírus (HÍV) repitkáciőjának elősegítésével (Legrand-Pöels, S. és munkatársai, AIDS Rés. Bura. Retrovlruses, δ, 1389 (1990)].

Jól ismert, hogy az adereozm és az adenozire bizonyos analógjai, amelyek nem szelektíven aktiválják az aáéaozm receptor altípusokat, csökkentik a gyulladást okozó oxidációs termékek neurofrl termelését [Cronsteia, 8. N. és. munkatársai, Aon, Y. N. Acad. Sci., 45.1,291 (1985); Roberts, P. A. és munkatársak Biochem. 1. 227. öó9 (1985); .Schrier, D. J, és munkatársai, 137,3284 (19Ső); Crönsteín, Β. N. és munkatársai, Cítóc&l immunok .and .immunopath., 42, 76 (1987); laonone, M. A. ás munkatársai, Topics and Ferspective in Adesostne Research, Gerlach, E. és munkatársai, szerL Sprmger-Verlag, Berlin, 286 (1987); McGarrity, S. T. és munkatársai, J, Eeakocyte Siet, 94, 411-421 (1988); De La Barpe, X és munkatársai, I Immunot, 193. 59ő (1989); McGarrüy, S. T. és munkatársai, 3. immunoi., 142, 1986 (19S9);és Nielson, C. P. és munkatársai, Br. J. Fharmacoi., 97, 882 (1989)]. Például kimutatták, hogy az adenozín gátolja a kémiai atraktáresok, mint a bakteriális peptidek szintetikus utánzója, az. f-met-leu-pbe· (ÍMLP) és a C₅a komplementül» komponens által •stimulált nestrohlekböl felszabaduló szuperoxidot (Cronstein, Β. N. és munkatársai, J, immunok, 135, 1366 (1985)]. Azudenozla csökkentem képes a PMN (neutrofli) óriási mértékben felfokozott, robbanásszerűen végbemenő oxidációs hálását, amelyet a TNF-α indított be, majd egy második stnnulus, példán! az f-met-iéu-phe stimulált jSnlüvars, G, W. és munkatársai, Clin. Rés,, 41, 172A (1993)]. Azt is leírták, hogy az sdeooztó csökkenteni képes egy T-sejtvonaiban a HÍV replikációjának sebességét (Sipka, S. és munkatársai, Aetó. Bioemm, Hiophys. Bong., 23, 75 (1988)]. Azonban nincs arra bizonyíték, hogy az adereozinnak /» vivő gyullad,áselienes hatása volna [Fírestein, G, 5., és munkatársai, din. Rés,, 91, 170A (í 993) és Croustetó, Β, K. és munkatársai, din. Rés., 41,294A (1993)].

Feltételezték, hogy a neotrofüéken egynél több adereozm receptor altípus van, amely a szuperoxid felszabadulásra ellentétes hatást gyakorol. (Cronsfein, Β. N. és munkatársai, J, Cilin. levest, 85, 1150 (1990)}, A neutrofílfikeri az Α_ίΛ receptor jelenlétét eredetileg Van Galker és munkatársai mutatták be [Van Caiker, D, és munkatársai. Búr. X Rharmacology, 206,285 (1991)}.

Jelentős fejlődés észlelhető a radioaktív ligandum kötési vizsgálat és a ítzioiógíás válaszok alapján egyre hatékonyabb és/vagy szelektív A_2A adenozín receptor agonistáknak (AR) mutatkozó vegyöfeíek kutatása terén. Először olyan vegySiéteket fejlesztettek ki, amelyek az A₂a receptorokkal szemben kis szelektivitást mutatnak vagy nem mutatnak, mint maga az adereozire vagy az adencszin-5'-karhoxamíd-számrazékök, például az 5’-N~etlskarboxamidoadenozln (NBCA) [Cronstsin, Β. N. és munkatársai. X Immunoi., 135, I3ö6 (1985)], Később kimutatták, hogy a 2-alkitamino-ho1yeítesttők bevitelével a hatás és a szelektivitás nő, például a CV1808 és a CGS2ÍÓ8Ö esetében [Jarvts, M. F. és munkatársai, .1. Pharmaeol. Exp. Ther., 251, 888 (1989)}. A 2-aikoxi-helyettesitett adesozin-származékok, mint a WRC-0090, még hatásosabb és szelektívebb· a sziv-koszorúér A_u ϊ ♦ * ♦,

-ϊ , , ... ”

-⁵ ··;’ .?*..· » receptorra ható agonistákrak feizsnyuIM [Leeda, M és munkatársai, 1 Med. Chcm., M 13-34 0591}]. Λ 2-atkithiára2Íno-adesozÍH-sste8^kukat, miöt az SHA 211 (WR.C-0474-nek is nevezik), szintén szívkoszorúér A_2A receptoron ható agomstakéni fejlesztették ki fNnya, K. és munkatársai, J, Med. Chetn., 33, 4.357 {1992}],

Egv helyen beszámoltak viszonylag sem-speeiflkas adeaezfe analógok, az R-fej-ilizopr^iWénozm <R-P1á) és a 2-lílóradeaozirs (Cl-Ado) egy íbszfodiészteráz (EDE) inhibitorral alkotott kombinációjáról, ami a neutroííl oxídatív aktivitás csökkentését eredményezi pannoné, M, A. és munkatársai, Topics and Perspestives in Adenosíne Research, öarteeh, B és munkatársai szerk., Springer-Verlag, Berlin, 286-298 (1987)], Azonban at R-P1A és a Cl-Ado analógok valójában- hatásosabb Aj aáeaozln receptor aktivátorok, mint az A_2A adenezin receptorok. és fgy valószínűleg a.szívizomban és más szövetekben az Aj receptorok aktiválódására visszavezethető meilékhatásokat okoznak, mint a “szív blokk”.

Az 5 278 150 számú amerikai egyesült állan^okbeli szabadalmi leírásban Olsson, R. A. és munkatársai ismertették az (A) általános képletű szelektív adenozin A? receptor ágon istákat, amelyek képletében Rib jelentése rlbozfcoport, R, jelentése hidrogénatom és R₂ jéteése dkloalkil-csoport isset Az itt ismertetett vegyületek siagasvérnyomás és aíeroszklerózis kezelésére, továbbá értágítóként használhatók.

Az 5 140 015 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban Olsson és munkatársai bizonyos (B) általános képlerti Aj receptor agonisíákat ismertettek, amely képiéiben a -C(X)BR₂ általános képletö helyettesítő jelentése -CFLOH képletö csoport, és R _s helyettesítő jelentése alkil- vagy alRoxíalkÜ-csoport lehet Az itt ismertetett vegyületek értágítókéot és vérnyomáscsökkentőként alkalmazhatók.

Az 5 877 180 számít amerikai egyesüli államokbeli szabadalmi leírást Linden és mnnkatársal arra a felismerésre alapozták, hogy' bizonyos gyulladásos betegségek, mint az artritisz és sz asztma, hatásosan kezelhetők szeleken’ Au adenozm receptor sgpmsta hatásé vegyületek, előnyösen IV típusú íbszfodiészteráz ínhiblterml kombinált beadásával. A Linden és munkatársi találmányának egyik megvalósítási módja gyulladásos betegségek kezelési eljárását foglalja magában, amelynek során (C) általános képletö Á_2A adenozin receptor hatásos mennyiségét adták be, amely (€} általános képletben R és X jelentése a szabadalmi leírásban megbatározott.

A Linden és munkatársai találmányának egy előnyös megvalósítási módja egy ÍV típusú föszíodiészteráz (EDE) inhibitor és egv Aja adenozrn receptor agorsista kombinációjának beadását foglalja magában, A ÍV típusú foszfödiészíeráz (PDE) inhibitor vegyűlet egy racém -vagy optikailag aktív (D) általános képletö 4~(poiíaikox?fenil)-2-pln-olidon-származék, ahol a képletben R’, R^!S, R^!’^J és X helyettesiek jelentése a -4 193 926 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalnú leírásban megadott, A fenti képlettel meghatározott I V típusú EDE Inhibitorok közé tartozik & roKpram.

Az 5 593 975 számú -amerikai egyesük államokbeli szabadalmi leírásban Cristalli, <3, olyan 2-ariíetinÍl-, 2-eiklöalkitetinmi- és 2-hidroxialkÍletÍinl~szártnazékokst ismertetett, amelyekben a ribozidmaradék karboxil-anttno- vagy helyettesített karboxil-amino- (R₃HNH(Ö)-) csoporttal van helyettesítve.. A 4 956 345 szántó amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban Miyasaka és munkatársai olyan 2-aikinil-purh-származékokat Ismertettek, amelyben a 2~3lkinH-esöport 3-16 szénatomos alkliesoprottai helyettesített. Az 5 593 975 számú amerikai -egyesült államokbeli szabadalom szerinti vegyüieteket mint értágkókat Írták le, amelyek gátolják a vérlemezke aggregáeiól, és így isémla-ellenes, aíeroszklerózls-ellenes és magas vérrsyomás-ellenes szerekként használhatók.

Azonban továbbra is fennáll az igény terápiás célokra jói alkalmazható és ke vesebb mellékhatást mutató szelektív Aj adenozls receptor anlagonisták iránt

Találmányunk emlősök szövetében fellépő gyulladásos aktivitás kezelésére alkalmas vegydletekre vonatkozik. A gyulladásos szövetaktivítást okozhatják kórokozó anyagok vagy rizíkai, kémiai vagy hőutórsékleti trauma, vagy·· orvosi beavatkozások, például szert'·, szövet- vagy seji-tómszplantáelö, sagloplasstia. (PCTA) vagy isétniát'mperő'sziót vagy áíiiítetést követő gyulladás által okozott trauma. A találmányonk szerinti vegyületek a S-alkínikíáenozin-származékok új osztályát képezik, ezek a vegyületek etín-helyzetben helyettesített ciklosikil-esoporttal vaunak helyettesítve. 'Előnyősén a ribozldmamdék 5*-heíyzetóben (X helyettesítő”) egy N-alkíi(vagy eikioaikíi-)karboxbmiRO-eso|50rtíal ramisokurhonli-esoport} van helyettesítve. Tehát találmányunk egy emlősnél, például egy humán személynél jelentkező gyulladásos válasz gátlására és sz érintett szövetnek a választól való megvédésére alkalmas vegyüleíekre vonatkozik. A gyógyászati hatás elérése céljából egy vagy több ilyen vegyüiet hatásos mennyiségéi adjuk be.

A találmányunk szerinti vegyületek az (1) általános képlettel írhatók le, amely képletben (a) R jelentése mindegy ik előfordulási helyén egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénstóraos aikll-. 3-7 szénatontos ctkloalkíl-. fenti- vagy feral(l-3 szenatomos aikilj-esoport;

(b) X jelentése -CH₂ÖÍ-Í képletü. csoport, -CO>R³, -OC(Ö)OR', -€4í₂ÖC{O}R.² vagy -CfÖ)NR³R⁴ általános képletü csoport, ahol fc) R², R² és R* jelentése egymástól fUggetleuül hidrogénatom; l-ő széttatotnos aikilesopört; 1-6 szénatomos alkiicsoport, amely 1 és 3 közötti számú 1-6 szénatomos alkoxi-, 3-7 szénatomos clktoaikíi-, 1-6 szénatomos alkiltio-csoportíal, haíogénatommd. bidroxil-, amino-, monofl-ó szénatomos alkilj-amlno-, di(l~6 szénatomos aíkilj-amine- vagy 6-1Ö szőnatomos arilcsoporttal van helyettesítve, amely árucsoport 1 és 3 közötti számú helyettesitövei, mégpedig halogénatommal, 1-6 szénatomos alkil-, bidroxil-, amioö-, mono<l-6 szénatomos slklljammo- vagy 41(1-6 szénatomos aikii)arnino-csoportíal lehet helyettesítve; 6-10 szénatosnos arilesoport; vagy 6-10 szénaíomos arilcsoport, amely 1 és 3 közötti számú helyettesítővel, mégpedig halogénatommal, hidroxll-, amino-, monot!-6 szénatomos alkilj&snin»-, difi-6 szésatomos alkíljanunö- vagy 1 -6 szén&tomos slkllesoporrtal helyettesített; és (d) Z és Z’ jelentése egymástól függetlenül 1-6 szesatómos alkiicsoport, amely adott esetben 1 és 3 közötti számú kénatommal és/vagy nem-peroxid típusú oxigénatónunal van megszakítva vagy hiányzik és h értéke 1 és 3 közötti szám, továbbá a fenti vegyületek gyógyászatiiag elfogadható sói.

Találmányunk kiterjed az (1) általános képletü vegyületek gyulladás elleni kezelésére vagy védelmére történő alkalmazására, mint például a gyulladásos válása. Ezenkívül találmányunk kiterjed az (1) általános képletű vegyületek alkalmazására emlősnél, például embernél jelentkező, gyulladással összefüggő patológiás állapotra vagy tünetre adott gyulladásos válasz kezelésére alkalmas gyógy szerkészítmény előállítására is.

Habár bizonyos Α_?Λ adenozis receptor antagonistáLtól leírták, hogy értágltó hatásúak, és így közvetlenül alkalmasak magasvérnyomás, trombózis, ateraszlclerózis és hasonlók kezelésére, az (ij általános képletü vegyítetek szövetvédő hatására nem Is utalnak a szskinxkdomban.

Találmányunk kiterjed a fenti vegyületek IV típusú foszfodlészteráz Inhibitorokkal kombinált alkalmazására hnrnunsejtek gyulladásos válaszának szinetgeííkus csökkentesére.

Találmányunk kiterjed az (1) általános képletü vegyüiet vagy gyógyászatiiag elfogadható sója hatásos mennyiségét és gyógyászatiiag elfogadható hígító- és/vagy hordozóanyagot és adott esetben egy IV típusú *» *»♦

«* fö^íodiészteráz (FDE) inhibitort tartalmazó gyégyszerkészltményre is. A készítményt előnyösen egységdózis formában óllítjuk elő.

A találmányunk szerinti vegyületek olyan, emlősöknél, például embereknél jelentkező patológiás állapot vagy tünet megelőzésére és kezelésére alkalmasak, amelyekben asz Α_;Λ adenozin receptorok szerepet játszasak, és essen hatás agonizáláséra van szükség, Az ilyen terápia sétán az emlősnek egy (l) általános képletö vegyőlet vagy gyógyászati feg elfogadható sója hatásos mennyiséget adjak be. Úgy gondoljuk, hogy az Α_?Λ adenozin receptorok aktiválása a gyulladást a neutrofikk, hízósejtek, monoéitáleúnakro tagok, Γ-sejtek és/vagy eoztnofilekre gyakorolt hatás ótján gátolja. Ezen gyulladást okozó sejtek gátlása a szövet megtámadását követően a szövetek védelmét eredményezi.

Az (í) általános képleté vegyülettei és adott esetben egy ÍV típusú- PDE inhibitorral kezelhető gyulladásos válaszok közöl (beleértve a profikdctlkus kezelést is) a gyulladás a következőkre vezethető vissza:

(a) autoimmun stimuláció (autoimmun betegségek), mint lapos eryíhematosus, szklerózís multiplex, endometrlózisból eredő meddőség, 1 típusú diabétesz meUitusz, beleértve a diabéteszhez vezető pankreász tesfocskék lebomlását magába foglaló I tipusá diabétesz meiUtuszt és a diabétesz gyulladásos következményeit, beleértve a lábszárfekélyt, Crohn-betegségef, fekélyes kolitiszt, gyulladásos bélbetegséget, oszíeoporózist és reumatoíd artriíiszt;

(b) allergiás betegségek, miöt as asztma, szénanátha, nátha, tavaszi kötőhártyagyulladás és más eozmoísl által közvetített ál lapotok;

(o) bőrbetegségek, például pszoriázis, kontakt dsrmatitisz, ekcéma, fertőző börfekéiyek, nyitott sebek és eellulitisz;

(d) fertőző betegségek, mint a vérmérgezés, szepszises sokk, enkefáiitisz, fertőző artritisz, endotoxikus sokk, gramm-negadv sokk, Jarisrij-Herxhetmer reakció, övsömör, toxikus sokk, agy i malária, bakteriális ntemngifisz, akut légúti rendellenesség szindróma (ARDS), lyme-kór, HlV-fertőzés (TNFct-áltai fokozódó HÍV rsplikácló, reverz transzkriptáz inhibitor aktivitás TNFö gátlása);

(«) sorvadást» betegségek: rák és HÍV által okozott másodlagos leromlás;

(i) szerv-, szövet- vagy sejt-transzplantáció (például csontvelő, szaruhártya, vese, tüdő, máj, szív, bőr, hasnyálmirigy testecskék), beleértve a transzpiantátum kilökődést és a iranszplanfáttim-gszda betegséget;

(g) hatóanyag terápiából származó káros haíások, mint az amfotericin B kezelésből eredő káros hatás, az inununszuppressziv terápiából, például interleukiu-2 kezelésből eredő káros hatás, az OKT3 kezelésből eredő káros hatás, a OM-CS'F kezelésiről eredő káros hatás, a cikiosporin kezelésből eredő káros hatás és az anhfíöglikozíd kezelésből eredő káros hatás, immaoszuppressziohól eredő szájtekélyesedés és oyáíkshánytt-gyalladás;

ih) szív-érrendszeri állapotok, mint a gyulladásos válasz által kiváltott vagy fokozott keringési betegségek, például Isémia, ateroszkierézis, perifériás érbetegség, angioplaszbát kővető resztenőzís, gyulladásos aorta aneurizmus, érgynlladás, síroké, gerinoverö sérülés, szívszélhüdés, vérzéses sokk, isémía/reperfáziós sérülés, pökhálőhártya alatti vérzés, agyvérzést kővető érgőres, mellhártya gytdhsdás, szív-burok gyulladás és diabétesz sziv-érrendszerí komplikációi;

(1) dialízis, beieértbe a perítoneáiis dialízis következtében jelentkező szlvburok gyulladást;

(j) köszvény; és

ό (k) égés, sav- és lügmaráskövetkeztében j elentkező kémiai vagy hőmérséklet i trauma..

Különösen nagy jelentőségű a taiátmáaytmlí szerinti vegyületek szerv-, szövet- vagy ssjtátükeíásre adott gyulladásos válasz kezelésére történő alkalmazásának hatékonysága, például emlősnél végzett allogén vagy xenogén szövet-lranszplamáeló, keringési bántelmakra visszavezethető autömtmao betegségek és gyulladásos állapotok és ezek kezelése, beleértve az angloplasztíát, stenf behelyezést, söot behelyezést vagy' beültetést. Arra a váratlan felismerésre jutottunk, hogy egy vagy több (1) általános képletű vegyölet hatékonyan alkalmazható a gyulladásos válasz fellépése után, száz a gyulladásos választ kiváltó kór jelentkezése vagy a trauma után.

Sematatonk. egy, az adott válasz meghatározására alkalmas eljárást is, továbbá az (!) általános képletö vegyületek .adott A_2a adenozis reeeptorhslyeken vagy' -helyekhez történő in w vagy m vhro kötődésének vizsgálatára is, amely helyek az említett receptorokat tartalmazzák. A vizsgálatot az (1) általános képletö vegyölet ilyen receptorokhoz történő kötődésében hatásos mennyiségével végezzük. A receptorhelyekhez; kötött ligartdumokat tartalmazó szövetek vagy sejtek a vizsgált vegyületeknek a specifikus receptor altípusokkal szemben mutatott szelektivitásának meghatározására, a bioaktív vegyületek vérben és más. fiziológiás folyadékokban lévő mennyiségének meghatározására, vagy egy receptor hely aktiválásával kapcsolatos betegségek vagy állapotok kezelésére alkalmas potenciális terápiás szerek azonosítására használhatók, amelynek során az említett anyagokat érintkezésbe hozzuk az említett ligandttm-receptor-komplexekkel, és meghatározzuk a Uganda® elmozdulásának és/vagy az anyag .kötődésének mértékét vagy az említett anyagra adott ceiiuláris válaszát (ilyen például a c.AMP akkumulációja).

Az alábbi meghatározásokat használjuk a leírásban, ahol nincs másképp fehüntetve. Halögénatsmoit fluor-, klór-, bróm- vagy jódatomot értőnk. Álfcíl-, alkosl-, aralkií-, alkllaril- és hasonló csoportokon egyenes vagy' elágazó láocö alkilcsoportot értünk, azonban egy meghatározott csoport esetén, mmt a propilesoport”, csak az egyenes láncú csoportot értjük, az elágazó láncú izomerre, mint az ’'Í2opropil, speciálisan hivatkozunk. Árucsoporton fenilcsoportot vagy körülbelül kilenc vagy tíz győröutomot tartalmazó orto-kondenzáli blciklusos karboelklusos csoportot értünk, amelyikben legalább az együk gyűrő aromás. Hcteroaril-esoporton ót vagy hat győrűatontot, mégpedig szdnatomof és egy és négy közötti számú heteroatomot tartalmazó monoc ikiusos aromás, gySrőszéuatomján keresztül kapcsolódó gyűrűs csoportot értőnk, amelyben az említett heteroatomok nens-peroxld típusú oxigénatomok, kénatomok vagy -XÍX>- általáoos képletö csoportok lehetnek, utóbbi csoport képletében X nincs jelen vagy jelentése hidrogénalom, oxigénatom, 1 -4 szénatomos alkil-, fenil- vagy' benzileso|xttt; továbbá körülbelül nyolc és tíz közötti számú gyüröaíomot tartalmazó orto-kondenzált blciklusos heteroeíkiusfeói származó csoportot értünk, különösen egy benzolszármazékból vagy annak egy propilénből, irimeíllénbői vagy létrámért lésből származó kefvegyértékü csoporttal kondenzált származékából képzett csoportot értünk,

A szakember számára nyilvánvaló, hogy az (1) általános képletö vegyületek egynél több királís centrumot tartalmaznak, és optikailag aktív vagy racém formában izolálhatok, Előnyőseit az (1) általános képlet rtbozid része D-rlbózból származik, azaz a 3’,4’-hídroxíl-esoportok a cufcorgy&őhöz képest alfa-helyzetben, és a 2’- és 5^!-csoportok béta-helyzetben vannak (3R, 4S, 2R, 5S). Antikor a ciklohexilcsoportos lévő két csoport 4-es helyzetű, akkor ezek előnyösen transz-helyzetben vonnák. Bizonyos vegyületek polimorf formában fordulhatnak elő. Természetesen találmányunk magában foglalja a találmányunk szerinti vegyületek bármely racém, optikailag aktív, polimorf vagy sztcreolzomer formáját vagy ezek keverékeit, amelyek az itt leírt hasznos ttilspdooságokat matatják. Ezen optikailag aktív formák előállítása a szakirodalomban Ismert (például a racém formák átkrístályosltásl eljárásokkal vagy enzimes eljárásokkal történő rezolválása, optikailag aktív kiindulást anyagból végzett ♦ * szintézis, királis szmtézis vagy egy királis áifo fizison végzett kromatográfiás eiválasziás), ismert továbbá a vegyületek adenozfe agosisto hatásának meghatározása az itt leírt vizsgálatok vagy más, a szakirodalomban jól ismert vizsgálatok alkalmazásával.

Az egyes csoportok, sz-absztiluensek és tartományok esetébea az alábbiakban megadott speciális és előnyős jelentéseket csak Illusztrálás céljából adtak meg, és a csoportok és helyettesítők megbatározott tartományán belől más jelentések alkalmazása nines kizárva.

1-6 szénatornos alkilcsoport kifejezésen meti!-, etil-, propik izopropik butik, izebutii-, szek-butík pentii-, 3-pentil- vagy·' hexilcsoportot értünk. A ‘‘cikiö&O” kifejezés magában foglalja a feidkloalkíl- (például norboroil- vagy 2,2,2.-bieikIöohtii-} és tneikloalkíl- (például adámantil-) csoportokat, melyek adott esetben egv vagy- két nitrogén-, oxigén- és/vagy kén-atomot tartalmaznak, A cikioalkll kifejezés a (cikloa!kil)-a!kil-eso|jortol is magában foglalja. Tehát a 3-6 szénatomos eikfoulkíksopori ciklopropil-, cikiobutii-, cikiopentil- vagy cSítohexilesoport lehet, a (3-6 szénatornos cíkioalkil)-<l-ó szénatomos aikilj-csoport ciklopropiimetil-, ciklobtttilöíeüi-, cíidopentilmetil-, ciklohexilmetil-, 2-ciklopropiietii-, 2-ciklobutÍfetíl-, 2-cikfopentetelil~ vagy 2 -cikiohexsfeti l-csoport lehet.

Az 1-6 széoatomos alkoxicsoport metoxk, etoxi-, propoxi-, izöpropoxi-, bútort-, izöbutoxk szek-bttíoxi-, pentoxi-, 3-pentoxí- vagy hexiloxi-csoport tehet, a 2-6 saénatoraos alkenilesöport víail~, allik, l-propenil-, 2-propesil-, 1-haíeail-, 2-huteoil-, 3-hutoník i-penteaik 2-penteaii-, 3’pentenil-, 4-peníenik 1-feexenii-, 2-hexenil-, 3-feexeail-, á-hexenil- vagy 5-feexenilcsoport lehet, a 2-6 szérsatomos alkmiiesoporí etsisl-,

1- propiník 2-propinsl-, 1-bottól-, 2-butlnil-, 3-btóni?-, 1-peatinil-, 2-pentiöi;-, 3~peminik 4-pentmíi-, khexínik

2- hexinil-, 3-feexiníl-, 4-hexinil- vagy 5-hexMcsopori lehet, az 1-6 széastoroos alkanoilcsoport acetil-, propánod- vagy butanoilcsoport lehet, a haíögén~{ 1-6 széoatomos alkdj-cssport jódmelil-, bróaanctii-, kforuselíl-, flaonnetil-, bifltturmetil-, 2-klóreh'k 2-3uoreíik 2,2,2-írifiuoretil- vagy pentaíluoredl-esoport tehet, a hidroxi-(i~ő széoatomos aikiij-esoport hidroxímetik l-hídroxietih, 2-bidroxietil-, 1 -hsdroxípropík 2-htóoxlpíOpii-, 3-hidroxipröpil·, l-hidroxibutli-, 4-hidroxibutik 1-hidroxípentik 5-bidroxÍpentik, l-bidroxihexil- vagy ő-hidroxihsxii-csoport lehet, az (i-ó szénatornos aikoxijksrbond-esoport («CöjR² általános képfetd csoport) metoxikarbonib, etoxikarbomk propoxikarbooii-, izopropoxíksrboníl-, butoxikarboníi-, pentoxtkarbonil- -vagy hexiloxíkttrfeoníí-esoport lobot, az 1-6 szénatomos aiklhfocsoport metütio-, ethtio-, propihso-, izopropiltío-, buíiltio-, Izoboiiltfo-, pentiliio- vagy hexiltio-csoport lehet, a 2-6 szénatomos aikanoiloxi-csoport acetoxí-, .propanoíioxk butaoohoxi-, izobutarsoifoxl-, pentauoiloxi- vagy hexanoífoxi-csoport lehet, az ariicsoport fond-, indenii- vagy naftl lesöpört lehet·, és a heteroanl-csoport furil-, imidazölil-, trtazolil-, triaziml-, oxazoil-, izexazoi!-, tiazoill-, izotíazoiil-, pirazolík pírrolii-, piraztói-, tetrazolii-, piridii-(vagy esnek N-oxidja), tientíl-, pirimidluil- (vagy ősnek N-exidjs), fedőül-, ízokmohl- (vagy ennek N-oxldjai vagy kísohtesoport (vagy osmok N-cxidja) leheti

R jelentése előnyösen mstfeo-, mostemeislsrmno- vagy ciklopröpdamíno-osoport.

R^l jelentése előnyösen karboxd- vagy (1-4 szánalmos alkoxí)-karboail-ciktehexil-(l-d szénatumos aikilj-csoport.

S² jelentése előnyösen hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, például roetd- vagy etüesoport,

R³ jelentése előnyösen hidrogénatom, meni- vagy fenilcsopor;.

R* jelentése előnyösen hidrogénatom;, metll- vagy feoüosoport.

* * * *«* **Χ **

X

Ζ jelentése előnyösen -CH₂- vagy -CH₂~CK₂-· képtető csoport.

X. jelentése előnyösen -CO₂R² általános képtetü csoport vagy 2-5 szénatomos alkaaoilmedí- vagy amídoesoport.

n értéke előnyösen 1.

Előnyösek: azok az (1) általános képletű vegyítetek, amelyek képletében R jelentése hidrogénatom, X jelentése etHaminokarbonil-esoport és R^} jelentése 4-katboelklöbexilmetil-esoport (DWFi-14őa>, R^! jelentése 4-metoxíkarfeoíiíSciklohexihnetil-csoport (D\YM-I4öe) vagy R* jelentése á-acetoxlmetílciklohexllra^al-csopcrt (JMR-193), Ezeket a vegyületeket sz <£) és (F) általános képlettel Írhatjuk le, ahol az (S) általános képlet a DWH-146 jelű vegyöfetsek (sav: X jelentése hisrogénatom, azaz DWH-146a jelű vegyület, észter X jelentése metilcsoport, azaz DWH-i4óe jelű vegyőlet) és az (F) képlet a JMR-193 jelű vegyü letoek felel meg.

A DWH-;l4óe jelű vegyület, azaz: a metlM-[34ö-£ímmo-9-(S-[(etíl3nijno)-karbonilj-3,4-dihidriJxitotrahidro-Z-fur;m!l-9R-2-puriml}-2~propmslj-l -cíklohexánkarboxllát előállítását ágy végezzük. hogy egy jőd-adenozin-szérrsjazékot, az (N-etsMMezoxi-l -(amÍ3to-2-jód-9H-purln-9-il}-g-D-rtboforanuoramid)-ot Pd” katalizátor jelenlétében metil-4-(2-pmpittí:l)-1 -ciklöhexánkarfeöxdáítal összekapcsoljuk, A jód-adesoziít-származák előállítását guanóimból végezzük. A guaaozinf először ecetsav-smhldrlddel kezeljük, amelynek. során a cakor-bidroxilcsoportokon acetélokat alakítunk ki, maid a δ-os helyzetben tetraroeUl-ammónionvldoriddal és feszforoxiklorlddal klórozzak. A 2-es helyzet jódozását módosított 'Sandmeyer reakcióval végezzük, majd a ó-os helyzetű kjöratomot és a cukor neetátokat ammóniával helyettesítjük. A 2'- és o'-helysstü hldroxHcsoportokat védjük, és az acetonidot és az 5-hdyzetü hidroxilcsoport^ savvá jódozzuk káHum-persnangseáítal. A 2-és 3‘-helyzeíü acetonid védócsopordát eltávehljsk, az S’-heiyzeíő savat Fisfeer észterezésnek vetjük alá etanollal, és a képződő etil-észtert etílatninaaí étii-amlddá alakítjuk ét, Így állítjuk: elő az N-etiM’-de2OXÍ-r-(mniho-2-jód>9H-purio-9-ii}-^-D-ribofura«uotomsdot

Az íícetdén-(tnetik4-(2-propin:il)-Í~cik::lohöxánkarboxi1át)-of transz-lA-ciklohexándlmetanolböl kiindulva állítjuk elő. Először a transz-dinit nionotozliáttá alakítsak, majd a tozdátot egy acetilén-anionnal helyettesítjük. A képződő hldrosll-aceíllén-fajta hidroxilcsoportját Jones -reagens alkalmazáséval savvá oxidáljuk, majd (írimetiiszilil)-diazometánnal metilezzük, igy állítják elő a ínettl^-CS-propinírpl-ciltlohsxánkarboxílátoí.

A kapcsolási reakciót a fent ismertetett körülmények között hajtjuk végre. 0,5 ml N.N-dimetílformamid, 1 ml acetonitril, 0,25 ml írletöamm és. 25 mg (0,06 mmól) N-etíM^:-dezoxil'-tamme-2-jéd-9H-pürf«~9!l>p-D-ribofurarnÍroamid oldatához 1 mg (2 mól%) bisz{tn(eniifoszfsn)-palládium-klorídot .és 0,86 mg. (5 mőM) réz(i}~jodidöf adunk, A képződd keverékhez: 54 mg (9,3 mmól) mstil-4-(2-prp!nii)-l-dklöhexánkarhoxilatot adunk, és a reakcióelegyet niírogénalrnoszférában 16 órán át keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a visszamaradó anyagot llash-kroföstogránának vetjük alá 20 %-os klorotormos metanotelegy alkalmazásával (R_{ ~ 8,45), így 19 mg nyersfehér színű metil-4-p-(6-a!tíino-9-(5-((etilamino)-kurbof3Ílj-3,4-dihídroxífep-ahídro-Z-f«ranil)~9H-2-purlnii}-2-propÍT!Ílj-i-ciklohexánkarboxi látót (DWH-iáóe) állítok, elő, olvadáspontja 125 ®C (bomlik).

A DWH-i4őe és a JMR193 lényegesen hatásosabb inhibitorok a gyulladásos modeii-reodszetekben vizsgálva, mint a CGS2I688 referencisvegytíleí, a 2-(p-(karboxidsi)-lenii-etiiámino]~5^í-'N-et5Íkarboxamidoadenozin, Például a DWH~146e körülbelül 8ő-szor hatásosabb az Α_2Λ receptorokon, és 40-szer szelektívebb tulajdonságú az A_2a receptorra nézve az A_s receptorral szemben, mint a CGS2I680,

A győgyászatílag elfogadható- sók például szerves savaddíeiós sók, amelyeket fiziológiásán elfogadható anionokat alkotó savakkal képeznek, Ilyenek a tozílát, meíánszulfonát, maleát, acetát, cihát, snalottát, tartarát, szakiéinál, benzoát, aszkorbáí, eí-ketogfetarát és a-glioerofoszfát. Megfelelő szervetlen sók is képezhetők, például hídroklorid, szulfát, nitrát, bikarbónái vagy karbonátsók.

A gyógyászatilag elfogadható sók a szakirodalomban jól kínért szokásos eljárásokkal állíthatók elő, például egy megfelelően bázlsos vegyület, példáét egy amin megfelelő fiziológiásán elfogadható aniont tartalmazó savval történő reagáItatásával. A karbonsavak alkálifomsói (példán! nátrium-, kálium- vagy Ikltmtsói) vagy alkáhfóldfémsói (például kaleíumsói} is előállíthatok.

Az (T) általános képletü vegyületek gyógyszerkészítményekké fortnálhaték, és egy emlősnek, például hamsán betegnek a beadást ót megválasztásától feggően különböző formákba» beadhatók, például orálisan vagy parenteráhsan, intravénásán, intramaszknlárisan, toptkábsan vagy szubkután úton.

Tehát a találmányunk szerinti készítmény beadható szisztémása», például -orálisan, egy gyógyászatifeg .elfogadható hordozóval, |tóldául inért higstöszsrrel vagy emészthetőfehetó hordozóval kombinálva. Kemény vagy lágy zsefetinkapssalákba zárhatók, vagy tablettákká préselhetök vagy közvetlenül is adagolhatok a beteg étrendjét képező élelmiszerbe. Orális terápiás beadás esetén a festőanyag egy vagy több adalékanyaggal kombinálható, és emészthető tabletták, hukkálís tabletták, pirulák, kapszulák, eilxírek, szuszpenzíók, szirupok, ostyák és hasonlók formájában használható. Ezek a készítmények legalább 0,1 % hatóanyagot tartalmaznak. A készítmények százalékos összetétele természetesen váltózhat, és általában egy adott egyságdőzas forma tömegére .számítva körülbelül 2% ás körülbelül óö % közötti. A hatóanyag mennyiségét a terápiás hatású készítményekben a hatásos dőzisszist eléréséhez megfelelően állítjuk be.

A tabletták, pirulák, pasztillák, kapszulák és hasonlók az alábbiakat íartahnazhatlák; kötőanyagok, mint tragírntgump afcácia, kukorícakeményitő vagy zselatin; kötőanyagok, mlat a dikáieitmt-foszfát; diszintegránsok, mint a ktíkoricakeményiíó, burgoayakeméayitő, aiginsav és hasonlók; síkos írószerek, mini a rnagnézium-sztearat; és édesítőszerek, mint a szacharóz, fruktóz, laktóz vagy aszpartám vagy Ízesítőszerek, mint a borsmenta, kaultma olaj vagy cseresznye Ízesítőszer adagolható-. Amikor egységdózis formaként .kapszulát használunk, ez a fenti típusú anyagok melléit egy folyékony hordozót, például növényi olajat vagy polietilén-glikolí is tartalmazhat Különböző más anyagok ís alkalmazhatók bevonatként vagy a szilárd egységdózfe forma fizikai formájának egyéb módosítása céljából. Például a tabletták, pirulák vagy' kapszulák bevonhatók zselatinnal, viasszal, sbeifekkal vagy cukorral és hasonlókkal. A szirup vagy elixít a hatóanyag mellett édesítőszerként szacharózt vagy fruktózt, tartósítószerként metil- és pröpiiparabéneket, továbbá festékanyagot és ízesítőszert, például cseresznye vagy narancs izü Ízesítőszert tartalmazhat. Természeteset; bármelyik egységdözis forma előállításánál olyan anyagok használhatók, amelyek győgyászatílag elfogadhatók és alapvetően nem mérgezóek az alkalmazott mennyiségben. Ezen túlmenően a hatóanyag nyújtott felszabadulási készítményekben és eszközökben ís alkalmazható.

A hatóanyag beadható intravénás vagy feíraperhoneáíis infúzióban vagy injekcióban. A hatóanyag vagy -sójának oldata előállítható vízben, adott esetben egy nem-toxikus felületaktív szemel összekeverve. Diszperziók is elöálníhatók glicerinben, folyékony pohetrlés-glikotókban, triaoetinfeen vagy ezek keverékében vagy olajokban. A- tárolás és alkalmazás szokásos körülményei között ezek a. készítmények tartósítószer tartalmaznak a mikroorganizmusok szaporodásának nregelőzése céljából.

*-*· * «»♦ * *

Az injekcióim vagy infúzióban beadható gyógyászati dézssformák .steril vizes oldatok vagy diszperziók vagy hatóanyagot tartalmazó steril porok lehetnek, amelyek adott esetben Hposzótnákba vannak, kapszulázva, amelyek felhasználás előtt sterilen injektálható vagy infúzióban beadható oldatokká vagy diszperziókká alakíthatók át. Minden esetben a kész dóztsformánák sterilnek, folyékonynak és stabilnak kell lembe a gyártás és tárolás körülményei között. Á folyékony hordozó lehet oldószer vagy folyékony diszpergáló közeg, amely például vizet, etanoit, egy pokoli (például glicerint, propilén-giikoh, folyékony políeíílén-gllkolt és hasonlókat), növényi olajokat, nem-toxikus glsceril-észfereket vagy ezek megfelelő keverékeit tartalmazza. A megfelelő folyékonyság megvalósítható például hposzóma képződéssel, diszperziók esetébe» a kívánt részecskeméret megtartásával vagy felületaktív anyagok alkalmazásával, A mikroorganizmusok hatásának megelőzése különböző amibakteriális és gombaellenes szerek, például parabének. klőrbutanol, fenol, szorbmsáv, timerozál és hasonlók alkalmazásával valósítható meg. Sok esetben előnyösen ízotóniás szereket, például cukrokat, puffereket vagy sáírlmn-kteridof alkalmazunk. Az injektálható készitmények nyújtott abszorpciója abszorpciót késleltető anyagok, például aiumíHÍwí-monosrtearát és zselatin· készítmények alkalmazásával hozható létre,

A steril injektálható oldatokat úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyag kívánt mennyiségét egy megfelelő oldószerben szükség esetén a fent megadott egyéb komponensekkel keverjük Össze, majd szűrve- sterilizáljuk, A steril injektálható oldatok előállítására alkalmas steril porok esetéit az előállílási előnyösen vákuamszáritáson és fagyasztva történő szárításon alapuló eljárásokkal végezzük, amellyel a hatóanyagot plusz az előzőleg sterilen szűrt oldatban jelenlévő bármilyen további alkotórészt tartalmazó port: állítunk elő.

Helyi beadás esetén a találmányunk szerinti vegyüieteket tiszta formában alkalmazhatjuk, például ha ezek folyékonyak. Azonban általában kívánatosabb ezeket ά bőrön alkalmazható készítmények formájúban használni derroaiológsailag elfogadható hordozóval kombinálva, amely lehet szilárd vagy folyékony.

A jól alkalmazható szilárd hordozók, például finoman eloszlatott szilárd anyagok, mint a talkum, agyag, mikrokristályos cellulóz, szlílcíum-dioxíd, aluminiam-oxíd és hasonlók, lói alkalmazható folyékony hordozók például a víz, alkoholok vagy glíkolok vagy zsir-alkohol/gltfeöl keverékek, amelyekben a találmányunk szerinti vegyületek hatásos mennyiségben oldva vagy díszpergálva lehetnek, adott esetben nem-toxikus felületaktív anyagok segítségével. Segédanyagként például i Hatos ítöanyagok és további mikrőbaeilenes anyagok is adagolhatok a meghatározott alkalmazás szempontjából kívánatos tulajdonságok optimál szólása céljából. A képződő folyékony készítmények abszorbens párnákon is alkalmazhatók, amelyeket impregnált kötéseknél és más kötszereknél használhatunk vagy pompás típusú vagy aeroszol porlasztókkal az érintett területre porlaszíhaíók.

Söritök, például: szintetikus polimerek, zsírsavak, zsírsavas sók és észterek, zsír-alkoholok, módosított cellulóz-származékok vagy módosított ásványi anyagok is alkalmazhatok folyékony hordozókban kenhető paszták, gélek, kenőcsök, szappanok és hasonlók előállítása céljából, amelyek közvetlenül felvihetők a felhasználó bőrére.

Az (I) általános képietű vegyületek bőrre történő fel juttatására használható alkalmas áermatolőglai készítményeket Ismertették például Jacquet és munkatársai (4 608 392 számú amerikai egyesült államokbeli szabadakul leírás), Geria (4 992 478 szánul amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), Smíth és munkatársai <4 559 157 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) és Wenzman (4 820 5β8 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás}.

Áz (I) általános képletü vegyületek dózisát ezek /« vfe-n aktivitásának és áltatoodélfeken mutatott fe vivő aktivitásának összehasonlításával határozhatjuk meg. Az egereknél és más állatoknál meghatározott hatásos

II dózis emberekre történő extrapolálása a szakirodalomban ismert {pékiául 4 938' 949 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból). A IV típusú EDE Inhibitorok esetében használható dózis a. szakirodalomban Ismert {például 5 87? 18Ö számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás 12. oszlopában).

Az (I) általános képletö vegyúiet(ek) koneentráeiőja egy folyékony készítményben, például egy iotionban általában körülbelül 8,1 tömeg% és 25 tömeg% közötti, előnyösen körülbelül 0,5 tömeg% és 10 tömegé® közötti. Egy félig szilárd vagy szilárd készítményben, például gélben vagy porban körülbelül 8,1 tömsg% és 5 tömeg% közötti, előnyösen körülbelül 0,5 tőmeg% és 2,5 tömsg% közötti koncentrációt használunk.

Á vegyület vagy aktív sója vagy származéka kezeléshez szükséges mennyisége nem csak az; adott kiválasztott sótól, de a beadás tájától, a kezelendő állapot természetétől és a beteg életkorától és állapotától is lügg, és ennek meghatározása kizárólag a kezelő orvos vagy klinikai orvos hatáskörébe tartozik.

Azonban a megfelelő dózis általában testtömegre számítva naponta körülbelül 0,5 gg/kg és körülbelül löö aa-kg közötti, például körülbelül lő pg/klg és körülbelül 75 ggdeg közötti, például a kezelésben részesülő testtömegére számítva naponta 3 pg/kg és körülbelül Sö pg/kg közötti, előnyösen 8 pg/kg/nap és 98 pg/kg/nap közötti, legelőnyösebben 15 aa/kg/nap és őö ug/kgtóap közötti tartományban van.

A vegyületet szokás szerint egységdózis formában adjak be, amely egységdózis formánként például 5 gg és 1808 pg közötti, előnyösen lö pg és 7'58 pg közötti, legelőnyösebben .50 pg és 50Ö pg közötti hatóanyagot tartalmaz.

Ideális esőiben a hatóanyagot úgy adjak he, hogy az körülbelül 0,1 runól/l és körülbelül 10 nmóitt közötti, előnyösen körülbelül 0,2 nmók'l és 10 nmől/l közötti, legelőnyösebben körülbelül 0,5 nmöl/l és körülbelül 5 nmői/l közötti legnagyobb plazma koncentrációi ér el. Ez. például sóoldattal készült 0,05 %-os és 5 %-os közötti koncentrációjú hatóanyag-oldatot tartalmazó intravénás injekcióval valósítható meg, vagy körülbelül 1 gg és 1Θ0 pg közötti mennyiségű hatóanyagot tartalmazó bólüsz formájában adható be. A kívánt vérkoncentráció körülbelül 0,0! agdsg/óra és 5,8 pg/kg/óra közötti koncentrációt biztosító folyamatos Infúzióval vagy körülbelül 9,4 .ugZkg és 15 ug/'kg közötti mennyiségű hatóanyago(ka)t tartalmazó időszakosan adagolt infúzióval tartható fenn.

A kívánt dózist általában egyetlen dózisban vagy megfelelő időtartamokban adagolt megosztott dózisokban adhatjuk be, például naponta két, három, négy vagy több aldózbhsn. Maga az aidózis is tovább osztható több külön beadásra, mint példátd egy ínszulfátorböl történő többszöri inhalálás vagy több csepp adagolása szembe- Előnyős például, ha a találmányunk szerinti készítményeket nyújtott időtartam alatt intravénásán adjuk be a gyulladást kiváltó bánfáimat követően.

A találmányunk szerinti vegyületek A_3A adenozin receptor agonísta (vagy amagomsta) tulajdonságát a szakirodalomban jói ismert farmakolőgíai modellek alkalmazásúval vagy az alábbiakban Ismertetett vizsgálat alkalmazásával határozhatjuk meg,

Találntónyunkat az alábbi részletes példákban mutatjuk he közelebbiét ezek a példák a találmányunk illusztrálását szolgálják, és találmányunk nem korlátozódik az ezekben foglaltakra,

A következő védjegyek: Celite, Fieoll, 2enecs és 1CN, t példa trans?,-( I -i4-Hídroximeííi)-cíklohe:«lj-rnetíÍ)-4-melilbenzolszultbnát (5,2 jelű vegyület) g (79 mmól) [4~(hidroximetil)-olklobexilj-metan-1 -ol (5.1 jelű vegyület) 780 mi tetrahídrofuránnal készült oldatához. I,Ö8 g ¢70 mmól) nátrium-lndrldet adunk, és l órán át keverjük, ezután 13,3 g (70 mmól) p-tofoötezulfosil-kteridot adunk hozzá, és a teakdóelegyet 5 órán át visszafolyó hűtő alatt forraljak. A reakeaóelegyet 0 *C-m hötjok, és a reakciót vízzel lassan leállítják a reaktív hidrld teljes elfogyásáig. A hidrld elbontása atá« a reakcióé legyet 700 ml: éterrel ingójuk és 2-szer 796 ml 16 %~os vizes kálium-karbosát'Okiaítal extraháljuk, A szerves oldatokat nátrium-szulfát alkalmazásával vfemeatesfijük, ós az oldószert csökkentett nyomásé» eltávolítják. A tormákéi sailikagélsn oszfogkrom&iográfisval tisztítjuk, eloenskéni 5:95 arányú aceton-dlklérmetán elegyet használunk, így állítjuk elő az 5,2 jelű vegyületet 35 %-os kitermeléssel.

*H NMR (300 MHz, CDC1₅) S 7,75 (d, I ~ 8,3 Hz, 2H), 7,32 (d, 1 - 8,1 Hz, 2H), 3,79 (d, í - 6,35 Hz, 2H). 3,39 « 3 - 6,35 Hz, 2H), 2,42 (s, 3H), 1,75 (m, 4H), 1,59 (®, IH), 1,37 (m, IK). 0,9 (m, 4H).

ⁿC NMR (309 MHz, €DCÍ_S) 8 145,3, 133,4, 130,3, 130,3, 128,3, 128,3, 75,68, 68,5, 40,6, 37,8, 28,9, 28,9, ,28,9,28,9,22,1.

2. példa (4~Prop-2-ÍBllcíkioÍ5exil)-met3n~ Hol (5.3 jelű vegyüiet)

g. {1Ö mmól) 5.2 jelű vegyüiet 40 disnetil-szultbxiddal készült, oldatához nagyon lassan 6,4 g (79 tntnőtl 90 66-os lítjusn-acetílíd-etnénáiarnm-komplexet adank. A reakelóelegyet 5 naivon át keverjük, majd lassan Θ °C-oa vízzel leállítjuk. A keveréket 309 ml éterrel hígítjuk és 3 x 200 ml telített vizes awatóum-kloriddal extraháljok. A szerves oldatokat nátríunt-szulfátou vízmentesítjük. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a terméket szilíkagélen osziopkromatogtánávtil tisztítjuk, elugnsként 20:80 arányú etíl-aceíát/hexán elegyet használunk, így állítjuk éld az 5.3 jelű vegyületet 85 %-oss kitermeléssel.

^SH NMR (300 MHz, CDC1_S) S 3,41 (d, 3 = 6,5 Hz, 2H), 2,07 (dd, í « 2,5, 6,5 Hz, 2H), 1,96-1,75 (m, 5H), 1,41 (m, 2H), 0,95 (m, 4).

^i?C NMR (300 MHz. CDCh) S 83.8, 69.6, 68,9, 40,7, 37,7, 32,3, 32,3,29,6,29,6, 26,5·.

4-Prop-2~jnílcíkíohexánksrbonsav (5.4 jelö vegyüiet)

1,1 g (11 mmól) krőm-írfexid 40 ml (27 mmól) 1,5 mó-l/l-es kénsav-oidsttal készült oldatát 0 ^sC-on tartjuk, és 2 óra alatt 0,46 g (3 mmól) 5.3 jelá vegyületet adunk hozzá SÖ ml acetenban. A reakcióé legyet további 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióé legyet .209 ml éterrel hígítják, és vízzel kétszer extraháljuk. A szerves oldatokat nátelum-szulíáton vízmentes síjük. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a terméket szilíkagélen oszfopkro:naíográfíával tisztítjuk, 70:30 arányú aeeíon-diklérmeíán elegy alkalmazásával, igy állítjuk elő az 5.4 jelű vegyületet 75 %-os kitermeléssel ^;H NMR (309 MHz, CÖCI₃) δ 2,24 (dt, J - 3,66, 12,1 Hz, IH), 2,10 idd, 5 - 2,7, 6,5 Hz, 2H), 2,04-1,89 (m, 5H), 1,76 (d, 3 - 2,3 Hz, IH), 1,43 (dq, 1 - 3,28, 13,1 Hz, 2H), 1,93 ídq, I - 3,28, 13,1 Hz, 2H).

'••C NMR (300 MHz, CÖCi₃) δ 183,2,83,3,69,9, 43,4, 36,7,3 1,8, 28,9, 26,3.

MetiI-4-prop-2-inlIeiklohexánkarböxílát (5 J jelű vegyüiet)

0,34 g (2 mmól) 5,4 jelű vegyüiet 15 mi 3:7 arányú metaookdikiőrmetán eleggyel készült oldatához 1 ml 2,0 mól/í-es bexános (trimetilsziiilidlszometánt (2 mmól) adunk, Az oldószereket csökkentett nyomásos eltávolítjuk, így a kiindulási anyag iöö %-ban átalakul a termékké.

^SH NMR (309 MHz, CDClj) Ó 2,24 (dt, j - 3,66, 12,1 Hz, IH). 2,10 (dd, i «= 2,7, 6,5 Hz, 2H), 2,06 (dd, 1 - 1,54, 6,54 Hz, IH), 2,061,89 (m, 3H), 1,76 (d, J - 2,3 Hz, IH), 1,43 (dq, 3 -3,28, 13,1 Hz, 2H), 1,03 * * (dq, .1 « 3,2.8,133 Hz, 2H).

°C NMR (300 MHz, CDCh) S 176,8,83,3, 69,8, 51,9,43,4,36,7,31,9,29,2,2ő,3.

S. példa ((2R,3R,4R,5R)~3,4-<haceti1oxs-5-(2-a!n!X!o-6-oxnhidropurin-9-il)-oxí>l3S-2-!l]-metíl-acetát (6.2 jeíö vcgyfikdj

113 g (0,4 mól) vízmentes guasozin (63 jelű vegyüiet), 240 ml (2,5 mól) ecetsav-mtódrid, 120 ml vízmentes píriáin és· 320 mi vízmentes dimeíil-fórmmníd sznszpenzióját 3,75 órán át 75 ^-on melegítjük, közben a hőmérsékletet m engedjük SŐ ’C fölé emelkedni, Ezafás a tiszta oldatot 2-pröpanollaí töltőit 3-hteres Etíenmyer lombikba visszük át Az oldatot szobahőmérsékletre hötjük, ekkor a kristályosodás megkezdődik, és egy éjszakán át 4 ®€-on tartjuk, Fehér szilárd csapadékot szőrünk ki, ezt 2-propauollal mossuk és 2-propanolból átkristályosftjeát, így állítjuk elő a 6.2 jelű vegyüíetet 96 %-os kitermeléssel ’i-lNMR (300 MHz, CD€%>S 8,20 (s, IH, H-8), 6,0 (d, 1 - 5,41 Hz, 1H, 5,75 (ί, H - 5,39 Hz, IH, H-23, 5,56 (U ~ 5,0, H-3’), 4,41 (m, 3H, H-4',5’), 2,14 (s, 3«, Ac), 231 (s, 3H, Ac), 2,10 <s, 311, Ac).

”€ NMR (300 MHz, CD_;iOD) § 171,0, 170,3, 170,2, 157,7, 154,8, 152,4, 136,7, 117,7, 85,5, 80,4, 73,0, 71,3, 64,0, 31,3,2.1,2, 21,0, ((2R,3E,4R,SR)-3.,4-di<ícet!lox!-5-(2-amlno-6~kIörpunn-9~!Í)-oxolan~2-i1j-meí!l-acetát (6.3 jelű vagyaiét)

Egy 1000 ml-es lombikba 80 g (0,195 mól) K2R,3.R,4R,5R>3,4-dtaeetíloxt-5-C2-ammo6-öxohldropurin-9-il)-exolan-2-iíj-f»etn-aeetáíol (6.2 jelit vegyüiet), 44 g (0,4 mól) tetrametiiammóíóum-kloridot, 400 mi vlzmexítes aeetoniirsít és 25 ml Ν,Ν-dimetilanílín mérünk be, A lombikot jeges sós iürdőhe helyezzük ás 2 ®C-ía hötjük. Ehhez az oldalhoz eseppenként 1Q7 ml (135 mól) foszforoxi-kforidot (POCI:·,) adunk a hőmérséklet 5 ®C alatt tartásához szükséges sebességgel, azaz 45 perc alatt. Ezután a lombikot a jeges fürdőről eltávolítjuk, egy hűtőhöz csatlakoztatjuk, olajfürdőbe helyezzük és lö percig visszafolyató hűtő alatt forraljuk, közben az oldat vörösesbarna színűre változik. Ezután az oldószert csökkentért nyomáson elpárologtatjuk, Így ©Újszerű anyagot kapunk, amelyet 1000 g jeget és 400 ml kloroformot tartalmazó fözöpofeárba viszünk át és 1,5 órán át hagyjuk keveredik az esetleg visszamaradó foszforoxi-klorid (POCÍ?) elbontása céljából. A szerves fázist ezután eltávolítjuk, es a vizes fázist 3 x 50 ml kloroformmal extrahálptk és összeSntjük a szerves fosriss&L Az összeöntört szerves oldatokat ezután Sö mi vízzel visszaextraháljuk, majd 260 mi telített nátrlujn-hidrogén-karbosrit-oídsttal keverjük össze. A szerves oldatokat nátríüm-hldrogán-karhonát-öidsöaí tovább «xtraháljuk. a vizes exíraktum semtegesítődsséig, azaz kétszer. A szerves oldatokat végül sós vízzel extraháíjuk. majd magnézlnm-szulföt fölött vízmentesitjük 16 órán át. Az oldathoz 800 ml 2-propanok adunk, ezután az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk,. Az olajszmí szilárd anyaghoz 200 ml 2-prepanc-lt adunk, és az oldatot egy éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. A kristályos terméket, kiszűrjük, mossak és egy éjszakán át szárítjuk, .így állítjuk elő a 6.3 jelű vegyüíetet 77 %-os ^termeléssel.

^SH NMR (300 MHz, CD_:,OD) S 8,31 (s, IH, H-8), ?,0Ö (s, 2H, NH₂), 6,06 (d. 3 ~ 5,8 Hz,. IH, Η-Γ), 5,83 (t. 3 - 6,16 Hz, IH, 171,0, 170,4, 170,2, 160,8, 154,6, 150,8, 1412, 124,5, 85,8, 80,6, 72,8, 71,2, 63,9, 2:1,4,21,3,21,1·

Μ

7. példa ((2R,3-R,4R,5R>3,4-dlac€ílíoxi-5^:-(6-klór-2.-jödpmin-9-tl)-oxolan-2-il}-metil-^etót (6,4 jelű vegyület)

5,12 g (12 mmól) <(2R,3R,4R,5R)-3,4-dtotilőxt-5-(2-mním>-6«kí&pörin-9-ll)-oxólan-2-íQ»metl-l-acetát (6.3 jelű vegyület), 3,04 g (12 mmöl) elemi jód (G), 10 ml (124 mmól) metttón-jodld (CHd·,·) és 2,4 g (Í2,ó mmól) réz(í)-jödid ÍCui) 60 ml tsírahiáröforámtai készült keverékéhez 5 mi (37 mmól) szoamíí-mírilt adunk. A keveréket 45 percig visszafolyatő hűtő alatt forraljuk, majd szobahőmérsékletre hagyjuk hóiul ehhez az oldatos 100 mi telheti nátrítimtlosznífát-oldatot (NajS^Oj) adunk, ami a jódtól származó vöröses elszíneződést megszünteti. A vizes oldatot háromszor kloroformmal extraháljuk, ezt összegyűjtjük, magnázíum-szuStatou vízmentesltjOk és csökkentett nyomáson bepárőljuk, Ezután a terméket szííikagél oszlopon tisztítjuk 98:2 arányú kloroform-metanol elegy alkalmazásával így állítjuk elő a i(2R,3R,4R,5R}-3,4-diaeetdoxí~5-(6-klor-2-jódpt3rm-9~íl)-oxolan-2-iri-metil-aeetáíot‘ (6.4 jelű vegyidet), A kitermelés etanolból történő átkristályoslíás után 80 %,

Ή WR(360 MHz, CDCla) § 8,29 (s. IH, H-S), 6,17 (d, J - 5,41 Hz, IH, H~1 ’), 5,75 (í, J - 5,39 Hz, 1 Η, H-2’), 5,56 (t, J - 5,46 Hz, IH, H-3H, 4,38 (m, 3H, H-4’,5’), 2,14 (s. IH, Ac>, 2,11 (s, IH, Ac), 2,10 (s, IH, Ac),

8. példa (4S,2R,3K<5R)”2-(6-amjno-2-jódpurÍ!t~9-il)-5-(hidroxín5etil)-oxo.lán-3_s4-díol <6.3 jelű vegyölet)

Egy lombikba bemérünk 6,0 g (11,1 rntaóíj [(2R,3R,4R,5R}-3,4-diueetíloxi-5-(6-kíör-2-jódpnrin-9-d)-oxalaii-2-8j-metil-aceíót0t. (6,4 jelű vegyölet), és -78 °C-on 160 ml folyékony ammóniát átok hozzá, majd az oldatot 6 órán át keverjük. Ezután szobulfomérsékietre hagyjuk melegedni, ás egy éjszakán- át állni hagyjuk, közben- az ammóniát elpárologtatisik, igy barna, színű olaj képződik. A terméket forró izopropsnolból kristályosítjuk, így állítjuk elő a cím szerinti vegyületet (6.5 jelű vegyölet} 80-%-os kitermeléssel olvadáspont: 143-145 °C, r.f. ~ 0.6 20 %-o$ MeOH/CHCÍs-han,

Ή NMR (306 MHz, DMSO-de). δ 8,24 (1, l.H), 7,68(s, 2H), .5,75 (d, J - 6,16, IH), 5,42(d, J « 5,40 Hz, IH), 5,16 (á, J «= 4,62 Hz, 1H), 4,99 (t, 3 -~ 5,39 Hz, ÍH), 4,67 (d, 5 - 4,8í Hz, Hft 4,96 (d, J = 3,37 Hz, l'H), 3,89 (m, IH), 3,54 (m, 2H).

9. példa ((lR,2R,4R,5R)-4(ó-ammo-2-jódptHÚt-9-il)-7,7-dimetil-3,6,S-írioxabiciklo(3.3.6jokt-2-ilj-fneían-l-ol (6.6 jelű vegyület)

2,9 g (5,08 mmól) <4S,2R,3R^R)-2-(6-amm©-2-j-ódpurin-9-íl)-5“(h-ttoxímetit>oxulá«}-3,4-áleí (6.5 jelé vegyölet) 100 mi aeetorsnal készüli oldatához 9,6 g p-foluoiszuifonsavat és 5 ml- dímeíöxipropánt adónk. A reakciőeiegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, ekkor 15 g trátrjum-hídrogen-karbooátot adunk hozzá, majd további 3 órán át kevesjük, A visszamaradó anyagot etü-aeetáttal kétszer mossak. A szörlefot csökkentett nyomáson hepároljuk. Λ visszamaradó anyagot szilikagéíosziepon kromatografáljuk 1:99 arányó metanol -kloroform elegy alkalmazásával igy állítjuk elő a cím -szerinti vegyületet (6.5 jel vegyidet) szilárd anyag formájában 72 %-os kitermeléssel. Olvadáspont: 185-18? °C.

’H NMR (300 MHz, DMSCM) S 8,22 (s, IH, H-8),7,69'<s, 2H, NHj), 6,00 (d, J ~ 2,7Ö Hz, 1.H, H1’), 5,21 (m. IH, H-2’), 5,97 (bs, ÍH, OH), 4,88 (m, ÍH, H-3’), 4,13 (m, IH, H-4'}, 3,4-7 (m,2», H-5’), 1,49-és

1,2.8 (s,3H,C(CH₂)j).

fcfc

X fc fc»· fc * ♦ X fcfc* ♦ *« *♦ ♦ fc fcfc fcfc * fc * fc XX fcfc * X (2SJ 'R,4R,5R)-4-(6-ámítto-2-jódpurin-9-lf>7,7-dimetíl-3>6,8-lrioxabiéiM<<3.3.0-j€drtto-2-kariwsav (6.7 jelű vegyület)

1,6 g (3,7 mmól) [{1R,2R,4R, S'R)-4-(6-atnmo-2-jódpmÍB-9-il)-7_x7-á}mefÍl-3,.6,8-íríexablciklö[3,3.Ö)okv-24lj-metan-l-ol (ő,ó jelű vegyület) 20ö ml vízzel készült oldatához keverés közben ö,60 g káiiam-hídrexidot és cseppenként 50 ml vízben. oldott 1,70 g (10,8 mmól) kálbwperswgaRátot adunk. A keveréket szobahőmérsékleten sötétben 225 órán át állni hagyjak. A reakcióelegyet ezután 5 ^ÖC és lö °C közötti hőmérsékletre hüíjűk, és színét 4 ml 3Ö %-os hsdrögén-peroxid 16 ml vízzel készített oldatával elszíntelenítjük, közben a hőmérsékletet jeges sós fürdő alkalmazásával 10 *C alatt tartjuk. Ezután a keveréket ceiiten szűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson körülbelül lö ml-re bepótoljuk, majd 2 N sósav-oldattal pH 4 értékig savanyítjuk, A képződött csapadékot kiszűrjük és éterrel mossuk, így állítják elő a 6.7 jelű vegyüietet fehér szilárd anyag formájában, amelynek kitermelése szárítás után 70 %. Olvadáspont: 187-I90 ^SC.

^!H NME (3ÖÖ MHz, DMSO~d_á) § 8,11 (s, IH, H-8), 7,62 (s, 2H, W>), 7,46 ís, 1K COOH), 6,22 (s, 1 Η, Η-Γ), 5,42 (d, 3 ~ 5,71 Hz, 1 Η, H-2’), 5,34 (á, H - 6,JÓ Hz, 1 Η. H-3’), 4,63 (s, IH, H-4’), 1,46 és 1,30 (s, 3H, C(CHj)j).

{2S,3S,4R,5R)-5-(6-antíno-2’jódpurín-9-il)~3,4-dihidrox!Osoián~2-karbönsav (ő.S jelű · vegyület)

1,72 g (3,85 mmól) (2S,3R,4R,5R)~4~(6-anilno~2-jódpHr!n-9-il)-7,7-dímeti1-3,6,8~

-tríöxabicsklo[3.3.0joktán-2-karbonsav <6.7 jelű vegyület) 80 ml 50 %-®s bahgyasswal készült oldatát 80 Ό-α» 1,5 órán át keverjük. A reakcióelegyet csökken tett nyomáson bepároljuk, vízben áldjuk, és az oldatot ismét bepároljuk, Ezt as eljárást addig ismételjük, amíg a visszamaradó anyagban a hangyasav szaga nem érződik. Vízből történő áíkristslyositás után 1,33 g 6.8 jelű vegyüietet kapunk fehér szilárd anyag tormájában 85%-os kítermeléssel. Olvadáspont: 221-223 X (bomlik).

’H NMR (3Θ0 MHz, DMS.O-d«) δ 8,31 (s, IH, H-S), 7,68 <s, 2H, MH₂), 5,90 (d, .1 « 6,55 Hz, IH, H-F), 4,42 (m, IH, H-2^!),.4,35«3 2,31 Hz, ΙΗ,Η-4’), 4,22 (m, IH, H-3’).

12. példa [(2S,3S,4R,5H)-5-(ó-amms>24ödparín-94í>3,4<iíhÍdröxíöXöian-2-il]-N-etiikafhoxamíd (6.9 jelű vegyűlöl)

1,29 g (3,17 mmól) (2S,3S.4E,5R)--5-(6-atnino-2~jódpur5n-9-íi)-3,4-díhldröxloxolán-2-karbonsav (6,8 jetii vegyület) 150 ml abszolút etanollal készült és 5 ^c€-ra hűtött oldatához keverés közben cseppenként 1,15 ml jéggel hűtött tionil-kloridot (SOCI₃) adunk. A keveréket szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük, majd kémhatását telített vizes nátnom-h'idrogén-k-arbonát-oldattal pH 8 értékre állitjnk be. A keveréket szűrjük, majd a szűrfetet csökkentett nyomásoo bepótoljuk, így fehér szilárd anyagot áilíbink élő, amelyet megszántunk., és 20 ml vízmentes etiiammban újra oldunk és 3 órán át -2ö C-on, majd egy éjszakán át szobahóorérsékleton tartjuk. A reakcióelegyet abszolút etanollal hígítjuk, és a kicsapódott terméket kiszűrjük és vízmentes éterrel mossuk, igy 530 mg é.9 jelű vegyöletet állítunk ei>5 tiszti: szilárd anyag formájában 72 %-os kitermeléssel. Olvadáspont; 332-234 °C.

’H NMR (3öÓ MHz, DMSO-dá) δ 8,34 (s, IH, KS), 8,12 (t, IK NH), 7,73 (s, 2H, NM,), 5,85 (d, 3 = 6,03 Hz, IH, Β-Γ), 4.54 (ra, IH, H-2'), 4,25 (d, í - 1,92 Hz, IH, H-4‘), 4,13 (m, IH, H-3’), 3,28 (m, 2H, lő

CHsCI’U 1,00 <l. 3 - 6,2 Hz, 3H, CHjCíE).

13- példa

Metii-4-(3~(9-í(4S,5S,2R_í31k>S-(N-stilk;5rbamoil)-3_s4~dihidroxioxoÍ5su-24ij-6-aminopurin-2-íÍ})-prop» -2-lníl)-eíklohexá'n-kmtoxl.lát (DWH-I46e jelű vegyölet) mg <0,063 mmél) ((2S3S,4R_>SR)-5-(S--sfnino-2~jóá©üí-m-9-il)~3,4-dihiárQSioxol8R-2-5ll-N' -edlkathoxamid (6.9 jelS vegyölet}, 16,9 mg <8,894 mmél) 5.5 jelű vegyület és 0,75 mg réz(i)-joáld 5 ml trietí lami-nnal (TEA) és 5 ml scetonítdilel készült degazált oldatához 15 mg Pd(ERh_? ji~et adunk Az oldatot 24 érán ál 70 °C-on keverjük, ezután célkén szikjük és szilikagélen: krtunatogmWj.uk. 5:95 arányú metanol«kloroform elegy alkalmazásával, így állítjuk elő a DWH-14Óe jelű vegyületet 24 %-os kitermeléssel.

14. példa í4-prop-2-í:oíieÍkÍohexil)-medi-acetgl (5,6. jelű vegyület)

258 mg (1,65 uwól) 5.3' jelű vegyület 25 ml éterrel készült oldatához.0,92 ml (8,25 mmól) eeetsav-ankídridet és 0,2 ml (2.5 jmaól) piridint adunk. A reakddeíegyeí szobahösnérsékfeten 24 órán ál keverjük. A reakclóelegyhez vizet adunk, és a szerves oldatot 10 %~os nátrümí-hidrogsa-karbonát-oldattel extraháljük. A szerves réteget nátrmm-szulWon vízmenteskjük és hepároljuk. A visszamaradó anyagot ssiiikagélen kromatografáljuk 5:95 arányú etíl-aceiát/fcexán elegy alkalmazásával így állítjuk elő az 5.6 jelű vegyületet 47 %-os kitermeléssel.

15. példa (4-(3-{9~(4S,5S,2R,3R.)-5-(N-etílkarbateoíi)«3,4-díhMroxíítxolaa«2-iO-ö«aír!Ítiop5i.rfe-2-Íl)-prop-2-isdj-eikiohexii j-mefii-scetát (í MR193}

12S mg <0,29 mmól} ((2S,3S,4B,5R}-5-(6-amino-2-j6dpuríu-9-ll)-3_s4-iiíhidroxioxolaB-2~íi}-N-otilksrboxamid (6.9 jelű vegyölet) 150 mg (8,77 mmól) 5.6 jelű vegyölet és 1,8 mg réz(l>jodsd 1,3 ml TEA-val és 4 ml dímetilfotmamidáal készült degazált oldatához 25 mg PátPPhsX-et adunk. Az.oldatot 60 ®C«on 72 éráit át keverjük, ezután celiten szűrjük és sziiikagélen kromaíogmWjuk 5:95 arányú meíanol-kloroForfn elegy alkalmazásával, így állítjuk eiS a IMR193 j'elÖ vegyöletet 10 %-os kitermeléssel, ((2S,3S_i4R(5R>5-(6-ammo-2-{3'(4«hídröX!metíl)-cíkíohexhj-’pro-p2“iníl}-pufso-9«d)-3,4-díh sdroxsoxo lan-2-1 I j-N-etil-karböxsmtd .A, (4 -prop-2~ínjlei klohex i !>metsn-1 -el g .(10 mmól) íransz-{4-(hidröxte>eiíi}eiklöhexnjmetíM-met:!benzoiszu!fonál 40 ml áhnehl-szídfoxiddai készült oldatához nagyon lassan 6,4 g <70 mmól) 90 %-os lítiu.m«aeetiiid-só’léndi3min-kompíexet adónk. A .reakeióelegyet 5 napon át hagyjuk keveredni, majd a reakciót lassan 0 *€~os vízzel leállítjuk. Ezt a keveréket 3ÖÖ túl éterrel hígítjuk és 3 x 208 ml telített vizes ammöoiutn-kiorld-öldatte.1 mossuk, A szerves oldatokat uátrium-szulfáttaí szárítjuk. Áz oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A terméket szilikagél oszlopon kromatográfíával tisztítjuk, eluensként 20:80 arányú Wl-acetáPhexán elegyet használunk, igy állítjuk elő a termékei 85 %-os kitermeléssel.

Ή NMR (300 MHz, CDCÍ₃)d3,41 (d, 1-6,51¼ 2H), 2,0?«j -2,5,6,5 Hz, 2H), 1,96-1,75 (m, 5H), 1,4 í <m, 2H)> 0,95 (m, 4).

^f3C NMR (380 MHz,CDCIj) ti 83,8, 69,6,68,9,<7,37,7,32,3, 32,3, 29,6, 26,5.

8, (<2S,3S,4S,SR>5-(ő-amino-2-{3-{4«(hidPoxsmetíl>cdttefeexl}}-prep-l-inil)-punsr«9-il)-3,417 »»χ

-dihítfeoxíoxolaa-Z-iij-N-etílkarboxaínsd (JME2837) mg (9,965 snmől) [(2S,3S,4R,5R)-S-(d-a!nino-2^ödpurin-9-iÍ)-3,4-dihi<?roxíoxolan-2-íi)-N-etilkarboxamíd, 38 mg (8,20 ssmól) (4-pwp>2-iftiteiklohexö)-meW’í-oi és 1,0 mg réz(í)-jodid 1 ml triettl-amsnnal (TEA), l ml dimeíiIformamíddai és 1 ml acetonltrilH -készült degaz&h oldatához 10 mg PdCPPhj^-et adunk. Az okkítot őO órán át. szobahőmérsékleten keverjük, eztsíán az oldatot eeliten szilijük és sziiíksgékm kromatograíáijak 7:9-3 arányú metanoJ-ktoroform -elegy alkalmazásával, így 5 mg 3MR2Ö37 jelű vegyületet dilitek elő 17 %-os kitermeléssel. A cím szerinti vegyületet az itt ismertetett kötődési vizsgálat alkalmazásával vizsgáljuk, eszernt a rekombináns humán Á_2A Tessptoretóoz való kötődés Ki értéke 694 ± 69 mél/l,

17. példa

Radioaktív Ugandám kötési vizsgalat

Az Aja receptorokhoz való kötődést ^ml-ZM24l385 jelű rádiollgandummal vizsgáljuk, A 28- ábrán a szelektív agooistak rekombináns barnát? A_2A adenozís receptorokhoz történd kötődésének kompetfciója látható. A DWH-H6e jelű vegyület nagymértékben szelektíven kötődik a rekombináns humán A_2a (bA2A) altípushoz. Az Aj receptorral szemben mutatott szelektivitás (Itt nem látható) kevésbé kifejezett, azonban még mindig körülbelül 58-szeres. A DW'H-Móe körülbelül 5-ször vagy 59-szer hatékonyabb, mint a WRC9479 és a CGS2J68Ö, ahogy ez az 1. ábrán látható. Váratlan és meglepő az a felismerés, hogy az észter, assz a ÖWH-146e jelit vegyület szántén körülbelül 59-szer hatékonyabb, mint a sav, azaz a DWH-I46a jelű vegyület, ahogy ez az 1. ábrán (átitató.

A DWH-Í4őe és JMR193 jeli? vegyületek seub'oíil oxsdatív aktivitásra gyakorolt hatása

Á. Anyagok

Az f-meí-ieu-phe (1MLP), lummel» szuperoxid-diszrsötáz, esíokróm C, fibrmogén, adenozin-dmmináz és tripan bice vegyületeket a Sigma Chemseal-iÖl szerezzük be. A Ftcöll-hypaqne-t az ICN-íől (Aurora, OH) és a Cardinal Seientiíie-től (Santa Fe, NM) és az- Aceurate Chemical and Scientitíc-iői szerezzük be (Wesrerbury, NY). Az endotoxint (lipopoüszaehsrid; E. colé K235) a List Biotegical-tÖl szerezzük be (Campbell» CA). A Haiát egyensúlyi sőoldatot (HBSS) és a limnius araebosyte lizá&mt vizsgálati kitel a BioWittaker-íől szerezzük be (Waíkersviib, MD), A barnás száram albumlní (HSA) a Culter Bíoiogieai-tői (Elkhart, 04), a rekombináns humán tumor nekrózís fektor-alfát a Dianippon Pharmaeentieai Co. Btd.-töl szerezzük be (Osaka, Japán), A ZM241385 jelű vegyület (4-(2-[7-anhnö-2-(2-őoil)-{l,2,4}-bfazo:lö[2,3-3j£Í,3,5]hiazin-5-i|-amisö)-etüj-fenol) Simon Poueher ajándéka (Zeneea Pharmaceutieals, Cheshtre, UK), 1 msöl/i-es és lö mmókhes tSrzsoldaíokaí állítunk elő dimsül-szulfoxidbas és -28 X-un tároljuk.

B, Humán neutrobl előállítása

Normál heperimzáit (145 tl/ml) vénás vérből egy-lépéses Fieoll-hypaque elválasztást eljárással humán neutroElekct (körülbelül 98 % neeírcfii és >95 % életképes, tripán kék kizárás alapján) állítunk elő (< I vérlemezke/S nentrofü és < 5Ö pg/ml endotoxin) (Innnlus asnefeecita Sizátym vizsgálat) [Ferraníe, A. és munkatársai, J. immunot 36, 109 (1988)).

C. Gyulladást okozó oxigén fajták beindított és stimulált hteáo neuírofílekböl történd felszabadulásának fcemilumiiaesszeneiás vizsgálata

A Immoöllal növelt késni hm? ^esszencia, ami a neutrofsl oxidativ aktivitásának meghatározására alKM kalmas, mind a szuperoxtd képződéstől, mind a. ifeoszőmáíis graaaia enzim míelogeroxidáz mobilizációjától függ. A fényt az aktíváit rteuteeffiek által felszabadított nem-stabil nagyeoergiájö oxigénfajták bocsátják ki. A tísztitott seutrortleket (5~10 x IO⁵/ml) ö,f % humán szérum albummí tartalmazó Hanka egyensúlyi sóoldatóan Ínkubáijuk (1 ml) D'WH-J4óa,. DWH~t4őe> CGS21Ó80 vagy 3MR193 jelenlétében vagy távollétében, továbbá rolipram jelenlétében vagy·· íávollélében, valamint tumor «ekrózís iuktor-alfa (1 U/mi) jelenlétében vagy távollétéheo 30 percig 37 ’C-on vízfürdőben rázva. Ezután 37 ’C-on 2-4 percig Chronolog® toíoméíerrei (Crono-íog Cefp., Havertow, PA) leolvassők a bmisolial (1 x. 10*⁴ möl/1) felfokozott f-met-feu-phe (I ptrtől/l) által kiváltott kemilummesszetieíár. A kemilnmlnssszencíát a kibocsátód legnagyobb relatív fényerő értékként (a görbe magassága) határozzuk meg, összehasonlítva a tumor nekrőzis faktor-alfát tartalmazó és DHW4, JMR-t vagy ronpramoí nem tartalmazó mintákkal.

D. Eredmények

A 2, ábrán látható, hogy mind a JMR193, mind a DWH- 146e növeli a tantor nekrőzis faktor-alfa által beindított, f-met-len-phe által stimulált humán nettboftí oxidatív aktivitását, amely Iuminollal «öveit kemény lumirtesszencta alapján meghatározva hatékonyabb, mist az adenozm Aj* receptor agosísta ÓGS21680. A vízszintes tengelyen látható a CGS2Íó80, DWB-ldóa, DWH-i4őe vagy JMR193 koncentráció (lóg tanod). A függőleges tengelyen látható a humán neutrofíí. stóvjjás csúcsa a reaktív oxigén fajták stimulált felszabadulásánttk mennyiségéhez viszonyítva, amelyet a imától által növelt ketnilummesszenciával határozunk meg, Összehasonlítva a kontroll mintákéval, amelyek nem voltak tumor nekrőzis faktor-alfával beindítva. SEM középérték: a “ 4-5 külön vizsgálat alapján.

A 2. ábrán a vízszintes tengely alatti értekek a humán neutron 1 aktivitásra vonatkozó EC_5Ö értékek (a

2. ábrán bemutatott adatok alapján), SEM középérték: n =» 4-5 külön vizsgálat alapján. *p <Ö,Ő5 csökkenő ICj₀ összehasonlítva a CGS21Ő80 jelű vegyűlettei,

A JMR193 és DWH-Í4óe jelú vegyidet csökkenti a stimulált neuíroftl robbanásszerűen végbemenő oxidációját, azaz az EC_SÖ érték 1 remől/l alá csökken (rendre ö,8 mól/i és 0,3 «nsöl/i). Ezzel szentben a szabad sav formájú A_2a adenezín receptor agomsta ÖWH-Móa és a CGS2 lő®) jelű vegyidet nem mutatkozik hatásosnak sz oxidatív folyamat gátlásában (a 2. ábrán rendre 53 nmól/l és 9 nmól/í). A stimulált neutroftl oxidatív folyamatát gátló OWH-146e jelű vegyület hatását atttagonizálja a szelektív Aj_A AR anisgomsta hatású ZM241'385.

A 3. ábrán látható, hogy a JMRI93 (1 nmől/l) a roliprammai együtt: <100 nmól/l) szlnergetikns hatást matatva csökkenti a reaktív oxigén fajták stimulált felszabadulását, A humán «entrofíleket tumor nekrőzis faktor-aifáva! (1 ü/ml) Indítjuk be, és f-met-leu-phe (1 nmól/l) alkalmazásával stimuláljak. A függőleges tengelyen a Iuminollal növelt kamílumínesszencíávai meghatározott oxidatív aktivitás százalékos gátlása látható. SEM középének; n ~ 4 külön vizsgálat alapján. *p «0,05 szinergetikns hatás. mutatkozik a JM.RJ93 és a rolípratn együtt történő alkalmazásánál az összegzett aktív írásokkal összehasonlítva, .A 4. ábrán látható, hogy a nagy mértékben szelektív Á>_A adenoxin receptor autagonista ZM241385 jlöO nmoVi) (2M) a humárt neutroSÍ 3MR193 (10 umőb'l) által gátolt oxidatív aktivitás ellen hat, amelyet a lómból által «öveit kemiiummesszencia alapján határozunk, meg. SEM középérték: 4 külön vizsgálat alapján., *p -0,0004 a ZM241385 a JMR193 jelű vegyölepel gátolt oxidatív hatás ellett hat,

E, A hantán «eutroSl (cAMP) és a neutrofíl biológiai felülethez történő kötődése mérőhelyes szövettenyészet lemezt humán fthrinogénnel vonunk be (5 rng/mí 1,S %-os nátrium19 * ΦΧ *« '♦»X ♦ « X ♦ χ

Φ χ «ΦΦ Φ«» ** *«.«-« ♦ « X * * ♦; ·*·* φφ » +

-bikarbónát oldatban, ő,S ml/mérőhely; Sigma Chemical)- egy éjszakás ás 3? °C-on 5 %-os szén-dioxid tartalom mellett A neaírofileket (3-4 x 10^0,5 ml/mlsta) a bevont lemez egyik mérőhelyén 45 percig iúkabáljuk 0,5 ml H8SS-ben> amely 04 % HSA-rés ADA-t tartalmaz (1 Ital), továbbá adott esetben rekomhmáns barnán TNPa-t (16 U/ml), ÖWH~14öe jelű vegyöletet (3-360 nmól/l), rellpramot (3öö nmél/1) és/vagy ZM24I385 jelő vegyhietet (1ÖÖ smól/l) tartalmaz, inkubáíás után .a mérőhelyekre 6,5 m! 0,2 N sósavoiáatot adunk, és szobahőmérsékleten további 45 percig inkubáljuk a cAMP kivonása céljából. Ezután a mintákat egy míkrocentrifugán centrifugáljuk 2 percig a sejttörsneiék eltávolítása céljából. Fél ml-es mintákat lefogyasztunk-cÁMP analízishez; (Brwker, 8. és aiunkafomi, Science, 194. 270 (1976)]. A mérőhelyeket normál sooidaítal kétszer mossuk, és a visszamaradó monoréteget szobahőmérsékleten 2 órán át SDS-t tartalmazó 0,2 ml 0,2 N nálnum-hidroxid-öidatíal leitárjuk. Ezután a fehérjém intákst -76 ^ftC-ra lefogyasztjuk egy későbbi fehérte analízis céljából, a relatív FMN kötődés meghatározására (Stoweil, K. P, és munkatársak Anal, Biocksm, 85,572 (1978)}.

Eredmények

A DWH-14óe (36-366 nmól/l) önmagában és rehprammal (300 nmól/l) együtt alkalmazva szmetgetíkns. módon növeli a humán neutröítl cAMP tartalmat, és a roliprarnmal együtt alkalmazva szisergetíkus módon csökkenti a fthrfeogénnai bevont felületen a neutrefíi kötődését, ahogy ez az 5. ábrán látható. A ZM241385 jelű szelektív A_2a sdenozin receptor antagonista a. DWH-14<Se (3ÖÖ nmól/l) í rolipram (306 nmól/l) neuíroffl cAMF termelésre és a kötődésre gyakorolt hatása (ZM; 160 nmól/l) elles hat. .SEM középérték; 5 külön vizsgálat alapján. ’p <0,05 megnövelt neutrofil (cAMF} összehasonlítva a DWK-l.4Óe nélkül kapott eredménynyel; * p <0,05 esőkként metrofil kötődés Összehasonlítva a DWH-14óe- nélkül végzett vizsgálattal.

F. Kötődő humán neutroirl oxidatlv aktivitása

Eljárás

Az E. pontban ismertetett eljárás szerbi járunk el módosítással, FicoU-Hypaque elválasztásból származó rieutrofileket (2 χ 1ifVml) inkubálunk 15 percig 37 '«C-on 0,45 ml Banks egyensúlyi sóoldatban, amely 0,1 % tatán szérum; albumát és adenozin déssurnntó (1 Ital), rollpramot (300 mnől/lj és DWH-l46e-t; (3-306 nmől/i) tartalmaz, inknbálás után- eitokröm G-t (Γ20 gmól/l) és katalázt (Ö,Öó2 mg/ml) adagolunk rekombináns humán tumor nekrózis faktor-alfa i 1 U/ml) jelenlétében és íávollétében, és a sejt szuszpenzíőból azonnal '200 ml alikvot mennyiségeket viszünk át egy 96 mérőheiyss lapos aljú szövettenyészfő lemez kettős mérőhelyeire, amelyet előzőleg egy éjszakán át humán ilbrisogénnel vontunk be. A minták optikai sűrűségét 556 nm-nél olvassak le megtételé szuperoxtd díszmutáz (200 ü/ml) mintákkal szemben.

ö. Eredmények

A ó. ábrán látható, bog)' a Ebrinogénoel bevont felSIetea a tumor nekrózis foktor-al fával (TNF) stimulált kötődő humán neutroíil sznperoxid felszabadulását a rolipram (300 nm.ól/1) és DWH.«l4óe jelű vegyidet gátolja. A DWkí-l4őe jelű vegyület csökkenti a kötődő neutroőiek oxídabv folyamatát és sztnergelikus módon csökkenti a robbanásszerűen végbemenő oxidációt rolipram jelenlétében, amely önmagában nem befolyásolja a iteutrofíl oxidátiv aktivitását A vízszintes tengelyen a DWH-14őe koncentrációja van megadva nmól/l-ben, és a függőleges tengelyen a neatrofi! által felszabadított sxuperosid mennyisége látható eitokröm e redukciója alapján meghatározva, jelentős szinergetikus hatás tapasztalható DWB- I4öe jelű vegyölet és I V típusú PDF, inhibitor, a rolipram között a tömör nekrózis faktor-alfa által stimulált kötődő humán neutroől oxidatlv aktivitásának csökkentésében. SEM középérték.: 4-5 külön vizsgálatban ismételve, *p <6,65 csökkenő szuperoxld felszabadulás « * ο * » ♦ » * ♦«* »»« >* λ χ φ ♦ X X * ♦ *

-V ** ** -♦·♦összehasonlítva a DWH-146 jelű -vegyület nétel végzett vizsgálattal; ~p <Ő,Ő5 csökkenő szuperoxid felszabad:»lás összehasonlítva a rellpmumal de DWM-146s nélkül végzett vizsgálattal.

í 8. példa isémia/rsperfözió (1/R) vesesérülés kezelése DWH-14őe jelé vegyüiettei

Annak meghatározására, hogy az A₂a adenozin receptor DWH-1.46e által indukált aktiválása a patkányokban létrehozott 1/R sérülés után .24 érával és 48 órával csökkenti a kreatiniaá,. patkányok veséjében 45 percig rsémtát és 24 érán vagy 48 órán át reperfezíót hozunk létre. Az VR előtt 5 órával kezdődően egy míniszívattyúvaí folyamatom DWH-146e jelé vegyületet £0,004 gg/kg/perc) vagy hordozót adunk he. A 7. ábrán látható, hogy a DWH-146e hatására a plazma kreatiaia jelentősen csökken DWH-146e-vé! kezelt 7/7 patkánynál (F<0,ö5) és 6/6 patkánymái (F<0,001} rendre a 24, órában és a 48. órában.

Annak meghatározására, hagy a DWH-14őe az I/R«nek alávetett patkányok plazma kreatíninjének csökkenésére gyakorolt hatását az Α_3Λ receptor közvetíti-e, a patkány veséket 45 percig isémiáoak, majd 48 órán át reperföziónsk vetjük alá, A DWH-146e jelű: vegyületet (0,004 ag/kg/pere) egy oáníszivaüyőval folyamatosan adagoljuk az lsérma elölt 5 órával kezdődően. A 8, ábrán látható, hogy a vesefuökció javuláséira az Aja asttagomsttt ZM-241385 ellenkezőleg hat (0,003 ug/kg/perc ekvimofáris bejuttatás! sebesség a DWH-MŐe-vel összehasonlítva) (*P<Ö,ÖÖ:1 a hordozóval szemben meghatározott DWH esetéo; *‘P <0,05 a DWH-val szenten meghatározott DWW2M esetén, N értéke 5 a hordozó és ÖW esetén; N értéke 6 a DWH/ZM esetén. Az AHOVA után Sonferroni korrekciót alkalmazunk).

A DWH-146e jelű vegyületet a hemodlhatsíkos hatás kifejtéséhez: nem megfelelő koncentrációban veseödéma, nekrózís és a belső medullában .a vörös sejtek felszaporodásának megelőzésére alkalmas.

A DWM446e állal biztosítón vesekárosodás elleni védelem (0,01 ug/kg/pere szubktkán 48 óra alatt) összhangban van a neutrofslek éfendotélhanhoz való tapadásának drámai mértékű gátlásával. Azt gondoljak, hogy a vesekárosodás elleni védelmet legalább részben a. neuíroftlek és az árendötóiíurn közötti kölcsönhatás DWH- i.46e jelö vegyüiettei történő gátlása biztossá.

/Innak meghatározására, hogy az IR-nek alávetett patkányok külső nredtiMájában a neaírofifeket az A_2a-AR aktiválása csökkenti-e, a veséket Neurolocida® alkalmazásával iöö-szoros nagyításban vizsgáljak a teljes vesére kiterjesztve. A RMN-eket ügy számoljuk meg, hogy a vesemeíszetekeí 250-szeres nagyításban vizsgáljuk. A vesemeíszeteket optikai keretekre fektetjük, és naisdegyik kereten belül mikroszkóp alatt megszámoljuk az összes PMN-t. Ezzel a módszerrel megelőzhető a PMN egy nél többszöri megszámlálása, A. 9, ábrán látható, hogy a neutroíliek sűrűsége a hordozó esetét? 15,ő5/mm² és a DWH-146e jelű vegyüiettei végzett kezelés esetén

3.Ö2/mm².

rtk példa

DWH~ ;4öe jelt! vegyület tüdő reperfózlós sérülésre gyakorol? hatása

A. Eljárások izolált, teljes vérrel átáramoitatott, szellőztetett nyál tüdő modellt használunk. A donor nyalak tüdőseterébe PGE_f injekciót adunk be, majd a tüdőket kivesszük, és Euro-Colllns tartósító oldattal történő elárasztás után a tüdőket 1 & órán át 4 ‘’C-cm tároljuk. Az első csoportba tartozó tüdőket (n ™ 9) kontrollként használjuk. A 11. csoportba tartozó tüdőket (n =- 9) teljes vérrel rep&tinzsőnak vetjük alá, amely vért előzőleg a leokoelták eltávolítása cédából szűrjük. A 111. csoportban (n ~ 9) közvetlenül a rsperfüziót megelőzően a vér reperfözárámhez « φ « « φ * « * φ * * .* φ .».** * * * * φ φ X * Φ * « » »* Λ* «Φ

DWH-1.4őe jelű vegyüíetet adagolunk (25 pg-'kg), és az adagolást a reperfúzíő ideje alatt végig folytaíjnk (1 gg/kg/perc), A repsrfüziőí az összes tüdőben 30 percig végezzük, és feljegyezzük a tüdöveröérhen a nyomást (PAP), tödőér ellenállását (FVR), s légúti teljesítményt (CPL) ás az artériák oxigénnel való telítését. Feljegyezzük továbbá a míkloperoxidáz aktivitást (MFÖ) a neutrofil képződés meghatározása céljából, és msghatárezztsk a rssdves/száraz tömegarányt a tüdő ödéma kírsmlmására.

B. Eredmények

Az. artéria oxigénnel való ellátottsága 30 pere repsrőizíó utáa a 11. ás HL csoportban jelentősen nagyobb mist az 1, csoportban (ŐS,-514,76 Fs és ől,4 £ 5,8 Fa, 12,3 £ 2,74. lö⁵ Pa nyomáson, p<Ö,Öl). A 19. ábrán látható, hogy a HL csoportba tartozó tüdők növekedő pÖ>_; felvételt mutatnak a mperfnzió alatt, A H, csoportba tartozó tüdőkben a feokociíák csökkenése javítja az artéria oxigénnel való ellátottságát a reperfózió korát szakaszán. 'p^O.Öbó a Π. csoportban s 1, és ML csoporttal szemben, *'^>p<9,i)Öl a 11 és HL csoportban az L csoporttal szemben,

Á 11. ábrán látható, hogy' a H csoportban a PVR középérték jelentősen csökken a kontroll tüdőkkel összehasonlítva (*p<0,091), A HL csoportban a. PVR még az olyan vérrel végzett reperföziónak alávetett tüdőkben végzett meghatározottnál is lényegesen kisebb, amely várból a ie«kociíáí kivontuk f’p<Ö,Ö01 az 1. és 11, csoporttal szemben), A tüdőben az ér ellenállása a HL csoportban jelentősen csökken (22,783 £ 357 N.s.ctn'⁵) mind a ÍL csoporttal, mind az L csoporttal összehasonlítva (31,057 ± 1743 és 3ő,9l 1 + 2173 .1 Ö'^s N.sxrrf³, p<0,ö91). A légúti teljesítmény a IL és HL. csoportban javult az L csoporttal összehasonlítva (1,68 + 6,08 és 1,68 £ 6,65 az 1,36 + 0,13 értékkel szemben, p~0,ö3), A HL csoportban a míkrovaszkalárís permeafeiíitás 196,82 £ 17,09 ng értékre csökken összehasouföva a 1. csoportban meghatározott 165,79 +21,83 ng Evans bitié festékig szövetével (p-^0,05}. A 12. ábrán látható, bogy a HL csoportban a mieloperoxidáz aktivitás lényegesen kisebb, rótt az L csoportban (’p = 0,03), MPÖ » mieloperoxidáz, A HL csoportban a mieloperoxidáz aktivitás 39,SS £ 4,87 AODZg/perc összehasonlítva az L csoportban meghatározott 88,70 £ 18,69 AÖD/gZperc értékkel, és a Π, csoportban a mieloperoxidáz aktivitás 56,06 + 7,46 AOD/g/perc,

C, Értékelés

A BWH-146e hatására a tüdőben neutroid képződés csökken és a tüdő graft működése drámai módon javul. A neotrofrlek a reperthzíós sérülés gyulladásos sorozatának fontos kotnporsensei, és ezek forrása mittd a eírkttiáló vér, snínd maga a tüdő graft. A szelektív adenozin-A^A aktiválásának hatására a neotrofli által közvetített gyulladásos válasz megszűnik, és a transzplantáció után a tüdőben a reperiuzíós sérü lés csökken.

Fénymikroszkóp alatt az L csoportba tartozó kontroli tüdők súlyos leakocita heszürödést és ödéma képződést matatnak az alveoláris térben 18 órás isémíás tárolás és 36 perces- reperítizló után. A IL csoportban a leukocita-mentes vérrel reperföziónak alávetett tüdőkben (amelyeket ÍWH-I4őe jelű vegyülettel kezeltünk a reperinzsó folyamát?) a beszűrődés sokkal kisebb mértékű.

2(L példa

A DWH- Í4óe jelű vegyűlet artéria sérülés utáni neoíntimáiís képződésre gyakorolt hatása

Perkufán sziv-koszorúér behatolás után a leukocita aktiválódás gyulladásos oitokirs felszabadulással jár együtt, tani szerepet játszhat a resztenőzisban. Olyan egerekben, ahol az enílotéliorn bevonat ép, erőteljes neoiníimts képződés mutatkozik a közös karotid artéria elkötése után. Ezen modell alkalmazásával véletlenszerűen kiválasztott C57/BL6 egereknek a karoisd elkötéssel egyidejűleg ozmótíte szivattyúval 7 napon át DWH22;

» X * Φ « * *f « « « * * ·* « ♦♦κ **

ÍOÍ * * X * ♦ «' »* ·♦.♦ **

-146e jelű vegyüietet (» ~ 7} vagy hordozót (n « 8) adagoltunk infúzióban.

A karodd elkötés utáni 14 . napon hisztomorfortreíríás vizsgálattal a neointimáEs terület jelentős csökkenését észleljük (0,005 + 0,004 e^x szemben a Ö,S21 ± 0,0.14 mm² értékkel, p - 0,02) a kezelt állatokban, öszszeliasörtiitva a kötifrerllokkaL A tteointímáiís középső terület aránya is jelentésen csökken (0,13 ± 0,07 szemben a .0,-64 ± 0,44 értőkkel, p *·· 0,01). A középső terület a két csoportban basoniö (0,034 ± 0,007 tara® szemben a 0,036 ± 0,009 mm-tel, ρ ~ 0,81). Ez a korlátozott neoíntimáiis növekedés előnyösen a 28. napig fennmarad. A 13, ábrán a DWH- 14őe neointimálís növekedést gátló hatásának összefoglalása látható LCCA modell egerekben. Ezek .a vizsgálatok, azt mutatták, hogy elkötott karof id artériája egér modellbe» a DWH-14őe jelű vegyületekkel végzett nyújtott időtartamú (7 nap) A_ja stimuláció legalább 21 napig jelentősen csökkenti a neolntimáhs képződést, valószínűleg ennek leukocitö aktiválásra és működésre gyakorolt hatásán keresztül.

22. példa

Esdotoxinnai stimulált humán tnonecitö TNF« felszabadulásának gátlása

A, Anyagok

A Fieoll-hypaque-t sz ICN-töl (Aurora, OH), a Cardinal Scientihc-töl (Santa Fe, HM) és ..az Aocnr&to Chemicals ásd Seientiíic-löi (Westhury, NY) szerezzük he. Az endotoxlní (liponohszacharíd; E. coli öl 1 löd) a Üst Biologícai-tŐl szerezzük be (Campbell, CA), Á Hattks egyensúlyi sóokbiot (HESS) és a litnulus amebocha Ifeátam vizsgálati kitel a BíoVÁtaker-től szerezzük be (Walkersvüle, MD). A humán szérum aíbunűní (HSA) a Gátér Bioiögieai-től szerezzük be (Eikhasrt, IN). A .2M2413S5 (4-(2~(7-aíninO“2-(2-fosr3Í)jf,2,4)-írlazoIopJ-alfEzjőJtriazin-S-il-amirtöj-efilj-fenol) Símen Pouefer ajándéka (Zeaecs Ftemacetátcals, Cheshire, UK). I mmöl/l és 10 mmól/1 koncentrációjú förzscidatokat .állítunk elő dimetii-szulfoxidban és -20 °C-on töröljük,

8. Tisztított humán kötödö monoeitákkai kiváltott TNF« képződés

Eljárások

Monoeítában gazdag mouoréteget állítunk elő (>65 % monoéba) Reoll-Hypaque elválasztásból eredő 1 ml monontíkleám leakocíta frakció (5 x löVml) Inkubálásával [Ferrante, A. és munkatársai, J. Immunoi, Meth„ M, 109 (1980)] egy 24 mérőhely es szövet tenyészet lemez mérőhelyein (I ónt; 37 ^:'C; 5 %-os szén-dioxld i&rteforts). A nem kötődő feukochákat mosással cltávoliljuk, és a kötődő mononukfeárrs sejteket tartalmazó mérőhelyekre tenyésztő közeget (1 ml Hanks egyensúlyi sóold&i, amely 0,1 %· humán szérum albumint, adenozín-dezaminázt (5 U/ml) és 1 % hővel maktivált awtológ szérumot törttdtntsz) adunk. A kővetkezőket adagoljuk: I) endotoxin (100 ngjm s) és AÁR szefektiv agosísta 2M241385(100 nrnéí/i) és 2) A_ja adenoztn receptor szelektív agonísta 3MR 193 (I-1ÖÖO^: nmől/l), DWH14óe (1-1000 nmól/1) és CÖS21Ó80 (10-1000 ntnóid). Ezutött a mintákat 4 órán át (37 ^öC~®u és 5 % szén-dioxld tartölomnál inkubáljuk), maid a téíüiászókat összegyűjtjük., A szsíszpesdáit sejteket cerdriíugálással ehávoíhjnk, és a sejfeoentes mintákat ~?Ö 'C--ra lefogyasztjuk, A ΤΝ'Ρα-t a sejtmentes telülúszékban vizsgáljuk (n - ó) ELÍSA kit alkahnazásávai (Coulíer/ Immunotech, Miami, Ft).

C, Eredmények

A I Ö. és 14. ábrán látható, hogy az A·^ adenozin receptor atttögomsta csökkenti a THFa endotoxin által stimulált kötődő mortoeita képződését. Ás A_2A AR szelektív antagonísta ZM241385 (iÖÖ nmól/'l) antagosizálja a HMR193 '174 Fa képződésre gyakorolt hatását ahogy ez a 15. ábrán látható.

Tehát a E>WH14őe és a JMR193 olyan mechanizmus útján csökkenti a humán monocitak EPS

ΦΦ φφ endofoxin által stimulált TNfcc képződését, amely fUgg az A_3A adenoaáa receptorokhoz történő agonista kötődéstől.

22, példa

DWH-146e akrivításáuak vizsgálata patkány,'égér peritonitisz modellen

A pentonitísszel kapcsolatos előzetes vizsgálatokba» zymosan Injekciót (Zym) adunk he, amellyel a gyulladás hatásosan kiváltható [Zhang, Y. és munkatársai. Bar. J, Pharmacet, 313, 237 (1996)}, A 16. ábrás látható, hogy a rymosan injekciót kővetően a közepes leukoeita ktmcealráció seubauer hemocitométemel meghatározva 7,325 + i₅S93/mm^!.. A zymosan előtt egy órával 2,5 pgíkg dózisban beadott Íntraperitoneális DHW446e Injekció gátolja a pefitonltisz kialakulását 6 órával később a középérték + SEM ieakoesía koncentráció 2,S12 + '374/tnm³ (p < Q,ö5). Tehát ezek a vizsgálatok azt mutatják, hogy az A_2a AR szerepet játszik a zymosas kezelést kővetően a PMN iraverzáiis perítóneumba történő közvetítésében.

A 2MR193 gyulladásgátló hatása által közvetített szív-védelem

A találmányunk szerinti vegyületek vizsgálata során miokardláils eseményt („stunning·’) váltunk ki, ez a szívsérülés egy olyan tormája, ami a szívkoszorúér véráramlásának átmenetileg ismételten megszakított periódusait kővetően következik be, melyet a szívkoszorúér vérellátásának ismételt elzárásával hozunk létre,

A. Mégy elzáródás-reperlúzló ciklus hatása

Az egyik csoportba tartozó kutyák bal első leszálló (LAD) szívkoszorúér artériáját izoláljuk, és hurkos elzáróval körülvesszük. A kutyák LAD artéria vérellátását 4x5 percig slzárjnk. A véráramot mindén elzárás után 10 percig visszaállítjuk. Egy másik, 6 kutyából álló csoportnak minden elzárást periódus után mfóziőbau ő,ől pg/kgí'pere dózisban adagoljuk a IS. példa szerint előállítóit acetái-származékot (.ÍMR193) tartalmazó oldatot, Egy másik hat csoportból álló kutyának infúzióban hordozót tartalmazó oldatot adunk. Az utolsó eizárús-reperíőzíő ciklus után az állatok szívműködését 3 órán át vizsgáljuk.

Az eredményeket a 17. és 18. ábrán mutatjuk be. A 1?.. ábrán a hat kontroli kutya szisztolés bal kamra (LV) növekedés válasza látható. A szívmegnagyobbodás körülbelül 50 %-kal csökken az utolsó elzárás után 3 óra elteltével. A IS. ábrán hat olyan kutya LV növekedési válasza látható, amelyek intravénás infúzióban 3MR193 vizsgálati vegyületet kaptak (ö,öi pg/kgípere) áz alapvonal időtartammal kezdődően, és a kísérletben mindvégig folytatva. A szívműködés a JMR193 infúzió hálására mar a reperfúzlo után 9ő perccel közel normális értékre tér vissza.

B. Tíz elzáíás-reperfözíő ciklus hatása

Kutyák két további csoportját tíz (és nem 4) eizárás-reperiuzíó ciklusnak vetjük alá, ahol mmdegyik elzárás 5 percig tart, 5 percig tartó reperiúziő közbeiktatásával. Ebben a példában két állatnak a 15. példa szerint előállított aeeíáf-származékot (3MR193) tartalmazó oldatét adjuk be infúzióban (6,.01 pg'kg/'perc) tnhdegyík elzárásí periódus után. Egy másik három állatnak hordozói tartalmazó oldatot adunk infúzióban. Az utolsó elzátás-ísperfözió ciklus után az állatok szívműködését 3 órán át vizsgáljuk.

Az eredményeket a 19. és 20. ábrán mutatjuk be... A 19, ábrán a hárem kontroll kutyánál jelentkező szísztolés bal kamra megnagyobbodás válasz látható. Ez egy sokkal súlyosabb, a szivei érő beavatkozás, mint a 23 A példa szerinti, és ennek eredményeképpen az LV megnagyobbodás a reperiuzíó után nagyon hamar teljesen hiányzik, és 3 órán át akinetikus marad. A 20. ábrán matatjuk be az LV megnagyobbodást annál a két kutyánál, * χ*« * ·♦ · * * » «« >·♦ amelyek intravénás infúzióban jMR.193 vizsgálati vegyületet kaptak (ö,öl ugk^perc) az alapvonal periódustól kezdve, és a vizsgálatban mindvégig folytatva. A kontroli csoporttal összehasonlítva & JMR193 inhizíőval kezelt kutyáknál a szívműködés jelentős és figyelemreméltó javulása látható közvetlenül a reperfázió után, és ez. 3 órán át megmarad.

C. A 3MR193 aeetáí-szárrnazék neuírofíl felvételre gyakorolt hatása az elzárás-reperfözió folyamán Néhány állatnak rádioaktívan jelzett neuírohleket adunk be. (A neutroíslaket kutya vérből izoláljuk, ^Te-tartalmű vegyülettei inkaháijuk, és a kutyákba vlsszainjekíáljuk,) A *^>wTc~vei jelzett neutrofileket intravénásán adjuk he a repert&ziós zóna gyulladási szintjenek meghatározó markerekértt négy ísémia-reperfáziós ciklus után. Az elzárás-reperfúziós ciklusból eredő gyulladás a rádioaktívan jelzett neutrofilsk kötődését okozza, és ezt gamma-kamerával mennyiségileg meghatározzuk,. A neutrofil kötődést a JMR.193 gátolja. Az eredményeket a 21. ábrán mutatjuk be, ahol a ^’Tc-jeízett seutrotllek lokalizációja a csak hordozóval kezelt kutyákban (folyamatos görbék) nagyobb, mint a 3MR193 jelű vegyülettei kezeiteknél (szaggatott görbék). Tehát a rádioaktívan jelzett öeutrofsfek JMR193 infúzióval ki váltott csökkenése a központi isémiás zónában a szfvgytílladás csökkenésére ·(*) utal.

A 23A és 23B példákban bemutatott vizsgálatok azt mutatják, hogy a szívgyulladás jelentős sérhlésí kiváltó szerepet játszik a miokardíálls esemény kialakulásában. Ezen túlmenően egy aáenozín Aja receptor antagonista, például aJMR-193 jelű vegyidet beadásával az enyhe esemény -megelőzhető (17. és 18. ábra) vagy a súlyos eseményt kísérő mioksrdíálls diszfunkdó jelentősen cnyfeííheíS, ahogy' ez a 19, és 2ö, ábrán látható.

Claims (25)

1. Szabadalmi igénypontok

   1. (í) általános képletű vegyölet a képletben

   R jelentése tumdsgyik előfordulási helyén egymástól függetlenöl hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkíl-, 3-7 szénatomos eíkloalkil·, fenil- vagy fentit í-3 szénatomos alküj-esoport;

   X jelentése -CH,OH, -CO₂R\ ~OC(O)OR² vagy -C(O)NR^:'R⁴ képleíö csoport, ahol

   R\ R' és R* jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom; l-ő szénatomos alkilcsoport; 1-6 szénatomos aikilesoport, amely 1 és 3 közötti számú l-ő szénatomos aikoxi-, 3-7 szénatomos cikloalkii-, 1-6 szénatomos alkiltio-csoporítal, halogénatommal, hidroxil-, amino-, motto(l-ő szénatomss alkií)amíno-, di(l-6 szénatomos alkdjamino- vagy 6-1Ö szénatomos árucsoporttal van helyettesítve, amely arílcsopört 1 és 3 közötti számú helyettesítővel, mégpedig halogénatommal, 1-6 szénatomos alkii-, hidroxil-, amino-, mono{l-ő szénatomos aikrl)amino- vagy di(l-6 szénatomos alkiljamlno-csoporttal lehet helyettesítve; 6-1Ö szénatomos arilesoport vagy' ő-IÖ szénatemos arilesoport, amely 1 és 3 közötti száma helyettesítővel, mégpedig halogéntitommai, hidroxil-, amino-, monoü -S szénatomos alkiljamino-, dí(i-6 szénatomos aikíl)amino~ vagy 1-6 szénafomos aMesoporttsí helyettesített; és

   X és jelentése egymástól fuggeíleníll í-ő szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben I és 3 közötti számú kéoatommal és/vagy oem-peroxid típusú oxigénatommal van megszak ítva vagy hiányzik és n értéke I és 3 közötti szám, továbbá .gyógyászati!^ elfogadható sója.
2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyölet, amelynek képletében az S’-helyzetö X helyettesítő jelentése -CHjOH képletű csoport vagy -<3(Ο)ΝΒΛΚ* általános képletű csoport.
3. 3. A 2. igénypont szerinti vegyölet, amelynek képletében az S’-feeiyzetö X helyettesítő jelentése -CfO'jNR^R⁴ általános képletö csoport.
4. 4. A 3. igénypont szerinti képletű vegySfot, amelynek képletében R^? jelentése hidrogénatom és R*jelentése 1-4 szénatomos alkticsoport.
5. 5. Az 1. igénypont szerinti képletö vegyölet, amelynek képletében R helyettesíts jelentése mindegyük előfordulási helyén hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkiicsoport.

   ő. Az 1. igénypont szerinti képletű vegyűlet, amelynek képletében 7? jelentése -CHj- vagy -CHj-CH₂képletö csoport.
6. 7. A ő, igénypont szerinti képletö vegyölet, amelynek képletében Z jelentése -CHj- vagy -CHj-CH₂fcépleíü csoport.
7. 8. Az í. igénypont szerinti képletű vegyűlet, amelynek képletében a 3-10 szénatomos ctkloalkllcsoport cikiohexil- vagy ciklopen.il lesöpört.
8. 9. A 8- igénypont szerinti képletö vegyölet, amelynek képletében X jelentése (1-4 szénatomos alkoxi)-karbont l-csoport, -C(O)NR^SK⁴ általános képletö csoport vagy acetostmetil-csoport.
9. 10. A 8, igénypont szerinti képletö vegyidet, amelynek képletélten az X-Z- helyettesítő jelentése HCxC-7- általános képletű csoport.
10. 11. A 8, Igénypont .szerinti képletö vegyölet, melynek képletében a 3-lö szénatomos ctkloalkilesoporthoz kapcsolódó X-Z- és 2Γ helyettesítők transz-helyzetben vannak.
11. 12. Az 1. Igénypont szerinti képletö vegyölet, amelynek képletében R jelentése hidrogénatom, az 5^!-hclyzetö X helyettesítő jelentése ettlammokarbettil-esoport, és az (Χ-Ζ-χ((3~1Θ szénatomos cikloalkilj-Z’-OC- helyettesítő jelentése 2-(4-metoxikarbonií)~eiklobexilmetii)-criE!.il- vagy 2~(4--karhonil~ciklohexilmetiljefinil-csoport.
12. 13. Az 1, igénypont szerinti képletö vegyölet, amelynek képletében R jelentése ttídmgémttom, az. 5’-helyzetö X helyettesítő jelentése etilamisiokarhoníl-csoport és az (X-Z-)_rj(3-ÍO szénatomos cíkloalkii]-Z’-CsC· helyettesítő jelentése 2-(4-aceteximetii-ciklohexilmetti)etií!Íi-csi>port.
13. 14. Hd3-(9~(2R,3R,4S,5S)~S-(N-Erilkarbsmöil)-3,4-dihidroxmxöian-2-sl]-6-ami»opiírsn-2-il)-pröp-2-ínii)-cikio.hexh'j-metil~aceíáí vagy gyógyászatllag cltbgadbaíó sója.
14. 15. {í2R,3R,4S,5S)«5-(ó-Ammo-2-{344rihidtoXímetíl}-eíklobexíl)»ptop~iMml)-purin~9-ii)-3,4~ -dihidroxiöxoian-2-ί! j-N-etílkarboxamid vagy gyógyászatllag elfogadható sója.

    lő. Metil-4-(3-19-((2R,3R,4S,SS)-5-(N-etlíkarbsmo!fo3,4-dihÍdroxíoxolan-2-ílj-ő-ammopsrÍ5!-2-il)}-prop-1 - !tiil)<ikíohexán~karboxilát vagy·· gyógyászatílag elfogadható sója.

    I?. 4-(3-{9~((2R“3R,4S,5S)-5-(N-Etilksrbsmoii)-33-dihidröxloxoían-2-lij-ó-am!n0purin-2-ll)j-prop-l-miO-ciklohexán-karbonstív vagy gyogyászaíilag elfogadható sója.
15. 18. Az 1-17. igénypontok bármelyike szerinti vegyölet gyógyászati kezelésre történő alkalmazásra.
16. 19. A2 18. igénypont szerinti vegyűlet, ahol a gyógyászati kezelés egy gyulladásos válasz gátlását foglalja magában.
17. 20. A 18. igénypont .szerinti képletö vegyölet, ahol a gyógyászati terápia egy IV tipnsű foszfo26 dtészferáz inhibitor alkalmazását is magában foglalja.
18. 21. A 2Ö. Igénypont szerinti képletü vegyüiet. ahol az inhibitor robpraro.
19. 22. A 19. igénypont szerinti vegyölet, ahol a gyulladásos válasz ísémta, aleroszklerózis, antoimmun betegség, isémi&Teperíúzios sérülés» síroké, tramsás agysérülés vagy gerincvelő-sérülés» szerv, szövet vagy seit-íranszplardáctó, bőrbetegség, fertőzés, augíoplaszda, sfent behelyezés, sönt behelyezés vagy átültetés, allergiás megbetegedés, sorvadásos megbetegedés, hnmanszuppresszJ'v terápia vagy egy eatlősnél jelentkező olyan kóros állapot vagy tünet következménye, amelyben szerepet játszanak az A_2a adenozís receptorok, és ezen aktivitás agorttzálására van szükség,
20. 23. A 19. igénypont -szerinti vegyidet, almi a gyulladásos válasz a szívben, vesében vagy a tüdőben je~ leníkezlk.
21. 24. Az 1-17. igénypontok bármelyike szerinti képletü vegyüiet alkalmazása gyulladásos válasz kezelésére alkalmas gyógyszerkészkrnény előállítására.
22. 25. Az 24. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a gyógyszerkészítmény egy IV típusú foszfodiésztejús inhibitort tartalmaz,
23. 26. Az 25. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a. foszfodiészteráz inhibitor robpram.
24. 27. Az 25. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a gyógyszerkészítmény folyékony hordozót tartalmaz.
25. 28. Az 25. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a gyógyszerkészítmény parenterális beadásra alkalmas formában van.