HU200487B - Process for producing new demethylavermeltin derivatives - Google Patents
Process for producing new demethylavermeltin derivatives Download PDFInfo
- Publication number
- HU200487B HU200487B HU88261A HU26188A HU200487B HU 200487 B HU200487 B HU 200487B HU 88261 A HU88261 A HU 88261A HU 26188 A HU26188 A HU 26188A HU 200487 B HU200487 B HU 200487B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- avermectins
- acid
- branched
- formula
- avermectin
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000005660 Abamectin Substances 0.000 claims abstract description 93
- 241001468227 Streptomyces avermitilis Species 0.000 claims abstract description 40
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 28
- RRZXIRBKKLTSOM-XPNPUAGNSA-N avermectin B1a Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 RRZXIRBKKLTSOM-XPNPUAGNSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 51
- -1 2-pentyl Chemical group 0.000 claims description 26
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 16
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 14
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 13
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 12
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 6
- 150000004716 alpha keto acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000006552 (C3-C8) cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 claims 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003431 oxalo group Chemical group 0.000 claims 1
- 108010046716 3-Methyl-2-Oxobutanoate Dehydrogenase (Lipoamide) Proteins 0.000 abstract description 8
- 101710116650 FAD-dependent monooxygenase Proteins 0.000 abstract description 6
- 101710128228 O-methyltransferase Proteins 0.000 abstract description 6
- 230000000590 parasiticidal effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000002297 parasiticide Substances 0.000 abstract 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 25
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 25
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- SWWQQSDRUYSMAR-UHFFFAOYSA-N 1-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-6,7-diol;hydrochloride Chemical group Cl.C1=CC(O)=CC=C1CC1C2=CC(O)=C(O)C=C2CCN1 SWWQQSDRUYSMAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 16
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 14
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 7
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 7
- MNULEGDCPYONBU-UIXCWHRQSA-N (1R,4E,5'S,6S,6'S,7R,8S,10R,11R,12S,14R,15S,16R,18Z,20Z,22R,25S,27R,28S,29R)-22-ethyl-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-[(2R)-2-hydroxypropyl]-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethylspiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2'-oxane]-3,9,13-trione Polymers CC[C@@H]1CC[C@@H]2O[C@]3(CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O3)[C@@H](C)[C@H](OC(=O)\C=C\[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)C\C=C/C=C\1)[C@@H]2C MNULEGDCPYONBU-UIXCWHRQSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-CBLVMMTCSA-N (1R,4Z,5'S,6S,6'S,7R,8S,10R,11R,12S,14R,15S,16R,18Z,20Z,22R,25S,27R,28S,29R)-22-ethyl-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-[(2R)-2-hydroxypropyl]-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethylspiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2'-oxane]-3,9,13-trione Polymers CC[C@@H]1CC[C@@H]2O[C@]3(CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O3)[C@@H](C)[C@H](OC(=O)\C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)C\C=C/C=C\1)[C@@H]2C MNULEGDCPYONBU-CBLVMMTCSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-WABYXMGOSA-N (1S,4E,5'R,6R,6'R,7S,8R,10S,11S,12R,14S,15R,16S,18E,22S,25R,27S,28R,29S)-22-ethyl-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethylspiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2'-oxane]-3,9,13-trione Polymers CC[C@H]1CC[C@H]2O[C@@]3(CC[C@@H](C)[C@@H](CC(C)O)O3)[C@H](C)[C@@H](OC(=O)\C=C\[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@@](C)(O)[C@H](O)[C@@H](C)C\C=C\C=C1)[C@H]2C MNULEGDCPYONBU-WABYXMGOSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-QECWTJOCSA-N (1r,4s,5e,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,16s,18r,19s,20r,21e,25s,26r,27s,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers O([C@@H]1CC[C@@H](/C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)O[C@H]([C@H]2C)[C@H]1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](CC(C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-QECWTJOCSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N (1r,4s,5e,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,16s,18r,19s,20r,21e,25s,26r,27s,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trio Polymers O([C@@H]1CC[C@@H](/C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)O[C@H]([C@H]2C)[C@H]1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](C[C@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-BOXGPLBDSA-N (1r,4s,5e,5'r,6'r,7e,10s,11s,12s,14r,15s,16s,18r,19s,20r,21e,25s,26r,27s,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trio Polymers O([C@@H]1CC[C@@H](/C=C/C=C/C[C@H](C)[C@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)O[C@H]([C@H]2C)[C@H]1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](C[C@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-BOXGPLBDSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-YOKYSHDFSA-N (5'R,10S,11R,12S,14S,15R,16R,18R,19S,20R,26R,29S)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2S)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers C([C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C=CC(=O)OC([C@H]1C)[C@H]2C)C=CC=CC(CC)CCC2OC21CC[C@@H](C)C(C[C@H](C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-YOKYSHDFSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N (5e,5'r,7e,10s,11r,12s,14s,15r,16r,18r,19s,20r,21e,26r,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers C([C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]1C)[C@H]2C)\C=C\C=C\C(CC)CCC2OC21CC[C@@H](C)C(C[C@H](C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N 0.000 description 6
- CWGATOJEFAKFBK-UHFFFAOYSA-N Ac-(E)-8-Tridecen-1-ol Natural products C1C(O)C(C)C(C(C)CC)OC11OC(CC=C(C)C(OC2OC(C)C(OC3OC(C)C(O)C(OC)C3)C(OC)C2)C(C)C=CC=C2C3(C(C(=O)O4)C=C(C)C(O)C3OC2)O)CC4C1 CWGATOJEFAKFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-MQLHLVDXSA-N CC[C@@H]1CC[C@@H]2O[C@]3(CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O3)[C@@H](C)[C@H](OC(=O)\C=C\[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)C\C=C\C=C\1)C2C Polymers CC[C@@H]1CC[C@@H]2O[C@]3(CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O3)[C@@H](C)[C@H](OC(=O)\C=C\[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)C\C=C\C=C\1)C2C MNULEGDCPYONBU-MQLHLVDXSA-N 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- JVGWUGTWQIAGHJ-DRBFDSOZSA-N avermectin a2 Chemical compound C1C(O)[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](OC2OC(C)C(OC3OC(C)C(O)C(OC)C3)C(OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](OC)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 JVGWUGTWQIAGHJ-DRBFDSOZSA-N 0.000 description 6
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N oligomycin A Polymers O([C@H]1CC[C@H](/C=C/C=C/C[C@@H](C)[C@H](O)[C@@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)O[C@@H]([C@@H]2C)[C@@H]1C)CC)[C@@]12CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N 0.000 description 6
- MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N oligomycin A Natural products CC1C(C2C)OC(=O)C=CC(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)CC=CC=CC(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 5
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 5
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 5
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 241000893864 Nerium Species 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 230000002141 anti-parasite Effects 0.000 description 4
- AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L barium carbonate Chemical compound [Ba+2].[O-]C([O-])=O AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- JBDSSBMEKXHSJF-UHFFFAOYSA-N cyclopentanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCC1 JBDSSBMEKXHSJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- IBSREHMXUMOFBB-JFUDTMANSA-N 5u8924t11h Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](OC)C[C@H](O[C@@H]2C(=C/C[C@@H]3C[C@@H](C[C@@]4(O3)C=C[C@H](C)[C@@H](C(C)C)O4)OC(=O)[C@@H]3C=C(C)[C@@H](O)[C@H]4OC\C([C@@]34O)=C/C=C/[C@@H]2C)/C)O[C@H]1C.C1=C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 IBSREHMXUMOFBB-JFUDTMANSA-N 0.000 description 3
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N CoASH Chemical class O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical class O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZPAKHHSWIYDSBJ-QDXJZMFISA-N avermectin b2 Chemical compound O1C(C)C(O)C(OC)CC1OC1C(OC)CC(O[C@@H]2C(=C/C[C@@H]3C[C@@H](C[C@@]4(O[C@@H]([C@@H](C)C(O)C4)C(C)C)O3)OC(=O)[C@@H]3C=C(C)[C@@H](O)[C@H]4OC\C([C@@]34O)=C/C=C/[C@@H]2C)/C)OC1C ZPAKHHSWIYDSBJ-QDXJZMFISA-N 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 125000006030 1-methyl-3-butenyl group Chemical group 0.000 description 2
- WLAMNBDJUVNPJU-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutyric acid Chemical compound CCC(C)C(O)=O WLAMNBDJUVNPJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVBFMEVBMNZIBR-UHFFFAOYSA-N 2-methylvaleric acid Chemical compound CCCC(C)C(O)=O OVBFMEVBMNZIBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 108010088278 Branched-chain-amino-acid transaminase Proteins 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006968 Helminthiasis Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 2
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N S-adenosyl-L-methioninate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H](N)C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 229960001570 ademetionine Drugs 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000000211 autoradiogram Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N coenzime A Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005516 coenzyme A Substances 0.000 description 2
- 229940093530 coenzyme a Drugs 0.000 description 2
- NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCC1 NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N dephosphocoenzyme A Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000078703 ectoparasite Species 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 2
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 208000014837 parasitic helminthiasis infectious disease Diseases 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 229960002363 thiamine pyrophosphate Drugs 0.000 description 2
- 235000008170 thiamine pyrophosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011678 thiamine pyrophosphate Substances 0.000 description 2
- YXVCLPJQTZXJLH-UHFFFAOYSA-N thiamine(1+) diphosphate chloride Chemical compound [Cl-].CC1=C(CCOP(O)(=O)OP(O)(O)=O)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N YXVCLPJQTZXJLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UAXOELSVPTZZQG-UHFFFAOYSA-N tiglic acid Natural products CC(C)=C(C)C(O)=O UAXOELSVPTZZQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UBQZUBPODLPCFG-PIBDHAAFSA-N (2S)-2-amino-4-[[(2S,3S,4R,5R)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl-ethylsulfonio]butanoate Chemical compound CC[S+](CC[C@@H](C([O-])=O)N)C[C@H]([C@H]([C@H]1O)O)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 UBQZUBPODLPCFG-PIBDHAAFSA-N 0.000 description 1
- PBKONEOXTCPAFI-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-trichlorobenzene Chemical compound ClC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 PBKONEOXTCPAFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XFOASZQZPWEJAA-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylbutyric acid Chemical compound CC(C)C(C)C(O)=O XFOASZQZPWEJAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVRZYSHVZOELOH-UHFFFAOYSA-N 2-Methyl-4-pentenoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)CC=C HVRZYSHVZOELOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVKMFSAVYPAZTQ-UHFFFAOYSA-N 2-methylhexanoic acid Chemical compound CCCCC(C)C(O)=O CVKMFSAVYPAZTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BKAJNAXTPSGJCU-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-2-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)CC(=O)C(O)=O BKAJNAXTPSGJCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 241000258993 Anthrenus museorum Species 0.000 description 1
- 241001124076 Aphididae Species 0.000 description 1
- 240000007087 Apium graveolens Species 0.000 description 1
- 235000015849 Apium graveolens Dulce Group Nutrition 0.000 description 1
- 235000010591 Appio Nutrition 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 241000244186 Ascaris Species 0.000 description 1
- JVGWUGTWQIAGHJ-DFAYUBCLSA-N Avermectin A2a Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](C(C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](OC)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 JVGWUGTWQIAGHJ-DFAYUBCLSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108010023063 Bacto-peptone Proteins 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 241001674044 Blattodea Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000253350 Capillaria Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 229920002245 Dextrose equivalent Polymers 0.000 description 1
- 241000243990 Dirofilaria Species 0.000 description 1
- 241000498256 Enterobius Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000239183 Filaria Species 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical group C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 238000010268 HPLC based assay Methods 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 description 1
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 description 1
- 125000002061 L-isoleucyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- WAEMQWOKJMHJLA-UHFFFAOYSA-N Manganese(2+) Chemical compound [Mn+2] WAEMQWOKJMHJLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123379 Methyltransferase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 235000017879 Nasturtium officinale Nutrition 0.000 description 1
- 240000005407 Nasturtium officinale Species 0.000 description 1
- 241000498271 Necator Species 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 240000009164 Petroselinum crispum Species 0.000 description 1
- 241001674048 Phthiraptera Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Chemical class CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- ZJUKTBDSGOFHSH-WFMPWKQPSA-N S-Adenosylhomocysteine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CSCC[C@H](N)C(O)=O)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZJUKTBDSGOFHSH-WFMPWKQPSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 1
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 241000244174 Strongyloides Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 241000243774 Trichinella Species 0.000 description 1
- 241001489151 Trichuris Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940100228 acetyl coenzyme a Drugs 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- JVGWUGTWQIAGHJ-UHFFFAOYSA-N avermectin A2a Natural products C1C(O)C(C)C(C(C)CC)OC11OC(CC=C(C)C(OC2OC(C)C(OC3OC(C)C(O)C(OC)C3)C(OC)C2)C(C)C=CC=C2C3(C(C(=O)O4)C=C(C)C(OC)C3OC2)O)CC4C1 JVGWUGTWQIAGHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFSHKCWTGFDXJR-HLFFGZBOSA-N avermectin a1 Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](OC2OC(C)C(OC3OC(C)C(O)C(OC)C3)C(OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](OC)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 AFSHKCWTGFDXJR-HLFFGZBOSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- AYJRCSIUFZENHW-DEQYMQKBSA-L barium(2+);oxomethanediolate Chemical compound [Ba+2].[O-][14C]([O-])=O AYJRCSIUFZENHW-DEQYMQKBSA-L 0.000 description 1
- MJAMCTLGWXIKOT-UHFFFAOYSA-M benzyl-dimethyl-[2-[2-[2-methyl-4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethoxy]ethyl]azanium;hydroxide Chemical compound [OH-].CC1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 MJAMCTLGWXIKOT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N beta-methyl-butyric acid Natural products CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- TXWOGHSRPAYOML-UHFFFAOYSA-N cyclobutanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCC1 TXWOGHSRPAYOML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZFUCHSFHOYXIS-UHFFFAOYSA-N cycloheptane carboxylic acid Natural products OC(=O)C1CCCCCC1 VZFUCHSFHOYXIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 244000079386 endoparasite Species 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical group 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- BRMYZIKAHFEUFJ-UHFFFAOYSA-L mercury diacetate Chemical compound CC(=O)O[Hg]OC(C)=O BRMYZIKAHFEUFJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 230000001035 methylating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003697 methyltransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001617 migratory effect Effects 0.000 description 1
- VYQNWZOUAUKGHI-UHFFFAOYSA-N monobenzone Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1OCC1=CC=CC=C1 VYQNWZOUAUKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 229940101270 nicotinamide adenine dinucleotide (nad) Drugs 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000011087 paperboard Substances 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000011197 perejil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- QAQREVBBADEHPA-IEXPHMLFSA-N propionyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)CC)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 QAQREVBBADEHPA-IEXPHMLFSA-N 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- QBERHIJABFXGRZ-UHFFFAOYSA-M rhodium;triphenylphosphane;chloride Chemical compound [Cl-].[Rh].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 QBERHIJABFXGRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- XREXPQGDOPQPAH-QKUPJAQQSA-K trisodium;[(z)-18-[1,3-bis[[(z)-12-sulfonatooxyoctadec-9-enoyl]oxy]propan-2-yloxy]-18-oxooctadec-9-en-7-yl] sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].CCCCCCC(OS([O-])(=O)=O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(CCCCCC)OS([O-])(=O)=O)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(CCCCCC)OS([O-])(=O)=O XREXPQGDOPQPAH-QKUPJAQQSA-K 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000015192 vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000007222 ypd medium Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 1
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/22—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/10—Anthelmintics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
- C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin
- C12P19/623—Avermectin; Milbemycin; Ivermectin; C-076
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás a parazitaellenes nemtermészetes új demetil-avermektinek előállítására.
Az avermektineket, e hatásos antiparazitikus aktivitással rendelkező rokonvegyületek komplexét és az avermektinek Streptomyces avermitilis törzsek, nevezetesen a S. avermitilis ATCC 31267, 31271 és a 31272 törzsek aerob tenyésztése útján történő előállítását a 4 310 519, és a 4 429 042 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmak írják le.
Az utóbb említett két törzs a S. avermitilis ATCC 31267 ultraibolya fénnyel történő besugárzással kapott és lefagyasztott, illetve liofilizált állapotban levő származéka.
Az 1987. március 18-án közzétett EP 214731 sz. szabadalom számos olyan - nem-természetes avermektinként említett — vegyületet ír le, melyek a természetes vagy ismert avermektinekkel rokon vegyületek, de a 25-ös szénatomon a természetes avermektinektől eltérő, új szubsztituenst hordoznak. E szabadalom ismerteti ezeknek a vegyületeknek az előállítását is, mely abból áll, hogy az avermektint termelő mikroorganizmust bizonyos karbonsavak vagy azok származékai vagy előanyagai jelenlétében tenyésztik. Az említett, a 25-ös szénatomon új szubsztituenst hordozó avermektinek előállítására a S, avermitilis ATCC 31267, 31274, 31272 és az NCIB 12121 törzset használják. Ez utóbbi mikroorganizmus, melyet az EP 214731 sz. szabadalom ír le, a S. avermitilis ATCC 31271 törzstől származik. Félszintetikus táptalajon tenyésztve ez a törzs magasabb termelékenységgel szolgáltatja a 25-ös szénatomon új szubsztituensekkel helyettesített avermektineket. Az ATCC 31267, 37271, 31272 és az NCIB 12121 törzsek mindegyike a 25-ös szénatomon szubsztituált új származékok mellett különböző mennyiségben ismert vagy természetes avermektineket is termelnek, ahol a 25-ös szénatom szubsztituense izopropilcsoport vagy (S)-szek-butil-csoport (1-metil-propil-csoport).
A avermektinek (I) általános képlettel jellemzett szénváza acetátokból és propionátokból épül fel, és a természetes avermektineknél a 25-ös szénatom szubsztituense L-izoleucinből (R jelentése (S)-szek-butil-csoport) vagy L-valinból (R jelentése izopropilcsoport) származik [Fisher és Mrozik, „Macrolid antibiotics”, Academic Press (1984), 14. fejezet], „Ismert” vagy „természetes” avermektineknek nevezzük azokat a S. avermitilis ATCC 31267, ATCC 31271 és ATCC 31272 törzsek által termelt avermektineket, ahol a 25-ös helyzetű szubsztituens izopropilcsoport vagy (S)-szek-butil-csoport (1-metil-propil-csoport). Azokat az avermektineket. ahol a 25-ös helyzetű szubsztituens nem izopropil- vagy (S)-szek-butil-csoport, a találmányban új vagy nem-természetes avermektineknek hívjuk.
A fent említett amerikai egyesült államokbeli szabadalmakban szereplő S. avermitilis törzsek az anyagok egy csoportját termelik, mely csoportot C-076 generikus névvel láttak el. A csoport nyolc megkülönböztethető, de szoros rokonságban levő vegyületből áll, melyeket C-076 Alá, A2a, Álb, A2b, Bla, Blb, B2a és B2b jelöléssel ínak le. Az „a” betűvel jelölték azokat a természtes avermektineket, ahol a 25-ös szubsztituens (S)-szek-butil-csoport, „b” betűvel, ahol a szubsztituens izopropilcsoport. Az „A”, illetőleg „B jelölés arra utal. hogy az 5-ös helyzetű szubsztituens metoxicsoport, illetve hidroxilcsoport. Végül „1” számmal jelölték azokat az avermektineket, ahol kettős kötés szerepel a 22-es és 23-as szénatom között; „2” számmal azokat, ahol a 22-es szénatomhoz hidrogénatom, a 23-as szénatomhoz hidroxilcsoport kapcsolódik és a 22-23 szénatom között egyes kötés van. A találmányban nem használjuk a természetes avermektinek 25-ös helyzetű szubsztituenst jellemző jelölését, de megtartjuk az Al, A2, B1 és B2 jelöléseket, melyeket a nem-természetes avermektinek esetében is a fentiekben ismertetett értelemben használunk.
Elágazó láncú 2-oxo-sav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsokat eddig Bacillus subtilisnél [Willecke és Pardee, J. Bioi. Chem., 246: 5264-72 (1971)] és Pseudomonas putidanál [Martin és munkatársai, J. Bacteriology, 115: 198-204 (1973)] írták le, de Streptomycesnél még nem.
A 4 285 963 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom leír egy A-avermektin származékot, mely a 25-ös helyen egy metil- és egy etilcsoporttal szubsztituált és a 23-as hely szubsztituense hidroxilcsoport. A 4 378 353 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom C-076 csoporttal rokon vegyületeket ír le, melyeket az S. avermitilis ATCC 31272 egy mutáns törzsével, az MA-5218 törzs tenyésztésével állítanak elő. Az MA-5218 mutánst az S. avermitilis ATCC 31272 ultraibolya fénnyel történő besugárzásával állították elő. A mutánst ATCC 31780-ként azonosították. Az említett mutáns által előállított és a C-076-tal rokon vegyületeknél hiányzik a furángyűrű. A leírt vegyületek némelyikénél hiányzik továbbá R2 helyén az egyik vagy mindkét oleandróz cukorrész, míg másoknál az 5-ös helyzetű csoport ketocsoporttá oxidált.
O-metil-csoportokat nem viselő avermektineket termelő S. avermitilis O-metiltranszferáz mutánsok három csoportjáról számolnak be Ruby és munkatársai a „Biology of Actinomycetes” 6. Nemzetközi Szimpóziumon (Debrecenben 1985. augusztus 26-30.) és Schulman és munkatársai [Antimicrobial Agents and Chemotherapy 31:744-7, (1987)]. Az első csoport főként B-avermektineket termel, minthogy nem képes metilezni a makrociklusos laktongyűrű 5-ös szénatomon lévő hidroxilcsoportját. A második csoport 3’-O,3”-O-bisz-demetil-avermektineket termel (olyan avermektinek, melyek mindkét oleandróz cukorcsoportján hiányzik a 3-as helyhez kapcsolódó O-metil-csoport), melyeket demetil-avermektineknek neveznek. Á harmadik csoport képtelen metilezni bárhol is.
Schulman és munkatársai [Fed. Proc., 44: 931 (1985)] oly módon fokozták a S. avermitilis B-avermektinek termelését, hogy a fermentációt szinefungin, S-adenozil-etionin vagy S-adenozil-homocisztein jelenlétében végezték, melyek gátolják az ágiikon C-5 helyű hidroxilcsoportját metilező B-avermektin-O-metiltranszferáz enzimet. Az O-metil-transzferáz aktivitással nem rendelkező Streptomyces avermitilis mutánsokról és az ezekkel történő fokozott B-avermektintermelésről ugyancsak beszámolnak Schulman és munkatársai [Antimicrobial Agents and Chemotherapy 29: 620-624 (1986)].
Schulman és munkatársai [J. Antibiot., 38 (11): 1494-1498 (1985)] leírják, hogy az S. avermitilis Agly-1 mutáns, mely szinte csak Alá és A2a agli-21
HU 200487 Β konokat termel, szinefungin jelenlétében fokozott mennyiségű B-avermektin aglikonokat állított elő. Hasonlóképpen a S. avermitilis 08, mely törzsre a magas avermektintermelés jellemző, az Q-metiltranszferázt gátló szinefungin jelenlétében csak olyan avermektineket termelt, melyeknél az ágiikon C-5 helyén és az oleandróz cukorrészen hiányzottak az oxi-metil-csoportok.
A S. avermitilis mutagén kezelésével olyan mutánsok állíthatók elő, melyeknél hiányzik az elágazó láncú-2-oxo-dehidrogenáz aktivitás. Ezek a mutánsok már nem képesek jelentős mennyiségű természetes avermektineket termelni, ha RCOOH általános képletú
- ahol R jelentése izopropilcsoport vagy (S)-szek-butil-csoport - vegyület, vagy a fermentációs folyamatok során ilyen RCOOH savvá átalakulni képes vegyület nincs a tenyészetben. Meglepő módon azonban ezek a mutánsok természetes vagy nem-természetes avermektineket termelnek, ha a fermentációt hozzáadott RCOOH általános képletú - ahol R jelentése izopropilcsoport, (S)-szek-butilcsoport vagy más, itt tárgyalt csoport - vegyület, vagy azzá átalakulni képes előanyag jelenlétében végezzük. Még meglepőbb, hogy az itt ismertetett mutánsok, melyek nem rendelkeznek az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással és, amelyek nem tudják lebontani az L-izoleucint, L-leucint vagy L-valint, sokféle vegyületet képesek felhasználni nem-természetes avermektinek bioszintézisénél, miközben természetes avermektineket nem termelnek.
Mint már említettük, a természetes avermektinek nyolc megkülönböztethető, de egymással szoros rokonságban levő vegyület keverékeként keletkeznek, melyek az (I) általános képlettel jellemezhetők, ahol R jelentése izopropilcsoport vagy (S)-szek-butilcsoport. Noha ezek lényegében tisztán előállíthatók, (lásd 4 429 042 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom), az eljárás legjobb esetben is, nagyon munkaigényes. A nem természetes avermektinek EP 214 731 számú szabadalom szerinti előállításánál különböző mennyiségben ugyancsak keletkezhetnek bizonyos természetes avermektinek, a felhasznált S. avermitilis törzsek sejtjeiben levő elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz, valamint az L-valin és L-izoleucin jelenlétének köszönhetően.
A jelen találmányt megelőzően ismert S. avermitilis törzsek szinefungin - egy S-adenozil-metionin analóg
- jelenlétében végzett tenyésztésével A és B típusú demetil-avermektineket állítottak elő.
A kívánatos cél az volt, hogy lehetőség nyíljon arra, hogy tetszés szerint lehessen - akár természetes, akár nem-természetes - avermektineket vagy demetil-avermektineket termelni, ezáltal csökken a komponensek száma a keverékben, megnő a tisztasága a kívánt avermektinnek, és egyszerűbbé válik a kinyerési eljárás. Az előállított vegyületek újak és parazitaellenes hatásúak, ezenkívül értékes közbenső termékek hatékony avermektin-származékok előállítására és kinyerésére.
A találmány tárgya eljárás az (I) általános képletú
- ahol a szaggatott vonal jelentése adott esetben kettőskötés a 22-es és a 23-as szénatom között;
R1 jelentése hidroxilcsoport, ha a kettőskötés hiányzik, és hidrogénatom, ha a kettőskötés jelen van;
R2 jelentése (II) általános képletű diszacharidcsoport, melyen belül
R4 és R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, azzal a feltétellel, hogy legalább egyik jelentése hidrogénatom;
R3 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
R jelentése α-helyzetben elágazó, 3-8 szénatomszámú alkil-, 3-8 szénatomszámú alkenil- vagy 3-8 szénatomszámú cikloalkil-csoport, az izopropil- és szek-butil-csoport kivételével parazita-ellenes demetil-avermektinek előállítására oly módon, hogy Streptomyces avermitilis ATCC 53568 törzset, vagy annak elágazó láncú 2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező és/vagy elágazó láncú aminosav-transzamináz aktivitással nem rendelekező mutánsát vagy variánsát adott esetben szinefungin jelenlétében tenyésztjük.
Az elágazó láncú 2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező S. avermitilis törzseket avermektint termelő S. avermitilis törzsek, különösen S. avermitilis ATCC 31267, ATCC 31271, ATCC 31272 vagy az NCIB 12121 törzsek mutációjával állítjuk elő. A mutánsok nem képesek természetes avermektineket termelni, hacsak izopropil- vagy (S)-szek-butil-csoportot viselő zsírsavat vagy annak előanyagát nem adjuk a mutáns táptalajhoz. Aerob körülmények között, megfelelő primer savat vagy a fermentációs folyamatok során azzá átalakulni képes előanyagot tartalmazó vizes táptalajon tenyésztve, a mutánsok természetes és nemtermészetes avermektineket termelnek. Ha a fermentációt szinefungin jelenlétében végezzük, demetilált A és B avermektinek keletkeznek, melyeknél a diszacnarid rész 3’ és/vagy 3” helyén hiányzik az egyik vagy mindkettő metoxicsoport, a nevezett helyen vagy helyeken hidroxilcsoportot találunk.
Az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsokat a jelzett széndioxid vizsgálattal választhatjuk ki a mutagenizált telepek közül. Az eljárás azon alapszik, hogy az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsok permeabilizált sejtjei nem termelnek 14CO2-ot a [14C-l]-2 -oxo-izokapronsav vagy a [ l4C-1 ]-2-oxo-3-metil-valeriánsav szubsztrátból.
Meglepő és váratlan volt, hogy az itt leírt, elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsok megőrizték avermektint termelő képességüket, különösen a nem-természetes avermektineket illetően, és szinefungin jelenlétében demetil-avermektineket termelnek. A képesség elvesztése, hogy a mutáns a szokásos táptalajokon természetes zsírsavak koenzim-A származékait termelje, letális mutációhoz vezethetett volna, ha a membrán integritása az említett származékok függvénye, vagy, ha a 2-oxosav felszaporodása citotoxicitáshoz vezet. Nem vártuk továbbá a mutánsoktól, hogy acetil-koenzim-A-t és propionil-koenzim-A-t tudnak szintetizálni L-izoleucin- és L-valin degradatív metabolizmusával, minthogy ez igényli azt az enzimaktivitást, amivel a mutánsok nem rendelkeznek. Az a tény, hogy az avermektin bioszintéziséhez szükség van ezekre az acil-koenzim-A származékokra, arra a következtetésre vezetett, hogy a mutánsok nem-természetes avermektintermelése súlyosan sérült lesz, de meglepően nem ez a helyzet.
Az „avermektin vagy „avermektinek’’ kifejezést az (I) általános képletű vegyületekre használjuk, ahol
HU 200487 Β a 25-ös helyzet R szubsztituens jelentése a fenti. A „demetil-avermektínek” kifejezést olyan A és B típusú avermektinek megnevezésére használjuk, ahol a diszacharid rész 3’- és/vagy 3” helyén kapcsolódó egyik vagy mindkét szubsztituens hidroxilcsoport.
Az itt leírt mutánsok kiemelkedő jelentőségűek a találmányban szereplő és példákban szemléltetett nemtermészetes demetil-avermektinek előállítása szempontjából. Különösen fontosak az olyan előnyös demetil-avermektinek előállításánál, mint például azok a vegyületek, ahol a 25-ös szénatom szubsztituense
4-6 szénatomszámú cikloalkilcsoport.
A Streptomyces avermitilis avermektint termelő mutánsait különféle ismert mutagén kezeléssel állíthatjuk elő: ultraibolya fénnyel, Röntgen sugárral történő besugárzás, N-metil-N’-nitro-N-nitrozo-guanidines, etil-metán-szulfonátos, salétromsavas és nitrogén-mustáros, például N-metil-bisz(2-klór-etil)-aminos vagy hasonló kezelés. A mutagenezist végezhetjük a természetes avermektineket termelő S. avermitilis, például az S. avermitilis ATCC 31272 spóráin vagy vegetatív tenyészetén.
Az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsok szelektálására használt, jól ismert módszer az a biokémiai vizsgálati eljárás, mely lehetővé teszi nagy számú véletlenszerű mutagenizált baktériumtelep átvizsgálását. A módszer azon alapszik, hogy termelődik-e jelzett széndioxid az elágazó láncú [l4C-l]-2-oxosavból vagy nem [Tábor és munkatársai, J. Bact., 128: 485—486 (1976)].
Az eljárás abból áll, hogy a mutánst mikrotiter lemez lyukában növesztjük alkalmas tápközegben, a sejteket toluollal permeabilizáljuk, majd [,4C-1 J-2-oxosavat (pl. 2-oxo-izokapronsavat) adunk minden tenyészethez, és vizsgáljuk a felette lévő légtérben a 14CO2 megjelenését. A [14C-1 ]-2 -oxo-izokapronsav helyett használhatunk [l4C-l]-2-oxo-3-metil-valeriánsavat vagy [ 14C-1 ]-2- οχο-3-metil-vajsavat is. A l4CO2 termelődését alkalmas módon úgy mutatjuk ki, hogy az egyes lyukak fölé megnedvesítetett bárium-hidroxidos szűrőpapírt helyezünk, mely minden l4CO2-ot megköt, és a jelzett bárium-karbonátot, ha egyáltalán keletkezett, autoradiográfiával kimutatjuk. Az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsok autoradiogrammja a vak kontroll aktivitása körüli radioaktivitást mutat, vagyis a mutáns nem képezett jelzett bárium-karbonátot.
Az itt szereplő mutánsok morfológiai sajátosságai és a tenyészetük jellemzői általában véve a 4 429 042 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban leírtakkal azonos. A mutánsok megkülönböztető tulajdonsága, hogy nem rendelkeznek az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással, mely tulajdonságot a leírtak alapján határozzuk meg. Az említett aktivitás hiányának következménye, hogy a mutánsok nem termelnek természetes avermektineket. ha olyan definiált táptalajon tenyésztjük őket, mely nem tartalmaz RCOOH általános képletű - ahol R jelentése izopropilcsoport vagy (S)-szek-butilcsoport - zsírsavakat. vagy a megadott zsírsavakká a fermentáció során átalakulni képes vegyületet. Az American Type Culture Collection által irányított rendszertani vizsgálatok megerősítik, hogy a fenti l4CO2 vizsgálat alapján kiválasztott 1-3 és HL-026 mutáns törzsek tulajdonságai szoros rokonságot mutatnak a 4 429 042 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban leírt ATCC 31272 szülőtörzzsel, de bizonyos tulajdonságokban eltérnek. így az 1-3 mutáns (ATCC 53567) lényegesen kevesebb spóraláncot képez, mint az ATCC 31272 törzs, a HL-026 törzs (ATCC 53568) pedig gyakorlatilag nem képez légmicéliumot és spórákat, de az a nagyon kevés spóralánc, amit képez, hasonló jellegű, mint az ATCC 31272 törzsé. Kétséges, hogy a HL-026 mutáns hasznosítja-e a rafinózt, mint kizárólagos szénforrást, míg az ATCC 31272 törzs és az 1-3 mutáns erre képes. (A szabadalmaztatok kísérleteiben egyik törzs sem látszott növekedni rafinózon). A HL-026 mutáns törzs egy további tulajdonsága, hogy kevesebb melanin pigmentet termel, mint a másik két törzs, sőt tirozinos agaron egyáltalán nem termeli a színanyagot. Végül, a 4 429 042 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban az ATCC 31272 törzsre megadott leírással ellentétben nem tudtunk növekedést kimutatni olyan táptalajon, mely szénforrásként kizárólag szacharózt tartalmazott.
A Streptomyces avermitilis 1-3 és HL-026 törzseket a Budapesti Egyezmény szerint helyeztük el az American Type Culture Collection-ban (amerikai törzsgyűjtemény) (Rockville, Maryland, USA) Streptomyces avermitilis ATCC 53 567, illetve ATCC 53568 megnevezés alatt.
Ha a találmány szerinti mutánsokat megfelelő primer vegyületet tartalmazó táptalajon tenyésztjük, (I) általános képletű vegyületek keverékét termelik, ahol az (I) általános képletben R jelentése megfelel az alkalmazott primer vegyületnek. Négy termék keletkezhet, melyeket a 4 429 042 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom jelölését alkalmazva „R”-avermektin Al, A2, Bl és B2 elnevezéssel illetünk, ahol „R” természetesen a 25-ös helyzetű szubsztituenst jelenti. így például, ha R jelentése ciklopentilcsoport, a négy lehetséges avermektin:
| triviális név | R> | R3 |
| ciklopentil-avermektin Al | hidrogénatom | CH3 |
| ciklopentil-avermektin A2 | hidroxilcsoport | ch3 |
| ciklopentil-avermektin B1 | hidroxilcsoport | H |
| ciklopentil-avermektin B2 | hidroxilcsoport | H |
Szinefungin jelenlétében a megfelelő demetil-avermektin keletkezik. Általában megfigyelhető, hogy a demetil-avermektin A komponens mennyisége csökken és a demetil-avermektin B komponensé nő.
Az (I) általános képletű vegyületet, ahol megvan a kettős kötés és hiányzik a hidroxilcsoport, alternatív módon előállíthatjuk a megfelelő (I) általános képletű vegyületböl, ahol R1 jelentése hidroxilcsoport és a kettős kötés hiányzik, dehidratációs reakció útján. A reakció előtt szelektíven védjük az 5-ös és 4” helyzetű hidroxilcsoportokat, például t-butil-dimetil-szilil-oxi-acetil származékot képezve, majd szubsztituált tio-karbonil-halogeniddel, például (4-metil-fenoxi)-tio-karbonil-kloriddal regáltatunk, amit magas forráspontú oldószerben, például triklór-benzolban történő melegítés követ, hogy a vízkihasadás megtörténjen. A védőcsoportok eltávolítása után megkapjuk a telítetlen vegyületet. Ezt a reakciót a megfelelő reagensekkel
HU 200487 Β és reakciókörülményekkel a 4 328 335 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom írja le.
Az (I) általános képletű vegyületeket, ahol R3 jelentése hidrogénatom, előállíthatjuk a megfelelő vegyületekből is - ahol R3 jelentése metilcsoport demetilezéssel. A reakciót úgy végezzük, hogy a
5-metoxi vegyületet vagy megfelelő védett származékát higany(II)-acetáttal reagáltatjuk és a kapott 3-acetoxi-enol-étert híg savval hidrolizáljuk az 5-keto vegyülethez jutva. Ezt azután például nátrium-bórhidriddel redukáljuk 5-hidroxi-származékot nyerve. A reakciólépés alkalmas reagenseit és a reakciókörülményékét a 4 423 209 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom írja le.
Az (I) általános képletnek megfelelő olyan vegyületeket, ahol
R1 jelentése hidrogénatom és a kettőskötés hiányzik, előállíthatjuk olyan megfelelő vegyületböl, ahol megvan a kettőskötés és az R1 hidrogénatom, a vegyület szelektív katalitikus hidrogénezésével, alkalmas katalizátort használva. Elvégezhetjük a redukciót például trisz(trifenil-foszfin)-ródi um(I)-kloriddal, amint azt a 0.001.689 számú európai szabadalmi bejelentés és az ennek megfelelő, 4.199.569 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom leírja.
Az (I) általános képletű demetil-avermektinek bioszintéziséhez a S. avermitilis R-COOH általános képletű vegyületeket vagy a fermentáció során ezekké átalakulni képes vegyületeket tud felhasználni. Ezeket a vegyületeket „primer vegyületeknek” hívjuk.
Összefoglalva; ezek R-Z általános képlettel jellemezhetők, ahol
R az előzőekben megadott, és
Z -CH2OH, -CHO, -COOR6, -CH2NH2 vagy -CO-( 1-4 szénatomszámú)-alkánkarbonsav-csoport, és
R6 hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport.
A találmány eljárása abban áll, hogy aerob körülmények között, adott esetben szinefungin jelenlétében a fenti S. avermitilis törzseket tenyésztjük nitrogénforrást, szénforrást, szervetlen sókat és R-COOH általános képletű vegyületet tartalmazó, vizes tápközegben. A savat az oltáskor vagy a fermentáció ideje alatt, adott időközönként adjuk a táptalajhoz. A hozzáadás történhet egyidóben vagy adagonként a fermentáció során.
Az S-adenozil-metionint is adhatjuk az oltás idején vagy a fermentáció adott pontján, egyszerre vagy a fermentáció alatt adagokban, illetve folyamatosan. Az avermektin-termelés nyomonkövetéséhez mintákat veszünk a fermentléből, szerves oldószemei extraháljuk, és a terméket kromagotráfiásan, például HPLC alkalmazásával mutatjuk ki. A fermentációt a termékképzés maximumáig folytatjuk, ez általában 4-15 nap időtartamot jelent.
A primer vegyületek (karbonsavak) előnyös koncentrációja 0,05-3,0 gramm literenként. A primer vegyületet adhatjuk folyamatosan, megszakításokkal vagy egyszerre a táptalajhoz. Az RCOOH általános képletű savat alkalmazhatjuk szabad sav, sója - például nátrium-, lítium- vagy ammóniumsó - vagy a savvá átalakuló származéka formájában. A savat, amennyiben szilárd, előnyös alkalmas oldószerben, például vízben vagy 1-4 szénatomszámú alkoholban oldani.
A szinefungint olyan időben és koncentrációban adjuk a tenyészethez, hogy ezzel a mikroorganizmus növekedését ne akadályozzuk. Általában 0,01-1,0 mM koncentrációban alkalmazzuk. Ezt a mennyiséget előnyösen a fermentáció 24-168 órás korában juttatjuk be. Előnyös a 0,05-0,50 mM, illetve a 0,05-0,25 mM koncentrációtartomány. A fermentációt szénforrást, nitrogénforrást és nyomelemeket tartalmazó szokásos tápközegben végezzük. Előnyös természetesen a táptalaj komponenseit úgy megválasztani, hogy olyan primer vegyületeket, ahol R jelentése izopropilcsoport vagy (S)-szek-butilcsoport ne, vagy csak minimális mennyiségben tartalmazzák.
A fermentációt előnyösen 24—33 “C közötti hőmérséklettartományban végezzük. A fermentáció befejeztével a fermentlevet centrifugáljuk vagy szűrjük, és a micéliumot előnyösen acetonnal vagy metanollal extraháljuk. Az extraktumot betöményítjük, és a kívánt terméket vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel, például metilén-kloriddal, etil-acetáttal, kloroformmal, butanollal vagy metil-izobutil-ketonnal extraháljuk. Az extraktumot bepároljuk, és a nyersterméket, ha szükséges tovább tisztítjuk kromatográfiával, például fordított fázisú HPLC segítségével.
A termék rendszerint (I) általános képletű vegyületek keveréke, ahol R2-ben az R4 és R6 egyike, vagy mindkettő hidrogénatom; R1 jelentése hidroxilcsoport és hiányzik a kettős kötés, vagy R* hidrogénatom és megvan a kettős kötés; és R3 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport. A komponensek aránya változhat az adott mutánsoktól, a primer vegyülettől és - bizonyos mértékig - a szinefungin alkalmazott mennyiségétől, illetve a fermentációs körülményektől függően.
Az R szubsztituens eredete, azaz, hogy a közvetlenül az RCOOH vegyületböl, vagy a fenti előanyagok egyikéből vagy bármi más előanyagból származik, a dezmetil-avermektinek termelése szempontjából lényegtelen. A találmány szerinti eljárás kritikus követelménye viszont, hogy a kívánt R csoport az S. avermitilis számára a fermentációs folyamatok során hozzáférhető legyen.
Alkalmas vegyületek a következők:
2,3-dimetil-vajsav
2-metil-hexánsav
2-metil-pént4-énsav ciklobután-karbonsav ciklopentán-karbonsav ciklohexán-karbonsav cikloheptán-karbonsav (S)-2-metil-pentánsav (R)-2-meti 1-pentánsav.
Az O-metil-transzferáz mutánsokat az itt leírt elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz negatív mutánsokból kaptuk. Azon S. avermitilis mutánsok, melyekben az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitás mutációja kombinálódik az egyik vagy mindkettő O-metil-transzferáz aktivitás mutációjával, ha RCOOH általános képletű vegyületet. vagy a fermentációs folyamatok során ezzé átalakulni képes előanyagot adunk a táptalajhoz, főként B-avermektineket, demetil-avermektineket vagy demetil-B-avermektine5
HU 200487 Β két termelnek. Ezekhez a mutánsokhoz úgy juthatunk hozzá, hogy az itt ismertetett mutánsokat, melyek az ultraibolya fény és/vagy kémiai mutagén ágensek, mint amilyen az N-metil-N-nitrozo-uretán, nitrozo-guanidin, etil-metánszulfonát vagy más, fentebb felsorolt ágens hatására az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitásukat elvesztették, mutagenizáljuk. Alternatív módon kiindulhatunk olyan mutánsokból, melyek az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással rendelkeznek, de hiányzik az egyik vagy mindkettő O-metil-transzferáz aktivitásuk. Ezeket a mutánsokat ultraibolya fénnyel vagy mutagén ágensekkel kezeljük, hogy olyan mutánsokhoz jussunk, melyek nem rendelkeznek az elágazó láncú-2-οχοsav-dehidrogenáz és/vagy az elágazó láncú-aminosav-transzamináz aktivitással.
Az ezek a mutánsok által előállított nem-természetes avermektineket az jellemzi, hogy az ágiikon 5-ös szénatomján és/vagy az oleandróz 3’ és/vagy 3” szénatomján hidroxilcsoportot találunk.
A fent leírt mutánsokat Schulman és munkatársai [Antimicrobiol Agents and Chemotherapy, 29: 620624 (1986)] módszerével határozzuk meg. Ugyanazon céllal és módon használjuk fel őket, mint az ismert avermektinekkel kapcsolatban tették.
A vegyüietek hatásosak endoparaziták okozta különféle megbetegedések kezelésére, ideértve a helmintiázist, melyet leggyakrabban a parazita férgek egy csoportja, a nematódák okoznak. A helmintiázis súlyos gazdasági károkat okoz sertéseknél, juhoknál, lovaknál és szarvasmarháknál, valamint felléphet más háziállatoknál és a baromfiaknál is. A vegyüietek más nematódákkal szemben is hatásosak, így például a kutyákban élősködő Dirofilaria-val szemben. Hatásosak az ember gyomor-bél rendszerében élő Acylostoma, Necator, Ascaris, Strongyloides, Trinchinella, Capillaria, Trichuris. Enterobius ellen, továbbá a vérben és más szövetekben és szervekben élő paraziták, például a Filaria férgek és a bélrendszeren kívüli állapotban levő Strongyliodes és Trichinella ellen.
Sikerrel alkalmazhatók a vegyüietek ektoparazitákkal szemben is, ideértve elsősorban az emlősök és madarak ízeltlábú ektoprazitáit, mint amilyenek az atkák, kullancsok, tetve, legyek, húslegyek, csípő rovarok és a kétszárnyúak; szarvasmarhákon, lovakon élősködő migráló lárváik.
A vegyületeket hatásos inszekticidként használhatjuk a háztartásban előforduló rovarokkal, például csótányokkal, ruhamollyal, múzeumbogárral és háziléggyel szemben, de hatékonyak a raktározott gabonát és mezőgazdasági növényeket károsító rovarok elpusztításában is, mint amilyenek az atkák, levéltetvek, hernyók, és a vándorló egyenesszárnyúak, például a sáskák.
Az (I) általános képletű vegyüietek beviteli módja függ a készítmény megformáltságától, különösen a kezelendő gazdaállattól és a kérdéses parazitától. Antelmintikumként alkalmazva a vegyületeket bejuttathatjuk szájon keresztül, azaz kapszula, bólusz, tabletta vagy ivóié alakjában, de injekcióval vagy beültetéssel is. Ezeket a készítményeket az állat-gyógyszertechnológiában szokásos módon állítjuk elő. így a kapszulákat, bóluszokat vagy tablettákat úgy állíthatjuk elő. hogy a hatóanyagot finoman elporított alkalmas hígító- vagy vivőanyaggal keverjük össze, mely szétesést elősegítő anyagot és/vagy kötőanyagot, például keményítőt, laktózt, talkumot, magnézium-sztearátot, stb. tartalmaz. Az ivóié elkészítéséhez a hatóanyagot vizes oldatban diszpergáljuk, mely diszpergáló vagy nedvesítő anyagot, stb. is tartalmaz. A befecskendezésre alkalmas készítményt steril oldatként készítjük el, ami más anyagokat is tartalmazhat, például az oldatot a vénei izotóniássá tevő sókat vagy glükózt. A kezelendő állatfajtól, a fertőzöttség súlyosságától, a gazdaállat tömegétől függően a készítmények eltérnek egymástól a hatóanyag mennyiségét illetően. Szájon keresztüli adagolásnál testtömegkilogrammonként általában 0,00110 mg hatóanyagot juttatunk be egyszeri vagy osztott dózisként 1-5 napos időtartamra számolva, de alkalmazhatunk alacsonyabb vagy magasabb dózist is, ez a találmány oltalmi körét nem korlátozza.
Az előzőektől eltérő módon a vegyületeket bejuttathatjuk az állatok táplálékával is. E célból tömény tápadalékot vagy premixet készítünk, amit a szokásos takarmányhoz keverhetünk.
Inszekticidként vagy a mezőgazdasági kórokozók elleni szerként a vegyületeket alkalmazhatjuk permetként, porzószerként, emulzióként vagy a mezőgazdasági gyakorlatban szokásos hasonló készítményként.
Az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz hiányos
S. avermitilis 1-3 (ATCC 53567) törzset az alábbi lépéseken keresztül állítottuk elő:
1. lépés:
Az S. avermitilis ATCC 31272 törzset összefüggő telepekké növesztjük 12 nap alatt 30 °C hőmérsékleten New Patch Agar Médium táptalajon. A táptalaj összetétele:
| V-8 táplé0 | 200 ml |
| kalcium-karbonát | 3 g |
| agar | 15 g |
| vízzel kiegészítve | 1000 ml-re |
| Nutrient broth | 1,0 g/1 |
| nátri um-acetát-3-νίζ | 1,4 g/1 |
| izovaleriánsav | 50 mg/1 |
| izovajsav | 50 mg/1 |
| 2-metil-vajsav | 50 mg/1 |
| izoleucin | 250 mg/1 |
| leijein | 250 mg/1 |
| valin | 250 mg/1 |
| nyomelemoldat0 | 1 ml/1 |
a A V-8 táplé nyolc növényi levet (paradicsom, sárgarépa, zeller, répa, petrezselyem, saláta, vízitorma és spenót), aszkorbinsavat, citromsavat és természetes ízesítőszereket tartalmaz (Campbell Soup Company, Camden, NJ. USA).
b A nyomelemoldat összetétele:
vas(III)-klorid-6 víz 2,7 g mangán(II)-szulfát-víz 4,2 g réz-szulfát-5 víz 0,5 g kalcium-klorid 11.0 g bórsav (H3BO3) 0.62 g kobalt-klorid-6 víz 0.24 g cink-klorid 0.68 g nátrium-molibdenát (NajMoOa) 0,24 g
-6HU 200487 Β
A vegyületeket 1 liter 0,1 n sósavban oldjuk.
Három lemezről összegyűjtjük a spórákat, és 20 ml 0.05M trisz/maleinsav pufferben, pH=9,0, szuszpendáljuk.
2. lépés:
ml spóraszuszpenziót adunk egy kémcsőbe, mely 10 mg N-metil-N’-nitro-N-nitrozo-guanidint (NTG) tartalmaz. A kémcsövet 28 ’C hőmérsékleten rázatjuk 60 percen keresztül, majd a spórákat alaposan kimossuk 1 %-os nátrium-klorid oldattal.
3. lépés:
A mosott spórákat 1 %-os nátrium-klorid oldatban szuszpendáljuk, és azonos térfogatú 80 %-os etilén-glikollal keverjük össze. A szuszpenziót -20 ’C hőmérsékleten tároljuk, és ezt használjuk sejtforrásként a mutánsok keresésénél. Milliliterenként kb. 104 telepet kapunk.
A spóraszuszpenzióból annyit kenünk fel egy YPD lemezre, hogy lemezenként kb. 100 telepet kapjunk. Az YPD táptalaj összetétele: 10 g/1 élesztőkivonat, 10 g/1 Bacto pepton (Difco Laboratories, Detroit, Michigan 48238, USA), 10 g/1 dextróz és 15 g/1 Bacto agar (Difco Laboratories).
4. lépés:
A telepeket 28 ’C hőmérsékleten növesztjük 2-3 héten át, majd az egyes telepeket egy szokásos 96 lyukú mikrotiterlemez lyukaiba visszük át. Ugyancsak mindegyik átvitt telepről friss agarlemezre is viszünk, hogy a mutánsok azonosítása után legyenek friss sejtjeink.
5. lépés:
A mikrotiterlemez lyukaiba 75 μΐ M9 pufferoldatot adunk, mely tartalmaz még 1 % glükózt, 0,1 % kazaminosavakat, 0,01 % izovaleriánsavat, 0,01 % izovajsavat és 0,01 % 2-metil-vajsavat is. Miután néhány napon át 28 ’C hőmérsékleten inkubáltunk, a sejteket megvizsgáljuk az elágazó láncú-2-oxosav—dehidrogenáz aktivitás szempontjából. Az M9 pufferoldat öszszetétele: literenként 6 g dinátrium-hidrogén-foszfát, 3 g kálium-dihidrogén-foszfát, 0,5 g nátrium-klorid és 1 g ammónium-klorid. Az oldatot sterilezzük, majd sterilen 1 ml 1 M magnézium-szulfát oldatot és 1 ml 0,1 M kalcium-klorid oldatot adunk hozzá.
6. lépés:
M9 pufferoldatban rövid ultrahangos kezeléssel emulgeálunk 5 % toluolt. 25 ml emulzióhoz hozzáadunk 1,2 ml, milliliterenként 2,5 mikrocurie [l4C-l]-2 -oxo-izokapronsavat tartalmazó oldatot (10 mikrocurie/mikromól). A vizsgálandó telepeket tartalmazó egyes lyukakhoz a fenti keverékből hozzáadunk 50 μΐ-t.
7. lépés:
A titerlemez egyes lyukaiban fejlődő jelzett széndioxidot Tábor és munkatársai [J. Bacteriol., 128:485486 (1976)] „Convenient method fór detecting 14CO? in multiple samples: application to rapid Screening fór mutáns módszerével kötjük meg és mutatjuk ki.
Az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással nem rendelkező mutánsoknál a kontrolihoz képest nem keletkezik több jelzett bárium-karbonát (Ba14CO3). Pozitív eredménynél az autoradiogrammon sötét folt jelzi a Ba14CO3 keletkezését, negatív eredménynél nincs, vagy csak nagyon gyenge ez a folt. A módszer érzékenyebbé tehető, ha a módszer alábbi módosított változatát alkalmazzuk.
A 2-3 hetes növesztés helyett az egyes telepeket
7-14 napos korukban visszük a mikrotiterlemezre és az 5. lépés elhagyásával a 6. és 7. lépés szerint vizsgáljuk őket.
A jelzett széndioxid mennyiségi mérésére szolgáló még tovább javított módszernél a mutánsokat olyan M9 pufferoldatban növesztjük, mely 1 % glükózt és 0,1 % „Syncasa-bcaa” készítményt tartalmaz. A „Syncasa-bcaa” körülbelül a kereskedelmi kazaminosavaknak megfelelő L-aminosav keverék, de nem tartalmaz L-valint, L-izoleucint és L-leucint (lásd alább).
Miután nagy sejtsűrűségű tenyészetet készítettünk, a sejteket M9 pufferoldattal mossuk és újra szuszpendáljuk 1 % toluolt tartalmazó M9 pufferoldatban. Előzőleg a toluolt ultrahangos kezeléssel tejfehér emulzióvá diszpergáljuk. A sejtek permeabilizálása céljából a sejt/puffer/toluol szuszpenziót 30 ’C hőmérsékleten inkubáljuk 40 percen keresztül. A permeabilizált sejteket M9 pufferoldattal mossuk és újra szuszpendáljuk az eredetileg alkalmazott térfogat egyötödét kitevő M9 pufferoldatban. 180 μΐ ilyen szuszpenziót használnak fel a vizsgálathoz.
A toluollal kezelt sejteket tartalmazó 300 μΐ reakciókeverék összetétele: 0,4 mM tiamin-pirofoszfát (TPP), 0,11 mM koenzim-A (CoA), 0,68 mM nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD), 2,6 mM ditiotreitol (DTT), 4,1 mM magnézium-klorid, 60 mM Tris-HCl, pH=7,5 és 6000 cpm [14C-l]-2-oxo-izokapronsav (mikroCurie/mM). A számlálás hatékonysága 73 %. A reakciót egy 15 ml-es szcintillációs csőben végezzük, melynek kupakjába egy 2x2 cm-es Whatman 4 papímégyzetet szorítottunk. A papírba 30 μΐ 1 mM Hyamine Hydroxide (1 M metil-benzetonium-hidroxid metanolos oldat; Sigma Chemical Co., St. Louis, MO 63178, USA) itatunk fel, mely a reakció során felszabaduló jelzett széndioxidot megköti. Kétórás inkubálás után a papírt 10 ml Beckman Aquasol II oldatba (Universal LSC, New England Nuclea Research Products, Boston, MA 02118) merítjük, és 4 órás vagy hosszabb kiegyensúlyozódás után mérjük a radioaktivitást folyadék szcintillációs számlálóban. A sejteket nem tartalmazó vak kontroll kb. 50-300 cpm aktivitást mutat.
Az 1-3 mutánsnál és a hozzá hasonló mutánsoknál az érték kevesebb vagy azonos a kontrolinál kapott értékkel, míg a szülőtörzs a kontroll értékének többszörösét adja.
A HL-026 (ATCC 53568) törzset az alábbiak szerint állítottuk elő az S. avermitilis 1-3 (ATCC 53567) törzsből.
S. avermitilis 1-3 (ATCC 53567) törzset tápagar lemezen szélesztettünk. Viszonylag nagy számú spontán változat jelent meg, melyek némelyike 4 napos 30 ’C hőmérsékleten történő inkubálás elteltével nem fejlesztett légmicéliumot. Izoláltunk néhány ilyen változatot, és megvizsgáltuk ciklopentán-karbonsavat tartalmazó AP-5 közegben fermentálva képesek-e nem-természetes avermektineket termelni. A természetes avermektinektől mentes nem-természetes avermekti7
-7HU 200487 Β neket termelő izolátumok közül az egyik törzset, mely a rázott lombikos kísérletek szerint az S. avermitilis 1-3 (ATCC 53576) szülőtörzsnél magasabb avermektintermelő képességgel rendelkezett, HL-026 (ATCC 53568) jelöléssel láttuk el.
A „Syncasa-bcaa” készítmény összetétele százszoros koncentrációban literenként:
L-alanin 3 g
L-arginin 4 g
L-aszparaginsav 6 g
L-cisztin 1 g
L-glutaminsav 20 g glicin 1 g
L-hisztidin 2 g
L-lizin 7 g
L-metionin 3 g
L-fenil-alanin 6 g
L-prolin 10 g
L-szerin 6 g
L-treonin 4 g
L-tirozin 4 g
L-triptofán 1 g
Az oldat kémhatását pH=7 értékre -állítjuk be és szűréssel sterilizáljuk. Egy térfogat koncentrátumot adunk 99 térfogatnyi táptalajhoz.
A példákban használt táptalajok összetétele:
AS-7 táptalaj hidrolizált keményítő0 20 g/1
Ardamine pH/? 5 g/1
Pharmamedia6' 15 g/1 kalcium-karbonát 2 g/1
A kémhatást nátrium-hidroxiddal pH=7,2 értékre állítjuk be.
a Bacillus licheniformis-ból származó a-amilázzal hidrolizált keményítő, dextróz-ekvivalens tartalom: 40 % ±5 % (α-amiláz: Novo Enzymes, Wilton, CT; „Termomyl”).
b Yeast Products, Inc., Clifton, NJ 07012, USA. c Traders Protein., Memphis, TN 38108, USA.
AP-5 táptalaj literenként hidrolizált keményítő 80 g
Ardamine pH 5 g dikálium-hidrogén-foszfát 1 g magnézium-szulfát-7 víz 1 g nátrium-klorid 1 g kalcium-karbonát 7 g vas(II)-szulfát-7 víz 0;01 g mangán(II)-klorid-7 víz 0,001 g cink-szulfát-7 víz 0,001 g
P-2000 habzásgátló 1 ml
Az oldat kémhatást 25 %-os nátrium-hidroxiddal pH=6,9 értékre állítjuk be.
A HPLC vizsgálatokat az alábbi körülmények között végezzük:
Mozgó fázis: 150 ml víz ml acetonitril literre kiegészítve metanollal Oszlop: Ultrasphere ODS, 25 cm (Beckman Instruments, Fullerton, CA 92634-3100, USA).
Áramlási sebesség: 0,75 ml/perc
Detektálás: 240 nm-nél
Csillapítás (érzékenység): 6 körüli
A mintát 35 ml acetontitril és 390 ml metanol elegyével hígítjuk (mintahígító).
Standardok:
1. 0,5 mg avermektin A2A-t 10 milliliteres mérőedényben jelig töltve metanollal oldunk.
2. 0,5 mg vizsgálandó anyagot 10 milliliteres mérőedényben jelig töltve metanolban oldunk. Kromatografáláshoz összemérünk 100 μΐ (1) oldatot, 100 μΐ (2) oldatot és 800 μΐ mozgófázist.
Mintaelőkészítés:
1. 1 ml fermentlevet lecentrifugálunk:
2. az üledék felkavarása nélkül leöntjük a felülúszót;
3. az üledékhez hozzáadunk 100 μΐ HPLC minőségű vizet és felszuszpendáijuk;
4. hozzáadunk a szuszpenzióhoz 2 ml mintahígítót és alaposan összekeverjük;
5. a keveréket leszűrjük és HPLC-vel vizsgáljuk.
A fenti HPLC rendszerben megvizsgálva a természetes avermektineket, az egyes avermektínek csúcsainak retenciós idejét a belső standardként használt oligomicin-A retenciós idejéhez viszonyítjuk. Az oligomicin-A csaknem mindig megjelenik, mint melléktermék a S. avermitilis fermentlevében, és az itt ismertetett mutánsok esetében ez az egyetlen, a HPLC kromatogramon megjelenő termék, ha a táptalaj nem tartalmaz RCOOH általános képletű - ahol R jelentése a fentiekben meghatározott - savat, illetve ezzé átalakulni képes vegyületet. Az oligomicin-A retenciós ideje általában 12,5 és 14 perc között van. A retenciós idők aránya sokkal pontosabb az avermektinek azonosítása szempontjából. A HPLC kromatogrammon az avermektin termékek általános sorrendje: B2, A2, B1 és Al.
| természetes avermektínek | avermektin retenciós idő oligomicin-A retenciós idő |
| B2b | 0,70 |
| B2a | 0,84 |
| A2b | 0,90 |
| A2a | 1,09 |
| Blb | 1,40 |
| Bla | 1,83 |
| Alb | 1,83 |
| Alá | 2,42 |
Megjegyzendő, hogy a Bla és az Alb nem válnak el egymástól.
HU 200487 Β
| nem-természetes avermektinek | avermektin retenciós idő oligomicin-A retenciós idő |
| ciklopentil-B2 | 0,94 |
| ciklopentil-A2 | 1,23 |
| ciklopentil-Bl | 1,99 |
| ciklopentil-Al | 2,62 |
A retenciós idők napról-napra 1-2 percet változnak, az oligomicin-A általában 12,5 és 14 perc között jelenik meg.
Az elmondottak szemléltetésére az alábbiakban példákat adunk meg.
7. példa
A demetilált ciklohexil-avermektinek előállításához 500 milliliteres horpasztott lombikban levő 100 ml AS-7 táptalajt lefagyasztott S. avermitilis HL-026 (ATCC 53568) törzzsel oltunk be, és a tenyészetet 28-30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 24-28 órán keresztül. 1 ml így nyert tenyészettel oltunk be egy 300 milliliteres lombikban levő 40 ml AP-5 táptalajt (literenkén 0,6 g glutaminsavat tartalmaz). 28-30 ’C hőmérsékleten inkubálunk 96 órán át rázatva, majd literenként 0,2 g ciklohexán-karbonsavat (nátriumsó alakjában) és 0,1 mM szinefungint adunk a tenyészethez. A 312 órás minta HPLC kromatogrammja demetilált ciklohexil-avermektin-B2, A2 és B1 jelenlétét bizonyítja; a demetil-származékoknak a megfelelő ciklohexil-avermektinek retenciós idejéhez viszonyított retenciós idői a következők;
di-demet-CH-B2/CH-B2 = 0,470 mono-demet-CH-B2/CH-B2 = 0,515 di-demet-CH-A2/CH-A2 = 0,466 mono-demet-CH-A2/CH-A2 = 0,520 di-demet-CH-Bl/CH-Bl = 0,486 mono-demet-CH-Bl/CH-Bl = 0,517 CH = ciklohexil demet = demetil
2. példa
A demetilált ciklopentil-avermektinek előállításához 500 milliliteres horpasztott lombikban levő 100 ml AS-7 táptalajt lefagyasztott S. avermitilis HL-026 (ATCC 53568) törzzsel oltunk be, és a tenyészetet 28-30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 24-28 órán keresztül. 1 ml így nyert tenyészettel oltunk be egy 300 milliliteres lombikban levő 40 ml AP-5 táptalajt (literenként 0,6 g glutaminsavat tartalmaz). 28-30 °C hőmérsékleten rázatjuk 96 órán át, majd literenként 0,4 g ciklopentán-karbonsavat (nátriumsó alakjában) és 0,1 mM szinefungint adunk a tenyészethez. A 312 órás minta HPLC kromatogrammja demetilált ciklopentil-avermektin B2, A2 és Β1 jelenlétét bizonyítja; a demetil-származékoknak a megfelelő ciklopentil-avermektinek retenciós idejéhez viszonyított retenciós idői a következők:
di-demet-CP-B2/CP-B2 = 0,519 mono-demet-CP-B2/CP-B2 = 0,564 di-demet-CP-A2/CP-A2 = 0.513 mono-demet-CP-A2/CP-A2 = 0,567 di-demet-CP-Bl/CP-Bl = 0,538 mono-demet-CP-Bl/CP-Bl = 0,593 CP = ciklopentil
3. példa
A demetil-ciklobutil-avermektinek előállításához 500 milliliteres horpasztott lombikban levő 100 ml AS-7 táptalajt lefagyasztott S. avermitilis HL-026 (ATCC 53568) törzzsel oltunk be, és a tenyészetet 28-30 °C hőmérsékleten rázatjuk 24-28 órán keresztül. 1 ml így nyert tenyészettel oltunk be egy 300 milliliteres lombikban levő 40 ml AP-5 táptalajt (literenkén 0,6 g glutaminsavat tartalmaz). 28-30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 96 órán át, majd literenként 0,4 g ciklobután-karbonsavat (nátriumsó alakjában) és 0,1 mM szinefungint adunk a tenyészethez. A 312 órás minta HPLC kromatogrammja demetil-ciklobutil-avermektin B2, A2 és B1 jelenlétét bizonyítja; a demetil-származékoknak a megfelelő ciklobutil-avermektinek retenciós idejéhez viszonyított retenciós idői a következők:
di-demet-CB-B2/CB-B2 = 0,581 mono-demet-CB-B2/CB-B2 = 0,627 di-demet-CB-A2/CB-A2 = 0,570 mono-demet-CB-A2/CB-A2 = 0,626 di-demet-CB-B 1/CB-B1 = 0,574 mono-demet-CB-Bl/CB-Bl = 0,623 CB = ciklobutil
4. példa
A demetil-2-pentiI-avermektinek előállításához 500 milliliteres lombikban levő 100 ml AS-7 táptalajt lefagyasztott S. avermitilis HL-026 (ATCC 53568) törzzsel oltunk be, és a tenyészetet 28—30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 24-28 órán keresztül. 1 ml így nyert tenyészettel oltunk be egy 300 milliliteres lombikban levő 40 ml AP-5 táptalajt (literenként 0,6 g glutaminsavat tartalmaz). 28-30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 96 órán keresztül, majd literenként 0,4 g 2-metil-valeriánsavat (nátriumsó alakjában) és 0,1 mM szinefungint adunk a tenyészethez. A 312 órás minta HPLC kromatogrammja demetil-2-pentil-avermektin B2 és A2 jelenlétét bizonyítja; a demetil-származékoknak a megfelelő 2-pentil-avermektinek retenciós idejéhez viszonyított retenciós idői a következők:
di-demet-IP-B2/IP-B2 = 0,497 mono-demet-IP-B2/IP-B2 = 0,541 di-demet-IP-A2/IP-A2 = 0,493 mono-demet-IP-A2/IP-A2 = 0,545 IP = 2-pentil
5. példa
A demetilált l-metíl-3-butenil-avermektinek előállításához 500 milliliteres horpasztott lombikban levő 100 ml AS-7 táptalajt lefagyasztott S. avermitilis HL-026 (ATCC 53568) törzzsel oltunk be, és a tenyészetet 28-30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 24-28 órán keresztül. 1 ml így nyert tenyészettel oltunk be egy 300 milliliteres lombikban levő 40 ml AP-5 táptalajt (literenként 0,6 g glutaminsavat tartalmaz). 28-30 ’C hőmérsékleten rázatjuk 96 órán keresztül, majd literenként 0,4 g 2-metil-4-penténsavat (nátriumsó alakjában) és 0,1 mM szinefungint adunk a tenyészethez. A 312 órás mint HPLC kromatogrammja 9
HU 200487 Β demetilált l-metil-3-butenil-avermektin B2, A2 és BI jelenlétét bizonyítja; a demetil-származékoknak a megfelelő l-metil-3-butenil-avermektinek retenciós idejéhez viszonyított retenciós idői a következők:
di-demet 1M3B-B2/1M3B-B2 = 0,547 mono-demet 1M3B-B2/1M3B-B2 = 0,591 di-demet 1M3B-A2/1M3B-A2 = 0,532 mono-demet 1M3B-A2/1M3B-A2 = 0,586 di-demet 1M3B-B1/1M3B-B1 = 0,551 1M3B = l-metil-3-butenil.
Claims (4)
1. Eljárás az (I) általános képletű - ahol a szaggatott vonal jelentése adott esetben a 22-es és a 23-as hely közötti kettőskötés;
R1 jelentése hidroxilcsoport és a kettőskötés hiányzik, vagy a kettőskötés jelen van és az R1 szubsztituens hidrogénatom;
R jelentése α-helyzetben elágazó 3-8 szénatomszámú alkil-, 3-8 szénatomszámú alkenil- vagy 3-8 szénatomszámú cikloalkilcsoport, azonban izopropilcsoporttól vagy szek-butil-csoporttól eltérő;
R2 jelentése (II) általános képletű diszacharidcsoport, melyen belül
R4 és R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy legalább egyikük jelentése hidrogénatom: és
R3 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces avermitilis ATCC 53568 törzset vagy annak elágazó láncú 2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással és elágazó láncú aminosav-transzamináz aktivitással vagy ez említett aktivitások valamelyikével nem rendelkező mutánsát vagy variánsát asszimilálható szénforrást, nitrogénforrást, szervetlen sókat és egy, az avermektin bioszintézisében felhasználódni képes R-COOH általános képletű vegyületet
- ahol R a fenti tartalmazó vizes táptalajon tenyésztjük aerob körülmények között, adott esetben szinefungin jelenlétében.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan R-COOH általános képletű vegyületet alkalmazunk, ahol R jelentése ciklobutil-, ciklopentil-, ciklohexil-, cikloheptil-, 2-pentil-, 2,3-dimetil-propil-, 2-pent-4-én-il-, S-2-pentil-, R-2-pentil- vagy 2-hexil-csoport.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan R-COOH általános képletű vegyületet alkalmazunk, ahol R jelentése ciklopentil- vagy ciklohexilcsoport.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan R-COOH általános képletű vegyületet alkalmazunk, ahol R jelentése α-helyzetben elágazó, 3-8 szénatomszámú alkilcsoport, de izopropilcsoporttól vagy szek-butil-csoporttól eltérő.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US651287A | 1987-01-23 | 1987-01-23 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT47978A HUT47978A (en) | 1989-04-28 |
| HU200487B true HU200487B (en) | 1990-06-28 |
Family
ID=21721247
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU88260D HU201973B (en) | 1987-01-23 | 1988-01-22 | Process for producing avermeclin beta derivatives |
| HU88261A HU200487B (en) | 1987-01-23 | 1988-01-22 | Process for producing new demethylavermeltin derivatives |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU88260D HU201973B (en) | 1987-01-23 | 1988-01-22 | Process for producing avermeclin beta derivatives |
Country Status (30)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0276103B1 (hu) |
| JP (2) | JPH0681757B2 (hu) |
| KR (2) | KR900004419B1 (hu) |
| CN (1) | CN1056883C (hu) |
| AR (1) | AR241798A1 (hu) |
| AT (2) | ATE96174T1 (hu) |
| AU (2) | AU595673B2 (hu) |
| BG (1) | BG51051A3 (hu) |
| BR (1) | BR8800271A (hu) |
| CZ (1) | CZ279782B6 (hu) |
| DD (2) | DD290214A5 (hu) |
| DE (2) | DE3884973T2 (hu) |
| DK (2) | DK28988A (hu) |
| EG (1) | EG18797A (hu) |
| ES (2) | ES2059498T3 (hu) |
| FI (2) | FI90091C (hu) |
| GR (1) | GR3007586T3 (hu) |
| HU (2) | HU201973B (hu) |
| IE (2) | IE61066B1 (hu) |
| IL (2) | IL85118A (hu) |
| IN (1) | IN167980B (hu) |
| MA (1) | MA21160A1 (hu) |
| MY (1) | MY103514A (hu) |
| NZ (2) | NZ223271A (hu) |
| PL (2) | PL156763B1 (hu) |
| PT (2) | PT86583B (hu) |
| RU (1) | RU1806198C (hu) |
| SK (1) | SK279351B6 (hu) |
| YU (1) | YU47878B (hu) |
| ZA (3) | ZA88448B (hu) |
Families Citing this family (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4806527A (en) * | 1987-03-16 | 1989-02-21 | Merck & Co., Inc. | Avermectin derivatives |
| US4874749A (en) * | 1987-07-31 | 1989-10-17 | Merck & Co., Inc. | 4"-Deoxy-4-N-methylamino avermectin Bla/Blb |
| EP0313297B1 (en) * | 1987-10-23 | 1993-05-19 | Pfizer Inc. | Process for production of avermectin aglycones and cultures therefor |
| GB8807280D0 (en) * | 1988-03-26 | 1988-04-27 | Pfizer Ltd | Antiparasitic agents |
| GB8811036D0 (en) * | 1988-05-10 | 1988-06-15 | Glaxo Group Ltd | Chemical compounds |
| GB8813760D0 (en) * | 1988-06-10 | 1988-07-13 | American Cyanamid Co | Chemical process |
| GB8815967D0 (en) * | 1988-07-05 | 1988-08-10 | Pfizer Ltd | Antiparasitic agents |
| NZ231772A (en) * | 1988-12-23 | 1992-11-25 | Merck & Co Inc | Avermectin derivatives, preparation and parasiticidal compositions thereof |
| NZ231773A (en) * | 1988-12-23 | 1992-09-25 | Merck & Co Inc | Avermectin derivatives, preparation and parasiticidal pharmaceutical compositions thereof |
| US5015630A (en) * | 1989-01-19 | 1991-05-14 | Merck & Co., Inc. | 5-oxime avermectin derivatives |
| US4897383A (en) * | 1989-02-13 | 1990-01-30 | Merck & Co., Inc. | Avermectin derivatives |
| US5252474A (en) * | 1989-03-31 | 1993-10-12 | Merck & Co., Inc. | Cloning genes from Streptomyces avermitilis for avermectin biosynthesis and the methods for their use |
| US5030622A (en) * | 1989-06-02 | 1991-07-09 | Merck & Co., Inc. | Avermectin derivatives |
| US5057499A (en) * | 1989-06-02 | 1991-10-15 | Merck & Co. Inc. | Avermectin derivatives |
| US5023241A (en) * | 1989-07-31 | 1991-06-11 | Merck & Co., Inc. | Avermectin derivatives |
| US5830875A (en) * | 1989-10-30 | 1998-11-03 | Merck & Co., Inc. | 24-and 25-substituted avermectin and milbemycin derivatives |
| JP2888586B2 (ja) * | 1990-03-05 | 1999-05-10 | 社団法人北里研究所 | エバーメクチンの特定成分を選択生産するための微生物およびその選択的製造法 |
| US5169839A (en) * | 1990-05-11 | 1992-12-08 | Merck & Co., Inc. | Derivatives of 3'- and 3"-o-desmethyl avermectin compounds, compositions and methods of treating melmintic and parasitic infections |
| US5208222A (en) * | 1991-03-28 | 1993-05-04 | Merck & Co., Inc. | 4"-and 4'-alkylthio avermectin derivatives |
| US5240915A (en) * | 1991-10-15 | 1993-08-31 | Merck & Co., Inc. | Avermectin derivatives |
| US6103504A (en) * | 1992-03-25 | 2000-08-15 | Pfizer Inc. | Process for production of avermectins and cultures therefor |
| US5292647A (en) * | 1992-11-30 | 1994-03-08 | Eli Lilly And Company | Strain of streptomyces for producing avermectins and processes therewith |
| CN1038330C (zh) * | 1993-07-05 | 1998-05-13 | 塞泰克斯公司 | 阿弗麦菌素的生产与分离 |
| EP0711349B1 (en) * | 1993-07-30 | 2003-09-03 | Pfizer Inc. | Genes encoding branched-chain alpha-ketoacid dehydrogenase complex from streptomyces avermitilis |
| JP2761296B2 (ja) * | 1993-10-05 | 1998-06-04 | フアイザー・インコーポレイテツド | ドラメクチンの製造方法および駆虫性中間体 |
| FI942725A (fi) * | 1993-12-16 | 1995-06-17 | Pfizer | Haaraketjuista alfaketohappodenydrogenaasikompleksia koodaavia geenejä Streptomyces avermitiliksesta |
| US5701591A (en) * | 1995-04-07 | 1997-12-23 | Telecommunications Equipment Corporation | Multi-function interactive communications system with circularly/elliptically polarized signal transmission and reception |
| CN1297485A (zh) * | 1998-02-13 | 2001-05-30 | 辉瑞产品公司 | 介导除虫菌素b2:b1比例的除虫链霉菌基因 |
| IL147563A0 (en) * | 1999-08-12 | 2002-08-14 | Pfizer Prod Inc | Streptomyces avermitilis gene directing the ratio of b2:b1 avermectins |
| KR100415395B1 (ko) * | 2000-08-02 | 2004-01-16 | 한국생명공학연구원 | 에버멕틴 ｂｃ-5-ｏ-메칠트랜스퍼라제의 유전자가 파괴된 스트렙토마이세스 에버미티리스 변이균주 및 그의 제조 방법 |
| ES2373629T3 (es) | 2002-02-12 | 2012-02-07 | Pfizer Products Inc. | Gen de streptomyces avemitilis que dirige la proporción de avermectinas b2:b1. |
| WO2023203038A1 (en) | 2022-04-19 | 2023-10-26 | Syngenta Crop Protection Ag | Insect, acarina and nematode pest control |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE434277B (sv) | 1976-04-19 | 1984-07-16 | Merck & Co Inc | Sett att framstella nya antihelmintiskt verkande foreningar genom odling av streptomyces avermitilis |
| NZ188459A (en) * | 1977-10-03 | 1982-09-07 | Merck & Co Inc | Derivatives of c-076 compounds and pesticidal compositions |
| US4429042A (en) | 1978-09-08 | 1984-01-31 | Merck & Co., Inc. | Strain of Streptomyces for producing antiparasitic compounds |
| ES8800986A1 (es) * | 1985-07-27 | 1987-12-01 | Pfizer | Un procedimiento para la produccion de un nuevo derivado de avermectina |
| GB8606120D0 (en) * | 1986-03-12 | 1986-04-16 | Glaxo Group Ltd | Process |
-
1987
- 1987-12-10 IN IN1059/DEL/87A patent/IN167980B/en unknown
-
1988
- 1988-01-18 BG BG082657A patent/BG51051A3/xx unknown
- 1988-01-18 EP EP88300354A patent/EP0276103B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-18 ES ES88300354T patent/ES2059498T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-18 AT AT88300354T patent/ATE96174T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-01-18 IL IL85118A patent/IL85118A/xx not_active IP Right Cessation
- 1988-01-18 DE DE88300354T patent/DE3884973T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-19 MA MA21397A patent/MA21160A1/fr unknown
- 1988-01-19 MY MYPI88000037A patent/MY103514A/en unknown
- 1988-01-20 ES ES88300426T patent/ES2053719T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-20 AT AT88300426T patent/ATE87927T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-01-20 EP EP88300426A patent/EP0276131B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-20 DE DE8888300426T patent/DE3879975T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-21 SK SK407-88A patent/SK279351B6/sk unknown
- 1988-01-21 EG EG3588A patent/EG18797A/xx active
- 1988-01-21 PT PT86583A patent/PT86583B/pt unknown
- 1988-01-21 PT PT86584A patent/PT86584B/pt unknown
- 1988-01-21 PL PL1988270238A patent/PL156763B1/pl unknown
- 1988-01-21 CZ CS88407A patent/CZ279782B6/cs unknown
- 1988-01-21 PL PL1988270239A patent/PL156764B1/pl unknown
- 1988-01-21 IL IL85165A patent/IL85165A/xx not_active IP Right Cessation
- 1988-01-22 YU YU11988A patent/YU47878B/sh unknown
- 1988-01-22 ZA ZA88448A patent/ZA88448B/xx unknown
- 1988-01-22 CN CN88100649A patent/CN1056883C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-22 IE IE16188A patent/IE61066B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-01-22 HU HU88260D patent/HU201973B/hu unknown
- 1988-01-22 FI FI880280A patent/FI90091C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-01-22 DD DD88312393A patent/DD290214A5/de unknown
- 1988-01-22 JP JP63012462A patent/JPH0681757B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-22 DK DK028988A patent/DK28988A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-01-22 AR AR88309888A patent/AR241798A1/es active
- 1988-01-22 HU HU88261A patent/HU200487B/hu unknown
- 1988-01-22 ZA ZA88449A patent/ZA88449B/xx unknown
- 1988-01-22 ZA ZA88447A patent/ZA88447B/xx unknown
- 1988-01-22 DK DK198800290A patent/DK175720B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-01-22 IE IE16088A patent/IE61483B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-01-22 NZ NZ223271A patent/NZ223271A/en unknown
- 1988-01-22 DD DD88312394A patent/DD267512A5/de unknown
- 1988-01-22 NZ NZ223272A patent/NZ223272A/xx unknown
- 1988-01-22 FI FI880281A patent/FI90088C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-01-22 RU SU884355079A patent/RU1806198C/ru active
- 1988-01-22 AU AU10696/88A patent/AU595673B2/en not_active Expired
- 1988-01-22 KR KR1019880000470A patent/KR900004419B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-01-23 KR KR1019880000506A patent/KR910002225B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-01-23 JP JP63011881A patent/JPH0817693B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-01-25 BR BRPI8800271-3A patent/BR8800271A/pt not_active IP Right Cessation
-
1991
- 1991-02-15 AU AU71110/91A patent/AU631298B2/en not_active Expired
-
1993
- 1993-04-08 GR GR930400638T patent/GR3007586T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU200487B (en) | Process for producing new demethylavermeltin derivatives | |
| US5077278A (en) | Non-natural demethylavermectins compositions and method of use | |
| KR900007937B1 (ko) | 아베르멕틴의 제조방법 및 그를 위한 배양물 | |
| US5234831A (en) | Cultures for production of B avermectins | |
| US5238848A (en) | Cultures for production of avermectins | |
| US5240850A (en) | Cultures for production of avermectin aglycones | |
| US5387509A (en) | Ethylated avermectins | |
| JPH01153083A (ja) | アベルメクチンアグリコンの製造法およびそのための培養菌株 | |
| US5525506A (en) | Process for production of avermectins and cultures therefor | |
| JP2858951B2 (ja) | アベルメクチン類の産生プロセスとそのための培養法 | |
| AP64A (en) | "Process for production of B avermectins and cultures therefor". |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 |