ES2249779T3 - Inhibidores de la proteasa retroviral de bis aminoacido de hidroxietilamino sulfonamida. - Google Patents

Inhibidores de la proteasa retroviral de bis aminoacido de hidroxietilamino sulfonamida.

Info

Publication number
ES2249779T3
ES2249779T3 ES96910337T ES96910337T ES2249779T3 ES 2249779 T3 ES2249779 T3 ES 2249779T3 ES 96910337 T ES96910337 T ES 96910337T ES 96910337 T ES96910337 T ES 96910337T ES 2249779 T3 ES2249779 T3 ES 2249779T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
carbon atoms
alkyl
radicals
amino
ethyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES96910337T
Other languages
English (en)
Inventor
Daniel P. Getman
Gary A. Descrescenzo
John N. Freskos
Michael L. Vasquez
James A. Sikorski
Balekudru Devadas
Srinivasan Nagarajan
David L. Brown
Joseph J. Mcdonald
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GD Searle LLC
Original Assignee
GD Searle LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GD Searle LLC filed Critical GD Searle LLC
Application granted granted Critical
Publication of ES2249779T3 publication Critical patent/ES2249779T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Abstract

COMPUESTOS SELECCIONADOS DE ACIDO BIS AMINO SULFONAMIDA DE FORMULA (I) SON EFICACES COMO INHIBIDORES DE PROTEASAS RETROVIRALES Y, EN PARTICULAR, COMO INHIBIDORES DE LA PROTEASA DE HIV. LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A TALES INHIBIDORES DE PROTEASAS RETROVIRALES Y, MAS PARTICULARMENTE, SE REFIERE A NUEVOS COMPUESTOS SELECCIONADOS, LA COMPOSICION Y EL METODO PARA INHIBIR PROTEASAS RETROVIRALES, TALES COMO LA PROTEASA DEL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANO (HIV), PARA PREVENIR PROFILACTICAMENTE LA INFECCION RETROVIRICA O LA PROPAGACION DE UN RETROVIRUS Y PARA EL TRATAMIENTO DE UNA INFECCION RETROVIRICA.

Description

Inhibidores de la proteasa retroviral de bis aminoácido de hidroxietilamino sulfonamida.
Antecedentes de la invención
La presente invención se relaciona con inhibidores de la proteasa retroviral y, más particularmente, se relaciona con nuevos compuestos, composiciones y métodos para inhibir a las proteasas retrovirales, tal como a la proteasa del virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Esta invención, en particular, se relaciona con los compuestos inhibidores de la proteasa retroviral del bis aminoácido hidroxietilamino sulfonamida, composición y método para inhibir a las proteasas retrovirales, prevenir profilácticamente la infección retroviral o la diseminación de un retrovirus, y el tratamiento de una infección retroviral, por ejemplo, una infección por el VIH. El objeto de la invención también se relaciona con los procesos para elaborar tales compuestos así como los intermediarios útiles en tales procesos.
Durante el ciclo de replicación o de transcripción de los genes, los productos se trasladan como proteínas. Estas proteínas son posteriormente procesadas por medio de una proteasa codificada en forma viral (o proteinasa) para producir enzimas virales y proteínas estructurales del núcleo del virus. Más comúnmente, las proteínas precursoras gap se procesan dentro de las proteínas núcleo y las proteínas precursoras pol se procesan dentro de las enzimas virales, por ejemplo, transcripstasa reversa y proteasa retroviral. Se ha demostrado que es necesario el procesamiento correcto de las proteínas precursoras por medio de la proteasa retroviral para el montaje de los viriones infecciosos. Por ejemplo, se ha demostrado que las mutaciones del marco de lectura en la región de la proteasa del gen pol del VIH, previene el procesamiento de la proteína precursora gap. También se ha demostrado a través de la mutagénesis dirigida al sitio de un residuo de ácido aspártico en el sitio activo de la proteasa del VIH, que se evita el procesamiento de la proteína precursora gap. Por lo tanto, se han realizado intentos para inhibir la replicación viral inhibiendo la acción de las proteasas retrovirales.
La inhibición de la proteasa retroviral típicamente involucra una mimética de estado de transición mediante la cual la proteasa retroviral se expone a un compuesto mimético que se une (típicamente en forma reversible) a la enzima en competición con las proteínas gag y gag-pol para de ese modo inhibir el procesamiento específico de las proteínas estructurales y la liberación de la proteasa retroviral por si misma. De esta forma, pueden inhibirse en forma efectiva las proteasas de replicación retroviral.
Se han propuesto diferentes clases de compuestos, particularmente para la inhibición de proteasas, tales como para la inhibición de la proteasa del VIH. Tales compuestos incluyen isoésteres de hidroxietilamina y los isoésteres de amida reducida. Ver, por ejemplo, EP 0 346 847; EP 0 342 541; Roberts y colaboradores, "Rational Design of Peptide-Based Proteinase Inhibitors", Science, 248, 358 (1990); y Erickson y colaboradores, "Design Activity, and 2,8\ring{A} Crystal Structure of a C_{2} Symmetric Inhibitor Complexed to HIV-1 Protease", Science, 249, 527 (1990). US 5.157.041, WO 94/04491, WO 94/04492, WO 94/04493, WO 92/08701 y la solicitud estadounidense de patente con serial No. 08/294.468, presentada el 23 de agosto de 1994, (cada una de las cuales se incorpora aquí como referencia en forma completa) describen por ejemplo isoésteres de hidroxietilamina, hidroxietilurea o hidroxietil sulfonamida que contienen inhibidores de proteasa retroviral.
WO 94/05639 también revela inhibidores de sulfonamida que son inhibidores de aspartil proteasa, especialmente inhibidores de aspartil proteasa del VIH. A partir de WO 95/06030, se conocen los compuestos inhibidores de proteasa de hidroxietilamina que contienen sulfonamida para inhibir a las proteasas retrovirales, tales como a la proteasa del virus de inmunodeficiencia humana (VIH).
Se sabe que diferentes clases de compuestos son útiles como inhibidores de la enzima proteolítica renina. Ver, por ejemplo, U.S. No. 4.599.198; U.K. 2.184.730; G.B 2.209.752; EP 0 264 795; G.B. 2.200.115 y U.S. SIR H725. De estas, G.B. 2.200.115, G.B. 2.209.752, EP 0 264.795, U.S. SIR H725 y U.S. 4.599.198 revelan a los inhibidores de renina hidroxietilamina que contienen urea. EP 468 641 revela inhibidores de renina e intermediarios para la preparación de los inhibidores, que incluyen compuestos hidroxietilamina que contienen sulfonamida, tales como 3-(t-butoxicarbonil)aminociclohexil-1-(fenilsulfonil)amino-2(5)-butanol. G.B. 2.200.115 también revela inhibidores de renina hidroxietilamina que contienen sulfamoilo, y EP 0 264 795 revela ciertos inhibidores de renina hidroxietilamina que contienen sulfonamida. Sin embargo, se sabe que, aunque las proteasas de renina y del VIH se clasifican ambas como aspartil proteasas, los compuestos que son inhibidores efectivos de renina, generalmente no son de predicción para la inhibición efectiva de la proteasa del VIH.
Breve descripción de la invención
La presente invención se relaciona con compuestos seleccionados inhibidores de proteasa retroviral, análogos y sales farmacéuticamente aceptables, ésteres y prodrogas de los mismos. Los compuestos que se exponen se caracterizan como compuestos inhibidores del bis aminoácido de hidroxietilamino sulfonamida. Los compuestos de la invención inhiben convenientemente a las proteasas retrovirales, tal como a la proteasa del virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Por lo tanto, esta invención también abarca a las composiciones farmacéuticas, a los métodos para inhibir a las proteasas retrovirales y los métodos para el tratamiento o la profilaxis de una infección retroviral, tal como una infección por el VIH. El objeto de la invención también se relaciona con los procedimientos para elaborar tales compuestos, así como a los intermediarios útiles en tales procedimientos.
Descripción detallada de la invención
De acuerdo con la presente invención, se provee un compuesto inhibidor de proteasa retroviral de fórmula:
1
o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde
R^{1} representa radicales alquilo de 1-5 átomos de carbono, alquenilo de 2-5 átomos de carbono, alquinilo de 2-5 átomos de carbono, hidroxialquilo de 1-3 átomos de carbono, alcoxialquilo de alquilo de 1-3 y alcoxi 1-3 átomos de carbono, cianoalquilo de alquilo de 1-3 átomos de carbono, imidazolilmetilo, -CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}S(O)_{2}NH_{2}, -CH_{2}SCH_{3}, -CH_{2}S(O)CH_{3}, -CH_{2}S(O)_{2}CH_{3}, -C(CH_{3})_{2}SCH_{3}, -C(CH_{3})_{2}S(O)CH_{3} o -C(CH_{3})_{2}S(O)_{2}CH_{3};
R^{2} representa radicales de alquilo de 1-5 átomos de carbono, arilalquilo de 1-3 alquilo átomos de carbono, alquiltioalquilo de alquilo 1-3 átomos de carbono, ariltioalquilo de alquilo de 1-3 átomos de carbono o cicloalquilalquilo de alquilo 1-3 átomos de carbono y un anillo de 3-6 átomos de carbono;
R^{3} representa radicales de radical alquilo de 1-5 átomos de carbono, cicloalquilo de 5-8 miembros de anillo o radical cicloalquilmetilo de 3-6 miembros de anillo;
R^{10} representa hidrógeno, radicales alquilo, hidroxialquilo o alcoxialquilo, en donde alquilo y alcoxi tienen cada uno 1-3 átomos de carbono;
R^{11} representa radicales alquilo de 1-5 átomos de carbono, hidroxialquilo de 1-4 átomos de carbono, alcoxialquilo de 1-4 alquilo átomos de carbono, bencilo, imidazolilmetilo, -CH_{2}CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CH_{2}SCH_{3} o -CH_{2}SCH_{3} o los derivados sulfona o sulfóxido de los mismos;
R^{4} representa arilo;
R^{12} y R^{13} representan cada uno independientemente hidrógeno, radicales alquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, arilo o heteroarilo, en donde alquilo es de 1-5 átomos de carbono, cicloalquilo es un anillo de 3-6 miembros cicloalquilo opcionalmente benzo-fusionado, y heteroarilo es un anillo de 5 a 6 miembros heteroarilo opcionalmente benzo fusionado.
La estereoquímica absoluta del átomo de carbono del grupo -CH(OH)- es preferiblemente (R). La estereoquímica absoluta del átomo de carbono del grupo -CH(R^{1})- es preferiblemente (S). La estereoquímica absoluta del átomo de carbono de los grupos -CH(R^{2})- es preferiblemente (S).
Una familia de compuestos de particular interés dentro de la Fórmula I son los compuestos abarcados por la fórmula
2
o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{10}, R^{11}, y R^{13} son como se define más arriba.
Una familia de compuestos de interés adicional dentro de la Fórmula II son los compuestos abarcados por la fórmula
3
o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{10}, R^{11}, y R^{13} son como se define más arriba.
Una familia más preferida de compuestos de interés adicional dentro de la Fórmula III consiste de compuestos o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde
R^{1} representa radicales sec-butilo, tert-butilo, isopropilo, 3-propinilo, cianometilo o -C(CH_{3})_{2}S(O)_{2}CH_{3};
R^{2} representa un radical bencilo;
R^{3} representa radicales propilo, isoamilo, isobutilo, butilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclopentilmetilo o ciclohexilmetilo;
R^{4} es como se define más arriba;
R^{10} representa radicales hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroximetilo o hidroxietilo;
R^{11} representa radicales metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, isobutilo, tert-butilo, hidroximetilo, hidroxietilo, metoximetilo o metoxietilo; y
R^{13} representa radicales hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexilmetilo, bencilo, feniletilo, 2-piridilmetilo, 3-piridilmetilo, 4-piridilmetilo, 2-(2-piridil) etilo, 2-(3-piridil)etilo, 2-(4-piridil) etilo, furilmetilo, 2-furiletilo, 2-hidroxietilo, 2-metoxietilo o fenilo.
Como se lo utiliza aquí, el término "alquilo", solo o en combinación, significa un radical alquilo de cadena recta o de cadena ramificada que contiene preferiblemente de 1 a 8 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 a 5 átomos de carbono, lo más preferible de 1 a 3 átomos de carbono. Ejemplos de tales radicales incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, tert-butilo, pentilo, isoamilo, hexilo, octilo y similares. El término "hidroxialquilo", solo o en combinación, significa a radical alquilo como se define más arriba en donde al menos un átomo de hidrógeno ha sido reemplazado por un grupo hidroxilo, pero no más de un átomo de hidrógeno por átomo de carbono; preferiblemente, 1 a 4 átomos de hidrógeno han sido reemplazados por grupos hidroxilo; más preferiblemente, 1 a 2 átomos de hidrógeno han sido reemplazados por grupos hidroxilo; y lo más preferible, un átomo de hidrógeno ha sido reemplazado por un grupo hidroxilo. El término "alquenilo", solo o en combinación, significa un radical hidrocarburo de cadena recta o de cadena ramificada que tiene uno o más dobles enlaces y que preferiblemente contiene de 2 a 10 átomos de carbono, más preferiblemente de 2 a 8 átomos de carbono, lo más preferible de 2 a 5 átomos de carbono. Ejemplos de radicales alquenilo adecuados incluyen etenilo, propenilo, 2-metilpropenilo, 1,4-butadienilo y similares. El término "alquinilo", solo o en combinación, significa un radical hidrocarburo de cadena recta o de cadena ramificada que tiene uno o más triples enlaces y que contiene preferiblemente de 2 a 10 átomos de carbono, más preferiblemente de 2 a 5 átomos de carbono. Ejemplos de radicales alquinilo incluyen etinilo, propinilo (propargilo), butinilo y similares. El término "alcoxi", solo o en combinación, significa un radical alquil éter en donde el término alquilo se define más arriba. Ejemplos de radicales adecuados de alquil éter incluyen metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, sec-butoxi, tert-butoxi y similares. El término "alcoxialquilo", solo o en combinación, significa un radical alquilo como se define más arriba en donde al menos un átomo de hidrógeno ha sido reemplazado por un grupo alcoxi, pero no más de un átomo de hidrógeno por átomo de carbono; preferiblemente, 1 a 4 átomos de hidrógeno han sido reemplazados por grupos alcoxi; más preferiblemente, 1 a 2 átomos de hidrógeno han sido reemplazados por grupos alcoxi; y lo más preferible, un átomo de hidrógeno ha sido reemplazado por un grupo alcoxi. El término "cicloalquilo", solo o en combinación, significa un radical alquilo saturado o parcialmente saturado monocíclico, bicíclico o tricíclico en donde cada fracción cíclica contiene preferiblemente un anillo de 3 a 8 miembros de átomos de carbono, más preferiblemente un anillo de 3 a 7 miembros de átomo de carbono, lo más preferible un anillo de 5 a 6 miembros de átomos de carbono, y que puede opcionalmente ser un sistema de anillo fusionado benzo que está opcionalmente sustituido como se definió aquí con respecto a la definición de arilo. Ejemplos de tales radicales cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, octahidronaftilo, 2,3-dihidro-1H-indenilo, adamantilo y similares. "Bicíclico" y "tricíclico" como se los usa aquí intentan incluir tanto sistemas de anillo fusionado, tales como naftilo y \beta-carbolinilo, como sistemas de anillo sustituido, tales como bifenilo, fenilpiridilo, naftilo y difenilpiperazinilo. El término "cicloalquilalquilo" significa un radical alquilo como se define más arriba que está sustituido por un radical cicloalquilo como se defina más arriba. Ejemplos de tales radicales cicloalquilalquilo incluyen ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentilmetilo, ciclohexilmetilo, 1-ciclopentiletilo, 1-ciclohexiletilo, 2-ciclopentiletilo, 2-ciclohexiletilo, ciclobutilpropilo, ciclopentilpropilo, ciclohexilbutilo y similares. El término "benzo", solo o en combinación, significa el radical divalente C_{6}H_{4} = derivado del benceno. El término "arilo", solo o en combinación, significa un radical fenilo o naftilo que está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre alquilo, alcoxi, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, haloalquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, cicloalquilo, heterociclo, alcanoilamino, amido, amidino, alcoxicarbonilamino, N-alquilamidino, alquilamino, dialquilamino, N-alquilamido, N,N-dialquilamido, aralcoxicarbonilamino, alquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo y similares. Ejemplos de radicales arilo son fenilo, p-tolilo, 4-metoxifenilo, 4-(tert-butoxi)fenilo, 3-metil-4-metoxifenilo, 4-fluorofenilo, 4-clorofenilo, 3-nitrofenilo, 3-aminofenilo, 4-CF_{3}-fenilo, 3-acetamidofenilo, 4-acetamidofenilo, 2-metil-3-acetamidofenilo, 2-metil-3-aminofenilo, 3-metil-4-aminofenilo, 2-amino-3-metilfenilo, 2,4-dimetil-3-aminofenilo, 4-hidroxifenilo, 3-metil-4-hidroxifenilo, 1-naftilo, 2-naftilo, 3-amino-1-naftilo, 2-metil-3-amino-1-naftilo, 6-amino-2-naftilo, 4,6-dimetoxi-2-naftilo, piperazinilfenilo y similares. Los términos "arilalquilo" y "aralcoxi", solos o en combinación, significan un radical alquilo o un radical alcoxi como se define más arriba en los cuales al menos un átomo de hidrógeno es reemplazado por un radical arilo como se define más arriba, tal como bencilo, benciloxi, 2-feniletilo, dibencilmetilo, hidroxifenilmetilo, metilfenilmetilo, difenilmetilo, difenilmetoxi, 4-metoxifenilmetoxi y similares. El término "aralcoxicarbonilo", solo o en combinación, significa un radical de fórmula aralquil-O-C(O)- en el cual el término "arilalquilo" tiene el significado dado más arriba. Ejemplos de un radical aralcoxicarbonilo son benciloxicarbonilo y 4-metoxifenilmetoxicarbonilo. El término "ariloxi" significa un radical de la fórmula aril-O-en el cual el término arilo tiene el significado dado más arriba. El término "alcanoilo", solo o en combinación, significa un radical acilo derivado de un ácido alcanocarboxílico, Ejemplos del cual incluyen acetilo, propionilo, butirilo, valerilo, 4-metilvalerilo, y similares. El término "cicloalquilcarbonilo" significa un radical acilo de la fórmula cicloalquil-C(O)- en la cual el término "cicloalquilo" tiene el significado dado más arriba, tal como ciclopropilcarbonilo, ciclohexilcarbonilo, adamantilcarbonilo, 1,2,3,4-tetrahidro-2-naftoil, 2-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-2-naftoil, 1-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidro-6-naftoilo y similares. El término "aralcanoilo" significa un radical acilo derivado de un ácido alcanocarboxílico arilsustituido tal como fenilacetilo, 3-fenilpropionilo (hidrocinamoilo), 4-fenilbutirilo, (2-naftil)acetilo, 4-clorohidrocinamoilo, 4-aminohidrocinamoilo, 4-metoxihidrocinamoilo, y similares. El término "aroilo" significa un radical acilo derivado de un ácido arilcarboxílico, "arilo" tiene el significado dado más arriba. Ejemplos de tales radicales aroilo incluyen benzoilo o naftoilo sustituidos y no sustituidos tales como benzoilo, 4-clorobenzoilo, 4-carboxibenzoilo, 4-(benciloxicarbonilo)benzoilo, 1-naftoilo, 2-naftoilo, 6-carboxi-2 naftoilo, 6-(benciloxicarbonilo)-2-naftoilo, 3-benciloxi-2-naftoilo, 3-hidroxi-2-naftoilo, 3-(benciloxiformamido)-2-naftoilo, y similares. Los términos "heterociclo," solos o en combinación, significan a radical heterocíclico saturado o parcialmente insaturado monocíclico, bicíclico o tricíclico que contiene al menos un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre como parte de un anillo y que tiene preferiblemente de 3 a 8 miembros en el anillo en cada anillo, más preferiblemente de 3 a 7 miembros en el anillo en cada anillo y el más preferible de 5 a 6 miembros en el anillo en cada anillo. "Heterociclo" se pretende que incluya sulfonas, sulfóxidos, N-óxidos de miembros de anillo con nitrógeno terciario, y sistemas de anillo carboxíclico fusionado y benzo fusionado. Tales radicales heterociclo pueden estar opcionalmente sustituidos sobre uno o más átomos de carbono por halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, oxo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, amidino, N-alquilamidino, alcoxicarbonilamino, alquilsulfonilamino y similares, y/o sobre un átomo de nitrógeno secundario (esto es, -NH-) por hidroxi, alquilo, aralcoxicarbonilo, alcanoilo, heteroarilalquilo, fenilo o fenilalquilo y/o sobre un átomo de nitrógeno terciario (esto es, =N-) por óxido. "Heterocicloalquilo" significa un radical alquilo como se define más arriba en el cual al menos un átomo de hidrógeno se reemplaza por un radical heterociclo como se defina más arriba, tal como pirrolidinilmetilo, tetrahidrotienilmetilo, piridilmetilo y similares. El término "heteroarilo", solo o en combinación, significa un radical aromático heterociclo como se defina más arriba, que está opcionalmente sustituido como se defina más arriba con respecto a las definiciones de arilo y heterociclo. Ejemplos de tales grupos heterociclo y heteroarilo son pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, pirrolilo, imidazolilo (por ejemplo, imidazol 4-ilo, 1-benziloxicarbonilimidazol-4-ilo, etc.), pirazolilo, piridilo, (por ejemplo, 2-(1-piperidinil)piridilo y 2-(4-bencil piperazin-1-il-1-piridinilo, etc.), pirazinilo, pirimidinilo, furilo, tetrahidrofurilo, tienilo, tetrahidrotienilo y su sulfóxido y derivados de sulfona, triazolilo, oxazolilo, tiazolilo, indolilo (por ejemplo, 2-indolilo, etc.), quinolinilo, (por ejemplo, 2-quinolinilo, 3-quinolinilo, 1-oxido-2-quinolinilo, etc.), isoquinolinilo (por ejemplo, 1-isoquinolinilo, 3-isoquinolinilo, etc.), tetrahidroquinolinilo (por ejemplo, 1,2,3,4-tetrahidro-2-quinolilo, etc.), 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo (por ejemplo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-oxoisoquinolinilo, etc.), quinoxalinilo, \beta-carbolinilo, 2-benzofurancarbonilo, 1-,2-,4- o 5-benzimidazolilo, metilenedioxifen-4-ilo, metilenedioxifen-5-ilo, etilenedioxifenilo, benzotiazolilo, benzopiranilo, benzofurilo, 2,3-dihidrobenzofurilo, benzoxazolilo, tiofenilo y similares. El término "cicloalquilalcoxicarbonilo" significa un grupo acilo derivado de un ácido cicloalquilalcoxicarboxílico de fórmula cicloalquilalquil-O-COOH en donde cicloalquilalquilo tiene el significado dado más arriba. El término "ariloxialcanoilo" significa un radical acilo de fórmula aril-O-alcanoilo en donde arilo y alcanoilo tienen el significado dado más arriba. El término "heterocicloalcoxicarbonilo" significa un grupo acilo derivado de heterocicloalquil-O-COOH en donde heterocicloalquilo es como se define más arriba. El término "heterocicloalcanoilo" es un radical acilo derivado de un ácido heterocicloalquilcarboxílico en donde heterociclo tiene el significado dado más arriba. El término "heterociclo alcoxicarbonilo" significa un radical acilo derivado de un heterocicloalquil-O-COOH en donde heterociclo tiene el significado dado más arriba. El término "heteroariloxicarbonilo" significa un radical acilo derivado de un ácido carboxílico representado por heteroaril-O-COOH en donde heteroarilo tiene el significado dado más arriba. El término "aminocarbonilo" solo o en combinación, significa un grupo carbonilo sustituido por un grupo amino (carbamoilo) en donde el grupo amino puede ser un grupo amino primario, secundario o terciario que contiene sustituyentes seleccionados entre radicales alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo y similares. El término "aminoalcanoilo" significa un grupo acilo derivado de un ácido alquilcarboxílico sustituido con amino en donde el grupo amino puede ser un grupo amino primario, secundario o terciario que contiene sustituyentes seleccionados entre radicales alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo y similares. El término "halógeno" significa fluor, cloro, bromo o yodo. El término "haloalquilo" significa un radical alquilo que tiene el significado como se definió más arriba, en donde uno o más hidrogenasas se reemplazan con un halógeno. Ejemplos de tales radicales haloalquilo incluyen clorometilo, 1-bromoetilo, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1,1-trifluoroetilo y similares. El término "grupo saliente" (L o W) generalmente se refiere a grupos fácilmente desplazables por un nucleófilo, tal como una amina, un tiol o un alcohol nucleófilo. Tales grupos salientes son bien conocidos en el arte. Ejemplos de tales grupos salientes incluyen, pero no se limitan a, N-hidroxisuccinimida, N-hidroxibenzotriazol, haluros, triflatos, tosilatos y similares. Los grupos salientes preferidos se indican aquí donde se apropiado.
Los procedimientos para preparar los compuestos de Fórmula I se exponen más adelante. Debe observarse que el procedimiento general se expone relacionado con la preparación de compuestos que tienen la estereoquímica especificada, por ejemplo, en donde la estereoquímica absoluta acerca del grupo hidroxilo se designa como (R). Sin embargo, tales procedimientos son generalmente aplicables a aquellos compuestos de configuración opuesta, por ejemplo, donde la estereoquímica acerca del grupo hidroxilo es (S). Además, los compuestos que tienen la estereoquímica (R) pueden utilizarse para producir aquellos que tienen la estereoquímica (S). Por ejemplo, un compuesto que tiene la estereoquímica (R) puede invertirse a la estereoquímica (S) utilizando métodos bien conocidos.
Preparación de Compuestos de Fórmula I
Los compuestos de la presente invención representados por la Fórmula I más arriba, pueden prepararse utilizando los siguientes procedimientos generales como se muestra esquemáticamente en los Esquemas I y II.
Esquema I
4
a) desprotección; X = Cl o Br.
\newpage
Esquema II
\vskip1.000000\baselineskip
5
a) desprotección; X = Cl o Br; L = Grupo saliente.
Una clorocetona N-protegida derivada de un aminoácido que tiene la fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
6
en donde P representa un grupo de protección amino, y R^{2} es como se defina más arriba, se reduce al alcohol correspondiente utilizando un agente reductor apropiado. Los grupos adecuados de protección amino son bien conocidos en el arte e incluyen carbobenzoxi, t-butoxicarbonilo, y similares. Un grupo preferido de protección amino es el carbobenzoxi. Una clorocetona preferida N-protegida es la N-benciloxicarbonil-L-fenilalanina clorometilcetona. Un agente de reducción preferido es el borohidruro de sodio. La reacción de reducción se lleva acabo a una temperatura entre -10ºC hasta alrededor de 25ºC, preferiblemente alrededor de 0ºC, en un sistema solvente apropiado tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano, y similares. Las clorocetonas N-protegidas se encuentran disponibles comercialmente, por ejemplo con Bachem, Inc., Torrance, California. Alternativamente, las clorocetonas pueden prepararse por medio del procedimiento expuesto en S. J. Fittkau, J. Prakt. Chem., 315, 1037 (1973), y posteriormente, la N-protección utiliza procedimientos que son bien conocidos en la técnica.
El halo alcohol puede ser utilizado directamente, como se describe más adelante, o, preferiblemente, reacciona preferiblemente a temperatura ambiente con una base adecuada en un sistema solvente apropiado para producir un amino epóxido N-protegido de fórmula:
7
en donde P y R^{2} son como se define más arriba. Los sistemas solventes apropiados para preparar el amino epóxido incluyen etanol, metanol, isopropanol, tetrahidrofurano, dioxano, y similares, incluidas las mezclas de los mismos. Las bases adecuadas para producir el epóxido a partir de la clorocetona reducida incluyen hidróxido de potasio, hidróxido de sodio, t-butóxido de potasio, DBU y similares. Una base preferida es hidróxido de potasio.
Alternativamente, un amino epóxido protegido puede prepararse tal como en la Solicitud de Patente PCT de propiedad compartida y en tramite junto con la presente de Serial No. PCT/US93/04804 (WO 93/23388), en la PCT/US94/12201, y en el Extracto de Abogado de la Solicitud de Patente Estadounidense No. C-2860 (cada una de las cuales se incorpora aquí como referencia en su totalidad) donde se revelan métodos para preparar un epóxido quiral, una cianohidrina quiral, una amina quiral y otros intermediarios quirales útiles en la preparación de inhibidores de proteasa retroviral, partiendo de los DL, D o L aminoácidos que reaccionan con un grupo apropiado de protección amino en un solvente adecuado para producir un éster de aminoácido amino protegido. Para propósitos de ilustración, un L-aminoácido protegido con la siguiente fórmula, se utilizará para preparar los inhibidores de esta invención:
8
en donde P^{3} representa un grupo de protección carboxilo, por ejemplo, metilo, por ejemplo, metilo, etilo, bencilo, butilo terciario, 4-metoxifenilmetilo y similares; R^{2} es como se define más arriba; y P^{1} y P^{2} y/o P' se seleccionan independientemente entre los grupos de amino protección, incluidos pero no limitados a, arilalquilo, arilalquilo sustituido, cicloalquenilalquilo y cicloalquenilalquilo sustituido, alilo, alilo sustituido, acilo, alcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilo y sililo. Los ejemplos de arilalquilo incluyen, pero no se limitan a bencilo, orto-metilbencilo, tritilo y benzihidrilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con halógeno, alquilo de C_{1-8}, alcoxi, hidroxi, nitro, alquileno, amino, alquilamino, acilamino y acilo, o sus sales, tales como sales de fosfonio y de amonio. Los ejemplos de grupos arilo incluyen radicales fenilo, naftalenilo, indanilo, antracenilo, durenilo, 9-(-9-fenilfluorenilo) y fenantrenilo, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo sustituido que contienen cicloalquilos de C_{6}-C_{10}. Los grupos acilo adecuados incluyen carbobenzoxi, t-butoxicarbonilo, isobutoxicarbonilo, benzoilo, benzoilo sustituido, butirilo, acetilo, tri-fluoroacetilo, tri-cloroacetilo, ftaloilo y similares. Preferiblemente P^{1} y P^{2} se seleccionan independientemente entre arilalquilo y arilalquilo sustituido. Más preferiblemente, tanto P^{1} como P^{2} son bencilo.
Adicionalmente, los grupos de protección P^{1} y/o P^{2} y/o P' pueden formar un anillo heterocíclico con el nitrógeno al cual ellos están unidos, por ejemplo, 1,2-bis(metilén)benceno, ftalimidilo, succinimidilo, maleimidilo y similares y en donde estos grupos heterocíclicos pueden incluir además anillos contiguos arilo y cicloalquilo. Además, los grupos heterocíclicos pueden ser mono, di o tri-sustituidos, por ejemplo, nitroftalimidilo. El término sililo se refiere a un átomo de silicio opcionalmente sustituido por uno o más grupos alquilo, arilo y arilalquilo.
Los grupos adecuados de protección de sililo incluyen, pero no se limitan a, trimetilsililo, trietilsililo, tri-isopropilsililo, tert-butildimetilsililo, dimetilfenilsililo, 1,2-bis(dimetilsilil)benceno, 1,2-bis(dimetilsilil)etano y difenilmetilsililo. La sililación de las funciones amina para proveer mono o bis-disililamina, pueden proveer derivados del aminoalcohol, aminoácido, ésteres de aminoácido y amida de aminoácido. En el caso de los aminoácidos, los ésteres de aminoácido y las amidas de aminoácido, la reducción de la función carbonilo provee los mono o bis-sililaminoalcoholes requeridos. La sililación del aminoalcohol puede conducir al derivado N,N,O-tri-sililo. La remoción de la función sililo de la función éter de sililo se logra fácilmente por tratamiento con, por ejemplo, con un reactivo de hidróxido metálico o fluoruro de amonio, ya sea como una etapa discreta de reacción o in situ durante la preparación del reactivo de amino aldehído. Los agentes de sililación adecuados son, por ejemplo, cloruro de trimetilsililo, cloruro de tert-buti-dimetilsililo, cloruro de fenildimetilsililo, cloruro de difenilmetilsililo o sus productos de combinación con imidazol o DMF. Los métodos para la sililación de aminas y la remoción de los grupos de protección sililo son bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Los métodos de preparación de estos amino derivados a partir de los correspondientes aminoácidos, amidas de aminoácido o ésteres de aminoácido también son bien conocidos por aquellos expertos en las técnicas de la química orgánica, incluida la química de aminoácidos/ésteres de aminoácidos o de aminoalcoholes.
El éster del L-aminoácido amino protegido se reduce entonces, hasta el correspondiente alcohol. Por ejemplo, el éster del L-aminoácido amino protegido puede reducirse con hidruro de diisobutilaluminio a -78ºC en un solvente adecuado tal como tolueno. Los agentes de reducción preferidos incluyen hidruro de aluminio y litio, borohidruro de litio, borohidruro de sodio, borano, hidruro de litio tri-terbutoxialuminio, complejo borano/THF. Más preferiblemente, el agente de reducción es hidruro de diisobutilaluminio (DiBAL-H) en tolueno. El alcohol resultante se convierto entonces, por ejemplo, por medio de una oxidación Swern, al correspondiente aldehído de fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
9
en donde P^{1}, P^{2} y R^{2} son como se define más arriba. Por lo tanto, se añade una solución en diclorometano del alcohol a la solución enfriada (-75 a -68ºC) de cloruro de oxalilo en diclorometano y DMSO en diclometano y se agitó durante 35 minutos.
Los reactivos de oxidación aceptables incluyen, por ejemplo, complejo de trióxido de azufre- piridina y DMSO, cloruro de oxalilo y DMSO, cloruro de acetilo o anhídrido y DMSO, cloruro de trifluoroacetilo o anhídrido y DMSO, cloruro de metanosulfonilo y DMSO u óxido de tetrahidro tiafeno-S, bromuro de toluenosulfonilo y DMSO, anhídrido de trifluorometanosulfonilo (anhídrido tríflico) y DMSO, pentacloruro de fósforo y DMSO, cloruro de dimetilfosforilo y DMSO y cloroformato de isobutilo y DMSO. Las condiciones de oxidación reportadas por Reetz y colaboradores [Angew Chem., 99, p 1186, (1987)], Angew Chem Int. Ed. Engl., 26, p. 1141, 1987) emplearon cloruro de oxalilo y DMSO a -78ºC.
El método de oxidación preferido que se describe en esta invención es por medio del complejo trióxido de azufre piridina, trietilamina y DMSO a temperatura ambiente. Este sistema provee excelentes rendimientos del aldehído quiral amino protegido utilizable sin la necesidad de purificación, esto es, se elimina la necesidad de purificar kilogramos de intermediarios por medio de cromatografía y las operaciones a gran escala se hacen menos peligrosas. La reacción a temperatura ambiente también eliminó la necesidad del uso de un reactor de baja temperatura que hace al proceso más adecuado para la producción comercial.
La reacción puede llevarse acabo bajo atmósfera inerte tal como nitrógeno o argón, o normal o aire seco, a presión atmosférica o en un recipiente de reacción sellado bajo presión positiva. Se prefiere atmósfera de nitrógeno. Las bases alternativas de amina incluyen, por ejemplo, tri-butil amina, tri-isopropil amina, N-metilpiperidina, N-metil morfolina, azabiciclononano, diisopropiletilamina, 2,2,6,6-tetrametilpiperidina, N,N-dimetilaminopiridina, o mezclas de esas bases. La trietilamina es una de las bases preferidas. Las alternativas al DMSO puro como solvente incluyen mezclas de DMSO con solventes no próticos o halogenados tales como tetrahidrofurano, acetato de etilo, tolueno, xileno, diclorometano, dicloro etileno y similares. Los cosolventes apróticos dipolares incluyen acetonitrilo, dimetilformamida, dimetilacetamida, acetamida, tetrametil urea y su análogo cíclico, N-metilpirrolidona, sulfolano y similares. En vez de N,N-dibencilfenilalaninol como el precursor aldehído, los derivados de fenilalaninol discutidos antes pueden ser usados para proveer el aldehído correspondiente N-monosustituido [ya sea P^{1} o P^{2} = H] o N,N-disustituido.
Además, puede llevarse acabo la reducción por hidruro de un derivado de amida o de éster del correspondiente bencilo (u otro grupo de protección adecuado) de fenilalanina con nitrógeno protegido, fenilalanina sustituida o análogo cicloalquilo del derivado de fenilalanina para proveer los aldehídos. La transferencia de hidruros es un método adicional de síntesis de aldehídos bajo condiciones en donde se evita la condensación del aldehído, cf, Oxidación Oppenauer.
Los aldehídos de este proceso pueden prepararse también por métodos de reducción de fenilalanina protegida y análogos de fenilalanina o sus derivados amida o éster por medio, por ejemplo, de amalgama de sodio con HCl en etanol o litio o sodio o potasio o calcio en amoniaco. La temperatura de reacción puede estar entre -20ºC hasta alrededor de 45ºC, y preferiblemente desde alrededor de 5ºC hasta alrededor de 25ºC. Dos métodos adicionales de obtener al aldehído con nitrógeno protegido incluyen la oxidación del alcohol correspondiente con lejía en presencia de una cantidad catalítica del radical libre 2,2,6,6-tetrametil-1-piridiloxi. En un segundo método, la oxidación del alcohol hasta aldehído se logra por medio de una cantidad catalítica de perrutenato de tetrapropilamonio en presencia de N-metilmorfolina-N-óxido.
Alternativamente, un derivado de cloruro de ácido de una fenilalanina protegida o derivado de fenilalanina como se revela más arriba, puede reducirse con hidrógeno y un catalizador tal como Pd o carbonato de bario o sulfato de bario, con o sin un agente adicional de moderación catalítica tal como azufre o un tiol (Reducción de Rosenmund).
El aldehído resultante de la oxidación de Swern reacciona entonces con un reactivo de halometilitio que se genera in situ por reacción de un compuesto alquillitio o arillitio con un dihalometano representado por la fórmula X^{1}CH_{2}X^{2} en donde X^{1} y X^{2} representan independientemente I, Br o Cl. Por ejemplo, una solución del aldehído y cloroiodometano en THF se enfría a -78ºC y se añade una solución de n-butillitio en hexano. El producto resultante es una mezcla de diasteroisómeros de los correspondientes epóxidos amino protegidos de las fórmulas.
10
Los diasteroisómeros pueden separarse por ejemplo, por cromatografía, o, alternativamente, una vez que ha reaccionado en las etapas posteriores, los productos diasteroisoméricos pueden separarse. Un D-aminoácido puede utilizarse en lugar del L-aminoácido con el propósito de preparar compuestos que tienen una estereoquímica (S) en el carbono unido a R^{2}.
La adición de clorometillitio o bromometillitio a un aldehído amino quiral es altamente diasteroselectivo. Preferiblemente, el clorometillitio o el bromometillitio se generan in situ a partir de la reacción del dihalometano y n-butillitio. Los halometanos para metilenación incluyen cloroiodometano, bromoclorometano, dibromometano, diyodometano, bromofluorometano y similares. El éster sulfonato del producto de adición de, por ejemplo, bromuro de hidrógeno a formaldehído, también es un agente para metilenación. El tetrahidrofurano es el solvente preferido, sin embargo pueden usarse solventes alternativos tales como tolueno, dimetoxietano, dicloruro de etileno, cloruro de metileno, como solventes puros o como una mezcla. Los solventes apróticos dipolares tales como acetonitrilo, DMF, N-metilpirrolidona son útiles como solventes o como parte de una mezcla de solventes. La reacción puede llevarse acabo bajo una atmósfera inerte tal como nitrógeno o argón. El n-butillitio pueden sustituirse por otros reactivos organometálicos tales como metillitio, tert-butillitio, sec-butillitio, fenillitio, fenil sodio y similares. La reacción puede llevarse acabo a temperaturas entre alrededor de -80ºC a 0ºC, pero preferiblemente entre alrededor de -80ºC a -20ºC. Las temperaturas de reacción que más se prefieren están entre -40ºC a -15ºC. Los reactivos pueden añadirse uno por uno, pero se prefieren múltiples adiciones en ciertas condiciones. La presión preferida de la reacción es la atmosférica, sin embargo, una presión positiva es valiosa bajo ciertas condiciones tales como un ambiente de alta humedad.
Los métodos alternativos de conversión de los epóxidos de esta invención incluyen la sustitución de otra de las especies precursoras cargadas de metilenación, seguido por su tratamiento con una base para formar el anión análogo. Los ejemplos de estas especies incluyen tosilato o triflato de trimetilsulfoxonio, haluro de tetrametilamonio, haluro de metildifenilsulfoxonio, en donde el haluro es cloro, bromo o yodo.
La conversión de los aldehídos de esta invención en su derivado epóxido, puede llevarse acabo también en múltiples etapas. Por ejemplo, la adición del anión de tioanisol preparado a partir, por ejemplo, de un reactivo de butilo o arilo de litio, al aminoaldehído protegido, la oxidación del alcohol aminosulfuro protegido resultante con agentes de oxidación bien conocidos tales como peróxido de hidrógeno, hipoclorito de tert-butilo, lejía o peryodato de sodio para dar un sulfóxido. La alquilación del sulfóxido con, por ejemplo, yoduro o bromuro de metilo, tosilato de metilo, mesilato de metilo, triflato de metilo, bromuro de etilo, bromuro de isopropilo, cloruro de bencilo o similares, en presencia de una base orgánica o inorgánica. Alternativamente, el alcohol aminosufuro protegido puede alquilarse con, por ejemplo, los agentes de alquilación anteriores, para proveer sales de sulfonio que son convertidas posteriormente en los epóxidos objetivo con bases tert-amina o minerales.
Los epóxidos deseados formados, utilizando las condiciones más preferidas, diasteroselectivamente en una relación de cantidades de al menos una proporción de 85:15 (S:R). El producto puede purificarse por cromatografía para dar el producto diasteromérica y enantioméricamente puro, pero es más conveniente utilizarlo directamente sin purificación para preparar los inhibidores de la proteasa retroviral. El proceso anterior se aplica a mezclas de isómeros ópticos así como a compuestos separados. Si se desea un isómero óptico particular, puede seleccionarse por medio de la escogencia de los materiales de partida, por ejemplo, L-fenilalanina, D-fenilalanina, L-fenilalaninol, D-fenilalaninol, D-hexahidrofenilalaninol y similares, o la separación puede ocurrir en etapas intermedias o finales. Pueden utilizarse los auxiliares quirales tales como uno o dos equivalentes del ácido canfor sulfónico, ácido cítrico, ácido canfórico, ácido 2-metoxifenilacético y similares, para formar sales, ésteres o amidas de los compuestos de esta invención. Estos compuestos o derivados pueden cristalizarse o separarse cromatográficamente utilizando ya sea una columna quiral o aquiral como es bien conocido por aquellos entrenados en la técnica.
El amino epóxido reacciona entonces, en un sistema adecuado de solvente, con una cantidad igual, o preferiblemente un exceso de, una amina deseada de fórmula R^{3}NH_{2}, en donde R^{3} es hidrógeno o es como se define más arriba. La reacción puede conducirse en un amplio rango de temperaturas, por ejemplo, desde alrededor de 10ºC hasta alrededor de 100ºC, pero se prefiere, aunque no necesariamente, conducirse a una temperatura a la cual el solvente entra en reflujo. Los sistemas adecuados de solventes incluyen solventes orgánicos próticos, no próticos y dipolares apróticos tales como, por ejemplo, aquellos en donde el solvente es un alcohol, tal como metanol, etanol, isopropanol y similares, éteres tales como tetrahidrofurano, dioxano y similares, y tolueno, N,N-dimetilformamida, dimetil sulfóxido, y mezclas de los mismos. Un solvente preferido es isopropanol. El producto resultante es un derivado de 3-(N-amino protegido)-3-(R^{2})-1-(NHR^{3})-propano-2-ol (en lo sucesivo denominado como un amino alcohol) que puede representarse por medio de las fórmulas:
11
en donde P, P^{1}, P^{2}, R^{2} y R^{3} son como se describe más arriba. Alternativamente, puede utilizarse un haloalcohol en lugar del amino epóxido.
El amino alcohol definido más arriba reacciona entonces en un solvente adecuado con el cloruro de sulfonilo R^{4}SO_{2}Cl, el bromuro de sulfonilo R^{4}SO_{2}Br o el correspondiente anhídrido de sulfonilo, preferiblemente en presencia de un recogedor ácido. Los solventes adecuados en los cuales se lleva acabo la reacción incluyen cloruro de metileno, tetrahidrofurano y similares. Los recogedores ácidos adecuados incluyen trietilamina, piridina y similares. Los derivados de sulfonamida resultantes pueden representarse, dependiendo del epóxido utilizado por medio de las fórmulas:
12
en donde P, P^{1}, P^{2}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se define más arriba. Estos intermediarios son útiles para la preparación de los compuestos inhibidores de la presente invención.
Los haluros de sulfonilo de fórmula R^{4}SO_{2}X pueden prepararse por medio de la reacción de reactivos adecuados aril Grignard o de litio con cloruro de sulfurilo, o dióxido de azufre, seguido por la oxidación con un halógeno, preferiblemente cloro. Los reactivos aril Grignard o de litio pueden prepararse a partir de sus compuestos de haluro correspondientes (tales como cloro o bromo) que se encuentran comercialmente disponibles o se preparan fácilmente a partir de materiales de partida comercialmente disponibles, utilizando métodos conocidos en el estado de la técnica. Los tioles también pueden ser oxidados hasta cloruros de sulfonilo utilizando cloro en presencia de agua bajo condiciones cuidadosamente controladas. Adicionalmente, los ácidos sulfónicos, tales como los ácidos arilsulfónicos, pueden convertirse en haluros de sulfonilo usando reactivos tales como PCl_{5}, SOCl_{2}, ClC(O)C(O)Cl y similares, y también en anhídridos utilizando reactivos de deshidratación adecuados. Los ácidos sulfónicos pueden prepararse a su vez utilizando procedimientos bien conocidos en el estado del arte. Algunos ácidos sulfónicos se encuentran comercialmente disponibles. En lugar de los haluros de sulfonilo, pueden utilizarse los haluros de sulfinilo (R^{4}SOX) o los haluros de sulfenilo (R^{4}SX), para preparar compuestos en donde la fracción -SO_{2}- se reemplaza por una fracción -SO- o -S-, respectivamente. Los ácidos arilsulfónicos pueden prepararse por sulfonación del anillo aromático, por métodos bien conocidos en el estado de la técnica, tales como por reacción con ácido sulfúrico, SO_{3}, complejos de SO_{3}, tales como DMF(SO_{3}), piridina(SO_{3}), y similares. Preferiblemente, los haluros de arilsulfonilo se preparan a partir de compuestos aromáticos por reacción con DMF(SO_{3}) y ClC(O)C(O)Cl. Las reacciones pueden llevarse acabo escalonadamente o en un recipiente único.
Los ácidos arilsulfónicos se encuentran comercialmente disponibles o pueden prepararse fácilmente a partir de materiales de partida comercialmente disponibles utilizando métodos estándar bien conocidos en el estado de la técnica.
Después de la preparación del derivado de sulfonamida, el grupo amino protector P o los grupos de amino protección P^{1} y P^{2}, se remueven bajo condiciones que no afectarán la porción remanente de la molécula. Estos métodos son bien conocidos en el estado de la técnica e incluyen hidrólisis ácida, hidrogenólisis y similares. Un método preferido involucra la remoción del grupo de protección, por ejemplo, la remoción de un grupo carbobenzoxi por medio de hidrogenólisis utilizando paladio sobre carbono en un sistema adecuado de solvente tal como un alcohol, ácido acético, y similares, o mezclas de los mismos. En donde el grupo de protección es un grupo t-butoxicarbonilo, éste puede removerse utilizando un ácido inorgánico u orgánico, por ejemplo, HCl o ácido trifluoroacético, en un sistema adecuado de solvente, por ejemplo, dioxano o cloruro de metileno. El producto resultante es el derivado de la sal de amina.
Después de la neutralización de la sal, la amina se acopla entonces al DL-, D- o L-aminoácido correspondiente a la fórmula PNC(R^{1})COOH, en donde P y R^{1} son como se define más arriba, seguido por la desprotección de la amina como se describe más arriba, y el acoplamiento a
13
en donde R^{10} y R^{11} son como se define más arriba, W es un grupo saliente, tal como mesilato, bromo o cloro, y L es un grupo saliente tal como haluro, anhídrido, éster activo y similares.
Finalmente, la reacción del intermediario anterior con la amina R^{12}R^{13}NH puede producir los compuestos antivirales de la presente invención que tienen la fórmula
14
en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{10}, R^{11}, R^{12} y R^{13} son como se define más arriba. Las aminas de fórmula R^{12}R^{13}NH se encuentran comercialmente disponibles, tales como dimetilamina, isobutilamina, isopropilamina, bencilamina y similares; o pueden prepararse fácilmente a partir de los materiales de partida disponibles comercialmente, utilizando métodos estándar bien conocidos en el estado de la técnica.
Alternativamente, después de la neutralización de la sal, la amina de fórmula
15
se acopla luego al DL-, D- o L-aminoácido correspondiente a la fórmula PNHCH(R^{1})COOH, en donde P y R^{1} son como se define más arriba, seguido por la desprotección de la amina como se describe más arriba y luego el acoplamiento de la amina desprotegida al aminoácido de fórmula
16
o al estereoisómero específico del mismo, en donde R^{10}, R^{11}, R^{12} y R^{13} son como se define más arriba, tal como N-metilalanina, N,N-dimetilalanina y similares, para producir los compuestos antivirales de la presente invención. Los aminoácidos se encuentran comercialmente disponibles o pueden prepararse fácilmente a partir del ácido carboxílico protegido con un grupo saliente W (definido más arriba), W-(R^{10})(R^{11})C-CO_{2}P^{3}, por medio de la reacción con la amina R^{12}R^{13}NH como se muestra en el Esquema III, en donde P^{3}, R^{10}, R^{11}, R^{12} y R^{13} son como se define más arriba.
Esquema III
17
Alternativamente, después de la neutralización de la sal, la amina de fórmula
18
se acopla entonces al DL-, D-, o L-aminoácido correspondiente a la fórmula
19
en donde R^{1}, R^{10}, R^{11}, R^{12} y R^{13} son como se define más arriba, que puede prepararse en forma similar a los métodos de acoplamiento descritos más arriba, a partir del DL-, D- o L-aminoácido correspondiente a la fórmula NH_{2}CH(R^{1})COOP^{3}, en donde P^{3} y R^{1} son como se define más arriba.
El DL-, D- o L-aminoácido correspondiente a la fórmula PNHCH(R^{1})COOH o NH_{2}CH(R^{1})COOP^{3}, en donde P, P^{3} y R^{1} son como se define más arriba, están disponibles comercialmente (Sigma Chemical Co.), o se preparan fácilmente utilizando métodos estándar bien conocidos en el estado de la técnica a partir de los materiales de partida fácilmente disponibles. Preferiblemente, P es un radical benciloxicarbonilo o un radical t-butoxicarbonilo y P^{3} es un radical bencilo o un radical tert-butilo. Los procedimientos estándar de acoplamiento pueden utilizarse para acoplar los aminoácidos y las aminas. El grupo del ácido carboxílico reacciona para formar un anhídrido, anhídrido mezclado, haluro de ácido, tal como cloruro o bromuro, o un éster activo, tal como ésteres de N-hidroxisuccinimida, HOBT y similares, utilizando procedimientos y condiciones bien conocidas. Los sistemas apropiados de solventes incluyen tetrahidrofurano, etiléter, metil-tert-butiléter, cloruro de metileno, N,N-dimetilformamida y similares, incluidas las mezclas de los mismos.
Alternativamente, el alcohol amino protegido de la abertura del epóxido, puede ser protegido además en el grupo amino recientemente introducido con un grupo de protección P' que no se remueve con la remoción de los grupos de amino protección P o P^{1} y P^{2}, esto es, P' se remueve selectivamente. Alguien entrenado en la técnica puede escoger las combinaciones apropiadas de P', P, P^{1} y P^{2}. Por ejemplo, las combinaciones adecuadas son P = Cbz y P' = Boc; P' = Cbz y P = Boc; P^{1} = Cbz, P^{2} = bencilo y P' = Boc; y P^{1} = P^{2} = bencilo y P' = Boc. El compuesto resultante representado por la fórmula
20
puede ser conducido por el resto de la síntesis para proveer un compuesto de fórmula
21
en donde P', R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{10}, R^{11}, R^{12} y R^{13} son como se define más arriba. El resto de la síntesis anterior puede realizarse como se desee ya sea por medio de la adición de los residuos deseados o de los grupos, uno a la vez, o en una molécula preformada elaborada con más de un residuo o grupo en una etapa. Aquella aproximación es el método de la síntesis secuencial y este es el método de síntesis convergente. Las transformaciones sintéticas son posibles en esta etapa. El grupo de protección P' es removido entonces selectivamente y la amina resultante reacciona con el cloruro de sulfonilo R^{4}SO_{2}Cl, el bromuro de sulfonilo R^{4}SO_{2}Br o el correspondiente anhídrido de sulfonilo, preferiblemente en presencia de un recogedor ácido, para formar los compuestos de la presente invención
22
en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{10}, R^{11}, R^{12} y R^{13} son como se define más arriba. Esta desprotección selectiva y conversión a la sulfonamida puede lograrse ya sea al final de la síntesis o en cualquier etapa intermedia apropiada que se desee.
Las reacciones químicas descritas anteriormente se revelan generalmente en términos de su más amplia aplicación para la preparación de los compuestos de esta invención. Ocasionalmente, las reacciones pueden no ser aplicables como se describe para cada uno de los compuestos incluidos dentro del alcance de lo revelado. Los compuestos para los cuales esto ocurre serán fácilmente reconocidos por aquellos entrenados en la técnica. En todos aquellos casos, o bien las reacciones pueden realizarse exitosamente por medio de modificaciones convencionales conocidas por aquellos entrenados en la técnica, por ejemplo, por medio de la protección apropiada de los grupos de interferencia, cambiando a reactivos alternativos convencionales, por medio de una modificación de rutina de las condiciones de reacción, y similares, o de otras reacciones reveladas aquí o bien convencionales, serán aplicables a la preparación de los compuestos correspondientes de esta invención. En todos los métodos preparativos, todos los materiales de partida son conocidos o se preparan fácilmente a partir de materiales de partida conocidos.
Sin una elaboración adicional, se cree que una persona entrenada en la técnica puede, utilizando la descripción anterior, utilizar la presente invención en toda su extensión. Las siguientes modalidades específicas preferidas son, por lo tanto, proyectadas únicamente como ilustrativas, y no limitativas del resto de lo revelado en cualquier forma sea lo que fuere.
Todos los reactivos fueron utilizados como se recibieron sin purificación. Todos los espectros de RMN tanto protónica como de carbono, se obtuvieron ya sea en un espectrómetro de resonancia magnética nuclear Varian VXR-300 o VXR-400.
Los siguientes Ejemplos ilustran la preparación de los compuestos inhibidores de la presente invención y de los intermediarios útiles en la preparación de los compuestos inhibidores de la presente invención.
Ejemplo 1
23
Preparación de 2S-[Bis(fenilmetil)amino]bencenopropanol
Método 1
2S-[Bis(fenilmetil)amino]bencenopropanol a partir de la Reducción DIBAL de N,N-bis(fenilmetil)-L-Fenilalanina fenilmetil éster
Etapa 1
Una solución de L-fenilalanina (50.0 g, 0.302 mol), hidróxido de sodio (24.2 g, 0.605 mol) y carbonato de potasio (83.6 g, 0.605 mol) en agua (500 mL) fue calentada a 97ºC. Se le añadió luego lentamente bromuro de bencilo (108.5 mL, 0.605 mol) (tiempo de adición - 25 min). La mezcla fue agitada a 97ºC por 30 minutos bajo atmósfera de nitrógeno. La solución fue enfriada a temperatura ambiente y extraída con tolueno (2 x 250 mL). Las capas orgánicas combinadas fueron lavadas con agua y salmuera, secadas sobre sulfato de magnesio, filtradas y concentradas hasta un aceite. La identidad del producto fue confirmada como sigue. El TLC analítico (10% acetato de etilo/hexano, sílica gel) mostró un componente principal con un valor de Rf = 0.32 para ser el deseado compuesto tribencilado, N,N-bis(fenilmetil)-L-fenilalanina fenilmetil éster. Este compuesto puede ser purificado por cromatografía en columna (sílica gel, 15% acetato de etilo/hexano). Usualmente el producto es suficientemente puro para ser usado directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. El espectro de RMN ^{1}H estaba de acuerdo con la literatura publicada. RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta, 3.00 y 3.14 (Sistema ABX, 2H, J_{AB} = 14.1 Hz, J_{AX} = 7.3 Hz y J_{BX} = 5.9 Hz), 3.54 y 3.92 (Sistema AB, 4 H, J_{AB} = 13.9 Hz), 3.71 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 5.11 y 5.23 (Sistema AB, 2H, J_{AB} = 12.3 Hz), y 7.18 (m, 20 H). EIMS: m/z 434 (M-1).
Etapa 2
El éster fenilmetílico bencilado de fenilalanina (0.302 mol) de la reacción anterior fue disuelto en tolueno (750 mL) y enfriado a -55ºC. Se le añadió una solución 1.5 M de DIBAL en tolueno (443.9 mL, 0.666 mol) a una velocidad tal para mantener la temperatura entre -55 a -50ºC (tiempo de adición - 1 hora). Se agitó la mezcla por 20 minutos bajo una atmósfera de nitrógeno y luego se la interrumpió a -55ºC por medio de la adición lenta metanol (37 ml). La solución fría fue vertida entonces en solución fría (5ºC) de HCl 1.5 N (1.8 L). El sólido precipitado (aprox. 138 g) fue filtrado y lavado con tolueno. El material sólido fue suspendido en una mezcla de tolueno (400 mL) y agua (100 ml). La mezcla fue enfriada a 5ºC y tratada con NaOH 2.5 N (186 mL) y luego agitada a temperatura ambiente hasta que se disolvió el sólido. La capa de tolueno fue separada de la fase acuosa y lavada con agua y salmuera, secada sobre sulfato de magnesio, filtrada y concentrada hasta un volumen de 75 mL (89 g). Se añadieron acetato de etilo (25 mL) y hexano (25 mL) al residuo sobre el cual el producto alcohólico deseado comenzó a cristalizar. Después de 30 min, se añadieron 50 mL adicionales de hexano para promover una cristalización adicional. El sólido fue filtrado y lavado con 50 mL de hexano para dar 34,9 g del producto de la primera cosecha. Una segunda cosecha de producto (5.6 g) fue aislada por refiltración del licor madre. Las dos cosechas fueron combinadas y recristalizadas a partir de acetato de etilo (20 mL) y hexano (30 mL) para dar 40 g de \betaS-2-[Bis(fenilmetil)amino]bencenopropanol, 40% de rendimiento de L-fenilalanina. 7 g adicionales (7%) de producto pueden obtenerse de la recristalización del licor madre concentrado. El TLC del producto Rf = 0.23 (10% acetato de etilo/hexano, sílica gel); RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 2.44 (m, 1H,), 3.09 (m, 2H), 3.33 (m, 1H), 3.48 y 3.92 (Sistema AB, 4H, J_{AB} = 13.3 Hz); 3.52 (m, 1H) y 7.23 (m, 15H); [\alpha]_{D}25 +42.4 (c 1.45, CH_{2}Cl_{2}); DSC 77.67ºC; Calculado Anal. para C_{23}H_{25}ON: C, 83.34; H, 7.60; N, 4.23. Encontrado: C, 83.43; H, 7.59; N, 4.22. HPLC sobre fase estacionaria quiral: columna Cyclobond I SP (250 x 4.6 mm D.I.), fase móvil: metanol/buffer acetato de trietil amonio pH 4.2 (58:42, v/v), velocidad de flujo de 0.5 ml/min, detección con detector
a 230 nm y una temperatura de 0ºC. Tiempo de retención: 11.25 min., tiempo de retención del producto enantiómero deseado: 12.5 min.
Método 2
Preparación de \betaS-2-[Bis(fenilmetil)amino]benceno-propanol a partir de la N,N-Dibencilación de L-Fenilalaninol
El L-fenilalaninol (176.6 g, 1.168 mol) fue añadido a una solución agitada de carbonato de potasio (484.6 g, 3.506 mol) en 710 mL de agua. La mezcla fue calentada a 65ºC bajo atmósfera de nitrógeno. Se añadió una solución de bromuro de bencilo (400 g, 2,339 mol) en etanol 3A (305 mL) a una velocidad que mantuvo la temperatura entre 60-68ºC. La solución bifásica fue agitada a 65ºC por 55 min y luego se le permitió enfriar hasta 10ºC con agitación vigorosa. El producto aceitoso solidificó en pequeños gránulos. El producto fue diluido con 2.0 L de agua corriente y agitado por 5 minutos para disolver los subproductos inorgánicos. El producto fue aislado por filtración a presión reducida y lavado con agua hasta un pH de 7. El producto crudo obtenido fue secado al aire durante la noche para dar un sólido semiseco (407 g) que fue recristalizado a partir de 1.1 L de acetato de etilo/heptano (1:10 en volumen). El producto fue aislado por filtración (a -8ºC), lavado con 1.6 L de (-10ºC) acetato de etilo/heptano (1:10 en volumen) y secado al aire para dar 339 g (88% de rendimiento) de \betaS-2-[Bis(fenilmetil)amino]benceno-propanol, P.f. = 71,5-73,0ºC. Más producto puede obtenerse a partir del licor madre si es necesario. La otra caracterización analítica fue idéntica a la del compuesto preparado como se describe en el Método 1.
Ejemplo 2
24
Preparación de 2S-[Bis(fenilmetil)amino]bencenopropanaldehído
Método 1
El 2S-[Bis(fenilmetil)amino]benceno-propanol (200 g, 0.604 mol) fue disuelto en trietilamina (300 mL, 2.15 mol). La mezcla fue enfriada a 12ºC y se le añadió una solución del complejo trióxido de azufre/piridina (380 g, 2.39 mol) en DMSO (1.6 L) a una velocidad tal para mantener la temperatura entre 8-17ºC (tiempo de adición - 1.0 h). La solución fue agitada a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno por 1.5 horas después de las cuales se completó la reacción como lo muestra el análisis por TLC (33% acetato de etilo/hexano, sílica gel). La mezcla de reacción fue enfriada con agua hielo e interrumpida con 1.6 L de agua fría (10-15ºC) durante 45 minutos. La solución resultante fue extraída con acetato de etilo (2.0 L), lavada con ácido cítrico al 5% (2.0 L), y salmuera (2.2 L), secada sobre MgSO4 (280 g) y filtrada. El solvente fue removido en un evaporador rotatorio a 35-40ºC y luego se llevó a sequedad al vacío para dar 198.8 g de 2S-[Bis-(fenilmetil)amino]-bencenopropanaldehído como un aceite de color amarillo pálido (99.9%). El producto crudo obtenido era lo suficientemente puro para ser usado directamente en la etapa siguiente sin purificación. Los datos analíticos del compuesto fueron consistentes con los publicados en la literatura. [\alpha]_{D}25 = -92.9º (c 1.87, CH_{2}Cl_{2}); RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta, 2.94 y 3.15 (Sistema ABX, 2H, J_{AB} = 13.9 Hz, J_{AX} = 7.3 Hz y JBX = 6.2 Hz), 3.56 (t, 1H, 7.1 Hz), 3.69 y 3.82 (Sistema AB, 4H, J_{AB} = 13.7 Hz), 7.25 (m, 15 H) y 9.72 (s, 1H); HRMS Calculado para (M+1) C_{23}H_{24}NO 330.450, encontrado: 330.1836. Calculado Analíticamente para C_{23}H_{23}ON: C, 83.86; H, 7.04; N, 4.25. Encontrado: C, 83.64; H, 7.42; N, 4.19. HPLC sobre fase estacionaria quiral:(S,S) columna Pirkle-Whelk-O 1 (250 x 4.6 mm D.I.), fase móvil: hexano/isopropanol (99.5:0.5, v/v), velocidad de flujo: 1.5 ml/min, detección con detector UV a 210nm. Tiempo de retención del S-isómero deseado: 8.75 min., tiempo de retención del enantiómero R 10.62 min.
Método 2
Una solución de cloruro de oxalilo (8.4 ml, 0.096 mol) en diclorometano (240 ml) fue enfriada a -74ºC. Se le añadió luego lentamente una solución de DMSO (12.0 ml, 0.155 mol) en diclorometano (50 ml) a una velocidad tal para mantener la temperatura a -74ºC (tiempo de adición -1.25 horas). La mezcla fue agitada por 5 minutos seguido por la adición de una solución de \betaS-2-[bis(fenilmetil)amino]benceno-propanol (0.074 mol) en 100 ml de diclorometano (tiempo de adición -20 min., temp. -75ºC a -68ºC). La solución fue agitada a -78ºC por 35 minutos bajo atmósfera de nitrógeno. Se añadió luego trietilamina (41.2 ml, 0.295 mol) durante 10 min. (temp. -78º a -68ºC) después de los cuales se precipitó la sal de amonio. La mezcla fría fue agitada por 30 min. y luego se añadió agua (225 ml). La capa de diclorometano fue separada de la fase acuosa y lavada con agua, salmuera, secada sobre sulfato de magnesio, filtrada y concentrada. El residuo fue diluido con acetato de etilo y hexano y luego filtrado para remover más sal de amonio. El filtrado fue concentrado para dar \alphaS-[bis(fenilmetil)amino]bencenopropanaldehído. El aldehído fue llevado a la siguiente etapa sin purificación.
Método 3
A una mezcla de 1.0 g (3.0 mmoles) de \betaS-2-[bis(fenilmetil)amino]bencenopropanol, 0.531 g (4.53 mmoles) de N-metil morfolina, 2.27 g de tamices moleculares (4A) y 9.1 mL de acetonitrilo, se le añadieron 53 mg (0.15 mmoles) de perrutenato de tetrapropilamonio (TPAP). La mezcla fue agitada por 40 minutos a temperatura ambiente y concentrada a presión reducida. El residuo fue suspendido en 15 mL de acetato de etilo, filtrado a través de una almohadilla de sílica gel. El filtrado fue concentrado a presión reducida para dar un producto que contiene aproximadamente 50% de \alphaS-2-[bis(fenilmetil)amino]benceno propanaldehído como un aceite de color amarillo pálido.
Método 4
A una solución de 1.0 g (3.02 mmoles) de \betaS-2-[bis(fenilmetil)amino]bencenopropanol en 9.0 mL de tolueno se le añadieron 4.69 mg (0.03 mmoles) de 2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi, radical libre (TEMPO), 0.32 g (3.11 mmoles) de bromuro de sodio, 9.0 mL de acetato de etilo y 1.5 mL de agua. Lamezcla fue enfriada a 0ºC y se le añadió lentamente una solución acuosa de 2.87 mL de blanqueador para el hogar al 5% que contenía 0.735 g (8.75 mmoles) de bicarbonato de sodio y 8.53 mL de agua, durante 25 minutos. La mezcla fue agitada a 0ºC por 60 minutos. Se hicieron dos adiciones más (44 mL cada vez) de blanqueador seguidas de agitación por 10 minutos. Se permitió a las dos fases de la mezcla que se separaran. La capa acuosa fue extraída dos veces con 20 mL de acetato de etilo. La capa orgánica combinada fue lavada con 4.0 mL de una solución que contenía 25 mg de yoduro de potasio y agua (4.0 mL), 20 mL de solución acuosa de tiosulfato de sodio y luego solución de salmuera. La solución orgánica fue secada sobre sulfato de magnesio, filtrada y concentrada a presión reducida para dar 1,34 g de aceite crudo que contenía una pequeña cantidad del aldehído deseado, \alphaS-[bis(fenilmetil)amino]bencenopropanaldehído.
Método 5
Siguiendo los mismos procedimientos descritos en el Método 1 de este Ejemplo, excepto por que se usaron 3.0 equivalentes de complejo trióxido de azufre piridina, y se aisló \alphaS-[bis(fenilmetil)amino]bencenopropanaldehído con rendimientos comparables.
Ejemplo 3
25
Preparación de N,N-dibencil-3(S)-amino-1,2-(S)-epoxi-4-fenilbutano
Método 1
Una solución de \alphaS-[Bis(fenilmetil)amino]bencenopropanaldehído (191.7 g, 0.58 mol) y cloroiodometano (56.4 mL, 0.77 mol) en tetrahidrofurano (1.8 L) fue enfriada entre -30 a -35ºC (una temperatura más fría tal como -70ºC también trabajó bien pero las temperaturas más cálidas se logran más fácilmente en operaciones a gran escala) en un reactor de acero inoxidable bajo atmósfera de nitrógeno. Se añadió entonces una solución de n-butil litio en hexano (1.6 M, 365 mL, 0.58 mol) a una velocidad que mantuvo la temperatura por debajo de -25ºC. Después de la adición, la mezcla fue agitada entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Se llevaron acabo más adiciones de reactivos de la siguiente forma: (1) se añadió cloroiodometano adicional (17 mL), seguido por n-butil litio (110 mL) a < -25ºC. Después de la adición se agitó la mezcla entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Esto se repitió una vez más. (2) Se añadió cloroiodometano adicional (8.5 mL, 0.11 mol), seguido por n-butil litio (55 mL, 0.088 mol) a < -25ºC. Después de la adición se agitó la mezcla entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Esto fue repetido 5 veces. (3) Se añadió cloroiodometano adicional (8.5 mL, 0.11 mol), seguido por n-butil litio (37 mL, 0.059 mol) a < -25ºC. Después de la adición se agitó la mezcla entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Esto fue repetido una vez más. Se suspendió el enfriamiento externo y se calentó la mezcla hasta temperatura ambiente de 4 a 16 horas cuando el TLC (sílica gel, 20% acetato de etilo/hexano) indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción fue enfriada a 10ºC e interrumpida con 1.452 g de solución de cloruro de amonio al 16% (preparada por disolución de 232 g de cloruro de amonio en 1.220 mL de agua), manteniendo la temperatura por debajo de 23ºC. La mezcla fue agitada por 10 minutos y las capas orgánica y acuosa fueron separadas. La fase acuosa fue extraída con acetato de etilo (2x 500 mL). La capa de acetato de etilo fue combinada con la capa de tetrahidrofurano. La solución combinada fue secada sobre sulfato de magnesio (220 g), filtrada y concentrada sobre un evaporador rotatorio a 65ºC. El residuo aceitoso de color café fue secado a 70ºC al vacío (0.8 bar) por 1 h para producir 222,8 g de material crudo. (El peso del producto crudo fue >100%. Debido a la inestabilidad relativa del producto sobre sílica gel, se utiliza usualmente el producto crudo en la siguiente etapa sin purificación). La proporción diastereomérica de la mezcla del crudo fue determinada por medio de RMN protónica: (2S)/(2R): 86:14. Los epóxidos diastereomeros fueron caracterizados en esta mezcla por medio de análisis por TLC (sílica gel, 10% acetato de etilo/hexano), Rf = 0.29 & 0.32, respectivamente. Se obtuvo una muestra analítica de cada uno de los diastereomeros por medio de purificación con cromatografía sobre sílica-gel (3% acetato de etilo/hexano) y se caracterizó como sigue:
N,N,\alphaS-Tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina
RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 2.49 y 2.51 (Sistema AB, 1H, J_{AB} = 2.82), 2.76 y 2.77 (Sistema AB, 1H, J_{AB} = 4.03), 2.83 (m, 2H), 2.99 & 3.03 (Sistema AB, 1H, J_{AB} = 10.1 Hz), 3.15 (m, 1H), 3.73 & 3.84 (Sistema AB, 4H, J_{AB} = 14.00), 7.21 (m, 15H); RMN ^{13}C (400 Naiz, CDCl_{3}) \delta 139.55, 129.45, 128.42, 128.14, 128.09, 126.84, 125.97, 60.32, 54.23, 52.13, 45.99, 33.76; HRMS Calculada para C_{24}H_{26}NO (M+1) 344.477, encontrada 344.2003.
N,N,\alphaS-Tris(fenilmetil)-2R-oxiranometanamina
RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 2.20 (m, 1H), 2.59 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.97 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.85 (Sistema AB, 4H), 7.25 (m, 15H).HPLC sobre fase estacionaria quiral: columna Pirkle-Whelk-O 1 (250 x 4.6 mm D.I.), fase móvil: hexano/isopropanol (99.5:0.5, v/v), velocidad de flujo: 1.5 ml/min, detección con detector UV a 210 nm. Tiempo de retención de (8): 9.38 min., tiempo de retención del enantiómero de (4): 13.75 min.
Método 2
Una solución del aldehído crudo 0.074 mol y cloroiodometano (7.0 ml, 0.096 mol) en tetrahidrofurano (285 ml) fue enfriada a -78ºC, bajo atmósfera de nitrógeno. Se añadió entonces una solución 1.6 M de n-butil litio en hexano (25 ml, 0.040 mol) a una velocidad tal para mantener la temperatura a -75ºC (tiempo de adición - 15 min.). Después de la primera adición, se añadió nuevamente cloroiodometano adicional (1.6 ml, 0.022 mol), seguido por n-butil litio (23 ml, 0.037 mol), manteniendo la temperatura a -75ºC. La mezcla fue agitada por 15 min. Cada uno de los reactivos, cloroiodometano (0.70 ml, 0.010 mol) y n-butil litio (5 ml, 0.008 mol) fueron añadidos 4 veces más durante 45 min. a -75ºC. Se removió entonces el baño de enfriamiento y se calentó la solución a 22ºC durante 1.5 horas. La mezcla fue vertida en 300 ml de solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La capa de tetrahidrofurano fue separada. La fase acuosa fue extraída con acetato de etilo (1 x 300 ml). Las capas orgánicas combinadas fueron lavadas con salmuera, secadas sobre sulfato de magnesio, filtradas y concentradas para dar un aceite de color café (27.4 g). El producto podría ser utilizado en la siguiente Etapa sin purificación. El diastereómero deseado puede ser purificado por medio de recristalización en una etapa posterior. El producto podría ser también purificado por cromatografía.
Método 3
Una solución de \alphaS-[Bis(fenilmetil)amino]bencenopropanaldehído (178.84 g, 0.54 mol) y bromoclorometano (46 mL, 0.71 mol) en tetrahidrofurano (1.8 L) fue enfriada entre -30 a -35ºC (una temperatura más fría tal como -70ºC también trabajó bien pero las temperaturas más cálidas se logran más fácilmente en operaciones a gran escala) en un reactor de acero inoxidable bajo atmósfera de nitrógeno. Se añadió entonces una solución de n-butil litio en hexano (1.6 M, 340 mL, 0.54 mol) a una velocidad que mantuvo la temperatura por debajo de -25ºC. Después de la adición, la mezcla fue agitada entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Se llevaron acabo más adiciones de reactivos de la siguiente forma: (1) se añadió bromoclorometano adicional (14 mL), seguido por n-butil litio (102 mL) a < -25ºC. Después de la adición se agitó la mezcla entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Esto se repitió una vez más. (2) Se añadió bromoclorometano adicional (7 mL, 0.11 mol), seguido por n-butil litio (51 mL, 0.082 mol) a <-25ºC. Después de la adición se agitó la mezcla entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Esto fue repetido 5 veces. (3) Se añadió bromoclorometano adicional (7 mL, 0.11 mol), seguido por n-butil litio (51 mL, 0.082 mol) a <-25ºC. Después de la adición se agitó la mezcla entre -30 a -35ºC por 10 minutos. Esto fue repetido una vez más. Se suspendió el enfriamiento externo y se calentó la mezcla hasta temperatura ambiente de 4 a 16 horas cuando el TLC (sílica gel, 20% acetato de etilo/hexano) indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción fue enfriada a 10ºC e interrumpida con 1.452 g de solución de cloruro de amonio al 16% (preparada por disolución de 232 g de cloruro de amonio en 1.220 mL de agua), manteniendo la temperatura por debajo de 23ºC. La mezcla fue agitada por 10 minutos y las capas orgánica y acuosa fueron separadas. La fase acuosa fue extraída con acetato de etilo (2x 500 mL). La capa de acetato de etilo fue combinada con la capa de tetrahidrofurano. La solución combinada fue secada sobre sulfato de magnesio (220 g), filtrada y concentrada sobre un evaporador rotatorio a 65ºC. El residuo aceitoso de color café fue secado a 70ºC al vacío (0.8 bar) por 1 h para producir 222,8 g de material crudo.
Método 4
Siguiendo los mismos procedimientos que se describen en el Método 3 de este Ejemplo, excepto por que las temperaturas de reacción fueron de -20ºC. La N,N,\alphaS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina resultante era una mezcla diastereomérica de menor pureza que aquella del Método 3.
Método 5
Siguiendo los mismos procedimientos que se describen en el Método 3 de este Ejemplo, excepto por que las temperaturas de reacción fueron entre -70-78ºC. La N,N,\alphaS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina resultante era una mezcla diastereomérica, que fue utilizada directamente en las etapas posteriores sin purificación.
Método 6
Siguiendo los mismos procedimientos que se describen en el Método 3 de este Ejemplo, excepto por que se utilizó una adición continúa de bromoclorometano y n-butil litio entre -30 a -35ºC. Después de la reacción y de agotar los procedimientos que se describen en el Método 3 de este Ejemplo, se aisló la N,N,\alphaS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina deseada con un rendimiento y una pureza comparables.
Método 7
Siguiendo los mismos procedimientos que se describen en el Método 2 de este Ejemplo, excepto por que se utilizó dibromometano en vez de cloroiodometano. Después de la reacción y de agotar los procedimientos que se describen en el Método 2 de este Ejemplo, se aisló la N,N,\alphaS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina deseada.
Ejemplo 4
26
Preparación de N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
A una solución de N,N-dibencil-3(S)-amino-1,2(S)-epoxi-4-fenilbutano crudo (388.5 g, 1.13 mol) en isopropanol (2.7 L) (o acetato de etilo) se le añadió isobutilamina (1.7 kg, 23.1 mol) durante 2 min. la temperatura se incrementó desde 25ºC y hasta 30ºC. La solución se calentó a 82ºC y se agitó a esta temperatura por 1.5 horas. La solución caliente fue concentrada a presión reducida a 65ºC. El residuo aceitoso de color café fue transferido a un balón de 3 L y se lo secó al vacío (0.8 mm Hg) por 16 h para dar 450 g de 3S-[N,N-bis(fenilmetil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como un aceite crudo.
Se obtuvo una muestra analítica del producto diasteromérico principal deseado, purificando una pequeña muestra del producto crudo por cromatografía en sílica gel (40% acetato de etilo/hexano). Análisis por Tlc: sílica gel, 40% acetato de etilo/hexano; Rf = 0.28; análisis por HPLC: columna ultrasphere ODS, 25% de buffer trietilamina/fosfato pH 3 en acetonitrilo, velocidad de flujo 1 mL/min, detector UV; tiempo de retención 7.49 min.; HRMS Calculado para C_{28}H_{27}N_{2}O (M+ 1) 417.616, encontrado 417.2887. Se obtuvo también una muestra analítica del menor de los productos diastereoméricos, 3S-[N,N-bis(fenilmetil)amino]1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2S-ol por purificación de una pequeña muestra del producto crudo por cromatografía en sílica gel (40% acetato de etilo/hexano).
Ejemplo 5
27
Preparación de la sal del ácido oxálico \bullet N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
A una solución de ácido oxálico (8.08 g, 89.72 mmol) en metanol (76 mL) se le añadió una solución de 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo (39.68g, que contenía alrededor de 25.44 g (61.06 mmol) del isómero 3(S),2(R) y alrededor de 4.49 g (10.78 mmol) del isómero 3(S),2(S) en acetato de etilo (90 mL) durante 15 minutos. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por alrededor de 2 horas. Se aisló el sólido por filtración, se lo lavó con acetato de etilo (2 x 20 mL) y se lo secó al vacío por alrededor de 1 hora para producir 21.86 g (70.7% del isómero recuperado) de sal diastereoméricamente pura en un 97% (con base en las áreas de los picos de HPLC). Análisis por HPLC: columna C18 Vydec-péptido/proteína, detector UV a 254 nm, velocidad de flujo 2 mL/min., gradiente (A = 0.05% ácido trifluoroacético en agua, B = 0.05% ácido trifluoroacético en acetonitrilo, 0 min. 75% A/25% B, 30 min. 10% A/90% B, 35 min. 10% A/90% B, 37 min. 75% A/25% B); Tiempo de retención 10.68 min. (isómero 3(S),2(R)) y 9.73 min. (isómero 3(S),2(S)). Pf = 174,99ºC; Microanálisis: Calculado: C 71.05%, H 7.50%, N 5.53%; Encontrado: C 71.71%, H 7.75%, N 5.39%.
Alternativamente, se añadió ácido oxálico dihidratado (119 g, 0.94 mole) en un balón de fondo redondo de 5000 mL al cual se acoplaron un agitador mecánico y un embudo de goteo. Se añadió metanol (1000 ml) y se agitó la mezcla hasta disolución completa. Se añadió una solución de 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil) amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo en acetato de etilo (1800 ml, 0.212 g de isómeros de amino alcohol/mL, 0.9160 moles) durante un período de veinte minutos. Se agitó la mezcla por 18 horas y se aisló el producto sólido por centrifugación en seis porciones a 400G. Cada porción se lavó con 125 mL de acetato de etilo. Se recolectó entonces la sal y se la secó durante la noche a 1 torr para producir 336.3 g de producto (71% con base en el amino alcohol total). HPLC/MS (electrospray) fue consistente con el producto deseado (m/z 417 [M+H]+).
Alternativamente, el 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo (5 g) se disolvió en metil-tert-butiléter (MTBE) (10 mL) y se añadió ácido oxálico (1 g) en metanol (4 mL). Se agitó la mezcla por alrededor de 2 horas. El sólido resultante fue filtrado, lavado con MTBE frío y secado para producir 2.1 g de un sólido blanco de alrededor del 98.9% de pureza diastereomérica (con base en las áreas de los picos de HPLC).
Ejemplo 6 Preparación de la sal del ácido acético \bullet N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
A una solución de 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo en metil-tert-butiléter (MTBE) (45 mL, 1.1 g isómeros de amino alcohol/mL) se le añadió ácido acético (6.9 mL) gota a gota. La mezcla se agitó aproximadamente por 1 hora a temperatura ambiente. Se removió el solvente al vacío para producir un aceite de color café como un producto diasteroméricamente puro aproximadamente en un 85% (con base en las áreas de los picos de HPLC). El aceite color café se cristalizó como sigue: se disolvieron 0.2 g del aceite en el primer solvente con calor para obtener una solución clara, el segundo solvente fue añadido hasta que la solución se tornó turbia, la mezcla fue calentada nuevamente hasta hacerla clara, se la sembró con un producto aproximadamente 99% puro diastereoméricamente, se la enfrió hasta temperatura ambiente y luego se la almacenó en refrigerador durante la noche. Se filtraron los cristales, se los lavó con el Segundo solvente y se los secó. La pureza diastereomérica de los cristales fue calculada a partir de las áreas de los picos de HPLC. Los resultados se muestran en la Tabla 1.
TABLA 1
Primer Solvente Segundo Solvente Proporción de los Peso Pureza Diasteromérica
Solventes Recuperado (g) (%)
MTBE Heptano 1:10 0,13 98,3
MTBE Hexano 1:10 0,03 99,6
Metanol Agua 1:1.5 0,05 99,5
Tolueno Heptano 1:10 0,14 98,7
Tolueno Hexano 1:10 0,10 99,7
Alternativamente, el 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo (50.0 g, que contienen alrededor de 30.06 g (76.95 mmol) del isómero 3(S),2(R) y alrededor de 5.66 g (13.58 mmol) del isómero 3(S).2(S)) fue disuelto en metil-tert-butiléter (45.0 mL). A esta solución se le añadió ácido acético (6.90 mL, 120.6 mmol) durante un período de alrededor de 10 min. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por alrededor de 1 hora y se la concentró a presión reducida. Se purificó el residuo aceitoso por recristalización a partir de metil-tert-butiléter (32 mL) y heptano (320 mL). Se aisló el sólido por filtración, se lo lavó con heptano frío y se lo secó al vacío por alrededor de 1 hora para producir 21.34 g (58.2% de recuperación de isómero) de la sal monoacética ácida 96% diastereoméricamente pura (con base en las áreas d los picos de HPLC). Pf = 105-106ºC; Microanálisis: Calculado: C 75.53%, H 8.39%, N 5.87%; Encontrado: C 75.05%, H 8.75%, N 5.71%.
Ejemplo 7 Preparación de la sal de ácido L-tartárico \bullet N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
El 3(S)-(N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo (10.48 g, que contienen alrededor de 6.72 g (16.13 mmol) del isómero 3(S),2(R) y alrededor de 1.19 g (2.85 mmol) del isómero 3(S),2(S)} se disolvió en tetrahidrofurano (10.0 mL). A esta solución se le añadió una solución ácido L-tartárico (2.85 g, 19 mmol) en metanol (5.0 mL) por un período de alrededor de 5 min. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por alrededor de 10 min. y concentrada a presión reducida. Se añadió metil-tert-butiléter (20.0 mL) al residuo aceitoso y se agitó la mezcla a temperatura ambiente por alrededor de 1 hora. Se aisló el sólido por filtración para producir 7.50 g de la sal cruda. La sal cruda fue purificada por medio de recristalización a partir de acetato de etilo y heptano a temperatura ambiente para producir 4.13 g (45.2% de recuperación de isómero) de la sal del ácido L-tartárico con una pureza diastereoméricamente pura del 95% (con base en las áreas de los picos de HPLC). Microanálisis: Calculado: C 67.76%, H 7.41%, N 4.94%; Encontrado: C 70.06%, H 7.47%, N 5.07%.
Ejemplo 8 Preparación de la sal del ácido dihidroclórico \bullet N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
Se disolvió el 3 (S)-[N,N-bisifenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol (10.0g, que contenía alrededor de 6.41g (15.39 mmol) del isómero 3(S),2(R) y alrededor de 1.13 g (2.72 mmol) del isómero 3(S),2(S)} en tetrahidrofurano (20.0 mL). A esta solución se le añadió ácido clorhídrico (20 mL, 6.0 N) durante un período de alrededor de 5 min. La mezcla se agitó a temperatura ambiente aproximadamente por 1 hora y se la concentró a presión reducida. El residuo fue recristalizado a partir de etanol a 0ºC para producir 3.20 g (42.7% de recuperación de isómero) de la sal del ácido dihidroclórico con una pureza diastereomérica del 98% (con base en las áreas de los picos de HPLC). Microanálisis: Calculado: C 68.64%,H 7.76%,N 5.72%; Encontrado: C 68.79%, H 8.07%, N 5.55%.
Ejemplo 9 Preparación de la sal del ácido toluenosulfónico de la N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
Se disolvió el 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol crudo (5.0 g, que contenía alrededor de 3.18 g (7.63 mmol) del isómero 3(S),2(R) y alrededor de 0.56 g (1.35 mmol) del isómero 3(S),2(S)} en metil-tert-butiléter (10.0 mL). A esta solución se le añadió una solución de ácido toluenosulfónico (2.28 g, 12 mmol) en metil-tert-butiléter (2.0 mL) y metanol (2.0 mL) por un período aproximado de 5 min. La mezcla se agitó a temperatura ambiente aproximadamente por 2 horas y se la concentró a presión reducida. El residuo fue recristalizado a partir de metil-tert-butiléter y heptano a 0ºC, filtrado, lavado con heptano frío y secado al vacío para producir 1.85 g (40.0% de recuperación de isómero) de la sal del ácido monotoluenosulfónico con una pureza diastereomérica del 97% (con base en las áreas de los picos de HPLC).
Ejemplo 10 Preparación de la sal del ácido metanosulfónico de la N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
Se disolvió 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol (10.68 g, que contenía alrededor de 6.85 g (16.44 mmol) del isómero 3(S),2(R) y alrededor de 1.21g (2.90 mmol) del isómero 3(S),2(S)) en tetrahidrofurano (10.0 mL). A esta solución se le añadió ácido metanosulfónico (1.25 mL, 19.26 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente aproximadamente por 2 horas y se la concentró a presión reducida. El residuo fue recristalizado a partir de metanol y agua a 0ºC, filtrado, lavado con metanol frío/agua (1:4) y secado al vacío para producir 2.40 g (28.5% de recuperación de isómero) de la sal del ácido monometanosulfónico con una pureza diastereomérica del 98% (con base en las áreas de los picos de HPLC).
Ejemplo 11 Preparación de N-bencil-L-fenilalaninol
Método 1
Se disolvió L-fenilalaninol (89.51 g, 0.592 moles) en 375 mL de metanol bajo atmósfera inerte, y se añadieron 35.52 g (0.592 moles) de ácido acético glacial y 50 mL de metanol seguido de una solución de 62.83 g (0.592 moles) de benzaldehído en 100 mL de metanol. La mezcla se enfrió hasta aproximadamente 5ºC y se añadió una solución de 134.6 g (2.14 moles) de cianoborohidruro de sodio en 700 mL de metanol aproximadamente en 40 minutos, manteniendo la temperatura entre 15ºC y 25ºC. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente por 18 horas. La mezcla se concentró a presión reducida y se hizo partición entre 1 L de solución de hidróxido de amonio 2M y 2 L de éter. Se lavó la capa etérea con 1 L de solución de hidróxido de amonio 1M, dos veces con 500 mL de agua, 500 mL de salmuera y se la secó sobre sulfato de magnesio por 1 hora. Se filtró la capa etérea, se la concentró a presión reducida y se recristalizó el producto sólido crudo a partir de 110 mL de acetato de etilo y 1.3 L de hexano para dar 115 g (81% de rendimiento) de N-bencil-L-fenilalaninol como un sólido de color blanco.
Método 2
Se disolvieron L-fenilalaninol (5 g, 33 mmoles) y 3.59 g (33.83 mmoles) de benzaldehído en 55 mL de etanol 3A bajo atmósfera inerte en un agitador Parr y se calentó la mezcla a 60ºC por 2.7 horas. La mezcla se enfrió hasta aproximadamente 25ºC y se añadieron 0.99 g de platino sobre carbón al 5%, y se hidrógeno la mezcla a 60 psi de hidrógeno y 40ºC por 10 horas. Se filtró el catalizador, se concentró el producto a presión reducida y se recristalizó el producto sólido crudo a partir de 150 mL de heptano para dar 3.83 g (48% de rendimiento) de N-bencil-L-fenilalaninol como un sólido de color blanco.
Ejemplo 12 Preparación de N-(t-butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninol
Se disolvió N-bencil-L-fenilalaninol (2.9 g, 12 mmoles) en 3 mL de trietilamina, y se añadieron 27 mL de metanol y 5.25 g (24.1 mmoles) de bicarbonato de di-tert-butilo. Se calentó la mezcla hasta 60ºC por 35 minutos y se la concentró a presión reducida. Se disolvió el residuo en 150 mL de acetato de etilo y se lo lavó dos veces con 10 mL de ácido clorhídrico diluido (0-5ºC) (pH 2.5 a 3), 15 mL de agua, 10 mL de salmuera, se lo secó sobre sulfato de magnesio, se lo filtró y se lo concentró a presión reducida. El aceite como producto crudo fue purificado por cromatografía sobre sílica gel (acetato de etilo: hexano, 12:3 como solventes de elución) para dar 3.98 g (97% de rendimiento) de un aceite incoloro.
Ejemplo 13 Preparación de N-(t-Butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninal
Método 1
A una solución de 0.32 g (0.94 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninol en 2.8 mL de tolueno se le añadieron 2.4 mg (0.015 mmoles) de 2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi, radical libre (TEMPO), 0.1 g (0.97 mmoles) de bromuro de sodio, 2,8 mL de acetato de etilo y 0.34 mL de agua. La mezcla se enfrió a 0ºC y se añadió lentamente una solución acuosa de 4.2 mL de blanqueador casero al 5% que contenía 0.23 g (3.0 mL, 2.738 mmoles) de bicarbonato de sodio por 30 minutos. La mezcla se agitó a 0ºC por 10 minutos. Se hicieron tres adiciones más (0.4 mL cada vez) de blanqueador seguido de agitación por 10 minutos después de cada adición para consumir todo el material de partida. Se permitió a las dos fases de la mezcla que se separaran. Se extrajo la capa acuosa dos veces con 8 mL of tolueno. Se lavó la capa orgánica combinada con 1.25 mL de una solución que contenía 0.075 g de yoduro de potasio, bisulfato de sodio (0.125 g) y agua (1.1 mL), 1.25 mL de solución acuosa al 10% de tiosulfato de sodio, 1.25 mL de buffer de fosfato pH 7 y 1.5 mL de solución de salmuera. La solución orgánica fue secada sobre sulfato de magnesio, filtrada y concentrada a presión reducida para dar 0.32 g (100% de rendimiento) de N-(t-Butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninal.
Método 2
A una solución de 2.38 g (6.98 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninol en 3.8 mL (27.2 mmoles) de trietilamina a 10ºC se le añadió una solución de 4.33 g (27.2 mmoles) del complejo trióxido de azufre piridina en 17 mL de sulfóxido de dimetilo. Se calentó la mezcla a temperatura ambiente y se la agitó por una hora. Se le añadió agua (16 mL) y se extrajo la mezcla con 20 mL de acetato de etilo. Se lavó la capa orgánica con 20 mL de ácido cítrico al 5%, 20 mL de agua, 20 mL de salmuera, se la secó sobre sulfato de magnesio y se la filtró. Se concentró el filtrado a presión reducida para dar 2.37 g (100% de rendimiento) de N-(t-Butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninal.
Ejemplo 14
28
Preparación de 3-(S)-[N-(t-butoxicarbonil)-N-bencilamino]-1,2-(S)-epoxi-4-fenilbutano 
\newpage
Método 1
Una solución de 2.5 g (7.37 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninal y 0.72 mL de cloroiodometano en 35 mL de TF fue enfriada a -78ºC. Se le añadieron lentamente 4.64 mL de una solución de n-butillitio (1.6 M in hexano, 7.42 mmoles), manteniendo la temperatura por debajo de -70ºC. Se agitó la mezcla por 10 minutos entre -70 a -75ºC. Se añadieron secuencialmente dos porciones adicionales de 0.22 mL de cloroiodometano y 1.4 mL de n-butillitio y se agitó la mezcla por 10 minutos entre -70 a -75ºC después de cada adición. Se añadieron secuencialmente cuatro porciones adicionales de 0.11 mL de cloroiodometano y 0.7 mL de n-butillitio y se agitó la mezcla por 10 minutos entre -70 a -75ºC después de cada adición. Se calentó la mezcla a temperatura ambiente por 3.5 horas. El producto fue apagado por debajo de los 5ºC con 24 mL de agua fría-hielo. Se separaron las capas bifásicas y se extrajo la capa acuosa dos veces con 30 mL de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas fueron lavadas tres veces con 10 mL de agua, diez con 10 mL de salmuera, secadas sobre sulfato de sodio, filtradas y concentradas a presión reducida para dar 2.8 g de un aceite crudo de color amarillo. Este aceite crudo (>100% de rendimiento) es una mezcla de los epóxidos diastereoméricos N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina y N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2R-oxiranometanamina. La mezcla cruda se utiliza directamente en la etapa siguiente sin purificación.
Método 2
A una suspensión de 2.92 g (13.28 mmoles) de yoduro de trimetilsulfoxonio en 45 mL de acetonitrilo se le añadieron 1.49 g (13.28 mmoles) de t-butóxido de potasio. Se le añadió una solución de 3.0 g (8.85 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninal en 18 mL de acetonitrilo y se agitó la mezcla a temperatura ambiente por una hora. Se diluyó la mezcla con 150 mL de agua y se extrajo dos veces con 200 mL de acetato de etilo. Se combinaron las capas orgánicas y se las lavó con 100 mL de agua, 50 mL de salmuera, se las secó sobre sulfato de sodio, se las filtró y se las concentró a presión reducida para dar 3.0 g de un aceite crudo de color amarillo. Se purificó el producto crudo por cromatografía sobre sílica gel (acetato de etilo/hexano: 1:8 como solvente eluyente) para dar 1.02 g (32.7% de rendimiento) de a mezcla de los dos diastereómeros N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina y N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2R-oxiranometanamina.
Método 3
A una suspensión de 0.90 g (4.42 mmoles) de yoduro de trimetilsulfonio en 18 mL de acetonitrilo se le añadieron 0.495 g (4.42 mmoles) de t-butóxido de potasio. Se le añadió una solución de 1.0 g (2.95 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-bencil-L-fenilalaninal en 7 mL de acetonitrilo y se agitó la mezcla a temperatura ambiente por una hora. Se diluyó la mezcla con 80 mL de agua y se extrajo dos veces con 80 mL de acetato de etilo. Se combinaron las capas orgánicas y se las lavó con 100 mL de agua, 30 mL de salmuera, se las secó sobre sulfato de sodio, se las filtró y se las concentró a presión reducida para dar 1,04 g de un aceite crudo de color amarillo. El producto crudo era una mezcla de los dos diastereómeros N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina y N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2R-oxiranometanamina.
Ejemplo 15
29
Preparación de 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil) aminol-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol
A una solución de 500 mg (1.42 mmoles) del epóxido crudo (una mezcla de los dos diastereómeros N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina y N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2R-oxiranometanamina) en 0.98 mL de isopropanol se la añadieron 71 mL (7.14 mmoles) de isobutilamina. Se calentó la mezcla a reflujo entre 85ºC y 90ºC por 1.5 horas. Se concentró la mezcla a presión reducida y se purificó el producto aceitoso por cromatografía en sílica gel (cloroformo:metanol, 100:6 como solventes eluyentes) para dar 330 mg de 3S-[N-t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como un aceite incoloro (54.5% de rendimiento). También se aisló al 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2S-ol. Cuando se utilizó a la N,\alphaS-bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina purificada como material de partida, se aisló al 3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol después de purificación por cromatografía con un rendimiento del 86%.
Ejemplo 16
30
Preparación de 3S-(N-t-Butoxicarbonil)amino-4-fenilbutan-1,2R-diol
A una solución de 1 g (3.39 mmoles) del ácido 2S-(N-t-butoxicarbonil)amino-1S-hidroxi-3-fenilbutanoico (disponible comercialmente con Nippon Kaiaku, Japón) en 50 mL de TF a 0ºC se le añadieron 50 mL del complejo borano-TF (líquido, 1.0 M en TF), manteniendo las temperaturas por debajo de 5ºC. Se calentó la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se la agitó por 16 horas. Se enfrió la mezcla 0ºC y se añadieron lentamente 20 mL de agua para destruir el exceso de BH_{3} y para interrumpir la mezcla del producto, manteniendo la temperatura por debajo de 12ºC. Se agitó la mezcla interrumpida por 20 minutos y se la concentró a presión reducida. Se extrajo tres veces la mezcla del producto con 60 mL de acetato de etilo. Se combinaron las capas orgánicas y se las lavó con 20 mL de agua, 25 mL de solución saturada de cloruro de sodio y se las concentró a presión reducida para dar 1.1 g de aceite crudo. Se purificó el producto crudo por cromatografía en sílica gel (cloroformo/metanol, 10:6 como solventes eluyentes) para dar 900 mg (94.4% de rendimiento) de 3S-(N-t-butoxicarbonil) amino-4-fenilbutan-1,2R-diol como un sólido de color blanco.
Ejemplo 17
31
Preparación de 3S-(N-t-Butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbut-1-il Toluenosulfonato
A una solución de 744.8 mg (2.65 mmoles) de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-4-fenilbutan-1,2R-diol en 13 mL de piridina a 0ºC se le añadieron 914 mg de cloruro de toluenosulfonilo en una porción. Se agitó la mezcla entre 0ºC y 5ºC por 5 horas. Se añadió una mezcla de 6.5 mL de acetato de etilo y 15 mL de solución acuosa de bicarbonato de sodio al 5% a la mezcla de reacción y se agitó por 5 minutos. Se extrajo la mezcla del producto tres veces con 50 mL de acetato de etilo. Se combinaron las capas orgánicas y se las lavó con 15 mL de agua, 10 mL de solución de cloruro de sodio saturado y se las concentró a presión reducida para dar alrededor de 1.1 g de un sólido grueso de color amarillo. Se purificó el producto crudo cromatografía en sílica gel (acetato de etilo/hexano 1:3 como solventes eluyentes) para dar 850 mg (74% de rendimiento) de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbut-1-il toluenosulfonato como un sólido de color blanco.
Ejemplo 18
32
Preparación de 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol
A una solución de 90 mg (0.207 mmoles) de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbut-1-il toluenosulfonato en 0.143 mL de isopropanol y 0.5 mL de tolueno se le añadieron 0.103 mL (1.034 mmoles) de isobutilamina. Se calentó la mezcla entre 80 y 85ºC y se la agitó por 1.5 horas. Se concentró la mezcla del producto a presión reducida entre 40 y 50ºC y se la purificó por cromatografía en sílica gel (cloroformo/metanol, 10:1 como solventes eluyentes) para dar 54.9 mg (76.8% de rendimiento) de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)amino]-1-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como un sólido de color blanco.
Ejemplo 19
33
Preparación de N-[3(S)-benciloxicarbonilamino-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina
Parte A
A una solución de 75.0 g (0.226 mol) de N-benciloxicarbonil-L-fenilalanina clorometil cetona en una mezcla de 807 mL de metanol y 807 mL de tetrahidrofurano a -2ºC, se le añadieron 13.17g (0.348 mol, 1.54 equivalentes) de borohidruro de sodio sólido durante cien minutos. Los solventes fueron removidos a presión reducida a 40ºC y el residuo se disolvió en acetato de etilo (aprox. 1L). La solución fue lavada secuencialmente con sulfato ácido de potasio 1M, bicarbonato de sodio saturado y luego con soluciones saturadas de cloruro de sodio. Después de secar sobre sulfato de magnesio anhídro y de filtrar, se removió la solución a presión reducida. Al aceite resultante se le añadió hexano (aprox. 1L) y se calentó la mezcla a 60ºC con turbulencia. Después de enfriar a temperatura ambiente, se recolectaron los sólidos y se los lavó con 2 L de hexano. El sólido resultante fue recristalizado a partir de acetato de etilo caliente y hexano para producir 32.3 g (43% de rendimiento) de N-benciloxicarbonil-3(S)-amino-1-cloro-4-fenil-2(S)-butanol, pf 150-151ºC y M+Li^{+} = 340.
Parte B
A una solución de 6.52 g (0.116 mol, 1.2 equivalentes) de hidróxido de potasio en 968 mL de etanol absoluto a temperatura ambiente, se le añadieron 32.3 g (0.097 mol) de N-CBZ-3(S)-amino-1-cloro-4-fenil-2(S)-butanol. Después de agitar por quince minutos, se removió el solvente a presión reducida y se disolvieron los sólidos en cloruro de metileno. Después de lavar con agua, de secar sobre sulfato de magnesio, de filtrar y de remover, se obtienen 27.9 g de un sólido blanco. La recristalización a partir de acetato de etilo en caliente y hexano produjo 22.3 g (77% de rendimiento) de N-benciloxicarbonil-3(S)-amino-1,2(S)-epoxi-4-fenilbutano, pf 102-103ºC y MH^{+} 298.
Parte C
Una solución de N-benciloxicarbonil 3(S)-amino-1,2-(S)-epoxi-4-fenilbutano (1.00 g, 3.36 mmol) e isobutilamina (4.90 g, 67.2 mmol, 20 equivalentes) en 10 mL de alcohol isopropílico fue calentada a reflujo por 1.5 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente, se la concentró al vacío y luego se la vertió en 100 mL de hexano con agitación después de lo cual se cristalizó el producto de la solución. Se aisló el producto por filtración y se lo secó al aire para dar 1.18 g, 95% de N-[[3(S)-fenilmetilcarbamoil)amino-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]N-[(2-metilpropil)]amina, C_{22}H_{30}N_{2}O_{3}, pf 108.0-109.5ºC, MH^{+} m/z = 371.
Ejemplo 20
34
Preparación de N-[(1,1-dimetiletoxil)carbonil]-N-[2-metilpropil]-3S-[N1-(fenilmetoxicarbonil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutilamina
A una solución de 7.51 g (20.3 mmol) de N-[3S-[(fenilmetoxicarbonil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-2-metilpropilamina en 67 mL de tetrahidrofurano anhídro se le añadieron 2.25 g (22.3 mmol) de trietilamina. Después de enfriar 0ºC, se añadieron 4.4g (20.3 mmol) de di-tert-butildicarbonato y con agitación continua a temperatura ambiente por 21 horas. Los volátiles fueron removidos al vacío, se añadió acetato de etilo, luego se lavó con ácido cítrico al 5%, bicarbonato de sodio saturado, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para producir 9.6 g de producto crudo. La cromatografía sobre sílica gel utilizando 30% acetato de etilo/hexano produjo 8.2 g de N-[[3S-(fenilmetilcarbamoil)amino]-2R-hidroxi-4-fenil]-1-[(2-metilpropil)amino-2-(1,1-dimetiletoxil)carbonil]butano puro, m/e del espectro de masas = 477 (M+Li).
Ejemplo 21
35
Preparación de N-[3(S)-benciloxicarbonilamino-2(R)-hidroxi-4-fenil]N-isobutilamina
Parte A
N-benciloxicarbonil-3(S)-amino-1-cloro-4-fenil-2(S)-butanol
A una solución de N-benciloxicarbonil-L-fenilalanina clorometil cetona (75 g, 0.2 mol) en una mezcla de 800 mL de metanol y 800 mL de tetrahidrofurano se le añadió borohidruro sodio (13.17 g, 0.348 mol, 1.54 equivalentes) durante100 minutos. Se agitó la solución a temperatura ambiente por 2 horas y luego se la concentró al vacío. Se disolvió el residuo en 1000 mL de acetato de etilo y se lo lavó con KHSO_{4} 1N, NaHCO_{3} acuoso saturado, NaCl acuoso saturado, se lo secó sobre MgSO_{4} anhídro, se lo filtró y concentró al vacío para producir un aceite. El producto crudo fue disuelto en 1000 mL de hexanos a 60ºC y se le permitió enfriarse hasta temperatura ambiente en donde se formaron cristales que fueron aislados por filtración y lavados con copiosas cantidades de hexanos. Este sólido fue recristalizado entonces a partir de acetato de etilo caliente y hexanos para producir 32.3 g, 43% de N-benciloxicarbonil-3(S)-ameno-1-cloro-4-fenil-2(S)-butanol, pf 150-151ºC, FAB MS: MLi^{+} = 340.
Parte B
3(S)-[N-(benciloxicarbonil)amino]-1,2(S)-epoxi-4-fenilbutano
Una solución de hidróxido de potasio (6.52 g. 0.116 mol, 1.2 equivalentes) en 970 mL de etanol absoluto fue tratada con N-benciloxicarbonil-3(S)-amino-1-cloro-4-fenil-2(S)-butanol (32.3 g, 0.097 mol). Se agitó esta solución a temperatura ambiente por 15 minutes y luego se la concentró al vacío para dar un sólido de color blanco. El sólido fue disuelto en diclorometano y lavado con agua, secado sobre MgSO_{4} anhídro, filtrado y concentrado al vacío para dar un sólido de color blanco. El sólido se cristalizó a partir de hexanos y acetato de etilo para dar 22.3 g, 77% de 3(S)-[N-(benciloxicarbonil)amino]-1,2(S)-epoxi-4-fenilbutano, pf 102-103ºC, FAB MS: MH^{+} = 298.
Parte C
N-[3(S)-benciloxicarbonilamino-2(R)-hidroxi-4-fenil]N-isobutilamina
Una solución de N-bencilcarbonil-3(S)-amino-1,2-(S)-epoxi-4-fenil butano (50.0 g, 0.168 mol) e isobutilamina (246 g, 3.24 mol, 20 equivalentes) en 650 mL de alcohol isopropílico fue calentada a reflujo por 1.25 horas. La solución fue enfriada a temperatura ambiente, concentrada al vacío y luego vertida en 1 L de hexano con agitación después de lo cual el producto cristalizó de la solución. Se aisló el producto por filtración y se lo secó al aire para dar 57.56 g, 92% de N[3(S)-benciloxicarbonilamino-2(R)-hidroxi-4-fenil]-N-isobutilamina, pf 108.0-109.5ºC, MH^{+} m/z = 371.
Ejemplo 22
36
Preparación de 2R-hidroxi-3-[[(4-aminofenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propilamina 
\newpage
Parte A
Preparación del éster fenilmetílico del ácido 2R-hidroxi-3-[[(4-nitrofenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fe-nilmetil)propilcarbámico
A una solución de 4.0 g (10.8 mmol) de N-[3S-benciloxicarbonilamino-2R-hidroxi-4-fenil]-N-isobutilamina en 50 mL de cloruro de metileno anhidro, se le añadieron 4.5 mL (3.27g, 32.4 mmol) de trietilamina. La solución fue enfriada hasta 0ºC y se le añadieron 2.63g (11.9 mmol) de cloruro de 4-nitrobenceno sulfonilo, se la agitó por 30 minutos a 0ºC, luego por 1 hora a temperatura ambiente. Se añadió acetato de etilo, se lavó con ácido cítrico al 5%, bicarbonato de sodio saturado, salmuera, se secó y concentró para producir 5.9 g del material crudo. Este fue recristalizado a partir de acetato de etilo/hexano para producir 4.7 g del éster fenilmetílico del ácido [2R-hidroxi-3-[[(4-nitrofenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propilcarbámico puro, m/e = 556(M+H).
Parte B
Preparación de 2R-hidroxi-3-[[(4-aminofenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propilamina
Se hidrógeno una solución de 3.0g (5.4 mmol) del éster fenilmetílico del ácido 2R-hidroxi-3-[[(4-nitrofenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propilcarbámico en 20 mL de acetato de etilo sobre 1.5 g de catalizador de paladio sobre carbono al 10% con 35 psig de hidrógeno por 3.5 horas. Se removió el catalizador por filtración y se concentró la solución para producir 2.05 g de la 2R-hidroxi-3-[[(4-aminofenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propilamina deseada, m/e = 392(M+H).
Ejemplo 23 Preparación de N-[2R-hidroxi-3-[(fenilsulfonil)(2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-2S-amino-3S-metilpentanamida
37
Parte A
Preparación de N-[2R-hidroxi-3-[(fenilsulfonil)(2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-2S-[(fenilmetoxicar-bonil)amino]-3S-metilpentanamida
Se enfrió una solución de 6.0 gramos (22.6 mmol) de N-CBC-L-isoleucina en 45 mL de DMF anhídro a 0ºC y se la cargó con 4.0 gramos (29.5 mmol) de HOBT y 4.3 gramos (22.6 mmol) de EDC. Se removió el baño de hielo después de 20 minutos y se continuó la agitación por 40 minutos adicionales. La solución de la reacción fue cargada entonces con una solución de 7.4 gramos (19.7 mmol) de 2R-hidroxi-3-[(fenilsulfonil)(2-metilpropil)amino)-1S-(fenilmetil)propilamina y 2.3 gramos (22.6 mmol) de 4-metilmorfolina en 25 mL de DMF anhídro y se agitó por 18 horas. Se removieron los solventes al vacío y se repartió el residuo entre 300 mL de acetato de etilo y 120 mL de solución de sulfato ácido de potasio al 5%. Se separaron las capas, y se lavó la capa orgánica cada vez con 120 mL de solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y salmuera, luego se la secó sobre sulfato de magnesio anhídro, se la filtró y concentró para producir 13 gramos de material crudo. El material crudo cristalizó a partir de etanol, se aisló el sólido por filtración, se lo enjuagó con una porción de 50 mL de hexano, y se lo secó al aire para producir 10.3 gramos (84%) del producto deseado, m/e = 630 (M+Li).
Parte B
Preparación de N-[2R-hidroxi-3-[(fenilsulfonil) (2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-2S-amino-3S-metilpentanamida
Se cargó una botella de Fischer-Porter equipada con una barra de agitación magnética, con 10.2 gramos (16.4 mmol) de el producto de la Parte A y 75 mL de tetrahidrofurano (TF). Se hidrógeno la solución en presencia de 4 gramos de catalizador de paladio sobre carbono al 10% (50% de agua en peso) bajo 50 psig de hidrógeno por 3 horas a temperatura ambiente. El catalizador fue removido por filtración, y los solventes se removieron al vacío. El residuo fue disuelto en 300 mL de acetato de etilo y lavado cada vez con 120 mL de solución saturada de bicarbonato de sodio y salmuera, luego se lo secó sobre sulfato de magnesio anhídro, se lo filtró y concentró al vacío para producir 7.4 gramos del producto, m/e = 490 (M+H).
Ejemplo 24 Preparación del clorhidrato de 2S-[[2R-(N-metilamino)propionil]amino]-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-3,3-dimetilbutanamida
38
Parte A
Preparación de 2S-[[2R-[N-(tert-butoxicarbonil)-N-(metil)amino]propionil]amino]-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-3,3-dimetilbutanamida
Una solución de 0.7 gramos (3.3 mmol) de N-t-BOC-N-metil-D-alanina en 5 mL de DMF anhídro fue enfriada a 0ºC, cargada con 0.7 gramos (5.0 mmol) de HOBT y 0.7 gramos (3.8 mmol) de EDC y agitada por tres horas. La solución de la reacción fue cargada entonces con una solución de 1.7 gramos (3.3 mmol) de 2S-amino-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-3,3-dimetilbutanamida y 1.0 gramos (9.9 mmol) de 4-metilmorfolina en 5 mL de DMF anhídro y agitada por 18 horas. Los solventes fueron removidos al vacío y el residuo fue repartido entre 150 mL de acetato de etilo y 50 mL de una solución de sulfato ácido de potasio al 5%. Se separaron las capas, y se lavó la capa orgánica cada vez con 50 mL de solución saturada de bicarbonato de sodio, agua, y salmuera, luego se la secó sobre sulfato de magnesio anhídro, se la filtró y concentró al vacío para producir 2.3 gramos (100%) del producto deseado como un sólido de color blanco, m/e = 711 (M+Li).
Parte B
Preparación de clorhidrato de 2S-[[2R-(N-metilamino)propionil]amino]-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-3,3-dimetilbutanamida
Una solución de 2.3 gramos (3.2 mmol) del producto de la Parte A en 10 mL de 1,4-dioxano fue cargada con 20 mL (40 mmol) de HCl 4 N en solución de dioxano y agitada por 2 horas. Los solventes fueron removidos al vacío para producir un sólido de color blanco. El sólido fue secado añadiendo secuencialmente y luego removiendo al vacío, tres volúmenes de etanol y luego tres volúmenes de agua. El secado final fue realizado sobre pentóxido de fósforo (P_{2}O_{5}) a presión reducida a temperatura ambiente y produjo 1.9 gramos (90%) del producto deseado como el clorhidrato de la sal, m/e = 611 (M+Li).
Ejemplo 25 Preparación del clorhidrato de la sal de 2S-[[2R-(N-metilamino)propionil]amino]-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil]{2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-2S-amino-3S-metilpentanamida
39
Parte A
Preparación de 2S-[[2R-[N-(tert-butoxicarbonil)-N-(metil)amino]propionil]amino]-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-2S-amino-3S-metil-pentanamida
Una solución de 0.7 gramos (3.3 mmol) de N-t-BOC-N-metil-D-alanina en 5 mL de DMF anhídro fue enfriada a 0ºC, cargada con 0.7 gramos (5.0 mmol) de HOBT y 0.7 gramos (3.8 mmol) de EDC y agitada por tres horas. La solución de la reacción fue cargada entonces con una solución de 1.7 gramos (3.3 mmol) de 2S-amino-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-3S-metilpentanamida y 1.0 gramos (9.9 mmol) de 4-metilmorfolina en 5 mL de DMF anhídro y agitada por 16 horas. Los solventes fueron removidos al vacío y el residuo fue repartido entre150 mL de acetato de etilo y 50 mL de solución de sulfato ácido de potasio al 5%. Se separaron las capas, y se lavó la capa orgánica cada vez con 50 mL de solución de bicarbonato de sodio saturada, agua, y salmuera, luego se la secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se la filtró y concentró al vacío para producir el material crudo. La purificación se logró usando cromatografía flash sobre sílica gel utilizando 30-50% de acetato de etilo/hexano y produjo 1.6 gramos (70%) del producto deseado como un sólido de color blanco, m/e = 711 (M+Li).
Parte B
Preparación del clorhidrato de la sal de 2S-[[2R-(N-metilamino)propionil]amino]-N-[2R-hidroxi-3-[[(4-metoxifenil)sulfonil](2-metilpropil)amino]-1S-(fenilmetil)propil]-2S-amino-3S-metil-pentanamida
Una solución de 1.6 gramos (2.2 mmol) del producto de la Parte A en 10 mL de 1,4-dioxano fue cargada con 20 mL (40 mmol) de HCl 4 N en solución de dioxano y agitada por 2 horas. Los solventes fueron removidos al vacío para producir un sólido de color blanco. El sólido fue secado añadiendo secuencialmente y luego removiendo a presión reducida, tres volúmenes de etanol, luego tres volúmenes de agua. El secado final fue realizado sobre pentóxido de fósforo (P_{2}O_{5}) a presión reducida a temperatura ambiente y produjo 1.2 gramos (86%) del producto deseado como el clorhidrato de la sal, m/e = 611 (M+Li).
Ejemplo 26
Los compuestos de la presente invención son inhibidores efectivos de la proteasa del VIH. Utilizando un ensayo de enzima como se describe más abajo, los compuestos expuestos en los ejemplos revelados aquí inhibieron a la enzima de VIH. Los compuestos preferidos de la presente invención y sus valores calculados de IC_{50} (concentración de inhibición del 50%, esto es, la concentración a la cual el compuesto inhibidor reduce la actividad de la enzima en un 50%) son mostrados en la Tabla 2. El método de la enzima es descrito más abajo. El sustrato es 2-Ile-Nle-Phe(p-NO_{2})-Gln-ArgNH_{2}. El control positivo es MVT-101 (Miller, M. y colaboradores, Science, 246, 1149 (1989)]. Las condiciones del ensayo son como sigue:
Buffer del ensayo: Fosfato de sodio 20 mM, pH 6.4
Glicerol al 20%
EDTA 1 mM
DTT 1 mM
CHAPS al 0,1%
El sustrato anteriormente descrito se disolución en DMSO, luego se lo diluyó 10 veces en el buffer del ensayo. La concentración final del sustrato en el ensayo es de 80 \muM. La proteasa del VIH se diluye en el buffer del ensayo hasta una concentración final de la enzima de 12.3 nanomolar, con base en un peso molecular de 10,780.
La concentración final de DMSO es del 14% y la concentración final de glicerol es del 18%. El compuesto de prueba se disuelve en DMSO y se diluye en DMSO hasta 10 veces de la concentración de la prueba; se añaden 10 \mul de la preparación de la enzima, se mezclan los materiales y luego se incuba la mezcla a temperatura ambiente por 15 minutos. La reacción de la enzima se inicia por la adición de 40 \mul de sustrato. El incremento en fluorescencia se mide en 4 momentos en el tiempo (0, 8, 16 y 24 minutos) a temperatura ambiente. Cada ensayo se lleva acabo en pozos por duplicado.
Los ejemplos anteriores pueden repetirse con éxito similar sustituyendo los reactivos descritos en forma genérica o en forma específica y/o las condiciones de operación de esta invención de aquellos utilizados en los ejemplos precedentes.
Ejemplo 27
La efectividad de diferentes compuestos se determinó en el ensayo de la enzima anteriormente descrita y en un ensayo de célula CEM.
El método de ensayo de inhibición del VIH de células infectadas en forma aguda es esencialmente un ensayo colorimétrico automatizado con base en tetrazolio reportado por Pauwles y colaboradores, J. Virol. Methods, 20, 309-321 (1988). Los ensayos se realizaron en placas de cultivo de tejido de 96 pozos. Las células CEM, una línea celular CD4^{+}, fueron cultivadas en medio RPMI-1640 (Gibco) suplementado con suero fetal de ternera al 10% y luego fueron tratadas con polibrene (2 \mug/ml). Se dispensó un volumen de 80 \mul de medio que contenía 1 x 10^{4} células dentro de cada pozo de la placa de cultivo de tejidos. A cada pozo se le añadió un volumen de 100 \mul del compuesto de prueba disuelto en medio de cultivo para tejidos (o en medio sin compuesto de prueba como control) para lograr la concentración final deseada y se incubaron las células a 37ºC por 1 hora. Un cultivo congelado de VIH-1 fue diluido en medio de cultivo a una concentración de 5 x 10^{4} de TCID_{50} por ml (TCID_{50} = la dosis de virus que infecta 50% de las célalas en el cultivo de tejido), y se añadió un volumen de 20 \mul de la muestra con el virus (que contenía 1000 TCID_{50} del virus) a los pozos que contenían el compuesto de prueba y a los pozos que contenían solamente medio (células de control infectadas). Diferentes pozos recibieron medio de cultivo sin virus (células de control no infectadas). Además, la toxicidad intrínseca del compuesto de prueba se determinó añadiendo medio sin virus a diferentes pozos que contenían compuesto de prueba. En resumen, las placas de cultivo de tejido contenían los siguientes experimentos:
Células Droga Virus
1. + - -
2. + + -
3. + - +
4. + + +
En los experimentos 2 y 4 las concentraciones finales de los compuestos de prueba fueron 1, 10, 100 y 500 \mug/ml. Se incluyeron o bien azidotimidina (AZT) o dideoxiinosina (ddI) como control positivo de droga. Los compuestos de prueba se disolvieron en DMSO y se diluyeron dentro del medio de cultivo de tejidos de tal manera que la concentración final de DMSO no excedió del 1.5% en ningún caso. Se añadió DMSO a todos los pozos de control en una concentración apropiada.
Después de la adición del virus, las células fueron incubadas a 37ºC en atmósfera húmeda de CO_{2} al 5% por 7 días. Los compuestos de prueba podrían ser añadidos los días 0, 2 y 5 si se desea. El día 7 posterior a la infección, las células de cada pozo fueron resuspendidas y se tomó una muestra de l00 \mul de cada suspensión celular para el ensayo. Se añadió un volumen de 20 \muL de una solución de 5 mg/ml de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT) a cada suspensión de células de 100 \muL, y éstas fueron incubadas por 4 horas a 27ºC en un ambiente de CO_{2} al 5%. Durante esta incubación, el MTT es reducido metabólicamente por células vivas resultantes en la producción en la célula de un producto formazán coloreado. A cada muestra se le añadieron 100 \mul de dodecilsulfato de sodio al 10% en HCl 0.01 N para lisar las células, y se incubaron las muestras durante la noche. Se determinó la absorbancia a 590 nm para cada muestra utilizando un lector de microplacas Molecular Devices. Los valores de absorbancia para cada juego de pozos se comparó para evaluar la infección del control viral, la respuesta de las células de control no infectadas así como del compuesto de prueba por su citotoxicidad y eficacia antiviral.
TABLA 2
40
Los compuestos de la presente invención son compuestos antivirales efectivos y, en particular, son inhibidores retrovirales efectivos como se mostró más arriba. Por lo tanto, los compuestos expuestos son inhibidores efectivos de la proteasa del VIH. Se contempla que los compuestos expuestos inhibirán también a otros retrovirus tales como a otros lentivirus, en particular a otras cepas del VIH, por ejemplo, el virus de la leucemia de las células T humanas, el virus respiratorio sincitial, el virus de inmunodeficiencia en simios, virus de leucemia felina, virus de inmunodeficiencia felina, hepadnavirus, citomegalovirus y picornavirus. Por lo tanto, los compuestos expuestos son efectivos en el tratamiento, profilaxis de infecciones retrovirales y/o en la prevención de la diseminación de las infecciones retrovirales.
Los compuestos expuestos son también efectivos en la prevención del desarrollo de los retrovirus en una solución. Tanto los cultivos de células de humanos como de animales, tales como los cultivos de linfocitos T, son utilizados para una variedad de propósitos bien conocidos, tales como los procedimientos de investigación y de diagnóstico incluidos calibradores y controles. Antes y durante el crecimiento y almacenamiento de un cultivo celular, los compuestos expuestos pueden ser añadidos al medio de cultivo celular en una concentración efectiva para prevenir la replicación inesperada o indeseada de un retrovirus que pueda estar presente en forma inadvertida, con o sin conocimiento de causa en el cultivo celular. El virus puede estar presente originalmente en el cultivo celular, por ejemplo se sabe que el VIH está presente en los linfocitos T humanos mucho tiempo antes de que pueda ser detectable en la sangre o por exposición al virus. Este uso de los compuestos expuestos previene de una exposición desconocida o inadvertida de un retrovirus potencialmente letal para un investigador o practicante clínico.
Los compuestos de la presente invención pueden poseer uno o más átomos de carbono asimétricos, y son por lo tanto capaces de existir en la forma de isómeros ópticos, así como en la forma de mezclas recémicas o no racémicas de los mismos. Los isómeros ópticos pueden obtenerse por resolución de las mezclas racémicas de acuerdo con procedimientos convencionales, por ejemplo por medio de la formación de sales diasteroisoméricas por tratamiento con un ácido o una base ópticamente activo. Ejemplos de ácidos apropiados son los ácidos tartárico, diacetiltartárico, dibenzoiltartárico, ditoluiltartárico y canforsulfónico y luego la separación de la mezcla de diasteroisómeros por cristalización seguida por liberación de la bases ópticamente activas de estas sales. Un procedimiento diferente para la separación de isómeros ópticos involucra el uso de una columna cromatográfica quiral escogida de forma óptima para maximizar la separación de los enantiómeros. Aún otro método utilizable involucra la síntesis de moléculas diasteroisoméricas covalentes por reacción de compuestos de Fórmula I con un ácido ópticamente puro en una forma activada o con un isocianato ópticamente puro. Los diasteroisómeros sintetizados pueden separarse por medios convencionales tales como por cromatografía, destilación, cristalización o sublimación y luego hidrolizarse para liberar al compuesto enantioméricamente puro. Los compuestos ópticamente activos de Fórmula I pueden también obtenerse utilizando materiales de partida ópticamente activos. Estos isómeros pueden estar en la forma de un ácido libre, una base libre, un éster o una sal.
Los compuestos de la presente invención pueden ser usados en la forma de sales derivadas de ácidos orgánicos o inorgánicos. Estas sales incluyen, pero no se limitan a las siguientes: acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, digluconato, ciclopentanopropionato, dodecilsulfato, etanosulfonato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxi-etanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, nicotinato, 2-naftalenosulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato, mesilato y undecanoato. También, los grupos básicos que contienen nitrógeno pueden ser cuaternarizados con agentes tales como haluros de alquilo, tales como metilo, etilo, propilo, y cloruros, bromuros, y yoduros de butilo; sulfatos de dialquilo como dimetilo, dietilo, dibutilo, y sulfatos de diamilo, haluros de cadena larga tales como decilo, laurilo, miristilo y cloruros, bromuros y yoduros de estearilo, haluros de arilalquilo como los bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. Se obtienen así productos dispersables o solubles en aceite o en agua.
Ejemplos de ácidos que pueden emplearse para formar sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables incluyen ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico, y ácidos orgánicos tales como ácido oxálico, ácido maléico, ácido succínico y ácido cítrico. Otros ejemplos incluyen sales con metales alcalinos o metales alcalinotérreos, tales como sodio, potasio, calcio o magnesio o con bases orgánicas.
La dosis diaria total administrada a un huésped en dosis únicas o divididas pueden ser en cantidades, por ejemplo, desde 0,001 hasta 10 mg/kg de peso corporal diarios, y más usualmente desde 0,01 hasta 1 mg. Las composiciones de dosificación unitaria pueden contener cantidades tales de submúltiplos de las mismas para formar la dosis diaria. La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con los materiales excipientes para producir una forma de dosificación única, variará dependiendo del huésped tratado y de la forma particular de administración.
El régimen de dosificación para tratar una condición de enfermedad con los compuestos y/o composiciones de esta invención, se seleccionan de acuerdo con una variedad de factores, incluidos el tipo, edad, peso, sexo, dieta y condición médica del paciente, la severidad de la enfermedad, la vía de administración, consideraciones farmacológicas tales como la actividad, eficacia, los perfiles de farmacocinética y toxicología del compuesto particular empleado, ya sea que se utilice un sistema de liberación de droga o que se administre el compuesto como parte de una combinación de drogas. Por lo tanto, el régimen de dosificación actualmente empleado puede variar ampliamente y por lo tanto puede desviarse del régimen de dosificación preferida expuesta anteriormente.
Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados en forma oral, en forma parenteral, por inhalación, en forma rectal o en forma tópica, en formulaciones de dosificación unitaria que contienen excipientes convencionales no tóxicos farmacéuticamente aceptables, adyuvantes, y vehículos según se desee. La administración tópica puede también involucrar el uso de administración transdérmica tal como los parches transdérmicos o los dispositivos de ionoforesis. El término parenteral como se lo utiliza aquí incluye inyecciones subcutáneas, intravenosas, intramusculares, inyección intrasternal, o técnicas de infusión. Las preparaciones inyectables, por ejemplo, las suspensiones inyectables estériles acuosas u oleaginosas pueden formularse de acuerdo a las técnicas conocidas, utilizando dispersantes adecuados o agentes de humectación y agentes de suspensión. Las preparaciones inyectables estériles pueden ser también una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, como una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y solventes aceptables que pueden ser empleados están el agua, la solución de Ringer, y una solución isotónica de cloruro de sodio. Además, se emplean convencionalmente aceites estériles fijos como medio solvente o de suspensión. Para este propósito pueden emplearse aceites fijos suaves incluidos los mono o diglicéridos sintéticos. Además, ácidos grasos tales como el ácido oleico encuentran uso en la preparación de inyectables.
Los supositorios para administración rectal de la droga pueden prepararse mezclando la droga con un excipiente no irritante adecuado tal como manteca de cacao y polietilén glicoles que son sólidos a temperaturas ordinarias, pero líquidos a temperatura rectal y por lo tanto se fundirán en el recto y liberarán la droga.
Las formas de dosificación sólida para administración oral pueden incluir cápsulas, tabletas, píldoras, polvos, y granulados. En tales formas de dosificación sólida, el compuesto activo puede ser mezclado con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa o almidón. Tales formas de dosificación pueden comprender también, como práctica normal, sustancias adicionales diferentes a los diluyentes inertes, por ejemplo, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio. En el caso de las cápsulas, tabletas, y píldoras, las formas de dosificación pueden comprender también agentes tampón. Las tabletas y las píldoras pueden prepararse adicionalmente con recubrimientos entéricos.
Las formas de dosificación líquida para administración oral pueden incluir emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires farmacéuticamente aceptables que contengan diluyentes inertes comúnmente utilizados en la técnica, tal como agua. Tales composiciones pueden comprender también adyuvantes, tales como agentes de humectación, agentes emulsificantes y de suspensión, y agentes edulcorantes, saborizantes y perfumantes.
Mientras que los compuestos de la invención pueden ser administrados como el único agente farmacéutico activo, ellos también pueden ser utilizados en combinación con uno o más inmunomoduladores, agentes antivirales u otros agentes antiinfecciosos. Por ejemplo, los compuestos de la infección pueden administrarse en combinación con AZT, DDI, DDC o con inhibidores de glucosidasa, tales como N-butil-1-desoxinojirimicina o prodrogas del mismo, para la profilaxis y/o el tratamiento del SIDA. Cuando se administran en combinación, los agentes terapéuticos pueden formularse como composiciones separadas que se dan al mismo tiempo o en diferentes momentos, o los agentes farmacéuticos pueden darse como una composición única.
Lo anterior es meramente ilustrativo de la invención y no se pretende que limite la invención a los compuestos revelados. Las variaciones y los cambios que son obvios para alguien capacitado en la técnica, están encaminados a encontrarse dentro del alcance y naturaleza de la invención que se define en las reivindicaciones anexas.

Claims (12)

1. Un compuesto representado por la fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
41
o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde
R^{1} representa radicales alquilo de 1-5 átomos de carbono, alquenilo de 2-5 átomos de carbono, alquinilo de 2-5 átomos de carbono, hidroxialquilo de 1-3 átomos de carbono, alcoxialquilo de alquilo de 1-3 y alcoxi 1-3 átomos de carbono, cianoalquilo de alquilo de 1-3 átomos de carbono, imidazolilmetilo, -CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}S(O)_{2}NH_{2}, -CH_{2}SCH_{3}, -CH_{2}S(O)CH_{3}, -CH_{2}S(O)_{2}CH_{3}, -C(CH_{3})_{2}SCH_{3}, -C(CH_{3})_{2}S(O)CH_{3} o -C(CH_{3})_{2}S(O)_{2}CH_{3};
R^{2} representa radicales de alquilo de 1-5 átomos de carbono, arilalquilo de 1-3 alquilo átomos decarbono, alquiltioalquilo de alquilo 1-3 átomos de carbono, ariltioalquilo de alquilo de 1-3 átomos de carbono o cicloalquilalquilo de alquilo 1-3 átomos de carbono y un anillo de 3-6 átomos de carbono;
R^{3} representa radicales de radical alquilo de 1-5 átomos de carbono, cicloalquilo de 5-8 miembros de anillo o radical cicloalquilmetilo de 3-6 miembros de anillo;
R^{10} representa hidrógeno, radicales alquilo, hidroxialquilo o alcoxialquilo, en donde alquilo y alcoxi tienen cada uno 1-3 átomos de carbono;
R^{11} representa radicales alquilo de 1-5 átomos de carbono, hidroxialquilo de 1-4 átomos de carbono, alcoxialquilo de 1-4 alquilo átomos de carbono, bencilo, imidazolilmetilo, -CH_{2}CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CH_{2}SCH_{3} o -CH_{2}SCH_{3} o los derivados sulfona o sulfóxido de los mismos;
R^{4} representa arilo;
R^{12} y R^{13} representan cada uno independientemente hidrógeno, radicales alquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, arilo o heteroarilo, en donde alquilo es de 1-5 átomos de carbono, cicloalquilo es un anillo de 3-6 miembros cicloalquilo opcionalmente benzo fusionado, y heteroarilo es un anillo de 5 a 6 miembros heteroarilo opcionalmente benzo fusionado.
2. Un compuesto de la Reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde
R^{1} representa radicales alquilo de 1-4 átomos de carbono, alquenilo de 2-3 átomos de carbono, alquinilo de 3-4 átomos de carbono, cianometilo, imidazolilmetilo, -CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}S(O)_{2}NH_{2}, -CH_{2}SCH_{3},
-CH_{2}S(O)CH_{3}, -CH_{2}S(O)_{2}CH_{3}, -C(CH_{3})_{2}SCH_{3}, -C(CH_{3})_{2}S(O)CH_{3} o -C(CH_{3})_{2}S(O)_{2}CH_{3};
R^{2} representa radicales alquilo de 3-5 átomos de carbono, arilmetilo, alquiltioalquilo de 1-3 alquilo átomos de carbono, ariltiometilo o radicales ciclometilalquilo de anillos de 5-6 átomos de carbono;
R^{3} representa radicales alquilo de 1-5 átomos de carbono, ciclometilalquilo de anillos de 3-6 miembros, ciclohexilo o cicloheptilo;
R^{4} representa radicales fenilo, 2-naftilo, 4-metoxifenilo, 4-hidroxifenilo, 3,4-dimetoxifenilo, 3-aminofenilo o 4-aminofenilo;
R^{12} y R^{13} cada uno independientemente representa hidrógeno, radicales alquilo de 1-5 átomos de carbono, fenilalquilo de alquilo de 1-3 átomos de carbono, heteroarilalquilo con anillo de 5 a 6 miembros de alquilo de 1-3 átomos de carbono, cicloalquilo de anillo de 3-6 miembros, ciclometilalquilo de anillo de 3-6 miembros, hidroxialquilo de 1-3 átomos de carbono, metoxialquilo de alquilo 1-3 átomos de carbono o fenilo.
3. Un compuesto de la Reivindicación 2, o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde
R^{1} representa radicales isopropilo, sec-butilo, tert-butilo, 3-propinilo, cianometilo, imidazolilmetilo, -CH_{2}CONH_{2}, -CH_{2}SCH_{3}, -CH_{2}S(O)CH_{3}, -CH_{2}S(O)_{2}CH_{3}, -C(CH_{3})_{2}SCH_{3}, -C(CH_{3})_{2}S(O)CH_{3} o -C(CH_{3})_{2}S(O)_{2}CH_{3};
R^{2} representa radicales isobutilo, n-butilo, CH_{3}SCH_{2}CH_{2}-, feniltiometilo, (2-naftiltio)metilo, bencilo, 4-metoxifenilmetilo, 4-hidroxifenilmetilo, 4-fluorofenilmetilo o ciclohexilmetilo;
R^{3} representa radicales propilo, isoamilo, isobutilo, butilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclopentilmetilo o ciclohexilmetilo;
R^{10} representa hidrógeno, radicales metilo, etilo, propilo, metoximetilo, metoxietilo, hidroximetilo o hidroxietilo;
R^{11} representa radicales metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, isobutilo, tert-butilo, hidroximetilo, hidroxietilo, metoximetilo o metoxietilo;
R^{4} representa radicales fenilo, 2-naftilo, 4-metoxifenilo o 4-hidroxifenilo;
R^{12} y R^{13} representan independientemente cada uno hidrógeno, radicales metilo, etilo, propilo, isopropilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexilmetilo, bencilo, feniletilo, 2-piridilmetilo, 3-piridilmetilo, 4-piridilmetilo, 2-(2-piridil)etilo, 2-(3-piridil)etilo, 2-(4-piridil)etilo, furilmetilo, 2-furiletilo, 2-hidroxietilo, 2-metoxietilo o fenilo.
4. Un compuesto de la Reivindicación 3, o una sal farmacéuticamente aceptable, prodroga o éster del mismo, en donde n representa 1;
R^{1} representa radicales sec-butilo, tert-butilo, isopropilo, 3-propinilo, cianometilo, o -C(CH_{3})_{2}S(O)_{2}CH_{3};
R^{2} representa radicales bencilo, 4-fluorofenilmetilo o ciclohexilmetilo;
R^{10} y R^{11} representan independientemente cada uno radicales metilo o etilo;
R^{4} representa radicales fenilo, 4-metoxifenilo o 4-hidroxifenilo;
R^{12} representa hidrógeno o radicales metilo; y
R^{13} representa hidrógeno, radicales metilo, etilo, propilo, ciclopropilo, isopropilo, bencilo, 2-feniletilo, 2-piridilmetilo, 3-piridilmetilo, 4-piridilmetilo, 2-(2-piridil)etilo, 2-(3-piridil)etilo, 2-(4-piridil)etilo, furilmetilo, 2-furiletilo o 2-metoxietilo.
5. Un compuesto de la Reivindicación 1 en donde dicha sal farmacéuticamente aceptable es una sal de ácido clorhídrico, sal de ácido sulfúrico, sal de ácido fosfórico, sal de ácido oxálico, sal de ácido maléico, sal de ácido succínico, sal de ácido cítrico, o sal de ácido metanosulfónico.
6. Un compuesto de la Reivindicación 5 en donde dicha sal farmacéuticamente aceptable es una sal de ácido clorhídrico, sal de ácido oxálico, sal de ácido cítrico, o sal de ácido metanosulfónico.
7. Una composición que comprende un compuesto de cualquiera de las Reivindicaciones 1-6 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
8. El uso de un compuesto de cualquiera de las Reivindicaciones 1-6 para preparar un medicamento para inhibir a una proteasa retroviral.
9. El uso de una composición de la Reivindicación 7 para preparar un medicamento para el tratamiento de una infección retroviral.
10. El uso de un compuesto de cualquiera de las Reivindicaciones 1-6 para preparar un medicamento para prevenir la replicación de un retrovirus.
11. Un método para prevenir la replicación de un retrovirus in vitro que comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto de cualquiera de las Reivindicaciones 1-6.
12. El uso de una composición de la Reivindicación 7 para preparar un medicamento para tratar el SIDA.
ES96910337T 1995-03-10 1996-03-07 Inhibidores de la proteasa retroviral de bis aminoacido de hidroxietilamino sulfonamida. Expired - Lifetime ES2249779T3 (es)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40245095A 1995-03-10 1995-03-10
US402450 1995-03-10
US479071 1995-06-07
US08/479,071 US6150556A (en) 1995-03-10 1995-06-07 Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2249779T3 true ES2249779T3 (es) 2006-04-01

Family

ID=27017890

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES96910337T Expired - Lifetime ES2249779T3 (es) 1995-03-10 1996-03-07 Inhibidores de la proteasa retroviral de bis aminoacido de hidroxietilamino sulfonamida.

Country Status (23)

Country Link
US (2) US6150556A (es)
EP (2) EP1076062A1 (es)
JP (1) JPH11501921A (es)
KR (1) KR100428499B1 (es)
CN (1) CN1178954C (es)
AT (1) ATE304550T1 (es)
AU (1) AU704360B2 (es)
BR (1) BR9607543A (es)
CA (1) CA2215025A1 (es)
CZ (1) CZ294966B6 (es)
DE (1) DE69635183T2 (es)
DK (1) DK0813543T3 (es)
EA (1) EA000578B1 (es)
EE (1) EE04376B1 (es)
ES (1) ES2249779T3 (es)
HU (1) HUP9802647A3 (es)
MX (1) MX9706913A (es)
NO (3) NO325230B1 (es)
NZ (1) NZ305544A (es)
PL (2) PL185543B1 (es)
SK (2) SK285930B6 (es)
UA (1) UA55384C2 (es)
WO (1) WO1996028464A1 (es)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040122000A1 (en) 1981-01-07 2004-06-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated. Inhibitors of aspartyl protease
US7339078B2 (en) * 1995-03-10 2008-03-04 G.D. Searle Llc Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6861539B1 (en) 1995-03-10 2005-03-01 G. D. Searle & Co. Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
EP1188766A1 (en) * 1995-03-10 2002-03-20 G.D. Searle & Co. Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
WO2000002862A1 (en) 1998-07-08 2000-01-20 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors
HUP0105235A3 (en) * 1999-01-13 2002-08-28 Pont Pharmaceuticals Company W Bis-amino acid sulfonamides containing n-terminally a substituted benzyl group as hiv protease inhibitors, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
AR031520A1 (es) * 1999-06-11 2003-09-24 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de aspartilo proteasa, una composicion que lo comprende y un metodo para tratar un paciente con dicha composicion
US6391919B1 (en) 2000-01-12 2002-05-21 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Bis-amino acid sulfonamides containing substituted benzyl amines HIV protease inhibitors
US20020022742A1 (en) * 2000-07-19 2002-02-21 Harris Gregory D. Salt forms of an HIV protease inhibitor
US6617310B2 (en) * 2000-07-19 2003-09-09 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Phosphate esters of bis-amino acid sulfonamides containing substituted benzyl amines
US20020022659A1 (en) * 2000-07-19 2002-02-21 Harris Gregory D. Crystalline and salt forms of an HIV protease inhibitor
ES2275866T3 (es) 2001-02-14 2007-06-16 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. 2-(aminosustituido)-benzotiazol-sulfonamidas de amplio esprecto inhibidoras de la proteasa de vih.
AP1544A (en) * 2001-04-09 2006-01-12 Tibotec Pharm Ltd Broadspectrum 2- (substituted-amino) -benzoxazole sulfonamide HIV protease inhibitors.
EA009590B1 (ru) * 2001-05-11 2008-02-28 Тиботек Фармасьютикалз Лтд. 2-аминобензоксазолсульфонамидные ингибиторы вич-протеазы широкого спектра
US6562848B1 (en) 2001-09-18 2003-05-13 Bristol-Myers Squibb Company Bis-amino acid sulfonamides as HIV protease inhibitors
JP4578101B2 (ja) 2001-12-21 2010-11-10 テイボテク・フアーマシユーチカルズ・リミテツド 幅広いスペクトルのｈｉｖプロテアーゼ阻害剤である複素環置換フェニル含有スルホンアミド
MY142238A (en) 2002-03-12 2010-11-15 Tibotec Pharm Ltd Broadspectrum substituted benzimidazole sulfonamide hiv protease inhibitors
ATE371652T1 (de) * 2002-05-17 2007-09-15 Tibotec Pharm Ltd Substituierte benzisoxazolsulfonamide mit breitbändiger hiv-protease hemmender wirkung
JP4681296B2 (ja) 2002-08-14 2011-05-11 テイボテク・フアーマシユーチカルズ・リミテツド スペクトルの広い置換オキシインドールスルホンアミドｈｉｖプロテアーゼ阻害剤
US20060128634A1 (en) * 2002-11-14 2006-06-15 Carini David J Alpha, alpha-disubstituted benzylglycine derivatives as HIV protease inhibitors
US6943170B2 (en) * 2002-11-14 2005-09-13 Bristol-Myers Squibb Company N-cycloalkylglycines as HIV protease inhibitors
EP1651192A1 (en) * 2003-08-06 2006-05-03 Nirmal Mulye Pharmaceutical composition containing water soluble drug
US8193227B2 (en) 2003-12-11 2012-06-05 Abbott Laboratories HIV protease inhibiting compounds
US20050131042A1 (en) * 2003-12-11 2005-06-16 Flentge Charles A. HIV protease inhibiting compounds
DK1725566T3 (da) 2003-12-23 2009-10-05 Tibotec Pharm Ltd Fremgangsmåde til fremstilling af (3R,3AS, 6AR)-hexahydrofuro [2,3.B] furan-3-yl (1S,2R)-3-3[[(4-aminophenyl) sulfonyl] (isobutyl) amino]-1-benzyl-2-hydroxypropylcarbamat
US7772411B2 (en) 2003-12-23 2010-08-10 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Process for the preparation of (3R,3aS,6aR)-hexahydrofuro [2,3-b] furan-3-yl (1S,2R)-3[[(4-aminophenyl) sulfonyl] (isobutyl) amino]-1-benzyl-2-hydroxypropylcarbamate
KR101192127B1 (ko) 2006-11-03 2012-10-17 쉐링-프라우 리미티드 개 라임병 백신
BRPI0819883A2 (pt) 2007-11-28 2017-05-23 Sequoia Pharmaceuticals Inc composições e métodos para inibir citocromo p450 2d6
WO2013009923A1 (en) * 2011-07-13 2013-01-17 Creighton University Methods of promoting neuron growth
US20150113867A1 (en) 2013-10-24 2015-04-30 Basf Se Use of an alkoxylated polytetrahydrofuran to reduce fuel consumption
CN104478830B (zh) * 2014-12-31 2016-06-22 中国医学科学院医药生物技术研究所 一组叔胺类拟肽衍生物及其在抑制hiv-1蛋白酶中的应用

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5142056A (en) * 1989-05-23 1992-08-25 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
DE3269604D1 (en) * 1981-06-26 1986-04-10 Schering Corp Novel imidazo(1,2-a)pyridines and pyrazines, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US4634465A (en) * 1982-07-16 1987-01-06 Ciba-Geigy Corporation Fused N-phenylsulfonyl-N'-pyrimidinylureas and N-phenylsulfonyl-N'triazinylureas
DE3377497D1 (en) * 1982-09-15 1988-09-01 Haessle Ab Enzyme inhibitors
US4595407A (en) * 1982-11-01 1986-06-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Triazinyl-amino-carbonyl-1,3-benzohetero- or -1,4-benzohetero-sulfonamides
EP0114993B1 (en) * 1982-12-27 1990-05-16 Merck & Co. Inc. Renin inhibitory tripeptides
US4668770A (en) * 1982-12-27 1987-05-26 Merck & Co., Inc. Renin inhibitory tripeptides
AU573735B2 (en) * 1983-02-07 1988-06-23 Aktiebolaget Hassle Peptide analogue enzyme inhibitors
JPS59227851A (ja) * 1983-06-09 1984-12-21 Sankyo Co Ltd レニン阻害作用を有するペプチド類
US4514391A (en) * 1983-07-21 1985-04-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Hydroxy substituted peptide compounds
US4477441A (en) * 1983-09-14 1984-10-16 Merck & Co., Inc. Renin inhibitors containing a C-terminal disulfide cycle
US4645759A (en) * 1984-06-22 1987-02-24 Abbott Laboratories Renin inhibiting compounds
US4616088A (en) * 1984-10-29 1986-10-07 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino acid ester and amide renin inhibitor
US4599198A (en) * 1985-08-02 1986-07-08 Pfizer Inc. Intermediates in polypeptide synthesis
US4668769A (en) * 1985-08-02 1987-05-26 Hoover Dennis J Oxa- and azahomocyclostatine polypeptides
CA1282549C (en) * 1985-11-12 1991-04-02 Eric M. Gordon Aminocarbonyl renin inhibitors
US4757050A (en) * 1985-12-23 1988-07-12 E. R. Squibb Sons, Inc. Ureido renin inhibitors
CA1297631C (en) * 1985-12-23 1992-03-17 Sesha I. Natarajan Ureido renin inhibitors
US4880938A (en) * 1986-06-16 1989-11-14 Merck & Co., Inc. Amino acid analogs
DE3635907A1 (de) * 1986-10-22 1988-04-28 Merck Patent Gmbh Hydroxy-aminosaeurederivate
CH676988A5 (es) * 1987-01-21 1991-03-28 Sandoz Ag
USH725H (en) * 1987-02-26 1990-01-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Ureido amino and imino acids, compositions and methods for use
GB8707412D0 (en) * 1987-03-27 1987-04-29 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptide compounds
DE3830825A1 (de) * 1987-09-15 1989-03-23 Sandoz Ag Hydrophile reninhemmer, ihre herstellung und verwendung
IL89900A0 (en) * 1988-04-12 1989-12-15 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids and pharmaceutical compositions containing them
US4977277A (en) * 1988-05-09 1990-12-11 Abbott Laboratories Functionalized peptidyl aminodiols and -triols 4-amino-5-cyclohexyl-3-hydroxy-1,2-oxopentane and derivatives thereof
IL90218A0 (en) * 1988-05-13 1989-12-15 Abbott Lab Retroviral protease inhibitors
CA1340588C (en) * 1988-06-13 1999-06-08 Balraj Krishan Handa Amino acid derivatives
IL91307A0 (en) * 1988-08-24 1990-03-19 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors and pharmaceutical compositions for the treatment of aids containing them
CA2012306A1 (en) * 1989-03-28 1990-09-28 Werner Neidhart Amino acid derivatives
JP2701932B2 (ja) * 1989-04-10 1998-01-21 サントリー株式会社 タンパク質分解酵素阻害剤
DE3912829A1 (de) * 1989-04-19 1990-10-25 Bayer Ag Verwendung von renininhibitorischen peptiden als mittel gegen retroviren
TW225540B (es) * 1990-06-28 1994-06-21 Shionogi & Co
DE69118907T2 (de) * 1990-11-19 1996-11-14 Monsanto Co Retrovirale proteaseinhibitoren
WO1993013066A1 (en) * 1991-12-20 1993-07-08 Syntex (U.S.A.) Inc. Cyclic amides of 3-amino-2-hydroxy-carboxylic acids as hiv-protease inhibitors
US5843946A (en) * 1992-08-25 1998-12-01 G.D. Searle & Co. α-and β-amino acid hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
JP4091654B2 (ja) * 1992-08-25 2008-05-28 ジー．ディー．サール、リミテッド、ライアビリティ、カンパニー レトロウイルスプロテアーゼ阻害剤として有用なスルホニルアルカノイルアミノヒドロキシエチルアミノスルホンアミド
IS2334B (is) * 1992-09-08 2008-02-15 Vertex Pharmaceuticals Inc., (A Massachusetts Corporation) Aspartyl próteasi hemjari af nýjum flokki súlfonamíða
DE69319351T2 (de) * 1992-10-30 1998-11-19 Searle & Co Hydroxyethylaminosulfamidsäure-derivate verwendbar als inhibitoren retroviraler proteasen
ES2127938T3 (es) * 1993-08-24 1999-05-01 Searle & Co Hidroxietilamino sulfonamidas utiles como inhibidores de proteasas retroviricas.
UA49803C2 (uk) * 1994-06-03 2002-10-15 Дж.Д. Сьорль Енд Ко Спосіб лікування ретровірусних інфекцій

Also Published As

Publication number Publication date
US6150556A (en) 2000-11-21
EA199700220A1 (ru) 1998-02-26
NZ305544A (en) 1999-04-29
NO974149L (no) 1997-11-05
SK285958B6 (sk) 2007-12-06
AU704360B2 (en) 1999-04-22
CN1196732A (zh) 1998-10-21
EA000578B1 (ru) 1999-12-29
KR100428499B1 (ko) 2004-11-16
HUP9802647A3 (en) 2000-10-30
MX9706913A (es) 1997-11-29
EP1076062A1 (en) 2001-02-14
NO20075806L (no) 1997-11-05
EE04376B1 (et) 2004-10-15
WO1996028464A1 (en) 1996-09-19
UA55384C2 (uk) 2003-04-15
PL185543B1 (pl) 2003-05-30
NO974149D0 (no) 1997-09-09
US6316496B1 (en) 2001-11-13
JPH11501921A (ja) 1999-02-16
EE9700200A (et) 1998-02-16
HUP9802647A2 (hu) 1999-02-01
DE69635183D1 (de) 2005-10-20
CN1178954C (zh) 2004-12-08
PL322163A1 (en) 1998-01-19
DK0813543T3 (da) 2006-01-16
AU5356196A (en) 1996-10-02
NO325230B1 (no) 2008-03-03
KR19980702908A (ko) 1998-09-05
SK285930B6 (sk) 2007-11-02
PL185108B1 (pl) 2003-02-28
NO20075810L (no) 1997-11-05
BR9607543A (pt) 1997-12-23
EP0813543A1 (en) 1997-12-29
DE69635183T2 (de) 2006-06-29
CZ282597A3 (cs) 1998-02-18
ATE304550T1 (de) 2005-09-15
CA2215025A1 (en) 1996-09-19
EP0813543B1 (en) 2005-09-14
CZ294966B6 (cs) 2005-04-13
SK122297A3 (en) 1998-02-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2249779T3 (es) Inhibidores de la proteasa retroviral de bis aminoacido de hidroxietilamino sulfonamida.
ES2303337T3 (es) Inhibidores de la proteasa retroviral de bis-hidroxietilamino sulfonamida.
ES2226665T3 (es) Inhibidores de proteasa retroviral de sulfonilalcano-ilamino hidroxietilamino sulfonamida.
KR100377855B1 (ko) 아미노산 히드록시에틸아미노 술폰아미드 레트로바이러스 프로테아제 저해제
RU2174519C2 (ru) Гидроксиэтиламино сульфонамиды гетероциклокарбонил аминокислоты, ингибирующие ретровирусную протеазу
US6172101B1 (en) Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6458785B1 (en) Amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US7161033B2 (en) Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US20070004646A1 (en) Heterocyclecarbonyl amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US7339078B2 (en) Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors
US6683210B2 (en) Bis-amino acid hydroxyethylamino sulfonamide retroviral protease inhibitors