EA012810B1 - Димерные ингибиторы ингибиторов белков апоптоза (iap) - Google Patents

Димерные ингибиторы ингибиторов белков апоптоза (iap) Download PDF

Info

Publication number
EA012810B1
EA012810B1 EA200701597A EA200701597A EA012810B1 EA 012810 B1 EA012810 B1 EA 012810B1 EA 200701597 A EA200701597 A EA 200701597A EA 200701597 A EA200701597 A EA 200701597A EA 012810 B1 EA012810 B1 EA 012810B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
alkyl
independently represent
carbon atoms
alkylene
mmol
Prior art date
Application number
EA200701597A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200701597A1 (ru
Inventor
Стефен М. Кондон
Мэттью Г. Лапорте
Йиджун Денг
Сюзан Р. Риппин
Original Assignee
Тетралоджик Фармасеутикалс
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=36636946&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA012810(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Тетралоджик Фармасеутикалс filed Critical Тетралоджик Фармасеутикалс
Publication of EA200701597A1 publication Critical patent/EA200701597A1/ru
Publication of EA012810B1 publication Critical patent/EA012810B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06165—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Молекулярные миметики Smac способны модулировать апоптоз посредством их взаимодействия с клеточными IAP (белками ингибитора апоптоза). Эти миметики основаны на мономере или димере N-концевой части тетрапептида белков, связывающихся с IAP, таких как Smac/DIABLO, Hid, Grim и Reaper, которые взаимодействуют со специфическим желобком на поверхности IAP. Также раскрыты способы применения этих пептидомиметиков в терапевтических целях. В различных вариантах осуществления изобретения миметики Smac согласно изобретению сочетаются с химиотерапевтическими средствами, включая, без ограничения, ингибиторы топоизомеразы, ингибиторы киназы, NSAID, таксаны и содержащие платину соединения.

Description

Данная заявка заявляет право на приоритет, возникающее из предварительной заявки на патент США № 60/656201 Пептидомиметики, поданной 25 февраля 2005 г., предварительной заявки на патент США № 60/668344 Иммунотерапевтические применения миметиков 8МАС, поданной 5 апреля 2005 г., предварительной заявки на патент США № 60/692111 Одиночные пептидомиметики 8МАС или в сочетании с ингибиторами топоизомеразы, поданной 20 июня 2005 г., предварительной заявки на патент США № 60/706649 Пептидомиметики 8МАС в качестве ингибиторов С1АР, поданной 9 августа 2005 г. и предварительной заявки на патент США № 60/729853 Одиночные пептидомиметики 8МАС или в сочетании с содержащими платину соединениями и таксанами, поданной 25 октября 2005 г., которые включены в данное описание во всей их полноте путем ссылки.
Предпосылки создания изобретения
Апоптоз (программируемая клеточная смерть) играет основную роль в развитии и гомеостазе всех многоклеточных организмов. Апоптоз может инициироваться изнутри клетки под действием внешнего фактора, такого как хемокин (внешний путь) или внутриклеточное событие, такое как повреждение ДНК (внутренний путь). Изменения апоптопических путей влекут за собой множество патологий у людей, в т.ч. нарушения развития, рак, аутоиммунные заболевания, а также нейродегенеративные расстройства. Один из способов действия химиотерапевтических лекарств является клеточная смерть путем апоптоза.
Апоптоз имеет аналогичную природу у различных видов и осуществляется в основном посредством активированных каспаз-семейства цистеиновых протеаз с аспартатной активностью их субстратов. Эти содержащие цистеин специфические к аспартату протеазы (каспазы) продуцируются в клетках как каталитически неактивные зимогены и обрабатываются протеолитически с превращением в активные протеазы в процессе апоптоза. После активации эффекторные каспазы отвечают за протеолитическое расщепление широкого спектра клеточных мишеней, которое в конечном итоге приводит к гибели клетки. В нормальных живых клетках, не получивших апоптопического стимула, большинство каспаз остаются неактивными. В случае аберрантной активации каспаз их протеолитическая активность может ингибироваться семейством сохраняющихся в процессе эволюции белков, называемых 1АР (ингибиторы белков апоптоза).
Семейство белков 1АР подавляет апоптоз, предотвращая активацию прокаспаз и ингибируя ферментную активность зрелых каспаз. Было обнаружено несколько отдельных 1АР млекопитающих, в т.ч. ΧΙΑΡ, С-1АР1, С-1АР2, МБ-1АР, ΝΛΙΡ (белок, ингибирующий нейронный апоптоз), Вгисе и сурвивин, которые проявляют антиапоптотическую активность в культуре клеток. Первоначально 1АР были обнаружены в бакуловирусе по их функциональной способности замещаться Р35 белком- антиапоптогенным геном. 1АР были описаны в различных организмах: от дрозофилы до человека. Известно также об их сверхэкспрессии во многих видах рака человека. В целом, 1АР включают от одного до трех повторяющихся доменов (ΒΙΚ) БАР 1АР бакуловируса, и большинство из них имеют карбоксильный терминальный мотив ΚΕΝΟ. Домен ΒΙΚ представляет собой связывающий цинк домен из приблизительно 70 остатков, включающий 4 альфа-спиралей и 3 бета-нитей с цистеиновыми и гистидиновыми остатками, координирующими ион цинка. Считается, что именно домен ΒΙΚ вызывает антиапоптический эффект путем ингибирования каспаз и, таким образом, ингибирования апоптоза. Х1АР экспрессируется повсеместно в большинстве тканей взрослых особей и эмбрионов. Было показано, что сверхэкспрессия Х1АР в клетках опухолей предоставляет защиту от множества проапоптических стимуляторов и способствует резистентности к химиотерапии. Это подтверждается сильной корреляцией между уровнями белков Х1АР и выживанием у пациентов с острой миелогенной лейкемией. Регулирование в сторону снижения экспрессии Х1АР посредством антисмысловых олигонуклеотидов, как было показано, повышает чувствительность клеток опухоли к смерти, индуцированной широким диапазоном про-апоптических средств, как ίη νίΐτο, так и ίη νίνο. 8тас/О1АВБО-производные пептиды также повышают чувствительность различных клеток опухолей к апоптозу, индуцированному разными проапоптическими лекарствами.
Однако в обычных клетках, получивших сигнал к апоптозу, опосредованный 1АР ингибиторный эффект должен быть устранен. Это, по меньшей мере, частично осуществляет митохондриальный белок 8тас (кесопб тйосйопбпа1 асбуаЮг оГ сакракек - второй митохондриальный активатор каспаз). 8тас (или Э1АВБО) синтезируется как молекула предшественника из 239 аминокислот; 55 остатков на Ν-конце служат в качестве митохондриальной целевой последовательности, удаляемой после импорта. Зрелая форма 8тас содержит 184 аминокислоты и в растворе ведет себя как олигомер. 8тас и различные его фрагменты предлагались для использования в качестве мишеней для идентификации различных терапевтических средств.
8тас синтезируется в цитоплазме с Ν-концевой митохондриальной целевой последовательностью, которая удаляется протеолитически в процессе созревания до зрелого полипептида, а затем нацеливается на внутримембранное пространство митохондрий. В момент индуцирования апоптоза 8тас высвобождается из митохондрий в цитозоль вместе с цитохромом С, где и связывается с 1АР и обеспечивает активацию каспаз, таким образом, устраняя ингибирующий эффект 1АР на апоптоз. В то время, как цитохром С индуцирует мультимеризацию АраГ-1 для активизации прокаспазы-9 и -3, 8тас устраняет ингибирующий эффект множественных 1АР. 8тас взаимодействует по существу со всеми 1АР, которые были иссле- 1 012810 дованы до настоящего времени, в т.ч ΧΙΑΡ, с-ΙΑΡΙ, С-1АР2 и МЬ-ΙΑΡ. Таким образом, 8тас выступает главным регулятором апоптоза у млекопитающих.
Было показано, что 8тас действует как антагонист ΙΑΡ, способствующий не только протеолитической активации прокаспаз, но также и ферментной активности зрелой каспазы, которые обе зависят от его способности к физическому взаимодействию с ΙΑΡ. Рентгеновская кристаллография показала, что первые четыре аминокислоты (ΑνΡΙ) зрелой 8тас связываются с частью ΙΑΡ. Эта Ν-конечная последовательность существенна для связывания ΙΑΡ и блокирования их антиапоптических эффектов.
Основная биология антагонистов ΙΑΡ свидетельствует о том, что они могут дополнять или выступать синергистами других химиотерапевтических/антинеопластических агентов и/или облучения. Химиотерапевтические/антинеопластические агенты и облучение должны индуцировать апоптоз в результате повреждения ДНК и/или нарушения клеточного метаболизма.
В настоящее время разработка лекарств от рака сосредоточена на селективной активации апоптических сигнальных путей в опухолях, сохраняя при этом нормальные клетки. Сообщалось о специфичных к опухолям свойствах определенных противоопухолевых средств, таких как ΤΚΑΙΤ. Связанный с фактором некроза опухолей индуцирующий апоптоз лиганд (Титог песгокщ ГасЮг-Вс1а1сб ΑρορΙοδίδ-Ιηάιιάηβ Ρίβηηά-ΤΚΑΙΡ) - один из нескольких элементов суперсемейства факторов некроза опухолей (ΤΝΡ), индуцирующих апоптоз посредством задействования рецепторов смерти. ΤΚΑΙΤ взаимодействует с чрезвычайно сложной системой рецепторов, которая в организме человека включает два рецептора смерти и три рецептора ловушки. ΤΚΑΙΤ использовался как средство против рака сам по себе или в сочетании с другими средствами, включая химиотерапевтические лекарства и ионизирующее излучение. ΤΚΑΙΤ может инициировать апоптоз в клетках, сверхэкспрессирующих факторы выживания Вс1-2 и Вс1-ХЬ, и может представлять собой стратегию лечения опухолей, которые обрели устойчивость к химиотерапевтическим лекарствам. ΤΚΑΙΤ связывается с родственными рецепторами и активирует каспазный каскад, используя молекулы адаптера, такие как ΡΑΌΌ. На сегодняшний день идентифицированы пять рецепторов ΤΚΑΙΤ. Два рецептора ΤΚΑΙΤ-Κ1 (ΌΚ4) и ΤΚΑΙΡ-Κ2 (ΌΚ5) опосредуют апоптическую сигнализацию, а три нефункциональных рецептора: ЭсВ1, ЭсР2 и остеопротегерин (ΟΡΟ) могут выполнять роль рецепторов ловушек. Средства, повышающие экспрессию ΌΚ4 и ΌΚ5, могут проявлять синергическую противоопухолевую активность в сочетании с ΤΚΑΙΤ.
Благоприятные эффекты продуцирования ΤΚΑΙΤ были продемонстрированы при нескольких типах рака. Например, внутрипузырное вливание вакцины ВСО индуцирует иммунный отклик ΤΡ1, приводящий к продуцированию антиопухолевых цитокинов, включая ΤΚΑΙΤ, и инфильтрацию поражения иммунными клетками, являясь первой линией лечения поверхностного рака мочевого пузыря. Исследования ίη νίίτο показывают, что интерферон альфа (ΙΝΡ-α), который в настоящее время испытывают в рамках клинических испытаний на эффективность против рака мочевого пузыря, вызывает апоптоз, опосредованный аутокринным продуцированием ΤΚΑΙΤ в линиях клеток рака мочевого пузыря человека. Циркулирующий уровень остеопротогерина- рецептора ловушки ΤΚΑΙΤ - также повышен у пациентов с раком мочевого пузыря и отрицательно коррелируется со стадией рака, степенью и прогнозом.
Более того, было показано, что экспрессия ΤΚΑΙΤ клетками ΝΚ (Νηΐιιπιΐ КШег-естественными киллерами) повышается при лечении ΙΤ-2 (Интерлейкином 2), а экспрессия ΤΚΑΙΤ необходима для полных цитотоксических влияний на клетки опухоли. Цитокин ΙΤ-2 в настоящее время одобрен для лечения меланомы и рака почки.
Ингибирование репликации раковых клеток и/или репарация повреждения ДНК способствует фрагментации ядерной ДНК, таким образом, индуцируя ее переход на апоптический путь. Топоизомеразы - класс ферментов, которые уменьшают сверхскручивание ДНК путем разрыва и повторного соединения одной или нескольких нитей молекулы ДНК, играют важную роль в таких клеточных процессах, как репликация и репарация ДНК. Ингибирование этого класса ферментов ослабляет способность клетки к репликации, а также репарации поврежденной ДНК и активирует внутренний апоптический путь.
Главные пути, ведущие от опосредованного топоизомеразой повреждения ДНК к гибели клетки, включают активацию каспаз в цитоплазме проапоптическими молекулами, выделенными из митохондрий, такими как 8тас. Задействование этих путей апоптических эффекторов строго контролируется верхними регуляторными путями, реагирующими на повреждения ДНК, индуцированными топоизомеразными ингибиторами в клетках, в которых происходит процесс апоптоза. Инициирование клеточных откликов на повреждения ДНК, индуцированные топоизомеразными ингибиторами, обеспечивается протеинкиназами, связывающимися с разрывами ДНК. Эти киназы (неограничивающие примеры которых включают Α1<1. ΡΝΚ и Р38), которые обычно называются датчиками ДНК, опосредуют репарацию ДНК, остановку клеточного цикла и/или апоптоз путем фосфорилирования большого числа субстратов, в т.ч. нескольких нижних киназ.
Платиновые химиотерапевтические лекарства относятся к общей группе ДНК-модифицирующих средств. ДНК-модифицирующими средствами могут выступать любые высоко реакционноспособные химические соединения, связывающиеся с различными нуклеофильными группами в нуклеиновых кислотах и белках и вызывающие мутагенные, канцерогенные или цитотоксические эффекты. ДНКмодифицирующие средства действуют посредством различных механизмов, нарушения функции ДНК и
- 2 012810 гибели клетки; повреждения ДНК/образования поперечных мостиков и связей между атомами в ДНК; и индуцирования ошибочного спаривания нуклеотидов, ведущего к мутациям, с достижением того же конечного результата. Три неограничивающих примера содержащих платину ДНК-модифицирующих средств - это цисплатин, карбоплатин и оксалиплатин.
Считается, что цисплатин убивает раковые клетки путем связывания с ДНК и вмешательства в механизм ее репарации, приводя, в конечном итоге, к гибели клетки. Карбоплатин и оксалиплатин являются производными цисплатина и имеют такой же механизм действия. Высоко реакционноспособные платиновые комплексы образуются внутри клетки и ингибируют синтез ДНК путем ковалентного связывания с молекулами ДНК с образованием внутринитевых и межнитевых связей в ДНК.
Было показано, что нестероидные противовоспалительные лекарства (Ν8ΑΙΌ) индуцируют апоптоз в колоректальных клетках. Вероятно, Ν8ΑΙΌ8 индуцирует апоптоз посредством выделения 8тас из митохондрий (ΡΝΑ8, 30 ноября 2004 г., том 101:16897-16902). Поэтому следует ожидать, что использование Ν8ΑΙΌ в сочетании с миметиками 8тас повышает активность каждого лекарства по сравнению с активностью каждого лекарства по отдельности.
В патенте США № 6992063 Ши и др. (8Ы е! а1.) Композиции и способ регулирования апоптоза (Сотро8Йюи8 апб тебюб £ог Кещбабпд Αρορΐοδίδ), заявка на который была подана 28 сентября 2001 г., а патент был получен 31 января 2006 г., включенном в данное описание во всей его полноте путем ссылки, указывается, что миметики Ν-концевой части 8тас обеспечивают полезные варианты лекарств.
Кроме того, в заявке на патент США № 10/777946 Маклендон и др. (МсЬеибои е! а1.) Связывающиеся с ΙΑΡ транспортные молекулы и пептидомиметики для использования в способах диагностики и лечения ('ЧЛР-Вшбшд Сагдо Мо1еси1е8 апб Рербботтебсз Еот Изе Ιη П1адио811с апб Тйетареибс МеШобб), поданной 12 февраля 2004 г. и включенной в данное описание во всей ее полноте путем ссылки, указывается, что транспортная молекула может присоединяться к Ν-концевому тетрапептидному пептидомиметику 8тас.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение предлагает соединения, имитирующие третичную структуру связывания 8тас с ΙΑΡ или активность Ν-концевой части 8тас. В объем изобретения также входят стереоизомеры описанных здесь миметических соединений. Данное изобретение также предлагает способы использования этих миметиков для модулирования апоптоза, а также в терапевтических целях. Настоящее изобретение также предлагает промежуточные соединения и способы их применения для получения соединений, модулирующих апоптоз путем имитации третичной структуры связывания 8тас с ΙΑΡ или активности Ν-концевой части 8тас.
Соединение согласно настоящему изобретению, имеющее общую формулу (Ι):
отличающееся тем, что К1 и К2 независимо представляют собой Н, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил, ацетил, трифторацетил, алкил, необязательно замещенный алкил, или
где К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио, или
- 3 012810
В5а и В5Ь независимо необязательно замещены гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, В5а и В5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8;
Вба и ВбЬ независимо представляют собой Н, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил, ацетил, трифторацетил, алкил, низший алкил, необязательно замещенный алкил, или
где В7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино;
т и η независимо представляют собой 0, 1, 2 или 3;
X и Υ независимо представляют собой О, Ν, 8 или С=С; и
В9а, В9Ь, В10а, К10Ь независимо представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, арил, гетероарил, необязательно замещенный арил, гетероарил, или К9а и К10а, независимо или параллельно с В9Ь и К10Ь могут быть связаны 4-8 необязательно замещенными атомами, такими как С, Н, О или 8, с образованием ароматического или неароматического кольца; и если \Уа и \УЬ ковалентно связаны, \Уа и \УЬ представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, арилалкиленовую, арилалкилалкиленовую, гетероарильную, гетероарилалкиленовую или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8; и К11а и К11Ь независимо отсутствуют или представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил; или К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода необязательно замещены Ν, О или 8.
Если \Уа и \УЬ не связаны ковалентно, \¥а и \УЬ независимо представляют собой Н, С1, Вг, Е, алкил, ΟΝ, СО2Н; и В11а и В11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода необязательно замещены Ν, О или 8; или \Уа является Н, С1, Вг, Е, алкилом, ΟΝ, СО2Н, и \УЬ и В11а вместе представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, арилалкиленовую, арилалкилалкиленовую, гетероарильную, гетероарилалкиленовую или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8, и К11Ь отсутствует или представляет собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является терапевтическое сочетание соединений согласно настоящему изобретению с ТКЛ1Ь или другими химическими или биологическими средствами, связывающимися с рецептором (или рецепторами) ТКА1Ь и активирующими их. С недавнего времени ТКА1Ь стал объектом пристального внимания в результате открытия того, что многие типы раковых клеток чувствительны к индуцированному ТКА1Ь апоптозу, в то время как нормальные клетки, похоже, устойчивы к этому действию ТКАЩ Устойчивые к ТВАШ клетки могут появляться посредством различных механизмов, включая утрату рецептора, присутствие рецепторов ловушек или сверхэкспрессию ЕЫР, конкурентно связывающегося с зимогенкаспазой-8 в процессе образования ΌΙ8Ο. При устойчивости к ТВА1Ь миметики 8тас повышают чувствительность клеток опухоли к ТКАГБ, приводя к улучшению показателей клеточной смерти. Ожидается, что с этим будут связаны такие клинические результаты, как усиление апоптической активности в устойчивых к ТКАГБ опухолях, улучшение клиниче
- 4 012810 ского отклика, увеличение длительности отклика и, в конечном итоге, повышение показателей выживания среди пациентов. В подтверждение этого было показано, что снижение уровней ΧΙΑΡ путем ίη νίίτο антисмыслового лечения вызывает повышение чувствительности устойчивых клеток меланомы и клеток рака почки к ТКА1Ь (Чавла-Саркар и др. (СйаМа-8аткат с( а1.), 2004). Раскрытые здесь миметики 8шас связываются с ΙΑΡ и ингибируют их взаимодействие с каспазами, таким образом, усиливая индуцированный ТКА1Ь апоптоз.
В другом варианте осуществления данного изобретения миметики 8шас используются в сочетании с лечением рака мочевого пузыря вакциной ВСС. ΧΙΑΡ-номинальная мишень миметиков 8шас - сверэкспессирован в значительной части видов рака мочевого пузыря. В исследованиях с использованием антисмыслового ΧΙΑΡ клетки рака мочевого пузыря были сенсибилизированы к химиотерапевтическим средствам, индуцирующим апоптоз клеток посредством пути ТКА1Ь. Настоящее изобретение предлагает миметики 8шас для использования вместе с ВСС-терапией рака поверхности мочевого пузыря/карциномы ίη δίΐιι. Раскрытые здесь миметики 8шас усиливают действие вакцины ВСС путем усиления влияния ТКА1Ь, образованного в ответ на вакцину.
Аналогично, миметики 8шас усиливают индуцированный ТКА1Ь апоптоз, наблюдаемый у пациентов с меланомой и раком почек, проходящих лечение 1Ь-2. Поскольку 1Ь-2 индуцирует активность клеток ΝΚ путем повышения экспрессии ТКА1Ь, дополнительное лечение активатором каспазы-9, таким как миметик 8шас, обеспечит более эффективный клинический отклик.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предлагает миметики 8шас, действующие синергично с ингибиторами топоизомеразы с усилением их вызывающего апоптоз действия. Ингибиторы топоизомеразы ингибируют репликацию и репарацию ДНК, таким образом, способствуя апоптозу, и применяются в качестве химиотерапевтических средств. Ингибиторы топоизомеразы способствуют повреждению ДНК путем ингибирования ферментов, необходимых для процесса репарации ДНК. Таким образом, экспорт цитохрома С и 8шас из митохондрий в цитозоль клетки индуцируется повреждением ДНК, вызванным ингибиторами топоизомеразы.
Ингибиторы топоизомеразы Типа I (камптотецин, топотекан, 8Ν-38, иринотекан, топотекан, ΒΝΡ 1350, 9-амино-камптотекан, луртотекан, гриматекан, эксатекан, амсакрин и дифломотекан) и Типа II (этопосид, антрацицилин, антрахинон и подофиллотоксин) демонстрируют сильное синергичное действие с миметиками 8шас согласно изобретению в мультирезистентных линиях клеток глиобластомы (Т98С), рака груди (ΜΌΑ-ΜΒ-231), рака яичника (ОУСАЯ-3). а также других. Другие ингибиторы топоизомеразы включают, например, Аклациномицин А, камптотецин, даунорубицин, доксорубицин, эллиптицин, эпирубицин и митаксантрон.
В другом варианте осуществления изобретения химиотерапевтическое/антинеопластическое средство может быть содержащим платину соединением. В одном варианте осуществления изобретения содержащим платину соединением является цисплатин. Цисплатин может оказывать синергичное действие с пептидомиметиком 8шас и усиливать ингибирование ΙΑΡ, таких как (без ограничения) ΧΙΑΡ, с1АР-1, сΙΑΡ-2, МЬ-ΙΑΡ и т.д. В другом варианте осуществления изобретения содержащим платину соединением является карбоплатин. Карбоплатин может оказывать синергичное действие с пептидомиметиком 8шас и усиливать ингибирование ΙΑΡ, включая без ограничения ΧΙΑΡ, ^ΑΡ-1, ^ΙΑΡ-2, МЬ-ΙΑΡ и т.д. В другом варианте осуществления изобретения содержащим платину соединением является оксалиплатин. Оксалиплатин может оказывать синергичное действие с пептидомиметиком 8шас и усиливать ингибирование ΙΑΡ, включая без ограничения ΧΙΑΡ, ^ΑΡ-1, ^ΙΑΡ-2, МЬ-ΙΑΡ и т.д.
В другом варианте осуществления изобретения химиотерапевтическое/антинеопластическое средство, оказывающее синергичное действие с соединением согласно настоящему изобретению, является таксаном. Таксаны - это антимитотические средства, митотические ингибиторы или средства полимеризации микротрубочек. Таксаны включают без ограничения доцетаксел и паклитаксел.
Таксаны характеризуются как соединения, способствующие собиранию микротрубочек путем ингибирования деполимеризации тубулина, таким образом блокируя прохождение клеточного цикла через повреждение центросом, индукцию аномальных веретен и подавление динамики микротрубочек веретена. Уникальный механизм действия таксана резко отличается от других микротрубочных ядов, таких как алкалоидов барвинка, колхицина и криптофицинов, ингибирующих полимеризацию тубулина. Микротрубочки представляют собой очень динамичные клеточные полимеры, состоящие из αβ-тубулина и соответствующих белков и играющие ключевую роль в процессе митоза путем участия в организации и функционировании веретена, обеспечивая целостность разделенной ДНК. Поэтому они являются эффективной мишенью при лечении рака.
В другом варианте осуществления любое средство, активирующее внутренний апоптический путь и/или вызывающее выделение 8шас или цитохрома С из митохондрий, имеет потенциал синергичного действия с миметиком 8шас.
Сочетание пептидомиметика 8шас и химиотерапевтического/анти-неопластического средства и/или лучевой терапии любого типа, активирующих внутренние или внешние пути или выделение 8шас, может обеспечить более эффективный подход к разрушению клеток опухоли. Пептидомиметики 8шас взаимодействуют с такими ΙΑΡ, как ΧΙΑΡ, ^ΑΡ-1, ΗΑΡ-2, МЬ-ΙΑΡ и т.д. и блокируют опосредованное ΙΑΡ ин
- 5 012810 гибирование апоптоза, в то время как химиотерапевтические/антинеопластические средства и/или лучевая терапия убивают активно делящиеся клетки путем активации внутреннего апоптического пути, приводящего к апоптозу и клеточной смерти. Согласно приведенному ниже более подробному описанию варианты осуществления данного изобретения предлагают сочетания пептидомиметика 8тас и химиотерапевтического/антинеопластического средства и/или облучения, которые обеспечивают синергичное действие против нежелательной пролиферации клеток. Такое синергичное действие пептидомиметика 8тас и химиотерапевтического/антинеопластического средства и/или лучевой терапии может повысить эффективность химиотерапевтического/антинеопластического средства и/или лучевой терапии. Это обеспечит повышение действенности имеющихся на сегодняшний день химиотерапевтических/антинеопластических средств или лучевой терапии, позволяя снизить дозу химиотерапевтического/антинеопластического средства и, таким образом, обеспечить более эффективную схему применения и лучше переносимые дозы химиотерапевтического/антинеопластического средства и/или лучевой терапии.
Для упрощения и иллюстрации принципы данного изобретения будут описаны со ссылкой, в основном, на его варианты осуществления. Кроме того, многочисленные конкретные сведения включены в следующее описание с целью достижения полного понимания изобретения. Однако обычному специалисту в данной области техники будет понятно, что изобретение можно применять, не ограничивая его указанными конкретными подробностями. В других случаях авторы не приводили подробное описание хорошо известных способов и структур, чтобы без необходимости не усложнять раскрытие изобретения.
Описание чертежей
На фиг. 1 приведен график относительной афинности к связыванию тетрапептида 8тас (ΑΥΡΙ) и сильного миметика 8тас согласно настоящему изобретению с ΧΙΑΡ ΒΙΚ-3. Данные получены путем анализа поляризации флуоресценции. Результаты показывают 30000-кратное повышение афинности к связыванию миметика 8тас по сравнению с тетрапептидом 8тас.
На фиг. 2 приведен график значений полужизни трех миметиков 8тас согласно настоящему изобретению после однократного внутривенного введения крысе в дозе 1 мг/кг. Результаты демонстрируют, что период полужизни тестированных миметиков составляет до шести часов.
На фиг. 3 приведен график, показывающий способность миметика 8тас согласно настоящему изобретению селективно противодействовать пролиферации клеток рака яичника линии 8К-ОУ-3. В этом МТТ-анализе миметик 8тас демонстрирует противораковые свойства при концентрациях, не оказывающих влияние на нормальные диплоидные клетки линии МКС-5.
На фиг. 4 продемонстрировано химиоусиливающее действие миметика 8тас на примере клеток меланомы, которые известны своей устойчивостью против апоптического действия ТКА1Ь. Анализы пролиферации клеток показали, что при обработке клеток рака груди линии ΜΌΑ-ΜΒ-231 только пептидомиметиком 8тас-соединением №1 согласно изобретению клетки проявляли устойчивость к антипролиферативному действию миметика 8тас согласно изобретению. И наоборот, при использовании соединения № 1 в сочетании с ТКАГЬ наблюдали 1000-кратное повышение антипролиферативного действия, приводящее к 100-кратному повышению показателя гибели клеток, определяемого по соответствующему ослаблению образования колонии.
Подробное описание
Следует отметить, что используемое в настоящем описании и формуле изобретения указание на единственное число предполагает указание и на множественное число, если только контекст четко не указывает на обратное. Если не указано иное, все употребляемые здесь технические и научные термины имеют значение, обычно воспринимаемое специалистами с обычным уровнем подготовки в области техники, к которой относится данное изобретение. Хотя в практике или тестировании вариантов осуществления данного изобретения могут использоваться способы, аналогичные или эквивалентные описанным здесь, ниже описаны предпочтительные способы. Все указанные здесь публикации и ссылки включены в описание путем ссылки. Ничто из указанного здесь не должно истолковываться таким образом, что настоящее изобретение не может иметь приоритет перед приведенными описаниями по принципу более раннего изобретения.
Употребляемый здесь термин приблизительно означает диапазон +/- 10% от указанного с ним числового значения. Таким образом, приблизительно 50% соответствует диапазону 45-55%.
Алкил означает разветвленную или неразветвленную, насыщенную или ненасыщенную (например, алкенил, алкинил) алифатическую углеводородную группу, имеющую до 12 атомов углерода, если не указано иное. При использовании в качестве части другого термина, например, алкиламино, алкильная часть может представлять собой цепочку насыщенного углеводорода, однако, также включает цепочки ненасыщенных углеводородов, такие как алкениламино и алкиниламино. Конкретные примеры алкильных групп включают метил, этил, η-пропил, изопропил, η-бутил, изо-бутил, втор-бутил, третбутил, η-пентил, 2-метилбутил, 2,2-диметилпропил, η-гексил, 2-метилпентил, 2,2-диметилбутил, ηгептил, 3-гептил, 2-метилгексил и т.п. Термины низший алкил С1-С4 алкил и алкил с 1-4 атомами углерода являются синонимами и используются взаимозаменяемо для обозначения следующих соединений: метил, этил, 1-пропил, изопропил, циклопропил, 1-бутил, втор-бутил или ΐ-бутил. Если не указано
- 6 012810 иного, замещенные алкильные группы могут содержать один, два, три или четыре заместителя, которые могут быть одинаковыми или различными. Примеры указанных выше замещенных алкильных групп включают без ограничения: цианометил, нитрометил, гидроксиметил, тритилоксиметил, пропионилоксиметил, аминометил, карбоксиметил, карбоксиэтил, карбоксипропил, алкилоксикарбонилметил, аллилоксикарбониламинометил, карбамоилоксиметил, метоксиметил, этоксиметил, ΐ-бутоксиметил, ацетоксиметил, хлорметил, бромметил, йодметил, трифторметил, 6-гидроксигексил, 2,4-дихлор(п-бутил), 2амино(изопропил), 2-карбамоилоксиэтил и т.п. Алкильная группа может быть также замещена группой карбоцикла. Примеры включают циклопропилметильную, циклобутилметильную, циклопентилметильную и циклогексилметильную группы, а также соответствующие этильные, -пропильные, -бутильные, -пентильные, -гексильные группы и т.д. Некоторые замещенные алкилы являются замещенными метилами, например, метильная группа замещена теми же заместителями, что и замещенная Сп-Ст алкильная группа. Примеры замещенных метильных групп включают такие группы, как гидроксиметил, защищенный гидроксиметил (например, тетрагидропиранилоксиметил), ацетоксиметил, карбамоилоксиметил, трифторметил, хлорметил, карбоксиметил, бромметил и йодметил.
Амино означает первичный (т.е. -ΝΗ2), вторичный (т.е. -ΝΚΗ) и третичный (т.е. -ΝΚΚ) амины. Конкретные вторичные и третичные амины представляют собой алкиламин, диалкиламин, ариламин, диариламин, арилалкиламин и диарилалкиламин. Конкретные вторичные и третичные амины представляют собой: метиламин, этиламин, пропиламин, изопропиламин, фениламин, бензиламин диметиламин, диэтиламин, дипропиламин и дизопропиламин.
Используемый отдельно или как часть другого термина арил означает карбоциклическую ароматическую группу, слитую или нет, имеющую указанное количество атомов углерода, а при отсутствии указания - до 14 атомов углерода. Конкретные арильные группы включают фенил, нафтил, бифенил, фенантренил, нафтаценил и т.п. (см., например, Справочник по химии Ланга, под ред. Дин Ж. А., 13ое изд., Таблица 7-2 [1985] (Ьапд'к НапйЬоок οί СйстйЦу. (Оеап, 1. А., ей) 134Ь ей. ТаЫе 7-2 [1985])). В конкретном варианте осуществления арильная группа является фенилом. Замещенный фенил или замещенный арил означает фенильную группу или арильную группу, замещенную одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, выбранными, если не указано иное, из галогена (Р, С1, Вг, I), гидрокси, защищенного гидрокси, циано, нитро, алкила (такого как С1-С6 алкил), алкокси (такого как С1-С6 алкокси), бензилокси, карбокси, защищенного карбокси, карбоксиметила, защищенного карбоксиметила, гидроксиметила, защищенного гидроксиметила, аминометила, защищенного аминометила, трифторметила, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероциклилсульфониламино, гетероциклила, арила или других указанных групп. Одна или несколько групп метина (СН) и/или метилена (СН2) в этих заместителях могут, в свою очередь, быть замещены группами, аналогичными указанным выше. Примеры термина замещенный фенил включают без ограничения моно- или ди(гало)фенильную группу, такую как 2хлорфенил, 2-бромфенил, 4-хлорфенил, 2,6-дихлорфенил, 2,5-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 3хлорфенил, 3-бромфенил, 4-бромфенил, 3,4-дибромфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 2-фторфенил и т.п.; моно- или ди(гидрокси)фенильную группу, такую как 4-гидроксифенил, 3-гидроксифенил, 2,4дигидроксифенил, их защищенные гидроксипроизводные и т.п.; нитрофенильную группу, такую как 3или 4-нитрофенил; цианофенильную группу, например 4-цианофенил; моно- или ди(низший алкил)фенильную группу, такую как 4-метилфенил, 2,4-диметилфенил, 2-метилфенил, 4-(изопропил)фенил, 4-этилфенил, 3-(п-пропил)фенил и т.п.; моно- или ди(алкокси)фенильную группу, например 3,4-диметоксифенил, 3-метокси-4-бензилоксифенил, 3-метокси-4-(1-хлорметил)бензилоксифенил, 3этоксифенил, 4-(изопропокси)фенил, 4-(1-бутокси)фенил, 3-этокси-4-метоксифенил и т.п.; 3- или 4трифторметилфенил; моно- или дикарбоксифенильную или (защищенную карбокси)фенильную группу, такую как 4-карбоксифенил; моно- или ди(гидроксиметил)фенил или (защищенный гидроксиметил)фенил, такой как 3-(защищенный гидроксиметил)фенил или 3,4-ди(гидроксиметил)фенил; моно- или ди (аминометил)фенил или (защищенный аминометил)фенил, такой как 2-(аминометил)фенил или 2,4(защищенный аминометил)фенил; или моно- или ди(№(метилсульфониламино))фенил, такой как 3-(Νметилсульфониламино))фенил. Также термин замещенный фенил обозначает дизамещенные фенильные группы, где заместители являются различными, например, 3-метил-4-гидроксифенил, 3-хлор-4гидроксифенил, 2-метокси-4-бромфенил, 4-этил-2-гидроксифенил, 3-гидрокси-4-нитрофенил, 2гидрокси-4-хлорфенил и т.п.; а также тризамещенные фенильные группы, в которых заместители являются различными, например, 3-метокси-4-бензилокси-6-метилсульфониламино, 3-метокси-4-бензилокси6-фенилсульфониламино, и тетразамещенные фенильные группы, в которых заместители являются различными, такие как 3-метокси-4-бензилокси-5-метил-6-фенилсульфониламино. Конкретными замещенными фенильными группами являются: 2-хлорфенильная, 2-аминофенильная, 2-бромфенильная, 3метоксифенильная, 3-этоксифенильная, 4-бензилоксифенильная, 4-метоксифенильная, 3-этокси-4бензилоксифенильная, 3,4-диэтоксифенильная, 3-метокси-4-бензилоксифенильная, 3-метокси-4-(1хлорметил)бензилоксифенильная, 3 -метокси-4-(1 -хлорметил)бензилокси-6-метилсульфониламинофенильная группы. Слитые арильные кольца также могут быть замещены указанными здесь заместителями, например 1, 2 или 3 заместителями, таким же образом, как и замещенные алкильные группы.
Употребляемый здесь термин алкиленовый радикал включает ссылку на дифункциональный насы
- 7 012810 щенный разветвленный или неразветвленный углеводородный радикал, содержащий 1-30 атомов углерода, и включает, например, метилен (СН2), этилен (СН2СН2), пропилен (СН2СН2СН2), 2-метилпропилен (СН2СН(СН3)СН2), гексилен ((СН2)6) и т.п. Низший алкилен включает алкиленовую группу из 1-10, предпочтительно 1-5 атомов углерода.
Замещенные алкиленовые радикалы включает ссылку на дифункциональный насыщенный разветвленный или неразветвленный алкиленовый радикал или группу, включающую 1-30 атомов углерода и имеющую от 1 до 5 заместителей. Низшие замещенные алкиленовые радикалы означают группу замещенного алкиленового радикала, включающую 1-10 атомов углерода, предпочтительно 1-5 атомов углерода, и имеющую от 1 до 5 заместителей. Заместители могут включать, без ограничения, указанные для алкильных групп.
Употребляемый здесь термин алкенильный радикал включает ссылку на разветвленный, циклический углеводородный или неразветвленный углеводородный радикал, содержащий 2-30 атомов углерода и включающий по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, такой как этенил, п-пропенил, изопропенил, п-бутенил, изобутенил, ΐ-бутенил, октенил, деценил, тетрадеценил, гексадеценил, эйкосенил, тетракосенил и т.п. Термин низший алкенил включает алкенильную группу из 2-10 атомов углерода, предпочтительно 2-5 атомов углерода, содержащую по меньшей мере одну двойную связь углеродуглерод. Одна или несколько двойных связей углерод-углерод могут независимо иметь цис- или трансконфигурацию. Замещенный алкенильный радикал означает группу алкенильного радикала или низшего алкенила, имеющую 1-5 заместителей, которые могут включать, без ограничения, указанные для алкильных групп.
Термин алкениленовый радикал включает ссылку на дифункциональный разветвленный или неразветвленный углеводородный радикал или группу, включающую 2-30 атомов углерода и по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод. Низший алкенилен включает алкениленовую группу из 2-10, предпочтительно 2-5 атомов углерода, содержащую одну двойную связь углерод-углерод. Замещенный алкениленовый радикал означает группу алкениленового радикала или низшего алкенила, имеющую 1-5 заместителей, которые могут включать, без ограничения, указанные для алкильных групп.
Термин алкинильный радикал или группа означает углеводородный радикал с неразветвленной или разветвленной цепочкой, имеющий 2-12 атомов углерода и по меньшей мере одну тройную связь, некоторые варианты осуществления включают алкинильные группы, имеющие 2-6 атомов углерода и одну тройную связь. Замещенный алкинил содержит один, два или три заместителя, определенных для замещенных алкильных групп. Алкинилен включает ссылку на дифункциональную разветвленную или неразветвленную углеводородную цепочку, включающую 2-12 атомов углерода и по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод; некоторые варианты осуществления включают алкиниленовые группы с 2-6 атомами углерода и одной тройной связью. Замещенный алкинилен содержит один, два или три заместителя, определенных для замещенных алкильных групп.
Гетероциклическая группа, гетероциклический, гетероцикл, гетероциклил или гетероцикло отдельно или в качестве части сложной группы, такой как гетероциклоалкильная группа, используются взаимозаменяемо и означают любое моно-, би- или трициклическое, насыщенное или ненасыщенное, ароматическое (гетероарильное) или неароматическое кольцо с указанным количеством атомов, в общем, от 5 до приблизительно 14 атомов в кольце, где атомы в кольце представляют собой углерод и по меньшей мере один гетероатом (азот, сера или кислород). В отдельном варианте осуществления группа включает 1-4 гетероатома. Как правило, 5-членное кольцо имеет 0-2 двойные связи, а 6- или 7-членное кольцо имеет 0-3 двойные связи, гетероатомы азота или серы могут быть необязательно окислены (например, 80, 8О2), а любой гетероатом азота может быть необязательно кватернизован. Некоторые неароматические гетероциклы включают: морфолинил (морфолино), пирролидинил, оксиранил, оксэтанил, тетрагидрофуранил, 2,3-дигидрофуранил, 2Н-пиранил, тетрагидропиранил, тииранил, тиэтанил, тетрагидротиэтанил, азиридинил, азетидинил, 1-метил-2-пирролил, пиперазинил и пиперидинил. Гетероциклоалкильная группа является гетероциклической группой, как определено выше, ковалентно связанной с определенной выше алкильной группой.
Некоторые 5-членные гетероциклы, содержащие атом серы или кислорода и от одного до трех атомов азота, включают тиазолил, такой как тиазол-2-ил и тиазол-2-ил Ν-оксид, тиадиазолил, такой как
1,3,4-тиадиазол-5-ил и 1,2,4-тиадиазол-5-ил, оксазолил, такой как оксазол-2-ил, и оксадиазолил, такой как 1,3,4-оксадиазол-5-ил и 1,2,4-оксадиазол-5-ил. Некоторые 5-членные гетероциклы, содержащие 2-4 атома азота, включают имидазолил, такой как имидазол-2-ил; триазолил, такой как 1,3,4-триазол-5-ил, 1,2,3-триазол-5-ил и 1,2,4-триазол-5-ил, и тетразолил, такой как 1Н-тетразол-5-ил. Некоторые бензослитые 5-членные гетероциклы представляют собой бензоксазол-2-ил, бензтиазол-2-ил и бензимидазол2-ил. Некоторые 6-членные гетероциклы содержат от одного до трех атомов азота и, необязательно, атом серы или кислорода, например, пиридил, такой как пирид-2-ил, пирид-3-ил и пирид-4-ил; пиримидил, такой как пиримид-2-ил и пиримид-4-ил; триазинил, такой как 1,3,4-триазин-2-ил и 1,3,5-триазин-4-ил; пиридазинил, такой как пиридазин-3-ил, и пиразинил. Заместители для необязательно замещенных гетероциклов и дальнейшие примеры 5- и 6-членных кольцевых систем указаны в патенте США № 4278793, выданном В. Друкхаймер и др. (^. Огаскйеппег с1 а1.).
- 8 012810
Арилалкильные радикалы - это алкильные радикалы, имеющие арильный заместитель и включающие от приблизительно 6 до приблизительно 20 атомов углерода (и все сочетания и субсочетания диапазонов и конкретных количеств атомов углерода в них), предпочтительно от приблизительно 6 до приблизительно 12 атомов углерода. Арилалкильные группы могут быть необязательно замещены. Неограничивающие примеры включают бензил, нафтилметил, дифенилметил, трифенилметил, фенилэтил и дифенилэтил. Замещенная арилалкильная группа содержит один или несколько заместителей в арильной или алкильной группе, определенных для замещенных алкильных групп.
Циклоалкиларильный радикал или группа означает циклоалкильный радикал, слитый с арильной группой, включая все сочетания независимо замещенных алкил циклоалкиларилов, циклоалкильных и арильных групп, имеющих два общих атома.
Циклоалкильный радикал или группа, конкретнее, включает ссылку на моновалентный насыщенный карбоциклический алкильный радикал, состоящий из одного или нескольких колец и имеющий от приблизительно 3 до приблизительно 14 атомов углерода (и все сочетания и субсочетания диапазонов и конкретных количеств атомов углерода в них), предпочтительно от приблизительно 3 до приблизительно 7 атомов углерода. Многокольцевые структуры могут быть связанными мостиками или слитыми. Кольца могут быть необязательно замещенными одним или несколькими заместителями, указанными для алкильных групп. Примеры циклоалкильных групп включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклооктил и адамантил. Замещенная циклоалкильная группа содержит один или несколько заместителей, определенных для замещенных алкильных групп.
Циклоалкилалкильные радикалы, конкретнее, означают алкильные радикалы, имеющие циклоалкильный заместитель и включающие от приблизительно 4 до приблизительно 20 атомов углерода (и все сочетания и субсочетания диапазонов и конкретных количеств атомов углерода в них), предпочтительно от приблизительно 6 до приблизительно 12 атомов углерода, и могут включать без ограничения метилциклопропильные, метилциклогексильные, изопропилциклогексильные и бутилциклогексильные группы. Циклоалкилалкильный радикал или группа могут быть необязательно замещенными одним или несколькими заместителями, указанными для алкильных групп, включающими без ограничения гидрокси, циано, алкил, алкокси, тиоалкил, гало, галоалкил, гидроксиалкил, нитро, амино, алкиламино и диалкиламино.
Гетероарил отдельно или в качестве части сложной группы, такой как гетероарилалкильная группа, означает любую моно-, би- или трициклическую ароматическую кольцевую систему с указанным количеством атомов, в которой по меньшей мере одно кольцо является 5-, 6- или 7-членным кольцом, имеющим от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы: азот, кислород и сера (Ьаид'к НаибЬоок о£ СЬешкЬу, см. выше). В определение включены любые бициклические группы, в которых любое из указанных выше гетероарильных колец слито с бензольным кольцом. Следующие кольцевые системы являются примерами гетероарильных (замещенных или незамещенных) групп, обозначенных термином гетероарил: тиенил, фурил, имидазолил, пиразолил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, триазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тетразолил, тиатриазолил, оксатриазолил, пиридил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, тиазинил, оксазинил, триазинил, тиадиазинил, оксадиазинил, дитиазинил, диоксазинил, оксатиазинил, тетразинил, тиатриазинил, оксатриазинил, дитиадиазинил, имидазолинил, дигидропиримидил, тетрагидропиримидил, тетразоло[1,5-Ь]пиридазинил и пуринил, а также бензо-слитые производные, например бензоксазолил, бензофурил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензотриазолил, бензоимидазолил и индолил. В частности, гетероарилы включают 1,3-тиазол-2-ил, 4(карбоксиметил)-5-метил-1,3-тиазол-2-ил, 4-(карбоксиметил)-5-метил-1,3-тиазол-2-ила натриевую соль,
1.2.4- тиадиазол-5-ил, 3-метил-1,2,4-тиадиазол-5-ил, 1,3,4-триазол-5-ил, 2-метил-1,3,4-триазол-5-ил, 2гидрокси-1,3,4-триазол-5-ил, 2-карбокси-4-метил-1,3,4-триазол-5-ила натриевую соль, 2-карбокси-4метил-1,3,4-триазол-5-ил, 1,3-оксазол-2-ил, 1,3,4-оксадиазол-5-ил, 2-метил-1,3,4-оксадиазол-5-ил, 2(гидроксиметил)-1,3,4-оксадиазол-5-ил, 1,2,4-оксадиазол-5-ил, 1,3,4-тиадиазол-5-ил, 2-тиол-1,3,4тиадиазол-5-ил, 2-(метилтио)-1,3,4-тиадиазол-5-ил, 2-амино-1,3,4-тиадиазол-5-ил, 1Н-тетразол-5-ил, 1метил-1Н-тетразол-5-ил, 1-(1-(диметиламино)эт-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил, 1-(карбоксиметил)-1Н-тетразол5-ил, 1-(карбоксиметил)-1Н-тетразол-5-ила натриевую соль, 1-(метилсульфокислота)-1Н-тетразол-5-ил, 1-(метилсульфокислота)-1Н-тетразол-5-ила натриевую соль, 2-метил-1Н-тетразол-5-ил, 1,2,3-триазол-5ил, 1-метил-1,2,3-триазол-5-ил, 2-метил-1,2,3-триазол-5-ил, 4-метил-1,2,3-триазол-5-ил, пирид-2-ил Ν’оксид, 6-метокси-2-(п-оксид)пиридаз-3-ил, 6-гидроксипиридаз-3-ил, 1-метилпирид-2-ил, 1-метилпирид-4ил, 2-гидроксипиримид-4-ил, 1,4,5,6-тетрагидро-5,6-диоксо-4-метил-аз-триазин-3-ил, 1,4,5,6-тетрагидро4-(формилметил)-5,6-диоксо-аз-триазин-3-ил, 2,5-дигидро-5-оксо-6-гидрокси-азтриазин-3-ил, 2,5дигидро-5-оксо-6-гидрокси-аз-триазин-3-ила натриевую соль, 2,5-дигидро-5-оксо-6-гидрокси-2-метилазтриазин-3-ила натриевую соль, 2,5-дигидро-5-оксо-6-гидрокси-2-метил-аз-триазин-3-ил, 2,5-дигидро-5оксо-6-метокси-2-метил-аз-триазин-3-ил, 2,5-дигидро-5-оксо-аз-триазин-3-ил, 2,5-дигидро-5-оксо-2метил-аз-триазин-3-ил, 2,5-дигидро-5-оксо-2,6-диметил-аз-триазин-3-ил, тетразоло[1,5-Ь]пиридазин-6-ил и 8-аминотетразоло[1,5-Ь]-пиридазин-6-ил. Альтернативная группа гетероарила включает 4(карбоксиметил)-5-метил-1,3-тиазол-2-ил, 4-(карбоксиметил)-5-метил-1,3-тиазол-2-ила натриевую соль,
1.3.4- триазол-5-ил, 2-метил-1,3,4-триазол-5-ил, 1Н-тетразол-5-ил, 1-метил-1Н-тетразол-5-ил, 1-(1
- 9 012810 (диметиламино)эт-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил, 1 -(карбоксиметил)-1Н-тетразол-5-ил, 1 -(карбоксиметил)-1Нтетразол-5-ила натриевую соль, 1-(метилсульфокислота)-1Н-тетразол-5-ил, 1-(метилсульфокислота)-1Нтетразол-5-ила натриевую соль, 1,2,3-триазол-5-ил, 1,4,5,6-тетрагидро-5,6-диоксо-4-метил-аз-триазин-3ил, 1,4,5,6-тетрагидро-4-(2-формилметил)-5,6-диоксо-аз-триазин-3-ил, 2,5-дигидро-5-оксо-6-гидрокси-2метил-аз-триазин-3-ила натриевую соль, 2,5-дигидро-5-оксо-6-гидрокси-2-метил-аз-триазин-3-ил, тетразоло[1,5-Ь]пиридазин-6-ил и 8-аминотетразоло[1,5-Ь]пиридазин-6-ил.
Ингибитор означает соединение, снижающее или препятствующее связыванию белков ΙΑΡ с белками каспазы, снижает или предотвращает ингибирование апоптоза белком ΙΑΡ или связывается с доменом ΒΙΕ ΙΑΡ образом, аналогичным аминоконцевой части 8тас, таким образом, высвобождая 8тас для ингибирования действия IΑΡ.
Фармацевтически приемлемые соли включают кислотные и основные аддитивные соли. Фармацевтически приемлемые кислотные аддитивные соли означают соли, сохраняющие биологическое действие и свойства свободных оснований, не являющиеся нежелательными с биологической или иной точки зрения, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, угольная кислота, фосфорная кислота и т.п, и органическими кислотами, выбранными из классов алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых органических кислот, таких как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, глюконовая кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, аспарагиновая кислота, аскорбиновая кислота, глютаминовая кислота, антраниловая кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, эмбоновая кислота, фенилуксусная кислота, метансульфокислота, этансульфокислота, р-толуолсульфокислота, салициловая кислота и т.п.
Термины миметик, пептид-миметик и пептидомиметик используются здесь взаимозаменяемо и в целом означают пептидную, частично пептидную или непептидную молекулу, имитирующую третичную структуру связывания или активность выбранного нативного пептида или функциональной области белка (например, мотив связывания или активный сайт). Эти пептиды-миметики включают рекомбинантно или химически модифицированные пептиды, а также непептидные средства, такие как миметики лекарственных средств с малыми молекулами, описанные ниже.
Употребляемые здесь понятия фармацевтически приемлемый, физиологически переносимый и их грамматические формы, относящиеся к композициям, носителям, разбавителям и реагентам, используются взаимозаменяемо и означают материалы, которые могут вводиться млекопитающим без нежелательных физиологических последствий, таких как тошнота, головокружение, сыпь или расстройство желудка.
Обеспечение при использовании в связи с терапевтическими средствами означает введение лекарства непосредственно в ткань-мишень или на нее или введение лекарства пациенту, при котором терапевтическое средство оказывает положительное влияние на ткань-мишень.
Употребляемый здесь термин субъект или пациент означает животное или млекопитающее, включая (без ограничения) человека, собаку, кошку, лошадь, корову, свинью, овцу, козу, курицу, обезьяну, кролика, крысу, мышь и т. д.
Употребляемый здесь термин терапевтический означает средство, используемое для лечения, борьбы, облегчения, предотвращения или улучшения нежелательного состояния или болезни у пациента. Варианты осуществления данного изобретения направлены на содействие апоптозу и, таким образом, клеточной смерти.
Употребляемые здесь понятия терапевтически эффективное количество или эффективное количество могут использоваться взаимозаменяемо и означают количество компонента терапевтического соединения согласно настоящему изобретению. Например, терапевтически эффективное количество терапевтического соединения - это предварительно определенное количество, рассчитанное для достижения требуемого эффекта, т.е. для того, чтобы эффективно содействовать апоптозу или повысить чувствительность клетки к апоптозу, предпочтительно, путем устранения ингибирования ΙΑΡ апоптоза, более предпочтительно, путем ингибирования связывания ΙΑΡ с каспазой.
Миметики или пептидомиметики - это синтетические соединения, имеющие трехмерную структуру (т.е. мотив основного пептида), основанную на трехмерной структуре выбранного пептида. Пептидный мотив обеспечивает соединению миметика требуемую биологическую активность, т.е. связывание с ΙΑΡ, причем активность связывания соединения миметика по существу не снижается, и часто является такой же или большей, чем афинность к связыванию нативного пептида, на основании которого миметик был смоделирован. Например, у миметиков согласно настоящему изобретению нами было обнаружено, что Х3 и Х4 могут быть достаточно непохожими на пептид. Соединения пептидомиметика могут иметь дополнительные характеристики, расширяющие спектр их терапевтического применения, такие как повышенная клеточная проницаемость, большая афинность и/или авидность, а также более длительный период биологической полужизни.
Стратегии создания миметика, а конкретнее, пептидомиметика хорошо известны из уровня техники
- 10 012810 и могут быть легко адаптированы к настоящему изобретению (см., например, Рипка и Рич, Совр. мнен. в хим. биол. 2, 441-452, 1998; Хруби и др., Совр. мнен. в хим. биол. 1, 114-119, 1997; Хруби и Бэлс, Совр. мед. химия 9, 945-970,2000 (Шрка & Шек, Сигг. Ор. Скет. Βίοί. 2, 441-452, 1998; НгаЬу е! а1., Сигг. Ор. Скет. Βίοί. 1, 114-119, 1997; НгиЬу & Ва1ке, Сигг. Меб. Скет. 9, 945-970, 2000)). Один класс миметиков имитирует остов, полностью или частично не являющийся пептидом, однако имитирует пептидный остов атом за атомом и содержит боковые группы, которые аналогично имитируют функциональность боковых групп нативных аминокислотных остатков. Несколько типов химических связей, например, сложноэфирная, тиосложноэфирная, тиоамидная, ретроамидная, восстановленная карбонильная, диметиленовая и кетометиленовая связи известны из уровня техники как, в целом, полезные замены пептидных связей в построении протеаза-устойчивых пептидомиметиков. Другой класс пептидомиметиков включает малые непептидные молекулы, которые связываются с другим пептидом или белком, однако необязательно являются структурным миметиком нативного пептида. Еще один класс пептидомиметиков возник благодаря комбинаторной химии и созданию обширных химических библиотек. Они обычно включают новые шаблоны, которые, хотя структурно не связаны с нативными пептидами, обладают необходимыми функциональными группами, расположенными в непептидном каркасе, которые служат топографическими миметиками первоначального пептида (Рипка и Рич (Шрка & Шек), 1998, см. выше). Тетрапептидомиметики согласно изобретению относятся к типу, раскрытому и указанному в формуле изобретения патента США № 6992063 на имя Ши и др. (81ιί е! а1.).
В соответствии с настоящим изобретением было показано, что связывающиеся с ΙΑΡ пептиды или их миметики способны усиливать апоптоз клеток.
Миметики основных связывающихся с ΙΑΡ частей являются предпочтительными. Описанные здесь миметики в подходящем случае являются малыми, и поскольку структурные характеристики в отношении связывающегося с ΙΑΡ желобка хорошо охарактеризованы, можно синтезировать широкий спектр соединений миметиков. Дополнительные преимущества соединений этого размера включают улучшенную растворимость в водном растворе и простоту доставки к выбранным мишеням ίη νινο.
В одном варианте осуществления связывающиеся с ΙΑΡ пептиды согласно изобретению модифицируются с образованием пептидных миметиков путем замены одной или нескольких встречающихся в природе боковых цепочек из 20 генетически кодированных аминокислот или Ό аминокислот другими боковыми цепочками, например, группами, такими как алкил, низший алкил, циклический 4-, 5-, 6-, 7членный алкил, амид, амид низший алкил, амид ди(низший алкил), низший алкокси, гидрокси, карбокси и их низшие сложноэфирные производные, и 4-, 5-, 6-, 7-членными гетероциклами. Например, могут быть получены пролиновые аналоги, в которых размер кольца пролинового остатка изменяется от 5 членов до 4, 6 или 7 членов. Циклические группы могут быть насыщенными или ненасыщенными, и если они ненасыщенные - ароматическими или неароматическими. Гетероциклические группы могут содержать один или несколько гетероатомов азота, кислорода и/или серы. Примеры таких групп включают фуразанил, имидазолидинил, имидазолил, имидазолинил, изотиазолил, изоксазолил, морфолинил (например, морфолино), оксазолил, пиперазинил (например, 1-пиперазинил), пиперидил (например, 1пиперидил, пиперидино), пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолил, пиридазинил, пиридил, пиримидинил, пирролидинил (например, 1-пирролидинил), пирролинил, пирролил, тиадиазолил, тиазолил, тиенил, тиоморфолинил (например, тиоморфолино) и триазолил. Эти гетероциклические группы могут быть замещенными или незамещенными. Если группа является замещенной, заместителем может быть алкил, алкокси, галоген, кислород или замещенный или незамещенный фенил. Пептидомиметики могут также иметь аминокислотные остатки, химически модифицированные путем фосфорилирования, сульфонирования, биотинилирования или добавления или удаления этих частей.
Настоящее изобретение предлагает соединения, имитирующие третичную структуру связывания 8тае с ΙΑΡ или активность Ν-концевой части 8тае. В объем изобретения также входят стереоизомеры описанных здесь миметических соединений. Данное изобретение также предлагает способы использования этих миметиков для модулирования апоптоза, а также в терапевтических целях. Настоящее изобретение также предлагает промежуточные соединения и способы их применения для получения соединений, модулирующих апоптоз путем имитации третичной структуры связывания 8тае с ΙΑΡ или активности Ν-концевой части 8тае.
В соответствии с настоящим изобретением предлагаются соединения общей формулы (I):
- 11 012810
отличающиеся тем, что К1 и К2 независимо представляют собой Н, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил, ацетил, трифторацетил, алкил, необязательно замещенный алкил, или или
где К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или К5а и К5Ь независимо необязательно замещены гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8;
Кба и КбЬ независимо представляют собой Н, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил, ацетил, трифторацетил, алкил, низший алкил, необязательно замещенный алкил, или или
где К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфона мидо или амидино;
т и η независимо представляют собой 0, 1, 2 или 3;
X и Υ независимо представляют собой О, Ν, 8 или С=С;
К9а, К9Ь, К10а, К10Ь независимо представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, арил, гетероарил, необязательно замещенный арил, гетероарил, или К9а и К10а, независимо или параллельно с К9Ь и К10Ь, могут быть связаны 4-8 необязательно замещенными атомами, такими как С, Н, О или 8, с образованием ароматического или неароматического кольца;
Если \Уа и \УЬ ковалентно связаны, \Уа и \УЬ представляют собой связь, алкиленовую, алкенилено вую, алкиниленовую, арильную, арилалкиленовую, арилалкилалкиленовую, гетероарильную, гетероари
- 12 012810 лалкиленовую или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8; и К11а и К11Ь независимо отсутствуют или представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил; или К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода необязательно замещены Ν, О или 8.
Если \Уа и \УЬ не связаны ковалентно, \¥а и \УЬ независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, ΟΝ, СО2Н; и К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода необязательно замещены Ν, О или 8; или \Уа является Н, С1, Вг, Р, алкилом, С^ СО2Н, и \УЬ и К11а вместе представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, арилалкиленовую, арилалкилалкиленовую, гетероарильную, гетероарилалкиленовую или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8; и К11Ь отсутствует или представляет собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил.
Соединения, охватываемые настоящим изобретением, включают миметики 8тас и их промежуточные соединения. Настоящее изобретение включает стереоизомеры каждого из раскрытых соединений. В целом, соединения согласно настоящему изобретению включают тетрапептидные миметики 8тас, ковалентно связанные димеры тетрапептидных миметиков 8тас и ковалентно связанные гомодимеры тетрапептидных миметиков 8тас. Гомодимеры - это миметики, в которых по существу идентичные тетрапептидные миметики ковалентно связаны.
Приведенные ниже экспериментальные схемы используются для получения соединений, впервые раскрытых в РСТ публикации № \¥О 2004/007529, включенной сюда во всей своей полноте путем ссылки. Подходящие пептиды и пептидомиметики также описаны в заявке на патент США № 11/184503, поданной 15 июля 2005 г. Связывающиеся с ΙΑΡ соединения, основанной на предварительной заявке № 60/588050, поданной 15 июля 2004 г., раскрытия которых включены сюда путем ссылки во всей их полноте.
Аффинность к связыванию соединений согласно настоящему изобретению к ΧΙΑΡ определяли методом, описанным Николовска-Колеска З. и др. (№ко1отека-Со1е§ка, Ζ. скак) (Аналитическая биохимия (2004), том 332:261-273 (Аиа1у11са1 ВюсйетщБу (2004), νοί. 332:261-273)), используя различные флуорогенные субстраты, и выражалась в виде значений Кс. Вкратце, различные концентрации тестируемых пептидов смешивали с 5 нМ флуоресцентно меченого пептида (АЬиВРР-К(5-Рат)-МН2) и 40 нМ ΧΙΑΡΒΙΒ3 в течение 15 мин при комнатной температуре в 100 мкл 0,1М буфера фосфата калия, рН 7,5, содержащем 100 мкг/мл бычьего γ-глобулина. После инкубации значения поляризации (тР) измеряли У1с1ог2У, используя 485 нм активирующий фильтр и 520 нм эмиссионный фильтр. Значения 1С50 определяли по графику, используя нелинейный анализ методом наименьших квадратов с помощью СтарйРаб Ртщт. Описанные здесь соединения обеспечивают значения Кс в диапазоне: Кс<0,1 мкМ (А), Кс=0,1-1 мкМ (В), Ко=1-10 мкМ (С) и Кс>10 мкМ (О).
Схема Ι
2-(2-Бром-6-фтор-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (2):
ΝΒ8 (3,2 г, 17,9 ммоль) добавляли к раствору, содержащему 1 (5,4 г, 17,0 ммоль) в СС14 (50 мл). Гетерогенную реакционную смесь нагревали с обратным холодильником (80-85°С) в течение 2 ч. На этом этапе анализ ТСХ показал полное израсходование 1. [Анализ ТСХ, 4:1 гексан/ЕЮАс, ^,(8)=0^ В£(2)=0,5]. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды, а затем выливали на колонку с силикагелем. Продукт элюировали 10-15% Е1ОАс/гексана с получением 4,4 г (65%) 2 в виде белого твердого вещества.
- 13 012810
Ή ЯМР (ΌΜ8Ο, 300 МГц) δ 11,74 (δ, 1Н), 7,56 (т, 1Н), 7,02 (б, 1=9,3 Гц, 1Н), 6,88 (т, 1Н), 3,99 (т, 1Н), 3,22 (т, 2Н), 2,97 (т, 1Н), 2,58 (бб, 1= 13,5, 9,3 Гц, 1Н), 1,9-1,5 (4Н), 1,40 (δ, 9Н) частей на миллион.
1,4-Бис-[2-(6-фтор-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир] бензол (4):
Раствор, содержащий 2 (3,3 г, 8,3 ммоль), в толуоле (25 мл), ЕЮН (25 мл) и воде (1 мл) дегазировали под высоким вакуумом. К2СОз (4,5 г, 32,5 ммоль), 3 (0,97 г, 5,8 ммоль) и (РЬ3Р)4Рб (0,29 г, 0,25 ммоль) добавляли, и полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 5 ч. [Анализ ТСХ, 4:1 гексан/ЕЮАс, КД2) - 0,5; И(/4)=0.3|. Реакционную смесь фильтровали через короткий слой силикагеля и промывали 5% ЕЮАс/гексана. Фильтрат концентрировали и неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (20% ЕЮАс/гексан) с получением 3,0 г (98%) 4 в виде беловатого, высоко флуоресцентного твердого вещества.
Ή ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 8,6-8,4 (т, 2Н), 7,65 (т, 2Н), 7,57 (Ьг δ, 4Н), 7,05 (т, 2Н), 7,90 (т, 2Н), 4,22 (Ьг δ, 2Н), 3,4-3,1 (т, 6Н), 2,90 (т, 2Н), 1,8-1,3 (т, 26Н) частей на миллион.
Схема II
1,4-Бис-{2-[1-(2-ацетоксиэтил)-6-фтор-1Н-индол-3 -илметил] пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир}бензол (6):
К суспензии 60% №1Н (0,67 г, 17,0 ммоль) в безводном ΌΜΕ (10 мл) добавляли раствор 4 (3,0 г, 4,2 ммоль) в ΌΜΕ (10 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч, а затем вновь охлаждали до 0°С. Раствор, содержащий 5 (2,8 г, 16,8 ммоль) в ΌΜΡ (5 мл), добавляли в реакционную смесь и после добавления удаляли ледяную баню. Через 2 ч при температуре окружающей среды анализ ЬС/Μδ и ТСХ показал завершение расходования 4. [Анализ ТСХ, 4:1 гексан/ЕЮАс, К.{(4)=0,4; К((6)=0,8]. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли насыщенный водный ИН4С1. Продукт экстрагировали диэтиловым эфиром. Эфирные экстракты промывали водой, рассолом, сушили над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали НФВЭЖХ (силикагель, 10-100% ЕЮАс/гексан более 30 мин) с получением 1,4 г 6 в виде беловатого твердого вещества.
Ή ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 7,68 (т, 2Н), 7,54 (δ, 4Н), 7,12 (т, 2Н), 6,94 (т, 2Н), 4,25 (т, 4Н), 4,14 (т, 6Н), 3,4-3,1 (6Н), 2,60 (бб, 1=9,6, 13,8 Гц, 2Н), 1,90 (δ, 6Н), 1,83 (т, 2Н), 1,7-1,3 (т, 24Н) частей на миллион.
Схема III
Уксусной кислоты 2-(2-{4-[ 1 -(2-ацетоксиэтил)-6-фтор-3 -пирролидин-2-илметил-1Н-индол-2-ил]фенил}-6-фтор-3-пирролидин-2-илметилиндол-1-ил)сложный эфир (7):
Раствор, содержащий 6 (1,4 г, 1,58 ммоль) в ΟΓ’Μ (20 мл), охлаждали до 0°С. ТРА (5 мл) добавляли через пипетку, и реакции давали нагреться до температуры окружающей среды и следили за ней до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 6 (~2 ч). Анализ ТСХ, 10% ΜеΟΗ/^СΜ, Вг(6)=0,7; ^(/7)=0,2. Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток растворяли в ЕЮАс. Раствор ЕЮАс дважды промывали насыщенным водным ЫаНСО3 и один раз рассолом. Объединенные вод
- 14 012810 ные промывки вновь экстрагировали ЕЮАс и органические экстракты сушили над безводным Να2δΟ4, фильтровали и концентрировали с получением 1,2 г (кол.) 7 в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки.
1Н ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 8,05 (άά, 1=8,4, 5,4 Гц, 2Н), 7,56 (8, 4Н), 7,13 (άά, 1=9,9, 2,4 Гц, 2Н), 6,99 (т, 2Н), 4,60 (ά, 1=9,9 Гц, 2Н), 4,51 (т, 2Н), 4,26 (т, 4Н), 4,15 (т, 4Н), 3,63 (т, 2Н), 3,54 (т, 2Н), 3,5-3,3 (т, 4Н), 2,41 (т, 2Н), 1,89 (8, 6Н), 1,8-1,5 (т, 6Н), 1,43 (8, 18Н), 1,09 (8, 18Н) частей на миллион.
1,4-Бис-{уксусной кислоты 2-(3 -[ 1 -(2-трет-бутоксикарбониламино-3,3-диметилбутирил)пир- ролидин-2-илметил]-6-фториндол-1-ил)этил сложный эфир}бензол (8):
Раствор, содержащий Вос-Ь-трет-Ееи-ОН (0,82 г, 3,54 ммоль) и НАТи (1,41 г, 3,70 ммоль) в безводном ΝΜΡ (15 мл) охлаждали до 0°С. Через 15 мин шприцем добавляли Ν-метилморфолин (0,46 г, 0,5 мл, 4,54 ммоль). Через 15 мин добавляли раствор, содержащий 7 (1,10 г, 1,61 ммоль) в ЭСМ (10 мл), и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 16 ч. На этом этапе анализ ТСХ показал полное использование 7 [Анализ ТСХ, 2:1 гексан/ЕЮАс, К.г(4)=0,01; К.г(8)=0,8]. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и промывали один раз разбавленной водной НС1, пять раз водой для удаления избытка ΝΜΡ, один раз насыщенным водным №1НСО3, и рассолом, сушили над безводным №ьЗО4. фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали НФ-ВЭЖХ (силикагель, 10-100% ЕЮАс/гексан в течение 30 мин) с получением 1,3 г (73%) 8 в виде беловатого твердого вещества.
'Н ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,05 (άά, 1=5,4, 8,4 Гц, 2Н), 7,56 (8, 4Н), 7,11 (άά, 1=2,4, 9,9 Гц, 2Н), 6,98 (т, 2Н), 5,43 (ά, 1=9,9 Гц, 2Н), 4,51 (т, 2Н), 4,26 (т, 6Н), 4,17 (т, 6Н), 3,2-3,7 (т, 8Н), 2,41 (άά, 1=12,13 Гц, 2Н), 1,88 (8, 6Н), 1,7-1,5 (т, 4Н), 1,43 (8, 18Н), 1,04 (8, 18Н) частей на миллион.
Схема IV
Уксусной кислоты 2-{2-(4-{ 1-(2-ацетоксиэтил)-3-[1-(2-амино-3,3-диметилбутирил)пирролидин-2илметил]-6-фтор-1Н-индол-2-ил}фенил)-3-[1-(2-амино-3,3-диметилбутирил)пирролидин-2-илметил]-6фториндол-1-ил}этил сложный эфир (9):
Раствор, содержащий 8 (1,3 г, 1,17 ммоль) в ЭСМ (5 мл), охлаждали до 0°С. 20% ТРА в ЭСМ (25 мл) добавляли через пипетку, и реакции давали нагреться до температуры окружающей среды, и следили за ней до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 8 (~2 ч). Анализ ТСХ, 10% МеОН/ОСМ, Р((8)=0.7; Р((9)=0.3. Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток очищали ОФВЭЖХ (Способ: растворитель А: вода мас./0,1% об./об. НОАс, растворитель В: АСN мас./0,1% об./об. НОАс. Эупатах Мюго8ОгЬ С18 60А 8 μ, 41,4 мм х 25 см; поток: 40 мл/мин; датчик: 254 нм).
Содержащие продукт фракции собирали и нейтрализовали насыщенным водным №1НС.'О3. Продукт экстрагировали ЕЮАс, и органический экстракт промывали рассолом, сушили над безводным №ьЗО4. фильтровали и концентрировали с получением 0,80 г (75%) 9 в виде беловатого твердого вещества.
Ίί ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 8,09 (άά, 1=5,1, 8,7 Гц, 2Н), 7,51 (8, 4Н), 7,13 (т, 2Н), 7,0 (т, 2Н), 4,41 (т, 2Н), 4,25 (т, 4Н), 4,16 (т, 4Н), 3,6-3,0 (т, 6Н), 2,86 (т, 2Н), 2,39 (т, 2Н), 1,91 (8, 6Н), 1,8-1,4 (т, 12Н), 1,04 (8, 18Н) частей на миллион.
1,4-Бис-{уксусной кислоты 2-{ [3-(1-{2-[2-(трет-бутоксикарбонилметиламино)пропиониламино]3,3-диметилбутирил}пирролидин-2-илметил)-6-фториндол-1-ил]этил сложный эфир}бензол (10):
Раствор, содержащий Вос-Б-ММе)А1а-ОН (0,27 г, 1,32 ммоль) и НАТИ (0,54 г, 1,43 ммоль) в безводном NΜΡ (15 мл), охлаждали до 0°С. Через 15 мин шприцем добавляли Ν-метилморфолин (0,17 г, 0,2 мл, 1,68 ммоль). Через 15 мин добавляли раствор, содержащий 9 (0,50 г, 0,55 ммоль) в ЭСМ (10 мл), и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 16 ч. На этом этапе
- 15 012810 анализ ТСХ показал полное использование 9 [Анализ ТСХ, 3:2 гексан/ΕΐОΑс, К|(9)=0.01; Кг(10)=0,5]. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и промывали один раз разбавленной водной НС1, пять раз водой для удаления избытка ΝΜΡ, один раз насыщенным водным NаНСΟз и рассолом, сушили над безводным №128О4. фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали НФ-ВЭЖХ (силикагель, 10-100% ΕΐОΑс/гексан в течение 30 мин) с получением 0,64 г (91%) 10 в виде беловатого твердого вещества.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,05 (т, 2Н), 7,58 (Ьг 8, 4Н), 7,13 (т, 2Н), 6,97 (т, 2Н), 4,75 (т, 2Н), 4,60 (б, 1=9,3 Гц, 2Н), 4,50 (т, 2Н), 4,25 (т, 4Н), 4,16 (т, 4Н), 3,70 (т, 2Н), 3,57 (т, 2Н), 3,5-3,2 (т, 4Н), 2,85 (Ьг 8, 6Н), 2,42 (т, 2Н), 1,88 (8, 6Н), 1,8-1,4 (т, 8Н), 1,52 (8, 18Н), 1,33 (т, 6Н), 1,04 (Ьг 8, 18Н) частей на миллион.
Схема V
1.4- Бис-{уксусной кислоты 2-(3-{ 1-[3,3-диметил-2-(2-метиламинопропиониламино)бутирил]- пирролидин-2-илметил}-6-фториндол-1-ил)этил сложный эфир}бензол (11):
Раствор, содержащий 10 (0,64 г, 0,5 ммоль) в ЭСМ (20 мл), охлаждали до 0°С. ΤΕΑ (5 мл) добавляли через пипетку, и реакции давали нагреться до температуры окружающей среды, и следили за ней до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 10 (~2 ч). Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток очищали ОФ-ВЭЖХ (способ: растворитель А: вода мас./0,1% об./об. НОАс, растворитель В: ΑСN мас./0,1% об./об. НОАс. Эу патах Мкго8огЬ С 60А 8 μ 41,4 ммх25 см; поток: 40 мл/мин; датчик: 254 нм). Содержащие продукт фракции собирали и нейтрализовали насыщенным водным NаНСО4. Продукт экстрагировали ЕЮЛс, и органический экстракт промывали рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 0,50 г (93%) 11 в виде беловатого твердого вещества.
Ή ЯМР (СБС13, 300 МГц) δ 8,04 (т, 2Н), 7,83 (б, 1= 9,3 Гц, 2Н), 7,55 (т, 4Н), 7,12 (т, 2Н), 6,99 (т, 2Н), 4,60 (б, 1= 9,3 Гц, 2Н), 4,57 (т, 2Н), 4,24 (т, 4Н), 3,73 (т, 2Н), 3,55 (т, 2Н), 3,41 (т, 2Н), 3,30 (т, 2Н), 3,08 (т, 2Н), 2,40 (8, 6Н), 2,38 (т, 2Н), 1,87 (8, 6Н), 1,8-1,3 (т, 16Н), 1,04 (Ьг 8, 18Н) частей на миллион.
1.4- Бис-{№(1-{2-[6-фтор-1-(2-гидроксиэтил)-1Н-индол-3-илметил]пирролидин-1-карбонил}-2,2диметилпропил)-2-метиламинопропионамид}бензол (12):
Водный №1ОН (1М, 5 мл, избыток) добавляли при 0°С к раствору, содержащему 11 (0,48 г, 0,44 ммоль) в МеОН (5 мл). После добавления ледяную баню удаляли, а реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли водой/ΕΐОΑс, и слои разделяли. Органическую фазу промывали рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали ОФ-ВЭЖХ (способ: растворитель А: вода мас./0,1% об./об. НОАс, растворитель В: ΑСN мас./0,1% об./об. НОΑс. Эуиатах Мюго8огЬ С18 60А 8 μ, 41,4 ммх25 см; поток: 40 мл/мин; датчик: 254 нм). Содержащие продукт фракции собирали, замораживали и лиофилизировали с получением 0,19 г 12 в виде хлопьевидного, белого твердого вещества. 'Н ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ частей на миллион.
13С ЯМР (СОС13, 75 МГц) δ 7,8-7,4 (т, 8Н), 7,11 (т, 2Н), 6,95 (т, 2Н), 4,57 (б, 1=9,3 Гц, 2Н), 4,4-4,0 (т, 6Н), 3,8-3,4 (т, 8Н), 3,2-3,0 (т, 3Н), 2,6-2,4 (т, 14Н), 2,38 (т, 6Н), 2,2-1,5 (т, 12Н), 1,29 (б, 1= 6,9 Гц, 6Н), 1,00 (8, 18Н) частей на миллион.
- 16 012810
Примеры
Пример 1.
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое коль цо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
где К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, в некоторых случаях, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 212 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфона мидо или амидино;
X и Υ независимо представляют собой О, Ν, 8 или С=С;
К11а и К11Ь отсутствуют или независимо представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил; или К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
\Уа и \УЬ вместе представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, гетероарильную или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8.
- 17 012810
ί и V л я я ё 4« а К я ί а ί ί и 2 «1 * Δ * я 3 А г л А Ё Л 2 3 (*ϊ г я* 3 1 £ |
в 5-Мс *У-1Рг (У о о па 1,4-фенпл н н 3-ίΡτ З-Ме Я в и и А
2 и З-Ме •У-ίΡι* о о пя транс- (СН=€П) н н •Γ-ϊΡγ 5-Ме я н я я А
3 н З-Ме 3-1Рг 3 о о па СН1СН3 н II 3-ΙΡτ З-Ме я я я я А
4 н рУ-Мс 3-1Рг 3 0 о ла 1,4-фенкл я я 54Рг Я я я я я А
6 н 5-Ме ρΪ-ιΡγ 5 N N N11 1,4‘феннл я II 5-ϊΓγ З-Ме я и н я А
7 н З-Ме 3-(Ви 3 О о па 1,4-феннл н н 3-ΙΒ· З-Ме н н н н А
я № 5-Ме З-Шв 5 0 о па 13'фснвл Ή я З-Шв З-Ме Ме я я я А
9 и 5-Εΐ £-1Ви 3 о о па 1^4-фенкл Я н У-ίΒβ Я я я и В
14 Мс З-Ме 3-1Рг 3 0 о па 1,4-феннл Я я 5ιΡγ -8Ме Ме я я я А
11 ТТ о. « шυ-ιτι ст и Л V Л V а 1>4*фСцлЛ и и .У4РГ <Г 17* ОЫ1 и я к я А
11 и З-Ме 5-сН.ех 3 0 о па 1^4-фенил Я И еУ- «Нех 5-Ме Я я п 11 А
13 Ме З-Ме 3-еНет 3 о о па 1,4-феамл н н еУ- сНсх 5тМе Ме я я н А
14 н 5-ΕΙ 5-сНех £ о о па 1,4-февкл я п 5- сИех 3-ΕΙ Я я я я В
15 Ме йУ-Ме 3-(21ЕЮН) 0 о па 1,4-фенял и я 3421 -ЕЮ) еУ-Ме Ме я я я А
16 Ме З-Ме .У-1Рг |У N N Я М-фенил и я 3-И*г З-Ме Ме я Р я А
17 я 5*-Ме -5-ΙΡγ N N II 24твпфенвл я я 5-1Рг ί-Ме Я я Р я А
1Я Ме 5-Ме 5-сНех 5 N N Н 24- тнпфенвл я н 3- еИех У-Ме Ме я Р я А
19 И З-Ме 5ЧНех 3 N N в М-фсннл я я Я- сНех З-Ме и н Г и А
20 Ме 5-Ме 5-гНех * N N в 1Л-февнл в я 3- З-Ме Ме в Р я А
- 18 012810
сНех
21 Ме З-Ме ЗМРг Я N N и 1,4-феннл Л- О Н X- ο Η ЗМРг З'-Ме Мс И я н в
22 Ме З-Ме 3-«Ви в N N п 1,4-фепил Xо н Яο Η ί-ίΒπ 5-Ме Ме н н и в
23 Ме З'-Ме ЗМРг ί N N н 1,4-фС1ЕЯЛ я Η 3-1Ρτ З'-Ме Ме г и н А
24 Ме ί-Ме ί-Ши я N N н 1,4-фенил ίο н ί- ο Η 3-(Β» З'-Ме Ме н Ή в А
25 Ме З-Ме &42Я- ЕЮВ) я N N н 1,4*ф£нвл Ή Η ί-(2Χ- ЕЮВ η) ί-Ме Ме н Е н А
26 Ме 5-Ме ί-(2Χ- ЕГОН) 3 N N н 1,4-феивл я Η 34Μ- ΕίΟΒ η) З-Ме Ме н Е н Λ
27 Мс З'-Ме 3-(23ЕЮН) ί N N и 1,4-фен ил Ή Η 3-(23- ΕίΟ) З-Ме Ме и Е II А
28 Ме ί-Ме ЛЧ2Я- ЕЮН) Л N N 11 1,4-феннл ί- ο Η 3ο Η ί-(2ΧЕЮ) З-Ме Ме н Е н А
2» Ме ί-Ме ί-ιΡΓ Л N N н 1^4-февнл ίο Η ί- ο Η ί-ί₽Γ ί-Ме Ме в Е п А
30 Ме ί-Ме ί-ΣΒιι Л N N н 1,4-февнл ί- ο Η д ο ν» ! _____ί ί-Ши З-Ме Ме в Г я А
31 Ме 5-Ме 3-(23- ЕЮН) 5 N N н 1,4-феянл Η Η ИМЕЮ) З-Ме Ме в Г в А
32 Ме З'-Ме ί-(2Λ- ΕίΟΗ) ί N N н 1,4-феннл Η Η ί-(2ί- ЕЮВ η) З'-Ме Ме II Р II А
33 Ме З-Ме 3423ЕЮВ) 5 N N н 1,4-феннл Η Η 3-(23- ЕЮВ ·) З-Ме Ме я г я А
34 Ме З-Ме ί-ΐΒιι Я N N я 1,4-феннл ί- ο ί- ο 3-»Β. З-Ме Ме и я в А
- 19 012810
- 20 012810
ОН
4? Ме 5-Ме 5-1Ви 8 N N СН1 СНх ОАс 1,4-феннл Н н 5-Ши 8-Ме Ме н Е а А
50 Ме 5-Ме 5Ч2Я- ЕЮН) 5 N N СН, СНг ОМе 1,4-феннл Н н 5-(2Я- ЕЮ) 5-Ме Ме н Р н А
51 Ме 5-Ме 5-Ши 5 N N СН, СН, ОМе 1,4-феннл Н н 5-Ши 5-Ме Ме н Е н А
52 Ме 5-Ме 5-1Рг 5 N N СН, СН, ОМе 1,4-фенил н н 8-ίΡτ 5-Ме Ме н Р И А
53 Ы 5-Ме 5-1Рг 5 N N СН, СН, ОМе 1,4-феннл я н 8->Рт 5-Ме Н н Р н А
54 Ме 5-Ме 5-Ши 5 N N СН, сн2 он 1,4-фенил и н 5-Ши 5-Ме Ме г н н А
55 Ме 5-Ме 8-1Рг 5 N N СН, сн, он 1,4-феннл н н 5-1РГ 5-Ме Ме Е н н А
56 Ме 5-Ме 5-(2Я- ЕЮН) 8 N N сн, СИ, он 1,4-фенвд н н 5-(2Я- ЕЮ) 5-Ме М* г н н А
57 Ме 5-Ме 5-1Рг 5 N N Ме 1.4’фенял н н 5-ϊΡτ 5-Ме Ме н г н А
58 Ме 5-Ме 5-(2Я- ЕЮН) 5 N —1 N Ме 1,4-феняд н н 8-(2Я- Е(О) 5-Ме Ме н Е н А
55 Ме 5-Ме 5-Ши 5 N N Ме 1,4-феннл н н 5-ίΒα Х-Ме Ме н Р Ή А
60 Ме Я-Ме Я-Ши Я N N СН- СКг ОН 1,4-феннл н н Я-1Ви к- Ме Ме н г н С
61 Н Я-Ме Я-ΪΡϊ я О О па М-феяил н н Я-1Рг Л- Ме Н н И н β
Дополнительные примеры:
- 21 012810
Пример 2.
Где К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
где К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, в некоторых случаях, К5а и К5Ь соединены алкиленом, алкениленом, алкиниленом с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино;
X и Υ независимо представляют собой О, Ν, 8 или С=С;
К11а и К11Ь независимо отсутствуют или представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил; или К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
\Уа и \УЬ вместе представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, гетероарильную или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8.
г ф и а а <1> а в а £ а а £ Стер еокин. в позиции X *ч и £ г X г X £ X £ X £ К12 Л ч* в я 5 а X ф я
62 н н 5-1Гг 5 О О па 1,4фен ил н н X- ΪΡ г н н н н н в
62 н н Χ-ΙΒιι 5 N N СН; СНг ОН 1.4феи ил н н X1В и И н н ₽ н в
63 н Ме 5-Ши X N N СН; снг ОАс 1,4фен ил н н 5- 1В и Ме н н н в
Дополнительные примеры:
- 22 012810
Пример 3.
Е7а и Е7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или Е8а и Е7а и Е8Ь и Е7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
Е8а и Е8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или Е8а и Е7а и Е8Ь и Е7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
Е5а и Е5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, в некоторых случаях, Е5а и Е5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 212 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8;
Е12а, Е12Ь, Е13а, Е13Ь, Е14а и Е14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Е, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
Е3а и Е3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино;
X является О, Ν, 8 или С=С;
Е11а и Ε11Ь независимо отсутствуют или представляют собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил; или К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
\Уа и \УЬ вместе представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, гетероарильную или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8.
3 е О 4> & Я V 9 Я а § Я 2 л £ «X ί и ε £ я ί = 5 5 * Й « С X а 1-1 2 ί 3 £ Λ 1 л £ еч 2 ΙΓ. —ч £ ’ЧГ ев Е 1¾ а 9 С Я.......
64 Ме 5- Ме 5ίΡτ 5 N СН2С НгОАс 1,4феннл н н 5- 1Рг 5- Ме Ме н к н Л.
63 Н и 5- ίΡι 5 N СН2С Н2ОАс 1,4фен нл и и 5- |Рг н Н н Р н в
66 Ме 5- Ме 5ΐΒ и 5 N СН2С Н2ОАс 1,4фенил н н $. (Ви 5Ме Ме н 1 н А
67 Ме 5- Ме 5- 1Рг 5 N СН2С Н2ОН 1,4фенил и н 5- 1Рг 5- Ме Ме н г н А
68 Н Н 5- (Рг 5 N снлс Н2ОН фенил н н 5- 1Рг Н Н н Г н С
69 Ме 5- Ме 5- (В и 5 N €1ЬС н2он 1,4фен ил н н 5- 1Ви 5- Ме Ме н Е н А
70 Ме Я- Ме 5- 1Рг 5 N сн2с НгОАс 1.4фенил н н 5- 1Рг Я- Ме Ме и Е н А
71 Ме Я- Ме 5- ίΒ и ί N СН2С Н2ОН 14фен ил и и 5- 1Ви Я- Ме Ме н г Ή В
- 23 012810
См.: Масог, I. Е.; В1апк, Ό. Η.; Ροδί, Κ. I.; Вуап, К. Τеΐ^айеά^οη Ьей. 1992, 55(52), 8011-8014. 2-(2-Этоксикарбонилвинил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (14):
В 2 л 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную верхней мешалкой и впускным отверстием для азота, загрузили раствор оксалилхлорида (130 мл г, 0,26 моль) в ЭСМ (250 мл). Раствор охлаждали до -78°С. Раствор ΌΜ8Ο (20 мл, 0,28 моль) в ЭСМ (30 мл) добавляли по каплям. Через 30 мин по каплям добавляли раствор спирта 13 (40 г, 0,20 моль) в ЭСМ (200 мл). Через 30 мин в раствор добавляли ΤΕΑ (140 мл, 1,00 моль). Раствор переносили в ледяную/водную баню (0°С) и перемешивание продолжали 30 мин [Обратите внимание: реакционная смесь - белая густая суспензия]. Анализ ТСХ показал отсутствие исходного материала [1:1 гексан/ΕΐΟΑс, ΚΓ(13)=0,4; ВГ(альдегид)=0,6]. Реакционную смесь разбавляли ЭСМ (200 мл) и промывали последовательно Η2Ο, 1М НС1, насыщенным NаΗСΟз и рассолом. Слой ЭСМ сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного 2-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложного эфира (40 г) в виде масла, которое использовали без дальнейшей очистки.
Ή ЯМР (СБС1з, 300 МГц) δ 9,50 (а, 1=24 Гц, 1Н), 4,20-4,03 (т, 1Н), 3,60-3,40 (т, 2Н), 2,20-1,87 (т, 4Н), 1,43 (δ, 9Н) частей на миллион.
В 2 л 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную верхней мешалкой и впускным отверстием для азота, загрузили NаΗ (60%, 10,0 г, 0,25 моль) и безводный ΤΗΡ (200 мл). К перемешиваемой смеси медленно добавляли триэтилфосфоноацетат (53,8 г, 0,24 моль) в течение 20 мин. По каплям добавляли раствор неочищенного 2-формил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (40 г, 0,20 моль) в ΤΗΡ (75 мл). Раствор приобрел оранжевый цвет, и перемешивание продолжали в течение 1 ч, пока анализ ТСХ не показал отсутствие оставшегося альдегида [1:1 гексан/ΕΐΟΑс, ВГ(альдегид)=0,6; ΚΓ(14)=0,8]. Раствор разбавляли ΕΐΟΑс и рассолом, и слои разделяли. Слой ΕΐΟΑс промывали 1М НС1, рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 14 (67 г) в виде желтого масла, которое использовали без дальнейшей очистки.
Ή ЯМР (СБС1з, 300 МГц) δ 6,92-6,76 (т, 1Н), 5,82 (ά, 1Н), 4,56-4,32 (т, 1Н), 4,25-4,12 (т, 2Н), 3,483,27 (т, 2Н), 2,20-1,98 (т, 1Н), 1,91-1,72 (т, 2Н), 1,43 (δ, 9Н), 1,25 (ί, 3Н) частей на миллион.
2-(3-Гидроксипропенил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (15):
В 2 л 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную верхней мешалкой, загрузили 14 (67 г, 0,20 моль) и ЭСМ (400 мл). Раствор охлаждали до -78°С. В этот раствор медленно добавляли бора трифторидэтерат (30 мл, 0,20 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. ΟΚΑΕ (1М в ЭСМ, 600 мл, 0,6 моль) добавляли с умеренной скоростью. Раствор перемешивали при -78°С в течение 2 ч, а затем обрабатывали ΕΐΟΑс (100 мл) в течение 30 мин для удаления оставшегося реагента. Реакционной смеси дали нагреться до -5°С. Реакционную смесь ОСТОРОЖНО гасили, добавляя по каплям 1М НС1. Реакционную смесь разбавляли ЭСМ и Н2О и сделали кислотной для растворения солей алюминия. Слои разделяли, и органическую фазу промывали последовательно разбавленной водной НС1, водой и рассолом. Слой ЭСМ сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (8ίΟ2, 2580% ΕΐΟΑс/гексан) с получением 15 в виде желтого масла (36 г, 79%). [Анализ ТСХ, 14:1 гексан/ΕΐΟΑс, ΚΓ(14)=0,8; ΚΓ(15)=0,2].
Ή ЯМР (СБС1з, 300 МГц) δ 5,73-5,52 (т, 2Н), 4,39-4,16 (т, 1Н), 4,15-4,04 (т, 2Н), 3,46-3,25 (т, 2Н), 2,92 (Ьг δ, 1Н), 2,08-1,93 (т, 1Н), 1,92-1,79 (т, 2Н), 1,78-1,62 (т, 1Н), 1,42 (δ, 9Н) частей на миллион.
транс-28-(3-Метансульфонилоксипропенил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (16):
В раствор 15 (19 г, 84 ммоль) в ЭСМ (100 мл) добавляли триэтиламин (10 г, 13,9 мл, 100 ммоль). Раствор охлаждали до 0°С, и добавляли по каплям метансульфонилхлорид (9,6 г, 6,5 мл, 84 ммоль) в ЭСМ (20 мл). Через 1 ч анализ ТСХ показал полное использование 15 [1:1 гексан/ΕΐΟΑс, ΚΓ(15)=0,2; ΚΓ(16)=0,6]. Добавляли рассол, и продукт экстрагировали ЭСМ (3x50 мл). Органические экстракты объединяли и промывали 1 Ν НС1, водой, рассолом, сушили над безводным Νη28Ο4, фильтровали и концентрировали с получением 21,4 г 16, которое использовали без очистки.
Ή ЯМР (ΟΌΟ13, 300 МГц) δ 4,4-4,0 (т, 2Н), 3,42-3,21 (т, 3Н), 3,0 (δ, 3Н), 2,00-1,6 (т, 4Н), 1,42 (δ, 9Н) частей на миллион.
- 24 012810
2-{3-[Ацетил-(2-бром-5-фторфенил)амино]пропенил}пирролидин-1-карбоновой кислоты третбутил сложный эфир (18):
К суспензии б0% №Н (9,2 г, 0,23 моль) в безводном ΌΜΕ (150 мл) при 0°С добавляли 2-бром-5фторацетанилид (17, 53,4 г, 0,23 моль) малыми порциями. Через 1 ч раствор неочищенного мезилата 1б (приблиз. 0,19 моль) в ΌΜΡ (20 мл) добавляли по каплям через воронку для добавления. Реакционной смеси дали нагреваться до температуры окружающей среды на протяжении ночи. Реакционную смесь повторно охлаждали до 0°С и осторожно гасили путем добавления рассола и нейтрализовали путем добавления разбавленной водной НС1 до рН=7. Смесь разбавляли диэтиловым эфиром и водой, и слои разделяли. Органическую фазу промывали несколько раз водой, чтобы удалить ΌΜΕ, а затем промывали рассолом, сушили над безводным №ь8О4. фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (0,5-2% МеОН/ΏΟΜ) с получением бб г 18 в виде масла. [Анализ ТСХ, 1:1 гексан/ЕЮАс, К(1б)=0,5; К(17)=0,б; К(18)=0,4].
'Н ЯМР (ΟΌΟ13, 300 МГц) δ 7,б4 (т, 1Н), 7,01 (т, 2Н), 5,52 (т, 1Н), 5,39 (приблизительно άά, 1=б,0, 15,3 Гц, 1Н), 4,77 (приблизительно άά, 1=4,5, 13,8 Гц, 1Н), 4,24 (т, 1Н), 3,б7 (приблизительно άά, 1= 7,5, 13,8 Гц, 1Н), 3,32 (т, 2Н), 1,90 (т, 1Н), 1,81 (т, 3Н), 1,75 (т, 2Н), 1,57 (т, 1Н), 1,43 (т, 9Н) частей на миллион.
2-(1-Ацетил-б-фтор-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (19):
В атмосфере азота раствор 18 (бб г, 0,15 моль) в безводном ΌΜΕ (350 мл) загружали (η-Βυ)4ΝΟ1 (41,5 г, 0,15 моль), К2СО3 (20,б г, 0,15 моль), ΝπΠΟ02 (10,2 г, 0,15 моль) и Рй(ОАс)2 (3,35 г, 0,015 моль) при температуре окружающей среды. Гетерогенную смесь погрузили в предварительно нагретую (85°С) масляную баню. Через 1 ч анализ ТСХ показал некоторое оставшееся количество 18, после чего добавили еще катализатор (1 г). Через 1,5 ч добавили еще одну порцию катализатора (0,б г). После дополнительных 1,5 ч нагревания 18 был полностью израсходован согласно анализу ТСХ [Анализ ТСХ, 2% ΜеОН/^СΜ, Кг(18)=0,7; К|(19)=0,8|. Теплую реакционную смесь переносили в водно-ледяную баню для охлаждения, а затем разбавляли диэтиловым эфиром и фильтровали через слой целита. Твердые вещества промывали диэтиловым эфиром, а фильтрат промывали несколько раз водой для удаления ΌΜΡ, а затем один раз рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 52,5 г неочищенного 19, который использовали без дальнейшей очистки.
'|| ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,18 (т, 1Н), 7,б0 (т, 1Н), 7,18 (т, 1Н), 7,05 (άΐ, 1=2,4, 8,7 Гц, 1Н), 4,13 (т, 1Н), 3,41 (т, 1Н), 3,33 (т, 2Н), 3,17 (приблизительно άά, 7=14,1, 38,1 Гц, 1Н), 2,б1 (8, 3Н), 1,83 (т, 3Н), 1,б9 (т, 1Н), 1,49 (8, 9Н) частей на миллион.
2-(б-Фтор-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (20):
Раствор, содержащий неочищенный 19 (48 г) в МеОН класса реактива (480 мл), охлаждали до 0°С. Водный №1ОН (1Μ, 144 мл) добавляли одной порцией. Через 30 мин анализ ТСХ показал полное расходование исходного материала [Анализ ТСХ, 3:2 гексан/ЕЮАс, К(19)=0,7; КХ20)=0,8]. Реакционную смесь нейтрализовали 1 Ν НС1, и продукт экстрагировали ЭСМ. Экстракты ЭСМ промывали водой, рассолом, сушили над безводным №ь8О+ фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт собирали на 200 мл силикагеля и проводили хроматографию (80-б5% гексан/ЕЮАс) с получением 31,7 г 20 в виде густого масла.
'Н ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,11 (Ьг 8, 1Н), 7,б5-7,57 (т, 1Н), 7,04 (т, 1Н), б,9б (8, 1Н), б,87 (ΐ, 1=2,8 Гц, 1Н), 4,1б-4,09 (т, 1Н), 3,45-3,14 (т, 3Н), 2,7б-2,б3 (т, 1Н), 1,75 (Ьг 8, 4Н), 1,58 (8, 9Н) частей на миллион.
- 25 012810
2-{1-[2-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)этил]-6-фтор-1Н-индол-3 -илметил}пирролидин-1карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (22):
В атмосфере азота добавляли раствор 20 (3,0 г, 9,42 ммоль) в безводном ΌΜΡ (40 мл) через воронку для добавления в смесь 60% ΝαΗ (0,45 г, 11,3 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) при 0°С. Через 1 ч шприцом добавляли бромид 21 (2,47 г, 2,22 мл, 10,3 ммоль) в ΌΜΡ (5 мл). Через 30 мин реакционную смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали еще 30 мин. Реакцию гасили путем добавления насыщенного водного ΝΗ.·|ί.Ί и разбавляли водой. Продукт экстрагировали диэтиловым эфиром, и объединенные эфирные экстракты промывали несколько раз водой для удаления ΌΜΡ, рассолом, сушили над безводным №28О+ фильтровали и концентрировали с получением 4,49 г (кол.) 22 в виде желтого масла, которое использовали без дальнейшей очистки. Анализ ТСХ [3:1 гексан/ЕЮЛс, ^,(20)=0.4: В((22)=0.7|.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 7,68 (т, 1Н), 7,12 (б, 4=3,3 Гц, 1Н), 7,03 (8, 1Н), 6,98 (ί, 1=3,2 Гц, 1Н), 4,26-4,23 (т, 3Н), 4,05-3,99 (т, 2Н), 3,55-3,27 (т, 3Н), 2,75 (т, 1Н), 1,88 (Ьг 8, 4Н), 1,67 (8, 9Н), 1,33 (т, 1Н), 1,06-1,00 (т, 3Н), 0,95 (8, 9Н), 0,23-0,14 (т, 2Н) частей на миллион.
2-[6-Фтор-1 -(2-гидроксиэтил)-1Н-индол-3 -илметил]пирролидин-1 -карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (23):
Раствор, содержащий 22 (4,49 г, 9,42 ммоль) в безводном ТНР (50 мл), охлаждали до 0°С. Тетра-пбутиламмонийфторид (1Μ в ТНР, 14 мл, 14 ммоль) добавляли шприцом. Через 1 ч реакция завершалась согласно анализу ТСХ [3:1 гексан/ЕЮЛс, К{(22)=0,7; К{(23)=0,1], поэтому разбавляли ЕЮЛс. Раствор ЕЮЛс дважды промывали 1М НС1, водой, рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 3,9 г 23 (>100%; загрязненного некоторыми ТВ8-содержащими примесями) в виде желто-коричневого масла, которое использовали без дальнейшей очистки.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 7,59 (Ьг 8, 1Н), 7,01-6,85 (т, 3Н), 4,19-4,10 (т, 3Н), 3,90 (Ьг 8, 2Н), 3,383,31 (т, 2Н), 3,15 (бб, 1= 1,4, 4,6 Гц, 1Н), 2,68 (т, 1Н), 1,79-1,72 (т, 4Н), 1,47 (б, 1= 10,9 Гц, 9Н) частей на миллион.
2-{6-Фтор-1-[2-(толуол-4-сульфонилокси)этил]-1Н-индол-3-илметил}пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир (12):
Триэтиламин (1,13 г, 1,56 мл, 11,2 ммоль) добавляли к раствору 23 (3,4 г, 9,38 ммоль) в безводном ΩΟΜ (50 мл) при 0°С, а затем добавляли р-Т8С1 (1,79 г, 9,38 ммоль) и ΌΜΆΡ (0,12 г, 0,94 ммоль). Через 30 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. По завершении расходования 23 (~30 мин при температуре окружающей среды) реакционную смесь разбавляли Οί’Μ и промывали два раза 1М НС1, рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный тозилат очищали флэш-хроматографией на силикагеле (3:1 гексан/ЕЮЛс) с получением 3,67 г (76%) 24 в виде белой пены, которая была гомогенной согласно анализу ТСХ [3:1 гексан/ЕЮЛс, КХ23)=0,1; Кг(24)=0,3].
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 7,64-7,45 (т, 3Н), 7,11 (ί, 1=2,5 Гц, 2Н), 6,85 (бб, 1=0,8, 3,3 Гц, 1Н), 6,79 (8, 1Н), 6,73 (ί, 1=3,6 Гц, 1Н), 4,25 (8, 4Н), 4,08 (Ьг 8, 1Н), 3,34 (Ьг б, 1=9,6 Гц, 2Н), 3,20-3,09 (т, 1Н), 2,642,57 (т, 1Н), 2,36 (8, 1Н), 1,75 (Ьг 8, 4Н), 1,53 (8, 9Н) частей на миллион.
Схема IX
- 26 012810
1.2- Бис[2-(6-фтор-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутил сложный эфир]этан (25):
К суспензии 60% ΝηΗ (0,34 г, 8,50 ммоль) в безводном ΌΜΕ (20 мл) при 0°С добавляли раствор 20 (2,47 г, 7,75 ммоль) в ΌΜΕ (30 мл) через воронку для добавления. Через 1 ч реакционную смесь переносили в -40°С баню ХСХсухой лед). При -40°С раствор тозилата 24 (3,65 г, 7,06 ммоль) в ΌΜΕ (20 мл) добавляли в холодный анионный раствор через воронку для добавления. Через 30 мин согласно анализу ТСХ наблюдали только исходные материалы, поэтому медленно нагревали до 0°С в течение 2 ч. Через 23 ч при 0°С реакцию гасили путем добавления насыщенного водного ΝΗ4ί.Ί. Смесь разбавляли диэтиловым эфиром и водой, и слои разделяли. Эфирный слой промывали несколько раз водой, чтобы удалить ΌΜΕ, а затем один раз рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали ВЭЖХ с нормальной фазой (10-100% ΕΐОΑс/гексан в течение 30 мин) с получением 3,27 г (70%) 25 в виде белой пены, которая была гомогенной согласно анализу ТСХ [3:1 гексан/ΕΐОΑс (два проявления), К{(20)=0,8; Кг(24)=0,55; К{(25)=0,5].
'|| ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 7,61-7,52 (т, 1Н), 6,82 (ΐ, 1=9,6 Гц, 1Н), 6,68-6,61 (т, 1Н), 6,48-6,46 (т, 1Н), 4,34 (8, 2Н), 3,93 (т, 1Н), 3,34-3,26 (т, 2Н), 3,17-3,01 (т, 1Н), 2,05 (т, 1Н), 1,70-1,58 (т, 4Н), 1,50 (8, 9Н) частей на миллион.
1.2- бис[2-(6-Фтор-1Н-индол-3 -илметил)пирролидин]этан (26):
Трифторуксусную кислоту (2 мл) добавляли при 0°С к раствору, содержащему 25 (3,27 г, 4,93 ммоль) в ЭСМ (10 мл). Через 3 ч добавляли еще одну порцию ΊΈΑ (2 мл), и реакция завершалась в пределах 1 ч. Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток растворяли в ЭСМ и дважды промывали насыщенным водным NаНСОз, один раз рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 26 в виде желтой пены, которую использовали без дальнейшей очистки.
'|| ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 7,31 (άά, 1=5,1, 8,7 Гц, 1Н), 6,92 (8, 1Н), 6,77 (άάά, 1=2,4, 9,6, 11,1 Гц, 1Н), 6,44 (άά, 1=2,4, 9,9 Гц, 1Н), 4,41 (8, 2Н), 3,65-3,55 (т, 1Н), 3,24-3,16 (т, 1Н), 3,01-2,96 (т, 1Н), 2,92 (ά, 1=7,8 Гц, 2Н), 2,15-1,99 (т, 1Н), 1,96-1,84 (т, 2Н), 1,76-1,67 (т, 1Н) частей на миллион.
1.2- Бис{2,2,2-трифтор-1-[2-(6-фтор-1Н-индол-3 -илметил)пирролидин-1-ил]этанон}этан (27):
При 0°С ΊΕΑΑ (2,17 г, 1,44 мл, 10,3 ммоль) добавляли в раствор, содержащий 26 (2,28 г, 4,93 ммоль; на основании теоретического выхода на предыдущем этапе) и ΊΕΑ (2,49 г, 3,43 мл, 24,6 ммоль) в ΩΕΜ (50 мл). Через 30 мин реакционную смесь разбавляли ^СΜ и дважды промывали насыщенным водным NаНСОз, один раз рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (4:1-1:1 гексан/ΕΐОΑс) с получением 2,66 г (82%, 2 этапа) 27, который был гомогенным согласно анализу ТСХ [2:1 гексан/ΕίОΑс, Кг(26)=0,01; Κί(27)=0,5].
'Н ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 7,70 (άά, 1=5,4, 9,0 Гц, 1Н), 6,84 (άάά, 1=1,8, 9,3, 10,5 Гц, 1Н), 6,62 (άά, 1= 1,8, 10,2 Гц, 1Н), 6,44 (8, 1Н), 4,36 (8, 2Н), 4,29-4,28 (т, 1Н), 3,60 (приблизительно ΐ, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,23 (άά, 1=2,4, 14,1 Гц, 1Н), 2,51 (άά, 1=9,9, 14,1 Гц, 1Н), 1,92-1,84 (т, 2Н), 1,72-1,66 (т, 1Н), 1,57-1,56 (т, 1Н) частей на миллион.
Схема Χ р
1-(2-{3,10-Дифтор-14-[1-(2,2,2-1рифторацетил)пирролидин-2-илметил]-6,7-дигидропиразино[1,2-а;4,3а']дииндол-13-илметил}пирролидин-1-ил)-2,2,2-1рифторэтанон (28):
Ациклический димер 27 (2,66 г, 4,06 ммоль) растворяли в чистом ΊΕΑ (25 мл) при температуре окружающей среды. Через 3 ч растворитель удаляли на роторном испарителе, а полученный остаток растворяли в ΕίΌΑ^ дважды промывали насыщенным водным NаНСОз, один раз рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 2,65 г (кол.) диастереомерных индолилиндолинов в виде желтой пены. [Анализ ТСХ: 3:1 гексан/ΕΐОΑс, К|(27)=0,3; К((индолилиндолины)=0,60,7].
В смесь неочищенных индолилиндолинов (2,65 г, 4,05 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) добавляли ЭЭР (1,10 г, 4,84 ммоль) одной порцией. Через 2-3 ч реакционную смесь разбавляли ΕΐОΑс и фильтровали через слой целита. Твердые вещества промывали ΕΐΌΑο, а фильтрат пять раз промывали насыщенным водным NаНСОз, а затем один раз рассолом. Объединенные водные промывки вновь экстрагировали два раза ΕΏΑ^ и объединенные органические экстракты сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (4:1 гексан/ΕΐОΑс) с получением 1,94 г (73%, 2 этапа) 28 в виде беловатого твердого вещества, которое было
- 27 012810 гомогенным согласно анализу ТСХ [2:1 гексан/ЕЮАс, К{(индолилиндолины)=0,6-0,7; К{(28)=0,55]. Обратите внимание: продукт 2,2'-бииндол (28) является весьма флуоресцентным и легко очищается путем титрования МеОН класса реактива с получением белого твердого вещества.
'|| ЯМР (СБС1з, 300 МГц) δ 8,06 (йй, 1=5,1, 8,1 Гц, 1Η), 7,03-6,93 (т, 2Н), 4,49 (й, 1=9,0 Гц, 1Η), 4,40 (т, 1Η), 4,12 (й, 1=9,0 Гц, 1Η), 3,75-3,69 (т, 2Η), 3,57-3,51 (т, 2Н), 2,85 (йй, 1=10,5, 12,9 Гц, 1Η), 1,78-1,74 (т, 2Н), 1,51-1,45 (т, 1Η) частей на миллион.
Схема XI
'Р
3,10-Дифтор-13,14-бис-пирролидин-2-илметил-6,7-дигидропиразино [1,2-а;4,3-а'] дииндол (29):
Смесь, содержащую 28 (1,94 г, 2,97 ммоль) и К2СО3 (2,05 г, 14,8 ммоль) в МеОН (60 мл), нагревали при 60°С в течение 1,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и разбавляли ЕЮАс и водой. Слои разделяли, и водную фазу экстрагировали три раза ЕЮАс. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над безводным №ь8О+ фильтровали и концентрировали с получением 1,57 г (кол.) 29 в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки. Анализ ТСХ, 1:1 гексан/ЕЮАс, К{(28)=0,9; Кд(29)=0,01.
'Н ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 7,65 (т, 1Η), 6,98 (приблизительно й, 1=8,2 Гц, 1Η), 6,90 (приблизительно 1, 1=8,3 Гц, 1Η), 4,31 (к, 2Н), 3,97 (Ьг к, 3Н), 3,54 (т, 1Η), 3,31 (т, 1Η), 3,14 (т, 1Н), 2,97 (т, 1Η), 1,83 (т, 1Н), 1,68 (т, 2Н), 1,42 (т, 1Η) частей на миллион.
13С ЯМР (СОС13, 75 МГц) δ 160,6 (й, 1С-Р=238,7 Гц), 136,2 (й, 1С-Р=12,0 Гц), 127,1, 125,4, 120,8 (й, 1С-Р=10,2 Гц), 109,8, 108,9 (й,1С-Р=24,6 Гц), 95,3 (й, 1С-Р=26,3 Гц), 59,6, 45,6, 41,6, 31,0, 30,7, 24,5 частей на миллион.
[1-(2-{14-[1 -(2-трет-Бутоксикарбониламино -3 -метилбутирил)пирролидин-2-илметил]-3,10-дифтор6,7-дигидропиразино [1,2-а:4,3-а'] дииндол-13-илметил}пирролидин-1-карбонил)-2-метилпропил]карбаминовой кислоты трет-бутил сложный эфир (30):
Раствор, содержащий Вос-Ь-Уа1-ОН (0,69 г, 3,18 ммоль) и НАТи (1,27 г, 3,34-ммоль) в безводном ΝΜΡ (4 мл), охлаждали до 0°С. Через 15 мин шприцом добавляли 01РЕА (0,45 г, 0,61 мл, 3,50 ммоль). Через 15 мин раствор, содержащий 29 (0,70 г, 1,52 ммоль) в ΝΜΡ (4 мл), добавляли и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 2 ч. На этом этапе ТСХ показала полное использование 29 [анализ ТСХ, 2:1 гексан/ЕЮАс, К((29)=0,01; К((30)=0,5]. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и промывали один раз разбавленной водной НС1, пять раз водой для удаления избытка ΝΜΡ, один раз насыщенным водным NаΗСО3 и рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (3:1 гексан/ЕЮАс) с получением 1,09 г (83%) 30 в виде бледно-желтого твердого вещества.
'Н ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,04 (йй, 1=5,1, 8,7 Гц, 1Н), 6,98 (т, 2Н), 5,33 (й, 1=9,3 Гц, 1Н), 4,50 (т, 1Н), 4,49 (й, 1=8,1 Гц, 1Н), 4,24 (йй, 1=7,2, 9,3 Гц, 1Н), 4,11 (т, 2Н), 3,67 (йй, 1=3,0, 13,5 Гц, 1Н), 3,56 (т, 2Н), 2,73 (приблизительно 1, 1=12,9 Гц, 1Н), 1,99 (йй, 1=7,2, 13,5 Гц, 1Н), 1,70-1,17 (т, 2Н), 1,43 (к, 9Н), 1,01 (й, 1=7,2 Гц, 3Н), 0,98 (й, 1=7,5 Гц, 3Н) частей на миллион.
13С ЯМР (СБС1з, 75 МГц) δ 171,2, 160,4 (й, 1С-Р=238 Гц), 155,7, 136,6 (й, 1С-Р=12,0 Гц), 127,2, 124,8, 122,0 (й, 1С-Р=9,7 Гц), 109,2, 108,5 (й, 1С-Р=24,0 Гц), 95,0 (й, 1С-Р=26,3 Гц), 79,4, 57,7, 56,9, 47,3, 41,7, 31,8, 29,7, 28,4, 28,3, 23,8, 19,7, 17,7 частей на миллион.
- 28 012810
Схема XII
2-Амино-1 -(2-{14-[1-(2-амино-3 -метилбутирил)пирролидин-2-илметил]-3,10-дифтор-б,7-дигидропиразино [1,2-а;4,3-а'] дииндол-13-илметил}пирролидин-1-ил)-3-метилбутан-1-он (31):
Раствор, содержащий 30 (1,09 г, 1,27 ммоль) в ЭСМ (20 мл), охлаждали до 0°С. ТРА (4 мл) добавляли через пипетку, и за реакцией следили до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 30 (~2 ч). Анализ ТСХ, 10% МеОН/ОСМ, К1(30)=0.5; К£(31)=0,4. Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток растворяли в ЕЮАс. Раствор ЕЮАс дважды промывали насыщенным водным ΝιНСОз и один раз рассолом. Объединенные водные промывки вновь экстрагировали ЕЮАс. и органические экстракты сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 0,83 г (кол.) 31 в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,09 (йй, 1=5,1, 8,7 Гц, 1Н), б,97 (т, 2Н), 4,52 (т, 1Н), 4,50 (й, 1=8,7 Гц, 1Н), 4,11 (т, 1Н), 3,71 (Ьг й, 1=11,1 Гц, 1Н), 3,51-3,32 (т, 2Н), 2,74 (приблизительно I, 1=12,б Гц, 1Н), 2,30 (Ьг 8, 4Н), 1,92 (т, 1Н), 1,б8 (т, 2Н), 1,41 (т, 1Н), 1,03 (т, бН) частей на миллион.
13С ЯМР (СПС13, 75 МГц) δ 174,3, 171,4, 1б0,б (й, 1С-Р=232,5 Гц), 13б,8 (й, 1С-Р=7,5 Гц), 127,4 (й, 1СР=3,7 Гц), 125,0, 122,4 (й, 1С-Р=7,5 Гц), 109,б, 108,7 (й, 1С-Р=22,5 Гц), 95,2 (й, 1С-Р=22,5 Гц), 58,0, 47,3, 41,9, 30,0, 28,5, 28,5, 24,1,19,9, 17,б частей на миллион.
Предпоследнее промежуточное вещество (32):
Раствор, содержащий Вос-Ь-ММе)А1а-ОН (0,49 г, 2,45 ммоль) и НАТИ (0,98 г, 2,5б ммоль) в безводном ΝΜΡ (4 мл), охлаждали до 0°С. Через 15 мин шприцом добавляли 01РЕА (0,35 г, 0,47 мл, 2,б9 ммоль). Через 15 мин добавляли раствор, содержащий 31 (0,77 г, 1,17 ммоль) в ΝΜΡ (4 мл), и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 2 ч. На этом этапе анализ ТСХ показал полное использование 31 [анализ ТСХ, 1:1 гексан/Е1ОАс, К|(31)=0,01; ^32)=0,5]. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и промывали один раз разбавленной водной НС1, пять раз водой для удаления избытка ΝΜΡ, один раз насыщенным водным NаНСО3 и рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (1:1 гексан/Е1ОАс) с получением 0,92 г (7б%) 32 в виде бледно-желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,05 (т, 1Н), 7,б5-б,90 (т, 2Н), 4,53 (т, 3Н), 4,13 (т, 1Н), 3,70-3,52 (т, 4Н), 2,82 (т, 2Н), 2,72 (приблизительно I, 1=11,1 Гц, 1Н), 1,70 (т, 1Н), 1,б4 (8, 3Н), 1,53 (8, 9Н), 1,45-1,25 (т, 2Н), 1,34 (й, 1=7,0 Гц, 3Н), 1,05-0,88 (т, бН) частей на миллион.
13С ЯМР (СПС13, 75 МГц) δ 171,3, 170,4, 1б0,4 (й, 1С-Р=232,5 Гц), 13б,б (й, 1С-Р=7,5 Гц), 127,2, 124,7, 122,1, 109,2, 108,5 (й, 1С-Р=22,5 Гц), 95,0 (й, 1С-Р=22,5 Гц), 57,8, 55,5, 47,4, 41,7, 31,б, 29,9, 29,7, 28,4, 23,8, 19,3, 18,0 частей на миллион.
Схема XIII
- 29 012810
Ы-{1-[2-(3,10-Дифтор-14-{1-[3-метил-2-(2-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2илметил}-6,7-дигидропиразино [1,2-а;4,3-а'] дииндол- 13-илметил)пирролидин-1 -карбонил]-2-метилпропил }-2-метиламинопропионамид (33):
Раствор, содержащий 32 (0,92 г, 0,89 ммоль) в ΩΓΜ (15 мл), охлаждали до 0°С. ТЕЛ (3 мл) добавляли через пипетку, и за реакцией следили до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 32 (~3 ч). Анализ ТСХ, 10% ΜеΟΗ/^СΜ, К^32)=0,4; В£(33)=0,3. Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток растворяли в ЕЮАс. Раствор ЕЮАс дважды промывали насыщенным водным ΝαНСО3 и один раз рассолом. Объединенные водные промывки вновь экстрагировали ЕЮАс, и органические экстракты сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 0,73 г неочищенного 33. Неочищенный продукт очищали ОФ-ВЭЖХ (способ: растворитель А: вода мас./0,1% об./об. НОАс, растворитель В: АСN мас./0,1% об./об. НО Ас. Эупатах ΜκτοδοΦ С18 60А 8 μ, 41,4 мм х 25 см; поток: 40 мл/мин; датчик: 272 нм). Содержащие продукт фракции разбавляли насыщенным водным NаΗСΟ3 и экстрагировали ЕЮАс. ЕЮАс экстракт промывали рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в минимальном количестве АСЮ разбавляли водой до помутнения, замораживали и лиофилизировали с получением 33 в виде хлопьевидного белого твердого вещества.
Ή ЯМР 11)38(), 300 МГц) δ 8,04-7,86 (т, 2Н), 7,38 (приблизительно бб, 1=2,3, 10,5 Гц, 1Н), 6,90 (приблизительно б1, 1=2,3, 9,9 Гц, 1Н), 4,68 (приблизительно б, 1= 8,7 Гц, 1Н), 4,34-4,23 (т, 2Н), 3,98 (б, 1=8,7 Гц, 1Н), 3,46 (т, 2Н), 2,94 (приблизительно μ, 1=6,4 Гц, 1Н), 2,70 (ΐ, 1=12,8 Гц, 1Н), 2,12 (δ, 3Н), 1,94 (т, 1Н), 1,58 (т, 2Н), 1,35 (т, 1Н), 1,16-1,07 (т, 2Н), 1,03 (б, 1=7,0 Гц, 3Н), 0,85 (т, 6Н) частей на миллион.
13С ЯМР (СПС13, 75 МГц) δ 175,0, 170,8, 160,6 (б, 1С-Р=232,5 Гц), 136,8 (б, 1С-Р=7,5 Гц), 127,4 (б, бС-Р=3,7 Гц), 125,0, 122,3 (б, 1С-Р=7,5 Гц), 109,5, 108,7 (б, 7 ·. 22,5Гц), 95,2 (б, 1С-Р=22,5 Гц), 60,4, 57,9, 55,3, 47,6, 42,0, 35,2, 31,7, 30,0, 28,6, 24,0, 19,7, 19,6, 18,2 частей на миллион. Масс-спектр, т/х= [415,6] (М+2)+/2.
Примеры:
Пример 4.
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или
К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н; и
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино.
- 30 012810
1 и 4 9 Е 4 Ζ я * £ Я £ О. 5 ξ Е Ζ г Ϊ ί. ё 1 л £ -О 2 1 2 ί*Ί 2 а Е Я ϊ о т К
72 Ме 5-Ме 542Д- ЕЮН) 5 Н н 5-(25ЕЮН) 5-Ме Ме н Е н А
73 Ме 5-Ме 5-1Рг 5 И н 54Рг 5-Ме Ме н Г н А
74 Н 5-Ме 54Рг 5 н н 5-1Рх 5-Ме Ме 11 Г н А
75 Ме 5-Ме 5-1Рг 5 н н 5-1Рг 5-Ме Ме Е н н А
76 Ме 5-Ме Н 5 н н Н 5-Ме Ме н Р н В
77 Ме 5-Ме 5-Ме 5 н и 5-Ме 5-Ме Ме н г н В
78 Ме 5-Ме 5-(25- ЕЮН) 5 н н 5-(25- ЕЮН) 5-Ме Ме II Р я А
79 Ме 5-Ме 5-Е1 5 н н 5-ΕΙ 5-Ме Ме н г н А
80 Ме 5-Ме 5425- ЕЮН) 5 н н 5425- ЕЮН) 5-Ме Ме г н я А
81 Н Я 5-ΐΡτ 5 н я 8-1Рг Н И н Р н В
83 Ме 5-Ме 5-зВи 5 н и 5-»Ви 5-Ме Ме г я н А
83 Ме 5-Ме 5-сНех 5 н н 5-сНех 5-Ме Ме Е н н А
84 Ме 5-Ме 5-1Ви 5 и и 5-1Ви 5-Ме Ме Η Р н А
85 Ме 5-Ме 5-сНех 5 н II 5-сНех 5-Ме Ме Н г я А
86 Ме 5-Ме 5425- ЕЮН) К 5он 5-ОН 5-(25- ЕЮН) 5-Ме Ме Я г я А
87 Ме 5-Ме 5-1Рг К 5- он 5-ОН 5-ϊΡτ 5-Ме Ме я г я А
88 Ме -8Ме 5425- ЕЮМе) К 5- он 5-ОН 5-(25ЕЮМе) 5-Ме Ме н г н А
89 Ме 5-Ме 5425- ΕίΟιΒιι) К 5- ОН 5-ОН 5-(25- ЕЮ1Ви) 5-Ме Ме н Р я В
90 Ме 5-Ме 5-(25- ЕЮН) Л 5- ОН 5-ОН 5-(25- ЕЮН) 5-Ме Ме я Р и А
91 Ме Л-Ме 5-1Рг 5 н н 5-ΙΡΓ К-Ме Ме н Р н В
92 Ме 5-Ме 5-ΐΡτ 5 н н 5-ϊΡγ 5- Ме Ме н Р н С
93 Ме К-Ме 54Рг 5 н Н 5-1Рг 5-Ме Ме я Р н С
- 31 012810
Дополнительные примеры:
Пример 5.
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Е, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н; и
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино,
Схема ΧΙν
Бис-(Вос-аллилглицин)содержащие виды (34)
Раствор, содержащий Вос-Ь-аллил-С1у-ОН (0,115 г, 0,53 ммоль) и ΗΑΤυ (0,20 г, 0,53 ммоль) в безводном ПМ^ (3 мл), охлаждали до 0°С. Через 10 мин шприцом добавляли диизопропилэтиламин (0,1 мл, 0,58 ммоль). Через 5 мин добавляли раствор, содержащий 29 (0,11 г, 0,23 ммоль) в NΜΡ (3 мл), и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 16 ч. На этом этапе анализ ТСХ показал полное использование 29 [анализ ТСХ, 5% МеОН/ОСМ, ^(29)=0,4]. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и промывали один раз насыщенным водным NаΗСОз, один раз разбавленным водным НС1, два раза рассолом, сушили над безводным №;8О+ фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали ОФ-ВЭЖХ (Эуиатах М1сго8огЬ С18 60А 8)1, 41,4 ммх250 мм; поток 40 мл/мин; датчик: 254 нм, 20-100% градиент ΑСN/вода с 0,1% АсОН в течение 30 мин). Содержащие продукт фракции разбавляли ΕΏΑμ промывали насыщенным водным NаΗСО4, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 0,067 г (73%) 34 в виде светло-желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (СБС1з, 300 МГц) δ 8,06 (бб, 1=5,4, 8,7 Гц, 1Н), 7,02-6,92 (т, 2Н), 5,88-5,79 (т, 1Н), 5,42 (б,
- 32 012810
1=8,4 Гц, 1Н), 5,19-5,11 (т, 2Н), 4,49 (άά, 1=6,9, 15,9 Гц, 2Н), 4,16-4,08 (т, 1Н), 3,65-3,41 (т, 3Н), 2,75 (приблизительно 1, 1=12,9 Гц, 1Н), 2,54-2,35 (т, 2Н), 1,75-1,68 (т, 3Н), 1,46-1,43 (т, 9Н), 1,21-1,19 (т, 1Н) частей на миллион. Масс-спектр, т/х=877.7 (М+№)'.
Продукт реакции обмена замыкания цикла (КСМ) (35):
В раствор 34 (0,067 г, 0,08 ммоль) в безводном ЭСМ (30 мл) добавляли катализатор Граббса первого поколения (9,2 мг, 0,01 ммоль, 12 мол.%) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч. На этом этапе анализ ТСХ показал в основном исходный материал. Затем в реакционную смесь добавили дополнительное количество катализатора Граббса (7 мг, 0,009 ммоль, 11 моль%). Через 2 дня растворитель выпаривали, а неочищенный остаток очищали с помощью НФ-ВЭЖХ (31О2, 20% гексан/Е1ОАс-100% ЕЮАс в течение 20 мин) с получением требуемых олефинов 35 (изомеры олефина: 15 мг и 24 мг) в виде разделяемой смеси изомеров (неустановленной геометрии олефинов), в виде светло-желтых твердых веществ. [Анализ ТСХ, 1:1 гексан/ЕЮАс, Кг(34)=0,7; Κί(35)=0,6]. 35 Изомер А:
'|| ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 7,80 (приблизительно 1, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,00 (άά, 7=1,5, 11,07 Гц, 1Н), 6,92 (άάά, 1=2,1, 9,3, 11,2 Гц, 1Н), 5,62 (приблизительно ά, 1=7,8 Гц, 1Н), 5,56 (Ьг 8, 1Н), 4,79 (т, 1Н), 4,564,47 (т, 2Н), 4,12 (приблизительно ά, 1=6,9 Гц, 1Н), 3,85 (άά, 1=3,6, 13,5 Гц, 1Н), 3,52-3,49 (т, 1Н), 3,41 (т, 1Н), 2,73 (т, 1Н), 2,45-2,40 (т, 2Н), 1,70-1,64 (т, 4Н), 1,44 (8, 9Н), 1,07-1,05 (т, 1Н) частей на миллион. Масс-спектр, ш/х=849.7 (М+№)+. 35 Изомер В:
'|| ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 7,85 (Ьг 8, 1Н), 7,0 (άά, 1=1,5, 9,3 Гц, 1Н), 6,92 (άάά, 1=2,4, 9,3, 11,1 Гц, 1Н), 5,66 (Ьг 8, 1Н), 5,56 (приблизительно ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,80 (Ьг 8, 1Н), 4,62-4,51 (т, 2Н), 4,17-4,09 (т, 1Н), 3,75-3,52 (т, 3Н), 2,69-2,60 (т, 2Н), 2,47 (приблизительно ά, 1=15,3 Гц, 1Н), 1,69 (т, 3Н), 1,45 (8, 9Н), 1,18 (т, 1Н) частей на миллион. Масс-спектр, ш/х=849.7 (М+Να)'.
Схема XVI
Р
Алкилсвязанный продукт (36):
К раствору олефина 35 Изомера А (15 мг, 0,02 ммоль) в ЕЮАс (5 мл) добавляли 5% Ρά/С (25 мг). Реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 с помощью аппарата Рагг (~45-50 фунт/кв. дюйм). Через 2,5 ч анализ ТСХ показал непрореагировавший исходный материал. Добавляли еще 5% Ρά/С (20 мг) и смесь вновь подвергали гидрированию с помощью аппарата ΡηΓΓ. Через 1,5 ч смесь фильтровали через Се111е® и твердые вещества промывали ЕЮАс. Фильтрат концентрировали ίη уасио с получением 36 в виде светло-желтого твердого вещества.
Изомер В (24 мг, 0,03 ммоль) подвергали таким же условиям реакции и операциям обработки, описанным для Изомера А. Продукт (36) объединяли с продуктом гидрирования Изомера А. Соединение 36 выделяли в виде светло-желтого твердого вещества (35 мг, 85%). [Анализ ТСХ, 1:1 гексан/ЕЮАс, Кг(36)=0,3].
'Н ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 7,85 (άά, 1=5,4, 8,1 Гц, 1Н), 7,00 (άά, 1=1,8, 9,9 Гц, 1Н), 6,92 (άάά, 1=2,4, 9,2, 11,1, 1Н), 5,70 (ά, 1=7,8 Гц, 1Н), 4,79-4,78 (т, 1Н), 4,57-4,51 (т, 2Н), 4,13-4,09 (т, 1Н), 3,75 (άά, 1=3,6, 12,9 Гц, 1Н), 3,53-3,41 (т, 2Н), 2,49 (приблизительно 1, 1=12,3 Гц, 1Н), 1,68-1,62 (т, 3Н), 1,46 (8, 9Н), 1,08-1,02 (т, 1Н), 0,93-0,89 (т, 1Н) частей на миллион. Масс-спектр, т//=851,7 (М+№1)'.
- 33 012810
Свободный алкилсвязанный диамин (37):
Раствор, содержащий 36 (0,035 г, 0,04 ммоль) в Οί’Μ (10 мл), охлаждали до 0°С. ТРА (1 мл) добавляли через пипетку, и реакции давали нагреться до температуры окружающей среды, и следили за ней до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 36 (~1 ч). Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток растворяли в ЕЮАс. Раствор ЕЮАс дважды промывали насыщенным водным №НСОз и один раз рассолом. Объединенные водные промывки вновь экстрагировали ЕЮАс и органические экстракты сушили над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали с получением 0,025 г (кол.) 37 в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки.
Ή ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 7,92-7,87 (т, 1Н), 7,00 (бб, 1=2,1, 9,9 Гц, 1Н), 6,91 (ббб, 1=2,4, 9,3, 11,1 Гц, 1Н), 4,81 (т, 1Н), 4,52 (б, 1=8,1 Гц, 1Н), 4,13-4,09 (т, 1Н), 3,79-3,76 (т, 2Н), 3,42-3,39 (т, 2Н), 2,50 (приблизительно ί, 1=12,9 Гц, 1Н), 1,89 (т, 4Н), 1,65-1,61 (т, 3Н), 1,33-1,24 (т, 4Н), 1,09-1,03 (т, 1Н), 0,94-0,82 (т, 1Н) частей на миллион. Масс-спектр, ιη/ζ=315,3 (М+Н)+/2; т/х=629,5 (М+Н)+.
Схема XVIII
Бис-[Вос-Ы(Ме)аланин]содержащий макроцикл (38):
Раствор, содержащий Вос-№метил-Ь-А1а-ОН (0,022 г, 0,11 ммоль) и НАТИ (0,03 г, 0,09 ммоль) в безводном ΝΜΡ (4 мл), охлаждали до 0°С. Через 10 мин шприцом добавляли диизопропилэтиламин (0,05 мл, 0,29 ммоль). Через 5 мин добавляли раствор, содержащий 37 (0,025 г, 0,04 ммоль) в ΝΜΡ (3 мл), и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 24 ч. На этом этапе анализ ТСХ показал полное использование 37 [анализ ТСХ, 5% ΜеОН/^СΜ, КХ38)=0,3]. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром, и промывали один раз насыщенным водным NаНСО3, один раз разбавленным водным НС1, два раза рассолом, сушили над безводным №28О+ фильтровали и концентрировали с получением 38 в виде желтого масла (35 мг), которое использовали без дальнейшей очистки.
Схема XIX
Макроциклический миметик 8тас (39):
Раствор, содержащий 38 (0,035 г, 0,04 ммоль) в Οί’Μ (10 мл), охлаждали до 0°С. ТРА (1 мл) добавляли через пипетку и реакции давали нагреться до температуры окружающей среды, и следили за ней до тех пор, пока анализ ТСХ не показал полное использование 38 (~2 ч). Растворитель удаляли на роторном испарителе, а остаток растворяли в ЕЮАс. Раствор ЕЮАс дважды промывали насыщенным водным ΝαНСО3 и один раз рассолом. Объединенные водные промывки вновь экстрагировали ЕЮАс и органические экстракты сушили над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали с получением 39 в виде желтого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали ОФ-ВЭЖХ (Эу патах Μκγο8οΦ С18 60А
- 34 012810
8μ, 41,4 ммх250 мм; поток 40 мл/мин; датчик 254 нм, 20-100% градиент АС^вода с 0,1% АсОН в течение 30 мин). Содержащие продукт фракции разбавляли Е1ОАс, промывали насыщенным водным ΝιНСО3, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Материал растворяли в минимальном количестве ΛΟΝ, разбавляли водой, замораживали и лиофилизировали с получением 39 в виде хлопьевидного белого твердого вещества (0,002 г).
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,1б (приблизительно й, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,90-7,8б (т, 1Н), 7,00 (приблизительно й, 1=8,7 Гц, 1Н), б,93 (ййй, 1=3,0, 7,5, 9,0 Гц, 1Н), 4,80 (т, 2Н), 4,52 (й, 1=8,4 Гц, 1Н), 4,11 (й, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,79 (йй, 1=3,9, 12,9 Гц, 1Н), 3,51 (т, 1Н), 3,44 (т, 1Н), 3,11-3,09 (т, 1Н), 2,4б (8, 3Н), 1,351,25 (т, 8Н), 1,0б (т, 1Н), 0,89-0,85 (т, 1Н) частей на миллион. Масс-спектр, т/х=400,5 (М)+/2; т^=799,7 (М)+; μ/ζ=821,7 (М+ + №+).
Примеры:
Пример б.
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или
К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
Ζ представляет собой связь; алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую группу с 1-б атомами; или, необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую группу с 1-б атомами углерода; сульфидную (-8-), сульфоксидную (-8О-), сульфоновую (-8О2-) или дисульфидную (-88-) группу; арильную, арилалкиленовую, гетероарильную, гетероарилалкиленовую или необязательно замещенную арильную, арилалкиленовую, гетероарильную, гетероарилалкиленовую группу; амино или замещенную амино группу; атом кислорода;
т и η независимо представляют собой 0, 1, 2 или 3;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидроксил, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н; и
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино.
Соедн некие К8а К7а ш η Ζ КЗа кзь К7Ь К8Ь Κ1Ϊ К13 КН Диапазон Кр, мкМ
95 Ме Ме 1 1 2-СН=СН- Н н Ме Ме н г н А
96 Ме Ме 1 1 Λ'4Η=ΙΉ- н н Ме Ме н Р Н А
97 Ме Ме 1 1 СНгСНг н н Ме Ме Р н н А
98 Ме Ме 1 1 -СН2СН2- н н Ме Ме Н Р н А
99 Н Ме 1 1 -55- н н Ме Н н Р н А
100 Ме Ме 1 1 -СН(ОН>СН(ОН)- н н Ме Ме н Н н А
101 Ме Ме 1 1 ^СН2СН2- 5-ОН 5-ОН Ме Ме н Р н А
- 35 012810
Дополнительные примеры:
Пример 7.
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Е, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н; и
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино.
- 3б 012810
1 и V X = V X а л 2 л 2 Ск £ - X X . 5 ж 3 з я 5 3 3 § •с £ л £ л к М м к го тН £ ΚΙ4 Е л 1
102 Η 5-Ме 5-1Рг 5 н н 5-ϊΡγ 5-Ме Ме н Е Н А
103 Ме 5-Ме 542К- ЕЮН) 5 н н 542Я- ЕЮН) -&Ме Ме н Е Н А
104 Η 5-Ме Л’чРг 5 н и 5-1Рг 5-Ме Ме н Н н А
105 Ме 5-Ме 5-(2К- ЕЮН) 5 н п 542Я- ЕЮН) 5-Ме Ме н Н н А
106 Η 5-Ме 542Я- ЕЮН) 5 н н 542Х- ЕЮН) 5-Ме Ή н н Ή А
107 Ме 5-Ме 5-ιΡγ 5 н н 5-ΐΡτ 5-Ме Ме н н Н А
108 Ή 5-Е) 5-ίΡτ 5 н н 5-ΐΡτ 5-Е1 И н н Н А
109 Ме -Εί 5-ΐΡτ 5 н н 54 Рг «·£( Ме н и н А
110 Ме 5-Ме 5425- ЕЮН) 5 н и 5425- ЕЮН) 5-Ме Ме н Е н Л
111 Ме З-Ме 5- Аллил и в н 5-Аллил 5-Ме Ме II Р в А
112 Ме 5-Ме Л'-1Рг Л 5- ОН 5- он Х4Рг 5-Ме Ме н ₽ н А
113 Ме -8Ме 5-йВи к 5- ОН 5- он 5*яВ« 5-Ме Ме н Е н А
114 Ме 5-Ме 5425- ЕЮ1Ви) я 5- ОН 5- ΟΉ 5425- ЕЮеВи) 5-Ме Ме н Г н А
115 Ме 5-Ме 5425- ЕЮН) к 5- ОН 5- ОН 5425- ЕЮН) 5-Ме Ме II Е н А
11« Ме 5-Ме 542Я- ЕЮМе> к 5- ОН 5- ОН 542ЯЕЮМе) 5-Ме Ме Ή Е н А
117 Ме 5-Ме 5425- ЕЮМе) к 5- ОН ЗОН 5425- ЕЮМе) 5-Ме Ме н Е II А
118 Ме 5-Ме 5Ч2Я- ЕЮН) к 5- ОН 5- ОН 542К- ЕЮН) 5-Ме Ме II Е н А
- 37 012810
Получение 2-амино-Ш[1-(2-{1-[6-(3-{1-[2-(2-аминопропиониламино)-3-метилбутирил]пирролидин2-илметил}индол-1 -ил)гекса-2,4-диинил]-1Н-индол-3 -илметил}пирролидин-1 -карбонил)-2метилпропил] пропионамида (43):
A. (18-{2-Метил-18-[28-(1 -проп-2-инил-1Н-индол-3 -илметил)пирролидин-1 -карбонил]пропилкарбамоил}этил)карбаминовой кислоты трет-бутил сложный эфир (41):
К раствору 40 (0,150 г, 0,319 ммоль) в ТНР (2 мл) добавляли пропаргилбромид [0,06 мл, 0,410 ммоль, (80% мас./толуол)], а затем №1Н [0,015 г, 0,410 ммоль, (60% дисперсия в минеральном масле)]. Реакционную смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. В реакционную смесь добавляли воду (2 мл), и продукт экстрагировали этилацетатом (3 х 30 мл). Экстракты этилацетата промывали водой, рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали ВЭЖХ.
'11 ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 8,0 (8, 1Н), 7,9 (б, 4=9,9 Гц, 1Н), 7,38 (б, 1= 9,9 Гц, 1Н), 7,3-7,1 (т, 3Н),
6,8 (т, 1Н), 4,8 (8, 2Н), 4,62 (т 1Н), 4,5-4,4 (т 1Н), 4,4-4,0 (т, 2Н), 3,7-3,5 (т, 2Н), 3,4 (т, 1Н), 2,5 (т, 1Н), 2,4 (8, 1Н), 2,2-1,8 (т, 4Н), 1,48 (8, 9Н), 1,35 (б, 1=9,9 Гц, 3Н), 1,05 (б, 1=5,5 Гц, 3Н), 0,95 (б, 1=5,5 Гц, 3 Н) частей на миллион.
B. {1-[1-(2-{ 1-[6-(3-(1-[2-(2-трет-Бутоксикарбониламинопропиониламино)-3-метилбутирил]пирролидин-2-илметил)индол-1 -ил)гекса-2,4-диинил]-1Н-индол-3 -илметил}пирролидин-1-карбонил)-2метилпропилкарбамоил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутил сложный эфир (42):
К раствору 41 (0,040 г, 0,077 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) добавляли ацетат меди (II) (0,070 г, 0,385 ммоль), и реакционную смесь погружали в предварительно нагретую масляную баню (~100°С) и пропускали через обратный холодильник в течение 5 мин. Затем в реакционную смесь добавляли воду (2 мл), и продукт экстрагировали ЕЮАс (3x30 мл). Органические экстракты промывали водным Б1Н4ОН (5 мл), водой, рассолом и сушили над безводным №ι280.·|. фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта.
'11 ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 8,0 (8, 2Н), 7,9 (б, 1=9,9 Гц, 2Н), 7,38 (б, 1=9,9 Гц, 2Н), 7,3-7,1 (т, 6Н),
6,8 (т, 2Н), 4,8 (8, 4Н), 4,62 (т, 2Н), 4,5-4,4 (т, 2Н), 4,4-4,0 (т, 4Н), 3,7-3,5 (т, 4Н), 3,4 (т, 2Н), 2,5 (т, 2Н), 2,2-1,8 (т, 8Н), 1,48 (8, 18Н), 1,35 (б, 1=9,9 Н, 6Н), 1,05 (б, 1=5,5 Гц, 6Н), 0,95 (б, 1=5,5 Гц, 6Н) частей на миллион.
C. 2-Амино-Ш[1-(2-{1-[6-(3-{1-[2-(2-аминопропиониламино)-3-метилбутирил]пирролидин-2илметил}индол-1 -ил)-гекса-2,4-диинил]-1Н-индол-3 -илметил}пирролидин-1-карбонил)-2-метилпропил]пропионамид (43):
К раствору 42 (0,030 г, 0,029 ммоль) в ЭСМ (5 мл) добавляли ТРА (1 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем в реакционную смесь добавляли водный №1НС.'О3, (3 мл). Реакционную смесь концентрировали, разбавляли водой, и продукт экстрагировали ЭСМ (3x30 мл). Органические экстракты промывали водой, рассолом и сушили над безводным №128О4. Растворитель удаляли на роторном испарителе, и продукт очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ.
'11 ЯМР (ЭМ8О, 300 МГц) δ 8,0 (8, 2Н), 7,9 (б, 1=9,9 Гц, 2Н), 7,38 (б, 1=9,9 Гц, 2Н), 7,3-7,1 (т, 6Н),
6,8 (т, 2Н), 4,8 (8, 4Н), 4,62 (т, 2Н), 4,5-4,4 (т, 2Н), 4,4-4,0 (т, 4Н), 3,7-3,5 (т, 4Н), 3,4 (т, 2Н), 2,5 (т, 2Н), 2,2-1,8 (т, 8Н), 1,35 (б, 1=9,9 Гц, 6Н), 1,05 (б, 1=5,5 Гц, 6Н), 0,95 (б, 1=5,5 Гц, 6Н) частей на миллион.
- 38 012810
Примеры:
Пример 8
К7а и К7Ъ независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или
К8а и К7а и К8Ь и К7Ъ могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфона-
- 39 012810
Схема XXI
46
Получение Ν-{ 1-циклогексил-2-[2-(1-{2-[2-(3-{1-[2-циклогексил-2-(2-метиламинопропиониламино)ацетил]пирролидин-2-илметил}индол-1-ил)этокси]-этил}-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-ил]2-оксоэтил}-2-метиламинопропионамида (51):
Соединение (46):
При 0°С №1Н (60%, 0,025 г, 0,62 ммоль) добавляли в раствор индола 45 (0,17 г, 0,56 ммоль) в безводном ΌΜΡ (5 мл). Через 1 ч последовательно и быстро добавляли бромэтиловый простой эфир (0,16 г, 0,68 ммоль) и η-Βι.ι.·|ΝΟΊ (0,021 г, 0,05 ммоль). Реакционной смеси дали медленно нагреться до температуры окружающей среды, и перемешивание продолжали в течение 16 ч. Реакцию гасили путем добавления насыщенного водного ЫН4С1, и продукт экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные эфирные экстракты промывали последовательно водой для удаления избытка ΌΜΡ, а затем рассолом и сушили над безводным №28О+ фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт объединяли с материалом, полученным при аналогичных условиях реакции (0,11 г 45, 0,36 ммоль), и очищали нормальнофазовой ВЭЖХ (10-100% ЕЮАс/гексан) с получением 0,18 г 46 в виде бесцветного масла и 0,18 г моноалкилированного индола.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 7,75-7,66 (т, 2Н), 7,25-7,07 (т, 6Н), 6,85-6,80 (т, 2Н), 4,13 (т, 8Н), 3,62 (Ьг δ, 4Н), 3,40-3,15 (т, 4Н), 2,63 (т, 2Н), 2,04 (Ьг δ, 4Н), 1,53 (δ, 18Н) частей на миллион.
Соединение (47):
Раствор, содержащий 46 (0,18 г, 0,27 ммоль) в Οί,’Μ (8 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл), и реакционную смесь держали при 0°С в течение 1 ч. Реакцию гасили путем осторожного добавления насыщенного водного NаΗСΟ3 и продукт экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические экстракты промывали водным NаΗСΟ3, рассолом, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 0,075 г 47 в виде бледно-желтого масла. Неочищенный продукт непосредственно использовали в следующей реакции.
Ή ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 8,49 (Ьг δ, 2Н), 7,57 (приблизительно, б, 7= 8,2, Гц, 2Н), 7,26-7,052 (т, 6Н), 6,82 (δ, 2Н), 4,11 (т, 8Н), 3,57 (т, 4Н), 3,29-2,96 (т, 6Н), 1,95-1,58 (т, 8Н) частей на миллион.
[2-(2-{1-[2-(2-{3-[1-(2-трет-Бутоксикарбониламино-2-циклогексилацетил)пирролидин-2-илметил]индол-1 -ил}этокси)этил]-1Н-индол-3-илметил}пирролидин-1-ил)-1-циклогексил-2-оксо-этил]карбаминовой кислоты трет-бутил сложный эфир (48):
В раствор, содержащий Ν-Вос-циклогексилглицин (0,09 г, 0,34 ммоль) в безводном ΝΜΡ (2 мл), добавляли НАТи (0,15 г, 0,38 ммоль) и Ν-метилморфолин (0,042 г, 0,42 ммоль). Через 15 мин добавляли 47 (0,075 г, 0,16 ммоль) в безводном ΝΜΡ (2 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и продукт экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные эфир
- 40 012810 ные экстракты промывали последовательно водой для удаления избытка NМΡ, рассолом и сушили над безводным Νη28Ο4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали нормальнофазовой ВЭЖХ (50-100% ΕίΟΑс/гексан) с получением 0,085 мг 48 в виде бесцветного масла.
Ή ЯМР (ΟΌΟ13, 300 МГц) δ 7,87 (ά, 1=7,62 Гц, 2Н), 7,27-7,10 (т, 6Н), 6,84 (δ, 2Н), 5,36 (ά, 1=9,37 Гц, 2Н), 4,45 (т, 2Н), 4,30 (приблизительно, ί, 1=6,4 Гц, 2Н), 4,18-4,12 (т, 6Н), 3,70-3,58 (т, 6Н), 3,35 (άά, 1=14,0, 2,9 Гц, 2Н), 2,41 (άί, 1=11,1, 2,3 Гц, 2Н), 2,04-1,57 (т, 20Н), 1,44 (δ, 18Н), 1,37-1,07 (т, 10Н) частей на миллион.
2-Амино-1 -(2-{1-[2-(2-{3-[1 -(2-амино-2-циклогексилацетил)пирролидин-2-илметил]индол-1 -ил}этокси)этил]-1Н-индол-3-илметил}пирролидин-1-ил)-2-циклогексилэтанон (49):
Раствор, содержащий 48 (0,085 г, 0,08 ммоль) в ЭСМ (8 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл), и реакционную смесь держали при 0°С в течение 30 мин. Добавляли еще одну порцию ΤΡΑ (1 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°С. Реакцию гасили путем осторожного добавления насыщенного водного NаΗСΟз, и продукт экстрагировали. Объединенные органические экстракты промывали водным NаΗСΟз, рассолом, сушили над безводным Νη28Ο4, фильтровали и концентрировали с получением 0,068 г 49 в виде бледно-желтого масла. Неочищенный продукт непосредственно использовали в следующей реакции.
Ή ЯМР (СБС13, 300 МГц) δ 7,90 (ά, 1=7,6 Гц, 2Н), 7,31-7,12 (т, 6Н), 6,84 (приблизительно ί, 1=14 Гц, 2Н), 4,47 (т, меньший ротомер), 4,15 (т, 4Н), 3,66-3,36 (т, 8Н), 2,80 (т, 2Н), 2,42 (т, 2Н), 2,04-0,83 (т, 30Н) частей на миллион.
Амид (50):
В раствор, содержащий №Вос-И-метилаланин (0,041 г, 0,19 ммоль) в безводном NМΡ (2 мл), добавляли ΗΑΤυ (0,083 г, 0,21 ммоль) и Ν-метилморфолин (0,024 г, 0,23 ммоль). Через 15 мин добавляли 49 (0,068 г, 0,09 ммоль) в безводном NМΡ (2 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли водой, и продукт экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные эфирные экстракты промывали последовательно водой для удаления избытка NМΡ, рассолом и сушили над безводным Νη28Ο4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт объединяли с материалом, полученным при аналогичных условиях реакции (0,05 г 49, 0,06 ммоль), и очищали нормальнофазовой ВЭЖХ (10-100% ΕίΟΑс/гексан) с получением 32 мг 50 в виде бесцветного масла.
Ή ЯМР (СБС13, 300 МГц) δ 7,86 (ά, 1=7,6 Гц, 2Н), 7,27-7,08 (т, 6Н), 6,84 (δ, 2Н), 4,70 (т, 2Н), 4,58 (приблизительно ί, 1=7,6 Гц, 2Н), 4,19 (т, 2Н), 4,15-4,04 (т, 6Н), 3,76-3,60 (т, 6Н), 3,37 (т, 2Н), 2,83 (δ, 6Н), 2,42 (т, 2Н), 1,98-1,55 (т, 20Н), 1,51 (δ, 18Н), 1,33 (ά, 1=7,0 Гц, 6Н), 1,30-0,98 (т, 10Н) частей на миллион.
№{1-Циклогексил-2-[2-(1-{2-[2-(3-{1-[2-циклогексил-2-(2-метиламинопропиониламино)ацетил]пирролидин-2-илметил}индол-1 -ил)этокси]этил}-1Н-индол-3 -илметил)пирролидин-1-ил]-2-оксоэтил}-2метиламинопропионамид (51):
Раствор, содержащий 50 (0,062 г, 0,055 ммоль) в ЭСМ (8 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл), и реакционную смесь держали при 0°С в течение 1 ч. Реакцию гасили путем осторожного добавления насыщенного водного NаΗСΟз и продукт экстрагировали ΕίΟΑ^ Объединенные органические экстракты промывали водным NаΗСΟз, рассолом, сушили над безводным Νη28Ο4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (10-100% ΑΟΝ/вода мас./0,1% НОАс) с получением 0,047 г 51· 2НОАс в виде белого твердого вещества с дальнейшей лиофилизацией.
Ή ЯМР (ϋ№5Ο, 300 МГц) δ 7,91 (ά, 1=8,7 Гц, 2Н), 7,71 (ά, 1=7,8 Гц, 2Н), 7,32 (ά, 1= 7,5 Гц, 2Н), 7,05 (т, 2Н), 6,99-6,92 (т, 4Н), 4,39 (приблизительно ί, 1=6,6 Гц, 2Н), 4,15 (т, 6Н), 3,57 (т, 4Н), 3,52-3,23 (т, 4Н), 3,06-2,91 (т, 4Н), 2,46 (δ, 6Н), 2,31 (т, 2Н), 2,15 (δ, 12Н), 1,91-1,65 (т, 12Н), 1,55-1,49 (т, 8Н), 1,07 (ά, 1=7,0 Гц, 6Н), 1,16-0,93 (т, 10Н) частей на миллион.
Примеры:
Пример 9.
В7а и Н7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или В8а и В7а и Н8Ь и Н7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
В8а и Н8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто,
- 41 012810 карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 3;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино; и №а и №Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, СН СО2Н.
1 1 а ! Я Я СЙ я £ с. ί £ № В - £ 5 = § - * £ Е л £ 8 л г § Л г £ Ё ΛΪ г-1 2 г*> н к чГ «и С£ с с Е а № X ? я
122 Ме 5-Ме 5-сНех 5 н н н н Х-сНех 5-Ме Ме Н н Н А
123 Ме Х-Ме 5-сНек 5 н н н н 5-сНех 5-Ме Ме Н Е Ή А
124 Ме 5-Ме 5Ч2Й- ЕЮН) 5 в н н и 5-(2й- ЕЮВ) 5-Ме Ме Ή Г Н А
125 Ме 5-Εί Я2Й- ЕЮН) X н н н н 5-(2К- ЕЮН) 5-Е1 Ме Г В Н В
126 Ме ХМе 5*сНек 5 н н н н 5-сНе.х ί-Ме Ме г н п А
127 Ме 5-Ме 5*сНех X Ме Ме н н 5-сНех 5-Ме Ме Е н н А
128 Ме Ϊ-ΕΙ З'-сНех 5 Ме Ме н н З-сПех 5-Е( Ме Р н н А
129 Н 5-Ме 5-сНех $ Н Н в н 5-сНех 5-Ме Ή а н в А
130 Ме 5-Ме 5<Нех 5 н н н н 5-сНех 5-Ме Ме С1 н н А
131 Н 5-Ме 5-ϊΡγ 5 н н н н 5-ΐΡτ 5-Ме Н а н н А
132 Ме 5-Ме 5·ϊΡγ 5 н н н н 5-1Рг З'-Ме Ме а н н А
133 Ме 5-Ме 5-ϊΓγ 5 н н н н $-1Рг 5-Ме Ме Р н н А
134 Н н 5-сНех Ϊ н н н н 3-еНех н н н Е н С
135 Ме 5-Ме Η 5 н н и н н З'-Ме Ме н Р н с
136 Ме 5-Е1 8-(28- ЕЮН) 5 н н н н 8-(28- ЕЮН) 5-Е1 Ме н г я с
137 Ме 5-Ме 5-сНех 5 н н н и 5-сНех 5-Ме Ме Ме в я А
138 Н Н 5-сНех 5 н н н н ХсНсх Н Н Н н я В
139 н 5-Ме 5-сНех 5 н н н н 5чгНех 5-Ме Н и в н А
140 Ме 5-Ме 5*1Ви 5 н н н ,5-ΙΒιι 5-Ме Ме п Е н А
- 42 012810
Другие примеры:
Пример 10.
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или
К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, необязательно, К5а и К5Ь соединены алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Е, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино;
\Уа и \УЬ независимо представляют собой Н, С1, Вг, Е, алкил, СЦ СО2Н; и
К11а и К11Ь вместе образуют алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую или алкилоксиалкиленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода необязательно замещены Ν, О или 8.
- 43 012810
ί V X X ν ζ X % л « я £ ί χ ΐ ί = 1 1 в я Ξ * 1 л 8 £ л И η н ΐ*> 1*4 »( В! -г---- я * ί § е* Я
147 Η Я-Ме 5-ΐΡτ н н 5 СНгСН1СН3С Н2СН2СН2 11 н Я-ίΡτ я- Ме 11 Н н н А
148 Ме Я-Ме Я-сНех н н 5 СНзСНЬС^С Н3СН2СН2 н н Я-сНех Я- Ме Ме н н н А
149 Ме 5-Ме Я-ίΒιι н н 5 СЩОЬСНзС н2сн2сн3 н н 5’Ши Я- Ме Ме н н н А
150 Η 5-Ме ϊΡι н н 5 (АЛ)- СН2СН(ОН) СВ(ОН)СН2 н н 1Рг Я- Ме Н н Г н А
151 Ме 5-Ме 2Л- Е1ОН н н 5 (ял> СМ2СН(ОН) СН(ОН)СН2 и н 2Я- ЕЮН 5- Ме Ме н Е н А
152 Ме 5-Ме 2Й- н н 5 (ВД)· н н 2Я- Я- Ме н Г н А
ЕЮН СН2СН(ОН) СН(0Н)СНг ЕЮН Ме
153 Ме Я-Ме сНех н н 5 СН2СН2СНг н н сНех Я- Ме Ме н н н В
154 Ме Я-Ме сНех н н 5 сн 2СН2ОСН2С Η сн 2СН2 н н сНех Я- Ме Ме н н н А
155 Ме Я-Е1 сНех н н 5 сн 2СН2ОСН2С Н2ОСН2СН1 н н сНех Я- Εί Ме н н н В
156 Ме Я-Ме 2??ЕЮН н н 5 сн 2СН1ОСН2С НгОСН-СНг н н аг- ЕЮН Я- Ме Ме н н н А
157 Ме 5-Εΐ 2Л- ЕЮН н и 5 СН гСН2ОСН2С Н1ОСН2СН2 н н 2Й- ЕЮН Я- Εί Ме Ή н н в
158 Ме Я-Ме сНех н н .5 С(О)СН2СН2 СН2С(О) н н сНех 5’ Ме Ме Н н н А
159 Ме З-Ме сНех н н 5 С(О}С*Н4С(О ) н н сНех з- Ме Ме и н н А
160 Ме 5-Ме 2Я- ЕЮН н н 5 СН2СН2 н н 2Е- ЕЮН Я- Ме Ме н н н А
161 Ме 5-Ме 2Л- ЕЮН н н Я сн гСНгСН2СН2 н н 2Λ- ГЮН 5- Ме Ме н н н В
- 44 012810
Дополнительные примеры:
Пример 11.
К7а и К7Ъ независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, галоалкил; или К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н, гидроксил, алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждый алкил, арил, арилалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил необязательно замещен галогеном, гидроксилом, меркапто, карбоксилом, алкилом, алкокси, амино и нитро; или
К8а и К7а и К8Ь и К7Ь могут независимо или вместе образовывать кольцо, такое как азиридиновое или азетидиновое кольцо;
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил; или каждый из них необязательно замещен гидроксилом, меркапто, галогеном, амино, карбоксилом, алкилом, галоалкилом, алкокси или алкилтио; или, в некоторых случаях, К5а и К5Ь соединены алкиленом, алкениленом, алкиниленом с 2-12 атомами углерода или необязательно замещенным алкиленовым, алкениленовым, алкиниленовым мостиком с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода замещены Ν, О или 8;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а и К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Вг, Р, алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, циано или СО2Н;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н, галоген, алкил, арил, арилалкил, амино, ариламино, арилалкиламино, гидрокси, алкилокси, арилокси, арилалкилгидрокси, диалкиламино, амидо, сульфонамидо или амидино;
X является О, Ν, 8 или С=С;
\Уа является Н, С1, Вг, Р, алкилом, СЫ, СО2Н;
К11Ь отсутствует или представляет собой Н, алкил, необязательно замещенный алкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил.
^Ь и К11а вместе представляют собой связь, алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую, арильную, арилалкиленовую, арилалкилалкиленовую, гетероарильную, гетероарилалкиленовую или необязательно замещенную алкиленовую, алкениленовую, алкиниленовую цепочку с 2-12 атомами углерода, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены Ν, О или 8.
ί а а ί а 1 а а £ д 1—1 С£ X μ _ 5 η ~ ! 1 А Г © « а> с С я м № 2 л 2 л £ 1 ί И м (*> 2 Ξ а
162 Ме 5-Ме 5-(2Л- ЕЮН) н - О СН1СН» СН1 н н 5Ч2К- Е1ОН 5-Ме Ме н н н О
163 Ме 5-Ме 5-сНех н - 5 О СЩСНд СН1 н н 5-сНех 5-Ме Ме н н н А
В клетках млекопитающих активация каспаз достигается по меньшей мере двумя независимыми механизмами, которые инициируются отдельными каспазами, однако приводят к активации общих убивающих (эффекторных) каспаз. Помимо активируемого цитохромом С механизма (иногда называемого внутренним путем гибели) внешний путь гибели является механизмом, посредством которого активируется каспазный каскад посредством активации рецептора гибели, расположенного на мембране клетки. Примеры рецепторов гибели включают ΌΚ4, ΌΚ5 и ΤΝΓ-Κ1 (а также другие элементы ΤΝΡ группы рецепторов цитокина). Соответствующими лигандами являются ТКА1Ь и ΤΝΡ-α. Связывание прокаспазы-8 с рецептором гибели индуцирует аутоактивацию, при которой ингибирующий продомен
- 45 012810 прокаспазы-8 отщепляется и удаляется. Каспаза-8 выделяется из рецептора и может затем активировать эффекторные каспазы (каспаза-3, -6, -7), и, подобно инициируемому каспазой-9 пути, результатом является протеолитическое расщепление клеточных мишеней эффекторными каспазами и индукция апоптоза.
Настоящее изобретение относится в целом к пептидомиметикам 8тас, способам получения пептидомиметиков 8тас и их применению, включая способы получения описанных выше пептидомиметиков. В одном варианте осуществления настоящего изобретения пептидомиметики 8тас (называемые здесь миметиками 8тас) действуют как химиоусиливающие средства. Термин химиоусиливающее средство означает средство, повышающее чувствительность организма, ткани или клетки к химическому соединению или лечению, а именно химиотерапевтическим препаратам, химиолекарствам или лучевой терапии. Один вариант осуществления изобретения представляет собой терапевтическую композицию миметика 8тас. Другим вариантом осуществления изобретения является терапевтическая композиция миметика 8тас, которая может действовать в качестве химиоусиливающего средства и биологического или химиотерапевтического средства или облучения. Другим вариантом осуществления изобретения является способ ингибирования роста опухоли ίη νίνο путем введения пептидомиметика 8тас. Другим вариантом осуществления изобретения является способ ингибирования роста опухоли ίη νίνο путем введения миметика 8тас и биологического или химиотерапевтического средства или проведения химиорадиотерапии. Другим вариантом осуществления изобретения является способ лечения пациента, страдающего раком, путем введения миметиков 8тас согласно настоящему изобретению, отдельно или в сочетании с биологическим или химиотерапевтическим средством или химиорадиотерапией.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения подходящие биологические и химиотерапевтические средства, которые могут одновременно вводиться с миметиками 8тас, включают алкилирующие средства, растительные алкалоиды, антиопухолевые антибиотики, антиметаболиты, ингибиторы топоизомеразы, гормональные средства, ЫЗАГО, факторы роста, цитокины, митотические ингибиторы и их сочетания.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения клетки находятся ίη 8ίΙιι или в организме, а этап контакта достигается путем введения фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество миметика 8тас, причем организм может подвергаться одновременной или предшествовавшей лучевой терапии или химиотерапии для лечения неопролиферативной патологии. Патогенные клетки являются клетками опухоли, такой как (без ограничения) рак мочевого пузыря, рак груди, рак простаты, рак легких, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак толстой кишки, рак яичника, рак почки, гепатому, меланому, лимфому, саркому и их сочетания. Однако клетками могут также быть иммортализированные клетки опухоли, используемые в культуре клеток опухоли.
Миметики 8тас могут также использоваться для лечения аутоиммунных заболеваний. Помимо обнаруженных в опухоли дефектов апоптоза, нарушения в способности устранять аутореактивные клетки иммунной системой ввиду устойчивости к апоптозу, как считается, играют ключевую роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний. Аутоиммунные заболевания характеризуются тем, что клетки иммунной системы продуцируют антитела против собственных органов и молекул или непосредственно атакуют ткани, приводя к их разрушению. То, что данные аутореактивные клетки не проходят процесс апоптоза, приводит к проявлениям заболевания. Нарушения регулирования апоптоза были обнаружены в аутоиммунных заболеваниях, таких как системная красная волчанка или ревматоидный артрит.
В одном варианте осуществления патоген также включает аномально пролиферирующие клетки, такие как относящиеся к аутоиммунному заболеванию или заболеваниям, устойчивые к апоптозу ввиду сверхэкспрессии IАΡ или элементов семейства белков Вс1-2. Примеры таких аутоиммунных заболеваний включают без ограничения коллагеновые заболевания, такие как ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром Шарпа, синдром СКЕ8Т (кальциноз, синдром Рейно, нарушение моторики пищевода, телеангиэктазия), дерматомиозит, васкулит (болезнь Вегенера) и синдром Шегрена, заболевания почек, такие как синдром Гудпасчура, быстро прогрессирующий гломерулонефрит и мембранопролиферативный гломерулонефрит типа II, эндокринные заболевания, такие как диабет I типа, хронический кандидоз на фоне аутоиммунной полиэндокринопатии (АРЕСЕИ), аутоиммунный паратиреоидизм, злокачественная анемия, недостаточность половых желез, идиопатическое заболевание Аддисона, гипертиреоз, тироидит Хашимото и первичная микседема, заболевания кожи, такие как вульгарная пузырчатка, буллезный пемфигоид, герпес беременных, врожденный буллезный эпидермолиз и эритема многих форм, заболевания печени, такие как первичный билиарный цирроз печени, аутоиммунный холангит, аутоиммунный гепатит типа 1, аутоиммунный гепатит типа 2, первичный склерозирующий холангит, нервные заболевания, такие как рассеянный склероз, острая миастения, миастенический синдром Ламберта-Итона, приобретенная нейромиотония, синдром Гийена-Барре (синдром Мюллера-Фишера), синдром негнущегося тела, мозжечковая дегенерация, атаксия, опсоклонус, сенсорная нейропатия и ахалазия, заболевания крови, такие как аутоиммунная гемолитическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (болезнь Верльгофа), инфекционные заболевания со связанными аутоиммунными реакциями, такие как СПИД, малярия и болезнь Чагаса.
Охватываемые настоящим изобретением фармацевтические композиции включают терапевтически эффективное количество миметика 8тас в дозировочной форме и фармацевтически приемлемый носи
- 46 012810 тель, причем миметик 8тас ингибирует активность 1АР, таким образом, способствуя апоптозу. Другой вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой композиции, содержащие терапевтически эффективное количество миметика 8тас в дозировочной форме и фармацевтически приемлемый носитель в сочетании с биологическим или химиотерапевтическим средством и/или лучевой терапией, где миметик 8тас ингибирует активность 1АР и, таким образом, содействует апоптозу и повышает эффективность химиотерапии и/или лучевой терапии.
Способы получения фармацевтических композиций, содержащих миметики 8тас, также включены в объем настоящего изобретения и включают, без ограничения, сочетание терапевтически эффективного количества миметика 8тас с фармацевтически приемлемым наполнителем.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтическая композиция для содействия апоптозу содержит терапевтически эффективное количество пептидомиметика 8тас, который связывается по меньшей мере с одним 1АР. В одном варианте осуществления 1АР может быть Х1АР. В другом варианте осуществления 1АР может быть ΜΕ-ΙΛΡ. В другом варианте осуществления 1АР может быть с1АР-1 или с1АР-2. В иных вариантах осуществления 1АР может представлять собой несколько типов 1АР.
Варианты осуществления изобретения также включают способ лечения пациента, нуждающегося в этом, при котором пациенту обеспечивается введение терапевтически эффективного количества пептидомиметика 8тас, пептидомиметик 8тас связывается по меньшей мере с одним 1АР. В одном варианте осуществления 1АР может быть Х1АР. В другом варианте осуществления 1АР может быть Μ^-IАР. В другом варианте осуществления 1АР может быть с1АР-1 или сЬАР-2. В иных вариантах осуществления 1АР может представлять собой несколько типов 1АР. Способ может дополнительно включать одновременное введение химиотерапевтического средства. Химиотерапевтическое средство может представлять собой (без ограничения) алкилирующие средства, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики, таксаны, гормональные средства, моноклональные антитела, глюкокортикоиды, мимотические ингибиторы, ингибиторы топоизомеразы Ι, ингибиторы топоизомеразы ΙΙ, иммуномодулирующие средства, факторы роста клеток, цитокины и нестероидные противовоспалительные соединения.
Миметики 8тас предпочтительно вводятся в эффективных количествах. Эффективное количествоэто количество препарата, отдельно или вместе с другими дозами, которое обеспечивает требуемый отклик. Отклик может проявляться только во временном замедлении развития заболевания, хотя, предпочтительно, он проявляется в постоянном прекращении развитии заболевания или отсрочке возникновения или предотвращении возникновения заболевания или состояния. Отслеживание может выполняться обычными методами. В целом, дозы активных соединений могут составлять от приблизительно 0,01 до 1000 мг/кг в день. Ожидается, что дозы в диапазоне от 50-500 мг/кг будут пригодны предпочтительно для внутривенного, внутримышечного или внутрикожного введения один или несколько раз в день. Введение пептидомиметика 8тас может происходить одновременно, последовательно или раньше проведения химиотерапии или лучевой терапии при условии, что химиотерапевтическое средство или лучевая терапия повышает чувствительность системы к пептидомиметику 8тас.
В целом, обычное экспериментирование в ходе клинических испытаний позволит определить конкретные диапазоны для оптимального терапевтического действия каждого из терапевтических средств и каждого протокола введения, а введение конкретным пациентам можно регулировать в эффективном и безопасном диапазоне в зависимости от состояния пациента и реакции на первоначальные введения. Однако, в конечном итоге, протокол введения регулируется согласно мнению лечащего врача с учетом таких факторов, как возраст, состояние и масса тела пациента, активность пептидомиметика 8тас, длительность лечения и тяжесть заболевания, которое лечат. Например, схема приема пептидомиметика 8тас может предполагать пероральное введение от 1 до 2000 мг/день, предпочтительно 1-1000 мг/день, более предпочтительно 50-б00 мг/день, в виде 2-4 (предпочтительно 2) раздельных доз, с целью ослабления роста опухоли. Лечение с перерывами (например, в течение одной из трех недель или трех из четырех недель) также может использоваться.
В случае, если отклик в организме пациента на первоначально введенные дозы недостаточен, могут применяться большие дозы (или эффективно более высокие дозы, вводимые иным, более локализованным путем) в пределах, переносимых пациентом. Множественные дозы в день рассматриваются с целью достижения требуемого системного уровня соединений. В целом, используется максимальная доза, т.е. наибольшая безопасная и медицински обоснованная доза. Специалистам в данной области техники с обычным уровнем подготовки будет понятно, что пациент может настаивать на меньшей или переносимой дозе по медицинским, психологическим и любым другим причинам.
Имеется множество путей введения. Конкретный выбранный режим будет зависеть от выбора химиотерапевтического лекарственного средства, тяжести состояния пациента и дозы, необходимой для достижения терапевтического эффекта. Говоря в целом, способы согласно изобретению могут использоваться при любом способе введения, являющемся приемлемым с медицинской точки зрения. Это значит, что способ обеспечивает эффективные уровни активных компонентов, не вызывая клинически неприемлемые неблагоприятные воздействия. Эти способы введения включают без ограничения: пероральный, ректальный, топический, назальный, внутрикожный, ингаляция, внутрибрюшинный, внутрипузырный
- 47 012810 или парентеральный. Термин парентеральный включает подкожный, внутривенный, внутримышечный путь или вливание. Внутривенный или внутримышечный путь особенно подходят для данного изобретения.
В одном аспекте изобретения описанный здесь пептидомиметик 8тас, вместе с дополнительными биологическими или химиотерапевтическими средствами или лучевой терапией или без них, не оказывает неблагоприятного воздействия на нормальные ткани, но повышает чувствительность клеток опухоли к дополнительным химиотерапевтическим/радиотерапевтическим протоколам. Не желая ограничивать себя теорией, авторы считают, что благодаря специфическому к опухоли индуцированному апоптозу значительные и неблагоприятные побочные эффекты, такие как излишняя вазодилатация или шок, будут сведены к минимуму. Предпочтительно композиция или способ разрабатывается таким образом, чтобы обеспечить повышение чувствительности клетки или опухоли к химиотерапии или лучевой терапии путем введения по меньшей мере части пептидомиметика 8тас перед химиотерапией или радиотерапией. Лучевая терапия и/или включение химиотерапевтических препаратов может быть частью режима лечения для дальнейшего усиления уничтожения клеток опухоли пептидомиметиком 8тас.
В альтернативных вариантах осуществления данного изобретения миметики 8тас вводятся в сочетании со второй формой терапии, включая, без ограничения, второе лечение, выбранное из лучевой терапии, иммунотерапии, фотодинамической терапии, химиотерапии и их сочетаний.
Противораковые химиотерапевтические препараты, которые вводятся в сочетании с миметиками 8тас, могут быть любым терапевтическим средством, специфически нацеленным на онкогенную ткань или клетки, и включают без ограничения: алкилирующие средства, растительные алкалоиды, противоопухолевые антибиотики, антиметаболиты и ингибиторы топоизомеразы, включая альтретамин, бусульфан, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, циклофосфомид, дакарбазин, гексаметилмеламин, ифосфамид, ломустин, мелфалан, меклоретамин, оксалиплатин, прокарбазин, стрептозоцин, темозоломид, тиотепу, урамустин, доцетаксел, этопозид, иринотекан, паклитаксел, тенисопид, винкристин, винбластин, виндезин, винорелбин, блеомицин, дактиномицин, даунорубицин, эпирубицин, гидроксимочевину, идарубицин, митомицин, митоксантрон, пликамицин, азатиоприн, капецитабин, кладрибин, цитарабин, флударабин, фторурацил, флоксуридин, гемцитабин, меркаптопурин, метотрексат, неларабин, пеметрексед, пентостатин, тиогуанин, камптотекан, топотекан, ΒΝΡ 1350, 8Ν 38, 9-амино-камптотекан, луртотекан, гиматекан, дифломотекан, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, неморубицин, митоксантрон, локсоксантон, этопозид и их сочетания.
Описанные здесь миметики 8тас также могут вводиться одновременно с иммунотерапевтическими средствами. Иммунотерапия включает введение иммунологически активного средства, выбранного из бациллы Кальметта-Герена (ВСС), интерферона и других средств, которые специфически активируют иммунную систему пациентов, а также их сочетаний.
Фармацевтические композиции. В одном варианте осуществления изобретения дополнительное биологическое, химиотерапевтическое или антинеопластическое средство (см. ниже) и/или лучевая терапия могут добавляться до введения миметика 8тас, одновременно с ним или после него. Употребляемый здесь термин фармацевтически приемлемый носитель означает один или несколько сочетаемых твердых или жидких наполнителей, разбавителей или капсулирующих веществ, подходящих для введения в организм человека. Термин носитель означает органический или неорганический ингредиент, натуральный или синтетический, с которым объединяют активный ингредиент для облегчения применения. Компоненты фармацевтических композиций могут быть смешаны с молекулами согласно настоящему изобретению и друг с другом таким образом, что отсутствует взаимодействие, которое может значительно ослабить требуемое фармацевтическое действие.
Системы доставки согласно изобретению разрабатываются таким образом, что они включают системы доставки пролонгированного действия, с отсроченным или замедленным высвобождением, так что доставка пептидомиметика 8тас происходит до повышения чувствительности места проведения лечения и с достаточным временем для осуществления этой сенсибилизации. Пептидомиметик 8тас может использоваться в связи с лучевой терапией и/или дополнительными химическими средствами против рака (см. ниже). Такие системы позволяют избежать повторного введения соединения пептидомиметика 8тас, делая процесс более удобным для пациента и врача, и может особенно подходить для некоторых композиций согласно настоящему изобретению.
Многие типы систем доставки известны специалистам в данной области техники с обычным уровнем подготовки и могут использоваться в контексте данного изобретения, они включают без ограничения системы на основе полимеров, таких как поли(лактид-гликолид), сополиоксалаты, поликапролактоны, полиэфирамиды, полиортоэфиры, полигидроксимасляная кислота и полиангидриды. Микрокапсулы из указанных полимеров, содержащие лекарственные средства, описаны, например, в патенте США № 5075109. Системы доставки также включают неполимерные системы, такие как: липиды, включая стерины, такие как холестерин, эфиры холестерина и жирные кислоты или нейтральные жиры, такие как моно-, ди- и триглицериды; гидрогелевые системы высвобождения; силастические системы; системы на основе пептидов; восковые покрытия; сжатые таблетки, использующие обычные связывающие вещества и наполнители; частично слитые имплантаты; и т. п. Конкретные примеры включают без ограничения: (а) эрозионные системы, в которых активное соединение содер- 48 012810 жится в форме внутри матрицы, такие как описанные в патентах США №№ 4452775, 4667014, 4748034 и 5239660 и (Ь) диффузионные системы, в которых активный компонент проникает с контролируемой скоростью из полимера, такие как описаны в патентах США №№ 3832253 и 3854480. Кроме того, могут использоваться системы доставки с применением насосов, некоторые из которых приспособлены для имплантирования.
Желательным может быть применение имплантата с длительным временем высвобождения. Применяемый здесь термин длительное высвобождение означает, что имплантат создан таким образом, чтобы доставлять терапевтические количества активного ингредиента в течение по меньшей мере 30 дней, а предпочтительно - 60 дней. Имплантаты с длительным высвобождением хорошо известны специалистам в данной области техники, имеющим обычный уровень подготовки, и включают некоторые из описанных выше систем доставки.
Фармацевтические композиции могут удобным образом приготовляться в единичных дозировочных формах и любыми способами, известными в фармации. Все способы включают этап соединения активного средства с носителем, включающим один или несколько вспомогательных ингредиентов или наполнителей. В целом, композиции готовят путем обеспечения равномерного и тесного контакта между активным соединением и жидким носителем, тонко размолотым твердым носителем или, при необходимости, обоими вместе с приданием продукту требуемой формы.
В одном варианте осуществления изобретения описанные выше димерные пептидомиметики объединяются с фармацевтически приемлемым наполнителем.
Пригодные для парентерального введения композиции включают стерильный водный препарат химиоусиливающего средства (например, пептидомиметика 8тас), который предпочтительно является изотоническим с кровью пациента. Этот водный препарат может составляться известнымы способами и с применением подходящих диспергирующих или смачивающих средств и суспендирующих агентов. Стерильный, пригодный для инъекций препарат также может быть стерильным, пригодным для инъекций раствором в нетоксичном, приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например, раствором 1,3-бутандиола. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут использоваться, - вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды удобным образом могут использоваться стерильные, нелетучие масла. Для этой цели может использоваться мягкое нелетучее масло, в т.ч. синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при приготовлении пригодных для инъекции препаратов могут использоваться жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. Композиции носителя, пригодные для перорального, подкожного, внутривенного, внутримышечного и др. введения, описаны в Фармацевтические науки Ремингтона, Мак Паблишинг Ко., Истон, Пенсильвания (КеттдЮпЗ Рйагтасеибса1 8αοικοδ, Μаск РиЬΗδΐιίημ Со., εηδίοη, РА), включенной сюда во всей полноте путем ссылки.
Дополнительные химиотерапевтические препараты. Химиотерапевтические препараты, подходящие для использования в сочетании с данным изобретением, включают без ограничения химиотерапевтические средства, описанные в Современная фармакология и клинические применения, издание 6, Крейг и Стицел, глава 56, стр. 639-656 (2004) (Μοбет Рйагтасо1оду \νί11ι С11шса1 АррНсабощ, 8ίχΐΗ ЕбШоп, Стар & 8111/01, С11р1. 56, рд 639-656 (2004)), включенная сюда во всей полноте путем ссылки. Этот источник описывает химиотерапевтические лекарственные средства, включающие алкилирующие средства, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики, полученные из растений продукты, такие как таксаны, ферменты, гормональные средства, такие как глюкокортикоиды, другие средства, такие как цисплатин, моноклональные антитела, иммуномодулирующие средства, такие как интерфероны и факторы роста клеток. Другие пригодные классификации химиотерапевтических препаратов включают митотические ингибиторы и нестероидные антиэстрогенные аналоги. Другие подходящие химиотерапевтические средства включают ингибиторы топоизомеразы I и II, ингибиторы киназы и любые средства, способные активировать внешний или внутренний апоптический путь или выделение 8тас из митохондрий.
Конкретные примеры подходящих биологических и химиотерапевтических средств включают без ограничения цисплатин, кармустин (ВСИИ), 5-фторурацил (5-РИ), цитарабин (Ага-С), гемцитабин, метотрексат, даунорубицин, доксорубицин, дексаметазон, топотекан, этопозид, паклитаксел, винкристин, тамоксифен, ΤΝΡ-альфа, ТКАШ, интерферон (в обеих формах альфа и бета), талидомид и мелфалан. Другие конкретные примеры подходящих химиотерапевтических средств включают азотистые иприты, такие как циклофосфамид, алкилсульфонаты, нитрозомочевины, этиленимины, триазены, антагонисты фолатов, аналоги пурина, аналоги пиримидина, антрациклины, блеомицины, митомицины, дактиномицины, пликамицин, алкалоиды барвинка, эпиподофиллотоксины, таксаны, глюкокортикоиды, Ьаспарагиназу, эстрогены, андрогены, прогестины, лютеинизирующие гормоны, октреотидацетат, гидроксимочевину, прокарбазин, митотан, гексаметилмеламин, карбоплатин, митоксантрон, моноклональное антитела, левамизол, интерфероны, интерлейкины, филграстим и сарграмостим. Химиотерапевтические композиции также включают другие элементы, т.е. отличные от ТКАЮ, ТИР суперсемейства соединений или средств, такие как ВСС, которые индуцируют синтез хемокинов после внутрипузырного лечения. И8АШ8 также могут использоваться в сочетании с миметиками 8тас согласно настоящему изобретению и могут включать избирательные и неизбирательные ингибиторы СОХ-2, целекоксиб и рофекоиб.
- 49 012810
Протоколы лучевой терапии.
Кроме того, в некоторых способах согласно настоящему изобретению лечение пептидомиметиками 8тас может использоваться вместе с химиорадиотерапией или другими протоколами лечения рака, применяемыми для ингибирования роста клеток опухоли. Например (без ограничения сказанным), радиотерапия (или лучевая терапия) представляет собой применение в медицинских целях ионизирующего излучения, как часть лечения рака для уничтожения злокачественных клеток. Она может использоваться в вариантах осуществления настоящего изобретения. Хотя лучевая терапия часто используется в рамках лечения, иногда она применяется в качестве облегчающего средства, когда излечение невозможно, и цель состоит в облегчении симптомов. Лучевая терапия часто используется для лечения опухолей. Она может применяться как первичная терапия. Также общей практикой является сочетание лучевой терапии с хирургическим вмешательством и/или химиотерапией. Чаще всего лучевую терапию применяют при лечении рака груди, рака простаты, рака прямой кишки, рака головы и шеи, гинекологических опухолей, рака мочевого пузыря и лимфомы. Радиотерапия часто применяется к локализованной области, пораженной опухолью. Часто поле облучения также включает дренирующие лимфатические узлы. Возможно проведение радиотерапии всего тела или всей поверхности кожи, хотя это осуществляется редко. Радиотерапию обычно проводят ежедневно с 35-38 частями (частью является ежедневная доза). Эти малые частые дозы дают время здоровым клеткам вырасти, устранить повреждения, вызванные радиацией. Тремя основными видами лучевой терапии являются радиотерапия внешним лучом или телетерапия, брахитерапия или радиотерапия с герметичным источником и радиотерапия с негерметичным источником. Все они являются подходящими примерами протокола лечения для данного изобретения. Отличия связаны с расположением источника радиоактивного облучения; при внешней терапии источник находится вне тела, а при радиотерапии с герметичным или негерметичным источником радиоактивный материал доставляется внутрь организма. Герметичные источники для брахитерапии обычно позднее извлекаются, а негерметичные источники вводятся в организм путем инъекции. Введение пептидомиметика 8тас может происходить до проведения протокола лечения или одновременно с ним.
Относительная аффинность к связыванию тетрапептида 8тас (ΑΥΡΙ) и сильного миметика 8тас (Соединение 17) с ΧΙΑΡ ΒΙΚ-3 показана на фиг. 1. Здесь продемонстрировано значительное повышение афинности к связыванию - 30000-кратное повышение миметика 8тас (Соединение 17) по сравнению с тетрапептидом 8тас.
Период полужизни 3 миметиков 8тас (Соединение 1, Соединение 122 и Соединение 123) изучали на крысах. ГУ доза каждого миметика 8тас составляла 1 мг/кг. На фиг. 2 показано, что период полужизни до полного устранения составляет приблизительно 6 ч для миметиков 8тас, причем Соединение 1 имеет наиболее длительный период полужизни.
Биологические и химиотерапевтические/антинеопластические средства и радиация индуцируют апоптоз путем активации внутренних или внешних апоптических путей, а поскольку миметики 8тас выделяют ингибиторы апоптических белков (ΙΑΡ) и, таким образом, устраняют блокировку апоптоза, сочетание химиотерапевтических/антинеопластических средств и радиации с миметиками 8тас оказывают синергичное действие, способствуя апоптозу. Для демонстрации синергичного действия миметиков 8тас с часто применяемыми химиотерапевтическими средствами был подобран набор различных линий клеток опухолей, и проводили испытания представительных соединений различных механистических классов химиотерапевтических средств, а также гамма-радиации.
72-часовой МТТ анализ, описанный Хансен, М. Б., Нилсен, С. И., и Берг, К. (1989, Журн. иммунолог, методов, 119, 203-210) (Нащсн. М. В., Νίβίδβη, 8. Е., и Вегд, К.,1989, б. Iттиηο1. Мебйобк 119, 203210) и включенный сюда во всей полноте путем ссылки, использовали для проведения различия между специфическим и неспецифическим влиянием на уничтожение клеток миметиками 8тас. Вкратце, клетки 8К-ОУ-3 засевали в 96-луночные планшеты в среде Маккоя, содержащей 10% альбумина фетальной бычьей сыворотки (20 000 на лунку) и инкубировали на протяжении ночи при 37°С. На следующий день тестовые соединения добавляли в различных концентрациях (0,003-10 мкМ), и планшеты инкубировали при 37°С еще 72 ч. Затем добавляли 50 микролитров 5 мг/мл МТТ реагента в каждую лунку, и планшеты инкубировали при 37°С в течение 3 часов. В конце инкубационного периода добавляли 50 мкл ΌΜ8Ο в каждую лунку для растворения клеток, оптическую плотность (ΟΌ) лунок измеряли с помощью считывателя микропланшетов (У1сбог21420, Валлак (^а11ас), Финляндия) при 535 нм. Выживание клеток (С8) рассчитывали по формуле:
Ο8=(ΌΩ обработанной лунки/ средняя ΟΌ контрольных лунок) х 100%
Миметик 8тас Соединение 116 испытывали с применением клеточной линии рака яичника 8К-ОУ3, а клетки МКС-5 использовались в качестве контроля нормальных клеток. На фиг. 3 показано, что Соединение 116 в 100000 более эффективно в уничтожении клеток опухоли, чем негативный контроль. При этом оно не влияло на нормальные (неонкогенные) клетки.
ЕС50, определяемую как концентрация лекарственного вещества, обеспечивающая 50% С8, получали путем расчета точки пересечения кривой отклика на дозу с 50% С8, используя СгарНРаб Ρπδΐη. Эти результаты показывают, что миметики 8тас, связывающиеся с ΧΙΑΡ, могут использоваться в лечении
- 50 012810 рака в качестве монотерапии или в сочетании с химиотерапией.
Окрашивание аннексином ν/пропидий-йодидом. Для демонстрации способности миметиков 8тас индуцировать апоптоз использовали окрашивание аннексин ν-флуоресцеин изотиоцианатом. Вкратце, согласно протоколу производителя (Инвитроген, Карлсбад, Калифорния Цпуйгодеп, СагкЬаб, СА)), клетки подвергали действию различных концентраций миметиков 8тас в течение 18-24 ч, а затем удаляли из планшета для анализа путем трипсинизации. Затем клетки гранулировали и ресуспендировали в аналитическом буфере (предоставленном производителем). Аннексин V и пропидий-йодид добавляли к клеточным препаратам и инкубировали в течение 1 ч в темноте при комнатной температуре. После инкубации в каждую пробирку добавляли дополнительный буфер (200 мкл), и образцы немедленно анализировали путем поточной цитометрии. В присутствии миметиков 8тас апоптоз значительно усиливался. Это определяли окрашиванием аннексином/ΡΙ, и анализировали путем поточной цитометрии. Увеличение количества апоптических клеток (аннексии V - положительный/пропидий - йодид - отрицательный низший правый квадрант) антагонистами ΙΑΡ по сравнению с контролем зависело от дозы и было обусловлено индукцией апоптоза, а не посредством увеличения пропорции некротических клеток.
Химиоусиливающий эффект миметика 8тас на клетки меланомы, которые, как было показано, устойчивы к апоптическому действию ТКА1Ь - химиотерапевтическому средству (Чавла-Саркар., Клин. иссл. рака, 2001 (СйаЮа-8агкаг. Сйп. Сапсег Ке8., 2001)). Анализ пролиферации клеток (МТТ анализ, фиг. 4) показал, что при обработке клеток рака груди линии МОА-МВ-4 только пептидомиметиком 8тас - Соединением № 1 согласно изобретению- клетки проявляли устойчивость к антипролиферативному действию миметика 8тас согласно изобретению. И наоборот, при использовании Соединения № 1 в сочетании с ТКА!Ь наблюдали 1000-кратное повышение антипролиферативного действия, приводящее к 100-кратному повышению показателя гибели клеток, определяемого по соответствующему ослаблению образования колонии. Контрольный пептидомиметик (Соединение 62) не смогло оказать синергичное действие с ТКА1Ь, и результаты (данные не отображены) показывают отсутствие антипролиферативной активности только лишь Соединения 62 или Соединения 62 в сочетании с ТКА1Й. Сам по себе ТКА1Ь индуцирует малый (если вообще наблюдаемый) апоптоз клеток МЭА МВ-231 через 4 ч. Лечение только лишь Соединением 121 также не привело к значительному апоптозу (приблизительно 10% общего количества клеток). И наоборот, сочетание ТКАГЙ с Соединением 121 привело к 4-кратному повышению апоптической активности через 4 ч.
Способность клеток образовывать различные колонии анализировали путем добавления различных концентраций соединения в присутствии 0,4 нг/мл ТКАТЬ или при его отсутствии. Вкратце, клетки засевали в количестве 100 на лунку в 12-луночном формате в 2 мл среды роста. Среду удаляли через 24 ч и заменяли миметиками 8тас с различными концентрациями в среде роста с 1% ЭМ8О. Через 72 ч испытания концентрации удаляли и заменяли 2 мл среды роста. Планшеты возвращали в инкубатор на 7-10 дней, в течение которых колонии размножились до по меньшей мере 10 клеток на колонию. Подсчет производили на глаз. Планшеты окрашивали 0,01% кристально-фиолетовым раствором (мас.: об. в Н2О) в течение тридцати минут. Планшеты промывали водопроводной водой для удаления остатка кристально-фиолетового вещества, сушили и подсчитывали колонии. Данные ингибирования анализировали с помощью сигмоидального отклика на дозу (переменный наклон характеристики) в СгарйРаб Рп8т (СгарНРаб 8ой^аге, Сан-Диего, Калифорния). Ингибирующая на 50% концентрация (ЕС50) - это концентрация лекарственного вещества, снижающая активность фермента на 50% относительно контрольных образцов без лекарственного средства.
Синергию наблюдали с топотеканом и камптотецином - двумя примерами ингибиторов топоизомеразы в исследовании цитотоксичности на клетках Т98С. Наивысшая синергия составляла на 50-60% больший показатель гибели клеток по сравнению с ожидаемым показателем при суммировании цитотоксичности каждого соединения в отдельности. Результаты показывают, что и топотекан, и камптотецин могут действовать синергично с миметиком 8тас согласно изобретению, таким как Соединение 1, усиливая апоптоз. Общий синергичный объем равнялся 457, причем наибольшее синергичное действие составляло приблизительно на 30-40% больший показатель гибели клеток по сравнению с ожидаемым показателем при суммировании цитотоксичности 8тас и топотекана по отдельности в случае Соединения 1 и ингибитора топоизомеразы, такого как топотекан.
Для дальнейшей оценки возможных взаимодействий между лекарственными средствами тестировали матрицу перестановок двукратных последовательных разбавлений каждого из лекарств и миметика 8тас, а также активность каждого соединения по отдельности. Для этого применяли программу Мас8упегду II (Причард М. Н., Аселтин К. Р., Шипман С. мл., 1993, Максинержи II. Руководство пользователя, Мичиганский ун-т, Энн Арбор (Рйсйагб, М.К, К.К. А8е1йпе и С. 8Ыртап, 1г. 1993. Мас8упегду II. и8ег'8 тапиа1. Ишу. о£ МЧсЫдап, Апп АгЬог)). Испытывали синергичное действие паклитаксела и пептидомиметика 8тас (Соединение 122) на клетки ОVСΑК3. Наивысшая синергия была обнаружена на уровне 1020%, что соответствует на 10-20% большему показателю гибели клеток по сравнению с ожидаемым показателем при суммировании цитотоксичности каждого соединения в отдельности.
Таксаны - это соединения, ингибирующие митоз путем препятствования деполимеризации основанного на микротрубочках веретена. Эти данные были получены при тестировании различных концен- 51 012810 траций обычного таксана, паклитаксела и миметика 8тас. Доза паклитаксела составляла от приблизительно 0,0 до приблизительно 500,0 нМ. Для Соединения 122 доза составляла от приблизительно 125,0 до приблизительно 8000,0 нМ. Общий синергичный объем составлял приблизительно 170.
Механизм действия содержащих платину соединений состоит (согласно нынешним представлениям) в связывании с ДНК и вмешательстве в механизм ее репарации, что приводит, в конечном итоге, к гибели клетки. Испытывали синергичное действие цисплатина и пептидомиметиков 8тас на клетки ОУСАК-3. Наивысшая синергия составляла на 40-50% больший показатель гибели клеток по сравнению с ожидаемым показателем при суммировании цитотоксичности каждого соединения в отдельности. Эти данные были получены при тестировании различных концентраций цисплатина и лекарственных средств-миметиков 8тас. Для цисплатина доза составляла от приблизительно 0,0 до приблизительно 166500,0 нМ. Для Соединения 122 доза составляла от приблизительно 500,0 до приблизительно 32000,0 нМ. Общий синергичный объем составлял приблизительно 434. Аналогичные испытания проводили с сочетанием карбоплатина и миметиков 8тас. Синергия между пептидомиметиком 8тас (Соединение 122) и карбоплатином.
Эта мощная синергия позволяет использовать пептидомиметики 8тас, являющиеся антагонистами ЬАР, для повышения эффективности предлагаемых на рынке противоопухолевых соединений (таких как, без ограничения: паклитаксел, цисплатин и карбоплатин). Этот эффект позволит снизить необходимую дозу плохо переносимых противоопухолевых соединений и/или усилить отклик доз предлагаемых на рынке препаратов.
Настоящее изобретение не ограничивается описанными и приведенными в качестве примеров вариантами осуществления, а может быть изменено или модифицировано в рамках прилагаемой формулы изобретения.

Claims (10)

1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль в котором К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил или необязательно замещенный алкил, где заместители алкила выбраны из группы, состоящей из гидрокси, алкокси, арилокси и амино; либо К5а и К5Ь вместе образуют алкилен, гидроксизамещенный алкилен; алкенилен или СН288СН2-;
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н или низший алкил;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н или низший алкил;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н или гидрокси;
X и Υ независимо выбраны из О или Ν;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а, К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Р или алкил;
\Уа и \УЬ вместе образуют связь, алкилен, алкенилен, арил или 5-членный гетероарил, имеющий один гетероатом, выбранный из Ν, О или 8; и
К11а и К11Ь независимо отсутствуют или независимо выбраны из Н, низшего алкила, гидроксиалкила, алкоксиалкила, ацетоксиалкила либо К11а и К11Ь вместе образуют алкилен, гидрокси-замещенный алкилен, алкинилен, алкиленокси, -С(О)СН2СН2СН2С(О)- или
- 52 012810
2. Соединение по п.1, включающее соединение формулы (II) или его фармацевтически приемлемую соль в котором каждый из К5а; К5Ь; К7а; К7Ь; К8а; К8Ь; К3а; К3Ь; X; Υ; К12а; К12Ь; К13а; К13Ь; К14а; К14Ь; \¥а; \УЬ; К11а и К11Ь имеют значения согласно п.1.
3. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором \Уа и \УЬ вместе образуют связь, где каждый алкилен имеет от 1 до 10 атомов углерода, каждый гидроксизамещенный алкилен имеет от 1 до 10 атомов углерода; каждый алкенилен имеет от 2 до 10 атомов углерода; каждый алкинилен имеет от 2 до 12 атомов углерода; каждый алкиленокси имеет от 1 до 10 атомов углерода.
4. Соединение по п.3 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, низший алкил, циклогексил или необязательно замещенный низший алкил, где заместители низшего алкила выбраны из группы, состоящей из гидрокси, метокси; бутокси; бензилокси и амино;
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н или низший алкил;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н или низший алкил;
где К3а и К3Ь независимо представляют собой Н или гидрокси;
X и Υ представляют собой Ν;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а, К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Р или метил и
К11а и К11Ь независимо выбраны из Н, низшего алкила, гидроксиэтила, метоксиэтила или ацетоксиэтила.
5. Соединение по п.4 или его фармацевтически примелемая соль, в котором
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, низший алкил или необязательно замещенный низший алкил, где заместители низшего алкила выбраны из группы, состоящей из гидрокси, метокси; бутокси; бензилокси и амино; и
К11а и К11Ь представляют собой Н.
6. Соединение по п.4 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором
К5а и К5Ь представляют собой низший алкил;
К7а, К7Ь, К8а и К8Ь представляют собой низший алкил;
К11а и К11Ь представляют собой Н;
К12а и К12Ь представляют собой Р и
К13а, К13Ь, К14а и К14Ь представляют собой Н.
7. Соединение формулы (III) или его фармацевтически приемлемая соль
- 53 012810 в котором
К5а и К5Ь независимо представляют собой Н, алкил, циклоалкил или необязательно замещенный алкил, где заместители алкила выбраны из группы, состоящей из гидрокси, алкокси, арилокси и амино; или К5а и К5Ь вместе образуют алкилен, гидроксизамещенный алкилен, алкенилен или -СН288СН2-;
К7а и К7Ь независимо представляют собой Н или низший алкил;
К8а и К8Ь независимо представляют собой Н или низший алкил;
К3а и К3Ь независимо представляют собой Н или гидрокси;
Х и Υ независимо выбирают из О или Ν;
К12а, К12Ь, К13а, К13Ь, К14а, К14Ь независимо представляют собой Н, С1, Р или алкил;
\Уа и К11а вместе образуют алкилен.
8. Соединение по п.7, включающее соединение формулы (IV) или его фармацевтически приемлемую соль в котором каждый К5а; К5Ь; К7а; К7Ь; К8а; К8Ь; К3а; К3Ь; Х; Υ; К12а; К12Ь; К13а; К13Ь; К14а; К14Ь; \¥а и Κ11 имеют значения согласно п.7.
9. Соединение по п.8 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором каждый алкилен имеет от 1 до 10 атомов углерода, каждый гидроксизамещенный алкилен имеет от 1 до 10 атомов углерода и каждый алкенилен имеет от 2 до 10 атомов углерода.
10. Соединение по п.1, выбранное из
EA200701597A 2005-02-25 2006-02-27 Димерные ингибиторы ингибиторов белков апоптоза (iap) EA012810B1 (ru)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US65620105P 2005-02-25 2005-02-25
US66834405P 2005-04-05 2005-04-05
US69211105P 2005-06-20 2005-06-20
US70664905P 2005-08-09 2005-08-09
US72985305P 2005-10-25 2005-10-25
PCT/US2006/007068 WO2006091972A2 (en) 2005-02-25 2006-02-27 Dimeric iap inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200701597A1 EA200701597A1 (ru) 2008-02-28
EA012810B1 true EA012810B1 (ru) 2009-12-30

Family

ID=36636946

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200701597A EA012810B1 (ru) 2005-02-25 2006-02-27 Димерные ингибиторы ингибиторов белков апоптоза (iap)

Country Status (17)

Country Link
US (7) US7517906B2 (ru)
EP (2) EP1851200B1 (ru)
JP (1) JP5198880B2 (ru)
KR (1) KR101317661B1 (ru)
CN (1) CN103083644B (ru)
AU (1) AU2006216450C1 (ru)
BR (1) BRPI0607988A2 (ru)
CA (1) CA2598995C (ru)
CY (1) CY1115972T1 (ru)
DK (1) DK1851200T3 (ru)
EA (1) EA012810B1 (ru)
ES (1) ES2456671T3 (ru)
HK (2) HK1104300A1 (ru)
IL (1) IL185454A (ru)
MX (1) MX2007010371A (ru)
PL (1) PL1851200T3 (ru)
WO (1) WO2006091972A2 (ru)

Families Citing this family (65)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2475207T3 (es) 2004-07-15 2014-07-10 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Compuestos de unión a IAP
DE602005022936D1 (de) * 2004-12-20 2010-09-23 Genentech Inc Pyrrolidine als inhibitoren von iap
AU2006216450C1 (en) 2005-02-25 2013-01-10 Medivir Ab Dimeric IAP inhibitors
JP4954983B2 (ja) * 2005-05-18 2012-06-20 ファーマサイエンス・インコーポレイテッド Ｂｉｒドメイン結合化合物
US20100256046A1 (en) * 2009-04-03 2010-10-07 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Treatment of proliferative disorders
CA2564872C (en) * 2005-10-25 2010-12-21 Aegera Therapeutics Inc. Iap bir domain binding compounds
CN101374829A (zh) 2005-12-19 2009-02-25 健泰科生物技术公司 Iap的抑制剂
TWI543988B (zh) * 2006-03-16 2016-08-01 科學製藥股份有限公司 結合於細胞凋亡抑制蛋白（ｉａｐ）之桿狀病毒ｉａｐ重複序列（ｂｉｒ）區域之化合物
WO2007131366A1 (en) * 2006-05-16 2007-11-22 Aegera Therapeutics Inc. Iap bir domain binding compounds
BRPI0715195A2 (pt) * 2006-07-24 2013-06-11 Tetralogic Pharm Corp composto, mÉtodos para induzir e para estimular a apoptose em uma cÉlula, para intensificar a apoptose de cÉlulas patogÊnicas in vivo em um indivÍduo, e para tratar uma doenÇa, e, composiÇço farmacÊutica
WO2008014240A2 (en) 2006-07-24 2008-01-31 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
WO2008014236A1 (en) * 2006-07-24 2008-01-31 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
US8143426B2 (en) * 2006-07-24 2012-03-27 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation IAP inhibitors
WO2008014238A2 (en) * 2006-07-24 2008-01-31 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
JP2010513561A (ja) 2006-12-19 2010-04-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｉａｐのイミダゾピリジンインヒビター
AU2008240153B2 (en) * 2007-04-12 2013-01-31 Joyant Pharmaceuticals, Inc. SMAC mimetic dimers and trimers useful as anti-cancer agents
WO2008134679A1 (en) * 2007-04-30 2008-11-06 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
WO2008144925A1 (en) * 2007-05-30 2008-12-04 Aegera Therapeutics Inc. Iap bir domain binding compounds
CN101951766A (zh) * 2008-01-24 2011-01-19 泰特拉洛吉克药业公司 凋亡抑制蛋白抑制剂
WO2009136290A1 (en) * 2008-05-05 2009-11-12 Aegera Therapeutics, Inc. Functionalized pyrrolidines and use thereof as iap inhibitors
EP3701947A1 (en) * 2008-05-16 2020-09-02 Novartis AG Immunomodulation by iap inhibitors
CA2728933A1 (en) * 2008-06-27 2009-12-30 Aegera Therapeutics Inc. Bridged secondary amines and use thereof as iap bir domain binding compounds
CN102171209A (zh) 2008-08-02 2011-08-31 健泰科生物技术公司 Iap抑制剂
JP2012502994A (ja) * 2008-09-22 2012-02-02 アムジエン・インコーポレーテツド 治療方法
US20100317593A1 (en) * 2009-06-12 2010-12-16 Astrazeneca Ab 2,3-dihydro-1h-indene compounds
US8283372B2 (en) 2009-07-02 2012-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic
JP5529282B2 (ja) * 2009-10-28 2014-06-25 ジョイアント ファーマスーティカルズ、インク． 二量体Ｓｍａｃ模倣薬
AU2011214057B2 (en) 2010-02-12 2016-11-17 Pharmascience Inc. IAP BIR domain binding compounds
UY33236A (es) * 2010-02-25 2011-09-30 Novartis Ag Inhibidores dimericos de las iap
UY33794A (es) 2010-12-13 2012-07-31 Novartis Ag Inhibidores diméricos de las iap
GB201106817D0 (en) 2011-04-21 2011-06-01 Astex Therapeutics Ltd New compound
AU2012315986A1 (en) 2011-09-30 2014-04-17 Srinivas Chunduru Smac mimetic (birinapant) for use in the treatment of proliferative diseases (cancer)
US20130196927A1 (en) * 2012-01-27 2013-08-01 Christopher BENETATOS Smac Mimetic Therapy
CA2930030A1 (en) * 2012-11-09 2014-05-15 Ensemble Therapeutics Corporation Macrocyclic compounds for inhibition of inhibitors of apoptosis
WO2014121178A1 (en) * 2013-02-04 2014-08-07 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. Smac mimetic method of treatment
EA036275B1 (ru) 2013-06-25 2020-10-21 Дзе Уолтер Энд Элиза Хол Инститьют Оф Медикал Рисерч Способ лечения внутриклеточной инфекции
GB201311891D0 (en) 2013-07-03 2013-08-14 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compound
GB201311888D0 (en) 2013-07-03 2013-08-14 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
WO2015017520A1 (en) * 2013-07-30 2015-02-05 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. Method of treatment
SG11201604795RA (en) 2013-12-20 2016-07-28 Astex Therapeutics Ltd Bicyclic heterocycle compounds and their uses in therapy
JP6768522B2 (ja) 2014-06-04 2020-10-14 サンフォード−バーンハム メディカル リサーチ インスティテュート Ｈｉｖ治療におけるアポトーシスタンパク質阻害剤（ｉａｐ）のアンタゴニストの使用
CN104030964B (zh) * 2014-06-05 2016-06-29 天津科技大学 双吲哚类化合物及合成方法
WO2016079527A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Tetralogic Birinapant Uk Ltd Combination therapy
WO2016097773A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Children's Cancer Institute Therapeutic iap antagonists for treating proliferative disorders
JP6817962B2 (ja) 2015-01-20 2021-01-20 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． ターゲティングされたアンドロゲン受容体分解のための化合物および方法
US20170327469A1 (en) 2015-01-20 2017-11-16 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of androgen receptor
EP3302482A4 (en) 2015-06-05 2018-12-19 Arvinas, Inc. Tank-binding kinase-1 protacs and associated methods of use
WO2017030814A1 (en) 2015-08-19 2017-02-23 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of bromodomain-containing proteins
JP2019514900A (ja) 2016-04-27 2019-06-06 メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド 新規な二価のｉａｐアンタゴニストとしてのベンズイミダゾール結合インドール化合物
WO2017194390A1 (en) * 2016-05-09 2017-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Dimeric compounds
CN110234646A (zh) 2016-11-01 2019-09-13 阿尔维纳斯股份有限公司 靶向PROTAC的Tau蛋白及相关使用方法
US10647698B2 (en) 2016-12-01 2020-05-12 Arvinas Operations, Inc. Tetrahydronaphthalene and tetrahydroisoquinoline derivatives as estrogen receptor degraders
EP3558994A4 (en) 2016-12-23 2021-05-12 Arvinas Operations, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR TARGETED DEGRADATION OF RAPIDLY ACCELERATED FIBROSARCOMA POLYPEPTIDES
US11173211B2 (en) 2016-12-23 2021-11-16 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of rapidly accelerated Fibrosarcoma polypeptides
US10806737B2 (en) 2016-12-23 2020-10-20 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of fetal liver kinase polypeptides
JP2020505327A (ja) 2016-12-23 2020-02-20 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． Ｅｇｆｒタンパク質分解標的化キメラ分子およびその関連する使用方法
US11191741B2 (en) 2016-12-24 2021-12-07 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of enhancer of zeste homolog 2 polypeptide
AU2018211975B2 (en) 2017-01-26 2022-05-26 Arvinas Operations, Inc. Modulators of estrogen receptor proteolysis and associated methods of use
EP3710443A1 (en) 2017-11-17 2020-09-23 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of interleukin-1 receptor-associated kinase 4 polypeptides
KR20240095318A (ko) 2018-04-04 2024-06-25 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 단백질분해 조절제 및 연관된 사용 방법
JP7297053B2 (ja) 2018-08-20 2023-06-23 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド 神経変性疾患を治療するためのｅ３ユビキチンリガーゼ結合活性を有するキメラ（ｐｒｏｔａｃ）化合物を標的とし、アルファ－シヌクレインタンパク質を標的とするタンパク質分解
JP7548992B2 (ja) 2019-07-17 2024-09-10 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド タウタンパク質標的化化合物および関連する使用方法
CN114980883A (zh) 2020-01-20 2022-08-30 阿斯利康(瑞典)有限公司 用于治疗癌症的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂
US11957759B1 (en) 2022-09-07 2024-04-16 Arvinas Operations, Inc. Rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) degrading compounds and associated methods of use
WO2024133721A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Step Pharma S.A.S. Combinations of ctps1 inhibitor with iap inhibitor for use in the treatment of cancer

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005084317A2 (en) * 2004-03-01 2005-09-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Dimeric small molecule potentiators of apoptosis
US20060025347A1 (en) * 2004-07-15 2006-02-02 Condon Stephen M IAP binding compounds

Family Cites Families (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3854480A (en) 1969-04-01 1974-12-17 Alza Corp Drug-delivery system
US3832253A (en) 1973-03-21 1974-08-27 Baxter Laboratories Inc Method of making an inflatable balloon catheter
DE2714880A1 (de) 1977-04-02 1978-10-26 Hoechst Ag Cephemderivate und verfahren zu ihrer herstellung
US4667014A (en) 1983-03-07 1987-05-19 Syntex (U.S.A.) Inc. Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists
US4452775A (en) 1982-12-03 1984-06-05 Syntex (U.S.A.) Inc. Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules
CA1200416A (en) 1983-05-13 1986-02-11 Societe Des Produits Nestle S.A. Food process
US5075109A (en) 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
US5208007A (en) 1988-11-22 1993-05-04 Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Isotopic tracer composition and method for making and using same
JPH04167172A (ja) 1990-10-31 1992-06-15 Nec Corp ベクトルプロセッサ
DK0656368T4 (da) 1992-08-05 2003-09-29 Meito Sangyo Kk Kompositmateriale med lille diameter, som indeholder et vandopløseligt carboxypolysaccharid og magnetisk jernoxid
US6187557B1 (en) 1995-08-08 2001-02-13 Tularik Inc. c-IAP1 and c-IAP2: inhibitors of apoptosis
US5786173A (en) 1996-03-19 1998-07-28 Idun Pharmaceuticals, Inc. MCH4 and MCH5, apoptotic protease, nucleic acids encoding and methods of use
US6133437A (en) 1997-02-13 2000-10-17 Apoptogen, Inc. Modulation of IAPs for the treatment of proliferative diseases
US5961955A (en) 1997-06-03 1999-10-05 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioprotectant for peptides labeled with radioisotope
US5977311A (en) 1997-09-23 1999-11-02 Curagen Corporation 53BP2 complexes
US6110691A (en) 2000-01-06 2000-08-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Activators of caspases
US6608026B1 (en) 2000-08-23 2003-08-19 Board Of Regents, The University Of Texas System Apoptotic compounds
US20020132786A1 (en) 2000-08-24 2002-09-19 Alnemri Emad S. IAP binding peptide or polypeptide and methods of using the same
US7718600B2 (en) 2000-09-29 2010-05-18 The Trustees Of Princeton University IAP binding compounds
US6992063B2 (en) 2000-09-29 2006-01-31 The Trustees Of Princeton University Compositions and method for regulating apoptosis
WO2002096930A2 (en) 2001-05-31 2002-12-05 The Trustees Of Princeton University Iap binding peptides and assays for identifying compounds that bind iap
WO2002026775A2 (en) 2000-09-29 2002-04-04 Trustees Of Princeton University Compositions and methods for regulating apoptosis
WO2002030959A2 (en) 2000-10-13 2002-04-18 Abbott Laboratories Peptides derived from smac (diablo) and methods of use therefor
US20020160975A1 (en) 2001-02-08 2002-10-31 Thomas Jefferson University Conserved XIAP-interaction motif in caspase-9 and Smac/DIABLO for mediating apoptosis
WO2003018014A2 (en) 2001-08-23 2003-03-06 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods of inhibiting formation of vascular channels and profileration using pyridinone derivatives
CN101029080A (zh) 2001-11-21 2007-09-05 伯纳姆研究院 用于对iap抑制卡斯蛋白酶进行去阻遏的方法及组合物
US20060258581A1 (en) 2001-11-21 2006-11-16 Reed John C Methods and composition for derepressions of IAP-inhibited caspase
JP4541882B2 (ja) 2002-07-02 2010-09-08 ノバルティス アーゲー Ｓｍａｃタンパク質のアポトーシスタンパク質阻害物質（ｉａｐ）との結合に対するペプチド阻害剤
US20080199439A1 (en) 2003-02-12 2008-08-21 Mclendon George L IAP-binding cargo molecules and peptidomimetics for use in diagnostic and therapeutic methods
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
US20100093645A1 (en) 2004-01-16 2010-04-15 Shaomeng Wang SMAC Peptidomimetics and the Uses Thereof
CN1960728A (zh) 2004-01-16 2007-05-09 密歇根大学董事会 构象受限的smac模拟物及其应用
KR20060126548A (ko) 2004-02-05 2006-12-07 노파르티스 아게 (ａ) ＤＮＡ 토포이소머라제 억제제 및 (ｂ) ＩＡＰ 억제제조합물
US20070217607A1 (en) 2004-02-15 2007-09-20 Matrixview Limited Repetition Coded Compression For Encrypting Highly Correlated Data
AU2005228950B2 (en) 2004-03-23 2012-02-02 Genentech, Inc. Azabicyclo-octane inhibitors of IAP
NZ549925A (en) 2004-04-07 2010-08-27 Novartis Ag Inhibitors of IAP
WO2006014361A1 (en) 2004-07-02 2006-02-09 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
JP4828840B2 (ja) 2004-07-08 2011-11-30 パナソニック株式会社 表示パネルの駆動方法
US7674787B2 (en) 2004-07-09 2010-03-09 The Regents Of The University Of Michigan Conformationally constrained Smac mimetics and the uses thereof
US20100190688A1 (en) 2004-07-12 2010-07-29 Bin Chao Tetrapeptide analogs
DE602005022936D1 (de) 2004-12-20 2010-09-23 Genentech Inc Pyrrolidine als inhibitoren von iap
AU2006216450C1 (en) * 2005-02-25 2013-01-10 Medivir Ab Dimeric IAP inhibitors
US20070003535A1 (en) 2005-03-17 2007-01-04 Reed John C Methods and compositions for derepression of IAP-inhibited caspase
JP4954983B2 (ja) 2005-05-18 2012-06-20 ファーマサイエンス・インコーポレイテッド Ｂｉｒドメイン結合化合物
EP1888619B1 (en) 2005-05-25 2013-04-17 2cureX ApS Compounds modifying apoptosis
RU2007147959A (ru) 2005-06-08 2009-07-20 Новартис АГ (CH) Органические соединения
US20070203749A1 (en) 2005-08-09 2007-08-30 Sri Chunduru Business methods for compounds for treatment of proliferative disorders
AU2006279929A1 (en) 2005-08-09 2007-02-22 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Treatment of proliferative disorders
CA2564872C (en) 2005-10-25 2010-12-21 Aegera Therapeutics Inc. Iap bir domain binding compounds
CN101374829A (zh) 2005-12-19 2009-02-25 健泰科生物技术公司 Iap的抑制剂
MX2008008191A (es) 2005-12-20 2008-11-04 Novartis Ag Combinacion de un inhibidor iap y un taxano 7.
WO2007101347A1 (en) 2006-03-07 2007-09-13 Aegera Therapeutics Inc. Bir domain binding compounds
TWI543988B (zh) 2006-03-16 2016-08-01 科學製藥股份有限公司 結合於細胞凋亡抑制蛋白（ｉａｐ）之桿狀病毒ｉａｐ重複序列（ｂｉｒ）區域之化合物
CA2646186A1 (en) 2006-03-21 2007-11-29 Joyant Pharmaceuticals, Inc. Small molecule apoptosis promoters
EP2019671B1 (en) 2006-05-05 2014-09-24 The Regents Of The University Of Michigan Intermediates for the preparation of bivalent smac mimetics
US8202902B2 (en) 2006-05-05 2012-06-19 The Regents Of The University Of Michigan Bivalent SMAC mimetics and the uses thereof
WO2007131366A1 (en) 2006-05-16 2007-11-22 Aegera Therapeutics Inc. Iap bir domain binding compounds
BRPI0715195A2 (pt) * 2006-07-24 2013-06-11 Tetralogic Pharm Corp composto, mÉtodos para induzir e para estimular a apoptose em uma cÉlula, para intensificar a apoptose de cÉlulas patogÊnicas in vivo em um indivÍduo, e para tratar uma doenÇa, e, composiÇço farmacÊutica
US8143426B2 (en) 2006-07-24 2012-03-27 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation IAP inhibitors
PE20110217A1 (es) 2006-08-02 2011-04-01 Novartis Ag DERIVADOS DE 2-OXO-ETIL-AMINO-PROPIONAMIDA-PIRROLIDIN-2-IL-SUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DEL ENLACE DE LA PROTEINA Smac AL INHIBIDOR DE LA PROTEINA DE APOPTOSIS
AU2007318220A1 (en) 2006-10-19 2008-05-15 Novartis Ag Organic compounds
JP2010513561A (ja) 2006-12-19 2010-04-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｉａｐのイミダゾピリジンインヒビター
AU2008240153B2 (en) 2007-04-12 2013-01-31 Joyant Pharmaceuticals, Inc. SMAC mimetic dimers and trimers useful as anti-cancer agents
WO2008134679A1 (en) 2007-04-30 2008-11-06 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
EP2328412A4 (en) 2008-09-17 2012-03-14 Tetralogic Pharm Corp IPA INHIBITORS
EA201171415A1 (ru) 2009-05-28 2013-01-30 Тетралоджик Фармасьютикалз Корп. Ингибиторы белков семейства iap
US8481495B2 (en) 2009-05-28 2013-07-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation IAP inhibitors
US8283372B2 (en) * 2009-07-02 2012-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005084317A2 (en) * 2004-03-01 2005-09-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Dimeric small molecule potentiators of apoptosis
US20060025347A1 (en) * 2004-07-15 2006-02-02 Condon Stephen M IAP binding compounds
WO2006020060A2 (en) * 2004-07-15 2006-02-23 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Iap binding compounds

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PARK C.-M. ET AL.: BIOORG. MED. CHEM. LETT., vol. 15, 2005, pages 771-775, XP002390385, the whole document *
SUN H. ET AL.: J. AM. CHWEM. SOC., vol. 126, no. 51, 2004, pages 16686-16687, XP002390384, the whole document *

Also Published As

Publication number Publication date
US7517906B2 (en) 2009-04-14
JP5198880B2 (ja) 2013-05-15
MX2007010371A (es) 2008-01-11
IL185454A (en) 2013-01-31
US20160355547A1 (en) 2016-12-08
KR20080013855A (ko) 2008-02-13
US20100075911A1 (en) 2010-03-25
US20160052965A1 (en) 2016-02-25
HK1104300A1 (en) 2008-01-11
EP1851200A2 (en) 2007-11-07
US20110301151A1 (en) 2011-12-08
US9920093B2 (en) 2018-03-20
CA2598995A1 (en) 2006-08-31
PL1851200T3 (pl) 2014-06-30
US8022230B2 (en) 2011-09-20
BRPI0607988A2 (pt) 2009-10-27
KR101317661B1 (ko) 2013-10-15
AU2006216450B2 (en) 2011-12-22
AU2006216450A1 (en) 2006-08-31
EP2385038A1 (en) 2011-11-09
EA200701597A1 (ru) 2008-02-28
IL185454A0 (en) 2008-01-06
AU2006216450C1 (en) 2013-01-10
US8497297B2 (en) 2013-07-30
EP1851200B1 (en) 2014-01-15
JP2008531601A (ja) 2008-08-14
HK1118044A1 (en) 2009-01-30
CA2598995C (en) 2014-07-15
ES2456671T3 (es) 2014-04-23
US8822525B2 (en) 2014-09-02
CN103083644B (zh) 2014-05-28
CN103083644A (zh) 2013-05-08
US20060194741A1 (en) 2006-08-31
US20130289042A1 (en) 2013-10-31
US20140329823A1 (en) 2014-11-06
US9187490B2 (en) 2015-11-17
WO2006091972A3 (en) 2006-10-05
WO2006091972A2 (en) 2006-08-31
DK1851200T3 (da) 2014-04-14
CY1115972T1 (el) 2017-01-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA012810B1 (ru) Димерные ингибиторы ингибиторов белков апоптоза (iap)
EP2049563B1 (en) Dimeric iap antagonists
JP5642777B2 (ja) Ｉａｐ阻害剤
US8143426B2 (en) IAP inhibitors
JP2011520770A (ja) Ｉａｐ阻害剤
JP5631387B2 (ja) Ｉａｐ阻害剤
AU2012202098A1 (en) Dimeric IAP antagonists

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
TK4A Corrections in published eurasian patents