BRPI0715195A2 - composto, mÉtodos para induzir e para estimular a apoptose em uma cÉlula, para intensificar a apoptose de cÉlulas patogÊnicas in vivo em um indivÍduo, e para tratar uma doenÇa, e, composiÇço farmacÊutica - Google Patents

Abstract

COMPOSTO, MÉTODOS PARA INDUZIR E PARA ESTIMULAR A APOPTOSE EM UMA CÉLULA, PARA INTENSIFICAR A APOPTOSE DE CÉLULAS PATâGENICAS IN VIVO EM UM INDIVÍDUO, E PARA TRATAR UMA DOENÇA, E, COMPOSIÇçO FARMACÊUTICA. Miméticos de Smac que Inibem IAPs.

Description

"COMPOSTO, MÉTODOS PARA INDUZIR E PARA ESTIMULAR A APOPTOSE EM UMA CÉLULA, PARA INTENSIFICAR A APOPTOSE DE CÉLULAS PATOGÊNICAS IN VIVO EM UM INDIVÍDUO, E PARA TRATAR UMA DOENÇA, E, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA"

Este pedido reivindica prioridade para e benefício do Pedido Provisório U.S. N- 60/820.156 intitulado "Dimeric IAP Inhibitors" depositado em 24 de julho de 2006; os conteúdos totais dos quais são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade.

A apoptose (morte celular programada) desempenha um papel central no desenvolvimento e homeostase de todos os organismos multi- celulares. A apoptose pode ser iniciada dentro de uma célula a partir de um fator externo tal como uma quimiocina (um caminho extrínseco) ou por intermédio de um evento intracelular tal como um dano ao DNA (um caminho intrínseco). Alterações nos caminhos apoptóticos foram implicados em muitos tipos de patologias humanas, incluindo distúrbios de desenvolvimento, câncer, doenças autoimunes, assim como distúrbios neurodegenerativos. Um modo de ação das drogas quimioterapêuticas é a morte celular por intermédio da apoptose.

A apoptose é conservada através das espécies e executada primariamente pelas caspases ativadas, uma família de cisteína proteases com especificidade de aspartato em seus substratos. Estas proteases específicas de aspartase contendo cisteína ("caspases") são produzidas em células como zimogênios cataliticamente inativos e são proteoliticamente processados para se tornarem proteases ativas durante a apoptose. Uma vez ativadas, as caspases efetoras são responsáveis pela clivagem proteolítica de um espectro amplo de alvos celulares que por fim leva à morte celular. Em células sobreviventes normais que não receberam um estímulo apoptótico, a maior parte das caspases permanecem inativas. Se as caspases são aberrantemente ativadas, a sua atividade proteolítica pode ser inibida por uma família de proteínas evolucionariamente conservadas chamadas de IAPs (inibidores de proteínas de apoptose).

A família de IAP de proteínas suprime a apoptose pela prevenção da ativação da procaspases e inibição da atividade enzimática de caspases maduras. Diversos IAPs mamíferos distintos incluindo XIAP, c- IAP1, c-IAP2, ML-IAP, NAIP (proteína inibidora da apoptose neuronal), Bruce e survivina, foram identificados e todos eles exibem atividade anti- apoptótica em cultura de célula. Os IAPs foram originalmente descobertos em baculovírus pela sua capacidade funcional para substituir no lugar da proteína P35, um gene anti-apoptótico. Os IAPs foram descritas em organismos variando da Drosófíla ao ser humano e são conhecidos como sendo superexpressados em muitos cânceres humanos. Falando no geral, os IAPs compreendem de um a três domínios de repetição de IAP de Baculovírus (BIR) e a maioria deles também possuem um motivo de dedo de RTNG de terminal carboxila. O próprio domínio BIR é um domínio de ligação de zinco de cerca de 70 resíduos compreendendo 4 hélices alfa e 3 filamentos beta, com resíduos de cisteína e histidina que coordenam o íon zinco. É o domínio BIR que é acreditado causar o efeito anti-apoptótico pela inibição das caspases e inibindo assim a apoptose. XIAP é expressado ubiquosamente na maioria dos tecidos adulto e fetal. A superexpressão de XIAP em células de tumor foi demonstrada conferir proteção contra uma variedade de estímulos pró-apoptóticos e promove a resistência à quimioterapia. Compatível com isto, uma forte correlação entre níveis de proteína XIAP e a sobrevivência foi demonstrada para pacientes com leucemia mielógena aguda. A infra- regulagem da expressão de XIAP pelos oligonucleotídeos de anti-sentido foi mostrado sensibilizar células de tumor para a morte induzida por uma ampla faixa de agentes pró-apoptóticos, tanto in vitro quanto in vivo. Os peptídeos derivados de Smac/DIABLO também foram demonstrado sensibilizar várias linhas de célula de tumor diferentes à apoptose induzida por uma variedade de drogas pró-apoptóticas. Em células normais sinalizadas para passar pela apoptose, entretanto, o efeito inibitório mediado pelo IAP deve ser removido, um processo pelo menos em parte realizado por uma proteína mitocondrial chamada Smac (segundo ativador mitocondrial de caspases). Smac (ou, DIABLO), é sintetizado como uma molécula precursora de 239 aminoácidos; os 55 resíduos de terminal N serve como a seqüência de alvejamento da mitocôndria que é removida depois da importação. A forma madura de Smac contém 184 aminoácidos e comporta-se como um oligômero em solução. Smac e vários fragmentos destes foram propostos para o uso como alvos para a identificação de agentes terapêuticos.

Smac é sintetizado no citoplasma com uma seqüência alvej adora mitocondrial de terminal N que é proteoliticamente removida durante a maturação ao polipeptídeo maduro e é depois alvejada ao espaço inter-membrana da mitocôndria. No momento da indução da apoptose, Smac é liberado da mitocôndria no citossol, junto com o citocromo c, onde o mesmo se liga aos IAPs e possibilita a ativação da caspase, eliminando dessa maneira o efeito inibitório de IAPs na apoptose. Ao passo que o citocromo c induz a multimerização de Apaf-I para ativar a procaspase-9 e -3, Smac elimina o efeito inibitório de IAPs múltiplos. Smac interage essencialmente com todos IAPs que foram examinados até agora incluindo XIAP, c-IAP 1, c- IAP2, ML-IAP e survivina. Assim, Smac parece ser um regulador principal da apoptose em mamíferos.

Foi mostrado que Smac promove não apenas a ativação proteolítica de procaspases, mas também a atividade enzimática de caspase madura, ambas as quais dependem da sua capacidade para interagir fisicamente com IAPs. A cristalografia de raio X tem mostrado que os primeiros quatro aminoácidos (AVPI) de Smac maduro ligam-se a uma porção de IAPs. Esta seqüência de terminal N é essencial para ligar IAPs e bloquear seus efeitos anti-apoptóticos. As tendências correntes no planejamento de droga contra o câncer focaliza no alvejamento seletivo para ativar os caminhos da sinalização apoptótica dentro de tumores enquanto poupa as células normais. As propriedades específicas de tumor de agentes quimioterapêuticos específicos, tais como TRAIL foram relatadas. O ligante indutor de apoptose relacionado com o fator de necrose de tumor (TRAIL) é um de diversos membros da super família do fator de necrose de tumor (TNF) que induz a apoptose através do recrutamento de receptores de morte. TRAIL interage com um sistema de receptor não vulgarmente complexo, que nos seres humanos compreende dois receptores de morte e três receptores isca. TRAIL foi usado como um agente anticâncer sozinho e em combinação com outros agentes incluindo radiação ionizante. TRAIL pode iniciar a apoptose em células que superexpressam os fatores de sobrevivência Bcl-2 e Bcl-XL e pode representar uma estratégia de tratamento para tumores que adquiriram resistência às drogas quimioterapêuticas. TRAIL liga seus receptores cognatos e ativa a cascata de caspase utilizando moléculas adaptadoras tais como TRADD. A sinalização de TRAIL pode ser inibida pela superexpressão de cIAP-1 ou 2, indicando um papel importante para estas proteínas no caminho da sinalização. Correntemente, cinco receptores TRAIL foram identificados. Dois receptores TRAIL-Rl (DR4) e TRAIL-R2 (DR5) medeiam a sinalização apoptótica e três receptores não funcionais, DcRl, DcR2 e osteoprotegerina (OPG) podem atuar como receptores isca. Agentes que aumentam a expressão de DR4 e DR5 podem exibir atividade antitumor sinergística quando combinados com TRAIL.

A biologia básica de como os antagonistas de TAP funcionam sugere que eles podem complementar ou sinergizar outros agentes quimioterapêuticos/anti-neoplásticos e/ou radiação. Os agentes quimioterapêuticos/anti-neoplásticos e radiação seriam esperados induzir a apoptose como um resultado do dano ao DNA e/ou o rompimento do metabolismo celular.

A inibição da capacidade de uma célula cancerosa para replicar e/ou reparar o dano ao DNA intensificará a fragmentação do DNA nuclear e assim promoverá a célula para entrar no caminho apoptótico. As topoisomerases, uma classe de enzimas que reduzem a superespiralação no DNA pelo rompimento e reunião de um ou de ambos os filamentos da molécula de DNA, são vitais para os processos celulares, tais como replicação e reparo do DNA. A inibição desta classe de enzimas diminui a capacidade das células para replicar assim como para reparar DNA danificado e ativa o caminho apoptótico intrínseco.

Os caminhos principais que leva do dano ao DNA mediado pela topoisomerase à morte celular envolve a ativação de caspases no citoplasma pelas moléculas pró apoptóticas liberadas da mitocôndria, tais como Smac. O alistamento destes caminhos efetores apoptóticos é firmemente controlado pelos caminhos regulatórios a montante que respondem às lesões de DNA induzidas pelos inibidores da topoisomerase em células que passam pela apoptose. O início de respostas celulares às lesões do DNA induzidas pelos inibidores da topoisomerase é garantido pelas cinases de proteína que ligam aos rompedores de DNA. Estas cinases (os exemplos não limitantes das quais incluem Akt, JNK e P38) habitualmente chamadas de "sensores de DNA" medeiam o reparo do DNA, parada do ciclo celular e/ou apoptose pela fosforilação de um grande número de substratos, incluindo diversas cinases a jusante.

As drogas de quimioterapia com platina pertencem a um grupo

geral de agentes modificadores de DNA. os agentes modificadores de DNA podem ser qualquer composto químico altamente reativo que se liga com vários grupos nucleofílicos em ácidos nucléicos e proteínas e causam efeitos mutagênicos, carcinogênicos ou citotóxico. Os agentes modificadores de DNA funcionam por mecanismos diferentes, rompimento da função do DNA e morte celular; dano ao DNA/a formação de pontes ou ligações cruzadas entre átomos no DNA; e indução de desemparelhamento dos nucleotídeos levando a mutações, para se alcançar o mesmo resultado final. Três exemplos não limitantes de um agente modificador de DNA contendo platina são cisplatina, carboplatina e oxaliplatina.

Acredita-se que a cisplatina mate as células cancerosas pela ligação ao DNA e interferindo com seu mecanismo de reparo, levando eventualmente à morte celular. A carboplatina e a oxaliplatina são derivados da cisplatina que compartilham o mesmo mecanismo de ação. Os complexos de platina altamente reativos são formados intracelularmente e inibem a síntese do DNA pela ligação de modo covalente das moléculas de DNA para formar reticulações de DNA intrafilamento e interfilamento.

As drogas antiinflamatórias não esteroidais (NSAIDs) mostraram induzir a apoptose em células colorretais. Os NSAIDs parecem induzir a apoptose por intermédio da liberação de Smac a partir da mitocôndria (PNAS, 30 de novembro de 2004, vol. 101: 16897-16902). Portanto, o uso de NSAIDs em combinação com Smac miméticos seria esperado aumentar a atividade de cada droga em relação à atividade de cada droga independentemente.

Muitos compostos que ocorrem naturalmente isolados de bactérias, planta e animais podem demonstrar atividade biológica potente e seletiva em seres humanos incluindo atividades anticâncer e antineoplásticas. De fato, muitos produtos naturais ou seus derivados semi-sintéticos, que possuem atividade anticâncer, são já são habitualmente usados como agentes terapêuticos; estes incluem paclitaxel, etoposida, vincristina e camptotecina entre outros. Adicionalmente, existem muitas outras classes de produtos naturais tais como os indolocarbazóis e epotilonas que estão passando por avaliação clínica como agentes anticâncer. Um motivo estrutural reocorrente em muitos produtos naturais é a ligação de um ou mais resíduos de açúcar em uma estrutura de núcleo de aglicona. Em alguns casos, a porção de açúcar do produto natural é crítica para fabricar interações de proteína-ligante separadas no seu sítio de ação (isto é, farmacodinâmicas) e a remoção do resíduo de açúcar resulta em reduções significantes na atividade biológica. Em outros casos, a porção ou porções de açúcar são importantes para modular as propriedades físicas e farmacocinéticas da molécula. Rebecamicina e estaurosporina são representativos da família do indolocarbazol ligado a açúcar de produtos anticâncer naturais com atividade anti-cinase e anti- topoisomerase demonstrada.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção fornece antagonistas de IAP que são compostos peptidomiméticos que imitam a estrutura de ligação terciária e a atividade dos quatro aminoácidos do terminal N do Smac maduro aos IAPs. A invenção também fornece métodos de usar estes miméticos para modular a apoptose e além disso para propósitos terapêuticos.

Em um aspecto da presente invenção, um antagonista de IAP que é um composto homodimérico ou heterodimérico tendo a fórmula geral (I), representada abaixo e sais destes farmaceuticamente aceitáveis. Solvatos incluindo hidratos, estereoisômeros incluindo enantiômeros, formas cristalinas incluindo polimorfos e outros são abrangidos dentro do escopo da invenção.

Uma outra forma de realização da presente invenção é a combinação terapêutica de compostos da presente invenção com TRAIL ou outros agentes químicos ou biológicos que se ligam a e ativam o(s) receptor(es) de TRAIL. O TRAIL tem recebido atenção considerável recentemente por causa da descoberta de que muitos tipos de célula cancerosa são sensíveis para a apoptose induzida por TRAIL, enquanto que a maior parte das células normais parecem ser resistentes a esta ação de TRAIL. As células resistentes a TRAIL podem surgir por uma variedade de mecanismos diferentes incluindo a perda do receptor, presença de receptores isca ou superexpressão de FLIP que compete com a ligação da caspase-8 de zimogênio durante a formação de DISC. Na resistência a TRAIL, miméticos de Smac aumentam a sensibilidade da célula de tumor ao TRAIL levando às morte celular intensificada, as correlações clínicas das quais são esperadas ser a atividade apoptótica aumentada em tumores resistentes a TRAIL, resposta clínica melhorada, duração de resposta aumentada e por fim, taxa de sobrevivência do paciente intensificada. Em defesa disto, a redução nos níveis de XIAP pelo tratamento de anti-sentido in vitro foi mostrado causar a sensibilização de células de melanoma resistentes e células de carcinoma renal ao TRAIL (Chawla-Sarkar, et al., 2004). Os miméticos de Smac aqui divulgados ligam-se aos IAPs e inibem a sua interação com caspases, potenciando desta maneira a apoptose induzida por TRAIL.

Uma outra forma de realização da presente invenção fornece miméticos de Smac que atuam sinergisticamente com inibidores da topoisomerase para potenciar o seu efeito indutor apoptótica. Os inibidores da topoisomerase inibem a replicação e reparo de DNA, promovendo dessa maneira a apoptose e foram usados como agentes quimioterapêuticos. Os inibidores da topoisomerase promovem o dano do DNA pela inibição das enzimas que são requeridas no processo de reparo do DNA. Portanto, a exportação de Smac da mitocôndria no citossol celular é provocado pelo dano ao DNA causado pelos inibidores da topoisomerase.

Os inibidores da topoisomerase tanto da classe do Tipo I (camptotecina, topotecano, SN38 (metabólito ativo de irinotecano) quanto a classe do Tipo II (etoposida) mostram sinergia potente com os miméticos de Smac da invenção em uma linhagem de célula de glioblastoma multi- resistente (T98G), linhagem de câncer de mama (MDA-MB-231) e linhagem de câncer ovariano (OVCAR-3) entre outros. Outros exemplos de agentes inibidores da topoisomerase que podem ser usados incluem, mas não são limitados a, irinotecano, topotecano, etoposida, ansacrina, exatecano, gimatecano, etc. Outros inibidores da topoisomerase incluem, por exemplo, Aclacinomicina A, camptotecina, daunorrubicina, doxorrubicina, elipticina, epirrubicina e mitaxantrona.

Em uma outra forma de realização da invenção, o agente quimioterapêutico/anti-neoplástico pode ser um composto contendo platina. Em uma forma de realização da invenção o composto contendo platina é cisplatina. Cisplatina pode sinergizar com um peptidomimético Smac e potenciar a inibição de um IAP, tal como mas não limitado a XIAP, cIAP-1, c-IAP-2, ML-IAP, etc. Em uma outra forma de realização um composto contendo platina é carboplatina. Carboplatina pode sinergizar com um peptidomimético Smac e potenciar a inibição de um IAP, incluindo, mas não limitado a, XIAP, cIAP-1, c-IAP-2, ML-IAP, etc. Em uma outra forma de realização um composto contendo platina é oxaliplatina. A oxaliplatina pode sinergizar com um peptidomimético Smac e potenciar a inibição de um IAP, incluindo, mas não limitado a, XIAP, cIAP-1, c-IAP-2, ML-IAP, etc.

Em uma outra forma de realização da invenção, o agente quimioterapêutico/anti-neoplástico que sinergiza com um composto de acordo com a presente invenção é um taxano. Taxanos são anti-mitóticos, inibidores mitóticos ou agentes de polimerização de microtúbulo. Os taxanos incluem mas não são limitados a, docetaxel e paclitaxel.

Os taxanos são caracterizados como compostos que promovem a montagem de microtúbulos pela inibição da despolimerização de tubulina, bloqueando deste modo a progressão do ciclo celular através da deterioração centrossômica, indução de fusos anormais e supressão das dinâmicas de microtúbulo de fuso. O mecanismo único de ação de taxano está em contraste de outros venenos de microtúbulo, tais como alcalóides Vinca, colchicina e criptoficinas, que inibem a polimerização de tubulina. Os microtúbulos são polímeros celulares altamente dinâmicos fabricados de alfa-beta-tubulina e proteínas associadas que desempenham papéis durante a mitose pela participação na organização e função do fuso, garantindo a integridade do DNA segregado. Portanto, estes representam um alvo eficaz para a terapia contra o câncer.

Em uma outra forma de realização, qualquer agente que ativa o caminho apoptótico intrínseco e/ou causa a liberação de Smac ou citocromo c da mitocôndria tem o potencial para atuar sinergisticamente com um mimético de Smac.

Uma combinação de um peptidomimético de Smac e um agente quimioterapêutico/anti-neoplástico e/ou terapia de radiação de qualquer tipo que ativa o caminho intrínseco pode fornecer um método mais eficaz para destruir células de tumor. Os peptidomiméticos Smac interagem com IAP's, tais como XIAP, cIAP-1, cIAP-2, ML-IAP, etc. e bloqueiam a inibição mediada por IAP da apoptose enquanto que os agentes quimioterapêuticos/anti-neoplásticos e/ou terapia de radiação mata ativamente as células que se dividem pela ativação do caminho apoptótico intrínseco que leva à apoptose e morte celular. Como é descrito em mais detalhes abaixo, as formas de realização da invenção fornecem combinações de um pepidomimético de Smac e um agente quimioterapêutico/anti-neoplástico e/ou radiação que fornecem uma ação sinergística contra a proliferação celular não desejada. Esta ação sinergística entre um peptidomimético de Smac e um agente quimioterapêutico/anti-neoplástico e/ou terapia de radiação pode melhorar a eficiência do agente quimioterapêutico/anti-neoplástico e/ou terapia de radiação. Isto permitirá um aumento na eficácia de agentes quimioterapêuticos/anti-neoplásticos ou tratamento por radiação correntes permitindo que a dose do agente quimioterapêutico/anti-neoplástico fosse diminuída, fornecendo desse modo tanto um programa de dosagem mais eficaz assim como uma dose mais tolerável de agente quimioterapêutico/anti- neoplástico e/ou terapia de radiação.

Para simplicidade e propósitos ilustrativos, os princípios da invenção são descritos por referência principalmente às suas formas de realização ilustrativas específicas. Além disso, na seguinte descrição, numerosos detalhes específicos são apresentados de modo a fornecer um completo entendimento da invenção. Entretanto estará evidente, a uma pessoa de habilidade comum na técnica, que a invenção pode ser praticada sem limitação a estes detalhes específicos. Em outros casos, métodos e estruturas bem conhecidos não foram descritos em detalhes de modo a não obscurecer desnecessariamente a invenção.

Definições

"Alquila" e "alquileno" significam um grupo hidrocarboneto ramificado ou não ramificado, saturado ou não saturado (isto é, alquenila, alquenileno, alquinila, alquinileno) não cíclico alifático, tendo até 12 átomos de carbono a menos que de outro modo especificado. (Entretanto, se o alquenileno é especificado mas o alquinileno não é, então o alquinileno é excluído. Por exemplo, "alquileno ou alquenileno" excluem o alquinileno.) Quando usado como parte de um outro termo, por exemplo, "alquilamino", a porção alquila pode ser uma cadeia de hidrocarboneto saturada, entretanto também inclui cadeias carbônicas de hidrocarboneto não saturadas tais como "alquenilamino" e "alquinil-amino". Os exemplos de grupos alquila particulares incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, iso-butila, sec-butila, terc-butila, n-pentila, 2-metilbutila, 2,2-dimetilpropila, n-hexila, 2- metilpentila, 2,2-dimetil-butila, n-heptila, 3-heptila, 2-metilexila e outros. Os termos "alquila inferior", "alquila CrC4" e "alquila de 1 a 4 átomos de carbono" são sinônimos e usados intercambiavelmente para significar metila, etila, 1-propila, isopropila, ciclopropila, 1-butila, sec-butila ou t-butila. A menos que de outro modo especificado, grupos alquila opcionalmente substituídos podem conter um, dois, três ou quatro substituintes que podem ser os mesmos ou diferentes. Os exemplos dos grupos alquila substituídos acima incluem, mas não são limitados a; cianometila, nitro-metila, hidroximetila, tritiloximetila, propioniloximetila, aminometila, carboximetila, carboxietila, carboxipropila, alquiloxicarbonilmetila,

aliloxicarbonilaminometila, carbamoiloximetila, metoximetila, etóxi-metila, t- butoximetila, acetoximetila, clorometila, bromometila, iodo-metila, trifluorometila, 6-hidroxiexila, 2,4-dicloro (n-butila), 2-amino (iso-propila), 2- carbamoiloxietila e outros. O grupo alquila também pode ser substituído com um grupo carbociclo. Os exemplos incluem grupos ciclopropilmetila, ciclobutilmetila, ciclopentilmetila e cicloexilmetila, assim como os grupos etila, propila, pentila, hexila correspondentes, etc. Alquilas substituídos particulares são grupos metila substituídos. Os exemplos do grupo metila substituído incluem grupos tais como hidroximetila, hidroximetila protegida (por exemplo, tetraidropiranilóxi-metila), acetoximetila, carbamoiloximetila, trifluorometila, clorometila, carboximetila, bromometila e iodometila.

"Cicloalquila" significa um grupo hidrocarboneto saturado ou não saturado cíclico alifático, tendo até 12 átomos de carbono a menos que de outro modo especificado e inclui cicloalquila cíclico e policíclico, incluindo fundido.

"Amino" denota aminas primarias (isto é, -NH2), secundárias (isto é, -NRH) e terciárias (isto é, - NRR).

As aminas secundárias e terciárias particulares são alquilamina, dialquilamina, arilamina, diarilamina, aralquilamina e diaralquilamina. As aminas secundárias e terciárias particulares são metilamina, etilamina, propilamina, isopropilamina, fenilamina, benzil-amina dimetilamina, dietilamina, dipropilamina e disopropilamina.

"Arila" quando usada sozinha ou como parte de um outro termo significa um grupo aromático carbocíclico sendo fundido ou mão tendo o número de átomos de carbono designado ou se nenhum número é designado, até 14 átomos de carbono. Os grupos arila particulares incluem fenila, nafltila, bifenila, fenantrenila, naftacenila e outros (ver por exemplo, Lang's Handbook of Chemistry (Dean, J. A., ed) 13a ed. Tabela 7-2 [1985]). Em uma forma de realização particular um grupo arila é fenila. Fenila opcionalmente substituído ou arila opcionalmente substituído denotam um grupo fenila ou grupo arila que podem ser substituídos com um, dois, três, quatro ou cinco substituintes escolhidos, a menos que de outro modo especificado, de halogênio (F, Cl, Br, I), hidróxi, hidróxi protegido, ciano, nitro, alquila (tal como alquila CrC6), alcóxi (tal como alcóxi CrC6), benzilóxi, carbóxi, carbóxi protegido, carboximetila, carboximetila protegido, hidroximetila, hidroximetila protegido, aminometila, aminometila protegido, trifluorometila, alquil-sulfonilamino, arilsulfonilamino,

heterociclilsulfonilamino, hetero-ciclila, arila ou outros grupos especificados. Um ou mais grupos de metina (CH) e/ou metileno (CH2) nestes substituintes por sua vez podem ser substituídos com um grupo similar como aqueles mencionados acima. Os exemplos do termo "fenila substituído" inclui não está limitado a um grupo mono ou di (halo)fenila tal como 2-clorofenila, 2- bromofenila, 4-clorofenila, 2,6-diclorofenila, 2,5-dicloro fenila, 3,4- diclorofenila, 3-clorofenila, 3-bromofenila, 4-bromofenila, 3,4-dibromofenila, 3-cloro-4-fluorofenila, 2- fluorofenila e outros; um grupo mono ou di (hidróxi)fenila tal como 4-hidroxifenila, 3- hidroxifenila, 2,4-diidroxifenila, os derivados protegidos no hidróxi destes e outros; um grupo nitrofenila tal como 3-ou 4-nitrofenila; um grupo cianofenila, por exemplo, 4-cianofenila; um grupo mono ou di (alquila inferior)fenila tal como 4-metilfenila, 2,4- dimetilfenila, 2-metilfenila, 4-(iso-propil)fenila, 4-etilfenila, 3-(n-propil)fenila e outros; um grupo mono ou di (alcóxi)fenila, por exemplo, 3,4- dimetoxifenila, 3-metoxi-4-benziloxifenila, 3- metoxi-4-(l-clorometil) benzilóxi-fenila, 3-etoxifenila, 4-(isopropóxi)fenila, 4-(t-butóxi)fenila, 3- etóxi-4-metoxifenila e outros; 3 ou 4-trifluorometilfenila; um grupo mono ou dicarboxifenila ou (protegido carbóxi)fenila tal 4-carboxifenila; um mono ou di (hidroximetil)fenila ou (hidroximetila protegida)fenila tal como 3- (hidroximetila protegida)fenila ou 3,4-di (hidroximetil)fenila; um mono ou di (aminometil)fenila ou (aminometila protegida)fenila tal como 2- (aminometil)fenila ou 2, 4-(aminometila protegida)fenila; ou um mono ou di (N-(metilsulfonil-amino))fenila tal como 3-(N-metilsulfonilamino))fenila. Também, o termo "fenila substituído" representa grupos fenila dissubstituídos onde os substituintes são diferentes, por exemplo, 3-metil-4-hidroxifenila, 3- cloro-4-hidroxifenila, 2-metóxi-4-bromofenila, 4-etil-2-hidroxifenila, 3- hidróxi-4-nitrofenila, 2-hidróxi-4-clorofenila e outros, assim como grupos fenila trissubstituídos onde os substituintes são diferentes, por exemplo 3- metóxi-4-benzilóxi-6-metila sulfonilamino, 3-metóxi-4-benzilóxi-6-fenil sulfonilamino e grupos fenila tetrassubstituídos onde os substituintes são diferentes tais como 3-metóxi-4-benzilóxi-5-metil-6-fenil sulfonilamino. Grupos fenila substituídos particulares são grupos 2-clorofenila, 2- aminofenila, 2-bromofenila, 3-metoxifenila, 3-etóxi-fenila, 4-benziloxifenila, 4-metoxifenila, 3-etóxi-4-benziloxifenila, 3,4-dietoxi-fenila, 3-metóxi-4- benziloxifenila, 3 -metóxi-4-( 1 -clorometil)benzilóxi-fenila, 3 -metóxi-4-( 1 - clorometil)benzilóxi-6-metil sulfonil amino fenila. anéis de arila fundidos também podem ser substituídos com substituintes aqui especificados, por exemplo com 1, 2 ou 3 substituintes, da mesma maneira como os grupos alquila substituídos.

"Grupo heterocíclico", "heterocíclico", "heterociclo", "heterociclila" ou "heterociclo" sozinhos e quando usados como uma porção em um grupo complexo tal como um grupo heterocicloalquila, são usados intercambiavelmente e referem-se a qualquer um dos sistemas de anel mono, bi ou tricíclico, saturado ou não saturado, não aromático tendo o número de átomos designado, no geral de 5 a cerca de 14 átomos do anel, onde os átomos do anel são carbono e pelo menos um heteroátomo (nitrogênio, enxofre ou oxigênio). Em uma forma de realização particular o grupo incorpora de 1 a 4 heteroátomos. Tipicamente, um anel de 5 membros tem de 0 a 2 ligações duplas e anel de 6 ou 7 membros tem de 0 a 3 ligações duplas e os heteroátomos de nitrogênio ou enxofre podem ser opcionalmente oxidados (por exemplo, SO, SO2) e qualquer heteroátomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado. Os heterociclos não aromáticos particulares incluem morfolinila (morfolino), pirrolidinila, oxiranila, oxetanila, tetraidro- furanila, 2,3-diidrofuranila, 2H-piranila, tetraidropiranila, aziridinila, azetidinila, l-metil-2-pirrolila, piperazinila e piperidinila. Para se evitar dúvidas, "heterocicloalquila inclui heterocicloalquil alquila.

"Heteroarila" sozinha e quando usada como uma porção em um grupo complexo tal como um grupo heteroaralquila, refere-se a qualquer sistema de anel mono, bi ou tricíclico aromático tendo o número de átomos designado onde pelo menos um anel é um anel de 5, 6 ou 7 membros contendo de um a quatro heteroátomos selecionados do grupo nitrogênio, oxigênio e enxofre (Lang's Handbook of Chemistry, acima). São incluídos na definição quaisquer grupos bicíclicos onde qualquer um dos anéis heteroarila acima são fundidos a um anel benzeno. Os seguintes sistemas de anel são os exemplos de grupos heteroarila (sejam substituídos ou não substituídos) denotados pelo termo "heteroarila": tienila, furila, imidazolila, pirazolila, tiazolila, isotiazolila, oxazolila, isoxazolila, triazolila, tiadiazolila, oxadiazolila, tetrazolila, tiatriazolila, oxatriazolila, piridila, pirimidila, pirazinila, piridazinila, tiazinila, oxazinila, triazinila, tiadiazinila, oxadiazinila, ditiazinila, dioxazinila, oxatiazinila, tetrazinila, tiatriazinila, oxa-triazinila, ditiadiazinila, imidazolinila, diidropirimidila, tetraidro-pirimidila, tetrazol [1,5-b] piridazinila e purinila, assim como derivados fundidos em benzo, por exemplo benzoxazolila, benzofurila, benzotiazolila, benzotiadiazolila, benzotriazolila, benzoimidazolila e indolila. Particularmente "heteroarilas" incluem; l,3-tiazol-2-ila, 4-(carboximetil)-5-metil-l,3-tiazol-2-ila, sal sódico de 4-(carboximetil)-5-metil-l,3-tiazol-2-ila, l,2,4-tiadiazol-5-ila, 3-metil- l,2,4-tiadiazol-5-ila, l,3,4-triazol-5-ila, 2-metil-l,3,4-triazol-5-ila, 2-hidróxi- l,3,4-triazol-5-ila, sal sódico de 2-carbóxi-4-metil-l,3,4-triazol-5-ila, 2- carbóxi-4-metil-l,3,4-triazol-5-ila, l,3-oxazol-2-ila, l,3,4-oxadiazol-5-ila, 2- metil-l,3,4-oxadiazol-5-ila, 2-(hidroximetil)-l,3,4-oxadiazol-5-ila, 1,2,4- oxadiazol-5-ila, l,3,4-tiadiazol-5-ila, 2-tiol-l,3,4-tiadiazol-5-ila, 2-(metiltio)- 1,3,4- tiadiazol-5-ila, 2-amino-l,3,4-tiadiazol-5-ila, lH-tetrazol-5-ila, 1-metil- 1 H-tetrazol-5-ila, 1 -(1 -(dimetilamino)et-2-il)-1 H-tetrazol-5-ila, 1 - (carboximetil)-l H-tetrazol-5-ila, sal sódico de l-(carboximetil)-lH-tetrazol- 5-ila, 1-(ácido metilsulfônico)-lH-tetrazol-5-ila, sal sódico de 1-(ácido metilsulfônico)-lH-tetrazol-5-ila, 2-metil-lH-tetrazol-5-ila, 1, 2,3-triazol-5- ila, l-metil-l,2,3-triazol-5-ila, 2-metil-l,2,3-triazol-5-ila, 4-metil-1,2,3- triazol-5-ila, pirid-2-ila N-óxido, 6-metóxi-2-(n-óxido)-piridaz-3-ila, 6- hidroxipiridaz-3-ila, 1-metilpirid-2-ila, 1 -metilpirid-4-ila, 2-hidroxipirimid-4- ila, l,4,5,6-tetraidro-5,6-dioxo-4-metil-como-triazin-3-ila, l,4,5,6-tetraidro-4- (formilmetil)-5,6-dioxo-as-triazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-6-hidróxi-as-triazin- 3-ila, sal sódico de 2,5-diidro-5-oxo-6-hidróxi-as-triazin-3-ila, sal sódico de 2,5-diidro-5-oxo-6-hidróxi-2-metil-as-triazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-6-

hidróxi-2-metil-astriazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-6-metóxi-2-metil-como- triazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-as-triazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-2-metil-as- triazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-2,6-dimetil-as-triazin-3-ila, tetrazol[l ,5- b]piridazin-6-ila e 8-amino-tetrazol[l,5-b]-piridazin-6-ila. Um grupo alternativo de "heteroarila" inclui: 4-(carboximetil)-5-metil-l,3-tiazol-2-ila, sal sódico de 4-(carboximetil)-5-metil-l,3-tiazol-2-ila, 1, 3,4-triazol-5-ila, 2- metil-1,3,4- triazol-5-ila, lH-tetrazol-5-ila, l-metil-lH-tetrazol-5-ila, 1-(1- (dimetil-amino)et-2-il)-lH-tetrazol-5-ila, l-(carboximetil)-lH-tetrazol-5-ila, sal sódico de l-(carboximetil)-lH-tetrazol-5-ila, 1-(ácido metilsulfônico)-lH- tetrazol-5-ila, sal sódico de l-(ácido metilsulfônico)-lH-tetrazol-5-ila, 1,2,3- triazol-5-ila, l,4,5,6-tetraidro-5,6-dioxo-4-metil-as-triazin-3-ila, 1,4,5,6- tetraidro-4-(2-formilmetil)-5,6-dioxo-as-triazin-3-ila, sal sódico de 2,5-diidro- 5-oxo-6-hidróxi-2-metil-as-triazin-3-ila, 2,5-diidro-5-oxo-6-hidróxi-2-metil- as-triazin-3-ila, tetrazol[l,5-b)]piridazin-6-ila e 8-aminotetrazol[l,5- b]piridazin-6-ila.

Para se evitar dúvidas, arila inclui arila fundida que inclui, por

exemplo, naftila, indenila; cicloalquila inclui cicloalquila fundida que inclui, por exemplo, tetraidronaftila e indanila; heteroarila inclui heteroarila fundida que inclui, por exemplo, indoíla, benzofuranila, benzotienila; heterociclo fundida inclui heterocicloalquila fundida que inclui, por exemplo, indolinila, isoindolinila, tetraidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila.

"Opcionalmente substituído" significa que um átomo de H pode ser, mas não é necessariamente, substituído por um ou mais átomos diferentes. Uma pessoa de habilidade na técnica facilmente saberá ou pode facilmente averiguar, quais átomos ou porções podem ser substituídos por um átomo de hidrogênio ou átomos em uma dada posição. Os substituintes opcionais típicos são qualquer um ou mais de hidróxi, alquila, alquila inferior, alcóxi, alcóxi inferior, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, halogênio, pseudo-halogênio, halo-alquila, pseudo-haloalquila, carbonila, carboxila, mercapto, amino, nitro e tiocarbonila, mas outras porções também podem ser substituintes opcionais. Assim, por exemplo, nitrogênio opcionalmente substituído pode significar uma amida, sulfonamida, uréia, carbamato, alquilaminas, dialquilaminas, arilaminas, etc; alquila opcionalmente substituído inclui metila, etila, propila, isopropila, t-butila, etc.; arila opcionalmente substituído inclui fenila, benzila, tolila, piridina, naftila, imidazol, etc. Referência a um grupo como "opcionalmente substituído" abrange este grupo quando o mesmo é substituído como descrito acima ou, alternativamente, quando o mesmo não é substituído. Quando "opcionalmente substituído" é usado na frente de ou no final de uma listagem de grupos químicos, todos os tais grupos são opcionalmente substituídos (a menos que de outro modo indicado pelo contexto.)

Um "Ligante" é uma ligação ou grupo de ligação por meio do qual duas porções químicas são direta e covalentemente ligadas uma a outra ou são indiretamente ligadas por intermédio de uma porção química que covalentemente liga as duas porções químicas, em cada caso, para formar um homo ou heterodímero. Um Ligante (L), portanto, é uma ligação covalente única, dupla ou tripla ou é uma cadeia contígua, ramificada ou não ramificada, substituída ou não substituída, de 1 a cerca de 100 átomos, tipicamente de 1 a cerca de 20 átomos e tipicamente até cerca de 500 MW, por exemplo, cadeia de alquila, alquileno, alquilino, alquiloxialquila, alquilarilalquila ou alquila, alquileno, alquilino, alquiloxialquila, alquilarilalquila opcionalmente substituídos de 1 a 12 átomos. Os Ligantes Ilustrativos descritos, por exemplo, na US 20050197403 assim como no Pedido da Patente US Serial Número 11/363.387 depositado em 27/02/2006, ambos os quais são incorporados aqui por referência como considerado completamente apresentado.

"Pseudo-halogênios" são compostos inorgânicos binários da fórmula geral XY, onde X é um grupo cianeto, cianato, tiocianato etc. e Y é qualquer de X ou um halogênio verdadeiro. Nem todas as combinações são conhecidas como sendo estáveis. Os exemplos incluem cianogênio, (CN)2 e cianeto de iodo, ICN. Estes ânions comportam-se como halogênios e a presença das ligações duplas ou ligações triplas internas não parece afetar o seu comportamento químico.

"Inibidor" ou "antagonistas" significam um composto que reduz ou previne a ligação de proteínas de IAP às proteínas de caspase ou que reduz ou previne a inibição da apoptose por uma proteína de IAP ou que se liga a um domínio BIR de IAP em uma maneira similar à porção de terminal amino de Smac, isentando desse modo Smac de inibir a ação de um IAP.

Os "sais farmaceuticamente aceitáveis" incluem os sais de adição tanto de ácido quanto de base. O "sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável" refere-se àqueles sais que retêm a eficácia e propriedades biológicas das bases livres e que não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis, formados com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfurico, ácido nítrico, ácido carbônico, ácido fosfórico e outros e os ácidos orgânicos podem ser selecionados de classes alifáticas, cicloalifáticas, aromáticas, aralifáticas, heterocíclicas, carboxílicas e sulfônicas de ácidos orgânicos tais como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido glicônico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido málico, ácido maléico, ácido malonéico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido aspártico, ácido ascórbico, ácido glutâmico, ácido antranílico, ácido benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido embônico, ácido fenilacético, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido salicíclico e outros. DESCRIÇÃO DETALHADA DAS FORMAS DE REALIZAÇÃO PREFERIDAS

Também deve ser mencionado que como aqui usado e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "uma" e "o", "a" incluem referências plurais a menos que o contexto claramente dite de outro modo. A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos aqui usados têm os mesmos significados como habitualmente entendido por uma pessoa de habilidade comum na técnica. Embora quaisquer métodos similares ou equivalentes àqueles aqui descritos possam ser usados na prática da invenção ou no teste de formas de realização da presente invenção, os métodos preferidos são agora descritos. Todas as publicações e referências aqui mencionadas são incorporadas por referência. Nada aqui deve ser interpretado como uma admissão de que a invenção não é designada antedatar tal divulgação em virtude da invenção anterior.

Os termos "mimético," "mimético de peptídeo" e "peptidomimético" são aqui usados intercambiavelmente e no geral referem- se a uma molécula de peptídeo, peptídeo parcial ou não peptídica que imita a estrutura de ligação terciária ou atividade de um peptídeo nativo selecionado ou domínio funcional de proteína (por exemplo, motivo de ligação ou sítio ativo). Estes miméticos de peptídeo incluem peptídeos recombinante ou quimicamente modificados, assim como agentes não peptídicos tais como miméticos de droga de molécula pequena, como ainda descrito abaixo.

Como aqui usado, os termos "farmaceuticamente aceitável", "fisiologicamente tolerável" e variações gramaticais destes, quando eles se referem às composições, carregadores, diluentes e reagentes, são usados intercambiavelmente e representam que os materiais podem ser administrados a um ser humano.

Como aqui usado "paciente" ou "paciente" referem-se a um animal ou mamífero incluindo, mas não limitado a, ser humano, cão, gato, cavalo, vaca, porco, ovelha, cabra, galinha, macaco, coelho, rato, camundongo, etc.

Como aqui usado, o termo "terapêutico" significa um agente utilizado para tratar, combater, aperfeiçoar, prevenir ou melhorar uma condição ou doença não desejadas de um paciente. As formas de realização da presente invenção são direcionadas para promover a apoptose e assim a morte celular.

Os termos "quantidade terapeuticamente eficaz" ou "quantidade eficaz", como aqui usado, podem ser usados intercambiavelmente e referem-se a uma quantidade de um componente de composto terapêutico da presente invenção. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto terapêutico é uma quantidade predeterminada calculada para se alcançar o efeito desejado, isto é, para promover eficazmente a apoptose, preferivelmente pela eliminação de uma inibição de IAP da apoptose, mais preferivelmente pela inibição de uma ligação de IAP a uma caspase.

Foi demonstrado de acordo com a presente invenção que os compostos que ligam IAP da presente invenção são capazes de potenciar a apoptose de células. Os seguintes compostos são ilustrativos de dímeros da presente invenção.

em que Zja, Z2a, Zib e Z2b são independentemente CH ou N; Ria e Rib são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituídos; e quando R2a' é H então R2a e Ria podem juntos formar um anel de aziridina ou azetidina e quando R2b' é H então R2b e Rib podem juntos formar um anel de aziridina ou azetidina;

R2a, R2a', R2b e R2b' são independentemente H ou alquila opcionalmente substituído, cicloalquila ou heterocicloalquila; ou quando R2a' é H então R2a e Ria podem juntos formar um anel de aziridina ou azetidina e quando R2b' é H então R2b e Rib podem juntos formar um anel de aziridina ou azetidina;

R3a, R3b, R^a e R^b são independentemente H ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituídos; ou, R^a e R3a ou R^ e R3b,

ou ambos, são átomos de carbono ligados por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituído de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C-O; R5a, R^a, R5b e R6b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituídos; ou R5a e R^a ou R5b e R^b ou ambos, são átomos de carbono ligados por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituído de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O;

R7a, R7b, R8a, Rgb são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituídos; ou R7a e R8a ou R7b e R8b ou ambos, podem ser ligados por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 3 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O para formar um anel aromático ou não aromático;

η pode ser o mesmo ou diferente em cada uso e é O, 1 ou 2;

Xa é -O-, -N(La-Ri0a)-, -S-, -C(La-Ri0a)=CH- opcionalmente substituído, -C(O)-O-, -C(O)-N(La-Rioa)-, -N=C(La-R,0a)-;

Xb é -O-, -N(Lb-Riob)-, -S-, -C(Lb-Ri0b)=CH- opcionalmente substituído, -C(O)-O-, -C(O)-N(Lb-Riob)-, -N=C(Lb-Riob)-;

La e Lb são independentemente uma ligação covalente ou alquileno CrC4;

Wa, Wb, R]0a e Ri0b são definidos nos parágrafos de (a) até (e), que seguem:

(a) quando Wa e Wb juntos são um Ligante, então Xa ou Xb são independentemente -O-, -S- ou -C(O)-O-; Ri0a e Riob, respectivamente, são ausentes; ou

(b) quando Wa e Wb juntos são um Ligante; Xa é -N(La- Rioa)-, -C(La-Rioa)=CH-, -N=C(La-Ri0a)- ou -C(O)-N(La-Ri0a)-; Xb é - N(Lb-Riob)-, -C(Lb-Riob)=CH-, -N=C(Lb-Riob)- ou -C(O)-N(Lb-Ri0b)-; R]0a e Ri0b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; ou

(c) quando Wa e Wb juntos são um Ligante; Xa é -N(La-Rioa)- , -C(La-Rioa)=CH-, -N=QLa-R10a)- ou -C(O)-N(La-R10a)-; Xb é -N(Lb- Riob)-, -C(Lb-Riob)=CH-, R10b)- ou -C(O)-N(Lb-R10b)-; Ri0a e R,0b juntos

são um Ligante; ou

(d) quando Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa e Wb são independentemente H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; Xa é -N(La-Rioa)-, -C(La-R10a)=CH-, -N=C(La-R10a)- ou -C(O)-

N(La-Rioa)-; Xb é -N(Lb-R10b)-, -C(Lb-Ri0b)=CH-, -N=C(Lb-Riob)- ou - C(O)-N(Lb-Riob)-; Ri0a e Ri0b juntos são um Ligante; ou

(e) quando Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa é H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; Xa é - N(La-Rioa)-, -C(La-

Ri0a)=CH-, -N=C(La-Ri0a)- ou -C(O)-N(La-R,0a)-; Xb é -O-, -N(LbRiob)-, - S-, -C(Lb-Riob)=CH-, -C(O)-O-, -N=QLb-R10b)-, -C(O)-N(Lb-Ri0b)-; e Lb é uma ligação covalente e Ri0b é ausente ou é H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; e Wb e Rioajuntos são um Ligante.

Os compostos ilustrativos têm a fórmula (II): em que

Xa é -N-, -OC(R16a)-, -N=C- ou -C(O)N-;

Xb é -N-, -C=C(Rieb)-, -N=C- ou -C(O)N-;

La e Lb são independentemente uma ligação covalente ou alquileno CrC4;

Ya é -C-, -N- ou -N+-; tal que,

Quando Ya é -C- então R10a, R1 ia, R12a, Ri3a, R14a, R15a e Rióa são, independentemente, -H, halogênio ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima opcionalmente substituídos; contanto que quando Xa é -N- ou -C(O)-N-, -LrRioa é ligado ao átomo -N-; e, quando Xa é -C=C(Ri6a)- ou -N=C-, -LrRi0a é ligado ao átomo -C=; e

Quando Ya é -N- ou -N+-, então Rna é ausente ou -O- e Rioa, Rua, R^a, Ri4a, R^a e Ri6a são, independentemente, -H, halogênio ou alquila opcionalmente substituído, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima; contanto que quando X é -N- ou -C(O)-N- , -LrRio é ligado ao átomo de -N-; e, quando X é -C=C(Ri6a)- ou -N=C-, -L1- Rioa é ligado ao átomo -C=;

Yb é -C-, -N- ou -N+-; tal que,

Quando Yb é -C- então Ri0b, Ri ib, R12b, R^b, Ri4b, Ri5b e Ri ôb são, independentemente, -H, halogênio ou alquila opcionalmente substituído, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima; contanto que quando Xb é -N- ou -C(O)-N-, -LI-R10b é ligado ao átomo -N-; e, quando Xb é - C=C(Ri6b)- ou -N=C-, -LrRiob é ligado ao átomo -C=; e

Ri2b, R]3b, Ri4b, R15b e R]6b são, independentemente, -H, halogênio ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima opcionalmente substituídos; contanto que quando Xb é -N- ou -C(O)- N-, -Ll-R10b é ligado ao átomo -N-; e, quando Xb é -C=C(Ri6b)- ou -N=C-, - Li-Riob é ligado ao átomo -C=.

N e Z2a é CH e Zib é N e Z2b é CH, então pelo menos um dos seguintes é verdadeiro:

(i) R5a e R^a não são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente;

(ii) R5a e R6a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e R5a é dissubstituído;

(iii) R5a e R6a são ambos átomos de carbono ligados por uma

Quando Yb é -N- ou -N+-, então Rnb é ausente ou -O- e Riob,

Os compostos ilustrativos têm a fórmula (IV):

o „

0

Em compostos ilustrativos da fórmula I, II ou IV, quando Zia é ligação única covalente e R^a é mono ou dissubstituído;

(iv) R5a e R^a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e R3a e R4a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituído de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O.

(v) R5a e R^a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e nem R2a nem R2a' são H.

Nas formas de realização ilustrativas dos compostos da fórmula I, II ou IV, um ou quaisquer dois ou mais das seguintes limitações podem se aplicar:

R3a, R4a, R3b e R^ são independentemente selecionados de H, metila, etila, isopropila, isobutila, sec-butila, terc-butila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila, opcionalmente substituídos com hidroxila, mercapto, sulfonila, alquilsulfonila, halogênio, pseudo-halogênio, amino, carboxila, alquila, haloalquila, pseudo-haloalquila, alcóxi ou alquiltio; ou R3a, R4a, R3b e R^ são independentemente alquila inferior ou cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituídos em que os substituintes opcionais são hidróxi ou alcóxi inferior;

R2a e R2b são independentemente selecionados de -H, metila, fluorometila, difluorometila, etila, fluoroetila, hidroxietila e cicloalquila;

Ria e Rjb são independentemente selecionados de H, metila, alila, propargila, etila, hidroxietila, cicloalquila ou cicloalquilmetila;

Wa e Wb juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; e Xa e Xb são independentemente -O-, -S- ou -C(O)-O-; ou Wa e Wb não são covalentemente ligados e Wa e Wb são independentemente H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituídos; ou Wb e Ri0a (ou Wa e Riob) juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n;

La e Lb são cada um, uma ligação covalente;

Ri0a e R10b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; ou R10a e Ri0b juntos são um alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n;

Zia e Z]b são ambos N e Z2a e Z2b são ambos C;

Ri0a e Ri0b não são heterocicloalquila ou heteroarila.

Em formas de realização ilustrativas, Wa, Wb, Ri0a e R]0b são definidos nos parágrafos de (a) até (e), que seguem:

(a) quando Wa e Wb juntos são -L- e formam, por exemplo, uma ligação covalente, alquileno, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila ou uma cadeia de alquileno opcionalmente substituído de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; e Xa e Xb são respectivamente -O-, -S- ou - C(O)-O-; Ri0a e R]0b são ausentes;

(b) quando Wa e Wb juntos são -L- e formam, por exemplo, uma ligação covalente, alquileno, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, arilalquileno, arilalquilalquileno, heteroarila, heteroarilalquileno ou uma cadeia de alquileno opcionalmente substituído, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; e Xa e Xb são respectivamente -N(La-Ri0a)-, -C(La-R)0a)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(La-Ri0a)- ou -N(Lb-Riob)-, -C(Lb- Ri0b)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(Lb-Riob)-; Rioa e R]0b são independentemente Η, hidroxila, hidroxialquila, alquila, alcóxi, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila, em cada caso opcionalmente substituídos; ou

(c) quando Wa e Wb juntos são -L- e formam, por exemplo, uma ligação covalente, alquileno, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila ou uma cadeia de alquileno opcionalmente substituído de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; e Xa e Xb são respectivamente -N(LaRi0a)-, -C(La-Ri0a)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(LaRi0a)- ou -N(Lb- RlOb)-, -C(Lb-Riob)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(Lb-R,0b)-; Ri0a e Ri0b juntos são -L- e formam, por exemplo, uma cadeia de alquileno ou alquiloxialquileno opcionalmente substituídos de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; ou

(d) quando Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa e Wb são independentemente H, Cl, Br, F, CN, CO2H, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila ou alquila opcionalmente substituído, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila; Xa e Xb são respectivamente -N(La-R]0a)-, -C(La-Ri0a)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(La-Rioa)- ou -N(Lb-Ri0b)-, -C(Lb-Riob)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(Lb-Rjob)-; e Ri0a e Riobjuntos são -L- e formam, por exemplo, uma cadeia de alquileno ou alquiloxialquileno opcionalmente substituídos de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; ou

(e) quando Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa é H, Cl, Br, F, CN, CO2H, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila ou alquila opcionalmente substituído, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila; Xa é -N(La-Ri0a)-, -C(LaRi0a)=CH- opcionalmente substituído ou -C(O)-N(La-Ri0a)-; Xb é -O-, -N(Lb-Riob)-, -S- , -C(Lt)-R10b)=CH- opcionalmente substituído, -C(O)-O-, -C(O)-N(Lb-R10b)-; e Riob é ausente ou H, hidroxila, hidroxialquila, alquila, alcóxi, alcoxialquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila, em cada caso opcionalmente substituído; e Wb e R10a juntos são -L- e formam, por exemplo, uma ligação, alquileno, cicloalquila, arila ou heteroarila ou uma cadeia de alquileno opcionalmente substituído, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n.

Os compostos ilustrativos são compostos tendo a fórmula

em que Ria, Rib, R2a, R2b, R3a e R3b são independentemente alquila inferior, alcóxi inferior, alcanol inferior ou cicloalquila C3-C6; Rua e Ri4b são independentemente -OH, alcóxi inferior ou alquila inferior; Rua, Riib, R^a, R^b, Ri3a, R!3b são independentemente -H ou halogênio.

Os compostos ilustrativos são compostos tendo a fórmula:

em que Ria, Rib, R2a, R2b, R3a e R3b são independentemente alquila inferior, alcóxi inferior, alcanol inferior ou cicloalquila C3-C6; Rna e Ri7b são independentemente -OH, alcóxi inferior ou alquila inferior; RJ2a e R!2b são independentemente -H ou halogênio. Esquemas Químicos Ilustrativos:

As abreviações usadas nas seguintes preparações, que são ilustrativas da síntese dos compostos da invenção no geral, são: Cbz: Benziloxicarbonila; Boc: terc-butiloxicarbonila; THF: tetraidrofurano; DCM: diclorometano; DDQ: 2,3-dicloro-5,6-diciano-l,4-benzoquinona; NMP; N- metilpirrolidinona; DMF: dimetilformamida; TFA: ácido trifluoroacético; HOAc ou AcOH: ácido acético; Hex: hexanos; HPLC: cromatografia líquida de alto desempenho; TLC: cromatografia de camada fina; EtOAc: acetato de etila; DIPEA: diisopropiletilamina; TEA: trietilamina; HATU: hexafluoro fosfato de 2-(7-Aza-lH-benzo-triazol-l-il)-l,l,3,3-

tetrametilurônio.

Os compostos da fórmula 8 podem ser preparados usando métodos esboçados em Angiolini et al. (Eur. J. Org. Chem. 2000, 2571-2581), Harris et al. (Org. Lett. 2003, 5, 1847-1850), 0'Neil et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 5434-5438), Grossmith et al. (Synlett 1999, 10, 1660- 1662) e na Publicação do Pedido de Patente U.S. Número 20060025347 e Pedido de Patente US Serial Número 11/363.387 depositado em 27/2/2006, todas as quais são aqui incorporadas por referência como completamente apresentadas e descritas nos Esquemas IeH. Esquema 1 Esquema II

10

1. RCM (catalisador Giubb)

2. M2, Pd-em-C

1. TFA, DCM

2.C&T-CI, TÊA

BocHN'

θαι

«JHCbz

CazHN

1.H2, Pd-orvC

2. ψ

MATU1 t»EA 3. H2, Pdon-C

Os compostos da fórmula 18 podem ser preparados usando métodos esboçados nos Esquemas III e IV e descritos em Jako et al. (J. Org. Chem. 1991, 56, 5729-5733), Kozikowski et al. (J. Am. Chem. Soe. 1995, 117, 6666-6672), Sheppard et al. (J. Med. Chem. 1994, 37, 2011-2032), e na Publicação do Pedido da Patente U.S. Número 20060025347 e Pedido da Patente US Serial Número 11/363,387 depositadas em 27/2/2006, todas as quais são aqui incorporadas por referência como consideradas completamente apresentadas, e descritas nos Esquemas III e IV. Esquema III

1.BH3,THP -V0n

-O^ 3.HWE"Í01 «J.V t. ^CI-TEA

Cta-N-^ DIBAL1 BFS 1, 2' .Ap,--

COiH 10 QH 1,0, Br

Cbz-N

V

Pd(QAc)?, nBu4NCI Cbz-N NaHCOZ1 K2C03

depois NaOH, MeOH

1. aq, HCI. EtOH

2. TFA (pukj) ) HN,

3. DDQ. DioxaiiD CtaHN

f NH

1, \J

NHCtJZ

1. TaClfTEA

2. AcSH1 NaH

3. NaOH1 MeOH

CbzHN- HS.

i HN1 J

KHCXZ

- Q Esquema IV

HATUtOlPSA

3. N2. Pd-Qfl-C

Os compostos da fórmula 29 podem ser preparados usando métodos esboçados em Liu et ai. (Tetrahedron 2003, 59, 8515-8523), Mish et al. (J. Am. Chem, Soe. 1997, 119, 8379-8380), e na Publicação do Pedido da Patente U.S. Número 20060025347 e Pedido da Patente US Serial Número 11/363,387 depositadas em 27/2/2006, todas as quais são aqui incorporadas por referência como consideradas completamente apresentadas, e descritas nos Esquemas V e VI. Esquema V

ctawO +

H COiEt BocW "C0?H

HATU1

19

t. ÍÍ8H4

2. Swwm IOJ ^ CbzN '

3. HWE homologação

20

A. DSBAL. Bf 3

BocHN'

Pd(OAc|2, riBu4NO \ OsN^) f<íaHC02, K2C03 m—'

depois NaOH1 WôOH BocHN''

1. MsafTEA

OH 2·

BODHN

1 a., diisoamilboraiio tí> M202, NIaOAc

SocHN

ctahO

25

1. DesaKMsrlm JOJ

2. H2, Pd-Dr.-C

Esquema VI

BocHN

1. TFA, DCM

2. F3CCO-Q, TEA

1. TFA (puro)

2. DDQ, dioxano

K2C03, MeOH

2 M=

HATU1 DIPEA 3. TFA, DCM

Os compostos da fórmula 36 podem ser preparados usando métodos esboçados em Hoffmann et oi. (J. Org. Chem. 2003, 68, 62-69) e na Publicação do Pedido da Patente U.S. Número 20060025347 e Pedido da Patente US Serial Número 11/363,387 depositadas em 27/2/2006, todas as quais são aqui incorporadas por referência como consideradas completamente apresentadas, e descritas nos Esquemas VII e VIII. Esquema VII

Esquema VIII

podem ser preparados substancialmente como descritos nos Esquemas IX- XXIX, abaixo. Esquema IX 1-terc-butil éster 2 metil-éster do ácido 3-hidroxipirrolidino- 1,2-dicarboxílico (38): Uma solução que contém terc-butil éster do ácido 3- hidróxi-pirrolidino-l,2-dicarboxílico (37, 16 g, 71 mmol)1 em DMF (100 ml) foi esfriada a 0°C. A esta solução foi adicionado K2CO3 (16 g, H6 mmol) seguido por iodometano (5,4 ml, 87 mmol). A mistura de reação foi lentamente aquecida até a temperatura ambiente em 1 hora no tempo no qual tornou-se uma solução homogênea amarela. Esta mistura foi aquecida a 90°C por 1 hora e depois esfriada até a temperatura ambiente. A solução foi diluída com salmoura, extraída com dietila depois, secada em Na2SC^ anidro, filtrada, e concentrada para produzir 14,8 g (87 %) do 38 como um óleo amarelo,

1Hodges, J. A.; Raines, R. T. J. Am. Chem. Soe. 2005, 45,

15923.

Demange, L.; Cluzeau, J.; Menez, A.; Dugave, C. Tetrahedron Lett. 2001, 42, 651. Esquema X

OH -OTBS

TBDMSCS, imidazol \ /

------- N—C

O-^ V-OMe

O O

39

y{

1-terc-butil éster 2 metil-éster do ácido 3-(terc-butildimetil- silanilóxi)pirrolidino-l,2-dicarboxílico (39): Uma solução que contém álcool 38 (14,8 g, 60 mmol) em DCM (150 ml) foi esfriada a 0°C. A esta solução foi adicionado imidazol (5,4 g, 79 mmol) seguido por cloreto de t-butil- dimetilsilila (10 g, 66 mmol) em duas porções. A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente em 1 hora. Depois de 5 horas, a solução foi diluída com HCl IMe extraída duas vezes com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SÜ4 anidro, filtrados, e concentrados para produzir 21,2 g (99 %) do 39 como um óleo amarelo. 1RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 4,38 - 4,34 (m, 1H), 4,18 (bs, rotômeros, 0,5H), 4,04 (app d, J = 2,1 Hz, rotômeros, 0,5H), 3,74 (s, 3H), 3,62 - 3,50 (m, 2H), O^ V-OMe O^

Λ 0 0 A0

2,04 - 1,96 (m, 1H), 1,85 - 1,78 (m, 1H), 1,46 (s, rotômero menor), 1,41 (s, 9H), 0,92 (s, rotômero menor), 0,86 (s, 9H), 0,11 (s, 6H), 0,09 (s, rotômero menor) ppm. Esquema XI

\ J LiBH4, THF \ 7

N —"1 - ' »» N—\

-OH

39 ' s 40

Terc-butil éster do ácido 3-(terc-Butildimetilsilanilóxi)-2-

hidróxi-metilpirrolidino-1 -carboxílico (40): Uma solução que contém o 39 (12 g, 33 mmol) em THF (50 ml) foi esfriada a O0C. LiBH4 em THF (2 M, 20 ml) foi adicionada em uma maneira às gotas. Depois de 1 hora a solução foi aquecida até a temperatura ambiente. Depois de 2 horas, a solução foi diluída com MeOH, depois H2O, e concentrada. O resíduo foi extraído com EtOAc, lavado com HCl 1 M, NaHCO3 saturado aquoso, salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado, e concentrado para produzir 9,5 g (87 %) do 40 como um óleo incolor,3

λ

Herdeis, C.; Hubmann, H. P.; Lotter, H. Tetrahedron: Asymmetry, 1994, 5, 119. Esquema XII

,.,.OTBS /Vr-OTas

Swem [OI ^ /

O^" \~0H ~ />-< "V0

o o H

N

40 * 41

Terc-butil éster do ácido 3-(terc-butildimetilsilanilóxi)-2- formilpirrolidino-1 -carboxílico (41): Uma solução que contém cloreto de oxalila 2 M em DCM (22 ml) em DCM (40 ml) foi esfriada a -78°C. Uma solução que contém DMSO (3,2 ml, 45 mmol) em DCM (20 ml) foi adicionada em uma maneira às gotas. Depois de 45 minutos, álcool 40 (9,5 g, 29 mmol) em DCM (50 ml) foi adicionado em uma maneira às gotas. Depois de 45 minutos, TEA (16 ml, 115 mmol) foi adicionado em uma maneira às gotas. A mistura de reação foi aquecida e mantida a O0C por 15 minutos. A solução foi diluída com HCl 1 M, extraída com DCM, lavada com salmoura, secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 9,5 g (100 %) do 41 como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 9,53 (d, J = 29 Hz, 1H), 4,39 - 4,36 (m, 1H), 4,24 (m, rotômero, 0,5H), 3,93 (m, rotômero, 0,5H), 3,73 - 3,49 (m, 2H), 1,98 - 1,86 (m, 2H), 1,47 (s, rotômero menor), 1,41 (s, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,09 (s, 6H), 0,07 (s, rotômero menor) ppm. Esquema XIII

etoxicarbonilvinil)pirrolidino-1 -carboxílico (42): A uma suspensão que contém NaH (60 %, 1,9 g, 46 mmol) em THF (50 ml) foi lentamente adicionado fosfonoacetato de trietila (7,5 ml, 38 mmol) em THF (20 ml) a O0C. Depois de 30 minutos, uma solução que contém aldeído 41 (9,5 g, 29 mmol) em THF (40 ml) foi depois adicionada em uma maneira às gotas. A solução tornou-se de cor laranja e a agitação foi continuada por 05 hora. A mistura de reação foi diluída com salmoura, extraída com EtOAc, secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 8,6 g (74 %) do 42 como um óleo amarelo que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 6,82 - 6,72 (m, 1H), 5,87 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,24 - 4,11 (m, 4H), 3,67 - 3,46 (m, 2H), 1,94 - 1,89 (m, 1H), 1,79 (m, 1H), 1,48 (s, rotômero, 4,5H), 1,41 (s, rotômero, 4,5H), 1,31 - 1,24 (m, 3H), 0,91 - 0,88 (m, 9H), 0,09 - 0,07 (m, 6H) ppm. Esquema XIV

Terc-butil éster do ácido 3-(terc-butildimetilsilanilóxi)-2-(2-

O

ores

CO.,Et

DlBAL, BF3 Et2O

OH

43 Terc-butil éster do ácido 3-(terc-butildimetilsilanilóxi)-2-(3- hidroxipropenil)pirrolidino-l -carboxílico (43): Uma solução que contém o 42 (8,6 g, 22 mmol) em DCM (80 ml) foi esfriada a -78°C. a esta solução foi lentamente adicionado eterato trifluoreto de boro (2,8 ml, 22 mmol) seguido pela adição de DIBALH 1 M em DCM (60 ml). A solução foi agitada a -78°C por 1 hora. A mistura de reação foi depois tratada com EtOAc e agitada por minutos. A mistura de reação foi deixada aquecer a -5°C. A reação foi extinta pela adição às gotas de HCl 1 Μ. A mistura foi diluída com DCM e H2O e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM.

Os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, filtrados, e concentrados para produzir 8,5 g do 43 como um óleo amarelo claro que foi usado sem outra purificação. 1RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 5,70

(m, 1H), 5,59 - 5,55 (m, 1H), 4,16 - 4,13 (m, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,72 - 3,35 (m, 4H), 1,95 - 1,88 (m, 2H), 1,77 - 1,67 (m, 2H), 1,48 - 1,44 (m, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,08 - 0,03 (m, 6H) ppm. Esquema XV

silanilóxi)]-2-(3-metanossulfoniloxipropenil)pirrolidino-l-carboxílico (44): A uma solução que contém álcool 43 (8,5 g, 24 mmol) em DCM (30 ml) foi adicionada trietilamina (4,0 ml, 29 mmol). A solução foi esfriada em um banho de gelo e cloreto de metanossulfonila (2 ml, 26 mmol) foi adicionado em uma maneira às gotas. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos. Água (10 ml) foi adicionada e o produto foi extraído com DCM (3 χ 50 ml). Os extratos orgânicos foram combinados e lavados com HCl 1 M, salmoura, secados em Na2SO4 anidro, filtrados, e concentrados para produzir 8,9 g do 44 (92 % em duas etapas) como um óleo

Terc-butil éster do ácido trans-2R-[3-(terc-butildimetil- laranja que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 5,73 (m, 1H), 4,71 (d, J = 5,4

2H), 3,02 (s, 3H),194 - 1,89 (m, 1H), 1,79 - 1,78 (m, 1H), 1,45 - 1,43 (m, 9H), 0,92 - 0,87 (m, 9H), 0,09 - 0,07 (m, 6H) ppm. Esquema XVI

fluorofenil)amino]propenil}]-3-(terc-butildimetilsilanilóxi-pirrolidino-l- carboxílico (45): A uma solução que contém N-(2-bromo-5- fluorofenil)acetamida (5,7 g, 24 mmol) em DMF (30 ml) foi adicionado NaH (60 %, 1,2 g, 30 mmol) a 0°C. Depois de 30 minutos, a solução foi aquecida e mantida na temperatura ambiente por 30 minutos. A esta solução foi lentamente adicionado mesilato 44 (8,9 g, 24 mmol) em DMF (30 ml) a 0°C. a reação foi deixada aquecer lentamente até a temperatura ambiente em 1 hora. Depois de 2 horas, a solução foi diluída com salmoura, extraída com éter dietílico, lavada duas vezes com salmoura, secada em Na2SC^ anidro, filtrada, e concentrada para produzir 12 g do 45 bruto (o produto conteve acetanilida não reagida que co-eluiu na TLC que foi usada sem outra purificação.

Hz, 1H), 4,30 - 4,15 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,54 - 3,33 (m,

Terc-butil éster do ácido trans-2R-[2-{3-[acetil-(2-bromo-5-

Esquema XVII

TBAFt THF

Λ ' Terc-butil éster do ácido trans-2R-Γ2- (3-Tacetil^-bromo-S-

fluorofenil)aminolpropenin]-3-hidroxipirrolidino-l-carboxílico (46): A uma solução que contém o 45 bruto (11 g, aprox., 19 mmol) em THF (30 ml) foi adicionado TBAF 1 M /THF (25 ml) na temperatura ambiente. Depois de 1 hora a solução foi diluída com EtOAc, lavada com HCl 1 M, salmoura, secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada. O resíduo foi absorvido em gel de sílica e purificado pela cromatografia em gel de sílica cintilante (hexanos/EtOAc 1:1 a 5 % de MeOH/DCM) para produzir 4,2 g do álcool 46 como uma espuma laranja. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 7,65 (m, 1H), 7,04 - 7,02 (m, 2H), 5,62 (m, 1H), 5,40 - 5,34 (m, 1H), 4,74 - 4,69 (m, 1H), 4,26 - 4,00 (m, 2H), 3,74 - 3,38 (m, 3H), 2,69 - 2,57 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,46 (s, 9H) ppm. Esquema XVIII

indo 1-3 -ilmetil)] -3 -hidroxipirrolidino-1 -carboxíIico (47): A uma solução que contém o 46 (5,7 g, 12,5 mmoles) em DMF (40 ml) foram adicionados K2CO3 (1,7 g, 12,3 mmol), formiato de sódio (0,86 g, 12,7 mmol), cloreto de tetrabutilamônio (3,5 g, 12,7 mmol), e Pd(OAc)2 (0,32 g, 1,4 mmol) na temperatura ambiente. Esta mistura de reação foi imersa em um banho de óleo pré aquecido a 90°C. Depois de 4 horas, a mistura de reação foi esfriada em um banho de gelo, diluída com salmoura, extraída com EtOAc, lavada duas vezes com salmoura, secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 4,5 g do indol bruto 47 como uma espuma laranja que foi usada sem outra purificação.

jL

F

Terc-butil éster do ácido trans-2R[2-(l-acetil-6-fluoro-lH-

25 Esquema XIX

Terc-butil éster do ácido trans-2R-r2-(6-Fluoro-1 H-indol-3- ilmetim-3-hidroxipirrolidino-l-carboxílico (48): A uma solução que contém acetato 47 (2,5 g, 6,6 mmol) em MeOH (15 ml) foi adicionado NaOH 1 M (8 ml) na temperatura ambiente. Depois de 40 minutos, a solução foi concentrada, diluída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em Na2SÜ4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado pela NP-HPLC (SiO2, 40 % de EtOAc/hexanos crescendo para EtOAc em 30 minutos) para produzir 1,3 g de indol 48 como uma espuma amarela clara. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 8,75 (s, rotômero, 0,5H), 8,71 (s, rotômero, 0,5H), 7,52 (dd, J - 9,0, 14,1 Hz, 1H), 7,03 - 6,81 (m, 3H), 4,15 - 4,08 (m, 2H), 3,96 (dd, J = 3,3, 10,2 Hz, 1H), 3,57 - 3,33 (m, 2H), 3,22 - 3,09 (m, 1H), 2,60 - 2,49 (m, 2H), 2,01 - 1,91 (m, 1H), 1,79 - 1,75 (m, 1H), 1,50 (s, 9H) ppm. Esquema XX

Terc-butil éster do ácido trans-2R|"3-Acetóxi-2-(6-fluoro-lH- indol-3-ilmetil)]pirrolidino-l-carboxílico (49): A uma suspensão que contém indol 48 (0,35 g, 1,1 mmol) em DCM (10 ml) foi adicionado anidrido acético (0,15 ml, 1,5 mmol) seguido por DMAP (10 mg, 0,08 mmol) na temperatura ambiente. Depois de 30 minutos, a solução tornou-se homogênea. Depois de 1 hora a solução foi diluída com HCl 1 M, extraída com DCM, secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 0,36 g (87 %) de 49 como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) 68,62 (s, rotômero, 0,5Η), 8,57 (s, rotômero, 0,5Η), 7,62 - 7,51 (m, 1Η), 7,03 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,90 - 6,85 (m, 1H), 5,05 (s, 1H), 4,18 - 4,08 (m, 1H), 3,51 - 3,11 (m, 3H), 2,90 - 2,44 (m, 1H), 2,23 (s, 3H), 1,86 - 1,84 (m, 2H), 1,53 (s, 9H) ppm. Esquema XXI

pirrolidin-3-il éster (50): A uma solução que contém carbamato 49 (0,48 g, 1,3 mmol) em DCM (15 ml) a O0C foi adicionado TFA (3 ml), depois de 15 minutos, a reação foi aquecida e mantida na temperatura ambiente por 1 hora.

A solução foi concentrada, diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 saturado, secada em Na2S04 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 0,32 g (89 %) de amina 50 como um óleo laranja que foi usado sem outra

purificação. 1HRMN (CDCl3, 300 MHz) δ 8,25 (s, 1 H), 7,52 (dd, J = 5,4, 8,7 Hz, 1H), 7,03 - 6,91 (m, 2H), 6,88 (ddd, J = 0,9, 8,7, 17,4 Hz, 1H), 5,01 - 4,98 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,07 - 3,00 (m, 2H), 2,82 (dd, J - 8,1, 14,7 Hz, 1H), 2,14 - 2,03 (m, 2H), 2,03 (s, 3H), 1,82 - 1,79 (m, 1H) ppm. Esquema XXII

Pirrolidina protegida por Cbz (51): Uma solução que contém amina 50 (0,65 g, 2,4 mmol) em DCM (25 ml) foi tratada com CbzCl (0,35 ml, 2,5 mmol) seguido por TEA (0,5 ml, 1,4 mmol) a O0C. Depois de 15 minutos, a solução foi aquecida até a temperatura ambiente. Depois de 1 hora

Trans-2R-ácido acético 2-(6-fluoro-lH-indol-3-ilmetil)l- a mistura de reação foi diluída com HCl 1 M e extraída com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4, filtrados e concentrados. O óleo residual foi purificado pela HPLC preparativa (SiO2, 20 a 100 % de EtOAc/hexanos) para dar 0,98 g (100 %) de 51 como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): mistura -1:1 de rotâmeros de amida, δ 8,27 (s, 1H), 7,62 (app q, J = 5,4 Hz, 0,5 H), 7,16 (app q, J = 5,1 Hz, 0,5 H), 7,44 - 7,37 (m, 5H), 6,89 - 6,92 (m, 1H), 6,83 (m, 0,5 H), 6,65 (m, 0,5 H), 5,30 - 5,16 (m, 2H), 5,09 - 5,07 (m, 1H), 4,23 (dd, J = 3,3, 9 Hx, 0,5H), 4,12 (dd, 3,6, 9,6 Hz, 0,5 H), 3,58 - 3,45 (m, 2H), 3,30 - 3,12 (m, 1H), 2,85 - 2,64 (m, 1H), 1,99 - 1,86 (m, 5H) ppm. Esquema XXIII

Biindol (52): Indol 51 (0,98 g, 2,4 mmol) foi dissolvido em TFA (20 ml) a O0C e a reação foi monitorada pela análise de LC/MS. Depois de 5 horas, a mistura de reação foi diluída com K2CO3 saturado frio, e extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaHCO3 saturado depois salmoura, secados em Na2SO4, anidro filtrados e concentrados para dar 0,8 g de um óleo amarelo que foi usado sem outra purificação. Este óleo foi diluído com EtOAc (10 ml) e tratado com DDQ (315 mg, 1,4 mmol) na temperatura ambiente. Depois de 15 minutos, a solução verde escura foi diluída com NaHCO3 saturado, e extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaHCO3 saturado, salmoura, secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados. O resíduo bruto foi absorvido em gel de SiO2 e purificado pela cromatografia cintilante (SiO2, hexanos/EtOAc 2:1) para dar 0,6 g (61 %) do 52 como uma espuma amarela clara. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 11,2 (s, 1H), 7,51 - 7,26 (m, 8H), 6,93 (app t, J = 8,4 Hz, 1H), 5,36 (s, 2H), 5,24 (s, 1H), 4,17 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,74 (app t, J = 9,6 Hz, 1H), 3,62 - 3,56 (m, 2H), 2,89 (app t, J = 14,1 Hz, 1H), 2,24 - 2,17 (m, 1H), 1,85 (s, 3H) ppm. Espectro de massa, m/z 820,8 (M+ H)+, 842,7 (M+ Na)+. Esquema XXIV

Bis-pirrolidina (53): A uma solução que contém biindol 52 (0,6 g, 0,73 mmol) em MeOH (20 ml) foi adicionado 10 % de Pd/C (50 mg). A mistura de reação foi agitada sob H2 usando um aparelho de Parr. depois de 3 horas, a mistura foi filtrada através de Celite®, e enxaguada com MeOH e EtOAc. o filtrado foi concentrado a vácuo para produzir 0,32 g (80 %) do 53 como um sólido branco amarelado que foi usado sem outra purificação. Espectro de massa, m/z 550,4 (M)+. Esquema XXV

Dímero protegido por Boc (54): Uma solução que contém N- Boc-Thr(Me)-OH (152 mg, 0,65 mmol) em NMP (4 ml) foi esfriada a 0°C. A esta solução foi adicionado HATU (224 mg, 0,60 mmol) seguido por DIPEA (0,15 ml, 0,80 mmol). Depois de 5 minutos, diamina 53 (180 mg, 0,33 mmol) em NMP (5 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente. Depois de 16 horas, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, lavada com HCl 1 M, NaHCO3 saturado, salmoura, secada em Na2SC^ anidro, filtrada e concentrada para produzir 290 mg do 54 como um óleo laranja que foi usado sem outra purificação. Esquema XXVI

Diamina (55): Uma solução que contém o 54 (0,29 g, 0,3 mmol) em DCM (15 ml) foi esfriada a O0C. A esta solução foi adicionado TFA (3 ml). Depois de 15 minutos, a mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente. Depois de 1,5 hora, a mistura de reação foi concentrada, diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 saturado, secada em Na2S04 anidro, filtrada e concentrada para produzir 0,19 g (82 %) do diamina 55 como uma espuma laranja clara que foi usada sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 11,7 (s, 1H), 7,51 (dd, J = 1,8, 11,7 Hz, 1H), 7,38 - 7,28 (m, 1H), 6,93 (app t, J = 7,2 Hz, 1H), 5,30 (d, J - 3,3 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,01 (app t, J = 9 Hz, 1 H), 3,82 (app q, J = 9,9 Hz, 1H), 3,68 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 3,56 - 3,50 (m, 1H), 3,46 (s, 3H), 2,92 - 2,80 (m, 2H), 2,67 - 2,63 (m, 1H), 2,36 - 2,29 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,26 - 1,23 (m, 4H) ppm. Espectro de massa, m/z 780,8 (M)+. Esquema XXVII

Dipeptídeo protegido por Boc (56): Uma solução que contém N-Boc-N(Me)Ala-OH (58 mg, 0,28 mmol) em NMP (4 ml) foi esfriada a O0C. A esta solução foi adicionado HATU (106 mg, 0,28 mmol) seguido por DIPEA (0,1 ml, 0,57 mmol), depois de 5 minutos, diamina 55 (110 mg, 0,14 mmol) em NMP (5 ml) foi adicionada às gotas. A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente. Depois de 16 horas, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, lavada com HCl 1 M, NaHCO3 saturado, salmoura, secada em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada para produzir 126 mg do 56 como um óleo laranja que foi usado sem outra purificação. Esquema XXVIII Dipeptídeo (57): Uma solução que contém o 56 (126 mg, 0,11 mmol) em DCM (15 ml) foi esfriada a O0C. A esta solução foi adicionado TFA (3 ml). Depois de 15 minutos, a reação foi aquecida até a temperatura ambiente. Depois de 1,5 hora, a mistura de reação foi concentrada, diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 saturado, secada em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada para produzir 100 mg (95%) do 57 como um óleo laranja que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 11,73 (s, 1H), 8,49 (d, J - 8,1 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 2,1, 9,9 Hz, 1H), 7,39 - 7,34 (m, 1H), 6,94 (app t, J = 9 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,98 (app q, J = 3,6 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,88 - 3,73 (m, 2H), 3,61 - 3,56 (m, 1H), 3,45 (s, 3H), 3,15 (app q, J = 6,9 Hz, 1H), 2,92 - 2,80 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,35 - 2,29 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,40 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,28 - 1,24 (m, 6H) ppm. Espectro de massa, m/z 951,0 (M+ H)+.

Esquema XXIX

Bis-(3-OH-pirrolidino)-dipeptídeo (58): Uma solução que contém o 57 (100 mg, 0,11 mmol) em MeOH (10 ml) foi tratada com NaOH 1 M (1 ml) na temperatura ambiente. Depois de 45 minutos, a solução foi concentrada, diluída com HOAc e água e purificada pela RP-HPLC [Dynamax Microsorb Cl8 60A, 8 μ, 41,4 mm χ 25 cm; Fluxo: 40 ml/min; Detetor: 272 nm; Solvente A: água v/v 0,1 % de HOAc, Solvente B: ACN v/v 0,1% de HOAc; Método: de 10 a 90 % de B em 30 minutos]. As frações contendo produto foram combinadas, congeladas, e liofilizadas para produzir 40 mg do 58 como um sólido branco. RMN (CDCl3, 300 MHz): mistura -4:1 de rotâmeros, δ 11,77 (s, 1H), 10,78 (s, menor), 8,20 (d, J - 7,8 Hz, 1H), 7,92 (d, 9,9 Hz, menor), 7,54 (dd, 1 = 1,8, 9,6 Hz, 1H), 7,04 (dd, J - 1,8, 9,9 Hz, menor), 7,38 - 7,25 (m, 2H), 6,92 - 6,87 (m, 1H), 5,0 (dd, J = 3,9, 8,1 Hz, menor), 4,84 (dd, J = 3,9, 8,1 Hz, 1H), 4,33 (d, J - 2,4 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,05 - 3,89 (m, 1H), 3,79 - 3,74 (m, 1H), 3,55 (app d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 3,16 - 3,05 (m, 2H), 2,82 - 2,69 (m, 2H), 2,47 - 2,37 (m, 6H), 2,14 - 2,08 (m, 1H), 1,94 - 1,85 (m, 1H), 1,40 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 1,28 - 1,23 (m, 4H) ppm. Espectro de massa, m/z 866,9 (M)+.

as químicas esboçadas nos Esquemas acima utilizando os intermediários sintéticos descritos nos seguintes esquemas. Esquema XXX

carboxílico (60): Um frasco de três bocas de 500 ml equipado com um agitador suspenso e entrada de nitrogênio foi carregado com uma solução de cloreto de oxalila DCM (20,5 ml, 0,041 mol) e DCM anidro (100 ml) e esfriada a -78°C. Uma solução de DMSO anidro (3,45 ml, 0,044 mol) em DCM (20 ml) foi adicionada às gotas com agitação. Depois de 30 minutos, álcool 59 (7,35 g, 0,034 mol)1 foi adicionado em DCM (40 ml) em um maneira às gotas. Depois de 30 minutos, Et3N (23,7 ml, 0,17 mol) foi adicionado resultando na formação de uma suspensão branca. A mistura de

Antagonistas de IAP adicionais podem ser preparados usando

59

80

61

Terc-butil éster do ácido 2-formil-3-metil-pirrolidino-l- reação foi transferida a um banho gelo/água a O0C e mantida por 30 minutos. A mistura de reação foi extinta pela adição de água. O produto foi extraído com DCM e os extratos orgânicos combinados foram lavados sucessivamente com água, HCl 1 M, e salmoura. A fase orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 7,05 g (99 %) de aldeído 60 que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 9,45 (s, rotâmero menor), 9,40 (s, 1 H, rotâmero maior), 3,78 - 3,35 (m, 3H), 2,3 - 2,0 (m, 2H), 1,70 - 1,55 (m, 1H), 1,47 (s, rotâmero menor), 1,42 (s, 9H, rotâmero maior), 1,15 (d, J = 6 Hz, 3H) ppm. 1Ver: Herdeis, C.; Hubmann, Η. P. Tetrahedron Asymmetry

1992, 3, 1213-1221; e, Ohfune, Y.; Tomita, Am. Chem. Soe. 1982, 104, 3511 -3513.

Terc-butil éster do ácido 2-(2-etoxicarbonil-etil-3-metil- pirrolidino-l-carboxílico (61): Um frasco de fundo redondo de 3 bocas de 500 ml foi carregado com hidreto de sódio (60 %, 1,77 g, 0,044 mol) em THF anidro (100 ml) sob nitrogênio e esfriado a 10°C. Uma solução de acetato de trietilfosfono (9,15 g, 0,041 mol) em THF (50 ml) foi adicionada às gotas à suspensão de NaH/THF. Seguida pela adição de aldeído bruto 60 (7,25 g, 0,034 mol) em THF (15 ml) e adicionado em uma maneira às gotas. Depois de ~1 hora, a reação foi completada pela análise de TLC [30 % de EtOAc/Hexanos: Rf(60) 0,7; Rf(61) = 0,75]. A mistura de reação foi extinta pela adição de NH4Cl saturado aquoso. O produto foi extraído com EtOAc, lavado com HCl 1 M, água, salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado, e concentrado para produzir 13,3 g do 61 bruto (quant.) que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 6,8 (m, 1H), 5,82 (m, 1H), 4,2 (m, 2H), 4,0 - 3,25 (m, 3H), 2,2 - 1,85 (m, 2H), 1,70 - 1,55 (m, 1 H), 1,47 (s, rotâmero menor), 1,42 (s, 9H, rotâmero maior), 1,15 (d, 6 Hz, 3H) ppm. Esquema XXXI

61

DlBAL, BF5 eterato

OH

Terc-butil éster do ácido 2-(3-hidróxi-propenil)-3-metil-

pirrolidino-l-carboxílico C62): Uma solução que contém 61 bruto (16,7 g, 0,059 mol) em DCM (150 ml) foi esfriada a -78°C. BF3 Et2O (8,9 ml, 0,07 mol) foi adicionado seguido pela adição às gotas de DIBAL (2 M/DCM, 200 ml, 0,4 mol). Depois de 2 horas, a análise de TLC indicou o consumo completo do 61 [a análise de TLC: hexano/EtOAc 1:1, Rf(62) = 0,3]. EtOAc (40 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida a -15°C. A mistura de reação foi cuidadosamente extinta com HCl 1 M até o pH = 2. O produto foi extraído com DCM. Os extratos orgânicos foram lavados com HCl 1 M, água, e salmoura, secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados. O 62 bruto foi purificado pela cromatografia em gel de sílica (hexanos/EtOAc 2:1) para produzir 7,2 g (51 %) do 62. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) 85,8 - 5,5 (m,

2H), 4,18 (m, 2H), 4,0 - 3,25 (m, 3H), 2,2 - 1,85 (m, 2H), 1,55 - 1,3 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,15 (d, J = 6 Hz, 3H) ppm. Esquema XXXII

metilpirrolidino-1 -carboxílico (63): A uma solução que contém o 62 (6,0 g, 0,025 mol) em DCM (25 ml) a O0C foi adicionado Et3N (4,5 ml, 0,032 mol). Depois de 5 minutos, uma solução que contém cloreto de metanossulfonila (2,33 ml, 0,03 mol) em DCM (5 ml) foi adicionado às gotas. Depois de 2 horas, a análise de TLC revelou consumo completo de 62 [hexanos/EtOAc

Terc-butil éster do ácido 2-(3-Metanossulfonilóxi-propenil)-3- 1:1, Rf(63) = 0,5; Rf(62) = 0,4]. A mistura de reação foi vertida água gelada e extraída com DCM. Os extratos orgânicos foram lavados com água, salmoura, e secados em Na2SO4 anidro, filtrados, e concentrados para produzir 7,05 g (89 %) de 63 bruto como um óleo marrom claro que foi usado sem outra

purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) 85,8 - 5,5 (m, 2H), 4,69 (d, J = 6,15 Hz, 2H), 3,85 - 3,3 (m, 3H), 3,0 (s, 3H), 2,0 - 1,9 (m, 1H), 1,55 - 1,30 (m, 1H), 1,40 (s, 9H), 1,0 (d, J = 6,74 Hz, 3H) ppm.

3-metil-pirrolidino-l-carboxílico (64): A uma suspensão de NaH (60 %, 1,44 g, 0,036 mol) em DMF (15 ml) a O0C foi adicionada uma solução que contém 2-bromo-5-fluoroacetanilida (8,35 g, 0,036 mol) em DMF (10 ml). Depois de minutos, uma solução que contém o 63 bruto (9,58 g, 0,03 mol) em DMF (10 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta vertendo-se sobre água gelada contendo HCl 1 Μ. O produto foi extraído com éter dietílico, lavado com água, salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado. O produto foi purificado pela cromatografia em gel de sílica cintilante (hexano/EtOAc 2:1) para produzir 5,41 g (45 %) do 64 como um óleo viscoso marrom claro.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 7,62 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 5,65 - 5,25 (m, 2H), 4,9 - 4,7 (m, 1H), 4,3 - 4,1 (m, 1H), 3,85 - 3,3 (m, 4H), 2-1,9 (m, 1H), 1,8 (s, 3H) 1,55 - 1,3 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 0,96 (d, J - 6,15 Hz, 3H) ppm. Espectro de massa, m/z 354,36 (M - Boc)+. Esquema XXXII

Ácido 2-{3-Γacetil-(2-bromo-5-fluoro-fenil)-aminol-propenin- Terc-butil éster do ácido 2-(l-acetil-6-fluoro-lH-indol-3-ilmetil- 3-metil-pirrolidino-1 -carboxílico (65): Uma solução que contém o 64 (5 g, 0,011 mol), Ii-Bu4NCl (3,3 g, 0,012 mol), K2CO3 (1,65 g, 0,012 mol), e NaHCO2 (0,81 g, 0,012 mol) em DMF (20 ml) foi desgaseificada sob alto vácuo. Acetato de paládio (0,49 g, 0,002 mol) foi adicionado e a mistura de reação heterogênea foi imersa em um banho de óleo pré aquecido (80 a 85°C). Depois de 3 horas a análise de TLC revelou consumo completo de 64 [hexano/EtOAclrl, Rf(64) = 0,4, Rf(65) = 0,5]. A mistura de reação foi esfriada em um banho de gelo e éter dietílico (100 ml) foi adicionado. A mistura foi filtrada através de Celite® e os sólidos foram lavados com éter dietílico. O filtrado foi lavado com água, salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado. O produto bruto foi purificado pela fase de HPLC normal (10 - 100 % de EtOAc/hexano em 50 minutos) para produzir 2,2 g (54 %) do 65 como óleo marrom viscoso. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 8,22 - 8,1 (m, 1H), 7,7 - 7,5 (m, 1H), 7,15 - 6,97 (m, 2H), 3,8 - 2,65 (m, 4H), 2,6 (s, 3H), 2,12 - 1,85 (m, 1 Η), 1,62 (s, 1 Η), 1,42 (s, 9H, rotâmero maior), 1,4 (s, rotâmero menor), 0,9 (d, J = 6 Hz, 3H) ppm. Espectro de massa, m/z = 274,5 (M - BOC)+.

Terc-butil éster do ácido 2-(6-Fluoro-lH-indol-3-ilmetil)-3- metil-pirrolidin-1-carboxílico (66): A uma solução que contém 65 (2,2 g, 0,006 mol) em MeOH (15 ml) foi adicionado NaOH 1 M (6 ml, 0,006 mol) a O0C. Depois de 30 minutos, a análise de TLC revelou consumo completo de 65 [EtOAc/hexanos 1:1, Rf(65) = 0,6; Rfó6) = 0,5]. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc. A fase orgânica foi lavada com HCl 1 M, água, salmoura, secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrado para produzir 2,11 g (quant.) do 66 bruto que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) 89,0 (s, 1H, rotâmero maior), 8,85 (s, rotâmero menor), 7,62 - 7,5 (m, 1H), 7,1 - 6,72 (m, 3H), 3,8 - 2,7 (m, 5H), 2,15-1,3 (m, 3H), 1,55 (s, 9H), 0,85 (d, J - 7 Hz, 3H) ppm.

6-Fluoro-3-(3-metil-piirolidin-2-ilmetil)- lH-indol (67): À solução contendo 66 (0,89 g, 0,0024 mol) em DCM (20 ml) a 0°C foi adicionado TFA (4 ml). Depois de 2 horas, a análise de TLC revelou consumo completo de

66 [10 % de MeOHZDCM, Rf(66) = 0,7, Rf(67) - 0,3], A mistura de reação foi concentrada a vácuo, diluída com DCM, lavada com NaHCOs aquoso, salmoura,

secada em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para produzir 0,6 g (86 %) do

67 que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) 69,0 (br s, 1 H), 7,6 - 7,35 (m, 1H), 7,1 - 6,7 (m, 3H), 4,2 (br m, 1H), 3,2 - 2,5 (m, 5H), 2,1 - 1,2 (m, 3H), 1,05 (d, J = 6,74 Hz, 3H) ppm.

Esquema XXXIII

Benzil éster do ácido 2-(3-["acetil-(3-bromo-piridin-2-il)-

amino]-propenil)-4-('terc-butil-dimetilsilanilóxi)-pirrolidino-l-carboxílico (69): Sob uma atmosfera de nitrogênio a O0C, NaH (0,89 g, 23,0 mmol) foi adicionado em porções a uma solução que contém 2-acetilamino-3- bromopiridina (4,12 g, 19,2 mmol) em DMF (30 ml). Depois de 15 minutos a 0°C por 1 hora na temperatura ambiente a mistura de reação foi resfriada a O0C e uma solução que contém o 68 (8,99 g, 19,2 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionada às gotas. A mistura de reação foi depois agitada na temperatura ambiente por 2 horas ponto no qual a análise de TLC revelou consumo completo de 68 [hexanos/ EtOAc 1:1, Rf(68) = 0,6; Rf(69) 0,3], A mistura de reação foi esfriada a O0C seguida pela adição às gotas de NH4Cl saturado aquoso. O produto foi extraído com éter dietílico. Os extratos de éter foram lavados com água, salmoura, secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em gel de sílica cintilante (20 % de EtOAc/hexanos) para produzir 6,0 g (54 %) do 69 como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) δ 7,4 - 7,2 (m, 5H), 5,6 - 5,4 (m, 2Η), 5,0 (s, 2Η), 4,4 - 4,2 (m, 4Η), 3,5 - 3,2 (m, 2Η), 1,8 (s, 3Η), 1,6 (s, 2Η), 0,9 (s, 6Η), 0,1 (s, 9Η) ppm. Esquema XXXIV

Benzil éster do ácido 4-acetóxi-2-(l-acetil-lH-pirrolo[2,3- blpiridino-3-ilmetil)-pirrolidino-l-carboxílico (70): Sob uma atmosfera de nitrogênio, uma solução que contém o 69 (5,92 g, 10,1 mmol) em DMF anidro (50 ml) foi carregado com (n-Bu)4NCl (2,8 g, 10,1 mmol), K2CO3 (1,4 g, 10,1 mmol), NaHCO2 (0,68 g, 10,1 mmol), e Pd(OAc)2 (0,045 g, 0,20 mmol) na temperatura ambiente. A mistura heterogênea foi imersa em um banho de óleo pré aquecido (85°C). Depois de 3 horas, a análise de TLC revelou que um pouco de 69 permaneceu, portanto o catalisador adicional (0,01 g) foi adicionado. Depois de um adicional de 1 hora de aquecimento, o 69 foi completamente consumido pela análise de TLC [EtOAc/hexanosl:l, Rf(69) = 0,3; Rf{70) = 0,8]. A reação da mistura quente foi esfriada em um banho de gelo depois diluída com éter dietílico e filtrada através de uma almofada de celite. Os sólidos foram lavados com éter dietílico e o filtrado foi lavado algumas vezes com água para remover o excesso de DMF, depois lavado uma vez com salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado, e concentrado para produzir 5,1 g do 70 bruto que foi purificado pela cromatografia em gel de sílica cintilante (20 % de EtOAc/hexanos) para produzir 3,0 g (59 %) do 70 como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) 85,18 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,18 (m, 1H), 7,05 (dt, J = 2,4, 8,7 Hz, 1H), 4,13 (m, 1H), 3,41 (m, 1H), 3,33 (m, 2H), 3,17 (app dd, J = 14,1, 38,1 Hz, 1H), 2,61 (s, 3H), 1,83 (m, 3H), 1,69 (m, 1H), 1,49 (s, 9H) ppm. Esquema XXXV

OTBS

OH

10

15

O-0^-

^Ac TBAF

CKI

0 Γ "Ν "W/ O Γ N

70 ^^^^ 71

Benzil éster do ácido 2-(l-acetil-lH-pirrolor2.3-b1piridino-3- ilmetil)-4-hidróxi-pirrolidino-1 -carboxílico (71): A uma solução que contém 70 (2,99 g, 5,88 mmol) em THF (20 ml) a O0C foi adicionada uma solução de TBAF (1 M em THF, 11,8 ml, 11,8 mmol) em um maneira às gotas. Depois de 1,5 hora, a análise de TLC revelou consumo completo de 70 [hexanos/EtOAc 1:1, Rf(70) = 0,64; Rf(71) = 0,3]. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado com água, salmoura, secado em Na2SC^ anidro, filtrado, e concentrado para produzir 2,11 g do 71 bruto que foi usado sem outra purificação. Esquema XXXVI

20

Benzil éster do ácido 4-hidróxi-2-(lH-pirrolor2,3-blpiridin-3- ilmetil)-pirrolidino-1 -carboxílico (72): A uma solução que contém o 71 (2,11 g, 5,36 mmol) em MeOH (30 ml) a O0C foi adicionado NaOH 1 M (8,1 ml, 8,05 mmol) em um maneira às gotas. Depois de 1 hora a análise de TLC revelou consumo completo de 71 [EtOAc, Rf(71) = 0,4; Rf<72) = 0,2]. O MeOH foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com HCl aquoso diluído, água, salmoura, secado em Na2S04 anidro, filtrado e concentrado para produzir 1,99 g do 72 bruto que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Esquema XXXVII

blpiridino-3-ilmetil)-pirrolidino-l-carboxílico (73): A uma solução que contém 72 (1,99 g, 5,66 mmol), ácido p-nitrobenzóico (1,23 g, 7,36 mmol), e Ph3P (2,07 g, 7,92 mmol) em THF (35 ml) a 0°C foi adicionado DIAD (1,6 ml, 8,2 mmol). Depois que a adição foi completada, o banho de gelo foi removido e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas ponto no qual a análise de TLC revelou consumo completo de 72 [EtOAc, Rf(72) = 0,2; Rf(73) = 0,6], O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com NaHCO3 saturado aquoso, salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado, e concentrado para produzir 7 g do 73 bruto que foi purificado pela cromatografia em gel de sílica cintilante (20 % EtOAc/hexanos) para obter 2,68 g do 73 (95 %) como um sólido branco 1H RMN (CDCl3,300 MHz): δ 8,3 (d, J = 35 Hz, 2H), 7,6 (d, = 35 Hz, 2H), 7,2 (m, 5H), 7,0 (s, 1H), 5,2 (s, 2H), 4,4 - 3,2 (m, 3H), 3,0 - 2,9 (m, 1H), 2,2 (s, 2H), 1,9 (s, 2H) ppm. Esquema XXXVIII

ilmetil)-pirrolidino-1 -carboxílico (74) A uma solução que contém o 73 (2,8 g, 5,6 mmol) em uma mistura 3:1 de MeOH/DCM (40 ml) a 0°C foi adicionado em NaOH (8,5 ml) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 15 minutos quando a análise de TLC revelou consumo completo de 73 [EtOAc/hexanos 1:1; Rf(73) = 0,3; Rf(74) = 0,02]. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com HCl aquoso diluído, água, salmoura, secado em Na2SO4 anidro, filtrado, e concentrado para produzir 2,7 g do 74 bruto que foi purificado pela cromatografia em gel de sílica cintilante (50 % de EtOAc/hexanos) para obter 1,6 g do 74 (94 %) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3,300 MHz): 68,5 (m, 2H), 7,4 (s, 5H), 7,0 (m, 2H), 5,2 (s, 2H), 4,3 (s, 1H), 4,2 (m, 1H), 3,65 - 3,8 (m, 1H), 3,5 - 3,3 (m, 2H), 3,2 - 3,0 (m, 1H), 1,9 - 2,0 (m, 3H) ppm.

Tabela 1:

Com- posto Rla IUa IUa R14a R14b R3b R2b Rlb Rllo/Rlíb RIZe/Rnb H].1a/R!3b Kd μΜ A Mc S-Me S-Wl- MeCHOMc) S- OH S- OH S-&JI- MeCHOMe) S-Me Me H F H A B Mc S- CHjOH S-QR- McCHOMe) S- OH S- OH S-{2/f- MeCHOMe) S- CHjOH Me Il F H A C Mc S-Mc S-SBo S- OH S- OH S-tBu S-Me Me H F H A D Mc S-Et S-IB u S- OH S- OH S-tBu S-El Me H F Il A ε Et S-Me S-IlJt- MeCHOMe) S- OH S- OH S-ÇiR. MeCHOMe) S-Me Et H P H A F Me S-Et S-flR- MeCHOMe) S- OH S- OH S-(2Í- MeCHOMe) S-£t Me H F H A G Me S-Me S41R- MeCHOMe) S- OMe S- OMe S-(2£- MeCIIOMe) S-Me Me H F H A H Me S-E* S-(IJ)- MeCHOMc) S- OMe S- OMe MeCHOMe) S-Et Me H F H A I Me S-Mc S-tBii S- OMc S- OMe S-tBu S-Me Me H F H A J Me S-Et S-tBu S- OMe S- OMe S-tBu S-Et Me H F 11 B K et S-Me S-( ZH- MeCHOMc) S- OMe S- OMe S-Í2K- MeCHOM c) S-Me Et H F H A L Et S-Me S-tBu S- OMe S- OMe S-tBu S-Me Et H F H A M Me S-Me S-QiR- McC HOMej S- Me S-Mc S-(lfí- MeCHOMe) S-Mc Me H F H A As afinidades de ligação dos compostos listados na Tabela 1 a um IAP foram determinadas substancialmente como descrito por Nikolovska- Coleska, Z. et ai. (Analytical Biochemistry (2004), vol. 332: 261-273) usando uma variedade de substratos fluorigênicos e são relatadas como um valor Kd.

Em resumo, várias concentrações de antagonistas de IAP foram misturadas com 5 nM de peptídeo fluorescentemente rotulado (AbuRPF-K(5-Fam)-NH2) e 40 nM de um IAP-BIR3 por 15 min na temperatura ambiente em 100 ml de tampão de Fosfato de Potássio 0,1 M, pH 7,5 contendo 100 mg/ml de g- globulina bovina. A seguir da incubação, os valores de polarização (mP) foram medidos em um Victor2V usando um filtro de excitação de 485 nm e um filtro de emissão de 520 nm. Os valores de IC50 foram determinados a partir da plotagem usando a análise dos quadrados mínimos não lineares usando GraphPad Prism. Os compostos aqui descritos proporcionam valores de Kd nas faixas de: Kd < 0,1 μΜ (A), Kd = 0,1 a 1 μΜ (B) e Kd = 1 a 10 μιη (C). Os valores de Kd relatados são os mais baixos do Kd para XIAP BIR-3 e cIAP-1 BIR-3.

O seguinte composto da invenção também foi fabricado e testado. O valor de Kd relatado é o mais baixo dos Kd para XIAP BIR-3 e cIAP-1 BIR-3.

Com- posto RlaZRlb R2a/R2b R3a/R3b R17a/R17b R12a/R12b Kd (μΜ) N Me Me R- (Me)CHOMe (<S)-OH 6-F B Em células de mamífero, a ativação das caspases é obtida através de pelo menos dois mecanismos independentes que são iniciados pelas caspases distintas, mas resultam na ativação de caspases executoras (efetoras) comuns. Além do mecanismo ativado pelo citocromo c (algumas vezes aludido como o 'caminho da morte intrínseco') é um mecanismo pelo qual a cascata de caspase é ativada por intermédio da ativação de um receptor de morte localizado na membrana celular (algumas vezes aludida como o 'caminho da morte extrínseco'). Os exemplos de receptores de morte incluem CD-95 e TNF-Rl (assim como outros membros do grupo TNF de receptores de citocina). Os ligantes correspondentes são CD-95L e TNF-alfa, respectivamente. A ligação de pro-caspase-8 ao receptor de morte induz a auto-ativação em que o pró domínio inibidor da pro-caspase-8 é clivado e removido. A caspase-8 é liberada do receptor e pode então ativar caspases efetoras (caspase-3, -6, -7), e, como no caminho iniciado pela caspase-9, o resultado é a clivagem proteolítica de alvos celulares pelas caspases efetoras e a indução de apoptose.

A presente invenção está direcionada no geral aos peptidomiméticos de Smac e aos usos de peptidomiméticos de Smac. Em uma forma de realização os peptidomiméticos de Smac atuam como agentes quimiopotenciadores. O termo "agente quimiopotenciador" refere-se a um agente que atua para aumentar a sensibilidade de um organismo, tecido ou célula a um composto químico ou tratamento a saber "agentes quimioterapêuticos" ou "quimio drogas" ou tratamento por radiação. Uma forma de realização da invenção é a composição terapêutica de um peptidomimético de Smac. Uma outra forma de realização da invenção é a composição terapêutica de um peptidomimético de Smac, que pode atuar como um agente quimiopotenciador (aqui aludido como mimético de Smac) e um agente biológico ou quimioterapêutico ou radiação. Uma outra forma de realização da invenção é um método de inibir o crescimento de tumor in vivo pela administração de um peptidomimético de Smac. Uma outra forma de realização da invenção é um método de inibir o crescimento de tumor in vivo pela administração de um mimético de Smac e um agente biológico ou quimioterapêutico ou quimiorradiação. Uma outra forma de realização da invenção é um método para tratar um paciente com um câncer pela administração de miméticos de Smac da presente invenção sozinhos ou em combinação com um agente quimioterapêutico ou quimiorradiação.

Em uma forma de realização da presente invenção, as células são in situ, em um indivíduo e a etapa de contactar é efetuada pela administração de uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do mimético de Smac em que o indivíduo pode ser submetido à radiação ou quimioterapia concorrentes ou antecedentes para o tratamento de uma patologia neoproliferativa. As células patogênicas são de um tumor tal como, mas não limitado a, câncer de bexiga, câncer de mama, câncer da próstata, câncer pulmonar, câncer pancreático, câncer gástrico, câncer de cólon, câncer ovariano, câncer renal, hepatoma, melanoma, linfoma, sarcoma e combinações dos mesmos.

Como descrito na US 7.244.851, os antagonistas de IAP podem ser usados para o tratamento de todos os tipos de câncer que falham em passar pela apoptose. Os exemplos de tais tipos de câncer incluem neuroblastoma, carcinoma intestinal tal como carcinoma do reto, carcinoma do cólon, carcinoma de polipose adenomatosa familiar e câncer colorretal que não de polipose hereditário, carcinoma esofágico, carcinoma labial, carcinoma da laringe, carcinoma da hipofaringe, carcinoma da língua, carcinoma de glândula salivar, carcinoma gástrico, adenocarcinoma, carcinoma da tireóide medular, carcinoma da tireóide papilar, carcinoma renal, carcinoma da parênquima renal, carcinoma ovariano, carcinoma do colo do útero, carcinoma de corpo uterino, carcinoma endometrial, carcinoma coriônico, carcinoma pancreático, carcinoma da próstata, carcinoma dos testículos, carcinoma mamário, carcinoma urinário, melanoma, tumores cerebrais tais como glioblastoma, astrocitoma, meningioma, meduloblastoma e tumores neuroectodérmicos periféricos, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de Burkitt, leucemia linfática aguda (ALL), leucemia linfática crônica (CLL), leucemia mielóide aguda (AML), leucemia mielóide crônica (CML), linfoma de leucemia de célula T no adulto, carcinoma hepatocelular, carcinoma da vesícula biliar, carcinoma brônquico, carcinoma pulmonar de célula pequena, carcinoma pulmonar de célula não pequena, mieloma múltiplo, basalioma, teratoma, retinoblastoma, melanoma da coróide, seminoma, rabdomiossarcoma, craniofaringeoma, osteossarcoma, condrossarcoma, miossarcoma, lipossarcoma, fibrossarcoma, sarcoma de Ewing e plasmocitoma.

Além dos defeitos de apoptose encontrados em tumores, os defeitos na capacidade para eliminar células auto-reativas do sistema imune devido à resistência à apoptose são considerados desempenhar um papel chave na patogênese de doenças autoimunes. As doenças autoimunes são caracterizados em que as células do sistema imune produzem anticorpos contra seus próprios órgãos e moléculas ou diretamente atacam tecidos resultando no destruição do último. Uma insuficiência destas células auto- reativas para passar pela apoptose leva à manifestação da doença. Os defeitos na regulagem da apoptose foram identificados em doenças autoimune tais como lupus eritematoso sistêmico ou artrite reumatóide.

Em uma forma de realização as células patogênicas são aquelas de qualquer doença autoimune ou doenças que são resistentes à apoptose devido à expressão de IAPs ou membros da família Bc 1-2. Os exemplos de tais doenças autoimunes são doenças do colágeno tais como artrite reumatóide, lupus eritematoso sistêmico, síndrome de Sharp, síndrome de CREST (calcinose, síndrome de Raynaud, dismotilidade esofágica, telangiectasia), dermatomiosite, vasculite (Morbus Wegener's) e síndrome de Sjõgren, doenças renais tais como a síndrome de Goodpasture, glomerulonefrite que progride rapidamente e glomerulonefrite membrano- proliferativa tipo II, doenças endócrinas tais como diabete tipo I, poliendocrinopatia autoimune-candidíase-distrofia ectodérmica (APECED), paratireoidismo autoimune, anemia perniciosa, insuficiência das gônadas, Morbus Addison's idiopático, hipertireóse, tireoidite de Hashimoto e mixedema primária, doenças de pele tais como pênfigo vulgar, penfigóide bolhoso, herpes gestacional, epidermólise bolhosa e eritema multiforme maior, doenças hepáticas tais como cirrose biliar primária, colangite autoimune, hepatite autoimune tipo I, hepatite autoimune tipo 2, colangite esclerosante primário, doenças neuronais tais como esclerose múltipla, miastenia grave, síndrome de Lambert-Eaton miastênica, neuromiotonia adquirida, síndrome de Guillain-Barre (síndrome de Muller-Fischer), síndrome do homem duro, degeneração cerebelar, ataxia, opsoclônus, neuropatia sensorial e achalasia, doenças do sangue tais como anemia hemolítica autoimune, púrpura trombocitopênica idiopática (Morbus Werlhof), doenças infecciosas com reações autoimunes associadas tais como AIDS, Malária e doença de Chagas.

As composições objeto abrangem composições farmacêuticas compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um mimético de Smac em forma de dosagem e um carregador farmaceuticamente aceitável, em que o mimético de Smac inibe a atividade de um Inibidor de Proteína da Apoptose (IAP), promovendo assim a apoptose. Uma outra forma de realização da presente invenção são composições compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um mimético de Smac em forma de dosagem e um carregador farmaceuticamente aceitável, em combinação com um quimioterapêutico e/ou radioterapia, em que o mimético de Smac inibe a atividade de um Inibidor de Proteína da Apoptose (IAP), promovendo assim a apoptose e intensificando a eficácia dos produtos quimioterapêuticos e/ou radioterapia.

Em uma forma de realização da invenção uma composição terapêutica para promover a apoptose pode ser uma quantidade terapeuticamente eficaz de um peptidomimético de Smac que se liga a pelo menos um IAP. Em uma forma de realização o IAP pode ser XIAP. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser ML-IAP. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser cIAP-I ou cIAP-2. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser tipos múltiplos de IAP.

As formas de realização da invenção também incluem um método para tratar um paciente com uma condição em necessidade deste em que a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um peptidomimético de Smac é liberada ao paciente e o peptidomimético de Smac liga-se a pelo menos um IAP. Em uma forma de realização o IAP pode ser XIAP. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser ML-IAP. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser cIAP-1 ou cLAP-2. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser os tipos múltiplos de IAP.

Os métodos podem incluir ainda a administração concorrente de um outro agente quimioterapêutico. O agente quimioterapêutico pode ser, mas não está limitado a, agentes alquiladores, antimetabólitos, antibióticos antitumor, taxanos, agentes hormonais, anticorpos monoclonais, glicocorticóides, inibidores mitóticos, inibidores da topoisomerase I, inibidores da topoisomerase II, agentes imunomoduladores, fatores de crescimento celular, citocinas e compostos antiinflamatórios não esteroidais.

Administração de peptidomiméticos de Smac Os peptidomiméticos de Smac podem ser administrados em quantidades eficazes. Uma quantidade eficaz é aquela quantidade de uma preparação que sozinha ou junta com outras doses, produz a resposta desejada. Isto pode envolver apenas diminuir a progressão da doença temporariamente, embora preferivelmente, envolva deter a progressão da doença permanentemente ou retardar o início ou a prevenção da doença ou condição de ocorrer. Isto pode ser monitorado por métodos de rotina. No geral, doses de compostos ativos seriam de cerca de 0,01 mg/kg por dia a 1000 mg/kg por dia. É esperado que as doses que variam de 50 a 500 mg/kg serão adequadas, preferivelmente intravenosa, intramuscular ou intradermicamente e em uma ou diversas administrações por dia. A administração do peptidomimético de Smac pode ocorrer simultaneamente com, subseqüente a ou antes da quimioterapia ou radiação contanto que o agente quimioterapêutico ou radiação sensibilizem o sistema ao peptidomimético de Smac. No geral, a experimentação de rotina em testes clínicos

determinará faixas específicas para o efeito terapêutico ótimo para cada agente terapêutico e cada protocolo administrativo e a administração aos pacientes específicos será ajustada dentro de faixas eficazes e seguras dependendo da condição e responsividade do paciente às administrações iniciais. Entretanto, o protocolo de administração final será regulado de acordo com o julgamento do médico atendente considerando fatores tais como a idade, condição e tamanho do paciente, as potências do peptidomimético de Smac, a duração do tratamento e a severidade da doença a ser tratada. Por exemplo, um regime de dosagem do peptidomimético de Smac pode ser a administração oral de 1 mg a 2000 mg/dia, preferivelmente de 1 a 1000 mg/dia, mais preferivelmente de 50 a 600 mg/dia, em duas a quatro doses divididas (preferivelmente duas), para reduzir o crescimento de tumor. Terapia intermitente (por exemplo, uma semana das três semanas ou três das quatro semanas) também pode ser usada. No evento em que uma resposta em um paciente é insuficiente

nas doses iniciais aplicadas, doses mais altas (ou doses eficazmente mais altas por uma via de liberação diferente, mais localizada) podem ser utilizadas até o grau em que a tolerância do paciente permita. As doses múltiplas por dia são consideradas para se obter níveis sistêmicos apropriados de compostos. No geral, uma dose máxima é usada, isto é, a dose segura mais alta de acordo com julgamento médico criterioso. Aqueles de habilidade comum na técnica entenderão, entretanto, que um paciente pode insistir em uma dose mais baixa ou dose tolerável por razões médicas, razões psicológicas ou virtualmente por qualquer outra razão.

As formas de realização da invenção também incluem um método para tratar um paciente com câncer pela promoção da apoptose em que a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um peptidomimético de Smac e o peptidomimético de Smac liga-se a pelo menos um IAP. Em uma forma de realização o IAP pode ser XIAP. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser ML-IAP. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser cIAP-1 ou cIAP-2. Em uma outra forma de realização o IAP pode ser tipos múltiplos de IAP. Os métodos podem incluir ainda a administração concorrente de um agente quimioterapêutico. O agente quimioterapêutico pode ser, mas não está limitado a, agentes alquiladores, antimetabólitos, antibióticos antitumor, taxanos, agentes hormonais, anticorpos monoclonais, glicocorticóides, inibidores mitóticos, inibidores da topoisomerase I, inibidores da topoisomerase II, agentes imunomoduladores, fatores do crescimento celular, citocinas e compostos antiinflamatórios não esteroidais.

Vias de administração Uma variedade de vias de administração são disponíveis. O modo particular selecionado dependerá, naturalmente, das drogas quimioterapêuticas particulares selecionadas, da gravidade da condição que é tratada e da dosagem requerida para a eficácia terapêutica. Os métodos da invenção, falando no geral, podem ser praticados usando qualquer modo de administração que seja medicamente aceitável, significando qualquer modo que produza níveis eficazes dos compostos ativos sem causar efeitos adversos clinicamente inaceitáveis. Tais modos de administração incluem, mas não são limitados às, vias oral, retal, tópica, nasal, intradérmica, inalação, intra-peritoneal ou parenteral. O termo "parenteral" inclui subcutâneo, intravenoso, intramuscular ou infusão. As vias intravenosas ou intramusculares são particularmente adequadas para os propósitos da presente invenção.

Em um aspecto da invenção, um peptidomimético Smac como

aqui descrito, com ou sem agentes biológicos ou quimioterapêuticos adicionais ou radioterapia, não afeta adversamente tecidos normais, embora sensibilize as células de tumor para os protocolos quimioterapêuticos/radiação adicionais. Embora não se deseje estar ligado pela teoria, parece que por causa desta apoptose induzida específica de tumor, os efeitos colaterais acentuados e adversos tais como vasodilatação inadequada ou choque são minimizados. Preferivelmente, a composição ou métodos são planejados para possibilitar a sensibilização da célula ou tumor aos produtos quimioterapêuticos ou terapia de radiação pela administração de pelo menos uma porção do peptidomimético de Smac antes dos produtos quimioterapêuticos ou terapia de radiação. A terapia de radiação e/ou a inclusão de agentes quimioterapêuticos, podem ser incluídos como parte do regime terapêutico para potenciar ainda mais a morte da célula de tumor pelo peptidomimético de Smac. Composições Farmacêuticas Em uma forma de realização da

invenção, um agente quimioterapêutico adicional (infra) ou radiação podem ser adicionados antes, junto com ou a seguir do peptidomimético de Smac. O termo "carregador farmaceuticamente aceitável" como aqui usado significa um ou mais enchedores, diluentes ou substâncias encapsulantes sólidos ou líquidos compatíveis que são adequados para a administração em um ser humano. O termo "carregador" denota um ingrediente orgânico ou inorgânico, natural ou sintético, com que o ingrediente ativo é combinado para facilitar a aplicação. Os componentes das composições farmacêuticas também são capazes de serem co-misturados com as moléculas da presente invenção e entre si, em uma maneira tal que não exista nenhuma interação que substancialmente prejudicaria a eficácia farmacêutica desejada.

Os sistemas de liberação da invenção são planejados para incluir sistemas de liberação liberados com o tempo, de liberação retardada ou de liberação prolongada tais que a liberação do peptidomimético de Smac ocorra antes e com tempo suficiente, para causar a sensibilização do sítio a ser tratado. Um peptidomimético de Smac pode ser usado em conjunção com radiação e/ou agentes químicos anticâncer adicionais (infra). Tais sistemas podem evitar administrações repetidas do composto peptidomimético de Smac, aumentando a conveniência para o paciente e o médico e podem ser particularmente adequados para certas composições da presente invenção.

Muitos tipos de sistemas de liberação são disponíveis e conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. Estes incluem sistemas com base em polímero tais como poli(lactídeo-glicolídeo), copolioxalatos, policaprolactonas, poliesteramidas, poliortoésteres, ácido poli-hidroxibutírico e polianidridos. Microcápsulas dos polímeros precedentes contendo drogas são descritas, por exemplo, na Pat. U.S. Nfi 5.075.109. Os sistemas de liberação também incluem sistemas não poliméricos que são: lipídeos incluindo esteróis tais como colesterol, ésteres de colesterol e ácidos graxos ou gorduras neutras tais como mono-, di- e tri-glicerídeos; sistemas de liberação de hidrogel; sistemas silásticos; sistemas com base em peptídeo; revestimentos de cera; tabletes comprimidos usando aglutinantes e excipientes convencionais; implantes parcialmente fundidos; e outros. Os exemplos específicos incluem, mas não são limitados a: (a) sistemas erosionais em que o composto ativo está contido em uma forma dentro de uma matriz tal como aquelas descritas nas Pat. U.S. N- 4.452.775, 4.667.014, 4.748.034 e 5.239.660 e (b) sistemas difusionais em que um componente ativo permeia em uma taxa controlada a partir de um polímero tal como descrito nas Pat. U.S. N- 3.832.253 e 3.854.480. Além disso, os sistemas de liberação de hardware com base em bomba podem ser usados, alguns dos quais são adaptados para implantação.

O uso de um implante de liberação prolongada de longa duração pode ser desejável. A liberação de longa duração, como aqui usada, significa que o implante é construído e disposto para liberar níveis terapêutico do ingrediente ativo por pelo menos 30 dias e preferivelmente 60 dias. Os implantes de liberação prolongada de longa duração são bem conhecidos por aqueles de habilidade comum na técnica e incluem alguns dos sistemas de liberação descritos acima.

As composições farmacêuticas podem ser convenientemente apresentadas em forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer um dos métodos bem conhecidos na técnica da farmácia. Todos os métodos incluem a etapa de levar o agente ativo em associação com um carregador que constitui um ou mais ingredientes acessórios. No geral, as composições são preparadas levando-se uniforme e intimamente o composto ativo em associação com um carregador líquido, um carregador sólido finamente dividido ou ambos e depois, se necessário, dar forma ao produto.

As composições adequadas para a administração parenteral convenientemente compreende uma preparação aquosa estéril de um agente quimiopotenciador (por exemplo peptidomimético de Smac), que é preferivelmente isotônico com o sangue do receptor. Esta preparação aquosa pode ser formulada de acordo com métodos conhecidos usando agentes de dispersão ou umectação e agentes de suspensão adequados. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estéril em um diluente ou solvente não tóxicos parenteralmente aceitáveis, por exemplo, como uma solução em 1,3-butano diol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser utilizados são água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotônica. Além disso, óleos estéreis, fixos são convencionalmente utilizados como um solvente ou meio de suspensão. Para este propósito qualquer óleo fixo brando pode ser utilizado incluindo mono ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, ácidos graxos tais como ácido oléico podem ser usados na preparação de injetáveis. A formulação de carregador adequada para as administrações orais, subcutâneas, intravenosas, intramusculares, etc. podem ser encontradas em Remington's Pharmaceutic Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA que é aqui incorporada na sua totalidade por referência a isso.

Agentes quimioterapêuticos adicionais Os agentes quimioterapêuticos adequados, incluem mas não são limitados aos agentes quimioterapêuticos descritos em "Modern Pharmacology with Clinicai Applications", Sexta Edição, Craig & Stitzel, apt. 56, pg 639-656 (2004), aqui incorporada por referência. Esta referência descreve drogas quimioterapêuticas para incluir agentes alquiladores, antimetabólitos, antibióticos anti-tumores, produtos derivados de planta tais como taxanos, enzimas, agentes hormonais tais como glicocorticóides, agentes mistos tais como cisplatina, anticorpos monoclonais, agentes imunomoduladores tais como interferons e fatores de crescimento celular. Outras classificações adequadas para agentes quimioterapêuticos incluem inibidores mitóticos e análogos anti-estrogênicos não esteroidais. Outros agentes quimioterapêuticos adequados incluem inibidores da topoisomerase I e II e inibidores de cinase.

Os exemplos específicos de agentes biológicos e quimioterapêuticos adequados incluem, mas não são limitados a, cisplatina, carmustina (BCNU), 5-flourouracila (5-FU), citarabina (Ara-C), gencitabina, metotrexato, daunorrubicina, doxorrubicina, dexametasona, topotecano, etoposida, paclitaxel, vincristina, tamoxifeno, TNF-alfa, TRAIL, interferon (em ambas das suas formas alfa e beta), talidomida e melfalan. Outros exemplos específicos de agentes quimioterapêuticos adequados incluem mostardas nitrogenadas tais como ciclofosfamida, sulfonatos de alquila, nitrosouréias, etileniminas, triazenos, antagonistas de foliato, análogos de purina, análogos de pirimidina, antraciclinas, bleomicinas, mitomicinas, dactinomicinas, plicamicina, alcalóides vinca, epipodofilotoxinas, taxanos, glicocorticóides, L-asparaginase, estrogênios, androgênios, progestinas, hormônios luteinizantes, acetato de octreotide, hidroxiuréia, procarbazina, mitotano, hexametilmelamina, carboplatina, mitoxantrona, anticorpos monoclonais, levamisol, interferons, interleucinas, filgrastim e sargramostim. As composições quimioterapêuticas também compreendem outros membros, isto é, outros que não TRAIL, da superfamília TNF de compostos.

Protocolos de Radioterapia Adicionalmente, em diversas formas de realização de métodos da presente invenção a terapia com peptidomimético de Smac pode ser usada em conexão com quimioradiação ou outros protocolos de tratamento contra o câncer usados para inibir o crescimento de célula de tumor.

Por exemplo, mas não limitado a, terapia de radiação (ou radioterapia) é o uso medicinal de radiação ionizante como parte do tratamento contra o câncer para controlar células malignas é adequado para o uso nas formas de realização da presente invenção. Embora a radioterapia seja freqüentemente usada como parte da terapia curativa, a mesma é ocasionalmente usada como um tratamento paliativo, onde a cura não é possível e o objetivo é para o alívio sintomático. A radioterapia é habitualmente usada para o tratamento de tumores. Esta pode ser usada como a terapia primária. Também é comum combinar radioterapia com cirurgia e/ou quimioterapia. Os tumores mais comuns tratados com radioterapia são câncer de mama, câncer de próstata, câncer retal, cânceres da cabeça & pescoço, tumores ginecológicos, câncer da bexiga e linfoma. A terapia de radiação é habitualmente aplicada exatamente à área localizada envolvida com o tumor. Freqüentemente os campos de radiação também incluem a drenagem de linfonodos. É possível mas incomum dar radioterapia ao corpo inteiro ou à superfície de pele inteira. A terapia de radiação é usualmente dada diariamente por até 35 a 38 frações (uma dose diária é uma fração). Estas doses freqüentes pequenas permitem que as células saudáveis tenham tempo para crescer novamente, reparando o dano inflingido pela radiação. Três divisões principais da radioterapia são a radioterapia de feixe externo ou teleterapia, braquiterapia ou radioterapia de fonte selada e radioterapia de fonte não selada, que são todas exemplos adequados de protocolo de tratamento na presente invenção. As diferenças relacionadas com a posição da fonte de radiação; externo é fora do corpo, enquanto a radioterapia de fonte selada e não selada tem material radioativo liberado internamente. As fontes seladas de braquiterapia são usualmente extraídas posteriormente, enquanto que as fontes não seladas são injetadas no corpo. A administração do peptidomimético Smac pode ocorrer antes, concorrentemente com o protocolo de tratamento. Tingimento com Anexina V/Iodeto de Propídio - Para mostrar a capacidade de miméticos de Smac para induzir a apoptose, o tingimento com Anexina V-isotiocianato de fluoresceína foi realizado como pelo protocolo do fabricante (Invitrogen, Carlsbad, CA). Em resumo, as células foram expostas às várias concentrações de miméticos de Smac por 18 a 24 horas e depois removidas da placa de ensaio pela tripsinização. As células foram depois pelotizadas e recolocadas em suspensão em tampão de ensaio (fornecido pelo fabricante). Anexina V e iodeto de propídio foram adicionados às preparações de célula e incubadas por 1 hora no escuro na temperatura ambiente. A seguir da incubação tampão adicional (200 μΐ) foi depois adicionado a cada tubo e as amostras foram analisadas imediatamente pela citometria de fluxo. Na presença de miméticos de Smac a apoptose foi fortemente promovida, como avaliado pelo tingimento com anexina/PI e analisado pela citometria de fluxo. A amplificação no número de células apoptóticas (Anexina V positivo/iodeto de propídio negativo - quadrante direito inferior) pelos antagonistas de IAP quando comparado com o controle foi dependente da dose e devido à indução da apoptose e não por intermédio de aumentar a proporção de células necróticas.

Os agentes biológicos e quimioterapêuticos/anti-neoplásticos e radiação induzem a apoptose pela ativação dos caminhos apoptóticos extrínsecos ou intrínsecos, e, visto que miméticos de Smac aliviam os inibidores de proteínas apoptóticas (IAPs) e, assim, removem o bloco na apoptose, a combinação de agentes quimioterapêuticos/anti-neoplásticos e radiação com miméticos de Smac devem funcionar sinergisticamente para facilitar a apoptose.

A relevância desta sinergia potente é que torna possível o uso dos peptidomiméticos de Smac, que são antagonistas de IAP, para melhorar a eficácia do composto comercializado contendo platinas (cisplatina e carboplatina). Isto pode ser realizado pela diminuição da dose requerida do composto deficientemente tolerado contendo platinas e/ou pela melhora da taxa de resposta na dose comercializada.

A presente invenção não é limitada às formas de realização descrita e exemplificada acima, mas é capaz de variação e modificação dentro do escopo das reivindicações anexas.

Claims (38)

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser da fórmula (I): <formula>formula see original document page 74</formula> cicloalquila, substituídos; em que Z,a, Z2a, Zjb e Z2b são independentemente CH ou N; Ria e Rib são independentemente H ou hidroxila, alquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente R2a, R2a', R2b e R2b' são independentemente H ou alquila, cicloalquila ou heterocicloalquila opcionalmente substituído; ou quando R2a' é H então R2a e Riapodem juntos formar um anel de aziridina ou azetidina e quando R2b' é H então R2b e R]b podem juntos formar um anel de aziridina ou azetidina; R3a, R3b, R4a e R^ são independentemente H ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; ou, R4a e R3a ou R^ e R3b ou ambos, são átomos de carbono ligados por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou R5a, R^a, R5b e R^,b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; ou R5a e R^a ou R5b e R^b ou ambos, são átomos de carbono ligados por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de -1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n, ou C=O; R7a, R7b, R8a, R8b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; ou R7a e R8a ou R7b e R8b ou ambos, podem ser ligados por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 3 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n, ou C=O; cada η pode ser o mesmo ou diferente e é O, 1 ou 2; Xa é -O-, -N(La-R10a)-, -S-, -QLa-R10a)=CH-, -C(O)-O-, - C(O)-N(La-R10a)-, -N=C(La-Ri0a)- opcionalmente substituídos; Xb é -O-, -N(Lb-Riob)-, -S-, -C(Lb-Ri0b)=CH-, -C(O)-O-, - C(O)-N(Lb-Riob)-, -N=C(Lb-Rjob)- opcionalmente substituídos; La e Lb são independentemente uma ligação covalente ou alquileno C1-C4; Wa, Wb, Ri0a e Ri0b são definidos nos parágrafos de (a) até (e), que seguem: (a) quando Wa e Wb juntos são um Ligante, então Xa ou Xb são independentemente -O-, -S- ou -C(O)-O-; Rioa e Ri0b, respectivamente, são ausentes; ou (b) quando Wa e Wb juntos são um Ligante; Xa é -N(La- R]0a)-, -C(La-R]0a)=CH-, -N=C(La-Ri0a)- ou -C(O)-N(La-Ri0a)-; Xb é - N(Lb-Riob)-, -N=C(Lb-Riob)- ou -C(O)-N(Lb-R10b)-; Ri0a e Rj0b são independentemente H ou hidroxila, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; ou (c) quando Wa e Wb juntos são um Ligante; Xa é -N(La-Rioa)- , -C(La-Rioa)=CH-, -N=C(La-Ri0a)- ou -C(O)-N(La-R,0a)-; Xb é -N(Lb- Riob)-, -C(Lb-Riob)=CH-, -N=C(Lb-Ri0b)- ou -C(O)-N(Lb-Riob)-; Ri0a e Riobjuntos são um Ligante; ou (d) quando Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa e Wb são independentemente H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; Xa é -N(La-R10a)-, -C(La-R10a)=CH-, -N=C(La-Ri0a)- ou -C(O)- N(La-R10a)-; Xb é -N(Lb-R10b)-, -C(Lb-R10b)=CH-, -N=C(Lb-Riob)- ou - C(O)-N(Lb-R]0b)-; Ri0a e Riobjuntos são um Ligante; ou (e) quando Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa é H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituído; Xa é - N(La-R]0a)-, -C(La- Ri0a)=CH-, -N=C(La-Rioa)- ou -C(O)-N(La-R,0a)-; Xb é -O-, -N(Lb-R,0b)-, - S-, -C(Lb-Riob)=CH-, -C(O)-O-, -N=C(Lb-Ri0b)-, -C(O)-N(Lb-Riob)-; e Ri0b é ausente ou é H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; e Wb e La-R]0a juntos são um Ligante; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; contanto que quando Zia é N e Z2a é CH e Zib é N e Z2b é CH, então pelo menos um dos seguintes é verdadeiro: (i) R5a e R^a não são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente; (ii) R5a e R^a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e R5a é dissubstituído; (iii) R5a e R^a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e R6a é mono ou dissubstituído; (iv) R5a e R^a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e R3a e R4a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n, ou (v) R5a e R6a são ambos átomos de carbono ligados por uma ligação única covalente e nem R2a nem R2a' são H.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R3a, R^a, R3b e R^ são independentemente H, metila, etila, isopropila, isobutila, sec-butila, terc-butila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila, opcionalmente substituídos com hidroxila, mercapto, sulfonila, alquilsulfonila, halogênio, pseudo-halogênio, amino, carboxila, alquila, haloalquila, pseudo-haloalquila, alcóxi ou alquiltio.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2a e R2b são independentemente H, metila, fluorometila, difluorometila, etila, fluoroetila, hidroxietila ou cicloalquila.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Ria e Rib são independentemente H, metila, alila, propargila, etila, hidroxietila, cicloalquila ou cicloalquilmetila.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R3a, R4a, R3b e R^b são independentemente alquila inferior ou cicloalquila C3-Cs opcionalmente substituídos em que os substituintes opcionais são hidróxi ou alcóxi inferior.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Wa e Wb juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; e Xa e Xb são independentemente -O-, -S- ou - C(O)-O-.

7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Wa e Wb juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; Xa é -N(La-Ri0a)-, -C(La-Ri0a)=CH- ou -C(O)- N(La-Ri0a)-; Xb é - N(Lb-R10b)-, -C(Lb-Riob)=CH- ou -C(O)-N(Lb-R]0b)-; R,0a e Ri0b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos.

8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Wa e Wb juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; Xa é -N(La-R10a)-, -QLa-R10a)=CH- ou -C(O)- N(La-R10a)-; Xb é - N(Lb-R10b)-,-C(Lb-Riob)=CH- ou -C(O)-NiLb-R10b)-; R10a e R10b juntos são um alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n.

9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Wa e Wb não são covalentemente ligados e Wa e Wb são independentemente H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; Xa é -N(La-R10a)-, -C^a-R10a)=CH- ou -C(O)-N(La-R10a)-; Xb é -N(Lb-R10b)-, -C(Lb-R1Ob)=CH- ou -C(O)-N(Lb-R10b)-; R10a e R10b juntos são um alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n.

10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wa é H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; Xa é -N^a-R10a)-, -C(La-R]0a)=CH- ou -C(O)-N(La-R10a-; Xb é -O-, -N(Lb-R10b)-, -S-, -C(Lb-R10b)=CH-, -C(O)- O-, -C(O)-N(Lb-R10b)-; e R10b é H ou alquila opcionalmente substituído; e Wb e R10a juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n.

11. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Wa e Wb não são covalentemente ligados, Wb é H, Cl, Br, F, CN, COOH ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos; Xb é -N(Lb-Ri0b)-, -C(Lb-Riob)=CH- ou -C(O)-N(Lb-Riob)-; Xa é -O-, - N(La-Rioa)-, -S-, -QLa-R10a)=CH-, - C(O)-O-, -C(O)-N(La-R]0a)-; e Ri0a é H ou alquila opcionalmente substituído; e Wa e Rj 0b juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n.

12. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Zia e Zib são ambos N e Z2a e Z2b são ambos C e em que R5a e R^a e R5b e R^b, são cada um carbono e são ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O.

13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Zia e Zib são ambos N e Z2a e Z2b são ambos C e em que R3a e R*a e R3b e Rib, são cada um carbono e são ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Ri0a e Ri0b não são heterocicloalquila ou heteroarila.

15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a fórmula (II): <formula>formula see original document page 80</formula> em que Xa é -N-, -N=C- ou -C(O)N-; Xb é -N-, -C=C(Rieb)-, -N=C- ou -C(O)N-; La e Lb são independentemente uma ligação covalente ou alquileno C1-C4; Ya é -C-, -N- ou -N+-; tal que, Quando Ya é -C- então Rioa, Rua, R^a, R^a, R^a, Ri5a e R^a são, independentemente, -H, halogênio ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima opcionalmente substituídos; contanto que quando Xa é -N- ou -C(O)-N-, -LrRioa é ligado ao átomo -N-; e, quando Xa é -C=C(Ri6a)- ou -N=C-, -LrRioa é ligado ao átomo -O-; e Quando Ya é -N- ou -N+-, então Rna é ausente ou -O- e Rioa, Rua, R^a, R]4a, R15a e Ri6a são, independentemente, -H, halogênio ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima opcionalmente substituídos; contanto que quando X é -N- ou -C(O)-N-, -L1-R1Oa é ligado ao átomo -N-; e, quando X é -C=C(R^a)- ou -N=C-, -L1- R1Oa é ligado ao átomo -C=; Yb é -C-, -N- ou -N+-; tal que, Quando Yb é -C- então R10b, R1 !b, R12b, R13b, R14b, R15b e R16b são, independentemente, -H, halogênio ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima opcionalmente substituídos; contanto que quando Xb é -N- ou -C(O)-N-, -L1-R1Ob é ligado ao átomo -N-; e, quando Xb é -C=C(R16b)- ou -N=C-, -LrR10b é ligado ao átomo -C=; e Quando Yb é -N- ou -N+-, então Rnb é ausente ou -O- e R1Ob, Rl2b, Rnb, R^b, R15b e R16b são, independentemente, -H, halogênio ou alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, hidroxila, alcóxi, polialquiléter, amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxialquila, sulfonato, arilóxi, heteroarilóxi, acila, acetila, carboxilato, sulfonato, sulfona, imina ou oxima opcionalmente substituídos; contanto que quando Xb é -N- ou -C(O)- N-, -LrR10b é ligado ao átomo de -N-; e, quando Xb é -C=C(R16b)- ou -N=C- , -L1-R10b é ligado ao átomo -C=.

16. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que Z^a e Zxb são ambos N e Z2a e Z2b são ambos C e em que (i) R5a e R^a e R5b e R^b, são cada um carbono e são ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O ou (ii) R3a e R4a e R3b e R^b, são cada um carbono e são ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituído de 1 a 8 átomos de carbono onde um a três átomos de carbono podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O ou (iii) tanto (i) quanto (ii) são verdadeiros.

17. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R3a e I^a e R3b e R4I), são átomos de carbono e são ligados por uma ligação covalente ou por um grupo alquileno ou alquenileno opcionalmente substituídos de 1 a 3 átomos de carbono dos quais um ou mais podem ser substituídos por N, O, S(O)n ou C=O.

18. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R4a e R3a ou R^ e R3b ou ambos, são ligados por um grupo alquileno ou alquenileno de 1 a 3 átomos; R2a e R2b são independentemente selecionados de metila, fluorometila, difluorometila, etila, fluoroetila e cicloalquila; Wa e Wb juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; e Xa e Xb são independentemente -O-, -S- ou -C(O)-O-; ou Wa e Wb juntos são uma ligação covalente ou alquileno, cicloalquila ou arila opcionalmente substituídos, de 2 a 20 átomos de carbono onde um ou mais átomos de carbono podem ser substituídos com Ν, O ou S(O)n; Xa é -N(La-R10a)-, -C(La-Rj0a)=CH- ou -C(O)-N(La-R10a)-; Xb é - N(Lb-Riob)-, -C(Lb-R10b)=CH- ou -C(O)-N(Lb-R10b)-; R10a e Rj0b são independentemente H ou hidroxila, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituídos.

19. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que Rioa e Ri0b não são heterocicloalquila ou heteroarila de 5, 6 ou 7 membros opcionalmente substituídos.

20. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a fórmula (IV) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: <formula>formula see original document page 83</formula> em que -La-Ri0a-Wb- é uma ligação covalente.

21. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado fato de que é selecionado dos compostos de A até N, como segue: <formula>formula see original document page 83</formula> <table>table see original document page 84</column></row><table> <formula>formula see original document page 84</formula>

22. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a fórmula: <formula>formula see original document page 85</formula> em que Ria, Rib, R2a, R2b, R3a e R3b são independentemente alquila inferior, alcóxi inferior, alcanol inferior ou cicloalquila C3-C6; R^a e Ri7b são independentemente -OH, alcóxi inferior ou alquila inferior; Rua, Ri ib, Ri2a, Ri2b, Ri3a, Ri3b, R!4a e RJ4b são independentemente -H ou halogênio.

23. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a fórmula em que Ria, Rib, R2a, R2b, R3a e R3b são independentemente alquila inferior, alcóxi inferior, alcanol inferior ou cicloalquila C3-Ce', Ri 7a e Ri 7b são independentemente -OH, alcóxi inferior ou alquila inferior; Ri2a e Ri2b são independentemente -H ou halogênio.

24. Método para induzir a apoptose em uma célula, caracterizado pelo fato de que compreende contactar a célula com um composto como definido na reivindicação 1 em uma quantidade suficiente para induzir a apoptose na célula.

25. Método de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a dita célula é neoplástica.

26. Método de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a dita célula superexpressa um inibidor de caspase.

27. Método de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o inibidor inibe a ativação ou atividade de uma ou mais de uma caspase selecionada de caspase-3, caspase-7 e caspase-9.

28. Método para estimular a apoptose em uma célula, caracterizado pelo fato de que compreende contactar a célula com um composto de acordo com a reivindicação 1 em uma quantidade suficiente para estimular a apoptose na célula.

29. Método de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que as ditas células são células cancerosas.

30. Método para intensificar a apoptose de células patogênicas in vivo em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido na reivindicação 1.

31. Método de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que compreende ainda administrar uma segunda terapia selecionada de radiação, quimioterapia, imunoterapia, terapia fotodinâmica e combinações dos mesmos.

32. Método para tratar uma doença associada com a superexpressão de IAP em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um composto como definido na reivindicação 1.

33. Método para tratar uma doença, a doença sendo câncer, caracterizado pelo fato de que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido na reivindicação 1.

34. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende: um composto selecionado de um composto como definido na reivindicação 1 e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

35. Composição de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que compreende ainda um segundo agente quimioterapêutico.

36. Composição de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que o dito segundo agente quimioterapêutico é selecionado de agentes alquiladores, alcalóides vegetais, antibióticos antitumor, antimetabólitos, inibidores da topoisomerase e combinações dos mesmos.

37.

Composição de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que o dito agente quimioterapêutico é selecionado de altretamina, busulfano, carboplatina, carmustina, clorambucila, cisplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, hexametil-melamina, ifosfamida, lomustina, melfalan, mecloretamina, oxaliplatina, procarbazina, estreptozocina, temozolomida, tiotepa, uramustina, docetaxel, etoposida, irinotecano, paclitaxel, tenisopida, topotecano, vincristina, vinblastina, vindesina, vinorelbina, bleomicina, dactinomicina, daunorrubicina, epirrubicina, hidroxiuréia, idarrubicina, mitomicina, mitoxantrona, plicamicina, azatioprina, capecitabina, cladribina, citarabina, fludarabina, fluorouracila, floxuridina, gencitabina, mercaptopurina, metotrexato, nelarabina, pemetrexed, pentostatina, tioguanina, camptotecano, irinotecano, topotecano, BNP 1350, SN 38, 9-amino-camptotecano, lurtotecano, gimatecano, diflomotecano, anantraciclina, antraquinona, podofilotoxina, doxorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, nemorrubicina, mitoxantrona, loxoxantrona, etoposida, teniposida e combinações dos mesmos.