EA008609B1 - 2'-фторнуклеозиды - Google Patents

2'-фторнуклеозиды Download PDF

Info

Publication number
EA008609B1
EA008609B1 EA200000870A EA200000870A EA008609B1 EA 008609 B1 EA008609 B1 EA 008609B1 EA 200000870 A EA200000870 A EA 200000870A EA 200000870 A EA200000870 A EA 200000870A EA 008609 B1 EA008609 B1 EA 008609B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
use according
fluoro
mmol
apb
Prior art date
Application number
EA200000870A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200000870A1 (ru
Inventor
Рэймонд Ф. Шинази
Деннис К. Лиотта
Чунг К. Чу
Джеффри Дж. Макати
Дзунксинг Ши
Йонгсеок Чой
Кийеонг Ли
Дзоон Х. Хонг
Original Assignee
Эмори Юниверсити
Дзе Юниверсити Оф Джорджиа Рисерч Фаундейшн, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эмори Юниверсити, Дзе Юниверсити Оф Джорджиа Рисерч Фаундейшн, Инк. filed Critical Эмори Юниверсити
Publication of EA200000870A1 publication Critical patent/EA200000870A1/ru
Publication of EA008609B1 publication Critical patent/EA008609B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A61K31/708—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid having oxo groups directly attached to the purine ring system, e.g. guanosine, guanylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals

Abstract

Настоящее изобретение относится к соединениям 2'-фторнуклеозидов, которые предназначены для лечения инфекционного гепатита В, инфекционного гепатита С, ВИЧ и аномальной пролиферации клеток, в том числе опухолей и рака. Эти соединения имеют общие формулы (I), (II), (III), (IV), в которых Base обозначает пуриновое или пиримидиновое основание, Rобозначает ОН, Н, OR, N, CN, галоген, в том числе F или CF, низший алкил, амино, низший алкиламино, ди(низший)алкиламино или алкокси, и основание является пуриновым или пиримидиновым основанием; Rобозначает H; фосфат, в том числе монофосфат, дифосфат, трифосфат, или стабильное пролекарство на основе фосфата; ацил или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении in vivo способна дать соединение, в котором Rобозначает Н или фосфат; эфир сульфокислоты, включающий алкил или арилалкилсульфонил, в том числе метансульфонил; бензил, в котором фенильная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, указанными в приведенном выше определении арила; липид, аминокислоту, пептид или холестерин; Rобозначает ацил, алкил, фосфат или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении in vivo может отщепляться с образованием исходного соединения, или являются их фармацевтически приемлемыми солями.

Description

Описываемое изобретение сделано при поддержке правительства на основании гранта № ΑΙ32351, предоставленного Национальным институтом здравоохранения. Правительство США имеет определенные права на это изобретение.
Настоящее изобретение сделано в области фармацевтической химии и относится, в частности, к 2'фторнуклеозидам, способам их получения и применения.
Предпосылки создания изобретения
Синтетические нуклеозиды, такие как 5-йод-2'-дезоксиуридин и 5-фтор-2'-дезоксиуридин, в течение ряда лет использовались для лечения рака и вирусов герпеса. В 1980-х годах синтетические нуклеозиды привлекли к себе особое внимание в связи с возможностью их применения для лечения вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), гепатитов и вируса Эпштейна-Барра.
В 1981 г. было установлено, что синдром приобретенного иммунодефицита человека (СПИД) является заболеванием, которое серьезно поражает иммунную систему человека и почти без исключения ведет к смерти. В 1983 г было обнаружено, что этиологической причиной возникновения СПИДа является вирус иммунодефицита человека. В 1985 г. появилась информации о том, что синтетический нуклеозид 3'-азидо-3'-дезокситимидин (ΑΖΤ) подавляет репликацию вируса иммунодефицита человека. С тех пор был открыт ряд других синтетических нуклеозидов, в том числе 2',3'-дидезоксиинозин (ΌΌΙ), 2',3'дидезоксицитидин (ЭЭС) и 2',3'-дидезокси-2',3'-дидегидротимидин (Ό4Τ), которые эффективно воздействуют на ВИЧ. Синтетические нуклеозиды фосфорилируются в клетке под действием клеточных киназ с образованием 5'-трифосфата и встраиваются в растущую цепь вирусной ДНК, прекращая рост цепи изза отсутствия 3'-гидроксильной группы. Они могут также ингибировать обратную транскриптазу фермента вируса.
Успешное применение разных синтетических нуклеозидов для подавления репликации ВИЧ ίη νίνο или ίη νίίτο заставило многих исследователей направить усилия на создание и испытание нуклеозидов, в которых атом углерода замещен гетероатомом в 3'-положении нуклеозида. В публикации заявки на европейский патент № 0337713 и в патенте США № 5041449, выданных ВюСйет Рйагта, 1пс., описаны рацемические 2-замещенные-4-замещенные-1,3-диоксоланы, обладающие антивирусным действием. В патенте США № 5047407 и в заявке на европейский патент № 0382526, выданных также ВюСйет Рйагта, 1пс., указано, что ряд нуклеозидов, таких как рацемический 2-замещенный-5-замещенный 1,3-ксатиолан, обладают антивирусной активностью, и особо подчеркнуто, что рацемическая смесь 2-гидроксиметил-5(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолана (именуемого ниже ВСН-189) обладает такой же активностью против ВИЧ, что и ΑΖΤ, при незначительной токсичности. (-)-Этантиомер рацемата ВСН-189, известный как 3ТС, который описан в патенте США № 5539116, выданном Ьюйа е1 а1., в настоящее время продается в США как средство для лечения ВИЧ в сочетании с ΑΖΤ.
Кроме того, известно, что цис-2-гидроксиметил-5-(5-фтороцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан (РТС) обладает сильным действием против ВИЧ. δΟιίηαζί. е1 а1. 8е1есйуе ΙηΙιίΝΐίοη οί Нитап 1ттипойеПс1епсу уйизез Ьу Васета1ез анй ΕηηηΙίοιικίΈ οί с^8-5-Р1οи^ο-1-[2-(Нуά^οxутеΐйу1)-1,3-Оxаίй^ο1аηе-5-у1] СуШзше, Αηί^т^с^οЬ^а1 АдеШз анй Сйетοίйе^аρу, ШуетЬег 1992, рр. 2423-2431. См. также патент США № 5210085; АО 91/11186 и АО 92/14743.
Другим вирусом, который создает серьезную опасность для здоровья человека, является вирус гепатита В (далее именуется НВУ). НВУ является второй по значимости причиной возникновения рака у человека после табака. Механизм возникновения рака под действием НВУ неизвестен. Считается, что он может быть прямым или косвенным фактором образования опухоли вследствие хронического воспалительного процесса, цирроза и регенерации клеток, обусловленной этой инфекционной болезнью.
После 2-6-месячного инкубационного периода, в течение которого носитель инфекции не подозревает о существовании опухоли, НВУ вызывает острый гепатит и поражение печени, сопровождающееся болями в животе, желтухой и повышенным содержанием в крови определенных ферментов. НВУ может вызывать молниеносный гепатит часто с летальным исходом, при котором разрушаются значительные участки печени.
Пациенты обычно выздоравливают после острого гепатита. Однако у некоторых пациентов высокие концентрации вирусного антигена сохраняются в крови в течение продолжительного периода времени, являясь причиной возникновения хронического заболевания. Хронические инфекции могут быть причиной хронического персистирующего гепатита. Пациенты, страдающие хроническим персистирующим НВУ, особенно часто встречаются в развивающихся странах. К середине 1991 г. только в Азии насчитывалось примерно 225 млн хронических носителей НВУ, а во всем мире их число составляло почти 300 млн. Хронический персистирующий гепатит может вызывать утомление, цирроз печени и злокачественную гепатому, основной тип рака печени.
В промышленно развитых странах Запада к группам населения с высокой степенью риска заражения НВУ относятся носители этого вируса или их кровь. Эпидемиология НВУ очень схожа с синдромом приобретенного иммунодефицита и позволяет объяснить тот факт, что заражение НВУ широко распространено среди ВИЧ-инфицированных пациентов или больных СПИДом. Однако НВУ является более заразным, чем ВИЧ.
Как РТС, так и 3ТС воздействуют на НВУ. Рщ-тащ е1 а1., Тйе А1Ш-Нера1Ш5 В У1гиз АсЦуШез, С’уШ
- 1 008609 ΐοχίαΐίβδ, апй АпаЬоНс Ргой1е§ о£ 1Не (-) апй (+) Епапйотегк о£ с18-5-Е1оиго-1-[2-(Нуйгохуте1Ьу1)-1,3охаЛю1апе-5-у1]-Су!о8ше АпШшсгоЫа1 Адепй апй СНетоЛегару, БесетЬег 1992, рр. 2686-2692; и СНепд, е! а1. 1оигпа1 о£ Вю1одка1 СНетЩгу. уо1. 267(20), рр. 13938-13942 (1992).
Из сыворотки человека получена вакцина для иммунизации пациентов против НВУ. Хотя эта вакцина признана эффективной, ее производство является трудоемким процессом из-за ограниченного количества сыворотки, предоставляемого хроническими носителями, при этом процедура очистки является длительной и дорогостоящей. Кроме того, каждую партию вакцины, полученной из другой сыворотки, необходимо испытывать на шимпанзе, чтобы удостовериться в ее безопасности. Вакцины были также получены генноинженерными методами. Ежедневный прием α-интерферона, генетически сконструированного методом генной инженерии, также является многообещающим.
Вирус гепатита С (НСУ) является основной причиной посттрансфузии и поражения спорадическим гепатитом, не являющимся гепатитом А или В (А1!ег, Н.Е (1990) ί. Сайга. Нера!о1, 1:78-94, Б1епйад, ЕЕ (1983) Сайга 85: 439-462). Несмотря на всестороннее обследование населения, на долю НСУ попрежнему приходится по крайней мере 25% случаев острого вирусного гепатита во многих странах (А1!ег, Н.Е (1990) см. выше; Б1епйад, ЕБ. (1983) см. выше; А1!ег М.Е е! а1. (1990а) ЕЛ.М.Л. 264:22312235; А1!ег М.1. е! а1, (1992) N. Еп§1. I. Мей. 327:1899-1905; А1!ег, М.1. е! а1. (1990Ь) N. Еп§1. I. Мей. 321:1494-1500). Поражение НСУ протекает без явных симптомов у большого количества хронически инфицированных (и контагеозных) носителей, у которых клинические симптомы не проявляются в течение многих лет. Высокий коэффициент перехода острой формы инфекционного заболевания в хроническую (70-100%) и в болезнь печени (>50%), распространение по всему миру и отсутствие вакцины - все это делает НСУ серьезной причиной заболеваемости и смертности.
Опухоль представляет собой неупорядоченную, дезорганизованную пролиферацию растущих клеток. Опухоль считается злокачественной или раковой, если ее отличают инвазивность и метастазы. Инвазивность - это способность опухоли внедряться в окружающие ткани, проникая через тонкие слои, определяющие границы тканей, и таким образом попадать в систему кровообращения. Метастазы - это способность опухоли мигрировать в другие области тела и вызывать пролиферацию клеток на расстоянии от места первоначального появления опухоли.
Рак в настоящее время является второй по значимости причиной смертности в США. Более чем у 8 млн чел. в США был диагностирован рак, и предполагается, что в 1994 г. он будет обнаружен еще у 1 млн 208 тыс. чел. Более 500 тыс. чел. ежегодно умирают в США от этой болезни.
На молекулярном уровне природа рака не совсем ясна. Известно, что воздействие на клетку канцерогена, такого как некоторые вирусы, химические вещества или облучение, вызывает изменение ДНК, подавляющее супрессивный ген или активирующее онкоген. Супрессивные гены регулируют рост клетки, но в результате мутации они перестают выполнять эту функцию. Онкогены первоначально являются нормальными генами (именуемыми проонкогенами), которые в результате мутации или изменения условий экспрессии превращаются в трансформирующие гены. Продукты трансформирующих генов вызывают неконтролируемый рост клеток. Более 20 различных нормальных клеточных генов могут стать онкогенами вследствие генетического изменения. Трансформированные клетки отличаются от нормальных клеток во многих отношениях, включая морфологию клетки, взаимодействие между клетками, содержимое мембраны, цитоскелетную структуру, секрецию белка, экспрессию и гибель гена (трансформированные клетки могут расти бесконечно).
Практически все типы клеток в организме могут быть трансформированы в клетки доброкачественной или злокачественной опухоли. Наиболее часто опухоли поражают легкие, затем толстую и прямую кишку, молочную железу, предстательную железу, мочевой пузырь, поджелудочную железу и яичники. Другими преобладающими типами рака являются лейкоз, рак центральной нервной системы, в том числе рак мозга, меланома, лимфома, эритролейкоз, рак матки и рак головы и шеи.
В настоящее время рак лечат одним или несколькими методами трехкомпонентной терапии: хирургическое вмешательство, облучение и химиотерапия. В результате хирургического вмешательства удаляют основную массу пораженной ткани. Хотя хирургическое вмешательство иногда позволяет эффективно удалять опухоли, расположенные в определенных местах, таких как молочная железа, толстая кишка и кожа, этот метод нельзя использовать для лечения опухолей, расположенных в других местах, таких как позвоночник; он также не подходит для лечения диссеминированных состояний неоплазии, таких как лейкоз.
Химиотерапия направлена на прекращение репликации или метаболизма клеток. Этот метод чаще всего используют для лечения лейкоза, а также рака груди, легкого и яичек.
В настоящее время для лечения рака используют химиотерапевтические средства пяти основных классов: природные продукты и их производные; антациклины; алкилирующие средства; антипролиферативные средства (именуемые также антиметаболитами) и гормональные средства. Химиотерапевтические средства часто именуются противоопухолевыми средствами.
Считается, что алкилирующие средства алкилируют и сшивают гуанин и, вероятно, другие основания в ДНК, прекращая деление клеток. Типичными алкилирующими средствами являются азотсодержащие дихлордиэтилсульфиды, соединения этиленимина, алкилсульфаты, цисплатин и разные нитрозомо
- 2 008609 чевины. Недостатком этих соединений является то, что они проникают не только в злокачественные клетки, но и в здоровые клетки, которые находятся в процессе естественного деления, например в клетки костного мозга, кожи, слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и эмбриональной ткани.
Антиметаболиты обычно являются обратимо или необратимо действующими ингибиторами ферментов либо соединениями, которые другим образом препятствуют репликации, трансляции или транскрипции нуклеиновых кислот.
Получено несколько синтетических нуклеозидов, обладающих противораковым действием. Хорошо известным производным нуклеозида, оказывающим сильное противораковое действие, является 5фторурацил. 5-Фторурацил используется в клинической практике для лечения злокачественных опухолей, включая, например, карциномы, саркомы, рака кожи, рака органов пищеварения и рака молочной железы. Однако 5-фторурацил вызывает серьезные побочные эффекты, такие как тошнота, алопеция, диарея, стоматит, лейкоцитарная тромбоцитопения, анорексия, пигментация и отек. Производные
5-фторурацила, обладающие противораковым действием, описаны в патенте США № 4336381 и в публикациях патентов Японии №№ 50-50383, 50-50384, 50-64281, 51-146482 и 53-84981.
В патенте США № 4000137 указано, что продукт перокисления инозина, аденозина или цитидина метанолом или этанолом обладает активностью против лимфолейкоза.
Цитозинарабинозид (именуемый также цитарабин, агаС и цитозар) является нуклеозидным аналогом дезоксицитидина, который был впервые синтезирован в 1950 г. и введен в клиническую практику в 1963 г. В настоящее время он является важным лекарственным средством, применяемым для лечения острой формы миелоидного лейкоза. Кроме того, это лекарственное средство позволяет эффективно лечить острую форму лимфолейкоза, и в меньшей степени он воздействует на хроническую форму миелоцитарного лейкоза и лимфому, не являющуюся лимфомой Ходжкинса. Основным действием агаС является ингибирование синтеза ядерной ДНК. Наибксйишасйег, В. апб Сйеид, Υ., Ригше апб Рупт1бше Апбше1аЬо1йе8, Саисег Мебюше, Сйар!ет ХУ-1, 3гб Ебйюп, Ебйеб Ьу 1. Но11аиб, е! а1., издатели Ьеа апб ЕеЫдо1.
5-Азацитидин является аналогом цитидина, который в основном используют для лечения острой формы миелоцитарного лейкоза и синдрома миелодисплазии.
2-Фтораденозин-5'-фосфат (флудара, именуемый также Е-агаА) является одним из наиболее активных средств, предназначенных для лечения хронической формы лимфоцитарного лейкоза. Это соединение ингибирует синтез ДНК. Воздействие на клетки, оказываемое Е-агаА, связано с накоплением клеток на границе фаз 01/8 и в фазе 8; таким образом, это лекарственное средство специфически воздействует на фазу 8 цикла развития клетки. Введение активного метаболита Е-агаАТР замедляет удлинение цепи ДНК. Е-агаА является также сильнодействующим ингибитором рибонуклеотид-редуктазы, ключевого фермента, ответственного за образование бАТР.
2-Хлордезоксиаденозин является эффективным средством для лечения новообразований В-клеток на начальной стадии, таких как хроническая форма лимфолейкоза, лимфома, не являющаяся лимфомой Ходжкинса, и волосато-клеточный лейкоз.
В процессе создания новых биологически активных нуклеозидов было предпринято несколько попыток ввести фторсодержащий заместитель в углеводное кольцо нуклеозида. Фтор был предложен в качестве заместителя, потому что он может быть изополярным и изостерическим имитатором гидроксильной группы, так как длина связи С-Е (1,35 А) аналогична длине связи С-0 (1,43 А), и фтор является акцептором водородной связи. Фтор способен вызывать значительные электронные изменения в молекуле при минимальных пространственных деформациях. Замещение фтором другой группы в молекуле может вызывать изменения в метаболизме субстрата из-за высокой прочности связи С-Е (116 ккал/моль по сравнению с С-Н=100 ккал/моль).
В ряде справочных материалов был описан синтез и применение 2'-арабинофторнуклеозидов (нуклеозидов, в которых 2'-фторогруппа имеет верхнюю конфигурацию, т.е. вверх от плоскости кольца). В нескольких научных работах были описаны 2-фтор- β-Ό-арабинофуранозилнуклеозиды, обладающие активностью против гепатита В и герпеса. См., например, патент США № 4666892, выданный Еох, е! а1.; патент США № 4211773, выданный Боре/, е! а1.; 8и, е! а1. Ыискоыбек. 136, 8уп1йе818 апб Ап1Мга1 ЕПссЦ оП 8еуета1 1-(2-Оеоху-2-Пиого-в-П-агаЬтоПигапо8у1)-5-а1ку1игас118. 8оте 81гис!иге-АсДуйу Ве1абоп8Ыр8,
1. Меб. Сйет., 1986, 29, 151-154; ВогШвдск, е! а1. 8уп1йе8Щ апб Еп/утабс РеюкШоп оП СатЬосусйс 2'Ага-Пиого-Сиапойпе: А Ро!еп1 №\ν Апб-Нетребс ЛдепБ 1. Сйет., 8ос., Сйет. Соттип, 1988; ^ап!апаЬе, е! а1. 8уп(11е515 апб Апб-НГУ АсДуНу оП 2'-ир-Е1иого Апа1одие8 оП АсДуе Апб-А1б8 Ыискоыбек 3'-А/1бо3'-беоху1йут1бше (А2Т) апб 2',3'-б1беохусу11бте (ЭЭС), 1. Меб. Сйет. 1990, 33, 2145-2150; Майш, е! а1. 8уп(11е515 апб Апбу1га1 АсДуйу оП МопоДиого апб ЭШиото Апа1одие8 оП Рупт1бте ЭеохупЬопиЭеомбех адашй Нитап 1ттипобеДс1епсу Уиик (Н1У-1), 1. Меб. Сйет. 1990, 33, 2137-2145; 81егхуск1, е! а1. 8уп1йе515 апб Апб-НГУ АсДуНу оП 8еуега1 2'-Е1иого-Соп1ашшд Рупт1бте Ыискоыбек, 1. Меб. Сйет. 1990, а также заявку на европейский патент № 0316017, которая также была подана 8!егхускт е! а1.; и Моп!дотегу, е! а1. 9-(2-Оеоху-2-Г1иого-в-О-агаЫпоГигапо5у1)диап1пе: А Ме1аЬойса11у 8!аЬ1е Су!о!охю Апа1одие оП 2'-Эеохудиапо5ше. В патенте США № 5246924 описан способ лечения инфекционного гепатита, ко
- 3 008609 торый включает введение 1-(2'-дезокси-2'-фтор-в-О-арабинофуранозил)-3-этилурацила, именуемого также РЕЛИ. В патенте США № 5034518 описаны 2-фтор-9-(2-дезокси-2-фтор-3-Эарабинофуранозил)адениннуклеозиды, которые обладают противораковым действием, выражающимся в изменении метаболизма адениннуклеозидов, в результате чего это соединение утрачивает способность быть субстратом для аденозина. В заявке на европейский патент № 0292023 раскрыты конкретные β-Ό2'-фторарабинонуклеозиды, обладающие активностью против вирусных инфекций.
В патенте США № 5128458 описаны в-О-2',3'-дидезокси-4'-тиорибонуклеозиды в качестве антивирусных средств. В патенте США № 5446029 указано, что 2',3'-дидезокси-3'-фторнуклеозиды имеют активность против гепатита.
В заявке на европейский патент № 0409227 А2 описаны конкретные 3'-замещенные β-Όпиримидин- и пуриннуклеозиды для лечения гепатита В.
Кроме того, указано, что Ь-РМЛи (2'-фтор-5-метил-в-Ь-арабинофуранозилурацил) является сильнодействующим средством против НВ У и ЕВУ. См., С1ш. с1 а1. ике о£ 2'-Р1иого-5-те1йу1-в-ЬатаЬто£игапо8у1игас11 ак а Ыоуе1 ΑηΙίνίΓαΙ Лдеп1 £от Нераббк В У1тик апб Ерк1еш-Ватг Уник Апбт1сгоЫа1 Лдеп1к апб СйетоЛетару, Артб 1995, рр. 979-981; Ва1акт1кйпа, е1 а1. 'ТпЫЬйюп о£ Нераббк В У1тик Ьу Nоνе1 Ь-№с1еок1бе, 2'-Р1иого-5-МеЛу1-в-Е-агаЬ1по£игапоку1 Итасб, Лп1ишсгоЫа1 Адеп1к апб СйетоШетару, РеЬ 1996, рр. 380-356; патенты США №№ 5587362; 5567688 и 5565438.
В патентах США №№ 5426183 и 5424416 описаны способы получения 2'-дезокси-2',2'дифторнуклеозидов и 2'-дезокси-2'-фторнуклеозидов. См. также Кшебс 8!иб1ек о£ 2',2'бШиотобеохусуббше (СетсйаЬше) \νίΐ1ι Рипйеб Нитап Иеохусуббше Κι паке апб Суббше Иеатшаке, ВюсЬет1са1 Р1аттасо1оду, νо1. 45 (№ 9), рр. 4857-1861, 1993.
В патенте США № 5446029, выданном Епкккоп, е1 а1., указано, что конкретные 2',3'-дидезокси-3'фторнуклеозиды обладают активностью против гепатита В. В патенте США № 5128458 описаны конкретные 2',3'-дидезокси-4'-тиорибонуклеозиды, в которых 3'-заместитель является Н, азидом или фтором. В заявке XV О 94/14831 описаны конкретные 3'-фтордигидропиримидин-нуклеозиды, в заявке XVО 92/08727 - в-Ь-2'-дезокси-3'-фтор-5'-замещенные уридиннуклеозиды, предназначенные для лечения простого герпеса 1 и 2.
В публикации заявки на европейский патент № 0352248 описано большое семейство Ьрибофуранозилпуриннуклеозидов, предназначенных для лечения ВИЧ, герпеса и гепатита. Хотя конкретные 2'-фторированные пуриннуклеозиды входят в рамки большого семейства, в этом описании изобретения не рассмотрены способы получения этих соединений, и они специально не описаны и не входят в список предпочтительных нуклеозидов. В этом описании изобретения не описаны способы получения 3'-рибофуранозилфторированных нуклеозидов. Аналогичные соединения представлены в заявке ΧνΟ 88/09001, поданной ЛкйеЬо1аде1 Лк1га.
В заявке на европейский патент № 0357571 приведена большая группа β-Ό- и α-Όпиримидиннуклеозидов, предназначенных для лечения СПИДа, которые включают и нуклеозиды, замещенные в 2'-или 3'-положении фтора группой. Однако этот широкий класс соединений не охватывает 2'фторированные нуклеозиды или способ их получения.
В заявке на европейский патент № 0463470 приведено описание способа получения (58)-3фтортетрагидро-5-[(гидрокси)метил]-2-(3Н)-фуранона, который является известным промежуточным соединением при получении 2'-фтор-2',3'-дидезоксинуклеозидов, таких как 2'-фтор-2',3'дидезоксицитидин.
В υ.8.8.Ν. 07/556713 описаны в-Э-2'-фторарабинофуранозилнуклеозиды и способ получения указанных веществ, которые являются промежуточными соединениями в процессе синтеза 2',3'-дидезокси2'-фторарабинозилнуклеозидов.
В патенте США № 4625020 приведено описание способа получения 1-галоген-2-дезокси-2фторарабинофуранозильных производных, содержащих защитные сложноэфирные группы из 1,3,5-триО-ацилрибофуранозы.
В научной литературе отсутствует описание в-Ь-2'-фторрибофуранозилнуклеозидов, предназначенных для лечения ВИЧ, гепатита (В или С) или заболеваний, обусловленных пролиферацией клеток. По крайней мере в отношении 2'-рибофуранозилнуклеозидов это может быть связано с ранее возникшими трудностями при введении группы фтора в 2'-рибофуранозильную конфигурацию. То же самое верно в отношении Ь-2'-фтор-2',3'-ненасыщенных пуриннуклеозидов, так как пуриннуклеозиды не устойчивы в кислотных средах, что ведет к расщеплению гликозильной связи.
В связи с тем, что распространение синдрома ВИЧ приобретенного иммунодефицита, СПИД ассоциированного комплекса и вирусных гепатитов В и С достигло во всем мире эпидемических масштабов и имеет трагические последствия для инфицированного субъекта, существует большая потребность в создании новых эффективных фармацевтических средств для лечения этих болезней, характеризующихся низкой токсичностью для пациента. Кроме того, существует потребность в новых антипролиферативных средствах.
Поэтому целью настоящего изобретения являются способ и композиция для лечения людей, стра
- 4 008609 дающих вирусными гепатитами В или С.
Другой целью настоящего изобретения является применение 2'-фтор-в-О-нуклеозида и 2'фторнуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения людей, инфицированных вирусом гепатита В или С соответственно.
Изложение сущности изобретения
2'-Фторнуклеозиды являются биологически активными молекулами, позволяющими эффективно лечить гепатит В, гепатит С или ВИЧ. Эти соединения полезны также для лечения аномальной пролиферации клеток, включая опухоли и рак. Спектр активности этого соединения можно легко определить при помощи описанных здесь методов или любого другого подтверждающего анализа.
В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения активное соединение, его производное или соль, предназначенные для лечения гепатита или ВИЧ, можно вводить в сочетании или поочередно с другим антивирусным средством, таким как средство против ВИЧ или средство против гепатита, включая соединения вышеуказанной формулы. В случае комбинированной терапии эффективные дозы двух или большего количества средств обычно вводят одновременно, а в случае альтернированной терапии эффективные дозы всех средств - последовательно. Дозировка зависит от скорости поглощения, инактивации и выведения лекарственного средства, а также от других факторов, известных специалистам в этой области. Следует отметить, что величина дозы может быть различной в зависимости от серьезности заболевания. Кроме того, вполне понятно, что схемы приема лекарственных средств, разработанные для любого конкретного пациента, должны изменяться с течением времени в соответствии с потребностями субъекта и профессиональным мнением специалиста, наблюдающего за введением этих композиций.
Неограничивающие примеры антивирусных средств, которые можно использовать в сочетании с описанными здесь соединениями, включают 2-гидроксиметил-5-(5-фторцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан (РТС); (-)-энантиомер 2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолана (3ТС); карбовир, ацикловир, интерферон, фамцикловир, пенцикловир, ΑΖΤ, ΌΌΙ, ЭЭС. Ό4Τ, абакавир, Ь-(-)-РМАи, пролекарства на основе фосфата Ь-ΌΌΑ и β-Ό-диоксоланнуклеозиды, такие как β-Ό-диоксоланилгуанин (ЭС), β-Όдиоксоланил-2,6-диаминопурин (ΌΑΡΌ) и β-Ό-диоксоланил-б-хлорпурин (АСР), ингибиторы обратной транскриптазы (ВТ), не являющиеся нуклеозидами, такие как невирапин, МКС-442, ΌΜΡ-266 (δυκίινα), а также ингибиторы протеазы, такие как индинавир, саквинавир, ΑΖΤ, ΌΜΡ-450 и др.
Эти соединения можно также использовать для лечения вирусных заболеваний, вызываемых вирусом инфекционной анемии лошадей (ΕΙΑν), вирусом иммунодефицита кошек и вирусом иммунодефицита обезьян. (^аид, 8., Моп!е1аго, В., δοΡίηαζί, В.Р., 1адеткк1, В. апб Ме11отк, IV.: ΑοΙίνίΙν оГ пис1еок1бе апб поп-пис1еок1бе тететке 1тапкспр1аке 1пЫЬйотк (ΝΝΒΤΙ) адашк! ес.|шпе шГесбоик апеш1а νίπικ (ΕΙΑν). Ρίτκΐ №1бопа1 СопГегепсе оп Нитап Ре1го тзгикек апб Ве1а1еб 1пГесбопк, ‘№акйшд1оп, ЭС, Эес. 12-16, 1993; 8е11оп
Э.С., Ес.|ише 1пГесбоик Αηет^а, Vеΐ. С1ш. №П11 Αт. Едите Ргас!. Ипйеб 81а1ек, 9:321-336, 1993; РЫ1рой,
М.8., ЕЬпег, ЕР., Ноотег, Ε.Α., Ета1иабоп оГ 9-(2-рйокрйопу1те1йохуе1йу1)абешп Легару Гог Ге1ше 1ттипобеГШепсу νίπικ икшд а с.|иапШабте ро1утегаке скат геасбоп. Vеΐ. 1ттипо1. 1ттипораЛо1. 35:155166, 1992).
Кроме того, создан новый и совершенно диастереоселективный метод введения фтора в предшественник кольца безуглеводного сахара. Этот метод включает взаимодействие предшественника хирального кольца безуглеводного сахара (48)-5-(замещенный окси)-пентан-4-олида, который может быть получен из Ь-глутаминовой кислоты, с электрофильным источником фтора, которым является, но не ограничивается им, №фтор-(бис)бензолсульфонимид, с получением основного промежуточного соединения фторлактона 6. Фторлактон восстанавливают в лактон и ацетилируют, что дает аномерный ацетат, который затем используют для синтеза ряда новых в-Ь-а-2'-фторнуклеозидов. Можно также синтезировать соответствующий Ό-энантиомер, используя Ό-глутаминовую кислоту в качестве исходного вещества.
В соответствии с альтернативным вариантом осуществления изобретения получают фторированный гликаль, который дегидрируют и затем превращают в 2',3'-дидезокси-2',3'-дидегидро-2'-фторнуклеозид или β-Ь- или в-О-арабинозил-2'-фторнуклеозид, как это более подробно описано ниже.
Кроме того, описан более простой способ получения 2',3'-дидезокси-2',3'-дидегидро-2'фторнуклеозидов, который включает прямую конденсацию силилированного 6-хлорпурина ключевым промежуточным соединением, которое получают из Ь-2,3-О-изопропилиденглицеральдегида.
Изобретение относится к применению 2'-фтор-в-О-нуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения инфекционного гепатита В у человека, в котором 2'-фтор-в-Энуклеозид имеет формулу
- 5 008609 где Ваке обозначает пуриновое основание;
В1 обозначает ОН, Н, ОН3, Ν3, ΟΝ, галоген, СР3, С1-С4алкил, амино, С1-С4алкиламино, ди-С1 -С4алкиламино;
В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат, ацил или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίη νίνο способна дать соединение, в котором В2 обозначает Н или фосфат; эфир сульфокислоты, включая С1-С10алкилсульфонил или С1-С10арилалкилсульфонил, в том числе метансульфонил; бензил, в котором фенильная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, включающими гидроксил, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфокислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат или фосфонат; и
В3 обозначает ацил, С1-С4алкил, фосфат или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίη νίνο способна отщепляться с образованием исходного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, необязательно в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.
Предпочтительно, если в указанных выше соединениях
В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат или ацил;
В1 обозначает Н, ОН, ОВ3, С1-С4 низший алкил или галоген;
В3 обозначает ацил,
В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат или ацил,
В1 обозначает Н, ОН, С1-С4 низший алкил или галоген; и
В3 обозначает ацил;
основание является пуриновым основанием, выбираемым из группы, состоящей из гуанина, аденина, гипоксантина, 2,6-диаминопурина и 6-хлорпурина;
В1 и В2 обозначают водород;
В1 обозначает ОН или ОВ3;
В1 обозначает галоген;
В1 обозначает С1-С4 низший алкил или СР3;
В2 обозначает ацил.
Предпочтительно, если в указанных выше соединениях основание обозначает пуриновое основание, выбираемое из аденина, Ц’-алкилпуринов, Ц-ацилпуринов [где ацил является С(О)(алкилом, арилом, алкиларилом или арилалкилом)], Ц6-бензилпурина, Ц6-галогенпурина, Ц6-винилпурина, Ν6ацетиленпурина, Ц6-ацилпурина, Ц6-гидроксиалкилпурина, Ц6-тиоалкилпурина, Ц2-алкилпуринов, Ν2алкил-6-тиопуринов, гуанина, гипоксантина, 2,6-диаминопурина, 2-хлор-2-аминопурина, инозина или 6хлорпурина.
Предпочтительно, если лекарственное средство является подходящим для орального, парентерального или внутривенного введения.
В другом аспекте изобретение относится к применению 2'-фторнуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения инфекционного гепатита С у человека, в котором 2'фторнуклеозид является соединением, описываемым формулой
в которой Ваке обозначает пуриновое или пиримидиновое основание;
В1 обозначает ОН, Н, ОВ3, Ν3, СЦ, галоген, СР3, С1-С4алкил, амино, С1-С4алкиламино, ди-С1С4алкиламино или алкокси;
В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат, ацил или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίη νίνο способна дать соединение, в котором В2 обозначает Н или фосфат; эфир сульфокислоты, включая С1-С10алкилсульфонил или С1С10арилалкилсульфонил, в том числе метансульфонил; бензил, в котором фенильная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, включающими гидроксил, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфокислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат или фосфонат; и
В3 обозначает ацил, С1-С10алкил, фосфат или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίη νίνο способна отщепляться с образованием исходного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, необязательно в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.
- 6 008609
Предпочтительно, если в указанных выше соединениях
В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат или ацил;
В1 обозначает Н, ОН, ОВ3, С1-С4 низший алкил, СР3 или галоген;
В3 обозначает ацил;
В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат или ацил;
В1 обозначает Н, ОН, С1-С4 низший алкил или галоген; и
В3 обозначает ацил.
Предпочтительно, если В2 обозначает ацил.
Предпочтительно, если в указанных выше соединениях основание обозначает пуриновое основание или пиримидиновое основание.
Предпочтительно, если основание обозначает пуриновое основание, выбираемое из аденина, Ν6алкилпуринов, Ц6-ацилпуринов [где ацил является С(О) (алкилом, арилом, алкиларилом или арилалкилом)], Ц6-бензилпурина, №-галогенпурина, Ц6-винилпурина, Ц6-ацетиленпурина, Ц6-ацилпурина, Ν6гидроксиалкилпурина, Ц6-тиоалкилпурина, Ц2-алкилпуринов, N -алкил-6-тиопуринов, гуанина, гипоксантина, 2,6-диаминопурина, 2-хлор-2-аминопурина, инозина или 6-хлорпурина.
Предпочтительно, если в указанных выше соединениях основание обозначает пиримидиновое основание, выбираемое из тимина, цитозина, 5-фторцитозина, 5-метилцитозина, 6-азапиримидина, в том числе 6-азацитозина, 2- и/или 4-меркаптопиримидина, урацила, 5-галогенурацила, в том числе 5фторурацила, С5-алкилпиримидинов, С5-бензилпиримидинов, С5-галогенпиримидинов, С5винилпиримидина, С5-ацетиленпиримидина, С5-ацилпиримидина, С5-гидроксиалкилпурина, С5амидопиримидина, С5-цианопиримидина, С5-нитропиримидина, С5-аминопиримидина, 5-азацитидинила, 5-азаурацилила, триазолопиридинила, имидазолопиридинила, пирролопиримидинила или пиразолопиримидинила.
Предпочтительно, если лекарственное средство является подходящим для орального, парентерального или для внутривенного введения.
Предлагается применение 2'-фтор-в-О-нуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения инфекционного гепатита В или С.
Термин алкил в используемом здесь значении за исключением особо оговоренных случаев означает насыщенный, с прямой или разветвленной цепью, циклический, первичный, вторичный или третичный углеводород, имеющий С1-С1о атомов и, в частности, включает метил, этил, пропил, изопропил, циклопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, циклопентил, изопентил, неопентил, гексил, изогексил, циклогексил, циклогексилметил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил и 2,3-диметилбутил. Алькильная группа может быть необязательно замещена одной или несколькими фрагментами, выбираемыми из группы, включающей гидроксил, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфокислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат или фосфонат, которые могут быть не защищены или при необходимости защищены группами, известными специалистам в этой области, например, описанными в справочнике Отееие, с1 а1., Рго1ссНус Огоирк ίη Отдашс δνηΐΐιοκίκ. ίοΐιη \УПсу & δοηκ, 8есоиб Ε6ίίίοη, 1991, который включен в это описание изобретения в качестве ссылки.
Термин низший алкил в используемом здесь значении за исключением особо оговоренных случаев означает С1-С4 насыщенную, с прямой или разветвленной цепью, или, когда удобно, циклическую (например, циклопропил) алкильную группу.
Термин алкиламино или ариламино означает аминогруппу, имеющую соответственно один или два алкильных или арильных заместителя.
Термин защищенный в используемом здесь значении за исключением особо оговоренных случаев означает группу, присоединяемую к атому кислорода, азота или фосфора для предотвращения его дальнейшего взаимодействия или в других целях. Специалистам в области органического синтеза известно большое число защитных групп для атомов кислорода и азота.
Термин арил в используемом здесь значении за исключением особо оговоренных случаев означает фенил, бифенил или нафтил, предпочтительно фенил. Арильная группа может быть необязательно замещена одной или несколькими фрагментами, выбираемыми из группы, включающей гидроксил, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфокислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат или фосфонат, которые могут быть не защищены или при необходимости защищены группами, известными специалистам в этой области, например, описанными в справочнике Отее^, е1 а1., Рго1ее1|уе Огоирк ίη Отдашс 8уи1Нс51к, ίοΐιη ХУбеу апб δοηκ, 8ееог1б Ε6ίΐίοη, 1991.
Термин алкарил или алкиларил означает алкильную группу с арильным заместителем. Термин аралкил или арилалкил означает арильную группу с алкильным заместителем.
Термин галоген в используемом здесь значении означает хлор, бром, йод и фтор.
Термин пуриновое или пиримидиновое основание означает, но не ограничивается ими, аденин, Ц6-алкилпурины, Ц6-ацилпурины [где ацил является С(О) (алкилом, арилом, алкиларилом или арилалкилом)], Ц6-бензилпурин, Ц6-галогенпурин, Ц6-винилпурин, Ц6-ацетиленпурин, Ц6-ацилпурин, Ц6-гидроксиалкилпурин, Ц6-тиоалкилпурин, Ц2-алкилпурины, Ц2-алкил-6-тиопурины, тимин, цитозин, 5-фторцитозин, 5-метилцитозин, 6-азапиримидин, в том числе 6-азацитозин, 2- и/или
- 7 008609
4- меркаптопиримидин, урацил, 5-галогенурацил, в том числе 5-фторурацил, С5-алкилпиримидины,
С5-бензилпиримидины, С5-галогенпиримидины, С5-винилпиримидин, С5-ацетиленпиримидин, С5-ацилпиримидин, С5-гидроксиалкилпурин, С5-амидопиримидин, С5-цианопиримидин,
С5-нитропиримидин, С5-аминопиримидин, №-алкилпурины, №-алкил-6-тиопурины, 5-азацитидинил,
5- азаурацилил, триазолопиридинил, имидазолопиридинил, пирролопиримидинил и пиразолопиримидинил. Пуриновые основания включают, но не ограничиваются ими, гуанин, аденин, гипоксантин,
2,6-диаминопурин и 6-хлорпурин. Функциональные кислородные и азотные группы в этом основании могут быть защищены при необходимости или при желании. Приемлемые защитные группы хорошо известны специалистам в этой области и включают триметилсилил, диметилгексилсилил, третбутилдиметилсилил и трет-бутилдифенилсилил, тритил, алкильные группы, ацильные группы, такие как ацетил и пропионил, метансульфонил и п-толуолсульфонил.
Активное соединение можно вводить в виде любого производного, которое при введении реципиенту может прямо или косвенно образовывать исходное соединение либо само обладает требуемой активностью. Неограничивающими примерами являются фармацевтически приемлемые соли (альтернативно именуемые физиологически приемлемыми солями) и соединение, алкилированное или ацилированное в 5'-положении либо в пуриновом или пиримидиновом основании (альтернативно именуемые фармацевтически приемлемыми производными). Кроме того, на биологическую активность соединения могут влиять модификации, которые в некоторых случаях повышают активность по сравнению с исходным соединением. Это можно легко определить, получив производное и испытав его на антивирусную активность при помощи описанных здесь методов или любого другого метода, известного специалистам в этой области.
Термин ацил означает эфир карбоновой кислоты, в котором некарбонильный фрагмент сложноэфирной группы выбирают из группы, включающей алкил или низший алкил с прямой или разветвленной цепью либо циклический алкил или низший алкил, алкоксиалкил, в том числе метоксиметил, аралкил, в том числе бензил, арилоксиалкил, такой как феноксиметил, арил, в том числе фенил, необязательно замещенный галогеном, С1-С4алкил или С1-С4алкокси, эфиры сульфокислоты, такие как алкил или аралкилсульфонил, в том числе метансульфонил, эфир моно-, ди- или трифосфорной кислоты, тритил или монометокситритил, замещенный бензил, триалкилсилил (например, диметил-трет-бутилсилил) или дифенилметилсилил. Арильные группы в сложных эфирах предпочтительно содержат фенильную группу.
В используемом здесь значении термин практически не содержащий или практически при отсутствии означает нуклеозидную композицию, которая содержит по крайней мере 95-98% или более, предпочтительно 99-100% указанного энантиомера этого нуклеозида.
Нуклеотидные пролекарственные препараты
Все описываемые здесь нуклеозиды можно вводить в виде нуклеотидного пролекарства, что позволяет увеличить активность, биологическую доступность, стабильность или каким-либо другим образом изменить свойства нуклеозида. Известен ряд нуклеотидных пролекарственных лигандов. Как правило, алкилирование, ацилирование или другая липофильная модификация моно-, ди- или трифосфата нуклеозида увеличивает стабильность нуклеотида. Примерами замещающих групп, которые могут заменять один или несколько атомов водорода в фосфатном фрагменте, являются алкил, арил, стероиды, углеводы, в том числе сахара, 1,2-диацилглицерин и спирты. Многие из них описаны в статье В. Зопек апб
N. В1ксйо£Ьетдет, ΑηΙίνίΓαΙ Векеагсй, 27 (1995) 1-17. Все эти группы можно использовать в сочетании с рассматриваемыми нуклеозидами для достижения требуемого эффекта.
Активный нуклеозид может быть также получен в виде липида 5'-фосфоэфира или липида 5'-эфира, как это описано в нижеследующих материалах, которые включены в это описание изобретения в качестве ссылки: Кисета, Ь.8., N. 1уег, Е. Ьеаке, Α. ВаЬеп, Мобек! Е.К., И.Ь.^., апб С. Р1ап!абок1, 1990, Nоνе1 тетЬгапе-ш!егасб'е е!йег 1ϊρϊ6 апа1одк Ιΐιηΐ ίηΐιφίΐ 1п£есйоик Н1У-1 ртобисбоп апб тбисе беГесб'е νίπικ Готтабоп. ΑΙΌ8 Век. Нит. Вебо Уйикек. 6:491-501; Р1ап!абок1, С., I. Магаксо С.1, 8.Ь. Могпк-№11кс11ке. К. Ь. Меуег, Е. Ситик, ЕВ. 8иг1ек, К.8. 1кйац, Ь.8. Кисета, N. 1уег, С.А. ХУаПеи 8. Р1ап!абок1, апб ЕЭ. Мобек1, 1991, 8уп!йек1к апб е'а1иабоп оГ по'е1 е!йег йр1б пис1еок1бе сопщда!ек Гог апб-Н1У асб'йу, ί. Меб. Сйет., 34:1408-1414; К.У. Нок!е11ег, Ό.Ό. Вюйтап, Ό.Α. Сагкоп, Ь.М. 8!ийтй1ег, С.М.Т. 'ап ХУцк, апб Н. 'ап беп Воксй, 1992, Стеабу епйапсеб 1пй1Ь1боп оГ йитап 1ттипобейс1епсу '1гик 1уре 1 терйсабоп ш СЕМ апб НТ4-6С се11к Ьу 3'-беоху!йут1бше б1рйокрйа!е б1тупк!оу1-д1усето1, а йр1б ргобгид 3'беоху!йуш1бте, АпбтюгоЬ. Адеп!к Сйето!йег, 36:2025-2029; Нокебет, К.У., Ь.М. 8!ийтШет, Н.В. Ьепбпд, Н. 'ап беп Воксй, апб Ό.Ό. Вюйтап, 1990, 8уп!йек1к апб апйгебо'йа1 асй'йу оГ рйокрйойр1б апа1одк оГ а/|бо111у1шбше апб о!йег апй'йа1 пис1еок1бек, ί. Вю1. Сйет., 265:61127.
Неограничивающие примеры патентов США, в которых описаны приемлемые липофильные заместители, которые можно ковалентно вводить в нуклеозид, предпочтительно в 5'-ОН положении нуклеозида или липофильных препаратов, имеют патенты США №№ 5149794 (22 сентября 1992 г., ΥηΙν6ι е! а1.); 5194654 (16 марта 1993 г., Нок!ебет е! а1.); 5223263 (29 июня 1993 г., Нок!ебет е! а1.); 5256641 (26 октября 1993 г., Υаΐν^η е! а1.); 5411947 (2 мая 1995 г., Нок!ебет е! а1.); 5463092 (31 октября 1995 г., Нок!ебет е! а1.); 5543389 (6 августа 1996 г., Υа!ν^η е! а1.); 5543390 (6 августа 1996 г., Υаΐν^η е! а1.); 5543391 (6 авгу
- 8 008609 ста 1996 г., ΥαΙνίη е! а1.); и 5554728 (10 сентября 1996 г., Вакауа е! а1.), которые включены в данное описание изобретения в качестве ссылки. Иностранными заявками на патент, в которых описаны липофильные заместители, присоединяемые к нуклеозидам по настоящему изобретению, или липофильные препараты, являются АО 89/02733, АО 90/00555, АО 91/16920, АО 91/18914, АО 93/00910, АО 94/26273, АО 96/15132, европейский патент № 0350287, европейский патент № 93917054.4 и АО 91/19721.
Неограничивающие примеры нуклеотидных пролекарств приведены в нижеследующих ссылках: Но, Э.Н.А. (1973) 'ΌίδίΓΐΗυΙίοη оГ Ктаке апб беаттаке оГ 1-в-О-агаЬтоГигапоку1су1:окте ίη йккиек оГ тап апб тике. Сапсег Век. 33, 2816-2820; Но1у, А. (1993) 1коро1аг рйокрйогоик-тоб|Г|еб пис1ео11бе апа1одиек. 1п: Эе С1егсс| (Еб.), Абуапсек ίη Апйупа1 Отид Оек1дп, уо1. I, 1А1 Ргекк, рр. 179-231; Нопд, С.1., Ыесйаеу, А., апб Аек!, С.В. (1979а) 8уп!йек1к апб ап1йитот асйуйу оГ 1-в-О-агаЫпо-Гигапоку1суЮкте сопщдакк оГ сог41ко1 апб сотйкопе. Вкойетп. Вюрйук. Вк. Соттип. 88, 1223-1229; Нопд, С.1., Ыесйаеу, А., Кткйк,
А.Е, Висййей, Ό.Ι. апб Аек!, С.В. (1980) Ыис1еок1бе сощидакк ак ро!епйа1 апШитог адеп!к. 3. 8уп!йек1к апб апШитог асйуйу оГ 1-(в-О-агаЬшоГигапоку1)суккте сощидакк оГ соПкоккго1бк апб ке1ес!еб йрорЫйс а1сойо1к. 1. Меб. Сйет. 28, 171-177; Нок1е11ег, Κ.Υ., 81ийтШег, Ь.М., Ьепйпд, Н.В.М. уап беп Воксй, Н. апб Вкйтап. 1. Вю1. Сйет. 265, 6112-6117; Но1к1е11ег, Κ.Υ., Сагкоп, О.А. апб Вкйтап, Ό.Ό. (1991); Рйокрйаббу1а/|бо1йупибте: тесйашкт оГ апйге1гоу1га1 асйоп ш СЕМ се11к. 1. Вю1. Сйет. 266, 11714-11717; Но1к1е11ег, Κ.Υ., КогЬа, В., 8пбйат, С., Оатбепет, М. (1994а) АпЙУ1та1 асйуйу оГ рйокрйаббу1б1беохусуйбте ш Нера1111к В-шГескб се11к апб епйапсеб йерайс ир!аке т тке. Апйупа1 Век. 24, 59-67; Нок1е11ег, Κ.Υ., Вкйтап, Ό.Ό., 8пбйаг, ΟΝ. Ее1дпет, Р.Ь. Ее1дпет, 1. Вкс1, 1., Оатбепет, М.Е., 8е11еке1й,
Э.А. апб ЕШк М.Ы. (1994Ь) Рйокрйаббу1а/|бо1йупибте апб рйокрйа!1бу1-ббС: Аккекктеп! оГ ир!аке ш тоике 1утрйо1б бккиек апб апйу1га1 асйуйкк т йитап 1ттипобейскпсу укикбпГескб се11к апб т гаиксйег 1еикет1а упикйпГескб тке. АпйткгоЬ1а1 Адеп!к Сйето!йег. 38, 2792-2797; Нипккп, В.Ы., 1опек, А.А., МсОшдап, С., Аа1кег, В.Т., Ва1хаг1п1, 1., апб ОеСкгсд, Е. (1984) 8уп!йек1к апб Ью1одка1 рторегйек оГ коте сусйс рйокрйойккктк бепуеб Ггот 2'-беоху-5-Г1оигоипбте. 1. Меб. Сйет. 27, 440-444; Ιί, ΥΉ., Моод, С, 8сйтйГ, О., В1ксйоГГ, Р. апб Ьии, В. (1990); Мопорйокрйопс ас1б еккгк оГ 7-в-йубгохусйо1еккго1 апб оГ рупт1бте пис1еок1бе ак рокпйа1 ап!йитог адеп!к: куп!йек1к апб ргейттату еуа1иа1юп оГ ап1йитот асйуйу.
1. Меб. Сйет. 33, 2264-2270; 1опек, А.8., МсОшдап, С., Аа1кег, В.Т., Вакапш, 1. апб ОеСкгсд, Е. (1984) 8уп!йек1к, рторегйек, апб Ью1одка1 асйуйу оГ коте пис1еок1бе сусйс рйокрйотаткбакк. 1. Сйет. 8ос. Регкт Тгапк. I, 1471-1474; 1иобка, В.А. апб 8тт1, 1. (1974) 8уп!йек1к оГ бшЬопис1еок1бе рйокрй(Р-Ы)атто ас1б бепуайуек. Со11. Схесй. Сйет. Сотт. 39, 363-968; Ка!аока, 8., 1та1, 1., Υата^^, Ν., Ка!о, М., 8айо,
М., Катеаба, Т. апб 1та1, 8. (1989) А1ку1а1еб сАМР бепуайуек; ке1есйуе куп!йек1к апб Ью1одка1 асйуйкк. Шс1ек Ас1бк Век. 8ут. 8ег. 21, 1-2; Ка!аока, 8., ИсЫба, (сАМР) Ьепху1 апб те1йу1 йкккгк. Не1егосус1ек 32, 1351-1356; КтсЫпдкп, Ό., Нагуеу, ЕЕ, О'Соппог, Т.1. 1опек, В.С.КМ., Пеуше, К.О., Тау1огВоЬткоп Ό., кГГпек, Ό.Ι. апб МсОшдап, С. (1992) Сотрапкоп оГ апйу1га1 еГГес1к оГ /|боуибте рйокрйога1тба1е апб рйокрйотоб1аш1бак бепуакк адатк! НГУ апб ИЙУ т уйто. Апйу1та1 Сйет. СйетоЛет. 3, 107112; Кобата, К., Мого/итк М., 8аййой, К.1., Кишпака, Н., Υοк^ηο, Н. апб 8апеуокй1, М. (1989) АпШитог асйуйу апб рйагтасо1оду оГ 1-в-О-агаЬтоГигапоку1су1:окте-5'-ккагу1рйокрйа1е; ап ога11у асйуе бепуайуе оГ
1-в-О-агаЬтоГигапоку1су1:окте. 1рп. 1. Сапсег Век. 80, 679-685; Ког!у, М. апб Епде1к, 1. (1979) Тйе еГГес!к оГ абепокше- апб диапокше 3',5' рйокрйопс ас1б апб Ьепху1 ек1егк оп дшпеар1д уепйки1аг туосагбшт. №-шпуп-8сйткбеЬегд'к Агсй Рйагтасо1. 310, 103-111; Китаг, А., Оое, Р.Ь., 1опек, А.8., Аа1кег, В.Т., Вакапш, 1. апб ОеСкгсд, Е. (1990) 8уп!йек1к апб Ью1одка1 еуа1иайоп оГ коте сусйс рйокрйогат1ба1е пис1еок1бе бепуайуек. 1. Меб. Сйет. 33, 2368-2375; ЬеВес, С., апб Ниупй-Этй, Т. (1991) 8уп!йек1к оГ НрорЬтНс рйокрйак 1г1ек1ег бепуайуек оГ 5-Г1иогоипбте ап агаЬтосуббте ак апйсапсег ртобтидк. Тейайебтоп Ьей. 32, 6553-6556; Ькйкпккт, 1., Вагпег, Н.О. апб Сойеп, 8.8. (1960) Тйе те1аЬойкт оГ еходепоик1у киррйеб пес1еойбек Ьу ЕксйепсЫа сой., 1. Вю1. Сйет. 235, 457-465; Ьис1йу, 1., Уоп Оаеткеп, А., Епебепсй, 1. Мап!йеу, В., 2тее1Ге1, 1., 8сй1айег, С. апб Вепп, М.Н. (1981) 8уп!йек1к апб 1охко1одка1 рторегйек оГ 1йгее паШга11у осситпд суапоерййка1капек. М1й. Оед. ЕеЬепктйГе1ип1егк. Нуд. 72, 131-133 (Сйет. АЬк!г. 95, 127093); МсО1дап, С., То11егГ1е1б, 8.М. апб В11еу, Р.А. (1989) 8уп!йек1к апб Ью1одка1 еуа1иайоп оГ коте рйокрйак 1г1ек1ег бепуайуек оГ !йе апйуйа1 бгид Ага. Шс1ею Ас1бк Век. 17, 6065-6075; МсОшдап, С., Пеуте, К.О., О'Соппог, Т.1., Оа1рт, 8.А., кГГпек, Ό.Ε апб КшсЫпдГоп, Ό. (1990а) 8уп!йек1к апб еуа1иайоп оГ коте поуе1 рйокрйогат1бак бепуайуек оГ 3'-а/|бо-3'-беоху1йупибте (А2Т) ак апй-Н1У сотроипбк. Апйуйа1 Сйет. СйетоШег, 1, 107-113; МсОшдап, С., О'Соппог, Т.1., №сйо11к, 8.В., №сккоп, С. апб КтсЫпд!оп, Ό. (1990Ь) 8уп!йек1к апб апй-Н1У асйуйу оГ коте поуе1 кийкбиДеб б1а1ку1 рйокрйак бепуайуек оГ А2Т апб ббСуб. Апйу1га1. Сйет. СйетоШег. 1, 355-360; МсОшдап, С., №сйо11к, 8.В., О'Соппог, Т.Е, апб КтсЫпдГоп, Ό. (1990с) 8уп!йек1к оГ коте поуе1 б1а1ку1 рйокрйак бепуайуе оГ 3'-тобШеб пис1еок1бек ак ро!епйа1 апй-АГО8 бгидк. Апйуйа1 Сйет. СйетоШег. 1, 25-33; МсОшдап, С., Оеу1п, К.О., О'Соппог, Т.Е, апб К1псй1пд!оп, Ό. (1991) 8уп!йек1к апб апй-НГУ асйуйу оГ коте йа1оа1ку1 рйокрйогат1бак бепуайуек оГ 3'-а/|бо-3'-беоху1йут1бте (А2Т); ро1еп1 асйуйу оГ !йе йкй1огое1йу1 те1йохуа1атпу1 сотроипб. Апйу1га1 Век. 15, 255-263; МсОшдап, С, Ра1ййапа, В.К, Ва1хаг1п1, 1. апб ПеС1етсд, Е. (1993Ь) 1п1гасе11и1ат бейуегу оГ Ьюасйуе А2Т пискойбек Ьу агу1 рйокрйак бепуайуек оГ А2Т. 1. Меб. Сйет. 36, 1048-1052.
- 9 008609
Кислые алкилфосфатные производные анти-ВИЧ агента ΑΖΤ могут быть менее токсичными по сравнению с аналогом исходного нуклеозида. Απίίνίηΐ СИет. СИетоЛег. 5, 271-277; Меуег, КВ., 1г., 81штап. Ό.Α. апб КоЫпк, К.К. (1973) 8упЛек1к оГ риппе пис1еок1бе 3',5'-сусИс рИокрИогат1ба!ек. Те1таИебгоп Ьей. 269-272; Иадууагу, 1., 6оЫ1, ΚΝ., КйсИпег, С.К. апб 8!етепк, Ι.Ό. (1973) 8й.1б1ек оп пеи!га1 ек!егк оГ сусИс АМР, ВюсИет. ВюрИук. Кек. Соштип. 55, 1072-1077; Nатапе, Α., боиуейе, С., РйИоп, М.Р., РйИоп, 6. апб НиупИПшИ, Т. (1992) 'Лтргоуеб Ьгат беНуегу оГ ΑΖΤ иктд а д1усоку1 рИокрИо!пек!ег ргобгид. 1. Меб. СИет. 35, 3039-3044; Кагдео!, 1. №гЬоппе, 1.М., Епде1к, 1. апб Ьекег, Η.Α. (1983), №!1. Αсаб. 8α. υ8Α 80, 2395-2399; №1коп, Κ.Α., Вепйибе, У.6., 8!кег, №.Ν. апб Ни!сЫпкоп, РР. (1987) ТИе диекПоп оГ сИапймй! едтИЬпа Гог Ле рИокрИа!е ппдк оГ пис1еок1бе сусНс 3',5'-топорИокра!ек. 1ΗNМК апб х-гау сгук!а11одгарЫс к!ибу оГ Ле б1ак!егеотегк оГ Лут1бте рИепу1 сусИс 3',5'-топорИокра!е. 1. Αт. СИет. 8ос. 109, 4058-4064; №гЬоппе, ЕМ., КюИагб, 8., №1гдео1 1. апб Еек!ег, Η.Α. (1984) кем рИо!оасбуа!аЬ1е сусИс пис1еоббек ргобисе т!гасе11и1ат )птрк т сусИс ΑМР апб сусИс 6МР сопсеп!габопк. №1иге 301, 74-76; №итапп, ЕМ., Негуе, М., ПеЬоиху, ЕС., биегга, Р.Е, боиуейе, С, Эиргах, В. апб Ниупу-О1пИ, Т. (1989) 8уп!Иек1к апб !гапктетЬгапе йапкрой к!иб1ек Ьу NМК оГ а д1исоку1 рИокрИоИр1б оГ Лут1бте. 1. Αт. СИет. 8ос. 111, 4270-4277; ОИпо, К., Та!кит1, Ν., Нпапо, М., Итак К., М|ходисИг Н., Какатига, Т., Кокака, М., ТакаШккг К., Уатауа, Т., Тоуата К., УокЫба, Т., Макаока, Т., НакЫто!о, 8., ОИкЫта, Т., К1тига, I., Уатаба, К. апб К1тига, 1. (1991) Тгеа1теп1 оГ туе1обукр1акйс купбготек мйИ ога11у абт1шк!егеб 1-в-О-агаЫпоигапоку1су!окте-5'-к!еагу1рИокрИа!е. Опсо1оду 48, 451-455. Ра1отто, Е., Кекк1е, Ό. апб Ногмйх, ЕР. (1989) Α бЛубгорупбте сатег кук!ет Гог кик!атеб беИтегу оГ 2',3'-б1беохупис1еок1бек 1о !Ие Ьгат. 1. Меб. СИет. 32, 22-625; Регктк, К.М., Вагпеу, 8, Уййоск, К., С1агк, Р.Н., Ьеут, К., ЬатЬей, И.М., Ре!!емау, 8.К., 8ега1томкка, Н.Т., Вабеу, 8.М., 1асккоп, 8., Нагпбеп, М.К., ΑкИ!оп, К., 8ийоп, Ό., Нагуеу, 1.1. апб Вгомп, Α.6. (1993) Α^ίνίΙν оГ ВКЬ47923 апб йк ога1 ргобгид, 8В203657Α адатк! а гаиксИег типпе 1еикет1а Т1гик 1п£есбоп т тюе. ΑπΙίνίηι1 Кек. 20 (8ирр1. I). 84; Р1ап1абок1, С, Магаксо, С.1., 1г., №тк-Ха1ксйке, 8.Ь., Меуег, К.Ь., битик, Р., 8иг1ек, 1.К., 1кйад, К.8., Кисега, Ь.8., 1уег, Ν., Уа11еп, ΟΑ., Р1ап1абок1, 8. апб Мобек!, Е.1. (1991) 8уп!Иек1к апб ета1иабоп оГ поνе1 еЛег Ир1б пис1еок1бе сопщда1ек Гог апб-Н1У-1 асПтИу. 1. Меб. СИет. 34, 1408-1414; Ротроп, Α., ЕеГеИуге, I., 1тЬас1, РЬ., КаИп, 8. апб Ращийаг, Ό. (1994) Иесотрокйюп раЛмаук оГ Ле топо- апб Ык(ргуа1оу1охутеЛу1) ек!егк оГ ах1боЛут1бте-5'-топорИокрИа!е ш се11 ех!гас! апб т йккие сиЙиге тебтт; ап аррбсайоп оГ Ле 'оп-Ипе 18КРс1еатпд НРЬС 1есИшдие. ΑπΙίνίη·ι1 СИет. СйетоЛег. 5, 91-98; Рок!етагк, Т. (1974) СусНс ΑМР апб сусйс 6МР. Αппи. Кет. РИагтасо1. 14, 23-33; РпкЬе, Е.1., МатНп, 1.С.М., МсбИее, И.Р.С., Вакег, М.Р., 8тее, Ό.Ρ., Ийке, ΑΚ, МайИемк, Т.К. апб УеЛеубеп, 1.Р.1. (1986) 8упЛек1к апб апйИегрек т1гик асПтйу оГ рИокрИа1е апб рИокрИопа!е бептаОтек оГ 9-[(1,3-бЛубгоху-2-ргороху)теЛу1]диашпе. 1. Меб. СИет. 29, 671675; РиссИ, Р., Соккейп, 6., ЕеГеЬуге, I., Ротроп, Α., Αη^ήΛ, Α^., И1т апб 1тЬасИ, 1. Ь. (1993) 1п1гасе11и1аг бейуегу оГ пис1еок1бе топорИокрИа!е !ИгоидИ а гебис1аке-теб1а1еб асПуабоп ргосекк. Αп!^ν^^а1 Кек. 22, 155-174; Ридаета, У.Р., К1осИкеуа, 8.Е, МакИЬйк, Ρ.Ό. апб Е1хепдат1, К.8. (1969). Тохюо1одюа1 аккекктеп! апб ИеаИИ к!апбагб гайпдк Гог еЛу1епе кп1Пбе ш Ле тбик1па1 а!токрИеге. С|д. ТгГ. РгоЕ ΖаЬо1. 14, 47-48 (СИет. ΑΛΙγ. 72, 212); КоЫпк, К.К. (1984) ТИе ро!епйа1 оГ пис1еойбе апа1одк ак 1пЫЬйогк оГ Ке1го у1гикек апб !итогк. РИагт. Кек. 11-18; Кокомкку, Α., К1т, 8.Н., Кокк, 1. апб Уюк, М.М. (1982) ЬорорИЛс 5'(а1ку1рИоркрИа1е) ек!егк оГ 1-13-О-агаЫпоГигапоку1су!окте апб йк Х'-асу1 апб 2,2'-апИуб!о-3',0-асу1 беЛаПтек ак ро!епйа1 ргобгидк. 1. Меб. СИет. 25, 171-178; Кокк, У. (1961) 'Лсгеакеб кепкйгуйу оГ Ле ма1кег ШгпоШ !омагбк а!отайс пйгодеп тик!агбк сапутд Ьакю к1бе сНатк Го11ом1пд д1исоке рге1геа!теп1. ВюсИет. РИагт. 8, 235-240; Куи, Е.К., Кокк, К.1., Ма1кикИйа, Т., МасСокк, М., Нопд, С.Е апб Уек!, С.К. (1982) РИокрИо11р1б-пис1еок1бе соп)ида1ек. 3. 8упЛек1к апб ргеИттагу Ью1одюа1 етайиШоп оГ 1-β-ΌатаЬтоГигапоку1су1окте 5' б1рИокрИа!е [-], 2-б1асу1д1укего1к. 1. Меб. СИет. 25, 1322-1329; 8айИй1, К. апб Ните, ХУ.1. (1986) ТИе бедгабайоп оГ 5-юбобеохуипбте апб 5-ЬготоеЛохуипбте Ьу кегит Ггот бШегеп! коигсек апб йк сопкедпепсек Гог Ле ике оГ Леке сотроипбк Гог тсогрогаИоп 1п1о ΌΝΑ. СИет. Вю1. Шегас!. 57, 347-355; 8апеуокИ1, М., Могохит1, М., Кобата, К., МасЫба, 1., Кишпака, Α. апб УокЫпо, Н. (1980) 8упЛе!ю пис1еок1бек апб пис1еойбек. XVI. 8уп!Иек1к апб Ью1одюа1 етайиШопк оГ а кепек оГ 1-β-ΌагаЬтоГигапоку1су!окте 5'-а1ку1 ог агу1рИокрИа!ек. СИет. РИагт. Ви11. 28, 2915-2923; 8ак!гу, 1.К., №Ие!е, Р.К, КИап, 8., Хомак, В.1., Р1ипкей, У., Α^1^пдИаиκ. К.В. апб РагдиИаг, Ό. (1992) МетЬгаперегтеаЬ1е б1беохуипбте 5'-топорИокрИа!е апа1одие 1пИ1Ьйк Иитап (ттипобеДЫепсе т1гик 1пГесйоп. Мо1. РИагтасо1. 41, 441-445; 8Иам, 1.Р., 1опек, К.1., Ατ^ίΛ, М.К, Иоте, М.8., Еее, ^.Α. апб Сипбу, К.С. (1994) Ога1 ЬюауаПаЬййу оГ РМЕΑ Ггот РМЕΑ ргобгидк ш та1е 8ргадие-Эам1еу га!к. 9!И Αппиа1 ΑΑ68 Меейпд. 8ап П1едо, СΑ (ΑΗ^η-κΙ). 8Ии!о, 8., иеба, 8., Iтати^а, 8., Рикикама, К., Ма!киба, Α. апб иеба, Т. (1987). Α Гасйе опе-к!ер купЛекй оГ 5'-рИокрИаббу1пис1еок1бек Ьу ап епгутайс !мо-рИаке геасйоп. ТейаИебгоп Ьей. 28, 199-202; 8Ии!о, 8., ИоИ, Н., иеба, 8., Латита, 8., Кикикама, К., Ткпрпо, М., Ма!киба, Α. апб иеба, Т. (1988) РИагт. Ви11. 36, 209-217. Примером полезной фосфатной группой пролекарства является
8-ацил-2-тиоэтил группа, также называемая 8ΑΊΈ.
- 10 008609
Комбинированная и альтернированная терапия
Установлено, что после продолжительного лечения антивирусным средством могут появиться устойчивые к лекарственным средствам варианты ВИЧ и ИВУ. Устойчивость к лекарственному средству обычно возникает в результате мутации гена, кодирующего фермент, используемый в репликации вируса, причем в случае ВИЧ таким ферментом чаще всего бывает обратная транскриптаза, протеаза или полимераза ДНК, и в случае НВУ таким ферментом является полимераза ДНК. Недавно было показано, что действие лекарственного средства против ВИЧ можно продлить, усилить или восстановить путем введения данного соединения в сочетании или поочередно со вторым и, возможно, третьим антивирусным соединением, которое вызывает другую мутацию, отличающуюся от мутации, вызываемой основным лекарственным средством. Кроме того, при помощи такой комбинированной или альтернированной терапии можно изменить фармакокинетику, распределение в организме и другие параметры лекарственного средства. Как правило, комбинированная терапия является более предпочтительной по сравнению с альтернированной терапией, так как она оказывает множественное одновременное действие на вирус.
Вторым антивирусным средством, предназначенным для лечения ВИЧ в соответствии с одним вариантом осуществления изобретения, является ингибитор обратной транскриптазы (ΚΤΊ), который может быть или синтетическим нуклеозидом (ΝΚΤΙ), или соединением, не являющимся нуклеозидом (ΝΝΚΤΙ). В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения в случае ВИЧ вторым (или третьим) антивирусным средством может быть ингибитор протеазы. В соответствии с другими вариантами осуществления изобретения вторым (или третьим) соединением может быть аналог пирофосфата или ингибитор слияния. Данные об устойчивости к лекарственным средствам, полученные ίη νίίτο и ίη νίνο для ряда антивирусных соединений, приведены в статье δοϊιίηαζί. с1 а1., ΜιιΙαΙίοηκ ίη ΓοίΓονίτηΙ депек аккос1а1еб \νί11ι бшд ^еκ^κίаηсе, Iηίе^ηаί^οηа1 ΑηίίνίταΙ 1997.
Предпочтительными соединениями для комбинированной или альтернированной терапии, предназначенными для лечения НВУ, являются 3ТС, РТС, Ь-ЕМАИ, интерферон, β-Ό-диоксоланилгуанин (ΌΧΟ), в-О-диоксоланил-2,6-диаминопурин (ΌΑΡΌ) и β-Ό-диоксоланил-б-хлорпурин (АСР), фамцикловир, пенцикловир, ВМ8-200475, Ык ροт РМЕА (адефовир, дипивоксил), лобукавир, ганцикловир и рибаварин.
Предпочтительными примерами антивирусных средств, которые можно использовать в сочетании или поочередно с описываемыми здесь соединениями для лечения ВИЧ, являются цис-2-гидроксиметил5-(5-фторцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан (РТС); (-)-энантиомер 2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3оксатиолан (3ТС); карбовир, ацикловир, фоскарнет, интерферон, ΑΖΤ, ΌΌΙ, ИИС, Ό4Τ, С8-87 (З'-азидо2',3'-дидезоксиуридин) и β-Ό-диоксоланнуклеозиды, такие как β-Ό-диоксоланилгуанин (ΌΧΟ), β-Όдиоксоланил-2,6-диаминопурин (ΌΑΡΌ) и β-Ό-диоксоланил-б-хлорпурин (АСР), МКС-442 (6-бензил-1этоксиметил)-5-изопропилурацил.
Предпочтительными ингибиторами протеазы являются криксиван (Мегск), нелфинавир (Α§ουτοη), ритонавир (Α№οίί), саквинавир (Клсйе), ОМР-266 (διικίίνη) и ОМР-450 (ΌπΡοηί Мегск).
Более полный список соединений, которые можно вводить в сочетании или поочередно со всеми описываемыми нуклеозидами, включает сукцинат (18,4К)-4-[(2-амино-6-циклопропиламино)-9Н-пурин-9-ил]-2-циклопентен-1-метанола (1592, аналог карбовира; ΟΙαχο ^еНтете);
3ТС: (-)-β-^-2',3'-дидезокси-3'-тиацитидин (ΟΙαχο ^еНотше);
а-ΑΡΑ К18893: а-нитроанилинофенилацетамид;
А-77003: С2-симметричный ингибитор протеазы (ΑΌΌοίί);
Α-75925: С2-симметричный ингибитор протеазы (ΑΌΌοίί);
ΑΑΡ-ВНΑΡ: аналог бисгетероарилпиперазина (ΌρίοΡη);
ΑВΤ-538: С2-симметричный ингибитор протеазы (ΑΌΌοίί);
ΑζάάΌ: 3'-азидо-2',3'-дидезоксиуридин;
ΑΖΤ: 3'-азидо-3'-дезокситимидин (Ск-ιχο ^еНтете);
ΑΖΤ-ρ-66Ι: 3'-азидо-3'-дезокситимидилил-(5',5')-2',3'-дидезоксиинозиновая кислота (Ινηχ);
ВНΑΡ: бисгетероарилпиперазин;
ΕΚΑ 1906: №{18-[[[3-[28-{[(1,1-диметилэтил)амино]карбонил}-4К-[(3-пиридинилметил)тио]-1пиперидинил]-2К-гидрокси-18-(фенилметил)пропил]амино]карбонил]-2-метилпропил}-2хинолинкарбоксамид (В^οМеда/Вοейπηде^-IηдеШе^т);
ΡΙΡΑ 2185: N-(1,1-диметилэтил)-1-[28-[[(2-2,6-диметилфенокси)-1-оксоэтил]амино]-2Β-гидροкси-4фенилбутил]-4Β-πиρидинилгиο-2-πиπеридинкарбоксамид (В^οМеда/Вοейπηде^-IηдеШе^т);
ВМ+51,0836: производное тиазолоизоиндолинона;
ВМ8 186318: ингибитор протеазы ВИЧ-1 на основе производного аминодиола (ВбкФКМуегк8дшЬЬ);
64ΑΡΙ: 9-[2,5-дигидро-5-(фосфонометокси)-2-фуранел]аденин (Сбеаб);
64С: 2' ,3' -дидегидро -2',3' -дидезоксицитидин;
64Τ: 2',3'-дидегидро-3'-дезокситимидин (ВпкФКМуегк-ЗдшЬЬ);
- 11 008609 ййС: 2',3'-дидезоксицитидин (Коске);
άάΐ: 2',3'-дидезоксинозин (Вп81о1-Муег8-8с.|шЬЬ);
ΌΜΡ-266: 1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он;
ΌΜΡ-450: {[[4К-(4-а,5-а,6-Ь,7-Ь)]гексагидро-5,6-бис(гидрокси)-1,3-бис(3-амино)фенил]метил-4,7бис(фенилметил)-2Н-1,3-диазепин-2-он}бисмезилат (Άνίά);
ΌΧΟ: (-)-в-И-диоксолангуанозин (ТпапДе);
ЕВИ-йМ: 5-этил-1-этоксиметил-6-(3,5-диметилбензил)урацил;
Е-ЕВИ: 5-этил-1 -этоксиметил-6-бензилурацил;
Ό8: декстрансульфат;
Е-ЕР8еИ: 1-(этоксиметил)-(6-фенилселенил)-5-этилурацил;
Е-ЕРИ: 1-(этоксиметил)-(6-фенилтио)-5-этилурацил;
ЕТС: в-2',3'-дидезокси-5-фтор-3'-тиацитидин (Тпап§1е);
НВ Υ097: 8-4-изопропоксикарбонил-6-метокси-3 -(метилтиометил)-3,4-дигидрохиноксалин-2(1Н)тион;
НЕРТ: 1-[(2-гидроксиэтокси)метил]-6-(фенилтио)тимин;
Н1У-1: вирус иммунодефицита человека типа 1;
ΙΜ27 63: 1,1'-(1,3-пропандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан Цоктоп Майкеу);
ΙΜ3100: 1,1'-[1,4-фениленбис-(метилен)] -бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан (1окп8оп Майкеу);
ΚΝΙ-272: трипептид, содержащий (28,38)-3-амино-2-гидрокси-4-фенилмасляную кислоту;
Ь-697593: 5-этил-6-метил-3-(2-фталимидоэтил)пиридин-2(1Н)-он;
Ь-735524: ингибитор протеазы ВИЧ-1 на основе гидроксиаминопентанамида (Мегск);
Ь-697661: 3-{[(4,7-дихлор-1,3-бензоксазол-2-ил)метил]амино}-5-этил-6-метилпиридин-2(1Н)-он;
Ь-ЕИПС: (-)-в-Ь-5-фтор-2',3'-дидезоксицитидин;
Ь-ЕИОС: (-)-в-Ь-5-фтордиоксоланцитозин;
МКС442: 6-бензил-1-этоксиметил-5-изопропилурацил (Ι-ЕВИ; Тпап§1е/МЙ8иЫ81и);
невирапин: 11-циклопропил-5,11-дигидро-4-метил-6Н-дипиридол[3,2-Ь:2',3'-е]диазепин-6-он (Воейппдег-1идеШе1т);
N80648400: 1-бензилоксиметил-5-этил-6-(альфа-пиридилтио)урацил (Е-ВРТИ);
Р9941: [2-пиридилацетил-11еРкеА1а-у(СНОН)]-2 (ОироШ Мегск);
РЕА: фосфоноформиат (фоскарнет; А§1га);
РМЕА: 9-(2-фосфонилметоксиэтил)аденин (Сйеай);
РМРА: (К)-9-(2-фосфонилметоксипропил)аденин (Сйеай);
Ко 31-8959: ингибитор протеазы ВИЧ-1 на основе производного гидроксиэтиламина (Коске);
КР1-312: ингибитор пептидилпротеазы, 1-[(38)-3-(н-альфа-бензилоксикарбонил)-1-аспаргинил) амино-2-гидрокси-4-фенилбутирил]-н-трет-бутил-1-пролинамид;
2720: 6-хлор-3,3-диметил-4-(изопропенилоксикарбонил)-3,4-дигидрохиноксалин-2(1Н)тион;
8С-52151: ингибитор протеазы на основе изостера гидроксиэтилмочевины (8еаг1е); 8С-55389А: ингибитор протеазы на основе изостера гидроксиэтилмочевины (8еаг1е);
Т1ВО К82150: (+)-(58)-4,5,6,7-тетрагидро-5-метил-6-(3-метил-2-бутенил)имидазо[4,5,1_)к][1,4]бензодиазепин-2(1Н)тион (,1ап88еп);
Т1ВО 82913: (+)-(58)-4,5,6,7-тетрагидро-9-хлор-5-метил-6-(3-метил-2-бутенил)имидазо[4,5,1_)к][1,4]бензодиазепин-2-(1Н)тион (4ап88еп);
Т8АО-т3Т: [2',5'-бис-О-(трет-бутилдиметилсилил)-3'-спиро-5'-(4'-амино-1',2'-оксатиол-2',2'диоксид)]-Ь-Э-пентофуранозил-№-метилтимин;
И90152: 1 - [3 - [(1 -метилэтил)амино]-2-пиридинил]-4-[[5- [(метилсульфонил)амино]-1Н-индол-2ил]карбонил]пиперазин;
ИС: производные тиокарбоксанилида (Ишгоуа1);
ИС-781: =№[4-хлор-3-(3-метил-2-бутенилокси)фенил]-2-метил-3-фуранкарботиоамид;
ИС-82: =№[4-хлор-3-(3-метил-2-бутенилокси)фенол]-2-метил-3-тиофенкарботиоамид;
УВ 11328: ингибитор протеазы на основе гидроксиэтилсульфонамида (Уейех);
УХ-478: ингибитор протеазы на основе гидроксиэтилсульфонамида (Уейех);
ХМ 323: ингибитор протеазы на основе циклической мочевины (Пироп! Мегск).
Комбинированная терапия для лечения пролиферативных состояний
В соответствии с еще одним вариантом осуществления изобретения соединения используемые в качестве антипролиферативных средств можно вводить в сочетании с другими соединениями, повышающими эффективность лечения, которые включают, но не ограничиваются ими, антифолат, 5-фтор-пиримидин (в том числе 5-фторурацил), аналог цитидина, такой как в-Ь-1,3-диоксоланилцитидин или в-Е-1,3-диоксоланил-5-фторцитидин, антиметаболиты (в том числе пуриновые антиметаболиты, цитарабин, фударабин, флоксуридин 6-меркаптопурин, метотрексат и 6-тиогуанин), гидроксимочевину, ингибиторы митоза (в том числе СРТ-11, этопозид (УК-21)), таксол и винкаалкалоиды, такие как винкристин и винбластин, алкилирующие средства (которые включают, но не ограничиваются ими, бусульфан,
- 12 008609 хлорамбуцил, циклофосфамид, ифофамид, метахлорамин, мелфалан и тиотепа), неклассические алкилирующие средства, соединения, содержащие платину, блеомицин, противоопухолевый антибиотик, антрациклин, такой как доксорубицин и данномицин, антрацендион, ингибиторы топоизомеразы II, гормональные средства (которые включают, но не ограничиваются ими, кортикостероиды (дексаметазон, преднизон и метилпреднизон), андрогены, такие как флуоксиместерон и метилтестостерон, эстрогены, такие как диэтилстильбэстерол, антиэстрогены, такие как тамоксифен, аналоги ЬНКН, такие как лейпролид, антиандрогены, такие как флутамид, аминоглютэтимид, мегестролацетат и медроксипрогестерон, аспарагиназу, кармустин, ломустин, гексаметилмеламин, дакарбазин, митотан, стрептозоцин, цисплатин, карбоплатин, левамазол и лейковорин. Соединения по настоящему изобретению можно также использовать в сочетании с ферментными лечебными средствами и модуляторами иммунной системы, такими как интерферон, интерлейкин, фактор опухолевого некроза, фактор, стимулирующий колонию макрофагов, и колониестимулирующий фактор.
Способ получения активных соединений
В соответствии с одним вариантом осуществления изобретения выполняют диастереоселективную реакцию, обеспечивающую введение фтора в сахарную часть новых аналогов нуклеозида. Этот метод синтеза можно использовать для получения производных пурина и пиримидина. Основной стадией синтеза является фторирование предшественника хирального кольца безуглеводного сахара (48)-5(защищенный-окси)пентан-4-олида, например, (48)-5-(трет-бутилдифенилсилокси)пентан-4-олида 4, с использованием источника электрофильного фтора, которым является, но не ограничивается им, Ν-фтор(бис)бензолсульфонимид 5. Этот относительно новый класс Ν-фторсульфонимидных реагентов был первоначально получен Барнетом в 1984 г.; с тех пор он был усовершенствован и используется в настоящее время в качестве удобного и реакционноспособного источника электрофильного фтора (Вагпе!!е, ν.Ε., I. Ат. Скет. 8ос. 1984, 106, 452; ϋονΐδ, Е.А.; Нап, V., Мигрку, С.К, I. Огд. Скет. 1995, 60, 4730; 8шескик, V., ВеаиНеи, Е. , Мокп, К., Нап, V., Мигрку, С.К., Όανίκ, Е.А., Те1тайебтоп Ье!!. 1994, 35(21), 3465). Эти реагенты чаще всего используют для введения фтора в нуклеофилы, такие как еноляты и метилированные ароматические соединения (Όηνίκ. Е.А., Нап, V., Мигрку, С.К., I. Огд. Скет. 1995, 60, 4730). В частности, №фтор-(бис)бензолсульфонимид (ΝΡ8ί) является устойчивым на воздухе, простым в обращении твердым веществом с достаточным пространственным объемом для стереоизбирательного фторирования енолята силилзащищенного лактона 4. В качестве неограничивающего примера этого способа ниже подробно описан синтез фторолактона 6 и его использование в качестве промежуточного соединения для синтеза ряда новых а-2'-фторнуклеозидов. На основании этого описания специалист в этой области сможет при желании изменить этот способ для достижения поставленной цели и получить требуемое соединение.
Можно использовать любой источник электрофильного фтора, который фторирует предшественник, такой как (48)-5-(защищенный-окси)пентан-4-олид, например, (48)-5-(трет-бутилдифенилсилокси) пентан-4-олид. Альтернативными источниками электрофильного фтора являются
Ν-фторсульфамы (рИГегбшд, е! а1., Те!. Ьей. νοί. 29, № 47, рр. 6087-6090 (1988);
Скет1са1 Кеу1ете, 1992, νοί. 92, № 4 (517)), Ν-фтор-О-бензолдисульфонимид (Те!. Ье!!., νοί. 35, рр. 3456-3468 (1994), Те!. Ье!!. νο1. 35, № 20, рр. 3263-3266 (1994));
I. Огд. Скет. 1995, 60, 4730-4737), 1-фторэтен и его синтетические эквиваленты (Майкете, Те!. Ье!!. νοί. 35, № 7, рр. 1027-1030 (1994);
фторирующие агенты АссиГкюг фирмы АШеб 81дпа1, 1пс., ΒιιΓΓηΙο Кекеатск ^аЬο^а!ο^у, ВийаЦ, №\\ΥοιΈ №Тй 1-фтор-4-гидрокси-1,4-диазоабицикло[2.2.2]октан-бис(тетрафторборат), №Ру (пиридингептафтордиборат Ν-фторпиридиния) и ΝΡ8ί (Ν-фторбензолсульфонимид);
электрофильные фторирующие реагенты фирмы А1бпск Скет1са1 САтрапу, 1пс., в том числе соли Ν-фторпиридиния, а именно трифлат 1-фтор-2,4,6-триметилпиридиния, трифлат 3,5-дихлор-1-фторпиридиния, трифлат 1-фторпиридиния, тетрафторборат 1-фторпиридиния и пиридингептафтордиборат
1-фторпиридиния (см. также I. Ат. Скет. 8ο^ νο1. 112, № 23, 1990);
Ν-фторсульфонимиды и амиды, в частности Щ-фтор-Ы-метил-п-толуолсульфонамид, Ν-фтор-Ыпропил-п-толуолсульфонамид и Ν-фторбензолсульфонимид);
фторид Ν-фторхинуклидиния (I. Скет. 8ο^ Реткш Ттапк I 1988, 2805-2811);
перфтор-2,3,4,5-тетрагидропиридин и перфтор-(1-метилпирролидин), Вапкк, Скепд, апб На^еШте, Не!егосускс Рο1уΓ1иο^ο-Сοтрοипб8 Раг! II (1964);
1-фтор-2-пиридон, I. Огд. Скет., 1983, 48, 761-762;
четвертичные стереогенные центры, имеющие атом фтора (I. Скет. 8ο^ Реткш Ттапз, рр. 221-227 (1992));
трифлат ^фтор^Д^-пиридиния, 8Ыт17и, Те!такебгоп, νο1. 50(2), рр. 487-495 (1994); пиридингептафтордиборат Ν-фторпиридиния, I. Огд. Скет. 1991, 56, 5962-5964; υтетο!ο, е! а1. Ви11. Скет. 8οο 1рп., 64, 1081-1092 (1991);
Ν-фторперфторалкилсульфонимиды, I. Ат. Скет. 8οο, 1987, 109, 7194-7196;
Ри^^^ηд!οη, е! а1., Бе^15 Ас1б Меб1а!еб Екюппа1юп5 οΓ Аготайс 8иЬ5!га!е5, I. Огд. Скет. 1991, 56, 142-145.
- 13 008609
Существенным преимуществом этого метода является возможность получения отдельно природного (1а)-Э- или неприродного (1й)-Ь-энантиомера нуклеозидов в результате соответствующего выбора Ь- или Ό-глутаминовой кислоты в качестве исходного вещества.
Ат - Н, СНд. Р
Аг х ОН, 1МНг, ЫНАс
Лактон 4 синтезируют по методу, показанному на схеме 1, из Ь-глутаминовой кислоты, как это описано Кау1б е! а1. (Тейайебгоп 1978, 34, 1449) и ТашдиеЫ е! а1. (Тейайебгоп 1974, 30, 3547).
Схема 1
Известно, что енолят лактона 4, полученный при температуре -78°С с использованием ЬШМО8 в ТГФ, является устойчивым веществом. Этот енолят используют при осуществлении нескольких методов синтеза, включая добавление электрофилов, таких как дифенилдиселенид, дифенилдисульфид и алкилгалогениды, с получением высоких выходов (Ыойа, Э.С.. ХУПюп, Ь., ί. Тейайебгоп Ьей. 1990, 31 (13), 1815; Сйи, С.К., Вайи, 1.К., Веаей, ТУ., Αηη. 8.К., Ниапд, Н., 1еопд, Ь.8., Ьее, 8.1., 1. Огд. Сйетп., 1990, 55, 1418; Ка^акаш1, Н., Ейа1а, Т., Кокект, К., Ма18И8Ййа, Н., №ок Υ., Ной, К., Сйет. Ьей. 1990, 1459). Однако добавление к еноляту 4 раствора соединения 5 в ТГФ дает плохой выход требуемого монофторированного продукта 6. Получены многочисленные побочные продукты, в том числе вещество, которое предположительно является дифторированным лактоном и не отделяется от других примесей. По этой причине порядок введения реагентов изменен таким образом, что лактон 4 и ΝΓδί 5 вместе растворяют в ТГФ и охлаждают до температуры -78°С. Медленное добавление ЫНМ08 позволяет получить вещество 6 в виде единственного продукта с небольшим количеством непрореагировавшего исходного вещества (1)
Фторолактон 6 можно получить с 50-70% выходом, производя хроматографию на колонках из силикагеля и кристаллизацию. Реакция приводит к получению одного диастереомера 6 главным образом в результате взаимодействия пространственно объемной группы ТВЭР8 и объемного фторирующего реагента 5. Фторолактон 6 идентифицируют как α- или нижний фтороизомер, т.е. с положением атома Г книзу от плоскости кольца, производя сравнение с ранее опубликованными данными ЯМР и при помощи рентгеноструктурного исследования энантиомера 20.
Лактон 6 превращают в аномерный ацетат 8, как это показано на схеме 2. Интересно отметить, что лактон 7 существует исключительно в виде β-аномера и у ацетата 8 при помощи ЯМР не обнаружен αаномер, о чем сообщили №1йа!а е! а1. (Ви11. Сйет. 8ое. 1рп. 1995, 68, 1509).
Схема 2
Реакцию сочетания соединения 8 с силилированными пиримидиновыми основаниями выполняют в соответствии со стандартным методом Ворбруггена (Тейайебгоп Ьей., 1978, 15, 1339) с использованием трифлата ТМ8 в качестве кислоты Льюиса. Альтернативно можно использовать любую другую кислоту Льюиса (которая, как известно, способна эффективно конденсировать основание вместе с углеводом, в результате чего образуется нуклеозид), включая хлорид олова, хлорид титана и другие соединения олова или титана. Целый ряд оснований можно успешно подвергнуть реакции сочетания с получением высоких
- 14 008609 выходов в интервале 72-100% после выполнения хроматографии на колонках (уравнение 2, табл. 1)
Таблица 1
Гликозилирование замещенных пиримидинов соединением 8
Соединение Κι я2 выход
9 Р он 87%
10 г νη2 99%
11 н ΝΗΑς 91%
12 н νη2 72%
13 сн3 ОН 89%
Результаты ПМР показывают, что соотношение между аномерами β- и α-нуклеозидов во всех случаях составляет примерно 2:1. Силилзащищенные нуклеозиды нельзя разделить при помощи хроматографии на колонках на отдельные аномеры. Однако после снятия защиты с 5'-кислорода при помощи ΝΗ4Ε в метаноле (уравнение 3) β- и α-аномеры можно легко отделить друг от друга; полученные результаты приведены в табл. 2.
8,10,11,12.13
Таблица 2
Снятие защиты с нуклеозидов
Κι к2 а выход Ь выход
Р он 14а 19% 14Ъ 48%
Р νη2 15а 27% 15Ъ 51%
Н ЫНАс 16а 17% 16Ь 31%
н νη2 17а - 17Ь -
сн3 он 18а 12% 18Ъ 33%
Классификацию свободных нуклеозидов с выявлением α-или β-формы производят на основании химического сдвига аномерного протона (табл. 3) или полярности нуклеозидов, определяемой при помощи тонкослойной хроматографии. Тенденция создавать α/β пары свободных нуклеозидов выражается в том, что менее полярное соединение из двух имеет химический сдвиг аномерных протонов в сторону сильного поля от более полярного соединения.
Таблица 3
Химический сдвиг аномерных протонов (миллионные доли)
Соединение а β
14а,Ь 6,11 5,89
15а,Ь 6,08 5,92
16а,Ь 6,09 5,90
17а,Ь 6,05 5,92
18а,Ь 6,11 5,93
Корреляцию между химическим сдвигом аномерных протонов и абсолютной структурой проверяют, сравнивая показатели соединений 18а (Νίίΐιαία. 8., ЕЬа1а, Т., Катоакатц Η., Ма1кикЫБа, Η. Ви11. Скет.
- 15 008609
8οο Ιρη. 1995, 68, 1509) и 18Ь (Аегас^!, А.У., Негбетащ, Р., ВаНапш, I., Раите1з, К., Эе С1егсц, Е., I. Меб. Сйет. 1989, 32, 1743) с ранее опубликованными спектральными данными и при помощи рентгеноструктурного исследования соединений 14Ь и 15Ь. Это открытие противоречит обычной тенденции, характерной для нуклеозидов, в соответствии с которой α-аномер обычно является менее полярным из двух аномеров. Предполагается, что у 2'-фторированных нуклеозидов со слабопольным сдвигом сильный диполь связи С-Р противоположен диполю аномерной связи С-Ν в β-изомере и уменьшает общий молекулярный диполь. И наоборот, геометрия α-аномера позволяет усилить молекулярный диполь в результате добавления диполей связи С-Р и С-Ν. Таким образом, в случае а-2'-фторнуклеозидов α-аномер является более полярным, чем β-изомер.
α- и β-Аномеры соединений 17а и 17Ь нельзя разделить хроматографией на колонках, так как из-за наличия свободной аминогруппы нуклеозиды образуют полосы на силикагеле. Поэтому необходимо использовать И-ацетилцитозин для получения соединения 11 и последующего разделения соединений 16а и 16Ь. И4-ацетильную группу количественно удаляют насыщенным раствором аммиака в метаноле, что позволяет разделить соединения 17а и 17Ь. Аномеры 15а и 15Ь можно легко разделить, используя 5фторцитозин в качестве основания (соединение 10), при этом на силикагеле отсутствуют полосы.
Из десяти нуклеозидов, приведенных в табл. 2, ранее были синтезированы только соединения 17Ь (Майш, ЕА., Вияй^Е, Ό.Ε, Виадая 1.В., Όπηδάοη, 8.Е; На11, М.Е, Масйш, Р.Е, Мелей, ЕН., Рагкез, К.Е.В, ^Ьейз, И.А., Т^таз, 6.Ι., 6а1рт, 8.А., Κΐ№Μη§ΐοη, Ό., I. Мей. Сйет. 1990, 33(8), 2137; Ζеηсйοίί, 6.В., 8ип, К., ОкаЬе, М., I. Огд. Сйет. 1991, 56, 4392), 18а (Иийа1а, 8., ЕЬа!а, Т., Ка^акатц Н., Ма1зизй1йа, Н. Ви11. Сйет. 8οο Ιρη. 1995, 68, 1509) и 18Ь (Аегас^!, А.У., НеМе^-Щ, Р., ВаНалш, I., Раи^е1з, К., Эе С1егсц, Е. I. Мей. Сйет. 1989, 32, 1743). Подобно многочисленным известным аналогам 2'-β или фторнуклеозидов с расположением атома фтора вверх от плоскости кольца14 они синтезированы из природных предшественников (т.е. имеют β-Ό-конфигурацию). По-видимому, в научной литературе ранее не были описаны в-Ь-2'-фторрибофуранозилнуклеозиды.
Фтор обычно вводят в эти молекулы путем нуклеофильной атаки на ангидронуклеозид (Ме^е^ К., 6изсй1Ьаиет, А. Анде^. Сйет., Ιηΐ. Ей. Еп§1. 1978, 17, 525) или путем замещения и превращения стереохимически фиксированной гидроксильной группы при помощи трифторида диэтиламиносеры (ΌΛ8Τ) (НеМе^/щ, Р., Аегас^!, А.У., Кеггетаиз, Ь., Νι.κΚο3^3 ^с^Мез 1989, 8(1), 65). Преимуществом способа по настоящему изобретению является то, что для введения фтора не требуется гидроксильная группа. Таким образом, этот способ не ограничивается использованием природных нуклеозидов или сахаров в качестве исходных веществ и позволяет легко получить неприродные энантиомеры 2'фторнуклеозидов.
В соответствии с этой схемой синтезировано несколько неприродных нуклеозидов с использованием Ό-глутаминовой кислоты 19 в качестве исходного вещества (схема 3). Предшественник кольца сахара 20 фторируют так, как это описано выше, и подвергают реакции сочетания с разными силилированными основаниями (табл. 4).
Схема 3
- 16 008609
Таблица 4
Выходы неприродных аналогов нуклеозидов
Соединение Выход (23-25) К! Κι а Выход Ь Выход
23 87% СНз ОН 26а 24% 26Ь 61%
24 85% Р ОН 27а 35% 27Ь 51%
25 99% Р ын2 28а 34% 28Ь 52%
Схема 4
Успешный синтез соединения 29, показанного на схеме 4, позволяет получить две категории нуклеозидов. Первый класс составляют соединения, известные как 2',3'-дидезокси-2',3'-дидегидро-2,2'фторнуклеозиды (соединение 30), и второй класс образуют фтор- или арабиносодержащие аналоги с положением заместителей вверх (соединение 31) нуклеозидов, показанных на схеме 5
Схема 5
Соединения 30 и 31 можно синтезировать из общего промежуточного соединения 32, которое получают селенилированием фторгликаля 29
Схема 6
1. РП£«С1
2. силилированное основание
- 17 008609
Селенилированное соединение 32 можно превратить во фторсодержащий аналог 31 с положением атома фтора вверх в результате восстановления никелем Ренея. Альтернативно окисление селенида 32 при помощи №11О4 или перекисью водорода и последующее элиминирование промежуточного селеноксида при нагревании позволяют получить соединение 30. Оба эти превращения нефторированных систем хорошо описаны в научной литературе (Уигйег, 1.А., Рй.Э. Тйекк, Етогу Ишуегайу, 1995; Уйкоп, ЬЭ., Рй.Э. Тйе818, Етогу Ишуегайу, 1992).
Кроме того, можно также синтезировать энантиомеры нуклеозидов 30 и 31, так как их получают из энантиомера соединения 29.
Альтернативный способ получения соединений типа соединения 30 2',3'-дидезокси-2',3'-дидегидро2'-фторнуклеозидов показан на схеме 7. Этот простой и прямой способ получения данного класса соединений с использованием ряда силилированных оснований оказался весьма успешным.
Получение силилкетенацеталя из соединения 6 делает возможным стереоизбирательное введение бромида фенилселения с образованием соединения 36 в виде одного изомера.
Восстановление и ацетилирование этого соединения происходит легко и обеспечивает высокий выход соединения 37 в результате выполнения двух стадий. α-Ориентация фенилселенильной группой делает возможной стереоизбирательность на последующей стадии гликозилирования, и синтез β-изомера нуклеозида 38 происходит с хорошим выходом. Соединение 38 может быть окислено перекисью водорода в дихлорметан с получением продукта элиминирования 39, но опыт работы заявителей показывает, что достаточно адсорбировать соединение 38 силикагелем и оставить выстаиваться на несколько часов, после чего соединение 39 можно элюировать из колонки почти с количественным выходом. Удаление защищенной группы из соединения 39 с получением конечного соединения 30 выполняют в соответствии с приведенным выше описанием, что дает хороший выход (81%) целевого нуклеозида.
Схема 8
33 34 3*
Тот же порядок химических превращений, который был использован для синтеза соединений 30 и 31, можно использовать для синтеза соединений 34 и 35.
Экспериментальная часть
Общие способы получения №Фтор-(бис)бензолсулъфонимид 5 фирмы АШеб 81дпа1 использовали без дополнительной очистки. Все другие реагенты были предоставлены фирмой А1бпсй Сйетка1 Сотрапу и использовались без дополнительной очистки. Температуры плавления измеряли в устройстве для определения точки плавления вещества в капилляре Тйотак Нооуег, и полученные значения не корректировали. Инфракрасные спектры (ИКС) были получены в спектрометре №со1е! 1трас! 400 ЕТ-ΙΚ. Спектры 1Н ЯМР и 13С ЯМР определяли в спектрометре ΝΓ-360 или Уапап 400 МГц. Пластинки для тонкослойной хроматографии (ТСХ) изготовлены из силикагеля 60 Г254 (толщиной 0,25 мм) фирмы ЕМ 8с1епсе. Флеш-хроматографию выполняли на силикагеле 60 (230-400 меш. по стандарту А8ТМ) фирмы ЕМ 8с1епсе. Все реакции осуществляли в высушенной пламенем стеклянной посуде в атмосфере сухого аргона. Растворители удаляли испарением в роторном испарителе. Элементные анализы выполнены фирмой Айапйс Мюго1ай, 1пс., А!1ап!а, СА.
- 18 008609 (28,4В)-5-(трет-Бутилдифенилсилокси)-2-фторпентан-4-олид (20).
В колбу вводят (4В)-5-(трет-бутилдифенилсилокси)пентан-4-олид (2о,о г, о,564 моль, 1,о экв.) и Νфтор-(бис)бензолсульфонимид (ΝΡδί) 5 (17,80 г, 0,0564 моль, 1,0 экв.) в 250 мл безводного ТГФ. Раствор охлаждают до -78°С, и 68,0 мл (0,0680 моль, 1,2 экв.) 1,0М раствора Ь1НМИ8 в ТГФ добавляют по каплям в течение 1 ч. Полученную смесь перемешивают при температуре -78°С в течение еще 2 ч, нагревают до комнатной температуры и перемешивают еще 1 ч. После окончания реакции реакционную смесь гасят 10 мл насыщенного раствора ЦН4С1. Смесь разбавляют тремя объемами диэтилового эфира и выливают в равный объем насыщенного раствора ЦаНСО3. Органический слой дважды промывают насыщенным раствором ЦаНСО3 и один раз насыщенным раствором №С1. Органический слой сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют до образования светло-желтого масла. Полученное масло очищают хроматографией на колонках из силикагеля, используя систему растворителей, состоящую из 30% диэтилового эфира/70% гексанов. Полученное белое твердое вещество кристаллизуют из горячих гексанов, что дает 13,04 г (выход 62%) прозрачного кристаллического твердого вещества: В£ (30% диэтилового эфира/70% гексанов)=0,26; т.пл.115-116°С.
'Н ЯМР (360 МГц, СИС13) б 7,63-7,60 (м, 4Н), 7,45-7,35 (м, 6Н), 5,49 (дт, 1=52,9 и 7,9 Гц, 1Н), 4,69 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 3,91 (д, 1=11,5 Гц, 1Н), 3,60 (д, 1=11,5 Гц, 1Н), 2,72-2,40 (м, 2Н), 1,05 (с, 9Н).
13С ЯМР (100 МГц, СИС13) б 172,1 (д, 1=20,5 Гц), 135,5, 135,4, 132,3, 131,7, 130,1, 128,0, 127,9, 85,6 (д, 1=186,6 Гц), 77,3 (д, 1=5,3 Гц), 65,0, 31,8 (д, 1=20,5 Гц), 26,7, 19,1. ИКС (тонкая пленка) 2958, 1796, 1252, 1192, 1111, 1016 см-1.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (МСВР), высчитано для [М+Ы] С21Н25О3Р81Г1: 379,1717.
Обнаружено: 379,1713.
Элементный анализ, высчитано для СНЛРР8: С, 67,71; Н, 6,76.
Обнаружено: С, 67,72; Н, 6,78.
5-О-(трет-Бутилдифенилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-(Ь)-эритронпентофураноза (21).
В колбу вводят лактон 20 (12,12 г, 0,0325 моль, 1,0 экв.) и 240 мл безводного ТГФ. Раствор охлаждают до температуры -78°С, и 65 мл (0,065 моль, 2,0 экв.) 1,0М раствора И1ВЛЬН в гексанах добавляют по каплям в течение 30 мин. Полученную смесь перемешивают при температуре -78°С в течение 3 ч и гасят, медленно добавляя 2,93 мл (0,163 моль, 5,0 экв.) воды. Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч, в результате чего в колбе образуется прозрачное желеобразное твердое вещество. Реакционную смесь разбавляют двумя объемами диэтилового эфира и выливают в равный объем насыщенного водного раствора тартрата калия-натрия в колбе Эрленмейера. Полученную смесь перемешивают в течение 20 мин до разрушения эмульсии. Органический слой отделяют, и водный слой трижды экстрагируют 250 мл диэтилового эфира. Объединенные органические слои сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют до образования светло-желтого масла. Полученный продукт очищают хроматографией на колонках из силикагеля, используя систему растворителей, состоящую из гексанов/этилацетата (6:1). Полученное прозрачное масло кристаллизуют из кипящих гексанов, что дает 11,98 г (выход 98%) белого кристаллического твердого вещества: В£ (30% диэтилового эфира/70% гексанов)=0,33; т.пл. 66-67°С.
'|| ЯМР (360 МГц, СИС13) б 7,68-7,66 (м, 4Н), 7,55-7,38 (м, 6Н), 5,39 (т, 1=7,6 Гц, 1Н), 4,99 (дд, 1=52,2 и 4,3 Гц, 1Н), 4,52 (м, 1Н), 3,88 (дд, 1=10,8 и 2,5 Гц, 1Н), 3,65 (д, 1=7,9 Гц, 1Н), 3,49 (дд, 1=7,9 и
1.8 Гц, 1Н), 2,44-2,07 (м, 2Н), 1,07 (с, 9Н).
13С ЯМР (100 МГц, СИС13) б 135,7, 135,5, 132,2, 132,1, 130,2, 130,0, 129,8, 127,9, 127,7,
99.8 (д, 1=31,1 Гц), 96,6 (д, 1=178,3 Гц), 79,4, 64,8, 29,9 (д, 1=21,2 Гц), 26,8, 19,2. ИКС (тонкая пленка) 3423, 2932, 1474, 1362, 1113 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С21Н27О3Р81Г1: 381,1874.
Обнаружено: 381,1877.
Элементный анализ, высчитано для С2£Н27О3Р81: С, 67,35; Н, 7,27.
Обнаружено: С, 67,42; Н, 7,31.
1-О-Ацетил-5-О-(трет-бутилдифенилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-(Ь)-эритронпентофураноза (22).
В колбу вводят лактон 21 (8,50 г, 0,0227 моль, 1,0 экв.) и 170 мл безводного СН2С12. Затем добавляют ИМЛР (0,277 г, 0,00277 моль, 0,1 экв.) и уксусный ангидрид (13,5 мл, 0,143 моль, 6,3 экв.) и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После окончания реакции реакционную смесь выливают в насыщенный раствор ЦаНСО3. Органический слой отделяют, и водный слой трижды экстрагируют хлороформом. Объединенные органические слои сушат над Мд8О4, фильтруют, и удаляют растворитель с получением светло-желтого масла. Полученное масло очищают хроматографией на колонках из силикагеля, используя систему растворителей, состоящую из гексанов/этилацетата (8:1), что дает 9,85 г (выход 99%) прозрачного бесцветного масла: В£ (30% диэтилового эфира/70% гексанов)=0,44.
'|| ЯМР (360 МГц, СИС13) б 7,69-7,67 (м, 4Н), 7,43-7,38 (м, 6Н), 6,30 (д, 1=10,4 Гц, 1Н), 5,06 (д, 1=54,9 Гц, 1Н), 4,53 (м, 1Н), 3,81 (дд, 1=10,8 и 4,3 Гц, 1Н), 3,72 (дд, 1=10,8 и 4,3 Гц, 1Н), 2,38-2,12 (м, 2Н),
1,89 (с, 3Н), 1,07 (с, 9Н).
13С ЯМР (100 МГц, СИС13) б 169,4, 135,6, 135,5, 133,2, 133,1, 129,8, 129,7, 127,8, 127,7, 99,3 (д, 1=34,1 Гц), 95,5 (д, 1=178,2 Гц), 81,4, 65,3, 31,6 (д, 1=20,5 Гц), 26,8, 21,1, 19,3. ИКС (тонкая пленка) 3074,
- 19 008609
2860, 1750, 1589, 1229, 1113 см-1.
МСВР, высчитано для [М-ОСОСН3] С21Н26О2Е81: 357,1686.
Обнаружено: 357,1695.
Элементный анализ, высчитано для С23Н29О4Р81: С, 66,32; Н, 7,02.
Обнаружено: С, 66,30; Н, 7,04.
Типичный способ сочетания силилированного основания с соединением 22: (Ь)-5'-О-(третбутилдифенилсилил)-2',3-дидезокси-2'-фтор-5-фторцитидин (25).
В колбу, оснащенную насадкой для молекулярной перегонки, вводят 5-фторцитозин (2,01 г,
15,6 ммоль, 5,0 экв.), 35 мл 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазана (ΗΜΌ8) и каталитическое количество (~1 мг) (ИН4)28О4. Белую суспензию нагревают до температуры кипения в течение 1 ч до силилирования основания и превращения реакционной смеси в прозрачный раствор. Избыток ΗΜΌ8 отгоняют, и оставшийся масляный остаток помещают в вакуум на 1 ч, чтобы удалить последние следы ΗΜΌ8. Полученное белое твердое вещество растворяют в атмосфере аргона в 5 мл безводного 1,2-дихлорэтана. К этому прозрачному раствору добавляют раствор ацетата 22 (1,30 г, 3,12 ммоль, 1,0 экв.) в 5 мл безводного 1,2дихлорэтана. К полученной смеси добавляют при комнатной температуре триметилсилилтрифторметансульфонат (3,32 мл, 17,2 ммоль, 5,5 экв.). Ход реакции контролируют ТСХ (10% метанола/90% СН2С12), по результатам которой реакция заканчивается через 4 ч. Реакционную смесь выливают в насыщенный раствор NаНСО3. Органический слой отделяют, и водный слой трижды экстрагируют хлороформом. Объединенные органические слои сушат над Мд8О4, фильтруют, и удаляют растворитель с получением белой пены. Полученное соединение очищают хроматографией на колонках из силикагеля, используя градиентную систему растворителей от 100% СН2С12 до 10% метанола в СН2С12. Соединение выделяют в виде 1,51 г (выход 99%) белой пены: смесь аномеров В£ (100% ЕЮЛс)=0,36; т.пл. 74-80°С.
Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) Б 8,84 (шс, 1Н), 8,04 (д, 33,4 Гц, 0,67 Н), 7,67-7,63 (м, 4Н), 7,51-7,39 (м, 6,33Н), 6,11 (д, 1=20 Гц, 0,33Н), 5,98 (д, 1=16,4 Гц, 0,67Н), 5,88 (шс, 1Н), 5,41 (д, 1=52,4 Гц, 0,33Н), 5,23 (дд, 1=50,4 и 4 Гц, 0,67Н), 4,56 (м, 0,33Н), 4,45 (м, 0,67Н), 4,23 (дд, 1=12,0 и 1,6 Гц, 0,67Н), 3,89 (дд, 1=11,2 и 3,2 Гц, 0,33Н), 3,74-3,66 (м, 1Н), 2,45-1,96 (м, 2Н), 1,09 (с, 6Н), 1,06 (с, 3Н).
13С ЯМР (100 МГц, СЭС13) Б 158,6 (д, 1=14,4 Гц), 158,4 (д, 1=14,4 Гц), 153,9, 153,8, 136,6 (д, 1=240,5 Гц), 136,3 (д, 1=239,7 Гц), 135,6, 135,56, 135,5, 135,4, 133,1, 132,9, 132,5, 132,4, 130,1, 130,0, 129,9,
127,9, 127,8, 125,8 (д, 1=33,4 Гц), 124,6 (д, 1=32,6 Гц), 96,5 (д, 1=182,0 Гц), 91,7 (д, 1=185,1), 90,7 (д, 1=35,6 Гц), 87,7 (д, 1=15,2 Гц), 81,5, 79,5, 64,9, 63,0, 33,5 (д, 1=20,5 Гц), 30,6 (д, 1=20,4 Гц), 26,9, 26,8, 19,22, 19,18. ИКС (тонкая пленка) 3300, 2960, 1682, 1608, 1513, 1109 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] ίΥΗ-,ΝΌ,δίΒΓί: 492,2106.
Обнаружено: 492,2085.
Элементный анализ, высчитано для С^Н^^О^Ш^Ш Н2О: С, 60,71; Н, 6,11; Ν, 8,50.
Обнаружено: С, 60,67; Н, 6,03; Ν, 8,44.
Типичный способ удаления защитной группы из силилзащищенных нуклеозидов: α- и β-(Ε)-2',3'дидезокси-2'-фтор-5-фторцитидин (28а и 28Ь).
Нуклеозид 25 (1,098 г, 2,26 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в 15 мл метанола, в который добавляют фторид аммония (0,838 г, 22,6 ммоль, 10,0 экв.). Полученную смесь интенсивно перемешивают в течение 24 ч и выполняют ТСХ (15% этанола/85% этилацетата), результаты которой показывают, что реакция закончена. Реакционную смесь разбавляют тремя объемами этилацетата и фильтруют через небольшой слой (1 см) силикагеля. Слой промывают 200 мл раствора 15% этанола/85% этилацетата, и удаляют растворитель с получением белой пены. Полученное соединение очищают хроматографией на колонках из силикагеля, используя систему растворителей, состоящую из 15% этанола/85% этилацетата, которая также влияет на разделение α- и β-аномеров. Выход α-аномера в виде белой пены равен 0,190 г (0,768 ммоль, выход 34%) и выход β-аномера в виде белой пены равен 0,290 г (1,17 ммоль, выход 52%): (28а) Вг (15% Е1ОН, 85% Е1ОЛс)=0,22; т.пл. 199-203°С (разложение).
Ή ЯМР (400 МГц, СЭ3ОЭ) Б 7,78 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 6,07 (д, 1=19,2 Гц, 1Н), 5,37 (д, 1=54,0 Гц, 1Н),
4,60 (м, 1Н), 3,80 (дд, 1=12,0 и 3,2 Гц, 1Н), 3,56 (дд, 1=12,4 и 4,4 Гц, 1Н), 2,40-2,00 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-Б6) Б 157,7 (д, 1=13,6 Гц), 153,2, 135,9 (д, 1=239,0 Гц), 126,2 (д, 1=31,1 Гц), 92,4 (д, 1=183,6 Гц), 86,7 (д, 1=15,2 Гц), 79,6, 62,7, 33,3 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3343, 3100, 1683, 1517, 1104 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] СдНп^О^Ы: 254,0929.
Обнаружено: 254,0919.
Элементный анализ, высчитано для СдНп^О^-Ш Н2О:С, 42,19; Н, 4,72; Ν, 16,40.
Обнаружено: С, 42,44; Н, 4,56; Ν, 16,56. (28Ь) Вг (15% Е1ОН, 85% Е1ОЛс)=0,37; т.пл. 182-186°С (разложение).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) Б 8,32 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,79 (шс, 1Н), 7,53 (шс, 1Н), 5,81 (д, 1=16,8 Гц, 1Н), 5,37 (т, 1=4,8 Гц), 5,18 (дд, 1=51,6 и 3,2 Гц, 1Н), 4,32 (м, 1Н), 3,88 (дд, 1=12,0 и 2,8 Гц, 1Н), 3,59 (дд, 1=12,4 и 2,4 Гц, 1Н), 2,20-1,99 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-Б6) Б 157,7 (д, 1=13,7 Гц), 153,2, 136,1 (д, 1=237,4 Гц), 125,3 (д,
- 20 008609
1=33,4 Гц), 97,3 (д, 1=176,8 Гц), 89,9 (д, 1=35,7 Гц), 81,6, 60,2, 30,3 (д, 1=19,7 Гц). ИКС (КВг) 3487, 2948, 1678, 1509, 1122 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] СИ^Ю^Ы: 254,0929.
Обнаружено: 254,0935.
Элементный анализ, высчитано для ί’9Η||Ν3Ο3Ε2: С, 43,73; Н, 4,49; Ν, 17,00.
Обнаружено: С, 43,69; Н, 4,53; Ν, 16,92.
(Э)-5'-О-(трет-Бутилдифенилсилил)-2',3'-дидезокси-2'-фтор-5-фторуридин (9).
Смесь аномеров К£ (гексаны/ЕЮАс, 1:1)=0,48; т.пл. 65-70°С.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) ά 10,0 (шм, 1Н), 7,99 (д, 1=5,6 Гц, 0,63Н), 7,65 (м, 4Н), 7,42 (м, 6,37Н),
6,12 (дд, 1=18,0 и 1,6 Гц, 0,37Н), 6,00 (д, 1=16 Гц, 0,63Н), 5,37 (дд, 1=54,6 и 2,4 Гц, 0,37Н), 5,22 (дд, 1=50,4 и 4 Гц, 0,63Н), 4,57 (м, 0,37Н), 4,44 (м, 0,63Н), 4,22 (дд, 1=12,2 и 2,0 Гц, 0,63Н), 3,92 (дд, 1=11,2 и
3,2 Гц, 0,37Н), 3,70 (м, 1Н), 2,22 (м, 2Н), 1,09 (с, 5,67Н), 1,074 (с, 3,33Н).
13С ЯМР (100 МГц, СЭС13) ά 157,2 (д, 1=31,7 Гц), 157,1 (д, 1=25,8 Гц), 149,1, 148,8, 140,4 (д, 1=236,6 Гц), 140,1 (д, 1=235,2 Гц), 135,6, 135,5, 135,4, 132,9, 132,7, 132,4, 132,3, 130,1, 130,0, 129,9, 127,9,
127.8, 125,1 (д, 1=34,9 Гц), 123,6 (д, 1=34,1 Гц), 96,4 (д, 1=182,0 Гц), 92,0 (д, 1=185,9 Гц), 90,2 (д, 1=37,2 Гц), 87,0 (д, 1=15,2 Гц), 81,7, 79,8, 64,8, 63,0, 33,3 (д, 1=21,2 Гц), 31,0 (д, 1=21,2 Гц), 26,9, 26,8, 19,2. ИКС (тонкая пленка) 3185, 1722, 1117 см-1.
МСВР, высчитано для [М+1] С25Н2^2О481Р2: 487,1866.
Обнаружено: 487,1853.
Элементный анализ, высчитано для С25Н2^2О481Р2: С, 61,71; Н, 5,80; Ν, 5,76.
Обнаружено: С, 61,72; Н, 5,86; Ν, 5,72. (П)-5'-О-(трет-Бутилдифенилсилил)-2',3'-дидезокси-2'-фтор-5-фторцитидин (10).
Смесь аномеров К£ (100% ЕЮЛе)=0,36; т.пл.75-81°С.
’Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) ά 8,50 (шм, 1Н), 8,05 (д, 1=6,0 Гц, 0,67Н), 7,67-7,63 (м, 4Н), 7,51-7,39 (м, 6,33Н), 6,10 (д, 1=20 Гц, 0,33Н), 5,98 (д, 1=16,4 Гц, 0,67Н), 5,62 (шм, 1Н), 5,41 (д, 1=52,4 Гц, 0,33Н), 5,23 (дд, 1=51,6 и 4 Гц, 0,67Н), 4,57 (м, 0,33Н), 4,48 (м, 0,67Н), 4,24 (дд, 1=12,4 и 2,0 Гц, 0,67Н), 3,89 (дд,
1=11,2 и 3,2 Гц, 0,33Н), 3,74-3,66 (м, 1Н), 2,39-1,95 (м, 2Н), 1,09 (с, 6Н), 1,06 (с, 3Н).
13С ЯМР (100 МГц, СЭС13) ά 158,4 (д, 1=14,4 Гц), 158,3 (д, 1=15,2 Гц), 153,8, 153,7, 136,5 (д, 1=240,5 Гц), 136,2 (д, 1=241,8 Гц), 135,59, 135,56, 135,4, 133,0, 132,9, 132,5, 132,4, 130,1, 130,0, 129,9,
127.9, 127,8, 124,8 (д, 1=31,9 Гц), 96,5 (д, 1=181,3 Гц), 91,8 (д, 1=175,2 Гц), 90,7 (д, 1=24,9 Гц), 87,8 (д, 1=21,2 Гц), 81,6, 79,6, 64,9, 63,0, 33,5 (д, 1=19,7 Гц), 30,6 (д, 1=21,3 Гц), 26,9, 26,8, 19,2, 14,2. ИКС (тонкая пленка) 3304, 2959, 1680, 1621, 1508, 1105 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С25Н2<Х2О48|Б2Ы: 492,2106.
Обнаружено: 492,2110.
Элементный анализ, высчитано для С25Н2^3О381Р2: С, 61,84; Н, 6,02; Ν, 8,65.
Обнаружено: С, 61,86; Н, 6,09; Ν, 8,55.
(Э)-+-Ацетил-5'-О-(трет-бутилдифенилсилил)-2',3'-дидезокси-2'-фторцитидин (11).
Смесь аномеров К£ (15% ЕЮН, 85% ЕЮАс)=0,75; т.пл.81-86°С.
’Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) ά 10,58 (шс, 1Н), 8,40 (д, 1=7,2 Гц, 0,61Н), 7,86 (д, 1=7,6 Гц, 0,38Н), 7,67-
7,65 (м, 4Н), 7,51-7,41 (м, 6Н), 7,27 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,12 (т, 1=15,8 Гц, 1Н), 5,51 (д, 1=52,6 Гц, 0,38Н),
5,21 (дд, 1=50,8 и 2,9 Гц, 0,61Н), 4,62 (м, 0,38Н), 4,54 (м, 0,61Н), 4,28 (д, 1=11,5 Гц, 0,61Н), 3,95 (дд, 1=11,9 и 3,2 Гц, 0,38Н), 3,79-3,70 (м, 1Н), 2,46-2,04 (м, 5Н), 1,12 (с, 5,49Н), 1,07 (с, 3,42Н).
’3С ЯМР (100 МГц, СЭС13) ά 171,5, 171,3, 163,4, 154,9, 144,9, 144,1, 135,5, 135,4, 133,0, 132,8, 132,5,
132,2, 130,2, 130,1, 129,9, 128,0, 127,8, 96,8 (д, 1=91,1 Гц), 96,2 (д, 1=147,9 Гц), 92,3, 91,2 (д, 1=35,7 Гц),
90,5, 88,5 (д, 1=15,9 Гц), 81,9, 80,1, 64,7, 62,9, 33,5 (д, 1=20,5 Гц), 30,5 (д, 1=20,5 Гц), 26,9, 26,8, 24,9, 24,8,
19,3, 19,2. ИКС (тонкая пленка) 3237, 2932, 1722, 1671, 1559, 1493, 1107 см-’.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С27Н32^О4Е81Ы: 516,2306.
Обнаружено: 516,2310.
Элементный анализ, высчитано для С27Н32^О4Е81; С, 63,63; Н, 6,33; Ν, 8,24.
Обнаружено: С, 63,45; Н, 6,42; Ν, 8,09.
(П)-5'-О-(трет-Бутилдифенилсилил)-2',3'-дидезокси-2'-фторцитидин (12).
Смесь аномеров К£ (15% ЕЮН, 85% ЕЮАс) 0,50; т.пл. 98-104°С.
’Н ЯМР (360 МГц, СЭС13) ά 7,97 (д, 1=7,2 Гц, 0,64Н, Н-6), 7,65 (м, 4Н), 7,47-7,38 (м, 6,36Н), 6,15 (д, 1=20,5 Гц, 0,36Н), 6,05 (д, 1=16,6 Гц, 0,64Н), 5,83 (д, 1=7,9 Гц, 0,36Н), 5,46 (д, 1=7,2 Гц, 0,64Н), 5,30-5,10 (м, 1Н), 4,55 (м, 0,36Н), 4,44 (м, 0,64Н), 4,22 (д, 1=9,7 Гц, 0,64Н), 3,88-3,63 (м, 1,36Н), 2,38-1,95 (м, 2Н), 1,09 (с, 5,76Н), 1,06 (с, 3,24Н).
’3С ЯМР (100 МГц, СЭС13) ά 166,1, 155,8, 141,5, 140,5, 135,6, 135,4, 133,1, 132,9, 132,8, 132,4, 130,1, 130,0, 129,8, 128,0, 127,9, 127,8, 96,7 (д, 1=181,3 Гц), 93,4 (д, 1=140,3 Гц), 94,5, 90,8 (д, 1=35,6 Гц), 90,8,
87,8 (д, 1=15,9 Гц), 81,2, 79,4, 65,0, 63,2, 33,7 (д, 1=21,2 Гц), 30,8 (д, 1=20,4 Гц), 26,9, 26,8, 19,3, 19,2. ИКС (тонкая пленка) 3470, 3339, 1644, 1487, 1113 см-’.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С25Н3Д3О3Б8|Ы: 474,2201.
Обнаружено: 474,2198.
- 21 008609
Элементный анализ, высчитано для С25Н33Д3О3Е8|: С, 64,21; Н, 6,47; Ν, 8,99.
Обнаружено: С, 64,04; Н, 6,58; Ν, 8,76.
а-(Б)-2',3'-Дидезокси-2'-фтор-5-фторуридин (14а).
Кг (100% Е!ОАс)=0,38; т.пл.153-155°С.
'Н ЯМР (360 МГц, СБ3ОБ) й 7,80 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 6,11 (д, 1=18,7 Гц, 1Н), 5,35 (д, 1=52,9 Гц, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 3,81 (д, 1=11,9 Гц, 1Н), 3,57 (дд, 1=12,6 и 3,6 Гц, 1Н), 2,36-2,15 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СБ3ОБ) й 159,6 (д, 1=25,8 Гц), 150,7, 141,5 (д, 1=230,6 Гц), 127,0 (д, 1=34,9 Гц),
93,9 (д, 1=185,1 Гц), 88,5 (д, 1=15,1 Гц), 81,8, 64,3, 34,3 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3421, 3081, 1685, 1478, 1111 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] С9Н|0^О4Е3Ы 255,0769.
Обнаружено: 255,0778.
Элементный анализ, высчитано для С9Н1^2О4Г2: С, 43,56; Н, 4,06; Ν, 11,29.
Обнаружено: С, 43,59; Н, 4,11; Ν, 11,17.
в-(Б)-2',3'-Дидезокси-2'-фтор-5-фторуридин (14Ь).
Кг (100% Е!ОАс)=0,54; т.пл.152-154°С.
'Н ЯМР (360 МГц, СБ3ОБ) й 8,41 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 5,89 (д, 1=16,6 Гц, 1Н), 5,21 (дд, 1=51,5 и 3,6 Гц, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,00 (д, 1=12,6 Гц, 1Н), 3,67 (д, 1=12,2 Гц, 1Н), 2,25-2,09 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СБ3ОБ) й 159,7 (д, 1=25,8 Гц), 150,7, 141,8 (д, 1=229,8 Гц), 126,3 (д, 1=36,4 Гц),
98.3 (д, 1=179 Гц), 91,9 (д, 1=37,1 Гц), 83,6, 61,9, 31,9 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3417, 3056, 1684, 1474,
1105 см-1.
МСВР, высчитано для [М+ЬГ| С9Н|0^О4Е3Ы 255,0769.
Обнаружено: 255,0764.
Элементный анализ, высчитано для С9Н1^2О4Г2: С, 43,56; Н, 4,06; Ν, 11,29.
Обнаружено: С, 43,37; Н, 3,98; Ν, 11,22.
а-(Б)-2',3'-Дидезокси-2'-фтор-5-фторцитидин (15а).
Кг (15% Е!ОН, 85% Е!ОАс)=0,22; т.пл.198-202°С (разложение).
Ίΐ ЯМР (400 МГц, СБ3ОБ) й 7,78 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 6,07 (д, 1=18,8 Гц, 1Н), 5,37 (д, 1=54,0 Гц, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 3,80 (дд, 1=12,0 и 3,2 Гц, 1Н), 3,57 (дд, 1=12,4 и 4,4 Гц, 1Н), 2,38-2,14 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СБ3ОБ) й 159,9 (д, 1=13,6 Гц), 156,5, 138,3 (д, 1=240,4 Гц), 127,5 (д, 1=33,4 Гц),
93,6 (д, 1=184,3 Гц), 89,5 (д, 1=15,9 Гц), 81,8, 64,4, 34,5 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3486, 3098, 1681, 1519, 1108 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] С9Нц^О3Г2Ы: 254,0929.
Обнаружено: 254,0929.
Элементный анализ, высчитано для С^^О^-Ш^О: С, 42,19; Н, 4,72; Ν, 16,40.
Обнаружено: С, 41,86; Н, 4,75; Ν, 16,36.
в-(Б)-2',3'-Дидезокси-2'-фтор-5-фторцитидин (15Ь).
Кг (15% Е!ОН, 85% Е!ОАс)=0,37; т.пл.181-183°С (разложение).
Ίΐ ЯМР (400 МГц, СБ3ОБ) й 8,45 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 5,92 (дд, 1=16,2 и 1,2 Гц, 1Н), 5,18 (дд, 1=50,8 и 4,0 Гц, 1Н), 4,46 (м, 1Н), 4,05 (дд, 1=12,4 и 2,4 Гц, 1Н), 3,72 (дд, 1=12,8 и 2,4 Гц, 1Н), 2,27-2,05 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СБ3ОБ) й 159,9 (д, 1=13,6 Гц), 156,5, 138,5 (д, 1=240,5 Гц), 126,9 (д, 1=33,4 Гц),
98.4 (д, 1=179,0 Гц), 92,5 (д, 1=36,4 Гц), 83,6, 61,9, 31,6 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3494, 2944, 1689, 1522,
1106 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] С9Нц^О3Г2Ы: 254,0929.
Обнаружено: 254,0936.
Элементный анализ, высчитано для СдНп^О^: С, 43,73; Н, 4,49; Ν, 17,00.
Обнаружено: С, 43,84; Н, 4,47; Ν, 17,05. а-(П)-^-Ацетил-2',3'-дидезокси-2'-фторцитидин (16а).
Кг (15% Е!ОН, 85% Е!ОАс)=0,40; т.пл.208-212°С.
Ίΐ ЯМР (360 МГц, ДМСО-й6) й 10,91 (шс, 1Н), 8,05 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 7,25 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 6,08 (дд, 1=19,1 и 2,9 Гц, 1Н), 5,42 (д, 1=52,2 Гц, 1Н), 4,97 (шс, 1Н), 4,54 (м, 1Н), 3,63 (д, 1=13,0 Гц, 1Н), 3,47 (д, 1=13,3 Гц, 1Н), 2,35-2,15 (м, 2Н), 2,11 (с, 3Н).
13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-й6) й 171,0, 162,6, 154,3, 145,7, 94,9, 92,0 (д, 1=183,6 Гц), 87,5 (д, 1=15,9 Гц), 80,2, 62,6, 33,3 (д, 1=19,7 Гц), 24,4. ИКС (КВг) 3436, 3227, 1702, 1661, 1442, 1102 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] СцН1/Ц3О4ГЫ: 278,1128.
Обнаружено: 278,1136.
Элементный анализ, высчитано для СцН1/Ц3О4Г: С, 48,71; Н, 5,20; Ν, 15,49.
Обнаружено: С, 48,73; Н, 5,23; Ν, 15,52. в-(Б)-^-Ацетил-2',3'-дидезокси-2'-фторцитидин (16Ь).
Кг (15% Е!ОН, 85% Е!ОАс)=0,50; т.пл. 174-178°С.
'Н ЯМР (360 МГц, ДМСО-й6) й 10,90 (шс, 1Н), 8,46 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 7,18 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 5,90 (д, 1=16,9 Гц, 1Н), 5,27 (д, 1=52,9 Гц, 1Н), 5,27 (шс, 1Н), 4,39 (м, 1Н), 3,88 (д, 1=13,0 Гц, 1Н), 3,61 (д,
- 22 008609
1=13,0 Гц, 1Н), 2,09 (с, 3Н), 2,20-1,85 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-б6) б 171,0, 162,6, 154,4, 144,7, 97,0 (д, 1=177,5 Гц), 95,0, 90,7 (д, 1=36,6 Гц), 82,2, 60,3, 30,3 (д, 1=19,7 Гц), 24,3. ИКС (КВг) 3447, 3245, 1703, 1656, 1497, 1122 см-1. МСВР, высчитано для [М+Ь1] СцН14^О4РЬ1: 278,1128. Обнаружено: 278,1133. Элементный анализ, высчитано для СцН14Ы3О4Р: С, 48,71; Н, 5,20; Ν, 15,49. Обнаружено: С, 48,65; Н, 5,22; Ν, 15,46.
а-(Э)-2',3'-Дидезокси-2'-фторцитидин (17а).
К£ (15% ЕЮН, 85% ЕЮАс)=0,08; т.пл.234-237°С (разложение).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) б 7,52 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,21 (шм, 2Н), 6,05 (дд, 1=20,4 и 3,2 Гц, 1Н),
5,73 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 5,28 (д, 1=52,4 Гц, 1Н), 4,93 (т, 1=5,6 Гц, 1Н), 4,45 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,43 (м, 1Н), 2,26-2,13 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-б6) б 165,8, 155,0, 141,6, 93,3, 92,2 (д, 1=182,8 Гц), 86,6 (д,
1=15,1 Гц), 79,4, 62,8, 33,3 (д, 1=19,7 Гц). ИКС (КВг) 3366, 3199, 1659, 1399,
1122 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С9Н|;^ОзЕЫ: 236,1023.
Обнаружено: 236,1014.
Элементный анализ, высчитано для СдН12^О3Р: С, 47,16; Н, 5,28; Ν, 18,33.
Обнаружено: С, 47,40; Н, 5,34; Ν, 18,51.
в-(Э)-2',3'-Дидезокси-2'-фторцитидин (17Ь).
Нуклеозид 25 (0,160 г, 0,59 ммоль) растворяют в 10 мл насыщенного раствора аммиака в метаноле. Полученный раствор перемешивают в течение 5 мин, и реакцию прекращают. Раствор аммиака в метаноле удаляют, полученное белое твердое вещество помещают в вакуум и осторожно нагревают на водяной бане с температурой 60°С в течение 2 ч, чтобы удалить сублимацией побочный продукт ацетамид. Белое твердое вещество кристаллизуют из 5% метанола/95% метиленхлорида, что дает количественный выход белого кристаллического твердого вещества. К£ (15% ЕЮН, 85% ЕЮАс)=0,18; т.пл.191-195°С (разложение).
Ή ЯМР (360 МГц, СЭ3ОО) б 8,10 (д, 1=7,2 Гц, 1Н), 5,92 (д, 1=17,3 Гц, 1Н), 5,82 (д, 1=7,6 Гц, 1Н),
5,13 (д, 1=50,0 Гц, 1Н), 4,39 (м, 1Н), 3,97 (д, 1=12,2 Гц, 1Н), 3,68 (дд, 1=13,0 и 2,5 Гц, 1Н), 2,21-2,00 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СЭ3ОО) б 165,9, 155,0, 140,8, 97,3 (д, 1=176,8 Гц), 93,6, 90,3 (д, 1=35,6 Гц), 81,3, 60,7, 31,0 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3397, 3112, 1680, 1400, 1178, 1070 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С9Н12Н3О3РЫ: 236,1024.
Обнаружено: 236,1028.
Элементный анализ, высчитано для СЩ^Ю^: С, 47,16; Н, 5,28; Ν, 18,33.
Обнаружено: С, 47,01; Н, 5,21; Ν, 18,29. (Ь)-5'-О-(трет-Бутилдифенилсилил)-2',3'-дидезокси-2'-фтортимидин (23).
Смесь аномеров К£ (10% МеОН/90% СН2С12)=0,56; т.пл.61-65°С.
Ή ЯМР (360 МГц, СЭС13) б 9,48 (шс, 1Н), 7,67 (м, 4Н), 7,45-7,37 (м, 7Н), 6,15 (дд, 1=20,2 и 3,2 Гц, 0,36Н), 5,99 (д, 1=18,4 Гц, 0,64Н), 5,34 (д, 1=51,8 Гц, 0,36Н), 5,24 (дд, 1=52,2 и 4,3 Гц, 0,64Н), 4,59 (м, 0,36Н), 4,45 (м, 0,64Н), 4,17 (дд, 1=12,2 и 2,5 Гц, 0,64Н), 3,91 (дд, 1=11,9 и 2,9 Гц, 0,36Н), 3,81 (дд, 1=11,5 и 2,9 Гц, 0,64Н), 3,68 (дд, 1=10,8 и 3,6 Гц, 0,36Н), 2,40-2,12 (м, 2Н), 1,94 (с, 1,08Н), 1,61 (с, 1,92Н), 1,10 (с, 5,76Н), 1,07 (с, 3,24Н).
13С ЯМР (100 МГц, СЭС13) б 164,1, 164,0, 150,4, 150,2, 136,4, 135,6, 135,5, 135,4, 135,3, 135,2, 133,0,
132.8, 132,6, 130,1, 130,0, 129,9, 127,94, 127,90, 127,8, 110,8, 109,8, 96,4 (д, 1=181,3 Гц), 92,1 (д, 1=185,8 Гц), 90,7 (д, 1=36,4 Гц), 86,6 (д, 1=15,2 Гц), 80,9, 79,4, 64,9, 63,6, 33,4 (д, 1=20,5 Гц), 32,0 (д, 1=21,2 Гц), 27,0, 26,8, 19,4, 19,2, 12,6, 12,2. ИКС (тонкая пленка) 3183, 3050, 1696, 1506, 1188 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С96Н31Н9О.18|Р: 489,2197.
Обнаружено: 489,2175.
Элементный анализ, высчитано для С26Н3^2О48!Е: С, 64,71; Н, 6,47; Ν, 5,80.
Обнаружено: С, 64,88; Н, 6,56; Ν, 5,76. (Ь)-5'-О-(трет-Бутилдифенилсилил)-2',3'-дидезокси-2'-фтор-5-фторуридин (24).
Смесь аномеров К£ (гексаны/ЕЮАс, 1:1)=0,48; т.пл. 65-71°С.
!Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 9,08 (шс, 0,4Н), 9,00 (шс, 0,6Н), 8,01 (д, 1=5,4 Гц, 0,6Н), 7,65 (м, 4Н),
7,42 (м, 6,4Н), 6,10 (дд, 1=20,2 и 1,4 Гц, 0,4Н), 6,00 (д, 1=16,0 Гц, 0,6Н), 5,35 (дд, 1=52,4 и 1,6 Гц, 0,4Н),
5,22 (дд, 1=51,2 и 4 Гц, 0,6Н), 4,57 (м, 0,4Н), 4,44 (м, 0,6Н), 4,22 (дд, 1=12,4 и 2,0 Гц, 0,6Н), 3,91 (дд, 1=11,2 и 2,9 Гц, 0,4Н), 3,70 (м, 1Н), 2,45-2,00 (м, 2Н), 1,09 (с, 5,4Н), 1,07 (с, 3,6Н). 13С ЯМР (100 МГц, СЭС13) б 156,9 (д, 1=26,5 Гц), 148,8, 148,6, 140,3 (д, 1=236,7 Гц), 140,1 (д, 1=235,1 Гц), 135,6, 135,5, 135,4,
132.9, 132,7, 132,4, 132,3, 130,2, 130,1, 129,9, 127,9, 127,8, 125,1 (д, 1=34,9 Гц), 123,6 (д, 1=34,2 Гц), 96,4 (д, 1=182,9 Гц), 92,0 (д, 1=186,6 Гц), 90,2 (д, 1=36,0 Гц), 86,9 (д, 1=15,1 Гц), 81,7, 79,8, 64,8, 63,0, 33,2 (д, 1=20,5 Гц), 30,9 (д, 1=20,4 Гц), 26,9, 26,8, 19,2. ИКС (тонкая пленка) 3191, 1719, 1113 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ь1] С25Н2^2О481Г2Ь1: 493,1946.
Обнаружено: 493,1952.
- 23 008609
Элементный анализ, высчитано для С25Н2^2О481Р2: С, 61,71; Н, 5,80; Ν, 5,76.
Обнаружено: С, 61,73; Н, 5,83; Ν, 5,77. а-(Ь)-2',3'-Дидезокси-2'-фтортимидин (26а).
ВГ (100% ΕΐΟΑ^=0,25; т.пл.147-149°С.
Ή ЯМР (360 МГц, С‘1);О1)) б 7,45 (с, 1Н), 6,11 (дд, 1=19,4 и 2,9 Гц, 1Н), 5,30 (д, 1=53,6 Гц, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 3,79 (дд, 1=12,2 и 2,2 Гц, 1Н), 3,55 (дд, 1=12,2 и 3,6 Гц, 1Н), 2,40-2,15 (м, 2Н), 1,87 (с, 3Н).
13С ЯМР (100 МГц, С1ЫО12) б 166,6, 152,3, 138,6, 110,5, 93,9 (д, 1=185,1 Гц), 88,3 (д, 1=15,1 Гц), 81,7,
64.4, 34,5 (д, 1=20,5 Гц), 12,6. ИКС (КВг) 3436, 3166, 1727, 1667, 1362, 1186 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] СнН13Н2О4РЫ 251,1019.
Обнаружено: 251,1014.
Элементный анализ, высчитано для С10Н13И2О4Р: С, 49,18; Н, 5,37; Ν, 11,47.
Обнаружено: С, 49,32; Н, 5,40; Ν, 11,29. в-(Ь)-2',3'-Дидезокси-2'-фтортимидин (26Ь).
ВГ (100% ΕΏΑο) = 0,38; т.пл. 186-188°С.
Ή ЯМР (360 МГц, С173О17) б 7,94 (с, 1Н), 5,93 (д, 1=17,6 Гц, 1Н), 5,20 (д, 1=51,8 Гц, 1Н), 4,40 (м, 1Н), 3,98 (д, 1=11,9 Гц, 1Н), 3,68 (д, 1=13,0 Гц, 1Н), 2,37-2,10 (м, 2Н), 1,83 (с, 3Н).
13С ЯМР (100 МГц, С1ЫО12) б 166,7, 152,3, 138,2, 111,0, 98,4 (д, 1=178,3 Гц), 92,1 (д, 1=36,4 Гц), 83,1,
62.4, 32,5 (д, 1=20,5 Гц), 12,6. ИКС (КВг) 3478, 3052, 1684, 1363, 1192, 1005 см-1.
Элементный анализ, высчитано для С10Н13И2О4Р: С, 49,18; Н, 5,37; Ν, 11,47.
Обнаружено: С, 49,29; Н, 5,44; Ν, 11,36. а-(Ь)-2',3'-Дидезокси-2'-фтор-5-фторуридин (27а).
ВГ (100% ΕΏΑ^^^; т.пл.155-157°С.
Ή ЯМР (400 МГц, СШОН) б 7,80 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 6,13 (д, 1=20,0 Гц, 1Н), 5,35 (д, 1=54,4 Гц, 1Н),
4,63 (м, 1Н), 3,81 (дд, 1=11,9 и 3,2 Гц, 1Н), 3,58 (дд, 1=12,4 и 2,0 Гц, 1Н), 2,41-2,15 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СШОН) б 159,6 (д, 1=25,8 Гц), 150,7, 141,5 (д, 1=230,6 Гц), 127,0 (д, 1=34,9 Гц),
93,9 (д, 1=184,3 Гц), 88,5 (д, 1=15,1 Гц), 81,9, 64,3, 34,3 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3401, 3098, 1661, 1458, 1018 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] СПнЦзО.ЫЫ 255,0769.
Обнаружено: 255,0771.
Элементный анализ, высчитано для С9Н1^2О4Р2: С, 43,56; Н, 4,06; Ν, 11,29.
Обнаружено: С, 43,70; Н, 4,17; Ν, 11,15. в-(Ь)-2',3'-Дидезокси-2'-фтор-5-фторуридин (27Ь).
ВГ (100% ΕΏΑ^^^; т.пл. 153-156°С.
Ή ЯМР (400 МГц, С1ЫО17) б 8,46 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 5,94 (д, 1=16,4 Гц, 1Н), 5,25 (дд, 1=51,6 и 4,0 Гц, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,05 (дд, 1=12,8 и 2,4 Гц, 1Н), 3,72 (дд, 1=12,4 и 2,4 Гц, 1Н), 2,34-2,09 (м, 2Н).
13С ЯМР (100 МГц, СШОН) б 159,7 (д, 1=25,8 Гц), 150,7, 141,8 (д, 1=230,6 Гц), 126,3 (д, 1=35,7 Гц),
98,3 (д, 1=184,6 Гц), 91,9 (д, 1=36,4 Гц), 83,6, 61,9, 31,9 (д, 1=20,5 Гц). ИКС (КВг) 3482, 3037, 1702, 1654, 1402, 1103 см-1.
МСВР, высчитано для [М+Ы] СПнЦзО.ЫЫ 255,0769.
Обнаружено: 255,0764.
Элементный анализ, высчитано для С9Н10Ы2О4Р2: С, 43,56; Н, 4,06; Ν, 11,29.
Обнаружено: С, 43,59; Н, 4,06; Ν, 11,17.
Получение Ы2'-фтор-2',3'-ненасыщенных нуклеозидов.
В настоящее время разработан второй простой метод синтеза ненасыщенных 2'-фторнуклеозидов, который описан ниже. Этот метод синтеза включает взаимодействие защищенного пиримидинового или пуринового основания с основным промежуточным соединением 309 в присутствии кислоты Льюиса, как это показано на схеме 9. В табл. 5, 6 приведены типичные соединения, полученные в соответствии с этим методом синтеза.
- 24 008609
Схема 9
Реагенты: (ί) 2-метоксипропен, ДМФ, п-Т§0Н, (ίί) ЫаЮ4, Н20, (ш) (Е!0)2Р(0)СНЕС02Е!, ЫаНМП8, ТГФ, -78°С, (ίν) с-НС1, ЕЮН, (ν) ТВОМ8С1, имидазол, СН2С12, (νί) ПГВАЬ-Н, СН2С12, -78°С, (νίί) Ас20, пиридин, СН2С1.
Схема 9
- 25 008609
Реагенты: (ί) силилированный урацил, ТМ8ОТГ, ОСЕ, (ίί) силилированный тимин, ТМ8ОТГ, ОСЕ, (ίίί) силилированный Ν/ΐ-βζ-цитозин, ТМ8ОТГ, СН3СН (ίν) 5-Е-цитозин, ТМ8ОТГ, СН3СН (ν) ТВАЕ, СН3СН (νΐ) NН3/МеОН.
Схема 9
Реагенты: (ί) силилированный 6-С1-пурин, ТМ8ОТГ, ОСЕ, (ίί) силилированный 6-С1-2-Е-пурин, ТМ8ОТГ, (ίίί) ТВАЕ, СН3СН (ίν) N43/ОМЕ, (ν) 1\1Н3/МеОН, 90°С, (νΐ) Н8СН2СН2ОН, №ОМе, МеОН, нагревание с обратным холодильником.
- 26 008609
А
-27008609
-28008609
-29008609
Таблица 5
№ т.п. °С (раствори* тель)3 [а]ц, градусы формула анализ
10 сироп €15Η23ΓΝ2θ48ί С, Η,Ν
И сироп €16Η25ΓΝ2Ο48> С,Η,Ν
12 144-146( А) -20,47 (с 0,36, СНС1з) С, Η,Ν
13 139-141(А) +157,68 (сО,31,СНС1з) С22Н28^3°4^1 С,Η,Ν
14 сироп С,Η,Ν
15 сироп С, Η,Ν
16 161-162 (С) -13,412 (с 0,20, МеОН) θ9Η9ΕΝ2θ4θ,3Η2θ С, Η,Ν
17 136-137 (Е) +138,55 (с 0,14, МеОН) θ9Η9ΓΝ2θ4θ,2Η2θ С,Η,Ν
18 149-151 (О) -30,44 (с 0,20, МеОН) С1бН15НЧ2О5 с,Η,Ν
19 116-118 (Е) +132,42 (с 0,25, МеОН) Οΐ6Η13ΓΝ2θ5 С,Η,Ν
20 200-202 разложение (С) -54,89 (с 0,39, СНС13) С1бН14ГНзО4 С,Η,Ν
21 170-172(С) +136,38 (с 0,45, СНС1з) С 1бН14НЧзО40,ЗН2О С, Η,Ν
22 198-200 разложение (В) -21,31 (с 0,25, МеОН) 09Η|ΟΕΝ3034Η20 С, Η,Ν
23 120-121 (Е) +159,15 (с 0,21, МеОН) С9Н10РН3О3 С, Η,Ν
24 сироп С, Η,Ν
25 сироп С, Η,Ν
26 сироп С|6Н22ГС1Н5О281 С,Η,Ν
27 пена +9,80 (с 0,20, СНС13) С1бН21Р2С1М4О28| С,Η,Ν
28 сироп +139,67 (с 0,18, СНС1з) €|6Η2ΐΓ2αΝ4θ23ι С, Η,Ν
29 С, Η,Ν
30 пена С,Η,Ν
31 180-182 (А) +13,33 (с 0,54, СНС13) εΐ6Η23ρ2Ν5θ25ΐ θ.2 ацетон С, Η,Ν
32 129-130 (А) +90,22 (с 0,23, СНС1з) С1бН23РС^5О28‘ С,Η,Ν
33 184-186 (А) +116,53 (с0,13,СНС1з) С 16н23 ?2Ν5θ25ί ацетон С, Η,Ν
34 128-130 (А) +89,87 (с 0,15, СНС1з) С16Н2ЗРС^5О251 С,Η,Ν
35 188-189 (О -54,91 (с 0,17, МеОН) С]оН1ога5020,2Н20 С, Η,Ν
36 169-171 (О +160,62 (с 0,19, МеОН) С1(Н1(Щ5О2ОЗМ0ОН С,Η,Ν
37 128-130 <Е> -50,21 (с 0,20, МеОН) С 10Η9ΓΝ4θ30,2Η2Ο С, Η,Ν
38 >200 разложение (С) +169,60 (с 0,20, МеОН) СюНрИЦОзОЗНзО С, Η,Ν
39 185-188 разложение (В) -56,15 (с 0,16, МеОН) С, Η,Ν
40 180 разложение (В) . +178,22 (с 0,10, МеОН) с, Η,Ν
41 155-156 разложение (В) +10,64 (с 0,17, МеОН) С, Η,Ν
42 150-152 (В) +142,49 (с 0,17, МеОН) С,Η,Ν
43 >200 разложение (В) +24,42 (с 0,10, ДМФ) С,Η,Ν
44 >210 разложение _ +58,68 (с 0,10, ДМФ) С,Η,Ν
“Растворители; А; ЕКАс-гексапы, В; С1 ЕСЕ-МеО1 Е С; СНС^-МеОН, Б; ТЕФ-циклогексан, Е; лиофилизованный.
Синтез 2',3'-ненасыщенных Ό-нуклеозидов ранее осуществляли при помощи реакции элиминирования, используя в качестве исходного вещества легко доступный аналог нуклеозида, который представляет собой модификацию отдельных нуклеозидов с длинной цепью. Некоторые исследователи сообщили о получении Б-2'-фтор-2',3'-ненасыщенных пиримидиннуклеозидов путем элиминирования приемлемых аналогов 2'-фторированных нуклеозидов (Майш, Ι.Α., е1 аЕ, 1. Меб. С’йет. 1990, 33, 2137-2145; §ΐеζуск^,
- 30 008609
Κ.Ζ., е! а1., 1. Меб. Сйет. 1990, 33, 2150-2157). Однако этот метод синтеза Ε-Ε64Ν связан с дополнительными трудностями получения Ь-нуклеозидов в качестве исходного вещества. Можно привести всего несколько примеров синтеза 2',3'-ненасыщенных пуриннуклеозидов прямой конденсацией, что обусловлено неустойчивостью фрагмента 2,3-ненасыщенного сахара в условиях сочетания в присутствии кислоты Льюиса, за исключением одного случая получения аналога пиримидина, в котором использовано тиофенильное промежуточное соединение (Айбе1-Меб1еб, А.У.-8., е! а1. 8уп1йе515 1991, 313-317; 8ицпо, К., е! а1., Те!гайебгоп Ье!!. 1996, 37, 6133-6136). Предполагается, что в отличие от фрагмента 2,3ненасыщенного сахара 2-фтор-2,3-ненасыщенный сахар, который характеризуется более высокой устойчивостью гликозильной связи во время конденсации с гетероциклом, более пригоден для выполнения прямой реакции сочетания. Таким образом, в качестве предшественника для основного промежуточного соединения 508 выбран (К)-2-фторбутенолид 506, который получают из Ь-глицеральдегидацетонида 501.
Получают смесь (Ε)-502/(Ζ)-2 (9:1 по результатам 1Н ЯМР), используя в качестве исходного вещества Ь-глицеральдегидацетонид и выполняя реакцию Хорнера-Эммонса в присутствии триэтил-αфторфосфоноацетата и бис(триметилсилил)амида натрия в ТГФ (Тйепаррап, А., е! а1., 1. Огд. Сйет., 1990, 55, 4639-4642; Мойката, Т., е! а1., Сйет. Рйагт. Ви11. 1992, 40, 3189-3193; Райгск, Т.В., е! а1., 1. Огд. Сйет. 1994, 59, 1210-1212). Из-за трудностей, связанных с разделением изомеров (Ε)-502/(Ζ)-502, при осуществлении последующей реакции циклизации в кислотных условиях используют смеси, что дает требуемый лактон 503 и нециклизованный диол 504. Полученную смесь превращают в силиллактон 506 и восстанавливают при помощи ПГВАЬ-Н в СН2С12 при температуре 78°С, что дает лактон 507. Лактон 507 обрабатывают уксусным ангидридом с получением основного промежуточного соединения 508, которое конденсируют силилированным 6-хлорпурином в условиях реакции Ворбургена, что дает смеси аномеров 509. Обработка смеси 509 соединением ТВАГ в ТГФ позволяет получить свободные нуклеозиды 510 и 511, которые можно легко разделить хроматографией на колонках из силикагеля. Аналоги аденина 512 и 513 получают в результате обработки соответственно соединений 510 и 511 меркаптоэтанолом и №ОМе в стальном автоклаве при 90°С. В результате обработки соединений 510 и 511 меркаптоэтанолом и №ОМе получают соответственно аналоги инозина 514 и 515. Стереохимические характеристики этих соединений определены спектроскопией NОЕ8Υ (пик поперечной связи между Н-1' и Н-4'в Визомере 512).
Схема 10
Синтез Ь-2'-фтор-б4-аденина и гипоксантина при помощи прямой конденсации _ί___ -тЦ СО.В -До ₽ _«___о-_Г<х ОН г
О^н---- Ο4ΑΖ5 ’ о^^ЛСО1Е1 - но^мАсс>6]
I и
(«мы
131 Χ.ΝΗ, 08*1 111X* ОН 03*)
Реагенты: (ί) (Е!О2)Р(О)СНЕ-СО2Е![(СН3)381]^а, ТГФ, -78°С, (и) НС1/Е!ОН, (ίίί) ТВПМ8С1, имидазол, СН2С12, (ίν) 1М раствор О|ВАЙ-Н в СН2С12, СН2С12, -78°С, (ν) Ас2О, пиридин, СН2С12, (νί) силилированный 6-С1-пурин, ТМ8ОТГ, ПСЕ, (νίί) ТВАГ, СН3СН (νίίί) 1МН3/МеОН, 90°С, (ίχ) Н8(СН2)2ОН, №ОМе/МеОН, нагревание с обратным холодильником.
- 31 008609
Таблица 6
Средняя эффективная (ЕС50) и ингибирующая (1С50) концентрация Ь-2'-фтор-й4-аденина и гипоксантина против ВИЧ-1 в клетках РВМ
Соединение № ЕС50 (μκΜ) (клетки ΡΒΜ) ЕСад (μκΜ) (клетки ΡΒΜ) Цитотоксичность
Клетки РМС Клетки Уето Клетки СЕМ
1С» (мкМ) 1С5о (мкМ) 1С» (мкМ)
512 1,5 15,1 >100 >100 >100
513 47,6 332 >100 >100 >100
514 >100 >100 >100 >100 >100
515 >100 >100 >100 >100 >100
316(β) >100 >100 >100 >100 >100
317(α) >100 >100 >100 >100 >100
318((β) >100 >100 >100 >100 >100
319(α) >100 >100 >100 >100 >100
322(β) 0,51 4,3 >100 >100 >100
323(α) >100 >100 >100 >100 >100
335((β) 1,5 15,1 >100 >100 >100
336(α) 47,6 332 >100 >100 >100
337((β) >100 >100 >100 >100 >100
338(α). >100 >100 >100 >100
ΑΖΤ 0,004 0,04 >100 29,0 14,3
Экспериментальная часть
Температуры плавления определяли в лабораторном устройстве Ме1-!етр II и не корректировали. Спектры ядерного магнитного резонанса получены в спектрометрах Вгикег 250 и АМХ400 400 МГц с использованием тетраметилсилана в качестве внутреннего эталона; химические сдвиги (δ) указаны в миллионных долях (ррт), сигналы имеют обозначения: с (8) - синглет, д (й) -дублет, т (!) - триплет, к (ц) квартет, шс (Ьг 8) - широкий синглет, дд (йй) - дублет дублетов, м (т) - мультиплет и Гц (Ηζ) - герцы. УФ-спектры получены на спектрофотометре Весктап ЭИ 650. Оптические вращения измерены в цифровом поляриметре Э1Р-370. Масс-спектры измерены в масс-спектрометрах высокого разрешения с двойной фокусировкой (ЕВЕ) Аи!о8рес фирмы М1сгота88 1пс. Инфракрасные спектры получены в спектрометре №1со1е! 510 ЕТ-1К. Элементные анализы выполнены фирмой А!1ап!1с М1сго1аЬ, 1пс., №огсго88, СА. Ход всех реакций контролировали тонкослойной хроматографией на 200-мм пластинках из силикагеля СЕ фирмы Апа1!еск. Сухие 1,2-дихлорэтан, дихлорметан и ацетонитрил получали перегонкой из СаН2 перед использованием. Сухой ТГФ получали перегонкой из №1 и бензофенона, когда раствор становился пурпурным.
Ь-(8)-Глицеральдегидацетонид (302).
Раствор Ь-гулоно-у-лактона (175 г, 0,98 моль) в ДМФ (1 л) охлаждают до 0°С, и птолуолсульфоновую кислоту (1,1 г, 5,65 ммоль) добавляют порциями при перемешивании. К полученному раствору по каплям добавляют 2-метоксипропен (87,7 г, 0,92 моль) через капельную воронку при 0°С. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 24 ч. После окончания реакции добавляют карбонат натрия (124 г), и полученную суспензию интенсивно перемешивают в течение 3 ч. Затем суспензию фильтруют через стеклянный фильтр и фильтрат упаривают в вакууме. К желтому остатку добавляют толуол (170 мл), в результате чего происходит кристаллизация. Твердое вещество фильтруют вакуумной фильтрацией, промывают гексанами/этанолом (9:1, 1 л) и сушат, что дает желтоватое твердое вещество 301 (99,1 г, 65%).
К перемешиваемой суспензии 5,6-О-изопропилиден-Ь-гулоно-1,4-лактона (70,0 г, 0,32 моль) в воде (270 мл) порциями добавляют метапериодат натрия (123 г, 0,58 моль) при 0°С в течение 30 мин, поддерживая рН равным 5,5 (который регулируют, добавляя 2 н раствор №аОН). Суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, насыщают хлоридом натрия и фильтруют. Показатель рН фильт
- 32 008609 рата доводят до 6,5-7,0 и экстрагируют дихлорметаном (5 раз, 200 мл) и этилацетатом (5 раз, 300 мл). Объединенный органический слой сушат безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении (<20°С). Полученный остаток перегоняют, что дает соединение 302 (23,2 г, 69%) в виде бесцветного масла; т.к. 49-51°С/16 торр. [а]25 с-66,4 (с 6,3, бензол).
(Е)/^)-Этил-3-[(К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-2-фторакрилат (Е-303 и Ζ-303).
Раствор триэтил-2-фторфосфоноацетата (39,2 г, 162 ммоль) в ТГФ (70 мл) охлаждают до -78°С, и по каплям добавляют раствор бис(триметилсилил)амида натрия (1,0М раствор в ТГФ, 162 мл, 162 ммоль). Смесь выдерживают в течение 30 мин при -78°С, и добавляют раствор соединения 303 (19,14 г, 147 ммоль) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при -78°С, обрабатывают водным раствором ИН4С1 и экстрагируют простым эфиром. Эфирную фазу промывают насыщенным раствором ИаС1, сушат над Мд8О4, фильтруют и упаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле, что дает соединения Е-303 и Ζ-303 (9:1 по результатам 'Н ЯМР) в виде бледно-желтоватого масла (34,6 г, 97,9%). !Н ЯМР (СБС1з) δ 1,34, 1,36 (2т, 1=8 Гц, -СН2СН3), 1,40, 1,45 (2с, -СН3), 3,69 (м, На-5), 4,28 (м, НЬ-5, СН2СН3), 5,02 (м, Н-4), 5,40 (м, Н-4), 6,02 (дд, 1=8,20 Гц, Н-3), 6,18 (дд, 1=8,32 Гц, Н-3).
(К)-(+)-4-[(трет-Бутилдиметилсилилокси)метил]-2-фтор-2-бутен-4-олид (307).
Раствор соединений Е-303 и Ζ-303 (19,62 г, 89,89 ммоль) в 110 мл безводного ЕЮН обрабатывают 30 мл концентрированной НС1 и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и остаток упаривают вместе с толуолом (3 раза, 300 мл), что дает лактон 304 и нециклизованный сложный эфир 305. Полученный желтоватый сироп используют при осуществлении следующей реакции без дополнительной очистки. трет-Бутилдиметилсилилхлорид (27,1 г, 180 ммоль) добавляют к смеси соединений 304, 305 и имидазола (12,3 г, 180 ммоль) в СН2С12 (250 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч при комнатной температуре. Полученную смесь промывают водой, сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют до сухого состояния. Остаток отделяют хроматографией на колонках из силикагеля, используя в качестве элюента 4% ЕЮАс-гексанов, что дает соединение 307 (28,0 г, 70,2% от соединения 302) в виде белого кристаллического твердого вещества, т.пл.48-50°С; [а]28с +105,3 (с 1,60, СНС13); !Н ЯМР (СПС13) δ 0,07, 0,08 (2с, 2хСН3), 0,88 (с, ‘Ви), 3,88 (м, 2Н, Н-5), 5,01 (м, 1Н, Н-4), 6,73 (рз т, 1Н, 1=4 Гц).
Элементный анализ, высчитано для СюН19рО381: С, 53,63; Н, 7,77.
Обнаружено: С, 53,70; Н, 7,75.
1-Ацетил-4-[(трет-бутилдиметилсилилокси)метил]-2-фтор-2-бутен-4-олид (309).
Лактон 307 (20,58 г, 83,54 ммоль) растворяют в 200 мл СН2С12 в атмосфере азота, смесь охлаждают до -78°С и добавляют 1,0М раствор П1ВАЬ-Н в СН2С12 (125 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 2 ч при -78°С. Холодную смесь обрабатывают разбавленной азотной кислотой, промывают водой и сушат (Иа28О4). Выпаривание растворителя дает аномеры соединения 308 в виде бледно-желтого масла (16,6 г, выход сырого продукта 80%), которое используют на следующей стадии без дальнейшей очистки.
Ас2О (25 мл, 0,27 моль) добавляют к раствору соединения 308 и пиридина (22 мл, 0,27 моль) в СН2С12 (200 мл) при 0°С, и полученную смесь перемешивают в течение 16 ч. Реакционную смесь промывают разбавленной НС1, насыщенным раствором ИаНСО3 и насыщенным раствором соли. Объединенный органический слой сушат, фильтруют и концентрируют до сухого состояния. Остаток хроматографируют на колонках (6,5% ЕЮАс/гексаны), что дает соединение 309 (12,6 г, 65%) в виде бесцветного масла.
Общий способ конденсации ацетата 309 с пиримидиновыми основаниями
Смесь урацила (420 мг, 3,75 ммоль), гексаметилдисилазана (15 мл) и сульфата аммония (20 мг) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 3 ч в атмосфере азота. Полученный прозрачный раствор концентрируют до сухого состояния в вакууме. ТМ8ОТТ (0,7 мл, 3,14 ммоль) добавляют к раствору сахара 309 (728 мг, 2,50 ммоль) и силилированного основания в сухом ОСЕ (20 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч в атмосфере азота, выливают в охлажденный насыщенный раствор ИаНСО3 (30 мл) и перемешивают в течение 15 мин. Полученную смесь промывают, сушат (Иа28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают хроматографией на колонках (3% МеОН/СНС13), что дает соединение 310 (0,960 г, 2,73 ммоль, 73%) в виде неразделимой смеси аномеров, которую используют на следующей стадии, не разделяя.
1-[5-О-(трет-Бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-Е-глицеропент-2-енофуранозил]урацил (310) .
УФ (СНС13) Хтах 257,5 нм. Элементный анализ (С15Н23РИ2О481) С, Н, Ν.
1-[5-О-(трет-Бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-Е-глицеропент-2-енофуранозил]тимин (311) .
Силилированный тимин (242 мг, 1,92 ммоль), соединение 307 (500 мг, 1,72 ммоль) и ТМ8ОТ (0,5 мл, 2,25 ммоль) подвергают взаимодействию в течение 2 ч с получением смеси 311, которую очищают хроматографией на колонках из силикагеля (3% МеОН/СНС13) в виде неразделимой смеси аномеров (0,392 г, 1,10 ммоль, 64%). УФ (СНС13) Хтах 262,0 нм.
- 33 008609
Элементный анализ (С1бН25ЕМ20481) С, Н, N.
Ы6-Бензоил-1-[5-0-(трет-бутилдимитилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-(а,Ь)-Ь-глицеропент-2енофуранозил]цитозин (312 и 313).
Силилированный Х-бензоилцитозин (790 мг, 3,67 ммоль), соединение 307 (470 мг, 1,62 ммоль) и ТМ80ТП (0,5 мл, 2,25 ммоль) подвергают взаимодействию в течение 2 ч с получением смесей соединений 312 и 313, которые очищают хроматографией на колонках из силикагеля (30% ЕЮАс/гексан), что дает β-аномер 312 (0,34 г, 0,76 ммоль, 47,1%) в виде белого твердого вещества и α-аномер 313 (0,23 г, 0,52 ммоль, 31,8 %) в виде белого твердого вещества.
Соединение 312: УФ (СНС13) /тах 260,5 нм.
Элементный анализ (С22Н28Е^0481) С, Н, N.
Соединение 313: УФ (СНС13) /тах 260,5 нм.
Элементный анализ (С22Н28Е^0481) С, Н, N.
5-Фтор-1-[5-0-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-(а,Ь-Ь-глицеропент-2енофуранозил]цитозин (314 и 315).
Силилированный 5-фторцитозин (300 мг, 2,32 ммоль), соединение 309 (360 мг, 1,24 ммоль) и ТМ80ТП (0,4 мл, 1,86 ммоль) подвергают взаимодействию в течение 2 ч с получением смеси соединений 314 и 315, которую очищают хроматографией на колонках из силикагеля (3% Ме0Н/СН2С12), что дает βаномер 314 в виде белого твердого вещества (168 мг, 37,8%) и α-аномер 315 (121 мг, 27,1%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 314: УФ (МеОН) λ,,,,,,. 281,5 нм.
Соединение 315: УФ (МеОН) /_т,|х 281,5 нм.
1-(2,3-Дидезокси-2-фтор-(а,в)-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)урацил (316 и 317).
Фторид тетра-н-бутиламмония (0,6 мл, 0,6 ммоль) добавляют к смеси соединения 310 (177 мг, 0,52 ммоль) в ТГФ (15 мл), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Растворитель удаляют, и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (2% МеОН/СНС13), что дает β-аномер 316 (52,8 мг, 0,23 ммоль, 44,5%) и α-аномер 317 (35,1 мг, 0,15 ммоль, 29,6%).
Соединение 316: УФ (Н20) /тах 261,0 нм (рН 7).
Элементный анализ (С9Н9Е^04-0,3Н2О) С, Н, N.
Соединение 317: УФ (Н2О) /тах 261,0 нм (рН 7).
Элементный анализ (С9Н9Е^04-0,2Н2О) С, Н, N.
1-(2,3-Дидезокси-2-фтор-(а,в)-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)тимин (318 и 319).
Фторид тетра-н-бутиламмония (0,8 мл, 0,8 ммоль) добавляют к смеси соединений 311 (240 мг, 0,67 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°С и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Растворитель удаляют, и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (40% ТГФ/циклогексан), что дает β-аномер 318 (66,5 мг, 0,28 ммоль, 41%) и α-аномер 319 (52,8 мг, 0,23 ммоль, 26%).
Соединение 318: УФ (Н2О) /тах 265,5 нм (рН 7).
Элементный анализ (С10НПР^04-0,4Н20) С, Н, N.
Соединение 319: УФ (Н20) /тах 266,0 нм (рН 7).
Элементный анализ (С9Н9Е^04-0,3Н2О) С, Н, N.
^-Бензоил-1-(2,3-дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)цитозин (320).
Фторид тетра-н-бутиламмония (1М раствор в ТГФ) (1 мл, 1 ммоль) добавляют к раствору β-аномера 312 (280 мг, 0,63 ммоль) в ТГФ (10 мл), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают флешхроматографией на колонках из силикагеля, используя 2,5% МеОН/СНС13, что дает соединение 320 (218 мг, 0,66 ммоль, 75%) в виде белого твердого вещества. УФ (МеОН) /тах 260,5 нм.
Элементный анализ (^^^^0^ С, Н, N.
Х3-Бензоил-1-(2,3-дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)цитозин (321).
Фторид тетра-н-бутиламмония (1М раствор в ТГФ) (1 мл, 1 ммоль) добавляют к раствору αаномера 313 (280 мг, 0,63 ммоль) в ТГФ (10 мл), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля, использя 2,5% МеОН/СНС13, что дает соединение 321 (145,8 мг, 0,44 ммоль, 69%) в виде белого твердого вещества. УФ (МеОН) /тах 260,5 нм.
Элементный анализ (Ск5Н14Е^04-0,3Н2О) С, Н, N.
1-(2,3-Дидезокси-2-фтор-β-^-глицеропент-2-енофуранозил)цитозин (322).
Раствор β-аномера (67,60 мг, 0,204 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывают ХН3/Ме0Н (10 мл насыщенного раствора), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре до исчезновения исходного вещества (10 ч). Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают препаративной ТСХ, используя в качестве элюента 12% МеОН/СН2С12. Вещество, снятое с пла
- 34 008609 стинки, растирают в порошок с гексанами и диэтиловым спиртом, что дает соединение 322 (43 мг, 93,1%) в виде твердого вещества. УФ (Н2О) /тах 266,5 нм (рН 7).
Элементный анализ (С9НюЕЩОз-0,4Н2О) С, Н, N.
1-(2,3-Дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил) цитозин (323).
Раствор α-аномера (65,90 мг, 0,199 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывают ^Ж3/МеОН (10 мл насыщенного раствора), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре до исчезновения исходного вещества (16 ч). Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают препаративной ТСХ, используя в качестве элюента 12% МеОН/СН2С12. Вещество, снятое с пластинки, растирают в порошок с гексанами и диэтиловым эфиром, что дает соединение 322 (42,5 мг, 94,5%) в виде твердого вещества. УФ (Н2О) /тах 276,0 нм (рН 2).
Элементный анализ (С9Н10ЕЩО3) С, Н, N.
5-Фтор-1-(2,3-дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)цитозин (324).
Фторид тетра-н-бутиламмония (1М раствор в ТГФ) добавляют к раствору β-аномера 314 в ацетонитриле, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают флеш-хроматографией на колонках из силикагеля, используя 12% МеОН/СНС13, что дает соединение 324.
5- Фтор-1-(2,3-дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)цитозин (325).
Фторид тетра-н-бутиламмония (1М раствор в ТГФ) добавляют к раствору β-аномера 315 в ацетонитриле, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают флеш-хроматографией на колонках из силикагеля, используя 12% МеОН/СНС13, что дает соединение 325.
Общий способ конденсации ацетата 309 с пуриновыми основаниями
Смесь 6-хлорпурина (1/20 г, 7,75 ммоль), гесаметилдисилазана (25 мл) и сульфата аммония (каталитическое количество) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 4 ч в атмосфере азота. Полученный прозрачный раствор концентрируют в вакууме, остаток растворяют в сухом ОСЕ (10 мл) и подвергают взаимодействию с раствором соединения 307 (1,50 г, 5,17 ммоль) в ОСЕ (40 мл) и триметилсилилтрифлате (1,5 мл, 7,75 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего реакционный раствор выливают в охлаждаемый льдом насыщенный раствор NаНСО3 (20 мл) и перемешивают в течение 15 мин. Органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли и сушат над Мд8О4. Растворители удаляют при пониженном давлении, и остаток отделяют хроматографией на колонках из силикагеля, используя 12,5% Е!ОАс/гексаны, что дает смесь аномеров 326 (1,25 г, 62,9%) в виде сиропа.
6- Хлор-9-[5-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-Ь-глицеропент-2-енофуранозил] пурин (326).
Соединение 326: УФ (МеОН) 265,0 нм.
Элементный анализ (С1бН22С1ЕЩО281) С, Н, N.
6-Хлор-2-фтор-9-[5-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-(а,в)-Ь-глицеропент-2енофуранозил]пурин (327 и 328).
Смесь силилированного 2-фтор-6-хлорпурина [полученного из 1,170 г (6,78 ммоль) 2-фтор-6хлорпурина] и сухого ОСЕ (40 мл) перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре. Полученную смесь обрабатывают аналогично соединению 326, очищают хроматографией на колонках из силикагеля (12% Е!ОАс/гексаны), что дает β-аномер 327 (685 мг, 1,70 ммоль, 30,0%) в виде белой пены и αаномер 328 (502 мг, 1,25 ммоль, 22,1%) в виде желтоватого сиропа.
Соединение 327: УФ (МеОН) /тах 268,5 нм.
Элементный анализ (СЩ^Е^ГЩО^) С, Н, N.
Соединение 328: УФ (МеОН) /тах 269,0 нм.
Элементный анализ (СЩ^Е^ГЩО^) С, Н, N.
6-Хлор-9-(2,3-дидезокси-2-фтор-(а,в)-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)пурин (329 и 330).
Раствор соединения 326 (1,2 г, 3,12 ммоль) в сухом СН3СN (20 мл) обрабатывают ТВАЕ (1М раствор в ТГФ) (3,2 мл, 3,2 ммоль) и перемешивают в течение 1 ч. Растворитель выпаривают и полученный продукт очищают хроматографией на колонках (3% МеОН/СНС13), что дает β-аномер 329 (296 мг, 35%) в виде белого твердого вещества и α-аномер 330 (380 мг, 45%) в виде пены.
Соединение 329: УФ (МеОН) /тах 265,0 нм.
Соединение 330: УФ (МеОН) /тах 265,0 нм.
6-Амино-2-фтор-9-[5-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2енофуранозил]пурин (331) и 6-хлор-2-амино-9-[5-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-вЬ-глицеропент-2-енофуранозил]пурин (332).
Сухой аммиак барботируют в перемешиваемый раствор соединения 327 (420 мг, 1,04 ммоль) в сухом ОМЕ (35 мл) при комнатной температуре в течение ночи. Соли отфильтровывают, и фильтрат упаривают при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (25%
- 35 008609
Е!ОАс/гексаны), что дает два соединения, 331 (114 мг, 0,30 ммоль) в виде белого твердого вещества и
332 (164 мг, 0,41 ммоль) в виде белого твердого вещества.
Соединение 331: УФ (МеОН) Хтах 268,5 нм.
Элементный анализ (С|бН23,Е2N5О28^·0.2 ацетон) С, Н, Ν.
Соединение 332: УФ (МеОН) Хтах 307,5 нм.
Элементный анализ (С^^Е^О^^) С, Н, Ν, С1.
6-Амино-2-фтор-9-[5-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2енофуранозил] пурин (333) и 6-хлор-2-амино-9-[5-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2,3-дидезокси-2-фтор-аЬ-глицеропент-2-енофуранозил] пурин (334).
Сухой аммиак барботируют в перемешиваемый раствор соединения 333 (420 мг, 1,04 ммоль) в сухом ОМЕ (35 мл) при комнатной температуре в течение ночи. Соли отфильтровывают, и фильтрат упаривают при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (25% Е!ОАс/гексаны), что дает два соединения, 332 (150 мг, 0,38 ммоль) в виде белого твердого вещества и
333 (69,3 мг, 0,18 ммоль) в виде белого твердого вещества.
Соединение 333: УФ (МеОН) Хтах 269,0 нм.
Элементный анализ (С16Н23Е2М5О281-0,3 ацетон) С, Н, Ν.
Соединение 334: УФ (МеОН) Хтах 309,5 нм.
Элементный анализ (С^^ЕС^О^) С, Н, Ν.
9-(2,3-Дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)аденин (335).
Раствор соединения 329 (100 мг, 0,369 ммоль) и насыщенный раствор МН3/МеОН (50 мл) нагревают при 90°С в стальном автоклаве в течение 24 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, растворитель удаляют при пониженном давлении, и остаточный сироп очищают хроматографией на колонках, используя в качестве элюента 6% МеОН/СНС13, что дает соединение 335 (70 мг, 75%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 335: УФ (Н2О) Хтах 258 нм (ε 18800) (рН 2), 258,5 нм (ε 18800) (рН 7), 258,5 нм (ε 19100) (рН 11).
Элементный анализ (С1οН10ΡN5О2·0,2Н2О) С, Н, Ν.
9-(2,3-Дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)аденин (336).
Раствор соединения 330 (99 мг, 0,366 ммоль) и насыщенный раствор ΝΉβ/МеОН (50 мл) нагревают при 90°С в стальном автоклаве в течение 24 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, растворитель удаляют при пониженном давлении и остаточный сироп очищают хроматографией на колонках, используя в качестве элюента 6% МеОН/СНС13, что дает соединение 336 (72 мг, 78%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 336: УФ Н2О Хтах 258 нм (ε 21100) (рН 2), 259 нм (ε 21500) (рН 7), 259 нм (ε 22600) (рН 11).
Элементный анализ (С1οН10ΡN5О2·0,3МеОН) С, Н, Ν.
9-(2,3-Дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)гипоксантин (337).
Смесь соединения 329 (100 мг, 0,369 ммоль), №1ОМе (0,5М раствор в МеОН) (2,94 мл, 1,4 6 ммоль) и Н8СН2СН2ОН (0,1 мл, 1,4 6 ммоль) в МеОН (20 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 4 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждают, нейтрализуют ледяной АсОН и упаривают до сухого состояния в вакууме. Остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (10% МеОН/СНС13), что дает соединение 337 (74 мг, 80%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 337: УФ (Н2О) Хтах 247 нм (ε 12400) (рН 2), 247,5 нм (ε 13000) (рН 7), 253 нм (ε 13100) (рН 11).
Элементный анализ (С1οН9рN4О3·0,2Н2О) С, Н, Ν.
9-(2,3-Дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)гипоксантин (338).
Смесь соединения 330 (100 мг, 0,369), №1ОМе (0,5М раствор в МеОН) (2,94 мл, 1,46 ммоль) и Н8СН2СН2ОН (0,1 мл, 1,46 ммоль) в МеОН (20 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 4 ч в атмсофере азота. Реакционную смесь охлаждают, нейтрализуют ледяной АсОН и упаривают до сухого состояния в вакууме. Остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (10% МеОН/СНС13), что дает соединение 338 (70 мг, 80%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 338: УФ (Н2О) Хтах 247,5 нм (ε 12700) (рН 2), 247,5 нм (ε 13700) (рН 7), 252,5 нм (ε 13100) (рН 11). Элементный анализ (С10Н9рN4О3·0,2 Н2О) С, Н, Ν.
2-Фтор-6-амино-9-(2,3-дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)пурин (339). Раствор соединения 31 (101 мг, 0,26 ммоль) в сухом ацетонитриле (15 мл) обрабатывают ТВАЕ (1 М раствор в ТГФ) (0,35 мл, 0,35 ммоль) и перемешивают в течение 30 мин. Растворитель выпаривают и сухой продукт очищают хроматографией на колонках (9% СН2С12/МеОН), что дает соединение 339 (64,7 мг, 0,24 ммоль, 92,3%) в виде белого кристаллического твердого вещества. УФ (Н2О) Хтах 269,0 нм (рН 7).
2-Фтор-6-амино-9-(2,3-дидезокси-2-фтор-а-Е-глицеропент-2-енофуранозил)пурин (340).
Раствор соединения 333 (73,4 мг, 0,19 ммоль) в сухом ацетонитриле (10 мл) обрабатывают ТВАЕ
- 36 008609 (1М раствор в ТГФ) (0,25 мл, 0,25 ммоль) и перемешивают в течение 30 мин. Растворитель выпаривают и сухой продукт очищают хроматографией на колонках (9% СН2С12/МеОН), что дает соединение 340 (46,2 мг, 0,17 ммоль, 90,3%) в виде белого кристаллического твердого вещества. УФ (Н2О) Хтах 269,0 нм (рН 7).
2-Амино-6-хлор-9-(2,3-дидезокси-2-фтор-3-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)пурин (341).
Раствор соединения 332 (143,5 мг, 0,40 ммоль) в сухом ацетонитриле (15 мл) обрабатывают ТВАР (1М раствор в ТГФ) (0,6 мл, 0,60 ммоль) и перемешивают в течение 30 мин. Растворитель выпаривают, и сухой продукт очищают хроматографией на колонках (5% СН2С12/МеОН), что дает соединение 341 (109 мг, 0,382 ммоль, 95,5%) в виде белого кристаллического твердого вещества. УФ (Н2О) Хтах 308,5 нм (рН 7).
2-Амино-6-хлор-9-(2,3-дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)пурин (342).
Раствор соединения 334 (145 мг, 0,36 ммоль) в сухом ацетонитриле (10 мл) обрабатывают ТВАР (1М раствор в ТГФ) (0,5 мл, 0,50 ммоль) и перемешивают в течение 30 мин. Растворитель выпаривают, и сухой продукт очищают хроматографией на колонках (9% СН2С12/МеОН), что дает соединение 342 (99,9 мг, 0,35 ммоль, 96,4%) в виде белого кристаллического твердого вещества. УФ (Н2О) Хтах 309,0 нм (рН 7).
9-(2,3-Дидезокси-2-фтор-в-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)гуанин (343).
Смесь соединения 341 (63,6 мг, 0,223 ммоль), 2-меркаптоэтанола (0,06 мл, 0,89 ммоль) и 1 н раствора ЦаОМе (0,89 мл, 0,89 ммоль) в МеОН (10 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 5 ч в атмосфере азота. Смесь охлаждают, нейтрализуют ледяной АсОН и концентрируют до сухого состояния при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонках (12% СН2С12/МеОН), что дает соединение 343 (30,1 мг, 0,113 ммоль, 50,7%) в виде белого твердого вещества. УФ (НО) λ 253,5 нм (рН 7).
9-(2,3-Дидезокси-2-фтор-а-Ь-глицеропент-2-енофуранозил)гуанин (344).
Смесь соединения 342 (59,3 мг, 0,208 ммоль), 2-меркаптоэтанола (0,07 мл, 1,04 ммоль) и 1 н раствора ЦаОМе (1,04 мл, 1,04 ммоль) в МеОН (10 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 5 ч в атмосфере азота. Смесь охлаждают, нейтрализуют ледяной АсОН и концентрируют до сухого состояния в вакууме. Остаток очищают хроматографией на колонках (12,5% СН2С12/МеОН), что дает соединение 344 (28,0 мг, 0,105 ммоль, 50,5%) в виде белого твердого вещества. УФ (Н2О) Хтах 253,0 нм (рН 7).
Синтез цис-(±)-карбоциклических б4-цитозиннуклеозидов и их 5'-трифосфатов
В соответствии со схемой 11 при использовании в качестве исходного вещества диэтилдиаллилмалоната (701) синтезирован 4-карбэтокси-1,6-гептадиен (702) с 78% выходом (ν.Α. ЦидеШ, 1. Ат. Сйет. 8ое., 1995, 117, 8992-8998). Соединение 703 синтезировано из соединения 702 с 71% выходом (Ь.Е. Маг1лпсх, 1. Огд. Сйет., 1996, 61, 7963-7966), и соединение 705 синтезировано из соединения 704 с 43% выходом (И.М. Нобдкощ 1. Сйет. 8ое. Регкт Тгиик. I, 1994, 3373-3378). Основное промежуточное соединение, цис-(±)-3-ацетокси-5-(ацетоксиметил)циклопентен (708), можно альтернативно синтезировать из циклопентадиена и формальдегида в уксусной кислоте, выполняя реакцию Принса (Е.А. δπνίΐ^-δΐο^κ, 1. Сйет. 8ое. Регкт Тгиик. I, 1991, 2603-2604), хотя для этого способа получения характерны такие недостатки, как низкий выход и невозможность разделения компонентов; или из бициклического лактона, который синтезируют многостадийным методом, состоящим из 4 стадий (Р. Вигйг1а, Вюогд. Меб. Сйет. ЬеИ, 1997, 7, 247-250). При помощи последнего метода можно получить хиральное соединение 708 [(-)энантиомер], хотя для этого необходимо синтезировать хиральный бициклический лактон. Ц4-Ацетил-5фторцитозин синтезирован из 5-фторцитозина и п-нитрофенилацетата (А.8. 81еш£е1б, 1. Сйет. Векеагей (М), 1979, 1437-1450).
- 37 008609
Схема 11 «оси
ЗД-дибромфеноп ₽Ь(Е1)*/топуол
Ν·ΟΝ □ΜδΟ
фосфорин <4-он/ ДИоксан/ДМФ/пиримидин ίί) пирофосфорная кислота/
Вы^МГДМФ
Ш) Ι^/Η^Ο/πηρμμηαηη/ΤΓΦ
Экспериментальная часть
Общая информация.
Все реагенты использовали в том виде, в каком они были получены, за исключением особо оговоренных случаев. Безводные растворители были приобретены в компании Α16γχ1ι СНет1са1 Со. Температуры плавления (т.пл.) измеряли в электротермическом цифровом устройстве для определения температуры плавления и не корректировали. Спектры 1Н ЯМР и 13С ЯМР определены в спектрометре Vа^^аη ип11у Р1ик 400 при комнатной температуре и указаны в миллионных долях со сдвигом в сторону слабого поля от внутреннего стандарта тетраметилсилана.
4-Карбэтокси-1,6-гептадиен (702).
Смесь диэтилдиаллилмалоната (701; 50 г, 208 ммоль), цианида натрия (20,7 г, 422 ммоль) и ДМСО (166 мл) нагревают при 160°С в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют 400 мл воды, и полученный продукт экстрагируют в гексан (4x100 мл). Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток перегоняют (42-43°С/1 торр), что дает 27,34 г (78%) соединения 702 в виде бесцветной жидкости.
Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 5,80-5,70 (м, 2Н, 2СН=СН2), 5,10-5,02 (м, 4Н, 2СН=СН2), 4,14 (к, 2Н, 1=7,2 Гц, ОСН2), 2,54-2,48 (м, 1Н, СН), 2,41-2,34, 2,29-,2,23 (2м, 4Н, 2СН2), 1,25 (т, 1=7,2 Гц, 3Н, СН3).
Этиловый эфир (±)-3-циклопентенкарбоновой кислоты (703).
В высушенную пламенем 500 мл колбу вводят 2,6-дибромфенол (1,20 г, 4,76 ммоль), оксихлорид
- 38 008609 вольфрама (0,813 г, 2,38 ммоль) и безводный толуол (25 мл). Полученную суспензию нагревают при кипении с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 1 ч, после чего растворитель выпаривают в вакууме. Твердый остаток разбивают шпателем и сушат в вакууме в течение 30 мин. К остатку добавляют толуол (160 мл), ЕЦРЬ (1,54 г, 4,76 мл) и соединение 702 (22 г, 131,0 ммоль). Смесь нагревают при 90°С в атмосфере азота в течение 1,5 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через целит, и целит промывают трет-ВиОМе. Объединенные фильтраты промывают 1% раствором №1ОН, водой и насыщенным раствором соли и концентрируют, упаривая при пониженном давлении. Остаток перегоняют (37-38°С/1 торр), что дает 13,06 г (71%) соединения 703 в виде бесцветной жидкости. 'Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 5,67 (с, 2Н, СН=СН), 4,14 (к, 2Н, 1=7,2 Гц, ОСН2), 3,11 (пентаплет, 1=7,6 Гц, 1Н, СН), 2,65 (д, 1=7,6 Гц, 4Н, 2СН2), 1,27 (т, 1=7,2 Гц, 3Н, СН3).
(+)-1-(Гидроксиметил)-3-циклопентен (704).
К холодному (-78°С) раствору соединения 703 (7 г, 50 ммоль) в сухом ТГФ (150 мл) добавляют Ь1А1Н4 (1М раствор в ТГФ, 25 мл, 25 ммоль), и реакционный раствор перемешивают при -78°С в атмосфере аргона в течение 4 ч. Затем реакционный раствор оставляют нагреваться до 0°С и последовательно добавляют 2,5 мл воды, 2,5 мл 15% №1ОН и 7,5 мл воды. Смесь нагревают до комнатной температуры, осадок фильтруют через целит, и промывают целит горячим ЕЮАс. Объединенные фильтраты промывают 0,1 н раствором №1ОН и насыщенным раствором соли, сушат (Мд8О4), фильтруют, концентрируют и сушат в вакууме, что дает 4,294 г (84%) соединения 704 в виде бледно-желтой жидкости. 'Н ЯМР (400 МГц, δ 5,68 (с, 2Н, 2СН=СН), 3,57 (д, 1=6,0 Гц, 2Н, СН2ОН), 2,54-2,48 (м, 3Н,
СН+СН2), 2,15-2,10 (м, 2Н, СН2).
цис-(±)-4-(Гидроксиметил)-1,2-эпоксициклопентан (705).
К раствору соединения 704 (930 мг, 9,1 ммоль) и ванадилацетилацетоната (10 мг) в безводном СН2С12 (20 мл) по каплям добавляют трет-ВиО2Н [3М раствор в СН2С12, полученный из смеси третВиО2Н (70 вес.% в воде, 41 мл, 0,3 моль) и СН2С12 (59 мл) в результате сушки (2Мд8О4) и хранения на молекулярном сите 4 А, 10 мл, ~30 ммоль]. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч, добавляют водный №28О3 (15% раствор, 60 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 6 ч. Органический слой отделяют, промывают насыщенным раствором NаΗСО3 и насыщенным раствором соли и концентрируют. Остаток очищают флеш-хроматографией на силикагеле, производя элюирование гексаном/ЕЮАс (2:1), что дает 460 мг (43%) соединения 705 в виде бесцветной жидкости. ' Н ЯМР (400 МГц, СИСЬ) δ 3,54 (с, 2Н, (СН)2О), 3,49 (т, 1=4,0 Гц, 2Н, СН2ОН), 2,95 (шс, 1Н, ОН), 2,442,40 (м, 1Н, СН), 2,05-2,02 (м, 4Н, 2СН2). 13С ЯМР (100 МГц, СИСЬ) δ 66,9 (д, (СН)2О), 59,2 (т, СН2ОН),
36,5 (д, СН), 31,4 (т, 2СН2).
цис-(±)-3-Ацетокси-5-(ацетоксиметил)циклопентен (708).
К раствору дифенилдиселенида (2,70 г, 8,65 ммоль) в безводном Е1ОН (100 мл) порциями добавляют NаВΗ4. Раствор желтого цвета перемешивают до тех пор, пока он не становится бесцветным, после чего добавляют раствор соединения 705 (1,70 г, 14,4 ммоль) в безводном ТГФ (10 мл). Реакционный раствор нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч в атмосфере азота, и растворитель выпаривают в вакууме. К остатку добавляют ЕЮАс (80 мл) и воду (30 мл). Органическую фазу отделяют, промывают насыщенным раствором соли, сушат (Мд8О4), фильтруют, концентрируют и сушат в вакууме. Полученный (±)-1-гидрокси-4-(гидроксиметил)-2-(фенилселенил)циклопентан (706; светло-желтое масло) используют при выполнении следующей реакции без дальнейшей очистки. К сырому продукту 706 добавляют безводный СН2С12 (60 мл), Е!^ (30 мл, 216 ммоль) и ОМАР (50 мг). Полученный раствор охлаждают до 0°С и по каплям добавляют Ас2О (14,7 г, 144 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение ночи и растворитель выпаривают, что дает (±)-1-ацетокси-4(ацетоксиметил)-2-(фенилселенил)циклопентан (707; светло-желтое масло). К холодному (0°С) раствору соединения 707 в СН2С12 (50 мл), содержащему 3 капли пиридина, добавляют 30% раствор Н2О2 (20 мл) в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин и при комнатной температуре еще 30 мин, после чего смесь разбавляют, добавляя СН2С12 (50 мл). Органическую фазу отделяют, промывают водой, насыщенным раствором NаНСО3 и насыщенным раствором соли, сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют, упаривая в вакууме. Остаток очищают флеш-хроматографией на силикагеле, производя элюирование 0-10% ЕЮАс в гексане, что дает 2,254 г (79%, для трех стадий) соединения 708 в виде бледно-коричневой жидкости. 'Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 6,01-6,00, 5,92-5,90 (2м, 2Н, СН=СН), 5,66-5,64 (м, 1Н, Н-3), 4,04 (д, 1=6,8 Гц, 2Н, СН2О), 2,98-2,92 (м, 1Н, Н-5), 2,53-2,46 (м, 1Н, Н4а), 2,08, 2,04 (2с, 6Н, 2СН3), 1,60-1,54 (м, 2Н, Н-4Ь). 13С ЯМР (100 МГц, СИСЬ) δ 171,1, 170,9 (2с, 2С=О), 137,0, 131,4 (2д, СН=СН), 79,2 (д, С-3), 67,4 (т, СН2О), 43,7 (д, С-5), 33,4 (т, С-4), 21,3, 20,9 (2к, 2СН3).
цис-(±)-Карбоциклический 5'-О-ацетил-2',3'-дидегидро-2',3'-дидезокси-5-фторцитидин (709).
Суспензию 5-фторцитозина (258 мг, 2 ммоль) и ΝηΗ (58 мг, 2,4 ммоль) в безводном ДМСО (15 мл) нагревают на предварительно нагретой масляной бане при 70°С в течение 30 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и добавляют РБ(РРй3)4 (73 мг, 0,063 ммоль) и раствор соединения 708 (298 мг, 1,5 ммоль) в безводном ТГФ (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при 70°С в атмосфере аргона в течение 3 дней. Растворитель выпаривают в вакууме и остаток обрабатывают СН2С12 (50 мл).
- 39 008609
Осадок фильтруют через целит и промывают целит СН2С12. Объединенные фильтраты концентрируют и остаток очищают флеш-хроматографией на силикагеле, производя элюирование 0-5% МеОН в СН2С12, что дает 40 мг (10%) соединения 709 в виде светло-коричневого твердого вещества. Перекристаллизация из МеОН/СН2С12/гексана дает чистый продукт в виде белого порошка. Т.пл.182-184°С. 1Н ЯМР (400 МГц, СБС13) δ 7,43 (д, 1=6,0 Гц, 1Н, Н-6), 6,18-6,16 (м, 1Н, Н-3'), 5,83-5,81 (м, 1Н, Н-2'), 5,73-5,71 (м, 1Н, Н-1'), 4,23-4,21, 4,08-4,04 (2м, 2Н, СН2О), 3,14-3,12 (м, 1Н, Н-4'), 2,92-2,84 (м, 1Н, Н-6'а), 2,08 (с, 3Н, СН3), 1,41-1,35 (м, 1Н, Н-6'Ь).
цис-(±)-Карбоциклический ^,5'-О-диацетил-2',3'-дидегидро-2',3'-дидезокси-5-фторцитидин (710).
Аналогично способу получения соединения 709 целевое соединение 710 получают из соединения 708 (560 мг, 2,828 ммоль) и ^-ацетил-5-фторцитозина (726 мг, 4,24 ммоль): 560 мг (64%, коричневое масло). Этот сырой продукт используют при выполнении следующей реакции без дальнейшей очистки.
цис-(±)-Карбоциклический ^,5'-О-диацетил-2',3'-дидегидро-2',3'-дидезоксицитидин (711).
Аналогично способу получения соединения 709 целевое соединение 711 получают из соединения 708 (272 мг, 1,37 ммоль) и ^-ацетилцитозина (316 мг, 2,06 ммоль): 108 мг (27%) белого порошка. Т.пл.
169,5-171,5°С. Ί1 ЯМР (400 МГц, СБС13) δ 8,80 (шс, 1Н, ΝΉ), 7,72 (д, 1=6,8 Гц, 1Н, Н-6), 7,39 (д, 1=6,8 Гц, 1Н, Н-5), 6,19-6,17 (м, 1Н, Н-3'), 5,86-5,81 (м, 1Н, Н-2'), 5,77-5,75 (м, 1Н, Н-1'), 4,17-4,13, 4,074,02 (2м, 2Н, СН2О), 3,18-3,10 (м, 1Н, Н-4'), 2,96-2,88 (м, 1Н, Н-6'а), 2,27, 2,06 (2с, 6Н, 2СН3), 1,43-1,37 (м, 1Н, Н-6'Ь). 13С ЯМР (100 МГц, СБС13) δ 170,8 (с, 2С=О), 162,0 (с, С-4), 155,6 (с, С-2), 145,3 (д, С-6), 139,2 (д, С-3'), 130,0 (д, С-2'), 96,8 (д, С-5), 66,3 (т, С-5'), 62,8 (д, С-1'), 44,2 (д, С-4'), 34,7 (т, С-6'), 25,0, 20,9 (2к, 2СН3).
цис-(±)-Карбоциклический 2',3'-дидегиро-2',3'-дидезокси-5-фторцитидин (712).
В колбу, содержащую соединение 709 (33 мг, 0,12 ммоль), добавляют №1ОМе (0,5М раствор в МеОН, 0,5 мл). Реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего растворитель выпаривают в вакууме. Остаток очищают флеш-хроматографией на силикагеле, производя элюирование 5-10% МеОН в СН2С12, что дает 17 мг (61%) соединения 712 в виде светлокоричневого твердого вещества. Перекристаллизация из МеОН/СН2С12/гексана дает чистый продукт в виде белого порошка. Т.пл.205,5-206,0°С. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) δ 7,66 (д, 1=6,0 Гц, 1Н, Н-6), 7,60, 7,40 (2шс, 2Н, ΝΉ2), 6,06-6,05 (м, 1Н, Н-3'), 5,68-5,65 (м, 1Н, Н-2'), 5,53-5,50 (м, 1Н, Н-1'), 4,77-4,75 (м, 1Н, Н-4'), 3,50-3,48, 3,41-3,37 (2м, 2Н, Н-5'), 2,79-2,77 (м, 1Н, Н-6'а), 1,34-1,27 (м, 1Н, Н-6'Ь). 13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-Б6) δ 157,0 (д, 1С-Р=11,9 Гц, С-4), 154,0 (с, С-2), 139,2 (д, С-3'), 135,8 (д, 1С-Р=241,3 Гц, С-5), 130,2 (д, С-2'), 126,8 (д, 1С-Р=11,8 Гц, С-6), 63,5 (т, С-5'), 61,3 (д, С-1'), 47,2 (д, С-4'), 33,3 (т, С-6'). МС (РАВ) т/е 226 (МН+).
Элементный анализ (С10Н12Р^О2), высчитано: С 53,33; Н 5,37; Ν 18,66; обнаружено: С 53,10; Н 5,40; Ν 18,44. Аналогично вышеописанному способу целевое соединение 712 получают также из соединения 710 (750 мг, 2,42 ммоль): 320 мг (59%, белый порошок).
цис-(±)-Карбоциклический 2',3'-дидегидро-2',3'-дидезокси-цитидин (713).
Аналогично способу получения соединения 712 целевое соединение 713 получают из соединения 711 (75 мг, 0,257 ммоль): 48 мг (90%, белое твердое вещество). Т.пл.200-201°С. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Б6) δ 7,40 (д, 1=7,2 Гц, 1Н, Н-6), 7,03, 6,95 (2шс, 2Н, ΝΉ2), 6,07-6,05 (м, 1Н, Н-3'), 5,67 (д, 1=7,2 Гц, 1Н, Н-5), 5,65-5,64 (м, 1Н, Н-2'), 5,55-5,52 (м, 1Н, Н-1'), 4,71-4,68 (м, 1Н, Н-4'), 3,43-3,36 (м, 2Н, Н-5'), 2,78-2,76 (м, 1Н, Н-6'а), 1,24-1,18 (м, 1Н, Н-6'Ь). 13С ЯМР (100 МГц, ДМСО-Б6) δ 165,5 (с, С-4), 155,8 (с, С-2), 142,2 (д, С-6), 138,6 (д, С-3'), 130,5 (д, С-2'), 93,7 (д, С-5), 63,9 (т, С-5'), 60,8 (д, С-1'), 47,3 (д, С-4'), 34,0 (т, С-6'). МС (РАВ) т/е 208 (МН+).
Элементный анализ (С10Н13^О2), высчитано: С 57,96; Н 6,32; Ν 20,28; обнаружено: С 57,35; Н 6,27; Ν 20,02. МСВР (РАВ) высчитано для (С10Н14^О2): 208,1086; обнаружено 208,1088.
Кислая триэтиламмониевая соль цис-(±)-карбоциклического 2',3'-дидегидро-2',3'-дидезокси-5фторцитидин-5'-трифосфата (714).
К раствору соединения 712 (10 мг) в безводном ДМФ (0,3 мл) и пиридина (0,1 мл) добавляют 1М раствор 2-хлор-4Н-1,3,2-бензодиоксафосфорин-4-она в безводном 1,4-диоксане (0,05 мл). Реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем последовательно добавляют 1М раствор, пирофосфорной кислоты-Ви^ в безводном ДМФ (0,12 мл) и Ευ3Ν (0,05 мл). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре еще 15 мин и по каплям добавляют раствор 12/Н2О/пиридина/ТГФ до появления устойчивой йодной окраски (около 0,5 мл), после чего смесь концентрируют, упаривая в вакууме. Остаток растворяют в воде (2 мл), промывают СН2С12 (3x1 мл), фильтруют и очищают жидкостной хроматографией быстрого разрешения (РРЬС) (колонка: Н1Ьоай 26/10 О ЗерНагоке Рак! Е1о\у; буфер А: 0,01М Е!3NНСО3; буфер В: 0,7 М Е!3NНСО3; скорость потока: 10 мл/мин; градиент: увеличение буфера В от 0 в начале до 10% через 4 мин и до 100% через 64 мин). Сбор и лиофилизация необходимых фракций дает соединение 714 в виде бесцветного сиропа. ВЭЖХ [колонка: 100x4,6 мм с ионным обменом Каши Нуй!ороге ЗАХ; буфер А: 10 мМ NН4Н2РО4 в 10% МеОН/Н2О (рН 5,5); буфер В: 125 мМ NН4Н2РО4 в 10% МеОН/Н2О (рН 5,5); скорость потока: 1,0 мл/мин; градиент: увеличение буфера В от 0 в начале до 100% через 25 мин]; время удерживания: 11,9 мин. МС (РАВ) т/е 464 ([М-Н]+).
- 40 008609 цис-(±)-Карбоциклический 2',3'-дидегидро-2',3'-дидезокси-цитидин-5'-фосфат (715).
Аналогично способу получения соединения 714 целевое соединение 715 получают из соединения 713. Время удерживания ВЭЖХ (в условиях, аналогичных вышеописанным): 12,1 мин. МС (РАВ) т/е 446 ([М-Н]+).
Ингибирующее действие (±)-карбокси-И4РС-трифосфата на обратную транскриптазу ВИЧ-1
Анализ роста цепи выполняли с использованием гомополимерного матричного праймера г(1)п · (бС)12-18 (Рйагтас1а, Р1кса1а^ау, ΝΤ) и обратной транскриптазы р66/51 гетеродимера ВИЧ-1 (ВТ, Вю1ес11по1оду 6епега1, Кейоνаΐ, 1кгае1). Стандартная реакционная смесь (100 мкл) содержала 100 мМ трисгидрохлорида (рН 8,0), 50 мМ КС1, 2 мМ МдС12, 0,05 ед./мл г(1)п-(бС)12-18, 5 мМ ИТТ, 100 мкг/мл бычьего сывороточного альбумина и 1 мкМ 3Н-бСТР (23 С1/ммоль). 3ТСТР (0,001-50 мкМ) использовали в качестве положительного эталона. Соединения инкубировали в течение 1 ч при 37°С в реакционной смеси с 1 единицей обратной транскриптазы (КТ) ВИЧ-1. Реакцию останавливали, добавляя равный объем холодной смеси 10% ТСА/0,05% пирофосфата натрия, и инкубировали в течение 30 мин при 4°С. Осажденные нуклеиновые кислоты собирали на фильтровальной бумаге из стекловолокна, используя ручной харвестер фирмы Раскагб (Мепбеп, СТ). Поглощение меченых радиоактивных изотопов, выраженное в количестве отсчетов/минуту (срт), определяли в счетчике прямого бета-излучения Раскагб 9600.
Анти-ВИЧ активность
В соответствии с одним вариантом осуществления изобретения описываемые соединения и их фармацевтически приемлемые производные, соли или фармацевтически приемлемые составы, содержащие эти соединения, предназначены для профилактики и лечения ВИЧ-инфекций и других родственных заболеваний, таких как СПИД-ассоциированный комплекс (АКС), хроническая генерализованная лимфаденопатия (РСЬ), СПИД-ассоциированные неврологические заболевания, положительная реакция на антитела против ВИЧ и ВИЧ-положительная реакция, саркома Капоши, тромбоцитопенический акроангиотромбоз и условно-патогенные инфекции. Кроме того, эти соединения или препараты можно использовать в профилактических целях для предотвращения или замедления развития клинических заболеваний у субъектов с положительной реакцией на антитела против ВИЧ или антиген вируса ВИЧ либо у ВИЧинфицированных субъектов.
Способность нуклеозидов ингибировать ВИЧ можно измерить разными экспериментальными методами. С помощью одного такого метода, подробно описанного ниже, можно измерить ингибирование репликации вируса в стимулируемых фитогемагглютинином (РНА) периферических кровяных мононуклеарных клетках (РВМ) человека, инфицированных ВИЧ-1 (штамм ЬАУ). Количество продуцированного вируса определяют, измеряя количество кодированного вирусом фермента обратной транскриптазы. Количество продуцированного фермента пропорционально количеству продуцированного вируса.
Анализы на антивирусную активность и цитотоксичность.
Анти-ВИЧ-1 активность указанных соединений определяли в периферических кровяных мононуклеарных клетках (РВМ) человека в соответствии с ранее описанными методами (8с1ипахк К.Р.; МсМШап, А.; Саппоп, Ό.; Ма1Ык, К.; Ь1оуб, К.М. 1г.; Реск, А.; 8оттабокк1, Т-Р.; 81. С1аи, М.; V^Ιкоη. 1.; Ригтап, Р.А.; Рат1ег, 6.; С1о1, ν.-В.; Ыойа, Э.С. АпйткгоЬ. Адеп1к СйетоШег. 1992, 36, 2423; 8с1ипахк К.Р.; 8оттабокк1, Τ-Р.; 8аа1тапп, У.; Саппоп, Ό.; Х1е, М.-Υ.; НаЛ, 6.; 8тйй, 6.; На1п, Е. АпйткгоЬ. Адеп1к СйетоЛег. 1990, 34, 1061). Исходные растворы (20-40 мМ) указанных соединений получали в стерильном ДМСО и разводили до требуемой концентрации в полной среде. Исходные растворы 3'азидо-3'-дезокситимидина (А2Т) получали в воде. Клетки инфицировали прототипом ВИЧ-1ЬА1 при множественности заражения 0,01. Количественное определение вируса, полученного из клеточного супернатанта, производили на 6-й день после инфицирования, по анализу обратной транскриптазы с использованием поли(гА)полиго(бТ)12-18 в качестве матричного праймера. ДМСО, присутствующий в разведенном растворе (<0,1%), не должен влиять на выход вируса. Токсичность соединений можно определить в клетках РВМ, СЕМ и Уего человека. ЕС50 антивирусной активности и 1С50 цитотоксичности определяют на основании кривой концентрация - ответ по методу средней эффективности, описанному С1ои и Та1а1ау (Абν. Епхуте Кеди1. 1984, 22,27).
Трехдневные стимулируемые фитогемагглютинином клетки РВМ (106 клеток/мл), взятые у здоровых доноров с отрицательной серологической реакцией, инфицировали ВИЧ-1 (штамм ЬАУ) в концентрации, которая примерно в 100 раз превышает 50% инфицирующую дозу культуры ткани (Т1СИ 50) на 1 мл, и культивировали в присутствии и отсутствии антивирусных соединений с разной концентрацией.
Примерно через 1 ч после инфицирования в колбы (5 мл; конечный объем 10 мл) вводили среду с испытуемым соединением (в 2 раза больше конечной концентрации в среде) или без соединения. А7Т использовали в качестве положительного эталона.
Клетки подвергали воздействию вируса (примерно 2х105 распадов в мин/мл по результатам анализа обратной транскриптазы) и помещали в инкубатор с СО2. ВИЧ-1 (штамм ЬАУ) предоставлен Центром контроля за болезнями, Атланта, шт. Джоржия. Для культивирования клеток РВМ, сбора вируса и определения активности обратной транскриптазы использовали методики, описанные МсИоида1 е! а1. (1. 1ттип. МеЛ., 76, 171-183, 1985) и 8р1га е! а1. (1. С1т. МеЛ., 25, 97-99, 1987), за исключением того, что в
- 41 008609 среду не вводили фунгизон (см. 8^ηΗζί, е1 а1., Αηί^т^с^οЬ. Адейз Сйетοΐйе^., 32, 1784-1787 (1988); там же, 34:1061-1067 (1990)).
На 6-й день клетки и супернатант переносили в 15-мл пробирку и центрифугировали со скоростью около 900 д в течение 10 мин. 5 мл супернатанта удаляли, и вирус концентрировали центрифугированием со скоростью 40000 об./мин в течение 30 мин (ротор Весктаη 70.1 Т1). Солюбилизованный вирусный осадок обрабатывали с целью определения уровней обратной транскриптазы. Результаты выражены в виде числа распадов в мин/мл отобранного супернатанта. Вирус из супернатанта меньшего объема (1 мл) можно также концентрировать центрифугированием до солюбилизации и определения уровней обратной транскриптазы.
Среднюю эффективную концентрацию (ЕС50) определяли по методу средней эффективности (АпЦт1сгоЬ. Адейз Сйетοΐйе^., 30, 491-498 (1986)). Коротко этот метод можно описать следующим образом: строят график процентного ингибирования вируса, определенного на основании измерений обратной транскриптазы, в зависимости от микромолярной концентрации соединения. ЕС50 означает концентрацию соединения, при которой достигается 50% подавление роста вирусов.
Стимулированные митогеном неинфицированные клетки РВМ человека (3,8х105 клеток/мл) можно культивировать в присутствии и отсутствии лекарственного средства в тех же условиях, которые использовали для вышеописанного анализа на антивирусную активность. Подсчет клеток производили через 6 дней в гемацитометре и по методу исключения трипана голубого, описанному 8Ηιίηηζί е1 а1., Αηΐ^т^с^οЬ1а1 Адейз аай Сйетοΐйе^аρу, 22(3), 499 (1982). 1С50 означает концентрацию соединения, которая обеспечивает 50% подавление роста нормальных клеток.
В табл. 7 приведены данные анти-ВИЧ активности выбранных соединений. Результаты этого анализа показывают, что (±)-карбоциклический-Э4РС-ТР (2',3'-ненасыщенный-5-фторцитидин) имеет ЕС50, равную 0,40 мкМ, и (+)-карбоциклический-Э4С-ТР (2',3'-ненасыщенный цитидин) имеет ЕС50, равную 0,38 мкМ.
Активность против гепатита В
Способность активных соединений подавлять рост вируса гепатита в культурах клеток 2.2.15 (клетки НерС2, трансформированные вирионом гепатита) можно определить так, как это подробно описано ниже.
В научной литературе даны краткое изложение и описание анализа для определения антивирусного действия в культуральной системе и анализа ДНК вируса гепатита В (НВУ) (КюгЬа аай МИшаи 1991, АйгуиШ Кез., 15:217). Антивирусную активность оптимально оценивают в двух отдельных пассажах клеток. Все лунки во всех планшетах засевают с одинаковой плотностью и в одно и то же время.
Из-за существующих различий между уровнями внутриклеточной и внеклеточной ДНК вируса гепатита В (НВУ) только величины подавления роста, превышающие в 3,5 раза (для ДНК вириона НВУ) или в 3,0 раза (для промежуточных продуктов репликации ДНК НВУ) средние уровни для этих форм ДНК НВУ в необработанных клетках, считаются статистически значимыми (Р<0,05). Уровни интегрированной ДНК НВУ в каждом клеточном препарате ДНК (которые остаются постоянными в расчете на клетку в этих экспериментах) используют для вычисления уровней внутриклеточных форм ДНК НВУ, в результате чего гарантируется сравнение равных количеств клеточной ДНК в разных образцах.
Типичные значения для внеклеточной ДНК вириона НВУ в необработанных клетках составляют от 50 до 150 пг/мл культуральной среды (среднее значение равно примерно 76 пг/мл). Промежуточные продукты репликации внутриклеточной ДНК НВУ в необработанных клетках составляют от 50 до 100 пг/мкг клеточной ДНК (среднее значение равно примерно 74 пг/мкг клеточной ДНК). Как правило, снижение уровней внутриклеточной ДНК НВУ под воздействием антивирусных соединений являются менее выраженным и происходит более медленно, чем снижение уровней ДНК вириона НВУ (КюгЬа аай МИтая 1991, АйМга1 Кез., 15:217).
Анализы гибридизации, выполненные для этих экспериментов, позволили получить значения эквивалентности, равные примерно 1,0 пг внутриклеточной ДНК НВУ на 2-3 геномные копии в клетке и 1,0 пг/мл внеклеточной ДНК НВУ на 3х 105 вирусных частиц/мл.
Анализы токсичности выполняли для определения влияния антивирусной активности на жизнеспособность клетки. С этой целью использовали метод измерения поглощения нейтрального красного красителя, стандартный и широко используемый анализ определения жизнеспособности клеток в разных системах вирус-хозяин, включая Н8У и ВИЧ. Анализы токсичности выполняли на 96-луночных плоскодонных планшетах для культивирования тканей. Клетки, используемые для анализов токсичности, культивировали и обрабатывали испытуемыми соединениями аналогично схеме, описанной ниже для оценки антивирусного действия. Все соединения испытывали в 4 концентрациях и в трех культурах (лунки А, В и С). Относительный уровень токсичности определяли по поглощению нейтрального красного красителя. Поглощение красителя внутри клеток при 510 нм (Азш) используют для выполнения количественного анализа. Полученные значения выражены в процентах средних значений Азш для 9 разных культур необработанных клеток, находившихся на таком же 96-луночном планшете, что и испытуемые соединения.
- 42 008609
Активность против гепатита С
Активность соединений против гепатита С можно определить на основании ингибирования полимеразы вируса гепатита С (НСУ), ингибирования других ферментов, необходимых для цикла репликации, или с помощью других известных методик. В научной литературе приведены описания ряда тестов, предназначенных для определения этой активности.
В заявке \¥О 97/12033, поданной 27 сентября 1996 г. Эмори университетом, список С, авторы изобретения С. Надейот и А. Кешо1йи8, с приоритетом по заявке υ.8.8.Ν. 60/004383, поданной в сентябре 1995 г., рассмотрен анализ полимеразы НСУ, который можно использовать для определения активности описываемых здесь соединений. По этой заявке и изобретению выдана лицензия фирме Тпапд1е Ркагтасеи!1са18, 1пс., Эигкат. №ог1к Сагокпа. Другие анализы полимеразы НСУ описаны Ваг11ю1оте1.^. е! а1., Нера!1!18 С νπυ8 (НСУ) К№А ро1утега8е а88ау И8шд с1опей НСУ поп-81гис1ига1 рго!ет8; АпЦ\зга1 Ткегару 1996:1 (8ирр 4) 18-24.
Подавление аномальной пролиферации клеток
В соответствии с альтернативным вариантом осуществления изобретения указанные соединения используют для подавления аномальной пролиферации клеток. Активность соединения можно определить обычным способом, в частности способом, применяемым Национальным институтом рака, или любым другим известным тестом, например тестом, приведенным в заявке \¥О 96/07413.
Уровень противораковой активности можно легко определить, анализируя соединение в соответствии с нижеследующим способом, используя клетки СЕМ или другой линии опухолевых клеток. Клетки СЕМ являются клетками лимфомы человека (линию Т-лимфобластоидных клеток можно приобрести в АТСС, КоскуШе, МО). Токсичность соединения в отношении клеток СЕМ позволяет получить полезную информацию, касающуюся противоопухолевой активности соединения. Токсичность измеряют в виде 1С50 (микромолярная концентрация). 1С50 означает такую концентрацию испытуемого соединения, которая подавляет рост 50% опухолевых клеток в культуре. Чем ниже 1С50, тем выше активность соединения в качестве противоопухолевого средства. Как правило, 2'-фторнуклеозид оказывает противоопухолевое действие, и его можно использовать для подавления аномальной пролиферации клеток, если он обладает токсичностью в отношении СЕМ или другой линии иммортализованных опухолевых клеток менее 50 мкМ, более предпочтительно менее примерно 10 мкМ и особенно предпочтительно менее 1 мкМ. По три образца лекарственных растворов, включая циклогексимид, используемый в качестве положительного эталона, анализируют на планшетах в 50 мкл питательной среды с концентрацией, в 2 раза превышающей конечную, и уравновешивают при температуре 37°С в инкубаторе с 5% СО2. Клетки логарифмической фазы добавляют в 50 мкл питательной среды до конечной концентрации 2,5х103 (СЕМ и 8КМЕЬ-28), 5х103 (ММА№, МПА-МВ-4358, 8КМЕ8-1, Ш-145, Ь№Сар) или 1х104 (РС-3, МСЕ-7) клеток/лунку и инкубируют в течение 3 дней (Όυ-145, РС-3, ММА№), 4 дней (МСЕ-7, 8К-МЕБ-28, СЕМ) или 5 дней (8К-МЕ8-1, МОА-МВ-4358, Ь№СаР) при температуре 37°С в атмосфере воздуха с 5% СО2. В контрольные лунки помещают только среду (контрольный опыт) и клетки вместе со средой без лекарственного средства. После окончания периода роста в каждую лунку добавляют 15 мкл раствора красителя из набора Се11 Т1!ег 96 (Рготеда, Май18оп, XVI) и планшеты инкубируют в течение 8 ч при 37°С в инкубаторе с 5% СО2. Затем в каждую лунку добавляют основной раствор из набора Се11 Т1!ег 96 и инкубируют 4-8 ч в инкубаторе. Поглощение регистрируют при 570 нм, выполняя контрольное испытание в отношении лунок, содержащих только среду, при помощи спектрофотометра для прочтения планшетов Вю!еск Вюкшекс8 (Вю!ек, XV^ηоо8к^. УТ). Высчитывают среднее процентное значение подавления роста по сравнению с необработанным контрольным образом. 1С50/ 1Сд0, наклон кривой и значение г высчитывают по методу Скои и Та1а1ау. Скои Т-С, Та1а1ау Р. ОиапШай'е апа1у818 о£ йо8е-е££ес! ге1акоп8к1р8: Тке сотЬшей е££ес!8 о£ ти1!1р1е йгид8 ог епζуте 1пк1Ьйог8. Айу Епζуте Кеди1. 1984, 22:27-55.
Активное соединение можно вводить специально для подавления аномальной пролиферации клеток и, в частности, гиперпролиферации клеток. Примерами аномальной пролиферации клеток являются, но не ограничиваются ими, доброкачественные опухоли, в том числе папиллома, аденома, фиброма, хондрома, остеома, липома, гемангиома, лимфангиома, лейомиома, рабдомиома, менингиома, неврома, ганглионеврома, невус, феохромоцитома, невринома, фиброаденома, тератома, хорионаденома, гранулосатека, опухоль Бреннера, арренобластома, адренокортикоидная аденома яичника, мезенхима зародышевых тяжей, интерстициальный эндокриноцит и тимома, а также пролиферация клеток гладких мышц при образовании тромбов в кровеносных сосудах; злокачественные опухоли (рак), в том числе карцинома, рак почки, аденокарцинома предстательной железы, рак мочевого пузыря и аденокарцинома, фибросаркома, хондросаркома, остеосаркома, липосаркома, гемангиосаркома, лимфангиосаркома, лейомиосаркома, рабдомиосаркома, миелоцитарный лейкоз, эритролейкоз, множественная миелома, глиома, менингиальная саркома, тимома, листовидная цистосаркома, аденомиосаркома, тератома, хориокарцинома, кожная Т-клеточная лимфома (СТСЬ), первичные кожные опухоли (например, базально-клеточный рак, плоскоклеточный рак, меланома и болезнь Бовена), рак молочной железы и другие опухоли, инфильтрующие кожу, саркома Капоши, а также предраковые и раковые заболевания слизистой оболочки, включая заболевания ротовой полости, мочевого пузыря и прямой кишки; предраковые образования, микоз,
- 43 008609 псориаз, дерматомиозит, ревматоидный артрит, вирусные заболевания (например, бородавки, простой герпес и кондилома), контагиозный моллюск, предраковые и раковые заболевания женских половых путей (шейка матки, влагалище и наружные женские половые органы). Эти соединения можно также использовать для прерывания беременности.
В соответствии с этим вариантом осуществления изобретения активное соединение или его фармацевтически приемлемую соль вводят в эффективном количестве для уменьшения гиперпролиферации клеток-мишеней. Активное соединение может быть модифицировано с введением в него целенаправленного фрагмента, который концентрирует соединение на активном сайте. Целенаправленные фрагменты могут включать антитело или фрагмент антитела, который связывается с белком на поверхности клеткимишени, включая, но не ограничиваясь ими, рецептор эпидермального фактора роста (ЕСЕВ), семейство с-ЕкЬ-2 рецепторов и эндотелиальный фактор роста сосудов (УЕСЕ).
Фармацевтические композиции
Субъектам, страдающим вышеуказанными заболеваниями, можно вводить эффективное количество активного соединения, его фармацевтически приемлемого производного или соли в присутствии фармацевтически приемлемого носителя или разбавителя. Активные вещества можно вводить любым известным способом, например перорально, парентерально, внутривенно, внутрикожно, подкожно или местно, в жидкой или твердой форме. Предпочтительная доза соединения для всех вышеуказанных заболеваний составляет от около 1 до 50, предпочтительно 1-20, обычно от 0,1 до около 100 мг/кг массы тела реципиента в день. Эффективную дозу фармацевтически приемлемых производных можно высчитать с учетом массы исходного нуклеозида, предназначенного для введения. Если производное соединение само обладает необходимой активностью, эффективную дозу можно определить, как это показано выше, исходя из массы производного, или другими способами, известными специалистам в этой области.
Соединение обычно вводят в любой приемлемой лекарственной форме, которая содержит от 7 до 3000, предпочтительно от 70 до 1400 мг активного ингредиента в стандартной лекарственной форме. Доза для перорального введения, равная 50-1000 мг, обычно бывает достаточной.
Активный ингредиент необходимо вводить с достижением максимальных концентраций активного соединения в плазме от около 0,2 до 70 пМ, предпочтительно от около 1,0 до 10 мкМ. Такую дозу обычно вводят внутривенной инъекцией 0,1-5% раствора активного ингредиента, необязательно в физиологическом растворе, или в виде болюса активного ингредиента.
Концентрация активного соединения в лекарственной композиции зависит от скоростей поглощения, инактивации и выведения лекарственного средства, а также от других факторов, известных специалистам в этой области. Следует отметить, что величина дозы может также изменяться в зависимости от серьезности заболевания. Необходимо понять, что для любого конкретного пациента схема приема лекарственного средства должна изменяться с течением времени в зависимости от потребностей пациента и профессионального мнения специалиста, следящего за введением композиций, и что вышеуказанные концентрации приведены только в качестве примеров и не ограничивают объем настоящего изобретения или способы введения заявленной композиции. Активный ингредиент можно вводить в виде однократной дозы или его можно разделить на несколько меньших доз, которые вводят через разные интервалы времени.
Предпочтительным способом введения активного соединения является пероральный. Композиции для перорального введения обычно содержат инертный разбавитель или усваиваемый носитель. Они могут быть заключены в желатиновые капсулы или спрессованы в таблетки. В случае перорального введения активное соединение может быть соединено с наполнителями и использовано в виде таблеток, лепешек или капсул. В композицию могут быть введены фармацевтически совместимые связывающие агенты и/или адъюванты.
Таблетки, пилюли, капсулы, лепешки и тому подобные формы могут содержать любые из вышеуказанных ингредиентов или соединения подобного характера и связывающее вещество, такое как микрокристаллическая целлюлоза, трагант или желатин; наполнитель, такой как крахмал или лактоза; дезинтегрирующее вещество, такое как альгиновая кислота, примогель или кукурузный крахмал; смазывающее вещество, такое как стеарат магния или стеротес; скользящее вещество, такое как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как мята, метилсалицилат или апельсиновый экстракт. Лекарственная форма в виде капсулы содержит помимо вещества вышеуказанного типа жидкий носитель, такой как нелетучее жирное масло. Кроме того, лекарственные формы могут содержать разные другие вещества, модифицирующие физическую форму лекарственной формы, например покрытия из сахара, шеллака или другие энтеросолюбильные оболочки.
Это соединение можно вводить в качестве компонента эликсира, суспензии, сиропа, вафлей, жевательной резинки и т.п. Сироп может содержать помимо активных соединений сахарозу в качестве подсластителя и определенные консерванты, красители, пигменты и ароматизаторы.
Это соединение, его фармацевтически приемлемое производное или соли можно также смешивать с другими активными веществами, которые не ухудшают требуемое действие, или с веществами, которые дополняют требуемое действие, такими как антибиотики, противогрибковые средства, противовоспалительные средства или другие антивирусные средства, в том числе другие нуклеозидные соединения. Рас
- 44 008609 творы или суспензии, используемые для парентерального, внутрикожного, подкожного или местного применения, могут содержать следующие компоненты: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, физиологический раствор, нелетучие масла, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители; антибактериальные средства, такие как бензиловый спирт или метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или бисульфит натрия; хелатообразующие средства, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота; буферы, такие как ацетаты, цитраты или фосфаты; и средства, регулирующие тонус, такие как хлорид натрия или декстроза. Препарат для парентерального введения может находиться в ампулах, одноразовых шприцах или флаконах из стекла или пластика, содержащих несколько доз.
В случае внутривенного введения предпочтительными носителями являются физиологический раствор или физиологический раствор с фосфатным буфером (РВ8).
В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления изобретения активные соединения смешивают с носителями, защищающими соединение от быстрого выведения из организма и получают препарат с регулируемым высвобождением, в частности имплантаты и микроинкапсулированные системы доставки лекарственного средства. Можно использовать биологически разлагаемые и биологически совместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимер молочной кислоты. Способы получения таких препаратов известны специалистам в этой области. Необходимые вещества можно также приобрести в корпорации Аба Согрогабоп.
Липосомные суспензии (включая липосомы, воздействующие на инфицированные клетки моноклональными антителами против вирусных антигенов) также являются предпочтительными в качестве фармацевтически приемлемых носителей. Эти препараты можно получить в соответствии со способами, известными специалистам в этой области, например, описанными в патенте США № 4522811 (который полностью включен в это описание изобретения в качестве ссылки). Липосомные препараты можно получить, растворяя один или несколько соответствующих липидов (таких как стеароилфосфатидилэтаноламин, стеароилфосфатидилхолин, арахадоилфосфатидилхолин и холестерин) в неорганическом растворителе, который затем выпаривают, в результате чего получают тонкую пленку высушенного липида на поверхности сосуда. Затем в этот сосуд вводят водный раствор активного соединения, его монофосфата, дифосфата и/или трифосфата. Сосуд встряхивают рукой, чтобы отслоить липидное вещество от боковых стенок сосуда и диспергировать липидные агрегаты, в результате чего образуется липосомная суспензия.
Это изобретение описано со ссылкой на предпочтительные варианты его осуществления. Специалистам в этой области должны быть очевидны варианты и модификации изобретения из приведенного выше подробного описания изобретения.

Claims (26)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Применение З^фт-орХ-О-нуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения инфекционного гепатита В у человека, в котором 2'-фтор-β-^-нуклеозид имеет формулу в которой Ваке обозначает пуриновое основание;
    В1 обозначает ОН, Н, 0В3, N3, СТИ, галоген, СЕ3, С1-С4алкил, амино, С1-С4алкиламино, ди-С1С4алкиламино;
    В2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат, ацил или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίπ νί\Ό способна дать соединение, в котором В2 обозначает Н или фосфат; эфир сульфокислоты, включая С1-С10алкилсульфонил или С1С10арилалкилсульфонил, в том числе метансульфонил; бензил, в котором фенильная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, включающими гидроксил, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфокислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат или фосфонат; и
    В3 обозначает ацил, С1-С10алкил, фосфат или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ш νί\Ό способна отщепляться с образованием исходного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, необязательно в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.
  2. 2. Применение 2'-фторнуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для
    - 45 008609 лечения инфекционного гепатита С у человека, в котором 2'-фторнуклеозид имеет формулу в которой Ваке обозначает пуриновое или пиримидиновое основание;
    К’ обозначает ОН, Н, ОК3, Ν3, СЦ, галоген, СЕ3, С’-С4алкил, амино, С’-С4алкиламино, ди-С’С4алкиламино или алкокси;
    К2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат, ацил или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίη νίνο способна дать соединение, в котором К2 обозначает Н или фосфат; эфир сульфокислоты, включая С’-С10алкилсульфонил или С’С10арилалкилсульфонил, в том числе метансульфонил; бензил, в котором фенильная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, включающими гидроксил, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфокислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат или фосфонат; и
    К3 обозначает ацил, С’-С10алкил, фосфат или другую фармацевтически приемлемую отщепляемую группу, которая при введении ίη νίνο способна отщепляться с образованием исходного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, необязательно в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.
  3. 3. Применение по п.1 или 2, где К2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат или ацил.
  4. 4. Применение по п.1 или 2, где К’ обозначает Н, ОН, ОК3, С’-С4алкил или галоген.
  5. 5. Применение по пп.1-4, где К3 обозначает ацил.
  6. 6. Применение по пп.1-4, где К2 обозначает Н, монофосфат, дифосфат, трифосфат или ацил; К’ обозначает Н, ОН, С’-С4алкил или галоген и К3 обозначает ацил.
  7. 7. Применение по п.2, где основание обозначает пуриновое основание.
  8. 8. Применение по п.2, где основание обозначает пиримидиновое основание.
  9. 9. Применение по п.1, где основание является пуриновым основанием, выбираемым из группы, состоящей из гуанина, аденина, гипоксантина, 2,6-диаминопурина и 6-хлорпурина.
  10. 10. Применение по п.1 или 2, где К’ и К2 обозначают водород.
  11. 11. Применение по п.1 или 2, где К’ обозначает ОН или ОК3.
  12. 12. Применение по п.1 или 2, где К’ обозначает ОН.
  13. 13. Применение по п.1 или 2, где К1 обозначает Н.
  14. 14. Применение по п.1 или 2, где К’ обозначает галоген.
  15. 15. Применение по п.1 или 2, где К’ обозначает С’-С4алкил или СЕ3.
  16. 16. Применение по п.1 или 2, где К2 обозначает ацил.
  17. 17. Применение по п.1 или 2, где основание обозначает пуриновое основание, выбираемое из аденина, Ц6-алкилпуринов, Ц6-ацилпуринов, где ацил является С(О) (алкилом, арилом, алкиларилом или арилалкилом), Ц6-бензилпурина, Ν’-галогенпурина, Ц6-винилпурина, Ν’-ацетиленпурина, Ν6ацилпурина, Ц6-гидроксиалкилпурина, Ц6-тиоалкилпурина, Ц2-алкилпуринов, Ц2-алкил-6-тиопуринов, гуанина, гипоксантина, 2,6-диаминопурина, 2-хлор-2-аминопурина, инозина или 6-хлорпурина.
  18. 18. Применение по п.2, где основание обозначает пиримидиновое основание, выбираемое из тимина, цитозина, 5-фторцитозина, 5-метилцитозина, 6-азапиримидина, в том числе 6-азацитозина, 2- и/или 4меркаптопиримидина, урацила, 5-галогенурацила, в том числе 5-фторурацила, С5-алкилпиримидинов, С5бензилпиримидинов, С5-галогенпиримидинов, С5-винилпиримидина, С5-ацетиленпиримидина, С5ацилпиримидина, С5-гидроксиалкилпурина, С5-амидопиримидина, С5-цианопиримидина, С5нитропиримидина, С5-аминопиримидина, 5-азацитидинила, 5-азаурацилила, триазолопиридинила, имидазолопиридинила, пирролопиримидинила или пиразолопиримидинила.
  19. 19. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство является подходящим для орального введения.
  20. 20. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство является подходящим для парентерального введения.
  21. 21. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство является подходящим для внутривенного введения.
  22. 22. Применение 2'-фтор-3-Э-пуринового нуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения инфекционного гепатита В.
  23. 23. Применение 2'-фтор-3-Э-пуринового или пиримидинового нуклеозида для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения инфекционного гепатита С.
  24. 24. Применение по п.22 или 23, где лекарственное средство является подходящим для орального
    - 46 008609 введения.
  25. 25. Применение по п.22 или 23, где лекарственное средство является подходящим для парентерального введения.
  26. 26. Применение по п.22 или 23, где лекарственное средство является подходящим для внутривенного введения.
EA200000870A 1998-02-25 1999-02-25 2'-фторнуклеозиды EA008609B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7589398P 1998-02-25 1998-02-25
US8056998P 1998-04-03 1998-04-03
PCT/US1999/004051 WO1999043691A1 (en) 1998-02-25 1999-02-25 2'-fluoronucleosides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200000870A1 EA200000870A1 (ru) 2001-08-27
EA008609B1 true EA008609B1 (ru) 2007-06-29

Family

ID=26757404

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200700564A EA200700564A1 (ru) 1998-02-25 1999-02-25 2`-фторнуклеозиды
EA200000870A EA008609B1 (ru) 1998-02-25 1999-02-25 2'-фторнуклеозиды

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200700564A EA200700564A1 (ru) 1998-02-25 1999-02-25 2`-фторнуклеозиды

Country Status (17)

Country Link
US (7) US6348587B1 (ru)
EP (3) EP2392580A1 (ru)
JP (2) JP2002504558A (ru)
KR (3) KR100954390B1 (ru)
CN (1) CN100349913C (ru)
AT (1) ATE344271T1 (ru)
AU (2) AU2787199A (ru)
BR (1) BR9908270A (ru)
CA (1) CA2322008C (ru)
DE (1) DE69933860T2 (ru)
DK (1) DK1058686T3 (ru)
EA (2) EA200700564A1 (ru)
ES (1) ES2276515T3 (ru)
IL (3) IL138037A0 (ru)
MX (1) MXPA00008348A (ru)
PT (1) PT1058686E (ru)
WO (1) WO1999043691A1 (ru)

Families Citing this family (199)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5703058A (en) * 1995-01-27 1997-12-30 Emory University Compositions containing 5-fluoro-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxycytidine or a mono-, di-, or triphosphate thereof and a second antiviral agent
EP2392580A1 (en) 1998-02-25 2011-12-07 Emory University 2'-fluoronucleosides
SK11922002A3 (sk) 2000-02-18 2003-06-03 Shire Biochem Inc. Použitie analógov nukleozidov na liečenie alebo prevenciu infekcií spôsobených flavivírusom
AU2001259068A1 (en) 2000-04-13 2001-10-30 Pharmasset, Ltd. 3'-or 2'-hydroxymethyl substituted nucleoside derivatives for treatment of hepatitis virus infections
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
CN1315862C (zh) * 2000-05-26 2007-05-16 艾登尼科斯（开曼）有限公司 处理黄病毒和瘟病毒的方法和组合物
FR2810319A1 (fr) * 2000-06-15 2001-12-21 Ppg Sipsy Composes alpha-phenylsulfinyl-alpha-halogeno-butyrolactone et halogeno-2-buten-2-olide-4 utiles pour la preparation de composes halogeno-2-oxymethyl-4-furanone (4h)
US20030008841A1 (en) * 2000-08-30 2003-01-09 Rene Devos Anti-HCV nucleoside derivatives
PT2251015E (pt) * 2000-10-18 2013-04-15 Gilead Pharmasset Llc Nucleosídeos modificados para o tratamento de infeções virais e de proliferação celular anormal
DZ3487A1 (fr) 2001-01-22 2002-07-25 Merck Sharp & Dohme Derives de nucleoside comme inhibiteurs de l'arn polymerase virale d'arn-dependant
US7105499B2 (en) * 2001-01-22 2006-09-12 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
US8481712B2 (en) 2001-01-22 2013-07-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
AU2002242096A1 (en) 2001-02-06 2002-08-19 The University Of Georgia Research Foundation, Inc. Novel compounds and methods for inhibiting/treating hiv infections and aids related symptoms
CA2439836A1 (en) 2001-03-01 2002-09-12 Pharmasset Ltd. Method for the synthesis of 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydronucleosides
AU2002252183A1 (en) * 2001-03-06 2002-09-19 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of rna viral polymerases
GB0112617D0 (en) 2001-05-23 2001-07-18 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
GB0114286D0 (en) * 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
KR20050059975A (ko) 2001-06-22 2005-06-21 파마셋 인코포레이티드 β-2'- 또는 3'-할로뉴클레오시드
AU2002330154A1 (en) * 2001-09-28 2003-04-07 Centre National De La Recherche Scientifique Methods and compositions for treating hepatitis c virus using 4'-modified nucleosides
US7049303B2 (en) 2001-11-07 2006-05-23 Medical Research Council Inhibition of viruses
BR0214944A (pt) * 2001-12-14 2005-06-07 Pharmasset Ltd Nucleosìdeos de n4-acilcitosina para o tratamento de infecções virais
CN1646534A (zh) * 2002-02-14 2005-07-27 法玛塞特有限公司 修饰的氟化核苷类似物
CN103319554A (zh) 2002-06-28 2013-09-25 埃迪尼克斯医药公司 用于治疗黄病毒感染的修饰的2’和3’-核苷前药
NZ537662A (en) * 2002-06-28 2007-10-26 Idenix Cayman Ltd 2'-C-methyl-3'-O-L-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections
US7608600B2 (en) * 2002-06-28 2009-10-27 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections
PL374781A1 (en) * 2002-06-28 2005-10-31 Idenix (Cayman) Limited 2'-c-methyl-3'-o-l-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections
US20040067877A1 (en) 2002-08-01 2004-04-08 Schinazi Raymond F. 2', 3'-Dideoxynucleoside analogues for the treatment or prevention of Flaviviridae infections
AU2003257157C1 (en) 2002-08-01 2010-03-18 Pharmasset Inc. Compounds with the bicyclo[4.2.1] nonane system for the treatment of Flaviviridae infections
US6884880B2 (en) * 2002-08-21 2005-04-26 Ash Stevens, Inc. Process for the preparation of 9-β-anomeric nucleoside analogs
US7902203B2 (en) * 2002-11-01 2011-03-08 Abbott Laboratories, Inc. Anti-infective agents
PL377342A1 (pl) * 2002-11-15 2006-01-23 Idenix (Cayman) Limited Nukleozydy rozgałęzione w pozycji 2' oraz mutacja Flaviviridae
AU2003300901A1 (en) * 2002-12-12 2004-06-30 Idenix (Cayman) Limited Process for the production of 2'-branched nucleosides
CN100335492C (zh) * 2002-12-23 2007-09-05 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 生产3’－核苷前体药物的方法
JP2006524227A (ja) * 2003-03-28 2006-10-26 ファーマセット，インク． フラビウイルス科ウイルス感染の治療のための化合物
EP1620451A4 (en) * 2003-04-28 2009-02-18 Novartis Ag TO THE MOST EXTENSIVE NUCLEOSIDE SYNTHESIS
CN100503628C (zh) * 2003-05-30 2009-06-24 法莫赛特股份有限公司 修饰的氟化核苷类似物
BRPI0412031A (pt) 2003-06-30 2006-09-19 Idenix Cayman Ltd sìntese de beta-l-2'-deóxi-nucleosìdeos
JP2007501185A (ja) 2003-07-25 2007-01-25 イデニクス（ケイマン）リミテツド Ｃ型肝炎を含むフラビウイルス関連疾患を治療するためのプリンヌクレオシド類似体
WO2005018330A1 (en) * 2003-08-18 2005-03-03 Pharmasset, Inc. Dosing regimen for flaviviridae therapy
ES2355565T3 (es) 2003-08-27 2011-03-29 Biota Scientific Management Pty. Ltd. Nuevos nucleósidos o nucleótidos tricíclos como agentes terapéuticos.
EP1668023A1 (de) * 2003-09-12 2006-06-14 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin B-l-nucleoside und ihre verwendung als pharmazeutische mittel zur behandlung viraler erkrankungen
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
US20050182252A1 (en) 2004-02-13 2005-08-18 Reddy K. R. Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives
US7405220B2 (en) * 2004-06-09 2008-07-29 Hoffmann-La Roche Inc. Pyrazolopyrimidines
KR100839394B1 (ko) * 2004-06-09 2008-06-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 피라졸로 피리미딘
JP5055564B2 (ja) 2004-06-15 2012-10-24 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｒｎａ依存性ｒｎａウイルスポリメラーゼの阻害剤としてのｃ−プリンヌクレオシド類似体
AU2005256963A1 (en) * 2004-06-23 2006-01-05 Centre National De La Recherche Scientifique 5-aza-7-deazapurine derivatives for treating infections with flaviviridae
CN1972696B (zh) 2004-06-24 2010-08-11 默沙东公司 用于治疗rna依赖性rna病毒感染的核苷氨基磷酸芳基酯
CN101023094B (zh) * 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
CA2577526A1 (en) * 2004-08-23 2006-03-02 Joseph Armstrong Martin Antiviral 4'-azido-nucleosides
WO2006031725A2 (en) 2004-09-14 2006-03-23 Pharmasset, Inc. Preparation of 2'­fluoro-2'- alkyl- substituted or other optionally substituted ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
WO2006093801A1 (en) * 2005-02-25 2006-09-08 Abbott Laboratories Thiadiazine derivatives useful as anti-infective agents
US7524831B2 (en) * 2005-03-02 2009-04-28 Schering Corporation Treatments for Flaviviridae virus infection
WO2006094347A1 (en) 2005-03-08 2006-09-14 Biota Scientific Management Pty Ltd. Bicyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
JP4516863B2 (ja) * 2005-03-11 2010-08-04 株式会社ケンウッド 音声合成装置、音声合成方法及びプログラム
CA2606195C (en) 2005-05-02 2015-03-31 Merck And Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
TWI387603B (zh) 2005-07-20 2013-03-01 Merck Sharp & Dohme Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑
WO2007016441A1 (en) 2005-08-01 2007-02-08 Merck & Co., Inc. Macrocyclic peptides as hcv ns3 protease inhibitors
US7705009B2 (en) * 2005-11-22 2010-04-27 Hoffman-La Roche Inc. 4-aminopyrimidine-5-thione derivatives
BRPI0619563A2 (pt) * 2005-12-09 2011-10-04 Pharmasset Inc nucleosìdeos antivirais
DE602006015861D1 (de) 2005-12-21 2010-09-09 Abbott Lab Antivirale verbindungen
ES2395386T3 (es) 2005-12-21 2013-02-12 Abbott Laboratories Compuestos antivirales
EP2345652A1 (en) 2005-12-21 2011-07-20 Abbott Laboratories Antiviral compounds
JP2009521479A (ja) * 2005-12-21 2009-06-04 アボット・ラボラトリーズ 抗ウイルス化合物
CA2634749C (en) * 2005-12-23 2014-08-19 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Process for preparing a synthetic intermediate for preparation of branched nucleosides
KR101237312B1 (ko) * 2006-02-10 2013-03-04 삼진제약주식회사 피리미딘다이온 유도체를 포함하는 ｃ형 간염의 예방 및치료용 약학 조성물
US8895531B2 (en) 2006-03-23 2014-11-25 Rfs Pharma Llc 2′-fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents
WO2010005847A1 (en) * 2008-07-08 2010-01-14 The Regents Of The University Of California Acid-degradable and bioerodible modified polyhydroxylated materials
US9644039B2 (en) 2006-03-24 2017-05-09 The Regents Of The University Of California Acid-degradable and bioerodible modified polyhydroxylated materials
NZ571826A (en) 2006-04-11 2012-01-12 Novartis Ag HCV/HIV inhibitors and their uses
GB0609492D0 (en) 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
GB0612423D0 (en) 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
US7662958B2 (en) * 2006-07-19 2010-02-16 Rolf Wagner Anti-infective agents
US20090298708A1 (en) * 2006-08-23 2009-12-03 Masad Damha J 2'-deoxy-2'-fluoro-beta-d-arabinonucleoside 5'-triphosphates and their use in enzymatic nucleic acid synthesis
KR101057239B1 (ko) 2006-10-10 2011-08-16 에프. 호프만-라 로슈 아게 뉴클레오사이드 리보푸라노실 피리미딘의 제조
AU2007306405A1 (en) * 2006-10-10 2008-04-17 Medivir Ab HCV nucleoside inhibitor
AU2007309488B2 (en) 2006-10-24 2012-10-11 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US8377873B2 (en) 2006-10-24 2013-02-19 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
WO2008051475A2 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
US8377874B2 (en) 2006-10-27 2013-02-19 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
JP5268927B2 (ja) 2006-10-27 2013-08-21 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤
GB0625349D0 (en) 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
WO2008133753A2 (en) * 2006-12-20 2008-11-06 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
GB0625345D0 (en) 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
JP2010513450A (ja) 2006-12-20 2010-04-30 イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー 抗ウイルス性インドール
US7951789B2 (en) 2006-12-28 2011-05-31 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2008085508A2 (en) 2007-01-05 2008-07-17 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
BRPI0808089A2 (pt) 2007-02-28 2014-07-15 Conatus Pharmaceuticals Inc Método para tratar uma doença do fígado, para diminuir um nível elevado de uma enzima do fígado, para inibir uma cascata de sinalização de tnf-alfa e uma cascata de sinalização de alfa-faz, para reduzir um dano ao fígado, para suprimir a apoptose excessiva em uma célula de fígado, e para inibir a replicação do vírus da hepatite c.
CA2679391C (en) * 2007-03-23 2015-02-03 Southern Research Institute Method for treating and preventing arthritis
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
CN100532388C (zh) * 2007-07-16 2009-08-26 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其制备方法及应用
EP2178886A1 (en) 2007-07-17 2010-04-28 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic indole derivatives for the treatment of hepatitis c infections
CN101754974B (zh) 2007-07-19 2016-02-03 Msd意大利有限公司 作为抗病毒剂的大环化合物
WO2009058800A2 (en) * 2007-10-29 2009-05-07 President And Fellows Of Harvard College Synthesis of nucleosides
TW200946541A (en) 2008-03-27 2009-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Solid forms of an anti-HIV phosphoindole compound
CN102014911A (zh) 2008-04-28 2011-04-13 默沙东公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
US20090274686A1 (en) * 2008-05-02 2009-11-05 Yat Sun Or Nucleoside phosphonate derivatives
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
JP2011526893A (ja) 2008-07-02 2011-10-20 イデニク プハルマセウティカルス，インコーポレイテッド ウイルス感染の治療のための化合物、及び医薬組成物
WO2010002877A2 (en) 2008-07-03 2010-01-07 Biota Scientific Management Bycyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
SI2540350T1 (sl) 2008-07-22 2015-01-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Kombinacije makrocikliäśnih kinoksalinske spojine, ki je hcv ns3 proteazni inhibitor z drugimi hcv uäśinkovinami
CN102325783A (zh) 2008-12-23 2012-01-18 法莫赛特股份有限公司 嘌呤核苷的合成
US8551973B2 (en) 2008-12-23 2013-10-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside analogs
WO2010075549A2 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidates
WO2010082050A1 (en) 2009-01-16 2010-07-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic and 7-aminoalkyl-substituted benzoxazocines for treatment of hepatitis c infections
GB0900914D0 (en) 2009-01-20 2009-03-04 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
US8193372B2 (en) 2009-03-04 2012-06-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Phosphothiophene and phosphothiazole HCV polymerase inhibitors
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
JP2012526831A (ja) * 2009-05-12 2012-11-01 サザン リサーチ インスティテュート ２’−フルオロアラビノヌクレオシド及びその使用
CA2761650C (en) 2009-05-13 2015-05-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
EP2459582B1 (en) 2009-07-30 2015-05-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis c virus ns3 protease inhibitors
WO2011014882A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Medtronic, Inc. CONTINUOUS SUBCUTANEOUS ADMINISTRATION OF INTERFERON-α TO HEPATITIS C INFECTED PATIENTS
TW201117812A (en) 2009-08-05 2011-06-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
AU2010317996A1 (en) 2009-11-14 2012-05-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for predicting rapid response to HCV treatment
US8816074B2 (en) * 2009-11-16 2014-08-26 University of Georgia Foundation, Inc. 2′-fluoro-6′-methylene carbocyclic nucleosides and methods of treating viral infections
US9700560B2 (en) 2009-11-16 2017-07-11 University Of Georgia Research Foundation, Inc. 2′-fluoro-6′-methylene carbocyclic nucleosides and methods of treating viral infections
WO2011063076A1 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis c virus with oxoacetamide compounds
EP2507636A1 (en) 2009-12-02 2012-10-10 F. Hoffmann-La Roche AG Biomarkers for predicting sustained response to hcv treatment
CA2784748A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
SI3290428T1 (sl) 2010-03-31 2022-01-31 Gilead Pharmasset Llc Tableta, ki obsega kristalinični (S)-izopropil 2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R) -5-(2,4-diokso-3,4-dihidropirimidin-1(2H)-il)-4-fluoro-3-hidroksi-4- metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi)(fenoksi)fosforil)amino)propanoat
BR112012024661A2 (pt) 2010-04-01 2015-09-15 Centre Nat Rech Scient composto, composição farmacêutica e método de tratamento de um hospedeiro infectado com vírus de hepatite c
US9284188B2 (en) 2010-09-03 2016-03-15 The Regents Of The University Of California Cytosolic delivery of materials with endosome-disrupting colloids
TWI523658B (zh) 2010-09-21 2016-03-01 安塔製藥公司 巨環脯胺酸衍生之ｈｃｖ絲胺酸蛋白酶抑制劑
BR112013008510A2 (pt) 2010-10-08 2016-07-05 Novartis Ag vitamina e formulações de inibidores de sulfamida ns3
AR084044A1 (es) 2010-11-30 2013-04-17 Pharmasset Inc Compuestos 2’-espiro-nucleosidos
WO2012080050A1 (en) 2010-12-14 2012-06-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Solid forms of a phenoxybenzenesulfonyl compound
US9353100B2 (en) 2011-02-10 2016-05-31 Idenix Pharmaceuticals Llc Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating HCV infections
WO2012154321A1 (en) 2011-03-31 2012-11-15 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
EP2697242B1 (en) 2011-04-13 2018-10-03 Merck Sharp & Dohme Corp. 2'-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EA201391519A1 (ru) 2011-04-13 2014-03-31 Мерк Шарп И Доум Корп. 2'-замещенные нуклеозидные производные и способы их применения для лечения вирусных заболеваний
CA2832449A1 (en) 2011-04-13 2012-10-18 Vinay GIRIJAVALLABHAN 2'-cyano substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP2731434A4 (en) 2011-07-13 2014-12-31 Merck Sharp & Dohme 5'-SUBSTITUTED NUCLEOSIDE DERIVATIVES AND METHOD FOR THEIR USE FOR THE TREATMENT OF VIRUS DISEASES
EP2731433A4 (en) 2011-07-13 2014-12-31 Merck Sharp & Dohme 5'-SUBSTITUTED NUCLEOSIDE ANALOGUES AND METHODS OF USE FOR THE TREATMENT OF VIRAL DISEASES
EP2755983B1 (en) 2011-09-12 2017-03-15 Idenix Pharmaceuticals LLC. Substituted carbonyloxymethylphosphoramidate compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
JP2014526474A (ja) 2011-09-12 2014-10-06 アイディニックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ウイルス感染の治療のための化合物および薬学的組成物
HUE036588T2 (hu) 2011-09-16 2018-07-30 Gilead Pharmasset Llc Eljárások HCV kezelésére
EP2768838A1 (en) 2011-10-14 2014-08-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3',5'-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2013070887A1 (en) * 2011-11-10 2013-05-16 Inhibitex, Inc. Substituted purine nucleosides, phosphoramidate and phosphordiamidate derivatives for treatment of viral infections
US9328138B2 (en) 2011-11-15 2016-05-03 Msd Italia S.R.L. HCV NS3 protease inhibitors
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
AU2012345732B2 (en) 2011-11-30 2016-07-14 Emory University Antiviral JAK inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
WO2013106344A1 (en) 2012-01-12 2013-07-18 Ligand Pharmaceuticals, Inc. 2 '-c-methyl nucleosides containing a cyclic phosphate diester of 1, 3-propanediol (2-oxo-[1, 3, 2]-dioxaphosphorinane) at position 5'
US20130217644A1 (en) 2012-02-13 2013-08-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical Compositions of 2'-C-Methyl-Guanosine, 5'-[2[(3-Hydroxy-2,2-Dimethyl-1-Oxopropyl)Thio]Ethyl N-(Phenylmethyl)Phosphoramidate]
MD20140094A2 (ru) 2012-02-14 2015-03-31 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Спиро[2.4]гептаны для лечения инфекций вызванных Flaviviridae
US9109001B2 (en) 2012-05-22 2015-08-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection
WO2013177195A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection
SG11201407674TA (en) 2012-05-22 2014-12-30 Idenix Pharmaceuticals Inc D-amino acid compounds for liver disease
CA2871547C (en) 2012-05-25 2021-05-25 Janssen R&D Ireland Uracyl spirooxetane nucleosides
US9192621B2 (en) 2012-09-27 2015-11-24 Idenix Pharmaceuticals Llc Esters and malonates of SATE prodrugs
EP2900684A2 (en) 2012-09-29 2015-08-05 Novartis AG Cyclic peptides and use as medicines
PE20151318A1 (es) 2012-10-08 2015-10-03 Idenix Pharmaceuticals Inc Analogos de 2'-cloro nucleosido para infeccion por vhc
WO2014063019A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Dinucleotide compounds for hcv infection
EP2909222B1 (en) 2012-10-22 2021-05-26 Idenix Pharmaceuticals LLC 2',4'-bridged nucleosides for hcv infection
WO2014078427A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of rp-nucleoside analog
WO2014078436A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
US9211300B2 (en) 2012-12-19 2015-12-15 Idenix Pharmaceuticals Llc 4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
KR102327888B1 (ko) 2012-12-21 2021-11-17 얀센 바이오파마, 인코퍼레이트. 치환된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 그것의 유사체
UA118256C2 (uk) 2013-01-31 2018-12-26 Гіліад Фармассет Елелсі Комбінований склад двох противірусних сполук
WO2014121417A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014121418A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
WO2014137926A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-deoxy nucleosides for the treatment of hcv
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
US20140271547A1 (en) 2013-03-13 2014-09-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Amino acid phosphoramidate pronucleotides of 2'-cyano, azido and amino nucleosides for the treatment of hcv
RU2534613C2 (ru) 2013-03-22 2014-11-27 Александр Васильевич Иващенко Алкил 2-{ [(2r,3s,5r)-5-(4-амино-2-оксо-2н-пиримидин-1-ил)- -гидрокси-тетрагидро-фуран-2-илметокси]-фенокси-фосфориламино} -пропионаты, нуклеозидные ингибиторы рнк-полимеразы hcv ns5b, способы их получения и применения
US9187515B2 (en) 2013-04-01 2015-11-17 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
WO2014197578A1 (en) 2013-06-05 2014-12-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv
EP3027636B1 (en) 2013-08-01 2022-01-05 Idenix Pharmaceuticals LLC D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
SG11201600919UA (en) 2013-08-27 2016-03-30 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
EP3046924A1 (en) 2013-09-20 2016-07-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
CN105722977A (zh) 2013-10-30 2016-06-29 绿色生活生物技术有限责任公司 用于柑橘绿化枯萎病的发病定量系统和治疗方法
WO2015066370A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine phosphoramidate pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluoro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
EP3074399A1 (en) 2013-11-27 2016-10-05 Idenix Pharmaceuticals LLC 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
US10683321B2 (en) 2013-12-18 2020-06-16 Idenix Pharmaceuticals Llc 4′-or nucleosides for the treatment of HCV
WO2015123352A1 (en) 2014-02-13 2015-08-20 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and their uses
WO2015134561A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
US20170066779A1 (en) 2014-03-05 2017-03-09 Idenix Pharmaceuticals Llc Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
EP3131914B1 (en) 2014-04-16 2023-05-10 Idenix Pharmaceuticals LLC 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
CN106687118A (zh) 2014-07-02 2017-05-17 配体药物公司 前药化合物及其用途
IL302877A (en) 2015-03-06 2023-07-01 Atea Pharmaceuticals Inc Cell-D-2'-deoxy-2'-alpha-fluoro-2'-cell-C-modified-2-different-N6-purine modified nucleotides for the treatment of hepatitis C virus
CN108350016B (zh) * 2015-09-02 2021-07-27 艾伯维公司 抗病毒四氢呋喃衍生物
US10202412B2 (en) 2016-07-08 2019-02-12 Atea Pharmaceuticals, Inc. β-D-2′-deoxy-2′-substituted-4′-substituted-2-substituted-N6-substituted-6-aminopurinenucleotides for the treatment of paramyxovirus and orthomyxovirus infections
US10711029B2 (en) 2016-07-14 2020-07-14 Atea Pharmaceuticals, Inc. Beta-d-2′-deoxy-2′-alpha-fluoro-2′-beta-c-substituted-4′fluoro-n6-substituted-6-amino-2-substituted purine nucleotides for the treatment of hepatitis c virus infection
PT3512863T (pt) 2016-09-07 2022-03-09 Atea Pharmaceuticals Inc Nucleótidos de purina 2'-substituídos-n6-substituídos para tratamento de vírus de rna
AU2017376922B2 (en) 2016-12-15 2022-12-01 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods that modulate phosphorus or enzymes in a companion animal
EP3554255B1 (en) 2016-12-15 2023-07-19 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods that modulate cholesterol in a companion animal
IL288737B (en) 2017-02-01 2022-09-01 Atea Pharmaceuticals Inc Hemisulfate nucleotide salt for treatment of hepatitis c virus
PL3661937T3 (pl) 2017-08-01 2021-12-20 Gilead Sciences, Inc. Formy krystaliczne ((s)-((((2r,5r)-5-(6-amino-9h-puryn-9-ylo)-4-fluoro-2,5-dihydrofuran-2-ylo)oksy)metylo)(fenoksy)fosforylo)-l-alaninianu etylu (gs-9131) do leczenia zakażeń wirusowych
EP3737676B1 (en) 2018-01-09 2024-03-06 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Acetal compounds and therapeutic uses thereof
CN112351799A (zh) 2018-04-10 2021-02-09 阿堤亚制药公司 具有硬化的hcv感染患者的治疗
WO2020045628A1 (ja) * 2018-08-31 2020-03-05 ダイキン工業株式会社 核酸アナログ及び抗ｂ型肝炎ウイルス剤
CN113167802A (zh) 2018-12-04 2021-07-23 百时美施贵宝公司 通过多同位素体反应监测使用样品内校准曲线的分析方法
US10874687B1 (en) 2020-02-27 2020-12-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against COVID-19
WO2022245814A1 (en) * 2021-05-17 2022-11-24 Rome Therapeutics, Inc. Methods of treating medical conditions and inhibiting line1 reverse transcriptase using a substituted 4-fluoro-2,5-dihydrofuranyl phosphonic acid or related compound

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1500645A1 (ru) * 1987-12-18 1989-08-15 Inst Bioorg Chimii 3'-фтор-з'-дезоксирибонуклеозиды, проявляющие цитостатическую активность
RU2043361C1 (ru) * 1989-09-11 1995-09-10 Дзе Веллкам Фаундейшн Лимитед Способ получения производных 2'-дезокси-2'-фторрибонуклеозидов или их фармацевтически приемлемых солей
US5512671A (en) * 1993-02-16 1996-04-30 Wake Forest University Ether lipid-nucleoside covalent conjugates
WO1996022778A1 (en) * 1995-01-27 1996-08-01 Emory University Derivatives of succinamide and their use as metalloproteinase inhibitor
WO1996040164A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Emory University Nucleosides with anti-hepatitis b virus activity
WO1997037993A1 (fr) * 1996-04-09 1997-10-16 Yamasa Corporation DERIVES DE 9-(2-DESOXY-2-FLUORO-4-THIO-β-D-ARABINOFURANOSYL)PURINE

Family Cites Families (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US438395A (en) 1890-10-14 Vania
US3870700A (en) * 1973-05-29 1975-03-11 Miles Lab 2-halogeno-2-deoxy-5-(substituted)uridines
JPS525517B2 (ru) 1973-09-05 1977-02-14
JPS5123512B2 (ru) 1973-09-05 1976-07-17
JPS525518B2 (ru) 1973-10-15 1977-02-14
US4000137A (en) 1975-06-10 1976-12-28 American Home Products Corporation Antitumor derivatives of periodate-oxidized nucleosides
JPS5384981A (en) 1976-09-03 1978-07-26 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Method of producing 11*tetrahydroo22furanyl**55 fluorouracile
US4211773A (en) 1978-10-02 1980-07-08 Sloan Kettering Institute For Cancer Research 5-Substituted 1-(2'-Deoxy-2'-substituted-β-D-arabinofuranosyl)pyrimidine nucleosides
JPS5668674A (en) 1979-11-08 1981-06-09 Shionogi & Co Ltd 5-fluorouracil derivative
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4526988A (en) * 1983-03-10 1985-07-02 Eli Lilly And Company Difluoro antivirals and intermediate therefor
US4625020A (en) 1983-11-18 1986-11-25 Bristol-Myers Company Nucleoside process
US4666892A (en) 1984-03-06 1987-05-19 Sloan-Kettering Memorial Cancer Center Method and composition for hepatitis treatment with pyrimidine nucleoside compounds
JPS61146482A (ja) 1984-12-20 1986-07-04 工業技術院長 異構造異自由度バイラテラル・マスタスレイブ・マニピユレ−タの制御装置
US5223263A (en) 1988-07-07 1993-06-29 Vical, Inc. Liponucleotide-containing liposomes
US5446029A (en) 1986-07-04 1995-08-29 Medivir Ab Anti-retroviral activity of 2',3'-dideoxy-3'-fluoronucleosides
SE8701605D0 (sv) 1987-04-16 1987-04-16 Astra Ab Novel medicinal compounds
DE3715666A1 (de) 1987-05-11 1988-11-24 Kodak Ag Kassettenentlade- und beladegeraet
GB8712115D0 (en) 1987-05-22 1987-06-24 Hoffmann La Roche Pyrimidine derivatives
US5246924A (en) 1987-09-03 1993-09-21 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Method for treating hepatitis B virus infections using 1-(2'-deoxy-2'-fluoro-beta-D-arabinofuranosyl)-5-ethyluracil
IL87646A (en) * 1987-09-03 1994-07-31 Sloan Kettering Inst Cancer Preparation for the treatment of hepatitis virus containing 1 -) 2 '- Deoxy - 2' - Fluoro - Beta - B - D - Arabino - Furanozil (- 5 - Orcil
WO1989002733A1 (en) 1987-09-22 1989-04-06 The Regents Of The University Of California Liposomal nucleoside analogues for treating aids
JPH01100190A (ja) * 1987-10-12 1989-04-18 Asahi Glass Co Ltd ヌクレオシド類
US4908440A (en) 1987-11-12 1990-03-13 Bristol Myers Company 2',3'-dideoxy-2'-fluoroarabinopyrimidine nucleosides
US5047407A (en) 1989-02-08 1991-09-10 Iaf Biochem International, Inc. 2-substituted-5-substituted-1,3-oxathiolanes with antiviral properties
NZ228645A (en) 1988-04-11 1991-09-25 Iaf Biochem Int 1,3-dioxolane derivatives substituted in the 5th position by a purine or pyrimidine radical; treatment of viral infections
US5041449A (en) 1988-04-11 1991-08-20 Iaf Biochem International, Inc. 4-(nucleoside base)-substituted-1,3-dioxolanes useful for treatment of retroviral infections
GB8813148D0 (en) * 1988-06-03 1988-07-06 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
SE8802173D0 (sv) 1988-06-10 1988-06-10 Astra Ab Pyrimidine derivatives
SE8802687D0 (sv) 1988-07-20 1988-07-20 Astra Ab Nucleoside derivatives
US5034518A (en) 1989-05-23 1991-07-23 Southern Research Institute 2-fluoro-9-(2-deoxy-2-fluoro-β-D-arabinofuranosyl) adenine nucleosides
US5194654A (en) 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
US5411947A (en) 1989-06-28 1995-05-02 Vestar, Inc. Method of converting a drug to an orally available form by covalently bonding a lipid to the drug
DD293498A5 (de) 1989-07-20 1991-09-05 Zi Fuer Molekularbiologie Der Adw,De Verfahren zur herstellung eines mittels fuer die behandlung oder prophylaxe von hepatits-infektionen bei mensch und tier
CA2021784A1 (en) * 1989-07-24 1991-01-25 Alan D. Borthwick Cyclopentane derivatives
US5886162A (en) 1989-11-03 1999-03-23 Research Foundation Of State University Of New York Lipophilic diakylaminomethylene prodrug derivatives for the inhibition of replication of viruses
US5463092A (en) 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
US5204466A (en) 1990-02-01 1993-04-20 Emory University Method and compositions for the synthesis of bch-189 and related compounds
GB9007569D0 (en) * 1990-04-04 1990-05-30 Nycomed As Carbo-nucleoside derivatives
US5128458A (en) 1990-04-20 1992-07-07 Southern Research Institute 2',3'-dideoxy-4'-thioribonucleosides as antiviral agents
WO1991016920A1 (en) 1990-05-07 1991-11-14 Vical, Inc. Lipid prodrugs of salicylate and nonsteroidal anti-inflammatory drugs
JPH05507279A (ja) 1990-05-29 1993-10-21 ネクススター・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド グリセロールジ―およびトリホスフェート誘導体の合成
JP3347723B2 (ja) 1990-06-13 2002-11-20 グラツィエル，アーノルド 含リンプロドラッグ
EP0463470A3 (en) 1990-06-22 1992-08-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of a fluorotetrahydrofuranone derivative
US5817799A (en) * 1990-07-23 1998-10-06 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services 2'-Fluorofuranosyl derivatives and methods for preparing 2'-fluoropyrimidine and 2'-fluoropurine nucleosides
US5256641A (en) 1990-11-01 1993-10-26 State Of Oregon Covalent polar lipid-peptide conjugates for immunological targeting
US5543390A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Covalent microparticle-drug conjugates for biological targeting
US5543389A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of The Oregon Health Sciences University, A Non Profit Organization Covalent polar lipid-peptide conjugates for use in salves
US5149794A (en) 1990-11-01 1992-09-22 State Of Oregon Covalent lipid-drug conjugates for drug targeting
IT1246983B (it) 1990-11-13 1994-12-12 Consiglio Nazionale Ricerche L-2'-desossiuridine e composizioni farmaceutiche che le contengono.
IL100965A (en) 1991-02-22 1999-12-31 Univ Emory 2 - Hydroxymethyl - 5 -) 5 - Fluorocytocin - 1 - Eyal (- 1, 3 - Oxathiolane, its resolution and pharmaceuticals containing it
JPH07500573A (ja) 1991-07-12 1995-01-19 ネクススター・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 抗ウィルス性リポヌクレオシド：ｂ型肝炎の治療
US5554728A (en) 1991-07-23 1996-09-10 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Lipid conjugates of therapeutic peptides and protease inhibitors
US5426183A (en) 1992-06-22 1995-06-20 Eli Lilly And Company Catalytic stereoselective glycosylation process for preparing 2'-deoxy-2',2'-difluoronucleosides and 2'-deoxy-2'-fluoronucleosides
CA2130265A1 (en) 1992-12-18 1994-07-07 Edward E. Knaus Dihydropyrimidine nucleosides with antiviral properties
US5458773A (en) * 1993-04-19 1995-10-17 Holland; Herbert W. Bilge oil absorber and solidifier
AU701574B2 (en) 1993-05-12 1999-02-04 Karl Y. Hostetler Acyclovir derivatives for topical use
US5424416A (en) 1993-08-25 1995-06-13 Eli Lilly And Company Process for preparation of 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl-3,5-hydroxy protected-1-alkyl and aryl sulfonates and their use in preparation of 2',2'-difluoro-2'-deoxy nucleosides
US5446045A (en) * 1993-12-20 1995-08-29 Revankar; Ganapathi R. Antiviral guanine analogs
US5587362A (en) 1994-01-28 1996-12-24 Univ. Of Ga Research Foundation L-nucleosides
IL115156A (en) 1994-09-06 2000-07-16 Univ Georgia Pharmaceutical compositions for the treatment of cancer comprising 1-(2-hydroxymethyl-1,3-dioxolan-4-yl) cytosines
US5696277A (en) 1994-11-15 1997-12-09 Karl Y. Hostetler Antiviral prodrugs
US5808040A (en) * 1995-01-30 1998-09-15 Yale University L-nucleosides incorporated into polymeric structure for stabilization of oligonucleotides
GB9505025D0 (en) 1995-03-13 1995-05-03 Medical Res Council Chemical compounds
US5633367A (en) * 1995-03-24 1997-05-27 Eli Lilly And Company Process for the preparation of a 2-substituted 3,3-difluorofuran
GB9517022D0 (en) * 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
EP0859833B1 (en) 1995-09-27 2006-03-01 Emory University Recombinant hepatitis c virus rna replicase
US5856085A (en) * 1995-12-01 1999-01-05 The Penn State Research Foundation Compositions and methods of developing oligonucleotides and oligonucleotide analogs having antiviral activity
GB9602025D0 (en) 1996-02-01 1996-04-03 Amersham Int Plc Nucleoside analogues
US5684143A (en) * 1996-02-21 1997-11-04 Lynx Therapeutics, Inc. Oligo-2'-fluoronucleotide N3'->P5' phosphoramidates
EP0841344B1 (en) * 1996-04-09 2002-09-25 Yamasa Corporation 1-(2-deoxy-2-fluoro-4-thio-beta-d-arabinofuranosyl)cytosines
AU5584698A (en) 1996-10-30 1998-05-22 University Of North Carolina At Chapel Hill, The P2y receptor antagonists
EP2392580A1 (en) 1998-02-25 2011-12-07 Emory University 2'-fluoronucleosides
CN1216893C (zh) 1998-11-05 2005-08-31 法国国家科学研究中心 具有抗乙型肝炎病毒活性的核苷
US6407077B1 (en) * 1998-11-05 2002-06-18 Emory University β-L nucleosides for the treatment of HIV infection
US6232058B1 (en) * 2000-01-11 2001-05-15 Eastman Kodak Company High-speed high quality direct radiographic film
US6348857B1 (en) * 2000-08-31 2002-02-19 Tzu-Lung Hsu Warning device for door lock of car

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1500645A1 (ru) * 1987-12-18 1989-08-15 Inst Bioorg Chimii 3'-фтор-з'-дезоксирибонуклеозиды, проявляющие цитостатическую активность
RU2043361C1 (ru) * 1989-09-11 1995-09-10 Дзе Веллкам Фаундейшн Лимитед Способ получения производных 2'-дезокси-2'-фторрибонуклеозидов или их фармацевтически приемлемых солей
US5512671A (en) * 1993-02-16 1996-04-30 Wake Forest University Ether lipid-nucleoside covalent conjugates
WO1996022778A1 (en) * 1995-01-27 1996-08-01 Emory University Derivatives of succinamide and their use as metalloproteinase inhibitor
WO1996040164A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Emory University Nucleosides with anti-hepatitis b virus activity
WO1997037993A1 (fr) * 1996-04-09 1997-10-16 Yamasa Corporation DERIVES DE 9-(2-DESOXY-2-FLUORO-4-THIO-β-D-ARABINOFURANOSYL)PURINE

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Izobreteniya, FIPS, M., 10.12.1998, 34 (1 ch.), RU 96117323 A (YUNIVERSITI OF DZHORDZHIA RISERCH FAUNDEYSHN, INK. i dr.) *
SIDDIQUI M.A. ET AL.: "A New Synthetic Approach to the Clinically Useful, Anti-HIV-Active Nucleoside, 9-(2,3-Dideoxy-2-fluoro-beta-D-threo-pentofuranosyl)adenine (beta-FddA). Introduction of a 2@?-beta-Fluoro Substituent via Inversion of a Readily Obtainable 2@?-alpha-Fluoro Isomer", TETRAHEDRON LETTERS, vol. 39, no. 13, 26 March, 1998 (1998-03-26), pages 1657-1660, XP004108441, ISSN: 0040-4039, page 1658, scheme 1 *
STERZYCKI R.Z. ET AL.: "Synthesic and anti-HIV activity of several 2'-fluoro-containing pyrimidine nucleosides". JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 33, 1990, pages 2150-2157, XP002107310, page 2150-page 2151, page 2152, scheme IV *

Also Published As

Publication number Publication date
US9861652B2 (en) 2018-01-09
ATE344271T1 (de) 2006-11-15
US20130157971A1 (en) 2013-06-20
US20020198171A1 (en) 2002-12-26
US6911424B2 (en) 2005-06-28
DK1058686T3 (da) 2007-03-05
PT1058686E (pt) 2007-01-31
EA200700564A1 (ru) 2007-08-31
JP2010174019A (ja) 2010-08-12
EP2390257A1 (en) 2011-11-30
KR20090009338A (ko) 2009-01-22
ES2276515T3 (es) 2007-06-16
KR100965488B1 (ko) 2010-06-24
EP1058686A1 (en) 2000-12-13
JP2002504558A (ja) 2002-02-12
US20160158266A1 (en) 2016-06-09
US6348587B1 (en) 2002-02-19
US20100173863A1 (en) 2010-07-08
BR9908270A (pt) 2004-06-29
DE69933860D1 (de) 2006-12-14
EA200000870A1 (ru) 2001-08-27
EP1058686B1 (en) 2006-11-02
IL138037A (en) 2010-05-17
KR20010082516A (ko) 2001-08-30
CN100349913C (zh) 2007-11-21
US20040254141A1 (en) 2004-12-16
US7307065B2 (en) 2007-12-11
AU2003244569B2 (en) 2007-04-05
US7662938B2 (en) 2010-02-16
IL200914A0 (en) 2010-05-17
IL138037A0 (en) 2001-10-31
KR100954390B1 (ko) 2010-04-26
US8168583B2 (en) 2012-05-01
CA2322008A1 (en) 1999-09-02
CA2322008C (en) 2011-06-28
CN1332747A (zh) 2002-01-23
EP2392580A1 (en) 2011-12-07
AU2787199A (en) 1999-09-15
KR100719606B1 (ko) 2007-05-17
AU2003244569A1 (en) 2003-10-02
US9180138B2 (en) 2015-11-10
WO1999043691A1 (en) 1999-09-02
US20080300398A1 (en) 2008-12-04
KR20080032262A (ko) 2008-04-14
MXPA00008348A (es) 2005-07-15
DE69933860T2 (de) 2007-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA008609B1 (ru) 2&#39;-фторнуклеозиды
BRPI0709127A2 (pt) 2&#39;-fluoronucleosìdeo fosfonatos como agentes antivirais
JP2005503358A (ja) β−２’−または３’−ハロヌクレオシド
JPH08501086A (ja) エナンチオマー的に純粋なβ‐Ｄ‐ジオキソラン−ヌクレオシド
CN101240001B (zh) 2&#39;-氟代核苷
KR100886653B1 (ko) 2&#39;-플루오로뉴클레오사이드
AU2007203174B2 (en) 2&#39;-Fluoronucleosides
EP1754710A2 (en) 2&#39;-Fluoroncucleosides
MXPA99009253A (es) Actividades anti-virus de inmunodeficiencia humana y anti-virus de hepatitis b de la sintesis de nucleosidos de 1,3-oxaselenolano

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU