DK160099B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af optisk aktive eller racemiske 6-substituerede 2-penem-3-carboxylsyreforbindelser eller farmaceutisk anvendelige salte deraf - Google Patents

Description

i

DK 160099 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte, optisk aktive eller racemiske 6-substituerede 2-penem-3-carboxylsyre-5 forbindelser med den almene formel I

tr Ea H o SUk\ oJ_i >-E <« ' <r i 2

0=C-IT

hvori

Ra betyder lavalkyl, hydroxylavalkyl, phenyllavalkyl, lavalkoxy eller lavalkanoyloxy substitueret med phenyl-10 oxy,

Ri betyder hydrogen, aminolavalkyl, acylaminolavalkyl, hvori acyl er lavalkanoyl, med mono- eller dilavalkyl-amino substitueret lavalkylthio eller acylaminolavalkyl-thio, hvori acyl er lavalkanoyl, 15 eller hvori Ra betyder lavalkyl, phenyllavalkyl, lavalkoxy eller lavalkanoyloxy substitueret med phenyloxy, og R1 betyder lavalkyl, lavalkylthio eller aminolavalkyl-thio, og 20 i hvert tilfælde betyder hydroxy eller sammen med carbonylgruppen -C(=0)- en under fysiologiske betingelser spaltelig forestret carboxylgruppe, samt farmaceutisk anvendelige salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper.

DK 160099 B

2 5 Siden opdagelsen af penicillin er talrige bicycliske thia-azaforbindelser med β-lactamstruktur "blevet kendte. En oversigt over tidlige arbejder findes i E. H. Plynn's "Cephalosporins and Penicillins", Academic Press, New York og London 1972. Nyere udviklinger er beskrevet af J. Cs.

10 Jåszberényi et al. i Progr. Med. Chem., bind 12, 1975, 595-4*77 af P. G. Sammes i Chem. Eev. 1976, bind 76, nr. 1, 113-155 og af forskellige forfattere ved et internationalt symposium afholdt af Chemical Society i Cambridge, England, juni 1976 (jfr. følgende publikation: J. Elks: "Eecent 15 Advances in the Chemistry of β-Lactam Antibiotics", The Chemical Society, Burlington House, London 1977)·

Poruden de sædvanlige penam- og cephem-forbindelser, der i 6- henholdsvis 7-stilling bærer en acylaminogruppe, kendes også sådanne, der er usubstituerede i disse stillinger, 20 f.eks. 3-carboxy-2,2-dimethylpenam (J. P. Clayton, J. Chem.

Soc., 1969, 2123) og 3-methyl-4—carboxy-3-cephem (E. Kuhlein, Liebigs Ann., 1974-, side 369 og D. Bormann, ibid., side 1391)· 3-Carboxy-2,2-dimethylpenamf orbindelser, der i stedet for den sædvanlige 6β-acylaminogruppe har en 6a-chlor- eller 25 δβ-bromgruppering, er blevet kendte gennem I. McMillan og E.J. Stoodley, Tetrahedron Letters 1205 (1966) og J. Chem.

Soc. C2533 (1968), medens tilsvarende 6a-hydroxy-, 6a-acet-oxy- og 6a-phenoxyacetoxy-2,2-dimetbyl-penam-3-carboxyl-syrer er beskrevet af D. Hauser og Η. P. Sigg, Helv.

30 Chimica Acta 50, 1327 (1967). Ved alle disse forbindelser har man ikke fundet nogen eller nogen væsentlig antibiotisk virkning.

Antibiotisk virksomme 6-acylamino-2-penem-3-carboxylsyre-forbindelser, der indeholder et nyt 2-penemringsystem, er beskrevet i tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.655.298.

2-Penem-3-carboxylsyreforbindelserne med formlen I har en overraskende bedre mikrobicid virkning end de fra ovennævnte tyske offentliggørelsesskrift kendte forbindelser, hvilket beskrives nærmere i det følgende.

DK 160099 B

3

Ringsystemet i de omhandlede forbindelser har formlen H 4

6 i S

0=1n-T

I 2 og kan systematisk betegnes som 7-oxo-4-thia-l-azabicyclo [ J.2.0]hept-2-en. Ror nemheds skyld benævnes det i det 5 følgende '^-penem", idet der anvendes følgende indenfor penicillinkemien sædvanlige, af penam afledte nummerering; H g o=J_y 7 *\y I 3

En lavalkylgruppe indeholder indtil 7, især indtil 4 car-bonatomer og er f.eks. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, 10 butyl, isobutyl, tert.butyl eller pentyl.

Hydroxylavalkyl Ra er f.eks. hydroxymethyl, hydroxyethyl eller hydroxypropyl.

Phenyl1avalkyl er f.eks. benzyl eller 1- eller 2-phenyl-ethyl .

15 En lavalkoxygruppe Ra indeholder indtil 7, især indtil 4 carbonatomer og er bl.a. methoxy, ethoxy, propoxy, iso-propoxy, butoxy, isobutoxy, tert.butoxy eller pentoxy.

Phenyloxyalkanoyloxy Ra er i første række tilsvarende substitueret acetoxy, f.eks. phenyloxyacetoxy.

DK 160099 B

4

Aminolavalkyl r! indeholder indtil 7, især indtil 4 car-bonatomer og er f.eks. aminomethyl, aminoethyl eller aminopropyl.

5 Lavalkanoyl er f.eks. acetyl.

En lavalkylthiogruppe R1 indeholder indtil 7, især indtil 4 carbonatomer og er f.eks. methylthio, ethylthio, propyl thio, isopropylthio, butylthio, isobutylthio, tert.bu-tylthio eller pentylthio.

10 Aminolavalkylthio er f.eks. aminomethylthio, aminoethyl-thio eller aminopropylthio, medens med mono- eller dilav-alkylamino substitueret lavalkylthio f.eks. er tilsvarende med methylamino eller dimethylamino substitueret lavalkylthio, og lavalkanoylaminolavalkylthio f.eks. er 15 tilsvarende acetyleret aminolavalkylthio.

Fortrinsvis danner gruppen R sammen med carbonylgrupperin-gen -C(=0)- en under fysiologiske betingelser spaltelig for-estret carboxylgruppe.

Disse estergrupper giver de egentlig virksomme carboxylsy- 20 rer en bedre absorption ved oral applikation og/eller en forlænget virkning. Talrige sådanne estergrupper er kendte

indenfor penicillin- og cephalosporin-området. Hævnes kan , . På 2A

f.eks. -C(=0)-R -grupper, hvori R er en med acyl, acyl-oxy, acylthio, acylamino eller foretheret hydroxy og eventu-25 elt en yderligere organisk gruppe substitueret methyloxy-gruppe, idet methylgruppen også kan være forbundet med carbonyl i acylgruppen via et carbonatomholdigt broled eller en 2-aminoaliphatyloxygruppe. I sådanne grupper er acyl-resten af en organisk carboxylsyre med ca. indtil 18 carbon-30 atomer og er f.eks. eventuelt substitueret alkanoyl, cyclo-alkanoyl, aroyl, heterocyclylcarbonyl, f.eks. også en heterocyclylcarbonylgruppe af en carboxylsyre med formlen I, eller en biologisk aktiv penam-3- eller cephem-4—carboxylsyre, eller acylresten af en halvester af kulsyre. Roreste-35 ret hydroxy i methoxygruppen er foretheret med en carbon-hydridgruppe, især med lavalkyl. Den eventuelt methoxygrup- 5

DK 160099 B

pen yderligere substituerede organiske gruppe har indtil 7 C-atomer og er især lavalkyl, såsom methyl, eller aryl, såsom phenyl. Den nævnte carbonbro indeholder et til tre, især 2 C-atomer, således at der foreligger en lacton, især 5 γ-lacton. Aliphatylgruppen i den nævnte 2-aminoaliphatyl-gruppe kan være af aliphatisk eller cycloaliphatisk art og er mættet eller umættet. 2-Aminogruppen er fortrinsvis substitueret med to lavalkylgrupper eller eventuelt med en oxagruppeholdig alkylen. I sådanne fysiologisk spaltelige 10 estergrupper -C(=0)-R^ er f.eks. 1 ava 1 kanoyloxy- methoxy, f.eks. acetyloxymethoxy eller pivaloyloxymethoxy, aminolavalkanoyloxymethoxy, især a-aminolavalkanoylmethoxy, f.eks. glycyloxyme thoxy, L-valyloxymethoxy, L-leucyloxy-methoxy, lavalkoxycarbonyloxymethoxy eller L-lavalkoxy-15 carbonyl oxye thoxy, f.eks. 1-ethyloxycarbonyloxyethoxy, lav-a1kanoy1thiorne thoxy, f.eks. acetylthiomethoxy eller pival-oylthiomethoxy, lavalkanoylaminomethoxy, hvori lavalkanoyl eventuelt er substitueret med halogen, såsom chlor, f.eks. acetylaminomethoxy eller 2,2-dichloracetylaminomethoxy, 20 aroylaminomethoxy, f.eks. benzoylaminomethoxy, eller som

2A

eksempel på en lacton indeholdende R phthalidyloxy. Den

2A

foretherede hydroxymethoxygruppe R er f.eks. lavalkoxy-

methoxy, især methoxymethoxy. En 2-aminoaliphatyloxygruppe 2A

R er f.eks. 2-aminolavalkoxy, såsom en 2-aminoethyloxy-25 gruppe, hvori amino kan være substitueret med to lavalkyl eller eventuelt en oxagruppeholdig alkylen, f.eks. 2-dimethylaminoethoxy, 2-diethylaminoethoxy eller 2-(l-morpho-lino)-ethoxy, eller 2-aminocycloalkyloxy, f.eks. 2-dimethyl-aminocyclohexyloxy.

30 Farmaceutisk anvendelige salte er især de af forbindelser med formlen I med en sur gruppering, såsan en carbaxygruppe, eller også en hydroxy-

DK 160099 B

6 sulfonyloxy- eller sulfogruppe, i første række metal- eller ammoniumsalte, såsom alkalimetal- eller jordalkalimetalsalte, f.eks. natrium-, kalium-, magnesium- eller calciumsalte, eller ammoniumsalte med ammoniak eller egnede organiske 5 aminer, idet der i "betragtning i første række kommer alipha-tiske, cycloaliphatiske, cycloaliphatiske-aliphatiske og araliphatiske primære, sekundære eller tertiære mono-, dieller polyaminer, eller heterocycliske "baser til saltdannelsen, såsom lavalkylaminer, f.eks. triethylamin, hydroxy-10 lavalkylaminer, f.eks. 2-hydr oxy ethylamin, di-(2-hydr oxy-ethyl)-amin eller tri-(2-hydroxyethyl)-amin, "basiske, ali-phatiske estere af carboxylsyrer, f.eks. 4-aminobenzoesyre- 2-diethylamino-ethylester, lavalkylenaminer, f.eks. 1-ethyl-piperidin, cycloalkylaminer, f.eks. "bicyclohexylamin, eller 15 "benzylaminer, f.eks. Ν,ΪΓ-dihenzylethylendiamin, eller "baser af pyridintypen, f.eks. pyridin, collidin eller quinolin. forbindelser med formlen I, der har en basisk gruppe, kan ligeledes danne syreadditionssalte, f.eks. med uorganiske syrer, såsom saltsyre, svovlsyre eller phosphorsyre, eller 20 med egnede organiske carboxyl- eller sulfonsyrer, f.eks. trifluoreddikesyre eller p-toluensulfonsyre. forbindelser med formlen I med en sur og en basisk gruppe kan også foreligge i form af indre salte, d.v.s. i amfoionisk form.

25 I penemforbindelserne med formlen I kan de to asymmetriske carbonatomer i 5- og 6-stilling foreligge i R-, S- eller racemisk R,S-konfiguration. foretrukket er de forbindelser, hvori konfigurationen af 5-carbonatomet svarer til den af naturligt penicillin (5R-konfiguration). Substituenterne i 50 5- og 6-stilling kan stå i cis- eller trans-stilling til hinanden.

De omhandlede forbindelser har -værdifulde farmakologiske egenskaber. Forbindelserne med fomlen I og farmakologisk anvendelige salte af sådanne forbindelser med

DK 160099 B

7 saltdannende grupper har antibakterielle egenskaber. De hæmmer f.eks. væksten af gram-positive og gram-negative kim, såsom Staphylococcus aureus og penicillinresistent Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas 5 aeruginosa og Pseudomonas aeroginosa R. Ved dics-pladetest konstateres med de omhandlede forbindelser med formlen I ved de nævnte kim med en 0,5%'s opløsning på filtrerpapir (6 mm diameter) hæmningszoner med ca. 12 til 33 mm diameter.

10 Samtidig analogt testet Penicillin V giver ved penicillinfølsomme Staphylococcus aureus-kim hæmningszoner på 29 til 33 mm diameter og ved penicillinresistente kim zoner på højst 9 til 12 mm. Mod Pseudomonas aeruginosa er hverken Penicillin V eller Penicillin G- virksomme.

15 Den antibakterielle virkning in vitro kan også konstateres ved agarfortyndingstest (ifølge Ericsson), idet der mod gram-positive og gram-negative kokker findes MIC-værdier på 0,06 til 8 mikrogram/ml og mod gram-negative stavbakterier, såsom enterobakterier, Pseudomonas og Haemophilus findes 2 20 til 128 mikrogram/ml.

In vivo ved systemisk infektion af mus med Streptococcus pyogenes Aronson findes ved subcutan applikation af de omhandlede forbindelser ED^Q-værdier på ca. éil til ca. 50 mg/kg.

Fremhæves skal især virkningen mod Pseudomonas aeruginosa.

25 Forbindelserne hæmmer β-laetamaser og virker synergistisk i kombination med andre β-lactamantibiotika.

Disse omhandlede forbindelser, især de foretrukne, eller deres farmakologisk anvendelige salte, kan derfor alene el-

DK 160099 B

8 ler i kombination med andre antimikrobika, f.eks. i form af antibiotisk virksomme præparater, finde anvendelse til behandling af tilsvarende system- eller organinfek-5 tioner.

Opfindelsen angår især en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen I, hvori

Ra betyder lavalkyl, 1-hydroxylavalkyl, phenyllavalkyl, phenoxylavalkanoyloxy eller lavalkoxy, og 10 Ri betyder hydrogen, aminolavalkyl, acylaminolavalkyl, hvori acyl er lavalkanoyl, eller med mono- eller dilav-alkylamino eller lavalkanoylamino substitueret lavalkyl-thio, og hvori lavalkyl-, lavalkenyl- og lavalkanoylgrupperne 15 indeholder indtil 4 carbonatomer, samt farmaceutisk anvendelige salte af sådanne forbindelser.

Opfindelsen angår i første række en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen I, hvori R2 20 sammen med carbonylgruppen -C(=0)- er en under fysiologiske betingelser spaltelig forestret carboxylgruppe, og Ra og Ri har de ovenfor angivne betydninger, samt farmaceutiske anvendelige salte af sådanne forbindelser med formlen 1.

25 Opfindelsen angår hovedsagelig en fremgangsmåde til fremstilling af (5R)-konfigurerede forbindelser med formlen I.

Opfindelsen angår i første række fremstillingen af de i eksemplerne nævnte forbindelser med formlen I og deres 30 farmaceutisk anvendelige salte.

På grund af deres særlig gode antibakterielle virkning skal fremhæves 6-ethyl-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre, især den tilsvarende 5R-forbindelse samt

DK 160099 B

9 dens farmakologisk anvendelige salte og fysiologisk spaltelige estere.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at 5 en ylidforbindelse med formlen II

Z

rS. τι II Π

H * * S - G - R

-;rS (II) O- Έ '''c® - X®

I ?A

0=c - R

hvori

Ra og Ri har de ovenfor angivne betydninger, idet funktionelle grupper i disse grupper fortrinsvis foreligger på beskyttet form, 10 r2A sammen med carbonylgruppen -C(=0)- udgør en beskyttet carboxylgruppe, Z betyder oxygen eller svovl, og hvori X® enten betyder en tre gange substitueret phos-phoniogruppe eller en to gange forestret phosphonogruppe 15 sammen med en kation, ringsluttes, og den beskyttede carboxylgruppe med formlen -C(=0)-r2A i en opnået forbindelse med formlen I omdannes til en fri eller en under fysiologiske betingelser spaltelig for-20 estret carboxylgruppe, og en gruppe Ra og/eller R^- i en opnået forbindelse med formlen I inden for definitionen om ønsket omdannes til en anden gruppe Ra og/eller R1, og/eller en opnået fri forbindelse om ønsket omdannes til et salt 25 eller et opnået salt til den frie forbindelse eller til et andet salt, og/eller en fremkommen blanding af isomere forbindelser om ønsket adskilles i de enkelte isomere.

DK 160099 B

10 1 Pj^ I udgangsmaterialet med formlen II liar Ra, R1 og Ti især de foretrukne "betydninger, idet funktionelle grupper sædvanligvis foreligger i beskyttet form, amino f.eks. også i form af 5 en nitro- eller azidogruppe.

PA

I et udgangsmateriale med formlen II er R fortrinsvis en foretberet hydroxygruppe, der sammen med -C(=O)-grupperingen danner en især under milde betingelser let spaltelig foresteret carboxylgruppe, idet eventuelt tilstedeværende funk-10 tionelle grupper i en carboxylbeskyttelsesgruppe R kan være beskyttet på i og for sig kendt måde, f.eks. som angivet

PA

ovenfor. En gruppe R er bl.a. lavalkoxy, især a-polyfor-grenet lavalkoxy, f.eks. metboxy eller tert.butyloxy, lav-alkenyloxy, især 2-lavalkenyloxy, f.eks. allyloxy, eller 2-15 balogen-lavalkoxy, f.eks. 2,2,2-tricbloretboxy, 2-brom- etboxy eller 2-iodethoxy, 2-lavalkylsulfonyl-lavalkoxy, f.eks.

2-metbylsulfonylethoxy, eller en eventuelt substitueret, så- · som med lavalkoxy, f.eks. methoxy, eller nitro forsynet 1-pbenyllavalkoxygruppe, såsom eventuelt, f.eks. som angivet 20 substitueret benzyloxy eller dipbenylmethoxy, f.eks. benzyl-oxy, 4-methoxybenzyloxy, 4-nitrobenzyloxy, dipbenylmetboxy eller 4,4·'-dimethoxy-dipbenylmetboxy, pentacblorpbenyloxy, acetonyloxy, 2-cyanetboxy, en 2-(S-^)(S2)(S^)-silyletboxy-gruppe, såsom 2-trimethylsilyletboxy, 2-(dibutyl-methyl-25 silyl)-ethoxy eller 2-tripbenylsilyletboxy, eller en organisk silyloxy- eller stannyloxygruppe, såsom trilavalkylsilyloxy, f.eks. trimetbylsilyloxy, eller en af de nævnte fysiologisk spaltelige, foretherede bydroxygrupper.

Gruppen X® i udgangsmaterialet med formlen II er en af de 50 ved Wittig-kondensationsreaktionen sædvanlige phospbonio-eller pbosphonogrupper, især en triaryl-, f.eks. tripbenyl-eller trilavalkyl-, f.eks. tributylpbosphoniogruppe, eller en med lavalkyl, f.eks. ethyl, to gange foresteret phosphono-gruppe, idet symbolet X® i tilfælde af phospbonogruppen DK 160099 8 11 desuden omfatter kationen af en stærk base, især en egnet metalion, såsom alkalimetal-, f.eks. lithium-, natrium- eller kaliumion. Poretrukket som gruppe X® er dels tri-phenylphosphonio og dels diethylphosphono sammen med en 5 alkalimetal-, f.eks. natriumion.

I phosphonioforbindelser med formlen II, som i den isomere ylenform også kan betegnes som phosphoranforbindelser, neutraliseres den negative ladning af den positivt ladede phosphoniogruppe. I phosphonoforbindelser med formlen II, 10 som man i deres isomere form også kan betegne som phosphonat-forbindelser, neutraliseres den negative ladning af kationen af en stærk base, der alt efter fremstillingsmåden af phos-phonoudgangsmaterialet f.eks. kan være en alkalimetal-, f.eks. natrium-, lithium- eller kaliumion. Phosphonatudgangs-15 stoffer anvendes derfor som salte til reaktionen.

Formlen II gengiver udgangsmaterialet i den form, hvori ringslutningen finder sted. Sædvanligvis anvendes den tilsvarende phosphoranylidenforbindelse med formlen

pO TT Z

- c - r1 0- T\T (IIA) C = X1

o = c - e2A

20 hvori X^ er en trisubstitueret, især en triaryl-, f.eks. triphenyl-, eller en trilavalkyl-, f.eks. tri-n-butyl-phos-phoranylidengruppe, eller en tilsvarende phosphonoforbindel-se med formlen

DK 160099B

12

ES. TT Z

7· 11 1 I (UB) 0=1_jr \ 2 CH - ΊΓ

I 2A O - C - R

o hvori X er en phosphono-, især en dialkylphosphono-, f.eks. diethylphosphonogruppe, idet et phosphonoudgangsmateriale med formlen IIB omdannes til en forbindelse med formlen II 5 ved behandling med et egnet basisk reagens, såsom en uorganisk base, f.eks. et alkalimetalcarbonat, såsom natriumeller kaliumcarbonat, eller en organisk base, såsom en tri-lavalkylamin, f.eks. triethylamin, eller en cyclisk base af amidintypen, såsom en tilsvarende diazabicycloalkenforbin-10 delse, f.eks. l,5-&iazabicyclo[5.4.0]undec-5-en.

foretrukne udgangsmaterialer er phosphoranylidenforbindelser med formlen IIA.

Bingslutningen kan ske spontant, d.v.s. ved fremstillingen af udgangsstofferne, eller ved opvarmning, f.eks. i et tem-15 peraturområde på fra ca. 50 til 160°C, fortrinsvis fra ca.

50 til ca. 100°0.

Omsætningen udføres fortrinsvis i nærværelse af et egnet inaktivt opløsningsmiddel, såsom i et aliphatisk, cycloali-phatisk eller aromatisk carbonhydrid, f.eks. hexan, cyclo-20 hexan, benzen, toluen, xylen eller mesitylen, et halogeneret carbonhydrid, f.eks. methylenchlorid, en ether, f.eks. di-ethylether, en lavalkylenglycoldilavalkylether, f.eks. dimethoxy ethan eller diethylenglycoldimethylether, en cyclisk ether, f.eks. dioxan eller tetrahydrofuran, et carboxyl-25 syreamid, f.eks. dimetbylformamid, et dilavalkylsulfoxid, f.eks. dimetbylsulfoxid, eller en lavalkanol, f.eks. methanol, ethanol eller tert.butanol, eller i en blanding deraf, og om nødvendigt under en inaktiv gas, f.eks. argon- eller

DK 160099B

13 nitrogenatmosfære.

I en ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen opnået forbindelse med formlen I med en beskyttet carboxylgruppe, isser en foresteret carboxylgruppe med formlen -0(=0)-31^ kan denne 5 på i og for sig kendt måde, f.eks. alt efter arten af beskyttelsesgruppe omdannes til en fri carboxylgruppe. Således kan en med en egnet 2-balogenlavalkyl-, en arylcarbonyl-methyl- eller en 4-nitrobenzylgruppe foresteret carboxylgruppe f.eks. ved behandling med et kemisk reduktionsmiddel, 10 såsom et metal, f.eks. zink, eller et reducerende metalsalt, såsom et chrom-II-salt, f.eks. chrom-II-chlorid, omdannes til en fri carboxylgruppe, sædvanligvis i nærværelse af et hydrogenafgivende middel, der sammen med metallet kan tilvejebringe nascerende hydrogen, såsom en syre, i første ræk-15 ke eddikesyre eller myresyre, eller en alkohol, hvorved man fortrinsvis tilsætter vand, en med en arylcarbonylmethyl-gruppe foresteret carboxylgruppe også ved behandling med et nucleofilt, fortrinsvis saltdannende reagens, såsom natrium-thiophenolat eller natriumiodid, og en med 4—nitrobenzyl 20 foresteret carboxylgruppe også ved behandling med et alkalimetal-, f.eks. natriumdithionit. En med en 2-lavalkyl-sulfonyl-lavalkylgruppe foresteret carboxylgruppe kan spaltes eller frigøres ved behandling med f.eks. et basisk middel, f.eks. en af de nedenfor nævnte nucleofilt reagerende 25 baser og en med en egnet arylmethylgruppering foresteret carboxylgruppe spaltes eller frigøres, f.eks. ved bestråling, fortrinsvis med ultraviolet lys, f.eks. under 290 nm, hvis arylmethylgruppen f.eks. er en eventuelt i 3-» 4- og/ eller 5-stilling, f.eks. med lavalkoxy- og/eller nitrogrup-30 per substitueret benzylgruppe, eller med langbølget ultraviolet lys, f.eks. over 290 nm , når arylmethylgruppen f.eks. er en i 2-stilling med en nitrogruppe substitueret benzylgruppe, eller en med en egnet substitueret methyl-gruppe, såsom en med tert.butyl eller diphenylmethyl for-35 esteret carboxylgruppe spaltes eller frigøres, f.eks. ved behandling med et egnet surt middel, såsom myresyre eller

DK 160099 B

14 trifluoreddikesyre, eventuelt under tilsætning af en nucleo-fil forbindelse, såsom phenol eller anisol, eller en hydro-genolytisk spaltelig, foresteret carboxylgruppe, f.eks. benzyloxycarbonyl eller 4-nitrobenzyloxycarbonyl, spaltes el-5 ler frigøres ved by dr o g eno lyse, f.eks. ved behandling med hydrogen i nærværelse af en ædelmetalkatalysator, f.eks. palladiumkatalysator. Desuden kan en med en lavalkenylgruppe, såsom med 2-lavalkenyl, især allyl, foresteret carboxylgrup-pe oxidativt, f.eks. ved behandling med ozon efterfulgt af 10 et reduktionsmiddel, f.eks. dimethylsulfid, omdannes til en formylmethoxycarbonylgruppe, hvoraf en carboxylgruppe kan frigøres ved behandling med en base, såsom en sekundær amin, f.eks. dimethylamin, eller man kan isomerisere en 2-lavalkenyl-oxycarbonylgruppe, f.eks. allyloxycarbonyl, f.eks. ved be-15 handling med tristriphenylphosphinrhodiumchlorid, palladium-på-kul eller et alkalimetallavalkanolat, f.eks. kalium-tert.butylat, i dimethylsulfoxid til en 1-lavalkenyloxy-carbonylgruppe og hydrolytisk spalte denne under svagt sure eller svagt basiske betingelser. En eventuelt i 2-stilling 20 med lavalhyl eller aryl substitueret 2-oxoethoxycarbonyl-eller 2-cyanethoxycarbonylgruppe, f.eks. en acetonyloxy-carbonyl- eller 2-cyanethoxycarbonylgruppe, kan under milde betingelser, d.v.s. ved stuetemperatur eller under afkøling, ved behandling med en egnet base omdannes til det tilsvaren-25 de salt af denne carboxylgruppe, hvoraf den frie carboxyl-gruppe kan fås ved syrning. Egnede baser er nucleofilt reagerende metalbaser, såsom jordalkalimetal- og især alkali-metalbaser, såsom tilsvarende hydroxider, carbonater, hydrogencarbonater, alkoxider, phenolater, mercaptider, 30 thiophenolater eller amider, f.eks. natriumhydroxid, natriumcarbonat, natriumhydrogencarbonat, natriumethanolat, natriumthiophenolat, natriumamid eller natriummorpholid, eller tilsvarende lithium- eller kaliumforbindelser, der kommer til anvendelse i vand eller vandige eller hydroxyl-35 gruppeholdige eller også polære, inaktive opløsningsmidler under efterfølgende behandling med vand. Til spaltning af 2-cyanethoxycarbonylgrupper kan også anvendes tertiære 15

DK 160099 B

aminer, såsom trilavalkylamin, f.eks. triethylamin eller Hiinigbase, eller cycliske eller bicycliske aminer eller iminer, såsom IT -me t hy Imo r pho lin eller 1,5-diazabicyclo [ 5.^.0]und.ec-5-en, i et inaktivt opløsningsmiddel, såsom 5 methylenchlorid eller tetrahydrofuran, idet der direkte fås de tilsvarende ammoniumsalte af carboxylforbindelsen. En substitueret silylethoxycarbonylgruppe kan omdannes til en fri carboxylgruppe ved behandling med et salt af hydrogenfluorid, der afgiver fluoridanioner, såsom et alkalimetal-10 fluorid, f.eks. natrium- eller kaliumfluorid i nærværelse af en makrocyclisk polyether ("kroneether") eller med et fluorid af en organisk kvaternær base, såsom tetraalkyl-ammoniumfluorid eller trialkylarylammoniumfluorid, f.eks. tetraethyiammoniumfluorid eller tetrabutylammoniumfluorid, 15 i nærværelse af et aprotisk polært opløsningsmiddel, såsom dimethylsulfoxid eller Ν,ΪΤ-dimethylacetamid. En pentachlor-phenyloxycarbonylgruppe kan under milde betingelser, f.eks. med fortyndet natriumcarbonat- eller natriumhydrogencarbo-natopløsning eller med en organisk base i nærværelse af 20 vand omdannes til en fri carboxylgruppe.

En f.eks. ved silylering eller stannylering beskyttet carboxylgruppe kan på sædvanlig måde frigøres solvolytisk, f.eks. ved behandling med vand eller en alkohol.

I en fremstillet forbindelse med formlen I, der indeholder 25 en fri carboxylgruppe, kan en sådan på i og for sig kendt måde omdannes til en beskyttet carboxylgruppe. Således får man estere, f.eks. ved behandling med en egnet diazoforbin-delse, såsom en diazolavalkan, f.eks. diazomethan eller diazobutan, eller en phenyldiazolavalkan, f.eks. diphenyl-30 diazomethan, om nødvendigt i nærværelse af en Lewis-syre, 16

DK 160059B

såsom bortrifluorid, eller ved omsætning med en til forestering egnet alkohol i nærværelse- af et for es teringsmiddel, såsom et carhodiimid, f.eks. dicyclohexylcarbodiimid eller carbonyldiimidazol, eller med et E,F'-disubstitueret 5 O- eller S-snbstitneret isonrinstof hhv. isothiourinstof, hvori en O- eller S-substituent f.eks. er lavalkyl, især tert.butyl, phenyllavalkyl eller cycloaLkyl og Έ- henholdsvis 3P-substitnenter f.eks. er lavalkyl, især isopropyl, cycloalkyl eller phenyl, eller efter en vilkårlig anden 10 kendt og egnet foresteringsfremgangsmåde, såsom reaktion af et eventuelt in situ fremstillet salt af syren med en reaktionsdygtig ester af en alkohol og en stærk uorganisk syre eller en stærk organisk sulfonsyre. Endvidere kan syre-halogenider, såsom -chlorider (fremstillet f.eks. ved be-15 handling med oxalylchlorid), aktiverede estere (dannet f.eks. med H-bydroxynitrogenforbindelser, såsom N-hydroxy-succinimid) eller blandede anhydrider (opnået f.eks. med halogenmyresyrelavalkylestere, såsom chlormyresyreethyl-eller chlormyresyreisobutylester, eller med halogeneddike-20 syrehalogenider, såsom trichloreddikesyreehlorid) ved omsætning med alkoholer og eventuelt i nærværelse af en base, såsom pyridin, omdannes til en foresteret carboxylgruppe.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen samt ved de eventuelt eller nødvendigvis gennemførte supplerende fremgangsmådetrin er om nødvendigt de i reaktionen ikke deltagende, frie funktionelle grupper, såsom frie aminogrupper, f.eks. på i 25 og for sig kendt måde forbigående beskyttede, f.eks. ved acylering, tritylering eller silylering, og frie hydroxy-grupper beskyttede ved f.eks. forethering eller forestering, herunder silylering, og kan om ønsket efter udført reaktion på i og for sig kendt måde frigøres hver for sig 30 eller sammen. Således kan de i et udgangsmateriale tilstedeværende amino-, hydroxy- eller carboxylgrupper være beskyttede, f.eks. i form af acylaminogrupper, såsom de ovennævnte, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxycarbonylamino-, 2-bromethoxycarbonylamino-, 4-methoxybenzyloxycarbonyl- 17

DK 16 Π C 9 9 B

amino- eller tert.butyloxycarbonylaminogrupper, aryl-eller aryllavalkylthioaminogrupper, f.eks. 2-nitrophenyl-thioamino- eller arylsulfonylaminogrupper, f.eks 4-me-5 thylphenylsulfony1amino, l-lavalkoxycarbonyl-2-propyli-denaminogrupper eller o-nitrophenyloxyacetylaminogrupper eller acyloxygrupper, såsom de ovennævnte, f.eks. tert.-butyloxycarbonyloxy-, 2,2,2-trichlorethoxycarbonyloxy-, 2-bromethoxycarbonyloxy- eller p-nitrobenzyloxycarbo-10 nyloxygrupper, eller forestrede carboxylgrupper, såsom de ovennævnte, f.eks. diphenylmethoxycarbonyl-, p-nitro-benzyloxycarbonyl-, acetonyloxycarbonyl- eller 2-cyan-ethyloxycarbonylgrupper, og efter udført reaktion frigøres, eventuelt efter omdannelse af beskyttelsesgruppen.

15 Eksempelvis kan en 2,2,2-trichlorethoxycarbonylamino-eller 2-iodethoxycarbonylaminogruppe eller også en p-ni tr ob enzy1oxy carb ony1aminogruppe fraspaltes ved behandling med egnede reduktionsmidler, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre eller hydrogen i nærværelse af en 20 palladiumkatalysator, en diphenylmethoxycarbonylamino- eller tert.butylcarbonylaminogruppe ved behandling med myreeller trifluoreddikesyre, en aryl- eller aryllavalkylthio-aminogruppe fraspaltes ved behandling med en nucleofilt reagens, såsom svovlsyrling, en arylsulfonylgruppe fraspal-25 tes ved hjælp af elektrolytisk reduktion, en 1-lavalkoxy-carbonyl-2-propylidenaminogruppe fraspaltes ved behandling med vandig mineralsyre eller en t er t. butyl oxycarbonyloxy-gruppe fraspaltes ved behandling med myre- eller trifluoreddikesyre eller en 2,2,2-trichlorethoxycarbonyloxygruppe 30 eller p-nitrobenzyloxycarbonyloxygruppe fraspaltes ved behandling med et kemisk reduktionsmiddel, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre, eller med hydrogen i nærværelse af en palladiumkatalysator eller en diphenylmethoxycarbonyl gruppe fraspaltes ved behandling med myre- eller 35 trifluoreddikesyre eller ved hydrogeno lyse, en acetonyloxy-eller cyanethoxycarbonylgruppe fraspaltes ved behandling med baser, såsom natriumhydrogencarbonat eller 1,5-diaza-bicyclo[5-^*0]undec-5-en eller en substitueret sulfogruppe fraspaltes ved behandling med et alkalimetalhalogenid, om ønsket trinvis.

DK 160099 B

18

Endvidere kan man i en opnået forbindelse omdanne funktionelle substituenter, såsom fri amino-, hydroxy- eller carboxygrupper efter i og for sig kendte fremgangsmåder^ 5 f.eks. ved alkylering, acylering, forestering eller substitution.

Således kan man alkylere, f.eks. methylere en amino-, hydroxy- eller carboxygruppe ved behandling med et alkyleringsreagens, såsom en diazoforbindelse, f.eks.

10 diazomethan, eller en reaktionsdygtig ester af en alkohol, f.eks. dimethylsulfat, eller acylere, f.eks. acetylere amino- eller hydroxygrupper ved behandling med et reaktionsdygtigt funktionelt derivat af en syre, f.eks. et arihydrid eller syrechlorid, såsom acetan-15 hydrid eller acetylchlorid. Endvidere kan f.eks. en amino-gruppe omdannes til en sulf o amino grupp e ved behandling med svovltrioxid, fortrinsvis i form af et kompleks med en organisk base, såsom en trilavalkylamin, f.eks. trietbylamin.

En hydroxygruppe i substituenten Ra, især hydroxygruppen i 20 en 1-bydroxylavallylgruppe, kan omdannes til en i tilsvarende saltform foreliggende bydroxysulfonyloxygruppe ved behandling med et svovltrioxidkompleks, f.eks. komplekset med dioxan eller med en tertiær nitrogenbase, såsom trilavalkylamin, f.eks. triethylamin, l^h-dilavalkylanilin, f.eks.

25 Ε,ϊΓ-dimethylanilin, eller især med pyridin eller også ved behandling med en amido sulf onsyre, eventuelt i nærværelse af pyridin, og denne gruppe kan ved dobbelt omsætning med et tilsvarende metalhydroxid, metalcarbonat eller metal-hydrogencarbonat, såsom alkalimetalhydroxid, -carbonat eller 30 hydrogencarbonat, f.eks. natriumhydroxid, -carbonat eller -hydrogencarbonat, omdannes til en i metalsaltform foreliggende bydroxysulfonyloxygruppe.

19

DK 16009^ B

Salte af forbindelserne med formlen I kan fremstilles på i og for sig kendt måde. Således kan man fremstille salte af sådanne forbindelser med sure grupper, f.eks. ved behandling med metalforbindelser, såsom alkalimetalsalte af egnede 5 carboxylsyrer, f.eks. et natriumsalt af α-etbylcapronsyre, eller med ammoniak eller en egnet organisk amin, idet man fortrinsvis anvender støkiometriske mængder eller kun et lille overskud af det saltdannende middel. Salte af carboxylsyrer med formlen I kan også fås ved basisk spaltning af de 10 nævnte, under basiske betingelser spaltelige estere af sådanne forbindelser, f.eks. af 2-cyanetbyl- eller aceto-nylestere. Syreadditionssalte af forbindelser med formlen I med basiske grupperinger får man på sædvanlig måde, f.eks. ved behandling med en syre eller et egnet anionbytterrea-15 gens. Indre salte af forbindelser med formlen I, der f.eks. indeholder en saltdannende aminogruppe og en fri carboxyl-gruppe, kan f.eks. dannes ved neutralisering af salte, såsom syreadditionssalte, til det isoelektriske punkt, f.eks. med svage baser, eller ved behandling med flydende ionbyt-20 tere. Salte af 1-oxider af forbindelser med formlen I med saltdannende grupper kan fremstilles på analog måde.

Salte kan på sædvanlig måde omdannes til de frie forbindelser, metal- og ammoniumsalte f.eks. ved behandling med egnede syrer og syreadditionssalte, f.eks. ved behandling med 25 et egnet basisk middel.

Opnåede blandinger af isomere kan efter i og for sig kendte metoder opspaltes i de enkelte isomere, blandinger af dia-stereomere isomere f.eks. ved fraktioneret krystallisation, adsorptionskromatografi (kolonne- eller tyndtlagskromato-30 grafi) eller andre egnede adskillelsesfremgangsmåder.

Opnåede racemater kan på sædvanlig måde, eventuelt efter indføring af egnede saltdarmende grupperinger opspaltes i antipoderne, f.eks. ved dannelse af en blanding af diaste-reomere salte og omdannelse af de optisk aktive salte til de 35 frie forbindelser eller ved fraktioneret krystallisation fra optisk aktive opløsningsmidler.

DK 160099B

20

Ved alle de efterfølgende omdannelser af opnåede forbindelser foretrækkes sådanne reaktioner, der sker under neutrale, alkaliske eller svagt basiske betingelser.

Udgangsstofferne kan foreligge i form af derivater 5 eller dennes in situ, eventuelt under reaktionsbetingelserne. Eksempelvis kan et udgangsmateriale med formlen II, bvori Z er oxygen, fremstilles på den i trin 2.5 angivne måde ud fra en forbindelse med formlen II, hvori Z er en eventuelt substitueret methylidengruppe, ved ozonise-10 ring og efterfølgende reduktion af det dannede ozonid, hvorefter der, især når er hydrogen, i reaktionsopløsningen sker en ringslutning til forbindelsen med formlen I.

Udgangsforbindelserne med formlen II og deres udgangsprodukter kan som vist i reakfcionsskemaerne 1, 2 og 5 fremstil-15 les som følger:

DK 160099 B

21

Re akt i ons s kema 1.

H Ea Η H Ra Η ψ Ί

\LL-s-°-E

] Trin 1.1 j

0= L_jm ττι 9 o—_m IV

Trin 1.2

T

o 7' a H Ba Η B η H Ra Η q J! T)1

N_VS-C-E xL!zs"c"E

0=_N ^Γΐη.··ί:-2 0=,_W

\ o \

OH'—X° CH OH

I 2A 0- f1 r^· VI 0=C-R V υ-υ-κ

Trin 1.4 Ra „ * Z·

Nil/

0=J-B

\G-X© O.O-E24·

II

I forbindelserne med formlen IV, V, VI og II i reaktionsskema I og i forbindelserne med formlen Xa, XI, XII og IVa i reaktionsskema 2 er Z' oxygen, svovl eller også, især når 5 R1 er hydrogen, en eventuelt med en eller to substituenter Y substitueret methylidengruppe, der ved oxidation kan omdannes til en oxogruppe Z. En substituent Y i denne methyl- 22

DK 160099 B

idengruppe er en organisk gruppe, f.eks. en eventuelt substitueret lavalkyl-, cycloalkyl-, cycloalkyllavalkyl-, phenyl- eller phenyllavalkylgruppe;, eller især? en af. de 5 funktionelt omdannede, såsom foresterede, herunder med en optisk aktiv alkohol, såsom 1-menthol foresterede carboxyl-grupper. Denne methylidengruppe bærer fortrinsvis en af de nævnte substituent er. Fremhæves skal en 2-carbomethoxy-methyliden- og 2-carbo-l-menthyloxymetbylidengruppe Z'.

10 Sidstnævnte kan anvendes til fremstilling af optisk aktive forbindelser med formlerne IV til VI og II.

Irin 1.1:

En thioazetidinon med formlen IV fås ved, at man behandler en 4-W-azetidinon med formlen III, hvori ¥ betyder en 15 nucleofug afgangsgruppe, med en mercaptoforbindelse R^-C(=Z')-SH eller et salt deraf, f.eks. et alkalimetal-, såsom natrium- eller kaliumsalt deraf, og om ønsket opspal-ter en opnået isomerblanding i de enkelte isomere og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe 20 Z" til en oxogruppe Z.

Den nucleofuge afgangsgruppe ¥ i et udgangsmateriale med formlen III er en med en nucleofil gruppe E1-G(=Z')-S- erstattelig gruppe. Sådanne grupper ¥ er f.eks. acyloxygrup-per, sulfonylgrupper R°-S02-, hvori R° er en organisk grup-25 pe, azido eller halogen. I en acyloxygruppe ¥ er acylresten af en organisk carboxylsyre, herunder en optisk aktiv carboxylsyre, og har f.eks. den samme betydning som acyl-gruppen R^-CO-, hvori R^ er bydrogen eller en af de nævnte, via et carbonatom bundet organisk gruppe, f.eks. en af de 30 nævnte, eventuelt substituerede lavalkyl-, cycloalkyl-, cycloalkyllavalkyl-, phenyl- eller phenyllavalkylgrupper. I en sulfonylgruppe R^SOg- er R° f.eks. en eventuelt substi-

DK 160099B

23 tueret aliphatisk, araliphatisk eller aromatisk carbonhydrid-gruppe med indtil 12 carbonatomer, og er især lavalkyl, såsom methyl, ethyl eller en med en optisk aktiv gruppe substitueret methyl, såsom campheryl, eller benzyl, phenyl el-5 ler toluyl. En halogengruppe ¥ er brom, iod eller især chlor.

W er fortrinsvis acetoxy eller chlor.

hen nucleofile substitution kan gennemføres under neutrale eller svagt basiske betingelser i nærværelse af vand og eventuelt et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, he 10 basiske betingelser kan f.eks. tilvejebringes ved tilsætning af en uorganisk base, såsom et alkalimetal- eller jordalkali-metalhydroxid, -carbonat eller -hydrogencarbonat, f.eks. natrium-, kalium- eller calciumhydroxid, -carbonat eller -hydrogencarbonat. På tale som organisk opløsningsmiddel 15 kommer f.eks. med vand blandbare alkoholer, f.eks. lavalkan-oler, såsom methanol eller ethanol, ketoner, f.eks. lavalk-anoner, såsom acetone, amider, f.eks. lavalkancarboxylsyre-amider, såsom dimethylformamid og lignende. Reaktionen gennemføres sædvanligvis ved stuetemperatur, men kan også gen-20 nemføres ved forhøjet eller sænket temperatur. Yed tilsætning af et salt af hydrogeniodid eller thiocyansyre, f.eks. et alkalimetal-, såsom natriumsalt, kan reaktionen fremmes.

Ved reaktionen kan anvendes såvel optisk inaktive cis- eller trans-forbindelser med formlen III som blandinger deraf 25 eller tilsvarende optisk aktive forbindelser, hen indførte gruppe R^-C(=Z’)-S- dirigeres af gruppen Ra fortrinsvis i trans-stilling, uafhængigt af, om ¥ står i cis- eller transstilling til gruppen Ra. Selv om der overvejende dannes trans-isomere, kan cis-isomeren eventuelt også isoleres.

50 Opspaltningen af cis- og trans-isomere sker efter sædvanlige metoder, især ved kromatografi og/eller krystallisation.

hen efterfølgende ozonisering af en methylidengruppe Z' kan gennemføres som angivet nedenfor. Et opnået racemat med formlen IV kan adskilles i de optisk aktive forbindelser.

DK 160099 B

24

Forbindelser med formlen IV er hidtil ukendte.

De af formlen IV omfattede optisk aktive forbindelser med formlen IVa kan også fremstilles efter det nedenfor angivne reaktionsskema 2. i 5 Azetidinoner med formlen II, hvori Ra er methyl og ¥ acetyloxy-phenylsnlfonyl eller campher-10-sulfonyl, er kendte (tysk offentliggørelsesskrift nr. 1.906.401 eller K. Olauss et al.,

Liebigs Ann. Chem., 1974, 539-560). De øvrige forbindelser med formlen III er hidtil ukendte. De kan fremstilles efter 10 de i og for sig kendte metoder.

Azetidinonerne med formlen III fremstilles f.eks. ved addition af chlorsulfonylisocyanat til tilsvarende substituerede vinylestere og efterfølgende fraspaltning af chlorsulfonyl-gruppen. Ved denne syntese fås sædvanlige blandinger af cis-15 og trans-isomere, der om ønsket kan opspaltes i de rene cis- eller trans-isomere, f.eks. ved kromatografi og/eller krystallisation eller destillation. De rene cis- og trans-isomere foreligger som racemater og kan adskilles i deres optiske antipoder, f.eks. når acyl i en acyloxygruppe ¥ i 20 forbindelser med formlen III hidrører fra en optisk aktiv syre. De af formlen III omfattede optisk aktive forbindelser med formlen Illa kan også fremstilles efter det nedenfor angivne reaktionsskema 3·

Trin 1.2; 25 En α-hydroxycarboxylsyreforbindelse med formlen V fås ved, at man omsætter en forbindelse med formlen IV med en

, . 2A

glyoxylsyreforbindelse med formlen 0HC-C(=0)-R eller et egnet derivat deraf, såsom et hydrat, hemihydrat eller halv-acetal, f.eks. et halvacetal med en lavalkanol, f.eks.

30 methanol eller ethanol, og om ønsket opspalter en opnået

DK 160099B

25 isomerblanding i de enkelte isomere og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe Z' til en oxogruppe Z.

Forbindelsen V får man sædvanligvis som blanding af de to 5 isomere (med bensyn til grupperingen ^ CH—OH). Man kan imidlertid også isolere de rene isomere deraf.

Tillejringen af glyoxylsyreesterforbindelsen til lactamrin-gens nitrogenatom sker ved stuetemperatur eller om nødvendigt under opvarmning, f.eks. til ca. 100°C, i nærværelse 10 af et egnet kondensationsmiddel og/eller uden dannelse af et salt. Ved anvendelse af hydratet af glyoxylsyreforbindel-sen dannes vand, der om nødvendigt fjernes ved destillation, f.eks. azeotropt, eller ved anvendelse af et egnet dehydra-tionsmiddel, såsom en molekylsigte. Fortrinsvis arbejder 15 man i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel, såsom dioxan, toluen eller dimetbylformamid, eller en opløsningsmiddel-blanding, om ønsket eller nødvendigt under en atmosfære af en inaktiv gas, såsom nitrogen.

Ved reaktionen kan anvendes såvel rene optisk inaktive 20 cis- eller trans-forbindelser med formlen IV som blandinger deraf, eller tilsvarende optisk aktive forbindelser. Et opnået racemat med formlen V kan adskilles i de optisk aktive forbindelser.

Trin 1.5: 25 Forbindelser med formlen VI, bvori X° er en reaktionsdygtigt foresteret hydroxygruppe, især halogen eller organisk sulfonyloxy, fremstilles ved, at man i en forbindelse med formlen V omdanner den sekundære bydroxygruppe til en reaktionsdygtigt foresteret bydroxygruppe, især til halogen, 30 f.eks. chlor eller brom, eller til en organisk sulfonyloxy-gruppe, såsom lavalkylsulfonyloxy, f.eks. methylsulfonyloxy, eller arylsulfonyloxy, f.eks. 4-methylphenylsulfonyloxy,

DK 160099 B

26 om ønsket opspalter en opnået isomerblanding i de enkelte isomere og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe Z1 til en oxogruppe Z.

Forbindelsen VI kan man få i form af blandinger af isome-5 re (m. h. t. grupperingen ^ΧΗΛ^-Χ°) eller i form af rene isomere. ‘

Ovennævnte reaktion gennemføres ved behandling med et egnet fores teringsmiddel ved, at man f. eks. anvender et halogener ingsmiddel, såsom et thionylhalogenid, f. eks. thio-10 nylchlorid, et phosphoroxyhalogenid, især phosphoroxychlo-rid, eller et halogenphosphoniumhalogenid, såsom triphenyl-phosphindibromid eller -diiodid, eller et egnet organisk sul-fonsyrehalogenid, såsom sulfonsyrechlorid, fortrinsvis i nærværelse af et basisk, i første række organisk basisk 15 middel, såsom en aliphatisk tertiær amin, f. eks. triethyl-amin, diisopropylethylamin eller "polystyren-Hunigbase", eller en heterocyclisk base af pyridintypen, f. eks. pyri-din eller collidin. Fortrinsvis arbejder man i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel, f. eks. dioxan eller tetra-20 hydrofuran, eller en opløsningsmiddelblanding, om nødvendigt under afkøling og/eller under en atmosfære af en inaktiv gas, såsom nitrogen.

I en således opnået forbindelse med formlen VI kan en reaktionsdygtigt foresteret hydroxygruppe X° på i og for 25 sig kendt måde omdannes til en anden reaktionsdygtigt foresteret hydroxygruppe. Således kan man f. eks. udskifte et chloratom med et brom- eller iodatom ved behandling af den tilsvarende chlorforbindeIse med-et egnet brom- eller iodreagens, især et uorganisk bromid- eller iodidsalt, så-30 som lithiumbromid, fortrinsvis i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel, såsom ether.

Ved reaktionen kan anvendes både rene optisk inaktive cis- eller trans-forbindelser med formlen V og blandinger deraf eller tilsvarende optisk aktive forbindelser. Et op-35 nået racemat med formlen VI kan adskilles i de optisk aktive forbindelser.

27

DK 16CQ99B

Trin 1.4: Et udgangsmateriale med formlen II fås ved, at man behandler en forbindelse med formlen VI, hvori X° er en reaktionsdygtigt foresteret hydroxygruppe, med en egnet phosphin-forbindelse, såsom en trilavalkylphosphin, f. eks.

5 tri-n-butyl-phosphin, eller en triaryl-phosphin, f. eks. triphenylphosphin, eller med en egnet phosphit-forbindelse, såsom et trilavalkylphosphit, f. eks. triethylphosphit, eller et alkalimetaldimethylphosphit, idet man alt efter valg af reagens får en forbindelse med formlen IIA eller IIB, 10 og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methyli-dengruppe Z' til en oxogruppe Z.

Ovennævnte reaktion foretages fortrinsvis i nærværelse af et egnet inaktivt opløsningsmiddel, såsom et carbonhy-drid, f. eks. hexan, cyclohexan, benzen, toluen eller xy-15 len, eller en ether, f. eks. dioxan, tetrahydrofuran eller diethylenglycol-dimethylether, eller en opløsningsmiddelblanding. Alt efter reaktionsdygtighed arbejder man under afkøling eller ved forhøjet temperatur, f. eks. mellem -10 og +100°C, fortrinsvis ved ca. 20 til ca. β0°0, og/el-20 ler under en atmosfære af en inaktiv gas, såsom nitrogen.

For at forhindre en oxidativ proces kan der tilsættes katalytiske mængder af en antioxidant, f. eks. hydroquinon.

Derved arbejder man ved anvendelse af en phosphinfor-bindelse sædvanligvis i nærværelse af et basisk middel, 25 såsom en organisk base, f. eks. en amin, såsom triethyl-amin, diisopropyl-ethylamin eller "polystyren-Hunigbase", og kommer således direkte til phosphoranyliden-udgangsmate-rialet med formlen IIA, der dannes af det tilsvarende phos-phoniumsalt.

30 Ved reaktionen kan anvendes både rene optisk inaktive cis- eller trans-forbindelser med formlen VI og blandinger deraf eller tilsvarende optisk aktive forbindelser. Et op-

DK 160099B

28 nået racemat med formlen II kan adskilles i de optisk aktive forbindelser.

I forbindelserne med formlen II til VI foreligger even-5 tuelt tilstedeværende funktionelle grupper fortrinsvis i beskyttet form.

Opspaltningen af de ovenfor nævnte cis,trans-forbindelser i de rene cis- eller trans-isomere sker efter sædvanlige opspaltningsmetoder, f.eks. kromatografisk og/eller ved 10 destillation eller krystallisation.

Opspaltningen af de ovenfor nævnte racemater i deres optiske antipoder sker efter i og for sig kendte metoder.

En af disse metoder består deri, at man lader et racemat reagere med et optisk aktivt hjælpestof, ved hjælp af egne-15 de fysisk-kemiske metoder adskiller den derved dannede blanding af to diastereomere forbindelser og derefter opspalter de enkelte diastereomere forbindelser i de optisk aktive forbindelser.

Racemater, der er særlig egnede til adskillelse i antipo-20 der, er sådanne, som har en sur gruppe, f. eks. racemater af forbindelser med formlen I. Andre af de beskrevne racemater kan man omdanne til sure racemater ved simple reaktioner. F. eks. reagerer aldehyd- eller ketogruppeholdige racemater med et hydrazinderivat, der bærer sure grupper, f.

25 eks. 4-(4-carboxyphenyl)-semicarbacid, til de tilsvarende hydrazon-derivater eller alkoholgruppeholdige forbindelser med et dicarboxylsyreanhydrid, f. eks. phthalsyreanhydrid, til racematet af en sur halvester.

Disse sure racemater kan omsættes med optisk aktive ba-30 ser, f. eks. estere af optisk aktive aminosyrer, eller (-)-

: DK 160099 B

29 ; \ brucin, (+)-chinidin, (-)-chinin, (+)-cinchonin, (+)-dehy-droabietylamin, (+)- og (-)-ephedrin, (+)- og (-)-l-phenyl-ethylamin eller deres N-mono- eller Ν,Ν-dialkylerede derivater til blandinger bestående af to diastereomere salte.

5 I carboxylgruppeholdige racemater, f.eks. også i racemater, der indeholder en funktionelt omdannet carboxymethyl-idengruppe Zr, kan denne carboxylgruppe være foresteret eller foresteres med en optisk aktiv alkohol, såsom (-)-menthol, (+)-borneol, (+)- eller (-)-2-octanol, hvorefter der 1° efter isolering af den ønskede diastereomere sker frigørelse af carboxylgruppen, eller man fraspalter molekyldelen, der indeholder den foresterede carboxylgruppe, f. eks. en foresteret carboxymethylidengruppe.

Hydroxygruppeholdige racemater kan ligeledes opspaltes 15 i deres optiske antipoder, idet især optisk aktive syrer eller deres reaktionsdygtige funktionelle derivater finder anvendelse, når de med de nævnte alkoholer danner diastereomere estere. Sådanne syrer er f. eks. (-)-abietinsyre, D(+)- og L(-)-æblesyre, N-acylerede optisk aktive aminosy-20 rer, ( + )-og (-)-canphansyre, (+Tog (-)-ketopinsyre, L(+)-ascorbinsyre, (+) -camphersyre, (+) -campher-10-sulfonsyre (β), (+Γ eller (-)-3C-bromcampher-!ll·-sulfonsyre, D(-)-chinasyre, D(-)-isoascorbinsyre, D(-)- og L(+)-mandelsyre, (+)-l-men-thoxyeddikesyre, D(-)- og L(+)-vinsyre og deres di-O-benz-25 oyl- og di-O-p-toluylderivater. Acylgrupperne i de nævnte optisk aktive syrer kan eksempelvis foreligge som acyl i forbindelser med formlen III eller som R*-C(=0)- i forbindelser med formlen II og IV til VI og muliggøre racematopspaltningen af sådanne forbindelser. Om ønsket eller 30 nødvendigt kan den optisk aktive gruppe R1-C{=0)- efter udført racematopspaltning omdannes til en ønsket optisk inaktiv gruppe R1-C(=0)-.

Hydroxygruppeholdige racemater kan omdannes til en blanding af diastereomere urethaner, f. eks. ved omsætning med

DK 160099 B

30 optisk aktive isocyanater, såsom (+)- eller (-)-l-phenyl-ethylisocyanat.

Basiske racemater kan danne diastereomere salte med de optisk aktive syrer. Dobbeltbindingholdige racemater kan f. eks.

5 med platinchlorid og (+)-l-phenyl-2-aminopropan i blanding omdannes til diastereomere komplekssalte.

Til adskillelse af diastereomerblandinger egner sig fysiskkemiske metoder, i første række fraktionskrystallisation,

Man kan imidlertid også anvende kromatografiske metoder, frem 10 for alt fast-flydende-kromatografi. Letflygtige diastereomerblandinger kan også adskilles ved destillation eller gaskromatografi .

Opspaltningen af de adskilte diastereomere i de optisk aktive udgangsmaterialer sker ligeledes efter sædvanlige meto-15 der. Af saltene frigør man syrerne eller baserne, f. eks. ved behandling med stærkere syrer eller baser end de oprindeligt anvendte. Ud fra esterne og urethanerne får man de ønskede optisk aktive forbindelser f. eks. efter alkalisk hydrolyse eller reduktion med et komplekst hydrid, såsom li-20 thiumaluminiumhydrid.

En anden metode til opspaltning af racematerne består i kromatografi på optisk aktive absorptionslag, f. eks. på rørsukker.

Ifølge en tredie metode kan racematerne opløses i optisk ak-25 tive opløsningsmidler og den mest tungtopløselige optiske antipode udkrystalliseres.

Ved en fjerde metode benytter man den forskellige reaktionsdygtighed af de optiske antipoder overfor biologisk materiale, såsom mikroorganismer eller isolerede enzymer.

Ifølge en femte metode opløser man racematerne og udkry-

DK 160099 B

31 stalliserer en af de opniske antipoder ved podning med en ringe mængde af et efter de ovennævnte metoder opnået optisk aktivt produkt.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendte optisk ak-5 tive trans-forbindelser med formlen IVa kan også fremstilles efter følgende reaktionsskema:

Reaktionsskema 2 O

Ha H S Ra H S

H-f—Y\y trin 2.1 Η'Γ| V

0=_N Z'' * 0=-N

0=C-R24 C^C-R24 (VII) trin 2.2 (VIII)

Ra H S-S-R0 ψ H S-S-R0

H-j_Y H-f-Y

I trin 2.3 I

o=L_n ch <- 0=1_N /¾ xc=o^ 3 nch - c

1 iCIi3 π l R2A

0=C-R“ 5 0=C-R

(X) (ix) trin 2.4 trin 2.4a Z' z*

Ra H S-C-R1 Ra H S-C-R1 I = / trin 2.3¾ ξ * /

H-j-"i/ i- H-j-Y

0=LVC . 0^3 °=LÅ\ch - uf2 oi-R24®3 oi-R24 °H3 (XI) (xa) trin 2.5 *4/

DK 160099 B

32 Z' Z' a ® 1 a Hi

Ra H S-O-R-1- Ra H S-C-R1 H-:_Y K-^J/ I trin 2.6 |

0=1_N -> 0=J_KH

Y° O^-R21 (XII) (IVa)

Trin 2.1: Et oxid af en peniciliansyreforbindelse med formlen VIII fås ved, at man oxiderer en penicillansyreforbin-delsen med formlen VII i 1-stillingen. Oxidationen 5 sker på i og for sig kendt måde med egnede oxidationsmidler, såsom hydrogenperoxid eller uorganiske eller organiske persyrer. Egnede uorganiske persyrer er f. eks. periodsyre og persvovlsyre. Egnede organiske persyrer er f. eks. percarboxylsyrer, såsom permyresyre, pereddikesyre, 10 trifluorpereddikesyre, permaleinsyre, perbenzoesyre, 3-chlor- perbenzoesyre og monoperphthalsyre, eller persulfonsyrer, f. eks. p-toluenpersulfonsyre. Persyrerne kan også fremstilles in situ ud fra hydrogenperoxid og de tilsvarende syrer. Oxidationen sker under milde betingelser, f. eks. ved tempe-15 raturer på ca. -50 til ca. +100°C, fortrinsvis ved ca. -10 til ca. +40°C/i et inaktivt opløsningsmiddel.

Racemiske j.-oxider med formlen VIII, hvori R betyder phen-

2A

oxy eller methoxy og R methoxy, er kendte (A. K. Bose et al, Tetrahedron 28, 5977 (±972)). De optisk aktive forbin-20 delser med formlen VIII er hidtil ukendte.

Udgangsforbindelser med formlen VII er kendte og kan fremstilles i analogi med kendte fremgangsmåder. F. eks. kan de fås ifølge D. Hauser og Η. P. Sigg, Helv. Chimica Acta £0,

DK 160099B

33 1327 (x967) ved, at man omsætter en 6-diazopenicillansyre-ester, der eventuelt er fremstillet in situ ud fra en 6-aminopenicillansyreester og salpetersyrling, med vand eller en alkohol eller en syre med formlen H-Ra. Forbindelser med 5 formlen VII, hvori Ra betyder en acyloxygruppe, kan ligeledes fås ifølge D. Hauser ved, at man pyrolyserer en tilsvarende 6a- eller 63-N-nitroso-acylaminopenicillansyreester i et inaktivt opløsningsmiddel. Forbindelser med formlen VII, hvori Ra er hyaroxy, er også beskrevet af J. G. Sheehan et 10 al, J. Org. Chem. )39, 1444 (l974) (fremstilling ud fra tilsvarende 6-diazopenicillansyreforbindelser). Andre udgangsstoffer med formlen VII, hvori Ra er eventuelt beskyttet 1-hydroxyethyl, brom eller iod, er blevet kendte gennem DiNin-no et al (J. Org. Chem. j±2 (I967) , 2960). I en opnået for- di 15 bindelse med formlen VIII kan en gruppe R omdannes til en anden gruppe Ra.

Trin 2.2: En 3-methylensmørsyreforbindelse med formlen IX fås ved, at man behandler et 1-oxid af en penicillansyrefor-bindelse med formlen VIII med en mercaptoforbindelse R°-SH.

20 I en mercaptoforbindelse R°-SH og i et reaktionsprodukt med formlen IX er R en eventuelt substitueret aromatisk hete-rocyclisk gruppe med indtil 15, fortrinsvis indtil 9 car-bonatomer og mindst et ringnitrogenatom og eventuelt et yderligere ringheteroatom, såsom oxygen eller svovl, hvilken 25 gruppe er bundet til thiogruppen -S- med et af sine ring-carbonatomer, som er forbundet med et ringnitrogenatom ved en dobbeltbinding. Sådanne grupper er monocycliske eller bi-cycliske og kan eksempelvis være substitueret med lavalkyl, såsom methyl eller ethyl, lavalkoxy, såsom methoxy eller 30 ethoxy, halogen, såsom fluor eller chlor, eller aryl, såsom phenyl.

Sådanne grupper R° er f. eks. monocycliske femleddede thia- 34

DK 16(1099 B

diazacycliske, thiatriazacycliske, oxadiazacycliske eller oxatriazacycliske grupper af aromatisk karakter, men især monocycliske femleddede diazacycliske, oxazacycliske eller thiazacycliske grupper af aromatisk karakter og/eller i før-5 ste række de tilsvarende benzodiazacycliske, benzoxazacycli-ske ellerbenzothiazacycliske grupper, hvori den heterocycli-ske del er femleddet og har aromatisk karakter, hvorved et substituerbart ringnitrogenatom i grupperne R° f. eks. kan være substitueret med lavalkyl. Repræsentanter for sådanne 10 grupper R° er i-methyl-imidazol-2-yl, l,3-thiazol-2-yl, 1,3,4-thiadiazol-2-yl, 1,3,455-thiatriazol-2-yl, 1,3-ozazol- 2-yl, 1,3,4-oxadiazol-2-yl, 1,3,4,5-oxatriazol-2-yl, 2-qui-nolyl, l-methyl-benzimidazol-2-yl, benzoxazol-2-yl og især benzothiazol-2-yl.

15 Reaktionen udføres i et inaktivt opløsningsmiddel, såsom et aliphatisk eller aromatisk carbonhydrid, f. eks. benzen eller toluen, under opvarmning til tilbagesvalingstemperaturen af det anvendte opløsningsmiddel.

Trin 2.3: En 3-methylcrotonsyrefortindelse med formlen I 20 fås ved, at man isomeriserer en 3-methylensmørsyrefortinde1-se med formlen IX ved behandling med et egnet basisk middel.

Egnede basiske midler er f. eks. organiske nitrogenbaser, såsom tertiære aminer, f. eks. trilavalkyiaminer, såsom tri-ethylamin eller Hunigbase, eller også uorganiske baser, der 25 ved stuetemperatur eller eventuelt lidt formindsket eller forhøjet temperatur kommer til anvendelse i et inaktivt opløsningsmiddel, såsom et eventuelt halogeneret carbonhydrid, f. eks. methylenchlorid.

Trin 2.4: En thioforbindelse med formlen XI fås ved, at man 30 behandler en forbindelse med formlen X med et egnet reduktionsmiddel og samtidig eller efterfølgende omsætter med et

DK 160099 B

35 acyleringsderivat af en syre med formlen R^-Cf^Z)-OH eller når Zf betyder en eventuelt med Y substitueret methyliden-gruppe, med en alkyn med formlen Ri-C=C-Y og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe 5 Z' til en oxogruppe.

Egnede reduktionsmidler er f. eks. hydridreduktionsmidler, såsom alkalimetalborhydrider, f. eks. natriumborhydrid, eller også zink i nærværelse af en carboxylsyre, f. eks. en carboxylsyre med formlen R^-C(=0)-OH. Hydridreduktionsmid-10 lerne anvendes sædvanligvis i nærværelse af egnede opløsningsmidler, såsom dimethylformamid. Hydridreduktionen gennemføres fortrinsvis i dimethylformamid med natriumborhydrid ved temperaturer pa ca. -50 til ca. -10°C, fortrinsvis ved ca. -20°C, hvorefter man ved samme temperatur til-15 sætter acyleringsmidlet og eventuelt en tertiær base, såsom pyridin. Reduktionen med zink og en carboxylsyre gennemføres ved temperaturer pa fra ca. -10 til ca. +50°C, fortrinsvis ved ca. 0 C til stuetemperatur, eventuelt i et opløsningsmiddel, som hvilket carboxylsyren, såfremt 20 den er flydende, selv kan tjene. Acyleringsmidlet kan fra begyndelsen være sat til reduktionsblandingen eller tilsættes efter afsluttet reduktion og eventuelt efter afdampning af den anvendte carboxylsyre og/eller opløsningsmidlet. Egnede acyleringsmidler er især anhydriderne af de 25 nævnte carboxylsyrer,-såsom de symmetriske anhydrider, f.

eks. eddikesyreanhydrid, eller blandede anhydrider, fortrinsvis sådanne med hydrogenhalogenider, dvs. de tilsvarende carb-oxylsyrehalogenider, f. aks. chloriderne og bromiderne, såsom acetylbromid. Eksempelvis kan en forbindelse med form-30 len X med zink i en blanding af eddikesyre og eddikesyreanhydrid ved 0 til ca. 20°C omdannes til en forbindelse med formlen XI, hvori R1 er methyl. Pa grund af den ringere racemiserings-fare foretrækkes zink/carboxylsyre-reduktionen. Alkynen kan ligeledes være sat til reduktionsblandingen fra begyn-35 delsen eller først tilsættes efter afsluttet reduktion.

DK 160099 B

36

Additionen af den ved reduktionen intermediært dannede 4-mercaptoazetidin-2-on til alkynens tredobbelte binding sker spontant ved reduktionstemperaturen.

Trin 2.3a: En thieforbindelse med formlen II fås også ved, 5 at man ved behandling med et egnet basisk middel isomerise-rer en forbindelse med formlen la efter reaktionsbetingel-serne i trin 2.3 og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe Z1 til en oxogruppe Z.

Trin 2.4a: En forbindelse med formlen Xa fås ved, at man be-10 handler en 3-methylensmørsyreforbindelse med formlen IX i-følge reaktionsbetingelserne i trin 2.4 med et egnet reduktionsmiddel og samtidig eller efterfølgende omsætter med et acyleringsderivat af en carboxylsyre med formlen R1—C(=Z) -OH eller når Zr betyder en eventuelt med I substitueret 15 methylidengruppe, med en alkyn med formlen R1-C=C-Y og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe Z1 til en oxogruppe Z.

Trin 2.3: En 2-oxoeddikesyreforbindelse med formlen XII fås ved, at man ozoniserer en forbindelse med formlen XI og 20 spalter det dannede ozonid reduktivt til oxo-forbindelsen og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe Z' til en oxogruppe Z.

Ozoniseringen gennemføres på sædvanlig måde med en ozon-oxygen-blanding i et inaktivt opløsningsmiddel, såsom en 25 lavalkanol, f. eks. methanol eller ethanol, en lavalkanon, f. eks. acetone, et eventuelt halogeneret aliphatisk, cyc-Ipaliphatisk eller aromatisk carbonhydrid, f. eks. en ha-

DK tj Γ; C 9 9 B

37 logenlavalkan, såsom methylenchlorid eller tetrachlorcar-. bon, eller i en opløsningsmiddelblanding, herunder en vandig blanding, fortrinsvis under afkøling, f. eks. ved temperaturer på fra ca. -90 til ca. 0°C.

5 Et som mellemprodukt opnået ozonid spaltes sædvanligvis u-den isolation reduktivt til en forbindelse med formlen XII, hvorved man anvender katalytisk aktiveret hydrogen, f. eks. hydrogen i nærværelse af en tungmetalhydrogeneringskataly-sator, såsom en nikkel- eller palladiumkatalysator, fortrins-10 vis på et egnet bæremateriale, såsom calciumcarbonat eller kul, eller kemiske reduktionsmidler, såsom reducerende tungmetaller, herunder tungmetallegeringer eller -amalgamer, f. eks. zink, i nærværelse af en hydrogendonor, såsom en syre, f. eks. eddikesyre, eller en alkohol, f. eks.

15 lavalkanol, reducerende uorganiske salte, såsom alkalime-taliodider, f. eks. natriumiodid, eller alkalimetalhydro-gensulfiter, f. eks. natriumhydrogensulfit, i nærværelse af en hydrogendonator, såsom en syre, f. eks. eddikesyre, eller vand, eller reducerende organiske forbindelser, såsom 20 myresyre. Til anvendelse som reduktionsmiddel kommer også forbindelser, der let kan omdannes til de tilsvarende epoxyforbindelser eller oxider, idet epoxiddannelsen kan ske på grundlag af en C,C-dobbeltbinding og oxiddannelsen på grundlag af et tilstedeværende oxiddannende heteroatom, 25 såsom svovl-, phosphor- eller nitrogenatom. Sådanne forbindelser er f. eks. egnet substituerede ethenforbindel-ser (der i reaktionen omdannes til ethylenoxidforbindel-ser), såsom tetracyanethylen, endvidere især egnede sulfidforbindelser (der i reaktionen omdannes til sulfoxid-50 forbindelser), såsom dilavalkylsulfider, i første række dimethylsulfid, egnede organiske phosphorforbindelser, såsom en phosphin, der som substituenter eventuelt indeholder substituerede aliphatiske eller aromatiske carbonhydrid-grupper (og som i reaktionen omdannes til et phosphinoxid), 55 såsom trilavalkyl-phosphiner, f. eks. tri-n-butylphosphin, eller triarylphosphiner, f. eks. triphenylphosphin, eller

DK 160099 B

38 phosphiter, der som substituenter eventuelt indeholder substituerede aliphatiske carbonhydridgrupper (og i reaktionen omdannes til phosphorsyretriestere), såsom trilavalkyl-phosphiter, sædvanligvis i form af tilsvarende alkoholad-5 duktforbindelser, såsom trimethylphosphit, eller phosphor-syrling-triamider, der som substituenter eventuelt indeholder substituerede aliphatiske carbonhydridgrupper, såsom hexalavalkyl-phosphorsyrlingtriamider, f. eks. hexamethyl-phosphorsyrlingtriamid, dette fortrinsvis i form af et me-10 thanoladdukt, eller også egnede nitrogenbaser (der i reaktionen omdannes til de tilsvarende N-oxider), såsom hete-rocycliske nitrogenbaser af aromatisk karakter, f. eks. baser af pyridintypen og især pyridin selv. Spaltningen af det sædvanligvis ikke isolerede ozonid sker normalt under 15 de betingelser, som man anvender til dets fremstilling, dvs. i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel eller en opløsningsmid de lb landing samt under afkøling eller let opvarmning, idet man fortrinsvis arbejder ved temperaturer på fra ca. -10 til ca. +25°C og sædvanligvis afslutter reak-20 tionen ved stuetemperatur.

Trin 2.6: En forbindelse med formlen IYa fås ved, at man solvolyserer en forbindelse med formlen XII og/eller om ønsket omdanner en eventuelt substitueret methylidengruppe Z' til en· oxogruppe Z. 1 2 3 4 5 6

Solvolysen kan gennemføres som hydrolyse, alkoholyse eller 2 også hydrazinolyse. Hydrolysen gennemføres med vand, even 3 tuelt i et med vand blandbart opløsningsmiddel. Alkoholy- 4 sen gennemføres sædvanligvis med en lavalkanol, f. eks.

5 methanol eller ethanol, fortrinsvis i nærværelse af vand 6 og et organisk opløsningsmiddel, såsom en lavalkancarboxyl-syre-lavalkylester, f. eks. eddikesyre-ethylester, og fortrinsvis ved stuetemperatur, om nødvendigt under afkøling eller opvarmning. Hydrazinolysen gennemføres på sæd-

39 DK 16Π099 B

vanlig måde med en substitueret hydrazin, f. eks. med phenyl- eller en nitrophenylhydrazin, såsom 2-nitrophenylhydrazin, 4-nitrophenylhydrazin eller 2,4-dinitrophenylhydrazin, der fortrinsvis anvendes i omtrentlig ækvimolær mængde, i et 5 organisk opløsningsmiddel, såsom en ether, f, eks. tetra-hydrofuran, dioxan, diethylether, et aromatisk- carbonhydrid, såsom benzen eller toluen, et halogeneret carbonhydrid, såsom methylenchlorid, chlorbenzen eller dichlorbenzen, en ester, såsom ethylacetat, og lignende ved temperaturer på mellem ca. stuetemperatur og ca. 65°C. øc-Ketoforbindelsen med formlen XII behøver man ikke nødvendigvis at. isolere. Gennemfører man f. eks. spaltningen af ozonid i nærværelse af et solvolysemiddel, såsom vand, kan direkte fås en forbindelse med formlen IVa.

15 Optisk aktive cis-, trans- og cis,trans-forbindelser med formlen Illa kan også fås efter følgende reaktionsskema:

40 DK 160099 B

Re aktions skema 3 0 t β& H S Ra O-Acyl 4-K V l·/ I X trin 3.1 f °= E yA » 0=1-li c X/ XGH - οζ * I PA I pa ο=ο-έγά o=c-r^ 0 (VIII) (XIII) trin 3-2 T?a R®· f ψ i w H-|-/ H-j ^ „,l_i »» ».Li

Va , (XV) 0-0 E (XIV) O^-R21 trin 3„5 trin 3-3 v ψ

,Ra w, Ra H S

"X n-f—k \

o=J m o=J n /X

(Illa) 0=C-R2å (VII) W = acyloxy eller halogen 41

DK 1 6GG99B

Trin 31· En 3-methylensmørsyreforbindelse med formlen XIII fås ved, at man behandler et l-oxid af en penicillansyre-forbindelse med formlen VIII i nærværelse af et trilavalkyl-phosphit med en organisk carboxylsyre acyl-OH og/eller 5 fra en opnået cis/trans-forbindelse isolerer cis- og/eller trans-forbindelsen.

Egnet som trilavalkylphosphit er f. eks. trimethylphosphit.

I betragtning som organisk carboxylsyre acyl-OH kommer f. eks. en carboxylsyre R^-COOH, hvori betyder hydrogen el-10 ler en af de nævnte via et carbonatom bundne organiske grupper, f. eks. en af de nævnte lavalkyl-, cycloalkyl-, cycloalkyllavalkyl-, phenyl- eller phenyllavalkylgrupper. Foretrukne er lavalkancarboxylsyrer, herunder myresyre, og især eddikesyre.

15 Reaktionen sker som beskrevet af Suarato et al. i Tetrahedron Letters, 4,2, 4059-4062, 1978, i et inaktivt organisk opløsningsmiddel, f. eks. en carbonhydrid, såsom benzen, toluen eller xylen, eller et etheragtigt opløsningsmiddel, såsom dioxan eller tetrahydrofuran, eller en opløsnings-20 middelblanding ved forhøjet temperatur, såsom indtil tilbagesvalingstemperaturen af det anvendte opløsningsmiddel, f. eks. ved 50 til 150°C, og fortrinsvis ved ca. 80 til ca. 100°C.

Ved reaktionen dannes en blanding af cis- og trans-forbin-25 delser. Ved sædvanlige adskillelsesmetoder, såsom krystallisation eller kromatografi, kan cis- og/eller trans-forbindelsen fås i ren form.

Trin 3.2: En 3-methylcrotonsyreforbindelse med formlen XIV, hvori WT betyder acyloxy, fås ved, at man isomeriserer en 30 3-methylensmørsyreforbindelse med formlen XIII ved behandling med et egnet basisk middel og/eller om ønsket fra en opnået cis,trans-forbindelse isolerer cis- og/eller trans--forbindelsen.

DK 160099 B

42

Den basiske isomerisering gennemføres som beskrevet under trin 2.3· Den om ønsket gennemførte, efterfølgende adskillelse i de rene forbindelser gennemføres som beskrevet under trin 3,1· 5 Trin 3.3: En forbindelse med formlen XIV, hvori WT betyder halogen, fås ved, at man behandler en penicillansyre-forbindelse med formlen VII med et halogeneringsmiddel, der giver positive halogenioner, og om nødvendigt et eventuelt opnået mellemprodukt med en base og/eller fra en opnået 10 cis,transforbindelse isolerer cis- og/eller trans-forbindelsen.

Halogeneringsmidler, der giver positive halogenioner, er f. eks. elementære halogener, såsom chlor, brom eller iod, blandede halogener, såsom BrCl, C1I eller BrI, sulfuryl-15 halogenider, såsom sulfurylchlorid eller sulfurylbromid, N-halogenamider eller N-halogenimider, såsom N-chloracet-amid, N-bromacetamid, N-chlorsuccinimid, N-bromsuccinimid eller N,Nf-dibromhydantoiner, eller organiske hypohaloge-niter, især lavalkanoylhypohalogeniter, såsom acetylhypo-20 chlorit, propionylhypochlorit, butyrylhypochlorit, acetyl-hypobromit, propionylhypobromit, butyrylhypobromit, og lignende .

Reaktionen gennemføres som beskrevet i US-patentskrift nr. 3,920,696 eller af St. Kukolja i Journ. Am. Chem. Soc. 93, 25 6267 (1971) i et inaktivt, aprotisk opløsningsmiddel, især i et halogeneret carbonhydrid, såsom methylenchlorid eller tetrachlorcarbon, ved temperaturer mellem ca. -80 og +80°C, fortrinsvis ved ca. -76°C til ca. stuetemperatur.

Molforholdet mellem halogeneringsmiddel og forbindelse med 30 formlen VII ligger mellem 1:1 og 3:1 eller også højere.

Når molforholdet er ca. 1:1, fås som mellemprodukt en forbindelse med formlen

DK 160099 B

43 -p3.

s Hal H-l/ I CH, 0=]_N / 5 (XIV) '\iH-C-S-Hal CHj 0=0-1121 der ved behandling med en base, såsom en tertiær amin, f. eks. triethylamin, kan omdannes til en forbindelse med formlen XIV. Ved anvendelse af mindst 2 mol halogenerings-5 middel eller mere pr. mol penicillansyreforbindelse fås den ønskede forbindelse med formlen XIV også uden efterfølgende behandling med base.

Ved ringåbningsreaktionen dannes en blanding af cis- og trans-forbindelsen, idet trans-forbindelsen dog fortrins-10 vis dannes. Ved sædvanlige adskillelsesmetoder, såsom krystallisation eller kromatografi, kan cis- og/eller trans-forbindelserne fås i ren form.

Trin 3·4: En 2-oxoeddikesyreforbindelse med formlen XV, hvori Wf betyder acyloxy eller halogen, fås ved, at man 15 ozoniserer en forbindelse med formlen XIV og spalter det dannede ozonid reduktivt til en oxogruppe og/eller om ønsket fra en opnået cis,trans-forbindelse isolerer cis-og/eller trans-forbindelsen.

Ozoniseringen og reduktionen af det dannede ozonid gen-20 gennemføres som beskrevet under trin 2.5. Den om ønsket efterfølgende adskillelse i de rene forbindelser gennemføres som beskrevet under trin 3.1.

DK 160099B

44

Trin 3.5: En forbindelse med formlen Illa, hvori ¥ har den under formel III angivne betydning, fås ved, at man solvo-lyserer en forbindelse med formlen XV, hvori W* betyder acyloxy eller halogen, og/eller om ønsket omdanner en gruppe 5 w' til en anden gruppe W eller W og/eller om ønsket isome-riserer en opnået cis-forbindelse til den tilsvarende trans--forbindelse og/eller fra en opnået cis,trans-forbindelse isolerer cis- og/eller trans-forbindelsen.

Solvolysen gennemføres som beskrevet under trin 2.6. Når 10 W er halogen, anvendes fortrinsvis hydrazinolyse. Ej heller her er det nødvendigt at isolere mellemproduktet med formlen XV efter ozoniserings- og reduktionsreaktionen, idet man kan fremstille det in situ og solvolysere det umiddelbart.

15 I en opnået forbindelse med formlen Illa, hvori W betyder acyloxy eller halogen, kan denne gruppe ved nucleofil ombytning omdannes til en anden gruppe W, hvorved den indførte gruppe W må være mere nucleofil end den fjernede.

Denne ombytning kan gennemføres på lignende måde som trin 20 1,1, f. eks. ved behandling med et alkalimetalsalt, såsom et natrium- eller kaliumsalt af en syre H-W.

Ved denne udskiftning af W med et andet W samt ved den efterfølgende udskiftning med en gruppe R^-C^Z’) -S- ifølge trin 1.1 fås de optisk aktive trans-forbindelser med form-25 len Illa eller IVa i overskud uanset om man går ud fra en cis- eller trans-forbindelse.

Ved isomerisering, f. eks. ved behandling med en mild Lewis-syre i katalytiske mængder, kan en opnået cis-forbindeIse omdannes til en trans-forbindeIse. Isomeriseringen med en 30 Lewis-syre sker i et inaktivt opløsningsmiddel ved forhøjet temperatur, ved ca. 50 til 150°C, f. eks. under tilbagesvaling i benzen.

45

DK 160093 B

I forbindelserne IV (inkl. IVa) til VI og II kan en eventuelt substitueret methylidengruppe Zf efter den under trin 2.5 beskrevne fremgangsmåde omdannes til en oxogruppe Z ved ozonisering og efterfølgende reduktion af det dannede 5 ozonid.

De farmakologisk anvendelige forbinderlser, der er fremstillet efter fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan f. eks. anvendes til fremstilling af farmaceutiske præparater, der indeholder en virksom mængde af aktivt stof sammen med 10 eller i blanding med uorganiske eller organiske, faste eller flydende, farmaceutisk anvendelige bærestoffer, der egner sig til enteral eller parenteral indgivelse. Således anvender man tabletter eller gelatinekapsler, der indeholder det virksomme stof sammen med fortyndingsmidler, f.

15 eks. lactose, dextrose, sucrose, mannitol, sorbitol, cellulose og/eller glycin, og smøremidler, f. eks. kiseljord, talk, stearinsyre eller salte deraf, såsom magnesium- eller calciumstearat, og/eller polyethylenglycol; tabletter indeholder ligeledes bindemidler, f. eks. magnesiumalumini-20 umsilicat, stivelser, såsom majs-, hvede-, ris- eller pile-rodsstivelse, gelatine, traganth, methylcellulose, natrium-carboxymethylcellulose og/eller polyvinylpyrrolidon og om ønsket sprængmiddel, f. eks. stivelser, agar, alginsyre eller et salt deraf, såsom natriumalginat, og/eller bruse-25 blandinger eller adsorptionsmidler, farvestoffer, smagsstoffer og sødemidler. Endvidere kan man anvende de omhandlede farmakologisk virksomme forbindelser i form af injicerbare, f. eks. intravenøst indgivelige præparater eller infusionsopløsninger. Sådanne opløsninger er fortrins-30 vis isotoniske vandige opløsninger eller suspensioner, og disse kan f. eks. fremstilles forud for brug ud fra lyo-filiserede præparater, der indeholder det virksomme stof alene eller sammen med et bæremateriale, f. eks. mannit.

De farmaceutiske præparater kan være steriliseret og/el-35 ler indeholde hjælpestoffer, f. eks. konserverings-, stabiliserings-, befugtnings- og/eller emulgeringsmiddel, opløsningshjælpestoffer, salte til regulering af det osmotiske tryk og/eller puffer. De omhandlede farmaceutiske præparater, der om ønsket kan indeholde yderligere farma-

46 DK 160099 B

kologisk værdifulde stoffer, fremstilles på i og for sig kendt måde, f. eks. ved sædvanlige blandings-, granulerings-, dragerings-, opløsnings- eller lyofiliseringsfremgangsmå-der, og indeholder ca. 0,1 til ca. 100 %, især ca. 1 til 5 ca. 50 fo virksomt stof, lyofilisater indtil 100 $ virksomt stof.

I foreliggende beskrivelse indeholder de med "lav" betegnede organiske grupper, såfremt intet udtrykkeligt er defineret, indtil 7, fortrinsvis indtil 4 carbonatomer; acyl-10 grupper indeholder indtil 20, fortrinsvis indtil 12 og i første række indtil 7 carbonatomer.

De følgende eksempler tjener til illustration af fremgangsmåden ifølge opfindelsen. Forkortelsen DC betyder tyndt-lagskromatogram på silicagel.

15 Eksempel 1: 4-Acetylthio-3-methyl-2-oxo-azetidin (race-misk cis- og trans-forbindelse).

Til en opløsning af 438 mg (3,06 mmol) 4-acetoxy-3-methyl-azetidin-2-on (fremstillet ifølge K. Clauss et al, Lieb.

Ann. Chem., 1974. 539; racemisk blanding af cis- og trans-20 isomer i forholdet 3;i; smp. 53-65°C) i 1,13 ml vand og 0,27 ml acetone sættes ved stuetemperatur under nitrogenatmosfære dråbevist en opløsning af 0,33 ml thioeddike-syre i 4,5 ml i N natriumhydroxidopløsning, og der omrøres ved den samme temperatur i 3 timer. Reaktionsblan-25 dingen ekstraheres fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede organiske faser tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 4:1 til 3:2, og giver først den rene trans-forbindelse, derefter en blanding af cis-30 og trans-isomeren af titelforbindelsen og endelig den rene cis-forbindelse. DC: Rf = 0,31 (cis-isomer); 0,36 (trans-isomer) (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (C^C^): absorptionsbånd ved 2,95; 5,6; 5,87; 8,65; 8,85; 10,45pm· NMR-spektrum (i CDCl^/l00 MHz; i ppm): 35 cis-forbindelse: 6,2, IH, bred (udskiftning med D2O); 5,45, IH, d(J=5,5 Hz; 3,5-3,9, lH,m; 2,4, 3H,s; 1,3, 3H,d; trans-forbindelse: 6,5, lH, bred (udskiftning med D2O); 4,93; lH,d (J 2,5 Hz); 3,0-3,4, lH,m; 2,4, 3H,s; 1,42, 3H,d.

47 DK 16 O C S ? B

Eksempel 2: 2-(4-Acetylthio-3-methyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk eis,transblanding)

Ved stuetemperatur sættes til 129 mg (0,81 mmol) 4-acetyl-5 thio-3-methyl-2-oxo-azetidin (racemisk cis,trans-blanding) en opløsning af 500 mg 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester i en blanding af 10 ml toluen og 2,5 ml dimethylformamid. Efter tilsætning af frisk tørret molekyl-sigte omrøres blandingen under nitrogen i 15 timer ved stue-10 temperatur og derefter i 2 timer ved 50°C. Molekylsigten frafiltreres og vaskes med toluen, og filtrat og vaskevæske inddampes sammen under vakuum. Remanensen tørres under højvakuum og kromatograferes på silicagel med toluen-ethyl-acetat 9:1 til 8:1. Efter borteluering af ikke omsat 2-15 ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester elueres en blanding af cis-trans-isomere af titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,3$ (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CI^C^): absorptionsbånd ved 2,85; 5,62; 5,7; 5,9; 6,2; 6,55; 7,4 og 8,25 jim.

20 Eksempel 3: 2-(4-Acetvlthio-3-methyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenvl-phosphoranvliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,trans-blanding) a) En opløsning af 225 mg 2-(4-acetylthio-3-methyl-2-oxo- 1-azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester (ra-25 cemisk cis,trans-blanding) i 5 ml absolut dioxan sættes til en allerede i 30 minutter omrørt opløsning af 1 g poly-Hunigbase i 2,5 ml absolut dioxan. Efter tilsætning af en opløsning af 0,175 ml thionylchlorid i 1,5 ml absolut dioxan omrøres reaktionsblandingen i 100 minutter ved stuetem-30 peratur under nitrogen. Poly-Hiinigbasen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet inddampes under vakuum. DC af den rå 2-(4-acetyithio-3-methyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,transblanding ) : Rf = 0,62 (toluen-ethylacetat 2:3)·

DK 160099 B

48 b) Den opnåede rå 2-(4-acetylthio-3-methyl-2-oxo-l-azeti-dinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester opløses i 12 ml absolut dioxan, der tilsættes 1 g poly-Hunig-base, omrøres i 30 minutter, tilsættes derefter 312 mg triphenyl-5 phosphin, og blandingen omrøres i 15 timer ved 50°C under nitrogen. Poly-Hunig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel med tolu-en-ethylacetat og giver en cis,trans-blanding af titel-10 forbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC:

Rf = 0,28 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CI^Cl^): absorptionsbånd ved 5,67; 5,9; 6,15; 6,5-5; 6,95; 7,4; 9,0 og 9,25 jam.

Eksempel 4: 2,6-Dimethvl-2-penem-3-carboxvlsvre-p-nitro-15 benzylester (racemisk cis,trans-blanding)

Til en opløsning af 118 mg 2-[4-acetylthio-3-methyl-2-oxo- 1-azetidinyl]-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,trans-blanding) i 50 ml absolut toluen sættes en katalytisk mængde hydroqui-20 non, og der omrøres under nitrogen i 4$ timer ved 90UC.

Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 19:1.

Man får· en cis,trans-blanding (1:4) af titelforbindelsen i form af en gullig olie med følgende fysisk-kemiske egen-25 skaber: DC. Rf = 0,59 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (C^Clg): absorptionsbånd ved 5,6; 5,85; 6,3; 6,55; 7,4; 7,6; 8,3; 9,25jxn; NMR-spektrum (i CDCl^/100 MHz; i ppm): 8,4-8,2, 2H, 7,75-7,76, 2H,m; 5,7-5,2, 3H,m; 4,1-3,6, lH,m; 2,4, 2,43, 3H, 2s; 1,6-1,4, 3H, 2d.

30 Eksempel 5: 2,6-Dimethyl-2-penem-3-carboxylsyre (racemisk cis,trans-blanding)

Til en opløsning af 47 mg (o,14 mM) 2,6-dimethyl-2-penem- 3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,trans-

DK 160099B

49 blanding 1:4) i 3 ml absolut ethylacetat sættes 2 ml 0,2 M vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og 100 mg 10%1 s palladium/kul-katalysator, og der omrøres i 40 minutter under hydrogen af normaltryk. Den hydrogenerede blanding fra-5 filtreres for katalysator gennem diatomejord og vaskes med 0,2 M natriumhydrogencarbonatopløsning og flere gange med ethylacetat. Den vandige fase vaskes med methylenchlo-rid, syrnes med 5%'s vandig citronsyreopløsning og ekstra-heres fuldstændigt med methylenehlorid. De samlede orga-10 niske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum, og remanensen tørres under højvakuum.

Den opnåede titelforbindelse (cis,trans-blanding o/l:4) har følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,28 (toluen-ethylacetat-eddikesyre 60:40:5); IR-spektrum 15 (CH^Cl^): absorptionsbånd ved 3,5, 5,6, 5,95, 6,3 pm; NMR-spektrum (DMS0 d6/l00 MHz; i ppm): 5,65, lH,q; 3,3-3,9, 2H,m (+H20); 2,28, 3H,s. Smp. 119°C.

Eksempel 6: 2,6-Dimethyl-2-penem-3-carboxylsyre, natriumsalt (racemisk cis,trans-blanding) 20 En opløsning af 50 mg 2,6-dimethyl-2-penem-3-carboxylsyre i den ækvivalente mængde vandig natriumhydrogencarbonatop-løsning inddampes under vakuum, og der tørres ved højvakuum.

Eksempel 7: 4-Acetylthio-3~methyl-2-oxo-azetidin (racemisk trans-forbindelse) 1

Til en opløsning af 2 g 4-acetoxy-3-methyl-azetidin-2-on (fremstillet ifølge K. Clauss et al, Lieb. Ann. Chem., 1974. 539; racemisk blanding af eis- og trans-isomer i forholdet 3:1; smp. 53-65°C) i 5,16 ml vand og 1,25 ml acetone sættes dråbevist ved stuetemperatur under nitrogen-50 atmosfære en opløsning af 1,5 ml thioeddikesyre i 20,5 ml 1 N natriumhydroxidopløsning, og der omrøres ved den samme temperatur i 3 timer. Reaktionsblandingen ekstraheres fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede organiske faser

DK 160099B

50 tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på 150 g silicagel med toluen-ethyl-acetat 9*1 og giver den næsten rene trans-isomere af titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: 5 0,38 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CH2C12): ab sorptionsbånd ved 2,95; 5,6; 5,67; 7,37; 7,4-5; 6,62; 8,82pm. NMR-spektrum (i CDCl^/lOO MHz; i ppm) : 6,55, lH,m (udskiftning med D20); 4,9, lH,d, J=2 Hz, 3,35-3,05, lH,m; 2,36, 3H,s; 1,4, 3H,d,J= 7Hz. Efterfølgende isoleres en blanding 10 a-f cis- og trans-is ornerer.

Eksempel 6: 2-(4-Acetvlthio-3-methyl-2-oxo-l-azetidinvl)- 2-hvdroxveddikesyre-p-nitrobenzvlester (racemisk transforbindelse)

Ved stuetemperatur sættes der til 1,35 g (6,49 mmol) 4-15 acetylthio-3-methyl-2-oxo-azetidin (racemisk trans-forbindelse) en opløsning af 5 g 2-ethoxy-2-hydroxyeddike-syre-p-nitrobenzylester i en blanding af 100 ml toluen og 25 ml dimethylformamid. Efter tilsætning af frisk tørret molekylsigte omrøres blandingen under nitrogen i 15 20 timer ved stuetemperatur og derefter i 2 timer ved 50 C.

1 Molekylsigten frafiltreres og vaskes med toluen, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen tørres under højvakuum og kromatograferes på 100 g silicagel med toluen-ethylacetat 9·Ί. Efter bort-25 eluering af ikke omsat 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre~p-nitrobenzylester elueres titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,33 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CH2C12): absorptionsbånd ved 2,85; 5,6; 5,7; 5,87; 6,2; 6,52; 7,4; 8,28; 9-9,2 pm.

30 Eksempel 9: 2-(4-Acetylthio-3-methyl-2-oxo-l-azetidinyl)- 2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) a) En opløsning af 3 g 2-(4-acetylthio-3-methyl-2-oxo-l- 51

DK 16 O C 9 9B

azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester (race-misk trans-forbindelse) i 75 ml absolut dioxan sættes til en allerede i 30 minutter omrørt opløsning af 13,5 g poly-Hunig-base i 35 ml absolut dioxan. Efter tilsætning af en 5 opløsning af 2,4 ml thionylchlorid i 22,4 ml absolut dioxan omrøres reaktionsblandingen i 100 minutter ved stuetemperatur under nitrogen. Poly-Hiinig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet inddampes under vakuum. DC af den rå 2-(4-acetylthio-3-*methyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-10 chloreddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse): Rf = 0,59 (toluen-ethylacetat 2:3)· b) Den opnåede rå 2-(4~acetylthio-3-methyl-2-oxo-l-aze-tidinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester opløses i 175 ml absolut dioxan, der tilsættes 13,5 g poly-Hiinig-15 base og derefter 4,2 mg triphenylphosphin, og man omrører i 15 timer ved 50°C under nitrogen. Poly-Hiinig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen kromatogra-feres på silicagel med toluen-ethylacetat og giver trans-20 titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,24 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CH£ C^): absorptionsbånd ved 5,67; 5,9; 6,15; 6,55; 7,4; 9,0 pm.

Eksempel 10: 2,6-Dimethyl-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitro-25 benzylester (racemisk trans-forbindeIse)

Til en opløsning af 363 mg 2-(4-acetylthio-3-methyl-2-oxo-l-azetidinyl)-3-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i ISO ml absolut toluen sættes en katalytisk mængde hydroqui-50 non, og der omrøres under nitrogen i 4$ timer ved 90UC. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes på 20 g silicagel med toluen-ethylacetat 19:1. Man får trans-titelforbindelsen i form af gullige krystaller med smeltepunkt 141-143°C og følgende fysisk-

DK 160099B

52 kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,6 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CH2C12): absorptionsbånd ved 3,4; 5,57; 5,82; 6,27; 6,55; 7,4; 7,6; 8,3; 9,22 pm; NMR-spektrum (i CDCl^/ 100 MHz; i ppm): δ,25-8,15, 2H,m; 7,65-7,56, 2H,m; 5,55-5 5,12, 3H,m+d (J = 1,5 Hz); 3,9-3,6, lH,m; 2,36, 3H,s; 1,5, 3H,d.

Eksempel 11: 2,6-Dimethyl-2-penem-3-carboxylsyre (racemisk i trans-forbindelse)

Til en opløsning af δ0 mg (0,24 mmol) 2,3-dimethyl-2-penem-10 3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i 5 ml absolut ethylacetat sættes 3 ml 0,2 N vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og 150 mg 10$’s palladium/ kul-katalysator, og der omrøres i 50 minutter under hydrogen af normaltryk. Den hydrogenerede blanding frafiltreres 15 for katalysator gennem diatomejord og vaskes med 0,2 N

natriumhydrogencarbonatopløsning og flere gange med ethylacetat. Den vandige fase vaskes med methylenchlorid, syrnes med 5%'s vandig citronsyreopløsning og ekstraheres fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede organiske faser 20 tørres over natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum, og remanensen tørres ved højvakuum. Den opnåede titelforbindelse har følgende fysisk-kemiske egenskaber:

Smeltepunkt 119°C (sønderdeling); DC: Rf = 0,3 (toluen-ethylacetat-eddikesyre 60:40:5); IR-spektrum (KBr): ab-25 sorptionsbånd ved 3,3-3,5; 5,62; 6,0; 6,36; 6,95; 7,55; 7,85 pm; NMR-spektrum (DMS0 d6/l00 MHz; i ppm): 5,38, lH,d, (J = 1,5 Hz); 3,7, lH,m; 3,4, lH,m (udskiftning med D20); 2,2δ, 3H,s; 1,34, 3H,d.

Eksempel 12: 4-Acetylthio-3-isopropyl-2-oxo-azetidin 30 (racemisk trans-forbindelse)

Til en opløsning af 750 mg (4,38 mmol) 4-acetoxy-3-isopro-pyl-azetidin-2-on (racemisk blanding af cis- og trans-isomer i forholdet 1:3) i 3,6 ml vand og 0,9 ml acetone

DK 160099B

53 sættes dråbevist ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære en opløsning af 0,52 ml thioeddikesyre i 7 ml 1 N natriumhydroxidopløsning, og der omrøres ved den samme temperatur i 75 minutter. Reaktionsblandingen ekstraheres 5 fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede organiske faser tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på 40 g silicagel med toluen-ethylacetat 4:1 og giver trans-titelforbindelsen. DC: Rf = 10 0,4 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CHgC^) : absorptionsbånd ved 2,95; 3,37; 5,62; 5,#7; 8,8 pm. NMR-spektrum (i CDCl^/100 MHz; i ppm): 6,35, lH,m (udskiftning med D20); 5,04, lH,d (J=2,5 Hz); 3,0, lH,m; 2,37, 3H,s; 2,1, lH,m; 1,05, 3H,m.

15 Udgangsmaterialet fremstilles som følger: a) En blanding af 172,28 g (216,5 ml; 2 mol) isovaleraldehyd, 306 g (283 ml) eddikesyreanhydrid og 24 g frisksneltet kalium- acetat koges i 17 timer under tilbagesvaling. Den afkølede blanding vaskes med 5%Ts natriumcarbonatopløsning indtil 20 den organiske fase reagerer neutralt. Efter vask med vand og tørring over magnesiumsulfat destilleres den opnåede olie. Man får 3-methyl-l-butenylacetat (cis,trans-blanding 1:4) med smp. 135-140°C/760 mmHg.

b) Til en opløsning af 12,8 g (0,1 mol) 3-methyl-l-butenyl-25 acetat (cis,trans-blanding 1:4) i 40 ml absolut methylenchlorid sættes dråbevist ved stuetemperatur under nitrogen en opløsning af 8,72 ml N-chlorsulfonyl-isocyanat i 10 ml absolut methylenchlorid. Efter 4 timer hældes reaktionsblandingen langsomt på en blanding af 10 ml vand, 45 g is, 30 24 g natriumhydrogencarbonat og 8,3 g natriumsulfit, hvor ved temperaturen holdes på mellem 0 og 5°C ved lejlighedsvis tilsætning af is. Efter ca. 30 minutter reagerer den organiske fase neutralt, hvorefter den fraskilles. Den vandige fase ekstraheres med methylenchlorid. De organiske 35 faser samles, tørres over natriumsulfat og inddampes under

DK 160099 B

54 vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat og giver en cis,trans-blanding af 4-acetoxy- 3-isopropyl-azetidin-2-on i forholdet ca. 1:3. DC: Rf = 0,3 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (i methylenchlo-5 rid): absorptionsbånd ved 2,95; 3,37; 5,6; 5,72; 7,32; 8,1; 9,7; 10,2pm; NMR-spektrum (CDCl^/lOO MHz; i ppm): 6,75, IH, m (udskiftning med DgO); 5,85, d, J = 4,5 Hz (cis) og 5,6, d, J = 1,5 Hz (trans), IH; 3,03. lH,m; 2,1, 3H,2s; 2,3-1,8, lH,m; 1,1, 6H,m.

10 Eksempel 13: 2-(4-Åcetylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidin-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk transforbindelse)

Ved stuetemperatur sættes der til en opløsning af 6l6 mg (3,3mmol) 4-acetylthio-3-isopropyl-2-oxo-azetidin (racemisk 15 trans-forbindelse) i 48 ml toluen og 10,5 ml dimethyl-formamid 1,9 g 2-ethoxy-2-hydroxyeddikesyre-p-nitroben-zylester. Efter tilsætning af frisk tørret molekylsigte omrøres blandingen under nitrogen i 15 timer ved stuetemperatur og derefter i 2 timer ved 50°C. Molekylsigten fra-20 filtreres og vaskes med toluen, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen tørres ved højvakuum og kromatograferes på 60 g silicagel med toluen-ethylacetat 9:1· Man får de to med ikke omsat 2-ethoxy- 2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester noget forurenede 25 trans-isomere af titelforbindelsen med følgende fysiskkemiske egenskaber: DC: Rf = 0,4 og 0,37 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CH^Cl^): absorptionsbånd ved 5,62; 5,68; 6,55; 7,42 pm.

Eksempel 14: 2-(4-Åcetylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidin-50 yl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzyl-ester (racemisk trans-forbindelse) a) En opløsning af 1,175 g 2-(4-acetylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester 55

DK 160059B

(racemisk trans-forbindelse) i 21 ml absolut dioxan sættes til en allerede i 30 minutter omrørt opløsning af 3,3 g poly-Hunig-base i 10 ml absolut dioxan. Efter tildrypning af en opløsning af 0,67 ml thionylchlorid i 6,3 ml absolut 5 dioxan omrøres reaktionsblandingen i 90 minutter ved stuetemperatur under nitrogen. Poly-Hunig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet inddampes under vakuum.

Den opnåede rå 2-(4-acetylthio-3-isopropyl-2-oxO“l-azeti-dinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk transit) forbindelse) kan uden videre rensning anvendes til det følgende trin.

b) Den opnåede rå 2-(4-acetylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester opløses i 50 ml absolut dioxan, der tilsættes 3,δ g poly-Hunig-15 base og omrøres i 30 minutter, og endelige tilsættes der 1,13 g triphenylphosphin og omrøres i 15 timer ved 50°C under nitrogen. Poly-Hunig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen kromatograferes på 60 g silicagel 20 med toluen-ethylacetat 7:3 og giver trans-titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,25 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CHgC^): absorptionsbånd ved 5,7; 5,9; 6,17; 6,55; 7,42; 9,05 pm.

Eksempel 15: 2-Methyl-6-isopropyl-2-penem-3-carboxylsvre-p-25 nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse)

Til en opløsning af 660 mg 2-(4-acetylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i 300 ml absolut toluen sættes en katalytisk mængde hydroquinon, 30 og der omrøres under nitrogen i 4$ timer ved 90UC. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes på 30 g silicagel med toluen-ethylacetat 19:1.

Man får trans-titelforbindelsen efter omkrystallisation fra diethylether-methylenchlorid i form af farveløse krystaller 56 DIS ί < π π ο Ο ο U W ; υ ·,./ υ V 7 Ο med følgende fysisk-kemiske egenskaber: Smeltepunkt: 138-139°C; DC: Rf = 0,59 (toluen-ethylacetat 2:3): IR-spektrum (CH^Clg): absorptionsbånd ved 5>57; 5,82; 6,27; 6,55; 7,4; 7,6pmy NMR-spektrum (i CDCl^/100 MHz; i ppm): 5 8,3-8,2, 2H,m; 7,5-7,4, 2H,m; 5,75-5,1, 3H,m; 3,6-3,5, IH, dd, J=8 og 1,5 Hz; 2,35, 3H,s; 1,07, 6H,m.

Eksempel 16: 2-Methyl-6-isopropyl-2-penem-3-carboxylsyre (racemisk trans-forbindelse)

Til en opløsning af 100 mg 2-methyl-6-isopropyl-2-penem-10 3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i 7 ml absolut ethylacetat sættes 4 ml 0,2 N vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og 50 mg 10$Ts palladium/ kul-katalysator, og der omrøres i 30 minutter under hydrogen af normaltryk. Den hydrogenerede blanding frafiltre-15 res for katalysator gennem diatoméjord og vaskes med 0,2 N natriumhydrogencarbonatopløsning og flere gange med ethylacetat. Den vandige fase vaskes med methylenchlorid, syrnes med 5 s vandig citronsyreopløsning og ekstrahe-res fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede organi-20 ske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum, og der tørres ved højvakuum. Den opnåede titelforbindelse har følgende fysisk-kemiske egenskaber: Smeltepunkt 140-143°C (sønderdeling); DC: Rf = 0,37 (toluen-ethylacetat-eddikesyre 60:40:5); IR-spek-25 trum (KBr): absorptionsbånd ved 3,5; 5,62; 6,0; 6,35; 6,9; 7,52; 7,8; 8,0 pm; NMR-spektrum (DMS0 d6/l00 MHz; i ppm): 5,52, lH,d, J=l,5 Hz; 3,56, IH + 2H20, dd, J= 1,5 og 7,5 Hz, 2,26, 3H,s; 2,04, lH,m; 1-0,9, 6H,m.

Eksempel 17: 4-Acetylthio-3-benzyl-2-oxo-azetidin (race-50 misk trans-forbindelse)

Til en opløsning af 2,19 g (10 mM) 4-acetoxy-3-benzyl-azetidin-2-on (racemisk blanding af cis- og trans-isomer i forholdet 9:13) i 10 ml dioxan sættes dråbevist ved

DK 160099 B

57 stuetemperatur under nitrogenatmosfære en opløsning af 0,76 g (10 mmol·) thioeddikesyre i 10 ml IN natriumhydroxidopløsning, og der omrøres ved den samme temperatur i 3 timer. Reaktionsblandingen ekstraheres fuldstændigt med methylen-5 chlorid. De samlede organiske faser tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatogra-feres på silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 og giver en cis,trans-blanding af titelforbindelsen i forholdet 2:10.

Ved omkrystallisation fra methylenchlorid/hexan ved -10°C 10 får man den rene trans-forbindelse med smeltepunkt 42-43°c.

DC: Rf = 0,52 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-spektrum (CHg Cl2): absorptionsbånd ved 2,95; 5,65; 5,95; 7,40; 6,6; 10,5jum. NMR-spektrum (i CDCL^/lOO MHz; i ppm): 7,24; 5H,m; 6,60, lH,b; 4,99, lH,d, J = 2Hz; 3,45, IH, dq, Jg = 15 S Hz; Jc = 6 Hz, JD = 2 Hz; 3,16, lH,q, JA = 15 Hz, Jc = 6 Hz; 3,00, IH,q, JA = 15 Hz, Jg = 6 Hz; 2,30, 3H,s.

Udgangsmaterialet kan fremstilles som følger: a) En blanding af 25 g (0,1«6 mol) 3-phenylpropionaldhyd, 50 ml eddikesyreanhydrid og 50 ml pyridin anrøres i 15 timer ved 20 100°C og inddampes derefter under vandstrålevakuum. Rema nensen opløses i methylenchlorid, og opløsningen vaskes med 5 fo1 s vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og citronsyreopløsning, tørres over natriumsulfat og befries for opløsningsmiddel under vakuum. Remanensen destilleres 25 under vakuum. Man får 3-henyl-l-propenylacetat (cis,transblanding 1:1) med kogepunkt 6l-65°C/ 1 mmHg.

b) En ved 0°C fremstillet blanding af 17,6 g (0,1 mol) 3-phenyl-l-propenylacetat (cis,trans-blanding 1:1) og 14,15 g (0,1 mmol) N-chlorsulfonyl-isocyanat omrøres i 6 timer ved 50 10-15°C. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml koldt methylenchlorid og hældes langsomt på en blanding af 10 ml vand, 45 g is, 24 g natriumhydrogencarbonat og 17 g natriumsulfit. Efter filtrering fraskilles den organiske fase. Den vandige fase ekstraheres med methylenchlorid.

DK 160099 B

58

De organiske faser samles, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på si-licagel med toluen-ethylacetat 9:1 til 8:2 og giver en cis, trans-blanding af 4-acetoxy-3-benzyl-azetidin-2-on i for-5 holdet 9:13· DC: Rf = 0,5 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-spektrum (i methylenchlorid): absorptionsbånd ved 2,95;

5,6; 5,75; 7,35; 8,15; 8,65; 9,6; 10,25pm. NMR-spektrum (CDCl^/100 MHz; i ppm); 2,04,s og 2,08,s,3H; 2,95-3,15, 2H

m; 3,35-3,0, lH,m; 5,50, 0,6 H,d, J = 2Hz (trans); 5,86, 10 0,4 H,d, J- 4 Hz (cis); yderligere signaler ved 6,80-7,45·

Eksempel 18: 2-(4-Acetylthio-3-benzyl-2-oxo-l-azetidinvl)- 2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk transforbindelse )

Ved stuetemperatur sættes der til en opløsning af 0,73 g 15 (3,lmmol) 4-acetylthio-3-benzyl-3-oxo-azetidin (racemisk trans-forbindelse) i 50 ml toluen og 20 ml> dimethylformamid 1 2 g 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester. Efter ! tilsætning af frisk tørret molekylsigte omrøres blandingen I under nitrogen i 16 timer ved stuetemperatur og derefter 20 i 2 timer ved 50°C. Molekylsigten frafiltreres og vaskes med toluen, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen ved højvakuum. Remanensen tørres ved højvakuum og kromatograferes pa silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 til 4:1. Man far de to med ikke omsat 2-ethoxy-2-hydroxy-25 eddikesyre-p-nitrobenzylester noget forurenede trans-isomere af titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egneskaber: DC: Rf = 0,57 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-spektrum (CHgCl^J: absorptionsband ved 2,85; 5,60; 5,70; 6,00; 6,20; 6,55; 7,40; 8,25; 9,00; 11,75 pm.

^0 Eksempel 19: 2-(4-Acetylthio-3-benzyl-2-oxo-l-azetidinvl)-

2-triphenyl-phosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzvlester (racemisk trans-forbindelseJ

a) Til en opløsning af 1,5 g 2-(4-acetylthio-3-benzyl-2- 59 p. I / ο / Λ ο Λ Π, ο

DK 1 duuV 7U

oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i 20 ml tør dioxan sættes 6 g poly-Hunig-base. Efter tildrypning af en opløsning af 1,5 ml thionylchlorid i 10 ml dioxan omrøres reaktionsblandin-5 gen i 60 minutter ved stuetemperatur under nitrogen. Poly-Hunig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet inddampes under vakuum. Den opnåede rå 2-(4-acetyl-thio-3-benzyl-2-oxo-l-azetidinyl]-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) kan uden 10 videre rensning anvendes til det næste trin.

b) Den opnåede rå 2-(4~acetylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester opløses i 20 ml tør dioxan, der tilsættes 6 g poly-Hiinig-base og omrøres i 30 minutter, og derefter tilsættes der 1,5 g 15 triphenylphosphin og omrøres i 16 timer ved 50°C under nitrogen. Poly-Hunig-basen frafiltreres og vaskes med dioxan, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethyl-acetat 9:1 til 1:1 og giver trans-titelforbindelsen med 20 følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf =0,50 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-spektrum (CHgClg): absorptionsbånd ved 5,7; 5,9; 6,2; 6,55; 7,00; 7,42; 9,05; 11,75 pm.

Eksempel 20: 2-Methyl-6-benzyl-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) 1

Til en opløsning af 0,90 g (1,3 mmol) 2-(4-acetylthio-3-benzyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i 50 ml tør toluen sættes en katalytisk mængde hydro-quinon, og der omrøres under nitrogen i to dage ved 90 C.

50 Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 9:1· Man får trans-titelforbindelsen efter omkrystallisation fra methylenchlorid-diethylether med følgende fysisk-kemiske egneskaber: Smeltepunkt: 182-1S3°C; DC: Rf = 0,«5 (toluen- i

DK 160099 B

60 ethylacetat 1:1): IR-spektrum (CHgClg): absorptionsbånd ved 1 5,60; 5,«5; 6,30; 6,55; 7,4; 7,6; «,25; 9,25; 11,70 pm? NMR-spektrum (i CDCl^/100 MHz; i ppm): 2,36, 3H,s; 3,12; IH, dd, = 14 Hz, Jg = 9Hz; 3,34, IH, dd, = 14 Hz, 5 Jc = 6 Hz; 4,03 , lH,dq, Jg = 9 Hz, Jq = 6 Hz, = 2 Hz; 5,40, lH,d, JD = 2 Hz; 5,25, lH,d, J = 14 Hz; 5,45, lH,d, J - 14 Hz; 7,30, 5H,m; '/,66, 2H,d, J = 9 Hz; 8,27, 2H,d, J = 9 Hz.

Eksempel 21: 2-Μθίίιγ1-6-66ηζν1-2-ρβηθΠΐ-3-carboxylsyre 10 (racemisk trans-forbindelse)

Til en opløsning af 200 mg 2-methyl-6-benzyl-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i 12 ml absolut ethylacetat sættes tt ml 0,2 M vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og 409 mg 10$fs palladium/ 15 kul-katalysator, og der omrøres i 60 minutter under hydrogen af normaltryk. Den hydrogenerede blanding frafiltreres for katalysator gennem diatomejord. Den vandige fase fraskilles, syrnes med 5%rs vandig citronsyreopløsning og ekstraheres fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede 20 organiske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum, og remanensen tørres ved højvakuum.

I Den opnåede titelforbindelse har følgende fysisk-kemiske I egenskaber: DC: Rf = 0,31 (toluen-ethylacetat-eddikesyre [ 60:40:5); IR-spektrum (KBrJ: absorptionsbånd ved 3,20- 25 4,30b; 5,65; 6,0; 6,35; 6,5; 7,5; 7,9; 8,2 pm.

Eksempel 22: 4-Ethylthio-thiocarbonylthio-3-isopropyl-2-oxoazetidin (racemisk trans-forbindeIse)

Til en opløsning af 195 mg (1,14 mM) 4-acetoxy-3~isopro-pyl-azetidin-2-on (racemisk blanding af cis- og trans-30 isomer i forholdet 1:3) i 1 ml vand og 0,2 ml acetone dryppes ved stuetemperatur under nitrogenatmosfære en opløsning af 230 mg kaliumethyltrithiocarbonat i 1,5 ml vand, og der omrøres ved den samme temperatur i 120 minutter.

DK 160099 B

61

Reaktionsblandingen ekstraheres fuldstændigt med methylen-chlorid. De samlede organiske faser tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatogra-feres pa 12 g silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 og gi-5 ver trans-titelforbindelsen. Smeltepunkt: 65-66°C. DC:

Rf = 0,5 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (CH2CI2): absorptionsbånd ved 2,95; 3,37; 5,62; y,25 μη. NMR-spektrum (i CDCl^/100 MHz; i ppm): 6,65, lH,m (udskiftning med D^OJ ; 5,4, lH,d (J = 2,5 Hz J; 3,39, 2H,q; 3,05, lH,m; 2,15, lH,m; 10 1,3», 3H,t; 1,1, 6H,m;

Eksempel 23: 2-(4-Ethylthiothiocarbonylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelseJ

Ved stuetemperatur sættes der til en opløsning af 137 mg 15 (0,55 mmol) 4-ethylthiothiocarbonylthio-3-isopropyl-2-oxo- azetidin (racemisk trans-forbindelse) i o ml toluen og 2 ml dimethylformamid 311 mg 2-ethoxy-2-hydroxy-eddike-syre-p-nitrobenzylester. Efter tilsætning af frisk tørret molekylsigte omrøres blandingen under nitrogen i 15 timer 20 ved stuetemperatur og derefter i 2 timer ved 50°C. Mole-kylsigten frafiltreres og vaskes med toluen, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen tørres ved højvakuum og kromatograferes på ΰ0 g silicagel med toluen-ethylacetat 9:1. Man får de to med ikke 25 omsat 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester noget forurenede trans-isonere af titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,4 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum (C^CLJ: absorptionsbånd ved 5,62; 5,7; 6,55; 7,42; «,2; 9,2 μια.

30 Eksempel 24: 2-(4-Ethylthiothiocarbonylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse)

En opløsning af 606 mg 2-(4-ethylthio-thiocarbonylthio-3- 62 isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitro-benzylester (racemisk trans-forbindelse) i 6 ml absolut te-trahydrofuran afkøles til -15°C, og til oplosningen sættes under omrøring 0,16 ml (2,23 mmol) thionylchlorid og deref-5 ter langsomt en oplosning 0,31 ml triethylamin i 0,3 ml ' absolut tetrahydrofuran. Reaktionsblandingen omrøres i en time ved 0°C, der tilsættes 30 ml koldtmethylenchlorid, og man vasker med iskold 2 N saltsyre. Den organiske fase vaskes med vand til neutralreaktion, tørres med natrium-j 10 sulfat og inddampes under vakuum. Den opnåede rå 2-(4- ethylthiothiocarbonylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)- 2-chlor-eddikesyre-p-nitrobenzylester opløses i 1,5 ml tør tetrahydrofuran, der tilsættes 0,71 g triphenylphos-phin, og man omrører under en nitrogenatmosfære ved stue-15 temperatur i 16 timer. Reaktionsblandingen fortyndes med methylenchlorid, vaskes først med mættet vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning og derefter med vand, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen giver efter kromatografi pa silicagel med toluen-ethylace-20 9;1 titelforbindelsen. DC: Rf = 0,5 (toluen-ethyl- , acetat 2:3); IR-spektrum (CH^C^): absorptionsband ved j 3 ,4; 5,7; 6,15; 6,55; 7,45; 9,05; 9,25 μια.

I Eksempel 25: 2-Ethylthio-6-isopropyl-2-penem-3-carboxyl- syre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) 1

Til en opløsning af 600 mg (0, »55 mmol) 2- (4-ethylthio-thio-carbonylthio-3-isopropyl-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenyl-phosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) i.250 ml absolut o-xylen sættes en katalytisk mængde hydroquinon, og der omrøres under 50 nitrogen i 4o timer under tilbagesvaling. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes pa 35 g silicagel med toluen-ethylacetat 19:1 · Man får trans-titel-forbindelsen efter omkrystallisation fra diethylether-methylenchlorid i form af farveløse krystaller; DC: Rf = 35 0,62 (toluen-ethylacetat 2:3); IR-spektrum CH2C12): ab- 63

DK '60099B

sorptionsbånd ved 5,57; 5,9; 6,55; 7,4; 7,52 μπι.

Eksempel 26: 2-Ethylthio-6-isopropyl-2-penem"3-carboxylsyre (racemisk trans-forbindelse)

Til en oplosning af 100 mg 2-ethylthio-6-isopropyl-2-5 penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk transforbindelse j i 6 ml absolut ethylacetat sættes 4 ml 0,2 N vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og 150 ml 10$Ts palladium/kul-katalysator, og der omrøres i 240 minutter under hydrogen af normaltryk. Den hydrogenerede blanding P0 frafiltreres for katalysator gennem diatomejord, og vaskes med 0,2 N natriumhydrogencarbonatopløsning og flere gange med ethylacetat. Den vandige fase vaskes med methylen-chlorid, syrnes med 5$fs vandig citronsyreopløsning og ekstraheres fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede 15 organiske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum, og remanensen tørres ved højvakuum.

Den opnåede titelforbindelse har følgende fysisk-kemiske egenskaber: DG: Rf = 0,35 (toluen-ethylacetat-eddikesyre 60:40:5); IR-spektrum (KBr): absorptionsbånd ved 3,5; 20 5,62; 6,0; 6,75; 6,9; 7,52; 7,9; 8,15; 8,9 μια.

Eksempel 27: 6-Piazo-penicillansyre-methylester.

På lignende måde som beskrevet i tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.305.972 opløses 1,01 g rå 6(3-(N-nitroso)-phenoxyacetamido-penicillansyre-methylester (fremstillet 25 ifølge US-patentskrift nr. 3,«80,837) ved stuetemperatur i 75 ml absolut chloroform, og efter tilsætning af 200 ml mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning omrøres der i 9 timer ved mellem 10 og 20°C. Den chloroforme opløsning fraskilles, vaskes med vand og tørres over na-30 triumsulfat. Efter afdampning af opløsningsmidlet under vakuum ved stuetemperatur fås den rå diazoforbindelse i form af en olie. Den kan uden yderligere rensning anvendes til den følgende reaktion. IR-spektrum (i methylen- 64

DK 16 O O S 9 B

. chlorid: karakteristiske absorptionsbånd ved 3,40; J4,«0; 5,55; 5,70; 6,23; 6,50; 6,63; 7,75; 3,22; 3,85; 10,6; 11,42 pm.

Eksempel 28: 6 α-Methoxv-penicillansyre-methylester.

5 Til en opløsning af 2 g rå 6-diazo-penicillansyre-methyl-ester i 15 ml absolut methylenchlorid sættes 5 ml methanol og nogle dråber 30%'s vandig perchlorsyre, og der omrøres i 15 minutter ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med 30 ml natriurichlor idopløsning, tørres over natrium-10 vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, derefter med vand og endelig med natriumchlorid, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatogra-feres pa silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 og 4:1 og giver den let forurenede titelforbindelse. IR-spektrum 15 (i methylenchlorid): karakteristiske band ved 3,40; 5,63; i 5,70; 6,90; 7,30; 7,68; 8,25; »,47; 8,90; 9,15; 9,70; ; 9,86 pm.

: Eksempel 29: éa-Methoxv-penicillansyre-methylester-l- oxid ; 20 En opløsning af 473 mg 6a-methoxy-penicillansyre-methyl- ester i 10 ml methylenchlorid afkøles til 0°C, der tilsættes 334 mg m-chlorperbenzoesyre, og den opnåede suspension videreomrøres i 1 time ved den samme temperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med 50 ml methylenchlorid, 25 vaskes to gange med vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og med vand og tørres over natriumsulfat. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatogra-feres på silicagel. Ved hjælp af toluen-ethylacetat 9:1 og 4:1 fås titelforbindelsen i form af et hvidt pulver.

30 En analytisk prøve omkrystalliseres fra methylenchlorid-diethylether-pentan og har følgende fysisk-kemiske egenskaber: Smp. 121°C; = +281°+1°; IR-spektrum (i meth ylenchlorid) : karakteristiske absorptionsbånd ved 3,40; 5,58; 5,70; 6,85; 6,97; 7,75; 8,20; 3,90; 9,45pm.

65 Γ\1/ ί ί η η C Ο Q ϋ!\ ! υ ί ,· u >· 7 Ο

Eksempel 30: 2-( (3S ,4R) -4-(benzothlazol-2-ylrHthifn methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylensmørsyre-methylester

En opløsning af 307 mg 6a-methoxy-penicillansyre-methyl-ester-l-oxid opløses i 10 ml toluen, der tilsættes 196,57 5 mg 2-mercaptobenzothiazol, og man opvarmer i 90 minutter under tilbagesvaling. Opløsningsmidlet afdestilleres under vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel. Ved eluering med toluen-ethylacetat 9*1 fås titelforbindelsen i form af en farveløs olie. IR-Spektrum (i methylenchlorid): 10 karakteristiske bånd ved 3,40; 5,62; 5,72; 6,68; 7,02; 7,25; 7,50; 8,10; 8,20; 8,60; 8,95; 9,55; 9,92; 10,92 pm.

Eksempel 31: 2-((3S,4R)-4-(benzothiazol-2-yldithio)-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-methylester

Til en opløsning af 432 mg 2-1(3S,4R)-4-(benzothiazol-2- 15 yldithio)-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylensmørsyre -methylester i 25 ml methylenchlorid sættes 0,1 ml triethylamin, og der omrøres ved stuetemperatur i 100 minutter. Reaktionsblandingen fortyndes med methylenchlorid, vaskes po gange med vandig citronsyreopløsning 20 og vand, tørres over natriumsulfat og befries for opløsningsmiddel under vakuum. Remanensen renses ved kromatografi pa silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 og 4:1 og giver titelforbindelsen i form af en olie. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 25 3,40; 5,63; 5,78; 6,85; 7,03; 7,23; 7,32; 7,0; 8,15; 8,87; 9,00; 9,25; 9,92 ym.

Eksempel 32: 2-((3S,4R)-4-Acetvlthio-3-methoxv-2-oxoaze-tidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-methylester

En opløsning af 372 mg 2-((3S,4R)-4-(benzothiazol-2-yldi-50 thio)-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-methylester i 10 ml dimethylformamid afkøles til -20°C, der tilsættes 10 ml af en opløsning af 2 g natriumborhydrid

DK 160099 B

i i 66 i i 200 ml dimethylformamid, og man omrører ved den samme , temperatur i 30 minutter. Til reaktionsblandingen sættes ' 5 ml frisk destilleret acetylbromid, og der videreomrøres ved 0°C i 110 minutter. Efter tilsætning af 150 ml benzen : 5 vaskes reaktionsblandingen først med natriumhydrogencar- bonatopløsning og derefter med vand, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen giver efter kromatografi på silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 titelforbindelsen i form af en let gullig olie, IR-Spektrum I 10 (i methylenchlorid): karakteristiske absorppionsbånd ved 3,40; 5,63; 5,77; 5,83; 6,10; 6,95; 7,20; 7,30; 7,70; 8,12; 8,90; 9,20; 9,90; 10,20; 10,50; 11,83 pm.

Eksempel 33-' 2-( (3S ,4R) -4-Acetylthio-3-methoxy-2-oxoaze-tidin-l-yl)-2-oxoeddikesyre-methylester 15 Gennem en til -30°C afkølet opløsning af 87 mg (0,31 mmol) 2- ((3S,4RJ-4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)- 3- methylcrotonsyre-methylester i 5 ml ethylacetat ledes 3 ækvivalenter ozon. Reaktionsblandingen fortyndes med 30 ml methylenchlorid og rystes i 2 minutter med en 10%Ts 20 vandig natriumhydrogensulfitopløsning. Den organiske fase fraskilles, vaskes med mættet natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum.

IR-Spektrum af den opnåede olieagtige titelforbindelse (i methylenchlorid): karakteristiske band ved 3,40; 5,47; 25 5,67; 5,«2; 6,97; 7,33; 8,10; 8,92; 9,88; 10,40 pm. Det opnåede produkt kan uden yderligene rensning anvendes i ! det følgende trin.

Eksempel 34: (3S,4R)-4-Acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin

En opløsning af 71,20 mg 2-( (3S ,4Rj-4-acetyltMo-3-meth-50 oxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-oxoeddikesyre-methylester (råprodukt) i 10 ml 1 %Ts vandig methanol omrøres i 16 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med methylenchlorid, vaskes med vand, tørres over natriumsulfat 67 OK i l!'' ' og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes pa silicagel med toluen-ethylacetat y:l og giver titelforbindelsen. IR-Spektrum (i methylenchloridj: karakteristiske absorptionsband ved 2,95; 3,4-0; 5,60; 5,83; 7,00; 7,37; 7,52 5 8,25; 8,70; 8,85; 10,5; 12,15 jam.

Eksempel 35: 2-((3S,4R)-4~Acetylthio-3-methoxy-2-oxoaze-tidin-l-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester

Til en opløsning af 245 mg (3S,4R)-4-acetylthio-3-methoxy- 2-oxoazetidin i en blanding af 8 ml toluen og 2 ml dimeth-10 ylformamid sættes 714 mg 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester og 4 g molekylsigte A4, og der omrøres yed stuetemperatur i 16 timer. Molekylsigten bortfiltreres, og filtratet inddampes under vakuum. Remanensen kromato-graferes pa silicagel, hvorved der ved eluering med to-15 luen-ethylacetat 9:1 og 4^1 fås titelforbindelsen, der er noget forurenet med glyoxylat.

Eksempel 36: 2-((3S,4R)-4-Acetylthio-3-methoxy-2-oxo-azetidin-l~yl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester 20 a) En suspension af 2 g poly-Hunig-base i 8 ml dioxan omrøres i 30 minutter ved stuetemperatur, og der tilsættes 832 mg 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester opløst i 12 ml dioxan og derefter langsomt en opløsning af 0,54 ml thio-25 nylchlorid i 10 ml dioxan. Blandingen omrøres i 2 timer ved stuetemperatur, poly-Hiinig-basen bortfiltreres, og filtratet inddampes under vakuum. Remanensen renses ved kromatografi pa silicagel med poluen-ethylacetat 1:1 og giver 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-30 l-yl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester i ra form.

b) Til en opløsning af 833 mg 2-((3S,4Rj-4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenz-

I DK 160099B

i 68 I ylester i 50 ml dioxan sættes 812 mg triphenylphosphin og ; 3 g poly-Hunig-base, og der omrøres i 16 timer ved 50°C.

Poly-Hunig-basen fjernes ved filtrering, og filtratet inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silica-; 5 gel med toluen-ethylacetat 9:1, 4:1 og 1:1 og giver titel forbindelsen. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,40; 5,67; 5,tf5; 6,15; 6,55; I 6,97; 7,42; 8,0; 9,03 pm.

Eksempel 37: (5R,6S)-2-Methvl-6-methoxv-2-penem-3-carboxyl-10 svre-p-nitrobenzylester

Til en opløsning af 244 mg 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester i 100 ml toluen sættes en katalytisk mængde hydroquinon, og der omrøres i 32 timer ved 90°C under nitrogen. Toluenet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 19:1- Titelforbindelsen fås i form af et fast hvidt stof. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,40; 5,55; 6,30; 6,55; 7,03; 20 7,42; 7,60; 8,20;. 8,42; 8,60; 8,90; 9,20; 9,60; 11,7pm? NMR-spektrum (CDCl^/l00 MHz; i ppm): 8,22, 2H,d, J=8 Hz; 7,64, 2H,d, J=8 Hz; lH,d, J=2 Hz; 5,35, 2H,AB; 4,91, lH,d J-2 Hz; 3,57, 3H,s; 2,37, 3H,s.

Eksempel 38: (5R,6S)-2-Methyl-6-methoxy-2-penem-3-carb-25 oxylsyre

Til en opløsning af 34 mg (5R,6S)-2-methyl-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester i en blanding af 2 ml ethylacetat og 2 ml 2 M natriumhydrogencarbonatop-løsning sættes 75 mg 10%1 s palladium/kul-katalysator, og 30 der hydrogeneres under atmosfæretryk i l| time ved stuetemperatur. Den hydrogenerede blanding filtreres gennem diatomejord, og filtreremanensen vaskes med 1 ml 2 M vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og ethylacetat.

DK 1Γ>0099 Β 69

Den vandige fase skilles fra filtratet, syrnes med 0,1 M vandig citronsyreopløsning og ekstraheres flere gange med methylenchlorid. De samlede methylenchloridekstrakter tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. IR-spek-5 trum (i methylenchlorid) af den opnåede rå titelforbindel-se: karakteristiske absorptionsbånd ved 3,40; 5,57; 5,SO; 5,95; 6,30; 7,00; δ,20; 9,90 μια.

Eksempel 39: 6a-Phenoxyacetoxy-penicillansyre-methylester På lignende måde som beskrevet af D. Hauser og Η. P. Sigg 10 i Helv. Chim. Acta 50, 1327 (1967), omrøres en opløsning af 7,4 g (20,3 mmol) 6β-(N-nitroso/-phenoxyacetamido-peni-cillansyre-methylester (råprodukt ifølge US-patentskrift nr. 3,S80,837) i 100 ml benzen i 3 timer ved 50°C under en nitrogenatmosfære. Opløsningsmidlet afdampes under 15 vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 9**1. Det opnåede olieagtige produkt omkrystalliseres fra diethylether-hexan og giver titelforbindelsen med smeltepunkt 71°C; ^ = 114°± 1° (CHCl^); IR-spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorp-20 tionsbånd ved 3,4; 5,6; 5,7; 6,25; 6,69; 7,17; S,26; 8,55; 9,05; 9,lSpm.

Eksempel 40: 6a-Phenoxyacetoxy-penicillansyre-methylester- 1-oxid

Til en opløsning af 1,16 g (3,IS mmol) 6a-phenoxy-acetoxy-25 penicillansyre-methylester i 30 ml absolut methylenchlorid sættes ved 0°C portions vist 1,1 g (jl ækvivalent) 50%'s m-chlorperbenzoesyre. Efter afsluttet tilsætning omrøres reaktionsblandingen i 30 minutter ved 0°C, derefter fortyndes med methylenchlorid, vaskes først med vandig na-30 triumhydrogencarbonatopløsning, derefter med vand og endelig med natriumchloridopløsning, og der tørres over natriumsulfat. Efter afdampning af opløsningsmidlet kromatograferes remanensen på silicagel med toluen-ethylacetat ! 70

DK 160099B

i 4:1· Man får titelforbindelsen i form af et skum; DC: i Rf = 0,24 (toluen-ethylacetat 1:1), IR-spektrum (i methyl- i enchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,33; 3,41? i 5,$7; 5,72; 6,27; 6,72; 7,0; 8,25; S,6; 9,21; 9,46 m.

j 5 Eksempel 41: 2-((3S,4R)-4-(Benzothiazol-2-yldithio)-3-phenoxv- I acetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylensmørsyre-methylester I En opløsning af 1,01 g (2,65 ntmol) 6a-phenoxyacetoxy-peni- cillansyre-methylester-l-oxid opløses i 30 ml toluen, og der tilsættes 445 mg (2,65 mmol) 2-mercaptobenzothiazol og 10 opvarmes i 60 minutter under en nitrogenatmosfære under tilbagesvaling. Opløsningsmidlet afdestilleres under vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel. Ved eluering med toluen-ethylacetat 19:1 fås titelforbindelsen i form ! af en svagt brun olie. IR-Spektrum (i methylenchlorid): 15 karakteristiske bånd ved 3,45; 5,62; 5,75; 6,27; 6,71; 6,S9; 7,05; 7,30; 7,54; 7,63; S,15; δ,55; 9,15; 9,35; 9,95pm; DC: Rf = 0,63 (toluen-ethylacetat 1:1).

! Eksempel 42: 2-((3S ,4R)-4-(Benzothiazol-2-yiaithic>) -3- I phenoxvacetoxy-2-oxoazetidin-l-vl)-3-methylcrotonsyre- : 20 methylester

Til en opløsning af 1,28 g (2,41 mmol) 2-((3S,4R) -4-(benzo-thiazol-2-yldithio)~3~phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-! 3-methylensmørsyre-methylester i 30 ml methylenchlorid sættes 0,4 ml triethylamin, og der omrøres ved stuetem-25 peratur i 30 minutter. Reaktionsblandingen fortyndes med 50 ml methylenchlorid, vaskes først med 2 N saltsyre, derefter med vand og endelig med natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og befries for opløsningsmiddel under vakuum. Remanensen renses ved kromatografi på si-30 licagel med toluen-ethylacetat 19:1 og giver titelforbindelsen i form af en svagt gul olie. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,46; : 5,69; 5,82; 5,90; 6,28; 6,73; 6,90; 7,06; 7,28; 7,38; 7,75; 71

DK ir,Γ.399 B

S,20; S,60; 9,27; 9,96 jjmj DC: Rf = 0,6l (toluen-ethylacetat 1:1).

Eksempel 43 : 2— C (3S ,4R)-4-Acetvlthio-3-phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-methylester 5 En opløsning af 687 mg (1,29 mmol) 2-((3S,4R)-4-(benzothia-zol-2-yldithio)-3-phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-methylester i 14 ml dimethylformamid sættes til en til -20°C afkølet opløsning af 76 mg (2 mmol) natriumborhydrid i 10 ml dimethylformamid, og der om-10 røres ved den samme temperatur i 10 minutter. Til reak-tionsblandingen sættes 7 ml friskdestilleret acetylbromid, og der videreomrøres ved 0°C i 40 minutter. Efter tilsætning af 400 ml benzen vaskes reaktionsblandingen først med vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, derefter med 15 vand og endelig med natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen giver efter kromatografi på silicagel med toluen-ethylacetat titelforbindelsen i form af en olie, der på silicagelpla-der kan renses yderligere med toluen-ethylacetat 4;1· 20 Man får titelforbindelsen i olieagtig form; IR-spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,45; 5,63; 5,83; 6,27; 6,70; 7,00; 7,25; 7,35; 8,15; 8,58; 8,93; 9,20 pmjDC: Rf = 0,54 (toluen-ethylacetat 1:1).

Eksempel 44: 2-((3S,4R)-4-Acetvlthio-3-phenoxvacetoxy-2-25 oxoazetidin-l-yl)-2-oxoeddikesyre-methvlester

Gennem en til -20°C afkølet opløsning af 170 mg (0,42 mmol) 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-methylester i 5 ml ethylacetat ledes 4 ækvivalenter ozon. Reaktionsblandingen fortyndes 50 roed 5 ml ethylacetat og rystes intensivt med en 10%Ts vandig natriumhydrogensulfitopløsning. Den organiske fase fraskilles, vaskes med vand og mættet natriumchlondopløs-ning, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum.

i DK 160099B

72 IR-Spektrum af den opnåede olieagtige titelforbindelse (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 3,38; 5,4#; ; 5,63; 5,70; 5,83; 6,27; 6,70; 7,00; 7,40; S,07; 8,25; 1 S,63; 8,95 jum.Det opnåede produkt kan uden yderligere 5 rensning anvendes i det følgende trin.

Eksempel 45: (3S,4R)-4-Acetylthio-3-phenoxyacetoxy-2-oxo-azetidin

En opløsning af 129 mg (0,34 mmol) (3S,4R)-2-(4-acetylthio- 3-phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-oxoeddikesyre-10 methylester (råprodukt) i 10 ml 1 fo*s vandig methanol omrøres i 4 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med 50 ml methylenchlorid, vaskes først med : vand og derefter med mættet natriumchloridopløsning, tør res over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Rema-i 15 nensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylace- tat 9:1 og giver titelforbindelsen. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,95; 3,45·? 5,55; ; 5,60; 5,83; 6,25; 6,63; 3,33; $,85pm$DC: Rf = 0.36 (to- luen-ethylacetat 1:1).

I 20 Eksempel 46: 2-((3S,4R)-4-Acetylthio-3-phenoxyacetoxy-j 2-oxoazetidin-l-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester i Til en opløsning af 233 mg (3S,4R)-4-acetylthio~3-methoxy- 2-oxoazetidin i en blanding af 3 ml toluen og 2 ml dimeth-ylformamid sættes 760 mg 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-25 nitrobenzylester og 4 g molekylsigte A4, og der omrøres ved stuetemperatur i 16 timer. Molekylsigten bortfiltreres, og filtratet inddampes under vakuum. Remanensen kromato-graferes på silicagel, hvorved der ved eluering med to-luen-ethylacetat 9:1 og 4::1 fås titelforbindelsen, der 1 7)0 er forurenet med lidt glyoxylat.

Eksempel 47: 2-((3S,4R)~4-Acetylthio-3-phenoxyacetdxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-

DK 160099 B

73 p-nitrobenzylester a) En suspension af 2 g poly-Hunigbase i 8 ml dioxan omrøres i 30 minutter ved stuetemperatur, og der tilsættes 962 mg 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-phenoxyacetoxy-2-oxo- 5 azetidin-l-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester opløst i 10 ml dioxan og derefter langsomt en opløsning af 0,3S ml thionylchlorid i 8 ml dioxan. Blandingen omrøres i 2 timer ved stuetemperatur, poly-Hunig-basen bortfiltreres, og filtratet inddampes under vakuum. Remanensen 10 renses ved kromatografi på silicagel med toluen-ethyl-acetat 1:1 og giver 2-((3S,4R)-4~acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester i rå form.

b) Til en opløsning af 960 mg 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-15 phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-chloreddikesyre-p- nitrobenzylester i 40 ml dioxan sættes 7$6 mg triphenyl-phosphin og 3 g poly-Hunig-base, og der omrøres i 16 timer ved 50°C under nitrogen. Poly-Hiinig-basen fjernes ved filtrering, og filtratet inddampes under vakuum. Remanen-20 sen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 9:1, 4:1 og 1:1 og giver titelforbindelsen. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 5,7; 5,9; 6,17; 6,55; 7,45 pm.

Eksempel 48: (5R,6S)-2-Methyl-6-phenoxyacetoxy-2-penem-3-25 carboxylsyre-p-nitrobenzylester

Til en opløsning af 2$5 mg 2-((3S,4R)-4-aeetylthio-3-phenoxyacetoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-triphenylphosphoran-yliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester i 100 ml absolut toluen sættes en katalytisk mængde hydroquinon, og der om-50 røres i 35 timer ved 90°C under nitrogen. Toluenet afdampes under vakuum, og remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 19:1. Titelforbindelsen fås i form af en olie. IR-Spektrum (i methylenchlorid) : karakteristiske absorptionsbånd ved 5,55; 6,30;

! DK 16 O O 9 9 B

i ! : 74 ! 6,55; 7,42 pm.

i I Eksempel 49: (5R,6S) -2-Methyl-6-phenoxyacetoxy-2-penem-3“ | carboxylsyre

Til en opløsning af 45 mg (5R,6S)-2-methyl-6-phenoxyacet-5 oxy-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester i en blan-! ding af 2 ml ethylacetat og 2 ml 2 M natriumhydrogencar- I bonatopløsning sættes 75 mg 10$f s palladium/kul-katalysa- j tor, og der hydrogeneres under atmosfæretryk i 1¾ time ved

stuetemperatur. Den hydrogenerede blanding filtreres gen-10 nem diatomejord, og filterremanensen vaskes med 1 ml 2 M vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og methylacetat. j Den vandige fase skilles fra filtratet, syrnes med 0,1 M

vandig citronsyreopløsning og ekstraheres flere gange med methylenchlcrid. De samlede methylenchloridakstrakter tør-15 res over natriumsulfat og inddampes under vakuum. IR-Spek-! trum (i ethanol) af.den opnåede rå titelforbindelse: kail rakteristisk absorptionsbånd ved 5,6 pm?UV-spektrum (i ! ethanol): ^-max = ^°5 nm* i i [ Eksempel 50: 6a-Methoxy-penicillansvre-2,2,2-trichlor- I 20 ethylester-l-oxid j I En opløsning af 2 g 6a-methoxy-penicillansyre-2,2,2-tri- chlorethylester (fremstillet som angivet af P. J. Giddins, D. I. Johns og E. J. Thcmas i T.L. 11. 995, 197&) i 100 ml methylenchlorid og 0,3 ml acetone afkøles til -15°C, der 25 tilsættes i løbet af 5 minutter 1 ml pereddikesyre, og man omrører ved den samme temperatur i 15 minutter.

[ Til reaktionsblandingen sættes derefter 15 ml 0,1 N na- i I triumthiosulfatopløsning. Den organiske opløsning fraskil- [ I les og vaskes to gange med isvand. Opløsningsmidlet af- 30 dampes efter tørring over natriumsulfat under vakuum, og remanensen omkrystalliseres fra ether-petroleumsether.

Den opnåede forbindelse har følgende fysisk-kemiske egenskaber: Smp. 127-12S°C. IR-Spektrum (i methylenchlorid): 75

DK 11)0099 B

karakteristiske absorptionsbånd ved 3,41; 5,56; 5,65; 6,33; 6,47; 6,70; 9,46 pm·,

Eksempel 51· 2-((3S,4R)-4-(Benzothiazol-2-vldithio)-3-methoxy-2-oxo-azetidin-l-vl)-3-methylensmørsyre-2,2,2-5 trichlorethylester

Til en opløsning af 3 g 6<x-methoxy-penicillansyre-2,2,2-trichlorethylester-l-oxid i 40 ml absolut toluen sættes 1,39 g 2-mercaptobenzothiazol, og der opvarmes under tilbagesvaling i 105 minutter under nitrogen. Opløsningsmid-10 let afdestilleres under vakuum og giver titelforbindelsen i form af en gullig olie. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,39; 5,60; 5,65; 6,65; 6,20; 6,62; 6,97; 9,65; 9,95 μια.

Det opnåede produkt kan uden yderligere rensning anvendes 15 til det følgende trin.

Eksempel 52: 2-((3S,4R)-4-(Benzothiazol-2-yldithio)-3-methoxv-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre-2,2,2-tri-chlorethylester

Til en opløsning af 4,17 g 2-((3S,4R)-4-(benzothiazol-2-20 yldithio)-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylensmørsyre- 2,2,2-trichlorethylester i 75 ml absolut methylenchlorid sættes ved 0°C 0,76 ml triethylamin, og der omrøres ved denne temperatur i 15 minutter.

Reaktionsblandingen vaskes først med 4 N phosphorsyre, der-25 efter med mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og endelig med vandig natriumchloridopløsning og tørres over natriumsulfat. Opløsningsmidlet afdampes, og remanensen renses ved kromatografi på silicagel med toluen og toluen-ethylacetat 19:1. Titelforbindelsen fås i form af 30 en olie, IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,39; 5,62; 5,76; 6,65; 7,04; 7,25;

DK 160099 B

76 6,85; 9,01; 9,4β; 9,85; 9,95 μια.

I Eksempel 53 : 2-( (3S ,4R)-4-Acetvlthio-3-methoxv-2-oxoaze- | tidin-l-vl)-3-methvlcrotonsvre-2,2,2-trichlorethvlester j i En opløsning af 3,26 g 2-((3S,4R)-4-(benzothiazol-2-yldi- I 5 thio)-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcrotonsyre- i 2,2,2-trichlorethylester i 36,3 ml eddikesyreanhydrid og 12,4 ml eddikesyre afkøles til -15°C, og der tilsættes 1,7 g tri-j phenylphosphin. Efter 75 minutters omrøring under nitro- ! gen ved den samme temperatur tilsætter man 24,8 ml pyri- ! 10 din til blandingen. Efter yderligere 3 timers omrøring ved 0°C inddampes reaktionsblandingen under formindsket I tryk, og den opnåede remanens renses ved kromatografi på S silicagel med toluen-ethylacetat 19:1. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved I 15 3,40; 5,63; 5,77; 5,80; 6,13; 7,25; 7,35; S,26; 9,0; j 9,52; 11,90 μτη.

I Eksempel 54: 2-( (3S ,4R) -4-Acetylthio-3-methoxv-2-oxoaze-’ • tidin-l-yl) -2-oxoeddikesyre-2,2,2-trichlorethylester

Gennem en til -30°C afkølet opløsning af 8,4 g 2-((3S,4R)-20 4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methylcroton-! syre-2,2,2-trichlorethylester i 765 ml methylacetat ledes 3 ækvivalenter ozon. Efter ozonbehandlingen lader man reaktionsblandingen henstå i 15 minutter ved samme tem-! peratur og fjerner derefter overskydende ozon ved hjælp

! 25 af en nitrogenstrøm. Reaktionsblandingen vaskes ved 0°C

1 med en lOfo's vandig natriumhydrogensulfitopløsning og derefter med vandig natriumchloridopløsning. Efter adskillelse ekstraheres de samlede vandige faser endnu 4 gange med methylacetat. De samlede methylesteropløsnin-30 ger tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. IR-Spektrum af den opnåede olieagtige titelforbindelse (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,39; 5,48; 5,63; 6,09; 6,94; 7,25; 7,33; 7,46; 8,23;

DK 160099 B

77 3,93; 9,90; 11,83 pm.

Eksempel 55: (3S ,4R) -4-Acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin a) En opløsning af 1,52 g 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-oxoeddikesyre-2,2,2-tri- 5 chlorethylester (råprodukt) i 290 ml methanol, 40 ml methylacetat og 5,9 ml vand opvarmes under tilbagesvaling i 20 minutter under nitrogen. Opløsningsmidlet inddampes under vakuum. Remanensen giver efter kromatografi på sili-cagel med toluen-ethylacetat 3:1 titelforbindelsen. IR-Spek-10 trum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 2,95; 3,40; 5,60; 5,88; 7,37; 7,52; 8,25; 8,70; 8,85; 10,5; 12,12 jim.

Den samme forbindelse kan også fås som følger: b) Til en opløsning af 40 mg (3S,4S)-4-acetoxy-3-methoxy-15 2-oxoazetidin (fremstilling se nedenfor) i 1,5 ml phos- phatpuffer af pH 7 og 0,1 ml dioxan sættes 1,5 ækvivalenter af en vandig natriumthioacetatopløsning, og der omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter. Reaktionsblandingen ekstraheres med methylenchlorid, og den fraskilte 20 organiske opløsning tørres derefter over natriumsulfat. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen renses ved kromatografi på silicagel med toluen-ethylacetat 3:1· IR-Spektret af den således opnåede titelforbindelse (i methylenchlorid) er identisk med spektret af 25 det ifølge a) opnåede produkt.

Eksempel 56; 2-((3S,4R)-4-Acetylthio-3-methoxy-2-oxoaze-tidin-l-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester

Til en opløsning af 350 mg (3S,4R)-4-acetylthio-3-methoxy- 2-oxoazetidin i en blanding af 24 ml absolut toluen og 6 30 ml absolut dimethylformamid sættes 1,15 g 2-ethoxy-2-hydr-oxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester og 4 g molekylsigte A4,

DK 160099 B

78 og der omrøres ved stuetemperatur under nitrogen i 16 timer. Molekylsigten bortfiltreres, og filtratet inddampes i under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel, i hvorved fås titelforbindelsen ved eluering med toluen- ; 5 ethylacetat 19:1. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karak- | teristiske absorptionsbånd ved 2,B6; 3,39; 5,60; 5,63; I 6,21; 6,56; 7,41; S,26; 9,01; ll,76jum.

i i Eksempel 57: 2-((3S,4R)-4-Acetylthio-3-methoxv-2^oxoaze- tidin-l-yl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzvlester i j 10 En opløsning af 0,6 g 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3~methoxy- j 2-oxoazetidin-l-yl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester I i 7 ml tør tetrahydrofuran afkøles til -15°C, og der til- | sættes 0,19 ml thionylchlorid.

Derefter tildrypper man 0,37 ml triethylamin i 0,4 ml 15 tør tetrahydrofuran ved samme temperatur. Reaktionsblandingen omrøres i en time ved 0°C, fortyndes med kold meth- i i ylenchlorid og vaskes med en iskold 2 N HCl-opløsning.

i Efter udrystning flere gange med vand tørres methylen- chloridopløsningen over natriumsulfat og inddampes. IR-; 20 Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptions bånd ved 3,41; 5,59; 5,65; 5,SS; 6,21; 6,56; 7,41; S,23; i S,55; 9,05; 10,5; 11,76 ;um.

i

Eksempel 5S: 2-((3S,4R)-4-Acetylthio-3-methoxy-2-oxoaze-tidin-l-yl)-2-triphenvlphosphoranvliden-eddikesyre-p-ni-25 trobenzylester i

Til en opløsning af 0,63 g 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-! methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-chloreddikesyre-p-nitro- 1 benzylester i 1,S ml tør tetrahydrofuran sættes 0,S4 g triphenylphosphin, og der omrøres i 16 timer under nitrogen 50 ved stuetemperatur. Blandingen fortyndes med methylenchlorid og vaskes med en kold mættet vandig natriumhydro-gencarbonatopløsning. Efter yderligere vask med vand, 79

DK "()0099 B

tørring over natriumsulfat og inddampning under vakuum fås den rå titelforbindelse, der renses ved kromatografi på silicagel med toluen-ethylacetat 19:1 til 3:1. IR-Spektrum (i meth-ylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,40; 5 5,67; 5,90; 6,20; 6,53; 7,46; 9,05 /im.

Eksempel 59: (5R, 6S) -2-Methyl-6-methoxy-2-penem-3-carboxyl-syre-p-nitrobenzylester

Til en opløsning af 74 mg 2-((3S,4R)-4-acetylthio-3-meth-oxy-2-oxoazetidin-l-yl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddi-10 kesyre-p-nitrobenzylester i 30 ml absolut toluen sættes en katalytisk mængde 3,5-di-tert.butyl-4-hydroxytoluen, og der opvarmes under tilbagesvaling i 3 timer under nitrogen. Toluenet afdampes under vakuum, og remanensen kromatogra-feres på silicagel med toluen-ethylacetat 19:1. Titelfor-15 bindeisen fås i fast tilstand. IR-Spektrum (i methylen-chlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,41; 5,60; 5,35; 6,63; 6,53; 7,41; 7,60; S,23; 9,26; 11,76 m.

Eksempel 60: 3-Ethyl-4-f2-acetylaminoethylthio-thiocar-bonylthio)-2-oxoazetidin (racemisk cis,trans-forbindelse) 20 a) En opløsning af 0,73 g (5 mmol) 4-acetoxy-3-ethyl-azeti-din-2-on (racemisk blanding af cis- og trans-isomer i forholdet 6:4) i 2 ml dioxan dryppes under nitrogenatmosfære til en opløsning af 1,175 g kalium-(2-acetylamino-ethyl)-trithiocarbonat i 20 ml forud afkølet (pH 7)-phos-25 phatpuffer, og der omrøres i 60 minutter. Reaktionsblandingen centrifugeres, den foroven liggende klare opløsning fradekanteres, og den olieagtige remanens opløses i methylenchlorid. Den organiske fase tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen tritureres 30 en gang med diethylether og videreforarbejdes i denne form. DC: Rf = 0,l6 (ethylacetat); IR-spektrum (CH2CI2): absorptionsbånd ved 2,92; 2,97; 5,63; 5,97; 6,62; 9,35; 12,34 Jim.

i 80

DK 160099 B

De to udgangsmaterialer kan fremstilles som følger: !

b) Til en omrørt opløsning af 34,5 g (0,302 mol) 1-bu-tenylacetat i 35 ml tørfcmethylenchlorid dryppes ved -10°C

i løbet af 30 minutter 42,7 g (26,3 ml; 0,302 mol) N-chlor- 5 sulfonylisocyanat. Efter yderligere 4 timers omrøring ved 0°C fortyndes reaktionsblandingen med 50 ml forud afkølet methylenchlorid og dryppes til en hydrolyserende blanding af 32 ml vand, 144 g is, 113 g natriumhydrogencarbo-| nat og 3S,2 g vandfrit natriumsulfit. Under hydrolysen 10 holdes temperaturen ved ydre køling ved 0°C. Når den organiske fase ikke længere reagerer surt, fortyndes reaktionsblandingen med 100 ml diethylether og filtreres gennem "Celite". Den organiske fase fraskilles, den vandige fase ekstraheres tre gange med 400 ml diethylether, og de 15 organiske faser samles, tørres og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethyl-acetat 2:1 og giver en racemisk blanding af cis- og trans- 4-acetoxy-3-ethyl-azetidin-2-on i forholdet 6:4 i olieagtig form. IR-Spektrum (CI^C^) : absorptionsbånd ved i 20 2,94; 5,60; 5,75; 7,35; δ,06; 8,85 μη.

c) En opløsning af 1,708 g (14,35 mmol) 2-acetyl-amino-ethylmercaptan i 2 ml absolut ethanol dryppes i løbet af \ time under omrøring og afkøling til 10-15°C til en opløsning af 0,80 g (14,35 mmol) kaliumhydroxid i 5 ml abso- 25 lut ethanol. Efter yderligere en halv time tilsættes en I opløsning af 1,09 g (14,35 mmol) carbondisulfid i 3 ml abso lut ethanol, hvorunder temperaturen holdes ved 10-15°C. Reaktionsblandingen videreomrøres i 3 timer ved stuetemperatur og afkøles i 20 minutter i isbad. Det gule kry-30 stallinske bundfald frafiltreres, vaskes en gang med absolut ethanol og giver kalium-(2-acetylaminoethyl)-trithio-: carbonat med smeltepunkt 171-174°C. IR-Spektrum (KBr): absorptionsbånd ved 2,95; 6,18; 6,50; 7,00; 7,32; 7,43; 7,79; δ,33; 9,09; 11,83 pm.

DK 160099 B

81

Eksempel 6l: 2- (3-Ethyl-4-(2-acetylaminoethylthio-thiocarb-onylthio) -2-oxo-l-azetidinyl) -2-hydroxy-eddikesyre-p-nitro-benzylester (racemisk cis,trans-forbindelse)

Til en opløsning af 3 j30 g (11 mmol) 3-ethyl-4-(2-acetyl-5 aminoethylthio-thiocarbonylthio-2-oxo-azetidin (racemisk cis,trans-forbindelse) i 120 ml toluen og 32 ml dimethyl-formamid sættes ved stuetemperatur 4,20 g (16,5 mM) 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester. Efter tilsætning af frisk tørret molekylsigte omrøres blandingen 10 under nitrogen i 3 timer ved stuetemperatur, Molekylsigten frafiltreres derefter og vaskes med 20 ml toluen, og filtratet og vaskevæsken inddampes sammen under vakuum. Remanensen tørres ved højvakuum og tritureres derefter med diethylether til fjernelse af ikke omsat 2-ethoxy-2-hydr-15 oxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester. Man får titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,16 (ethylacetat) ; IR-spektrum (CEL^C^): absorptionsbånd ved 2,36; 2,92; 3,03; 5,65; 5,71; 5,97; 6,53; 7,41; 3,37 jam.

20 Eksempel 62: 2-(3-Ethyl-4-(2-acetylaminoethylthio-thio-carbonylthio)-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenylphosphor-anyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis, trans-forbindelse)

En opløsning af 5,52 g (11 mmol) 2-(3-ethyl-4-(2-acetyl-25 aminoethylthio-thiocarbonylthio)-2-oxo-l-azetidinyl)- 2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis, trans-forbindelse) i 30 ml absolut tetrahydrofuran afkøles til -15°C, og under omrøring tilsættes der 1,02 ml (14 mmol) thionylchlorid og derefter langsomt 1,95 ml (14 50 mmol) triethylamin. Reaktionsblandingen omrøres i 20 minutter ved 0°C, der tilsættes 150 ml methylenchlorid, og den vaskes med iskold 1 N saltsyre. Den organiske fase tørres med natriumsulfat og inddampes.under vakuum. Den opnåede rå 2- (3 -ethyl-4- (2-acetylaminoethylthio-thiocarbonylthio) -

DK 160099 B

i | i 82 1 2-oxo-l-azetidinyl)-2-chloreddikesyre-p-nitrobenzylester opløses i 3 ml tør tetrahydrofuran, der tilsættes 6 g ! triphenylphosphin, og man omrører i 24 timer ved stuetem peratur. Reaktionsblandingen fortyndes med 200 ml methylen-j 5 chlorid, vaskes med mættet vandig natriumhydrogencarbonat- opløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen giver efter .kromatografi på silicagel 1 med ethylacetat titelforbindelsen. DC: Rf = 0,19 (ethyl- ! acetat); IR-spektrum (CH2C12): absorptionsbånd ved 2,93; 10 5,70; 5,97; 6,17; 6,53; 6,99; 7,00; 8,07; 3,33; 9,39 pm.

j Eksempel 63 : 2- (2-Acetvlaminoethylthio) -6-ettiyl-2-penem- i 3-carboxylsyre-p-nitrobenzvlester (racemisk cis- og trans- I forbindelse)

Til en opløsning af 1,75 g (2,34 mmol) 2-(3-ethyl-4-(2-' 15 acetylaminoethylthio-thiocarbonylthio)-2-oxo-l-azetidinyl)- 2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzyles-j ter (racemisk cis,trans-forbindelse) i 1500 ml tør o-xylen sættes en katalytisk mængde hydroquinon, og der omrøres under nitrogen i 7 timer under tilbagesvaling. Opløsnings-20 midlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatogra-feres på silicagel med ethylacetat. Man får en blanding af cis- og trans-titelforbindelsen.

Gennem en kombination af præparativ tyndtlagskromatogra-fi (silicagel med methyl-isobutyl-keton) og søjlekromato-25 grafi (silicagel med ethylacetat) kan man få cis- og trans-titelforbindelsen.

cis-forbindeIse: Smeltepunkt 141-142°C (efter omkrystal-i lisation fra methylenchlorid-diethylether); DC: Rf = 0,62 i (methyl-isobutylketon); IR-spektrum (Cl^Clg): absorptions- 30 bånd ved 2,93; 5,62; 5,93; 6,60; 7,46; 7,57; 3,44; 9,09 pm.

trans-forbindelse: Smeltepunkt 132-133°C (efter omkrystallisation fra methylenchlorid-diethylether); DC: Rf = 0,56 (methyl-isobutylketon); IR-spektrum (CHgClg): absorptions- 83

DK 16009-B

bånd ved 2,92; 5,62; 5,96; 6,58; 7,44; 7,58; 8,40; 9,01pm.

Eksempel 64: 2-(2r-Acetvlaminoethylthio) -6-ethyl-2-penem- 3- carboxylsyre (racemisk cis- og trans-forbindelse) a) Til en opløsning af 100 mg (0,22 mmol) 2-(2-acetylamino-5 ethylthio)-6-ethyl-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzyl- ester (racemisk cis-forbindelse) i 6 ml absolut ethyl-acetat sættes 4 ml 0,2 N vandig natriumhydrogencarbonat-opløsning og 200 mg 10$fs palladium/kul-katalysator, og der omrøres i 60 minutter under hydrogen af normaltryk.

10 Den hydrogenerede blanding befries for katalysator ved filtrering gennem diatomejord. Den vandige fase fraskilles, vaskes med diethylether, syrnes med 5 %fs vandig citronsyreopløsning og ekstraheres fuldstændigt med methylen-chlorid. De samlede methylenchlorid-faser tørres over 15 natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum, og remanensen tørres ved højvakuum. Den opnåede cis-titel-forbindelse har følgende fysisk-kemiske egenskaber:

Smeltepunkt 153-154°C (methylenchlorid/diethylether); IR-spektrum (KBr): absorptionsbånd ved 3,08; 3,22; 3,39; 20 3,42; 3,50; 3,77; 4,08; 5,67; 6,06; 6,21; 6,35; 6,75; 7,04; 7,69; 7,93; 8,27; 9,01; 9,62; 14,38 μη.

b) På samme måde fås ud fra 100 mg 2-(2-acetylaminoethyl-thio)-6-ethyl-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk trans-forbindelse) trans-titelforbindelsen.

25 IR-Spektrum (KBr): absorptionsbånd ved 3,01; 3,39; 3,44; 5,68; 6,10; 6,85; 7,75; 8,l6; 8,47; 8,93 pm.

Eksempel 65: 3-Ethyl-4-(4-P-nitrobenzyl·oχycarbonylamino-butyrylthio)-2-oxo-azetidin (racemisk cis,trans-forbindelse i forholdet 1:4) 1

Til en forud afkølet opløsning af 3,24 g (20 mmol) 3-ethyl- 4- acetoxyazetidin-2-on (racemisk cis,trans-forbindelse i forholdet 6:4) i 50 ml dioxan dryppes en i kulde frem- | 84

DK 160099 B

i | stillet opløsning af 7,95 g (26,7 mmol) 4-p-nitrobenzyl- oxycarbonylamino-thiosmørsyre i 26,7 ml 1 N natrivimhydroxidopløsning, og der omrøres ved stuetemperatur i 2 timer, i Reaktionsblandingen ekstraheres fuldstændigt med methylen- : 5 chlorid. De samlede organiske faser tørres over natrium- sulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatogra-feres på silicagel med toluen-ethylacetat 9:1, 4:1 og 1:1 , og giver titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber. DC: Rf = 0,10 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-10 spektrum (CHgC^/: absorptionsbånd ved 2,Cl; 2,92; 5,66; 5,Cl; 5,94; 6,5C; 7,52; C,20pn.

i

Den som udgangsmateriale anvendte thiocarboxylsyre fås som I følger: a) Til en opløsning af 10,30 g (0,1 mmol) 4-aminosmørsyre I 15 i 300 ml 1 N natriumhydroxidopløsning i et isbad dryppes : i løbet af 20 minutter en opløsning af 25,C7 g (0,12 mM) ; p-nitrobenzyl-chlorformiat i 100 ml tør dioxan. Reaktions blandingen omrøres i 3 timer ved stuetemperatur, vaskes •med ethylacetat og syrnes med 2 N saltsyre. Den udfældede 20 4-p-nitrobenzyloxycarbonylaminosmørsyre frafiltreres og omkrystalliseres fra ethylacetat; smp. 145-146°C.

I b) Til en til -10°C afkølet opløsning af 2,C2 g (10 mmol) I 4-p-nitrobenzyloxycarbonylaminosmørsyre i 50 ml tør methylenchlorid dryppes først 2,2 g (20 mmol) triethylamin i 25 °g derefter en opløsning af 1,4 ml (10 mmol) isobutylchlor-formiat i 20 ml tørtmethylenchlorid. Blandingen omrøres i en time, og derefter gennemledes i 2 timer en stærk : hydrogensulfidstrøm. Efter syrning med 2 N svovlsyre fra skilles den organiske fase, tørres og inddampes under va-30 kuum. Den opnåede 4-p-nitrobenzyloxycarbonylamino-thio-smørsyre kan videreforarbejdes uden yderligere rensning.

DK 160099 B

85

Eksempel 66: 2-f3-Ethvl-4-i4-p~nitrobenzYloxycarbonvl-aminobutyrylthio)-2-oxo»l~azetidinvl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzvlester (racemisk cis,trans-forbindelse)

Ved stuetemperatur opløses 6,50 g (16,45 mmol) 3-ethyl-4-5 (4-p-nitrobenzyloxycarbonylaminobutyrylthio)-2-oxo-aze-tidin (racemisk cis,trans-forbindelse) og 8,41 g 2-ethoxy- 2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester i 160 ml toluen og 40 nil dimethylformamid. Efter tilsætning af ca. 15 g frisk tørret molekylsigte omrøres blandingen under nitro-10 gen i 3 timer ved stuetemperatur. Molekylsigten frafil-treres og vaskes med dimethylformamid-toluen (1:4).

Filtratet inddampes under vakuum og tørres ved højvakuum, og remanensen digereres med diethylether til fjernelse af ikke omsat 2-ethoxy~2-hydroxy-eddikesyre-p-nitroben-15 zylester. Den rå titelforbindelse har følgende fysiskkemiske egenskaber: DC: Rf = 0,1 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-spektrum fCI^C^): absorptionsbånd ved 2,83; 2,90; 5,67; 5,73; 5,80; 5,99; 6,58; 7,52; 8,26; 9,52 /am.

Eksempel 67: 2-(3-Ethyl-4-(4-P-nitrobenzyloxycarbonvl-20 aminobutyrvlthio)-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenylphos-phoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,trans-forbindelse) a) Til en blanding af 10,40 g (17,2 mmol) 2-(3-ethyl-4-(4-p-nitrobenzyloxycarbonylaminobutyrylthio)-2-oxo-l- 25 azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester i 40 ml absolut dioxan dryppes ved -15°C først 3,06 ml (42 mmol) thionylchlorid og derefter 5,85 ml (42 mmol) tri-ethylamin. Reaktionsblandingen omrøres i 20 minutter ved 0°C under nitrogen, fortyndes med 200 ml methyienchlorid 30 og vaskes med afkølet 1 N saltsyre. Den organiske fase tørres og inddampes under vakuum.

b) Den opnåede rå 2-(3-ethyl-4-(4-p**nitrobenzyloxycarbon-ylaminobutyrylthio)-2-oxo-l-azetidinyl)-2-chloreddikesyre- 86

DK 160099 B

p-nitrotenzylester opløses i en minimal mængde tetrahydro-furan, og der tilsættes 9 g triphenylphosphin og omrøres i 16 timer ved stuetemperatur under nitrogen. Reaktions-blandingen fortyndes med 250 ml methylenchlorid, vaskes ; 5 med mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, tørres og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel med toluen-ethylacetat 1:1 og giver titelforbindelsen med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,05 (toluen-ethylacetat l:l); IR-spektrum (CH^Clg): ab-10 sorptionsbånd ved 2,90; 5,73; 5,SO; 5,94; 6,5&; 7,52; S,20; 9,35 μια.

Eksempel 68: 6-Ethyl-2-(3-p-nitrobenzyloxycarbonylaminopro-pyl)-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,trans-forbindelse) 15 Til en opløsning af 5,40 g (6,36 mmol) 2-(3-ethyl-4-(4-p-nitrobenzyloxycarbonylaminobutyrylthio)-2-oxo-l-azetidin-yl)-2-triphenylph©sphoranyliden-eddikesyre-p«nitrobenzyl-; ester (racemisk cis,trans-forbindelse) i 1500 ml tør toluen sættes en katalytisk mængde hydroquinon, og der I 20 omrøres under nitrogen i 20 timer ved 100°C. Opløsnings- ^ midlet afdampes under vakuum, og remanensen kromatografe- res på silicagel med toluen-ethylacetat 4;1· Man får en I blanding af cis- og trans-forbindelsen i forholdet 1:10 med følgende fysisk-kemiske egenskaber: DC: Rf = 0,22 25 (toluen-ethylacetat 1:1); IR-spektrum (CH^Clg): absorptionsbånd ved 2,90; 5,62; 5,Si; 5,#5; 6,5#; 7,52; 7,&7; 3,20 μια. Ved gentaget kromatografi kan cis- og transforbindelsen fås i ren form.

Eksempel 69: 6-Ethyl-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxyl-30 syre (racemisk cis,trans-forbindelse)

Til en opløsning af 2 g (3,5 mmol) 6-ethyl-2- (3-p-nitro-benzyloxycarbonylaminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester (racemisk cis,trans-forbindelse) i 600

DK 160099 B

87 ml dioxan, 330 ml ethanol og 600 ml vand sættes 2 g di-natriumhydrogenphosphat og 4 g 10$’s palladium/kul-katalysator, og der omrøres i en time under hydrogen af normaltryk. Den hydrogenerede blanding befries for katalysa-5 tor ved filtrering gennem diatomejord. Filtratet vaskes 3 gange med 1500 ml ethylacetat og lyofiliseres. Lyofilisa-tet kromatograferes to gange på silyleret silicagel (tyndt-lagsplader ANTEC-GEL, UP-C^) me^· vahd-acetonitril (9:1) og giver titelforbindelsen (cis:trans ca. 1:10) med følgende 10 fysisk-kemiske egenskaber: DC (ANTEC-GEL, UP-C^): Rf = 0,55 (vand-acetonitril 9:1); IR-spektrum (KBr): absorptionsbånd ved 2,94; 3,39; 5,63; 6,41; 7,33; 7,31; 3,93; 12,32; 14,23 pm.

Ud fra de rene cis- eller trans-udganssforbindelser kan 15 fremstilles de rene cis- og trans-titelforbindelser.

Eksempel 70: 2-((3S,4S)- og (3S,4R)-4-acetoxy-3-methoxy- 2-oxoazetidin-l-yl) -3-methylensmørsyre-y3^3,>a-trichlor-ethylester

Til 200 mg (6S) -6-methoxy-penicillansyre-β,β,/3-trichlor-20 ethylester-l-oxid sættes i 13 ml absolut benzen 0,114 ml iseddike og 0,35 ml trimethylphosphit, og der opvarmes i 7 timer under tilbagesvaling. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen renses ved kromatografi på silicagel med toluen-ethylacetat 19:1 og 9:1· 25 Titelforbindelserne kan derved isoleres. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd for (3'S ,4R)-isomer (trans-forbindelse): 3,42; 5,62; 5,63; 7,25; 7,35; 3,26; 9,01; 10,93; 11,33 μη; (3S,4S)-isomer (cis-forbindelse): 3,42; 5,61; 5,7; 7,25; 7,35; 3,21; 50 9,61; 10,93 pm.

Forholdet cis:trans-forbindelse er ca. 1:1.

DK 160099 B

88

Eksempel 71: 2-((3S,4S)- og (3S,4R)-4--acetoxy-3-methoxy~ ί 2-oxoazetidin-l-vl) -3-methvlcrotonsvre-A AA-trichlor- ethylester

En opløsning af 0,93 g 2-((3S,4S)- og (3S,4R)~4-acetoxy-5 3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl) -3-methylensmørsyre-/0,/$,/0-tri-chlorethylester i 60 ml absolut methylenchlorid afkøles til 0°C, og der omrøres i 10 minutter med 0,33 ml tri-etbylamin. Reaktionsblandingen vaskes derefter, først med i 4 N phosphorsyre, derefter med mættet vandig natriumhydro- 10 gencarbonatoplpsning og endelig med vand, og tørres over natriumsulfat. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen renses ved kromatografi på silicagel. IR-Spektret (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved: 3,41; 5,60; 5,73; 6,13; 7,19; 7,33; 8,26; 9,09; !5 9,57; 10,64; 10,87; 12,19 pm.

Eksempel 72: 2 — C C3S ,4S)— og (3S,4R)-4-acetoxy-3~methoxy- 2-oxoazetidin-l-yl) -2-oxoeddikesvre-Ay^</g-trichlorethyl" ester i ! Gennem en til -30°C afkølet opløsning af 0,91 g 2-((3S, 1 20 4S)“ og (3S,4R)-4-acetoxy-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)- 3»methylcrotonsyre-/3,/d,^-trichlorethylester i 130 ml eddikesyremethylester ledes 3 ækvivalenter ozon. Efter ozonbehandlingen lader man blandingen henstå i 15 minutter ved den samme temperatur, og derefter fjernes overskydende 25 ozon ved hjælp af en nitrogenstrøm. Reaktionsblandingen vaskes ved 0°C med en 10%'s vandig natriumsulfitopløsning og derefter med vandig natriumchloridopløsning. De samlede vandige opløsninger genekstraheres endnu tre gange med eddikesyrernethylester. De samlede organiske ekstrak-^0 ter tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,41; 5,46; 5,68; 5,81; 7,27; 7,43; 8,23; 8,40; 9,52; 9,90 pm.

DK 160099 B

89

Eksempel 73 : (3S t Z|.S) — og (3S ,4R) -4-acetoxy-3-methoxv-2-oxoazetidin

En opløsning af 120 mg 2— ((3S,4S) — og (3S ,l+R) -4-acetoxy- 3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl) -2-oxoeddikesyre-/3y3yø-tri-5 chlorethylester i 25 ml methanol, 3>5 ml eddikesyremeth-ylester og 0,5 ml vand opvarmes i 20 minutter under tilbagesvaling. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen giver efter kromatografi på silicagel med toluen-ethylacetat 9:1 det rene (3S,4R)-l-acetoxy-3-meth-10 oxy-2-oxoazetidin; IR-spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 2,96; 3,42; 5,57; 5,73; 7,30; S,23; S,70; 8,85; 9,62; 10,0; 10,20μτη; og ved videre eluering det rene (3S,4S)-4-acetoxy-3-methoxy- 2-oxoazetidin; IR-spektrum (i methylenchlorid): karak-15 teristiske absorptionsbånd ved 2,94; 3,41; 5,56; 5,73; 7,35; 7,49; S,20; 9,52 m.

Eksempel 74: (3S,4R)-4-(2-p-nitrobenzvloxvcarbonvlamino-ethylthio-thiocarbonylthio)-3-methoxy-2-oxoazetidin

Til en opløsning af 159 mg (1 mmol) (3S,4s)-4-acetoxy-3-20 methoxy-2-oxoazetidin i 3 ml (pH 7)-phosphatpuffer og 0,2 ml dioxan dryppes ved stuetemperatur under nitrogenatmosfære en opløsning af 422 mg kalium-2-p-nitrobenzyl-oxycarbonylaminoethyl-trithiocarbonat i 1 ml vand, og der omrøres ved den samme temperatur i 30 minutter.

25 Reaktionsblandingen ekstraheres fuldstændigt med methylenchlorid. De samlede organiske faser tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatogra-feres på silicagel og giver titelforbindelsen med følgende IR-spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske 30 absorptionsbånd ved 2,95; 5,62; 5,7$; 6,21; 6,56; 7,41; 8,26; 9,25 pm.

i

DK 160099 B

9°

Eksempel 75: 2-((3S,4R)-4~(2-p-nitrobenzvloxvcarbonvl-aminoethylthio-thiocarbonylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-aze-tidinyl)-2-hvdroxv-eddikesyre-p-nitrobenzvlester På lignende måde som i eksempel 23 omsættes 646 mg 5 (l,5mmol) (3S,4R)-4-(2-p~nitrobenzyloxycarbonylaminoethyl-thio-thiocarbonylthio)-3-methoxy-2-oxoazetidin i 22 ml absolut toluen og 5,5 ml absolut dime t hylf ormamid med 543 mg 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester i nærværelse af frisk tørret molekylsigte. Efter opar-10 bejdnmg og kromatografering på silicagel får man titelforbindelsen. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 5,62; 5,7) 5,7$) 6,56; 7,41) S,26 μη.

Eksempel 76: 2—(C3S, 4R)-4-(2-p-nitrobenzvloxycarbonyl-15 aminoethvlthio-thiocarbonvlthio)-3-methoxv-2-oxo-l-azetidinyl)-2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p~ nitrobenzylester På lignende måde som i eksempel 24 sættes der til en opløsning af 64Ο mg 2-((3S,4R)-4-(2-p-nitrobenzyloxycarbon-20 ylaminoethylthio-thiocarbonylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxyeddikesyre-p-nitrobenzylester i 4,5 ml absolut tetrahydrofuran 0,12 ml thionylchlorid og 0,23 ml triethylamin i 0,23 ml absolut tetrahydrofuran. Efter reaktion og oparbejdning sættes der til den som mellem-25 produkt opnåede rå 2-((3S,4R)-4-(2-p-nitrobenzyloxycarb-onylaminoethylthio-thiocarbonylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-azetidinyl)-2-chlor-eddikesyre-p-nitrobenzylester i 1,15 ml absolut tetrahydrofuran 0,54 g triphenylphosphin.

Efter oparbejdning og kromatografi på silicagel får man ^0 titelforbindelsen. IR-Spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,4; 5,7; 5,73; 6,15; 6,55; 7,45; 3,26 μη.

Eksempel 77: (6S,5R)-2-(2-p-nitrobenzyloxycarbonylamino- ethylthio)-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzyl- ester f Λ [λ Vj J 91 På lignende måde som i eksempel 25 omrøres en opløsning 5 af 500 mg 2-((3S,4R)-4-(2-p-nitrobenzyloxycarbonylamino-ethylthio-thiocarbonylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-azetidinyl)- 2-triphenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester i 165 ml absolut o-xylen under tilbagesvaling.

Efter oparbejdning og kromatografering på silicagel med 10 toluen-ethylacetat 19:1 til 9:l får man titelforbindelsen. IR-Spektrum (CH^C^): absorptionsbånd ved 5,57', 5,7$; 5,9; 6,55; 7,45; $,26 pm.

Eksempel 7$: (6S,5R)-2-(2-Aminoethylthio)-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre 15 På lignende måde som i eksempel 69 sættes der til en opløsning af 295 mg (6S,5R)-2-(2-p-nitrobenzyloxycarbonyl-aminoethylthio)-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitro-benzylester i $5 ml dioxan, 47 ml ethanol og $5 ml vand 2$6 mg dinatriumhydrogenphosphat og 570 mg af en 10%'s 20 palladium-på-kul-katalysator, og der omrøres under hydrogen af normaltryk. Efter reaktion og oparbejdning får man titelforbindelsen med følgende IR-spektrum (KBr) : absorptionsbånd ved 2,$-4,16; 5,6$; 6,41; $,26 pm.

Eksempel 79: (3S,4R)-4-(4-P-nitrobenzyloxycarbonylamino-25 butyrylthio)-3-methoxy-2-oxoazetidin På lignende måde som i eksempel 55b) sættes der til 159 mg (3S,4S)-4-acetoxy-3-methoxy-2-oxo-azetidin i 6 ml (pH 7)-phosphatpuffer og 0,4 ml dioxan en vandig opløsning af 4$0 mg 4-p-nitrobenzyloxycarbonylamino-thiosmØrsyre-natri-30 umsalt. Efter oparbejdning og kromatografi på silicagel får man titelforbindelsen med følgende IR-spektrum (CH^C^): 92

DK 160099 B

karakteristiske absorptionsbånd ved 2,95; 5,6; 5,73; I 5,37; 6,56; 7,41; 3,26 μια.

Eksempel &0: 2-((3S,4R)-4-(4-P-nitrobenzyloxycarbonyl-aminobutyrylthio)-3-methoxv-2-oxo-l-azetidinvl)-2-hydr-5 oxy-eddikesyre-p-nitrobenzylester På lignende måde som i eksempel 23 omsættes 400 mg (3S,4R)- 4-(4-p-nitrobenzyloxycarbonylaminobutyrylthio)-3-methoxy-i 2-oxoazetidin i 15 ml absolut toluen og 3,7 ml absolut I dimethylformamid med 565 mg 2-ethoxy-2-hydroxy-eddikesyre- 10 p-nitrobenzylester i nærværelse af frisk tørret molekyl-' sigte. Efter oparbejdning og kromatografering på silica- gel får man titelforbindelsen med følgende IR-spektrum karakteristiske absorptionsbånd ved 5,6; 5,7; ; 5,73; 5,37; 6,56; 7,41; 3,26 μια.

15 Eksempel 31: 2-((3S,4R)-4-f4-P-nitrobenzyloxvcarbonvl-i aminobutvrvlthio)-3-methoxv-2-oxo-l-azetidinvl)~2-tri- phenylphosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester ; På lignende måde som i eksempel 24 sættes der til en 20 opløsning af 606 mg 2-((3S,4R)-4-p-nitrobenzyloxycarbo-nylaminobutyrylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-azetidinyl)-2-hydroxy-eddikesyre~p«nitrobenzylester i 4,5 ml absolut tetrahydrofuran først 0,12 ml thionylchlorid og derefter 0,23 ml triethylamin i 0,23 ml absolut tetrahydrofu-25 ran. Efter reaktion og oparbejdning sættes der til den I opnåede rå 2-((3S,4R)-4-(4-p-nitrobenzyloxycarbonylamino- tutyrylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-azetidinyl)-2-chlor-ed-dikesyre-p-nitrobenzylester i 1,15 ml absolut tetrahydrofuran 0,54 g triphenylphosphin. Oparbejdning og kroma-30 tografi på silicagel giver titelforbindelsen med følgen« de IR-spektrum (CHgClg): karakteristiske absorptionsbånd ved 5,7; 5,73; 5,9; 6,15; 6,55; 7,45; 3,26 μια.

Eksempel 82: (6S,5R)-2-(3-P-nitrobenzyloxycarbonylamino- propyl)-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzyl- ester 93

DK 16C:99B

På lignende måde som i eksempel 68 omrøres en opløsning 5 af 400 mg 2-((3S,4R)-4-(4-p~nitrobenzyloxycarbonylamin;>-butyrylthio)-3-methoxy-2-oxo-l-azetidinyl) -2-triphenyl-phosphoranyliden-eddikesyre-p-nitrobenzylester i 160 ml absolut toluen under tilbagesvaling. Efter oparbejdning og kromatografering på silicagel med toluen-ethylacetat 10 19:1 til 9:1 får man titelforbindelsen. IR-Spektrum (CR^C^): karakteristiske absorptionsbånd ved 5,57; 5,78; 5,85; 6,55; 7,45; 8,26 μπι.

Eksempel 83: (6S,5R)-2-(3-aminopropyl)-6-methoxv-2-pe-nem-3-carboxylsyre 15 På lignende måde som i eksempel 69 sættes der til en opløsning af 572 mg (6S,5R)-2-(3-p-nitrobenzyloxycarbonyl-aminopropy3)-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenz-ylester i 170 ml dioxan, 94 ml ethanol og 17n ml vand 571 mg dinatriumhydrogenphosphat og 1,14 g - af en lO^’s 20 palladium-på-kul-katalysator, og der omrøres under hydrogen af normaltryk. Efter reaktion og oparbejdning får man titelforbindelsen med følgende IR-spektrum (KBr): absorptionsbånd ved 2,75-4,15; 5,67; 6,42; 8,25 pm.

Eksempel 84: 2-((3S,4S)~ og (3S,4R)-4-chlor~3-methoxy~2-25 oxoazetidin-l-yl) 3-methvlcrotonsyre-/3,/?.y»-trichlor-ethylester

Til 6l2 mg (6S)-6-methoxy-penicillansyre-/>,/3,/3-trichlor-ethylester i 9 ml absolut methylenchlorid dryppes ved -80°C 3,25 ml 1,1 M chloropløsning i CCl^.

Efter 2 timers omrøring ved -80°C lader man reaktionsblandingen antage stuetemperatur i løbet af en time.

DK 160099 B

i 94

Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, og remanensen kro-matograferes på silicagel med 10$ vand. Titelforbindelsen har følgende IR-spektrum (CHgClg): karakteristiske absorptionsbånd ved 3,41; 5,60; 5,76; 6,15; 7,22; 7,35; 5 6,33; 9,09; 9,52; 12,20 pm.I den opnåede blanding er for holdet (3S,4S)- til (3S,4R)-forbindelse 1:10.

Eksempel £5: 2-((3S,4S)- og (3S,4R)-4-chlor-3-methoxy- 2-oxoazetidin-l-yl)-2-oxoeddikesyre-A AjA-trichlorethyl- ester 10 Gennem en til -35°C afkølet opløsning af 210 mg 2-((3S,4S)-og (3S,4R)-4-chlor-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl)-3-methyl-crotonsyre-/J,/J,/3-trichlorethylester i 30 ml eddikesyre-methylester ledes 3 ækvivalenter ozon. Efter ozonbehandlingen lader man blandingen henstå i 15 minutter ved den 15 samme temperatur og fjerner derefter overskydende ozon ved hjælp af en nitrogenstrøm. Reakt i'· nsblandingen vaskes ved 0°C først med en 10$Ts vandig natriumhydrogensulfit-opløsning og derefter nrd vandig natriumchloridopløsning.

De samlede vandige opløsninger genekstraheres endnu tre 20 gange med eddikesyremethylester. De organiske ekstrakter tørres over natriumsulfat og inddampes under vakuum. Den rå titelforbindelse har følgende IR-spektrum (CHgClg): 1 karakteristiske absorptionsbånd ved 3,41; 5,46; 5,65; 5,60; 7,46; δ,23; 6,47; M9; 9,57; 9,95; 25 Eksempel £6: (3S.4S)- og (3S,4R)-4-chlor-3-methoxy-2-oxoazetidin

En opløsning af 339 mg 2-((3S,4S)- og (3S,4R)-4~chlor-3-methoxy-2-oxoazetidin-l-yl) -2-oxoeddikesyre-/?,/øJ/M;richlor-ethylester og 197 mg 2,4-dinitrophenylhydrazin i 9 ml 30 tetrahydrofuran opvarmes i 30 minutter under tilbagesva-: ling. Opløsningsmidlet afdampes, og remanensen kromato'-ra- feres på silicagel. Titelforbindelsen har følgende IR-spektrum (CHgClg): karakteristiske absorptionsbånd ved 2,94; 5,56; £,26; 9,09 pm.

DK '' *; Π Π 9 9 Β 95

Eksempel 87: (3S,4Η)-4-(4-P-nitrobenzyloxycarbonylamino-butyrylthio) -3-methoxy-2-oxoazetidin.

Til en opløsning af 135 mg (3S ,4R) -4-chlor-3-methoxy-2-oxoazetidin i 6 ml (pH 7)-phosphatpuffer og 0,4 ml dioxan 5 dryppes i nærværelse af 150 mg natriumiodid en opløsning af 350 mg 4-p-nitrobenzyloxycarbonylamino-thiosmørsyre-natriumsalt i 4 ml vand.

Efter 30 minutters omrøring ved stuetemperatur ekstrahe-res fuldstændigt med methylenchlorid. Efter fraskillelse 10 og tprring af den organiske fase med natriumsulfat af-dampes opløsningsmidlet under vakuum, og remanensen kro-matograferes pa silicagel. Titelforbindelsen har følgende IR-spektrum (CH^Clg): absorptionsbånd ved 2,95; 5,6; 5,78; 5,87; 6,56; 7,41; 8,26 μια.

15 Eksempel 88

Ud fra tilsvarende udgangsmaterialer og via tilsvarende mellemprodukter fås på lignende måde som i de foregående eksempler nedenstående forbindelser. De anførte talværdier angiver Xmax-værdier i nm i UV-spektret optaget i det i 20 parentes anførte opløsningsmiddel.

6-ethyl-2-(2-aminoethylthio)-2-penem-3-carboxylsyre racemisk 6-hydroxymethyl-2-penem-3-carboxylsyre; 304, 356 (H20) 6-hydroxymethyl-2-methyl-2-penem-3-carboxylsyre 25 6-hydroxymethyl-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre 6-hydroxymethyl-2-(3-acetylaminopropyl)-2-penem-3-carbox-ylsyre racemisk 6-hydroxymethyl-2-ethylthio-2-penem-3-carboxyl-syre; 325, 254 (phosphatpuffer, pH 7,4) 30 (5R,6S)-6-hydroxymethyl-2-(2-aminoethylthio)-2-penem-3- carboxylsyre, 321, 254 (phosphatpuffer, pH 7,4)

DK 160099 B

96 6-hydroxymethyl-2-(2-acetylaminoethylthio)-2-penem-3-carb- oxylsyre racemisk 6-(1-hydroxyethyl)-2-penem-3-carboxylsyre, 311, i 5 260 (ethanol) 6-(1-hydroxyethyl)-2-methyl-2-penem-3-carboxylsyre (5R,6S)-6-(1-hydroxyethyl)-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre, 306, 261 (H2O) ! (5R,6S,8R)-6-(1-hydroxyethyl)-2-(3-acetylaminopropyl) - 2- 10 penem-3-carboxylsyre, 310, 263 (ethanol) (5R,6S,8R)-6-(1-hydroxyethyl)-2-ethylthio-2-penem-3-carb-oxylsyre; 322, 253 (phosphatpuffer pH 7,4) 6-(1-hydroxyethyl)-2-(2-aminoethylthio)-2-penem-3-carb-oxylsyre; 322, 252 (phosphatpuffer pH 7,4) 15 6-(1-hydroxyethyl)-2-(2-acetylaminoethylthio)-2-penem-3- carboxylsyre 1 6-methoxy-2-penem-3-carb oxylsyre 1 6-methoxy-2-(3-acetylaminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre 6-methoxy-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre 20 6-methoxy-2-(2-acetylaminoethylthio)-2-penem-3-carboxylsyre 6-methoxy-2-(1,354-thiadiazol-2-ylthio)-2-penem-3-carboxylsyre 6-(2-hydroxyprop-2-yl)-2-penem-3-carboxylsyre ! 6-(2-hyuroxyprop-2-yl)-2-methyl-2-penem-3-carboxylsyre i 25 6-(2-hydroxyprop-2-yl)-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carb- oxylsyre 6-(2-hydroxyprop-2-yl)-2-(3-acetylaminopropyl)-2-penem-3-I carboxylsyre 6-(2-hydroxyprop-2-yl)-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre 30 6- (2-hydroxyprop-2-yl) -2- (2-aminoethylthio)-2-penem-3 -carb oxylsyre i 6- (2-hydroxyprop-2-yl) -2- (2-acetylaminoethylthio)-2-penem- ' 3-carboxylsyre, både i racemisk og i optisk aktiv form 35 og deres salte.

Eksempel «9: Tørampuller eller hætteglas indeholdende 0,5 g 6-ethyl-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre som virksomt stof fremstilles som følger: 97 I / Λ Γ\ r—ί

U i I ) , Q

Sammensætning (for 1 ampul eller hætteglas):

Virksomt stof 0,5 g

Mannit 0,05 g

En steril vandig opløsning af det virksomme stof og mannitet 5 frysetørres under aseptiske betingelser i 5 ml ampuller eller 5 ml hætteglas, og ampullerne eller hætteglassene lukkes og prøves.

Eksempel 90: Tørampuller eller hætteglas indeholdende 0,25 g 6-ethy1-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre som virksomt stof fremstilles som følger: 10 Sammensætning (for 1 ampul eller hætteglas) :

Virksomt stof 0,25 g

Mannit 0,025 g

En steril vandig opløsning af det virksomme stof og mannitet frysetørres under aseptiske betingelser, og ampullerne el-15 ler hætteglassene lukkes og prøves.

Eksempel 91

Threo-trans-6-(11-p-nitrobenzyloxycarbonyloxyethyl)-penem- 3-carboxylsyre-acetonylester.

Til en opløsning af 1,96 g (2,5 mmol) 2-[ threo-trans-3-20 (1’-p-nitrobenzyloxycarbonyloxyethyl)-4-(cis-Ø-carbometh- oxyvinylmercapto)-2-oxo-l-azetidinyl ]-2-triphenylphospho-ranylideneddikesyre-acetonylester i 40 ml methylenchlorid sættes ved -20°C 1,25 ml trifluoreddikesyre, og ved denne temperatur ledes en strøm af O3 i O2 (0,33 mmol O3 pr.

25 minut) til blandingen i 15 minutter. Derefter fjernes overskud af O3 ved gennemledning af nitrogen, hvorpå der tilsættes 2 ml dimethylsulfoxid, blandingen omrøres i 10 minutter ved 10°C, fortyndes med 50 ml iskoldt methylenchlorid, vaskes med 2 gange 25 ml 10%'s vandig kaliumhy-30 drogencarbonatopløsning, den organiske fase tørres med i Π\/ ί ' ηηηπ ο

i U ί\ i ο υ u 7 7 D

i 98 natriumsulfat, inddampes i en vakuumrotationsfordamper, hvorpå den faste remanens tørres i 2 minutter i højvakuum og opløses i 60 ml methylenchlorid, som er frisk filtreret 5 over aluminiumoxid. Opløsningen opvarmes derefter i 90 minutter med tilbagesvaling under en nitrogenatmosfære, , hvorpå den afkøles, inddampes i en vakuumrotationsfor damper, og remanensen kromatograferes på 25 mg Si02 (Merck) med toluen-ethylacetat (3:1) som elueringsmiddel.

10 Efter inddampning af de egnede fraktioner fås den rene amorphe titelforbindelse.

Rf-værdi = 0,55 (ethylacetat) IR-spektrum (CH2CI2): absorptionsbånd med 1795, 1750, 1745, 1720, 1530, 1350 cm"!. NMR-spektrum (i acetone-d/100 MHz, i ppm): 8,3-7,6, 15 4H, dd, 7,6, IH, s, 5,95, IH, d, J = 2,5 Hz, 5,3, 2H, s, 5,4-5,1, IH, m, 4,8, 2H, s, 4,2, IH, dd, J = 6 Hz, J = 2,5 Hz, 2,1, 3H, s, 1,45, 3H, d, J = 6,5 Hz.

Eksempel 92 j

Erythro-trans-6-(11-p-nitrobenzyloxycarbonyloxyethyl)-20 penem-3-carboxylsyre-acetonylester.

Analogt med den ovenfor i eksempel 91 beskrevne fremgangs- i måde fremstilles titelforbindelsen ud fra den tilsvarende erythro-trans-udgangsforbindelse.

Smp. 154-156°C, Rf = 0,55 (ethylacetat). IR-spektrum 25 (CH2CI2): absorptionsbånd ved 1795, 1745, 1720, 1530, 1350 cm"!. NMR-spektrum (i acetone-d/100 MHz, i ppm): 8,4-7,6, 4H, dd, 7,6, IH, s, 5,8, IH, d, J = 2,5 Hz, 5,35, 2H, s, 5,25, IH, dd, J = 6,5, J = 3,5 Hz, 4,80, 2H, s, 3,8, IH, m, 2,1, 3H, s, 1,5, 3H, d, J = 6,5 Hz.

DK 160099 B

99

Eksempel 93

Threo-trans-6-(1'-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylsyreace-tonylester.

5 En opløsning af 0,936 g (2 mmol) threo-trans-6-(1'-p-ni-trobenzyloxycarbonyloxyethyl)-penem-3-carboxylsyre-aceto-nylester i 80 ml af en blanding af lige store dele aceto-nitril og 95%’s ethanol hydrogeneres over 800 mg 10%'s Pd/C-katalysator ved stuetemperatur i 2,5 timer. Bland-10 ingen filtreres, filtratet inddampes, og remanensen kroma-tograferes på 40 g Si02 (Merck) med toluen-ethylacetat (2:1) som elueringsmiddel. Opløsningsmidlet afdampes fra de egnede fraktioner i en vakuumrotationsfordamper, og remanensen krystalliseres ved tilsætning af methylenchlo-15 rid/ether.

Rf-værdi = 0,4 (ethylacetat), smp. 115-116°C. IR-spektrum (CH2C12): 3580, 1790, 1725, 1720, 1560, 1175 cm"1. NMR-spektrum (i acetone-d/100 MHz, i ppm): 7,6, IH, s, 5,85, IH, d, J = 2 Hz, 4,8, IH, s, 4,4, IH, m, 4,4-4,0, IH, s, 20 3,85, IH, dd, J = 7 Hz, J = 2 Hz, 2,15, 3H, s, 1,3, 3H, d, J = 6,5 Hz.

Eksempel 94

Erythro-trans-6-(1'-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylsyreace-tonylester.

25 Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles titelforbindelsen ud fra den tilsvarende erythro-trans-udgangsforbindelse.

Rf-værdi = 0,4 (ethylacetat), smp. 120-121,5*0. IR-spektrum (CH2C12): absorptionsbånd ved 3580, 1790, 1725, 1720, 30 1560, 1175 cm”1. NMR-spektrum (i acetone-d/100 MHz, i ppm): 7,55, IH, d, J = 1 Hz, 5,8, IH, d, J = 2 Hz, 4,8,

DK 16 C O 9 9 B

i | loo ! 2H, s, 4,4-4,0, IH, s, 4,4-4,2, IH, m, 4,0, IH, m, 2,15, 3H, s, 1,35, 3H, d, J = 6,5 Hz.

Eksempel 95 5 Threo-trans-6-(1'-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylsyre

Til en opløsning af 0,271 g (lmmol) threo-trans-6-(1'-hy-droxyethyl)-penem-3-carboxylsyre-acetonylester i 40 ml acetonitril og 10 ml vand sættes dråbevis ved 0°C under en nitrogenatmosfære i løbet af 15 minutter 10 ml vandig 0,1N 10 NaOH-opløsning. Blandingen omrøres i yderligere 30 minutter ved 0°C, hvorpå den omrøres ved 6 g kvældet, svagt sur kationbytter IV (Merck) i 5 minutter ved 0°C, hvorpå der filtreres, og filtratet inddampes i vakuum til et rumfang på ca. 20 ml, som kromatograferes på 10 stk. 20 x 20 cm 15 antecgel-dodecyltrichlorsilan-tyndtlagskromatografi-plader med vand. Ved eluering med acetonitril/H20 (3:1) og ! lyofilisering af filtratet fås den rene titelforbindelse I som et amorpht fast stof.

i Rf-værdi =0,4 (H2O, antecgel-dodecyl-trichlorsilan-tyndt- 20 lagskromatografi-plade). IR-spektrum (KBr), 1750 cm“l, NMR-spektrum (i D2O/IOO MHz, i ppm): 7,25, IH, s, 5,95, IH, d, J = 2 Hz, 4,45, IH, m, 4,15, IH, dd, J = 6 Hz, J = 2 Hz, 1,48, 3H, d, J = 6,5 Hz.

Eksempel 96 25 Erythro-trans-6-(11-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylsyre

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles ud fra erythro-trans-udgangsforbindelsen den tilsvarende titelforbindelse i form af et amorpht fast stof.

Rf = 0,4 (H2O, antecgel-dodecyltrichlorsilan-tyndtlags- 30 kromatografi-plader). IR-spektrum (KBr), 1750 cm“l.

DK 1 o c 3 9 9 B

101 NMR-spektrum (in D2O/IOO MHz, i ppm): 7,3, IH, s, 5,9, IH, d, J = 2 Hz, 4,4, IH, m, 4,2, IH, dd, J = 4 Hz, J = 2 Hz, 1,52, d, J = 6,5 Hz.

5 Eksempel 97 (5R,6S)-6-(2-hydroxyprop-2-yl)-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester

Til en opløsning af 0,49 g (0,69 mmol) 2-[ (3S,4R)-3-(2-hy-droxyprop-2-yl)-4-(trans-Ø-carbethoxyvinylmercapto)-2-oxo-l-10 azetidinyl ]-2-triphenylphosphoranylideneddikesyre-p-nitro-benzylester i 60 ml methylenchlorid sættes ved -20°C 3,06 ml trifluoreddikesyre, og til blandingen ledes ved denne temperatur en strøm af O3 i 03. Derefter fjernes overskud af O3 ved gennemledning af nitrogen, der tilsættes 3,06 ml 15 dimethylsulfid, blandingen omrøres ved stuetemperatur i 15 minutter, fortyndes med 20 ml iskoldt methylenchlorid, vaskes med 2 x 20 ml 10%'s vandig natriumhydrogencarbonat-opløsning og derpå med 20 ml saltopløsning, hvorpå den organiske fase tørres med natriumsulfat og inddampes i en 20 vakuumrotationsfordamper, hvorpå den faste remanens tørres i høj vakuum og opløses i 60 ml toluen, som er frisk filtreret over alumiumoxid. Derpå opvarmes opløsningen i 90 minutter ved 60°C under en nitrogenatmosfære, hvorpå den afkøles og inddampes i en vakuumrotationsfordamper, og 25 remanensen kromatograferes på 6 g Si02 (Merck) med toluen-ethylacetat (5:1) som elueringsmiddel. Efter ind-dampning af de egnede fraktioner fås den rene amorphe titelforbindelse.

Rf-værdi = 0,49 (ethylacetat-ether 1:1). IR-spektrum 30 (CH2CI2): absorptionsbånd ved 3570, 1790, 1720, 1530, 1350, 1330, 1210 cm-1. NMR-spektrum (i CDCI3/IOO MHz, i ppm): 8,3-7,5, 4H, dd, 7,33, IH, s, 5,8, IH, d (J = 2 Hz), 5,35, 2H, m, 4,3, IH, m, 3,85, IH, dd, (J = 2 Hz, J = 6 Hz), 2,05, IH, bredt, 1,38, 3H, d (J = 6 Hz).

ί ρ, \/ Α ' ^ Ο Ο Q

! UιΛ ni., ϋ 7 7 D

i j 102

Eksempel 98 (5R,6S)-6-(2-hydroxyprop-2-yl)-penem-3-carboxylsyre (natriumsalt) 5 Til en opløsning af 0,18 g (5R,6S)-6-(2-hydroxyprop-2-yl)-penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester i en blanding af 15 ml ethylacetat og 15 ml 0,4%'s vandig natriumhydro-gencarbonatopløsning sættes 0,15 g 10%'s palladium/kul-katalysator, hvorpå der hydrogeneres under atmosfæretryk i ; 10 50 minutter ved stuetemperatur. Hydrogeneringsblandingen filtreres gennem diatomejord, og filterremanensen efter-vaskes med vand. Den vandige fase isoleres fra filtratet, vaskes med ethylacetat, inddampes i højvakuum og kromato-graferes på seks 20 x 20 cm antecgel-dodecyltrichlorsilan-15 tyndtlagskromatografi-plader med vand. Ved eluering med acetonitril-vand (4:1) og lyophilisering af filtratet fås den rene titelforbindelse som et amorpht fast stof.

Rf-værdi = 0,37 (H2O, antecgel-dodecyltrichlorsilan-tyndtlagskromatografi-plader ) . IR-spektrum (KBr), 1755, 1590, 20 1555 cm“l, NMR-spektrum (i D2O/IOO MHz, i ppm): 7,40, IH, I s, 6,12, IH, d (J = 2Hz), 4,32, IH, d (J = 2 Hz), 1,7, 3H, I s, 1,66, 3H, s.

Eksempel 99 (5R,6S)-6-((1R)-11-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylsyre-p-25 nitrobenzylester

Til en opløsning af 0,17 g (0,21 mmol) 2-[(3S,4R)-3-((lR)- 1-hydroxyethyl) -4- (trans-/3-carboethoxyvinylmercapto) -2-oxo- 1-azetidinyl ]-2-triphenylphosphoranylideneddikesyre-p-ni-trobenzylester i 18 ml methylenchlorid sættes ved -20°C 30 0,93 ml trifluoreddikesyre, og til blandingen ledes ved denne temperatur en blanding af ozon og oxygen. Derefter fjernes overskud af ozon ved tilledning af nitrogen. Efter 103 rv/ /· - r -,,-. n r> tilsætning af 0,93 ml dimethylsulfid omrøres blandingen i en time ved stuetemperatur, fortyndes med 20 ml iskoldt methylenchlorid, hvorpå den vaskes med 2 gange 15 ml 10%'s 5 vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og derpå med saltopløsning. Den organiske fase tørres med natriumsulfat og inddampes i en vakuumrotationsfordamper. Den faste remanens tørres i høj vakuum og opløses i 20 ml toluen, som er frisk filtreret over aluminiumoxid (Alox). Opløsningen 10 opvarmes i tre timer ved 60°C under en nitrogenatmosfære, hvorpå den afkøles, inddampes i en vakuumrotationsfordamper, og remanensen kromatograferes på 16 g Si02 (Merck) med toluen/ethylacetat (9:1) som elueringsmiddel. Efter inddampning af de egnede fraktioner fås den rene amorphe 15 titelforbindelse.

Rf-værdi = 0,59 (ethylacetat-ether 1:1). IR-spektrum (CH2Cl2): absorptionsbånd ved 3550, 1790, 1720, 1525, 1350, 1320, 1200 cm-1: NMR-spektrum (i CDCI3/IOO MHz, i ppm): 8,3-7,5, 4H, dd, 7,3, IH, s, 5,85, IH, d (J = 2 Hz), 20 5,33, 2H, m, 3,85, IH, d (J = 2 Hz).

Eksempel 100 (5R,6S)-((IR)-1-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylsyre (natriumsalt)

Til en opløsning af 43 mg (5R,6S)-6-((IR)-1-hydroxyethyl)-25 penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester i en blanding af 4 ml ethylacetat og 4 ml 0,4%fs vandig natriumhydrogencar-bonatopløsnig sættes 36 mg 10%’s palladium/kul-katalysa-tor, og blandingen hydrogeneres under atmosfæretryk i 40 minutter ved stuetemperatur. Ved oparbejdning og kromato-30 grafi analogt med den i eksempel 96 beskrevne fremgangsmåde fås den rene titelforbindelse som et amorpht fast stof. Rf-værdi = 0,4 (H20, antecgel-dodecyltrichlorsilan-tyndt-lagskromatografi-plade). IR-spektrum (KBr): 1760 cm-1, 104

DK 16C099 B

NMR-spektrum (i D2O/IOO MHz, i ppm): 7,25, 1H, s, 5,95, IH, d (J = 2Hz), 4,45, 1H, m, 4,15, IH, dd (J = 6 Hz, J = 2 Hz), 1,5, 3H, d (J = 6 Hz).

5 Eksempel 101 I (5R,6S)-6-hydroxymethyl-penem-3-carboxylsyre-natriumsalt ! Ved katalytisk hydrogenering af (5R,6S)-6-hydroxymethyl- penem-3-carboxylsyre-p-nitrobenzylester, der kan fremstilles som beskrevet i eksempel 99, i tetrahydrofuran/-10 vand med 10%’s palladium/kul-katalysator, filtrering, afdampning af opløsningsmidlet, optagelse af remanensen i vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og lyofilisering fås titelforbindelsen.

UV-spektrum (H2O): Xmax = 304 nm (ε = 4400), IR-spektrum 15 (nujol): karakteristiske absorptionsbånd ved 2,95, 5,66, 6,29, 6,43 μτα. Tyndtlagskromatografi: Rf-værdi = 0,5 (UPci2-Plac*er' elueringsmiddel: H2O).

f t ! Biologiske forsøg

For et repræsentativt udvalg af de ved fremgangsmåden 20 ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser og en fra ! tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.655.298 kendt analog forbindelse foretages sammenlignende bestemmelse af de minimale hæmningskoncentrationer (MIC) ved hjælp af agar-fortyndingsmetoden (i DST 0X0ID, Steer's replikator, 1 25 inoculum 10^ mikroorganismer pr. ml).

j j Der anvendes følgende forsøgsforbindelser: 1. 2,6-Dimethyl-2-penem-3-carboxylsyre (eksempel 11) ί ' 2. 2-Methyl-6-isopropyl-2-penem-3-carboxylsyre (eksempel 16) 105 '"'i/··-- η η ρ

Jr\ .···.· .- >·:· d 3. 2-(2-Acetylaminoethy1thio)-6-ethyl-2-penem-3-carboxy1-syre (trans, racemisk, eksempel 64) 4. 2-(2-Acetylaminoethylthio)-6-ethyl-2-penem-3-carboxyl- 5 syre (cis, racemisk, eksempel 64) 5. 6-Ethyl-2-(3-aminopropyl)-2-penem-3-carboxylsyre (eksempel 69) 6. (5R,6S)-2-Methyl-6-methoxy-2-penem-3-carboxylsyre (eksempel 38) 10 7. (5R,6S)-2-(3-Aminopropyl)-6-methoxy-2-penem-3-carb- oxylsyre (eksempel 83) 8. 6-(1-Hydroxyethyl)-2-penem-3-carboxylsyre (threo-trans, eksempel 93) 9. 6-(1-Hydroxyethyl)-2-penem-3-carboxylsyre (erythro- 15 trans, eksempel 94) 11. (5R,6S)-6-Hydroxymethyl-2-penem-3-carboxylsyre-natri-umsalt (eksempel 99) 12. (1R,5R,6S)-6-(1-Hydroxyethyl)-2-(3-aminopropyl)-2-pe-nem-3-carboxylsyre-natriumsalt (eksempel 88) 20 13. 6-(1-Hydroxyethyl)-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre (threo, trans, eksempel 88) 14. 6-(l-HYdroxyethyl)-2-(2-aminoethylthio)-2-penem-3-carboxylsyre (threo, trans, eksempel 88) 15. 6-Hydroxymethyl-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre 25 (trans, racemisk, eksempel 88)

ί Π!Χ ί Γ! Ci Ο Q

Uf\ I Ο ου D

106 16. 6-Hydroxymethyl-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre (cis, racemisk, eksempel 88) 17. 6-(1-Hydroxyethyl)-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre 5 (cis, racemisk, eksempel 88) 18. (1R,5R,6S)-6-(1-Hydroxyethyl)-2-ethylthio-2-penem-3-carboxylsyre (eksempel 88) 19. (5R/6S)-6-Hydroxymethyl-2-(2-aminoethylthio)-2-penem- 3-carboxylsyre (eksempel 88) 10 20. (IS,5R,6S)-6-(1-Hydroxyethyl)-2-ethylthio-2-penem-3- carboxylsyre (eksempel 88) 21. (5R,6S)-2-Methyl-6-phenoxyacetylamino-2-penem-3-carboxy1syre (kendt).

De opnåede resultater er anført i nedenstående tabel 1.

!

107 OKI 60099 B

_| Λ ΙΛ ΚΙ

Π CN <Γ - - ι—I KC£lc0tD<f03N\DvDN(M

Μ ΟΟΟ co--<r-<rOcn

<f<rcMcocMcMcocooo-<i-oocooocoooa> u vOvocncMcomcMcMcMvocMcMcMcMcMcN

Η Η Η H i“4 H r—I «—Ί H

Λ A Λ. Λ Λ m m ιη 00 Γ-1 Τ—t -< r—« k '-ίΠ03·ία)ΝΜΝ'ίΊ

ΟΟΟ cn cn νθ sO

, CM CM

1 cncnoooOMrOcooococooococococooo

vOi—ICMCMCMCMCMCMCMCMCMCM

• i—i i—f r—< i—I i—I 1—I f—i i—I T—J r—l μ ΛΛΛΛΛΑΑΛΛΑ ΰ φνο <rMrcMCMCMCMcMCMCMcMCM<TCOaOCO <X>

to cncncncncnvocMCMcMCM

I—I τ-1 I—l I I

<D A

d d rl cm cm m oococooocoeocoooco ft in k » k rl N «.vOcmcmcmcmcscmcmcmcm i. Ο Ο Ο o .—* I—I i—1 I—i I—I r-l i—l r—I r—1 i—1 qo λα a λ a λ λ λ e w \ Cfl ω tji cm vo 3s. ^(¾ in i—1 o

sin CM <T *· i-4 ., „OOCOOOsiMOcMVDCOvOCO

OOO CM i—1 cn i—1 t—1 CM

n W *—< h

μ o A

S Cm ' in m vo -, m cm cm o

11 i—l CM s s - '•cOiSOsOcMCMCMCMCMOO

OOOO i-ir-ii-icncncncncn cM

—4 Λ

CM -st-Sl-SfMl-i-ICOOOCOOOstOOOOOOaDOOOO

cmcmvocmcmcmcmcmcm i—I i—l τ—4 i—l i—l i—l i—4 i—1 aA aaaaaa in in in

H 4f Μ N * ** 'cMOOCOMfMl’vOvOvOeMCO

OOO i-lt-li-4CnCM

r—^ m o m \D o

Cm cm o <r »-4 co COO c o tQ O r-4 Η r- o o

OVicno r^n.tnai H

I—I <1 1—4 2 CM CM U ΟΛ <5 cn a) to m a) E J3 Pn to tO 0) t4<tC 3 0 0 <T O' 01 3 C o \ n in ·ηλ tur-mo a>+ a)sj-*HrsCO m -h m to r» m c

WO-MaO-Ur-tOcM 3CCCJ CM -H

<D 3+ o\-i-tcn3 SEQajttjto ω

Cl CtJ -r-4 £*-, si" 00 i—1 i—I ·ι-1 C=1 ki*4 E CJ Ο ·ι-Ι *—1 3

5 O.I-1C l4-l.-IE-l.S3Wr-ll-4-.-4H

” CO o> -HtUCO cu 0» a) O *1-4 C OJ

n 3Cr\toa)CtO-WcJ+ ►. C U Λ π) M

H OCTiStOOJQ) fx! 4J Ο. Η H H) 00 id ocMU'iMEomrt njojjjijto . r> o o c Æ3--imtorteu-r-jo«

_, t. cJtooottJMi-ijiO'_,,—· ο E E G

1-1 V OCUE'H^iii-IcJcMi-I'—ittJta O

H 1-40)034-10,3-.-1 0) 0) ->-I .O W W E

Η O >,i4AJ0)a)C&.W -1-4 3-1-4 XJ 0 3 3 0 m }-i j33aCwooo).-ioo)tduo)(i)-o η μ curtain-mME-So E ,η η ο -u u 3 -¾ □ 3 μ -.-4 o)uc;«-ia)444JOoa)

'u ,£3 jj.jj^QjiifltO'tei-iOCI-iVJCO

m <«-4 WtftWWSSRWH.MOTStfWWPmCmrm ί 108 DK 160099 Β ΙΟ . oommo - οοοοοοοοοο

Γ-ί' OOCMCMOCMOOOOOOOOOO

C\J i-1 ι-i Η Τ""I i—i τ—1 r—f Η τ—I γ—I Η τ-^ Η ι—I

αλαααλαααλ ΙΟ ιο

Μ CM CM Ο r-J ο CO

θ' ‘‘s,. *" ..kCOcMOOi-ICMCOcMCOCOCM

OJ Ο Ο Ο Ο Ο Ο r-i 1—I Cvl ΙΟ * · · Ο O r-J Ο Χϊ -Ο Λ σ\ *.·“**··· Η Ο Ο Ο Ο C C Ε'ί'ίΗΝΠΝΊ'ί-ί ΙΟ • cm CM <Μ Ο tji—ι r-ι ο Q Ο Ο ίο ν ιο οο 2θΟ ^ τ-ι * ** · Ν Η Η Μ Ν ΟΟΟΟΟΟ Ο <-ι ο Ο <-*

α> A

03

OJ CM CM

(iiv ΙΟ ΙΟ O O' -< O CM tO

, "'i—It—ICO “· i—I CO -3" i—I CO -+

gH ΟΟΟΟΟΟ O CO

·Η r-J Ο ίο ε S-ι CM Pkl ‘Ο o CO CM CM 00

\ nvr\ . ** *» *· " CM -VO - CM Mf i-J c CM CM

«> oJ i-< O o ° ° O r-l O O r-J

>3* 03

O ¥5 ΙΟ lO tO LO

W min r-l OJ. Q. O O Q. to CO

S * r-I r-J CM - r-l -+ τ—I τ—I CM CM

”H‘ ΟΟΟΟΟΟ O r-J

S Λ i t f · cm s Η N Ο ι-1 N H CM CM ft ** K * ^ ^^cocococococncocococo *""* ΟΟΟΟΟΟ w

<D

Λ CO g i to CO O CM i—I i—* CM CM 1¾

^ λ - - - - -eo-a-cocMcMcococococo M

; r-J ΟΟΟΟΟΟ -H

. ·· r-llOr-llOOja · s v κ · * vD \D VD GO vD sT vO vD CM Λ

r-iOOOO C d ι—I r—I r-J i-l Ό r-l τ-l VO CO

--ti to Ο ΙΟ

vO O

β tO CM

Ο MT i-l m d vo u do O r-j H o. o o PQ J-tCOO N S B OV E-t

0<Ji-JZ CM CM d CO

;^-s r-l CO (U

t) co oj ¢) s o P-ι rt T3 w a)*rjMi-ce d α) o <r σ\ to

S 3 β fl \ N lO -i-jcfl (UO-iOO

u3 0)+ Ο) -+ -rl l~- do M-rJCQcOO-COd -P )-1 Cu 00 00 Ο r-J 0) CM 23ddtJ CM ·Η

Pi π) 3+ o\-rico3 taHoortco ω η p ca -Η -+ 00 l-l r-J -H H *i-t Β t) O -rJ -rj 3

[X 5 Oil-Id Ή T-J XJdWr-IrH.rJP

τ* X co ov •riQ>co+ α.ωα)ϋ·ιΜβα) h 3cr>coo)dra*i-iopi>ido .ocfld C uoNdcetua) ο ο- s-ι m ca oo * H td UCMO-rlBOcooJtO tt)Q)PPC0 en o ud jd3-i-iortcaB*J’'-iod . X ucooodMr-ij3cMi-Ji-j u E S d

Vi n 030g-HM-rl0 r-lr-tctjct) O

Φ O i-ia)o3)-iOJ3*i-J-i-i(i)aj*rjjatocoH

Λ 0 >vpj-)o)a)dD,pr^d-ri 00330

id Pi Æ304dcooo<uoocotaMa)a)O

C-i V D-tflcDO.WClOE.dCJB.Oi-ICUJ-’+'P

j Cl) p -rJ 0)0 r-4 0) M 4J O O (I) 5 o »o · cu · ca cn · d i—ι ο d ϊ-· )-ι co _ —i cocococnzzaiEJiacnt^coiap-idiPLt

V

i

Claims (4)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af optisk aktive eller racemiske 6-substituerede 2-penem-3-carb-5 oxylsyreforbindeiser med den almene formel 1 H f 9 s A >-e1 x c i 2 0=C-Ix hvori Ra betyder lavalkyl, hydroxylavalkyl, phenyllavalkyl, lavalkoxy eller lavalkanoyloxy substitueret med phenyl-10 oxy, R1 betyder hydrogen, aminolavalkyl, acylaminolavalkyl, hvori acyl er lavalkanoyl, med mono- eller dilavalkyl-amino substitueret lavalkylthio eller acy1aminolavalkyl-thio, hvori acyl er lavalkanoyl, 15 eller hvori Ra betyder lavalkyl, phenyllavalkyl, lavalkoxy eller lavalkanoyloxy substitueret med phenyloxy, og R* betyder lavalkyl, lavalkylthio eller aminolavalkyl-thio, og 20 r2 i hvert tilfælde betyder hydroxy eller sammen med carbonylgruppen -C(=0)- en under fysiologiske betingelser spaltelig forestret carboxylgruppe, samt farmaceutisk anvendelige salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper, kendetegnet ved, at en 25 ylidforbindelse med formlen II DK 160099 3 z -p9- TT tf η Η ς * S-C-R \j_p 0=1-Nx (II) XdSL# o=c—r2a hvori ! Ra og R1 har de ovenfor angivne betydninger, idet funk tionelle grupper i disse grupper fortrinsvis foreligger 5 på beskyttet form, r2A sammen med carbonylgruppen -C(=0)- udgør en beskyttet carboxylgruppe, Z betyder oxygen eller svovl, og . hvori X® enten betyder en tre gange substitueret phos- I 10 phoniogruppe eller en to gange forestret phosphonogruppe sammen med en kation, i ringsluttes og i den beskyttede carboxylgruppe med formlen -C(=0)-R2A i en opnået forbindelse med formlen I omdannes til en fri ! 15 eller en under fysiologiske betingelser spaltelig for estret carboxylgruppe, og en gruppe Ra og/eller Ri i en opnået forbindelse med formlen I inden for definitionen om ønsket omdannes til en anden gruppe Ra og/eller R1, og/eller 20 en opnået fri forbindelse om ønsket omdannes til et salt eller et opnået salt til den frie forbindelse eller til et andet salt, og/eller en fremkommen blanding af isomere forbindelser om ønsket adskilles i de enkelte isomere. 1

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles forbindelser med formlen I, hvori Ra betyder lavalkyl, 1-hydroxylavalkyl, phenyllavalkyl, phenoxylavalkanoyloxy eller lavalkoxy, og R1 betyder hydrogen, aminolavalkyl, acylaminolavalkyl, r\\s λ ' r. ~·- Γ· ^ U !\ ιΟ 7 :· D hvori acyl er lavalkanoyl, eller med mono- eller dilav-alkylamino eller lavalkanoylamino substitueret lavalkyl-thio, 5 eller salte af sådanne forbindelser.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles forbindelser med formlen I, hvori sammen med carbonylgruppen -C(=0)- udgør en under fysiologiske betingelser spaltelig forestret carboxylgruppe, 10 og Ra og R^ har de i krav 1 angivne betydninger, eller farmaceutisk anvendelige salte af sådanne forbindelser.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles (5R)-konfigurerede forbindelser med formlen I, hvori Ra, R1 og R^ har de i krav 1 angivne 15 betydninger.