DE60028003T2 - Bifidobakterium zur behandlung von entzündungskrankheiten - Google Patents

Bifidobakterium zur behandlung von entzündungskrankheiten Download PDF

Info

Publication number
DE60028003T2
DE60028003T2 DE60028003T DE60028003T DE60028003T2 DE 60028003 T2 DE60028003 T2 DE 60028003T2 DE 60028003 T DE60028003 T DE 60028003T DE 60028003 T DE60028003 T DE 60028003T DE 60028003 T2 DE60028003 T2 DE 60028003T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
strain
formulation according
treatment
prophylaxis
formulation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE60028003T
Other languages
English (en)
Other versions
DE60028003D1 (de
Inventor
Kevin John COLLINS
Christopher Gerald O'SULLIVAN
Liam O'mahony
Fergus Shanahan
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ENTPR IE TRD AS BIORESEARCH IE
University College Cork
Enterprise Ireland
Original Assignee
ENTPR IE TRD AS BIORESEARCH IE
University College Cork
Enterprise Ireland
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from IE990033A external-priority patent/IE990033A1/en
Application filed by ENTPR IE TRD AS BIORESEARCH IE, University College Cork, Enterprise Ireland filed Critical ENTPR IE TRD AS BIORESEARCH IE
Application granted granted Critical
Publication of DE60028003D1 publication Critical patent/DE60028003D1/de
Publication of DE60028003T2 publication Critical patent/DE60028003T2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/179—Sakei
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/542—Mucosal route oral/gastrointestinal
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

  • Einleitung
  • Diese Erfindung betrifft probiotische Bifidobacterium-Stämme, die verschiedene Anwendungen in Lebensmitteln und in der Medizin haben. Im Besondern betrifft die Erfindung probiotische Stämme von Bifidobakterien, die in der Lage sind, erkennbare Symptome von Entzündungskrankheiten vorteilhaft zu verändern und infolgedessen diese zu mildern.
  • Die Verbraucher werden sich zunehmend Angelegenheiten bewußt, die zur Erhaltung ihrer Umwelt, Gesundheit und Ernährung notwendig sein können. Als Antwort darauf hat sich die wissenschaftliche Forschung auf die Rollen, die Ernährungsweisen, Streß und moderne medizinische Praktiken (z.B. Antibiotika und Strahlenbehandlung) bei der Bedrohung menschlicher Gesundheit spielen können, konzentriert. Im Besonderen da sich die Bevölkerungsdynamiken hin zu älteren Gesellschaften verschieben, erhöhen sich die Häufigkeit von Krankheiten, die durch fehlerhafte oder beeinträchtigte Mikroflora, wie zum Beispiel Infektionen des Magen-Darm-Trakts („gastrointestinal tract", GIT), Darmträgheit, Reizkolon („irritable bowel syndrome", IBS), inflammatorische Darmerkrankung („inflammatory bowel disease", IBD) – Crohn-Krankheit und Colitis ulcerosa, Lebensmittelallergien, durch Antibiotika hervorgerufene Diarrhoe, Herz-Kreislauf-Erkrankung und bestimmte Krebsarten (z.B. kolorektaler Krebs), verursacht werden kann.
  • Probiotika wurden als lebensfähige mikrobielle Nahrungsergänzungen, die den Wirt durch Verbesserung der intestinalen mikrobiellen Balance vorteilhaft beeinflussen, oder allgemeiner, als lebende Mikroorganismen, die nach Aufnahme in gewisser Anzahl mit der Nahrung, gesundheitliche Effekte ausüben, die über die inhärente, grundlegende Ernährung hinausgehen, definiert. Cocktails von verschiedenen Mikroorganismen, vor allem Spezies von Lactobacillus und Streptococcus wurden herkömmlicherweise in vergorenen Milchprodukten zur Förderung der Gesundheit verwendet.
  • In den letzten Jahren hat sich die kommerzielle Herstellung und Vermarktung von funktionellen Lebensmitteln (Lebensmittel, die Funktionen des Körpers in einer gezielten Weise beeinflussen, um positive Effekte auf die Physiologie und Ernährung zu bewirken), vorzugsweise probiotische (Acidophilus-Bifidus) Joghurts, von dem eingeführten japanischen Marktnischenplatz in die lukrative und wachsende Europäische Union ausgedehnt. Obwohl eine Anzahl von probiotischen Bakterien menschlichen Ursprungs (z.B. L. acidophilus LA-1) nun kommerziell ausgenutzt werden, stehen viele Verbraucher, Verbraucherorganisationen und Mitglieder der wissenschaftlichen Gemeinschaft solchen Produkten und deren veröffentlichten probiotischen Ansprüchen gegenüber skeptisch. Die Molkereiindustrie ist daher unter erheblichem Druck, diese neuen probiotischen Lebensmittelprodukte wissenschaftlich zu validieren.
  • Kriterien, die zur Auswahl von potentiell effektiven probiotischen Mikroorganismen vorgeschlagen wurden, können wie folgt zusammengefaßt werden: menschlichen Ursprungs, nicht-pathogenes Verhalten, Widerstandsfähigkeit gegenüber technologischen Prozessen (d.h. Lebensfähigkeit und Aktivität in Bereitstellungsvehikeln), Widerstandsfähigkeit gegenüber Magensäure und Giftigkeit der Galle, Adhäsion an Darmepithelgewebe, Fähigkeit zur Besiedlung des GIT, Produktion von antimikrobiellen Substanzen, Fähigkeit zur Anpassung von Immunreaktionen und die Fähigkeit zur Beeinflussung von metabolischen Aktivitäten (z.B. Aufnahme von Cholesterin, Laktaseaktivität, Vitaminproduktion) (J. Huis in't Veld, C. Shortt, Selection criteria for probiotic micro-organisms. In: A. R. Leeds, I. R. Rowland, Ed. Gut Fora and Health – Past, Present and Future. London: The Royal Society of Medicine Press Ltd., 1996: 19–26).
  • Bifidobakterien sind eine von mehreren vorherrschenden kultivierbaren Bakterien in der Mikroflora des Darms.
  • Die Funktionen von endogenen Bifidobakterien im Kolon sind noch nicht vollständig aufgeklärt. Es ist jedoch anerkannt, dass Säuglinge, die ausschließlich gestillt wurden, gegenüber nicht gestillten Säuglingen ein geringeres Risiko von Diarrhoe haben. Die Tatsache, dass diese Säuglinge eine größere Anzahl von kolonischen Bifidobakterien haben, kann zum Teil diesen beobachteten Gesundheitsvorteil erklären, da die Besetzung von verfügbaren Nischen im GIT durch ein große Anzahl von nicht-pathogenen Bifidobakterien bei der Verhütung einer bakteriellen Infektion helfen kann. Es wird angenommen, dass die Pathogenese der Crohn-Krankheit mit der kolonischen bakteriellen Mikroflora in Verbindung steht (S. Targan und F. Shanahan, Inflammatory bowel disease: From bench to bedside. Williams and Wilkins, 1994).
  • Vor kurzem wurde gefunden, dass Patienten, die an aktiver Crohn-Krankheit leiden, verglichen mit gesunden Individuen, signifikant weniger zurückgewinnbare Bifidobakterien in ihren Fäzes haben. Es wurde beobachtet, dass diese Abnahme der Anzahl an Bifidobakterien direkt mit den verringerten Levels an β-D-Galaktosidase-Produktion und -Aktivität korreliert (C. Favier et al., Dig. Dis. Sci. 1997; 42: 817–822). β-D-Galaktosidase ist ein durch Bifidobakterien hergestelltes Enzym. Diese Ergebnisse unterstützen Vermutungen, die in anderen Studien vorgeschlagen wurden, dass Stämme von Bifidobakterien wichtige Rollen bei der Aufrechterhaltung einer ausgewogenen, gesunden Mikroflora des Darms spielen können.
  • Bifidobakterien werden als Probiotika angesehen, da sie lebend Organismen sind, die bei Aufnahme mit der Nahrung in ausreichender Anzahl gesundheitliche Effekte, die über die grundlegende Ernährung hinausgehen, ausüben. Zahlreiche mit der Nahrung aufgenommene Bifidobakterien müssen die Stelle der Aktivität im Darm erreichen, um einen probiotischen Effekt auszuüben. Ein minimaler Level von ungefähr 106–107 lebensfähigen Bifidobakterien pro Gramm Darminhalt wurde vorgeschlagen (Y. Bouhnik, Lait 1993; 73: 241–247). In der Literatur gibt es Berichte, die zeigen, dass in vivo-Studien an Erwachsenen und Säuglingen darauf hindeuten, dass einige Stämme von Bifidobakterien in der Lage sind, die Passage durch den Magen-Darm-Trakt zu überleben. Es wurden signifikante Unterschiede zwischen den Fähigkeiten von verschiedenen Bifidobakterienstämmen Säure und Gallensalze zu tolerieren, beobachtet, was darauf hindeutet, dass das Überleben ein wichtiges Kriterium für die Auswahl von potentiellen probiotischen Stämmen ist.
  • Die Aufnahme von Bifidobakterien mit der Nahrung kann die Magen-Darm-Passage verbessern.
  • Darüber hinaus veranschaulichen indirekte Hinweise bei Menschen, dass der Konsum von durch Bifidobakterien vergorener Milch zu verringerten Levels von bestimmten fäkalen Enzymen wie β-D-Galaktosidase, die die Umwandlung von Prokarzinogenen zu Karzinogenen zur Folge haben (Y. Bouhnik et al., Eur. J. Clin. Nutr. 1996; 50: 269–273), führen kann. Durch Fäkalien übertragene Fäulnismetaboliten wie p-Kresol, Indol und Ammoniak wurden ebenfalls reduziert, wenn Probanden durch Bifidobacterium longum und S. thermophilus (R. Takiguchi et al., Bifidus – Flores, Fructus et Semina 1996; 9: 135–140) vergorene Milch konsumierten.
  • Es wurde berichtet, dass antimikrobielle Aktivität mit Bifidobakterien verbunden ist. Es wurde auch gezeigt, dass Bifidobakterien verschiedene Parameter des Immunsystems modulieren.
  • Es wurde berichtet, dass eine Schleimhautentzündung bei IL-10 defizienten Mäusen durch Fütterung der Versuchstiere mit einem Präparat aus Milchsäurebakterien zurückgeht (K. Madsen et al., Gastroenterol. 1997; 112: A1030). Weitere, an Ratten durchgeführte Studien haben demonstriert, dass die Aufnahme von Bifidobakterien mit der Nahrung die Bildung von aberrierenden Kryptstellen (frühe preneoplastische Läsionen) im Kolon unterdrücken kann (N. Kulkarni und B. Reddy, Proc. Soc. Experim. Biol. Med. 1994; 207: 278–283), zusätzlich zu signifikanten Abnahmen im Auftreten von Kolontumor und der Anzahl an vorhandenen Tumoren (J. Singh et al., Carcinogenesis 1997; 18: 833–841).
  • Es gibt eine anhaltende Suche nach probiotischen Stämmen mit besonders vorteilhaften Effekten auf die Ernährung und Therapie und auf die Gesundheit im Allgemeinen.
  • Darstellung der Erfindung
  • Die Erfindung liefert einen Stamm vom Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 oder ein Mutant oder eine Variante davon.
  • Eine Hinterlegung des Stammes Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 wurde am 13. Januar 1999 bei der National Collections of Industrial and Marine Bacteria Limited (NCIMB) gemacht und die Zugangsnummer NCIMB 41003 verliehen.
  • In einer Ausführungsform ist der Mutant ein genetisch veränderter Mutant.
  • In einer Ausführungsform ist die Variante eine natürlich vorkommende Variante von Bifidobacterium longum infantis UCC 35624.
  • Der Stamm vom Bifidobacterium kann in der Form von lebensfähigen Zellen sein. Alternativ ist der Stamm vom Bifidobacterium in der Form von nicht lebensfähigen Zellen.
  • Der Stamm vom Bifidobacterium longum infantis der Erfindung wird aus herausgeschnittenem und gewaschenem menschlichen Magen-Darm-Trakt isoliert und ist beim Menschen nach oraler Aufnahme signifikant immunomodulatorisch. Der Stamm der Erfindung bewirkt Änderungen an einem immunologischen Marker, wenn er in ein System eingebracht wird, das aus Zellen, die mit dem Immunsystem interagieren und Zellen des Immunsystems, enthält. Die Zellen, die mit dem Immunsystem interagieren, können Epithelzellen sein. Der immunologische Marker kann ein Cytokin, vorzugsweise TNFα, sein. Die Zellen, die mit dem Immunsystem interagieren und die Zellen des Immunsystems können von abgestimmter Herkunft sein. Die Zellen, die mit dem Immunsystem interagieren, sind von gastrointestinaler, respiratorischer oder urogenitaler Herkunft. Die Zellen des Immunsystems sind bevorzugt von gastrointestinaler, respiratorischer oder urogenitaler Herkunft.
  • Der Stamm vom Bifidobacterium der Erfindung hat nach oraler Aufnahme einen signifikant entzündungshemmenden Effekt beim Menschen.
  • Der Stamm von Bifidobacterium gemäß der Erfindung ist dazu fähig, die Effekte einer inflammatorischen Darmerkrankung zu bekämpfen, wobei die genannte Fähigkeit in der Gegenwart von physiologischen Konzentrationen von menschlicher Galle und menschlichem Magensaft aufrecht erhalten wird. Die Fähigkeit die Effekte einer inflammatorischen Darmerkrankung zu bekämpfen, wird gemessen, indem eine Umkehr einer zehrenden Krankheit bei Empfängermäusen mit schwerem kombiniertem Immundefekt („severe combined immunodeficient recipient", SCID), denen gereinigte CD4+, CD45RBhigh T-Zellen verabreicht wurden, gemessen wird.
  • Die Fähigkeit des Stammes von Bifidobacterium longum infantis gemäß der Erfindung die Effekte einer inflammatorischen Darmerkrankung zu bekämpfen, kann auch gemessen werden, indem die Abnahme der Darmentzündung bei IL-10 defizienten Mäusen (IL-10+ 129 Svex Stamm) im Anschluß an eine Verabreichung des Stammes vom Bifidobacterium longum infantis gemäß der Erfindung gemessen wird. Interleukin 10 (IL-10) ist ein wichtiges regulatorisches Cytokin, das Effektorfunktionen von Makrophagen/Monozyten, T-Helfer-1 (Th1)-Zellen und natürlichen Killerzellen unterdrückt. Zusätzlich steigert IL-10 die Proliferation und Differenzierung von B-Zellen. Maustypen, denen das IL-10-Gen fehlt, entwickeln spontan eine inflammatorische Darmerkrankung und gastrointestinale Tumore. Die Magen-Darm-Flora wurde mit der Pathogenese dieser Krankheitszustände in Verbindung gebracht, da keimfreie Tiere keine Krankheit entwickeln.
  • Der Stamm vom Bifidobacterium der Erfindung hat eine hemmende Aktivität gegen ein breites Sortiment von grampositiven und gramnegativen Bakterien. Der Stamm vom Bifidobacterium der Erfindung zeigt ein breites Spektrum von Aktivitäten gegen Bakterien einschließlich Spezies von Staphylococcus, Pseudomonas, Coliform und Bacillus.
  • In einem weiteren Aspekt liefert die Erfindung eine Formulierung, die einen Stamm vom Bifidobacterium der Erfindung umfaßt.
  • Die Formulierung kann einen anderen probiotischen Stoff enthalten. Alternativ oder zusätzlich enthält die Formulierung einen präbiotischen Stoff.
  • Bevorzugt enthält die Formulierung einen ingestierbaren Träger. Der ingestierbare Träger kann ein pharmazeutisch akzeptabler Träger, wie zum Beispiel eine Kapsel, Tablette oder Pulver sein.
  • Der ingestierbare Träger kann ein Nahrungsmittel, wie zum Beispiel gesäuerte Milch, Joghurt, gefrorener Joghurt, Milchpulver, Milchkonzentrat, Streichkäse, Soßen oder Getränke sein.
  • Die Formulierung kann ein Protein und/oder Peptid, im besonderen Proteine und/oder Peptide, die reich an Glutamin/Glutamat sind, ein Lipid, ein Kohlenhydrat, ein Vitamin, Mineralien und/oder Spurenelement umfassen.
  • In einer Ausführungsform liegt das Bifidobacterium der Erfindung bei mehr als 106 KBE pro Gramm des Bereitstellungssystems vor.
  • In einer anderen Ausführungsform enthält die Formulierung ein Hilfsmittel.
  • Die Formulierung kann eine bakterielle Komponente enthalten. Die Formulierung kann alternativ oder zusätzlich eine Wirkstoffeinheit enthalten. Die Formulierung kann auch eine biologische Verbindung enthalten.
  • Die Formulierung kann in einer Form zur oralen Immunisierung vorliegen.
  • Die Erfindung stellt weiterhin einen Stamm der Erfindung oder eine Formulierung davon zur Verwendung in Lebensmitteln bereit.
  • In einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung einen Stamm der Erfindung oder eine Formulierung davon zur Verwendung als ein Arzneimittel bereit.
  • Der Stamm der Erfindung oder eine Formulierung der Erfindung kann zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von unerwünschter inflammatorischer Aktivität sein.
  • Der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung kann zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von unerwünschter inflammatorischer Aktivität, wie zum Beispiel inflammatorischer Darmerkrankung, z.B. Crohn-Krankheit oder Colitis ulcerosa, Reizkolon, Pouchitis oder Postinfektions-Colitis, sein.
  • Die unerwünschte inflammatorische Aktivität kann aufgrund von Krebs auftreten.
  • Darüber hinaus kann der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von gastrointestinalem Krebs/gastrointestinalen Krebsen sein.
  • Der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung kann für die Prophylaxe von Krebs verwendet werden. Weiterhin kann der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung in der Prophylaxe und/oder Behandlung einer systemischen Erkrankung, wie zum Beispiel rheumatoide Arthritis, verwendet werden.
  • Der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung kann zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Autoimmunstörungen, die auf unerwünschte inflammatorische Aktivität zurückzuführen sind, verwendet werden.
  • Der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung kann zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Krebs, der auf unerwünschte inflammatorische Aktivität zurückzuführen ist, verwendet werden.
  • Der Stamm der Erfindung oder die Formulierung der Erfindung kann zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Diarrhoeerkrankung, die auf unerwünschte inflammatorische Aktivität, wie zum Beispiel mit Clostridium difficile assoziierte Diarrhoe, mit Rotavirus assoziierte Diarrhoe oder post-infektiöse Diarrhoe, zurückzuführen ist, verwendet werden.
  • Kurze Beschreibung der Zeichnungen
  • In den beigefügten Zeichnungen:
  • 1 ist ein Graph von KBE/ml gegen Zeit für den Bifidobacterium longum infantis Stamm 35612, wie im Beispiel 2 beschrieben;
  • 2 ist ein Graph von KBE/ml gegen Zeit für den Bifidobacterium longum infantis Stamm 35624, wie im Beispiel 2 beschrieben;
  • 3 ist ein Graph von prozentualer Gewichtsveränderung gegen Zeit (Tage) für fünf SCID Mäuse (1–5), denen der Stamm UCC 35624, wie im Beispiel 5 beschrieben, verabreicht wurde;
  • 4 ist ein Graph von durchschnittlicher prozentualer Gewichtsveränderung gegen Zeit (Tage) Für die SCID Mäuse (1–5), denen der Stamm UCC 35624, wie im Beispiel 5 beschrieben, verabreicht wurde;
  • 5 ist ein Graph von prozentualer Gewichtsveränderung gegen Zeit (Tage) für Mäuse (6–10), denen eine Kombination der Stämme Lactobacillus salivarius UCC 118 und UCC 35624, wie im Beispiel 5 beschrieben, verabreicht wurde;
  • 6 ist ein Graph von durchschnittlicher prozentualer Gewichtsveränderung gegen Zeit (Tage) für Mäuse (6–10), denen eine Kombination der Stämme UCC 118 und UCC 35624, wie im Beispiel 5 beschrieben, verabreicht wurde;
  • 7 ist ein Graph von prozentualer Gewichtsveränderung gegen Zeit (Tage) für Mäuse (11–15), denen eine Kombination der Stämme UCC 118 und UCC 35624, wie im Beispiel 5 beschrieben, verabreicht wurde;
  • 8 ist ein Graph von durchschnittlicher prozentualer Gewichtsveränderung gegen Zeit (Tage) für Mäuse (11–15), denen eine Kombination der Stämme UCC 118 und UCC 35624, wie im Beispiel 5 beschrieben, verabreicht wurde;
  • 9 ist ein Balkendiagramm der TNFα-Level der Patienten- und Kontrollproben in der Gegenwart von PBMCs und Bifidobacteria longum infantis, wie im Beispiel 7 beschrieben;
  • 10 ist ein Balkendiagramm, das die TNFα- und IL-8-Level der Co-Kulturen von Ephitelzellen, PBMCs und Bifidobacterium longum infantis, wie im Beispiel 7 beschrieben, zeigt. Die Kontrollgruppen stellen Co-Kulturen von Ephitelzellen und PBMCs alleine dar;
  • 11 sind Balkendiagramme des peripheren Blutcytokin-Levels nach dreiwöchiger Aufnahme von Bifidobacterium longum infantis durch gesunde menschliche Freiwillige (n = 18), wie in Beispiel 8 beschrieben;
  • 12 sind Balkendiagramme von Serumlevels von TNFα und IL-1RA nach Aufname von Bifidobacterium longum infantis durch gesunde menschliche Freiwillige (n = 18), wie in Beispiel 8 beschrieben;
  • 13 ist ein Balkendiagramm von TNFα-Levels in zellfreien verbrauchten Überständen von Bifidobacterium longum infantis und einer MRS-Kontrolle, wie in Beispiel 9 beschrieben;
  • 14 ist eine schematische Darstellung eines unteren Darms einer SCID Maus nach Behandlung mit Bifidobacterium longum infantis; und
  • 15 ist eine schematische Darstellung des unteren Darms einer unbehandelten SCID Maus.
  • Ausführliche Beschreibung
  • Wir haben Stämme von probiotischen Bakterien, die in der Lage sind erkennbare Symptome von inflammatorischen Störungen vorteilhaft zu verändern und diese infolgedessen zu mildern, isoliert. Diese Stämme und die hergestellten Formulierungen können in einer Vielfalt von Nahrungsmitteln und Medikamenten zur Bekämpfung des Effektes von Entzündungsbeschwerden verwendet werden.
  • Es wurden in vivo- und in vitro-Studien unter Verwendung der probiotischen Bakterienstämme durchgeführt. Es wurde gefunden, dass Menschen, die mit Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 enthaltendem Joghurt verpflegt wurden, merkliche Abnahmen in ihren systemischen Levels von IL-8 aufwiesen. Dieser Stamm kann daher eine potentielle Anwendung in der Behandlung eines Bereichs an Entzündungsbeschwerden haben, besonders, wenn er in Kombination mit aktuellen entzündungshemmenden Therapien, wie zum Beispiel nicht-steroide entzündungshemmende Heilmittel („non-steroid anti-inflammtory drugs", NSAIDs) oder Infliximab, verwendet wird.
  • Die Aufnahme von Bifidobacterium longum infantis durch SCID-Mäuse wurde ebenfalls untersucht. Während dieses Experiment die inflammatorische Aktivität signifikant abschwächte, bewahrten Mäuse, die Bifidobacterium longum infantis konsumierten, festen Stuhl, während die Kontrollmäuse unter Diarrhoe litten. Dieser anti-diarrhoeische Effekt konnte der entzündungshemmenden Aktivität dieser Erfindung zugeordnet werden, möglicherweise durch cAMP-Modulation vermittelt.
  • Es ist nicht bekannt, ob intakte Bakterien zur Ausübung eines entzündungshemmenden Effekts benötigt werden oder ob einzelne aktive Komponenten der Erfindung alleine verwendet werden können. Proinflammatorische Komponenten von bestimmten Bakterienstämmen wurden identifiziert. Die proinflammatorischen Effekte von Gram-negativen Bakterien werden durch Lipopolysaccharid (LPS) vermittelt. LPS alleine induziert ein proinflammatorisches Netzwerk, zum Teil aufgrund von Bindung von LPS an den CD 14 Rezeptor auf Monozyten. Es wird angenommen, dass Komponenten von probiotischen Bakterien aufgrund der Effekte der ganzen Zelle, entzündungshemmende Aktivität besitzen. Nach Isolierung dieser Komponenten wird eine Manipulation in pharmazeutischer Qualität erwartet.
  • Die generelle Verwendung von Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 ist in der Form lebensfähiger Zellen. Sie kann jedoch auch auf nicht-lebensfähige Zellen, wie zum Beispiel als abgetötete Kulturen oder durch Bifidobacterium longum infantis UCC 3564 exprimierte nützliche Faktoren enthaltende Zusammensetzungen, ausgedehnt werden. Dies könnte thermisch abgetötete Mikroorganismen oder Mikroorganismen, die durch Exposition mit geänderten pH oder Unterwerfung von Druck abgetötet wurden, einschließen. Die Herstellung des Produkts ist mit nicht-lebensfähigen Zellen einfacher, Zellen können einfach in Arzneimittel aufgenommen werden und die Lagerungserfordernisse sind deutlich weniger eingeschränkt als mit lebensfähigen Zellen. Lactobacillus casei YIT 9018 bietet ein Beispiel für die effektive Verwendung von Zellen, die durch Hitze abgetötet wurden, als ein Verfahren für die Behandlung und/oder Prävention von Tumorwachstum, wie im US Patent Nr. US 4347240 beschrieben.
  • Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele besser verstanden werden.
  • Beispiel 1
  • Isolierung der probiotischen Bakterien
  • Blinddärme und Sektionen des Dick- und Dünndarms des menschlichen GITs, die bei wiederherstellender Chirurgie erhalten wurden, wurden nach probiotischen Bakterienstämmen, wie in Tabelle 1 gezeigt, überprüft.
  • Tabelle 1. Nach der Gegenwart von probiotischen Bakterien überprüfte Gewebeproben des Magen-Darm-Trakts
    Figure 00100001
  • Alle Proben wurden unmittelbar nach der Operation bei –80°C in sterilen Behältern gelagert. Die gefrorenen Gewebe wurden aufgetaut, gewogen und in mit Cystein (0,05%) versetzte, 25%ige Ringer-Lösung gelegt. Jede Probe wurde behutsam geschüttelt, um lose anhaftende Mikroorganismen (genannt – Wash 'W') zu entfernen. Nach dem Transfer in eine zweite Menge Ringer-Lösung wurde die Probe 7 min durchgewirbelt, um fest anhaftende Bakterien (genannt – Sample 'S') zu entfernen. Um im Gewebe eingebettete Bakterien zu isolieren, wurden die Proben A, B und C auch in einem Braun-Mischer (genannt – Homogenate 'H') homogenisiert. Die Lösungen wurden seriell verdünnt (Verdünnung 10–1 von einer Wash-Probe wurde mit W1 bezeichnet, Verdünnung 10–2 wurde mit W2 bezeichnet und das gleiche Bezeichnungssystem wurde für die 'S'- und 'H'-Proben verwendet) und auf den Folgenden Agarmedien spatel-plattiert (100 μl): RCM (verstärktes Clostridien-Medium) und mit Essigsäure auf pH 5,5 eingestelltes RCM; TPY (Tryptikase, Pepton- und Hefeextrakt), (P. Chevalier et al., (1990) J. Appl. Bacteriol. 68, 619–624). MRS (deMann, Rogosa und Sharpe); ROG (Acetatmedium (SL) von Rogosa); LLA (Leberlactose-Agar von Lapiere); BHI (Hirn-Herz-Infusionsagar); LBS (Lactobacillusselektives Altar) und TSAYE (Trypton-Soya-Agar ergänzt mit 0,6% Hefeextrakt). Alle Agarmedien wurden von Oxoid Chemicals, mit der Ausnahme von TPY-Agar, geliefert. Platten wurden in anaeroben Gefäßen (BBL, Oxoid) unter der Verwendung von CO2-generierenden Kits (Anaerocult A, Merck) für 2–5 Tage bei 37°C inkubiert. Gram-positive, Katalase-negative stäbchenförmige oder gegabelt/pleomorphische Bakterienisolierungen wurden zur Reinigung auf komplexes nicht-selektives Medium (TPY) gestrichen. Die Isolierungen wurden routinemäßig in TPY-Medium, soweit nicht anders vermerkt, bei 37°C unter anaeroben Bedingungen, kultiviert. Mutmaßliche Bifidobacteria-Spezies wurden in 40% Glyzerin eingelagert und bei –20°C und –80°C gelagert.
  • Analyse der Endprodukte der Fermentation
  • Der Metabolismus des Kohlenhydrats Glukose und die nachfolgenden organischen Säuren als Endprodukte wurden unter Verwendung einer „LKB Bromma, Aminex HPX-87H High Performance Liquid Chromatography" (HPLC)-Säule untersucht. Die Säule wurde konstant bei 60°C mit einer Flußrate von 0,6 ml/min (konstanter Druck) gehalten. Der verwendete HPLC-Puffer war 0,01 N H2SO4. Vor der Analyse wurde die Säule unter Verwendung von 10 mM Citrat, 10 mM Glukose, 20 mM Laktat und 10 mM Acetat als Standards kalibriert. Die Kulturen wurden in modifizierter MRSBrühe für 1–2 Tage bei 37°C anaerob fortgepflanzt. Nach Zentrifugieren für 10 min bei 14.000 g wurde der Überstand 1:5 mit HPLC-Puffer verdünnt und 200 μl wurden in der HPLC analysiert. Alle Überstände wurden zweifach analysiert.
  • Biochemische und physiologische Charakterisierung
  • Biochemische und physiologische Eigenschaften der Bakterienisolierungen wurden zur Unterstützung der Identifizierung bestimmt. Nitratreduktion, Indolbildung und Expression der β-Galaktosidaseaktivität wurden untersucht. Wachstum sowohl bei 15°C als auch bei 45°C und Proteaseaktivität auf Gelatin wurden bestimmt. Wachstumscharakteristika der Stämme in Lackmusmilch wurden ebenfalls beurteilt.
  • Antibiotische Sensitivitätsprofile
  • Antibiotische Sensitivitätsprofile der Isolierungen wurden unter Verwendung des Scheibenempfindlichkeitsassays' bestimmt. Die Kulturen wurden im geeigneten Brühemedium für 24–48 h aufgezogen, auf Agarmedium spatel-verteilt (100 μl) und Scheiben, die bekannte Konzentrationen der Antibiotika enthielten, wurden auf das Agar aufgebracht. Die Stämme wurden bezüglich der antibiotischen Sensitivität nach 1–2 Tagen Inkubation unter anaeroben Bedingungen bei 37°C untersucht. Die Stämme wurden als sensitiv angesehen, wenn Inhibitionszonen von 1 mm oder größer gesehen wurden.
  • Isolierung von Bifidobacteria sp.
  • Sieben aus dem menschlichen GIT entnommene Gewebesektionen wurden bezüglich der Gegenwart von Stämmen, die der Gattung des Bifidobacteriums angehörig sind, überprüft. Es gab wie folgt einige Unterschiede zwischen den Gewebeproben. Proben A (Ileum) und E (Appendix) hatten mit ungefähr 102 isolierten Zellen pro Gramm Gewebe die niedrigsten Zählungen. Im Vergleich dazu wurden mehr als 103 KBE pro Gramm Gewebe in anderen Proben entdeckt. Ähnliche Mengen an Bakterien wurden während des 'Wash'- und 'Sample'-Schritts isoliert, mit geringfügig höheren Zählungen in den 'Sample'-Lösungen von F (Ileum) und G (Ileum-caecal). Von denen, die auf fest anhaftende Bakterien (homogenisiert) untersucht wurden, war C (Ileum-caecal) die einzige Gewebesektion, die signifikante Zählungen ergab.
  • Während der Überprüfung einiger Gewebesektionen, zum Beispiel C und B, gab es keine direkte Korrelation zwischen Zählungen, die während einer Verdünnungsreihe erhalten wurden. Das würde anzeigen, dass einige Wachstumsfaktoren, entweder blut- oder gewebeabgeleitet, für das Wachstum der anspruchsvollen Bakterien in der ursprünglichen Suspension, die nachfolgend wegverdünnt wurde, zur Verfügung gestellt wurden.
  • Selektion und Charakterisierung der Stämme
  • Ungefähr fünfzehnhundert Katalase-negative Bakterienisolierungen aus verschiedenen Proben wurden ausgewählt und bezüglich ihrer Gram-Reaktion, Zellgröße und -morpholugie, Wachstum bei 15°C und 45°C und den Fermentationsendprodukten von Glucose charakterisiert. Mehr als sechzig Prozent der getesteten Isolierungen waren Gram-positiv, die homofermentativen Kokken waren entweder in Tetraden, Ketten oder Bündel angeordnet. Achtzehn Prozent der Isolierungen waren Gram-negative Stäbchen und heterofermentative Coccobacilli.
  • Die verbleibenden Isolierungen (zweiundzwanzig Prozent) waren überwiegend homofermentative Coccobacilli. Achtunddreißig Stämme wurden detaillierter charakterisiert – 13 Isolierungen aus G; 4 aus F; 8 aus D; 9 aus C; 3 aus B und 1 aus E. Alle achtunddreißig Isolierungen wurden negativ sowohl auf Nitratreduktion als auch auf Produktion von Indol aus Tryptophan getestet.
  • Antibiotische Sensitivitätsprofile
  • Antibiotika von klinischer Wichtigkeit für den Menschen wurden zur Ermittlung der Sensitivitätsprofile von ausgewählten Bifidobakterien verwendet. Die gestesteten Bifidobakterien waren sensitiv gegenüber Ampicillin, Amoxycillinceftaxim, Ceftriaxon, Ciprofloxacin, Cephradin, Rifampicin, Amikacin, Gentamicin und Chloramphenicol. Sie waren auch resistent gegenüber Netilmicin, Trimethoprim, Nalidixinsäure, Cefuroxim, Vancomycin und Tetracyclin.
  • Beispiel 2
  • Säureresistenz
  • Die erste Line der Abwehr des Wirtes, die ein Mikroorganismus nach menschlicher Aufnahme erreicht, ist die Magensäure im Magen. Ein Schlüsselfaktor, der Bakterien beeinflußt, ist das Überleben in Magensäure. Das Überleben und Wachstum von Stämmen von Bifidobacterium longum infantis 35612 und 35624 in einer Umgebung mit niedrigem pH wurde untersucht. Die Stämme wurden routinemäßig in Trypticase-Pepton-Hefe-Extrakt-Medium (TPY) bei 37°C unter strikt anaeroben Bedingungen (BBL Gasgläser unter Verwendung des Merck Anaerocult A Gas Pak Systems) für 12–24 h kultiviert. Menschlicher Magensaft wurde von gesunden Probanden durch Aspiration durch eine nasale Magensonde (Mercy Hospital, Cork, Ireland) erhalten. Er wurde unmittelbar bei 13.000 g für 30 min zur Entfernung aller festen Partikel zentrifugiert, durch 0,45 μm und 0,2 μm Filter sterilisiert und bei 4°C gelagert. Der pH und die Pepsinaktivität wurden vor der experimentellen Verwendung gemessen. Die Pepsinaktivität wurde unter Verwendung des quantitativen Hämoglobinassays gemessen (S. Guantam und R. S. de la Motte, 1989. Proteolytic enzymes, a practical approach, Chapter 3. R. J. Beynon und J. S. Bond (Ed.), IRL Press, Oxford University Press; R. M. Dawson, 1969. pH and buffers. In Data for Biochemical Research S. 138. R. M. Dawson, D. C. Elliot und K. M. Jones (Ed.), Clarendon Press, Oxford). Das Überleben der Stämme in vitro bei niedrigem pH wurde unter Verwendung der folgenden Assays untersucht:
    • (a) Die Zellen wurden von frischen Übernacht-Kulturen geerntet, zweimal in Phosphatpuffer (pH 6,5) gewaschen und in auf pH 3,5, 3,0, 2,5 und 2,0 (mit 1 N HCl) eingestellter MRS-Brühe zu einer abschließenden Konzentration von ungefähr 106 KBE/ml resuspendiert. Die Zellen wurden bei 37°C inkubiert und das Überleben in Intervallen von 5, 30, 60 und 120 min mit Hilfe der Plattenzählungsmethode gemessen.
  • Die Stämme überlebten ohne Verlust der Lebensfähigkeit bei pH 3,5. Bei pH 2,5 trat über den 60 min Inkubationszeitraum eine 3 log-Reduktion auf, wie in den 1 und 2 dargestellt.
  • Überleben von Stämmen vom Bifidobacterium in menschlichem Magensaft
  • Frische Übernacht-Kulturen wurden geerntet, zweimal in Puffer (pH 6,5) gewaschen und in menschlichem Magensaft zu einer abschließenden Konzentration von 106 KBE/ml resuspendiert. Das Überleben wurde über einen Inkubationszeitraum von 30–60 min bei 37°C überwacht. Das Experiment wurde unter Verwendung von Magensaft bei pH 1,2 (nicht eingestellt) und pH 2,0 und pH 2,5 (unter Verwendung von 1 N NaOH eingestellt) durchgeführt.
  • Das Überleben der Stämme in Magensaft bei pH 2,0 war verglichen mit dem in Magensaft bei pH 1,2 gestiegen. Nach 30 min Inkubation wurden keine lebensfähigen Zellen bei irgendeinem pH entdeckt, wie in Tabelle 2 gezeigt.
  • Tabelle 2. Überleben von Bifidobacterium sp. in menschlichem Magensaft*
    Figure 00150001
  • Beispiel 3
  • Gallenresistenz
  • Bei der Bewertung der Effektivität der Verwendung von Milchsäurebakterien als nützliche Angehörige des Magen-Darm-Trakts, wird bedacht, dass die Resistenz gegenüber Gallensäuren eine wichtige biologische Eigenschaft des Stammes ist, die zum Überleben in dieser feindlichen Umgebung benötigt wird und außerdem dürfen sie nicht durch Produktion von giftigen Verbindungen, wie zum Beispiel Deoxycholsäure (DCA) and Lithocholsäure (LCA), die mit einer Anzahl an cytotoxischen Phänomenen in Verbindung stehen, die Gesundheit des Wirtes beeinträchtigen.
  • Eine Anzahl an Stämmen vom Bifidobacterium longum infantis wurde auf TPY-Agar-Platten, ergänzt mit Schweinegalle (B-8631, Sigma Chemical Co. ltd., Poole) mit Konzentrationen von 0,3, 0,5, 1,0, 1,5, 5,0 und 7,5% (m/v) (R. Legrand-Defretin et al., Lipids 1991; 26 (8), 578–583), gestrichen. Schweinegalle ist in ihrer Zusammensetzung in Bezug auf die Gallensalz/Cholesterin- und Phospholipid/Cholesterin-Verhältnisse der menschlichen Galle am nächsten. Die Platten wurden bei 37°C unter anaeroben Bedingungen inkubiert und das Wachstum wurde nach 24–48 h aufgezeichnet. Es wurde gefunden, dass der Stamm 35624 stark gallenresistent ist und bis zur Konfluenz bei bis zu 55 Schweinegalle wuchs, wie in Tabelle 3 gezeigt. Tabelle 3. Wachstum von Bifidobacterium sp.-Isolierungen in der Gegenwart von Schweinegalle
    Figure 00160001
    • –, kein Wachstum; +, konfluentes Wachstum
    • * zum Vergleich
  • Menschliche Galle wurde aus mehreren menschlichen Gallenblasen gewonnen und bei 80°C für 10 min sterilisiert. Die Zusammensetzung der Gallensäure der menschlichen Galle wurd unter Verwendung von Umkehrphasenhochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) in Verbindung mit einem gepulsten amperometrischen Detektor gemäß der Methode von R. R. Dekker et al., Chromatographia, 1991, 31 (11/12), 255–256 bestimmt. Die menschliche Galle wurde mit einer Konzentration von 0,3% (v/v) zugegeben. Frisch bestrichene Kulturen wurden bezüglich des Wachstums nach 24 und 48 h untersucht.
  • Stamm 35624 war in der Lage in der Gegenwart von physiologisch relevanter menschlicher Galle (0,3% (v/v)) zu wachsen.
  • Das Wachstum der Stämme wurde in der Gegenwart von einzelnen konjugierten und unkonjugierten Gallensäuren untersucht. Unter physiologischen Bedingungen werden Gallensäuren oft als Natriumsalze gefunden. Die Stämme wurden in Hinblick auf Wachstum auf TPY-Agar, das die konjugierten und unkonjugierten Natriumsalze jeder der folgenden Gallensäuren enthielt, überprüft.
    • (a) konjugierte Form: Glykocholsäure (GCA); Glykodesoxycholsäure (GDCA) und Glykochenodesoxycholsäure (GCDCA);
    • (b) unkonjugierte Form: Lithocholsäure (LCA); Chenodesoxycholsäure (CDCA); Desoxycholsäure (DCA) und Cholsäure (CA). Für alle Gallensäuren wurden Konzentrationen von 1, 3 und 4 mM verwendet. Das Wachstum wurde nach 24 und 48 h anaerober Inkubation aufgezeichnet.
  • Die fünf untersuchten Stämme wuchsen auf Agarmedium, ergänzt mit 5 mM GCA und GCDCA, und auf Agarmedium, ergänzt mit 1 mM GDCA, wie in Tabelle 4 dargestellt. Der Stamm 35624 war gegenüber Konzentrationen von 5 mM LCA (Daten nicht dargestellt) resistent und die Stämme 35612 und 35624 waren in der Lage bei Konzentrationen von 5 mM CA zu wachsen, wie in Tabelle 5 gezeigt. Kein Wachstum konnte in der Gegenwart von 1 mM CDCA (Daten nicht dargestellt) beobachtet werden.
  • Tabelle 4. Wachstum von Bifidobacterium sp.-Isolierungen in der Gegenwart von Glyzin-konjugierten Gallensäuren
    Figure 00170001
  • Figure 00180001
  • Tabelle 5. Wachstum von Bifidobacterium sp.-Isolierungen in der Gegenwart von unkonjugierter Cholsäure (CA)
    Figure 00180002
  • Beispiel 4
  • Antimikrobielle Aktivität
  • Bifidobacterium-Spezies üben inhibierende Effekte auf andere Bakterien durch Ausschluß von Langzeitkolonisierung durch invasive Pathogene aus. Ihre antagonistische Aktivität beruht auf der Produktion von Essigsäure und Milchsäure durch Fermentation (V. Scardovi (1986) Bifidobacterium in Bergey's Manual of systemic bacteriology, Vol. 2. Eds. P. H. Sheath, N. S. Main, M. Sharpe und J. G. Holdt, Williams and Wilkins Publishers, Baltimore M. D., S. 1418). Es existieren sehr wenige Berichte zur Produktion von anderen antimikrobiellen Verbindungen außer Säuren (S. K. Anand et al., Cult. Dairy Prods. 1985; J. 2, 21–23). Bakteriozine und andere Verbindungen können das Überleben eines Bakteriums in einer ökologischen Nische beeinflussen und ihnen erlauben, fermentierende Ökosysteme effektiv zu dominieren. Eine solche Eigenschaft ist ein gutes Merkmal für einen probiotischen Stamm.
  • Die inhibitorischen Bandbreiten von verschiedenen Bifidobakterienstämmen wurde durch die Methode von Tagg et al. (J. R. Tagg et al., Bacteriol. Rev. 1976, 40, 722–756) bestimmt. Zellfreier Überstand wurde bezüglich der inhibitorischen Aktivität gegen ein breites Spektrum von Gram-positiven und Gram-negativen Mikroorganismen untersucht. Auflagen eines jeden Indikators wurden auf Agarplatten hergestellt und trocknen gelassen. Flecken (5 ml) von zellfreiem Überstand wurden auf der geimpften Platte aufgebracht, trocknen gelassen und die Platten übernacht inkubiert.
  • Es wurde beobachtet, dass bei Tests auf TPY-Medium die Stämme gegenüber einem breiten Spektrum an Staphylococcus, Pseudomonas, Coliform und Bacillus sp. inhibitorisch waren. Zonen der Inhibierung gegen Pseudomonas und Staphylococcus von bis zu 4,4 mm und umgebend Bacillus sp. von bis zu 7,0 mm wurden registriert, wie in den Tabellen 6 und 7 gezeigt. Wenn die zurückgestellten Assays jedoch auf gepuffertem TPY-Medium durchgeführt wurden, wurden keine Zonen der Inhibierung gegen irgendeinen Indikatorstamm beobachtet. Daher scheint die Inhibierung einzig auf die Gegenwart von Säure, die von den Bifidobakterien hergestellt wurde, zurückzuführen sein. Tabelle 6 Inhibierung von Staphylococcus-Stämmen durch Bifidobacterium sp. auf ungepuffertem Medium*
    Figure 00200001
    • * Die angegebenen Werte sind Radien von Inhibitionszonen in mm (Entfernung von der Kante der Produzentenkolonie zur Kante der Zone der Inhibierung)
    • ** zum Vergleich
    Tabelle 7 Inhibierung von Pseudomonus- und Bacillus-Stämmen durch Bifidobacterium sp. auf ungepuffertem Medium*
    Figure 00200002
    Figure 00210001
    • * Die angegebenen Werte sind Radien von Inhibitionszonen in mm (Entfernung von der Kante der Produzentenkolonie zur Kante der Zone der Inhibierung)
    • ** zum Vergleich
  • Beispiel 5
  • Mausfütterungsversuch zur Untersuchung der Fähigkeit von Lactobacillus salivarius subsp. Salivarius UCC 118 und Bifidobacteria longum infantis 35624 die Symptome von inflammatorischer Darmerkrankung (IBD) zu mildern.
  • Hintergrund
  • Eine Anzahl an Maustypen wurde kürzlich entweder durch genetische oder immunologische Methoden entwickelt, um die Mechanismen von IBD zu untersuchen. Eine dieser Typen ist mit dem Transfer von Milz- oder Lymphknoten-abgeleiteten CD4+T-Lymphozyten von normalen Mäusen in Empfängermäuse mit schwerem kombiniertem Immundefekt (SCID) verbunden. Es wurde gezeigt, dass Mäuse, die gereinigte CD4+, CD45RBhigh T-Zellen erhalten, eine zehrende Krankheit entwickeln, die durch chronische intestinale Inflammation, die im Kolon schwerwiegender ist, charakterisiert ist. In dieser Studie wurde einer Kontrollgruppe von SCID-Mäusen CD4+ CD45Rbhigh injiziert und die Mäuse entwickelten eine progressive zehrende Krankheit, einschließlich zusammengekauerte Erscheinung, Piloarrektion des Fells, Diarrhoe, Gewichtsverlust und makro- und mikroskopischem Schadens des Kolons. Ein Fütterungsversuch zur Verabreichung von UCC 118 und Stamm 35624 (hier auch als UCC 35624 bezeichnet) wurde vorbereitet, um zu bestimmen, ob die Symptome der IBD in diesem Modell verändert werden können.
  • Bakterienstämme
  • Lactobacillus salivarius subsp. Salivarius UCC 118 und Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 wurden aus dem Ileum-caecalen Bereich eines erwachsenen Menschen, wie in Beispiel 1 beschrieben, isoliert. In diesem Beispiel wurden spontan Rifampicin- und Streptomycin-widerstandsfähige Derivate der Stämme durch Plattieren von Zellen gebildet, die zuvor über Nacht wuchsen und anschließend in 25%ige Ringer-Lösung auf MRS- und TPY-Agar, das jeweils 50 μg/ml Rifampicin (Sigma) und MRS, das 400 μg/ml Streptomycin (Sigma) enthielt, gewaschen wurden. Die Platten wurden für 2 Tage bei 37°C anaerob inkubiert. Es wurde bestimmt, dass die resultierenden antibiotisch resistenten Derivate ansonsten phänotypisch dem Vorgängerstamm ähnlich sind. Diese wählbare Eigenschaft ermöglichte eine gute Auszählbarkeit der Stämme nach dem Transit durch den Darm.
  • Tiere und Haltung
  • Donormäuse (C57BL/6 × BALB/c) F1 wurden von Simosen Laboratories (Gilroy, CA) bezogen und im Tiergehege der University of California – Los Angeles in belüfteten Ständerkäfigen (Thoren caging systems, Hazelton, PA) unter spezifischen pathogenfreien (SPF) Bedingungen gehalten. CB-17 SCID-Mäuse wurden in belüfteten Ständerkäfigen, die ursprünglich von der University of California – Los Angeles SCID core facility beschafft wurden, gezüchtet. Die Mäuse waren eher Mäuse mit reeduzierter Flora („reduced flora", RF) als keimfrei und agierten als Empfängermäuse (R. Aranda et al., J. of Immunol. 1997; 158(7), 3464–3473). Acht Wochen alte, weibliche CB-17 (SCID) Mäuse wurden zu zweit in Filter-Kopfkäfigen in belüfteten Ständern beherbergt. Die Mäuse wurden in vier Gruppen aufgeteilt. Gruppe A: konsumierte 10% entrahme Milch, Kontrollgruppe; Gruppe B: konsumierte Lactobacillus salivarius UCC 118; Gruppe C: konsumierte Lactobacillus salivarius UCC 118 und Bifidobacterium longum UCC 35624 9 (Verhältnis 1:1); Gruppe D: konsumierte Bifidobacterium longum UCC 35624. UCC 118 und UCC 35624, die jeweils über Nacht in MRS-Brühe und in mit 0,05% Cystein (Sigma) ergänzter MRS-Brühe gezüchtet wurden, wurden in PBS gewaschen, in entrahmter Milch resuspendiert (10% (v/v)) und im ansonsten sterilen Trinkwasser (PBS) verabreicht. Die Mäuse in jeder entsprechenden Gruppe erhielten für die Dauer der Fütterungsperiode täglich 2,55 × 108 KBE/ml an UCC 118 und 2,35 × 108 KBE/ml an UCC 35624. Die Mäuse der Kontrollgruppe erhielten sterile in sterilem, salzigen Phosphatpuffer (PBS) verdünnte Milch und wurden unter identischen Bedingungen wie die Testgruppe gehalten.
  • Versuchsplan
  • Allen CB-17 Mäusen wurde ihr entsprechendes Futter gemäß ihrer Eingruppierung für Tage vor der Injektion der CD4+ CD45RBhigh-Zellen verabreicht. Die geordneten Donorlymphozyten (3–4 × 105) wurden in 200 μl steriler PBS repräsentiert und den CB-17 SCID Empfängermäusen i.p. injiziert. Alle Mäuse wurden anfänglich gewogen, dann danach zweimal wöchentlich. Sie wurden hinsichtlich klinischer Anzeichen von Krankheit beobachtet: zusammengekauerte Erscheinung, Piloarrektion des Fells und Diarrhoe.
  • Beurteilung der Effekte der verabreichten Probiotika auf die Anzahl an indigenen Bakterienkulturen aus Mausfäzes
  • Der vom verabreichten UCC 118 und UCC 35624 ausgeübte Einfluß, wenn entweder alleine oder in Kombination mit dem anderen verabreicht, auf die Mikroflora des CB-17 SCID Mäusedarms wurde untersucht. Fäkalienproben wurden von jeder Maus wöchentlich gesammelt, gewogen und in 10 ml PBS resuspendiert. Die Proben wurden dann nacheinander in PBS verdünnt und in geeigneten Verdünnungen auf geeignetem Medium entweder zweifach guss-plattiert oder spatel-plattiert. Die folgenden Bakteriengruppen wurden ausgezählt: Lactobacilli; Bifidobakterien; Enterokokken; Bakteroide und Coliforme. Das verwendete selektive Medium war: de Mann Rogosa & Sharpe- (MRS) Agar; mit 0,2% Lithiumchlorid (BDH), 0,3% Natriumpropionat (Fluke Chemie), 0,5% Cysteinhydrochlorid (Sigma) und 5% Schafblut ergänztes MRS-Agar; Slanetz und Bartley Agar; mit anaerober Ergänzung SR 108 und 5% Pferdeblut ergänztes Wilkins und Chalgren Agar; und Kristallviolett-Neutrarol-Galle-Agar. (Alle von Oxoid, solange nichts anderes vermerkt). VRBA und Slanetz und Bartley Platten wurden jeweils aerob für 24 und 45 h inkubiert. Alle anderen Platten wurden anaerob für 48 h bei 37°C inkubiert.
  • Auszählung der kultivierbaren indigenen Flora aus spezifischen Segmenten des GITs der CB-17 SCID Mäuse.
  • Nach der Fütterungsperiode wurden alle Mäuse getöet und seziert. Segmente des ileum-caecalen Bereichs, Dünndarms und des Dickdarms wurden entfernt. Ein peripherer Lymphknoten (PLN), ein mesenterer Lymphknothen (MLN) und ein Stück der Milz wurden ebenfalls entnommen. Alle Gewebe wurden gewogen, bevor sie in 10 ml PBS resuspendiert wurden. Die Proben wurden dann homogenisiert und nacheinander in PBS verdünnt und in geeigneten Verdünnungen auf geeignetem Medium entweder zweifach spatel-plattiert oder guß-plattiert. Die Bakteriengruppen wurden genauso ausgezählt, wie die der Fäkalanalyse ausgezählt wurden, und die Proben wurden wie zuvor beschrieben inkubiert.
  • Herstellung von intraepithelialen und laminapropriare Lymphozyten
  • Die Isolierung der Schleimlymphozyten wurde gemäß der Methode von R. Aranda et al. ((1997) siehe oben) durchgeführt.
  • Zytometrische Durchflußanalyse der Lymphozytenpopulationen
  • Die Analyse wurde durchgeführt, wie von R. Aranda et al. ((1997) siehe oben) beschrieben.
  • Präparation von Gewebe für die histopathologische Analyse
  • Gewebeproben vom Dünndarm, Dickdarm und dem ileum-caecalen Bereich wurden entnommen und in 10%igem Formalin fixiert. Das Verfahren war wie in R. Aranda et al. ((1997) siehe oben) beschrieben.
  • Es wurde im durchgeführten Experiment beobachtet, dass, im Einklang mit früheren Ergebnissen, die mit CD4+ CD45RBhigh T-Lymphozyten wieder hergestellten und nur entrahmte Milch konsumierenden SCID-Mäuse (Kontrollgruppe) eine progressive zehrende Krankheit entwickelten, die durch ihre signifikante Gewichtsabnahme gekennzeichnet war. Die Krankheit wurde nach ungefähr zweieinhalb bis drei Wochen offensichtlich und die kranken Mäuse offenbarten charakteristischerweise eine zusammengekauerte Erscheinung, Piloarrektion ihres Fells und dünnen Stuhl. Eine der Mäuse in der Kontrollgruppe (Maus 4) starb nach 25 Tagen und die Mäuse 1, 2, 3 und 5 zeigten jeweils eine –20%ige, 25%ige, 21%ige und –35%ige Gewichtsveränderung, wie in den 3 und 4 dargestellt.
  • CB-17 SCID-Mäuse, die ausschließlich UCC 118 konsumierten, ergaben ein ähnliches Ergebnis wie die Kontrollgruppe mit dem charakteristischen Gewichtsverlust. Maus 3 starb nach 14 Tagen und die Mäuse 4, 5 und 6 zeigten jeweils eine –15%ige, –25%ige und –28%ige Gewichtsveränderung (Daten nicht gezeigt). Bei den Mäusen, die eine Kombination von UCC 118 und UCC 35624 konsumierten, wurde eine merkliche Verbesserung gegenüber den Mäusen der Kontrollgruppe gefunden. Diese Mäuse verloren über die Fütterungsperiode nicht so viel Gewicht wie die Mäuse der Kontrollgruppe. Selbst nach 35 Tagen zeigten drei der Mäuse dieser Gruppe nur eine geringe prozentuale Gewichtsveränderung (5 und 6). Zwei der Mäuse in dieser Gruppe zeigten erst nach ungefähr 30 Tagen einen Gewichtsverlust, während die Mäuse der Kontrollgruppe einen Gewichtsverlust nach 14 Tagen zeigten (3 und 4).
  • Mäuse, die ausschließlich UCC 35624 konsumierten, zeigten sich bei guter Gesundheit und der mit der Kontrollgruppe verglichene Gewichtsverlust war wieder wesentlich geringer (7 und 8). Es kann daher geschlossen werden, dass die Aufnahme von UCC 35624, alleine oder in Kombination mit UCC 118, die Symptome einer inflammatorischen Darmerkrankung lindern kann.
  • Tabelle 8 ist eine Zusammenfassung der experimentellen Daten der Untersuchung über die Behandlung von CD45RB Colitis-induzierten CB17- und SCID-Mäusen mit einer Mischung aus UCC 118 und UCC 35624.
  • In den Untersuchungen wurde gefunden, dass die Mäuse erfolgreich mit Lymphozyten und Lymphozyten, die vom Donormodell abgeleitet waren, wieder hergestellt werden konnten (Daten nicht gezeigt).
  • Tabelle 8. Behandlung von CD45RB Colitis-induzierten CB-17 SCID-Mäusen mit einer Mischung aus Lactobacillus Salvarius UCC 118 und Bifidobakterien
    Figure 00250001
  • Figure 00260001
  • Figure 00270001
  • Beispiel 7
  • In vitro-Studien zur Untersuchung der Immunwahrnehmung von Bifidobacterium longum infantis
  • Über Nacht gewaschene Kulturen der Bifidobakterien wurden mit menschlichen periphären, mononuklearen Blutzellen (PBMCs) sowohl von gesunden Freiwilligen (n = 9) als auch von Patienten, die unter inflammatorischer Darmerkrankung litten (n = 5), inkubiert. Die Produktion des proinflammatorischen Cytokin-Tumor-Nekrose-Faktors α-(TNFα) wurde durch ELISA in Zweiundsiebzig-Stunden-Kultur-Überständen gemessen. Co-Inkubation von Bifidobacterium longum infantis mit menschlichen PBMCs führte nicht zur Stimulation der TNFα-Produktion (9). Daher induziert die Exposition des systemischen Immunsystems mit diesem Bakterium eine inflammatorischen Rückmeldung.
  • Um die Immunwahrnehmung von Bifidobacterium longum infantis auf mukosalen Oberflächen zu bewerten, wurden Co-Kulturen von Epithelzellen und PBMCs in Zwischenvertiefungskammern durchgeführt. In Kürze, eine Monoschicht Epithelzellen wuchs in der oberen Kammer und PBMCs wurden im unteren Fach inkubiert. Diese waren voneinander durch eine poröse Membran, die den Durchtritt von löslichen Mediatoren zwischen den beiden Fächern, aber keinen Kontakt zwischen den Zellen erlaubt, getrennt. Unter Verwendung dieses Modells wurde die Produktion von TNFα und Interleukin-8 (IL-8) in der Gegenwart und Abwesenheit von Bifidobacterium longum infantis im PBMC-Fach gemessen. Co-Kulturen von Epithelzellen, PBMCs und Bifidobacterium longum infantis führten zu einer signifikanten Unterdrückung der Produktion von TNFα und IL-8 (10). Daher führt ein trizelluläres Netzwerk, das Epithelzellen, PBMCs und Bifidobacterium longum infantis umfaßt, zu einer Unterdrückung der proinflammatorischen Cytokinproduktion.
  • Beispiel 8
  • Entzündungshemmende Aktivität von Bifidobacterium longum infantis in vivo
  • Bifidobacterium longum infantis (1 × 109 Zellen pro Tag) wurde von 18 gesunden Menschen in einem Produkt aus vergorener Milch (Joghurt) für drei Wochen konsumiert. Serum wurde zur Cytokinanalyse vor und nach der Aufnahme dieses probiotischen Stammes gesammelt. Fäkalproben wurden zur mikrobiologischen Analyse erhalten.
  • Bemerkenswerte Veränderungen der Mengen an periphäre, mononukleare Blutzellen wurden in dieser Ernährungsstudie beobachtet. Die Level von serumlöslichem Interleukin-6-Rezeptor (sIL-6R, p = 0,007), Interferon-γ (IFNγ, p = 0,041) und IL-8 (p = 0,004) wurden nach der Aufnahme dieses probiotischen Stammes signifikant reduziert (11). Keine Veränderung wurde bei den Serum-TNFα- und Interleukin-1-Rezeptorantagonist- (IL-1RA) Leveln beobachtet (12).
  • Bifidobacterium longum infantis wurde zu ungefähr 1 × 105 koloniebildenden Einheiten pro Gramm Fäkalmasse im Verlauf dieser Ernährungsstudie erfaßt.
  • Gezielte in vitro-Selektionskriterien, die die komplexen Interaktionen der GI-Umwelt widerspiegeln, ermöglichen die Identifikation von probiotischen Stämmen, die in der Lage sind effektiv zu arbeiten, wenn sie wieder in diese Umwelt eingeführt werden.
  • Unter Verwendung der oben skizzierten Selektionskriterien hat das probiotische Bakterium Bifidobacterium longum infantis in vitro nachweislich immunomodulatorische Eigenschaften. Nach der Aufnahme durch SCID-Mäuse und menschliche Freiwillige wurden signifikante Änderungen von systemischen Immunparametern beobachtet. Daher ist die Verwendung von Bifidobacterium longum infantis als ein biotherapeutisches Mittel in der Behandlung von immunvermittelten Krankheiten berechtigt.
  • Beispiel 9
  • Messung von TNFα in zellfreiem Überstand von Bifidobacterium longum infantis UCC 35624
  • Über-Nacht-Kulturen von Bifidobacterium longum infantis wurden zentrifugiert und der zellfreie Überstand der Kultur wurde im Hinblick auf das Verhandensein von Cytokininhibitoren untersucht. Zellfreie Überstände wurden mit menschlichem TNFα fü 20 Minuten bei 37°C inkubiert. TNFα-Level wurden danach mittels ELISA quantifiziert. Nach Exposition gegen den Überstand von Bifidobakterien waren die TNFα-Level signifikant verringert (13). Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 sondert daher einen Faktor ab, der die TNFα-Aktivität bekämpft. Die Herstellung dieses Faktors durch Bifidobacterium longum infantis an der Oberfläche des Magen-Darm-Trakts in vivo würde die inflammatorische Reaktion des Wirts signifikant einschränken.
  • Dies zeigt an, dass der Antagonismus von TNFα auch auf einer molekularen Ebene, aufgrund eines von UCC 35624 freigesetzten löslichen Faktors, stattfindet.
  • Entzündung
  • Entzündung ist der Begriff, der verwendet wird, um die lokale Anreicherung von Flüssigkeiten, Plasmaproteinen und weißen Blutkörperchen an einem Ort, der einen anhaltenden physischen Schaden, eine Infektion aufweist oder wo eine anhaltende Immunreaktion stattfindet, zu beschreiben. Kontrolle über die Entzündungsreaktion wird auf einer Anzahl von Ebenen ausgeübt (für eine Übersicht siehe B. Henderson und M. Wilson 1998, in "Bacteria-Cytokine interactions in health and disease." Portland Press, 79–130). Die kontrollierenden Faktoren beinhalten Cytokine, Hormone (z.B. Hydrokortison), Prostaglandine, reaktive Intermediate und Leukotriene. Cytokine sind biologisch aktive Proteine mit niedrigem Molekulargewicht, die bei der Bildung und Kontrolle von immunologischen und entzündlichen Reaktionen beteiligt sind, während sie auch die Entwicklung, Gewebereparatur und Blutbildung regulieren. Sie liefern ein Mittel der Kommunikation zwischen den Leukozyten selbst und auch mit anderen Zelltypen. Die meisten Cytokine sind pleiotrop und exprimieren mehrere biologisch überlappende Aktivitäten. Cytokinkaskaden und -netzwerke kontrollieren eher die Entzündungsreaktion als die Aktion eines speziellen Cytokins auf einen speziellen Zelltyp (K. I. Arai et al., Annu. Rev. Biochem. 1990; 59: 783–836). Die Abnahme der Entzündungsreaktion resultiert in geringeren Konzentrationen des geeigneten Aktivierungssignals und anderen Entzündungsmediatoren, was zur Beendigung der Entzündungsreaktion führt. TNFα ist ein entscheidendes proinflammatorisches Cytokin, da es eine Kaskade von Cytolcinen und biologischen Effekten initiiert, was zu einem Zustand der Entzündung führt. Deshalb werden zurzeit zur Behandlung von Entzündungskrankheiten Mittel, die TNFα inhibieren, eingesetzt, z.B. Infliximab.
  • Von proinflammatorische Cytolcinen wird angenommen, dass sie eine Hauptrolle in der Pathogenese von vielen Entzündungskrankheiten, einschließlich der inflammatorischer Darmkrankheit (IBD), spielen. Die derzeitigen Therapien zur Behandlung von IBD zielen darauf ab, die Niveaus dieser proinflammatorischen Cytokine, einschließlich IL-8 und TNFα, zu reduzieren. Es wurde vorgeschlagen, dass solche Therapien auch eine signifikante Rolle in der Behandlung von systemischen Entzündungskrankheiten, wie zum Beispiel rheumatoide Arthritis, spielen können. Menschen, die mit Joghurt ernährt wurden, der Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 enthielt, zeigten ausgeprägte Abnahmen an ihren systemischen Levels von IL-8. Dieser Stamm kann daher potentiell Anwendung in der Behandlung eines Spektrums von Entzündungskrankheiten haben, besonders wenn er in Kombination mit gegenwärtigen entzündungshemmenden Therapien, wie zum Beispiel nicht-steroide entzündungshemmende Heilmittel (NSAIDs) oder Infliximab, verwendet wird.
  • Durchfallerkrankungen
  • Die Barrierefunktion des Darmepithels kann während nervös- (Acetylcholin) und immun- (Histamin) vermittelter Absonderung abgeschwächt werden. Gewisse bakterielle Gifte können auch Ca2+- und PKC-abhängige Absonderungen induzieren und dadurch die Epithelbarriere stören (N. K. Ganguly und T. Kaur, Indian. J. Med. Res. 1996; 104: 28–37, J. A. Groot, Vet. Q. 1998; 20(S3): 45–9). Mehrere Studien haben die Vorbeugung und Behandlung von Diarrhoe durch Verwendung von probiotischen Bakterien untersucht. Vorausblickende Studien haben die Wirksamkeit der Verabreichung von Milchsäurebakterien sowohl zur prophylaktischen als auch therapeutischen Verwendung gegen Diarrhoe bei Frühgeburten, Neugeborenen, Kindern (E. Isolauri et al., Dig. Dis. Sci. 1994 Dec; 39(12): 2595–600) und zur Behandlung von Diarrhoe, die mit Antibiotika in Verbindung steht (S. Siitonen et al., Ann. Med. 1990 Feb; 22(1): 57–9), und Reisedurchfall (P. J. Oksanen et al., Ann. Med. 1990 Feb; 22(1): 53–6), gezeigt.
  • Wir haben die Aufnahme von Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 durch SCID-Mäuse untersucht. Es wurde gefunden, dass die inflammatorische Aktivität signifikant abgeschwächt wurde und Mäuse, die Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 konsumierten, festen Stuhl beibehielten, während die Kontrollmäuse an Diarrhoe litten. Die 14 und 15 stellen den unteren Darm von behandelten und unbehandelten SCID-Mäusen dar. Der gezeigte untere Darm enthält den Blinddarm 2, Darm 3 und Anus 5. In 14 wurden die Mäuse mit Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 behandelt und es ist offensichtlich, dass im Darm feste Stühle 4 beibehalten wurden. Zum Vergleich zeigt 15 den Darm 3 einer unbehandelten Maus, der charakteristisch entzündet ist. Die Absorption von Wasser fand nicht statt, so dass keine festen Stühle beibehalten wurden, was in Diarrhoe resultiert.
  • Der beobachtete Anti-Diarrhoe-Effekt kann mit der entzündungshemmenden Aktivität, eventuell durch cAMP-Modulation vermittelt, in Verbindung gebracht werden.
  • Zyklische AMP-abhängige Cl-Absonderung ist der Hauptabsonderungsweg im menschlichen Darm (I. M. Brzuszczak et al., J. Gastroenterol. Hepatol. 1996; 11(9): 804–10). Es kann abgeleitet werden, dass der Anti-Diarrhoe-Effekt von Bifidobacterium longum infantis UCC 35624 nicht alleine auf Diarrhoe, die aus gastrointestinaler Entzündung resultiert, beschränkt ist, sondern auf die allgemeine Behandlung von Durchfallerkrankungen angewendet werden kann.
  • Autoimmunkrankheit
  • Das Immunsystem hat ein großes Repertoire an Ausprägungen, die durch B- und T-Zellen exprimiert wird. Einige dieser Ausprägungen sind auf Eigenbestandteile gerichtet. Selbsterkennung wird normalerweise durch klonale Beseitigung und Deaktivierung von selbstreaktiven Lymphozyten gesteuert. Es gibt jedoch einen konstanten Hintergrund an Autoimmunität, wobei Antikörper für viele Proteine im Serum gefunden werden. Eine Störung im Selbst-/Fremderkennungssystem führt zu Autoimmunität. Wenn eine Autoimmunkrankheit auftritt, schädigt die resultierende Immunreaktion das Gewebe, das das verletzende Antigen trägt.
  • Immunkomplexablagerung, Typ II Hypersensitivität und Zell-vermittelte Reaktionen sind die wichtigsten Mechanismen, durch die immunopathologischer Schaden auftritt. Beispiele von Autoimmunkrankheiten schließen ein, sind aber nicht beschränkt auf systemischer Lupus erythematosus, rheumatoide Arthritis, insulinabhängiger Diabetes Mellitus, Myasthenia gravis und pernizöse Anämie. Bifidobacterium longum infantis und Lactobacillus salivarius subsp. Salivarius sind immunomodulatorische Bakterien. Die Aufnahme dieser Bakterien, entweder als einzelne Komponenten oder in Kombination, durch Patienten, die an Autoimmunkrankheiten leiden, kann daher Organschäden einschränken und dabei helfen die normale Homeostase des Körpers wiederherzustellen.
  • Entzündung und Krebs
  • Die Herstellung von multifunktionalen Cytokinen bei einem breiten Spektrum von Tumortypen legt nahe, dass bei Patienten mit Krebs signifikante Entzündungsreaktionen ablaufen. Es ist zurzeit unklar, welchen schützenden Effekt diese Reaktion gegen das Wachstum und die Entwicklung von Tumorzellen in vivo hat. Diese Entzündungsreaktionen könnten jedoch den tumortragenden Wirt nachteilig beeinflussen. Komplexe Cytokininteraktionen sind bei der Steuerung der Cytokinproduktion und Zellproliferation innerhalb von Tumorgeweben und normalen Geweben beteiligt (D. W. McGee et al., lmmunology 1995 Sep; 86(1): 6–11, S. Wu et al., Gynecol. Oncol. 1994 Apr; 53(1): 59–63). Es ist seit langem anerkannt, dass Gewichtsverlust (Cachexia) die häufigste einzelne Todesursache bei Patienten mit Krebs ist (J. Inagaki et al., Cancer 1974 Feb; 33(2): 568–73) und anfängliche Unterernährung eine schlechte Prognose anzeigt (J. Van Eys, Nutr. Rev. 1982 Dec; 40(12): 353–9). Damit ein Tumor wächst und sich ausbreitet, muß er die Bildung von neuen Blutgefäßen hervorrufen und die extrazelluläre Matrix abbauen. Die Entzündungreaktion kann in den obigen Mechanismen signifikante Rollen spielen und trägt somit zum Verfall des Wirtes und dem Fortschreiten des Tumors bei. Aufgrund der entzündungshemmenden Natur dieser Bakterienstämme können diese möglicherweise die Rate der malignen Zellveränderung reduzieren. Darüber hinaus können intestinale Bakterien aus Verbindungen der Nahrung, Substanzen mit gentoxischer, karzinogener und tumorfördernde Aktivität herstellen und Darmbakterien können Prokarzinogene zu DNA-reaktiven Wirkstoffen aktivieren (1. R. Rowland (1995) Toxicology of the colon: role of the intestinal microflora. In: G. R. Gibson (Ed). Human colonic bacteria: role in nutrition, physiology and pathology, S. 155–174. Boca Raton CRC Press). Im Allgemeinen besitzen Spezies von Bifidobacteria und Lactobacillus im Vergleich zu anderen Populationen innerhalb des Darms, wie zum Beispiel Bakteroiden, Eubakterien und Klostridien, niedrige Aktivitäten von xenobiotischen Enzymen zur Metabolisierung (Y. Saito et al., Microb. Ecol. Health Dis., 1992; 5, 105–110). Deshalb könnte eine Zunahme der Anzahl an Milchsäurebakterien im Darm die Levels dieser Enzyme vorteilhaft beeinflussen.
  • Präbiotika
  • Die Einführung von probiotischen Organismen wird durch die Ingestion der Mikroorganismen in einem geeigneten Träger durchgeführt. Es wäre vorteilhaft ein Medium, dass das Wachstum dieser probiotischen Stämme im Dickdarm begünstigen wurde, bereit zu stellen. Die Zugabe von einem oder mehreren Oligosacchariden, Polysacchariden oder anderen Präbiotika erleichtert das Wachstum von Milchsäurebakterien im Magen-Darm-Trakt (G. R. Gibson, Br. J. Nutr. 1998; 80(4): S209–12). Präbiotika bezieht sich auf jede nicht-lebensfähige Nahrungskomponente, die im Kolon durch indigene Bakterien, denen ein positiver Nutzen zugeschrieben wird, z.B. Bifidobacteria, Lactobacilli, spezifisch fermentiert wird. Typen von Präbiotika können jene, die Fructose, Xylose, Soja, Galactose, Glucose und Mannose enthalten, umfassen. Die kombinierte Verabreichung von einem probiotischen Stamm mit einem oder mehreren präbiotischen Verbindungen könnte das Wachstum des verabreichten Probiotikums in vivo fördern, was zu einem stärker ausgeprägten Gesundheitsvorteil führt und synbiotisch genannt wird.
  • Andere aktive Inhaltsstoffe
  • Es wird bevorzugt sein, wenn das Bifidobacterium prophylaktisch oder als eine Behandlungsmethode entweder alleine oder mit anderen probiotischen und/oder präbiotischen Stoffen, wie oben beschrieben, verabreicht werden kann. Zusätzlich können die Bakterien als ein Teil eines Prophylaxe- oder Behandlungssystems unter Verwendung anderer aktiver Materialien, wie zum Beispiel solcher, die zur Behandlung von Entzündungen oder anderen Störungen, speziell solcher des Magen-Darm-Trakts. verwendet werden können, verwendet werden. Solche Kombinationen können in einer einzelnen Formulierung oder als separate Formulierungen, zur gleichen oder zu verschiedenen Zeiten und unter Verwendung des gleichen oder unterschiedlichen Verabreichungswegs, verabreicht werden.
  • Die Erfindung ist nicht auf die zuvor hier beschriebenen Ausführungsformen beschränkt, die im Detail variiert werden können.

Claims (30)

  1. Stamm vom Bifidobacterium longum infantis UCC35624 (NCIMB 41003).
  2. Stamm vom Bifidobacterium longum infantis UCC35624 (NCIMB 41003) oder ein Mutant oder eine Variante davon.
  3. Stamm nach Anspruch 2, worin der Mutant einen genetisch veränderten Mutant darstellt.
  4. Stamm nach Anspruch 2, worin die Variante eine natürlich vorkommende Variante darstellt.
  5. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 4 in der Form von lebensfähigen Zellen.
  6. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 4 in der Form von nicht lebensfähigen Zellen.
  7. Formulierung, die einen Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 umfasst.
  8. Formulierung nach Anspruch 7, die einen anderen probiotischen Stoff umfasst.
  9. Formulierung nach Anspruch 7 oder 8, die einen prebiotischen Stoff umfasst.
  10. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 9, die einen ingestierbaren Träger umfasst.
  11. Formulierung nach Anspruch 10, worin der ingestierbare Träger einen pharmazeutisch akzeptablen Träger, wie zum Beispiel eine Kapsel, Tablette oder Pulver, darstellt.
  12. Formulierung nach Anspruch 10, worin der ingestierbare Träger ein Nahrungsmittel, wie zum Beispiel gesäuerte Milch, Jogurt, gefrorenen Jogurt, Milchpulver, Milchkonzentrat, Streichkäse, Soßen oder Getränke darstellt.
  13. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 12, die weiter ein Protein und/oder Peptid, insbesondere Proteine und/oder Peptide, die reich an Glutamin/Glutamat sind, ein Lipid, ein Kohlenhydrat, ein Vitamin, Mineral- und/oder Spurenelement umfasst.
  14. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 13, worin der Stamm bei mehr als 106 KBE pro Gramm des Zuführungssystems vorliegt.
  15. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 14, die ein Hilfsmittel umfasst.
  16. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 15, die eine bakterielle Komponente umfasst.
  17. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 16, die eine Wirkstoffeinheit umfasst.
  18. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 17, die eine biologische Verbindung umfasst.
  19. Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 18 zur oralen Immunisierung.
  20. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in Lebensmitteln.
  21. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung als ein Arzneimittel.
  22. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von unerwünschter inflammatorischer Aktivität.
  23. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von unerwünschter inflammatorischer, gastrointestinaler Aktivität, wie zum Beispiel inflammatorische Darmerkrankung, z.B. Crohn-Krankheit oder Colitis ulcerosa, Reizkolon, Pouchitis oder Postinfektions-Colitis.
  24. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von gastrointestinalem Krebs/gastrointestinalen Krebsen.
  25. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von systemischer Erkrankung, wie zum Beispiel rheumatoide Arthritis.
  26. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von Autoimmunstörungen, die auf unerwünschte inflammatorische Aktivität zurückzuführen sind.
  27. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von Krebs, der auf unerwünschte inflammatorische Aktivität zurückzuführen ist.
  28. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe von Krebs.
  29. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von Diarrhoeerkrankung, die auf unerwünschte inflammatorische Aktivität zurückzuführen ist, wie zum Beispiel mit Clostridium difficile assoziierte Diarrhoe, mit Rotavirus assoziierte Diarrhoe oder post-infektiöse Diarrhoe.
  30. Stamm nach einem der Ansprüche 1 bis 6 oder eine Formulierung nach einem der Ansprüche 7 bis 19 zur Verwendung in der Prophylaxe und/oder Behandlung von Reizkolon.
DE60028003T 1999-01-15 2000-01-17 Bifidobakterium zur behandlung von entzündungskrankheiten Expired - Lifetime DE60028003T2 (de)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IE990033A IE990033A1 (en) 1999-01-15 1999-01-15 Bifidobacterium longum infantis in the treatment of inflammatory bowel disease
IE990033 1999-01-15
IE990782 1999-09-20
IE990782 1999-09-20
PCT/IE2000/000008 WO2000042168A2 (en) 1999-01-15 2000-01-17 Bifidobacterium in the treatment of inflammatory disease

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE60028003D1 DE60028003D1 (de) 2006-06-22
DE60028003T2 true DE60028003T2 (de) 2007-04-12

Family

ID=26320235

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE60027866T Expired - Lifetime DE60027866D1 (de) 1999-01-15 2000-01-17 In vitro modell für gastrointestinale entzündungen
DE60035670T Expired - Lifetime DE60035670T2 (de) 1999-01-15 2000-01-17 Verwendung von lactobacillus salivarius
DE60028003T Expired - Lifetime DE60028003T2 (de) 1999-01-15 2000-01-17 Bifidobakterium zur behandlung von entzündungskrankheiten

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE60027866T Expired - Lifetime DE60027866D1 (de) 1999-01-15 2000-01-17 In vitro modell für gastrointestinale entzündungen
DE60035670T Expired - Lifetime DE60035670T2 (de) 1999-01-15 2000-01-17 Verwendung von lactobacillus salivarius

Country Status (22)

Country Link
US (13) US20020006432A1 (de)
EP (4) EP1688481A1 (de)
JP (2) JP2004502633A (de)
CN (3) CN101744841B (de)
AT (3) ATE326012T1 (de)
AU (3) AU779405B2 (de)
BR (2) BR0007550A (de)
CA (3) CA2359334C (de)
DE (3) DE60027866D1 (de)
DK (2) DK1141235T3 (de)
ES (2) ES2265331T3 (de)
HK (1) HK1044964B (de)
ID (2) ID29150A (de)
IE (1) IE20000033A1 (de)
IL (3) IL144185A0 (de)
MX (2) MXPA01007144A (de)
NO (2) NO327792B1 (de)
NZ (2) NZ529353A (de)
PT (1) PT1141235E (de)
RU (2) RU2308483C2 (de)
TR (2) TR200102058T2 (de)
WO (3) WO2000042429A2 (de)

Families Citing this family (222)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020035071A1 (en) * 1997-07-08 2002-03-21 Josef Pitha Mimicking the metabolic effects of caloric restriction by administration of glucose antimetabolites
US20060116330A1 (en) * 1997-07-08 2006-06-01 The Iams Company Methods of mimicking the metabolic effects of caloric restriction by administration of mannoheptulose
US8563522B2 (en) 1997-07-08 2013-10-22 The Iams Company Method of maintaining and/or attenuating a decline in quality of life
US7029702B2 (en) * 1998-07-07 2006-04-18 Ritter Natural Sciences Llc Method for increasing lactose tolerance in mammals exhibiting lactose intolerance
ID29150A (id) * 1999-01-15 2001-08-02 Entpr Ireland Cs Penggunaan lactobacillus salivarius
WO2001010448A1 (en) * 1999-08-09 2001-02-15 University Of Maryland, Baltimore Pro-gut maturation and anti-inflammatory effects of lactobacillus and lactobacillus secreted proteins, carbohydrates and lipids
CN1446103A (zh) * 2000-07-03 2003-10-01 普罗本多有限公司 采用益生菌治疗内毒素血症及相关疾病
AUPQ899700A0 (en) 2000-07-25 2000-08-17 Borody, Thomas Julius Probiotic recolonisation therapy
CA2342040C (en) * 2000-09-21 2012-07-10 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Anaerobic bacterium as a drug for cancer gene therapy
CN100553646C (zh) 2000-10-06 2009-10-28 雀巢产品股份有限公司 用乳酸菌微生态制剂调节皮肤免疫系统
IT1320772B1 (it) * 2000-11-02 2003-12-10 Proge Farm Srl Composizione farmaceutica a base di agenti attivi contro la candidaper il trattamento di disturbi della mucosa orale e intestinale
BR0116828B1 (pt) * 2001-02-01 2014-02-04 Bebida ou alimento laticínio fermentado
US20020141977A1 (en) * 2001-04-02 2002-10-03 Collins John Kevin Immunotherapy based on dendritic cells
JP4671384B2 (ja) * 2001-05-15 2011-04-13 雪印乳業株式会社 新規乳酸菌株
EP1264893A1 (de) * 2001-06-08 2002-12-11 Teagasc Dairy Products Research Centre Biosynthese von CLA durch Bifidobakterien
PE20030274A1 (es) 2001-07-26 2003-05-08 Alimentary Health Ltd Cepas de lactobacillus salivarius
PE20030284A1 (es) * 2001-07-26 2003-05-01 Alimentary Health Ltd Cepas de bifidobacterium
JP5116194B2 (ja) * 2001-09-04 2013-01-09 株式会社ヤクルト本社 炎症性腸疾患予防治療剤
US20040241149A1 (en) * 2001-09-05 2004-12-02 Claudio De Simone Use of unmethylatd cpg
GB0124580D0 (en) * 2001-10-12 2001-12-05 Univ Reading New composition
WO2003048343A1 (fr) * 2001-12-07 2003-06-12 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Bifidobacterium longum
US6941649B2 (en) * 2002-02-05 2005-09-13 Force10 Networks, Inc. Method of fabricating a high-layer-count backplane
DE10206995B4 (de) * 2002-02-19 2014-01-02 Orthomol Pharmazeutische Vertriebs Gmbh Mikronährstoffkombinationsprodukt mit Pro- und Prebiotika
WO2003105893A2 (en) * 2002-06-13 2003-12-24 Alimentary Health Limited Probiotic therapies
US8168170B2 (en) 2002-10-03 2012-05-01 The Procter And Gamble Company Compositions having an inner core and at least three surrounding layers
IL152127A0 (en) 2002-10-06 2003-05-29 Bio Balance Corp Probiotic compositions for the treatment of inflammatory bowel disease
US7105336B2 (en) * 2002-10-07 2006-09-12 Biogaia Ab Selection and use of lactic acid bacteria for reducing inflammation caused by Helicobacter
FR2848115B1 (fr) * 2002-12-05 2005-03-25 Rhodia Chimie Sa Composition de bacteries et son utilisation
US7740838B2 (en) * 2002-12-05 2010-06-22 Danisco A/S Bacterial composition and its use
JP2004189672A (ja) * 2002-12-11 2004-07-08 Gen Corp:Kk 抗下痢症組成物
US20040208863A1 (en) * 2003-01-30 2004-10-21 James Versalovic Anti-inflammatory activity from lactic acid bacteria
SE526711C2 (sv) * 2003-01-31 2005-10-25 Probi Ab Nya stammar av Bifidobacterium med förmåga att överleva i magtarmkanalen och producera glutamin in vivo, samt kompositioner och användningar därav
US20040197304A1 (en) 2003-04-01 2004-10-07 The Procter & Gamble Company And Alimentary Health, Ltd. Methods of determining efficacy of treatments of inflammatory diseases of the bowel
US20040265279A1 (en) * 2003-05-08 2004-12-30 Timothy Dinan Probiotics in the treatment of atypical depression and other disorders characterized by hypothalamic pitiuitary-adrenal axis over-activity
US7749509B2 (en) * 2003-08-29 2010-07-06 Cobb And Company, Llp Treatment of autism using probiotic composition
US7759105B2 (en) * 2003-08-29 2010-07-20 Cobb & Company, Llp Probiotic composition useful for dietary augmentation and/or combating disease states and adverse physiological conditions
US7731976B2 (en) * 2003-08-29 2010-06-08 Cobb And Company, Llp Treatment of irritable bowel syndrome using probiotic composition
US8192733B2 (en) * 2003-08-29 2012-06-05 Cobb & Associates Probiotic composition useful for dietary augmentation and/or combating disease states and adverse physiological conditions
US20060177424A1 (en) * 2003-08-29 2006-08-10 Cobb Mark L Treatment of disease states and adverse physiological conditions utilizing anti-fungal compositions
GB0323039D0 (en) * 2003-10-01 2003-11-05 Danisco Method
BRPI0417307A2 (pt) * 2003-12-04 2008-12-30 Biofilms Strategies Inc mÉtodos e composiÇÕes para impedir as formaÇÕes de biofilme, reduzindo os biofilmes existentes, e para reduzir os biofilmes existentes, e para reduzir as populaÇÕes de bactÉria
US20050152884A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-14 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria globosum
US7785635B1 (en) * 2003-12-19 2010-08-31 The Procter & Gamble Company Methods of use of probiotic lactobacilli for companion animals
US8894991B2 (en) 2003-12-19 2014-11-25 The Iams Company Canine probiotic Lactobacilli
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050158294A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
WO2005072718A1 (ja) * 2004-01-28 2005-08-11 Kurume University 乳清発酵物を含有する医薬組成物
US7862808B2 (en) * 2004-07-01 2011-01-04 Mead Johnson Nutrition Company Method for preventing or treating respiratory infections and acute otitis media in infants using Lactobacillus rhamnosus LGG and Bifidobacterium lactis Bb-12
WO2006012536A2 (en) * 2004-07-22 2006-02-02 Ritter Andrew J Methods and compositions for treating lactose intolerance
KR100568036B1 (ko) 2004-08-12 2006-04-07 하남주 장기능 활성화 및 면역기능 강화작용을 하는비피도박테리움 균주 및 이를 함유하는 생균제제
JP2006166829A (ja) * 2004-12-17 2006-06-29 Best Ecology:Kk アイスサプリメント及びその製造方法
WO2006097949A1 (en) * 2005-03-16 2006-09-21 Actial Farmacêutica, Lda. Mixture of at least 6 species of lactic acid bacteria and/or bifidobacteria in the manufacture of sourdough
WO2006110631A1 (en) 2005-04-08 2006-10-19 The Procter & Gamble Company Methods of use of orally administered probiotic bifidobacteria for human beauty benefits
AU2011205121B2 (en) * 2005-04-08 2012-07-05 Alimentary Health Ltd Method of use of orally administered probiotic bifidobacteria for human beauty benefits
US20060228448A1 (en) 2005-04-11 2006-10-12 The Iams Company Pet food compositions comprising two components
US7303745B2 (en) * 2005-04-15 2007-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Method for preventing or treating the development of respiratory allergies
EP1880001B1 (de) 2005-05-31 2011-06-08 The Iams Company Feline probiotische lactobacilli
JP4938006B2 (ja) 2005-05-31 2012-05-23 ザ・アイムス・カンパニー ネコ科動物プロバイオティク・ビフィドバクテリア
BRPI0613805A2 (pt) * 2005-07-20 2011-02-15 Unilever Nv método de preparação de um produto comestìvel e produto comestìvel
ITMI20051510A1 (it) * 2005-08-02 2007-02-03 Proge Farm Srl Uso di specifici batteri lattici per la preparazione di composizioni iunomodulanti
RU2297835C1 (ru) * 2005-09-26 2007-04-27 Закрытое акционерное общество "Партнер" Препарат для лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника
US8246946B2 (en) * 2005-09-27 2012-08-21 Cobb & Associates Treatment of bipolar disorder utilizing anti-fungal compositions
US7943328B1 (en) 2006-03-03 2011-05-17 Prometheus Laboratories Inc. Method and system for assisting in diagnosing irritable bowel syndrome
ATE552734T1 (de) * 2006-03-31 2012-04-15 Morinaga Milk Industry Co Ltd Verfahren zur herstellung des interleukin- produktionsreglers
WO2007133188A1 (en) * 2006-05-01 2007-11-22 Cobb & Company, Llp Treatment of disease states and adverse physiological conditions utilizing anti-fungal compositions
US20080085524A1 (en) 2006-08-15 2008-04-10 Prometheus Laboratories Inc. Methods for diagnosing irritable bowel syndrome
WO2008053444A2 (en) 2006-11-01 2008-05-08 The Procter & Gamble Company Treating a respiratory condition with bifidobacterium
US7964238B2 (en) * 2007-01-29 2011-06-21 Guardian Industries Corp. Method of making coated article including ion beam treatment of metal oxide protective film
WO2008093303A2 (en) 2007-02-01 2008-08-07 The Iams Company Method for decreasing inflammation and stress in a mammal using glucose antimetaboltes, avocado or avocado extracts
KR20100014523A (ko) * 2007-02-22 2010-02-10 위르겐 슈레첸메이르 인간의 알레르기 반응을 예방, 억제 또는 제거하는 프로바이오틱 그램-양성 박테리아
WO2008106373A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-04 Mead Johnson Nutrition Company Product containing inactivated probiotic for children or infants
CN101636173A (zh) * 2007-03-27 2010-01-27 宝洁公司 施用益生菌剂的方法及试剂盒
MX2009010418A (es) * 2007-03-28 2010-02-18 Alimentary Health Ltd Cepas de bacterias bifidas probioticas.
MY146590A (en) * 2007-03-28 2012-08-30 Alimentary Health Ltd Probiotic bifidobacterium strains
KR20100020938A (ko) 2007-05-04 2010-02-23 앨러멘터리 헬스 리미티드 엑소폴리사카라이드
WO2009000899A1 (en) 2007-06-27 2008-12-31 Laboratorios Ordesa, S.L. A novel strain of bifidobacterium and active peptides against rotavirus infections
JP2009057346A (ja) * 2007-09-03 2009-03-19 Kirin Holdings Co Ltd 免疫バランス調節用組成物
FR2921795B1 (fr) * 2007-10-03 2011-04-29 Gervais Danone Sa Utilisation d'une souche de bifidobacterium,pour la preparation d'une composition destinee a la prevention et/ou au traitement de manifestations de type allergique
US20100310522A1 (en) * 2007-11-26 2010-12-09 Plant Bioscience Limited Novel Polypeptides Having Endolysin Activity and Uses Thereof
US20110223248A1 (en) * 2007-12-12 2011-09-15 Ritter Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating lactose intolerance
EP2072053B1 (de) * 2007-12-21 2012-11-07 Compagnie Gervais Danone Verfahren zur Verringerung des Bauchumfangs durch Verabreichung einer Bakterie der Gattung Bifidobacterium
ES2343499B1 (es) * 2007-12-24 2011-06-10 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Microorganismos para mejorar el estado de salud de individuos con desordenes relacionados con la ingesta de gluten.
EP2110028A1 (de) 2008-04-15 2009-10-21 Nestec S.A. Bifidobacterium longum und hippocampale BDNF-Expression
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
US20110189148A1 (en) * 2008-06-25 2011-08-04 Ritter Pharmaceuticals, Inc. Lactose compositions with decreased lactose content
US9232813B2 (en) * 2008-07-07 2016-01-12 The Iams Company Probiotic supplement, process for making, and packaging
EP2318513B1 (de) * 2008-07-11 2012-09-19 Chr. Hansen A/S Neues probiotisches bifidobacterium longum
RU2453320C2 (ru) * 2008-08-05 2012-06-20 Виктор Владимирович Чалов Композиция для перорального применения, содержащая непатогенные микроорганизмы, обладающая способностью нормализовать микрофлору кишечника (варианты)
AU2009291899B2 (en) * 2008-09-11 2014-05-22 Mars, Incorporated Animal feed kibble with protein-based core and related methods
US20100074870A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Probiotic infant products
KR101057357B1 (ko) 2008-09-22 2011-08-17 광주과학기술원 유산균 및 콜라겐을 유효성분으로 포함하는 관절염 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 및 식품 조성물
WO2010055499A2 (en) * 2008-11-11 2010-05-20 Alimentary Health Limited Bifidobacterium longum
CN107320480A (zh) 2009-02-24 2017-11-07 里特制药股份有限公司 益生素制剂和使用方法
GB0908949D0 (en) 2009-05-26 2009-07-01 Plant Bioscience Ltd Novel polypeptides having endolysin activity and uses thereof
US20100330151A1 (en) 2009-06-25 2010-12-30 Mary Elaine Freeland Method of Promoting Gastrointestinal Health Using a Combination of a Probiotic Microorganism and Chocolate
US20110027412A1 (en) * 2009-07-31 2011-02-03 Kris Eugene Spence Compositions and Methods for Promoting Gastrointestinal and/or Cardiovascular Health
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
TR201807143T4 (tr) 2009-08-25 2018-06-21 Nestec Sa Bifidobacterium longum ve fonksiyonel gastrointestinal bozukluklar.
WO2011027829A1 (ja) * 2009-09-02 2011-03-10 京都府公立大学法人 乳酸菌由来のｒｎａを有効成分とする組成物
EP2485744A4 (de) * 2009-10-09 2014-01-22 Prothera Inc Zusammensetzungen und verfahren mit pediokokken zur reduzierung mindestens eines symptoms für autismusspektrumserkrankungen bei einem patienten mit diagnostizierter autismusspektrumserkrankung
JP5600179B2 (ja) * 2009-11-11 2014-10-01 アリメンタリー、ヘルス、リミテッド ビフィズス菌株
MX2012005524A (es) * 2009-11-11 2013-04-03 Procter & Gamble Cepa de probioticos bifidobacterium.
MY162344A (en) * 2010-01-28 2017-06-15 Ab-Biotics S A Probiotic composition for use in the treatment of bowel inflammation
AU2011209940B2 (en) 2010-02-01 2015-08-20 Mikrobex Inc. Bacteriotherapy for clostridium difficile colitis
FR2955774A1 (fr) 2010-02-02 2011-08-05 Aragan Preparation destinee a traiter l'exces ponderal et les desordres associes et applications de ladite preparation
WO2011118060A1 (ja) * 2010-03-26 2011-09-29 株式会社明治 腸管免疫の抑制剤のスクリーニング方法
RU2451740C2 (ru) * 2010-04-26 2012-05-27 Татьяна Александровна Левченко ШТАММ Bifidobacterium longum АБД-7, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ
RU2451741C2 (ru) * 2010-04-26 2012-05-27 Татьяна Александровна Левченко ШТАММ Bifidobacterium longum АБД-3, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ
WO2011137249A1 (en) 2010-04-28 2011-11-03 Ritter Pharmaceuticals, Inc. Prebiotic formulations and methods of use
WO2011148219A1 (en) * 2010-05-28 2011-12-01 Compagnie Gervais Danone Probiotic strains for use in improving the enteric nervous system
CN102269858A (zh) 2010-06-02 2011-12-07 北京智朗芯光科技有限公司 自动聚焦系统和自动聚焦方法
WO2011151941A1 (ja) 2010-06-04 2011-12-08 国立大学法人東京大学 制御性ｔ細胞の増殖または集積を誘導する作用を有する組成物
FR2962045B1 (fr) * 2010-07-05 2012-08-17 Bifinove Complexe macromoleculaire d'origine bacterienne et utilisation dudit complexe moleculaire pour prevenir et traiter les rhumatismes inflammatoires
RU2013109251A (ru) 2010-08-04 2014-09-10 Томас Джулиус БОРОДИ Композиции для трансплантации фекальной флоры и способы их получения и применения и устройства для их доставки
EP2637513A2 (de) * 2010-11-11 2013-09-18 Nestec S.A. Gefrorene süsswaren mit probiotischen mikroorganismen
ES2610908T3 (es) 2011-01-31 2017-05-04 Synformulas Gmbh Cepas de bifidobacterium bifidum para su aplicación en enfermedades gastrointestinales
CN103561752B (zh) 2011-03-09 2016-04-20 明尼苏达大学评议会 用于移植结肠微生物群的组合物和方法
WO2012140636A1 (en) 2011-04-11 2012-10-18 Alimentary Health Limited A probiotic formulation
RU2460777C1 (ru) * 2011-04-21 2012-09-10 Общество с ограниченной ответственностью "Бифилюкс" Штамм bifidobacterium longum, используемый для получения бифидосодержащей продукции
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
KR101355440B1 (ko) 2011-10-26 2014-02-05 주식회사한국야쿠르트 류마티스 관절염 예방 효능을 갖는 락토바실러스 헬베티쿠스 에이취와이7801 및 이를 유효성분으로 함유하는 제품
CN103131647B (zh) * 2011-11-29 2017-06-27 上海上药信谊药厂有限公司 婴儿双歧杆菌及其制剂
CN104160014A (zh) 2011-12-01 2014-11-19 国立大学法人东京大学 诱导调节性t细胞的增殖或积累的人源细菌
WO2013099883A1 (ja) 2011-12-28 2013-07-04 株式会社山田養蜂場本社 IgA産生促進作用を有する新規乳酸菌及びその用途
EP2828375B1 (de) 2012-01-19 2017-11-22 University College Cork-National University of Ireland, Cork Gaba-erzeugende, aus dem menschlichen magen-darm-trakt stammende kultivierbare bakterie
WO2013130773A2 (en) 2012-02-29 2013-09-06 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Compositions of microbiota and methods related thereto
EP2830599B1 (de) 2012-03-29 2018-08-15 Therabiome, Llc Ortsspezifische gastrointestinale orale impfrezepte zur wirkung am ileum und am blinddarm
US9719144B2 (en) 2012-05-25 2017-08-01 Arizona Board Of Regents Microbiome markers and therapies for autism spectrum disorders
WO2014031553A1 (en) 2012-08-20 2014-02-27 Markosian Boris Placental vaccination therapy for cancer
FR2999601B1 (fr) * 2012-12-17 2015-01-30 Urgo Lab Methode pour prevenir et/ou traiter les infections, colonisations ou maladies liees a staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, streptococcus pyogenes, enterococcus faecium, enterobacter cloacae, proteus mirabilis et/ou bacteroides fragilis
CN105120847B (zh) 2013-03-14 2018-12-28 塞拉拜姆有限责任公司 益生生物和/或治疗剂的靶向胃肠道递送
KR101434220B1 (ko) * 2013-03-26 2014-08-28 삼육대학교산학협력단 다제내성균에 대한 저해 활성을 갖는 신규 유산균
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
KR102093537B1 (ko) 2013-06-05 2020-04-23 리바이오틱스, 인코퍼레이티드 미생물상 복원 요법(mrt), 조성물 및 제조방법
US10383901B2 (en) 2013-06-05 2019-08-20 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
US9511099B2 (en) 2013-06-05 2016-12-06 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
US9694039B2 (en) 2013-06-05 2017-07-04 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
US9782445B2 (en) 2013-06-05 2017-10-10 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
US9511100B2 (en) 2013-06-05 2016-12-06 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
GB2535034A (en) 2013-07-21 2016-08-10 Whole Biome Inc Methods and systems for microbiome characterization, monitoring and treatment
WO2015112291A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Filaments comprising a microorganism and method for making same
US20150209468A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Hygiene article containing microorganism
CN106414708A (zh) 2014-01-24 2017-02-15 宝洁公司 包含含有微生物的纤维元件的纤维网及其制备方法
CN113730442A (zh) 2014-10-31 2021-12-03 潘德勒姆治疗公司 与病症的微生物治疗和诊断有关的方法和组合物
EP3395351A1 (de) 2014-12-23 2018-10-31 4D Pharma Research Limited Immunmodulation
SI3193901T1 (en) 2014-12-23 2018-06-29 4D Pharma Research Limited Pirin polypeptide and immune modulation
CN107404902A (zh) 2015-02-13 2017-11-28 马斯公司 宠物食物饲喂系统
MX2017013715A (es) 2015-04-28 2018-03-02 Mars Inc Proceso de preparacion de un producto de alimento para mascotas humedo esterilizado.
WO2016183577A1 (en) 2015-05-14 2016-11-17 Crestovo Llc Compositions for fecal floral transplantation and methods for making and using them and devices for delivering them
BR112017024777A2 (pt) 2015-05-22 2018-08-07 Univ Arizona State uso de uma composiçao farmacêutica e de um antibiótico não absorvível para tratamento de transtorno do espectro autista referência cruzada a pedidos relacionados?
TW201717975A (zh) * 2015-06-01 2017-06-01 美國芝加哥州立大學 藉由控制共生微生物叢來治療癌症
US20160354507A1 (en) 2015-06-07 2016-12-08 The Procter & Gamble Company Article of commerce containing absorbent article
US10828340B2 (en) 2015-06-09 2020-11-10 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT) compositions and methods of manufacture
KR102066242B1 (ko) 2015-06-09 2020-01-14 리바이오틱스, 인코퍼레이티드 미생물상 복원 치료(mrt) 조성물 및 제조 방법
US10799539B2 (en) 2015-06-09 2020-10-13 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT) compositions and methods of manufacture
US10905726B2 (en) 2015-06-09 2021-02-02 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT) compositions and methods of manufacture
KR20180012846A (ko) 2015-06-15 2018-02-06 4디 파마 리서치 리미티드 박테리아 균주를 함유한 조성물
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
LT3206700T (lt) 2015-06-15 2019-08-26 4D Pharma Research Limited Kompozicijos, apimančios bakterijų kamienus
MX2017016529A (es) 2015-06-15 2018-03-12 4D Pharma Res Ltd Composiciones que comprenden cepas bacterianas.
MA41010B1 (fr) 2015-06-15 2020-01-31 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
US20170020750A1 (en) 2015-07-23 2017-01-26 The Procter & Gamble Company Patch containing microorganism
EP3341081B1 (de) 2015-08-27 2020-11-11 PrecisionBiotics Group Limited Verwendung von bifidobakterium longum sowie einem hiervon gewonnenen exopolysaccharid
MX2018001820A (es) 2015-08-27 2018-05-17 Procter & Gamble Bifidobacterium longum.
WO2017060698A1 (en) 2015-10-05 2017-04-13 Liam O'mahony Use of akkermansia muciniphila for treating inflammatory conditions
LT3209310T (lt) 2015-11-20 2018-04-25 4D Pharma Research Limited Kompozicijos, apimančios bakterinius kamienus
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201612191D0 (en) 2016-07-13 2016-08-24 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
SG10201913557TA (en) 2016-03-04 2020-02-27 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial blautia strains for treating visceral hypersensitivity
EP3950590A3 (de) * 2016-03-04 2022-06-08 California Institute of Technology Neue germanosilikatzusammensetzungen und verfahren zur herstellung davon
RU2659240C2 (ru) * 2016-05-23 2018-06-29 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кемеровский государственный университет" (КемГУ) Способ получения функционального продукта питания для реабилитации онкологических больных
US20170360848A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University Methods for treating autism spectrum disorder and associated symptoms
US10849936B2 (en) 2016-07-01 2020-12-01 Regents Of The University Of Minnesota Compositions and methods for C. difficile treatment
TW201821093A (zh) 2016-07-13 2018-06-16 英商４Ｄ製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
US20180036352A1 (en) 2016-08-03 2018-02-08 Crestovo Holdings Llc Methods for treating ulcerative colitis
US11026978B2 (en) 2016-10-11 2021-06-08 Finch Therapeutics Holdings Llc Compositions and methods for treating multiple sclerosis and related disorders
US10092601B2 (en) 2016-10-11 2018-10-09 Crestovo Holdings Llc Compositions and methods for treating multiple sclerosis and related disorders
WO2018071536A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Crestovo Holdings Llc Compositions and methods for treating primary sclerosing cholangitis and related disorders
IT201600121481A1 (it) * 2016-11-30 2018-05-30 Sintal Dietetics Srl L. salivarius sgl03: attività probiotiche e produzione di proteine antimicrobiche
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
CN107043705A (zh) * 2016-12-30 2017-08-15 大连医科大学 用于建立临床营养菌种资源库的益生菌筛选方法
SG11201907043VA (en) * 2017-01-31 2019-08-27 Univ Industry Cooperation Group Kyung Hee Univ Novel lactic acid bacteria and use thereof
EP3589726A1 (de) 2017-02-28 2020-01-08 Alimentary Health Limited Bifidobakterium longum zur vorteilhaften modulation einer immunreaktion auf virale atemwegsinfektion
AU2018250206A1 (en) 2017-04-05 2019-10-31 Crestovo Holdings Llc Compositions and methods for treating parkinson's disease (PD) and related disorders
US11040073B2 (en) 2017-04-05 2021-06-22 Finch Therapeutics Holdings Llc Compositions and methods for treating diverticulitis and related disorders
EP3630136B1 (de) 2017-05-22 2021-04-21 4D Pharma Research Limited Zusammensetzungen mit bakterienstämmen
TW201907931A (zh) 2017-05-24 2019-03-01 英商4D製藥研究有限公司 包含細菌菌株之組合物
CN110996917A (zh) 2017-05-26 2020-04-10 克雷斯顿沃控股公司 包含基于粪便微生物的治疗剂的冻干组合物及其制造和使用方法
TW201919670A (zh) 2017-06-14 2019-06-01 英商4D製藥研究有限公司 包含細菌品系之組成物
CN111032061A (zh) 2017-06-14 2020-04-17 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
US10792314B2 (en) 2017-07-05 2020-10-06 Evelo Biosciences, Inc. Compositions and methods of treating cancer using Bifidobacterium animalis ssp. lactis
AU2018313766A1 (en) * 2017-08-07 2020-02-20 Finch Therapeutics, Inc. Compositions and methods for maintaining and restoring a healthy gut barrier
CA3073838A1 (en) 2017-08-30 2019-03-07 Pendulum Therapeutics, Inc. Methods and compositions for treatment of microbiome-associated disorders
RU2665173C1 (ru) * 2017-09-18 2018-08-28 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Оренбургский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ профилактики атопического дерматита у младенцев путем модуляции микробного механизма гистаминообразования
WO2019087842A1 (ja) * 2017-11-01 2019-05-09 ビオフェルミン製薬株式会社 非ステロイド性抗炎症薬及びプロトンポンプ阻害薬誘発性小腸障害の予防又は治療剤
WO2019103198A1 (ko) 2017-11-24 2019-05-31 주식회사 고바이오랩 락토바실러스 퍼멘텀 kbl 375 균주 및 그 용도
EP3517119B1 (de) 2018-01-26 2021-08-11 Probisearch, S.L.U. Zusammensetzung mit neuem lactobacillus salivarius-stamm und verfahren zur vorbeugung und behandlung von ohrenentzündung und infektionen der oberen atemwege
CN112074193A (zh) * 2018-01-29 2020-12-11 精密生物集团有限公司 一种用于预防和治疗肠易激综合征的组合产品
US20190298783A1 (en) * 2018-03-28 2019-10-03 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Composition for relieving stress, pharmaceutical composition and food and drink composition and method for relieving stress using the composition for relieving stress
RU2670054C1 (ru) * 2018-04-24 2018-10-17 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук Штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 - продуцент ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ
WO2019216662A1 (ko) 2018-05-09 2019-11-14 주식회사 고바이오랩 락토바실러스 파라카제이 균주 및 그 용도
CN113151036A (zh) * 2018-05-11 2021-07-23 韩国亿诺生物有限公司 具有预防或治疗癌症的效果的新型菌株
WO2019226003A1 (ko) 2018-05-23 2019-11-28 주식회사 고바이오랩 락토바실러스 가세리 kbl697 균주 및 그 용도
CN112236154A (zh) * 2018-05-31 2021-01-15 深圳华大生命科学研究院 一种组合物及其应用
US11166990B2 (en) 2018-07-13 2021-11-09 Finch Therapeutics Holdings Llc Methods and compositions for treating ulcerative colitis
CN109486700A (zh) * 2018-08-31 2019-03-19 石家庄君乐宝乳业有限公司 副干酪乳杆菌n1115预防结肠炎的应用及相应的益生菌粉、应用
AU2019351017A1 (en) 2018-09-27 2021-04-29 Finch Therapeutics Holdings Llc. Compositions and methods for treating epilepsy and related disorders
ES2752798B2 (es) * 2018-10-05 2020-08-12 Consejo Superior Investigacion Cepa de Bifidobacterium longum sub. infantis y uso de la misma
KR102074445B1 (ko) 2018-12-12 2020-02-06 주식회사 비피도 류마티스관절염 개선, 예방 또는 치료를 위한 비피도박테리움 롱검 rapo 균주 및 이를 포함하는 조성물
EP4003300A4 (de) * 2019-07-26 2023-06-28 Infinant Health, Inc Nahrhafte zusammensetzungen mit bioaktiven proteinen
KR102224072B1 (ko) * 2019-08-19 2021-03-10 주식회사 빙그레 면역 조절능력과 혈중콜레스테롤 감소 능력이 모두 뛰어난 비피도박테리엄 롱검 아종 균주 및 이의 용도
CN110547915A (zh) * 2019-08-29 2019-12-10 云南白药清逸堂实业有限公司 应用益生菌的卫生棉制品及其制备方法
CN110452860A (zh) * 2019-09-24 2019-11-15 厦门大学 一种唾液链球菌及其在治疗炎症性肠病药物中的应用
EP4117697A1 (de) 2020-03-13 2023-01-18 PrecisionBiotics Group Limited Bifidobacterium longum
TWI748395B (zh) * 2020-03-31 2021-12-01 豐華生物科技股份有限公司 緩解過敏以及提升運動表現之組合物及其用途
CN113943681B (zh) * 2020-11-12 2023-07-04 江南大学 一株降低炎症反应且具有缓解便秘作用的长双歧杆菌
KR102307603B1 (ko) * 2020-11-13 2021-10-05 주식회사 비피도 비피도박테리움 롱검 rapo (kctc13773bp)를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물
CN114317310B (zh) * 2021-03-31 2023-09-22 江苏蓝泽生物科技有限公司 一种抗过敏的婴儿双歧杆菌制剂及其制备方法
CN114558037B (zh) * 2022-02-24 2023-08-15 同济大学 Akk和ls在制备提高认识水平的抗衰老产品中的应用

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6038372B2 (ja) 1975-04-09 1985-08-31 日清製粉株式会社 犬の下痢予防および治療方法
JPS55113718A (en) * 1979-02-27 1980-09-02 Yakult Honsha Co Ltd Antitumor agent
US4435389A (en) * 1980-07-07 1984-03-06 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Composition for promoting growth of bifidobacteria
JPS59118712A (ja) * 1982-12-27 1984-07-09 Morinaga Milk Ind Co Ltd 抗腫瘍剤及びその製造法
US4678773A (en) * 1983-08-26 1987-07-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antitumor agent
US4839281A (en) * 1985-04-17 1989-06-13 New England Medical Center Hospitals, Inc. Lactobacillus strains and methods of selection
JPH0696538B2 (ja) * 1985-12-19 1994-11-30 株式会社アドバンス 抗発癌剤
JPS63196521A (ja) * 1987-02-10 1988-08-15 Yakult Honsha Co Ltd 腫瘍細胞障害性因子誘起剤
US5352586A (en) * 1987-05-01 1994-10-04 Biogaia Ab Method of determining the presence of an antibiotic produced by Lactobacillus reuteri
DK686187D0 (da) 1987-12-23 1987-12-23 Hansens Chr Bio Syst Veterinaert praeparat
CA1333564C (en) 1988-08-02 1994-12-20 Thomas Julius Borody Treatment of gastro-intestinal disorders
US5443826A (en) * 1988-08-02 1995-08-22 Borody; Thomas J. Treatment of gastro-intestinal disorders with a fecal composition or a composition of bacteroides and E. Coli
SE8900546D0 (sv) 1989-02-17 1989-02-17 Bioinvent Int Ab Medel foer inhibering av patogeners adhesion tillvaext och /eller oeverlevnad
NZ244737A (en) 1989-02-21 1993-09-27 Viskase Corp Food packaging polymeric film containing antibiotic material; method of treating foodstuff and food casing therefor
JP2932283B2 (ja) * 1989-07-14 1999-08-09 雪印乳業株式会社 ビフィズス菌を含有する醗酵乳の製造方法
GB9107305D0 (en) 1991-04-08 1991-05-22 Unilever Plc Probiotic
US5413785A (en) * 1993-01-27 1995-05-09 New England Deaconess Hospital Corp. Methodology employing lactobacillus GG for reduction of plasma endotoxin levels circulating in-vivo
RU2031586C1 (ru) * 1993-02-05 1995-03-27 Тамара Георгиевна Извекова Биологически активный кисломолочный продукт "ацидолакт-наринэ" и способ его получения
JPH0782158A (ja) * 1993-09-16 1995-03-28 Yakult Honsha Co Ltd 抗腫瘍剤
JP3623977B2 (ja) * 1993-10-29 2005-02-23 明治乳業株式会社 潰瘍性大腸炎治療剤
JPH07265064A (ja) * 1993-11-23 1995-10-17 Taketoshi Yamada 腸内細菌叢改善組成物
EP0727216B1 (de) * 1994-07-15 2003-05-28 TAIYO KAGAKU Co., LTD. Medizinische zusammensetzungen enthaltend ein sialinsäurederivat
JP2780154B2 (ja) * 1995-02-17 1998-07-30 株式会社ヤクルト本社 ヨーグルト
JPH092959A (ja) * 1995-06-16 1997-01-07 Yakult Honsha Co Ltd ＩｇＥ抗体産生抑制剤および抗アレルギー剤
RU2091075C1 (ru) 1995-06-28 1997-09-27 Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Комплексный бактериальный препарат для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний животных
JPH09241179A (ja) * 1996-03-01 1997-09-16 Meiji Seika Kaisha Ltd ビフィドバクテリウム属菌由来の水溶性免疫賦活物質およびその精製法
JP4021951B2 (ja) * 1996-03-01 2007-12-12 わかもと製薬株式会社 乳酸菌を有効成分とする抗胃炎剤、抗潰瘍剤および醗酵食品
US5902578A (en) 1996-03-25 1999-05-11 Abbott Laboratories Method and formula for the prevention of diarrhea
TW357191B (en) * 1996-06-04 1999-05-01 Food Industry Development Res Institute Bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance and their culture method the invention relates to bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance and their culture method
IT1288119B1 (it) 1996-06-28 1998-09-10 Renata Maria Anna Ve Cavaliere Composizioni dietetiche da utilizzare nell'alimentazione per via enterica
ATE496989T1 (de) * 1997-02-11 2011-02-15 Entpr Ie Trd As Bioresearch Ie Probiotische stämme des lactobacillus salivarius und daraus hergestellte antimikrobielle mittel
US6132710A (en) * 1997-03-17 2000-10-17 Probiotix, Inc. Preventing/treating neonatal NEC by administering lactobacillus salivarius and lactobacillus plantarum or a combination thereof
RU2109054C1 (ru) 1997-04-01 1998-04-20 Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Г.Н.Габричевского Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791, b. longum b 379 m, b. breve 79-119, b. infantis 73-15, b. adolescentis г 7513 для приготовления кисломолочных, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов
CN1178703A (zh) * 1997-08-06 1998-04-15 北京东方百信生物技术有限公司 幼儿胃肠安制剂及其生产工艺
EP0904784A1 (de) 1997-09-22 1999-03-31 N.V. Nutricia Probiotisches Ernährungspräparat
US5902743A (en) * 1998-03-20 1999-05-11 Wisconsin Alumni Research Foundation Probiotic bifidobacterium strain
FI980782A (fi) 1998-04-03 1999-10-04 Timo Korhonen Epiteelisoluihin sitoutuva proteiinialue ja sitä koodaava DNA-sekvenssi
US6368591B2 (en) * 1998-05-15 2002-04-09 Shanghai Sine Pharmaceutical Corporation Ltd. Beneficial microbe composition, new protective materials for the microbes, method to prepare the same and uses thereof
ATE220857T1 (de) 1998-05-29 2002-08-15 Entpr Ie Trd As Bioresearch Ie Verfahren zur herstellung von probiotischem käse
AU770726B2 (en) * 1998-10-20 2004-02-26 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw Use of a cytokine-producing lactococcus strain to treat colitis
ID29150A (id) 1999-01-15 2001-08-02 Entpr Ireland Cs Penggunaan lactobacillus salivarius
AUPQ415899A0 (en) 1999-11-19 1999-12-16 Vasse Research Institute Pty Ltd Compositions for and methods of treatment of allergic diseases
DE60137235D1 (de) 2000-08-25 2009-02-12 Wakamoto Pharma Co Ltd L. salivarius-Stamm enthaltende probiotische Produkte
US6618973B2 (en) * 2001-05-15 2003-09-16 Ned H. Nelson Banner holder

Also Published As

Publication number Publication date
HK1044964A1 (en) 2002-11-08
MXPA01007152A (es) 2003-04-02
TR200102058T2 (tr) 2001-12-21
EP1143985A3 (de) 2002-08-28
WO2000042168A3 (en) 2000-11-16
CN100552016C (zh) 2009-10-21
WO2000042429A2 (en) 2000-07-20
AU3071700A (en) 2000-08-01
IE20000033A1 (en) 2000-08-09
ID29150A (id) 2001-08-02
NO20013429D0 (no) 2001-07-10
EP1141235B1 (de) 2006-05-17
CN101744841B (zh) 2013-05-15
BRPI0007481A (pt) 2002-04-09
CA2359334C (en) 2011-03-22
DE60035670T2 (de) 2008-04-30
US20070141039A1 (en) 2007-06-21
DK1141235T3 (da) 2006-09-18
ATE367820T1 (de) 2007-08-15
CA2359334A1 (en) 2000-07-20
CN1338940A (zh) 2002-03-06
EP1143985A2 (de) 2001-10-17
BR0007550A (pt) 2001-10-30
MXPA01007144A (es) 2002-04-24
AU3071600A (en) 2000-08-01
US20060002908A1 (en) 2006-01-05
NO20013467D0 (no) 2001-07-12
BRPI0007481B8 (pt) 2021-07-06
US20050214272A1 (en) 2005-09-29
EP1145001A2 (de) 2001-10-17
NZ530273A (en) 2005-04-29
BRPI0007481B1 (pt) 2015-12-15
EP1141235A2 (de) 2001-10-10
TR200102059T2 (tr) 2002-02-21
US20100112003A1 (en) 2010-05-06
US20080311080A1 (en) 2008-12-18
US20030166257A1 (en) 2003-09-04
JP4706016B2 (ja) 2011-06-22
CA2724287A1 (en) 2000-07-20
AU3071500A (en) 2000-08-01
EP1143985B1 (de) 2007-07-25
NO327792B1 (no) 2009-09-28
CN1342196A (zh) 2002-03-27
US20080057109A1 (en) 2008-03-06
DE60027866D1 (de) 2006-06-14
EP1145001B1 (de) 2006-05-10
WO2000041707A2 (en) 2000-07-20
AU779405B2 (en) 2005-01-20
NO20013429L (no) 2001-08-27
ATE326012T1 (de) 2006-06-15
RU2001119046A (ru) 2003-06-20
NO20013467L (no) 2001-09-14
IL144185A0 (en) 2002-05-23
EP1688481A1 (de) 2006-08-09
DE60028003D1 (de) 2006-06-22
IL144185A (en) 2009-05-04
ATE326525T1 (de) 2006-06-15
US20060292133A1 (en) 2006-12-28
WO2000041707A3 (en) 2001-09-27
CN1245994C (zh) 2006-03-22
US20050084482A1 (en) 2005-04-21
DK1143985T3 (da) 2007-11-19
US7195906B2 (en) 2007-03-27
NZ529353A (en) 2005-06-24
US20020006432A1 (en) 2002-01-17
ID30449A (id) 2001-12-06
RU2279282C2 (ru) 2006-07-10
HK1044964B (zh) 2010-01-15
JP2004502633A (ja) 2004-01-29
PT1141235E (pt) 2006-10-31
US20030215467A1 (en) 2003-11-20
DE60035670D1 (de) 2007-09-06
CN101744841A (zh) 2010-06-23
RU2308483C2 (ru) 2007-10-20
JP2002534113A (ja) 2002-10-15
WO2000042429A3 (en) 2001-10-11
ES2290008T3 (es) 2008-02-16
CA2360243A1 (en) 2000-07-20
IL144184A0 (en) 2002-05-23
US20030170217A1 (en) 2003-09-11
WO2000042168A2 (en) 2000-07-20
US20050074441A1 (en) 2005-04-07
ES2265331T3 (es) 2007-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE60028003T2 (de) Bifidobakterium zur behandlung von entzündungskrankheiten
JP2002534113A5 (de)
WO2017057718A1 (ja) 難消化性成分を含む飲食品および大腸内水素ガス産生剤
CA2689360A1 (en) Mammalian milk microorganisms, compositions containing them and their use for the treatment of mastitis
EP2220210B1 (de) Lactobacillus plantarum-stämme als probiotika mit immunomodulatorischem spezifischem effekt
DE60306666T2 (de) Mikroorganismus Pediococcus pentosaceus EROM101 mit immunverstärkender, antikrebs- und antimikrobieller Wirkung
HUE027285T2 (en) Lactobacillus fermentum cect 7472 with probiotic properties
DE60130235T2 (de) Screening-verfahren für probiotische stämme der gattung bifidobacterium
IE990033A1 (en) Bifidobacterium longum infantis in the treatment of inflammatory bowel disease
Botes Survival of probiotic lactic acid bacteria in the intestinal tract, their adhesion to epithelial cells and their ability to compete with pathogenic microorganisms
IE20000034A1 (en) Bifidobacterium in the treatment of Inflammatory Disease
Mathipa Pre-adaptation of selected probiotic strains to multiple stress factors: consequent effect on their stability and probiotic properties

Legal Events

Date Code Title Description
8364 No opposition during term of opposition