DE2452285C3 - Verfahren zur Herstellung von a -LAspartyl-Lphenylalaninmethylester - Google Patents

Verfahren zur Herstellung von a -LAspartyl-Lphenylalaninmethylester

Info

Publication number
DE2452285C3
DE2452285C3 DE2452285A DE2452285A DE2452285C3 DE 2452285 C3 DE2452285 C3 DE 2452285C3 DE 2452285 A DE2452285 A DE 2452285A DE 2452285 A DE2452285 A DE 2452285A DE 2452285 C3 DE2452285 C3 DE 2452285C3
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
phenylalanine
aspartyl
formyl
reaction
methyl ester
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE2452285A
Other languages
English (en)
Other versions
DE2452285B2 (de
DE2452285A1 (de
Inventor
Gerald Lee Vineyard Billy Dale Bachman
Marvin Loren St. Louis Oftedahl
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Monsanto Co
Original Assignee
Monsanto Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Monsanto Co filed Critical Monsanto Co
Publication of DE2452285A1 publication Critical patent/DE2452285A1/de
Publication of DE2452285B2 publication Critical patent/DE2452285B2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2452285C3 publication Critical patent/DE2452285C3/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • C07K5/06121—Asp- or Asn-amino acid the second amino acid being aromatic or cycloaliphatic
    • C07K5/0613—Aspartame
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/801—Peptide sweetners

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Seasonings (AREA)

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester. Diese Verbindung ist als Süßmittei gut bekannt
Bei bisher bekannten Verfahren zur Herstellung von «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-alkylestern wurde als Ausgangsverbindung L-Phenylalanin-alkylester eingesetet So wird in der DE-OS 20 53 188 ein Verfahren zur Herstellung von niederen Alkylestern des «-L-Aspartyl-L-phenylalanins beschrieben, bei dem ein L-acyliertes L-Asparaginsäureanhydrid mit einem Phenylalanin-alkylester umgesetzt wird und in einer weiteren Stufe die Acylgruppe entfernt wird. Die DE-OS 21 52 111 betrifft ein Verfarhen zur Reinigung von «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester, der durch Umsetzung von L-Phenylalanin-methylester mit L-Asparaginsäureanhydridhydrochlorid erhalten werden kann. r>
Bei einem weiteren Verfahren zur Herstellung von ot-L-Aspartyl-L-phenylalanin-alkylestern erfolgt die Umsetzung von L-Asparaginsäureanhydrid mit einem L-Phenylalaninalkylester in Gegenwart von Salzen starker Säuren und einer anorganischen Säure mit bestimmter Dissoziationskonstante (DE-OS 22 33 535).
In der Veröffentlichung in Bull. Chem. Soc Japan 46 (1973), Seite 2611/12 wird schließlich die Umsetzung von L-Asparaginsäureanhydrid-isopropylsulfat mit L-Phenylalanin-methylester beschrieben. <τ>
Bei den bekannten Verfahren, die unter Verwendung von L-Phenylalanin-alkylester durchgeführt werden, muß in einer vorhergehenden Stufe die Veresterung von Phenylalanin durchgeführt werden. Die Verwendung dieses L-Phenylalanin-alkylesters als Ausgangsmaterial ist mit Nachteilen verbunden, da die Verbindung instabil ist und sich leicht zu unerwünschten Nebenprodukten zersetzt, falls sie nicht unmittelbar nach ihrer Bildung eingesetzt wird. Meist wird daher die Verbindung in Form des Hydrochlorids eingesetzt und unmittelbar vor der Umsetzung in die freie Verbindung übergeführt
Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, ein industriell gut durchführbares Verfahren zur Herstellung von Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester zur Verfugung zu stellen, bei dem gut zugängliche Ausgangsmaterialien verwendet werden können und in den einzelnen Stufen die jeweils gewünschten Produkte ohne merkliche Nebenproduktbildung erhalten werden können.
Gegenstand der Erfindung ist demnach ein Verfahren zur Herstellung von a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester, das dadurch gekennzeichnet ist daß man
A) N-Formyl-L-asparaginsäureanhydrid mit L-Phenylalanin in Eisessig bei einer Temperatur von weniger als etwa 8O0C umsetzt
B) aus dem erhaltenen N-Formyl-Ä-aspartyl-L-phenylalanin die Formylgruppe durch saure Hydrolyse in an sich bekannter Weise abspaltet
C) das erhaitene «x-L-Aspartyl-L-phenylalanin mit Methanol in saurem Medium bei Temperaturen von etwa -200C bis zu dem Siedepunkt des Reaktionsmediums verestert und den «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester gewinnt
Gegenstand der Erfindung ist außerdem ein neues Zwischenprodukt N-Formyl-a-L-aspartyl-L-phenylalanin.
Die erfindungsgemäße Synthese von a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester verläuft nach der nachstehenden Reaktionsfolge, in der X die Formylgruppe und R die Methylgruppe bedeuten:
Il
CH2-C
\ O + NH2-CH-COOH
CH C CH2
CH2COOH O
■> CH-C- -NH-- CH - COOH und
I I //-Form
X-NH CU2
(λ-Form)
CH2COOH O
Ii
2) CH-C—NH-CH-COOH X-NH CH2
Entfernen der Schutzgruppe
CH,COOH
CH-C—NH-CH-COOH
NH,
CH,COOH
O
Il
3) CH-C—NH-CH-COOH + ROH
NH2 CH2
CH2COOH
CH-C—NH-CH-COR
Wie in Gleichung 1) gezeigt ist, werden als Ausgangsreaktanten N-Formyl-L-asparaginsäureanhydrid und L-Phenylalanin verwendet, die unter Bildung von N-Formyl-«-L-aspartyl-L-phenylaIanin umgesetzt werden. N-Formyl-L-asparaginsäureanhydrid kann beispielsweise nach dem in der FR-PS 20 40 473 beschriebenen Verfahren hergestellt werden, bei dem N-Formyl-L-asparaginsäure bei O bis 600C in einem organischen Lösungsmittel mit Essigsäureanhydrid behandelt wird.
L-Phenylalanin wird gewöhnlich in einer Menge von 2,0 bis 0,5 Mol pro Mol des N-Formyl- L-asparaginsäureanhydrids, vorzugsweise in einer Menge von etwa 1,0 Mol L-Phenylalanin pro Mol des N-Formyl-L-asparaginsäureanhydrids, eingesetzt.
Wenn auch die Reaktion bei Raumtemperatur glatt verläuft, kann die Reaktionsgeschwindigkeit durch Erhitzen des Reaktionsgemisches erhöht werden. Wenn jedoch die Reaktionstemperatur zu hoch ist, besteht die Neigung zum Auftreten von Nebenreaktionen, wie einer Racemisierung. Aus diesem Grund wird die Reaktion bei einer Temperatur von weniger als etwa 800C, vorzugsweise bei einer Temperatur von weniger als etwa 60° C1 durchgeführt.
Die Reaktionsmasse, die aus der in Gleichung 1) dargestellten Reaktion erhalten wird, enthält das gwünschte Produkt der Formel
CH2COOH X —NH—CH-C-NH-CH-COOH
Il I
O CH1
ein unerwünschtes Nebenprodukt der Formel
X —NH-CH-COOH
CH2-C- NH -CH — COOH O CH,
(das nachstehend als »\-Ι·"οπιι« bczcichncl wird) und (das nachstehend als »/i-Form« bezeichnet wird).
Überraschenderweise werden die als Reaktionsprodukte erhaltene «-Form und /?-Form in einem Verhältnis entsprechend etwa 4 Teilen der «Form zu etwa 1 Teil der 0-Form gebildet, wenn die Reaktion in Eisessig bei einer Reaktionstemperatur von etwa 200C bis etwa 600C durchgeführt wird. Es wurde gefunden, daß relativ reine «-Form dann durch Kristallisation aus der Reaktionsmasse gewonnen werden kann. Diese Tatsache ist ein besonders vorteilhaftes Merkmal des erfindungsgemäßen Verfahrens. Die so gewonnene «-Form kann dann weiter in die zweite Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens eingesetzt werden. Die /?-Form, die in der resultierneden Mutterlauge verbleibt, kann einer weiteren Aufarbeitung, wie der Hydrolyse, unterworfen werden, um L-Asparaginsäure und L-Phenylalanin zu gewinnen, die dann in vorhergehende Stufen zurückgeführt werden können.
Gemäß einer anderen Ausführungsform kann auch die Reaktionsmasse, die beide Reaktionsprodukte enthält, der nächsten Reaktionsfolge unterworfen werden.
Das erhaltene N-Formyl-a-L-aspartyi-L-phenylalanin wird dann zum Entfernen der Formylgruppe (Gleichung 2) der sauren Hydrolyse unterworfen, wobei
Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin erhalten wird. Diese Hydrolyse kann beispielsweise in einer verdünnten wäßrigen Chlorwasserstoffsäurelö.iung durchgeführt werden. Die Umwandlung in «-L-Aspartyl-L-phenylalanin ist überraschenderweise sehr hoch, & h. sie liegt in der Größenordnung von 95% oder darüber, bezogen auf das so behandelte N-Formyl-Ä-L-aspartyl-L-phenylalanin. Ein anderes geeignetes Medium für eine derartige Behandlung ist eine wäßrige Essigsäure-Chlorwasserstoffsäure-Lösung.
Das Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin kann dann durch Ausfällung und Flüssig/Fest-Phasentrennung gewonnen werden. Diese Ausfällung kann beispielsweise durch Einstellen des pH-Werts verursacht werden. Das unerwünschte Nebenprodukt, das in der Mutterlauge verbleibt, ist ß-L-Aspartyl-L-phenylalanin, wenn sein Vorläufer in der oben angegebenen Weise in diese Reaktionsstufe übernommen wurde. Diese Verbindung kann dann aufgearbeitet werden, wie durch Hydrolyse, um L-Asparaginsäure und L-Phenylalanin zur Zurückführung in vorhergehende Stufen zu gewinnen.
Wie in Gleichung 3) verdeutlicht ist, wird dann Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin der Veresterung mit Methanol unterworfen, wobei «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester gebildet wird. Es wird bevorzugt, die Reaktion in Anwesenheit von möglichst wenig Wasser durchzuführen.
Diese Veresterungsreaktion wird im sauren Medium durchgeführt So kann die Rekation beispielsweise in Methanol, das etwa 1 bis etwa 10 Mol Chlorwasserstoff pro Mol Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin, vorzugsweise etwa 1,05 bis etwa 2,0MoI Chlorwasserstoff pro Mol Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin enthält, durchgeführt werden.
Für den Fachmann ist leicht ersichtlich, daß die Veresterungsreaktion praktisch durch Umsetzung eines Säuresalzcs von Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin und Methanol vorgenommen werden kann; aus Gründen der Bequemlichkeit wird jedoch hier nur von einer Reaktion zwischen Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin und Methanol gesprochen.
Die angewendeten Temperaturen sollten etwa -2O0C bis zu dem Siedepunkt des Reaktionsmediunis betragen, wobei eine Temperatur von etwa 200C bis 40° C besonders bevorzugt wird. 4
Im allgemeinen sollte das angewendete Molverhältnis von Methanol zu Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin etwa 0,5 bis etwa 50, vorzugsweise etwa 0,1 bis 10, betragen.
Bei dieser Veresterungsreaktion tritt notwendigerweise die Bildung der nachstehenden unerwünschten Nebenprodukte ein:
Il
C—OCH3
55
H2N-CH-C-NH-CH-C-O-CH3
Il
C-OCH3
H2N-CH-C — NH—CH-C-OH
(nachstehend als »Aspartylester« bezeichnet).
Außer diesen beiden unerwünschten Nebenprodukten enthält die Reaktionsmasse außerdem unumgesetztes Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin. Die Reaktionen, die zu dem gewünschten Produkt und den Nebenprodukten führen, sind sämtlich Gleichgewichtsreaktionen.
Es wurde gefunden, daß die Reaktionen zur Bildung von Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester in hohem Maß führen, wenn die Veresterung in Methanol in Gegenwart eines Oberschusses von einem Mol Chlorwasserstoff pro Mol Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin, gewöhnlich etwa 1,1 Mol Chlorwasserstoff pro Mol Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin, vorgenommen wird. Bei etwa Raumtemperatur wird ein so hoher Anteil wie etwa 40 bis 45% des Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanins in «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester übergeführt.
Der Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester kann dann gewonnen werden, beispielsweise durch partielle Neutralisation der resultierenden Reaktionsmasse, wobei nicht umgesetztes Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin ausgefällt wird, welches dann durch Feststoff-Flüssigkeits-Trennung gewonnen werden kann. Die verbleibende Lösung kann dann zum Entfernen von unumgesetztem Methanol aufgearbeitet werden, beispielsweise durch Destillation. Aus der verbleibenden Reaktionsmasse kann dann das gewünschte Produkt gewonnen werden. Dies erfolgt beispielsweise durch Behandlung mit einer Chlorwasserstoffsäurelösung, wobei das Hydrochloridsalz des Ä-L-Aspartyl-L-phenylalaninmethylesters ausfällt. Dieses kann dann gewonnen und in das gewünschte Produkt umgewandelt werden.
Das Hydrochlorid von Ä-L-Aspartyl-L-Phenylalaninmethylester ist bedeutend weniger löslich als die anderen vorstehend angegebenen Verbindungen, so daß diese Verbindung in einfacher Weise durch Feststoff/ Flüssigkeits-Trennung abgetrennt werden kann. Im wesentlichen verbleiben alle anderen Verbindungen in der Mutterlauge und können zu Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin hydrolysiert werden, welches dann gewonnen und/oder in die Veresterungsreaktion zurückgeführt werden kann.
Die nachstehenden Beispiel dienen dazu, die Erfindung ausführlich zu erläutern.
Für die in den Beispielen angewendeten Analysen durch Dünnschichtchromatographie wurden folgende Materialien und Verfahren benutzt:
bO
(nachstehend als »Diester« bezeichne!) und
A. Platten: 64 Vol.-%
Silicagel F auf Glasplatten 30 Vol.-%
B. Lösungsmittelsysteme: 2 V0I.-O/0
1. Chloroform 4 Vol.-%
Methanol
Essigsäure
destilliertes Wasser
2. n-Propanol 70 Vol.-%
destilliertes Wasser 10 Vol.-%
Methanol 10 Vol.-%
Ameisensäure 10Vol.-%
C. Sprühlösungen zum Nachweis:
1. 0,3 g Ninhydrin, gelöst in einem Gemisch aus 100 ml n-Butanol und 3 ml Eisessig
2. 1 g Kaliumjodid und 1 g lösliche Stärke, gelöst in 100 ml destilliertem Wasser
D. Verfahrensweise:
Nach dem Auftragen der Flecken und der Entwicklung in einem geeigneten Lösungsmittelsystem wurde die Platte 30 Minuten an der Luft getrocknet
Ninhydrinspray:
Die Platte wurde besprüht und 15 Minuten bei 1000C im Trockenschrank gehalten.
Stärkejodid-Spray:
Die Platte wurde 15 Minuten in eine mit t-Butyl-hypochlorit-Dampf gesättigte Kammer gelegt, 30 Minuten an der Luft getrocknet und danach mit frisch zubereiteter Stärkejodidlösung besprüht
Beispiel 1
N-Formyl-a-L-aspartyl-L-phenylalanin
In einem geeigneten Reaktionsgefäß werden bei einer Temperatur von 45 bis 500C 34,6 g (0,21 Mol) L-Phenylalanin innerhalb etwa 45 Minuten zu einem Gemisch aus 30 g (0,21 Mol) N-Formyl-L-asparaginsäureanhydrid und 300 g Eisessig gegeben. Das erhaltene Gemisch wird weitere 30 Minuten bei dieser Temperatur gehalten und danach auf 25° C gekühlt Das entstandene kristalline Produkt wird durch Filtration gewonnen und mit 50 g Eisessig gewaschen. Die Ausbeute an N-Formyl-a-L-aspartyl-L-phenylalanin beträgt 40,5 g (62,7%); F. 180 bis 182°C. Die Analyse dieses Produkts durch Dünnschichtchromatographie zeigt keine feststellbare Verunreinigung durch die /?-Form an.
Beispiel 2
N-Formyl-a-L-aspartyl-L-phenylalanin
In einem geeigneten Reaktionsgefäß werden 288 g (2,82 Mol) Essigsäureanhydrid zu 428 g 97°/oiger Ameisensäure während einer Dauer von etwa 45 Minuten bei 250C gegeben und das Gemisch wird dort weitere 45 Minuten gehalten. Dann wird das Reaktionsgefäß mit 147 g (1,1 Mol) L-Asparaginsäure beschickt Die erzielte Lösung wird etwa 3,5 Stunden bei 25° C gerührt Überschüssige Ameisensäure wird durch fraktionierte Destillation entfernt Dann wird eine ausreichende Menge Eisessig zugesetzt, so daß insgesamt 972 g Essigsäure vorliegen. Bei 50°C werden 174 g (1,05 MoI) L-Phenylalanin mit Hilfe einer Schneckenfördervorrichtung innerhalb 45 Minuten zugesetzt Die gebildete Masse wird 30 Minuten bei 50° C gehalten und danach auf 25° C abkühlen gelassen. Das kristalline N-Formyl-«- L-aspartyl-L-phenylalanin wird mit Hilfe einer Zentrifuge gewonnen und mit 200 ml Eisessig gewaschen. Das endgültig erhaltene Trockengewicht des Produkts beträgt 178 g (54,8%), F. 182 bis 184° C Die Dünnschichtchrcmatographie zeigte praktisch reines N-Formyl-a-L-aspartyl-L-phenylalanin an, in welchem keine erkennbare Menge der jS-Form vorlag.
Beispiel 3
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin
Ein Gemisch aus 100 g (0,322 Mol) N-Formyl-«-L-aspartyl-L-phenylalanin und 59,7 g 37%iger HCl (0,607 Mol) in 392 ml Wasser wird 4 bis 5 Stunden auf 60° C erhitzt. Die erhaltene Lösung wird mit 32,6 g (0,41 Mol) 5O°/oiger NaOH partiell neutralisiert und danach auf 20 bis 25° C abgekühlt. Das gebildete Festprodukt
ίο wurde gewonnen und mit 50 ml kaltem Wasser (50C) gewaschen. Die Menge des gewonnenen ersten Anteils an Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin beträgt 32,7 g.
Die mit dem Waschwasser aus dem ersten Anteil kombinierte Mutterlauge wird weiter mit 17,6 g (0,22 Mol) 50%iger NaOH bei 60° C neutralisiert. Durch Kühlen der Reaktionsmasse auf 25° C, Gewinnen des gebildeten Feststoffes und Waschen mit 50 cm3 kaltem Wasser werden weitere 45 g «-L-Aspartyl-L-phenylalanin gewonnen. Die Gesamtausbeute an «-L-Aspartyl-L-phenylalanin beträgt 77,7 g (85,5%) [«]? +30,2°, c=0,7 (75% wäßrige Essigsäure).
Beispiel 4
OC-L-Aspartyl-L-phenylalanin
A) Zu 441 g 97%iger Ameisensäure in einem 2 Ltr.-Kolben, der mit Rührer versehen war, wurden tropfenweise während 95 Minuten 286 g (2,8 Mol) Essigsäureanhydrid zugegeben. Nach vollständiger Zugabe wurde die Lösung bei Raumtemperatur 45 Minuten gerührt Zu dieser Lösung wurden 147 g (1,1 Mol) L-Asparaginsäure in einem Anteil zugesetzt und das Rühren wurde bei Raumtemperatur 3,5 Stunden fortgesetzt Überschüssige Ameisensäure wurde durch fraktionierte Destillation in einem Vakuum von 30 bis 60 mm entfernt Dem Kolbenrückstand wurden 244 g Essigsäure zugesetzt, so daß eine Gesamtmenge von 379 g Essigsäure vorlag.
Zu dieser Lösung von N'-Formyl-L-asparaginsäureanhydrid, von 50° C, wurden anteilweise während 1 Stunde 174 g (1,05 Mol) L-Phenylalanin zugesetzt Die Reaktionsmasse wurde 1,5 Stunden bei 50° C gerührt.
B) Die erhaltene Reaktionsmasse, die sowohl die flc-Form als auch die ß-Form enthielt, wurde mit 875 ml Wasser und 195 g 37%iger Chlorwasserstoffsäure behandelt und 4 Stunden auf 60° C erhitzt. Das Produkt wurde aus dieser Hydrolyselösung durch Zugabe von 235,6 g 50%iger Natriumhydroxidlösung ausgefällt Die Feststoffe wurden durch Zentrifugieren abgetrennt und mit 150 ml Wasser gewaschen. Der erhaltene Kuchen wurde getrocknet wobei 146,4 g (49,6%) eines Produkts erhalten wurden, das sich durch Dünnschichtchromatographie als Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin mit einer Reinheit von mehr als 95% erwies. [«] ? +27,7, c=0,9 (75% wäßrige Essigsäure).
Beispiel 5
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin
Zu einer Aufschlämmung von 6,0 g (0,042MoI) N-Formyl-L-asparaginsäureanhydridin 15,1 g Essigsäure von 50°C wurden anteilweise während 45 Minuten 6,92 g (0,042 Mol) L-Phenyalanin gegeben. Nach beendigter Zugabe wurde das Gemisch 30 Minuten gerührt
Diese Reaktionsmasse, die sowohl die cc- als auch die ß-Form enthielt wurde mit 35 ml Wasser und 7,8 g 37%iger Chlorwasserstoffsäure behandelt und 4 Stunden bei 60° C gerührt Das Produkt wurde aus der
Hydrolyselösung durch Zugabe von 8,1 g 50%iger Natriumhydroxidlösung ausgefällt. Die Feststoffe wurden durch Filtration abgetrennt und mit 5 ml Wasser gewaschen. Der Kuchen wurde getrocknet, wobei 7,1 g (69,7%) des Produkts erhalten wurden, das sich durch Dünnschichtchromatographie als Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin erwies; [«]? +29,5, c=0,8 (75% wäßrige Essigsäure).
Beispiel 6
Eine Lösung von 46 mg (0,16 mMol) Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin, 35 mg (0,18 mMol) p-Toluolsulfonsäuremonohydrat und 0,5 ml wasserfreiem Methanol wurde 1,5 Stunden bei der Rückflußtemperatur (64,7° C) gehalten. Dabei wurden die nachstehenden, durch Dünnschichtchromatographie bestimmten Produkte, bezogen auf das ursprünglich eingesetzte Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin, erhalten:
Produkt
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin- 35-40
methylester
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin 15-20
(unumgesetzt) 15-20
Aspartylester 10-15
Diester
Produkt Reaktionsprodukte,
Vo
ix-L-Aspartyl-L-phenylalanin-
methylester 20-25
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin
(unumgesetzt) 35
Aspartylester 20-25
Diester 5-10
Beispiel 9
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester
Eine Lösung aus 1,86 g Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin, 2,9 ml 2,6 η Chlorwasserstoffsäure in Methanol und 7,2 ml Methanol wurde 2 Stunden bei 30° C gerührt. Dabei wurden die nachstehenden Produkte, bezogen auf die Anfangsbeschickung an «-L-Aspartyl-L-phenylalanin, bestimmt durch DSC, erhalten:
10
15
Reaktionsprodukte,
Produkt Beispiel 10 Reaktionsprodukte,
%
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-
methylester 40-45
Λ-L-AspartyI-L-phenyiaianin
(unumgesetzt) 20-25
Aspartylester 15-20
Diester 15-20
Beispiel 7
Eine Lösung aus 46 mg (0,16 mMol) a-L-Aspartyl-L-phenylalanin, 1,1ml 0,37 η H2SO4-CH3OH-Lösung (mit einem Gehalt an 0,2 mMol H2SO4 und 4 ml wasserfreiem Methanol wurde 1,5 Stunden am Rückfluß gehalten (64,7° C). Die durch Dünnschichtchromatographie bestimmten, erhaltenen Produkte haben folgende Werte, bezogen auf die Anfangsbeschickung an Ä-L-Aspartyl-L-phenylalanin:
Produkt Reaktionsprodukte,
Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-
methylester 15-20
a- L-Aspartyl-L-phenylalanin
(unumgesetzt) 35
Aspartylester 10
Diester Spuren
Beispiel 8
Eine Lösung aus 46 mg (0,16 mMo!) Ä-L-Aspartyi-L-phenylalanin, 0,43 mMol Pyrophosphorsäure und 5 ml wasserfreiem Methanol wurde 3 Stunden am Rückfluß (64,7° C) gehalten. Dabei wurden folgende Produkte, bezogen auf die Anfangsbeschickung an «-L-Aspartyl-L-phenylalanin, erhalten (bestimmt durch Dünnschichtchromatographie):
In ein geeignetes Reaktionsgefäß, das mit Thermometer, Rührer und Rückflußkühler versehen ist, werden 111,5 g (0,4 Mol) Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin gegeben. Dann werden 500 ml Methanol und 132,5 ml 3,42 η HCl in Methanol zugesetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden gerührt und auf 30° C erwärmt. Dann wird auf 25° C abgekühlt und es werden während 15 Minuten 9,5 ml (0,12 Mol) 50%ige NaOH zugegeben. In einem Eisbad wird eine Stunde gerührt und nicht umgesetztes Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin abfiltriert. Der «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-Kuchen wird mit zwei 50 ml-Anteilen eiskaltem Methanol gewaschen. Der Kuchen wird in einem Vakuumtrockenschrank getrocknet, wobei 25 g Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin (etwa 90% rein) gewonnen werden.
575 ml Methanol werden aus dem Filtrat durch Destillation entfernt. Dann werden 225 ml Wasser und 41,5 ml 37%ige HCl (0,49 Mol) zugegeben, wonach 2 Stunden bei 0 bis 5° C gerührt wird. Das feste Chlorwasserstoffsäuresalz von Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methyiester wird filtriert und wieder in 610 ml Wasser von 50°C gelöst Der pH-Wert der erhaltenen Lösung wird mit 17,45 g (0,22 Mol) 50%iger NaOH auf 4 bis 4,5 eingestellt und dann wird 2 Stunden bei 5° C gerührt Der Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester wird filtriert und mit fünf 30 ml-Anteilen Wasser von 0 bis 5°C gewaschen. Der erhaltene a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester wird im Vakuumtrockenschrank getrocknet Die Ausbeute beträgt 33,65 g bei einer Reinheit von mehr als 98% (durch Dünnschichtchrornatographie).
Beispiel 11
a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester
Eine Lösung von 223 g «-L-Aspartyl-L-phenylalanin. 243 ml 3,76 η Chlorwasserstoffsäure in Methanol und 25 ml Methanol wurde 1,5 Stunden bei 30° C gerührt Nachdem die Veresterungsreaktion beendet war, wurden 2,85 g 50%ige Natriumhydroxidlösung tropfenweise während einer Dauer von 12 Minuten zugegeben, um das unumgesetzte «-L-Aspartyl-L-phenylalanin auszufällen. Die Reaktionsmasse wurde 45 Minuten bei Raumtemperatur gerührt Das kristalline «-L-Aspartyl-L-phenylalanin wurde durch Filtration entfernt Der «-L-Aspartyl-L-phenylalanin-Kuchen wurde mit zwei
11 12
10 ml-Anteilen Methanol gewaschen und getrocknet, 50°C gelöst und der pH-Wert der resultierenden
wobei 6,5 g «-L-Aspartyl-L-phenylalanin erhalten wur- Lösung wurde durch Zugabe von 3,2 g 50%iger
den (90% rein, bestimmt durch DSC). Natriumhydroxidlösung auf 4,5 eingestellt. Die resultie-
Das Filtrat und die Waschflüssigkeiten wurden in das rende Masse wurde 1,5 Stunden bei 0 bis 5° C gerührt
Reaktionsgefäß zurückgegeben und das Methanol 5 und der ausgefällte ot-L-Aspartyl-L-phenylalanin-me-
wurde durch Vakuumdestillation entfernt. Zu dem thylester wurde durch Filtration gewonnen. Der
Rückstand nach der Destillation wurden 45 ml Wasser erhaltene Kuchen wurde mit fünf 6 ml-Anteilen Wasser
und 8,3 ml 37%ige Chlorwasserstoffsäure gegeben. Die von 0 bis 5°C gewaschen und dann getrocknet, wobei
Reaktionsmasse wurde 1,5 Stunden bei 0 bis 5°C gerührt 6,7 g Λ-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester einer
und das feste Hydrochlorid von «-L-Aspartyl-L-phenyl- io Reinheit von mehr als 98% erhalten wurden (bestimmt
alanin-methylester wurde durch Filtration gewonnen. durch DSC).
Der erhaltene Kuchen wurde in 120 ml Wasser von

Claims (2)

Patentansprüche:
1. N-Formyl-a-L-aspartyl-L-phenylalanin.
2. Verfahren zur Herstellung von a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester, dadurch gekennzeichnet, daß man
A) N-Formyl-L-asparaginsäureanhydrid mit
L-Phenylalanin in Eisessig bei einer Temperatur von weniger als etwa 800C umsetzt,
10
B) aus dem erhaltenen N-Formyl-a-aspartyl-L-phenylalanin die Formylgruppe durch saure Hydrolyse in an sich bekannter Weise abspaltet,
C) das erhaltene «-L-Aspartyl-L-phenylalanin mit Methanol in saurem Medium bei Temperaturen von etwa — 200C bis zu dem Siedepunkt des Reaktionsmediums verestert und den a-L-Aspartyl-L-phenylalanin-methylester gewinnt
DE2452285A 1973-11-05 1974-11-04 Verfahren zur Herstellung von a -LAspartyl-Lphenylalaninmethylester Expired DE2452285C3 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US05/412,928 US3933781A (en) 1973-11-05 1973-11-05 Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine alkyl esters

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE2452285A1 DE2452285A1 (de) 1975-05-07
DE2452285B2 DE2452285B2 (de) 1979-12-20
DE2452285C3 true DE2452285C3 (de) 1980-08-21

Family

ID=23635037

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2452285A Expired DE2452285C3 (de) 1973-11-05 1974-11-04 Verfahren zur Herstellung von a -LAspartyl-Lphenylalaninmethylester

Country Status (17)

Country Link
US (1) US3933781A (de)
JP (1) JPS5526133B2 (de)
BE (1) BE821825A (de)
BR (1) BR7409198A (de)
CA (1) CA1020159A (de)
CH (1) CH605678A5 (de)
DE (1) DE2452285C3 (de)
DK (1) DK573674A (de)
FR (1) FR2249872B1 (de)
GB (2) GB1464140A (de)
HU (1) HU170725B (de)
IT (1) IT1025399B (de)
NL (1) NL7414280A (de)
NO (2) NO143940C (de)
SE (2) SE7413807L (de)
SU (1) SU544367A3 (de)
ZA (1) ZA747077B (de)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5223001A (en) * 1975-08-14 1977-02-21 Ajinomoto Co Inc Process for elimination of formyl group
US4173562A (en) * 1976-12-27 1979-11-06 Monsanto Company Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester
MX4704E (es) * 1976-12-27 1982-08-04 Monsanto Co Procedimiento mejorado para la preparacion de ester metilico de alfa-l-aspartil-l-fenilalanina
JPS5535059A (en) * 1978-09-05 1980-03-11 Ajinomoto Co Inc Preparation of lower alkyl ester of alpha-l-aspartyl-l- phenylalanine
US4333872A (en) * 1980-05-27 1982-06-08 Chimicasa Gmbh Method of producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine methylester
JPS57131746A (en) * 1981-02-10 1982-08-14 Ajinomoto Co Inc Removal of n-formyl group
IT1194795B (it) * 1981-05-13 1988-09-28 Pierrel Spa Procedimento per la eliminazione del gruppo n-formile da peptidi n-formilati e da esteri di peptidi n-formilati
JPS58185545A (ja) * 1982-04-22 1983-10-29 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルまたはその塩酸塩の製法
IT1155060B (it) * 1982-09-02 1987-01-21 Sirac Srl Procedimento per la preparazione di esteri alchilici della alfa-l-aspartil-l-fenilalanina
JPS59219258A (ja) * 1983-05-28 1984-12-10 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製法
JPS59225152A (ja) * 1983-06-02 1984-12-18 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製法
US4480112A (en) * 1983-06-20 1984-10-30 G. D. Searle & Co. Method and intermediates for producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine
US4440677A (en) * 1983-06-20 1984-04-03 G. D. Searle & Co. Method and intermediates for producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine
GB8321802D0 (en) * 1983-08-12 1983-09-14 Erba Farmitalia Aspartame synthesis
JPS6075497A (ja) * 1983-09-30 1985-04-27 Ajinomoto Co Inc Ν−保護−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの製造法
JPH07636B2 (ja) * 1984-12-17 1995-01-11 三井東圧化学株式会社 Ｎ−ホルミル−α−アスパルチルフエニルアラニンの製造法
CA1277098C (en) * 1984-12-27 1990-11-27 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Preparation process of -l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester
JPH0680074B2 (ja) * 1985-07-01 1994-10-12 味の素株式会社 Ｎ―ホルミル―Ｌ―α―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンの製法
AU561384B2 (en) * 1985-03-26 1987-05-07 Mitsui Toatsu Chemicals Inc. Preparation of -l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester or hydrochloride thereof
JPS6274296A (ja) * 1985-09-25 1987-04-06 Ajinomoto Co Inc α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステルの製造方法
US4730076A (en) * 1985-12-18 1988-03-08 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Process for producing α-aspartyl-phenylalanine ester
JPH0680075B2 (ja) * 1985-12-24 1994-10-12 味の素株式会社 Ｎ―ホルミル―α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステルの製造法
DE3600731A1 (de) * 1986-01-13 1987-07-16 Green Cross Korea Verfahren zur herstellung von (alpha)-l-aspartyl-l-phenylalaninmethylester
JPS6344594A (ja) * 1986-08-11 1988-02-25 Ajinomoto Co Inc Ｎ−保護−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンの分離方法
US5002871A (en) * 1986-08-18 1991-03-26 The Coca-Cola Company Enzymatic membrane method for the synthesis and separation of peptides
US5336601A (en) * 1986-08-18 1994-08-09 The Coca-Cola Company Enzymatic membrane method for the snythesis and separation of peptides
US5202235A (en) * 1986-08-18 1993-04-13 The Coca-Cola Company Enzymatic method for the synthesis and separation of peptides
US5350681A (en) * 1986-08-18 1994-09-27 The Coca-Cola Company Enzymatic membrane method for the synthesis and separation of peptides
US5037741A (en) * 1986-08-18 1991-08-06 The Coca Cola Company Enzymatic method for the synthesis and separation of peptides
JPH085912B2 (ja) * 1986-09-04 1996-01-24 味の素株式会社 Ｎ−ホルミルアスパルチル−フエニルアラニンまたはそのメチルエステルの製造方法
DE3780585T2 (de) * 1986-12-05 1993-03-18 Mitsui Toatsu Chemicals Herstellung von alpha-l-aspartyl-l-phenylalanin-methylester oder deren hydrohalide.
JPH0832719B2 (ja) * 1986-12-19 1996-03-29 三井東圧化学株式会社 吸湿性の小さいα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルの製造法
US4774027A (en) * 1987-11-13 1988-09-27 General Foods Corporation Process for the preparation of N-L-aminodicarboxylic acid esters and new compositions used in the preparation thereof
AU648291B2 (en) * 1988-02-12 1994-04-21 Nutrasweet Company, The A one-pot process for the preparation of alpha-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride
BR9007647A (pt) * 1988-02-12 1992-09-15 Nutrasweet Co Processo para a preparacao de anidrido n-formil-l-aspartic
US5053532A (en) * 1988-02-12 1991-10-01 The Nutra Sweet Company One-pot process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride
US5283357A (en) * 1988-03-14 1994-02-01 Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated Separation method of α-l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester
US4946988A (en) * 1988-07-14 1990-08-07 The Nutrasweet Company Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride by use of isolated N-formyl L-aspartic anhydride
US5017690A (en) * 1989-08-11 1991-05-21 W. R. Grace & Co.-Conn. Deblocking N-formyl aspartame compounds
US5183937A (en) * 1990-02-07 1993-02-02 The Nutrasweet Company Acetic acid recovery
DE69110374T2 (de) * 1990-03-12 1995-11-02 Nutrasweet Co Verfahren zur erhöhung des alpha/beta-verhältnisses in einer aspartamkupplungsreaktion.
JP2979761B2 (ja) * 1991-05-23 1999-11-15 味の素株式会社 α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造法
JP3144430B2 (ja) * 1991-08-27 2001-03-12 味の素株式会社 有機溶媒の分離方法
IT1270852B (it) * 1992-08-27 1997-05-13 Miwon Co Ltd Procedimento per la produzione dell'estere metilico di alfa-l-aspartil-l-fenilalanina.
JP3591004B2 (ja) 1994-09-28 2004-11-17 味の素株式会社 Ｎ−ホルミル−ｌ−アスパラギン酸無水物の製造方法
US6627431B1 (en) * 2000-05-12 2003-09-30 The Nutrasweet Company Chemoenzymatic synthesis of neotame
CN101270092B (zh) * 2008-04-30 2010-12-08 厦门大学 一种合成纽甜的方法
EP2599786A4 (de) 2010-07-26 2014-11-26 Ajinomoto Kk Verfahren zur peptidherstellung
CN103130870B (zh) * 2011-11-30 2015-03-18 江苏维多股份有限公司 α-L-天冬氨酸-L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐的制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3786039A (en) * 1969-04-30 1974-01-15 Ajinomoto Kk Method of producing alpha-l-aspartyl-l-phenylalanine lower alkyl esters
GB1309605A (en) * 1970-01-31 1973-03-14 Ajinomoto Kk Process for producing alpha-dipeptide esters of l-aspartic acid
JPS4935607B1 (de) * 1970-08-21 1974-09-25 Takeda Chemical Industries Ltd
US3769333A (en) * 1972-08-07 1973-10-30 American Home Prod L-aspartic acid derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
DK573674A (de) 1975-07-07
SE7413807L (de) 1975-05-06
DE2452285B2 (de) 1979-12-20
SE7710696L (sv) 1977-09-23
NO743957L (de) 1975-06-02
AU7500274A (en) 1976-05-06
US3933781A (en) 1976-01-20
ZA747077B (en) 1975-11-26
NO145273B (no) 1981-11-09
CA1020159A (en) 1977-11-01
JPS5526133B2 (de) 1980-07-11
NO143940C (no) 1981-05-13
SU544367A3 (ru) 1977-01-25
NO143940B (no) 1981-02-02
BR7409198A (pt) 1976-05-11
DE2452285A1 (de) 1975-05-07
BE821825A (fr) 1975-05-05
NL7414280A (nl) 1975-05-07
JPS5071642A (de) 1975-06-13
HU170725B (de) 1977-08-28
IT1025399B (it) 1978-08-10
GB1464140A (en) 1977-02-09
FR2249872A1 (de) 1975-05-30
GB1464139A (en) 1977-02-09
FR2249872B1 (de) 1978-09-15
CH605678A5 (de) 1978-10-13
NO145273C (no) 1982-02-17
NO803386L (no) 1975-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2452285C3 (de) Verfahren zur Herstellung von a -LAspartyl-Lphenylalaninmethylester
DE19515625C2 (de) Verfahren zur Herstellung von enantiomerenreinen Tropasäureestern
EP0512211A2 (de) Verfahren zur Herstellung von substituierten Malonesteraniliden und Malonsäure-monoaniliden
DE2349496A1 (de) Verfahren zur herstellung von dl-threobeta-p-methylsulfonylphenylserinderivaten
DE1938513B1 (de) Verfahren zur Herstellung von D-threo-1-p-Methylsulfonyl-phenyl-2-dichloracetamido-propan-1,3-diol
DE2757771C2 (de)
DE3123668C2 (de) Verfahren zur Herstellung von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure
DE3600731A1 (de) Verfahren zur herstellung von (alpha)-l-aspartyl-l-phenylalaninmethylester
EP0048345A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines alpha-L-Aspartyl-L-Phenylalanin-Alkyl-Esters
EP1087945B1 (de) Verfahren zur herstellung von carbonyldiimidazol
DE68918357T2 (de) Verfahren zur Herstellung von optisch aktiver Aminosäure.
DE3434142C2 (de)
EP0174624B1 (de) Verfahren zur Herstellung von Milchsäureestern
DE2844777C2 (de)
DE2950608C2 (de)
EP0915840A1 (de) Verfahren zur herstellung von substituierten valinamid-derivaten
DE887816C (de) Verfahren zur Herstellung von 1-Nitrophenyl-2-amino-propan-1, 3-diolderivaten
DE2721265C2 (de) Verfahren zur Herstellung von Di- n-propylacetonitril
DE1695500B2 (de) Verfahren zum herstellen von 1-methyl- 5-nitroimidazolverbindungen
EP0015516B1 (de) Verfahren zur Herstellung von 5-Hydroxymethylimidazolen
DE69011996T2 (de) Verfahren zur Herstellung von 1,4-Dihydroxy-2-arylnaphthoat.
EP0081459B1 (de) Verfahren zur Herstellung von N-Phosphonomethylglycin
DE3135728C2 (de) Verfahren zur Herstellung von Apovincaminsäureestern
DE2065698A1 (de) Verfahren zur herstellung von 2isopropyl-6-methyl-4(3h)-pyrimidon
AT326638B (de) Verfahren zur herstellung von n(beta-diäthylaminoäthyl) -4-amino-5-chlor-2-methoxybenzamid

Legal Events

Date Code Title Description
C3 Grant after two publication steps (3rd publication)
8328 Change in the person/name/address of the agent

Free format text: VON FUENER, A., DIPL.-CHEM. DR.RER.NAT. EBBINGHAUS, D., DIPL.-ING., PAT.-ANW., 8000 MUENCHEN

8339 Ceased/non-payment of the annual fee