DE3123668C2

DE3123668C2 - Verfahren zur Herstellung von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure

Info

Publication number: DE3123668C2
Application number: DE3123668A
Authority: DE
Inventors: Susan Bolluyt 60010 Barrington Ill. Gorman; Ralph Brewster 60521 Hinsdale Ill. Thompson; Edward Easho 60187 Carol Stream Ill. Yonan
Original assignee: PPG Industries Inc
Current assignee: PPG Industries Inc
Priority date: 1980-06-19
Filing date: 1981-06-15
Publication date: 1984-01-12
Also published as: JPS5714570A; JPS5929187B2; US4293706A; FR2485005B1; CA1154457A; DE3123668A1; FR2485005A1

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure, die im wesentlichen frei von N-Benzyloxycarbonylasparaginylsäure ist. Es wird Ben zylchlorid allmählich in eine wäßrige Lösung des Dinatriumsalzes von Asparaginsäure bei einer Temperatur zwischen 10 und 45 ° C eingeführt, wobei das pH der wäßrigen Lösung bei 10,75 bis 11,75 gehalten wird. Bevorzugt wird im Reaktionsmedium ein Molverhältnis von nicht umgesetztem Benzyl chlorformiat zu dem Asparaginsäuresalz nicht größer als 0,2 aufrechterhalten. Die erhaltene Reaktionsmischung wird angesäuert und die freie N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure wird abgetrennt und getrocknet.

Description

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das Benzylchlorformiat in die wäßrige Lösung mit einer derartigen Geschwindigkeit einführt, daß das Molverhä'tnis von nicht ²^ umgesetztem Benzylchlorformiat zu Asparaginsäure in der wäßrigen Lösung nicht größer als 0,2 ist

3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Molverhältnis von nicht umgesetztem Benzylchlorformiat zu Asparaginsäure in der wäßrigen Lösung nicht größer als 0,1 ist

4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in der Stufe (a) das pH der wäßrigen Lösung zwischen 11,5 und Il,75hält.

5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man die Stufe (a) bei einer Temperatur zwischen 20 und 25° C durchführt

40

Die niedrigen Alkylester von a-L-Asparäginyl-L-phenylalanin. die f bis 4 Kohlenstoffatome im Alk.ySrest *s enthalten, besitzen einen Geschmack, der demjenigen von Zucker stark gleicht und sind deshalb wertvolle Zuckerersatzstoffe (vergleiche z.B. US-PS 34 92131). Ein solches Dipeptid, d. h. L-Asparaginyl-L-phenylalaninmethylester soll die 100- bis 200fache Süßkraft von so Saccharose haben. Derartige Dipeptidester lassen sich in einfacher Weise aus Asparaginsäurederivaten herstellen, wenn deren Aminogruppe durch eine Benzyloxycarbonylgruppe, die Carboxygruppe durch eine Benzylestergruppe und die a-Carboxygruppe durch eine p-Nitrophenylestergruppe geschützt ist Dip Herstellung eines solchen Äsparaginsäurederivats ist von S. Guttmann in HeIv. Chim. Acta, 44,721 (1961) beschrieben. Die weitere Umsetzung von diesem Derivat mit einem Phenylalaninester, z. B. &o L-PhenyJaJaninmeihylester, ergibt ein geschütztes Dipeptid, das bei der Hydrolyse den niedrigeren Alkylester bildet, z. B. den Methylester von L-Asparaginyl-L-phenylalanin. Das zuvor genannte Asparaginsäurederivat kann aus N-BenzyloxycarböHyl-L-äsparaginsäure hergestellt werden.

Die Verwendung der Dipeptid-Süßstoffe in eßbaren Materialien macht es erforderlich, daß die in den Vorstufen verwendeten Asparaginsäurederivate so rein als möglich sind. Es besteht deshalb der Wunsch, daß diese Vorprodukte im wesentlichen frei von Nebenprodukten, die sich während ihrer Synthese bilden können, sind.

Gegenstand der Erfindung ist deshalb ein Verfahren zur Herstellung von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure, die im wesentlichen frei von N-Benzyloxycarbonylasparaginylsäure ist durch Umsetzung von Asparaginsäure mit Benzylchlorformiat wobei dieses Verfahren dadurch gekennzeichnet ist daß man

(a) eine stöchiometrische Menge Benzylchlorformiat allmählich in eine wäßrige Lösung eines Alkalisalzes von Asparaginsäure bei einer Temperatur zwischen 10 und 45° C einführt und dabei das pH der wäßrigen Lösung durch gleichzeitige Zugabe von Alkalihydroxid bei 10,75 bis 11,75 halt

(b) die erhaltene Reaküonsmischung ansäuert und

(c) die N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure abtrennt

In der Regel hat die durch das erfindungsgemäße Verfahren hergestellte N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure einen Reinheitsgrad von mindestens 97 Gew.-%. Bevorzugt enthält sie weniger als 0,2 Gew.-°/o N-Benzyloxycarbonylasparaginylasparaginsäure.

In einer bevorzugten Ausführungsform wird das Benzylchlorformiat mit einer solchen Geschwindigkeit zugegeben, daß das Molverhältnis von nicht umgesetztem Benzylchlorformiat zu dem Asparaginsäuresalz in der Reaktionsmischung n'cht größer als 0,2, insbesondere nicht größer als 0.1 ist

Die Umsetzung von Asparaginsäure mit Benzylchlorformiat ist in der Literatur mehrfach beschrieben worden. Als Beispiele seien der Aufsatz von Max Bergmann et al. in Berichte der D. Chem. Gesellschaft, Band 65, Seiten 1192-1291, insbesondere 1197 (1932) und Houben-Weyl, Band XV/1, Seite 321 (1974) genannt Auch in der US-PS 38 08190 ist diese Umsetzung beschrieben. In diesen Veröffentlichungen sind aber die Reaktionsbedingungen nicht angegeben, die sich gemäU der Erfindung als erforderlich Mr die Herstellung von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure (im folgenden als »Z-Asp« bezeichnet), im wesentlichen frei von N-Besizyloxycarbcnyiasparagsnyiaspsrginsäürc (im folgenden als »Z-Asp-Asp« bezeichnet) erwiesen hat.

Bei dem Verfahren gemäß der Erfindung wird Benzylchlorformiat allmählich in ein Reaktionsgefäß eingeführt das eine wäßrige Lösung eine^- Dialkalisalzes von Asparaginsäure enthält, wobei das pH und die Temperatur sorgfältig kontrolliert werden. Das pH der wäßrigen Lösung wird bei 10,75 bis 11,75 während der Zugabe des Benzylchlorformiats gehalten. Bevorzugt wird das pH zwischen etwa 113 und 11.75 gehalten. Ein

z 5 ein pH z-wischcr;

12 und 13,5, führt zu einer bemerkenswerten Hydrolyse des Benzylchlorformiats unter Bildung von Benzylalkohol und das erhaltene Z-Asp-Produkt enthält Spuren von Verunreinigungen, die weniger polar sind als Z-Asp, wie durch Dünnschicht-Chromatographie festgestellt werden kann. Die. Ausbeute an Z-Asp wird bei einem hohen pH-Wert, wie 12 bis 13,5, ebenfalls reduziert. Wenn das pH der wäßrigen Lösung nennenswert niedriger ist als 10,75, z. B. 7 bis 9, entstehen bemerkenswerte Mengen an Z-Asp-Asp, z. B. 5 bis 16 Gew.-°/o, bezogen auf Z-Asp, und auch andere Verunreinigungen, die weniger polar oder polarer sind

als Z-Asp. Auch in diesem Fall können die Verunreinigungen durch Dünnschicht-Chromatographie festgestellt werden.

Wie bereits ausgeführt wurde, soll das pH der wäßrigen Reaktionsniischung bei 10,7 bis 11.V5 während der Zugabe des Benzylchlorformiats gehalten werden. Es sollte jedoch beachtet werden, daß die Reaktionsmischung ein heterogenes System ist das sich in einer dauernden Änderung befindet, so daß kurze Abweichungen von dem gewünschten pH-Bereich ohne nachteilige Folgen auf die Reinheit des Reaktionsproduktes eintreten können. Das Aufrechterhalten des genannten pH-Bereiches schließt deshalb solche kurze Abweichungen ein.

Das pH der wäßrigen Lösung wird auf den gewünschten Wert von 10,75 bis 11,75 dadurch eingestellt, daß gleichzeitig mit dem Benzylchlorformiat ein Alkalihydroxid zugegeben wird. Der alkalische Stoff muß in der Lage sein, den während der Umsetzung freigesetzten Chlorwasserstoff zu neutralisieren, um die Reaktionsmischung bei jom gewünschten pH zu halten. Bevorzugt ist das Alkalihydroxid identisch mit demjenigen, das zur Herstellung des Alkalisalzes der Asparaginsäure verwendet wird. Bevorzugte Alkalihydroxide sind Natriumhydroxid und Kaliumhydroxid.

Die Menge des zur Reaktionsmischung zugegebenen Alkalihydroxids entspricht dem gewünschten pH-Wert, wobei sie bevorzugt der Menge des als Nebenprodukt entstehenden Chlorwasserstoffs stöchiometrisch äquivalent ist. Ein geringer stöchiometrischer Oberschuß kann verwendet weHen, doch soll das pH der Reaktionsmischung 11,75 nicht übersteigen. So wird z. B. im Fall des Natriumhydroxids mindestens ein MoI Natriumhydroxid für jedes MoI Chlorwasserstoff zugegeben. Die Geschwindigkeit, mit d«;r uas alkalische Mittel zugeführt wird, wird so gewählt, daß d>e wäßrige Lösung im Reaktor innerhalb des gewünschten pH-Bereiches bleibt. Die Konzentration des alkalischen Mittels ist nicht kritisch. Im Falle von Natrium- oder Kaliumhydroxid wird üblicherweise eine 20- bis 50gew.-%ige Lösung verwendet

Das Verfahren gemäß der Erfindung wird bei Temperaturen zwischen 10 und 45°C, bevorzugt zwischen 20 und 30 oder 40⁰C, insbesondere zwischen

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führt Die Geschwindigkeit mit der die Reaktion voranschreitet ist eine direkte Funktion der verwendeten Temperatur. Mit Ansteigen der Temperatur innerhalb des genannten Bereiches nimmt jedoch der Anteil an Verunreinigungen, d.h. weniger polaren bis ⁵ⁿ unpolaren Verunreinigungen, in dem Z-Asp-Produkt zu. Es entstehen jedoch keine nennenswerten Verunreinigungen in dem Produkt, bis eine Temperatur von 45° C erreicht wird, wobei diese Verunreinigungen durch Dünnschicht-Chromatographie festgestellt werden. Bei von nicht umgesetztem Benzylchlorformiat zu dem Asparaginsäuresalz nicht größer als 0,2, bevorzugt nicht größer als 0,15 und insbesondere nicht größer als 0,1 ist. Es können auch die mit einem niedrigeren Alkylrest d. h. Ci -Ci-Alkylrest kernsubstituierte Benzylchlorformiate statt des unsubstituierten Benzylchlorformiat verwendet werden. Beispiele von solchen Substituenten sind meta- oder para-substituierie Methyl- oder Äthylbenzylchlorformiate. Die Zugabe des Benzylchlcrformiats zu der Reaktionsmischung mit einer Geschwindigkeit die zur Anwesenheit von größeren Mengen an nicht umgesetztem Benzylchlorformiat in der Reaktionsmischung führt, hat die Hydrolyse von mehr als eineir kleinen Anteil des Benzylchlorformiats zur Folge. Dies ki :in zum Beispiel eintreten, wenn das Benzylchlorformiat auf einmal zugegeben wird. Der entstehende Benzylalkohol Benzylalkohol bildet dann Ester mit den sauren Materialien, d.h. mit Carbonsäuregruppen enthaltenden Materialien, die in der Reaktionsmischung vorhanden sein können. Es wird angenommen, daß diese Ester die weniger polaren Verunreinigungen sind, die bei der Dünnschicht-Chromatograpie in dem Z-Asp-Produkt gefunden werden. Es wurde festgestellt daß die allmähliche und gleichförmige Zugabe des Benzylchlorformiats zu dem Reaktor im Verlauf von mindestens zwei Stunden, z. B. zwei bis drei Stunden, ausreichend ist um das Molverhältnis von nicht umgesetztem Benzyichlorformiat zum Asparaginsäuresalz in der Reaktionsmischung bei weniger als 0,2 zu halten. Gleichzeitig wird dadurch die Geschwindigkeit kontrolliert, bei der eine Erwärmung der Reaktionsmischung eintritt Die bei dem Verfahren gemäß der Erfindung verwendete Asparaginsäure ist im Handel als D( —), H + ) oder DL-Isomere erhältlich. Bei dem Verfahren kann jedes dieser Isomeren verwendet werden. Bei der Herstellung von Süßstoffen ist das L(+)-Stereoisomere bevorzugt, die DL-Isomerenmischung ist weniger bevorzugt

Beim Verfahren gemäß der Erfindung wird Benzylchlorformiat zu einer wäßrigen Lösung eines Aikalisalzes von Asparaginsäure zugegeben. Diese wäßrige Lösung kann man herstellen, indem man Alkalihydroxid zu einer wäßrigen Aufschlämmung der Säure hinzugibt. Unter Alkalisalzen sind beim Verfahren der Erfindung insbesondere Natrium- und Kaüurnsalze zu verstehen. Um eine wäßrige Lösung des Alkalisalzes der Asparaginsäure mit dem gewünschten pH von 10,75 bis 11,75 zu erhalten, ist es erforderlich, ein Alkalihydroxid, das sich bevorzugt von Natrium oder Kalium ableitet, der wäßrigen Lösung zuzugeben.

Bei der Herstellung der Salze aus der Asparaginsäure ist es zweckmäßig, die Asparaginsäure im Wasser aufzuschlämmen und danach z. B. wie bei einer Titration die Alkalihydroxidlösung zuzugeben, bis das gewünschte pH erreicht ist. Es ist jedoch auch möglich, die

Reaktion zu langsam, um in der Technik verwendbar zu sein.

Das als Ausgangsstoff verwendete Benzylchlorformiat ist im Handel erhältlich. Es wird der Reaktionsmischung langsam und unter Rühren zugegeben, um die Anwesenheit von überschüssigem Benzylchlorformiat an einzelnen Stellen der Reaktionsmischung zu vermeiden. Das Rühren sollte deshalb ausreichen, um eine schnelle und innige Berührung zwischen den Ausgangsstoffen herbeizuführen. In einer bevorzugten Ausführungsform ist die Geschwindigkeit der Zugabe von Benzylchlorformiat derartig, daß das Molverhäitnis droxid einzuführen. Die Asparaginsäure wird dabei unter Bildung ihres Alkalisalzes, das wasserlöslich ist. neutralisiert Um den gewünschten pH-Wert zu erreichen, ist eine geringfügig höhere Menge an Alkalihydroxid als die stöchiometrische Menge (2 Mol Alkalihydroxid auf 1 Mol Asparaginsäure) erforderlich. Die durch Herstellung der Lösung des Salzes der Asparaginsäure erforderliche Menge an Wasser ist nicht kritisch. Überschüssige Mengen an Wasser sind aber aus wirtschaftlichen Gründen nicht erwünscht. Aus diesem Grund wird nur eine solche Menge an Wasser verwendet, daß eine Reaktionsmischung entsteht, die

leicht handhabbar ist. Beispielsweise ist ein Verhältnis von 0,55 Liter Wasser pro MoI Asparaginsäure geeignet Die Löslichkeit des Z-Asp-Produktes Li Wasser ist eine direkte Funktion der Temperatur der Lösung. Unabhängig von der Temperatur gilt, daß je mehr Wasser für die Herstellung der Lösung der Asparaginsäure verwendet wird, desto mehr Reaktionsprodukt geht verloren, wenn die wäßrige Phase der Reaktionsmischung von dem Reaktionsprodukt abgetrennt wird. Die bei dem Verfahren gemäß der Erfindung erfolgende Umsetzung wird nun am Beispiel der Herstellung des Dinatriumsalzes von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure formelmäßig erläutert:

COONa O

I 11

CH-NH₂ + ClC-OCH₂

CH₂

COONa

Dinatriumsalz von N-Ber/v'' -y^rbonylasparaginsäure COONa

+ HCl

Die Umsetzung des N-. · -""nsalzes von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure mu einem weiteren Mol des Natriumsalzes der Asparaginsäure ergibt nach der Ansäuerang die unerwünschte Verunreinigung N-Benzyloxycarbonylasparaginylasparaginsäure (Z-Asp-Asp).

COOH

CH- NHCOOCH;

CH₂ COOH

CONH-CH

CH,

COOH
N-Benzyloxycarbonylasparaginylasparaginsäure

In der vorstehenden Formel wird Z-Asp-Asp als /?-Amid gezeigt, obwohl angenommen wird, daß die Verunreinigung sowohl als cc- als auch als /?-Amid vorliegt

Bei dem Verfahren der Erfindung wird N-Benzyloxycarbonyiasparaginsäure im wesentlichen frei von N-Benzyioxycarbonylasparaginylasiaraginsäure hergestellt; in der Regel enthält sie weniger als 0,2 Gew.-% dieser Verunreinigung. Außerdem enthält die so hergestellte N-Benzylojiycarbonylasparaginsäure nur geringe Mengen an sideren Verunreinigungen, d.h. weniger als 0,5, inder Rpgel weniger als 0,2 Gew.-°/o von anderen organischen Verunreinigungen, d.h. Stoffen, die weniger polar und polarer sind als Z-Asp (bestimmt durch Dünnschicht-Chromatographie). Bei Anwendung der bevorzugter: Reaktionsbedingungen wird ein Z-Asp-Reaktionsprodukt erhalten, das weniger als etwa 0,1 Gew.-% Z-Asp-Asp enthält.

Das Z-Asp-Prcdukt, das nach dem Verfahren der Erfindung hergestellt wird, ist im wesentlichen rein, d. h. daß es mindestens 97 Gew.-% Z-Asp enthält Häufig liegt der Reinheitsgrad des: Prödulctes bei 98 oder 99 Gew.-^o. Äußer Z-Asp-Asp und den bereits erwähnten organischen Verunreinigungen kann das Z-Asp-Produkt kleine Mengen (nicht mehr als etwa 1 Gew.-%) an Alkalisalzen, wie Natrium- oder Kaliumchlorid, und Wasser enthalten. Der Anteil des Alkalisalzes, der in dem Z-Asp-Produkt verbleibt, läßt sich zum Teil durch 20- die Gründlichkeit des Waschens des Produktes, z. B. mit Wasser, nach seiner Abtrennung steuern.

Nach Beendigung der Zugabe jn Benzylchlorformiat zur Reaktionsmischung wird das Rühren und die Zugabe von Alkalihydroxid fortgesetzt, bis eine vollständige Umsetzung des Benzylchlorformiats eingetreten ist Um die Beendigung der Reaktion zu erreic! ;n, werden in der Regel in Abhängigkeit von der Geschwindigkeit der Zugabe des Benzylchlorformiats 0,5 bis 1 Stunde benötigt Das Ende der Reaktion ist an der Stabilisierung des pH-Wertes der Reaktionsmischung zu erkennen. Unter Stabilisierung des pH-Wertes wird verstanden, daß kein zusätzliches Alkalihydroxid erforderlich ist, um den pH-Wert der Reaktionsmischung innerhalb des gewünschten Bereiches zu halten.

Die Reaktionsmischung wird dann unter Kühlen auf einen pH-Wert zwischen etwa 1,5 und 2,5 eingestellt, um das Alkalisalz des Z-Asp-Produktes in die freie Säure umzuwandeln. Beispiele von geeigneten Säuren sind Salzsäure und Schwefelsäure. Salzsäure wird bevorzugt, um kein weiteres Anion in das Reaktions»nedium einzuführen. Es wird ausreichend gekühlt, um die Neutralisationswärme zu kompensieren.

Das Z-Asp-Produkt kristallisiert in Form der freien Säure aus der angesäuerten Reaktionsmis-'hung aus und

4t wird von der Mutterlauge durch übliche Maßnahmen. z. B. durch Filtrieren oder Zentrifugieren, abgetrennt. Das abgetrennte weiße körnige Z-Asp-Produkt wird mit Wasser gewaschen, um Alkalisalz zu entfernen und wird bei Temperaturen unterhalb seiner Zersetzungstemperatur getrocknet. Das Waschen des abgeschiedenen feuchten Z-Asp-Produktes mit etwa der gleichen Wassermenge (größere Wassermengen können gegebenenfalls verwendet werden) und das Trocknen ^:m Vukuum oder in einem Luftumwälzofen bei 40⁰C ist ausreichend, um ein im wesentlichen reines Produkt zu erhalten.

Das Verfahren der Erfindung wird in de», folgenden Beispielen näher erläutert.

Beispiel 1

In einen Mehrhalsrundkolben, der mit einem Thermo- - meter, sinem mechanischen Rührer, einem Zugabetrichter, einem Fühler und einer pH-Mefisirtrichtung ausgerüstet war, wurden 550 ml Wasser und 133 g L-Asparäginsäuri gegeben; Die erhaltene Aufschlämmung wurde mit 50%igem wäßrigem Natriumhydroxid auf einen pH-Wert von 10,78 eingestellt, wobei ein Beckman Modell 3500 Digita!-pH-meter verwendet

wurde. Die erhaltene Lösung wurde bei 20⁰C gehalten und es wurden 175,3 g E^nzylchlorformiat (97%ig) langsam unter Rühren im Verlauf von zwei Stunden zugegeben. Das pH der Lösung wurde durch gleichzeitige Zugabe von 50%igem wäßrigem Natriumhydroxid im Bereich von 11,5 bis 11,75 gehalten. Während eines Zeitraumes von 7 Minuten (etwa in der Mitte der Zugabe des Benzylchlorformiats) überschritt der pH-Wert der Lösung 11,75 und erreichte ein Maximum von 12,38. Der pH-Wert wurde dann aber auf den gewünschten Bereich eingestellt

Nach der Zugabe des Benzylchlorformiats wurde die Reaktionsmischung gerührt, bis sich das pH stabilisiert hatte (etwa 5 Minuten). Die Reaktionsmischung wurde dann bei 5 bis 10⁸C gehalten und es wurde konzentrierte Salzsäure zugegeben, bis ein pH von 1,7 erreicht worden war. Das gebildete kristalline Produkt wurde abfiltriert und der Filterkuchen wurde einmal mit der gleichen Menge Wasser gewaschen. Ein Tei! des gewaschenen Filterkuchens wurde in einem Luftumwälzofen bei 40°C Ober Nacht getrocknet. Die Analyse des Produktes

ι durch Flüssig-Chromatographie zeigte folgendes Er- ! gebnis:

N-Benzyloxycarbonylasparagin- r>

säure (Z-Asp) 100,7 Gew.-%

N-Benzyloxycarbonylasparaginylasparaginsäure (Z-Asp- Asp) 0.17 Gew.-°/o

Benzylalkohol 0.03 Gew.-%

JO

Es wurde ferner festgestellt, daß das getrocknete Produkt etwa 0.15 Gew.-% Natriumchlorid. 0,05 Gew.-% Wasser enthielt und zu 983% aus Z-Asp bestand Es waren nur Spurenmengen (nicht mehr als geschätzt 0,5 Gew-%) von weniger polaren und J5 polareren Verunreinigungen bei der Dünnschicht-Chromatographie feststellbar. Es wurden insgesamt 2493 g des gewaschenen und getrockneten Produkt* erhalten, was einer Ausbeute von 93.6% entspricht

Vergleichsversuch 1

Es wurde die Arbeitsweise von Beispiel 1 wiederholt, mit der Ausnahme, daß die Reaktionsmischung bei einem pH im Bereich von 12 bis 13,5 und die Temperatur bei 25°C gehalten wurde. Die Mengen der Ausgangs-45 stoffe waren:

50

L- Asparaginsäure	3325 g
Benzylchlorformiat	43.4 g und
Wasser	155 ml

Das Benzylchlorformiat wurde in den Reaktionskolben im Verlauf von 1,5 bis 2 Stunden eingeführt Die Analyse des getrockneten Z-Asp-Produktes zeigte an, daß 83,5 Gew.-% Z-Asp, 0,02 Gev/.-% Z-Asp-Asp und etwa 6 Gew.'% Benzylalkohol vorhanden waren. Die Dünnschicht-Chromatographie zeigte einen größeren Anteil an weniger polaren bis unpo!aren Verunreinigungen im Vergleich zu Beispiel 1 an. Die Ausbeute betrug 68%.

Vergieichsversuch 2

Die Arbeitsweise von Vergleichsversuch 1 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß das pH der Reaktionsmischung im Bereich von 7 bis 9 gehalten wurde. Die angesäuerte Reaktionsmischung war ölartig und kristallisierte nicht leicht aus. Die Mischung wurde über Nacht stehengelassen und es schied sich ein gummiartiges Material ab. Die Ausbeute des getrockneten Produktes war niedrig und es wurde gefunden, daß dieses Produkt 513 Gew-% Z-Asp, 9.08 Gew.-% Z-Asp-Asp und 3,05 Gew.-% Benzylalkohol enthielt Die Dünnschicht-Chromatographie zeigte an, daß das Reaktionsprodukt nennenswerte Mengen an polaren Und auch weniger polaren bis unpolaren Verunreinigungen als das Produkt von Beispiel 1 enthielt

Vergleichsversuch 3

Die Arbeitsweise von Vergieichsversuch I wurde wiederholt mit der Ausnahme, daß das pH im Bereich von 11,0 bis 11,75 gehalten wurde und das Benzylchlorformiat auf einmal zugegeben wurde. Die Analyse des getrockneten Produktes ergab 87 Gew.-% Z-Asp, 0,24 Gew.-% Z-Asp-Asp und 032 Gew.-% Benzylalkohol. Bei der Dünnschicht-Chromatographie wurde im Vergleich zu dem Produkt des Beispiels 1 ein größerer Anteil an weniger polaren bis unpolaren Verunreinigungen gefunden.

Vergleichsversuch 4

Die Arbeitsweise von Beispiel 1 wurde wiederholt, mit der Abweichung, daß das pH im Bereich von 10 bis 10.2 gehalten wurde und daß die Menge der Ausgangsstoffe wie folgt war: 66.5 g L-Asparaginsäure, 873 g Benzylchlorformiat und 310 m! Wasser. Die Analyse des getrockneten Produktes hatte folgendes Ergebnis: 97.6 Gew.-% Z-Asp und 037 Gew.-% Z-Asp-Asp. Die Dünnschicht-Chromatographie zeigte etwa die gleiche Menge an weniger polaren bis unpolaren Verunreinigungen, wie bei dem Produkt von Betspiel 1.

Claims

Patentansprüche:

t. Verfahren zur Herstellung von N-Benzyloxycarbonylasparaginsäure, die im wesentlichen Frei 5 von N-Benzyloxycarbonyiasparaginylsäure ist, durch Umsetzung von Asparaginsäure mit Benzylchlorfonniat, dadurch gekennzeichnet, daß man

IO

(a) eine stöchiometrische Menge Benzylchlorformiat allmählich in eine wäßrige Lösung eines Alkalisalzes von Asparaginsäure bei einer Temperatur zwischen 10 und45°C einführt und dabei das pH der wäßrigen Lösung durch gleichzeitige Zugabe von Alkalihydroxid bei 10,75bisll,75hält,

(b) die erhaltene Reaktionsmischung ansäuert und
{c) die N-Benzyioxycarbonylasparaginsäure abtrennt.