NO143940B - Fremgangsmaate ved fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenyl-alaninalkylestere - Google Patents

Fremgangsmaate ved fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenyl-alaninalkylestere Download PDF

Info

Publication number
NO143940B
NO143940B NO743957A NO743957A NO143940B NO 143940 B NO143940 B NO 143940B NO 743957 A NO743957 A NO 743957A NO 743957 A NO743957 A NO 743957A NO 143940 B NO143940 B NO 143940B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
aspartyl
phenylalanine
formyl
protected
mol
Prior art date
Application number
NO743957A
Other languages
English (en)
Other versions
NO743957L (no
NO143940C (no
Inventor
Gerald L Bachman
Marvin L Oftedahl
Billy D Vineyard
Original Assignee
Monsanto Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Monsanto Co filed Critical Monsanto Co
Publication of NO743957L publication Critical patent/NO743957L/no
Publication of NO143940B publication Critical patent/NO143940B/no
Publication of NO143940C publication Critical patent/NO143940C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • C07K5/06121—Asp- or Asn-amino acid the second amino acid being aromatic or cycloaliphatic
    • C07K5/0613—Aspartame
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/801—Peptide sweetners

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Seasonings (AREA)

Description

Oppfinnelsen angår en fremgangsmåte ved fremstilling av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere. ct-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere, spesielt methylesteren, er velkjente som søt-ningsmidler.
a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere er blitt fremstilt syn-tetisk ved bruk av L-fenylalaninalkylestere som reaktanter. Disse metoder for fremstilling av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere har vært meget kompliserte og kostbare og ført til høye fremstill-ingsomkostninger.
Det tas ved oppfinnelsen sikte på å tilveiebringe en ny syntese for fremstilling av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere under til-veiebringelse av nye utgangsforbindelser for fremstilling av disse.
Oppfinnelsen angår således en fremgangsmåte ved fremstilling
av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere som er særpreget ved at et N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid omsettes med L-fenylanalin under dannelse av N-beskyttet a-L-aspartyl-L-fenylalanin, idet det anvendes et N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid med en N-beskyttende gruppe bestående av formyl, acetyl, benzoyl, substituert og usubstituert carbobenzoxy, t-butoxycarbonyl eller hydrohalogenidsaltene, og den beskyttende gruppe fjernes fra det dannede N-beskyttende a-L-aspartyl-L-fenylalanin under dannelse av a-L-aspartyl-L-fenylalanin som forestres med en alkanol med 1-3 carbonatomer under dannelse av den tilsvarende a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylester som utvinnes.
Av nye forbindelser som er nyttige for utførelse av den foreliggende fremgangsmåte kan nevnes de N-beskyttede a-L-aspartyl-L-f enylalaniner. Av disse er den foretrukne forbindelse N-formyl-a-L-aspartyl-L-fenylalanin gjort til gjenstand for en avdelt patentsøknad. Den foreliggende fremgangsmåte ved fremstilling av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere kan forløpe som følger:
I de ovenstående ligninger betyr X en amino-beskyttende gruppe og R en lavere alkylgruppe med 1-3 carbonatomer.
Det fremgår av ligningen 1) at utgangsreaktantene er et N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid og L-fenylalanin som omsettes under dannelse av N-beskyttet a-L-aspartyl-L-fenylalanin. Den amino-beskyttende gruppe kan være en hvilken som helst av de for fagmannen kjente grupper som f.eks. en formyl-, acetyl-, benzoyl-, substituert eller usubstituert carbobenzoxy eller t-butoxycarbonylgruppe eller hydrohalogenidsaltet derav. N-formyl-L-aspartinsyreanhydrid er spesielt foretrukket og kan fremstilles f.eks. som beskrevet i fransk patentskrift nr. 20^0^73 hvor N-formyl-L-aspartj_nsyre behandles med eddiksyreanhydrid i et organisk opplosningsmiddel ved en temperatur på 0-60°C. L-fenylalaninet kan lett erholdes ved hjelp av kjemisk syntese og/eller fermenteringsprosesser og anvendes vanligvis i en mengde av 2,0-0,5 mol, fortrinnsvis ca. 1,0 mol, pr. mol N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid. Et hvilket som helst opplosningsmiddel kan anvendes, forutsatt at reaktantene er opploselige i og ikke på uonsket måte reagerer med opplosningsmidlet. Som eksempler på egnede opplosnings-midler kan nevnes ethylacetat, methylpropionat, tetrahydrofuran, didxc ether, kloroform, toluen og eddiksyre. Iseddik er spesielt foretrukket.
Selv om omsetningen forloper glatt ved værelsetemperatur, kan reaksjonshastigheten okes ved å oppvarme reaksjonsblandingen. Hvis reaksjonstemperaturen imidlertid er for hoy, kan sekundære reak-sjoner, som racemisering, forekomme. Omsetningen utfores derfor fortrinnsvis ved en temperatur på under ca. 80°C, fortrinnsvis under ca. 60°C.
Den ifolge den ovenfor viste reaksjonsligning 1) erholdte reaksjonsmåsse vil inneholde det dnskede produkt (herefter betegnet som "a-formen") og et ubnsket biprodukt
(herefter betegnet som "P"-formen").
Reaksjonsproduktene med a-form og (3-form dannes overraskende nok som regel i et forhold på ca. <*>+ deler a-form pr. ca. 1 del (3-form når omsetningen utfores i iseddik ved en reaksjonstemperatur på 20-60°C. Det har vist seg at forholdsvis ren a-form da kan utvinnes fra reaksjonsmassen ved krystallisering. Dette er et spesielt fordelaktig særtrekk ved den foreliggende oppfinnelse.
Den således utvundne a-form kan omsettes i det annet trinn av den foreliggende fremgangsmåte. ^-formen som blir tilbake i den erholdte moderlut, kan behandles videre, f.eks. ved hydrolyse, for utvinning av L-aspartinsyre og L-fenylalanin som kan resirkuleres til de tidligere trinn av den foreliggende fremgangsmåte.
Reaksjonsmassen kan også inneholde begge reaksjonsprodukter
og overfores til det neste reaksjonstrinn.
Det erholdte N-beskyttede a-L-aspartyl-L-fenylalanin behandles derefter (reaksjonsligning 2) for å fjerne den beskyttende gruppe slik at a-L-aspartyl-L-fenylalanin fås. En hvilken som helst egnet metode for å fjerne beskyttende grupper fra aminer kan anvendes.
Som eksempler på slike metoder kan nevnes katalytisk hydrogenering og behandling med mineralsyrer eller -baser. Det foretrekkes å fjerne den beskyttende gruppe, spesielt formylgruppen ved hjelp av sur hydrolyse. Denne kan utfores f.eks. i en fortynnet vandig saltsyreopplosning. Omdannelsen til a-L-aspartyl-L-fenylalanin er overraskende nok meget hoy, nærmere bestemt .ca. 95%.eller derover basert på det således behandlede N-beskyttede a-L-aspartyl-L-fenylalanin. En annen væske for gjennomføring av en sur hydrolyse ut-gjores av en vandig opplosning av eh blanding av eddiksyre og saltsyre.
a-L-aspartyl-L-fenylalanin kan derefter utvinnes ved hjelp
av utfelling og væske/faststoffseparasjon. En slik utfelling kan erholdes f.eks. ved regulering av pH når den beskyttende gruppe er blitt fjernet ved hjelp av en sur opplosning. Det hovedsakelige uonskede biprodukt som er tilbake i moderluten, er j3-L-aspartyl-L-fenylalanin hvis dets forutgående forbindelse overfores som antydet ovenfor, og dette kan behandles, f.eks. ved hydrolyse, for utvinning av L-aspartinsyre og L-fenylalanin som kan resirkuleres til de tidligere trinn av den foreliggende fremgangsmåte.
Som vist ved hjelp av reaksjonsligningen 3) forestres derefter a-L-aspartyl-N-fenylalaninet med en alkanol under dannelse av en alkylester av a-L-aspartyl-L-fenylalanin.
Det for denne omsetning anvendte opplosningsmiddel kan være
et hvilket som helst organisk opplosningsmiddel, forutsatt at reåktantene er oppldselige i opplosningsmidlet og at det ikke inn-virker på den onskede omsetning. Som eksempler på egnede opp-losningsmidler kan neves alkanol,' tetrahydrofuran, methylenkloridT kloroform og benzen. En alkanol er spesielt foretrukken. Det foretrekkes at omsetningen utfores under tilstedeværelse av så lite vann saim mulig.
Det foretrekkes at forestringen utfores i et surt medium. Omsetningen kan således utfores i en alkanol som inneholder 1-10 mol, fortrinnsvis 1,05-2 mol, hydrogenklorid pr. mol a-L-aspartyl-L-fenylalanin. Fagmannen vil lett forstå at selve forestringen i virkeligheten kan foregå mellom et syresalt av a-L-aspartyl-L-fenylalanin og alkanolen, men for enkelhets skyld vil denne omsetning bli beskrevet som om den finner sted mellom a-L-aspartyl-L-fenylalanin og alkanolen.
De anvendte temperaturer bor være fra -20°C og opp til reaksjonsblandingens kokepunkt, fortrinnsvis 20-<l>4-0°C når-methanol anvendes.
Molforholdet mellom alkanol og a-L-aspartyl-L-fenylalanin
bor vanligvis være 0,5-50, fortrinnsvis 1,0-10.
Ved denne forestring dannes uunngåelig de folgende-uonskede biprodukter: (herefter betegnet som "diesteren") og
(herefter betegnet som "aspartylesteren").
Foruten disse to uonskede biprodukter, vil reaksjonsblandingen også inneholde uomsatt a-L-aspartyl-L-fenylalanin. Omsetninger som forer til det onskede produkt og til biprodukter, er alle likevekts-reaksjoner. Det har nu vist seg at omsetningene forer til en sterk dannelse av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylester når forestringen f.eks. utfores i methanol i nærvær av l.mol, som regel 1,1 mol, hydrogenklorid pr. mol a-L-aspartyl-L-fenylalanin. Ved ca. værelsetemperatur omdannes så meget som h0- h5% av a-L-aspartyl-L-f enylalaninet til a-L-aspartyl-L-fenylalaninmethylesteren.
a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylesteren kan derefter utvinnes.. Dette kan gjores f.eks. ved delvis å noytralisere den erholdte reaksjonsblanding for utfelling av uomsatt a-L-aspartyl-L-fenylalanin som derefter kan utvinnes ved hjelp av faststoff/vasske-separeringsmetoder. Den erholdte oppldsning kan derefter videre-behandles, f.eks. ved destillasjon for å fjerne uomsatt alkanol,, Den gjenværende reaksjonsblanding kan derefter behandles for utvinning av det onskede produkt, f.eks. ved behandling med en saltsyreopplosning, hvorved hydrokloridsaltet av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylesteren vil felles ut. Hydrokloridsaltet kan derefter
utvinnes og omdannes til det onskede produkt.
Det har overraskende vist seg at hydrokloridsaltet av a-L-aspartyl-L-f enylalaninalkylesteren er betraktelig mindre opp-ldselig enn de andre ovennevnte forbindelser og at det derfor lett kan fraskilles og utvinnes i denne form ved hjelp av faststoff/væske-separasjon. Praktisk talt alle de ovrige forbindelser blir tilbake i moderluten og kan hydrolyseres til a-L-aspartyl-L-fenylalanin som kan utvinnes og/eller resirkuleres til forestringsreaksjonen.
Oppfinnelsen er nærmere beskrevet i de nedenstående eksempler.
De materialer og metoder som ble anvendt for tyntskiktskroraa-tografi (TSK)-analysene i eksemplene, var som folger:
A. Plate
Siliciumdioxyd F på glassplate erholdt fra Brinkman Instru-ment Inc., Westbury, N.Y. 11590 (siliciumdioxydgel).
B. Op<p>losningsmiddelsystemer
C. Påvisningssproyteopplosninger
1. 0,3 g ninhydrin opplost i en blanding av 100 ml n-buta-nol og 3 ml iseddik. 2. 1 g kaliumiodid og 1 g opploselig stivelse opplost i 100 ml destillert vann.
D. Metoder
Efter flekkdannelse dg fremkalling i det egnede opplosnings-middelsystem ble platen tdrket i 30 min. i luft.
Ninhydrindusj - Platen ble dusjet og holdt i 15 minutter i en ovn ved en temperatur på 100°C.
Stivelse/ jodiddus. i - Platen ble holdt i 15 minutter i et kammer som var mettet med t-butylhypoklorittdamp, torket i 30 min.. L luft og derefter dusjet med en nylaget stivelse/jodidopplosning.
Eksempel 1
Fremstilling av N- formyl- q- L- aspartyl- L- fenylalanin.,,
3^,6 g (0,21 mol) L-f enylalanin ble i lopet av ca. k- 5 minutter satt til en blanding av 30 g (0,21 mol) N-formyl-L-aspartinsyreanhydrid og 300 g iseddik i en egnet reaksjonsbeholder ved en temperatur på <1>+5-50°C. Den erholdte blanding ble holdt på denne temperatur i ytterligere 30 minutter og derefter avkjolt til 25°C. Det dannede krystallinske produkt ble utvunnet ved filtrering og vasket med 50 g iseddik. Utbyttet av N-formyl-a-L-aspartyl-L-fenylalanin var ^-0,5 g og dets smeltepunkt l80-l82°C. TSK-analyser av dette produkt ga ingen påvisbar forurensning av p-formen.
Eksempel 2
288 g (2,82 mol) eddiksyreanhydrid ble i lopet av ca. <*>*5 min. og ved en temperatur på 25°C satt til h- 28 g 97%- lg maur syre i en egnet reaksjonsbeholder, og den erholdte blanding ble holdt på denne temperatur i ytterligere <>>+5 min. l<>>+7 g (1,1 mol)- L-aspartinsyre ble satt til reaksjonsbeholderen. Den erholdte opplosning ble omrdrt i ca. 3,5 timer mens den ble holdt på en temperatur av 25°C. Et eventuelt overskudd av maursyre ble fjernet ved fraksjonert destillasjon. Tilstrekkelig iseddik ble tilsatt slik at det samlet var tilstede 972 g iseddik. 17^ g (1,05 mol) L-fenylalanin ble ved hjelp av et skruepåmatningsapparat tilfort i lopet av hj min. ved• en temperatur på 50°C. Den erholdte masse ble holdt på 50°C i 30 minutter og derefter avkjolt til 25°C. Det krystallinske N-formyl-a-L-aspartyl-L-fenylalanin ble oppsamlet på en sentrifuge og vasket med 200 cm<3> iseddik. Sluttorrvekten for produktet var 178 g og dets smeltepunkt l82-l8<l>f<0>C. Tyntskiktskromatografi antydet at produktet i det vesentlige besto av rent N-formyl-a-L-aspartyl-L-fenylalanin og at ingen påvisbare mengder av (J-formen var tilstede.
Eksempel 3
Fremstilling av a- L- aspartyl- L- fenylalanin
En blanding av 100 g (0,322 mol) N-formyl-a-L-aspartyl-L-formylalanin.og ^9,7 g 37%- ig HC1 (0,67 mol) i 392 cm<3> vann ble
oppvarmet i h-5 timer ved 60°C. Den erholdte opplosning ble delvis noytralisert med 32,6 g (0,<1>*1 mol) 50%- ig NaOH og derefter avkjolt til 20-25°C. Det dannede faste produkt ble oppsamlet og vasket med 50 cm<3> vann med en temperatur på 5°C. Den forste utvundne del av a-L-aspartyl-L-fenylalanin veide 32,7 g.
Dan kombinerte moderlut og vaskevannet fra den fdrste utvinning ble ytterligere nøytralisert ved 60°C med 17,6 g (0,22 mol) 50%- ig NaOH. Reaksjonsblandingen ble avkjolt til 25°C, og den dannede faste forbindelse ble oppsamlet og vasket med 50 cm<3> kaldt vann, og dette ga ytterligere k5 g a-L-aspartyl-L-fenylalanin.
Det samlede utbytte av a-L-aspartyl-L-fenylalanin var 77,7 g • [a] po+ 30,2°, C = 0,7, 75% vandig eddiksyre. D
Eksempel h
Fremstilling av a- L- aspartyl- L- fenylalanin
286 g (2,8 mol) eddiksyreanhydrid ble i lopet av 95 min. dråpevis satt til M+l g 97%-ig maursyre i en 2 1 kolbe forsynt med en omrdrer. Efter avsluttet tilsetning ble oppldsningen omrdrt i
h5 min. ved omgivelsestemperatur. En porsjon på l1+7 g '(1,1 mol) L-aspartinsyre ble satt til denne opplosning, og omrdringen ble fort-, satt ved omgivelsestemperatur i 3,5 timer. Overskuddet av maur syre ble fjernet ved hjelp av fraksjonert destillasjon ved et vakuum på 30-60 mmHg. 2M+ g eddiksyre ble satt til resten i kolben slik at det samlet var tilstede 379 g eddiksyre.
17h g (1,05 mol) L-fenylalanin ble i lopet av 1 time tilsatt " i porsjoner til denne opplosning av N-formyl-L-aspartinsyreanhydrid ved 50°C. Reaksjonsblandingen ble omrdrt i 1,5 time ved 50°C.
Den erholdte reaks jonsblanding som inneholdt både a- og {3-formen, ble behandlet med 875 ml vann og 195 g 37%-ig saltsyre og oppvarmet i h timer ved 60°C. Produktet ble utfelt fra hydrolyseopplosningen ved tilsetning av 235,6 g av en 50%- ig natriumhydroxydoppldsning. Faststoffene ble fraskilt ved hjelp av sentrifugering og vasket med 150 ml vann. Den erholdte kake ble torket, og det ble oppnådd 1^-6, h g produkt som ved hjelp av tyntskiktskromatografi ble påvist å bestå av a-L-aspartyl-L-fenylalanin med en renhet på over 95%. [ a]20+ 27,7, P=0,9, 75% vandig eddiksyre.
D
Eksempel 5
Fremstilling- av a- L- aspartyl- L- fenylalanin
6,92 g (0,0^2 mol) L-fenylalanin ble i lopet av k5 min. tilsatt i porsjoner til en oppslemning av 6,0 g (0,0^-2 mol) N-formyl-L-aspartinsyreanhydrid i 15,1 g eddiksyre ved 50°C. Efter avsluttet tilsetning ble blandingen omrort i 30 min.'
Denne reaksjonsblanding som inneholdt både a- og p-formen,
ble behandlet med 35 ml vann og 7,8 g 37%-ig saltsyre og omrdrt i
h timer ved 60°C. Produktet ble utfelt fra hydrolyseopplosningen ved tilsetning av 8,1 g av en 50%- ig natriumhydroxydoppldsning. Faststoffene ble fraskilt ved hjelp av filtrering og vasket med 5 ml vann. Den erholdte kake ble tdrket, og det ble oppnådd 7,1 g produkt som ved hjelp av tyntskiktskromatografi ble påvist å bestå av a-L-aspartyl-L-fenylalanin,[a ]d 2 0 +29,5, C =0,8, 75% vandig eddiksyre.
Eksempel 6
0,825 g (5 millimol) L-fenylalanin ble opplost i 20 ml vann som inneholdt 0,5 g (5 millimol) triethylamin, og den erholdte opplosning ble avkjdlt i et isbad. 0,83 g (5,5 millimol) L-aspartin-syreanhydridhydroklorid ble i lopet av 5 min. satt til den avkjolte, omrdrte opplosning. Anhydridet ble straks opplost. Oppldsningen ble omrort i 2 timer ved 5°C og derefter oppvarmet til omgivelsestemperatur under omrdring.
En analyse av reaksjonsblandingen ved hjelp av tyntskikts-kromatograf i ga som resultat at blandingen inneholdt ca. 20$ a-L-aspartyl-L-fenylalanin.
Eksempel 7-
En opplosning av h6 mg (0,16 millimol) a-L-aspartyl-L-fenylalanin, 35 mg (0,18 millimol) p-toluensulfonsyremonohydrat og 0,5 ml vannfri methanol ble holdt på tilbakeldpsdestillasjonstemperaturen (6^,7°C) i 1,5 time. De erholdte utbytter, basert på den opprinnelig forekommende mengde av a-L-aspartyl-L-fenylalanin, var som folger (bestemt ved hjelp av TSK):
Eksempel 8
En opplosning av <>>+6 mg (0,16 millimol) a-L-aspartyl-L-fenylalanin, 1,1 ml av en 0,37 H H^SO^/CH^OH-oppldsning (inneholdt 0,2 millimol R^SO^) og h ml vannfri methanol ble holdt på tilbakeldps-destillas jonstemperaturen (6<1>+,7°C) i 1,5 time. De erholdte utbytter, basert på den opprinnelig forekommende mengde av a-L-aspartyl-L-fenylalanin, var som folger (bestemt ved hjelp av TSK):
Eksempel 9
En opplosning av <1>+6 mg (0,16 millimol) a-L-aspartyl-L-f enylalanin, -0^3 millimol pyrofosforsyre og 5 ml vannfri methanol ble holdt på tilbakelopsdestillasjonstemperaturen (6<l>f,7°C) i 3 timer. De erholdte utbytter, basert på den opprinnelig forekommende mengde av a-L-aspartyl-fenylanalin, var som folger (bestemt ved hjelp av
TSK):
Eksempel 10
Fremstilling av q- L- aspartyl- L- fenvlalaninmethylester
En opplosning av 1,86 g a-L-aspartyl-L-fenylalanin, 2,9 ml
2,6 n saltsyre imethanol og 7,2 ml methanol ble omrdrt ved 30°C i 2 timer. De erholdte utbytter, basert på den opprinnelig forekommende mengde av a-L-aspartyl-L-fenylalanin, var som folger (bestemt ved hjelp av TSK):
Eksempel 11
111,5 g (0,*+ mol) a-L-aspartyl-L-fenylalanin ble fylt i en egnet reaksjonsbeholder forsynt med termometer, omrdrer og kondensator. 500 ml CH^OH og 132,5 ml 3,^+2 n HC1 i methanol ble tilsatt. Blandingen ble omrdrt og oppvarmet til 30°C i 2 timer. Derefter ble. blandingen avkjolt til 25°C, og 9,5 ml (0,12 mol) 50%- ±g NaOH ble tilsatt i lopet av 15 minutter. -Denne blanding ble omrort i et is-
bad i 1 time,, og uomsatt a-L-aspartyl-L-fenylalanin ble frafiltrert. Den erholdte a-L-aspartyl-L-fenylalaninkake ble vasket med to 50 ml porsjoner av isavkjdlt methanol. Den vaskede kake ble tdrket i en vakuumovn. 25 g a-L-aspartyl-L-fenylalanin (renhet ca. 90$) ble utvunnet.
575 ml methanol ble fjernet fra filtratet ved hjelp av destillasjon. 225 ml vann og <>>+l,5 ml 11%- xg HC1 (0,^-9 mol) ble derefter tilsatt, fulgt av omrdring i 2 timer ved 0-5°C. Det faste hydro-kloridsalt av a-L-aspartyl-L-fenylalaninmethylester ble frafiltrert og gjenoppldst i 610 ml vann med en temperatur på 50°C. Den erholdte oppldsnings pH ble regulert til 1+-If, 5 ved tilsetning av 17,^5 g (0,22 mol) 50%-ig NaOH og omrdrt i 2 timer ved 5°C, og oppløsningen ble filtrert og filterresten vasket med fem 30ml porsjoner vann med en temperatur på 0-5°C. g-L-aspartyl-L-fenylalaninmethylesteren ble tdrket i en vakuumovn. Utbyttet var 33,65 g, og produktet hadde en renhet på over 98% (bestemt ved hjelp av TSK).
Eksempel 12
Fremstilling av a- L- aspartyl- L- fenylalaninmethylester
En opplosning av 22,3 g a-L-aspartyl-L-fenylalanin, 2^,3 ml 3,76 n saltsyre i methanol og 25 ml methanol ble omrdrt ved 30° C i 1,5 time. Efter at forestringsreaksjonen var avsluttet, ble 2,85 g av en 50%- ig natriumhydroxydoppldsning dråpevis tilsatt i lopet av 12 minutter for å utfelle uomsatt a-L-aspartyl-L-fenylalanin. Reaksjonsblandingen ble omrdrt i <*>+5 minutter ved værelsetemperaturc Det krystallinske a-L-aspartyl-L-fenylalanin ble fjernet ved hjelp av filtrering. a-L-aspartyl-L-fenylalaninkaken ble vasket med to 10 ml porsjoner av methanol og tdrket, og det ble oppnådd et utbytte på 6,5 g a-L-aspartyl-L-fenylalanin (med en renhet på ca. 90% bestemt ved hjelp av TSK).
Filtratet og vaskeoppldsningene ble tilbakefdrt til reaksjonsbeholderen, og methanolen ble fjernet ved hjelp av destillasjon under vakuum. Efter destillasjonen ble det til resten tilsatt h$ ml vann og 8,3 ml 37%-ig saltsyre. Reaksjonsblandingen ble omrdrt i 1,5 time ved 0-5°C, og det faste hydrokloridsaJt av a-L-aspartyl-L-fenylalaninmethylester ble utvunnet ved hjelp av filtrering.
Den utvundne kake ble opplost i 120 ml vann med en temperatur på 50°C, og den erholdte oppldsnings pH ble regulert til <*>+,5 ved tilsetning av 3,2 g av en 50%-ig natriumhydroxydoppldsning. Den erholdte blanding ble omrdrt i 1,5 time ved 0-5°C, og den utfelte a-L-aspartyl-L-fenylalaninmeth<y>lester ble utvunnet ved hjelp av filtrering. Den utvundne kake ble vasket med fem 6 ml porsjoner vann med en temperatur på 0-5°C og derefter tørket. Det ble oppnådd 6,7 g a-L-aspartyl-L-fenylalaninmethylester med. en renhet på over 98% bestemt ved hjelp av TSK.

Claims (5)

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylestere, karakterisert ved at et N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid omsettes med L-fenylalanin under dannelse av N-beskyttet a-L-aspartyl-L-fenylalanin, idet det anvendes et N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid med en N-beskyttende gruppe bestående av formyl, acetyl, benzoyl, substituert og usubstituert carbobenzoxy, t-butoxycarbonyl eller hydrohalogenidsaltene, og den beskyttende gruppe fjernes fra det dannede N-beskyttede a-L-aspartyl-L-fenylalanin under dannelse av a-L-aspartyl-L-fenylalanin som forestres med en alkanol med 1-3 carbonatomer under dannelse av den tilsvarende a-L-aspartyl-L-f enylalaninalkylester som utvinnes.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisert ved at det som N-beskyttet L-aspartinsyreanhydrid anvendes N-formyl-L-aspartinsyreanhydrid.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at N-formyl-L-aspartinsyreanhydridet omsettes med L-fenylalanin i nærvær av iseddik.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at N-formyl-a-L-aspartyl-L-fenylalaninet hydrolyseres med en vandig oppløsning av hydrogenklorid.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 1-4, karakterisert ved at a-L-aspartyl-L-fenylalaninalkylesteren utvinnes som hydrokloridsaltet.
NO743957A 1973-11-05 1974-11-04 Fremgangsmaate ved fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenyl-alaninalkylestere NO143940C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US05/412,928 US3933781A (en) 1973-11-05 1973-11-05 Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine alkyl esters

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO743957L NO743957L (no) 1975-06-02
NO143940B true NO143940B (no) 1981-02-02
NO143940C NO143940C (no) 1981-05-13

Family

ID=23635037

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO743957A NO143940C (no) 1973-11-05 1974-11-04 Fremgangsmaate ved fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenyl-alaninalkylestere
NO803386A NO145273C (no) 1973-11-05 1980-11-11 N-formyl-alfa-l-aspartyl-l-fenylalanin for anvendelse til fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenylalaninalkylestere

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO803386A NO145273C (no) 1973-11-05 1980-11-11 N-formyl-alfa-l-aspartyl-l-fenylalanin for anvendelse til fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenylalaninalkylestere

Country Status (17)

Country Link
US (1) US3933781A (no)
JP (1) JPS5526133B2 (no)
BE (1) BE821825A (no)
BR (1) BR7409198A (no)
CA (1) CA1020159A (no)
CH (1) CH605678A5 (no)
DE (1) DE2452285C3 (no)
DK (1) DK573674A (no)
FR (1) FR2249872B1 (no)
GB (2) GB1464140A (no)
HU (1) HU170725B (no)
IT (1) IT1025399B (no)
NL (1) NL7414280A (no)
NO (2) NO143940C (no)
SE (2) SE7413807L (no)
SU (1) SU544367A3 (no)
ZA (1) ZA747077B (no)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5223001A (en) * 1975-08-14 1977-02-21 Ajinomoto Co Inc Process for elimination of formyl group
US4173562A (en) * 1976-12-27 1979-11-06 Monsanto Company Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester
MX4704E (es) * 1976-12-27 1982-08-04 Monsanto Co Procedimiento mejorado para la preparacion de ester metilico de alfa-l-aspartil-l-fenilalanina
JPS5535059A (en) * 1978-09-05 1980-03-11 Ajinomoto Co Inc Preparation of lower alkyl ester of alpha-l-aspartyl-l- phenylalanine
US4333872A (en) * 1980-05-27 1982-06-08 Chimicasa Gmbh Method of producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine methylester
JPS57131746A (en) * 1981-02-10 1982-08-14 Ajinomoto Co Inc Removal of n-formyl group
IT1194795B (it) * 1981-05-13 1988-09-28 Pierrel Spa Procedimento per la eliminazione del gruppo n-formile da peptidi n-formilati e da esteri di peptidi n-formilati
JPS58185545A (ja) * 1982-04-22 1983-10-29 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルまたはその塩酸塩の製法
IT1155060B (it) * 1982-09-02 1987-01-21 Sirac Srl Procedimento per la preparazione di esteri alchilici della alfa-l-aspartil-l-fenilalanina
JPS59219258A (ja) * 1983-05-28 1984-12-10 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製法
JPS59225152A (ja) * 1983-06-02 1984-12-18 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製法
US4480112A (en) * 1983-06-20 1984-10-30 G. D. Searle & Co. Method and intermediates for producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine
US4440677A (en) * 1983-06-20 1984-04-03 G. D. Searle & Co. Method and intermediates for producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine
GB8321802D0 (en) * 1983-08-12 1983-09-14 Erba Farmitalia Aspartame synthesis
JPS6075497A (ja) * 1983-09-30 1985-04-27 Ajinomoto Co Inc Ν−保護−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの製造法
JPH07636B2 (ja) * 1984-12-17 1995-01-11 三井東圧化学株式会社 Ｎ−ホルミル−α−アスパルチルフエニルアラニンの製造法
ES8703487A1 (es) * 1984-12-27 1987-03-01 Mitsui Toatsu Chemicals Procedimiento para la preparacion de a-l-aspartil-l-fenila- lanina metil ester
JPH0680074B2 (ja) * 1985-07-01 1994-10-12 味の素株式会社 Ｎ―ホルミル―Ｌ―α―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンの製法
AU561384B2 (en) * 1985-03-26 1987-05-07 Mitsui Toatsu Chemicals Inc. Preparation of -l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester or hydrochloride thereof
JPS6274296A (ja) * 1985-09-25 1987-04-06 Ajinomoto Co Inc α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステルの製造方法
US4730076A (en) * 1985-12-18 1988-03-08 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Process for producing α-aspartyl-phenylalanine ester
JPH0680075B2 (ja) * 1985-12-24 1994-10-12 味の素株式会社 Ｎ―ホルミル―α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステルの製造法
DE3600731A1 (de) * 1986-01-13 1987-07-16 Green Cross Korea Verfahren zur herstellung von (alpha)-l-aspartyl-l-phenylalaninmethylester
JPS6344594A (ja) * 1986-08-11 1988-02-25 Ajinomoto Co Inc Ｎ−保護−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンの分離方法
US5336601A (en) * 1986-08-18 1994-08-09 The Coca-Cola Company Enzymatic membrane method for the snythesis and separation of peptides
US5002871A (en) * 1986-08-18 1991-03-26 The Coca-Cola Company Enzymatic membrane method for the synthesis and separation of peptides
US5037741A (en) * 1986-08-18 1991-08-06 The Coca Cola Company Enzymatic method for the synthesis and separation of peptides
US5350681A (en) * 1986-08-18 1994-09-27 The Coca-Cola Company Enzymatic membrane method for the synthesis and separation of peptides
US5202235A (en) * 1986-08-18 1993-04-13 The Coca-Cola Company Enzymatic method for the synthesis and separation of peptides
JPH085912B2 (ja) * 1986-09-04 1996-01-24 味の素株式会社 Ｎ−ホルミルアスパルチル−フエニルアラニンまたはそのメチルエステルの製造方法
ES2042583T3 (es) * 1986-12-05 1993-12-16 Mitsui Toatsu Chemicals Preparacion de metil ester de alpha-l-aspartil-l-fenil-alanina o uno de sus hidrohaluros.
JPH0832719B2 (ja) * 1986-12-19 1996-03-29 三井東圧化学株式会社 吸湿性の小さいα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルの製造法
US4774027A (en) * 1987-11-13 1988-09-27 General Foods Corporation Process for the preparation of N-L-aminodicarboxylic acid esters and new compositions used in the preparation thereof
JP2611047B2 (ja) * 1988-02-12 1997-05-21 ザ ヌトラスウィート カンパニー Ｎ―ホルミル―ｌ―アスパラギン酸無水物の製造方法
BR9007646A (pt) * 1988-02-12 1992-09-15 Nutrasweet Co Processo em recipiente unico de preparacao de hidrocloreto de -apm,processo de copulacao de anidrido n-formil-l-aspartico com l-fenilalanina e processo de preparacao de isomeros de / -n-formil-l-aspartil-l-fenilalanina
US5053532A (en) * 1988-02-12 1991-10-01 The Nutra Sweet Company One-pot process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride
US5283357A (en) * 1988-03-14 1994-02-01 Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated Separation method of α-l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester
US4946988A (en) * 1988-07-14 1990-08-07 The Nutrasweet Company Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride by use of isolated N-formyl L-aspartic anhydride
US5017690A (en) * 1989-08-11 1991-05-21 W. R. Grace & Co.-Conn. Deblocking N-formyl aspartame compounds
US5183937A (en) * 1990-02-07 1993-02-02 The Nutrasweet Company Acetic acid recovery
DK0471833T3 (da) * 1990-03-12 1995-09-25 Nutrasweet Co Fremgangsmåde til forøgelse af alfa/beta-forholdet ved en aspartam-koblingsreaktion
JP2979761B2 (ja) * 1991-05-23 1999-11-15 味の素株式会社 α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造法
JP3144430B2 (ja) * 1991-08-27 2001-03-12 味の素株式会社 有機溶媒の分離方法
IT1270852B (it) * 1992-08-27 1997-05-13 Miwon Co Ltd Procedimento per la produzione dell'estere metilico di alfa-l-aspartil-l-fenilalanina.
JP3591004B2 (ja) 1994-09-28 2004-11-17 味の素株式会社 Ｎ−ホルミル−ｌ−アスパラギン酸無水物の製造方法
US6627431B1 (en) 2000-05-12 2003-09-30 The Nutrasweet Company Chemoenzymatic synthesis of neotame
CN101270092B (zh) * 2008-04-30 2010-12-08 厦门大学 一种合成纽甜的方法
WO2012014808A1 (ja) 2010-07-26 2012-02-02 味の素株式会社 ペプチドの製造方法
CN103130870B (zh) * 2011-11-30 2015-03-18 江苏维多股份有限公司 α-L-天冬氨酸-L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐的制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3786039A (en) * 1969-04-30 1974-01-15 Ajinomoto Kk Method of producing alpha-l-aspartyl-l-phenylalanine lower alkyl esters
GB1309605A (en) * 1970-01-31 1973-03-14 Ajinomoto Kk Process for producing alpha-dipeptide esters of l-aspartic acid
JPS4935607B1 (no) * 1970-08-21 1974-09-25 Takeda Chemical Industries Ltd
US3769333A (en) * 1972-08-07 1973-10-30 American Home Prod L-aspartic acid derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
JPS5071642A (no) 1975-06-13
NO803386L (no) 1975-05-06
NO145273B (no) 1981-11-09
FR2249872A1 (no) 1975-05-30
ZA747077B (en) 1975-11-26
GB1464139A (en) 1977-02-09
BE821825A (fr) 1975-05-05
NO743957L (no) 1975-06-02
DE2452285A1 (de) 1975-05-07
BR7409198A (pt) 1976-05-11
IT1025399B (it) 1978-08-10
NL7414280A (nl) 1975-05-07
NO145273C (no) 1982-02-17
HU170725B (no) 1977-08-28
NO143940C (no) 1981-05-13
DE2452285B2 (de) 1979-12-20
GB1464140A (en) 1977-02-09
SU544367A3 (ru) 1977-01-25
FR2249872B1 (no) 1978-09-15
CA1020159A (en) 1977-11-01
DE2452285C3 (de) 1980-08-21
SE7710696L (sv) 1977-09-23
CH605678A5 (no) 1978-10-13
AU7500274A (en) 1976-05-06
US3933781A (en) 1976-01-20
JPS5526133B2 (no) 1980-07-11
SE7413807L (no) 1975-05-06
DK573674A (no) 1975-07-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO143940B (no) Fremgangsmaate ved fremstilling av alfa-l-aspartyl-l-fenyl-alaninalkylestere
US4173562A (en) Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester
EP0127411B1 (en) Method of preparing alpha-l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester and its hydrochloride
US5391770A (en) Process for preparing ascorbic acid
US4966982A (en) Process for the production of lactide
IL95480A (en) Process for the preparation of cyclic amino acids and intermediates
TW201429977A (zh) 於製備式ｉ之吡啶并吡咯烯（ｐｙｒｉｐｙｒｏｐｅｎｅ）化合物之方法
HU179735B (en) Improved process for producing alpha-l-asparagyl-phenyl-alanine methyl-esters
JPS6339869A (ja) アミノチアゾリル酢酸の新規なオキシム誘導体及びその製造法
US4760164A (en) Process for producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester
US2949449A (en) Synthesis of 3, 5-diaroyl-2-deoxy-d-ribofuranosyl ureas
CA2608388A1 (en) A process for the dynamic resolution of (substituted) (r) - or (s) -mandelic acid
US2436532A (en) Production of 4-keto pimelic acid
IL25711A (en) 5,5&#39;-dinucleoside phosphates
Beyerman et al. Stereospecific synthesis and optical resolution of 5‐hydroxypipecolic acid
US3983162A (en) Optical resolution of alkyl esters of DL-phenylalanine
US4111925A (en) Hydrolysis of esters of α-L-aspartyl-L-phenylalanine
US4256897A (en) Process for the preparation of L-aspartic acid N-thiocarboxyanhydride
US3987094A (en) Preparing carboxylic acids from glycidonitriles
US2687413A (en) Preparation of alkali metal penicillinates
JP3184345B2 (ja) ５−クロロオキシインドールの製造方法
US2478788A (en) Process for preparing amino acids
EP0306936A2 (en) Process for producing aminooxyacetic acid salts
US4144239A (en) Manufacture of pyridoxin
EP0437058B1 (en) Formation of hydroxyaromatic ketoacetal from an hydroxyaromatic methylketone and production of 5-(4&#39;-hydroxyphenyl)hydantoin and D-p-hydroxyphenylglycine from 4-hydroxyacetophenone