DE2403733A1 - Neue lipopolysaccharide und verfahren zu ihrer herstellung - Google Patents
Neue lipopolysaccharide und verfahren zu ihrer herstellungInfo
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Description
Neue Lipopolysaccharide und Verfahren zu ihrer Herstellung
Lipopolysaccharide (LPS) sind hochmolekulare Bestandteile
der Zellwände gram-negativer Bakterien. Alle bekannten Lipopolysaccharide weisen im wesentlichen das gleiche Bauprinzip
auf, Und zwar besteht ein LPS-Molekül aus 3 Regionen:
den O-spezifischen Zuckerketten, dem Kempolysaccharid und
dem sogenannten Lipid A (θ. Lüderitz; Angewandte Chemie 82, 70S - 722 (1970)). Je nach ihrer Herkunft unterscheiden
sich jedoch die Lipopolysaccharide in der Ax-t und Menge
ihrer einzelnen Bausteine.
Schon in relativ geringen Mengen entwickeln Lipopolysaccharide vielfältige und intensive biologische Wirkungen. Jm Vordergrund
steht die ausgeprägte Antigen!tat der LPS. Weiterhin
ist bekannt, daß Lipopolysaccharide eine starke fiebererzeugende Wirkung besitzen. Weiterhin sind Lipopolysaccharide
in der Lage, bei Warmblütern einen hohen Interferone!ter zu
erzeugen. Eine durch LPS bewirkte Interferonindulction kann
allerdings nicht zur Heilung von Viruserkrankungen angewendet
werden, weil dazu LPS-Mengen verabreicht werden
müßten, die bereits deutlich toxische Wirkungen hervorrufen.
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Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind neue Lipopolysaccharide
aus O-spezifischen Zuckerketten, dem Kernpolysaccharid und Lipid A, welche durch den folgenden relativen
Gehalt an Fettsäuren gekennzeichnet sind: Dodecansäure 8 - 13 56, 2-OH-Dodecansäure 31 - 39 c/>, 3-OH-Decansäure
22 - 29 #, 3-OH-Dodecansäure 23 - 27 # und andere Fettsäuren
0 - 7 $.
Besonders günstige therapeutische Eigenschaften besitzen
solche der erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide, die den folgenden relativen Gehalt an Fettsäuren aufweisen:
Dodecansäure 9 - 11 $, 2-OH-Dodecansäure 33 - 37 ?a, 3-OH-Decansäure
23 - 27 #, 3-OH-Dodecansäure 2k - 2.6 <$ und andere
Fettsäuren k - 6 96.
Vie aus der folgenden Tabelle I hervorgeht, unterscheiden sich die erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide teilweise
sehr erheblich bezüglich des Gehaltes der einzelnen Fettsäuren von bekannten Lipopolysacchariden, die aus anderen
gramnegativen Bakterienstämnien gewonnen worden sind. Relativer
Gehalt an Fettsäuren bedeutet hierbei, dd3 sich die angegebenen Prozentzahlen auf den Gesamtgehalt an Fettsäuren
in dem jeweiligen Lipopolysaccharid beziehen. Der Gesamtanteil an Fettsäuren in den ex'findungsgemäßen Lipopolysacchariden
liegt im üblichen Rahmen, also zwischen etwa 10 und 18 <ji.
3/
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TABELLE I
Relativer Gehalt an Fettsäuren in
verschiedenen LPS
cn σ CD CO CjO CaJ
-J cn
| LPS aus | Dodecan- | 2-OH-Dodecan- | 3-OH-Decan- | 3_0H-Dodecan- | Andere Fett |
| säure | säure | säure | säure | säuren | |
| FH-N-845 ATCC-Nr, 21996 |
8-13 io | 31-39 96 | 22-29 io | 23-27 i> | 0-7 io |
| Ps. syncyanea | 26,2 # | 13,0 io | 18,2 i> | 29,3 io | 13,3 io |
| Ps. alcaligenes | 10,5 io | 0,0 io | 20,3 io | 34,2 $> | 35,0 # |
| PR * aerugino sa | 8,4 t | 22,8 io | 14,O 5έ | 4o,2 5ε | 15,6 # |
VJ
CD OJ
Von wenigen Ausnahmen abgesehen (LPS aus Ps, aeruginosa, A. H, Fenson, G. ¥. Grey, Biochem. J. 114, I85 (1969) und K. Ikeda,
F. Egami, J. Gen. Appl. Microbiol. 19» 115 {1973)J LPS aus
Ps. alcaligenes, B. A. Key, G. ¥. Grey, S. G. Wilkinson,
Biochem. J. 120, 559 (i97O) und LPS aus Ps. syncyanea,
S. G. Wilkinson, L. Galbraith, G. A. Lightfoot, Eur. J. Biochem.
33> 158 (1973)) enthalten Lipopolynaccliaride im Lipid A-Teil
als typische Fettsäuren u.a. Tetradecansäure (Myristinsäure)
sowie 3-OH-Tetradecansäure (ß-Hydroxy-myristinsäure), die in
Form des N-Acyl-Derivates des Glucosamine vorliegen (Microbial Toxins, Vol. IV, Edit. G. ¥einbaum, S. Kadis, S. J. AjI, Acad.
Press, New York, London, 1971, S 115 und 218). Die erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide zeichnen sich nun weiterhin dadux-ch
aus, daß sie diese Säuren nicht oder allenfalls in verschwindender Menge enthalten. Falls überhaupt andere Fettsäuren als
die in der Tabelle I angegebenen vorhanden sind, so ist deren geringer Gehalt, vor allem der niedrige Gehalt an
Hexadecansäure (Palmitinsäure; etwa 0-5 $)' characteristisch
für die erfindungsgemäßen Produkte.
Vie aus Tabelle II hervorgeht, unterscheiden sich die vorliegenden
Lipopolysaccharide auch bezüglich der Zuckerzusammensetzung von allen bekannten Lipopolysacchariden. So
-enthalten die Lipopolysaccharide aus Ps. syncyanea bedeutende Mengen an Ribose, während dieser Zucker in den erfindungsgemäßen
Lipopolysacchariden nicht oder allenfalls in nicht nennenswerten Mengen enthalten ist. Entsprechendes trifft zu
für Fukosamin, das in den Lipopolysacchariden aus Ps. aeruginosa ein wesentlicher Zuckex-bestandteil ist. Das aus
Ps. alcaligenes gewonnene LPS hingegen enthält kein Chinovosamin, während es in den erfindungsgemäßen Lipopolysacchariden
ein typischer Bestandteil ist.
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Kohlenhydratanteile in Lipopolysaccharide!!
(Absolutwerte)
cn ο co CX) CjO CaJ
LPS aus
rlukosamin
Galakt0samin
Chinovo samin
Glukose Rhamnose
Andere Zucker
FH-N-845 ATCC-Nr.21996
Ps. syncyanea
Ps. alkaligenes
Ps. aeruginosa (Ikeda)
Ps. aeruginosa (Wilkinson,Grey)
2,0-3,5
4,96 *
4-5,32 #
2,5-4,4
3,3-3,7
0,5-1,5
1,98
2,5-3.6
i,8-i1,8
2,1-2,6
2,0-3,5
6-9
0,41 #
8,2
2,4-5,3
3-6,3 10-18 ?6
Ji
Ketodesoxyoctanat 2,8-3,7 96
Ribose<0,1 #
Fukosamin<0,1 $
Fukosamin<0,1 $
Ribose 8,7 96
Keine Angaben
Keine Angaben
Fukosamin 2,2-4,5 Fukosamin
Die obigen Prozentangaben beziehen sich auf den Gehalt der
jeweiligen Zucker im gesamten Lipopolysaccharid.
Daneben enthalten die vorliegenden Lipopolysaccharide noch andere Bestandteile in geringen Mengen, wie sie auch in
bekannten Lipopolvsacchariden vorkommen, wie Alanin (. ^-1 $)
und Äthanolamin.
Die vorliegenden Lipopolysaccharide sind einheitlich farblose Substanzen, in denen weniger als etwa 0,05 % Nukleinsäuren
enthalten sind. Untersucht man die erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide gelöst in 0,25 $ Natriumdodecylsulfatlösung
mit Hilfe einer analytischen Ultrazentrifuge, so stellt man
fest, daß die Substanz einheitlich ist und daß das Molekulargewicht in der Größenordnung zwisqhen 15·000 und 25*000
liegt. Das scheinbare Molekulargewicht reiner wässriger Lösungen liegt dagegen bei mehreren Millionen. Die neuen
Lipopolysaccharide werden erhalten, indem man Ps. aeruginosa FH-N-8^5 (ATCC-Nr. 21996) seine Varianten oder Mutanten in
einem Nährmedium in an sich bekannter Veise züchtet und aus den Bakterienzellen die Lipopolysaccharide in an sich bekannter
¥eise gewinnt.
Eine Kultur dieses Organismus wurde bei der American Type Culture Collection unter der Nummer ATCC-21996 hinterlegt.
Der Bakterienstamm wird in einem Nährmedium der üblichen
Zusammensetzung (assimilierbare Kohlenstoff- und Stickstoffquelle sowie Spurenelemente) angezüchtet, worauf mit dieser
Vorkultur ein Fermentationsmedium gleicher Zusammensetzung angeimpft wird. Die Fermentation erfolgt bei Temperaturen
zwischen etwa 25 und 35 vorzugsweise bei etwa 28 - 30 C,
Nach genügendem ¥achstum wird die Zellraasse gewonnen, was durch Filtrieren in Gegenwart eines Filterhilfsmittels
oder vorteilhafter durch Zentrifugieren geschehen kann.
Anschließend wird die Zellmasse zveckmäßigerweise mit einem
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mit Wasser mischbaren Lösungsmittel, vorzugsweise mit einer
Chloroform-Methanol-Mischung, versetzt und erneut zentrifugiert. Hierbei werden die Bakterien zum größten Teil abgetötet,
entfettet und getrocknet. Die Gewinnung der Lipopolysaccharide aus der getrockneten Zellmasse erfolgt nach literaturbekannten
Verfahren (θ. ¥estphal, O. Lüderitz, Angew. Chem. 66, kOJ
(1951O J O· Lüderitz, Angew. Ghem. 82, 708 (1970)? Z. Naturforsch.
7b, 148 (1952); Wilkinson, et al. Eur. J. Biochem. 33»
158 (1973)). Die LPS kann durch Extraktion mit heißem Wasser,
Mischungen von Diäthylenglycol oder Pyridin mit Wasser oder mit wässriger Trichloressigsäure gewonnen werden. Am vorteilhaftesten
erfolgt die Gewinnung der rohen Lipopolysaccharide durch Extraktion mit Phenol-Wasser-Mischungen
bei erhöhter Temperatur (etwa 6O - 70 C).
Die so erhaltenen rohen Lipopolysaccharide werden dann von niedermolekularen Beimengungen getrennt, was durch Fällen
mit wasserlöslichen organischen Lösungsmitteln, Dialyse oder Ultrafiltration geschehen kann. Ss ist weiterhin
vorteilhaft, die in den Lipopolysacchariden als Beimengungen enthaltenen Nukleinsäuren durch enzyinatisehen Abbau mit
Ribo-nukleasen bzw. Desoxy-ribonukleasen zu entfernen.
Weiterhin ist es vorteilhaft, die wässrigen LPS-Lösungen kurz zum Sieden zu erhitzen, wodurch eine Sterilisation
und eine leichtere Abzentrifugierbarkeit vieler Verunreinigungen erreicht wird. Anschließend kann dann mit Hilfe
einer Ultrazentrifuge fraktioniert zentrifugiert werden. Weitet- werden sehr gute Reinigungserfolge durch Anwendung
der Gelchronomatographie z. B. an Sepharose erreicht. Die erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide sind in der Ultrazentrifuge
bei 180 000 g sedimentierbar.
Die neuen Lipopolysaccharide zeichnen sich gegenüber den bekannten
Lipopolysacchariden dadurch aus, daß bereits in sehr geringen Dosen, die 100 mal kleiner als die zur Erhöhung des
Interferonspiegels erforderlichen sind, durch deren Applikation
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eine sehr intensive Schutzwirkung gegen viele Viruserkrankungen (hervorgerufen durch Infektion mit beispielsweise
Influenza A , A2 oder B/Lee, Columbia SK, Encephalomyocarditis,
Visicular stomatitis, Herpes Simplex 1, "\accinia P7i) erreicht
werden kann. Außer zur Prophylaxe können die erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide auch zur Therapie angewendet
werden, obwohl hier deren Wirkung geringer ist.
Der therapeutische Index der neuen Lipopolysaccharide ist also erheblich größer als der der bekannten Substanzen.
Die erfindungsgemäßen Lipopolysaccharide kommen zusammen mit den üblichen pharmazeutischen Trägern zur Anwendung z. B. in
Form von Sprays für die nasale Anwendung oder in Form wässriger Injektionslösungen. Die Dosis liegt im allgemeinen
zwischen 10 und 100 mcg/kg Körpergewicht.
Der Stamm Pseudomonas aeruginosa FH-N-845 wird auf Schrägagarröhrchen
mit einem Nährboden folgender Zusammensetzung geimpft:
.1,0 56 Glucose 0,4 $0 Caseinpepton
0,4 96 Fleischextrakt 0,1 i» Hefeextrakt
0,2596 NaCl
0,1 96 Leberextrakt 1,8 $> Agar pH 7,0 - 7,2
0,1 96 Leberextrakt 1,8 $> Agar pH 7,0 - 7,2
Das geimpfte Röhrchen wird 24 Stunden bei 30° C bebrütet und danach bei Zimmertemperatur gehalten.
Zur Abschwemmung der vegetativen Zellen vom Sehrägagarröhrchen
wird steriles Aqua dest. oder physiologische NaCl-Lösung
(etwa 10 ml) verwandt. 0,5 ml dieser Zellabschwemaung
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dienen zur Beimpfung mehrerer 300 ml Erlenmeyerkolben, die
50 ml sterilisierter Nährlösung folgender Zusammensetzung
enthalten:
.1,0 <j/o Glucose
Q,k <j/o Caseinpepton
0fk ia Fleischextrakt
0,1 io Hefeextrakt
0,25 $> NaCl
0,1 $ Leberextrakt
ad 1000 ml Wasser pH 7,0
Der pH-Wert der Nährlösung soll nach dem Sterilisieren zwischen pH 6,8 und 7»2 betragen, vorzugsweise pH 7»0.
Erforderlichenfalls wird er entsprechend eingestellt.
Die Kolben werden bei 30° C und ZkO Upm 18 Stunden auf einer
rotierenden Schüttelmaschine inkubiert und stellen nach dieser Zeit den vegetativen Impfstoff für die folgende Fermentation
dar.
Ein Fermenter von 30 1 Gesamtvolumen, der 20 1 einer Nährlösung
gleicher Zusammensetzung - Glucose ausgenommen - wie die der Vorkultur enthält, wird 20 Minuten bei 121 C und
1 atü sterilisiert. Nach Erkalten wird dem Fermenter der separat sterilisierte Glucose-Anteil zugegeben und der pH-Wert
mit steriler 2 η NaOH auf den bevorzugten Anfangswert von pH 7>0 eingestellt.
Beimpft wird mit 100 ml der wie oben beschrieben hergestellten
Vorkultur, das sind 0,5 $» bezogen auf das Fermentervolumen.
Es wird 18 bis 2k Stunden bei 28° C fermentiert, wobei die
Belüftungsrate 0,55 vvm beträgt und mit 400 Upm gerührt
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Durch Probenentnahme wird der Fermentationsverlauf, insbesondere die Glucoseabnahme, der pH-Wert und die optische
und gravimetrieehe Biomassezunähme verfolgt. Als Zeitpunkt
des Fermentationsabbruchs wird der vollständige Glucoseverbrauch gewählt, gleichbedeutend, wenn ein Biomassetiter von
5 mg/1 ml, bzw. +, 5 $ dieses Wertes, bei einem pH-Wert von
5i5 -5»6 erreicht ist.
Ansatz wie im Beispiel 1, jedoch wird ein Fermenter von 75
Gesamtvolumen eingesetzt, der mit όΟ 1 des im Beispiel 1 beschriebenen
Fermentationsmediuras beschickt ist und dem 0,1 $» bezogen auf das Arbeitsvolumen, Desophen 36ΟΟ als
Antischaummittel zugesetzt ist.
Gegenüber der im Beispiel 1 ausgeführten Fermentation werden verändert:
Fermentationstemperatür: 30 C
Belüftungsrate : 0.^2 wm
Rührung 1 5OO Upm
Impfmenge : 1 # = 0,6 1
Sterilisations- und Fermentationszeit sowie Parameter, Kontrolle und Kriterien der Abernte bleiben unverändert.
60 1 entsprechend Beispiel 1 gewonnene Fermentationslösung wurde in,einer Sharpies -Röhrenzentrifuge geschleudert und
die Bakterienzellmasse so von der Kulturlösung abgetrennt.
Das Waschen der Zellen erfolgte in der Zentrifuge durch Hindurchlaufenlassen
von destilliertem Wasser. Das Waschwasser und die nun klare Fermentationsfiüssigkeit wurden verworfen.
Die gesammelte Feuchtzellmasse wog 785 g. Durch Verrühren
der Feuchtzellen mit einem Gemisch von 3 i Chloroform und 3 1 Methanol und darauffolgendes Zentrifugieren in einer
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Becherzentrifuge wurden die Bakterienzellen entfettet und
weitgehend vom Wasser befreit. Anschließendes Entfernen
des Lösungsmittels aus dem Zentrifugationsniederschlag unter vermindertem Druck ergab 76 g eines trockenen Pulvers,
bestehend aus fettarmen Bakterienzellen.
40 g Trockenzellen wurden mit 2,4 1 destilliertem Wasser aufgeschäumt, mit 2 kg Phenol versetzt, die Mischung auf
65° C erwärmt und unter Rühren 15 Minuten auf dieser Temperatur
gelassen. Danach wurde auf 2 C abgekühlt und bei 5000 g zentrifugiert. Die oben abgeschiedene wässrige Phase
wurde abgehoben, die verbliebenen Phasen mit 2 1 Wasser verrührt, erneut zentrifugiert, die wässrige Schicht wieder abgetrennt
und mit der ersten vereinigt. Zur Entfernung des Phenols und der gelösten Salze wurde die LPS-haltige Phase
3 Tage gegen destilliertes Wasser dialysiert. Aus der nun von niedermolekularen Verbindungen befreiten Lösung ist das
Roh-LPS durch Gefriertrocknung als weiße Substanz gewonnen worden. Die Ausbeute betrug 4,8 g.
Beispiel 4
':
Das nach Beispiel 3 gewonnene Roh-LPS enthält noch hochmolekulare Verunreinigungen, wie z. B. Nukleinsäuren. Zur weiteren
ren Reinigung wurden 2 g des Rohproduktes in 0,7 1 Wasser gelöst, mit 0,1 η NaOH auf pH 7,4 eingestellt, 20 mg käufliche
Ribonuklease hinzugefügt und 3 Stunden auf 37P C erwärmt.
Nach der ersten Stunde wurde mit Natronlauge der leicht abgefallene pH- Wert wieder auf 7,4 gestellt. Nach Ablauf der
Reaktionszeit wurde kurz aufgekocht, danach auf etwa 10° C abgekühlt und zunächst 15 Minuten mit 20 000 g geschleudert.
Es bildete sich wenig hellbraunes Sediment, während das LPS in
Lösung blieb. Anschließend wurde der abgetrennte Überstand eine Stunde bei 18Ο 000 g zentrifugiert. Hierbei sedimentierte
das LPS, der Überstand wurde verworfen. Durch zweimaliges wiederholtes Ultrazentrifugieren und anschließendes Gefiertrocknen
wurden 0,9 g reines LPS erhalten.
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Bei der Analyse des erhaltenen Präparates -wurden die folgenden
Werte gefunden:
Gesamtfettsäuregehalt 12 <jo% Dodecansäure 10,8 #; 2-Hydroxydodecansäure
34,2 # j 3-Hydroxydecansäure 25,8 °fo\ 3-Hydroxydodecansäure
26,7 #? Palmitinsäure (Hexadecansäure) 2,5 #·
Alanin 0,94 #j KDO 3,1 #f Glucose 8,2 #j Glucosamin 2,6 #j
Galactosamin 1,2 j6j Chinovosamin 2,8 96$ Rhamnose 12 $.
Protein außer Alanin und Diaminopimelinsäure <3 /^J
Nukleinsäure <0,5 56.
1,4 g (nach Beispiel 3) wurden entsprechend Beispiel 4 mit
Ribonuklease behandelt, bei 20 000 g zentrifugiert, worauf der wässrige überstand abgetrennt und im Vakuum auf 200 ml
eingeengt wurde. Diese Lösung wurde auf eine Trennsäule aufgetragen.
Als Trennträger diente 4 1 Sepharose 4 B, die Säulenlänge betrug 80 cm. Das Elutionsmittel bestand aus
einer 0,1 m wässrigen Ammoniumacetatlösung, der 0,02 $ Natriumazid beigefügt war. Das Eluat der gelchromatographischen
Trennung wurde in mehreren Fraktionen gesammelt und auf Nukleotod sowie LPS-Gehalt geprüft. Die LPS-haltigen, aber
Nukleinsäure-freien Fraktionen wurden vereinigt, in Vakuum eingeengt, gegen Wasser dialysiert und gefiergetrocknet.
Es resultierten 0,8 g reines, weißes LPS.
Bei der Analyse des erhaltenen Präparates wurden die folgenden Werte gefunden:
Gesamtfettsäuregehalt 13»5 %» Dodecansäure 9t6 #j 2-Hydroxydodecansäure
36,3 #>
3-Hydroxydecansäure 25,2 $$ 3-Hydroxydodecansäure
25,9 $» Palmitinsäure (Hexadecansäure) 2,9 $>.
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Alanin 0,98 $έ; KDO 3,2 565 Glucose 8,1
Galactosamin 1,0 °fo\ Chinovosamin 3,1 !
Glucosamin 2,4
Protein außer Alanin und Diaminopimelinsäure «£l2 56}
Nukleinsäure < 0,1 #.
Die antivirale Wirkung der erfindungsgemäß gewonnenen LPS äußert sich, in einer Verzögerung des Krankheitsablaufes bei
den infizierten Tieren bzw. einer dosisabhängigen Erhöhung
der Überlebensrate gegenüber den nur mit dem Lösungsmittel behandelten Kontrolltieren.
Diese Wirkung kann an verschiedenen Virusstämmen nach einmaliger
oder mehrmaliger lokaler oder systemischer Applikation des LPS erzielt werden. Der hierbei induzierte
antivirale Effekt unterscheidet sich deutlich von dem Interferonrelease der Endotoxine.
Beispiel A, Influenza A/PR8, nasale Infektion der Maus/NMRI,
SPF-Zucht Hattersheim/20 LD50
| LPS-Dosierung mcg/20gMaus | Mittl.Über lebenszeit in Tagen |
Verz. in Tagen |
Überle bensrate |
| 1x1 nasal 24 Std.v.Inf. 1x3» « » 1 χ 10 » » " 1x30« " tt |
7,4 9,0 8,0 |
2,4 4,0 3,0 |
3/TO
8/10 10/10 9/10 |
| Kontrolle unbehandelt | 5,0 | 0/5 |
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Beispiel B, Encephalomyocarditis-Virus (EMC),
intrarauscul. Infekt. 15LD5O NMRI-Maus/SPF
| LPS-Dosierung mcg/20gMaus | Mitti.Über lebens ze it in Tagen |
Verz.gegen Kontrollen |
Überle- bensrate |
| 1 χ 60 i.p. 24 Std.v.Inf. 1 χ 200 i.p. " 1 χ 60 se " 1 χ 200 se n |
6,0 5,5 6,8 5,6 |
1,8 1,3 2,6 1,4 |
8/10 S/10 3/10 4/10 |
| Kontrollen unbehandelt | 4,2" | O/IO |
Beispiel C, Columbia SK.Virus intramusc. Infek., Maus NMRl/SPF
| LPS-Dosierung mcg/20gMaus | Mittl.Über- lebenszeit in Tagen |
Überlebensrate |
| 1 χ 10 i.m. 6 Std.v.Inf. 1 χ 30 i.ra. n w 1,x 100 " η « |
9,4 9,0 8,0 |
3/10 6/10 δ/10 |
| Kontrollen unbehandelt | 9,6 | 2/1O |
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Claims (3)
1. Lipopolysaccharide bestehend aus O-spezifischen Zuckerketten,
dem Kernpolysaccharid und Lipid A, gekennzeichnet
durch den folgenden relativen Gehalt an Fettsäuren: Dodecansäure 8-13 #, 2-OH-Dodecansäure 31-39 #, 3-OH-Decansäure
22-29 %, 3-OH-Dodecansäure 23-2? °fo und andere
Fettsäuren 0-7 $>.
2. Lipopolysaccharide nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch,
den folgenden relativen Gehalt an Fettsäuren: Dodecansäure 9-11 56, 2-OH-Dodecansäure 33-37 $» 3-0H-Decansäure
23-27 #, 3-OH-Dodecansäure 24-26 0Jo und
andere Fettsäuren k-6 96.
3. Antivirale Mittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einem Lipopolysaccharid nach Ansprüchen 1 oder 2.
h. Verfahren zur Herstellung von Lipopolysacchariden nach
Ansprüchen 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß man
Pseudomonas aeruginosa FH-N-845 (ATCC Nr. 21996), seine
Varianten oder Mutanten in einem Nährmedium in an sich bekannter Weise züchtet und aus den Bakterienzellen der
Lipopolysaccharide in an sich bekannter Weise gewinnt.
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Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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