DD216017A5

DD216017A5 - Verfahren zur herstellung von 4"-epi-9-desoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin a

Info

Publication number: DD216017A5
Application number: DD83256672A
Authority: DD
Inventors: Gene M Bright
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1982-11-15
Filing date: 1983-11-14
Publication date: 1984-11-28
Also published as: FI834163A0; NO160262C; PL142601B1; EP0109253A3; EP0109253B1; PL143281B1; HU193886B; PL250350A1; ZA838460B; ES527249A0; EP0109253A2; NO160262B; CS845583A2; PH19293A; IE56234B1; YU43425B; DK159322C; ES543638A0; DK518683D0; YU197285A

Abstract

Antibakterielles 4"-Epi-9-desoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinA, pharmazeutisch annehmbare Salze hiervon, pharmazeutische Zusammensetzungen mit antibakteriell wirksamen Mengen hiervon, ein Verfahren zur Behandlung bakterieller Infektionen mit antibakteriell wirksamen Mengen hiervon und Zwischenstufen fuer die Synthese aus Erythromycin A.

Description

Berlin, den 12, 6. 84 AP C 07 D/256 672 8 63 136 12/38

Verfahren zur Herstellung von 4"-Epi-9-desoxo-9a-methyl-9a-' aza-ga-homoerythromycin A

Anwendungsgebiet der Erfindung

Die Erfindung bezieht sich auf die Herstellung von antibakteriellem 4"-cpi-9-desoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-homoerytbromycin A und dessen pharmazeutisch annehmbaren Salzen, das in der Medizin als anti/nikrobielles Mittel eingesetzt'werden kann.

S-ekannte technische Lösunaen

Erythromycin A ist ein gut bekanntes Makrolid-Antibiotikum der Formel (I), das extensive klinische Verwendung gefunden hat.

CH.

: HO »»in,

CH

(I)

Die erfindungsgemäß hergestellte therapeutische Verbindung ist das 4"-Epimer des zuvor beschriebenen Erythromycin A-Derivats der Formel (II) ,

(II) R = Methyl

(III) R = Wasserstoff ,

die Gegenstand der SE-PS 892 357 sowie der anhängigen US-Anmeldung 399 401 vom 19. 7. 1982 ist. In der BE-PS ist die Verbindung der Formel (II) aid N-Methyl-Derivat von "11-AzalO-desoxo-lO-dihydroerythTomycin A" bezeichnet, ein früher von Kobrehel et al,, US-PS 4 328 334, für die Vorstufenverbindung der Formel (III) geprägter Name. Für das letztere, ringerweiterte (Homo) , Aza (Kohlenstoff durch Stickstoff substituiert) Erythromycin . Α-Derivat ziehen j.vir die. Bezeichnung 9-Desoxo-9a-aza-9a-hotnoerythromycin A vor. Diese Verbindung könnte als ein 10-Aza-14-hexadecanolid-Oerivat bezeichnet werden, .

Bestimmte der erfindungsgemäS hergestellten neuen Zwischenstufen sind ebenso 4"-cpirnere_/von zuvor bekannten Verbindunist 4"-Epi-9-desoxG-Sa-aza-9a-homoerythromycih A das

4"-Epimer der obigen Verbindung der Formel (III); und 4"~ Epierythromycin A-oxim ist das 4"-Epimer des Erythromycin A-oxims von Djokic et al., US-PS 3-473 014. 4"-Epi-erythromycin A ist Gegenstand der US-Anmeldung 353 547 vom 1. 3. 1982, Sciavolino et al.

Ziel der Erfindung

Es ist Ziel der Erfindung, den Stand der Technik durch neue Arzneimittel zu bereichern.

Wesen der Erfindung

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Herstellungsverfahren für 4"-Epi-9-desoxo-Qa-methyi-9a-aza-93-homoerythromycin A bereitzustellen, wobei dies über neue Zvvischenverbindungen erfolgt.

Erfindungsgemäß hergestellt wird die für die antibakterielle Behandlung von Säugern verwendbare Verbindung der Formel IV*

: . . - 4 - .

(IV)₁ R = Methyl, Z = Z¹ = Wasserstoff

1

(V) R = .Wasserstoff, Z und Z sind zusammen Sauerstoff

(VI) R=Z=Z¹= Wasserstoff ,

Die erfindungsgemäß hergestellte therapeutische Verbindung (IV) zeigt ein relativ breites Spektrum antibakterieller Aktivität,; die gegenüber Erythromycin A empfindliche Organismen einschließt und außerdem den hauptsächlichen, für das Atmungssyst.em pathogen'en Organismus Haemophilus influenzae völlig einbezieht. Ihre hohe orale Absorption und außerordentlich lange Halbwertzeit in vivo macht die Verbindung (xV) von besonderem Wert bei der oralen Behandlung von Infektionen durch empfängliche Bakterien in Säugern,

Die Erfindung läuft über die folgenden Zwischenstufen, die bei der Synthese von 4"-Epi-9-desoxo-9a-methyl-9a-aza-9ahomoerythromycinjA (IV) brauchbar sind:

(b) 4"-Epi-erythroraycin A-oxim.

(c) Eine Verbindung aus der Gruppe 9a-Benzyloxycarbonyl-9-desoxo-4"-desoxy-4"-oxo-9a-aza-9a-homoerythromycin A der Formel (VII); 9-Desoxo~4"-desoxy-4"-oxo-9a-methyl-9a-aza-9a-'nomoerythrbmycin A'der Formel (VIIa) ; und der entsprechenden 2'-O-(C„-C^)Alkanoyl^Derivate der Formeln (VIII) und (Villa), Acetyl ist die bevorzugte·Bedeutung von 2'-Q-(C₂-C^)Aikanoyl. .' '. '

CH,

υπ.

(VII) (VIII)

(Vila) R (Villa) R

R¹

R¹ 1

OCH.

= Berizyloxycarbonyl, R = H

2 = Benzyloxycarbonyl,

2 R =

Methyl, FT = H

Methyl, R² = (C-C,) Alkanoyl

Alkanoyl

(d) tine Verbindung aus der Gruppe 2'-G-Acetyl- und 2'-0-Propionyl-S-desoxo-Qa-benzyloxycarbonyl-Qa-aza-Sa-homoerythromycin A der Formel (IX). Das 2"-O-Acetyl-Derivat ist von besonderem Wert,

CH

• 't-

(IX) R¹ = Benzyloxycarbonyl, R² =

( e) Eine Verbindung aus der Gruppe 4"-Epi-9-desoxo-9a-hydroxy-9a-aza-9a-homoerytHromycin A-3'-N-oxid und 4"-Epi-9-desoxo-9a-raethyl-9a-aza-9a--homoerythromycin A-3'-N-oxid der Formeln

(X) bzw. (XI).

(X) R° = Hydroxy

(XI). R"⁵ = Methyl '

Die erfindungsgemäß hergestellte antibakterielle Verbindung, 4"-Epi-9-desoxo-9a-.methyl-9a-aza-9a--homoerythroraycin A (IV) wird leicht aus Erythromycin A- nach einer Reihe von Wegen ..hergestellt, Diese vVege, die unterschiedlich über neue und b'ekannte Verbindungen als Zwischenstufen verlaufen, umfassen vorgegebene Umwandlungen wie' folgt:

L-4 -cpimerisierung;

Ringerweiterung unter Einführung von 9a-Stickstoff; Entfernung der 9-Gxo-Gruppe und 9a-N-Methylierung

zusammen mit irgend einer gegebenenfalls erfolgenden oder notwendigen .Einführung und Abspaltung von Schutzgruppen, Bevorzugt sind die eine oder die andere der folgenden Umwandlungsfolgen: (A) (B) (C) (D)₁ (B) (A) (C) (D) oder (B) (C) (D) (A). Die verschiedenen Zwischenstufen und Endprodukte werden nach Standardarbeitsmethoden (z. B. Extraktion, Fällung, Einengen, Chromatographie, Kristallisieren) isoliert.

(A) (B) (C) (D) ' '

Die Arbeitsfolge (A) (B) (C) (D) umfaßt die anfägliche. Umwandlung von Erythromycin A(I) in 4-Epi-erythromycin A nach der Methode von' Sciavolino et al. (s.o.). Letzteres wird dann in praktisch quantitativer Ausbeute in 4"-Epi-erythromycin A-oxim durch Umsetzen mit Hydroxylamin oder vorzugsweise einem Hydroxylaminsalz, wie dem Hydrochlorid,umgewandelt, unter derzeit aufgefundenen bevorzugten Bedingungen wird wenigstens ein Moläquivalent, gewöhnlich ein Überschuß z. 8. IO bis 30 Äquivalente, des Hydroxylamine eingesetzt; in einem Oberschuß eines schwach-basischen tertiären Amins (vorzugsweise Pyridin) als Lösungsmittel bei einer Temperatur im Bereich von O bis 50 , bequemerweise bei Raumtemperatur.

Das anfallende 4"-Epi-srythromycin-oxim wird zum 4"-Epi-9aaza-9a-homo-Oerivat (V) nach einer Beckmannumlagerung umgelagert. Die bevorzugten Bedingungen sind ein Überschuß (z. B. 3 bis 4 Moläquivalente) eines organischen SuIfonylchlorids, vorzugsweise Methansulfonylchlorid, das mit dsm Oχim (als freie Base oder als Säuresalz) in einem Gemisch mit einem

- 8 -

niederen Keton (ζ. 3* Methylethylketon, Aceton) und Wasser, das einen großen molaren Überschuß an Natriumbicarbonat ent-, hält, bei einer Temperatur von O bis 50 ⁰C, vorzugsweise bei .0 bis;30 ⁰C₁ umgesetzt wird.

Das C-9-Amid-Carbonyl von (V) wird dann bequemerweise zürn entsprechenden Dihydro-Derivat reduziert,.d. h. 4"-£pi-9-desoxo-9a-aza-9a-hoffloerythromycin A₁ (VI) , durch Reduktion mit Natriümborhydrid (vorzugsweise im Oberschuß, um die Reaktion in vernünftiger Zeit' zu Ende zu führen, aber mit mindestens 2 Äquivalenten). Die Reduktion erfolgt in einem geeigneten protischen Lösungsmittel, wie einem niederen Alkanol (vorzugsweise Methanol) bei O bis 50 (vorzugsweise bei oder unter 38). Überschüssiges NaBH. wird sorgfältig durch Abschrecken des Reaktionsgemisches in verdünnter wäßriger Säure zersetzt.

Abschließende .Methylierung zur Verbindung (IV) erfolgt durch reduktives Methylieren unter Verwendung von Formaldehyd in Gegenwart eines Reduktionsmittels, z, 3. Wasserstoff, und eines edelmetallkatalysators, Natriumcyar.oborhydrid oder vorzugsweise Ameisensäure« Die-Reaktion erfolgt mit wenigstens jeweils -einem Äquivalent Formaldehyd und Ameisensäure in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 20 bis 100 C. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Chloroform. In diesem Lösungsmittel werden die Reaktionskomponenten bequemerweise bei Raumtemperatur zusammengebracht und dann auf Rückfluß erwärmt, um die Reaktion zu Ende zu bringen.

Alternativ erfolgt die Methylierung,von (VI) zu (IV) durch oxidativen Schutz der Dimethylaminogruppe als N-Oxid (unter

gleichzeitiger Bildung des 9a-N-Hydroxy-Derivats), Methylierung mit Methyljodid, mit zumindest teilweise) gleichzeitiger 9a-N-Desoxygenierung, und Reduktion des anfallenden 9a-Methyl-3"-N-oxids. Oxidation von (VI) erfolgt leicht durch Reaktion mit Wasserstoffperoxid, ira allgemeinen im Überschuß zu den mindestens nötigen zwei Moläquivalenten in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 10 bis 50 C₁ bequemerweise bei Raumtemperatur, So entsteht 9a-Hydroxy-3'-N-oxid (X). Letzteres wird mit Methyljodid, bequemerweise in einem reaktionsinerten Lösungsmittel (z. B. Methylenchlorid) bei 0 bis , 50 ⁰C (bequemerweise bei Raumtemperatur), vorzugsweise in Gegenwart einer im Lösungsmittel unlöslichen Base, die gebildete Säure neutralisiert (z, B, Ho, wenn, Methyljodid das Methylierungsmittel ist) zu (Xl) methyliert und desoxygeniert. Mit Methylenchlorid als Lösungsmittel 'ist ein Oberschuß an Kaliumcarbonat die Base äer Wahl. So v/erden die überschüssige 3ase und gebildetes Natriumiodid vollständig durch einfaches Filtrieren vor dem Isolieren des^:Qa-Methyl-3'-N-oxids (XI) entfernt. Schließlich erfolgt die Entfernung der 3'-N-öxid-Gruppe leicht durch Hydrieren über einem Edelmetall- oder Raney-Nickel-Katalysator. Sei dieser Hydrierung sind Temperatur und Druck unkritisch, z. 8. in geeigneter Weise O bis 100 ⁰C und ein Druck im Bereich von unteratmosphärisch bis ICO bar (at) oder darüber. Am bequemsten sind Raumtemperatur und mäßige Drücke,, z. 3, 2 bis 3 oar (at). Geeignete Edelmetailkatalysatoren umfassen Pal- ladium, Rhodium und Platin, mit oder ohne Träger, auf dem Gebiet der katalytischen Hydrierung gut bekannt. Die bevorzugten Katalysatoren sind Pd/C und Raney-Mickal.

¹ /

Die Arbeitsfolge (B) (A) (C) (D) umfaSt die anfängliche Umwandlung von Erythromycin A (I) in 9-Desoxo-9a-aza-9a-horaoerythromycin (III) über Erythromycin A-oxim und 9a-Aza-9ahomoerythroraycin nach der Methode von Kobrehel et al« (s*o.)« In diesem Zusammenhang wird das neue Verfahren, oben für 4"-Epi-erythromycin A-oxira beschrieben, in vorteilhafter Weise zu Herstellung der Zwischenstufe Erythromycin Ä-oxim angewandt, . '

Die 2'-Hydroxy-Gruppe der Verbindung (III) wird zuerst in Form' des Acetat- oder Propioat-Esters geschützt. Die Acylierung erfolgt selektiv durch Umsetzen der Verbindung (III) mit einem begrenzten Überschuß an Essigsäure- oder Propionsäureanhyd.rid in einen¹, reaktionsinerten Lösungsmittel (z, 3« Methylenchlorid) bei O bis 30 ,C (bequemervveise bei Raumtemperatur) , Der begrenzte 'Überschuß an Anhydrid wird zum Kompensieren von in Nebenreaktionen verbrauchtem Reagens verwendet, z, 3« in der unerwünschten Acylierung anderer Gruppen, insbesondere des 9a-Stickstoffs»

.Das anfallende 2'-(C₂-C₃)Alkanoyl-Oerivat wird dann am 9a-Stickstoff mit einer Benzyloxycarbonylgruppe geschützt. So entsteht die Verbindung (IX) durch Umsetzen des obigen 2'-Esters mit C'arbobenzoxychlorid in einem reaktionsinerten Lösungsmittel in Gegenwart einer Base. Besonders gut eignen sich Schotten-Baumann-Bedingungen, d. h,> die Reaktion des 2'-Esters mit dem Säurechlorid unter wäßrig-alkalischen Bedingungen, z« 3. wäßrigem Tetrahydrofuran, wobei der pH' mit verdünnter NaOH. bei 7,5 bis 8,5 gehalten wird, wenn das

Säurechlorid zugesetzt wird und die Reaktion abläuft. Die Temperatur ist unkritisch, liegt aber im allgemeinen im Bereich von O bis 50 ⁰C, bequemerweise bei Raumtemperatur.

Die C-4"-Hydroxyl-Verbindung (IX) wird dann zur C-4"-0xo-Verbindung (VIII) durch Einwirkung von Oxalylchlorid/Dimethylsulfoxid bei tiefer Temperatur (-40 bis -80 C) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel (z. B. riethylenchlorid) unter anschließender Behandlung des kalten Reaktionsgemisches mit einem Oberschuß an tertiärem Amin (z. B. Triethylamin) oxidiert. Die Alkanoatester-Schutzgruppe wird durch Solvolyse abgespalten, vorzugsweise durch Zusammenbringen mit überschüssigem Methanol bindung (VII) 'entsteht.

überschüssigem Methanol bei O bis 100 C, wodurch die Ver-

Die Hydrierung über Raney-Nickel-Katalysator unter Anwendung der oben beschriebenen Bedingungen wandelt die Verbindung (VII) in 4"-Epi-9-desoxo-9a-aza-9a-horaoerythromycin A "(VI) ' ₍ um. Letztere wird nach einer der Alternativmethoden, wie oben beschrieben, in das Qa-N-Hethyl-Dsrivat (IV) umgewandelt. .

Diese Arbeitsfolge um/faßt die anfängliche Umwandlung von Erythromycin A in die. obige Verbindung oer Formel (II) nach der oben genannten anhängigen Anmeldung unter Anwendung von in dem späteren Herstellungsabschnitt im einzelnen angegebenen Methoden. Die C-4"-Epiiiierisierung erfolgt dann nach aen oben beschriebenen Schritten und Methoden.'Die 2¹-Hydroxy-Gruppe wird durch Acylieren geschützt, die 4".-Hydroxy-Gruppe wird zur 4"-0xo-Gruppe oxidiert, wobei Vorzugs-

.ι .

weise Trifluoressigsäureanhydrid an die Stelle von Oxalylchlorid tritt; die schützende Acylgruppe wird entfernt und die 4"-Oxo-Gruppe katalytisch zur gewünschten 4"-epimeren Hydroxygruppe hydriert. In diesem Falle ist der bevorzugte Katalysator Raney-Nickel,

Da die erfindungsgeraäß hergestellte Verbindung (IV) zwei basische Stickstoffatome enthält/ bilden sich durch Zusammenbringen der freien'Base (IV) mit praktisch einem Äquivalent der Säure oder mit wenigstens zwei Äquivalenten der Säure pharmazeutisch annehmbare Mono- und Disäureadditionssalze. Salze entstehen allgemein durch Zusammenbringen der Reagentien in einem reaktionsinterten Lösungsmittel; wenn das Salz nicht direkt ausfällt,wird es durch Konzentrieren und/oder Zugabe einesNichtlösungsmittals isoliert. Geeignete pharmazeutisch annehmbare Säursadditionssalze umfassen, ohne aber hierauf beschränkt zu sein, solche mit HcI, HBr, HNO, , H₀SG .,,HO-CCH₀GH₀-CO₀H , eis- und t ranS-HO₀CCHCHCO₀H, CH-,SO_H und o-Cl-UCH .SO-H, ^:

,. ρ · 3 ' ο α 4 ο ·

Die antibakterielle Aktivität der Verbindung der Formel (IV) wird durch Messen ihrer Mindesthemmkonzentrationen (MHK) in ,ug/ml gegenüber einer Vielzahl von Mikroorganismen in Hirn-Herz-Infusionsbrühe (BHI) demonstriert. Im, allgemeinen werden 12 Zweifachverdünnungen aer Testverbindungen angewandt, bei einer Anfangskonzentration des Testwirkstoffs im Bereich von 50 bis 200 /jg/tnl.'Die Suszeptibilität (MHK) des Testorganismus wird als die geringste Konzentration der Verbindung 'genommen, die in der Lage ist, vollständige Wachstuiiisheüiraung nach Beurteilung mit dem bloßen Auge hervorzurufen. Ein Vergleich der Aktivität von 4"-£pi-

g-desoxo-Sa-methyl-Qa-aza-Qa-homoerythromycin A (IV) mit der einer Erythromycin-Α-Kontrolle ist in der Tabelle I wiedergegeben.

Tabelle I In vitro-Aktivität der Verbindung (IV)

Staph	. aur.	pn.	005
			052
		oxy.	400
Staph	. epi	mult.	111
Strep	. faec.	mar.	006
Strep	» pyog.	. sic.	203
Strep	. pneumo.	aerog,	012
E. CoIi	cloac.	125
	Strua.	129
	flu.	266
		. 470
Kleb.		009
	031
Kleb.	024
Past.	001
Serr.	017
Neiss	000
	040
ent.	009
Prov.	013
H. in	' 012
	036
	033

	A	. MHK-Wert	e	2-	A	Tag	B
1.	0.05	Tag	0.05	,' 0.39
0.10	8	0.10	0.39
3.12	0.20	6.25	12.5
0.05 .	0.20	0.05	0.20
0.7S	3.12	0.7S	. 0.78
0.025	0.10	0.025	0.025
0.025	1.56	0.025	0.025
(a)	0.025	(a)	6.25
(a)	0.025	(a)	6.25
(a)	6.25	(a)	6.25
3.12	1.56	3.12	0.78
(a)	3.12	(a)	12.5
(a)	0.78	(a)	12.5
(a) .	12.5	(a)	' 12.5
1.56	12.5	1.56	O₁IO
(a)	12.5	(a)	50
1. 56	0.10	3.12	0.39
(a) ..	50	(a)	12.5
(a)	0.20	(a)'	25
(a)	12.5	(a)	50
3.12	25 , ;	1.56	• 0.39
6.25	50	3 .12 .	0.39
6.25	0.39	3.12	0.73
0.39
.0.39

- 14 Tabelle I (Fortsetzung)

*

In vitro-Aktiyität _i der Verbindung (IV)

MHK-Werte

1. lag- . 2« Tag

3 A . B

H. influ.	042	1.55	0.39	. 1. 55	0.39
	051	3.12	0.39	3.12 .	0.73
	073	3.12	0.39	3.12	. 0.78
	078	.· 1.55 .	0.39	1.56	0.-39
	CSl	3.12	0.39	3.12	0.78

(a) > 50 , .. I

A Erythromycin A-Kontrolle B Verbindung (IV)-·

Außerdem wird die Verbindung (IV) ,in vivo nach dem gut bekannten Mäuseschutztest oder durch eine mikrobiologische (Biotest-)Bestimmung von Serumgehalten in einer Reihe von Saugetieren (z« 3. Maus, Ratte, Hund) getestet. Bei Ratten als Testtieren hat sich die Verbindung (IV) als nach oraler Dosierung, die außergewöhnlich hohe und lang anhaltende Serufflgehalte liefert, außergewöhnlich gut absorbiert erwie-' sen,ν . .

Für die Behandlung systemischer Infektionen in Tieren, den Menschen eingeschlossen, verursacht durch empfängliche Mikroorganismen, wird die Verbindung (IV) in einer Menge von 2,5 bis 100 mg/kg/Tag, vorzugsweise 5 bis 50 rag/kg/Tag, in unterteilten Dosen oder vorzugsweise in einer einzigen

- 15 - -

Tagesdosis dosiert. Änderungen in der Dosierung erfolgen in Abhängigkeit vom Individuum und von der Empfänglichkeit des Mikroorganismus. Diese Verbindungen werden oral oder parenteral dosiert, wobei der bevorzugte Weg der orale ist. Die Suszeptibilität von in den Kliniken isolierten Mikroorganismen wird routinemäßig in klinischen Laboratorien nach der gut bekannten Rundplat'tenmethode getestet. Die Verbindung (IV) ist im allgemeinen die Verbindung der Wahl, wenn sie eine relativ große Heramzone gegenüber Bakterien zeigt, die die zu behandelnde Infektion verursachen.

Die Herstellung optimaler Dosierungsformen erfolgt nach auf dem pharmazeutischen Gebiet gut bekannten Methoden. Für orale Verabreichung werden die Verbindungen allein oder in Kombination mit pharmazeutischen Trägern zusammengestellt,Wie inerten festen Verdünnungsmitteln, wäßrigen Lösungen oder verschiedenen nicht-toxischen organischen Lösungsmitteln in solchen Dosierungsformen, wie Gelatinekapseln, Tabletten, Pulvern, Pastillen, Sirup und dergleichen. Solche Träger umfassen Wasser, Ethanol, Benzylalkohol; Glycerin, Ppopylenglykol, pflanzliche öle, Lactose, Stärken, Talkum, Gelatinen, Harze und andere gut bekannte Träger. Die für die obige systemischa Verwendung erforderlichen parenteralen Dosierungsformen werden in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger, wie Wasser, Salzlösung, SesamÖl und dergleichen gelöst oder suspendiert. Auch können Mittel, die die Suspendierbar-· keit und die Dispersionseigenschaf tan verbessern, zugesetzt werden, . · ^ '

rür die topische Behandlung von oberflächlichen Infektionen 'bei Tiaren, dan Menschen eingeschlossen, ausgelöst durch

empfängliche Mikroorganismen, wird die Verbindung (IV) nach auf dem pharmazeutischen Gebiet gut bekannten Methoden zu Lotionen, Salben, Cremes, Pasten, Gelen oder dergleichen mit Konzentrationen ira Bereich von 5 bis 200 mg/cm der Dosierungsform, vorzugsweise ira Bereich von 10 bis 100 mg/cra , zusammengestellt. Die Dosierungsform wird am Ort der Infektion nach Belieben, im allgemeinen zumindest einmal täglich, aufgebracht, , . .

Ausf ühruncjsb ei spiele

Dia Erfindung yvird durch die folgenden Beispiele veranschaulicht. Es sollte jedoch klar sein, daß sie nicht auf die speziellen Einzelheiten dieser Beispiele beschränkt ist♦ -Sofern nicht anders angegeben, erfolgten alle'Arbeiten bei Raumtemperatur; das Abziehen aller Lösungsmittel erfolgte im Vakuum 'aus einem Bad bei 40 oder darunter ; alle angegebenen Temperaturen sind in Cj jede Dünnschichtchromatographie (DC) erfolgte an handelsüblichen Kieselgelplatten (unter Verwendung des in Klammern angegebenen Elutionsmittsls) ; und alle Lösungsmittelverhältnisse beziehen sich auf das Volumen. THF wird für Tetrahydrofuran, DMSO für Dimethylsulfoxid verwendet.

Beispiel 1 ' ' . ' ·

4'V-Epi-arythromycin A-oxim ^""Oxira des 4"-Spimers von(I)_J7.

4"-£pi-erythromycin A (50 g, 0,0646 Mol) wurde in 265 ml Pyridin gelöst. Hydroxylamin-Hydrochlorid (112,2 g, 1,615 Mol) wurde zugesetzt und die Aufschlämmung 16 h gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde zu einem dicken 3rei eingeengt,

mit 300 ml Isopropanol verdünnt, gut gerührt und mit 3 χ 100 ml Isopropanol zum Waschen filtriert. Das Filträt und die Waschflüssigkeit wurden vereinigt., zu einem wasserlöslichen Schaum eingeengt und mit Ether verrieben, um rohes Titelprodukt als Hydrochlorid (100 g) zu ergeben. Letzteres wurde durch Verteilen zwischen CH₂CIp und wäßrigem NaHCOv₁ mit verdünnter NaOH auf pH 9,5 eingestellt, gereinigt. Die !(VäSrige Schicht wurde abgetrennt und mit Ethylacetat und dann mit Ether gewaschen. Alle organischen Schichten wurden vereinigt, (über Na₂SO₁) getrocknet und eingeengt, um Titeln produkt als weißen Schaum zu ergeben, 59,5 g, DC Rf 0,5 (60:10:1 Ch" ClVCH^OH/konz. NH₁OH-); ¹HMMR (CDCl,) / 2,31 /""6H, s, (CH-KN- J₁ 3,32 (3H, s, Cladinose-CH-O-) .

Beispiel 2 '

4"-Epi-9a-aza-9a-homoerythroniycin A (V)

Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels (59,2 g, 0,0787 , Mol) wurde in 400 ml Aceton gelöst,- Eine Aufschlämmung von NaHCO, (60 g) in 225 ml H^O wurde zugesetzt. Methansulfonylchlorid (36,3 g, 24,5 ml) in 50 ml Aceton wurde über 10 min zugetropft, während die Temperatur mit Hilfe eines Kühlbades unter 30 gehalten wurde. Das Gemisch wurde 4,5 h garührt, von Aceton befreit, CH₂Cl^ (400 ml) dsm wäßrigen Rückstand zugesetzt und der pH mit 5 η HCl auf 5,δ eingestellt. Die wäßrige Schicht wurde abgetrennt, mit zwei zusätzlichen Portionen CH₀Cl^ gewaschen und dann mit 6 η NaOH auf pH 9,5 eingestellt, Die basische Lösung wurde mit 2 χ frischem CH₂C1_, 1 χ Ethylacetat und i χ Ether extrahiert. Die basisch-organischen Extrakte wurden vereinigt, (über 1'Ja₉SQ₁) getrocknet und zum Titelprodukt., einem elfenbeinfarbigen

Schaum, eingeengt, 41 g; DC Rf 0,4 (50:10:1 CH₂Cl konz·· NH₄OH) ; ¹HNMR (CDCl₃) 2,27 /""6H, s, (CH₃J₂N-J^; 3,29 (3H, s, Ciadinose-CH₃O-J ; ¹³CNMR /"CDCl₃, !-(CH₃J₄ SlJ ppm 177,24 (Lacton-C=O), 163,53 (AmId-C=O), 102,29 und 95,24 (C-3/G-5), 40,22 2l~(C.H₃)₂N-J7.

Seispiel 5-

"2^<-0-Acetyl-9-desoxo-9a-aza-Sa-horaoerythromycin A /~*2'-G-Acetat von (III)J ' .

9-Oesoxo-9a-aza-9a-hotncerythromycin A (10 g, 0,0136 MoI; (III); US-PS 4 328 334) wurde inv ,150 ml CH₂Cl₂ gelöst. Essigs'äureanhydrid (1,39 g, 1,23 ml, 0,0136 Mol) wurde zugesetzt und das Gemisch 3 h gerührt. Die Acetylierung wurde dünnschichtchromatographisch überwacht; um die Reaktion zu Ende zu bringen, wurden 0,25 ml Essigsäureanhydrid und dann 0,5 ral Essigsäureanhydrid zugesetzt, unter jeweils 1,5- bzw, 1-stündigem zusätzlichem Rühren. Das Reaktionsgemisch wurde mit H₉O verdünnt und der pH mit verdünnter MaOH auf 11 eingestellt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, (über Na₂SO,) getrocknet und zu-einem Schaum, 11,5 g., eingeengt. Der Schaum (10 g) wurde an 300 g Kieselgel mit 9 : 1 CH₀Cl₂:CH-,OH als Elutionsraittel unter dünnschichtchromatigraphischer überwachung chromatographiert. Eine weniger polare Verunreinigung . (3,6 .g) wurde elulert, darauf gereinigtes Titelprodukt, isoliert als weißer Schaum, 2 g; DC Rf 0,2 (90:10:1 CH.. Cl„ZCH,OHZkonz. MH₁OH); ¹HNMR (CDCl,)-, ei 2,02 -(3H₁ s, „ 2,26 /~6H, s (CH,).,

^p ° C-2¹-0-C-Cn₃) ^ύ -

N-J7, 3,35 (3H, s, Cladinose-CH-O-).

Nach der gleichen Methode '«Vird unter Ersatz des Essigsäure-

anhydrids durch Propionsäureanhydrid das entsprechende 2'-0-Propionyl-Derivat hergestellt.

Beispiel 4

2'-0-Acetyl-9-desoxo-9a-benzyloxycarbonYl-9a-aza-9a^homo-

— 2 —-erythromycin A ^/ (IX) # R = Acetyl__/

Titelprodukt des-vorhergehenden 3-eispiels (1,7 g, 0,00219 Mol) -wurde in 70 ml 5:2 THF/HpO gelöst. Der pH wurde mit verdünnter NaOH auf 8, eingestellt. Darbobenzoxychlorid (o,51 g, 0,427 ml, 0,003 Mol) wurde zugesetzt und das Gemisch 2 h unter weiterer Zugabe von verdünnter NaOH na.ch Notwendigkeit zur Aufrechterhaltung eines pH von 8 gerü'nri* Da sich die Umsetzung dünnscnichtchrpmatographlsch als unvollständig erwies, wurde weiteres Carbobenzoxychlorid (0,3 ml) zugesetzt und die Umsetzung 3 h fortgesetzt, wobei der pH bei 8 gehalten wurde. Das Reaktionsgemisch wurde mit reichlich H_pO und Ethylacetat abgeschreckt, der pH wurde auf 1,5 eingestellt und die wäßrige Schicht mit CH„Clp gewaschen. Die organischen Schichten wurden vereinigt, (über Na_nSO ) getrocknet und zu einem Schaum, 2,4 g, eingeengt. Der Schaum wurde an 85 σ Kieselgelt unter Elution mit 170: 10:1 CH^CL^/CH-GH/konz. NH₁OH chromatographiert. Reine Fraktionen wurden vereinigt, zu einem Schaum eingeengt, in CH^Cl₉ aufgenommen und eingeengt, bis Titelprodukt kristallisierte, 1,2 g; Schmp. 122°; DC Rf 0,4 (90:10:1 C^₂Cl₂OH/. konz. NH₄OH); ¹HMMR (CDCl,) .^ 2,00 (3H, S, 0-2'-0-G-CH-,), 2,27 /~6H, s, (CHj)₂M-J^, 3,35 (3H, s, Cladinose-CH^O-) ; ¹⁰CNMR^TCDCi-, i-(CH^) SiJ/ ppm 176,31 (Lacton-C=Q), . 159,36 (C-2'-Ester-C=0) , 157,10 (Carbamat-C=O) ; 137,0, 127,55 und 127,92 (aromatischer Ring).; 40,6 £~[CH₃J₂N

Nach der gleichen Methode wird das 2'-O-Propionyl-Derivat des vorhergehenden Beispiels in das entsprechende 2'-Q-PrO-pion-yl-Qa-benzyloxycarbonyl-Derivat umgewandelt»

Beispiel 5 -«

2' -0-Äcetyl-9a-benzyloxycaTbonyl-9-desoxo-4"-des.oxy-4"-oxo-9a-aza-9a-horaoerythromycin A Z_- (VIII), R = Acetyl__/

Oxalylchlorid_;(4,37 g, 3,0 ml _t 0,0344 Mol) wurde in 25 ml CH Cl₂ gelöst und auf -60 gekühlt. -DMSO (5,70 g, 5,09 ml. 0,0856 Mol) in .9 ml CH Cl₂ wurde zugesetzt. Nach 10 min Halten des Gemisches bei -60° wurde Titelprodukt des vorhergehenden Seispiels (5,2 g, 0,00572 Mol) in 16 ml CH₂Cl₂ bei' der gleichen Temperatur zugesetzt. Nach weiteren 25 min,bei -60° wurde Triethylamin (17,3 g, 23,9.ml, 0,172 Mol) zugesetzt und das Gemisch auf Raumtemperatur erwärmt,mit 50 ml H^O und überschüssigem NaHCO-, verdünnt» Die organische Schicht wurde abgetrennt, (über Na^SO,,) getrocknet und zum Titelprodukt, einem klebrigen Schaum, eingeengt, 6,Sg,. DC Rf 0,6 (.90:10':l CH Cl₉/ Q-LOH/konz, NH OH; ¹HNMR (CDCl,)

2,05 (3H, s, C-2¹ -0-C-CH₃), 2,25 / CH₃) ₂N-_/' 3,32 (3H₁ s, Chladinose-CH_0-), 7,37 (5H, s, aromatische Protonen); MS: Hauptpeaks bei m/e 535 und 51S (N-Senzyloxycarbonylagiycon-Ion (minus beide Zucker über Spaltung am C-I", C-S)) 200 (Basis-Peak, vom Des.osamin stammendes Fragment) , 125 (vom neutralen Zucker stammendes Fragment). Diese. Zwischenstufe· wird vorzugsweise unmittelbar in der nächsten Stufe eingesetzt, ·

Ebanso wird das entsprechende 2'-0-Propionyl-4"-oxo-Derivat ^!

aus der 2'-0-Propionyl-Verbindung des vorhergehenden Beispiels hergestellt«

Beispiel 6

9a-3enzyloxycarbonyl-9-dasoxo-4"-desoxy-4"-oxo-9a-aza-9ahomosrythromycin (VII)

Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels, 1,0 g wurde in 25 ml Methanol 65 h gerührt, dann zu einem Schaum eingeengt. Der zweite Schaum wurde an 20 g Kieselgel mit 13:1 CH₂Cl^/ GH-,ΟΗ als Elutionsmittel chromatographiert. Reine Produktfraktionen wurden vereinigt und zu einem gereinigten¹ Titelprodukt, einem Schaum, eingeengt, 336 mg; DC R_x 0,4 (90:10:1 CH₂Cl₂ZCH₃OHZkOnZ. NH₄OH; ¹³CNMR ^CDCl₃, i-(CH₃)₄ Si_-J⁷ ppm 210,87 (C-4-¹· C=C) , 176,03 (Lacton-C=G), 157,41 (Carbamates); 136,31, 128, 2 und 123,0 (aromatischer.Ring) ; 104,15 und 96,83 (C-3, C-5).

Alternativ wurde Titelprodukt des vorhergehenden 3eispiels (6 g) 16 h gerührt, dann 4 h rückfluSgekocht und zum Titelprodukt, einem klebrigen Schaum, 6,2 g, eingeengt,, dessen DC (Rf und Elutionsmitte! wie oben) ausreichende Reinheit zur direkten Verwendung in der nächsten Stufe anzeigt.

Ebenso wird das gleiche Titelprodukt durch Solvolyse des 2'-O-Propionylesters des vorhergehenden Seispiels hergestellt,

Beispiel 7

4"-Epi-9-desoxo-9a-aza-9a-homoerythromycin A (VI) Methode A , .

Titelprodukt des Beispiels 2 (40 g) wurde in 600 ml,CH„GH gelöst, NaBH (45 g) wurde über 45 min zugesetzt, wobei die Temperatur unter 38 gehalten wurde. Das Reaktionsgamisch wurde 64 h gerührt, dann zu einem dicken Brei eingeengt, aer überschüssiges Borhydrid und Soresterkomplex des Produkts ,enthielt,. Letzterer wurde zwischen je 500 ml CH₀Cl₀ und HpO verteilt, und folgende Sequenz wurde dreimal wiederholt: Der pH wurde unter Rühren mit verdünnter HCl auf konstanten pH 2/5 eingestellt; das Gemisch wurde 25 min kräftig gerührt.; und die HpQ-Schicht wurde abgetrennt, mit 500'ml frischem CH₂Cl₀ vereinigt, mit verdünnter NaOH auf pH 9,5 eingestellt und die Cn'Clp-Schicht abgetrennt. Die CH₀CIp-Schicht vom pH 9,5 wurde mit 500 ml frischem H₀O zum Wiederholen der Sequenz zusammengebracht, Beim dritten Durchgang wurde die CH^Clp-Schic'ht vom pH 9,5 (über Na₉SO.) getrocknet und zu einem rohen Titelprodukt, einem Schaum, 34 g, eingeengt, das aus 150 ml heißem Isopropylether kristallisiert wurde, gc-kühlt und verdünnt mit 300 ml Pentan, was' gereinigtes Titelprodukt, 25,3 g lieferte; weiße Kristalls; DC Rf 0,5 (9:1- CHCl₃!Diethylamin); Rf 0,1 (90:10:1 CH₂Cl₂/ CH₃OH/konz* NH₄OH) , Schmp.' 170 - ISO⁰; ¹HNMR (CDCl-.) tiT 2 ,26 /~6H, s (CH^)pN-J/, 3,29 (3H, s, Cladinose-CH^O-) ; ¹³CMMR /""CDCl₃, i-(CH₃J₄ Si_7 ppm 179,44 (Lac ton-C=O) , 103,57 und-' .96,70 fc-S, -C-5); 41,50 /"( CH-,). _- M- 7.

Methode 8 . .

Micht-chromatographiertes Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels (6,2 g) wurde in, 200 ml Ethanol gelöst und über 12,5 g Raney-Ni bei 3,5 bar Oberdruck (50 psig) 18 h hydriert. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, mit 20 g frischem Raney-Ni versorgt und weitere 4 h hydriert, Filtrieren und frische Katalysatorzufuhr wurden wiederholt und die Hydrierung weitere 15 h fortgeführt. Filtrieren und Einengen des Filtrats ergab rohes Titelprodukt als weißen Schaum, Letzterer wurde zwischen'CHpCl₂ und gesättigter NaHCO-, verteilt und die organische Schicht abgetrennt,, (übe>' Na₀SO₄) getrocknet und zum Titelprodukt eingeengt, .. einem zweit en weiSen Schaum, 3,6 g, kristallisiert wie oben, um gereinigtes Titslprodukt, 8,55 mg, mit zu dem nach Methode A hergestellten Produkt, identischen physikalischen-Eigenschaften zu ergeben. .'

Beispiel 8

4"-Epi-9-desoxo-Sa-hydroxy-9a-aza-9a-hornοerythromycin A-3¹-

Titelprodukt des vorhergehenden, Seispiels (3,0 g) wurde unter Rühren unter N₂ in 15 ml 1:1 THF :CH_,OH gelöst. 30Jbiges H^O,, (5 ml) .wurde zugesetzt. Nach 0,5 h wurde weiteres 30%iges H₂C' (2,5 ml) zugesetzt. Mach weiteren. 0,5 h wurde das Reaktionsgemisch vorsichtig in. 1:1'CH₂Cl₂:HpQ ' mit einem Überschuß an Na₀SO- gegossen (exotherm). Der pH war 9. Die wäßrige Schicht wurde mit frischem CH₂Cl₀ und dann mit Ethylacetat gewaschen. Die organischen Schichten

. . ' - 24 -

wurden vereinigt, (über Na^SO ) getrocknet und zum, Titelprodukt eingeengt, 2,7 g, DC Rf 0,15 (60:10:1 l konz. NHOH); ¹HNMR (CDCl₃) <f-3 ,21 £~6H , S, ₃₂ 3,38 (3H₁ s, Cladinose-CH^Q-); MS: Hauptpeaks bei m/e 576 (Ion ,aus der Desosarain-Fragmentierung am C-5), 418 (N-Hydroxyaglycon-Ion minus beide Zucker). Seide Peaks fürden -N-OH-Rest mit Aglycon diagnostisch.

Beispiel 9

Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels (2,6 g; 0,0034 Hol) wurde in 100 ml CHpCl„ gelöst..Unter starkem Rühren wurden K₂CO₃ (37,5 g, 0,271 Mol) und dann CH₃J (19,3 g, 8,5 ml 0,136 Hol) zugesetzt und das Gemisch 20 h gerührt. Filtrieren und Einengen ergab wenig Produkt als Schaum, 2,9 g; DG Rf 0,3 (60:10:1 CH^Clg/CHjOH/konz. NH₄OH), Rf 0,15 (90:10:1 CH₂Cl₂/CH₃OH/konz, NH₄OH).

So hergestelltes Titelprodukt (2,3 g) wurde durch Chromatographie an 85 g Kieselgel mit 9O':1O:1 CH₂Cl₂/CH_OH/konz, NH₁OH als Elutionsmit tel weiter gereinigt.; dadurchvvurden geringere, polare Verunreinigungen entfernt, Ausbeute 0,87g·; ¹HrJHR' (CDCl₃) 2,32 (3H, s, Aglycon CH₃-N-), 3 ,20 /"6H , s, '(CH₃) N*Q_7, 3,37 (3H,-s, Cladinose-CH₃O-).

3eispiel 10

4"-Epi-9-desoxo-9a-methyl-9a-aza-93-homoerythrotnycin A (IV) Methode A " . :

Titelprodukt des Beispiels 7 (0,706 g, 0,96 mMol) wurde in 20 ml CHCl- gelöst. Formaldehyd (37 %, O,07S ml) und dann Ameisensäure (0,03 inl) wurden zugesetzt und das Gemisch 4 h 'gerührt, dann 7 h rückfluSgekocht. Das-Reaktionsgemisch, wurde gekühlt, zu 30 ml H₀O gegeben und mit 6 η NaOH auf pH 9 eingestellt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, (über Nap-SO.) getrocknet und zu Titelprodukt, einem weißen Schaum, ,0,7 g, eingeengt; kristallisiert aus heißem Ethanol/ H₀Q, 302 mg, Scnmp'. 153 ; umkristallisiert aus heißem Ethanol/ H₂O, 246 mg, Schrap. 155°, DC Rf 0,55 (60:10:1 CH₂Cl₀ZCH₃OH/ konz. NH OH) , Rf 0,6 (9:1 CHCl.,: Diethylamin); ¹HMMR (CDCl,) c/ 2,29 l_ 9H, verbreitertes s, Aglycon-N-CH-, und Desosamin-(CH-^)₀N-J/, 3,31 (3H, s, Cladinose-CH-O-) ; ^³CNMR (i-CDCl-,)/ ppm 173,89 (Lacton-C=O) , 102,63 und 9.5,15 (C-3, C-5) ,' 40,33 - £2.{ CH^)₀N-JZ; MS.: Hauptpeaks bei m/e 590 (N~Nethyl-aglycon~ Desosamin-lon über Cladinose-Spaltung am C-I"), 415 (N-Methyl-aglycon-Ion (minus beide Zucker über Spaltung am C-I", C-5), 158 (Grund-Peak, vom Desosamin stammendes Fragment). _; ;

Methode .3

Nicht-chromatographiertss Titelprodukt des vorhergehenden' Beispiels (0,242 g) und 10 % Pd/C (0,4 g). wurden in 15 ml 95S&igen Ethanols zuaafinnengebracht und das Gemisch eine Stunde bei 3,5 bar überdruck (50 psig) hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtrieren rückgewonnen und das Filtrat zum Titelpr.odukt als einem weißen Schaum, 160 mg, eingeengt,

kristallisiert aus Ether/Pentan, 124 mg, umkristallisiert aus Ethanol/H-Q, 95 mg, mit physikalischen Eigenschaften, die mit denen des Titelprodukts nach Methode A identisch waren. - .

Methode C .

Chroraatographisch gereinigtes Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels (319 mg) und Raney-Nickel (1,5 g, 50 % wasserfeucht) wurden in 20 ml Ethanol zusammengebracht und 1,5 h bei 3,5 bar Oberdruck (50 psig) hydriert. Katalysator wurde abfiltriert und die Mutterlauge zur Trockne eingeengt, um

205 mg Titelprodukt zu ergeben, identisch in den physikalischen Eigenschaften mit dem Titelprodukt nach Methode A.

Seispiel 11 ' . -

2' -O-Acetyl-g-desoxo.-ga-methyl-ga-aza-ga-hofp.oerythromvcin A

Titelprodukt der Herstellung 5 (2,5 g, 3,34 mMol) wurde mit Essigsäureanhydrid (0,339 ml, 3,60 mMol) in 30 ml CH_pCl_o 4 η gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde eingeengt und der Rückstand in 50 ml Ethylacetat gelöst, mit 50 ml H_0 zusammengebracht, und dar pH mit 1 η MaOH auf '9,5 eingestellt. Die wäßrige Schicht wurde abgetrennt und mit 20 ml frischem Ethylacetat gewaschen. Die organischen Schichten wurde vereinigt, (über Na^SO^) getrocknet, eingeengt, in 30 ml CHCl₃ gelöst und erneut eingeengt, um Titelprodukt als trockenen Feststoff zu ergeben, 2,32 g ^HNMR/CDCi-, mit <$ 3,31 (C4^U-OCH,) 7 2]28 (N-CfU),- 2,25 /~N-(CH-.) _o__/ und 2,0 (2'-0COCH^).

Beispiel 12 '

2'-O-Acetyl-4"-desoxy-4"-oxo-9~desoxo-9a-methyl-9a-aza-9ahomoerythromycin A (Villa) '

Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels (2,5 g , 3,2 mMol)' und DMSO (0,38 ml, 5,23 fflHol) wurden in 90 ml CHpCl₂ gelöst und auf -70 ⁰C gekühlt. Unter Halten einer Temperatur unter -50 ⁰C wurde Trifluoressigsäureanhydrid (0,72 mi, 4,95 rnMol) zugespritzt und das Gemisch 50 min bei -60 gerührt. Triethylamin (1.54 ml, 21 mMol) wurde zugespritzt, wobei während der Zugabe weniger als -50 gehalten wurden. Das Gemisch wurde dann auf O erwärmt,, mit H„0 vermengt und der pH mit verdünnter NaOi-K auf 9,5 eingestellt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, (über NaSO,,) getrocknet, um Titelprodukt als Schaum, 2,5 g, zu^ergeben. Der Schaum wur- de·.an Kieselgel mit 10:1 CHCl-,:CH-,OH als Elutionsmit tel ; unter dünnschicntchromatographiscner überwachung und Auffangen von drei Fraktionen blitzchromatog.raphiert. Die reinste Produktfraktion 1, 1,7 g, wurde in CHCl-, gelöst., mit Ή^Ο verdünnt,, mit verdünnter HCi auf pH 4 eingestellt und die wäßrige Schicht abgetrennt, mit frischem CHCl- verdünnt, mit verdünnter NaQH auf pn S eingestellt und die 'organische Schicht abgetrennt.. Die letzte wäßrige Schicht wurde mit 3 Portionen, frischem CHCl- extrahiert. Die letzten vier organischen Schichten wurden vereinigt, mit H„0 rückgewasehen, (über Na^SG,,) getrocknet und eingeengt, um gereinigtes Titelprodukt zu ergeben, 0,93 g; DC Rf 0,7 (5:1:0,1 CHCl VCH-,ΟΗ/ΝΗ ,OH) ; ¹HNMR (CDCl-,) mit </" (ppm) : 2,05 (s, 3H , CCCH-,), 2,25 /fs, SH, N(CH.,) 7, 2,33 (d, 3H, NCH-) und 3,33 (d, 3H₁ CCH-).

- 28 Beispiel 15

raycin A (VIIa)

Titelprodukt des vorhergehenden Beispiels (0,93 g) wurde in Methanol gelöst. Nach 20 min wurde das Geraisch eingeengt, um das Titelprodukt zu ergeben, 0,74 g; MS 746,4, 588,4, 573,4, 413,3, 158,1, 125,1; ¹HMNR'(CDCl,) mit (f {ppm) χ 5,5 (t, IH, Cl"-H) , 4,6 (q, IH, Cr"-H) , 3,35 ( s, 3Η , OGH₃), 2,38 (s, 3H, NCH₃), 2,30 £""s, 6H, N(CH₃) ₂J7.

Beispiel 14 .

4"-£pi~9-desoxo-93-methyl-9a-aza-9a-hoffloerythromycin A (IV)

Titalprodukt des vorhergehenden Beispiels (0,25 g) und 250 mg Räney-Mickel' wurden in 20 ml Ethanol zusammengebracht und 4 h unter 3,5 bar Oberdruck (50 psig) hydriert» Der Katalysator wurde abfiltriert und. das Filtrat zu einem öl eingeengt, das beim Stehen kristallisierte. Titelprodukt wurde; durch Verreiben mit Isopropylether und Filtrieren gewonnen, · 0,13 g, identisch in seinen Eigenschaften mit dem Produkt des. Beispiels". 10.

Herstellung 1 ' .'.'..

4"-£pi-erythro;r;ycin A

Eine Suspension von 100 g Raney-Mickelschlanrn in 1 1 aosolutsfii Ethanol mit 100 g 4"-Oesoxy-4"-oxoBrythro,T.ycin A (US-PS 4 510 220) wurde in einer V/asserstoffatmosphäre über Nacht bei Raumtemperatur bei 3,5 bar .Oberdruck (50 Psig).geschüt-

telt. Der verbrauchte Katalysator wurde über,Diatomeenerde abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zu 300 ml eingeengt. Wasser (700 ml) wurde dem konzentrierten Filtrat zugesetzt und die anfallende milchige Lösung auf.einem Dampfbad erwärmt. Eine kleine Menge Ethanol wurde zugesetzt, um Harzbildung des Produkts beirr. Ausfallen aus der Lösung zu verhindern. Mach 2 h Rühren bei Raumtemperatur wurde das Produkt filtriert und getrocknet, 57,6 g, und das. Filtrat im Vakuum bis zum Trübungspunkt eingeengt. Das Gemisch wurde, I h gerührt und filtriert und getrocknet, 21,4 g.

pie anfallenden Ausbeuten wurden vereinigt, Schmpi 141 144 ⁰C. Das ^xHNMR-5pektrum (CDCl.,) zeigte Absorption beim ., 3,3 (3H, s),.. 2,3 (5H, s) und 1,4 (3H, s) 'ppm,

Herstellung 2 Erythromycin A-oxim-Hydrochlorid

Unter U₀ wurde Erythromycin A (500 g, 0,681 Mol) in Pyridin (2,787 kg,· 2,350 1, 35,29 Mol) gelöst. Hydroxyiamin-Hydrochlorid (1,183 kg, 17,02 Mol) wurde zugesetzt und das Gemisch 22 h gerührt, dann zu einer dicken Aufschlämmung eingeengt und mit Isopropanol zum Waschen filtriert. Filtrat und V/aschflüssigksit wurden nach ihrer Vereinigung erneut j zu einer dicken, wachsartigen Masse eingeengt, die durch Verreiben mit 2 1 -Vasser kristallisierte, 515 g (etwas wasserfeucht, in der nächsten Stufe ohne gründliches Trocknen eingesetzt); DC Rf 0,45 (60:10:1 CH^Ci^/CH-OH/konz. NH₄OH).

Nach der gleichen, Arbeitsweise wurden 5 g Erythromycin A in getrocknetes Titelprodukt umgewandelt, 4,5 g, wenigstens

95 % rein nach GNMR, Umkristallisieren von 1 g aus 10 ml Methanol und 30 ml Isopropylether ergab 725 mg, Scnmp, 187 (Zers.) ^"Literatur-Schmp, 188 - 191 , Massey et al./ Tetrahydron Letters, S. 157 - 160, 197O_-J; ¹³CNMR /"OMSO-dg, i-(CH₃)₄ Si_-J⁷ ppm 174,35 (Lacton-C=-O) , 168,78 (C=N-), 101,0 und 95,46 (C-3, G-5).

Herstellung 3

9a~Aza-9a-homoerythromycin A -

Nach der Arbeitsweise des Beispiels 2 wurde unter Gasentwicklung auf Zugabe des Bicarbonats etwas wasserfeuchtes Titel- >. produkt dar vorhergehenden Herstellung (615 g, geschätzt 506 g, 0,613 Mol auf Trockenbasis) in kristallines Titelprodukt umgewandelt, 416 g; ¹³CNMR £~i-CDCl₃J7 ppm 177,54 (Lacton-C=0) , 163,76 (AmId-C=O), 102,28 und 94,20 (C-3, C-5) , 40,13 Z.""(CH₃ J₂N-J⁷. -

Herstellung 4 Q-Desoxo-ga-aza-ga-hofnOerythromycin A

Durch Reduktion mit NaBH nach der Methode von Kobrehel et al. (s. o.) wurde Titelprodukt der vorhergehenden Herstellung in dieses Titelprodukt umgewandelt»

Herstellung 5

9-O es οχ ο-9 a-m e t h yl-9a-aza-9 a-h om ο e ryt h r omyc in A

Nach der Arbeitsweise·des obigen Beispiels 10 wurde Titelproduktdar vorhergehendan Herstellung (21,1 g, 0,0287 Mol)

in dieses Titelprodukt umgewandelt, zunächst als weißer

Schaum isoliert, kristallisiert aus heißem Ethanol/H^O, 18,0 g, Schmp. 136 ⁰C.

Claims

E rfindungsanspruch

1. Verfahren zur Herstellung von 4"-Epi-Q-desoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-hamoerythromycin A oder einem pharmazeutisch annehmbaren Salz hiervon, gekennzeichnet durch

a) Methylieren von 4"-Epi-9-desoxo-9a-aza-Sa-homoerythromycin A mit Formaldehyd in Gegenwart eines Reaktionsmittelsi ausgewählt unter Ameisensäure, Natriumcyanoborhydrid oder Wasserstoff und einem Edelmetallkatalysator in einem reaktionsinerten Lösungsmittel· bei . 20 - 100 ⁰C,

b) N-Desoxygenieren von 4"-Epi-9-desoxo-9a-meihyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A-3'-N-oxid mit Vi/asserstoff über einem Edelmetall- oder Raney-Nickel-Katalysator in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 20 - 100 C oder

c) Hydrieren von 4"-üesoxy-4"-desoxo-9-desoxo-9a-raethyl-9-a-aza-9a-horaoerythromycin: A über einem Edelmetall- oder Raney-Nickel-Katalysator in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 20 - 100 ⁰C.
2. 'Verfahren nach Punkt I^ gekennzeichnet dadurch, daß ^"-Epi-Q-desoxo-ga-aza-Qa-hoinoerythromycin A durch ¹Reduktion von 4"-Epi-9a-aza-9a-homoerythromycin A mit überschüssigem NaSH^ in einem protischen Lösungsmittel bei O - 50 ⁰C hergestellt wird.

3« Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß

4"-Epi-Q-desoxo-9a-raethyl-9a-aza-9i3~!iGi7!uer ythroraycin A-3¹ M-Oxid durch Hsthylleren und Deshydroxylierenι von 4"-Epi-S-desoxo-9a-hydroxy-9a-aza-9a-homoerythroraycin A-3¹-N-oxid mit überschüssigem Methyljodid und K^CCL in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 0-50 C hergestellt . wird. . ^s ' ;'
4. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß 4"-Desoxy-4;'¹-oxo-9-desoxo-9a-inethyl-9a-aza-9a-horaoerythromycin A hergestellt wird durch

a) Oxidieren von '2'-0-(0'--C-,) Alkanoyl-S'-desoxo-Qa-methyl-9ä-a2a-9a-homoerythromycin A rait Trifluoressigsäureanhydrid und Diraethylsulfoxid bei -40 ⁰C bis -30 ⁰C, anschließendes Behandeln mit Triethylamin zur Bildung von 2'-0-(C^-C₃)-Alkanoyl-4"-desoxy-4"-oxo-9-desoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A und

b) Solvolyse des 2'-O-(C₂-C₃)Alkanoyl-4^I'-oxo-Derivats in Methanol bei O - 100 ⁰C.
5. Verfahren nach Punkt 3, gekennzeichnet dadurch, daß 4"- £pi-9-desoxO-9a-hydroxy-9a-aza-9a-homoerythromycin A-3'-N-oxid durch Oxidieren von 4"-Epi-9-desoxo-9a-aza-9ahomoerythromycin A mit H₀O₇ in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 10 - 50 C hergestellt wird, das wiederum durch Reduktion von 4"-Epi-'9a-aza-9a-nomoerythromycin A mit überschüssigem NaBH/ in einem protischen Lösungsmittel bei O - 50 ⁰C hergestellt wird.
6. Verfahren nach Punkt 2 oder Punkt 5, gekennzeichnet dadurch, daß 4"-cpi-9a-aza-9a-homoerythromycin A durch Um-

lagerung von 4"-Epi-erythromycin A-oxim in Gegenwart eines Überschusses eines organischen SuIfonylchlorids in einem wäßrigen Niederketon-Lösungsmittel mit einem großen Überschuß an NaHCO₃ bei O - 50 ⁰C hergestellt wird.

7, Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß 4"-.Epi-9-desoxo-Q.a-aza-Ba-.homoeTythromycin A durch Hydrieren von 9a-8enzyloxycarbonyl-9-desoxo-4"-desoxy-4"-oxo-9aaza-9a-honroerythromycin A über einem Raney-Nickel-Katalysator in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei 20 100 ⁰G hergestellt wird.

S. Verfahren nach Punkt 7, gekennzeichnet dadurch, daß 9a-Benzyloxycarbonyl-9-desQxO"-4''-desoxy-4"-^oxo-9^a-^aza~2^a~ horaoerythromycin A hergestellt wird durch .' -

a) Acylieren von 9-Desoxo-9a-aza-9a-honⁱ.oerythromycin A mit einem begrenzten Überschuß an Essig- oder Propionsäureanhydrid in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei^O - 30 ⁰C zu 2' -O- (C₂-C₃) Alkanoyl-9-desoxo-9a-az^:ä-9a-homoerythromycin A, .

b) Umsetzen des 2'-0-{C^,-C,) Alkanoyl-9^-desoxo-9a-aza-9ahomoerythromycin A mit Carbobenzoxychlorid in Gegenwart einer Base in einera reaktionsinerten Lösungsmittel/bei O -.50'⁰C zu 2-'-0-(C_C)-C^)Alkanoyl-9-desoxo-9a' benzyloxycarbonyl-9a-aza-9a-horaoerythroίrIycin A,

c) Oxidieren des 2¹-G-(C₀-C) Alkanoyl-9-desoxo-Sa-benzyl-. oxy-carb.onyl-.Sa-aza-Qa-horaoerythroaycin A mit Oxalylchlorid und Dimethylsuifoxid bei -40 bis -80 C und anschließendes Behandeln mit Triethylamin zur Bildung

. ' ι . von 2'-(C„-C-)Alkanoyl-9a-benzyloxycarbonyl-9-despxo-4"-desoxy-4"-oxo-9a-aza-9a-homoerythi^omycin A und

d) Solvolysieren des 2'-0-(C₂-C) Alkanoyl-9a-desoxo-9abenzyloxycarbonyl-4"-desoxy-4"-oxo-9a-aza-9a-horaoerythromycins in Methanol bei O - 100 C.
9. Verfahren zur Herstellung von Erythromycin A-oxim oder 4"-Epi-erythromycin A-oxim, gekennzeichnet dadurch, daß Erythromycin A (oder ein Säureadditionssalz von diesem) oder 4"-Epi-erythromycin A (oder ein Säureadditionssalz hiervon mit wenigstens einem Äquivalent Hydroxylamin (odsr einem Säureadditionssalz hiervon) in einem Oberschuß eines schwach basischen tertiären Amins zusammengebracht wird i > *
10. Verfahren nach Funkt 9/ gekennzeichnet dadurch, daß das schwach basische Arnin Pyridin ist.