CZ304522B6

CZ304522B6 - C-Arylglukosidový inhibitor SGLT2, farmaceutická kompozice s jeho obsahem, farmaceutická kompozice či kombinace s jeho obsahem a použití

Info

Publication number: CZ304522B6
Application number: CZ2002-1285A
Authority: CZ
Inventors: Bruce Ellsworth; William N. Washburn; Philip M. Sher; Gang Wu; Wei Meng
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1999-10-12
Filing date: 2000-10-02
Publication date: 2014-06-18
Also published as: AU781009B2; DE60020259T2; CN1407990A; TR200200986T2; PL355018A1; PE20011000A1; AU7848300A; DE60020259D1; NO20070149L; PL204358B1; HUP0300393A2; CZ20021285A3; US6414126B1; CA2388818C; EP1224195B1; HUP0300393A3; MY125405A; CN1284793C; MX237254B; JP4365554B2

Abstract

Jsou popsány sloučeniny připojeného vzorce, které jsou inhibitory na sodíku závislých glukózových přenašečů, které se nachází ve střevech a ledvinách (SGLT2). Dále jsou popsány farmaceutické kompozice obsahující uvedenou sloučeninu, farmaceutické kombinace obsahující kromě uvedené sloučeniny také antidiabetické činidlo a použití svrchu uvedené sloučeniny pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčení diabetu, zvláště diabetu typu II, hyperglykemie, hyperinzulinemie, obezity, hypertriglyceridemie, syndromu X, diabetických komplikací, atherosklerózy a příbuzných chorob, samostatně nebo v kombinaci s antidiabetickým léčivem a/nebo terapeutickým činidlem, jako je hypolipidemické činidlo. Také jsou popsány meziprodukty pro jejich výrobu.

Description

Tento vynález se týká C-arylglukosidů, které jsou inhibitory na sodíku závislých glukózo vých přenašečů, které se nachází ve střevech a ledvinách (SGLT2), farmaceutická kompozice obsahující svrchu uvedený C-arylglukosid, farmaceutické kombinace obsahující svrchu uvedený Carylglukosid společně s antidiabetickým činidlem a použití svrchu uvedeného C-arylglukosidu pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčení diabetů, zvláště diabetů typu II, hyperglykemie, hyperinzulinemie, obezity, hypertriglyceridemie, syndromu X, diabetických komplikací, atherosklerózy a příbuzných chorob, samostatně nebo v kombinaci s jedním, dvěma nebo více jinými typy antidiabetických léčiv a/nebo jedním, dvěma nebo více typy terapeutických činidel, jako jsou hypolipidemická činidla.

Dosavadní stav techniky

Přibližně 100 milionů lidí po celém světě trpí diabetem typu II (NIDDM), který je charakteristický hyperglykemií v důsledku nadměrné produkce jatemí glukózy a periferní inzulínovou rezistencí, klíčových příčin, které jsou dosud neznámé. Hyperglykemie je považována za hlavní rizikový faktor pro rozvoj diabetických komplikací a pravděpodobně přispívá přímo k poruchám inzulínové sekrece při pokročilé NIDDM. Předpokládá se, že normalizace plazmové glukózy u pacientů s NIDDM by mohla zlepšit inzulínové působení a eliminovat rozvoj diabetických komplikací. U inhibitoru na sodíku závislého glukózového přenašeče SGLT2 v ledvině by bylo možno předpokládat, že pomáhá při normalizaci hladin plazmové glukózy a snad tělesné hmotnosti zvýšením exkrece glukózy. Vývoj nových bezpečných a orálně aktivních antidiabetických léčiv je také žádoucí pro doplnění existujících léčiv, které zahrnují sulfonylmočoviny, thiazolidindiony, metformin a inzulín a vyhnout se tak případným vedlejším účinkům spojených s použitím těchto léčiv.

Hyperglykemie je charakterizovaný znak diabetů typu II (NIDDM); důsledná kontrola hladin plazmové glukózy u diabetů může eliminovat rozvoj diabetických komplikací a selhání beta buněk, ke kterému dochází u pokročilé choroby. Plazová glukóza je normálně filtrována v ledvinách v glomerulech a je aktivně reabsorbována v proximální tubule. Zdá se, že SGLT2 je hlavní přenašeč odpovědný za opětné získání glukózy na tomto místě. SGLT specifický inhibitor phlorizin nebo blízce příbuzné analogy inhibuj i proces opětného získání u diabetických hlodavců a psů, což má za následek normalizaci hladin glukózy v plazmě podnícením exkrece glukózy bez hypoglykemických vedlejších účinků. Bylo popsáno, že dlouhodobé léčení (6 měsíců) Zuckerových diabetických krys pomocí inhibitoru SGLT2 zlepšuje odezvu inzulínu na glykemii, zlepšuje inzulínovou citlivost a posouvá začátek nefropathie a neuropathie u těchto zvířat s nedetekovatelným patologickým účinkem na ledviny a bez elektrolytické nevyváženosti plazmy. Selektivní inhibice SGLT2 u diabetických pacientů by mohla normalizovat plazmovou glukózu zvýšením exkrece glukózy do moči a tím zlepšovat inzulínovou citlivost a oddalovat rozvoj diabetických komplikací.

Devadesát procent zpětného příjmu glukózy v ledvinách se děje v buňkách epitelu prvního SI segmentu renální kortikální proximální tubuly a SGLT2 je pravděpodobně hlavní přenašeč odpovědný za tento zpětný příjem. SGLT2 je protein o 672 aminokyselinách obsahující 14 membránových segmentů, který je převážně exprimován v prvním SI segmentu renálních proximálních tubul. Substrátová specifita, závislost na sodíku a umístění SGLT2 jsou v souladu s vlastnostmi vysokokapacitních nízkoafinitních na sodíku závislých přenašečů glukózy dříve popsaných v lidských kortikálních ledvinových proximálních tubulách. Kromě toho studie naznačují, že SGLT2 je převažující Na⁺/glukózový spolupřenašeč vSÍ segmentu proximální tubuly, neboť

-1 CZ 304522 B6 skutečně všechna Na-dependentní glukózová transportní aktivita zakódovaná v mRNA z kortexu krysích ledvin je inhibována proti oligonukleotidem specifickým ke krysí SGLT2. SGLT2 je kandidátní gen pro určité formy glukosurie, genetické abnormality, při které je renální reabsorpce glukózy do různé míry zhoršena. Žádný z dosud zkoumaných syndromů nemapuje umístění SGLT2 na chromozomu 16. Avšak studie vysoce homologních hlodavčích SGLT silně naznačují, že SGLT2 je hlavní renální na sodíku závislý přenašeč glukózy a naznačují, že místo glukosurie, které bylo zmapováno, kóduje regulátor SGLT2. Inhibice SGLT2 by mohla redukovat hladiny glukózy v plazmě prostřednictvím zvýšené exkrece glukózy u diabetických pacientů.

SGLT1, jiný Na-dependentní glukózový spolupřenašeč, který je z 60 % identický s SGLT2 na hladině aminokyselin, je exprimován v tenkém střevu a ve vzdálenějším S3 segmentu renální proximální tubuly. Navzdory této podobnosti v sekvenci, jsou lidské SGLT1 a SGLT2 biochemicky rozlišitelné. U SGLT1 je molámí poměr Na⁺ ku transportované glukóze 2:1, přičemž u SGLT2 je tento poměr 1 : 1. Km pro Na⁺je pro SGLT1 32 a pro SGLT2 250 až 300 mM. Hodnoty Km pro zpětný příjem glukózy a nemetabolizovatelného analogu glukózy oc-methyl-Dglukopyranosidu (AMG) jsou obdobné pro SGLT1 a SGLT2, tj. pro přenašeče SGLT1 a SGLT2 0,8 a 1,6 mM (glukóza) a 0,4 a 1,6 mM (AMG). Tyto dvě přenašeče se liší svými substrátovými specifitami pro cukry, jako je galaktóza, která představuje substrát pouze pro SGLT1.

Podávání phlorizinu, specifického inhibitoru aktivity SGLT, poskytlo in vivo důkaz konceptu povzbuzením exkrece glukózy, snížením nedostatku a spotřeby glukózy v plazmě a zvýšením využití glukózy bez hypoglykemických vedlejších účinků u několika diabetických modelů u hlodavců a u jednoho modelu diabetů u psů. Nebyly zjištěny žádné nežádoucí účinky na plazmatickou iontovou vyváženost, funkci ledvin nebo morfologii ledvin jako následek léčení phlorizinem po dobu dvou týdnů. Kromě toho nebyly pozorovány žádné hypoglykemické nebo jiné nežádoucí účinky při podávání phlorizinu normálním zvířatům, nehledě na přítomnost glykosurie. Bylo popsáno, že podávání inhibitoru renální SGLT po dobu 6 měsíců (Tanabe Seiyaku), zlepšuje spotřebování glukózy v plazmě, zlepšuje sekreci a využití inzulínu u obézních NIDDM krys a brání rozvoji nefropathie a neuropathie při absenci hypoglykemických nebo renálních vedlejších účinků.

Samotný phlorizin je nezajímavý jako orální léčivo, neboť je nespecifický inhibitor SGLT1/SGLT2, který je hydrolyzován ve střevu na aglykonpholoretin, který představuje silný inhibitor usnadněného transportu glukózy. Konkurenční inhibice glukózových přenašečů (GLUT) je nežádoucí, neboť u těchto inhibitorů se předpokládá, že aktivují periferní inzulínovou rezistenci a vyvolávají hypoglykemii v CNS. Inhibice SGLT1 může také mít nežádoucí následky, jak je doloženo dědičným syndromem malabsorpce glukózy/galaktózy (GGM), při kterém mutace spolupřenašeče SGLT1 vedou ke zhoršení opětného příjmu glukózy v zažívacím traktu a život ohrožujícímu průjmu a dehydrataci. Biochemické rozdíly mezi SGLT2 a SGLT1 stejně jako stupeň rozdílnosti sekvence mezi nimi umožňují identifikaci selektivních inhibitorů SGLT2.

Běžné syndromy glukosurie jsou podmínky, při kterých transport glukózy ve střevech a renální transport jiných iontů a aminokyselin je normální. Běžní pacienti s glykosurií se jeví jako normální, mají normální hladiny glukózy v plazmě a zdá se, že netrpí žádnými zásadními zdravotními potížemi jako následek jejich choroby vyjma někdy poměrně vysokých (110 až 114 g/den) hladin vyloučené glukózy. Hlavní symptomy pozorovatelné u těchto pacientů zahrnují polyfagii, polyurii a polydipsii, a ledviny se jeví jako normální co do struktury a funkce. Z dosud uvedených faktů se proto jeví, že defekty renálního opětného získávání glukózy mají minimální dlouhodobé negativní důsledky u jinak normálních jednotlivců.

Následující odkazy popisují O-arylglukosidové inhibitory SGLT2 pro léčení diabetů.

EP 598359A1 (také JP 035988) (Tanabe Seiyaku) popisuje sloučeniny následujícího vzorce A.

-2CZ 304522 B6

R¹ = H, acyl

R² = H, Me

R⁴, R⁴ mohou být různé substituenty

EP 0850948A1 popisuje vzorce následujícího základu B

R¹ = H, acyl, CO(OAlkyl) R² = H, allyl R³ = H nebo Me

JP 09188625A rozšiřuje strukturu B pro zahrnutí příkladů B, kde R³ je H a kde pětičlenný kruh je nasycený stejně jako u benzotiofenů (O = S) a indenů (O = CH₂).

R¹ = H, acyl, CO(OAlkyl) R² = H, allyl R³ = H nebo Me

JP 09124685A rozšiřuje strukturu B pro R³ = a H, zahrnuje deriváty monoacylovaných C6 hydroxylů, kde acylová skupina je substituována benzoovou nebo pyridylkarboxylovou kyselinou nebo urethanem vytvořeným z odpovídajícího fenolu.

-3CZ 304522 B6

R¹, R² = H, alkyl, alkoxyskupina, aryl nebo spolu oxoskupina = alkanoyl pokud R² = H = alkoxykarbonyl pokud = H

EP 773226-A1 popisuje deriváty struktury B.

JP 08027006-A popisuje deriváty struktury A, kde různé kombinace hydroxylu glukózy jsou acylovány a jeví se být obdobný jako EP 598359A1.

Jeví se, že EP 684254-A1 zahrnuje deriváty struktury B popsané v JP 09188625A.

Jiné zprávy a publikace, které popisují inhibitory SGLT2 zahrnují:

K. Tsujihara et al., Chem. Pharm. Bull. 44, 1174- 1180 (1996).

M. Hongu et al., Chem. Pharm. Bull. 46, 22 - 33 (1998)

M. Hongu et al., Chem. Pharm. Bull, 46, 1545 - 1555 (1998)

A. Oku et al., Diabetes, 48, 1794 - 1800 (1999)

JP10245391 (Dainippon) popisuje 500 struktur jako hypoglykemická činidla pro léčení diabetů.

Jedná se o O-glukosidy hydroxylovaných kumarinů.

WO 98/31697 popisuje sloučeniny vzorce

kde Ar zahrnuje mezi jinými fenyl, bifenyl, difenylmethan, difenylethan a difenylether a R¹ je glykosid, R² je H, OH, aminoskupina, halogen, karboxyskupina, alkyl, cykloalkyl nebo karboxamidoskupina a R³ je vodík, alkyl nebo acyl, a k, m a n jsou nezávisle 1 až 4. Podskupina slouče30 nin popsaných ve WO 98/31697 obsahuje sloučeniny následujících vzorců

-4CZ 304522 B6

A je O nebo (CH₂)_X, kde x = až 3

R³ je vodík, alkyl nebo acylová skupina, kde n je 1 až 4

R² je vodík, alkyl, OH,

NH₂, halogen, CO₂H nebo karboximid, kde k je 1 až 4

které jsou popsány pro použití při léčení nebo prevenci mezi jinými zánětlivými chorobami, autoimunitních chorob, infekcí, rakoviny a rakovinných metastáz, poruch reperfuze, trombózy, vředů, poranění, osteoporózy, diabetů mellitu a atherosklerózy.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je sloučenina mající strukturu

kde

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vodík, OH, OR⁵, (Ci-Cio)alkyl, CF3, OCHF2, OCF3, SR⁵¹ nebo halogen nebo dvě z R¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

R³ a R⁴ jsou nezávisle vodík, OH, OR^5a, 0(C6-Cio)aryl, OCH2(C6-Cio)aryl, (Ci-Cio)alkyl, (C3Cjo)cykloalkyl, CF3, -OCHF2, OCF3, halogen, -CN, -CO2R^5b, -CO2H, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, -CONR⁶R^6a, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-Ci„)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g, -SO2(C₆-C_]0)aryl nebo pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂, nebo R³a R⁴ spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂;

R⁵, R^5a, R^5b, R^5c, R^5d, R^5e, R^5f, R^5g, R^5h a R⁵¹ jsou nezávisle (Cj-Cwjalkyl;

R⁶, R^6a, R^6b, R^6c a R^6d jsou nezávisle vodík, (C,-Ci0)alkyl, (C6-C10)aryl, -CCi-C10)alkyl(C6Cio)aryl nebo (C3-Ci0)cykloalkyl, nebo R⁶ a R^6a spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

A je O, S, NH nebo (CH₂)_n, kde n je 0 až 3,

-5CZ 304522 B6 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo stereoizomer;

s podmínkou, že když A je (CH₂)_n, kde n je 0, 1, 2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF3, OCF3 nebo OCHF2 a/nebo ale5 spon jedna z R³ a R⁴ je CF3, -OCHF₂, -OCF₃, -CN, -CO₂R^5b, CH(OR^5h)R^6d, CH(OH)R^6c, COR^6b,

-NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHS02(C₆-Cio)aryl, (C₆-Cio)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g nebo -SO2(C₆-C,₀)aryl.

Zvláštním provedením tohoto vynálezu je svrchu uvedená sloučenina s podmínkou, že když A je (CH₂)_n, kde n je 0, 1,2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R³ a R⁴ je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF3, OCF3 nebo OCHF2 a/nebo alespoň jedna z R³ a R⁴ je CF3, -OCHF₂, -OCF3, -CN, -CO₂R^5b, CH(OR^5h)R^6d, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C_l0)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g nebo -SO2(C₆-C₁₀)aryl nebo halogen.

Jiným zvláštním provedením tohoto vynálezu je svrchu uvedená sloučenina, která má strukturu

R*

OH

Podle tohoto vynálezu je přitom výhodné, pokud ve sloučenině podle tohoto vzorce A je CH₂20 nebo O nebo S. Z těchto sloučenin jsou zvláště výhodné sloučeniny, které mají strukturu vzorce

-6CZ 304522 B6

Ještě jiným zvláštním provedením tohoto vynálezu je svrchu uvedená sloučenina, kde A je (CH₂)_n.

Ještě dalším zvláštním provedením tohoto vynálezu je vpředu uvedená sloučenina,

-7CZ 304522 B6 kde Aje CH₂ nebo O nebo S;

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vybrány zH, (Cj-Cgjalkylu, halogenu, OR⁵ nebo OCHF2 nebo dvě skupiny z R¹, R² a R^2a jsou H a další je (C]-C8)alkyl, halogen, OR⁵ nebo OCHF₂;

R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z (Ci-C8)alkylu, OR^5a, -OCHF2, -SR^5a, OH, -CO2R^5b, -3,4(OCH2O)-, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, CF₃,

O

R^5c-C-NH-, -SOR^5f, -SO2R^5g, (C6-Cio)arylu, -NHSO₂(C₆-C_l0)arylu, -NHSO₂R^5d, CO₂H, thiadiazolu, tetrazolu, -OCH₂(C₆-Cio)arylu, -OCF₃, O(C₆-C₁₀)arylu nebo H.

Přitom podle tohoto vynálezu je přitom výhodné, pokud ve sloučenině podle tohoto vzorce A je CH₂; R¹ je vodík, halogen nebo (Ci-C8)alkyl; R² a R^2ajsou každá H; R³ je H; R⁴ je (C]-C8)alkyl, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, R^5aO, -OCHF2, -OCF3 nebo -SR^5e, a z nich jsou obzvláště výhodné sloučeniny, kde A je CH2; R¹ je vodík, halogen nebo (Ci-C8)alkyl; a R⁴ je (Ci— C8)alkyl, R^5aO, -OCHF2, nebo -SR^5e. Nejvýhodnější z takových sloučenin je sloučenina, kde R⁴je 4-C2H₅.

Ještě jiným zvláštním provedením tohoto vynálezu je vpředu uvedená sloučenina, která má následující strukturu

ve které

Aje CH₂ a v poloze meta ke glukosidu; R¹, R² a R^2ajsou každá H, a R³ je následující:

4-methyl, 4-OH, 3-methyl, H, 3-methoxy, 4-CO₂methyl, 3,4-(OCH₂O), 4-CF₃, 4-NHacetyl, 4SO₂methyl, 4-fenyl, 4-NHSO₂fenyM'-methyl, 4-NHSO₂methyl, 4-CO₂H, 4-thiadiazol, 4tetrazol, 4-OCH₂fenyl-4'-CN, 4-OCHF₂, 4-isopropyl, 2-isopropyl, 4-O-n-propyl, 4-tetrazol2'-methyl, 4-tetrazo 1-1'-methyl, 4-Ofenyl, 4-n-propyl, 4-n-butyl, 4-SO₂ethyl, 4-SO₂-npropyl, 4-SO₂fenyl nebo 4-SOmethyl.

ve kteréje

-8CZ 304522 B6

A:	R³:
vazba	H
vazba	3-methyl
vazba	4-methoxy
(CH₂)₂	H
(CH₂)₂	4-methyl
(CH₂)₃	H
(CH₂)₃	4-methyl
(CH₂)₃	3-methyl
vazba (para poloha)	H
CH₂ (ortho poloha)	H
CH₂ (ortho poloha)	4-ethyl
O	4-methyl
S	4-methyl.

ve kterém je A:	R¹:	R²:	R³:
ch₂	2-methyl	H	4-ethyl
ch₂	4-methyl	H	4-ethyl
ch₂	4-methyl	H	4-SO₂methyl
ch₂	4-methyl	H	4-OH
ch₂	4-methyl	H	4-S(O)methyl
ch₂	4-methyl	H	4-F
ch₂	4-methyl	H	4-C1
ch₂	4-methyl	H	4-methyl
ch₂	4-methyl	H	H
ch₂	4-methyl	6-methyl	4-methoxy
ch₂	4-F	H	4-methoxy
ch₂	4—Cl	H	4-SOmethyl
ch₂	4-C1	H	4-SO₂methyl
ch₂	4-C1	H	4-OCHF₂
ch₂	4-ethyl	H	4-methoxy
ch₂	4-isopropyl	H	4-methoxy
ch₂	4-isopropyl	H	4-methylthio
ch₂	4-isopropyl	H	4-SO₂methyl
ch₂	4,5-OCH₂O	H	4-ethyl

9CZ 304522 B6

ch₂	5-methyl	H	4-ethyl
ch₂	5-methyl	6-methyl	4-methoxy
ch₂	6-methyl	H	4-ethyl.

Ještě jiným zvláštním provedením tohoto vynálezu je sloučenina, která má následující strukturu

Předmětem tohoto vynálezu je rovněž farmaceutická kompozice, jejíž podstatou je, že obsahuje kteroukoli ze svrchu uvedených sloučenin a její farmaceuticky přijatelný nosič.

Předmětem tohoto vynálezu je taktéž farmaceutická kombinace, jejíž podstatou je, že obsahuje kteroukoli ze svrchu uvedených sloučenin a antidiabetické činidlo jiné než inhibitor SGLT2, činidlo pro léčení komplikací spojených s diabetem, antiobezitní činidlo, antihypertenzivní činidlo, činidlo proti krevním destičkám, antiatherosklerotické činidlo a/nebo činidlo snižující hladinu lipidu. Z nich je zvláště výhodná farmaceutická kombinace, jejíž podstatou je, že obsahuje kteroukoli ze svrchu uvedených sloučenin a antidiabetické činidlo.

Výhodným provedením tohoto vynálezu je svrchu uvedená kombinace, jejíž podstatou je, že

- antidiabetickým činidlem jsou 1, 2, 3 nebo více látek vybraných zbiguanidu, sulfonylmočoviny, glukosidázového inhibitoru, agonisty PPAR γ, duálního agonisty PPAR α/γ, inhibitoru aP2, inhibitoru DP4, inzulínového senzitizeru, glukogonu podobného peptidu-1 (GLP-1), inzulínu, meglitinidu, inhibitoru PTP1B, inhibitoru glykogenfosforylázy a/nebo inhibitoru glukos-6fosfatázy;

-antidiabetickým činidlem jsou 1, 2, 3 nebo více látek zahrnujících metformin, glyburid, glimeperid, glipyrid, glipizid, chlorpropamid, gliclazid, acarbosu, miglitol, pioglitazon, troglitazon, rosiglitazon, inzulín, Gl-262570, isaglitazon, JTT-501, NN-2344, L895645, YM-440, R119702, AJ9677, repaglinid, nateglinid, KADÍ 129, AR-HO39242, GW-409544, KRP297, AC2993, LY315902 a/nebo NVP-DPP-728A;

- sloučenina vpředu uvedeného vzorce, která je přítomna v hmotnostním poměru k antidiabetickému činidlu v rozmezí od 0,01 do 300 : 1;

- antiobezitním činidlem je beta 3 adrenergický agonista, inhibitor lipázy, inhibitor zpětného získávání serotoninu (a dopaminu), sloučeniny thyroidního receptoru beta a/nebo anorektické činidlo;

-antiobezitním činidlem je orlistat, ATL-962, AJ9677, L750355, CP331648, sibutramin, topiramat, axokin, dexamfetamin, fentermin, fenylpropanolamin a/nebo mazindol;

-činidlem snižujícím hladinu lipidů je inhibitor MTP, inhibitor HMG CoA reduktázy, inhibitor skvalensyntetázy, derivát fibrové kyseliny, regulátor aktivity receptoru LDL, inhibitor lipoxygenázy nebo inhibitor ACAT;

- činidlem snižujícím hladinu lipidu je pravastatin, lovastatin, simvastatin, atorvastatin, cerivastatin, fluvastatin, nisvastatin, visastatin, atavastatin, rosuvastatin, fenofibrat, femfibrozil, clofibrat, avasimib, TS-962, MD-700 a/nebo LY295427;

- inhibitor SGLT2 je přítomen v hmotnostním poměru k činidlu snižujícímu hladinu lipidu v rozmezí od 0,01 do 300 : 1.

- 10CZ 304522 B6

Předmětem tohoto vynálezu je taktéž použití kterékoli ze sloučenin vpředu uvedeného vzorce pro výrobu farmaceutické kompozice určené pro léčení nebo oddálení progrese nebo propuknutí diabetů, diabetické retinopathie, diabetické neuropathie, diabetické nefropathie, zpomaleného hojení ran, inzulínové rezistence, hyperglykemie, hyperinzulinemie, zvýšených hladin mastných kyselin nebo glycerolu v krvi, hyperlipidemie, obezity, hypertriglyceridemie, syndromu X, diabetických komplikací, atherosklerózy nebo hypertenze nebo pro zvýšení hladin lipoproteinů o vysoké hustotě;

- použití sloučeniny vpředu uvedeného vzorce pro výrobu farmaceutické kompozice určené pro léčení nebo oddálení progrese nebo propuknutí diabetů, diabetické retinopathie, diabetické neuropathie, diabetické nefropathie, zpomaleného hojení ran, inzulínové rezistence, hyperglykemie, hyperinzulinemie, zvýšených hladin mastných kyselin nebo glycerolu v krvi, hyperlipidemie, obezity, hypertriglyceridemie, syndromu X, diabetických komplikací, atherosklerózy nebo hypertenze nebo pro zvýšení hladin lipoproteinů o vysoké hustotě, kde sloučenina má strukturu

R⁴

- použití sloučeniny vpředu uvedeného vzorce pro výrobu farmaceutické kompozice samostatně nebo v kombinaci s jiným antidiabetickým činidlem, činidlem pro ošetření diabetických komplikací, antiobezitním činidlem, antihypertenzním činidlem, činidlem proti krevním destičkám, antiatherosklerotickým činidlem a/nebo hypolipidemickým činidlem, pro léčení diabetes typu II. Předmětem tohoto vynálezu je konečně sloučenina, která má strukturu

-11 CZ 304522 B6 ve kterém

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vodík, OH, OR⁵, (C3—C10)alkyl, CF3, OCHF2, OCF3, SR⁵' nebo halogen nebo dvě zR¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

-SR , -SOR , -SO₂R^5g, -S0₂(C₆-C,o)aryl nebo pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂, nebo R³a R⁴ spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂;

A je O, S, NH nebo (CH₂)_n, kde nje 0 až 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo stereoizomer;

Bn znamená benzyl;

každý R⁵, R^5a, R^5b, R^5c, R^5d, R^5e, R^5f, R^5g, R^5h a R⁵ⁱ jsou nezávisle (C,-C,₀)alkyl; a

R⁶, R^6a, R^6b, R^6c a R^6d jsou nezávisle vodík, (C,-C10)alkyl, (C6-C10)aryl, -(C^wjalkylCCeCiojaryl nebo (C3-Ci0)cykloalkyl, nebo R⁶ a R^6a spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

s podmínkou, že když A je (CH₂)_n, kde nje 0, 1,2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R¹, R² a

nebo sloučeniny struktury

BnO

BnO+‘ Y^OBn 08 r>

Br

ΒηΟ^χν γ ^ζ/ΟΒι OBn nebo ve kterém

gen nebo dvě z R¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂; každý R⁵ a R^5ljsou nezávisle (Ci-Cio)alkyl; a

- 12CZ 304522 B6

Bn znamená benzyl;

s podmínkou, že když alespoň jedna zR¹ a R² je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF₃, OCF₃ nebo OCHF₂.

Předmětem tohoto vynálezu je také sloučenina, která má strukturu

Br

Et

Dále jsou uvedeny údaje dokreslující šíři předloženého vynálezu.

Předmětné sloučeniny svrchu v úvodu kapitoly uvedeného vzorce mají aktivitu jako inhibitory na sodíku závislých přenašečů glukózy nalézajících se ve střevech a ledvinách savců, a jsou proto užitečné při léčení diabetů a mikro- a makrovaskulámích komplikací diabetů, jako je retinopathie, neuropathie, nefropathie a hojení ran.

Předmětný vynález umožňuje způsob léčení nebo oddálení postupu nebo propuknutí diabetů, zvláště diabetů typu I a typu II, včetně diabetických komplikací, zahrnujících retinopathii, neuropathii, nefropathii a zpoždění hojení ran a příbuzných chorob, jako je inzulínová rezistence (narušená glukózová homeostáza), hyperglykemie, hyperinzulinemie, zvýšených hladin mastných kyselin nebo glycerolu v krvi, obezity, hyperlipidemie, včetně hypertriglyceridemie, syndrom X, atheroskleróza a hypertenze a pro zvýšení hladin lipoproteinů o vysoké hustotě, kde terapeuticky účinné množství svrchu uvedené sloučeniny je podávané lidskému pacientovi, který to potřebuje.

Předmětný vynález skýtá způsob léčení diabetů a příbuzných chorob, jak jsou definovány výše a kromě toho, kde je podáváno lidskému pacientovi, který to potřebuje, terapeuticky účinným množstvím kombinace svrchu uvedené sloučeniny I a jiného typu antidiabetického léčiva a/nebo jiného typu terapeutického činidla, jako je hypolipidemické činidlo.

Stavy, choroby a poruchy souhrnně nazývané jako „syndrom X“ (také známý jako metabolický syndrom) jsou detailně popsány v Johannsson J. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 727 - 34 (1997).

Pojem ,jiný typ terapeutického činidla“, jak je zde použit, označuje jedno nebo více antidiabetických činidel (jiných než inhibitory SGLT2 uvedeného vzorce), jedno nebo více antiobezitních činidel, antihypertenzních činidel, činidel proti shlukování krevních destiček, antiatherosklerotických činidel a/nebo jedno nebo více činidel snižujících hladinu lipidů (včetně antiatherosklerotických činidel).

Ve výše uvedeném způsobu bude sloučenina svrchu uvedené struktury používána v hmotnostním poměru k jednomu, dvěma nebo více antidiabetických činidel a/nebo jednomu, dvěma nebo více terapeutických činidel jiného typu (v závislosti na jejich účinku) v rozmezí od asi 0,01 : 1 do asi 300 : 1, výhodně od asi 0,1 : 1 do asi 10 : 1.

Zvláště výhodnými sloučeninami jsou sloučeniny svrchu uvedeného vzorce o struktuře IB

HO

OH (IB)

- 13CZ 304522 B6 kde R¹ je vodík, halogen nebo nižší alkyl a R⁴ je nižší alkyl, R⁵O, -OCHF₂ nebo SR^5e. Je výhodné, aby R¹ byla napojena v pozici para k vazbě glykosidu a substituent R⁴ byl napojen v para pozici.

Detailní popis vynálezu

Sloučeniny vzorce I podle vynálezu mohou být připraveny způsobem popsaným v následujících reakčních schématech a popisech, přičemž teploty jsou vyjádřeny ve stupních celsia.

Sloučeniny svrchu uvedeného vzorce (dále označované jako sloučeniny vzorce I) mohou být připraveny způsobem uvedeným na schématu 1 reakcí sloučeniny vzorce II

(kde Bn = benzyl) s H₂ v přítomnosti katalyzátoru jako je 1) Pd/C za využití rozpouštědla, jako je MeOH nebo EtOH, nebo 2) výhodně Pd(OH)₂ za použití rozpouštědla, jako je EtOAc. Alternativně mohou být sloučeniny vzorce I připraveny reakcí sloučenin vzorce II s Lewisovou kyselinou, jako je BBr₃, BC1₃ nebo BC1₃ . MeS v rozpouštědle, jako je CH₂C1₂, při -78 °C. Sloučeniny vzorce I mohou být také připraveny reakcí sloučenin vzorce II v rozpouštědle, jako je EtSH, obsahujícím BF₃ . Et₂O při 20 °C.

Sloučeniny vzorce II (které jsou novými meziprodukty) mohou být připraveny reakcí sloučenin vzorce III se silany, jako je Et₃SiH, nebo výhodně (iPr)₃SiH, v rozpouštědle, jako je MeCN nebo směs MeCN/CH₂Cl₂, obsahujícím Lewisovu kyselinu, jako je BF₃. Et₂O, při -30 °C.

Sloučeniny vzorce III (které představují nové meziprodukty) mohou být připraveny reakcí sloučeniny vzorce IV

- 14CZ 304522 B6 se sloučeninou vzorce V.

V

Sloučeniny vzorce IV jsou aktivovány pro reakci reakcí s n-BuLi nebo t-BuLi při -78 °C v rozpouštědle, jako je THF, před přídavkem laktonu V. Příprava laktonu V je popsána v R. Benhaddou, S. Czemecki et al., Carbohydr. Res., 260 (1994), 243 - 250.

ío Schéma 1

Sloučeniny vzorce IV, kde A je (CH₂)„, kde η = 1 — 3 mohou být připraveny, jak je uvedeno ve 15 schématu 2 reakcí sloučeniny vzorce VI

VI

se sílaný, jako je Et₃SiH, v rozpouštědle, jako je MeCN nebo CH2CI2, obsahujícím Lewisovu 20 kyselinu jako je BF₃ . Et₂O nebo TFA, při -30 °C až 60 °C.

Sloučeniny vzorce VI mohou být připraveny reakcí komerčně dostupných brombenzaldehydů vzorce VII

- 15CZ 304522 B6

VII

BrΟχ

R² O s buď lithiovým nebo hořečnatým organokovovým derivátem sloučeniny vzorce VIII

VIII

v rozpouštědle, jako je Et₂O nebo THF, za použití podmínek dobře známých odborníkům v oboru.

Sloučeniny vzorce VIII jsou buď komerčně dostupné nebo snadno připravitelné běžnými metodami dobře známými odborníkům v oboru.

Schéma 2

VIH

y, E^SW

IV A»(CHjK,

Sloučeniny vzorce I, kde R⁴ je CH(OR^5h)R^6d, mohou být připraveny reakcí sloučenin vzorce I, kde R⁴ je COR^6b, postupně s

1) acetylačním činidlem, jako je Ac₂O, v rozpouštědle, jako je pyridin samotný nebo CH₂C1₂, obsahujícím 1,5 ekvivalentů báze, jako je Et₃N,

2) redukčním činidlem, jako je NaBH₄, v rozpouštědle, jako je EtOH,

3) alkylačním činidlem, jako je R^5hBr nebo R^5hI, v přítomnosti báze, jako je NaH, v rozpouštědle, jako je DMF, a

4) za podmínek alkalické hydrolýzy esteru, jako je LiOH ve směsi THF/MeOH/H₂O v poměru 2 : 3 : 1.

Sloučeniny vzorce I, kde R⁴ je CH(OH)R^6c, mohou být připraveny reakcí sloučenin vzorce I, kde R⁴ je COR^6b, s redukčním činidlem, jako je NaBH₄, v rozpouštědle, jako je EtOH.

-16CZ 304522 B6

Sloučeniny vzorce I, kde R⁴ je COR^6b, mohou být připraveny reakcí sloučenin vzorce II, kde R⁴je COR^6b, s Lewisovou kyselinou, jako je BC1₃ nebo BBr₃, při -78 °C v rozpouštědle, jako je CH₂C1₂.

Sloučeniny vzorce II, kde A je CH₂ a R⁴ je -COR^6b, mohou být připraveny způsobem popsaným ve schématu 3 kondenzací komerčně dostupných nebo snadno získatelných sloučenin vzorce IX

IX

R⁴

kde Zje Br nebo Cl, se sloučeninami vzorce X

SnBuj zahřátím dvou složek v rozpouštědle, jako je PhMe, v přítomnosti katalyzátoru, jako je Pd(PH₃)₄.

Sloučeniny vzorce X (které představují nové meziprodukty) mohou být připraveny ze sloučenin vzorce XI

reakcí s (Bu₃Sn)₂ a s katalyzátorem jako je Pd(Ph₃P)₄ v rozpouštědle, jako je toluen.

Sloučeniny vzorce XI (které představují nové meziprodukty) mohou být připraveny ze sloučenin vzorce XII

XII

- 17CZ 304522 B6 reakcí se sílaný, jako jsou iPr₃SiH nebo Et₃SiH, v rozpouštědle, jako je MeCN, obsahujícím Lewisovu kyselinu, jako je BF₃. Et₂O, při -30 °C.

Sloučeniny vzorce XII (které představují nové meziprodukty) mohou být připraveny kondenzací 5 sloučeniny V s organolithiem získaným po reakci sloučenin vzorce XIII

XIII

Br

R*

Br s n-BuLi nebo t-BuLi při -78 °C v THF.

Schéma 3

II

Alternativní syntéza (Schéma 4) sloučenin vzorce IV, kde A je CH₂, následuje po redukci sloučenin vzorce XIV

XIV

s redukčním činidlem, jako je Et₃SiH, v rozpouštědle, jak je MeCN nebo CH₂C1₂ nebo jejich směsi, obsahujícím katalyzátor, jako je BF₃. Et₂O.

- 18CZ 304522 B6

Sloučeniny vzorce XIV mohou být snadno připraveny Friedel-Craftovou acylací komerčně dostupných uhlovodíků vzorce XV

XV ,3 R· se snadno dostupnými chloridy kyselin vzorce XVI

XVI

io v rozpouštědle, jako je CS₂, obsahujícím dva ekvivalenty Lewisovy kyseliny, jako je A1C1₃ nebo AlBr₃.

Schéma 4

Br

R*'

XVI 'tk¹

Et^iH

Sloučeniny vzorce II, kde A je vazba, mohou být připraveny způsobem uvedeným ve schématu 5 kondenzací sloučenin vzorce XI se sloučeninami vzorce XVII

XVII nebo odpovídající kyselinou boritou XVIII.

XVIII

R*

HO J

H°'^BXK_R3

Kondenzaci doprovází zahřátí v přítomnosti katalyzátoru, jako je Pd(PPh₃)₄ za využití rozpouštědla, jako je směs PhMe/EtOH v poměru 3:1, obsahujícím Na₂CO₃. Sloučeniny vzorce XVIII jsou buď komerčně dostupné nebo mohou být připraveny po reakci sloučenin vzorce XVII s BC1₃

-19CZ 304522 B6 v rozpouštědle, jako je CH₂C1₂. Sloučeniny vzorce XVII mohou být připraveny zahřátím sloučenin vzorce XIX

XIX

Br v rozpouštědle, jako je DMSO, obsahujícím katalyzátor, jako je PdCl₂.dppf, a bázi, jako je KOAc, se sloučeninou XX.

XX <3 o'

B-B.

Schéma 5

XVII

A = vazba

Sloučeniny vzorce II, kde A = CH₂ a R² = OH, mohou být připraveny způsobem uvedeným ve schématu 6 po postupné reakci sloučenin vzorce XXI

XXI

s bází, jako je NaH, a poté zahřátím se sloučeninami vzorce IX v rozpouštědle, jako je PhMe. Sloučeniny vzorce XXI mohou být připraveny ze sloučenin vzorce XXII

-20CZ 304522 B6

XXII

reakcí se silany, jako je Et₃SiH nebo i-Pr₃SiH, v rozpouštědle, jako je MeCN, obsahujícím Lewisovu kyselinu, jako je BF₃.Et₂O, při -30 °C.

Sloučeniny vzorce XXII mohou být připraveny kondenzací sloučeniny vzorce V s aktivovanými kovovými deriváty sloučenin vzorce XXIII

XXIII

které jsou připraveny postupnou reakcí sloučeniny XXIII s bází, jako je NaH, KH nebo KOtBu ío následovanou alkyllithiem, jako je nBuLi nebo tBuLi, v rozpouštědle, jako je suchý THF.

Schéma 6

Sloučeniny vzorce I, kde A = O nebo NH, mohou být připraveny způsobem uvedeným na schématu 7 kondenzací sloučenin vzorce XXIV

-21 CZ 304522 B6

XXIV

s komerčně dostupnými sloučeninami vzorce XXV, kde X = O nebo NH

XXV R*

zahřátím v rozpouštědle, jako je pyridin, obsahujícím bázi, jako je Et₃N, katalyzátor, jako je Cu(OAc)₂, a molekulární síta.

Sloučeniny vzorce XXIV (které představují nové meziprodukty) mohou být připraveny reakcí 10 sloučenin vzorce XXVI s BC1₃ v rozpouštědle, jak je CH₂C1₂, při -78 °C.

XXVI

Sloučeniny vzorce XXVI (které představují nové meziprodukty), mohou být připraveny zahřátím 15 sloučenin vzorce XI se sloučeninami vzorce XX v rozpouštědle, jako je DMSO, obsahujícími katalyzátor, jako je PdCl₂.dppf, a bázi, jako je KOAc.

XI

XXVI

BCI3

-22CZ 304522 B6

XXIV kde X = O nebo NH

Sloučeniny vzorce IV, kde A je O nebo NH, mohou být připraveny způsobem uvedeným ve schématu 8 kondenzací sloučenin vzorce XVIII

XVIII

se sloučeninami vzorce XXVII, kde X = O nebo NH

XXVII

R^a ,^R

Br zahřátím v rozpouštědle, jako je pyridin, obsahujícím bázi, jako je EtsN, katalyzátor, jako je Cu(OAc)2 a molekulární síta.

Schéma 8

XVIII

R¹

H z

X t

XXVII

CufOAcb

Sloučeniny vzorce IV, kde A je S, mohou být připraveny způsobem popsaným ve schématu 9 kondenzací aryldisulfidů vzorce XXVIII

-23 CZ 304522 B6

XXVIII

Schéma 9

Dále jsou uvedeny definice různých pojmů použitých v popisu tohoto vynálezu. Tyto definice se týkají pojmů, jak jsou uvedeny v popisu (pokud nejsou ve zvláštních případech jinak omezeny) ať už samostatně nebo jako část větší skupiny.

Použity jsou následující zkratky:

Ph = fenyl

Bn = benzyl t-Bu = terciární butyl

Me = methyl

Et = ethyl

TMS = trimethylsilyl

TMSN₃ = trimethylsilyazid

TBS = terc-butyldimethylsilyl

THF = tetrahydrofuran

Et₂O = diethylether

EtOAc = ethylacetát

DMF = dimethylformamid

MeOH = methanol

EtOH = ethanol i-PrOH = isopropanol

HOAc nebo AcOH = kyselina octová

TFA = kyselina trifluoroctová i-Pr₂Net - diisopropylethylamin

Et₃N = triethylamin

DMAP = 4-dimethylaminopyridin

NaBHt = tetrahydridoboritan sodný

L1AIH4 = hydrid hlinitolithný n-BuLi = n-butyllithium

Pd/C = palladium na uhlí

KOH = hydroxid draselný

-24CZ 304522 B6

NaOH = hydroxid sodný

LiOH = hydroxid lithný

K2CO3 = uhličitan draselný

NaHCO₃ = hydrogenuhličitan sodný

EDC (nebo EDC.HC1) nebo EDCI (nebo EDCLHC1) nebo EDAC = 3-ethyl-3'-(dimethylamino)propyl-karbodiimid hydrochlorid (nebo l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochlorid)

HOBT nebo HOBT . H₂O = 1-hydroxybenzotriazol hydrát

HOAT = l-Hydroxy-7-azabenzotriazol

Ph₃P = trifenylfosfin

Pd(OAc)₂ = palladiumacetát (PH₃P)₃Pd° = tetrakis trifenylfosfinpalladium

Ar = argon

N₂ = dusík min = minuta/minuty h = hodina/hodiny = litr ml = mililitr μΐ = mikrolitr g = gram/gramy mg = miligram/miligramy mol - ol mmol = milimol/milimoly meq = miliekvivalent

RT = pokojová teplota nas. nebo sat. = nasycený aq. = vodný

TLC = tenkovrstevná chromatografie

HPLC = vysokoúčinná kapalinová chromatografie

LC/MS = vysokoúčinná kapalinová chromatografie/hmotová spektrometrie

MS nebo Mass Spec = hmotová spektrometrie

NMR = nukleární magnetická rezonance mp nebo t.t. = teplota tání dppf = difenylfosfinoferrocen

Pokud není uvedeno jinak, pojem „nižší alkyl“ jak je zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, zahrnuje uhlovodíky s přímým a rozvětveným řetězcem obsahující 1 až 8 uhlíků a pojem „alkyl“ a „alk“, jak je zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny zahrnuje uhlovodíky jak s přímým, tak rozvětveným řetězcem obsahující 1 až 20 uhlíků, výhodně 1 až 10 uhlíků, zvláště výhodně 1 až 20 uhlíků, výhodně 1 až 10 uhlíků, zvláště výhodně 1 až 8 uhlíků, v normálním řetězci jako je methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, t-butyl, isobutyl, pentyl, hexyl, isohexyl, heptyl, 4,4-dimethylpentyl, oktyl, 2,2,4-trimethylpentyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl, různé rozvětvené řetězce jejich izomerů a podobně, stejně jako tyto skupiny obsahující 1 až 4 substituentů, jako je halogen, například F, Br, Cl nebo I nebo CF₃, alkyl, alkoxyskupinu, aryl, aryloxyskupinu, aryl(aryl) nebo diaryl, arylalkyl, arylalkyloxyskupinu, alkenyl, alkinyl, cykloalkyl, cykloalkenyl, cykloalkylalkyl, cykloalkyloalkyloxyskupinu, případně substituované aminoskupinou, hydroxyskupinou, hydroxyalkylem, acylem, alkanoylem, heteroarylem, heteroaryloxyskupinou, cykloheteroalkylem, arylheteroarylem, aiylalkoxykarbonylem, heteroarylalkylem, heteroaryloalkoxyskupinou, aryloxyalkylem, aryloxyarylem, alkylamidoskupinou, alkanoylaminoskupinou, arylkarbonylaminoskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolem, halogenalkylem, trihalogenalkylem a/nebo alkylthioskupinou.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „cykloalkyl“, jak je zde použit samostatně nebo jako části jiné skupiny, zahrnuje nasycené nebo částečně nenasycené (obsahující 1 nebo dvě dvojné vazby) cyklické uhlovodíkové skupiny obsahující 1 až 3 kruhy, zahrnující monocyklický alkyl, bicyklický

-25CZ 304522 B6 alkyl a tricyklický alkyl, obsahující celkově 3 až 20 uhlíků tvořících kruhy, výhodně 3 až 10 uhlíků tvořících kruh, a které mohou být kondenzované na 1 nebo 2 aromatické kruhy, jak je popsáno pro aryl, které zahrnují cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklodecyl a cyklododecyl, cyklohexenyl, přičemž jakákoli skupina může být případně substituovaná 1 až 4 substituenty, jako je halogen, alkyl, alkoxyskupina, hydroxyskupina, aryl, aryloxyskupina, arylalkyl, cykloalkyl, alkylamidoskupina, alkanoylaminoskupina, oxoskupina, acyl, arylkarbonylaminoskupina, aminoskupina, nitroskupina, kyanoskupina, thiol a/nebo alkylthioskupina a/nebo jakýkoli z alkylových substituentů.

Pojem „cykloalkenyl“, jak je zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, označuje cyklické uhlovodíky obsahující 3 až 12 uhlíků, výhodně 5 až 10 uhlíků a 1 nebo 2 dvojné vazby. Příklady cykloalkenylových skupin zahrnují cyklopentenyl, cyklohexenyl, cykloheptenyl, cyklooktenyl, cyklohexadienyl a cykloheptadienyl, které mohou být případně substituovány, jak je definováno pro cykloalkyl.

Pojem „alkanoyl“, jak je zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, označuje alkyl napojený na karbonylovou skupinu.

Pokud není uvedeno jinak, označuje pojem „nižší alkenyl“ jak je zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, přímé nebo rozvětvené řetězce radikálů o 2 až 8 uhlících a pojem „alkenyl“, jak je zde použit samostatně nebo jako součást jiné skupiny, označuje přímý nebo rozvětvený řetězec radikálů o 2 až 20 uhlících, výhodně 2 až 12 uhlících, a zvláště výhodně 2 až 8 uhlících v normálním řetězci, který zahrnuje jeden až šest dvojných vazeb v normálním řetězci, jako je vinyl, 2-propenyl, 3-butenyl, 2-butenyl, 4-pentenyl, 3-pentenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl, 2heptenyl, 3-heptenyl, 4-heptenyl, 3-oktenyl, 3-nonenyl, 4-decenyl, 3-undecenyl, 4-dodecenyl, 4,8,12-tetradekatrienyl a podobně, a který může být případně substituován 1 až 4 substituenty, konkrétně halogenem, halogenalkylem, alkylem, alkoxyskupinou, alkenylem, alkinylem, arylem, arylalkylem, cykloalkylem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, heteroarylem, cykloheteroalkylem, alkanoylaminoskupinou, alkylamidoskupinou, arylkarbonylaminoskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolem, alkylthioskupinou a/nebo jakýmkoli z výše uvedených alkylových substituentů.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „nižší alkinyl“, jak je zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, označuje přímý nebo rozvětvený radikálový řetězec o 2 až 8 uhlících, a pojem „alkinyl“, jak je zde použit samostatně nebo jako součást jiné skupiny, označuje přímý nebo rozvětvený radikálový řetězec o 2 až 20 uhlících, výhodně 2 až 12 uhlících a zvláště výhodně 2 až 8 uhlících v normálním řetězci, který zahrnuje jednu trojnou vazbu v normálním řetězci, jako je 2-propinyl, 3-butinyl, 2-butinyl, 4-pentinyl, 3-pentinyl, 2-hexinyl, 3-hexinyl, 2-heptinyl, 3-heptinyl, 3pentinyl, 2-hexinyl, 3-hexinyl, 4-decinyl, 3-undecinyl, 4-dodecinyl a podobně, který může být případně substituován 1 až 4 substituenty, konkrétně halogenem, halogenalkylem, alkylem, alkoxyskupinou, alkenylem, alkinylem, arylem, arylalkylem, cykloalkylem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, heteroarylem, cykloheteroalkylem, alkanoylaminoskupinou, alkylamidoskupinou, arylkarbonylaminoskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolem, alkylthioskupinou a/nebo jakýmkoli z výše uvedených alkylových substituentů.

-26CZ 304522 B6

Pojem „arylalkyl“, „arylalkenyl“ a „arylalkinyl“ jak je zde použit samostatně nebo jako součásti jiné skupiny označuje alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny, jak jsou popsané výše, mající arylový substituent.

Kde alkylové skupiny, jak jsou definovány výše, mají jednoduché vazby pro připojení na jiné skupiny ke dvěma různým atomům uhlíku, jsou označovány jako „alkylenové“ skupiny a mohou být případně substituované, jak je definováno výše pro „alkyl“.

Kde alkenylové skupiny, jak jsou definovány výše, a alkinylové skupiny, jak jsou definovány výše, mají jednoduché vazby pro připojení ke dvěma rozdílným atomům uhlíku, jsou označovány jako „alkenylenové skupiny“ a „alkinylenové skupiny“ a mohou být případně substituované, jak je výše popsáno pro „alkenyl“ a „alkinyl“.

Vhodné alkylenové, alkenylenové nebo alkinylenové skupiny (CH₂)_m nebo (CH₂)_P (kde p je 1 a 8, výhodně 1 až 5, a m je 1 až 5, výhodně 1 až 3, které zahrnují alkylenové, alkenylenové nebo alkinylenové skupiny), jak jsou zde definovány, mohou případně obsahovat 1, 2 nebo 3 substituenty, které zahrnují alkyl, alkenyl, halogen, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, aminoskupinu, thioalkyl, ketoskupinu, C3-C6 cykloalkyl, alkylkarbonylamínoskupinu nebo alkylkarbonyloxyskupinu.

Příklady (CH₂)_m nebo (CH₂)_P, alkylenu, alkenylenu a alkinylenu zahrnují -CH₂-, -CH₂CH₂-, —CH=CH-CHj— , —CHjCH=CH— , — CšC-CHj— _f —CHj—C—

CH, —CH₂—CHj,—CHj—C— _f -CHjCECCHj— , — Č=CH-CHj— ch₃ —(CHj) ₂— , —(CHj) ₃— , —(CH₂)₄— , —(CHjJj—C-CHjCHj— CH₃

-CHjCHCHj

Pojem „halogen“ nebo „halo“, jakje zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, označuje chlor, brom, fluor a jod, přičemž chlor a fluor jsou výhodné.

Pojem „ion kovu“ označuje ion alkalického kovu, jako je sodík, draslík nebo lithium a ion kovu alkalické zeminy, jako je hořčík a vápník, a dále zinku a hliníku.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „aryl“ nebo „Aryl“, jakje zde použit samostatně nebo jako část jiné skupiny, označuje monocyklické a bicyklické aromatické skupiny obsahující 6 až 10 uhlíků v kruhové části (jako je fenyl nebo naftyl zahrnující 1-naftyl a 2-naftyl) a mohou případně zahrnovat jeden až tři další kruhy kondenzované na karbocyklický kruh nebo heterocyklický kruh (jako je arylový, cykloalkylový, heteroarylový nebo cykloheteroalkylový kruh, například

-27CZ 304522 B6

a mohou být případně substituovány na vhodném atomu uhlíku 1, 2 nebo 3 skupinami vybranými z vodíku, halogenu, halogenalkylu, alkylu, halogenalkylu, alkoxyskupiny, halogenalkoxyskupiny, alkenylu, trifluormethylu, trifluormethoxyskupiny, alkinylu, cykloalkyl-alkylu, cykloheteroalkylu, cykloheteroalkylalkylu, arylu, heteroarylu, arylalkylu, aryloxyskupiny, aryloxyalkylu, arylalkoxyskupiny, alkoxykarbonylu, arylkarbonylu, arylalkenylu, aminokarbonylalkylu, arylthioskupiny, arylsulfinylu, arylazoskupiny, heteroarylalkylu, heteroarylalkenylu, heteroarylheteroarylu, heteroaryloxyskupiny, hydroxyskupiny, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, substituované aminoskupiny, kde aminoskupina zahrnuje 1 nebo 2 substituenty (kterými jsou alkyl, aryl nebo jakákoli jiná arylová sloučenina uvedená v definicích), thiolu, alkylthioskupiny, arylthioskupiny, heteroarylthioskupiny, arylthioalkylu, alkoxyarylthioskupiny, alkylkarbonylu, aiylkarbonylu, alkylaminokarbonylu, arylaminokarbonylu, alkoxykarbonylu, aminokarbonylu, alkylkarbonyloxyskupiny, arylkarbonyloxyskupiny, alkylkarbonylaminoskupiny, arylkarbonylaminoskupiny, arylsulfinylu, arylsulfinylalkylu, arylsulfonylaminoskupiny a arylsulfonaminokarbonylu a/nebo jakýchkoli alkylových substituentů zde uvedených.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „nižší alkoxyskupina“, „alkoxyskupina“, „aryloxyskupina“ nebo „aralkoxyskupina“, jak je zde použit sám nebo jako část jiné skupiny, zahrnuje jakýkoli z výše uvedených aralkylových, aralkylových nebo arylových skupin napojených na atom kyslíku.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „substituovaná aminoskupina“, jak je zde použit sám nebo jako součást jiné skupiny, označuje aminoskupinu substituovanou jedním nebo dvěma substituenty, které mohou být stejné nebo různé, jako je alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroarylalkyl, cykloheteroalkyl, cykloheteroalkylalkyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl, halogenalkyl, hydroxyalkyl, alkoxyalkyl a thioalkyl. Tyto substituenty mohou být dále substituovány karboxylovou kyselinou a/nebo jakýmkoli z výše uvedených alkylových substituentů. Kromě toho mohou být substituenty aminoskupiny mohou spolu s dusíkovým atomem, ke kterému jsou připojeny, tvořit 1pyrrolidinyl, 1-piperidinyl, 1-azepinyl, 4-morfolinyl, 4-thiamorfolinyl, 1-piperazinyl, 4-alkyl1-piperazinyl, 4-arylalkyl-l-piperazinyl, 4-diary laiky 1-1-piperazinyl, 1-pyrrolidinyl, 1-piperidinyl nebo 1-azepinyl, případně substituovaný alkylem, alkoxyskupinou alkylthioskupinou, halogenem trifluormethylem nebo hydroxyskupinou.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „nižší alkylthioskupina“, „alkylthioskupina“, „arylthioskupina“ nebo „aralkylthioskupina“, jak je zde použit sám nebo jako část jiné skupiny, zahrnuje jakýkoli z výše uvedených alkylových, aralkylových, aralkylových nebo arylových skupin napojených na atom síry.

-28CZ 304522 B6

Pokud není uvedeno jinak, pojem „nižší alkylaminoskupina“, „alkylaminoskupina“, „arylaminoskupina“ nebo „arylalkylaminoskupina“, jakje zde použit sám nebo jako část jiné skupiny, zahrnuje jakýkoli z výše uvedených alkylových, arylových nebo arylalkylových skupin napojených na atom dusíku.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „acyl“ jakje zde použit sám nebo jako součástjiné skupiny, jak je zde definována, označuje organický radikál napojený na skupinu karbonylu; příklady acylových skupin zahrnují jakýkoli z alkylových substituentů napojených na karbonyl, jako je alkanoyl, alkenoyl, aroyl, aralkanoyl, heteroaroyl, cykloalkanoyl, cykloheteroalkanoyl a podobně.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „cykloheteroalkyl“ jak je uveden sám nebo jako část jiné skupiny, označuje 5-, 6- nebo 7-členný nasycený nebo částečně nenasycený kruh, který zahrnuje 1 až 2 heteroatomy, jako je dusík, kyslík a/nebo síru, napojené přes atom uhlíku nebo heteroatom, kde je to možné, případně přes linker (CH₂)_P (kde p je 1,2 nebo 3), jako je

N.

O.

a podobně. Výše uvedené skupiny mohou zahrnovat 1 až 4 substítuenty, jako je alkyl, halogen, oxoskupinu a/nebo jakýkoli ze zde uvedených alkylových substituentů. Kromě toho jakýkoli z cykloheteroalkylových kruhů může být kondenzován na cykloalkylový, arylový, heteroarylový nebo cykloheteroalkylový kruh.

Pokud není uvedeno jinak, pojem „heteroacyl“, jak je zde použit sám nebo součástjiné skupiny, označuje 5- nebo 6- členný aromatický kruh, který obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy, jako je dusík, kyslík nebo síra a tyto kruhy kondenzované na arylový, cykloalkylový, heteroarylový nebo cykloheteroalkylový kruh (např. benzothiofenyl nebo indolyl) a zahrnuje možné N-oxidy. Heteroarylová skupina může případně obsahovat 1 až 4 substituentu, jako je jakýkoli z alkylových substituentů uvedených výše. Příklady heteroarylových skupin zahrnují následující:

-29CZ 304522 B6

a podobně.

Pojem „cykloheteroalkylalkyl“, jak je zde použit, samostatně nebo jako součást jiné skupiny, označuje cykloheteroalkylové skupiny, jak jsou definovány výše, napojené přes atom C nebo heteroatom na řetězec (CH₂)_P.

Pojem „heteroarylalkyl“ nebo „heteroarylalkenyl“, jak je zde použit, samostatně nebo jako součást jiné skupiny, označuje heteroarylovou skupinu, jak je výše definovaná, napojenou přes atom C nebo heteroatom na řetězce -(CH₂)_P-, alkylen nebo alkenylen, jak jsou definovány výše.

Pojem „pěti, šesti nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus“, jak je zde použit, označuje cykloalkylové nebo cykloalkenylové skupiny, jak jsou definovány výše, nebo heteroarylové skupiny nebo cykloheteroarylové skupiny, jak jsou definovány výše, jako je thiadiazol, tetrazol, imidazol nebo oxazol.

Pojem „polyhalogenalkyl“, jak je zde použit, označuje skupinu „alkyl“ nebo „alkoxyskupinu“, jak je zde definována, která zahrnuje od 2 do 9, výhodně od 2 do 5, halogenových substituentů, jako je F nebo Cl, výhodně F, jako je CF₃CH₂O, CF₃O nebo CF₃CF₂CH₂O.

Kde jsou sloučeniny vzorce I ve formě kyseliny, mohou tvořit farmaceuticky přijatelné soli, jako jsou soli s alkalickými kovy, jako je lithium, sodík nebo draslík, soli s kovy alkalických zemin, jako je vápník nebo hořčík, stejně jako se zinkem nebo hliníkem a jinými kationty, jako je amonium, cholin, diethanolamin, lysin (D nebo L), ethylendiamin, terc-butylamin, terc-oktylamin, tris-(hydroxymethyl)aminomethan (TRIS), N-methylglukosamin (NMG), triethanolamin a dehydroabietylamin.

Do rozsahu tohoto vynálezu jsou zahrnuty všechny stereoisomery sloučenin podle tohoto vynálezu, ať už ve směsi nebo čisté nebo v podstatě čisté formě. Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou mít asymetrická centra na jakémkoli atomu uhlíku včetně kteréhokoliv ze substituentů R. Následkem toho mohou sloučeniny vzorce I existovat v enantiomemí nebo diastereomerní formě nebo jejich směsích. Způsob přípravy může využít jako výchozí látky racemáty, enantiomery nebo diastereomery. Pokud se připraví diastereomerní nebo enantiomemí produkty, mohou být odděleny běžnými postupy, například chromatograficky nebo frakční krystalizací.

-30CZ 304522 B6

Tam, kde je to žádoucí, mohou být sloučeniny vzorce I použity v kombinaci s jedním nebo více typy antidiabetických prostředků a/nebo jedním nebo více typy terapeutických činidel, které mohou být podávány orálně ve stejně dávkovači formě, oddělené orální dávkovači formě nebo injekčně.

Jiným typem antidiabetického léčiva, které může být případně použito v kombinaci s inhibitorem SGLT2 vzorce I, může být 1, 2, 3 nebo více antidiabetických činidel nebo antihyperglykemických činidel zahrnujících inzulínové sekretalogy nebo inzulínové zcitlivovače, nebo jiná antidiabetická činidla výhodně mající odlišný mechanismus působení než je inhibice SGLT2 a mohou zahrnovat biguanidy, sulfonylmočoviny, glukosidázové inhibitory, agonisty PPAR γ jako jsou thiazolidindiony, aP2 inhibitory, duální agonisty PPAR α/γ, inhibitory dipeptidylpeptidázy IV (DP4) a/nebo meglitinidy, stejně jako inzulín, glukagonu podobný peptid-1 (GLP-1), inhibitory PTPP1B, inhibitory glykogenfosforylázy a/nebo inhibitory glukos-6-fosfatázy.

Jiné typy terapeutických činidel, které mohou být případně použity v kombinaci s inhibitory SGLT2 vzorce I zahrnují léčiva proti obezitě, antihypertenzní léčiva, léčiva proti shlukování krevních destiček, antiatherosklerotická léčiva a/nebo léčiva na snížení hladiny lipidů.

Inhibitory SGLT2 vzorce I mohou také být případně použity v kombinacích s léčivy pro léčení komplikací při diabetů. Tato léčiva zahrnují inhibitory PKC a/nebo inhibitory AGE.

Má se za to, že použití sloučenin vzorce jedna v kombinaci s 1, 2, 4 nebo více antidiabetickými činidly dává antihyperglykemické výsledky lepší než jsou možné u každého z těchto léčiv samostatně a vyšší než aditivní kombinace antihyperglykemických účinků dosažených těmito léčivy.

Jiná antidiabetická činidla mohou být orální antihyperglykemická činidla výhodně biguanid, jako je metformin nebo fenformin nebo jejich soli, výhodně metformin HC1.

Tam, kde je jiným antidiabetickým činidlem biguanid, budou sloučeniny vzorce I použity v hmotnostní poměru k biguanidu v rozmezí od asi 0,01 : 1 do asi 100 : 1, výhodně od asi 0,1 : 1 do asi 5 : 1.

Jiným antidiabetickým činidlem může také výhodně být sulfonylmočovina, jako je glyburid (také známý jako glibenclamid), glimepirid (popsaný v US patentu č. 4 379 785), glipizid, gliclazid nebo chlorpropamid, jiné známé sulfonylmočoviny nebo jiná známá antihyperglykemická činidla, která mohou působit na ATP-závislý kanál β-buněk které mohou být podávány stejnou nebo oddělenou orální dávkovou formou, přičemž glyburid a glipizid jsou výhodné.

Sloučeniny vzorce I budou použity v hmotnostním poměru k sulfonylmočovině v rozsahu od asi 0,01 : 1 do asi 100 : 1, výhodně od asi 0,2 : 1 do asi 10 : 1.

Orální antidiabetická činidla mohou být také glukosidázové inhibitory, jako je acarosa (popsaná v US patentu 4904769) nebo miglitol (popsaný v US patentu 4639436), které mohou být podávány ve stejné nebo oddělené dávkovači formě.

Sloučeniny vzorce I budou použity v hmotnostním poměru k inhibitoru glukosidasy v rozmezí od asi 0,01 : 1 do asi 100 : 1, výhodně od asi 0,5 : 1 do asi 50 : 1.

Sloučeniny vzorce I mohou být použity v kombinace s agonisty PPAR γ jako thiazolidindionové orální antidiabetické činidlo nebo jiné zcitlivovače na inzulín (které mají zcitlivující účinek na inzulín v pacientů NIDDM), jako je troglitazon (Warner-Lambert Rezulin®, popsaný v US patentu 4572912), rosiglitazon (SKB), pioglitazon (Takeda), Mitsubishi MCC-555 (popsaný v US patentu 5594016), Glaxo-Welcome GL-262570, englitazon (CP-68722, Pfizer) nebo darglitazon (CP-86325, Pfizer) isaglitazon (MIT/J & J), JTT-501 (JPNT/P & U), L-895645 (Merck), R-31 CZ 304522 B6

AA9702 (Sankyo/WL), NN-2344 (Dr. Reddy/NN) nebo YM-EEO (Yamanouchi), výhodně rosiglitazon a pioglitazon.

Sloučeniny vzorce I budou použity v hmotnostním rozmezí k thiazolidindionu v množství v rozmezí od asi 0,01 : 1 do asi 100 : 1, výhodně od asi 0,2 : 1 do asi 10 : 1.

Sulfonylmočoviny a thiazolidindiony v množství méně než asi 150 mg orálního antidiabetického činidla mohou být začleněny do jedné tablety se sloučeninami vzorce I.

Sloučeniny vzorce I mohou také být použity v kombinaci s antihyperglykemickým činidlem, jako je inzulín nebo s glukagonu podobným peptidem-1 (GLP-1), jako je GLP-l(l-36)amid, GLPl(7-36)amid, GLP-l(7-37), (jak jsou popsány v US patentu č. 5614492 (Habener), na který se tímto odkazuje) stejně jako AC2993 (Amylen) a LY-315902 (Lilly), které mohou být podávány injekcí, transnazálně nebo transdermálními nebo bukálními zařízeními.

Tam, kde jsou přítomné, mohou být použity v kompozicích metformin, sulfonylmočoviny, jako je glyburid, glimepirid, glipyrid, glipizid, chlorpropamid a gliclazid a glukosidázové inhibitory acarbosa nebo miglitol nebo inzulín (injektovatelné, pulmonámí, bukální nebo orální), jak je popsáno výše a v množstvích a dávkování, uvedených v Physiciaiťs Desk Reference (PDR).

Tam, kde jsou přítomny, mohou být použity metformin nebo jeho sůl v množstvích v rozmezí od asi 500 do asi 200 mg na den mohou být podávány v jednotlivé nebo v dávce rozdělené od jedné až čtyř denně.

Tam, kde jsou přítomné, mohou být thiazolidindionové antidiabetická činidla použita v množství v rozmezí od asi 0,01 do asi 2000 mg/den, které mohou být podávány v jedné nebo rozdělené dávce na jednu nebo čtyři denně.

Tam, kde je přítomen inzulín, může být použit v kompozicích, množstvích a dávkování uvedených v Physician's Desk Reference.

Tam, kde jsou přítomny, mohou být peptidy GLP-1 podávány v orálních bukálních kompozicích, nazálním podáváním nebo parenterálně, jak je popsáno v US patentu 5346701 (TheraTech), 5614492 a 5631224, na které se tímto odkazuje.

Jiným antidiabetickým činidlem může také být duální agonista PPAR γ/α, jako je AR-HO39242 (Astera/Zeneca), GW-409544 (Glaxo-Welcome), KRP297 (Kyorin Merck) stejně jako ty popsané v Murakami et al., „A Noevel Insulin Sensitizer Acts As a Coligand for Peroxisome Proliferation Activated Receptor Alpha (PPAR alpha)- a PPAR gamma. Effect on PPAR alpha Activation on Abnormal Lipid Metabolism in Liver of Zucker Fatty Rats“, Daibetes 47, 1841 - 1847 (1998) a US předběžná přihláška 60/155400, podaná 22. září 1999 (značka zástupce LA29), na které se tímto odkazuje, využívající dávkování, jakje zde uvedeno, přičemž zde uvedené výhodné sloučeniny jsou výhodné i pro zde uvedené použití.

Jiná antidiabetická činidla mohou být inhibitor aP2, jakje popsán v US přihlášce 09/391053, podané 7. září 1999 a US předběžné přihlášky 60/127745, podané 5. dubna 1999 (značka zástupce LA27*), která používá zde uvedené dávkování. Výhodné jsou sloučeniny uvedené jako výhodné ve výše uvedených přihláškách.

Jiným antidiabetickým činidlem může být inhibitor DP4 jak je popsaný vWO99/38501, WO99/46272, WO99/67279 (PROBIODRUG), WO99/67278 (PROBIODRUG), WO99/61431 (PROBIODRUG), VNP-DPP728A (1 -[[[2-[(5-kyanopyridin-2-yl)amino]ethyl]amino]acetyl]2-kyano-(S)-pyrrolidin) (Novartis (výhodný) je popsán v Hughes et al., Biochemistry, 38(36), 11597 - 11603, 1999, TSL-225 (kyselina tryptophyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-karboxylová (popsaná v Yamada et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett. 8 (1988) 1537 - 1540, 2-kyano-32CZ 304522 B6 pyrrolididy a 4-kyanopyrrolididy popsané v Ashworth et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., Vol. 6, No. 22, pp 1163 - 1166 a 2745 - 2748 (1996) používající dávkování uvedené ve výše uvedených odkazech.

Meglitinidem, který může být případně použit v kombinaci se sloučeninou vzorce I podle vynálezu může být repaglinid, nateglinid (Novartis) nebo KADÍ229 (PF/Kiessei), přičemž repaglinid je výhodný.

Inhibitor SGLT2 vzorce I bude použit v hmotnostním poměru k meglitinidu, agonistovi PPAR γ, duálnímu agonistovi PPAR α/γ, inhibitoru aP2 nebo inhibitoru DP4 v rozmezí od asi 0,01 : 1 do asi 100 : 1, výhodně od asi 0,2 : 1 do asi 10 : 1.

Hypolipidemické činidlo nebo činidlo snižující hladinu lipidů, které mohou být případně použity v kombinaci se sloučeninami vzorce I podle vynálezu, může zahrnovat 1, 2, 3 nebo více MTP inhibitorů, inhibitorů HMG CoA reduktázy, inhibitorů skvalensynthetázy, derivátů fibrové kyseliny, inhibitorů ACAT, inhibitorů lipoxygenázy, inhibitorů absorpce cholesterolu, inhibitorů spolupřenašečů ileální Na⁺/žlučové kyseliny, pozitivních regulátorů aktivity LDL receptoru, sequestrantů žlučové kyseliny a/nebo nikotinové kyseliny a jejich derivátů.

Zde použité inhibitory MTP zahrnují inhibitory popsané v US patentu 5595872, US patentu 5739135, US patentu 5712279, US patentu 5760246, US patentu 5827875, US patentu 5885983, US patentové přihlášce 09/175180 podané 20. října 1998, nyní US patent 5962440. Výhodné jsou všechny výhodné inhibitory MTP popsané v každé z výše uvedených patentů a přihlášek. Na všechny výše uvedené US patenty a přihlášky se tímto odkazuje.

Hypolipidemickým činidlem může být inhibitor HMG CoA reduktázy, který zahrnuje, ale není omezen na, mevastatin a příbuzné sloučeniny popsané v US patentu 3983140, lovastatini (mevinolin) a příbuzné sloučeniny popsané v US patentu 4231938, pravastatin a příbuzné sloučeniny, které jsou popsané v US patentu 4346227, simvastatin a příbuzné sloučeniny popsané v US patentu 448784 a 4450171. Hypolipidemickým činidlem mohou být také sloučeniny popsané v US předběžné přihlášce 60/211594 a 60/211595. Jiné inhibitory HMG CoA reduktázy, které zde mohou být použity zahrnují, ale nejsou omezeny na, fluvastatin, popsaný v US patentu 5354772, cerivastatin popsaný v US patentu 5006530 a 5177080, atorvastatin popsaný v US patentu 4681893, 5273995, 5385929 a 5686104, atavastatin (Nissan/Sankyo nisvastatin (NK-104)) popsaný v US patentu 5011930, Shionogi-Astra/Zeneca visastatin (ZD-4522) popsaný v US patentu 5260440 a příbuzné statinové sloučeniny popsané v US patentu 5753675, pyrazolové analogy mevalonolaktonových derivátů popsaných v US patentu 4613610, indenové analogy derivátu mevalonolaktonu popsané v PCT přihlášce WO 86/03488, 6-[2-(substituovaný pyrrol-l-yl)alkyl)pyran-2-ony a jejich deriváty, jak jsou popsány v US patentu 4647576, SC-45355 od Searle (3-substituovaný derivát pentandiové kyseliny), dichloracetát, imidazolové analogy mevalonolaktonu popsané v PCT přihlášce WO 86/07054, deriváty 3-karboxy-2-hydroxy-propanfosfonové kyseliny popsané ve francouzském patentu 2596393, deriváty 2,3-disubstituovaného pyrrolu, furanu a thiofenu popsané v evropské patentové přihlášce 4499289, ketoanalogy mevinolinu (lovastatinu) popsané v evropské patentové přihlášce 0142146 A2 a chinolinové a pyridinové deriváty popsané v US patentu 5506219 a 5691322.

Kromě toho jsou sloučeniny kyseliny fosfínové užitečné při inhibici HMG CoA reduktázy vhodné pro zde uvedené použití popsány v GB 2205837.

Inhibitory skvalensyntetázy vhodné pro zde uvedené použití zahrnují, ale nejsou omezeny na afosfonosulfonáty popsané v US patentu 5712396, ty popsané v Biller et al., J. Med. Chem., 1988, vol. 31, č. 10, pp 1869 - 1871, zahrnující isoprenoid (fosfinylmethyl)fosfonáty stejně jako jiné známé inhibitory skvalensyntetázy, například popsané v US patentu 4871721 a 4924024 a v Biller, S. A., Neunschwander, K., Ponpipom, Μ. M. a Poulter C. D., Current Pharmaceutical Design, 2, 1 -40(1996).

-33 CZ 304522 B6

Kromě toho zahrnují zde uvedené inhibitory skvalensyntetázy vhodné pro zde uvedené použití zahrnují terpenové pyrofosfáty popsané v P. Ortiz de Montellano et al., J. Med. Chem., 1977, 20, 243 - 249, famesylové difosfátové analogy A a preskvalenové pyrofosfátové (PSQ-PP) analogy popsané v Corey a Volante, J. Am. Chem. Soc., 1976, 98, 1291 - 1293, fosfinylfosfonáty popsané v McClard, RW. et al., J.A.C.S., 1987, 109, 5544 a cyklopropany popsané v Capson, T. L., Phd disertace, červen 1987, Dept. Med. Chem. U of Utah, abstrakt, tabulka výsledků, str. 16, 17, 40 - 43, 48 - 51, shrnutí.

Jiná hypolipidemická činidla vhodná pro zde uvedené použití zahrnují, ale nejsou omezena na deriváty fibrové kyseliny, jako je fenofibrát, gemfibrozil, clofibrát, bezafibrat, ciprofibrát, clinofibrat a podobně, probucol a příbuzné sloučeniny popsané v US patentu 3674836, přičemž probucol a gemfibrozil jsou výhodné, sekvestranty žlučové kyseliny, jako je cholestyramin, colestipol a DEAD-Sephadex (Secholex®, Policexide®) stejně jako lipastabil (Rhone-Poulenc), Eisai E-5050 (N-substituovaný derivát ethanolaminu), imanixil (HOE-402), tetrahydrolistatin (THL), istigmastanylfosforylcholin (SPC, Roche), aminocyklodextrin (Tanabe Seiyoku), Ajinomoto Aj814 (derivát azulenu), melinamid (Sumitomo), Sandoz 58-035, American Cyanamid CL277,082 a CL-283,546 (disubstituované deriváty močoviny), kyselina nikotinová, acipimox, acifiran, neomycin, kyselina p-aminosalicylová, asprin, poly(diallylmethylaminové) deriváty popsané v US patentu 4759923, kvartémí amin poly(diallyldimethylammoniumchlorid) a ioneny popsané v US patentu 4027009 a jiná známá činidla snižující sérový cholesterol.

Jiným hypolipidemickým činidlem může být inhibitor ACAT, jako jsou ty popsané v Drugs of the Future 24 - 15 (1999) (Avasimibe); „The ACAT inhibitor, Cl—1011 is effective in the prevention and regression of aortic fatty streak area in hamsters“, Nicolosi et al., Atherosclerosis (Shannon, Irel). 1998), 137 (1), 77 - 85; „The pharmacological profile of FCE 27677: a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hapatic secretino of ApoB 100-containing lipoprotein“, Ghiselli, Giancarlo, Cardiovasc. Drug Rev. (1998), 16(1), 16 - 30; „RP 73163: a bioavailable alkylsulfinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor“ Smith, C., et al., bioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 6 (1), 47 - 50; „ACAT inhibitors: physilogic mechanisms for hypolipidemic and anti-atherosclerotic activities in experimental animals“, Krause et al. Editor(s): Ruffolo, Robert R., Jr.; Hollinger, Mannfred A., Inflamation: Mediators Pathways (1995), 173 - 98, Publisher: CRC, Boča Raton, Fla.; „ACAT inhibitors: potential anti-atherosclerotic agents“, Sliskovic et al., Curr. Med. Chem. (1994), 1 (3), 204 - 25; „Inhibitors of acyl-CoA:cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. 6. The First water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity. Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT). 7. Development of series of substituted N-phenyl-N'-[(lphenylcyklopentyl)methyl]ureas with enhanced hypocholesterolemic activity“ Sout et al., Chemtracts: Org. Chem. (1995), 8 (6), 359-62, nebo TS-962 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd.).

Hypolipidemickým činidlem může být regulátor aktivity receptorů LD2, jako je MD-700 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd) a LY295427 (Eli Lilly).

Hypolipidemickým činidlem může být inhibitor absorpce cholesterolu, výhodně SCH48461 od Schering-Plough, stejně jako inhibitory popsané v Atherosclerosis 115, 45 - 63 (1995) a J. Med. Chem. 41, 973 (1998).

Hypolipidemickým činidlem může být ileální inhibitor spolupřenašeče Na⁺/žlučové kyseliny, jak je popsán v Drugs of the Future, 24, 425 - 430 (1999).

Výhodnými hypolipidemickými činidly jsou pravastatin, lovastatin, simvastatin, atorvastatin, fluvastatin, cerivastatin, atavastatin a rosuvastatin.

Na výše uvedené US patenty se tímto odkazuje. Zde uvedená množství a dávkování budou stejná jako v Physiciaďs Desk Reference a/nebo u výše uvedených patentů.

-34CZ 304522 B6

Sloučeniny vzorce I podle vynálezu budou použity v hmotnostním poměru k hypolipidemickému činidlu (tam, kde je přítomno) v rozmezí od asi 500 : 1 do asi 1 : 500, výhodně od asi 100 : 1 do asi 1 : 100.

Podávané dávky musí být pečlivě zvoleny podle věku, hmotnosti a stavu pacienta, stejně jako podle způsobu podávání, dávkové formě a režimu a požadovanému výsledku.

Dávkování a formulace pro hypolipidemické činidlo budou stejné jako ve výše uvedených různých patentech a přihláškách.

Dávkování a formulace pro jiná hypolipidemická činidla, která mají být použita tam, kde je to možné, budou stanovena v souladu s nejnovějším vydáním Physicians' Desk Reference.

Pro orální podávání může být dosaženo přijatelných výsledků při použití inhibitoru MPT v množství v rozmezí od asi 0,01 mg/kg do asi 500 mg a výhodně od asi 0,1 mg do asi 100 mg, jednou až čtyřikrát denně.

Výhodná orální dávková forma, jako jsou tablety nebo kapsle, bude obsahovat inhibitor MTP v množství od asi 1 do asi 500 mg, výhodně od asi 2 do asi 400 mg a zvláště výhodně od asi 5 do asi 250 mg, jednou až čtyřikrát denně.

U orálního podávání může být dosaženo uspokojivého výsledku při použití inhibitoru HMG CoA reduktázy, například pravastatinu, lovastatinu, simvastatinu, atorvastatinu, fluvastatinu nebo cerivastatinu v dávkách použitých v souladu s Physiciaďs Desk Reference, jako je množství v rozmezí od asi 1 do 2000 mg, výhodně od asi 4 do asi 200 mg.

Inhibitory skvalensyntetázy mohou být použity v dávkách v množství v rozmezí od asi 10 mg do asi 2000 mg a výhodně od asi 25 mg do asi 200 mg.

Výhodná orální dávkovači forma, jako jsou tablety nebo kapsle, bude obsahovat inhibitor HMG CoA reduktázy v množství od asi 0,1 do asi lOOmg, výhodně od asi 5 do asi 80 mg, a zvláště výhodně od asi 10 do asi 40 mg.

Výhodná orální dávková forma, jako jsou tablety nebo kapsle, bude obsahovat inhibitor skvalensyntetázy v množství od asi 10 do asi 500 mg, výhodně od asi 25 do asi 200 mg.

Jiným hypolipidemickým činidlem může také být inhibitor lipoxygenázy zahrnující inhibitor 15lipoxygenázy (15-LO), jako jsou deriváty benzimidazolu, jako jsou ty popsané ve WO97/12615, inhibitory 15-LO popsané ve WO 97/12613, isothiazolony popsané ve WO 96/38144 a inhibitory 15-LO popsané v Sendobiy et al., „Attenuation of diet-induced atherosclerosis in rabits with a highly selective 15-lipoxygenase inhibitor laking significant antioxidant properties, Brit. J. Pharmacology (1997) 120, 1199 - 1206, a v Comicelli et al., „15-Lipoxygenase and its Inhibition: A Novel Therapeutic Target for Vascular Disease“, Current Pharmaceutical Design, 1999, 5, 11-20.

Sloučeniny vzorce I a hypolipidemická činidla mohou být použity společně ve stejné orální dávkové formě nebo v oddělené orální dávkové formě podávané ve stejné době.

Výše popsané kompozice mohou být podávány v dávkových formách popsaných výše v jedné nebo rozdělené dávce jednou až čtyřikrát denně. Je radno začít u pacienta s kombinací nízkých dávek a postupně se propracovávat ke kombinaci vyšších dávek.

Výhodná hypolipidemická činidla jsou pravastatin, simvastatin, lovastatin, atorvastatin, fluvastatin, cerivastatin, atavastatin a rosuvastatin.

-35CZ 304522 B6

Pokud jiným typem terapeutického činidla, které může být případně použito s inhibitorem SGLT2 vzorce I, je 1, 2, 3 nebo více činidel proti obezitě, mohou tato činidla zahrnovat beta 3 adrenergického agonistu, inhibitor lipázy, inhibitor zpětného příjmu serotoninu (a dopamin), léčivo ovlivňující thyroidní receptor beta, anorektické činidlo, antagonistu NPY, analog Leptinu a/nebo agonistu MC4.

Beta 3 adrenergický agonista, který může být případně použit v kombinaci se sloučeninou vzorce I může být AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck) nebo CP331648 (Pfizer) nebo jiný známý beta 3 agonista, jak jsou popsány v US patentu 5541204, 5770615, 5491134, 5776983 a 5488064, přičemž AJ9677, L750355 a CP331648 jsou zvláště výhodné.

Inhibitor lipázy, který může být případně použit v kombinaci se sloučeninou vzorce I, může být orlistat nebo ATL-962 (Alizym), přičemž orlistat je zvláště výhodný.

Inhibitor zpětného příjmu serotoninu (a dopaminu), který může být případně použit v kombinaci se sloučeninou vzorce I, může být sibutramin, topiramat (Johnson & Johnson) nebo axokin (Regeneron), přičemž sibutramin a topiramat jsou výhodné.

Sloučenina thyroidního receptoru beta, která může být případně použita v kombinaci se sloučeninou vzorce I, může být ligand thyroidního receptoru popsaný ve WO 97/21993 (U. Cal SF), WO 99/00353 (KaroBio) a GB 98/284425 (KaroBio), přičemž sloučeniny uvedené v přihláškách KaroBio jsou zvláště výhodné.

Anorektické činidlo, které může být případně použito v kombinaci se sloučeninou vzorce I, může být dexamfetamin, fentermin, fenylpropanolamin nebo mazindol, přičemž dexamfetamin je výhodný.

Různá výše popsaná antiobezitní činidla mohou být použita ve stejné dávkovači formě jako sloučeniny vzorce I nebo v odlišných dávkovačích formách, v dávkách a režimech dávkování obecně známých odborníkovi v oboru nebo lékaři.

Příklady činidla/činidel proti krevním destičkám, která mohou být případně použita v kombinacích podle vynálezu, zahrnují abciximab, ticlopidin, eptifibatid, dipyridamol, aspirin, anagrelid, tirofiban a/nebo clopidogrel.

Příklady činidla/činidel proti hypertenzi, která mohou být případně použita v kombinacích podle tohoto vynálezu, zahrnují inhibitory ACE, antagonisty vápníku, alfa-blokátory, diuretika, centrálně působící činidla, antagonisty angiotensinu-II, beta-blokátory a inhibitory vasopeptidázy.

Příklady inhibitorů ACE zahrnují lisinopril, enalapril, quinapril, benazepril, fosinopril, ramipril, captopril, enalaprilat, moexipril, trandolapril a perindopril; příklady antagonistů vápníku zahrnují amlodipin, diltiazem, nifedipin, verapamil, felodipin, nisoldipin, isradipin a nicardipin; příklady alfa-blokátorů zahrnují terazosin, doxazosin a prazosin; příklady diuretik zahrnují hydrochlorothiazid, torasemid, furosemid, spironolakton a indapamid; příklady centrálně působících činidel zahrnují clonidin a guanfacin; příklady antagonistů angiotensinu-II zahrnují losartan, valsartan, irbesartan, candesartan a telmisartan; příklady beta-blokátorů zahrnují metoprolol, propranolol, atenolol, carvedilol a sotalol; a příklady inhibitorů vasopeptidázy zahrnují omapatrilat a gemopatrilat.

Při provádění způsobu podle vynálezu bude použita farmaceutická kompozice obsahující sloučeniny vzorce I s nebo bez jiného antidiabetického činidla/a nebo antihyperlipidemického činidla nebo jiné typu terapeutického činidla ve spojení s farmaceutickým nosičem nebo ředidlem. Farmaceutická kompozice může být vytvořena za použití běžných pevných nebo kapalných vehikul nebo ředidel a farmaceutických aditiv vhodného typu k umožnění požadovaného podávání. Slou-36CZ 304522 B6 čeniny mohou být podávány savčím druhům včetně lidí, opic, psů atd. orální cestou, například ve formě tablet, kapslí, granulí nebo prášků, nebo mohou být podávány parenterální cestou nebo prášků, nebo mohou být podávány parenterální cestou ve formě - injektovatelných přípravků, nebo mohou být podávány intranazálně nebo transdermální cestou. Dávka pro dospělé je výhodně mezi 10 a 2000 mg na den, která může být podávána v jedné dávce nebo ve formě individuálních dávek od 1 do 4 krát denně.

Typický injektovatelný preparát se vyrobí aseptickým umístěním 250 mg sloučeniny vzorce I do ampule, aseptickou lyofilizaci a zatavením. Pro použití se obsah ampule smíchá s 2 ml fyziologického roztoku za účelem výroby injektovatelného preparátu.

Inhibiční aktivita vůči SGLT2 u sloučenin podle vynálezu může být stanovena použitím zkušebního systému uvedeného níže.

Zkouška aktivity na SGLT2

Za použití standardních metod molekulární biologie byla reverzní transkripcí a amplifikací z lidské ledvinové mRNA klonována sekvence mRNA pro lidskou SGLT2 (GenBank#M95549). Sekvence cDNA byla stabilně převedena do buněk CHO a klony byly zkoušeny na SGLT2 aktivitu v podstatě způsobem popsaným v Ryan et al. (1994). Vyhodnocení inhibice aktivity SGLT2 v klonové selektované buněčné linii bylo provedeno v podstatě způsobem popsaným v Ryyn et al., s následujícími modifikacemi. Buňky byly kultivovány v 96jamkových deskách 2 až 4 dny na 75000 nebo 30000 buněk na jamku v nutriční směsi F—12 (Ham F—12), 10% fetálním hovězím séru, 300 pg/ml Geneticinu a penicilin-streptomycinu. Postupně byly buňky promyty dvakrát 10 mM Hepes/Tris, pH 7,4, 137 mM N-methyl-D-glukaminem, 5,4 mM KC1, 2,8 mM CaCl₂, 1,2 mM MgSO₄. Buňky byly inkubovány s 10 μΜ [¹⁴C]AMG a 10 pM inhibitoru (konečné DMSO = 0,5%) v 10 mM Hepes/Tris, pH 7,4, 137 mM NaCl, 5,4 mM KC1, 2,8 mM CaCl2, 1,2 mM MgSO4 při 37 °C 1,5 h. Zkušební vzorky byly zředěny ledovým IX PBS obsahujícím 0,5 mM phlorizinu a buňky byly poté lyžovány pomocí 0,1% NaOH. Po přídavku scintilační kapaliny MicroScint, byly buňky ponechány protřásat lha poté bylo kvantitativně stanoveno [¹⁴C]AMG na scintilačním čítači TopCount. Kontrolní vzorky byly bez a s NaCl. Pro stanovení hodnot EC5o bylo použito 10 koncentrací inhibitoru během intervalů 2 log ve vhodném rozmezí odezvy, a trojité stanovení na deskách bylo zprůměrováno.

Ryan MJ, Johnson G, Kirk J, Fuersanberg SM, Zager RA a Torok-Storb B. 1994. HK-2: an immortalized proximal tubule epithelial cell line from normál adult human kidney. Kidney International 45: 48-57.

Následující příklady provedení představují výhodná provedení tohoto vynálezu. Všechny teploty jsou vyjádřeny ve stupních Celsia, pokud není uvedeno jinak.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

-37CZ 304522 B6

A. 3-Brom^ť-ethylbenzylhydrol

Suché piliny Mg (4,4 g, 0,178 mol) pod Ar byly míchány přes noc, poté bylo přidáno 100 ml suchého Et₂O a poté během 1 hodiny p-bromethylbenzen (22 g, 0,119 mol) v 20 ml Et₂O. (V případě, že nezačala reakce, bylo přidáno 0,5 ml 1,2-dibromethanu). Po míchání přes noc byl přidán pomalu m-brombenzaldehyd (lig, 0,06 mol) v 20 ml Et₂O. Výsledný světlý roztok byl monitorován HPLC během 4 až 6 hodin ke zjištění konce reakce. Reakční směs byla po zředění nasyceným vodným NH₄C1 extrahována 3x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky. Výsledný žlutý olej byl podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 5% EtOAc/hexan pro eluci nepolárních nečistot a 7 - 9% EtOAc/hexan k eluci 12,4 g (71 %) 3-brom-4'-ethylbenzhydrolu jako světle žlutého oleje.

B. 3-Brom-4'-ethyldifenylmethan

Kmíchanému roztoku 3-brom-4'-ethylbenzhydrolu (12,4 g, 0,0426 mol) zčásti A ve 120 ml MeCN při -30 °C byl přidán BF₃.Et₂O (6,04 g, 0,0426 mol) a poté Et₃SiH (9,9 g, 0,852 mol). Tmavá reakční směs byla po míchání po dobu 1 hodiny při -30 °C ohřátá pomalu na -5 °C. Když bylo tle zjištěno, že reakce je u konce, byla reakční směs zředěna přídavkem nasyceným vodným K₂CO₃. Po přídavku 100 ml vody byla směs extrahována 3x Et₂O. Spojené organické vrstvy byly promyty solankou a vysušeny síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odparky byl získán 3-brom-4'-ethyldifenylmethan (11,17 g, 95 %) jako světle žlutý olej, který byl použit bez dalšího přečištění.

C.

Et

K míchanému roztoku 3-brom—4'-ethyldifenylmethanu (10,9 g, 0,04 mol) z části B při -78 °C ve 100 ml suchého THF pod Ar bylo přidáno 25,7 ml 1,7 M t-BuLi v hexanu během 20 min. Po 1 hodině byl během 15 minut přidán 2,3,4,6-tetra—O—benzyl—β—D—glukolaktonu (23,5 g, 0,0437 mol) v 30 ml THF. Roztok byl míchán 1 hodinu při —78 °C, poté byl zředěn nasyceným vodným NH4CI. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna dvojnásobně EtOAc před promytím vodou a poté solankou. Po vysušení síranem sodným a odpaření za použití rotační odparky bylo získáno 29,2 g požadovaného titulního laktolu jako bezbarvý sirup, který byl dále zpracován bez dalšího přečištění.

-38CZ 304522 B6

K míchanému roztoku laktolu z části C (29,1 g, 0,04 mol) ve 100 ml MeCN při -30 °C byl přidán PF₃.Et₂O (5,62 g, 0,04) a poté Et₃SiH (9,21 g, 0,08 mol). Po 2 hodinách, když tle ukázala, že reakce je u konce, byl přidán nasycený vodný uhličitan draselný a suspenze byla míchána 1 hodinu při 20 °C před zředěním vodou a Et₂O. Spojené organické vrstvy z 3 extrakcí Et₂O byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky, čímž bylo získáno 28,3 g světle žlutého sirupu. Chromatografie na silikagelu pomocí systému 5% EtOAc/hexan vymyla nepolární nečistoty a poté pomalu požadovaný beta anomer a poté alfa anomer. Frakce obohacené beta anomerem mohou být dále přečištěny triturací s hexanem nebo rekrystalizaci z EtOH, čímž lze získat 6 g požadovaného titulního beta tetra-O-benzyl Cglukosidu. (Pozn.: Když je redukčním činidlem Et₃SiH, získá se směs beta/alfa anomeru 5:1, když substituovaný iPr₃SiH, získá se směs 30 : 1).

E.

Roztok tetra-O-benzyl-C-glukosidu (2,4 g, 3,35 mmol) z části D v EtOAc (100 ml) obsahující 10% Pd(OH)₂/C (0,35 g) byl míchán přes noc pod 1 atm H₂ (= 101,325 kPa). Poté, co HPLC ukázala, že reakce je u konce, byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno za použití rotační odparky, čímž bylo získáno 1,1 g požadovaného beta-C-glukosidu (92 %) jako žluté krystalické pevné látky.

Retenční čas HPLC: 7,04 min, čistota 100 %, kolona YMC S5 C-l8 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 5 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

'HNMR (500 MHz, CD₃OH) δ 7,27 (s, IH), 7,23 (d, 2H, J = 4,95 Hz), 7,1 - 7,0 (m, 5H), 4,08 (d, IH, J = 9,3 Hz), 3,91 (s, 2H), 3,9 (dd, IH, J = 2,2, 11 Hz), 3,68 (dd, IH, J = 5,5, 11,5 Hz), 3,5 - 3,35 (m, 4H), 2,57 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 1,18 (t, 3H, J = 7,2 Hz) ¹³C NMR (125 MHz, CD₃OH) δ 143, 142,8, 141, 140, 129,9, 129,6, 129,5, 129,1, 128,8, 126,7, 83,8, 82,3, 79,93, 76,4, 72,0, 63,2, 42,5, 29,4, 16,2.

Anal. vypočt. pro C₂iH₂6O₅ LC-MS [M+NH4] 376; zjištěno 376

Příklad 2

-39CZ 304522 B6

A. 3-Brom-4'-methoxybenzhydrol

K míchanému roztoku m-dibrombenzenu (70,9 g, 0,3 mol) v 200 ml suchého THF pod Ar o teplotě -78 °C bylo přidáno během 10 min 117 ml 2,56M n-BuFi (0,3 mol) v hexanu. Po 30 minutách byl během 20 minut přidán p-methoxybenzaldehyd (27,2 g, 0,02 mol) v 50 ml THF. Roztok byl míchán 1 hodinu při -78 °C (ukončení reakce zjištěno tle) před zředěním nasyceným aq. NH4CI. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna před promytím vodou a poté solankou dvojnásobkem EtOAc. Po vysušení Na₂SO₄ a odpaření za použití rotační odparky bylo získáno 103 g 3-brom-4'-methoxybenzhydrolu jako žlutého oleje, který byl zpracován dále bez dalšího přečištění.

B. 3-Brom-4'-methoxydifenylmethan

K míchanému roztoku surového 3-brom-4'-methoxybenzhydrolu (103 g, 0,2 mol) z části A v 300 ml MeCN při teplotě -40 °C byl přidán Et₃SiH (64 ml, 0,4 mol) a poté BF₃ . Et₂O (27,7 g, 0,2 mol). Když byl tle zjištěn konec reakce, byla reakční směs zředěna přídavkem nasyceného aq. K₂CO₃ (25 ml). Po přídavku 100 ml vody byla směs 3x extrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty solankou a vysušeny síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odparky byl surový titulní 3-brom-4'-methoxydifenylmethan (92 g) podroben chromatografií na silikagelu za použití 9% EtOAc/hexan k eluci 17 g čistého produktu následovaného méně čistými frakcemi.

C.

Kmíchanému roztoku 3-brom-4'-methoxydifenylmethanu (9,6 g, 0,035 mol) zčásti B při 78 °C v 50 ml suchého THF pod Ar byl přidáno během 5 min 14 ml 2,5 M n-BuFi v hexanu. Po míchání po dobu 40 minut byl přidán během 10 minut 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-|3-D-glukolakton (12,5 g, 0,023 mol) v 20 ml THF. Roztok byl míchán 1 hodinu při -78 °C, načež analýza tle ukázala, že reakce proběhla kompletně. Po zředění nasyceným vodným NH4CI (25 ml) a ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna EtOA (200 ml). Organická vrstva byla promyta vodou a poté solankou. Po vysušení síranem sodným a odpaření za použití rotační odparky byl podroben požadovaný titulní laktol chromatografií na silikagelu za použití 12,5% EtOAc/hexan k eluci 8,1 g laktolu o čistotě více než 90 % a poté 9,7 g o čistotě více než 80 %.

-40CZ 304522 B6

K míchanému roztoku laktolu z části C (7,8 g, 0,019 mol) v 100 ml MeCn byl při ^10 °C přidán Et₃SiH (3,42 ml, 0,04 mol) a poté BF₃ . Et₂O (1,37 ml, 0,02 mol). Po 1 hodině, když tle ukázala, že reakce je u konce, byl přidán nasycený vodný uhličitan draselný (10 ml) a suspenze byla míchána 1 hodinu při 20 °C a poté byla extrahována 3x pomocí EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou, solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky, čímž bylo získáno 8 g surového produktu. Chromatografií na silikagelu za použití systému 5% EtOAc/hexan byly eluovány nepolární nečistoty a poté 0,92 g čistého titulního β-tetra-Obenzyl-C-glukosidu a poté 6,5 g obsahujících oba anomery.

Výše uvedené frakce sloučeniny zčásti D byly hydrogenovány odděleně na 10% Pd(OH)₂(2 % hmotnostně) přes noc při 1 atmosféře H₂ v EtOAc (12,5 ml/g sloučeniny z části D). Po filtraci a odpaření rozpouštědla byl produkt hydrogenolýzy směsných frakcí přečištěn preparativní HPLC za použití kolony YMC S10 s reverzní fází. Kompletní materiál poskytnul 1,85 g čistého β anomeru jako bílou pevnou látku.

Retenční čas HPLC: 6,04 min, kolona Zorbax C-l 8 4,6 x 75 mm, 2,5ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 3 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

’H NMR (400 MHz, CD₃OH) δ 7,28 (s, 1H), 7,24 (d, 2H, J = 3 Hz), 7,09 (m, 3H), 6,79 (d, 2H, J = 7 Hz), 4,08 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 3,88 (s, 2H), 3,75 (d, 1H, J = 12 Hz), 3,73 (s, 3H), 3,65 (dd, 1H, J = 12, 3 Hz), 3,4 (m, 4H).

¹³C NMR (100 MHz, CD₃OH) δ 158,6, 142,1, 140,2, 133,8, 130,0, 128,7, 128,6, 128,3, 125,8, 82,9, 81,3, 79,0, 75,5, 71,1, 62,5, 55,1, 41,1.

Anal. vypočt. pro C₂₀H₂₄O₆ LC-MS (M-H) 359; zjištěno 359.

Příklad 3

A.

-41 CZ 304522 B6

K míchanému roztoku m-dibrombenzenu (12,6 g, 53 mmol) v 50 ml suchého THF pod Ar při -78 °C bylo přidáno během 10 minut 20 ml 1,56 M 2,56 M n-BuLi (51 mmol) v hexanu. Po 40 minutách byl přidán během 15 minut 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-(3-D-glukolakton (12 g, 22 mmol) v 30 ml THF. Roztok byl míchán 1 hodinu při -78 °C (konec zjištěn tle) před zředěním nasyceným vodným NH4CI (40 ml). Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna dvojnásobkem EtOAc a poté byla promyta vodou a poté solankou. Po vysušení síranem sodným a odpaření za použití rotační odparky bylo získáno 20 g surového titulního laktolu jako oleje, který byl dále zpracován bez dalšího přečištění.

B.

BnO^i BnÓ^'

OBn

X = Br

K míchanému roztoku laktolu z části A (20 g, 0,2 mol) v 60 ml MeCN při -45 °C byl přidán Et₃SiH (7,8 ml, 45 mmol) a poté byl pomalu přidán během 20 minut BF₃ . Et₂O (4,2 ml, 22 mmol). Když bylo po hodině tle zjištěno, že reakce proběhla, byla reakční směs zředěna přídavkem nasyceného vodného uhličitanu draselného (25 ml) a směs byla extrahována 3x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky. Výsledný olej byl triturován s 50 ml hexanu, načež po stání 1 hodinu se vysrážela pevná látka. Tato látka byla shromážděna filtrací, promyty dvakrát chladným hexanem a vysušena vzduchem, čímž bylo získáno 8,9 g požadovaného β-m-bromfenyl-C-glukosidu.

C.

SnBu₃

Roztok β-m-bromfenyl-C-glukosidu (1,356 g, 2 mmol) z části B, Pd(Ph₃)₄ (70 mg, 0,06 mmol) a hexabutyldistannanu (2,7245 g, 6 mmol) v suchém toluenu (10 ml) byl zahříván za míchání pod Ar při 80 °C po 15 hodin. Po odstranění toluenu za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému EtOAc/hexan 12 : 1 k eluci požadovaného titulního arylstannanu (761 mg) a směsných frakcí, které po druhé kolonové chromatografii daly dalších 92 mg čistého titulního stannanu za celkového výtěžku 48 %, poté 230 mg znovu získaného β-m-bromfenyl-C-glukosidu z části B.

-42CZ 304522 B6

D.

Směs stannanu z části E (2,66 g, 3 mmol) p-trifluormethoxybenzylchloridu (1,04 g, 6 mmol) a Pd(PPh₃)₄ (100 mg, 0,09 mmol) byla vařena pod zpětným chladičem pod Ar v THF (1 ml) po dobu 15 hodin. Po odstranění THF na rotační odparce byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/EtOAc 10 : 1 keluxi 1,3 g požadovaného titulního tetrabenzyletheru.

o

E.

Konverze na konečný volný glukosid bylo dosaženo mícháním 295 mg tetrabenzyletheru z části 15 D s Pd(OH)₂ (15 mg) v EtOAc (3 ml) pod 1 atmosférou H₂ po dobu 15 hodin. Titulní produkt (104 mg) byl izolován po filtraci, preparativní HPLC a odstranění rozpouštědla.

Retenční čas HPLC: 7,21 min, kolona Zorbax C-l8 4,6 x 75 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 až 100% B udržovaný 3 min při 100% B. Rozpouštědlo A:

10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂ + 0,2 % H₃PO₄.

'H NMR (400 MHz, CD₃OH) δ 7,3 (m, 5H), 7,15 (m, 3H), 4,10 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 3,99 (s, 2H), 3,9 (d, 1H, J = 12 Hz), 3,7 (dd, 1H, J = 12, 3 Hz), 3,4 (m, 4H).

Anal. vypočt. pro C₂oH₂iF₃0₆ LC-MS (M-H) 413; zjištěno 413.

-43 CZ 304522 B6

Příklad 4

A.

SnBu₃

Směs β-m-bromfenyl-C-glukosidu (3,0 g, 4,41 mmol) z části B příkladu 3 a Pd(PPh₃)₄ (153 mg, 0,13 mmol) a hexabutyldistananu (6,0 g, 13,2 mmol) v suchém toluenu (5 ml) byla zahřívána za míchání pod Ar při 88 °C po dobu 3 hodiny, načež analýza tle ukázala, že reakce proběhla z 90 %. Reakce byla ukončena po celkově 5 hodinách. Po odstranění toluenu za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému EtOAc/hexan 1 : 8, ío čímž bylo eluováno 2,95 g požadovaného arylstannanu.

B.

Směs stannanu zčásti A (2,66 g, 3 mmol), p-methylthiobenzylchloridu (1,04 mg, 6,0 mmol) a tetrakis(trifenylfosfin)palladia (100 mg, 0,09 mmol) byla vařena pod zpětným chladičem pod Ar v THF (5 ml) po dobu 15 h. Po odstranění THF na rotační odparce byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/EtOAc 6:1, přičemž bylo eluováno 1,2 g požadovaného titulního tetra-O-benzyletheru a poté 600 mg titulního tetra-O-benzyletheru obsahuj í20 čího Ph₃P.

-44CZ 304522 B6

C.

K míchanému 78 °C roztoku tetrabenzyletheru (295 mg, 0,4 mmol) pod Ar v CH2CI2 (0,25 ml) 5 byl během 5 minut přidán 1 M BC1₃/CH₂C1₂ (6 ml, 8 mmol). Po 30 min, když analýza tle ukázala, že reakce úplně proběhla, bylo přidáno 30 ml směsi CH₂Cl₂/PhMe 2:1a poté 2 ml MeOH. Objem byl zredukován na polovinu za použití rotační odparky a bylo přidáno 10 ml MeOH. Po zopakování tohoto postupu 3x byly všechny těkavé látky odstraněny za vakua. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za použití 5% MeOH/CH₂Cl₂, přičemž bylo eluováno 143 mg poža10 dováného glukosidu o čistotě 90 %. Tato látka byla dále přečištěna HPLC s reverzní fází, čímž bylo získáno 104 mg konečného požadovaného glukosidu.

Retenční čas HPLC: 6,69 min, kolona Zorbax C-18 4,6 x 75 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 až 100 % B udržovaný 3 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10%

MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

'H NMR (400 MHz, CD₃OH) δ 7,27 (s, IH), 7,25 (d, 2H, J = 2 Hz), 7,15 (m, 5H), 4,09 (d, IH, J = 8,8 Hz), 3,92 (s, 2H), 3,86 (d, IH, J = 12 Hz), 3,68 (dd, IH, J = 12, 3 Hz), 3,4 (m, 4H), 2,43 (s, 3H).

Anal. vypočt. pro C₂oH₂₄0₆S LC-MS (M-H) 375; zjištěno 375.

Příklad 5

A.

-45CZ 304522 B6

K míchané suspenzi 60% NaH (180 mg, 4,5 mmol) v THF (7 ml) pod Ar byl přidán 2-bromfenol (350 μΐ, 3 mmol). Po míchání po dobu 15 min byla reakční směs ochlazena na -78 °C a bylo po kapkách přidáno 1,4 M t-BuLi/hexan (2,36 ml, 3,3 mmol). Po 10 min byl roztok převeden kanylou k míchanému -78 °C teplému roztoku 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-[3-D-glukolaktonu (1,62 g, 3,0 mmol) v THF (5 ml). Reakce byla ukončena po 15 minutách pomalým přídavkem nas. NH4CI/H2O a poté byla ponechána ohřát na 20 °C, načež bylo přidáno 200 ml EtOAc. Organická vrstva byla poté postupně promyta vodou a solankou, vysušena síranem hořečnatým a odpařena. Chromatografie na silikagelu za použití systému hexan/EtOAc 3 : 1 dala 390 mg požadovaného titulního laktolu.

K míchané směsi MeCN/CH₂Cl2 (4 ml) 3 : 1 obsahující laktol z části A (310 mg, 0,62 mmol) při -30 °C byl přidán Et₃SiH (197 pL, 1,23 mmol) a BF₃. Et₂O (78 μΐ, 0,62 mmol). Po 1 hodině byla reakce ukončena přídavkem 1 ml nas. K₂CO₃, reakční směs byla ohřátá na 20 °C a zředěna 100 ml EtOAc. Organická vrstva byla promyta postupně vodou a solankou, vysušena síranem hořečnatým a odpařena. Chromatografie na silikagelu pomocí systému hexan/EtOAc 3 : 1 dala 269 mg požadovaného titulního fenolického C-glukosidu.

KPhMe roztoku (1,1 ml) fenolu zčásti B (139 mg, 0,22 mmol) pod Ar byl přidán 60% NaH (11 mg, 0,27 mmol). Po 10 min byl přidán 4-methylbenzylbromid (46 mg, 0,25 mmol) jako pevná látka k modrému roztoku, který byl poté zahřát na 80 °C na 3,5 h, dokud nebylo tle zjištěno, že reakce úplně proběhla. Po ochlazení a poté přídavku vodného NH4CI byla reakční směs zředěna EtOAc. Organická vrstva byla promyta postupně vodou a solankou, vysušena MgSO₄ a odpařena. Chromatografie na silikagelu za použití systému hexan/EtOAc 5 : 1 dala 71 mg požadovaného titulního tetra-O-benzylglykosidu.

-46CZ 304522 B6

Následná hydrogenolýza tetra-O-benzylglukosidu z části C na Pd/C v MeOH pod 1 atm H₂ dala konečný titulní produkt, který byl přečištěn preparativní HPLC za použití kolony s reverzní fází 08 za gradientu 45 až 90 % Me0H/H₂0 během 10 min, čímž byl eluován požadovaný β-Cglukosid (2 mg).

Retenční čas HPLC: 6,754 min, čistota 100 %, kolona YMC S3 ODS 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 až 100 % B udržovaný 5 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

^]H NMR (500 MHz, CD₃OH) δ 7,15 (dd, IH, J = 1,1, 7,7 Hz), 707 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,02 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 6,96 (dd, IH, J = 1,2, 7,7 Hz), 6,77 (t, IH, J = 7,7 Hz), 4,44 (d, IH, J = 8,78 Hz), 3,89 (d, 2H), 3,87 (d, IH, J = 2,2 Hz), 3,75 (dd, IH, J = 4,9, 12,1), 3,49 - 3,41 (m, 4H), 2,26 (s, 3H).

Anal. vypočt. pro C₂₀H₂₄O₆ LC-MS [M-H] 361; zjištěno 361.

Příklad 6

A. p-Chlormethylacetofenon

K míchanému roztoku p-chlormethylbenzoylchloridu (390 mg, 3,06 mmol) v 8 ml THF při -20 °C pod Ar byl přidán tributylfosfin (406 mg, 2,29 mmol). Po míchání po dobu 20 min bylo k výslednému žlutému roztoku při -20 °C až -15 °C přidáno 0,7 ml 3 M methylmagnesiumbromidu v etheru (2,1 mmol) v jedné dávce, čímž se vytvořil červený roztok, který se následně změnil během 10 minut na oranžový. Reakce byla ukončena přídavkem 1M vodné HCI. Po zředění vodou byla směs extrahována 3x EtOAc, a před vysušením Na₂SO₄ promyta vodou. Zbytek získaný po odstranění těkavých látek byl podroben chromatografií na silikagelu za použití systému

5% EtOAc/hexan, přičemž bylo získáno 171 mg (50 %) p-chlormethylacetofenonu.

B.

-47CZ 304522 B6

Směs stannanu popsaného v části C příkladu 3 (300 mg, 0,33 mmol) v p-chlormethylacetofenonu (114 mg, 0,66 mmol) a Pd(PPh₃)₄ (20 mg, 0,09 mmol), trimethylfosfinoxidu (180 mg, 0,65 mmol), uhličitanu draselného (75 mg, 0,55 mmol) byla zahřáta na 70 °C pod Ar v THF (0,3 ml) na 16 h. Po odstranění THF na rotační odparce byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/EtOAc 20 : 1 až 10 : 1 k eluci požadovaného tetrabenzyletheru (170 mg, 70 %).

C.

Roztok tetrabenzyletheru z části B (60 mg, 0,08 mmol) v CH2CI2 (5 ml) pod Ar byl ochlazen na -78 °C před přídavkem 0,8 ml 1M BC1₃ v CH₂C1₂. Po míchání po dobu 1 h při -78 °C byla přidána za míchání reakční směsi druhá dávka 0,8 ml 1 M BC1₃. Po druhé hodině bylo přidáno 0,5 ml PhMe a poté po kapkách 0,5 ml MeOH. Těkavé látky byly odstraněny za použití rotační odparky; proces se opakoval po přídavku 3 ml směsi CH₂Cl₂/MeOH 2:1. Chromatografíe výsledného zbytku na silikagelu za eluce pomocí 5% MeOH/EtOAc dala 2é mg tetrazolového konečného produktu s výtěžností 67 %.

Retenční čas HPLC: 2,35 min, čistota 100 %, kolona YMC S3 ODS 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 4 min gradient 0 až 100 % B udržovaný 4 min při 100 % B.

Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

‘H NMR (500 MHz, CD₃OH) δ 7,88 (d, 2H), 7,29 - 7,34 (m, 5H), 7,13 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,03 (s, 2H), 3,85 (d, 1H), 3,68 (dd, 1H), 3,35 - 3,48 (m, 4H), 2,55 (s, 3H) ¹³C NMR (500 MHz, CD₃OH) δ 200,3, 148,8, 141,4, 141,2, 136,3, 130,2, 129,7, 129,6, 129,3, 127,0, 83,6, 82,2, 79,8, 76,4, 71,9, 63,1, 42,7, 26,6.

Anal. vypočt. pro C₂₁H₂₄O₆ LC-MS (M+NH4+); 390,2, zjištěno 390,2.

Příklad 7

-48CZ 304522 B6

Míchaný roztok konečného produktu z příkladu 6(15 mg, 0,04 mmol) v 5 ml EtOH byl ochlazen na -20 °C, načež byl přidán NaBH₄ (5 mg, 0,13 mmol). Po 20 min, kdy bylo tle zjištěno, že reakce proběhla, byla reakční směs zředěna několika kapkami nasyceného aq. NH4CI. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografii na silikagelu. Eluce pomocí 5% MeOH/EtOAc dala 10 mg (67 %) požadovaného produktu.

Retenční čas HPLC: 5,2 min, čistota 100 %, kolona YMC S3 ODS 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 až 100 % B udržovaný 5 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

^]H NMR (500 MHz, CD₃OH) δ 7,21 - 7,32 (m, 5H), 7,16 (d, 2H), 7,10 - 7,11 (m, 1H), 4,77 (q, 1H), 4,08 (d, 1H), 3,94 (s, 2H), 3,86 (dd, 1H), 3,68 (dd, 1H), 3,34 - 3,48 (m, 4H), 1,40 (d, 3H).

¹³C NMR (500 MHz, CD₃OH) δ 145,2, 142,5, 141,5, 140,9, 129,8, 129,6, 129,5, 129,2, 126,7,

126,6, 83,7, 82,2, 79,8, 76,4, 72,0, 62,2, 42,5, 25,5.

Anal. vypočt. pro ΰ₂|Η₂₆Ο₆ LC-MS (M+NH4+): 392,2 zjištěno 392,1.

Příklad 8

A. Kyselina 5-brom-2-methylbenzoová

Směs kyseliny o-toluenové (28 g, 206 mmol), práškového železa (0,74 g, 13 mmol) a Br₂ (42 g, 260 mmol) byla míchána při 0 °C po dobu 2 h. V tomto okamžiku byla reakční směs, kde bylo zreagováno asi 40 %, zředěna 25 ml CH₂C1₂ k usnadnění míchání. Reakční směs byla poté ohřátá na 45 °C na 16 h, což vedlo k dokončení reakce. Po ochlazení byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, 2x promyta 10% NaHSO₃, lx solankou a poté byla vysušena síranem sodným. Po odstranění těkavých látek byl zbytek obsahující směs 5-brom a 3-bromtoluenové kyseliny v poměru 2 : 1 rekrystalizován z 95% EtOH, čímž bylo získáno 14,4 g kyseliny 5-brom-2-methylbenzoové.

B. 5-Brom-2-methyl-4'-methylbenzofenon

K míchané suspenzi kyseliny 5-brom-2-methylbenzoové (1,29 g, 6 mmol) v 12 ml CH₂C1₂ obsahujícím oxalylchlorid (8 mmol) byly přidány 2 kapky DMF. Jakmile pominulo bouřlivé vyvíjení plynu, byla reakční směs míchána 6 hodin před odstraněním těkavých látek za použití rotační odparky. Po rozpuštění surového 5-brom-2-methylbenzoylchloridu v 15 ml CS₂ byla míchaná směs ochlazena na 4 °C před přidáním anisolu (0,7 g, 6,6 mmol) a poté A1C1₃ (1,7 g, 12 mmol). Reakční směs po ohřátí na 20 °C během 1 h byla míchána 15 h před přídavkem IN HCI. Následně byla suspenze zředěna 50 ml vody a míchána, dokud všechny pevné látky nebyly v roztoku. Směs byla extrahována 3x EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty 1 x 1 N HCI, vodou, aq. NaHCO₃ a solankou a poté vysušena Na₂SO₄. Po odstranění těkavých látek byla výsledná žlutohnědá pevná látka rekrystalizována z 95% EtOH, čímž bylo získáno 1,6 g 5-brom-2methyl^F-methoxybenzofenonu.

C. 5-Brom-2-methyl-4'-methoxydifenylmethan

-49CZ 304522 B6

Roztok Et₃SiH (2,5 ml, 15,5 mmol), BF₃ . Et₂O (1,3 ml, 10 mmol) a 5-brom-2-methyM'methoxybenzofenonu (1,6 g, 5,25 mmol) v 11 ml směsi CH₂Cl₂/MeCN 1 : 4 byl míchán přes noc při 20 °C. Protože bylo zjištěno HPLC, že 5% výchozího ketonu zůstalo, roztok byl zahřát na 40 °C na 1 h před zředěním 10% NaOH. Po zředění vodou byla reakční směs extrahována pomo5 ci EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2x vodou a jednou solankou před vysušením síranem sodným. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití hexanu k eluci 5-brom-2-methyl-4'-methoxydifenylmethanu jako bezbarvého oleje (1,4 g, 95 %).

io D.

K míchanému 78 °C roztoku 5-brom-2-methyl-4'-methoxydifenylmethanu (0,43 g, 1,5 mmol) z části C v 7 ml suchého THF pod Ar bylo po kapkách přidáno 0,9 ml 1,8 M η-BuLi v hexanu.

Po 2 h byl během 1 minuty přidán 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-|3-D-glukolaktonu (0,88 g, 1,6 mmol) v 3 ml THF. Roztok byl míchán 2 h při -78 °C před zředěním nasyceným aq. NH4CI. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna 2 násobně vodou před 3 extrakcemi EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odparky bylo získáno 1,1 g požadovaného titulního laktolu jako bezbarvý sirup, který byl dále zpraco20 váván bez dalšího přečištění.

E.

K míchanému roztoku laktolu z části C (1,1 g, 1,47 mmol) při -30 °C v 10 ml MeCN byl přidán iPr₃SiH (0,7 g, 4,5 mmol) a poté BF₃ . Et₂O (0,38 g, 2,6 mmol). Po 3 h při -40 až -30 °C bylo tle zjištěno, že reakce proběhla úplně. Byl přidán nasycený aq. K₂CO₃ a suspenze byla míchána 1 h při 20 °C před zředěním vodou a EtOAc. Spojené organické vrstvy z 3 EtOAc extrakcí byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky, čímž bylo zís30 káno 1,2 g světle žlutého sirupu. Chromatografií na silikagelu pomocí systému 10% EtOAc/hexan byly eluovány nepolární nečistoty a poté požadovaný beta C-aiylglukosid (0,54 g).

-50CZ 304522 B6

F.

Roztok tetra-O-benzyl C-glukosidu (515 mg, 0,7 mmol) zčásti E v EtOAc (10 ml) obsahující 10% Pd(OH)₂/C (80 mg) byl míchán přes noc pod 1 atm H₂. Poté, co HPLC ukázala, že reakce je u konce, byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odstraněno za použití rotační odparky, čímž byla získána bílá sklovitá pevná látka, která byla dále přečištěna preparativní HPLC za použití kolony s Cig reverzní fází, čímž bylo získáno 220 mg požadovaného beta C-glukosidu jako bezbarvý sirup.

Retenční čas HPLC: 6,43 min, čistota 100 %, kolona YMC S5 C-l 8 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 5 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

'HNMR (500 MHz, CD₃OH) δ 7,20 (s, 1H), 7,18 (d, 1H, J = 7 Hz), 7,11 (d, 1H, J = 7 Hz), 6,89 (ABq, 4H), 4,07 (d, 1H, J = 9 Hz), 3,90 (s, 2H), 3,87 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,68 (dd, 1H), 3,48 3,30 (m, 4H), 2,16 (s, 3H).

¹³C NMR (125 MHz, CD₃OH) δ 159,3, 140,3, 138,3, 137,4, 133,7, 131,0, 130,8, 130,6, 126,9

114,7, 83,5, 82,1, 79,8, 76,3, 71,9, 63,1, 55,6, 59,6, 19,5.

Anal. vypočt. pro C₂iH₂₆O₆ LC-MS [M+H] 373; zjištěno 373.

Příklad 9

A. 5-Brom-2-methyM -hydroxydifeny lmethan

K 10 ml míchaného CH₂C1₂ roztoku 5-brom-2-methyl^ť-methoxydifenylmethanu (1,0 g, 3,4 mmol) (viz příklad 8, část C pro přípravu) o teplotě -78 °C bylo přidáno 4,12 ml 1 M BBr₃/CH₂Cl₂. Po 2 h byla reakční směs udržována 20 h při -40 °C, načež HPLC ukázala, že nezůstal žádný výchozí ether. Reakce byla ukončena aq. NaOH, extrahována 3x CH₂C1₂, promyta solankou a vysušena Na₂SO₄. Po odstranění těkavých látek bylo získáno 0,84 g 5-brom-2methyl-4'-hydroxydifenylmethanu jako sirup, který byl použit bez dalšího přečištění.

B. 5-Brom—2-methyl^l'-benzyloxydifěnylmethan

-51 CZ 304522 B6 ml roztoku DMF obsahujícího 5-brom-2-methyM-hydroxydifenylmethanu (735 mg, 2,65 mmol) z části A, benzylbromidu (548 mg, 3,2 mmol) a uhličitanu draselného (732 mg, 5,3 mmol) bylo mícháno přes noc. Reakční směs byla poté zahřáta na 60 °C na 6 h k posunu stupně konverze z 80 na 100 %. Po zředění vodou byla reakční směs extrahována 3x EtOAc.

Spojené EtOAc vrstvy byly promyty vodou a solankou před vysušením síranem sodným. Zbytek po odstranění rozpouštědla pod vakuem byl podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 3% EtOAc/hexan, čímž bylo eluováno 785 mg 5-brom-2-methyl-4'-benzyloxydifenylmethanu jako bezbarvého sirupu.

io C.

K míchanému roztoku 5-brom-2-methyl^l'-benzyloxydifenylmethanu z části B (0,43 g, 1,2 mmol) v 7 ml suchého THF o teplotě -78 °C pod Ar bylo přidáno po kapkách 0,68 ml 1,9 M n-BuLi v hexanu. Po 30 min byl přidán během 1 min 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-|3-D-glukolakton (0,7 g, 1,3 mmol) v 3 ml THF. Roztok byl míchán 0,75 h při -78 °C před zředěním nasyceným aq. NH4CI. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna 2 násobkem vody před 3 extrakcemi EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušen síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odparky bylo získáno 0,96 g požadovaného titulního laktolu jako bezbarvého sirupu, který byl dále zpracován bez dalšího přečištění.

D.

K míchanému roztoku laktolu z části C (0,96 g, 1,16 mmol) při teplotě -30 °C v 10 ml MeCn byl přidán iPr₃SiH (0,37 g, 2,3 mmol) a poté BF₃ . Et₂O (0,2 g, 1,4 mmol). Po 3 h při -40 °C až -30 °C byl přidán nasycený aq. K₂CO₃ a suspenze byla míchána 1 h při 20 °C před zředěním vodou a EtOAc. Spojené organické vrstvy z 3 EtOAc extrakcí byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky, čímž bylo získáno 1,2 g světle žlutého sirupu. Chromatografií na silikagelu systémem 9% EtOAc/hexan byly eluovány nepolární nečistoty; systémem 10% EtOAc/hexan byl eluován požadovaný beta C-arylglukosid (0,26 g).

-52CZ 304522 B6

Ε.

Roztok penta-O-benzyl C-glukosidu (255 mg, 0,31 mmol) z části D v EtOAc (10 ml) obsahující 10% Pd(OH)₂/C (65 mg) byl míchán 24 h pod 1 atm H₂. Poté, co HPLC ukázala, že reakce proběhla úplně, byl odfiltrován katalyzátor a rozpouštědlo bylo odstraněno za použití rotační odparky, čímž bylo získáno 115 mg bílé sklovité pevné látky, která byla použita bez dalšího přečištění.

F.

Zakrytá zkumavka obsahující magnetické míchadlo, 4 ml iPrOH a fenolický C-glukosid (80 mg, 0,16 mmol) z části E byla ochlazena na -78 °C, načež bylo přidáno 1,5 g CHC1F₂ kondenzováním plynu. Po přídavku 3 ml 25% aq. NaOH byla baňka zatavena Teflonem a zahřáta na 70 °C na 2 h. Podle HPLC reakční směs obsahovala směs výchozího fenolu a žádaného etheru v poměru 2:3. (Pokusy posunout míru konverze prodloužením reakční doby nebyly úspěšné). Po ochlazení byl přidán dostatek 1 N HC1 k úpravě pH na 2, načež byla odstraněna většina těkavých látek za použití rotační odparky. Zbytek po rozpuštění v systému MeOH/voda v poměru 2 : 1 byl přečištěn preparativní HPLC pomocí kolony s C_]8reverzní fází YMC S5 (20 x 100 mm) používající 10 min lineární gradient s 45% až 90% aq. MeOH při 20 ml/min, čímž bylo získáno 40 mg požadovaného fenolického etheru.

Retenční čas HPLC: 6,46 min, čistota 95 %, kolona YMC S5 C-18 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 5 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

’H NMR (400 MHz, CD₃OH) δ 7,22 (s, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 7,06 (Abq, 4H), 6,73 (t, 1H, J = 27 Hz), 4,09 (d, 1H, J = 9 Hz), 3,98 (s, 2H), 3,90 (d, 1H), 3,68 (dd, 1H), 3,47 - 3,30 (m, 4H), 2,17 (s, 3H).

¹³C NMR (105 MHz, CD₃OD) δ 138,7, 138,2, 137,7, 136,6, 130,3, 130,2, 130,1, 126,4, 119,3 117,0, 82,7, 81,4, 79,0, 75,6, 71,1, 62,3, 49,0, 38,8, 18,6

Anal. vypočt. pro C₂iH₂₄F₂C>6 LC-MS [M+HH4] 428; zjištěno 428.

-53CZ 304522 B6

Příklad 10

A. 5-Brom-2-methyM'-thiomethylbenzofenon

A1C1₃ (535 mg, 4 mmol) byl přidán k 5 ml CS₂ roztoku 5-brom-2-methylbenzoylchloridu (446 mg, 2 mmol) (pro přípravu viz příklad 8, části B) a thioanisolu (270 mg, 2,3 mmol) o teplotě 4 °C. Reakční směs byla po ohřátí na 20 °C 1 h míchána 2 hodiny před zředěním 1 N HCI. Následně byla suspenze zředěna 50 ml vody a míchána, dokud nepřešla veškerá pevná látka do roztok. Směs byla extrahována 3x EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty lx IN HCI, vodou, aq. NaHCO₃ a solankou a poté byly vysušeny síranem sodným. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 15 % EtOAc/hexan k eluci 450 mg 5-brom-2-methyl-4'-thiomethylbenzofenonu jako bílé pevné látky.

B. 5-Brom-2-methyMi'-thiomethyldifenylmethan

Roztok Et₃SiH (0,45 ml, 2,85 mmol), BF₃ . Et₂O (0,3 ml, 2,4 mmol) a 5-brom-2-methyM'thiomethylbenzofenonu (450 mg, 1,4 mmol) zčásti A (450 mg, 1,4 mmol) ve 3 ml směsi CH₂Cl₂/MeCN 1 : 9 byla míchána přes noc při 20 °C. Po zředění 10% NaOH a zředění vodou byla reakční směs 3x extrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2x vodou a jednou solankou před vysušením pomocí Na₂SO₄. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografii na silikagelu za použití systému 5% EtOAc/hexan k eluci 416 mg 5brom-2-methyl-4'-thiomethyldifenylmethanu jako bezbarvého oleje.

C.

K míchanému roztoku 5-brom-2-methyl-4'-thiomethyldifenylmethanu z části B (200 mg, 0,65 mmol) při -78 °C v 10 ml suchého THF pod Ar bylo po kapkách přidáno 0,42 ml 1,8 M nBuLi v hexanu. Po 2 hodinách byl roztok převeden kanylou do míchaného roztoku 2,3,4,6-tetraO-benzyl-|3-D-glukolaktonu (0,88 g, 1,6 mmol) v 5 ml THF při teplotě -78 °C. Roztok byl míchán 2 hodiny při -78 °C před zředěním nasyceným vodným NH4CI. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna 2 násobně pomocí vody a poté byla 3x extrahována EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odpar-54CZ 304522 B6 ky bylo získáno 550 mg požadovaného titulního laktolu jako bezbarvého sirupu, který byl dále zpracován bez dalšího přečištění.

K míchanému roztoku laktolu z části C (550 mg, 0,72 mmol) v 60 ml MeCn o teplotě -40 °C byl přidán iPr₃SiH (0,22 ml, 1,0 mmol) a poté BF₃ . Et₂O (0,11 ml, 0,8 mmol). Po 1,5 hodině při -40 až -30 °C, když tle ukázala, že reakce je u konce, byl přidán nasycený vodný uhličitan draselný a suspenze byla míchána 1 h při 20 °C před zředěním vodou a EtOAc. Spojené organické vrstvy z 3 extrakcí EtOAc byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky. Chromatografie zbytku na silikagelu za použití systému 9% EtOAc/hexan jako elučního činidla dala 240 mg požadovaného beta C-arylglukosidu.

E.

Roztok tetra-O-benzyl-C-glukosidu zčásti D (70mg, 0,1 mmol) vEtSH (1,5 ml) obsahující BF₃ . Et₂O (0,24 ml, 2 mmol) byl míchán při 20 °C po dobu 2 h. Po další 1 h, po následném přídavku dalších 0,12 ml BF₃ . Et₂O, byla reakce u konce. Reakční směs byla zředěna pomalým přídavkem 0,4 ml pyridinu před zředěním vodným NH₄C1. Spojené organické vrstvy z 3 extrakcí EtOAc byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za požití rotační odparky. Zbytek byl přečištěn preparativní HPLC za použití kolony s C]g reverzní fází, čímž bylo získáno 20 mg, požadovaného C-glukosidu jako bílého lyofilizátu po lyofilizaci.

Retenční čas HPLC: 3,8 min, čistota 95 %, kolona YMC S5 C-18 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 4 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 4 min při 100 % B. Rozpouštědlo A: 10% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄. Rozpouštědlo B: 90% MeOH/H₂O + 0,2 % H₃PO₄.

’HNMR (500 MHz, CD₃OH) δ 7,21 - 7,11 (m, 5H), 7,05 (d, 2H), J = 8,0 Hz), 4,08 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 3,98 (s, 2H), 3,87 (d, 1H, J = 12,6 Hz), 3,68 (dd, 1H, J = 5,2, 12,1 Hz), 3,49 - 3,30 (m, 4H), 2,41 (s,3H).

13,

C NMR (125 MHz, CD₃OD) δ 139,8, 138,9, 138,44, 137,5, 137,1, 131,1, 130,9, 129,1, 130,3,

127,8, 127,1, 83,6, 82,2, 79,8, 76,4, 72,0, 63,2, 39,9, 19,5, 16,1.

Anal. vypočt. pro C₂iH₂6O₅S LC-MS [M+NH₄] 408; zjištěno 408.

-55CZ 304522 B6

Příklad 11

A. 5-Brom-2-chlor-A'-thiomethylbenzofenon

K míchané suspenzi komerčně dostupné kyseliny 5-brom-2-chlorbenzoové (506 mg,

2,12 mmol) v 10 ml CH₂C1₂ obsahující oxalylchlorid (2,4 mmol) byly přidány 2 kapky DMF. Jakmile skončilo bouřlivé uvolňování plynu byla reakční směs míchána 1,5 h před odstraněním těkavých látek za použití rotační odparky. Po rozpuštění surového 5-brom-2-chlorbenzoylchloridu v 8 ml CS₂ byla míchaná směs ochlazena na 4 °C před přídavkem thioanisolu (260 mg,

2,12 mmol) a poté A1C1₃ (566 mg, 4,25 mmol). Reakční směs po ohřátí na 20 během 1 hodiny byla míchána 20 h před zředěním 1 N HCl. Následně byla suspenze zředěna 50 ml vody a míchána, dokud všechny pevné látky nepřešly do roztoku. Směs byla extrahována 3x EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty lx 1 N HCl, vodou, aq. Na₂CO₃ a solankou před vysušením pomocí síranu sodného. Po odstranění těkavých látek bylo získáno 710 mg surového 5-brom-2chlor-4'-thiomethylbenzofenonu, který nebyl dále přečištěn.

B. 5-brom-2-chlor-4'-thiomethyIdifenylmethan

Roztok Et₃SiH (1,4 ml, 8,8 mmol), BF₃ . Et₂O (0,83 ml, 6,6 mmol), 5-brom-2-chlor-4'-thiomethylbenzofenonu z části A (710 mg, 2,1 mmol) v 10 ml směsi CH₂Cl₂/MeCn v poměru 1 : 4 byl míchán 2 h při 20 °C. Po zředění 10% NaHCO₃ a zředění vodou byla reakční směs extrahována 3x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2x vodou a jednou solankou před vysušením Na₂SO₄. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití 5% EtOAc/hexan, čímž bylo získáno 630 mg, 5-brom-2-chlor-4'-thiomethyldifenylmethanu jako bezbarvého oleje.

C.

K míchanému roztoku 5-brom-2-chlor-4'-thiomethyldifenylmethanu (200 mg, 0,61 mmol) z části B v 6 ml suchého THF pod Ar při -78 °C bylo přidáno po kapkách 0,48 ml 1,5 M n-BuLi v hexanu. Po 35 minutách byl tento roztok převeden kanylou k míchanému 78 °C roztoku 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-(3-D-glukolaktonu (361 mg, 0,67 mmol) v 5 ml THF. Roztok byl míchán 1,5 h při -78 °C před zředěním nasyceným aq. NH₄C1. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna 2 násobkem vody před 3 extrakcemi EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny Na₂SO₄. Po odpaření za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografii na

-56CZ 304522 B6 silikagelu za použití 20% EtOAc/hexan, čímž bylo eluováno 250 mg požadovaného titulního laktolu.

K míchanému roztoku laktolu z části C (250 mg, 0,32 mmol) v 5 ml MeCN při -30 °C byl přidán iPr₃SiH (0,10 ml, 0,56 mmol) a poté BF₃ . Et₂O (0,048 ml, 0,38 mmol). Po 0,5 h při -30 °C, když tle ukázala, že reakce proběhla úplně, byl přidán nasycený aq. NaHCO₃ a suspenze byla míchána 1 h při 20 °C před zředěním vodou a EtOAc. Spojené organické vrstvy z 3 EtOAc extrakcí byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky. Chromatografie zbytku na silikagelu za použití systému 9% EtOAc/hexan jako eluční činidlo dala 200 mg požadovaného beta C-arylglukosidu.

Roztok tetra-O-benzyl C-glukosidu (60 mg, 0,1 mmol) z části D v EtSH (2 ml) obsahující BF₃. Et₂O (0,24 ml, 2 mmol) byl míchán při 20 °C po dobu 3 h. Reakce byla ukončena pomalým přídavkem 0,4 ml pyridinu před zředěním aq. NH4CI. Spojené organické extrakty ze 3 EtOAc extrakcí byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky. Zbytek byl přečištěn preparativní HPLC za použití kolony s Cis reverzní fází, čímž bylo po lyofilizaci získáno 21,4 mg požadovaného beta C-glukosidu jako bílého lyofilizátu.

Retenční čas HPLC: 3,96 min, čistota 95 %, kolona YMC S5 C-18 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 4 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 4 min při 100 % B.

'H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7,36 - 7,27 (m, 3H), 7,15 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,11 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 4,10-4,04 (m, 3H), 3,87 (d, 1H, J = 12 Hz), 3,70 (dd, 1H,J = 7,1, 11,8 Hz), 3,47 - 3,26 (m, 4H), 2,42 (s, 3H).

^,3C NMR (105 MHz, CD₃OD) δ 140,1, 139,3, 138,0, 137,5, 134,5, 132,0, 130,4, 130,2, 128,4, 128,0, 82,9, 82,8, 82,2, 79,7, 76,5, 71,8, 63,1, 39,5, 16,1.

-57CZ 304522 B6

Anal. vypočt. pro C20H23CIO5S LC-MS [M+H] 409; zjištěno 409.

Příklad 12

A. 5-brom-2-chlor-4'-methoxybenzofenon

2,12 mmol) v 10 ml CH₂C1₂ obsahující oxalylchlorid (2,4 mmol) byly přidány 2 kapky DMF. Jakmile pominulo bouřlivé vyvíjení plynu, byla reakční směs míchána 1,5 h před odstraněním těkavých látek za použití rotační odparky. Po rozpuštění surového 5-brom-2-chlorbenzoylchloridu v 8 ml CS₂ byla míchaná směs ochlazena na 4 °C před přídavkem anisolu (240 mg, 2,12 mmol) a poté A1C1₃ (566 mg, 4,25 mmol). Reakční směs byla po ohřátí na 20 °C na 1 h míchána 20 h před zředěním 1 N HC1. Následně byla suspenze zředěna 50 ml vody a míchána, dokud nebyly všechny pevné látky rozpuštěny. Směs byla extrahována 3x EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty lx 1 N HC1, vodou, aq. NaHCO₃ a solankou a poté vysušeny síranem sodným. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 15% EtOAc/hexan, čímž bylo eluováno 450 mg 5-brom-2-chlor-4'-methoxybenzofenonu.

B. 5-Brom-2-chlor-4'-methoxydifenylmethan

Roztok Et₃SiH (0,45 ml, 2,85 mmol), BF₃ . Et₂O (0,3 ml, 2,4 mmol) a 5-brom-2-chlor-4'methoxybenzofenonu (450 mg, 1,4 mmol) v 3 ml směsi CH₂Cl₂/MeCN v poměru 1 : 9 byla míchána přes noc při 20 °C. Po ukončení reakce 10% NaOH a zředění vodou byla reakční směs extrahována 3x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2x vodou a jednou solankou před vysušením síranem sodným. Po odstranění těkavých látek byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 2% EtOAc/hexan, čímž bylo eluováno 416 mg 5-brom-2-chlor4'-methoxydifenylmethanu jako bezbarvého oleje.

K míchanému roztoku 5-brom-2-chlor-4'-methoxydifenylmethanu (212 mg, 0,68 mmol) z části B v 8 ml suchého THF o teplotě -78 °C pod Ar bylo po kapkách přidáno 0,36 ml 1,9 n-BuLi v hexanu. Po 30 minutách byl roztok převeden kanylou k míchanému roztoku 2,3,4,6-tetra-Obenzyl-[3-D-glukolaktonu (0,3 í g, 0,71 mmol) v 5 ml THF o teplotě -78 °C. Roztok byl míchán

-58CZ 304522 B6 hodiny při -78 °C před ukončením reakce nasyceným aq. NH4CI. Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna dvojnásobně vodou před 3 extrakcemi EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny Na₂SO₄. Po odpaření za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 20% EtOAc/hexan, čímž bylo eluováno 142 mg požadovaného titulního laktolu.

K míchanému roztoku laktolu z části C (142 mg, 0,18 mmol) v 1,5 ml MeCn o teplotě -40 °C byl přidán iPr₃SiH (0,041 ml, 0,2 mmol) a poté BF₃ . Et₂O (0,026 ml, 0,ě mmol). Po 2 h při -40 °C, když tle ukázala, že reakce proběhla úplně, byl přidán nasycený aq. NaHCO₃ a reakční směs byla zředěna vodou a CH2CI2. Spojené organické vrstvy z 3 CH₂C1₂ extrakcí byly promyty solankou, vysušeny Na₂SO₄ a odpařeny za použití rotační odparky. Chromatografie zbytku na silikagelu za použití systému EtOAc/hexan jako elučního činidla dala 139 mg požadovaného beta Carylglukosidu.

Roztok tetra-O-benzyl C-glukosidu (136 mg, 0,18 mmol) z části D v EtSH (1,0 ml) obsahující BF₃ . Et₂O (0,46 ml, 3,6 mmol) byl míchán při 20 °C 4 h. Reakční směs byla zředěna CH₂C1₂ a poté byla odpařena za použití rotační odparky. Zbytek po rozpuštění v CH₂C1₂ byl promyt aq. NFLtCl, vodou, solankou, vysušen síranem sodným a odpařen za použití rotační odparky. Surový produkt byl přečištěn preparativní HPLC za použití kolony s Cjg reverzní fází, čímž bylo získáno po lyofílizací 26 mg požadovaného beta C-glukosidu jako bílého lyofilizátu.

Retenční čas HPLC: 3,07 min, čistota 95 %, kolona YMC S5 C-18 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 4 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 4 min při 100 % B.

Ή NMR (500 MHz, CD₃OD) δ 7,35 - 7,28 (m, 3H), 7,1 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,8 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 4,05 - 3,90 (m, 3H), 3,80 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 3,67 (s, 3H), 3,61 (dd, 1H, J = 4,8, 11,9 Hz), 3,42 - 3,25 (m, 4H).

-59CZ 304522 B6 ¹³C NMR (125 MHz, CD₃OD) δ 159,6, 140,0, 139,9, 134,5, 133,0, 131,9, 130,8, 130,1, 114,8, 82,9, 82,9, 82,2, 79,8, 76,5, 71,9, 63,1, 55,6, 39,2.

Anal. vypočt. pro C₂oH₂₃C10₆ LC-MS [M+NHJ 412; zjištěno 412.

Příklad 13

HO

OH

A. 5-brom-2-methoxy-4'-ethylbenzhydrol

K míchanému roztoku p-bromethylbenzenu (2,03 g, 11 mmol) v 10 ml suchého THF o teplotě 78 °C pod Ar bylo přidáno 5ml 2,5 M n-BuLi (12 mmol) v hexanu během 10 min. Teplota byla ponechána vystoupit na 10 °C během 2 h, načež byla reakční směs ochlazena na -78 °C před přídavkem pevného 5-brom-2-methoxybenzaldehydu (2,15 g, 10 mmol). Po míchání přes noc při 20 °C byla reakce ukončena nasyceným aq. NH₄C1 a zředěna 5 násobkem vody před 3 extrakcemi EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografii na silikagelu za použití systému 10% EtOAc/hexan, čímž bylo získáno 1,44 g 5-brom-2-methoxy-4'-ethylbenzhydrolu.

B. 5-Brom-2-methoxy-4'-ethyldifenylmethan ml CH₂Cl₂/MeCN 1:8 obsahujícího 5-brom-2-methoxy-4'-ethylbenzhydrol (1,44 g, 4,5 mol), Et₃SiH (0,75 ml, 5 mmol) a BF₃ . Et₂O (0,6 ml, 6,4 mmol) byl míchán přes noc při 20 °C. Po ukončení reakce nasyceným aq. NaOH byla směs extrahována 3x EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny Na₂SO4. Po odpaření za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 2% EtOAc/hexan, čímž bylo eluováno 1,28 g 5-brom-2-methoxy-4'-ethyldifenylmethanu.

C.

Me

BnO

OBn

Et

K míchanému roztoku 5-brom-2-methoxy-4'-ethyldifenylmethanu (0,25 g, 0,82 mmol) v 7 ml suchého THF o teplotě -78 °C pod Ar bylo po kapkách přidáno 0,5 ml 1,8 M n-BuLi v hexanu. Po 2 hodinách byl během 1 minuty přidán 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-|3-D-glukolakton (0,48 g, 0,9 mmol) v 3 ml THF. Roztok byl míchán 2 h při -78 °C před zředěním nasyceným aq. NH4CI.

-60CZ 304522 B6

Po ohřátí na 20 °C byla reakční směs zředěna 5 násobkem vody před 3 extrakcemi EtOAc. Spojené EtOAc frakce byly promyty solankou a vysušeny síranem sodným. Po odpaření za použití rotační odparky bylo získáno 0,67 g požadovaného titulního laktolu jako světle žlutého sirupu, který byl dále zpracován bez dalšího přečištění.

K míchanému roztoku laktolu z části C (450 mg, 0,59 mmol) v 10 ml MeCN o teplotě -30 °C byl přidán i-Pr₃SiH (0,2 ml, 0,9 mmol) a poté BF₃ . Et₂O (0,1 ml, 0,7 mmol). Po 1,5 h při -40 °C kdy proběhla úplně reakce, jak bylo zjištěno tle, byla reakční směs zředěna přídavkem aq. NaHCO₃ a následně extrahována 3x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty solankou, vysušeny síranem sodným a odpařeny za použití rotační odparky. Chromatografie zbytku na silikagelu pomocí systému 10% EtOAc/hexan dala 320 mg požadovaného beta C-arylglukosidu.

E.

Roztok tetra-O-benzyl C-glukosidu (320 mg, 0,7 mmol) z části D v EtOAc (15 ml) obsahující 10% Pd(OH)2/C (30 mg) byl míchán přes noc pod 1 atm H₂. Poté, co HPLC ukázala, že reakce úplně proběhla, byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odstraněno za použití rotační odparky. Surový produkt byl dále přečištěn preparativní HPLC za použití kolony s C_]8 reverzní fází, čímž bylo získáno po lyofilizaci 24 mg požadovaného beta C-glukosidu jako bílé pevné látky.

Retenční čas HPLC: 3,84 min, čistota 95 %, kolona YMC S5 C-18 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 4 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 4 min při 100 % B.

*H NMR (500 MHz, CD₃OD) δ 7,23 (d, IH, J = Hz), 7,17 (d, IH), 7,05 (ABq, 4H), 6,89 (d, IH, J = 7 Hz), 4,02 (d, IH, J = 9 Hz), 3,92 - 3,83 (m, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,66 (dd, IH), 3,45 - 3,29 (m, 4H), 2,55 (q, 2H), 1,16 (t, 3H).

Anal. vypočt. pro C₂₂H₂₈O₆ LC-MS [M+NHt] 406; zjištěno 406.

-61 CZ 304522 B6

Příklad 14

A. N-Ethyl-N-4-methoxybenzyl-2,6-dihydroxybenzamid 5

K míchanému roztoku N-ethyU4-methoxybenzylaminu (1,07 g, 6,49 mmol) v DMF (10 ml) byla přidána kyselina 2,6-dihydroxybenzoová (1,09 g, 6,49 mmol) a poté HOAt (0,97 g, 7,14 mmol) a EDC (1,31 g, 6,81 mmol). Po míchání přes noc byla reakční směs zředěna EtOAc a poté promyta 3x vodou. Spojené vodné vrstvy byly extrahovány jednou EtOAc. Organické frakce ío byly spojeny, jednou promyty solankou, vysušeny síranem sodným a poté odpařeny za použití rotační odparky. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za použití systému 75%

EtOAc/hexan jako elučního činidla. Výsledné předpokládané znečištěné frakce byly dále přečištěny chromatografií na silikagelu. Bylo získáno celkově 631 mg požadovaného N-ethyl-N-4methoxybenzyl-2,6-dihydroxybenzamidu.

B.

Míchaná suspenze amidu z části A (630 mg, 2,09 mmol), CdCO₃ (939 mg, 5,44 mmol) v toluenu (30 ml) byla vařena pod zpětným chladičem 1,5 h za použití Dean Stárková nástavce a poté byl přidán 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-D-glukosapyranosylbromidu (1,12 g, 2,72 mmol). Po 15 hodinách varu pod zpětným chladičem nebyl zjištěn analýzou tle žádný výchozí amid. Horká suspenze byla přefiltrována přes celit, který byl promyt horkým PhMe a poté 3x horkým CHC1₃. Po odstranění těkavých látek za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografii na sili25 kagelu. Směs O-glukosidů byla eluována systémem EtOAc/hexan 1 : 1 před tetraacetátem požadovaného titulního C-glukosidu; bylo získáno 172 mg značně kontaminovaného titulního Cglukosidu.

-62CZ 304522 B6

Znečištěný ester z části B byl míchán 16 h v systému EtOH/H₂O 6 : 1 (1,4 ml) obsahujícím KOH (140 mg, 2,5 mmol). Výsledný roztok byl ochlazen na 4 °C, okyselen na pH 5 a poté extrahován

2x EtOAc. Spojené EtOAc vrstvy byly promyty solanku, vysušeny síranem sodným před odpařením za použití rotační odparky. Zbytek byl přečištěn preparativní HPLC za použití kolony YMC s Cu reverzní fází za použití gradientu 45 - 90 % MeOH/H₂O během 30 min, čímž byl eluován požadovaný titulní C-glukosid (7,8 mg).

HPLC: 99,1%; Shimadzu LC-6A, YMC S3 ODS (6,0 x 150 mm), průtok 1,5 ml/min; detekce při 220 nm; 30 min gradient 0 - 100 % B (A = 90% H₂O, 10% MeOH, 0,2% H₃PO₄, a B = 90% MeOH, 10% H₂O, 0,2 % H₃PO₄); retenční čas = 23,4 minut.

'HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 1,22 (3H, t, J = 7,2 Hz), 3,4 - 3,5 (6H, m), 3,73 (3H, s), 3,74 (IH, m), 3,77 (IH, m), 3,8 - 3,9 (2H, m), 4,36 (IH, d, J = 9,3 Hz), 6,77 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,11 (2H, d, J = 8,6Hz), 7,18 (IH, s).

13,

C NMR (125 MHz, CD₃OD) δ 14,9, 35,1, 35,1, 55,7, 62,5, 71,2, 75,8, 79,6, 80,3, 82,3, 104,8, 114,7, 117,1, 133,7, 130,7, 134,5, 134,6, 151, 159,3, 161, 171,9.

Anal. vypočt. pro C₂₃H₂₉NO₉ LC-MS [M+H] 462; zjištěno 462.

Příklad 15

A.

-63CZ 304522 B6

Směs β-m-bromfenyl-C-glukosidu zčásti B příkladu 3 (100 mg, 0,14 mmol), kyseliny pmethylfenylborité (59 mg, 0,43 mmol), uhličitanu sodného (46 mg, 0,43 mmol) a Pd(PPh₃)₄(153 mg, 0,13 mmol) ve směsi PhMe/EtOH 3 : 1 byla míchána pod Ar při 80 °C po dobu 15 h. Po odstranění těkavých látek za použití rotační odparky byl zbytek podroben chromatografií na silikagelu. Systémem hexan/EtOAc 10 : 1 byl eluován požadovaný titulní bifenyl-C-glukosid (90 mg) jako čirý olej.

K míchanému CH₂C1₂ roztoku (0,4 ml) tetra-O-benzyletheru (65 mg, 0,09 mmol) z části A o teplotě -78 °C pod Ar bylo přidáno 0,37 ml 1M BC1₃ v CH₂C1₂. Po 1 h byla reakční směs zředěna 2 ml MeOH a byla ponechána ohřát na 20 °C. Po úpravě pH na asi 7 pomocí vodného NaHCO₃byla suspenze extrahována 2x CH₂C1₂. Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým a odpařeny. Výsledný zbytek byl přečištěn preparativní HPLC za použití kolony s C₎₈ reverzní fází, čímž bylo získáno 6,6 mg konečného titulního produktu. (Pozn.: produkt je částečně zničen silně kyselým prostředím vytvořeným pro MeOH přídavku BC1₃).

Retenční čas HPLC: 6,353 min, čistota 100 %, Zorbax C-18 4,6 x 50 mm, 2,5 ml/min, detekce při 220 nm; 8 min gradient 0 - 100 % B udržovaný 5 min při 100 % B.

'Η NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7,65 (s, 1H), 7,53 - 7,50 (m, 3H), 7,39 - 3,37 (m, 2H), 7,23 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 4,20 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 3,89 (dd, 1H, J = 2,2, 11,9 Hz), 3,71 (dd, 1H, J = 5,7, 11,9 Hz), 3,50 - 3,40 (m, 4H), 2,36 (s, 3H).

Anal. vypočt. pro Ci₉H₂₂O₅ MS s nízkým rozlišením [M-H] 329; zjištěno 329.

Příklady 16 až 80

Sloučeniny z příkladů 16 až 80 dále uvedené v tabulkách 1 a 2 byly připraveny za použití postupů uvedených v příkladech 1 až 15 a výše uvedených reakčních schématech 1 až 9. Je zřejmé, že sloučeniny, kde A, která může být napojena v ortho, meta nebo para pozici ary lového kruhu napojeného na glukosid, může být kterákoli ze skupin (CH₂)_n, O, NH nebo S, zatímco R¹, R², R^2a, R³ a R⁴ mohou být kterýkoli z výše uvedených substituentů, mohou být připraveny za použití způsobů uvedených v příkladech 1 až 15 a reakčních schématech 1 až 9.

-64CZ 304522 B6

Tabulka 1

Příklad	A	R³	Způsob z příkladu #	LC/MS nebo MS (M + H) ⁺
16	ch₂	4-Me	1	345
17	ch₂	4-OH	1	347
18	ch₂	3-Me	2	345
19	ch₂	H	3	331
20	ch₂	3-OMe	3	361
21	ch₂	4-CO₂Me	3	389
22	ch₂	3,4-(OCH₂O)	3	375
23	ch₂	4-CF₃	3	399
24	ch₂	4-NHAc	3	388
25	ch₂	4-SO₂Me	3	409
26	ch₂	4-Ph	3	407
27	ch₂	4-NHSO₂Ph-4'-Me	3	500
28	ch₂	4-NHSO₂Me	3	424
29	ch₂	4-CO₂H	3	375
30	ch₂	4-Thiadiazol	3	415
31	ch₂	4-Tetrazol	3	399
32	ch₂	4-OCH₂Ph-4'-CN	1	462
33	ch₂	4-OCHF₂	1	397
34	ch₂	4-iPr	3	373

-65CZ 304522 B6

35	ch₂	2-iPr	3	373
36	ch₂	4-O-nPr	1	389
37	ch₂	4-Tetrazol -2'-Me	3	413
38	ch₂	4-Tetrazol -l'-Me	3	413
39	ch₂	4-OPh	1	423
40	ch₂	4-nPr	1	373
41	ch₂	4-nBu	1	387
42	ch₂	4-SO₂Et	1	423
43	ch₂	4-SO₂-nPr	1	437
44	ch₂	4-SO₂Ph	3	471
45	ch₂	4-SOMe	4	393
46	Vazba	H	15	317
47	Vazba	3-Me	15	331
48	Vazba	4-MeO	15	347
49	(CH₂)₂	H	1	343 (M-H)
50	(CH₂)₂	4-Me	1	357 (M-H)
51	(CH₂) 3	H	1	376 (M+NH4)
52	(CH₂)₃	4-Me	1	390 (M+NH4)
53	(CH₂)₃	3-Me	1	390 (M+NH4)
54	Vazba (para)	H	15	317
55	CH; (ortho)	H	1	331
56	CH; (ortho)	4-Et	1	376 (M+NH4)

-66CZ 304522 B6

57	0	4-Me	Schéma 8	364 (M+NH4)
58	s	4-Me	Schéma 9	380 (M+NH4)

Přiklad	λ	R¹	R²	R³	Způsob z příkladu #	LC/MS or MS (M + H)*

59	ch₂	2-Me	H	4-Et	1	371 (M-H)
60	ch₂	4-Me	H	4-Et	8	371 (M-H)
61	ch₂	4-Me	H	4-SO₂Me	8	445 (M+Na)
62	ch₂	4-Me	H	4-OH	9	359 (M-H)
63	ch₂	4-Me	H	4-S(O)Me	10	407 (M+H)
64	ch₂	4-Me	H	4-F	8	385 (M+NH4)
65	ch₂	4-Me	H	4-C1	8	377 (M-H)
66	ch₂	4-Me	H	4-Me	8	357 (M-H)
67	ch₂	4-Me	H	H	8	343 (M-H)
68	ch₂	4-Me	6-Me	4-OMe	1	406 (M+NH4)
69	ch₂	4-F	H	4-OMe	1	396 (M+NH4)
70	ch₂	4-C1	H	4-SOMe	11	427 (M+H)
71	ch₂	4-Cl	H	4-SO₂Me	11	441 (M-H)
72	ch₂	4-C1	H	4-OCHF₂	9	448 (M+NH4)

-67CZ 304522 B6

73	ch₂	4-Et	H	4-OMe	8	406 (M+NH4)
74	ch₂	4-iPr	H	4-OMe	8	420 (M+NH4)
75	ch₂	4-iPr	H	4-SMe	10	417 (M-H)
76	ch₂	4-iPr	H	4-SO₂Me	10	439 (M-H)
77	ch₂	4,5-OCH₂O	H	4-Et	1	403 (Μ +H)
78	ch₂	5-Me	H	4-Et	1	390 (M+NH4)
79	ch₂	5-Me	6-Me	4-OMe	1	406 (M+NH4)
80	ch₂	6-Me	H	4-Et	8	395 (M+Na)

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina mající strukturu kde

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vodík, OH, OR⁵, (Ci-Cio)alkyl, CF3, OCHF2, OCF3, SR⁵* nebo halogen nebo dvě zR¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

R³ a R⁴ jsou nezávisle vodík, OH, OR^5a, O(C6-Ci0)aryl, OCH2(C6-Ci0)aryl, (C2—Ci0)alkyl, (C3C10)cykloalkyl, CF3, -OCHF2, -OCF3, halogen, -CN, -CO2R^5b, -CO2H, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, _CH(OR^5h)R^6d, -CONR⁶R^6a, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C₁₀)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g, -S02(C₆-Cio)aryl nebo pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂, nebo R³a R⁴ spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný

-68CZ 304522 B6 karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂;

R⁵, R^5a, R^5b, R^5c, R^5d, R^5e, R^5f, R^5g, R^5h a R⁵¹ jsou nezávisle (Ci-Cio)alkyl;

R⁶, R^6a, R^6b, R^6c a R^6d jsou nezávisle vodík, (Ci-Cio)alkyl, (C6-Ci0)aryl, -(Ci-Ci0)alkyl(C6Ciojaryl nebo (C3-Ci0)cykloalkyl, nebo R⁶ a R^6a spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

A je O, S, NH nebo (CH₂)_n, kde nje 0 až 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo stereoizomer;

s podmínkou, že když A je (CH₂)_n, kde nje 0, 1, 2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R¹, R² a R ^a je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF3, OCF3 nebo OCHF2 a/nebo alespoň jedna z R³ a R⁴ je CF3, -OCHF₂, -OCF₃, -CN, -CO₂R^5b, CH(OR^5h)R^6d, CH(OH)R^6c, COR^6b, -NHCOR⁵⁰, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C₁₀)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g nebo —SO2(C₆-C i o)ary 1.
2. Sloučenina podle nároku 1 s podmínkou, že kde A je (CH₂)_n, kde nje 0, 1, 2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R³ a R⁴ je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2aje CF3, OCF3 nebo OCHF2 a/nebo alespoň jedna z R³ a R⁴ je CF3, -OCHF₂, -OCF₃, -CN, -CO₂R^5b, CH(OR^5h)R^6d, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C₁₀)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g, -S02(C₆-Cio)aryl nebo halogen.
3. Sloučenina podle nároku 1, mající strukturu
4. Sloučenina podle nároku 1, kde A je (CH₂)_n.
5. Sloučenina podle nároku 3, kde A je CH₂ nebo O nebo S.
6. Sloučenina podle nároku 1, kde A je CH₂ nebo O nebo S;

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vybrány z H, (Ci-C8)alkylu, halogenu, OR⁵ nebo OCHF2 nebo dvě skupiny z R¹, R² a R^2a jsou H a další je (C]-C8)alkyl, halogen, OR⁵ nebo OCHF2;

R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z (Ci-C8)alkylu, OR^5a, -OCHF2, -SR^5e, OH, -CO2R^5b, -3,4(OCH2O)-, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, CF₃,

O

R^5c-C-NH-, -SOR^5f, -SO2R^5g, (C6-Cio)arylu, -NHSO₂(C₆-C,₀)arylu, -NHSO₂R^5d, CO₂H, thiadiazolu, tetrazolu, -OCH₂(Cé-Cio)arylu, -OCF₃, O(C₆-C|₀)arylu nebo H.

-69CZ 304522 B6
7. Sloučenina podle nároku 6, kde A je CH₂; R¹ je vodík, halogen nebo (Ci-C
8)alkyl; R² a R^2ajsou každá H; R³ je H; R⁴ je (C,-C8)alkyl, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, R⁵O, -OCHF₂, -OCF₃ nebo -SR^5e.

5 8. Sloučenina podle nároku 7, kde A je CH₂; R¹ je vodík, halogen nebo (Cj—C₈)alkyl; a R⁴ je (C,-C₈)alkyl, R^5aO, -OCHF₂, nebo -SR^5e.
9. Sloučenina podle nároku 7, kde R⁴ je 4-C₂Hs.

ío
10. Sloučenina podle nároku 3 mající strukturu

-70CZ 304522 B6
11. Sloučenina podle nároku 1 mající následující strukturu kde A je CH₂ a v poloze meta ke glukosidu; R¹, R² a R^2a jsou každá H, a R³ je následující: 4-methyl, 4-OH, 3-methyl, H, 3-methoxy, 4-CO₂methyl, 3,4-(OCH₂O)-, 4-CF₃, 4-NHacetyl, 4-SO₂methyl, 4-fenyl, 4-NHSO₂fenyl-4'-methyl, 4-NHSO₂methyl, 4-CO₂H, 4-thiadiazol, 4ío tetrazol, 4-OCH₂fenyl-4'-CN, 4-OCHF₂, 4-isopropyl, 2-isopropyl, 4-O-n-propyl, 4-tetrazol2'-methyl, 4-tetrazol-l'-methyl, 4-Ofenyl, 4-n-propyl, 4-n-butyl, 4-SO₂ethyl, 4-SO₂-npropyl, 4-SO₂fenyl nebo 4-SOmethyl.

12. Sloučenina podle nároku 1 mající strukturu

kde je A: R³: 20 vazba H vazba 3-methyl vazba 4-methoxy (CH₂)₂ H (CH₂)₂ 4-methyl 25 (CH₂)₃ H (CH₂)₃ 4-methyl (CH₂)₃ 3-methyl vazba (para poloha) H CH₂ (ortho poloha) H 30 CH₂ (ortho poloha) 4-ethyl O 4-methyl S 4-methyl.

-71 CZ 304522 B6

13. Sloučenina podle nároku 1 mající vzorec

R* R¹ Μ r*³ h/ ^//Z/oh OH kde je A: R¹: R²: R³: ch₂ 2-methyl H 4-ethyl ch₂ 4-methyl H 4-ethyl ch₂ 4-methyl H 4-SO₂methyl ch₂ 4-methyl H 4-OH ch₂ 4-methyl H 4-S(O)methyl ch₂ 4-methyl H 4-F ch₂ 4-methyl H 4-C1 ch₂ 4-methyl H 4-methyl ch₂ 4-methyl H H ch₂ 4-methyl 6-methyl 4-methoxy ch₂ 4-F H 4-methoxy ch₂ 4-C1 H 4-SOmethyl ch₂ 4-C1 H 4-SO₂methyl ch₂ 4-C1 H 4-OCHF₂ ch₂ 4-ethyl H 4-methoxy ch₂ 4-isopropyl H 4-methoxy ch₂ 4-isopropyl H 4-methylthio ch₂ 4-isopropyl H 4-SO₂methyl ch₂ 4,5-OCH₂O H 4-ethyl ch₂ 5-methyl H 4-ethyl ch₂ 5-methyl 6-methyl 4-methoxy ch₂ 6—methyl H 4-ethyl.

14. Sloučenina podle nároku 1 mající strukturu
15. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle jakéhokoli z nároků 1 až 14 a její farmaceuticky přijatelný nosič.

-72CZ 304522 B6
16. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu inhibitoru SGLT2 podle jakéhokoli z nároků 1 až 14 a antidiabetické činidlo jiné než inhibitor SGLT2, činidlo pro léčení komplikací spojených s diabetem, antiobezitní činidlo, antihypertenzivní činidlo, činidlo proti krevním destičkám, antiatherosklerotické činidlo a/nebo činidlo snižující hladinu lipidu.
17. Farmaceutická kompozice podle nároku 16, vyznačující se tím, že obsahuje uvedenou sloučeninu inhibitoru SGLT2 a antidiabetické činidlo.
18. Kombinace podle nároku 17, vyznačující se tím, že antidiabetickým činidlem jsou 1, 2, 3 nebo více látek vybraných z biguanidu, sulfonylmočoviny, glukosidázového inhibitoru, agonisty PPAR γ, duálního agonisty PPAR α/γ, inhibitoru aP2, inhibitoru DP4, inzulínového senzitizeru, glukogonu podobného peptidu-1 (GLP-1), inzulínu, meglitinidu, inhibitoru PTP1B, inhibitoru glykogenfosforylázy a/nebo inhibitoru glukos-6-fosfatázy.
19. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že antidiabetickým činidlem jsou 1, 2, 3 nebo více látek zahrnujících metformin, glyburid, glimepirid, glipyrid, glipizid, chlorpropamid, gliclazid, acarbosu, miglitol, pioglitazon, troglitazon, rosiglitazon, inzulín, Gl262570, isaglitazon, JTT-501, NN-2344, L895645, YM-440, R-l 19702, AJ9677, repaglinid, nateglinid, KADÍ 129, AR-HO39242, GW-409544, KRP297, AC2993, LY315902 a/nebo NVPDPP-728A.
20. Kombinace podle nároku 17, vyznačující se tím, že sloučenina inhibitoru SGLT2 je přítomna v hmotnostním poměru k antidiabetickému činidlu v rozmezí od 0,01 do 300 : 1.
21. Kombinace podle nároku 16, vyznačující se tím, že antiobezitním činidlem je beta 3 adrenergický agonista, inhibitor lipázy, inhibitor zpětného získávání serotoninu a dopaminu, sloučeniny thyroidního receptoru beta a/nebo anorektické činidlo.
22. Kombinace podle nároku 21, vyznačující se tím, že antiobezitním činidlem je orlistat, ATL-962, AJ9677, L750355, CP331648, sibutramin, topiramat, axokin, dexamfetamin, fentermin, fenylpropanoamin a/nebo mazindol.
23. Kombinace podle nároku 16, vyznačující se tím, že činidlem snižujícím hladinu lipidů je inhibitor MTP, inhibitor HMG CoA reduktázy, inhibitor skvalensyntetázy, derivát fibrové kyseliny, regulátor aktivity receptoru LDL, inhibitor lipoxygenázy nebo inhibitor ACAT.
24. Kombinace podle nároku 23, vyznačující se tím, že činidlem snižujícím hladinu lipidu je pravastatin, lovastatin, simvastatin, atorvastatin, cerivastatin, fluvastatin, nisvastatin, visastatin, atavastatin, rosuvastatin, fenofibrat, gemfibrozil, clofibrat, avasimib, TS-962, MD700 a/nebo LY295427.
25. Kombinace podle nároku 23, vy z n a č uj í c í se t í m , že inhibitor SGLT2 je přítomen v hmotnostním poměru k činidlu snižujícímu hladinu lipidu v rozmezí od 0,01 do 300 : 1.
26. Použití sloučeniny podle jakéhokoli z nároků 1 až 14 pro výrobu farmaceutické kompozice určené pro léčení nebo oddálení progrese nebo propuknutí diabetů, diabetické retinopathie, diabetické neuropathie, diabetické nefropathie, zpomaleného hojení ran, inzulínové rezistence, hyperglykemie, hyperinzulinemie, zvýšených hladin mastných kyselin nebo glycerolu v krvi, hyperlipidemie, obezity, hypertriglyceridemie, syndromu X, diabetických komplikací, atherosklerózy nebo hypertenze nebo pro zvýšení hladin lipoproteinů o vysoké hustotě.
27. Použití sloučeniny podle jakéhokoli z nároků 1 až 9 pro výrobu farmaceutické kompozice určené pro léčení nebo oddálení progrese nebo propuknutí diabetů, diabetické retinopathie, diabe-73 CZ 304522 B6 tické neuropathie, diabetické nefropathie, zpomaleného hojení ran, inzulínové rezistence, hyperglykemie, hyperinzulinemie, zvýšených hladin mastných kyselin nebo glycerolu v krvi, hyperlipidemie, obezity, hypertriglyceridemie, syndromu X, diabetických komplikací, atherosklerózy nebo hypertenze nebo pro zvýšení hladin lipoproteinů o vysoké hustotě, kde sloučenina inhibito5 ru SGLT2 má strukturu
28. Použití sloučeniny podle jakéhokoli z nároků 1 až 14 pro výrobu farmaceutické kompozice ío samostatně nebo v kombinaci s jiným antidiabetickým činidlem, činidlem pro ošetření diabetických komplikací, antiobezitním činidlem, antihypertenzním činidlem, činidlem proti krevním destičkám, antiatherosklerotickým činidlem a/nebo hypolipidemickým činidlem, pro léčení diabetes typu II.

15
29. Sloučenina mající strukturu kde

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vodík, OH, OR⁵, (Ci-Cio)alkyl, CF3, OCHF2, OCF3, SR⁵' nebo halogen nebo dvě z R¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

-74CZ 304522 B6

R³ a R⁴ jsou nezávisle vodík, OH, OR^5a, O(C6-Ci0)aryl, OCH2(C6-Ci0)aryl, (Ci-Cio)alkyl, (C3Cio)cykloalkyl, CF3, -OCHF2, -OCF3, halogen, -CN, -CO2R^5b, -CO2H, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, -CONR⁶R^6a, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C₁₀)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g, -S02(C6-Cio)aryl nebo pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂, nebo R³a R⁴ spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂;

A je O, S, NH nebo (CH₂)_n, kde n je 0 až 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo stereoizomer;

Bn znamená benzyl;

každý R⁵, R^5a, R^5b, R^5c, R^5d, R^5e, R^5f, R^5g, R^5h a R⁵'jsou nezávisle (Ci-Cio)alkyl; a

R⁶, R^6a, R^6b, R^6c a R^6d jsou nezávisle vodík, (Ci-C10)alkyl, (C6-Cio)aryl, —(Ci—Cio)alkyl(C6— C|0)aryl nebo (C3-Cio)cykloalkyl, nebo R⁶ a R^6a spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2, s podmínkou, že když A je (CH₂)_n, kde n je 0, 1, 2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF3, OCF3 nebo OCHF2 a/nebo alespoň jedna z R³ a R⁴ je CF3, -OCHF₂, -OCF₃, -CN, -CO₂R^5b, CH(OR^5h)R^6d, CH(OH)R^6c, COR^6b, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHS02(C₆-Cio)aryl, (C₆-C_]0)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g nebo -SO2(C₆-C₁₀)aryl;

nebo sloučenina struktury nebo kde

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vodík, OH, OR⁵, (C,-Cl0)alkyl, CF3, OCHF2, OCF3, SR⁵ⁱ nebo halogen nebo dvě z R¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

každý R⁵ a R^5ljsou nezávisle (Ci-Cio)alkyl; a

Bn znamená benzyl;

s podmínkou, že když alespoň jedna z R¹ a R² je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF₃, OCF₃ nebo OCHF₂.

-75CZ 304522 B6

R³ a R⁴ jsou nezávisle vodík, OH, OR^5a, 0(C6-Cio)aryl, OCH2(C6-Cio)aryl, (Ci-Cio)alkyl, (C3Cio)cykloalkyl, CF3, -OCHF2, -OCF3, halogen, -CN, -CO2R^5b, -CO2H, -COR^6b, -CH(OH)R^6c, -CH(OR^5h)R^6d, -CONR⁶R^6a, -NHCOR^5c, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C₁₀)aiyl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g, -S02(C₆-Cio)aryl nebo pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂, nebo R³a R⁴ spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO₂;

Aje O, S, NH nebo (CH₂)_n, kde nje 0 až 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo stereoizomer;

Bn znamená benzyl;

každý R⁵, R^5a, R^5b, R^5c, R^5d, R^5e, R^5f, R^5g, R^5h a R⁵'jsou nezávisle (Ci-Cio)alkyl; a

R⁶, R^6a, R^6b, R^6c a R^6d jsou nezávisle vodík, (Ci-Cio)alkyl, (C6-C10)aryl, -(Ci-Cio)alkyl(C6Cio)aryl nebo (C3-Ci0)cykloalkyl, nebo R⁶ a R^6a spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny, tvoří anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2, s podmínkou, že když Aje (CH₂)_n, kde n je 0, 1,2 nebo 3, nebo A je O a alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF3, OCF3 nebo OCHF2 a/nebo alespoň jedna z R³ a R⁴ je CF3, -OCHF₂, -OCF₃, -CN, -CO₂R^5b, CH(OR^5h)R^6d, CH(OH)R^6c, COR^6b, -NHCOR⁵⁰, -NHSO2R^5d, -NHSO2(C₆-C₁₀)aryl, (C₆-C₁₀)aryl, -SR^5e, -SOR^5f, -SO2R^5g nebo -S02(C6-Cio)aryl;

nebo sloučenina struktury nebo kde

R¹, R² a R^2a jsou nezávisle vodík, OH, OR⁵, (Ci-Cio)alkyl, CF3, OCHF2, OCF3, SR⁵¹ nebo halogen nebo dvě z R¹, R² a R^2a spolu s uhlíky, ke kterým jsou připojeny, mohou tvořit anelovaný pěti-, šesti- nebo sedmičlenný karbocyklus nebo heterocyklus, který může obsahovat 1 až 4 heteroatomy v kruhu, kterými jsou N, O, S, SO a/nebo SO2;

každý R⁵ a R^5ljsou nezávisle (Ci-Cio)alkyl; a

Bn znamená benzyl;

s podmínkou, že když alespoň jedna z R¹ a R² je OH nebo OR⁵, potom alespoň jedna z R¹, R² a R^2a je CF₃, OCF₃ nebo OCHF₂.

-76CZ 304522 B6
30. Sloučenina mající strukturu

Et

Br