CZ20031257A3 - Selektivní agonisty receptoru EP4 při léčení osteoporosy - Google Patents

Selektivní agonisty receptoru EP4 při léčení osteoporosy Download PDF

Info

Publication number
CZ20031257A3
CZ20031257A3 CZ20031257A CZ20031257A CZ20031257A3 CZ 20031257 A3 CZ20031257 A3 CZ 20031257A3 CZ 20031257 A CZ20031257 A CZ 20031257A CZ 20031257 A CZ20031257 A CZ 20031257A CZ 20031257 A3 CZ20031257 A3 CZ 20031257A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
prodrugs
compounds
alkyl
bone
phenyl
Prior art date
Application number
CZ20031257A
Other languages
English (en)
Inventor
Kimberly O´Keefe Cameron
Bruce Allen Lefker
Original Assignee
Pfizer Products Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer Products Inc. filed Critical Pfizer Products Inc.
Publication of CZ20031257A3 publication Critical patent/CZ20031257A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/20—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/10—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Selektivní agonisty receptoru EP4 při léčení osteoporosy
Oblast techniky
Vynález se týká agonistů prostaglandinu selektivních vůči receptoru EP4, kombinací, způsobů, kitů a farmaceutických kompozic na' bázi takových agonistů prostaglandinu, které jsou užitečné při prevenci úbytku kostní hmoty nebo jejím obnovování nebo zvyšování a jako podpora hojení kostí, včetně léčení stavů, které se projevují nízkou kostní hmotou a/nebo kostními defekty u obratlovců, zejména savců, včetně člověka.
Dosavadní stav techniky
Osteoporosa je systemická kosterní choroba, pro niž je charakteristická nízká kostní hmota a zhoršování kostní tkáně, v jejichž důsledku dochází ke zvýšení křehkosti kostí a náchylnosti ke zlomeninám. V USA tento stav postihuje více než 25 milionů lidí a každý rok je příčinou více než 1,3 milionu zlomenin, z nichž je 500 000 zlomenin páteře, 250 000 zlomenin kyčle a 240 000 zlomenin zápěstí. Nejvážnější jsou zlomeniny kyčle, poněvadž 5 až 20 % pacientů postižených těmito zlomeninami umírá do jednoho roku a více než 50 % přeživších zůstává invalidních.
Největšímu riziku osteoporosy jsou vystaveni starší lidé, a předpokládá se, že se tento problém bude významně narůstat se stárnutím populace. Odhaduje se, že ve světovém měřítku dojde v průběhu následujících 60 let ke ztrojnásobení počtu zlomenin, a podle jedné studie má v roce 2050 ve světě celkem dojít ke 4,5 milionu zlomenin kyčle.
• · • ·
Ženy jsou ohroženy osteoporosou více než muži. U žen dochází k významnému urychlení úbytku kostní hmoty v průběhu 5 let po menopauze. Z jiných faktorů zvyšujících úbytek kostní hmoty vedoucí k osteoporose, je možno uvést kouření, abúzus alkoholu, sedavý životní styl a nízký příjem vápníku.
Pro léčení osteoporosy v současné době existují dva hlavní typy farmakoterapie. Při prvním z nich se za účelem snížení resorpce kotní tkáně používá antiresorpčních sloučenin.
Příkladem antiresorpčního činidla je estrogen, o němž je známo, že redukuje zlomeniny. Kromě toho Black et al. v EP 0605 193 Al uvádějí, že estrogen, zejména je-li podáván perorálně, snižuje hladinu LDL v plasmě a zvyšuje hladinu prospěšných lipoproteinů s vysokou hustotou (HDL). V případě kostry postižené rozvinutou osteoporosou však estrogen při opětovné výstavbě kostí na úroveň odpovídající mladému dospělému člověku selhává. Kromě toho se dlouhodobá léčba estrogenem dává do souvislosti s různými poruchami, jako je zvýšené riziko rakoviny dělohy, rakoviny endometria a možná rakoviny prsu, což vede mnoho žen k tomu, že se takovému léčení vyhýbají. Významné nežádoucí účinky spojené s léčením estrogenem podtrhují nutnost vyvinout alternativní způsoby léčení osteoporosy, které by měly žádoucí příznivý vliv na hladinu LDL v séru, ale bez nežádoucích vedlejších účinků. Druhým typem farmakoterapie při léčení osteoporosy je použití anabolických činidel za účelem podpoření tvorby kosti a zvýšení kostní hmoty. O činidlech z této třídy se předpokládá, že obnovují kostní tkáň u kostry postižené rozvinutou osteoporosou.
• ·
Uvádí se, že kromě osteoporosy v samotné Americe má ročně 20 až 25 milionů žen a zvyšující se počet mužů s detekovatelnými zlomeninanu obratlů, které souvisí se sníženou kostní hmotou a dochází k dalším 250 000 zlomenin kyčle. Zlomeniny kyčle jsou spojeny s 12% úmrtností v prvních dvou letech a 30% podílem pacientů, kteří po zlomenině potřebují domácí pečovatelskou službu. Ačkoliv je to významné již dnes, předpokládá se další zvýšení ekonomických a zdravotních dopadů rekonvalescence vyvolané pomalým nebo nedokonalým hojením těchto zlomenin kostí, protože celá populace stárne.
Ukázalo se, že estrogeny (Bolander et al. , 3 8th Annual
Meeting Orthopedic Research Society, 1992) zlepšují kvalitu hojení apendikulárních zlomenin. Zdá se tedy, že estrogenová substituční terapie by tedy mohla být způsobem léčení zlomenin. Kompliance pacientů s estrogenovou terapií je však relativně nízká, vzhledem k jejich vedlejším účinkům, jako je opětovné zahájení menstruace, mastodynie, zvýšené riziko rakoviny dělohy, pocit zvýšeného rizika rakoviny prsu a doprovodné používání progestinů. Kromě toho je pravděpodobné, že muži budou mít námitky proti léčbě estrogeny. Je tedy zřejmé, že existuje potřeba terapie, která by byla prospěšná pro pacienty, kteří utrpěli zne- schopňující zlomeniny kostí nebo kteří mají nízkou kostní hmotu, a která by zvýšila komplianci pacientů.
Bylo prokázáno, že prostaglandin E2 (PGE2) může nahradit úbytek kosti u ovariektomizovaných (OVX) potkanů, modelu postmenopauzální osteoporosy (Ke, H. Z. et al. , Bone, 23: 249 až
255, 1998) . S PGE2 jsou však spojeny závažné vedlejší účinky (Jee. W. S. S. a Ma, Y. F., Bone, 21: 297 až 304, 1997).
V GB 1 553 595 jsou popsány sloučeniny obecného vzorce • i • · · ·
kde dvojné vazby jsou v poloze cis nebo trans a obecné symboly mají význam uvedený v tomto dokumentu. Tyto sloučeniny jsou popsány jako látky vykazující spasmogenní a spasmolytickou účinnost, například s bronchodilatačními a antihypertensivními účinky. Tyto sloučeniny jsou také popsány jako látky užitečné při inhibici sekrece žaludeční šťávy, a látky s abortivními účinky.
V US patentu č. 4 115 401 jsou popsány sloučeniny obecného vzorce
kde obecné symboly mají význam uvedený v citovaném dokumentu. Tyto sloučeniny jsou popsány jako látky se spasmogenními, kardiovaskulárními a bronchodilatačními účinky.
V US patentu č. 4 113 873 jsou popsány sloučeniny obecného vzorce
O
R2 OH • ·
kde obecné symboly mají význam uvedený v citovaném dokumentu. Tyto sloučeniny jsou popsány jako látky užitečné jako bronchodilatanty, antihypertensivní činidla, činidla zesilující spontánní kontrakce dělohy a látky užitečné při léčení gastrointestinálních poruch nebo žaludečních vředů.
V GB 1 583 163 jsou popsány sloučeniny obecného vzorce
kde obecné symboly mají význam uvedený v citovaném dokumentu. Tyto sloučeniny jsou popsány jako látky se spasmogenními, bronchodilatačními, vasokonstrikčními, vasodilatačními a abortivními vlastnosti a jaké jako látky užitečné při inhibici sekrece žaludeční kyseliny.
V US patentu č. 4 177 346, stejného majitele, jsou popsány sloučeniny obecného vzorce
kde proměnné mají význam uvedený v citovaném dokumentu. Tyto sloučeniny jsou popsány jako látky s vasodilatační, antihypertenzivní, bronchodilatační, antikoncepční a antisekreční účinností.
· • ·
V mezinárodní patentové přihlášce WOOO/21542 jsou popsány agonisty receptoru subtypu EP4, užitečné jako stimulátory tvorby kosti.
Přestože existují různé způsoby léčení osteoporosy, na tomto poli přetrvává potřeba vyvinout alternativní způsoby léčení této choroby. Kromě toho existuje potřeba vyvinout způsoby léčení zlomenin kostí. Rovněž by bylo žádoucí vyvinout terapii, která by podporovala opětovnou výstavbu kostí v oblastech kostry, které jsou postiženy defekty, jako defekty vyvolanými například kostními nádory. Potřebnou se dále jeví terapie, která by podporovala opětovnou výstavbu kosti v oblastech kostry, kde byly indikovány kostní štěpy.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I
kde přerušovaná čára představuje případnou vazbu;
X představuje skupinu -CH2- nebo kyslík;
Z představuje skupinu -(CH2)3-, thienylskupinu, thiazolylskupinu nebo fenylskupinu, přičemž když X představuje kyslík, potom Z představuje fenylskupinu;
• ·· · ·
Q představuje karboxyskupinu, (C1-C4)alkoxylkarbonylskupinu nebo tetrazolylskupinu;
R2 představuje skupinu -Ar nebo -Ar1-V-Ar2;
V představuje vazbu nebo skupinu -0-, -OCH2- nebo -CH2O-;
Ar představuje zčásti nasycený, zcela nasycený nebo zcela nenasycený pěti- až osmičlenný kruh, který popřípadě obsahuje 1 až 4 heteroatomy nezávisle zvolené z kyslíku, síry a dusíku nebo bicyklický kruh sestávající ze dvou anelovaných nezávisle zčásti nasycených, zcela nasycených nebo zcela nenasycených pěti- nebo šestičlenných kruhů, bráno nezávisle, které popřípadě obsahují 1 až 4 heteroatomy nezávisle zvolené z dusíku, síry a kyslíku; přičemž uvedený částečně nebo zcela nasycený kruh nebo bicyklický kruh popřípadě obsahuje jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na uhlíku, nebo jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na síře;
Ar1 a Ar2 představuje každý nezávisle zčásti nasycený, zcela nasycený nebo zcela nenasycený pěti- až osmičlenný kruh, který popřípadě obsahuje 1 až 4 heteroatomy nezávisle zvolené z kyslíku, síry a dusíku, přičemž částečně nebo zcela nasycený kruh popřípadě obsahuje jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na uhlíku, nebo jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na síře;
přičemž uvedený zbytek Ar je popřípadě substituován na uhlíku nebo dusíku jednoho kruhu, pokud je monocyklický, nebo jednoho nebo obou kruhů, pokud je bicyklický, až třemi substituenty, vztaženo na kruh, z nichž každý je nezávisle zvolen ze souboru sestávajícího z hydroxyskupiny, halogenu, karboxyskupiny, (Ci-C7) alkoxyskupiny, (Ci-C4) • ·
alkoxy (Ci-C4) alkyl skupiny, (Cx-C7) alkyl skupiny, (C2-C7) alkenylskupiny, (C3-C7) cyklo.alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (C1-C4) alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (Ci-C4) alkanoylskupiny, formylskupiny, (Ci-C8)alkanoylskupiny, (Ci-C6) alkanoyl (Ci-C6) alkylskupiny, (Ci-C4) alkanoylaminoskupiny, (Ci-C4)alkoxykarbonylaminoskupiny, hydroxysulfonylskupiny, aminokarbonylaminoskupiny a mono-Ν-, di-Ν,Ν-, di-Ν,Ν'- nebo tri-N,N,N' - (Ci-C4) alkylsubstituované aminokarbonylaminoskupiny, sulfonamidoskupiny, (C1-C4) alkylsulfonamidoskupiny, aminoskupiny, mono-N- a di-N,N- (Ci-C4)alkylaminoskupiny, karbamoylskupiny, mono-N- a di-N,N- (Ci-C4)alkylkarbamoylskupiny, kyanoskupiny, thiolu, (Ci-C6) alkylthioskupiny, (Ci~C6) alkylsulf inylskupiny, (Ci-C4) alkylsulfonylskupiny a mono-N- a di-N,N- (C1-C4) alkylamínosulfinylskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány na uhlíku až 3 atomy fluoru; a zbytky Ar1 a Ar2 jsou nezávisle popřípadě substituovány na uhlíku nebo na dusíku až třemi substituenty, z nichž každý je nezávisle zvolen ze souboru sestávajícího z hydroxyskupiny, halogenu, karboxyskupiny, (Ci-C7)alkoxyskupiny, (Ci-C4) alkoxy (C1-C4) alkylskupiny, (C1-C7) alkylskupiny, (C2-C7) alkenyl skupiny, (C3-C7) cykloalkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (Ci~C4) alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl(C1-C4) alkanoylskupiny, formylskupiny, (Ci-C8) alkanoylskupiny, (Ci-C6) alkanoyl (Ci-C6) alkylskupiny, (C1-C4) alkanoyl aminoskupiny, (C1-C4)alkoxykarbonylaminoskupiny, hydroxysulfonylskupiny, aminokarbonylaminoskupiny a mono-N-, di-Ν,Ν-, di-N,Ν'- a tri-N,N,N'-(C1-C4)alkylsubstituované aminokarbonylaminoskupiny, sulfonamidoskupiny, (C1-C4)-alkylsulfonamidoskupiny, aminoskupiny, mono-N- a di-Ν,Ν- (C1-C4) alkylaminoskupiny, karbamoylskupiny, mono-Na di-N,N- (C1-C4) alkylkarbamoylskupiny, kyanoskupiny, thio• · lu, (Ci-C6) alkylthioskupiny, (Ci-C6) alkylsulf inylskupiny, (C1-C4) alkylsulfonylskupiny a mono-N- a di-N,N- (C3.-C4) alkylaminosulfinylskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar1 a Ar2 jsou popřípadě substituovány na uhlíku až 3 atomy fluoru;
s tou podmínkou, že (a) když X představuje skupinu - (CH2) - a Z představuje skupinu -(CH2)3-, potom R2 nepředstavuje thienylskupinu, fenylskupinu nebo fenylskupinu monosubstituovanou chlorem, fluorem, fenylskupinou, methoxyskupinou, trifluormethylskupinou nebo (Ci-C4) alkyl skupinou; a (b) když X představuje skupinu -(CH2)-, Z představuje skupinu -(CH2)3-, a Q představuje karboxyskupinu nebo (C!-C4) alkoxykarbonylskupinu, potom R2 nepředstavuje (i) (C5-C7)cykloalkylskupinu nebo (ii) fenylskupinu, thienylskupinu nebo furylskupinu, z nichž každá je popřípadě monosubstituovaná nebo disubstituovaná jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z atomů halogenu, alkylskupin s 1 až 3 atomy uhlíku, které jsou popřípadě substituovány jedním nebo více atomy halogenu, a alkoxyskupin s 1 až 4 atomy uhlíku;
jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Přednostní skupinu sloučenin, označovanou jako skupina A, tvoří sloučeniny obecného vzorce Ia * ·
(Ia) představuje skupinu -(CH2)3- nebo skupinu vzorce \\ //
R2 představuje zbytek -Ar; přičemž zbytek -Ar je popřípadě substituován na uhlíku nebo dusíku jednoho kruhu, pokud je monocyklický, nebo jednoho nebo obou kruhů, pokud je bicyklický, až třemi substituenty, vztaženo na kruh, z nichž každý je nezávisle zvolen ze souboru sestávajícího z hydroxyskupiny, halogenu, karboxyskupiny, (C1-C7)alkoxyskupiny, (C1-C4) alkoxy (C1-C4) alkyl skupiny, (C1-C7) alkyl skupiny, (C2-C7) -alkenylskupiny, (C3-C7) cykloalkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (C1-C4) alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl(C1-C4) alkanoylskupiny, formylskupiny, (Ci-C8) alkanoylskupiny, (Ci-C6) alkanoyl (Ci-C6) alkylskupiny, (Ci-C4)alkanoylaminoskupiny, (C1-C4)alkoxykarbonylaminoskupiny, hydroxysulfony1skupiny, aminokarbonylaminoskupiny a monoN-, di-Ν,Ν-, di-N,N'- a tri-Ν,Ν,Ν1 - (C1-C4) alkylsubstituované aminokarbonylaminoskupiny, sulfonamidoskupiny, * · • · (Ci-C4)alkylsulfonamidoskupiny, aminoskupiny, mono-N- a di-N, N- (C1-C4) alkylaminoskupiny, karbamoylskupiny, mono-Na di-N,N-(C1-C4) alkylkarbamoyl skupiny, kyanoskupiny, thiolu, (Ci-C6) alkylthioskupiny, (Ci-C6) alkylsulf inylskupiny, (C1-C4)alkylsulfonylskupiny a mono-N- a di-N,N- (C1-C4)alkylaminosulfinylskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány na uhlíku až 3 atomy fluoru;
jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Ze skupiny A se dává přednost sloučeninám, které tvoří skupinu B. Do skupiny B spadají sloučeniny, kde Ar představuje cyklohexylskupinu, 1,3-benzodioxolylskupinu, thienylskupinu, naftylskupinu nebo fenylskupinu popřípadě substituovanou jednou nebo dvěma skupinami zvolenými z (C1-C4)alkylskupiny, (C1-C4) alkoxyskupiny, (C1-C4) alkoxy (C1-C4) alkyl skupiny, chloru, fluoru, trifluormethylskupiny a kyanoskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány až 3 atomy fluoru; jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto proléčiv a solí.
proléčiv a sloučenin,
Ze skupiny B se dává přednost sloučeninám, které tvoří skupinu C. Do skupiny C spadají sloučeniny, kde přerušovaná čára nepředstavuje vazbu; Q představuje karboxyskupinu nebo (C1-C4)alkoxykarbonylskupinu; a Z představuje skupinu vzorce z-s\ \\ // ·· · jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Ze skupiny C se' dává přednost sloučeninám, které tvoří skupinu D. Do skupiny D spadají sloučeniny, kde Q představuje karboxyskupinu a Ar představuje fenylskupinu popřípadě substituovanou jednou (C1-C4) alkyl skupinou, (Ci~C4) a lkoxy skupinou, (Ci - C4) alkoxy (Ci.-C4) alkyl skupinou, chlorem, fluorem, trifluormethylskupinou nebo kyanoskupinou, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány až 3 atomy fluoru, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Ze skupiny D se dává přednost sloučeninám, kde Ar představuje m-trifluormethylfenylskupinu, jejich proléčivům, farmaceuticky vhodným solím těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomerům a diastereomerním směsím těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Ze skupiny D se dále dává přednost sloučeninám, kde Ar představuje m-chlorfenylskupinu, jejich proléčivům, farmaceuticky vhodným solím těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomerům a diastereomerním směsím těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Ze skupiny D se dále dává přednost sloučeninám, kde Ar představuje m-trifluormethoxyfenylskupinu, jejich proléčivům, farmaceuticky vhodným solím těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomerům a diastereomerním směsím těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Do skupiny zvláště přednostních sloučenin podle tohoto vynálezu spadá
5-(3-(2S-(3R-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina;
5-(3-(2S-(3R-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)butyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina; a
5-(3-(2S-(4-(3-chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina.
Ze skupiny A se dále dává přednost sloučeninám, kde X představuje skupinu -CH2-, Z představuje skupinu -(CH2)3-, Q představuje karboxyskupinu nebo (Ci-C4)alkoxykarbonylskupinu a Ar představuje fenylskupinu nezávisle substituovanou jednou až třemi skupinami zvolenými z kyanoskupiny, (Ci-C7)alkoxyskupiny substituované 1 až 3 atomy fluoru a (Ci~C4) alkoxy (Ci-C4) alkyl skupiny; jejich proléčivům, farmaceuticky vhodným solím těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomerům a diastereomerním směsím těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Předmětem vynálezu jsou zejména sloučeniny obecného vzorce I definované v předchozím odstavci, kde přerušovaná čára nepředstavuje vazbu; Q představuje karboxyskupinu nebo (Ci-C4) alkoxykarbonylskupinu; a Z představuje skupinu vzorce
jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
• · zejména sloučeniny obecného odstavci, kde Q představuje
Předmětem vynálezu jsou dále vzorce I definované v předchozím karboxyskupinu a Ar představuje fenylskupinu popřípadě substituovanou jednou (Ci-C4) alkylskupinou, (C1-C4) alkoxyskupinou, (Ci-C4) alkoxy (Ci-C4) alkyl skupinou, chlorem, fluorem, trifluormethylskupinou nebo kyanoskupinou, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány až 3 atomy fluoru, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
Předmětem vynálezu jsou také způsoby léčení stavů, které se projevují nízkou kostní hmotou u savců, jejichž podstata spočívá v tom, že se takovému savci podává sloučenina obecného vzorce I selektivní vůči receptoru EP4, její proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli.
Předmětem vynálezu jsou zejména takové způsoby léčení, kde stavem je osteoporosa, křehkost, osteoporotická fraktura, kostní defekt, juvenilní idiopatický úbytek kostní tkáně, úbytek alveolární kosti, úbytek mandibulární kosti, fraktura kosti, osteotomie, úbytek kosti spojený s periodontitis a prorůstání protézy. Při přednostních způsobech podle tohoto vynálezu se selektivní agonista receptoru EP4 podává systemicky. Při jiných přednostních způsobech podle vynálezu se agonista EP4 podává lokálně.
Předmětem vynálezu jsou zejména takové způsoby, kde stavem je metastabilní kostní choroba, kde se kost odstraňuje chirurgicky s následným defektem, který je třeba vyplnit.
• · «··· · • ·· · • ·· · · · • ♦ · · · · • * ·· · ···♦ • · · * · ·♦« ·· ·
Způsoby podle vynálezu jsou zejména užitečné v případě, že stavem je křehkost.
Způsoby podle vynálezu jsou zejména užitečné v případě, že stavem je osteoporosa.
Způsoby podle vynálezu jsou také zvláště užitečné v případě, že stavem je fraktura kosti nebo osteoporotická fraktura.
Předmětem vynálezu jsou také farmaceutické kompozice, jejichž podstata spočívá v tom, že obsahují sloučeninu obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodnou sůl této sloučeniny nebo proléčiva, nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli podle vynálezu a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo. Předmětem vynálezu jsou také způsoby léčení stavů, které se projevují nízkou kostní hmotou, u savců, jejichž podstata spočívá v tom, že se takovému savci podává farmaceutická kompozice podle vynálezu..
Přednostně se léčí ženy po menopauze a muži ve věku nad 60 let a také jednotlivci bez ohledu na věk, kteří mají významně sníženou kostní hmotu, tj. 1,5 standardní odchylky a více pod normálními hladinami v mládí.
Jako stavy, které se projevují nízkou kostní hmotou, je v souvislosti se způsoby podle tohoto vynálezu možno například uvést osteoporosu, juvenilní idiopatický úbytek kostní tkáně, úbytek alveolární kosti, úbytek mandibulární kosti, frakturu kosti, osteotomii, úbytek kostní tkáně spojený s periodontitis a prorůstání protézy.
• · • ·
Do rozsahu vynálezu také spadají způsoby léčení sekundární osteoporosy. Jako sekundární osteoporosu je možno uvést osteoporosu indukovanou glukokortikoidy, osteoporosu indukovanou hyperthyroidismem, osteoporosu indukovanou imobilizací, osteoporosu indukovanou heparinem a osteoporosu indukovanou imunosupresivy u obratlovců, například savců (jako člověka). Tyto způsoby se provádějí tak, že se obratlovci, například savci, podá selektivní agonista receptoru prostaglandinu EP4, obecného vzorce I, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná agonisty nebo jeho proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs agonisty, proléčiva nebo soli v množství účinném při léčení sekundární osteoporosy.
Předmětem vynálezu jsou dále také způsoby zpevňování kostních štěpů, indukování vertebrální synostosy, podporování prodlužování dlouhých kostí, podporování hojení kostí po rekonstrukci obličeje, rekonstrukci horní a/nebo dolní čelisti u obratlovců, například savců (včetně člověka), jejichž podstata spočívá v tom, že se obratlovci, například savci, který prodělal transplantaci kostního štěpu, potřebuje indukovat vertebrální synostosu nebo podporu prodlužování dlouhých kostí, prodělal rekonstrukci obličeje nebo rekonstrukci horní nebo dolní čelisti, podá selektivní agonista receptoru prostaglandinu EP4 obecného vzorce I, jeho proléčivo, farmaceuticky vhodná agonisty nebo proléčiva, stereoisomer nebo diastereomerní směs agonisty, proléčiva nebo soli podle vynálezu v množství posilujícím kosti. Selektivní agonisty receptoru prostaglandinu EP4 podle tohoto vynálezu je možno aplikovat lokálně na místo rekonstrukce kosti, nebo systemicky.
Předmětem vynálezu je také způsob léčení impotence nebo erektilní dysfunkce, jehož podstata spočívá v tom, že se pacientu, který takové léčení potřebuje, podává sloučenina ··
obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli v množství, které je účinné při léčení impotence nebo erektilní dysfunkce.
Předmětem vynálezu je také způsob léčení zhoršené funkce ledvin, jehož podstata spočívá v tom, že se pacientu, který takové léčení potřebuje, podává sloučenina obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli v množství, které je účinné při regeneraci ledvin.
Předmětem vynálezu je také způsob podporování růstu kosti, jehož podstata spočívá v tom, že se pacientu, který takové léčení potřebuje, podává sloučenina obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli v terapeuticky účinném množství, a inhibitor HMG-CoA reduktasy (statin), jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva v terapeuticky účinném množství.
Denní dávka sloučeniny obecného vzorce I, jejího proléčiva, farmaceuticky vhodné soli této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomeru nebo diastereomerní směsi této sloučeniny, proléčiva nebo soli přednostně leží v rozmezí od asi 0,001 do asi 100 mg/kg, přičemž zvláštní přednost se dává denním dávkám v rozmezí od asi 0,01 do asi 10 mg/kg
Ještě dalším předmětem vynálezu je farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodnou • · • · a · ·
sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli; a antiresorpční činidlo, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodnou sůl tohoto činidla nebo proléčiva; a taková kompozice pro léčení nebo prevenci stavů, které se projevují nízkou kostní hmotou, jako je osteoporosa, u obratlovců, například savců (například lidí, zejména žen) nebo použití takové kompozice pro jiné zvyšování kostní hmoty.
Kombinace podle vynálezu obsahuje terapeuticky účinné množství první sloučeniny, kterou je sloučenina obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli, a terapeuticky účinné množství druhé sloučeniny, kterou je antiresorpční činidlo, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl tohoto činidla nebo proléčiva, jako agonista/antagonista estrogenu nebo bisfosfonát.
Podle dalšího aspektu je předmětem vynálezu způsob léčení obratlovců, například savců, kteří vykazují nízkou kostní hmotu, při němž se obratlovci, například savci, který vykazuje nízkou kostní hmotu podává
a. množství první sloučeniny, přičemž touto první sloučeninou je sloučenina obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli; a
b. množství druhé sloučeniny, přičemž touto druhou sloučeninou je antiresorpční činidlo, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl tohoto činidla nebo proléčiva, jako agonista/antagonista estrogenu nebo bisfosfonát.
• · · *· « · • · * ·· · « · · • « · ·
Takové kompozice a způsoby je možno používat také pro jiné zvyšování kostní hmoty.
V přednostním provedení tohoto způsobu je stavem, který se projevuje nízkou kostní hmotou, osteoporosa.
Podle jiného přednostního provedení se při tomto způsobu první sloučenina a druhá sloučenina podávají v podstatě současně.
Podle dalšího aspektu je předmětem vynálezu kit, který obsahuj e:
a. množství sloučeniny obecného vzorce I, jejího proléčiva, farmaceuticky vhodné soli této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomeru nebo diastereomerní směsi této sloučeniny, proléčiva nebo soli a farmaceuticky vhodný nosič nebo ředidlo v první jednotkové dávkovači formě;
b. množství antiresorpčního činidla, jeho proléčiva nebo farmaceuticky vhodné soli tohoto činidla nebo proléčiva, jako agonisty/antagonisty estrogenu, nebo bisfosfonátu, a farmaceuticky vhodný nosič nebo ředidlo ve druhé jednotkové dávkovači formě; a
c. obalový prostředek.
Ještě dalším předmětem vynálezu je farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodnou sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli a jiné kostní anabolické činidlo (druhým kostním anabolickým činidlem však • · ·· · ·· · • ·· · ♦ · • * · · · « • · · · · ···· • · ··· ··· ···· »·» ·· ··« ·» φ může být odlišná sloučenina obecného vzorce I), jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodnou sůl tohoto činidla nebo proléčiva, a použití takové kompozice pro léčení stavů, které se projevují nízkou kostní hmotou, jako je osteoporosa, u obratlovců, například savců (například lidí, zejména žen) nebo použití také kompozice pro jiné zvyšování kostní hmoty. Taková kombinace obsahuje terapeuticky účinné množství první sloučeniny, kterou je sloučenina obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli, a terapeuticky účinné množství druhé sloučeniny, kterou je jiné kostní anabolické činidlo, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl tohoto činidla nebo proléčiva.
Podle dalšího aspektu je předmětem vynálezu způsob léčení obratlovců, například savců, kteří vykazují nízkou kostní hmotu, při němž se obratlovci, například savci, který vykazuje nízkou kostní hmotu podává
a. množství první sloučeniny, přičemž touto první sloučeninou je sloučenina obecného vzorce I, její proléčivo, farmaceuticky vhodná sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli; a
b. množství druhé sloučeniny, přičemž touto druhou sloučeninou je je jiné kostní anabolické činidlo, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl tohoto činidla nebo proléčiva.
Takové kompozice a způsoby je možno používat také pro jiné zvyšování kostní hmoty.
• · · • ·
V přednostním provedení tohoto způsobu je stavem, který se projevuje nízkou kostní hmotou, osteoporosa.
Podle dalšího aspektu je předmětem vynálezu kit, který obsahuje:
a. množství sloučeniny obecného vzorce I, jejího proléčiva, farmaceuticky vhodné soli této sloučeniny nebo proléčiva nebo stereoisomeru nebo diastereomerní směsi této sloučeniny, proléčiva nebo soli a farmaceuticky vhodný nosič nebo ředidlo v první jednotkové dávkovači formě;
b. množství druhé sloučeniny, přičemž touto druhou sloučeninou je jiné kostní anabolické činidlo, jeho proléčivo nebo farmaceuticky vhodná sůl tohoto činidla nebo proléčiva, ve druhé jednotkové dávkovači formě; a
c. obalový prostředek.
Při kterémkoliv z výše uvedených způsobů nebo v kitech nebo kompozicích se dává přednost nebo zvláštní přednost určitým kostním anabolickým činidlům, agonistům/antagonistům estrogenu a bisfosfonátům.
Jako přednostní kostní anabolická činidla je možno uvést IGF-1, prostaglandiny, agonisty/antagonisty prostaglandinu, fluorid sodný, parathyroidní hormon (PTH), aktivní fragmenty parathyroidního hormonu, peptidy příbuzné parathyroidnímu hormonu, aktivní fragmenty a analogy peptidů příbuzných parathyroidnímu hormonu, růstové hormony nebo sekretagogy růstového hormonu a jejich farmaceuticky vhodné soli.
• ·
Jako přednostní agonisty/antagonisty estrogenu je možno uvést droloxifen; raloxifen; tamoxifen; 4-hydroxytamoxifen; toremifen; centchroman; levormeloxifen; idoxifen;
6-(4-hydroxyfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)benzyl]naftalen-2-ol;
4-[2-(2-azabicyklo[2,2,1]hept-2-yl)ethoxy]fenyl}-[6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)benzo[b]thiofen-3-yl]methanon;
3-(4-(1,2-difenylbut-l-enyl)fenyl)akrylovou kyselinu;
2-(4-methoxyfenyl)-3- [4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen-6-ol;
cis-6-(4-fluorfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol;
(-)-cis-6-fenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol;
cis-6-fenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol;
cis-1-[6'-pyrrolodinoethoxy-3'-pyridyl]-2-fenyl-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaftalen;
1-(4'-pyrrolidinoethoxyfenyl)-2-(4-fluorfenyl)-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin;
cis-6-(4-hydroxyfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol a
1-(4'-pyrrolidinolethoxyfenyl)-2 -fenyl-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin.
Jako zvláště přednostní agonisty/antagonisty estrogenu je možno uvést
3-(4-(1,2-difenylbut-l-enyl)fenyl)akrylovou kyselinu;
2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen-6-ol;
cis-6-(4-fluorfenyl)-5- [4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol;
(-)-cis-6-fenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol (lasofoxifen);
cis-6-fenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol;
cis-1-[61-pyrrolodinoethoxy-31-pyridyl]-2-fenyl-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaftalen;
1-(41-pyrrolidinoethoxyfenyl)-2-(4-fluorfenyl)-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin;
cis-6-(4-hydroxyfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ol a
1-(41-pyrrolidinolethoxyfenyl)-2-fenyl-6-hydroxy-l,2,3,4-tetrahydroisochinolin.
Jako přednostní bisfosfonáty je možno uvést tiludronovou kyselinu, alendronovou kyselinu, zoledronovou kyselinu,
ibandronovou kyselinu, risedronovou kyselinu, etidronovou kyselinu, klodronovou kyselinu, pamidronovou kyselinu a jejich farmaceuticky vhodné soli.
Je zřejmé, že ze sloučenin, kterých se v kombinacích podle vynálezu používá jako druhých sloučenin, mohou vznikat farmaceuticky vhodné soli a proléčiva. Všechna takto vzniklá proléčiva a farmaceuticky vhodné soli spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Jako příklady zvláště přednostních solných forem je možno uvést hydrochlorid raloxifenu, citrát tamoxifenu a citrát toremifenu.
Pod pojmem stav, který se projevuje nízkou kostní hmotou se rozumí stav, při němž je úroveň kostní hmoty pod normální hladinou specifickou pro věk, jak je definována ve standardech Světové zdravotnické organizace Assesment of Fracture Risk and its Application to Screening for Postmenopausal Osteoporosis (1994), Report of a World Health Organization Study Group. World Health Organization Technical Series 843. Takovým stavem se rozumí například primární a sekundární osteoporosa uvedená výše. Spadají sem také periodontální choroba, úbytek alveolární kosti, stavy po osteotomii a juvenilní idiopatický úbytek kostní hmoty. Stavem, který se projevuje nízkou kostní hmotou se také rozumějí dlouhodobé komplikace osteoporosy, jako je zakřivení páteře, ztráta výšky a voperování protézy.
Pojem stav, který se projevuje nízkou kostní hmotou se vztahuje také na obratlovce, například savce, u nichž je pravděpodobnost vývoje některé z výše uvedených chorob, jako je osteoporosa, vyšší než průměrná (například ženy po přechodu, muži nad 50 let). Jako příklady zvyšování nebo posilování kostní hmoty je možno uvést rekonstrukci kostí, urychlování hojení zlomenin, všechny operace s nahrazováním kostními • · H 9 ··· · · · • · * · · ···· · ·····*···»··
ZJ · · ··· · · « ···· ··· ·· ··· ·· * štěpy, urychlování přijetí kostních štěpů, urychlování hojení kostí po rekonstrukci obličeje nebo rekonstrukci horní nebo dolní čelisti, prorůstání protézy, vertebrální synostosu a prodlužování dlouhých kostí.
Způsobů podle vynálezu je také možno používat spolu s ortopedickým aparátem, jako jsou košíčky pro fúzi páteře (spinal fusion cages), kovový aparát pro fúzi páteře, zařízení pro vnitřní a vnější fixaci kosti, šrouby a hřeby.
Odborníkům v tomto oboru bude zřejmé, že se pod pojmem kostní hmota ve skutečnosti rozumí hmotnost kosti na jednotku plochy, která je někdy (ačkoliv ne zcela přesně) označována jako minerální hustota kosti.
Pojem léčení nebo léčba, jak se ho používá v tomto textu, zahrnuje preventivní (například profylaktickou) a paliativní a kurátivní léčbu.
Přívlastku farmaceuticky vhodný se používá pro označení nosičů, vehikul, ředidel, excipientů a/nebo solí, které musí být kompatibilní s ostatními složkami formulace a nepoškozují recipienta.
Pod pojmem proléčiva se rozumí sloučeniny, které jsou prekursory léčiv, které po podání působením určitého chemického nebo fyziologického mechanismu uvolňují léčivo in vivo (například se proléčivo vystaví fyziologickému pH nebo se na požadovanou formu léčiva převede enzymatickým působením). Typická proléčiva po štěpení uvolňují odpovídající léčivou látku.
Pod pojmem farmaceuticky vhodné soli se rozumějí soli obsahující netoxické anionty. Jako neomezující příklady tako26 • · • · 4 • ·· 4 vých solí je možno uvést chloridové, bromidové, jodidové, sulfátové, hydrogensulfátové, fosfátové, acetátové, maleátové, fumarátové, oxalátové, laktátové, tartrátové, citrátové, glukonátové, methansulfonátové a 4-toluensulfonátové soli. Do rozsahu pojmu farmaceuticky vhodné soli rovněž spadají soli s netoxickými kationty. Jako neomezující příklady takových solí je možno uvést soli, které obsahují kationty sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, amonia nebo protonovaného benzathinu (N,Ν'-dibenzylethylendiaminu), cholinu, ethanolaminu, diethanolaminu, ethylendiaminu, meglaminu (N-methylglukaminu), benethaminu (N-benzylfenylethylaminu), piperazinu nebo tromethaminu (2-amino-2-hydroxymethyl-l,3-propandiolu).
Odborníku v oboru chemie bude zřejmé, že některé sloučeniny obecného vzorce I podle tohoto vynálezu mohou existovat v tautomerní formě, tzn. že existuje rovnována mezi dvěma isomery, při níž jednotlivé isomery mohou vzájemně rychle přecházet rychle jeden v druhý. Obvyklým příkladem tautomerie je tautomerie keto-enol, tj .
H
O
Jako příklady sloučenin, které se mohou vyskytovat jako tautomery, je možno uvést hydroxypyridiny, hydroxypyrimidiny a hydroxychinoliny. Odborník však bude schopen uvést další příklady. Do rozsahu vynálezu spadají všechny takové tautomery a jejich směsi.
Do rozsahu vynálezu také spadají sloučeniny značené isotopy, které jsou identické se sloučeninami obecného vzorce I až na to, že v nich je jeden atom nebo více atomů nahrazeno atomem s atomovou hmotností nebo hmotnostním číslem odlišným od atomové hmotnosti nebo hmotnostního čísla s jakým se obvykle nacházejí v přírodě. Jako příklady isotopů, které je možno začlenit do sloučenin podle tohoto vynálezu je možno uvést isotopy vodíku, uhlíku, dusíku, kyslíku, fosforu, síry, fluoru a chloru, jako je 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 180, 170, 31P, 32p, 35S, 18F a 38C1. Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí, které obsahují výše uvedené isotopy a/nebo jiné isotopy jiných atomů rovněž spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Určité isotopově značené sloučeniny podle vynálezu, například sloučeniny značené radioaktivními isotopy, jako 3H nebo 14C, jsou užitečné při zkouškách distribuce léčiva a/nebo substrátu v tkáních. Zvláštní přednost se dává tritiovaným isotopům, tj . 3H, a 14C isotopům, jelikož je lze snadno připravovat a detekovat. Nahrazením těžšími isotopy, jako deuteriem, tj . 2H, je možno dosáhnout určitých terapeutických výhod vyplývajících z vyšší metabolické stability, například prodloužení poločasu in vivo nebo snížení potřebných dávek, čemuž se za určitých okolností dává přednost. Isotopově značené sloučeniny obecného vzorce I podle tohoto vynálezu a jejich proléčiva lze obvykle připravovat prováděním způsobů znázorněných ve schématech a/nebo popsaných v příkladech provedení nebo přípravných postupech, při nichž se reakční činidlo neznačené isotopem nahradí snadno dostupným činidlem značeným isotopem.
Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu obsahují asymetrické atomy uhlíku, a proto se vyskytují ve formě enantiomerů nebo diastereomerů. Diastereomerní směsi je možno dělit na individuální diastereomery na základě jejich fyzikálně chemických odlišností o sobě známými metodami, například chromatografií a/nebo frakční krystalizací. Enantiomery je možno dělit tak, že se enantiomerní směs • · • · · • · « • · ·« převede na diastereomerní směs reakcí s vhodnou opticky aktivní sloučeninou (například alkoholem), potom se oddělí diastereomery a jednotlivé diastereomery se převedou (například hydrolýzou) na odpovídající čisté enantiomery. Enantiomery a diasteremery podle tohoto vynálezu je také možno připravovat za použití vhodných enantiomerně obohacených výchozích látek nebo asymetrickými nebo diastereoselektivními reakcemi, jimiž se zavádí asymetrické atomy uhlíku se správnou stereochemií. Do rozsahu vynálezu spadají všechny takové isomery, včetně diastereomerů a enantiomerů, jakož i jejich směsi. Některé sloučeniny podle vynálezu jsou kyselé, a mohou tvořit soli s farmaceuticky vhodnými kationty. Všechny takové soli spadají do rozsahu tohoto vynálezu a je možno je připravovat konvenčními metodami. Tak například je možno je připravit jednoduše tak, že se kyselé a zásadité složky smíchají, obvykle ve stechiometrickém poměru, ve vodném, nevodném nebo zčásti vodném prostředí, podle toho, jak je to vhodné. Soli se izolují bud' filtrací nebo vysrážením nerozpouštědlem s následující filtrací, nebo odpařením rozpouštědla nebo, v případě vodných roztoků, také lyofilizací, podle toho, jak je to vhodné.
tvorbě kosti,
Tento vynález
oboru, jelikož
í kostní hmotu,
regresí osteo-
Způsoby podle tohoto vynálezu vedou k tvorbě jejímž výsledkem je snížený počet zlomenin, představuje významný příspěvek v tomto poskytuje způsoby, které zvyšují a zachovávají kostní hmotu, což se projevuje prevencí, retardací a/ne) porosy a příbuzných kostních poruch.
Další znaky a výhody budou zřejmé z popisu tohoto vynálezu a připojených patentových nároků.
Následuje podrobnější popis vynálezu.
• ·
Sloučeniny obecného vzorce I podle tohoto vynálezu (které jsou dále uváděny pod souhrnným označením sloučeniny podle tohoto vynálezu) se obvykle připravují způsoby, které zahrnují způsoby analogické způsobům známým. Některé způsoby mohou vyžadovat chránění vzdálených funkčních skupin (např. primární amin, sekundární amin, sekundární alkohol, primární alkohol a karboxyskupina v prekursorech sloučenin obecného vzorce I). Potřeba takového chránění se bude měnit v závislosti na druhu vzdálené funkční skupiny a podmínkách použitých při přípravě. Potřebu takového chránění je odborník v tomto oboru snadno rozeznat. Používání metod zavádění/odštěpování chránících skupin leží v rozsahu zkušeností běžného odborníka. Pod pojmem chránící skupina se rozumí zbytek, který lze snadno připojit k funkční skupině substrátu a následně ho snadno odštěpit a který zabraňuje odštěpení, změně nebo jinému poškození chráněné funkční skupiny. Obecný popis chránících skupin a jejich používání je možno nalézt v publikaci Greene, T. W. ; Wuts, P. G. M. , Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání; John Wiley and Sons, New York, USA, 1991. Výchozí látky a reakční činidla pro výrobu výše popsaných sloučenin jsou také snadno dostupné nebo je odborník v tomto oboru je schopen syntetizovat za použití obvyklých způsobů syntézy organických sloučenin.
Sloučeniny obecného vzorce I se obvykle připravují zavedením ochrany na hydroxyskupinu racemického nebo (R)-hydroxymethyl-2-pyrrolidinonu a následnou alkylací amidového dusíku alkylhalogenidem, který obsahuje vhodně chráněný prekursor nebo isoster kyseliny (schéma A) . Pod pojmem isoster se v tomto texto rozumí funkční skupina, která je-li použita namísto jiné funkční skupiny, se svou reaktivitou blíží reaktivitě funkční skupiny, kterou nahrazuje. Zavedení vhodné chráněného prekursoru nebo isosteru kyseliny (schéma Bl) v některých případech vyžaduje další zpracování alkylhalogenidu.
• · · • · · · • * · · · I ♦ « · ·· ·
Chránící skupina hydroxyskupiny se odstraní a alkohol se oxiduje na aldehyd, který se poté nechá reagovat s aniontem vhodného ketofosfonátu (schéma C) . Vzniklý enon vzorce 8 ze schématu E se poté podrobí redukci jak dvojné vazby, tak i ketonu, za vzniku požadovaných alkoholů vzorce 9 ze schématu E. V případě potřeby je možno provést diastereoselektivní redukci enonu za vzniku například převážně 15-(R) isomeru nebo 15- (S) isomeru. Ester karboxylové kyseliny nebo isoster kyseliny (například nitril) lze poté převést na vhodnou kyselou skupinu (karboxylovou kyselinu, tetrazol atd.).
Přednostní způsobem, jímž se nitril převádí na požadovaný tetrazol, je reakci nitrilu s dibutylcínoxidem a trimethylsilylazidem v refluxujícím toluenu (S. J. Wittenberger a B. G. Donner, J. Org. Chem. 1993, 58, 4139-4141, 1993). Přehled alternativních způsobů příprava tetrazolů viz R. N. Butler, Tetrazoles, Comprehensive Heterocyclic Chemistry; Potts, K. T.
ed.; Pergamon Press: Oxford, 1984, sv. 5, str. 791-838.
Schéma A
0 |1 0
A™ 1) ochrana OH A xch2ch2-x-z-qp
V—OH 2) báze, , A \^°^pG
1 hal-CH2CH2-X-Z-QP 2
Konkrétněj i se sloučeniny obecného vzorce I připravuj í
způsoby popsanými dále. Při postupu podle první obecné
sekvence, která začíná schématem A, se hydroxyskupina 5-(R)-
-hydroxymethyl-2-pyrrolidinonu (od Aldrich Chemical nebo připraveného způsobem popsaným v Bruckner et al. , Acta. Chim. Hung. Tomus, 21, 106 (1959)) vhodně chrání (Pg představuje vhodnou chránící skupinu) tak, že se sloučenina vzorce 1 nechá reagovat ve vhodném rozpouštědle inertním vůči reakci. Pod • · · ··· · pojmem rozpouštědlo inertní vůči reakci a inertní rozpouštědlo se rozumí rozpouštědlo nebo směs rozpouštědel neinteragující s výchozími látkami, reakčními činidly, meziprodukty nebo produkty způsobem, který by negativně ovlivňoval výtěžek požadovaného produktu. V některých případech je uveden seznam přednostních rozpouštědel inertních vůči reakci. Při konkrétní reakci je však možno použít jakéhokoliv rozpouštědla, které splňuje definici rozpouštědla inertního vůči reakci uvedenou výše vzhledem k této reakci. Všechny reakce se provádějí v rozpouštědle inertním vůči reakci, pokud není konkrétně uvedeno jinak. Lze použít jakékoliv standardní chránící skupiny alkoholu. Jako příklady takových chránící skupin je možno uvést tetrahydropyranylskupinu, trimethylsilylskupinu, terc-butyldimethylskupinu nebo benzylskupinu. Přednostní chránící skupinou je terc-butyldimethylsilylskupina (TBS), kterou lze zavádět standardními způsoby, jako způsoby popsanými v publikaci Greene, T. W.; Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání.; John Wiley and Sons lne. : New York, 1991. V přednostním provedení se reakce 5-(R)-hydroxymethyl-2 -pyrrolidinonu provádí v methylenchloridu při 0°C za použití 0,1 ekv. 4-dimethylaminopyridinu, 1,1 ekv. terc-butyldimethylsilylchloridu a 2 ekv. imidazolu (viz např. Tetrahedron Asymmetry, 7, 2113, (1996)). Amidový dusík se alkyluje za použití jednoho z řady alkylačních činidel (hal-CH2CH2-X-Z-QP, kde hal představuje odstupující skupinu, jako bromid nebo jodid, X a Z mají výše uvedený význam, QP představuje nitril, ester karboxylové kyseliny nebo jiný prekursor karboxylové kyseliny nebo isoster kyseliny), čímž se zavede postranní řetězec. Amidový dusík se nejprve deprotonuje vhodnou bází. Jako přednostní báze lze uvést hexamethyldisilazid sodný (který je také uváděn jako NaHMDS nebo NaN(SiMe3)2) nebo hydrid sodný, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako je N,N-dimethylformamid (DMF), tetrahydrofuran (THF), 1,2-dimethoxy• · • · ethan nebo 1,4-dioxan. Přednostně se používá N, N-dimethylformamidu. Vhodná teplota pro tvorbu aniontu leží v rozmezí od -78°C do teploty zpětného toku použitého rozpouštědla. Tato reakce se přednostně provádí při teplotě asi 0°C. Po vytvoření aniontu se přidá alkylační činidlo (hal-CH2CH2-X-Z-QP) a výsledný roztok se míchá při vhodné teplotě. Vhodná teplota pro alkylaci leží v rozmezí od -20°C do teploty zpětného toku použitého rozpouštědla, přednostně v rozmezí od 0 do 100°C. Jako typická alkylační činidla lze uvést primární, sekundární, benzylové, propargylové halogenidy a primární, sekundární, benzylové nebo propargylové sulfonáty. Přednostními alkylačními činidly jsou alkylbromidy nebo alkyljodidy.
Řada užitečných alkylačních činidel obecného vzorce hal-CH2CH2-X-Z-QP je dostupných na trhu. Například ethyl-7--bromheptanoát a 7-bromheptanonitril je možno získat od firmy Aldrich Chemical, P.O. Box 355, Milwaukee, Wis. 53201, USA. Tato a jiná požadovaná alkylační činidla, kterých se používá při způsobu podle výše uvedeného schématu, je možno připravovat řadou způsobů, které jsou odborníkům v tomto oboru známy (viz např. The Chemistry of the Carbon-Halogen Bond, Ed. S. Patai, J. Wiley, New York, 1973 a/nebo The Chemistry of Halides, Pseudo-Halides, and Azides, Eds. S. Patai a Z. Rappaport, J. Wiley, New York, 1983).
Alkylhalogenidy je také možno připravovat halogenací alkoholu nebo derivátu alkoholu. Alkylchloridy se z alkoholů typicky připravují za použití činidel, jako je chlorovodík, thionylchlorid, chlorid fosforečný, oxychlorid fosforitý nebo trifenylfosfin/tetrachlormethan, v rozpouštědle inertním vůči reakci. Při přípravě alkylbromidů se alkohol obvykle nechá reagovat s činidlem, jako bromovodíkem, bromidem fosforitým, trifenylfosfinem/bromem nebo karbonyldiimidazolem/allylbromidem, v rozpouštědle inertním vůči reakci. Při přípravě • · • · · · ··· alkyljodidů se alkohol typicky nechá reagovat s činidlem, jako trifenylfosfinem/jodem/imidazolem nebo jodovodíkem, v rozpouštědle inertním vůči reakci. Alkylchloridy lze převést na reaktivnější alkylbromidy nebo alkyljodidy reakcí s anorganickou solí, jako bromidem sodným, bromidem lithným nebo jodidem draselným, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako acetonu nebo methylethylketonu. Alkylsulfonáty se také používají jako elektrofily nebo se převádějí na alkylhalogenidy. Sulfonáty se z alkoholu připravují za použití slabé báze, jako triethylaminu nebo pyridinu, a sulfonylchloridu v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako methylenchloridu nebo diethyletheru. Konverze na halogenid se provádí tak, že se alkylsulfonát nechá reagovat s anorganickým halogenidem (jodidem sodným, bromidem sodným, jodidem draselným, chloridem lithným, bromidem lithným atd.) nebo tetrabutylamoniumhalogenidem za přítomnosti rozpouštědla inertního vůči reakci.
Alkylhalogenidy obecného vzorce hal-CH2CH2 -X-Z-QP, kde Y představuje skupinu CH2 a Z představuje fenylskupinu, thienylskupinu nebo thiazolylskupinu, je také možno připravovat způsobem znázorněným ve schématu B1. Například se propargylalkohol nechá reagovat se sloučeninou vzorce 14 (viz schéma 1) obsahující vhodně chráněný isoster kyseliny (hal-Z-QP), kde skupina hal-Z představuje arylbromid, jodid nebo trifluormethansulfonát, za přítomnosti jodidu měďného; katalyzátoru obsahujícího palladium, jako chloridu palladnatého, chloridu bis(trifenylfosfin)palladnatého nebo tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0); a aminu, jako triethylaminu, diisopropylaminu nebo butylaminu, v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně v aprotickém rozpouštědle, jako acetonitrilu, při teplotě od asi 0 do asi 100°C. Další odkazy viz Tetrahedron, 40, 1433 (1984) a Org. Lett. 2, 12, 1729 (2000). Výsledné alkyny se poté převádějí za odpovídající alkany hydrogenací za • * přítomnosti katalyzátoru obsahujícího palladium nebo platinu, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako methanolu, ethanolu a/nebo ethylacetátu, při teplotě od asi 0 do asi 50°C. Alkoholická část molekuly se nahradí vhodnou odstupující skupinou, jako bromidem nebo jodidem. Při přípravě alkylbromidů se alkohol obvykle nechá reagovat s činidlem, jako bromovodíkem, bromidem fosforitým, trifenylfosfinem/bromem nebo karbonyldiimidazolem/allylbromidem. Přednost se dává použití karbonyldiimidazolu/allylbromidu. Alkyljodidy se typicky připravují tak, že se alkohol nechá reagovat s činidlem, jako trifenylfosfinem/jodem/imidazolem nebo jodovodíkem, v rozpouštědle inertním vůči reakci. Alkylchloridy se převádějí na reaktivnější alkylbromidy nebo alkyljodidy reakci s anorganickou solí, jako bromidem sodným, bromidem lithným, jodidem sodným nebo jodidem draselným, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako acetonu nebo methylethylketonu. Alkylsulfonáty je možno použít jako elektrofily nebo je možno je převést na alkylhalogenidy. Alkylsulfonáty se připravují z odpovídajícího alkoholu za použití slabé báze, jako triethylaminu nebo pyridinu a sulfonylchloridu v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako methylenchloridu nebo diethyletheru. Konverze na halogenid se provádí tak, že se alkylsulfonát nechá reagovat s anorganickým halogenidem, jako například jodidem sodným, bromidem sodným, jodidem draselným, bromidem draselným, chloridem lithným nebo bromidem lithným, v rozpouštědle inertním vůči reakci. Konverzi na halogenid je možno také provádět tak, že se alkylsulfonát nechá reagovat s organickým amoniumhalogenidem, jako tetrabutylamoniumhalogenidem, v rozpouštědle inertním vůči reakci. Alkylchloridy se typicky připravují z alkoholu za použití reakčních činidel, jako chlorovodíku, thionylchloridu, chloridu fosforečného, oxychloridu fosforitého nebo trifenylfosfinu/tetrachlormethanu.
• · • ♦* ·« ♦ · · • · · • · · · • · · ··· ·· · • · ··· ·
Schéma B 1
1) Cul, Pd(0), Et3N
+ hal^z/QP 14
2) hydrogenace
3) konverze na alkylhalogenid
V některých případech, jak je to znázorněno ve schématu B2, se přednostně nejprve provede alkylace propargylbromidem nebo jodidem a poté se dalším zpracováním zavede vhodně chráněný prekursor nebo isoster kyseliny. Například když je alkylačním činidlem propargylbromid nebo jodid, sloučenina vzorce 3 (viz schéma B2) se nechá reagovat se sloučeninou vzorce 14 (viz schéma B2) , která obsahuje vhodně chráněný prekursor nebo isoster kyseliny (Hal-Z-QP), kde skupina hal-Z představuje arylbromid, jodid nebo trifluormethansulfonát, za přítomnosti jodidu mědhého; katalyzátoru obsahujícího palladium, jako chloridu palladnatého, chloridu bis(trifenylfosfin)palladnatého nebo tetrakis(trifenylfosfin)palladia(O); a aminu, jako triethylaminu, diisopropylaminu nebo butylaminu, v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně v aprotickém rozpouštědle, jako acetonitrilu, při teplotě od asi 0 do asi 100°C. Další odkazy viz Tetrahedron, 40, 1433 (1984) a Org. Lett. 2, 12, 1729 (2000). Výsledné alkyny se poté převádějí na odpovídající alkany hydrogenací za přítomnosti katalyzátoru obsahujícího palladium nebo platinu, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako methanolu, ethanolu od asi 0 do asi 50°C.
a B 2 a/nebo ethylacetatu, pri teplote
S c h e m
·· 9 ♦ · · · • · ···· • · · ·· ·
Halogenarylestery a halogenarylnitrily vzorce 14 (viz schéma B2) se připravují způsoby, které jsou v tomto oboru známé. Například 2-brom-4-(ethoxykarbonyl)thiazol se připravuje způsobem popsaným v J. Org. Chem. 61, 14, 4623, (1996); a 2-brom-5-(ethoxykarbonyl)thiazol se připravuje podle způsobu popsaného v Helv. Chim. Acta, 25, 1073, (1942). Jiné halogenarylestery a halogenarylnitrily vzorce 14 ze schématu B2, které mohou být užitečné při způsobech podle tohoto vynálezu, jako jsou mj . ethyl-4-brombenzoát a 4-brombenzonitril, jsou dostupné na trhu. Ethyl-2-bromthiofen-5-karboxylát se připravují esterifikací 2-bromthiofenkarboxylové kyseliny, která je dostupná na trhu.
Poté se odstraní chránící skupiny alkoholu ve sloučeninách vzorce 2 ze schématu A nebo vzorce 4 ze schématu B2. Obecný popis deprotekce chráněných alkoholu viz Greene, T. W. ; Wuts, P. G. M. , Protéctive Groups in Organic Synthesis, 2. vydání; John Wiley and Sons lne.: New York, 1991. terc-Butyldimethylsilylskupina se ze sloučenin vzorce 2 a 4 ze schématu B2 odstraňuje přednostně tak, že se sloučenina nechá reagovat s tetrabutylamoniumfluoridem nebo trifluoroctovou kyselinou v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně vhodném protickém rozpouštědle, při teplotě od asi -30°C do teploty okolí. Pod pojmem teplota okolí se rozumí teplota bezprostředního nezměněného okolí reakční směsi. Teplota okolí je obvykle v rozmezí 20 až 25°C. Zvláště přednostním rozpouštědlem je methylenchlorid. Teplota přednostně leží v rozmezí od 0°C do teploty okolí. Jiným přednostním způsobem odstraňování skupiny TBS je reakce silyletheru s vodným roztokem minerální kyseliny v protickém rozpouštědle. V tomto případě se silylether přednostně nechá reagovat s 1M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové v methanolu při teplotě okolí. Po deprotekci se alkoholy oxidují na aldehydy za použití modifikované Pfitzner-Moffattovy oxidace [K. E. Pfitzner a Μ. E. Moffatt, J. Am. Chem.
• · ····
Soc., 87, 5661 (1965)], kterou se minimalizuje racemizace, jelikož nedochází ke kontaktu s vodou. Alkohol se na aldehyd například oxiduje tak, že se alkohol míchá v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně uhlovodíkovém rozpouštědle, jako toluenu, xylenu nebo, přednostně benzenu, s dimethylsulfoxidem, slabou kyselinou, jako kyselinou octovou nebo, přednostně, pyridiniumtrifluoracetátem, a diimidem, jako diethylkarbodiimidem nebo, přednostně, dimethylaminopropylethylkarbodiimidem, nebo v případě potřeby hydrochloridem dimethylaminopropylethylkarbodiimidu, při teplotě od asi 0°C přibližně do teploty okolí po dobu asi 1 hodiny až asi 4 hodin. Alternativní způsoby oxidace při minimalizaci racemizace asymetrického centra přiléhajícího k výslednému aldehydu jsou podrobně diskutovány v Tetrahedron Letters, 41, 1359, (2000) a zahrnují obvyklou Pfitzner-Moffattovu reakci, oxidaci komplexem oxid chromový-pyridin [J. Org. Chem., 35, 4000 (1970)], oxidaci Dess-Martinovým činidlem [J. Org. Chem. 48, 4155, (1983)] nebo oxidaci za použití TEMPO-bělidlo [Tetrahedron Letters 33, 5029, (1992)].
Výsledný aldehyd se přednostně bez přečištění podrobí Horner-Wittigově reakci se sodnou nebo lithnou solí fosfonátu vzorce 7 ze schématu C (R představuje nižší alkylskupinu, halogenalkylskupinu nebo arylskupinu. Sodné nebo lithné soli se připraví předem předběžnou reakcí fosfonátu s vhodnou bází, jako hydridem sodným nebo NaN(SiMe3)2 ve vhodném rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně aprotickém etherovém rozpouštědle, při teplotě od asi 0 do asi 50°C. Přednostním rozpouštědlem je tetrahydrofuran a přednostní teplotou teplota okolí. Roztok aldehydu se poté přidá k soli fosfonátu v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně aprotickém rozpouštědle, při teplotě od asi 0 do asi 50°C za vzniku enonu vzorce 8 ze schématu C. Rozpouštědlem je přednostně tetrahydrofuran. Přednostní teplotou je teplota okolí.
nebo 4
Schéma deprotekce
• · · · t · ···· c · * »· *
1) oxidace
2) báze,
Způsoby přípravy fosfonátů vzorce 7 ze schématu Cl je možno nalézt v US patentu č. 3 932 389, US patentu 4 177 346, Tetrahedron Lett., 30, 36, 4787-4790, (1989); a Angew.Chem., 108, 3, 366-369, (1996). Fosfonáty vzorce 7 se obecně, jak je znázorněno ve schématu Cl, připravují reakcí vhodně substituovaného esteru aryloctové kyseliny nebo methoxymethylamidu aryloctové kyseliny s činidlem obsahujícím lithium odvozeným od dialkylmethylfosfonátu. Tyto způsoby jsou také aplikovatelné na estery methoxymethylamidy cykloalkyloctových kyselin, jako ethylcyklohexylacetát a ethylcyklopentylacetát. Estery aryl- a cykloalkyloctových kyselin je možno připravovat esterifikací odpovídající octové kyseliny za použití způsobů, které jsou odborníkům v tomto oboru známy. Methoxymethylamidy se připravují standardní reakcí, při níž vzniká amidová vazba, odpovídající octové kyseliny s methoxymethylaminem. Přednostně se kopulace aminu s karboxylovou kyselinou provádí v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako dichlormethanu nebo dimethylformamidu, za použití kopulačního činidla, jako hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropyl-3-ethylkarbodiimidu (EDC) nebo 1,339 ·· · • · ·· • · * · • · ··«· ··· ·· • · • · · • ···« • ·
-dicyklohexylkarbodíimidu (DCC) za přítomnosti činidla aktivujícího kyselinu, jako hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu (HOBT), za vzniku methoxymethylamidu. Pokud je amin přítomen ve formě hydrochloridové solí, k reakční směsi se přednostně přidává jeden ekvivalent vhodné báze, jako triethylaminu. Alternativně se kopulace aminu s karboxylovou kyselinou provádí za přítomnosti kopulačního činidla, jako benzotriazol-l-yloxytris(dimethylamino)fosfoniumhexafluorfosfátu (BOP), v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako methanolu. Takové kopulační reakce se obvykle provádějí při teplotách od asi -3 0 do asi 80°C, přednostně od asi 0 do asi 25 °C. Jiné podmínky, kterých je možno použít pro amidové kopulace jsou diskutovány v publikaci HeubenWeyl, sv. XV, část 11, E. Wunsch, ed., George Theime Verlag, 1974, Stuttgart.
Schéma Cl
(T=O-alkyl,
N(OMe)Me)
Potřebné aryloctové kyseliny a estery vzorce 6 ze schématu Cl jsou dostupné na trhu nebo je možno je připravovat způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy. Jak je znázorněno ve schématu C2, řada aryl- a heteroaryl-substituovaných aryloctových kyselin se připravuje Suzukiho kopulací vhodných arylboronových kyselin nebo arylboronátových esterů s požadovanými arylhalogenidy (přehled Suzukiho kopulačních reakcí viz A. R. Martin a Y. Yang, Acta Chem. Scand. 1993, 47, 221 or J. Am. Chem. Soc. , 2000, 122, 17, 4020). Například 3-pinakolboronátový ester ethyl-3-brom-fenylacetátu se připra• ·
...............
vuje způsobem popsaným v Masuda et al. , J. Org. Chem. , 65,
164 (2000) . 3-Pinakolboronátový ester ethyl-3-bromfenylacetátu se poté kopuluje s požadovaným arylhalogenidem za vzniku požadované 3-arylfenyloctové kyseliny (viz Synlett., 6, 829 (2000)) . Hydroxysubstituované estery aryloctových kyselin se alkylují za použiti alkylhalogenidů a benzylových halogenidů způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy.
Schéma C2
Přehled způsobů přípravy diaryletherů je možno nalézt v publikaci Angew. Chem., Int. Ed., 38, 16, 2345, (1999). Aryloctové kyseliny substituované alkyletherovým seskupením je možno připravovat za použití Mitsunobuho podmínek (přehled viz Synthesis, 1, (1981)). Kopulace mezi fenolickou složkou a benzylovým alkoholem se typicky dosáhne přídavkem trifenylfosfinu a diethylazodikarboxylátu nebo diisopropylazodikarboxylátu v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako methylenchloridu nebo tetrahydrofuranu.
• ·
Alternativně se fosfonáty vzorce 7 ze schématu D připravuji způsobem znázorněným ve schématu D. Obvykle se triethylfosfit pomalu přidá k epibrom- nebo epichlor-hydrinu vzorce 10 při teplotě asi 135°C. Když se přidá triethylfosfit, teplota se sníží na asi 105°C. Reakční směs se přes noc zahřívá ke zpětnému toku a produkt, sloučenina vzorce 11, se izoluje vakuovou destilací (viz Phosphorus, Sulfur Silicon Relat. Elem., 165, 71 (1992) nebo U.S. patent č. 2 627 521). Potřebné Grignardovy roztoky se připravují z vhodných arylhalogenidů způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy, v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně etherovém rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu, a ochladí se na asi -30°C. Po přídavku epoxidu vzorce 11 [Phosphorus, Sulfur Silicon Relat. Elem., 105, 45 (1995)] se přidá katalytický jodid mědný. Potřebné arylhalogenidy (například 3-brombifenyl) jsou dostupné na trhu nebo se připravují způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy.
Výsledné alkoholy se poté oxidují, přednostně Swernovou oxidací [Synthesis, str. 165-185, (1981)] nebo Dess-Martinovým činidlem [J. Org. Chem. 48, 4155, (1983)]. Alternativně je možno oxidovat je Pfitzner-Moffattovou reakcí, za použití komplexu oxid chromový-pyridin [R. Ratcliffe, et al. , J. Org. Chem., 35, 4000 (1970)], TEMPO-bělidlo [Tet. Lett. 33, 5029, (1992)], Jonesovou oxidaxí, oxidem manganičitým, pyrinidiumchlorchromátem nebo pyridiniumdichromátem za vzniku ketofosfonátů vzorce 7 ze schématu D.
S c h e ,R
II o o
1)R-Mg-X, Cut
2) [O] • · · ·
Enon vzorce 8 ze schématu E (který je také možno připravit způsobem znázorněným ve schématu C) se redukuje na směs diastereomerních alkoholů vzorce 9 ze schématu E způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy. Obvykle se postupuje tak, že se dvojná vazba enonu nejprve redukuje katalytickou hydrogenací. V přednostním provedení se dvojná vazba redukuje hydrogenací za přítomnosti katalyzátoru obsahujícího vzácný kov, jako palladia na uhlíku nebo oxidu platiny, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako ethylacetátu, methanolu nebo ethanolu, při teplotě místnosti až přibližně teplotě zpětného toku použitého rozpouštědla za tlaku vodíku 0,1 až 0,4 MPa. Výsledný keton se poté nechá reagovat s redukčním činidlem, přednostně tetrahydroboritanem sodným, v protickém rozpouštědle, přednostně ethanolu nebo methanolu, za vzniku alkoholu vzorce 9 ze schématu E. Stejně snadno lze použít jiných známých selektivních redukčních činidel, která budou redukovat keton, ale nikoliv jiné skupiny, jako je například tetrahydroboritan zinečnatý nebo lithiumborhydrid. Teplota se volí na základě aktivity redukčního činidla a přednostně leží v rozmezí od asi 0°C do teploty okolí. V případě potřeby je směs alkoholů vzorce 9 možno rozdělit preparativní chromatografií nebo HPLC, čímž se získá požadovaný 15-(R) diastereomer.
Při alternativní sekvenci, která je znázorněna ve schématu E, se enon vzorce 8 ze schématu E nejprve nechá reagovat s hydridovým redukčním činidlem za přítomnosti chirálního katalyzátoru. Pod pojmem hydridové redukční činidlo se rozumí sloučeniny, které jsou schopny redukovat sloučeninu ve vyšším oxidačním stavu tak, že jí předají vodík. Jako přednostní hydridová redukční činidla je možno uvést katecholborany. Přednostním chirálním katalyzátorem pro enantioselektivní provádění takových reakcí je (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinové činidlo (Aldrich Chemical Co.) (viz způsob popsaný v Eur.
• · ♦ ·
J. Org. Chem., 2655 (1999)). Redukce se provádí v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně aprotickém rozpouštědle, jako methylenchloridu, při teplotě od asi -100°C do teploty okolí, přednostně při asi -40°C. Alternativní způsoby a katalyzátory, kterých lze využít při stereoselektivní redukci enonového karbonylu jsou popsány v J. Am. Chem. Soc., 117, 2675, (1995); J. Am. Chem. Soc., 101, 5843, (1979); Tett. Lett., 31, 611, (1990); US patentu č. 6 037 505; a Angew. Chem. Int. Ed., 37, 1986, (1998). Poté se redukuje dvojná vazba allylického alkoholu. V přednostním provedení se dvojná vazba redukuje hydrogenací za přítomnosti katalyzátoru obsahujícího vzácný kov, jako palladia na uhlíku nebo oxidu platiny, v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako ethylacetátu, methanolu nebo ethanolu, při teplotě okolí až teplotě zpětného toku použitého rozpouštědla za tlaku vodíku 0,1 až 0,4 MPa.
Schéma E
• ·
Alternativní způsob přípravy sloučenin vzorce 9 ze schématu F je znázorněn ve schématu F. Tetrahydropyrrolizin-3,5-dion (sloučenina vzorce 12 ze schématu F) se připraví způsobem popsaným v US patentu č. 4 663 464 nebo J. Med. Chem. 30; 3; 498-503; (1987). Sloučenina vzorce 12 ze schématu F se poté při vhodné teplotě rozpustí v rozpouštědle inertním vůči reakci, přednostně aprotickém rozpouštědle. V přednostním provedení se tato sloučenina rozpustí v methylenchloridu při asi 0°C. Vzniklá směs se smísí s vhodným Grignardovým činidlem (další odkazy na přídavek Grignardových činidel ke sloučenině vzorce 12 ze schématu F viz Synth. Commun. , 18, 1, 37-44, (1988); Helv. Chim. Acta, 70, 2003-2010, (1987)). Úplný průběh reakce lze usnadnit tak, že se reakční směs zahřeje na teplotu okolí. Vzniklý keton se poté nechá reagovat s redukčním činidlem, přednostně tetrahydroboritanem sodným, v protickém rozpouštědle, přednostně ethanolu nebo methanolu. Stejně snadno lze použít jiných známých selektivních redukčních činidel, která budou redukovat keton, ale nikoliv jiné skupiny, jako je například tetrahydroboritan zinečnatý nebo lithiumborhydrid. Teplota se volí na základě aktivity redukčního činidla a přednostně leží v rozmezí od asi 0°C do teploty okolí. Poté se vhodně chrání vzniklá hydroxyskupina. Je možno použít standardních chránících skupin alkoholu, jako je tetrahydropyranylskupina, trimethylsilylskupina, terc-butyldimethylsilylskupina nebo benzylskupina. Přednostně se používá terc-butyldimethylsilylskupiny, která se zavádí standardními způsoby, popsanými v publikaci Greene, T. W.; Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání; John Wiley and Sons lne.: New York, USA, 1991. Za přednostních podmínek se tato reakce provádí tak, že se alkohol nechá reagovat v dimethylformamidu při teplotě okolí s 0,1 ekv. 4-dimethylaminopyridinu, 1,1 ekv. terc-butyldimethylsilylchloridu a 2 ekv. imidazolu.
• ·
9 9 9 9
9999 ze schématu F se poté alkyalkylačních činidel vzorce
Výsledná sloučenina vzorce 13 luje na dusíku jedním z řady hal-CH2CH2-X-QP, čímž se zavede požadovaný postranní řetězec. Amidový dusík se nejprve deprotonuje vhodnou bází v rozpouštědle inertním vůči reakci. Jako přednostní báze lze uvést NaN(SiMe3)2) nebo hydrid sodný v rozpouštědle inertním vůči reakci, jako je DMF, tetrahydrofuran, dimethoxyethan nebo dioxan. Přednostně se používá N,N-dimethylformamidu. Vhodná teplota pro tvorbu aniontu leží v rozmezí od -78°C přibližně do teploty zpětného toku použitého rozpouštědla. Tato reakce se přednostně provádí při teplotě okolí. Po vytvoření aniontu se přidá alkylační činidlo vzorce hal-CH2CH2-X-Z-QP a výsledný roztok se míchá při teplotě v rozmezí od -20°C přibližně do teploty zpětného toku použitého rozpouštědla, přednostně v rozmezí od teploty okolí do 100°C. Jako typická alkylační činidla lze uvést primární halogenidy a primární sulfonáty. Přednostně se používá alkylbromidu nebo alkyljodidu. Chránící skupinu alkoholu je poté možno odstranit za použití způsobů, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy (viz Greene, T. W.; Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání.; John Wiley and Sons lne. : New York, USA, 1991) za vzniku sloučenin vzorce 9.
• · ·'
Schéma F
MeOH
NaHCO,
MeO
O
O
-Na
H2, Rh/AI
ΈξΝ
1) R2CH2MgX
2) NaBH4 *“
3) TBSCI
Sloučeniny vzorce 9 ze schématu F se převádějí na sloučeniny obecného vzorce I způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy. V případě, že skupina QP představuje ester karboxylové kyseliny, je možno použít podmínek kyselé nebo bázické vodné hydrolýzy. Nižší alkylestery se typicky hydrolyzují bázicky katalyzovanou hydrolýzou v rozpouštědle inertním vůči reakci při teplotě okolí až přibližně teplotě zpětného toku použitého rozpouštědla. V přednostním provedení se nižší alkylester hydrolyzuje vodným 1M hydroxidem sodným v methanolu při vhodné teplotě, přednostně při teplotě okolí. Když QP ···· ·
představuje benzylester nebo terc-butylester, je možno použít standardních metod deprotekce, jako způsobů popsaných v publikaci Greene, T. W.; Wuts, P. G. M., Protéct ive Groups in Organic Synthesis, 2. vydání; John Wiley and Sons lne.: New York, 1991. Když QP představuje nitril a nikoliv chráněnou karboxylovou kyselinu, tetrazol se přednostně připravuje tak, že se nitril nechá reagovat s dibutylcínoxidem a trimethylsilylziadem v refluxujícím toluenu (S. J. Wittenberger a B. G. Donner, J. Org. Chem. 1993, 58, 4139-4141, 1993). Přehled alternativních způsobů přípravy tetrazolů viz R. N. Butler, Tetrazoles, Comprehensive Heterocyclic Chemistry; Potts, K. T. Ed.; Pergamon Press: Oxford, 1984, sv. 5, str. 791-838.
Všechny selektivní agonisty receptoru EP4, kterých se používá při způsobech podle vynálezu, jsou uzpůsobeny pro terapeutické použití ve formě činidel, která stimulují tvorbu kosti a zvyšují kostní hmotu u obratlovců, například savců, a zejména lidí. Jelikož tvorba kosti úzce souvisí s rozvojem osteoporosy a kostních poruch, užitečnost agonistů, kterých se používá při způsobech podle vynálezu, spočívá v tom, že svým účinkem na kosti zabraňují osteoporose, zastavují a/nebo regretují osteoporosu.
Užitečnost selektivních agonistů EP4, kterých se používá při způsobech podle vynálezu jako léčiv pro léčení stavů, které se projevují nízkou kostní hmotou (například osteoporosy) u obratlovců, například savců (zvláště lidí, zejména u žen), je možno demonstrovat pomocí účinnosti agonistů při konvenčních zkouškách, jako je zkouška s vazbou k receptoru, zkouška s cyklickým AMP, in vivo stanovení a zkouška hojení zlomeniny (všechny tyto zkoušky jsou popsány dále). Takových zkoušek je také možno použít jako prostředků pro porovnání účinnosti selektivních agonistů EP4 mezi sebou a s účinností jiných známých sloučenin a kompozic. Výsledky • · těchto srovnávacích zkoušek jsou užitečné pro určení úrovně dávkování u obratlovců, například u savců, včetně člověka, při léčení takových chorob.
Zkouška in vivo
Účinnost činidel s anabolickým účinkem na kosti při stimulaci tvorby kosti a zvyšování kostní hmoty je možno zkoušet na intaktních samcích nebo samicích potkana nebo na samcích nebo samicích potkana s deficiencí pohlavních hormonů (po orchidektomii nebo ovariektomii).
Pro studii je možno použít samců nebo samic potkana o různém stáří (jako 3 měsíců). Buď intaktním nebo kastrovaným (ovariektomizovaným nebo orchidektomizovaným) potkanům se 30 dní subkutánními injekcemi nebo žaludeční sondou podávají agonisté prostaglandinu v různých dávkách (jako 1, 3 nebo 10 mg/kg/den). V případě kastrovaných potkanů se ošetřování zahájí následující den po chirurgickém výkonu (za účelem prevence ztráty kostní tkáně) nebo v době, kdy již ke ztrátě kostní tkáně došlo (za účelem jejího znovuobnovení). Všem zvířatům se během zkoušky ponechá volný přístup k vodě a peletizované potravě dostupné na trhu (Teklad Rodent Diet #8064, Harlan Teklad, Madison, WI, USA) obsahující 1,46 % vápníku, 0,99 % fosforu a 4,96 IU/g vitaminu D3. 12 dnů a 2 dny před usmrcením se všem potkanům subkutánními injekcemi podá 10 mg/kg kalceinu. Potkani se usmrtí a provedou se následující měření:
Stanovení minerálů ve femuru
Při pitvě se každému potkanu vyjme pravý femur a podrobí skanování za použití zařízení pro rentgenovou absorpciometrii při dvou energetických úrovních (duální fotonová rentgenová ···· technika, DXA, QDR 1000/W, Hologic lne., Waltham, MA, USA) vybaveného softwarem Regional High Resolution Scan (Hologic lne., Waltham, MA, USA), přičemž velikost snímaného pole je 5,08 x 1,902 cm, rozlišení 0,0254 x 0,0127 cm a rychlost snímání 7,25 mm/s. Analyzují se skanové obrazce femuru a stanoví se kostní plocha, minerální obsah kosti (BMC) a minerální hustota kosti (BMD) celého femuru (WF), distální femorální metafýzy (DFM), dříku femuru (FS) a proximálního femuru (PF).
Histomorfometrická analýza tibie
Při pitvě se vyjme pravá holenní kost, svaly se odpreparují a kost se nařeže na tři části. Proximální tibie a dřík tibie se fixují v 70% ethanolu, dehydrují ethanolem o odstupňované koncentraci, v acetonu zbaví tuku a poté uloží do methylmethakrylátu (Eastman Organic Chemicals, Rochester, NY, USA) .
Přední části proximální metafýzy tibie se za použití zařízení pro mikrotomy Reichert-Jung Polycut S nařežou na na tloušťku 4 a 10 μτη. Řezy o tloušťce 4 μτη se obarví modifikovaným Massonovým barvivém Tri chromé, zatímco 10/zm řezy se ponechají neobarvené. Pro histomorfometrii spongiosní kosti se použije jednoho 4/zm a jednoho ΙΟμιη řezu od každého potkana.
Za použití mikrotomu Reichert-Jung Polycut S se připraví příčné řezy dříku tibie o tloušťce 10 μττι. Těchto řezů se použije pro histomorfometrickou analýzu kortikální kosti.
Histomorfometrie spongiosní kosti
Pro statická a dynamická histomorfometrická měření sekundární spongiosy proximální metafýzy tibie mezi 1,2 a 3,6 • · • * ···· ·· · ·· · • · · · · · · • · · · · · · » · t · · · · ···· • · 9 · · · ·· ··· ·· · mm distálně k junkci růstové chrupavky a epifýzy se použije histomorfometrického systému Bioquant OS/2 (R&M Biometrics, lne., Nashville, TN, USA). Prvních 1,2 mm metafýzové oblasti tibie je třeba vynechat, aby se měření omezilo na sekundární spongiosu. Pro stanovení ukazatelů objemu kosti, struktury kosti a resorpce kosti se použije 4/zm řezů, zatímco pro stanovení ukazatelů tvorby kostní tkáně a obratu kosti se použije ΙΟμτη řezů.
I. Měření a výpočty objemu a struktury trámčiny kosti:
1. Celková plocha metafýzy (TV, mm2); plocha metafýzy mezi
I, 2 a 3,6 mm distálně k junkci růstové chrupavky a epifýzy.
2. Plocha trámčité kosti (BV, mm2): celková plocha trámčiny v TV.
3. Obvod trámčité kosti (BS, mm): délka celkového obvodu trámčité kosti.
4. Objem trámčité kosti (BV/TV, %) : BV/TV x 100.
5. Trabekulární kostní číslo (TBN, #/mm): 1,199/2xBS/TV.
6. Tloušťka trámčité kosti (TBT, μτη) : (2000/1,199) x x (BV/BS).
7. Trabekulární kostní separace (TBS, Mm): (2000x1,199) x x (TV-BV).
II. Měření a výpočty týkající se resorpce kosti
1. Počet osteoklastů (OCN, #) : celkový počet osteoklastů v celé oblasti metafýzy.
·« * ·· * • · ·· · » · • · · ♦ · · · • t · · · · ···· • · · · ♦ · ·· ·*· ·· ·
2. Obvod osteoklastů (OOP, mm): délka obvodu trámčiny pokryté osteoklasty.
3. Počet osteoklastů na milimetr (OCN/mm, #/mm): OCN/BS.
4. Procenta obvodu osteoklastů (%OCP, %): OCP/BSxlOO.
III. Měření a výpočty týkající se tvorby kostní tkáně a obratu kosti
1. Obvod jednou značený kalceinem (SLS, mm): celková délka obvodu trámčité kosti s jednou kalceinovou značkou.
2. Obvod dvakrát značený kalceinem (DLS, mm): celková délka obvodu trámčité kosti se dvěma kalceinovými značkami.
3. Vzdálenost mezi značkami (ILW, /zrn): průměrná vzdálenost mezi dvěma kalceinovými značkami.
4. Procento mineralizovaného obvodu (PMS, %) : (SLS/2 + + DLS)/BSxlOO.
5. Rychlost minerální apozice (MAR, /zm/den) : ILW/značkový interval.
6. Rychlost tvorby kosti/povrch ref. (BFR/BS, /zm2/den//zm) : (SLS/2+DLS)xMAR/BS.
7. Rychlost obratu kosti (BTR, %/rok): (SLS/2+DLS) x x MAR/BV x 100.
Histomorfometrie kortikální kosti
Pro statická a dynamická histomorfometrická měřeni kortikální tkáně dříku tibie se použije histomorfometrického systému Bioquant OS/2 (R&M Biometrics, lne., Nashville, TN, USA). Vypočítá se celková plocha tkáně, plocha medulární dutiny, obvod periostu, obvod endokortexu, jednou značený obvod, dvakrát značený obvod a vzdálenost mezi značkami jak na povrchu okostice, tak na endokortexu a dále plocha kortexu kosti (celková plocha tkáně - plocha medulární dutiny), procentický podíl plochy kortexu kosti (plocha kortexu/celková plocha tkáně x 100) , procentický podíl medulární dutiny (plocha medulární dutiny/celková plocha tkáně x 100) , procentický značený obvod periostu a endokortexu [(jednou značený obvod/2 + dvakrát značený obvod)/celkový obvod x 100], rychlost minerální apozice (vzdálenost mezi značkami/intervaly) a rychlost tvorby kosti [rychlost minerální apozice x x [(jednou značený obvod/2 + dvakrát značený obvod)/celkový obvod].
Statistické metody
Statistické údaje se vypočtou za použití balíčku StatView 4,0 (Abacus Concepts, lne., Berkeley, CA, USA). Pro porovnání rozdílů mezi skupinami se použije analýzy variance (ANOVA) a poté Fisherovy PLSD (Stát View, Abacus Concepts lne., 1918
Bonita Ave Berkeley, CA, 94704-1014).
Kódující sekvence pro receptor EP1 o plné délce se připraví způsobem popsaným ve Funk et al., Journal of Biological Chemistry, 1993, 268, 26767 až 26772. Kódující sekvence pro receptor EP2 o plné délce se připraví způsobem popsaným v Regan et al. , Molecular Pharmacology, 1994, 46, 213 až 220. Kódující sekvence pro receptor EP3 o plné délce se připraví způsobem popsaným v Regan et al. , British Journal of Pharmacology, 1994, 112, 377 až 385. Kódující sekvence pro ·· · ·· * ·» · • · ·· · · ·· ··· • · · * · · · « · * · · ·· · · · « ···· ···· ··· ·· o·· *·»* · receptor EP4 o plné délce se připraví způsobem popsaným v Bastien, Journal of Biological Chemistry, 1994, 269, 11873 až
11877. Těchto receptorů o plné délce se použije pro přípravu buněk 293S, které exprimují receptory EP1, EP2, EP3 a EP4.
Buňky 293S, které exprimují receptor lidského prostaglandinu E2 EP1, EP2, EP3 nebo EP4 se připraví postupy dobře známými odborníkům v tomto oboru. Obvykle se postupy dobře známými odborníkům v tomto oboru připraví PCR primery odpovídající 5’a 3’ koncům publikovaného receptorů o plné délce a použije se jich při RT-PCR reakci za použití celé RNA z lidských ledvin (pro EP1), lidských plic (EP2), lidských plic (EP3) nebo lidských lymfocytů (EP4), jako zdroje. PCR produkty se klonuj í postupem s TA přesahem do pCR2,1 (Invitrogen, Carlsbad, CA) a totožnost klonovaného receptorů se potvrdí sekvencováním DNA.
Do buněk 293S (Mayo, Dept. of Biochemistry, Northwestern Univ.) se elektroporací trasfekuje klonovaný receptor v pcDNA3. Po selekci transfekovaných buněk pomocí G418 se získají stabilní buněčné linie exprimující receptor.
Po vazebné zkoušce za použití 3H-PGE2, při níž je kompetitorem neznačený PGE2, se zvolí klonované buněčné linie exprimující maximální počet receptorů.
Zkouška účinnosti na hojení zlomenin
Zkouška účinnosti na hojení zlomenin po systemickém podávání
Vyvolání zlomeniny
Potkani Sprague-Dawley o stáří 3 měsíců se anestetizují ketaminem. Proximální částí pravé tibie nebo femuru se vede • · · « lem anteromediální řez. Následující popis se týká chirurgického postupu na tibii. Provede se řez ke kosti a 4 mm proximálně k distální poloze tibiální drsnatiny a 2 mm od středové čáry k přednímu válu se vyvrtá lmm otvor. Nitrodřeňové hřebování se provede za použití 0,8mm trubičky z nerezové oceli (maximální zátěž 36,3 N, maximální tuhost 61,8 N/mm, při zkoušce za stejných podmínek jako kosti). Neprovádí se žádné rozšiřování medulárního kanálu. 2 mm nad tibiofibulární junkcí se způsobí standardizovaná uzavřená zlomenina tříbodovým ohnutím za použití speciálně zkonstruovaných nastavitelných kleští s tupými čelistmi. Za účelem minimalizace poškození měkkých tkání, se pracuje opatrně, aby nedošlo k dislokaci zlomeniny. Kůže se uzavře šitím nylonovým monofilamentem. Operace se provádí za sterilních podmínek. Bezprostředně po hřebování se fraktury zrentgenují. Zvířata se zlomeninami mimo danou oblast diafýzy nebo s dislokovanými hřeby se vyloučí. Za účelem zkoušení hojení zlomenin se zbývající zvířata náhodně rozdělí do dále popsaných skupin, přičemž každá podskupina má 10 až 12 zvířat. První skupině se denně žaludeční sondou podává vehikulum (směs vody a 100% ethanolu v poměru 95 : 5, 1 ml/potkan) , zatímco zbývajícím se denně žaludeční sondou podává zkoušená sloučenina v denní dávce 0,01 až 100 mg/kg (1 ml/potkan), po dobu 10, 20, 40 a 80 dní.
10., 20., 40. a 80. den se 10 až 12 potkanů z každé skupiny anestetizuje ketaminem a usmrtí exsangvinací. Obě tibiofibulární kosti se vyříznou a zbaví všech měkkých tkání. Kosti 5 až 6 potkanů z každé skupiny se pro účely histologické analýzy uchovávají v 70% ethanolu a kosti dalších 5 až 6 potkanů z každé skupiny se pro účely radiografie a biomechanického zkoušení uchovávají v pufrovaném Ringerově roztoku (+4°C, pH 7,4).
• · ·· t • · «*» • * i? · ···· · ·· • · o ·· «€· »· ·
Histologická analýza
Způsoby histologické analýzy zlomenin kostí byly publikovány v Mosekilde a Bak (The Effects of Growth Hormone on Fracture Healing in Rats: A Histological Description. Bone, 14: 19 až 27, 1993). Tyto postupy lze stručně popsat takto: Zlomená kost se odřízne ve vzdálenosti 8 mm na obě strany od linie lomu a nedekalcifikovaná uloží do methylmetakrylátu. Za použití mikrotomu Reichert-Jung Polycut se připraví čelní řezy o tloušťce 8 /zrn. Pro vízualizaci buněčné a tkáňové odpovědi na hojení zlomeniny s ošetřením a bez ošetření se použije středních čelních řezů (jak kosti holenní, tak kosti lýtkové) barvených Masson-Trichrome. Řezů barvených červení Sirius se použije pro demonstraci strukturálních charakteristik svalku a pro rozlišení mezi vláknitou kostí a lamelární kostí v místě fraktury. Provedou se následující měření: (1) rozestup zlomeniny - měří se jako nejkratší vzdálenost mezi konci kortikální kosti ve zlomenině, (2) délka svalku a průměr svalku, (3) celkový objem oblasti svalku v kosti, (4) kostní tkáň na oblast tkáně uvnitř oblasti svalku, (5) vláknitá tkáň ve svalku, (6) chrupavčitá oblast ve svalku.
Biomechanická analýza
Biomechanické analytické postupy jsou popsány v Bak a Andreassen (The Effects of Aging on Fracture Healing in Rats. Calcif. Tissue Int. 45: 292 až 297, 1989). Tento postup je stručně možno popsat takto: Před biomechanickou zkouškou se pořídí radiografické snímky všech zlomenin. Mechanické vlastnosti hojících se fraktur se analyzují destruktivním postupem ohýbání ve třech nebo čtyřech bodech. Stanoví se maximální zátěž, tuhost, energie při maximální zátěži, ohyb při maximální zátěži a maximální napětí.
• · · · « • · · • · · · • · · • · « o • · · ·· · · · ♦ · · • · · • * « · • · ··· · • · » «· «
Zkouška účinnosti na hojení zlomenin po místním podávání
Vyvolání zlomeniny
Pro zkoušku se použije anestetizovaných samic nebo samců psa beagle o stáří asi 2 roky. Příčná zlomenina vřetenní kosti se vyvolá pomalým zvyšujícím se zatěžováním při tříbodovém ohýbání, jak je to popsáno v Lenehan et al. (Lenehan, T. M. , Balligand, M. , Nunamaker, D. M., Wood, F. E., Effects of EHDP on Fracture Healing in Dogs, J. Orthop. Res. 3, 499 až 507,
1985). Zlomenina se protáhne drátem, aby se zajistilo úplné anatomické přerušení kosti. Následná místní dodávka agonistů prostaglandinu na místo fraktury se provádí pomalým uvolňováním sloučeniny z pelet s pomalým uvolňováním nebo se sloučeniny podávají ve vhodné formulaci, jako jsou roztoky nebo suspenze gelových past po dobu 10, 15 nebo 20 týdnů.
Histologická analýza
Způsoby histologické publikovány v Peter et al Nunamaker, D. M., Provost, Μ. T.
analýzy zlomenin kostí byly (Peter, C. P., Cook, W. O., Seedor, J. G., Rodan, G. A.,
Effects of alendronate on fracture healing and bone remodeling in dogs, J. Orthop. Res. 14, 74 až 70, 1996) a Mosekilde a Bak (The Effects of Growth Hormone on Fracture Healing in Rats: A Histological Description. Bone, 14: 19 až 27, 1993) . Tyto postupy lze stručně popsat takto: Zlomená kost se odřízne ve vzdálenosti 3 cm na obě strany od linie lomu a nedekalcifikovaná uloží do methylmetakrylátu. Za použití mikrotomu Reichert-Jung Polycut se připraví čelní řezy o tloušťce 8 μτη. Pro vizualizaci buněčné a tkáňové odpovědi na hojení zlomeniny s ošetřením a bez ošetření se použije středních čelních řezů (jak kosti holenní, tak kosti lýtkové) barvených Masson-Trichromé. Řezů barvených červení Sirius se * · ♦ ·· « ··· * · · · · · · a · · · • * » » · « · · · * ·> · · « · ·· » 4 · · « „„ · * · · · · · · **· ·· ··· ·· · použije pro demonstraci strukturálních charakteristik svalku a pro rozlišení mezi vláknitou kostí a lamelární kostí v místě fraktury. Provedou se následující měření: (1) rozestup zlomeniny - měří se jako nejkratší vzdálenost mezi konci kortikální kosti ve zlomenině, (2) délka svalku a průměr svalku, (3) celkový objem oblasti svalku v kosti, (4) kostní tkáň na oblast tkáně uvnitř oblasti svalku, (5) vláknitá tkáň ve svalku, (6) chrupavčitá oblast ve svalku.
Biomechanická analýza
Biomechanické analytické postupy jsou popsány v Bak a Andreassen (The Effects of Aging on Fracture Healing in Rats. Calcif. Tissue Int. 45: 292 až 297, 1989) a Peter et al. (Peter, C. P., Cook, W. 0., Nunamaker, D. M., Provost, Μ. T., Seedor, J. G., Rodan, G. A., Effects of alendronate on fracture healing and bone remodeling in dogs, J. Orthop. Res. 14, 74 až 70, 1996) . Tento postup je stručně možno popsat takto: Před biomechanickou zkouškou se pořídí radiografické snímky všech zlomenin. Mechanické vlastnosti hojících se fraktur se analyzují destruktivním postupem ohýbání ve třech nebo čtyřech bodech. Stanoví se maximální zátěž, tuhost, energie při maximální zátěži, ohyb při maximální zátěži a maximální napětí.
Použití agonistů receptoru prostaglandinu při regeneraci ledvin
Úloha agonistů prostaglandinu při regeneraci ledvin se zkoumá pomocí schopnosti PGE2 nebo agonisty prostaglandinu indukovat expresi kostního morfogenetického proteinu 7 (BMP-7) v buňkách divokého typu 293S a buňkách 293S transfekovaných receptorem EP2.
• · • ·
Postupy:
Buňky 293S a EP2 293S se pěstují v Dulbeccem modifikovaném Eaglově médiu (DMEM, Gibco, BRL, Gaithersburg, MD, USA) . Jeden den před ošetřením PGE2 nebo agonistou prostaglandinu se buňky navzorkují při hustotě 1,5 x 106 buněk/lOcm miska. Následující den se buněčné monovrstvy omyjí jednou OptiMEM (Gibco, BRL) a do každé misky se poté přidá 10 ml OptiMEM za přítomnosti nebo za nepřítomnosti vehikula (DMSO), PGE2 (10_6M) nebo agonisty prostaglandinu (10_6M) . Buňky se sklidí a v dobu 8, 16 a 24 hodin se extrahuje RNA. Celková analýza severním přenosem (20 mg/proužek) se provádí zkoušením blotů 22P-značeným BMP-7, jako sondou. Bloty se normalizují pro vnášení RNA hybridizací s 22P-značenou 18s ribosomální RNA sondou. Bylo zjištěno, že jak PGE2, tak i agonista prostaglandinu v přímo úměrně k času indukují expresi BMP-7 v buňkách EP2293S, nikoliv však v rodičovské buněčné linii. S ohledem na to, že role BMP-7 při regeneraci ledvin a schopnost agonisty prostaglandinu indukovat expresi BMP-7 v buňkách ledvin 293S specificky vzhledem k času a receptoru je známa, zdá se, že agonista prostaglandinu se podílí na regeneraci ledvin.
Odborníku v tomto oboru bude zřejmé, že spolu se sloučeninami podle vynálezu je možno používat antiresorpční činidla (například progestiny, polyfosfonáty, bisfosfonát(y), agonisty/antagonisty estrogenu, kombinace estrogenu a progestinu, Premarin®, estron, estriol nebo 17a- nebo 17/?-ethinylestradiol).
Jako příklady progestinů dostupných na trhu je možno uvést algestonacetofenid, altrenogest, amadinon acetát, anageston acetát, chlormadinon acetát, cingestol, klogeston acetát, klomegeston acetát, delmadinon acetát, desogestrel, • ·
dimethisteron, dydrogesteron, ethyneron, ethynodiol diacetát, etonogestrel, flurogeston acetát, gestaklon, gestoden, gestonoron kaproát, gestrinon, haloprogesteron, hydroxyprogesteron kaproát, levonorgestrel, lynestrenol, medrogeston, medroxyprogesteron acetát, melengestrol acetát, methynodiol diacetát, norethindron, norethindron acetát, norethynodrel, norgestimat, norgestomet, norgestrel, oxogestonfen propionát, progesteron, chingestanol acetát, chingestron a tigestol.
Jako přednostní progestiny je možno uvést medroxyprogestron, norethindron a norethynodrel
Jako příklady polyfosfonátů inhibujících resorpci kosti je možno uvést polyfosfonáty typu sloučenin popsaných v US patentu č. 3 683 080, který je zde citován náhradou přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu. Přednostními polyfosfonáty jsou geminální difosfonáty (jako označované jako bisfosfonáty) . Přednostním polyfosfonátem je dvoj sodná sůl tiludronátu. Dále je přednostním polyfosfonátem ibandronová kyselina a zvláštní přednost se jako polyfosfonátu také dává alendronátu a zoledronové kyselině. Jako další přednostní polyfosfonáty lze uvést 6-amino-l-hydroxyhexyliden-bisfosfonovou kyselinu a l-hydroxy-3-(methylpentylamino)propylidenbisfosfonovou kyselinu. Polyfosfonáty je možno podávat ve formě kyseliny nebo ve formě rozpustné soli alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin. Dále je také možno uvést hydrolyzovatelné estery polyfosfonátů. Jako konkrétní příklady lze uvést ethan-1-hydroxy-l,1-difosfonovou kyselinu, methandifosfonovou kyselinu, pentan-1-hydroxy-l,1-difosfonovou kyselinu, methandichlordifosfonovou kyselinu, methanhydroxydifosfonovou kyselinu, ethan-l-amino-1,1-difosfonovou kyselinu, ethan-2-amino-l,1-difosfonovou kyselinu, propan-3-amino-1-hydroxy-1,1-difosfonovou kyselinu, propan-N,N-dimethyl-3-amino-1-hydroxy-l,1-difosfonovou kyselinu, propan-3,3-di60 • · · t fc· · · methyl-3-amino-l-hydroxy-l,1-difosfonovou kyselinu, fenylaminomethandifosfonovou kyselinu, N,N-dimethylaminomethandifosfonovou kyselinu, N-(2-hydroxyethyl)aminomethandifosfonovou kyselinu, butan-4-amino-l-hydroxy-l,1-difosfonovou kyselinu, pentan-5-amino-l-hydroxy-l,1-difosfonovou kyselinu, hexan-6-amino-l-hydroxy-1,1-difosfonovou kyselinu a jejich farmaceuticky vhodné estery a soli.
Sloučeniny podle vynálezu je zejména možno kombinovat s agonisty/antagonisty savčího estrogenu. Jako druhé sloučeniny kteréhokoliv agonista/antavynálezu podle je možno použit agonisty/antagonisty estrogenu. Pod pojmem gonista estrogenu se rozumí sloučeniny, které jsou schopné se vázat k receptoru estrogenu, inhibovat obrat v kostech (turnover) a zabraňovat ztrátě kostní tkáně. Pod pojmem agonista estrogenu se rozumí sloučenina, která je schopna se vázat k receptorovým místům estrogenu v savčí tkáni a napodobovat účinky estrogenu v jedné nebo více tkáních. Pod pojmem antagonisté estrogenu se rozumí chemické sloučeniny, které jsou schopné se v savčí tkáni vázat na receptorová místa estrogenu a blokují účinky estrogenu v jedné nebo více tkáních. Takové účinky odborník v tomto oboru snadno stanoví za použití standardních zkušebních postupů, jako jsou zkoušky vazby k receptoru estrogenu a standardních histomorfometrických a densitometrických metod (viz Eriksen E. F. et al., Bone Histomorphometry, Raven Press, New York, 1994, str. 1 až 74; Grier S. J. et al., The Use of Dual-Energy X-Ray Absorptiometry In Animals, Inv. Radiol., 1996, 31(1): 50 až
62; Wahner H. W. a Fogelman I., The Evaluation of Osteoporosis: Duál Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical
Practice, Martin Dunitz Ltd., London, 1994, str Dále jsou popsány různé takové sloučeniny s odkazy.
až 296). příslušnými • ·
Přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je droloxifen ((E)-3-[1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]fenyl]-2-fenyl-lbutenyl]fenol) a příbuzné sloučeniny, které jsou popsány v US patentu 5 047 431 (tento patent je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je 3(4-(1,2-difenylbut-l-enyl)fenyl)akrylová kyselina, která je popsána ve Willson et al. , Endocrinology, 1997, 138, 39013911.
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je tamoxifen (2-hydroxy-l,2,3-propantrikarboxylát (Z)-2-[4-(l,2-difenyl-l-butenyl)fenoxy]-N,N-dimethyl]ethanaminu (1:1)) a příbuzné sloučeniny, které jsou popsány v US patentu 4 536 516 .
Další příbuznou sloučeninou je 4-hydroxytamoxifen, který je popsán v US patentu č. 4 623 660. (Oba tyto patenty jsou zde citovány náhradou za přenesení jejich celého obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je raloxifen (hydrochlorid [6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)benzo[b]thien-3-yl]-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenyl]methanonu a příbuzné sloučeniny, které jsou popsány v US patentu 4 418 06 8 (tento patent je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je toremifen (2-hydroxy-l,2,3-propantrikarboxylát (Z)-2-[4-(4-chlor-1,2-difenyl-l-butenyl)fenoxy] -Ν,Ν-dimethylethanaminu (1 : 1) ) a příbuzné sloučeniny, které jsou popsány v US patentu • · · ·* 4 • · • · * ·4
996 225 (tento patent je zde citován náhradou za přeneseni celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je centchroman (1-[2-[[4-(3,4-dihydro-7-methoxy-2,2-dimethyl-3-fenyl-2H-l-benzopyran-4-yl)fenoxy]ethyl] pyrrolidin) a příbuzné sloučeniny, které jsou popsány v US patentu 3 822 287 (tento patent je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je idoxifen (1-[4-[ [1-(4-jodfenyl)-2-fenyl-l-butenyl]fenoxy]ethyl]pyrrolidin) a příbuzné sloučeniny, které jsou popsány v US patentu 4 83 9 155 (tento patent je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je 2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen-6-ol, který je popsán v US patentu 5 488 058 (tento patent je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je 6-(4-hydroxyfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)benzyl]naftalen-2-ol, který je popsán v US patentu č. 5 484 795 (tento patent je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu).
Dalším přednostním agonistou/antagonistou estrogenu je 4- [2- (2-azabicyklo[2,2,1]hept-2-yl)ethoxy]fenyl}-[6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)benzo[b]thiofen-3-yl]methanon, který je spolu se způsoby výroby popsán v PCT publikaci č. WO 95/10513. Tato přihláška byla převedena na firmu Pfizer lne.
· · · «
Jako příklady dalších přednostních agonistů/antagonistů estrogenu je možno uvést sloučeniny popsané v US patentu č. 5 552 412, který je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu). Z těchto sloučenin se zvláštní přednost dává cis-6-(4-fluorfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-olu;
(-)-cis-6-fenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-olu;
cis-6-fenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-olu;
cís-1-[61-pyrrolodinoethoxy-31-pyridyl]-2-fenyl-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaftalenu;
1-(4'-pyrrolidinoethoxyfenyl)-2-(4-fluorfenyl)-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu;
cis-6-(4-hydroxyfenyl)-5-[4-(2-piperidin-l-ylethoxy)fenyl]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-olu a
1-(4'-pyrrolidinoethoxyfenyl)-2-fenyl-6-hydroxy-l,2,3,4-tetrahydroisochinolinu.
Další agonisty/antagonisty estrogenu jsou popsány v US patentu č. 4 133 814, který je zde citován náhradou za přenesení celého jeho popisu do tohoto textu. V US patentu č. 4 133 814 jsou popsány deriváty 2-fenyl-3-aroylbenzothiofenu a 2 -fenyl-3-aroylbenzothiofen-1-oxidu.
* · · • * · · · 99 • · • * 9
9999
9
Odborníku v tomto oboru bude zřejmé, že spolu se sloučeninami podle tohoto vynálezu je možno používat další kostní anabolická činidla (činidla zvyšující kostní hmotu).
Činidlem zvyšujícím kostní hmotu je sloučenina, která zvyšuje kostní hmotu na úroveň, která je nad práhem kostní fraktury (což je podrobně popsáno v World Health Organization Study World Health Organization, Assessment of Fracture Risk and its Application to Screening for Postmenopausal Osteoporosis (1994) . Report of a WHO Study Group. World Health Organization Technical Series 843).
Jako druhou sloučeninu podle vynálezu je možno použít jakéhokoliv prostaglandinu nebo agonisty/antagonisty prostaglandinu například je možno použít dvou různých sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu. Odborníkům v tomto oboru bude zřejmé, že je rovněž možno použít IGF-1, fluoridu sodného, parathyroidního hormonu (PTH), aktivních fragmentů parathyroidního hormonu, růstového hormonu nebo sekretagogů růstového hormonu. V následujících odstavcích jsou podrobněji popsány příklady druhé sloučeniny.
Jako druhé sloučeniny podle vynálezu je možno použít jakéhokoliv prostaglandinu. Pod pojmem prostaglandin se rozumí sloučeniny, které jsou analogy přírodních prostaglandinů PGDlř PGD2, PGE2, PGEi a PGF2, které jsou užitečné při léčbě osteoporosy. Tyto sloučeniny se vážou k receptorům prostaglandinu. Tuto vazbu může odborník v tomto oboru snadno stanovit za použití standardních zkušebních postupů (například An S. et al., Cloning and Expression of the EP2 Subtype of Human Receptors for Prostaglandin E2,
Biochemical and Biophysical Research Communications, 1993, 197(1) : 263 až 270) .
· « · *· • ♦ » • ♦ · * · · * • * »»>· • · · • > ·
Prostaglandiny jsou alicyklické sloučeniny odvozené od základní sloučeniny, kyseliny prostanové. Atomy uhlíku základního prostaglandinu se počítají od karboxylového uhlíku přes cyklopentylový kruh k terminálnímu uhlíku na sousedním postranním řetězci. Normálně mají sousední vedlejší řetězce orientaci trans. Přítomnost oxoskupiny na uhlíku C9 cyklopentylového zbytku je charakteristická pro prostaglandiny z třídy E, zatímco PGE2 obsahuje trans nenasycenou dvojnou vazbu mezi uhlíky v polohách C13-C14 a cis dvojnou vazbu mezi uhlíky v polohách Cg-Cg.
V následujícím textu jsou popsány různé prostaglandiny s příslušnými odkazy. Odborníkům v tomto oboru však budou známy ještě další prostaglandiny. Příklady prostaglandinů jsou uvedeny v US patentech 4 171 331 a 3 927 197 (které jsou zde citovány náhradou za přenesení celého jejich textu do tohoto popisu).
Norrdin et al. , The Role of Prostaglandins in Bone In Vivo, Prostaglandins Leukotriene Essential Fatty Acids 41, 139 až 150, 1990 podávají přehled o prostaglandinech s anabolickým účinkem na kosti.
Jako druhé sloučeniny podle vynálezu je možno použít jakéhokoliv agonisty/antagonisty prostaglandinu. Pod pojmem agonista/antagonista prostaglandinu se rozumějí sloučeniny, které se vážou k receptorům prostaglandinu (například například An S. et al. , Cloning and Expression of the EP2 Subtype of Human Receptors for Prostaglandin E2, Biochemical and Biophysical Research Communications, 1993, 197(1): 263 až 270) a napodobují účinek prostaglandinu in vivo (například stimulují tvorbu kosti a zvyšují hmotu kostí). Takové účinky odborník v tomto oboru snadno stanoví za použití standardních *· · «· · ·· » * ♦ ·· · λ «« · r »
9 · » · * ♦ * * • V * » · 9 · ♦ «···· • · ··· « * · **·· ·♦· ·· ··· ** zkušebních postupů, (Eriksen E. F. et al. , Bone Histomorphometry, Raven Press, New York, 1994, str. 1 až 74; Grier S. J. et al. , The Use of Duál-Energy X-Ray Absorptiometry In Animals, Inv. Radiol., 1996, 31(1): 50 až 62; Wahner H. W. a Fogelman I., The Evaluation of Osteoporosis: Duál Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical Practice, Martin Dunitz Ltd., London, 1994, str. 1 až 296). Dále jsou uvedeny různé takové sloučeniny. Odborníkům v tomto oboru je však zřejmé, že existují i další agonisty/antagonisty prostaglandinu. Jako příklady konkrétních agonistů/antagonistů prostaglandinu lze například uvést následující sloučeniny.
V US patentu č. 3 932 389 jsou popsány 2-deskarboxy-2(tetrazol-5-yl)-ll-desoxy-15-substituované-omega-pentanoprostaglandiny, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
V US patentu č. 4 018 892 jsou popsány p-bifenylestery 16-aryl-13,14-dihydro-PGE2, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
V US patentu č. 4 219 483 jsou popsány 2,3,6-substituované-4-pyrony, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
V US patentu č. 4 132 847 jsou popsány 2,3,6-substituované-4-pyrony, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
V US patentu č. 4 000 309 jsou popsány p-bifenylestery 16-aryl-13,14-dihydro-PGE2, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
• · *· ♦ ♦ » · « • · · * *··· • · · · • · ·» *
V US patentu č. 3 982 016 jsou popsány p-bifenylestery 16-aryl-13,14-dihydro-PGE2, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
V US patentu č. 4 621 100 jsou popsány substituované cyklopentany, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
V US patentu č. 5 216 183 jsou popsány cyklopentanony, které jsou užitečné pro tvorbu kostní tkáně.
Jako druhé sloučeniny podle vynálezu je možno použít také fluoridu sodného. Pod pojmem fluorid sodný se rozumí všechny jeho formy (například fluorid sodný s pomalým uvolňováním, fluorid sodný s přetrvávajícím uvolňováním). Fluorid sodný s přetrvávajícím uvolňováním je popsán v US patentu 4 904 478 (který je zde citován náhradou za přenesení celého jeho textu do tohoto popisu). Odborník v tomto oboru snadno stanoví účinnost fluoridu sodného za použití standarních biologických protokolů (viz například Eriksen E. F. et al. , Bone Histomorphometry, Raven Press, New York, 1994, str. 1 až 74; Grier S. J. et al. , The Use of Dual-Energy X-Ray Absorptiometry In Animals, Inv. Radiol., 1996, 31(1): 50 až
62; Wahner H. W. a Fogelman I., The Evaluation of Osteoporosis: Duál Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical Practice, Martin Dunitz Ltd., London, 1994, str. 1 až 296).
Jako druhé sloučeniny podle vynálezu je možno použít kostního morfogenního proteinu (např. viz Ono et al., Promotion of the Osteogenetic Activivy of Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein by Prostaglandin El, Bone, 1996, 19(6) , 581 až 588) .
Jako druhé sloučeniny podle vynálezu je možno použít jakéhokoliv parathyroidního hormonu (PTH). Pod pojmem « * · · · • * · · · · • « · ♦ ··♦·· • « ·«· · · · ···· ··· ·· ··· ·· · parathyroidní hormon se rozumí pyrathyroidní hormon, jeho fragmenty a metabolity a jejich strukturní analogy, které mohou stimulovat tvorbu kostní tkáně a zvyšovat kostní hmotu. Do rozsahu tohoto pojmu také spadají příbuzné peptidy a aktivní fragmenty a analogy peptidů příbuzných parathyroidnímu hormonu (viz WO 94/01460). Funkční účinnost těchto sloučenin odborník v tomto oboru snadno stanoví za použití standarních zkušebních postupů (viz například Eriksen E. F. et al., Histomorphometry, Raven Press, New York, 1994, str. 1 až 74; Grier S. J. et al., The Use of Duál-Energy X-Ray Absorptiometry In Animals, Inv. Radiol., 1996, 31(1): 50 až 62,- Wahner H. W. a Fogelman I., The Evaluation of Osteoporosis: Duál Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical
Practice, Martin Dunitz Ltd., London, 1994, str. 1 až 296). Dále jsou uvedeny a popsány různé takové sloučeniny, ačkoliv odborníkům v tomto oboru budou známy ještě jiné parathyroidní hormony. Příklady parathyroidních hormonů jsou zmíněny v dále uvedených citacích: Human Parathyroid Peptide Treatment of Vertebral Osteoporosis, Osteoporosis Int., 3, (doplněk 1) :
199 až 203; PTH 1-34 Treatment of Osteoporosis with Added Hormone Replacement Therapy: Biochemical, Kinetic and
Histological Responses, Osteoporosis Int. 1: 162 až 170.
Jako druhé sloučeniny podle vynálezu je možno použít jakéhokoliv růstového hormonu nebo sekretagogu růstového hormonu. Pod pojmem sekretagog růstového hormonu se rozumí sloučeniny, které stimulují uvolňování růstového hormonu nebo napodobují jeho účinek (například zvyšují tvorbu kostní tkáně vedoucí ke zvýšení kostní hmoty). Tuto účinnost odborník v tomto oboru snadno stanoví za použití standardních zkušebních postupů. Různé tyto sloučeniny jsou například popsány v následující PCT patentových publikacích: WO 95/14666, WO 95/13069, WO 94/19367, WO 94/13696 a WO 95/34311. Odborníkům v • 9 • ♦ • ♦··· * · tomto oboru však budou známy ještě jiné sekretagogy růstového hormonu.
Jako sekretagogu růstového hormonu se zvláštní přednost dává N-[1(R)-[1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro[3H-indol-3,4 ' -piperidin]-1'-yl)karbonyl]-2-(fenylmethyloxy)ethyl]-2-amino-2-methylpropanamidu: MK-677.
Jako jiné přednostní sekretagogy růstového hormonu je možno uvést:
2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-methyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymethyl-2-oxoethyl]isobutyramid a jeho L-tartrátovou sůl;
2-amino-N-{l-(R)-benzyloxymethyl-2 -[3a-(R)-(4-fluorbenzyl)-2-methyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoethyl}isobutyramid;
2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexa- hydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R-)benzyloxymethyl-2 -oxoethyl]isobutyramid; a
2-amino-N-{l-(2,4-difluorbenzyloxymethyl)-2-oxo-2-[3-oxo-3a-pyridin-2-ylmethyl-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,3a,4,6,7hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]ethyl}-2-methylpropionamid.
Pod pojmem inhibitor HMG-CoA reduktasy se rozumí sloučeniny, které inhibují enzym 3-hydroxy-3-methylglutaryl koenzym A (HMG-CoA) reduktasu. Jako druhé sloučeniny podle tohoto vynálezu je možno použít jakýkoliv inhibitor HMG-CoA reduktasy, jako mevastatin, lovastatin, pravastatin, velostatin, simvastatin, fluvastatin, cerivastatin, mevastatin,
• · · • · · • · · · • » »»·· dalvastatin, fluindostatin a atorvastatin, jejich proléčiva a farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv.
Statiny zvyšují produkci osteoblastů, buněk, které produkují novou kostní tkáň. O kostním růstovém faktoru kostním morfogenetickém proteinu (BMP) je známo, že podporuje diferenciaci osteoblastů. S. E. Harris, et al., Mol. Cell. Differ. 3, 137 (1995). O statinech se tedy zjistilo, že zvyšují produkci BMP. G. Mundy, et al. , Stimulation of Bone Formation in Vitro and in Rodents by Statins, Science, 286, 1946 (1999) . Mundy, et al. zjistili, že statiny zvyšují tvorbu nové kostní tkáně a také počet osteoblastů ve všech stádiích diferenciace.
Jako statinu se přednostně používá mevastatinu, lovastatinu, pravastatinu, velostatinu, simvastatinu, fluvastatinu, cerivastatinu, mevastatinu, dalvastatinu, fluindostatinu nebo atorvastatinu nebo jejich proléčiv nebo farmaceuticky vhodných solí těchto sloučenin a proléčiv.
Statinem je zvláště přednostně atorvastatin, nejvýhodněji atorvastatin kalcium.
Inhibitory HMG-CoA reduktasy je možno snadno připravovat za použití známých způsobů. Mevastatin, lovastatin, pravastatin, velostatin, simvastatin, fluvastatin, cerivastatin a mevastatin, dalvastatin a fluindostatin lze připravovat způsoby, které jsou popsány v US patentech č. 3 983 140, 4 231 938,
346 227, 4 448 784, 4 450 171, 4 739 073, 5 177 080,
177 080, evropské patentové přihlášce č. 738 510 A2 a evropské patentové přihlášce č. 3 63 934 Al. Tyto dokumenty jsou citovány náhradou za přenesení jejich obsahu do tohoto textu.
• «
• · 9 · 9 · · • · 9 9 9 9 9 9999
Atorvastatin lze snadno připravovat způsobem popsaným v US patentu č. 4 681 893, který je citován náhradou za přenesení jeho obsahu do tohoto textu. Hemivápenatou sůl atorvastatinu, která je v současné době na trhu jako Lipitor®, je možno snadno připravovat způsobem popsaným v US patentu č. 5 2 73 995, který je citován náhradou za přenesení jeho obsahu do tohoto textu. Jiné soli atorvastatinu s farmaceuticky vhodnými kationty je možno snadno připravit tak, že se atorvastatin ve formě volné kyseliny nechá reagovat s vhodnou bází, obvykle 1 ekvivalentem, v korozpouštědle.
Selektivní agonisty EP4 je při způsobech podle vynálezu možno podávat jakýmkoliv způsobem pro systemickou a/nebo místní dodávku (například na místo zlomeniny kosti, osteotomie nebo na místo chirurgického ortopedického výkonu). Jako tyto způsoby je možno uvést perorální podávání, parenterální podávání, intraduodenální podávání atd. Sloučeniny se podle vynálezu obvykle podávají perorálně. Parenterálního podávání (intravenosního, intramuskulárního, subkutánního nebo intramedulárního) je však možno využít například v případech, kdy je perorální podávání nevhodné s ohledem na zvolený cíl nebo kdy je pacient neschopen pozřít léčivo.
Způsobů podle vynálezu se používá pro léčení a zlepšování hojení zlomenin kostí a osteotomií tak, že se místně (například na místa zlomenin kostí nebo osteotomií) podávají selektivní agonisté receptoru EP4. Selektivní agonisté se podávají na místo zlomeniny nebo osteotomie například injekcí sloučeniny ve vhodném rozpouštědle (například olejovém rozpouštědle, jako arašídovém oleji) k růstové chrupavce nebo, v případě otevřeného chirurgického zákroku, se taková sloučenina ve vhodném nosiči nebo ředidle, jako jsou kostní vosk, demineralizovaný kostní prášek, polymerní kostní cementy, kostní těsniva atd., aplikuje na místo zákroku.
• · · « · · · • · · « · · · ···· * · · · · · »· ··· ·· ·
Alternativně je lokální aplikaci možno provádět tak, že se roztok nebo disperze sloučeniny ve vhodném nosiči nebo ředidle nanese na povrch nebo se začlení do tuhých nebo polotuhých implantátů, jakých se obvykle používá v ortopedické chirurgii, jako je dakronová sítzka, pěnový gel a Kiel Bone, nebo protéz.
Množství a doba podávání sloučenin bude v každém případě samozřejmě záviset na léčeném subjektu, závažnosti postižení, způsobu podávání a rozhodnutí předepisujícího lékaře. Vzhledem k odlišnostem mezi jednotlivými pacienty je nutno uvedené dávkování chápat pouze jako vodítko a ošetřující lékař může dávky léčiva nastavit tak, aby se dosáhlo účinku (například zvýšení kostní hmoty), kterou považuje za vhodnou pro konkrétního pacienta. Při posuzování stupně požadovaného účinku musí ošetřující lékař zvážit různé faktory, jako výchozí hladinu kostní hmoty, věk pacienta, předchozí chorobu, jakož i přítomnost jiných chorob (například kardiovaskulárních) .
Obvykle se používá takového množství selektivního agonisty receptoru EP4, které je dostatečné pro zvýšení kostní hmoty nad práh zlomeniny kosti (podrobněji viz World Health Organization Study citovaná výše).
Selektivní agonisty receptoru EP4 se při způsobech podle vynálezu obvykle podávají ve formě farmaceutické kompozice, která obsahuje alespoň jednu ze sloučenin podle vynálezu spolu s farmaceuticky vhodným vehikulem nebo ředidlem. Sloučeniny podle vynálezu mohou být tedy podávány jednotlivě v podobě kterékoliv z obvyklých perorálních, intranasálních, parenterálních, rektálních nebo transdermálních dávkovačích forem.
Pro perorální podávání se může použít roztoků, suspenzí, tablet, pilulí, tobolek, prášků apod. Lze použít tablet obsahujících různé excipienty, jako je citran sodný, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, spolu s různými rozvolňovadly, jako je škrob (přednostně bramborový nebo tapiokový škrob) a určité, komplexní silikáty s granulačními pojivý, jako je polyvinylpyrrolidon, sacharosa, želatina a klovatina. Pro tabletovací účely mohou být přídavně přítomna lubrikační činidla, jako je stearan hořečnatý, natriumlaurylsulfát a mastek. Pevné prostředky podobného typu mohou být také přítomny jako náplně v měkkých nebo tvrdých želatlnových tobolkách. V tomto případě obsahují použité prostředky přednostně také laktosu nebo vysokomolekulární polyethylenglykoly. Při výrobě vodných suspenzí a/nebo elixírů, které se hodí pro perorální podávání, se může účinná přísada mísit s různými sladidly nebo aromatizačními látkami, barvicími přísadami či barvivý a - pokud je to zapotřebí - emulgátory a/nebo suspenzními činidly a dále také takovými ředidly, jako je voda, ethanol, propylenglykol, glycerol a jejich různé kombinace.
Pro parenterální podávání se může použít roztoků bud' v sezamovém nebo arašídovém oleji, nebo ve vodném propylenglykolu, jakož i sterilních vodných roztoků odpovídající vodorozpustné soli. Vodné roztoky by měly být účelně pufrovány (pokud je to nutné) a kapalné ředidlo by mělo být nejprve isotonizováno přidáním dostatečného množství solného roztoku nebo glukosy. Takové vodné roztoky se hodí pro intravenosní, intramuskulární, subkutánní a intraperitoneální injekční podávání. Výroba všech takových roztoků za sterilních podmínek se snadno provádí standardními farmaceutickými technologiemi, které jsou dobře známy odborníkům v tomto oboru.
• ·
............ ·* *
Pro účely transdermálního (například topického) podávání se používá zředěných sterilních vodných nebo zčásti vodných roztoků (obvykle o koncentraci 0,1 až 5%), které se připravují podobným způsobem jako parenterální roztoky.
Způsoby výroby různých farmaceutických kompozic, které obsahují určité množství účinné složky jsou známé nebo budou odborníku v tomto oboru zřejmé z tohoto popisu (viz například Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa, 19. vydání (1995)).
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.
Příklady provedení vynálezu
Obecné experimentální postupy
NMR spektra byla zaznamenána na spektrometru Varian Unity 400 (Varian Co., Palo Alto, Kalifornie, USA) při asi 23°C a 400 MHz pro protonová jádra. Chemické posuny jsou vyjádřeny v dílech na milion dílů. Tvary píků jsou označovány následujícím způsobem: s - singlet, d - dublet, t - triplet, q - kvartet, m multiplet, b = široký. Hmotnostní spektra při chemické ionizaci za atmosférického tlaku (APCI) byla získána na spektrometru Fisons Platform II (Micromass lne., Beverly, Massachusetts, USA). V případech, kdy se uvádí intenzita iontů obsahujících chlor nebo brom, byl zjištěn předpokládaný poměr intenzity (přibližně 3 : 1 pro 35C1/37C1-obsahuj ící ionty) a 1 : 1 pro 79Br/81Br-obsahuj ící ionty) a udává se pouze intenzita iontu o nižší hmotnosti.
Středotlaká systému Biotage chromatografie se provádí (Biotage lne., Dyax Corp., na za použití Charlottesville,
Virginia, USA) za tlaku dusíku. Mžiková chromatografie se provádí na silikagelu Baker 40 (40 μτη) (J. T. Baker,
Phillipsburg, N. J., USA) nebo silikagelu 60 (EM Sciences, Gibbstown, N. J., USA) ve skleněných kolonách za nízkého tlaku dusíku. Radiální chromatografie se provádí za použití zařízení Chromatron (model 7924T, Harrison Research, Palo Alto, Kalifornie, USA) . Preparativní chromatografie se provádí za použití desek Analtech Uniplates Silica Gel GF (20 x 20 cm) (Analtech, lne., Newark, DE, USA). Dimethylformamid (DMF), tetrahydrofuran (THF) a dichlormethan (CH2C12) , kterých se používá jako reakčních rozpouštědel, byla v bezvodém stavu dodána firmou Aldrich Chemical Company (Milwaukee, Winconsin, USA). Pod pojmem zkoncentruje se rozumí odstranění rozpouštědla za tlaku vodní vývěvy v rotačním odpařováku. Zkratkou TBAF se označuje tetrabutylamoniumfluorid a zkratkou DMAP dimethylaminopyridin. Pojmy dichlormethan a methylenchlorid jsou synonymní, a tedy vzájemně zaměnitelné.
Obecné experimentální postupy
NMR spektra byla zaznamenána na spektrometru Varian Unity 400 (Varian Co., Palo Alto, Kalifornie, USA) při asi 23°C a
400 MHz pro protonová jádra. Chemické posuny jsou vyjádřeny v dílech na milion dílů. Tvary píků jsou označovány následujícím způsobem: s - singlet, d - dublet, t - triplet, q - kvartet, m - multiplet, b = široký. Hmotnostní spektra při chemické ionizaci za atmosférického tlaku (APCI) byla získána na spektrometru Fisons Platform II (Micromass lne., Beverly, Massachusetts, USA) . V případech, kdy se uvádí intenzita iontů obsahujících chlor nebo brom, byl zjištěn předpokládaný poměr intenzity (přibližně 3 : 1 pro 35Cl/37Cl-obsahuj ící ionty) a 1 :
• · · • ···· • ·
Ί6 • · · · ···· ··· ®· pro 79Br/81Br-obsahuj ící ionty) a udává se pouze intenzita iontu o nižší hmotnosti.
Středotlaká chromatografie se provádí na za použití systému Biotage (Biotage lne., Dyax Corp., Charlottesville, Virginia, USA) za tlaku dusíku. Mžiková chromatograf ie se provádí na silikagelu Baker 40 (4 0 /zm) (J. T. Baker, *T
Phillipsburg, N. J. , USA) nebo silikagelu 60 (EM Sciences, Gibbstown, N. J., USA) ve skleněných kolonách za nízkého tlaku ►
dusíku. Radiální chromatografie se provádí za použití zařízení 4 Chromatron (model 7924T, Harrison Research, Palo Alto,
Kalifornie, USA). Preparativní chromatografie se provádí za použití desek Analtech Uniplates Silica Gel GF (20 x 20 cm) (Analtech, lne., Newark, DE, USA). Dimethylformamid (DMF), tetrahydrofuran (THF) a dichlormethan (CH2CI2) , kterých se používá jako reakčních rozpouštědel, byla v bezvodém stavu dodána firmou Aldrich Chemical Company (Milwaukee, Winconsin, USA) . Pod pojmem zkoncentruje se rozumí odstranění rozpouštědla za tlaku vodní vývěvy v rotačním odpařováku. Zkratkou TBAF se označuje tetrabutylamoniumfluorid a zkratkou DMAP dimethylaminopyridin. Pojmy dichlormethan a methylenchlorid jsou synonymní, a tedy vzájemně zaměnitelné.
Příklad IA
4-{3-[2-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina
Stupeň A: 5-(3-Oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-2-on. K roztoku tetrahydropyrrolizin-3,5-dionu (5 g, 36 mmol) v CH2C12 (320 mL) se při 0°C přikape benzylmagnesiumchlorid (1M roztok v tetrahydrofuranu, 39 ml, 39 mmol) . Výsledný roztok se 3 hodiny míchá při 0°C a poté rozloží nasyceným vodným chloridem amonným a zahřeje na teplotu místnosti. Vodný roztok se extrahuje • · dichlormethanem (3x). Spojené organické extrakty se vysuší síranem horečnatým, přefiltrují a zkoncentrují. Zbytek se přečistí středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1% methanol v dichlořmethanu až 2% methanol v dichlormethanu). Získá se 5,9021 g 5-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-2-onu. 1H NMR (CDC13) 5 7,35-7,18 (m, 5H) , 3,69 (s, 2H) , 3,56 (m, 1H) , 2,50 (t, 2H) , 2,27 (m, 2H) , 2,15 (m, 1H) , 1,73 (m, 2H), 1,61 (m, 1H).
Stupeň B: 5-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)pyrrolidin-2-on. K roztoku 5-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-2-onu (5,902 g, 25,52 mmol) v ethanolu (30 ml) se při 0°C přidá tetrahydroboritan sodný (485 mg, 12,76 mmol) . Reakční směs se 25 hodin míchá při 0°C, rozloží nasyceným vodným chloridem amonným a přidá se k ní voda a dichlormethan. Vodná vrstva se promyje dichlormethanem (2x). Spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se přečistí středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu) . Získá se 4,3 g 5-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)pyrrolidin-2-onu. XH NMR (CDC13) δ 7,35-7,16 (m, 5H) , 6,02 (m, 1H) , 3,80 (m, 1H) , 3,63 (m, 1H) , 2,79 (m, 1H) , 2,64 (m, 1H) , 2,26 (m, 3H), 1,72-1,22 (m, 6H).
Stupeň C: 5-[3 -(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]pyrrolidin-2-on. K roztoku 5-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)pyrrolidin-2-onu (4,3 g, 18,43 mmol) v dimethylformamidu (86 ml) se přidá terc-butyldimethylsilylchlorid (3,06 g, 20,3 mmol, poté imidazol (2,5 g, 37 mmol) a DMAP (225 mg). Reakční směs se 24 hodin míchá a poté rozloží nasyceným vodným chloridem amonným. Vodný roztok se promyje ethylacetátem (3x) a spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se přečistí středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (dichlormethan až • * • ·
1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu). Získá se 5,94 g 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]pyrrolidin-2-onu. NMR (CDC13) δ 7,26-7,10 (m, 5H) ,
5,68 (m, 1H) , 3,83 (m, 1H) , 3,54 (m, 1H) , 2,69 (m, 2H) , 2,302,16 (m, 3H) , 1,66-1,35 (m, 5H) , 0,82 (s, 9H) , -0,06 (d, 3H) , -0,2 (d, 3H).
Stupeň D: Methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. K roztoku 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4fenylbutyl]pyrrolidin-2-onu (3,20 g, 9,21 mmol) v dimethylformamidu (3 0 ml) se při 0°C přidá NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 11,5 ml, 11,5 mmol) . Ke vzniklé směsi se po 1 hodině přidá methylester 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (2,84 g, 11,0 mmol). Reakční směs se 18 hodin míchá při 70°C. Dimethylformamid se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Organický roztok se promyje vodou, vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se přečistí středotlakou chromatografií (30% ethylacetát v hexanech). Získá se 3,39 g methylesteru 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) -4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,92 (m, 2H) , 7,25-7,09 (m, 7H) , 3,86 (s, 3H) , 3,80 (m, 1H) , 3,61 (m, 1H) , 3,46 (m, 1H) , 2,90 (m, 1H) , 2,78-2,57 (m, 4H) , 2,382,18 (m, 2H), 0,83 (s, 9H); MS 524,1 (M+l).
Stupeň E: Methylester 4-{3-[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny. K roztoku methylesteru 4- (3-{2- [3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (3,37 g, 6,43 mmol) v tetrahydrofuranu (40 ml) se při 0°C. přidá tetrabutylamoniumfluorid (1M v tetrahydrofuranu, 9,6 ml, 9,6 mmol) . Reakční směs se 18 hodin míchá při teplotě místnosti a za sníženého tlaku se z ní odstraní těkavé látky. Ke zbytku se přidá ethylacetát a organický roztok se promyje nasyceným vodným hydrogenuhličitaném sodným (2x), vodou (lx) a vodným chloridem sodným (lx). Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se přečistí středotlakou chromatografií za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Získá se 2,28 g methylesteru 4-{3-[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny. 1H NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,91 (d, 2H) , 7,327,15 (m, 7H) , 3,86 (s, 3H) , 3,75 (m, 1H) , 3,63 (m, 1H) , 3,54 (m, 1H) , 2,94 (m, 1H) , 2,78 (m, 1H) , 2,61 (m, 3H) ; MS 410,1 (M+l).
Stupeň F: 4-{3-[2-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina. K roztoku methylesteru 4-{3-[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny (2,28 g, 5,57 mmol) v methanolu (20 ml) se přidá 2M hydroxid sodný (5 ml). Reakční směs se 20 hodin míchá při teplotě místnosti, poté 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku a za sníženého tlaku se z ní odstraní těkavé látky. Zbytek se zředí dichlormethanem a 1M roztokem kyseliny chlorovodíkové. Vodný roztok se extrahuje dichlormethanem (2x) . Spojené organické extrakty se promyjí vodným chloridem sodným. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a
filtrát se zkoncentruje. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu
(2,03 g) . ΧΗ NMR (CDCI3) δ 7,98 (d, 2H) , 7,34-7,18 (m, 7H) ,
3,80 (m, 1H) , 3,67 (m, 1H) , 3,58 (m, 1H) , 2,97 (m, 1H) , 2,81
(m, 1H) , 2,68 (m, 3H) , 2,45-2,27 (m, 2H) , 2,13-1,30 (m, 9H) ;
MS 396,3 (M+l), 394,2 (M-l).
Příklad 1 B
4-(3-{2-[3-Hydroxy-4-(3-trifluormethyl-fenyl)butyl]-5oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová kyselina • ·
• ·
Stupeň A; 5-[3-0XO-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin2-on. V nádobě s kulatým dnem se za sníženého tlaku 60 hodin míchají hořčíkové hobliny (1,13 g), načež se k nim přidá bezvodý diethylether (5 ml) . Vzniklá směs se ochladí na 0°C a během 3 hodin se k ní přikape roztok 3-trifluormethylbenzylchloridu (1,0 ml, 7,5 mmol) v diethyletheru (25 ml). Reakční směs se dále 2,5 hodiny míchá. Za použití injekční stříkačky se vzniklý roztok (přefiltrovaný přes injekční filtr Nylon Acrodisc®) pomalu při 0°C přidá k roztoku tetrahydropyrrolizin-3,5-dionu (650 mg, 4,68 mmol) v dichlormethanu (30 ml). Po 2 hodinách se reakční směs rozlotí 1M kyselinou chlorovodíkovou. Vodný roztok se promyje dichlormethanem (2x) . Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a zkoncentrují. Středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát) se získá 5-[3-oxo-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (1,376 g) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,38 (m, 4H) , 3,78 (s, 2H) , 3,61 (m, 1H) , 2,58 (t, 2H) , 2,30 (m, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 2,86-1,59 (m, 3H) .
Stupeň B: 5-[3-Hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni B se 5-[3-oxo-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (1,37 g, 4,59 mmol) redukuje tetrahydroboritaném sodným (174 mg) 2 hodiny při 0°C. Po přečištění středotlakou chromatografií (2% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (1,19 g) . XH NMR (CDC13) δ 7,42 (m, 4H) , 6,26 (m, 1H) , 3,82 (m, 1H) , 3,65 (m, 1H) , 2,84 (m, 1H) , 2,72 (m, 1H) , 2,27 (m, 3H) , 1,86 (m, 1H), 1,75-1,42 (m, 5H); MS 302,2 (M+l).
Stupeň C: 5-[3-(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-trifluormethylfenyl) butyl] pyrrolidin- 2 -on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, Stupni C, se 5-[3-hydroxy-4-(3-trifluormethylf enyl) butyl] pyrrolidin-2-on (1,19 g, 3,95 mmol) chrání terc-butyldimethylsilylchloridem (893 mg, 6,22 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití ethylacetátu jako elučního činidla se získá 5-[3 -(terc-butyldimethylsilanyloxy) -4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on.
NMR (CDCI3) δ 7,47-7,32 (m, 4H) , 5,73 (m, 1H) , 3,86 (m, 1H) ,
3,59 (m, 1H) , 2,75 (m, 2H) , 2,35-2,20 (m, 3H) , . 1,70 -1,40 (m,
5H) , 0,81 (s, 9H), -0,05 (d, 3H) , - 0,3 (d, 3H) ; MS 416,1
(M+l).
Stupeň D: Methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-trifluormethylfenyl)-butyl]5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5-[3 -(terc-butyldimethylsilanyloxy)4- (3-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (250 mg, 0,602 mmol) alkyluje za použití NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 0,72 ml, 0,72 mmol) a methylesteru 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (170 mg, 0,663 mmol) za vzniku methylesteru 4-(3-{2-[3- (terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (300 mg). MS 592,1 (M+l).
Stupeň E: Methylester 4-(3-{2-[3-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl) butyl] -5-oxopyrrolidin-l- yl}propyl)benzoové kyseliny. Methylester 4-(3-{2-[3-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny se připraví podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E. rH NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,91 (d, 2H) , 7,49-7,35 (m, 4H) , 7,22 (d, 2H) , 3,85 (s, 3H) , 3,80 (m, 1H) , 3,65 (m, 1H) , 3,55 (m, 1H), 2,98-2,61 (m, 5H).
Stupeň F: 4-(3-{2-[3-Hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]5- oxopyrrolidin-l-yl}propyl)-benzoic acid. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni F, se methylester 4-(3{2- [3-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl] -5-oxopyrrolidin• · l-yl}propyl)benzoové kyseliny hydrolyzuje 24 hodin při teplotě místnosti, čímž se získá 4-(3-{2-[3-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová
kyselina. XH NMR (CDC1; d δ 7,98 (d, 2H) , 7,52-7,37 (m, 4H) ,
7,26 (d, 2H), 3, 82 (m, 1H) , 3,68 (m, 1H) , 3,58 (m, 1H) , 2,98-
2,66 (m, 5H), 2, 34 (m, 2H) , 2,09 (m, 1H) , 1,95-1,37 (m, 7H) ;
MS 464,2 (M+l).
P ř í k 1 a d 1 C
4-(3-{2-[4-(3-Chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzová kyselina
Stupeň A: 5- [4-(3-Chlorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni A, se tetrahydropyrrolizin-3,5-dion (2 g, 14 mmol) nechá 2 hodiny reagovat s 3-chlorbenzylmagnesiumchloridem(0,25M v diethyletheru, 62 ml, 15,5 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (2:1 hexany :EtOAc až EtOAc až 5% methanol v dichlormethanu) se získá 5 - [4-(3 - chlorf enyl)-3-oxobutyl] pyrrolidin-2-on (1,9142 g) . •’Ή
NMR (CDC13) δ 7,27 (m, 2H) , 7,19 (m, 1H) , 7,08 (m, 1H) , 6,27
(br, 1H), 3,68 (s, 2H) , 3,60 (m, 1H) , 2,52 (t, 2H), 2, 29 (m,
2H) , 2,21 (m, 1H) , 1,88-1,60 (m, 3H) ; MS 266,2 (M+l) , 264,2
(M-l).
Stupeň B: 5-[4-(3-Chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni B se 5-[4-(3-chlorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on (1,9 g, 7,15 mmol) redukuje tetrahydroboritanem sodným (135 mg, 3,57 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu až 8% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[4-(3-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on (1,53 g) . NMR (CDC13) δ 7,22 (m, 3H) ,
7,07 (m, 1H) , 6,51 (d, 1H), 3,82 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H), 2,77
(m, 1H) , 2,66 (m, 1H) , 2,33-2,19 (m, 3H) , 2,04 (d, 1H), 1,74-
1,45 (m, 5H) ; MS 268,2 (M+l).
Stupeň C: 5-[3-(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-chlorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, Stupni Č, se 5-[4-(3-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on (1,53 g, 5,71 mmol) nechá reagovat s terc-butyldimethylsilylchloridem (0,97 g, 6,4 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3 -(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-chlorfenyl) butyl] pyrrolidin-2-on (1,77 g). 1H NMR (CDCls) δ 7,16 (m, 3H) , 7,01 (m, 1H) , 5,61 (d, 1H) , 3,83 (m, 1H) , 3,58 (m, 1H) , 2,68 (m, 2H) , 2,28 (m, 3H) , 1,73-1,36 (m, 5H), 0,84 (s, 9H), -0,05 (s, 3H), -0,2 (d, 3H).
Stupeň D: Methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-chlorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3chlorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (246,5 mg, 0,645 mmol) alkyluje za použití NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 0,77 ml, 0,77 mmol) a methylesteru 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (200 mg, 0,767 mmol). Po přečištění středotlakou chromatograf ií (5:1 hexany: EtOAc až 1:1 hexany: EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-chlorfenyl)-
butyl]pyrrolidin-2-on (246,3 mg) . NMR (CDC13) δ 7,94 (d,
2H), 7,25-7,13 (m, 5H), 7,01 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H), 3,82 (m,
1H) , 3,66 (m, 1H) , 3,50 (m, 1H) , 2,94 (m, 1H), 2,73-2,57 (m,
• ·
4H), 2,47-2,27 (m, 2H) , 2,12-11,23 (m, 8H) , 0,84 (s, 9H) , 0,05 (d, 3H), -0,2 (d, 3H); MS 558,5 (M+).
Stupeň E: Methylester 4-(3-{2-[4-(3-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propy l)benzoové kyseliny. 4-(3{2-[4-(3-Chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny se připraví podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E. Po přečištění středotlakou chromatografií (dichlormethan až 1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,94 (d, 2H) , 7,25-7,19 (m, 5H) ,
7,07 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) , 3,78 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) , 3,58 (m, 1H) , 2,97 (m, 1H) , 2,76 (m, 1H) , 2,68-2,58 (m, 3H), 2,452,27 (m, 2H), 2,07 (m, 1H), 1,95-1,34 (m, 8H).
Stupeň F: 4-(3-{2-[4-(3-Chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni F, se methylester 4-(3-{2-[4-(3-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny 24 hodin při teplotě místnosti hydrolyzuje 6M hydroxidem sodným. Získá se 4-(3-{2-[4-(3-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová kyselina. NMR (CDC13) δ 7,98 (d, 2H), 7,27-7,09 (m,
6H) , 3,81 (m, 1H) , 3,65 (m, 2H) , 2,99 (m, 2H) , 2,75 (m, 3H) ,
2,39 (m, 2H), 2,20-1,30 (m, 9H).
Příklad ID
4-(3-{2-[4-(3-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-lyl} propyl) benzoová kyselina
Stupeň A: 5-[4-(3-Fluorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni A, se tetrahydropyrrolizine-3,5-dion (2 g, 14 mmol) 2,5 hodiny nechá • · reagovat 3-fluorbenzylmagnesiumchlorideem (0,25M v Et2 O, 62 ml, 15,5 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až 2:1 EtOAc:hexanes až EtOAc až 2% methanol v dichlormethanu až 10% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[4-(3-fluorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on (2,1730 g) . 1H NMR (CDC13) δ 7,32-7,27 (m, 1H), 7,00-6,90 (m, 3H) , 6,12 (bs, 1H) , 3,69 (s, 2H) , 3,59 (m, 1H) , 2,52 (t, 2H) , 2,30 (m, 2H) , 2,19 (m, 1H) , 1,75 (m, 2H), 1,65 (m, 1H).
Stupeň B: 5-[4-(3-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni B se 5-[4-(3-fluorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on (2,17 g, 8,71 mmol) redukuje tetrahydroboritanem sodným (165 mg, 4,35 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu až 6% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[4-(3-fluorfenyl)-3hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on (2,23 g) . ’Ή NMR (CDC13) δ 7,27
(m, 1H) , 6,94 (m, 3H) , 6,38 (m, 1H) , 3,82 (m, 1H) , 3,66 (m,
1H) , 2,79 (m, 1H) , 2,67 (m, 1H), 2,33-2,21 (m, 3H) , 1,92 (d,
1H) , 1,75-1,40 (m, 5H); MS 252,2 (M+l).
Stupeň C: 5-[3-(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fluorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, Stupni C, se 5-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl] pyrrolidin-2 -on (2,23 g, 8,87 mmol) nechá reagovat s terc-butyldimethylsilylchloridem (1,47 g, 9,76 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3 -(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fluorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (2,84 g) . ’ή NMR (CDC13) δ 7,23 (m, 1H) , 6,88 (m, 3H) , 5,75 (m, 1H) , 3,85 (m, • · • · • ·
1H) , 3,57 (m, 1H) , 2,71 (m, 2H) , 2,30 (m, 2H) ,
1,70-1,38 (m, 5H), 0,84 (s, 9H) , 0 (s, 3H), -0,2
2,25 (m, 1H) , (s, 3H).
Stupeň D: Methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fluorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fluorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (254,7 mg, 0,697 mmol) alkyluje za použití NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 0,84 ml, 0,84 mmol) a methylesteru 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (200 mg, 0,778 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (5:1 hexany: EtOAc až 1:1 hexany: EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) se získá methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fluorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (275,3 mg) . 1H NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,94 (d, 2H) , 7,23 (m, 3H) , 6,87 (m, 3H) , 3,88 (s, 3H) , 3,86 (m, 1H) , 3,63 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 2,94 (m, 1H), 0,84 (s, 9H).
Stupeň E: Methylester 4-(3-{2-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E, se 4-(3-{2- [3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fluorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (275,3 mg, 0,508 mmol) podrobí deprotekci za vzniku methylesteru 4- (3-{2- [4- (3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (217,2 mg). Přečištění se provádí středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (dichlormethan až 1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu). 1H
NMR (CDC13) δ 7,94 (d, J=7,88 Hz, 2H) , 7,27 (m, 3H) , 6,93 (m,
3H) , 3,88 (S, 3H), 3,78 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) , 3,57 (m, 1H) ,
2,97 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,64 (m, 4H), 2,45- -2,25 (m, 2H) ,
2,07 (m, 1H) , 1,95-: 1,30 (m, 7H).
···· ··· ··
Stupeň F: 4-(3-{2-t4-(3-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v přikladu 1A, stupni F, se methylester 4-(3--{2-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5oxopyrrolidin-l-yl}-propyl)benzoové kyseliny hydrolyzuje 24 hodin při teplotě místnosti 6M hydroxidem sodným za vzniku 4(3-{2-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-
yl}propyl)-benzoové kyseliny. XH NMR (CDC13) δ 7,99 1 (d, 2H) ,
7,26 (m, 3H), 6,95 (m, 3H), 3,81 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,01
(m, 1H), 2,86-2,66 (m, 3H), 2,39 (m, 2H), 2,08 (m, 1H), 2,00-
1,30 (m, 9H).
P ř í k 1 a d 1 E
4-(3-{2-[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-lyl}propyl)benzoová kyselina
Stupeň A: 5-[3-Oxo-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1B, stupni A, se tetrahydropyrrolizine-3,5-dion (650 mg, 4,68 mmol) 3,5 hodiny nechá reagovat s 3-fenoxybenzylchloridem (1,20 g, 5,49 mmol), čímž se získá 5-[3-OXO-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (924 mg). H NMR (CDC13) δ 7,30 ( m, 3H) , 7,10 (m, 1H) , 6,99 (m, 2H) , 6,92-6,84 (m, 3H) , 3,66 (s, 2H) , 3,57 (m, 1H) , 2,52 (t, 2H) , 2,27 (m, 2H), 2,17 (m, 1H) , 1,80-1,58 (m, 3H) ,
Stupeň B: 5 -[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni B se 5-[3-OXO-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (923,6 mg, 2,86 mmol) redukuje tetrahydroboritanem sodným (54 mg, 1,4 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:EtOAc až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu až 10% methanol v dichlormethanu) se získá 5• ·
- [3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (668,3 mg).
XH NMR (CDC13) δ 7,31 (m, 2H) , (d, 2H) , 6,91 (d, 1H) , 6,84
1H), 2,77-2,03 (m, 2H), 2,40 (m, 5H); MS 326,3 (M+l).
7,23 (m, 1H) , 7,08 (m, 1H), 6,97
(m, 2H) , 3,80 (m, 1H) , 3,73 (m,
(m, 2H) , 2,24 (m, 1H) , 1,75-1,41
Stupeň C: 5-[3-(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fenoxyfenyl) butyl] pyrrolidin-2-on . Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, Stupni C, se 5-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (668,3 mg, 2,05 mmol) nechá reagovat s terc-butyldimethylsilylchloridem (341 mg, 2,26 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (dichlormethan až 1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fenoxyfenyl)-
butyl]pyrrolidin-2- on (673 mg) . XH NMR L (CDCI3) δ 7,32 (m, 2H) ,
7,22 (m, 1H) , 7,09 (m , 1H), 6,99 (d, 2H), 6,89 (d, 1H) , 6,83
(m, 2H) , 3,85 (m, 1H) , 3,58 (m, 1H) , 2,76-2,62 (m, 2H) , 2,32
(m, 2H) , 2,23 (m, 1H) , , 1,73-1,34 (m, 5H), 0,84 (s, 9H) , -0,03
(d, 3H), -0,16 (d, 3H) ; MS 440,7 (M+l)
Stupeň D: Methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) -4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljpropyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)4-(3-fenoxyfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (200 mg, 0,455 mmol) alkyluje za použití NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 0,55 ml, 0,55 mmol) a methylesteru 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (128 mg, 0,501 mmol), čímž se získá methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-
-oxopyrrolidin- 1-yljpropyl)benzoové kyseliny (173,1 mg) . NMR
(CDCI3) δ 7,94 (d, 2H) , 7,32 (m, 2H) , 7,25-7,19 (m , 3H), 7,09
(m, 1H), 6,98 (d, 2H) , 6,88-6,81 (m, 3H), 3,88 (s , 3H), 3,84
(m, 1H), 3,64 (m, 1H) , 3,50 (m, 1H) , 2,95 (m, 1H) , 2,76-2,57
(m, 4H), 2,37 (m, 2H) , 2,03 (m, 1H) , 1,92-1,67 (m , 3H), 1,56
• «
(m, 1H), 1,46-1,25 (m, 3H), 0,84 (s, 9H), -0,04 (d, 3H), -0,15 (d, 3H).
Stupeň E: Methylester 4-(3-{2-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Methylester 4-(3-{2-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny se připraví podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E. Po přečištění after purification středotlakou chromatografií (dichlormethan až 1% methanol v dichlormethanu až 2% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu). NMR (CDC13) δ 7,94 (d, 2H) , 7,35-7,23 (m, 5H) , 7,11 (m, 1H) , 7,00 (d, 2H) , 6,93-6,85 (m, 3H) , 3,88 (s, 3H) , 3,77 (m, 1H) , 3,703,53 (m, 2H) , 2,97 (m, 1H) , 2,77 (m, 1H) , 2,62 (m, 3H) , 2,462,26 (m, 2H), 2,06 (m, 1H), 1,96-1,28 (m, 7H).
Stupeň F: 4-(3-{2-[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni F, se methylester 4-(3--{2-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5oxopyrrolidin-l-yl}-propyl)benzoové kyseliny hydrolyzuje 24 hodin při teplotě místnosti 6M hydroxidem sodným za vzniku 4(3-{2-[3-hydroxy-4--(3-fenoxyfenyl)butyl] -5-oxopyrrolidin-l-
yl jpropyl)benzoové kyseliny. NMR (CDCI3) δ 7,99 (d, 2H) ,
7,37-7,26 (m, 5H) , 7,12 (m, 1H) , 7,03-6,88 (m, 5H) , 3,82 (m,
1H) , 3,66 (m, 2H) , 3,00 (m, 1H) , 2,85-2,60 (m, 4H) , 2,41 (m,
2H), 2,09 (m, 1H), 2,03-1,28 (m, 8H) .
P ř í k lad 1 F
4-{3-[2-(4-Bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina ·· ·· ·
9ι · · • · · · • · ····· • · · ·· ·
Stupeň A: 5-(3-Brom-3-oxobutyl)pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni A, se tetrahydropyrrolizin-3,5-dion (5 g, 36 mmol) nechá 2 hodiny reagovat s 3-brombenzylmagnesiumbromidem (0,25M b Et2O, 155 ml, 38,8 mmol) . Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 5% methanol v dichlormethanu) se získá 5-(3-brom-3-oxobutyl)pyrrolidin-2-on (7,84 g) . 1H NMR (CDC13) δ 7,41-7,11 (m, 4H) ,
6,24 (bs, 1H) , 3,67 (s, 2H) , 3,60 (m, 1H) , 2,52 (t, 2H) , 2,32 (m, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,88-1,60 (m, 3H) .
Stupeň B: 5-(3-Brom-3-hydroxybutyl)pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni B, se 5-(3-brom-3-oxobutyl)pyrrolidin-2-on (7,84 g, 25,3 mmol) redukuje tetrahydroboritanem sodným (480 mg, 12,6 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu až 8% methanol v dichlormethanu) se získá 5-(3-brom-3-hydroxybutyl) pyrrolidin-2-on (6,76 g) . •‘Ή NMR (CDC13) δ
7,36-7,09 (m, 4H) , 6,27 (m, 1H), 3,78 (m, 1H) , 3,63 (m, 1H) ,
2,75 (m, 1H) , 2,62 (m, 1H) , 2,32-2,18 (m, 3H) , 1,88 (m, 1H) ,
1,73-1,42 (m, 5H) ; MS 312,2, 314. (M+).
Stupeň C: 5-[3-Brom-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)butyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, Stupni C, se 5-(3-brom-3-hydroxybutyl)pyrrolidin-2-on (6,76 g, 21,6 mmol) nechá reagovat s terc-butyldimethylsilylchloridem (3,59 g, 23,8 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (dichlormethan až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu až 8% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3-brom-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) butyl] pyrrolidin-2-on (7,45 g) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,30 • · • * • ·*··
91 • · · ···· ·♦· • ·« · » ·· •
(m, 2H) , 7,12 (m, 1H) , 7,04 (m, 1H), 5,71 (m, 1H) , 3,81 (m,
1H) , 3, 56 (m, 1H), 2,66 (m, 2H) , 2,32-2,17 (m, 3H) , 1,70-1,35
(m, 5H) , 0,82 (s, 9H) , - 0,06 (d, 3H), -0,24 (d, 3H) ; MS 426,2,
428,2 (M+).
Stupeň D: 5-[4-Bifenyl-3-yl-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)butyl]pyrrolidin-2-on. K roztoku 5-[3-brom-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) butyl] pyrrolidin- 2 -onu (750 mg, 1,76 mmol) v DME (15 ml) se přidá fenylboronová kyselina (236 mg, 1,93 mmol). K výsledné směsi se přidá octan palladnatý (26,8 mg, 0,120 mmol) a tri-o-tolylfosfin (39,5 mg, 0,130 mmol) a poté roztok uhličitanu sodného (373 mg, 3,52 mmol) ve vodě (1,8 ml). Reakční směs se 24 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a za sníženého tlaku se z ní odstraní těkavé látky. Zbytek se zředí vodným chloridem sodným a ethylacetátem. Vodný roztok se promyje ethylacetátem (3x) a spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[4-bifenyl-3-yl-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-butyl]pyrrolidin-2- one (717,3 mg). JH NMR (CDC13) δ 7,57 (m, 2H) , 7,43 (m, 2H) , 7,33 (m, 3H) ,
7,11 (m, 2H) , 5,78 (m, 1H), 3,91 (m, 1H) , 3,59 (m, 1H) , 2,76
(m, 2H) , 2,27 (m, 3H) , 1,73-1,38 (m, 5H) , 0,83 (s, 9H) , -0,03
(d, 3H) , -0,16 (d, 3H) ; MS 424,3 (M+l) •
Stupeň E: Methylester 4-(3-{2-[4-bifenyl-3-yl-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5-[4-bifenyl-3-yl-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) butyl]pyrrolidin-2-on (5,116 g, 12,08 mmol) 20 hodin alkyluje methylesterem 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (3,41 g, 13,3 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (5:1 hexany:EtOAc až 1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) se získá methylestesr 4-(3-{2-[4bifenyl-3-yl-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }propyl ) benzoové kyseliny (5,38 g) . ΧΗ NMR (CDCls) δ 7,93 (d, 2H) , 7,56 (d, 2H) , 7,43 (m, 3H) , 7,34 (m,
3H) , 7,23 (m, 2H) , 7,12 (m, 1H) , 3,89 (m, 1H) , 3,87 (s, 3H) ,
3,64 (m, 1H) , 3,49 (m, 1H) , 2,95-2,61 (m, 5H) , 2,30 (m, 2H) ,
2,01 (m, 1H) , 1,89-1,70 (m, 3H) , 1,59-1,24 (m, 4H) , 0,84 (s,
9H) , -0,04 (d, 3H) , -0,16 (d, 3H) .
Stupeň F: Methylester 4-{3-[2-(4-bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)~ 5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu IA, stupni E, se methylester 4-(3-{2-[4-bifenyl-3-yl-3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) butyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl) benzoové kyseliny (5,38 g, 8,97 mmol) podrobí deprotekci. Po přečištění středo-tlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (hexany až 2:1 hexany: EtOAc až 1:1 hexany: EtOAc až 0,5% methanol v dichlormethanu až 1% methanol v dichlormethanu) se získá methylester 4-{3-[2-(4-bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny (3,70 g) . 1H NMR
(CDC1 3) δ 7,93 (d, 2H) , 7,57 (d, 2H) , 7,40 (m, 6H) , 7,24 (m,
2H) , 7,17 (m, 1H) , 3,86 (s, 3H) , 3,80 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) ,
3,56 (m, 1H) , 2,97 (m, 1H) , 2,90- -2,60 (m, 4H) , 2,33 (m, 2H) ,
2,07 (m, 1H) , 1,98- 1,34 (m, 8H) .
Stupeň G: 4-{3 -[2 -(4-Bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] propyl}benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu IA, stupni F, se methlyester 4-{3-[2-(4-bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5--oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny (3,14 g, 6,47 mmol) 24 hodin při teplotě místnostnosti hydrolyzuje 6M hydroxidem sodným (40 ml) v methamolu (160 ml). Získá se 4-{3 -[2 -(4-bifenyl-3-yl-3ΛΛ » · · · ···
...............
-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]-propyl}benzoová kyselina (2,73 g) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,98 (d,
6H) , 7,26 (m, 2H) , 7,18 (m, 1H) ,
3,59 (m, 1H) , 2,98 (m, 1H) , 2,88
(m, 2H) , 2,08 (m, 1H) , 1,85 (m,
470, 1 (M- 1) , 4' 72,2 (M+l) 9
2H) , Ί, 57 (d, 2H), 7,40 (m,
3,85 (m, 1H), 3,68 (m, 1H) ,
(m, 1H) , 2,70 (m, 3H), 2,36
3H) , 1, 69-1,35 (m, 4H) ; MS
ad 1 G
4-(3 -{2 -[4-(4-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová kyselina
Stupeň A: 5-[4 -(4-Fluorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni A, tetrahydropyrrolizin-3,5-dion (1,41 g, 10,1 mmol) 5 hodin nechá reagovat s 4-fluorbenzylmagnesiumchloridem (0,25M v Et2O, 50 ml, 12,5 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (2% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[4-(4-fluorfenyl)-3-oxobutyl] pyrrolidin-2-on (2,64 g) . NMR (CDC13) δ 7,18 (m,
2H) , 7,03 (m, 2H) , 6,34 (m, 1H) , 3,70 (s, 2H) , 3,62 (m, 1H) ,
2,54 (t, 2H), 2,34-2,15 (m, 3H), 1,82-1,61 (m, 3H).
Stupeň B: 5-[4-(4-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni B, se 5-[4-(4-fluorfenyl)-3-oxobutyl]pyrrolidin-2-on (2,64 g, 10,6 mmol) 1 hodinu při teplotě místnosti redukuje tetrahydroboritanem sodným (400 mg, 10,5 mmol). K reakční směse se přidá další tetrahydroboritan sodný (150 mg, 3,95 mmol) a vzniklá směs se 20 hodin míchá. Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (dichlormethan až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on (2,01 g) . 1H NMR (CDC13) δ 7,14 (m, 2H) , 6,98 (m, 2H) , 6,78 (m, • · ·· ···
1H) , 3,76 (m, 1H) , 3,65 (m, 1H) , 2,76 (m, 1H) , 2,64 (m, 1H) ,
2,32-2,18 (m, 4H), 1,72-1,47 (m, 5H).
Stupeň C: 5-[3-(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-(4-fluorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, Stupni C, se 5-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]pyrrolidin-2-on (1,95 g, 7,79 mmol) nechá reagovat s terc-butyldimethylsilylchloridem (1,47 g, 9,76 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) se získá 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(4-f luorfenyl) butyl]pyrrolidin-2-on. 1H NMR (CDC13) δ 7,12 (m,
2H) , 6,97 (m, 2H), 5,75 (m, 1H) , 3,83 (m, 1H) , 3,60 (m, 1H) ,
2,71 (m, 2H) , 2,36-2,24 (m, 3H) , 1,70- 1,38 (m, 5H) , 0,84 (s,
9H) , -0,05 (d, 3H), -0,2 (d, 3H).
Stupeň D: Methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(4-fluorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5- [3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(4-fluorfenyl)butyl]pyrrolidin-2-on (296 mg, 0,809 mmol) 72 hodin alkyluje methylesterem 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny (276 mg, 1,07 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:EtOAc) se získá methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(4-fluorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (250 mg) . 1H NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,92 (d, 2H) , 7,21 (d, 2H) , 7,05 (m, 2H) , 6,92 (m, 2H) , 3,86 (s, 3H) , 3,76 (m, 1H) , 3,62 (m, 1H) , 3,45 (m, 1H), 0,81 (s, 9H).
Stupeň E: Methylester 4-(3-{2-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E, se methylester 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-(4-fluorfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny
(241,2 mg, 0,445 mmol) podrobí deprotekci. Po středotlaké chromatografii (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) se získá methylester 4-(3-{2-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (61,1 mg). ’Ή NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,93 (d,
2H) , 7,24 (d, 2H) , 7,14 (m, 2H) , 7,00 (m, 2H) , 3,88 (s, 3H) ,
3,80-3,51 (m, 3H), 2,98 (m, 1H), 2,32 (m, 2H).
Stupeň F: 4-(3-{2-[4-(4-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni F, se methylester 4-(3-{2-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzoové kyseliny (61,1 mg, 0,143 mmol) 24 hodin při teplotě místnosti hydrolyzuje 6M hydroxidem sodným (1 ml) v methanolu (5 ml). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (dichlormethan až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu až 6% methanol v dichlormethanu až 10% methanol v dichlormethanu) se získá sloučenina uvedená v nadpisu (45 mg) . NMR (CDC13) δ
7,97 (d, 2H) , 7,25 (m, 2H), 7,14 (m, 2H), 6,99 (m, 2H), 3,75
3,58 (m, 3H) , 2,97 (m, 1H), 2,69 (m, 4H), 2,40 (m, 2H), 2,15
1,35 (m, 9H) ; MS 413,8 (M+).
Příklad 1H
4-{2-[2-(3-Hydroxy4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]ethoxy}benzoová kyselina
Stupeň A: Ethylester 4-(2-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}ethoxy)benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl] pyrrolidin-2-on (připravený v příkladu 1A, stupni C) • · (250 mg, 0,719 mmol) alkyluje za použiti NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 0,86 ml, 0,86 mmol) a ethylesteru 4-(2-bromethoxy)benzoové kyseliny (216 mg, 0,791 mmol). Reakční teplota se udržuje 24 hodin na 50°C. Po přečištění radiální chromatografií (hexany až 4:1 hexany:EtOAc) se získá ethylester 4-(2{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}ethoxy)benzoové kyseliny (66,4 mg). •’Ή NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,96 (m, 2H), 7,29-7,13 (m, 5H), 6,84 (m, 2H) , 4,33 (q, 2H) , 4,12 (m, 2H) , 3,90 (m, 2H) , 3,68 (m, 1H) , 3,34 (m, 1H) , 2,73 (m, 2H) , 2,32 (m, 2H) , 1,36 (t, 3H) , 0,85 (s, 9H), -0,03 (s, 3H), -0,15 (d, 3H).
Stupeň B: Ethylester 4-{2-[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]ethoxy}benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E, se ethylester 4-(2-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}ethoxy)benzoové kyseliny (66,4 mg, 0,122 mmol) podrobí deprotekci za vzniku ethylesteru 4-{2-[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]ethoxy}benzoové kyseliny (52 mg) po přečištění radiální chromatografií (dichlormethan až 2%
methanol v dichlormethanu). XH NMR (CDCI3) δ 7,94 (m, 2H) ,
7,31-7,16 (m, 5H) , 6,83 (m, 2H) , 4,30 (q, 2H) , 4,12 (m, 2H) ,
3,90 (m, 1H) , 3,76 (m, 2H) , 3,38 (m, 1H), 2,80 (m, 1H) , 2,64
(m, 1H) , 2,33 (m, 2H), 2,10 (m, 1H) , 1,69-1,37 (m, 6H) , 1,34
(t, 3H).
Stupeň C: 4-{2-[2-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-lyl] ethoxy}benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni F, se ethylester 4-{2-[2-(3-hydroxy-4fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]ethoxy}benzoové kyseliny (52 mg, 0,122 mmol) hydrolyzuje 6M hydroxidem sodným (1 ml) . Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (41,5 mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,98 (d, 2H) , 7,32-7,16 (m, 5H) , 6,85 (m, 2H) , 4,13 (m, 2H) ,
3,92 (m, 1H) , 3,81 (m, 1H) , 3,75 (m, 1H), 3,40 (m, 1H) , 2,82
(m, 1H) , 2,66 (m, 1H) , 2,36 (m, 2H) , 2,10 (m, 2H) , 1,70-1,34 (m, 5H); MS 398,4 (M+l), 396,3 (M-l).
Příklad 2 A
7-{2S-[3R-Hydroxy-4-(3-methoxymethylf enyl) butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }heptanové kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)-heptanové kyseliny (1,63 g, 6,01 mmol) v bezvodém benzenu (50 ml) se přidá hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (3,46 g, 18,03 mmol) a dimethylsulfoxid (1,5 ml, 24,04 mmol). Vzniklý roztok se ochladí na 0°C a přidá se k němu pyridiniumtrif luoracetát (1,28 g, 6,61 mmol) . Reakční směs se 15 minut míchá při 0°C a 2 hodiny při teplotě místnosti. Roztok se dekantuje a olej ovitý zbytek se promyje benzenem (3x) . Benzenové promývací louhy se zkoncentrují za sníženého tlaku. Získá se ethylester 7-(2Rformyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny, kterého se použije ve stupni B bez dalšího přečištění.
Stupeň B: Ethylester 7-{2R-[4-(3-methoxymethylfenyl)-3-oxobut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. K roztoku diethylesteru [3-(3-methoxymethylfenyl)-2-oxopropyl]-fosfonové kyseliny (1,715 g, 5,46 mmol) v tetrahydrofuranu (43 ml) se při 0°C po částech přidá hydrid sodný (60% hmotn. v oleji, 240 mg, 6,00 mmol). Reakční směs se 45 minut míchá při teplotě místnosti, poté ochladí na 0°C a přikape se k ní roztok ethylesteru 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (připravený ve stupni A, asi 6,01 mmol) v tetrahydrofuranu (32 ml) . Reakční směs se 15 minut míchá při 0°C a 24 hodin při teplotě místnosti, ochladí na 0°C a přidáváním kyseliny octové se její pH upraví na 5. Ke směsi se přidá
ethylacetát a voda. Vodný roztok se promyje ethylacetátem (3x). Organické roztoky se spojí, promyjí vodou, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a zkoncentrují. Zbytek se přečistí středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (2:1 hexany:EtOAc až 1:1 hexany-.EtOAc až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu). Získá se ethylester 7-{2R-[4-(3-methoxymethylfenyl)-3-oxobut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl} heptanové kyseliny (1,4 g). 1H
NMR (CDC13) δ 7,29 (m, 1H) , 7,22 (m, 1H) , 7,16 (s, 1H) , 7,09
(d, 1H), 6,62 (dd, 1H) , 6,19 (d, 1H) , 4,41 (s, 2H), 4,10 (m,
3H) , 3,82 (s, 2H) , 3,51 (m, 1H) , 3,36 (S, 3H) , 2,67 (m, 1H) ,
2,43 -2,18 (m, 5H) , 1,75 (m, 1H) , 1,56 (m, 2H) , 1,42-1,17 (m,
9H) .
Stupeň C: Ethylestser 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-{2R-[4-(3-methoxymethylfenyl)-3-oxobut1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (1,40 g, 3,26 mmol) v bezvodém dichlormethanu (200 ml) se přidá (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidin (1M v toluenu, 0,49 ml, 0,49 mmol). Výsledný roztok se ochladí na -45°C. Reakční směs se 20 minut míchá a přidá se k ní katecholboran (1M v tetrahydrofuranu, 9,8 ml, 9,8 mmol). Reakční směs se 24 hodin míchá při -45°C a přidá se k ní tetrahydrofuran (100 ml) a kyselina chlorovodíková (1M, 100 ml) . Reakční směs se 24 hodin míchá při teplotě místnosti a 1,5 hodin při 40 až 45°C. Získaný roztok se zředí dichlormethanem a vodou. Vrstvy se oddělí a organický roztok se ochladí na 0°C a promyje ledově chladným hydroxidem sodným (0,5M) a poté vodným chloridem sodným. Organický roztok se znovu promyje ledově chladným chloridem sodným (0,5M) a poté vodným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (5:1 hexany :EtOAc až 2:1 hexany :EtOAc až 1:1 hexany: EtOAc až EtOAc • · ·· * · · • · · · · • ♦· · · · · · • » · · ··· »· 4 až 2% methanol v dichlormethanu) se získá ethylester 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }heptanové kyseliny (1,2 g) jako směs 3S:3R diastereomerů na funkční skupině alkoholu podle analýzy HPLC přibližně v poměru 12:1. 1H NMR (CDC13) (vybrané píky) δ 7,26-7,07 (m,
4H) , 5,67 (m, 1H) , 5,43 (m, 1H) , 4,39 (s, 2H) , 4,36 (m, 1H) , 4,06 (q, 2H) , 3,98 (m, 1H) , 3,41 (m, 1H) , 3,35 (s, 3H) ; MS 432,3 (M+l), 430,3 (M-l).
Stupeň D: Ethylester 7-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (1,2 g, 2,78 mmol) v ethanolu (100 ml) se přidá 10% palladium na uhlíku (120 mg) . Reakční směs se 24 hodin hydrogenuje v Parrově třepaném zařízení za tlaku 3 0 9,15 kPa. Katalyzátor se odstraní filtrací přes celit za použití ethanolu. Po přečištění středotlakou chromatografií za použití rozpouštědlového gradientu (dichlormethan až 2% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) (2x) se získá ethylester 7-{2S-(3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}-
heptanové kyseliny (1,1 g) . 1H NMR (CDC13) δ 7,28 (m, 1H), 7,18
(m, 2H) , 7,11 (m, 1H) , 4,42 (s, 2H) , 4,08 (q, 2H) , 3,82 (m,
1H) , 3,58 (m, 2H) , 3,38 (s, 3H) , 2,84 (m, 2H) , 2,66 (m, 1H) ,
2,41-2,23 (m, 4H) , 2,08 (m, 1H) , 1,78 (m, 1H) , 1,64 -1,37 (m,
9H), 1,28 (m, 4H), 1,22 (t, 3H).
Stupeň E: 7-{2S-[3R-Hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanová kyselina. K roztoku ethylesteru 7-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (1,1 g, 2,53 mmol) v ethanolu (32 ml) se přidá hydroxid sodný (6M, 16 ml) . Reakční směs se 24 hodin míchá a 1M kyselinou chlorovodíkovou se její pH upraví přibližně na 2. Ke směsi se přidá vodný chlorid sodný a di100
chlormethan. Vrstvy se oddělí a vodný roztok se promyje 5% methanolem v dichlormethanu (2x) . Spojené organické vrstvy se vysuší síranem horečnatým, přefitrují a filtrát se zkoncentruje. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu příkladu 2A (990 mg). NMR (CDC13) δ 7,28 (m, 1H), 7,18 (m, 2H), 7,11 (m, 1H) ,
4,43 (s, 2H) , 3,83 (m, 1H) , 3,57 (m, 2H) , 3,40 (s, 3H) , 2,91
(m, 1H) , 2,79 (m, 1H) , 2,66 (m, 1H), 2,43-2,25 (m, 4H) , 2,10
(m, 1H) , 1,83 (m, 1H) , 1,66-1,22 (m, 13H) ; MS 406,3 (M+l),
404, 3 (M- 1) .
Příklad 2B
7-[2R-(3-Hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-[2R-(4-naftalen-2-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]-heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion odvozený od dimethylesteru (3-naftalen-2-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny (646 mg, 2,21 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 81 mg, 2,02 mmol) nechá 163 hodin reagovat s ethylesterem 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (asi 1,84 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc) se získá ethylester 7-[2R-(4-naftalen-2-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (340 mg). 1H NMR
(CDC1 3) δ 7,78 (m, 3H) , 7,65 (s, 1H) , 7,46 (m, 2H) , 7,30 (d,
1H) , 6,66 (dd, 1H) , 6,24 (d, 1H) , 4,10 (m, 3H) , 3,99 (S, 2H),
3,45 (m, 1H) , 2,63 (m, 1H), 2,44-2,18 (m, 5H), 1,75 (m, 1H) ,
1,52 (m, 2H) , 1,37-1,06 (m, 9H); MS 436,1 (M+l), 434,1 (M-l).
Stupeň B: Ethylester 7-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxo-pyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se směs ethylesteru 7-[2R(4--naftalen-2-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]9 ·
101 heptano-vé kyseliny (337 mg, 0,774 mmol) a 10% palladia na uhlíku (50 mg) v ethanolu (50 ml) se 3 hodiny hydrogenuje za tlaku 343,5 kPa. Středotlakou chromatograf ií (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc) se získá ethylester 7-[2S-(4-naftalen-2-yl-3oxobutyl)-5-oxo-pyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (290 mg). 1H
NMR (CDC13) δ 7,80 (m, 3H) , 7,66 (s, 1H) , 7,47 (m, 2H) , 7,30
(m, 1H), 4,10 (q, 2H), 3,85 (S, 2H) , 3,52 (m, 2H), 2,77 (m,
1H) , 2,47 (m, 2H) , 2,26 (m, 4H) , 1,98 (m, 2H) , 1,61-1,16 (m,
13H); MS 438,1 (M+l), 436,1 (M-l).
Stupeň C: Ethylester 7-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (367 mg, 0,839 mmol) v ethanolu (20 ml) přidá tetrahydroboritan sodný (32 mg, 0,839 mmol). Reakční směs se 2 hodiny míchá a přidá se k ní voda (5 ml) . Těkavé látky se odstraní za sníženého tlaku a výsledný vodný roztok se promyje trichlormethanem (4x10 ml). Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:EtOAc až EtOAc) se získá ethylester 7-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (332 mg). NMR
(CDC13) δ 7,80 (m, 3H), 7,65 (s, 1H) , 7,46 (m, 2H) , 7,33 (m,
1H) , 4,07 (m, 2H), 3,91 (m, 1H) , 3,60 (m, 2H) , 2,98 (m, 1H),
2,84 (m, 2H), 2,35 (m, 2H) , 2,25 (t, 2H), 2,10 (m, 1H), 2,01
(m, 1H), 1,81 (m, 1H) , 1,70 (d, 1H) , 1,68-1,37 (m, 7H), 1,36-
1,20 (m, 7H); MS 440,1 (M+l).
Stupeň D: 7-[2S-(3-Hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina. Roztok ethylesteru 7-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (327 mg, 0,744 mmol), hydroxid sodný (1M, 0,8 ml) a methanol (15 ml) se 4 hodiny zahřívají ke zpětnému toku. Těkavé látky se odstraní za sníženého tlaku a ke zbytku se • ··
102 přidá voda. Vodný roztok se 1M kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 5 a okyselený roztok se promyje trichlormethanem (4 x 10 ml). Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Získá se 7- [2S(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]heptanová kyselina (180 mg) . 1H NMR (CDC13) δ 7,80 (m, 3H), 7,65 (s,
1H) , 7,46 (m, 2H) , 7,33 (m, 1H) , 3,94 (m, 1H) , 3,58 (m, 2H) ,
3,02-2,80 (m, 3H) , 2,34 (m, 4H) , 2,08 (m, 2H) , 1,67-1,23 (m,
13H); MS 412,1 (M+l), 410,2 (M-l).
Stupeň E: Sodná sůl 7-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny. K roztoku 7-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (35 mg, 0,0851 mmol) v methanolu se při 0°C přidá hydroxid sodný (1M, 0,085 ml). Reakční směs se 1,5 hodiny míchá při 0°C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se azeotropicky předestiluje s trichlormethanem (3x5 ml). Získá se sůl uvedená v nadpisu titulní sloučeniny z příkladu 2B (37 mg). XH NMR (CDC13) δ 7,69-7,24 (m, 7H) , 3,78 (m, 1H) , 3,40 (m, 2H) , 2,80 (m, 6H) , 2,16-1,70 (m, 4H) , 1,43-1,18 (m, 12H) .
Příklad 2C
7-[2R-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-oxobut-1-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (3-benzo[1,3]dioxol-5-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny (12,65 g, 44,2 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 1,62 g, 40,5 mmol) nechá 24 hodin reagovat s ethylesterem 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyše103 líny (asi 36,8 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (10% ethylacetát v hexanech až 40% ethylacetát v hexanech) se získá ethylester 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (4,18
g) · ’Ή NMR (CDC13) δ 6,76 (d, 1H), 6,63 (m, 3H) , 6,20 (d, 1H) ,
5,94 (S, 2H), 4,13 (m, 3H) , 3,74 (s, 2H) , 3,52 (m, 1H), 2,71
(m, 1H) , 2,38 (m, 2H) , 2,26 (m, 3H) , 1,78 (m, 1H) , 1,58 (m,
5H) , 1,46-1,19 (m, 6H) .
Stupeň B: Ethylester 7-[2R-(4-benzo[1,31]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se ethylester 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (4,18 g, 9,74 mmol) nechá reagovat s tetrahydroboritanem sodným (369 mg, 9,74 mmol) v ethanolu (32 ml) . Tetrahydroboritan sodný se přidává při 0°C a reakční směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti. Po přečištění středotlakou chromatografií (EtOAc) se získá ethylester 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (3,36 g).
Stupeň C: 7-[2R-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (3,36 g, 7,79 mmol) hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným (11 ml) v methanolu. Po přečištění středotlakou chromatografií (50% ethylacetát v hexanech až ethylacetát až 5% methanol v dichlormethanu) a poté na druhém sloupci za použití rozpouštědlového gradientu (1% MeOH až dichlormethan až 5% methanol v dichlormethanu) se získá 7-[2R-(4benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina (2,26 g) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 6,66 (m, 3H), 5,91 (s, 2H) , 5,69 (m, 1H) , 5,44 (m, 1H) , 4,31 (m, 1H) , 4,01
9 • 99 9 9
104 (m, 1H) , 3,45 (m, 1H) , 2,76 (m,
1H), 1,70-1,20 (m, 10H); MS 404,3
3H) , 2,34 (m, 4H) , (M+l), 402,1 (M-l).
2,15 (m,
Stupeň D: Sodná sůl 7-[2R-(4-Benzo[1,3] dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] heptanové kyseliny. Tato sodná sůl se připraví tak, že se hydrogenuhličitan sodný (470 mg, 5,60 mmol) ve vodě přidá k roztoku 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol -5 -yl -3 -hydroxybut-l-enyl) -5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (2,26 g, 5,60 mmol) v ethanolu. Reakční směs se 3 hodiny míchá a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se sodná sůl titulní sloučeniny z příkladu 2C. XH NMR (CD3 OD) δ 6,65 (m, 3H) , 5,85 (s, 2H) , 5,67 (m, 1H) , 5,34 (m, 1H) , 4,24 (m, 1H) , 4,09 (m, 1H) , 3,45 (m, 1H) , 2,79 (m, 2H) , 2,61 (m, 2H), 2,29 (m, 2H), 2,16 (m, 3H), 1,68-1,17 (m, 9H).
Příklad 2D
7-[2S-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] heptanová kyselina
Stupeň A: Ί-[2S-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se směs 7-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanové kyseliny (120 mg, 2,96 mmol), methanolu (30 ml) a 10% palladia na uhlíku (14 mg) hydrogenuje po dobu 18 hodin. Získá se 7-[2S-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptanová kyselina (71,3 mg). NMR
(CDC13) δ 6,68 (m, 3H) , 5,92 (s, 2H) , 3,74 (m, TH) , 3,57 (m,
2H) , 2,87 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,31 (m, 4H) ,
2,10 (m, 1H) , 1,99 (m, 1H) , 1,66-1, 19 (m, 13H); MS 406,3
(M+l), 404,3 (M-l).
» ♦
105
Příklad 2E
4-{3-[2R-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina
Stupeň A: Methylester 4-{3 - [2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-oxo-but-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyljbenzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (3-benzo[1,3]dioxol-5-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny (356 mg, 1,28 mmol) a NaH (60% v oleji, 46 mg, 1,14 mmol) nechá 24 hodin reagovat s methylesterem 4- [3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]benzoové kyseliny (asi 1,04 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (30% hexan v ethylacetátu až ethylacetát) se získá methylester 4-{3 - [2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] propyl }benzoové kyseliny (202 mg). 1H NMR
(CDC13) δ 7,92 (d, 2H) , 7,18 (d, 2H) , 6,73 (d, 1H) , 6,60 (m,
3H) , 6,15 (d, 1H) , 5,91 (S, 2H) , 4,08 (m, 1H) , 3,87 (s, 3H) ,
3,68 (s, 2H) , 3,56 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,59 (t, 2H) , 2,34
(m, 2H), 2,14 (m, 1H), 1,72 (m, 3H) ; MS 450,1 (M+l).
Stupeň B: Methylester 4-{3-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 4-{3-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-oxobut-1-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny (202 mg, 0,449 mmol) nechá 2 hodiny při 0°C reagovat s tetrahydroboritanem sodným (17 mg, 0,45 mmol) v methanolu (8 ml) . Po přečištění středotlakou chromatografií (ethylacetát až 2% methanol v dichlormethanu) se získá methylester 4-{3-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-
-yl]propyl}benzoové kyseliny (156 mg) . XH NMR (CDCI3) δ 7,94
(d, 2H) , 7,23 (d, 2H), 6,67 (m, 3H) , 5,92 (s, 2H) , 5,66 (m,
1H) , 5,45 (m, 1H) , 4,28 (m, 1H) , 3,99 (m, 1H) , 3,87 (s, 3H) ,
106 • · • · • ·«
3,55 (m, 1H) , 2,88-2,59 (m, 5H) , 2,50-1,61 (m, 7H) ; MS 452,1 (M+l) .
Stupeň C: 4-{3-[2R-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 4-{3-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny (156 mg, 0,345 mmol) hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (5 ml) za vzniku titulní sloučeniny z příkladu 2E (12 0 mg) . ΧΗ NMR
(CDC1 3) δ 7,99 (d, 2H) , 7,26 (m, 2H) , 6,74 (d, 1H) , 6,63 (m,
2H) , 5,91 (s, 2H) , 5,67 (m 1H) , 5,46 (m, 1H) , 4,29 (m, 1H) ,
3,99 (m, 1H) , 3,57 (m, 1H), 2,94-2,60 (m, 5H) , 2,36 (m, 2H) ,
2,14 (m, 1H) , 1,87- 1,62 (m, 4H); MS 436 ,2 (M-l).
Příklad 2F
4-{3-[2S-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] propyl}benzoová kyselina
Stupeň A: 4-{3-[2S-(4-Benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se 4-{3-[2R-(4-benzo[1,3]dioxol-5-yl-3-hydroxybut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoová kyselina (116 mg, 0,265 mmol) hydrogenuje za vzniku 4-{3-[2S-(4-benzo[1,3] dioxol-5-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzoové kyseliny (101 mg). H NMR (CDC13) δ 7,99 (d, 2H) , 7,26 (m, 2H) , 6,74 (d, 1H) , 6,63 (m, 2H) , 5,91 (s, 2H) , 5,68 (m, 1H) , 5,46 (m, 1H) , 4,29 (m, 1H) , 3,99 (m, 1H) , 3,56 (m, lh) , 2,91 (m, 4H) , 2,84-2,60 (m,
4H) , 2,36 (m, 2H) , 2,14 (m, 1H) , 1,87-1,62 (m, 4H) ; MS 438,2 (M-l).
·· · í * · ♦· · · · · · · · · ·
10/ ........
···· ··· ·· *·« ·· ·
Příklad 2G
7-{2S-[3R-Hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljheptanová kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(3-trifluormethoxyfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [2-oxo-3-(3-trifluormethoxyfenyl)propyl] fosfonové kyseliny (370 mg, 1,13 mmol) a NaH (60% v oleji, 45 mg, 1,13 mmol) nechá 16 hodin reagovat s ethylesterem 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (asi 1,13 mmol). Středotlakou chromatografií (19:1 hexany: :ethylacetát až 6:4 hexany:ethylacetát až 1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá ethylester 7-{2-oxo-5R-[3-OXO-4-(3-trifluormethoxyfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-1-yl}heptanové kyseliny (132 mg). NMR (CDC13) δ 7,35 (m, 1H), 7,12 (m, 2H) ,
7,05 (s, 1H) , 6,66 (dd, 1H) , 6,21 (d, 1H) , 4,18 (m, 1H) , 4,10 (q, 2H) , 3,86 (s, 2H) , 3,54 (m, 1H) , 2,70 (m, 1H) , 2,47-2,22 (m, 5H) , 1,78 (m, 1H) , 1,57 (m, 2H) , 1,61-1,21 (m, 9H) ; MS
470,2 (M+l), 468,1 (M-l).
Stupeň B: Ethylester 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(3-trifluormethoxyfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-1-yl}heptanové kyseliny (169 mg, 0,360 mmol) a (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 0,054 ml, 0,054 mmol) v dichlormethanu (25,0 ml) se při -45°C přikape katecholboran (1M v tetrahydrofuranu, 1,08 ml, 1,08 mmol) . Reakční směs se 19 hodin míchá při -45°C a přidá se k ní methanol (5 ml) . Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v trichlormethanu a organický roztok se promyje 1M hydroxidem sodným (4x10 ml) a vodou (1x10 ml). Organický roztok se vysuší ·· ·
108 * · ♦ • ·» · · « · * » · · · • · · ·· » síranem horečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (9:1 hexany:ethylacetát až 1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá ethylester 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-trifluormethoxy-fenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljheptanové kyseliny (90 mg) jako směs (3S:3R) diastereomerů na funkční skupině alkoholu v poměru 9 :
: 1 (podle analýzy HPLC) . XH NMR (CDC13) δ 7,32 (m, 1H) , 7,10
(m, 3H) , 5,70 (dd, 1H) , 5,50 (dd, 1H), 4,41 (m, 1H) , 4,09 (q,
2H) , 4,01 (m, 1H), 3,45 (m, 1H) , 2,85 (d, 2H) , 2,70 (m, 1H) ,
2,41 -2,24 (m, 4H), 2,17 (m, 1H) , 1,71-1,54 (m, 5H), 1,47-1,21
(m, 8H); MS 472,3 (M+l), 470,2 (M-l).
Stupeň C: Ethylester 7-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl) butyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se roztok ethylesteru 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljheptanové kyseliny (86 mg, 0,182 mmol) v ethanolu (40 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku 2,5 hodiny hydrogenuje za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (9:1 hexany:EtOActo 1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá ethylester 7-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}hepta-
nové kyseliny (49 mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,33 (m, 1H) , 7,11 (m,
3H) , 4,09 (q, 2H) , 3,84 (m, 1H), 3,59 (m, 2H), 2,85 (m, 2H) ,
2,72 (m, 1H) , 2,42-2,24 (m, 4H), 2,10 (m, 1H) , 1,79 (m, 1H) ,
1,68 -1,21 (m, 16H); MS 474,2 (M+l).
Stupeň D: 7-{2S-[3R-Hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)butyl]5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 7-{2S- [3R-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-1-yljheptanové kyseliny (45 mg, 0,095 mmol) 4 hodiny při teplotě zpětného toku hydrolyzuje 1M hydroxidem sodným (0,95 ml) v methanolu (20 ml). Získá se titulní sloučenina z příkla109 ·· · • · • · · • ·« ·· « · * · · · · · ···· ··· ·· ··· ·· ·
du 2G (35 mg) . 3H NMR (CDC13) δ 7,33 (m, 1H) , 7,10 (m, 3H) ,
3,86 (m, 1H), 3,58 (m, 2H), 2,90 (m, 1H) , 2,81 (m, 1H) , 2,73
(m, 1H), 2,34 (m, 4H) , 2,10 (m, 1H) , 1,80 (m, 1H) , 1,66 -1,24
(m, 13H); MS 446,3 (M+l) , 444,2 (M -1) .
Příklad 2H
7-{2S-[4-(3-Kyano-fenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanová kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-{2R- [4-(3-bromfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [3-(3-brom-fenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny (2,90 g, 9,03 mmol) a NaH (60% v oleji, 489 mg, 12,23 mmol) nechá 24 hodin reagovat s ethylesterem 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (asi 11,06 mmol). Mžikovou chromatografií (ethylacetát až 5% methanol v ethylacetátu) se získá ethylester 7-{2R- [4-(3-brom-feny1)-3-oxobut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}-heptanové kyseliny (2,63 g) . 1H
NMR (CDC13) δ 7,40 (d, 1H) , 7,35 (s, 1H) , 7,20 (m, 1H), 7,12
(d, 1H), 6,66 (dd, 1H) , 6,21 (d, 1H) , 4,17 (m, 1H) , 4,11 (q,
2H) , 3,81 (s, 2H) , 3,54 (m, 1H) , 2,71 (m, 1H) , 2,48 -2,21 (m,
5H) , 1,79 (m, 1H) , 1,58 (m, 2H) , 1,47 -1,20 (m, 9H) ; MS 466,1
(M+l).
Stupeň B: Ethylester 7-{2R-[4-(3-bromfenyl)-3S-hydroxybut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-{2R-[4-(3-bromfenyl)-3-oxobut-1-eny1]-5-oxopyrrolidin-l-yl }heptanové kyseliny (2,63 g, 5,66 mmol) a (R) -2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 0,85 ml, 0,85 mmol) v dichlormethanu (225 ml) se při -45°C přikape katecholboran (1M v tetrahydrofuranu, 17,0 ml, 17,0 mmol) Reakční směs se 17 hodin míchá při -45°C, načež se k ní přidá vodná
110 ·· ···· · • · · • · • · · • ·
kyselina chlorovodíková (1M, 17 ml). Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti. Organický roztok se postupně promyje 1M kyselinou chlorovodíkovou (1 x 100 ml) , vodou (2 x 100 ml) a vodným chloridem sodným (1 x 100 ml) . Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění mžikovou chromatografií (ethylacetát až 5% methanol v ethylacetátu) se získá ethylester 7-{2R-[4-(3-bromfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (705 mg) jako 3S:3R diastereomery na funkční skupině alkoholu v poměru přibližně 95 : 5 podle NMR. 1H NMR (CDC13) δ 7,36 (m, 2H) , 7,15 (m, 2H) , 5,70 (dd, 1H) , 5,48 (dd, 1H) ,
4,40 (m, 1H) , 4,10 (q, 2H) , 4,03 (m, 1H) , 3,46 (m, 1H) , 2,81 (d, 2H) , 2,72 (m, 1H) , 2,39 (m, 2H) , 2,27 (t, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,84-1,22 (m, 13H) .
Stupeň C: Ethylester 7-{2R-[4-(3-kyanofenyl)-3S-hydroxybut-lenyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljheptanové kyseliny. Roztokem ethylesteru 7-{2R-[4-(3-bromfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (700 mg, 1,50 mmol) v dimethylformamidu (2,6 ml) se 5 minut nechá probublávat dusík. K roztoku se přidá kyanid zinečnatý (108 mg, 0,92 mmol) a tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (58 mg, 0,05 mmol). Reakční směsí se 5 minut nechá probublávat dusík. Reakční směs se 24 hodin zahřívá na 105°C, přidá se k ní další tetrakis(trifenylfosf in) palladium ( 0 ) (58 mg, 0,050 mmol) a v zahřívání se pokračuje po dobu 1,5 hodiny. Reakční směs se nalije do vody (50 ml) . Vodný roztok se promyje diethyletherem (3 x 50 ml) . Spojené etherové vrstvy se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Středotlakou chromatografií (ethylacetát až 5% methanol v ethylacetátu až 10% methanol v ethylacetátu) se získá ethylester 7-{2R-[4(3-kyanofenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (323 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,53 (m, 2H) ,
7,48-7,39 (m, 2H), 5,72 (dd, 1H), 5,51 (dd, 1H), 4,41 (m, 1H),
111 • · · · · · • · · * · · • · · · · · · · • · · · · • · · 9 9 9
4,10 (q, 2H) , 4,03 (m, 1H) , 3,46 (m, 1H) , 2,86 (m, 2H) , 2,73 (m, 1H) , 2,36 (m, 2H) , 2,27 (t, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,71-1,22 (m, 13H); MS 413,3 (M+l).
Stupeň D: Ethylester 7-{2S-[4-(3-kyanofenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se roztok ethylesteru 7-{2R-[4-(3-kyanofenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl] -5-oxopyrrolidin-1-yl}heptanové kyseliny (150 mg, 0,36 mmol) v ethanolu (13 ml) 3,5 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (16 mg) za tlaku 309,15 kPa. Získá se ethylester 7-{2S-[4-(3-kyanofenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}-heptanové kyseliny (150 mg). ’Ή NMR (CDC13) δ 7,54 (m, 2H) ,
7,44 (m, 2H) , 4,09 (q,2H), 3,84 (m, 1H) , 3,60 (m, 2H) , 2,952,71 (m, 3H) , 2,36 (m, 2H) , 2,27 (t, 2H) , 2,11 (m, 1H) , 1,79 (m, 1H), 1,68-1,20 (m, 16H); MS 415,2 (M+l).
Stupeň E: 7-{2S-[4-(3-Kyanofenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 7-{2S-[4-(3-kyanofenyl)-3R-hydroxybutyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}-heptanové kyseliny (150 mg, 0,36 mmol) 24 hodin při teplotě místnosti hydrolyzuje 5M hydroxidem sodným (3 ml) v ethanolu (5 ml).
Získá se titulní sloučenina z příkladu 2H (119 mg),1H
(CDC13) δ 7,52 (m, 2H), 7,43 (m, 2H) , 3, 84 (m, 1H), 3,56
2H), 2,93-2,70 (m, 3H), 2,32 (m, 4H) , 2, 09 (m, 1H), 1,78
1H), 1,65-1,21 (m, 13H); MS 387,2 (M+l) •
Pří k 1 . a d 2 I
7-(2S-{3R-Hydroxy-4-[3-(2-methoxy-ethyl)-fenyl]-butyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanová kyselina
112 • · • *
Stupeň A: Ethylestser 7-(2R-{4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-3-oxobut-l-enyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z diethylesteru {3-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-2-oxopropyl}fosfonové kyseliny (130 mg, 0,396 mmol) a NaH (60% v oleji, 17 mg, 0,425 mmol) nechá 24 hodin reagovat s ethylesterem 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (asi 0,461 mmol). Středotlakou chromatografií (50% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá ethylester 7-(2R-{4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-3-oxobut-l-enyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl) -heptanové kyseliny (101 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,23
(m, 1H) , 7,11 (m, : 1H) , 7,02 (m, 2H) , 6,62 (dd, 1H) , 6,20 (d,
1H), 4,12 (m, 3H) , 3,80 (s, 2H) , 3,56 (t, 2H) , 3,51 (m, 1H) ,
3,32 (s, 3H) , 2,84 (t, 2H) , 2,68 (τη, 1H) , 2,37 (m, 2H) , 2,24
(m, 3H) , 1,75 (m, 1H) , 1,56 (m, 2H) , 1,4 2-1,17 (m, , 9H) ; MS
444,2 (M+: 1) .
Stupeň B: Ethylester 7-(2R-(3S-hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-but-l-enyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny. K roztoku ethylesteru 7-(2R-{4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-3-oxobut-l-enyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (88 mg, 0,198 mmol) a (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 0,200 ml, 0,200 mmol) v dichlormethanu (10 ml) se při -45°C přikape katecholboran (1M v tetrahydrofuranu, 0,60 ml, 0,60 mmol) . Reakční směs se 24 hodin míchá při -45°C a přidá se k ní vodná kyselina chlorovodíková (1M, 10 ml) . Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti a 1,5 hodiny míchá. Organický roztok se promyje chladným 1M hydroxidem sodným (3 x 15 ml) a poté vodným chloridem sodným (1 x 2 0 ml) . Organický roztok se vysuší síranem horečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (50% ethylacetát v hexanech až 75% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá ethylester 7-(2R-{3S-hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-but-l-enyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (45
113
mg) ve formě směsi 3S:3R diastereomerů na funkční skupině alkoholu v poměru přibližně 4 : 1 podle XH NMR. ΧΗ NMR (CDC13)
δ 7, 22 (m, 1] H) , 7,09 (m, 1H) , 7,04 (m, 2H) , 5,72 (dd, 1H) ,
5,49 (dd, 1H) , 4,38 (m , 1H), 4, 10 (q, 2H) , 4 , 02 (m, 1H), 3,58
(t, 2H), 3,46 (m, 1H) , 3,34 (s, 3H) , 2,87-2, 68 (m, 5H), 2,41-
2,24 (m, 4H) , 2,18 (m, 1H), 1,7 0 (m, 2H), 1, 59 (m, 2H), 1,48-
1,21 (m, 9H) ; MS 446,4 (M+l).
Stupeň C: Ethylester 7-(2S-{3R-hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-butyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se roztok ethylesteru 7-(2R-{3S-hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-but-l-enyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (43 mg, 0,0965 mmol) v ethanolu (20 ml) 18 hodin hydrogenuje za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (20 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (50% ethylacetát v hexanech až ethylacetát až 10% methanol v dichlormethanu) se získá ethylester 7-(2S-{3R-hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-butyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (16 mg). MS 448,3 (M+l).
Stupeň D: 7-(2S-{3R-Hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-butyl } -5-oxopyrrolidin-l-yl) heptanová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 7-(2S-{3R-hydroxy-4-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-butyl}-5-oxopyrrolidin-l-yl) heptanové kyseliny (15 mg, 0,034 mmol) 18 hodin při teplotě místnosti hydrolyzuje 6M hydroxidem sodným (0,20 ml) v ethanolu (0,50 ml) . Získá se titulní sloučenina z
příkladu 21 ( 14 mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,22 (m, 1H) , 7,05 (m,
3H), 3,82 (m, 1H) , 3,56 (m, 4H) , 3,32 (s, 3H), 2,93-2,82 (m,
3H), 2,76 (m, 1H) , 2,62 (m, 1H), 2,42-2,25 (m, 4H) , 2,09 (m,
1H) , 1,81 (m, 1H) , 1,66 -1,22 (m, 13H) ; MS 420,3 (M+l); 418,2
(M-l).
• ·
114
Příklad 2 J
7-{2R-[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}-heptanová kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(3-fenoxyfenyl)but-1-enyl]pyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [2-oxo-3-(3-fenoxyfenyl)propyl]fosfonové kyseliny (633 mg, 1,98 mmol) a NaH (60% v oleji, 70 mg, 1,74 mmol) nechá 24 hodin reagovat s ethylesterem 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (asi 1,58 mmol). Středotlakou chromatografií (ethylacetát) se získá ethylester 7-{2-oxo-5R-[3-OXO-4-(3-fenoxyfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-l-yl}hepta-
nové kyseliny (215 mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,28 (m, 3H) , 7,08 (m,
1H) , 6,97 (m, 2H) , 6,89 (m, 2H) , 6,83 (m, 1H) , 6,62 (dd, 1H) ,
6,19 (d, 1H) , 4,13 (m, 1H) , 4,08 (g, 2H) , 3,79 (s, 2H) , 3,51
(m, 1H) , 2,68 (m, 1H) , 2,35 (m, 2H) , 2,24 (m, 3H) , 2,24 (m,
3H) , 1,75 (m, 1H) , 1,54 (m, 2H), 1,43-1,20 (m, 9H) .
Stupeň B: Ethylestesr 7-{2R-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)but-lenyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se ethylester 7-{2-OXO-5R-[3-oxo-4-(3-fenoxyfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-1-yl}heptanové kyseliny (215 mg, 0,451 mmol) nechá 4 hodiny při 0°C reagovat s tetrahydroboritanem sodným (17 mg, 0,45 mmol) v ethanolu (3 ml) . Po přečištění středotlakou chromatografií (ethylacetát) se získá ethylester 7-{2R-[3-hydroxy-4-(3 fenoxyfenyl)but-l-enyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}-heptanové kyše-
liny (167 mg) NMR (CDC13 ) δ 7,33 (m, 2H) , 7,25 (m, 1H) ,
7,10 (m, 1H) , 6,99 (m, 2H) , 6,93 (m, 1H) , 6,86 (m, 2H) , 5,72
(m, 1H) , 5,45 (m, 1H) , 4,37 (m, 1H) , 4,10 (q, 2H) , 3,47 (m,
1H) , 2,82 (m, 3H) , 2,35 (m, 2H) , 2,26 (t, 2H) , 2,15 (m, 1H) ,
1,70 -1,21 (m, 13H) .
115 • ·
Stupeň C: 7-{2R-[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 7-{2R-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljheptanové kyseliny (29 mg, 0,060 mmol) 24 hodin při teplotě místnosti hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v ethanolu
(4,0 ml) za vzniku titulní sloučeniny z příkladu 2J (2 0 mg) . 1H
NMR (CDC13) δ 7,33-7,21 (m, 3H) , 7,08 (m, 1H) , 6, 98-6,84 (m,
5H) , 5,70 (m, 1H) , 5,44 (m, 1H) , 4,36 (m, 1H) , 4, 00 (m, 1H) ,
3,44 (m, 1H) , 2,85-2,51 (m, 3H), 2,32 (m, 4H) , 2, 14 (m, 1H) ,
1,68 -1,18 (m. 10H) .
Příklad 2 K
7-{2S-[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanová kyselina
Stupeň A: Ethylester 7-{2S-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se směs ethylesteru 7-{2R-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl)heptanové kyseliny (139 mg, 0,290 mmol), methanolu (30 ml) a 10% palladia na uhlíku (14 mg) v Parrově třepaném zařízení 18 hodin hydrogenuje za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatograf i í (1:1 hexany-.ethylacetát) se získá ethylester 7-{2S-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxo-
pyrrolidin-l-yl}heptanové kyseliny (86 mg) . H NMR (CDC1 3) δ
7,35-7,24 (m, 3H) , 7,10 (m, 1H) , 6,99 (m, 2H) , 6,93 (m, 1H) ,
6,87 (m, 2H) , 4,09 (q, 2H) , 3,80 (m, 1H) , 3,58 (m, 2H) , 2, 82
(m, 2H) , 2,64 (m, 1H) , 2,42-2,24 (m, 4H) , 2,10 (m, 1H) , 1, 77
(m, 1H), 1,66-1,21 (m, 16H).
··
116
Stupeň B: 7-{2S-[3-Hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptanová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 7-{2S-[3-hydroxy-4-(3-fenoxyfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljheptanové kyseliny (86 mg, 1,79 mmol) 18 hodin hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (4 ml) za vzniku titulní
sloučeniny z příkladu 2K (62 mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,33-7,23
(m, 3H) , 7,09 (m, 1H) , 6,98 (m, 2H) , 6,91 (m, 1H) , 6,86 (m,
2H) , 3,80 (m, 1H) , 3,56 (m, 2H) , 2,88 (m, 1H), 2,77 (m, 1H) ,
2,64 (m, 1H) , 2,38-2,28 (m, 4H) , 2,09 (m, 1H), 1,77 (m, 1H) ,
1,64-1,21 (m, 13H).
Příklad 3A
5{-3-[2S-(3-Hydroxy-4-thiofen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylová kyselina
Stupeň A: Methylester 5-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-thiofen-2-yl-but-1-enyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (2-oxo-3-thiofen-2-yl-propyl)fosfonové kyseliny (101 mg, 0,407 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 16 mg, 0,41 mmol) nechá 17 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (připraveným z methylesteru 5-[3-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2karboxylové kyseliny podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni A) (asi 0,34 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-{3-[2-OXO-5R-(3-oxo-4-thiofen-2-yl-but-1-enyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (74 mg). XH NMR (CDC13) δ 7,60 (d, 1H) , 7,21 (m, 1H) , 6,96 (m,
1H) , 6,88 (m, 1H) , 6,78 (d, 1H) , 6,65 (dd, 1H) , 6,23 (d, 1H) , 4,14 (m, 1H) , 4,01 (s, 2H) , 3,84 (s, 3H) , 3,58 (m, 1H) , 2,88• ·
117
2,77 (m, 3H), 2,46-2,17 (m, 3H), 1,82 (m, 3H); MS 418,0 (M+l), 416,0 (M-l).
Stupeň B: Methylester 5-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-thiofen-2-ylbutyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-thiofen-2-yl-but-l-enyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (71 mg, 0,17 mmol) 2 hodiny hydrogenuje v ethanolu (20 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (50 mg) za tlaku 343,5 kPa. K reakční směsi se přidá další katalyzátor (50 mg) a v hydrogenaci směsi se pokračuje další 1 hodinu. Získá se methylester 5-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-thiofen-2-ylbutyl)pyrrolidin-l-yl]-
propyl}thiof en-2 -karboxylové kyseliny ( 63 mg) . XH NMR (CDCI3) δ
7,61 (d, 1H) , 7,22 (m, 1H) , 6,97 (m, 1H) , 6,88 (m, 1H), 6,80
(d, 1H) , 3,88 (s, 2H) , 3,84 (s, 3H) , 3,65 (m, 1H) , 3,52 (m,
1H) , 2,95 (m, 1H) , 2,81 (t, 2H), 2,48 (m, 1H) , 2,30 (m, 2H) ,
2,07-1,80 (m, 4H), 1,55 (m, 3H); MS 419,9 (M+l), 418,0 (M-l).
Stupeň C: Methylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-thiofen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-thiofen-2-ylbutyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (60 mg, 0,143 mmol) během 2 hodin redukuje tetrahydroboritanem sodným (5 mg, 0,132 mmol). Po přečištění preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát) se získá methylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-thiofen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-lyl] propyl} thiof en- 2 -karboxylové kyseliny (10 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,18 (d, 1H) , 6,96 (m, 1H) , 6,85 (d,
1H) , 6,81 (d, 1H) , 3,83 (s, 3H) , 3,80 (m, 1H) , 3,61 (m, 2H) ,
3,00 (m, 2H) , 2,89 (m, 1H) , 2,83 (t, 2H) , 2,34 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H), 1,98-1,23 (m, 8H); MS 422,2 (M+l).
9 • 9
Stupeň D: 5-{3-[2S-(3-Hydroxy-4-thiofen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-thiofen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (10 mg, 0,024 mmol) během 29 hodin hydrolyzuje hydroxidem sodným (1M, 0,03 ml) v methanolu (5 ml) za vzniku titulní sloučeniny z
příkladu 3A (10 mg) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,68 (d, 1H) , 7,18 (m,
1H) , 6,96 (m, 1H) , 6,85 (m, 2H), 3,80 (m, 1H) , 3,63 (m, 2H) ,
3,01 (m, 2H), 2,91 (m, 1H) , 2,85 (t, 2H) , 2,36 (m, 2H), 2,11
(m, 1H), 2,00-1,18 (m, 8H).
Příklad 3B
5-(3-{2S-[4-(4-Chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxo-pyrrolidin-l-yljpropyl)thiofen-2-karboxylové kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4-(4-chlorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [3-(4-chlorfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny (113 mg, 0,407 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 16 mg, 0,41 mmol) nechá 17 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 0,34 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(4-chlorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (94 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) ,
7,29 (m, 2H) , 7,10 (d, 2H) , 6,78 (d, 1H) , 6,62 (dd, 1H) , 6,18 (d, 1H) , 4,13 (m, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 3,79 (s, 2H) , 3,56 (m, 1H) , 2,87-2,77 (m, 3H) , 2,47-2,16 (m, 3H) , 1,80 (m, 3H) .
119 « · · ·
Stupeň Β·. Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5- (3-{2R- [4-(4-chlorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }propyl) thiofen-2-karboxylové kyseliny (91 mg, 0,204 mmol) 2 hodiny hydrogenuje v ethanolu (20 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (50 mg) za tlaku 343,5 kPa. Získá se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (84 mg). '’Ή NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,30 (d, 2H) , 7,11 (d, 2H) , 6,80 (d, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 3,66 (s, 2H) , 3,64 (m, 1H) , 3,51 (m, 1H) , 2,94 (m, 1H) , 2,81 (t, 2H) , 2,42 (m, 2H) , 2,29 (m,
2H) , 2,04-1,79 (m, 4H) , 1,56 (m, 2H) ; MS 448,0 (M+l), 446,0 (M-l).
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl] -5-oxo-pyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (81 mg, 0,181 mmol) během 2 hodin redukuje tetrahydroboritanem sodným (7 mg, 0,181 mmol). Po přečištění preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát, 2x) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-
-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen -2-karboxylové kyseliny (54
mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,28 (d, 2H), 7,12 (d, 2H) ,
6,81 (d, 1H) , 3,82 (s, 3H) , 3,77 (m, 1H), 3,60 (m, 2H) , 2,99
(m, 1H) , 2,83 (t, 2H) , 2,77 (m, 1H) , 2,62 (m, 1H) , 2,34 (m,
2H), 2,09 (m, 1H), 1,97-1,30 (m, 8H); MS 450,0 (M+l).
Stupeň D: 5-(3-{2S-[4-(4-Chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxo120 • · pyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (52 mg, 0,116 mmol) během 29 hodin při teplotě zpětného toku hydrolyzuje hydroxidem sodným (1M, 0,14 ml) v methanolu (5 ml).
Získá se 5-(3-{2S-[4-(4-chlorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl jpropyl)thiofen-2-karboxylové kyselina (16 mg). H NMR (CDC13) δ 7,67 (d, 1H), 7,28 (d, 2H), 7,12 (d, 2H), 6,84 (d, 1H) , 3,78 (m, 1H) , 3,62 (m, 1H) , 3,01 (m, 1H) , 2,85 (t,
2H) , 2,77 (m, 1H) , 2,63 (m, 1H) , 2,36 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 1,90 (m, 3H), 1,75 (m, 1H), 1,69-1,24 (m, 4H); MS 434,0 (M-l).
Příklad 3C
5-(3-{2S-[3-Hydroxy-4-(2-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(2-trifluormethylf enyl)but-1-enyl]pyrrolidin-1-y1}propyl)thiof en-2 -karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [2-oxo-3-(2-trifluormethylfenyl)propyl]fosfonové kyseliny (74 mg, 0,239 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 10 mg, 0,239 mmol) nechá po dobu 17 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 0,239 mmol). Po přečištění středotlakou chromatograf ií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(2-trifluormethylfenyl)but-1-enyl]pyrrolidin-1-y1}propyl)thiofen-2-karboxylové
kyseliny (32 mg). XH NMR (CDC 13) δ 7,66 (d, 1H) , 7,60 (m, 1H) ,
7,51 (m, 1H) , 7,39 (m, 1H) , 7,28 (m, 1H) , 6,79 (m, 1H) , 6,64
(dd, 1H) , 6,22 (d, 1H) , 4,16 (m, 1H), 3,83 (s, 3H) , 3,78 (S,
2H) , 3,60 (m, 1H), 2,93- -2,79 (m, 3H), 2,48- 2,20 (m, 3H) , 1,83
(m, 3H); MS 479,9 (M+l). 478,0 (M-l).
121 ·· · • · · • · · * • · ···· • · «
Stupeň B: Methylester 5-(3 -{2-oxo-5S-[3-oxo-4-(2-trifluormethylfenyl)-butyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-(3 -{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(2-trifluormethylfenyl)but-1-enyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (29 mg, 0,060 mmol)· 2 hodiny hydrogenuje v ethanolu (20 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (40 mg) za tlaku 343,5 kPa. Získá se methylester 5-(3-{2-OXO-5S-[3-oxo-4-(2-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)-
thiofen-2-karboxylové kyseliny (29 mg) . τΗ NMR (CDC13) δ 7,66
(d, 1H) , 7,59 (m, 1H) , 7,52 (m, 1H) , 7,39 (m, 1H) , 7,27 (m,
1H) , 6,80 (d, 1H) , 3,83 (s, 3H) , 3,78 (s, 2H), 3,64 (m, 1H) ,
3,55 (m, 1H) , 2,97 (m, 1H) , 2,81 (t, 2H), 2,48 (m, 1H) , 2,33
(m, 2H) , 2,05 (m, 2H) , 1,87 (m, 2H) , 1,56 (m, 3H) ; MS 482,0
(M+l), 480,0 (M-l).
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[3-hydroxy-4-(2-trifluormethylfenyl) butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propylj thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-(3-{2-oxo-5S-[3-oxo-4-(2-trifluormethylfenyl)butyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (26 mg, 0,054 mmol) během 2 hodin redukuje tetrahydroboritanem sodným (2 mg, 0,054 mmol). Po přečištění preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát) se získá methylester 5-(3-(2S-[3-hydroxy-4-(2-trifluormethylfenyl) butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové
kyseliny (10 mg). 1H NMR (CDCI3) δ 7,65 (d, 1H) , 7,59 (m, 1H) ,
7,49 (m, 1H) , 7,36 (m, 2H) , 6,81 (d, 1H), 3,81 (S, 3H) , 3,81
(m, 1H) , 3,62 (m, 2H) , 3,02 (m, 2H) , 2,83 (t, 2H) , 2,78 (m,
1H), 2,34 (m, 2H), 2,12 (m, 1H) , 2,01-1,35 (m, 8H) ; MS 484,0
(M+l).
Stupeň D: 5-(3-{2S-[3-Hydroxy-4-(2-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina.
122 ·· ·· ··· ··
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[3-hydroxy-4-(2-trifluormethylfenyl) butyl]-5-oxopyrro1idin-1-y1}propyl)thiofen-2-karboxy1ové kyseliny (10 mg, 0,0207 mmol) během 29 hodin při teplotě zpětného toku hydrolyzuje hydroxidem sodným (1M, 0,07 ml) v methanolu (5 ml). Získá se 5-(3-{2S-[3-hydroxy-4-(2-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina (13 mg)
7,50 (m, 1H) , 7,37 (m, 3H) ,
(m, 2H) , 3,04 (m, 2H) , 2,85
2H) , 2,12 (m, 1H) , 2,02-1,2
(M-l) .
Pří
. ίΉ NMR (CDC13) δ 7,66 (m, 1H) ,
;, 84 (d, 1H), 3,83 (m, 1H) , 3,64
(t, 2H) , 2,78 (m, 1H), 2,3 7 (m,
(m, 8H) ; MS 470,1 (M+l), 468,0
k 1 a d 3 D
5-(3-{2S-[4-(4-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l~ -yljpropyl)thiofen-2-karboxylová kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4 -(4-fluorfenyl)-3-oxobut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [3-(4-fluor-fenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny (106 mg, 0,407 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 16 mg, 0,407 mmol) nechá 17 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 0,407 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (77 mg). 3H NMR (CDC13) δ 7,60 (d, 1H) , 7,16 (m,
2H) , 7,00 (m, 2H) , 6,77 (d, 1H) , 6,62 (dd, 1H) , 6,19 (d, 1H) , 4,13 (m, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 3,79 (s, 2H) , 3,57 (m, 1H) , 2,872,77 (m, 3H) , 2,37 (m, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,80 (m, 3H) ; MS
430,0 (M+l), 428,1 (M-l).
123 • · · • ···
Stupeň B: Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluorfenyl)-3-oxobut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (74 mg, 0,172 mmol) 2 hodiny hydrogenuje v ethanolu (20 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (50 mg) za tlaku 343,5 kPa. Získá se methylester 5-(3-{2S- [4-(4-fluorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (72 mg). ’Ή NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,14 (m, 2H) , 7,01 (m, 2H) ,
6,80 (d, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 3,66 (s, 2H) , 3,64 (m, 1H) , 3,51 (m, 1H) , 2,94 (m, 1H) , 2,81 (t, 2H) , 2,43 (m, 2H) , 2,30 (m,
2H) , 2,05-1,79 (m, 4H) , 1,56 (m, 2H) ; MS 432,0 (M+l), 430,1 (M-l).
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-ylJpropyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (69 mg, 0,160 mmol) během 2 hodin redukuje tetrahydroboritanem sodným (6 mg, 0,160 mmol). Po přečištění preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (37 mg). ’Ή NMR (CDC13) δ
7,61 (d, 1H) , 7,15 (m, 2H) , 7,00 (m, 2H) , 6,81 (d, 1H) , 3,82
(s, 3H) , 3,75 (m, 1H) , 3,60 (m, 2H) , 2,99 (m, 1H) , 2,83 (t,
2H) , 2,77 (m, 1H) , 2,34 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 2,00-1,80 (m,
4H) , 1,75 (m, 1H) , 1,68- 1,34 (m, 4H); MS 434,3 (M+l).
Stupeň D: 5-(3-{2S-[4-(4-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se 5-(3··
124 ...............
-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (35 mg, 0,0807 mmol) během 29 hodin při teplotě zpětného toku hydrolyzuje hydroxidem sodným (1M, 0,10 ml) v methanolu (5 ml). Získá se 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina (36 mg). ‘‘H NMR (CDC13) δ
7,67 (d, 1H) , 7,15 (m, 2H) , 7,00 (m, 2H) , 6,84 (d, 1H) / 3,77
(m, 1H) , 3,62 (m, 2H) , 3,01 (m, 1H) , 2,85 (t, 2H), 2, 78 (m,
1H) , 2,62 (m, 1H) , 2,36 (m, 2H), 2,10 (m, 1H) , 2,00-1, 72 (m,
4H) , 1,69- -1,34 (m, 4H); MS 420,1 (M+l), 417, 7 (M- 1) .
Příklad 3E
5-(3-{2S-[4-(4-Fluorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluorfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }-propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. K roztoku methylesteru 5-(3-{2R-[4-(4-fluorfenyl) -3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (20 mg, 0,047 mmol) a (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 0,047 ml, 0,047 mmol) v bezvodém toluenu (3,0 ml) se při -45°C přikape katecholboran (1M v tetrahydrof uranu, 0,14 ml, 0,14 mmol). Reakční směs se 17 hodin míchá při -45°C a přidá se k ní methanol. Výsledná směs se zahřeje na teplotu místnosti a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v trichlormethanu. Organický roztok se promyje 1M hydroxidem sodným (4 x 5 ml) , 1M kyselinou chlorovodíkovou (1 x 5 ml) a vodou (1 x 5 ml) . Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluorfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny jako směs 3S:3R diaste• ·
125 • · · • · · ♦ • · ··· • · · ·· » reomerů na alkoholické funkční skupině v poměru přibližně 39:1 podle HPLC. MS 432,1 (M+l).
Stupeň B: Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluorfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}-propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (15 mg, 0,035 mmol) po dobu 2 hodin hydrogenuje v ethanolu (10 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (5 mg) za tlaku 343,5 kPa. Získá se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-
-karboxylové kyseliny (11 mg) . NMR (CDCI3) δ 7,60 (d, 1H) ,
7,14 (m, 2H) , 7,00 (m, 2H) , 6,81 (d, 1H), 3,82 (s, 3H) , 3,77
(m, 1H) , 3,60 (m, 2H) , 3,00 (m, 1H) , 2,83 (t, 2H) , 2,76 (d,
1H) , 2,63 (dd, 1H), 2,34 (m, 2H) , 2,0£ i (m, 1H), 1,98 -1,42 (m,
8H); MS 434,1 (M+l).
Stupeň C: 5-(3-{2S-[4 -(4-Fluorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (11 mg, 0,0254 mmol) 3 hodiny při teplotě zpětného toku hydrolyzuje hydroxidem sodným (1M, 0,25 ml) v methanolu (4 ml). Získá se
5-(3-{2S-[4-(4-fluorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljpropyl)thiofen-2-karboxylové kyselina (9 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,67 (d, 1H) , 7,14 (m, 2H) , 6,99 (m, 2H) , 6,83 (d, 1H) , 3,78 (m, 1H) , 3,62 (m, 2H) , 3,02 (m, 1H) , 2,85 (t, 2H) , 2,76 (dd, 1H) , 2,64 (dd, 1H) , 2,37 (m, 2H) , 2,09 (m, 1H) ,
2,00-1,42 (m, 8H); MS 420,1 (M+l), 418,0 (M-l).
Příklad 3F «« • 4 ·
126 • · ·· · · · • · · · « 4 * * · · · · · • · · · · ·· «·· ··
5-{3-[2S-(3-Hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyselina
Stupeň A: terc-Butylester 5-{3-[2R-(4-naftalen-2-yl-3-oxobut-1 - enyl) - 5 - oxo-pyrrolidin-1 -yl ] propyl }:thiof en- 2 -karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (3-naftalen-2-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny (208 mg, 0,71 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 26 ;mg, 0,65 mmol) nechá 18 hodin reagovat s terc-butylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl] thiofen-2 -karboxylové kyseliny (asi 0,589 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá terc-butylester 5-(3-[2R-(4-naftalen-2-y1-3 -oxobut-1-enyl)-5-oxopyrrolidin-1-y1]propyl}thiof en-2 -karboxylové kyseliny (181 mg), XH NMR (CDC13) δ 7,79 (m, 3H),
7,65 (s, 1H) , 7,47 (m, 3H) , 7,29 (m, 1H) , 6,63 (m, 2H) , 6,22 (d, 1H) , 4,08 (m, 1H) , 3,98 (s, 2H) , 3,49 (m, 1H) , 2,73 (m,
1H) , 2,63 (m, 2H) , 2,36 (m, 2H) , 2,19 (m, 1H) , 1,72 (m, 3H) ,
1,54 (s, 9H); MS 504,1 (M+l), 502,0 (M-l).
Stupeň B: terc-Butylestser 5-(3-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se. terc-butylester 5-(3-[2R-(4-naftalen-2-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidín-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (178 mg, 0,353 mmol) 3 hodiny hydrogenuje v ethanolu (40 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (75 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá terc-butylester 5-{3-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (144 mg) . 1H NMR (CDC13) δ 7,80 (m, 3H), 7,66 (s, 1H), 7,48 (m, 3H), 7,30 (m, 1H), 6,74 (d, 1H) , 3,85 (S, 2H) , 3,59 (m, 1H) , 3,48 (m, 1H) , 2,89 (m, • ·
127 • » · • 9 · · _ > · · «··· • · · · · · · · ···· *♦· 99 ··· «· *
1H) , 2,73 (t, 2H) , 2,47 (tn, 2H) , 2,26 (m, 2H) , 2,04-1,74 (m,
4H), 1,53 (s, 9H) , 1,50 (m, 2H); MS 506,1 (M+l), 503,8 (M-l).
Stupeň C: terc-Butylester 5-{3-[2S-(3~hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se terc-butylester 5-{3-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (142 mg, 0,281 mmol) během 2 hodin redukuje tetrahydroboritanem sodným (11 mg, 0,281 mmol). Po přečištění středotlakou chromatograf ií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá terc-butylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (125 mg). JH NMR (CDC13) δ 7,79 (m, 3H) , 7,65 (s, 1H) , 7,52 (d, 1H) , 7,46 (m, 2H) , 7,32 (d, 1H) , 6,76 (d, 1H) , 3,90 (m, 1H) , 3,62 (m, 2H) , 2,98 (m, 2H) , 2,81 (m, 3H) , 2,34 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 2,04-1,75 (m, 2H) , 1,70-1,36 (m, 6H) , 1,52 (s, 9H) ; MS 508,0(M+l).
Stupeň D: 5-{3-[2S-(3-Hydroxy-4~naftalen-2-yl]-butyl)-5-oxopyrrolidin-l-propyl}thiofen-2-karboxylová kyselina. K roztoku terc-butylesteru 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylová kyseliny (123 mg, 0,242 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se při 0°C přidá trifluoroctová kyselina (0,19 ml, 0,247 mmol) . Reakční směs se 23 hodin míchá při teplotě místnosti a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát). Získá se titulní sloučenina z příkladu 3F (47 mg). rH NMR (CDC13) δ 7,78 (m, 3H) , 7,63 (m, 2H) , 7,44 (m, 2H) , 7,31 (m, 1H) , 6,78 (m, 1H) , 3,89 (m, 1H) , 3,57 (m, 2H) , 2,94 (m, 2H) , 2,79 (m, 3H) , 2,32 (m, 2H) , 2,10-1,17 (m,
9H); MS 452,3 (M+l), 450,2 (M-l).
128
Příklad 3G
5-{3-[2S-(4-Bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-lyl] -propyl}thiofen-2-karboxylové kyselina
Stupeň A: Methylester 5-{3-[2R-(4-bifenyl-3-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (3-bifenyl-3-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny (3,217 g, 10,09 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 404 mg, 10,09 mmol) nechá 17 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 10,09 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (rozpouštědlový gradient 9:1 hexany :ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-{3-(2R-(4-bifenyl-3-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl } thiof en-2 -karboxylové kyseliny (4,0 g) . ΤΗ NMR (CDC13) δ
7,56 (m, 3H) , 7,49 (m, 1H) , 7,42 (m, 4H) , 7,34 (m, 1H) , 7,16 (d, 1H) , 6,73 (d, 1H) , 6,62 (dd, 1H) , 6,22 (d, 1H) , 4,11 (m,
1H) , 3,88 (s, 2H) , 3,82 (s, 3H) , 3,54 (m, 1H) , 2,79 (m, 1H) ,
2,73 (t, 2H) , 2,36 (m, 2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,76 (m, 3H) ; MS
488,1 (M+l), 486,0 (M-l).
Stupeň B: Methylester 5-{3-[2S-(4-bifenyl-3-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se směs methylesteru 5-{3-[2R-(4-bifenyl-3-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (3,535 g, 7,25 mmol), 10% palladia na uhlíku (750 mg) a ethanolu (250 ml) 2 hodiny hydrogenuje za tlaku 343,5 kPa. Získá se methylester 5-{3-[2S-(4-bifenyl-3-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny, kterého se bez dalšího přečištění použije ve stupni C. MS 490,1 (M+l).
• ·
129
Stupeň C: Ethylester 5-{3-[2S-(4-bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-{3- [2S-(4-bifenyl-3-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (7,25 mmol) 1 hodinu při teplotě místnosti nechá reagovat s tetrahydroboritanem sodným (274 mg, 7,25 mmol) v ethanolu. Po přečištění středotlakou chromatografi£ (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá ethylester 5-{3-[2S-(4-bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxy-
lové kyseliny (1,68 g) · ΧΗ NMR (CDC13) δ 7, 58 (m, 3H) , 7,40 (m,
6H) , 7,17 (a, 1H) , 6,79 (d, 1H) , 4,27 (q, 2H), 3,85 (m, 1H) ,
3,62 (m, 2H) , 3,00 (m, 1H), 2,86 (m, 3H) , 2,71 (m, 1H) , 2,34
(m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 2,01-1,75 (m, 4H) , 1,70-1,35 (m, 4H) ,
1,31 (t, 3H) ; MS 506,1 (M+l).
Stupeň D: 5-{3-[2S-(4-Bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] propyljthiofen-2-karboxylová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 5-{3-[2S-(4-bifenyl-3-yl-3-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (1,882 g, 3,72 mmol) 3 hodiny při teplotě zpětného toku hydrolyzuje
hydroxidem sodným ( 1 M, 5,6 ml) v methanolu (100 ml) za vzniku
titulní sloučeniny z příkladu 3G (1,741 g) NMR (CDC13) δ
7,66 (d, 1H) , 7,56 (d, 2H), 7,40 (m, 6H) , 7,17 (d, 1H), 6,82
(d, 1H) , 3,85 (m, 1H) , 3,63 (m, 2H), 3,02 (m, 1H) , 2,86 (m,
3H) , 2,72 (m, 1H) , 2,36 (m, 2H) , 2,11 (m, 1H) , 2,01 -1,75 (m,
4H), 1,71-1,35 (m, 4H); MS 478,1 (M+l), 476,0 (M- 1) .
Příklad 3H
5- (3{-2S- [4-(3-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina • · • ·· · ··· · · · • · ··· ···· • ·· · · ·· · ··· • · · · · 9 «
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4-(3-fluorfenyl)-3-oxobut-l-enyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [3-(3-fluorfenyl)-2oxopropyl]fosfonové kyseliny (3,236 g, 12,4 mmol) a NaH (60% v oleji, 458 mg, 11,4 mmol) nechá 18 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 10,4 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií za použití 20% ethylacetátu v hexanech až 80% ethylacetátu v hexanech a po druhé eluci sloupce 20% acetonem v toluenu až 30% acetonem v toluenu se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(3-fluorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,95 g) . 1H
NMR (CDC13) δ 7,60 (d, 1H) , 7,27 (m, 1H) , 6,92 (m, 3H), 6,76
(d, 1H) , 6,60 (dd, 1H) , 6,18 (d, 1), 4,12 (m, 1H) , 3,83 (s,
3H) , 3,80 (s, 2H) , 3,56 (m, 1H) , 2,82 (m, 1H) , 2,77 (t, 2H) ,
2,37 (m, 2H), 2,22 (m, 1H) , 1,78 (1 m, 3H).
Stupeň B: Methylester 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfeny1)-3-oxobutyl]5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-(3 -{2R-[4-(3-fluorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,95 g, 6,87 mmol) 2 hodiny hydrogenuje v methanolu (60 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (500 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (50% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(3fluorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-
karboxylové kyseliny (2,60 g) . 1H NMR (CDCI3) δ 7,60 (d, 1H) ,
7,28 (m, 1H) , 6,92 (m, 3H) , 6,79 (d, 1H), 3,82 (s, 3H) , 3,67
(s, 2H) , 3,62 (m, 1H) , 3,50 (m, 1H) , 2,93 (m, 1H) , 2,80 (t,
2H) , 2,43 (m, 2H) , 2,27 (m, 2H) , 2,04 -1,76 (m, 4H) , 1,50 (m,
2H); MS 432,2 (M+l), 430,1 (M-l).
• ·
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl] - 5 -oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiof en-2 -karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yljpropyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,60 g, 6,03 mmol) nechá 3 hodiny.při 0°C reagovat s tetrahydroboritaném sodným (114 mg, 3,01 mmol) v methanolu (30 ml) . Po přečištění středotlakou chromatografií (ethylacetát až 2% methanol v dichlormethanu) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,43 g). MS 434,0 (M+l).
Stupeň D: 5-(3-{2S-[4-(3-Fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl)propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,43 g) 18 hodin hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (30 ml) . Získá se 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina (2,06 g) ·
Stupeň E: Sodná sůl 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2D, stupni E, se 5-(3-{2S-[4-(3-fluorfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina (2,058 g, 4,905 mmol) nechá reagovat s hydrogenuhličitanem sodným (412 mg, 4,906 mmol). Získá se sodná sůl titulní sloučeniny z příkladu 3H. NMR (CD3 OD) δ 7,35 (d, 1H) , 7,26 (m, 1H) , 6,96 (m, 3H) ,
6,75 (d, 1H) , 3,76 (m, 1H) , 3,67 (m, 1H) , 3,57 (m, 1H) , 3,02 (m, 1H) , 2,76 (m, 3H), 2,30 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 1,98-1,28 (m, 9H) .
» · • * • · 1 ♦ ··<
132
Příklad 31
5-(3-{2S-[4-(4-Ethylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4-(4-ethylfenyl)-3-oxobut-lenyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z diethylesteru [3-(4-ethylfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny (274 mg, 0,915 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 41 mg, 1,01 mmol) nechá 18 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylová kyseliny (asi 1,01 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(4-ethylfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová
kyše' liny (227 mg) . XH NMR (CD Cl3) δ 7,5! 9 (d, 1H) , 7,13 (d, 2H) ,
7,07 (d, 2H) , 6,75 (d, 1H), 6,58 (dd, 1H) , 6,18 (d, 1H) , 4,10
(m, 1H) , 3,83 (s, 3H), 3,77 (s, 2H) , 3,53 (m, 1H) , 2,78 (m,
3H) , 2,5S > (q, 2H) , 2,36 (m, 2H) , 2,19 (m, 1H) , 1,76 (m, 3H) ,
1,19 (t, 3H) ; MS 440,2 (M+l).
Stupeň B: Methylester .5-(3-{2S-[4-(4-ethylfenyl)-3-oxobutyl] - 5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyseliny.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-(3-{2R-[4-(4-ethylfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyseliny (227 mg, 0,517 mmol) 1,5 hodiny hydrogenuje v methanolu (30 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(4-ethylfenyl)-3 -oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (119 mg). XH NMR (CDC13) δ 7,62 (d, 1H), 7,16 (d, 2H) , 7,10 (d, 2H) , 6,81 (d, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 3,65 (s, 2H) , 3,63 • ·
133 ..............
(m, 1H) , 3,49 (m, 1H) , 2,95 (m, 1H) , 2,80 (t, 2H) , 2,62 (q, 2H) , 2,43 (m, 2H),'2,31 (m, 2H) , 2,06-1,79 (m, 4H) , 1,48 (m, 2H), 1,21 (t, 3H); MS 442,2 (M+l).
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-ethylfenyl)-3-hydroxybutyl] -5-oxopyrrolidin-1-yljpropyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-ethylfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (109 mg, 0,247 mmol) během 3 hodin při 0°C až teplotě místnosti redukuje tetrahydroboritanem sodným (5 mg, 0,132 mmol) v methanolu (7 ml) . Po přečištění středotlakou chromatograf ií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(4-ethylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (77 mg).
τΗ NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H), 7, 16 (d, 2H) , 7,10 (d, 2H), 6,81
(d, 1H) , 3,83 (s, 3H) , 3,77 (m, 1H) , 3,62 (m, 2H) , 3,01 (m,
1H) , 2, 83 (t, 2H), 2,77 (m, 1H) , 2,60 (m, 3H) , 2,35 (m, 2H),
2,09 (m , 1H) , 1,99-1,34 (m, 8H) , 1,22 ( t, 3H :); MS 444,3 (M+l).
Stupeň D: 5-(3-{2S-[4-(4-Ethylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-ethylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (76 mg) během 18 hodin hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (7 ml) za vzniku titulní sloučeniny z příkladu 31 (58 mg) . NMR (CD3 OD) δ 7,57 (m, 1H) , 7,08 (d, 4H) , 6,88 (d, 1H) , 3,72 (m, 1H) , 3,63 (m, 1H) , 3,52 (m, 1H) , 2,99 (m, 1H) , 2,81 (t, 2H) , 2,68 (m, 2H) , 2,56 (q, 2H) , 2,27 (m, 2H) , 2,06 (m, 1H) , 1,951,25 (m, 6H), 1,16 (t, 3H); MS 430,3 (M+l), 428,5 (M-l).
134 • · • · · • ·· ·
Příklad 3 J
5-(3-{2S-[4-(4-Fluor-3-methylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3oxobut-1-enyl]-5 -oxopyrrolidin-1-y1}propy1)thiof en-2 -karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z diethylesteru [3-(4-fluor-3-methylfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny (273 mg, 0,903 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 41 mg, 1,01 mmol) nechá 18 hodin reagovat s methylesteru 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-1-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 1,01 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3 -oxobut-1-eny1]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (174 mg). NMR (CDC13)
δ 7,59 (d, 1H) , , 6,97 (d, 1H) , 6,93 (d, 2H) , 6,76 (d, 1H), 6,60
(dd, 1H) , 6,18 (d, 1H) , 4,11 (m, 1H) , 3,82 (S, 3H) , 3,73 (S,
2H) , 3,56 (m, 1H) , 2,82 (m, 1H), 2,77 (t, 2H) , 2,36 (m, 2H) ,
2,22 (s, 3H) , 2,19 (m, 1H) , 1,78 (m, 3H) ; MS 444,2 (M+l);
442,2 (M-l).
Stupeň B: Methylester 5 -(3-{2S-[4 -(4-Fluor-3-methylfenyl)-3 -oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-(3-{2R-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (174 mg, 0,392 mmol) 1,5 hodiny hydrogenuje v methanolu (30 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (70 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (30% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá methylester 5-(3 -{2S-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (114 • · · · * · · • * · ·· «··» • β · · · · ·· ··· ·· ·
135 • · · · • ·· ·· · • · · ·
mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,60 (d, 1H) , 6,97 (d, 1H) , 6,93 (d, 2H) ,
6,79 (d , 1H), 3,82 (S, 3H), 3,63 (m, 1H) , 3,60 (s, 2H) , 3,50
(m, 1H) , 2,93 (m, 1H) , 2,79 (t, 2H), 2,42 (m, 2H) , 2,33 -2,21
(m, 5H) 2,02-1,78 (m, 4H), 1,50 (m, 2H); MS 446, 1 (M+l) .
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v přikladu 2B, stupni C, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3-oxobutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (114 mg, 0,256 mmol) 2,5 hodiny při 0°C až teplotě místnosti redukuje tetrahydroboritanem sodným (5 mg, 0,132 mmol) v methanolu (10 ml). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxy-
lové kyseliny (80 mg). 1 H NMR (CDCI3) δ 7,59 ' (d, 1H) , 6,98 (d,
1H) , 6,93 (m, 2H), 6,80 (d, 1H) , 3,81 (s, 3H) , 3,74 (m, 1H) ,
3,60 (m, 2H) , 2,99 (m, 1H) , 2,82 (t, 2H), 2,72 (m, 1H) , 2,54
(m, 1H), 2,33 (m, 2H) , 2,22 (s, 3H), 2,08 (m, 1H) , 1, 96- 1,32
(m, 8H); MS 448,1 (M+l).
Stupeň D: 5-(3-{2S-[4-(4-Fluor-3-methylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[4-(4-fluor-3-methylfenyl)-3-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (80 mg, 0,179 mmol) 18 hodin hydrolyzuje 2M hydroxidem
sodným v methanolu (6 ml) za vzniku titulní sloučeniny z
příkladu 3J (56 mg) . XH NMR (cd3 OD) δ 7,58 (d, 1H), 7,08- 6,98
(m, 2H) , 6,90 (m, 2H) , 3,69 (m, 2H) , 3,55 (m, 1H) , 3,04 (m,
1H), 2,84 ; (t, 2H), 2,67 (m, 2H) , 2,31 (m, 2H), 2,21 (s, 3H) ,
2,11 (m, 1H), 1,98-1,27 (m, 7H) ; MS 432,4 (M-l).
136
Příklad 3 K
5-{3-[2S-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyselina
Stupeň A: Methylester 5-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-fenyl-but-1-enyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (2-oxo-3-fenylpropyl)fosfonové kyseliny (543 mg, 2,24 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 94 mg, 2,35 mmol) nechá 18 hodin reagovat s methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 2,36 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až 70% ethylacetát v hexanech) se získá methylestser 5-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-fenylbut-1-enyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny
(315 mg) . 1H NMR (CDC13 ) δ 7,61 (d, 1H) , 7,34- -7,15 (m, 5H) ,
6,77 (m, 1H) , 6,61 (dd, 1H) , 6,19 (d, 1H) , 4,12 (m, 1H), 3,85
(s, 3H) , 3,82 (s, 2H) , 3,54 (m, 1H) , 2,81 (m, 3H) , 2,37 (m,
2H) , 2,20 (m, 1H) , 1,78 (m, 3H); MS 411,8 (M+l); 409,7 (M-l).
Stupeň B: Methylester 5-{3 -[2-oxo-5S-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se methylester 5-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-fenyl-but-l-enyl)pyrrolidin- 1-yl] propyl} thiofen -2-karboxylové kyseliny (305 mg, 0,741 mmol) 1,5 hodiny hydrogenuje v methanolu (30 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (100 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (235 mg). τΗ NMR (CDC13) δ 7,62 (d, 1H) , 7,35-7,18 (m, 5H) , 6,81 (d, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 3,69 (s, 2H) , 3,62 (m, 1H) ,
137 • 4 · • ·· 4 4
3,48 (m, 1H) , 2,94 (m, 1H) , 2,80 (t, 2H) , 2,43 (m, 2H) , 2,26 (m, 2H), 2,04-1,78 (m, 4H), 1,48 (m, 2H); MS 414,1 (M+l).
Stupeň C: Methylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se methylester 5-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (235 mg, 0,569 mmol) během 2 hodin při 0°C až teplotě místnosti redukuje tetrahydroboritanem sodným (11 mg, 0,284 mmol) v methanolu (7 ml) . Po přečištění středotlakou chromatografií (30% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá methylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (177 mg). NMR (CDC13) δ 7,70 (d,
1H) , 7,32-7,16 (m, 5H) , 6,79 (d, 1H) , 3,80 (m, 4H) , 3,60 (m, 2H) , 2,99 (m, 1H) , 2,80 (m, 3H) , 2,62 (m, 1H) , 2,32 (m, 2H) , 2,09 (m, 1H), 1,97-1,32 (m, 8H); MS 416,0 (M+l).
Stupeň D: 5-{3-[2S-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-{3-[2S-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (177 mg, 0,426 mmol) 18 hodin hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (7 ml) za vzniku
titulní sloučeniny z příkladu 3K (132 mg) . XH NMR (CD3OD) δ
7,57 (m, 1H) , 7,26-7,14 (m, 5H) , 6,88 (d, 1H) , 3,75 (m, 1H) ,
3,64 (m, 1H) , 3,54 (m, 1H) , 3,00 (m, 1H), 2,82 (t, 2H), 2,71
(m, 2H) , 2,28 (m, 2H) , 2,08 (m, 1H) , 1,96-1,26 (m, 7H) ; MS
402,2 (M+l), 400,4 (M-l).
Příklad 3L
5-(3-{2S- [4-(3-Chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyselina
138 ···· ·
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2R-[4-(3-chlorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v přikladu 2C, stupni D, se anion vytvořený z dimethylesteru [3-(3-chlorfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny (3,68 g, 13,3 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 533 mg, 14,5 mmol) nechá 24 hodin reagovat s methylesterem 5-[3 -(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl] thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 12,1 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (15% aceton v toluenu až 20% aceton v toluenu) se získá methylester 5-(3-{2R-[4-(3-chlorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiof en-2-karboxylové kyseliny (2,63 g) . XH NMR (CDC13) δ 7,59
(d, 1H) , 7,23 (m, 2H) , 7,16 (s, 1H) , 7,04 (m, 1H) , 6,76 (d,
1H) , 6,60 (dd, 1H) , , 6,17 (d, 1H) , 4,12 (m, 1H) , 3,82 (s, 3H) ,
3,78 (s, 2H) , 3,56 (m, 1H), 2,87 -2,75 (m, 3H) , 2,45- -2,28 (m,
2H) , 2,21 (m, 1H) , 1,78 (m, 3H).
Stupeň B: Methylester 5-(3-{2R-[4-(3-chlorfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}-propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. K roztoku methylesteru 5-(3-{2R-[4-(3-chlorfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,63 g, 5,91 mmol) a (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 5,9 ml, 5,9 mmol v dichlormethanu (140 ml) se při -45°C přikape katecholboran (1M v tetrahydrofuranu, 17,7 ml, 17,7 mmol). Reakční směs se 18 hodin míchá a přidá se k ní methanol. Methanolická směs se 18 hodin míchá a za sníženého tlaku se z ní odstraní těkavé látky. Ke zbytku se přidá dichlormethan. Organický roztok se promyje chladným 1M hydroxidem sodným (3x), 1M kyselinou chlorovodíkovou, vodou a vodným chloridem sodným. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až 80% ethylacetát v hexanech) se získá methylester 5-(3-{2R-[4139 • · • · 9 • 999
-(3-chlorfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (870 mg) jako směs 3S:3R diastereomerů na funkční skupině alkoholu v poměru přibližně 10:1 podle ΧΗ NMR. ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,21 (m, 3H) , 7,07 (m, 1H), 6,80 (d, 1H), 5,68 (dd, 1H), 5,45 (dd, 1H), 4,36 (m, 1H) , 4,01 (m, 1H) , 3,82 (s, 3H) , 3,51 (m, 1H) , 2,84-2,76 (m, 5H) , 2,44-2,28 (m, 2H) , 2,18 (m, 1H), 1,86-1,56 (m, 4H) .
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[4-(3-chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se směs methylesteru 5-(3-{2R-[4-(3-chlorfenyl)-3S-hydroxybut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}-propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (850 mg) a 10% palladia na uhlíku (100 mg) v methanolu (50 ml) 3 hodiny hydrogenuje v Parrově třepaném zařízení za tlaku 343,5 kPa. Reakční směs se znovu hydrogenuje po dobu 6 hodin za použití 100 mg 10% palladia na uhlíku. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá methylester 5-(3-{2S-[4-(3-chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (504 mg). ·*Ή NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H), 7,23 (m, 3H) , 7,08 (m, 2 H) , 6,82 (d, 1H) , 3,83 (s, 3H) , 3,81 (m, 1H) , 3,62 (m, 2H) , 3,01 (m, 1H) , 2,84 (t, 2H) , 2,77 (m, 1H) , 2,65 (m, 1H) , 2,35 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 1,97-1,43 (m, 8H) .
Stupeň D: 5-(3-{2S-[4-(3-Chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2Ά, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[4-(3-chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (504 mg) během 4 hodin při 50 °C hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (20 ml) za vzniku titulní sloučeniny z příkladu 3L (338,6 mg). NMR (CDC13) δ 7,68 (d, 1H) , 7,22 (m, 3H) , 7,08 (m, 1H) , 6,84 (d, 1H) , 3,80 (m, 1H) , 3,64 (m, 2H) , 3,01 (m, • · • *
140 ·· · · ·· · • · • · · • ·· · • · • · ·
1H) , 2,82 (m, 4H) , 2,64 (m, 1H) , 2,38 (m, 2H) , 2,12 (m, 1H) , 1,92 (m, 3H), 1,66 (m, 1H), 1,57-1,19 (m, 3H). MS 436,1 (M+l), 434,2 (M-l).
Příklad 3M
5-(3-{2S-[3R-Hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl } propyl) thiofen-2-karboxylové kyselina
Stupeň A: Methylester 5-(3-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(3-trifluormethylfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru [2-oxo-3-(3-trifluormethylfenyl)propyl]fosfonové kyseliny (5,026 g, 17,0 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 750 mg, 18,8 mmol) nechá po dobu 24 hodin reagovat methylesterem 5-[3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (asi 18,8 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (15% aceton v toluenu až 20% aceton v toluenu) se získá methylester 5-(3-{2-oxo-5R-[3-OXO-4-(3-trifluormethylfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyse-
liny (4, 02 g) . . 1H NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,54 (d, 1H) ,
7,45 (m, 2H) , 7,37 (d, 1H) , 6,79 (d, 1H), 6,66 (dd, 1H) , 6,20
(d, 1H) , 4,16 (m, 1H) , 3,90 (S, 2H) , 3,84 (s, 3H) , 3,60 (m,
1H) , 2,89-2,78 (m, 3H) , 2,48-2,31 (m, 2H), 2,23 (m, 1H) , 1,82
(m, 3H).
Stupeň B: Methylestesr 5-(3-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-trifluorme thylfenyl)but-1-enyl]-5 -oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2 -karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni C, se methylester 5-(3-{2-oxo-5R-[3-oxo-4-(3-trifluormethylfenyl)but-l-enyl]pyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (2,63 g, 5,91 mmol) během 18 hodin při -45°C redukuje katecholboranem (1M v tetrahydrofura• ♦ • ·
141 • · · • »· · · nu, 18,8 ml, 18,8 mmol) za přítomnosti (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 0,94 ml, 0,94 mmol). Reakční směs se rozloží přídavkem 1M kyseliny chlorovodíkové. Výsledná směs se 40 minut míchá. Organický roztok se promyje postupně ledově chladným 1M hydroxidem sodným (3x), 1M kyselinou chlorovodíkovou a vodným chloridem sodným. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (10% aceton v toluenu až 20% aceton v toluenu) se získá methylester 5-(3-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)but-1-enyl] -5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (3 g) jako směs 3S:3R diastereomerů na funkční skupině alkoholu v poměru přibližně 4:1 podle 1H NMR. 1H NMR (CDC13) δ 7,60 (d, 1H) , 7,50 (d, 1H) , 7,41 (m, 3H) , 6,79 (d, 1H) , 5,70 (dd, 1H) , 5,48 (dd, 1H) , 4,41 (m, 1H), 4,00 (m, 1H) , 3,81 (s, 3H) , 3,50 (m, 1H) , 2,86-2,77 (m, 5H) , 2,42-2,26 (m, 2H) , 2,16 (m, 1H) , 1,81 (m,
2H), 1,72-1,54 (m, 2H).
Stupeň C: Methylester 5-(3-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-trifluormethylfeny1)butyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2 -karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se směs methylesteru 5-(3-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-trifluormethy1f enyl)but-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (3 g) a 10% palladia na uhlíku (400 mg) v methanolu (70 ml) 16 hodin hydrogenuje v Parrově třepaném zařízení za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až 70% ethylacetát v hexanech) se získá methylester -5-(3-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl }propyl) thiof en-2 -karboxylové kyseliny (2,26 g) . ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,52-7,38 (m, 4H), 6,81 (d, 1H) , 3,83 (m, 4H) , 3,63 (m, 2H) , 3,00 (m, 1H) , 2,85 (m, 3H) , 2,74 (m, 1H) , 2,34 (m, 2H), 2,10 (m, 1H) , 1,98-1,45 (m, 8H) .
• · • ·
142 »·*· ·
Stupeň D: 5-(3-(2S-[3R-Hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl] -5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se methylester 5-(3-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny (625 mg) 24 hodin při teplotě místnosti hydrolyzuje 2M hydroxidem sodným v methanolu (20 ml) za vzniku titulní sloučeniny z příkladu 3M (599 mg) . 1H NMR (CDC13) δ 7,67 (d,lH), 7,51-7,38 (m, 4H) , 6,84 (d, 1H) , 3,85 (m, 1H) , 3,63 (m, 2H) , 3,02 (m, 1H) , 2,85 (m, 3H) , 2,75 (m, 1H) , 2,37 (m, 2H) , 2,11 (m, 1H) , 2,00-1,45 (m, 8H) ; MS 470,2 (M+l), 468,2 (M-l).
Příklad 4A
5S-(3-Hydroxy-4-naftalen -2-ylbutyl)-1-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2 -on
Stupeň A: 7-(2R-Formyl-5-oxopyrrolidín-l-yl)heptannitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni A, se 7-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptannitril (150 mg, 0,67 mmol) oxiduje za vzniku 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptannitrilu, kterého se použije ve stupni B bez dalšího přečištění.
Stupeň B: 7-[2R-(4-Naftalen-2-yl-3-oxobut-1-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptannitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v. příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (3-naftalen-2-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny (196 mg, 0,67 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 27 mg, 0,67 mmol) nechá 19 hodin reagovat s 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptannitrilem (asi 0,67 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá 7-[2R-(4-naftalen-2-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]-
·· • » · ·· · ·· • · ·· * ·
143 * • ···· « • · · · * • · · · * · · • · · · · • ·· ·»· »·
heptannitril (74 mg) . XH NMR (CDC13) δ 7,79 (m, 3H) , 7,67 (m,
1H), 7,46 (m, 2H) , 7,30 (d, 1H) , 6,65 (dd, 1H) , 6,25 (d, 1H) ,
4,10 (m, 1H) , 3,99 (S, 2H), 3,42 (m, 1H), 2,66 (m, 1H), 2,37
(m, 2H) , 2,22 (m, 3H) , 1,76 (m, 1H) , 1,52 (m, 2H) , 1,29 (m,
4H), 1,10 (m, 2H); MS 389,1 (M+l), 387, 0 (M-l).
143
Stupeň C: 7-[2S-(4-Naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]heptannitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v přikladu 2A, stupni D, se 7-[2R-(4-naftalen-2-yl-3-oxobut-l-enyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptannitril (74 mg, 0,19 mmol) 3 hodiny hydrogenuje v ethanolu (30 ml) za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (50 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) provided 7-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5-oxo-
pyrrolidin-l-yl]heptannitril (45 mg) . 1 H NMR (CDCI3) δ 7,80 (m,
3H) , 7,66 (s, 1H) , 7,47 (m, 2H) , 7,30 (d, 1H) , 3,85 (s, 2H) ,
3,51 (m, 2H), 2,81 (m, 1H) , 2,48 (m, 2H) , 2,28 (m, 4H), 1,98
(m, 2H) , 1,62 (m, 4H) , 1,44 (m, , 4H) , 1,22 (m, 2H) ; MS 3 91,4
(M+l), 389,3 (M-l).
Stupeň D: 7-[2S-(3-Hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] heptannitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, 7-[2S-(4-naftalen-2-yl-3-oxobutyl)-5oxopyrrolidin-l-yl]heptannitril (42 mg, 0,108 mmol) během 3 hodin při teplotě místnosti redukuje tetrahydroboritanem sodným (4 mg, 0,11 mmol) v ethanolu (20 ml) za vzniku 7-[2S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptan-
nitrilu (40 mg). 1H NMR (CDCI3) δ 7,80 (m, 3H) , 7,65 (m, 1H) ,
7,46 (m, 2H), 7,33 (d, 1H), 3,92 (m, 1H) , 3,59 (m, 2H) , 3,03-
2,78 (m, 3H), 2,35 (m, 4H), 2,12 (m, 1H) , 1,81 (m, 1H) , 1,68-
1,40 (m, 11H), 1,28 (m, 2H); MS 393,1 (M+l)
Stupeň E: 5S-(3-Hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-1-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-on. Roztok 7-[2S-(3-hydroxy-4144
-naftalen-2-ylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]heptannitrilu (39 mg, 0,0994 mmol), azidotrimethylsilanu (150 mg, 1,30 mmol) a dibutylcínoxidu (25 mg, 0,10 mmol) v toluenu (15 ml) se 18 hodin zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí a 1M kyselinou chlorovodíkovou (5 ml) okyselí na pH 2. Těkavé látky se odstraní za sníženého tlaku a vodný roztok se promyje ethylacetátem (4 x 10 ml) . Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se přečistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě (9:1 EtOAc:MeOH). Získá se 5S-(3-hydroxy-4-naftalen-2-ylbutyl)-1-
-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-on (11 mg) . 1H NMR
(CDC13) δ 7,79 (m, 3H) , 7,65 (m, 1H) , 7,45 (m, 2H) , 7,32 (m,
1H) , 3,94 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) , 3,52 (m, 1H) , 3,03 -2,83 (m,
5H) , 2,44 (m, 2H) , 2,18 (m, 1H) , 1,87-1,20 (m, 14H) ; MS 436,1
(M+l), 435,2 (M-l).
Příklad 4 B
5S-[3R-Hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-1-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-on
Stupeň A: 7-{2R-[4-(3-Methoxymethylfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z diethylesteru [3- (3-methoxymethylfenyl) -2-oxoprop'yl] fosfonové kyseliny (2,87 g, 9,13 mmol) a NaH (60% v oleji, 446 mg, 11,2 mmol) nechá 24 hodin reagovat s 7-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-1-yl)heptannitrilem (asi 11,15 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu) se získá 7-{2R-[4-(3-methoxymethylfenyl)-3-oxobut-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitril (2,06 g) . ’ή NMR (CDC13) δ
7,29 (m, 1H) , 7,22 (m, 1H) , 7,16 (s, 1H) , 7,10 (m, 1H) , 6,62 (dd, 1H) , 6,20 (d, 1H) , 4,41 (s, 2H) , 4,12 (m, 1H) , 3,82 (s,
145
2H) , 3,49 (m, 1H) , 3,37 (s, 3H) , 2,72 (m, 1H) , 2,43-2,20 (m,
5H), 1,76 (m, 1H), 1,60 (m, 2H), 1,40 (m, 4H), 1,24 (m, 2H)
Stupeň B: 7-{2R-[3S-Hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)but-l-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-ylJheptannitril. K roztoku 7-{2R-[4-(3-methoxymethylfenyl)-3-oxobut-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitrilu (2,06 g, 5,39 mmol) a (R)-2-methyl-CBS-oxazaborolidinu (1M v toluenu, 0,81 ml, 0,81 mmol) v dichlormethanu (200 ml) se při -45°C přikape katecholboran (1M v tetrahydrofuranu, 16,2 ml, 16,2 mmol). Reakční směs se 24 hodin míchá při -45°C a přidá se k ní 1M kyselina chlorovodíková. Výsledná směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se promyje dichlormethanem (2x). Organické roztoky se spojí, promyjí chladným 1M hydroxidem sodným a poté vodným chloridem sodným (2x) . Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu) se získá 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)but-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitril (2,07 g) jako směs 3S:3R diastereomerů na funkční skupině alkoholu v poměru přibližně 2:1 podle XH NMR.
NMR (CDC13) δ 7,30-7,09 (m, 4H) , 5,71 (m, 1H) , 5,46 (m, 1H) , 4,41 (s, 2H) , 4,38 (m, 1H) , 4,00 (m, 1H) , 3,45 (m, 1H) , 3,38 (s, 3H) , 2,88-2,68 (m, 3H) , 2,31 (m, 4H) , 2,17 (m, 1H) , 1,701,21 (m, 10H).
Stupeň C: 7-{2S-[3R-Hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se 7-{2R-[3S-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)but-1-enyl]-5-oxopyrrolidin-1-yl}heptannitril (2,07 g, 5,39 mmol) v ethanolu (100 ml) 24 hodin hydrogenuje v Parrově třepaném zařízení za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (200 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středo• ·
tlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až 2:1 ethylacetát: hexany až ethylacetát až 2% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu až 10% methanol v dichlormethanu) se získá 7-{2S-[3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitril (1,28 g) . NMR (CDC13) δ
7,30-7,10 (m, 4H) , 4,41 (s, 2H) , 3,82 (m, 1H) , 3,57 (m, 2H) , 3,38 (s, 3H) , 2,89 (m, 2H) , 2,66 (m, 1H) , 2,32 (m, 4H) , 2,10 (m, 1H), 1,77 (m, 1H), 1,66-1,40 (m, 11H), 1,29 (m, 2H).
Stupeň D: 5S-[3R-Hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-1-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 4A, stupni E, se 7-{2S-[3R-hydroxy4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}heptannitril (1,28 g, 3,31 mmol) nechá 24 hodin při teplotě zpětného toku reagovat s azidotrimethylsilanem (0,90 ml, 6,78 mmol) a dibutylcínoxicem (128 mg, 0,514 mmol) v toluenu (68 ml) . K reakční směsi se přidá další azidotrimethylsilan (1,8 ml, 13,56 mmol) a dibutylcínoxid (256 mg, 1,03 mmol) a v refluxování se pokračuje po dobu 3 dnů. Po přečištění středotlakou chromatografií (dichlormethan až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu až 6% methanol v dichlormethanu až 10% methanol v dichlormethanu) se získá 5S-[3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-1-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-on (619,5 mg). NMR (CDC13) δ 7,30-7,11 (m, 4H) , 4,42 (s, 2H) , 3,87 (m, 1H) , 3,64 (m, 1H) , 3,52 (m, 1H) , 3,39 (s, 3H) , 2,99-2,67 (m, 5H) , 2,42 (m, 2H) , 2,16 (m, 1H) , 1,871,25 (m, 14H).
Stupeň E: Sodná sůl 5S- [3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-1- [6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-onu. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2C, stupni D, se reakcí 5S-[3R-hydroxy-4-(3-methoxymethylfenyl)butyl]-1-[6-(2H-tetrazol-5-yl)hexyl]pyrrolidin-2-onu (619,5 mg, 1,44 mmol) s hydrogenuhličitaném sodným (121 mg, 1,44 mmol) získá sodná sůl
147
titulní sloučeniny z příkladu 4B (628,3 mg). ’Ή NMR (CD3OD) δ 7,20 (m, 4H) , 3,79 (m, 1H), 3,64 (m, 1H) , 3,50 (m, 1H) , 2,972,69 (m, 5H) , 2,29 (m, 2H) , 2,10 (m, 1H) , 1,81-1,28 (m, 14H) .
Příklad 5 A
2-{3-[2S-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylová kyselina
Stupeň A: Ethylester 2-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-fenyl-but-lenyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny.
Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni B, se anion vytvořený z dimethylesteru (2-oxo-3-fenyl-propyl)fosfonové kyseliny (105 mg, 0,434 mmol) a NaH (60% hmotn. v oleji, 17 mg, 0,434 mmol) nechá 17 hodin reagovat s ethylesterem 2- [3-(2R-formyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl] thiazol-4-karboxylové kyseliny (připraveným z ethylestseru 2 -[3 -(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiazol-4-karboxylové kyseliny podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni A, asi 0,359 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 hexany:ethylacetát až ethylacetát) se získá ethylester 2-{3-[2-oxo-5R-(3-oxo-4-fenyl-but-l-enyl)pyrrolidin-l-yl]propyl} thiazol-4-karboxylové kyseliny (59 mg). ’Ή NMR (CDC13) δ
8,03 (s, 1H), 7,33-7,17 (m, 5H), 6,61 (dd, 1H), 6,20 (d, 1H) ,
4,40 (q, 2H) , 4,19 (m, 1H) , 3,82 (s, 2H) , 3,60 (m, 1H) , 2,98 (m, 2H) , 2,80 (m, 1H) , 2,44-2,15 (m, 3H) , 1,94 (m, 2H) , 1,75 (m, 1H), 1,38 (t, 3H); MS 427,0 (M+l), 424,9 (M-l).
Stupeň B: Ethylester 2-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni D, se ethylester 2-{3- [2-oxo-5R-(3-oxo-4-fenylbut-1-enyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny (23 mg, 0,0539 mmol) 3 hodiny hydrogenuje v ethanolu (15 ml) za přítomnosti 10% ♦ · · · · · · · 9 · · * · · · · ····
148 ··:· ···· ··· ·· ··· ·· « palladia na uhlíku (15 mg) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění preparátivní chromatografií na tenké vrstvě (1:1 hexany:ethylacetát) (2x) se získá ethylester 2-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny (19 mg). NMR (CDC13) δ 8,03 (s, 1H), 7,34-7,17 (m,
5H) , 4,39 (q, 2H) , 3,68 (s, 2H) , 3,65 (m, 1H) , 3,53 (m, 1H) , 2,98 (m, 3H) , 2,43 (t, 2H) , 2,26 (m, 2H) , 1,98 (m, 4H) , 1,49 (m, 2H), 1,37 (t, 3H); MS 429,0 (M+l).
*·
Stupeň C: Ethylester 2-{3-[2S-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni C, se ethylester 2-{3-[2-oxo-5S-(3-oxo-4-fenylbutyl)pyrrolidin-1-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny (34 mg, 0,0793 mmol) během 2 hodin při teplotě místnosti redukuje tetrahydroboritanem sodným (3 mg, 0,079 mmol) v ethanolu (10 ml). Po přečištění preparativní chromatografií na tenké vrstvě (ethylacetát) se získá ethylester 2-{3-[2S-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny (18 mg). 1HNMR (CDC13) δ 8,02 (m, 1H) , 7,33-7,18 (m, 5H) , 4,38 (q, 2H) , 3,82 (m, 1H) , 3,65 (m, 2H) , 3,06 (m, 3H) , 2,80 (m, 1H) , 2,67 (m, 1H) , 2,32 (m, 2H) , 2,09 (m, 2H) , 1,98 (m, 2H) , 1,82 (m, 1H) , 1,68-1,42 (m, 4H) , 1,37 (t, 3H) ; MS 431,1 (M+l).
Stupeň D: 2-{3-[2S-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylová kyselina. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2A, stupni E, se ethylester 2-{3- [2S- (3-hydroxy-4-fenylbutyl) -5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny (18 mg, 0,042 mmol) 3 hodiny při teplotě zpětného toku hydrolyzuje 1M hydroxidem sodným (0,06 ml) v methanolu (5 ml) za vzniku titulní sloučeniny z příkladu 5A (8 mg). ΧΗ NMR (CDCI3) δ 8,01 (s, 1H) , 7,33-7,18 (m, 5H) , 3,83 (m, 1H) , 3,66 (m, 2H) , 3,09 (m, 1H) , 3,02 (t, • · · « · · ·
149
2H) , 2,81 (m, 1H) , 2,68 (m, 1H) , 2,35 (m, 2H) , 2,06 (m, 4H) ,
1,82 (m, 1H) , 1,69-1,38 (m, 4H); MS 403,0 (M+l), 401,0 (M-l).
Stupeň E: Sodná sůl 2-{3 -[2S-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] propyl)thiazol-4-karboxylové kyseliny. Sodná sůl titulní sloučeniny z příkladu 5A se připraví podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 2B, stupni E. 1H NMR (CDC13) δ 7,58 (s, 1H) , 7,25-7,14 (m, 5H) , 3,75 (m, 1H) , 3,36 (m, 2H) , 2,78 (m, 1H) , 2,61 (m, 3H) , 2,16-1,20 (m, 12H) .
Příklad 5B
5-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-1-{3-[4-(2H-tetrazol-5-yl)fenyl]propyl}pyrrolidin-2-on
Stupeň A: 4-(3-{2-[3-(terc-Butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzonitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni D, se anion vytvořený z 5-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy)-4-fenylbutyl]pyrrolidin-2-onu (262,8 mg, 0,756 mmol) a NaHMDS (0,83 ml, 0,83 mmol) nechá 24 hodin při 70°C reagovat s 4-(3-brompropyl)benzonitrilem (186 mg, 0,832 mmol). Po přečištění středotlakou chromatografií (5:1 hexany:ethylacetát až 1:1 hexany:
:ethylacetát až 1% methanol v dichlormethanu až 5% methanol v dichlormethanu) se získá 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethylsilanyloxy) -4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)benzonitril (257,6 mg). XH NMR (CDC13) δ 7,56 (m, 2H) , 7,26 (m, 5H) , 7,13 (m, 2H) , 3,85 (m, 1H) , 3,62 (m, 1H) , 3,48 (m, 1H) , 2,93 (m, 1H) , 2,82-2,60 (m, 4H) , 2,29 (m, 2H) , 1,88-1,25 (m, 7H) ; MS
491,5 (M+l).
Stupeň B: 4-{3-[2-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzonitril. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1A, stupni E, se 4-(3-{2-[3-(terc-butyldimethyl150 • · · · · ♦ · silanyloxy)-4-fenylbutyl]-5-oxopyrrolidin-l-yl}propyl)benzonitril (257,6 mg, 0,525 mmol) podrobí deprotekci 24hodinovou reakcí s TBAF (1M v tetrahydrofuranu, 0,79 ml, 0,79 mmol) . Po přečištění středotlakou chromatografií (1:1 EtOAc:hexany až ethylacetát až 1% methanol v dichlormethanu až 3% methanol v dichlormethanu) se získá 4-{3-[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzonitril (157,8 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,56 (m, 2H) , 7,26 (m, 7H) , 3,80 (m, 1H) , 3,67-3,55 (m, 2H) , 2,98 (m, 1H) , 2,80 (m, 1H) , 2,65 (t, 2H) , 2,43-2,24 (m, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,89-1,33 (m, 9H); MS 375,3 (M-l).
Stupeň C: 5-(3-Hydroxy-4-fenylbutyl)-1-{3-[4-(2H-tetrazol-5-yl)fenyl]propyl}pyrrolidin-2-on. Podobným způsobem, jaký je popsán v příkladu 4A, stupni E, se 4-{3 -[2-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}benzonitril (157,8 mg, 0,419 mmol) nechá 60 hodin při teplotě zpětného toku reagovat s azidotrimethylsilanem (0,11 ml, 0,84 mmol) a dibutylcínoxidem (20 mg, 0,08 mmol) v toluenu (8,6 ml). Po přečištění středotlakou chromatografií (dichlormethan až 2% methanol v dichlormethanu až 4% methanol v dichlormethanu až 6% methanol v dichlormethanu) se získá 5-(3-hydroxy-4-fenylbutyl)-1-{3-[4-(2H-tetrazol~5-yl)fenyl]propyl}pyrrolidin-2-on
(144,7 rng) . ΧΗ NMR (CDCI3) δ 8,02 (m, 2H) , 7,27 (m, 7H), 3,84
(m, 1H) , 3,67 (m, 2H), 3,10 (m, 1H) , 2,84 (m, 1H) , 2,67 (m,
2H) , 2,53 (m, 1H) , 2,42 (m, 1H) , 2,14 (m, 1H) , 1,97-1,40 (m,
9H); MS 420,3 (M+l) , 418,3 (M- -1) .
Přípravný postup 1
Methylester 5-[3-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny
Stupeň A: 5R-(terc-Butyldimethylsilanyloxymethyl)-l-prop-2-ynylpyrrolidin-2-on. K roztoku 5R-(terc-butyldimethylsilanyl151 oxymethyl)pyrrolidin-2-on (Tetrahedron: Asymmetry, 1996, 7,
2113) (10,24 g, 44,6 mmol) v dimethylformamidu (650 ml) se při 0°C přikape NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 49 ml, 49 mmol). Reakční směs se 2 hodiny při teplotě místnosti mechanicky míchá, čímž se získá hustá suspenze, která se ochladí na 0°C a pomalu se k ní přidá propargylbromid (8 0% v toluenu, 5,0 ml, 45 mmol) v dimethylf ormamidu (50 ml) . Reakční směs se 2 hodiny míchá při 0°C a 0,5 hodiny při teplotě místnosti, načež se k ní přidá nasycený chlorid amonný (70 0 ml) a voda (3 0 0 ml) . Výsledný roztok se promyje ethylacetátem (3x600 ml). Organické roztoky se spojí, promyjí vodou (4 x 3 00 ml) a poté vodným chloridem sodným (1 x 3 00 ml) . Oganický roztok se vysuší síranem sodným, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (10% ethylacetát v hexanech až 25% ethylacetát v hexanech) se získá 5R-(terc-butyldímethylsilanyloxymethyl)-1-prop-2-ynyl-pyrrolidin-2-on
(9,85 g) . XH NMR (CDC13) δ 4, 58 (dd, 1H), 3,88 (m, 1H) , 3,77
(dd, 1H) , 3,70 (d, 1H) , 3,61 (m, 1H) , 2,50-2,28 (m, 2H) , 2,18
(m, 1H) , 2,10 (m, 1H) , 1,86 (m, 1H) , 0,87 (s, 9H), 0,05 (s,
6H); MS 268,2 (M+l).
Stupeň B: Methylester 5-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]prop-1-ynyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Směs 5R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-l-prop-2-ynyl-pyrrolidin-2-onu (8,64 g, 32,3 mmol), methylesteru 5-bromthiofen-2-karboxylové kyseliny (7,5 g, 33,9 mmol), jodidu měďného (308 mg, 1,62 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) (1,9 g, 1,62 mmol), triethylaminu (5,0 ml,
6 mmol) a CH3CN (3 00 ml) se 19 hodin zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a za sníženého tlaku se z ní odstraní těkavé látky. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu (500 ml) . Organický roztok se promyje vodou (3x200 ml) a poté vodným chloridem sodným (1x200 ml). Organický roztok se vysuší síranem sodným, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po * ·
152 přečištění středotlakou chromatografi£ (10% ethylacetát v hexanech až 25% ethylacetát v hexanech) (2x) se získá methylester 5-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl] prop-l-ynyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (11,42 g) . XH NMR (CDC13) δ 7,61 (d, 1H) , 7,09 (d, 1H) , 4,81 (d, 1H) , 3,98 (d, 1H) , 3,87 (m, 1H) , 3,85 (s, 3H) , 3,78 (dd,
1H) , 3,63 (dd, 1H) , 2,49-2,29 (m, 2H) , 2,11 (m, 1H) , 1,82 (m,
1H); 0,85 (s, 9H), 0,03 (s, 6H); MS 408,0 (M+l).
Stupeň C: Methylester 5-{3 -[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny. Směs methylesteru 5-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-1-yl]prop-l-ynyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (11,4 g, 28 mmol) v ethanolu (200 ml) se v Parrově třepaném zařízení 3 hodiny hydrogenuje za tlaku 343,5 kPa za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (1,2 g). Katalyzátor se odstraní filtrací přes celit za použití ethanolu jako pomocné filtrační látky. Organický roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku. Poté se provede 24hodinová hydrogenace za použití ethanolu (200 ml) a 10% palladia na uhlíku (1,2 g) za tlaku 343,5 kPa. Po přečištění středotlakou chromatografií (25% ethylacetát v hexanech až 50% ethylacetát v hexanech) se získá methylester 5-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karbo-
xylové kyseliny (10 /2 g) . h NMR (CDC13) δ 7,64 (d, 1H) , 6,83
(d, 1H) , 3,87 (s, 3H) , 3,64 (m, 3H), 3,13 (m, 1H), 2,86 (t,
2H), 2, 51-2,24 (m, 2H) , 2,12 -1,78 (m, 4H) , 0,88 (s, 9H) , 0,04
(s, 6H).
Stupeň D: Methylester 5-[3-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-1-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny. K roztoku methylesteru 5-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiofen-2-karboxylové kyseliny (1,5 g, 3,64 mmol) v methanolu (40 ml) se přidá 1M kyselina chloro« · ·
153 • · vodíková (18 ml). Reakční směs se 1,5 hodiny míchá, načež se z ní za sníženého tlaku odstraní těkavé látky. Vodný roztok se promyje dichlormethamem (3 x 50 ml). Organické roztoky se spojí, promyjí vodným chloridem sodným, vysuší síranem horečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (5% methanol v dichlormethanu) se získá methylester 5-[3-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiofen-2-karboxylové kyseliny (689 mg). 1H NMR (CDC13) δ 7,59 (d, 1H) , 6,79 (d, 1H) , 3,82 (s, 3H) , 3,75 (m, 1H) , 3,62 (m, 3H) , 3,07 (m, 1H) , 2,82 (t, 2H) , 2,44 (m, 1H) , 2,26 (m, 2H), 2,09-1,83 (m, 4H); MS 298,2 (M+l).
Přípravný postup 2
Ethylester 7-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny
Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 1, stupni A, se anion vytvořený z 5R- (terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)pyrrolidin-2-onu (18,83 g, 82,1 mmol) a NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 90 ml, 90 mmol) alkyluje ethyl-7-bromheptanoátem (16 ml, 82 mmol) . Reakční směs se 16 hodin míchá při 60°C a zpracuje podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 1, stupni A. Surový zbytek se rozpustí v methanolu (600 ml) a k methanolickému roztoku se přidá 1M HC1 (300 ml) . Vzniklý roztok se 3 hodiny míchá a za sníženého tlaku se z něj odstraní těkavé látky. Vodný roztok se zředí dichlormethanem (300 ml) . Organický roztok se promyje vodou (2x75 ml) a poté vodným chloridem sodným (1x75 ml) , vysuší sířanem sodný, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (ethylacetát) se získá ethylester 7-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptanové kyseliny (21,2 g) . TH NMR (CDCI3) δ 4,12 (q, 2H) , 3,80 (dd, 1H) , 3,66 (m, 3H) ,
154 ···« • · · • ·· ·
2,97 (m, 1H) , 2,54-2,27 (m, 5H) , 2,04 (m, 2H) , 1,67-1,28 (m,
8H), 1,26 (t, 3H); MS 272,3 (M+l).
Přípravný postup 3
7-(2R-Hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptannitril
Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 1, stupni A, se anion vytvořený z 5R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)pyrrolidin-2-onu (20 g, 87 mmol) a NaHMDS (1M v tetrahydrofuranu, 96 ml, 96 mmol) alkyluje 7-bromheptannitrilem (13 ml, 87 mmol) . Reakční směs se 24 hodin míchá při 60°C a zpracuje podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 1, stupni A. Surový zbytek se rozpustí v methanolu (350 ml) a k methanol i ckému roztoku se přidá 1M HCl. Výsledný roztok se 2 hodiny míchá a za sníženého tlaku se z něj odstraní těkavé látky. Vodný roztok se promyje dichlormethanem (3x200 ml). Organické roztoky se spojí a promyjí vodným chloridem sodným (1x150 ml), vysuší síranem sodným, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (1% methanol v ethylacetátu až 4% methanol v ethylacetátu) se získá 7-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)heptannitril (10,3 g). 'H NMR (CDC13) δ 3,76 (dd, 1H), 3,62 (m, 3H) , 2,97 (m, 1H) , 2,43 (m, 1H) , 2,33-1,94 (m, 5H) , 1,92 (m, 1H), 1,66-1,41 (m, 6H), 1,30 (m, 2H); MS 225,3 (M+l).
Přípravný postup 4
Methylester 4-(3-Brompropyl)benzoové kyseliny
Stupeň A: Methylester 4-(3-hydroxy-prop-l-ynyl)benzoové kyseliny. K roztoku methyl-4-jodbenzoátu (20 g, 76 mmol), propargylalkoholu (5,55 g, 99,0 mmol) a triethylaminu (20 ml) v acetonitrilu (200 ml) se přidá chlorid bis(trifenylfosfin)44 4 44 4 44 4 • · ·· 4 4 44 4 4 4 ·· · · 4 4 4 4 4 • · 4 · 4 · 4 4 44··
1Γί · · ··· 4 4 4
100 ···· 444 44 444 44 4 palladnatý (1,55 g, 2,21 mmol) a poté jodid mědný (454 mg, 2,38 mmol). Reakční směs se 24 hodin míchá při teplotě místnosti a poté se k ní přidá voda. Vodný roztok se promyje ethylacetátem (3x). Organické roztoky se spojí, vysuší síranem horečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (9:1 hexany:ethylacetát až 4:1 hexany:ethylacetát) se získá methylester 4-(3-hydroxyprop-l-ynyl)benzoové kyseliny (12,65 g).
Stupeň B: Methylester 4-(3-hydroxypropyl)benzoové kyseliny. Roztok methylesteru 4-(3-hydroxy-prop-l-ynyl)benzoové kyseliny (12,65 g) v ethylacetátu (75 ml) a methanolu (75 ml) se v Parrově třepané nádobě 24 hodin hydrogenuje za tlaku 343,5 kPa za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (2 g) for 24 h. Katalyzátor se odstraní filtrací přes celit a filtrát se zkoncentruje. Reakce se zopakuje tak, že se je zbytku přidá 10% palladium na uhlíku (2 g) a hydrogenace se provádí po dobu 24 hodin v Parrově třepaném zařízení. Směs se přefiltruje přes celit a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se methylester 4-(3-hydroxypropyl)benzoové kyseliny (11,98 g).
Stupeň C: Methylester 4-(3-brompropyl)benzoové kyseliny.
Roztok methylesteru 4 -(3-hydroxy-propyl)benzoové kyseliny (11,98 g) a 1,1'-karbonyldiimidazolu (9,0 g, 55,50 mmol) v CH3CN (200 ml) se 1,5 hodiny míchá při teplotě místnosti a přidá se k němu allylbromid (20 ml) . Reakční směs se 2 0 hodin zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a přidá se k ní nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Vodný roztok se promyje ethylacetátem (3x). Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (9:1 hexany:ethylacetát) se získá sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 4.
• ·
156
Přípravný postup 5
Ethylester 2-[3-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiazol-4-karboxylové kyseliny
Stupeň A: Ethylester 2-bromthiazol-4-karboxylové kyseliny. Chladný roztok dusitanu sodného (228 mg, 3,31 mmol) ve vodě (2,0 ml) se při -5 až 0°C přikape ke směsi ethylesteru 2-aminothiazol-4-karboxylové kyseliny (J. Am. Chem. Soc., 1946, 68, 266) (500 mg, 2,90 mmol), pentahydrátu síranu mědhatého (2,100 g, 8,41 mmol), bromidu sodného (1,134 g, 11,02 mmol), kyseliny sírové (3,0 ml) a vody (3,0 ml) . Reakční směs se 20 minut míchá při 0°C a 1 hodinu při teplotě místnosti, nčež se její pH 1M hydroxidem sodným (105 ml) upraví na 9. Vodný roztok se promyje trichlormethanem (4x50 ml). Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a zkoncentrují. Po přečištění středotlakou chromatografií (39:1 hexany:ethylacetát až 19:1 hexany:ethylacetát) se získá ethylester 2-brom-thiazol-4-karboxylové kyseliny (257 mg).
Stupeň B: Ethylester 2-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)- 5-oxopyrrolidin-1-yl]prop-1-ynyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny. Sloučenina ze stupně B se připraví podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 4, stupni A, při němž se nahradí odpovídající výchozí látky a jako katalyzátorů se použije tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a jodidu měďného.
Stupeň C: Ethylester 2-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny. Sloučenina ze stupně C se připraví podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 4, stupni B.
·· · ·♦ · ·· · • «·· · · · · 9 » ·
9 ··· » · · · • ···· · · · · ····
1CH 9 9 ··· · 9 «
U/ 9999 9 99 99 999 99 9
Stupeň D: Ethylester 2-[3-(2R-hydroxymethyl-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl]thiazol-4-karboxylové kyseliny. K roztoku ethylesteru 2-{3-[2R-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl]propyl}thiazol-4-karboxylové kyseliny (306 mg, 0,717 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) se při 0°C pomalu přidá tetrabutylamoniumfluorid (1M v tetrahydrofuranu, 1,1 ml, 1,1 mmol) . Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti, 2 hodiny míchá a přidá se k ní nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Těkavé látky se odstraní za sníženého tlaku. Vodný roztok se promyje trichlormethanem (4x10 ml). Organické roztoky se spojí, vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Získá se sloučenina uvedená v přípravném postupu 5 (225 mg).
Přípravný postup 6
Diethylester [3-(4-fluor-3-methylfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
Stupeň A: Diethylester [3-(4-fluor-3-methylfenyl)-2-hydroxypropyl]fosfonové kyseliny. K roztoku 4-fluor-3-methylfenylmagnesiumbromidu (0,5M v Et2O, 15,5 ml, 7,75 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) se -30°C přidá jodid mědhý (196 mg, 1,03 mmol). Reakční směs se 10 minut míchá, poté zahřeje na -15°C a přidá se k ní diethylester oxiranylmethylfosfonové kyseliny (1 g, 5,2 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) . Reakční směs se 2 hodiny míchá při 0°C a přidá se k ní nasycený vodný chlorid amonný. Produkt se extrahuje do ethylacetátu. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až 70% ethylacetát v hexanech) se získá diethylester [3-(4-fluor-3-methylfenyl)-2-hydroxypropyl]fosfonové kyseliny (1,37 g).
158 ·· w
·>· • · ·
• 9 · • · • · · • ···· • ·
Stupeň B: Diethylester [3 -(4-fluor-3-methylfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny. K roztoku diethylesteru [3-(4-fluor-3methylfenyl)-2-hydroxypropyl]fosfonové kyseliny (1,37 g, 4,51 mmol) v dichlormethanu (30 ml) se přidá Dess-Martinovo činidlo (Chemical Abstracts No. 87413-04-0, 2,10 g, 4,96 mmol). Reakční směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní další dichlormethan. Organický roztok se promyje hydrogenuhličitanem sodným (2x) a jednou vodným chloridem sodným. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Po přečištění středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až 70% ethylacetát v hexanech) se získá sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 6 (1,1 g).
Přípravný postup 7
Diethylester [3-(3-methoxymethylfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
Za použití odpovídajících výchozích látek se podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 6, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 7.
Přípravný postup 8
Diethylester [3-(4-ethylfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
Za použití odpovídajících výchozích látek se podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 6, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 8.
• · • · · · · ··· · · · • · · · · * · · · • * · · · · · · ·····
1cn · · ··· ··· ijy ···· ··· ·· ··· ·· ·
Přípravný postup 9
Diethylester {3-[3-(2-methoxyethyl)fenyl]-2-oxopropyl}fosfonové kyseliny
Za použití odpovídajících výchozích látek se podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 6, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 9.
Přípravný postup 10
Dimethylester [2-oxo-3-(3-trifluormethylfenyl)propyl]fosfonové kyseliny
Stupeň A: N-Methoxy-N-methyl-2-(3-trifluormethylfenyl)acetamid. K roztoku hydrochloridu N,O-dimethylhydroxylaminu (1,577 g, 16,2 mmol) v dimethylformamidu (25 ml) a dichlormethanu (25 ml) se při 0°C přidá triethylamin (2,25 ml). Vzniklá směs se 5 minut míchá a přidá se k ní 3-trifluormethylfenyloctová kyselina (3,0 g, 14,7 mmol), HOBT (3,177 g, 23,5 mmol) a EDC (3,10 g, 16,2 mmol) . Reakční směs se 18 hodin míchá při teplotě místnosti a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se zředí ethylacetátem. Organický roztok se promyje postupně 1M hydroxidem sodným (2x), vodou a vodným chloridem sodným. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až 50% ethylacetát v hexanech) se získá N-methoxy-N-methyl-2-(3-trifluormethylfenyl)acetamid.
Stupeň B: Dimethylester [2-oxo-3-(3-trifluormethylfenyl)propyl]fosfonové kyseliny. K roztoku dimethylmethylfosfonátu (9,4 g, 75,8 mmol) v toluenu (80 ml) se při -78°C pomalu přidá n-butyllithium (2,5M v hexanech, 28 ml, 70 mmol). Reakční směs
160 se 1 hodinu míchá a pomalu se k ní přidá roztok N-methoxy-N-methyl-2-(3-trifluormethylfenyl)acetamidu (14,39 g) v toluenu (50 ml). Reakční směs se 2,5 hodiny míchá a přitá se k ní kyselina octová (4 0 ml) . Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti a přidá se k ní voda. Organická vrstva se promyje vodou a poté vodným chloridem sodným. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Středotlakou chromatografií (dichlormethan až 2% methanol v dichlormethanu) se získá sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 10 (9,37 g) . ’ή NMR (CDC13) δ 7,52 (m, 1H) , 7,44 (m, 2H) , 7,37 (m, 1H) , 3,96 (s, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,76 (S, 3H), 3,12 (d, 2H).
Přípravný postup 11
Dimethylester [3-(3-chlorfenyl)-2-oxopropy1]fosfonové kyseliny
Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 10, se za použití vhodných výchozích látek vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 11.
Přípravný postup 12
Dimethylester [3-(3-bromfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 10, se za použití vhodných výchozích látek vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 12.
Přípravný postup 13
Dimethylester [2-oxo-3-(3-trifluormethoxyfenyl)propyl]fosfonové kyseliny • ·
161 • · · · · · · • · · · ·· ····· • · · · · · • · · · · ·· ·
Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 10, se za použití vhodných výchozích látek vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 13. MS 327,1 (M+l),
325,1 (M-l).
Přípravný postup 14
Dimethylester [3 -(3-chlorfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
K roztoku dimethylmethylfosfonátu (17,93 g, 144 mmol) v tetrahydrofuranu (270 ml) se při -78°C pomalu přidá n-butyllithium (2,5M, 64,2 ml, 160,6 mmol). Reakční směs se 1 hodinu míchá, načež se k ní pomalu přidá methylester (3-chlorfenyl)octové kyseliny (26,93 g, 146 mmol). Reakční směs se nechá zahřát na teplotu místnosti, 24 hodin míchá a přidá se k ní kyselina octová (15 ml) . Ze vzniklé směsi se za sníženého tlaku odstraní těkavé látky. Zbytek se zředí dichlormethanem. Organický roztok se opatrně promyje nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (3x). Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Po přečištění středotlakou chromatografií (20% ethylacetát v hexanech až ethylacetát) se získá sloučenina uvedená v nadpisu (9,28 g).
Přípravné postupy 15 až 24
Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 14, se za použití odpovídajících výchozích látek připraví následující fosfonáty:
Přípravný postup 15: Dimethylester [3-(3-fluorfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny • · • ·
162 • · · • ···
Přípravný postup 16: Dimethylester [3-(4-fluorfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
Přípravný postup 17: Dimethylester [3-(4-chlorfenyl)-2-oxopropyl]fosfonové kyseliny
Přípravný postup 18: Dimethylester (3-naftalen-2-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny
Přípravný postup 19: Dimethylester (2-oxo-3-thiofen-2-ylpropyl)fosfonové kyseliny
Přípravný postup 20: Dimethylester (3-cyklohexy1-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny
Přípravný postup 21: Dimethylester (2-oxo-3-fenylpropyl)fosfonové kyseliny
Přípravný postup 22: Dimethylester (3-benzo[1,3]dioxol-5-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny
Přípravný postup 23: Dimethylester [2-oxo-3-(3-fenoxyfenyl)propyl]fosfonové kyseliny
Přípravný postup 24: Dimethylester [2-oxo-3-(2-trifluormethylfenyl)propyl]fosfonové kyseliny
Přípravný postup 25
Dimethylester (3-bifenyl-3-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny
Stupeň A: Methylester bifenyl-3-yloctové kyseliny. Směs fenylboronové kyseliny (1,000 g, 8,20 mmol), methyl-3-bromfenylacetátu (1,691 g, 7,38 mmol), uhličitanu sodného (1,738 g, 16,4 • * • · ·
163 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) (0,474 g, 0,41 mmol) , toluenu (3 0 ml) a vody (5 ml) se 2 0 hodin zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se zředí vodou (20 ml) a za sníženého tlaku se z ní odstraní těkavé látky. Vodný roztok se promyje ethylacetátem (4x2 0 ml) . Organické roztoky se spojí, promyjí 1M hydroxidem sodným (15 ml) a poté vodou (15 ml) . Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Po přečištění středotlakou chromatografií (79:1 hexany:ethylacetát až 39:1 hexany:ethylacetát) se získá methylester bifenyl-3-yloctové kyseliny (1,316 g).
Stupeň B: Dimethylester (3-bifenyl-3-yl-2-oxopropyl)fosfonové kyseliny. Podobným způsobem, jaký je popsán v přípravném postupu 14, se z methylesteru bifenyl-3-yloctové kyseliny ze stupně A připraví sloučenina uvedená v nadpisu přípravného postupu 25.
Přípravný postup 26
Tetrahydropyrrolizin-3,5-dion
Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví způsobem popsaným v US patentu č. 4 663 464.

Claims (15)

1. Sloučeniny obecného vzorce I přerušovaná čára představuje případnou vazbu;
X představuje skupinu -CH2- nebo kyslík;
Z představuje skupinu -(CH2)3-, thienylskupinu, thiazolylskupinu nebo fenylskupinu, přičemž když X představuje kyslík, potom Z představuje fenylskupinu;
Q představuje karboxyskupinu, (Ci-C4) alkoxylkarbonylskupinu nebo tetrazolylskupinu;
R2 představuje skupinu -Ar nebo -Ar1-V-Ar2;
V představuje vazbu nebo skupinu -0-, -OCH2- nebo -CH2O-;
Ar představuje zčásti nasycený, zcela nasycený nebo zcela nenasycený pěti- až osmičlenný kruh, který popřípadě obsahuje 1 až 4 heteroatomy nezávisle zvolené z kyslíku, síry a dusíku nebo bicyklický kruh sestávající ze dvou anelovaných nezávisle zčásti nasycených, zcela nasycených nebo zcela nenasycených pěti- nebo šestičlenných kruhů, bráno nezávisle, které popřípadě obsahují 1 až 4 hetero165 atomy nezávisle zvolené z dusíku, síry a kyslíku; přičemž uvedený částečně nebo zcela nasycený kruh nebo bicyklický kruh popřípadě obsahuje jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na uhlíku, nebo jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na síře;
Ar1 a Ar2 představuje každý nezávisle zčásti nasycený, zcela nasycený nebo zcela nenasycený pěti- až osmičlenný kruh, který popřípadě obsahuje 1 až 4 heteroatomy nezávisle zvolené z kyslíku, síry a dusíku, přičemž částečně nebo zcela nasycený kruh popřípadě obsahuje jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na uhlíku, nebo jednu nebo dvě oxoskupiny, jako substituenty na síře;
přičemž uvedený zbytek Ar je popřípadě substituován na uhlíku nebo dusíku jednoho kruhu, pokud je monocyklický, nebo jednoho nebo obou kruhů, pokud je bicyklický, až třemi substituenty, vztaženo na kruh, z nichž každý je nezávisle zvolen ze souboru sestávajícího z hydroxyskupiny, halogenu, karboxyskupiny, (Ci-C7) alkoxy skupiny, (Ci-C4) alkoxy (Ci-C4) alkylskupiny, (Ci-C7) alkylskupiny, (C2-C7) alkenyl skupiny, (C3-C7) cykloalkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (Ci-C4) alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (Cx-C4) alkanoylskupiny, formylskupiny, (Ci-C8)alkanoylskupiny, (Ci-C6) alkanoyl (Ci-C6) alkylskupiny, (Cx-C4) alkanoyl aminoskupiny, (Ci-C4)alkoxykarbonylaminoskupiny, hydroxysulfonylskupiny, aminokarbonylaminoskupiny a mono-N-, di-Ν,Ν-, di-N,Ν'- nebo tri-N, N, Ν' - (Ci-C4) alkylsubstituované aminokarbonylaminoskupiny, sulfonamidoskupiny, (Ci-C4) alkylsulfonamidoskupiny, aminoskupiny, mono-N- a di-N,N- (Ci-C4)alkylaminoskupiny, karbamoylskupiny, mono-N- a di-N,N-(Ci-C4)alkylkarbamoylskupiny, kyanoskupiny, thiolu, (Ci-C6) alkylthioskupiny, (Ci-C6) alkylsulf inylskupiny, (Ci-C4) alkylsulfonylskupiny a mono-N- a di-N,N- (Ci~C4) 166 • · · · · alkylaminosulfinylskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány na uhlíku až 3 atomy fluoru; a zbytky Ar1 a Ar2 jsou nezávisle popřípadě substituovány na uhlíku nebo na dusíku až třemi substituenty, z nichž každý je nezávisle zvolen ze souboru sestávajícího z hydroxyskupiny, halogenu, karboxyskupiny, (C3.-C7) alkoxyskupiny, (C1-C4) alkoxy (C1-C4) alkylskupiny, (C1-C7) alkylskupiny, (C2-C7) alkenyl skupiny, (C3-C7) cykloalkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (C1-C4) alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl(Ci-C4) alkanoylskupiny, formylskupiny, (Cx-C8) alkanoyl skupiny, (Ci-C6) alkanoyl (Ci-C6) alkylskupiny, (C1-C4) alkanoyl aminoskupiny, (C1-C4)alkoxykarbonylaminoskupiny, hydroxysulfonylskupiny, aminokarbonylaminoskupiny a mono-N-, di-Ν,Ν-, di-Ν,Ν'- a tri-Ν,Ν,Ν' - (C1-C4) alkylsubstituované aminokarbonylaminoskupiny, sulfonamidoskupiny, (C1-C4)-alkylsulfonamidoskupiny, aminoskupiny, mono-N- a di-N, N- (C1-C4) alkylaminoskupiny, karbamoylskupiny, mono-Na di-Ν,Ν- (C1-C4) alkylkarbamoylskupiny, kyanoskupiny, thiolu, (Cx-C6) alkylthioskupiny, (Ci-C6) alkyl sul f inylskupiny, (C1-C4) alkylsulfonylskupiny a mono-N- a di-Ν,Ν- (C1-C4) alkylaminosulfinylskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar1 a Ar2 jsou popřípadě substituovány na uhlíku až 3 atomy fluoru;
s tou podmínkou, že (a) když X představuje skupinu -(CH2) - a Z představuje skupinu -(CH2)3-, potom R2 nepředstavuje thienylskupinu, fenylskupinu nebo fenylskupinu monosubstituovanou chlorem, fluorem, fenylskupinou, methoxyskupinou, trifluormethylskupinou nebo (C1-C4) alkylskupinou; a
167
4 4 • 44 (b) když X představuje skupinu -(CH2)-, Z představuje skupinu -(CH2)3-, a Q představuje karboxyskupinu nebo (Ci-C4)alkoxykarbonylskupinu, potom R2 nepředstavuje (i) (C5-C7)cykloalkylskupinu nebo (ii) fenylskupinu, thienylskupinu nebo furylskupinu, z nichž každá je popřípadě monosubstituovaná nebo disubstituovaná jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z atomů halogenu, alkylskupin s 1 až 3 atomy uhlíku, které jsou popřípadě substituovány jedním nebo více atomy halogenu, a alkoxyskupin s 1 až 4 atomy uhlíku;
jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
2. Sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce Ia kde
HO představuje skupinu -CH2-;
představuje skupinu -(CH2)3- nebo skupinu vzorce nebo a
R2 představuje zbytek -Ar; přičemž zbytek -Ar je popřípadě substituován na uhlíku nebo dusíku jednoho kruhu, pokud je monocyklický, nebo jednoho nebo obou kruhů, pokud je bicyklický, až třemi substituenty, vztaženo na kruh, z nichž každý je nezávisle zvolen ze souboru sestávajícího z hydroxyskupiny, halogenu, karboxyskupiny, (Ci-C7)alkoxyskupiny, (Ci - C4) alkoxy (Ci-C4) alkyl skupiny, (Ci-C7) alkylskupiny, (C2-C7)-alkenylskupiny, (C3-C7) cykloalkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl (Cx-C4) alkylskupiny, (C3-C7) cykloalkyl(Ci - C4)alkanoylskupiny, formylskupiny, (Ci-C8)alkanoylskupiny, (Ci-C6) alkanoyl (Ci-C6) alkylskupiny, (Ci-C4)alkanoylaminoskupiny, (Ci-C4)alkoxykarbonylaminoskupiny, hydroxysulfonylskupiny, aminokarbonylaminoskupiny a mono-N-, di-Ν,Ν-, di-N,Ν'- a tri-Ν,Ν,Ν' - (Ci-C4) alkylsubstituované aminokarbonylaminoskupiny, sulfonamidoskupiny, (Ci-C4)alkylsulfonamidoskupiny, aminoskupiny, mono-N- a di-N, N- (Ci-C4) alkylaminoskupiny, karbamoyl skupiny, mono-Na di-Ν,Ν- (Ci-C4) alkylkarbamoyl skupiny, kyanoskupiny, thiolu, (Ci-C6) alkylthioskupiny, (Ci-C6) alkylsulf inylskupiny, (Ci-C4)alkylsulfonylskupiny a mono-N- a di-N,N- (Ci-C4)alkylaminosulfinylskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány na uhlíku až 3 atomy fluoru;
jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
3. Sloučeniny podle nároku 2, kde Ar představuje cyklohexylskupinu, 1,3-benzodioxolylskupinu, thienylskupinu, naftylskupinu nebo fenylskupinu popřípadě substituovanou jednou nebo dvěma skupinami zvolenými z (Ci-C4)alkylskupiny,
169 (C1-C4) alkoxyskupiny, (C1-C4) alkoxy (C1-C4) alkyl skupiny, chloru, fluoru, trifluormethylskupiny a kyanoskupiny, přičemž alkylové a alkoxylové suhstituenty v definici Ar jsou popřípadě až 3 atomy fluoru; jejich proléčiva, vhodné soli těchto sloučenin a a diastereomerní směsi těchto substituovány farmaceuticky stereoisomery proléčiv a solí, proléčiv a sloučenin,
4. Sloučeniny podle nároku 3, kde přerušovaná čára nepředstavuje vazbu; Q představuje karboxyskupinu nebo (C1-C4) alkoxykarbonyl skupinu; a Z představuje skupinu vzorce jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
5. Sloučeniny podle nároku 4, kde Q představuje karboxyskupinu a Ar představuje fenylskupinu popřípadě substituovanou jednou (C1-C4) alkylskupinou, (C1-C4) alkoxyskupinou, (C1-C4) alkoxy (C1-C4) alkylskupinou, chlorem, fluorem, trifluormethylskupinou nebo kyanoskupinou, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány až 3 atomy fluoru, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
6. Sloučeniny podle nároku 5, kde Ar představuje m-trifluormethylfenylskupinu, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
170 • ·
7. Sloučeniny podle nároku 5, kde Ar představuje m-chlorfenylskupinu, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
8. Sloučeniny podle nároku 5, kde Ar představuje m-trifluormethoxyfenylskupinu, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
9. Sloučeniny zvolené ze souboru sestávajícího z
5-(3-(2S-(3R-hydroxy-4-(3-trifluormethylfenyl)butyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny;
5-(3-(2S-(3R-hydroxy-4-(3-trifluormethoxyfenyl)butyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny; a
5-(3-(2S-(4-(3-chlorfenyl)-3R-hydroxybutyl)-5-oxopyrrolidin-l-yl)propyl)thiofen-2-karboxylové kyseliny.
10. Sloučeniny podle nároku 2, kde X představuje skupinu -CH2-, Z představuje skupinu -(CH2)3-, Q představuje karboxyskupinu nebo (Ci-C4) alkoxykarbonylskupinu a Ar představuje fenylskupinu nezávisle substituovanou jednou až třemi skupinami zvolenými z kyanoskupiny, (Ci-C7) alkoxyskupiny substituované 1 až 3 atomy fluoru a (C1-C4) alkoxy (Ci-C4) alkyl skupiny; jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
11. Sloučeniny podle nároku 3, kde přerušovaná Čára nepředstavuje vazbu; Q představuje karboxyskupinu nebo (C3-C4)alkoxykarbonylskupinu; a Z představuje skupinu vzorce • · • e
171
S nebo jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
12. Sloučeniny podle nároku 11, kde Q představuje karboxyskupinu a Ar představuje fenylskupinu popřípadě substituovanou jednou (Ci-C4) alkylskupinou, (Ci-C4) alkoxyskupinou, (Ci-C4) alkoxy (Ci-C4) alkylskupinou, chlorem, fluorem, trifluormethylskupinou nebo kyanoskupinou, přičemž alkylové a alkoxylové substituenty v definici Ar jsou popřípadě substituovány až 3 atomy fluoru, jejich proléčiva, farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomery a diastereomerní směsi těchto sloučenin, proléčiv a solí.
13. Použití sloučenin podle nároku 1, jejich proléčiv, farmaceuticky vhodných solí těchto sloučenin a proléčiv a stereoisomerů a diastereomerních směsí těchto sloučenin, proléčiv a solí pro výrobu léčiva pro léčení stavu, který se projevuje nízkou kostní hmotou, u savců.
14. Použití podle nároku 13, kde stavem je osteoporosa, křehkost, osteoporotická fraktura, kostní defekt, juvenilní idiopatický úbytek kostní tkáně, úbytek alveolární kosti, úbytek mandibulární kosti, fraktura kosti, osteotomie, úbytek kosti spojený s periodontitis a prorůstání protézy.
15. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1, její proléčivo, farmaceuticky vhodnou sůl této sloučeniny nebo proléčiva nebo
Y12 ♦
···· stereoisomer nebo diastereomerní směs této sloučeniny, proléčiva nebo soli.
CZ20031257A 2000-11-27 2001-11-05 Selektivní agonisty receptoru EP4 při léčení osteoporosy CZ20031257A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US25327500P 2000-11-27 2000-11-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20031257A3 true CZ20031257A3 (cs) 2004-04-14

Family

ID=22959588

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20031257A CZ20031257A3 (cs) 2000-11-27 2001-11-05 Selektivní agonisty receptoru EP4 při léčení osteoporosy

Country Status (41)

Country Link
US (3) US6552067B2 (cs)
EP (1) EP1339678B1 (cs)
JP (2) JP3984164B2 (cs)
KR (1) KR20030053063A (cs)
CN (1) CN1476429A (cs)
AR (1) AR035074A1 (cs)
AT (1) ATE374182T1 (cs)
AU (1) AU2002210848A1 (cs)
BG (1) BG107697A (cs)
BR (1) BR0115687A (cs)
CA (1) CA2429850C (cs)
CY (1) CY1106976T1 (cs)
CZ (1) CZ20031257A3 (cs)
DE (1) DE60130675T2 (cs)
DK (1) DK1339678T3 (cs)
EA (1) EA200300379A1 (cs)
EC (1) ECSP034623A (cs)
EE (1) EE200300246A (cs)
ES (1) ES2291361T3 (cs)
GT (2) GT200100238A (cs)
HN (1) HN2001000266A (cs)
HU (1) HUP0400807A2 (cs)
IL (1) IL155368A0 (cs)
IS (1) IS6775A (cs)
MA (1) MA26961A1 (cs)
MX (1) MXPA03004623A (cs)
NO (1) NO20032360L (cs)
NZ (1) NZ525164A (cs)
OA (1) OA12533A (cs)
PA (1) PA8533901A1 (cs)
PE (1) PE20020637A1 (cs)
PL (1) PL362030A1 (cs)
PT (1) PT1339678E (cs)
SI (1) SI1339678T1 (cs)
SK (1) SK5562003A3 (cs)
SV (1) SV2003000746A (cs)
TN (1) TNSN01166A1 (cs)
TW (1) TW200424170A (cs)
UY (1) UY27038A1 (cs)
WO (1) WO2002042268A2 (cs)
ZA (1) ZA200302803B (cs)

Families Citing this family (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ525164A (en) * 2000-11-27 2005-04-29 Pfizer Prod Inc EP4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis
RU2288913C2 (ru) 2001-07-16 2006-12-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Аналоги простагландинов, способ их получения и фармацевтическая композиция, обладающая селективной агонистической активностью в отношении рецептора ep4
AU2002328338C1 (en) 2001-07-16 2009-01-08 Ono Pharmaceutical Co., Ltd 2 pyrrolidone derivatives as prostanoid agonists
MXPA04000757A (es) * 2001-07-23 2004-07-08 Ono Pharmaceutical Co Remedios para enfermedades con perdida de masa de hueso que tienen agonistas ep4 como ingrediente activo.
US20040254230A1 (en) * 2001-12-03 2004-12-16 Ogidigben Miller J. Method for treating ocular hypertension
MXPA04008596A (es) 2002-03-05 2004-12-06 Ono Pharmaceutical Co Compuestos derivados de 8-azaprostaglandina y farmacos que contienen los compuestos como ingrediente activo.
EP1487437B1 (en) * 2002-03-18 2006-08-16 Pfizer Products Inc. Use of selective ep4 receptor agonists for the treatment of diseases
MXPA04009036A (es) * 2002-03-18 2005-01-25 Pfizer Prod Inc Uso de agonistas del receptor ep4 selectivos para el tratamiento de la insuficiencia hepatica, perdida de permeabilidad del ductus arterioso, glaucoma o hipertension ocular.
US6573294B1 (en) 2002-05-14 2003-06-03 Allergan, Inc. 8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure
WO2003103664A1 (en) * 2002-06-06 2003-12-18 Merck Frosst Canada & Co. 1,5-disubstituted imidazolidin-2-one derivatives for use as ep4 receptor agonists in the treatment of eye and bone diseases
WO2003103772A1 (en) 2002-06-06 2003-12-18 Merck Frosst Canada & Co. 1,5-distributed pyrrolid-2-one derivatives for use as ep4 receptor agonists in the teatment of eye diseases such as glaucoma
EP1556347A4 (en) * 2002-06-10 2006-08-09 Applied Research Systems GAMMA LACTAME AS PROSTAGLAND INAGONISTS AND THEIR USE
GB0219143D0 (en) * 2002-08-16 2002-09-25 Univ Leicester Modified tailed oligonucleotides
ES2393321T3 (es) 2002-10-10 2012-12-20 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Promotores de la producción de factores de reparación endógenos
AU2003275838A1 (en) * 2002-10-25 2004-05-13 Beunard, Jean-Luc Pyrrolidin-2-on derivatives as ep4 receptor agonists
US7196082B2 (en) 2002-11-08 2007-03-27 Merck & Co. Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
WO2004043354A2 (en) 2002-11-08 2004-05-27 Merck & Co., Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
US7053085B2 (en) * 2003-03-26 2006-05-30 Merck & Co. Inc. EP4 receptor agonist, compositions and methods thereof
CA2511255C (en) * 2003-01-10 2009-04-07 F. Hoffmann-La Roche Ag 2-piperidone derivatives as prostaglandin agonists
JP4582456B2 (ja) * 2003-01-21 2010-11-17 小野薬品工業株式会社 ８−アザプロスタグランジン誘導体およびその医薬用途
JP4662926B2 (ja) 2003-03-03 2011-03-30 メルク セローノ ソシエテ アノニム プロスタグランジン作動薬としてのγ−ラクタム誘導体
US6734206B1 (en) 2003-06-02 2004-05-11 Allergan, Inc. 3-oxa-8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure
US6734201B1 (en) 2003-06-02 2004-05-11 Allergan, Inc. 8-Azaprostaglandin carbonate and thiocarbonate analogs as therapeutic agents
WO2005012232A2 (en) 2003-07-18 2005-02-10 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Hydrazide derivatives as prostaglandin receptors modulators
US7034051B2 (en) * 2003-08-28 2006-04-25 Adolor Corporation Fused bicyclic carboxamide derivatives and methods of their use
US7576122B2 (en) 2003-09-02 2009-08-18 Merck & Co. Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
KR20060090801A (ko) 2003-09-04 2006-08-16 머크 앤드 캄파니 인코포레이티드 고안압증 치료용 안용 조성물
JP2007504236A (ja) 2003-09-04 2007-03-01 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 高眼圧症を治療するための眼用組成物
WO2005027931A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and an ep2 or ep4 selective agonist
BRPI0417621A (pt) * 2003-12-17 2007-04-10 Pfizer Prod Inc terapia de combinação contìnua com agonistas seletivos do receptor ep4 de prostaglandina e um estrogênio para o tratamento de estados que se apresentem com baixa massa óssea
US7169807B2 (en) * 2004-04-09 2007-01-30 Allergan, Inc. 10-Hydroxy-11-dihydroprostaglandin analogs as selective EP4 agonists
JP2008507521A (ja) 2004-07-20 2008-03-13 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 高眼圧症を治療するための眼科用組成物
JP4893999B2 (ja) * 2004-10-22 2012-03-07 小野薬品工業株式会社 吸入用医薬組成物
US20080132543A1 (en) * 2004-10-26 2008-06-05 Wha Bin Im Therapeutic and Delivery Methods of Prostaglandin Ep4, Agonists
WO2006052630A1 (en) * 2004-11-04 2006-05-18 Allergan, Inc. Therapeutic substituted piperidone compounds
CA2586752A1 (en) * 2004-11-08 2006-05-18 Allergan, Inc. Substituted pyrrolidone compounds as ep4 agonists
US7101906B2 (en) * 2004-11-16 2006-09-05 Allergan, Inc. 2,3,4-substituted cyclopentanones as therapeutic agents
US7183324B2 (en) 2004-11-23 2007-02-27 Allergan, Inc. 2,3,4-substituted cyclopentanones as therapeutic agents
KR100890490B1 (ko) * 2005-01-27 2009-03-26 아사히 가세이 파마 가부시키가이샤 헤테로 6원환 화합물 및 그의 용도
US7531533B2 (en) 2005-01-27 2009-05-12 Asahi Kasei Pharma Corporation 6-Membered heterocyclic compound and use thereof
WO2006121708A1 (en) * 2005-05-06 2006-11-16 Allergan, Inc. Substituted beta-lactams and their use in medicine
US7772392B2 (en) 2005-05-06 2010-08-10 Allergan, Inc. Therapeutic substituted β-lactams
US7893107B2 (en) * 2005-11-30 2011-02-22 Allergan, Inc. Therapeutic methods using prostaglandin EP4 agonist components
KR100598678B1 (ko) * 2006-02-15 2006-07-19 (주)아이앤씨 수직형 대형 폐기물 파쇄기
US20070232660A1 (en) * 2006-04-04 2007-10-04 Allergan, Inc. Therapeutic and delivery methods of prostaglandin ep4 agonists
EP2094839B1 (en) 2006-12-08 2020-02-05 University of Rochester Expansion of hematopoietic stem cells
BRPI0721067A2 (pt) * 2006-12-18 2014-02-25 Allergan Inc Métodos e composições para tratar distúrbios gastrointestinais.
KR20100016299A (ko) 2007-05-08 2010-02-12 고쿠리츠다이가쿠호진 하마마츠이카다이가쿠 Ｅｐ４ 아고니스트를 함유하여 이루어지는 세포 상해성 ｔ 세포의 활성화제
WO2008144623A1 (en) * 2007-05-23 2008-11-27 Allergan, Inc. Cyclic lactams for the treatment of glaucoma or elevated intraocular pressure
US8063033B2 (en) * 2008-01-18 2011-11-22 Allergan, Inc. Therapeutic beta-lactams
US8202855B2 (en) 2008-03-04 2012-06-19 Allergan, Inc Substituted beta-lactams
US7705001B2 (en) * 2008-03-18 2010-04-27 Allergan, Inc Therapeutic substituted gamma lactams
EP2320906B1 (en) * 2008-08-14 2016-02-24 Beta Pharma Canada Inc. Heterocyclic amide derivatives as ep4 receptor antagonists
WO2010116270A1 (en) 2009-04-10 2010-10-14 Pfizer Inc. Ep2/4 agonists
US20120190637A1 (en) 2009-10-14 2012-07-26 Gemmus Pharma, Inc. Combination therapy treatment for viral infections
ES2593229T3 (es) * 2010-03-08 2016-12-07 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Nuevo agonista de EP4
CA2738045C (en) 2010-05-28 2019-02-19 Simon Fraser University Conjugate compounds, methods of making same, and uses thereof
EP2397141A1 (en) * 2010-06-16 2011-12-21 LEK Pharmaceuticals d.d. Process for the synthesis of beta-amino acids and derivatives thereof
US8697057B2 (en) 2010-08-19 2014-04-15 Allergan, Inc. Compositions and soft tissue replacement methods
EP2675491A2 (en) 2011-02-17 2013-12-25 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
WO2013105997A2 (en) 2011-02-23 2013-07-18 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
WO2013123272A1 (en) 2012-02-16 2013-08-22 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
EP2814526B1 (en) 2012-02-16 2016-11-02 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
EP2814527A1 (en) 2012-02-16 2014-12-24 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
WO2013123270A1 (en) 2012-02-16 2013-08-22 Allergan, Inc. Compositions and improved soft tissue replacement methods
KR102151578B1 (ko) * 2012-07-19 2020-09-03 카이맨 케미칼 컴파니 인코포레이티드 Ep4-매개의 골 관련 질병 및 질환을 위한 디플루오로락탐 조성물
JP6400479B2 (ja) 2012-10-29 2018-10-03 株式会社カルディオ 肺疾患特異的治療剤
JP6368351B2 (ja) 2013-03-15 2018-08-01 ケイマン ケミカル カンパニー， インコーポレーテッド ジフルオロラクタムアナログを合成する方法
CA2906134A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Cayman Chemical Company, Inc. Lactam compounds as ep4 receptor-selective agonists for use in the treatment of ep4-mediated diseases and conditions
US9676712B2 (en) 2013-03-15 2017-06-13 Cayman Chemical Company, Inc. Lactam compounds as EP4 receptor-selective agonists for use in the treatment of EP4-mediated diseases and conditions
JP2016527006A (ja) 2013-07-19 2016-09-08 ケイマン ケミカル カンパニー， インコーポレーテッド 骨成長を促進するための方法、システム、及び組成物
NZ717739A (en) 2013-08-09 2023-12-22 Ardelyx Inc Compounds and methods for inhibiting phosphate transport
WO2015056504A1 (ja) 2013-10-15 2015-04-23 小野薬品工業株式会社 薬剤溶出性ステントグラフト
US9650414B1 (en) 2014-05-30 2017-05-16 Simon Fraser University Dual-action EP4 agonist—bisphosphonate conjugates and uses thereof
BR112016028614A8 (pt) 2014-06-06 2021-04-06 Allergan Inc novos agonistas de ep4, composição farmacêutica compreendendo os mesmos e seu uso
US9540357B1 (en) 2014-07-31 2017-01-10 Allergan, Inc. 15-aryl prostaglandins as EP4 agonists, and methods of use thereof
EP3307747A4 (en) 2015-06-12 2019-02-27 Simon Fraser University AMIDE-LINKED EP4-BISPHOSPHONATE AGONIST COMPOUNDS AND USES THEREOF
CN107011377B (zh) * 2017-05-03 2019-02-26 南通书创药业科技有限公司 一种β-羰基磷酸酯的制备方法
BR112020012405A2 (pt) 2017-12-25 2020-11-24 Asahi Kasei Pharma Corporation composto cíclico de 6 membros contendo nitrogênio.
US20200368223A1 (en) 2019-05-21 2020-11-26 Ardelyx, Inc. Methods for inhibiting phosphate transport

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1158163A (en) 1966-06-15 1969-07-16 Berk Ltd Improvements in or relating to Polymer Compositions
ZA72645B (en) * 1971-03-05 1972-11-29 Upjohn Co Prostaglandin analogs
DE2346706A1 (de) * 1973-09-17 1975-04-03 Hoechst Ag Neue, nicht natuerlich vorkommende analoga von prostansaeuren und verfahren zu ihrer herstellung
US3975399A (en) 1974-08-06 1976-08-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company 1,5-Disubstituted-2-pyrrolidinones, -3-pyrrolin-2-ones, and -4-pyrrolin-2-ones
US4113873A (en) 1975-04-26 1978-09-12 Tanabe Seiyaku Co. Ltd. 8-azaprostanoic acid derivatives
NL7604330A (nl) 1975-04-28 1976-11-01 Syntex Inc Werkwijze voor de bereiding van 8-azaprostaan- zuurderivaten.
DE2528664A1 (de) 1975-06-27 1977-01-13 Hoechst Ag Pyrrolidone und verfahren zu ihrer herstellung
IL49325A (en) 1976-03-31 1979-11-30 Labaz 8-aza-11-deoxy-pge1 derivatives,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
DE2619638A1 (de) 1976-05-04 1977-11-17 Hoechst Ag Pyrrolidone und verfahren zu ihrer herstellung
US4177346A (en) * 1976-08-06 1979-12-04 Pfizer Inc. 1,5-Disubstituted-2-pyrrolidones
CA1077948A (en) * 1976-08-06 1980-05-20 Albin J. Nelson 1,-5 disubstituted-2-pyrrolidones and processes for their production
US4320136A (en) 1980-08-11 1982-03-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company 8-Aza-16,16-difluoroprostanoids
US4456613A (en) 1982-12-27 1984-06-26 E. I. Du Pont De Nemours And Company 6-Keto- and 6-hydroxy-8-azaprostanoids and anti-ulcer use thereof
TW288010B (cs) 1992-03-05 1996-10-11 Pfizer
SE9302334D0 (sv) 1993-07-06 1993-07-06 Ab Astra New compounds
ZA944647B (en) 1993-07-06 1995-01-06 Astra Ab Novel (1-phenyl-1-heterocyclyl)methanol and (1-phenyl-1-heterocyclcl)methylamine derivatives
US5955481A (en) 1994-03-28 1999-09-21 Nissan Chemical Industries, Ltd. Pyridine type thiazolidines
TW420669B (en) 1994-03-28 2001-02-01 Nissan Chemical Ind Ltd Pyridine type thiazolidines
US5703108A (en) * 1996-02-28 1997-12-30 Pfizer Inc. Bone deposition by certain prostaglandin agonists
WO2000021532A1 (en) 1998-10-15 2000-04-20 Merck & Co., Inc. Methods for inhibiting bone resorption
JP2002527400A (ja) * 1998-10-15 2002-08-27 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド 骨形成刺激方法
TR200201643T2 (tr) * 1999-12-22 2002-11-21 Pfizer Products Inc. Osteoporoz tedavisi için EP4 reseptörünü seçici agonistler.
DE60120007T2 (de) * 2000-01-31 2006-11-16 Pfizer Products Inc., Groton Verwendung von Aktivatoren des Prostaglandinrezeptores 4 zur Behandlung von akuter oder chronischer Niereninsuffizienz
US20010056060A1 (en) * 2000-02-07 2001-12-27 Cameron Kimberly O. Treatment of osteoporsis with EP2/EP4 receptor selective agonists
NZ525164A (en) * 2000-11-27 2005-04-29 Pfizer Prod Inc EP4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis
US6573294B1 (en) * 2002-05-14 2003-06-03 Allergan, Inc. 8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure

Also Published As

Publication number Publication date
BR0115687A (pt) 2003-09-09
EP1339678B1 (en) 2007-09-26
NO20032360L (no) 2003-07-23
AU2002210848A1 (en) 2002-06-03
AR035074A1 (es) 2004-04-14
US20020065308A1 (en) 2002-05-30
ECSP034623A (es) 2003-07-25
CY1106976T1 (el) 2012-09-26
US6552067B2 (en) 2003-04-22
EP1339678A2 (en) 2003-09-03
JP3984164B2 (ja) 2007-10-03
US7192979B2 (en) 2007-03-20
EA200300379A1 (ru) 2003-08-28
ZA200302803B (en) 2004-04-13
HUP0400807A2 (hu) 2004-07-28
GT200100238A (es) 2002-06-26
BG107697A (en) 2004-01-30
SV2003000746A (es) 2003-01-13
CN1476429A (zh) 2004-02-18
ATE374182T1 (de) 2007-10-15
DE60130675T2 (de) 2008-01-24
IS6775A (is) 2003-04-10
NZ525164A (en) 2005-04-29
WO2002042268A3 (en) 2002-07-25
GT200100238AA (es) 2004-05-12
PE20020637A1 (es) 2002-07-18
NO20032360D0 (no) 2003-05-26
DE60130675D1 (de) 2007-11-08
PA8533901A1 (es) 2002-11-28
US6747054B2 (en) 2004-06-08
JP2007197467A (ja) 2007-08-09
PT1339678E (pt) 2007-11-30
CA2429850A1 (en) 2002-05-30
DK1339678T3 (da) 2008-02-04
US20040259921A1 (en) 2004-12-23
HN2001000266A (es) 2002-01-30
KR20030053063A (ko) 2003-06-27
PL362030A1 (en) 2004-10-18
WO2002042268A2 (en) 2002-05-30
SI1339678T1 (sl) 2007-12-31
MXPA03004623A (es) 2003-09-05
UY27038A1 (es) 2002-07-31
SK5562003A3 (en) 2004-08-03
IL155368A0 (en) 2003-11-23
JP2004521869A (ja) 2004-07-22
ES2291361T3 (es) 2008-03-01
US20030149086A1 (en) 2003-08-07
TNSN01166A1 (fr) 2005-11-10
EE200300246A (et) 2003-10-15
CA2429850C (en) 2008-12-30
TW200424170A (en) 2004-11-16
MA26961A1 (fr) 2004-12-20
OA12533A (en) 2006-06-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20031257A3 (cs) Selektivní agonisty receptoru EP4 při léčení osteoporosy
DE69736007T2 (de) Vorbeugung des verlustes und wiederherstellung von knochenmasse unter verwendung von prostaglandin-analogen
US6642266B2 (en) EP4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis
JPH11180926A (ja) 骨粗しょう症用化合物
US6531485B2 (en) Prostaglandin agonists