CN101522624B - 苯乙烯基吡啶衍生物及其用于结合和成像淀粉样蛋白斑的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及成像淀粉状蛋白沉积物的方法和苯乙烯基吡啶化合物以及制备用于成像淀粉状蛋白沉积物的放射性标记的苯乙烯基吡啶化合物的方法。本发明还涉及用于抑制淀粉样蛋白质聚集形成淀粉状蛋白沉积物的化合物和制备所述化合物的方法，以及向淀粉状蛋白沉积物递送治疗剂的方法。

Description

苯乙烯基吡啶衍生物及其用于结合和成像淀粉样蛋白斑的用途

发明背景

发明领域

本发明涉及新的苯乙烯基吡啶化合物，其在诊断性成像和抑制淀粉样蛋白-β聚集中的用途，以及制备这些化合物的方法。

背景技术

阿尔茨海默病(AD)是一种进行性的神经变性疾病，其以认知下降、不可逆的记忆丧失、定向障碍和语言障碍为特征。AD脑切片的尸检显示大量由淀粉样蛋白-β(Aβ)肽和许多由高度磷酸化的τ蛋白丝形成的神经原纤维缠结(NFTs)组成的老年斑(SPs)(关于最近的综述和附加的引用参见在Cerebral Cortex：NeUrodegenerative and Age-related Changes in Structure andFunction of Cerebral Cortex，Kluwer Academic/Plenum，NY(1999)，pp.603-654中Ginsberg，S.D.等人的＂Molecular Pathology of Alzheimer′s Diseaseand Related Disorders，＂；Vogelsberg-Ragaglia，V.等人，＂Cell Biology of Tauand Cytoskeletal Pathology in Alzheimer′s Disease，＂Alzheimer′s Disease，Lippincot，Williams & Wilkins，费城，PA(1999)，pp.359-372)。

淀粉样变是以在患者组织中蓄积各种不溶性的纤维状蛋白为特征的病症。通过淀粉样蛋白聚集，接着聚集物和/或淀粉样蛋白再结合而形成淀粉状蛋白沉积物。β-淀粉样蛋白(Aβ)肽聚集物在脑中的形成和蓄积是AD发生和进行的关键因素。

除了淀粉状蛋白沉积物在阿尔茨海默病中的作用外，已证明在诸如下述疾病中存在淀粉状蛋白沉积物：地中海热、穆-韦综合征、原发性骨髓瘤、淀粉样多神经病、淀粉样心肌病、全身性老年淀粉样变性、淀粉样多神经病、遗传性脑出血伴淀粉样变、唐氏综合征、羊瘙痒病、克-雅病、库鲁病、格-施-沙综合征、甲状腺管道样癌、孤立性心房淀粉样变性、透析患者中的β₂-微球蛋白淀粉样蛋白、包涵体肌炎、肌萎缩疾病中的β₂-淀粉状蛋白沉积物和胰岛II型糖尿病胰岛素瘤。

淀粉样蛋白肽的纤维状聚集物Aβ_1-40和Aβ_1-42是源自发现于AD患者的老年斑和脑血管淀粉状蛋白沉积物中的淀粉样蛋白前体蛋白的主要的代谢肽(Xia，W.等人，J.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.97:9299-9304(2000))。治疗该疾病的目标是预防和逆转Aβ斑形成(Selkoe，D.，J.JAMA283:1615-1617(2000)；Wolfe，M.S.等人，J.Med.Chem.41:6-9(1998)；Skovronsky，D.M.和Lee，V.M.，Trends Pharmacol.Sci.21:161-163(2000))。

家族性AD(FAD)由前体蛋白(APP)、早老素1(PS1)和早老素2(PS2)基因的多重突变引起(在Cerebral Cortex：Neurodegenerative and Age-relatedChanges in Structure and Function of Cerebral Cortex，KluwerAcademic/Plenum，NY(1999)，pp.603-654中Ginsberg，S.D.等人的＂Molecular Pathology of Alzheimer′s Disease and Related Disorders，＂；Vogelsberg-Ragaglia，V.等人，＂Cell Biology of Tau and Cytoskeletal Pathologyin Alzheimer′s Disease，＂Alzheimer′s Disease，Lippincot，Williams & Wilkins，费城，PA(1999)，pp.359-372)。

尽管尚未完全明白AD的确切机制，但迄今研究的所有致病FAD突变都使更具淀粉样变发生性(amyloidogenic)的42-43个氨基酸长度的形式的Aβ肽产生增加。因此，至少在FAD中，Aβ产生的调节异常似乎足以诱导导致神经变性事件的级联。事实上，该淀粉样蛋白级联的假设提示，细胞外纤维状的Aβ聚集物在脑内的形成可能是AD发病机制中的关键事件(Selkoe，D.J.，＂Biology of β-amyloid Precursor Protein and the Mechanism ofAlzheimer′s Disease，＂Alzheimer′s Disease，Lippincot Williams & Wilkins，费城，PA(1999)，pp.293-310；Selkoe，D.J.，J.Am.Med.Assoc.283:1615-1617(2000)；Naslund，J.等人，J.Am.Med.Assoc.283:1571-1577(2000)；Golde，T.E.等人，Biochimica et Biophysica Acta1502:172-187(2000))。

目前，设法抑制脑内纤维状Aβ产生并减少其蓄积的各种方法正作为AD的可能疗法进行评价(Skovronsky，D.M.和Lee，V.M.，Trends Pharmacol.Sci.21:161-163(2000)；Vassar，R.等人，Science286:735-741(1999)；Wolfe，M.S.等人，J.Med.Chem.41:6-9(1998)；Moore，C.L.，等人，J.Med.Chem.43:3434-3442(2000)；Findeis，M.A.，Biochimica et Biophysica Acta1502:76-84(2000)；Kuner，P.，Bohrmann等人，J.Biol.Chem.275:1673-1678(2000))。因此，重要的是开发特异性地结合纤维状Aβ聚集物的配体。由于细胞外SP是可到达的靶，所以这些新的配体可用作体内诊断工具，并在研究有生命的患者中的AD淀粉样变发生(amyloidogenesis)中作为探针以显现Aβ的进行性的沉积。

为此，已报道了用于开发纤维状Aβ聚集物特异性配体的几种有趣的方法(Ashbum，T.T.等人.，Chem.Biol.3:351-358(1996)；Han，G.等人，J.Am.Chem.Soc.118:4506-4507(1996)；Klunk，W.E.等人，Biol Psychiatry35:627(1994)；Klunk，W.E.等人，Neurobiol Aging16:541-548(1995)；Klunk，W.E.等人，Society for Neuroscience Abstract23:1638(1997)；Mathis，C.A.等人，Proc.XIIth Intl.Symp.Radiopharm.Chem.，Uppsala，Sweden:94-95(1997)；Lorenzo，A.和Yankner，B.A.，Proc.Natl Acad.Sci.U.S.A.91：12243-12247(1994)；Zhen，W.等人，J.Med.Chem.42:2805-2815(1999))。最吸引人的方法基于高度共轭的柯胺-G(CG)和刚果红(CR)，后者己经用于尸检AD脑切片中的SP和NFT的荧光染色(Ashbum，T.T.等人，Chem.Biol.3:351-358(1996)；Klunk，W.E.等人，J.Histochem.Cytochem.37：1273-1281(1989))。CR、CG和CG的3’-溴-和3’-碘衍生物与纤维状Aβ聚集物结合的抑制常数(K_i)分别为2800、370、300和250nM(Mathis，C.A.等人，Proc.XIIth Intl.Symp.Radiopharm.Chem.，Uppsala，Sweden:94-95(1997))。己经证明这些化合物在体外选择性地与Aβ(1-40)肽聚集物结合，并在AD脑切片中选择性地与纤维状Aβ沉积物结合(Mathis，C.A.等人，Proc.XIIth Intl.Symp.Radiopharm.Chem.，Uppsala，Sweden:94-95(1997))。

成像脑中的Aβ聚集物有几个可能的益处。成像技术会通过识别脑中具有过量Aβ斑的潜在患者来改善诊断；因此，它们可能会发生阿尔茨海默病。其还可用于监测该疾病的进展。当抗斑药物治疗变得可用时，成像脑内的Aβ斑可为监测治疗提供基本工具。因此，已在急切地寻找用于检测和定量患者中淀粉状蛋白沉积物的简单的非侵袭性的方法。目前，淀粉状蛋白沉积物的检测包括活检或验尸材料的组织学分析。这两种方法都有缺陷。例如，验尸只能用于死后诊断。

由于淀粉状蛋白沉积物与正常组织具有许多相同的物理性质(例如密度和含水量)，所以该沉积物的体内直接成像是困难的。用磁共振成像(MRI)和计算机辅助体层摄影术(CA)成像淀粉状蛋白沉积物的尝试是令人失望的，它们仅在某些有利条件下检测到淀粉状蛋白沉积物。此外，用抗体、血清淀粉样P蛋白或其他探针分子标记淀粉状蛋白沉积物的努力在外周组织中提供了一定的选择性，但提供差的组织内部成像。

用于检测活的脑内的Aβ聚集物的潜在配体必须穿过完整的血脑屏障。因此，通过使用具有相对较小的分子尺寸(与刚果红相比)和增加的亲脂性的配体，可改善脑摄取。高度共轭的硫磺素(S和T)通常用作染色AD脑内Aβ聚集物的染料(Elhaddaoui，A.等人，Biospectroscopy1:351-356(1995))。

已经报道了用于结合(主要由高磷酸化的τ蛋白组成的)缠结和(含有A6蛋白聚集体的)斑的高亲脂性示踪剂，[¹⁸F]FDDNP(Shoghi-Jadid K等人，AmJ Geriatr Psychiatry.2002；10:24-35)。使用正电子成象术(PET)，报道了在九名AD患者和七名对比个体中，该示踪剂特异性地标记了斑和缠结的沉积物(Nordberg A.Lancet Neurol.2004；3:519-27)。使用调用(call)脑的兴趣区与脑桥的相对滞留时间的新的药动学分析程序，证明了AD患者与对比个体之间的差异。在AD患者中，相对滞留时间显著更高。这被以下引人入胜的发现进一步复杂化，即对于体外结合Aβ原纤维和离体结合Aβ斑，FDDNP与一些NSAID竞争(Agdeppa ED等人2001；Agdeppa ED等人，Neuroscience.2003；117:723-30)。

近期报道了通过使用苯并噻唑苯胺衍生物[¹¹C]6-OH-BTA-1(也称为[¹¹C]PIB)成像AD患者脑内的β-淀粉样蛋白(Mathis CA等人.，Curr PharmDes.2004；10:1469-92；Mathis CA等人，Arch.Neurol.2005，62:196-200)。与对于[¹⁸F]FDDNP所观察的相反，[¹¹C]6-OH-BTA-1在体内特异性地与纤维状Aβ结合。诊断有轻度AD的患者显示[¹¹C]6-OH-BTA-1在皮质中显著保留，己知在AD中皮质含有大量淀粉状蛋白沉积物。在AD患者组中，[¹¹C]6-OH-BTA-1保留在额皮质中增加得最显著。还在颅顶部、太阳穴和枕部皮质中及在纹状体中观察到了巨大的增加。在已知相对不受淀粉样蛋白沉积影响的区域(如皮质下白质、脑桥和小脑)中，在AD患者和对比个体中的[¹¹C]6-OH-BTA-1滞留相等。近期，已经研究另一种¹¹C标记的Aβ斑靶向探针，即芪衍生物[¹¹C]SB-13。使用所述[¹¹C]SB-13的体外结合提示，该化合物显示极好的结合亲合力，且在大脑皮质灰质皮层物质中能清楚地测量该结合，但在AD病例的白质中并非如此(Kung M-P等人，Brain Res.2004；1025:89-105)。在对照脑的皮质组织匀浆中具有非常低的特异性结合。[³H]SB-13在AD皮质匀浆中的Kd值为2.4±0.2nM。观察到了高结合容量和可比较的值(14-45pmol/mg蛋白)(Id.)。如所预期，在轻度至中度AD患者中，[¹¹C]SB-B在额皮质(推测为含有高密度Aβ斑的区域)中显示高度蓄积，但在年龄匹配的对照个体中却并非如此(VerhoeffNP等人，Am J GeriatrPsychiatry.2004；12:584-95)。

用于成像和定量患者中淀粉状蛋白沉积物的非侵入性的技术会是有用的。此外，抑制淀粉样蛋白聚集以形成淀粉状蛋白沉积物的化合物和用于确定化合物抑制淀粉样蛋白聚集的能力的方法会是有用的。

发明概述

本发明提供式I、Ia、II和III的新化合物。

本发明还提供诊断组合物，其包含式I、Ia、II和III的放射性标记化合物和药学可接受的载体或稀释剂。

本发明还提供成像淀粉状蛋白沉积物的方法，所述方法包括将可检测量的式I、Ia、II和III的标记化合物或其药学可接受的盐、酯、酰胺或前药引入患者中。

本发明还提供用于抑制淀粉样蛋白聚集的方法，所述方法包括向哺乳动物给药淀粉样蛋白抑制量的式I、Ia、II和III的化合物或其药学可接受的盐、酯、酰胺或前药。

本发明的另外方面涉及用于合成本文描述的式I、Ia、II和III的淀粉样蛋白抑制和成像化合物的方法和中间体。

附图说明

图1描述本发明的化合物成像形成的胶片。

图2描述与芪类似物相比苯乙烯基吡啶2的脑和骨摄取。

图3描述比较苯乙烯基吡啶2与芪类似物的胶片放射自显影法。

图4描述苯乙烯基吡啶2在AD脑匀浆中的饱和曲线。

图5描述若干本发明的化合物和它们各自的结合数据。

图6描述宏阵列(macroarray)脑切片的体外放射自显影。

图7描述F-18标记的示踪剂对所收集的人肝微粒体部分的体外稳定性。在不含微粒体部分的PBS中的示踪剂用作对照。数值(未变化的母体化合物％)为双份的平均值。

图8描述[¹⁸F]2与收集的AD和对照脑组织匀浆的特异性结合。从脑皮质区域切出灰质和白质。主要在灰质中检测到高度特异性结合。表示的数值为6个测量值的平均值±SEM。在白质匀浆中观察到相对较低结合。相反，对照脑的匀浆，灰质或白质都表现出显著较低的[¹⁸F]2特异性结合。

图9描述：(上图)化合物[¹⁸F]2的HPLC曲线；(下图)非放射性参比物2的UV踪迹，(350nm)。HPLC条件：Agilent1100系列；Phenomenex GeminiC-18柱5μ250x4.6mm，CH₃CN/甲酸铵缓冲液(1mM)8/2v/v，1mL/分钟。Rt.6.34分钟(放射性)，6.05分钟(UV)。由于检测器结构导致保留时间差。

发明详述

式I的化合物：

或其药学可接受的盐；其中，n为1-6的整数；A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH或者如果允许的话为-CR²；R¹选自：

a.-(CH₂)_pNR^aR^b，其中R^a和R^b独立地为氢、C_1-4烷基、羟基(C_1-4)烷基或卤代(C_1-4)烷基，且p为0-5的整数；

b.羟基，

c.C_1-4烷氧基，

d.羟基(C_1-4)烷基，

e.卤素，

f.氰基，

g.氢，

h.硝基，

i.(C₁-C₄)烷基，

j.卤代(C₁-C₄)烷基，

k.甲酰基，

1.-NHCO(C_1-4烷基)，和

m.-OCO(C_1-4烷基)；

R²选自：

其中q为1-10的整数；Z选自卤素、卤素取代的苯甲酰氧基、卤素取代的苄氧基、卤素取代的苯基(C_1-4)烷基、卤素取代的芳氧基和卤素取代的C_6-10芳基，或者Z还可为羟基；且R³⁰、R³¹、R³²和R³³在每种情况下独立地选自氢、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C]-4)烷基；或者Z为羟基；

其中q为1-10的整数，R^x和R^y为氢、羟基或C_1-4烷基；t为0、1、2或3；且Z、R³⁰、R³¹、R³²和R³³如上文所描述；

其中Y选自卤素、卤素取代的苯甲酰氧基、卤素取代的苯基(C_1-4)烷基、卤素取代的芳氧基和卤素取代的C_6-10芳基；U选自氢、羟基、卤素、卤素取代的苯甲酰氧基、卤素取代的苯基(C_1-4)烷基、卤素取代的芳氧基和卤素取代的C_6-10芳基；且R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰在每种情况下独立地选自氢、卤素、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基；

其中R^x和R^y为氢、羟基或C_1-4烷基；t为0、1、2或3；且Y、U、R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰如上文所描述；

iii.NR′R＂，其中R′和R＂中至少一个为(CH₂)_dX，其中X为卤素，优选F或¹⁸F，且d为1-4的整数；R′和R＂中的另一个选自氢、C_1-4烷基、卤代(C_1-4)烷基和羟基(C_1-4)烷基；

iv.NR′R＂-(C_1-4)烷基，其中R′和R＂中至少一个为(CH₂)_dX，其中X为卤素，优选F或¹⁸F，且d为1-4的整数；R′和R＂中的另一个选自氢、C_1-4烷基、卤代(C_1-4)烷基和羟基(C_1-4)烷基；

v.卤代(C_1-4)烷基；和

vi.具有下述结构的醚(R-O-R)：[卤代(C_1-4)烷基-O-(C_1-4)烷基]-；且

R⁷和R⁸在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。

优选的化合物包括那些在结构上的卤素在一种或多种情况下为放射性标记的卤素的化合物。还优选的是其中所述卤素选自I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br、F或¹⁸F的化合物。特别优选的化合物是那些含¹⁸F的化合物。含¹²³I的化合物也是特别优选的。

有用的R¹值如上文所列。优选值为羟基或NR^aR^b(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R^a和R^b独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-4的整数。有用的p值为0-5的整数。优选地，p为0、1或2。最优选地，p为0，从而R¹代表NR^aR^b。在优选的实施方案中，R¹相对于各桥基在间位或对位。R¹的优选值为NR^aR^b，其中R^a和R^b独立地为氢或C_1-4烷基。在此实施方案中，优选的是C_1-4烷基为甲基。优选地，R^a和R^b之一为氢，另一个为C_1-4烷基，例如甲基。最优选地，R^a和R^b均为甲基。R¹的另一优选值为羟基。还优选在给药后得到优选的R¹值的任何前药基团。这样的前药基团在本领域内是已知的。

有用的n值包括0-6的整数。优选地，n的值为1-4。最优选地，n的值为1-3。特别优选的是n为1。

有用的R⁷和R⁸值在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。n的值决定化合物中存在的R⁷和R⁸基团的数目。如果在特定化合物中存在多于一次，R⁷和R⁸在每种情况下的值可以不同于任何其他R⁷和R⁸的值。在优选的实施方案中，R⁷和R⁸在每种情况下为氢。

有用的R²值包括亚结构i、i′、ii、ii′、iii、iv、v和vi，如上文所描述。在式I的优选的实施方案中，R²相对于各桥基在间位或对位。优选R²为亚结构i或ii。还优选亚结构i′和ii′。在这些实施方案中，有用的q值包括1-10的整数。优选在R²为i或i′的化合物中，q为1-5的整数。最优选q为1-4，特别是3或4。在亚结构i或i′中，有用的R³⁰、R³¹、R³²和R³³的值独立地包括氢、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。优选的化合物包括那些其中R³⁰、R³¹、R³²和R³³中的一个或多个为氢的化合物。更优选的化合物包括那些其中R³⁰、R³¹、R³²和R³³各自为氢的化合物。

在亚结构ii或ii′中，有用的Y、U和R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰的值如上文所描述。优选的化合物包括其中U为羟基的化合物。

有用的化合物包括A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH或者如果允许的话为-CR²。更优选N在位置A₄。

优选的式I的化合物包括那些化合物，其中A₄为N，所述化合物具有下述结构：

其中R^a和R^b独立地选自氢或C_1-4烷基，Z如上文所描述，且q为1-5的整数。优选的化合物的实例包括：

其中q为1-4的整数；例如：

当R²为ii时，其他优选的式I的化合物包括：

和

在另一方面，本发明涉及具有下述结构的式I的化合物：

或其药学可接受的盐，其中：A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH或者如果允许的话为-CR²；n为1-6的整数；R¹包括所有上述的有用值，优选羟基或NR^aR^b(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R^a和R^b独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-6的整数；R²选自：

其中q为2-10的整数；Z为-Ch；

其中q为1-10的整数，R^x和R^y为氢、羟基或C_1-4烷基；t为0、1、2或3；且Z、R³⁰、R³¹、R³²和R³³如上文所描述；且Z为-Ch；

其中Z为-Ch，R³⁰、R³¹、R³²和R³³如上文所描述，和

其中Y为-Ch；U选自氢、羟基、卤素、卤素取代的苯甲酰氧基、卤素取代的苯基(C_1-4)烷基、卤素取代的芳氧基和卤素取代的C_6-10芳基；且R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰在每种情况下独立地选自氢、卤素、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基；

其中，R^x和R^y为氢、羟基或C_1-4烷基；t为0、1、2或3；且Y、U、R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰如上述；

iv.-(CH₂)_w-O-Ch，其中w为1-10的整数；

v.-Ch；和

vi.-(CH₂)_w-Ch，其中w为1-10的整数；

其中，基团“-Ch”为能够与金属配合形成金属螯合物的螯合配体。许多配体在本领域内是已知的，并适用作本发明的化合物的标记基团。本领域技术人员会理解这样的配体提供了标记化合物的方法，且本发明不限于特定的配体，其中许多是可互换的。优选地，这种配体为三或四齿配体，例如N₃、N₂S、NS₂、N₄以及那些N₂S₂型的配体，它们用下述结构表示但不限于此：

其中R^P为氢或巯基保护基，且R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³、R¹⁴、R¹⁵、R¹⁶、R³³和R³⁴在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。当与金属如⁹⁹m-Tc配合时，-Ch具有下述结构：

此外，铼放射性同位素可以与四齿配体配合，而锝则不能。当所述螯合基团不与金属配合时，R^P均为氢或可为可被硫利用的许多保护基中的任何一种，包括甲氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、对甲氧基苄基或苄基。硫保护基详细记载在以下文献中：Greene，T.W.和Wuts，P.G.M.，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，第2版，John Wiley and Sons，Inc.，纽约(1991)。保护基R^P可以通过有机合成领域中熟知的适宜的方法除去，如使用三氟乙酸、氯化汞或在液氨中的钠。关于对路易斯酸敏感的基团，包括乙酰氨基甲基和苯甲酰氨基甲基的情况下，R^P可以保持完整。在此情况下用锝标记配体将裂解保护基，使保护的二胺二硫醇(diaminedithiol)等同于未受保护的形式。而且许多一般N₂S₂型的配体是已知的，并可以互换使用，而不改变本发明的范围；且

R⁷和R⁸在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。

优选的R¹值为羟基或NR^aR^b(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R^a和R^b独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-4的整数。有用的p值包括0-5的整数。优选p为0、1或2。最优选p为0，从而R¹代表NR^aR^b。在优选的实施方案中，R¹相对于各桥基在间位或对位。优选的R¹值为NR^aR^b，其中R^a和R^b独立地为氢或C_1-4烷基。在此实施方案中，优选C_1-4烷基为甲基。优选R^a和R^b之一为氢，另一个为C_1-4烷基，例如甲基，或者R^a和R^b均为甲基。另一个优选的R¹值为羟基。对于R¹还优选的是在给药至机体中后，代谢或降解为上文所列的优选的R¹值的任何基团。这样的基团在本领域中已知组成前药，且这些基团能够形成本领域普通技术人员熟知的前药。

有用的n值包括1-6的整数。优选地，n值为1-4。最优选地，n值为1-3。特别优选的是n为1。

有用的R⁷和R⁸值在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。n的值决定化合物中存在的R⁷和R⁸基团的数目。如果在特定化合物中存在多于一次，每种情况下的R⁷和R⁸的值可以不同于任何其他的R⁷和R⁸的值。在优选的实施方案中，R⁷和R⁸在每种情况下为氢。

有用的R²值包括上述的亚结构i、i′、ii、iii和iii′。在式I的优选的实施方案中，R²相对于各桥基在间位或对位。优选在R²为i或i’的化合物中，q为2-5的整数。最优选q为3或4。在亚结构i或ii’中，有用的R³⁰、R³¹、R³²和R³³的值独立地包括氢、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。优选的化合物包括那些其中R³⁰、R³¹、R³²和R³³中的一个或多个为氢的化合物。更优选的化合物包括那些其中R³⁰、R³¹、R³²和R³³中的每一个为氢的化合物。

在亚结构iii或iii′中，有用的U和R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰的值如上文所描述。优选的化合物包括那些其中U为羟基的化合物。

有用的化合物包括这样的化合物：其中A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中的一个、不多于三个为N，其他为-CH或者如果允许的话为-CR²。优选如果A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中仅一个为N，则它是A₄。

在另一方面，本发明涉及具有下述结构的式II的化合物：

或其药学可接受的盐，其中：A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH，如果允许的话为-CR³或-CR⁴；R⁵和R^5’独立地为氢或C_1-4烷基；R¹和R²在每种情况下独立地选自氢、卤素、C_1-4烷基、氰基、羧基(C_1-5)烷基、三氟甲基、硝基、卤代(C_1-4)烷基、甲酰基和NR⁶R⁷(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R⁶和R⁷独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-4的整数；除了上列R¹和R²的值之外，R¹和/或R²还可以独立地为羟基；R³选自氢、卤素、C_1-4烷基、氰基、羧基(C_1-5)烷基、三氟甲基、硝基、卤代(C_1-4)烷基、甲酰基、NR⁶R⁷(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R⁶和R⁷独立地为氢、C_1-4烷基或其中X为卤素且d为1-4的整数的(CH₂)_dX、¹⁸氟甲基、¹⁸氟乙基、¹⁸氟丙基和Sn(烷基)₃；

R⁴选自：

a.C_1-4烷硫基，

b.C_1-4烷基磺酰基，

c.羟基，

d.C_1-4烷氧基，

e.NR⁶R⁷(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R⁶和R⁷独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-4的整数，

f.苯基(C_1-4)烷基，

g.C_6-10芳基，

h.杂芳基，

i.杂环基，

j.杂环基(C_1-4)烷基，和

k.C_3-6环烷基，

其中所述苯基(C_1-4)烷基、C_6-10芳基、杂芳基、杂环基、杂环基(C_1-4)烷基或C_3-6环烷基被下述基团中的一个取代：C_1-4烷硫基、C_1-4烷基磺酰基、甲氧基、羟基、二甲氨基或甲氨基；并且，X’为氢、¹⁸氟甲基、¹⁸氟乙基或¹⁸氟丙基、¹²⁵I、¹²³I、¹³¹I、¹⁸F、⁷⁶Br、⁷⁷Br或Sn(烷基)₃；条件是R¹、R²、R³和R⁴之一为NR⁶R⁷(CH₂)_p-。在另一实施方案中，条件也是R¹、R²和R⁴之一为羟基。

R⁵和R^5′的有用的值包括所有上文列出的值。优选地，R⁵和R^5′独立地为氢或C_1-4烷基，例如甲基。还优选R¹和R²独立地为羟基、一甲基胺或二甲基胺。

R³的有用的值包括所有那些上文列出的值。更优选地，R³为氢、¹⁸氟甲基、¹⁸氟乙基、¹⁸氟丙基、¹²⁵I、¹²³I、¹³¹I或¹⁸F。

R¹和R²的有用的值包括所有上文列出的值。优选地，R¹和R²独立地为氢或C_1-4烷基，例如甲基。

R⁴的有用的值包括所有那些上文列出的值。优选地，R⁴为甲硫基、甲基磺酰基、羟基、甲氧基或NR⁶R⁷(CH₂)_p-。

X′的有用的值包括所有那些上文列出的值。优选的值包括氢、¹⁸氟甲基、¹⁸氟乙基或¹⁸氟丙基、¹²⁵I、¹²³I、¹³¹I和¹⁸F。

在A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中仅一个为N的所有本发明的化合物中，更优选A₄为N。

代表性的本发明的化合物包括：

其中-Ch为N₂S₂型螯合基团，X、q、R^a、R^b、R⁷、R⁸、R³⁰、R³¹、R³²和R³³如上文所描述。最优选地，R^a和R^b均为甲基。

在另一实施方案中是具有下述通式结构的式I′a的化合物：

其中A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH；q为1-10的整数；R′和R＂各自独立地为氢或C_1-4烷基且X为放射性标记的卤素或-Ch基团。这些化合物的实例包括具有下述结构的式Ia的化合物：

其中A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH；q为1-10的整数；且X为放射性标记的卤素或-Ch基团。优选一或二C_1-4烷基氨基，更优选一甲基氨基或二甲基氨基和PEG取代基在亚乙基桥的对位。而且，优选A₄为N，且A₁、A₂、A₃和A₅各自为-CH。优选的q值为2-5的整数；且特别优选的值为3和4。优选的X值包括¹²³I和¹⁸F。最优选的X值为¹⁸F。

本发明的另一实施方案为具有下述结构的式III的化合物：

或其药学可接受的盐；其中、n为1-6的整数；A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH，如果允许的话为-CR²或-CR³；R¹包括所有上文关于式I所列的有用的值，优选羟基或NR^aR^b(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R^a和R^b独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-4的整数，R³选自¹²⁵I、¹²³I、¹³¹I、¹⁸F、¹⁸F(C₁-C₄)烷基、⁷⁶Br、⁷⁷Br或Sn(烷基)₃；

R²选自：

其中q为1-10的整数；Z选自氢、羟基、卤素、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基；且R³⁰、R³¹、R³²和R³³在每种情况下独立地选自氢、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基；

其中q为1-10的整数，R^x和R^y为氢、羟基或C_1-4烷基；t为0、1、2或3；且Z、R³⁰、R³¹、R³²和R³³如上文所述；

其中Y和U独立地选自氢、羟基、卤素、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基；U选自氢、羟基、卤素、卤素取代的苯甲酰氧基、卤素取代的苯基(C_1-4)烷基、卤素取代的芳氧基和卤素取代的C_6-10芳基；且R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰在每种情况下独立地选自氢、卤素、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基；

其中R^x和R^y为氢、羟基或C_1-4烷基；t为0、1、2或3；且Y、U、R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰如上文所描述；

iii.NR′R＂，其中R′和R＂中至少一个为(CH₂)_dX，其中X为卤素，优选F或¹⁸F，且d为1-4的整数；R′和R＂中的另一个选自氢、C_1-4烷基、卤代(C_1-4)烷基和羟基(C_1-4)烷基；

iv.NR′R＂-(C_1-4)烷基，其中R′和R＂中至少一个为(CH₂)_dX，其中X为卤素，优选F或¹⁸F，且d为1-4的整数；R′和R＂中的另一个选自氢、C_1-4烷基、卤代(C_1-4)烷基和羟基(C_1-4)烷基；

v.卤代(C_1-4)烷基；和

vi.具有下述结构的醚(R-O-R)：[卤代(C_1-4)烷基-O-(C_1-4)烷基]-；且

R⁷和R⁸在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。

优选的化合物包括那些其中在其结构上的卤素在一种或多种情况下为放射性标记的卤素的化合物。还优选的是其中所述卤素选自I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br、F或¹⁸F的化合物。特别优选的化合物为那些包含¹⁸F的化合物。还特别优选含¹²³I的化合物。

有用的R¹值如以上文所列。优选值为羟基或NR^aR^b(CH₂)_p-，其中p为0-5的整数，且R^a和R^b独立地为氢、C_1-4烷基或(CH₂)_dX，其中X为卤素，且d为1-4的整数。有用的p值包括0-5的整数。优选地，p为0、1或2。最优选地，p为0，从而R¹代表NR^aR^b。在优选的实施方案中，R¹相对于各桥基在间位或对位。优选的R¹值为NR^aR^b，其中R^a和R^b独立地为氢或C_1-4烷基。在此实施方案中，优选C_1-4烷基为甲基。优选R^a和R^b之一为氢，另一为C_1-4烷基，例如甲基。最优选R^a和R^b均为甲基。另一优选的R¹值为羟基。对于R¹还优选的是在给药至机体中后，代谢或降解为上文所列的优选的R¹值的任何基团。这样的基团在本领域中已知组成前药，且这些基团能够形成本领域普通技术人员熟知的前药。

有用的n值包括1-6的整数。优选地，n值为1-4。最优选地，n值为1-3。特别优选的是n为1。

有用的R⁷和R⁸值在每种情况下独立地选自氢、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。n的值决定化合物中存在的R⁷和R⁸基团的数目。如果在特定化合物中存在多于一次，每种情况下的R⁷和R⁸的值可以不同于任何其他的R⁷和R⁸的值。在优选的实施方案中，R⁷和R⁸在每种情况下为氢。

有用的R²值包括亚结构i、i′、ii、ii′、iii、iv、v和vi，如上文所描述。在式I的优选的实施方案中，R²相对于各桥基在间位或对位。优选地，R²为亚结构i或ii。还优选的是亚结构i′和ii′。在这些实施方案中，有用的q值包括1-10的整数。优选在R²为i或i′的化合物中，q为1-5的整数。最优选地，q为1-4，特别是3或4。在亚结构i或i′中，有用的R³⁰、R³¹、R³²和R³³的值独立地包括氢、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基和羟基(C_1-4)烷基。优选的化合物包括那些其中R³⁰、R³¹、R³²和R³³中的一个或多个为氢的化合物。更优选的化合物包括那些其中R³⁰、R³¹、R³²和R³³各自为氢的化合物。

在亚结构ii或ii′中，Y、U和R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁷、R³⁸、R³⁹和R⁴⁰的有用的值如上文所描述。优选的化合物包括那些其中U为羟基的化合物。

有用的化合物包括A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中至少一个、不多于三个为N，其他为-CH或者如果允许的话为-CR²。更优选N在位置A₄。

特别有用的式III的化合物包括那些化合物，其中A₄为N，且其他基团为-CH，如果允许的话为-CR²或-CR³。

其中A₄为N的特别优选的式III的化合物包括下述：

其中R^a和R^b独立地选自氢或C₁-C₄烷基，q为1-4的整数，且R³优选为¹²³I或¹⁸F；

最优选的式III的化合物的实例包括以下：

和

当R²为ii时，其他优选的式III的化合物包括：

和

其中Y选自氢和F。

当R²为i或i′，当t为0时式III的化合物包括如下的羟基醚：

其中R¹和R³如上文关于式III所述。

在含-(CR^xR^y)_t，其中t不为0的式I和III的所有实施方案中，所述化合物具有下述通式结构，其中有至少一个在取代基和含氮环之间的碳-碳键：

本发明的化合物还可包含碳的放射性同位素作为放射性标记。这指包含一个或多个具有高于该原子的本底水平的比活度的放射性碳原子，优选¹¹C。在这方面熟知天然存在的元素以不同的同位素存在，其中一些为放射性同位素。天然存在的元素的放射性是这些同位素的天然分布或丰度的结果，并通常称为本底水平。本发明的碳标记的化合物具有高于天然丰度的比活度，因此高于本底水平。本文要求保护的包含本发明的碳标记的化合物的组合物含一定量的使该组合物可以用于示踪、成像、放射疗法等的化合物。

在本文公开的化合物的某些实施方案中，卤素(优选¹⁸F)或螯合剂通过具有可变数目的乙氧基的PEG链连接到苯乙烯基吡啶骨架上。氟化的苯乙烯基吡啶，2，显示高结合亲合力(Ki＝2.5±0.4nM)。二甲氨基类似物显示最大亲合力。这不同于芪类似物，当一甲基氨基取代时，其趋于具有更高亲合力。如本文路线1-3所示，成功地进行放射性标记得到目标化合物。路线5中化合物2的合成导致制备时间为大约60分钟；放射化学产率为～35％(衰变校正)；放射化学纯度>98％；而比活度为大约1000至大约1500Ci/mmol。¹⁸F聚乙二醇化的苯乙烯基吡啶在正常小鼠体内的生物分布表现出极好的脑渗透，并在静脉注射后快速清除。对2的尸检AD脑切片的放射自显影术证实了与Aβ斑存在有关的特异性结合。

C_6-10芳基范围内的优选值包括苯基、萘基或四氢萘基。杂芳基范围内的优选值包括包括噻吩基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡啶基、吲哚基和咪唑基。杂环范围内的优选值包括哌啶基、吡咯烷基和吗啉基。C_6-10芳基、杂芳基、杂环基、杂环基(C_1-4)烷基或C_3-6环烷基的优选的实施方案包括被下述基团中的一个取代的环：C_1-4烷硫基、C_1-4烷基磺酰基、甲氧基、羟基、二甲氨基或甲氨基。

式I、Ia、II和III的化合物还可被溶剂化，特别是被水合。水合可在制备所述化合物或包含所述化合物的组合物期间发生，或者水合可以由于化合物的吸湿性而随时间过去发生。此外，本发明的化合物可按非溶剂化的形式以及与药学可接受的溶剂，例如水、乙醇等溶剂化的形式存在。总之，认为溶剂化形式等同于用于本发明的目的的非溶剂化形式。

当在任何取代基中或在式I、Ia、II或III中任何变量出现超过一次时，其每次出现的定义独立于其在其他情况下每次的定义。只有当这样的组合生成稳定的化合物时，取代基和/或变量的组合才是允许的。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“烷基”指至多8个碳，优选6个碳，更优选4个碳的直链和支链基团，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基和异丁基。

本文所用的术语“烷氧基”意指与氧原子结合的如上文所定义的直链或支链烷基，除非链长度受其限制，包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基等。优选的烷氧基链为1-6个碳原子长度，更优选1-4个碳原子长度。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“一烷基胺”指被一个如上文所定义的烷基取代的氨基。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“二烷基胺”指被两个如上文所定义的烷基取代的氨基。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“卤代”或“卤素”指氯、溴、氟或碘及它们的同位素。术语“放射性卤素”特指放射性卤素同位素。

在本文中使用的术语“卤代烷基”指被一个或多个氯、溴、氟或碘取代的任何上述烷基，其中氟和氯是优选的，如氯甲基、碘甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基和2-氯乙基。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“烷硫基”指下述结构的硫醚：R-S，其中R为如上文所定义的C_1-4烷基。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“烷基磺酰基”指下述结构的砜：R-SO₂，其中R为如上文所定义的C_1-4烷基。

在本文中单独使用或作为另一基团的部分使用的术语“芳基”指在环部分含有6-12个碳，优选在环部分含有6-10个碳的单环或双环芳族基团，例如苯基、萘基或四氢萘基。

本文所用的术语“杂环基”或“杂环”除了其中指明的以外，其代表可以是饱和或不饱和的稳定的5-至7-元单杂环系统，且它由碳原子和1-3个选自N、O和S的杂原子组成，其中所述氮和硫杂原子可任选地被氧化。特别有用的是含有一个与一个氧或硫结合的氮，或者两个氮杂原子的环。这样的杂环基团的实例包括哌啶基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、咪嗪基(imidazinyl)、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑基、异噁唑烷基、噻唑基、噻唑烷基、异噻唑基、高哌啶基、高哌嗪基、哒嗪基、吡唑基和吡唑烷基，最优选硫吗啉基、哌嗪基和吗啉基。

本文所用的术语“杂原子”意指氧原子(“O”)、硫原子(“S”)或氮原子(“N”)。会认识到当所述杂原子为氮时，它可以形成NRR基团，其中所述R基团彼此独立地可为氢或C_1-4烷基、C_2-4氨基烷基、C_1-4卤代烷基、卤代苄基，或者R¹和R²共同形成在所述环中任选地具有O、S或NR^c的5至7元杂环，其中R^c为氢或C_1-4烷基。

本文中使用的术语“杂芳基”指如下基因：它们具有5至14个环原子；环状排列中共享6、10或14个π电子；并且含有碳原子和1、2、3或4个氧、氮或硫杂原子(其中杂芳基的实例为：噻吩基、苯并[b]噻吩基、萘并[2，3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、苯并噁唑基、色烯基、咕吨基、酚黄素基(phenoxathiinyl)、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4aH-咔唑基、咔唑基、α、β或γ-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌间二氮杂苯基、菲咯啉基、吩嗪基、异噻唑基、吩噻嗪基、异噁唑基、呋咱基和吩噁嗪基)。

本文中单独使用或者作为另一基团的一部分使用的术语“芳烷基”或“芳基烷基”指具有芳基取代基的上文讨论的C_1-6烷基，如苄基、苯乙基或2-萘基甲基。

本发明的另一方面涉及制备式I、Ia、II和III的化合物的方法。

二甲氨基取代的苯乙烯基吡啶衍生物1及其氟聚乙二醇化的化合物2的合成示于路线1中。通过在DMF中叔丁醇钾存在下，4-(二甲氨基)苄基膦酸二乙酯和6-氯烟醛之间的Wittig反应得到化合物1(产率62％)。使用在THF中的氢化钠，用2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙醇²将化合物1直接烷基化得到氟聚乙二醇化的化合物2(产率33％)，它可以用作放射性标记的冷标准(cold standard)。通过路线2所示的路线完成一甲基氨基取代的衍生物6的制备。在甲醇中的甲醇钠存在下，回流条件下，4-硝基-苄基膦酸酯和6-氯烟醛之间的Wittig反应以高产率得到化合物3(88％)。化合物3可以在反应后容易地被滤出，并直接用于下一步骤；无需进一步纯化。使用在THF中的氢化钠，用2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙醇将3烷基化得到化合物4(产率30％)。用在乙醇中的氯化亚锡还原化合物4的硝基得到化合物5(产率58％)。使用多聚甲醛、甲醇钠和硼氢化钠完成5的一甲基化，以较高产率得到化合物6(73％)。

为制备期望的F-18标记的二甲氨基取代的苯乙烯基吡啶衍生物[¹⁸F]2，将甲苯磺酸酯10(路线3)用作前体。10的制备起始于用在DMF中的三乙二醇对3进行微波辅助的烷基化，得到化合物7(产率77％)。然后用氯化亚锡将7的硝基还原为胺，得到化合物8(产率76％)，接着在乙酸中用多聚甲醛、氰基硼氢化钠进行二甲基化以高产率得到化合物9(95％)。最初尝试9的甲磺酰化，然而，9的甲磺酸酯非常不稳定且在制备期间分解。用在吡啶中的甲磺酰氯成功地完成了9的甲苯磺酰化，得到期望的甲苯磺酸酯10(产率41％)，作为制备放射性标记的[¹⁸F]2的前体。

路线1

路线2

路线3

路线4

路线5-7描述了式III的化合物的合成路线。路线5描述了用于制备本发明的化合物的一些中间体的合成。路线6和7描述了放射性标记和非放射性标记的本发明的化合物的合成。在化合物I7-I10中，化合物中的“I”意指“中间体”。

路线5

试剂和条件：(a)NIS，CH₃CN，回流，1h；(b)F(CH₂CH₂O)₃H，Ph₃P，DIAD，THF，-5℃至室温，2h，(c)(1)HOCH₂CH₂OTBDMS，Ph₃P，DIAD，THF，-5℃至室温，2h，(2)在95％EtOH中的1％HCl，室温，1h。

路线6

试剂和条件：(a)4-取代的苯乙烯，K₂CO₃，Bu₄NBr，Pd(OAc)₂，DMF，55-65℃；(b)(Bu₃Sn)₂Pd(PPh₃)₄，甲苯，110℃；(c)K₂CO₃，EtOH/THF，室温，2h；(d)I₂，THF，0℃至室温；(e)TMSOTf，2，6-二甲基吡啶，DCM，-78℃至室温。

路线7

Tc-99m复合物可以如下制备。将少量非放射性标记化合物(1-2mg)溶于100μLEtOH中，并与200μLHCl(1N)和1mL Sn-葡庚糖酸盐溶液(含有8-32μg SnCl₂和80-320μg Na-葡庚糖酸盐，pH6.67)和50μL EDTA溶液(0.1N)混合。然后加入[^99mTc]高锝酸盐(100-200μL；范围从2-20mCi)盐水溶液。将反应物在100E C下加热30分钟，然后冷却至室温。用TLC(EtOH：浓NH₃9：1)分析反应混合物以形成产物和检查纯度。可以用磷酸盐缓冲液中和混合物至pH5.0。

本发明还涉及一种通过在还原剂和任选的适宜的螯合剂存在下，通过用适宜的含Ch的化合物，以高锝酸盐的形式反应锝-99m，制备根据本发明的锝-99m复合物的方法。

所述还原剂用来在生理盐水溶液中还原从钼-锝发生器洗脱的Tc-99m高锝酸盐。适宜的还原剂为例如连二硫酸盐、甲脒亚磺酸、二氨基乙烷亚磺酸酯或适宜的金属还原剂，例如Sn(II)、Fe(II)、Cu(I)、Ti(III)或Sb(III)。已证明Sn(II)特别适宜。

关于上述复合物形成反应，将碍-99m与作为盐或作为与较弱的螯合剂结合的碍的形式的本发明的适宜化合物反应。在后一种情况下，通过配体交换形成期望的碍-99m复合物。用于放射性核素的适宜螯合剂的实例为二羧酸类，例如草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、邻苯二甲酸、苹果酸、乳酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、水杨酸或这些酸的衍生物；磷化合物如焦磷酸盐；或者烯醇化物。柠檬酸、酒石酸、抗坏血酸、葡庚糖酸或其衍生物为用于此目的的特别适宜的螯合剂，因为碍-99m与这些螯合剂之一的螯合特别容易经历期望的配体交换。

最常用于制备[Tc^vO]⁺³N₂S₂复合物的方法基于氯化亚锡(II)还原[^99mTc]高碍酸盐——最常用的原料。标记方法一般取决于Tc-99m(Sn)-葡庚糖酸盐和N₂S₂配体之间的Tc-99m配体交换反应。制备氯化亚锡(II)并将其保持在稳定的亚锡(II)形式对于标记反应的成功特别重要。为了稳定对空气敏感的亚锡离子，在核医学中的通常实践是使用冻干试剂盒，其中亚锡离子为在惰性气体如氮或氩中的与过量葡糖庚酸盐混合的冻干粉末形式。冻干的氯化亚锡制剂/葡糖庚酸钠试剂盒确保标记反应是可重复和可预测的。N₂S₂配体通常是对空气敏感的(硫醇容易被空气氧化)且随后的反应导致配体分解。用于保存配体的最方便和可预测的方法是在氩或氮气氛下生产包含100-500μg配体的冻干试剂盒。

当本发明的化合物用作成像试剂时，它们必须用适宜的放射性卤素同位素标记。尽管¹²⁵I-同位素用于实验室试验，但它们一般不用于实际诊断目的，因为¹²⁵I的半衰期较长(60天)且γ-发射低(30-65Kev)。同位素¹²³I的半衰期为13个小时且γ能量为159KeV，因此预期用此同位素标记用于诊断目的的配体。其他可被使用的同位素包括¹³¹I(半衰期为2小时)。适宜的溴同位素包括⁷⁷Br和⁷⁶Br。

本发明的放射性卤代化合物自身容易由可在试剂盒中提供给使用者的物质形成。用于形成该显像剂的试剂盒可含有例如小瓶，所述小瓶含有适合最佳复合条件的浓度和pH的式I、Ia、II或III的中间体的生理学适合的溶液。使用者向小瓶中添加适量的放射性同位素如Na¹²³I和氧化剂如过氧化氢。然后可将得到的标记配体向患者静脉给药，并通过测量来自脑的γ射线或光电发射成像脑中受体。

由于根据本发明的放射性药物组合物可以容易和简单地制备，因此该制备可由使用者容易地实现。因此，本发明还涉及试剂盒，所述试剂盒包含：

(1)本发明的非放射性标记化合物，该化合物任选地处于干燥条件下；还任选地具有加至其中的惰性的、药学可接受的载体和/或助剂；和

(2)还原剂和任选的螯合剂；

其中成分(1)和(2)可任选地被组合；且

其中还可任选地包含指示通过成分(1)和(2)与高锝酸盐溶液形式的锝-99m反应而实现上述方法的使用说明。

用于上述试剂盒的适宜的还原剂和螯合剂的实例已在上文列出。使用者可以由钼-锝发生器获得高锝酸盐溶液。这样的发生器在许多进行放射诊断方法的机构中可以得到。如上文所说明，成分(1)和(2)可以组合，条件是它们是相容的。这样的其中组合成分优选被冻干的单成分试剂盒非常适于被使用者以简单的方式与高锝酸盐溶液反应。

当需要时，放射性诊断试剂可以包含任何添加剂如pH控制剂(如酸、碱、缓冲剂)、稳定剂(如抗坏血酸)或等渗剂(如氯化钠)。

本文所用的术语“药学可接受的盐”指本发明的化合物的那些羧酸盐或酸加成盐，它们在合理的药学判断范围内，适于与患者的组织接触使用而没有不适当的毒性、刺激、过敏反应等，且相称于合理的利益/风险比率，以及对它们的预期用途有效；如果可能的话，它们也可以指本发明的化合物的两性离子形式。术语“盐”指本发明的化合物的相对无毒的，无机和有机酸加成盐。还包括那些由无毒的有机酸如脂族的单羧酸和二羧酸，例如乙酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸和链烷二酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸衍生的盐。这些盐可以在化合物的最终分离和纯化期间在原位制备，或者通过单独使其游离碱形式的纯化化合物与适宜的有机酸或无机酸反应并分离如此形成的盐来制备。其他代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖酸盐(lactiobionate)和月桂基磺酸盐、丙酸盐、新戊酸盐、环己基氨基磺酸盐、羟乙基磺酸盐等。这些盐可以包括基于碱金属或碱土金属(如钠、锂、钾、钙、镁等)的阳离子，以及包括无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等(例如参见Berge S.M.等人，Pharmaceutical Salts，J.Pharm.Sci.66：1-19(1977)，其引入本文作为参考)。

在本发明成像方法的第一步中，将式I、Ia、II或III的标记化合物以可检测量引入至组织或患者中。该化合物为药物组合物的代表性的部分，并通过本领域技术人员熟知的方法将其给药至组织或患者。

可以通过全身或局部给药途径向患者给药标记化合物。例如，该化合物可以进行口服、直肠、肠胃外(静脉内、通过肌内或皮下)、脑池内、阴道内、腹膜内、膀胱内、局部(散剂、软膏剂或滴剂)给药，或者作为含服或鼻腔喷雾给药。可以向患者给药标记化合物以将其递送到整个身体。可选地，可将标记化合物向重要的特定器官或组织给药。例如，适于在脑部将淀粉状蛋白沉积物进行定位和定量，以诊断或跟踪患者中的阿耳茨海默病的发展。脑的体内显像剂的一个最期望的特征是在推注静脉注射(bolus ivinjection)后穿过完整的血-脑屏障的能力。

在本发明的优选的实施方案中，将可检测量的标记化合物引入至患者中，在过去了充足的时间后该化合物与淀粉状蛋白沉积物缔合，非侵入性地检测患者中的标记化合物。在本发明的另一实施方案中，将式I、Ia、II或III的标记化合物引入患者中，并给予充足的时间使该化合物与淀粉状蛋白沉积物缔合，然后从患者中取出组织样品，并在患者体外检测组织中的标记化合物。在本发明的第三个实施方案中，从患者中取出组织样品，并将式I、Ia、II或III的标记化合物引入该组织样品中。该化合物在充足的时间后与淀粉状蛋白沉积物发生结合，检测该化合物。

术语“组织”意指患者机体的部分。组织的实例包括脑、心、肝、血管和动脉。可检测的量为通过所选择的检测方法进行检测所必需的标记化合物的量。可以容易地由本领域技术人员测定引入患者体内以提供检测的标记化合物的量。例如，可以给予患者增加量的标记化合物直至通过所选择的检测方法检测该化合物。将标记引入该化合物以提供检测化合物。

术语“患者”意指人类和其他动物。本领域技术人员对确定足以使化合物与淀粉状蛋白沉积物发生缔合的时间量也熟悉。可以通过以下方法容易地测定必需的时间量：将可检测量的式I、Ia、II或III的标记化合物引入患者中，然后在给药后的不同时间检测该标记化合物。

术语“缔合的”意指标记化合物和淀粉状蛋白沉积物之间的化学相互作用。缔合的实例包括共价键、离子键、亲水-亲水相互作用、疏水-疏水相互作用和复合物等。

本领域技术人员熟悉检测标记化合物的多种方法。例如，磁共振成像(MRI)、正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算体层摄影术(SPECT)可以用于检测放射性标记化合物。引入化合物的标记会取决于期望的检测方法。例如，如果选择PET作为检测方法，则该化合物必须具有正电子发射原子，如¹¹C或¹⁸F。

放射性诊断试剂应该具有可以确保可靠诊断的充足的放射活性和放射活性浓度。例如，在放射性金属为锝-99m的情况下，在给药时在大约0.5-5.0ml中通常包含0.1-50mCi的量。式I、Ia、II或III的化合物的量可为例如足以与放射性金属形成稳定的螯合化合物的量。

如此形成的作为放射性诊断试剂的螯合化合物为足够稳定的，因而其本身可原样立即给药或储存直至使用。如果需要的话，所述放射性诊断试剂可以包含任何添加剂如pH控制剂(如酸、碱、缓冲剂)、稳定剂(如抗坏血酸)或等渗剂(如氯化钠)。

还可以定量地完成淀粉状蛋白沉积物的成像，因而可以确定淀粉状蛋白沉积物的量。

用于成像的优选的化合物包括放射性同位素如¹¹C、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、¹⁸F、⁷⁶Br或⁷⁷Br。

本发明的另一方面是抑制淀粉样蛋白斑聚集的方法。本发明还提供通过向患者给药淀粉样蛋白抑制量的式I、Ia、II或III的化合物而抑制淀粉样蛋白聚集形成淀粉状蛋白沉积物的方法。

本领域技术人员能够容易地通过以下方法确定淀粉样蛋白抑制量：简单地向患者以增加量给药式I、Ia、II或III的化合物直至淀粉状蛋白沉积物的生长下降或停止。可以使用上述的成像或通过从患者中取得组织样品并观察其中的淀粉状蛋白沉积物来评价生长速率。可向患者给药剂量水平在大约0.1至大约1000mg/天的范围的本发明的化合物。对于体重为大约10kg的正常成人，大约0.01至大约100mg/千克体重/天范围内的剂量是足够的。但是，具体的使用剂量可以改变。例如，剂量取决于许多因素，包括患者的需求、治疗症状的严重度及所用化合物的药理学活性。特定患者的最佳剂量的确定对本领域技术人员来说是熟知的。

下述实施例是例示性的，但不限定本发明的方法和组合物。本领域技术人员通常遇到的和显而易见的其他适宜的多种条件和参数的改变和修正在本发明的主旨和范围内。

除非另有说明，合成中使用的所有试剂都是市售产品，且未经进一步纯化而使用。在Bruker DPX波谱测定仪(200MHz)上，在CDCl₃中获得¹HNMR光谱。将化学位移报告为相对于内标TMS的δ值(百万分之几)。偶合常数以赫兹报告。多重性由s(单峰)、d(双峰)、t(三重峰)、br(宽峰)、m(多重峰)定义。由Atlantic Microlab INC进行元素分析。对于每个程序，“标准后处理”指以下步骤：加入指明的有机溶剂，用水洗涤有机层，然后用盐水洗涤有机层，分离有机层和水层，经无水硫酸钠干燥合并的有机层，滤除硫酸钠，并减压除去有机溶剂。

实施例

实施例1

化合物2的合成

(E)-2-氯-5-(4-二甲基氨基苯乙烯基)吡啶(1)

将叔丁醇钾(99mg，0.89mmol)加至0℃在无水DMF(5.0ml)中的二乙基-(4-二甲基氨基-苄基)-膦酸酯(80mg，0.30mmol)溶液中。然后加入2-氯-5-吡啶基醛(42mg，0.30mmol)。将反应混合物暖至室温并搅拌4小时。加入水并用MeOH/DCM(1:9，v/v)萃取混合物。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(在DCM中的20％己烷作为显影溶剂)纯化残留物得到产物1(48mg，产率：62％)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.42(1H，d，J＝2.2Hz)，7.77(1H，d，d，J₁＝8.4Hz，J₂＝2.4Hz)，7.41(2H，d，J＝8.6Hz)，7.27(1H，d，J＝8.2Hz)，7.08(1H，d，J＝16.4Hz)，6.77(3H，m)，[C₁₃H₉ClN₂O₂]⁺的HRMS(ET)m/z计算量260.0353。

(E)-2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-二甲基氨基苯乙烯基)吡啶(2)

将氢化钠(95％，10mg，0.39mmol)加至在无水DMF(5.0ml)中的2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙醇(39mg，0.26mmol)溶液中。室温下搅拌20分钟后，加入化合物5(35mg，0.13mmol)，并将反应混合物加热至100℃，持续2小时。冷却至室温后，加入水，并用乙酸乙酯萃取反应混合物。分离有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(在DCM中的4％MeOH作为显影剂)纯化残留物得到产物2(16mg，产率32.9％)：¹HNMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.14(1H，d，J＝2.4Hz)，7.76(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.39(2H，d，J＝8.8Hz)，6.87(2H，m)，6.76(3H，m)，4.53(2H，d，t，J₁＝47.6Hz，J₂＝4.2Hz)，4.50(2H，t，J＝4.8Hz)，3.85(3H，m)，3.70(5H，m)，2.99(6H，s).[C₂₁H₂₈N₂O₄]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为372.2049。

实施例2

化合物6的合成

(E)-2-氯-5-(4-硝基苯乙烯基)吡啶(3)：

将甲醇钠(在甲醇中1M，5.0ml)缓慢加至在甲醇(5.0ml)中的二乙基-(4-硝基-苄基)-膦酸酯(546mg，2.0mmol)和2-氯-5-吡啶基醛(283mg，2.0mmol)的溶液中。然后将反应混合物回流1小时。冷却至0℃后，过滤黄色沉淀并用冷甲醇洗涤得到产物3(458mg，产率：88％)，将其直接用于下一步骤而不作进一步纯化。3：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.53(1H，d，J＝2.4Hz)，8.25(2H，d，J＝8.8Hz)，7.85(1H，d，d，J₁＝8.4Hz，J₂＝2.4Hz)，7.65(2H，d，J＝8.8Hz)，7.36(1H，d，J＝8.4Hz)，7.19(2H，s)，[C₁₃H₉ClN₂O₂]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为[C₁₃H₉ClN₂O₂]⁺260.0353。

(E)-2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-硝基苯乙烯基)吡啶(4)

在氮气氛保护下，将2-(2-(2-氟乙氧基)-乙氧基)-乙醇^a(60mg，0.39mmol)加至0℃在无水DMF(5ml)中的氢化钠的混合物(26.4mg，在矿物油中的60％分散体，0.66mmol)。将混合物在室温下搅拌半小时，并加入化合物3(85.7mg，0.33mmol)。然后将反应混合物加热至100℃，持续2小时，并冷却。加入乙酸乙酯和水，分离有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并蒸发。用PTLC(在DCM中的2％MeOH作为显影溶剂)纯化残留物得到产物4(37mg，产率：30％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.22(3H，d，J＝8.8Hz)，7.84(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.61(2H，d，J＝8.8Hz)，7.20(1H，d，J＝16.4Hz)，7.02(1H，d，J＝16.4Hz)，6.84(1H，d，J＝8.6Hz)，4.53(2H，d，t，J₁＝47.6Hz，J₂＝4.2Hz)，4.52(2H，t，J＝4.8Hz)，3.85(3H，m)，3.70(5H，m)；[C₁₉H₂₁FN₂O₅]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为376.1435。

(E)-2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-氨基苯乙烯基)吡啶(5)

将化合物4(34mg，0.09mmol)溶于乙醇(5ml)中，然后加入氯化亚锡(51.4mg，0.27mmol)和浓HCl(0.25ml)。将反应混合物回流2小时，并冷却。用2N NaOH调节pH至10。加入二氯甲烷，并分离有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(在DCM中的3％MeOH作为显影溶剂)纯化残留物得到产物5(18mg，产率：58％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.14(1H，d，J＝2.2Hz)，7.76(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.32(2H，d，J＝8.4Hz)，6.80(5H，m)，4.53(2H，d，t，J₁＝47.6Hz，J₂＝4.2Hz)，4.49(2H，t，J＝4.8Hz)，3.85(3H，m)，3.70(5H，m)，1.8-3.0(2H，br)；[C₁₉H₂₃FN₂O₃]⁺的HRMS(EI)m/z计算量376.1693。

(E)-2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-甲基氨基苯乙烯基)吡啶(6)

将甲醇钠(在甲醇中1M，0.23ml)加至在甲醇(5ml)中的化合物5(15.8mg，0.046mmol)的溶液中，然后加入多聚甲醛(6.6mg，0.23mmol)。将反应混合物回流1.5小时，接着用冰浴冷却至0℃。小心地加入硼氢化钠(10.4mg，0.27mmol)。将混合物再回流1小时并冷却。加入二氯甲烷和水。分离有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(3％在DCM中的MeOH作为显影溶剂)纯化残留物得到产物6(12mg，产率：73％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.14(1H，d，J＝2.2Hz)，7.76(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.35(2H，d，J＝8.6Hz)，6.92(1H，d，J＝16.4Hz)，6.80(1H，d，J＝16.4Hz)，6.76(2H，d，J＝8.6Hz)，4.53(2H，d，t，J₁＝47.6Hz，J₂＝4.2Hz)，4.49(2H，t，J＝4.8Hz)，3.85(3H，m)，3.70(5H，m)，2.88(3H，s).[C₂₀H₂₅FN₂O₃]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为360.1849。

实施例3

化合物10的合成

(E)-2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-硝基苯乙烯基)吡啶(7)

将在无水DMF(5.0ml)中的碳酸钾(158.7mg，1.15mmol)、化合物3(100mg，0.38mmol)和三乙二醇(576mg，3.8mmol)的混合物封入微波瓶(来自Biotage)，并在180℃下接受微波照射(Biotage Initiator系统)25分钟。冷却至室温后，加入水，并用乙酸乙酯萃取反应混合物。分离有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(在DCM中的4％MeOH作为显溶影剂)纯化残留物得到产物7(110mg，产率：77％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.20(3H，m)，7.83(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.61(2H，d，J＝8.8Hz).7.10(2H，m)6.84(1H，d，J＝8.6Hz)，4.53(2H，t，J＝4.8Hz)，3.88(2H，t，J＝4.8Hz)，3.71(6H，m)，3.61(2H，m)，2.10(1H，b)，[C₁₉H₂₂N₂O₆]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为374.1478。

(E)-2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-氨基苯乙烯基)吡啶(8)

将氯化亚锡(202.8mg，1.07mmol)加至在乙醇(10ml)中的化合物7(100mg0.27mmol)的溶液中，接着加入浓HCl(0.5ml)。将反应混合物回流1.5小，然后冷却至0℃。通过过滤收集黄色沉淀，然后悬浮在乙酸乙酯中。加入饱和NaHCO₃以调节pH至9。分离有机层，经无水硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(在DCM中的5％MeOH作为显影剂)纯化残留物得到产物8(70mg，产率：76％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ8.12(1H，d，J＝2.4Hz)，7.73(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.29(2H，d，J＝8.5Hz)，6.84(2H，m)，6.75(1H，d，J＝8.6Hz)，6.69(2H，d，J＝8.5Hz)，4.48(2H，t，J＝4.8Hz)，3.86(2H，t，J＝4.8Hz)，3.71(6H，m)，3.60(2H，m)，3.32(3H，b)，[C₁₉H₂₄N₂O₄]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为344.1736。

(E)-2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-二甲基氨基苯乙烯基)吡啶(9)

将氰基硼氢化钠(36mg，0.57mmol)加至在乙酸(10ml)中的化合物8(65mg，0.19mmol)和多聚甲醛(57mg，1.9mmol)的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜，并倒在冰上。用碳酸氢钠调节pH至9。用乙酸乙酯洗涤反应混合物。分离有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发。用PTLC(在DCM中的5％MeOH作为显影溶剂)纯化残留物得到产物9(67mg，产率：95％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.14(1H，d，J＝2.4Hz)，7.76(1H，d，d，J₁＝8.6Hz，J₂＝2.4Hz)，7.39(2H，d，J＝8.8Hz)，6.87(2H，m)，6.76(3H，m)，4.50(2H，t，J＝4.8Hz)，3.87(2H，t，J＝4.8Hz)，3.70(6H，m)，3.61(2H，m)，2.98(6H，s)，2.49(1H，b)，[C₂₁H₂₈N₂O₄]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为372.2049。

(E)-2-(2-(2-(2-甲苯磺酰基氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(4-二甲基氨基苯乙烯基)吡啶(10)

将甲苯磺酰氯(52mg，0.27mmol)加至0℃下在吡啶(5.0ml)中的化合物9(43mg，0.116mmol)溶液。将反应混合物于0℃下搅拌1小时，然后暖至室温，并搅拌3小时。加入水并用乙酸乙酯洗涤反应混合物。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过PTLC(在DCM中的4％MeOH作为显影溶剂)纯化残留物得到产物10(25mg，产率：41％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ.8.14(1H，d，J＝2.0Hz)，7.76(3H，m)，7.39(2H，d，J＝8.8Hz)，7.32(2H，d，J＝8.0Hz)，6.87(2H，m)，6.75(3H，m)，4.46(2H5t，J＝4.6Hz)，4.16(2H，t，J＝4.8Hz)，3.81(2H，t，J＝4.8Hz)，3.66(6H，m)，2.99(6H，s)，2.43(3H，s)，[C₂₈H₃₄N₂O₆S]⁺的HRMS(EI)m/z计算值为526.2138。

实施例4

化合物11a的合成

a.中间体I8和I9的合成

2-羟基-3-溴-5-碘吡啶(I8)

根据先前报道的方法(Meana A等人，Synlett2003，1678-1682)，由N-碘琥珀酰亚胺(2.48g，11.0mmol)和3-溴-2-羟基吡啶I7(1.74g，10.0mmol)制备化合物18，为一种灰褐色固体(2.55g，85％)。¹HNMR(DMSO-d₆)δ12.27(br s，1H)，8.08(d，1H，J＝2.3Hz)，7.71(d，1H，J＝2.3Hz)。

{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-3-溴-5-碘吡啶(I9)

-10℃下向在10mLTHF中的I8(0.393g，1.3mmol)、2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙醇(0.200g，1.3mmol)和PPh₃(0.511g，1.95mmol)的搅拌的悬浮液中滴加在5mL THF中的偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD，0.394g，1.95mmol)。移出冰-盐浴，并将混合物在室温(r.t)下保持2小时。将反应溶液浓缩，并通过FC纯化(MeOH/CHCl₃，1/99)，得到I9，为无色粘性液体(0.423g，75％)。¹H NMRδ8.21(d，1H，J＝2.0Hz)，8.02(d，1H，J＝2.0Hz)，4.66(t，1H，J＝4.1Hz)，4.50-4.39(m，3H)，3.89-3.64(m，8H).¹³C NMRδ159.4，151.2，148.5，108.5，84.9，81.6，81.5，71.1，71.0，70.8，70.4，69.3，66.9。CuH₁₄BrFINO₃(M⁺)的HRMS计算值，432.9186；测量值，432.9173。

b.化合物11a的合成

(E)-(5-溴-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-二甲基氨基苯基)-乙烯(11a)

通过吹入氮15分钟将在2mL DMF中的4-二甲基氨基苯乙烯(0.110g，0.75mmol)、I9(0.217g，0.5mmol)、K₂CO₃(0.173g，1.25mmol)、四丁基溴化铵(TBAB，0.322g，1.0mmol)和乙酸钯(Pd(OAc)2，0.006g，0.025mmol)的混合物去氧，然后加热至65℃，持续2小时。将反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(EtOAc)进行标准后处理。用FC(EtOAc/己烷，30/70)纯化粗产物，并得到作为浅黄色固体的(0.178g，79％)11a。¹H NMRδ8.08(d，1H，J＝2.1Hz)，8.00(d，1H，J＝2.1Hz)，7.39(d，2H，J＝8.8Hz)，6.92(d，1H，J＝16.3Hz)，6.74(d，1H，J＝16.3Hz)，6.72(d，2H，J＝8.1Hz)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.55(t，2H，J＝4.8Hz)，4.45(t，1H，J＝4.2Hz)，3.94-3.68(m，8H)，3.00(s，6H).¹³C NMRδ158.3，150.4，143.5，138.0，129.6，129.5，127.7，125.2，118.8，112.5，107.5，85.0，81.6，71.2，71.0，70.8，70.4，69.6，66.7，40.5。C₂₁H₂₆BrFN₂O₃(M⁺)的HRMS计算值，452.1111；测量值452.1099。

实施例5

化合物11b的合成

(E)-(5-溴-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-甲基氨基苯基)-乙烯(11b)

由4-甲基氨基苯乙烯(0.073g，0.55mmol)和I9(0.217g，0.50mmol)制备化合物11b，为一种浅黄色粘性液体(0.113g，52％产率)。¹H NMRδ8.07(d，1H，J＝2.1Hz)，8.00(d，1H，J＝2.1Hz)，7.35(d，2H，J＝8.6Hz)，6.91(d，1H5，J＝16.3Hz)，6.74(d，1H，J＝16.3Hz)，6.60(d，2H，J＝8.6Hz)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.55(t，2H，J＝4.8Hz)，4.45(t，1H，J＝4.2Hz)，3.94-3.68(m，8H)，2.88(s，3H)。¹³C NMRδ158.4，149.5，143.6，138.0，129.8，129.5，127.9，126.1，118.9，112.6，107.5，85.0，81.7，71.2，71.1，70.8，70.4，69.6，66.8，30.7。C₂₀H₂₄BrFN₂O₃(M⁺)的HRMS计算值，438.0954；测量值438.0967。

实施例6

化合物11e的合成

(E)-(5-溴-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-[4-N-甲基-4-N-(叔丁氧基羰基)氨基苯基]-乙烯(11c)

由4-N-甲基-4-N-(叔丁氧基羰基)氨基苯乙烯(0.219g，0.94mmol)和I9(0.273g，0.63mmol)制备化合物11c，为白色粘性液体(0.319g，94％产率)。¹H NMRδ8.12(d，1H，J＝2.1Hz)，8.03(d，1H，J＝2.1Hz)，7.44(d，2H，J＝8.6Hz)，7.25(d，2H，J＝9.0Hz)，6.94(d，2H，J＝2.1Hz)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.56(t，2H，J＝4.9Hz)，4.45(t，1H，J＝4.2Hz)，3.94-3.68(m，8H)，3.28(s，3H)，1.48(s，9H).¹³C NMRδ158.8，154.5，144.0，143.5，138.2，133.6，128.5，128.4，126.8，126.6，125.4，122.9，107.4，84.8，81.4，80.4，71.0，70.9，70.6，70.2，69.4，66.7，53.5，37.1，28.4。C₂₅H₃₂BrFN₂O₅(M⁺)的HRMS计算值，538.1479；测量值538.1476。

(E)-(5-溴-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-乙酸基苯基)-乙烯(11d)

由4-乙酰氧基苯乙烯(0.122g，0.75mmol)和I9(0.217g，0.5mmol)制备化合物11d，为白色粘性液体(0.181g，77％产率)。¹HNMRδ8.12(d，1H，J＝2.1Hz)，8.03(d，1H，J＝2.1Hz)，7.50(d，2H，J＝8.6Hz)，7.10(d，2H，J＝8.6Hz)，6.94(d，2H，J＝3.3Hz)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.56(t，2H，J＝4.9Hz)，4.45(t，1H，J＝4.2Hz)，3.94-3.68(m，8H)，2.32(s，3H)，1.48(s，9H).¹³C NMRδ169.3，158.9，150.3，144.1，138.2，134.5，128.24，128.16，127.4，123.4，121.9，107.5，84.8，81.5，71.0，70.9，70.6，70.3，69.4，66.7，21.1.C₂₁H₂₃BrFNO₅的HRMS计算值(M⁺)，467.0744；测量值467.0731。

(E)-(5-溴-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-羟基苯基)-乙烯(11e)

将乙酸酯11d(0.145g，0.31mmol)和K₂CO₃(0.064g，0.465mmol)置于EtOH/THF(5mL/5mL)中，并将反应混合物于室温下搅拌2小时。在用EtOAc标准后处理之后，通过PTLC纯化粗产物得到11e，为白色固体(0.128g，97％)。¹H NMRδ8.07(d，1H，J＝2.1Hz)，7.99(d，1H，J＝2.1Hz)，7.35(d，2H，J＝8.6Hz)，6.96-6.74(m，4H)，5.22(br s，1H)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.54(t，2H，J＝4.8Hz)，4.45(t，1H，J＝4.2Hz)，3.94-3.68(m，8H).¹³C NMRδ158.5，156.4，143.6，138.2，129.2，129.0，127.9，120.7，116.0，107.6，84.9，81.6，71.1，71.0，70.8，70.4，69.6，66.8.C₁₉H₂₁BrFNO₄(M⁺)的HRMS计算值，425.0638；测量值425.0651。

实施例7

化合物12b的合成

(E)-(5-三丁基甲锡烷基-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-甲基氨基苯基)-乙烯(12b)

由11b(0.069g，0.156mmol)制备化合物12b，为浅黄色油(0.068g，68％产率)。¹HNMRδ8.10(d，1H，J＝2.5Hz)，7.80(d，1H，J＝2.5Hz)，7.36(d，2H，J＝8.6Hz)，6.92(d，1H，J＝16.3Hz)，6.80(d，1H，J＝16.3Hz)，6.61(d，2H，J＝8.6Hz)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.45(t，3H，J＝5.1Hz)，3.83(t，3H，J＝4.4Hz)，3.71-3.66(m，5H)，2.88(s，3H)，1.68-1.48(m，6H)，1.43-1.25(m，6H)，1.15-1.02(m，6H)，0.91(t，9H，J＝7.1Hz).¹³CNMRδ166.8，149.1，145.4，143.6，127.8，127.7，127.0，123.8，121.2，112.6，85.0，81.6，71.1，70.9，70.8，70.5，70.1，65.0，30.8，29.5，29.3，29.1，28.1，27.5，26.9，13.9，13.4，13.3，9.9，6.6，6.4.HRMS计算值C₃₂H₅₁FN₂O₃Sn(M⁺)，650.2906；测量值650.2894。

实施例8

化合物12e的合成

(E)-(5-三丁基甲锡烷基-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-羟基苯基)-乙烯(12e)

化合物12e由11e(0.032g，0.075mmol)制备，为白色粘性液体(0.040g，84％产率)。¹HNMR δ8.11(d，1H，J＝2.5Hz)，7.82(d，1H，J＝2.5Hz)，7.39(d，2H，J＝8.6Hz)，6.98-6.74(m，4H)，5.19(br s，1H)，4.71-4.66(m，1H)，4.48-4.43(m，3H)，3.90-3.62(m，8H)，1.70-1.02(m，18H)，0.91(t，9H，J＝7.1Hz).¹³CNMR δ166.9，156.0，145.4，144.0，130.1，127.9，127.6，127.4，124.3，123.0，115.9，85.0，81.6，71.0，70.9，70.7，70.5，70.0，65.2，29.5，29.3，29.1，28.0，27.5，26.9，13.9，13.4，13.3，9.9，6.6，6.4.C₃₁H₄₈FNO₄Sn(M⁺)的HRMS计算值637.2589；测量值637.2573。

实施例9

化合物13a的合成

(E)-(5-三丁基甲锡烷基-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-二甲基氨基苯基)-乙烯(12a)

将在甲苯中的11a(0.052g，0.115mmol)、双(三丁基锡)((Bu₃Sn)₂，0.333g，0.57mmol)和四(三苯基膦)合钯(Pd(PPh₃)₄，0.013g，10mol％)的混合物在110℃加热18小时。将反应溶液冷却至室温，并用5mL10％KF处理。再剧烈搅拌0.5小时后，用EtOAc作标准后处理，并进行FC(EtOAc/己烷，25/75)得到12a，为浅黄色油(0.052g，68％)。¹HNMRδ8.11(d，1H，J＝2.5Hz)，7.81(d，1H，J＝2.5Hz)，7.41(d，2H，J＝8.8Hz)，6.93(d，1H，J＝16.5Hz)，6.81(d，1H，J＝16.5Hz)，6.72(d，2H，J＝8.7Hz)，4.69(t，1H，J＝4.2Hz)，4.46(t，3H，J＝4.9Hz)，3.83(t，3H，J＝4.8Hz)，3.71-3.66(m，5H)，3.00(s，6H)，1.68-1.48(m，6H)，1.43-1.21(m，6H)，1.15-1.02(m，6H)，0.91(t，9H，J＝7.1Hz).¹³C NMRδ166.7，150.2，145.4，143.6，127.8，127.7，127.5，126.0，123.7，121.2，112.6，85.0，81.6，71.0，70.8，70.7，70.4，70.0，65.0，40.6，29.5，29.3，29.1，28.1，27.5，26.9，13.9，13.4，13.3，9.9，6.6，6.4.C₃₃H₅₃FN₂O₃Sn(M⁺)的HRMS计算值，664.3062；测量值664.3037。

(E)-(5-碘-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-二甲基氨基苯基)-乙烯(13a)

将在THF(2mL)中的碘(I₂，0.063g，0.24mmol)的溶液滴加到冰浴冷却的在THF(3mL)中的12a(0.114g，0.172mmol)的溶液。加入后，将反应物在0℃下搅拌1小时。接着用CH₂Cl₂进行标准处理，用FC(EtOAc/己烷，25/75)纯化粗产物，得到浅黄色固体13a(0.037g，48％)。¹HNMRδ8.22(d，1H，J＝2.1Hz)，8.10(d，1H，J＝2.1Hz)，7.38(d，2H，J＝8.8Hz)，6.92(d，1H，J＝16.3Hz)，6.72(d，1H，J＝16.3Hz)，6.71(d，2H，J＝8.8Hz)，4.72-4.67(m，1H)，4.54-4.44(m，3H)，3.93-3.69(m，8H)，3.00(s，6H).¹³C NMRδ160.4，150.5，144.6，144.55，129.8，129.5，127.8，125.3，118.8，112.6，85.1，81.7，80.6，71.3，71.1，70.8，70.5，69.6，67.1，40.6.C₂₁H₂₆FIN₂O₃(M⁺)的HRMS计算值500.0972；测量值500.0959。

实施例10

化合物13b的合成

(E)-(5-三丁基甲锡烷基-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-[4-N-甲基-4-N-(叔丁氧基羰基)氨基苯基]-乙烯(12c)

化合物12c由11e(0.072g，0.133mmol)制备，为白色粘性液体(0.077g，77％产率)。¹H NMRδ8.14(d，1H，J＝2.5Hz)，7.83(d，1H，J＝2.5Hz)，7.46(d，2H，J＝8.6Hz)，7.23(d，2H，J＝8.5Hz)，6.96(s，2H)，4.70-4.66(m，1H)，4.49-4.42(m，3H)，3.86-3.66(m，8H)，3.28(s，3H)，1.80-1.02(m，27H)，0.90(t，9H，J＝7.1Hz).¹³CNMRδ5167.3，146.1，143.8，143.2，134.6，127.0，126.8，126.6，125.7，125.4，124.1，85.0，81.6，80.6，71.1，70.9，70.8，70.5，70.0，65.1，37.4，29.5，29.3，29.1，28.1，27.5，26.9，13.9，13.4，9.9，6.4。C₃₇H₅₉FN₂O₅Sn(M⁺)的HRMS计算值，750.343；测量值750.3425。

(E)-(5-碘-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-[4-N-甲基-4-N-(叔丁氧基羰基)氨基苯基]-乙烯(13c)

化合物13c由12c(0.024g，0.032mmol)制备，为白色粘性液体(0.018g，98％)。¹H NMRδ8.25(d，1H，J＝1.6Hz)，8.13(d，1H，J＝1.6Hz)，7.44(d，2H，J＝8.4Hz)，7.24(d，2H，J＝8.4Hz)，6.97(d，1H，J＝16.4Hz)，6.86(d，1H，J＝16.4Hz)，4.69(t，1H，J＝4.1Hz)，4.53(t，2H，J＝4.8Hz)，4.45(t，1H，J＝4.1Hz)，3.94-3.69(m，8H)，3.28(s，3H)，1.47(s，9H).¹³C NMRδ161.0，154.8，145.3，144.9，143.7，133.9，128.9，128.6，126.8，125.7，123.1，85.1，81.7，80.7，77.4，71.3，71.1，70.9，70.5，69.6，67.2，37.4，28.6。C₂₁H₂₆FIN₂O₃(M⁺)的HRMS计算值，500.0972；测量值500.0959。

(E)-(5-碘-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-甲基氨基苯基)-乙烯(13b)

在0℃，向在2mL CH₂Cl₂中的13c(0.014g，0.024mmol)和2，6-二甲基吡啶(28μL，0.24mmol)的搅拌溶液加入三甲基甲硅烷基三氟甲酸酯(34μL，0.19mmol)。15分钟后，用CH₂Cl₂对反应溶液进行标准后处理。通过PTLC纯化粗产物，得到浅黄色粘性液体13b(0.010g，88％)。¹HNMRδ8.22(d，1H，J＝2.1Hz)，8.10(d，1H，J＝2.1Hz)，7.34(d，2H，J＝8.6Hz)，6.91(d，1H，J＝16.3Hz)，6.70(d，1H，J＝16.3Hz)，6.60(d，2H，J＝8.6Hz)，4.71-4.67(m，1H)，4.54-4.43(m，3H)，3.94-3.69(m，9H)，2.88(s，3H).¹³C NMRδ160.5，149.5，144.6，129.8，129.7，128.0，126.3，118.9，112.6，85.1，81.7，80.6，77.4，71.3，71.2，70.9，70.5，69.7，67.2，30.8.C₂₀H₂₄FlN₂O₃HRMS计算值(M⁺)，486.0816；测量值486.0818。

实施例11

化合物13e的合成

(E)-(5-三丁基甲锡烷基-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-羟基苯基)-乙烯(12e)

化合物12e由11e(0.032g，0.075mmol)制备，为白色粘性液体(0.040g，84％产率)。¹HNMRδ8.11(d，1H，J＝2.5Hz)，7.82(d，1H，J＝2.5Hz)，7.39(d，2H，J＝8.6Hz)，6.98-6.74(m，4H)，5.19(br s，1H)，4.71-4.66(m，1H)，4.48-4.43(m，3H)，3.90-3.62(m，8H)，1.70-1.02(m，18H)，0.91(t，9H，J＝7.1Hz)。¹³CNMRδ166.9，156.0，145.4，144.0，130.1，127.9，127.6，127.4，124.3，123.0，115.9，85.0，81.6，71.0，70.9，70.7，70.5，70.0，65.2，29.5，29.3，29.1，28.0，27.5，26.9，13.9，13.4，13.3，9.9，6.6，6.4。C₃₁H₄₈FNO₄Sn(M⁺)的HRMS计算值，637.2589；测量值637.2573。

(E)-(5-碘-6-{2-[2-(2-氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)-2-(4-羟基苯基)-乙烯(13e)

化合物13e由12e(0.012g，0.019mmol)制备，为白色固体(0.008g，90％)。¹H NMRδ8.21(d，1H，J＝2.1Hz)，8.08(d，1H，J＝2.1Hz)，7.33(d，2H，J＝8.6Hz)，6.94-6.69(m，4H)，4.71-4.67(m，1H)，4.53-4.43(m，3H)，3.94-3.69(m，8H)。C₁₉H₂₁FINO₄(M⁺)的HRMS计算值，473.0499；测量值473.0498。

实施例12

化合物14a的合成

2-羟基乙氧基-3-溴-5-碘吡啶(9b)

在-10℃，向在20mL THF中的I8(参见以上实施例4)(0.906g，3.0mmol)、2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)乙醇(0.554g，3.15mmol)和PPh₃(0.944g，3.6mmol)的搅拌的悬浮液中滴加在10mL THF中的二异丙基氮杂二甲酸酯(DIAD)(0.728g，3.6mmol)。移出冰浴，并将反应物在室温下保持2小时。将反应溶液浓缩，并用FC(EtOAc/己烷，5/95)纯化得到2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)乙氧基-3-溴-5-碘吡啶，无色粘性液体(0.995g，72％)。¹HNMRδ8.23(d，1H，J＝2.0Hz)，8.05(d，1H，J＝2.0Hz)，4.42(t，2H，J＝4.9Hz)，3.98(t，2H，J＝4.9Hz)，0.90(s，9H)，0.10(s，6H).C₁₂H₁₈BrINO₂Si(M^-CH₃ ⁺)的HRMS计算值，441.9335；测量值441.9312。

(E)-[5-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-二甲基氨基苯基)-乙烯(14a)

化合物14a由4-二甲基氨基苯乙烯(0.031g，0.212mmol)和I10(0.073g，0.212mmol)制备，为浅黄色固体(0.022g，29％产率)。¹H NMRδ8.07(d，1H，J＝2.1Hz)，8.03(d，1H，J＝2.1Hz)，7.39(d，2H，J＝8.8Hz)，6.94(d，1H，J＝16.3Hz)，6.78-6.69(m，3H)，4.57-4.52(m，2H)，3.99(t，2H，J＝4.3Hz)，3.21(br s，1H)，3.00(s，6H).¹³C NMRδ158.3，150.4，143.0，138.2，129.9，129.8，127.6，124.9，118.3，112.3，107.5，69.6，62.1，40.3。C₁₇H₁₉BrN₂O₂(M⁺)的HRMS计算值.362.063；测量值362.0629。

实施例13

化合物14b的合成

(E)-[5-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-甲基氨基苯基)-乙烯(14b)

化合物14b由4-甲基氨基苯乙烯(0.140g，1.05mmol)和I10(0.241g，0.7mmol)制备，为浅黄色粘性液体(0.149g，61％产率)。¹H NMRδ8.07(d，1H，J＝2.1Hz)，8.03(d，1H，J＝2.1Hz)，7.35(d，2H，J＝8.6Hz)，6.93(d，1H，J＝16.3Hz)56.74(d，1H，J＝16.3Hz)，6.61(d，2H5J＝8.6Hz)，4.57-4.52(m，2H)，3.99(br s，2H)，3.18(br s，1H)，2.88(s，3H).¹³C NMRδ149.6，143.3，138.5，130.1，130.0，128.0，126.0，118.6，112.6，107.7，69.8，62.2，30.7。C₁₇H₁₉BrN₂O₂(M⁺)的HRMS计算值，348.0473；测量值348.0468。

实施例14

化合物14d的合成

(E)-[5-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-乙酰氧基苯基)-乙烯(14d)

化合物14d由4-乙酰氧基苯乙烯(0.130g，0.80mmol)和10(0.244g，0.7mmol)制备，为白色粘性液体(0.031g，12％产率)。¹HNMRδ8.12(d，1H，J＝2.1Hz)，8.08(d，1H，J＝2.1Hz)，7.50(d，2H，J＝6.8Hz)，7.11(d，2H，J＝6.8Hz)，6.95(d，2H，J＝5.2Hz)，4.58-4.54(m，2H)，4.01(br s，2H)，3.08(br s，1H)，2.32(s，3H)。

实施例15

化合物14e的合成

(E)-[5-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-羟基苯基)-乙烯(14e)

以类似于11e的制备中描述的方法，由乙酸酯14d(0.031g，0.082mmol)制备化合物14e，为白色固体(0.020g，73％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.60(brs，1H)，8.31(s，1H)，8.23(s，1H)，7.39(d，2H，J＝8.3Hz)，7.19(d，1H3J＝16.8Hz)，6.94(d，1H5J＝16.6Hz)56.77(d，2H，J＝8.3Hz)，4.35(t，2H，J＝5.1Hz)，3.73(t，2H，J＝5.1Hz).¹³C NMR(DMSO-d₆)δ157.9，157.4，143.7，138.1，129.2，129.0，127.8，119.8，115.6，106.7，68.4，59.2。C₁₅H₁₄BrNO₃(M⁺)的HRMS计算值，335.0157；测量值335.0165。

实施例16

化合物15e的合成

(E)-[5-三丁基甲锡烷基-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-羟基苯基)-乙烯(15e)

化合物15e由14e(0.031g，0.092mmol)制备，为白色粘性液体(0.012g，24％产率)。¹H NMRδ8.07(d，1H，J＝2.5Hz)，7.85(d，1H，J＝2.5Hz)，7.39(d，2H，J＝8.6Hz)，6.99-6.80(m，4H)，5.97(br s，1H)，5.01(br s，1H)，4.50-4.46(m，2H)，3.98-3.94(m，2H)，1.69-1.01(m，18H)，0.91(t，9H，J＝7.1Hz).¹³C NMRδ167.2，156.0，144.9，144.7，144.5，130.1，128.0，127.96，124.7，122.8，116.0，69.9，63.4，29.9，29.5，29.3，29.1，28.1，27.5，26.9，13.9，13.6，13.5，10.1，6.7，6.6。C₂₇H₄₁NO₃Sn(M⁺)的HRMS计算值，547.2108；测量值547.2112。

实施例17

化合物16a的合成

(E)-[5-三丁基甲锡烷基-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-二甲基氨基苯基)-乙烯(15a)

化合物15a由14a(0.100g，0.275mmol)制备，为浅黄色油(0.105g，66％产率)。¹H NMRδ8.10(d，1H，J＝2.5Hz)，7.85(d，1H，J＝2.4Hz)，7.41(d，2H，J＝8.7Hz)，6.95(d，1H，J＝16.3Hz)，6.81(d，1H，J＝16.6Hz)，6.73(d，2H，J＝8.8Hz)，4.48-4.44(m，2H)，3.96-3.92(m，2H)，2.99(s，6H)，1.68-1.01(m，18H)，0.92(t，9H，J＝7.2Hz).¹³C NMRδ166.6，150.1，144.5，144.1，128.2，128.1，127.4，125.6，124.0，120.5，112.4，69.4，63.0，40.4，29.0，27.2，13.6，9.8。C₂₉H₄₆N₂O₂Sn(M⁺)HRMS计算值574.2581；测量值574.2584。

(E)-[5-碘-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-二甲基氨基苯基)-乙烯(16a)

化合物16a由15a(0.011g，0.019mmol)制备，为浅黄色固体(0.004g，50％).¹H NMRδ8.25(s，1H)，8.10(s，1H)，7.39(d，2H，J＝8.6Hz)，6.94(d，1H，J＝16.3Hz)，6.76-6.70(m，3H)，4.51(t，2H，J＝4.2Hz)，4.02-3.95(m，2H)，3.19(s，1H)，3.00(s，6H)。C₁₇H₁₉IN₂O₂(M⁺)的HRMS计算值，410.0491；测量值410.0489。

实施例18

化合物16b的合成

(E)-[5-三丁基甲锡烷基-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-甲基氨基苯基)-乙烯(15b)

化合物15b由14b(0.052g，0.15mmol)制备，为浅黄色油(0.059g，64％产率)。¹H NMRδ8.08(d，1H，J＝2.5Hz)，7.84(d，1H，J＝2.4Hz)，7.37(d，2H，J＝8.6Hz)，6.93(d，1H，J＝16.3Hz)，6.80(d，1H，J＝16.4Hz)，6.61(d，2H5J＝8.6Hz)，4.48-4.43(m，2H)，3.95-3.91(m，2H)，2.88(s，3H)，1.69-1.01(m，18H)，0.91(t，9H，J＝7.1Hz).¹³C NMRδ166.9，149.2，144.7，144.3，128.4，128.3，127.8，126.7，124.2，120.7，112.6，69.6，63.2，30.8，29.5，29.3，29.1，28.0，27.5，26.9，13.9，13.5，13.4，10.0，6.6，6.5。C₂₈H₄₄N₂O₂Sn(M⁺)HRMS计算值，560.2425；测量值560.2419。

(E)-[5-碘-6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(4-甲基氨基苯基)-乙烯(16b)

化合物16b由15b(0.032g，0.057mmol)制备，为浅黄色固体(0.005g，21％)。¹H NMRδ8.24(d，1H，J＝2.1Hz)，8.09(d，1H，J＝2.0Hz)，7.36(d，2H，J＝8.5Hz)，6.92(d，1H，J＝16.3Hz)，6.76-6.64(m，3H)，4.53-4.49(m，2H)，4.01-3.96(m，2H)，2.96(s，1H)，2.89(s，3H)。C₁₆H₁₇IN₂O₂(M⁺)的HRMS计算值396.0335；测量值396.0335。

实施例19

放射碘化

通过碘代脱甲锡烷基化反应由相应的三丁基锡前体，根据前述的方法(参考文献)，制备放射性碘化的化合物，[¹²⁵I]13a、13b、16a、16b和16e。将过氧化氢(50μL，3％w/v)加至在密封瓶内的50μL三丁基锡前体(4μg/μLEtOH)、50μL1N HCl和[¹²⁵I]NaI(1-5mCi，购自Perkin Elmer)的混合物中。使反应在室温下进行5-10分钟，并通过加入100μL饱和NaHSO₃终止反应。在用1.5mL饱和碳酸氢钠溶液中和后，用乙酸乙酯(3x1mL)萃取反应混合物。将合并的萃取液蒸发至干。将残留物溶于100μLEtOH，并用反相柱进行HPLC纯化(Phenomenex Gemini C18分析柱，4.6x250mm，5μm，CH₃CN/甲酸铵缓冲液(1mM)8/2或7/3；流速0.5-1.0mL/min)。将无载体加入的产物蒸发至干，并再溶于100％EtOH(1μCi/μL)，在-20℃下保存至多6周以进行动物研究和放射自显影法研究。

实施例20

结合研究

如在Kung，M.-P.；Hou，C；Zhuang，Z.-P.；Cross，A.J.；Maier，D.L.；Rung，H.F.，＂Characterization of IMPY as a potential imaging agent forb-amyloid plaques in double transgenic PSAPP mice.＂Eur.J.Nucl.Med.MoI.Imaging2004，31，1136-1145中所报道，使用标准碘脱甲锡烷基化反应制备比活度为2200Ci/mmol、放射化学纯度大于95％的[¹²⁵I]IMPY，并通过简化的C-4小型柱纯化。在12x75mm硼硅酸盐玻璃试管中进行竞争结合测定。反应混合物含有50μl混合的AD脑匀浆(20-50μg)、50μl[¹²⁵I]IMPY(0.04-0.06nM，稀释在PBS中)和50μl抑制剂(在含0.1％牛血清白蛋白的PBS中按10^-5-10^-10M连续稀释)，最终体积为1ml。在相同的测定管中，在600nM IMPY存在下，定义非特异性结合。将混合物在37℃下温育2小时，并在室温下通过Whatman GF/B滤器真空过滤，使用Brandel M-24R细胞收集器分离结合的与游离的放射性，然后用2x3ml PBS洗涤。在γ计数器(Packard5000)中，以70％的计数效率计数含有结合¹²⁵I配体的滤器。在测定条件下，特异性结合部分占总放射性小于15％。使用平衡结合数据分析对抑制实验的结果进行非线性回归分析，由其计算K_i值。图1和6显示所选择的本发明的化合物的K_i值。

实施例21

胶片放射自显影

[¹⁸F]示踪剂：通过将脑冷冻在粉末化干冰中并切成20微米厚的切片来从AD个体获得脑切片。在室温下，将切片与[¹⁸F]示踪剂(200,000-250,000cpm/200μl)温育1小时。然后将切片浸入在40％EtOH中的饱和Li₂CO₃中(两次两分钟洗涤)，再用40％EtOH洗涤(一次两分钟洗涤)，然后用水漂洗30秒。干燥后，使¹⁸F-标记的切片整夜接触Kodak MR胶片。结果如图2中的胶片所示。

[¹²⁵I]示踪剂：为了使用类似的人类脑组织切片比较不同的探针，收集来自6例确定的AD病例和一个对照个体的人类宏阵列脑切片。用单克隆Aβ抗体4G8(Sigma)进行免疫组织化学染色来证实切片上斑的存在和位置。在室温下，将切片与[¹⁸F]示踪剂(200,000-250,000cpm/200μl)温育1小时。然后将切片浸在40％EtOH中的饱和Li₂CO₃中(两次两分钟洗涤)，并用40％EtOH洗涤(一次两分钟洗涤)，然后用水漂洗30秒。在干燥后，使¹²⁵I-标记的切片整夜接触Kodak MR胶片。

实施例22

在小鼠内的器官分布

在异氟烷麻醉下，将含有[¹²⁵I]示踪剂(5-10μCi)的0.15mL0.1％牛血清白蛋白溶液直接注射入ICR小鼠(22-25g，雄性)的尾静脉中。在注射后指定的时间点，通过颈脱位法处死小鼠(每个时间点n＝3)。取出重要器官并称重，用自动γ计数器测定放射性。通过比较组织计数与适当稀释的注射物质等分试样来计算每个器官的百分剂量。假设血液占总体重的7％，计算血液的总活性。通过比较样本计数与稀释初始剂量的计数来计算样本的剂量/g％。

表1.静脉注射在盐水中的5％EtOH中的[¹⁸F]10后，ICR小鼠中的生物分布(％剂量/g，3只小鼠的平均值±SD)

表2.静脉注射[¹²⁵I]标记的示踪剂后，ICR小鼠中的生物分布(％剂量/g，3只小鼠的平均值±SD)

[¹²⁵I]13a(logP＝2.59)

[¹²⁵I]13b(logP＝2.54)

[¹²⁵I]16a(logP＝2.64)

[¹²⁵I]16b(logP＝2.20)

[¹²⁵I]16e(logP＝1.98)

本领域普通技术人员会理解，在不影响本发明或其任何实施方案的范围的情况下，可在条件、配方和其他参数的广泛和等同范围内实施本发明。本文引用的所有专利、专利申请和出版物均全文引入本文作为参考。

Claims (22)

1.式I的化合物：

或其药学可接受的盐；其中

n为1；

A₁、A₂、A₃和A₅各自独立地为-CH或者-CR²；

A₄为N；

R¹为：

-(CH₂)_pNR^aR^b，其中R^a和R^b独立地为氢或(C_1-4)烷基，且p为0；

R²为：

其中，q为1-5的整数；t为0；Z为羟基或卤素；且R³⁰、R³¹、R³²和R³³在每种情况下独立地为氢；且

R⁷和R⁸在每种情况下独立地为氢。

2.权利要求1的化合物，其中Z为放射性卤素。

3.权利要求1的化合物，其中Z为I、Br或F。

4.权利要求3的化合物，其中R¹相对于各桥基在对位，R²相对于各桥基在对位，且q为3。

5.下式的化合物：

其中R^a和R^b独立地为氢或甲基，并且Z为-F。

6.下式的化合物：

其中R^a和R^b之一为氢，另一个为甲基，或者R^a和R^b均为甲基，并且Z为-F。

7.下式的化合物：

其中R^a和R^b之一为氢，另一个为甲基，或者R^a和R^b均为甲基，并且Z为-¹⁸F。

8.权利要求1的化合物，具有下式：

9.权利要求1的化合物，具有下式：

10.权利要求1的化合物，具有下式：

11.权利要求1的化合物，具有下式：

其中Z为I、Br或F。

12.权利要求1的化合物，其中Z为羟基。

13.权利要求1的化合物，其中q为1或3。

14.式III的化合物：

或其药学可接受的盐，其中，

A₁、A₂、A₃和A₅各自独立地为-CH、-CR²或-CR³；

A₄为N；

n为1；

R¹为：

-(CH₂)_pNR^aR^b，其中R^a和R^b独立地为氢或C_1-4烷基，且p为0；或羟基；

R³为放射性卤素；且

R²为：

其中，q为1-10的整数；t为0；Z为羟基或卤素，且R³⁰、R³¹、R³²和R³³各自独立地为氢；且

R⁷和R⁸在每种情况下独立地为氢。

15.权利要求14的化合物，其中R³为¹²⁵I、¹²³I、¹³¹I、¹⁸F、⁷⁶Br或⁷⁷Br。

16.权利要求14的化合物，其中q为1-4的整数。

17.权利要求14的化合物，其中Z为氟。

18.权利要求14的化合物，即：

19.包含有效量的权利要求1或14的化合物及药学可接受的载体或稀释剂的药物组合物。

20.用于成像淀粉状蛋白沉积物的诊断组合物，其包含有效量的权利要求1或14的化合物及药学可接受的载体或稀释剂，其中所述化合物是放射性标记的。

21.权利要求1或14的化合物在制备用于成像哺乳动物中的淀粉状蛋白沉积物的药物中的用途，其中所述化合物是放射性标记的。

22.权利要求1或14的化合物在制备用于抑制哺乳动物中淀粉样蛋白斑聚集的药物中的用途，其中所述化合物是放射性标记的。

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