EA022897B1 - СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ F-18 МЕЧЕНЫХ Аβ ЛИГАНДОВ - Google Patents

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ F-18 МЕЧЕНЫХ Аβ ЛИГАНДОВ Download PDF

Info

Publication number
EA022897B1
EA022897B1 EA201201645A EA201201645A EA022897B1 EA 022897 B1 EA022897 B1 EA 022897B1 EA 201201645 A EA201201645 A EA 201201645A EA 201201645 A EA201201645 A EA 201201645A EA 022897 B1 EA022897 B1 EA 022897B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
ethoxy
hplc
formula
compound
mixture
Prior art date
Application number
EA201201645A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201201645A1 (ru
Inventor
Матиас Берндт
Маттиас Фрибе
Фабрис Самсон
Райнер Браун
Гуннар Гарке
Марианне Патт
Андреас Шильдан
Кристоф Смуда
Original Assignee
Пирамаль Имэджинг Са
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=44584930&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA022897(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Пирамаль Имэджинг Са filed Critical Пирамаль Имэджинг Са
Publication of EA201201645A1 publication Critical patent/EA201201645A1/ru
Publication of EA022897B1 publication Critical patent/EA022897B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/78—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C217/80—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C07C217/82—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C217/84—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings of the same non-condensed six-membered aromatic ring the oxygen atom of at least one of the etherified hydroxy groups being further bound to an acyclic carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/041—Heterocyclic compounds
    • A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
    • A61K51/0453—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/041—Heterocyclic compounds
    • A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
    • A61K51/0455—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/12—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by a special physical form, e.g. emulsion, microcapsules, liposomes, characterized by a special physical form, e.g. emulsions, dispersions, microcapsules
    • A61K51/121—Solutions, i.e. homogeneous liquid formulation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C213/00—Preparation of compounds containing amino and hydroxy, amino and etherified hydroxy or amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C213/08—Preparation of compounds containing amino and hydroxy, amino and etherified hydroxy or amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton by reactions not involving the formation of amino groups, hydroxy groups or etherified or esterified hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу получения соединения формулы I, который обеспечивает введение F-18:

Description

Настоящее изобретение относится к способам, которые обеспечивают [Р-18]фторпегилированные производные (арил/гетероарил-винил)фенил метиламина.
Предпосылки создания изобретения
Болезнь Альцгеймера (АО) представляет собой прогрессирующее нейродегенеративное нарушение, характеризующееся потерей памяти, познавательных способностей и стабильности поведения. АО определяется патологически с помощью внеклеточных сенильных бляшек, состоящих из фибриллярных отложений бета-амилоидного пептида (Αβ) и нейрофибриллярных клубков, состоящих из спаренных спиральных филаментов гиперфосфорилированного тау. 39-43 аминокислоты, содержащиеся в Αβ пептидах, имеют происхождение из более крупного предшественника амилоидного белка (АРР). В амилоидогенном метаболическом пути Αβ пептиды отщепляются от АРР путем последовательного протеолиза с помощью бета- и гамма-секретаз. Αβ пептиды высвобождаются в виде растворимых белков и обнаруживаются в незначительных концентрациях в цереброспинальной жидкости (С8Р) в нормальном стареющем головном мозге. При прогрессировании АО Αβ пептиды агрегируют и образуют амилоидные отложения в паренхиме и сосудистой сети головного мозга, которые могут быть обнаружены посмертно в виде диффузных и сенильных бляшек и сосудистого амилоида при осуществлении гистологического анализа (недавний обзор см.: В1еппо\у е! а1. Раисе!. 2006 ίιι1. 29; 368(9533):387-403).
Болезнь Αльцгеймера (АО) становится большой медицинской и социально-экономической проблемой во всем мире. Большие усилия направлены на разработку техник и методов для раннего обнаружения и эффективного лечения заболевания. В настоящее время диагноз АО по академическим клиническим параметрам нарушений памяти составляет приблизительно 85-90% точности (Ре!ге11а ТВ. е! а1. Кайю1оду. 2003, 226:315-36). Он основывается на исключении различных заболеваний, вызывающих сходные симптомы, и тщательном неврологическом и психиатрическом исследовании, а также на нейропсихологическом тестировании.
Молекулярная визуализация является эффективной для более раннего обнаружения прогрессирования заболевания или терапевтической эффективности по сравнению с другими наиболее распространенными методами в области неврологии, онкологии и кардиологии. Среди нескольких перспективных технологий молекулярной визуализации, таких как оптическая визуализация, ΜΚΙ, 8РЕСТ и РЕТ, РЕТ представляет чрезвычайный интерес относительно разработки лекарственных средств в связи с их высокой чувствительностью и способностью обеспечивать количественные и кинетические данные.
Например, позитронно-активные изотопы включают, например, углерод, йод, азот и кислород. Эти изотопы могут заменять их нерадиоактивные аналоги в целевых соединениях с получением РЕТ индикаторов, которые обладают аналогичными биологическими свойствами. Из этих изотопов Р-18 является предпочтительным изотопом для мечения в связи с его периодом полураспада 110 мин, который предоставляет возможность приготовления диагностических индикаторов и последующего изучения биохимических процессов. Дополнительно, его низкая β+ энергия (634 кэВ) также является благоприятной.
Посмертное гистологическое исследование головного мозга все еще является единственным точным диагнозом болезни Αльцгеймера. Таким образом, полагают, что ίη νίνο обнаружение одной патологической характерной особенности заболевания - отложения амилоидных агрегатов в головном мозге будет оказывать сильное влияние на ранее выявление АО и дифференциацию ее от других форм деменции. Дополнительно, большинство терапий, модифицирующих заболевание, которые разрабатываются, нацелены на снижение амилоидной нагрузки в головном мозге. Таким образом, визуализация амилоидной нагрузки в головном мозге может обеспечивать существенный инструмент для стратификации пациентов и мониторинга лечения (недавний обзор см.: ЫогйЬегд. Еиг. ί. Ыис1. Мей. Μο1. 1тадш§. 2008 Маг.; 35 8ирр1. 1:846-50). Дополнительно, также известно, что амилоидные отложения принимают участие в амилоидозах, при которых амилоидные белки (например, тау) атипично отложены в различных органах и/или тканях, вызывая заболевание. Недавний обзор см. С/Ηίίί е! а1. Аиии Κ£ν. ВюсНет. 2006; 75:333-66.
Фторпегилированные (арил/гетероарил-винил)фенил метиламины, такие как
4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-М-метиланилин и
4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-Ы-метиланилин, метили с помощью Р-18 фторида, и они описаны в патентных заявках \УО 2006/066104, \УО 2007/126733 и представителях соответствующих патентных семейств.
- 1 022897
Пригодность этих радиоактивных индикаторов для обнаружения Αβ бляшек описана в литературе (^. /Напу е! а1., Кис1еаг Мебюте апб Вю1о§у, 32 (2005), 799-809; С. Ко^е е! а1., Рапсе! Кеиго1о§у, 7 (2008), 1-7; 8.К. СНо1 е! а1., ТНе .1оигпа1 оГ Кис1еаг Мебюте, 50 (2009), 1887-1894).
Чтобы не ограничивать использования таких Р-18 меченых диагностических средств, необходимы процессы, которые предоставляют возможность хорошо отлаженного и безопасного приготовления Р-18 меченых индикаторов. Дополнительно, такие процессы должны обеспечивать высокий выход полного синтеза для предоставления возможности получения количеств диагностического средства для доставки радиоактивного индикатора, несмотря на период полураспада 110 мин, к оборудованию без циклотрона или оборудованию для получения радиофармацевтического препарата.
Синтез Р-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарил-винил)фенил метиламинов был описан ранее.
4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18] Фторэтокси)этокси]этокси} фенил)винил] -Ν-метиланилин
а) /Напу е! а1., №с!еаг Мебюте апб Вю1о§у, 32 (2005), 799-809.
мг предшественника 2а (2-[2-(2-{4-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]фенокси}этокси)этокси]этил метансульфонат) в 0,2 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. С промежуточного соединения снимали защиту с помощью НС1 и нейтрализовали с помощью ΝπΟΙ I. Смесь экстрагировали с помощью этилацетата. Растворитель высушивали и упаривали. Остаток растворяли в ацетонитриле и очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ (ацетонитрил/5 мМ диметилглутаратный буфер рН 7 9/1). 20% (с поправкой на разложение), 11% (без поправки на разложение) 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-№ метиланилина получали в течение 90 мин. Дополнительное изменение состава лекарственного препарата,
- 2 022897 необходимое для получения раствора, пригодного для инъекций людям, не описано.
b) АО 2006/066104.
мг предшественника 2а (2-[2-(2-{4-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]фенокси}этокси)этокси]этил метансульфонат) в 0,2 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. С промежуточного соединения снимали защиту с помощью НС1 и нейтрализовали с помощью ΝαΟΗ. Смесь экстрагировали с помощью этил ацетата. Растворитель высушивали и упаривали, остаток растворяли в ацетонитриле и очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ. 30% (с поправкой на разложение), 17% (без поправки на разложение) 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-^метиланилина получали через 90 мин. Дополнительное изменение состава лекарственного препарата, необходимое для получения раствора, пригодного для инъекций людям, не описано.
c) С.С. Ро\ус е! а1., Раисе! №иго1о§у, 7 (2008), 129-135.
После введения радиоактивной метки, кислотного гидролиза и очистки путем полупрепаративной ВЭЖХ 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-^метиланилин приготавливали в виде лекарственного средства с помощью твердофазной экстракции (§РЕ).
ά) Н. Ааид е! а1., №с1еаг МеФсше аиб Вю1о§у, 38 (2011), 121-127.
мг (9,33 мкмоль) предшественника 2а (2-[2-(2-{4-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]фенокси}этокси)этокси]этил метансульфонат) в 0,5 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. С промежуточного соединения снимали защиту с помощью НС1 и нейтрализовали с помощью №ЮН. Неочищенный продукт разводили с помощью ацетонитрила/0,1 М формиата аммония (6/4) и очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ. Фракцию продукта собирали, разводили водой, пропускали через С18 картридж и элюировали с помощью этанола, получая 17% (без поправки на разложение) 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]метиланилина в течение 50 мин.
В том же источнике описано превращение незащищенного мезилатного предшественника.
мг (11,48 мкмоль) незащищенного мезилатного предшественника (2-{2-[2-(4-{(Е)-2-[4(метиламино)фенил]винил}фенокси)этокси]этокси}этил 4-метансульфонат) в 0,5 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. Неочищенный продукт разводили с помощью ацетонитрила/0,1 М формиата аммония (6/4) и очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ. Фракцию продукта собирали, разводили водой, пропускали через С18 картридж и элюировали с помощью этанола, получая 23% (без поправки на разложение) 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-^метиланилина в течение 30 мин.
Было обнаружено, что процесс, в котором радиоактивный индикатор очищают только с помощью §РЕ (без ВЭЖХ), обеспечивает получение продукта с приемлемой радиохимической чистотой (>95%), тем не менее, химическая чистота чрезвычайно низкая, например, побочные продукты вследствие избытка предшественника не могут быть удалены.
е) И8 20100113763.
2а (2-[2-(2-{4-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]фенокси}этокси)этокси]этил метансульфонат) подвергали реакции с [Р-18]фторидным реагентом в смеси трет-спирта и ацетонитрила. После фторирования растворитель упаривали и добавляли смесь НС1 и ацетонитрила. После снятия защиты (нагревание при 100-120°С) смесь неочищенного продукта очищали путем ВЭЖХ (С18, 60% ацетонитрил, 40% 0,1 М формиат аммония). Дополнительное изменение состава лекарственного препарата, необходимое для получения раствора, пригодного для инъекций людям, не описано.
- 3 022897
4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-Ы-метиланилин
a) З.К. СЬо1 е! а1., ТЬе 1оигпа1 о£ \ис1еаг Мейюте 50 (2009) 1887-1894.
мг предшественника 2Ь (2-{2-[2-({5-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]пиридин-2-ил}окси)этокси]этокси}этил 4-метилбензолсульфонат) в 1 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. С промежуточного соединения снимали защиту с помощью НС1 и нейтрализовали с помощью \аОН. ДМСО и неорганические компоненты удаляли путем твердофазной экстракции на картридже ЗерРак 1ΐβΕί С18 (Аа!ег§). Неочищенный продукт очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ (55% ацетонитрил, 45% 20 мМ ΝΗ4ΟΑο + 0,5% (мас./об.) аскорбат натрия). Фракцию продукта разводили водой и пропускали через ЗерРак ΙΐβΗί С18 картридж. Радиоактивный индикатор элюировали с помощью этанола. Выход для 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-Ы-метиланилина составил 10-30% (с поправкой на разложение).
b) АО 2010/078370.
1,5 мг (2,45 мкмоль) предшественника 2Ь (2-{2-[2-({5-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]пиридин-2-ил}окси)этокси]этокси}этил 4-метилбензолсульфонат) в 2 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. С промежуточного соединения снимали защиту с помощью НС1 и разводили с помощью 1% раствора \аО11 для нейтрализации. Смесь загружали на картридж с обращенной фазой. Картридж промывали водой (содержащей 5% (мас./об.) аскорбат натрия). Неочищенный продукт элюировали с помощью ацетонитрила в резервуар, содержащий воду + 5% (мас./об.) аскорбат натрия и ВЭЖХ растворитель. После очистки путем полупрепаративной ВЭЖХ фракцию продукта собирали в резервуар, содержащий воду + 0,5% (мас./об.) аскорбат натрия. Раствор пропускали через С18 картридж, картридж промывали водой (содержащей 0,5% (мас./об.) аскорбат натрия и конечный продукт элюировали с помощью этанола во флакон, содержащий 0,9% раствор хлорида натрия с 0,5% (мас./об.) аскорбатом натрия.
c) Υ. Пи е! а1., №с1еаг МеФсте апй Вю1оду, 37 (2010), 917-925.
мг (1,63 мкмоль) предшественника 2Ь (2-{2-[2-({5-[(Е)-2-{4-[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]фенил}винил]пиридин-2-ил}окси)этокси]этокси}этил 4-метилбензолсульфонат) в 1 мл ДМСО подвергали реакции с комплексом [Р-18]фторид/криптофикс/карбонат калия. С промежуточного соединения снимали защиту с помощью НС1 и разводили с помощью 1% раствора \аО11. Смесь загружали на картридж Оа§1§ НЬВ. Картридж промывали водой, высушивали в потоке аргона и продукт элюировали с помощью этанола во флакон, содержащий солевой раствор. Несмотря на то что радиохимические примеси удаляли посредством этой процедуры, нерадиоактивные побочные продукты, образовавшие вследствие гидролиза избытка предшественника, оставались в растворе конечного продукта.
Выход для 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-Хметиланилина составил 34% (без поправки на разложение) в течение 50 мин на уровне радиоактивности от 10-100 мКи (370-3700 МБк) [Р-18]фторида.
й) Б. 3ί1νη е! а1., АЬ§1гас1/Ро§1ег ΕΑΝΜ 2010.
Платформу 1ВА ЗупФега адаптировали для синтеза 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р18] фторэтокси)этокси] этокси} пиридин-3 -ил)винил] -Ν-метиланилина. Дополнительно, интегрировали полупрепаративную ВЭЖХ систему и дополнительный модуль ЗуШНега для изменения состава лекарственного препарата.
- 4 022897
е) С. Са§а1е е! а1. ^ог1й 1оигпа1 о£ Ыис1еаг Мейюше, 9, §1 (2010), §-174 (АЪ§!гас! о£ 1011' Сопдгекк о£ ^ΡΝΜΒ, Саре То\\п. §ои!й Лйтса, 18-23 §ер!етЪег 2010).
Приготовление 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]^метиланилина сопровождалось использованием модуля синтеза ΙΒΑ §уп!йета, соединенного с ВЭЖХ полупрепаративной системой очистки и дополнительным модулем для приготовления лекарственного средства (разведение ВЭЖХ фракции, захват на С18 картридж, промывка и элюирование с помощью этанола).
Несмотря на то что процессы очистки с помощью картриджей исследованы, оптимальное качество продукта относительно радиохимической чистоты и отделения от нерадиоактивных побочных продуктов показано и обосновано только для ВЭЖХ очистки. Таким образом, Р-18 меченые фторпегилированные (арил/гетероарил-винил)фенил метиламины были очищены путем ВЭЖХ, используя системы растворителей, состоящие из ацетонитрила и водного буфера. Очевидно, собранные фракции продукта не могут непосредственно использоваться для введения пациенту. Ацетонитрил и другие компоненты системы растворителей, которые являются недопустимыми для инъекций людям, должны быть удалены. Это может сопровождаться упариванием или с помощью твердофазной экстракции (например, захват на С18 твердофазный экстрагирующий картридж и элюирование этанолом, см. фиг. 1: картридж для окончательной твердофазной экстракции С3, элюирование этанолом из У8; см. также фиг. 7: картридж для окончательной твердофазной экстракции 11, элюирование этанолом одного из флаконов 9).
Тем не менее, в особенности при более высоких уровнях радиоактивности может происходить разложение радиоактивного индикатора вследствие процессов радиолиза. Эта проблема хорошо известна, для предотвращения радиолиза в процессе очистки 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-^метиланилина аскорбат натрия (в качестве акцептора радикалов) добавляли к ВЭЖХ растворителю и к промывочным растворам (§.К. С1ю1 е! а1., νθ 2010/078370). Тем не менее, концентрация радиоактивного индикатора после ВЭЖХ путем упаривания или путем твердофазной экстракции является решающей стадией приготовления. В обобщенных экспериментах более высокие радиохимические чистоты Р-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарил-винил)фенил метиламинов могут быть обнаружены после ВЭЖХ, перед твердофазной экстракцией по сравнению с композицией после твердофазной экстракции.
Общая схема процесса приготовления для Р-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарилвинил)фенил метиламинов, как было описано ранее, проиллюстрирована на фиг. 7. Процесс приготовления может быть разделен на три основные части:
Α) синтез;
Β) очистка путем ВЭЖХ;
С) приготовление лекарственного средства.
Стадии приготовления безводного [Р-18]фторида, введение радиоактивной метки в молекулу предшественника и снятие защиты осуществляют в части А устройства для синтеза (фиг. 7). Смесь неочищенного продукта переносят во вторую часть В для очистки путем ВЭЖХ (на силикагеле с обращенной фазой, используя элюент ацетонитрил/буфер). Для получения радиоактивного индикатора в лекарственном препарате, пригодном для инъекций людям, растворитель (ацетонитрил), присутствующий во фракции продукта, должен быть удален и поменян на композицию, которая является пригодной для приготовления лекарственного средства. Обычно (и это описано в вышеприведенных ссылках) фракцию продукта разводили водой (сосуд 8, фиг. 7, часть С) и затем пропускали через картридж с обращенной фазой (11, фиг. 7, часть С). Картридж промывали водным раствором из одного из резервуаров 9 (фиг. 7, часть С) и в завершение элюировали из картриджа с помощью этанольного раствора (или этанола) из другого резервуара 9 во флакон с продуктом, который необязательно содержит дополнительные части и наполнители конечного лекарственного препарата. Это является очевидным для квалифицированного специалиста в данной области техники, что иллюстрации на фиг. 7 представляют собой упрощение процесса и оборудования и что другие компоненты, такие как клапаны, флаконы, трубки и др. могут быть частью такого процесса или оборудования.
СМР соответствующий процесс приготовления для 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]^-метиланилин описан в νθ 2010/078370 и С.-Н. Уао е! а1., АррБей КаФайоп апй НоЮрек, 68 (2010), 2293-2297. Для предотвращения разложения 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]^-метиланилина аскорбат натрия добавляли к ВЭЖХ растворителю (45% ацетонитрил, 55% 20 мМ ацетат аммония, содержащий 0,5% (мас./об.) аскорбат натрия) и конечный лекарственный препарат (0,5% (мас./об.) аскорбат натрия). Процесс позволяет получить вплоть до 18,5 ГБк (25,4±7,7%, с поправкой на разложение) 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]^-метиланилина. Радиохимическая чистота составила 95,3±2,2%.
Несмотря на то что аскорбат/аскорбиновую кислоту добавляли к растворителям, задействованным в очистку, радиохимическая чистота составила только приблизительно 95,3±2,2% на уровнях активности продукта вплоть до 18,5 ГБк (Уао е! а1.), возможно, вследствие разложения путем радиолиза.
- 5 022897
При более высоких уровнях активности продукта была обнаружена еще более высокая изменчивость радиохимической чистоты для приготовления 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Ы-метиланилина (пример 7, фиг. 9, метод А).
Наряду с изменчивостью радиохимической чистоты, для изменения состава лекарственного препарата при действующем способе (превращение радиоактивного индикатора из ВЭЖХ среды в инъецируемый раствор) необходима дополнительная продолжительность процесса и требуется более сложное оборудование. Например, для процесса для синтеза 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-Ы-метиланилина, описанного δίίνα с1 а1. и Са§а1е с1 а1., требуется три модуля для суммарного процесса производства. Синтез неочищенного продукта (схематически проиллюстрирован на фиг. 7, часть А) осуществляют на модуле ΙΒΑ ЗуШНега. полупрепаративную ВЭЖХ систему используют для очистки (схематически проиллюстрирован на фиг. 7, часть В) и дополнительный модуль синтеза ΙΒΑ ЗуШНега используют для изменения состава лекарственного препарата (схематически проиллюстрирован на фиг. 7, часть С).
Задачей, на решение которой направлено настоящее изобретение, является обеспечение улучшенного способа ВЭЖХ очистки для Р-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарил-винил)фенил метиламинов, который обеспечивает высокие химические и радиохимические чистоты радиоактивного индикатора, избегая концентрации меченого продукта после очистки для предотвращения радиолиза, в особенности при более высоких уровнях радиоактивности. Этот процесс должен быть пригодным для приготовления больших количеств (радиоактивности) радиоактивного индикатора для предоставления возможности распределения визуализирующих способностей за пределами собственной фармацевтической продукции. До настоящего времени максимальная описанная активность для Р-18 меченого фторпегилированного (арил/гетероарил-винил)фенил метиламина составляла 18,5 ГБк (Уао е1 а1.). Тем не менее, еще более высокие выходы могут быть поддержаны для широкого использования и доступности радиоактивного индикатора. Предпосылкой нового способа приготовления должна быть высокая радиохимическая чистота (например, >95%) в пределах широкого спектра радиоактивности. Более точно, такой способ должен быть пригодным для приготовления более высоких уровней активности радиоактивного индикатора по сравнению с описанными ранее (например, >20 ГБк, или даже >50 ГБк, или даже >100 ГБк) с подтвержденными радиохимическими чистотами >95%. В качестве дополнительной характерной особенности такой способ должен быть менее сложным по сравнению с ранее описанными способами.
Проблемы, описанные выше, решают путем модифицированной процедуры очистки. Для упрощения общей схемы производства модифицируют состав растворителей для ВЭЖХ очистки. Вместо смеси ацетонитрил/буфер используют смесь этанол/буфер. Преимуществом новой смеси растворителей ВЭЖХ является то, что все составные компоненты ВЭЖХ растворителя - в отличие от ранее описанных композиций - являются хорошо переносимыми в виде части лекарственного препарата, следовательно, пригодны для инъекций людям. Следовательно, изменение состава лекарственного препарата для удаления составных компонентов ВЭЖХ растворителя (как проиллюстрировано на фиг. 7, часть С) уже больше не требуется. Это дополнительное преимущество нового способа - упрощенная схема - схематически проиллюстрировано на фиг. 8. (Очевидно, эта иллюстрация является упрощением, которое показывает общую схему нового способа, описанного в настоящем изобретении) Согласно изображению на фиг. 8 фракцию продукта собирают непосредственно (с помощью переключающего клапана 7) во флакон с продуктом (который может содержать другие части конечного лекарственного препарата). Вследствие уменьшенной сложности общее время приготовления при использовании нового способа, описанного в настоящем документе, сокращается, что непосредственно способствует более высоким выходам без поправки на разложение по сравнению с ранее использованным способом, где используют ВЭЖХ очистку с дополнительным (требующим затраты времени) изменением состава лекарственного препарата на твердофазном картридже (8РЕ).
Основным преимуществом нового способа, описанного в настоящем документе, является достоверная высокая радиохимическая чистота Р-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарилвинил)фенил метиламинов, синтезированных с помощью нового способа. В примере 7 и на фиг. 9 показана радиохимическая чистота в зависимости от способа очистки и количества (радиоактивности) радиоактивно меченого продукта при окончании синтеза. Точки/квадраты (каждая представляет отдельный эксперимент) и прямые на графике, отображающие тенденции, на фиг. 9 убедительно свидетельствуют о том, что радиохимическая чистота, полученная после ВЭЖХ с изменением состава лекарственного препарата путем §РЕ, изменяется существенно (фиг. 9, незарисованные квадраты). В особенности, при более высоких уровнях радиоактивности (>20 ГБк) радиохимическая чистота часто составляет даже <95%. В отличие от этого, изменчивость радиохимических чистот, полученных с помощью нового способа согласно настоящему изобретению, значительно более низкая и достигаются высокие радиохимические чистоты >95%, даже при уровнях радиоактивности продукта больше чем 50 ГБк или даже больше чем 100 ГБк (фиг. 9, зарисованные точки).
- 6 022897
Сущность изобретения
Настоящее изобретение обеспечивает способ получения радиоактивно меченого соединения формулы I и его подходящих солей неорганической или органической кислоты, его гидратов, комплексов, сложных эфиров, амидов, сольватов и пролекарств и, необязательно, фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя, адъюванта или наполнителя.
Способ включает следующие стадии: радиоактивное фторирование соединения формулы II; необязательно, отщепление защитной группы;
очистка соединения формулы I путем ВЭЖХ с использованием системы растворителей, которая может являться частью инъецируемого препарата.
Способ, обеспечиваемый настоящим изобретением, схематически проиллюстрирован на фиг. 8. Радиоактивное фторирование соединения формулы II и, необязательно, отщепление защитной группы осуществляют на находящейся слева части оборудования (фиг. 8, часть А). Очистку соединения формулы I осуществляют таким образом, что фракция продукта, полученная путем ВЭЖХ (фиг. 8, часть В), может быть непосредственно перенесена во флакон с продуктом, где флакон с продуктом необязательно содержит дополнительные фармацевтически приемлемые носители, разбавители, адъювант или наполнители. Дальнейшая часть процесса и оборудования, как проиллюстрировано на фиг. 7 (часть С), уже больше не является необходимой согласно способу в соответствии с настоящим изобретением.
Описание изобретения
В первом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы I
который включает следующие стадии.
Стадия 1. Введение радиоактивной метки в соединение формулы II с помощью Р-18 фторирующего агента, получая соединение формулы I, если К=Н, или получая соединение формулы III, если К=РО
Стадия 2. Необязательно, если К=РО, отщепление защитной группы РО, получая соединение формулы I.
Стадия 3. Очистка соединения формулы I (причем на этой стадии используют метод ВЭЖХ, где ВЭЖХ растворитель или смесь растворителей представляют собой часть препарата для инъекций соединения I, пригодного для инъекций людям, где ВЭЖХ растворитель выбирают из группы, включающей этанол, водный буфер или смесь этанол/водный буфер), где п=1-6, предпочтительно 2-4, более предпочтительно 3;
X выбирают из группы, включающей:
a) СН,
b) N.
В одном предпочтительном варианте осуществления Х=СН.
В другом предпочтительном варианте осуществления Χ=Ν.
К выбирают из группы, включающей:
a) Н,
b) РО,
РО представляет собой аминозащитную группу.
- 7 022897
В предпочтительном варианте осуществления РО выбирают из группы, включающей:
a) Вос,
b) тритил и
c) 4-метокситритил.
В более предпочтительном варианте осуществления К представляет собой Н. В другом более предпочтительном варианте осуществления К представляет собой Вос.
РО представляют собой уходящую группу.
В предпочтительном варианте осуществления РО выбирают из группы, включающей:
a) галоген и
b) сульфонилокси.
Галоген представляет собой хлор, бром или йод. Предпочтительно галоген представляет собой бром или хлор.
В предпочтительном варианте осуществления сульфонилокси выбирают из группы, включающей метансульфонилокси, п-толуолсульфонилокси, трифторметилсульфонилокси, 4-цианофенилсульфонилокси, 4-бромфенилсульфонилокси, 4-нитрофенилсульфонилокси, 2-нитрофенилсульфонилокси, 4-изопропил-фенилсульфонилокси, 2,4,6-триизопропил-фенилсульфонилокси, 2,4,6-триметилфенилсульфонилокси, 4-трет-бутил-фенилсульфонилокси, 4-адамантилфенилсульфонилокси и 4-метоксифенилсульфонилокси.
В более предпочтительном варианте осуществления сульфонилокси выбирают из группы, включающей:
a) метансульфонилокси,
b) п-толуолсульфонилокси,
c) (4-нитрофенил)сульфонилокси, б) (4-бромфенил)сульфонилокси.
В еще более предпочтительном варианте осуществления РО представляет собой метансульфонилокси.
В другом еще более предпочтительном варианте осуществления РО представляет собой п-толуолсульфонилокси.
Предпочтительное соединение формулы I представляет собой:
Другое предпочтительное соединение формулы I представляет собой:
Предпочтительное соединение формулы II представляет собой:
- 8 022897
Другое предпочтительное соединение формулы II представляет собой:
Другое предпочтительное соединение формулы II представляет собой:
Другое предпочтительное соединение формулы II представляет собой:
Другое предпочтительное соединение формулы II представляет собой:
Стадия 1 включает прямую реакцию введения [Р-18]фтор метки в соединения формулы II для получения соединения формулы I (если К=Н) или соединения формулы III (если К=РС).
Способ введения радиоактивной метки включает стадию взаимодействия соединения формулы II с Р-18 фторирующим агентом для получения соединения формулы III или соединения формулы I. В предпочтительном варианте осуществления, производное [ЭР-18]фторида представляет собой 4,7,13,16,21,24гексаокса-1,10-диазабицикло[8,8,8]гексакозан К[Р-18]Р (криптофикс К[Р-18]Р), К[Р-18]Р, Н[Р-18]Р, КН[Р-18]Р2, С§[Р-18]Р, Νη|Ι·'-18|Ι; или тетраалкиламмониевую соль [Р-18]Р (например, фторид [Р18]тетрабутиламмония). Более предпочтительно фторирующий агент представляет собой К[Р-18]Р, Н[Р-18]Р, фторид [Р-18]тетрабутиламмония, С§[Р-18]Р или КН[Р-18]Р2, более предпочтительно К[Р-18], С§[Р-18]Р или фторид [Р-18]тетрабутиламмония.
Еще более предпочтительный Р-18 фторирующий агент представляет собой криптофикс/калий[Р18]фторид, предпочтительно полученный из [Р-18]фторида, криптофикса и карбоната калия.
Реакции радиоактивного фторирования осуществляют в ацетонитриле, диметилсульфоксиде или диметилформамиде или их смеси. Но также можно использовать другие растворители, которые хорошо известны специалисту в данной области техники. Вода и/или спирты могут быть задействованы в реакцию в качестве сорастворителя. Реакции радиоактивного фторирования осуществляют в течение менее чем 60 мин. Предпочтительное время реакций составляет менее чем 30 мин. Дальнейшее предпочтительное время реакций составляет менее чем 15 мин. Эти и другие условия для такого радиоактивного фторирования известны экспертам (Соепеп, Р1иоппе-18 БаЪеНпд МеШобз: РеаШгез апб ΡοδδΐΡΐΙΐΐΐϋδ оР Ва§1с Кеасйопз, (2006), в 8сйиЫ§ег Р.А., РпеЪе М., Бейшапп Ь. (ред.), РЕТ-Сйеш1§1гу - ТИе Όπνΐη§ Рогсе ΐη Мо1еси1аг ^адтд. 8ргт§ег, Вегйп Не1бе1Ъег§, р. 15-50).
- 9 022897
В одном варианте осуществления 7,5-75 мкмоль, предпочтительно 10-50 мкмоль, более предпочтительно 10-30 мкмоль и еще более предпочтительно 12-25 мкмоль и еще более предпочтительно
13-25 мкмоль соединения формулы II используют на стадии 1.
В другом варианте осуществления более чем 7,5 мкмоль, предпочтительно более чем 10 мкмоль, более предпочтительно более чем 12 мкмоль и еще более предпочтительно более чем 13 мкмоль соединения формулы II используют на стадии 1.
В другом варианте осуществления более чем 5 мг, предпочтительно более чем 6 мг и более предпочтительно более чем 7 мг соединения формулы II используют на стадии 1.
В другом варианте осуществления 7 мг соединения формулы II используют на стадии 1.
В другом варианте осуществления 8 мг соединения формулы II используют на стадии 1.
В одном предпочтительном варианте осуществления радиоактивное фторирование соединения формулы II осуществляют в ацетонитриле или в смеси ацетонитрила и сорастворителей, где процент ацетонитрила составляет по меньшей мере 50%, более предпочтительно по меньшей мере 70%, еще более предпочтительно по меньшей мере 90%.
Необязательно, если К=РО, стадия 2 включает снятие защиты с соединения формулы III, получая соединение формулы I. Условия реакции являются известными или очевидными для специалиста в данной области техники, которые выбирают, но не ограничиваясь только ими, из условий, описанных в пособии Огееие апб ХУиК Рго1ес1шд дгоирк ίη Огдашс §уиНек15, 3-е изд., р. 494-653, включенном в настоящее описание в качестве ссылки. Предпочтительные условия реакции включают добавление кислоты и перемешивание при 0-180°С; добавление основания и нагревание при 0-180°С или их комбинацию.
Предпочтительно стадию 1 и стадию 2 осуществляют в одном реакционном сосуде.
Стадия 3 включает очистку соединения формулы I, используя систему ВЭЖХ разделения, где, ВЭЖХ растворитель элюент, а именно этанол, водный буфер или смесь этанол/водный буфер может быть частью инъецируемого лекарственного препарата соединения формулы I. Собранная фракция продукта может быть разведена или смешана с другими частями лекарственного препарата.
Смесь ВЭЖХ растворителей состоит из этанола или водного буфера или смеси этанол/водный буфер, где водный буфер состоит из компонентов или наполнителя, которые могут быть инъецированы человеку. Примерами такого водного буфера являются растворы хлорида натрия, натрий-фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, аскорбатный буфер или их смеси.
В предпочтительном варианте осуществления способ приготовления соединения формулы I осуществляют путем использования модуля (обзор: КгакЖоуа, 8уи1Ьек15 Моби1ек апб АиЮтаЬоп ίη Р-18 1аЪе1шд (2006), в БсЬиЫдег Р.А., РпеЬе М., ЬеЬтаии Ь. (ред.), РЕТ-СЬет1к1гу - ТЬе Ότίνίη§ Рогсе ίη Мо1еси1аг Ьпадшд. §ргшдег, ВегЬи Не1бе1Ъегд, р. 289-316), который предоставляет возможность автоматизированного синтеза. Более предпочтительно способ осуществляют путем использования модуля в одном сосуде. Еще более предпочтительно способ осуществляют на общеизвестных модулях некассетного типа (например, Ескег & 21ед1ег Моби1аг-ЬаЪ, ОЕ Тгасег1аЪ РХ, Кау1ек1 8уиСЬгот) и модулях кассетного типа (например, ОЕ Тгасег1аЪ МХ, ОЕ РакЙаЪ, ША §уиНега, Ескей & 21ед1ег Моби1аг-ЬаЪ РЬагшГгасег), необязательно, дополнительное оборудование, такое как ВЭЖХ или диспергирующие устройства, присоединены к указанным модулям.
В предпочтительном аспекте настоящее изобретение относится к полностью автоматизированному и/или дистанционно управляемому способу получения соединения формулы I, где соединения формулы I, II и III и стадии 1, 2 и 3 описаны выше.
В предпочтительном варианте осуществления этот способ представляет собой полностью автоматизированный процесс, соответствующий ОМР принципам, который обеспечивает лекарственный препарат формулы I для применения для введения (инъекции) человеку.
Определения
В контексте настоящего изобретения предпочтительные соли представляют собой фармацевтически приемлемые соли соединений в соответствии с изобретением. Изобретение также включает соли, которые в связи с их частью не пригодны для фармацевтических применений, но которые могут применяться, например для выделения или очистки соединений в соответствии с изобретением.
Фармацевтически приемлемые соли соединений в соответствии с изобретением включают соли присоединения кислот минеральных кислот, карбоновых кислот и сульфоновых кислот, например соли соляной кислоты, бромисто-водородной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, толуолсульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, нафталин дисульфоновой кислоты, уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, пропионовой кислоты, молочной кислоты, винной кислоты, яблочной кислоты, лимонной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты и бензойной кислоты.
Фармацевтически приемлемые соли соединений в соответствии с изобретением также включают соли общепринятых оснований, такие как, в качестве примера и предпочтения, соли щелочных металлов (например, соли натрия и соли калия), соли щелочно-земельных металлов (например, соли кальция и соли магния) и соли аммония, имеющие происхождение из аммиака или органических аминов, имеющих от 1 до 16 атомов углерода, такие как, в качестве примера и предпочтения, этиламин, диэтиламин, три- 10 022897 этиламин, этилдиизопропиламин, моноэтаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, дициклогексиламин, диметиламиноэтанол, прокаин, дибензиламин, N метилморфолин, аргинин, лизин, этилендиамин и
Ν-метилпиперидин. Термин галоген, или гало относится к С1, Вг, Р или I.
Термин аминозащитная группа, как используется в настоящем описании самостоятельно или в качестве части другой группы, известен или очевиден для специалиста в данной области техники, который выбирают, но не ограничиваясь только ими, из класса защитных групп, а именно карбаматы, амиды, имиды, Ν-алкиламины, Ν-ариламины, имины, енамины, бораты, Ν-Р-защитные группы, Ν-сульфенил, Ν-сульфонил и Ν-силил, и которые выбирают, но не ограничиваясь только ими, из групп, которые описаны в пособии Огеепе апб ХУиК Рго1есбпд дгоирк ίη Огдашс 8уп1Ьек1К, 3-е изд., с. 494-653, включенном в настоящее описание в качестве ссылки. Аминозащитная группа предпочтительно представляет собой карбобензилокси (СЬ/), п-метоксибензил карбонил (Мо/ или МеО2), трет-бутилоксикарбонил (Вос), 9-флуоренилметилоксикарбонил (РМОС), бензил (Вп), п-метоксибензил (РМВ), 3,4-диметоксибензил (ЭМРМ), п-метоксифенил (РМР) или защищенная аминогруппа представляет собой 1,3-диоксо-1,3дигидро-2Н-изоиндол-2-ил (фталимидо) или азидогруппу.
Термин уходящая группа, как используется в настоящем описании самостоятельно или в качестве части другой группы, известен или очевиден для специалиста в данной области техники и обозначает, что атом или группу атомов отсоединяют от химического вещества с помощью нуклеофильного агента. Примеры представлены, например, в 8уп(Ьек1К (1982), р. 85-125, табл. 2 (с. 86 (последнюю запись этой табл. 2 необходимо откорректировать: п-С4Р98(О)2-О-нонафлат вместо п-С4Н98(О)2-О-нонафлат), Сагеу апб 8ипбЬегд, ОгдашксЬе 8уйЬеке, (1995), р. 279-281, табл. 5.8; или №1ксЬег, КесеШ Кек. Эеу. Огд. Сйет., 2003, 7, 71-83, схемы 1, 2, 10 и 15 и др.). (Соепеп, Р1иогше-18 ЬаЬейпд Мебюбк: РеаШгек апб РокыЬбШек о£ Вакю Кеасбопк, (2006), в 8сЬиЫдег Р.А., РпеЬе М., Ьейтапп Ь., (ред.), РЕТ-СЬет1к1гу - ТЬе ЭгМпд Рогсе ш Мо1еси1аг Ппадтд. 8ргшдег, ВегЬп Не1бе1Ьегд, р. 15-50, а именно: схема 4 с. 25, схема 5 с. 28, табл. 4 с. 30, фиг. 7 с. 33).
Термин сульфонилокси относится к -О-8(О)2-Ц, где О представляет собой необязательно замещенный арил или необязательно замещенный алкил.
Термин алкил, как используется в настоящем описании самостоятельно или в качестве части другой группы, относится к С1-С10 неразветвленной или разветвленной алкильной группе, такой как, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, гептил, гексил, децил или адамантил. Предпочтительно алкил представляет собой С1-С6 неразветвленный или разветвленный алкил или С7-С10 неразветвленный или разветвленный алкил. Низший алкил представляет собой С1 -С6 неразветвленный или разветвленный алкил.
Термин арил, как используется в настоящем описании самостоятельно или в качестве части другой группы, относится к моноциклическим или бициклическим ароматическим группам, содержащим от 6 до 10 углеродов в кольцевой части, таким как фенил, нафтил или тетрагидронафтил.
Когда используется термин замещенный, это обозначает, что указание о том, что один или несколько водородов на атоме, указанном в выражении с использованием замещенный, заменен/заменены одним или несколькими компонентами из группы, включающей галоген, нитро, циано, трифторметил, алкил и О-алкил, при условии, что не превышается нормальная валентность соответствующего атома, и что замещение приводит к химически стабильному соединению, т.е. соединению, которое достаточно устойчиво для перенесения выделения до пригодной степени чистоты из реакционной смеси. Если специально не указано иначе, то при ссылке на соединения формулы согласно настоящему изобретению рег ке, а также на любую их фармацевтическую композицию, настоящее изобретение включает все гидраты, соли и комплексы.
Термин Р-18 обозначает изотоп фтора 18Р. Термин Р-19 обозначает изотоп фтора 19Р.
Примеры
Определение радиохимической и химической чистоты.
Радиохимические и химические чистоты 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-^метиланилина и 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]метиланилина определяли с помощью аналитической ВЭЖХ (колонка: АбапЬк Т3; 150x4,6 мм, 3 мкс, \Уа1егк; растворитель А: 5 мМ К2НРО4 рН 2,2; растворитель В: ацетонитрил; поток: 2 мл/мин, градиент: 0:00 мин 40% В, 0:00-05:50 мин 40-90% В, 05:50-05:60 мин 90-40% В, 05:60-09:00 мин 40% В).
Время удерживания 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]метиланилина: 3,5-3,9 мин в зависимости от ВЭЖХ системы, используемой для контроля качества. В связи с различным оборудованием (например, разливания по пробиркам) наблюдали отличия по времени удерживания между различными ВЭЖХ системами. Идентичность 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-^метиланилина доказывали путем совместной инъекции с нерадиоактивным эталоном 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-19]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]метиланилин.
Время удерживания 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]метиланилина: 3,47 мин. Идентичность 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3ил)винил]-^метиланилина путем совместной элюции с нерадиоактивным эталоном -[(Е)-2-(6-{2-[2-(2- 11 022897 [Р-19]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-К-метиланилин.
Пример 1. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Лметиланилина радиоактивный синтез на Ескег! & 21е§1ег модульной лаборатории
Синтез 4-[(Е)-2-(4- {2-[2-(2-[Р-18])фторэтокси)этокси]этокси} фенил)винил] -Ν-метиланилина осуществляли на Ескег! & 21е§1ег модульном лабораторном синтезаторе. [Р-18]Фторид (60362 МБк) захватывали на ОМА картридж. Активность элюировали с помощью смеси мезилат калия/криптофикс/н-Ви4МНСО3/метанол в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила. Раствор 4 мг 2а в 1 мл трет-амиловый спирт/ацетонитрил (9:1) добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 20 мин при 120°С. При осуществлении нагревания выпускную трубу реактора открывали для предоставления возможности испарения растворителя.
Добавляли смесь 2,2 мл 1,5 М НС1, 1,1 мл ацетонитрила и 30 мг аскорбата натрия и реактор нагревали при 100°С в течение 10 мин. Неочищенный продукт нейтрализовали (1,5 мл 2 М ΝαΟΗ + 0,3 мл буфера) и переносили на полупрепаративную ВЭЖХ колонку (Зупегду Нубго-КР, 250x10 мм, РЬепотепех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера (рН 7,0) продували через колонку со скоростью 3 мл/мин. Фракцию продукта при 18 мин (фиг. 2) непосредственно собирали во флакон с продуктом, содержащим 8,5 мл основы лекарственного препарата (фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, РЕС 400). Аналитическая ВЭЖХ конечного продукта (фиг. 3) показала чрезвычайно хорошую радиохимическую и химическую чистоту. Только холодный 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Л-метиланилин обнаруживали на УФ-хроматограмме (фиг. 3, нижняя часть), все нерадиоактивные примеси были удалены. Определенная радиохимическая чистота составила 99,6%.
Пример 2. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Лметиланилина радиоактивный синтез на Тгасег1аЬ ΡΧΝ.
Тгасег1аЬ ΡΧΝ синтезатор адаптировали для ВЭЖХ подхода с прямым срезом (фиг. 4).
[Р-18]Фторид (3700 МБк) захватывали на ОМА картридж. Активность элюировали с помощью смеси карбонат калия/криптофикс/ацетонитрил/вода в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила. Раствор 7 мг 2а в 1 мл ацетонитрила добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 8 мин при 120°С. После охлаждения до 60°С добавляли смесь 0,5 мл 2 М НС1 и 0,5 мл ацетонитрила и реактор нагревали при 110°С в течение 4 мин. Неочищенный продукт нейтрализовали (1 мл 1 М ΝπΟΙ I + 2 мл буфера) и переносили на полупрепаративную ВЭЖХ колонку (Зупегду Нубго-КР, 250x10 мм, РЬепотепех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера (рН 7,0) продували через колонку со скоростью 3 мл/мин. Фракцию продукта при 16 мин (фиг. 2) непосредственно собирали во флакон с продуктом, содержащим 8,5 основы лекарственного препарата (фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, РЕО 400). Определенная радиохимическая чистота составила >99%.
Пример 3. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Лметиланилина радиоактивный синтез на Тгасег1аЬ МХ и Ескег! & 21е§1ег очистном блоке.
Набор собирали для синтеза 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Лметиланилина (табл. 1).
- 12 022897
Таблица 1
Состав набора для производства
4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-^метиланилина на 1гасег1аЬ МХ и Ескег! & 21ед1ег очистном блоке
Флакон элюента
Синий закрытый колпачком флакон_
Красный закрытый колпачком флакон_
Зеленый закрытый колпачком флакон_ шприц 2 мл_
Мешок для воды_
Линия продукции на Ескег1&2|ед1ег очистном блоке_
Анионо-обменный картридж_
Одноразовый 3-ходовой клапан_
Флакон с продуктом Основа Лекарственного препарата_
ВЭЖХ растворитель
ВЭЖХ скорость потока мг криптофикса. 7 мг карбоната калия в 300 мкл воды + 300 мкл ацетонитрила_ мл ацетонитрила мг предшественника 2а мл 1,5М НС1 + 30 мг аскорбата натрия
1,5 мл 2М ЫаОН + 0,3 мл фосфатного буфера
Вода_
Трубка с двумя фитингами с фиксатором Люэра
ОМА НдЫ, \Л/а1егз (предварительно обработанный)_ _
С трубками и прикрепленный иглой к флакону с продуктом, вкл. стерильные фильтры_
Флакон 20 мл_
8,5 мл (РЕО 400, Ν32ΗΡΟ4Ή2Ο, аскорбиновая кислота в воде)
- этанол
- вода
- аскорбат натрия
- аскорбиновая кислота_ мл/мин
Конструкцию Тгасег1аЬ МХ кассеты адаптировали (фиг. 5). [Р-18]Фторид захватывали на ОМА картридж. Активность элюировали с помощью смеси карбонат калия/криптофикс/ацетонитрил/вода (из флакона элюента) в реактор.
Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила. Раствор 8 мг 2а в 1,8 мл ацетонитрила (ацетонитрил из синего закрытого колпачком флакона добавляли к твердому 2а в красный закрытый колпачком флакон при осуществлении последовательности) добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 10 мин при 120°С. Добавляли 1,5 М НС1 (из зеленого закрытого колпачком флакона) и реактор нагревали при 110°С в течение 5 мин. Неочищенный продукт нейтрализовали (1 мл 1 М ΝηΟΙΙ + 0,3 мл буфера, из шприца 2 мл) и переносили в инжекторный клапан Ескег! & 21е§1ег ВЭЖХ (фиг. 6) с помощью левого шприцевого насоса МХ модуля. Неочищенный продукт очищали на 8упегду Нубго-КР, 250x10 мм, РНепотепех ВЭЖХ колонку, используя смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера (рН 7,0). Фракцию продукта при 17,5 мин (фиг. 2) непосредственно собирали во флакон с продуктом, содержащим 8,5 основы лекарственного препарата (фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, РЕО 400).
Пример 4. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-№ метиланилина радиоактивный синтез на Ескег! & /,1ед1ег модульной лаборатории.
Синтез осуществляли на Ескег! & /,1ед1ег Моби1агБаЬ синтезаторе, используя ацетонитрил в качестве растворителя для фторирования. Установки синтезатора и результаты обобщены в табл. 2.
[Р-18]Фторид захватывали на ОМА картридж (С1). Активность элюировали с помощью смеси криптофикса (из У1) в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления 100 мкл ацетонитрила (из У2). Раствор предшественника 2а (из У3) добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 10 мин при 120°С. После охлаждения до 40°С добавляли 2 мл 1,5 М НС1 (из У4) и раствор нагревали в течение 5 мин при 110°С.
Смесь неочищенного продукта разводили с помощью 1,2 мл 2 М №ОН и 0,8 мл формиата аммония (1М) из флакона У5 и после этого переносили в ВЭЖХ флакон (Микс-флакон), содержащий предварительно 1 мл ацетонитрила и 0,5 мл этанола.
Смесь переносили в 10 мл петлевого дозатора образца полупрепаративной ВЭЖХ, используя избыточное давление азота, в ВЭЖХ сосуд (Микс-флакон) и с помощью жидкостного датчика, который контролирует окончание загрузки. Смесь загружали на полупрепаративную ВЭЖХ колонку (8упег§1 Нубго-КР, 250x10 мм, РНепотепех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера продували через колонку со скоростью 6 мл/мин. Фракцию продукта при 7 мин собирали непосредственно во флакон с продуктом, содержащим 15 мл основы лекарственного препарата (состоящей из фосфатного буфера, РЕО 400 и аскорбиновой кислоты). Аналитическая ВЭЖХ конечного продукта показала чрезвычайно хорошую радиохимическую и химическую чистоту. Не было обнаружено примесей больше чем 0,3 мкг/мл.
- 13 022897
Таблица 2
Флакон VI 22 мг криптофикса 7 мг карбоната калия 300 мкл ацетонитрила 300 мкл воды
Флакон М2 100 мкл ацетонитрила
Флакон УЗ 8 мг предшественника 2а в 1,8 мл ацетонитрила
Флакон У4 2 мл НС1 1,5М
Флакон У5 1,2 мл ЫаОН 2,ОМ 800 мкл формиата аммония 1М
Картридж С1 ОМА КдМ (\л/а!егз), кондиционированный с карбонатом калия 0,5М
Микс-флакон 1 мл ацетонитрила 500 мкл этанола
ВЭЖХ колонка 5упегд| Нубго-ЕР, 250*10 мм, Юрт 80А, РГ|епотепех
ВЭЖХ 60% этанол, 40% аскорбатный буфер (5 г/л аскорбата
растворитель натрия и 50 мг/л аскорбиновой кислоты)
ВЭЖХ поток 6 мл/мин
Исходная активность[Р18]фторида 46,0 ГБк
Активность продукта 19,4 ГБк
Радиоактивная чистота продукта(ЕСР) 99%
Радиохимически й выход 42% (без поправки на разложение)
Пример 5. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Е-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]^метиланилина радиоактивный синтез на 1гасег1аЬ МХ и Ескег! & Б1е§1ег очистном блоке.
Синтез осуществляли на ОЕ Тгасег1аЬ МХ синтезатора, очистку 4 осуществляли на Ескег! & /1е§1ег очистном блоке. Заполнение петлевого дозатора ВЭЖХ контролировали с помощью шприца МХ модуля. Установки обоих автоматизированных устройств и результаты обобщены в таблице ниже. [Р-18]Фторид захватывали на ОМА картридж (С1). Активность элюировали с помощью смеси криптофикса (из У1) в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила (из У2). Раствор предшественника 2а (из У3) добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 10 мин при 120°С. После охлаждения до 40°С добавляли 2 мл 1,5 М НС1 (из У4) и раствор нагревали в течение 5 мин при 110°С.
Смесь неочищенного продукта разводили с помощью 1,2 мл 2 М ΝιΟΙ I и 0,8 мл формиата аммония (1 М) из шприца 81 и после этого переносили в ВЭЖХ флакон (Микс-флакон), в который 1 мл ацетонитрила (из У2) и 0,5 мл этанола (из У5) добавляли раздельно.
В среднем 6-7 мл смеси переносили в шприц 30 мл, который затем выталкивали до общего объема в 10 мл петлевого дозатора образца полупрепаративной ВЭЖХ. Смесь загружали на полу-препаративную ВЭЖХ колонку (8упег§1 Нубго-КР, 250x10 мм, РЕепошепех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера продували через колонку со скоростью 6 мл/мин. Фракцию продукта при 9 мин собирали в течение 50 с непосредственно во флакон с продуктом, содержащим 15 мл основы лекарственного препарата (состоящей из фосфатного буфера, РЕО 400 и аскорбиновой кислоты). Аналитическая ВЭЖХ конечного продукта показала чрезвычайно хорошую радиохимическую и химическую чистоту. Не было обнаружено примесей больше чем 0,5 мкг/мл.
- 14 022897
Таблица 3
Пример 6. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-Пметиланилина радиоактивный синтез на Еасег1аЪ МХ и ЕскеП & 21е§1ег очистном блоке.
Синтез осуществляли на СЕ Тгасег1аЪ МХ синтезаторе, очистку 4 осуществляли на НскеП & 21е§1ег очистном блоке. Заполнение петлевого дозатора ВЭЖХ контролировали с помощью детектора жидкости НскеП & 21е§1ег Очистного блока. Установки обоих автоматизированных устройств и результаты обобщены в таблице ниже. [Т-18]Фторид захватывали на ОМА картридж (С1). Активность элюировали с помощью смеси криптофикса (из VI) в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила (из ν2). Раствор предшественника (из ν3) добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 10 мин при 120°С. После охлаждения до 40°С добавляли 2 мл 1,5 М НС1 (из ν4) и раствор нагревали в течение 5 мин при 110°С. Смесь неочищенного продукта разводили с помощью 1,2 мл 2 М №О11 и 0,8 мл формиата аммония (1 М) из шприца 81. 1 мл ацетонитрила (из ν2) и 0,5 мл этанола (из ν5) добавляли раздельно к смеси и после этого переносили в правый шприц автоматизированного устройства СЕ Тгасег1аЪ МХ. Смесь переносили в 10 мл петлевого дозатора образца полупрепаративной ВЭЖХ, используя правый шприц СЕ Тгасег1аЪ МХ автоматизированного устройства с помощью жидкостного датчика, который контролирует окончание загрузки. Смесь загружали на полупрепаративную ВЭЖХ колонку (8упег§1 Нубго-КР, 250x10 мм, Рйепошепех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера продували через колонку со скоростью 6 мл/мин. Фракцию продукта при 9 мин собирали непосредственно в течение 50 секунд во флакон с продуктом, содержащим 15 мл основы лекарственного препарата (состоящей из фосфатного буфера, РЕС 400 и аскорбиновой кислоты). Аналитическая ВЭЖХ конечного продукта показала чрезвычайно хорошую радиохимическую и химическую чистоту. Не было обнаружено примесей больше чем 0,7 мкг/мл.
- 15 Таблица 4
Флакон VI
Флакон М2
Флакон М3
Флакон М4
Флакон М5 мг криптофикса 7 мг карбоната калия 300 мкл ацетонитрила 300 мкл воды мл ацетонитрила мг предшественника в 1,8 мл ацетонитрила мл НС1 1,5М мл этанола
Шприц 81
Картридж С1
ВЭЖХ колонка
1,2 мл ЫаОН 2,ОМ
800 мкл формиата аммония 1М
ΩΜΑ НдЫ (\л/а1ег8), кондиционированный с карбонатом калия 0,5М
Зупегд! Нубго-ВР, 250*х10 мм, Юрт 80А, РЬепотепех
ВЭЖХ растворитель
60% этанол, 40% аскорбатный буфер (5 г/л аскорбата натрия и 50 мг/л аскорбиновой кислоты)
ВЭЖХ поток мл/мин
Исходная активность[Р18]фторида 62,2 ГБк
Активность продукта 24,8 ГБк
Радиоактивная чистота продукта(ВСР) 100%
Радиохимически й выход 40% (без поправки на разложение)
Пример 7. Влияние способа очистки на радиохимическую чистоту.
Серии синтезов 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Т-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-П-метиланилина осуществляли на двух различных синтезаторах (Ескег1 & Ζϊθ^Ιθγ модульной лаборатории и СЕ 1гасег1аЬ МХ), как в целом описано в примерах 1, 3-6. Введение радиоактивных меток осуществляли с использованием 4-10 мг предшественника 2а в ацетонитриле, а также в смеси трет-амиловый спирт/ацетонитрил при 100-120°С в течение 10-20 мин (в случае введения радиоактивных меток в растворитель третамиловый спирт упаривали перед снятием защиты). Ν-Вос защитную группу удаляли путем нагревания с НС1 (1,5-2 М).
Смеси неочищенных продуктов индивидуально очищали с помощью одного из двух методов А) или В).
Метод А).
Смесь неочищенного продукта, полученную после снятия защиты, нейтрализовали с помощью смеси 2 М ΝαΟΗ и 0,1 М формиата аммония и инъецировали в полупрепаративную ВЭЖХ (например, колонка: Сешш1 С18, 10x250 мм, 5 мкм, РЬепотепех; растворитель: 70% ацетонитрил, 30% буфер формиат аммония 0,1 М с 5 мг/мл аскорбата натрия, скорость потока 3 мл/мин). Фракцию продукта собирали в колбу, содержащую около 160 мл воды с 10 мг/мл аскорбата натрия. Смесь пропускали через С18 картридж (4С18 ЗерРак епу1гоптеп1а1, Аа1ег% Картридж промывали приблизительно 8-10 мл 20% ЕЮН в воде (содержащей 10 мг/мл аскорбата натрия). В завершение, продукт элюировали с 1,5-3 мл этанола во флакон, содержащий 8,5-17 мл основы лекарственного препарата (содержащей РЕС 400, фосфатный буфер и аскорбиновую кислоту).
Метод В).
Смесь неочищенного продукта, полученную после снятия защиты, нейтрализовали с помощью смеси 2 М №ΟΙ I и 0,1 М формиата аммония и инъецировали в полупрепаративную ВЭЖХ (колонка: например: Сет1П1 С18, 10x250 мм, 5 мкм, РЬепотепех или 8упег§1 Нубго-КР, 250x10 мм, 10 мкм 80 А, РЬепотепех или 8упег§1 Нубго-КР, 250x10 мм, 4 мкм 80 А, РЬепотепех; растворитель: 60-70% этанол, 40-30% аскорбатный буфер = 5 мг/мл аскорбата; поток 3, или 4, или 6 мл/мин). Фракцию продукта непосредственно собирали во флакон, содержащий основу лекарственного препарата (содержащую РЕС 400, фосфатный буфер и аскорбиновую кислоту), получая 10-24 мл конечного лекарственного препарата. Время снижения пикового значения корректировали с помощью программного обеспечения для получения лекарственного препарата, содержащего 15% Е1ОН.
Каждый незарисованный квадрат (каждый один результат для синтеза, включающего очистку с помощью метода А, 110 экспериментов) и каждая зарисованная точка (каждый один результат для синтеза, включающего очистку с помощью метода В, 105 экспериментов) на фиг. 9 представляет собой отдельный эксперимент относительно приготовления 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Т-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-№метиланилина. Тенденцию радиохимической чистоты в корреляции с радиоактивностью
- 16 022897 конечного продукта иллюстрировали с помощью прямых на графике, отображающих основные тенденции.
Радиохимическая чистота, полученная после ВЭЖХ с изменением состава лекарственного препарата с помощью 8РЕ (метод Α), изменяется существенно (фиг. 9, незарисованные квадраты). В особенности при более высоких уровнях радиоактивности (>20 ГБк) радиохимическая чистота часто даже <95%. В отличие от этого, изменчивость является значительно ниже для метода В). Соответственно, высокие радиохимические чистоты >95% достигали при уровнях активности продукта больше чем 50 ГБк и даже больше чем 100 ГБк (фиг. 9, зарисованные точки).
Пример 8. Синтез 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3-ил)винил]-Ыметиланилина на Тгасег1аЬ ΡΧΝ
4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этоксир этокси}фенил)пиридин-3-ил]-1Ч-метиланилин
Тгасег1аЬ ΡΧΝ синтезатор адаптировали для ВЭЖХ подхода с прямым срезом (фиг. 4). [Р-18]Фторид (10 ГБк) захватывали на ОМА картридж. Α^ηε^^γε элюировали с помощью смеси карбонат калия/криптофикс/ацетонитрил/вода в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила. Раствор 8 мг 2Ь в 1,5 мл ацетонитрила добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 10 мин при 120°С. После охлаждения до 60°С добавляли 1 мл 1,5 М НС1 и реактор нагревали при 110°С в течение 5 мин. Неочищенный продукт нейтрализовали (1 мл 1 М №О11 /формиат аммония), разводили (с помощью 0,5 мл ЕЮН и 1,5 мл МеСК) и переносили на полупрепаративную ВЭЖХ колонку (8уиег§у Нуйго-КР, 250x10 мм, РНеиотеиех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера (5 г/л аскорбата натрия и 50 мг/л аскорбиновой кислоты, рН 7,0) продували через колонку со скоростью 3 мл/мин. Фракцию продукта при 10 мин (см. фиг. 10) непосредственно собирали в течение 100 с и смешивали с 15 мл основы лекарственного препарата (фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, РЕО 400). 4,2 ГБк (42% без поправки на разложение) получали через 61 мин суммарного времени синтеза. Радиохимическая чистота (определенная с помощью ВЭЖХ, 1к=3,42 мин) составляла >99%.
- 17 022897
Пример 9. Синтез 4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]метиланилина на Тгасег1аЬ ΡΧΝ
4-[(Е)-2-(4-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}фенил)винил]-1Ч-метиланилин
Тгасег1аЬ ΡΧΝ синтезатор адаптировали для ВЭЖХ подхода с прямым срезом (фиг. 4).
[Р-18]Фторид (6,85 ГБк) захватывали на ОМА картридж. Активность элюировали с помощью смеси карбонат калия/криптофикс/ацетонитрил/вода в реактор. Растворитель удаляли, в это же время нагревали под мягким потоком азота и вакуумом. Высушивание повторяли после добавления ацетонитрила. Раствор 8 мг 2с в 1,5 мл ацетонитрила добавляли к высушенному остатку и смесь нагревали в течение 10 мин при 120°С. После охлаждения до 60°С неочищенный продукт разводили с помощью 4 мл ВЭЖХ элюент и переносили на полупрепаративную ВЭЖХ колонку (8уиег§у Нубго-КР, 250x10 мм, РЬеиошеиех). Смесь 60% этанола и 40% аскорбатного буфера (5 г/л аскорбата натрия и 50 мг/л аскорбиновой кислоты, рН 7,0) продували через колонку со скоростью 3 мл/мин. Фракцию продукта при 12 мин непосредственно собирали в течение 100 с и смешивали с 15 мл основы лекарственного препарата (фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, РЕО 400).
2,54 ГБк (37% без поправки на разложение) получали через 53 мин суммарного времени синтеза. Радиохимическая чистота (определенная с помощью ВЭЖХ, !К=3,78 мин) составляла >99%.
Описание чертежей
Фиг. 1. Установки Тгасег1аЬ ΡΧΝ для очистки с изменением состава лекарственного препарата (адаптированные с помощью программного обеспечения 1гасег1аЬ).
Фиг. 2. Хроматограмма очистки с использованием 8уиег§у колонки на Ескег! & 21ед1ег модульной лаборатории (канал радиоактивности).
Фиг. 3. Аналитическая ВЭЖХ радиоактивно меченого продукта (вверху канал радиоактивности, внизу УФ-канал).
Фиг. 4. Установки Тгасег1аЬ ΡΧΝ для очистки с изменением состава лекарственного препарата (адаптированные с помощью программного обеспечения 1гасег1аЬ).
Фиг. 5. Установки Тгасег1аЬ МХ (адаптированные с помощью программного обеспечения СотОбеисе ΡΌΟ).
Фиг. 6. Установки Ескег! & Меукт очистного блока (адаптированные с помощью программного обеспечения Мобиа1-ЬаЬ).
Фиг. 7. Схематическая иллюстрация процесса и оборудования для приготовления Ρ-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарил-винил)фенил метиламинов, включающая три части: А) синтез, В) ВЭЖХ, С) приготовление лекарственного препарата; включая (1) флаконы для реагентов и растворителей, (2) реакционный сосуд, (3) целевую линию для Р-18, необязательно газовые линии, вакуум и др., (4) необязательно детектор жидкости или фильтр и др., (5) инжекторный клапан, (6) ВЭЖХ колонку, (7) клапан для снижения максимального значения, (А) спускную(ые) линию(и), (8) сосуд для сбора/разведения ВЭЖХ фракции, (9) флаконы растворителей для промывания и элюции, (10) клапан, (11) картридж, например С18 картридж для улавливания продукта, (12) клапан.
Фиг. 8. Схематическая иллюстрация процесса и оборудования для приготовления Ρ-18 меченых фторпегилированных (арил/гетероарил-винил)фенил метиламинов, включающая две части: А) синтез, В) ВЭЖХ; включая (1) флаконы для реагентов и растворителей, (2) реакционный сосуд, (3) целевую линию для Р-18, необязательно газовые линии, вакуум и др., (4) необязательно, детектор жидкости или фильтр и др., (5) инжекторный клапан, (6) ВЭЖХ колонку, (7) клапан для снижения максимального зна- 18 022897 чения.
Фиг. 9. Влияние способа очистки на радиохимическую чистоту.
Фиг. 10. Хроматограмма очистки 4-[(Е)-2-(6-{2-[2-(2-[Р-18]фторэтокси)этокси]этокси}пиридин-3ил)винил]-^метиланилина на Ескег! & 21ед1ег модульной лаборатории (канал радиоактивности)

Claims (10)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ получения соединения формулы I который включает следующие стадии.
    Стадия 1. Введение радиоактивной метки в соединение формулы II с помощью Р-18 фторирующего агента, при этом получаем соединение формулы I, если К=Н, или соединение формулы III, если К=РО:
    Стадия 2. Отщепление защитной группы РО, при этом получаем соединение формулы I, если К=РО.
    Стадия 3. Очистка соединения формулы I, где п=1-6;
    X выбирают из группы, включающей:
    a) СН,
    b) Ν;
    К выбирают из группы, включающей:
    a) Н,
    b) РО;
    РО представляет собой аминозащитную группу;
    ЬО представляет собой уходящую группу.
    На стадии 3 используют метод ВЭЖХ, где ВЭЖХ растворитель или смесь растворителей представляют собой часть препарата для инъекций соединения I, пригодного для инъекций людям, где ВЭЖХ растворитель выбирают из группы, включающей этанол, водный буфер или смесь этанол/водный буфер.
  2. 2. Способ в соответствии с п.1, где РО выбирают из группы, включающей:
    a) Вос,
    b) тритил и
    c) 4-метокситритил.
  3. 3. Способ в соответствии с п.1 или 2, где
    ЬО выбирают из группы, включающей:
    a) галоген и
    b) сульфонилокси;
    галоген представляет собой хлор, бром или йод.
  4. 4. Способ в соответствии с п.3, где сульфонилокси выбирают из группы, включающей:
    a) метансульфонилокси,
    b) п-толуолсульфонилокси,
    c) (4-нитрофенил)сульфонилокси, б) (4-бромфенил)сульфонилокси.
  5. 5. Способ в соответствии с п.1, где п=3 и Х=СН.
  6. 6. Способ в соответствии с п.1, где п=3, Х=СН, К=Вос и ЬО=метансульфонилокси.
  7. 7. Способ в соответствии с пп.1-6, где водный буфер выбирают из группы растворов: хлорид натрия, натрий-фосфатный буфер, аскорбиновая кислота, аскорбатный буфер или их смесей.
  8. 8. Способ в соответствии с пп.1-7, где ВЭЖХ растворитель представляет собой смесь этанола и водного буфера, включающего аскорбиновую кислоту или соли аскорбиновой кислоты.
  9. 9. Способ в соответствии с пп.1-8, где используют 10-50 мкмоль соединения формулы II.
  10. 10. Способ в соответствии с пп.1-9, где способ осуществляют в виде полностью автоматизированного процесса.
EA201201645A 2010-06-04 2011-05-30 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ F-18 МЕЧЕНЫХ Аβ ЛИГАНДОВ EA022897B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP10164949 2010-06-04
PCT/EP2011/058820 WO2011151283A1 (en) 2010-06-04 2011-05-30 Method for production of f-18 labeled amyloid beta ligands

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201201645A1 EA201201645A1 (ru) 2013-05-30
EA022897B1 true EA022897B1 (ru) 2016-03-31

Family

ID=44584930

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201201645A EA022897B1 (ru) 2010-06-04 2011-05-30 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ F-18 МЕЧЕНЫХ Аβ ЛИГАНДОВ

Country Status (22)

Country Link
US (2) US20130209363A1 (ru)
EP (1) EP2579902B2 (ru)
JP (2) JP5869562B2 (ru)
KR (1) KR101761451B1 (ru)
CN (1) CN103269724B (ru)
AU (1) AU2011260421B2 (ru)
BR (1) BR112012030935B1 (ru)
CA (1) CA2801530C (ru)
DK (1) DK2579902T4 (ru)
EA (1) EA022897B1 (ru)
ES (1) ES2642086T5 (ru)
HR (1) HRP20171397T4 (ru)
HU (1) HUE033237T2 (ru)
IL (1) IL223358A (ru)
LT (1) LT2579902T (ru)
MX (1) MX345069B (ru)
PL (1) PL2579902T5 (ru)
PT (1) PT2579902T (ru)
SG (1) SG185782A1 (ru)
SI (1) SI2579902T2 (ru)
TW (1) TWI583397B (ru)
WO (1) WO2011151283A1 (ru)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112012030935B1 (pt) 2010-04-06 2020-11-17 Life Molecular Imaging Sa método para a produção de ligantes de beta-amiloide marcados com f-18
JP2013532136A (ja) * 2010-06-04 2013-08-15 ピラマル イメージング ソシエテ アノニム Ｆ−１８標識アミロイド・ベータ・リガンドの製造方法
AU2011351550B2 (en) * 2010-12-29 2017-02-02 Ge Healthcare Limited Eluent solution
PT2723394T (pt) 2011-06-21 2018-07-30 Life Molecular Imaging Sa Formulações de estilbeno fluorado, apropriadas para a imagiologia por pet
IN2014MN00875A (ru) * 2011-10-19 2015-04-17 Piramal Imaging Sa
KR101326000B1 (ko) * 2012-01-30 2013-11-07 재단법인 아산사회복지재단 수소이온 농도가 조절된 플루오린-18의 용리액 제조 및 이를 이용한 플루오린-18의 표지방법
GB201318450D0 (en) * 2013-10-18 2013-12-04 Ge Healthcare Ltd Closed evaporation system
WO2018089491A1 (en) * 2016-11-08 2018-05-17 The Regents Of The University Of California Methods for multi-dose synthesis of [f-18]fddnp for clinical settings
WO2018168643A1 (ja) * 2017-03-17 2018-09-20 日本メジフィジックス株式会社 イオフルパンの製造方法
CN111868062B (zh) * 2018-01-24 2023-07-07 Ac免疫有限公司 制备显像化合物的方法
CN109867591B (zh) * 2019-03-12 2020-11-06 浙江大学 18f标记的aie荧光/pet双模态探针及其制备方法和应用
WO2024107620A1 (en) * 2022-11-14 2024-05-23 Eli Lilly And Company Polymorphic forms of florbetapir precursor av-105

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5723103A (en) * 1994-12-09 1998-03-03 Vanderbilt University Substituted benzamides and radioligand analogs and methods of use
ATE473019T1 (de) 2002-11-05 2010-07-15 Ion Beam Applic Sa Stabilisierung von wässerigen zusammensetzungen von 18f-markiertem 2-fluoro-2-deoxy-d-glukose mit ethanol
KR100789847B1 (ko) * 2004-12-15 2007-12-28 (주)퓨쳐켐 알코올 용매하에서 유기플루오로 화합물의 제조방법
SI2213652T1 (sl) * 2004-12-17 2015-03-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Derivati stilbena in njihova uporaba za vezavo in prikaz amiloidnih plakov
JP4738419B2 (ja) * 2005-11-30 2011-08-03 富士フイルムＲｉファーマ株式会社 アミロイドの凝集及び／又は沈着に起因する疾患の診断薬及び治療薬
EP2363392B1 (en) 2006-03-30 2017-05-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Styrylpyridine derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
WO2008009444A1 (en) 2006-07-19 2008-01-24 Van Dulmen, Adrianus, A. Use of ethanol for stabilizing a single-vial liquid formulation of a radiolabeled peptide
AU2008324186B2 (en) 2007-11-07 2014-02-13 Ge Healthcare Bv Stabilization of radiopharmaceuticals
PE20120007A1 (es) 2008-12-31 2012-01-16 Avid Radiopharmaceuticals Inc Sintesis de estirilpiridinas radiomarcadas con 18f a partir de precursores de tosilato y composiciones farmaceuticas estables de estas
WO2011003591A1 (en) * 2009-07-10 2011-01-13 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Usage of low to medium-pressure liquid chromatography for the purification of radiotracers
BR112012030935B1 (pt) 2010-04-06 2020-11-17 Life Molecular Imaging Sa método para a produção de ligantes de beta-amiloide marcados com f-18

Also Published As

Publication number Publication date
TW201204395A (en) 2012-02-01
SI2579902T2 (sl) 2019-10-30
CN103269724B (zh) 2017-06-23
WO2011151283A1 (en) 2011-12-08
BR112012030935B1 (pt) 2020-11-17
CA2801530C (en) 2017-09-12
EP2579902A1 (en) 2013-04-17
US9592308B2 (en) 2017-03-14
EP2579902B2 (en) 2019-08-14
AU2011260421B2 (en) 2015-06-04
EP2579902B1 (en) 2017-07-12
ES2642086T3 (es) 2017-11-15
LT2579902T (lt) 2017-09-25
PT2579902T (pt) 2017-08-17
TWI583397B (zh) 2017-05-21
CN103269724A (zh) 2013-08-28
PL2579902T5 (pl) 2020-08-10
US20160184465A1 (en) 2016-06-30
MX345069B (es) 2017-01-16
HRP20171397T1 (hr) 2017-11-03
AU2011260421A1 (en) 2013-01-10
SI2579902T1 (sl) 2017-10-30
JP5869562B2 (ja) 2016-02-24
IL223358A (en) 2015-09-24
ES2642086T5 (es) 2020-04-13
JP2016047831A (ja) 2016-04-07
US20130209363A1 (en) 2013-08-15
KR20130136423A (ko) 2013-12-12
JP2013532137A (ja) 2013-08-15
PL2579902T3 (pl) 2017-12-29
EA201201645A1 (ru) 2013-05-30
DK2579902T4 (da) 2019-10-21
CA2801530A1 (en) 2011-12-08
KR101761451B1 (ko) 2017-07-25
HUE033237T2 (hu) 2017-11-28
BR112012030935A2 (pt) 2016-11-01
MX2012014117A (es) 2013-07-03
HRP20171397T4 (hr) 2019-11-15
DK2579902T3 (en) 2017-08-28
SG185782A1 (en) 2013-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA022897B1 (ru) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ F-18 МЕЧЕНЫХ Аβ ЛИГАНДОВ
JP2016028103A (ja) Ｆ−１８標識アミロイド・ベータ・リガンドの製造方法
EA025823B1 (ru) Способ получения f-18 меченых лигандов бета-амилоида
US20140243533A1 (en) Method for production of f-18 labeled a-beta ligands

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

TC4A Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent