NO342090B1 - Styrylpyridinderivater og deres anvendelse til binding og avbilding av amyloidplakker - Google Patents

Styrylpyridinderivater og deres anvendelse til binding og avbilding av amyloidplakker Download PDF

Info

Publication number
NO342090B1
NO342090B1 NO20084590A NO20084590A NO342090B1 NO 342090 B1 NO342090 B1 NO 342090B1 NO 20084590 A NO20084590 A NO 20084590A NO 20084590 A NO20084590 A NO 20084590A NO 342090 B1 NO342090 B1 NO 342090B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
compound
mmol
nmr
compounds
amyloid
Prior art date
Application number
NO20084590A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20084590L (no
Inventor
Hank F Kung
Mei-Ping Kung
Original Assignee
Univ Pennsylvania
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Pennsylvania filed Critical Univ Pennsylvania
Publication of NO20084590L publication Critical patent/NO20084590L/no
Publication of NO342090B1 publication Critical patent/NO342090B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/92—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with a hetero atom directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/94—Oxygen atom, e.g. piperidine N-oxide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/041—Heterocyclic compounds
    • A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
    • A61K51/0455—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/06—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom
    • C07D213/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom containing only one pyridine ring

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Denne oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for avbilding av amyloidavsetninger, og styrylpyridinforbindel-ser og fremgangsmåter for fremstilling av radioaktivt merkede styrylpyridin-forbindelser som kan anvendes ved avbilding av amyloidavsetninger. Denne oppfinnelsen vedrører også forbindelser og fremgangsmåter for fremstiling av forbindelser for inhibering av aggre-gasjonen av amyloidproteiner for å danne amyloidavsetninger, og en fremgangsmåte for avlevering av et terapeutisk middel til amyloidavsetninger,

Description

Oppfinnelsens bakgrunn
Oppfinnelsens område
Denne oppfinnelsen vedrører nye styrylpyridinforbindelser, anvendelsene derav i diagnostisk avbildning og inhibering av amyloid-p-aggregasjon, og fremgangsmåter forfremstilling av disse forbindelsene.
Teknikkens stand
Alzheimers sykdom (AD) er en progressiv neurodegenerativ forstyrrelse kjennetegnet ved kognitiv reduksjon, irreversibelt hukommelsestap, desorientering og språkforstyrrelse. Post mortem-undersøkelse av AD-hjernesnitt avslører rikelig med senilplakker (SP-er) sammensatt av peptider av type amyloid-p (Ap) og et stort antall nervefibrillfloker (NFT-er) dannet av filamenter med svært fosforylerte tau-proteiner (for nyereoversikter og ytterligere henvisninger, se Ginsberg, S.D. et al., "Molecular Pathology of Alzheimer's Disease and Related Disorders", i Cerebral Cortex: Neurodegenerative and Agerelated Changes in Structure and Function of Cerebral Cortex, Kluwer Academic/Plenum NY (1999), s. 603-654; Vogelsberg-Ragaglia, V. et al., "Cell Biology of Tau and CytoskeletalPathology in Alzheimer's Disease", Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999), s. 359-372).
Amyloidose er en tilstand som er kjennetegnet ved akkumuleringen av forskjellige uoppløselige fibrillproteiner i vevene til en pasient. En amyloidavsetning dannes ved aggregasjonen av amyloidproteiner, etterfulgt av den videre kombinasjonen av aggregater og/eller amyloidproteiner. Dannelse og akkumulering av aggregater av peptider av type amyloid-p (Ap) i hjernen er avgjørende faktorer i utviklingen og progresjonen av AD.
I tillegg til amyloidavsetningers rolle ved Alzheimers sykdom er tilstedeværelsen av amyloidavsetninger blitt påvist ved slike sykdommer som middelhavsfeber, Muckle-Wells-syndrom, idiopatisk myelom, amyloidpolyneuropati, amyloidkardiomyopati,systemisk senilamyloidose, amyloidpolyneuropati, arvelig hjerneblødning med amyloidose, Downs syndrom, skrapesyke, Creutzfeldt-Jacob-sykdom, Kuru, Gerstamnn-StrausslerScheinker-syndrom, medullarkarsinom i skjoldbruskkjertelen, isolert atrialamyloid, p2mikroglobulinamyloid hos dialysepasienter, inklusjonslegememyositt, p2-amyloidavsetningerved muskelsvinnsykdom og Langerhans øyer-diabetes type II-insulinom.
Fibrillaggregatene av amyloidpeptider, Api-40 og Api-42, er viktige metabolskepeptider avledet fra amyloidforløperprotein som finnes i senilplakker og cerebrovaskulære amyloidavsetninger hos AD-pasienter (Xia, W. et al., J. Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 97:92999304 (2000)). Forebyggelse og reversering av Ap-plakkdannelse tas i bruk som enbehandling for denne sykdommen (Selkoe, D., J. JAMA, 283'. 1615-1617 (2000); Wolfe, M.S.et al., J. Med. Chem., 41:6-9 (1998); Skovronsky, D.M. og Lee, V.M., Trends Pharmacol.Sci., 21:161-163 (2000)).
Arvelig AD (FAD) forårsakes av multippelmutasjoner i A-forløperproteinet(APP), presenilin 1(PS1)- og presenilin 2(PS2)-gener (Ginsberg, S.D. et al., "MolecularPathology of Alzheimer's Disease and Related Disorders", i Cerebral Cortex: Neurodegenerative and Age-related Changes in Structure and Function of Cerebral Cortex, KluwerAcademic/Plenum, NY (1999), s. 603-654; Vogelsberg-Ragaglia, V. et al., "Cell Biology ofTau and Cytoskeletal Pathology in Alzheimer's Disease", Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999), s. 359-372).
Selv om de nøyaktige mekanismene som ligger under AD ikke er fullstendig forstått, øker alle patogene FAD-mutasjoner som så langt er blitt studert, produksjon av denmest amyloidogene 42-43 aminosyrer lange formen av Ap-peptidet. Således synes, i detminste ved FAD, dysregulering av Ap-produksjon å være tilstrekkelig for å indusere enkaskade av hendelser som fører til nervedegenerasjon. Faktisk antyder amyloid-kaskadehypotesen at dannelse av ekstracellulære fibrill-Ap-aggregater i hjernen kan være envesentlig hendelse ved AD-patogenese (Selkoe, D.J., "Biology of p-amyloid Precursor Proteinand the Mechanism of Alzheimer's Disease", Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999), s. 293-310; Selkoe, D.J., J. Am. Med. Assoc., 283:16151617 (2000); Naslund, J. et al., J. Am. Med. Assoc., 283:1571-1577 (2000); Golde, T.E. etal., Biochimica et Biophysica Acta, 1502:172-187 (2000)).
Forskjellige fremgangsmåter for å forsøke å inhibere produksjonen og redusere akkumuleringen av fibriII-Ap i hjernen evalueres for tiden som potensielle terapier for AD(Skovronsky, D.M. og Lee, V.M., Trends Pharmacol. Sci., 21:161-163 (2000); Vassar, R. etal.. Science, 286:735-741 (1999); Wolfe, M.S. et al., J. Med. Chem., 41:6-9 (1998); Moore,C.L. et al., J. Med. Chem., 43:3434-3442 (2000); Findeis, M.A., Biochimica et BiophysicaActa, 1502:76-84 (2000); Kuner, P., Bohrmann et al., J. Biol. Chem., 275:1673-1678(2000)). Det er derfor av interesse å utvikle ligander som spesifikt binder fibrill-Apaggregater. Ettersom ekstracellulære SP-er er tilgjengelige mål, vil disse nye ligandenekunne brukes som diagnostiske redskaper in vivo og som prober for å visualisere den progressive avsetningen av Ap i studier av AD-amyloidogenese hos levende pasienter.
I denne hensikt er det blitt rapportert flere interessante fremgangsmåter for utvikling av fibrill-Ap-aggregatspesifikke ligander (Ashburn, T.T. et al., Chem. Biol., 3:351358 (1996); Han, G. et al., J. Am. Chem. Soc., 118:4506-4507 (1996); Klunk, W.E. et al..Biol. Psychiatry, 35:627 (1994); Klunk, W.E. et al., Neurobiol. Aging, 16:541-548 (1995);Klunk, W.E. et al.. Society for Neuroscience Abstract, 23:1638 (1997); Mathis, C.A. et al., Proc. Xllth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Sverige: 94-95 (1997); Lorenzo, A. ogYankner, B.A., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91:12243-12247 (1994); Zhen, W. et al., J. Med.Chem., 42:2805-2815 (1999)). Den mest attraktive fremgangsmåten er basert påhøykonjugert chrysamin-G (CG) og Kongo-rødt (CR), og det sistnevnte er blitt brukt tilfluorescensfarging av SP-er og NFT-er i AD-hjernesnitt post mortem (Ashburn, T.T. et al.,Chem. Biol., 3:351-358 (1996); Klunk, W.E. et al., J. Histochem. Cytochem., 37:1273-1281
(1989)). Inhiberingskonstantene (Ki) for binding til fibrill-Ap-aggregater av CR, CG og 3'brom- og 3'-jodderivater av CG er henholdsvis 2800, 370, 300 og 250 nM (Mathis, C.A. etal., Proc. Xllth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Sverige: 94-95 (1997)). Disseforbindelsene er blitt påvist å binde selektivt til Ap(l-40)-peptidaggregater in vitro samt tilfibrill-Ap-avsetninger i AD-hjernesnitt (Mathis, C.A. et al., Proc. Xllth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Sverige: 94-95 (1997)).
Det er flere potensielle fordeler ved å avbilde Ap-aggregater i hjernen.Avbildningsteknikken vil forbedre diagnose ved å identifisere potensielle pasienter med overmål av Ap-plakker i hjernen; de kan derfor sannsynligvis utvikle Alzheimers sykdom.Det vil også være nyttig å overvåke progresjonen av sykdommen. Når antiplakklegemiddelbehandlinger blir tilgjengelige, vil avbildning av Ap-plakker i hjernen kunne gi et vesentligredskap for overvåking av behandling. En enkel, ikke-inngripende metode for påvisning ogkvantifisering av amyloidavsetninger hos en pasient har det således vært søkt ivrig etter. Fortiden involverer påvisning av amyloidavsetninger histologisk analyse av biopsi- ellerautopsimaterialer. Begge metodene har ulemper. En autopsi kan f.eks. bare brukes til en diagnose post mortem.
Den direkte avbildning av amyloidavsetninger in vivo er vanskelig, ettersom avsetningene har mange av de samme fysiske egenskapene (f.eks. densitet og vanninnhold) som normale vev. Forsøk på å avbilde amyloidavsetninger ved å bruke magnetisk resonansavbildning (MRI) og datamaskinassistert tomografi (CAT) har vært skuffende, og har påvist amyloidavsetninger bare under visse gunstige betingelser. I tillegg har forsøk for å merke amyloidavsetninger med antistoffer, serumamyloid P-protein eller andre probemolekyler gitten viss selektivitet på periferien av vev, men har gitt for dårlig avbildning av vevsinteriører.
Potensielle ligander for påvisning av Ap-aggregater i den levende hjerne måkrysse den intakte blod-hjernebarriere. Hjerneopptak kan således forbedres ved å anvendeligander med forholdsvis mindre molekylstørrelse (sammenlignet med Kongo-rødt) og forøktlipofilisitet. Høykonjugerte tioflaviner (S og T) anvendes vanligvis som fargestoffer for farging av Ap-aggregatene i AD-hjernen (Elhaddaoui, A. et al., Biospectroscopy, 1:351-356(1995)).
Et svært lipofilt sporstoff, [18F]FDDNP, for binding av både floker (hovedsakelig sammensatt av hyperfosforylert tau-protein) og plakker (inneholdende Ap-proteinaggregater) er blitt rapportert (Shoghi-Jadid, K. et al.. Am. J. Geriatr. Psychiatry, 2002,10:24-35). Ved å anvende positronemisjonstomografi (PET), ble det rapportert at dettesporstoffet spesifikt merket avsetninger av plakker og floker hos ni AD-pasienter og sjusammenligningsindivider (Nordberg, A., Lancet Neurol., 2004, 3:519-27). Ved å anvende enny farmakokinetisk analyseprosedyre kalt den relative residenstid i hjerneregionen av interesse versus hjernebroen, ble forskjeller mellom AD-pasienter og sammenligningsindivider demonstrert. Den relative oppholdstid var betydelig høyere hos AD-pasienter. Dettekompliseres ytterligere ved et interessant funn av at FDDNP konkurrerer med noen NSAID
er om binding til AØ-fibriller in vitro og til Ap-plakker ex vivo (Agdeppa, E.D. et al., 2001;Agdeppa, E.D. et al., Neuroscience, 2003, 117:723-30).
Avbildning av p-amyloid i hjernen til AD-pasienter ved å anvende et benzotiazolanilinderivat, ["CjO-OH-BTA-l (også henvist til som ["CjPIB), ble nylig rapportert(Mathis, C.A. et al., Curr. Pharm. Des., 2004, 10:1469-92; Mathis, C.A. et al., Arch. Neurol.,2005, 62:196-200). I motsetning til det som ble observert for [18F]FDDNP, binder [11C]6OH-BTA-1 seg spesifikt til fibrill-Ap in vivo. Pasienter med diagnostisert mild AD vistemarkert retensjon av ["Cje-OH-BTA-l i hjernebarken, kjent for å inneholde store mengderav amyloidavsetninger ved AD. Hos AD-pasientgruppen ble ["Cje-OH-BTA-l-retensjonenforøkt mest fremtredende i den fremre hjernebark. Store økninger ble også observert i parietale, temporære og oksipitale hjernebarker, og i striatum. ["Cje-OH-BTA-l-retensjonvar ekvivalent hos AD-pasienter og sammenligningsindivider i områder som er kjent for åvære forholdsvis upåvirket av amyloidavsetning (slik som hvitt stoff under barken, hjernebroen og lillehjernen). Nylig er en annen "C-merket, Ap-plakkrettet probe, et stilbenderivat["CjSB-13, blitt studert. Binding in vitro ved anvendelse av [3H]SB-13 tyder på atforbindelsen oppviste utmerket bindingsaffinitet, og binding kan klart måles i det grå stoffet i hjernebarken, men ikke i det hvite stoff ved AD-tilfeller (Kung, M.-P. et al., Brain Res.,2004, 1025:98-105. Det var en svært lav spesifikk binding i hjernebarkvevshomogenater frakontrollhjerner. Kd-verdiene for [3H]SB-13 i AD-hjernebarkhomogenater var 2,4 ± 0,2 nM.Høy bindingskapasitet og sammenlignbare verdier ble observert (14-45 pmol/mg protein)(Id.). Som forventet, fremkom det en høy akkumulering av ["CjSB-13 i fremre hjernebark(sannsynligvis et område som inneholder en høy tetthet av Ap-plakker) hos lite til middelsrammede AD-pasienter, men ikke hos alderstilpassede kontrollindivider (Verhoeff, N.P. etal.. Am. J. Geriatr. Psychiatry, 2004, 12:584-95). Ono. M et al, in Nucl Med Biol. 200505,32(4) 320-335 described synthesis and biological evaluation of (E)-3-styrylpyridinederivatives as amyloid imaging agents for Alzheimer's disease.
Det ville være nyttig å ha en ikke-inngripende teknikk for avbildning ogkvantifisering av amyloidavsetninger hos en pasient. I tillegg ville det være nyttig å ha forbindelser som inhiberer aggregasjonen av amyloidproteiner for dannelse av amyloidavsetninger, og en fremgangsmåte for å bestemme en forbindelses evne til å inhibere amyloidproteinaggregasjon.
Oppsummering av oppfinnelsen
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer nye forbindelser med formel I.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også diagnostiske preparater som omfatter en radioaktivt merket forbindelse med formel I, Ia, II og en farmasøytisk akseptabel bærer eller fortynner.
Oppfinnelsen tilveiebringer videre en fremgangsmåte for avbildning av amyloidavsetninger, hvor fremgangsmåten omfatter å innføre i en pasient en påvisbar
mengde av en merket forbindelse med formel I eller farmasøytisk akseptabelt salt, ester, amid eller prolegemiddel derav.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også forbindelser med formel I, eller farmasøytisk akseptabelt salt, ester, amid eller prolegemiddel derav for anvendelse i en fremgangsmåte for inhibering av aggregasjonen av amyloidproteiner.
Et ytterligere aspekt av denne oppfinnelsen er rettet mot fremgangsmåter og mellomprodukter som kan anvendes til syntetisering av de amyloidinhiberende og -avbildende forbindelser med formel I.
Beskrivelse av figurene
Fig. 1viser en film som skriver seg fra avbildningen av en forbindelse ifølge den foreliggende oppfinnelse.
Fig. 2viser hjerne- og benopptak av styrylpyridin 2 sammenlignet med enstilbenanalog.
Fig. 3viser filmautoradiografi som sammenligner styrylpyridin 2 med en stilbenanalog.
Fig. 4viser en metningskurve for styrylpyridin 2 i AD-hjernehomogenater.
Fig. 5viser flere forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse og deres respektive bindingsdata.
Fig. 6viser in v/tro-autoradiografi av makrorekkehjernesnitt forreferanseforbindelser.
Fig. 7viser in v/tro-stabiliteten til F-18-merkede sporstoffer mot sammenslåttemikrosomalfraksjoner fra menneskelever. Sporstoffer i PBS uten mikrosomalfraksjoner tjente som kontroll. Verdier (% av uendret moderforbindelse) var gjennomsnitt av duplikater.
Fig. 8viser spesifikk binding av [18F]2 til sammenslåtte AD- ogkontrollhjernevevshomogenater. Grått og hvitt stoff ble dissekert fra hjernebarkregionene. Høyspesifikk binding ble påvist hovedsakelig i grått stoff. De presenterte verdier er gjennomsnittet ± SEM av seks målinger. Forholdsvis lav binding ble observert i hvitstoffhomogenater. I motsetning til dette oppviste homogenater av kontrollhjerne, enten grått eller hvitt stoff, signifikant lavere spesifikk binding av [18F]2.
Fig. 9viser (topp) HPLC-profil for forbindelse [18F]2; (bunn) UV-spor av ikkeradioaktiv referanseforbindelse 2 (350 nm). HPLC-betingelse: Agilent 1100-serien;Phenomenex Gemini C-18-kolonne, 5 jim, 250 x 4,6 mm, CHsCH-Zammoniumformiatbuffer(1 mM) 8/2 v/v, 1 ml/min. Rt 6,34 min (radioaktiv), 6,05 min (UV). Gap i retensjonstid skyldtes detektorkonfigurasjonen.
Nærmere beskrivelse av oppfinnelsen
En forbindelse med formel I:
A1-A2
Ag-Aopj2
R
I
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvor
n er én;
minst én, ikke mer enn tre, av Ai, A2, As, A4 og As er N, mens de øvrige er -CHeller -CR2 etter hva som er mulig;
R1 er NRaRb(CH2)P-, hvor Ra og Rb er uavhengig hydrogen eller Ci-4-alkyl, og p
er 0;
R2 er:
.30
,31
hvor q er et helt tall fra 1 til 5; R30, R31, R32 og R33 er i hvert tilfelle hydrogen; Z er valgt fra halogen, halogensubstituert benzoyloksy, halogen-substituert benzyloksy, halogensubstituert fenyl(Ci-4)alkyl, halogensubstituert aryloksy og halogensubstituert Ce-io-aryl,R7 og R8 er i hvert tilfelle hydrogen;
og hvor nevnte halogen i hvert tilfelle er valgt fra I, 123I, 125I, 131I, Br, 76Br, 77Br, F og 18F. Spesielt foretrukne forbindelser er de som inneholder 18F. Forbindelser som inneholder 123I, er også spesielt foretrukket.
I foretrukne utførelsesformer er R1 enten i meta- eller parastillingen i forhold tilden respektive bro. En foretrukket verdi for R1 er NRaRb, hvor Ra og Rb uavhengig av hverandre er hydrogen eller Ci-4-alkyl. I denne utførelsesformen er det foretrukket at C1-4-alkyl er metyl. Fortrinnsvis er én av Ra og Rb hydrogen, mens den andre er Ci-4-alkyl, sliksom metyl. Mest foretrukket er både Ra og Rb metyl. Også foretrukket er hvilke som helst prolegemiddelgrupper som etter administrering gir en foretrukket verdi for R1. Slike prolegemiddelgrupper er godt kjent på fagområdet.
I foretrukne utførelsesformer av formel I er R2 enten i meta- eller parastillingeni forhold til den respektive broen. Mest foretrukket er q 1-4, spesielt 3 eller 4.
Anvendbare forbindelser omfatter de forbindelsene hvor minst én, ikke mer enn tre, av Ai, A2, As, A4 og As er N, og de øvrige er -CH eller -CR2 etter hva som er mulig.Det er mest foretrukket at N er i A4-stilling.
Foretrukne forbindelser med formel I omfatter de forbindelsene hvor A4 er N, som har den følgende formel:
H
,Z q
hvor Ra og Rb er valgt uavhengig av hverandre fra hydrogen og Ci-4-alkyl, Z er sombeskrevet ovenfor, og q er et helt tall fra 1 til 5. Eksempler på foretrukne forbindelser omfatter:
'2
hvor q er et helt tall fra 1 til 4; slik som:
H
■N
H
H
Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse kan også inneholde en
radioaktiv isotop av karbon som den radioaktive markør. Dette henviser til en forbindelse som omfatter ett eller flere radioaktive karbonatomer, fortrinnsvis nC, med en spesifikk aktivitet som er over den til bakgrunnsnivået for det atomet. I dette henseende er det godt kjent at naturlig forekommende grunnstoffer er til stede i form av varierende isotoper, hvorav noen er radioaktive isotoper. Radioaktiviteten til de naturlig forekommende grunnstoffer er et resultat av den naturlige fordeling og rikelighet av disse isotopene, og henvises vanligvis til som et bakgrunnsnivå. De karbonmerkede forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse har en spesifikk aktivitet som er større enn den til den naturlige rikelighet, og derfor over bakgrunnsnivået. Preparatet som er krevd her, som omfatter én eller flere karbonmerkede forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse, vil ha en slik mengde av forbindelsen at preparatet kan brukes til sporing, avbilding, strålebehandling og lignende.
I visse utførelsesformer av forbindelsene som er beskrevet her, er et halogen.
fortrinnsvis 18F, bundet til styrylpyridinryggraden gjennom en PEG-kjede, som har etvariabelt antall etoksygrupper. Det fluorerte styrylpyridin, 2, oppviste høy bindingsaffinitet (Ki = 2,5 ± 0,4 nM). Dimetylaminoanalogen oppviste den største affiniteten. Dette er i motsetning til stilbenanaloger, som er tilbøyelige til å ha høyere affinitet når de er monometylaminosubstituert. Som vist i reaksjonsskjemaene 1-3 her, ble radioaktiv merking utførtmed hell, hvorved man fikk målforbindelsene. Syntesen av forbindelse 2 i reaksjonsskjema 5
resulterte i en fremstillingstid på ca. 60 minutter; radiokjemisk utbytte på ca. 35 % (nedbrytning korrigert); radiokjemisk renhet > 98 %; og spesifikk aktivitet fra ca. 1000 til ca. 1500 Ci/mmol. Biofordeling in vivo av et 18F-pegylert styrylpyridin hos normale musoppviste utmerkede hjernepenetrasjoner og hurtige utvaskinger etter en intravenøs injeksjon. Autoradiografi av AD-hjernesnitt av 2 post mortem bekreftet den spesifikke bindingenrelatert til tilstedeværelsen av Ap-plakker.
Foretrukne verdier under omfanget til Ce-io-aryl omfatter fenyl, naftyl ellertetrahydronaftyl. Foretrukne verdier under omfanget av heteroaryl omfatter tienyl, furyl, pyranyl, pyrrolyl, pyridinyl, indolyl og imidazolyl. Foretrukne verdier under omfanget av heteroring omfatter piperidinyl, pyrrolidinyl og morfolinyl. En foretrukket utførelsesform av Ce-io-aryl, heteroaryl, heteroring, heteroring(Ci-4)alkyl eller Cs-e-sykloalkyl inneholder en ringsubstituert med én av de følgende: Ci-4-alkyltio, Ci-4alkylsulfonyl, metoksy, hydroksy,dimetylamino eller metylamino.
Forbindelsene med formlene I kan også være solvatiserte, spesielt hydratiserte. Hydratisering kan inntre under fremstilling av forbindelsene eller preparatene som omfatter forbindelsene, eller hydratiseringen kan inntre over tid på grunn av forbindelsenes hygroskopiske natur. I tillegg kan forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse foreligge i usolvatiserte så vel som solvatiserte former med farmasøytisk akseptable løsemidler, slik som vann, etanol og lignende. Generelt anses de solvatiserte formene som ekvivalente med de usolvatiserte formene for den foreliggende oppfinnelses formål.
Når hvilken som helst variabel opptrer mer enn én gang i hvilken som helst bestanddel eller i formel I, er dens definisjon i hvert tilfelle uavhengig av dens definisjon i ethvert annet tilfelle. Dessuten er kombinasjoner av substituenter og/eller variabler bare tillatt dersom slike kombinasjoner resulterer i stabile forbindelser.
Uttrykket "alkyl" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til både rettkjedede og forgrenede radikaler med opptil 8 karbonatomer, fortrinnsvis 6 karbonatomer, mer foretrukket 4 karbonatomer, slik som metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, t-butyl og isobutyl.
Uttrykket "alkoksy" er her brukt i betydningen et rettkjedet eller forgrenet alkylradikal, som definert ovenfor, med mindre kjedelengden er begrenset, bundet til et oksygenatom, inkludert metoksy, etoksy, n-propoksy, isopropoksy og lignende. Fortrinnsviser alkoksykjeden 1-6 karbonatomer lang, mer foretrukket 1-4 karbonatomer lang.
Uttrykket "monoalkylamin" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til en aminogruppe som er substituert med én alkylgruppe, som definert ovenfor.
Uttrykket "dialkylamin" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til en aminogruppe som er substituert med to alkylgrupper, som definert ovenfor.
Uttrykket "halo" eller "halogen" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til klor, brom, fluor eller jod og deres isotoper. Uttrykket "radiohalogen" henviser spesifikt til radioaktive halogenisotoper.
Uttrykket "haloalkyl" henviser, slik det er anvendt her, til hvilken som helst av de ovenfor nevnte alkylgrupper substituert med ett eller flere klor-, brom-, fluor- eller jodatomer, idet fluor og klor er foretrukket, slik som klormetyl, jodmetyl, trifluormetyl, 2,2,2trifluoretyl og 2-kloretyl.
Uttrykket "alkyltio" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til en tioeter med strukturen: R-S, hvor R er Ci-4-alkyl, som definertovenfor.
Uttrykket "alkylsulfonyl" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til et sulfon med strukturen: R-SO?, hvor R er Ci-4-alkyl, somdefinert ovenfor.
Uttrykket "aryl" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til monosykliske eller bisykliske, aromatiske grupper inneholdende 6-12karbonatomer i ringdelen, fortrinnsvis 6-10 karbonatomer i ringdelen, slik som fenyl, naftyleller tetrahydronaftyl.
Uttrykket "heteroring" eller "heterosyklisk ring" representerer, slik det er brukt her, bortsett fra når noe annet er angitt, et stabilt 5-7-leddet, monoheterosyklisk ringsystemsom kan være mettet eller umettet, og som består av karbonatomer og fra 1 til 3 heteroatomer valgt fra gruppen bestående av N, O og S, og hvor nitrogen- ogsvovelheteroatomet eventuelt kan være oksidert. Spesielt anvendbare er ringer som inneholder ett nitrogenatom kombinert med ett oksygen- eller svovelatom, eller tonitrogenheteroatomer. Eksempler på slike heterosykliske grupper omfatter piperidinyl, pyrrolyl, pyrrolidinyl, imidazolyl, imidazinyl, imidazolidinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, oksazolyl, oksazolidinyl, isoksazolyl, isoksazolidinyl, tiazolyl, tiazolidinyl, isotiazolyl, homopiperidinyl, homopiperazinyl, pyridazinyl, pyrazolyl og pyrazolidinyl, mest foretrukket tiamorfolinyl, piperazinyl og morfolinyl.
Uttrykket "heteroatom" brukes her i betydningen et oksygenatom ("O"), et svovelatom ("S") eller et nitrogenatom ("N"). Det vil forstås at når heteroatomet er nitrogen, kan det danne en NRR-rest hvor R-gruppene uavhengig av hverandre kan værehydrogen eller Ci-4-alkyl, C2-4-aminoalkyl, Ci-4-haloalkyl eller halobenzyl, eller R1 og R2danner til sammen en 5-7-leddet, heterosyklisk ring som eventuelt har O, S eller NRC iringen, hvor Rc er hydrogen eller Ci-4-alkyl.
Uttrykket "heteroaryl" henviser, slik det er anvendt her, til grupper med 5-14ringatomer; 6, 10 eller 14 K-elektroner til felles i en syklisk rekke; og inneholdende karbonatomer og 1, 2, 3 eller 4 oksygen-, nitrogen- eller svovelheteroatomer (hvor eksempler påheteroarylgrupper er: tienyl-, benzo[b]tienyl-, nafto[2,3-b]tienyl-, tiantrenyl-, furyl-,pyranyl-, isobenzofuranyl-, benzoksazolyl-, kromenyl-, xantenyl-, fenoksatiinyl-, 2H
pyrrolyl-, pyrrolyl-, imidazolyl-, pyrazolyl-, pyridyl-, pyrazinyl-, pyrimidinyl-, pyridazinyl-,indolizinyl-, isoindol- yl-, 3H-indolyl-, indolyl-, indazolyl-, purinyl-, 4H-kinolizin-yl-,isokinolyl-, kinolyl-, ftalazinyl-, naftyridinyl-, kinazolinyl-, cinnolinyl-, pteridinyl-, 4aHkarbazolyl-, karbazolyl-, a-, p- eller y-karbolinyl-, fenantridinyl-, akridinyl-, perimidinyl-,fenantrolinyl-, fenazinyl-, isotiazolyl-, fenotiazin-yl-, isoksazolyl-, furazanyl- og fenoksazinylgrupper).
Uttrykket "aralkyl" eller "arylalkyl" henviser, slik det er anvendt her, i seg selv eller som del av en annen gruppe, til Ci-e-alkylgrupper, som omtalt ovenfor, som har enarylsubstituent, slik som benzyl, fenyletyl eller 2-naftylmetyl.
Også beskrevet er er fremgangsmåter for fremstilling av forbindelser med formlene I og III.
Syntesen av dimetylaminosubstituert styrylpyridinderivat 1 og dets fluorpegylerte forbindelse 2 er vist i reaksjonsskjema 1. Forbindelse 1 ble erholdt ved hjelp av en Wittig-reaksjon mellom dietyl-4-(dimetylamino)benzylfosfonat og 6-klornikotinaldehyd vedtilstedeværelsen av kalium-tert.-butoksid i DMF (utbytte 62 %). En direkte alkylering avforbindelse 1 med 2-(2-(2-fluoretoksy)etoksy)etanol2 under anvendelse av natriumhydrid iTHF ga den fluorpegylerte forbindelse 2 (utbytte 33 %) som kan anvendes som kaldstandarden for den radioaktive merkingen. Fremstillingen av monometylaminosubstituert derivat 6 ble utført gjennom en vei som er vist i reaksjonsskjema 2. En Wittig-reaksjonmellom 4-nitrobenzylfosfonat og 6-klornikotinaldehyd i nærvær av natriummetoksid imetanol under reflukserende betingelser ga forbindelse 3 i høyt utbytte (88 %). Forbindelse 3 kan lett filtreres ut etter reaksjonen og brukes direkte i neste trinn; ingen ytterligere rensing er nødvendig. Alkyleringen av 3 med 2-(2-(2-fluoretoksy)etoksy)etanol underanvendelse av natriumhydrid i THF ga forbindelse 4 (utbytte 30 %). Nitrogruppen i forbindelse 4 ble redusert ved å anvende tinnklorid i etanol, hvorved man fikk forbindelse 5 (utbytte 58 %). Monometylering av 5 ble oppnådd ved å anvende paraformaldehyd, natriummetoksid og natriumborhydrid, hvorved man fikk forbindelse 6 i et relativt høyt utbytte (73 %).
For å fremstille ønsket F-18-merket dimetylaminosubstituert styrylpyridinderivat [18F]2 ble tosylatet 10 (reaksjonsskjema 3) brukt som forløperen. Fremstillingen av 10 startet med en mikrobølgeassistert alkylering av 3 med trietylenglykol i DMF, hvorved man fikk forbindelse 7 (utbytte 77 %). Nitrogruppen i 7 ble deretter redusert til amin ved å anvende tinnklorid, hvorved man fikk forbindelse 8 (utbytte 76 %), så etterfulgt av en dimetylering under anvendelse av paraformaldehyd og natriumcyanborhydrid i eddiksyre, hvorved man fikk forbindelse 9 i høyt utbytte (95 %). Mesylering av 9 ble først prøvd, mesylatet 9 var imidlertid svært ustabilt og dekomponerte under fremstillingen. Tosylering av 9 ble utført med hell ved å anvende tosylklorid i pyridin, hvorved man fikk ønsket tosylat 10 (utbytte 41 %) som forløperen for fremstilling av radioaktivt merket [18F]2.
Reakslonssklema 1
\ N /
\
N /
//-CiN
P(D)(OEtk
KO’Bu, DMF
\ N' /
rF
NaH, DMF
N
Reakslonssklema 2
OHC—\7"~ 01
► OSN
NaOCHg. CH^OH
OaN
pfoxoeth
■N
« ™ HZN p SnCtg
5 HCrøOH
Fo'
NaH, OMF
iXCHaOX, NaOCHa
2) NaBH»
HN
Reakslonssklema 3
K2CO3, DMF
o2n
o2n
C,
o-S'™
Cl
mikrobølge, 180 25 min
•N
N
N /
(CHgOh
NaBHaCN AeOH
.OH
■N
TsCI
.OTs
Fy
■N
1G
Reakslonssklema 4
H dNAjy A4^y.(.-o--^-);,OTS -WW. Hadd V— Kl X N
mikrobølge 10 2
For referanseformål viser reaksjonsskjemaene 5-7 en syntesevei for forbindelser med formel III. Reaksjonsskjema 5 viser en syntese av flere mellomprodukter som kan anvendes til fremstilling av forbindelsene. Reaksjonsskjemaer 6 og 7 viser syntesen av radioaktivt merkede og ikke-radioaktivt merkede forbindelser. I forbindelsene 17-110 betyr"I" i forbindelsesnavnet "mellomprodukt".
Reaksjonsskjema 5
.Bk
Br
■ ■ M*
,OH
'‘Nr. na
Reagenser og betingelser: (a) NIS, CHsCN, refluks, 1 t; (b) F-(CH2CH2O)3H, PhsP, DIAD,THF, -5 °C til rt, 2 t; (c) (1) HOCH2CH2-OTBDMS, Ph3P, DIAD, THF, -5 °C til rt, 2 t; (2) 1 %
HCI i 95 % EtOH, rt, 1 t
Reaksjonsskjema 6
.*R*=-aCOCHj. x
16:R2^-CHjCHaOH.R»»4 J
R
$
ia»-'. 4 r.-isa
1U' w; li»’
t>
19^-1
• .. 13c Wk
■X
.tf Ma>. .
■ 1<S>
'.W*'
144 —: i4e—~
*: c!
no
Reagenser og betingelser: (a) 4-substituerte styrener, K2CO3, Bu4NBr, Pd(OAc)2, DMF, 55-65°C; (b) (Bu3Sn)2, Pd(PPh3)4, toluen, 110 °C; (c) K2C03, EtOH/THF, rt, 2 t; (d) I2, THF, 0 °C til rt; (e) TMSOTf, 2,6-lutidin, DCM, 78 °C til rt.
Reakslonssklema 7
. •SnBlh . HoOi Kal115 • . Jf-TK • J.!2®
7=\
V"V OR* . HCl-EtOH . x=/ ’ ^■Xr<r‘‘0.Rr
12a p»iiL3a: ^-(CHjCHjO^CHjCH^F
15? •. [l^IIL6a:k1"-N(;CHi)a,'K.z"-^aCH3OH'.
Tsb . " ■ ■•• - i:?-- ■ i.<- /•<"':s< ’;
. I12SII16b: Ri^lSHCCHijrRj-CHjCH^OH
15e '• ■: ■■ : ••■ ■ •• ’ " • • '. • •
Tc-99m-komplekser kan fremstilles som følger. En liten mengde ikkeradioaktivt merket forbindelse (1-2 mg) oppløses i 100 jil EtOH, og det blandes med 200 jilHCI (1 N) og 1 ml Sn-glukoheptonatløsning (inneholdende 8-32 jjg SnCb og 80-320 jig Naglukoheptonat, pH 6,67) og 50 jil EDTA-løsning (0,1 N). [99mTc]perteknetat(100-200 jil; iområdet 2-20 mCi)-saltløsning tilsettes så. Reaksjonsblandingen varmes opp i 30 minutterved 100 °C, avkjøles så til romtemperatur. Reaksjonsblandingen analyseres på TLC (EtOH:kons. NHs 9:1) med hensyn til produktdannelse og renhetssjekk. Blandingen kan nøytraliseres med fosfatbuffer til pH 5,0.
Ytterligere beskrevet her er en fremgangsmåte for fremstilling av et teknetium99m-kompleks ved å omsette teknetium-99m i form av et perteknetat i nærvær av etreduserende middel og eventuelt en egnet kelator med en passende Ch-inneholdende forbindelse.
Det reduserende middel tjener til å redusere Tc-99m-perteknetatet somelueres fra en molybdenum-teknetiumgenerator i en fysiologisk saltløsning. Egnedereduserende midler er f.eks. ditionitt, formamidinsulfinsyre, diaminoetandisulfinat eller egnede metalliske reduksjonsmidler, slik som Sn(II), Fe(II), Cu(I), Ti(III) eller Sb(III). Sn(II) har vist seg å være særlig egnet.
For den ovenfor nevnte kompleksdannende reaksjon omsettes teknetium-99mmed en passende forbindelse ifølge oppfinnelsen som et salt eller i form av teknetium bundet til forholdsvis svake kelatorer. I det sistnevnte tilfellet dannes det ønskede teknetium-99m-kompleks ved hjelp av ligandbytting. Eksempler på egnede kelatorer forradionuklidet er dikarboksylsyrer, slik som oksalsyre, malonsyre, ravsyre, maleinsyre, ortoftalsyre, eplesyre, melkesyre, vinsyre, sitronsyre, askorbinsyre, salisylsyre eller derivater av disse syrene; slike fosforforbindelser som pyrofosfater; eller enolater. Sitronsyre, vinsyre, askorbinsyre, glukoheptonsyre eller et derivat derav er særlig egnede kelatorer for dette formålet, ettersom et kelat av teknetium-99m med en av disse kelatorene gjennomgår denønskede ligandbytting særlig lett.
Den mest vanlig brukte fremgangsmåten for fremstilling av [TcvO]+3N2S2komplekser er basert på tinn(II)kloridreduksjon av [99mTc]perteknetat, det vanlige utgangsmaterialet. Merkingsprosedyren er normalt basert på en Tc-99m-ligandbyttingsreaksjonmellom Tc-99m-(Sn)-glukoheptonat og N2S2-liganden. Fremstilling av tinn(II)klorid ogkonservering av det i en varig tinn(II)-form er avgjørende viktig for suksessen vedmerkingsreaksjonen. For å stabilisere det luftsensitive tinnionet er det vanlig praksis innen nukleærmedisin å bruke et lyofiIisert sett hvor tinnionet er i en lyofilisert pulverform blandet med en rikelig mengde glukoheptonat under en inertgass som nitrogen eller argon. Fremstillingen av de lyofiliserte tinnklorid-/natriumglukoheptonatsettene sikrer at merkingsreaksjonen er reproduserbar og forutsigbar. N2S2-ligandene er vanligvis luftsensitive (tioleroksideres lett av luft), og det er etterfølgende reaksjoner som fører til dekomponering av ligandene. Den vanligste og mest forutsigbare metoden for å konservere ligandene er å fremstille lyofiliserte sett som inneholder 100-500 jig av ligandene, under argon ellernitrogen.
Når forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen skal anvendes som avbildingsmidler, må de merkes med egnede radioaktive halogenisotoper. Selv om 125I-isotoper eranvendbare for laboratorietesting, vil de generelt ikke være anvendbare for faktiske diagnostiske formål på grunn av den forholdsvis langvarige halveringstiden (60 dager) og lav gammaemisjon (30-65 KeV) av 125I. Isotopen 123I har en halveringstid på 13 timer oggamma-energi på 159 KeV, og det forventes derfor at merking av ligander som skalanvendes for diagnostiske formål, vil være med denne isotopen. Andre isotoper som kan brukes, omfatter 131I (halveringstid på 2 timer). Egnede bromisotoper omfatter 77Br og 76Br.
De radiohalogenerte forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen er tilbøyelige til lett dannelse fra materialer som kan tilveiebringes til brukere i sett. Sett for dannelse av avbildingsmidlene kan f.eks. inneholde en liten flaske som inneholder en fysiologisk egnet løsning av et mellomprodukt med formel I, Ia, II eller III i en konsentrasjon og ved en pH som er egnet for optimale kompleksdannelsesbetingelser. Brukeren vil tilsette til flasken en passende mengde av radioisotopen, f.eks. Na123I, og en oksidant, slik som hydrogenperoksid. Den resulterende merkede ligand kan så administreres intravenøst til en pasient, og reseptorer i hjernen avbildes ved hjelp av måling av gammastrålen eller fotoemisjoner fra den.
Ettersom det radioaktive, farmasøytiske preparatet ifølge den foreliggende oppfinnelse kan fremstilles lettvint og enkelt, kan fremstillingen lett utføres av brukeren. Den foreliggende beskrivelse omtaler derfor også et sett som omfatter:
(1) en ikke-radioaktivt merket forbindelse ifølge oppfinnelsen, hvorforbindelsen eventuelt er i en tørr tilstand; og også eventuelt har en inert, farmasøytisk akseptabel bærer og/eller hjelpestoffer tilsatt; og
(2) et reduserende middel og eventuelt en kelator;
hvor bestanddelene (1) og (2) eventuelt kan være kombinert; og videre hvor instruksjoner for bruk med en foreskrivelse for utførelse av den ovenfor beskrevne fremgangsmåten ved å omsette bestanddelene (1) og (2) med teknetium-99m i form av en perteknetatløsningeventuelt kan være inkludert.
Eksempler på egnede reduserende midler og kelatorer for settet ovenfor er blitt angitt ovenfor. Perteknetatløsningen kan fås av brukeren fra en molybden-teknetiumgenerator. Slike generatorer er tilgjengelige i et antall institusjoner som utfører radiodiagnostiske fremgangsmåter. Som angitt ovenfor, kan bestanddelene (1) og (2) kombineres, forutsatt at de er kompatible. Et slikt én-komponentsett hvor de kombinertebestanddelene fortrinnsvis er lyofiliserte, er utmerket egnet til å bli omsatt av brukeren med perteknetatløsningen på en enkel måte.
Når det er ønsket, vil det radioaktive diagnostiske midlet kunne inneholde hvilket som helst additiv, slik som pH-regulerende midler (f.eks. syrer, baser, buffere),stabiliseringsmidler (f.eks. askorbinsyre) eller isotoniserende midler (f.eks. natriumklorid).
Uttrykket "farmasøytisk akseptabelt salt" henviser, slik det er brukt her, til de karboksylatsaltene eller syreaddisjonssaltene av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse som innenfor rammen for sunn medisinsk bedømmelse er egnet for anvendelse i kontakt med vevene til pasienter, uten utilbørlig toksisitet, irritasjon, allergisk respons og lignende, som er i samsvar med et rimelig forhold mellom fordel og risiko, og som er effektive for deres påtenkte bruk, samt de zwitterioniske formene, der hvor dette er mulig, av forbindelsene ifølge oppfinnelsen. Uttrykket "salter" henviser til de forholdsvis ikketoksiske, uorganiske og organiske syreaddisjonssaltene av forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse. Også inkludert er de saltene som er avledet fra ikke-toksiske,organiske syrer, slik som alifatiske mono- eller dikarboksylsyrer, f.eks. eddiksyre, fenylsubstituerte alkansyrer, hydroksyalkan- og alkandisyrer, aromatiske syrer og alifatiske ogaromatiske sulfonsyrer. Disse saltene kan fremstilles in situ under sluttisoleringen og rensingen av forbindelsene, eller ved separat omsetning av den rensede forbindelse i dens frie baseform med en egnet organisk eller uorganisk syre, og isolering av saltet som da dannes. Ytterligere representative salter omfatter hydrobromid-, hydroklorid-, sulfat-,bisulfat-, nitrat-, acetat-, oksalat-, valerat-, oleat-, palmitat-, stearat-, laurat-, borat-,benzoat-, laktat-, fosfat-, tosylat-, sitrat-, maleat-, fumarat-, suksinat-, tartrat-, naftylat-,mesylat-, glukoheptonat-, laktiobionat- og laurylsulfonatsaltene, og propionatet, pivalatet,syklamatet, isetionatet og lignende. Disse kan omfatte kationer basert på alkali- og jordalkalimetaller, slik som natrium, litium, kalium, kalsium, magnesium og lignende, samt ikketoksiske ammonium-, kvaternære ammonium- og aminkationer, inkludert ammonium,tetrametylammonium, tetraetylammonium, metylamin, dimetyl-amin, trimetylamin, trietylamin, etylamin og lignende (se f.eks. Berge, S.M. et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977).
I det første trinnet av den foreliggende fremgangsmåten for avbilding innføres en merket forbindelse med formel I i et vev eller en pasient i en påvisbar mengde. Forbindelsen er vanligvis del av et farmasøytisk preparat og administreres til vevet eller pasienten ved hjelp av metoder som er godt kjent for dem med fagkunnskaper på området.
Administreringen av den merkede forbindelse til en pasient kan være ved hjelp av en generell eller lokal administreringsvei. For eksempel kan forbindelsen administreres enten oralt, rektalt, parenteralt (intravenøst, intramuskulært eller subkutant), intracisternalt, intravaginalt, intraperitonealt, intravesikalt, lokalt (pulvere, salver eller dråper) eller som en bukkal- eller nesespray. Den merkede forbindelse kan også administreres tilpasienten slik at den avleveres utover i kroppen. Alternativt kan den merkede forbindelse administreres til et bestemt organ eller vev av interesse. For eksempel er det ønskelig å lokalisere eller kvantifisere amyloidavsetninger i hjernen for å diagnostisere eller spore utviklingen av Alzheimers sykdom hos en pasient. Ett av de mest ønskelige kjennetegn til et in v/Vo-avbildingsmiddel for hjernen er evnen til å krysse den intakte blod-hjernebarrierenetter en i.v.-bolusinjeksjon.
Ved en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen innføres den merkede forbindelse i en pasient i en påvisbar mengde, og etter at tilstrekkelig tid har passert til at forbindelsen skal bli forbundet med amyloidavsetninger, påvises den merkede forbindelse ikke-invasivt inne i pasienten. Ved en annen utførelsesform av oppfinnelsen innføres enradioaktivt merket forbindelse med formel I i en pasient, man lar det gå tilstrekkelig tid til at forbindelsen skal bli forbundet med amyloidavsetninger, og så fjernes en vevsprøve fra pasienten, og den merkede forbindelse i vevet påvises borte fra pasienten. Ved en tredje utførelsesform av oppfinnelsen fjernes en vevsprøve fra en pasient, og en merket forbindelse med formel I innføres i vevsprøven. Etter at det har gått tilstrekkelig tid til at forbindelsen er blitt bundet til amyloidavsetninger, påvises forbindelsen.
Uttrykket "vev" betyr en del av en pasients kropp. Eksempler på vev omfatter hjernen, hjertet, leveren, blodkarene og arteriene. En påvisbar mengde er en mengde merket forbindelse som er nødvendig for å bli påvist ved hjelp av påvisningsmetoden som velges. Mengden av en merket forbindelse som skal innføres i en pasient for å sørge for påvisning, kan lett bestemmes av dem med fagkunnskaper på området. For eksempel kan det gis økende mengder av den merkede forbindelse til en pasient inntil forbindelsen påvises ved hjelp av påvisningsmetoden som velges. En markør innføres i forbindelsene for å sørge for påvisning av forbindelsene.
Uttrykket "pasient" betyr mennesker og andre dyr. De som har fagkunnskaper på området, er også kjent med bestemmelse av den tiden som er tilstrekkelig for at en forbindelse skal bli forbundet med amyloidavsetninger. Den tiden som er nødvendig, kan lett bestemmes ved å innføre en påvisbar mengde av en merket forbindelse med formel I i en pasient, og så påvise den merkede forbindelse til forskjellige tidspunkter etter administrering.
Uttrykket "forbundet" betyr en kjemisk interaksjon mellom den merkede forbindelse og amyloidavsetningen. Eksempler på forbindelser omfatter kovalente bindinger, ionebindinger, hydrofil-hydrofilinteraksjoner, hydrofob-hydrofobinteraksjoner og komplekser.
De som har fagkunnskaper på området, er kjent med de forskjellige måtene å påvise merkede forbindelser på. For eksempel kan det brukes magnetisk resonansavbilding (MRI), positronemisjonstomografi (PET) eller enkeltfotonemisjonsdatastyrt tomografi (SPECT) for å påvise radioaktivt merkede forbindelser. Markøren som innføres i forbindelsen, vil avhenge av påvisningsmetoden som ønskes. Dersom PET velges som en påvisningsmetode, må f.eks. forbindelsen ha et positronemitterende atom, slik som nC eller 18F.
Det radioaktive diagnostiske midlet bør ha tilstrekkelig radioaktivitet og radioaktivitetskonsentrasjon som kan sikre pålitelig diagnose. I tilfelle at det radioaktive metallet er teknetium-99m, kan det f.eks. vanligvis være inkludert i en mengde på 0,1 til 50mCi i ca. 0,5 til 5,0 ml på administreringstidspunktet. Mengden av en forbindelse med formel I kan være slik som er tilstrekkelig for å danne en stabil kelatforbindelse med det radioaktive metallet.
Den således dannede kelatforbindelse som et radioaktivt diagnostisk middel er tilstrekkelig stabil, og den kan derfor administreres umiddelbart som sådan eller lagres inntil dens bruk. Når det er ønsket, vil det radioaktive diagnostiske midlet kunne inneholde ethvert additiv, slik som pH-regulerende midler (f.eks. syrer, baser, buffere), stabiliseringsmidler(f.eks. askorbinsyre) eller isotoniseringsmidler (f.eks. natriumklorid).
Avbildingen av amyloidavsetninger kan også utføres kvantitativt, slik at mengden av amyloidavsetninger kan bestemmes.
Foretrukne forbindelser for avbilding omfatter en slik radioisotop som nC, 123I, 125I, 131I, 18F, 76Br eller 77Br.
Et annet aspekt av oppfinnelsen er en forbindelse med formel I for anvendelse i inhibering av amyloidplakkaggregasjon. Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en amyloidinhiberende mengde av en forbindelse med formel I ovenfor, for inhibering av aggregasjonen av amyloidproteiner.
De som har fagkunnskaper på området, er lett i stand til å bestemme en amyloidinhiberende mengde ved ganske enkelt å administrere en forbindelse med formel I, Ia, II eller III til en pasient i økende mengder inntil veksten av amyloidavsetninger er redusert eller stanset. Veksthastigheten kan fastlegges ved å anvende avbilding, som beskrevet ovenfor, eller ved å ta en vevsprøve fra en pasient og observere amyloidavsetningene i den. Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse kan administreres til en pasient ved doseringsnivåer i området fra ca. 0,1 til ca. 1000 mg pr. dag. For et normalt voksent menneske med en kroppsvekt på ca. 70 kg er en dosering i området fra ca. 0,01 til ca. 100 mg pr. kilogram kroppsvekt pr. dag tilstrekkelig. Den spesifikke dosering som anvendes, kan imidlertid variere. For eksempel kan doseringen avhenge av en rekke faktorer, inkludert behovene til pasienten, alvorligheten av tilstanden som behandles og den
farmakologiske aktiviteten til forbindelsen som anvendes. Bestemmelsen av optimale doseringer for en bestemt pasient er godt kjent for dem med fagkunnskaper på området.
De etter følgende eksempler er illustrerende for fremgangsmåten og preparatene ifølge den foreliggende oppfinnelse.
Alle reagenser som anvendes i syntese, var kommersielle produkter og ble brukt uten videre rensing, med mindre annet er angitt. ^-NMR-spektra ble oppnådd på etBruker DPX-spektrometer (200 MHz) i CDCIs. Kjemiske skift er rapportert som b-verdier(deler pr. million) i forhold til intern TMS. Koblingskonstanter er rapportert i hertz. Multiplisiteten er definert ved hjelp av s (singlett), d (dublett), t (triplett), br (bredt), m (multiplett). Elementæranalyser ble utført av Atlantic Microlab INC. For hver fremgangsmåte henviser "standardopparbeidelse" til de følgende trinn: tilsetning av angitt organisk løsemiddel, vasking av det organiske laget med vann og så saltløsning, separasjon av det organiske laget fra det vandige laget, tørking av de kombinerte organiske lag med vannfritt natriumsulfat, frafiltrering av natriumsulfatet og fjerning av det organiske løsemidlet under redusert trykk.
Eksempler
Eksempel 1
Syntese av forbindelse 2
(E)-2-klor-5-(4-dimetvlaminostvrvl)pyridin (1)
Kalium-tert.-butoksid (99 mg, 0,89 mmol) ble tilsatt til en løsning av dietyl-(4dimetylaminobenzyl)fosfonat (80 mg, 0,30 mmol) i vannfritt DMF (5,0 ml) ved 0 °C. 2-klor-5pyridylaldehyd (42 mg, 0,30 mmol) ble så tilsatt. Reaksjonsblandingen ble varmet opp til romtemperatur og omrørt i 4 timer. Vann ble tilsatt, og blandingen ble ekstrahert med MeOH/DCM (1:9, vol/vol). Det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (20 % heksaner i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 1 (48 mg, utbytte: 62 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,42 (1 H, d, J = 2,2 Hz), 7,77 (1 H, d, d, Ji =
8.4 Hz, J2 = 2,4 Hz), 7,41 (2 H, d, 1 = 8,6 Hz), 7,27 (1 H, d, 1 = 8,2 Hz), 7,08 (1 H, d, 1 =
16.4 Hz), 6,77 (3 H, m).
HRMS (EI) m/z beregnet for [CisHgCINzChr 260,0353.
(E)-2-(2-(2-(2-fluoretoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-dimetvlaminostvrvl)Dvridin (2)
Natriumhydrid (95 %, 10 mg, 0,39 mmol) ble tilsatt til en løsning av 2-(2-(2fluoretoksy)etoksy)etanol (39 mg, 0,26 mmol) i vannfritt DMF (5,0 ml). Etter omrøring ved romtemperatur i 20 minutter ble forbindelse 5 (35 mg, 0,13 mmol) tilsatt, og reaksjonsblandingen ble varmet opp til 100 °C i 2 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble vann tilsatt, og reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (4 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 2 (16 mg, utbytte: 32,9 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,14 (1 H, d, J = 2,4 Hz), 7,76 (1 H, d, d, Ji =8,6 Hz, J2 = 2,4 Hz), 7,39 (2 H, d, 1 = 8,8 Hz), 6,87 (2 H, m), 6,76 (3 H, m), 4,53 (2 H, d, t, Ji = 47,6 Hz, 12 = 4,2 Hz), 4,50 (2 H, t, 1 = 4,8 Hz), 3,85 (3 H, m), 3,70 (5 H, m), 2,99 (6 H, s).
HRMS (EI) m/z beregnet for [C2iH28N2O4]+ 372,2049.
Eksempel 2
Syntese av forbindelse 6
(E)-2-klor-5-(4-nitrostvrvl)pvridin (3)
Natriummetoksid (1 M i metanol, 5,0 ml) ble sakte tilsatt i en løsning av dietyl(4-nitrobenzyl)fosfonat (546 mg, 2,0 mmol) og 2-klor-5-pyridylaldehyd (283 mg, 2,0 mmol)i metanol (5,0 ml). Reaksjonsblandingen ble så kokt under tilbakeløpskjøling i 1 time. Etter avkjøling til 0 °C ble en gul utfelling frafiltrert og vasket med kald metanol, hvorved man fikk produkt 3 (458 mg, utbytte: 88 %), som ble brukt direkte i neste trinn uten videre rensing.
3: ^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,53 (1 H, d, 1 = 2,4 Hz), 8,25 (2 H, d, 1 = 8,8Hz), 7,85 (1 H, d, d, li = 8,4 Hz, 12 = 2,4 Hz), 7,65 (2 H, d, 1 = 8,8 Hz), 7,36 (1 H, d, 1 = 8,4 Hz), 7,19 (2 H, s).
HRMS (EI) m/z beregnet for [CisHgCIIXhChr 260,0353.
(E)-2-(2-(2-(2-fluoretoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-nitrostvrvl)pvridin (4)
Under nitrogenatmosfærebeskyttelse ble 2-(2-(2-fluoretoksy)etoksy)etanola(60 mg, 0,39 mmol) tilsatt i en blanding av natriumhydrid (26,4 mg, 60 % dispersjon i mineralolje, 0,66 mmol) i vannfritt DMF (5 ml) ved 0 °C. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i en halv time, og forbindelse 3 (85,7 mg, 0,33 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble så varmet opp til 100 °C i 2 timer og avkjølt. Etylacetat og vann ble tilsatt, det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (2 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 4 (37 mg, utbytte: 30 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,22 (3 H, d, J = 8,8 Hz), 7,84 (1 H, d, d, Ji =
8,6Hz, J2 = 2,4 Hz), 7,61 (2 H, d, J = 8,8 Hz), 7,20 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 7,02 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 6,84 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 4,53 (2 H, d, t, Ji = 47,6 Hz, J2 = 4,2 Hz), 4,52 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,85 (3 H, m), 3,70 (5 H, m).
HRMS (EI) m/z beregnet for [Ci9H2iFN2O5]+ 376,1435.
(E)-2-(2-(2-(2-fluoretoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-arninostvrvl)Dvridin (5)
Forbindelse 4 (34 mg, 0,09 mmol) ble oppløst i etanol (5 ml), etterfulgt av tilsetningen av tinnklorid (51,4 mg, 0,27 mmol) og konsentrert HCI (0,25 ml). Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 2 timer og avkjølt. 2 N NaOH ble brukt for å regulere pH til 10. Diklormetan ble tilsatt, og det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (3 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 5 (18 mg, utbytte: 58 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,14 (1 H, d, J = 2,2 Hz), 7,76 (1 H, d, d, Ji =
8,6Hz, J2 = 2,4 Hz), 7,32 (2 H, d, J = 8,4 Hz), 6,80 (5 H, m), 4,53 (2 H, d, t, Ji = 47,6 Hz, J2 = 4,2 Hz), 4,49 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,85 (3 H, m), 3,70 (5 H, m), 1,8-3,0 (2 H, br).
HRMS (EI) m/z beregnet for [Ci9H23FN2O3]+ 376,1693.
(B)-2-(2-(2-(2-fluoretoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-metvlaminostvrvl)Dvridin (6)Natriummetoksid (1 M i metanol, 0,23 ml) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 5 (15,8 mg, 0,046 mmol) i metanol (5 ml), etterfulgt av tilsetningen av paraformaldehyd (6,6 mg, 0,23 mmol). Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i
1.5 timer og så avkjølt til 0 °C med et isbad. Natriumborhydrid (10,4 mg, 0,27 mmol) ble tilsatt med forsiktighet. Blandingen ble igjen kokt under tilbakeløpskjøling i 1 time og avkjølt. Diklormetan og vann ble tilsatt. Det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (3 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 6 (12 mg, utbytte: 73 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,14 (1 H, d, J = 2,2 Hz), 7,76 (1 H, d, d, Ji =
8.6 Hz, J2 = 2,4 Hz), 7,35 (2 H, d, J = 8,6 Hz), 6,92 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 6,80 (1 H, d, J = 16,4 Hz), 6,76 (2 H, d, J = 8,6 Hz), 4,53 (2 H, d, t, Ji = 47,6 Hz, J2 = 4,2 Hz), 4,49 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,85 (3 H, m), 3,70 (5 H, m), 2,88 (3 H, s).
HRMS (EI) m/z beregnet for [C2oH25FN203]+ 360,1849.
Eksempel 3
Syntese av forbindelse 10 (E)-2-(2-(2-(2-hvdroksvetoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-nitrostvrvl)pvridin (7)
Blandingen av kaliumkarbonat (158,7 mg, 1,15 mmol), forbindelse 3 (100 mg, 0,38 mmol) og trietylenglykol (576 mg, 3,8 mmol) i vannfritt DMF (5,0 ml) ble lukket inne i en liten flaske egnet for mikrobølgebehandling (fra Biotage) og underkastet mikrobølgebestråling (Biotage Initiator-system) ved 180 °C i 25 minutter. Etter avkjøling til romtemperatur ble vann tilsatt, og reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset med PTLC (4 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 7 (110 mg, utbytte: 77 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,20 (3 H, m), 7,83 (1 H, d, d, Ji = 8,6 Hz, J2 =2,4 Hz), 7,61 (2 H, d, J = 8,8 Hz), 7,10 (2 H, m) 6,84 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 4,53 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,88 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,71 (6 H, m), 3,61 (2 H, m), 2,10 (1 H, b).
HRMS (EI) m/z beregnet for [CioHzzNzOer 374,1478.
(E)-2-(2-(2-(2-hvdroksvetoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-aminostvrvl)Dvridin (8)
Tinnklorid (202,8 mg, 1,07 mmol) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 7 (100 mg 0,27 mmol) i etanol (10 ml), etterfulgt av tilsetningen av konsentrert HCI (0,5 ml). Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 1,5 timer og så avkjølt til 0 °C. En gul utfelling ble samlet opp ved filtrering og så oppslemmet i etylacetat. Mettet NaHCOs ble tilsatt for å regulere pH til 9. Det organiske laget ble fraskilt, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (5 % MeOH i DCM som fremkallingløsemiddel), hvorved man fikk produkt 8 (70 mg, utbytte: 76 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,12 (1 H, d, J = 2,4 Hz), 7,73 (1 H, d, d, Ji =8,6 Hz, J2 = 2,4 Hz), 7,29 (2 H, d, 1 = 8,5 Hz), 6,84 (2 H, m), 6,75 (1 H, d, 1 = 8,6 Hz), 6,69 (2 H, d, 1 = 8,5 Hz), 4,48 (2 H, t, 1 = 4,8 Hz), 3,86 (2 H, t, 1 = 4,8 Hz), 3,71 (6 H, m), 3,60 (2 H, m), 3,32 (3 H, b).
HRMS (EI) m/z beregnet for [Ci9H24N2O4]+ 344,1736.
(E)-2-(2-(2-(2-hvdroksvetoksv)etoksv)etoksv)-5-(4- dimetvlaminostvrvl)Dvridin (9)Natriumcyanoborhydrid (36 mg, 0,57 mmol) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 8 (65 mg, 0,19 mmol) og paraformaldehyd (57 mg, 1,9 mmol) i eddiksyre (10 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur over natten og helt over på is. Natriumbikarbonat ble brukt for å regulere pH til 9. Reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset med PTLC (5 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemidlet), hvorved man fikk produkt 9 (67 mg, utbytte: 95 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,14 (1 H, d, 1 = 2,4 Hz), 7,76 (1 H, d, d, Ji =8,6 Hz, 12 = 2,4 Hz), 7,39 (2 H, d, 1 = 8,8 Hz), 6,87 (2 H, m), 6,76 (3 H, m), 4,50 (2 H, t, 1 = 4,8 Hz), 3,87 (2 H, t, 1 = 4,8 Hz), 3,70 (6 H, m), 3,61 (2 H, m), 2,98 (6 H, s), 2,49 (1 H, b).
HRMS (EI) m/z beregnet for [C2iH28N2O4]+ 372,2049.
(E)-2-(2-(2-(2-tosvloksvetoksv)etoksv)etoksv)-5-(4-dimetvlaminostvrvl)Dvridin (10)
Tosylklorid (52 mg, 0,27 mmol) ble tilsatt til en løsning av forbindelse 9 (43 mg, 0,116 mmol) i pyridin (5,0 ml) ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0 °C i 1 time og så varmet opp til romtemperatur og omrørt i 3 timer. Vann ble tilsatt, og reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble fraskilt, vasket med saltløsning, tørket over natriumsulfat og inndampet. Resten ble renset ved hjelp av PTLC (4 % MeOH i DCM som fremkallingsløsemiddel), hvorved man fikk produkt 10 (25 mg, utbytte: 41 %).
^-NMR (200 MHz, CDCIs): 8 8,14 (1 H, d, J = 2,0 Hz), 7,76 (3 H, m), 7,39(2 H, d, J = 8,8 Hz), 7,32 (2 H, d, J = 8,0 Hz), 6,87 (2 H, m), 6,75 (3 H, m), 4,46 (2 H, t, J = 4,6 Hz), 4,16 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,81 (2 H, t, J = 4,8 Hz), 3,66 (6 H, m), 2,99 (6 H, s), 2,43 (3 H, s).
HRMS (EI) m/z beregnet for [C28H34N2O6S]+ 526,2138.
Referanse eksempel 4
Syntese av forbindelse Ila
a. Syntese av mellomproduktene 18 og 19
2-hvdroksv-3-brom-5-jodpyridin (18)
Ved å følge en tidligere rapportert metode (Meana, A. et al., Synlett, 2003, 1678-1682), ble forbindelse 18 fremstilt fra N-jodsuksinimid (2,48 g, 11,0 mmol) og 3brom-2-hydroksypyridin 17 (1,74 g, 10,0 mmol) som et lysebrunt, fast stoff (2,55 g, 85 %).
^-NMR (DMSO-de) 8 12,27 (br s, 1 H), 8,08 (d, 1 H, J = 2,3 Hz), 7,71 (d, 1 H,J = 2,3 Hz).
-f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)--3-brom-5-1odpvridin (19)
Til en suspensjon av 18 (0,393 g, 1,3 mmol), 2-(2-(2- fluoretoksy)etoksy)etanol (0,200 g, 1,3 mmol) og PPhs (0,511 g, 1,95 mmol) i 10 ml THF under omrøring ved 10 °C ble det dråpevis tilsatt diisopropylazodikarboksylat (DIAD, 0,394 g, 1,95 mmol) i 5 ml THF. Badet av is og salt ble fjernet, og reaksjonsblandingen ble holdt ved romtemperatur (r.t) i 2 timer. Reaksjonsløsningen ble konsentrert og renset ved hjelp av FC (MeOH/CHCIs, 1/99), hvorved man fikk 19, en fargeløs, viskøs væske (0,423 g, 75 %).
^-NMR 8 8,21 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 8,02 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 4,66 (t, 1 H, J =4,1 Hz), 4,50-4,39 (m, 3 H), 3,89-3,64 (m, 8 H).
13C-NMR 8 159,4, 151,2, 148,5, 108,5, 84,9, 81,6, 81,5, 71,1, 71,0, 70,8,70,4, 69,3, 66,9.
HRMS beregnet for CiiHwBrFINOs (M+): 432,9186; funnet: 432,9173.
b. Syntese av forbindelse Ila
(E)-(5-brom-6-(2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv'}-Dvridin-3-vl)-2-(4-dimetvlaminofenvl)etylen (Ila)
En blanding av 4-dimetylaminostyren (0,110 g, 0,75 mmol), 19 (0,217 g,0,5 mmol), K2CO3 (0,173 g, 1,25 mmol), tetrabutylammoniumbromid (TBAB, 0,322 g, 1,0 mmol) og palladiumacetat (Pd(OAc)2, 0,006 g, 0,025 mmol) i 2 ml DMF ble deoksygenert ved å blåse inn nitrogen i 15 minutter, og det ble så varmet opp til 65 °C i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til r.t. og underkastet standard opparbeidelse med etylacetat (EtOAc). Råproduktet ble renset ved hjelp av FC (EtOAc/heksaner, 30/70), og resulterte i Ila som et lysegult, fast stoff (0,178 g, 79 %).
^-NMR 8 8,08 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,00 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,39 (d, 2 H, J =8,8 Hz), 6,92 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,74 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,72 (d, 2 H, J = 8,1 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,55 (t, 2 H, J = 4,8 Hz), 4,45 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 3,94-3,68 (m,8 H), 3,00 (s, 6 H).
13C-NMR 8 158,3, 150,4, 143,5, 138,0, 129,6, 129,5, 127,7, 125,2, 118,8,
112.5, 107,5, 85,0, 81,6, 71,2, 71,0, 70,8, 70,4, 69,6, 66,7, 40,5.
HRMS beregnet for C2iH26BrFN2O3 (M+): 452,1111; funnet: 452,1099.
Referanse eksempel 5
Syntese av forbindelse 11b (E)-(5-brom-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-pvridin-3-vl)-2-(4-N-metvlaminofenvl)etylen (11b)
Forbindelse 11b ble fremstilt fra 4-metylaminostyren (0,073 g, 0,55 mmol) og19 (0,217 g, 0,50 mmol) som en lysegul, viskøs væske (0,113 g, 52 % utbytte).
^-NMR 8 8,07 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,00 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,35 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,91 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,74 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,60 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,55 (t, 2 H, J = 4,8 Hz), 4,45 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 3,94-3,68 (m,8 H), 2,88 (s, 3 H).
13C-NMR 8 158,4, 149,5, 143,6, 138,0, 129,8, 129,5, 127,9, 126,1, 118,9,
112.6, 107,5, 85,0, 81,7, 71,2, 71,1, 70,8, 70,4, 69,6, 68 8, 30,7.
HRMS beregnet for C2oH24BrFN203 (M+): 438,0954; funnet: 438,0967.
Referanse eksempel 6
Syntese av forbindelse Ile (E)-(5-brom-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-pvridin-3-vl)-2-r4-N-metvl-4-N-(tert.butvIoksvkarbonvDaminofenvIletylen (11c)
Forbindelse 11c ble fremstilt fra 4-N-metyl-4-N-(tert.-butyloksykarbonyl)aminostyren (0,219 g, 0,94 mmol) og 19 (0,273 g, 0,63 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,319 g, 94 % utbytte).
^-NMR 8 8,12 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,03 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,44 (d, 2 H, J =
8,6Hz), 7,25 (d, 2 H, J = 9,0 Hz), 6,94 (d, 2 H, J = 2,1 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,56 (t, 2 H, J = 4,9 Hz), 4,45 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 3,94-3,68 (m, 8 H), 3,28 (s, 3 H), 1,48 (s, 9H).
13C-NMR 8 158,8, 154,5, 144,0, 143,5, 138,2, 133,6, 128,5, 128,4, 1268,
126.6, 125,4, 122,9, 107,4, 84,8, 81,4, 80,4, 71,0, 70,9, 70,6, 70,2, 69,4, 66,7, 53,5, 37,1,
28.4.
HRMS beregnet for C25H32BrFN2O5 (M+): 538,1479; funnet: 538,1476.
(E)-(5-brom-6-f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-Dvridin-3-vl)-2-(4-acetoksvfenvl)etvlen(Ild)
Forbindelse Ild ble fremstilt fra 4-acetoksystyren (0,122 g, 0,75 mmol) og 19(0,217 g, 0,5 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,181 g, 77 % utbytte).
^-NMR 8 8,12 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,03 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,50 (d, 2 H, J =
8,6Hz), 7,10 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 6,94 (d, 2 H, J = 3,3 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,56 (t, 2 H, J = 4,9 Hz), 4,45 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 3,94-3,68 (m, 8 H), 2,32 (s, 3H), 1,48 (s,9 H).
13C-NMR 8 169,3, 158,9, 150,3, 144,1, 138,2, 134,5, 128,24, 128,16, 127,4,
123.4, 121,9, 107,5, 84,8, 81,5, 71,0, 70,9, 70,6, 70,3, 69,4, 66,7, 21,1.
HRMS beregnet for C2iH23BrFNO5 (M+): 467,0744; funnet: 467,0731.
(E)-(5-brom-6-<2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-Dvridin-3-vl)-2-(4-hvdroksvfenvl)etvlen(He)
Acetat Ild (0,145 g, 0,31 mmol) og K2CO3 (0,064 g, 0,465 mmol) ble plassert i EtOH/THF (5 ml/5 ml), og reaksjonsblandingen ble omrørt ved r.t. i 2 timer. Etter standard opparbeidelse med EtOAc ble råproduktet renset ved hjelp av PTLC hvorved man fikk Ile som et hvitt, fast stoff (0,128 g, 97 %).
^-NMR 8 8,07 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,99 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,35 (d, 2 H, J =
8,6Hz), 6,96-6,74 (m, 4 H), 5,22 (br s, 1 H), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,54 (t, 2 H, J = 4,8Hz), 4,45 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 3,94-3,68 (m, 8 H).
13C-NMR 8 158,5, 156,4, 143,6, 138,2, 129,2, 129,0, 127,9, 120,7, 116,0,
107.6, 84,9, 81,6, 71,1, 71,0, 70,8, 70,4, 69,6, 66,8.
HRMS beregnet for Ci9H2iBrFNO4 (M+): 425,0638; funnet: 425,0651.
Referanse eksempel 7
Syntese av forbindelse 12b (E)-(5-tributvlstannvl-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv~}-pvridin-3-vl)-2-(4-metvlaminofenvDetylen (12b)
Forbindelse 12b ble fremstilt fra 11b (0,069 g, 0,156 mmol) som en lysegul olje (0,068 g, 68 % utbytte).
^-NMR 8 8,10 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,80 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,36 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,92 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,80 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,61 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,45 (t, 3 H, J = 5,1 Hz), 3,83 (t, 3 H, J = 4,4 Hz), 3,71-3,66 (m,5 H), 2,88 (s, 3 H), 1,68-1,48 (m, 6 H), 1,43-1,25 (m, 6 H), 1,15-1,02 (m, 6 H), 0,91 (t, 9H, J = 7,1 Hz).
13C-NMR 8 166,8, 149,1, 145,4, 143,6, 127,8, 127,7, 127,0, 123,8, 121,2,112,6, 85,0, 81,6, 71,1, 70,9, 70,8, 70,5, 70,1, 65,0, 30,8, 29,5, 29,3, 29,1, 28,1, 27,5, 26,9, 13,9, 13,4, 13,3, 9,9, 6,6, 6,4.
HRMS beregnet for C32H5iFN2O3Sn (M+): 650,2906; funnet: 650,2894.
Referanse eksempel 8
Syntese av forbindelse 12e (E)-(5-tributvlstannvl-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-pvridin-3-vl)-2-(4-hvdroksvfenvDetylen (12e)
Forbindelse 12e ble fremstilt fra Ile (0,032 g, 0,075 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,040 g, 84 % utbytte).
^-NMR 8 8,11 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,82 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,39 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,98-6,74 (m, 4 H), 5,19 (br s, 1 H), 4,71-4,66 (m, 1 H), 4,48-4,43 (m, 3 H), 3,903,62 (m, 8 H), 1,70-1,02 (m, 18 H), 0,91 (t, 9 H, J = 7,1 Hz).
13C-NMR 8 166,9, 156,0, 145,4, 144,0, 130,1, 127,9, 127,6, 127,4, 124,3,123,0, 115,9, 85,0, 81,6, 71,0, 70,9, 70,7, 70,5, 70,0, 65,2, 29,5, 29,3, 29,1, 28,0, 27,5, 26,9, 13,9, 13,4, 13,3, 9,9, 6,6, 6,4.
HRMS beregnet for Csi^sFNCUSn (M+): 637,2589; funnet: 637,2573.
Referanse eksempel 9
Syntese av forbindelse 13a (E)-(5-tributvlstannvl-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-pvridin-3-vl)-2-(4-dimetvlaminofenvDetvIen (12a)
En blanding av Ila (0,052 g, 0,115 mmol), bis(tributyltinn)((Bu3Sn)2, 0,333 g, 0,57 mmol) og palladiumtetrakistrifenylfosfin (Pd(PPh3)4, 0,013 g, 10 mol %) i toluen ble varmet opp ved 110 °C i 18 timer. Reaksjonsløsningen ble avkjølt til r.t. og behandlet med 5 ml 10 % KF. Etter kraftig omrøring i ytterligere 0,5 time ga standard opparbeidelsen med
EtOAc og etterfølgende FC (EtOAc/heksaner, 25/75) 12a som en lysegul, olje (0,052 g, 68 %).
^-NMR 8 8,11 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,81 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,41 (d, 2 H, J =8,8 Hz), 6,93 (d, 1 H, J = 16,5 Hz), 6,81 (d, 1 H, J = 16,5 Hz), 6,72 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,2 Hz), 4,46 (t, 3 H, J = 4,9 Hz), 3,83 (t, 3 H, J = 4,8 Hz), 3,71-3,66 (m,5 H), 3,00 (s, 6 H), 1,68-1,48 (m, 6 H), 1,43-1,21 (m, 6 H), 1,15-1,02 (m, 6 H), 0,91 (t, 9H, J = 7,1 Hz).
13C-NMR 8 166,7, 150,2, 145,4, 143,6, 127,8, 127,7, 127,5, 126,0, 123,7,121,2, 112,6, 85,0, 81,6, 71,0, 70,8, 70,7, 70,4, 70,0, 65,0, 40,6, 29,5, 29,3, 29,1, 28,1, 27,5, 26,9, 13,9, 13,4, 13,3, 9,9, 6,6, 6,4.
HRMS beregnet for CssHssFIWsSn (M+): 664,3062; funnet: 664,3037.
(E)-(5-1od-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv'}-Dvridin-3-vl)-2-(4-dimetvlaminofenvl)etylen (13a)
En løsning av jod (b, 0,063 g, 0,24 mmol) i THF (2 ml) ble tilsatt dråpevis til en isbadavkjølt løsning av 12a (0,114 g, 0,172 mmol) i THF (3 ml). Etter tilsetningen ble reaksjonsblandingen omrørt ved 0 °C i 1 time. Etter standard opparbeidelse med CH2CI2 ble råproduktet renset ved hjelp av FC (EtOAc/heksaner, 25/75), hvorved man fikk et lysegult, fast stoff 13a (0,037 g, 48 %).
^-NMR 8 8,22 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,10 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,38 (d, 2 H, J =8,8 Hz), 6,92 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,72 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,71 (d, 2 H, J = 8,8 Hz), 4,72-4,67 (m, 1 H), 4,54-4,44 (m, 3 H), 3,93-3,69 (m, 8 H), 3,00 (s, 6 H).
13C-NMR 8 160,4, 150,5, 144,6, 144,55, 129,8, 129,5, 127,8, 125,3, 118,8,112,6, 85,1, 81,7, 80,6, 71,3, 71,1, 70,8, 70,5, 69,6, 67,1, 40,6.
HRMS beregnet for C21H26FIN2O3 (M+): 500,0972; funnet: 500,0959.
Referanse eksempel 10
Syntese av forbindelse 13b (E)-(5-tributvlstannvl-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv~}-pvridin-3-vl)-2-r4-N-metvl-4N-(tert.-butvloksvkarbonvl)aminofenvl1 etylen (12c)
Forbindelse 12c ble fremstilt fra 11c (0,072 g, 0,133 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,077 g, 77 % utbytte).
^-NMR 8 8,14 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,83 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,46 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 7,23 (d, 2 H, J = 8,5 Hz), 6,96 (s, 2 H), 4,70-4,66 (m, 1 H), 4,49-4,42 (m, 3 H),3,86-3,66 (m, 8 H), 3,28 (s, 3 H), 1,80-1,02 (m, 27 H), 0,90 (t, 9 H, J = 7,1 Hz).
13C-NMR 8 167,3, 146,1, 143,8, 143,2, 134,6, 127,0, 126,8, 126,6, 125,7,125,4, 124,1, 85,0, 81,6, 80,6, 71,1, 70,9, 70,8, 70,5, 70,0, 65,1, 37,4, 29,5, 29,3, 29,1, 28,1, 27,5, 26,9, 13,9, 13,4, 9,9, 6,4.
HRMS beregnet for CszHsgFIWsSn (M+, 750,343; funnet: 750,3425.
(E)-(5-1od-6--f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv'}-Dvridin-3-vl)-2-r4-N-metvl-4-N-(tert.butvloksvkarbonvnaminofenvlletvlen (13c)
Forbindelse 13c ble fremstilt fra 12c (0,024 g, 0,032 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,018 g, 98 %).
^-NMR 8 8,25 (d, 1 H, J = 1,6 Hz), 8,13 (d, 1 H, J = 1,6 Hz), 7,44 (d, 2 H, J =8,4 Hz), 7,24 (d, 2 H, J = 8,4 Hz), 6,97 (d, 1 H, J = 16,4 Hz), 6,86 (d, 1 H, J = 16,4 Hz), 4,69 (t, 1 H, J = 4,1 Hz), 4,53 (t, 2 H, J = 4,8 Hz), 4,45 (t, 1 H, J = 4,1 Hz), 3,94-3,69 (m,8 H), 3,28 (s, 3 H), 1,47 (s, 9 H).
13C-NMR 8 161,0, 154,8, 145,3, 144,9, 143,7, 133,9, 128,9, 128,6, 126,8,125,7, 123,1, 85,1, 81,7, 80,7, 77,4, 71,3, 71,1, 70,9, 70,5, 69,6, 67,2, 37,4, 28,6.
HRMS beregnet for C21H26FIN2O3 (M+): 500,0972; funnet: 500,0959. (E)-(5-1od-6-<2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-Dvridin-3-vl)-2-(4-metvlaminofenvl)etvlen(13b)
Til en omrørt løsning av 13c (0,014 g, 0,024 mmol) og 2,6-lutidin (28 ju.1, 0,24mmol) i 2 ml CH2CI2 ved 0 °C ble det tilsatt trimetylsilyltriflat (34 ju.1, 0,19 mmol). Etter 15 minutter ble reaksjonsløsningen underkastet standardopparbeidelsen med CH2CI2. Råproduktet ble renset ved hjelp av PTLC, hvorved man fikk en lysegul, viskøs væske 13b (0,010 g, 88 %).
^-NMR 8 8,22 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,10 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,34 (d, 2 H, J= 8,6 Hz), 6,91 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,70 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,60 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 4,71-4,67 (m, 1 H), 4,54-4,43 (m, 3 H), 3,94-3,69 (m, 9 H), 2,88 (s, 3 H).
13C-NMR 8 160,5, 149,5, 144,6, 129,8, 129,7, 128,0, 126,3, 118,9, 112,6,85,1, 81,7, 80,6, 77,4, 71,3, 71,2, 70,9, 70,5, 69,7, 67,2, 30,8.
HRMS beregnet for C20H24FIN2O3 (M+): 486,0816; funnet: 486,0818.
Referanse eksempel 11
Syntese av forbindelse 13e (E)-(5-tributvlstannvl-6-<2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv)-pvridin-3-vl)-2-(4-hvdroksvfenvDetylen (12e)
Forbindelse 12e ble fremstilt fra Ile (0,032 g, 0,075 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,040 g, 84 % utbytte).
^-NMR 8 8,11 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,82 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,39 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,98-6,74 (m, 4 H), 5,19 (br s, 1 H), 4,71-4,66 (m, 1 H), 4,48-4,43 (m, 3 H), 3,903,62 (m, 8 H), 1,70-1,02 (m, 18 H), 0,91 (t, 9 H, J = 7,1 Hz).
13C-NMR 8 166,9, 156,0, 145,4, 144,0, 130,1, 127,9, 127,6, 127,4, 124,3,123,0, 115,9, 85,0, 81,6, 71,0, 70,9, 70,7, 70,5, 70,0, 65,2, 29,5, 29,3, 29,1, 28,0, 27,5, 26,9, 13,9, 13,4, 13,3, 9,9, 6,6, 6,4.
HRMS beregnet for Csi^sFNCUSn (M+): 637,2589; funnet: 637,2573.
(E)-(5-1od-6-f2-r2-(2-fluoretoksv)etoksv1etoksv'}-Dvridin-3-vl)-2-(4-hvdroksvfenvl)etvlen
(13e)
Forbindelse 13e ble fremstilt fra 12e (0,012 g, 0,019 mmol) som et hvitt, fast stoff (0,008 g, 90 %).
^-NMR 8 8,21 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,08 (d, 1 H, J
= 2,1 Hz), 7,33 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 6,94-6,69 (m, 4 H), 4,71-4,67 (m, 1 H), 4,53-4,43 (m,3 H), 3,94-3,69 (m, 8 H).
HRMS beregnet for C19H21FINO4 (M+): 473,0499; funnet: 473,0498.
Referanse eksempel 12
Syntese av forbindelse 14a
2-hvdroksvetoksv-3-brom-5-1odpyridin (9b)
Til en omrørt suspensjon av 18 (se eksempel 4 ovenfor) (0,906 g, 3,0 mmol), 2-(tert.-butyldimetylsilanyloksy)etanol (0,554 g, 3,15 mmol) og PPhs (0,944 g, 3,6 mmol) i20 ml THF ved -10 °C ble det dråpevis tilsatt diisopropylazodikarboksylat (DIAD) (0,728 g,3,6 mmol) i 10 ml THF. Badet av is og salt ble fjernet, og reaksjonsblandingen ble holdt ved r.t i 2 timer. Reaksjonsløsningen ble konsentrert og renset ved hjelp av FC (EtOAc/heksaner, 5/95), hvorved man fikk 2-(tert.-butyldimetylsilanyloksy)etoksy-3-brom-5-jodpyridin, enfargeløs, viskøs væske (0,995 g, 72 %).
^-NMR 8 8,23 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 8,05 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 4,42 (t, 2 H, J =4,9 Hz), 3,98 (t, 2 H, J = 4,9 Hz), 0,90 (s, 9 H), 0,10 (s, 6 H).
HRMS beregnet for CizHisBrINOzSi (M-CH3+), 441,9335; funnet: 441,9312.
(E)-r5-brom-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4-dimetvlaminofenvl)etvlen (14a)
Forbindelse 14a ble fremstilt fra 4-dimetylaminostyren (0,031 g, 0,212 mmol)og IIO (0,073 g, 0,212 mmol) som et lysegult, fast stoff (0,022 g, 29 % utbytte).
^-NMR 8 8,07 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,03 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,39 (d, 2 H, J =8,8 Hz), 6,94 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,78-6,69 (m, 3 H), 4,57-4,52 (m, 2 H), 3,99 (t, 2 H, J= 4,3 Hz), 3,21 (br s, 1 H), 3,00 (s, 6 H).
13C-NMR 8 158,3, 150,4, 143,0, 138,2, 129,9, 129,8, 127,6, 124,9, 118,3,112,3, 107,5, 69,6, 62,1, 40,3.
HRMS beregnet for CiyHigBrlXhO? (M+): 362,063; funnet: 362,0629.
Referanse eksempel 13
Syntese av forbindelse 14b (E)-r5-brom-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4-metvlaminofenvl)etvlen (14b)
Forbindelse 14b ble fremstilt fra 4-metylaminostyren (0,140 g, 1,05 mmol) ogIIO (0,241 g, 0,7 mmol) som en lysegul, viskøs væske (0,149 g, 61 % utbytte).
^-NMR 8 8,07 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,03 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,35 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,93 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,74 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,61 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 4,57-4,52 (m, 2 H), 3,99 (br s, 2 H), 3,18 (br s, 1 H), 2,88 (s, 3 H).
13C-NMR 8 149,6, 143,3, 138,5, 130,1, 130,0, 128,0, 126,0, 118,6, 112,6,107,7, 69,8, 62,2, 30,7.
HRMS beregnet for CizHigBrNzOz (M+): 348,0473; funnet: 348,0468.
Referanse eksempel 14
Syntese av forbindelse 14d
(E)-r5-brom-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4-acetoksvfenvl)etvlen (14d)
Forbindelse 14d ble fremstilt fra 4-acetoksystyren (0,130 g, 0,80 mmol) og 10(0,244 g, 0,7 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,031 g, 12 % utbytte).
^-NMR 8 8,12 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,08 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7,50 (d, 2 H, J =6,8 Hz), 7,11 (d, 2 H, J = 6,8 Hz), 6,95 (d, 2 H, J = 5,2 Hz), 4,58-4,54 (m, 2 H), 4,01 (br s,2 H), 3,08 (br s, 1 H), 2,32 (s, 3 H).
Referanse eksempel 15
Syntese av forbindelse 14e
(E)-r5-brom-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4-hvdroksvfenvl)etvlen (14e)
Ved en lignende fremgangsmåte som beskrevet i fremstillingen av Ile, ble forbindelse 14e fremstilt fra acetat 14d (0,031 g, 0,082 mmol) som et hvitt, fast stoff (0,020 g, 73 %).
^-NMR (DMSO-de) 8 9,60 (br s, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 8,23 (s, 1 H), 7,39 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,19 (d, 1 H, J = 16,8 Hz), 6,94 (d, 1 H, J = 16,6 Hz), 6,77 (d, 2 H, J = 8,3 Hz), 4,35 (t, 2 H, J = 5,1 Hz), 3,73 (t, 2 H, J = 5,1 Hz).
13C-NMR (DMSO-de) 8 157,9, 157,4, 143,7, 138,1, 129,2, 129,0, 127,8, 119,8,115,6, 106,7, 68,4, 59,2.
HRMS beregnet for CisHi4BrNO3 (M+): 335,0157; funnet: 335,0165.
Referanse eksempel 16
Syntese av forbindelse 15e
(E)-r5-tributvlstannvl-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4- hvdroksvfenvDetylen (15e)
Forbindelse 15e ble fremstilt fra 14e (0,031 g, 0,092 mmol) som en hvit, viskøs væske (0,012 g, 24 % utbytte).
^-NMR 8 8,07 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,85 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,39 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,99-6,80 (m, 4 H), 5,97 (br s, 1 H), 5,01 (br s, 1 H), 4,50-4,46 (m, 2 H), 3,983,94 (m, 2 H), 1,69-1,01 (m, 18 H), 0,91 (t, 9 H, J = 7,1 Hz).
13C-NMR 8 167,2, 156,0, 144,9, 144,7, 144,5, 130,1, 128,0, 127,96, 124,7,122,8, 116,0, 69,9, 63,4, 29,9, 29,5, 29,3, 29,1, 28,1, 27,5, 26,9, 13,9, 13,6, 13,5, 10,1, 6,7, 6,6.
HRMS beregnet for C27H4iNO3Sn (M+): 547,2108; funnet: 547,2112.
Referanse eksempel 17
Syntese av forbindelse 16a
(E)-r5-tributvlstannvl-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4- dimetvIaminofenvDetvIen(15a)
Forbindelse 15a ble fremstilt fra 14a (0,100 g, 0,275 mmol) som en lysegul olje (0,105 g, 66 % utbytte).
^-NMR 8 8,10 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,85 (d, 1 H, J = 2,4 Hz), 7,41 (d, 2 H, J =8,7 Hz), 6,95 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,81 (d, 1 H, J = 16,6 Hz), 6,73 (d, 2 H, J = 8,8 Hz),
4.48- 4,44 (m, 2 H), 3,96-3,92 (m, 2 H), 2,99 (s, 6 H), 1,68-1,01 (m, 18 H), 0,92 (t, 9 H, J= 7,2 Hz).
13C-NMR 166,6, 150,1, 144,5, 144,1, 128,2, 128,1, 127,4, 125,6, 124,0,120,5, 112,4, 69,4, 63,0, 40,4, 29,0, 27,2, 13,6, 9,8.
HRMS beregnet for C29H46N2O2Sn (M+): 574,2581; funnet: 574,2584.
(E)-r5-1od-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4-dimetvlaminofenvl)etvlen (16a)
Forbindelse 16a ble fremstilt fra 15a (0,011 g, 0,019 mmol) som et lysegult, fast stoff (0,004 g, 50 %).
^-NMR 8 8,25 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,39 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 6,94 (d, 1 H, J= 16,3 Hz), 6,76-6,70 (m, 3 H), 4,51 (t, 2 H, J = 4,2 Hz), 4,02-3,95 (m, 2 H), 3,19 (s, 1 H),3,00 (s, 6 H).
HRMS beregnet for C17H19IN2O2 (M+): 410,0491; funnet: 410,0489.
Referanse eksempel 18
Syntese av forbindelse 16b
(E)-r5-tributvlstannvl-6-(2-hvdroksvetoksv)pvridin-3-vl1-2-(4- metvIaminofenvDetylen
(15b)
Forbindelse 15b ble fremstilt fra 14b (0,052 g, 0,15 mmol) som en lysegul olje (0,059 g, 64 % utbytte).
^-NMR 8 8,08 (d, 1 H, J = 2,5 Hz), 7,84 (d, 1 H, J = 2,4 Hz), 7,37 (d, 2 H, J =8,6 Hz), 6,93 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,80 (d, 1 H, J = 16,4 Hz), 6,61 (d, 2 H, J = 8,6 Hz),
4.48- 4,43 (m, 2 H), 3,95-3,91 (m, 2 H), 2,88 (s, 3 H), 1,69-1,01 (m, 18 H), 0,91 (t, 9 H, J= 7,1 Hz).
13C-NMR 8 166,9, 149,2, 144,7, 144,3, 128,4, 128,3, 127,8, 126,7, 124,2,120,7, 112,6, 69,6, 63,2, 30,8, 29,5, 29,3, 29,1, 28,0, 27,5, 26,9, 13,9, 13,5, 13,4, 10,0, 6,6, 6,5.
HRMS beregnet for C28H44N2O2Sn (M+): 560,2425; funnet: 560,2419.
(E)-r5-1od-6-(2-hvdroksvetoksv)Dvridin-3-vl1-2-(4-metvlaminofenvl)etvlen (16b)Forbindelse 16b ble fremstilt fra 15b (0,032 g, 0,057 mmol) som et lysegult, fast stoff (0,005 g, 21 %).
^-NMR 8 8,24 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 8,09 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 7,36 (d, 2 H, J =8,5 Hz), 6,92 (d, 1 H, J = 16,3 Hz), 6,76-6,64 (m, 3 H), 4,53-4,49 (m, 2 H), 4,01-3,96 (m,2 H), 2,96 (s, 1 H), 2,89 (s, 3 H).
HRMS beregnet for C16H17IN2O2 (M+): 396,0335; funnet: 396,0335.
Referanse eksempel 19 Radioaktiv jodering
Radioaktivt joderte forbindelser, [125I]13a, 13b, 16a, 16b og 16e ble fremstilt via joddestannyleringsreaksjoner fra de tilsvarende tributyltinnforløperne i henhold til metoden beskrevet tidligere (ref.). Hydrogenperoksid (50 ju.1, 3 %, vekt/vol) ble tilsatt til en blanding av 50 jil av tributyltinnforløperen (4 pig/pj EtOH), 50 jil 1 N HCI og [125I]Nal (1-5mCi, innkjøpt fra Perkin Eimer) i en lukket liten flaske. Reaksjonen fikk forløpe i 5-10minutter ved romtemperatur og ble avsluttet ved tilsetning av 100 pil mettet NaHSOs. Reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat (3x1 ml) etter nøytralisering med 1,5 ml mettet natriumbikarbonatløsning. De kombinerte ekstrakter ble inndampet til tørrhet. Restene ble oppløst i 100 pil EtOH, og det ble renset ved hjelp av HPLC under anvendelse av en reversfasekolonne (Phenomenex Gemini C18 analytisk kolonne, 4,6 x 250 mm, 5 jim, CHsCN/ammoniumformiatbuffer (1 mM) 8/2 eller 7/3; strømningshastighet 0,5-1,0ml/minutt). De ikke-bærertilsatte produkter ble inndampet til tørrhet og på nytt oppløst i100 % EtOH (1 jLiCi/jLtl), for så å bli lagret ved -20 °C i opptil 6 uker for dyrestudier ogautoradiografi studier.
Eksempel 20
Bindinqsstudier
[125I]IMPY med 2200 Ci/mmol spesifikk aktivitet og mer enn 95 % radiokjemisk renhet ble fremstilt under anvendelse av standard joddestannyleringsreaksjonen, og ble renset ved hjelp av en forenklet C-4 minikolonne, som beskrevet tidligere av Kung, M.-P.,Hou, C., Zhuang, Z.-P., Cross, A.J., Maier, D.L., Kung, H.F., "Characterization of IMPY as apotential imaging agent for b-amyloid plaques in double transgenic PSAPP mice". Euro. J.Nucl. Med. Mol. Imaging, 2004, 31:1136-45. Konkurransebindingsanalyser ble utført i 12 x75 mm borsilikatglassrør. Reaksjonsblandingen inneholdt 50 pl sammenslåtte AD-hjerne
homogenater (20-50 pg), 50 pl [125I]IMPY (0,04-0,06 nM fortynnet i PBS) og 50 plinhibitorer (10-5-10 10 M fortynnet serievis i PBS inneholdende 0,1 % bovint serumalbumin) iet sluttvolum på 1 ml. Ikke-spesifikk binding ble definert i nærvær av 600 nM IMPY i desamme analyserørene. Blandingen ble inkubert ved 37 °C i 2 timer, og den bundne og den frie radioaktiviteten ble separert ved hjelp av vakuumfiltrering gjennom Whatman GF/B-filtreunder anvendelse av en Brandel M-24R-celleinnhøster, etterfulgt av 2 x 3 ml vaskinger medPBS ved romtemperatur. Filtre inneholdende den bundne 125I-ligand ble telt i en gammateller(Packard 5000) med 70 % telleeffektivitet. Under analysebetingelsene var den spesifikt bundne fraksjon mindre enn 15 % av den totale radioaktiviteten. Resultatene av inhiberingsforsøk ble underkastet ikke-lineær regresjonsanalyse under anvendelse av likevektsbindingsdataanalyse hvorfra Ki-verdier ble beregnet. Figurene 2 og 5 viser Ki-verdier for utvalgteforbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse.
Eksempel 21
Filmautoradiografi
[18F]-indikatorer: Hjernesnitt fra AD-individer ble erholdt ved å fryse nedhjernen i oppmalt tørris og kutte den i 20 pm tykke snitt. Snittene ble inkubert med [18F]indikatorer (200 000-250 000 cpm/200 pl) i 1 time ved romtemperatur. Snittene ble sådyppet i mettet l_i2CO3 i 40 % EtOH (to 2-minutters vaskinger) og vasket med 40 % EtOH(én 2-minutters vasking), etterfulgt av skylling med vann i 30 sekunder. Etter tørking ble de18F-merkede snittene eksponert for Kodak MR-film over natten. Resultatene er vist i filmen ifig- 2.
[125I]-indikatorer: For å sammenligne forskjellige prober ved å anvendelignende snitt av menneskehjernevev ble det sammenstilt humane makrorekkehjernesnitt fra seks bekreftede AD-tilfeller og ett kontrollindivid. Tilstedeværelsen og lokaliseringen avplakker på snittene ble bekreftet med immunhistokjemisk farging med monoklonalt Apantistoff 4G8 (Sigma). Snittene ble inkubert med [125I]-indikatorer (200000-250000cpm/200 pl) i 1 time ved romtemperatur. Snittene ble så dyppet i mettet IJ2CO3 i 40 % EtOH (to 2-minutters vaskinger) og vasket med 40 % EtOH (én 2-minutters vasking), etterfulgt avskylling med vann i 30 sekunder. Etter tørking ble de 125I-merkede snittene eksponert forKodak Biomax MR-film over natten.
Eksempel 22
Orqanfordelinq hos mus
Mens de var under isoflurananestesi, ble 0,15 ml av en 0,1 % løsning av bovint serumalbumin inneholdende [125I]-indikatorer (5-10 pCi) injisert direkte i halevenen til ICRmus (22-25 g, hannkjønn). Musene (n = 3 for hvert tidspunkt) ble avlivet ved hjelp avhalsdislokasjon på angitte tidspunkter etter injeksjon. Organene av interesse ble fjernet og veid, og radioaktiviteten ble telt med en automatisk gammateller. Den prosentvise dose pr.
organ ble beregnet ved hjelp av en sammenligning mellom vevstellingene og passende fortynnede alikvoter av det injiserte materialet. Totalaktiviteten i blodet ble beregnet under forutsetning av at den er 7 % av den totale kroppsvekten, %-dosen/g prøver ble beregnetved å sammenligne prøvetellingene med tellingen av den fortynnede startdose.
Tabell 1
Biofordeling hos ICR-mus etter i.v.-injeksjon av [18F] 10 i 5 % EtOH i saltløsning (%-dose/g,gjennomsnitt for tre mus ± SD)
Organ
2 minutter
30 minutter
1 time
2 timer
Blod
6,05 ± 0,33
2,65 ± 0,22
3,48 ± 0,47
2,15 ± 0,25
Hjerte
0,75 ± 0,14
0,17 ± 0,03
0,22 ± 0,03
0,18 ± 0,08
Muskel
7,03 ± 1,30
8,58 ± 0,26
10,62 ± 2,59
5,96 ± 0,06
Lunge
1,07 ± 0,20
0,30 ± 0,01
0,35 ± 0,07
0,20 ± 0,36
Nyre
6,38 ± 0,95
1,68 ± 0,11
1,96 ± 0,21
0,96 ± 1,58
Milt
0,43 ± 0,11
0,15 ± 0,05
0,13 ± 0,03
0,10 ± 0,17
Lever
24,90 ± 1,49
9,26 ± 0,83
10,52 ± 2,18
6,86 ± 0,59
Hud
2,52 ± 0,24
3,99 ± 0,34
4,42 ± 0,65
2,91 ± 0,16
Hjerne
3,49 ± 0,58
0,48 ± 0,07
0,55 ± 0,10
0,37 ± 0,08
Ben
5,97 ± 0,56
2,52 ± 0,34
4,39 ± 0,40
6,49 ± 0,08
Organ
2 minutter
30 minutter
1 time
2 timer
Blod
3,04 ± 0,29
1,33 ± 0,16
1,80 ± 0,16
1,08 ± 0,06
Hjerte
6,00 ± 1056
1,28 ± 0,16
1,66 ± 0,24
1,32 ± 0,33
Muskel
0,62 ± 0,10
0,75 ± 0,04
0,95 ± 0,18
0,52 ± 0,08
Lunge
5,65 ± 0,89
1,73 ± 0,17
1,82 ± 0,31
0,98 ± 10,08
Nyre
14,19 ± 2,34
3,77 ± 0,36
4,29 ± 0,52
2,19 ± 0,36
Milt
4,65 ± 0,76
1,57 ± 0,51
1,56 ± 0,17
1,14 ± 0,18
Lever
17,00 ± 0,69
7,21 ± 0,69
8,13 ± 1,42
4,96 ± 0,90
Hud
0,59 ± 0,03
0,93 ± 0,13
1,06 ± 0,09
0,68 ± 0,16
Hjerne
7,77 ± 1,34
1,03 ± 0,11
1,28 ± 0,20
0,84 ± 0,08
Ben
1,49 ± 0,08
0,63 ± 0,12
1,13 ± 0,01
1,64 ± 0,50
Tabell 2
Biofordeling hos ICR-mus etter i.v.-injeksjoner av referanse [125I]-merkede indikatorer(%-dose/g, gjennomsnitt for tre mus ± SD)
[125I] 13a (logP = 2,59)
Organ
2 minutter
30 minutter
1 time
2 timer
Blod
2,70 ± 0,58
2,05 ± 0,18
1,65 ± 0,45
1,45 ± 0,41
Hjerte
12,76 ± 1,24
1,63 ± 0,03
0,97 ± 0,16
0,73 ± 0,17
Muskel
0,90 ± 0,20
1,00 ± 0,08
0,59 ± 0,13
0,53 ± 0,08
Lunge
10,08 ± 2,15
2,50 ± 0,14
1,62 ± 0,46
1,33 ± 0,39
Nyre
16,62 ± 1,96
3,32 ± 0,11
2,30 ± 0,54
1,71 ± 0,24
Milt
4,47 ± 1,28
1,42 ± 0,05
0,99 ± 0,47
0,79 ± 0,27
Lever
22,15 ± 4,34
9,54 ± 1,30
5,34 ± 2,22
5,62 ± 1,31
Hud
0,54 ± 0,05
1,47 ± 0,26
1,59 ± 0,68
1,23 ± 0,41
Hjerne
4,03 ± 0,43
1,93 ± 0,18
0,68 ± 0,17
0,26 ± 0,04
Skjoldbruskkjertel
3,89 ± 0,67
16,23 ± 11,75
24,19 ± 8,26
60,76 ± 6,09
[125I]13b (logP = 2,54)
Organ
2 minutter
30 minutter+
1 time
2 timer
Blod
4,37 ± 1,07
3,83 ± 1,11
2,88 ± 0,28
2,21 ± 0,73
Hjerte
9,85 ± 1,78
2,54 ± 0,37
1,75 ± 0,26
1,22 ± 0,28
Muskel
1,04 ± 0,25
1,11 ± 0,34
0,85 ± 0,06
0,44 ± 0,19
Lunge
6,85 ± 0,27
3,01 ± 0,96
2,37 ± 0,29
1,85 ± 0,74
Nyre
9,03 ± 6,81
3,40 ± 0,76
2,81 ± 0,70
1,86 ± 0,36
Milt
4,41 ± 1,05
2,49 ± 0,75
1,75 ± 0,33
1,27 ± 0,24
Lever
26,24 ± 4,47
11,47 ± 2,10
7,70 ± 1,22
6,25 ± 1,79
Hud
1,48 ± 0,07
2,95 ± 0,81
2,46 ± 0,16
1,32 ± 0,41
Hjerne
6,22 ± 1,01
1,23 ± 0,13
0,62 ± 0,17
0,26 ± 0,01
Skjoldbruskkjertel
5,74 ± 0,42
24,09 ± 27,44
38,09 ± 6,37
215,05 ± 74,59
s [125I]16a (logP = 2,64)
Organ
2 minutter
30 minutter
1 time+
2 timer
Blod
2,71 ± 0,07
2,24 ± 0,38
2,18 ± 0,66
1,01 ± 0,02
Hjerte
10,24 ± 0,45
1,93 ± 0,27
1,12 ± 0,02
0,62 ± 0,12
Muskel
0,71 ± 0,46
1,05 ± 0,20
0,55 ± 0,03
0,22 ± 0,04
Lunge
9,41 ± 0,56
3,02 ± 0,38
1,98 ± 0,21
1,00, ± 0,15
Nyre
14,25 ± 1,98
4,19 ± 0,45
2,49 ± 0,33
1,48, ± 0,20
Milt
4,40 ± 1,89
1,94 ± 0,19
1,32 ± 0,10
0,80 ± 0,11
Lever
19,12 ± 2,68
12,38 ± 1,29
6,22 ± 0,96
4,87 ± 0,46
Hud
0,46 ± 0,13
1,18 ± 0,26
1,16 ± 0,00
0,40 ± 0,05
Hjerne
5,43 ± 0,85
3,56 ± 0,32
1,32 ± 0,00
0,46 ± 0,05
Skjoldbruskkjertel
4,15 ± 0,43
11,21 ± 7,88
59,13 ± 6,26
24,81 ± 0,62
[125I] 16b (logP = 2,20)
Organ
2 minutter
30 minutter
1 time
2 timer
Blod
4,14 ± 0,41
3,08 ± 0,35
1,81 ± 0,56
1,96 ± 0,14
Hjerte
7,16 ± 1,16
1,50 ± 0,18
0,88 ± 0,30
0,76 ± 0,03
Muskel
1,15 ± 0,38
0,91 ± 0,06
0,42 ± 0,08
0,38 ± 0,02
Lunge
7,43 ± 1,21
2,67 ± 0,46
1,76 ± 0,32
1,58 ± 0,10
Nyre
11,51 ± 1,48
3,73 ± 0,75
2,16 ± 0,08
1,53 ± 0,20
Milt
4,08 ± 0,68
1,34 ± 0,29
0,87 ± 0,37
1,08 ± 0,15
Lever
20,84 ± 2,38
12,57 ± 3,03
5,62 ± 0,68
3,41 ± 0,20
Hud
0,95 ± 0,09
1,86 ± 0,50
1,29 ± 0,51
1,43 ± 0,10
Hjerne
8,04 ± 0,82
0,88 ± 0,30
0,26 ± 0,03
0,15 ± 0,02
Skjoldbruskkjertel
6,31 ± 1,59
17,23 ± 14,23
36,69±37,17
19,88 ± 69,45
[125I]16e
(logP = 1,98)
Organ
2 minutter
30 minutter
1 time
2 timer
Blod
10,09 ± 1,12
3,92 ± 0,07
1,29 ± 0,05
1,56 ± 0,04
Hjerte
6,66 ± 0,31
1,35 ± 0,16
0,65 ± 0,21
0,51 ± 0,09
Muskel
1,01 ± 0,34
0,59 ± 0,05
0,21 ± 0,02
0,12 ± 0,01
Lunge
14,22 ± 0,92
3,10 ± 0,05
1,34 ± 0,11
1,02 ± 0,01
Nyre
20,40 ± 2,20
10,03 ± 2,12
2,94 ± 0,17
2,50 ± 1,32
Milt
4,20 ± 0,31
1,28 ± 0,44
0,50 ± 0,03
0,50 ± 0,06
Lever
18,27 ± 1,29
5,15 ± 0,61
2,38 ± 0,58
2,63 ± 1,30
Hud
0,64 ± 0,20
1,36 ± 0,07
0,62 ± 0,01
0,37 ± 0,08
Hjerne
0,99 ± 0,24
0,26 ± 0,03
0,09 ± 0,01
0,06 ± 0,01
Skjoldbruskkjertel
4,38 ± 0,46
3,99 ± 3,56
13,02 ± 8,11
16,02 ± 11,52

Claims (9)

Patentkrav En forbindelse med formel I:
1.
Af~A2
R
I
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvor
n er én;
minst én, ikke mer enn tre, av Ai, A?, As, A4 og As er N, mens de øvrige er -CHeller -CR2 etter hva som er mulig;
R1 er NRaRb(CH2)P-, hvor Ra og Rb er uavhengig hydrogen eller Ci-4-alkyl, og per 0;
R2 er:
,31
,33
hvor q er et helt tall fra 1 til 5; R30, R31, R32 og R33 er i hvert tilfelle hydrogen; Z er valgt fra halogen, halogensubstituert benzoyloksy, halogen-substituert benzyloksy, halogensubstituert fenyl(Ci-4)alkyl, halogensubstituert aryloksy og halogensubstituert Ce-io-aryl,
R7 og R8 er i hvert tilfelle hydrogen;
og hvor nevnte halogen i hvert tilfelle er valgt fra I, 123I, 125I, 131I, Br, 76Br, 77Br, F og 18F.
Forbindelsen ifølge krav 1 som har strukturen:
2.
R\
N
Forbindelsen ifølge krav 1, hvor A4 er N, som har formelen:
3.
hvor Z er I, 123I, 125I, 131I, Br, 76Br, 77Br, F og 18F.
4. Forbindelsen ifølge krav 1, som har formelen:
h3c
/N h3c
1B
5. Forbindelsen ifølge krav 1, som har formelen:
h3cs
HN
18p
N
H
6. Farmasøytisk preparat.
karakterisert ved at den omfatter en forbindelse ifølge et hvilket som helst av
kravene 1 til 5.
7. Diagnostisk preparat for avbilding av amyloidavsetninger, karakterisert ved at det omfatter en radioaktivt merket forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 5.
8. Fremgangsmåte for avbilding av amyloidavsetninger som omfatter å:
a. innføre i pattedyret en påvisbar mengde av et diagnostisk preparat ifølge krav 7;
b. la tilstrekkelig tid gå til at den merkede forbindelse forbindes med én eller flere amyloidavsetninger; og
c. påvise den merkede forbindelse forbundet med én eller flere amyloidavsetninger.
9. En forbindelse i henhold til et hvilket som helst av kravene 1 til 5 eller et preparat i henhold til krav 6 for anvendelse i inhibering av amyloidplakkaggregasjon hos et pattedyr.
NO20084590A 2006-03-30 2008-10-29 Styrylpyridinderivater og deres anvendelse til binding og avbilding av amyloidplakker NO342090B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US78715606P 2006-03-30 2006-03-30
PCT/US2007/007400 WO2007126733A2 (en) 2006-03-30 2007-03-26 Styrylpyridine derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20084590L NO20084590L (no) 2008-12-29
NO342090B1 true NO342090B1 (no) 2018-03-19

Family

ID=38326579

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20084590A NO342090B1 (no) 2006-03-30 2008-10-29 Styrylpyridinderivater og deres anvendelse til binding og avbilding av amyloidplakker
NO2018030C NO2018030I1 (no) 2006-03-30 2018-09-11 Florbetapir (18F)

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO2018030C NO2018030I1 (no) 2006-03-30 2018-09-11 Florbetapir (18F)

Country Status (34)

Country Link
US (3) US7687052B2 (no)
EP (3) EP2363391A1 (no)
JP (1) JP5290954B2 (no)
KR (1) KR101376807B1 (no)
CN (1) CN101522624B (no)
AT (1) ATE539060T1 (no)
AU (1) AU2007243712B2 (no)
BR (1) BRPI0710225B1 (no)
CA (1) CA2644530C (no)
CR (1) CR10329A (no)
CY (3) CY1113048T1 (no)
DK (2) DK2363392T3 (no)
EA (1) EA017898B1 (no)
EC (1) ECSP088783A (no)
ES (2) ES2628882T3 (no)
FR (1) FR13C0034I2 (no)
GT (1) GT200800201A (no)
HR (2) HRP20120135T1 (no)
HU (2) HUE032660T2 (no)
IL (1) IL193567A (no)
LT (1) LT2363392T (no)
LU (1) LU92232I2 (no)
MX (1) MX2008012527A (no)
NO (2) NO342090B1 (no)
NZ (1) NZ570887A (no)
PL (2) PL2363392T3 (no)
PT (2) PT1999109E (no)
RS (2) RS56171B1 (no)
SG (1) SG173338A1 (no)
SI (2) SI1999109T1 (no)
TW (1) TWI399366B (no)
UA (1) UA97802C2 (no)
WO (1) WO2007126733A2 (no)
ZA (1) ZA200807955B (no)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2007243712B2 (en) * 2006-03-30 2013-01-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Styrylpyridine derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
JP5322180B2 (ja) * 2007-07-04 2013-10-23 国立大学法人東北大学 フッ素およびヒドロキシ基で置換されたアルコキシ基を有するｐｅｔプローブ
US8557222B2 (en) 2008-04-04 2013-10-15 Avid Radiopharmaceuticals, Inc. Radiopharmaceutical imaging of neurodegenerative diseases
UA105914C2 (uk) * 2008-12-31 2014-07-10 Евід Рейдіофармасьютікалз, Інк. Синтез стирилпіридину, міченого радіоізотопом 18f, з тозилатного прекурсора та стабільна фармацевтична композиція на його основі
CA2767475A1 (en) * 2009-07-10 2011-01-13 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Usage of low to medium-pressure liquid chromatography for the purification of radiotracers
US20120263646A1 (en) 2009-10-15 2012-10-18 Guerbet Imaging agents and their use for the diagnostic in vivo of neurodegenerative diseases, notably alzheimer's disease and derivative diseases
EA022447B1 (ru) * 2009-12-23 2016-01-29 Пирамаль Имэджинг Са Композиции, приемлемые для рет-визуализации при помощи гидрофобных рет-агентов
WO2011141515A1 (en) 2010-05-14 2011-11-17 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Diagnostic agents for amyloid beta imaging
MX2012014116A (es) * 2010-06-04 2013-08-08 Piramal Imaging Sa Metodo para la produccion de ligandos beta amiloide marcados con 18f.
SG185785A1 (en) * 2010-06-04 2013-01-30 Piramal Imaging Sa Method for production of f-18 labeled amyloid beta ligand
ES2642086T5 (es) 2010-06-04 2020-04-13 Life Molecular Imaging Sa Procedimiento para la producción de ligandos de beta amiloide marcados con F-18
TWI504414B (zh) 2010-06-04 2015-10-21 Bayer Schering Pharma Ag 生產Ｆ－１８標記之Ａβ配位體之方法
CN101891674B (zh) * 2010-06-24 2012-11-14 山东大学 4-苯乙烯基吡啶类化合物及其制备方法与应用
EP2627361B1 (en) * 2010-10-12 2017-09-20 Mayo Foundation For Medical Education And Research Imaging of meningiomas using phenylbenzothiazole, stilbene, or biphenylalkyne derivatives
US20140079635A1 (en) * 2011-03-30 2014-03-20 Case Western Reserve University Molecular probes for detecting lipid composition
CA3058702C (en) 2011-04-21 2023-11-07 Massoud Akhtari Functionalized magnetic nanoparticles and use in imaging amyloid deposits and neurofibrillary tangles
MX2014004274A (es) 2011-10-19 2014-07-09 Piramal Imaging Sa METODO MEJORADO PARA LA PRODUCCION DE LIGANDOS Aß MARCADOS CON F-18.
SG10201608370TA (en) 2012-04-10 2016-11-29 Lantheus Medical Imaging Inc Radiopharmaceutical synthesis methods
JP6099045B2 (ja) * 2013-04-30 2017-03-22 国立大学法人京都大学 トリアゾロピリミジン誘導体化合物
JP2014218454A (ja) * 2013-05-07 2014-11-20 日本メジフィジックス株式会社 スチリルピリジン誘導体化合物
JP6041751B2 (ja) * 2013-05-07 2016-12-14 日本メジフィジックス株式会社 スチリルピリジン誘導体化合物
CN103645254B (zh) * 2013-11-28 2015-01-07 江苏省原子医学研究所 一种Aβ斑块显像剂前体AV45的含量分析方法
HUE053939T2 (hu) 2014-05-13 2021-08-30 Hoffmann La Roche Deuterált heterociklikus vegyületek és képalkotó kontrasztanyagként való használatuk
AU2016308189B2 (en) 2015-08-18 2021-03-11 The Regents Of The University Of California Nitroxide containing amyloid binding agents for imaging and therapeutic uses
US10300155B2 (en) 2015-12-31 2019-05-28 Washington University Alpha-synuclein ligands
CN109400615B (zh) * 2017-08-18 2021-07-16 上海交通大学医学院附属新华医院 一种靶向β-淀粉样蛋白的香豆素类化合物及其制备与应用
CN108299287A (zh) * 2018-01-02 2018-07-20 北京师范大学 与Aβ斑块具有高亲和力的N2S2类吡啶基苯乙烯化合物
CN114805190A (zh) * 2022-06-08 2022-07-29 吉林大学第一医院 一种甲基苯胺类Aβ蛋白显像剂的双柱合成方法

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1992000963A1 (en) * 1990-07-12 1992-01-23 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Styryl compounds and use thereof as medicine
JPH0545875A (ja) * 1991-08-08 1993-02-26 Konica Corp 感光性組成物
US6020436A (en) * 1993-03-09 2000-02-01 The Chromaline Corporation Photosensitive resin composition
TW544448B (en) * 1997-07-11 2003-08-01 Novartis Ag Pyridine derivatives
WO2001070667A1 (fr) * 2000-03-22 2001-09-27 Bf Research Institute, Inc. Sonde de diagnostic par image, a base d'azobenzene substitue ou d'un analogue de celui-ci, pour les maladies imputables a l'accumulation d'amyloide et composition pour le diagnostic par image le contenant
US8007954B2 (en) 2000-11-09 2011-08-30 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Use of sulfur-containing fuels for direct oxidation fuel cells
JP2002182254A (ja) 2000-12-18 2002-06-26 Fuji Photo Film Co Ltd 非線形光学材料とその製造方法
DK1432453T3 (da) * 2001-08-27 2013-11-18 Univ Pennsylvania Stilbenderivater og anvendelse heraf til binding og billeddannelse af amyloid-plaques
CN1672283A (zh) 2002-06-06 2005-09-21 宾夕法尼亚州大学理事会 陶瓷阳极及其制造方法
WO2004016271A1 (en) * 2002-08-14 2004-02-26 Axxima Pharmaceuticals Ag Pyrimidones as antiviral agents
JP4482352B2 (ja) 2004-03-11 2010-06-16 本田技研工業株式会社 固体高分子型燃料電池
WO2006078384A2 (en) * 2004-12-17 2006-07-27 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Stilbene derivatives and their use
DK2213652T3 (en) * 2004-12-17 2015-01-26 Univ Pennsylvania Stilbene AND USE THEREOF FOR BINDING AND IMAGING OF amyloid plaques
AU2006261917A1 (en) * 2005-06-24 2007-01-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Radiolabeled-pegylation of ligands for use as imaging agents
AU2007243712B2 (en) * 2006-03-30 2013-01-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Styrylpyridine derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
US20080253967A1 (en) * 2007-04-13 2008-10-16 Kung Hank F Halo-Stilbene Derivatives And Their Use For Binding And Imaging Of Amyloid Plaques

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ONO M ET AL, "Synthesis and biological evaluation of (E)-3-styrylpyridine derivatives as amyloid imaging agents for Alzheimer's disease", NUCLEAR MEDICINE AND BIOLOGY, ELSEVIER, NY, US, (200505), vol. 32, no. 4, ISSN 0969-8051, pages 329 - 335, Dated: 01.01.0001 *

Also Published As

Publication number Publication date
IL193567A (en) 2014-03-31
RS56171B1 (sr) 2017-11-30
HUS1300028I1 (hu) 2017-08-28
RS52222B (en) 2012-10-31
US20080038195A1 (en) 2008-02-14
AU2007243712A1 (en) 2007-11-08
SI1999109T1 (sl) 2012-04-30
US20090123369A1 (en) 2009-05-14
EA200870389A1 (ru) 2009-04-28
MX2008012527A (es) 2008-10-14
HRP20120135T1 (hr) 2012-03-31
WO2007126733A3 (en) 2008-03-06
ZA200807955B (en) 2012-11-28
KR101376807B1 (ko) 2014-03-20
UA97802C2 (uk) 2012-03-26
CY2013024I2 (el) 2015-11-04
BRPI0710225B1 (pt) 2021-07-13
ECSP088783A (es) 2008-10-31
CY2013024I1 (el) 2015-11-04
NO20084590L (no) 2008-12-29
SG173338A1 (en) 2011-08-29
KR20080106564A (ko) 2008-12-08
HUE032660T2 (en) 2017-10-30
TWI399366B (zh) 2013-06-21
FR13C0034I2 (fr) 2014-03-07
DK2363392T3 (en) 2017-07-03
EP2363391A1 (en) 2011-09-07
BRPI0710225A2 (pt) 2011-08-02
IL193567A0 (en) 2009-05-04
CA2644530C (en) 2015-05-19
GT200800201A (es) 2009-08-20
HRP20170857T1 (hr) 2017-12-01
EP1999109B1 (en) 2011-12-28
EP1999109A2 (en) 2008-12-10
JP2009532349A (ja) 2009-09-10
US8506929B2 (en) 2013-08-13
SI2363392T1 (sl) 2017-09-29
US8840866B2 (en) 2014-09-23
CA2644530A1 (en) 2007-11-08
PL1999109T3 (pl) 2012-05-31
PT2363392T (pt) 2017-06-15
US7687052B2 (en) 2010-03-30
EP2363392B1 (en) 2017-05-03
US20130129624A1 (en) 2013-05-23
FR13C0034I1 (no) 2013-08-09
PL2363392T3 (pl) 2017-10-31
DK1999109T3 (da) 2012-04-02
LU92232I2 (fr) 2013-08-26
LU92232I9 (no) 2019-01-15
TW200838852A (en) 2008-10-01
NZ570887A (en) 2011-05-27
EA017898B1 (ru) 2013-04-30
CR10329A (es) 2008-10-29
ES2628882T3 (es) 2017-08-04
PT1999109E (pt) 2012-03-16
NO2018030I1 (no) 2018-09-11
LT2363392T (lt) 2017-07-25
CY1113048T1 (el) 2015-11-04
EP2363392A1 (en) 2011-09-07
CN101522624B (zh) 2013-11-06
WO2007126733A2 (en) 2007-11-08
ATE539060T1 (de) 2012-01-15
ES2378785T3 (es) 2012-04-17
CN101522624A (zh) 2009-09-02
AU2007243712B2 (en) 2013-01-10
CY1119048T1 (el) 2018-01-10
JP5290954B2 (ja) 2013-09-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO342090B1 (no) Styrylpyridinderivater og deres anvendelse til binding og avbilding av amyloidplakker
JP4436928B2 (ja) スチルベン誘導体、およびアミロイド斑の結合および画像化のためのその使用
NO339195B1 (no) Stilbenderivater og deres anvendelse til binding og avbilding av amyloide plakk, fremgangsmåte for fremstilling av derivatene, farmasøytiske og diagnostiske preparater derav, og deres anvendelse ved hemming av amyloidplakkaggregering hos pattedyr.
NZ577458A (en) Acetylene derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
JP2006502220A (ja) アルツハイマー病における画像化剤としてのビフェニルおよびフルオレン

Legal Events

Date Code Title Description
SPCF Filing of supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: FLORBETAPIR (18F); NORWEGIAN MARKETING AUTHORISATION: 2013.01.14 , NO , EU/1/12/805 , AMYVID

Spc suppl protection certif: 2018030

Filing date: 20180911

SPCG Granted supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: FLORBETAPIR (18F); REG. NO/DATE: 20130117

Spc suppl protection certif: 2018030

Filing date: 20180911

Extension date: 20280117