CH642849A5

CH642849A5 - Ammidi di acil carnitine, procedimento per la loro preparazione e composizioni farmaceutiche che le contengono.

Info

Publication number: CH642849A5
Application number: CH311080A
Authority: CH
Inventors: Claudio Cavazza
Original assignee: Sigma Tau Ind Farmaceuti
Priority date: 1979-04-23
Filing date: 1980-04-22
Publication date: 1984-05-15
Also published as: IE800801L; IT7948816A0; AU538740B2; ATA215680A; GR68051B; SE8003004L; LU82386A1; DK155595C; GB2051779B; DE3015635C2; SE8003005L; FR2455028B1; AU538739B2; US4439438A; NO151823C; NO801155L; FR2455027A1; JPH0314810B2; NO151822C; BE882937A

Description

La presente invenzione riguarda una nuova classe di ammidi di acil carnitine, i procedimenti per la loro prepa-40 razione e le composizioni farmaceutiche che le contengono.

Più particolarmente, la presente invenzione riguarda ammidi di acil carnitine rappresentate dalla formula generale (I):

45 (ch3)3n-ch2-ch-ch2cor" a)

X- I

or'

ove

X- è un anione alogeno, preferibilmente CI-;

so R' è: acetile; acetile alogeno-sostituito (ad esempio cloro-acetile, dicloro acetile, bromo-acetile e simili); propionile, propionile alogeno-sostituito (ad esempio bromopropionile); butirrile; butirrile alogeno-sostituito (ad esempio cloro butirrile); isobutirrile; ß-idrossi butirrile; aceto-acetile; panto-55 tenile e linoleile; e

R" è: radicale ammino (purché R' non sia acetile), 2-sol-fonil etilammino, (2-idrossi-3-carbetossi-propil) ammino, (l-carbometossi-2-metil-propil) ammino, (I-carbometossi-3--metil-n-butil) ammino, (l-carbometossi-2-metil-n-butil) am-«0 mino, (1,2-dicarbometossi-etil) ammino, (1,3-dicarbometos-si-propil) ammino, {a-carbetossi-benzil) ammino, (4-carbe-tossi-fenil) ammino, (2-mercapto-l-carbometossi-etil) ammino, 2-mercaptoetil ammino, (5-trimetil ammonio cloruro-1--carbetossipentil) ammino, (carbetossi metil) ammino e (car-65 betossi etil) ammino.

È stato trovato che le ammidi di formula (I) possiedono interessanti proprietà farmacologiche e possono pertanto presentare utili applicazioni terapeutiche.

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In particolare:

Le ammidi di formula (I) sono risultate dotate di effetto antifi'bratorio e di un interessante effetto sulla contrattilità cardiaca.

L'attività antiaritmica diretta di tipo chinidinico è completata dalla attività antagonizzante l'adrenalina.

Le ammidi di formula (I) sono inoltre risultate dotate di attività stimolante il sistema nervoso centrale e capaci di abbassare la soglia convulsiva.

Pertanto, le applicazioni terapeutiche riguardano a) la cura delle aritmie funzionali o secondarie a processi miocardio-sclerotici non accompagnate dalla insufficienza della contrattilità miocardica;

b) la cura delle depressioni, in qualità di psicostimolanti cerebrali e come antagonisti de1la depressione da barbiturici.

Le ammidi di formula (I) vengono preparate, secondo l'invenzione, seguendo due distinte vie di sintesi a seconda che l'acil-derivato della carnitina venga alogenato trasformandolo nel corrispondente alogenuro acido e questo venga condensato con la desiderata ammina amminoacido (Procedimento A), oppure l'acil-derivato della carnitina venga direttamente condensato con l'ammina o l'amminoacido in presenza di un opportuno agente condensante (Procedimento B).

Più dettagliatamente il procedimento A comprende i seguenti stadi:

a) aggiungere ad una soluzione di carnitina in un solvente scelto nel gruppo consistente di acidi organici e corrispondenti anidridi, un alogenuro di acile di formula R'X ove R' ha il significato precedentemente indicato e X è

un atomo di alogeno, e mantenere la temperatura della miscela così ottenuta a 15-60°C circa per 4-48 ore circa, ottenendo il corrispondente acil-derivato della carnitina;

b) isolare l'acil-derivato della carnitina mediante aggiunta alla miscela dello stadio (a) di un agente precipitante e purificazione per ripetute cristallizzazioni;

c) far reagire l'acil-derivato della carnitina dello stadio (b) con un agente alogenante in eccesso a 25-60°C circa per 0,3-24 ore circa ed eliminare l'eccesso di agente alogenante, ottenendo il corrispondente alogenuro acido dell'acil-derivato di carnitina;

d) disciogliere l'alogenuro acido dell'acil-derivato di carnitina dello stadio (c) in un solvente anidro inerte;

e) condensare detto alogenuro acido dell'acil-derivato di carnitina con una base organica scelta fra gli esteri di ammino acidi con alcooli alifatici inferiori aventi da 1 a 4 atomi di carbonio e le ammine aventi formula R'H, in cui

R" ha il significato precedentemente menzionato, disciolta in un solvente anidro inerte, mantenendo la miscela risultante sotto agitazione a temperatura ambiente, per 6-48 ore circa, con ottenimento dell'ammide di formula (I); e s f) isolare l'ammide di formula (I) concentrando la miscela dello stadio e purificando per ripetute cristallizzazioni.

L'estere di amminoacido dello stadio (e) viene ottenuto esterificando l'ammino acido preferibilmente con alcool metilico, etilico o isopropilico in presenza di HCl gassoso, io L'estere viene quindi isolato come estere cloridrato. Successivamente:

i) l'estere cloridrato viene sciolto in H20, il pH è portato a neutralità con una soluzione basica satura ad esempio di Na2C03, la soluzione così ottenuta viene estratta ripetu-i5 tamente con cloruro di metilene o cloroformio o etere etilico, la fase organica viene concentrata e l'estere dell'amminoacido viene isolato come base libera e utilizzato tal quale per la reazione con l'alogenuro dell'acil-derivato di carnitina; oppure:

2o ii) l'estere cloridrato viene sospeso in etere etilico, si aggiunge trietilammina o piridina in quantità equimoleco-lare, a temperatura di 0°C; si filtra il cloridrato di trietilammina o piridina formatosi, si concentra la soluzione eterea e l'estere dell'amminoacido isolato come base libera viene 25 utilizzato tal quale per la reazione con l'alogenuro dell'acil-derivato di carnitina.

Secondo il procedimento B, dopo gli stadi (a) e (b) precedentemente illustrati, si procede in accordo ai seguenti stadi consistenti nel:

30 (c') condensare l'acil-derivato di carnitina dello stadio (b) in soluzione acquosa con una base organica scelta fra gli esteri di ammino acidi con alcooli alifatici inferiori aventi da 1 a 4 atomi di carbonio e le ammine di formula R"H in cui R" ha il significato precedentemente menzionato in 35 soluzione di solventi organici in presenza di una soluzione in solvente organico di dicicloesil carbodiimmide, mantenendo la miscela così ottenuta sotto agitazione a temperatura ambeinte per 2-24 ore con formazione dell'ammide di formula (I) e di un precipitato di dicicloesil urea; e « (d'> separare per filtrazione il precipitato di dicicloesil urea e isolare l'ammide di formula (I) concentrando il filtrato, essiccando e cristallizzando ripetutamente da solventi organici.

Nello stadio (d') il solvente organico è preferibilmente 45 acetone. Il rapporto molare acil-derivato di carnitina: ammina (o ammino acido): dicicolesil carbodiimmide è preferibilmente 1:1:2.

I procedimenti A e B per la preparazione delle ammidi di formula (I) sono illustrati nel seguente schema di sintesi:

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CH3

ch^—— f5-ch2-ch-ch2cooh acilazione> ch3//cl" oh stadl (a)' (b)

ch,

ch.— fv|-cho-ch-ch_cooh

V - i 2

ch-

Cl or'

ch-

ch3-

ch-

n-ch2-ch-ch2cooh cl or'

e ,

alogenazione >>

stadio (c)

chi

\ +

ch3--p n -ch2-çh-ch2cox '

ch cl or'

^7^

condensazione con estere di amminoacido (o anrnina) e isolamento stadi (d), (e) e (f)

ch-

ch-3 —n-cho-ch-chncor"

/ _ i 2

ch3 ci or'

I seguenti esempi non limitativi servono ad illustrare la preparazione di alcune ammidi di formula (I).

Esempio 1

Preparazione dell'ammide della acetil carnitina con la taurina (Procedimento A)

Preparazione del cloruro acido dell'aceti! carnitina cloruro.

Ad una sospensione di acetil carnitina cloruro preparato come descritto precedentemente (2 g; 0,01 moli in 30 cc di CH2C12 anidro) venne aggiunto PCI5 (2,1 g; 0,01 moli). La miscela risultante fu tenuta a reagire a temperatura ambiente e sotto agitazione magnetica per 4 ore (il tempo necessario per la solubilizzazione della acetil carnitina). Quindi si evaporò il solvente ed il residuo venne lavato con piccoli volumi di etere etilico per tre volte (30 cc) e tenuto sotto vuoto fino a scomparsa del solvente. Il residuo venne utilizzato tal quale per la reazione successiva.

Preparazione dell'ammide della acetil carnitina con la taurina:

Ad una soluzione raffreddata a 0°-5°C di taurina (2,5 g; 0,02 moli in acqua/acetone 100/150 cc contenente 5 g, 0,06 moli, di NaHCOj) venne aggiunta, goccia a goccia, la soluzione del cloruro acido precedente in acetone anidro (10 cc). Si lasciò reagire a temperatura ambiente per 2 ore. A questo punto si evaporò l'acetone. La soluzione acquosa venne portata a pH 2,5-3 con acido cloridrico diluito e si concentrò sotto vuoto fino a secchezza. Si riprese il residuo con metanolo anidro. Si filtrò l'insolubile ed il filtrato venne precipitato con acetone. Il prodotto precipitato risultò essere l'ammide pura, che venne cristallizzata da etanolo.

(resa: 70%)

P.F.: 290-295°C A.E. CnHjNAS

calcolato C 42.56 H 7,14 S 10,53 trovato C 42,00 H 6,79 S 10,16 Data l'assenza del cloro si determina una struttura tipo sale interno:

(CH3)3N-CH2-CH-CH2C0NH-CH2CH2S03-

30 |

OCOCH3

NMR: S 8,0 (m, IH, CONH); 5,5 (m, IH, CH); 3,7 (d, 2H,

I

35 oco

^N-CH2-); 3,3 (m, 2H, -NH-CH2); 3,1 (s, 9H, N(CH,)3; 2,9 (m, 2H, -CH2-S03); 2,5 (d, 2H, -CH2CO-); DMSO.

40 Esempio 2

Preparazione propionil carnitina ammide della leucina metil estere

Preparazione della propionil carnitina:

45 Del cloruro di carnitina (1,98 g; 0,01 moli) fu disciolto in 5 cc di acido trifluoro acetico, alla soluzione venne aggiunto propionil cloruro (1 cc; 0,01 moli) e la soluzione risultante fu mantenuta a 40-45°C per una notte. La miscela venne raffreddata a temperatura ambiente e si aggiunse so acetone (50 cc) tenendo sotto agitazione per 2 ore. Si filtrò il solido precipitato (carnitina), si aggiunsero circa 30 cc di etere etilico e si lasciò ancora sotto agitazione a temperatura di 0°C. Il solido precipitato venne filtrato e si cristallizzò a temperatura di 0°C. Il solido precipitato venne fil-55 trato e si cristallizzò con etanolo-acetone-etere etilico.

P.F.: 158-160°C A.E. C.10H20ClNO4

calcolato: C 47,34 H 7,94 N 5,52 CI 13,97 60 trovato C 47,22 H 8,09 N 5,50 CI 13,71 NMR: 8 5,69 (m, IH, -CH-); 3,78 (d, 2H, ^N-CH2); 3,27

I

O

[s, 9H, N{CH3)3]; 2,92 (d, 2H, -CH2-CO); 2,71 (q, «s 2H, OCOCH2); 1,11 (t, 3H, -CH2-CH5>D20.

Preparazione della propionil ammide della leucina metil estere:

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A 1,82 g (0,01 moli) di leucinato di' metile cloridrato si aggiunsero 0,8 cc (0,01 moli) di piridina in 15 cc di acetone. Precipitò il cloridrato di piridina che venne filtrato. All'estere metilico della leucina vase libera si aggiunse una soluzione acquosa di g 2,54 (0,01 moli) di propionil carnitina in 3,5 cc. Successivamente alla soluzione si aggiunsero lentamente sotto agitazione g 4,12 di dicicloesil carbodiimi-de sciolti in 5 cc di acetone. Si formò un precipitato di dicicloesil urea che dopo circa 16 ore venne allontanato per filtrazione. Le acque madri vennero concentrate sotto vuoto. Il prodotto grezzo ottenuto fu cristallizzato da metanolo-acetone, con ottenimento di un prodotto solido, molto igroscopico. (Resa: 75%).

(50 mi). La miscela di reazione fu lasciata per un giorno a temperatura ambiente, sotto vigorosa agitazione. Si formò un precipitato. Il precipitato costituito da dicicloesil urea venne filtrato ed il filtrato fu concentrato fino a totale 5 eliminazione del tetraidrofurano. La soluzione acquosa residua venne lavata con CHC13 (2 X 50 mi), quindi evaporata a secchezza. Il solido grezzo venne ripreso con CH3CN (30 mi), lasciando la risultante miscela a 0-5°C per 2 ore. Dopo aver filtrata l'eventuale acetil carnitina non reagita, io dalla soluzione filtrata, per aggiunta dì acetato di etile-etere etilico, cristallizzò il prodotto come solido molto igroscopico, che venne conservato sotto azoto ed in ambiente anidro.

A.E. C17Hm05N2C1 calcolato: trovato:

C 53,59 H 8,75 N 7,37 CI 9,31 C 53,63 H 8,71 N 7,33 CI 9,36

NMR: 8 5,69 (m, -CH-); 3,78 (d, ^N-CH-CH2-); 3,78 (s,

-COOCH3); 3,27 [s, N(CH3)3]; 2,92 (d, -CH2CO); 2,71 (d, -OCOCH2-); 1,52 (m, -CH2-CH) 1,11 (t, CH3

-CH3); 0,95 (d, C^. ); 4,52 (m, N-CH-); D20. CH,

is NMR 8 (D2): 2,06 (3H, s, -OCOH3); 2,66 (2H, d, -CH2, d, -CH2CONH-); 3,16 [9H, s, (CH3)aN-]; 3,61-4,18

F

[2H, m (CH3)3N-ÇH2; 2H, m, F^C-CH2); 5,48 (1H, 20 F

m, -ÇH- ); 9,21 (1H, d, -CONH-).

I

OCOCH3 A.B. CuH20C1F3N2O3

25 calc.: C 41,36 H 6,70 Cl 11,12 F 17,68 N 8,65

trov.: C 41,19 H 6,59 Cl 11,05 F 17,77 N 8,73

Esempio 3

Preparazione dell'acetil carnitina ammide della fenilglicina etilestere (Procedimento A)

10 g di fenilglicina vennero aggiunti a 150 ml di etanolo assoluto. Nella risultante miscela venne fatto gorgogliare HCl gassoso, a tempera ambiente, sotto agitazione, finché tutta la fenilglicina non si sciolse. La risultante soluzione fu tenuta a ricadere per tutta la notte e quindi raffreddata ed evaporata sotto vuoto. Il residuo venne ridisciolto in acqua e neutralizzato con NaHC03. La fenilglicina etilestere base libera venne estratta con CH2C12.

Ad una soluzione di 1,8 g (10 m moli) di fenilglicina etilestere base libera, sciolta in 10 mi di CH2C12 si aggiunse una soluzione del cloruro dell'acetil carnitina (10 m moli in CH2C12). La miscela venne mantenuta sotto agitazione tutta la notte a 50°C e quindi raffreddata e addizionata di etere etìlico (50 mi), con formazione di un olio. L'olio formatosi venne disciolto in una miscela di etanono:acetone (5:1) e riprecipitato con etere.

NMR (DMSO): 8 = 1,1 (t, -CH,-CHa); 2,0 (s, -CO-CH,);

2,8 (d, -CHP-COO-); 3,2 (s, -{CH^-N); 3,5 (d, -N-

-CH2); 4,0 (q, -CH2-CH3); 5,4 (s, -CH-^""\) );

5,5 (m, -CH2-CH-CH2-); 7,5 (s,(/ \)\ 9,2 (d,

CO-NH-) 1 \—/

calcolato: C 56,92 H 7,29 N 6,99 CI 8,84

trovato: C 56,84 H 7,31 N 6,89 CI 8,72

Esempio 4

Preparazione dell'acetil carnitina trifluoro etil ammide (Procedimento B)

Ad una soluzione di 2,2,2-trifluoroetilamina cloridrato (2,7 g; 0,02 moli) in tetraidrofurano (150 mi) e trietilamina (2,8 mi; 0,02 moli) venne aggiunta acetil carnitina cloruro (4,8 g; 0,02 moli) in acqua (10 mi) ed infine N,N'-dici-cloesil carbodiimide (4,2 g; 0,02) sciolta in tetraidrofurano

Attività farmacologiche

Le attività farmacologiche dei composti oggetto dell'in-30 venzione sono state studiate con le seguenti tecniche:

a) Tossicità acuta (DL50)

È stato impiegato il metodo descritto da Weil C.S. in Tables for convenient calculation of median-effective dose 35 (LD50 or ED50) and instructions in their use, Biométries, 249-263, 1952.

La tollerabilità delle sostanze oggetto di studio è stata studiata dopo somministrazione per via e.p. o per os nel topo. I risultati ottenuti indicano che le sostanze oggetto di 40 studio sono nettamente tollerate (si veda la tabella I).

b) Effetto inotropo

Cuori di coniglio isolati secondo Langendorff sono stati perfusi con una soluzione di Ringer ossigenato a 38,2°C. 45 Le contrazioni isometriche, l'elettrocardiogramma ed il flusso coronarico erano registrati adoperando un poligrafo «Battaglia-Rangoni».

Togliendo l'ossigeno dal liquido di perfusione veniva indotto un danno metabolico nel muscolo cardiaco, fino 50 alla riduzoine dell'80% della forza delle contrazioni.

In queste condizioni di anossia prolungata la glicolisi aerobica del miocardio viene rallentata, con accumulo di cataboliti acidi, dovuti sia al ristagno di acido piruvico sia alla sua trasformazione in acido latico che non può essere 55 utilizzato a causa della depressione degli enzimi piridinici, come la latticodeidrogenasi. Ciò ha ripercussioni sulla glicolisi anaerobica interessando un numero sempre crescente di enzimi, con un progressivo e sempre più critico esaurimento del miocardio. Si passa così attraverso tutta una m serie di livelli di affaticamento del muscolo cardiaco che vengono visualizzati dal comportamento dei parametri presi in esame e cioè la forza delle contrazioni, la portata coronarica, la frequenza cardiaca, il ritmo cardiaco. Non appena la forza delle contrazioni' si era ridotta dell'80%, il 65 liquido di perfusione veniva nuovamente ossigenato senza aggiunta di altre sostanze (controlli) o con l'aggiunta delle sostanze oggetto di studio a varie concentrazioni.

È stata presa in esame la forza delle contrazioni del

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La mortalità è stata controllata per 36 ore e l'effetto dei farmaci espresso in % di animali sopravvissuti rispetto a quelli tratti è riportata nella tabella I.

5 e) Antagonismo al cardiazólo

Ratti Albino Wistar femmine del peso di 120-150 g, poste in gabbie individuali, ricevevano le sostanze oggetto di studio (mg kg-1 os) e dopo 30 min 100 mg/2 al ml/kg di cardiazolo.

io La percentuale di animali protetti dalla morte in convulsione rispetto ai controlli nelle 5 ore successive alla somministrazione è riportata in tabella II.

f) Effetto sulla motilità spontanea 15 Topi Albino Swiss maschi del peso di 18-22 g divisi in due gruppi di 5 e stabulati per almeno 1 settimana, ricevevano le sostanze oggetto di studio o il veicolo (gruppo di controllo) e rimanendo nella loro gabbia venivano posti sull'ANIMEX (Farad-Sweden) che registrava i movimenti 20 per 2 periodi di 30 minuti a cominciare da 5 minuti dopo la somministrazione dei composti.

I risultati, espressi come variazione percentuale del numero dei movimenti spontanei compiuti dagli animali trattati rispetto a quelli propri degli animali di controllo sono 25 riportati in tabella II.

g) Interazione coi barbiturici Topi Albino Swiss maschi del peso di 18-22 g divisi in gruppi di 10 ricevevano le sostanze oggetto di studio (mg 30 kg-1 os) o il veicolo (gruppo di controllo) e dopo 30 min 75 mg kg-1 e.p. di Evipan. Veniva misurata la durata dell'assenza del riflesso di raddrizzamento e la differenza col gruppo di controllo calcolata in % è riportata in tabella II.

TABELLA I

Attività farmacologica di alcune amidi della Carnitina.

DL 50 per via endoperitoneale e orale nel topo, attività antifibrillatoria nel topo, attività antagonizzante l'adrenalina nel topo e attività inotropa sul cuore isolato di coniglio.

ch3

ch3^n+—ctt;—ch—ch2—coor'

ch3 1

or'

DL 50 mg kg-1 e.p. os

Attività

Antifibrillatoria (dose mg kg-1 e.v.) % riduzione

Attività Àntiadrenalina (dose mg kg-1 e.p.) % riduz. mortalità

Effetto inotropo (dose IO-5 g l-1 % del controllo r' =

-coch3

r" =

2 solfonil etile amino

1500

4000

70 (300)

65 (450)

+62

2 idrossi-3-carbetossi-propil amino

450

1300

65 (50)

60 (70)

+53

1 carbometossi-2-metil-propil amino

600

2400

100 ((50)

80 (50)

+70

1 carbometossi-3-metìl-butil amino

1000

3500

70 (50)

75 (50)

+45

1 carbcmetossi-2-metil-butil amino

500

1200

65 (40)

50 (100)

+45

( 1,2-dicarbometossi-etil) amino

1500

4200

80 (75)

55 (300)

+48

(1,3-dicarbometossi-propil) amino

1000

3600

65 (20)

40 (150)

+40

r' =

o-co-ch2-ch3

R» =

2 solfonil etil amino

1500

4000

95 (150)

70 (300)

+50

1 carbometossi 2 metil propil amino

500

1350

60 (35)

40 (50)

+65

1 carbometossi 3 metil butil amino

600

2350

75 (50)

70 (100)

+45

1 carbometossi 2 metil butil amino

750

2500

65 (50)

50 (100)

+65

1,2 dicarbometossi etil amino

590

1800

70 (40)

70 (100)

+50

1,3 dicarbometossi propil amino

400

1200

60 (IO)

40 (70)

+45

r' =

o-co-ch2-ch2-ch3

r" =

2 solfonil' etil amino

1500

4000

60 (50)

50 (300)

+40

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cuore, esprimente un effetto inotropo positivo, dopo 10 minuti dall'interruzione del periodo di anossia (ristoro del miocardio).

I risultati valutati con il test del «t» di Student hanno mostrato che le sostanze oggetto di studio inducono un effetto inotropo positivo statisticamente significativo rispetto ai controlli. Nella tabella I sono riportati i valori percentuali di aumento rispetto ai controlli.

c) Effetto antiaritmico

Per valutare l'attività antiaritmica dei vari derivati della carnitina studiati con test in vivo in aggiunta e in confronto a quelli in vitro usualmente impiegati, si è utilizzato il metodo descritto di Nwangwu et al. (Arch. Int. Pharma-codyn., 1977, 229, 219).

In questo metodo si infonde nella vena caudale del topo una soluzione di aconitina e si rileva il tempo di comparsa dell'aritmia e tachicardia da 2 a 60 minuti dalla somministrazione delle sostanze oggetto di studio.

L'attività antiaritmica calcolata dall'aumento del tempo di latenza per la comparsa delle aritmie degli animali trattati rispetto a quelli di controllo è riportata nella tabella I.

d) Effetto antagonizzante l'adrenalina

Topi Albino Swiss maschi del peso di 12-22 g, divisi in gruppi di 10, sono stati trattati con le sostanze oggetto di studio o con soluzione salina (controllo) per via e.p. e dopo 30 min con adrenalina (trattato) in dose capace di causare la morte nel 100% degli animali di controllo per fibrillazione ventricolare e per lesioni cardiache conseguenti l'aumento della frequenza, della pressione e del consumo di ossigeno da parte del miocardio.

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TABELLA II

Attività farmacologica di alcune amidi della Carnitina.

Antagonismo al cardiazolo nel ratto; interazione coi barbiturici nel topo; effetto sulla motilità spontanea nel topo.

CH,

CH3^N+—CH2—CH—CH—COOR'

CH,

OR'

Antagonismo al cardiazolo (dose mg kg-1 e.p.) % protezione dalla morte

Interazione barbiturica (dose mg kg-1 e.p.) % riduzione perdita del RR

Attività motoria spontanea (dose mg kg-1 e.p.) % increm. rispetto ai controlli (a)

R' =-COCH3

R" = 2 solfonil etile amino 65 (150)

2' idrossi-3-carbetossi-propil amino 70 (150)

1 carbometossi-2-metil-propil amino 84 (100)

1 carbometossi-3-metil-butir amino 60 (150)

1 carbometossi-2-metil-butil amino 53 (100)

(1,2-dicarbometossi-etil) amino 75 (100)

(1,3-dicarbometossi-propil) amino 70 (50)

R' = 0-C0-CH2-CH3

R" = 2 solfonil etil amino 40 (150)

1 carbometossi 2 metil propil amino 38 (35)

1 carbometossi 3 metil butil amino 32 (50)

1 carbometossi 2 metil butil amino 39 (50)

1.2 dicarbometossi etil amino 51 (40)

1.3 dicarbometossi propil amino 47 (50)

R' = 0-C0-CH2-CH2-CH3

R" = 2 solfonil etil amino 58 (50)

30 (100) 25 (50) 40 (50) 35 (50) 35 (40) 20 (75) 40 (20)

60 (100) 58 (50) 31 (100) 27 (100) 25 (100) 50 (50)

70 (50)

+25 (50) + 30 (50) + 50 (35) +28 (25) + 34 (25) + 60 (50) + 19 (25)

+40 (50) +75 (25) + 62 (50) + 35 (100) +59 (25) +25 (50)

+43 (50)

RR = riflesso di raddrizzamento, tempo medio del controllo: 48 min.

(a) = valore nel controllo: 850 ± 65 in 30 min. di esperimento (5 topi X gabbia).

I composti della presente invenzione vengono somministrati oralmente o parenteralmente, in qualsiasi delle usuali forme farmaceutiche che vengono preparate mediante procedure convenzionali, ben note agli esperti di queste tecniche. Queste forme comprendono forme di dosaggio unitario orale, sia solide che liquide, come ad esempio pastiglie, capsule, soluzioni, sciroppi e simili, e forme iniettabili quali ad esempio soluzioni sterili per ampolle e fiale.

Per tali forme farmaceutiche vengono impiegati gli usuali solventi diluenti ed eccipienti. Facoltativamente possono venir aggiunte sostanze conservanti, edulcoranti ed aromatizzanti. Esempi non limitativi di tali sostanze sono sodio carbossimetilcellulosa, polisorbato, mannitolo, sorbitolo, amido, talco ed altre cihe risulteranno evidenti agli esperti di tecnica farmaceutica.

La dose che viene somministrata verrà determinata dal medico curante tenendo conto dell'età, peso e condizioni generali del paziente, usila base di una appropriata valutazione professionale. Sebbene dei risultati efficaci possano venir notati perfino a delle dosi da 5 a 8 mg/kg di peso

40 corporeo al giorno, una dose fra circa 10 e circa 50 mg/kg generali del paziente, sulla base di una appropriata valuta-ritenuto necessario, si potranno somministrare delle dosi maggiori, a causa della scarsa tossicità dei composti dell'invenzione.

45 Non limitativamente, a seconda della forma farmaceutica di somministrazione, i dosaggi previsti sono i seguenti:

per le fiale per le capsule per le compresse per le soluzioni orali da 5 a 500 mg da 15 a 50 mg da 15 a 500 mg da 15 a 50 mg v

Claims

642849

1. Ammidi di acil carnitine rappresentate dalla formula generale (I):

(CH3)3N-CH2-CH-CH2-COR" (I)

x- |

OR'

ove

X~ è un anione alogeno;

R' è: acetile; acetile alogeno-sostituito; propionile; propugnile alogeno-sostituito; butirrile; butirrile alogeno-sostituito; isobutirrile; ß-idrossi butirrile; aceto-acetile; panto-tenile e linoleile, e

R" è: radicale ammino (purché R' non sia acetile), 2-sol-fonil etilammino, (2-idrossi-3-carbetossi-propil) ammino, (l-carbometossi-2-metil-propil) ammino, (l-carbometossi-3--metil-n-butil) ammino, ( 1 -carbometossi-2-metil-n-butil) ammino, (1,2-dicarbometossi-etil) ammino, (1,3-dicarbometossi--propil) ammino, (a-carbetossi-benzil) ammino, (4-carbetossi--fenil) ammino, (2-mercapto-l-carbometossi-etil) ammino, 2-mercaptoetil ammino, (5-trimetil ammonio cloruro-l-car-betossipentil) ammino, (carbetossi metil) ammino e (carbe-tossi etil) ammino.

2. Ammidi secondo la rivendicazione 1 caratterizzata dal fatto che detto acetile alogeno-sostituito è scelto fra cloro-acetile, dicloro-acetile e bromo-acetil; detto propionile alogeno-sostituito è bromopropionile e detto butirrile alogeno-sostituito è clorobutirrile.

2

RIVENDICAZIONI

3. Ammidi secondo la rivendicazione 1 caratterizzata dal fatto che X~ è CI-.

4. Procedimento per la preparazione delle ammidi di formula (I), caratterizzato dal comprendere gli stadi di:

(a) aggiungere ad una soluzione di carnitina in un solvente scelto nel gruppo consistente di acidi organici e corrispondenti anidridi, un alogenuro di acile di formula R'X ove R' ha il significato precedentemente indicato e X è un atomo di alogeno, e mantenere la temperatura della miscela così ottenuta a 15-60°C circa per 4-48 ore circa, ottenendo il corrispondente acil-derivato della carnitina;

(b) isolare l'acil-derivato della carnitina mediante aggiunta alla miscela dello stadio (a) di un agente precipitante e purificazione per ripetute cristallizzazioni;

(c) far reagire l'acil-derivato della carnitina dello stadio (b) con un agente alogerante in eccesso a 25-60°C circa per 0,3-24 ore circa ed eliminare l'eccesso di agente alo-genante, ottenendo il corrispondente alogenuro acido del-l'acil-derivato di carnitina;

(d) disciogliere l'alogenuro acido dell'acil-derivato di carnitina dello stadio (c) in un solvente anidro inerte;

(e) condensare detto alogenuro acido dell'acil-derivato di carnitina con una base organica scelta fra gli esteri di ammino acidi con alcooli alifatici inferiori aventi da 1 a 4 atomi di carbonio e le ammine aventi formula R'H, in cui R" ha il significato precedentemente menzionato, disciolta in un solvente anidro inerte, mantenendo la miscela risultante sotto agitazione a temperatura ambiente, per 6-48 ore circa, con ottenimento dell'ammide di formula (I); e

(f) isolare l'ammide di formula (I) concentrando la miscela dello stadio (e) e purificando per ripetute cristallizzazioni.

5. Procedimento per la preparazione delle ammidi di formula (I) caratterizzato dal comprendere gli stadi di:

(a') aggiungere ad una soluzione di carnitina in un solvente scelto nel gruppo consistente di acidi organici e corrispondenti anidridi, un alogenuro di acile di formula R'X ove R' ha il significato precedentemente indicato e X è un atomo di alogeno, e mantenere la temperatura della miscela così ottenuta a 15-60°C circa per 4-48 ore circa, ottenendo il corrispondente acil-derivato della carnitina;

(b') isolare l'acil-derivato della carnitina mediante aggiunta alla miscela dello stadio (a') di un agente precipitante s e purificazione per ripetute cristallizzazioni;

(c') condensare l'acil-derivato di carnitina dello stadio (b) in soluzione acquosa con una base organica scelta fra gli esteri di ammino acidi con alcooli alifatici inferiori aventi d'à 1 a 4 atomi di carbonio e le ammine di formula R"X io in cui R" ha il significato precedentemente menzionato in soluzione di solventi organici in presenza di una soluzione in solvente organico di dicicloesil carbodiimm'ide, mantenendo la miscela così ottenuta sotto agitazione a temperatura ambiente per 2-24 ore con formazione dell'animine di i5 formula (I) e di un precipitato di dicicloesil urea; e

(d') separare per filtrazione il precipitato di dicicloesil urea e isolare l'ammide di formula (I) concentrando il filtrato, essiccando e cristallizzando ripetutamente da solventi organici.

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6. Composizione farmaceutica oralmente o parenteral-mente somministrabile per il trattamento di aritmie funzionali o secondarie a processi miocardio-sclerotici, caratterizzata dal comprendere ima quantità terapeuticamente efficace di una ammide di formula (I) e un eccipiente farma-25 cologicamente accettabile.

7. Composizione farmaceutica oralmente o parenteral-mente somminstrabile attiva quale psicostimolante cerebrale ed antagonista delle depressioni da barbiturici, caratterizzata dal comprendere una quantità terapeuticamente efficace

30 di una ammide di formula (I) e un eccipiente farmacologicamente accettabile.

8. Composizione farmaceutica secondo le rivendicazioni 6 o 7 sotto forma di dosaggio unitario, caratterizzata dal comprendere da 5 a 500 mg di ammide di formula (I).