SE448375B - Estrar av acyl-karnitiner, sett att framstella desamma och farmaceutisk komposition innehallande sadana estrar - Google Patents

Description

v448 375 @ 2:a ocn snabbt koncentratí_onssankning_ i blodet., Föreningarna utÅ i övar cerebrala neurokemiska effekter bestående í föränd- e ringar i-centrala sertotoninergiska aktiviteter., Föreningarna kan därför användas terapeutiskt) a) för behandling av. nypokentrakviiite-a hos hjärtats i som, ej. åtföljs .av Ifytmstörningar, som t..ex.,e vid. hjärt-snack förorsakad av primär frånvaro av kontraktionskraft och i b) i som lugnande medel :i fall-nav störd sömn., Enligt uppfinningen framställas estrarna med formeln genomfatt utgå från karnitinhydroklórid och följa två I skilda syntesvàígarxeberoende på huruvida antingen hydroiqvlä gruppen i karnitingförst överföres till en acylgrupp och därefter karboxflgruppen i) karnitin föl-saraaa (meandi i) eller karb-oxylgruppen i karnitin först förestras och där- _) eefterehydrozqvlgzuppen iekarnitin »överföras till en acylgrupp- (metod _13). * . g . _ _ _ Närmareibestämti innefattar metod A följande steg: i g a) till -en karnitinlösning i ettïlösningsmedel valt) -blandorganiska syror och-motsvarande anhydrider sättes en - g acylhalogenid med formeln RfX, i vilken R' har ovan angiven p* betydelse och X betecknar en halogenatom, varefter tempera- turen pâden sålunda erhållna blandningen upprätthàlles under i ' ca 4 -f 48 timmar under bildning av motsvarande acylderivataav karnitin, g g i g g i * b.) acylderivatet av karnitin isoleras genom att till blandningenfrån steg (a) sätta ett utfälolningsmedel och företa reningogenom upprepad krístallisation, oc) i acylderivattet av ekarnitin från steg (b) omsättes .med ett jöverskott av ett. halogeneringsmedel vid ca 25 - 60°C under, goa 0,5 - ooh överskottet av halogenerings- medlet avlägsnas, varigenom erhålles motsvarande syrahalo- genid av aoylderivatet' avgkarnitixn i g i d) syrahalogeniden av aoylderivatet av karnitin från g steg (c) konderíseras med en alkohol medformeln P/'Hg i vil- ken R” har ovan angiven 'betydelsze., evarvid temperaturen på sålunda erhâllen blandning under omr-öring hålles vid rums- temperatur under ca'2 e 24 timmarunder bildning av festern I een' ' i i ' i ' i i “ i e) 'estei-n' isoleras genom att blandningen från steg _ v m. dc a448 375 , 3: g (d) isoleras och underkastas upprepad kristallísation i Qr- ganiska lösningsmedel. av g f Metod A kan illustreras med följande syntesschema 1: Kl» e: * a i i g .i . + -N-CH -cmcn cos . aålfiWflng en -w-ofi -cH-cflgcofl ß/s 2 I 2 i ”rr-vr 5/ i 2 I _0115 01' on e o 55995 (aÉfb) 0115 _01" _03' GH i en ä” “â\\+ 'e 'g ~ halogenerínâia GH _-“-N-cH2--(l;;1_.cH2dooH 5 _ , _ ¿ GHB-snfcng-GH-cfiacox _,//” _ '_ steg (c) Cfiïf/i _ I ' e CH Gl OR 7 _ ' _, Cl OR 5 . i . gfg f g , ¿ e 5 ' CH i f kondensation CH5 \¿L\+ _ . och isolering i \\\\+ CH5-vN:CH2-CH-CH2COX' f--*Q---ä CH5-N~CH?-CH-CHQCOR ~ _ j a, i i Stes (d), (e) _ , 57 Cl- R 7 - _ CH5 -Cl OR *'I steg (a) är den organiska syran eller motsvarande an- hydrid, vari karnitin är löst¿ företrädesvis halogenerad, Särskilt föredragna lösningsmedel är trifluorättiksyra ooh' triklorättiksyra. I " i ' A I steg (b) väljes utfällningsmedlet företrädesvis Bland_estrar och ketoner och isynnerhet föredras etyleter.

I reningssteget genom upprepad kristallisation av karnitinf -acylderivatet föredras etanol¿'aceton, isopropanol och eacetonitril._ I steg (0) är halogeneringen företrädesvis en klorure- *ringz Klorureringen.utföres företrädesvis med_tíonylklorid vid - ca 40 - 50°C under ca 20 -i4O minuter eller med oxalylklorid vid rumstemperatur under ca-5 - 5 timmar eller med fosfor- :pentaklorid i ett organiskt medium (t.ex.-kloroform) vid- g rumstemperatur-under ca 22 4 26 timmar. i I steg (d) utföres kondensationen genom att till den nvalda alkoholen sätta halogeniderna av karnitinacylderivaten som sådana eller lösta i ett organiskt vattenfritt, ínert lös- ningsmedel, t.ex. kloroform eller metylenklorid. a 'imetoa Binnëfattaif säljande steg: i ö-i(a') karnitin suspenderas i den önskade alkoholen R"H;e i' ' 443 375 ' * o i se 4 (b') ïsnspensíonen från steg (a'§ omsättes med en vat~ tenfri Oorganisk syra tills den suspenderade karnitínen helt lösts upp, varigenom erhålles motsvarande esten, dl' d(o')¶ estern från steg (b') omsättes med ett över- l skott av aoylhalogenid med formeln R'X, i vilken R' här ovan vangiven betydelse och X betecknar en halogenatom, varvid tem- peraturen pà sålunda ernåilen blandning hålles vid ca 25_¥ _ '_ I @ 4990 uuden cs 2d- 24 timmar under erhållande av motsvarande e ester ev acylderivatet_av karnitin med formeln I, J (d') dblandningen innehållande estern med formeln I behandlas med ett organiskt lösningsmedel, i vilket överskot- tet av acylhalogenid är lösligt, i syfte att separera detta acylhslogenidöverskott från estern ooh “ - (e') estern med fiormeln I renas genom uppnepad dkrístallisatíons Metod B kan illnstneràs med följande syntesschemadâz ' ' of “ CH nd + s -o " förestring + d 1 \å\* -cflfcfl coon - \å\* šš Q H -NFCH ---+--f--e> GH -n>oH -GH-GH ooR¶soo ß/mf* 2 sfieevec1f> eš/ _2 2 GH *cl ; on e - _ s CH G1 e OH 5- d ¶ - 5 CH :s+ 1 -J I scylerdng ocnd qÉå\\+ d A _ CH5. -oH2-CH-cfigcoafl 1s°1er1ng 3) on +en>cH¿~cH-cH2coR" __ I s '""**""7“"”“*ï“"' e,. s” o Gfišf/cl" OH e 1oÉ:?§e(° 31 (¿ )> GH5 cl* s R' H I steg (b') utföres förestrinåen företrädesvis genom: satt antingen låta bubbla gasformig E01 genom;suspensionen av o kaynitin i alkohol tills den suspendenede fasen försvunnit eller genom att till karnitinsnspensíonen í alkohol sätta koncentrerad svavelsyra och upphetta blandningen till åter- dflödestemperatur tills den suspenderade fasen försvunnit. s _vid ca 2 : 1. d I steg (c') är acylhàlogeniden vanligen en àcylklorid (t.ex. acetyl-, propíonyl-¿eller butyrylklorid). Överskottet av acylklorid i fönhållsndeitill karnitinester erhållen i > steg (b') är sådant att moliörhållandet mellan de två före~ o ; » ¶ V ningarná ligger mellán73 : 4 och 1,5 : 1 och företrädesvis /I .“~ Efterföljande icke begränsande exempel avser att be« 7 lysa fnamställningen_av vissa estrar odnoamider enligt uyp- __. 448 375 j finníngen. _ Framställning av acetylkarnítinisopropylester (metod A)_ Framställníng av acetylkarnitinklorídzl 5 2 8 karnitinkloria 1ösfes.1 20 ml isäetika och 10 ml -acetylklorid sattes därtill. Reaktionsblandningen hölls vidg rumstemperatur under 48 timmar. Överskottet av acetylklorid Aogoeh lösningsmedel avlägsnades under vakuum genom upphettníng på ett vattenbad vid 5000. Återstoden underkastades kristal- lisatíon ur isopropanol-etyleter och en ren produkt erhölls. smp.= _.1ss°c-çsönaeraelning) 5' du Utbyte! 80 % , V I C H N .Elementaranalys C CINO : beräknat 42,55 8,46 7,09 17,94 . - 16 5 funnet 42.59 8.18 7,20 17,65 tums: 6'5,5o (M,1H,-GH-); 5,82 š-CH -); 5,20 (s,9H, Ä 2 + _ OCO _ (CH5)5N#); 2,68 (d,2H,-GH2-CO); 2,02 (s,3H,COCH3);D2O.

Framställning av syrakloriden av aeetylkarnitinklorid: 2 g (0,01 mol) acetylkarnitinklorid framställd enligt ovan suspenderades i 5 ml oxalylklorid. Reaktionsblandningen' hölls vid rumstemperatur under 4 timmar. Överskottet av oxalyleg kloriduavlägsnades därefter genom indunstning i vakuum. Åter- stoden tvättades tre gånger med små volymer (10 ml) vattenfri etyleter och hölls under vakuum tills lösníngsmedlet helt I försvunnit. Äterstoden användes i nästa steg. lFramstäl1níng av acetylkarnitinisopropylester: » ,2 g av ovan erhållna syraklorid omsattes med ett_över- skott av isopropanol (8 ml) vid rumstemperatur under magnet- omröring under 5 timmar. 400 ml etyleter sattes därefter till reaktionsblandníngen, Därpå avsatte sig en tjockflytande olja.

Modervätskorna avdekanterades och fällningen togs upp i vat~ ltenïri CHBGN. Oreagerad acetylkarnítin separerades från den klara lösningen och frånfiltrerades. Överskottet av CH5CN in~ I dunstades. Återstoden torkades över P2O5 och befanns vara den önskade produkten. W 5 W Utbyte=2 75 % 0 I l_ to H N Elementaranalys G12H24ClN04% beräknat 51,15. 8,58 4,97 . funnet 51,005 8,55 4,81 , V($15Hs"COCH5)-S 'H5 (dsöfrïicícczïå )§' CD 'eUtby-be: eo % ' 4480 osivšs enfas _ WR: 6 5s6 '(m11VH*TCH")"§_59^-¿'(fn11H-> *ÜH.\ )š äs? (degli) ;'N"CH2“)§.5a2 (ssgHåN 2%? ((192H§-"CH2"C0)§ 291 CN° ' 5 e e 5 Exem2ela2 __Framställning av-estern av acetylkarnitinkloriå-med etyl- 0-6-hydroxibutyrat (metod A) 0 ' 0 framställning av etylester av 5-hydroxismörsyra: en lösning av 5-hydrdxismörsyra (2_g, 0¿02¶mol) i 50ml absolut etanol och 2 ml koncentrerad svavelsyra hölls vida återflödestemneratur ünder 15 timmar. Etanolen indunstadese och återstoden togs upp i vatten och etyleter, Den orga- níska_fasen tvättades med utspädd NaHC05-lösning och där-v efter med mättad Naclflösníng tills neutral reaktions upp- nåtts. Lösningen torkades därefter över vattenfritt Na2SO4, ö iiltrerades och indunstades tills en återstod erhölls, vil- ken befanns vara etylestern av 5-hydroxismörsyra. Denna iförening användes i nästa reaktionsstegè Framställning av estern av acetylkarnitin med etyl-ß- 0 -hyaroxíburyra1š; j - i till en lösning av syrakloriden av acetylkarnítin framställd som i exempel 1o(0¿01 mol i'50 ml vattenfri CHàGl2) sattes etylestern av B-hydroxismörsyra framställd enligt ovan 'och löst i_2O ml vattenfri CH2Clá¿ Eeaktionsblandningen hölls under omröring vid rumstemperatur under 5 timmar. Därefter tillsattes 100 ml etyleter. En tjockflytande olja avsatte sig därefter. Lösningen.dekanterades och återstoden tvätta~ 0 des_ïörst med 50 ml etyleter och togs_därefter upp i vatten- 0 fri CH5GN. Ur lösningen avskildes kristaller av acetylkar- nitin, vilka_frånfiltrerades. Eiltratet utfälldes på nytt med etyleter. Den avsatta substansen togs upp med vattenfri GH5CN,ofiltrerades och indunstadesß_Enatjockflytande olja er- hölls, vilken torkades i närvaro av 3205. _ a a a C H N * Elementaranalys C15H28CIN05:~ beräknat 1 50,77 7,95 10,02 ' v funnet _ o50,51 7,65 10,17 0 fu -Jv É 4482375 7 2 NMR= 6 5,6 Cm, 13, §;v+ca2-§H)§ 5,2 (m,1H,-oH_ø-co-3; 4,1 (qvzfls Q'CH2“CH5)š Éva (aj QÉS ÉšN;CH2”>§ 5s2 (sa9Hs N (cH¿)5); 2,7 (m, un, fcH2cooo~tH ); 2,1 (s,3H,cH3co); 1* ¿ = f cfizcoo 2 1,5 (m9 .DMSOo V Exèmgel 5 9 _ Framställning-av niopíonvlkarnitinisopropylester (metod Bl fFramställning>avökarnitínisopropylester: 1,98 g (0,01 mol) karnitin suspenderades i 10 ml iso- ipropanol. Vattenfri;_gasformig saltsyra bubblades genom sus~ ' ¶ pensionen vid 590 tills mättnad uppnåtts. Därefter hölls lös- ningen vid 6000 undan 3 timmar; Lösningen koncentrerades där- 2 efter i vakuum och återstoden kristalliserades ur isopropa- nolfetyleterfl sm@.= ' 1 145°c_- 15090 fllïfbyte! V65 % ' I i I 0% 31% N70 ~ 01% elementaranalys2C1oH22GlNOš: beräknat 50,10- 9,92 5;84 14,79 I '* i CH _funnet 49,65 9,21 §,46 14,49 omv 625.1 oèqnfr; O-GHÅCHÉJ; 4,5 (dold. 91); ms (dßfi, -acfljí 5 ); D20. . _CH * Framställning av propionylkarnitinisopropylester: till 1eg (O;0O5 mol) av ovan erhållen karnitinisopro- pylester sattes 1 ml (0,01 mol) pfopionylkloridm Den.resulte~2 rande blandningen hölls under omröring vid rumstemperatur itills karnitinisopropylestern efter 24 timmar helt gått i lös- 2_ ning. Till sålunda erhållen lösning sattes etyleter, varvid en trögflytande olja utfälldes, vilken snabbt togs upp i iso- propanoleetjleter och man erhöll en förening med följande fysikaliska data (utbyte 75 %): C H N Cl elementaranalys C15H26C1NO4: beräknat 52,78 8,86 4,74 11398 _ _ 2 funnet 52,65 8,78 4,65 12,02 2 2 2 on 2 * §5š=cH2f); 3,2 (s,9n, N (cH5)¿); 2,7 (a, 2Hø32co); 4,5 (d,eH, öel44s 375 sf e _¶ ¶ e . CH NmR=1ó's,v (m, 1H,çH>; see (ml 1H, 0H;:CHÉ>; 5,3 I . la. . i 5 lfeš-cH2>; 3;2L¿s.l9H{ Ne<0H5>5>1 2,7 (q,.2_ll,_cll2ca5)_; 1 ,2i (mgarncflz-cnš, 'cH/Cïššls 1120. \°5 <4) Exemgel 4 e _ e_ A Framstäl1ninqfav~isobutyrylkarnitinisobutylester (metod A) _ Fpamställning av issóbuwrylkarnielni; l , L* i till en lösning» av 5 g (o,o15*m0l) karnieln l 5 ml i .trifluqrättiksyra sattes 1o~ml (o,o9s-mol) isobutyrylklorifle dropptis. Den resulterande blandningen hölls vid 4500 under » 4 timmar, varefter aeeton tillsattes och kvarvarande karni- etin frånfiltrerades. Vattenfri etyleter sattes till lös- e / -5 _ w- emçI-.KCH e}),¶ lagd., ningen och den önskade produkten (2 g, utbyte 66 %) erhöllsl genom utfällning;elï ' « ' i smp.= 114 _ 11e°ci tunnskiktskromatógrafie(TLG); elueringsmedel CHCl5,CH OH,NH 3 5 (50 = 50 = s) _ e e + i NHR 6 5s7_(ms/|H9'GH")§' 3:8 (d-a2VHsšT"CH-2“)§ 5925 (Ssgfis : eíl ¶ voe *s e se 1 QH~ (cH ) m; 2,8 e( 5 5 ee e e 2 . e MH e 5 5 Framställning at isobutyrfilkarnitinsyraklorid: 2,7 g (0,01 mol) isobutyrylkarnitin erhållen enligtsl ovan suspenderades i 4,5 ml (0,05 mol) oxalylklorid ech sus- pensiónen hölls under omröring vid rumstemperatur under 4 timse mar. Därefter~späddes suspensionen med vattenfri etyleter och ekøncentrerades”under vakuum.'ÃterstQden behandlades två gånger med vattenfri etyleter och sålunda erhàllen råprodukt e(2,5 g¿ 0,009 mol) användes i efterföljande reaktionssteg.

Framställning av isobutyrylkarnitinisobutylester: _¶ ¶ *15 ml isobufmanøl sattes vid o°c under Qmröring till ovan framställd isobutyrylkarnitinsyraklorid (2,5 g, 0,009 emon;'Rqalftlqnsblandningen hölls under omrörning under 1 tim- ma vid en temperatur av Ca O°0. Blandningen koneentrerades “ därefter och återstoden löstes i vattenfri aceton och den I resulterande lösningen neutraliserades med vattenfritt Na2C05. Blandningen filtrerades oeh bringades till torrhet, 448 375, "Återstodeni(2,3 g, 0,007 mol) befanns vara isobutyrylkarnitinisö- butylester (utbyte 70%). , , _ -t-., , + NMR ö 5,7, (m,¿1H,-CH-)t;j3.~9 (mfilH >N-cH2-,~cr12o~); 2,9 (d,2H, ; I _' . ,«' -cH2co0); 2,6 (m,1H,cocH); 1,9 (m,1H,cH¿\ ); 1,1 (d, GH, cocH ); t a , _ 1 CH3 \*cH3 . 1 , /,cH3, , - t ,o,9 (a,5H, cnz-cH\\. 1); nzo, a _, cH i l lëelllrielá 3, '-Franställnin§ av dikloracetylkarnitinkloridetylester ¶ 15,8 ml (n,os mal) aiklaracetylkloria sattes till 7 g (o,o3 mol) karnitinkloridetylester. Den erhållna blandningen hölls vid l 40°C under 20 timmar,"Etyletet sattes till blandningen och den “resulterande fällningen togs upp med acetonitril och fälldes pâ' nytt ut med etyleter. Slutprodukten erhölls Qenom kristallisation ur vattenfli aceton. 7 7 l a Z i _ i i, _ ¿;cl t l NMR (D O) 6: 6,6- 1H, s-CH , 5,7 1H, m, -CH: , 4,5-3,9 _ 2 ' \ + _ l oco i MH' mf-fizf-Cflw šN-CHZ* 3,3 9H, S, CHš\\Éñ;>§- , 3,1.(2H, a, -cnz-eoon), 1,3 (an, t, " CH3/,,»3' 1 _ a "CH2'9É3ï' l l KV Exemgel ö Framställninq av butyrylkarnitinnydrokloridmetylester a) Framställning av butyrylkarnitinhydroklorid_ 7 26,5 ml (Q,25:mo1¶ butyrylklorid sattes till en lösning av ' ,1O g (0,05 molï karnitinhydroklorid i 15 ml trifluorättiksyra. Den erhållna reaktionsblandningen omrördes över natten. Till denna blandning sattes sedan vattenfri etyleter. Den rubricerade före~ ningen erhölls qenom utfällning. Smältpunkt 150-151°C.

NMR_(n2oyöa;,5,6 (Én, m -cHå>, 3,s'(zH, m, §;N~cH2-), 3,3 L 9H, S, _ >¶ ¶ .. _ ¿ ,_ t _} ö } , a +l _,- ¶ _ } o , } a ¶_~ (cH3)3N;7, 2,8 (za, d, gg2coocH3), 2,4 (za, t, ococnz-), 1,7 (2H, 2 : m, -g§_cn3), 0,9 (3H, t, cn2gg¿l. bi Étamstallning av butyrvlkarnitinklorid-hydroklorid. "», 2,67 g (o,o1 nal) butyrylkatnitinhyarokloria framställa D D _ . e fel under a) suspenderades i 4,5 ml (0,05 mol) oxalylklorid. Den er- hållna blandningen hölls under omröring i 4 timmar vid rumstempera- turfl Därefter späddes blandningen med vattenfri etyleter och in- - dunstadeš i vakuum¿'Återstoden tvättades med vattenfri etyleter.

Den så erhållna råprodukten användes som sådan vid efterföljande omsattning,' -ed ” di _ 1, ” Z f 5 c) Framställning av butyrylkarnitinkloridmetylester. 15 ml absolut etanol sattes under omröring vid 0°Cetillí 0,01 mol av den enligt b) framställda butyrylkarnitinkloridhydro- kloriden. Den erhållna lösningen omrördes vid 0°C under 30 minuter och indunstades sedan i vakuum och torkades slutligen över natten, vid @0oC. Man erhöll 3 g av föreningen. I NMRg(n2o) 5; 5,6 1H, m, -çH- , 4,0-3,6 (5H,'m, §5N-cH2-, -ocH3),r _ O ' I f r3,3 ¿"9H¿ e, (cH3)3N¿¿7, 2,s'<2H, a, -ggzèoocnz), 2,4 (za, t, D -ococH2), 1,6 (zu, n, Ecazggzcns), 9,8 (sn, t, -cnzggs).

'D Exemnel 7' Framställning av estern av propionylkarnitinklorid med etyl-Be -hydroxibutzrat Z _ 1. . of I i a) Framställning av etylestern av 3-hydroàismörsyra.

Denne förening framställdes 1 enlighet med exempel 2. b) Framställning av própionylkarnitinhydroklorid, 1,98 g (0,01 mol) karnitinhydroklorid löstes i 5 ml tri- fluorättiksyra och till lösningen sattes 1 ml (0,01 mol) propionyl- klorid. Den erhållna lösningen hölls över natten vid 40-4500; Lös- ningen kyldes sedan till rumstemperatur och försattes med 50 ml aceton och omrördes under 2 timmar. Den fasta fällningen som ibildades (karnitin) frånfiltrerades; 30 ml etyleter sattes till "vakuum. Återstoden tvättades med en liten volym vattenfri Et 0 filtratet och den erhållna blandningen hölls under omröring vid OOC. Den fasta fällningen som bildades frânfiltrerades och fick kristallisera ur etanol-aceton-etyleter. Smältpunkt 158-16000.

I c) Framställning av propionylkarnitinklorid-syraklorid. “ 3 2f5 g (0,01 mol) nropionylkarnitinhydrokloríd suspenderades i 4 ml oxalylklorid och den erhållna suspensionen hölls under om-- röringi.4 timmar; Överskottet av oxalylklorid indunstades under m I g r r 21 , (3lx 10 ml) och hölls sedan under vakuum tills lösningsmedlet helt avlägsnattsig. ff- » lNMR_(D2o) S: 5,7 p1H, m, -QH- d11”f ' Den så erhållna föreningen användes som sådan i efterföljande teg. " " Denna förening omsattes under omröring vid rumstemperatur i *frånvaro av_lösningsmedel med etylestern av 3-hydroxismörsyra. Efter 4 timmar var reaktionen fullbordad. Reaktionsblandningen hälldes långsamt i 200 ml vattenfri Et2O; Man erhöll en oljig återstod.

,Eterlösningen frândekanterades och återstoden togs upp i vattenfri CH3CN och löstes_däri. Den erhållna lösningen filtrerades för av- lägsnande av icke omsatt-propionylkarnitin. Därefter sattes aoeton till filtratet tills detta började bli mjölkaktigt för att inte fullständigt avlägsna icke omsatt propionylkarnitin. Den filtrerade plösningen indunstades, varvid erhölls en oljig återstod, som torka- des i närvaro av P_0 2 _ Utbyte 65%. 5 V g CH3 . I 9 , 5,2 1H, m, -gg-o- , 4,1 (za, q, _ I ' oco- d - - _ _ _ + _ 7 _ + * . -cH2o+), 3,7 (23, a, -çnz-Níf ), 3,2 ¿ 9H, S, (cH3)3N-_7, 2,9-2,2 d GH, m, -cH2fco~, -cH¿-ggz 2 -co, -CH-gg , I , n 0:13 -CO , 1,4-0,9 9H, m, §g3~cH2-co-,,gg3ca 20-, gg3-oss O__ Farmakologiska effekterl "De farmakologiska effekterna hos föreningarna enligt upp- finningen undersöktes med användning av följande tekniker: om 50> ,Den_använda metoden var den som finns beskriven av C.S. Weil i “Tables for convenient oalculation of median-effect dose (LD50 or ED50) and instructions on their use", Biometrics, 249 - 263, 1Q52. _ ' ___ ' 7 Toleransen hos de undersökta föreningarna studerades efter såväl intra peritoneal ii.p.) som oral administrering på råttor.

Resultaten visade att föreningarna utmärkt väl tolererades (jäm- för efterföljande tabell); B) Inotrop verkan _ Kaninhjärtan, som isolerats enligt Langendorffs metod, underkastades perfusion i en Ringer-lösning syresatt vid 38,2°C, De isometriska koncentrationernaj EKG och koronarflödet upp- tecknades med användning av en polygraf "Battaglia-Rangoni". f mulerades på grund av ansamling av pyrodruvsyra och dess omvand- 44s 375 V12 Metabolisk skada på hjärtmuskeln inducerades genom att'av\ lägsna syret från perfusionsvätskan tills kontraktionskraften _ reducerats med 30%, _ i 7 A, I f .Under dessa betingelser av utsträckt anoxi sjönk den myo- kardiala, aeroba¿glykolysaktiviteten och kataboliska syror acku- UL' P11 ling till mjölksyra, som ej kan användas på grund_ av undertrycf kandet av pyridinenàymer, såsom laktatdehydrogenaser. Detta inš verkar menligt på den anaeroba glykolysen, som tar i anspråk,§ _ett allt större antal enzymer och leder till en växande och -alltmer kritisk utmattning av hjärtmuskulaturen.

Det föreligger sålunda en hel serie av hjärtmuskelutmatt- ningstendenser, som kan avläsas i mönstren hos ifrågavarande pa- rametrar, dvs kontraktionskraften, kapaciteten, frekvensen ocn rytmen hos hjärtat. Så snart som kontraktionskraften nedöringats med 80% syresattes ånyo perfusionsvätskan utan tillsats av andra föreningar (kontroller) eller med tillsats av de undersökta för- eningarna i olika koncentrationer. V Hjärtats kontraktionskraft undersöktes och positiva inoe tropa verkningar uppträdde TO minuter efter avbrytandet av anoxi- perioden (återhämtning av hjärtmuskeln). I ' 7 1 Resultaten_av Studentfls "t" test visade att de undersökta föreningarna inducerade statistiskt signifikant positiva inotro-p pa verkningar gentemot kontrollprover. I efterföljande tabell ilf lustreras.ökningen i procent gentemot kontrollprover.' K G) Éffekt på CNS (centrala nervsystemet) Den använda metoden var den som beskrevs av Irwin, S., Nodin, J.H., Siegler, P.E. i "Animal and Clinical Pharmacologic Techniques in Drug Evaluation", Year Book Medical Publ., Chica- go, 1964, 36. i - i ' " c ' n Z ' Bestämningen av cerebral serotonin (5-HT) och 5-hydroxiin-_ dolättiksyra (5-HIÄA) utfördes med hjälp av tekniken beskriven av Ansell och Beeson, Anal, Biochem. 23, 196-206 (1968), Maickel and Cox, Int.;J. Neuropharmacol., 7-275Ä281 (1968) med använd- ning av râtthjärna uttagen 1 timma efter intraperitoneal injif cering av 50fTÖO_mg av de testade föreningarna (se tabell), (Vi f!! 448 375 11 ovuz nmøßflomà uv|w,æfl\<4HmTm ßmvwmmß nv|w.ws\smWm undnfiflaohßflom mon flmfiumb mmv Oowv mmm mmu om+ ßw+ wwoahmohmomw u.=M . Hhvm0m0pmom.u ~m wwn mm+ mw+. ooov. om. flwopma H :m . .Hhnñfdß u. »m .mmu wv+. mw+ oomv øßw fiwoflßvøpowfl H =m - . . . Hhnhesßomfl ".\m .. mm» . . @v+. mm+ . øomv oßf flxoHhm°nmrm|~x°pwpHmm«m » .m~n. .. _ . vm+. mß+ ooßw f. oow fiw°H»@°n@°wH u.=m.H . @ M ... . . p , . ~»møflmonm." vm om«. .mm+. om+ ..oo#N. cow fixwflhmflnmwmlflxøpwpnmmfm .mm«. wr+ @ow+ oømw .ooß M . fixøflhmonmomfi " mm: mv+ . oß+.. .oøofi oomv flw@fi»»m°n°fix«H» n.=m . .. . . Hhpmom H .m .._ . .wønw ..nøn@. nønfl . . . ; . lflflofivfloä bm Q. flHHoH»floM bw Q Iflflohvfiofi >m Q . 0 0 _ ._... . ön., íwl .Qvfiwm :ä m? må à »Q fl 1 .ß . m. m . . vw Hflwnwnnflaønpwnwu pxmwww monßonfi. wM\ma_ommA =moo1~mo|mø«wmo|z ^.møv .noupmn wmn.< _mm uxmwwu mcnvofifl .mmwä mon pHmHo.noo .m.fl .omQH ßnmnpmmflflpflqmmm mmmfl>.>m.nmxHm> Mmflmofiommflhwm . .. . . . .. H a m Q Q E . . i44s 57ser i 14k p Föreningarna enligt uppfinningen kan administreras oralt eller parenteralt i vilken som helst konventionell rfarmaceutisk form, som framställes enligt konventionell tek- I coral administrering, sâsom_tabletter, kapslar, lösningar, nik¿ Dessa former inkluderar fasta och flytande doser för _sirap och liknande liksom injicerbara former, såsom steril- iösningar för ampuiier pch rmeaicinflaskqr. p .För dessa farmaceutíska preparat används konventio- .nella lösningsmedel; utspädningsmedel och bärare. Eventuellt kan sötningsmedel, smakämnen och konserveringsmedel tillsät- tas. Icke begränsande exempel på sådana tillsatser är natrium- karboximetylcellulosa,'polysorbat, mannitol¿'sorbitol, stär~ kelse, avicelg talk och andra tillsatser av för den farmaceu-5 ' tiska fackmannen känt slag. p p p“ 5 Den i varje enskilt fall administrerade dosen bestäms av läkaren med hänsyn till ålder, vikt och allmänkondition hos patienten under utnyttjande av sin professionella bedöm- ning¿ Även om verksamma resultat kan iakttas med så låga do- ser som 5 - 8_ng(kg kroppsvikt och dag föredras en dos av ca 10 - 50 mggkg kroppsvikt. Vid behov kan större doser administre- ras genom att föreningarna_nppvisar låg toxicitet. Som exempel på lämpliga doseríngsintervall för olika farmaoeutiska former pkan följande uppgifter lämnas: för medicinflaska 5 - 500 mg, för kapslar 15 - 50 mg, för tabletter 15,--500 mg och för orala lösningar 15 f 50 mg. ' NJ' UI

Claims (3)

13' < ” 448 375ef

1. Estrer av acyl-kernitifier. k ä'n n ent e c K n a d e avi' ett de üppvisaç den allmänna formeln .lg e X OR" _i vilken X' betecknar en halogenanjon. företrädesvis Cl". R' betecknat àcetyl, halegensubefituerad acetyl. propionyl; halogensubsçituerad Qropionyl. butyryl. halogensubstituerad 7butyry1,_isobutyryl, P~hydroxibutyryl eller acetoacetyl och -R";beteeknar»metbxi, etoxí, propyloxi. butyloxí (förutsatt att 7 R! ej beteckna: àcetyl), isopzopyloxí, isobutyloxí. tríklor- etylexi eller 3-Kašbefioxi-Éfpropyloxi. g

2. Escçar enligt grav 1. k ä n n e t eic K w a d e av att den halogensubstituerade acetylgruppen är vald bland k1oracetyl.7 dikloraceryl den bromacetyl. den halogensubstituerade propion- ylgruppen är bremfiropionyl och den halogensubstituerade >buty:ylgruppen är klofbutyryl.

3. Förfarafide för fràfiställning av estrar enligt krav 1 med * den allmänna fienmeln I , + _ .I (CH3)3N:CH2-CH-CH2fCOR" (I) , X R' ii vilkefi X' beteckna: en halogenanjon, företrädesvis Cl", ¶R' betecknar acetyl;"halogensnbstituerad acetyl, pzopionyl. halogensubstituenad phopiqnyl, butyryl. halogensubstítuerad ,butyry1,¶ieobutyryl,: ß-hydroxibutyryl eller acetoacetyl och R" betecknar metoxi, etoxi, propyloxí, butyloxi (förutsatt att R' ej Betecknar acetYl).'ísøpropy1oxi. isobuty1oxí.'trík1or- etyloxi eller Bfkafbetoxi-2Åfiropyioxí. k ä n n e t e c k - nja t av stegen att man i ' .kr 443137522 t e i i a en (a) till en karnitinlösning i ett lösningsmedel valt bland organiska syror och motsvarande anhydrider sätter en acyl-g ihalogenid med formeln R'X. i vilken R' har ovan angiven fbetydelse och X betecknar en halogenatom, och håller tempera- *h turen på den sålunda erhållna bladningen vid ca 15-60QC under ca 4-48 ' timmar för erhållande av motsvarande acylderívat av karnitin, (b) isolerar acylderivatet av karnitin genom att till bland- ningen i steg (a) sätta ett utfällningsmedel och företa reningp få? genom upprepad krístallisation. (c) omsätter acvlderívatet av karnitin från steg (b) med ett _överskott av ett halogeneringsmedel_vid_ca_25-60°C under ca 0.3-24 timmar_och avlägsnar överskottet av halogeneringsmedlet för erhållande av motsvarande syrahalogenid av acylderívatetí av karnitin.ii 7 2 Ai _* (d) kondenserat syrahalogeniden av acylderivatet av karnitin från steg (c) med en alkohol med formeln R"H, där R" har ovan angiven betydelsel håller den sålunda erhållna blandningen under omröring vid rumstemperatur under ca 2-24 timmar för erhållande av estern med formel I ochwï (e) isolerar estern (I) genom att torka blandningen från steg ~_(d) och företa upprepad kristallisation ur organiska lösnings- medel, eller att man e (a') suspenderar karnitin i den önskade alkoholen R“H. där R" har ovan angiven betydelse, I ' 2 {b') omsätter suspensionen från steg (a') med en vattenfri- oorganisk syra för fullständig upplösning av den suspenderade karnitinen och erhållande av motsvarande ester. a(c') omsätter estern från steg (b') med ett överskott av en acylhalogenid med formeln R*K. där R' har ovan angiven betydelse och X betecknar en halogenatom. och håller den sålunda erhållna blandningen vid en temperatur av ca 25-40°C .under ca 2-24 timmar för erhållande av motsvarande ester av 'acylderivatet av karnitin med formel I. (d') behandlar blandningen innehållande estern med formeln I med ett organiskt lösningsmedel, vari överskottet av acylhalo- m- ' genid är lösligt i avsikt att separera acyfindogenidöverskottet från estern och 2 _ g ' , (e') renar estern med formeln I genom upprepad'kristallisation., Elisabeth oarlborg -1 443ís75% 4, Oralt eller parenténalt admínistzerfiarffarmaceutísk kompo- ï sítion för behandling_av_hjäntmuskélhypokontraktílitet, _ _ depressíbner elle: störd sömn. k ä~n n e t e¶c k n a d av att den innefattar-såsom aktiv komponent en terapeutiskt verksam mängd av en ester med formeln I -_V_¿__ _ I i (çH3)3N:CHéfCH-QH2-çOB"V (I) vx; f_en-- í vilken Kf betecknár en halogenanjon. företrädesvis Cl", R' bgtecknar acety1.¶halogenšubstituerad acetyl. propíonyl. halogensubstítuerad p:ofiíonYl. bñtyryl. halogensubstítuerad ízputyiyl, isobutyryl,'¶ßfhydrbxíbutyry1 eller acefibacetyl øch' R" betecknar metoxí; etoxi. propyloxí, bunyloxí (förutsatt att R' ej-betecknak acetyl),'ísopropy1oxi. ísobutyloxí. tríklor- etyloxi eller 3-katbetoxí-2-propyloxí och en farmakologískt 'godtagbar bärare därför. Å5.¶Komposítíon2én1i9t krav 4, k ä n n e t e.c k n aAd av att Ü den föreßígqer i form av efihetsdoser ínnehållènde ca 5-500 mg.