BR112015014714B1 - compostos carbamoilpiridona policíclicos, composição farmacêutica que os compreende e seu uso farmacêutico - Google Patents

Abstract

resumo patente de invenção: "compostos carbamoilpiridona policíclicos e seu uso farmacêutico". a presente invenção refere-se a compostos para uso no tratamento de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (hiv). os compostos têm a seguinte fórmula (i): (i) incluindo estereoisômeros e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que r1, x, w, y1, y2, z1, e z4 são como definidos aqui. métodos associados com a preparação e o uso de tais compostos, bem como composições farmacêuticas compreendendo tais compostos, são também descritos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSTOS CARBAMOILPIRIDONA POLICÍCLICOS, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE OS COMPREENDE E SEU USO FARMACÊUTICO.

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS [0001] Este pedido de patente reivindica o benefício sob 35 USC §119(e) de Pedido de Patente Provisório US No. 61/745,375, depositado em 21 de dezembro de 2012, Pedido de Patente Provisório US No. 61/788,397, depositado em 15 de março de 2013, e Pedido de Patente Provisório US No. 61/845,803, depositado em 12 de Julho de 2013. Os pedidos anteriores são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

ANTECEDENTES

Campo [0002] Os compostos, composições e métodos para o tratamento da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) são divulgados. Em particular, novos compostos de carbamoilpiridona policíclicos e métodos para a sua preparação e utilização como agentes terapêuticos ou profiláticos são divulgados.

Descrição da Técnica Relacionada [0003] Infecção pelo vírus da imunodeficiência humana e doenças relacionadas são um grande problema de saúde pública mundial. Vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV1), codifica três enzimas, que são necessárias para a replicação viral: a transcriptase reversa, protease e integrase. Embora as drogas dirigidas a transcriptase reversa e protease estejam em amplo uso e têm demonstrado eficácia, particularmente quando utilizadas em combinação, a toxicidade e desenvolvimento de cepas resistentes limitaram a sua utilidade (Palella et al., N. Engl. J. Med. (1998) 338: 853-860; Richman, DD. Nature (2001)410: 995-1001).

[0004] Receptor pregnano X (PXR) é um receptor nuclear que é

2/239 um dos principais reguladores das enzimas envolvidas no metabolismo e eliminação de moléculas pequenas do corpo. A ativação de PXR é conhecida para regular ou induzir a produção de enzimas metabólicas, tais como citocromo P450 3A4 (CYP3A4), bem como as enzimas envolvidas no transporte, tal como OATP2 no fígado e no intestino (Endocrine Reviews (2002) 23 (5): 687-702). Quando uma droga provoca o aumento da regulação destas e de outras enzimas de ativação de PXR, isto pode reduzir a absorção e/ou a exposição de uma droga coadministrada que é suscetível a enzimas supra-reguladas. Para minimizar o risco deste tipo de interação droga-droga, é desejável minimizar a ativação de PXR. Além disso, sabe-se que PXR é ativado por muitas classes diferentes de moléculas (Endocrine Reviews (2002) 23 (5): 687-702). Assim, para drogas que irão ser co-administradas com outras drogas, é importante testar para minimizar a ativação de PXR. [0005] Transportadores foram identificados como desempenhando um papel na farmacocinética, perfil de segurança e eficácia ou drogas, e certas interações droga-droga são mediadas por transportadores. Vide, Giacomini KM, et al. Membrane transporters em drug development, Nat.Rev Drug Discov. 9: 215-236, 2010; Zhang L, et al. Transporter-Mediated Drug-Drug Interactions, Clin. Pharm. Ther. 89(4):481484 (2011). Um transportador, o transportador de cário orgânico 2 (OCT2; SLC22A2), é um membro da super-família de veículo de soluto (SLC) de transportadores e está localizado principalmente na membrana basolateral do tubo proximal renal. OCT2, acredita-se que em conjunto com transportadores multidrogas expresso apical e de extrusão de toxina (MATE) 1 e 2-K, forme a principal via de secreção catiônica no rim e tem sido demonstrado transportar compostos endógenos, incluindo creatinina e xenobióticos incluindo metformina. A inibição de OCT2 pode, assim, levar ao aumento dos níveis de creatinina sérica e o potencial para aumento dos níveis de outros substratos

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0CT2. Ele é importante, bem como para testar e reduzir a inibição de OCT2 de drogas.

[0006] Um objetivo da terapia antirretroviral é alcançar a supressão viral no paciente infectado pelo HIV. Diretrizes de tratamento publicadas pelo Departamento de Saúde e Serviços Humanos dos Estados Unidos preveem que a realização da supressão viral requer o uso de terapias de combinação, ou seja, vários medicamentos a partir de pelo menos duas ou mais classes de drogas. (Painel sobre Orientações Antirretrovirais para Adultos e Adolescentes. Orientações para o uso de agentes antirretrovirais em adultos e adolescentes infectados por HIV-1. Departamento de Saúde e Serviços Humanos. Disponível em http://aidsinfo.nih.gov/ContentFiles/AdultandAdolescentGL.pdf. Seção acessada em 14 de março de 2013). Além disso, as decisões em relação a um tratamento de doentes infectados pelo HIV são complicadas quando o paciente necessita de tratamento para outras condições médicas (Id. Em E-12). Uma vez que o padrão de tratamento requer o uso de várias drogas diferentes para suprimir o HIV, assim como no tratamento de outras condições o paciente pode estar sofrendo, o potencial de interação da droga é um critério para a selecção de um regime de drogas. Como tal, existe uma necessidade de terapias antirretrovirais tendo uma diminuição potencial para interações de droga.

[0007] Por conseguinte, existe uma necessidade de novos agentes que inibem a replicação de HIV e que minimizam a ativação de PXR quando co-administrados com outras drogas.

BREVE SUMÁRIO [0008] A presente invenção é dirigida a novos compostos de carbamoilpiridona policíclicos, tendo atividade antiviral, incluindo estereoisômeros e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, e o uso de tais compostos no tratamento de infecções por HIV. Os compostos da invenção podem ser utilizados para inibir a atividade de integrase do HIV

4/239 que pode ser utilizada para reduzir a replicação do HIV.

[0009] Em uma modalidade da presente invenção, os compostos que têm a seguinte Fórmula (I) são fornecidos:

ou um esteroisômero ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[0010] X é -O- ou -NZ³- ou -CHZ³-;

[0011] W é-CHZ²-;

[0012] Z¹, Z² e Z³ são cada um, independentemente, hidrogênio ou

C-i^alquila, ou em que Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -Lem que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, ou C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, em que pelo menos um de Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L-;

[0013] Z⁴ é uma ligação, -CH₂-, ou -CH₂CH₂-;

[0014] Y¹ e Y² são cada um, independentemente, hidrogênio, C-i. ₃alquila ou Ci.₃haloalquila;

[0015] R¹ é fenila substituída por um a três halogênios; e [0016] cada R^a é, independentemente, hidrogênio, halo, hidroxila ou C₁.₄alquila.

[0017] Em outra modalidade da presente invenção, compostos tendo a seguinte Fórmula (I) são providos:

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ou um esteroisômero ou um sal farmaceuticamente aceitável do mes mo, em que:

[0018] X é -O- ou -NZ³- ou -CHZ³-;

[0019] W é -O- ou -NZ²- ou -CHZ²-;

[0020] Z¹, Z² e Z³ são cada um, independentemente, hidrogênio ou

C-i_₃alquila, ou em que Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L em que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)₂C(R^a)2-, -C(R^a)2OC(R^a)2-, -C(R^a)2NR^aC(R^a)₂-,

C(R^a)₂SC(R^a)2-, -C(R^a)2S(O)C(R^a)2-, -C(R^a)2SO₂C(R^a)₂-,

C(R )₂OC(R )₂C(R )₂-,

C(R^a)₂NR^aC(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)₂SC(R^a)2C(R^a)2-,

C(R^a)₂S(O)C(R^a)2C(R^a)2-,

C(R^a)₂SO₂C(R^a)2C(R^a)2-,

-C(R )₂C(R )₂OC(R )₂-,

-C(R^a)2C(R^a)2NR^aC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)₂SC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2S(O)C(R^a)2-,

-C(R^a)2C(R^a)2SO₂C(R^a)₂-,

C(R^a)2SO2NR^aC(R^a)2- ou -C(R^a)2NR^aSO2C(R^a)₂-;

[0021] Z⁴ é uma ligação ou -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, CH2OCH2-, -CH2NR^aCH2-, -CH₂SCH₂-, -CH₂S(O)CH₂- ou -CH₂SO₂CH₂ [0022] Y¹ e Y² são cada um, independentemente, hidrogênio, ₃alquila ou Ci.₃haloalquila, ou Y¹ e Y², junto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam um anel carboxíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel ou um anel heterocíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel, em que o anel carbocíclico ou heterocíclico é opcionalmente substituído por um ou mais R^a;

6/239 [0023] R¹ é arila opcionalmente substituída ou heteroarila opcionalmente substituída; e [0024] cada R^a é, independentemente, hidrogênio, halo, hidroxila ou C₁.₄alquila, ou em que dois grupos R^a, junto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam =0, e [0025] em que pelo menos um de: (i) Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L-; ou (ii) Y¹ e Y², junto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam um anel carboxíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel ou um anel heterocíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel [0026] Em uma outra modalidade, uma composição farmacêutica é proporcionada compreendendo um composto tendo a Fórmula (I), ou um seu estereoisômero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0027] A invenção também proporciona o uso de uma composição farmacêutica tal como aqui descrito acima para o tratamento de uma infecção por HIV no ser humano tendo ou em risco de ter a infecção.

[0028] Em uma outra modalidade, é proporcionado um método de utilização de um composto com a Fórmula (I) em terapia. Em particular, um método para tratar a proliferação do vírus HIV, tratar SIDA, ou retardar o aparecimento de sintomas de SIDA ou de ARC em um mamífero (por exemplo, um ser humano) é fornecido, que compreende a administração ao mamífero de um composto com a Fórmula (I), ou um seu estereoisômero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0029] Em uma outra modalidade, o uso de um composto de Fórmula (I), como aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de uma infecção por HIV no ser humano tendo ou em risco de ter a infecção é divulgado.

[0030] Em uma outra modalidade, o uso de um composto de Fór

7/239 mula (I), como aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HIV no ser humano tendo ou em risco de ter a infecção é divulgado.

[0031] Em uma outra modalidade, um artigo de fabricação compreendendo uma composio eficaz para tratar uma infecção por HIV; e material de embalagem compreendendo uma etiqueta que indica que a composição pode ser utilizada para tratar a infecção por HIV é divulgado. Exemplos de composições compreendem um composto de Fórmula (I) de acordo com esta invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0032] Em ainda outra modalidade, um método de inibição da replicação do HIV é divulgado. O método compreende a exposição do vírus a uma quantidade eficaz do composto de Fórmula (I), ou um seu sal, sob condições em que a replicação do HIV é inibida.

[0033] Em uma outra modalidade, o uso de um composto de Fórmula (I) para inibir a atividade da enzima integrase do HIV é divulgado. [0034] Em uma outra modalidade, o uso de um composto de Fórmula (I), ou um seu sal, para inibir a replicação do HIV é divulgado.

[0035] Outras modalidades, objetos, características e vantagens serão apresentados na descrição detalhada das modalidades que se segue, e em parte serão evidentes a partir da descrição, ou podem ser aprendidas pela prática, da invenção reivindicada. Estes objetos e vantagens serão compreendidos e alcançados pelas composições e processos particularmente apontados na descrição escrita e reivindicações da mesma. O sumário anterior foi feito com o entendimento de que é para ser considerado como uma sinopse breve e geral de algumas das modalidades aqui descritas, é fornecido apenas para os benefícios e conveniência do leitor, e não se destina a limitar de qualquer maneira o escopo, ou intervalo de equivalentes, para o qual as reivin

8/239 dicações anexas estão legalmente autorizadas.

DESCRIÇÃO DETALHADA [0036] Na descrição que se segue, certos detalhes específicos são estabelecidos de modo a proporcionar um entendimento completo das várias modalidades da invenção. No entanto, um versado na técnica entenderá que a invenção pode ser praticada sem estes detalhes. A descrição que se segue de várias modalidades é feita com o entendimento de que a presente divulgação deve ser considerada como uma exemplificação da matéria reivindicada, e não se destina a limitar as reivindicações em anexo para as modalidades específicas ilustradas. As posições utilizadas ao longo desta descrição são fornecidas apenas para conveniência e não devem ser interpretadas como limitativas das reivindicações de qualquer forma. Modalidades ilustradas sob qualquer posição podem ser combinadas com modalidades ilustradas a qualquer outro título.

Definições [0037] A menos que o contexto exija de outra forma, ao longo da presente especificação e reivindicações, a palavra compreendem e suas variações, tais como, compreende e compreendendo devem ser interpretadas em um sentido inclusivo, aberto, isto é, como incluindo, mas não limitado a.

[0038] Referência ao longo desta especificação como uma modalidade ou um modelo de realização significa que um determinado recurso, estrutura ou característica descritos em ligação com a modalidade estão incluídos em pelo menos uma modalidade da presente invenção. Assim, as aparências das frases em uma modalidade ou em um modelo de realização em vários lugares ao longo desta especificação estão necessariamente referindo-se a mesma modalidade. Além disso, as características particulares, estruturas, ou recursos podem ser combinados de qualquer forma adequada em uma ou mais

9/239 modalidades.

[0039] A menos que o contexto exija de outro modo, referência ao longo desta especificação a um composto de Fórmula (1) ou compostos de Fórmula (1) refere-se a todas as modalidades da Fórmula (I), incluindo, por exemplo, os compostos de Fórmulas (Il-A), (Il-B), (IIC), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), bem como os compostos divulgados aqui.

[0040] Amino refere-se a radical -NH₂.

[0041] Cyano refere-se a radical -CN.

[0042] Hidróxi ou hidroxila refere-se a radical -OH.

[0043] Imino refere-se a substituinte =NH.

[0044] Nitro refere-se a radical -NO₂.

[0045] Oxo refere-se a substituinte =0.

[0046] Tioxo refere-se a =S.

[0047] Alquila refere-se a um radical de hidrocarboneto de cadeia reta ou ramificada consistindo somente em átomos de carbono e hidrogênio, que é saturado ou insaturado (isto é, contém uma ou mais ligações duplas e/ou triplas), tendo de um a doze átomos de carbono (C-rC-|₂ alquila), preferivelmente um a oito átomos de carbono (CrCe alquila) ou um a seis átomos de carbono (Ci-C₆ alquila), e que é ligado ao resto da molécula por uma ligação simples, por exemplo, metila, etila, n-propila, 1-metiletil (/so-propila), n-butila, n-pentila, 1, 1-dimetiletil (t-butila), 3-metilhexila, 2-metilhexila, ethenila, prop-1-enila, but-1-enila, pent-1-enila, penta-1,4-dienila, etinila, propinila, butinila, pentinila, hexinila, e semelhantes. A menos que declarado especificamente nesta especificação, um grupo alquila pode ser opcionalmente substituído.

[0048] Alquileno ou cadeia de alquileno refere-se a um hidrocarboneto divalente de cadeia linear ou ramificada que liga o resto da

10/239 molécula a um grupo radical, que consiste apenas em carbono e hidrogênio, o qual é saturado ou insaturado (isto é, contém uma ou mais ligações duplas e/ou ligações triplas), e tendo de um a doze átomos de carbono, por exemplo, metileno, etileno, propileno, n-butileno, etenileno, propenileno, n-butenileno, propinileno, n-butinileno, e semelhantes. A cadeia de alquileno está ligada ao resto da molécula através de uma ligação simples ou dupla e ao grupo radical por uma ligação simples ou dupla. Os pontos de ligação do anel alquileno ao resto da molécula e ao grupo radical podem ser através de um carbono ou quaisquer dois carbonos na cadeia. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, uma cadeia de alquileno pode ser opcionalmente substituída.

[0049] Alcóxi refere-se a um radical de fórmula -OR_A, onde R_a é um radical alquila como definido acima, contendo um a doze átomos de carbono. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo alcoxi pode ser opcionalmente substituído.

[0050] Alquilamino refere-se a um radical de fórmula -NHR_A ou NR_aR_a onde cada R_A é, independentemente, um radical alquila como definido acima, contendo um a doze átomos de carbono. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo amino pode ser opcionalmente substituído.

[0051] Tioalquila refere-se a um radical de fórmula -SR_A, onde R_A é um radical alquila como definido acima, contendo um a doze átomos de carbono. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo tioalquila pode ser opcionalmente substituído. [0052] Arila refere-se a um radical no sistema de anel de hidrocarboneto monociclico que compreende hidrogênio e 6 a 18 átomos de carbono. Os radicais arila incluem, mas não estão limitados a, radicais arila derivados de benzeno. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, o termo arila ou o prefixo ar (tal como

11/239 em aralquila) pretende incluir radicais arila que estão opcionalmente substituídos.

[0053] Aralquila refere-se a um radical de fórmula -R_B-Rc> onde R_b é uma cadeia de alquileno, tal como definido acima e R_c é um ou mais radicais arila, como definido acima, por exemplo, benzila. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo aralquila pode ser opcionalmente substituído.

[0054] Cicloalquila ou anel carbocíclico refere-se a um radical hidrocarboneto não aromático monocíclico estável que consiste apenas em átomos de carbono e hidrogênio, tendo de três a quinze átomos de carbono, preferivelmente possuindo de três a dez átomos de carbono, e o qual é saturado ou insaturado e ligado ao resto da molécula por uma ligação simples. Os radicais monocíclicos incluem, por exemplo, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila, cicloheptila, e ciclo-octila. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo de cicloalquila pode ser opcionalmente substituído.

[0055] Cicloalquilalquila refere-se a um radical de fórmula -R_BR_D onde R_b é uma cadeia de alquileno tal como definido anteriormente e R_d é um radical cicloalquila como definido acima. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo cicloalquilalquila pode ser opcionalmente substituído.

[0056] Halo ou halogênio refere-se a bromo, cloro, flúor ou iodo.

[0057] Haloalquila refere-se a um radical alquila, como definido acima, que está substituído por um ou mais radicais halo, como definido acima, por exemplo, trifluorometila, difluorometila, triclorometila,

2,2,2-trifluoroetila, 1,2-difluoroetila, 3-bromo-2-fluoropropila, 1,2dibromoetila, e semelhantes. A menos que declarado especificamente nesta especificação, um grupo haloalquila pode ser opcionalmente

12/239 substituído.

[0058] Heterociclila ou anel heterocíclico refere-se a um radical de anel não aromático de 3 a 18 membros estável, que consiste em dois a doze átomos de carbono e de um a seis heteroátomos selecionados a partir do grupo que consiste em nitrogênio, oxigênio e enxofre. Nas modalidades aqui descritas, o radical heterociclila representa um sistema de anel monocíclico; e o radical heterociclila pode ser parcialmente ou completamente saturado. Exemplos de tais radicais heterociclila incluem, mas não estão limitados a, dioxolanila, tienila, [1,3] ditianila, imidazolinila, imidazolidinila, isotiazolidinila, isoxazolidinila, morfolinila, 2-oxopiperazinila, 2-oxopiperidinila, 2-oxopirrolidinila, oxazolidinila, piperidinila, piperazinila, 4-piperidonila, pirrolidinila, pirazolidinila, tiazolidinila, tetra-hidrofurila, tritianila, tetra-hidropiranila, tiomorfolinila, tiamorfolinila, 1-oxo-tiomorfolinila, 1,1-dioxo e tiomorfolinila. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo heterociclila pode ser opcionalmente substituído.

[0059] N-heterociclila refere-se a um radical heterociclila como definido acima, contendo pelo menos um átomo de nitrogênio e onde o ponto de ligação do radical heterocíclico ao resto da molécula é através de um átomo de nitrogênio no radical heterociclila. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo N-heterociclila pode ser opcionalmente substituído.

[0060] Heterociclilalquila refere-se a um radical de fórmula -R_BR_E onde R_b é uma cadeia de alquileno, tal como definido acima e R_E é um radical heterociclila como definido acima, e se a heterociclila é uma heterociclila contendo nitrogênio, a heterociclila pode estar ligado ao radical alquila no átomo de nitrogênio. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo heterociclilalquila podem ser opcionalmente substituídos.

[0061] Heteroarila refere-se a um radical de sistema de anel mo

13/239 nocíclico de 5 a 14 membros compreendendo átomos de hidrogênio, um a treze átomos de carbono, um a seis heteroátomos selecionados a partir do grupo que consiste em nitrogênio, oxigênio e enxofre. Exemplos incluem, mas não estão limitados a, azepinila, furanila, furanonila, isotiazolila, imidazolila, isoxazolila, oxadiazolila, 2-oxoazepinila, oxazolila, oxiranila, 1 -oxidopiridinila, 1-oxidopirimidinila, 1-oxidopirazinila, 1-oxidopiridazinila, pirazolila, piridinila, pirazinila, pirimidinila, piridazinila, tiazolila, tiadiazolila, triazolila, tetrazolila, triazinila, tiofenila, e tienila. A menos que declarado especificamente nesta especificação, um grupo heteroarila pode ser opcionalmente substituído.

[0062] N-heteroarila refere-se a um radical heteroarila como definido acima, contendo pelo menos um átomo de nitrogênio e onde o ponto de ligação do radical heteroarila ao resto da molécula é através de um átomo de nitrogênio no radical heteroarila. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo Nheteroarila pode ser opcionalmente substituído.

[0063] Heteroarilalquila refere-se a um radical de fórmula -RbRf onde R_b é uma cadeia de alquileno, tal como definido acima e R_F é um radical heteroarila como definido acima. A menos que especificamente indicado de outra forma na especificação, um grupo heteroarilalquila pode ser opcionalmente substituído. O termo substituído aqui utilizado significa qualquer um dos grupos acima (isto é, alquila, alquileno, alcóxi, alquilamino, tioalquila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, haloalquila, heterociclila, N-heterociclila, heterociclilalquila, heteroarila, N-heteroarila e/ou heteroarilalquila) em que pelo menos um átomo de hidrogênio é substituído por uma ligação a um átomo de não hidrogênio tal como, mas não limitado a: um átomo de halogênio, tal como F, Cl, Br, e I; um átomo de oxigênio em grupos tais como grupos hidroxila, grupos alcóxi, e grupos éster; um átomo de enxofre em grupos tais como grupos tiol, tioalquila, grupos sulfona, grupos sulfonila, e

14/239 grupos sulfóxido; um átomo de nitrogênio em grupos tais como aminas, amidas, alquilaminas, dialquilaminas, arilaminas, alquilarilaminas, diarilaminas, N-óxidos, imidas, e enaminas; um átomo de silício em grupos tais como grupos trialquilsilila, grupos dialquilarilsilila, grupos alquildiarilsilila, e grupos triarilsililo; e outros heteroátomos em vários outros grupos. Substituído também significa qualquer um dos grupos acima em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por uma ligação de ordem superior (por exemplo, uma ligação dupla ou tripla) a um heteroátomo tal como oxigênio em grupos oxo, carbonila, carboxila, e éster; e nitrogênio em grupos tais como iminas, oximas, hidrazonas, e nitrilas. Por exemplo, substituído inclui qualquer um dos grupos acima em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por -NR_gR_h, -NR_gC(=O)R_h, -NR_gC(=O)NR_gR_h, NR_gC(=O)OR_h, -NR_GC(=NR_g)NR_GR_H, -NR_GSO₂R_H, -OC(=O)NR_GR_H, OR_g, -SR_g, -SOR_g, -SO2RG, -OSO2R, -SO2OR_g, ⁼NSO₂Rg, θ SO₂NR_gR_h. Substituído também significa qualquer um dos grupos anteriores em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por -C(=O)R_G, -C(=O)OR_g, -C(=O)NR_gR_h, -CH₂SO₂Rg, -CH₂SO₂NR_gR_h. No que precede, R_G e R_H são os mesmos ou diferentes e independentemente hidrogênio, alquila, alcóxi, alquilamino, tioalquila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, haloalquila, heterociclila, Nheterociclila, heterociclilalquila, heteroarila, N-heteroarila e/ou heteroarilalquila. Substituído significa ainda qualquer um dos grupos anteriores em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por uma ligação a um grupo amino, ciano, hidroxila, imino, nitro, oxo, tioxo, halo, alquila, alcóxi, alquilamino, tioalquila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, haloalquila, heterociclila, N-heterociclila, heterociclilalquila, heteroarila, N-heteroarila e/ou grupo heteroarilalquila. Além disso, cada um dos substituintes anteriores pode também ser opcionalmente substituído com um ou mais dos substituintes acima mencio

15/239 nados.

[0064] O termo grupo de proteção, como aqui utilizado, refere-se a uma parte química lábil que é conhecida na técnica para proteger grupos reativos, incluindo sem limitação grupos, hidroxila e amino, contra reações indesejáveis durante os procedimentos sintéticos. Grupos hidroxila e amino protegidos com um grupo protetor são aqui referidos como grupos hidroxila protegidos e grupos amino protegidos, respectivamente. Os grupos de proteção são normalmente utilizados seletivamente e/ou ortogonalmente para proteger os sítios durante reações em outros sítios reativos e podem, então, ser removidos para deixar o grupo desprotegido como é ou disponível para outras reações. Os grupos protetores conhecidos na técnica são geralmente descritos em Greene e Wuts, Protective Groups em Organic Synthesis, 3^a edição, John Wiley & Sons, Nova Iorque (1999). Geralmente, os grupos são protegidos ou presentes como um precursor que irá ser inerte a reações que modificam outras áreas da molécula mãe para a conversão em seus grupos finais no momento apropriado. Além disso grupos representantes protetores ou precursores são discutidos em Agrawal et al., Protocols fro oligonucleotide Conjugates, Eds, Humana Press.; Nova Jérsei, 1994; Vol. 26 pp. 1-72. Exemplos de grupos de proteção de hidroxila incluem, mas não se limitam a, t-butila, tbutoximetila, metoximetila, tetra-hidropiranila, 1-etoxietila, 1-(2cloroetóxi)etila, 2-trimetilsililetila, p-clorofenila, 2,4-dinitrofenila, benzila,

2,6-diclorobenzila, difenilmetila, p-nitrobenzila, trifenilmetila, trimetilsilila, trietilsilila, t-butildimetilsilila, t-butildifenilsilila (TBDPS), trifenilsilila, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato, pivaloato, benzoato, p-fenilbenzoato, carbonato de 9-fluorenilmetila, mesilato e tosilato. Exemplos de grupos de proteção amino incluem, mas não são limitados a, grupos de proteção de carbamato, tais como

2-trimetilsililetoxicarbonila (Teoc), 1-metil-1-(4-bifenilil)etoxicarbonila

16/239 (Bpoc), t-butoxicarbonila (BOC), aliloxicarbonila (Alloc), 9fluorenilmetiloxicarbonila (Fmoc), e benziloxicarbonila (Cbz); grupos protetores amida, tais como formila, acetila, tri-haloacetila, benzoíla, e nitrofenilacetila; Os grupos protetores sulfonamida, tais como 2nitrobenzenossulfonila; e grupos de proteção de imina e imida cíclicos, tais como ftalimida e ditiasuccinoíla.

[0065] A invenção aqui descrita também se destina a abranger todos os compostos farmaceuticamente aceitáveis de fórmula (I) sendo isotopicamente marcados por terem um ou mais átomos substituídos por um átomo tendo uma massa atômica ou número de massa diferente. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos divulgados incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, flúor, cloro, e iodo, tais como ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F, ³⁶CI, ¹²³l, e ¹²⁵l, respectivamente. Estes compostos radiomarcados podem ser úteis para ajudar a determinar ou medir a eficácia dos compostos, por caracterizar, por exemplo, o local ou modo de ação, ou a afinidade de ligação a sítios farmacologicamente importantes de ação. Certos compostos marcados isotopicamente de fórmula (I), por exemplo, aqueles que incorporam um isótopo radioativo, são úteis em estudos de distribuição de tecido de substrato e/ou drogas. Os isótopos radioativos trítio, isto é, ³H, e carbono-14, isto é, ¹⁴C, são particularmente úteis para esta finalidade, tendo em conta a sua facilidade de incorporação e meios rápidos de detecção.

[0066] A substituição com isótopos mais pesados tais como deutério, isto é ²H, pode produzir certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica. Por exemplo, meia vida em vivo pode aumentar ou requisitos de dosagem podem ser reduzidos. Assim, isótopos mais pesados podem ser preferidos em algumas circunstâncias.

[0067] A substituição com isótopos emissores de positrons, tais

17/239 como ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O e ¹³N, pode ser útil em estudos de Topografia de Emissão de Positrons (PET) para examinar a ocupação do receptor de substrato. Os compostos marcados isotopicamente de fórmula (I) podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas dos versados na técnica ou por processos análogos aos descritos nos Exemplos a seguir indicados utilizando um reagente isotopicamente marcado adequado no lugar do reagente não marcado previamente empregue.

[0068] A invenção aqui descrita também se destina a englobar os produtos metabólicos em vivo dos compostos divulgados. Tais produtos podem resultar, por exemplo, da oxidação, redução, hidrólise, amidação, esterificação, e outros semelhantes do composto administrado, principalmente devido a processos enzimáticos. Por conseguinte, a invenção inclui compostos produzidos por um processo que compreende a administração de um composto desta invenção a um mamífero por um período de tempo suficiente para se obter um produto metabólico do mesmo. Tais produtos são tipicamente identificados por administração de um composto radiomarcado da invenção em uma dose detectável a um animal, tais como rato, camundongo, porquinho da índia, macaco, ou humano, permitindo tempo suficiente para que o metabolismo ocorra e isolando os seus produtos de conversão a partir da urina, sangue ou outras amostras biológicas.

[0069] Composto estável e estrutura estável pretendem indicar um composto que é suficientemente robusto para sobreviver ao isolamento até um grau útil de pureza a partir de uma mistura de reação, e formulação em um agente terapêutico eficaz.

[0070] Mamífero inclui humanos e animais domésticos tais como animais de laboratório e animais domésticos (por exemplo, gatos, cães, suínos, bovinos, ovinos, caprinos, equinos, coelhos), e animais não domésticos tais como animais selvagens e afins.

18/239 [0071] Opcional ou opcionalmente significa que o evento subsequentemente descrito das circunstâncias pode ou não ocorrer, e que a descrição inclui casos onde o referido evento ou circunstância ocorre e instâncias em que não ocorre. Por exemplo, arila opcionalmente substituída significa que o radical arila pode ou não ser substituído e que a descrição inclui ambos os radicais arila substituídos e radicais arila não substituídos.

[0072] Veículo farmaceuticamente aceitável, diluente ou excipiente inclui, sem limitação, qualquer adjuvante, veículo, excipiente, glidante, agente edulcorante, diluente, conservante, corante / colorante, melhorador de sabor, surfactante, agente umectante, agente dispersante, agente de suspensão, estabilizador, agente isotônico, solvente ou emulsionante que foram aprovados pela United States Food e Drug Administration como sendo aceitáveis paro uso em seres humanos ou animais domésticos.

[0073] Sal farmaceuticamente aceitável refere-se a um sal de um composto que é farmaceuticamente aceitável e que possui (ou pode ser convertido em uma forma que possui) a atividade farmacológica desejada do composto pai. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos aqui descritos incluem sais derivados de uma base apropriada, tal como um metal alcalino (por exemplo, sódio), um metal alcalino-terroso (por exemplo, magnésio), amônio e NX₄ ⁺ (em que X é C1-C4 alquila). Os sais farmaceuticamente aceitáveis de um átomo de nitrogênio ou um grupo amino incluem, por exemplo, sais de ácidos carboxílicos orgânicos tais como ácidos acético, benzóico, canforsulfônico, cítrico, glucoheptônico, glucônico, láctico, fumárico, tartárico, maleico, malônico, málico, mandélico, isetiônico, lactobiônico, succínico, 2-naftalenossulfônico, oleico, palmítico, propiônico, esteárico e trimetilacético; ácidos orgânicos sulfônicos, tais como ácidos metanossulfônico, etanossulfônico, benzenossulfônico e p-toluenossulfô

19/239 nico; e ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, bromídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico e sulfâmico. Os sais farmaceuticamente aceitáveis de um composto de um grupo hidróxi incluem o ânion do referido composto em combinação com um cátion adequado tal como Na⁺ e NX₄ ⁺ (em que X é selecionado independentemente a partir de H ou um grupo C1-C4 alquila). Os sais farmaceuticamente aceitáveis também incluem sais formados quando um próton ácido presente no composto pai ou é substituído por um ion metálico, por exemplo, um ion de metal alcalino, um ion alcalino-terroso, ou um ion alumínio; ou coordena com uma base orgânica, tal como dietanolamina, trietanolamina, Nmetilglucamina e semelhantes. Também incluídos nesta definição são amônio e sais de amônio substituídos ou quaternizados. Listas não limitativas representantes de sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser encontradas em S.M. Berge et al., J. Pharma Sei., 66(1), 1-19 (1977), and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, R. Hendrickson, ed., 21 st edition, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, (2005), at p. 732, Tabela 38-5, ambas as quais são aqui incorporadas por referência.

[0074] Para uso terapêutico, os sais de ingredientes ativos dos compostos aqui descritos serão tipicamente farmaceuticamente aceitáveis, isto é, serão sais derivados de um ácido ou base fisiologicamente aceitável. No entanto, sais de ácidos ou bases que não são farmaceuticamente aceitáveis podem também encontrar uso, por exemplo, na preparação ou purificação de um composto de Fórmula (I) ou um outro composto da invenção. Todos os sais, quer sejam ou não derivados de um ácido ou base fisiologicamente aceitável, estão dentro do âmbito da presente invenção.

[0075] Os sais de metais são preparados tipicamente fazendo reagir o hidróxido de metal com um composto da presente invenção. Exemplos de sais de metais que são preparados deste modo são sais

20/239 que contêm Li+, Na+, e K+. Um sal metálico menos solúvel pode ser precipitado a partir da solução de um sal mais solúvel por adição do composto metálico adequado.

[0076] Além disso, os sais podem ser formados a partir da adição de ácido de determinados ácidos orgânicos e inorgânicos, por exemplo, HCI, HBr, H₂SO₄, H3PO4 ou ácidos sulfônicos orgânicos, a centros básicos, tipicamente aminas. Finalmente, deve ser entendido que as composições desta invenção compreendem os compostos aqui descritos em sua forma não ionizada, bem como zwitteriônica, e combinações com quantidades estequiométricas de água como em hidratos.

[0077] Muitas vezes cristalizações produzem um solvato do composto da invenção. Tal como aqui utilizado, o termo solvato refere-se a um agregado que compreende uma ou mais moléculas de um composto da invenção com uma ou mais moléculas de solvente. O solvente pode ser água, caso em que o solvato pode ser um hidrato. Alternativamente, o solvente pode ser um solvente orgânico. Assim, os compostos da presente invenção podem existir como um hidrato, incluindo um mono-hidrato, di-hidrato, hemi-hidrato, sesqui-hidrato, tri-hidrato, tetra-hidrato e similares, bem como as formas solvatadas correspondentes. O composto da invenção pode ser solvatos verdadeiros, enquanto que em outros casos, o composto da invenção pode reter meramente água adventícia ou ser uma mistura de água mais algum solvente adventício.

[0078] Uma composição farmacêutica refere-se a uma formulação de um composto da invenção e um meio geralmente aceito na técnica para a entrega do composto biologicamente ativo a mamíferos, por exemplo, os seres humanos. Um tal meio inclui todos os veículos farmaceuticamente aceitáveis, diluentes ou excipientes para esse fim.

[0079] Quantidade eficaz ou quantidade terapeuticamente eficaz refere-se a uma quantidade de um composto de acordo com a

21/239 invenção, que quando administrada a um paciente que dela necessite, é suficiente para efetuar o tratamento de estados de doença, condições ou perturbações para as quais os compostos têm utilidade. Uma tal quantidade seria suficiente para desencadear a resposta biológica ou médica de um sistema de tecido, ou paciente que é buscada por um investigador ou clínico. A quantidade de um composto de acordo com a invenção que constitui uma quantidade terapeuticamente eficaz variará dependendo de fatores tais como o composto e a sua atividade biológica, a composição utilizada para a administração, o tempo de administração, a via de administração, a taxa de excreção do composto, a duração do tratamento, o tipo de distúrbio ou estado da doença a ser tratada e a sua gravidade, as drogas usadas em combinação com ou coincidentemente com os compostos da invenção, e a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente. Uma tal quantidade terapeuticamente eficaz pode ser determinada rotineiramente por um versado na técnica considerando o seu próprio conhecimento, o estado da técnica, e esta divulgação.

[0080] O termo tratamento como aqui usado pretende significar a administração de um composto ou composição de acordo com a presente invenção para aliviar ou eliminar os sintomas da infecção por HIV e/ou reduzir a carga viral em um doente. O termo tratamento abrange também a administração de um composto ou composição de acordo com a presente invenção após a exposição do indivíduo ao vírus, mas antes do aparecimento de sintomas da doença, e/ou antes da detecção do vírus no sangue, para prevenir o aparecimento de sintomas da doença e/ou para evitar que o vírus atinja níveis detectáveis no sangue, e a administração de um composto ou composição de acordo com a presente invenção para prevenir a transmissão perinatal do HIV da mãe para o bebê, pela administração na mãe antes do parto e na criança nos primeiros dias de vida.

22/239 [0081] O termo agente antiviral, tal como aqui utilizado pretende significar um agente (composto ou biológico) que é eficaz para inibir a formação e/ou a replicação de um vírus em um ser humano, incluindo, mas não limitado a, agentes que interferem com qualquer hospedeiro ou mecanismos virais necessários para a formação e/ou a replicação de um vírus em um ser humano.

[0082] O termo inibidor da replicação do HIV, tal como aqui utilizado pretende significar um agente capaz de reduzir ou eliminar a capacidade do HIV de se replicar em uma célula hospedeira, quer in vitro, ex vivo ou in vivo.

[0083] Os compostos da invenção, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem conter um ou mais centros assimétricos e podem assim dar origem a enantiômeros, diastereômeros, e outras formas estereoisoméricas que podem ser definidas, em termos de estereoquímica absoluta, como (R) ou (S) ou, como (D) ou (L) aminoácidos. A presente invenção pretende incluir todos estes isômeros possíveis, assim como as suas formas racémicas e opticamente puras. Opticamente ativa (+) e (-), (R) e (S), ou (D) e (L) isômeros podem ser preparados usando sintons quirais ou reagentes quirais, ou resolvidos usando técnicas convencionais, por exemplo, cromatografia e cristalização fracionada. As técnicas convencionais para a preparação / isolamento de enanciômeros individuais incluem a síntese quiral a partir de um precursor opticamente puro adequado ou a resolução do racemato (ou o racemato de um sal ou derivado) utilizando, por exemplo, cromatografia líquida de alta pressão quiral (HPLC). Quando os compostos aqui descritos contêm ligações duplas olefínicas ou outros centros de assimetria geométrica, e a menos que especificado de outro modo, pretende-se que os compostos incluam ambos os isômeros geométricos E e Z. Do mesmo modo, todas as formas tautoméricas também se destinam a ser incluídas.

23/239 [0084] Um estereoisômero refere-se a um composto constituído pelos mesmos átomos ligados pelas mesmas ligações, mas possuindo estruturas tridimensionais diferentes que não são intermutáveis. A presente invenção contempla vários estereoisômeros e suas misturas e inclui enantiômeros. que se referem a dois estereoisômeros cujas moléculas são imagens não sobrepostas no espelho uma da outra.

[0085] Um tautômero refere-se a uma mudança de prótons de um átomo de uma molécula para um outro átomo da mesma molécula. A presente invenção inclui tautômeros de qualquer um dos referidos compostos.

[0086] Uma pró-droga refere-se a um composto que é quimicamente eficiente projetado para liberar a droga original depois de ultrapassar as barreiras biológicas para a administração oral. Em certas modalidades, a presente invenção inclui pró-drogas dos compostos de Fórmula (I).

Compostos [0087] Como notado acima, em uma modalidade da presente invenção, os compostos que possuem atividade antiviral são fornecidos, os compostos que têm a seguinte Fórmula (I):

ou um esteroisômero ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[0088] X é -O- ou -NZ³- ou -CHZ³-;

[0089] W é -CHZ²-;

[0090] Z¹, Z² e Z³ são cada um, independentemente, hidrogênio ou

24/239

C^alquila, ou em que Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -Lem que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, ou C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, em que pelo menos um de Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L-;

[0091] Z⁴ é uma ligação, -CH₂-, ou -CH₂CH₂-;

[0092] Y¹ e Y² são cada um, independentemente, hidrogênio, ₃alquila ou C-|.₃haloalquila;

[0093] R¹ é fenila substituída por um a três halogênios; e [0094] cada R^a é, independentemente, hidrogênio, halo, hidroxila ou C^alquila.

[0095] Em outra modalidade, compostos são providos tendo a seguinte Fórmula (ll-A):

OH (ll-A) [0096] Em outra modalidade, compostos são providos tendo a seguinte Fórmula (ll-B):

OH (ll-B) [0097] Em outra modalidade, compostos são providos tendo a seguinte Fórmula (ll-C):

25/239

Ο

[0098] Em outra modalidade, L é -C(R^a)₂-. Em uma modalidade adicional, L é -C(R^a)2C(R^a)2-. Em ainda uma modalidade adicional, L é -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)₂-. Em ainda uma modalidade adicional, cada R^a é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é metila e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é halogênio e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, dois R^a são halogênio e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é halogênio e cada R^a restante é hidrogênio.

[0099] Em outra modalidade, X é -O-. Em outra modalidade, X é NZ³-. Em outra modalidade, X é -NH-. 16. Em outra modalidade, X é CHZ³- e Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L-. Em uma modalidade adicional, Z² é hidrogênio. Em outra modalidade, X é -CH₂-.

[0100] Em outra modalidade, Z⁴ é uma ligação ou -CH2-. Em outra modalidade, Z⁴ é -CH2-. Em outra modalidade, Z⁴ é uma ligação.

[0101] Em outra modalidade, Y¹ e Y² são cada um independentemente hidrogênio, metila ou trifluorometila.

[0102] Em outra modalidade, R¹ é substituído por um halogênio. Em uma modalidade adicional, R¹ é 4-fluorofenila ou 2-fluorofenila.

[0103] Em outra modalidade, R¹ é substituído por dois halogênios. Em uma modalidade adicional, R¹ é 2,4-difluorofenila, 2,3difluorofenila, 2,6-difluorofenila, 3-fluoro-4-clorofenila, 3, 4difluorofenila, 2-fluoro-4-clorofenila, ou 3,5-difluorofenila. Em ainda uma modalidade adicional, R¹ é 2,4-difluorofenila.

26/239 [0104] Em outra modalidade, R¹ é substituído por três halogênios.

Em uma modalidade adicional, R¹ é 2,4,6-trifluorofenila ou 2,3,4trifluorofenila. Em ainda uma modalidade adicional, R¹ é 2,4,6trifluorofenila.

[0105] Em uma modalidade, uma composição farmacêutica é fornecida compreendendo um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (II B), ou (II C), como referido acima, ou um seu estereoisômero ou sal farmaceuticamente aceitável,e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente.

[0106] Outra modalidade é fornecida compreendendo um método de tratamento de uma infecção pelo HIV em um humano tem ou está em risco de ter a infecção por administração ao humano de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (II B), ou (II C), como acima referido, ou uma sua composição farmacêutica. Outra modalidade é fornecido compreendendo um método de tratamento ou prevenção de uma infecção pelo HIV num humano tem ou está em risco de ter a infecção por administração ao humano de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (II B), ou (II C), como acima referido, ou uma sua composição farmacêutica.

[0107] Em uma outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (II B), ou (Il-C), como referido acima, ou uma sua composição farmacêutica, para o tratamento de um a infecção pelo HIV num humano tem ou está em risco de ter a infecção é fornecida. Em uma outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (II B), ou (Il-C), como referido acima, ou uma sua composição farmacêutica, para o tratamento ou prevenção de uma infecção pelo HIV num humano tem ou está em risco de ter a infecção é fornecida.

[0108] Em uma outra modalidade, o uso em terapia médica de um

27/239 composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), ou (ll-C), como referido acima, ou uma sua composição farmacêutica, é fornecido . [0109] Em uma outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), ou (ll-C), como referido acima, ou uma sua composição farmacêutica, paro uso no tratamento terapêutico tratamento de uma infecção por HIV é fornecida. Em uma outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), ou (ll-C), como referido acima, ou uma sua composição farmacêutica, paro uso no profilática ou o tratamento terapêutico de uma infecção por HIV é fornecida.

[0110] Tal como ainda notado acima, em outra modalidade da presente invenção, os compostos que têm atividade antiviral são fornecidos, os compostos que têm a seguinte Fórmula (I):

ou um esteroisômero ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[0111] X é-O-ou-NZ³-ou-CHZ³-;

[0112] W é -O- ou -NZ²- ou -CHZ²-;

[0113] Z¹, Z² e Z³ são cada um, independentemente, hidrogênio,

C-ioalquila ou C^haloalquila, ou em que Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L- em que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)₂-, C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2OC(R^a)2-, C(R^a)2NR^aC(R^a)2-, -C(R^a)2SC(R^a)2-, -C(R^a)2S(O)C(R^a)₂-,

C(R^a)₂SO₂C(R^a)2-, -C(R^a)2OC(R^a)₂C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2OC(R^a)2-, C(R^a)2NR^aC(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2NR^aC(R^a)2-,

28/239

C(R^a)₂SC(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2S(O)C(R^a)₂C(R^a)2·.

C(R^a)₂SO₂C(R^a)2C(R^a)2-,

-C(R^a)2C(R^a)2SC(R^a)₂-,

-C(R^a)2C(R^a)2S(O)C(R^a)₂-,

-C(R^a)2C(R^a)2SO₂C(R^a)₂-,

C(R^a)2SO2NR^aC(R^a)2- ou -C(R^a)2NR^aSO2C(R^a)2-;

[0114] Z⁴ é uma ligação ou -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2 OCH2-, -CH2NR^aCH2-, -CH2SCH2-, -CH₂S(O)CH₂- ou -CH2SO2CH2-;

[0115] Y¹ e Y² são cada um, independentemente, hidrogênio ou C1 3alquila, ou Y¹ e Y², em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam um anel carbocíclico com 3 a 6 átomos no anel ou um anel heterocíclico possuindo de 3 a 6 átomos no anel, em que o anel carbocíclico ou heterocíclico é opcionalmente substituído com um ou vários Ra;

[0116] R¹ é arila opcionalmente substituída ou heteroarila opcionalmente substituída; e [0117] cada R^a é, independentemente, hidrogênio, halo, hidroxila ou C1 4alquila, ou em que dois grupos Ra, em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados, formam = O, e [0118] em que pelo menos um de: (i) Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados em conjunto, forma L; ou (ii) Y¹ e Y², em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam um anel carbocíclico com 3 a 6 átomos no anel ou um anel heterocíclico possuindo de 3 a 6 átomos no anel.

[0119] Em uma outra modalidade, W representa -CHZ².

[0120] Em uma outra modalidade, Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados em conjunto, forma L.

[0121] Em uma outra modalidade, são proporcionados compostos tendo uma das seguintes fórmulas (ll-A), (Il-B), ou (Il-C):

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O OH (ΙΙ-Α)

Ο

Ο ΟΗ ; ou (ΙΙ-Β)

Ο

Ο ΟΗ (II-C) [0122] em que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)₂C(R^a)2-, C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)₂C(R^a)2-, -C(R^a)2OC(R^a)2-, -C(R^a)2NR^aC(R^a)₂-,

C(R^a)₂SC(R^a)2-, -C(R^a)2S(O)C(R^a)2-, -C(R^a)2SO₂C(R^a)₂-,

C(Ra)2OC(Ra)2C(Ra)2-, C(Ra)2NRaC(Ra)2C(Ra)2-, C(Ra)2SC(Ra)2C(Ra)2-, C(Ra)2S(O)C(Ra)2C(Ra)2-, C(Ra)2SO2C(Ra)2C(Ra)2-,

-C(Ra)2C(Ra)2OC(Ra)2-, -C(Ra)2C(Ra)2NRaC(Ra)2-, -C(Ra)2C(Ra)2SC(Ra)2-, -C(Ra)2C(Ra)2S(O)C(Ra)2-, -C(Ra)2C(Ra)2SO2C(Ra)2-,

C(R^a)2SO2NR^aC(R^a)2- ou -C(R^a)2NR^aSO2C(R^a)₂-.

30/239 [0123] Em outra modalidade, Y¹ e Y², junto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam um anel carboxíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel ou um anel heterocíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel.

[0124] Em outra modalidade, compostos são providos tendo uma das seguintes Fórmulas (lll-A), (lll-B), (lll-C) ou (lll-D):

Z¹ Õ ÓH (lll-A)

(lll-B)

(IH-C)

31/239

(lll-D) [0125] em que Z¹ e Z³ são cada um, independentemente, hidrogênio ou C-|.₃alquila.

[0126] Em outra modalidade, compostos são providos tendo uma das seguintes Fórmulas (lll-E), (lll-F), (lll-G) ou (lll-H):

(lll-E)

(lll-F)

(lll-G)

32/239

(ΙΙΙ-Η) [0127] em que Z¹ e Z³ são cada um, independentemente, hidrogênio ou Ci.₃alquila.

[0128] Em outra modalidade, ambos (i) Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L-, e (ii) Y¹ e Y², junto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados, formam um anel carboxíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel ou um anel heterocíclico tendo de 3 a 6 átomos de anel.

[0129] Em outra modalidade, compostos são providos tendo uma das seguintes Fórmulas (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG) ou (IV-AH):

O OH (IV-AA)

(IV-AB)

33/239

(IV-AC)

O OH (IV-AD)

O OH (IV-AE)

O OH (IV-AF)

34/239

(IV-AH) [0130] em que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)₂C(R^a)2-, -C(R^a)2OC(R^a)2-, -C(R^a)2NR^aC(R^a)₂-,

C(R^a)₂SC(R^a)2-, -C(R^a)2S(O)C(R^a)2-, -C(R^a)2SO₂C(R^a)₂-,

C(R )₂OC(R )₂C(R )₂-,

C(R^a)₂NR^aC(R^a)2C(R^a)2-,

C(R^a)₂SC(R^a)2C(R^a)2-,

C(R^a)₂S(O)C(R^a)2C(R^a)2-,

C(R^a)₂SO₂C(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2SO2NR^aC(R^a)2- ou -CCR¹

-C(R )₂C(R )₂OC(R )₂-,

-C(R^a)2C(R^a)2NR^aC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)₂SC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2S(O)C(R^a)2-,

-C(R^a)2C(R^a)2SO₂C(R^a)2-, )2NR^aSO2C(R^a)₂-, [0131] Em outra modalidade, compostos são providos tendo uma das seguintes Fórmulas (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG) ou (IV-BH):

35/239

(IV-BA)

(IV-BB)

(IV-BD)

36/239

O OH (IV-BE)

O OH (IV-BF)

(IV-BH) [0132] em que L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)₂C(R^a)2-, -C(R^a)2OC(R^a)2-, -C(R^a)2NR^aC(R^a)₂-,

37/239

-C(R^a)2SO2C(R^a)2-,

-C(R^a)2C(R^a)2OC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2NR^aC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2SC(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)₂S(O)C(R^a)2-,

-C(R^a)2C(R^a)2SO2C(R^a)2-,

C(R^a)₂SC(R^a)2-, -C(R^a)2S(O)C(R^a)₂-,

C(R^a)2OC(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2NR^aC(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2SC(R^a)2C(R^a)2-,

CÍRWJCÍRW)?·.

C(R^a)2SO2C(R^a)2C(R^a)2-,

C(R^a)2SO₂NR^aC(R^a)2- ou -C(R^a)2NR^aSO2C(R^a)2-.

[0133] Em outra modalidade, L é -C(R^a)2-, -C(R^a)2C(R^a)2-, C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-, ou -C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2C(R^a)2-. Em uma modali dade adicional, L é -C(R^a)₂-. Em ainda uma modalidade adicional, L é C(R^a)2C(R^a)2-. Em ainda uma modalidade adicional, L é C(R^a)₂C(R^a)2C(R^a)₂-. Em ainda uma modalidade adicional, cada R^a é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é metila e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um

R^a é halogênio e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, dois R^a são halogênio e cada R^a restante é hidrogê nio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é halogênio e cada R^a restante é hidrogênio.

[0134] Em outra modalidade, L é -C(R^a)2OC(R^a)2-, C(R^a)₂NR^aC(R^a)2-, -C(R^a)2SC(R^a)2-, -C(R^a)2S(O)C(R^a)₂-, ou C(R^a)2SO2C(R^a)2-. Em uma modalidade adicional, L é -C(R^a)2OC(R^a)2-. Em ainda uma modalidade adicional, cada R^a é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é metila e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é halogênio e cada

R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, dois R^a são halogênio e cada R^a restante é hidrogênio. Em ainda uma modalidade adicional, um R^a é halogênio e cada R^a restante é hidrogênio.

[0135] Em outra modalidade, X é -O-. Em uma modalidade adicional, Z² é hidrogênio. Em outra modalidade, X é -NZ³-. Em outra modalidade, X é -NH-. Em outra modalidade, X é -CHZ³-. Em outra modali38/239 dade, X é -CH₂-.

[0136] Em outra modalidade, Z⁴ é uma ligação ou -CH₂-. Em outra modalidade, Z⁴ é -CH₂-. Em outra modalidade, Z⁴ é uma ligação.

[0137] Em outra modalidade, Y¹ e Y² são cada um independentemente hidrogênio, metila ou trifluorometila.

[0138] Em outra modalidade, R¹ é substituído por um halogênio. Em uma modalidade adicional, R¹ é 4-fluorofenila ou 2-fluorofenila.

[0139] Em outra modalidade, R¹ é fenila. Em outra modalidade, R¹ é piridinila.

[0140] Em outra modalidade, R¹ é substituído por pelo menos um halogênio.] [0141] Em outra modalidade, R¹ é substituído por um halogênio. Em uma modalidade adicional, R¹ é 4-fluorofenila ou 2-fluorofenila.

[0142] Em outra modalidade, R¹ é substituído por dois halogênios. Em uma modalidade adicional, R¹ é 2,4-difluorofenila, 2,3difluorofenila, 2,6-difluorofenila, 3-fluoro-4-clorofenila, 3, 4difluorofenila, 2-fluoro-4-clorofenila, ou 3,5-difluorofenila. Em ainda uma modalidade adicional, R¹ é 2,4-difluorofenila.

[0143] Em outra modalidade, R¹ é substituído por três halogênios. Em uma modalidade adicional, R¹ é 2,4,6-trifluorofenila ou 2,3,4trifluorofenila. Em ainda uma modalidade adicional, R¹ é 2,4,6trifluorofenila.

[0144] Em outra modalidade, R¹ é 3-trifluorometil-4-fluorofenila ou

2-ciclopropóxi-4-fluorofenila.

[0145] Em uma modalidade, uma composição farmacêutica é provida compreendendo um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (IIIH), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IVAH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou um esteroisômero ou um sal farma39/239 ceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0146] Outra modalidade é provida compreendendo um método de tratar uma infecção por HIV em um humano tendo ou em risco de ter a infecção por administração ao humano de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (IIA), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos. Outra modalidade é provida compreendendo um método de tratar ou prevenir uma infecção por HIV em um humano tendo ou em risco de ter a infecção por administração ao humano de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos.

[0147] Em outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos para o tratamento de uma infecção por HIV em um humano tendo ou em risco de ter a infecção. Em outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH),

40/239 como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos para o tratamento ou prevenção de uma infecção por HIV em um humano tendo ou em risco de ter a infecção.

[0148] Em outra modalidade, o uso em terapia médica de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (Il-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IVAC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IVBC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos, é provido.

[0149] Em outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos, para uso no tratamento terapêutico de uma infecção por HIV é provido. Em outra modalidade, o uso de um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (IIIB), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como notado acima, ou uma composição farmacêutica dos mesmos, para uso no tratamento profilático ou terapêutico of uma infecção por HIV é provido.

[0150] É entendido que qualquer modalidade dos compostos de Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (IIIF), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como apresentado acima, e qualque substituinte específico apresentado aqui para um grupo R¹, R^a, X, W, Y¹, Y², L, Z¹, Z², Z³, ou Z⁴ nos compostos de Fórmula (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV41/239

AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IVBC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), como apresentado acima, podem ser independentemente combinados com outras modalidades e/ou substituintes de compostos de Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (lll-A), (lll-B), (lll-C), (lll-D), (lll-E), (lll-F), (lll-G), (lll-H), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), para formar modalidades das invenções não especificamente apresentadas acima. Em adição, no evento que uma lista de substituintes é listada para qualquer R¹, R^a, X, W, Y¹, Y², L, Z¹, Z², Z³, ou Z⁴ particular em uma modalidade particular e/ou reivindicação, é entendido que cada substituinte individual pode ser deletado da modalidade particular e/ou reivindicação e que a lista restante de substituintes será considerada estando dentro do escopo da invenção.

[0151] Um versado na técnica irá apreciar, compostos de Fórmulas (I), (ll-A), (ll-B), (ll-C), (IV-AA), (IV-AB), (IV-AC), (IV-AD), (IV-AE), (IV-AF), (IV-AG), (IV-AH), (IV-BA), (IV-BB), (IV-BC), (IV-BD), (IV-BE), (IV-BF), (IV-BG), e (IV-BH), em que Z¹ e Z² ou Z¹ e Z³, tomados juntos, formam -L- podem ser mostrados em diferentes caminhos. Por exemplo, o COmposto 3 do Exemplo 3 pode ser mostrado como:

O OH

O OH ou

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Composições Farmacêuticas [0152] Para os fins de administração, em certas modalidades, os compostos aqui descritos são administrados como um produto químico em bruto ou são formulados como composições farmacêuticas. As composições farmacêuticas aqui descritas incluem um composto de Fórmula (I) e um ou mais dos seguintes: um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável. O composto de Fórmula (I) está presente na composição em uma quantidade que é eficaz para tratar uma doença ou condição de interesse particular. A atividade dos compostos de Fórmula (I) pode ser determinada por um versado na técnica, por exemplo, como descrito nos Exemplos abaixo. As cuma vezntrações e dosagens apropriadas podem ser facilmente determinadas por um versado na técnica. Em certas modalidades, um composto de Fórmula (I) está presente na composição farmacêutica em uma quantidade de cerca de 25 mg a cerca de 500 mg. Em certas modalidades, um composto de Fórmula (I) está presente na composição farmacêutica em uma quantidade de cerca de 100 mg a cerca de 300 mg. Em certas modalidades, um composto de Fórmula (I) está presente na composição farmacêutica em uma quantidade de cerca de 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg ou cerca de 500 mg.

[0153] A administração dos compostos da invenção, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, em forma pura ou numa composição farmacêutica apropriada, é realizada através de qualquer dos modos aceitos de administração de agentes para servir utilidades semelhantes. As composições farmacêuticas da invenção são preparadas por combinação de um composto da invenção com um adequado veí43/239 culo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável, e em modalidades específicas são formuladas em preparações em formas sólidas, líquidas gasosas ou semissólidas, tais como comprimidos, cápsulas, pós, grânulos, pomadas, soluções, supositórios, injeções, inalantes, géis, microesferas, e aerossóis. Vias exemplares de administração de tais composições farmacêuticas incluem, sem limitação, administração oral, tópica, transdérmica, inalação, parentérica, sublingual, bucal, retal, vaginal e intranasal. As composições farmacêuticas da invenção são formuladas de modo a permitir que os ingredientes ativos nelas contidos sejam biodisponíveiss por administração da composição a um paciente. As composições que serão administradas a um indivíduo ou paciente tomam a forma de uma ou mais unidades de dosagem, onde, por exemplo, um comprimido pode ser uma única unidade de dosagem, e um recipiente de um composto da invenção na forma de aerossol pode conter uma pluralidade das unidades de dosagem. Os métodos atuais de preparação de tais formas de dosagem são conhecidos, ou serão evidentes, para os versados nesta técnica; por exemplo, vide Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition (Philadelphia College of Pharmacy and Science, 2000). A composição sendo administrada irá, em qualquer caso, conter uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de uma doença ou condição de interesse de acordo com os ensinamentos aqui descritos.

[0154] As composições farmacêuticas aqui divulgadas são preparadas por métodos bem conhecidos na arte farmacêutica. Por exemplo, em certas modalidades, uma composição farmacêutica destinada a ser administrada por injeção é preparada por combinação de um composto da invenção com água estéril, destilada, de modo a formar uma solução. Em algumas modalidades, um surfactante é adicionado para facilitar a formação de uma solução homogênea ou uma suspen44/239 são. Os surfactantes são compostos que não covalentemente interagem com o composto da invenção, de modo a facilitar a dissolução ou a suspensão homogênea do composto no sistema de entrega aquoso. [0155] Os compostos da invenção, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, são administrados em uma quantidade terapeuticamente eficaz, que irá variar dependendo de uma variedade de fatores incluindo a atividade do composto específico empregue; a estabilidade metabólica e duração da ação do composto; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente; o modo e tempo de administração; a taxa de excreção; a combinação de drogas; a gravidade da desordem ou condição particular; e o indivíduo submetido à terapia.

Terapia de Combinação [0156] Em uma modalidade, um método para o tratamento ou prevenção de uma infecção pelo HIV em um humano que tem ou está em risco de ter a infecção é fornecido, que compreende a administração ao humano de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais agentes terapêuticos adicionais.

[0157] Em uma modalidade, as composições farmacêuticas que compreendem um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, e um veículo farmaceuticamente aceitável, diluente ou excipiente são fornecidos.

[0158] Em uma modalidade, combinações de agentes farmacêuticos que compreendem um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais são fornecidos.

[0159] Nas modalidades acima, o agente terapêutico adicional pode ser um agente anti-HIV. Por exemplo, em algumas modalidades, o

45/239 agente terapêutico adicional é selecionado dentre o grupo que consiste em HIV inibidores de protease, inibidores de transcriptase reversa de HIV não nucleosídicos, inibidores de transcriptase reversa de HIV nucleosídicos, inibidores de transcriptase reversa de HIV nucleotídicos, inibidores de integrase de HIV, inibidores de integrase de sítio não catalítico de HIV (ou alostérico), inibidores de entrada (por exemplo, inibidores de CCR5, inibidores de gp41 (isto é, inibidores da fusão) e inibidores da ligação CD4), inibidores de CXCR4, inibidores de gp120, inibidores de oxidase de G6PD e NADH, compostos que direcionam a cápside do HIV (inibidores da cápside; por exemplo, inibidores da polimerização da cápside ou compostos de rompimento da cápside tais como os divulgados no documento WO 2013/006738 (Gilead Sciences), US 2013/0165489 (Universidade da Pensilvânia), e WO 2013/006792 (Pharma Recursos), intensificadores de farmacocinética, e outras drogas para o tratamento de HIV, e suas combinações. Em outras modalidades, o agente terapêutico adicional é selecionado dentre um ou mais dos seguintes:

(1) inibidores da protease do HIV selecionados dentre o grupo consistindo de amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE -2147 (AG1776), L-756, 423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, GW640385X, DG17, PPL100, DG35, eAG 1859;

(2) inibidores de transcriptase reversa de HIV não nucleosídicos, ou inibidores de transcriptase reversa de HIV não nucleotídicos selecionados a partir do grupo consistindo em capravirina, emivirine, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC -963, MIV-150, TMC-120, rilpivirene, BILR 355 BS, VRX 840,773, lersivirine (UK-453061), RDEA806, KM023 e MK-1439;

(3) inibidores de transcriptase reversa de HIV nucleosídicos

Petição 870180137638, de 04/10/2018, pág. 10/12

46/239 selecionados a partir do grupo que consiste em zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabine, alovudina, MIV-210, ±-FTC, D-d4FC, emtricitabina, phosphazide,tidoxil fozivudine, apricitibine (AVX754), KP-1461, GS-9131 (Gilead Sciences) e tidoxil fosalvudine (anteriormente HDP 99, 0003);

(4) inibidores de transcriptase reversa de HIV nucleotídicos selecionados a partir do grupo que consiste em tenofovir, tenofovir disoproxil fumarato, tenofovir alafenamide fumarato (Gilead Sciences), GS-7340 (Gilead Sciences), GS-9148 (Gilead Sciences), adefovir, adefovir dipivoxil, CMX-001 (Chimerix) ou CMX-157 (Chimerix);

(5) inibidores da integrase do HIV selecionados a partir do grupo que consiste em curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquínico, ácido aúrico tricarboxílico, derivados do ácido aúrico tricarboxílico, fenetil ácido de éster cafeico, derivados de fenetil éster de ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, RA-177, L-870,812 e L-870,810, raltegravir, BMS-538158, GSK364735C, BMS -707,035, MK2048, BA 011, elvitegravir, dolutegravir e GSK-744;

(6) sítio não catalítico de HIV, ou alostérico, inibidores de integrase (NCINI), incluindo, mas não se limitando a, BI-224436, CX0516, CX05045, CX14442, compostos revelados no documento WO

2009/062285 (Boehringer Ingelheim), WO 2010/130034 (Boehringer Ingelheim), WO 2013/159064 (Gilead Sciences), WO 2012/145728 (Gilead Sciences), WO 2012/003497 (Gilead Sciences), WO 2012/003498 (Gilead Sciences) cada um dos quais é aqui incorporado por referência na sua totalidade aqui;

(7) inibidores de gp41 selecionados a partir do grupo que

Petição 870180137638, de 04/10/2018, pág. 11/12

47/239 consiste em enfuvirtida, sifuvirtida, albuvirtide, FB006M, e tri-1144;

(8) o inibidor de CXCR4 AMD-070;

(9) o inibidor SP01A de entrada;

(10) o inibidor de gp120 BMS-488043;

(11) o inibidor de G6PD e NADH oxidase imunitina;

(12) inibidores de CCR5 selecionados a partir do grupo que consiste em aplaviroc, vicriviroc, maraviroc, cenicriviroc, PRO-140, INCB15050, PF-232798 (Pfizer), e CCR5mAb004;

(13) inibidores de ligação CD4 selecionados a partir do grupo que consiste em ibalizumab (TMB-355) e BMS-068 (BMS-663068);

(14) potenciadores farmacocinéticos selecionados a partir do grupo que consiste em cobicistat e SPI-452; e (15) outras drogas para o tratamento do HIV selecionadas a partir do grupo que consiste em BAS-100, SPI-452, REP 9, SP-01A, TNX-355, DES6, ODN-93, ODN-112, VGV-1, AP-457 (bevirimat), HRG214, VGX-410, KD-247, AMZ 0026, CYT 99007A-221 HIV, DEBIO-025, BAY 50-4798, MDX010 (ipilimumab), PBS 119, ALG 889 e PA-1050040 (PA- 040), e suas combinações [0160] Em certas modalidades, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com dois, três, quatro ou mais agentes terapêuticos adicionais. Em certas modalidades, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com dois agentes terapêuticos adicionais. Em outras modalidades, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com três agentes terapêuticos adicionais. Noutras modalidades, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com quatro agentes terapêuticos adicionais. Os dois, três quatro ou mais agentes terapêuticos adicionais podem ser diferentes agentes terapêuticos selecionados de entre a mesma classe de agentes terapêuticos, ou eles podem ser se

48/239 lecionados a partir de diferentes classes de agentes terapêuticos. Em uma modalidade específica, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com um inibidor de nucleotídeos de HIV da transcriptase reversa e um HIV inibidor não nucleósido da transcriptase reversa. Em uma outra modalidade específica, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com um inibidor de nucleotídeos de HIV da transcriptase reversa, e uma protease do HIV composto inibidor. Em uma outra modalidade, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com um inibidor de nucleotídeos de HIV da transcriptase reversa, um inibidor não nucleósido de HIV da transcriptase reversa, e um composto inibidor de HIV da protease. Em uma modalidade adicional, um composto aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é combinado com um inibidor de HIV de nucleotídeos da transcriptase reversa, uma inibidor não nucleósido de HIV da transcriptase reversa, e um potenciador farmacocinético.

[0161] Em certas modalidades, quando um composto aqui divulgado é combinado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, como descrito acima, os componentes da composição são administrados como um regime simultâneo ou sequencial. Quando administrada sequencialmente, a combinação pode ser administrada em duas ou mais administrações.

[0162] Em certas modalidades, um composto aqui divulgado é combinado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, em uma forma de dosagem unitária para administração simultânea, a um paciente, por exemplo, como uma forma de dosagem sólida para administração oral.

[0163] Em certas modalidades, um composto aqui descrito é administrado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. A coadministração de um composto aqui descrito com um ou mais agentes

49/239 terapêuticos adicionais, em geral, refere-se a administração simultânea ou sequencial de um composto aqui descrito e um ou mais agentes terapêuticos adicionais, divulgados de modo que quantidades terapeuticamente eficazes do composto aqui descrito e um ou mais agentes terapêuticos adicionais divulgados estejam ambos presentes no corpo do paciente.

[0164] A co-administração inclui a administração de dosagens unitárias dos compostos aqui descritos antes ou após a administração de doses unitárias de um ou mais agentes terapêuticos adicionais, por exemplo, a administração do composto aqui descrito dentro de segundos, minutos ou horas da administração de um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Por exemplo, em algumas modalidades, uma dose unitária de um composto aqui descrito é administrada primeiro, seguida dentro de segundos ou minutos, pela administração de uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Alternativamente, em outras modalidades, uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais é administrada primeiro, seguida pela administração de uma dose unitária de um composto aqui divulgado dentro de segundos ou minutos. Em algumas modalidades, uma dose unitária de um composto aqui descrito é administrada primeiro, seguida, após um período de horas (por exemplo, 1-12 horas), pela administração de uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Em outras modalidades, uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais é administrada primeiro, seguida, após um período de horas (por exemplo, 1-12 horas), pela administração de uma dose unitária de um composto aqui divulgado.

[0165] Os Exemplos que se seguem ilustram vários métodos de preparação de compostos da presente invenção, isto é, composto de Fórmula (I):

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[0166] em que R¹, X, W, Y¹, Y², Z¹, Z², ou Z⁴ são como definidos acima. Entende-se que um versado na técnica pode ser capaz de fazer estes compostos por métodos semelhantes ou através da combinação de outros métodos conhecidos por um versado na técnica. Também é entendido que um versado na técnica seria capaz de fazer, de um modo semelhante como descrito abaixo, outros compostos de Fórmula (I) não especificamente ilustrados a seguir, utilizando os componentes de partida apropriados, e modificando os parâmetros da síntese, conforme necessário . Em geral, os componentes de partida podem ser obtidos a partir de fontes tais como a Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI e Fluorochem EUA, etc, ou sintetizados de acordo com fontes conhecidas pelos versados na técnica (vide, por exemplo, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structures, 5^a edição (Wiley, Dezembro de 2000)) ou preparadas como aqui descrito.

[0167] Os exemplos seguintes são proporcionados para fins de ilustração, não de limitação.

EXEMPLOS

Esquemas Gerais de Síntese [0168] Esquemas 1-3 são proporcionados como outras modalidades da invenção e ilustram os métodos gerais que foram utilizados para preparar compostos com a Fórmula (I) e que podem ser utilizados para preparar o composto adicional com a Fórmula (I).

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Esquema 1 '°Y°' o

O o

Α5 o Y,/2 N^Ar

H

Α1

ΌΗ

Α1

Α2

Α3

Α1

Α6

Α8

Α4

Α1 pode ser convertido em amida A2, com uma amina [0169] apropriada e um reagente de acoplamento tal como HATU ou EDCI. A2 pode ser convertido em A3 com um ácido forte tal como ácido metanossulfônico. A3 pode ser convertido em qualquer um A4 ou A5 por aquecimento com uma diamina cíclica apropriada ou aminoálcool cíclico, seguido por desproteção de metila com um reagente tal como brometo de magnésio.

[0170] Alternativamente, A1 pode ser convertido em A6, por tratamento com um ácido forte tal como o ácido metanossulfônico. A6 pode ser condensado com uma diamina cíclica apropriada ou aminoálcool cíclico, seguido por desproteção de metila com um reagente tal como brometo de magnésio para formar ou A7 ou A8, respectivamente. A7 ou A8 podem ser convertidos em amidas A5 e A4 por tratamento com uma amina apropriada e um reagente de acoplamento tal como HATU ou EDCI seguido de desproteção de metilao com um reagente tal como brometo de magnésio.

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Esquema 2

B1 B2 B3 [0171] B1 (como descrito em WO2012/018065) é condensado com diamina sob condições de refluxo para se obter B2. B2 é hidrolisado e acoplado com uma amina através de um método de formação de amida para se obter o produto B3 após a remoção de um grupo protetor benzila.

CQmpqstos Representativos

Exemplo 1

Preparação de Composto 1 N-(2,4-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazepina-10carboxamida

O OH (+/-)

1-A ¹-^B 1-C

(+/-)

Etapa 1 [0172] Ácido 1 -(2,2-dimetoxietil)-5-metóxi-6-(metoxicarbonil)-4oxo-1,4-dihidropiridina-3-carboxílico (1-A, 0,300 g, 0,95 mmol), prepa53/239 rado como descrito em WO2011/119566 A1, foi evaporado uma vez a partir de tolueno seco, suspenso em acetonitrila (4 ml_) e tratado com N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,329 ml_, 1,90 mmol), 2,4difluorobenzilamina (0,125 ml_, 1,05 mmol) e HATU (0,433 g, 1,14 mmol). A mistura de reação foi agitada por 10 minutos e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica-gel (10 a 60% de acetato de etila:diclorometano) para render o composto 5-(2,4difluorobenzilcarbamoil)-1-(2,2-dimetoxietil)-3-metóxi-4-oxo-1,4dihidropiridina-2-carboxilato de metila, 1-B. ¹H-RMN (400 MHz, DMSOd6) δ 10,28 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,42 (dd, J = 15,4, 8,6 Hz, 1H), 7,24 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 4,52 (m, 3H), 4,22 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,29 (d, 6H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C20H23F2N2O7: 441,15; encontrado: 441,2.

Etapa 2 [0173] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dimetoxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-B, 0,106 g, 0,24 mmol) em acetonitrila (0,9 ml_) e ácido acético (0,1 ml_) foi tratado com ácido metanossulfônico (0,005 ml_, 0,072 mmol), vedado com uma tampa amarela, e aquecido a 70 O. Após 16 horas, a mistura foi resfriada para render uma solução bruta de 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1-(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila, 1-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C18H19F2N2O7: 413,12; encontrado: 413,1.

Etapas 3 e 4 [0174] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 0,65 ml_ da mistura bruta a partir da etapa anterior, 0,17 mmol) foi tratado com acetonitrila (0,65 ml_) e c/s-3-aminociclopentanol (0,06 ml_). A mistura de reação foi vedada e aquecida a 90 O. Após 30 minutos, a mistura de reação foi resfriada e brometo de magnésio (0,063 g, 0,34 mmol) foi

54/239 adicionado. A mistura foi vedada novamente e aquecida a 50 Ό. Após 10 minutos, a mistura de reação foi particionada entre diclorometano e ácido clorídrico (0,2 M aq). A camada orgânica foi removida e a camada aquosa extraída novamente com diclormetano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. Purificação por prep-HPLC (30-70% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 1 como uma mistura racêmica. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (br s, 1H), 10,35 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,37 (dd, J= 15,4, 8,6 Hz, 1H), 7,23 (dt, J = 2,5, 9,9 Hz, 1H), 7,05 (dt, J = 2,2, 8,7 Hz, 1H), 5,43 (dd, J = 9,6, 4,0 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,68 (dd, J = 13,2, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (br s, 1H), 4,53 (m, 2H), 4,02 (dd, J = 12,6, 9,4 Hz), 1,93 (br s, 4H), 1,83 (d, J = 12,0 Hz), 1,57 (dt, J = 12,2, 3,2 Hz). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₂oF2N30₅:

432,14; encontrado: 432,2.

[0175] Exemplos 2 e 3 [0176] Preparação de Compostos 2 e 3 [0177] (2R, 5S, 13aR)-N-(2,4-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b][1,3]oxazepina-10-carboxamida (2) e (2S, 5R, 13aS)-N-(2,4difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [ 1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0178] Composto 1 (16 mg) foi separado por HPLC quiral usando Chiralpak AS-H com 100% de etanol como eluente para render os Compostos 2 e 3 em forma enantiomericamente enriquecida. Para o Composto 2: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₁H₂₀F₂N₃O₅:

55/239

432,14; encontrado: 432,2, Chiral HPLC retention time = 4,50 minutos (Chiralpak AS-H, 150 x 4,6 mm, 1 mL/min EtOH). Para o Composto 3: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N3O5: 432,14; encontrado: 432,2, Tempo de retenção de HPLC quiral = 6,84 minutos (Chiralpak AS-H, 150 x 4,6 mm, 1 mL/min EtOH). ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (br s, 1H), 10,35 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H),

7,37 (dd, J = 15,2, 8,4 Hz, 1H), 7,23 (m, 1H), 7,05 (dt, J = 1,8 Hz, 8,7 Hz, 1H), 5,44 (dd, J = 9,6, 4,0 Hz), 5,09 (br s, 1H), 4,68 (dd, J = 12,8, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (br s, 1H), 4,53 (m, 2H), 4,02 (dd, J = 12,6, 9,4 Hz, 1H), 1,93 (br s, 4H), 1,83 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,57 (m, 1H).

[0179] Alternativamente, Composto 3 foi preparado como segue:

,OH

1-C

1-D (+/-) ⁰ °x

3-A ⁰ °\

3-B

O OH [0180] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 1,2 mmol em 5 mL de 9:1 acetonitrila:ácido acético contendo 0,026 mL de ácido me

56/239 tanossulfônico) foi tratado com acetonitrila (5,0 mL) e cis-3aminociclpentanol (0,24 g, 2,4 mmol). A mistura de reação foi vedada e aquecida a 90 O. Após 30 minutos, a mistura de reação foi resfriada, tratada com carbonato de potássio (0,332 g, 2,4 mmol), vedado e reaquecido a 90 O. Após 15 minutos, a mistura foi resfriada e particionada entre dichlormetano e ácido clorídrico (0,2 M aquoso). A camada orgânica foi removida e a solução aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio (anidro), filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (0-8% de etanol (contendo 11% de hidróxido de amônio aquoso saturado) em diclorometano) para render Intermediário

1-D. LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2 [0181] Intermediário 1-D (270 mg) foi separado por SFC quiral sobre uma coluna Chiralpak AD-H de 50 mm usando 50% (1:1 metanokacetonitrila) em dióxido de carbono supercrítico como eluente para render Intermediários 3-A (primeiro pico de eluição) e 3-B (segundo pico de eluição) em uma forma enatiomericamente enriquecida. Para

3-A: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2. For 3-B: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2.

[0182] Intermediário 3-A (0,110 g, 0,247 mmol) em acetonitrila (5 mL) foi tratado porção a porção com brometo de magnésio (0,091 g, 0,494 mmol), vedado e aquecido a 50 O. Após 10 min utos a mistura foi resfriada e particionada entre diclorometano e ácido clorídrico (0,2 M aquoso). A camada orgânica foi separada e a aquosa extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. Purificação por HPL preparativa (30-70% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 3 em uma forma enatiomericamente enriquecida. Tempo de re57/239 tenção de HPLC quiral = 6,51 minutos (Chiralpak AS-H, 150 x 4,6 mm, 1 mL/min EtOH). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para

C₂₁H₂₀F₂N₃O₅: 432,14; encontrado: 432,2. ¹H-RMN (400 MHz, DMSOd6) δ 12,45 (br s, 1H), 10,35 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,37 (dd, J = 15,2, 8,4 Hz, 1H), 7,23 (m, 1H), 7,05 (dt, J = 1,8 Hz, 8,7 Hz, 1H), 5,44 (dd, J = 9,6, 4,0 Hz), 5,09 (br s, 1H), 4,68 (dd, J = 12,8, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (br s, 1H), 4,53 (m, 2H), 4,02 (dd, J = 12,6, 9,4 Hz, 1H), 1,93 (brs, 4H), 1,83 (d, J= 12,4 Hz, 1H), 1,57 (m, 1H).

Exemplo 4

Preparação de Composto 4 (1S, 4R)-N-(2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12ahexahidro-2H-1,4-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[1,2-a]pirimidina-9-

[0183] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 0,12 mmol em 0,53 mL de 9:1 acetonitrila:ácido acético contendo 0,002 mL de ácido metanossulfônico) foi tratado com acetonitrila em seguida (R)pirrolidin-3-amina (0,032 mL, 0,36 mmol). A mistura de reação foi tampada e aquecida a 90 Ό por 5,5 horas. Após resfria r, a mistura foi particionada entre diclorometano e bicarbonato de sódio (1M aquoso). A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio (anidro), filtradas e concentradas. O resíduo foi dissolvido em acetonitrila (1 mL), tratado com brometo de magnésio (0,022 g, 0,12 mmol), tampado e aquecido a 50 “C por 10 minutos. Após resfriar a mistura foi particionada entre diclorometano e cloreto de amônio (sat).

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A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com diclorometano. A camada aquosa foi ajustada para pH = 1 com HCI (aq) e extraída novamente com diclorometano. A solução aquosa foi ajustada para pH = 3 com NaOH (aq) e extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas, e concentradas. Purificação por HPL preparativa (1055% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 4. ¹H-RMN (400 MHz, CD3OD-d4) δ 8,42 (s, 1H), 7,42, (q, J = 7,7 Hz, 1H), 6,99 6,90 (m, 2H), 5,07 (br s, 1H), 4,73 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,62 (s, 2H), 4,51 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,07 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,4- 3,0 (m, 3H), 2,76 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 2,15-2,0 (m, 1H), 1,9-1,8 (m, 1H). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C2oH19F₂N404: 417,14; encontrado: 417,2.

Exemplo 5

Preparação de Composto 5 (4R,12aS)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-7-hidróxi-4-metil-6,8dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexahidro-2H-[1,3]oxazino[3,2-d]pirido[1,2a]pirazina-9-carboxamida

OH O

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Etapa 1 [0184] ácido (4R, 12aS)-7-metóxi-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12ahexahidro-2H-[1,3]oxazino[3,2-d]pirido[1,2-a]pirazina-9-carboxílico (Intermediário 5-A) foi preparado de uma maneira análoga a ácido (3S, 11aR)-6-metóxi-3-metil-5,7-dioxo-2,3,5,7,11,11a-hexahidrooxazolo[3,2-d] pirido[1,2-a]pirazina-8-carboxílico como descrito em WO2011/119566, substituindo (R)-3-aminobutan-1-ol por (S)-2-aminopropan-1-ol. WO2011/119566 é incorporado aqui para referência em sua totalidade. Uma suspensão de Intermediário 5-A (24,8 mg, 0,080 mmol), sal HCL de 1-(2,4-difluorofenil)ciclopropanamina (5-B, 21,9 mg, 0,107 mmol), e HATU (48 mg, 0,126 mmol) em CH₂CI₂ (2 ml_) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,1 ml_, 0,574 mmol) foi adicionado. Após 30 minutos, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila antes de lavar com 10% de solução de ácido cítrico aquoso (x1) e solução de NaHCOg aquoso saturado (x1). Após as frações aquosas serem extraídas com acetato de etila (x1), as frações orgânicas foram combinadas, secas (MgSO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por combiflash (12 g de coluna) usando hexanos, acetato de etila, e 20% de metanol em acetato de etila para obter (4R,12aS)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-7-metóxi-4-metil-6,8dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexahidro-2H-[1,3]oxazino[3,2-d]pirido[1,2-

a]pirazina-9-carboxamida, Intermediário 5-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂3H₂4F₂N₃O₅: 460,17; encontrado 460,2.

Etapa 2 [0185] Uma suspensão de Intermediário 5-C (39 mg, 0,080 mmol) e brometo de magnésio (42 mg, 0,2282 mmol) em acetonitrila (2 ml_) foi agitada a 50 °C. Após 1 hora, a mistura de reação foi agitada a 0 °C de banho quando HCI a 1 N (2 ml_) foi adicionado. Após a mistura resultante ser diluída com água (~20 ml_), o produto foi extraído com diclorometano (x3) e os extratos combinados foram secos (MgSO₄) e

60/239 concentrados. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para obter (4R,12aS)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-7-hidróxi-4-metil-6,8dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexahidro-2H-[1,3]oxazino[3,2-d]pirido[1,2a]pirazina-9-carboxamida, composto 5, com sal de TFA. ¹H-RMN (400 MHz, CDCIs) δ 10,72 (br s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,57 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,71-6,81 (m, 2H), 5,23 (dd, J = 5,6 e 4,4 Hz, 1H), 4,98 (br quint, J = ~6,5 Hz, 1H), 4,26 (dd, J = 13,6 e 4,4 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 13,6 e 5,6 Hz, 1H), 4,00-4,06 (m, 2H), 2,16-2,25 (m, 1H), 1,55 (br dd, J = 13,8 e 1,8 Hz, 1H), 1,40 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,22-1,31 (m, 4H). ¹⁹F RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -76,38 (s, 3F), -111,69 ~ -111,645 (m, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C22H₂2F2N₃O₅: 446,15; encontrado: 446,2.

Exemplo 6

Preparação de Composto 6 (1R, 4S)-N-(2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12ahexahidro-2H-1,4-metanopirido[1 ’ ,2’:4,5] pirazi no[1,2-a]pirimidina-9carboxamida

O OH [0186] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 0,100 g, 0,243 mmol), (S)-pirrolidin-3-amina (0,043 mL, 0,485 mmol) e carbonato de potássio (0,067 g, 0,485 mmol) foram suspensos em acetonitrila (1,9 mL) e ácido acético (0,1 mL) e aquecidos a 90 Ό por 1,5 horas. Após resfriar, a mistura foi tratada com brometo de magnésio (0,090 g) e aquecido a 50 í por 30 minutos. Após resfriar, a m istura particionada entre diclorometano e HCl a 0,2 Μ. A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas or

61/239 gânicas foram secas sobre sulfato de sódio (anidro), filtradas e concentradas. Purificação por HPL preparativa (25-50% acetonitrilaiágua, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 6. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10,33 (t, J= 6,0 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,48-7,32 (m, 1H), 7,31 -7,15 (m, 1H), 7,14 - 6,97 (m, 1H), 4,86 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,62 - 4,54 (m, 1H), 4,52 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,01 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 2,99-2,76 (m, 3H), 1,96 - 1,81 (m, 1H), 1,71 - 1,53 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C20H-19F2N4O4: 417,14; encontrado: 417,2. Exemplo 7

Preparação de Composto 7 (2S, 6R)-N-(2,4-difluorobenzil)-9-hidróxi-8, 10-dioxo-3, 4,5, 6,8, 10, 14, 14a-octa-hidro-2H-2,6-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazocina-11 -carboxamida

[0187] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 0,050 g, 0,121 mmol), (1S, 3R)-3-aminociclohexanol (0,028 g, 0,243 mmol) e carbonato de potássio (0,034 g, 0,243 mmol) foram suspensos em acetonitrila (0,95 mL) e aquecidos a 90 Ό por 0,5 hora. Após resfriar, ácido acético (0,050 mL) foi adicionado e a mistura foi reaquecida a 90 Ό por 2h. Após resfriar a mistura foi tratada com brometo de magnésio (0,044 g) e aquecida a 50 Ό por 1 hora. Após resfriar, uma segunda porção de brometo de magnésio (0,044 g) foi adicionada e a mistura foi reaquecida a 50 “C por 15 minutos. Após resfriar, a mistu ra particionada entre diclorometano e HCI a 0,2 Μ. A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio (anidro), filtradas e concen

62/239 tradas. Purificação por HPL preparativa (40-80% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 7. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,40 (s, 1H), 10,36 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,48 - 7,29 (m, 1H), 7,31 - 7,13 (m, 1H), 7,13 - 6,97 (m, 1H), 5,56 (dd, J = 10,0, 4,1 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 12,7, 4,1 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 4,40 4,29 (m, 2H), 4,06 (dd, J = 12,5, 10,2 Hz, 1H), 2,46 - 2,36 (m, 1H), 1,98 - 1,63 (m, 4H), 1,57 - 1,30 (m, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2.

Exemplo 8

Preparação de Composto 8 (2R, 6S)-N-(2,4-difluorobenzil)-9-hidróxi-8, 10-dioxo-3, 4,5, 6,8, 10, 14, 14a-octa-hidro-2H-2,6-metanopirido[T,2’;4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazocina-11 -carboxamida

[0188] Composto 8 foi preparado de uma maneira similar ao composto 7 usando (1R,3S)-3-aminociclohexanol no lugar de (1S, 3R)-3aminociclohexanol. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,40 (s, 1H), 10,36 (t, J= 6,1 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,48-7,30 (m, 1H), 7,23 (td, J = 10,6, 2,7 Hz, 1H), 7,05 (td, J = 8,3,2,3 Hz, 1H), 5,56 (dd, J = 10,1, 4,1 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 12,8, 3,9 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,39 4,27 (m, 2H), 4,06 (dd, J = 12,6, 10,0 Hz, 1H), 2,47 - 2,35 (m, 1H), 2,00 - 1,64 (m, 4H), 1,58 - 1,30 (m, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado; 446,2.

Exemplos 9 e 10

Preparação de Compostos 9 e 10 (2S, 5R, 13aS)-N-((R)-1-(4-fluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,163/239

b][1,3]oxazepina-10-carboxamida 9 e (2R, 5S, 13aR)-N-((R)-1-(4fluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [ 1,3]oxazepina-10-carboxamida 10

Kh, [0189] Etapa 1 [0190] Ácido 1 -(2,2-dimetoxietil)-5-metóxi-6-(metoxicarbonil)-4oxo-1,4-dihidropiridina-3-carboxílico (1-A, 0,500 g, 1,59 mmol), foi suspenso em acetonitrila (6 ml_) e tratado com Ν,Ν-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,550 ml_, 3,17 mmol), (R)-1-(4-fluorofenil)etanamina (0,242 mg, 1,74 mmol) e HATU (0,661 g, 1,74 mmol). A mistura de reação foi agitada por 2 horas e particionada entre acetato de etila e água. A camada orgânica foi separada e lavada com HCI (10% aq), bicarbonato de sódio (1M aq), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para render 1 -(2,2-dimetoxietil)-5-(1 -(4-fluorofenil)etilcarbamoil)-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)-metila bruto que foi usado sem purificação na próxima etapa: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H26FN2O7: 437,17; encontrado: 437,1.

[0191] Etapa 2

i. 1-(2,2-dimetoxietil)-5-(1-(4-fluorofenil)etilcarbamoil)-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)-metila foi suspen64/239 so em acetonitrila (5,7 mL) e ácido acético (0,6 mL) e tratado com ácido metanossulfônico (0,031 mL, 0,477 mmol). A mistura foi tampada e aquecida a 75 Ό. Após 7h, a mistura foi resfriada e usada sem purificação na próxima etapa: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para

C19H22FN2O7: 409,14; encontrado: 409,0.

[0192] Etapa 3 [0193] 1 -(2,2-d i h id roxieti I )-5-( 1 -(4-fluorofenil)etilcarbamoil)-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)-metila (3,6 mL da mistura bruta a partir da Etapa 2, 0,8 mmol) foi diluído com acetonitrila (3,6 mL) e tratado com c/s-3-aminociclpentanol, Sal de HCI (0,219 g,

1,6 mmol) e carbonato de potássio (0,276 g, 2,0 mmol). A mistura foi tampada e aquecida a 90 Ό. Após 20 minutos, a mist ura de reação foi resfriada e particionada entre diclorometano e HCI (0,2 M aq). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram tratadas com uma pequena quantidade de acetonitrila, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas.

[0194] O resíduo foi suspenso em acetonitrila (4 mL) e tratado com brometo de magnésio (0,177 g). A mistura foi tampada e aquecida a 50 O. Após 10 minutos, a mistura de reação foi resfriada e particionada entre diclorometano e HCI (0,2 M aq). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída novamente com diclormetano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica-gel (0-8% de etanoLDCM) para render uma mistura diastereomérica de 9 e 10 desejado.

[0195] A mistura foi separada por HPLC quiral usando Chiralpak AD-H com 100% de etanol como eluente para render os Compostos 9 e 10 em forma enantiomericamente enriquecida:

[0196] Para o Composto 9: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado

65/239 para C22H23FN3O5: 428,16; encontrado: 428,1. Tempo de retenção de HPLC quiral = 10,177 minutos (Chiralpak AD-H, 150 x 4,6 mm, 1 mL/min EtOH). ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,45 (s, 1H), 10,45 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,37 (dd, J = 8,6, 5,6 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 8,9 Hz, 2H), 5,44 (dd, J = 9,5, 4,2 Hz, 1H), 5,17 - 5,04 (m, 2H), 4,73 - 4,62 (m, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,00 (dd, J = 12,7,9,5 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 1,56 (dt, J = 12,1,3,4 Hz, 1H), 1,44 (d, J = 6,9 Hz, 3H).

[0197] Para o Composto 10: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H23FN3O5: 428,16; encontrado: 428,1. Tempo de retenção de HPLC quiral = 14,061 minutos (Chiralpak AD-H, 150 x 4,6 mm, 1 mL/min EtOH). ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,44 (s, 1H), 10,46 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,37 (dd, J = 8,6, 5,6 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 8,9 Hz, 2H), 5,42 (dd, J = 9,6, 4,1 Hz, 1H), 5,18 - 5,02 (m, 2H), 4,67 (dd, J= 12,8, 4,2 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,02 (dd, J= 12,7,9,6 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,57 (dt, J = 13,0, 3,5 Hz, 1H), 1,44 (d, J= 6,9 Hz, 3H).

Exemplo 11

Preparação de Composto 11 (2S, 5R, 13aS)-N-((R)-1 -(2,4-difluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[r,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

66/239

Etapa 1 [0198] Ácido 1 -(2,2-dimetoxietil)-5-metóxi-6-(metoxicarbonil)-4oxo-1,4-dihidropiridina-3-carboxílico (1-A, 0,315 g, 1,00 mmol), foi suspenso em acetonitrila (4 mL) e tratado com N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,348 mL, 2,00 mmol), (R)-1-(2,4-difluorofenil)etanamina Sal de HCI (0,213 mg, 1,10 mmol) e HATU (0,418 g, 1,10 mmol). A mistura de reação foi agitada por 1 hora e particionada entre diclorometano e HCI (10% aq). A camada orgânica foi separada e lavada com bicarbonato de sódio (1M aq), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para render 5-(1-(2,4-difluorofenil)etilcarbamoil)-1-(2,2dimetoxietil)-3-metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)metila bruto que foi usado sem purificação na próxima etapa. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H25F2N2O7: 455,16; encontrado:

455,1.

Etapa 2 [0199] 5-(1 -(2,4-difluorofenil)etilcarbamoil)-1 -(2,2-dimetoxietil)-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)-metila foi suspenso em acetonitrila (3,6 mL) e ácido acético (0,4 mL) e tratado com ácido metanossulfônico (0,020 mL). A mistura foi tampada e aquecida a

O. Após 16 horas, a mistura bruta foi resfriada e usada sem purificação na próxima etapa. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para

C19H21F2N2O7: 427,13; encontrado: 427,1.

Etapa 3

67/239 [0200] 5-(1 -(2,4-d ifl uorofen i I )eti Icarbamoi I)-1 -(2,2-d i h id roxieti I )-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)metila (metade da mistura bruta da etapa 2, aprox 0,5 mmol) foi diluído com acetonitrila (2,5 mL) e tratado com (1S, 3R)-3-aminociclopentanol (0,110 g, 1,09 mmol) e carbonato de potássio (0,069 g, 0,50 mmol). A mistura foi tampada e aquecida a 90 Ό. Após 15 minutos, a mist ura de reação foi resfriada e brometo de magnésio (0,184 g) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 50 Ό. Após 10 minutos, a mistura foi resfriada e tratada com uma porção adicional de brometo de magnésio (0,184 g). A mistura de reação foi reaquecida a 50 Ό e agitad a por 10 minutos. Após resfriar, a mistura foi particionada entre diclorometano e HCI (0,2 M aq). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. Purificação por HPL preparativa (30-60% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto desejado 11. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,1. ¹H-RMN (400 MHz, DMSOd₆) δ 12,46 (s, 1H), 10,53 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,39 (q, J =

8,5 Hz, 1H), 7,29-7,12 (m, 1H), 7,13-6,93 (m, 1H), 5,44 (dd, J = 9,8,

4,2 Hz, 1H), 5,28 (p, J = 7,3, 6,8 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,66 (dd, J =

13,2, 4,3 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 3,99 (dd, J = 13,1, 9,6 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,56 (dt, J = 12,5, 2,9 Hz, 1H), 1,45 (d, J = 6,9 Hz, 3H).

Exemplo 12

Preparação de Composto 12 (2R, 5S, 13aR)-N-((R)-1 -(2,4-difluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[r,2’:4,5]pirazino[2,1-

b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

68/239

[0201] Composto 12 foi preparado de uma maneira similar ao composto 11 usando (1R,3S)-3-aminociclopentanol no lugar de (1S, 3R)-3-aminociclopentanol. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,43 (s, 1H), 10,52 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,39 (q, J = 8,4 Hz, 1H), 7,28 - 7,12 (m, 1H), 7,11 - 6,97 (m, 1H), 5,41 (dd, J = 10,0, 4,0 Hz, 1H), 5,35 - 5,20 (m, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,65 (dd, J = 13,1,3,8 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,01 (dd, J = 12,8, 9,5 Hz, 1H), 1,92 (s, 4H), 1,83 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 1,61 - 1,51 (m, 1H), 1,44 (d, J = 6,9 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,1. Exemplo 13

Preparação de Composto 13 (2S, 5R, 13aS)-N-((S)-1 -(2,4-difluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0202] Composto 13 foi preparado de uma maneira similar ao composto 11 usando (S)-1-(2,4-difluorofenil)etanaminano lugar de (R)1-(2,4-difluorofenil)etanamina, e usando apenas uma única porção de brometo de magnésio (0,184 g). ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,44 (s, 1H), 10,53 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,39 (q, J = 8,5 Hz, 1H), 7,32 - 7,14 (m, 1H), 7,05 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 5,42 (dd, J = 9,5, 4,2 Hz, 1H), 5,29 (p, J = 6,9 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,65 (dd, J = 12,9, 4,3 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,02 (dd, J = 12,6, 9,8 Hz, 1H), 1,92 (s, 4H), 1,83 (d,

69/239

J= 12,1 Hz, 1H), 1,61 - 1,52 (m, 1H), 1,44 (d, J = 6,9 Hz, 3H). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2.

Exemplo 14

Preparação de Composto 14 (2R, 5S, 13aR)-N-((S)-1 -(2,4-difluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

OH [0203] Composto 14 foi preparado de uma maneira similar ao composto 11 usando (S)-1-(2,4-difluorofenil)etanamina no lugar de (R)1-(2,4-difluorofenil)etanamina e usando (1R,3S)-3-aminociclopentanol no lugar de (1S, 3R)-3-aminociclopentanol. ¹H-RMN (400 MHz, DMSOc/₆) δ 12,46 (s, 1H), 10,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,39 (q, J = 8,6 Hz, 1H), 7,28 - 7,14 (m, 1H), 7,05 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 5,44 (dd, J = 9,8, 3,8 Hz, 1H), 5,28 (p, J = 8,0 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,66 (dd, J = 12,9, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 3,99 (dd, J = 12,5, 9,6 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J= 12,6 Hz, 1H), 1,56 (dt, J= 13,0, 3,3 Hz, 1H), 1,45 (d, J = 6,9 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,1.

Exemplo 15

Preparação de Composto 15 (2S, 5R, 13aS)-N-(4-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4_I5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

70/239

[0204] [0205]

Etapa 1 Ácido 1 -(2,2-dimetoxietil)-5-metóxi-6-(metoxicarbonil)-4-

oxo-1,4-dihidropiridina-3-carboxílico (1-A, 3,15 g, 10,0 mmol), suspenso em acetonitrila (36 mL) e ácido acético (4 mL) foi tratado com ácido metanossulfônico (0,195 mL). A mistura aquecida a 75 Ό. Após 7 horas, a mistura bruta foi resfriada e armazenada a -10Ό por três dias. A mistura bruta foi reaquecida a 75 Ό por 2 horas, resfriada e usada sem purificação na próxima etapa. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C-19H21F2N2O7: 288,07; encontrado: 288,1.

[0206] [0207]

Etapa 2 Ácido 1 -(2,2-dihidroxietil)-5-metóxi-6-(metoxicarbonil)-4-

oxo-1,4-dihidropiridina-3-carboxílico bruto (16,8 mL de mistura bruta a partir da Etapa 1, aprox 4 mmol) foi combinado com (1S, 3R)-3aminociclopentanol (0,809 g, 8 mmol), diluído com acetonitrila (16,8 mL), e tratado com carbonato de potássio (0,553 g, 4 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 85 Ό, agitada por 15 minutos, resfriada à temperatura ambiente e agitada por mais 16 horas. HCI (50 mL, 0,2M

71/239 aq) foi adicionado e a solução amarela clara foi extraída três vezes com diclorometano. Os orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados para um sólido amarelo. Este material bruto foi precipitado a partir de diclorometano/hexanos para render intermediário desejado 15-B como um pó bege claro. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8,72 (s, 1H), 5,42 (dd, J = 9,6, 4,1 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,72 (dd, J = 13,0, 3,7 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,09 (dd, J =

12,5, 9,6 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 1,92 (s, 3H), 1,78 (m, 2H), 1,62 - 1,47 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₁₅H₁₇N₂O₆: 321,11; encontrado: 321,2.

[0208] Etapa 3 [0209] Intermediário 15-B (0,040 g, 0,125 mmol) e (4fluorofenil)metanamina (0,017 g, 0,137 mmol) foram suspensos em acetonitrila (1 mL) e tratados com N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,033 mL, 0,187 mmol) e HATU (0,052 g, 0,137 mmol). Após agitação por 30 minutos, a mistura de reação foi tratada com brometo de magnésio (0,046 g, 0,25 mmol) e aquecida a 50 O. Após 10 minutos, a mistura de reação foi resfriada e tratada com HCI (2 mL, 10% aq). Após uns poucos minutos, o precipitado foi filtrado e lavado com HCI (10% aq) e água. Purificação por HPL preparativa do precipitado (2065% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto desejado 15. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,44 (s, 1H), 10,36 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,37 - 7,28 (m, 2H), 7,19 - 7,09 (m, 2H), 5,43 (dd, J = 9,6, 4,0 Hz, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 12,8, 4,1 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,58 - 4,42 (m, 3H), 4,02 (dd, J = 12,7,9,6 Hz, 1H), 1,92 (s, 5H), 1,83 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,56 (dt, J = 12,0, 3,4 Hz, 1H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H21FN3O5: 414,15; encontrado: 414,2. Exemplo 16

Preparação de Composto 16 (2S, 5R, 13aS)-N-(2,3-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo72/239

2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1’,2’:4,5]pirazino[2,1b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0210] Composto 16 foi preparado de uma maneira similar ao composto 15 usando (2,3-difluorofenil)metanamina no lugar de (4fluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,46 (s, 1H), 10,41 (t, J= 6,1 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,43-7,25 (m, 1H), 7,25-7,05 (m, 2H), 5,44 (dd, J = 9,5, 3,9 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 12,8, 4,0 Hz, 1H), 4,65 - 4,53 (m, 3H), 4,02 (dd, J = 12,7,9,8 Hz, 1H), 3,56 (s, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 1,57 (dt, J = 11,5, 3,0 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H₂oF₂N30₅: 432,14; encontrado: 432,2.

Exemplo 17

Preparação de Composto 17 (2S, 5R, 13aS)-N-(4-cloro-2-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1’,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0211] Composto 17 foi preparado de uma maneira similar ao composto 15 usando (4-cloro-2-fluorofenil)metanamina no lugar de (4fluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,46 (s, 1H),

10,45 - 10,29 (m, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,42 (dd, J = 10,0, 2,0 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,26 (dd, J = 8,4, 1,8 Hz, 1H), 5,50 - 5,38 (m, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 13,0, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,54 (m,

73/239

2Η), 4,02 (dd, J = 12,8, 9,7 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J = 12,0 Hz

1H), 1,57 (dt, J = 11,9, 3,4 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H20CIFN3O5: 448,11; encontrado: 448,2.

Exemplo 18

Preparação de Composto 18 (2S, 5R, 13aS)-N-(3, 4-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[r,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

Ο OH [0212] Composto 18 foi preparado de uma maneira similar ao composto 15 usando (3, 4-difluorofenil)metanamina no lugar de (4fluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,46 (s, 1H), 10,51 - 10,27 (m, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,50 - 7,23 (m, 2H), 7,23 - 7,03 (m, 1H), 5,44 (dd, J = 9,5, 3,6 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,75 - 4,63 (m, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,57 - 4,44 (m, 2H), 4,02 (dd, J = 12,6, 9,8 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,57 (dt, J = 12,0, 3,4 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C2iH2oF₂N30₅: 432,14; encontrado: 432,2.

Exemplo 19

Preparação de Composto 19 (1R, 5S)-N-(2,4-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13aocta-hidro-1, 5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[1,2-a] [ 1,3]diazepina-10carboxamida

O OH

74/239

Etapas 1 e 2 [0213] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 97,5 mg, 0,236 mmol) foi tratado com acetonitrila (1,9 mL), ácido acético (0,1 mL), carbonato de potássio (145 mg, 1,05 mmol), e cloridrato de (S)piperidin-3-amina (82 mg, 0,472 mmol). A mistura de reação foi vedada e aquecida a 90 Ό. Após 60 minutos, a mistura de reação foi resfriada particionada entre salmoura e diclorometano. A fase aquosa foi três vezes extraída em diclorometano e as fases orgânicas combinadas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas. O produto bruto foi dissolvido em acetonitrila (2 mL) e brometo de magnésio (89,1 mg, 0,48 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada novamente e aquecida a 50 O. Após 90 minutos, a mistura de reação foi arrefecida com ~5 mL de 0,2M HCI(aq), o pH ajustado para —10, diluído com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (Acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 19. ¹HRMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,43 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,39 - 7,30 (m, 1H), 6,81 (q, J = 8,1 Hz, 2H), 4,89 (dd, J = 11,6, 3,8 Hz, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,64 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 4,26 (dd, J = 12,6, 3,8 Hz, 1H), 3,91 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 3,20 - 3,10 (m, 2H), 3,06 (s, 2H), 2,14 - 2,02 (m, 1H), 1,96 - 1,81 (m, 2H), 1,81 - 1,70 (m, 1H). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N4O4: 431,15; encontrado: 431,2.

Exemplo 20

Preparação de Composto 20 (1S, 5R)-N-(2,4-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13aocta-hidro-1, 5-metanopirido[1’,2’:4,5]pirazino[1,2-a] [1,3]diazepina-1075/239 carboxamida

[0214] Etapas 1 e 2 [0215] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1 -(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 103,3 mg, 0,25 mmol) foi tratado com acetonitrila (1,9 mL), ácido acético (0,1 mL), carbonato de potássio (159,8 mg, 1,16 mmol), e (R)-piperidin-3-amina dihidrochloride (90 mg, 0,52 mmol). A mistura de reação foi vedada e aquecida a 90 “C. Após 40 minutos, a mistura de rea ção foi resfriada particionada entre salmoura e diclorometano. A fase aquosa foi três vezes extraída em diclorometano e as fases orgânicas combinadas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas. O produto bruto foi dissolvido em acetonitrila (2 mL) e brometo de magnésio (96,5 mg, 0,52 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada novamente e aquecida a 50 Ό. Após 80 minutos, a mistura de reação foi arrefecida com -5 mL de 0,2M HCI (aq), o pH ajustado para —10, diluído com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (Acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 20. ¹HRMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10,35 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,48 (s, 1H),

7.45 - 7,33 (m, 1H), 7,29 - 7,18 (m, 1H), 7,05 (td, J = 8,5, 2,4 Hz, 1H), 5,06 (dd, J = 11,4, 3,5 Hz, 1H), 4,56 - 4,47 (m, 3H), 4,44 (s, 1H), 4,05 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,07 - 2,89 (m, 4H), 1,85 - 1,73 (m, 3H), 1,54 -

1.46 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N4O4: 431,15; encontrado: 431,2.

76/239

Exemplo 21

Preparação de Composto 21 (2S, 5R, 13aS)-N-((S)-1 -(4-fluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-1O-carboxamida

OH

[0216] Etapas 1 e 2 [0217] 1-(2,2-dihidroxietil)-5-(1-(4-fluorofenil)etilcarbamoil)-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (S)-Metila (21-A, 1 ml_, solução a 0,23 M em 19:1 acetonitrila:ácido acético, preparado como per 1 -(2,2-dihidroxietiI)-5-( 1 -(4-fluorofenil)etilcarbamoil)-3-metóxi4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (R)-metila 9-A a partir do Exemplo 9 usando (S)-1-(4-fluorofenil)etanamina no lugar de (R)-1-(4fluorofenil)etanamina) foi tratado com (1S, 3R)-3-aminociclopentanol (62 mg, 0,61 mmol) e carbonato de potássio (34 mg, 0,25 mmol). A mistura de reação foi vedada e aquecida a 90 Ό. Ap ós 60 minutos, a mistura de reação foi resfriada particionada entre salmoura e diclorometano. A fase aquosa foi três vezes extraída em diclorometano e as fases orgânicas combinadas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas. O produto bruto foi dissolvido em acetonitrila (2 ml_) e brometo de magnésio (74 mg, 0,4 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada novamente e aquecida a 50 Ό. Após 100 minutos, a mistura de reação foi arrefecida com 0,2M HCI (aq), diluído com sal

77/239 moura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 21. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,42 (br s, 1H), 10,45 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,36 (dd, J = 8,6, 5,5 Hz, 2H), 7,14 (t, J = 8,9 Hz, 2H), 5,42 (dd, J = 9,6, 4,2 Hz, 1H), 5,15 - 5,04 (m, 2H), 4,72 - 4,55 (m, 2H), 4,02 (dd, J = 12,7,9,7 Hz, 1H), 1,97 - 1,89 (m, 4H), 1,82 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,56 (dt, J = 11,9, 3,3 Hz, 1H), 1,43 (d, J = 6,9 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22FN3O5: 428,16; encontrado: 428,1.

Exemplo 22

Preparação de Composto 22 (2R, 5S, 13aR)-N-((S)-1-(4-fluorofenil)etil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2_I3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

OH

Etapas 1 e 2 [0218] 1-(2,2-dihidroxietil)-5-(1-(4-fluorofenil)etilcarbamoil)-3metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de (S)-metila (21-A, 1 mL, solução a 0,23 M em 19:1 acetonitrila:ácido acético) foi tratado com (1R,3S)-3-aminociclopentanol (52 mg, 0,51 mmol) e carbonato de potássio (31 mg, 0,22 mmol). A mistura de reação foi vedada e aquecida a 90 Ό. Após 60 minutos, a mistura de reação foi resfriada particionada entre salmoura e diclorometano. A fase aquosa foi três vezes extraída em diclorometano e as fases orgânicas combinadas foram

78/239 combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas. O produto bruto foi dissolvido em acetonitrila (2 mL) e brometo de magnésio (91 mg, 0,49 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada novamente e aquecida a 50 O. Após 100 minutos, a mistura de reação foi arrefecida com 0,2M HCI(aq), diluído com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 22. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,44 (br s, 1H), 10,45 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,36 (dd, J = 8,5, 5,6 Hz, 2H), 7,14 (t, J = 8,9 Hz, 2H), 5,43 (dd, J = 9,6, 4,0 Hz, 1H), 5,15 - 5,06 (m, 2H), 4,66 (dd, J = 12,8, 3,9 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 3,99 (dd, J = 12,6, 9,5 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,82 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,56 (dt, J = 12,0, 3,0 Hz, 1H), 1,44 (d, J = 6,9 Hz, 3H). LCMS-ESF (m/z): [M+H]⁺calculado para C22H22FN3O5: 428,16; encontrado: 428,1.

Exemplo 23

Preparação de Composto 23 (2S, 5R, 13aS)-N-(2-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

O

O

OH

23-A

15-B

O OH

79/239

Etapas 1 e 2 [0219] 15-B (41 mg, 0,13 mmol) foi tratado com acetonitrila (1 mL), (2-fluorofenil)metanamina (17 mg, 0,14 mmol), HATU (67 mg, 0,18 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (24 mg, 0,19 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora e brometo de magnésio (47 mg, 0,26 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada e aquecida a 50 O. Após 60 minutos, a mistu ra de reação foi arrefecida com 0,2M HCI (aq), diluída com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (Acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 23. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,42 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,36 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,24 - 7,17 (m, 1H), 7,12 - 6,97 (m, 2H), 5,40 - 5,32 (m, 1H), 5,29 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 4,67 (s, 3H), 4,28 - 4,20 (m, 1H), 4,06 - 3,95 (m, 1H), 2,20 - 1,96 (m, 4H), 1,95 - 1,84 (m, 1H), 1,59 (dt, J = 12,4, 3,3 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₂iH2oFN₃0₅: 414,15; encontrado: 414,2. Exemplo 24

Preparação de Composto 24 (2S, 5R, 13aS)-N-(3,5-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13, 13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [ 1,3]oxazepina10-carboxamida

F

O OH

80/239

Etapas 1 e 2 [0220] 15-B (44 mg, 0,14 mmol) foi tratado com acetonitrila (1 mL), (3,5-difluorofenil)metanamina (32 mg, 0,23 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (37 mg, 0,29 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora e brometo de magnésio (57 mg, 0,31 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada e aquecida a 50 O. Após 60 minutos, a mistura de rea ção foi arrefecida com 0,2M HCI (aq), diluída com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (Acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 24. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,39 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 6,82 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,65 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 5,38 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 5,28 (s, 1H), 4,78 - 4,41 (m, 3H), 4,32 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,02 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 2,30- 1,97 (m, 4H), 1,97-1,81 (m, 1H), 1,59 (d, J = 12,3 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H19F2N3O5: 432,14; encontrado: 432,2.

Exemplo 25

Preparação de Composto 25 (2S, 5R, 13aS)-N-(4-fluoro-3-(trifluorometil)benzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1

b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

MgBr₂

O OH

81/239

Etapas 1 e 2 [0221] 15-B (43 mg, 0,13 mmol) foi tratado com acetonitrila (1 mL), (4-fluoro-3-(trifluorometil)fenil)metanamina (29 mg, 0,15 mmol), HATU (62 mg, 0,16 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (26 mg, 0,20 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora e brometo de magnésio (62 mg, 0,34 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada e aquecida a 50 O. Após 60 minutos, a mistu ra de reação foi arrefecida com 0,2M HCI(aq), diluída com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (Acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 25. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,44 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,56 - 7,38 (m, 2H), 7,06 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 5,30 (dd, J = 9,3, 3,5 Hz, 1H), 5,21 (s, 1H), 4,65 - 4,45 (m, 3H), 4,21 (dd, J = 12,8, 3,4 Hz, 1H), 3,95 (dd, J = 12,4, 9,7 Hz, 1H), 2,11 1,89 (m, 4H), 1,89 - 1,74 (m, 1H), 1,53 (dt, J = 12,4, 3,2 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₂₂H₁₉F4N3O₅: 482,14; encontrado: 482,2.

Exemplo 26

Preparação de Composto 26 (2S, 5R, 13aS)-N-(4-cloro-3-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2_l5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

Cl

82/239

MgBr₂

Etapas 1 e 2 [0222] 15-B (41 mg, 0,13 mmol) foi tratado com acetonitrila (1 mL), (4-cloro-3-fluorofenil)metanamina (40 mg, 0,25 mmol), HATU (60 mg, 0,16 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (28 mg, 0,22 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora e brometo de magnésio (48 mg, 0,26 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada e aquecida a 50 O. Após 60 minutos, a mistura de reação foi arrefecida com 0,2M HCI (aq), diluído com salmoura, e três vezes extraída em DCM. Purificação com HPLC (Acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 26. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,41 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,24 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 7,13 - 6,90 (m, 2H), 5,30 (dd, J = 9,1,3,2 Hz, 1H), 5,22 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,20 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 3,95 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,11 - 1,90 (m, 4H), 1,90 - 1,76 (m, 1H), 1,53 (d, J = 12,2 Hz, 1H). LCMS-ESF (m/z): [M+H]⁺calculado para C2iH₁₉CIFN₃O5: 448,11; encontrado: 448,2.

Exemplo 27

Preparação de Composto 27 (2S, 5R)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2_>5-metanopirido[1’,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

O OH

83/239

Etapa 1 [0223] Uma suspensão de the composto 1-A (1,004 g, 3,19 mmol), a amina 27-A (688 mg, 3,35 mmol), e HATU (1,453 g 3,82 mmol) em CH₂CI₂ (20 mL) foi agitada em banho a 0 °C como N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) (2 mL, 11,48 mmol) foi adicionado. Após 1 hora a 0 °C, a mistura de reação foi concentrada para xarope, diluída com acetato de etila, e lavada com água (x 2). Após as frações aquosas serem extraídas com acetato de etila (x 1), as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por combiflash (120 g de coluna) usando hexanos- acetato de etila como eluentes. O maior pico foi combinado e concentrado para render 1,082 g (73%) do produto 27-B. O menor pico ser combinado e concentrado, o resíduo concentrado foi dissolvido em CH₂CI₂ e alguns materiais insolúveis foram filtrados, o filtrado foi concentrado para dar 361 mg (24%) do produto adicional 27-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₂H₂₅F₂N₂O₇: 467,16; encontrado: 467,1.

Etapa 2 e 3 [0224] Composto 27-B (81 mg, 0,174 mmol) foi dissolvido em uma mistura (1 mL) de acetonitrila (22 mL), AcOH (2 mL), e ácido metanos84/239 sulfônico (0,14 mL, 2,16 mmol) à temperatura ambiente e a solução resultante foi agitada a 65 °C por 20 horas.

[0225] Após a solução resultante ser coletada à temperatura ambiente, o aminoálcool 27-D (50 mg, racêmico, 0,363 mmol), K₂CO₃ (50 mg, 0,362 mmol), e acetonitrila (2 mL) foram adicionados à solução. A mistura resultante foi agitada em banho a 65 °C por 1 hora. Após a mistura de reação ser resfriada à temperatura ambiente, ela foi acidificada com HCI a 1 N (~2 mL), diluída com água (~8 mL), e extraída com CH₂CI₂ (x 3). Extratos combinados foram secos (Na₂SO₄), concentrados, e purificados por combiflash para obter 67 mg (82%) do composto 27-E. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,53 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,60 (td, J = 8,5, 6,5 Hz, 1H), 6,85 - 6,57 (m, 2H), 5,33 (br, 1H), 5,26 (dd, J = 9,6, 3,9 Hz, 1H), 4,60 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,92 (dd, J = 12,7,9,6 Hz, 1 H),2,11 - 1,91 (m, 4H),

1,88 - 1,71 (m, 1H), 1,60 - 1,49 (m, 1H), 1,31 - 1,10 (m, 4H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -111,80 (q, J = 8,8 Hz, 1F), -112,05 (p, J = 7,9 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C24H24F₂N₃O₅: 472,17; encontrado: 472,1.

Etapa 4 [0226] Uma mistura do composto 27-E (67 mg, 0,142 mmol) e MgBr₂ (66 mg, 0,358 mmol) em MeCN (3 mL) foi agitada a 50 °C por 30 minutos e resfriada a 0 °C antes de tratar com HCI a 1 N (3 mL). Após a mistura ser diluída com água (~30 mL), o produto foi extraído com CH₂CI₂ (x 3), e os extratos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados. O produto foi purificado por HPLC preparativa e seco por congelamento para obter o produto 27 como uma mistura 1:1 com ácido trifluoroacético. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,70 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,57 (q, J = 8,2 Hz, 1H), 6,91 - 6,56 (m, 2H), 5,31 (dt, J = 14,3, 4,0 Hz, 2H), 4,68 (s, 1H), 4,22 (dd, J = 13,2, 3,9 Hz, 1H), 3,99 (dd, J =

12,8, 9,3 Hz, 1H), 2,28 - 1,96 (m, 5H), 1,88 (ddt, J = 12,1, 8,6, 3,7 Hz,

85/239

Η), 1,71 - 1,49 (m, 1 Η), 1,38-1,11 (m, 4Η). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI₃) δ -76,37 (s, 3F), -111,6 - -111,75 (m, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C23H22F2N3O5: 458,15; encontrado: 458,1. Exemplo 28

Preparação de Composto 28 (2S, 6R)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-9-hidróxi-8, 10-dioxo-3, 4,5, 6,8, 10, 14, 14a-octa-hidro-2H-2,6-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazocina-11 -carboxamida

28-B 28

Etapa 1 e 2 [0227] Composto 27-B (87 mg, 0,187 mmol) foi dissolvido em uma mistura (2 mL) de acetonitrila (22 mL), AcOH (2 mL), e ácido metanossulfônico (0,14 mL, 2,16 mmol) à temperatura ambiente e a solução resultante foi agitada a 65 °C por 20 horas.

[0228] Após a solução resultante ser coletada à temperatura ambiente, 0 aminoálcool 28-A (44 mg, racêmico, 0,382 mmol) e acetonitrila (2 mL) foram adicionados à solução. Após a mistura resultante foi agitada em banho a 65 °C por 30 minutos, K₂CO₃ (41 mg, 0,297 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 65 °C for 21 horas. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, ela foi acidificada com

86/239

HCI a 1 N (~2 mL), diluída com água (~8 mL), e extraída com CH2CI2 (x 3). Extratos combinados foram secos (Na₂SO₄), concentrados, e purificados por HPLC preparativa e a fração contendo o produto foi seca por congelamento. Após o resíduo ser dissolvido em acetato de etila, a solução foi lavada com NaHCO₃ saturado (x 1), seca (Na₂SO₄), e concentrada para obter 18 mg (20%) do composto 28-B como uma mistura 1:1 com ácido trifluoroacético. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,54 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,63 (td, J = 8,6, 6,6 Hz, 1H), 6,76 (dddd, J = 21,9,

11,2, 8,7, 2,3 Hz, 2H), 5,39 (dd, J = 9,6, 3,7 Hz, 1H), 4,53 - 4,36 (m, 2H), 4,09 (dd, J = 12,8, 3,7 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,99 (dd, J = 12,7,9,7 Hz, 1H), 2,41 - 2,20 (m, 2H), 1,84 (dtd, J = 19,7,9,3, 8,8, 4,4 Hz, 2H),

1,74 (dd, J = 14,6, 2,5 Hz, 1H), 1,62 - 1,35 (m, 2H), 1,34 - 1,14 (m, 5H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI₃) δ -111,75 (q, J = 8,9 Hz, 1F), 112,01 (p, J = 7,9 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C25H26F2N3O5: 486,18; encontrado: 486,2.

[0229] Etapa 3 [0230] Composto 28-B (18 mg, 0,037 mmol) foi tratado com MgBr₂ como descrito na etapa 4 na síntese do composto 27-E para obter composto 28. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,66 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,59 (td, J = 8,5, 6,6 Hz, 1H), 6,89 - 6,60 (m, 2H), 5,51 (dd, J = 9,9, 4,0 Hz, 1H), 4,55 (s, 1H), 4,48 (t, J = 4,2 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 12,9, 4,1 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 12,8, 9,8 Hz, 1H), 2,56 - 2,35 (m, 1H), 2,14 (dd, J= 16,1, 5,9 Hz, 1H), 1,96-1,74 (m, 3H), 1,66- 1,37 (m, 3H), 1,28 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 1,26-1,19 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ 76,41 (s, 3F, -111,79 (m, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C24H23F2N3O5: 472,17; encontrado: 472,1.

Exemplo 29

Preparação de Composto 29 (2R, 6S)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-9-hidróxi-8, 10-dioxo-3, 4,5,

6,8, 10, 14, 14a-octa-hidro-2H-2,6-metanopirido[r,2’:4,5]pirazino[2,187/239

b] [1,3]oxazocina-11 -carboxamida

O OH

29-B 29

Etapa 1 e 2 [0231] Composto 29-B (13 mg, 14%) foi preparado a partir do composto 27-B (87 mg, 0,187 mmol) e o aminoálcool 29-A (45 mg, 0,391 mmol) de uma maneira aquela descrita na etapa 1 da síntese do composto 28-B. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,54 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,63 (td, J = 8,6, 6,6 Hz, 1H), 6,76 (dddd, J = 21,9, 11,2, 8,7, 2,3 Hz, 2H), 5,39 (dd, J = 9,6, 3,7 Hz, 1H), 4,53 - 4,36 (m, 2H), 4,09 (dd, J = 12,8, 3,7 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,99 (dd, J = 12,7,9,7 Hz, 1H), 2,41 2,20 (m, 2H), 1,84 (dtd, J = 19,7,9,3, 8,8, 4,4 Hz, 2H), 1,74 (dd, J = 14,6, 2,5 Hz, 1H), 1,62 - 1,35 (m, 2H), 1,34 - 1,14 (m, 5H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -111,75 (q, J = 8,9 Hz, 1F), -112,01 (p, J = 7,9 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C25H₂6F₂N₃O5: 486,18; encontrado: 486,2.

Etapa 3 [0232] Composto 29 foi preparado a partir do composto 29-B de uma maneira aquela descrita na etapa 2 da síntese do composto 16. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,66 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,59 (td, J = 8,5, 6,6 Hz, 1H), 6,89 - 6,60 (m, 2H), 5,51 (dd, J = 9,9, 4,0 Hz, 1H),

88/239

4,55 (s, 1H), 4,48 (t, J = 4,2 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 12,9, 4,1 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 12,8, 9,8 Hz, 1H), 2,56 - 2,35 (m, 1H), 2,14 (dd, J = 16,1, 5,9 Hz, 1H), 1,96 - 1,74 (m, 3H), 1,66 - 1,37 (m, 3H), 1,28 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 1,26-1,19 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI₃) δ -76,41 (s, 3F, -111,79 (m, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C24H23F2N3O5: 472,17; encontrado: 472,1.

Exemplo 30

Preparação de Composto 30 (2S, 5R, 13aS)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2_I3,4,5,7₎9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

Etapa 1 e 2 [0233] Composto 27-B (150 mg, 0,322 mmol) foi dissolvido em acetonitrila (2 mL), AcOH (0,2 mL), e ácido metanossulfônico (0,007

89/239 mL, 0,108 mmol) à temperatura ambiente e a solução resultante foi agitada a 65 °C por 20 horas. Após a solução resultante ser coletada à temperatura ambiente, o aminoálcool 30-A (72,1 mg, chiral, 0,713 mmol), K₂CO₃ (89,4 mg, 0,647 mmol), e acetonitrila (2 mL) foram adicionados à solução. A mistura resultante foi agitada em banho a 65 °C por 0,5 hora. Após a mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, ela foi acidificada com HCI a 1 N (~3 mL), diluída com água (~12 mL), e extraída com CH2CI2 (x 3). Extratos combinados foram secos (Na₂SO₄), concentrada, e purificada por combiflash para obter 128 mg (84%) do composto 30-B. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,52 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,61 (td, J = 8,6, 6,6 Hz, 1H), 6,85 - 6,65 (m, 2H),

5,33 (t, J = 4,1 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 9,5, 3,9 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 4,18 - 4,08 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,99 - 3,87 (m, 1H), 2,12 1,91 (m, 4H), 1,85 - 1,69 (m, 1H), 1,55 (ddd, J = 12,3, 4,1,2,8 Hz, 1H),

1,31 - 1,14 (m, 4H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -111,79 (q, J = 8,8 Hz, 1F), -112,05 (p, J = 7,9 Hz, 1F). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺calculado para C24H24F₂N₃O5: 472,17; encontrado: 472,2.

Etapa 3 [0234] Uma mistura do composto 30-B (128 mg, 0,272 mmol) e MgBr₂ (130 mg, 0,706 mmol) em MeCN (5 mL) foi agitada a 50 °C por 30 minutos e resfriada a 0 °C antes de tratar com HCI a 1 N (4 mL). Após a mistura ser diluída com água, o produto foi extraído com CH₂CI₂ (x 3), e os extratos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados. O produto foi purificado por combiflash para obter o produto

30. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 12,27 (s, 1H), 10,52 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,61 (td, J = 8,6, 6,6 Hz, 1H), 6,96 - 6,54 (m, 2H), 5,36 - 5,23 (m, 2H), 4,66 (t, J = 3,1 Hz, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 1H), 3,94 (dd, J = 12,8,

9,4 Hz, 1H), 2,20 - 1,95 (m, 4H), 1,89 (td, J = 11,4, 9,8, 6,7 Hz, 1H), 1,70- 1,54 (m, 1H), 1,32-1,15 (m, 4H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI₃) δ -111,87 (q, J = 8,9 Hz, 1F), -112,21 (p, J = 7,9 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺

90/239 (m/z): [M+H]⁺ calculado para C23H22F2N3O5: 458,15; encontrado: 458,2.

Exemplo 31

Preparação de Composto 31 (2R, 5S)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

31-B 31

Etapa 1 e 2 [0235] Composto 31-B (123 mg, 81%) foi preparado a partir do composto 27-B (150 mg, 0. 322 mmol) e o aminoálcool 31-A (70,3 mg, 0,695 mmol) de uma maneira aquela descrita na etapa 1 e 2 da síntese do composto 30-B. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,52 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,62 (td, J = 8,6, 6,6 Hz, 1H), 6,91 - 6,63 (m, 2H), 5,33 (t, J = 4,1 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 9,5, 3,9 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 4,14 - 4,07 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,93 (dd, J = 12,7,9,5 Hz, 1H), 2,12 1,91 (m, 4H), 1,85 - 1,69 (m, 1H), 1,55 (ddd, J = 12,3, 4,1,2,8 Hz, 1H), 1,31 - 1,14 (m, 4H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -111,79 (q, J = 9,2, 8,7 Hz, 1F), -112,03 (h, J = 8,1, 7,5 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C24H24F2N3O5: 472,17; encontrado: 472,1.

Etapa 3 [0236] Composto 31 foi preparado a partir do composto 31-B de

91/239 uma maneira aquela descrita na etapa 3 da síntese do composto 30. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 12,26 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,58 (td, J = 8,6, 6,5 Hz, 1H), 6,90 - 6,56 (m, 2H), 5,32 (dd, J = 9,4, 4,1 Hz, 1H), 5,27-5,22 (m, 1H), 4,64 (t, J= 3,1 Hz, 1H), 4,11 (dd, J= 12,8, 4,0 Hz, 1H), 4,01 - 3,79 (m, 1H), 2,28 - 1,95 (m, 4H), 1,95 - 1,80 (m, 1H), 1,71 (m, 1H), 1,56 (m, 1H), 1,42 - 1,08 (m, 4H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -111,95 (q, J = 8,9 Hz, 1F), -112,22 (p, J = 7,9 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C2₃H22F₂N₃O₅: 458,15; encontrado: 458,1.

Exemplo 32

Preparação de Composto 32 (2S, 5R)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclobutil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,

9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

O OH

[0237] Uma solução do composto 32-A (22,2 mg, 0,069 mmol), composto 32-B (18,7 mg, 0,102 mmol), e HATU (43 mg, 0,113 mmol) em CH2CI2 (2 mL) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-di isopropiletilamina (DIPEA) (0,075 mL, 0,431 mmol) foi adicionado.

92/239

Após 30 minutos, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com água (x 2). Após as frações aquosas serem extraídas com EA (x 1), as frações orgânicas foram combinadas, secas, concentradas, e secas sob vácuo.

[0238] Uma mistura do produto bruuto acima e MgBr₂ (35 mg, 0,190 mmol) em MeCN (2 ml_) foi agitada em banho a 50 °C por 1 hora e resfriada a 0 °C antes de ser tratada com HCI a 1 N (~ 1 mL). A solução resultante foi diluída com água, e extraída com CH₂CI₂ (x 3). Os extratos combinados foram secos (Na₂SO₄), e concentrados. O produto foi purificado por HPLC preparativa e seco por congelamento para obter composto 32. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,87 (s, 1H), ~9,3 (br, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,50 (td, J = 8,7, 6,3 Hz, 1H), 6,89 - 6,78 (m, 1H), 6,72 (ddd, J = 11,2, 8,9, 2,6 Hz, 1H), 5,48 - 5,12 (m, 2H), 4,72 - 4,60 (m, 1H), 4,22 (dd, J= 13,0, 4,1 Hz, 1H), 3,98 (dd, J= 12,9, 9,4 Hz, 1H), 2,68 (m, 4H), 2,33 - 1,98 (m, 6H), 1,90 (m, 2H), 1,60 (ddd, J = 12,4, 4,1,2,7 Hz, 1H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CD3CN) δ -76,39 (s, 3F), 110,50 (q, J = 9,2 Hz, 1F), -112,65 (p, J = 7,8 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₄H₂₄F₂N₃O₅: 472,17; encontrado: 472,0. Exemplo 33

Preparação de Composto 33 (2S, 5R)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopentil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

93/239 [0239] Composto 33 foi obtido a partir do composto 32-A e composto 33-A como descrito na síntese do composto 32. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,70 (s, 1H), ~9,5 (br, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,43 (td, J = 8,9, 6,4 Hz, 1H), 6,85 - 6,76 (m, 1H), 6,72 (ddd, J = 11,5, 8,8, 2,6 Hz, 1H), 5,48 - 5,18 (m, 2H), 4,68 (t, J= 3,2 Hz, 1H), 4,26 (dd, J= 13,0, 4,1 Hz, 1H), 4,00 (dd, J = 13,0, 9,4 Hz, 1H), 2,72 - 2,45 (m, 2H), 2,22 1,96 (m, 6H), 1,96 - 1,75 (m, 5H), 1,60 (ddd, J = 12,5, 4,1,2,7 Hz, 1H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CD3CN) δ -76,41 (s, 3F), -107,86 (q, J = 9,4 Hz, 1F), -113,13 (p, J = 8,0 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C25H26F2N3O5: 486,18; encontrado: 485,9.

Exemplo 34

Preparação de Composto 34 (2S, 5R)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclohexil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,

9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0240] Composto 34 foi obtido a partir do composto 32-A e composto 34-A como descrito na síntese do composto 32. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,83 (s, 1H), ~9,6 (br, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,37 (td, J = 9,0, 6,4 Hz, 1H), 6,97 - 6,76 (m, 1H), 6,69 (ddd, J = 11,9, 8,8, 2,7 Hz, 1H), 5,48 - 5,18 (m, 2H), 4,68 (t, J= 3,0 Hz, 1H), 4,28 (dd, J = 13,1,4,1 Hz, 1H), 4,03 (dd, J= 13,0, 9,4 Hz, 1H), 2,60 (d, J = 13,1 Hz, 2H), 2,29 - 1,96 (m, 4H), 1,95 - 1,77 (m, 4H), 1,77 - 1,65 (m, 4H), 1,61 (ddd, J = 12,5, 4,1,2,7 Hz, 1H), 1,30 (br, 1H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CD₃CN) δ

94/239

76,41 (s, 3F), -107,86 (q, J = 9,4 Hz, 1F), -113,13 (p, J = 8,0 Hz, 1F).

LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C26H28F2N₃O₅: 500,20; encontrado: 500,0.

Exemplo 35

Preparação de Composto 35 (2S, 5R)-N-(4-(2,4-difluorofenil)tetra-hidro-2H-piran-4-il)-8-hidróxi-7,9dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1 -b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0241] Composto 35 foi obtido a partir do composto 32-A e composto 35-A como descrito na síntese do composto 32. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 10,95 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), ~7,6 (br, 1H), 7,38 (td, J = 9,0, 6,3 Hz, 1H), 6,85 (td, J = 8,4, 2,6 Hz, 1H), 6,73 (ddd, J = 11,7, 8,6, 2,6 Hz, 1H), 5,32 (dt, J = 14,4, 4,0 Hz, 2H), 4,68 (t, J = 3,1 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 13,0, 3,9 Hz, 1H), 4,11 - 3,81 (m, 5H), 2,60 (d, J = 13,7 Hz, 2H), 2,33 - 2,17 (m, 2H), 2,18 -1,97 (m, 4H), 1,87 (m, 1H), 1,61 (dt, J = 12,5, 3,3 Hz, 1H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CD3CN) δ -76,40 (s, 3F), 108,78 (q, J = 10,3, 9,8 Hz, 1F), -112,63 (p, J = 8,0 Hz, 1F). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C25H₂6F₂N₃O₆: 502,18; encontrado: 502,0.

Exemplo 36

Preparação de Composto 36 (2S, 5R)-N-((S)-1 -(2,4-d if I uorofen i I )-2, 2,2-trifluoroetil)-8-hidróxi-7,9dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,595/239 metanopi rido[1 ’ ,2’:4,5] pirazi ηο[2,1 -b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

36-A

[0242] Composto 36 foi obtido a partir do composto 32-A e composto 36-A como descrito na síntese do composto 32. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 11,31 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,65 - 7,44 (m, 1H), 6,95 (ddd, J = 9,6, 5,6, 2,0 Hz, 1H), 6,92 - 6,79 (m, 1H), 6,15 (h, J = 7,4 Hz, 1H), ~6 (br, 1H), 5,41 (dd, J = 9,5, 4,0 Hz, 1H), 5,31 (t, J = 4,0 Hz, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,34 (dd, J = 12,8, 3,9 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 12,9, 9,4 Hz, 1H), 2,26 - 1,99 (m, 4H), 1,99 - 1,87 (m, 1H), 1,62 (dt, J = 12,6, 3,4 Hz, 1H). ¹⁹F-RMN (376,1 MHz, CDCI3) δ -75,23 (t, J = 6,9 Hz, 3F), -76,33 (s, 3F), -108,31 (m, 1F), -112,30 (p, J = 8,0 Hz, 1F). LCMSESl· (m/z): [M+H]⁺calculado para C22H19F5N3O5: 500,12; encontrado: 500,1.

Exemplo 37

Preparação de Composto 37 (3S, 11aR)-N-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropil)-6-hidróxi-3-metil-5,7dioxo-2,3,5,7,11,11a-hexahidrooxazolo[3,2-a]pirido[1,2-d]pirazina-8-

O OH

96/239

Etapa 1 [0243] 5-(1 -(2,4-difluorofenil)ciclopropilcarbamoil)-1 -(2,2 dimetoxietil)-3-metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (27-B, 0,150 g, 0,32 mmol) em acetonitrila (1,5 mL) e ácido acético (0,2 mL) foi tratado com ácido metanossulfônico (0,05 mL), vedado com uma tampa amarela, e aquecido a 70 Ό. Após 16 hora s, a mistura foi resfriada para render uma solução bruta de 5-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropilcarbamoil)-1-(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina2-carboxilato de metila 27-C. LCMS-ESl· (m/z): [M+H]⁺ calculado para C18H19F2N2O7: 439; encontrado: 439.

Etapas 2 e 3 [0244] 5-(1-(2,4-difluorofenil)ciclopropilcarbamoil)-1-(2,2dihidroxietil)-3-metóxi-4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (27-C, 0,32 mmol, a mistura bruta a partir da etapa anterior) foi dissolvido em acetonitrila (1,5 mL) e ácido acético (0,2 mL). (S)-2aminopropan-1-ol (0,048 g, 0,64 mmol) e K₂CO₃ (0,088 g, 0,64 mmol) foram adicionados à mistura de reação. A mistura de reação foi vedada e aquecida a 70 Ό. Após 3 horas, a mistura de reação foi resfriada e brometo de magnésio (0,081 g, 0,44 mmol) foi adicionado. A mistura foi vedada novamente e aquecida a 50 Ό. Após 10 mi nutos, a mistura de reação foi resfriada para 0 O e ácido clorídric o a 1 N (0,5 mL) foi adicionado. Em seguida a mistura de reação foi diluída com MeOH (2

97/239 mL). Após filtração, o bruto foi purificado por Prep-HPLC (30-70% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) para render o Composto 37 como um sal de TFA. ¹H-RMN (400 MHz, Metanol-d₄) δ 8,31 (s, 1H), 7,62 (td, J =

9.2, 8,7, 6,5 Hz, 1H), 7,02 - 6,78 (m, 2H), 5,53 - 5,20 (m, 1H), 4,68 (dd, J= 12,3, 4,2 Hz, 1H), 4,40 (dq, J= 19,1, 6,7 Hz, 2H), 3,98 (dd, J =

12.2, 10,0 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 8,3, 6,3 Hz, 1H), 1,41 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,22 (s, 4H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Metanol-d₄) δ -113,66 - -113,95 (m, 1F), -113,94--114,29 (m, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N3O5: 432.; encontrado: 432.

Exemplo 38

Preparação de Composto 38 (1S, 4R, 12aR)-N-(2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina9-carboxamida

COOEI

MsCI

Etapa 1 [0245] Uma solução do composto 38-A (1562 mg, 5,799 mmol)

98/239 (see Exemplo 41b em WO 97/05139) em THF (10 mL) foi agitada a -78 °C as 2,0 M LiBH₄ em THF (3,2 mL) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente. Após 3 horas, mais2,0 M LiBH₄ em THF (3,2 mL) foi adicionado e a solução foi agitada à temperatura ambiente por 17,5 horas. Após a mistura de reação ser diluída com acetato de etila e adicionado água vagarosamente, duas fases foram separadas, e a fração aquosa separada foi extraída com acetato de etila (x 1). As duas frações orgânicas foram lavadas com água (x 1), combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por combiflash (40 g de coluna) usando hexanos - acetato de etila como eluentes para render o Composto 38-B. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,11 (s, 1H), 3,65 - 3,52 (m, 2H), 3,45 (m, 1H), 2,32 (d, J =

4,1 Hz, 1H), 2,20 (s, 1H), 1,75 - 1,64 (m, 2H), 1,61 (m, 2H), 1,49 - 1,41 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,28 - 1,23 (d, J = 10 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C12H22NO3: 228,16; encontrado: 227,7.

Etapa 2 [0246] Uma solução do composto 38-B (589 mg, 2,591 mmol) e NEt₃ (0,47 mL, 3,369 mmol) em CH₂CI₂ (6 mL) foi agitada a 0 °C como MsCI (0,22 mL, 2,842 mmol) foi adicionado. Após 1 hora à temperatura ambiente, a mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com água (x 2). As frações orgânicas foram extraídas com acetato de etila (x 1), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash (40 g de coluna) usando hexanos - acetato de etila como eluentes para render o Composto 38-C. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,39 - 4,28 (m, 1H), 4,16 (s, 0,4H), 4,06 (s, 0,6H), 3,98 (dd, J = 10,0, 8,7 Hz, 0,6H), 3,86 (t, J = 9,6 Hz, 0,4H), 3,51 (dd, J = 9,3, 3,7 Hz, 0,6H), 3,43 (dd, J = 9,3, 3,6 Hz, 0,4H), 3,02 (s, 3H), 2,59 (m, 1H), 1,82 - 1,58 (m, 4H), 1,51 - 1,44 (m, 9H), 1,41 (d, J= 14,8 Hz, 1H), 1,31 (s, 0,6H), 1,29 (s, 0,4H).

99/239

Etapa 3 [0247] A uma solução do composto 38-C (769 mg, 2,518 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado azida de sódio (819 mg, 12,6 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 °C por 15 horas, a 80 °C por 5 horas, e a 100 °C por 19 horas. A mistura de reação foi diluída com 5% LiCI solution e o produto foi extraído com acetato de etila (x 2). Após as frações orgânicas serem lavadas com água (x 1), as duas frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por combiflash (40 g de coluna) usando hexanos acetato de etila como eluentes para render o Composto 38-D. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,16 (s, 0,4H), 4,06 (s, 0,6H), 3,61 (dd, J =

12,2, 3,6 Hz, 0,6H), 3,51 (dd, J = 12,1,3,2 Hz, 0,4H), 3,38 (dd, J = 9,4,

3.4 Hz, 0,6H), 3,26 (dd, J = 9,8, 3,3 Hz, 0,4H), 3,06 (dd, J = 12,2, 9,4 Hz, 0,6H), 3,01 - 2,92 (m, 0,4H), 2,48 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 1,82 - 1,57 (m, 4H), 1,46 (d, J = 3,0 Hz, 9H), 1,42 (m, 1H), 1,28 (m, 0,6H), 1,27 -

1,23 (m, 0,4H).

Etapa 4 [0248] A uma solução do composto 38-D (507 mg, 2,009 mmol, ) em acetato de etila (10 mL) e EtOH (10 mL) foi adicionado 10% de Pd/C (52 mg). A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de H₂ por

1.5 hora. A mistura foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado para render crude composto 38-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₂H23N₂O2: 227,18; encontrado: 226,8.

Etapa 5 [0249] A mistura de composto bruto 38-E (206 mg, 0,910 mmol), composto 38-F (330 mg, 0,953 mmol), e NaHCO₃ (154 mg, 1,833 mmol) em água (3 mL) e EtOH (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 20 horas. Após a mistura de reação ser diluída com água e extraída com acetato de etila (x 2), os extratos foram lavados com água (x 1), combinados, secos (Na₂SO₄), e concentrados para render

100/239 o produto de piridina bruto.

[0250] O resíduo bruto (388 mg) foi dissolvido em CH₂CI₂ (4 mL) e HCI a 4 N em dioxano (4 mL). Após 1,5 horas, mais HCI a 4 N em dioxano (4 mL) foi adicionado e agitado por 1 hora à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada até secura, coevaporada com tolueno (x 1) e seca sob vácuo por 30 minutos.

[0251] O resíduo bruto e 1, 8-diazabicicloundec-7-eno (DBU) (1,06 mL, 7,088 mmol) em tolueno (10 mL) foi agitada em banho a 110 °C. Após 30 minutos, a mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por combiflash (40 g de coluna) usando acetato de etila - 20% de MeOH/acetato de etila como eluentes para obter composto 38-G. ¹HRMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,03 (s, 1H), 7,68 - 7,58 (m, 2H), 7,36 - 7,27 (m, 3H), 5,53 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,43 - 4,30 (m, 2H), 3,89 (dd, J = 12,2, 3,3 Hz, 1H), 3,73 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 11,9, 3,3 Hz, 1H), 2,53 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 1,87 - 1,67 (m, 4H), 1,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 1,51 -1,45 (m, 1H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C23H₂5N₂O₅: 409,18; encontrado: 409,2.

Etapa 6 [0252] A mistura do composto 38-G (232 mg, 0,568 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente como KOH a 1 N (3 mL) foi adicionado. Após 1 hora, a mistura de reação foi neutralizada com HCI a 1 N (—3,1 mL), concentrada, e o resíduo foi concentrado com tolueno (x 3). Após o resíduo ser seco sob vácuo por 30 minutos, uma suspensão do resíduo bruto, 2,4-difluorobenzilamina (86 mg, 0,601 mmol), e HATU (266 mg, 0,700 mmol) foram em CH₂CI₂ (4 mL) e DMF (4 mL) foi agitado a 0 O como N,N-di-iso propiletilamina (DIPEA) (0,7 mL, 4,019 mmol) foi adicionado. Após 45 minutos, mais

2,4-difluorobenzilamina (86 mg, 0,559 mmol), HATU (266 mg, 0,700 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,7 mL, 4,019 mmol) foram

101/239 adicionados à temperatura ambiente. Após 1,25 horas, a mistura foi concentrada para remover a maioria do CH₂CI₂, diluída com acetato de etila, e lavada com 5% de LiCI (x 2). Após as frações aquosas serem extraídas com acetato de etila (x 1), as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na2SO4), e concentradas. O resíduo foi purificado por combiflash (40 g de coluna) usando acetato de etila -20% de MeOH/acetato de etila como eluentes para render o Composto 38-H. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,48 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,62 - 7,51 (m, 2H), 7,40 - 7,27 (m, 4H), 6,87 - 6,75 (m, 2H), 5,39 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,15 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,68-4,53 (m, 2H), 3,97 (dd, J = 12,5, 3,4 Hz, 1H), 3,77 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 3,55 (dd, J = 12,1,3,3 Hz, 1H), 2,53 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 1,88 - 1,62 (m, 4H), 1,59 - 1,42 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -112,17 (q, J = 7,6 Hz, 1F), -114,79 (q, J = 8,6 Hz, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z)\ [M+H]⁺ calculado para C28H26F2N3O4: 506,19; encontrado: 506,2.

Etapa 7 [0253] Composto 38-H (240 mg, 0,475 mmol) foi dissolvido em TFA (3 mL) à temperatura ambiente por 30 minutos, e a solução foi concentrada. O resíduo foi purificado por combiflash (40 g de coluna) usando CH₂CI₂-20% de MeOH em CH₂CI₂ como eluentes. Após as frações de produto coletadas serem concentradas, o resíduo foi triturado em MeCN (~2 mL) a 0 °C por 15 minutos, e os sólidos foram filtrados e lavados com MeCN. Os sólidos coletados foram secos sob vácuo para render o Composto 38.

[0254] O filtrado foi concentrado, e o resíduo foi dissolvido em MeCN (-1 mL) e água (-1 mL) por aquecimento. A solução foi vagarosamente resfriada à temperatura ambiente e em seguida em banho de gelo por 15 minutos. Os sólidos foram filtrados e lavados com MeCN, e secos sob vácuo para render additional composto 38. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,68 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,41 102/239

7,31 (m, 1H), 6,86 - 6,73 (m, 2H), 4,90 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,71 - 4,53 (m, 2H), 4,07 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,90 - 3,67 (m, 2H), 2,68 (s, 1H), 2,01 (s, 1H), 1,97 - 1,80 (m, 3H), 1,80 - 1,62 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -112,28 (m, 1F), -114,74 (m, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2iH₁₉F2N₃O4: 416,14; encontrado: 416,3. Exemplos 39 e 40

Preparação de Compostos 39 e 40 (2R, 3S, 5R, 13aS)-N-(2,4-difluorobenzil)-8-hidróxi-3-metil-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b][1,3]oxazepina-10-carboxamida 39 e (2S, 3R, 5S, 13aR)-N-(2,4difluorobenzil)-8-hidróxi-3-metil-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octahidro-2,5-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [1,3]oxazepina-10-

103/239

Etapa 1 [0255] Cianeto cuproso (290 mg, 3,27 mmol) foi suspenso em 3,3 mL de THF e resfriado a -78 O. Uma solução a 1,6M de MeLi (4,1 mL, 6,56 mmol) em dietil éter foi adicionado gota a gota, a solução resultante foi permitida aquecer à temperatura ambiente durante o curso de 2 horas, e resfriada novamente a -78 O. (1R, 3R, 5S)-6oxabiciclo[3,1,0]hexan-3-ilcarbamato de terc-butila (330 mg, 1,66 mmol) foi adicionado gota a gota em 3,3 mL THF, seguido por dietil eterato de trifluoreto de boro (0,25 mL, 1,99 mmol), permitida aquecer a -30 Ό durante 30 minutos, e agitada entre -35 Ό e -25 Ό por uma hora. A solução de reação foi em seguida aquecida à temperatura ambiente e arrefecida com uma mistura de NH₃(aq)/NH₄(aq) saturado, extraída para EtOAc, lavada com salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada, e purificada por SGC (0-10% de EtOH/DCM) para render (1S, 3S, 4S)-3-hidróxi-4-metilciclopentilcarbamato terc-butil racêmico. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,16 (s, 1H), 3,98 (s, 1H),

3,74 (q, J = 4,3 Hz, 1H), 3,65 (q, J = 7,0 Hz, 1H), 2,23 (dt, J = 14,0, 7,0 Hz, 1H), 1,98 (dt, J = 13,3, 7,0 Hz, 1H), 1,89 - 1,79 (m, 1H), 1,58 1,44 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,18 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 0,91 (d, J = 7,0 Hz, 3H).

Etapa 2 [0256] 3 mL de HCI/dioxano (4M, 12 mmol) foi adicionado a uma solução de (1S, 3S, 4S)-3-hidróxi-4-metilciclopentilcarbamato de tercbutila racêmico (182 mg, 0,85 mmol) em 3 mL de dioxano. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas, concentrada e duas vezes capaturado com tolueno para render (1S, 2S, 4S)-4amino-2-metilciclopentanol racêmico.

Etapa 3 [0257] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1-(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi-

4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 310 mg, 0,75

104/239 mmol), (1S, 2S, 4S)-4-amino-2-metilciclopentanol racêmico (115 mg, 0,76 mmol), e carbonato de potássio (232 mg, 1,68 mmol) foram tomados em 3,8 mL de acetonitrila/0,2 mL de ácido acético e agitada a 90 Ό por 2 horas, após o que a mistura de reação foi particionada entre DCM e salmoura, a fase aquosa extraída para DCM, fases orgânicas combinadas secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por SGC (0-10% de EtOH/DCM) para render intermediário 39-A. Etapa 4 [0258] Intermediário 39-A (190 mg) foi separado por Prep-HPLC quiral sobre uma Coluna Lux Celulose-2 usando 9:1 ACN:MeOH como eluente para render Intermediários 39-B (primeiro pico de eluição) e 40-A (segundo pico de eluição) em uma forma enatiomericamente enriquecida. For intermediário 39-B: (estereoquímica absoluta confirmada por cristalografia de Raio X), Tempo de retenção de HPLC quiral = 3,98 minutos (Lux Cellulose-2 IC, 150 x 4,6 mm, 2 mL/min 9:1 ACN:MeOH). Para intermediário 40-A: (estereoquímica absoluta confirmada por cristalografia de Raio X), Tempo de retenção de HPLC quiral = 6,35 minutos (Lux Cellulose-2 IC, 150 x 4,6 mm, 2 mL/min 9:1 ACN:MeOH).

Etapa 5a [0259] Brometo de magnésio (68 mg, 0,37 mmol) foi adicionado a uma solução de intermediário 39-B (83 mg, 0,18 mmol) em 2 mL de acetonitrila. A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por 1 hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída para diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre M_gso4> filtradas e concentradas, e purificadas por cromatografia de sílica-gel (0-10% de EtOH/DCM) para render o Composto 39. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,32 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,44 - 7,33 (m, 1H), 6,88 - 6,76 (m, 2H), 5,37 (dd, J = 9,5, 4,1 Hz, 1H), 5,28 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,63 (d, J =

105/239

5,9 Hz, 2H), 4,23 (d, J = 23,0 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 12,7,9,5 Hz, 1H), 3,72 (q, J = 7,0 Hz, 1H), 2,51 (dq, J = 13,7, 6,8, 6,1 Hz, 1H), 2,15 (ddd, J = 14,7, 8,3,2,3 Hz, 1H), 1,94 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 1,77 (ddd, J = 12,7, 4,0, 2,9 Hz, 1H), 1,61 (dt, J = 14,6, 5,2 Hz, 2H), 1,24 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,09 (d, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2.

Etapa 5b [0260] Brometo de magnésio (59 mg, 0,32 mmol) foi adicionado a uma solução de intermediário 40-A (70 mg, 0,15 mmol) em 2 mL de acetonitrila. A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por 1 hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída para diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por cromatografia de sílica-gel (0-10% de EtOH/DCM) para render o Composto 40.¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,32 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,44 - 7,33 (m, 1H), 6,88 - 6,76 (m, 2H), 5,37 (dd, J = 9,5, 4,1 Hz, 1H), 5,28 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,63 (d, J =

5,9 Hz, 2H), 4,23 (d, J = 23,0 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 12,7,9,5 Hz, 1H), 3,72 (q, J = 7,0 Hz, 1H), 2,51 (dq, J = 13,7, 6,8, 6,1 Hz, 1H), 2,15 (ddd, J = 14,7, 8,3,2,3 Hz, 1H), 1,94 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 1,77 (ddd, J = 12,7, 4,0, 2,9 Hz, 1H), 1,61 (dt, J = 14,6, 5,2 Hz, 2H), 1,24 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,09 (d, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22F2N3O5: 446,15; encontrado: 446,2.

Exemplo 41

Preparação de Composto 41 (1R, 4S, 12aR)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

106/239

ΌΟΟΕΙ

41-8

41-C

NaN-ί

DMF

Boc

41-Α

MsCI py

41-F

41-G 41Ή

Etapa 1 [0261] Uma solução da 41-A (2020 mg, 7,463 mmol) (preparado pelo mesmo método que 38-A) em THF (14 mL) foi agitada a 0 °C as 2,0 M LiBH₄ em THF (7,5 mL, 15 mmol) foi adicionado. Após a mistura resultante foi agitada a rt por 21 h, ela foi resfriada a 0 °C e diluída com EA antes de água ser adicionada vagarosamente para arrefecer. Após duas fases serem separadas, a fração aquosa foi extraída com EA (x 1) e duas frações orgânicas foram lavadas com água (x 1), combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por combiflash (120 g de coluna) usando hexanos - EA como eluentes pa107/239 ra dar 41-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M-C4H8+H]⁺calculado para C8H₁₄NO₃: 172,10; encontrado: 171,95.

Etapa 2 [0262] Um frasco de fundo redondo de 100 ml_ foi carregado com reagente 41-B (1,6 g, 7,05 mmol) e trietilamina (0,94 g, 9,3 mmol) em DCM (20 ml_). Cloreto de matnossulfonila (0,91 g, 8,0 mmol) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura foi diluída com EA (100 ml_) e lavada com água (2x). As frações orgânicas foram extraídas com EA (1x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na2SO4), e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash (120 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 41-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C18H19F2N2O7: 306; encontrado: 306.

Etapa 3 [0263] Um frasco de fundo redondo de 100 ml_ foi carregado com reagente 41-C (2,1 g, 6,9 mmol) e azida de sódio (2,3 g, 34,5 mmol) em DMF (10 ml_). Em seguida a mistura de reação foi agitada a 100 Ό durante a noite. A mistura foi diluída com EA (100 ml_) e lavada com água (2x). As frações orgânicas foram extraídas com EA (1x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash (120 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 41-D. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci₈H₁₉F₂N₂O7: 253; encontrado: 253. Etapa 4 [0264] A uma solução (purgada com N2) de reagente 41-D (1,3 g) em EA (20 ml_) e EtOH (20 ml_) foi adicionado Pd/C (130 mg). A mistura foi agitada sob H₂ por 3 horas. A mistura foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado para render o Composto 41-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci₈H₁₉F₂N₂O₇: 227; encontrado: 227.

108/239

Etapa 5 [0265] Um frasco de fundo redondo de 100 ml_ foi carregado com reagente 41-E (1,05 g, 4,62 mmol) e reagente 38-F (1,6 g, 4,62 mmol) em etanol (20 ml_). Bicarbonato de sódio (0,77 g, 9,2 mmol) em água (20 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com água (2x). As frações orgânicas foram extraídas com EA (1x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na2SO4), e concentradas. O produto bruto (2,4 g) foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₁₈H₁₉F2N₂O7: 556; encontrado: 556.

[0266] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com o produto bruto a partir da reação anterior em HCI a 4 N /dioxano (24,7 mL). Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, o intermediário (2,1 g) e DBU (3,27 g, 21,5 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecido a 110 O com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por combiflash (120 g de coluna) usando hexanos - acetato de etila como eluentes para render 41-F. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para Ci8Hi9F₂N₂O₇: 409; encontrado: 409.

Etapa 6 [0267] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com reagente 41-F (0,5 g, 1,22 mmol) em THF (5 mL) e MeOH (5 mL). KOH a 1 N (3,7 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (3,7 mL), concentrada para remover a maioria do solventes orgânicos, e extraída com EtOAc (2 X). As camadas orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas para render o Composto 41-G.

109/239

Etapa 7 [0268] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com reagente 41-G (0,14 g, 0,37 mmol), (2,4,6-trifluorofenil)metanamina (0,12 g, 0,73 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,24 g, 1,84 mmol) e HATU (0,28 g, 0,74 mmol) foram dissolvidos em DCM (5 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH₄CI saturado (2x) e seco sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render o Composto 41-H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₈H₁₉F2N₂O7: 524,5; encontrado: 524,5.

Etapa 8 [0269] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com reagente 41-H (0,13 g, 0,25 mmol) em TFA (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílicagel com EtOAc-MeOH para render o Composto 41.¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,61 (s, 1H), 10,70 -10,01 (m, 1H), 8,26 (s, 1H), 6,65 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 4,88 (s, 1H), 4,65 (dd, J = 6,1,2,4 Hz, 2H), 4,07 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,93 - 3,58 (m, 2H), 2,67 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 2,08 1,41 (m, 7H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -109,22 (d, J = 11,6 Hz, 1F), -111,04 - -112,79 (m, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C2iH₂oF2N₃0₅: 434.; encontrado: 434.

Exemplo 42

Preparação de Composto 42 (2R, 5S, 13aR)-8-hidróxi-7,9-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)-2,3,4,5,7, 9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

110/239

OH

42-A

Etapa 1 [0270] Ácido 1 -(2,2-dimetoxietil)-5-metóxi-6-(metoxicarbonil)-4oxo-1,4-dihidropiridina-3-carboxílico (3,15 g, 10 mmol) em acetonitrila (36 mL) e ácido acético (4 mL) foi tratado com ácido metanossulfônico (0,195 mL, 3 mmol) e colocado em um banho a 75 °C. A mistura de reação foi agitada por 7 h, resfriada e armazenada a-10O por 3 dias e reaquecida a 75 Ό por por mais 2 h. Este matéria I foi resfriado e realizado sobre bruto para a próxima etapa.

Etapa 2 [0271] A mistura de reação bruta da etapa 1 (20 mL, 4,9 mmol) foi transferred to a flask contendo (1 R,3S)-3-aminociclopentanol (0,809 g, 8 mmol). A mistura foi diluída com acetonitrila (16,8 mL), tratado com

111/239 carbonato de potássio (0,553 g, 4 mmol) e aquecido a 85 O. Após 2 h, a mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e agitada durante a noite. 0,2M HCI (50 mL) foi adicionado, e a solução amarela clara foi extraída com diclorometano (2x150 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas to

1,49 g de um sólido laranja claro. Recristalização from dichlormetano:hexanos rendeu o intermediário desejado 42A: LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci5H₁₇N₂O6: 321,11; encontrado: 321,3.

Etapa 3 [0272] Intermediário 42-A (0,225 g, 0,702 mmol) e (2,4,6trifluorofenil)metanamina (0,125 g, 0,773 mmol) foram suspensos em acetonitrila (4 mL) e tratado com N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,183 mmol, 1,05 mmol). A esta suspensão foi adicionado hexafluorofosfato (dimetilamino)-A/,A/-dimetil(3/-/-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3ilóxi)metaniminio hexafluorophosphate (HATU, 0,294 g, 0,774 mmol). Após 1,5 horas, the a mistura de reação bruta foi taken on para a próxima etapa. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₂H₂₁F₃N₃O₅: 464,14; encontrado: 464,2.

Etapa 4 [0273] A esta mistura de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (0,258 g, 1,40 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por 10 minutos, acidificada com 10% de HCI aquoso, e extraída duas vezes com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por cromatografia de sílica-gel (EtOH/dichlormetano) seguido por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 42: ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,43 (s, 1H), 10,34 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,19 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 5,43 (dd, J = 9,5, 4,1 Hz, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,66 (dd, J = 12,9, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,56 4,45 (m, 2H), 4,01 (dd, J = 12,7,9,7 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,83 (d, J =

112/239

12,0 Hz, 1H), 1,56 (dt, J = 12,0, 3,4 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₁₉F3N₃O₅: 450,13; encontrado: 450,2.

Exemplo 43

Preparação de Composto 43 (12aR)-N-((R)-1 -(2,4-difluorofenil)etil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina9-carboxamida

41-G

Etapa 1

i. Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com reagente 41-G (0,14 g, 0,37 mmol), (R)-1-(2,4-difluorofenil)etanamina (0,12 g, 0,74 mmol), A/,/V-di-isopropiletilamina (0,24 g, 1,84 mmol) e HATU (0,28 g, 0,74 mmol) e foram dissolvidos em DCM (5 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render o Composto 43-A. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para Ci₈H₁₉F₂N₂O7: 520; encontrado: 520.

113/239

Etapas 2 [0274] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com reagente 43-A (0,14 g, 0,27 mmol) em TFA (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílicagel com EtOAc-MeOH para render o Composto 43.¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,65 (s, 1H), 10,57 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,31 (m, 1H), 6,99 - 6,62 (m, 2H), 5,64 - 5,32 (m, 1H), 4,90 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,93 - 3,63 (m, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,08 - 1,40 (m, 9H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ-113,09 (m, 1F), -115,01 (m, 1F). LCMS-ESl· (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N3O5: 430.; encontrado: 430.

Exemplo 44

Preparação de Composto 44 (13aS)-8-hidróxi-7,9-dioxo-N-(2,3,4-trifluorobenzil)-2,3,4,5,7,9,13,13aocta-hidro-2,5-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [1,3]oxazepina-10carboxamida o Ck

15-B

44-A

Etapa 1 [0275] Composto 15-B (40 mg, 0,12 mmol) foi tomado em 1 mL de acetonitrila e tratado com 2,3,4-trifluorobenzilamina (29 mg, 0,18

114/239 mmol), HATU (53 mg, 0,14 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (20 mg, 0,16 mmol), e agitada à temperatura ambiente por 2 horas, após o que Análise LCMS revelou consumo completo do composto 15B e formação de intermediário 44-A. A mistura de reação foi realizada na próxima etapa.

Etapa 2 [0276] À solução de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (63 mg, 0,34 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por uma hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída para diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) to composto 44. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,45 (s, 1H), 10,38 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,27 (q, J= 9,2 Hz, 1H), 7,16 (q, J = 8,5 Hz, 1H), 5,42 (dd, J = 9,5, 4,0 Hz, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,76 - 4,47 (m, 4H), 4,01 (dd, J = 12,8, 9,7 Hz, 1H), 1,92 (s, 4H), 1,82 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 1,55 (dt, J = 12,2, 2,9 Hz, 1H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺calculado para C^H-igFsNsOs: 450,13; encontrado: 450,2.

Exemplo 45

Preparação de Composto 45 (13aS)-8-hidróxi-7,9-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)-2,3,4,5,7,9,13,13aocta-hidro-2,5-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [1,3]oxazepina-10carboxamida

115/239

Etapa 1

Composto 15-B (38 mg, 0,12 mmol) foi tomado em 1 mL de acetonitrila e tratado com 2,4,6-trifluorobenzilamina (34 mg, 0,21 mmol), HATU (50 mg, 0,13 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (23 mg, 0,18 mmol), e agitada à temperatura ambiente por 2 horas, após o que Análise LCMS revelou consumo completo do composto 15-B e formação de intermediário 45-A. A mistura de reação foi realizada na próxima etapa.

Etapa 2 [0277] À solução de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (55 mg, 0,30 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por uma hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 45. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,37 (s, 1H), 10,37 - 10,25 (m, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,14 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 5,37 (dd, J = 9,5, 4,0 Hz, 1H), 5,02 (s, 1H), 4,66 - 4,40 (m, 4H), 3,95 (dd, J= 12,8, 9,6 Hz, 1H), 1,87 (s, 4H), 1,77 (d, J= 11,9 Hz, 1H), 1,50 (dt, J = 11,8, 3,2 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H₁₉F₃N3O₅: 450,13; encontrado: 450,2.

Exemplo 46

Preparação de Composto 46 (13aS)-N-(2,6-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a116/239 octa-hidro-2,5-metanopirido[1 ’,2’:4,5]pirazino[2,1 -b][1,3]oxazepina-10carboxamida

15-B 46-A

Etapa 1 [0278] Composto 15-B (38 mg, 0,12 mmol) foi tomado em 1 ml_ de acetonitrila e tratado com 2,6-difluorobenzilamina (19 mg, 0,14 mmol), HATU (56 mg, 0,15 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (20 mg, 0,15 mmol), e agitado à temperatura ambiente por 90 minutos, após o que Análise LCMS revelou consumo completo do composto A e formação de intermediário 46-A. A mistura de reação foi realizada na próxima etapa.

Etapa 2

À solução de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (50 mg, 0,27 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por uma hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 46. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12,37 (s, 1H), 10,33 - 10,26 (m, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,39 - 7,29 (m, 1H),

117/239

7,05 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 5,37 (dd, J = 9,5, 4,1 Hz, 1H), 5,02 (s, 1H), 4,66 - 4,45 (m, 4H), 3,95 (dd, J = 12,7,9,6 Hz, 1H), 1,87 (s, 4H), 1,77 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,50 (dt, J = 12,2, 3,5 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N3O5: 432,14; encontrado: 432,2.

Exemplo 47

Preparação de Composto 47 (1R, 4S, 12aR)-N-(2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8, 12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1’,2’-d]pirazina-9-carboxa-

O ácido bruto 41-G

1,18 mmol), 2,4-difluobenzilamida

Etapa 1 [0279] mina (0,35 g, 2,44 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,79 g, 6,11 mmol) e HATU (0,93 g, 2,44 mmol) foram dissolvidos em DCM (10 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render o Composto 47-A. LCMS-ESI⁺

118/239 (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₈H₁₉F₂N2O7: 506; encontrado: 506.

Etapa 2 [0280] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com reagente 47-A (0,5 g, 0,99 mmol) em TFA (6 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 47. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,70 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,60 - 7,29 (m, 1H), 6,95 - 6,58 (m, 2H), 4,10 (s, 1H), 4,02 - 3,54 (m, 3H), 2,68 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 2,00 - 1,40 (m, 8H). ¹⁹F RMN (376 MHz, Clorofórmiod) δ -112,31 (d, J = 8,0 Hz, 1F), -114,77 (d, J = 8,4 Hz, 1F). LCMS-ESI* (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N3O5: 416.; encontrado: 416. Exemplo 48

Preparação de Composto 48 (1S, 4R,12aS)-N-(2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8,12, 12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina-9-carboxamida o OH

48-A

48-B [0281] 48-B foi preparado analogamente a 55-H no Exemplo 55, substituindo 48-A por 55-A. Composto 48 foi preparado como descrito para 0 Composto 38 no Exemplo 38, substituindo 48-B por 38-B para render o Composto 48. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,79 (s, 1H), 10,44 (m, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 1H), 6,86 - 6,74 (m, 2H), 4,74 (s, 1H), 4,63 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 4,19 (m, 1H), 4,07 - 4,03

119/239 (m, 2H), 2,83 (s, 1H), 1,92 - 1,68 (m, 6H). ¹⁹F RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -112,3 (m, 1F), -114,8 (m, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H20F2N3O4: 416,14.; encontrado: 416,07.

Exemplo 49

Preparação de Composto 49 (2S, 5R, 13aS)-8-hidróxi-7,9-dioxo-N-((3-(trifluorometil)piridin-2i I )meti I )-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1 -b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

Etapa 1 [0282] Composto 15-B (44 mg, 0,14 mmol) foi tomado em 1 mL de acetonitrila e tratado com (3-(trifluorometil)piridin-2-il)metanamina (38 mg, 0,18 mmol, Sal de HCI), HATU (69 mg, 0,18 mmol), N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) (0,07 mL, 0,40 mmol), e agitada à temperatura ambiente por 1 hora, após 0 que Análise LCMS revelou consumo completo do composto 15-B e formação de intermediário 49-A. A mistura de reação foi realizada na próxima etapa.

Etapa 2 [0283] À solução de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (51 mg, 0,28 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por

120/239 minutos, acidificada com 10% de HCl aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e trituradas por metanol seguido por dietil éter para render o Composto 49. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,42 (s, 1H), 10,80 - 10,70 (m, 1H), 8,83 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,19 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 7,7, 5,2 Hz, 1H), 5,43 (dd, J = 9,5, 4,0 Hz, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,86 - 4,80 (m, 2H), 4,67 (dd, J = 12,9, 4,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,02 (dd, J = 12,6, 9,8 Hz, 1H), 1,93 (s, 4H), 1,82 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 1,60- 1,52 (m, 1H). LCMS-ESI* (m/z): [M+H]⁺calculado para C2iH2oF₃N₄0₅: 465,14; encontrado: 465,2.

Exemplos 50 e 51

Preparação de Compostos 50 e 51

N-(2,4-difluorobenzil)-9-hidróxi-8, 10-dioxo-2, 3, 5, 6,8, 10, 14, 14aocta-hidro-2,6-metanopirido[T,2^,:4,5]pirazino[2,1-b][1, 6,

3]dioxazocina-11-carboxamida 50 e 51

121/239

Etapa 1 [0284] 5-(2,4-difluorobenzilcarbamoil)-1-(2,2-dihidroxietil)-3-metóxi

4-oxo-1,4-dihidropiridina-2-carboxilato de metila (1-C, 392 mg, 0,95 mmol) (Exemplo 87), c/s-5-aminotetra-hidro-2H-piran-3-ol racêmico (WO 2012/145569 Bennett, B. L. et al, filed April 20, 2012 ) (112 mg,

0,95 mmol), e carbonato de potássio (134 mg, 0,97 mmol) foram tomados em 3,8 mL de acetonitrila/0,2 mL ácido acético e agitados a 90 í por 90 minutos, após o que a mistura de reação foi particionada entre

DCM e salmoura, a fase aquosa extraída com DCM, fases orgânicas combinadas secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por SGC (0-10% de EtOH/DCM) para render intermediário 50-A.

Etapa 2 [0285] Intermediário 50-A (40 mg) foi separado por SFC quiral on a Chiralpak IC coluna usando 10% DMF em dióxido de carbono supercrítico como eluente para render Intermediários 50-B (primeiro pico de eluição) e 51-A (segundo pico de eluição) em uma forma enatiomericamente enriquecida. For intermediário 50-B: (estereoquímica absoluta desconhecida), Tempo de retenção de HPLC quiral = 11,48 minutos (Chiralpak IC, 150 x 4,6 mm, 1 mL/min MeOH). For intermediário 51-A:

122/239 (estereoquímica absoluta desconhecida), Tempo de retenção de HPLC quiral = 14,35 minutos (Chiralpak IC, 150 x4,6 mm, 1 mL/min MeOH). Etapa 3a [0286] Brometo de magnésio (12 mg, 0,06 mmol) foi adicionado a uma solução de intermediário 50-B (10,5 mg, 0,02 mmol, estereoquímica absoluta desconhecida) em 1 mL de acetonitrila. A mistura de reação foi agitada a 50 O por 1 hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 50.¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,47 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,35 (q, J = 8,6,8,2 Hz, 1H), 6,81 (q, J = 8,7, 8,0 Hz, 2H), 6,41 (dd, J = 10,0, 3,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,36 - 4,26 (m, 2H), 4,20 - 4,08 (m, 2H), 3,98 (dd, J = 12,4, 10,2 Hz, 1H), 3,88 (t, J =

11,8 Hz, 2H), 2,27 (dt, J = 13,3, 3,1 Hz, 1H), 2,15 - 2,06 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₂iH₂₀F₂N₃O₆: 448,40; encontrado: 448,2.

Etapa 3b [0287] Brometo de magnésio (13 mg, 0,07 mmol) foi adicionado a uma solução de intermediário 51-A (13,2 mg, 0,03 mmol, estereoquímica absoluta desconhecida) em 1 mL de acetonitrila. A mistura de reação foi agitada a 50 € por 1 hora, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 51.¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,47 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,35 (q, J = 8,6,8,2 Hz, 1H), 6,81 (q, J = 8,7, 8,0 Hz, 2H), 6,41 (dd, J = 10,0, 3,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,36 - 4,26 (m,

123/239

2Η), 4,20 - 4,08 (m, 2H), 3,98 (dd, J = 12,4, 10,2 Hz, 1H), 3,88 (t, J = 11,8 Hz, 2H), 2,27 (dt, J = 13,3, 3,1 Hz, 1H), 2,15 - 2,06 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C21H20F2N3O6: 448,40; encontrado: 448,2.

Exemplo 52

Preparação de Composto 52 (2S, 5R, 13aS)-N-(2-ciclopropóxi-4-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2_>5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

Etapa 1 [0288] Uma soluçã de ciclopropanol (1,9 g, 29 mmol) em 20 ml_ de dioxano foi adicionado gota a gota a uma solução a 0 °C de hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo mineral, 1,04 g, 26 mmol) em 80 ml_ de dioxano. A mistura de reação foi permitida aquecer à temperatura ambiente, 2,4-difluorobenzonitrila (3,48 g, 25 mmol) foi adicionado porção a porção, e temperatura de reação subiu para 95 Ό. A solução de reação foi resfriada à temperatura ambiente após agitação por 18 horas, diluída com acetato de etila, lavada duas vezes com água e duas vezes com salmoura, seca sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas on124/239 to sílica-gel. Purificação por cromatografia de sílica-gel (0-10% de EtOAc/hexanos) rendeu 2-ciclopropóxi-4-fluorobenzonitrila. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,52 (dd, J = 8,6, 6,2 Hz, 1H), 7,05 (dd, J =

10,5, 2,3 Hz, 1H), 6,73 (td, J = 8,2, 2,3 Hz, 1H), 3,87 - 3,76 (m, 1H), 0,87 (m, 4H).

Etapa 2 [0289] A uma suspensão de 0 Ό de hidreto de alumín io de lítio em THF (1M, 15 mL, 15 mmol) foi adicionado 2-ciclopropóxi-4-fluorobenzonitrila em 14 mL dietil éter gota a gota. A solução de reação foi agitada por 3 horas, gradualmente aquecendo à temperatura ambiente, neste ponto ela foi resfriada novamente a 0 í, mai s 8 mL de hidreto de alumínio de lítio em THF (1M, 8 mmol) adicionado, e agitada por mais 90 minutos. A reação foi arrefecida por adição sequencial de 0,9 mL de água, 0,9 mL 15% de NaOH_(aq), e 2,7 mL de água. A reação foi filtrada através de celite com dietil éter lavada, seca sobre MgSO₄, e concentrada para render 2-ciclopropóxi-4-fluorobenzilamina de pureza suficiente para realizar como bruto. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,17 - 7,08 (m, 1H), 6,96 (dd, J = 10,9, 2,4 Hz, 1H), 6,61 (td, J =

8,3,2,5 Hz, 1H), 3,78 - 3,66 (m, 3H), 0,89 - 0,72 (m, 4H).

Etapa 3 [0290] Composto 15-B (46 mg, 0,14 mmol) foi tomado em 1 mL de acetonitrila e tratado com 2-ciclopropóxi-4-fluorobenzilamina (32 mg, 0,18 mmol), HATU (62 mg, 0,16 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DlPEA) (0,04 mL, 0,22 mmol), e agitado à temperatura ambiente por 2 horas, após o que Análise LCMS revelou consumo completo do composto 15-B e formação de intermediário 52-A. A mistura de reação foi realizada na próxima etapa.

Etapa 4 [0291] À solução de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (56 mg, 0,30 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por

125/239 minutos, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 52. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-cf6) δ 12,44 (s, 1H), 10,21 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,22 -7,15 (m, 1H), 7,12 (dd, J= 11,2, 2,5 Hz, 1H), 6,72 (td, J= 8,5, 2,5 Hz, 1H), 5,42 (dd, J = 9,6, 4,1 Hz, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,66 (dd, J = 12,8, 4,1 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,34 (dd, J = 5,6, 2,4 Hz, 2H), 4,04 - 3,91 (m, 2H), 1,92 (s, 4H), 1,82 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 1,55 (dt, J = 12,4, 3,5 Hz, 1H), 0,80 (q, J = 6,3, 5,7 Hz, 2H), 0,72 (q, J = 6,0, 4,9 Hz, 2H). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C24H₂5FN₃O₆: 470,17; encontrado:

470,1.

Exemplo 53

Preparação de Composto 53 (2R, 5S, 13aR)-N-(2-ciclopropóxi-4-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1^,,2’:4,5]pirazino[2,1b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

Etapa 1 [0292] Composto 42-A (46 mg, 0,14 mmol) foi tomado em 1 mL de acetonitrila e tratado com 2-ciclopropóxi-4-fluorobenzilamina (33 mg,

126/239

0,18 mmol), HATU (61 mg, 0,16 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DlPEA) (0,04 mL, 0,24 mmol), e agitada à temperatura ambiente por 2 horas, após o que Análise LCMS revelou consumo completo do composto 42-A e formação de intermediário 53-A. A mistura de reação foi realizada na próxima etapa.

Etapa 2 [0293] À solução de reação bruta da etapa anterior foi adicionado MgBr₂ (55 mg, 0,30 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 Ό por 90 minutos, acidificada com 10% de HCI aquoso, particionada entre o aquoso e diclorometano, e a fase aquosa extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas, e purificadas por HPLC (ACN/H₂O com 0,1% de Modificador de TFA) para render o Composto 53. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ 12,44 (s, 1H), 10,21 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,22 -7,15 (m, 1H), 7,12 (dd, J= 11,2, 2,5 Hz, 1H), 6,72 (td, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 5,42 (dd, J = 9,6, 4,1 Hz, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,66 (dd, J = 12,8, 4,1 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,34 (dd, J = 5,6, 2,4 Hz, 2H), 4,04 - 3,91 (m, 2H), 1,92 (s, 4H), 1,82 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 1,55 (dt, J = 12,4, 3,5 Hz, 1H), 0,80 (q, J = 6,3, 5,7 Hz, 2H), 0,72 (q, J = 6,0, 4,9 Hz, 2H). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C24H₂₅FN₃O₆: 470,17; encontrado:

470,1.

Exemplo 54

Preparação de Composto 54 (2R, 5S)-N-((S)-1 -(2,4-difluorofenil)-2, 2,2-trifluoroetil)-8-hidróxi-7,9dioxo-2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [ 1,3]oxazepina-10-carboxamida

127/239

54-Β

128/239

Etapa 1 [0294] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com reagente 54-A (0,02 g, 0,06 mmol), (S)-1-(2,4-difluorofenil)-2, 2,2-trifluoroetanamina (0,019 g, 0,09 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DlPEA) (0,048 g, 0,38 mmol) e HATU (0,036 g, 0,09 mmol) em DCM (2 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada, re-dissolvida em EtOAc (50 mL), lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para obter 54-B. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₁₈H₁₉F₂N₂O₇: 514; encontrado: 514. Etapa 2 [0295] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com reagente 54-B (0,03 g, 0,058 mmol) e brometo de magnésio (0,03 g, 0,15mmol) em acetonitrila (2 mL). A mistura de reação foi aquecida a 50 O. Após 10 minutos, a mistura de reação foi resfriada para 0 C e ácido clorídrico a 1 N (0,5 mL) foi adicionado in. Em seguida a mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL). Após filtração, o bruto foi purificado por pré-purificação com HPLC (30-70% acetonitrila:água, 0,1% de TFA) rendeu o Composto 54 com sal de TFA. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,28 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,54 (q, J = 7,8 Hz, 1H), 7,12 - 6,76 (m, 2H), 6,40 - 5,98 (m, 1H), 5,57 - 5,18 (m, 2H), 4,68 (s, 1H), 4,29 (dd, J = 13,1, 4,0 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 12,9, 9,3 Hz, 1H), 2,39 - 1,94 (m, 4H), 1,86 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 1,60 (dt, J = 12,6, 3,4 Hz, 1H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -75,30 (t, J = 6,8 Hz, 3 F), -

108,33 (dd, J = 8,6, 6,3 Hz, 1F), -111,56 - -113,23 (m, 1 F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₂iH₂oF₂N₃0₅: 500.; encontrado: 500. Exemplo 55

Preparação de Composto 55 (1R, 4S, 12aS)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)-1,2,3,4,6,8,

129/239

12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: T,2’-d]pirazina-9-carbo-

Etapa 1

H₂. Pd(OH)₂/C^ r.t, durante a noite π-BuLi, THF -78 °C, 5 h xamida

B0C2O

NaOH. dioxano* r.t.durante a noite [0296]

1) H₂. PdtOH^C

2) HCI/EtOH

HCI

HCI refluxado, 4h

COjEt		COjH
55-D		55-E
JjLcO2H	BHpDMS
-η
N'Boc	THF	H
55-G		55-H

Uma mistura do composto 55-A (40,60

g.

H HCI H

CO_?H

55-F

150 mmol) e

Pd(OH)₂/C (12 g) em EtOH (400 mL) sob uma atmosfera de H₂ foi agi tada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e tratado com HCI/EtOH (400 ml). A mistura foi agitada à tem peratura ambiente por 2 h. A mistura de reação foi concentrada para dar o composto 55-B, que foi usado na próxima etapa sem purificação. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₉H₁₆NO: 170,1.; encontrado:

170,2.

130/239

Etapa 2 [0297] A uma solução do composto 55-B (92,25 g, 0,45 mol) e K₂CO₃ (186,30 g, 1,35 mol) em CH₃CN (1 L) foi adicionado brometo de benzila (76,50 g, 0,45 mol) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica-gel para dar o composto 55-C.

Etapa 3 [0298] A uma mistura de di-isopropilamina (50 g, 0,50 mol) em THF (400 mL) foi adicionado n-BuLi (200 mL, 0,50 mol) at -78 °C em atmosfera de N₂. Após 0,5 h, a mistura de reação foi aquecida a 20 °C e agitada por 0,5 h. A mistura foi resfriada para -78 °C e adicionada uma solução do composto 55-C (64,75 g, 0,25 mol) em THF (600 mL) sob atmosfera de N₂. A mistura foi agitada por 4 h e arrefecida com Solução saturada de NH₄CI. A mistura foi extraída com EtOAc e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na₂SO₄, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica-gel para dar o composto 55-D.

Etapa 4 [0299] Uma mistura do composto 55-D (129,50 g 0,50 mol) em 4N HCI (1,30 L) foi refluxada for 4 h. a mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC para dar o composto 55-E.

Etapa 5 [0300] A uma mistura do composto 55-E (47 g, 176 mmol) e Pd(OH)₂/C (9 g) em EtOH (400 mL) sob uma atmosfera de H₂ foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada para dar o composto 55-F, que foi usado na próxima etapa sem purificação. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,22 (s, 1H), 4,06 (s, 1H), 2,98-2,95 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 1,96-1,93 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 1,86-1,82 (m, 2H), 1,76-1,74 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 1,49 (s, 1H). LCMS

131/239

ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C7H-12NO2: 142,1.; encontrado:

142,1.

Etapa 6 [0301] A uma misturado composto 55-F (29,20 g, 165 mmol) e 2N NaOH solution (330 mL, 0,66 mol) em dioxano (120 mL) foi adicionado Boc₂O (39,60 g, 181 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi ajustada com HCl a 3N para pH=5~6 e extraída com DCM. A camada orgânica foi seca sobre Na₂SO₄, filtrada e concentrada para dar 55-G. ¹H-RMN (400 MHz, CDCh) δ 4,40 (s, 1H), 4,26 (s, 1H), 2,89 (s, 1H), 1,76-1,74 (s, 1H), 1,69-1,59 (m, 4H), 1,50 (s, 1H), 1,47 (s, 9H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+Na]⁺calculado para Ci₂H₁₉NNaO₄: 264,1.; encontrado: 264,1.

Etapa 7 [0302] A uma mistura do composto 55-G (500 mg, 2,07 mmol) em THF (10 mL) resfriado a 0 Ό foi adicionado complexo BH3-DMS THF (2N em THF, 8,23 mmol, 4,1 mL) vagarosamente. Evolução de gás ocorreu. Temperatura interna foi monitorada para assegurar nenhuma exotermina maior. Reação foi permitida aquecer a r.t. durante a noite. Algum mateiral de partida permaneceu por LC/MS, mais 2 mL de complexo BH3-DMS THF foi adicionado e a mistura foi agitada por mais 3 h em seguida a reação fou resfriada para 0 °C e vagarosamente arrefecida com metanol (evolução de gás ocorre). Temperatura interna para assegurar exotermina abaixo de 25 °C. A mistura foi concentrada em seguida purificada por cromatografia de sílica-gel (20-40% de EtOAc/Hexanos) para render 55-H.

Etapa 8 [0303] Composto 55 foi preparado como descrito para o Exemplo 41, substituindo 55-H por 41-B para render o Composto 55. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,81 (s, 1H), 10,40 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,19 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 4,59 - 4,48 (m, 4H), 4,16 (t, J = 12,2

132/239

Hz, 1H), 4,03 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 2,69 (s, 1H), 1,75 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 1,69 - 1,55 (m, 5H). ¹⁹F RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ -109,3 (m, 1F), -112,5 (m, 1F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2iHi9F₃N₃O₄: 434,13.; encontrado: 434,32.

Exemplo 56

Preparação de Composto 56 (1R, 2S, 4R,12aR)-2-fluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

56-A

1) Phthalimide.

2) NH₂NH₂,

1) H₂Pd/C

2) Boc₂O,

1) KOH

2) HATU, DIEA.

2,4.6-F₃BnNH₂

56-J

133/239

Etapa 1 [0304] Uma solução de 56-A (5 g, 19,43 mmol) em tetra-hidrofurano (65 ml) foi resfriada em um banho de gelo como 0,5 M 9borabiciclo[3,3,1]nonano (48,58 ml) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi aquecida até atemperatura ambiente. Após 18 horas, a reação foi resfriada a 0 °C e uma mistura de 2M de hidróxido de sódio (34 ml) e peróxido de hidrogênio (9,34 ml, 97,15 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 2 horas a 0 ‘C, a reação fo i aquecida até atemperatura ambiente e agitada por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com água. As frações orgânicas foram extraídas com EtOAc, e as frações orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄) e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (50-70% de EtOAc/hexanos) para render 56-B (3,05 g, 57%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₆H₂₁NO₃: 275,34; encontrado: 276,122.

Etapa 2 [0305] A uma solução de 56-B (1,45 g, 5,27 mmol) em N,Ndimetilformamida (12 ml) foi adicionado terc-butilclorodifenilsilano (1,51 ml, 5,79 mmol) e imidazol (1,08 g, 15,8 mmol). Após 18 horas, a mistura foi diluída com água, extraída em EtOAc (2x), as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (10-20% de EtOAc/hexanos) para render 56-C (2,6 g, 96,1%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₃₂H₃₉NO₃Si: 513,74; encontrado: 514,625. Etapa 3 [0306] A uma solução de 56-C (3,27 g, 6,36 mmol) em EtOH (26 mL) e ácido acético (3 mL) foi adicionado 10% de PdOH/C (0,52 g, 3,7 mmol) e a suspensão foi agitada em um aparelho Parr a 50 atm por 20 horas. Após filtragem através de celite, a torta foi lavada com EtOH, o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em etanol

134/239 (26 ml) e ácido acético (3 ml, 52,4 mmol), tratado com 10% de PdOH/C (0,52 g, 3,7 mmol) e agitado em um aparelho Parr a 50 atm por 20 horas. Filtrado através de celite, a torta foi lavada com EtOH, o filtrado foi concentrado sob vácuo até secura para render o produto bruto desprotegido (2,07g, 79,4 %). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C24H31NO3S1: 409,59; encontrado: 410,485.

[0307] A resíduo bruto (2 g, 4,88 mmol) e dicarbonato di-terc-butila 97% (2,14 g, 9,79 mmol) em THF (20 ml) foi adicionado N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) (2,14 ml, 12,27 mmol). Após 20 h, a mistura de reação foi diluída com água, extraída em EtOAC (2x) e as duas frações orgânicas foram lavadas com água, combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (10-20% de EtOAc/Hexanos) para render 56-D (2,13 g, 86,14%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₃₀H₄₁NO₅Si: 523,74; encontrado: 523,922.

Etapa 4 [0308] Uma solução de 56-D (2,07 g, 4,06 mmol) em THF (20 ml) foi agitada em um banho de gelo como 2,0 M de LiBH₄ em THF (4,07 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 18 h. Após, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila e tratada vagarosamente com água. As duas fases foram separadas, e a fração aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As duas frações orgânicas foram lavadas com água, combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (20-40% EOAc/hexanos) para render 56-E (1,59 g, 81,3%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₈H₃₉NO₄Si: 481,7; encontrado: 482,337.

Etapa 5 [0309] Uma mistura de 56-E (1,58 g, 3,28 mmol), ftalamida (0,79 g,

5,38 mmol) e trifenilfosfina (1,93 g, 7,37 mmol) em THF (90 ml) foi res

135/239 friada em um banho de gelo. Azodicarboxilato de di-isopropila, 95% (1,46 ml, 7,42 mmol) foi adicionado. A mistura foi em seguida aquecida até atemperatura ambiente e agitada por 20 h. Após, a mistura de reação foi concentrada e o resíduo dissolvido em éter, resfriada em um banho de gelo e agitada por 1,5 h. Os sólidos foram filtrados e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (10-30% de EtOAc/hexanos) para render o composto de amino protegido (1,86 g, 92,8%).

[0310] Uma solução do composto de amino protegido 56-F (1,85 g, 3,03 mmol) e hidrato de hidrazina (0,6 ml, 12,39 mmol) em etanol (19 ml) foi agitada a 70 Ό por 2 h. A mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo, éter (10 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada por 30 min. O sólido formado foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo até secura.

Etapa 6 [0311] Uma mistura de composto de amino bruto 56-F (991 mg, 2,06 mmol), composto 38-F (Exemplo 38) (714 mg, 2,06 mmol) e NaHCO₃ (347 mg, 4,12 mmol) em água (15 mL) e EtOH (15 mL) foi agitada por 20 h. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi particionada entre água e EtOAc. A camada aquosa foi reextraída com EtOAc e as camadas orgânicas foram secas (Na₂SO₄) e concentrada. O resíduo (1,5 g) foi dissolvido em CH₂CI₂ (5 mL) e 4N HCI em dioxano (18,6 mL) foi adicionado. Após 1,5 horas a mistura foi concentrada até secura, co-evaporada com tolueno e seca em vácuo.

[0312] O resíduo bruto (1,38 g) e DBU (1,4 ml, 9,38 mmol) em tolueno (25 ml) foi agitado a 110 Ο. Após 35 minutos a mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (5-15% de MeOH/EtOAc) para render 56-G (450 mg, 72,3%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C3₉H₄₂N₂O₆Si: 662,85; encontrado: 663,766.

136/239

Etapa 7 [0313] A mistura de 56-G (890 mg, 1,34 mmol) em MeOH (14 ml) e THF (14 ml) foi agitada à temperatura ambiente como KOH a 1M (7,09 ml) foi adicionado. Após 30 min a mistura de reação foi neutralizada com 1N HCI, extraída em EtOAC (2x) e os extratos orgânicos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados.

[0314] Uma suspensão de o resíduo bruto (850 mg), 2,4,6trifluorobenzilamina (248 mg, 1,54 mmol) e HATU (662 mg, 1,74 mmol) em diclorometano (5 ml) foi agitada à temperatura ambiente como N,Ndi-isopropiletilamina (DIPEA) (1,63 ml, 9,37 mmol) foi adicionado. Após 1 h, mais2,4,6-difluorobenzilamina (32 mg, 0,2 mmol), HATU (153 mg, 0,4 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,12 ml, 0,67 mmol) foram adicionados. Após 30 minutos a mistura foi diluída com água, extraída em EtOAC (3x) As fases orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄), concentradas e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (50-75% de EtOAc/hexanos) para render 56-H (919 mg, 88,23%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para

CzuH^FsNsOsSi: 777,9; encontrado: 778,409.

Etapa 8 [0315] Uma solução de 56-H (915 mg, 1,18 mmol) em THF (5 ml) foi agitada em um banho de gelo como 1,0 M de fluoreto de tetrabutilamônio em THF (1,18 ml) foi adicionado gota a gota. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi diluído com EtOAc, lavado com água, seco (Na₂SO₄), concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (50-75% de EtOAc/hexanos em seguida 5% de MeOH/EtOAc). O material resultante (248 mg, 0,46 mmol) foi dissolvido em diclorometano (2 ml) resfriada a -78°C as trifluoreto de dietilaminoenxofre (0,07 ml_, 0,55 mmol) foi adicionado gota a gota e a reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 1

137/239

h. A reação foi resfriada em um banho de gelo e arrefecida com NaHCO₃ saturado, duas fases foram separadas, e a fração aquosa separada foi extraída com CH₂CI₂. As duas frações orgânicas foram combinadas e secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (1% de MeOH/EtOAc) para render 56-J (75 mg) (LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₈H23F4N₃O₄: 541,49; encontrado: 542,320) e 56-I (30 mg) (LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C28H22F3N3O4: 521,49; encontrado: 522,05).

Etapa 9 [0316] Composto 56-J (75 mg, 139 mmol) foi dissolvido em TFA (1 mL), agitado à temperatura ambiente por 10 minutos, e a solução foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, 15 to 43% ACN/H₂O + 0,1% de TFA) para render o Composto 56. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,67 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,17 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 5,45 - 5,18 (m, 1H), 4,70 - 4,39 (m, 3H), 4,23 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,11 -3,85 (m, 2H), 2,85 (dd, J = 4,2, 2,0 Hz, 1H), 2,34-2,13 (m, 1H), 1,81 (s, 1H), 1,55 - 1,33 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, DMSOc/₆) δ -74,20 (m), -106,95 - -116,45 (m), -190,65 - -194,54 (m).

Exemplo 57

Preparação de Composto 57 (1R, 4R,12aR)-2,2-difluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina9-carboxamida

138/239

57-Ε

3) DBU

ΚΟΗ

HATU. DIEA,

2.4,6-F₃BnNH₂

Etapa 1 [0317] Uma solução de 57-A (1,45 g, 5,34 mmol) em diclorometano (30 ml) foi resfriada em um banho de gelo como Dess Martin periodinano (4,53 g, 10,69 mmol) foi adicionado em portions e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 h. A reação foi arrefecida by pela adição de água, o precipitado foi filtrado e uma solução saturada de Na₂S₂O₃ foi adicionada. A mistura foi agitada até a solução bifásica voltar em seguida NaHCO₃ saturado foi adicionado e a camada aquosa extraída com CH₂CI₂. As frações orgânicas combinadas foram se cas (Na₂SO₄) e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (30-50% de EtOAc/Hexanos) para render 57-B (1,13 g, 78,2 %). LCMS-ESF (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₃H₁₉NO₅:

269,29; encontrado: 269,722.

Etapa 2 [0318] Uma solução de 57-B (0,5 g, 1,86 mmol) em diclorometano (10 ml) foi resfriada a -78°C como trifluoreto de dietilaminoenxofre (0,52 mL, 3,91 mmol) foi adicionado gota a gota e a reação foi aquecí139/239 da à temperatura ambiente e agitada por 18 h. A reação foi resfriada em um banho de gelo e arrefecida com NaHCO₃ saturado, duas fases foram separadas, e a fração aquosa separada foi extraída com CH₂CI₂. As duas frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄) e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (20-50% de EtOAc/hexanos) para render 57-C (518 mg, 95,39%). ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,43 (s, 1H), 4,36 - 4,27 (m, 1H), 4,22 (s, 1H), 3,75 (s, 3H), 2,95 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,30 - 1,98 (m, 2H), 1,85-1,71 (m, 1H), 1,44 (m, 9H).

Etapa 3 [0319] Uma solução de 57-C (935 mg, 3,21 mmol) em THF (10 ml) foi agitada em um banho de gelo como 2,0 M de LÍBH4 em THF (3,22 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 18 h. Após, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila e água foi adicionado vagarosamente. As duas fases foram separadas, e a fração aquosa separada foi extraída com acetato de etila. As duas frações orgânicas foram lavadas com água, combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (20-40% de EtOAc/hexanos) para render 57D (724 mg, 85,67%). ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,30 - 3,48 (m, 5H), 2,75 - 2,56 (m, 1H), 2,24 - 1,90 (m, 3H), 1,86 - 1,65 (m, 1H),

1,47 (s, 9H).

Etapa 4 [0320] Uma mistura de 57-D (720 mg, 2,74 mmol), ftalamida (402 mg, 2,73 mmol) e trifenilfosfina (1,61 g, 6,15 mmol) em THF (45 ml) foi resfriada em um banho de gelo. Azodicarboxilato de di-isopropila, 95% (1,22 ml, 6,19 mmol), foi adicionado. A mistura foi em seguida aquecida até atemperatura ambiente e agitada por 20 h. Após, a mistura de reação foi concentrada e o resíduo dissolvido em éter, resfriada em um banho de gelo e agitada por 1,5 h. Após os sólidos foram filtrados, o

140/239 filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (40-60% de EtOAc/hexanos) para render o aduto de ftalamida (1,07 g, 99,7%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C20H22F2N2O4: 392,4; encontrado: 393,204 [0321] Uma solução do aduto de ftalamida (1,07 g, 2,73 mmol) e hidrato de hidrazina (0,54 mL, 11,15 mmol) em etanol (10 ml) foi agitada a 70 Ό por 2 horas. A mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo e éter (10 ml) foi adicionado. A mistura foi agitada por 30 min. O sólido formado foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo até secura para render 57-E bruto.

Etapa 5 [0322] Uma mistura de 57-E bruto (709 mg, 2,7 mmol) composto 38-F (Exemplo 38) (936 mg, 2,7 mmol) e NaHCO₃ (454 mg, 5,41 mmol) em água (15 mL) e EtOH (15 mL) foi agitada por 20 h. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi particionada entre água e EtOAc. A camada aquosa foi re-extraída com EtOAc e as camadas orgânicas foram secas (Na₂SO₄) e concentradas. O resíduo (1,5 g) foi dissolvido em CH₂CI₂ (7 mL) e HCI a 4N em dioxano (26,9 mL) foi adicionado. Após 1,5 horas a mistura foi concentrada até secura, co-evaporada com tolueno e seca sob vácuo. O resíduo bruto (1,3 g) e DBU (2 ml, 13,4 mmol) em tolueno (25 ml) foi agitado a 110 O.

Após 35 minutos a mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (5-15% de MeOH/EtOAc) para render 57-F (426 mg, 36,17%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C23H22F2N2O5: 444,43; encontrado: 445,280.

Etapa 6 [0323] A mistura do composto 57-F (426 mg, 0,96 mmol) em MeOH (7 ml) e THF (7 ml) foi agitada à temperatura ambiente como KOH a 1M (5,06 ml) foi adicionado. Após 30 minutos a mistura de reação foi neutralizada com 1N HCI, extraída em EtOAC (2x) e os extratos

141/239 orgânicos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrada para 57-G bruto.

Etapa 7 [0324] Uma suspensão do resíduo bruto 57-G (189 mg), 2,4,6trifluorobenzilamina (95 mg, 0,59 mmol) e HATU (276 mg, 0,73 mmol) em diclorometano (3 ml) foi agitada à temperatura ambiente como N,Ndi-isopropiletilamina (DIPEA) (0,59 ml, 3,4 mmol) foi adicionada. Após 1 h a mistura foi diluída com água, extraída em EtOAC (3x). As fases orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄) e concentradas para 57-

H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₈H₂₂F₅N₃O₄: 559,48; encontrado: 560,24.

Etapa 8 [0325] Composto 57-H (150 mg, 0,27 mmol) foi dissolvido em TFA (2 mL), agitada à temperatura ambiente por 10 min, e a solução foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, 15 to 60% ACN/H₂O + 0,1% de TFA), para render o Composto 57 (85 mg, 67,5%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para

C₂iH₁₆F₅N₃O₄: 469,36; encontrado: 470,229. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10,41 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,12 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 4,79 (s, 1H), 4,48 (m, 3H), 4,10 (m, 2H), 3,02 (d, J = 5,7 Hz, 1H),

2,33 (m, 1H), 2,22-1,97 (m, 2H), 1,85 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 1,21 (s, 1H). ¹⁹F RMN (376 MHz, DMSO-d₆) δ -69,88,-71,77,-74,09,-88,33 (dd, J = 222,6, 23,8 Hz), -109,15 - -109,60 (m), -110,04,-112,44 (t, J = 7,6 Hz). Exemplo 58

Preparação de Composto 58 (1R, 4R,12aR)-N-(3-cloro-2,4-difluorobenzil)-2,2-difluoro-7-hidróxi-6,8dioxo-1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’ ,2’-d] pirazina-9-carboxamida

142/239

TFA

Etapa 1 [0326] Uma suspensão de o resíduo bruto 57-G (120 mg), 3-cloro,

2,4-difluorobenzilamina (67 mg, 0,38 mmol) e HATU (175 mg, 0,46 mmol) em diclorometano (3 ml) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,38 ml, 0,28 mmol) foi adicionado. Após 1 h a mistura foi diluída com água, extraída em EtOAC (3x) As fases orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄) e concentradas para render 58-A. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂8H22CIF₄N₃O₄: 575,94; encontrado: 576,394.

Etapa 2 [0327] Composto 58-A (166 mg) foi dissolvido em TFA (2 mL), agitada à temperatura ambiente por 10 min, e a solução foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, 15 a 70% ACN/H₂O + 0,1% de TFA), para render o Composto 57 (60 mg, 42,8%). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₁₆CIF₄N₃O₄: 485,82; encontrado: 486,135. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,77 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,28 (m, 2H), 4,77 (s, 1H), 4,64 - 4,40 (m, 2H), 4,27 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 3,93 (m, 2H), 2,95 (d, J = 5,8 Hz, 1H),

143/239

2,51 (s, 1H), 2,42 - 2,17 (m, 1H), 2,14 - 1,89 (m, 2H), 1,77 (m, 1H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, DMSO-cfe) δ -87,63,-88,23,-108,67,-109,27,116,42 (t, J = 7,0 Hz), -118,48 (d, J = 7,8 Hz).

Exemplo 59

Preparação de Composto 59 (1R, 2R, 4R,12aR)-2-fluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina9-carboxamida

Etapa 1 [0328] Uma solução de 57-B (1,9 g, 7,06 mmol) em metanol (35 mL) foi agitada a 0 °C como borohidreto de sódio (667 mg, 17,64 mmol) foi adicionada porção a porção e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A mistura de reação foi resfriada

144/239 em um banho de gelo, arrefecida by pela adição de água e concentrada. O resíduo foi particionada entre água e EtOAc. A camada aquosa foi re-extraída com EtOAc e as camadas orgânicas foram secas (Na₂SO₄) e concentrada O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (30-60% de EtOAc/hexanos) para render 59-A (1,49 g). ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,57 (s, 1H), 4,52 - 4,42 (m, 2H), 4,28 (s, 1H), 4,14 (s, 1H), 3,72 (d, J = 2,1 Hz, 3H), 2,74 (s, 1H), 2,08 - 1,87 (m, 2H), 1,43 (d, J = 23,1 Hz, 10H) e 57-A (96 mg): ¹HRMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,65 - 4,40 (m, 2H), 4,34 - 4,02 (m, 1H), 3,73 (d, J = 2,3 Hz, 3H), 2,74 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 2,12 - 1,55 (m, 3H), 1,52-1,18 (m, 11H).

Etapa 2 [0329] A uma solução de 59-A (686 mg, 2,53 mmol) em N,Ndimetilformamida (5 ml) foi adicionado terc-butilclorodifenilsilano (0,723 mL, 2,78 mmol) e imidazol (516 mg, 7,56 mmol). Após 18 h, a mistura foi diluída com água, extraída em EtOAC (2x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (10-20% de EtOAc/hexanos) para render 59-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₉H39NO₅Si: 509,71; encontrado: 510,793.

Etapa 3 [0330] Uma solução de 59-C (1,23 g, 2,41 mmol) em THF (13 ml) foi agitada em um banho de gelo como 2,0 M LiBH₄ em THF (2,42mL, 4,84 mmol)) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 18 h. Após a mistura de reação ser diluída com acetato de etila água foi adicionada vagarosamente, duas fases foram separadas, e a fração aquosa separada foi extraída com acetato de etila. As duas frações orgânicas foram lavadas com água, combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (20-40% de EtOAc/hexanos) para

145/239 render 59-D. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C28H39NO4SÍ: 481,7; encontrado: 482,741.

Etapa 4 [0331] Uma mistura de 59-D (963 mg, 2,0 mmol), ftalamida (482 mg, 3,28 mmol) e trifenilfosfina (1,18 g, 4,49 mmol) em THF (50 ml) foi resfriada em um banho de gelo. Azodicarboxilato de di-isopropila, 95% (0,89 mL, 4,52 mmol) foi adicionado. A mistura foi em seguida aquecida até atemperatura ambiente e agitada por 20 h. Após, a mistura de reação foi concentrada e o resíduo dissolvido em éter, resfriada em um banho de gelo e agitada por 1,5 h. Após, os sólidos foram filtrados e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica (10-30% de EtOAc/hexanos) para render o aduto de ftalamida. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C36H42N2O5SÍ: 610,81; encontrado: 611,935.

[0332] Uma solução da aduto de ftalamida (1,2 g, 1,97 mmol) e hidrato de hidrazina (0,4 ml, 8,03 mmol) em etanol (12 ml) foi agitada a 70 Ό por 2h. A mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo e éter (10 ml) foi adicionado, a mistura foi agitada por 30 min. O sólido formado foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo até secura para render 59-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C28H40N2O3SÍ: 480,71; encontrado: 481,356.

Etapa 5 [0333] Uma mistura de 59-E bruto (770 mg, 1,60 mmol), composto 38-F (Exemplo 38) (555 mg, 1,60 mmol) e NaHCO₃ (269 mg, 3,20 mmol) em água (12 mL) e EtOH (12 mL) foi agitada por 20 h. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi particionada entre água e EtOAc. A camada aquosa foi re-extraída com EtOAc e as camadas orgânicas foram secas (Na₂SO₄) e concentradas.

[0334] O resíduo (1,29 g) foi dissolvido em CH₂CI₂ (4 mL) e 4N HCI em dioxano (15,6 mL) foi adicionado. Após 1,5 horas a mistura foi con

146/239 centrada até secura, co-evaporada com tolueno e seca sob vácuo. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₄₁H4₈N₂O7Si: 708,91; encontrado: 709,782.

[0335] O resíduo bruto (1,09 mg) e DBU (1,17 ml, 7,8 mmol) em tolueno (20 ml) foi agitada a 110 O. Após 35 min a mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (5-15% de MeOH/EtOAc) para render 59-F. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₃9H₄₂N₂O₆Si: 662,85; encontrado: 663,677.

Etapa 6 [0336] Uma mistura de 59-F (680 mg, 1,03 mmol) em MeOH (10 ml) e THF (10 ml) foi agitada à temperatura ambiente como KOH a 1M (5,42 ml) foi adicionado. Após 30 min a mistura de reação foi neutralizada com 1N HCI, extraída em EtOAC (2x) e os extratos orgânicos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₃₇H₃₈N₂O₆Si: 634,79; encontrado: 635,466.

[0337] Uma suspensão de o resíduo bruto (650 mg), 2,4,6trifluorobenzilamina (214 mg, 1,33 mmol) e HATU (623 mg, 1,64 mmol) em diclorometano (6 ml) foi agitada à temperatura ambiente como N,Ndi-isopropiletilamina (DIPEA) (1,34 ml, 7,68 mmol) foi adicionado. Após 2 h, a mistura foi diluída com água, extraída em EtOAC (3x) nad. As fases orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄), concentradas e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (50-75% de EtOAc/hexanos) para render 59-G. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₄₄H₄₂F₃N₃O₅Si: 777,9; encontrado: 778,566.

Etapa 7 [0338] Uma solução de 59-G (648 mg, 0,83 mmol ) em THF (10 ml) foi agitada em um banho de gelo como 1,0 M fluoreto de tetrabutilamônio em THF (0,83 ml) foi adicionado gota a gota e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. Additional 1,0 M fluoreto de tetrabutilamônio em THF (0,1 ml) foi adicionado gota a go

147/239 ta. Após 30 minutos, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi diluído com EtOAc, lavado com água, seco (Na₂SO₄), concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (5% de MeOH/EtOAc). Uma solução de o resíduo (290 mg, 0,54 mmol) em diclorometano (3 ml) foi resfriada a -78°C como trifluoreto de dietilaminoenxofre (0,09 mL, 0,65 mmol) foi adicionado gota a gota e a reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 2,5 h. A reação foi resfriada em um banho de gelo, arrefecida com NaHCO₃ saturado, duas fases foram separadas, e a fração aquosa separada foi extraída com CH₂CI₂. As duas frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (1% de MeOH/EtOAc) para render 59-H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₈H₂₃F4N₃O₄: 541,49; encontrado: 542,320.

Etapa 8 [0339] Composto 59-H (103 mg, 0,19 mmol) foi dissolvido em TFA (1,4 mL) à temperatura ambiente por 15 min, e a solução foi concentrada. O resíduo foi suspenso em DMF, filtrado, e o produto precipitado foi lavado com água, seco sob vácuo para render o Composto 59. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₁₇F₄N₃O₄: 451,37, encontrado: 452,226. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,53 (s, 1H), 10,35 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,18 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 5,15 -

4,88 (m, 1H), 4,73 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,49 (m, 3H), 4,04 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 12,4, 3,7 Hz, 1H), 2,95 - 2,76 (m, 1H), 2,26 2,03 (m, 1H), 1,96 - 1,64 (m, 3H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, DMSO-d₆) δ 73,93,-74,74 (d, J = 28,8 Hz), -109,31 (m), -112,51 (m), -165,65 (m). Exemplo 60

Preparação de Composto 60 (1R, 4S, 12aR)-N-(2,3-diclorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8,12, 12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’ ,2’-d]pirazina-9-carboxamida

148/239

	O II
	O^VOMe
MeO.
1)	lii °
NaHCO3	O OMe

2) HCI

3) NaHCO₃

Etapa 1 [0340] A uma solução de 3-metóxi-4-oxo-4H-piran-2,5-dicarboxi lato de dimetial (5,5 g, 23 mmol) em MeOH (100 mL) foi adicionado 41E (Exemplo 41) (5 g, 22 mmol) e bicarbonato de sódio (3,6 g, 43 mmol). A solução foi agitada à temperatura ambiente por 1,5 h. HCI a

4M (em dioxano, 55 mL, 221 mmol) foi adicionado e a solução foi aquecido a 50 O por 2h. A reação foi resfriada à temperatura ambien te e concentrada em vácuo. O óleo resultante foi dissolvido em bicar bonato de sódio e lavada com EtOAc. As camadas aquososas foram em seguida extraídas com CH₂CI₂ (4x). As extrações de CH₂CI₂ combinadas foram secas sobre Na₂SO₄ e concentradas para fornecer 60A. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₆H₁₉N₂O₅: 319,13; en149/239 contrado: 319,20.

Etapa 2 [0341] A uma suspensãode 60-A (3,7 g, 11,6 mmol) em MeOH (12 ml_) e THF (23 ml_) foi adicionado KOH aquoso (2M, 15,7 ml_, 31,4 mmol). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente por 10 min. Voláteis foram removidos em vácuo, e a camada aquosa resltante foi acidificada com 1N HCI. O sólido branco resultante foi filtrado, lavado com água, e seco em vácuo para fornecer 60-B. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,36 (s, 1H), 5,01 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,12 (s, 4H), 3,90 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 12,1,3,1 Hz, 1H), 2,69 (s, 1H), 1,95 - 1,71 (m, 4H), 1,70 - 1,54 (m, 2H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C15H-17N2O5: 305,11; encontrado: 305,15.

Etapa 3 [0342] A uma solução de 60-B (0,10 g, 0,33 mmol) em CH₂CI₂ (3,5 ml_) foi adicionado (2,3-diclorofenil)metanamina (0,12 g, 0,70 mmol), HATU (0,25 g, 0,66 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,29 ml_, 1,64 mmol). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente até julgar finalizada por LC/MS. A mistura de reação foi diluída com CH₂CI₂ e lavada com 1N HCI. A camada aquosa foi extraída de volta com CH₂CI₂, e as camadas orgânicas foram secas sobre Na₂SO₄ e concentradas em vácuo. O material bruto foi dissolvido em DMF quente e permitida precipitar ao resfriar. Filtração proveu 60-C. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₂H₂₂CI₂N₃O₄: 462,10; encontrado: 462,14.

Etapa 4 [0343] A uma pasta fluida de 60-C (0,11 g, 0,24 mmol), em acetonitrila (4,5 ml_), foi adicionado brometo de magnésio (0,089 g, 0,48 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 45 Ό por 2,5 h e em seguida resfriada à temperatura ambiente. A pasta fluida foi diluída com CH₂CI₂ e lavada com HCI a 1N e salmoura. As camadas aquosas fo150/239 ram extraídas de volta com CH2CI2 (2x) e as camadas orgânicas foram secas sobre Na₂SO₄ e concentradas em vácuo. O sólido bruto foi triturado com metanol e filtrado para fornecer 60. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 10,50 (t, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,55 (dd, 1H), 7,40 - 7,24 (m, 2H), 4,67 (s, 1H), 4,61 (d, 2H), 4,45 (dd, 1H), 3,95 (t, 1H), 3,84 - 3,73 (m, 1H), 1,86 - 1,67 (m, 3H), 1,66 - 1,40 (m, 4H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH2oCl2N₃0₄: 448,08; encontrado: 448,18.

Exemplo 61

Preparação de Composto 61 (1R, 4S, 12aS)-N-(3-cloro-2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina9-carboxamida ci

OH

OMe

MeO.

Η NH

1) Π T NaHCO₃ O OMe

Boc

2) HCI

3) NaHCO₃

4) KOH

OH

O OMe

61-A

HATU, DIEA .Cl .Cl

O

OMe

61-B

O OH

151/239 foi preparado analogamente ao Exemplo 60, substituindo 3-(aminometil)-2-azabiciclo[2,2,1]heptano-2-carboxilato de (1S, 3S, 4R)-tercbutila (preparado no Exemplo 55) por 41-E, e (3-cloro-2,4-difluorofenil) metanamina por (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,85 (s, 1H), 10,45 (t, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,37 (td, 1H), 7,27 (td, 1H), 4,63 - 4,46 (m, 4H), 4,17 (t, 1H), 4,04 (dt, 1H), 1,76 (d, 1H), 1,73 - 1,54 (m, 5H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H19CIF2N3O4: 450,10; encontrado: 450,15.

Exemplo 62

Preparação de Composto 62 '(2R, 5S, 13aR)-N-(4-fluoro-2-(trifluorometil)benzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2_I3,4,5,7₎9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1’,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0344] Composto 62 foi preparado de uma maneira similar ao composto 42 usando (4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)metanamina no lugar de (2,4,6-trifulorofenilfenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,50 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,57 (dd, 1H), 7,36 (dd, 1H), 7,19 (td, 1H), 5,40 - 5,28 (m, 2H), 4,79 (t, 2H), 4,69 (s, 1H), 4,25 (dd, 1H), 4,03 (dd, 1H), 2,17 - 1,98 (m, 4H), 1,96 - 1,84 (m, 1H), 1,61 (dt, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H20F4N3O5: 482,13; encontrado: 482,145.

Exemplo 63

Preparação de Composto 63 (2R, 5S, 13aR)-N-(2-cloro-4-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7, 9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[r,2’:4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxa152/239 zepina-10-carboxamida

[0345] Composto 63 foi preparado de uma maneira similar ao composto 42 usando (2-cloro-4-fluorofenil)metanamina no lugar de (2,4,6-trifulorofenilfenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,48 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,39 (dd, 1H), 7,12 (dd, 1H), 6,93 (td, 1H), 5,37 (d, 1H), 5,31 (t, 1H), 4,68 (s, 3H), 4,29 (d, 1H), 4,04 (t, 1H), 2,21 2,01 (m, 4H), 1,97 - 1,82 (m, 1H), 1,67 - 1,56 (m, 1H). LCMS-ESF (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H20CIFN3O5: 448,10; encontrado: 448,143.

Exemplo 64

Preparação de Composto 64 (2R, 5S, 13aR)-8-hidróxi-7,9-dioxo-N-(2, 4,5-trifluorobenzil)-2,3,4,5,7,9, 13,13a-octa-hidro-2₎5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1 -b] [ 1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0346] Composto 64 foi preparado de uma maneira similar ao composto 42 usando (2, 4,5-trifluorofenil)metanamina no lugar de (2,4,6-trifulorofenilfenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,42 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,19 (ddd, 1H), 6,91 (td, 1H), 5,38 (dd, 1H), 5,31 (t, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,61 (d, 2H), 4,29 (dd, 1H), 4,05 (dd, 1H), 2,18 - 2,02 (m, 4H), 1,96 - 1,84 (m, 1H), 1,66 - 1,56 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₁₉F3N₃O₅: 450,12; encontrado: 450,119.

153/239

Exemplo 65

Preparação de Composto 65 (2R, 5S, 13aR)-N-(5-cloro-2,4-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4, 5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[1 ’ ,2’ :4,5]pirazino[2,1 -b][1,3] oxazepina-10-carboxamida

F

Cl [0347] Composto 65 foi preparado de uma maneira similar ao composto 42 usando (5-cloro-2,4-difluorofenil)metanamina no lugar de (2,4,6-trifulorofenilfenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,47 (t, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,40 (dd, 1H), 6,90 (t, 1H), 5,37 (dd, 1H), 5,31 (t, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,62 (d, 2H), 4,28 (d, 1H), 4,04 (dd, 1H), 2,17 - 2,02 (m, 4H), 1,94 - 1,86 (m, 1H), 1,61 (dt, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2iH₁₉CIF₂N3O5: 466,09; encontrado: 466,107.

Exemplo 66

Preparação de Composto 66 (1R, 4S, 12aR)-N-(3, 4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8,

12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9-carboxa-

[0348] Composto 66 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (3, 4-difluorofenil)metanamina no lugar de (2,3diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,59 (s, 1H), 7,24 - 7,16 (m, 2H), 7,14 - 7,04 (m, 2H), 4,91 (s, 1H), 4,58 (d, 3H), 3,94 - 3,82 (m, 1H), 3,79 (d, 1H), 1,99 - 1,81 (m, 4H), 1,76 (d,

154/239

1Η), 1,70 - 1,60 (m, 3H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H20F2N3O4: 416,13; encontrado: 416,415.

Exemplo 67

Preparação de Composto 67 (1R, 4S, 12aR)-N-(4-fluoro-2-(trifluorometil)benzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina-

[0349]

Composto 67 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,72 (s, 1H), 10,55 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,36 (dd, 1H),

7,18 (td, 1H), 4,91 (s, 1H), 4,80 (d, 3H), 4,11 (s, 1H), 1,99 - 1,80 (m, 4H), 1,76 (d, 1H), 1,71 - 1,47 (m, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calcu lado para C22H20F4N3O4: 466,13; encontrado: 466,297.

Exemplo 68

Preparação de Composto 68 (1R, 4S, 12aR)-N-(2-cloro-4-fluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,

6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:r,2’-d]pirazina-9-carboxamida

[0350] Composto 68 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (2-cloro-4-fluorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ

155/239

11,68 (s, 1H), 10,52 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,44-7,37 (m, 1H), 7,11 (dd, 1H), 6,93 (td, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,68 (d, 2H), 4,16-4,01 (m, 1H), 3,88 - 3,70 (m, 2H), 2,00 - 1,79 (m, 4H), 1,75 (d, 1H), 1,70 - 1,57 (m, 2H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H20CIFN3O4: 432,10; encontrado: 432,214.

Exemplo 69

Preparação de Composto 69 (1R, 4S, 12aR)-N-(3-cloro-2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3, 4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9carboxamida

[0351] Composto 69 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (3-cloro-2,4-difluorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,71 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,92 (td, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,66 (d, 2H), 4,08 (s, 1H), 3,91 - 3,69 (m, 2H), 2,01 - 1,79 (m, 3H), 1,75 (d, 1H), 1,71 - 1,44 (m, 2H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2iH₁₉CIF₂N₃O4: 450,10; encontrado: 450,27.

Exemplo 70

Preparação de Composto 70 (1R, 4S, 12aR)-N-(2-fluoro-3-metilbenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6, 8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9-carboxamida

156/239 [0352] Composto 70 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (2-fluoro-3-metilfenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,62 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,19 (t, 1H), 7,07 (t, 1H), 6,96 (t, 1H), 4,89 (d, 1H), 4,67 (d, 2H), 4,08 (s, 1H), 3,88 - 3,67 (m, 2H), 2,26 (d, 3H), 1,97 - 1,79 (m, 3H), 1,78 - 1,39 (m, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H₂3FN₃O₄: 412,16; encontrado: 412,26.

Exemplo 71

Preparação de Composto 71 (1R, 4S, 12aR)-N-(3, 6-dicloro-2-fluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3, 4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9-carboxamida

H		0 II
uÇ	D
	o cr
0	OH
71
[0353]	Composto	71 foi preparado de uma maneira similar ao

composto 60 usando (3, 6-dicloro-2-fluorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,62 (s, 1H), 10,47 (t, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,13 (dd, 1H), 4,88 (s, 1H), 4,85 - 4,73 (m, 2H), 4,09 (d, 1H), 3,88 - 3,68 (m, 2H), 1,99 - 1,53 (m, 8H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₁H₁₉CI₂FN₃O₄: 466,07; encontrado: 466,257.

Exemplo 72

Preparação de Composto 72 (1R, 4S, 12aR)-N-(3-clorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8,12,

12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9-carboxamida

157/239

[0354] Composto 72 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (3-clorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,75 (s, 1H), 10,44 (t, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,42 - 7,22 (m, 4H), 4,68 (s, 1H), 4,54 (d, 2H), 4,48 (dd, 1H), 3,97 (t, 1H), 3,81 (dd, 1H), 2,58 (s, 1H), 1,87 - 1,69 (m, 3H), 1,68 - 1,51 (m, 2H), 1,46 (d, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₂iCIN₃O4: 414,11; encontrado: 414,21.

Exemplo 73

Preparação de Composto 73 (1R, 4S, 12aR)-N-(3-cloro-2,6-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,

4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina-9-carboxamida

[0355] Composto 73 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (3-cloro-2,6-difluorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 10,46 (t, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,60 (td, 1H), 7,19 (td, 1H), 4,67 (s, 1H), 4,62 (d, 2H), 4,44 (dd, 1H), 3,95 (t, 1H), 3,78 (dd, 1H), 2,57 (s, 1H), 1,86 - 1,68 (m, 3H), 1,67 - 1,49 (m, 2H), 1,45 (d, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₁H₁₉CIF₂N₃O₄: 450,10; encontrado: 450,16.

Exemplo 74

Preparação de Composto 74 (1R, 4S, 12aR)-N-(2-fluoro-3-(trifluorometil)benzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo158/239

1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

[0356] Composto 74 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (2-fluoro-3-(trifluorometil)fenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,76 (s, 1H), 10,48 (t, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,68 (q, 2H), 7,38 (t, 1H), 4,68 (s, 1H), 4,65 (d, 2H), 4,47 (dd, 1H), 3,96 (t, 1H), 3,80 (dd, 1H), 2,57 (s, 1H), 1,88 - 1,69 (m, 3H), 1,67 - 1,50 (m, 2H), 1,45 (d, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H20F4N3O4: 466,13; encontrado: 466,142.

Exemplo 75

Preparação de Composto 75 (1R, 4S, 12aR)-N-(3-cloro-4-fluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6, 8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina-9-carboxamida

[0357] Composto 75 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (3-cloro-4-fluorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,75 (s, 1H), 10,43 (t, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,51 (dd, 1H), 7,42 - 7,28 (m, 2H), 4,68 (s, 1H), 4,51 (d, 2H), 4,47 (dd, 1H), 3,97 (t, 1H), 3,80 (dd, 1H), 2,58 (s, 1H), 1,86 - 1,68 (m, 3H), 1,68 - 1,52 (m, 2H), 1,46 (d, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH2oCIFN₃0₄: 432,10; encontrado: 432,159.

159/239

Exemplo 76

Preparação de Composto 76 (1R, 4S, 12aR)-N-((3,5-difluoropiridin-2-il)metil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina9-carboxamida

O OH [0358] Composto 76 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando (3,5-difluoropiridin-2-il)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ

10,80 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,33 (d, 1H), 7,20 (td, 1H), 4,90 (s, 1H),

4,82 (s, 2H), 4,28 (d, 1H), 3,92 - 3,75 (m, 2H), 3,48 (s, 2H), 1,98 - 1,80 (m, 3H), 1,77 (d, 1H), 1,71 - 1,58 (m, 2H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C20H-19F2N4O4: 417,13; encontrado: 417,189.

Exemplo 77

Preparação de Composto 77 (1R, 4S, 12aR)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-((R)-1 -(2,4,6-trif I uorofen il )etil )1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina9-carboxamida

OH

77-A

HATU

77-B

TFA

160/239

Etapa 1 [0359] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com 77-A (0,15 g, 0,39 mmol), (/?)-1-(2,4,6-trifluorofenil)etanamina (0,14 g, 0,78 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,25 g, 1,97 mmol) e HATU (0,29 g, 0,79 mmol) em DCM (10 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi concentrada, redissolvida em EtOAc (50 mL), lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH₄CI saturado e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para obter 77-B como um sólido branco. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 538.

Etapa 2 [0360] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com 77-B (0,20 g, 0,37 mmol) em TFA (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A solução foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc-20% de MeOH em EtOAc como eluentes para render o Composto 77. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,67 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 6,61 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 5,60 (dd, J = 8,1, 6,9 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 3,82 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 12,4, 3,4 Hz, 1H), 2,75 - 2,55 (m, 3H), 1,97 - 1,57 (m, 9H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -109,65 - 111,29 (m), -111,76 - -113,09 (m). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 448.

Exemplo 78

Preparação de Composto 78 (2R, 13aR)-8-hidróxi-7,9-dioxo-N-((R)-1 -(2,4,6-trifluorofenil)etil)2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[r,2’:4,5]pirazino[2,1-

b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

161/239

78·Α

Etapa 1 [0361] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com

78-A (0,30 g, 0,94 mmol), (R)-1 -(2,4,6-trifluorofenil) etanamina (0,39 g,

1,87 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,61 g, 4,87 mmol) e

HATU (0,71 g, 1,87 mmol) em DCM (10 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada, redissolvida em EtOAc (50 mL), lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH₄CI saturado e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para obter 78-B como um sólido branco. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺; encontrado: 478.

Etapa 2 [0362] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com

78-B (0,4 g, 0,84 mmol) e brometo de magnésio (0,4 g, 2,2 mmol) em acetonitrila (5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 50 Ό. Após 10 minutos, a mistura de reação foi resfriada para 0 °C e ácido clorídrico a

N (4 mL) foi adicionado. Mais água (~ 5 mL) foi adicionada e o sólido foi filtrado e lavado com água e seca para render composto 78. ¹HRMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,30 (s, 1H), 10,59 (d, J = 8,3 Hz,

1H), 8,21 (s, 1H), 6,60 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 5,59 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 5,37

162/239 (dd, J = 9,4, 4,1 Hz, 1H), 5,31 - 5,09 (m, 1H), 4,64 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 4,20 (dd, J = 12,9, 4,1 Hz, 2H), 3,96 (dd, J = 12,8, 9,4 Hz, 2H), 2,21 1,85 (m, 4H), 1,71 - 1,43 (m, 3H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -110,37 (tt, J = 8,7, 6,1 Hz), -112,19 (t, J = 7,2 Hz). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 464.

Exemplo 79

Preparação de Composto 79 (1R, 4S, 12aR)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2, 4,5-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1 ’,2’-d]pirazina-

HATU

Etapa 1 [0363] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com

79-A (0,12 g, 0,32 mmol), (2, 4,5-trifluorofenil)metanamina (0,10 g,

0,63 mmol), Ν,Ν-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,20 g, 1,58 mmol) e

HATU (0,24 g, 0,63 mmol) em DCM (10 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi con centrada, redissolvida em EtOAc (50 mL), lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH₄CI saturado e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com

163/239 hexano-EtOAc para obter 79-B como um sólido branco. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺; encontrado: 524.

Etapa 2 [0364] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com 79-B (0,15 g, 0,29 mmol) em TFA (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A solução foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc-20% de MeOH em EtOAc como eluentes para render o Composto 79. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,70 (s, 1H), 10,65 - 10,18 (m, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,26 (m, 1H), 6,90 (td, J = 9,7, 6,4 Hz, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,60 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 4,09 (dd, J = 11,4, 2,6 Hz, 1H), 3,96 - 3,66 (m, 2H), 2,68 (s, 1H), 2,15 - 1,43 (m, 6H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ 120,53 - -120,85 (m), -134,68 - -136,79 (m), -142,26 - -144,11 (m). LCMS-ESI* (m/z): [M+H]⁺encontrado: 434.

Exemplo 80

Preparação de Composto 80 (1R, 4S, 12aR)-N-(5-cloro-2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

164/239

Etapa 1 [0365] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com

80-A (0,12 g, 0,32 mmol), (5-cloro-2,4-difluorofenil)metanamina (0,11 g, 0,63 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,20 g, 1,58 mmol) e HATU (0,24 g, 0,63 mmol) em DCM (10 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi concentrada, redissolvida em EtOAc (50 mL), lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH₄CI saturado e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para obter 80-B como um sólido branco. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺; encontrado: 541.

Etapa 2 [0366] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com

80-B (0,14 g, 0,26 mmol) em TFA (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A solução foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc20% de MeOH em EtOAc como eluentes para render o Composto 80. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,40 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,89 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,78 - 4,48 (m, 2H), 4,08 (dd, J = 11,3,2,5 Hz, 1H), 3,95 - 3,63 (m, 2H), 2,68 (s, 1H), 2,22 - 1,51 (m, 7H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -113,37 (q, J = 8,1 Hz), -116,37 (q, J = 8,0 Hz). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺encontrado: 451.

Exemplo 81

Preparação de Composto 81 (1 R,3S, 4S, 12aS)-3-fluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

165/239

PPh,. DIAD THF, r.t.

Hidrazina

H

81-D

1) KOH

Etapa 1 [0367] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com 81-A (1,0 g, 3,7 mmol) em DCM (10 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C. Trifluoreto de dietilaminoenxofre (DAST) (0,58 mL, 4,1 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura foi resfriada de volta para 0 °C. NaHCO₃ saturado (5 mL) foi adicionado gota a gota para resfriar bruscamente a reação. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL), lavada com NaHCO₃ sat., sal166/239 moura, e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 81-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 274.

Etapa 2 [0368] Um frasco de fundo redondo de 100 ml_ foi carregado com

81-B (0,8 g, 3,0 mmol) em THF (10 ml_). A mistura de reação foi agitada a -78 °C. 2,0 M LiBH₄em THF (3,2 ml_, 6,4 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi aquecida e agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 ml_) e tratada vagarosamente com água (evolução de H₂). Após as duas fases serem separadas, a fração aquosa foi extraída com EtOAc e as duas frações orgânicas foram combinadas, lavadas com água, e secas sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 81-C. LCMS-EST (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 246.

Etapa 3 [0369] Um frasco de fundo redondo de 100 ml_ foi carregado com

81-C (0,57 g, 2,3 mmol), trifenilfosfina (1,3 g, 5,1 mmol) e ftalamida (0,55 g, 3,7 mmol) em THF (15 ml_). Em seguida a mistura de reação foi resfriada para 0 °C com agitação. Azodicarboxilato de di-isopropila (DIAD) (1,0 ml_, 5,1 mmol) foi vagarosamente adicionada à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 81D. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 375.

Etapa 4 [0370] A uma solução de 81-D (0,8 g, 2,1 mmol) EtOH (40 ml_) foi adicionado monoidrato de hidrazina (0,6 ml_). A mistura de reação foi aquecida a 70 °C com agitação por 3 horas. Após filtração para remo

167/239 ver o sólido, o filtrado foi concentrado para render 81-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 245.

Etapa 5 [0371] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

81-E (0,49 g, 2,0 mmol) e 81-F (0,7 g, 2,0 mmol) em etanol (7 mL). Bicarbonato de sódio (0,34 g, 4,0 mmol) em água (7 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL) e lavada com água (2 x). As frações orgânicas foram extraídas com EtOAc (1 x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O 81-G bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-EST (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 573.

Etapa 6 [0372] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

81-G (1,1 g, 1,9 mmol) em HCI a 4 N /dioxano (11 mL). Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, 1,0 g intermediário foi obtido. O intermediário e DBU (1,3 g, 8,8 mmol) foram dissolvidos em tolueno (10 mL). A mistura de reação foi aquecida a 110 °C com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 81-H. LCMS-EST (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 413.

Etapa 7 [0373] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

81-H (0,56 g, 1,4 mmol) em THF (5 mL) e MeOH (5 mL). KOH a 1 N (4 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (4 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3 x). Metade do ácido bruto,

168/239

2,4,6-trifluobenzilamina (0,2 g, 1,3 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,41 g, 3,1 mmol) e HATU (0,48 g, 1,25 mmol) foram dissolvidos em DMF (10 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 81-1. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 542.

Etapa 8 [0374] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com 81-1 (0,31 g, 0,58 mmol) em TFA (3 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 81. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,29 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 6,65 (dd, J = 8,7, 7,5 Hz, 2H), 5,05 - 4,75 (m, 2H), 4,65 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,11 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 3,83 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 3,56 (dd, J = 12,3, 3,3 Hz, 1H), 2,77 (s, 1H), 2,25 1,97 (m, 2H), 1,95 (d, J = 11,0 Hz, 2H), 1,77 (d, J = 11,2 Hz, 1H). ¹⁹FRMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -108,98 (t, J = 8,2 Hz), -112,03 (t, J = 7,2 Hz), -168,00. LCMS-ESI⁺ (m/z): encontrado: 452.

Exemplo 82

Preparação de Composto 82 (1S, 3R, 4R,12aR)-3-fluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina9-carboxamida

169/239

THF, r.t.

i hidrazina

NaHCOj

EtOH/HjO

1)KOH

Etapa 1 [0375] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

82-A (0,6 g, 2,1 mmol) em DCM (6 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C. DAST (0,35 mL, 3,0 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura foi resfriada de volta para 0 °C. NaHCO₃ saturado (5 mL) foi adicionado gota a gota para resfriar bruscamente a reação. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL), lavada com NaHCO₃ sat., salmoura, e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 82-B. LCMS-ESI⁺ (m/z):

170/239 [M+H]⁺encontrado: 274.

Etapa 2 [0376] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

82-B (0,4 g, 1,5 mmol) em THF (10 mL). A mistura de reação foi agitada a -78 °C. 2,0 M LiBH₄em THF (1,6 mL, 3,2 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi aquecida e agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL) e adicionado água vagarosamente (H₂ evolution). Após as duas fases foram separadas, a fração aquosa foi extraída com EtOAc e as duas frações orgânicas foram combinadas, lavadas com água e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 82-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 246.

Etapa 3 [0377] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

82-C (0,25 g, 1,0 mmol), trifenilfosfina (0,59 g, 2,2 mmol) e ftalamida (0,24 g, 1,6 mmol) em THF (10 mL). Em seguida a mistura de reação foi resfriada para 0 °C com agitação. DIAD (0,44 mL, 2,2 mmol) foi vagarosamente adicionada à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos EtOAc como eluentes para render 82-D. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 375.

Etapa 4 [0378] A uma solução de 82-D (0,35 g, 0,9 mmol) EtOH (20 mL) foi adicionado monoidrato de hidrazina (0,3 mL). A mistura de reação foi aquecida a 70 °C com agitação por 3 horas. Após filtração para remover o sólido, o filtrado foi concentrado para render 82-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 245.

171/239

Etapa 5 [0379] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

82-E (0,21 g, 0,87 mmol) e 82-F (0,3 g, 0,87 mmol) em etanol (7 mL). Bicarbonato de sódio (0,15 g, 1,7 mmol) em água (7 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL) e lavada com água (2 x). As frações orgânicas foram extraídas com EtOAc, e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O 82-G bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 573.

Etapa 6 [0380] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

82-G (0,49 g, 0,86 mmol) em HCI a 4 N /dioxano (5 mL). Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, 0,4 g intermediário foi obtido. O intermediário e DBU (0,6 g, 4,0 mmol) foram dissolvidos em tolueno (10 mL). A mistura de reação foi aquecida a 110 °C com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 82-H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 413.

Etapa 7 [0381] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

82-H (0,2 g, 0,49 mmol) em THF (5 mL) e MeOH (5 mL). KOH a 1 N (1,5 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (1,5 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3 χ). O ácido bruto,

2,4,6-trifluobenzilamina (0,15 g, 0,95 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,31 g, 2,4 mmol) e HATU (0,36 g, 0,95 mmol) foram dissol172/239 vidos em DCM (10 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 82-I. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 542.

Etapa 8 [0382] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com 82-I (0,22 g, 0,41 mmol) em TFA (3 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 82. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,25 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 6,65 (s, 2H), 5,15 - 4,77 (m, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,32 - 3,41 (m, 2H), 2,78 (s, 1H), 1,86 (dd, J = 144,8, 72,3 Hz, 6H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -108,98 (t, J = 8,2 Hz), 112,03 (t, J = 7,2 Hz), -168,00. LCMS-ESI⁺ (m/z): encontrado: 452. Exemplo 83

Preparação de Composto 83 (1S, 4R,12aS)-3, 3-difluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina9-carboxamida

173/239

βί-J

Bj

Etapa 1 [0383] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

83-A (1,0 g, 3,7 mmol) em DCM (20 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C. Dess-Martin periodinano (1,8 g, 4,2 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 83-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 270. Etapa 2 [0384] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

83-B (0,85 g, 3,2 mmol) em DCM (15 mL). A mistura de reação foi res

174/239 friada para 0 °C. DAST (1,5 mL, 11,3 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi resfriada de volta para 0 °C. NaHCO₃ saturado (5 mL) foi adicionado gota a gota para resfriar bruscamente a reação. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL), lavada com NaHCO₃ sat., salmoura, e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 83-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 292.

Etapa 3 [0385] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

83-C (0,44 g, 1,5 mmol) em THF (6 mL). A mistura de reação foi agitada a -78 °C. 2,0 M LiBH₄em THF (1,6 mL, 3,2 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi aquecida e agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL) e adicionado água vagarosamente (evolução H₂). Após as duas fases foram separadas, a fração aquosa foi extraída com EtOAc e as duas frações orgânicas foram combinadas, lavadas com água, e secas sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 83-D. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 264.

Etapa 4 [0386] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

83-D (0,17 g, 0,65 mmol), trifenilfosfina (0,37 g, 1,4 mmol) e ftalamida (0,15 g, 1,0 mmol) em THF (10 mL). Em seguida a mistura de reação foi resfriada para 0 °C com agitação. DIAD (0,28 mL, 1,4 mmol) foi vagarosamente adicionada à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos

175/239

EtOAc como eluentes para render 83-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 393.

Etapa 5 [0387] A uma solução de 83-E (0,25 g, 0,64 mmol) EtOH (20 mL) foi adicionado monoidrato de hidrazina (0,3 mL). A mistura de reação foi aquecida a 70 °C com agitação por 3 horas. Após filtração para remover o sólido, o filtrado foi concentrado para render 83-F. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 263.

Etapa 6 [0388] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

83-F (0,18 g, 0,69 mmol) e 83-G (0,324g, 0,69 mmol) em etanol (7 mL). Bicarbonato de sódio (0,12 g, 1,4 mmol) em água (7 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL) e lavada com água. As frações orgânicas foram extraídas com EtOAc, e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O 83-H bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-EST (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 591.

Etapa 7 [0389] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

83-H (0,4 g, 0,68 mmol) em HCI a 4 N /dioxano (3,8 mL). Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, 0,35 g intermediário foi obtido. O intermediário e DBU (0,51 g, 3,3 mmol) foram dissolvidos em tolueno (10 mL). A mistura de reação foi aquecida a 110 °C com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 83-I. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 431.

176/239

Etapa 8 [0390] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com 83-I (0,2 g, 0,47 mmol) em THF (5 mL) e MeOH (5 mL). KOH a 1 N (1,4 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (1,4 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3 χ). O ácido bruto,

2,4,6-trifluobenzilamina (0,14 g, 0,91 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,29 g, 2,2 mmol) e HATU (0,35 g, 0,91 mmol) foram dissolvidos em DCM (10 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 83-J. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 560.

Etapa 9 [0391] Um rbf de 50 mL foi carregado com 83-J (0,18 g, 0,32 mmol) em TFA (3 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 83 como um sólido branco. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,29 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 6,65 (dd, J = 8,7, 7,5 Hz, 2H), 4,83 (s, 1H), 4,72 - 4,58 (m, 2H), 4,36 - 4,10 (m, 2H), 4,05 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 2,97 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 2,49 - 2,08 (m, 3H), 2,12 -

1,94 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ - 92,32 (ddd, J = 225,6, 22,5, 9,1 Hz), -107,64 - -109,54 (m), -112,05 (t, J = 7,0 Hz), 114,67 (d, J = 226,7 Hz). LCMS-ESI⁺ (m/z): encontrado: 470.

Exemplo 84

Preparação de Composto 84 (1S, 2R, 4S, 12aR)-7-hidróxi-2-metil-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)177/239

1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a: 1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

•4-A

MG

MH

H«HCO, ttOHKjO

2>Οβυ/ΤοΙ

M4

Etapa 1

178/239 [0392] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

84-A (1,6 g, 5,9 mmol) em DCM (20 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C. Dess-Martin periodinano (4,9 g, 11,7 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 84-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 270. Etapa 2 [0393] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

84-B (1,3 g, 4,8 mmol) em THF (30 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C. Tebbe reagent (0,5 M em tolueno, 19,4 mL, 9,7 mmol) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi resfriada de volta para 0 °C. NaHCO₃ saturada (5 mL) foi adicionado gota a gota para resfriar bruscamente a reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por mais 15 minutos e filtrado através de celite. A torta filtrada foi lavada com DCM (2 x). Os filtrados combinados foram concentrados sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 84-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 268.

Etapa 3 [0394] A uma solução (purgada com N₂) de 84-C (0,9 g, 3,4 mmol) em EtOH (20 mL) foi adicionado Pd/C (0,18 g). A mistura foi agitada sob H2 por 3 horas. A mistura foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado para render 84-D. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 270.

Etapa 4 [0395] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

84-D (0,9 g, 3,3 mmol) em THF (6 mL). A mistura de reação foi agitada a -78 °C. 2,0 M LiBH₄em THF (13,2 mL, 26,4 mmol) foi vagarosamente

179/239 adicionada. Em seguida a mistura de reação foi aquecida e agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Em seguida a mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL) e adicionada água vagarosamente (evoluçãoH₂). Após as duas fases foram separadas, a fração aquosa foi extraída com EtOAc e as duas frações orgânicas foram combinadas, lavadas com água, e secas sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 84-E. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 242.

Etapa 5 [0396] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

84-E (0,4 g, 1,66 mmol), trifenilfosfina (0,96 g, 3,6 mmol) e ftalamida (0,39 g, 2,7 mmol) em THF (15 mL). Em seguida a mistura de reação foi resfriada para 0 °C com agitação. DIAD (0,7 mL, 3,6 mmol) foi vagarosamente adicionada à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos EtOAc como eluentes para render 84-F. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 371.

Etapa 6 [0397] A uma solução de 84-F (0,55 g, 1,5 mmol) EtOH (20 mL) foi adicionado monoidrato de hidrazina (0,3 mL). A mistura de reação foi aquecida a 70 °C com agitação por 3 horas. Após filtração para remover o sólido, o filtrado foi concentrado para render 84-G. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 241.

Etapa 7 [0398] Um frasco de fundo redondo de 100 mL foi carregado com

84-G (0,35 g, 1,4 mmol) e 84-H (0,5g, 1,4 mmol) em etanol (10 mL). Bicarbonato de sódio (0,24 g, 2,8 mmol) em água (10 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à

180/239 temperatura ambiente por durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc (50 ml_) e lavada com água (2 x). As frações orgânicas foram extraídas com EtOAc, e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. Ο 84-I bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 583.

Etapa 8 [0399] Um rbf de 100 ml_ foi carregado com 84-I (0,84 g, 1,4 mmol) em HCI a 4 N /dioxano (8,2 ml_). Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, 0,74 g de intermediário foi obtido. O intermediário e DBU (1,1 g, 7,2 mmol) foram dissolvidos em tolueno (10 ml_). A mistura de reação foi aquecida a 110 °C com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para render 84-J. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 409. Etapa 9 [0400] Um frasco de fundo redondo de 100 ml_ foi carregado com

84-J (0,4 g, 0,98 mmol) em THF (5 ml_) e MeOH (5 mL). KOH a 1 N (3,0 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (3,0 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3 χ). O ácido bruto,

2,4,6-trifluobenzilamina (0,32 g, 1,96 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,63 g, 4,9 mmol) e HATU (0,74 g, 1,9 mmol) foram dissolvidos em DCM (10 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 84-K. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 538.

181/239

Etapa 10 [0401] Um frasco de fundo redondo de 50 mL foi carregado com 84-K (0,5 g, 0,93 mmol) em TFA (6 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 84. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,37 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 6,65 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 4,80 (s, 1H), 4,77-4,52 (m, 3H), 4,08 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 3,88 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 2,47 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 2,35 (s, 1H), 2,16 (ddd, J = 14,3, 11,2, 3,6 Hz, 1H), 1,93 - 1,57 (m, 3H), 1,29 - 1,19 (m, 1H), 1,17 (d, J = 7,0 Hz, 3H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -109,24,-111,98. LCMSESI⁺ (m/z): encontrado: 448.

Exemplo 85 Preparação de Composto 85 (6aS, 7R, 11S)-1-hidróxi-2,13-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)-6₎ 6a, 7, 8, 9, 10, 11, 13-octa-hidro-2H-7,11-metanopirido[1’,2’:4,5]pirazino[1,2a]azepina-3-carboxamida

HO

85-A

COOEt

COOEt

COOEt

HO'

85-B

85-C

COOEt

COOEt

HO'

PhOSCO'

Boc

182/239

Etapa 1 [0402] Uma solução de 85-A (1100 mg, 3,855 mmol) em DMSO (6 mL) e água (0,75 mL) foi agitada à temperatura ambiente como Niodosuccinmida (885 mg, 3,934 mmol) foi adicionado. Após 2 h, mais N-iodosuccinmida (88 mg, 0,391 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 1,5 h. O marrom escuro para a mistura de reação foi diluído com EtOAc, e lavado com uma mistura de 10 % de solução de Na₂S₂O₃ aq. e solução de NaHCO₃ aq. (—1:4 de mistura) e em seguida com água (com alguma salmoura). Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para obter 85-B. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,51 7,44 (m, 2H), 7,33 - 7,17 (m, 3H), 4,22 - 4,05 (m, 2H), 4,02 - 3,86 (m, 2H), 3,77 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 3,54 - 3,44 (m, 1H), 3,27 (t, J = 4,5 Hz, 1H), 2,75 - 2,66 (m, 1H), 2,30 (dddd, J = 14,8, 13,1, 7,2,5,8 Hz, 1H), 2,14 (dddd, J = 14,8, 13,0, 6,1,2,1 Hz, 1H), 1,97 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 1,58 - 1,46 (m, 1H), 1,45 - 1,34 (m, 4H), 1,24 (t, J = 7,1 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci8H25INO₃: 430,1; encontrado: 430,0.

Etapa 2 [0403] Uma solução de 85-B (993 mg, 2,313 mmol), AIBN (305

183/239 mg, 1,857 mmol), e hidrido tributilina (1392 mg, 4,799 mmol) em tolueno (15 mL) foi agitada a 100 O. Após 2 h, a mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com EtOAc, e lavada com água e salmoura. Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos EtOAc como eluentes para obter 85-C. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 7,57 - 7,49 (m, 2H), 7,32 - 7,23 (m, 2H), 7,23 - 7,15 (m, 1H), 4,24 - 4,02 (m, 2H), 3,97 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,48 (t, J =

4,6 Hz, 1H), 3,19 - 3,04 (m, 1H), 2,58 (p, J = 4,0 Hz, 1H), 2,30 (dddd, J = 14,7, 13,1, 7,0, 4,5 Hz, 1H), 1,98 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 1,64 (tdd, J =

13,3, 6,2, 2,6 Hz, 1H), 1,49 - 1,33 (m, 3H), 1,37 (d, J = 6,7 Hz, 3H),

1,32 - 1,26 (m, 1H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₈H₂₆NO₃: 304,2; encontrado: 304,1.

Etapa 3 [0404] Uma mistura de 85-C (725 mg, 2,39 mmol) e 20% de Pd(OH)₂/C (351 mg) em EtOH (25 mL) e HCl a 4 N em dioxano (0,9 mL) foi agitada sob atmosfera de H₂. Após 2 h, a mistura de reação foi filtrada, e o filtrado foi concentrado. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci0H18NO3: 200,13; encontrado: 200,1. Após o resíduo foi coevaporada com tolueno (x 2), o resíduo e Boc2O (720 mg, 3,299 mmol) em THF (15 mL) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) (1,2 mL, 6,889 mmol) foi adicionado. Após 1 h, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com EtOAc (x 2). Após os extratos orgânicos serem lavados com água, os extratos combinados foram secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo foi purificado por flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para obter 85D que pareceu ser uma mistura de rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 4,42 - 3,97 (m, 5H), 2,62 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 2,45 - 2,26 (m, 1H), 2,25 - 2,15 (m, 1H), 1,80 (td, J = 13,7, 6,7 Hz, 1H), 1,66 (dd, J =

184/239

12,3, 6,6 Hz, 2H), 1,55 - 1,70 (m, 2H), 1,47 (s, 2H), 1,42 (s, 7H), 1,28 (dt, J = 9,5,7,1 Hz, 3H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C15H26NO5: 300,2; encontrado: 299,7.

Etapa 4 [0405] A uma solução de 85-D (568 mg, 1,897 mmol) e piridina (0,25 mL, 3,091 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado clorotionoformiato de fenila (0,3 mL, 2,169 mmol) a 0 °C, que produziu material insolúvel rapidamente. Após -30 min a 0 °C, maispiridina (0,3 mL, 3,709 mmol) e clorotionoformiato de fenila (0,3 mL, 2,169 mmol) foram adicionados. Após 1,5 h a 0 °C e 1 hà temperatura ambiente, a mistura foi concentrada, e o resíduo foi dissolvido em EtOAc e água. Após separação das duas camadas, a fração orgânica foi lavada com ~0. HCI a 1 N, NaHCO₃ aquoso saturado, e salmoura . Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, as frações orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc/hexanos como eluentes para render 85-E. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,47 - 7,37 (m, 2H), 7,30 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 8,0, 4,0 Hz, 2H), 5,54 (dt, J = 9,0, 4,9 Hz, 1H), 4,50 (dt, J = 9,8, 5,3 Hz, 1H), 4,35 (dd, J = 21,4,5,0 Hz, 1H), 4,30 - 4,14 (m, 2H), 2,71 (s, 1H), 2,54 (s, 1H), 2,14 - 2,00 (m, 1H), 1,82 (m, 3H), 1,54 (m, 1H), 1,48 (s, 4,5H), 1,45 (s, 4,5H), 1,30 (dt, J = 9,4, 7,1 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H₃₀NO₆S: 436,2; encontrado: 435,8.

Etapa 5 [0406] Uma mistura de 85-E (602 mg, 1,382 mmol), AIBN (182 mg, 1,108 mmol), e hidrido tributilina (608 mg, 2,096 mmol) em tolueno (8 mL) foi agitada a 100 °C. Após 1 h, a mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em EtOAc antes de lavar com água e salmoura. Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, as frações orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄) e concentradas.

185/239

O resíduo foi purificado com flash cromatografia usando EtOAc/hexanos como eluentes para dar 85-F que pareceu ser uma mistura de rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,37 - 4,06 (m, 4H), 2,69

- 2,53 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,97 (m, 0,65H), 1,93 - 1,80 (m, 1,35H),

1,54 (s, 5H), 1,46 (s, 3,15H), 1,42 (s, 5,85H), 1,27 (m, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M-C4H8+H]⁺ calculado para CnH18NO₄: 228,1; encontrado:

227,9.

Etapa 6 [0407] 85-F (420 mg) foi repurificado e o 85-F purificado em THF (3 mL) foi agitada a 0 °C como 2,0 M de LiBH₄ em THF (1,5 mL) foi adicionado. Após 5 min, a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 17 h e mais 2,0 M de LiBH₄ em THF (1,5 mL) foi adicionado à temperatura ambiente. Após 23 h à temperatura ambiente, mais 2,0 M LiBH₄ em THF (3 mL) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada por ~72 h. Após a mistura de reação ser agitada a 0 °C como água foi vagarosamente adicionada e adicionalmente diluída com água, o produto foi extraído com EtOAc (x 2). Os extratos foram lavados com água, combinados, secos (Na₂SO₄), e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexano - EtOAc como eluentes para dar 85-G. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,12 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 12,0, 7,9 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 3,73 (dd, J = 11,9, 1,4 Hz, 1H), 2,28 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 1,90- 1,73 (m, 2H), 1,68

- 1,45 (m, 6H), 1,47 (s, 9H), 1,43 - 1,33 (m, 1H). LCMS-ESP (m/z): [MC₄H₈+H]⁺calculado para C₉H₁₆NO₃: 186,1; encontrado: 186,0.

Etapa 7 [0408] Uma solução de 85-G (198 mg, 0,820 mmol), ftalamida (200 mg, 1,359 mmol), e PPh₃ (488 mg, 1,861 mmol) em THF (10 mL) foi agitada a banho a 0 °C como DIAD (0,36 mL, 1,828 mmol) foi adicionado. Após 30 min a 0 °C, a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 17 h. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi purifi

186/239 cado por cromatografia flash usando hexano-EtOAc como eluentes para 85-H que pareceu ser uma mistura de rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 7,82 (dd, J = 5,4, 3,1 Hz, 2H), 7,69 (dd, J = 5,4, 3,1 Hz, 2H), 4,46 (s, 1H), 4,19 (m, 2H), 3,95 (s, 1H), 2,31 - 2,14 (m, 1H), 2,05 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 1,84 (m, 2H), 1,79 - 1,70 (m, 1H), 1,66 (m, 1H),

1,61 - 1,30 (m, 12H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para C₂₁H₂₇N₂O₄: 371,2; encontrado: 370,8.

Etapa 8 [0409] A uma solução de 85-H (270 mg, 0,729 mmol) em EtOH (12 mL) foi adicionado hidrato de hidrazina (0,145 mL, 3,083 mmol) à temperatura ambiente e a solução resultante foi agitada a 70 °C. Após 1,5 h, a mistura foi resfriada para 0 °C e diluído com éter (30 mL) antes da agitação por 1 h a 0 °C. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi dissolvido em CH₂CI₂ e filtrado para remover algum material insolúvel. O filtrado resultante foi concentrado. O resíduo, combinado com 85-I (257 mg, 0,742 mmol), e NaHCO₃(131 mg, 1,559 mmol) em água (3 mL) e EtOH (3 mL) foi agitado à temperatura ambiente. Após 1 h, a mistura foi diluída com água e extraída com EtOAc (x 2). Após os extratos serem lavados com água, os extratos orgânicos foram combinados, secos (Na₂SO₄), e concentrados. A uma solução de o resíduo em CH₂CI₂ (2 mL) foi adicionado HCI a 4 N em dioxano (6 mL). Após 1,5 h à temperatura ambiente, a solução foi concentrada e coevaporada com tolueno. Uma mistura do resíduo e DBU (0,6 mL, 4,012 mmol) em tolueno (5 mL) foi agitada em banho a 100 °C. Após 1 h, mais DBU (0,3 mL, 2,006 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada mais 1 h a 100 °C. Após a mistura ser concentrada, o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc - 20% de MeOH/EtOAc como eluentes para dar 85-J. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 8,08 (s, 1H), 7,71 - 7,62 (m, 2H), 7,36 - 7,29 (m, 2H), 7,29 - 7,23 (m, 1H), 5,44 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 5,10 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,44 - 4,28 (m,

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3Η), 4,23 (t, J = 13,0 Hz, 1H), 3,99 (ddt, J = 10,2, 6,3, 3,6 Hz, 2H), 2,44 - 2,36 (m, 1H), 2,29 (dt, J = 11,6, 5,3 Hz, 1H), 1,84 (dt, J = 10,8, 5,3 Hz, 2H), 1,77 - 1,61 (m, 3H), 1,57 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 1,48 (ddd, J =

20,9, 12,3, 5,5 Hz, 1H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para C24H27N2O5: 423,2; encontrado: 423,3.

Etapa 9 [0410] Uma mistura de 85-J (214 mg, 0,507 mmol) em THF (4 mL) e MeOH (4 mL) foi agitada à temperatura ambiente como KOH a 1 N (1,1 mL) foi adicionado. Após 30 min, a mistura de reação foi concentrada a ~1 mL, acidificada com HCI a 1 N (—1,2 mL), e diluída com salmoura antes de extração com CH₂CI₂ (20 mL x 2). Os extratos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados para obter o ácido bruto. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para C₂₂H₂3N₂O₅: 395,2; encontrado: 395,3.

[0411] Uma mistura de o ácido bruto (199 mg, 0,505 mmol), 2,4,6trifluorobenzil amina (130 mg, 0,807 mmol), e HATU (304 mg, 0,800 mmol) em CH₂CI₂ (6 mL) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,62 mL, 3,559 mmol) foi adicionado. Após 30 min, a mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com NH₄CI aquoso saturado (x 2), NaHCO₃ aquoso saturado (x 2), e salmoura. Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, duas frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄) e concentradas. O resíduo foi purificado por flash usando EtOAc-20% de MeOH/EA como eluentes para obter 85-K. ¹HRMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,40 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,68 -

7,54 (m, 2H), 7,33 (ddd, J = 7,7, 6,3, 1,5 Hz, 2H), 7,30 - 7,26 (m, 1H),

6,74 - 6,60 (m, 2H), 5,37 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,76 - 4,57 (m, 2H), 4,46 (dd, J = 6,0, 4,3 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 12,4, 3,6 Hz, 1H), 3,91 (dt, J = 12,4, 3,9 Hz, 1H), 2,52 - 2,44 (m, 1H), 2,32 (dd, J = 11,8, 6,2 Hz, 1H), 1,92 (dt, J = 10,7,

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5,4 Hz, 1 Η), 1,83 - 1,70 (m, 3H), 1,67 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 1,52 (dddt, J = 25,5, 17,0, 11,8, 5,3 Hz, 2H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, CDCI3) δ -109,15 (dq, J = 15,0, 7,5,7,1 Hz, 1F), -111,85 (t, J = 6,8 Hz, 2F). LCMS-ESI* (m/z): [M +H]⁺calculado para C29H₂7F₃N₃O₄: 538,2; encontrado: 538,3. Etapa 10 [0412] 85-K (187 mg, 0,348 mmol) foi dissolvido em trifluoroácido acético (3 mL) à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente. Após 1 h, a solução foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em CH₂CI₂. Após a solução foi lavada com 0. HCI a 1 N, a fração aquosa foi extraída com CH₂CI₂ (x 2). As frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando CH₂CI₂-20% de MeOH em CH₂CI₂ como eluentes para obter 150 mg (96%) do composto 85. Composto 85 foi ainda purificado por recristalização a partir de metanol (10 mL) para dar o composto 85. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 12,09 (s, 1H), 10,39 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 6,74 - 6,48 (m, 2H), 4,64 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,59 (dd, J = 6,1,4,4 Hz, 1H), 4,36 - 4,18 (m, 2H), 4,12 (dt, J = 12,4, 4,1 Hz, 1H), 2,68-2,47 (m, 1H), 2,25-2,10 (m, 1H), 2,10-1,98 (m, 1H), 1,981,66 (m, 4H), 1,66 - 1,48 (m, 2H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, CDCI3) δ 109,23 (ddd, J = 15,1, 8,6, 6,0 Hz, 1F), -112,02 (t, J = 6,9 Hz, 2F). LCMS-ESI* (m/z): [M +H]⁺calculado para C₂₂H₂₁F₃N₃O₄: 448,2; encontrado: 448,3.

Exemplo 86

Preparação de Composto 86 (1 R,3S, 4R, 12aS)-7-hidróxi-3-metil-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina9-carboxamida o OH

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1ΪΗ,, Pd.^fC. HCI

2) BoejO

CQOMe

35-B

COOMe

86-C

NIS .

DMSO.HjO

COOMe

H,., Pa/c

BlhSnH AlBN

86-G

1) KOH

2) 2,4,6-F^BnHH_Zl HATU.DIEA

Etapa 1 [0413] Uma solução de 86-A (10,160 g, 39,48 mmol) em DMSO (52 mL) e água (6,5 mL) foi agitada à temperatura ambiente como Niodosuccinmida (8,888 g, 39,50 mmol) foi adicionado. Após 30 min, a mistura de reação marrom escura foi diluída com EtOAc, e lavada com solução de NaHCO₃ aquoso saturado, 10 % de solução aquosa de Na₂S₂O₃, e salmoura. Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para obter 86-B como um sólido branco. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 7,33 - 7,19 (m, 5H), 4,25 - 4,12 (m, 1H), 3,79 (q, J = 1,6 Hz, 1H), 3,72 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 3,51 (s, 1H),

3,47 (s, 3H), 3,31 (dd, J = 3,9, 1,6 Hz, 1H), 2,76 - 2,69 (m, 1H), 2,13 (ddd, J = 14,3, 7,8, 1,7 Hz, 1H), 2,08 - 1,97 (m, 1H), 1,91 (dtd, J = 14,1,

190/239

4,0, 1,5 Hz, 1H), 1,42 (d, J = 6,5 Hz, 3H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₆H₂iINO₃: 402,1; encontrado: 402,0.

Etapa 2 [0414] Uma solução de 86-B (12,468 g, 31,07 mmol), azobisisobutironitrila (AIBN) (4,082 g, 24,86 mmol), e hidreto de tributiltina (18,047 g, 62,22 mmol) em tolueno (150 mL) foi agitada a 100 °C. Após 30 min, a mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com EtOAc, e lavada com água e salmoura. Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash duas vezes usando hexanos - EtOAc como eluentes para obter 86-C. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,31 -

7,24 (m, 2H), 7,24 - 7,17 (m, 1H), 4,11 (s, 1H), 3,72 (s, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,33 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 3,27 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 2,65 - 2,51 (m, 1H), 1,92 (ddd, J = 13,6, 6,8, 2,4 Hz, 1H), 1,69 - 1,50 (m, 2H), 1,47 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 1,41 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,21 - 1,07 (m, 1H). LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para Ci₆H₂₂NO₃: 276,2; encontrado:

276,1.

Etapa 3 [0415] Uma mistura de 86-C (4,187 g, 15,21 mmol) e 20% Pd(OH)₂/C (1,022 g) em EtOH (100 mL) e HCI a 4 N em dioxano (5,7 mL) foi agitada sob atmosfera de H₂. Após 1,5 h, a mistura de reação foi filtrada, e o filtrado foi concentrado. Após o resíduo foi coevaporada com tolueno, o resíduo foi usado para a próxima etapa. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₈H₁₄NO₃: 172,1; encontrado: 172,1.

[0416] Após o resíduo foi coevaporada com tolueno, o resíduo e Boc₂O (5,712 g, 26,17 mmol) em THF (45 mL) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (8 mL, 45,93 mmol) foi adicionado. Após 30 min, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com EtOAc (x 2). Após os extratos orgânicos serem

191/239 lavados com água, os extratos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc como eluentes para obter 86-D. ¹H RMN espectro sugere uma mistura de rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,20 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,19 - 4,10 (m, 2H), 4,08 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 2,74 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 1,97 (ddd, J = 13,6, 6,9, 2,8 Hz, 1H),

1,88 - 1,78 (m, 1H), 1,79 - 1,50 (m, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,38 (s, 6H), 1,31 (d, J = 13,3 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₃H₂₂NO₅: 272,2; encontrado: 271,6.

Etapa 4 [0417] Uma solução de 86-D (1659 mg, 6,115 mmol) em CH₂CI₂ (35 mL) foi agitada a banho a 0 °C como Dess-Martin periodinana (5,183 g, 12,22 mmol) foi adicionado em porções. Após 5 min, a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Após 2 h, a mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo, arrefecida com água, e filtrado. O filtrado foi lavado com NaHCO₃ saturado, seco (Na₂SO₄), e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos EtOAc como eluentes para dar 86-E. ¹H RMN espectro sugere dois Rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,43 (d, J = 3,8 Hz, 0,5H),

4,39 (s, 1H), 4,26 (s, 0,5H), 3,75 (s, 3H), 3,10 (s, 1H), 2,24 (d, J = 4,5 Hz, 0,5H), 2,19 (d, J = 4,4 Hz, 0,5H), 2,12 (d, J = 4,4 Hz, 0,5H), 2,07 (d, J = 4,2 Hz, 0,5H), 2,01 (dd, J = 4,5, 2,2 Hz, 0,5H), 1,98 (dt, J = 4,3,

1,9 Hz, 0,5H), 1,80 (s, 0,5H), 1,77 (s, 0,5H), 1,46 (s, 4,5H), 1,40 (d, J =

2,8 Hz, 4,5H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M-C4H8+H]⁺ calculado para C9H₁₂NO₅: 214,1; encontrado: 213,8.

Etapa 5 [0418] Uma solução de 86-E (528 mg, 1,961 mmol) em THF (12 mL) foi agitada a 0 °C as 0,5 M de solução de reagente de Tebbe em tolueno (7,9 mL, 3,95 mmol) foi adicionado gota a gota. Após adição, a solução marrom foi permitida aquecer à temperatura ambiente vagara

192/239 samente e foi agitada à temperatura ambiente por 2,5 h. A mistura de reação foi agitada a banho a 0 °C como a reação foi arrefecida cuidadosamente pela adição de solução de NaHCO₃ aquoso saturado. Após a mistura ser diluída com CH₂CI₂ e agitada à temperatura ambiente por 15 minutos, a mistura resultante foi filtrado através de almofada de celite e a torata do filtro foi lavada com CH₂CI₂. Após as duas frações no filtrado serem separadas, a fração aq. foi extraída com CH₂CI₂, e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos EtOAc como eluentes para dar 86-F. ¹H RMN espectro sugere dois Rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 5,13 (s, 0,6H), 5,04 (s, 0,4H), 4,82 - 4,71 (m, 1H), 4,55 (s, 0,6H), 4,43 (s, 0,4H), 4,29 (d, J = 3,7 Hz, 0,4H), 4,24 (d, J = 3,7 Hz, 0,6H), 3,71 (s, 3H), 2,84 (s, 1H), 2,14 (m, 2H), 1,75 (s, 0,6H), 1,74 - 1,70 (s, 0,4H), 1,55 (m, 1H), 1,45 (s, 3,6H),

1.37 (s, 5,4H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para Ci₄H₂₂NO₄: 268,2; encontrado: 267,6.

Etapa 6 [0419] Uma mistura de 86-F (333 mg, 1,246 mmol) e 20% Pd(OH)₂/C (53 mg) em EtOH (5 mL) foi agitada sob atmosfera de H₂. Após 30 min, a mistura foi filtrado e o filtrado foi concentrado para dar 86-G. ¹H RMN spectrum suggests dois Rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,20 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,71 (two s, 3H), 2,68 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 1,80 - 1,63 (m, 2H), 1,63 - 1,51 (m, 1H), 1,44 (s, 4H),

1.38 (s, 5H), 1,13 (m, 3H), 0,92 (m, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺calculado para C₁₄H₂₄NO₄: 270,2; encontrado: 269,7.

Etapa 7 [0420] Uma solução de 86-G (336 mg, 1,482 mmol) em THF (5 mL) foi agitada a 0 °C as 2,0 M LiBH₄ em THF (1,5 mL) foi adicionado. Após 5 min, a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Após 2 h, mais 2,0 M LiBH₄ em THF (1,5 mL) foi adicionado. Após 21 h à tempe

193/239 ratura ambiente, mais2,0 M LiBH₄ em THF (3 mL) foi adicionado. Após 3 h à temperatura ambiente, a solução foi aquecida at 35 °C for 18 h. A mistura de reação foi resfriada para 0 °C e arrefecida cuidadosamente com água. Após a mistura ser extraída com EtOAc (x 2), As duas frações orgânicas foram lavadas com água, combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexanos - EtOAc para dar 86-H. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 4,95 - 4,09 (br, 1H), 4,05 (s, 1H), 3,82 (dd, J = 11,5,7,7 Hz, 1H), 3,76 - 3,69 (m, 1H), 3,66 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 2,45 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 2,03 (dqdd, J = 11,4, 7,0, 4,5, 2,6 Hz, 1H), 1,77 - 1,57 (m, 2H),

1,48 (dd, J = 10,1, 1,8 Hz, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,00 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,93 (ddd, J = 13,2, 4,7, 2,6 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺calculado para Ci3H₂₄NO₃: 242,2; encontrado: 241,7.

Etapa 8 [0421] Uma solução de 86-H (218 mg, 0,903 mmol), ftalamida (218 mg, 1,482 mmol), e PPh₃ (535 mg, 2,040 mmol) em THF (10 mL) foi agitada a banho a 0 °C como DIAD (0,40 mL, 2,032 mmol) foi adicionado. Após 10 min a 0 °C, a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 19 h. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando hexano-EtOAc como eluentes para dar 86-I. ¹H RMN sugere dois Rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,82 (dt, J = 7,3, 3,6 Hz, 2H), 7,70 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 4,53 4,26 (m, 1H), 4,26 - 3,89 (m, 2H), 3,89 - 3,65 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 2,04 (m, 1H), 1,82 - 1,65 (m, 2H), 1,66 - 1,43 (m, 7H), 1,38 (s, 4H), 1,19 - 1,01 (m, 3H). LCMS-ESP (m/z): [M +H]⁺ calculado para C₂iH₂₇N₂O₄: 371,2; encontrado: 370,8.

Etapa 9 [0422] A uma solução de 86-I (319 mg, 0,861 mmol) em EtOH (12 mL) foi adicionado hidrato de hidrazina (0,17 mL, 3,494 mmol) à temperatura ambiente e a solução resultante foi agitada em um banho a

194/239 °C. Após 1,5 h, a mistura foi resfriada para 0 °C e diluído com éter (25 mL) antes da agitação por 1 h a 0 °C. A mistura foi filtrado e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi dissolvido em CH₂CI₂ e filtrado para remover algum material insolúvel. O filtrado resultante foi concentrado para dar crude amina. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para Ci3H₂₅N₂O₂: 241,2; encontrado: 240,9.

[0423] Após a amina bruta ser coevaporada com tolueno, uma mistura da amina bruta, 85-I (300 mg, 0,866 mmol), e NaHCO₃ (150 mg, 1,845 mmol) em água (3 mL) e EtOH (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente. Após 2 h, a mistura foi diluída com água e extraída com EtOAc (x 2). Após os extratos foram lavados com água, os extratos orgânicos foram combinados, secas (Na₂SO₄), e concentrados. A uma solução de o resíduo em CH₂CI₂ (2 mL) foi adicionado HCI a 4 N em dioxano (6 mL). Após 1,5 h à temperatura ambiente, a solução foi concentrada e coevaporada com tolueno. Uma mistura do resíduo e DBU (0,65 mL, 4,347 mmol) em tolueno (6 mL) foi agitada a 100 °C. Após 1 h, mais DBU (0,65 mL, 4,347 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 100 °C. Mais DBU (0,65 mL, 4,347 mmol) foi adicionado após 1 h e a mistura foi agitada mais 2,5 h a 100 °C. A mistura foi diluída com CH₂CI₂ e lavada com água contendo 3 mL de HCI a 1 N. A fração orgânica foi seca (Na₂SO₄) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc-20% de MeOH/EtOAc como eluentes para dar 86-J. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 8,09 (s, 1H), 7,70 -

7,62 (m, 2H), 7,37 - 7,27 (m, 3H), 5,48 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,16 (d, J =

9,9 Hz, 1H), 4,53 (s, 1H), 4,38 (m, 2H), 4,11 (m, 1H), 3,97 (dd, J = 12,2, 3,0 Hz, 1H), 3,88 (dt, J = 12,2, 3,0 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 2,28 (qd, J = 7,2, 3,1 Hz, 1H), 2,00 - 1,88 (m, 1H), 1,80 - 1,56 (m, 2H), 1,39 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,04 (dd, J = 5,0,

2,5 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para C₂₄H₂₇N₂O₅: 423,2; encontrado: 423,2.

195/239

Etapa 10 [0424] Uma mistura de 86-J (83 mg, 0,196 mmol) em THF (2 mL) e EtOH (2 mL) foi agitada à temperatura ambiente como KOH a 1 N (0,4 mL) foi adicionado. Após 30 min, a mistura de reação foi diluída com água e lavada com CH₂CI₂. Após a fração aquosa foi acidificada com HCl a 1 N 0,45 mL), o produto foi extraído com CH₂CI₂ (x 2). Os extratos combinados foram secos (Na₂SO₄) e concentrados para obter o ácido bruto. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para C₂₂H₂₃N₂O₅: 395,2; encontrado: 395,2.

[0425] Uma mistura de o ácido bruto (69 mg, 0,175 mmol), 2,4,6trifluorobenzil amina (42 mg, 0,261 mmol), e HATU (106 mg, 0,279 mmol) em CH₂CI₂ (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente como N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,25 mL, 1,435 mmol) foi adicionado. Após 30 min, a mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavada com NH₄CI aquoso saturado (x 2), NaHCO₃ aquoso saturado (x 2), e salmoura. Após as frações aquosas serem extraídas com EtOAc, duas frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄) e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando EtOAc-20% de MeOH/EtOAc como eluentes para obter 86-K. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 10,40 (t, J = 5,7 Hz, 1H),

8,40 (s, 1H), 7,66 - 7,51 (m, 2H), 7,36 - 7,29 (m, 2H), 7,29 - 7,23 (m, 1H), 6,71 - 6,61 (m, 2H), 5,36 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,18 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,73 - 4,58 (m, 2H), 4,53 (s, 1H), 4,22 - 4,11 (m, 1H), 4,03 (dd, J =

12,4, 3,1 Hz, 1H), 3,81 (dt, J = 12,3, 3,1 Hz, 1H), 2,68 - 2,59 (m, 1H), 2,29 (dddd, J = 11,4, 7,1, 4,7, 2,4 Hz, 1H), 1,94 (ddd, J = 13,5, 11,2,

4,6 Hz, 1H), 1,88 - 1,67 (m, 2H), 1,06 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,03-1,09 (m, 1H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, CDCI3) δ -109,14 (ddd, J = 15,2, 8,7, 6,2 Hz, 1F), -111,86 (t, J = 7,0 Hz, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺ calculado para C29H₂₇F₃N₃O₄: 538,2; encontrado: 538,1.

196/239

Etapa 11 [0426] 86-K (61 mg, 0,113 mmol) foi dissolvido em trifluoroácido acético (2 mL) e agitada à temperatura ambiente. Após 1 h, a solução foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em CH₂CI₂. Após a solução foi lavada com O.HCI a 1 N, a fração aquosa foi extraída com CH₂CI₂ (x 2). As frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando CH₂CI₂-20% de MeOH em CH₂CI₂ como eluentes para obter composto 86. ¹H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ 12,02 (s, 1H), 10,40 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,35 (s, 1H), 6,63 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 4,62 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,59 (s, 1H), 4,22 (dd, J = 12,2, 3,5 Hz, 1H), 4,13 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 4,05 (dt, J = 12,0, 3,1 Hz, 1H), 2,77 - 2,70 (m, 1H), 2,31 m, 1H), 2,09 - 1,93 (m, 1H), 1,93 - 1,81 (m, 2H), 1,10 (ddd, J = 13,9, 5,0, 2,1 Hz, 1H), 1,02 (d, J = 6,9 Hz, 3H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, CDCI3) δ -109,22 (ddd, J = 15,1, 8,7, 6,1 Hz, 1F), -112,05 (t, J = 6,9 Hz, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M +H]⁺calculado para C₂₂H₂₁F₃N₃O₄: 448,2; encontrado: 448,3.

Exemplo 87

Preparação de c/s-5-aminotetra-hidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1 [0427]

Uma solução de benzila (5-oxotetra-hidro-2H-piran-3il)carbamate (740 mg, 3,0 mmol) e hepahidrato de cloreto de cério(lll) (1,12 g, 3,0 mmol) em 20 mL metanol foi resfriada a 0 Ό e boroidreto de sódio (120 mg, 3,2 mmol) foi em seguida adicionada porção a porção. A mistura de reação foi permitida agitar a 0 °C por 45 minutos e em seguida arrefecida pela adição vagarosa de 1 mL acetona seguido por 3 horas agitando à temperatura ambiente. A mistura de reação foi particionada entre água e diclorometano e a fase aquosa extraída em diclorometano seguido por 2-butanol. As fases orgânicas combinadas

197/239 foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas, e o resíduo purificado por cromatografia flash (0-100% de EtOAc/hexanos) para render o ((3R,5S)-5-hidróxitetra-hidro-2H-piran-3-il)carbamato de c/s-benzila desejado. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,39 - 7,26 (m, 5H), 6,06 (br s, 1H), 5,07 (s, 2H), 3,86 - 3,70 (m, 2H), 3,69 - 3,47 (m, 4H), 2,00 - 1,89 (m, 1H), 1,76 (d, J = 13,5 Hz, 1H). O transisômero não desejado foi também isolado.

Etapa 2 [0428] A uma solução de ((3R, 5S)-5-hidróxitetra-hidro-2H-piran-3il)carbamato de c/s-benzila (290 mg, 1,16 mmol) em 5 mL 1:1 DCM:EtOH foi adicionado 10% em peso de Pd/C (255 mg). Esta mistura foi agitada sob hidrogênio em balão de pressão por 18 horas e paládio removido por filtração através de celite com lavagem de etanol. Da concentração do filtrado, o c/s-5-aminotetra-hidro-2H-piran-3-ol foi fornecido e realizado como bruto.

Exemplo 88

Preparação de Composto 88 '(2R, 5S, 13aR)-N-(3-cloro-2-fluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo-2,3,4,5,7, 9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0429] Composto 88 foi preparado de uma maneira similar ao composto 15 usando (3-cloro-2-fluorofenil)metanamina no lugar de (4fluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,43 (br s, 1H), 8,34 (br s, 1H), 7,32 - 7,24 (m, 2H), 7,02 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,36 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,70 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 4,24 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,00 (dd, J = 12,7,9,5 Hz, 1H), 2,18 - 1,96 (m, 4H), 1,96 - 1,83 (m, 1H), 1,60 (dt, J = 12,4, 3,1 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z):

198/239 [M+H]⁺ calculado para C2iH₁₉CIFN₃O₅: 448,11; encontrado: 448,2.

Exemplo 89

Preparação de Composto 89 (2R, 5S, 13aR)-N-(2,5-difluorobenzil)-8-hidróxi-7,9-dioxo2,3,4,5,7,9,13,13a-octa-hidro-2,5-metanopirido[T,2’:4,5]pirazino[2,1b] [1,3]oxazepina-10-carboxamida

[0430] Composto 89 foi preparado de uma maneira similar ao composto 15 usando (2,5-difluorofenil)metanamina no lugar de (4fluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,32 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,31 (br s, 1H), 7,15 - 6,89 (m, 2H), 6,86 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,40 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,24 (s, 1H), 4,67 - 4,51 (m, 3H), 4,35 4,28 (m, 1H), 3,99 - 3,90 (m, 1H), 2,16 - 1,85 (m, 5H), 1,60 - 1,50 (m, 1H). LCMS-ESF (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₁H₁₉F₂N₃O₅: 432,14;

encontrado: 432,2.

Exemplo 90

Preparação de Composto 90 (1R, 4S, 12aR)-N-(3-cloro-2-fluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina9-carboxamida

o OH [0431] Composto 90 foi preparado de uma maneira similar ao composto 41 usando (3-cloro-2-fluorofenil)metanamina no lugar de

199/239 (2,4,6-trifluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 9,22 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 7,39 - 7,28 (m, 2H), 7,06 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,70 - 4,56 (m, 3H), 4,06 - 3,83 (m, 2H), 3,04 - 2,88 (m, 1H), 2,77 (s, 1H), 1,97- 1,58 (m, 6H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2iH₁₉CIFN₃O4: 432,11; encontrado: 432,2.

Exemplo 91

Preparação de Composto 91 (1R, 4S, 12aR)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,3,4-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1 ’,2’-d]pirazina-

9-carboxamida
H H		0 II	F I
		An—	ίιΎ
		Lh	XA-Y
n Y	T		F
0	OH
91
[0432]	Composto 91	foi preparado de uma maneira	similar ao
composto	41	usando	(2,3,4-trifluorofenil)metanamina no	lugar de

(2,4,6-trifluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,25 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,10 (d, J= 5,1 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,63 (s, 2H), 4,22 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,93 - 3,73 (m, 2H), 2,71 (s, 1H), 1,97 - 1,57 (m, 6H). LCMS-ESF (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₁₈F₃N₃O₄: 434,13; encontrado: 434,2.

Exemplo 92

Preparação de Composto 92 (1R, 4S, 12aR)-N-(4-cloro-2-fluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6, 8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9carboxamida

200/239 [0433] Composto 92 foi preparado de uma maneira similar ao composto 41 usando (4-cloro-2-fluorofenil)metanamina no lugar de (2,4,6-trifluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,28 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,11 - 6,95 (m, 2H), 4,85 (s, 1H), 4,57 (s, 2H), 4,22 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,81 (q, J = 13,9,13,1 Hz, 2H), 2,68 (s, 1H), 1,99- 1,50 (m, 6H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H-19CIFN3O4: 432,11; encontrado: 432,2.

Exemplo 93

Preparação de Composto 93 (1R, 4S, 12aR)-N-(2-cloro-4,6-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1 ’,2’-d]pirazina9-carboxamida

F

BH₃ DMS

F

CuCn, Pd(PPh₃)_a

Etapa 1 [0434] Um frasco de micro-ondas de 5 mL foi carregado com 2 bromo-1-cloro-3,5-difluorobenzeno (540 mg, 2,4 mmol), cianeto cuproso (436 mg, 4,87 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paládio (63 mg, 0,05

201/239 mmol), vedado, e esvaziado/enchido novamente com nitrogênio. A isto foi adicionado 5 mL desgaseificado DMF. O frasco vedado foi aquecido a 110 Ό por 18 horas, diluído com acetato de etila, e lavado sequencialmente duas vezes com 9:1 NH₄OH:NH₄CI(_aq), duas vezes com 5% de LiCI(_aq), e salmoura. A fase orgânica foi em seguida seca sobre sulfato de magnésio, filtrada, e concentrada. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia flash (100% hexanos) para render 2-cloro-4,6difluorobenzonitrila. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,13 (dt, J = 8,0, 1,9 Hz, 1H), 6,93 (td, J = 8,5, 2,3 Hz, 1H).

Etapa 2 [0435] A uma solução de 2-cloro-4,6-difluorobenzonitrila (210 mg,

1,2 mmol) em 2,4 mL de THF foi adicionado a 2M solução de boranoDMS em THF (0,6 mL). A esta mistura de reação foi permitida agitar a temperatura de refluxo por 18 horas resultando em uma perda de todo o solvente. O resíduo foi redissolvido em 3 mL THF, resfriado a 0 O, uma solução de HCI_(aq) a 6M foi cuidadosamente adicionada, e a mistura retornou para refluxo por 30 minutos. A mistura de reação foi uma vez novamente resfriada a 0 O e tratada com 4M NaO H_(aq). A fase aquosa foi extraída com DCM, fases orgânicas combinadas secas sobre sulfato de magnésio, filtradas, e concentradas. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia flash (0-10% de MeOH/DCM) para render (2-cloro-4,6-difluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmiod) δ 6,95 (dt, J = 8,3,2,1 Hz, 1H), 6,76 (td, J = 9,4, 2,5 Hz, 1H), 3,94 (d, J= 1,9 Hz, 2H).

Etapas 3 e 4 [0436] Uma solução de 93-A (74 mg, 0,11 mmol), (2-cloro-4,6difluorofenil)metanamina (48,5 mg, 0,27 mmol), HATU (100 mg, 0,26 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (0,1 mL, 0,57 mmol) em 1 mL diclorometano foi agitada à temperatura ambiente por uma hora neste ponto desaparecimento completo de 93-A e formação de 93-B foi obser202/239 vado por LCMS. TFA (0,65 M) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma hora, neste ponto 1 mL de DMF foi adicionado. A mistura de reação e em seguida concentrada e purificada por HPLC preparativa (ACN/H₂O + 0,1% de TFA) para render o Composto 93. ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,41 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,41 - 7,26 (m, 2H), 4,72 - 4,57 (m, 3H), 4,43 (dd, J = 12,5, 3,6 Hz, 1H), 3,94 (t, J = 12,4 Hz, 2H), 3,77 (dd, J = 12,4, 3,6 Hz, 3H), 1,87 - 1,67 (m, 3H), 1,67 - 1,45 (m, 2H), 1,43 (d, J = 10,4 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H₁₈CIF₂N₃O₄: 450,10; encontrado: 450,2.

Exemplo 94

Preparação de Composto 94 (1R, 4S, 12aR)-N-benzil-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8,12,12a-octahidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1 ’,2’-d]pirazina-9-carboxamida

[0437] Composto 94 foi preparado de uma maneira similar ao composto 41 usando fenilmetanamina no lugar de (2,4,6trifluorofenil)metanamina. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,37 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,37-7,19 (m, 5H), 4,55 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 28,2 Hz, 1H), 3,78 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,64 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,14 - 3,01 (m, 1H), 1,91 - 1,49 (m, 4H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₁H₂₁N₃O₄: 380,16; encontrado: 380,2.

Exemplo 95

Preparação de 3-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)-2-azabiciclo[2,1,1] hexano-2-carboxilatos de terc-butila quiral 95-A e 95-B

203/239

HPLC quiral

Lux Cellulos«-2

estereoquímica absoluta desconhecida

Etapa 1 [0438] A uma solução a 0 °C de 3-(h idróxi metil )-2azabiciclo[2,1,1]hexano-2-carboxilato de terc-butila racêmico (285 mg,

1,34 mmol), trifenilfosfina (425 mg, 1,62 mmol), e ftalamida (240 mg,

1,62 mmol) em 9 mL de THF foi adicionado gota a gota uma solução de azodicarboxilato de di-isopropila (0,35 mL, 1,8 mmol) em 1 mL de THF. A mistura de reação foi aquecida à temperatura ambiente, agitada por 90 minutos, concentrada em silica, e purificada por cromatografia flash (0-25% de EtOAc/hexanos) para render 3-((1,3dioxoisoindolin-2-il)metil)-2-azabiciclo[2,1,1]hexano-2-carboxilato de terc-butila como uma mistura racêmica. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₁₉H23N₂O4: 343,2; encontrado: 342,8.

Etapa 2 [0439] 3-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)-2-azabiciclo[2,1,1]hexano-

2-carboxilato de terc-butila racêmico (655 mg, 1,91 mmol) foi separado por HPLC quiral em uma Coluna Lux Celulose-2 usando um eluente de acetronitrila para render 95-A quiral (primeiro pico de eluição) e 95-B (segundo pico de eluição) em uma forma enatiomericamente enriquecida. Para 95-A: 144 mg, 98% de ee (estereoquímica absoluta desconhecida). Para 95-B: 242 mg, 49% de ee (estereoquímica absoluta desconhecida).

Exemplo 96

204/239

Preparação de Composto 96 (1R, 3R, 11aS)-6-hidróxi-5,7-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)-2,3,5,7,11,

11a-hexahidro-1 H-1,3-metanopirido[1,2-a]pirrolo[1,2-d]pirazina-8carboxamida

o OH

nh₂nh₂

O OBn

96-C

1) KOH___

2) HATU, DIEA

2.4.6-F₃BnBr

TÇÇÒÁ

O OH (estereoquímica absoluta desconhecida)

Etapa 1 [0440] A uma solução de intermediário 95-A (141 mg, 0,41 mmol, 98% de ee, esteroquímica absoluta desconhecida) em 9 mL de etanol foi adicionado hidrato de hidrazina (0,5 mL, 10,3 mmol) e agitada a 70 Ό por 18 horas para render 96-A de esteroquímica absoluta desconhecida. Sólidos foram removidos por filtração e o filtrado concentrado e realizado como bruto.

Etapa 2

205/239 [0441] Uma mistura de 96-A bruto (0,41 mmol presumido), 96-B (430 mg, 1,25 mmol), e bicarbonato de sódio (69 mg, 0,82 mmol) em 2 mL de água e 2 mL de etanol foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas, após o que a mistura de reação foi diluída com água e três vezes extraída para acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. O resíduo bruto (222 mg) foi dissolvido em 1,5 mL de DCM e HCI a 4 N em dioxano (4 mL) foi adicionado e agitado por 90 minutos à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada até secura e coevaporada com tolueno. O resíduo bruto e DBU (0,3 mL, 2,0 mmol) em 6 mL metanol foi agitado a 50 € por 90 minutos. A mistura de reação foi em seguida concentrada sobre sílica-gel e purificada por cromatografia flash (0-10% de MeOH/DCM) para render 96-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C22H22N2O5: 395,16; encontrado: 395,2.

Etapa 3 [0442] Uma mistura de 96-C (112 mg, 0,28 mmol), 1M de hidróxido de potássio aquoso (1 mL), 4 mL de metanol, e 4 mL de THF foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas, neste ponto a mistura foi diluída com diclorometano, acidificada pela adição de 1M de cloreto de hidrogênio aquoso, e a fase orgânica extraída para diclorometano. Os orgânicos combinados foram secos, filtrados, e concentrados a partir de tolueno. Após secagem sob vácuo, o resíduo foi suspenso em 1,5 mL de DCM e trifluorobenzilamina (62 mg, 0,38 mmol), HATU (220 mg, 0,58 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (0,15 mL, 0,86 mmol) foram adicionados. A esta mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas para render 96-D que foi realizado direto como bruto.

Etapa 4 [0443] Trifluoroácido acético (1,7 mL, 22,2 mmol) foi adicionado à solução de reação bruta contendo 96-D a partir da etapa anterior e a

206/239 mistura de reação permitida agitar à temperatura ambiente por 90 minutos. 1 mL de DMF foi em seguida adicionada, a mistura de reação concentrada a ~1 mL, filtrada, e purificada por HPLC preparativa (ACN/água + 0,1% de TFA) para render o Composto 96 (esteroquímica absoluta desconhecida). ¹H-RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10,45 10,35 (m, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,23 - 7,09 (m, 2H), 4,67 (dd, J = 12,6, 4,8 Hz, 2H), 4,53 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 4,20 (dd, J = 11,9, 3,8 Hz, 1H), 4,05 -

3,95 (m, 1H), 2,96-2,88 (m, 1H), 2,16 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 1,97 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 1,68 - 1,60 (m, 1H), 1,53 - 1,45 (m, 1H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C20H16F3N3O4: 420,12; encontrado: 420,2. Exemplo 97

Preparação de Composto 97 (1S, 3S, 11aR)-6-hidróxi-5,7-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)2,3,5,7,11,11a-hexahidro-1 H-1,3-metanopirido[1,2-a]pirrolo[1,2d]pirazina-8-carboxamida

o OH (estereoquimica absoluta desconhecida) [0444] Composto 97 (49% de ee, esteroquímica absoluta desconhecida) foi preparado de uma maneira similar ao composto 96 usando intermediário 95-B (49% de ee, esteroquímica absoluta desconhecida) no lugar de intermediário enantiomericamente oposto 95-A. ¹HRMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10,39 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H),

7,25 - 7,13 (m, 2H), 4,73 - 4,66 (m, 2H), 4,54 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,20 (dd, J = 12,3, 3,9 Hz, 1H), 4,01 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 6,7,

3,4 Hz, 1H), 2,19-2,14 (m, 1H), 1,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,65 (dd, J =

10,4, 7,9 Hz, 1H), 1,49 (dd, J = 10,5,7,7 Hz, 1H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2oH₁₆F₃N₃04: 420,12; encontrado: 420,2.

207/239

Exemplo 98

Preparação de Composto 98 (1S, 4R,12aR)-3, 3-difluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina-

9-carboxamida

11)TFA

Etapa 1 [0445] 98-A (0,5g, 1,87mmol) foi dissolvido em DCM (20 mL) e resfriada a 0 Ό sob nitrogênio. Dess-Martin Period inano (1,59 g, 3,74 mmol) foi adicionado vagarosamente. A mistura foi agitada por 2 h à temperatura ambiente, arrefecida com solução saturada aquosa de Na₂S2O₃/NaHCO3 (7:1) (160 mL) e agitada vigorosamente até as duas

208/239 camadas serem separadas. O produto bruto foi duas vezes extraído com DCM. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash sobre sílica-gel com 0-20% de MeOH/DCM para render 98-B. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,34 - 4,05 (m, 1H), 3,97 - 3,75 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,89 (dd, J = 4,4, 2,1 Hz, 1H), 2,30 - 1,97 (m, 3H), 1,56 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 1,35 (s, 9H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C13H-19NO5: 269,13; encontrado: 270,78.

Etapa 2 [0446] Uma solução de 98-B (504 mg, 1,87mmol) em DCM (15 mL) foi agitada aOV DAST (1ml) foi adicionado g ota a gota à mistura de reação. Após durante a noite agitando à temperatura ambiente, a mistura de reação foi resfriada de volta para 0 °C. NaHCO₃ saturado (10 mL) foi adicionado vagarosamente. A mistura foi extraída com duas vezes com DCM e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash 0-50% de EtOAc/hexanos para dar 98-C. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,45 - 4,18 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,72 (d, J = 1,5 Hz, 3H), 2,72 (ddd, J = 5,1,3,2, 1,6 Hz, 1H), 2,27 - 1,52 (m, 4H), 1,41 (d, J = 21,9 Hz, 9H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -91,72 - -93,99 (m), -113,65 - -115,98 (m). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci₃H₁₉F₂NO₄: 291,13; encontrado: 291,55.

Etapa 3 [0447] 98-C (476 mg, 1,634mmol) em THF (20 mL) foi agitada a 0

O como 2,0 M LiBH ₄ em THF (2,4 mL, 4,8mmol) foi adicionado. A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 4 h. A mistura de reação foi arrefecida com gelo e diluída com EtOAc e NH₄CI saturado (alguma evolução de H₂). Após as duas fases foram separadas, a fração orgânica foi lavada com salmoura, seca (Na₂SO₄), e concentrada. O produto bruto de 98-D foi usado como é para a próxima etapa.

209/239

LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C12H-19F2NO3: 263,13; encontrado: 164,10.

Etapa 4 [0448] 98-D (1,634mmol), ftalamida (0,36 g, 2,4 5mmol), e PPh₃ (0,855 g, 3,26mmol) em THF (10 mL) foram agitados em um banho a 0 O como DIAD (0,642 mL, 3,26mmol) foram adicionados . Após adição, a mistura foi agitada a 0 °C por 30 min e em seguida à temperatura ambiente por 16 h. Ela foi diluída com EtOAc, e NH₄CI saturado. Após agitação por 5 min, um sólido foi filtrado e as duas fases foram separadas. A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca (Na₂SO₄), e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash com 0-50%EA/Hex como eluentes para dar 98-E. ¹H-RMN sugere uma mistura de dois rotâmeros. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,89 7,80 (m, 2H), 7,78 - 7,66 (m, 2H), 5,02 (ddt, J = 16,6, 12,5, 6,3 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 71,8 Hz, 1H), 4,10 - 3,92 (m, 1H), 3,83 - 3,51 (m, 2H), 2,46 (s, 1H), 2,21 - 1,98 (m, 2H), 1,87 - 1,62 (m, 2H), 1,31 (d, J = 8,5 Hz, 9H); ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -91,22 - -93,58 (m), -113,20 - -115,45 (m). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₂oH22F2N₂0₄: 392,15; encontrado: 393,3.

Etapa 5 [0449] A uma solução de 98-E (696 mg, 1,774mmol) em EtOH (10mL) foi adicionado hidrato de hidrazina (1mL) à temperatura ambiente e a solução resultante foi agitada à temperatura ambiente por 2 h. A mistura foi diluída com etil éter (30 mL) e agitada a 0 O por 60 min antes de filtração. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi dissolvido em CH₂CI₂ e filtrado. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia flash sobre sílica-gel com 0-20% de MeOH (0,2% de TEA) /DCM para dar 98-F. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,91 (p, J =

6.2 Hz, 1H), 4,29 - 3,97 (m, 1H), 3,36 - 2,93 (m, 2H), 2,49 (qt, J = 8,8,

5.2 Hz, 2H), 2,08 (dddd, J = 25,5, 14,0, 7,1, 4,9 Hz, 1H), 1,89 - 1,49

210/239 (m, 4H), 1,41 e 1,21 (d, J = 6,2 Hz, 9H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -91,63 - -93,16 (m), -113,11 - -115,08 (m). LCMS-ESI⁺ (m/z):

[M+H]⁺calculado para C12H20F2N2O2: 262,15; encontrado: 262,8.

Etapa 6, 7 e 8 [0450] A mistura de 98-G (375,8 mg, 1,55 mmol), 98-E (370 mg,

1,41 mmol), e NaHCO₃ (261 mg, 3,10 mmol) em água (5 mL) e EtOH (5 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 2 h. A mistura foi diluída com salmoura e extraída com EtOAc (x 2). Os extratos foram combinados, secos (Na₂SO₄), concentrados, e secos em vácuo para render A bruto. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ 591,59. A bruto (1,38mmol) em CH2CI2 (5 mL) foi adicionado HCI a 4 N em dioxano (5 mL). Após 2 h à temperatura ambiente, a mistura foi concentrada até secura. Ela foi coevaporada com tolueno uma vez e seca em vácuo para render B bruto. B (1,38mmol + 0,442mmol) e DBU (3 mL, 11 mmol) em MeOH anidro (15 mL) foram agitados em um banho a 50 Ό por 40 min. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (80 g de coluna) usando 0 - 20% de MeOH/DCM como eluentes para dar 98-H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C23H₂₂F₂N₂O₅: 444,15; encontrado: 445,36 (90%), 431,18 (10%).

Etapas 9, 10 e 11 [0451] As etapas restantes foram realizadas usando procedimentos similares ao Exemplo 41 para render o composto 98 desejado. ¹HRMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,29 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 6,65 (dd, J = 8,7, 7,5 Hz, 2H), 4,83 (s, 1H), 4,72 - 4,58 (m, 2H), 4,36-4,10 (m, 2H), 4,05 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 2,97 (d, J =4,4 Hz, 1H),

2,49 - 2,08 (m, 3H), 2,12 - 1,94 (m, 1H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -92,08 - -93,57 (m, 1F), -108,92 (ddd, J = 15,1, 8,8, 6,3 Hz, 1F), -109,30 - -110,65 (m, 1F), -112,16 (p, J = 7,3 Hz, 2F). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂iH₁₆F₅N₃O₄: 469,11; encontrado: 470,23.

211/239

Exemplo 99

Preparação de Composto 99 (1R,3S, 4R,12aR)-7-hidróxi-3-metil-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-

9-carboxamida

2) 11,	Η H ?	3) LiBlI4
PdOllC
F.tOH
	W-C

11) TFA

Etapa 1 [0452] A uma solução agitada de 99-A (1 g, 3,71 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado gota a gota uma solução do reagente de Tebbe (0,5 M em tolueno, 14,85mL, 7,42 mmol) aO O. Após adição, a solução marrom foi permitida aquecer à temperatura ambiente vagarosamente e foi agitada à temperatura ambiente por 2 h. A reação foi arrefecida cuidadosamente pela adição de solução de NaHCO₃ saturado a

212/239

O, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 15 minutos. A mistura foi filtrada através de celite, e a torta do filtro foi lavada com éter e DCM (1:1) duas vezes. Após as camadas serem separadas, os orgânicos foram combinados e concentrados em vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel coluna com 050% de EtOAc/hexanos para render 99-B. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,06 (dt, J = 48,6, 2,6 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 7,0 Hz, 1H),

4.42 (d, J = 61,8 Hz, 1H), 3,81 (d, J = 48,2 Hz, 1H), 3,73 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 2,74 (dd, J = 9,4, 4,4 Hz, 1H), 2,38 (ddt, J = 13,5, 4,5, 2,5 Hz, 1H), 2,18 - 2,06 (m, 1H), 1,99 (dt, J = 10,2, 2,4 Hz, 1H), 1,58 (s, 1H), 1,42 (d, J = 25,5 Hz, 9H). LCMS-ESP (m/z): [M+H]⁺ calculado para Ci₄H₂iNO₄: 267,15; encontrado: 267,65.

Etapa 2 [0453] Uma mistura de 99-B (675 mg, 2,506 mmol) e 20% de Pd(OH)₂/C (500 mg) em EtOH (50 mL) foi agitada sob atmosfera de H₂. A mistura foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado para dar 99-C. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,23 - 3,99 (m, 1H), 3,77 - 3,64 (m, 4H), 2,55 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 2,14 - 1,86 (m, 3H),

1.42 (d, J = 24,2 Hz, 9H), 0,96 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,85 (ddd, J = 12,5,

4,8, 2,4 Hz, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para Ci4H₂₃NO₄: 269,16; encontrado: 269,69.

Etapa 3 [0454] 99-C (670 mg, 2,488 mmol) em THF (20 mL) foi agitada a 0

O as 2,0 M LiBH ₄ em THF (3,7mL, 7,46 mmol) foi adicionado. A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 4h. A mistura de reação foi arrefecida com gelo e diluída com EtOAc e NH4CI saturado (alguma evolução de H₂). Após duas fases foram separadas, a fração orgânica foi lavada com salmoura, seca (Na2SO4), e concentrada. O álcool bruto 99-D foi usado como é para a próxima etapa. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para Ci₃H₂₃NO₃: 241,17; encontrado: 241,76.

213/239

Etapas 4 e 5 [0455] Etapas 4 e 5 foram realizadas usando procedimentos similares aqueles no Exemplo 41 para render 99-F. I_CMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₁₃H24N₂O2: 240,18; encontrado: 241,2.

Etapa 6, 7 e 8 [0456] Etapas 6, 7 e 8 foram realizadas usando procedimentos similares aqueles do Exemplo 41 para dar 99-G. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺calculado para C₂₄H₂₆N₂O₅: 422,18; encontrado: 423,21.

Etapa 9, 10 e 11 [0457] As etapas restantes foram realizadas usando procedimentos similares a Exemplo 41 para render o Composto 99. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,71 (s, 1H), 10,36 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 6,63 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 4,63 (t, J = 5,4 Hz, 3H), 4,12 (dd, J = 12,3, 3,5 Hz, 1H), 3,83 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 12,3, 3,4 Hz, 1H), 2,64 - 2,52 (m, 1H), 2,30 (ddq, J = 10,5,7,2, 3,6 Hz, 1H), 2,13 (td, J = 12,1,4,4 Hz, 1H), 1,82 - 1,63 (m, 2H), 1,24 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 1,04 (d, J = 6,9 Hz, 4H), 0,90 - 0,79 (m, 1H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmiod) δ -109,20 (ddd, J = 15,0, 8,8, 6,2 Hz), -112,03 (t, J = 7,0 Hz). LCMSESl· (m/z): [M+H]⁺ calculado para C₂₂H₂₀F₃N₃O₄: 447,14; encontrado: 448,32.

Exemplo 100

Preparação de Composto 100 (1R, 4R,12aS)-N-(2,4-difluorobenzil)-7-hidróxi-6,8-dioxo-1,2,3,4,6,8,12, 12a-octa-hidro-1,4-etanodipirido[1,2-a:r,2’-d]pirazina-9-carboxamida

214/239

Bac

1Q0-A

Hidrazina

Borano

THF

NaHCO_a

EtOHj'H₂O

Ftalimida

IQtJC

PPh_3; DIAD THF, r.t.

Etapa 1 [0458] Um rbf de 100-mL foi carregado com 100-A (2,0 g, 7,8 mmol) em THF (20 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C. Sulfeto de dimetil borano (2 N em THF, 17,6 mL) foi vagarosamente adicionado. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. A mistura de reação foi resfriada de volta para 0 °C. Metanol (8 mL) foi adicionado gota a gota para resfriar bruscamente a reação. Após concentração, o resíduo foi purificado por Combi Flash (40 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 100-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 242.

Etapa 2 [0459] Um rbf de 100-mL foi carregado com 100-B (1,8 g, 7,4

215/239 mmol), trifenilfosfina (4,3 g, 16,2 mmol) e ftalamida (1,8 g, 12,2 mmol) em THF (30 mL). Em seguida a mistura de reação foi resfriada para 0 °C com agitação. DIAD (3,2 mL, 16,2 mmol) foi vagarosamente adicionado à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. Após concentração, o resíduo foi purificado por Combi Flash (80 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 100-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 371.

Etapa 3 [0460] A uma solução de 100-C (2,5 g, 6,8 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionado monoidrato de hidrazina (1,7 mL). A mistura de reação foi aquecida a 70 °C com agitação por 3 horas. Após filtração para remover o sólido, o filtrado foi concentrado para render 100-D. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 241.

Etapa 4 [0461] Um rbf de 100 mL foi carregado com 100-D (1,6 g, 6,7 mmol) e 100-E (2,3 g, 6,7 mmol) em etanol (30 mL). Bicarbonato de sódio (1,2 g, 1,4 mmol) em água (30 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. A mistura foi diluída com EA (200 mL) e lavada com água (2 x). As frações orgânicas foram extraídas com EA (1 x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O 100-F bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 569.

Etapa 5 [0462] Um rbf de 100 mL foi carregado com 100-F (3,7 g, 6,5 mmol) em HCI a 4 N /dioxano (38 mL). Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, 3,2 g intermediário foi obtido. O intermediário e DBU (5,1 g, 33,8 mmol) foram dissolvidos em tolueno (100 mL). A mistura de reação foi

216/239 aquecida a 110°C com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por Combi Flash (80 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 100-G. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 423.

Etapa 6 [0463] Um rbf de 100 mL foi carregado com 100-G (2,0 g, 4,7 mmol) em THF (20 mL) e MeOH (20 mL). KOH a 1 N (18,9 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (18,9 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3 x). O ácido bruto (0,28 g, 0,72 mmol),

2,4-difluobenzilamina (0,2 g, 1,44 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DlPEA) (0,47 g, 3,6 mmol) e HATU (0,55 g, 1,44 mmol) foram dissolvidos em DCM (20 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 100-H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 520.

Etapa 7 [0464] Um rbf de 50 mL foi carregado com 100-H (0,36 g, 0,69 mmol) em TFA (5 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 100. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,25 (m, 1H), 10,47 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,58 - 7,29 (m, 1H), 6,98 -

6,50 (m, 2H), 4,62 (dd, J = 14,8, 4,9 Hz, 3H), 4,22 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 4,14 - 4,07 (m, 1H), 3,96 (dd, J = 12,2, 3,1 Hz, 1H), 2,26 -1,44 (m, 9H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -112,38 (t, J = 7,7 Hz), -114,78 (q, J = 8,5 Hz). LCMS-ESI⁺ (m/z): encontrado: 430.

217/239

Exemplo 101

Preparação de Composto 101 (1R, 4R,12aS)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-etanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9- carboxamida

Etapa 1 [0465] Um rbf de 100 mL foi carregado com 101-A (0,3 g, 0,72 mmol) em THF (2 mL) e MeOH (2 mL). KOH a 1 N (2,1 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCl a 1 N (2,1 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3 x). O ácido bruto (0,72 mmol), 2,4,6 trifluobenzilamina (0,23 g, 1,44 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DlPEA) (0,47 g, 3,6 mmol) e HATU (0,55 g, 1,44 mmol) foram dissolvidos em DCM (20 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambi ente por 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄.

218/239

Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 101-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ encontrado: 538.

Etapa 2 [0466] Um rbf de 50 mL foi carregado com 101-B (0,36 g, 0,67 mmol) em TFA (5 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 101. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,11 (s, 1H), 10,40 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 6,91 - 6,39 (m, 2H), 4,62 (ddd, J = 25,0, 6,5, 2,8 Hz, 3H), 4,21 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 12,5, 3,0 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 12,2, 3,1 Hz, 1H), 2,35 - 1,39 (m, 9H). ¹⁹F RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ -112,38 (t, J = 7,7 Hz), -114,78 (q, J = 8,5 Hz). LCMS-ESI⁺ (m/z): encontrado: 448.

Exemplo 102

Preparação de Composto 102 (1S, 4S, 12aR)-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-etanodipirido[1,2-a:T,2’-d]pirazina-9carboxamida

OH

102

219/239

1Q2-A

Hidrazina

102-G

102

Etapa 1 [0467] Um rbf de 100 mL foi carregado com 102-A (2,0 g, 7,8 mmol) em THF (20 mL). A mistura de reação foi resfriada para 0 °C.

Sulfeto de dimetil borano (2 N em THF, 17,6 mL) foi vagarosamente adicionada. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. A mistura de reação foi resfriada de volta para 0 °C. Metanol (8 mL) foi adicionado gota a gota para resfriar bruscamente a reação. Após concentração, o resíduo foi purificado por

Combi Flash (40 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 102-B. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontra

220/239 do: 242.

Etapa 2 [0468] Um rbf de 100 mL foi carregado com 102-B (1,8 g, 7,4 mmol), trifenilfosfina (4,3 g, 16,2 mmol) e ftalamida (1,8 g, 12,2 mmol) em THF (30 mL). Em seguida a mistura de reação foi resfriada para 0 °C com agitação. DIAD (3,2 mL, 16,2 mmol) foi vagarosamente adicionada à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. Após concentração, o resíduo foi purificado por Combi Flash (80 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 102-C. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 371.

Etapa 3 [0469] A uma solução de 102-C (2,5 g, 6,8 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionado monoidrato de hidrazina (1,7 mL). A mistura de reação foi aquecida a 70 °C com agitação por 3 horas. Após filtração para remover o sólido, o filtrado foi concentrado para render 102-D. LCMSESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 241.

Etapa 4 [0470] Um rbf de 100 mL foi carregado com 102-D (1,6 g, 6,7 mmol) e 102-E (2,3 g, 6,7 mmol) em etanol (30 mL). Bicarbonato de sódio (1,2 g, 1,4 mmol) em água (30 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por durante a noite. A mistura foi diluída com EA (200 mL) e lavada com água (2 x). As frações orgânicas foram extraídas com EA (1 x), e as frações orgânicas foram combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O 102-F bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 569.

Etapa 5 [0471] Um rbf de 100 mL foi carregado com 102-F (3,7 g, 6,5 mmol) em HCI a 4 N /dioxano (38 mL). Em seguida a mistura de rea221/239 ção foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Após concentração, 3,2 g intermediário foi obtido. O intermediário e DBU (5,1 g, 33,8 mmol) foram dissolvidos em tolueno (100 mL). A mistura de reação foi aquecida a 110°C com agitação por 1 hora. Após concentração, o resíduo foi purificado por Combi Flash (80 g de coluna, cartucho usado) usando hexanos - EA como eluentes para render 102-G. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 423.

Etapa 6 [0472] Um rbf de 100 mL foi carregado com 102-G (0,3 g, 0,72 mmol) em THF (2 mL) e MeOH (2 mL). KOH a 1 N (2,1 mL) foi adicionado à mistura de reação. Em seguida a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi acidificada adicionando HCI a 1 N (2,1 mL). Após concentração, o resíduo foi coevaporada com tolueno (3x). O ácido bruto (0,72 mmol), 2,4,6trifluobenzilamina (0,23 g, 1,44 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (DlPEA) (0,47 g, 3,6 mmol) e HATU (0,55 g, 1,44 mmol) foram dissolvidos em DCM (20 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL) e lavada com NaHCO₃ saturado (2x), NH4CI saturado (2x) e seca sobre Na₂SO₄. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com hexano-EtOAc para render 102-H. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺encontrado: 538.

Etapa 7 [0473] Um rbf de 50 mL foi carregado com 102-H (0,36 g, 0,67 mmol) em TFA (5 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Após concentração, o bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel com EtOAc-MeOH para render o Composto 102. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,13 (s,

1H), 10,40 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 6,64 (t, J = 8,1 Hz, 2H),

4,89 - 4,41 (m, 3H), 4,22 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 12,3, 3,1

222/239

Hz, 1H), 3,95 (dd, J = 12,1, 4,1 Hz, 1H), 2,45 - 1,60 (m, 9H). ¹⁹F-RMN (376 MHz, Clorofórmio-d) δ - 109,26 (ddd, J = 15,1, 8,8, 6,3 Hz), 111,99 (t, J = 6,9 Hz). LCMS-ESI⁺ (m/z): encontrado: 448.

Exemplo 103

Preparação de Composto 103 (1R, 4R,12aR)-2,3-difluoro-7-hidróxi-6,8-dioxo-N-(2,4,6-trifluorobenzil)1,2,3,4,6,8,12,12a-octa-hidro-1,4-metanodipirido[1,2-a:1’,2’-d]pirazina9-carboxamida

103

DAST

DCM. -78 °C

1)Pd(OH)₂, H,

HCi etanol

3-A

1) DIAD. PPh_:,

2) Boc anidrido DIPEA. 2-MeTHF

O^X

103-B líaih₄

THF. 0 ’C

H

ftalamida THF

103-C

103-D

Etapa 1

2) hidrato de hidrazina EtOH

[0474] Uma solução de 5,6-dihidróxi-2-((S)-1 -feniletil)-2-azabiciclo [2,2,1]heptano-3-carboxilato de (1R, 3R, 4R, 5R, 6S)-metila (2,0g, 6,9mmol) em DCM (27mL) foi resfriada a -78 Ό em um banho de gelo

223/239 seco/acetona. A esta solução foi adicionado DAST (2,18 ml, 16,48 mmol) via pipeta com ponta de plástico. A solução foi agitada a -78 Ό por 30 minutos após este tempo ela foi removida do banho, deixada aquecer vagarosamente à temperatura ambiente, e agitada à temperatura ambiente por uma hora. A reação foi arrefecida pela adição vagarosa da mistura de reação em uma solução de agitação de bicarbonato de sódio saturado (150mL) via pipeta com ponta de plástico. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas em vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica-gel (7-28% de acetato de etila/hexano) para fornecer 103-A. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ

7,43 - 7,16 (m, 5H), 5,01 - 4,60 (m, 2H), 3,85 (q, J = 7,1, 6,6 Hz, 1H),

3,55 (s, 2H), 3,53 - 3,42 (m, 2H), 2,76 (dq, J = 5,1,2,0 Hz, 1H), 2,19 2,07 (m, 1H), 2,03 - 1,88 (m, 1H), 1,39 (d, J = 6,7 Hz, 3H).

Etapas 2 e 3 [0475] A uma solução de 103-A (0,96 g, 3,24 mmol) em etanol (36,01 ml) e 1,25M HCI-etanol (4,09 ml) foi adicionado 20% de PdOH/C (1,14 g, 1,62 mmol) a suspensão foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio por 22 horas. Após filtragem através de celite, a torta foi lavada com EtOH, o filtrado foi concentrado sob vácuo até secura para render o produto bruto desprotegido que foi preumido ser de 3,24 mmol para a próxima etapa. LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para CeHi₂F₂NO₂: 192,08; encontrado: 192,110.

[0476] Ao resíduo bruto (0,62 g, 3,24 mmol) e dicarbonato de diterc-butila (1,06 g, 4,86 mmol) em 2-Metiltetra-hidrofurano (32,43 ml) foi adicionado N,N-di-isopropiletilamina (0,56 ml, 0 mol). Ai finalizar, a mistura de reação foi diluída com água, extraída em EtOAC (2x) e as frações orgânicas foram lavadas com água, combinadas, secas (Na₂SO₄), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia

224/239 de coluna de silica (0-55% de EtOAc/Hexanos) para render 103-B. ¹HRMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,12 - 5,01 (m, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,49 (s, 1H), 4,14 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 2,91 (s, 1H), 2,24 -1,98 (m, 2H), 1,47 (s, 5H), 1,38 (s, 5H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C13H20F2NO4: 292,13; encontrado: 291,75.

Etapa 4 [0477] Uma solução de 103-B (0,68 g, 2,33 mmol) em THF (15 ml) foi agitada em um banho de gelo como 1,0 M LiBH₄ em THF (4,65 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 0 Ό por 30 minutos neste momento ela foi mostrada estar finalizada por TLC. A mistura de reação foi cuidadosamente tratada com água (0,3 mL), em seguida com NaOH (~15%, 3,5M, 0,3 mL), em seguida finalmente com mais água (0,9 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 15 minutos, e a ppt que se formou foi filtrada, lavada com dietil éter e o sobrenadante foi concentrado para render 103-C. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,83 (s, 1H), 4,56 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,37 (s, 1H), 3,78 - 3,47 (m, 3H), 2,76 (s, 1H), 2,36 - 2,18 (m, 1H), 2,17 - 1,98 (m, 1H), 1,55 (s, 1H), 1,48 (s, 9H).

Etapas 5 e 6 [0478] Uma mistura de 103-C (0,59 g, 2,25 mmol), ftalamida (0,53 g, 3,6 mmol) e trifenilfosfina (1,3 g, 4,95 mmol) em THF (11 ml) foi resfriada em um banho de gelo. Azodicarboxilato de di-isopropila (0,97 ml,

4,95 mmol) foi adicionado. A mistura foi em seguida aquecida até atemperatura ambiente e agitada por 14h e em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em éter, agitada por 1 h, em seguida os sólidos foram filtrados e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de silica (10-31-91% de EtOAc/hexanos) para render o composto de amino protegido (presumido

2,25 de mmol de produto). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C2oH₂₃F₂N₂0₄: 393,15; encontrado: 392,77.

225/239 [0479] Uma solução do composto de amino protegido (0,88 g, 2,25 mmol) e hidrato de hidrazina (0,46 ml, 9,52 mmol) em etanol (22 ml) foi agitada a 60 Ό por 2 h. A mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo, éter (10 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada por 30 min. O sólido formado foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo até secura para dar 103-D. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,17 4,61 (m, 2H), 4,37 (s, 1H), 3,80 (s, 1H), 3,11 - 2,77 (m, 1H), 2,01 (s, 2H), 1,87 (s, 1H), 1,83 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,30 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 1,27 (d, J = 6,3 Hz, 3H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C12H20F2N2O2: 263,15; encontrado: 262,86.

Etapas 7, 8 e 9 [0480] Composto 103 foi preparado de uma maneira similar ao composto 60 usando 103-D no lugar de 41-E e usando (2,4,6trifluorofenil)metanamina no lugar de (2,3-diclorofenil)metanamina. Um único diastereômero resultou. A estereoquímica do flúor é desconhecida. ¹H-RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,08 (s, 1H), 6,46 - 6,27 (m, 2H), 4,95 (d, J = 53,5 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 54,9 Hz, 1H), 4,45 (s, 1H),

4,33 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 3,84 (t, J = 3,6 Hz, 2H), 2,75 (s, 1H), 2,28 (p, J = 1,9 Hz, 2H), 2,20 (s, 1H), 1,91 (dd, J = 33,3, 15,2 Hz, 1H), 0,95 (s, 1H). LCMS-ESI⁺ (m/z): [M+H]⁺ calculado para C21H.17F5N3O4: 470,11; encontrado: ,470,13.

ENSAIO ANTIVIRAL

Exemplo 104

Ensaios Antivirais em Células MT4 [0481] Para o ensaio antiviral utilizando células MT4, 0,4 pl_ de concentração de teste 189X de composto diluído serialmente 3 vezes em DMSO foi adicionado a 40 pl_ do meio de crescimento celular (RPMI 1640, 10% de FBS, 1% de penicilina/streptomicina, 1% de LGlutamina, 1% de HEPES) em em cada poço de placas de ensaio de

384 poços (10 concentrações) em quidruplicata.

226/239 [0482] 1 mL de alíquotas de 2 χ 10⁶ de células MT4 são preinfectadas por 1 e 3 horas respectivamente a 37 Ό com 25 μ L (MT4) que de meio de crescimento celular (mock-infectado) ou um meio de diluição fresco 1:250 de um estoque de ABI concentrado HlV-lllb (0,004 m.o.i. para células MT4). Células infectadas e não infectadas são diluídas em meio de crescimento celular e 35 pL de 2000 (para MT4) células são adicionados a cada poço das placas de ensaio.

[0483] Placas de ensaio foram em seguida incubadas em um incubador a 37 O. Após 5 dias de incubação, 25 μL de Reagente CelITiter-GIo™ 2X concentrado (catálogo # G7573, Promega Biosciences, Inc., Madison, WI) foi adicionado a cada poço da placa de ensaio. Lise celular foi realizada incubando à temperatura ambiente por 2-3 minutos, e em seguida quimioluminescência foi lida usando o leitos Envision (PerkinElmer).

[0484] Compostos da presente invenção demonstram atividade antiviral neste ensaio como mostrado na Tabela 1 abaixo. Como tal, os compostos da invenção podem ser úteis para tratar a proliferação do vírus HIV, tratar AIDS, ou retardar o início dos sintomas da AIDS ou ARC.

Tabela 1

Número do Composto	nM em MT-4
EC50	θθ50
1	2,6	5819
2	2,2	3111
3	2,0	38446
4	14,8	45769
5	8,1	10452
6	5,3	53192
7	3,5	15610
8	2,5	13948

227/239

Número do Composto	nM em MT-4
EC50	CC50
9	5,1	13451
10	6,1	3670
11	4,9	10274
12	5,9	3337
13	46,0	12666
14	65,5	4939
15	2,2	16268
16	1,5	13633
17	5,9	6613
18	4,1	10263
19	2,8	38690
20	3,3	27990
21	38,3	13010
22	64,3	4433
23	2,3	13444
24	6,1	12074
25	26,2	5233
26	10,3	8836
27	4,4	8751
28	15,6	18687
29	13,9	9446
30	4,0	6828
31	9,0	4525
32	14,0	4684
33	43,5	3971
34	422,1	3585
35	157,0	15546

228/239

Número do Composto	nM em MT-4
EC50	CC50
36	7,6	11424
37	10,2	19486
38	1,7	10223
39	3,6	12174
40	2,4	9560
41	2,1	15675
42	2,5	3544
43	6,9	10321
44	2,3	9869
45	2,4	15765
46	2,6	19295
47	1,9	11301
48	2,7	13967
49	33,3	52219
50/51 (racêmico mixture)	1,9	37173
52	15,0	12943
53	14,3	3347
54	15,6	3236
55	1,5	11100
56	3,1	17238
57	2,3	11751
58	1,5	7694
59	3,1	22200
60	2,1	3308
61	1,8	25881
62	9,2	3492
63	2,5	3164

229/239

Número do Composto	nM em MT-4
EC50	CC50
64	3,5	3332
65	2,4	2508
66	9,4	11848
67	10,7	2981
68	2,7	4175
69	1,9	4767
70	5,1	8413
71	2,6	4660
72	4,3	6255
73	1,8	9194
74	29,3	4340
75	2,8	5292
76	17,8	34581
77	5,6	10145
78	5,6	3198
79	3,4	12092
80	4,6	5045
81	1,9	12298
82	2,9	30434
83	1,9	27501
84	2,9	9727
85	2,0	10378
86	2,3	22405
88	2,9	3230
89	8,4	4629
90	5,7	8086
91	5,0	7183

230/239

Número do Composto	nM em MT-4
EC50	CC50
92	18,6	4553
93	2,2	6158
94	11,5	51173
96	2,6	26586
97	2,1	17341
98	2,4	17947
99	2,0	8475
100	2,2	11580
101	2,1	11585
102	2,3	12042
103	10,3	35127

Exemplo 105

Ensaio de Ativação de PXR Humano [0485] Ensaio de Gene Repórter Luciferase. Uma linhagem celular de tumor estavelmente transformado (DPX2) foi colocada em placas de microtitulação de 96 poços. Células DPX2 ancorando no gene PXR (NR1I2) e um gene repórter luciferase ligado a dois promotores identificados no gene CYP3A4 humano, a saber XREM e PXRE. As células foram tratadas com seis concentrações de cada composto (0,15 ~ 50 μΜ) e incubadas por 24 horas. O número de células viáveis foi determinado e e a atividade do gene repórter foi avaliada. Controle positivo: Rifampicina em 6 concentrações (0,1 ~ 20 μΜ). %d e E_max em relação a indução de desdobramento máxima por 10 ou 20 μ M de RIF foi calculado para compostos testes de acordo com a seguinte equação que ajusta para fundo de DMSO: %E_max = (indução de desdobramento -

1)/( indução de desdobramento máxima por RIF - 1) x 100%.

Tabela 2

231/239

Número do Composto	%Emax a 15 pM
2	4,5
3	7,5
4	3
5	32
6	0
7	6
8	7
9	7
10	19
15	20
16	17
17	7
18	4
19	2
20	2
23	45
28	6
29	3
32	14
33	17
36	3
37	2
38	7
39	6
40	0
41	11,5
42	21
43	18

232/239

Número do Composto	%Emax a 15 pM
44	4
45	19
46	34
47	11
48	5
54	2
55	24
56	3
57	3
58	1
59	4
60	3
61	1
63	13
64	8
66	0
67	0
68	6
69	5
70	10
71	3
72	4
73	7
75	0
77	11
79	0
80	2
81	1

233/239

Número do Composto	%Emax θ 15 μΜ
82	1
83	1
84	21
85	77
86	30
88	27
89	5
90	11
91	3
92	3
93	9
96	11
97	9
98	0
99	17
100	45
102	123
103	0

Exemplo 106

Ensaio de Inibição de OCT2 [0486] A inibição dependente de dose de absorção mediada por OCT2 de um substrato modelo ¹⁴C-tetraetilamônio (TEA) pelos compostos de teste foi estudada em células MDCKII de tipo selvagem e transfectadas com OCT2 em 7 concentrações de 0,014 μΜ a 10 μΜ.

[0487] Células MDCKII foram mantidas em meio essencial mínimo (MEM), com 1% de Pen/Strep, 10% de soro fetal de bovino, e 0,25 mg/ml de higromicina B em uma incubadora a 37 O, 9 0% de umidade e 5% de CO₂. 24 horas antes do ensaio, o meio contendo butirato de

234/239 sódio a 5 mM foi adicionado a células MDCKII em frascos, e as células foram cultivadas a 80-90% de confluência. No dia do ensaio, as células foram tripsinizadas e ressuspensas em tampão de Krebs-Henseleit (KHB), pH 7,4 a 5 x 10⁶ milhões de células/mL. As células foram préincubadas durante 15 min na placa de ensaio antes da adição de composto de teste ou substrato.

[0488] Os compostos de teste foram diluídos em série em DMSO e depois cravado (2 pL) em tampão em 0,4 ml de KHB contendo de células tipo selvagem ou transfectadas com OCT2 e incubados durante 10 minutos. O ensaio foi iniciado com a adição de 0,1 mL de 100 μΜ de 14C-TEA em tampão KHB (20 μΜ de concentração final) depois da mistura. A concentração de TEA é baseada no k_m. Após 10 minutos de incubação, a mistura de ensaio foi arrefecida com adição de 0,5 mL de tampão 1X PBS resfriado em gelo. As amostras foram em seguida centrifugadas a 1000 rpm durante 5 minutos e os sobrenadantes foram removidos. As etapas de lavagem foram repetidas quatro vezes com PBS resfriado em gelo. Finalmente, os péletes de células foram Usados com NaOH 0,2 N e deixados repousar à temperatura ambiente durante pelo menos 30 minutos para assegurar uma lise completa. As amostras foram então contadas no contador de cintilação líquida e contagens dpm foram usadas para executar os cálculos necessários. A % de inibição foi calculada como se segue: % de inibição = [1{[OCT2], - [WT]_ni}/{[OCT2]_ni- [WT]_niJ] * 100 onde, [OCT2], representa a contagem dpm na presença de composto de teste, quer para células OCT2, [OCT2]_ni representa a contagem de DPM na ausência de composto de teste para as células OCT2 e [WT]_ni representa a contagem de dpm na ausência de composto de teste para as células do tipo selvagem, respectivamente.

235/239

Tabela 3

Número do Composto	IC50 (nM)
2	240
3	250
5	2230
11	10000
13	610
36	10000
39	358
40	204
41	2823
42	487
45	137
47	6200
48	4909
55	476
63	42
64	94
77	3830
82	10000
83	10000
96	1357
98	3726
99	1506
100	450

[0489] Os dados s dados das Tabelas 1, 2 e 3 representam uma média ao longo do tempo de cada um dos ensaios para cada composto. Para certos compostos, múltiplos ensaios foram realizados ao longo da vida do projeto. Assim, os dados reportados nas Tabelas 1, 2 e 3 incluem os dados informados nos documentos prioritários, bem como

236/239 dados de ensaios executados no período de intervenção.

Exemplo 107

Análise Farmacocinética Após Administração Oral ou Intravenosa em Cães Beagle [0490] A análise farmacocinética foi realizada em vários compostos de teste após à administração intravenosa ou oral em cães bigle.

[0491] Para a análise farmacocinética de compostos administrados por via intravenosa, os compostos de teste foram formulados em etanol a 5%, 55% de PEG 300, e 40% de água a 0,1 mg/mL para infusão IV. Para a análise farmacocinética de compostos administrados por via oral, os compostos de teste foram formulados na forma de uma suspensão aquosa, em 0,1% de Tween 20, 0,5% de HPMC em água Dl LV100 a 1 mg/kg.

[0492] Cada grupo de dosagem consistiu em três cães beagle de raça pura do sexo masculino não puros. No doseamento, os animais pesavam entre 10-13 kg. Os animais foram mantidos em jejum durante a noite antes da administração da dose e até 4 horas após a dosagem. Para os estudos de administração intravenosa, o artigo de teste foi administrado aos animais por infusão intravenosa ao longo de 30 min. A taxa de infusão foi ajustada de acordo com o peso corporal de cada animal para administrar uma dose de 0,5 mg/kg. Para os estudos de administração oral, o artigo de teste foi administrado de acordo com o peso corporal de cada animal para administrar uma dose de 1 mg/kg.

[0493] Para a análise farmacocinética de compostos administrados por via intravenosa, amostras seriadas de sangue venoso (cerca de 1 mL de cada) foram tomadas a partir de cada animal a 0, 0,250, 0,483,

0,583, 0,750, 1,00, 1,50, 2,00, 4,00, 8,00, 12,0, e 24,0 horas depois dosagem. As amostras de sangue foram coletadas em tubos Vacutainer™ contendo EDTA-K2 como o anticoagulante e foram imediatamente colocadas em gelo úmido pendente em centrifugação para

237/239 plasma. Um método LC/MS/MS foi utilizado para medir a concentração do composto de teste no plasma. Uma alíquota de 100 pl de cada amostra de plasma foi adicionada a uma placa de 96 poços limpos, e 400 pL da solução padrão de interna/acetonitrila fria (ACN)/(ISTD) foi adicionado. Após a precipitação de proteínas, uma alíquota de 110 μΙ do sobrenadante foi transferida para uma placa de 96 poços limpa e diluída com 300 mL de água. Uma alíquota de 25 μΙ da solução acima foi injetada em um sistema TSQ Quantum Ultra LC/MS/MS utilizando uma coluna de HPLC Hypersil Gold C₁₈ (50 x 3,0 mm, 5 m; ThermoHypersil Parte # 25.105-053.030). Uma bomba binária em série da Agilent 1200 (P/N G1312A Bin Pump) foi utilizada para a eluição e separação, e um amostrador automático HTS Pal (LEAP Technologies, Carrboro, NC) foi utilizado para injeção da amostra. Um espectrômetro de massa quadrupolo ultra triplo TSQ Quantum foi utilizado no modo de monitorização de reação seletiva (Thermo Finnigan, San Jose, CA). A cromatografia líquida foi realizada utilizando duas fases móveis: a fase móvel A continha 1% de acetonitrila em 2,5 mM de solução aquosa de formiato de amônio com pH de 3,0, e a fase móvel B continha 90% de acetonitrila em 10 mM de formato de amônio com pH de 4,6. A análise farmacocinética não compartimental foi realizada nos dados de concentração-tempo plasmática. Os dados resultantes estão apresentados nas três primeiras colunas da Tabela 4. Na Tabela 4, CL referese à recarga, o que caracteriza a taxa à qual a droga é removida do plasma. Quanto menor o afastamento de uma droga é, maior é a meiavida de eliminação no corpo. V_ss refere-se ao volume de distribuição em estado estacionário e indica quão bem uma droga é distribuída para os tecidos. Quanto maior for o V_ss, mais tempo a meia-vida de eliminação tem no corpo. MRT refere-se ao tempo médio de residência, que é uma medida do tempo médio de moléculas que existem no corpo.

238/239 [0494] Para a análise farmacocinética de compostos administrados por via oral, as amostras de sangue venoso em série (cerca de 0,3 ml cada uma) foram tomadas a partir de cada animal nos pontos de tempo de 0, 0,25, 0,50, 1,0, 2,0, 4,0, 6,0, 8,0, 12,0 e 24,0 horas após a administração. As amostras de sangue foram coletadas, preparadas e analisadas de um modo semelhante ao dos estudos intranvenosos descritos acima. A análise farmacocinética não compartimental foi realizada nos dados de concentração-tempo plasmática. Os dados resultantes estão apresentados nas últimas três colunas da Tabela 4. Na Tabela 4, F(%) refere-se a biodisponibilidade oral. C_max refere-se à concentração de pico no plasma do composto após a administração. AUC refere-se à área sob a curva e é uma medida da exposição total do plasma do composto indicado.

Tabela 4

Composto #	CL (L/h/kg)	Vss (L/kg)	MRT (h)	F (%) suspensão aquosa	Cmax(pM) suspensão aquosa	AUC (pM*h) suspensão aquosa
98	0,047	0,16	3,3	n/a	n/a	n/a
83	0,161	0,38	2,4	n/a	n/a	n/a
55	0,058	0,24	4,2	n/a	n/a	n/a
77	0,300	0,64	2,2	n/a	n/a	n/a
41	0,015	0,11	7,5	10,7	2,4	16,3
42	0,020	0,15	7,1	28,0	4,5	28,6
47	0,014	0,10	7,4	12,6	2,8	20,4
8	0,498	0,87	1,8	n/a	n/a	n/a
7	0,510	1,20	2,3	n/a	n/a	n/a
3	0,047	0,23	4,9	18,7	1,2	9,2
2	0,030	0,20	6,5	40,7	7,8	66,1

[0495] Todas as patentes U.S., publicações de pedido de patente U.S., pedidos de patentes U.S., patentes estrangeiras, pedidos de patentes estrangeiras e publicações não patentes referidas nesta especificação são aqui incorporadas por referência, na sua totalidade, na medida em que não são incompatíveis com a presente descrição.

239/239 [0496] A partir do que precede será apreciado que, embora modalidades específicas da invenção tenham sido aqui descritas para efeitos de ilustração, várias modificações podem ser feitas sem se desviar do espírito e âmbito da invenção. Por conseguinte, a invenção não está limitada exceto pelas reivindicações anexas.

Claims (9)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

3. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação

2, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um ou mais agentes terapêuticos adicionais.

4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação

3, caracterizada pelo fato de que o um ou mais agentes terapêuticos adicionais é um agente anti-HIV.

5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação

4, caracterizada pelo fato de que o um ou mais agentes terapêuticos adicionais é selecionado do grupo consistindo em inibidores de HIV protease, inibidores de transcriptase reversa de HIV não nucleosídicos, inibidores de transcriptase reversa de HIV nucleosídicos, inibidores de transcriptase reversa de HIV nucleotídicos, e suas combinações.

6. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a reivindicação 1 ou composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 5, caracterizado(a) pelo fato de que é para utilização no tratamento de uma infecção

Petição 870180137638, de 04/10/2018, pág. 12/12

2/2 por HIV em um humano que tem ou está em risco de ter a infecção.

7. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a reivindicação 1 ou composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 5, caracteriza-

5 do(a) pelo fato de ser para utilização em terapia médica.

8. Uso de um composto, como definido na reivindicação 1, ou de uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 2 a 5, caracterizado pelo fato de ser para preparação de uma composição / medicamento, respectivamente, para o tra-

10 tamento de uma infecção por HIV em um humano que tem ou está em risco de ter a infecção.

9. Uso de um composto, como definido na reivindicação, ou de uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 2 a 5, caracterizado pelo fato de ser para preparação de

15 uma composição / medicamento, respectivamente, em terapia médica.