BR112013014236B1 - Composição cosmética ou de limpeza e produto de consumo - Google Patents

Composição cosmética ou de limpeza e produto de consumo Download PDF

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Abstract

composição totalmente natural e produto de consumo. a presente invenção fornece uma formulação que compreende vários extratos naturais para uma variedade de aplicações humanas.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO
Esta invenção refere-se a formulações que compreendem saponinas e usos das mesmas em uma variedade de aplicações cosméticas, terapêuticas e conservantes.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Conforme conhecido na técnica, saponinas são compostos construídos de uma porção química de esteroide ou triterpeno (aglicona ou sapogenina) e uma ou duas porções químicas de glicosídeo (monodesmosídeos ou bidesmosídeos, respectivamente). A cadeia principal de carbono de aglicona pode ser saturada ou insaturada e/ou pode compreender um heteroátomo tal como nitrogênio. A porção química de glicosídeo contém açúcares tais como galactose, glicose, ácido glicurônico,metilpentose, ramnose e xilose.
A família saponina é conhecida por ter uma ampla gama de atividades biológicas tais como atividades citotóxica, anti-herbívora e/ou antimicrobiana e seu papel na natureza é provável de ser a defesa contra patógenos, pragas e predadores. E plantas, saponinas parecem agir como barreiras antimicrobianas pré-formadas ao ataque de patogênio mas pode funcionar, ainda, como supressores respostas de defesa induzidas após hidrólise [1].
Preocupação pública sobre a segurança de conservantes sintéticos usados em cosméticos e alimentos, especialmente em relação a seu acúmulo e subsequente efeito na saúde, têm conduzido autoridades de saúde a reduzir as concentrações aplicadas ou até mesmo a banir conservantes sintéticos. Alternativas tais como substâncias antimicrobianas vegetais estão no foco de muitas pesquisas, entretanto, devido à baixa potência, faixa estreita e preços altos, as mesmas são raramente usadas para substituir conservantes sintéticos.
O estado da técnica inclui tentativas de utilizar compostos de ocorrência natural em composições cosméticas. Por exemplo: O documento n2 US 2011/0020302 [2] revela uma composição cosmética que compreende ingredientes de ocorrência natural que têm de 0,1 a 20 p/p de espécies de Lonicera. O documento n2 WO 2000/072861 [3] revela um método de extração de substâncias bioativas tais como saponinas de plantas através de extrações de fluido supercritica. O documento WO n2 1998/048768 [4] revela uma composição cosmética que compreende extratos de espécies de Camellia e Lonicera como possiveis aditivos. 0 documento n2 US 2006/0018867 [5] revela uma composição cosmética que compreende compostos de épsilon polilisina que contêm poliorganossiloxano e um agente antimicrobiano. Extrato de Lonicera japonica é mencionado dentre uma lista muito longa como um agente anti- inflamatório, um adstringente e como um inibidor de tirosinase. Saponinas são mencionadas como agentes antimicrobianos e como inibidor de pigmentação. O pedido também ensina a adição opcional de uma saponina como um umectante e/ou um tensoativo natural. O documento n2 WO 2009153800 [6] ensina extrações de saponinas de Sapindus trifoliatus.
REFERÊNCIAS [1] "The saponins - polar isoprenoids with important and diverse biological activities" A. Osbourn, et al., Nat. Prod. Rep., 2011, 28, 1261; [2] Pedido n2 U.S. 2011/0020302; [3] WO 2000/072861; [4] WO 1998/048768; [5] Pedido n° U.S. 2006/0018867; [6] WO 2009153800; [7] Patente n- U.S. 4.247.569; [8] Patente n- U.S. 2.996.540; [9] Pedido n- U.S. 2010/183528.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Os inventores da invenção constataram, de modo surpreendente, que composições de pelo menos um material de saponina e um extrato de pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado a partir de Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou qualquer mistura de extratos dos mesmos exibem atividade biológica, por exemplo, atividade antimicrobiana, que é superior à atividade demostrada para cada componente individualmente e que é pelo menos comparável e até mesmo superior às alternativas quimicas conhecidas para um uso particular.
Em seu primeiro aspecto, a invenção fornece uma composição que compreende pelo menos um material de saponina e um extrato de pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado dentre Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou uma mistura dos mesmos.
Conforme usado no presente documento, o "material de saponina" é pelo menos um composto de saponina obtido naturalmente, conforme conhecido na técnica. Quando isolada de uma fonte natural, a pelo menos uma saponina pode ser usada em sua forma substancialmente pura (nomeadamente pelo menos 85%, 87%, 92%, 95%, ou 98% de pureza) , ou pode ser usada como um extrato que contém saponina isolado através de um método conhecido na técnica ou através de um método da invenção, conforme revelado no presente documento.
Em conformidade com a presente invenção, o extrato que contém saponina (referido no presente documento para fins de concisão como "extrato de saponina") contém pelo menos entre 0,2% e 95%, em peso, de saponinas, dentre o peso total do teor seco do extrato. Em algumas modalidades, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 0,2% e 99%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato.
Em algumas modalidades, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 10% e 80%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato. Em outras modalidades, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 10% e 60%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato. Em modalidades adicionais, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 10% e 50%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato. Em modalidades adicionais, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 10% e 40%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato. Em modalidades ainda adicionais, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 10% e 30%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato.
Em algumas modalidades, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 10% e 20%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato.
Em algumas modalidades, o extrato usado em conformidade com a presente invenção compreende entre 0,2% e 10%, em peso, de saponinas dentre o peso total do teor seco do extrato.
O extrato que contém saponina pode ser obtido a partir de qualquer fonte natural conhecida por compreender saponinas. Tal fonte natural pode ser uma fonte vegetal, algumas das quais são detalhadas acima, e também a partir de uma fonte não vegetal tal como fontes animais e organismos maritimos, tais como asteroides e holotúrias. Em algumas modalidades da invenção, as saponinas são extraidas a partir de uma fonte vegetal, naturalmente cultivada ou geneticamente modificada para ter um alto teor de saponina.
Em algumas modalidades da invenção, o material de saponina é obtido através da extração de uma fonte vegetal empregando-se água, álcool ou uma solução de água/álcool. Em algumas modalidades, o álcool é etanol ou metanol.
Em algumas modalidades, a extração é alcançada empregando-se uma solução de água/álcool. Em algumas modalidades, a solução de água/álcool tem uma razão de água:álcool entre 80:20 e 20:80. Em modalidades adicionais, a solução de água/álcool tem uma razão de água:álcool entre 60:40 e 40:60. Em modalidades adicionais, a solução de água/álcool é água/álcool a 80:20, água/álcool a 60:40, água/álcool a 50:50, razão de água/álcool a 40:60 ou água/álcool a 20:80.
O tempo de extração pode variar sem limitação de 1 a 8 horas, em ou acima da temperatura ambiente (20 °C a 30 °C), por exemplo, acima de 30 °C, 40 °C, 50 °C ou 60 °C. Em algumas modalidades, a extração é realizada a uma temperatura entre 30 °C e 70 °C.
Em algumas modalidades, o material de saponina é obtido a partir de uma fonte vegetal. A fonte vegetal pode ser selecionada a partir de shikakai, soja, feijão, ervilha (Pisum sativum) , alfafa, chá, espinafre, beterraba sacarina, quinoa, alcaçuz, girassol, castanha-da-india, ginseng, aveia, pimentas capsicum, berinjela, sementes de tomate, allium, aspargo, inhame, feno-grego, yucca e ginseng, alfafa, feijão- mungo, Bupleurum falcatum, Camellia oleifera, Camellia Gypsophila, quinqufolius, Panax japonicas, Quillaja saponaria, Sapindus delavayi, Sapindus mukorossi, Sapindus marginatus, Sapindus saponaria, Sapindus trifoliatus, Saponaria officinalis, Styrax japonica, e Yucca schidigera ou qualquer mistura dos mesmos. Qualquer parte da planta pode ser usada para a extração do material de saponina, incluindo folhas, caules, raizes, bulbos, flor e fruto (incluindo a pele, carne e semente do fruto) .
Em algumas modalidades, o material de saponina é um extrato de Camellia sinensis, Camellia oleifera, Saponaria officinalis ou Sapindus mukorossi ou uma mistura dos mesmos.
Em outras modalidades, o material de saponina é urn extrato de Camellia oleifera, ou Sapindus mukorossi ou uma mistura dos mesmos.
O material de saponina obtido a partir de uma fonte vegetal, por exemplo, Camellia oleifera e/ou Sapindus mukorossi, pode ser extraido conforme revelado abaixo no presente documento. Em algumas modalidades, o processo de extração compreende: tratar a fonte vegetal em uma solução de água/álcool sob condições que permitem a extração do material de saponina para a solução. 0 material que contém saponina assim extraido pode subsequentemente ser purificado através de qualquer meio conhecido na técnica, incluindo: filtração, centrifugação, recristalização, destilação, adsorção, métodos cromatográficos, fracionamento, etc.
Em algumas modalidades, a fonte vegetal é primeiramente ressecada e moida antes de ser tratada na solução de água/álcool.
Em algumas modalidades, o material de saponina é extraido de uma fonte vegetal que segue um método que compreende: 1. tratar a fonte vegetal em uma solução de água: álcool de 40:60 a 60:40 por um periodo de tempo e sob condições que permitem a extração do material de saponina da dita fonte vegetal para a dita solução, conforme definido acima no presente documento; 2. opcionalmente, evaporar a solução que contém saponina para obter um material sólido que contém saponina; e 3. opcionalmente, purificar o dito material sólido que contém saponina.
Em algumas modalidades, a fonte vegetal é uma ou ambas dentre Camellia oleifera e Sapindus mukorossi. Em algumas modalidades, a fonte vegetal é Sapindus mukorossi e o material de saponina é extraido da casca da noz. Em outras modalidades, a fonte vegetal é Camellia oleifera e em algumas modalidades o material de saponina é extraido da farinha de semente desengordurada de Camellia oleifera.
Conforme mencionado acima, a composição da invenção compreende pelo menos um material de saponina e um extrato de pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado dentre Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou uma mistura de extratos dos mesmos. Deve-se entender que o extrato pode ser um extrato de mais de uma planta selecionada a partir de Lonicera, Populus, Salix e Wasabia e que cada planta pode ser selecionada a partir do mesmo gênero ou a partir de um gênero diferente. Deve ser adicionalmente entendido que a presente invenção adicionalmente contempla uma composição que compreende misturas de extrato, preparadas e formuladas individualmente ou preparadas em uma tigela a partir de uma mistura de fonte vegetal (partes vegetais).
O gênero "Lonicera" contém um grupo de arbustos arqueados ou vinhas geminadas na familia Caprifoliaceae que são comumente conhecidos como Madressilvas. Espécies conhecidas incluem Lonicera periclymenum (Madressilva Europeia ou do tipo Woodbine), Lonicera japonica (Madressilva Japonesa, Madressilva Branca ou Madressilva Chinesa) e Lonicera sempervirens (Madressilva Coral, Madressilva Trompete, ou Madressilva do tipo Woodbine).
Em algumas modalidades, o extrato de Lonicera é um extrato de Lonicera periclymenum (Madressilva Europeia ou do tipo Woodbine) , Lonicera japonica (Madressilva Japonesa, Madressilva Branca ou Madressilva Chinesa) e/ou Lonicera sempervirens (Madressilva Coral, Madressilva Trompete, ou Madressilva do tipo Woodbine). Em outras modalidades, o extrato de Lonicera é um extrato de Lonicera japonica (Madressilva Japonesa, Madressilva Branca ou Madressilva Chinesa).
O gênero "Populus" compreende espécies de plantas de floração decidua na familia Salicaceae. Espécies desse gênero incluem aspen (por exemplo, Populus adenopoda, Populus alba, Populus grandidentata, Populus sieboldii, Populus tremula e Populus tremuloides), e salgueiro branco (por exemplo, Populus deltoids, Populus fremontii e Populus nigra) .
Em algumas modalidades, o extrato de Populus é um extrato de aspen (por exemplo, Populus adenopoda, Populus alba, Populus grandidentata, Populus sieboldii, Populus tremula e Populus tremuloides), e/ou salgueiro branco (por exemplo, Populus deltoids, Populus fremontii e Populus nigra). Em outras modalidades, o extrato de Populus é um extrato de aspen selecionado a partir de Populus adenopoda, Populus alba, Populus grandidentata, Populus sieboldii, Populus tremula e Populus tremuloides. Em outras modalidades, o extrato é de Populus tremuloides.
O gênero "Salix" que pertence à familia Salicaceae especificamente inclui as espécies Salix herbacea, Salix babylonica, Salix alba, Salix x sepulcralis (salgueiro chorão), e inclui, ainda, entre outros, as espécies Salix aegyptiaca, Salix alaxensis, Salix alba, Salix amplexicaulis, Salix amygdaloides, Salix ansoníana, Salix apennina, Salix apoda, Salix appendiculata, Salix arbuscula, Salix arctica,
Salix argyracea, Salix arizonica, Salix armenorossica, Salix atrocinerea, Salix aurita, Salix babylonica, Salix balfouriana, Salix barclayi, Salix bebbiana, Salix bi color, Salix bikouensis, Salix bonplandiana, Salix boothii, Salix brachycarpa, Salix breviserrata, Salix breweri, Salix burqinensis, Salix caesia, Salix calcicola, Salix calliantha, Salix canariensis, Salix Candida, Salix cantabrica, Salix capensis, Salix capitata, Salix caprea, Salix capusii, Salix carmanica, Salix caroliniana, Salix caspica, Salix cavaleriei, Salix chaenomeloides, Salix cinerea, Salix cordata, Salix delnortensis, Salix discolor, Salix drummondiana, Salix eastwoodiae, Salix eriocephala, Salix excelsa, Salix exigua, Salix fargesii, Salix floderusii, Salix fluviatilis, Salix foetida, Salix fragilis, Salix geyeriana, Salix gilgiana, Salix glabra, Salix glauca, Salix glaucosericea, Salix gooddingii, Salix gordejevil, Salix graciliglans, Salix gracilistyla, Salix hastata, Salix hegetschweileri, Salix helvetica, Salix herbacea, Salix hookeriana, Salix humboldtiana, Salix humilis, Salix hylematica, Salix integra, Salix irrorata, Salix japonica, Salix jejuna, Salix jepsonii, Salix jessoensis, Salix koreensis, Salix koriyanagi, Salix laevigata, Salix lanata, Salix lapponum, Salix lasiolepis, Salix lemmonii, Salix ligulifolia, Salix linearistipularis, Salix longiflora, Salix longistamina, Salix lucida, Salix lutea, Salix magnifica, Salix matsudana, Salix maximowiczii, Salix medwedewii, Salix melanopsis, Salix microstachya, Salix mielichhoferi, Salix miyabeana, Salix moupinensis, Salix mucronata, Salix muscina, Salix myricoides, Salix myrsinifolia, Salix myrsinites, Salix myrtilloides, Salix neowilsonii, Salix nigra, Salix nivalis, Salix orestera, Salix paraplesia, Salix pauciflora, Salix pedicellata, Salix pellita, Salix pentandra, Salix petiolaris, Salix phlebophylla, Salix phylicifolia, Salix planifolia, Salix polaris, Salix prolixa, Salix purpurea, Salix pyrenaica, Salix pyri folia, Salix pyroli folia, Salix rehderiana, Salix repens, Salix reptans, Salix reticulata, Salix retusa, Salix retusoides, Salix rorida, Salix rosmarinifolia, Salix sajanensis, Salix salviifolia, Salix schwerinii, Salix scouleriana, Salix sericea, Salix seríssima, Salix serpyllifolia, Salix sessilifolia, Salix sitchensis, Salix siuzevii, Salix starkeana, Salix subopposita, Salix subserrata, Salix suchowensis, Salix sungkianica, Salix taxi folia, Salix tenuijulis, Salix tetrasperma, Salix triandra, Salix turanica, Salix turfacea, Salix udensis., Salix uva-ursi, Salix variegata, Salix vestita, Salix viminalis, Salix vulpina, Salix waldsteiniana, Salix wallichiana, Salix wilhelmsiana, Salix wilsonii, Salix yezoalpina.
Em algumas modalidades, o extrato de uma espécie que pertence ao gênero Salix é Salix alba. Em algumas modalidades, o extrato de um espécie que pertence ao gênero Salix é extraida das folhas e em algumas modalidades é extraido da casca da planta.
O gênero "Wasabia" que pertence à familia Brassicaceae inclui, entre outros, as espécies Wasabia japonica, Wasabia koreana, Wasabia tetsuigi, Wasabia tenuis, Wasabia bracteata, Wasabia okinosimensis, Wasabia pungens, Wasabia thibeticum e Wasabia yunnanensis. Em algumas modalidades, o extrato de Wasabia é um extrato de Wasabia j aponica, Wasabia koreana, Wasabia tetsuigi, Wasabia tenuis, Wasabia bracteata, Wasabia okinosimensis, Wasabia pungens, Wasabia thibeticum e/ou Wasabia yunnanensis. Em outras modalidades, o extrato de Wasabia é um extrato de Wasabia japonica.
O extrato das fontes vegetais identificadas acima pode ser obtido de qualquer parte da planta, incluindo folhas, caules, raizes, bulbos, flor e fruto (incluindo a pele, carne e semente do fruto). Em algumas modalidades, os extratos são obtidos da noz de Sapindus mukorossi, da farinha de semente de Camellia oleifera, da flor e brotos de Lonicera japonica, da raiz de Wasabia japonica, da casca de Populus tremuloides ou de uma combinação dos mesmos. Em outras modalidades, cada um dos extratos vegetais é obtido comercialmente.
Em algumas modalidades, a composição da invenção compreende um material de saponina e pelo menos um extrato selecionado a partir de Lonicera japonica, Populus tremuloides, Salix alba e Wasabia japonica.
Geralmente, nas composições da invenção, a razão peso/peso (p/p) entre o material de saponina e cada um dos extratos de uma espécie que pertence ao gênero Lonicera,
Populus, Salix ou Wasabia pode variar de modo independente de entre 1:100 a 100:1 (material de saponina:extrato de espécie). Em algumas modalidades, a razão peso/peso entre o material de saponina e cada um dos extratos é de modo independente cerca de 1:10 a 1:100. Em algumas modalidades, a razão peso/peso entre o material de saponina e cada um dos extratos é de modo independente cerca de 1:100, 1:90, 1:80, 1:70, 1:60, 1:50, 1:40, 1:30, 1:20, 1:15, 1:10, 1:9, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1; 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, 20:1, 30:1, 40:1, 50:1, 60:1, 70:1, 80:1, 90:1 ou cerca de 100:1.
Em algumas modalidades, o peso do material de saponina pode estar em excesso em comparação com os outros componentes ativos na composição final.
Em algumas modalidades, a quantidade do material de saponina do peso total dos materiais sólidos na composição está na faixa de 0,33 a 99%, em peso.
Em algumas modalidades, a quantidade do material de saponina do peso total da composição está na faixa de 1 a 30% , em peso . Em outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição que compreende pelo menos um material de saponina, um salicilato e/ou salicina (2- (hidroximetil)fenil-β-D-glicopiranosideo).
Conforme usado no presente documento, "salicilato" se refere a um derivado de ácido salicilico (ácido 2- hidroxibenzenocarboxilico), que pode ser obtido de modo natural ou sintético. 0 termo engloba a forma de sal (sal de adição de base) de ácido salicilico bem como ésteres e amidas de ácido salicilico. Os sais de ácido salicilico podem ser sais de amina ou de metal, derivados de metais alcalino terroso ou alcalino ou aminas orgânicas e amónia. De acordo com algumas modalidades, a composição compreende ésteres de salicilato tais como salicilato de metila, salicilato de etila, salicilato de propila, salicilato de butila, salicilato de pentila, salicilato de hexila, salicilato de ciclohexila, salicilato de benzila e outros.
Em algumas modalidades, o pelo menos um salicilato é derivável de pelo menos uma fonte vegetal. Em modalidades adicionais, a fonte vegetal é pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado a partir de Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou uma mistura dos mesmos, conforme definido acima no presente documento.
Em algumas modalidades, o pelo menos um salicilato é derivável de uma planta selecionada a partir de Bétula lenta (bétula doce), Bétula pendula (bétula branca), Filipendula ulmaria (ulmária), Gaultheria procumbens (gaultéria), Populus balsamifera (choupo bálsamo), Populus nigra (choupo negro), Populus candicans (bálsamo de gilead), Salix alba (salgueiro branco) e Viburnum prunifolium (espinheiro preto).
Em algumas modalidades, a composição compreende um material de saponina e pelo menos um dentre extrato de Lonicera japonica, extrato de Wasabia japonica e/ou extrato de Populus tremuloides, e salicilato.
Em algumas modalidades, a composição da invenção compreende adicionalmente um ou mais dentre arbutina (obtenivel a partir de uva ursina) , ácido leontopódico (obtenivel através de extração de edelvais) e ácido clorogênico (obtenivel através de extração de chá verde, maçã, batata, lonicera e outras fontes).
As composições da invenção podem ser preparadas através de qualquer método comumente usado para preparar uma composição de materiais. Por exemplo, os componentes da composição podem ser adicionados como sólidos e misturados juntos, ou um dos componentes pode ser adicionado ao outro na forma de uma solução que pode, se desejado, ser evaporada ou liofilizada após mistura para obtenção de uma solução homogênea.
Conforme será adicionalmente demonstrado abaixo, as composições da invenção exibem propriedades antimicrobianas, não rasgáveis, ativa em superfície, de espumação, de limpeza, antioxidante, umectante e amaciante que tornam as composições adequadas para uma variedade de aplicações nos campos de, por exemplo, cosméticos, terapêuticos, gêneros alimentícios e como conservação de material. A composição da invenção pode, assim, ser formulada em uma variedade de formulações, tais como uma formulação cosmética, uma formulação terapêutica, uma formulação antimicrobiana, uma formulação de aditivo alimentar e uma formulação de conservante. Cada uma das formulações supramencionadas podem compreender adicionalmente um excipiente, diluentes ou carreador adequados para a aplicação particular, juntamente com pelo menos um aditivo adicional conforme revelado no presente documento.
Em outro de seus aspectos, as invenção fornece uma formulação de limpeza ou cosmética que compreende pelo menos um material de saponina e um extrato de pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado dentre Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou uma mistura de extratos dos mesmos, conforme definido nas várias modalidades acima.
As formulações cosméticas/de limpeza de acordo com a invenção são tipicamente formuladas em uma forma adaptada para aplicação tópica que compreende um meio dermatologicamente ou cosmeticamente aceito, nomeadamente um meio que é adequado para aplicação na pele de um indivíduo (humano ou não humano) . O meio pode estar na forma de uma solução aquosa ou hidroalcoólica, uma emulsão de óleo em água ou água em óleo, uma microemulsão, géis anidros ou aquosos, soro ou uma dispersão de vesiculas, um emplastro, creme, pulverizador, pomada, unguento, loção, gel, solução, suspensão ou qualquer outra formas cosmeticamente aceitáveis conhecidas. A formulação pode alternativamente ser formulada para aplicação à pele humana, cabelo, cilios, sobrancelhas ou unhas.
Além disso, a formulação pode conter outros aditivos padrões tais como um emoliente, hidratante, espessante, emulsificante, neutralizador, agente de coloração, uma fragrância, absorvente ou filtro, conservante e/ou agente formador de gel tais como aqueles descritos abaixo, carga tal como nylon, um agente de proteção solar, eletrólitos, proteinas, antioxidante e agentes quelantes.
A formulação pode adicionalmente compreender, ainda, pelo menos um ingrediente ativo tal como ingredientes ativo de peptideo, extratos de vegetal, agentes antienvelhecimento, agentes antirrugas, agentes suavizantes, sequestrantes de radical, agentes de absorção de UV, agentes que estimulam a sintese de macromoléculas dérmicas ou o metabolismo de energia, agentes de hidratação, agentes bactericidas, agentes fungicidas, agentes anti-inflamatórios, agentes anestésicos, agentes que modulam pigmentação, despigmentação ou diferenciação cutânea, agentes que estimulam o crescimento capilar ou das unhas.
Em algumas modalidades, cada um dos ingredientes ativos/aditivos supramencionados está geralmente presente em uma quantidade de entre cerca de 0,1 a 30%, em peso, do peso total da formulação.
Emolientes adequados para uso em uma formulação de limpeza/cosmética de acordo com a invenção incluem, por exemplo, opcionalmente ácido graxos insaturados C8-C5Q hidróxi-substituidos e ésteres dos mesmos, ésteres C1-C24 de ácidos graxos saturados C8-C3o tais como miristato de isoproprila, palmitato de cetila e octildodecilmiristato (Wickenol 142), cera de abelha, álcoois graxos insaturados e saturados tais como álcool de behenila e álcool cetila, hidrocarbonetos tais como óleos minerais, petrolato, esqualano, ésteres de sorbitano graxos, lanolina e derivados de lanolina, tais como álcool de lanolina, lanolinas acetiladas, hidroxiladas e etoxiladas, colesterol e derivados dos mesmos, triglicerideos animais e vegetais tais como óleo de amêndoa, óleo de amendoim, óleo de gérmen de trigo, óleo de linhaça, óleo de jojoba, óleo de caroços de damasco, nozes, nozes de babaçu, pistache, sementes de gergelim, semente de colza, óleo de oxicedro, óleo de milho, óleo de caroço de pêssego, óleo de semente de papoula, óleo de pinho, óleo de ricino, óleo de soja, óleo de abacate, óleo de açafrão, óleo de coco, óleo de avelã, óleo de oliva, óleo de semente de uva e óleo de semente de girassol e, ésteres C1-C24 de ácidos trimeros e dímeros tais como dimerato de diisopropila, diisoestearilmalato, diisoestearildimerato e triisoesteariltrimerato.
Em algumas modalidades, os emolientes usados em uma formulação de acordo com a invenção incluem álcool de isocetila, palmitato de octila, neopentanoato de isoestearila e estearato de isocetil estearila, óleos sintéticos ou naturais selecionados a partir de mineral, óleos animais e vegetais, gorduras e ceras, ésteres de ácido graxo, álcoois graxos, ésteres e éteres de alquileno glicol e polialquileno glicol, ácidos graxos e misturas dos mesmos.
Os emolientes podem ser usados de modo independente ou em misturas e podem estar presentes na composição da presente invenção em uma quantidade de cerca de 1 a cerca de 98%, em peso, e em algumas modalidades estão presentes em uma quantidade de cerca de 5% a cerca de 15%, em peso, da formulação total.
Emulsificantes adequados para uso em uma formulação de limpeza/cosmética de acordo com a presente invenção incluem estearato de glicerila e lauret 23, estearato PEG 20, e cloreto de 2-hidroxietilamônio de amidopropil dimetil de vison. Hidratantes tipicos são glicerina, petrolato e óleo de vegetal maleado.
A formulação da invenção pode conter, ainda, um agente formador de gel hidrofilico. Em algumas modalidades, o agente formador de gel é selecionado dentre tais que têm uma viscosidade (1% de solução aquosa, 20 °C, RVT Brookfield) de pelo menos cerca de 4.000 mPa. De acordo com outras modalidades, o agente formador de gel tem uma viscosidade de cerca de 10.000 mPa ou pelo menos 50.000 mPa.
Em outras modalidades, os agentes formadores de gel hidrofilico são selecionados a partir de polimeros solúveis em água coloidais ou solúveis em água, tais como éteres de celulose (por exemplo, hidroxietil celulose, metil celulose, hidroxipropilmetil celulose), álcool de polivinila, poliquatérnio-10, goma guar, goma guar de hidroxipropila, goma de xantana, gel de Aloe vera, sarandi, carragenina, farinha de aveia, amido (de milho, arroz, ou outras plantas), gelatina (pele porcina) , goma ghatti, goma arábica, inulina (de chicória), goma Konjac, goma de alfarrobeira, sais de malvaisco, pectina, extrato de quinoa, alga vermelha, goma sola e goma de tragacanto(TG).
Em modalidades adicionais, os agentes formadores de gel hidrofilico são selecionados dentre copolímeros de etil acrilato/ácido acrilico e os polímeros de carboxivinila vendidos pela B.F. Goodrich Company sob a marca comercial de resinas Carbopol. Essas resinas consistem essencialmente em um polímero reticulado de poliéter de polialquenila solúvel em água coloidal de ácido acrilico reticulado com 0,75% a 2,00% de um agente de reticulação tal como polialil sacarose ou polialil pentaeritritol. Exemplos incluem Carbopol 934, Carbopol 940, Carbopol 950, Carbopol 980, Carbopol 951 e Carbopol 981. Carbopol 934 é um polimero solúvel em água de ácido acrilico reticulado com cerca de 1 de polialil éter de sacarose que tem uma média de cerca de 5,8 grupos alila para cada molécula de sacarose. Também adequados para uso no presente documento são polimeros reticulados hidrofobicamente modificados de ácido acrilico que têm propriedades anfipáticas disponíveis sob o Nome Comercial Carbopol 1382, Carbopol 1342 e Pemulen TR-1. Uma combinação do polimero de ácido acrilico reticulado de polialquenil poliéter e do polimero de ácido acrilico reticulado hidrofobicamente modificado também é adequada para uso no presente documento.
Outros agentes formadores de gel adequados para uso no presente documento são oleogéis tais como trihidroxiestearina e hidróxi estearato de aluminio magnésio.
Em algumas modalidades, o agente formador de gel está presente na formulação de limpeza/cosmética em uma quantidade de cerca de 0,01% a cerca de 10% do peso total da formulação. Em algumas modalidades, a formulação compreende um agente formador de gel hidrofilico em uma quantidade entre cerca de 0,02% a cerca de 2%. Em outras modalidades, a quantidade do agente formador de gel é de cerca de 0,02% a cerca de 0,5%.
A formulação de limpeza/cosmética pode compreender, ainda, um espessante, tal como metilviniléteres de anidrido- alquil maleicos reticulados, e copolimeros, comercialmente disponíveis como Stabilizes QM (International Specialty Products (ISP)), Carbômero, gomas naturais, copolimero de polimetacrilato altamente reticulado, tal como Microspongess 5647, que assumem a forma de partículas geralmente esféricas de polímero hidrofóbico reticulado que tem um tamanho de poro de cerca de 0,01 a cerca de 0,05 μm e uma área de superfície de 200 a 300 m2/g.
Agentes de neutralização adequados para uso em uma formulação de limpeza/cosmética da invenção incluem grupo ácido neutralizador que contém agentes formadores de gel hidrofilico, conforme listado no presente documento, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de amónio, monoetanolamina, dietanolamina e trietanolamina e propanol de aminometila.
Em algumas modalidades, a formulação de limpeza/cosmética compreende um ou mais agentes de absorção de ultravioleta. Agentes de absorção de ultravioleta, frequentemente descritos como agentes de proteção solar, podem estar presentes em uma concentração entre cerca de 1% e cerca de 25%, em peso, com base no peso total da composição. De acordo com algumas modalidades da invenção, o agente de absorção de UV constitui entre cerca de 2% e 15%, em peso. De acordo com outras modalidades, o agente de absorção de UV constitui entre cerca de 4% e cerca de 10%, em peso. Exemplos não limitantes de agente de absorção de ultravioleta incluem benzofenona-3, benzofenona-4 , octil dimetil PABA (Padimato 0), octil metóxi cinamato, octil salicilato, octocrileno, cânfora de p-metilbenzilideno, butil metóxi dibenzoil metano (Parsol 1789), dióxido de titânio, óxido de zinco e misturas dos mesmos.
A formulação de limpeza/cosmética da invenção pode ser usada no tratamento ou prevenção de formação de rugas, imperfeições da pele, linhas finas, pele rachada, poros ampliados, perdas de firmeza, descoloração, áreas envelhecidas, queratose, perdas de colágeno e outras alterações da derme e epiderme.
Em um aspecto adicional, a invenção fornece uma formulação antimicrobiana que compreende pelo menos um material de saponina e pelo menos um extrato de uma espécie vegetal de um gênero selecionado a partir de Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou uma mistura de extratos dos mesmos, conforme definido no presente documento.
A formulação antimicrobiana da invenção é eficaz na redução ou eliminação de uma população de microrganismo ou de uma biofilme de tais microrganismos. Conforme demonstrado no presente documento, as formulações da invenção fornecem atividade antimicrobiana instantânea e persistente contra um amplo espectro de microrganismos e especificamente contra um vasto espectro de bactérias. O termo "microrganismo" se refere no presente documento a um organismo de célula única (unicelular), de agrupamentos celulares, ou sem célula (acelular) tal como bactérias, fungos, levedura, mofo, arquea, protistas, virus e algas.
Em algumas modalidades, o microrganismo é uma bactéria que é selecionada, em algumas modalidades, a partir de Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis, Brucella suis, Campylobacter jejuni, Chlamydia pneumonia, Chlamydia psittaci, Chlamydia trachomatis, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheria, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli (E. coli), Escherichia coll Enterotoxigênico (ETEC), E. coli Enteropatogênico, Francisella tularensis, Haemophilus influenza, Helicobacter pylori, Legionella pneumophila, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mycoplasma pneumonia, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Pseudomonas aeruginosa, Rickettsia rickettsii, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus mutans, Streptococcus pneumonia, Streptococcus pyogenes, Treponema pallidum, Vibrio cholera, Vibrio harveyi e Yersinia pestis.
Em algumas modalidades, o microrganismo é um fungo, selecionado em algumas modalidades a partir de Absidia corymbifera, Aj ellomyces capsulatus, Ajellomyces dermatitidis, Arthroderma benhamiae, Arthroderma fulvum, Arthroderma gypseum, Arthroderma incurvatum, Arthroderma otae, Arthroderma vanbreuseghemii, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigates, Aspergillus niger, Blastomyces dermatitidis, Candida albicans, Candida albicans var. stellatoidea, Candida dublinensis, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida pelliculosa, Candida tropicalis, Cladophialophora carrionii, Coccidioides immitis, Cryptococcus neof ormans, Cunninghamella sp., Epidermophyton floccosum, Exophiala dermatitidis, Filobasidiella neoformans, Fonsecaea pedrosoi, Geotrichum candidum, Histoplasma capsulatum, Hortaea werneckii, Issatschenkia orientalis, Madurella grisae, Malassezia furfur, complexo de Malassezia furfur, Malassezia globosa, Malassezia obtuse, Malassezia pachydermatis, Malassezia restricts, Malassezia slooffiae, Malassezia sympodialis, Microsporum canis, Microsporum fulvum,
Microsporum gypseum, Microsporum gypseum complex, Microsporum gypseum, Mucor circinelloides, Nectria haematococca, Paecilomyces variotii, Paracoccidioides brasiliensis, Penicillium marneffei, Phialophora verrucosa, Pichia anomala, Pichia guilliermondii, Pneumocystis jirovecii, Pseudallescheria boydii, Rhizopus oryzae, Rodotorula rubra, Saccharomyces cerevisiae, Scedosporium apiospermum, Schizophyllum commune, Sporothrix schenckii, Stachybotrys chartarum, Trichophyton mentagrophytes, complexo de Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum, Trichophyton violaceum, Trichosporon asahii, Trichosporon cutaneum, complexo de Trichosporon cutaneum, Trichosporon inkin e Trichosporon mucoides.
Em algumas modalidades, o microrganismo é uma levedura, que é selecionada, em algumas modalidades, a partir de Candida albicans, Candida albicans var. stellatoidea, Candida dublinensis, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida pelliculosa, Candida tropicalis, Cryptococcus neoformans, Filobasidiella neoformans, Geotrichum candidum, Issatschenkia orientalis, Malassezia furfur, Malassezia pachydermatis, Pichia anomala, Pichia guilliermondii, Pneumocystis jirovecii, Rodotorula rubra, Trichosporon asahii, Trichosporon cutaneum, Trichosporon inkin e Trichosporon mucoides.
Em algumas modalidades, o microrganismo é um mofo, que é selecionado, em algumas modalidades, a partir de Absidia corymbifera, Arthroderma benhamiae, Arthroderma fulvum, Arthroderma gypseum, Arthroderma incurvatum, Arthroderma otae, Arthroderma vanbreuseghemii, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigates, Aspergillus niger, Cladophialophora carrionii, Coccidioides immitis, Epidermophyton floccosum, Exophiala dermatitidis, Fonsecaea pedrosoi, Hortaea werneckii, Madurella grisae, Microsporum canis, Microsporum fulvum, Microsporum gypseum, Microsporum gypseum, Microsporum gypseum, Mucor circinelloides, Nectria haematococca, Paecilomyces variotii, Paracoccidioides brasiliensis, Penicillium marneffei, Pseudallescheria boydii, Rhizopus oryzae, Scedosporium apiospermum, Schizophyllum commune, Sporothrix schenckii, Stachybotrys chartarum, Trichophyton mentagrophytes complex, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum e Trichophyton violaceum.
De acordo com algumas modalidades da invenção, as formulações antimicrobianas da invenção são eficazes contra bactérias tais como Escherichia coli (E. Coli), Salmonella, Staphylococcus, Saccharomyces, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, A. niger conforme exibidas pelo teste de eficácia antimicrobiana fornecido abaixo.
Em algumas modalidades, as formulações antimicrobianas da invenção são eficazes na redução, inibição, eliminação ou prevenção do crescimento de Staphylococcus, E. coli e salmonella.
Em algumas modalidades, as formulações antimicrobianas da invenção são eficazes na redução, inibição, eliminação ou prevenção do crescimento de Streptococcus mutans e Vibrio harveyi.
Em um aspecto adicional, a invenção fornece uma formulação terapêutica (composição farmacêutica) que compreende pelo menos um material de saponina e pelo menos um extrato de uma espécie vegetal de um gênero selecionado a partir de Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou de uma mistura de extratos dos mesmos, conforme definido no presente documento.
A formulação farmacêutica da invenção pode ser eficaz no tratamento e/ou prevenção de uma variedade de doenças e disfunções. Conforme demonstrado abaixo no presente documento, as formulações da invenção fornecem atividade antimicrobiana instantânea e persistente contra um amplo espectro de microrganismos, conforme definido no presente documento. Em algumas modalidades, a doença ou disfunção a ser tratada é associada com infecção bacteriana, infecção fúngica ou infecção viral.
Em algumas modalidades, a composição farmacêutica da invenção é usada no tratamento ou prevenção de uma doença ou disfunção associada com uma infecção bacteriana, em que a dita infecção bacteriana é causada por uma bactéria selecionada, sem limitação, a partir de Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis, Brucella suis, Campylobacter jejuni, Chlamydia pneumonia, Chlamydia psittaci, Chlamydia trachomatis, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheria, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli (E. coli), Escherichia coli Enterotoxigênico (ETEC), E. coli Enteropatogênico, Francisella tularensis, Haemophilus influenza, Helicobacter pylori, Lactobacilli, Legionella pneumophila, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mycoplasma pneumonia, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Plasmodium falciparum, Plasmodium knowlesi, Plasmodium sp., Pseudomonas aeruginosa, Rickettsia rickettsii, Saccharo yces cerevisiae, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus hemolyticus, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus mutans Streptococcus pneumonia,
Streptococcus pyogenes, Treponema pallidum, Vibrio cholera, Vibrio harveyi e Yersinia pestis.
Exemplos não limitantes de doença ou disfunção associada com uma infecção bacteriana incluem doença de lyme, brucelose, enterite aguda, ornitose, uretrite não gonocócica (NGU), tracoma, conjuntivite de inclusão do recém-nascido (ICN), linfogranuloma venéreo (LGV), botulismo, colite pseudomembranosa, gangrena gasosa, intoxicação alimentar aguda, celulite anaeróbica, tétano, difteria, infecções nosocomiais, infecções do trato urinário (UTI), diarreia, meningite, meningite em infantes, colite hemorrágica, sindrome hemolitico-urêmica, tularemia, infecções do trato respiratório superior, pneumonia, pneumonia por micoplasma, pneumonia secundária, bronquite, úlcera péptica, doença do legionário, linfoma de gástrico células B, febre de pontiac, leptospirose, listeriose, lepra (doença de Hansen), tuberculose, gonorreia, oftalmia neonatal, doença meningocócica, Waterhouse- Friderichsen, infecção localizada (do olho, ouvido, pele, urinária, respiratória), infecção do trato gastrointestinal, infecção do sistema nervoso central, infecção sistêmica com bacteremia, infecções das articulações ou ósseas, endocardite, salmonelose do tipo febre tifoide, disenteria, colite, salmonelose com gastroenterite e enterocolite, disenteria bacilar/shigelose, faringite estreptocócica, escarlatina, febre reumática, impetigo e erisipela, febre puerperal, fasciite necrosante, sifilis, sifilis congenital e cólera.
Em algumas modalidades, a doença ou disfunção bacteriana é associada infecções por Staphylococcus ou Escherichia coli (E. coli) ou salmonela; sendo que a doença ou disfunção é selecionada a partir de:
Staphylococcus: infecções estafilocócicas coagulase positivas tais como infecções de pele localizadas, infecção de pele difusa (impetigo), infecções localizadas e profundas, endocardite infecciosa aguda, septicemia, pneumonia necrotizante, toxinoses, sindrome de choque tóxico, intoxicação alimentar estafilocócica, infecções de prótese implantada, por exemplo, cateteres e válvulas cardiacas e cistite em mulheres; E. coli: infecções do trato urinário (UTI), diarreia, meningite em infantes, diarreia de viajante, colite hemorrágica e sindrome hemolitico-urêmica; Salmonela: salmonelose do tipo febre tifoide, disenteria, colite, salmonelose, por exemplo, com gastroenterite e enterocolite.
Em algumas modalidades, a composição farmacêutica da invenção é usada no tratamento ou prevenção de uma doença ou disfunção associada com uma infecção fúngica, em que a dita infecção fúngica é causada por um fungo selecionado, sem limitação, a partir de Absidia corymbifera, Aj ellomyces capsulatus, Ajellomyces dermatitidis, Arthroderma benhamiae, Arthroderma fulvum, Arthroderma gypseum, Arthroderma incurvatum, Arthroderma otae, Arthroderma vanbreuseghemii, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigates, Aspergillus niger, Blastomyces dermatitidis, Candida albicans, Candida albicans var. stellatoidea, Candida dublinensis, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida pelliculosa, Candida tropicalis, Cladophialophora carrionii, Coccidioides immitis, Cryptococcus neoformans, Cunninghamella sp. , Epidermophyton floccosum, Exophiala dermatitidis, Filobasidiella neoformans, Fonsecaea pedrosoi, Geotrichum candidum, Histoplasma capsulatum, Hortaea werneckii, Issatschenkia orientalis, Madurella grisae, Malassezia furfur, Malassezia furfur complex, Malassezia globosa, Malassezia obtuse, Malassezia pachydermatis, Malassezia restricts, Malassezia slooffiae, Malassezia sympodialis, Microsporum canis, Microsporum fulvum,
Microsporum gypseum, complexo de Microsporum gypseum, Microsporum gypseum, Mucor circinelloides, Nectria haematococca, Paecilomyces variotii, Paracoccidioides brasiliensis, Penicillium marneffei, Phialophora verrucosa, Pichia anomala, Pichia guilliermondii, Pneumocystis jirovecii, Pseudallescheria boydii, Rhizopus oryzae, Rodotorula rubra, Scedosporium apiospermum, Schizophyllum commune, Sporothrix schenckii, Stachybotrys chartarum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton mentagrophytes complex, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum, Trichophyton violaceum, Trichosporon asahii, Trichosporon cutaneum, Trichosporon cutaneum complex, Trichosporon inkin e Trichosporon mucoides. Em algumas modalidades, o patógeno é uma levedura.
A levedura que causa a doença ou disfunção pode ser selecionada a partir de Candida albicans, Candida albicans var. stellatoidea, Candida dublinensis, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida pelliculosa, Candida tropicalis, Cryptococcus neoformans, Filobasidiella neoformans, Geotrichum candidum, Issatschenkia orientalis, Malassezia furfur, Malassezia pachydermatis, Pichia anomala, Pichia guilliermondii, Pneumocystis j irovecii, Rodotorula rubra, Saccharomyces cerevisiae, Trichosporon asahii, Trichosporon cutaneum, Trichosporon inkin e Trichosporon mucoides.
Em algumas modalidades, o patógeno é um mofo. O mofo que causa a doença ou disfunção é selecionado a partir de Absidia corymbifera, Arthroderma benhamiae, Arthroderma fulvum, Arthroderma gypseum, Arthroderma incurvatum, Arthroderma otae, Arthroderma vanbreuseghemii, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigates, Aspergillus niger, Cladophialophora carrionii, Coccidioides immitis,
Epidermophyton floccosum, Exophiala dermatitidis, Fonsecaea pedrosoi, Hortaea werneckii, Madurella grisae, Microsporum canis, Microsporum fulvum, Microsporum gypseum, Microsporum gypseum, Microsporum gypseum, Mucor circinelloides, Nectria haematococca, Paecilomyces variotii, Paracoccidioides brasiliensis, Penicillium marneffei, Pseudallescheria boydii, Rhizopus oryzae, Scedosporium apiospermum, Schizophyllum commune, Sporothrix schenckii, Stachybotrys chartarum, Trichophyton mentagrophytes complex, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum e Trichophyton violaceum.
De acordo com algumas modalidades da invenção, as formulações da invenção são eficazes contra bactérias tais como E. Coli, Salmonella, Staphylococcus, Saccharomyces, S. aureus, P. aeruginosa, C. albicans, A. níger conforme exibidas pelo teste de eficácia antimicrobiana fornecido abaixo. A combinação de saponinas com um extrato do gênero Lonicera, Populus, Salix Wasabia ou uma mistura dos mesmos exibe potência que é eficaz contra esses tipos de bactérias em concentrações que são muito menores do que seriam requeridas se cada um dos componentes fossem usados individualmente. Por exemplo, onde uma formulação exemplificativa de acordo com a invenção compreende 10% de sabão, 0,2% de extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides} e 2% do material de saponina, foi demonstrada uma redução nas contagens totais de Salmonella por 6 registros mesmo após apenas 72 horas de incubação.
De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra E. coli, S. aureus, P. aeruginosa, C. albicans e Aspergillus niger. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra E. coli. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra S. a ureus. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra P. aeruginosa. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra C. albicans. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra Aspergillus niger. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra Streptococcus mutans e Vibrio harveyi. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra Streptococcus mutans. De acordo com algumas modalidades, a formulação age de modo eficaz como um agente antimicrobiano contra Vibrio harveyi.
A composição farmacêutica pode ser adaptada para administração através de uma variedade de rotas que incluem tópica, oral, retal, vaginal, transdérmica, subcutânea, intravenosa, intramuscular, colirio e intranasal. Tal composição farmacêutica é preparada de uma maneira bem conhecida na técnica farmacêutica. Na criação da composição farmacêutica da invenção, os componentes supramencionados são normalmente misturados com um excipiente, diluido por um excipiente ou incluso em um carreador que pode ser manipulado para a forma desejada. Com base no modo particular de administração, a composição farmacêutica pode ser formulada em comprimidos, pílulas, cápsulas, sachês, grânulos, pós, goma de mascar, suspensões, emulsões e soluções.
Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, veiculos, adjuvantes, excipientes ou diluentes, são bem conhecidos por aqueles que são versados na técnica e são prontamente disponíveis para o público. É preferencial que o carreador farmaceuticamente aceitável seja um quimicamente inerte à formulação ativa e cada um dos componentes e um que não tenha qualquer efeito colateral nocivo ou toxicidade sob as condições de uso.
A escolha do carreador será determinada em parte pela formulação particular da invenção, bem como pelo método particular usado para administrar a composição. Consequentemente, há uma ampla variedade de formulações adequadas da composição farmacêutica da presente invenção.
Formulações adequadas para administração oral podem consistir em (a) soluções liquidas, tais como uma quantidade eficaz do composto, ou composição que compreende o mesmo, dissolvidas em diluentes, tais como água, solução salina ou suco (por exemplo, suco de laranja); (b) cápsulas, sachês, comprimidos, pastilhas e trociscos, cada um contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo, como sólidos ou grânulos; (c) pós; (d) suspensões em um liquido apropriado; e (e) emulsões adequadas. Formulações liquidas podem incluir diluentes, tais como água e álcoois, por exemplo, etanol, álcool de benzila e os álcoois de polietileno, com ou sem a adição de um tensoativo farmaceuticamente aceitável, agente de suspensão, ou agente emulsificante. Formas de cápsula pode ser do tipo de gelatina de cobertura mole ou dura comum que contém, por exemplo, tensoativos, lubrificantes e cargas inertes, tais como lactose, sacarose, fosfato de cálcio e amido de milho. Forma de comprimido podem incluir um ou mais dentre lactose, sacarose, manitol, amido de milho, amido de batata, ácido alginico, celulose microcristalina, acácia, gelatina, goma guar, dióxido de silicio coloidal, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio, estearato de zinco, ácido esteárico e outros excipientes, corantes, diluentes, agentes de tamponamento, agentes de desintegração, agentes de umidificação, conservantes, agentes de sabor e carreadores farmacologicamente compatíveis. Formas de pastilhas podem compreendem o ingrediente ativo em um sabor, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto, bem como pastilhas que compreendem a formulação ativa em uma base inerte, tal como gelatina e glicerina, ou sacarose e acácia, emulsões, géis e similares que contêm, além da formulação ativa, tais carreadores conforme são conhecidos na técnica.
As formulações da presente invenção, sozinhas ou em combinação com outros componentes adequados, por exemplo, aditivos/ingredientes ativos ou não ativos podem ser criadas em formulações de aerossol a serem administradas por meio de inalação. Essas formulações de aerossol podem ser colocadas em propelentes aceitáveis pressurizados, tais como diclorodifluorometano, propano, nitrogênio e similares. As mesmas podem ser formuladas como farmacêuticos para preparações não pressurizadas, tais como em um nebulizador ou um atomizador.
Formulações adequadas para administração parenteral incluem soluções de injeção estéreis isotônicas, aquosas e não aquosas, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do recipiente pretendido, e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que incluem agentes de suspensão, solubilizantes, agentes de espessamento, estabilizadores e conservantes. A formulação pode ser administrada em um diluente fisiologicamente aceitável em um carreador farmacêutico, tal como um liquido estéril ou mistura de liquidos, incluindo água, solução salina, dextrose aquosa e soluções de açúcar relacionadas, um álcool, tal como etanol, isopropanol ou álcool de hexadecil, glicóis, tais como propileno glicol ou polietileno glicol, cetais de glicerol, tais como 2,2-dimetil-l,3-dioxolano-4-metanol, éteres, tais como poli(etilenoglicol) 400, um óleo, um ácido graxo, glicerideo ou éster de ácido graxo, ou um glicerideo de ácido graxo acetilado com ou sem a adição de um tensoativo farmaceuticamente aceitável, tal como um sabão ou um detergente, agente de suspensão, tal como pectina, carbômeros, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose ou carboximetilcelulose, ou agentes emulsificantes e outros aditivos farmacêuticos.
Óleos, que podem ser usados em formulações parenterais, incluem óleos sintéticos, de vegetal, animais ou petróleo. Exemplos específicos de óleos incluem de amendoim, soja, gergelim, semente de algodão, milho, oliva, petrolato e mineral. Ácidos graxos adequados para uso em formulações parenterais incluem ácido oleico, ácido esteárico e ácido isoesteárico. Oleato de etila e miristato de isoproprila são exemplos de ésteres de ácido graxo adequados. Sabões adequados para uso em formulações parenterais incluem metal alcalino graxo, amónio e sais de trietanolamina, e detergente adequados incluem (a) detergentes catiônicos tais como, por exemplo, haletos de dimetil dialquil amónio, e haletos de alquil piridinio, (b) detergentes aniônicos tais como, por exemplo, sulfonatos de olefina, arila e alquila, sulfatos de monoglicerideo, alquila, olefina, e éter, e sulfosuccinatos, (c) detergentes não iônicos tais como, por exemplo, óxidos de amina graxos, alcanolamidas de ácido graxo, e copolimeros de polioxietilenopolipropileno, (d) detergentes anfotéricos tais como, por exemplo, alquil-β-aminopriopionatos, e sais de amónio quaternário de 2-alquil-imidazolina, e (3) misturas dos mesmos.
A fim de minimizar ou eliminar a irritação no sitio de injeção, tais composições podem conter um ou mais tensoativos não iônicos que têm um equilíbrio hidrófilo- lipofilico (HLB) de cerca de 12 a cerca de 17. A quantidade de tensoativo em tais formulações varia de cerca de 5 a cerca de 15%, em peso. Tensoativos adequados incluem ésteres de ácido graxo de polietileno sorbitano, tais como monooleato de sorbitano e os adutos de peso molecular alto de óxido de etileno com uma base hidrofóbica, formados através da condensação de óxido de propileno com propileno glicol. As formulações parenterais podem ser apresentadas em recipientes vedados de dose única ou de does múltiplas, tais como ampolas e frascos, e podem ser armazenadas em uma condição criodessecada (liofilizada) que requer apenas a adição do carreador liquido estéril, por exemplo, água, para injeções, imediatamente antes do uso. Suspensões e soluções de injeção extemporâneas podem ser preparadas a partir de comprimidos, grânulos e pós estéreis do tipo anteriormente descrito.
A formulação ativa é eficaz sobe uma ampla faixa de dosagem e pode geralmente ser administrada em uma quantidade farmaceuticamente eficaz. Deve-se entender, entretanto, que a quantidade da formulação ou cada componente da mesma a ser administrado, será determinado por um médico, à luz das circunstâncias relevantes, incluindo a condição a ser tratada, a rota de administração escolhida, a formulação real, a idade, peso e resposta do paciente individual, a severidade dos sintomas do pacientee similares.
Em outro aspecto da invenção, é fornecido o uso de uma formulação da invenção conforme definido no presente documento, para a preparação de uma composição farmacêutica para tratamento ou prevenção de uma doença ou disfunção em um mamifero (humano ou não humano). Em algumas modalidades, a doença ou disfunção é associada com uma bactéria, virus, fungo,levedura ou mofo.
Conforme usado no presente documento, o termo "tratamento" ou qualquer variação linguística do mesmo, se refere à administração de uma quantidade terapêutica da composição da presente invenção que é eficaz para melhorar sintomas indesejados associados com uma doença, para impedir a manifestação de tais sintomas antes que os mesmo ocorram, para reduzir a velocidade da progressão da doença, reduzir a velocidade da deterioração dos sintomas, para intensificar o início do período de remissão, reduzir a velocidade do dano irreversível causado no estágio crônico progressivo da doença, retardar o início do dito estágio progressivo, diminuir a severidade ou curar a doença, para aprimorar a taxa de sobrevivência ou recuperação mais rápida, ou para impedir que a forma da doença ocorra ou uma combinação de dois ou mais dos fatores descritos acima. A "quantidade eficaz" para fins revelados no presente documento é determinada por tais considerações conforme podem ser conhecidas na técnica. A quantidade pode ser eficaz para alcançar o efeito terapêutico desejado conforme descrito acima, dependendo, entre outras coisas, do tipo e severidade da doença a ser tratada e do regime de tratamento. A quantidade eficaz é tipicamente determinada em ensaios clínicos apropriadamente projetados (estudos de faixa de dose) e o indivíduo versado na técnica saberá como conduzir de modo apropriado tais ensaios a fim de determinar a quantidade eficaz. Conforme geralmente conhecido, uma quantidade eficaz depende de uma variedade de fatores que incluem a afinidade do ligante ao receptor, seu perfil de distribuição no corpo, uma variedade de parâmetros farmacológicos tais como vida útil no corpo, dos efeitos colaterais indesejados, se existentes, de fatores tais como idade e gênero, etc.
Em ainda outro aspecto, a invenção fornece uma formulação de conservante que compreende pelo menos um material de saponina e um extrato de pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado dentre Lonicera, Populus, Salix e Wasabia ou uma mistura de extratos dos mesmos, conforme definido no presente documento.
A formulação de conservante da invenção pode ser usada para reduzir, inibir ou eliminar completamente uma população de patógeno em uma variedade de produtos de consumo, tais como produtos de cuidado pessoal, produtos industriais, produtos alimentícios, terapêuticos e outros. Conforme demonstrado no presente documento, a formulação da invenção pode ser usada para substituir substâncias químicas disponíveis atualmente que são usadas como conservantes, algumas das quais conhecidas como tóxicas para humanos e animais, ou para reduzir a concentração das mesmas em tais produtos para uso humano ou animal. A formulação de conservante pode ser adicionada a qualquer tal produto, tal como cosméticos e artigos de higiene em solução aquosa ou hidroalcoólica, emulsão de óleo-em-água ou água-em-óleo, géis aquosos ou anidros, creme, unguento, loção, gel, solução e suspensão; produtos farmacêuticos de venda livre e terapêuticos, tintas à base de água, óleos de corte, soluções de látex, produtos alimentícios tais como bebidas, alimentos congelados, doces e produtos enlatados.
Em algumas modalidades, a formulação da invenção é um conservante antimicrobiano, que atesta a habilidade das formulações da invenção de suprimir crescimento microbiano, reduzir infestação microbiana, tratar produtos ou superficies para aprimorar a resistência do produto à infestação microbiana, reduzir biofilme, impedir a conversão de bactérias em biofilme, impedir ou inibir infecção microbiana, impedir deterioração, retardar ou minimizar ou impedir a percepção de quórum (quorum sensing) e retardar a reprodução microbiana. Tipicamente, a formulação de conservante de acordo com a invenção compreende o(s) extrato (s) vegetal/vegetais e saponina em uma concentração que é suficiente para impedir deterioração ou crescimento de microrganismos, estendendo, desse modo, o prazo de validade ou vida útil do produto.
Os patógenos contra os quais a formulação de conservante pode ser eficaz incluem um amplo espectro de microrganismos tais como bactérias, fungos, leveduras, mofos, arqueia, protistas, virus e algas, conforme listado e revelado acima no presente documento.
A formulação da invenção pode ser empregada, ainda, como um agente desinfetante ou bactericida. As formulações da invenção podem ser aplicadas em uma superficie a ser desinfetada, incluindo pele humana ou animal, por vários meios incluindo lavagem,pulverização,limpeza, etc.
MODOS DE REALIZAÇÃO DA INVENÇÃO
A seguinte descrição é fornecida, juntamente com todos os capitulos da presente invenção, de modo a permitir que um indivíduo versado na técnica faça uso da dita invenção. Os exemplos fornecidos no presente documento são representativos de conjuntos de procedimentos empregados pelos inventores na realização dos aspectos da presente invenção. Deve-se observar que embora esses conjuntos de procedimentos sejam exemplificativos de determinadas modalidades para a prática da invenção, aqueles versados na técnica, à luz da presente revelação, reconhecerão que numerosas modificações podem ser feitas sem que se distancie do espírito e escopo pretendido da invenção.
A presente invenção é direcionada a uma formulação que compreende um material de saponina e um extrato vegetal conforme revelado acima no presente documento.
PREPARAÇÃO GERAL DOS EXTRATOS
Conforme usado no presente documento, o termo "extrato" se refere a um ingrediente ativo ou fração isolada de uma planta por meio do uso de um solvente ou um sistema de solvente. O solvente pode ser escolhido a partir de água ou a partir de solventes orgânicos comumente usados tais como álcoois, especialmente álcoois inferiores tais como metanol, etanol, propanol, iso-propanol e butanol; alcanos tais como pentano e hexano, éter de petróleo 40 a 60 ou 60 a 80; alcanos clorinados tais como diclorometano e dicloroetano; solventes aromáticos tais como tolueno e xileno; éteres tais como dietil éter; acetato de etila e qualquer outro solvente comumente conhecido pelo individuo versado na técnica.
O procedimento de extração para obtenção de quaisquer dos extratos vegetais empregados em conformidade com a invenção, a menos que indicado de outra forma, pode ser realizado em qualquer variação e conjunto de procedimentos comumente usados nas técnicas conforme descrito, por exemplo, em M. Casey, J. Leonard, B. Lygo, e G. Procter "Advanced Practical Organic Chemistry", 1990, Chapman & Hall, Londres. Por exemplo, as partes da planta podem ser esmagadas e/ou moidas e opcionalmente secas antes de serem colocadas em contato com o solvente de extração; a extração pode ser assistida com sacudimento ou agitação, aquecimento; a extração pode ser assistida por micro-ondas e/ou ultrassom; salmoura pode ser usada ao invés de água; o solvente pode ser filtrado e reduzido sob evaporação de pressão reduzida; os sólidos filtrados podem ser reextraidos para produzir uma segunda safra; e assim por diante.
Extratos de pelo menos uma espécie vegetal de um gênero selecionado a partir de Lonicera, Populus, Salix e Wasabia são comercialmente disponíveis e podem ser usados sem purificação adicional. Por exemplo, extrato de Populus tremuloides pode ser adquirido da Active Micro Systems (EUA);
Lonicera japonica pode ser adquirido da Campo (Singapura), Salix American Botanicals (EUA) e Wasabi japonica da Active concepts (Itália).
O material de saponina pode ser alcançado de modo semelhante, ou pode ser extraido de uma fonte vegetal, conforme revelado acima no presente documento, através de extração de solvente que emprega álcool aquoso. O sistema de solvente água/álcool que é usado de acordo com algumas modalidades está na razão de entre 90:10 a 10:90. Em algumas modalidades, a razão água/álcool é entre 70:30 a 30:70. Em outras modalidades, a razão água/álcool é entre 60:40 a 40:60. Em outras modalidades, a razão água/álcool é entre 50:50 a 40:60.
O álcool usado na extração é selecionado a partir de metanol, etanol, propanol, iso-propanol e butanol. De acordo com algumas modalidades, o sistema de solvente usado para a extração de saponinas é água/etanol a 50:50.
De acordo com algumas modalidades da invenção, a saponina é extraida de Sapindus Mukorossi ou Camellia oleifera através de solução de extração de água/etanol a 50:50. A extração é realizada em pericarpo de Sapindus Mukorossi ou da farinha de semente desengordurada de Camellia oleifera. A extração prossegue pode um periodo de 2 a 8 horas em uma temperatura acima da temperatura ambiente; a extração pode ser realizada em um pH neutro a ácido.
Conforme pode ser entendido, o extrato que contém saponina pode conter, ainda, uma variedade de produtos naturais tais como oligoglicosideos de sesquiterpeno aciclicos (ASOGs).
EXEMPLOS Exemplo 1: Extrações de Sapindus Mukorossi e Camellia oleifera através do uso de várias misturas de etanol/água 100 gramas de extrato de Sapindus Mukorossi de pericarpo seco de Sapindus Mukorossi foram adicionados a 400 ml de água/etanol a 30:70 ou 50:50 ou 70:30 (p/p) em um agitador (Agitador incubador Innova 4000, New Brunswick scientific Edison, NJ EUA, 183 rpm), por duas horas. O agitador foi aquecido a 60 °C. A solução foi filtrada através de Whatman 1 (Circulos 110 mm 0 x 100 qualitativos) . Em seguida, a mistura de água foi expelida através de um Secador por Pulverização (SD-05, LabPlant, UK, taxa de bomba: 0,01, temperatura de entrada 120 °C, temperatura do pó 70 °C) , e um pó branco-marrom foi obtido (12,5 a 17% de rendimento). 100 gramas de extrato de Camellia oleifera de bagaço de semente de Camellia oleifera foram mergulhados em 400 ml de água/etanol a 50:50 (%, em peso/%, em peso) em um agitador (Agitador incubador Innova 4000, New Brunswick scientific, Edison, NJ EUA, 183 rpm), por duas, quatro ou seis horas. 0 agitador foi aquecido a 60 °C. A solução foi filtrada através de Whatman 1, Circulos 110 mm 0 x 100 qualitativos). Em seguida, a mistura de água foi expelida através de um Secador por Pulverização (SD-05, LabPlant, UK, taxa de bomba: 0,01, temperatura de entrada 120 °C, temperatura do pó 70 °C), e pó branco-marrom foi obtido. O rendimento foi medido entre 17 e 22%. Exemplo 2: Extração de Sapindus Mukorossi através de misturas de água/etanol a 50:50 100 gramas de pericarpo seco de Sapindus Mukorossi foram adicionados a 400 ml de água/etanol a 50:50 (p/p) em um agitador (Agitador incubador Innova 4000, New Brunswick scientific Edison, NJ EUA, 183 rpm), por duas, quatro ou seis horas. O agitador foi aquecido a 40 °C. A solução foi filtrada através de Whatman 1 (Circulos 110 mm 0 x 100 qualitativos). Em seguida, a mistura de água foi expelida através de um Secador por Pulverização (SD-05, LabPlant, UK, taxa de bomba: 0,01, temperatura de entrada 120 °C, temperatura do pó 70 °C), e um pó branco-marrom foi obtido. Exemplo 3: Preparação de uma composição que compreende saponinas 20 g de Sapindus Mukorossi sólido (extrato preparado por meio do uso do sistema de solvente água/etanol (50:50) de acordo com o Exemplo 2) foi dissolvido em um tampão de fosfato. Uma mistura de extrato de Wasabia japonica/extrato de Populus tremuloides/mistura de Lonicera japonica a 1:1:1 (no presente documento "WPL”) foi dissolvida em um tampão de fosfato. As misturas foram agitadas e em seguida diluidas em um tampão de fosfato para obter sete composições: 0:0, 0,2:2, 0,2:10, 0,2:20, 0,1:20, 0,05:20, 0,01:20, 0:20%, em peso, de soluções de (1:1:1 WPL/extrato de Sapindus Mukorossi). As soluções foram aquecidas de um dia para o outro a 50 °C para obter soluções estéreis. Exemplo 4: Efeito demonstrado em um teste de desafio
Os testes foram conduzidos através da adição a: (a) soluções estéreis das composições preparadas no Exemplo 3, (b) uma solução estéril a 20%, em peso, de extrato de Sapindus Mukorossi e (c) uma solução estéril da mistura de WPL a 1:1:1 do Exemplo 3 um inoculo de microrganismos adequados (bactérias e leveduras), conforme descrito abaixo. As soluções assim preparadas foram armazenadas a 37 °C para bactérias ou 30 °C para leveduras. Por meio do uso de diluições em série e contagens em placas, aliquotas foram tiradas durante o periodo de incubação para determinar a contagem de microrganismo.
Meios e reagentes usados: 100 mM de tampão de fosfato com pH=5,5 (estéril), TSYE (30 g/1/1 de caldo de soja tripitico + 5 g/1 de extrato de levedura) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2%, PDB (24 g/1 de caldo de dextrose de batata + 0,2 g/1 de cloranfenicol) foi adicionado a um meio sólido de ágar a 2% e um diluente (uma solução estéril de 0,9% de cloreto de sódio e 0,1% peptona) foi usado quando indicado.
Os organismos testados foram ATCC 14028 de Salmonella typhimurium, EDL933 de Escherichia coli, MRSA cepa Newman D2 ATCC 25904 de Staphylococcus aureus e ATCC 11777 de Saccharomyces cerevisiae. As três bactérias foram cultivadas de um dia para o outro em TSYE, em um agitador incubador a 37 °C. Células de levedura foram cultivadas de um dia para o outro em PDB, em um agitador incubador a 30 °C. Os meios das culturas de um dia para o outro foram lavados duas vezes com o diluente através de centrifugação e cada um dos organismos foi transferido para 5 ml do tampão de fosfato que contém combinações de extrato diferentes para render 105/ml. Os tubos de teste foram incubados a 37 °C para as bactérias ou 30 °C para as leveduras. As aliquotas foram tiradas durante o periodo de incubação a fim de determinar a contagem de microrganismo. Os números na tabela são as médias de dois experimentos separados. Cada tratamento foi repetido três vezes.
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Tabela 1: contagem total de diferentes microrganismos em função das concentrações extrato de Sapindus mukorossi e coquetel de conservantes
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 1, exceto para o caso de Staphylococcus, a Mistura de extrato de WPL por si só ou o Extrato de Sapindus por si só não reduziram a contagem de microrganismo total abaixo de 1.000. Em relação a Staphylococcus, o próprio Extrato de WPL reduziu a contagem por um fator de 10 enquanto o extrato de Sapindus a reduziu por 3 ordens de magnitude. Assim, de modo geral, a combinação da mistura de extrato de WPL e do extrato de Sapindus reduziu a contagem de microrganismos total abaixo de 10. Esses resultados surpreendentes indicam um efeito sinérgico entre o extrato de Sapindus e o coquetel de conservantes. Exemplo 5: Teste de Eficácia Antimicrobiana (USP 32, 2009) O teste foi realizado de acordo com os requisitos da US Pharmacopoeia 32 2009, (51) Teste de Eficácia Antimicrobiana.
O teste foi conduzido em 100 g de amostras de uma formulação de xampu que compreende 81,1% de água, 10% de extrato de noz de sabão, 4% de Betaina, 2% de Phospholipon 50 (Lipoide) , 2% de Goma guar, 0,3% de goma Xantana, 0,3% de extrato de Aspen (Active Micro Sycaules), 0,3% de mistura de Fragrância (Expressions Parfumees). No presente documento, essa formulação é chamada de formulação MC-6.
Cada amostra foi inoculada separadamente por um dos cinco organismos de teste. Os recipientes inoculados foram incubados em 25 °C juntamente com uma amostra inoculada. O número de microrganismos sobreviventes foi monitorado periodicamente durante uma incubação de 4 semanas e as unidades de formação de colônia (CFU)- foram contadas por um contador de placa.
Os microrganismos testados foram: 1. ATCC 8739 de E. coli 2. ATCC 6538 de Staphylococcus aureus 3. ATCC 9027 de Pseudomonas aeruginosa 4. ATCC 10231 de Candida albicans 5. ATCC 16404 de Aspergillus niger
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Tabela 2: contagem total para diferentes microrganismos após contato com a formulação MC-6
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 2, a formulação MC-6 reduziu as contagens totais de todos os microrganismos testados para abaixo de 10 após 2 semanas de incubação e impediu o recrescimento por pelo menos duas semanas adicionais. A amostra não contaminada permaneceu não contaminada. Exemplo 6: Teste de Eficácia Antimicrobiana (USP 32, 2009) - redesafio O teste foi realizado de acordo com os requisitos da US Pharmacopoeia 32 2009, (51) Teste de Eficácia Antimicrobiana. O teste foi conduzido em 100 g de amostras que foram usadas anteriormente no teste de desafio e mostraram uma contagem total inferior a 10 CFU/g após quatro semanas. Cada amostra foi reinoculada separadamente por um dos mesmos cinco microrganismos de teste.
Os recipientes inoculados foram incubados em 25 °C juntamente com uma amostra inoculada. 0 número de microrganismos sobreviventes foi verificado após uma incubação de 4 semanas.
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Tabela 3: contagem total para diferentes microrganismos reinoculados na formulação MC-6
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 3, a formulação MC-6 reduziu as contagens totais de todos os microrganismos inoculados testados para abaixo de 10 após 4 semanas de incubação. A amostra não contaminada permaneceu não contaminada. Exemplo 7: Identificação da fração ativa no extrato de noz de sapão em sabão sintético
Meios e reagentes usados: tampão de ácido citrico- Na2HPO4 (150 mM com pH=5,6) e TSYE (30 g/1 de caldo de soja tripitico + 5 g/1 de extrato de levedura) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2 % e um diluente (uma solução estéril de 0,1% de peptona) foi usado onde indicado. Os organismos testados foram ATCC 14028 de Salmonella typhimurium.
As bactérias foram cultivadas de um dia para o outro em TSYE em um agitador incubador a 37 °C. Os meios das culturas de um dia para o outro foram lavadas duas vezes com o diluente por centrifugação e os organismos transferidos para 5 ml do tampão de ácido citrico-Na2HPC>4 que contém combinações diferentes de sabão, extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides) e saponina para render 105 CFU/ml. 10% de Sabão (Lauril sulfato de amónio (6,6%) + cocamidopropil betaina (3.3%)) foram adicionados com 0,1% de Extrato de casca de Aspen e um dentre (1) 2% de extrato de noz de sabão, ou (2) 2% de fração de saponina (Solúvel em Etil-acetato) do extrato de noz de sabão, ou (3) 2% de fração de ASOGS (solúvel em água) do extrato de noz de sabão. OS tubos de teste foram incubados a 30 °C. As aliquotas foram tiradas durante o periodo de incubação para determinar a contagem de microrganismo. Os números apresentados na Tabela 4 são a média de dois experimentos separados. Cada tratamento foi repetido três vezes.
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Tabela 4: contagem total para Salmonella em sabão que contém diferentes frações do extrato de noz de sabão
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 4, a combinação de 10% de Sabão com 0,2% de extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides) e 2% da fração de saponina reduziu as Contagens totais de Salmonella em 6 registros após apenas 72 horas de incubação. Exemplo 8: Redução da concentração de extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides)
Meios e reagentes usados: 100 mM de tampão de fosfato com pH=5,5 e TSYE (30 g/1 de caldo de soja tripitico + 5 g/1 de extrato de levedura) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2 %, PDB (24 g/1 de caldo de dextrose de batata + 0,2 g/1 de cloranfenicol) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2% e um diluente (uma solução estéril de 0,1% de peptona) foi usado onde indicado.
O organismo testado foi ATCC 14028 de Salmonella typhimurium. As bactérias foram cultivadas de um dia para o outro em TSYE em um agitador incubador a 37 °C. Os meios das culturas de um dia para o outro foram lavados duas vezes com o diluente por centrifugação e os organismos foram transferidos para 5 ml do tampão de fosfato que contém combinações diferentes de extrato de noz de sabão (10%, em peso, de sólidos) e concentrações diferentes de extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides') para render 105 CFU/ml. Os tubos de teste foram incubados a 37 °C por 14 dias. As aliquotas foram tiradas durante o periodo de incubação para determinar a contagem de microrganismo. Os números apresentados na Tabela 5 são as médias de dois experimentos separados. Cada tratamento foi repetido três vezes
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Tabela 5: contagens totais de Salmonella typhimurium em função da concentração
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 5, o efeito conservante do extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides) foi quantitativo e mesmo tão baixo quanto 0,1% causou um redução de 4 registros nas contagens totais de Salmonella. Exemplo 9: Teste de diferentes Saponinas com sabão sintético
Meios e reagentes usados: 150 mM de tampão de ácido citrico-Na2HP04 com pH=5,β e TSYE (30 g/1 de caldo de soja tripitico + 5 g/1 de extrato de levedura) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2 % e um diluente (uma solução estéril de 0,1% peptona) foi usado onde indicado.
O organismo testado foi ATCC 14028 de Salmonella typhimurium. As bactérias foram cultivadas de um dia para o outro em TSYE em um agitador incubador a 37 °C. Os meios das culturas de um dia para o outro foram lavados duas vezes com o diluente através de centrifugação e os organismos foram transferidos para 5 ml do tampão de ácido citrico-Na2HP04 que contém diferentes combinações de sabão, extrato de casca de Aspen e saponina ou apenas casca de Aspen para render 105 CFU/ml. 10% de Sabão (Lauril sulfato de amónio (20%) + cocamidopropil betaina (10%)) foram adicionados com 0,2% de extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides) e um dentre (1) 1% de saponina de chá, (2) 2% de extrato de noz de sabão. Os tubos de teste foram incubados a 30 °C. As alíquotas foram tiradas durante o periodo de incubação para determinar a contagem de microrganismo. Os números apresentados na Tabela 6 são a média de dois experimentos separados. Cada tratamento foi repetido três vezes.
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Tabela 6: contagens totais de Salmonella em sabão que contém diferentes saponinas
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 6, a combinação de 10% de Sabão com 0,2% Extrato de casca de Aspen {Populus tremuloides) e 1% de saponina de chá ou 2% de extrato de noz de sabão reduziu as contagens totais de Salmonella para abaixo de 10 mesmo após apenas 72 horas de incubação. Exemplo 10: Redução da quantidade de extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides,) em sabão sintético
Meios e reagentes usados: 150 mM de tampão de ácido citrico-NaaHPCh com pH=5,6 e TSYE (30 g/1 de caldo de soja tripitico + 5 g/1 de extrato de levedura) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2 %, PDB (24 g/1 de caldo de dextrose de batata +0,2 g/1 de cloranfenicol) foi adicionado a um meio sólido de ágar a 2% e um diluente (uma solução estéril de 0,1% de peptona) foi usado onde indicado.
Os organismos testados foram ATCC 14028 de Salmonella typhimurium e ATCC 16404 de Aspergillus niger. As bactérias foram cultivadas de um dia para o outro em TSYE em um agitador incubador a 37 °C. Os fungos foram cultivados em PDB+ágar por três semanas em um incubador a 30 °C e colhidos a conidia em 0,15% de Tween 80. Os meios das culturas foram lavados duas vezes com o diluente através de centrifugação e os organismos foram transferidos para 5 ml do tampão de ácido citrico-Na2HP04 que contém diferentes combinações de sabão, conservante e saponina para render 105 CFU/ml. Sabão (Lauril sulfato de amónio (20%) + cocamidopropil betaina (10%)) foram adicionados a 10% com 2% de extrato de noz de sabão e quantidades variáveis de Extrato de casca de Aspen {Populus tremuloides) . Os tubos de teste foram incubados a 30 °C para bactérias ou 24 °C para fungos. As alíquotas foram tiradas durante o período de incubação para determinar a contagem de microrganismo. Os números apresentados na Tabela 7 são a média de dois experimentos separados. Cada tratamento foi 5 repetido três vezes.
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Tabela 7: contagens totais de Salmonella e
Aspargillus em sabão que contém concentrações variáveis de extrato de casca de Aspen {Populus tremuloides). Conforme pode ser visto a partir da Tabela 7, a quantidade de extrato de casca de Aspen {Populus tremuloides) pode ser reduzida a tão pouco quanto 0,1%. Mesmo nessa quantidade reduzida as contagens totais de Salmonella foram reduzidas a abaixo de 10. A combinação de sabão e 2% de saponina de noz de sabão sozinha foi suficiente para reduzir as contagens totais de Aspergillus para abaixo de 10. Exemplo 11: Determinação do componente ativo na formulação de conservante Meios e reagentes usados: 100 mM de tampão de fosfato com pH=5,5 e TSYE (30 g/1 de caldo de soja trípitico + 5 g/1 de extrato de levedura) foram adicionados a um meio sólido de ágar a 2 % e PDB (24 g/1 de caldo de dextrose de batata + 0,2 g/1 de cloranfenicol) foi adicionado a um meio sólido de ágar a 2% e um diluente (uma solução estéril de 0,1% de peptona) foi usado onde indicado.
Os organismos testados foram ATCC 14028 de Salmonella typhimurium e ATCC 11777 de Saccharomyces cerevisiae. As bactérias foram cultivadas de um dia para o outro em TSYE em um agitador incubador a 37 °C. As células de levedura foram cultivadas de um dia para o outro em PDB em um agitador incubador a 30 °C. Os meios das culturas de um dia para o outro foram lavados duas vezes com o diluente através de centrifugação e cada um dos organismos foi transferido para 5 ml do tampão de fosfato que contém combinações diferentes de noz de sabão (10%, em peso, de sólidos) e extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides) , extrato Wasabi (Wasabia japonica) ou extrato de Madressilva Japonesa (Lonicera Japonica) em 0,7%, em peso, para render 105 CFU/ml. Os tubos de teste foram incubados em ambos 37 °C para bactérias ou 30 °C para as leveduras. As aliquotas foram tiradas durante o periodo de incubação para determinar a contagem de microrganismo. Os números apresentados na Tabela 8 são o meio de dois experimentos separados. Cada tratamento foi repetido três vezes.
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Tabela 8: contagens totais de Salmonella em função da combinação de conservante e extrato de noz de sabão (10%, em peso, de sólidos) .
Conforme pode ser visto a partir da Tabela 8, o extrato de noz de sabão (10%, em peso, de sólidos) sozinho ou os diferentes extratos vegetais sozinhos, não reduziram a contagem de salmonella. Apenas a combinação de extrato de noz de sabão (10%, em peso, de sólidos) com um extrato vegetal natural tal como extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides) fez com que a contagem de microrganismo total caisse abaixo de 10. Esses resultados surpreendentes indicam um efeito sinérgico entre o extrato de noz de sabão (10%, em peso, de sólidos) e o extrato de casca de Aspen (Populus tremuloides). Exemplo 12: Determinação de eficácia in vivo
A eficácia de formulações da invenção como agentes antimicrobianos in vivo pode ser testada in vitro ou in vivo por uma variedade de métodos conhecidos na técnica para teste da atividade antimicrobiana. Consulte, por exemplo, os métodos discutidos no presente documento e usados durante todos os exemplos. Vários ensaios podem ser empregados em conformidade com a presente invenção a fim de determinar o grau de atividade antimicrobiana de um composto da invenção tal como cultura celular, modelos animais e administração a sujeitos humanos. Os ensaios descritos no presente documento podem ser usados para analisar o crescimento microbiano ao longo do tempo para determinar as características de crescimento de um micróbio na presença de uma formulação da invenção.
Um micróbio e uma formulação da invenção são adicionados a uma linhagem celular permissiva (por exemplo, células primárias, linhagens celulares transformadas, amostras de tecido de paciente, etc.) ou meio de crescimento (por exemplo, ágar/caldo de LB, ágar/caldo de YT, ágar/sangue, etc.) . O crescimento/infecção do micróbio pode ser comparado ao crescimento/infecção do micróbio na ausência da formulação da invenção. A atividade antimicrobiana da formulação da invenção é demonstrada por uma diminuição no crescimento/infecção do micróbio na presença da formulação da invenção. Qualquer método conhecido na técnica pode ser usado para determinar o crescimento/infecção, incluindo, mas sem limitação, coloração imunofluorescente, imunoblot ou detecção de um ácido nucléico de micróbio especifico (por exemplo, por hibridização in situ, ou após lise celular através de análise de RT-PCR ou Southern blot), inspeção visual/microscópica para efeito citopático de infecção de crescimento (por exemplo, para micróbios que são virus, arredondamento celular, desprendimento celular, lise celular, formação de sincicia multinucleada), titulação de micróbio (por exemplo, unidades formadoras de placas, unidades formadores de colônias, etc.), número de colônias de placas.
O micróbio e a formulação da invenção podem ser adicionados às células ou ao meio de crescimento ao mesmo tempo ou, alternativamente, o micróbio pode ser adicionado às células ou ao meio de crescimento antes da formulação da invenção ser adicionada. Conforme pode ser requisitado, a formulação da invenção pode ser adicionada às células ou ao meio de crescimento antes do micróbio ser introduzido às células ou ao meio de crescimento.
Um micróbio e uma formulação da invenção podem ser administrados a sujeitos animais suscetíveis a infecção com o micróbio. A incidência, severidade, duração, carga de micróbio, taxa de mortalidade de infecção, etc., podem ser comparadas à incidência, severidade, duração, carga de micróbio, taxa de mortalidade de infecção, etc., observadas quando aos sujeitos é administrado o micróbio sozinho (na ausência de uma formulação da invenção). A atividade antimicrobiana da formulação da invenção é demonstrada por uma diminuição na incidência, severidade, duração, carga de micróbio, taxa mortalidade de infecção, etc., na presença da formulação da invenção. O micróbio e a formulação da invenção podem ser administrados ao sujeito animal ao mesmo tempo, ou um após o outro.
A taxa de crescimento do micróbio pode ser testada através de amostra de meio de cultura celular ou amostras clinicas/fluidas biológicas (por exemplo, aspiração nasal, esfregaço da garganta, expectoração, lavagem brônquio- alveolar, urina, saliva, sangue ou soro) de sujeitos humanos ou animais em múltiplos pontos de tempo pós-infecção, tanto na presença quanto na ausência de uma formulação da invenção e medindo-se os niveis de micróbio. Em casos específicos, a taxa de crescimento de um micróbio pode ser analisada avaliando-se a presença de micróbio em uma amostra após crescimento em cultura celular, crescimento em um meio de crescimento permissivel, ou crescimento em um sujeito que usa qualquer método bem conhecido na técnica, por exemplo, mas sem limitação, imunoensaio (por exemplo, ELISA; para discussão em relação a ELISAs consulte, por exemplo, Ausubel et al.r eds. , 1994, Current Protocols in Molecular Biology, Volume 1, John Wiley and Sons, Nova Iorque em 11.2.1), coloração imunofluorescente, ou análise de imunoblot que usa urn anticorpo que imunoespecificamente reconhece o micróbio a ser analisado, ou detecção de um ácido nucléico de micróbio especifico (por exemplo, através análise de RT-PCR ou Southern blot, etc.).

Claims (9)

1. COMPOSIÇÃO COSMÉTICA OU DE LIMPEZA, para aplicação tópica e tendo atividade microbiana, caracterizada por compreender pelo menos um material isolado de uma fonte natural contendo saponina e um extrato de pelo menos uma espécie de planta de um gênero selecionado dentre Lonicera, Populus e Wasabia ou uma mistura dos mesmos, a fonte natural contendo saponina sendo Camellia oleifera, Sapindus mukorossi ou qualquer mistura dos mesmos, o extrato de Lonicera sendo um extrato de Lonicera japonica; o extrato de Populus sendo um extrato de Populus tremuloides; o extrato de Wasabia sendo um extrato de Wasabia japonica; a composição compreendendo pelo menos um material de saponina e o dito extrato de Lonicera, ou pelo menos um material de saponina e o dito extrato de Populus, ou pelo menos um material de saponina e o dito extrato de Wasabia..
2. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo material de saponina ser pelo menos um composto de saponina obtido naturalmente, pelo menos um extrato contendo saponina e uma mistura dos mesmos.
3. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizada pelo material de saponina ser obtido pela extração de uma fonte de planta, sendo que o dito processo de extração é executado por água, álcool ou uma solução de água/álcool.
4. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pela solução de água/álcool ter uma razão de água:álcool entre 80:20 a 20:80, preferivelmente 60:40 a 40:60, mais preferivelmente 70:30 a 30:70 ou 50:50.
5. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo material de saponina ser extraído a partir de uma fonte de planta que segue um método que compreende: a. tratar a fonte de planta em uma solução de razão água:álcool de 40:60 a 60:40, preferivelmente a razão de água:álcool é 50:50, por um período de tempo e sob condições que permitem a extração do material de saponina da dita fonte de planta na dita solução; b. opcionalmente, evaporar a solução que contém saponina para obter um material sólido que contém saponina; e c. opcionalmente, purificar o dito material sólido que contém saponina.
6. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo dito processo de extração ser executado por água.
7. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pela razão de peso entre o pelo menos um material de saponina e o extrato de pelo menos uma espécie de planta de um gênero selecionado a partir de Lonicera, Populus, Wasabia ou uma mistura dos mesmos estar entre cerca de 1:100 a cerca de 100:1, preferivelmente entre 1:1 e 10:1.
8. PRODUTO DE CONSUMO, caracterizado por compreender a composição conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 7.
9. PRODUTO DE CONSUMO, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo produto ser selecionado a partir do grupo consistindo de uma formulação conservante, uma formulação antimicrobiana, uma composição farmacêutica, um desinfetante e um produto cosmético.
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