JP5964172B2 - 硬質表面への菌の付着抑制方法 - Google Patents
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Description
各植物試料(植物の溶媒抽出物)を減圧下、溶媒を留去して固形物を得る。これに水:水飽和n−ブタノール=1:1(25℃における体積比)を加え、分液ロートで振り混ぜた後、分層させる。上層をとり、減圧下、溶媒を留去して粗サポニン画分を得る。これにアセトンを加え、25℃にて30分間撹拌した後これをろ過し、ろ紙に残った固形物を回収して乾燥させ、サポニンを含有する植物抽出物を得る。
[菌付着抑制率]
表1に示す濃度(有効分濃度)で調製した菌付着抑制剤を200μL、ポリエチレン試験板(3cm×8cm(厚さ1mm)、日本テストパネル株式会社製)の全面に塗布し、25℃にて30分間自然乾燥した試験板Aを作製した。この方法では、ポリエチレン試験板に適用した有効分(サポニン等)の全量が該試験板上に残留する。試験板Aに菌数109cfu/mLの菌液(使用菌種:Acinetobacter baumannii)を200μL塗布し、塗布した菌液が湿潤状態を維持する条件で、30℃で3時間静置した。その後50mLの滅菌水で菌液を洗い流し、基板上に付着した菌をLP希釈液「ダイゴ」(日本製薬株式会社製)10mLで流し取って回収し、培養法でコロニーカウントを行い、試験板への付着菌数を求めた。付着抑制率を下記の式(1)により算出し表1に記載した。なお、試験板Aにおける有効分(水以外の成分)の残留量は、塗布した菌付着抑制剤中の有効分の量を試験板の面積で除することにより求めると、4.2×10-6g/cm2程度となる(比較例1を除く)。
ここで、
Ac:コントロール菌数(cfu/cm2)=水をサンプル液とした時の付着菌数
As:サンプル菌数(cfu/cm2)=菌付着抑制剤をサンプル液とした時の付着菌数
表1に示す濃度(有効分濃度)で調製した菌付着抑制剤2mLに、菌数108cfu/mLの菌液(使用菌種:Acinetobacter baumannii)を100μL添加した。この際初期菌数は106.3cfu/mLであった。1分後、段階希釈を行い培養法でコロニーをカウントし、菌付着抑制剤接触後の菌数を表1に記載(対数表記)した。なお実験は全て25℃にて行った。表1に結果を示す。何れも、初期菌数106.3cfu/mLに対して差が1桁以内の菌数であるので、殺菌性はないと判断した。尚、本殺菌性の評価方法は、浮遊菌に対する試験であり、硬質表面に付着した菌に対する試験よりも殺菌性が発現しやすいものとなっている。そのため、この試験で殺菌性が生じない場合は、硬質表面での殺菌性も生じない。
A:サポニンのアグリコン及び糖鎖に由来するピークを主に観測したことから、サポニンが主たる構成成分であると判断した。
B:サポニンのアグリコン及び糖鎖に由来するピークを他の成分由来のピークと共に検出したので、サポニンが構成成分として含まれていると判断した。
・キラヤサポニン:下記抽出方法1で得られたキラヤサポニン、サポニン含有程度A
・ソウキョウサポニン:下記抽出方法2で得られたソウキョウサポニン、サポニン含有程度A
・ムクロジサポニン:下記抽出方法3で得られたムクロジサポニン、サポニン含有程度A
・ショウマサポニン:下記抽出方法4で得られたショウマサポニン、サポニン含有程度A
丸善製薬株式会社製キラヤニンS-100(バラ科キラヤ科のキラヤQuillaja saponaria Molより調製したキラヤ抽出物を含有)10.5gをとり、これを減圧下、溶媒を留去して固形物2.1gを得た。これに水500mLおよび水飽和n−ブタノール500mLを加え、分液ロートで振り混ぜた後、分層させた。上層をとり、減圧下、溶媒を留去して粗サポニン画分0.6gを得た。これにアセトン60mLを加え、25℃にて30分間撹拌した後これをろ過し、ろ紙に残った固形物を回収して乾燥させ、キラヤサポニン0.5gを得た。
マメ科サイカチ属のGleditsia sinensis Lam.(シナサイカチ)の奇形果実(新和物産株式会社より購入)100gをとり、これを割った後、80vol%エタノール1Lを加え、室温(25℃)下で10日間抽出を行い、ろ過して抽出液890mLを得た。減圧下、溶媒を留去、乾燥させて抽出物16.4gを得た。これに水500mLおよび水飽和n−ブタノール500mLを加え、分液ロートで振り混ぜた後、分層させた。上層をとり、減圧下、溶媒を留去して粗サポニン画分4.8gを得た。これにアセトン480mLを加え、25℃にて30分間撹拌した後これをろ過し、ろ紙に残った固形物を回収して乾燥させ、ソウキョウサポニン4.3gを得た。
ムクロジ科ムクロジ属の無患子(ムクロジ)Sapindus mukurossiの果実(新和物産株式会社より購入)100gをとり、これを粉砕した後、80vol%エタノール1Lを加え、25℃にて10日間抽出を行い、ろ過して抽出液930mLを得た。減圧下、溶媒を留去、乾燥させて抽出物20.6gを得た。これに水500mLおよび水飽和n−ブタノール500mLを加え、分液ロートで振り混ぜた後、分層させた。上層をとり、減圧下、溶媒を留去して粗サポニン画分7.8gを得た。これにアセトン780mLを加え、25℃にて30分間撹拌した後これをろ過し、ろ紙に残った固形物を回収して乾燥させ、ムクロジサポニン3.4gを得た。
キンポウゲ科ショウマ属の升麻(ショウマ)Cimicifuga foetidaの根茎(新和物産株式会社より購入)100gをとり、これを細断した後、80vol%エタノール1Lを加え、室温下で10日間抽出を行い、ろ過して抽出液870mLを得た。減圧下、溶媒を留去、乾燥させて抽出物13.7gを得た。これに水500mLおよび水飽和n−ブタノール500mLを加え、分液ロートで振り混ぜた後、分層させた。上層をとり、減圧下、溶媒を留去して粗サポニン画分7.2gを得た。これにアセトン720mLを加え、25℃にて30分間撹拌した後これをろ過し、ろ紙に残った固形物を回収して乾燥させ、ショウマサポニン6.1gを得た。
Claims (5)
- キラヤ、ソウキョウ、ムクロジ、及びショウマから選ばれる1種又は2種以上の植物から抽出されたサポニンを含有する溶液、及び前記植物から抽出されたサポニンを含有する抽出物を含有する溶液から選ばれる溶液を硬質表面に適用した後、該硬質表面を乾燥させて8×10-7〜1.6×10-4g/cm2の割合でサポニン又はサポニンを含有する抽出物を残留させる、硬質表面への菌の付着抑制方法。
- サポニン又はサポニンを含有する抽出物の適用を、サポニンを含有する溶液、及びサポニンを含有する植物抽出物を含有する溶液から選ばれる溶液の塗布により行う、請求項1記載の硬質表面への菌の付着抑制方法。
- 硬質表面の材質が、プラスチック、金属、陶磁器、及びガラスから選ばれる1種又は2種以上である、請求項1又は2記載の硬質表面への菌の付着抑制方法。
- 溶液中のサポニン又はサポニンを含有する植物抽出物の含有量が0.001〜0.2質量%である、請求項1〜3の何れか1項記載の硬質表面への菌の付着抑制方法。
- 溶液が水溶液である、請求項1〜4の何れか1項記載の硬質表面への菌の付着抑制方法。
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