CN115414403B - 余甘子提取物在制备抗海洋弧菌药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明是一种余甘子提取物在制备抗海洋弧菌药物中的用途，涉及中草药提取物的应用技术领域。所述余甘子提取物为以余甘子为原料，采用水或者醇提取所得的余甘子水提物或余甘子醇提取；所抑制的海洋弧菌为哈维氏弧菌或者副溶血弧菌。本发明筛选出前述的中草药中余甘子具有较好抑制海洋致病菌的作用，MIC值均为15.63mg/mL。本发明还确定抑制海洋致病菌的余甘子提取物的有效成分为酚酸类化合物。

Description

余甘子提取物在制备抗海洋弧菌药物中的用途
技术领域
本发明涉及中草药提取物的用途，特别涉及余甘子提取物的抗海洋弧菌的用途。
背景技术
中国作为世界第一的水产养殖国家，每年的养殖产量为世界养殖总产量的70％左右。但随着水产养殖环境的污染日益加剧，导致水产动物疾病爆发、病原微生物种类增多以及传播速度加快。目前，细菌性疾病在水产养殖，尤其是在密集型的养殖体系中发病率极高，严重阻碍了海水鱼类的养殖和发展，由致病性弧菌所引起的疾病，流行面积广，发病率高，更是给对水产养殖业造成了巨大危害。海洋致病菌主要包括副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌等。
目前，对于海洋致病菌多采用化学药物防治的方法，主要包括青霉素，诺氟沙星，新诺明等，但长期单一使用一种药物会产生抗性，出现耐药性菌株。中草药具有成分丰富、不易产生耐药性、绿色环保及功效多样等优点，在病毒性、细菌性等各类鱼病防治中均拥有独到的作用及良好的效果。
现有对中草药进行筛选来抑制海洋致病菌的研究，但是关于本发明的中草药在抑制海洋致病菌中的应用目前尚缺乏报道。因此，筛选中草药，寻找具有较好抑制海洋致病菌有效的中草药具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种效果显著的余甘子提取物在制备抑制海洋致病菌药物中的用途。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是余甘子提取物在制备抗海洋弧菌药物中的用途，其特点是，所述余甘子提取物为以余甘子为原料，采用水或者醇提取所得的余甘子水提物或余甘子醇提取；所抑制的海洋弧菌为哈维氏弧菌或者副溶血弧菌。
以上所述的用途，其进一步优选的技术方案是：所述的余甘子提取物的制备方法为：称取余甘子粉末，加入溶剂水或无水乙醇，在室温下超声提取10～90min，再在30～90℃下回流提取30～120min，抽滤，同法提取1～4次，收集滤液，浓缩使生药的最终浓度为1g/mL。
本发明优选的技术方案是：所述的余甘子提取物的提取方法如下：
(1)提取：称取余甘子粉末，加入无水乙醇，在室温下超声提取30min，再在50℃下回流提取30min，抽滤，同法提取2次，收集滤液，浓缩使生药的最终浓度为1g/mL；
(2)抑菌活性成分分离：对余甘子醇提物进行分离，余甘子醇提物旋蒸成浸膏后加入蒸馏水配成混浊液，分别用等体积石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取至溶液澄清无色，每次萃取时间30min。萃取完毕后，将溶剂旋干得到干燥粉末，将不同萃取物干燥粉末，配置成10mg/mL的样品溶液，用牛津杯法测定样品溶液的抑菌活性；
(3)抑菌活性成分化学定性检测：使用化学定性的方法对4个组分进行检测，用盐酸+镁粉、溴甲酚绿溶液及三氯化铁铁氰化钾溶液进行化学定性检测；确定乙酸乙酯组为酚酸类化合物；确定酚酸类化合物为抑制海洋致病菌。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明将余甘子提取物用于制备抑制海洋致病菌的药物，余甘子醇提物对哈维氏弧菌和副溶血弧菌均有较好的抑制作用，MIC值均为15.63mg/mL。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
实施例1，筛选具有抑制海洋致病菌作用的中草药，确定余甘子为抑制海洋致病菌活性最好的中草药
1、抑制海洋致病菌中草药的筛选
初步选出桔梗、金钱草、余甘子、三白草、酸枣仁、紫花地丁、荔枝草、马鞭草、卷柏、忍冬藤、杨树花、马蹄金、忍冬叶、首乌藤、大血藤、猫须草、蕨麻、车前草水提物或醇提取物中的一种或多种18种中草药。称取中药粉末，加入溶剂(水、无水乙醇或石油醚)，在室温下超声提取30min，再在50℃下回流提取30min，抽滤，同法提取2次，收集滤液，浓缩使生药的最终浓度为1g/mL。
选取哈维氏弧菌、副溶血弧菌为目标菌株，采用牛津杯法，在无菌环境下，向平板中倒入约20mL已灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，凝固后，加入200μL的菌悬液，涂布棒涂布均匀，静置10min。将牛津杯垂直均匀放置于培养基上，在杯中加入200μL的提取物样品，每个样品进行3次平行实验，移至37℃恒温培养箱培养18h后，用电子数显卡尺测定抑菌圈直径，结果取三次测量结果的平均值。抑菌圈直径大于20mm为极敏，15～19mm为高敏，10～15mm为中敏，小于10mm为低敏(无活性)。
通过上述体外抑菌实验筛选出对哈维氏弧菌、副溶血弧菌抑制作用较强的中草药作为进一步实验对象。18种中草药提取物对两种弧菌的抑菌效果见表1：
表1 18种中草药提取物对两种弧菌的抑菌效果
Figure BDA0003880916030000041
Figure BDA0003880916030000051
注：“+++”表示极敏、“++”表示高敏、“+”表示中敏、“-”表示低敏(无活性)。
实验结果如表1所示，桔梗醇提物、余甘子水提物及醇提物、金钱草水提物及醇提物、酸枣仁醇提物、首乌藤水提物、大血藤醇提物、猫须草醇提物、蕨麻水提物均对副溶血弧菌有抑制作用；余甘子水提物及醇提物、金钱草醇提物、三白草醇提物、酸枣仁醇提物、紫花地丁水提物及醇提物、荔枝草水提物及醇提物、马鞭草水提物及醇提物、卷柏醇提物、忍冬藤水提物、杨树花水提物、马蹄金醇提物、首乌藤水提物及醇提物、大血藤醇提物、猫须草水提物及醇提物、蕨麻水提物及醇提物、车前草醇提物均对哈维氏弧菌有抑制作用。其中，余甘子水提物及醇提物对两种弧菌的抑菌圈直径均达到15mm以上；荔枝草醇提物、首乌藤水提物、蕨麻水提物对哈维氏弧菌的抑菌圈也达到15mm以上。余甘子醇提物抑制两种弧菌活性最强，抑菌圈直径最大，分别为(19.11±0.20)mm、(23.9±0.30)mm。
根据上述实验结果，选择抑制哈维氏弧菌、副溶血弧菌活性最好的余甘子醇提物作为进一步实验对象，测定其最小抑菌浓度(MIC)。
2、余甘子醇提物对两种弧菌的MIC测定
采用二倍稀释法测定余甘子醇提物对两种弧菌的MIC，即将1g/mL的余甘子醇提液分别稀释至生药浓度为500mg/mL、250mg/mL、125mg/mL、62.5mg/mL、31.25mg/mL、15.63mg/mL、7.82mg/mL。于30℃200r/min摇床振荡恒温培养24h后观察结果，把无菌生长稀释度最大的药液浓度作为MIC值。
表2余甘子醇提物对两种弧菌的最低抑菌浓度实验结果
Figure BDA0003880916030000061
注：“-”表示无活性。
实验结果如表2所示，余甘子醇提物对哈维氏弧菌和副溶血弧菌均有较好的抑制作用，MIC值分别均为15.63mg/mL。
实施例2余甘子抑制海洋致病菌有效成分的提取分离、检测分析。
1、抑菌活性成分提取
称取余甘子粉末，加入无水乙醇，在室温下超声提取30min，再在50℃下回流提取30min，抽滤，同法提取2次，收集滤液，浓缩使生药的最终浓度为1g/mL。
2、抑菌活性成分分离
对余甘子醇提物进行分离，余甘子醇提物旋蒸成浸膏后加入蒸馏水配成混浊液，分别用等体积石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取至溶液澄清无色，每次萃取时间30min。萃取完毕后，将溶剂旋干后得到干燥粉末，将不同萃取物干燥粉末，配置成10mg/mL的样品溶液。选取哈维氏弧菌为目标菌株，采用牛津杯法，在无菌环境下，向平板中倒入约20mL已灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，凝固后，加入200μL的菌悬液，涂布棒涂布均匀，静置10min。将牛津杯垂直均匀放置于培养基上，分别在杯中加入200μL样品溶液溶液，每个样品进行3次平行实验，移至37℃恒温培养箱培养18h后，用电子数显卡尺测定抑菌圈直径，结果取三次测量结果的平均值。抑菌圈直径大于20mm为极敏，15～19mm为高敏，10～15mm为中敏，小于10mm为低敏(无活性)。
表3余甘子各组分抑制哈维氏弧菌结果
Figure BDA0003880916030000071
注：“+++”表示极敏、“++”表示高敏、“+”表示中敏、“-”表示低敏(无活性)。
通过对不同极性段的分离，得到四个组分。将四个组分进行抑菌实验，实验结果如表3所示，石油醚组对哈维氏弧菌没有抑制活性，正丁醇组与蒸馏水组对哈维氏弧菌均有抑制作用。乙酸乙酯组对哈维氏弧菌有较好的抑制作用。
3抑菌活性成分化学定性检测
使用化学定性的方法对乙酸乙酯组进行检测，用盐酸+镁粉、溴甲酚绿溶液及三氯化铁-铁氰化钾溶液进行化学定性检测。
表4余甘子抑制哈维氏弧菌活性成分的检测
Figure BDA0003880916030000081
实验结果如表4所示，乙酸乙酯组与溴甲酚绿溶液呈现阳性反应，说明其主要成分为羧酸类化合物；乙酸乙酯组又与三氯化铁-铁氰化钾溶液呈现阳性反应，说明其主要成分为酚酸类化合物。
通过上述分离、化学定性检测，初步确定余甘子抑制海洋致病菌的有效成分为酚酸类化合物。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.余甘子提取物在制备抗海洋弧菌药物中的用途，其特征在于，所述余甘子提取物为以余甘子为原料，采用水或者醇提取所得的余甘子水提物或余甘子醇提取；所抑制的海洋弧菌为哈维氏弧菌或者副溶血弧菌。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的余甘子提取物的提取方法为：称取余甘子制成的粉末，加入溶剂水或无水乙醇，在室温下超声提取10～90min，再在30℃～90℃下回流提取30～120min，抽滤，同法提取1～4次，收集滤液，浓缩使生药的最终浓度为1g/mL。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的余甘子提取物的提取方法如下：
(1)称取余甘子粉末，加入无水乙醇，在室温下超声提取30min，再在50℃下回流提取30min，抽滤，同法提取2次，收集滤液，浓缩使生药的最终浓度为1g/mL；
(2)抑菌活性成分分离：对余甘子醇提物进行分离，余甘子醇提物旋蒸成浸膏后加入蒸馏水配成混浊液，用等体积乙酸乙酯萃取至溶液澄清无色，萃取时间30min；萃取完毕后，将溶剂旋干得到干燥粉末，即得。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1947525A (zh) * 2006-11-28 2007-04-18 黄华信 余甘子中药复方防腐制剂及其制备和用途
CN103347529A (zh) * 2010-12-09 2013-10-09 Y&B妈妈之选有限公司 包含皂苷的制剂及其用途
CN109276602A (zh) * 2018-12-03 2019-01-29 四川省畜牧科学研究院 余甘子的用途及其组合物和组合物用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120107432A1 (en) * 2009-06-29 2012-05-03 Benny Antony Composition of extract of emblica officinalis and method of preparing the same
US11071764B2 (en) * 2016-11-20 2021-07-27 Laila Nutraceuticals Synergistic dietary supplement compositions of Sphaeranthus indicus and Terminalia chebula for liver health
SG11201908574TA (en) * 2017-03-17 2019-10-30 Kerala Ayurveda Ltd India Herbal composition

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1947525A (zh) * 2006-11-28 2007-04-18 黄华信 余甘子中药复方防腐制剂及其制备和用途
CN103347529A (zh) * 2010-12-09 2013-10-09 Y&B妈妈之选有限公司 包含皂苷的制剂及其用途
CN109276602A (zh) * 2018-12-03 2019-01-29 四川省畜牧科学研究院 余甘子的用途及其组合物和组合物用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Effects of Phyllanthus amarus extract on nonspecific immune responses ,growth,and resistance to Vibro alginolyticus in white shrimp Litopenaeus vannamei;Hoang-Viet-Trinh Ngo ,etc;《Fish & Shellfish Immunology》;第1-8页 *
红甜菜提取物抗菌潜力研究与应用;周艳丽等;《中国糖料》;第57-61页 *

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