UA75049C2 - Фармацевтична композиція, що містить поліпептид, який являє собою білковий фактор дозрівання в-клітин (всма), що зв'язується з фактором активації в-клітин (baff), спосіб інгібування росту в-клітин, спосіб лікування аутоімунного захворювання, спосіб лікування гіпертонії, спосіб інгібування запалення та спосіб модулювання імунної відповіді у ссавця за допомогою всма - Google Patents

Фармацевтична композиція, що містить поліпептид, який являє собою білковий фактор дозрівання в-клітин (всма), що зв'язується з фактором активації в-клітин (baff), спосіб інгібування росту в-клітин, спосіб лікування аутоімунного захворювання, спосіб лікування гіпертонії, спосіб інгібування запалення та спосіб модулювання імунної відповіді у ссавця за допомогою всма Download PDF

Info

Publication number
UA75049C2
UA75049C2 UA2002032076A UA200232076A UA75049C2 UA 75049 C2 UA75049 C2 UA 75049C2 UA 2002032076 A UA2002032076 A UA 2002032076A UA 200232076 A UA200232076 A UA 200232076A UA 75049 C2 UA75049 C2 UA 75049C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
cells
sequence
vare
polypeptide
amino acid
Prior art date
Application number
UA2002032076A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Фаб'єнн Маккей
Джеффрі Браунінг
Крістін Амброуз
Юрг Чопп
Паскаль ШНАЙДЕР
Джеффрі Томпсон
Original Assignee
Байоджен Айдек Ма Інк.
Байоджэн Айдэк Ма Инк.
Апотек Р Енд Д С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27386828&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA75049(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Байоджен Айдек Ма Інк., Байоджэн Айдэк Ма Инк., Апотек Р Енд Д С.А. filed Critical Байоджен Айдек Ма Інк.
Publication of UA75049C2 publication Critical patent/UA75049C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70575—NGF/TNF-superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Abstract

Описано фармацевтичну композицію, що містить поліпептид, який являє собою білковий фактор дозрівання В-клітин (ВСМА), що зв’язується з фактором активації В-клітин (BAFF). Описано також спосіб інгібування росту В-клітин, спосіб лікування аутоімунного захворювання, спосіб лікування гіпертонії, спосіб інгібування запалення у ссавця та спосіб модулювання імунної відповіді у ссавця за допомогою фармацевтичної композиції, яка містить поліпептид ВСМА.

Description

менше на 80 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- (а) антитіло, що зв'язується з послідовністю 5ЕО лідовності ЗЕО ІЮ МО:1, або його фрагмент, що ІО МО-1. зв'язується з ВАЕЕ; або 7. Спосіб лікування В-клітинного лімфопроліфера- (Б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну тивного порушення у ссавця, що включає в себе послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- стадію введення терапевтично ефективної кілько- менше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- сті композиції, яка містить лідовності ЗЕО ІЮ МО:1; або (а) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну послідовність, що зв'язується з ВАРЕЕ і яка щонай- послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з менше на 80 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- гетерологічною амінокислотною послідовністю; лідовності ЗЕО ІЮ МО: 1, або його фрагмент, що або зв'язується з ВАЕЕ; або (4) антитіло, що зв'язується з послідовністю ЗЕО (б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну
ІО МО71. послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- 4. Спосіб лікування аутоїмунного захворювання у менше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- ссавця, що включає в себе стадію введення тера- лідовності ЗЕО ІЮ МО:1; або певтично ефективної кількості композиції, яка міс- (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну тить послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з (а) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну гетерологічною амінокислотною послідовністю; послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- або менше на 80 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- (а) антитіло, що зв'язується з послідовністю ЗЕО лідовності ЗЕО ІЮ МО:1, або його фрагмент, що ІО МО-1. зв'язується з ВАЕЕ; або 8. Спосіб інгібування запалення у ссавця, що (Б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну включає в себе стадію введення терапевтично послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- ефективної кількості композиції, яка містить менше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- (а) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну лідовності ЗЕО ІЮ МО:1; або послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і щонаймен- (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну ше на 8095 ідентична амінокислотам 1-51 послідо- послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з вності ЗЕО 10 МО: 1, або його фрагмент, що гетерологічною амінокислотною послідовністю; зв'язується з ВАЕЕ; або або (б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну (4) антитіло, що зв'язується з послідовністю ЗЕО послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і щонаймен-
ІО МО:1. ше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 послі- 5. Спосіб лікування гіпертонії у ссавця, що включає довності ЗЕО ІЮ МО 1; або в себе стадію введення терапевтично ефективної (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну кількості композиції, яка містить послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з (а) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну гетерологічною амінокислотною послідовністю; послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- або менше на 80 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- (а) антитіло, що зв'язується з послідовністю ЗЕО лідовності ЗЕО ІЮ МО:1, або його фрагмент, що ІО МО-1. зв'язується з ВАЕЕ; або 9. Спосіб модулювання імунної відповіді, яка бере (Б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну участь у передачі сигналу між ВСМА і ВАРРЕ, у сса- послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- вця, що включає в себе стадію введення терапев- менше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- тично ефективної кількості композиції, яка містить лідовності ЗЕО ІЮ МО:1; або (а) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну послідовність, що зв'язується з ВАРЕЕ і яка щонай- послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з менше на 80 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- гетерологічною амінокислотною послідовністю; лідовності ЗЕО ІЮ МО: 1, або його фрагмент, що або зв'язується з ВАЕЕ; або (4) антитіло, що зв'язується з послідовністю ЗЕО (б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну
ІО МО71. послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- 6. Спосіб лікування ниркового порушення у ссавця, менше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- що включає в себе стадію введення терапевтично лідовності ЗЕО ІЮ МО:1; або ефективної кількості композиції, яка містить (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну (а) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- гетерологічною амінокислотною послідовністю; менше на 80 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- або лідовності ЗЕО І МО:1, або його фрагмент, що (4) антитіло, що зв'язується з послідовністю 5ЕО зв'язується з ВАЕЕ; або ІО МО-1. (Б) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну 10. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид послідовність, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- ВСМА містить амінокислотну послідовність, що менше на 80 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 90 95 іде- лідовності ЗЕО ІЮ МО:1; або нтична амінокислотам 8-41 послідовності ЗЕО ІЮ (с) поліпептид ВСМА, який містить амінокислотну МО. послідовність відповідно до (а) або (Б), злиту з 11. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид гетерологічною амінокислотною послідовністю; ВСМА містить амінокислотну послідовність, що або зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 90 95 іде-
нтична амінокислотам 1-51 послідовності ЗХЕО ІЮ 25. Фармацевтична композиція за п. 23, де поліпе-
МО:1. птид ВСМА містить амінокислоти 1-51 послідовно- 12. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид сті ЗЕО ІЮО МО:1 або її фрагмент, що зв'язується з
ВСМА містить амінокислоти 8-41 послідовності ВАЕРЕ.
ЗЕО ІЮ МО. 26. Фармацевтична композиція за п. 23, де поліпе- 13. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид птид ВСМА містить амінокислоти 8-41 послідовно-
ВСМА містить амінокислоти 1-51 послідовності сті БЕО ІЮ МО:1.
ЗЕО ІЮ МО. 27. Фармацевтична композиція за п. 23, де поліпе- 14. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид птид ВСМА містить амінокислотну послідовність,
ВСМА містить Ес-домен імуноглобуліну. що зв'язується з ВАРЕЕ і яка щонайменше на 85 95 15. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де антитіло яв- ідентична амінокислотам 8-41 послідовності ЗЕО ляє собою моноклональне антитіло. ІО МОЛ. 16. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де антитіло зв'я- 28. Фармацевтична композиція за п. 27, де поліпе- зується з амінокислотами 1-51 послідовності ЗЕО птид ВСМА містить амінокислотну послідовність,
ІО МО71. що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 90 95 17. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де ссавець є ідентична амінокислотам 8-41 послідовності ЗЕО людиною. ІО МО-1. 18. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид 29. Фармацевтична композиція за п. 23, де поліпе-
ВСМА є розчинним. птид ВСМА містить амінокислотну послідовність, 19. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де поліпептид що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 85 95
ВСМА не містить трансмембранного домена ідентична амінокислотам 1-51 послідовності ЗЕО
ВСМА. ІО МОГ:1, або її фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ. 20. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де вказаний по- 30. Фармацевтична композиція за п. 29, де поліпе- ліпептид містить поліпептид ВСМА, який по суті птид ВСМА містить амінокислотну послідовність, складається з що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 90 95 (а) амінокислотної послідовності, що зв'язується з ідентична амінокислотам 1-51 послідовності ЗЕО
ВАРРЕ і яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- ІО МОГ:1, або її фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ. кислотам 1-51 послідовності ЗЕО ІЮ МО, або її 31. Фармацевтична композиція, що містить фар- фрагмента, що зв'язується з ВАЕЕ; або мацевтично прийнятний носій і кількість поліпеп- (р) амінокислотної послідовності, що зв'язується з тиду ВСМА, ефективну для інгібування росту В-
ВАРРЕ і яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- клітин і/або продукування імуноглобуліну, де полі- кислотам 8-41 послідовності ХЕО ІЮ МО:1. пептид ВСМА містить: 21. Фармацевтична композиція, яка містить фар- (а) амінокислотну послідовність, що зв'язується з мацевтично прийнятний носій і кількість антитіла, ВАРРЕ їі яка щонайменше на 80 9о ідентична аміно- що зв'язується з послідовністю 5ЕО ІЮ МО:1, ефе- кислотам 1-51 послідовності ЗЕО ІЮ МО, або її ктивну для інгібування росту В-клітин і/або проду- фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ; або кування імуноглобуліну. (б) амінокислотну послідовність, що зв'язується з 22. Фармацевтична композиція, яка містить фар- ВАРРЕ їі яка щонайменше на 80 9о ідентична аміно- мацевтично прийнятний носій і кількість антитіла, кислотам 8-41 послідовності ХЕО ІО МО:1; або що зв'язується з амінокислотами 1-51 послідовно- (с) амінокислотну послідовність відповідно до (а) сті БЕО ІО МО, ефективну для інгібування росту або (Б), злиту з гетерологічною амінокислотною
В-клітин і/або продукування імуноглобуліну. послідовністю, 23. Фармацевтична композиція, що містить фар- і де поліпептид ВСМА не містить трансмембранно- мацевтично прийнятний носій і кількість поліпеп- го домена ВСМА. тиду ВСМА, ефективну для інгібування росту В- 32. Фармацевтична композиція за п. 31, де поліпе- клітин і/або продукування імуноглобуліну, де полі- птид ВСМА містить амінокислотну послідовність, пептид ВСМА містить: що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 85 90 (а) амінокислотну послідовність, що зв'язується з ідентична амінокислотам 1-51 послідовності ЗЕО
ВАРРЕ і яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- ІО МОГ:1, або її фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ. кислотам 1-51 послідовності ЗЕО ІО МО:1, або її 33. Фармацевтична композиція за п. 32, де поліпе- фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ; або птид ВСМА містить амінокислотну послідовність, (Б) амінокислотну послідовність, що зв'язується з що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 90 95
ВАРРЕ і яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- ідентична амінокислотам 1-51 послідовності ЗЕО кислотам 8-41 послідовності ХЕО ІЮ МО:1; або ІО МОГ:1, або її фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ. (с) амінокислотну послідовність відповідно до (а) 34. Фармацевтична композиція за п. 33, де поліпе- або (Б), злиту з гетерологічною амінокислотною птид ВСМА містить амінокислоти 1-51 послідовно- послідовністю. сті БЕО ІЮО МО: 1 або її фрагмент, що зв'язується з 24. Фармацевтична композиція за п. 23, де поліпе- ВАРРЕ. птид ВСМА містить 35. Фармацевтична композиція за п. 31, де поліпе- (а) амінокислоти 1-51 послідовності ЗЕО ІЮ МО:1 птид ВСМА містить амінокислотну послідовність, або її фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ; або що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 85 95 (Б) амінокислоти 8-41 послідовності ЗЕО ІО МО:1; ідентична амінокислотам 8-41 послідовності ЗЕО або ІО МОЛ. (с) амінокислотну послідовність відповідно до (а) 36. Фармацевтична композиція за п. 35, де поліпе- або (Б), злиту з гетерологічною амінокислотною птид ВСМА містить амінокислотну послідовність, послідовністю. що зв'язується з ВАРЕ і яка щонайменше на 90 95 ідентична амінокислотам 8-41 послідовності ЗХЕО 45. Фармацевтична композиція, що містить фар-
ІО МО71. мацевтично прийнятний носій і кількість розчинно- 37. Фармацевтична композиція за п. 36, де поліпе- го поліпептиду ВСМА, ефективну для інгібування птид ВСМА містить амінокислоти 8-41 послідовно- росту В-клітин і/або продукування імуноглобуліну, сті БЕО І МО:1. де розчинний поліпептид містить: 38. Фармацевтична композиція, що містить фар- (а) амінокислотну послідовність, що зв'язується з мацевтично прийнятний носій і кількість поліпеп- ВАРРЕ їі яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- тиду, ефективну для інгібування росту В-клітин кислотам 1-51 послідовності ЗЕО ІЮ МОЛ, або її і/або продукування імуноглобуліну, де поліпептид фрагмент, що зв'язується з ВАЕЕ; або містить поліпептид ВСМА, і по суті складається з (б) амінокислотну послідовність, що зв'язується з (а) амінокислотної послідовності, що зв'язується з ВАРРЕ їі яка щонайменше на 80 9о ідентична аміно-
ВАРРЕ і яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- кислотам 8-41 послідовності ХЕО ІО МО:1; або кислотам 1-51 послідовності ЗЕО ІО МО:1, або її (с) амінокислотну послідовність відповідно до (а) фрагмента, що зв'язується з ВАЕЕ; або або (Б), злиту з гетерологічною амінокислотною (р) амінокислотної послідовності, що зв'язується з послідовністю.
ВАРРЕ і яка щонайменше на 80 95 ідентична аміно- 46. Фармацевтична композиція за п. 45, де роз- кислотам 8-41 послідовності 5ЕО ІЮ МО 1. чинний поліпептид ВСМА містить амінокислотну 39. Фармацевтична композиція за п. 38, де поліпе- послідовність, що зв'язується з ВАРЕЕ і яка щонай- птид ВСМА по суті складається з амінокислотної менше на 85 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- послідовності, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- лідовності ЗЕО ІО МО:1, або її фрагмент, що менше на 85 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- зв'язується з ВАЕРРЕ. лідовності 5ЕО ІЮ МО: 1, або її фрагмента, що 47. Фармацевтична композиція за п.46, де розчин- зв'язується з ВАЕРРЕ. ний поліпептид ВСМА містить амінокислотну пос- 40. Фармацевтична композиція за п. 39, де поліпе- лідовність, що зв'язується з ВАЕЕ і яка щонайме- птид ВСМА по суті складається з амінокислотної нше на 90 95 ідентична амінокислотам 1-51 послідовності, що зв'язується з ВАРЕ і яка щонай- послідовності 5ЕО ІЮ МО, або її фрагмент, що менше на 90 95 ідентична амінокислотам 1-51 пос- зв'язується з ВАЕРРЕ. лідовності 5ЕО ІЮ МО: 1, або її фрагмента, що 48. Фармацевтична композиція за п. 47, де роз- зв'язується з ВАЕРРЕ. чинний поліпептид ВСМА містить амінокислоти 1- 41. Фармацевтична композиція за п. 40, де поліпе- 51 послідовності ЗЕО ІЮ МО: 1 або її фрагмента, птид ВСМА по суті складається з амінокислотної що зв'язується з ВАЕРЕ. послідовності 1-51 послідовності ЗЕО І МО 1 або 49. Фармацевтична композиція за п. 45, де роз- її фрагмента, що зв'язується з ВАЕРЕ. чинний поліпептид ВСМА містить амінокислотну 42. Фармацевтична композиція за п. 38, де поліпе- послідовність, що зв'язується з ВАРЕЕ і яка щонай- птид ВСМА по суті складається з амінокислотної менше на 85 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- послідовності, що зв'язується з ВАЕЕ і яка на 85 95 лідовності ЗЕО ІЮ МО:1. ідентична амінокислотам 8-41 послідовності ЗЕО 50. Фармацевтична композиція за п. 49, де роз-
ІО МО:1. чинний поліпептид ВСМА містить амінокислотну 43. Фармацевтична композиція за п. 42, де поліпе- послідовність, що зв'язується з ВАРЕЕ і яка щонай- птид ВСМА по суті складається з амінокислотної менше на 90 95 ідентична амінокислотам 8-41 пос- послідовності, що зв'язується з ВАЕЕ і яка на 90 95 лідовності ЗЕО ІЮ МО:1. ідентична амінокислотам 8-41 послідовності ЗЕО 51. Фармацевтична композиція за п. 50, де роз-
ІО МО:1. чинний поліпептид ВСМА містить амінокислоти 8- 44. Фармацевтична композиція за п. 43, де поліпе- 41 послідовності БЕО ІЮ МО1. птид ВСМА по суті складається з амінокислот 8-41 52. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. послідовності БЕО ІЮ МО:1. 23-51, де поліпептид ВСМА злитий з Ес-доменом імуноглобуліну.
Даний винахід відноситься до використання або спадкових генетичних порушень, у яких беруть рецептора для ВАРР, фактора активації р-клітин, участь В-клітини. Блокуючі агенти, такі як рекомбі- що належить до сімейства факторів некрозу пух- нантні варіанти або антитіла, специфічні для вка- лини ("ТМЕ"), і до його блокуючих агентів для сти- заного рецептора, застосовуються також як імуно- муляції або інгібування експресії В-клітин і імуног- регуляторні агенти. Розглядається також лобулінів. Цей рецептор володіє протираковими і використання рецептора для ВАРЕ як стимулятора імунорегуляторними властивостями, а також вико- В-клітин для лікування імуносупресорних захво- ристовується для лікування імуносупресорних рювань, включаючи, наприклад, його використан- розладів, таких як ВІЛ-інфекції. Крім того, цей ре- ня для трансплантації органів пацієнтам (напри- цептор і його блокуючі агенти грають певну роль у клад, трансплантату кісткового мозку), а також для розвитку гіпертонії і споріднених їй розладів. Крім відновлення після лікування рака з метою стиму- того, клітини, трансфіковані геном вказаного реце- ляції продукування В-клітин. Розглядається також птора, можуть бути використані у генній терапії використання рецептора для ВАГРЕ як ад'юванта для лікування пухлин, лімфом, аутоїмунних хвороб ілабо костимулятора для посилення і/або віднов-
лення В-клітинних рівнів приблизно до нормальних багатьох подій, опосередкованих передачею сиг- рівнів. Розчинні форми вказаного рецептора для налу через рецептори сімейства ТМЕ, буде мати
ВАРЕРЕ, які блокують В-клітинну функцію, можуть широке застосування для лікування імунних хво- бути також використані для інгібування захворю- роб, а також широкого ряду захворювань людини, вань, опосередкованих В-клітинами. які мають патологічні ускладнення, зумовлені по-
Даний винахід відноситься до нового рецепто- рушеннями імунної системи. Розчинна форма не- ра сімейства ТМЕ. Був ідентифікований новий ре- щодавно відкритого рецептора, остеопротегерину, цептор ВАЕРЕ-Е (або "ВСМА"). може блокувати втрату маси кісткової тканини, а
Сімейство ТМЕ складається з пар лігандів і їх тому події, регульовані передаючим сигнал рецеп- специфічних рецепторів, що називаються ліганда- тором сімейства ТМЕ, не обов'язково повинні бути ми сімейства ТМЕ і рецепторами сімейства ТМЕ обмежені регуляцією імунної системи. Антитіла до
ІВаглопі 5 Вешег, 1996). Вказане сімейство бере цього рецептора можуть блокувати зв'язування участь у регуляції імунної системи і, можливо, ін- ліганду, а отже, вони можуть також мати клінічне ших неімунологічних систем. Дана регуляція часто застосування. Такі антитіла часто є довгоживучи- відбувається на рівні "головного перемикання", ми і можуть мати деяку перевагу у порівнянні з так, що передача сигналу членами сімейства ТМЕ гібридними білками "рецептор-Ід", які мають більш може приводити до великого числа подальших короткий час напівжиття у кровотоці. подій, найбільш характерних для ТМЕ. ТМЕ може Хоча інгібування опосередкованого рецепто- ініціювати загальну протективну запальну відпо- ром каскаду реакцій являє собою найбільш широ- відь організму на інвазію чужорідного агента, що ко поширене терапевтичне застосування цих ре- приводить до зміни фетотипу адгезивних молекул, цепторів, однак спочатку таке застосування що беруть участь у транспорті клітин, до продуку- полягало у активації рецепторів ТМЕ, що вказува- вання хемокінів для направлення специфічних ло на перспективність його клінічного застосуван- клітин у конкретні дільниці і до примування різних ня ІАддагмаії 5 Маїагаздап, 1996). Активація рецеп- ефекторних клітин. Таким чином, регуляція цих торів ТМЕ може ініціювати клітинну загибель, а каскадів реакцій може мати клінічне застосування. тому їх застосування для лікування пухлин є ще
Індукування різних клітинних відповідей, опо- більш привабливим (Еддегптопі еї аї., 1996). Цей середкованих вказаними цитокінами сімейства рецептор може бути активований або шляхом
ТМЕ, очевидно ініціюється їх зв'язуванням зі спе- введення ліганду, тобто, ліганду, що бере участь у цифічними клітинними рецепторами. Були іденти- каскаді природних реакцій, або певних антитіл, які фіковані принаймні два різних рецептори ТМЕ, що можуть перехресно реагувати з даним рецептором мають молекулярну масу приблизно 55КкДа і також є сильними агоністами. Ці антитіла мають (ТМЕКТ) і 75кДа (ТМЕК2г) І(Ноптап еї аї., 9. Віої. певну перевагу в онкології, оскільки вони можуть
Спет. 264: 14927-14934 (1989) 5 Вгоскпацзг еї аї., існувати у кровотоці протягом тривалого періоду
РМАБ, 87:3127-3131 (1990)). Широкий поліморфізм часу, тоді як ліганди мають звичайно короткий час був асоційований з обома генами рецептора ТМЕ. напівжиття у кровотоці. Оскільки багато які з цих
Обидва ТМЕК мають загальну типову структуру рецепторів можуть бути експресровані більш селе- рецепторів клітинної поверхні, включаючи позаклі- ктивно у пухлинах, або вони можуть тільки пере- тинні, трансмембранні і внутрішньоклітинні доме- давати сигнал загибелі або диференціювання клі- ни. Вказана позаклітинна частина ТМЕК типу 1 і тин у пухлині, то антитіла-агоністи можуть бути типу 2 містить мотив амінокислотної послідовності, хорошою зброєю у боротьбі проти рака. Аналогіч- що повторюється, який складається з доменів, ним чином, багато позитивних імунологічних подій багатих чотирма цистеїнами (СОК). Аналогічний опосередковуються рецепторами ТМЕ, наприклад, мотив СОК, що повторюється, присутній і у деяких запальні реакції господаря, продукування антитіл і інших білках клітинної поверхні, включаючи рецеп- т.п. а тому антитіла-агоністи можуть володіти тор фактора зростання нервової тканини, антаго- сприятливою дією у інших неонкологічних застосу- ніста антигену СО40, присутнього на В-клітинах і ваннях. т.п. Парадоксально, але інгібування метаболічного
Завдяки своїй здатності легко перетворювати- шляху може виявитися клінічно ефективним для ся у гібридні білки імуноглобулінів рецептори яв- лікування пухлин. Так, наприклад, Раз-ліганд екс- ляють собою могутній інструмент для виявлення пресується деякими пухлинами і ця експресія мо- каскадів біологічних реакцій. Такі димерні розчинні же приводити до загибелі Раз-позитивних лімфо- форми рецепторів є хорошими інгібіторами подій, цитів, що, тим самим, дозволяє пухлині опосередкованих або секретованими, або поверх- "вислизати" від нагляду імунної системи. У цьому невими лігандами. Шляхом зв'язування з цими випадку інгібування Раз-системи може потім дава- лігандами вони можуть перешкоджати взаємодії ти можливість імунній системі взаємодіяти з пух- лігандів з клітинно-асоційованими рецепторами, линою іншими шляхами, доступ до яких у цей час які можуть передавати сигнал. Ці гібридні білки представляється можливим |Сгеепе 5 Умаге, 19971. "рецептор-Ід" є цінними не тільки з експеримента- Авторами даного винаходу був ідентифікова- льної точки зору, але і у випадку ТМЕ-В-Ід, вони ний кКДНК-клон, який кодує поліпептид, позначений можуть бути успішно використані клінічно для лі- у даній заявці "ВАЕЕ-К" або "ВСМА", який зв'язу- кування захворювань кишечнику, ревматоїдного ється з фактором некрозу пухлини, ВАЕР, факто- артриту і гострого клінічного синдрому, супрово- ром активації В-клітин, що належить до сімейства джуючого введення ОКТЗ (Еазоп еї аї., 1996; факторів некрозу пухлини ("ТМЕ"). ВАРЕ являє
ЕеІдтапп еї аї., 1996; мап ЮОшіетеп еї аї., 1995). собою ту ж саму молекулу, описану раніше у
Можна чекати, що маніпуляції по відношенню до М/О/9912964, яка вводиться у даний опис за допо-
могою посилання. лотна послідовність (ЗЕО 10 МО:3) ру5зтТ538, плаз-
У одному з варіантів свого здійснення, даний міди, що кодує ВАРРЕ-В-Ес: залишки нуклеїнової винахід відноситься до способів використання кислоти 1-69, мишача сигнальна послідовність
ВАБЕЕБ-К. Вказаними способами є способи |інгібу- каппа-ланцюга дос; залишки нуклеїнової кислоти вання зростання В-клітин, індукованого дендрит- 70-222, ВАРЕ-К (залишки нуклеїнової кислоти 1- ними клітинами зростання і дозрівання В-клітин, 153); залишки нуклеїнової кислоти 223-906, ІдС або продукування імуноглобуліну у тварин з вико- людини. ристанням поліпептиду ВАРЕ-К. Даний винахід На Фіг.3 показана послідовність нуклеїнової також включає способи стимуляції зростання В- кислоти руУЗТ535, плазміди, що кодує повнорозмі- клітин, зростання і дозрівання В-клітин, індукова- рний ВАРЕ-К людини, і виведена з неї амінокисло- ного дендритними клітинами, або продукування тна послідовність. імуноглобуліну у тварини з використанням поліпе- На Фіг.4 показане порівняння структури ТМЕ- птиду ВАРЕ-К, або ко-стимуляції зростання В- 55 і ВАГБ-В. клітин, зростання і дозрівання В-клітин, індукова- На Фіг.5 показані клітини 293ЕВМА, трансфіко- ного дендритними клітинами, або продукування вані або (а) СН269 (1,0мкг), або (р) ро5тТ535 імуноглобуліну у тварини з використанням поліпе- (0,1мкг), плазмідою, що експресує повнорозмірний птиду ВАЕРЕ-Е і антитіла проти Т, ліганду СО40 або ВАЕР-Е і забарвленою 0,5мкг/мл Пад-пВАРЕ у фо- ліганду проти СО40. рматі аналізу на планшетах.
У іншому варіанті свого здійснення даний ви- На Фіг.б(а) показано РГАС5-перекриття клітин нахід відноситься до способів з використанням 293ЕВМА, трансфікованих рО5ЗтТ535 і забарвлених
ВАРЕРЕ-Е для лікування аутоїмунних хвороб, гіпер- таким чином: без ліганду (чорна гістограма), тонії, серцево-судинних розладів, ниркоподібних 1мкг/мл Яад-пСО040!. (рожева) або Пад-пВАЕЕ (зе- захворювань, лімфопроліферативних захворю- лена). Потім всі зразки забарвлювали анти-йад вань, асоційованих з В-клітинами, імуносупресор- М2, а потім ослиним антитілом проти мишачих дО них захворювань, захворювань, асоційованими з як описано у способах у прикладі 2. трансплантацією органів і ВіІЛ-інфекцій. Даний На Фіг.6(Б) показані РАСсЗ-гістограми зі статис- винахід також відноситься до способів викорис- тичними даними одного і того ж експерименту. тання агентів для нормалізації, придушення або Фарбування здійснювалося таким чином: (1) не зміни імунної відповіді, що бере участь у шляху забарвлювали, (2) тільки 7ААО, (3) у 2-ій стадії і передачі сигналу між ВАЕРР-К і його лігандом, і до тільки 7ААО, (4) У9мкг/мл Пад-пВАЕРЕ, (5) Змкг/мл способів інгібування запалення шляхом введення Пад-пВАРРЕ, (6) 1Тмкг/мл Пад-пВАРР, (7) 0,3Змкг/мл антитіла проти ВАЕЕ-К або його епітопу. МПад-пВАРР, (8) 0,1ї1мкг/мл Пад-пВАРЕ, (9) Пад-
Способи даного винаходу переважно здійс- пСО40.., Імкг/мл. нюють шляхом введення терапевтично ефективної На Фіг.7 показана імунопреципітація ВАРЕ-В- кількості поліпептиду ВАРЕ-К, химерної молекули, Ес, як описано у способах у прикладі 4. Стандарти що містить поліпептид ВАРР-К, злитий з гетероло- молекулярної маси у кДа помічені у лівій частині гічною амінокислотною послідовністю, або гомоло- фігури. Доріжки: (1) 12,5нг Яад-пллЕАК, (2) 12,5нг га антитіла проти ВАЕРРБ-В. Пад-пВАРРЕ, (3) імунопреципітація Яад-пВАРЕ під
У одному з варіантів свого здійснення, даний дією 0,5мл ВАРР-В-Ес-кондиціонованого середо- винахід відноситься до фармацевтичних компози- вища, (4) імунопреципітація Пад-пТтУуМЕАК з вико- цій, що містять поліпептид ВАРЕ-К і фармацевти- ристанням 0,5мл ВАРРЕ-В-Ес-кондиціонованого чно прийнятний носій. середовища, (5) імунопреципітація без ліганду з
У іншому варіанті свого здійснення даний ви- використанням 0,5мл ВАРЕ-В-Ес-кондиціонованого нахід відноситься до химерних молекул, що міс- середовища, (б) імунопреципітація Яйад-пВАБЕ з тять поліпептид ВАЕРР-К, злитий з гетерологічною використанням 0,5мл кондиціонованого середо- поліпептидною або амінокислотною послідовністю. вища від нетрансфікованих 293ЕВМА, (7) імуноп-
Прикладом такої химерної молекули є ВАРБЕ-НВ, реципітація Пад-пТтУуЕАК з використанням 0,5мл злитий з Ес-областю імуноглобуліну або послідов- кондиціонованого середовища від нетрансфікова- ністю міченого епітопу. них 293ЕВМА.
У іншому варіанті свого здійснення даний ви- На Фіг.8 показаний графік результатів аналізу нахід відноситься до антитіла, яке специфічно зв'- проліферації спленоцитів, на якому представлені язується з поліпептидом ВАРЕ-К. Це антитіло є, криві, що відображають число імпульсів у хвилину але не обов'язково, моноклональним антитілом. (імп./хв.), включених у клітини мишачих спленоци-
На Фіг.1 показана послідовність нуклеїнової тів, у залежності від кількості доданої ВАЕРЕ люди- кислоти (ЗЕО ІЮ МО:2) кКДНК ВАРЕР-К (ВСМА) лю- ни (мкг/мл). дини і виведена з неї амінокислотна послідовність На Фіг.9 показаний графік результатів аналізу (ЗЕО ІО МО:1). Можливий сайт ініціації трансляції блокування ВАРЕРЕ, у якому вивчається зв'язування знаходиться у будь-якому із залишків нуклеїнової ВАРЕ з Каїі-клітинами, і приведені криві даних зчи- кислоти (нуклеотидів) 219 або 228; багатий цистеї- тування МРЕЇ (середньої інтенсивності флуоресце- ном домен (СКО) знаходиться у залишках нуклеї- нції), у залежності від кількості Е:ПІДСІ (нг/мл). нової кислоти 240-341 5ЕО ІО МО:2 (амінокислотні На Фіг.1д(а) показані графіки експресії ІМ у залишки 8-41 5ЕО ІО МО:1); а можлива трансмем- залежності від СО1 у ГАС5-аналізі Вай-Тд-мишей, бранна область знаходиться у залишках нуклеїно- яким вводили 1-Ід (середня панель) або ПНВСМА-Ід вої кислоти 375-459 5ЕО ІЮ МО:2. (нижня панель), і однопоносних контрольних ми-
На Фіг.2 показана послідовність нуклеїнової шей дикого типу, яким вводили РВ5-ін'єкції (верх- кислоти (ЗЕО ІО МО:4) і виведена з неї амінокис- ня панель), як описано у прикладі 11.
На Фіг.19(Б) показані графіки експресії СО21 у містить трансмембранних і цитоплазматичних до- залежності від (ЯМ у РГАСзЗ-аналізі на виявлення менів ВАРЕ-К. Звичайно позаклітинний домен (за дискримінаційними вікнами) ІдО-позитивних ВАЕРЕ-Е має менш, ніж 195 з таких трансмембран- популяцій для Вай-Тд-мишей, яким вводили Пп-Ід них і цитоплазматичних доменів, а переважно (середня панель) або ПНВСМА-ІдД (нижня панель), і менш, ніж 0,595 таких доменів. ВАЕЕ-А-ЕСО міс- для однопоносних контрольних мишей дикого ти- тить, але не обов'язково, амінокислотні залишки 8- пу, яким вводили РВ5-ін'єкції (верхня панель), як 41 5ЕО Ю МО: 1 або амінокислотні залишки 4-51 описано у прикладі 11. ЗЕО ІО МО:1 або амінокислотні залишки 1-53 5ЕО
На Фіг.10(с) показані графіки експресії СО21 у ІО МО/1. У переважному варіанті здійснення вина- залежності від (ЯМ у РГАСзЗ-аналізі на виявлення ходу ВАРЕ-А-ЕСО містить амінокислотні залишки (за дискримінаційними вікнами) ІдО-негативних 1-51 5БЕО ІО МО/1. У іншому переважному варіанті популяцій для Вай-Тд-мишей, яким вводили Пп-Ід здійснення винаходу ВАРЕ-Н-ЕСО містить аміно- (середня панель) або ПВСМА-ІдД (нижня панель) і кислотні залишки 1-50 5ЕО ІЮО МО:1. Потрібно за- для однопоносних контрольних мишей дикого ти- значити, що трансмембранний домен, ідентифіко- пу, яким вводили РВ5-ін'єкції (верхня панель), як ваний для поліпептиду ВАРЕ-К даного винаходу, описано у прикладі 11. ідентифікують відповідно до критеріїв, що звичай-
На Ффіг.11 показана маса селезінок для всіх но використовуються для ідентифікації гідрофоб- груп Вай-Тд-мишей (виражені як маса у мг х/- ста- ного домену такого типу. Точні межі трансмемб- ндартне відхилення). ранного домену можуть варіюватися, але,
На Фіг.12 показаний графік залежності протеї- ймовірно, не більш, ніж за 5 амінокислотами на нурії (мг/дл) від числа ін'єкцій для Вай-Тд-мишей, будь-якому кінці домену, конкретно згаданого у оброблених РВ5, під, ПВСМА-ІдД і для однопонос- даному описі. У відповідності з цим, ВАЕЕ-В8-ЕСО них контрольних мишей. може, але не обов'язково, включати у себе аміно-
На Фіг.13 показаний графік середнього артері- кислоти 8-41 (5БЕО ІЮ МО:1). ального тиску (мм рт.ст.) у Вай-Тд-мишей і у конт- "Варіант ВАРР-К" означає активний ВАРРЕ-В, рольних мишей дикого типу. що визначається нижче і що має щонайменше
На Фіг.14 показаний графік значень артеріаль- приблизно 8095-ну ідентичність амінокислотної ного тиску (мм рт.ст.) в окремих Вай-Тд-мишей і у послідовності з ВАРЕ-К, що має виведену аміно- контрольних мишей дикого типу. кислотну послідовність, показану у 5ЕО ІЮ МО
На Фіг.15 показана гістограма процентного ві- для повнорозмірної нативної послідовності ВАРРЕ- дношення мишей 5МЕТ, які виявляли важкий неф- Е або з послідовністю ВАРЕ-Н-ЕСО. Такими варіа- рит після обробки ВАЕРЕ-В-Ід (ВСМА-Ід), Нидо або нтами ВАРРЕ-К є, наприклад, поліпептиди ВАЕР-В,
РВБ5. у яких на кінці або С-кінці послідовності ЗЕО ІЮ
На Фіг.16 показаний графік загального числа МО:1 додані або делетовані один або декілька клітин СОІЇсСОсС (в мільйонах) у мишей, обробле- амінокислотних залишків. Звичайно варіант ВАЕР- них іп мімо 20мкг ВСМА-Ід, 5О0мкг ВСМА-І9, Ниїдсе К має щонайменше приблизно 8095-ну або 8595- або РВ5. Були оцінені клітинні популяції СОПСОС: ну, більш переважно - щонайменше приблизно (1) СОва-СОа4-, (2) Совансоя і (3) СоОва-СО4 к. 909о5-ну, і навіть більш переважно - щонайменше 1. Визначення приблизно 9595-ну ідентичність амінокислотної
Терміни "ВАРР-К" і "ВСМА", що використову- послідовності з амінокислотною послідовністю ються у даному описі, охоплюють нативну послі- ЗЕО ІЮ МО-1. довність ВАБЕ-К і варіанти ВАРЕ-К (які будуть "Процент (95) ідентичності амінокислотної пос- детально визначені нижче). ВАЕЕ-К може бути лідовності" по відношенню до послідовностей виділений з ряду джерел, таких, наприклад, як ВАРЕ-К, ідентифікованих у даному винаході, ви- деякі типи тканин миші або людини, або з інших значають як процент амінокислотних залишків у джерел, або він може бути одержаний рекомбінан- послідовності-кандидаті, яка є ідентичною аміно- тними методами або методами синтезу. кислотним залишкам у послідовності ВАРЕ-К, піс- "Нативна послідовність ВАЕР-К" включає у се- ля зіставлення первинних послідовностей і вве- бе поліпептид, що має таку ж амінокислотну пос- дення пропусків, якщо це необхідне для лідовність, що і ВАЕЕ-А, що походить від природ- досягнення максимального проценту ідентичності них джерел. Така нативна послідовність ВАРЕ-В послідовності, і не беручи до уваги які-небудь кон- може бути виділена з природних джерел, або вона сервативні заміни, зроблені у процесі ідентифікації може бути продукована рекомбінантними метода- послідовностей. Зіставлення первинних послідов- ми або методами синтезу. Існують природні усічені ностей з метою визначення проценту індентичнос- або секретовані форми ВАЕБЕ-Е (наприклад, роз- ті амінокислотної послідовності може бути досяг- чинні форми, що містять, наприклад, послідовність нуте різними способами, відомими фахівцям, позаклітинного домену), природні варіанти (напри- наприклад, з використанням широко доступного клад, альтернативно сплайсовані форми) і приро- програмного забезпечення, такого як ВІА5Т, дні алельні варіанти ВАЕР-К. в одному з варіантів АЦІСМ або Медаїїдп (ОМА5БТАК). Кожний фахівець здійснення винаходу нативна послідовність ВАЕРЕ- може визначити відповідні параметри для прове-
Е являє собою зрілу або повнорозмірну нативну дення порівняльного аналізу, включаючи будь-які послідовність поліпептиду ВАРЕ-К, що містить алгоритми, необхідні для досягнення максималь- амінокислоти 1-184 послідовність ЗЕО ІЮ МО 1 або ного зіставлення за всією довжиною послідовнос- її фрагмент. тей, що порівнюються. "Позаклітинний домен ВАЕБЕ-К" або "ВАЕР-В- Термін "мічений епітоп", що використовується
ЕСО" означає форму ВАРРЕ-К, яка в основному не тут, відноситься до химерного поліпептиду, що містить ВАРЕ-К або послідовність його домену, Термін "біологічно активний", що використову- злиту з "поліпептидною міткою". Поліпептидна ється тут, відноситься до іп мімо або іп мійго- мітка має достатнє число залишків для одержання активності, яка може бути здійснена безпосеред- епітопу, проти якого може бути продуковане анти- ньо або опосередковано. Біологічно активні фраг- тіло або який може бути ідентифікований яким- менти ВАРЕ-К можуть мати, наприклад, 7090 амі- небудь іншим агентом, але при цьому досить ко- нокислотну гомологію, більш переважно ротким, таким, щоб він не перешкоджав активності щонайменше 8095, а найбільш переважно - що-
ВАРРЕ-К. Поліпептидна мітка переважно також по- найменше 9090-гомологію з активним сайтом ре- винна бути абсолютно унікальною, так, щоб анти- цептора. Ідентичність або гомологія по відношен- тіло в основному не вступало у перехресну реак- ню до рецептора визначена тут як процент цію з іншими епітопами. Відповідні поліпетпидні амінокислотних залишків у послідовності- мітки в основному мають щонайменше 6 аміноки- кандидаті, яка ідентична залишкам ВАРЕ-К у ЗЕО слотних залишків, а звичайно від приблизно 8 до ІО МО 1 або яка ідентична певній області аміноки- амінокислотних залишків (переважно, приблиз- слотних залишків у БЕО ІЮ МО 1. но від 10 до 20 залишків). Термін "ссавець", що використовується тут,
Термін "виділений", що використовується для означає будь-яку тварину, класифіковану як сса- опису різних згаданих тут поліпептидів, відносить- вець, включаючи людину, корів, коней, собак, ми- ся до поліпептиду, який був ідентифікований і ви- шей і кішок. У переважному варіанті здійснення ділений і/або відновлений з компонента його при- винаходу таким ссавцем є людина. родного оточення. Домішковими компонентами Для здійснення даного винаходу можуть бути його природного оточення є матеріали, які звичай- використані, якщо це не обумовлене особливо, но перешкоджають діагностичному або терапевти- стандартні методи клітинної біології, клітинного чному застосуванню даного поліпептиду і якими культивування, молекулярної біології, трансгенної можуть бути ферменти, гормони і інші білкові або біології, мікробіології, рекомбінантних ДНК і імуно- небілкові розчинені речовини. У переважних варі- логії, які відомі фахівцям. Вказані методи описані у антах здійснення винаходу вказаний поліпептид літературі. може бути очищений (1) до міри, достатньої для Далі приводиться докладний опис переважних одержання щонайменше 15 залишків М-кінцевої варіантів здійснення даного винаходу. Даний ви- або внутрішньої амінокислотної послідовності з нахід відноситься до використання ВАЕР-К і спорі- використанням секвенатора з чашкою, що оберта- днених ВАРЕ-К молекул для ефективного зрос- ється, або (2) до гомогенності за допомогою елек- тання і дозрівання В-клітин і секреції трофорезу у ПААГ з ДСН у невідновлювальних імуноглобуліну. Даний винахід також відноситься або відновлювальних умовах з використанням до використання ВАРЕ-К і споріднених ВАЕРЕ-В кумаси синього або - переважно - срібного барвни- молекул для вироблення ефективних відповідей ка. Виділеним поліпептидом є поліпептид іп 5йи у імунної системи, необхідних при розладах, пов'я- рекомбінантних клітинах, оскільки щонайменше заних з імунними порушеннями. Крім того, даний один компонент природного оточення ВАРЕ-К у винахід відноситься до лікування рака та імунних них не присутній. Однак звичайно виділений полі- розладів за допомогою використання гена ВАЕЕ-В пептид може бути одержаний щонайменше за од- або спорідненого ВАЕРЕ-Е методами генної терапії. ну стадію очищення. ВАРР-К і його гомологи, продуковані господа-
Термін "антитіло" використовується у самому рями, трансформованими послідовностями даного широкому значенні і конкретно включає у себе винаходу, а також нативний ВАРЕ-Р, очищений моноклональні антитіла проти ВАРЕ-К (включаючи відомими методами або продукований з відомих антитіла-агоністи, антитіла-антагоністи і нейтралі- амінокислотних послідовностей, можуть бути ви- зуючі антитіла) і композиції антитіл проти ВАЕР-К з користані у ряді методів протиракового, протипух- поліепітопною специфічністю. Термін "моноклона- линного і імунорегуляторного застосування. Вони льне антитіло", що використовується тут, означає також можуть бути використані у терапії і у мето- антитіло, одержане з популяції в основному гомо- дах, направлених на лікування інших хвороб. генних антитіл, тобто окремі антитіла, що склада- В іншому своєму аспекті, даний винахід відно- ють цю популяцію, є ідентичними, за винятком ситься до використання поліпептиду, що кодується можливих природних мутацій, які можуть бути виділеною нуклеїновою кислотою, що кодує ВАЕРЕ- присутніми у незначних кількостях. Е, у "антисмисловій" терапії. Термін "антисмисло-
Термін "очищений препарат", що використову- ва" терапія, що використовується тут, відноситься ється тут, або "в основному чистий препарат" по- до введення або генерування іп 5йи олігонуклео- ліпептиду означає поліпептид, який був виділений тидів або їх похідних, які специфічно гібридизу- з інших білків, ліпідів і нуклеїнових кислот, що є ються у клітинних умовах з клітинною мРНК і/або його природним оточенням. Переважно, вказаний ДНК, що кодує потрібний ліганд, з метою інгібу- поліпептид також виділяють з інших речовин, на- вання експресії кодованого білка, тобто інгібуван- приклад, антитіл, матриксів і т.п., які використову- ня транскрипції і/або трансляції. Зв'язування може ють для його очищення. відбуватися за комплементарними стандартними
Терміни "лікування", "курс лікування" і "тера- парами основ або, наприклад, у разі зв'язування з пія", що використовуються тут, означають лікува- ДНК-дуплексами, за допомогою специфічних вза- льну терапію, профілактичну терапію і превентив- ємодій у великій борозенці подвійної спіралі. У ну терапію. загальних рисах, "антисмислова" терапія відно-
Терміни "пептиди", "білки" і "поліпептиди", що ситься до ряду методів, що звичайно використо- використовуються тут, є взаємозамінними. вуються фахівцями, і включає у себе будь-яку те-
рапію, яка заснована на специфічному зв'язуванні вони можуть бути розділені на фрагменти потріб- з олігонуклеотидними послідовностями. ної довжини, що перекриваються. Такі методи
Антисмислова конструкція даного винаходу більш детально описані нижче. може бути доставлена, наприклад, у вигляді екс- Генерування розчинних форм ВАРЕ-В пресуючої плазміди, яка, при її транскрибуванні у Розчинні форми ВАРЕ-К часто можуть ефек- клітині, продукує РНК, комплементарну щонайме- тивно передавати сигнал, а тому вони можуть бути нше частині клітинної мРНК, що кодує ВАРЕ- введені як лікарський засіб, який у цьому випадку ліганд. Альтернативно, антисмислова конструкція імітує природну мембранну форму. Передбачаєть- може являти собою олігонуклеотидний зонд, що ся, що заявлений тут ВАРЕ-К секретується у при- генерується ех мімо. Такі олігонуклеотидні зонди роді як розчинний цитокін, однак якщо це не має переважно являють собою модифіковані олігонук- місце, цей ген можна знов сконструювати для по- леотиди, які є резистентними до ендогенних нук- силення секреції. Для створення розчинної секре- леаз і, таким чином, є стабільними іп мімо. Прикла- тованої форми ВАРЕ-В необхідно видалити - на дами нуклеїновокислотних молекул, що рівні ДНК - М-кінцеві трансмембранні області і пев- використовуються як антисмислові олігонуклеоти- ну частину області-"стеблини" і замінити їх лідер- ди, є фосфорамідати, фосфотіоатні і метилфос- ною послідовністю типу І або лідерною послідовні- фонатні аналоги ДНК (див., наприклад, 5176996, стю альтернативного типу ІІ, яка забезпечує 5264564 і 5256775). Крім того, загальні підходи для ефективне протеолітичне розщеплення у вибраній конструювання олігомерів, що використовуються у експресійній системі. Кожний фахівець може варі- антисмисловій терапії, були описані, наприклад, ювати кількість області-"стеблини", присутньої у
ЇМап Оеєг Кто! еї аї., (1998) Віоїесппіднез 6:958-976; секреторній експресійній конструкції з метою оп- і 2іеїп еї а). (1998) Сапсег Ке5 48:2659-26681|, які тимізації як властивостей зв'язування ліганду, так і вводяться у даний опис за допомогою посилання. ефективності ескпресії. Так, наприклад, конструк-
ВАРЕР-Е згідно з винаходом, що обговорюється ції, що містять всі можливі довжини "стеблини", вище, є членом сімейства рецепторів ТЕ. Вказа- тобто М-кінцеві усікання можуть бути одержані так, ний білок, його фрагменти і гомологи можуть мати щоб продукувались білки від амінокислоти 1 до широке терапевтичне і діагностичне застосування. амінокислоти 51. Внаслідок аналізів такого типу
Поліпептиди згідно з винаходом специфічно повинна бути встановлена оптимальна довжина взаємодіють з ВАРЕРЕ, поліпептидом, раніше описа- послідовності "стеблини". ним у заявці М/099/12964, яка вводиться у даний У переважних варіантах здійснення винаходу, опис за допомогою посилання. Однак описані тут розчинний поліпептид ВАРЕ-К являє собою виді- пептиди і методи дозволяють ідентифікувати мо- лений поліпептид з нативною послідовністю ВАЕЕ- лекули, які специфічно взаємодіють з ВАРЕ-Е або Е, що містить амінокислотні залишки 1-51 5ЕО ІЮ з його фрагментами. МО:1 або його фрагмент; виділений поліпептид
У деяких своїх варіантах заявлений винахід ВАРЕРЕ-Е, що має принаймні 8095-ну (а більш пере- відноситься до способів використання пептидів, важно, 9095-ну) ідентичність амінокислотної послі- що походять від ВАЕРЕ-К, здатних зв'язуватися з довності з нативною послідовністю поліпептиду
ВАРЕР. Фрагменти ВАРЕ-К можуть бути продукова- ВАЕР-К, що містить амінокислотні залишки 1-51 ні декількома способами, наприклад, рекомбінант- ЗЕО ІО МО:1, або його фрагмент; виділений полі- но, за допомогою ПЛР, шляхом протеолітичного пептид ВАРР-К з нативною послідовністю, що міс- розщеплення або хімічного синтезу. Внутрішні або тить амінокислотні залишки 1-50 5ЕО ІО МО:1 або кінцеві фрагменти поліпептиду можуть бути гене- його фрагмент; або виділений поліпептид ВАЕЕ-НВ, ровані шляхом видалення одного або декількох що містить амінокислотні залишки 8-41 5ЕО І нуклеотидів від одного кінця або від обох кінців МО: 1 або його фрагмент. нуклеїнової кислоти, що кодує даний поліпептид. Генерування антитіл, реагуючих з ВАРЕ-В
Експресія мутагенізованої ДНК приводить до про- Даний винахід також відноситься до антитіл, дукування поліпептидних фрагментів. специфічно реагуючих із заявленим ВАРЕ-Е або з
Химерні молекули, що використовуються у да- його ко-рецепторами. Антисироватка або монок- ному винаході, можуть бути також продуковані лональні антитіла проти білка/проти пептиду мо- відомими методами. У даному винаході розгляда- жуть бути одержані стандартними методами (див., ється використання химерних молекул, що містять наприклад, Апііродіе5: А І арогаюгу Маппиаї, ед. Бу поліпептид ВАРЕ-К (або його варіант), злитий з Напом апа І апе (Соїй 5ргіпд Нагбог Ргезв: 1988). гетерологічною амінокислотною послідовністю, Ссавець, такий як миша, хом'як або кролик, може такою як домен Ідс-Ес імуноглобуліну. Вказані бути імунізований імуногенною формою даного химерні молекули переважно є розчинними і міс- пептиду. Методами повідомлення імуногенності тять розчинний поліпептид ВАРЕ-К. У переважно- білку або пептиду є кон'югування з носіями або му варіанті здійснення винаходу вказана химерна інші методи, добре відомі фахівцям. молекула містить амінокислотні залишки 1-50 5ЕО Імуногенна частина ВАРЕ-К або його ко-
ІО МО:1, злиті з Рсе-доменом. рецептори можуть бути введені у присутності ад'-
Поліпептидні фрагменти можуть бути також юванта. Хід імунізації може бути прослідкований хімічно синтезовані відомими методами, такими як шляхом детекції титрів антитіл у плазмі або сиро- стандартний твердофазний синтез з використан- ватці. Для оцінки рівнів антитіл можуть бути зроб- ням ї-тос- або і-рос-хімії Мерифільда. Так, напри- лені стандартний метод ЕГІ5А або інші імуноана- клад, пептиди і ДНК-послідовності згідно з винахо- лізи з використанням імуногена як антигену. дом можуть бути довільно розділені на фрагменти У переважному варіанті здійснення винаходу потрібної довжини без перекриття фрагментів, або антитіла, що розглядаються, є імуноспецифічними для антигенних детермінант ВАЕЕ-К або його ко- антигеном, що походять від тварини, потім клону- рецепторів, наприклад, антигенних детермінант ють у відповідне положення генів антитіла людини, поліпептиду ЗЕО ІЮО МО: 1 або його близькоспорід- у яких були делеговані області зв'язування з анти- неного людського або надлюдського гомолога (на- геном. "Гуманізовані" антитіла дозволяють мінімі- приклад, що має 70, 80 або 9095-ну гомологію, а зувати використання гетерологічних (наприклад, більш переважно принаймні 9595-ну гомологію). У міжвидових) послідовностей у антитілах людини, і іншому переважному варіанті здійснення винаходу тим самим знижують імовірність вироблення імун- антитіла проти ВАРБЕ-К або проти ВАЕР-ко- ної відповіді у індивідуумів, що проходять курс рецептора в основному не вступають у перехресну лікування. реакцію (тобто реагують специфічно) з білком, Конструювання рекомбінантних антитіл різних який, наприклад, менш, ніж на 8095 гомологічний класів може бути також здійснене шляхом проду-
ЗЕО ІЮ МО:1; а переважно, менш, ніж на 9095 го- кування химерних або "гуманізованих" антитіл, що мологічний 5ЕО ІО МО:1; а найбільш переважно - містять варіабельні домени і константні домени менш, ніж на 9595 гомологічний 5ЕО ІО МО:1. Тер- людини (СНІ, СН2, СНЗ), виділені з імуноглобулі- мін "в основному не вступаючий у перехресну реа- нів різних класів. Так, наприклад, антитіла з під- кцію" відноситься до антитіла, що має афінність вищеними валентностями антиген-зв'язуючого зв'язування негомологічного білка, яка складає центра можуть бути рекомбінантно продуковані менш, ніж 1095, більш переважно - менш, ніж 595, і шляхом клонування антиген-зв'язуючого центра у навіть більш переважно - менш, ніж 190 від афін- вектори, що несуть константні області ланцюга ності зв'язування білка з послідовністю ЗЕО ІЮ антитіла людини (Агшапапдат еї аї., 9). Ехр. Меад.,
МО-1. 177:1439-1450 (1993), ця робота вводиться у да-
Термін "антитіло", що використовується тут, ний опис за допомогою посилання|. охоплює його фрагменти, які також специфічно Крім того, для зміни афінностей зв'язування реагують з ВАРЕ-К або з його рецепторами. Анти- рекомбінантних антитіл з їх антигенами можуть тіла можуть бути фрагментовані стандартними бути використані стандартні методи рекомбінант- методами, і їх фрагменти можуть бути піддані них ДНК шляхом модифікації амінокислотних за- скринінгу для з'ясування можливості їх викорис- лишків, що знаходяться поблизу антиген- тання у способі, описаному вище для цілих анти- зв'язуючих центрів. Афінність зв'язування "гумані- тіл. Так, наприклад, Е(ар)2-фрагменти можуть бути зованого" антитіла з антигеном може бути збіль- генеровані шляхом обробки антитіла пепсином. шена за допомогою мутагенезу на основі молеку-
Одержаний Е(ар)г2-фрагмент може бути обробле- лярного моделювання. (Оцееп еї аї., Ргос. Маї|. ний для відновлення дисульфідних містків з про- Асад. сі. 86:10029-33 (1989), ця робота вводиться дукуванням Рар'-фрагментів. Крім того, антитіла у даний опис за допомогою посилання). даного винаходу містять біоспецифічні і химерні Генерування аналогів: Продукування модифі- молекули, що володіють активністю проти ВАРЕ-В кованих ДНК і пептид них послідовностей. або проти ВАРР-ко-рецептора. Так, наприклад, Аналоги ВАРЕ-К можуть відрізнятися від при- моноклональні і поліклональні антитіла (АБ), на- родного ВАРЕ-К за своїми амінокислотними послі- правлені проти ВАЕРР-К і їх ко-рецепторів, і фраг- довностями або за присутністю або відсутністю менти антитіл, такі як Гар'ї Е(аб)», можуть бути тих або інших послідовностей, або за тією або ін- використані для блокування дії ВАЕРРЕ-Е і його від- шою ознакою. Модифікації, що не відносяться до повідних ко-рецепторів. послідовностей, включають у себе іп ммо або іп
Різні форми антитіл можуть бути також одер- міго хімічну дериватизацію ВАРЕ-К. Модифікація- жані стандартними методами рекомбінантних ДНК ми, що не відносяться до послідовностей, є, але
ГММіпіег 5 Міївієїп, Майте 349: 293-299 (1991), ця не обмежуються ними, зміни у ацетилюванні, ме- робота вводиться у даний опис за допомогою по- тилюванні, фосфорилюванні, карбоксилюванні або силання). Так, наприклад, можуть бути сконстру- глікозилюванні. йовані химерні антитіла, у яких антиген-зв'язуючий Переважними аналогами є ВАБЕ-К або його домен, що походить від антитіла тварини, приєд- біологічно активні фрагменти, послідовності яких наний до константного домену людини (наприклад, відрізняються від послідовності ЗЕО ІЮ МО:1 за-
Сарійу еї ад., патент США 4816567, який вводить- вдяки одній або декільком замінам консервативних ся у даний опис за допомогою посиланняї. Химерні амінокислот, або завдяки одній або декільком за- антитіла можуть знижувати імуногенні відповіді, мінам, делеціям або вставкам неконсервативних що спостерігаються, які виробляються антитілами амінокислот, які не руйнують активність ВАЕЕ- тварини, при їх використанні у клінічній терапії ліганду. Консервативними замінами звичайно є пацієнта. заміни однієї амінокислоти на іншу з аналогічними
Крім того, можуть бути синтезовані "рекомбі- властивостями, наприклад, заміни всередині на- нантні гуманізовані антитіла", які розпізнають ступних груп: валін, гліцин; гліцин, аланін; валін,
ВАРЕРЕ-Е або його ко-рецептори. "Гуманізовані" ан- ізолейцин, лейцин; аспарагінова кислота, глутамі- титіла являють собою химери, що включають у нова кислота; аспарагін, глутамін; серії, треонін; себе головним чином послідовності (До людини, у лізин, аргінін; і фенілаланін, тирозин. які були вбудовані області, відповідальні за спе- Застосування цифічне зв'язування з антигеном. Тварин імунізу- Повнорозмірний ген ВАРР-К (ЗЕБО І МО:2) ють потрібним антигеном, виділяють відповідні або його частини можуть бути використані як гіб- антитіла і видаляють частину послідовностей ва- ридизаційні зонди для бібліотеки КДНК з метою ріабельної області, відповідальних за специфічне виділення, наприклад, інших генів, які мають пот- зв'язування з антигеном. Області зв'язування з рібну послідовність, ідентичну послідовності ВАЕБЕ-
Е, описаній у 5ЗЕО ІО МО:2. Нуклеотидні послідов- форми, наприклад, у вигляді ліпосом, плівок або ності, що кодують ВАРЕ-К, можуть бути також ви- мікрочастинок. Для кожного фахівця очевидно, що користані для конструювання гібридизаційних зон- деякі носії можуть бути більш переважними у за- дів для картування гена, що кодує ВАРР-К, і для лежності, наприклад, від шляху введення і концен- генетичного аналізу індивідуумів з генетичними трації поліпептиду ВАЕРЕ-К, що вводиться. порушеннями. Скринуючі аналізи можуть бути ро- Введення може бути здійснене за допомогою зроблені для виявлення основних сполук, що імі- ін'єкції (наприклад, внутрішньовенної, внутрішньо- тують біологічну активність ВАЕЕ-К. Такими скри- черевної, підшкірної, внутрішньом'язової) або ін- нінговими аналізами є аналізи, застосовні для шими методами, такими як інфузія, яка забезпечує високопродуктивного скринінгу хімічних бібліотек, доставку лікарського препарату у кровоток в ефек- що робить їх особливо придатними для ідентифі- тивній формі. кації невеликих молекул-кандидатів на лікарський Для здійснення даного винаходу можуть бути засіб. Вказаними невеликими молекулами є синте- використані, якщо це не обумовлене особливо, тичні органічні або неорганічні сполуки. Нуклеїнові стандартні методи клітинної біології, культивуван- кислоти, що кодують ВАЕРЕ-К, або його модифіко- ня клітин, молекулярної біології, мікробіології, ре- вані форми, можуть бути також використані для комбінантних ДНК, хімії білків і імунології, які відомі генерування трансгенних тварин або "нокаут"- фахівцям. Вказані методи описані у літературі. тварин, які, у свою чергу, можуть бути використані ІДив., наприклад, Моїесшціаг Сіопіпд: А І арогаюгу для розробки і скринінгу терапевтично ефективних Мапиа!, 2па єеайіоп. (ЗатргоокК, Ргйвсп апа реагентів. Мапіаїй», єеав.), Соїй Зрііпд Нагбог І арогаюгу Ргевв5,
Як описано у даний заявці, в одному з своїх 1989; ОМА Сіопіпд, Моїштез І апа пП (О.М. Сіомег, варіантів, даний винахід відноситься до способів ей), 1985; Оіїдописієоїййде бупіпевів, (М.). Саїї, єад.), стимуляції зростання В-клітин, зростання і дозрі- 1984; Ш.5. Раїєпі Мо. 4,683,195 (Миїйїв єї аї).,); вання В-клітин, індукованого дендритними кліти- Мисієїс Асій Нургіаігайоп (В.О. Натев5 апа 5.9. нами, або продукування імуноглобуліну у тварини Ніддіп5, еаз.), 1984; Тгапзспріоп апа Тгапвіайоп з використанням поліпептиду ВАРЕ-К, або ко- (8.0. Натез апа 53. Ніддіпв, єдв.), 1984; СиішШте ої стимуляції зростання В-клітин, зростання і дозрі- Апіта! СеїІв (А.І. ЕгезПппеу, ей). АІап В. І ів5, Іпс., вання В-клітин, індукованих дендритними клітина- 1987; Іттобій2гей Се апа Епгутев, ІВІ Ргевв, ми, або продукування імуноглобуліну у тварини з 1986; А Ргасіїса! Сціде юю Моіесшаг Сіопіпуд (В. використанням поліпептиду ВАРР-К і антитіла Ретаї), 1984; Мемшоав іп Епгутоіоду, Моїштев 154 проти антигена Т, ліганду СО40 або анти-СВ40- апа 155 (Ми єї аї., едв), Асадетіс Ргезв, Мем МогК; ліганду. Відповідними є також способи інгібування Сепе Тгапеїєгї Месіог5 г Маттаїап СеїЇв (9У.Н. зростання В-клітин, зростання і дозрівання В- Мійег апа М.Р. Саїов5, еадз.), 1987, Соїй Зргіпд клітин, індукованого дендритними клітинами, або Нарог І арогаюгу; Іттипоспетіса! Меїпод3 іп СеїЇ продукування імуноглобуліну у тварини з викорис- апа МоїІесшаг Віоюду (Мауєг апа Умаїкег, еав.), танням поліпептиду ВАЕРБ-В. Асадетіс Ргевз5, Іопаоп, 1987; Напароок ої
У іншому варіанті свого здійснення даний ви- Ехрегітепі Іттипоіоду, Моїште5 І-ІМ (О.М. УУ/еїг нахід відноситься до способів використання ВАЕЕ- апа С.б. ВіаскКмеїЇ, едв.), 1986; Мапіршайпо Ше
К для лікування аутоїмунних хвороб, гіпертонії, Моизе Етбргуо, Соїй Зрііпд Нарбог Іарогаюгу серцево-судинних розладів, ниркоподібних захво- Ргезв, 1986). рювань, лімфопроліферативних захворювань, Нижченаведені приклади наводяться для ілю- асоційованих з В-клітинами, імуносупресорних страції даного винаходу і не повинні розглядатися захворювань, порушень при трансплантації орга- як його обмеження. нів, запалень і ВІЛ-інфекцій. Відповідними також є Приклади методи використання агентів для лікування, при- Приклад 1: Детекція зв'язування ВАРЕ з ВАЕРЕ- душення або модифікації імунної відповіді, що К з використанням аналізу на планшетах бере участь у шляху передачі сигналу між ВАЕБЕ-В У цьому прикладі описано зв'язування ВАРЕ з і його лігандом. ВАРРЕ-В-трансфікованими клітинами з використан-
У одному з своїх варіантів даний винахід від- ням аналізу на планшетах. носиться до фармацевтичних композицій, що міс- Повнорозмірний ВАРЕ-К людини генерували з тять поліпептид ВАРР-К і фармацевтично прийня- роїуА ї- РНК ВОАВ з використанням набору для тний носій. Відповідні носії для поліпептиду ВАЕРЕ- попередньої ампліфікації ЗирегзсгірінН /(Сіте
ЕК і їх композиції описані, наприклад, у |(вНетіпдюп'5 Тесппоодієз) з метою генерування кКДНК-матриці і
РПпагтасешіса! Зсієпсеб5, 16 єа., 1980, Маск ампліфікували за допомогою Рімі з використанням
Рибіїзпіпа Со., едіейа ру Оз5іо єї аї!). Звичайно для праймерів, комплементарних 5'- і 3-кодуючим пос- приготування ізотонічної композиції використову- лідовностям ВАРЕ-К. ПЛР-продукт був клонований ють відповідну кількість фармацевтично прийнят- у СН2г69, похідне рСЕРА (Іпийгодеп). Одержаний ної солі. Прикладами такого носія є буфери, такі як клон позначали рузтТ535. Ембріональні клітини фізіологічний розчин, розчин Рінгера і розчин дек- нирок людини, що містять ген ЕВМА-1 (293ЕВМА), стрози. рН даного розчину переважно складає висівали у 6-ямкові планшети, сенсибілізовані фі- приблизно від 5 до 8, а більш переважно - прибли- бронектином, і трансфікували ліпофектаміном (Гіте зно від 7,4 до 7,8. Крім того, можуть бути викорис- Тесппоїодіез) з використанням або ру5Т535 при тані носії для приготування препаратів пролонго- різних розведеннях, або СН269 як фоновий конт- ваного вивільнення, такі як напівпроникні матриці з роль. Через 48 годин після трансфекції трансфіко- твердих гідрофобних полімерів, де вказані матриці вані клітини аналізували на їх здатність до зв'язу- можуть бути виготовлені у вигляді виробу певної вання з розчинним Пад-пВАРЕ (амінокислоти І 83-
825) таким чином. Всі інкубації проводили при мивання клітин ГРАЗС-буфером їх ресуспендували кімнатній температурі. Кондиціоновані середови- у ЕАБС-буфері, що містить 195 параформальдегі- ща відсмоктували з ямки, і клітини промивали бу- ду. Внаслідок РГАЗС-аналізу 7-ААЮО-позитивні клі- фером ВНА (20мММ НЕРЕЗБ, рН 7,0, 0,5мг/мл ВЗА, тини (загиблі) були відсортовані.
ОД 95 Мам») і інкубували у присутності 0,5мкг/мл Результати РГАЗС-аналізу показали, що фрак-
ЕГАС-ПВАРРЕ, розведеному у РВ5, що містить 1мММ ція клітин, трансфікованих ВАРРЕ-К, здатна зв'язу-
Масі», 1мМ сСасі і 0,195 МаМз. Після інкубування ватися з ВАРЕР. При концентрації ВАРЕ мкг/мл протягом 1 години розчин ВАЕЕ видаляли, і кліти- приблизно 2895 клітин зв'язуються з ВАЕЕ зі сере- ни промивали ВНА. Потім клітини інкубували про- дньою інтенсивністю флуоресценції (МЕ) 366. При тягом 30 хвилин у розчині РВ5, що містить 1мкг/мл використанні одного РЕ-міченого ослиного анти- моноклонального антитіла проти БРГАС, М2 мишачого реагенту значного зсуву клітин не спос- (бідта). Цей розчин відстоювали, і клітини проми- терігали. Тільки 1,390 клітин мали МРЕІ-23,5, при вали ВНА. Потім клітини інкубували протягом 30 цьому, середнє значення для всіх клітин станови- хвилин у розведенні 1:3000 кон'югованого з луж- ло 5,5. Сигнал від ВАРЕ-В-трансфікованих клітин ною фосфатазою козячого Е(ар)г2 проти мишачого давав титри з кількостями ВАРЕ, що знижуються.
Іде (Часкбзоп ІттипоКезеагсіп). Цей розчин відс- При 10Онг/мл, 8,7695 клітин мали МРІ-78,9. тоювали, і клітини промивали ВНА. Для зниження Приклад 3: РАБЗС-аналізи на ВАЕР/ВАРРЕ-В- фонового фарбування, що викликається ендоген- взаємодію, що включають маркер СЕР ною лужною фосфатазою, клітини інкубували про- У цьому прикладі описана здатність ВАРЕ зв'- тягом 15 хвилин у 2,5мММ левамізолу (Месіог язуватися з клітинами, ко-трансфікованими ВАЕРЕ-
Гарогаюгіез), розведеного у 100мМ масі, 100мМмМ К і репортерною плазмідою СЕР.
Трис-СІ, рН 9,5 і 5мМ Масі». Для хромогенної де- Клітини 293ЕВМА трансфікували рУзтТ535 і ре- текції лужної фосфатази, розчин інгібітора відсто- портерною плазмідою СЕР як описано у прикладі ювали, і клітини інкубували з розчином швидкого 2. Репортерна плазміда кодує заякорену на мем- червоного і нафтолфосфату (Ріегсе). Фарбування брані молекулу ЕР. З використанням /-ко- 24 спостерігали і фотографували на мікроскопі трансфекції двох плазмід автори даного винаходу низької потужності. проаналізували процент трансфікованих клітин, які
Осадження швидкого червоного барвника спо- здатні зв'язуватися з ВАРР. Ці клітини видаляли з стерігали у всіх ямках, трансфікованих ВАРЕ-В- планшетів і піддавали зв'язуванню з ВАРЕ і детек- експресуючою плазмідою, р/узтТ535. Частота сиг- ції, як описано у прикладі 2. І знов, 7-ААО включа- налу, титрованого як кількість плазміди, трансфі- ли для того, щоб виявити загиблі клітини. Зразки кованої у клітини, знижувалася. При цьому для аналізували за допомогою ЕАЗС і будували криві. клітин, трансфікованих контрольним експресую- Верхній правий квадрант представляє клітини з чим вектором, СН269, якого-небудь фарбування пов'язаним ВАРЕ (фікоеритрин-позитивні) і екс- не спостерігалося. Не спостерігалося також фар- пресуючі СЕР. бування і на будь-яких трансфікованих клітинах, у Хоча не всі СЕР-трансфіковані клітини вияв- яких, за схемою фарбування, був відсутній Яйад- ляли пов'язаний ВАРРЕ, однак у верхньому правому
НВАЕЕ або у випадку, коли Пад-пВАЕЕ був заміне- квадранті була присутньою значна фракція клітин ний на інший ліганд, член сімейства ТМЕ, РГАс- у порівнянні з контролем. У цьому верхньому пра- мічений ІОНТ. Тому фарбування ВАЕБ-В- вому квадранті було тридцять три проценти тран- трансфікованих клітин ВАРЕ є специфічним. сфікованих клітин, тоді як контроль давав 8 про-
Приклад 2: Зв'язування ВАРЕ з ВАРРБ-В- центів. Можливо, що для певного рівня експресії трансфікованими клітинами у аналізі ГАЗО ВАЕРЕ-Е необхідно, щоб ВАРЕЕ зв'язувався з дани-
У цьому прикладі описана детекція зв'язуван- ми клітинами. Можливо також, що для високоа- ня ВАРЕ з ВАРР-А-трансфікованими клітинами з фінної взаємодії потрібен ко-рецептор, і що цей використанням аналізу ГАЗО. рецептор є обмежуючим на клітинах 293ЕВМА.
Плазміду, що кодує повнорозмірний ВАРЕРЕ-В, Приклад 4: Імунопреципітація Над-нВАРЕ з ви- рузтТ535, трансфікували у клітини 293ЕВМА з ви- користанням гібриду ВАЕБЕ-В-Ес користанням РиСепеб (Воепгіпдег Мапппіет). Че- У цьому прикладі описана специфічна взаємо- рез 24 або 48 годин після трансфекції клітини ви- дія Тад-пВАРЕ з ВАЕР-В-Ес, молекулою, що скла- даляли з планшетів з використанням 5мММ ЕОТА у дається з цистеїн-багатого домену (СКО) ВАЕРБ-В,
РВ5 і підраховували. Ці клітини два рази промива- утворюючого гібрид з Ес-доменом людського Ід. ли РГАЗС-буфером (РВ5, що містить 1095 феталь- СВО ВАБЕ-К генерували за допомогою ОТ- ну бичачу сироватку, 0,190 МаМз і 10мкг/мл пІдО ПЛР з роїуА я РНК ВАВ, як описано у прикладі 1 з (Часквоп ІттипоВезеагсі), а потім 2,5х105 клітин використанням 3'-оліго-праймера, комплементар- інкубували протягом 1 години на льоду разом з ного нуклеотидам 132-152 кодуючої послідовності
МПад-пВАРЕ, розведеним у РГАЗС-буфері при кон- ПВАРБ-К. Одержаний ПЛР-фрагмент клонували у центраціях у межах від У9мкг/мл до 0,037мкг/мл. Ці СН2г69 нижче сигнальної послідовності каппа- клітини промивали РГАЗС-буфером і інкубували з ланцюга мишачого Ідс і вище Ро-частини до лю- моноклональним антитілом проти РГАС, М2, при дини. Цю конструкцію позначали р.)5Т538. Конст- концентрації 5мкл/мл протягом 30 хвилин на льо- рукцію р/У5Т538 або СН269 трансфікували у кліти- ду. Ці клітини промивали ГАЗС-буфером і інкубу- ни 293ЕВМА за допомогою ліпофектаміну. вали протягом 30 хвилин на льоду у розчині, що Кондиціоноване середовище і клітинні екстракти містить розведений 1:100 К-фікоеритрин, кон'юго- збирали через 20 годин після трансфекції. Клітини ваний з Е(аб)г2-фрагментом ослиного антитіла солюбілізували у 20мМ Триса, рН 7,5/50мММ проти мишачих Ідс і 1О0мкг/мл 7-ААО. Після про- Масі/0,595 Ме40/0,595 дезоксихолінової кислоти і дебрис центрифугували. Аліквоту кондиціонованих варіювати. Ця ампліфікована дільниця повинна середовищ і клітинних екстрактів об'єднували з бути сконструйована так, щоб вона включала у рівним об'ємом 2 х ДСсН-редукуючого буферу, ки- себе відповідні сайти рестрикції, що дозволило 6 її п'ятили і піддавали електрофорезу у ДСН-ПААГ і клонувати у різні С-кінцеві Ід-злиті химерні векто- вестерн-перенесенню. Для підтвердження експре- ри. Альтернативно, у 3-кінця можна вбудувати сії мембрану зондували розведеним 1:3000 миша- стоп-сигнал і одержати розчинну форму рецепто- чим антитілом проти людських Ідс, кон'югованим з ра, не вдаючись до техніки з використанням Ід- пероксидазою хрону (ПХ), у 595 знежиреному су- злитої химери. Одержані вектори можуть бути екс- хому молоці у ТВ5Т при кімнатній температурі пресовані у більшості систем, що використовують- протягом 30 хвилин, і промивали ТВ5Т. Блоти ви- ся у біотехнології, включаючи дріжджі, клітини ко- являли з використанням ЕХ Л (АтегзПпат) і експо- мах, бактерійні клітини і клітини ссавців, і такі нували з плівкою. приклади існують для експресії всіх типів експресії.
Імунопреципітацію здійснювали шляхом інку- При необхідності, для оптимізації або видалення бування 25нг Пад-пВАРГЕ або Пад-птУуЕАК з 0,5мл взаємодій між РсК і комплементом, різні домени кондиціонованого середовища від клітин Ес людини можуть бути пов'язані. Альтернативно, 293ЕВМА, трансфікованих або руБтТ538, або мутовані форми цих Ес-доменів можуть бути вико-
СНа269, при 4"С протягом 1 години при помішуван- ристані для селективного видалення взаємодій ні з подальшим додаванням ЗОмкл Білка А- між ЕСЕ або комплементом, або для приєднання
Сефарози (Рпагтасіа) і безперервним помішуван- М-пов'язаних цукрів до домену Ес, що має деякі ням протягом ночі. Гранули Білка А-Сефарози дві- переваги. чі промивали РВ5 і ресуспендували у 2 х ДСН- Приклад 6: Генерування антитіл-агоністів і ан- поновлюючому буфері для зразка. Після електро- титіл-антагоністів форезу у ДСН-ПААГ і вестерн-перенесення, блоти Вищеописані розчинні форми рецепторів мо- інкубували з 5мкг/мл моноклонального антитіла жуть бути використані для імунізації мишей і для проти Над М2 (Зідта), у 596-ному знежиреному одержання моноклональних антитіл стандартними сухому молоці у ТВ5Т при кімнатній температурі методами. Одержані тАрз5, які ідентифікуються протягом 1 години. Блоти промивали ТВ5Т і інку- методами ЕГІ5А, можуть бути потім скриновані на бували з розведеним 1:3000 козячим антитілом їх агоністичну активність або як розчинні антитіла, проти мишачих дО, кон'югованих з ПХ (Часк5оп або як антитіла, імобілізовані на пластиковій підк-
Іптипогезеагсі), у 5906 знежиреному сухому молоці ладці, у різних клітинних аналізах іп міго. Часто у ТВ5Т при кімнатній температурі протягом 30 загибель клітинної лінії НТ29 являє собою зручну хвилин. Блоти виявляли з використанням ЕХЛ систему, яка є чутливою до передачі сигналу че- (Атегзпат) і експонували з плівкою. рез множину рецепторів ТМЕ. Якщо ця лінія не має
Після трансфекції рузТ538 у клітини 293ЕВМА потрібного рецептора, то повнорозмірний рецеп- експресію білка з молекулярною масою приблизно тор може бути стабільно трансфікований у клітин- 4ЗкДа визначали у клітинному екстракті і у конди- ну лінію НТ29, що дозволило б у цьому випадку ціонованому середовищі шляхом Вестерн-блот- провести аналіз на цитотоксичність. Альтернатив- аналізу з використанням мишачого антилюдського но, вказані клітини можуть бути використані у апа- до (Часкзоп Іттипогезеагсі), що вказувало на те, раті Суюзепзог, з тим, щоб визначити, чи може що гібрид ВАЕРЕ-В-Ес був ефективно експресова- активація даного рецептора виявити зміну рнН, вка- ний і секретований. зуючу на подію передачі сигналу. Рецептори сі-
При імунопреципітаціях смугу спостерігали мейства ТМЕ передають сигнал у такому форматі тільки внаслідок інкубування ВАРЕЕ-Н-Ес і Ріад- досить добре, і цей спосіб не вимагає знання про
НВАРЕРЕ. Ця смуга мігрувала разом з безпосередньо дійсні біологічні події, що запускаються даним ре- завантаженим зразком Пад-пВАРГР. Жодна з інших цептором. Для клінічного застосування тАрвзг- доріжок не продукувала сигнал, що вказувало на агоністи повинні бути "гуманізованими". Ця проце- те, що злиття ВАЕРЕ-В-Ес з Пад-пВАЕЕ є специфіч- дура може бути також використана для визначен- ним. ня тАбБз-антагоністів. Такі тАр5 повинні бути ви-
Приклад 5: Генерування розчинних форм ре- значені за відсутністю агоністичної активності і за цептора здатністю інгібувати взаємодію рецептора з ліган-
Для одержання інгібітора рецептора з метою дом, що прослідковується за допомогою ЕГІ5А, його введення людині необхідна кДНК- методу класичного зв'язування або методу ВІА- послідовність позаклітинного домену рецептора соге. І нарешті, індукування секреції хемокіну різ- людини. Якщо мишача форма є відомою, бібліоте- ними клітинами у відповідь на антитіло-агоніст ки КДНК людини скринують з використанням ми- може бути покладено в основу скринуючого аналі- шачої кДНК-послідовності, і такі маніпуляції є ру- зу. тинними для фахівців у цій області. З Приклад 7: Скринінг інгібіторів взаємодії "ре- використанням кКДНК-послідовності людини можна цептор-ліганд" сконструювати олігонуклеотидні праймери для З використанням злитого білка "рецептор-Ід"
ПЛР-ампліфікації позаклітинного домену рецепто- можна піддати скринінгу будь-які комбінаторні біб- ра у відсутності трансмембранних і внутрішньоклі- ліотеки на предмет визначення молекул, які мо- тинних доменів. Звичайно більшість амінокислот жуть безпосередньо зв'язуватися з рецептором. Ці включають між останнім дисульфідом, пов'язаним молекули потім можуть бути протестовані у фор- з "доменом ТМЕ", і трансмембранним доменом. матованому ЕГІЗА-аналізі з використанням злито-
Для оптимізації активності одержаного розчинного го білка "рецептор-Ід" і розчинної форми ліганду на рецептора кількість областей "стеблини" можна їх здатність інгібувати взаємодію рецептора з ліга-
ндом. Вказаний ЕГІБА може бути використаний ЕАСсС5Саїїриєм (Весіоп ОісКкіпзоп, Зап уозе, СА) і безпосередньо для скринінгу бібліотек різних при- аналізували з використанням програмного забез- родних продуктів, наприклад, на присутність інгі- печення СВІ Г Опйевзітм (Весіоп Ріскіпзоп). буючих сполук. Цей рецептор може бути трансфі- Після обробки ПВАЕР-В-Ід спостерігалося при- кований у клітинну лінію, таку як лінія НТ29 для близно 5095 зниження числа В-клітин у перифери- розробки біологічного аналізу (в цьому випадку чній крові і у периферичних лімфоїдних органах, цитотоксичності), який може бути потім встанов- що розглядаються. В220"опІдМмот-В-клітини, за лений в основу скринуючого аналізу. оцінками, становили 23,4905 і 21,595 клітин у РВ5-
Приклад 8: ВАРР-В-Іаб приводить до знижен- оброблених і Ни!дС-оброблених мишах, відповід- ня числа В-клітин у нормальних мишей но, тоді як ця популяція у ПВАЕР-В-Ід-оброблених 8-Тижневих самиць мишей ВАГ-В/с закупову- мишей була представлена тільки 9,996-ми клітин. вали у лабораторії Джексона (Те аск5оп Очевидно, що число клітин плазми (синде-
ІГарогаюгу) (Ваг Нагрог, МЕ). Мишам (З на групу) кан/СО138-) злегка зменшувалося, становлячи внутрішньочеревно (і.р.) вводили або РВ5, або 5,796 і 4,895 у крові РВ5О-оброблених і Ниїдо- 400мкг людського гібридного білка ВАРЕ-В-ПиИЇДСІ оброблених мишей, відповідно, тоді як у НВАЕБ-В- (НВАРР-В-І9) (що поставляється Тегеза Ід-оброблених мишей воно становило 3,995. Моле-
СаспегоВіодеп), або 400мкг очищеного людського кула В7.2 була активована на 3,195 і 4,595 В220:- до (Ниїдсу(запаог, Вазеї, Зм/йгепапа) на дні -8, - клітин у РВ5-оброблених і НиїдсС-оброблених ми- 5,1 ії 42. Мишам вводили 100мкл 1095 овечих ери- шей, відповідно, а у НВАЕР-В-Ід-оброблених ми- троцитів (5КВС) (Соогадо Зегит Сотрапу, шей вона була активована на 1,995 клітин.
Оепмег, СО) на день 0. У селезінці число В220го9п-В-клітин помітно
Після умертвіння кров, за допомогою серцевої знижувалося у ПВАЕЕ-В-Ід-оброблених мишей і пункції, збирали у пробірки, що містять ЕОТ, і ери- становило 18,895, тоді як у РВб-оброблених і троцити піддавали лізису у гіпотонічному буфері. НиїдС-оброблених мишей воно становило 36,79 і
Кров також збирали без ЕОТА для одержання си- 4096, відповідно. Спад спостерігався в обох ІДМ" о! роватки. З селезінки і мезентеріальних лімфовуз- і Ідме»-субпопуляцій (див. таблицю 8А). Яких- лів (МЛВ) приготовляли суспензії з одиночних клі- небудь змін у новоутвореному В-клітинному ком- тин, і еритроцити лізували у гіпотонічному буфері. партменті у селезінці, В220омІдМме", не спостері-
Проточну цитометрію здійснювали з використан- галося (дані не приводяться). Число клітин плазми ням РЕ-кон'югованого антитіла проти СО45Р/8220, (синдекан/СО138-) злегка зменшувалося і стано- антитіла проти синдекану/С0138 і антитіла проти вило 3,395 і 3,495 у селезінці РВ5-оброблених і
В7.2 і РІТО-кон'югованого антитіла проти І9М і ан- Ниїдс-оброблених мишей, відповідно, тоді як у титіла проти СО45К/8220. Всі тАБ5 закуповували НВАЕЕ-В-Ід-оброблених мишей воно становило у фірми Рпагтіпдеп (Зап Оіедо, СА). Коротко, Ес- 2,4. рецептори блокували ТОмкг/мл с Віоск У МЛВ спостерігалося зниження числа В220:- (Рпагтіпдеп) протягом 15 хвилин на льоду, а потім В-клітин, яке становило 14,195 у ПВАЕР-В-Ід- додавали РЕ- і ФІТО-кон'юговані моноклональні оброблених мишей, тоді як у РВ5-оброблених і антитіла (тАБ) і інкубували на льоду протягом 20- Ниїда-оброблених мишей воно становило 26,795 і хвилин. Клітини промивали 1 х і суспендували у 35,895, відповідно. Дані систематизовані у таблиці 0,595 параформальдегіді. Дані клітинної флуорес- ВА. ценції визначали на проточному цитометрі
Таблиця ВА
Популяція В-клітин у ПВАЕЕ-В-Ід-, РВО- і НиїдОо-оброблених мишей! ши тет о: УТ ПОООЯ ПООООООО
Р! 7777777711267 7 ншює | 7777 358333 | 77777777! 0 НвВАБР-НЯЯ | 1415597 | 77777771
ІМишей обробляли як описано у розділі "Матеріали і методи", і дані приведені як процент я стандартне відхилення
Знижений процент В7.2---В-клітин з числа клі- дані 1095 фетальна теляча сироватка (КН), 2-4М тин крові і плазми у крові і селезінці ПВАЕР-В-1д- глутамін, 10бодиниць/мл пеніциліну і 10Омг/мл оброблених мишей після імунізації ЗЕВС дає стрептоміцину (Сіїе Тесппоіодіе5). Потім додава- підставу передбачити, що має місце інгібування ли різні кількості ВАЕРЕ людини, 1Омкг/мл людсь- активації і/або дозрівання В-клітин, і потенційно кого ВАЕЕ-Е:пПІДСЇ або людського Ід, а також підвищена елімінація активованих В-клітин. Дуже 10мкг/мл антимишачого поверхневого важкого д- невеликий процент антигенспецифічних В-клітин ланцюга (Часкзоп Іттипо Кезеагсп). Після ви- повинен бути активований і вони повинні реагу- тримання у культурі протягом 48год. при 377 вати на будь-який антиген, у цьому випадку на клітини піддавали імпульсному міченню
ЗЕВС. Оскільки ПВАЕЕ-В-Ід-обробка приводить 1мкКі/лямку (Іметил-ЗНІ-тимідину (Юиропі МЕМ) до такого різкого зниження проценту В-клітин у протягом 24 годин і збирали з використанням всіх тканинах, що оцінюються, -5095, то очевидно, колектора клітин Тогшес (Огапде, СТ). Радіоакти- що активність ПНВАЕР-В-Ід також направлена на вність вимірювали на рідкому сцинтиляційному зрілі В-клітини, що покояться. лічильнику Веїаріаге (Рпагтасіа Віотесп).
Тому передбачається, що злитий білок ВАРЕ- На Фіг.8 показані результати аналізу пролі-
Е може бути використаний як терапевтичний лі- ферації спленоцитів. На цій Фігурі показане число карський засіб для лікування В-клітинно- імпульсів у хвилину (імп./хв.), включених у клітини опосередкованих захворювань. Вказаними за- спленоцитів мишей, у залежності від кількості хворюваннями є аутоімунні захворювання, такі як доданого реагенту ВАЕРЕ. Рівень анти-н-антитіло системний червоний вовчак, важка міастенія, або злитого білка, або контрольного пІдДС підтри- аутоїмунна гемолітична анемія, ідіопатична тро- мувався постійним при 1Омкг/мл. Заштриховані мбоцитопенічна пурпура, синдром антифосфолі- квадрати означають рівень проліферації, індуко- підних антитіл, хвороба Шага, хвороба Грейвса, ваний лише ВАЕЕ. Заштриховані кружки означа- гранулематоз Вегенера, вузликовий поліартериїт ють проліферацію клітин з використанням ВАЕЕ і і швидко прогресуючий гломерулонефрит. Даний анти-н-антитіла. Крива з незаштрихованими три- терапевтичний агент також використовується для кутниками означає інгібування, що спостерігаєть- лікування розладів, пов'язаних з клітинами плаз- ся при додаванні ВАРЕ-В:"ЛІДСІВАЕЕ з анти-н-
Ми, таких як множинна мієлома, макроглобуліне- антитілом - ВАБЕБ-Б:підсІ. Незаштрихований мія Вальденстрема, хвороба важких ланцюгів, ромб означає інгібування, що спостерігається з первинний або імуноцитоасоційований амілоїдоз використанням контрольного Ід людини. і моноклональна гаммапатія невстановленої еті- Додавання ВАЕЕ разом з анти-н-антитілом ології (МГНЕ). Онкологічними мішенями є В- приводить до проліферації спленоцитів мишей іп клітинні карциноми, лейкоз і лімфоми. Й міо. Рівень ЗН-тимідину, включеного у ці клітини,
Приклад 9: Блокування ВАРР-індукованої значно перевищує рівень, одержаний при дода- проліферації В-клітин іп уйго з використанням ванні до спленоцитів або тільки ВАЕЕ, або тільки розчинного ВАРР-Н анти-д-антитіла. Обробка спленоцитів тільки
У цьому прикладі авторами винаходу було ВАЕЕ приводить лише до включення ЗН-тимідину показано, що розчинний гібридний білок ВАРЕ- у дуже високих концентраціях. Додавання тільки
В:Мосі здатний блокувати ВАРР-індуковану про- анти-н-антитіла не приводить до проліферації. ліферацію В-клітин у мишачих спленоцитах. При додаванні до спленоцитів 1Омкг/мл контро- виділяли кільтнеували у оБ'яміовому планшет 001 ЛЮДСЬКОГО Ю з кількостями ВАР. що зб у 100мкл ЕРМІ (ії Тесппоіодієв), у яку були до- ствол помірне зниження рівня проліферації У протилежність цьому, у даному аналізі при вве- навіть при 625нг/мл злитого білка. фонове зна- денні 1Омкг/мл людського гібридного білка ВАЕЕ- чення МЕЇ у даному експерименті становило 7.
Еспідс!І при тих же умовах, рівень проліферації Таким чином, ВАРР-К:пПІДСІЇ є дуже ефективним знижувався до рівня, що спостерігається у разі для блокування зв'язування ВАБЕ з клітинами обробки лише одним ВАЕР. Це вказує на те, що Ваїї. гібридний білок ВАРР-К:ПпПідс! володіє здатністю Приклад 11: ВАЕРБЕ-В-Ідо сприяє ослабленню до інгібування проліферації спленоцитів, індуко- аутоїмунних розладів типу червоного вовчака у ваних ВАРРЕ і анти-д-антитілом. трансгенних мишей
Приклад 10: Блокування зв'язування ВАРЕЕ з У цьому прикладі описана дія ВАРР-К, на-
Ва)ді-клітинами з використанням ВАЕР-В:підсаі правлена на зниження пулу периферичних В-
У цьому прикладі описане попереднє інкубу- клітин і інгібування розвитку спленомегалії і неф- вання ВАРЕ зі злитим білком ВАЕРБЕ-К:ПІДСІ, що риту. приводить до зниження зв'язування ВАРЕ з В- У даному експерименті використали п'ятимі- клітинною лінією лімфоми Гаї). сячних трансгенних (Т9) ВАРЕ-мишей (С57ВІ /б) і
У цьому РАСб-аналізі 200нг/мл РГАС- поноси відповідного віку. ВАРЕ-Тда-миші виявляли міченого людського ВАРЕ заздалегідь інкубували лімфатичні розлади і їх аутоїмунний фенотип був або з людським ВАЕБЕ-Е:СПІДСІ, або з людським аналогічний такому при системному червоному
І ТВЕ:пІдДСІ, при двократних розведеннях у межах вовчаку (МаскКау еї а!., 1999). Цей фенотип відпо- від 20мкг/мл до З9нг/мл, або без злитого білка, відав популяціям з підвищеним числом перифе- протягом 30 хвилин на льоду. Інкубування прово- ричних В-клітин, включаючи "перехідні" клітини 1 дили у ГАС5-буфері, що містить РВ5 без Са? (71) 12 (12), зрілі клітини (М), клітини маргіналь- або Мад2: з додаванням 1095 ЕС5 (УРН) і 0,05965- ної зони (М2) і клітини СОМ" 9п-В-клітини. ного азиду натрію. Після попереднього інкубу- Мишам внутрішньочеревно вводили РВ5, вання суміш ВАЕЕ-злитий білок додавали до 400мг очищеного людського Ідс (під) (Запаог, 5х106 Ваї)-клітин(АТоС)/мл. Це інкубування про- Вазеї, Зм/йгепапа)(З/групу) або 400мкг злитого водили протягом 30 хвилин на льоду, а потім, білка ВАРР-В-ниїда (НВСМА-1І9)(2/групу), що по- клітини промивали 2мл ЕАС5-буфера при 42С. ходить від СНО, у дні 0, 4, 7, 11, 14, 18, 21, 25, 28,
Для детекції пов'язаного ВАРЕЕ до клітин додава- 32, 35, а на 40-й день мишей умертвляли. ли 5мкг/мл антитіла М2 проти РГ АС (5ідгаа) і ін- Відразу після умертвіння визначали вагу се- кубували протягом 30 хвилин на льоду. Одержані лезінки, і після лізису еритроцитів у гіпотонічному клітини знов промивали, як описано вище, а по- буфері приготовляли суспензію з одиночних клі- тім інкубували при розведенні 11100 з РЕ- тин. Проточну цитометрію здійснювали з викори- кон'югованим ослиним антитілом проти мишачих станням ФІТО-кон'юЮгованого антитіла проти
Ід (Часкзоп Ітпипо Резеагсії) протягом 30 хвилин СО21/С035, РЕ-кон'югованого антитіла проти ДО на льоду. Після повторного промивання ЕАС5- і проти СО1, кон'югованого з цитохромом антиті- буфером ці клітини фіксували з використанням ла проти ср45г/8220 і кон'югованого з біотином 195 параформальдегіду і зчитували на ЕАС5О антитіла проти ІДМ. Всі тАр5 закуповували у фі- (Весюп Оіскіпзоп 8. Со.). рми РПаптіпдеп (Зап Оіедо, СА). Коротко, Ес-
На Фіг.9 показані результати аналізу на бло- рецептори блокували ТОмкг/мл с Віоск кування ВАЕБЕ. На цій фігурі показані дані зчиту- (Рпаптіпдеп) протягом 10 хвилин на льоду, потім вання МЕЇ (середньої інтенсивності флуоресцен- додавали біотин-кон'юговані тАВ протягом 30 ці), одержані внаслідок проведення ЕАС5Ф- хвилин на льоду, клітини промивали їх, а потім аналізу, вказуючого на зв'язування ВАРЕ з Раї- додавали РЕ- і ФІТС-, цитохром-кон'юговані тАб, клітинами. Заштриховані квадрати відповідають стрептавідин-АРС і тОмкг/мл Ро-Віоск. Ці клітини даним, одержаним при попередньому інкубуванні інкубували на льоду протягом 30 хвилин, клітини
ВАЕБ-В:ПІДСІ з ВАЕЕ перед зв'язуванням з цими промивали 1 х і суспендували у 0,575 парафор- клітинами. Кружки показують криву, одержану мальдегіді. Дані клітинної флуоресценції визна- після додавання неспецифічного злитого людсь- чали на проточному цитометрі РАСзСаїїриг" кого білка І ТВЕ:ПІДСІ до ВАЕРЕ. На осі х предста- (Весіоп Оіскіпзоп, зап уозе, СА) і аналізували з влена кількість злитого білка, доданого до використанням програмного забезпечення 200нг/мл ВАЕЕ перед інкубуванням з клітинами. СЕП Омевием (Весіюоп Оіскіпвоп).
Якщо злитий білок не був заздалегідь інкубо- , Шо Що ваний з людським ВАРЕРЕ, то середня інтенсивність Присутність білків у мишачій сечі вимірювали флуоресценції (МЕ!) зразка становила 80. Якщо з використанням смуг реагенту Мийівіх 10 зб людський ІТРЕ:пІдСІ заздалегідь інкубували з для аналізів сечі (|Вауег Согр., бБіадпо5ісь
ВАЕЕ, навіть при 20мкг/мл, то детекція зв'язуван- Оімівіоп). ня ВАРЕ з клітинами Раї не змінювалася. Однак Результати представлені нижче у Таблицях якщо людський ВАЕРБ-ЕК:ПІдСІ заздалегідь інкубу- ПА 118. вали з ВАРЕРЕ, то МЕЇ значно знижувалася до 2-25
Таблиця 11А
Анализ спленоцитів З-місячних мишей 11111111 Всьогоклітиннаселезінкубт03уї//:/ 17 11111117 17711111т2 | ми | Зрілий 81623 | 94 | 71877777 | 77777977 11
Спленоцити З-місячних Вай-Тд-мишей (п-3) і ТІ: 90, ІдМией, СО поносів відповідного віку (п-2) виділяли і підда- М2: 90, Юм", СО21 вали РГАС5-аналізу як описано у розділі "Матері- т2: 1905, Юм", СО217 али і методи". Клітини Т1, Т2, М і М7 визначали М: 190, дме, Срачтіт за експресією нижченаведених поверхневих мар- керів (пі: високий, Іо: низький, іпї: проміжний):
Таблиця 118
Аналіз спленоцитів 10-місячних мишей 11111711 Всьогоклітиннаселезіннуєто3ї//-/:/ лита ми | Зрілий 82331 171111117511Ї71111711143 |77717171171661111171 11171711 2001 10-місячних Вай-Тд-мишей (п-:3) і поноси від- Миші, трансгенні за Ваї мали значною мірою повідного віку (п-3) піддавали РГАС5-аналізу як збільшене число периферичних В-клітин, і додат- описано у таблиці 1. ковий аналіз, проведений авторами даного вина-
Після введення ПВАРР-В-Ід Вай-Тд-мишам по- ходу, виявив переважне збільшення субпопуляцій пуляції клітин Т1, Т2, М, М2 і Сором" еп-в- Т1, Т2, М2 В-клітин у цих мишей. Перехідна стадія клітин у селезінці значно знижувалися у порівнянні розвитку В-клітин (Т1 і Т2) являє собою контроль- з популяціями РВ5- і ПпІд-оброблених Вай-Тд- ну стадію, на якій приблизно відбувається еліміна- мишей, і загальне число Т1, Т2, М, М2 і ція аутореактивних В-клітин. У Вай-Тда-мишей було
Сопіт дмгв- В-клітин знижувалося до рівня, ана- також значно збільшене число СОМ" оп-в- логічного рівню клітин у РВ5-оброблених контро- клітин, які мають тенденцію залишатися у маргіна- льних поносів, або до меншого рівня (Фіг.1ба, 106, льній зоні. Було показано, що ця остання популя- 10с). ція В-клітин являє собою головне джерело проду-
ВАРЕ-В-Ід-обробка Вай-Тд-мишей приводила кування аутоантитіл у МАВ/МАМ/-мишей з до ослаблення Вай-опосередкованого аутоіїмунно- вовчаком. ВАРЕ-А-Тд-обробка Вай-Ід-мишей при- го захворювання, про що свідчило спостереження водила до зниження популяцій Т1, Т2, М, М2 і СОЇ" того факту, що ВАРЕ-К-оброблені миші мали се- В-клітин до рівня, що спостерігається у контроль- лезінку нормального розміру, тоді як контрольні них поносах дикого типу, або до меншого рівня.
Ван-Тд-миші виявляли спленомегалію (Ффіг.11). Дія ВАЕР-В-Ід направлена на зниження пулу
Крім того, у ВАРЕ-В-Ід-оброблених мишей приду- периферичних В-клітин і інгібування розвитку шувався розвиток протеїнурії як показника нирко- спленомегалії і нефриту. Тому, крім її ефективнос- подібної дисфункції, тоді як у контрольних Ваїй-Та- ті у лікуванні системного червоного вовчака і вов- мишей розвивався нефрит, як було визначено за чакового нефриту, дія ВАЕР-В-Ід також є ефектив- зростаючими рівнями протеїнурії (Фіг.12). ною для лікування В-клітинно-опосередкованих захворювань, які за своєю природою є аутоіїмун- сування хвороби з розвитком важкого нефриту ними, такі як важка міастенія, аутоїмунна гемоліти- Самицям мишей зі схильністю до вовчака чна анемія, ідіопатична тромбоцитопенічна пурпу- (5БМ/А х МАВ)Р(ЗМЕ Її), що має вік 21 тиждень і що ра, синдром антифосфоліпідних антитіл, хвороба виявляє помірний нефрит (30-100мг/дл протеїну-
Шага, хвороба Грейвса, гранулематоз Вегенера, рії), вводили і.р. 200мкг гібридного білка людського вузликовий поліартериїт і швидко прогресуючий ВАРЕ-В-пиЇда (НВСМА-І9), людського Це|Є) гломерулонефрит. Даний терапевтичний агент (Ншдс)(Запао?) або 200мкл РВ5 щотижня протя- також використовується для лікування розладів, гом 8 тижнів. Сечу кожної миші щотижня аналізу- пов'язаних з клітинами плазми, таких як множинна вали на протеїнурію з використанням АЇїризіїх мієлома, макроглобулінемія Вальденстрема, хво- (Вауег Согр., Тегпуїомуп, МУ). Протеїнурія понад роба важких ланцюгів, первинний або імуноцито- 10мг/мл оцінювалася як важкий нефрит. ВАРР-В-Ід асоційований амілоїдоз і моноклональна гаммапа- був продукований у тимчасово трансфікованих тія невстановленої етіології (МГНЕ). клітинах ЕВМА 293. Кондиціоновані середовища
Онкологічними мішенями є В-клітинні карциноми, від клітин 293, надекспресуючих ЯНВСМА-Ід, заван- лейкоз і лімфоми. тажували на колонку з білком А. Білок елюювали
Приклад 12: Середній артеріальний тиск у 25ММ фосфатом, 100мМм масі, рн 2,8, а потім ней- трансгенних ВАРЕ-мишей тралізували 1/20 об'єму 0,5М МарРох, рн 8,6. Фрак-
У цьому експерименті описане вимірювання ції, відібрані виходячи з ОП280, піддавали елект- кров'яного тиску у трансгенних ВАЕЕ-мишей. Спо- рофорезу у відновлювальному і стереження, зроблені під час оцінки фенотипу невідновлювальному ДСН-ПААГ і /Вестерн- трансгенних ВАРЕ-мишей, вказували на імовір- блотингу для ідентифікації очищеного білка. ність гіпертонії у цих мишей. Через три тижні після обробки було встанов-
Ван-Тд-мишей, описаних вище, анестезували лено, що важкий нефрит виявлявся у 5095 мишей, кетаміном. Ліву сонну артерію оголювали за допо- оброблених ВАЕРБ-В-ІД, і у 7595 і 87,595 мишей, могою надрізу на шиї. У цю сонну артерію встав- яким вводили НиїЇдо і РВ5, відповідно (див. Фіг.15). ляли катетер для вимірювання кров'яного тиску і Ці дані показали, що розчинний рецептор ВАКЕЕ, частоти серцевих скорочень. Катетер приєднували ВСМА-ІД, може блокувати опосередковані В- до датчика тиску, і кров'яний тиск вимірювали з клітинами аутоімунні захворювання, такі як вовча- використанням системи збирання даних (Ро-Ме- ковий нефрит, що приводить до помітного ослаб-
Май баїа Асдпізйоп зузієт апа Соша роїудгарн). лення прогресування даного захворювання.
Виходячи з форми зубців пульсового тиску, систо- Приклад 14: ВАЕЕ-В-ІдД-Обробка нормальних лічного тиску, діастолічного тиску, визначали се- мишей, що приводить до зниження числа дендри- редній тиск і частоту серцевих скорочень. При тних клітин селезінки (ДКС) і їх атипічної локаліза- цьому використали дві групи мишей: трансгенних ції у селезінці
ВАРЕ-мишей (п-8) і контрольних мишей дикого 7-Тижневим самицям мишей ВАГ В/с (З/групу) типу (п-:9). вводили і.р. або 20мкг або 50мкг людського ВАРЕ-
На Фіг.13 представлений середній артеріаль- В-Ідаї (НВСМА-Ід), або 50мкг їдДо людини (Ниїдс), ний тиск (МАР у мм рт.ст.) для двох груп. Як пока- або 100мкл РВ5 ї1х/тиждень протягом 4 тижнів. зано, трансгенні ВАРЕ-миші мали середній МАР Гібридний білок ПВСМА-Ід очищали з супернатан- 102ж158мм рт.ст. Контрольні миші мали середній тів культури стабільно трансфікованої клітинної
МАР 92жби мм рт.ст. Таким чином, у ВАЕЕ-мишей лінії СНО. Через 8 днів після останньої ін'єкції ви- виявлялося збільшення МАР на 10мм рт.ст. у по- діляли селезінки і розщеплювали колагеназою рівнянні з контролем, хоча це значення не є стати- (Зідта, саїЖж С-5138) протягом год. при 3770. стично значущим (АМОМА). Потім одержували суспензію з одиночних клітин,
Більш докладний аналіз цих даних поданий на еритроцити (ВВС) лізували у гіпотонічному буфері,
Фіг.14. На цій фігурі представлені результати ана- і клітини промивали Зх у РВ5. Спленоцити приго- лізів, одержаних від окремих тварин. У контроль- товляли для проточного цитометричного аналізу них мишей дикого типу (ВАРЕ-) розподіл даних шляхом фарбування клітин біотинільованим анти- відповідає типовому біноміальному розподілу. У тілом проти СОС, а потім стрептавідином-АРС, протилежність цьому, тиск у трансгенних ВАЕГЕ- кон'югованим з цитохромом антитілом проти СОва мишей (ВАРЕх) був таким, як якби вони були поді- і РІТО-кон'югованим антитілом проти СО4 для оці- лені на дві групи, де одна група мала тиск у діапа- нки ДК-популяцій. зоні 120-130мм рт.ст., а інша група мала тиск у У окремому експерименті самицям мишей діапазоні 80-90мм рт.ст. ВАСВ/сС (М-3) ір. вводили 100мкг ПпВСМА-1Ід
Трансгенні ВАРЕ-миші як популяція мали тен- 1Т1х/тиждень протягом 4 тижнів, після чого селезінки денцію до гіпертонії у порівнянні з мишами негати- вмить заморожували в ОСТ з використанням 2- вного контролю. Аналіз окремих рівнів артеріаль- метилбутану, охолодженого на СО». Кріозрізи роз- ного тиску показав, що трансгенні ВАРЕ-миші різали і фіксували у ацетоні. Зрізи інкубували з розділялися на дві субпопуляції, причому одна з біотинільованим антитілом проти СОС, потім зі них мала високий кров'яний тиск, а інша мала но- стрептавідином-АР і субстратом ВСІР (Ріегсе) для рмальний кров'яний тиск. Відповідно до цього, візуалізації ДК, а після цього з таб МОМА-1, а введення розчинного ВАЕРЕ-Е, гібридного білка або потім з ПХ-кон'югованим антитілом проти щурячих гомолога антитіла може ослабляти ефекти гіпер- Іо (Часкзоп ІгптипоКезеагсі) і субстратом 3,3- тонії. діамінобензидину (Зідта, 5. оціз МО, саї Ж О0-
Приклад 13: ВАРЕ-В-Із-обробка мишей ЗМР, з 1293) для візуалізації металофільних макрофагів, і встановленим захворюванням уповільнює прогре- з біотинільованим антитілом проти СОЗ5, потім зі стрептавідин-АР і субстратом (набір субстрату нта) у СОС я ДК селезінки у порівнянні з Ниїдо- і лужної фосфатази І, Месіог саїжеК-5100) для візу- РВ5-обробленими контролями. Це зменшення алізації фолікулярних дендритних клітин (ФДК). було очевидним для всіх СОС ї ДК-популяцій, що
Миші, оброблені іп мімо або 20мкг, або 50мкг оцінюються: СОва-С04-, СОва-СОа-, і СОва-С04--
ВСМА-Ід їТх/тиждень протягом 4 тижнів, виявляли (Фіг.16, Таблиця 144А). значне зменшення (р«е0,05 за т-критерієм Стьюде-
Таблиця 14А
ВАРРЕ-В-Ід-обробка приводить до зниження числа ДК селезінки 77777771 | РВ5 | ншоє | о с2омквоМАчЧо | БомквомАча у 11111111 середнечислосбі я Осло кош
Це зниження числа ДК селезінки, які є критич- кціонувати як антигенпредставляючих клітини, і, ними антигенпредставляючими клітинами, може тим самим, вплинути на активацію В-клітин, їх до- впливати на активацію В-клітин, їх дозрівання і зрівання і гуморальний імунітет. Крім того, у селе- гуморальний імунітет. зінках ВСМА-Ід-оброблених мишей був відсутній
Заморожені зрізи мишачої селезінки одержу- СО354РОС, як було визначено за допомогою іму- вали, як описано у розділі "Матеріали і Методи". ногістохімічного аналізу (дані не показані). Оскіль-
ВСМА-Ід-оброблені миші виявляли атиповий про- ки РОС здійснює презентацію антигену В-клітинам філь ДК-хомінгу при фарбуванні антитілом проти у зародкових центрах (З3Ц), відсутність таких клітин
СОісє. ДК звичайно локалізуються у Т-клітинній може впливати негативний чином на структуру ЗЦ області білої пульпи селезінки і у маргінальній з0- і афінну зрілість В-клітин. ні, концентруючись у канальцях, утворюючих сіт- Кожному фахівцеві очевидно, що у поліпепти- часту структуру маргінальної зони. Однак ДК у дах, композиціях і у способах даного винаходу
ВСМА-Ід-оброблених мишей були виявлені за всім можуть бути зроблені різні модифікації і зміни, що периметром маргінальної зони, і існує деяка імові- не виходять за рамки сутності або об'єму даного рність того, що вони потім можуть мігрувати у білу винаходу. Таким чином, передбачається, що да- пульпу селезінки (дані не показані). Тому блоку- ний винахід охоплює внесені в нього модифікації і вання взаємодії ВАЕР/ВАРРЕ-К з розчинним рецеп- зміни, за умови, що вони не вийдуть за рамки об'- тором ВАРЕ очевидно перешкоджає характеру єму прикладеної формули винаходу і її еквівален- хомінгу ДК, що може вплинути на їх здатність фун- тів.
АОовОрсв, схе АОвореє. схе и й 35 40 45
СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ Авп бі Тук Рре Азр бек рве це Нів А1а Сує це Рго Су5 Сіп цец 50 5 «1105 МасКау, Рабіеєейпе Аха Суз бег Бех Азп Тіт Рко Рго рем Тк Сув Пец Ніз Аїа Су5з І1е
Вго»тіпу, бекЕгеу 65 70 15 80
Атпокове, Спкібсіпе Рго Суз біп Пец Агу Суб бек бек Азп ТП Рко Рго Це Тіг Суб б1п
Твспорр, 7чгд 85 90 95
Зсппеїідег, Разсаї Агд Тук Сув Азп А1Іа бек Уа! Тих Авп бех Ма) Ппуз С1у біп Ага Тук
Тротрооп, Тейгхеу 100 105 1ю
Віодеп, Іпс. Сув Авп А1а бек Уа! Тих Азп бек Уаї руз сіу Уа1і А5р цуз Твк Нів
Арокесі НЕО 5.А. 115 120 125 , Тк Су Рко Рго Суз Рго Аза Рго бій Печ Бей б1у Сіу Рко бек Уа1 5120» Рецептор Вай(ВСМА), І зв Ре р. І-й ї ко ї/ А Ток ме Пе 5 Ах9 те. імунорегуляторний агент ге еч Ре Рко Рго ву хо Буз Ар Тк ев е е Вег Ахд тв «130» АОВОрРСТ Рго бі Уаї Тік Суз Маї Уа! Уаї Азр Уа! бек Нів Сіц Аво Рго біц 165 170 175 «140» вст/0500/22507 Ма1 цуз Рпе АБп Ткр Тух Уа! А5р с1іу Уа! бій Ма! Ніє Азп Аза Гу «141» 2000-08-16 180 185 130
Тахо був Рго Аго бій біо біп Туг Ап бек Тук Ма! Уа1ї бЗех МУа1 «150» 60/149,318 135 200 205 «1512» 1995-08-17 ,; «210» 4 «150» 60/181, 684 Тіз» дк «151» 2000-02-11 «213» пото заріеп «150» 60/183,536 «4100» 4 151» 2000-02-18
З асддадасад асасасссст дссасодуєд ссдссдсссс додесссадда сессассоде 50 «1605 8 часдєсасда соссдсадає дадссдодсад сосссссааа асдаасаєть єдасадсесо 120 х170» ЕазіЗЕО для версії Міпдохв 4.0 ссдсаєдсьс дсасассссу ссааскксда сосксЕсска асасссстсс бссаасаєує 180 «210» 1 садсяссасс здсаасасаад сдсдассаає ссадсдааад дадссдасаа аасссасаса «211» 184 240 «2122 РЕТ сдсссассоє дсссадсасс сдаасссссуд дододассоє садесекссь сессссссса «213» пото зарієп 300 азасссаадуо асасссісає даєсссссдуд ассссідачу Ссасасдсоє сдсоасдчас «4005 1 360
Мес йдеш біл Ме; Аза біу біп Суб бек біп Азп бій Тух Рпе Азр бек дЧедадссасу аадасссода доссаадісс аассодсасу содасодсує ддадаєсдсає 1 5 10 15 420
Бей бепч Ніб А1а Суб І1е Рго Суз біп їец Агд Суб бег бек деп Тих аасдссазуда сагадссосу уддадуздсад сасаасадса сосассусує дуєсадсуєс 480
Рго Рго рецш Тіт Суз біп Акд Тукг Суз Азп А1а бек Уа1ї ТЬг АвБп бек сесассуєсс бдсассадуа седодсідаає ддсааддадчі асаадсдсаа ддЕсессаас 540 уаї цув Сіу Тпг А5п Аза ч112е Бей Тгр Тс Суб Без біу реч бех Бе 29 60 «210» 5
Ііе І1е Бек це А1їа Уаї Рре Уаї реп Меє Рпе Пем їеи Акд цуз І1е «211» 140 65 70 15 8о 5212» РАТ й бек Зек бій Рго Пец Пуз Авр 012 Рпе уз Авп Тах біу Бех біу без «213» пото зарієп 85 90 95 МОВОресо хе
Аоворско хе -
Пец біу Мес Аїа Азп 116 АБр Беп бій Був бек Ак Тк Сіу Азр СИ «4002 5 100 105 110 реч Тк Ма! йеш Ні біп Азр Ткр ем Азп Сіу цу5 бій Тух бує Сув
І1їе І1е пед Рко Ак б1у цез Сій Тухк Тік Ма! бій 610 Суб5 Тиг Су 1 5 10 Б 115 120 125 цуз УМа1ї Бех А5п цуз Аза Пе Рго А1а Рго І1е біш цув Трх І1е бек
Сі Авр Суз І1е Пуз бек йПуз Рко уз Уаї А5р бек Авр Нів Суз Ре 20 25 30 130 135 . 140 Бу А1а Буз б1іу Сіл Рго Ахд бій Рго біп Ма1 Тук Тк Пе Рко Рто
Рко пем Ркго Аїа Мес біз бій біу А1їа Так І1е цей Уаї Тк Тв бує 15 40 45 145 150 155 160 бек Ак Авр біц рец Тк оцЦуз Ап о біп Уаї Зек еп Так Суб Пецп Уа1ї
Тих Ап Азр Тут Суз Пуз Бек ПЦеа Рто А1а Аза Цей бех Аза ТП 01 50 55 60 165 170 175 бух б1у Рпе Тук Рко бек Авр І1е А1а Ма! бій Ткр Сіц бег двп С1у
І1е біц буз бех І1е бек А)а Агд 55 70 75 80 180 Сіп Рго бі Авп Ап оТуг бує Тс ТБ оРко Рко Ма1і це Авр бег Авр 85 90 95 «210» 2 с1у Бех Рпе Ре уз Буз Пен Тік Уаї Азр ув бех Агу Ткр біп біп «211» 552 100 105 110 «212» ДНК б1іу АБп Уаї Ре бек Суз бег Ма! Мес Нів біц Аза рей Ні А5п Ні5 «2132 йото 5арієп 115 120 125
Тух Тк біп цув бесг пес бек Пец бек Рко Сіу Був «100» 2 130 135 140 асдссдсада сдуссудоса дсодсесссаа засдаасакь: седасадсс: дссодсаєсудсь 60 «210» 6 сдсаєбасссь уссаасьссу акокессссь аасасьсстс сессаасаєя ссаудесакс «211» 3659 120 «212» ДНК сіаасдсаад косдассаас ссадсдааад саасоаасує дассссссдд асссосссоа «213» пото зарієп 180 даседадсьс аайаасьсссо Есуусачьсь бсубодссаає дЕссссдсса аддаадаєаа «100» 5 240 ааадсссісс садсссссає сдадаааасс асссссазад ссааадддса дссссдадаа усЕсрдаасс ассазаддас дадсссаааа асасаддаєс аддєсссссд досасоддсекса 50 300 ссасадусєу; асасссідсс сссассссод дчаєсдадссда ссаадаасса ддассадссса асассдассс ддаааададс адчдасьдобу асдааастає сссссдадчад дссесдадса 120 360 асскдсседо ссааадась: ссаєссссадс дасаєссоссуд Содадсодода дадсааєсоучач сасддсддаа даасудсассі дідаадассд сассаададс азассдааду ссдасессда 180 420 садссудада асаассасаа дассасдссї сссдедЕсод асссседасдд сессЕксьсс ссассусссс ссасесссад ссасодадда аддсосаасс ассссудссас сасдаааасу 240 480 сЕсстасадса адсссассді ддасаададс адосодсадс адчодаасує ссесссаєдс аасдассаєс дсаадауссі дссадссосс ссдадсосса суддадасада дагассааси 300 540 Ессосоасус асдадусісі дсасаассас сасасусада ададссьссс сссдестссес сесоссадує аа 360 552 додазасча 369 «210» 3 «211» 207 «2102 7 «2122 РЕАТ «211» 184 «2132 йопо зарієп «212» ВЕТ «213» йото з5арієп «4002 3
Мек Ар Тйх Пец пес Бреш Тур УМа1 Преп Пе реч Ттр Уаї Рго б1іу бек «4005 7 1 5 10 15 Меє цем біп Мес А1іа Сіу біп Суз бех біп Ап бій Тух Рпе Азр 5ег
Тік біу Мес реч біп Мес Аза Сіу Сіп Суз Бек біп А5зп біш Тут Ре 1 5 10 15 20 25 30 це цем Ніз А1а Суз Т1е Рко Суз біп це) Акуд Суз бек Бех Азп ТБг
Вер бЗех рей Азр Уаї Тіх Меє цеч біп Мес А1а біу біп Суз бех біп ,
КОВвОоресо схе АОВорсе. схе - 20 25 30 120
Рко Рто цем Твх Сув С1п Ага Що Суз Авп Аїа 5ек у ТЕ Авп бек сдссадесус сссдадсусе асудадасад адагаєсаає сіссоссаду сагссаассге 4 780 уа1 во б1у Так Авзп А1а ще рем Ткр Тах Суз вом б1у рес бег Геч Ксссдасссу адсадьдсса ссссааааає ссЕстоєсад аасадаєдає дсоссадаєс - 840
І1е І1є бех це Аа та! Рце маї еп Меє Ре Пец Те Ахо уз І1е ссессаддає дассдваєьс сссадссудсс дасасадсьь сесдсссссь аассосоддаа о 75 80 300
Бех Бек б1ї Рго ее уз АБр б3м Ре 5 АБп Трпх біу Бек 5 ем ассстссаєд ссадавасає ссссссаддє сассоссоду адсссаасодд садазасьсс
З 5 960 їем біу Мек Аза Азп І1е А5р Беш 010 Пуз Бех Агд Тах біу Азр бій сЕсддсЕсса созссааадс ссссЕсЕсЕс ссіда 100 105 110 995
Пе І1е Пез Рко Аку Сіу ем б1ї Туг Тпг Уаї біо біз Су5 ТБІ Суб 115 120 125 сій Ар Суб І1е пує бет цу5 Рко Цуз Маї Азр бег Азр Ніз Сувє Ре 130 135 140
Рко цеш Рго Аїа Мес сім Сіш б1у Аїа Тах І1е Пец Уа1ї ТЕ ТЬг Ту 145 150 155 160
ТВх Азп о АзроТук Суз Пуз бек Бец Рго А1а Аза Пе бек Аза Тбх бій 165 170 175 11е бі буб5 бек І1е беї А1а Ага 180 «2105 8 «211» 395 «212» ДНК «213» Ното Барієп «400» 8 аадасссада сссадазась созаєсадає дсддсасьса аасссссасу суссусуаза 60 асасадасау сссссусаад аасссасдаа дсадусуаауд сссаксуссс ссаасасьсс 120 здссдсесЕї оссдсасссу сісстдчаацї сісоусбадача сассасеЕвдЕ ссссссадус 180 косесесесе дсадсесссо сосессссес ссосдаєсає дуссосадчаєо оссододсаус 240 дсісссазаа соаасасссс дасачіссос госасостсо сасассЕсоє саассєсоає 100
ЧсЕсЕсссаа сСасссстіссо ссаасасуєс адсоссасід саасосаауді дсдассаасс 360 садсдзаадуд аасудзаєдсу асьсесссдда сссдЕссода ассдаусська акааєсьсся 420 кдосадссве сусоссаасо ЕСЕЕсустаа ддаадасаау сессдаасса ссазаддаса 480 задсссаааза сасзддаєса дуссссссду дсасдодстза сассдасессд даззададса 540
Чаасьдаєда кдааассась стЕссдадад ассісудздса сасддсддаа даасдсассс 500 Й тс9даадасся сассаачадс ааассудаду ссдассстда ссаєсдссьс ссасссссад 660 ссасададда аддсусаасс аїссссдЕса ссасдаааас даасудассає Содсаададсс 5ЕОО 4 АТО КРИ САС МТЗ ОСТ ОЗ Аз ОС ОС САД ОАЕ ОДА ЛАЄ ОТИТ ОО АТХ ТИЗ ТО САТ ОСТ 5ЕОвІ їм ї 0 М 4 б оо 5 он п м В І нав
ОТ МТА ОСТ УК САК ОСТтТ СПА ОТ СТ СТ АКТ ВСТ ОСТ ОСТ СТА РАСА ТОЇ СМЗ СЛ ТАЖ шко є Р бан ов нт вв тва 121 ЧО ААТ УА АК ОТО МОСС ОАКУ ОМ СТО ААК ОСС АС АКТ ОО В СРО ТОЮ ВОС ТК зт до КА 8 М т как ат тн н и Ем т А их 181 ов сто Мас ТА ДАТА АРРОТСИ ТТ ОСЬ сг Тл сто СТА АО ТТТ ОТО ЄХА АБО АМО АТХ
Ех шк с КИМ ВИ З В п и З и и с в с У З п о В з З НЯ 2531 МУ: ЗСТ ОКА ОСА ОТТА ААБ СМ ОМ ТТ ААА МАС АСВ ОКА ТОМ СОСТ СРО СО СКУ АЮ ОСТ тк 5 ЕЕ В 6 Кк о ЕЕ Кк т ав ав ам А 301 АМС АТР ОСА СТЯ ЗАВ АМС АС МІ СТ СУТ ЗАКО САМ МРТ ОАТЕ СТРОСОВ МА ОК СТО ЗМ щен, ов у є КК в я т ов ії її РА а БЕ
ЗІ ТАС АС Ма ОМА СА ОТОЙ АОС ЗТ Ав САС ТОЙ МІ ЗЛАЖОКОС ААВОСОЮМ БО с ЗАС СОТ хе а мк Ма м НИ з о- І ем ЗИ се В о З о ЗІ «НА МИ КИ ЗУ 421 СМ САТ СНУ ТК ОСС СРС СОА СС АТО СВ БА СКМ СА АОС АТР СТР ОСЛО ОС ЛО АК
Мі а нн об ЕЕ В В А МЕ В ВА Тим тк 481 лоз АКТ АС ТР ОС ААС мо СВІ СОВОК ОК ТО ВД ОС АС КТ АТА З АЛЛА ОЛОК їі т 8 вх с КВ В в АА ВА ТЕ Є ЕЕ К 5
Я АТР ОСХ АОЗ ТА
1811 5 А й зививонних
КЗ. «рік. ЗА
Її кв. 1 хз
ФО
МЕ вяОЗ сАЗ АСА САС АСА СТО СТ ТА ЧОЛ СУ С СТУ СТ ОТО5 СТО ОСА ОТ ОО АСК ост
ІК
ЗзЕО0ірря ЗМ є ТО Вт їм її в км Б 65 тав 5ЕОЮа Бі пАС СС ОЗ АЗ ТЯ САД АТО ОСТ 0 ОО ОС ОС ОСЬ» БМ ЗА ТАТ ТР САС АОТ тю вм воша са св ак ЕЕ ХУ в в в жк ж т мі айккАлкл ва сва ке хв пп 121 тт САФ ОСТ ОС РТ) ОСЕ ЖК САД СТ ОА ЖУР СТ ЖОВ АКТ АСТ ССТ ОСТ ОСТА ВОК то 11 НН А с є во ок во Б тв Рі тс пк ная о їв бака ов в м т вві тв і81 см ОЗЖ ТАТ УК АКТ ОСА ВОТ СТО АСО ВИХ ЖСА СТО ВМ» ОА ЧИС СКС дай МТ САС ОМА зо В Ж б Ав мМ т її мМ Кк . ка Я її б о А в м т й 58 М Кома кт нт 341 ОП ОСА 005 ОС СОА ОСХ ОСТ САА СС Сп ОО ОЧА СОЗ СА ЗТ ТС СС ру СОС ОССА
ВЕ б в в са в А В ЕЕ ЕЕ їв У ЕЕ Її ж В В
Збі ААА СОС УМ САС МУ сте АТО ВИС тОС ОЗ АС Сск сла спо Ас У ст) 3 сто се віз де І з ПИ З З З ПИ ЗІ З Зх МИ ЗІ В с ЗЕ Уа п А ДЕ Я
ЗБІ ДІ МІС САС ОА САС ССР ОСМО СТО АМО ТЛО ВАС Оп ТАС сш са Оз УпІ сла сто САМЕ
І Я В но 00 Р Б У Кк ов п м у у в в у в М Н 421 ВАХ ОС АМІ АСА дАШ СО СО ОБО СО СМ МО АВС РОС ВОЗ Та сут ста ШИ МОЯ
МИ НН А Кт Кк Ра єЕ У в т хв мМ в У 481 СС АсС осВо сСлЗ САС САЗ сАС ОС СО АМг п Мамо су; МС ал ОС АВ ХО СОС ВАС «Фіг, ЗА. ха ше ие ШЕ З З ШЕ З З З З УНН ЗИ п с М З ЗЕ МЕ ж МВ ДЗ З 5чі а ОКО І СПА СОС ОО МЕ ЗАС АКА МмЖ ВУЄ ОС АВА СУ АК ОС СМ С СА ЄВА ке: ЕЕ: ж ЗЕ ЗЕ І МИ І и В З: З М ЧИ о с З о ПИ ЗИ З Я З 501 Ос сао т тА АОС ВХ С ск жом Оз ОАЕ са ст вах змі АМС СМмІ Є м ОоС шк ам м ті ве вве тк НнОо хв
БІ МО С ОО ОО АКА ОС ТО ТАЖ КС МО ОАМО АЖ ОКО БУДУ (МУЗ ЗХ ЗА МІ ААУ ех: же ши еле ЗИ І и З ІН о М М З з Пи пи З ЗЕ М С З НИ
Чаї СА СС ОМ ААС АВС ЗІ АН мМ АОС ст Ос т УВІ САС КО ЗАС АЮ ОС ССО 2150 в ЕЕ М М її ж т т в в аа а ЕЕ Е тв єп во Ми АМС МУ СВ ОВО ваз дос дж сх СМ СМ: ох МАС ОСИ ЗМО ОВ ОО ще її їх кати, к ва ам ЕЕ є В вії ЖУК АЖУ СУБ ОМІ СТ С САС ЛАСЬ СМС доз сСжІ БА ми сю МК сВІ ев ос зв У мМ Б КК А Я М Но т ток в 8 в в
ЗО уз а» ча зіва Кк » б. В
Взаді Бог ї ДАбАСТСААА СТТАЛАААСТ ТОААТТАСАТ СТОСТАТТСА ЛАТОСТТАЄЮ ТОСОХОААЄ
БІ АСАСАСАСАЄ СОСССОТАЛЄ БАСОСЛОСАХ ССАЮСОМВО БРОМІТОТУЄ ТОЛАСАТСТ
Есові і21 АОСТОСТСТт ОСТОСАТТТО СТСТОСЛАТТ СТІСТАСМОА ТАТТАСТТТ ОСТТОСАЮОС.
Вс! Всі
ІВ ОКІСТ СТАОСТОСТ ТОТИСТІТ ТИМОАТСАТ СТИЖАСАТО ОСИКА ричїеамАаа
Вері рВі Нівсії 241 ОСТОССАААА ТОААТАТТІТ САСАОТТТОТ ТОСАТОСТІЄ САТАССТИТ СААСТТОВАя
Фо ОМ ЕЧЕ 051 НАС .БІіН ве
АН
301 СТІСТІСТАА ТАСТОСТСТ СТВАСАТОТС АБОСТАТТО ТААТОСЛЮТ СТОДССААТТ
Кс 5 5 М ТР тс ОоВАУс МАВ МТК
Ван
ЗБЕ СМИМСАЛАЮЮ ААССААТОСО АТІСТСТОСА ССТОТТТОЗО АСТОАССТТА АТААТТТСТТ
У Ка т МА її М тб а ви її і ЛОБСАСТТТТ СОТОСТААТО ТТТОСТАХ СОБАСАТААЄ. СТСТСАЛССА ПЕЛАЖОСАЮЄ вп А ЕМ її ВАК 5ЕРІКВО ог! дім Веві «61. АСТСТАЛАЛА САСАОСАТСА ОСТСТОСТОЄ ОСАТОССТАА САТТСАЄСТО ОААЛАСВОССА
ВЖЕ ЕК М Та в 1 МАНІ В ЕК
Хто БИ хо 543 СБАСТОЗТСА ТОАЛАТТАТТ СКМОООАСАЄ СССТОСАЄТА САСОСТОЗАА САКТОСАССТ
ЮРА Таор ЕІ РАІ ЕХ ТМЕБЕСТ
БИ
Ніпаїї
Ва Асі 501 ОТОМАСАСТО САТСААСАЄС АКАСОБАНОЯ ТОСАСТСТОА ССАТТОСТТ СОС
ШЕС Е 0 б ІК КРЖК М050 Но РІВ
БІ. СТАТОСАОЗА. ВССОБСААСС АТОМА ССАССЛАВАЄ САКТОАСТАТ ТОСААСЖКЄ
НА МЕ Є АТ Ії ттІКТтТНОУ КІ
Речі 731 ТОССАОСТОС ТТТОМОСТ АООСЯСАТАЄ АОКААТСАМВ ТТСТСТА ТАМТТААОСЬ
ІВ РА А Її 5А ТЕ ЕЕ Х 8 55 В т Ота Во 7 ТТОЗАСТОЄ АОСАИТСССА СТТТАААААТ СТРІМОТО ААТАСАТОАТ СТСТСАСАТО 84х ТСТТТАСОМТ САСІСТАТТТ ТОМУ САТАСАОСТТ. ТТТСТОСТОТ. ЛАСТОТОСАХ
В
901 АСТСТТТАТЄ ТТАСАТАТАТ ТОСТСТАЮСТ ТАСТУКТОСИ АССТІААТОЮ ТАБЛАВСТТО !
ЗБ1 СРТОТТСА ТОАТТААН СТР? ССО
Фіг, З шо в що й і ен аа : - Б. п ЕК лив ен бр я и
Ко ов пк о
Еш А ен ее а ее ден ОН ЗК ОДЕ но
Тек у МР ДМЕ ВЖЕ 2 ую їчУ Ніде дття І, ек ВД ша а, я
ДК Мод Ве «жо що м, ра пккескковнокк тм си Ето Кат НВ, ня ї ов я ие о ОМ я рин СКК ого оклику йікв Ж, окт я ОК ЕКО ЕК С тех и ну та дя в вм А ий
То и пшоно ож Се и Кв м
СТ ВВЕ ОВ вхдужчя в ДЕ А зла
СОБКО о я А ей у Кано пи
А за пес
Но ра в кв пл ме Ан щих Фіг, ЗА зе м о В тних о ву мнюів и ми й
Се як. повія ау Я в ес ох до НК и номен повне дня я жа Ен и САВННЯ і ї пнининининии пора и УВА о ах В й і
Тех ВА» хе (З сх поВ ЯКА ще Пух я - ЩЕ і вив Ук НІХ сах, дам ж БК їк - НО ! ці дя дея 8. ел и Дек й Ач яа-і й. і са вия зу КК С ї й я ий хом ду і Ще і иа и ак и ОА ди и в ее о ли 7 і півечкия ве А я Зоя ВШ
Мою км усе ще В; "ях Го Кий, и в осудом Та Б Е - і ек Зх ОК ля ТНеїх ее що ОСИ а і І Ї
Шк в КА КИ СК хо ! ; о А я Кн Я я я ії жеьї І оо як п лож не ТЕ ив я Я Ж з і й і дви КК р кою Я Я и ни т Когу- Н ока ев о ей ї 11 і вия сет» «КИ 4 І ; і де ше Ен не ве ше ям ни у су наве з Ї Н им он КК ю о : ! ох ни - о Ви КИ Я ек т ня Й ! на ду ти цк Од, мо чі 4 і кл х ' о о ли "ни ни
Кн шо Кос Геї мий ЕК ; 1 ій Ди ! ія В З А КО Я ще МН чи ве ЗК че учютти сг піль інась пай і й БИ У у 13 їй т» 7 пе УМ Ьр няні ; щи в в
Фіг, 58 дк 0 ЖКОЮХ : її Дн мг. вА
НИ Н . чих -Я
ШЕУ Її мхмУцкх цу пух схе слон тю. лох 00МИМ жи
Пен МВ нн р ВК нин ;. : Н Ме Мем МАХ пф й :
ФО БОШ т» що хх ми УЮ ХВ фін ОМЕЛЯН пох зкткою Шо пою по ток жо і Мі І рев о хв оди уд ши М Ох «в ВВ Мотя Може вм жЖмо 8юхх жо ща п з ї Беннннннн вок мВ ми МИ Фа нин ї В Н ш на Я пад м х ру ж одн а КВ пос зе
Б Ці в ти же ЗІ й і : й йти те лихо дою ме мох хх: і; ренту медегв ІК ох ТЯ хтимкмя це пе см пав ФроеВ ЕД ЧИЯ СК т А Не В Ех ких Зо ЖЕА Кан о АННИ ен зах ж их ЗМЕН дан кОШКУВ мо че тою м янх вхо мех хо х і В | й х схо . й ХМ рі ІЛ я ЗИ яти од о ви їі й Й
Же ЕЙ Їмо юю сж зх Зх ХАТА ТЗ хщі У ! х
КАХ Ж М су Що 7 зж о кЖ пам са ми ЯКІ Рон Мерхулюх тр Мов х хх голо
Зк 7 МІЖ щи МК ПМК КК «дике їх
Мі За роя п во у Ки ву ве в й «ве М ХЛеоесеткідимої МО Же Б ою» пам ліво нев я з 8 КОВО ік ЗХ Меоме ми це ху ша Тая? же о пеху аву «хх по й Ії
З ! ї | й шк МО
Ж 411.02 Ес сровоа ооо хооєюю Ши зем сля с : и А и и ж нн ня и ИМЯ ов м и и ОС і та Я ОМ
ОКУ мн ватк жве жна 5 тів и шов ОХ.
Су е нан
М | ще яп Ї Миуккв о босо просо. Пооо змов їхох, к до пн и пою бив Ки ее ун Уч
Хе отдютяр Мт ет пов в 23 моти не ря у ие зам нав зна Ко
РЦЮК т Фан З хе митег кох
Ей 18 її г Н ч ких т І Мюмвлйстнимх лом; ехвях таких ой ха М Іо в ою нет соми
Же МА думі ТУ. Же о зо оохо тк я вок ОБж шо: ча а М й яз жкту т Зате віха вою же шк т
БЕК фе бр
БО сорти 1 а «пнтннлтнттн тт потен п ш- - пдднтечнннк Фіг. 7
Я тро ВАР
БЮ Ї
; -- ВАБЕ Е ; Н й . аао4 А - Я що НО й х й Е: / -ух- ВАБЕ з дк БАЕК- ВІНОЯ во тр
Що ї е і ЩІ яв рових рр ваке З віові
Ж вої нен ВАРЕ БЕ шк Е в
ЕЕ я г йВя «8 Й. інве
З і е ї Те изятволь Моїх кре ша я - р сж- лтВАЛВі
ВУ о Н й змо ло тва х 1. жан чик | Оз Ж й ; й | 88 У ною че. Е ще ГК ті НЕ Шк" ! и ол хчнлляфлнтю ТІЙЗАКІЕ ЗТ М-ОКТИ ВА хо З ожож. а пак ан 3 й
НА ж ск М 10-05 Вот і сн дну - що З т А
НАКЕ ов вежа т я в пебажи Фе. що Би коюн Ди
Фіг. 8 б,
ВСМА-р-обробка знижує загальне число СЮ1ТЛиМ
В-клітинних популяцій у селезінці ВайсТи-миней 48220 дискримянаційне вікко) пе ваокуде
НЕМА-ТЕ-опробку знижує загальне чвенп зрілих ж вмоб6б800.044. В-калимиюх поненай МТУ у салезінні Найосікомицшей ж й Я 7 ГТ упевху | ПО г лискримикаційне відно! коеф Загальна кількість ке; ЗЕ Мілля ке -оз сл ВКИ ! СОТ клісин (ХТО) ! о у що ШИН см й БО: з) | Го вия я- "хе С г 56. ; І - й яв, що зай ЗМ 0.55--06 | Ї ЖИВІ І - | и Уа : 2» І ге. с ся я СОКИ Я я т сб. Їх - НИ ее ЗнгалемаониюУ М Залі мето ТУ ар і 5 ь- ке ай Я ТІ о з Мк щ і г о сер
І бабою бо ло | ЗБЕ іт тив
І план Н м Ва Во ШІ рено бле
І пеня Н - зебвовог оо і В Я тютюн і ВАБЕТЕ(Вір), х пд ! м Ши маш
ЕЕ) сукня рн
І а Ус Н
СЯ 0 і сновок
Як ЕД їх т той і і ь нн вени - Мч. Й Н т, х ная УМ ВАРТА ЦЮ ві | Вр : юмі шо б БМК БВ ЩЕ су
Ага Хе ША ме сіб - Ще Б в г лен х ДЖ 5. ЗК -е Злити порох ШЕ НИК І 2. їз . та х кто 3о и З онсвнаевищени вн я щі кох ом ямдОвОВО0.012 же « пені тнскіньх та т що шо! й воКеОпО ОО
ВАРЕТЕВОМА) " | вд сім: ВАБКТУ ТОМА) і
З бюитуу реАОВ . І | ж 8 Й ї
Є 5 Б | 2 снення ж Ше оо й |! ДК м М ето ДННИ р но не УЗИ Ах 5-4 ж В Б яя І злої Я... ТВЕН ка Ка С
МКК ге лж Я пк М о с ПСИ аа т - Шк ОБ АВЯе ву я КВК Я. В она и, візою» і щі пліт Ї 5 воланів ! з. нки ни двнстртття | ие ово и и о ом ! вн нини ЛИШ мин сої їм
Фіг. ІА Фіг. ШВА
ВСМ АЛ РИВКа Моргує тич чиена зріхех
Бокоітннона цопуханій маргіналькї зони
У склежкці ВУХ учаютих
ЕВ З дискримячауційне Ви - ВДИХ Кк. ! УНІВ)
І ві МЕ Запиенесвнмн Ма Закалене нене гі
У пт тот
ВІЗ: вт ш с: Ку ху АКА г ї
З кое те й кА Я фо бліняМю шме»могля
БД, заваши її нки Мал ь КЕ песен сом: ИН ОоНШЬ КМ ван кУпЕВОвИ фодтттнитня 5 Ї шнтню
ЖОФр лт у ці зо Во зна о 0мнеа їх ОНЕУ я ТИНИ 1 о УВК НВ солі Б кое
Н " ДОМ ' зи В СОКИ зви
РКО КОКО а юки і
Ж й М ; Н т 1 ай : Я тож ам ат ! і г. я -к А нн
Н - УВК - з 7 і щі фр - Н Бі Н
Ї акиетьтсмхх ї ї Зв рі : ех ! З | ї тру - і Ж ук Н НН: іа ї 25 | ; ЕН:
Хе одини Її Н Н рі ва ши и а Я ко НН Її кю і ! ії Е - КА сн і і Н Н
ШИ ох ІВ : ЕЕ ШЕ о що хв ВИ Й Но Н і і Н
З» кто: ов в -- т і і : Її і ен
Й г і : і ро.
В и МИ: щої й і Я : Е Я Я кан УК і ! Н Н і : : : т Насті тах тано ла воМмА
Фіг. ОС Фк:
Середній зртернутьний тиск у трансгенних ВАБЕ-мищшей (ВАЕК-) і у контрольних мишей дикого типу (ВАКЕ-)
Середній зртеріальний тиск (МАР) 115500
ХІМАЛЕХЦУХКА межу. ОО МКУЮМ У МАКЕТ до ФК, 1 1 00 оМюом хджхех ХМК О Мун х Ки Хе ЖКХ
УК пря АНУ ння фр 10509
Н х ТО БО ВИМ ВАЖетат | г з» Ж пи и вена я й і : Тож му ВАР тв: і 100.06 де ОХ ві ОС 085.00 й
ЕЗШН Тор тих Н
БЕН рол 90.00 паї флотом В Е роди
Н щ Й шк щ - о к М Н до оо ж ВАРЕ я -і з : є ВАКЕ- і Жотзнпою і : ї Фанннннннянинннннернниннеяпу тн 800 п г Б ще
Муз ім'яМих
Фк Фіг. 13
ВСМАЧЬ обробка мнійей БМК з помірним нефритом уповільнює його прогресування у важкий нефрит
Середній артеріальний тиск у окремих транотенних ВАКЕ- мишей що яння (ВАРЕНІ у контрольних мишей дикого типу (ВАК) а Е І
Я що
Розподія середнього зруеріального тиску у ВАКЕ мишей їн ето - 140.09 : вв 130.00 ГІ .е х
Я во 120.00 и Рі 110.00 й В юю
Е
00,00 а й 0
ШЕ і 9000 ; : т 20 7. о що00 АГ, ВАЕЕ- е і-і 9 Ї ' 70.00 4» ВАК я з 1 І. й Що в | | спи 59.00 я ВСМА-Ес нм - РВ5
Фіг. 14 Фіг. 15 рр яв ШИ ч. . оолідн і ! і Е я | ІЗ боже пвСМАНО 5 8 і ин СІ дозвееомАСКО 2 паче і КА ПВ жо г Ї єюнеов ПИТ
ОА і і Сл ,
КЕ время, ТКА тових - ОМ кох Ат З Н АК х КИ 1 шов ю- 0 оОвеопяя 00 сдд- см.
Фне. 15
Комп'ютерна верстка 0. Гапоненко Підписне Тираж 26 прим.
Міністерство освіти і науки України
Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна
ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601
UA2002032076A 1999-08-17 2000-08-16 Фармацевтична композиція, що містить поліпептид, який являє собою білковий фактор дозрівання в-клітин (всма), що зв'язується з фактором активації в-клітин (baff), спосіб інгібування росту в-клітин, спосіб лікування аутоімунного захворювання, спосіб лікування гіпертонії, спосіб інгібування запалення та спосіб модулювання імунної відповіді у ссавця за допомогою всма UA75049C2 (uk)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14937899P 1999-08-17 1999-08-17
US18168400P 2000-02-11 2000-02-11
US18353600P 2000-02-18 2000-02-18
PCT/US2000/022507 WO2001012812A2 (en) 1999-08-17 2000-08-16 Baff receptor (bcma), an immunoregulatory agent

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA75049C2 true UA75049C2 (uk) 2006-03-15

Family

ID=27386828

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UA2002032076A UA75049C2 (uk) 1999-08-17 2000-08-16 Фармацевтична композиція, що містить поліпептид, який являє собою білковий фактор дозрівання в-клітин (всма), що зв'язується з фактором активації в-клітин (baff), спосіб інгібування росту в-клітин, спосіб лікування аутоімунного захворювання, спосіб лікування гіпертонії, спосіб інгібування запалення та спосіб модулювання імунної відповіді у ссавця за допомогою всма

Country Status (29)

Country Link
US (7) US7691804B2 (uk)
EP (3) EP1210425B2 (uk)
JP (4) JP4787439B2 (uk)
KR (2) KR20090016772A (uk)
CN (1) CN100447244C (uk)
AT (1) ATE360693T1 (uk)
AU (1) AU780240B2 (uk)
BG (1) BG106519A (uk)
BR (2) BRPI0013391B8 (uk)
CA (1) CA2383154C (uk)
CZ (1) CZ300364B6 (uk)
DE (1) DE60034579T3 (uk)
DK (1) DK1210425T4 (uk)
EA (1) EA004635B1 (uk)
EE (1) EE05673B1 (uk)
GE (1) GEP20053685B (uk)
HK (1) HK1043608B (uk)
HU (3) HU227947B1 (uk)
IL (3) IL148089A0 (uk)
IS (1) IS2955B (uk)
MX (1) MXPA02001665A (uk)
NO (2) NO331410B1 (uk)
NZ (1) NZ517782A (uk)
PL (2) PL211786B1 (uk)
RS (1) RS51157B (uk)
SK (2) SK288603B6 (uk)
TR (1) TR200201063T2 (uk)
UA (1) UA75049C2 (uk)
WO (1) WO2001012812A2 (uk)

Families Citing this family (134)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8212004B2 (en) 1999-03-02 2012-07-03 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha fusion proteins
US6812327B1 (en) 1996-10-25 2004-11-02 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha polypeptides
GB9828628D0 (en) 1998-12-23 1999-02-17 Glaxo Group Ltd Novel ligand
US7833529B1 (en) 1999-01-07 2010-11-16 Zymogenetics, Inc. Methods for inhibiting B lymphocyte proliferation with soluble ztnf4 receptor
US20050100548A1 (en) * 2001-07-24 2005-05-12 Biogen Idec Ma Inc. BAFF, inhibitors thereof and their use in the modulation of B-cell response
US20030095967A1 (en) * 1999-01-25 2003-05-22 Mackay Fabienne BAFF, inhibitors thereof and their use in the modulation of B-cell response and treatment of autoimmune disorders
US6475987B1 (en) 1999-05-06 2002-11-05 National Jewish Medical And Research Center Tall-1 receptor homologues
BRPI0013391B8 (pt) * 1999-08-17 2021-05-25 Apotech R&D S A uso de polipeptídeos bcma na preparação de uma composição farmacêutica para tratar uma doença autoimune ou um distúrbio linfoproliferativo de célula b
UA74798C2 (uk) * 1999-10-06 2006-02-15 Байоджен Айдек Ма Інк. Спосіб лікування раку у ссавця за допомогою поліпептиду, що протидіє взаємодії april з його рецепторами
DK1255558T3 (da) * 2000-02-16 2006-10-23 Genentech Inc Anti-april antistoffer og hybridomaceller
US20040002068A1 (en) 2000-03-01 2004-01-01 Corixa Corporation Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies
US7371388B1 (en) * 2000-05-04 2008-05-13 Human Genome Sciences, Inc. Treatment of Sjogren's syndrome by administration of TR18 polypeptides
WO2001087979A2 (en) * 2000-05-12 2001-11-22 Amgen Inc. Methods and compositions of matter concerning april/g70, bcma, blys/agp-3, and taci
PT2275449T (pt) 2000-06-16 2016-12-27 Human Genome Sciences Inc Anticorpos que se ligam imunoespecificamente a blys
US7879328B2 (en) * 2000-06-16 2011-02-01 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that immunospecifically bind to B lymphocyte stimulator
AU2001288301A1 (en) 2000-08-18 2002-03-04 Human Genome Sciences, Inc. Binding polypeptides and methods based thereon
UA83458C2 (uk) * 2000-09-18 2008-07-25 Байоджен Айдек Ма Інк. Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf)
DE10049010A1 (de) * 2000-10-04 2002-04-18 Boehringer Ingelheim Int Transferrin-Polykation/DNS-Komplexe für die systemische Therapie von Tumorerkrankungen mit zytotoxischen Proteinen
KR20040030628A (ko) 2001-05-24 2004-04-09 지모제넥틱스, 인코포레이티드 Ｔａｃｉ-면역글로불린 융합 단백질
EA200601861A1 (ru) * 2001-08-03 2007-02-27 Дженентек, Инк. ПОЛИПЕПТИДЫ TACIs И BR3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
WO2003072713A2 (en) * 2002-02-21 2003-09-04 Biogen Idec Ma Inc. Use of bcma as an immunoregulatory agent
BR0313033A (pt) * 2002-07-25 2007-07-10 Genentech Inc anticorpos, anticorpos monoclonais, linhagens de células de hibridoma, anticorpos receptores de anti-taci isolados, anticorpos anti -taci, métodos de modulação da atividade biológica
AU2004233164B2 (en) * 2003-03-28 2009-10-08 Biogen Ma Inc. Truncated BAFF receptors
PT1631313E (pt) * 2003-06-05 2015-07-02 Genentech Inc Terapêutica de combinação para distúrbios de células b
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
MXPA06004301A (es) 2003-10-20 2006-06-05 Biogen Idec Inc Regimenes terapeuticos para antagonistas del factor de activacion de celulas b.
WO2005075511A1 (en) * 2004-01-29 2005-08-18 Genentech, Inc. Variants of the extracellular domain of bcma and uses thereof
WO2006052493A1 (en) * 2004-11-04 2006-05-18 Genentech, Inc. Polypeptides that bind baff and/or april
CA2590461A1 (en) * 2004-12-23 2006-06-29 Laboratoires Serono S.A. Bcma polypeptides and uses thereof
DK1855711T3 (da) * 2005-01-28 2009-10-12 Biogen Idec Inc Anvendelse af BAFF til behandling af Th2-medierede tilstande
EP1922079A2 (en) 2005-08-09 2008-05-21 ZymoGenetics, Inc. Methods for the treatment and prevention of abnormal cell proliferation using taci-fusion molecules
AR059945A1 (es) 2005-08-09 2008-05-14 Zymogenetics Inc Metodos para tratar afecciones malignas de celulas b que utilizan una molecula de fusion taci-ig
US9168286B2 (en) 2005-10-13 2015-10-27 Human Genome Sciences, Inc. Methods and compositions for use in treatment of patients with autoantibody positive disease
EP1933873A4 (en) * 2005-10-13 2009-12-02 Human Genome Sciences Inc METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF PATIENTS WITH POSITIVE DISEASES FOR SELF-ANTIBODIES
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
AU2006318539B2 (en) 2005-11-23 2012-09-13 Genentech, Inc. Methods and compositions related to B cell assays
US8211649B2 (en) 2006-03-31 2012-07-03 Human Genome Sciences, Inc. Methods of diagnosing and prognosing hodgkin's lymphoma
US8784812B2 (en) 2006-05-15 2014-07-22 Zymogenetics, Inc. Methods for treating autoimmune diseases using a TACI-Ig fusion molecule
BRPI0915928B8 (pt) * 2008-07-17 2021-05-25 Novartis Ag anticorpo isolado ou proteína funcional e composição farmacêutica compreendendo os mesmos
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
EP2396035A4 (en) * 2009-02-12 2012-09-12 Human Genome Sciences Inc USE OF ANTAGONISTS OF PROTEIN STIMULATING LYMPHOCYTES B TO PROMOTE GRAFT TOLERANCE
PL2406284T3 (pl) 2009-03-10 2017-09-29 Biogen Ma Inc. Przeciwciała anty-bcma
EP3211094A3 (en) 2009-09-03 2017-11-01 F. Hoffmann-La Roche AG Methods for treating, diagnosing, and monitoring rheumatoid arthritis
CN101781679B (zh) * 2009-10-19 2012-05-23 南通大学附属医院 人baff-r基因启动子活性的测定方法
CN101781680B (zh) * 2009-10-19 2012-05-09 南通大学附属医院 测定对人baff-r基因启动子活性影响因素的方法
WO2011108008A2 (en) * 2010-03-04 2011-09-09 Transgene Biotek Ltd. Antibody for targeted induction of apoptosis, cdc and adcc mediated killing of cancer cells, tbl-cln1
CA2827859A1 (en) 2011-02-28 2012-09-07 Genentech, Inc. Biological markers and methods for predicting response to b-cell antagonists
PL3415531T3 (pl) * 2011-05-27 2024-02-26 Glaxo Group Limited Białka wiążące antygen
UA112434C2 (uk) 2011-05-27 2016-09-12 Ґлаксо Ґруп Лімітед Антигензв'язувальний білок, який специфічно зв'язується з всма
TWI679212B (zh) 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
CA2863066A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Genentech, Inc. Anti-ig-e m1' antibodies and methods using same
WO2015100246A1 (en) 2013-12-24 2015-07-02 Ossianix, Inc. Baff selective binding compounds and related methods
JP6752148B2 (ja) 2014-02-07 2020-09-09 マクマスター ユニバーシティー 三官能性ｔ細胞−抗原カプラ及び方法並びにこれらの使用
EP3119423B1 (en) 2014-03-15 2022-12-14 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
EP3172237A2 (en) 2014-07-21 2017-05-31 Novartis AG Treatment of cancer using humanized anti-bcma chimeric antigen receptor
WO2016014530A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Novartis Ag Combinations of low, immune enhancing. doses of mtor inhibitors and cars
CA2961636A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Boris ENGELS Targeting cytotoxic cells with chimeric receptors for adoptive immunotherapy
MY191537A (en) 2014-12-05 2022-06-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting b-cell maturation antigen and uses thereof
CN107206076B (zh) 2014-12-05 2021-07-09 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 靶向b-细胞成熟抗原的抗体及其用途
WO2016126608A1 (en) 2015-02-02 2016-08-11 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
KR102528825B1 (ko) 2015-04-13 2023-05-08 화이자 인코포레이티드 B-세포 성숙 항원을 표적화하는 키메라 항원 수용체
ES2905315T3 (es) * 2015-04-13 2022-04-07 Pfizer Anticuerpos terapéuticos y sus usos
EP3286211A1 (en) 2015-04-23 2018-02-28 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
EP3331913A1 (en) 2015-08-07 2018-06-13 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric cd3 receptor proteins
CN108603200B (zh) 2015-11-23 2022-08-19 诺华股份有限公司 优化的慢病毒转移载体及其用途
KR20180099768A (ko) 2015-12-30 2018-09-05 노파르티스 아게 증진된 효능을 갖는 면역 이펙터 세포 요법
SG10202007836WA (en) 2016-02-17 2020-09-29 Seattle Genetics Inc Bcma antibodies and use of same to treat cancer and immunological disorders
WO2017165683A1 (en) 2016-03-23 2017-09-28 Novartis Ag Cell secreted minibodies and uses thereof
US11136405B2 (en) * 2016-06-06 2021-10-05 Board Of Regents, The Unviersity Of Texas System BAFF-R antibodies and uses thereof
KR20230129583A (ko) 2016-06-21 2023-09-08 테네오바이오, 인코포레이티드 Cd3 결합 항체
EP4050034A1 (en) 2016-09-14 2022-08-31 TeneoOne, Inc. Cd3 binding antibodies
WO2018111340A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Novartis Ag Methods for determining potency and proliferative function of chimeric antigen receptor (car)-t cells
BR112019012354A2 (pt) 2016-12-21 2019-11-26 Teneobio Inc anticorpos apenas de cadeia pesada anti-bcma
WO2018140725A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Novartis Ag Cd28 compositions and methods for chimeric antigen receptor therapy
US20190375815A1 (en) 2017-01-31 2019-12-12 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric t cell receptor proteins having multiple specificities
WO2018160731A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 Novartis Ag Shp inhibitor compositions and uses for chimeric antigen receptor therapy
US20200179511A1 (en) 2017-04-28 2020-06-11 Novartis Ag Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
WO2018201056A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
US11622977B2 (en) 2017-05-12 2023-04-11 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology
US11166985B2 (en) 2017-05-12 2021-11-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
AU2018301393A1 (en) 2017-07-11 2020-02-06 Compass Therapeutics Llc Agonist antibodies that bind human CD137 and uses thereof
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
CA3078637A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 Mcmaster University T cell-antigen coupler with y182t mutation and methods and uses thereof
JP2021501570A (ja) 2017-10-18 2021-01-21 ノバルティス アーゲー 選択的タンパク質分解のための組成物及び方法
US20210040205A1 (en) 2017-10-25 2021-02-11 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
WO2019089798A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Novartis Ag Anti-car compositions and methods
US11718679B2 (en) 2017-10-31 2023-08-08 Compass Therapeutics Llc CD137 antibodies and PD-1 antagonists and uses thereof
KR20200116077A (ko) 2017-11-01 2020-10-08 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 B 세포 성숙 항원에 특이적인 키메라 항원 수용체 및 암호화 폴리뉴클레오타이드
CA3080904A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
WO2019099639A1 (en) 2017-11-15 2019-05-23 Navartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, cd19-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapies
EP3713961A2 (en) 2017-11-20 2020-09-30 Compass Therapeutics LLC Cd137 antibodies and tumor antigen-targeting antibodies and uses thereof
MX2020005651A (es) 2017-11-30 2020-10-28 Novartis Ag Receptor de antigeno quimerico dirigido a bcma y usos del mismo.
EP3737408A1 (en) 2018-01-08 2020-11-18 Novartis AG Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
WO2019152660A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
EP3752203A1 (en) 2018-02-13 2020-12-23 Novartis AG Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US20210047405A1 (en) 2018-04-27 2021-02-18 Novartis Ag Car t cell therapies with enhanced efficacy
WO2019213282A1 (en) 2018-05-01 2019-11-07 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
KR20210008502A (ko) 2018-05-11 2021-01-22 크리스퍼 테라퓨틱스 아게 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
WO2019227003A1 (en) 2018-05-25 2019-11-28 Novartis Ag Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
JP7398396B2 (ja) 2018-06-01 2023-12-14 ノバルティス アーゲー Ｂｃｍａに対する結合分子及びその使用
US20210123075A1 (en) 2018-06-08 2021-04-29 Novartis Ag Compositions and methods for immunooncology
BR112020025048A2 (pt) 2018-06-13 2021-04-06 Novartis Ag Receptores de antígeno quimérico de bcma e usos dos mesmos
EP3818083A2 (en) 2018-07-03 2021-05-12 Elstar Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
US11110123B2 (en) 2018-07-17 2021-09-07 Triumvira Immunologics Usa, Inc. T cell-antigen coupler with various construct optimizations
AU2019307928A1 (en) 2018-07-19 2021-02-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-BCMA x anti-CD3 antibodies and uses thereof
JP2021534783A (ja) 2018-08-31 2021-12-16 ノバルティス アーゲー キメラ抗原受容体発現細胞を作製する方法
US20210171909A1 (en) 2018-08-31 2021-06-10 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor?expressing cells
CN113271945A (zh) 2018-12-20 2021-08-17 诺华股份有限公司 包含3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物的给药方案和药物组合
MX2021009763A (es) 2019-02-15 2021-09-08 Novartis Ag Derivados de 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-il)isoindolin-2-il)piperidina -2,6-diona y usos de los mismos.
AU2020222346B2 (en) 2019-02-15 2021-12-09 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
SG11202107825WA (en) 2019-02-25 2021-09-29 Novartis Ag Mesoporous silica particles compositions for viral delivery
US20230074800A1 (en) 2019-03-21 2023-03-09 Novartis Ag Car-t cell therapies with enhanced efficacy
EP3953455A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
EP3959320A1 (en) 2019-04-24 2022-03-02 Novartis AG Compositions and methods for selective protein degradation
WO2020222176A1 (en) 2019-04-30 2020-11-05 Crispr Therapeutics Ag Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
JOP20210323A1 (ar) 2019-06-14 2023-01-30 Teneobio Inc ارتباط أجسام مضادة ثقيلة السلسلة ومتعددة النوعية بـ cd22 وcd3
EP3994270A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Fred Hutchinson Cancer Research Center Recombinant ad35 vectors and related gene therapy improvements
MX2022006391A (es) 2019-11-26 2022-06-24 Novartis Ag Receptores de antigeno quimerico que se unen a bcma y cd19 y usos de los mismos.
KR20220116257A (ko) 2019-12-20 2022-08-22 노파르티스 아게 골수섬유증 및 골수이형성 증후군을 치료하기 위한, 데시타빈 또는 항 pd-1 항체 스파르탈리주맙을 포함하거나 또는 포함하지 않는, 항 tim-3 항체 mbg453 및 항 tgf-베타 항체 nis793의 조합물
CA3173737A1 (en) 2020-02-27 2021-09-02 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
IL295604A (en) 2020-02-27 2022-10-01 Novartis Ag Methods for producing cells expressing a chimeric antigen receptor
MX2022013453A (es) 2020-04-29 2022-11-16 Teneobio Inc Anticuerpos de cadena pesada multiespecificos con regiones constantes de cadena pesada modificadas.
AU2021288224A1 (en) 2020-06-11 2023-01-05 Novartis Ag ZBTB32 inhibitors and uses thereof
KR20230027056A (ko) 2020-06-23 2023-02-27 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법
EP4188549A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Novartis AG Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
EP4199960A2 (en) 2020-08-21 2023-06-28 Novartis AG Compositions and methods for in vivo generation of car expressing cells
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
GB2623199A (en) 2021-04-08 2024-04-10 Marengo Therapeutics Inc Multifunctional molecules binding to TCR and uses thereof
EP4330381A1 (en) 2021-04-27 2024-03-06 Novartis AG Viral vector production system
US11453723B1 (en) 2021-06-25 2022-09-27 Mcmaster University BCMA T cell-antigen couplers and uses thereof
AU2022330406A1 (en) 2021-08-20 2024-03-07 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor–expressing cells
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
DE69630710T2 (de) 1996-03-14 2004-09-23 Human Genome Sciences Inc. Humaner tumornekrosefaktor delta und epsilon
US6541224B2 (en) * 1996-03-14 2003-04-01 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor delta polypeptides
BR9612752A (pt) 1996-10-25 2000-01-18 Human Genome Sciences Inc Neutrocina
WO1998027114A2 (en) 1996-12-17 1998-06-25 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
US5969102A (en) * 1997-03-03 1999-10-19 St. Jude Children's Research Hospital Lymphocyte surface receptor that binds CAML, nucleic acids encoding the same and methods of use thereof
CA2232743A1 (en) 1997-04-02 1998-10-02 Smithkline Beecham Corporation A tnf homologue, tl5
CZ302262B6 (cs) 1997-04-16 2011-01-19 Amgen Inc. Izolovaná nukleová kyselina, polypeptid kódovaný touto nukleovou kyselinou, expresní vektor obsahující tuto nukleovou kyselinu, hostitelská bunka transfekovaná tímto expresním vektorem, izolovaný protein vázající osteoprotegerin, protilátka vázající
EP1012292A1 (en) 1997-06-06 2000-06-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ntn-2 member of tnf ligand family
CA2292899A1 (en) 1997-06-06 1998-12-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ntn-2 member of tnf ligand family
AU9376498A (en) 1997-09-05 1999-03-22 University Of Washington Tumor necrosis factor family receptors and ligands, encoding nucleic acids and related binding agents
PL339463A1 (en) * 1997-09-12 2000-12-18 Biogen April - novel protein of growth promoting action
WO1999013078A1 (en) 1997-09-12 1999-03-18 Biogen, Inc. Cysteine rich receptors-train
BR9812433A (pt) 1997-09-12 2000-09-26 Biogen Inc Kay- uma proteìna do sistema de imunização
WO1999033980A2 (en) 1997-12-30 1999-07-08 Chiron Corporation Members of tnf and tnfr families
US6297367B1 (en) * 1997-12-30 2001-10-02 Chiron Corporation Polynucleotide encoding TNFL1
EP0947556B1 (en) * 1998-04-01 2004-11-10 Solvay Solexis, Inc. Compatible blends of polyvinylidene fluoride and aromatic polyimide
AU1467000A (en) 1998-11-04 2000-05-22 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The A novel tumor necrosis factor family member, drl, and related compositions and methods
GB9828628D0 (en) 1998-12-23 1999-02-17 Glaxo Group Ltd Novel ligand
US20060067933A1 (en) * 1999-01-07 2006-03-30 Gross Jane A Soluble receptor BR43x2 and methods of using
EE05539B1 (et) † 1999-01-07 2012-04-16 Zymogenetics, Inc. Hbriidvalk, selle kasutamine, seda sisaldav antikeha v?i selle fragment ja selle kasutamine
US7833529B1 (en) * 1999-01-07 2010-11-16 Zymogenetics, Inc. Methods for inhibiting B lymphocyte proliferation with soluble ztnf4 receptor
PL198934B1 (pl) * 1999-01-25 2008-08-29 Apoxis Sa Zastosowanie przeciwciała swoistego wobec rozpuszczalnego BAFF lub aktywnego fragmentu przeciwciała i zastosowanie rozpuszczalnego BAFF lub jego aktywnego fragmentu
US6475986B1 (en) * 1999-02-02 2002-11-05 Research Development Foundation Uses of THANK, a TNF homologue that activates apoptosis
JP2002541779A (ja) 1999-02-24 2002-12-10 ザ ジュネラル ホスピタル コーポレーション シグナル伝達中間体のクローニング方法
AU3633000A (en) 1999-03-26 2000-10-16 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha binding proteins and methods based thereon
US6475987B1 (en) * 1999-05-06 2002-11-05 National Jewish Medical And Research Center Tall-1 receptor homologues
BRPI0013391B8 (pt) 1999-08-17 2021-05-25 Apotech R&D S A uso de polipeptídeos bcma na preparação de uma composição farmacêutica para tratar uma doença autoimune ou um distúrbio linfoproliferativo de célula b
UA74798C2 (uk) 1999-10-06 2006-02-15 Байоджен Айдек Ма Інк. Спосіб лікування раку у ссавця за допомогою поліпептиду, що протидіє взаємодії april з його рецепторами
WO2001058949A2 (en) 2000-02-11 2001-08-16 Biogen, Inc. Heterologous polypeptide of the tnf family
DK1255558T3 (da) † 2000-02-16 2006-10-23 Genentech Inc Anti-april antistoffer og hybridomaceller
US20040013674A1 (en) 2001-04-27 2004-01-22 Christine Ambrose Taci as an anti-tumor agent
WO2001087979A2 (en) 2000-05-12 2001-11-22 Amgen Inc. Methods and compositions of matter concerning april/g70, bcma, blys/agp-3, and taci
PT2275449T (pt) 2000-06-16 2016-12-27 Human Genome Sciences Inc Anticorpos que se ligam imunoespecificamente a blys
WO2002018620A2 (en) 2000-08-15 2002-03-07 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha and neutrokine-alpha splice variant
UA83458C2 (uk) 2000-09-18 2008-07-25 Байоджен Айдек Ма Інк. Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf)
EP1456347A4 (en) 2001-11-16 2006-08-02 Human Genome Sciences Inc ANTIBODIES BINDING TO BLYS ACCORDING TO AN IMMUNOSPECIFIC MODE
WO2003072713A2 (en) 2002-02-21 2003-09-04 Biogen Idec Ma Inc. Use of bcma as an immunoregulatory agent
US7083735B2 (en) 2003-09-03 2006-08-01 Laing David A High debris content strainer
PL3415531T3 (pl) 2011-05-27 2024-02-26 Glaxo Group Limited Białka wiążące antygen
FR3005792B1 (fr) 2013-05-16 2017-12-29 Parknplug Procede de gestion dynamique et previsionnel du rechargement electrique de batteries

Also Published As

Publication number Publication date
IS6273A (is) 2002-02-15
DE60034579T3 (de) 2015-11-12
EP1210425B1 (en) 2007-04-25
CN100447244C (zh) 2008-12-31
CZ2002579A3 (cs) 2002-05-15
US20180273605A1 (en) 2018-09-27
MXPA02001665A (es) 2003-07-14
EP2314694A2 (en) 2011-04-27
ATE360693T1 (de) 2007-05-15
US20120214687A1 (en) 2012-08-23
WO2001012812A3 (en) 2001-09-07
PL354661A1 (en) 2004-02-09
SK2292002A3 (en) 2002-07-02
KR20090016772A (ko) 2009-02-17
US7083785B2 (en) 2006-08-01
SK288603B6 (sk) 2018-10-01
JP2003507364A (ja) 2003-02-25
EP1806143A2 (en) 2007-07-11
DK1210425T4 (en) 2015-08-10
AU6911200A (en) 2001-03-13
EP1210425A2 (en) 2002-06-05
US8828669B2 (en) 2014-09-09
HK1043608B (zh) 2007-12-07
US20020172674A1 (en) 2002-11-21
BG106519A (bg) 2003-04-30
US10494416B2 (en) 2019-12-03
IL148089A0 (en) 2002-09-12
JP2014037434A (ja) 2014-02-27
CZ300364B6 (cs) 2009-04-29
NO331410B1 (no) 2011-12-19
US7691804B2 (en) 2010-04-06
DE60034579T2 (de) 2008-01-31
EE05673B1 (et) 2013-08-15
JP2011063600A (ja) 2011-03-31
RS51157B (sr) 2010-10-31
CA2383154C (en) 2013-04-30
EP1806143B1 (en) 2016-06-15
DE60034579D1 (de) 2007-06-06
EP1806143A3 (en) 2007-07-18
BR0013391A (pt) 2002-07-09
US9650430B2 (en) 2017-05-16
TR200201063T2 (tr) 2002-10-21
YU10602A (sh) 2005-06-10
US20020165156A1 (en) 2002-11-07
CN1379815A (zh) 2002-11-13
EP2314694A3 (en) 2013-12-11
HU230583B1 (hu) 2017-02-28
JP4787439B2 (ja) 2011-10-05
NZ517782A (en) 2004-01-30
AU780240B2 (en) 2005-03-10
NO20020789L (no) 2002-04-08
CA2383154A1 (en) 2001-02-22
BRPI0013391B8 (pt) 2021-05-25
HUP0203084A2 (en) 2002-12-28
KR100897082B1 (ko) 2009-05-14
NO20020789D0 (no) 2002-02-18
US20200095305A1 (en) 2020-03-26
SK288287B6 (sk) 2015-07-01
WO2001012812A2 (en) 2001-02-22
EA004635B1 (ru) 2004-06-24
JP2011116790A (ja) 2011-06-16
BRPI0013391B1 (pt) 2018-09-11
GEP20053685B (en) 2005-12-12
IS2955B (is) 2016-12-15
PL211786B1 (pl) 2012-06-29
IL230961A (en) 2016-06-30
US20100040627A1 (en) 2010-02-18
DK1210425T3 (da) 2007-09-17
EA200200261A1 (ru) 2002-08-29
HU1000128D0 (en) 2010-05-28
NO344346B1 (no) 2019-11-11
HU227947B1 (en) 2012-06-28
EP1210425B2 (en) 2015-06-17
US20150139992A1 (en) 2015-05-21
JP5904985B2 (ja) 2016-04-20
NO20111232A1 (no) 2011-09-12
EE200200071A (et) 2003-04-15
JP5379107B2 (ja) 2013-12-25
SK500172015A3 (uk) 2002-07-02
KR20020084842A (ko) 2002-11-11
HK1043608A1 (en) 2002-09-20
IL230961A0 (en) 2014-03-31
HU227008B1 (en) 2010-04-28
IL148089A (en) 2015-03-31
PL207501B1 (pl) 2010-12-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA75049C2 (uk) Фармацевтична композиція, що містить поліпептид, який являє собою білковий фактор дозрівання в-клітин (всма), що зв'язується з фактором активації в-клітин (baff), спосіб інгібування росту в-клітин, спосіб лікування аутоімунного захворювання, спосіб лікування гіпертонії, спосіб інгібування запалення та спосіб модулювання імунної відповіді у ссавця за допомогою всма
HU228477B1 (en) Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
EA005601B1 (ru) Способ лечения злокачественных опухолей у млекопитающего, характеризующихся аномально высокой экспрессией лиганда, индуцирующего пролиферацию клеток (april)
EA007471B1 (ru) Растворимый рецептор br43x2 и способы его применения
TWI222453B (en) Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use
US20070196370A1 (en) Type 2 cytokine receptor and nucleic acids encoding same
JP2006206587A (ja) 新規なポリペプチド及びそれをコードする核酸
JP2002526028A (ja) ヒトトール相同体
US8003334B2 (en) Methods for identifying compounds which bind to TANGO294
CA2362924A1 (en) Secreted proteins and nucleic acids encoding them
CN101115767B (zh) 包含vWFA和/或ANT＿IG结构域的蛋白质
EP1244697A2 (en) Novx polypeptides nucleic acids encoding same and their diagnostic and thereapeutic use
US20040009541A1 (en) Novel carcinoma-related genes and polypeptides and methods of use thereof
US20020102267A1 (en) CLASP-5 transmembrane protein
JP2008509655A (ja) Ｕｎｃ５ｈ２のスプライス変異体
JP2002516067A (ja) 新規ｆｄｒｇタンパク質および核酸分子、ならびにそのための用途
JP2003521885A (ja) ポリヌクレオチドおよびそれらによってコードされるポリペプチド
JP2003529350A (ja) ポリペプチドおよびそれをコードする核酸
JP2003514530A (ja) ポリペプチドおよびそれらをコードする核酸
US20220112559A1 (en) Targeting treatment for adam30 in pathological cells
JP2003526369A (ja) 新規ポリヌクレオチドおよび同一物をコードする核酸
JP2003528583A (ja) ヘパトーム誘導増殖因子様タンパク質、これらをコードするポリヌクレオチド、および使用方法。
CA2476555A1 (en) Methods of therapy and diagnosis
AU2003213064B2 (en) Methods of therapy and diagnosis
JP2003509017A (ja) ヒトａｂｃ２輸送体およびその使用