TWI686200B - 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 - Google Patents
腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI686200B TWI686200B TW107103415A TW107103415A TWI686200B TW I686200 B TWI686200 B TW I686200B TW 107103415 A TW107103415 A TW 107103415A TW 107103415 A TW107103415 A TW 107103415A TW I686200 B TWI686200 B TW I686200B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- composition
- hsba
- individuals
- months
- meningococcal
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 738
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 128
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 title 1
- 101710186862 Factor H binding protein Proteins 0.000 claims abstract description 319
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 188
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 claims description 203
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 178
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 161
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 154
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims description 149
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 122
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 111
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 109
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 97
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 96
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 claims description 96
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 96
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 56
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims description 55
- -1 tetrafluoroborate 1-cyano-4-dimethylaminopyridinium Chemical compound 0.000 claims description 38
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 36
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 36
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 31
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 30
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 28
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 23
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 21
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 18
- 210000002418 meninge Anatomy 0.000 claims description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 13
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 12
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 12
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- AIHDUTVBOYDXOW-UHFFFAOYSA-N 4-(dimethylamino)pyridin-1-ium-1-carbonitrile Chemical compound CN(C)C1=CC=[N+](C#N)C=C1 AIHDUTVBOYDXOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241001493158 Simbu orthobunyavirus Species 0.000 claims 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O pyridinium Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 abstract description 99
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 abstract description 99
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 abstract description 99
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 313
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 275
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 262
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 261
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 260
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 180
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 179
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 179
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 171
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 118
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 117
- 230000004044 response Effects 0.000 description 104
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 94
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 87
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 54
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 53
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 52
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 39
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 35
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 33
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 32
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 30
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 28
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 27
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 27
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 26
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 26
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 25
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 24
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 24
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 23
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 23
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 21
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 21
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 21
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 21
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 21
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 19
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 19
- 229940035144 trumenba Drugs 0.000 description 19
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 18
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 18
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 18
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 16
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 14
- 230000008859 change Effects 0.000 description 13
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 12
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 11
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 11
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 11
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 10
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 10
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 10
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 10
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 10
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 10
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 10
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 10
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 10
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 description 9
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 9
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 9
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 9
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 9
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 9
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 9
- 238000011160 research Methods 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- 238000013461 design Methods 0.000 description 8
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 108010060123 Conjugate Vaccines Proteins 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 229940031670 conjugate vaccine Drugs 0.000 description 7
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 7
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 7
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 7
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 7
- 102000016550 Complement Factor H Human genes 0.000 description 6
- 108010053085 Complement Factor H Proteins 0.000 description 6
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 6
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 6
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 6
- 229940102614 adacel Drugs 0.000 description 6
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 6
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 6
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 208000037909 invasive meningococcal disease Diseases 0.000 description 6
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 6
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 6
- 238000012552 review Methods 0.000 description 6
- 229940124856 vaccine component Drugs 0.000 description 6
- 229910017119 AlPO Inorganic materials 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 5
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 5
- XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M cyanate Chemical compound [O-]C#N XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 5
- 208000037941 meningococcal disease Diseases 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 5
- 229940066827 pertussis vaccine Drugs 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 5
- 238000005549 size reduction Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000011752 CBA/J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 4
- 229940124897 Gardasil Drugs 0.000 description 4
- 229940124914 Havrix Drugs 0.000 description 4
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000007333 cyanation reaction Methods 0.000 description 4
- 210000000852 deltoid muscle Anatomy 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- HVODZEXFHPAFHB-UHFFFAOYSA-N hexadec-15-enoic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCCCCCCC=C HVODZEXFHPAFHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 229940041323 measles vaccine Drugs 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 4
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 4
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 description 4
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000034628 Celiac artery compression syndrome Diseases 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940124872 Hepatitis B virus vaccine Drugs 0.000 description 3
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 229940124904 Menactra Drugs 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 229940124858 Streptococcus pneumoniae vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 3
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 3
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229960005097 diphtheria vaccines Drugs 0.000 description 3
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 229960004443 hemophilus influenzae b vaccines Drugs 0.000 description 3
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 3
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 3
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 229940029583 inactivated polio vaccine Drugs 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229940124731 meningococcal vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 3
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 229960001539 poliomyelitis vaccine Drugs 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 229960002766 tetanus vaccines Drugs 0.000 description 3
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010034055 CRM45 fragment of diphtheria toxin Proteins 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124843 Measles-Mumps vaccine Drugs 0.000 description 2
- 206010027249 Meningitis meningococcal Diseases 0.000 description 2
- 201000010924 Meningococcal meningitis Diseases 0.000 description 2
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 229940032047 Tdap vaccine Drugs 0.000 description 2
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 2
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 2
- DHZPCJWLUQMUPF-RTRLPJTCSA-N [(2R,3S,4R,5R)-5-acetamido-4,6-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical group CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1O DHZPCJWLUQMUPF-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 2
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 2
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 239000004643 cyanate ester Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 125000003976 glyceryl group Chemical group [H]C([*])([H])C(O[H])([H])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 2
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 2
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002354 inductively-coupled plasma atomic emission spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 2
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 2
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000013439 planning Methods 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 2
- 229940021648 varicella vaccine Drugs 0.000 description 2
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RILZRCJGXSFXNE-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol Chemical compound OCCC1=CC=C(OC(F)(F)F)C=C1 RILZRCJGXSFXNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGRWRVVIDZRVSO-UHFFFAOYSA-N 2-bromoacetic acid Chemical compound OC(=O)CBr.OC(=O)CBr AGRWRVVIDZRVSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- OTLNPYWUJOZPPA-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 OTLNPYWUJOZPPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALEBYBVYXQTORU-UHFFFAOYSA-N 6-hydrazinyl-6-oxohexanoic acid Chemical compound NNC(=O)CCCCC(O)=O ALEBYBVYXQTORU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910018626 Al(OH) Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- 108010053406 CRM 107 Proteins 0.000 description 1
- BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L Carbenoxolone sodium Chemical compound [Na+].[Na+].C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C([O-])=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](OC(=O)CCC([O-])=O)C1(C)C BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 229940032024 DPT vaccine Drugs 0.000 description 1
- 101000597577 Gluconacetobacter diazotrophicus (strain ATCC 49037 / DSM 5601 / CCUG 37298 / CIP 103539 / LMG 7603 / PAl5) Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 101100005713 Homo sapiens CD4 gene Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108700014070 MenACWY Proteins 0.000 description 1
- 206010027202 Meningitis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQBAWAQIRZIWIV-UHFFFAOYSA-N N-methylpyridinium Chemical compound C[N+]1=CC=CC=C1 PQBAWAQIRZIWIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 101710084578 Short neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 102400000368 Surface protein Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 101710182223 Toxin B Proteins 0.000 description 1
- 101710182532 Toxin a Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 201000009904 bacterial meningitis Diseases 0.000 description 1
- 201000005008 bacterial sepsis Diseases 0.000 description 1
- 229940090821 bexsero Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- 229920005557 bromobutyl Polymers 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 150000001913 cyanates Chemical class 0.000 description 1
- OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N cystamine Chemical compound CCSSCCN OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940099500 cystamine Drugs 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- RAABOESOVLLHRU-UHFFFAOYSA-N diazene Chemical compound N=N RAABOESOVLLHRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000071 diazene Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000007905 drug manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000011985 exploratory data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001095 inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 229960005037 meningococcal vaccines Drugs 0.000 description 1
- 238000007392 microtiter assay Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-O n,n-dimethylpyridin-1-ium-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=[NH+]C=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- RYRIMPODRHVEIW-UHFFFAOYSA-N n-(2-phenylethyl)nitramide Chemical compound [O-][N+](=O)NCCC1=CC=CC=C1 RYRIMPODRHVEIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 125000002868 norbornyl group Chemical group C12(CCC(CC1)C2)* 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229960005030 other vaccine in atc Drugs 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000011076 safety test Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005464 sample preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000012090 serum-supplement Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical group O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/095—Neisseria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/22—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Neisseriaceae (F)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
- C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
- C07K16/1217—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Neisseriaceae (F)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/62—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier
- A61K2039/627—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier characterised by the linker
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32411—Hepatovirus, i.e. hepatitis A virus
- C12N2770/32434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Management, Administration, Business Operations System, And Electronic Commerce (AREA)
- Financial Or Insurance-Related Operations Such As Payment And Settlement (AREA)
Abstract
於一態樣中，本發明關於包含因子H結合蛋白(fHBP)和腦膜炎球菌(Neisseria Meningitidis
)非血清群B莢膜多糖之組成物。本發明進一步關於包含fHBP之組成物於諸如例如引發針對腦膜炎球菌血清群B菌株和非血清群B菌株之免疫反應的用途。本發明描述之組成物和方法係針對投予人類，其包括成人、青少年、幼兒和嬰兒。
Description
本發明關於腦膜炎球菌組成物和使用彼之方法。
腦膜炎球菌為可引起敗血症、腦膜炎和死亡之革蘭氏陰性莢膜細菌(encapsulated bacteria)。腦膜炎球菌基於化學上和抗原上不同之多糖莢膜可分類成至少12種血清群(包括血清群A、B、C、29E、H、I、K、L、W-135(現在大多被稱為W)、X、Y和Z)。這些血清群菌株中有5種(A、B、C、Y和W135)為造成大多數疾病之原因。
腦膜炎球菌腦膜炎(Meningococcal Meningitis)為一種破壞性疾病，儘管有可用之抗生素，其可在數小時內殺死兒童和年輕人。對於針對腦膜炎球菌血清群A、B、C、Y和W135及/或X之改善的免疫原性組成物是有需要的。
目前尚無能有效對抗廣範圍之MnB和腦膜炎球菌血清群A、C、Y和W及/或X分離株之交叉保護性疫苗或組成物商品。例如，迄今為止已發表之關於用於防護血清群B疾病之經核准的多組分組成物之結果尚未顯示出針對表現血清群B莢膜多糖之多種腦膜炎球菌菌株的直接殺菌免疫反應，至少在青少年中。因此，在測定現實世界疫苗針對一組不同或異源腦膜炎球菌菌株(例如代表不同的地理區域)的覆蓋率時，能有效對抗各種MnB和腦膜炎球菌血清群A、C、Y和W及/或X分離株之交叉保護性疫苗或組成物是有需要的。
本發明之進一步目的係提供改善之用於投予腦膜炎球菌疫苗，尤其是投予兒童之計劃表。雖然侵入性腦膜炎球菌病(IMD)之發病率隨年齡而變化，但在1個月到1歲大之間的嬰兒期之發病率通常最高，發病率之第二高峰是在青少年。在美國，在1998年至2007年之間，腦膜炎球菌病在2歲以下之嬰兒的總發病率為每10萬人中3.9人。在2至10歲之兒童中，發病率為每10萬人中0.68人，其中有41%之病例發生在2至3歲齡之兒童中。來自澳洲之國家監測數據顯示該疾病之發病率高峰在4歲或更小之兒童中，次高峰係發生在青少年和年輕人中；全部病例中約85%係歸因於血清群B疾病。
為滿足這些和其他需求，本發明關於腦膜炎球菌組成物及使用彼之方法。
本發明者意料外地發現一種組成物，該組成物包括至少一因子H結合蛋白(fHBP)和至少一種腦膜炎球菌莢膜糖軛合物。該組成物出奇地穩定並引發針對表現與該多組分組成物中之變體fHBP同源之fHBP變體的菌株之免疫反應及針對表現與該多組分組成物中之變體fHBP異源的fHBP變體之菌株的免疫反應。
該組成物包括第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)；第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135(MenW)莢膜糖；和與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。
於一實施態樣中，該組成物包含腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，該腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)；腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，該腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)；腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖，該腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)；及腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖，該腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)。
於一態樣中，本發明關於套組，該套組包括(a)第一組成物，其包括脂化之MenB rLP2086亞族A多肽和脂化之MenB rLP2086亞族B多肽；(b)第二組成物，其包括與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖；和與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。於一實施態樣中，該第一組成物為液體組成物且該第二組成物為凍乾組成物。於另一實施態樣中，該套組未進一步包括任一下列免疫原性組成物：MENACTRA(R)、MENVEO(R)、ADACEL(R)、HAVRIX(R)、GARDASIL(R)、REPEVAX或彼等之任何組合。於一實施態樣中，該套組包括布洛芬(ibuprofen)、撲熱息痛(paracetamol)和阿莫西林(amoxicillin)中任一者。
於一態樣中，本發明關於免疫原性組成物，該免疫原性組成物包括液體組成物和凍乾組成物，該液體組成物包括(i)包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的第一脂化多肽；和(ii)包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的第二脂化多肽；該凍乾組成物包括：藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)；藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)；在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合之腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖(MenW-TT軛合物)；和在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖(MenY-TT軛合物)。於一實施態樣中，該凍乾組成物係以液體組成物重構。
於另一態樣中，本發明關於誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應之方法。於一些實施態樣中，該方法包括對人投予包括fHBP蛋白之組成物。於一些實施態樣中，該方法包括對人投予包含多肽之組成物，該多肽包含與下列群組中之任一序列所示之胺基酸序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或99.9%同一性之胺基酸序列：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：33、SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、SEQ ID NO：38、SEQ ID NO：39、SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：49、SEQ ID NO：50、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：53、SEQ ID NO：54、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：56、SEQ ID NO：57、SEQ ID NO：58、SEQ ID NO：59、SEQ ID NO：60、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：62。於一些實施態樣中，該方法包括對人投予包括第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。
於另一態樣中，本發明關於誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應之方法。該方法包括對人投予包括下列者之組成物：第一脂化多肽，其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；第二脂化多肽該，其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135(MenW)莢膜糖；和與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。
於一態樣中，本發明關於用於在任何年齡之患者中引發免疫反應之方法。該方法包括對人投予包括第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。於一實施態樣中，該組成物進一步包括聚山梨醇酯80。於一實施態樣中，該組成物進一步包括鋁。於一實施態樣中，該組成物進一步包括組胺酸。於一實施態樣中，該組成物進一步包括氯化鈉。於一實施態樣中，該組成物進一步包括聚山梨醇酯80、鋁、組胺酸和氯化鈉。再於另一實施態樣中，該組成物進一步包括與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135(MenW)莢膜糖；和與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。
[發明之詳細描述]
本發明者意料外地發現包括至少一因子H結合蛋白(fHBP)和至少一腦膜炎球菌莢膜糖軛合物之組成物。該組成物出奇地穩定並引發針對表現與在該多組分組成物中之fHBP變體同源之fHBP變體的菌株之免疫反應和針對表現與在該多組分組成物中之fHBP變體異源之fHBP變體的菌株之免疫反應。本發明者進一步意料外地發現fHBP多肽有效地在兒童(例如12個月大及更年長之人類)體內引發免疫反應。再者，本發明者意料外地發現fHBP多肽有效地引發針對腦膜炎球菌血清群X菌株之免疫反應。
本發明者意料外地發現包括下列群組之組成物：(a)包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列之第一脂化多肽；(b)包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列之第二脂化多肽；(c)腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)；(d)腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)；(e)腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)；(f)腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)。該組成物包括凍乾之MenACWY-TT組成物，該凍乾之MenACWY-TT組成物意料外地可輕易地以液態MnB二價rLP2086組成物重構，其中該組成物係在單一小瓶中。本發明者發現該凍乾之MenACWY-TT組或物與液態MnB二價rLP2086組成物相容且在重構後可在室溫下穩定至少24小時。
再者，本發明者進一步發現MnB二價rLP2086組成物引發之殺菌抗體不僅針對腦膜炎球菌血清群B，亦針對除血清群B外之腦膜炎球菌血清群。例如該MnB二價rLP2086組成物引發至少針對腦膜炎球菌血清群A、C、W、Y和X之殺菌抗體。該MnB二價rLP2086組成物能引發針對腦膜炎球菌血清群X之殺菌抗體的意外發現指明MnB二價rLP2086組成物在人體中引發廣泛之交叉反應性殺菌免疫反應，該免疫反應可針對至少二種不同腦膜炎球菌血清群。
再者，本發明者意外地發現以4種主要腦膜炎球菌血清群B(MnB)測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行使用人補體之血清殺菌分析(hSBA)測量時，以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月可在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體中測量到免疫反應。本發明者亦意外地發現以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量時，以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月可在研究開始時年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體中測量到免疫反應。本發明者還意外地發現以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量時，以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月可在研究開始時年齡在≧24個月至＜10歲(即，合併之年齡層)之健康個體中測量到免疫反應。本發明者亦意外地發現以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量時，以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後6個月可在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體中、研究開始時年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體中及合併之年齡層中測量到免疫反應。該免疫反應透過額外之試驗指標(endpoine)來進一步描述，該額外之試驗指標係在指定之時間點，在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體中、在研究開始時年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體中及合併之年齡層中以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量。
此外，本發明者意外地發現以4種主要腦膜炎球菌血清群B(MnB)測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行使用人補體之血清殺菌分析(hSBA)測量時，以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月可在研究開始時年齡在12個月至＜18個月之健康幼兒中測量到免疫反應。本發明者亦意外地發現以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量時，以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月可在研究開始時年齡在18個月至＜24個月之健康幼兒中測量到免疫反應。本發明者還意外地發現以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量時，以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月可在研究開始時年齡在12個月至＜24個月(即，二個年齡層合併)之健康幼兒中測量到免疫反應。本發明者亦意外地發現以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量時，以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後至少6個月可在研究開始時年齡在12個月至＜18個月和18個月至＜24個月之健康幼兒中、及合併之二個年齡層中測量到免疫反應。例如，該hSBA可在第三次疫苗接種後之任何時間(包括12、24、36和48個月)，在研究開始時年齡在12個月至＜18個月和18個月至＜24個月之健康幼兒中、及及合併之二個年齡層中測量。該免疫反應透過額外之試驗指標來進一步描述，該額外之試驗指標係在第二次接種疫苗後1個月及第三次接種疫苗後至少1個月，在年齡在12個月至＜18個月和18個月至＜24個月之健康幼兒中、及合併之二個年齡層中以4種主要MnB測試菌株(2種菌株表現LP2086亞族A蛋白且2種菌株表現LP2086亞族B蛋白)進行hSBA來測量。例如，該hSBA可在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後之任何時間(包括6、12、24、36和48個月)，在研究開始時年齡在12個月至＜18個月和18個月至＜24個月之健康幼兒中、及合併之二個年齡層中測量。該免疫反應亦透過額外之試驗指標來描述，該額外之試驗指標係經由使用表現LP2086亞族A和B蛋白之次代MnB測試菌株，在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後至少1個月，在年齡在12個月至＜18個月和18個月至＜24個月之健康幼兒中、及合併之二個年齡層中藉由hSBA對次要MnB測試菌株(表現LP2086亞族A和B蛋白)進行測量。例如，該hSBA可在第三次疫苗接種後之任何時間(包括6、12、24、36和48個月)，在研究開始時年齡在12個月至＜18個月和18個月至＜24個月之健康幼兒中、在合併之二個年齡層中測量。
因此，於一態樣中，本發明關於用於在任何年齡之患者中引發免疫反應之方法。於一些實施態樣中，該人之年齡為至少4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週或12週齡。例如，於一較佳之實施態樣中，該人為至少6週齡。如本技藝所知，腦膜炎球菌A、C、W-135和Y群結合型疫苗(諸如NIMENRIX®)適合用於最小為6週齡之嬰兒且可投予6週齡或任何更年長之人類。於一些實施態樣中，該人之年齡為至少6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月。例如，於一較佳之實施態樣中，該人之年齡為至少12個月。於一實施態樣中，該人之年齡係介於12至18個月之間。於另一態樣中，本發明關於用於在年齡至少18個月之患者中引發免疫反應之方法。於一實施態樣中，該人之年齡係介於18至24個月之間。再於另一態樣中，本發明關於用於在年齡為至少24個月之患者中引發免疫反應之方法。於一實施態樣中，該人之年齡係在24個月至10歲之間。於另一態樣中，本發明關於用於在年齡為10歲及更年長之患者中引發免疫反應之方法。於進一步之態樣中，本發明關於用於在年齡在10歲至25歲之間的患者中引發免疫反應之方法。該方法包括對人投予包括第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)和第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)之組成物。於一實施態樣中，該組成物進一步包含聚山梨醇酯80。於一實施態樣中，該組成物進一步包括鋁。於一實施態樣中，該組成物進一步包括組胺酸。於一實施態樣中，該組成物進一步包括氯化鈉。於一實施態樣中，該組成物進一步包括聚山梨醇酯80、鋁、組胺酸和氯化鈉。再於另一實施態樣中，該組成物進一步包括與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135(MenW)莢膜糖；和與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。如本技藝所知，腦膜炎球菌A、C、W-135和Y結合型疫苗(諸如NIMENRIX®)適合用於最小為6週齡之嬰兒，且可投予6週齡及任何更年長之人類。
示例性組成物進一步描述之說明於下文中。 組成物和疫苗
本發明者進一步發現包括fHBP之組成物在年齡為至少12個月之人體內引發有效之免疫反應。該組成物亦引發針對腦膜炎球菌血清群X菌株之免疫反應。此外，本發明者意料外地發現包括至少一因子H結合多肽(fHBP)和至少一腦膜炎球菌莢膜糖軛合物之組成物。該組成物出奇地穩定並引發針對表現與該多組分組成物中之fHBP變體同源之fHBP變體的菌株之免疫反應及針對表現與該多組分組成物中之fHBP變體異源的fHBP變體之菌株的免疫反應。於一實施態樣中，該組成物包括任何fHBP，例如任一下列多肽：B24、B16、B44、A22、B03、B09、A12、A19、A05、A07、A06、A15、A29、B01、A62、B15及彼等之任何組合。較佳地，該組成物包括A05和B01多肽之組合物合。於另一較佳之實施態樣中，該組成物包括B24和A05多肽之組合物。於另一較佳之實施態樣中，該組成物包括A05、A12、B09和B44多肽之組合物。於一實施態樣中，該組成物包括脂化之fHBP。於一實施態樣中，該組成物不包括非脂化之fHBP。
於另一實施態樣中，該組成物包括非脂化之fHBP，諸如描述於下列文獻中之任一非脂化之fHBP：國際專利刊物第WO2012/032489號、美國專利刊物第US20120093852號、國際專利刊物第WO2013/132452號和美國專利刊物第US20160030543號，各篇之全部內容以引用方式併入本文。於一實施態樣中，該組成物包括至少一種非脂化之fHBP和至少一種脂化之fHBP。
於一些實施態樣中，該組成物包括與下列任一者所示之胺基酸序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或99.9%同一性之多肽：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：33、SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、SEQ ID NO：38、SEQ ID NO：39、SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：49、SEQ ID NO：50、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：53、SEQ ID NO：54、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：56、SEQ ID NO：57、SEQ ID NO：58、SEQ ID NO：59、SEQ ID NO：60、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：62。
本發明者還意外地發現液態MnB二價rLP2086組成物可輕易地重構凍乾之MenACWY-TT組成物且該組合之組成物可相容且穩定。
於一態樣中，本發明關於針對腦膜炎球菌之組成物。該組成物包括(a)包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的第一脂化多肽；(b)包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的第二脂化多肽；(c)藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)；(d)藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)；(e)在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合之腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖(MenW-TT軛合物)；(f)在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖(MenY-TT軛合物)。
於另一態樣中，本發明關於包括MnB二價rLP2086組成物和MenACWY-TT組成物之組合物的組成物。該MnB二價rLP2086組成物係指包括單一腦膜炎球菌多肽組分之組成物，該腦膜炎球菌多肽組分誘導針對多種腦膜炎球菌血清群B菌株之有效的廣泛保護性免疫反應。具體地說，於一實施態樣中，該MnB二價rLP2086組成物包括MnB rLP2086亞族A蛋白(SEQ ID NO：1)和MnB rLP2086亞族B蛋白(SEQ ID NO：2)。於一實施態樣中，該組成物不包括融合蛋白。於一實施態樣中，該組成物不包括嵌合蛋白。於一實施態樣中，該組成物不包括雜合蛋白。於一實施態樣中，該組成物不進一步包括肽片段。於另一實施態樣中，該組成物不進一步包括非fHBP之奈瑟氏球菌多肽。例如，於一實施態樣中，該組成物不包括 PorA蛋白。於另一實施態樣中，該組成物不包括NadA蛋白。於另一實施態樣中，該組成物不進一步包括奈瑟氏球菌肝素結合抗原(NHBA)。於另一實施態樣中，該組成物不進一步包括奈瑟氏球菌外膜囊泡(OMV)。於一較佳之實施態樣中，該組成物不進一步包括除第一多肽和第二多肽之外的抗原。於一較佳之實施態樣中，該MnB二價rLP2086組成物進一步包括聚山梨醇酯80。於一實施態樣中，該MnB二價rLP2086組成物進一步包括組胺酸緩衝液。於一實施態樣中，該MnB二價rLP2086組成物進一步包括氯化鈉。於一實施態樣中，該MnB二價rLP2086組成物進一步包括磷酸鋁。於一實施態樣中，該MnB二價rLP2086組成物進一步包括聚山梨醇酯80、組胺酸緩衝液、氯化鈉和磷酸鋁。較佳地，該MnB二價rLP2086組成物為液態調製劑，其中該多肽係在10mM組胺酸緩衝液，pH 6.0、150mM氯化鈉(NaCl)加上0.5mg/mL磷酸鋁(AlPO4
)中被配製成120μg/mL/亞族且在0.5mL劑量中進一步包括0.018mg聚山梨醇酯80。
該MenACWY-TT組成物係指包括腦膜炎球菌血清群A、C、W-135和Y之純化之莢膜多糖的組成物，該純化之莢膜多糖各自獨立地分別以~3、~3、~1.5和~1.3之比例(TT對多糖)與TT軛合。具體而言，該組成物包括(c)腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)；(d)腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)；(e)腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)；(f)腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)。較佳地，該MenACWY-TT組成物係以凍乾粉末呈現。
MenAAH
-TT、MenCAH
-TT、MenW-TT和MenY-TT軛合物係透過下列步驟製備：製造多糖藥物中間體，製造TT藥物中間體，將多糖微流體化，多糖之衍生反應(僅用於MenAAH-TT和MenCAH-TT過程)，TT之額外純化及將個別多糖與TT軛合。
關於MenAAH
-TT軛合物，首先將MenA多糖微流體化以減低分子大小和黏度，然後經由以四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓(CDAP)氰基化來活化之。以己二酸二醯肼(ADH)進行經活化之MenA的衍生反應以形成MenAAH
。MenAAH
和破傷風類毒素(TT)係透過由碳二亞胺介導之縮合作用耦合(1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳二亞胺(EDAC)耦合技術)以形成MenAAH
-破傷風類毒素軛合物(MenAAH
-TT)。
關於MenCAH
-TT軛合物，首先將MenC多糖微流體化以減低分子大小和黏度，然後經由以CDAP氰基化來活化之。以己二酸二醯肼(ADH)進行經活化之MenC的衍生反應以形成MenCAH
。MenCAH
和TT係透過由碳二亞胺介導之縮合作用耦合(EDAC耦合技術)以形成MenCAH
破傷風類毒素(MenCAH
-TT)。
關於MenW-TT軛合物，首先將MenW多糖微流體化以減低分子大小和黏度，然後經由以CDAP氰基化來活化之。經活化之MenW與TT直接耦合以形成MenW-破傷風類毒素(MenW-TT)。
關於MenY-TT軛合物，首先將MenY多糖微流體化以減低分子大小和黏度，然後經由以CDAP氰基化來活化之。經活化之MenY與TT直接耦合以形成MenY-破傷風類毒素(MenY-TT)。
於另一態樣中，本發明者意料外地發現該源自至多二種腦膜炎球菌血清群B菌株之多肽抗原誘導針對多個腦膜炎球菌血清群B菌株之有效的廣泛保護性免疫反應。因此，於一實施態樣中，該組成物不進一步包括非源自腦膜炎球菌血清群B fHBP亞族A M98250771菌株及/或腦膜炎球菌血清群B fHBP亞族B CDC1573菌株之多肽。
於一實施態樣中，該組成物不進一步包括與SEQ ID NO：1之序列同一性小於100%之多肽。於另一實施態樣中，該組成物不進一步包括與SEQ ID NO：2之序列同一性小於100%之多肽。例如，該組成物不進一步包括與全長SEQ ID NO：1及/或SEQ ID NO：2之序列同一性小於100%之多肽。
於一實施態樣中，該組成物進一步包括聚山梨醇酯80、鋁、組胺酸和氯化鈉。於一實施態樣中，該組成物包括約60μg之第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)、約60μg之第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)、聚山梨醇酯80對各多肽之莫耳比為2.8、呈磷酸鋁形式之0.5mg鋁/ml、10mM組胺酸和150mM氯化鈉，其中該組成物之總體積較佳為約0.5ml。
於另一態樣中，該組成物包括約120μg之第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)、約120μg之第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)、聚山梨醇酯80對各多肽之莫耳比為2.8、呈磷酸鋁形式之0.5 mg鋁/ml、10mM組胺酸和150mM氯化鈉。
於另一態樣中，該組成物包括a)60μg之第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)；b)60μg之第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)；c)18μg之聚山梨醇酯80；d)250μg之鋁；e)780μg之組胺酸，和；f)4380μg之氯化鈉。
於一示例性之實施態樣中，該組成物包括約60μg之第一脂化多肽(其係由SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列組成)、約60μg之第二脂化多肽(其係由SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列組成)、聚山梨醇酯80對第一脂化多肽和第二脂化多肽之莫耳比為2.8、0.5mg/ml之磷酸鋁、10mM之組胺酸和150mM之氯化鈉，其中該組成物之總體積為約0.5ml。於一示例性實施態樣中，該組成物為無菌等張之緩衝之液體懸浮液。於該示例性實施態樣中，該組成物為pH6.0。於該示例性實施態樣中，該第一多肽和第二多肽被吸附在鋁上。
於一實施態樣中，該組成物包括其平均TT/多糖比為3之MenAAH
-TT軛合物；其平均TT/多糖比為3之MenCAH
-TT軛合物；其平均TT/多糖比為1.5之MenW-TT軛合物；和其平均TT/多糖比為1.3之MenY-TT軛合物。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括具有5mcg MenA多糖和~15mcg TT之MenAAH
-TT軛合物；具有5mcg MenC多糖和~15mcg TT之MenCAH
-TT軛合物；具有5mcg MenW多糖和~7.5mcg TT之MenW-TT軛合物；和具有5mcg MenY多糖和~6.5mcg TT之MenY-TT軛合物。該組成物可進一步包含Tris-HCl、蔗糖和氯化鈉。
於另一實施態樣中，該組成物包括MenAAH
-TT軛合物；MenCAH
-TT軛合物；MenW-TT軛合物；和MenY-TT軛合物，其包括MenA多糖；MenC多糖；MenW多糖；和MenY多糖和TT載體蛋白。該組成物可進一步包括蔗糖和托莫他尼(Trometanol)。例如，於一實施態樣中，該組成物包括10μg/mL MenA多糖；10μg/mL MenC多糖；10 μg/mL MenW多糖；和10μg/mL MenY多糖；88μg/mL TT載體蛋白；164mM蔗糖；和1.6mM托莫他尼。
於一實施態樣中，該組成物之總體積為約0.5ml。於一實施態樣中，該組成物之第一劑量之總體積為約0.5ml。“第一劑量”係指在第0天投予之組成物的劑量。“第二劑量”或“第三劑量”係指接續在第一劑量之後投予之組成物的劑量，彼之量可能或可能不與第一劑量相同。
於一態樣中，本發明關於從凍乾之MenACWY-TT組成物產生之液態免疫原性組成物，該凍乾之MenACWY-TT組成物已經以液態MnB二價rLP2086組成物重構。重構係指藉由加入液體稀釋劑將乾燥之凍乾組成物恢復成液體形式。於一較佳之實施態樣中，該液態MnB二價rLP2086組成物不隨該凍乾之MenACWY-TT組成物投予、不與該凍乾之MenACWY-TT組成物共同投予、不與該凍乾之MenACWY-TT組成物同時投予，其中該凍乾之MenACWY-TT組成物已經以非為該液態MnB二價rLP2086組成物之液體組成物重構。例如，於一較佳之實施態樣中，該凍乾之MenACWY-TT組成物並非以由氯化鈉和水組成之水性稀釋劑重構，且不隨該液態MnB二價rLP2086組成物投予、不與該液態MnB二價rLP2086組成物共同投予、不與該液態MnB二價rLP2086組成物同時投予。
相反地，於一較佳之實施態樣中，該凍乾之MenACWY-TT組成物係與MnB二價rLP2086組成物在一次投予(即單次投予)中投予人。所產生之單次投予(例如，該MenABCWY組成物)可能由來自第一容器之MnB二價rLP2086組成物與來自第二容器之凍乾之MenACWY-TT組成物混合造成。或者，單次投予MenABCWY組成物可由包含該MnB二價rLP2086組成物和凍乾之MenACWY-TT組成物的一個(單個)容器造成。用於疫苗或免疫原性組成物之遞送裝置為本技藝中已知。於一實施態樣中，該MenABCWY組成物係與下列群組之任一者伴隨投予：布洛芬(ibuprofen)、撲熱息痛(paracetamol)和阿莫西林(amoxicillin)。
對人投予第一劑量後，該組成物具有免疫原性。於一實施態樣中，該第一劑量之總體積為約0.5ml。
當在完全相同之條件下，在使用人類補體之血清殺菌分析中(hSBA)測量時，該在接受組成物之第一劑量後由該組成物誘導之血清免疫球蛋白的殺菌效價較該人接受第一劑量前之血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少1倍，較佳為高至少2倍。
該殺菌效價或殺菌免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B。於一較佳之實施態樣中，該殺菌效價或殺菌免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B fHBP亞族A菌株和針對腦膜炎球菌血清群B fHBP亞族B菌株。最佳地，該殺菌效價或殺菌免疫反應係至少針對腦膜炎球菌血清群B，fHBP亞族B，B01菌株。
於一實施態樣中，當在完全相同之條件下，在使用人類補體之血清殺菌分析中測量時，該在接受組成物之劑量後由組成物誘導之血清免疫球蛋白的殺菌效價較該人接受該劑量前之血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少1倍，諸如例如至少1.01倍、1.1倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍或16倍。
於一實施態樣中，該組成物為免疫原性組成物。於一實施態樣中，該組成物為用於人類之免疫原性組成物。於另一實施態樣中，該組成物為疫苗。“疫苗”係指包括抗原之組成物，該抗原含有至少一個誘導特異於該抗原之免疫反應的抗原決定部位。該疫苗可經由皮下、口、口鼻或鼻內投予途徑直接投予入個體。較佳地，該疫苗係經肌肉內途徑投予。於一實施態樣中，該組成物為人類疫苗。於一實施態樣中，該組成物為針對腦膜炎球菌之免疫原性組成物。
於一實施態樣中，該組成物為液態組成物。於一較佳之實施態樣中，該組成物為液態懸浮液組成物。於另一較佳之實施態樣中，該組成物未經凍乾。 第一多肽；MNB RLP2086 亞族A(A05)蛋白
於一實施態樣中，該組成物包括具有SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的第一多肽。該多肽為來自腦膜炎球菌菌株M98250771之經修飾的因子H結合蛋白(fHBP)。fHBP之描述揭示於WO2012032489和美國專利刊物US 2012/0093852(該二篇之全部內容各自以引用方式併入本文)中。該多肽之N端被三個主要脂肪酸C16：0、C16：1和C18：1脂化，該三個主要脂肪酸C16：0、C16：1和C18：1共價連接在該多肽的三個位置。第一多肽共包含258個胺基酸。
MnB rLP2086 A05蛋白之代表性一級結構呈現於第4圖中。該蛋白質之一級結構說明於第4圖中，除N端之半胱胺酸和甘油基部分外(用全化學式說明)，所有胺基酸係使用單字母符號。該結構包括其中該N端半胱胺酸殘基被脂化之蛋白質序列的一級結構。在該蛋白質N端之N端半胱胺酸殘基的胺基團係連接至形成醯胺鍵聯之脂肪酸(R1)且該半胱胺醯巰基係連接含有二個酯鍵合之脂肪酸(R2)的甘油部分。該R1之結構被推定為十六烷酸(C16：0)且該R2之結構係根據MnB rLP2086同種型變化。
相較於該來自腦膜炎球菌菌株M98250771之對應的野生型序列，該第一多肽包括二個被引入該多肽之N端區的修飾。在第二位置中所添加之甘胺酸為引入選殖位點的結果。第二修飾包括刪除四個胺基酸。因此，於一實施態樣中，第一多肽在N端包括C-G-S-S序列(SEQ ID NO：3)。參見SEQ ID NO：1，前四個胺基酸殘基。
介於第一多肽序列和野生型奈瑟氏球菌序列之間的N端差異顯示於下。因此，於一實施態樣中，第一多肽至少包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的前2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13個或更多個胺基酸殘基。較佳地，第一多肽包括SEQ ID NO：1之至少前4個胺基酸殘基，更佳為至少前6個胺基酸殘基，且最佳為至少前8個胺基酸殘基。
重組和奈瑟氏球菌亞族A LP2086多肽之預測的N端序列之比較
於一實施態樣中，第一多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列。於一實施態樣中，第一多肽共具有258個胺基酸。於一實施態樣中，第一多肽不包括與SEQ ID NO：1之序列同一性小於100%之胺基酸序列。於另一實施態樣中，第一多肽係由SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列組成。於另一實施態樣中，第一多肽包括胺基酸序列KDN。參見，例如SEQ ID NO：1之胺基酸殘基73至75。於另一實施態樣中，第一多肽之多肽N端包括SEQ ID NO：3所示之胺基酸序列。於另一實施態樣中，第一多肽之多肽N端包括SEQ ID NO：4所示之胺基酸序列。
於較佳之實施態樣中，使用本技藝已知之標準技術可將第一多肽輕易地表現在重組宿主細胞中。於另一較佳之實施態樣中，第一多肽包抬SEQ ID NO：1之N及/或C結構域上之殺菌抗原決定部位。於一實施態樣中，第一多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的至少前4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100個胺基酸殘基。較佳地，第一多肽包括SEQ ID NO：1之至少前2個胺基酸殘基，更佳為至少前4個胺基酸殘基，最佳為至少前8個胺基酸殘基。
於另一實施態樣中，第一多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的至少後4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100個胺基酸殘基。
於一實施態樣中，該組成物包括約30μg/ml之第一多肽，該第一多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括約60μg之第一多肽，該第一多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括約60μg之第一多肽，該第一多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列，其中該組成物之總體積較佳為0.5ml。於另一實施態樣中，該組成物包括約120μg/ml之第一多肽，該第一多肽包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列。 第二多肽；MnB rLP2086亞族B(B01)蛋白
於一實施態樣中，該組成物包括具有SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的第二多肽。該多肽為來自腦膜炎球菌菌株CDC1573之因子H結合蛋白(fHBP)。fHBP之描述揭示於WO2012032489和美國專利刊物US 2012/0093852 (該二篇之全部內容各自以引用方式併入本文)中。該多肽之N端被三個主要脂肪酸C16：0、C16：1和C18：1脂化，該三個主要脂肪酸C16：0、C16：1和C18：1係共價連接在該多肽的三個位置。第二多肽共包括261個胺基酸。
MnB rLP2086 B01蛋白之代表性一級結構呈現於第5圖中。該蛋白質之一級結構說明於第5圖中，除N端半胱胺酸和甘油基部分外(使用全化學式說明)，所有胺基酸係使用單字母符號。該結構包括其中該N端半胱胺酸殘基被脂化之蛋白質序列的一級結構。在該蛋白質N端之N端半胱胺酸殘基的胺基團連接形成醯胺鍵之脂肪酸(R1)且該半胱胺醯巰基連接含有二個酯鍵合之脂肪酸(R2)的甘油部分。該R1之結構被推定為十六烷酸(C16：0)且該R2之結構係根據該rLP2086同種型變化。
相較於該來自腦膜炎球菌菌株CDC-1573之對應的野生型序列，第二多肽包括一個被引入該rLP2086亞族B蛋白之N端區的修飾。該第二位置中添之甘胺酸為引入選殖位點的結果。
與原始奈瑟氏球菌序列之N端差異顯示於下。
重組和奈瑟氏球菌亞族B LP2086蛋白之預測的N端序列之比較
於一實施態樣中，第二多肽在N端包括C-G-S-S序列(SEQ ID NO：3)。參見SEQ ID NO：2之前四種胺基酸殘基。
於一實施態樣中，第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。於一實施態樣中，第二多肽共具有261個胺基酸。於一實施態樣中，第二多肽係由SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列組成。於另一實施態樣中，第二多肽不進一步包括與SEQ ID NO：2之序列同一性小於100%之多肽。於較佳之實施態樣中，第一多肽和第二多肽在各別多肽之N端包括C-G-S-S序列(SEQ ID NO：3)。
於一較佳之實施態樣中，使用本技藝已知之標準技術可將第二多肽輕易地表現在重組宿主細胞中。於另一較佳之實施態樣中，第二多肽包括在SEQ ID NO：2之N及/或C結構域上之殺菌抗原決定部位。於一實施態樣中，第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的至少前2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100個胺基酸殘基。較佳地，第二多肽包括SEQ ID NO：2之至少前2個胺基酸殘基，更佳為至少前4個胺基酸殘基，且最佳為至少前8個胺基酸殘基。
於另一實施態樣中，第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的至少後4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100個胺基酸殘基。
於一實施態樣中，該組成物包括約30μg/ml之第二多肽，該第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括約60μg之第二多肽，該第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括約60μg之第二多肽，該第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列，其中該組成物之總體積較佳為0.5ml。於另一實施態樣中，該組成物包括約120μg/ml之第二多肽，該第二多肽包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 糖類
本專利說明書之全文中術語“糖”可表明多糖或寡糖且包括此二者。多糖係從細菌中分離出或從細菌中分離出並藉由已知方法將縮小至一定程度，且視需要地微流體化。多糖可縮小以降低多糖樣品之黏度及/或改善軛合產物之可過濾性。寡糖具有小數目之重複單元(通常為5至30個重複單元)且通常為水解之多糖。
每個腦膜炎球菌莢膜糖可與獨立選自由TT、DT、CRM197、TT之片段C和蛋白D組成之群組的載體蛋白軛合。雖然一或多個腦膜炎球菌莢膜糖可與彼此不同之載體蛋白軛合，於一實施態樣中，它們均與相同之載體蛋白軛合。例如，它們可全部與選自由TT、DT、CRM197、TT之片段C和蛋白D組成之群組的相同載體蛋白軛合。在此背景下，CRM197和DT可被認為是相同之載體蛋白，因為它們僅有一個胺基酸不同。於較佳之實施態樣中，所有存在之腦膜炎球菌莢膜糖與TT軛合。
若組成物中之二或多種糖的蛋白質載體相同，則該糖可與誤蛋白質載體之相同分子軛合(載體分子具有2種以上之不同糖與其軛合)[參見，例如WO 04/083251；例如單一載體蛋白可與MenA和MenC；MenA和MenW；MenA和MenY；MenC和MenW；MenC和MenY；Men W和MenY；MenA、MenC和MenW；MenA、MenC和MenY；MenA、MenW和MenY；MenC、MenW和MenY；MenA、MenC、MenW和MenY軛合。或者，該糖類可各自分別與蛋白質載體之不同分子軛合(各蛋白質載體分子僅具有一種類型之糖與其軛合)。
於一實施態樣中，至少2種不同之糖軛合物分別軛合至相同類型之載體蛋白，其中一或多種糖係經由蛋白質載體上之第一型化學基團與載體蛋白軛合且一或多種糖係經由蛋白質載體上之第二(不同)型化學基團與載體蛋白軛合。
於一實施態樣中，該2種軛合物牽涉相同糖與相同載體連接，但藉由不同之軛合化學。於替代之實施態樣中，2種不同之糖與蛋白質載體上之不同基團軛合。
“分別與相同類型之載體蛋白軛合”意指該糖類個別與相同載體軛合(例如，MenA係透過破傷風類毒素上之胺基與破傷風類毒素軛合，而MenC係透過破傷風類毒素之不同分子上的羧酸基團與破傷風類毒素軛合)。
該莢膜糖可與獨立地選自由下列組成之群組的相同載體蛋白軛合：TT、DT、CRM197、TT之片段C和蛋白D。可用於本發明之軛合物中的蛋白質載體之更完整列表呈現於下。在此背景下，CRM197和DT可被視為是相同的載體蛋白，因為它們僅有一個胺基酸不同。於一實施態樣中，所有存在之莢膜糖均與TT軛合。
該糖類可包括下列群組中之任一者：腦膜炎球菌血清群A莢膜糖(的MenA)、腦膜炎球菌血清群C莢膜糖(MenC)、腦膜炎球菌血清群Y莢膜糖(MenY)和腦膜炎球菌血清群W莢膜糖(MenW)或彼等之任何組合。
存在於蛋白質載體上之第一和第二化學基團彼此不同且理想上為可輕易地用於軛合目的之天然化學基團。該化學基團可獨立選自由下列組成之群組：羧基、胺基、巰基、羥基、咪唑基、胍基和吲哚基。於一實施態樣中，該第一化學基團為羧基且該第二化學基團為胺基，或者反之亦然。下文中將更詳細地解釋這些基團。
於一特定之實施態樣中，該免疫原性組成物包含至少2種不同之腦膜炎球菌莢膜糖，其中一或多種莢膜糖係選自由MenA和MenC組成之第一組(該一或多種莢膜糖係經由蛋白質載體上之第一型化學基團(例如羧基)與載體蛋白軛合)，而一或多種不同之糖係選自由MenC、MenY和MenW組成之第二組糖(該一或多種糖係經由蛋白質載體上之第二型化學基團(例如胺基)與載體蛋白軛合)。
於進一步之實施態樣中，本發明之免疫原性組成物包含經由第一類型化學基團(例如羧基)軛合之MenA和經由第二類型化學基團(例如胺基)軛合之MenC。
於另一實施態樣中，該免疫原性組成物包含經由第一類型化學基團(例如羧基)軛合之MenC和經由第二類型化學基團(例如胺基)軛合之MenY。
於另一實施態樣中，該免疫原性組成物包含經由第一類型化學基團(例如羧基)軛合之MenA和經由第二類型化學基團(例如胺基)軛合之MenC、MenY和MenW。
於另一實施態樣中，該免疫原性組成物包含經由第一類型化學基團(例如羧基)軛合之MenA和MenC及經由第二類型化學基團(例如胺基)軛合之MenY和MenW。
包含在本發明之醫藥(免疫原性)組成物中之本發明的糖類與載體蛋白軛合，諸如破傷風類毒素(TT)、破傷風類毒素片段C、破傷風毒素之無毒性突變體[注意，所有該等TT變體在本發明之目的方面均被認為是相同類型之載體蛋白]、白喉毒素(DT)、CRM197、白喉毒素之其他無毒性突變體[諸如CRM176、CRM197、CRM228、CRM45 (Uchida et al J. Biol. Chem. 218; 3838-3844, 1973)；CRM 9、CRM 45、CRM102、CRM 103和CRM107及其他由Nicholls和Youle 描述於Genetically Engineered Toxins, Ed: Frankel, Maecel Dekker Inc, 1992；US 4709017或US 4950740中揭示之缺失或Glu-148突變成Asp、Gln或Ser及/或Ala 158 突變成Gly及其他突變；US 5917017或US 6455673中揭示之至少一或多個殘基Lys 516、Lys 526、Phe 530及/或Lys 534之突變和其他突變；或US 5843711中揭示之片段](注意，所有該等DT變體在本發明之目的方面均被認為是相同類型之載體蛋白)、肺炎球菌溶血素(Kuo et al(1995)Infect Immun 63; 2706-13)、OMPC(腦膜炎球菌外膜蛋白-通常從腦膜炎球菌血清群B萃取-EP0372501)、合成肽(EP0378881、EP0427347)、熱休克蛋白(WO 93/17712、WO 94/03208)、百日咳蛋白(WO 98/58668、EP0471177)、細胞因子、淋巴因子、生長因子或激素(WO 91/01146)、包含多個來自各種源自病原體之抗原的人CD4+T細胞抗原決定部位之人工蛋白質(Falugi et al(2001) Eur J Immunol 31；3816-3824)，諸如N19蛋白(Baraldoi et al(2004)Infect Immun 72; 4884-7)、肺炎球菌表面蛋白PspA(WO 02/091998)、鐵攝取蛋白(WO 01/72337)、艱難梭菌之毒素A或B(WO 00/61761)或蛋白D(EP594610和WO 00/56360)。
於一實施態樣中，本發明之免疫原性組成物在其中所含有之至少二、三、四種或每種糖中使用相同類型之載體蛋白(各自獨立地)。
於一實施態樣中，本發明之免疫原性組成物包含與選自由下列組成之群組的載體蛋白軛合之腦膜炎球菌糖：TT、DT、CRM197、TT之片段C和蛋白D。
本發明之免疫原性組成物可選擇地包含至少一種腦膜炎球菌糖(例如MenA；MenC；MenW；MenY；MenA和MenC；MenA和MenW；MenA和MenY；MenC和Men W；Men C和MenY；Men W和MenY；MenA、MenC和MenW；MenA、MenC和MenY；MenA、MenW和MenY；MenC、MenW和MenY或MenA、MenC、MenW和MenY)軛合物，其中Men糖對載體蛋白之比係在1：5至5：1之間、在1：2至5：1之間、在1：0.5至1：2.5之間，或在1：1.25至1：2.5之間(w/w)。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括MenA、MenC、MenW和MenY，其各自分別以約3、約3、約1.5和約1.3之比例(類毒素對多糖)與破傷風類毒素軛合。
軛合物中糖對載體蛋白之比(w/w)可使用經滅菌之軛合物測定。蛋白質之量係使用Lowry分析(例如Lowry et al(1951)J. Biol. Chem. 193, 265-275或Peterson et al Analytical Biochemistry 100, 201-220(1979))測定，而糖之量係使用用於MenA之ICP-OES(電感耦合電漿體-光學發射光譜法(inductively coupled plasma-optical emission spectroscopy))、用於MenC之DMAP及用於MenW和MenY之間苯二酚分析(Monsigny et al(1988)Anal. Biochem. 175, 525-530)測定。
於一實施態樣中，本發明之免疫原性組成物包含腦膜炎球菌糖軛合物，其中該腦膜炎球菌糖經由連接子(例如雙官能連接子)與載體蛋白軛合。該連接子可選擇地為異雙官能或同雙官能的，其具有例如反應性胺基和反應性羧酸基、二個反應性胺基或二個反應性羧酸基。該連接子具有，例如4至20、4至12、5至10個碳原子。一種可能之連接子為ADH。其他連接子包括B-丙醯胺基(WO 00/10599)、硝苯基-乙胺(Gever et al(1979)Med. Microbiol. Immunol. 165; 171-288)、鹵烷基鹵化物(US4057685)、糖苷鍵(US4673574、US4808700)、己二胺和6-胺基己酸(US4459286)。
存在於本發明之免疫原性組成物中之糖軛合物可藉由任何已知之耦合技術製備。該軛合方法可依賴以四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓(CDAP)活化糖以形成氰酸酯。該經活化之糖因此可直接或經由間隔子(連接子)基團與載體蛋白上之胺基耦合。例如，該間隔子可為胱胺或半胱胺以產生硫醇化之多糖，該硫醇化之多糖可經由硫醚鍵與載體耦合，該硫醚鍵係在與經馬來醯亞胺活化之載體蛋白(例如使用GMBS)反應或與全乙醯化之載體蛋白(例如使用碘乙醯亞胺或N-琥珀醯亞胺溴乙酸酯溴乙酸酯)反應後獲得。可選擇地，該氰酸酯(可選擇地藉由CDAP化學製備)與己二胺或ADH耦合，且該胺基衍生之糖使用碳二亞胺(例如EDAC或EDC)化學，經由該蛋白質載體上之羧基與載體蛋白軛合。該等軛合物描述於PCT已發表之申請案WO 93/15760(Uniformed Services University)和WO 95/08348及WO 96/29094中。
其他合適之技術使用卡比尼定(carbiinide)、醯肼、活性酯、降冰片烷(norborane)、對硝基苯甲酸、N-羥基琥珀醯亞胺、S-NHS、EDC、TSTU。WO 98/42721中描述了多種。軛合可能涉及羰基連接子，該羰基連接子可藉由下述方法形成：將糖之游離羥基與CDI反應(Bethell et al J. Biol. Chem. 1979, 254; 2572-4, Hearn et al J. Chromatogr. 1981. 218; 509-18)，然後再與蛋白質反應以形成胺基甲酸酯鍵。此可能涉及將異頭端還原成一級羥基，視需要地以CDI進行該一級羥基之一級羥基保護/去保護反應以形成CDI胺基甲酸酯中間體，並使CDI胺基甲酸酯中間體與蛋白質上之胺基耦合。
該軛合物亦可藉由如US 4365170(Jennings)和US 4673574(Anderson)中描述之直接還原胺化法製備。其他方法描述於EP-0-161-188、EP-208375和EP-0-477508中。
另一種方法涉及藉由碳二亞胺縮合(Chu C. et al Infect. Immunity, 1983 245 256)(例如使用EDAC)將經溴化氰(或CDAP)活化的糖與蛋白質載體耦合，該經活化之糖係經己二酸醯肼(ADH)衍生。
於一實施態樣中，糖上之羥基(可選擇地為活化之羥基，例如藉由氰酸酯活化之羥基)係直接或間接(透過連接子)與蛋白質上之胺基或羧基連接。當存有連接子時，糖上之羥基可選擇地與連接子上之胺基連接，例如藉由使用CDAP軛合。連接子(例如ADH)中之其他胺基可例如藉由使用碳二亞胺化學(例如藉由使用EDAC)與蛋白質上之羧酸基軛合。於一實施態樣中，腦膜炎球菌莢膜糖(或一般糖)係在連接子與載體蛋白軛合前先與連接子軛合。或者，該連接子可先與載體軛合再與糖軛合。
通常可使用蛋白質載體上之下列類型之化學基團來用於軛合： A)羧基(例如經由天門冬胺酸或麩胺酸)。於一實施態樣中，該基團係直接連接至糖上之胺基或藉由碳二亞胺化學(例如藉由EDAC)連接至連接子上之胺基。 B)胺基(例如經由離胺酸)。於一實施態樣中，該基團係直接連接糖上之羧基或藉由碳二亞胺化學(例如藉由EDAC)連接至連接子上之羧基。於另一實施態樣中，該基團係直接連接至糖上之以CDAP或CNBr活化之羥基或連接至連接子上之該等基團；連接至具有醛基之糖類或連接子；連接子具有琥珀醯亞胺酯基團之糖或連接子。 C)巰基(例如經由半胱胺酸)。於一實施態樣中，該基團係藉由馬來醯亞胺化學連接至溴或氯乙醯化糖或連接子。於一實施態樣中，該基團係經雙重氮聯苯胺活化/修飾。 D)羥基(例如經由酪胺酸)。於一實施態樣中，該基團係經雙重氮聯苯胺活化/修飾。 E)咪唑基(例如經由組胺酸)。於一實施態樣中，該基團係經雙重氮聯苯胺活化/修飾。 F)胍基(例如經由精胺酸)。 G)吲哚基(例如經由色胺酸)。
在糖上，通常可使用下列基團來用於耦合：OH、COOH或NH2。醛基可在本技藝中已知之不同處理後產生，諸如：高碘酸鹽、酸水解、過氧化氫，等直接耦合方法：
糖-OH+CNBr或CDAP----＞氰酸酯+NH2-Prot---＞軛合物 糖-醛+NH2-Prot----＞Schiff鹼+NaCNBH3----＞軛合物 糖-COOH+NH2-Prot+EDAC----＞軛合物 糖-NH2+COOH-Prot+EDAC----＞軛合物 經由間隔子(連接子)方法間接耦合： 糖-OH+CNBr或CDAP--＞氰酸酯+NH2---NH2---＞糖----NH2+COOH-Prot+EDAC----＞軛合物 糖-OH+CNBr或CDAP----＞氰酸酯+NH2----SH----＞糖----SH+SH-Prot(具有暴露之半胱胺酸的天然蛋白或藉由例如SPDP修飾該蛋白質之胺基後取得)-----＞糖-S-S-Prot 糖-OH+CNBr或CDAP---＞氰酸酯+NH2---SH------＞糖----SH+馬來醯亞胺-Prot(修飾胺基)----＞軛合物 糖-COOH+EDAC+NH2----NH2---＞糖------NH2+EDAC +COOH-Prot---＞軛合物 糖-COOH+EDAC+NH2-----SH---＞糖-----SH+SH-Prot (具有暴露之半胱胺酸的天然蛋白或以例如SPDP修飾該蛋白質之胺基後取得)----＞糖-S-S-Prot 糖-COOH+EDAC+NH2---SH----＞糖----SH+馬來醯亞胺-Prot(修飾胺基)----＞軛合物 糖-醛+NH2----NH2---＞糖---NH2+EDAC+COOH-Prot---＞軛合物 注意：可使用任何合適之碳二亞胺代替上述之EDAC。
總結，通常用於與糖耦合之蛋白質載體化學基團的類型為胺基(例如在離胺酸殘基上)、COOH基團(例如在天門冬胺酸和麩胺酸殘基上)和SH基團(若可接近的話)(例如在半胱胺酸殘基上)。
於一實施態樣中，至少一種腦膜炎球菌莢膜糖(或一般糖)係直接與載體蛋白軛合；可選擇地，Men W及/或MenY及/或MenC糖直接與載體蛋白軛合。例如MenW；MenY；MenC；MenW和MenY；MenW和MenC；MenY和MenC；或MenW、MenY和MenC直接與載體蛋白連接。可選擇地，至少一種該腦膜炎球菌莢膜糖係藉由CDAP直接軛合。例如MenW；MenY；MenC；MenW和MenY；MenW和MenC；MenY和MenC；或MenW、MenY和MenC係直接藉由CDAP與載體蛋白連接(參見WO 95/08348和WO 96/29094)。於一實施態樣中，所有腦膜炎球菌莢膜糖均與破傷風類毒素軛合。
於一實施態樣中，Men W及/或Y糖對載體蛋白之比係在1：0.5至1：2(w/w)之間及/或MenC糖對載體蛋白之比係在1：0.5至1：4或1：0.5至1：1.5(w/w)之間，特別當這些糖係可選擇地使用CDAP直接與蛋白質連接時。
於一實施態樣中，至少一種腦膜炎球菌莢膜糖(或一般糖類)係經由連接子(例如雙官能連接子)與載體蛋白軛合。該連接子可選擇地為異雙官能或同雙官能的，其具有例如反應性胺基和反應性羧酸基、二個反應性胺基或二個反應性羧酸基。該連接子具有，例如4至20、4至12、5至10個碳原子。一種可能之連接子為ADH。
於一實施態樣中，MenA；MenC；或MenA和MenC係經由連接子(例如破傷風類毒素)與載體蛋白軛合。
於一實施態樣中，至少一種腦膜炎球菌糖係使用CDAP和EDAC經由連接子與載體蛋白軛合。例如，MenA；MenC；或MenA和MenC係如上述使用CDAP和EDAC經由連接子(例如那些在其端點具有二個肼基者，諸如ADH)與載體蛋白軛合。例如，CDAP係用於將糖與連接子軛合，而EDAC係用於將連接子與蛋白質軛合。在MenA；MenC；或MenA和MenC方面，經由連接子之軛合可選擇地導致糖對載體蛋白之比介於1：0.5至1：6之間； 1：1至1：5之間或1：2至1：4之間。
於一實施態樣中，當存有MenA莢膜糖時，該MenA莢膜糖至少部分被O-乙醯化從而使得至少50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元在至少一個位置被O-乙醯化。O-乙醯化至少出現在例如至少50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元之位置O-3處。
於一實施態樣中，當存有MenC莢膜糖時，該MenC莢膜糖至少部分被O-乙醯化從而使得至少30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之(α2→9)-連接之NeuNAc重複單元在至少一或二個位置處被O-乙醯化。O-乙醯化存在於例如至少30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元的位置O-7及/或O-8。
於一實施態樣中，當存有MenW莢膜糖時，該MenW莢膜糖至少部分被O-乙醯化從而使得至少30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元在至少一或二個位置處被O-乙醯化。O-乙醯化出現在例如至少30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元的位置O-7及/或O-9。
於一實施態樣中，當存有MenY莢膜糖時，該MenY莢膜糖至少部分被O-乙醯化從而使得至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元在至少一或二個位置處被O-乙醯化。O-乙醯化出現在例如至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或98%之重複單元的位置7及/或9。
O-乙醯化之百分比係指含有O-乙醯化之重複單元的百分比。此可在軛合之前及/或軛合之後在糖中測量。
於本發明之免疫原性組成物之一實施態樣中，存在之糖或存在之各腦膜炎球菌莢膜糖係與TT軛合。於進一步之實施態樣中，各腦膜炎球菌莢膜糖分別與單獨之載體蛋白軛合。於進一步之實施態樣中，各腦膜炎球菌莢膜糖軛合物之糖類：載體比為1：5至5：1或1：1至1：4(w/w)。於進一步之實施態樣中，至少一、二或三種腦膜炎球菌莢膜糖軛合物係直接與載體蛋白軛合。於進一步之實施態樣中，MenW及/或MenY、MenW及/或MenC、MenY及/或MenC或MenW和MenC及MenY係直接與載體蛋白軛合。於進一步之實施態樣中，至少一、二或三種腦膜炎球菌糖軛合物係直接藉由CDAP化學軛合。於進一步之實施態樣中，MenW及/或Y糖對載體蛋白之比係在1：0.5至1：2(w/w)之間。於進一步之實施態樣中，MenC糖對載體蛋白之比例在1：0.5至1：2(w/w)之間。於進一步之實施態樣中，至少一、二或三種腦膜炎球菌莢膜糖經由連接子(其可為是雙官能的，諸如具有二個反應性胺基(諸如ADH)或二個反應性羧基，或一端為反應性胺基，另一端為反應性羧基)與載體蛋白軛合。該連接子可具有4至12個碳原子。於進一步之實施態樣中，該經由連接子軛合之腦膜炎球菌莢膜糖或各腦膜炎球菌莢膜糖係藉由CDAP化學與該連接子軛合。於進一步之實施態樣中，該載體蛋白係使用碳二亞胺化學與該連接子軛合，例如使用EDAC。於進一步之實施態樣中，該腦膜炎球菌莢膜糖或各腦膜炎球菌莢膜糖係在載體蛋白與連接子軛合之前先與該連接子軛合。於進一步之實施態樣中，MenA係經由連接子與載體蛋白軛合(MenA糖對載體蛋白之比例可在1：2至1：5(w/w)之間)。於進一步之實施態樣中，MenC係經由連接子與載體蛋白軛合(MenC糖對載體蛋白之比例可在1：2至1：5(w/w)之間)。
藉由使用天然或略微縮小之多糖軛合物，可實現下列一或多項利益：1)可通過0.2微米濾器過濾之具有高免疫原性之軛合物；2)免疫記憶可被增強(如實施例三中)；3)軛合物中多糖對蛋白質之比例改變，從而使軛合物中之多糖對蛋白質之比例(w/w)可能增加(此可導致載體抑制作用降低)；4)易於水解之免疫原性軛合物(諸如MenA軛合物)可藉由使用較大之多糖進行軛合來穩定。使用較大之多糖可導致與軛合載體更多之交聯並可減少游離糖從軛合物釋出。現有技術中描述之結合型疫苗傾向在軛合之前將多糖解聚以改善軛合。保留較大尺寸之糖的腦膜炎球菌(或糖)軛合物疫苗可提供針對腦膜炎球菌病之良好免疫反應。
因此本發明之免疫原性組成物可包含一或多種糖軛合物，其中各糖在軛合之前的平均大小高於50kDa、75kDa、100kDa、110kDa、120kDa或130kDa。於一實施態樣中，軛合後之軛合物應可輕易地通過0.2微米過濾器過濾，從而在過濾後與過濾前樣品相比較，可取得超過50、60、70、80、90或95%之產率。
尤其是，本發明之免疫原性組成物包含與載體蛋白軛合之來自血清群A、C、W和Y之至少一、二、三或四者的腦膜炎球菌莢膜糖，其中至少一、二、三、或四個、或各腦膜炎球菌莢膜糖之平均大小(重均分子量；Mw)高於50kDa、60kDa、75kDa、100kDa、110kDa、120kDa或130kDa。
於一較佳之實施態樣中，該MenAAH
-TT軛合物之平均Mw為至少250kDa、260kDa、270kDa、280kDa或290kDa，最佳為約300kDa，且至多為350kDa或330kDa。於一較佳之實施態樣中，MenCAH
-TT軛合物之平均Mw為至少150kDa、160kDa、170kDa、180kDa或190kDa，最佳為約200kDa，且至多為250kDa或230kDa。於一較佳之實施態樣中，該MenW-TT軛合物之平均Mw為至少240kDa、250kDa、260kDa或270kDa，最佳為約280kDa，且至多為330kDa或310kDa。於一較佳之實施態樣中，該MenY-TT軛合物之平均Mw為至少220kDa、230kDa、240kDa或250kDa，最佳為約270kDa且至多320kDa或300kDa。
包含與載體蛋白軛合之來自血清群A、C、W和Y之至少一、二、三或四者的腦膜炎球菌莢膜糖，其中至少一、二、三、或四個、或各腦膜炎球菌莢膜糖為天然糖或相對於該天然糖之重均分子量尺寸縮小高達x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9或x10倍。
在本發明之目的方面，“天然多糖”係指未經歷處理過程的糖，該過程之目的係減小該糖之大小。在正常純化程序中，多糖之尺寸可能會略微減小。該等糖仍然為天然的。僅若該多糖已經受尺寸縮小技術，多糖才不會被認為是天然的。
在本發明之目的方面，“尺寸縮小達到x2倍”意指該糖經受意圖縮小該糖尺寸，但意圖保留該天然多糖之一半以上之尺寸的過程。x3、x4等係以相同之方式解釋，即，該糖經受意圖縮小該糖尺寸，但意圖保留超過該天然多糖尺寸之三分之一以上，四分之一以上，等之過程。
於本發明之一態樣中，該免疫原性組成物包含與載體蛋白軛合之來自血清群A、C、W和Y之至少一、二、三或四者的腦膜炎球菌莢膜糖，其中至少一、二、三、或四種、或各腦膜炎球菌莢膜糖為天然多糖。
於本發明之一態樣中，該免疫原性組成物包含與載體蛋白軛合之來自血清群A、C、W和Y之至少一、二、三或四者的腦膜炎球菌莢膜糖，其中至少一、二、三、或四種、或各腦膜炎球菌莢膜糖之尺寸縮小高達x1.5、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9或x10倍。
本發明之免疫原性組成物可選擇地包含下列群組之軛合物：腦膜炎球菌血清群C莢膜糖(MenC)、血清群A莢膜糖(MenA)、血清群W135莢膜糖(MenW)、血清群Y莢膜糖(MenY)、血清群C和Y莢膜糖(MenCY)、血清群C和A莢膜糖(MenAC)、血清群C和W莢膜糖(MenCW)、血清群A和Y莢膜糖(MenAY)、血清群A和W莢膜糖(MenAW)、血清群W和Y莢膜糖(Men WY)、血清群A、C和W莢膜糖(MenACW)、血清群A、C和Y莢膜糖(MenACY)；血清群A、W135和Y莢膜糖(MenAWY)、血清群C、W135和Y莢膜糖(MenCWY)；或血清群A、C、W135和Y莢膜糖(MenACWY)。此為本文中提及之“一、二、三或四種”或“至少一種”腦膜炎球菌血清群A、C、W和Y之定義。
於一實施態樣中，如藉由MALLS所測定者，至少一、二、三、四種或各腦膜炎球菌糖之平均大小係在50kDa至1500kDa之間、50kDa至500kDa之間、50kDa至300kDa之間、101kDa至1500kDa之間、101kDa至500kDa之間、101kDa至300kDa之間。
於一實施態樣中，當存有MenA糖時，其分子量為50至500kDa、50至100kDa、100至500kDa、55至90kDa、60至70kDa、或70至80kDa、或60至80kDa。
於一實施態樣中，當存有MenC糖時，其分子量為100至200kDa、50至100kDa、100至150kDa、101至130kDa、150至210kDa、或180至210kDa。
於一實施態樣中，當存有MenY糖時，其分子量為60至190kDa、70至180kDa、80至170kDa、90至160kDa、100至150kDa、或110至140kDa、50至100kDa、100至140kDa、140至170kDa或150至160kDa。
於一實施態樣中，當存有MenW糖時，其分子量為60至190kDa、70至180kDa、80至170kDa、90至160kDa、100至150kDa、110至140kDa、50至100kDa、或120至140kDa。
本文之糖的分子量或平均分子量係是指在軛合之前測量遼糖的重均分子量(Mw)且係藉由MALLS測量。
MALLS技術為本技藝所熟知且通常係實施例2中之描述進行。為了藉由MALLS分析腦膜炎球菌糖，可組合使用二個管柱(TSKG6000和5000PWxl)並將糖在水中洗提。使用光散射檢測器(例如配備488nm之10mW氬雷射光的Wyatt Dawn DSP)和光干涉折射計(inferometric refractometer)(例如配備P100細胞和498nm紅色濾光器之Wyatt Otilab DSP)來檢測糖類。
於一實施態樣中，腦膜炎球菌糖為天然多糖或已在正常萃取過程期間減小尺寸之天然多糖。
於一實施態樣中，腦膜炎球菌糖係藉由機械裂解(例如微流體化或音波處理)縮小尺寸。微流體化和音波處理具有縮小較大之天然多糖的尺寸至足以提供可過濾之軛合物(例如透過0.2微米過濾器)的益處。尺寸縮小不超過x20、x10、x8、x6、x5、x4、x3、x2、或x1.5倍。
於一實施態樣中，該免疫原性組成物包含由天然多糖及尺寸縮小不超過x20倍之糖的混合物製成之腦膜炎球菌軛合物。例如，來自MenC及/或MenA之糖為天然的。例如，來自MenY及/或MenW之糖類的尺寸縮小不超過x20、x10、x8、x6、x5、x4、x3或x2倍。例如免疫原性組成物含有從MenY及/或MenW及/或MenC及/或MenA製成之軛合物，該MenY及/或MenW及/或MenC及/或MenA之糖類的尺寸縮小不超過x10倍及/或係經微流體化。例如，免疫原性組成物包含從天然MenA及/或MenC及/或MenW及/或MenY製成之軛合物。例如，免疫原性組成物包含從天然MenC製成之軛合物。例如，免疫原性組成物包含從天然MenC和MenA製成之軛合物，該MenC和MenA之糖類尺寸縮小不超過x10倍及/或係經微流體化。例如，免疫原性組成物包含從天然MenC和MenY製成之軛合物，該MenC和MenY之糖類尺寸縮小不超過x10倍及/或係經微流體化。
於一實施態樣中，該糖類之多分散係數為1至1.5、1至1.3、1至1.2 、1至1.1或1至1.05且在與載體蛋白軛合之後，該軛合物之多分散係數為1.0至2.5、1.0至2.0、1.0至1.5、1.0至1.2、1.5至2.5、1.7至2.2或1.5至2.0。所有多分散係數測量均藉由MALLS進行。
糖類係視需要地從細菌分離出之多糖尺寸縮小高達1.5倍、2倍、4倍、6倍、8倍、10倍、12倍、14倍、16倍、18倍或20倍。
於一實施態樣中，各腦膜炎球菌糖為天然多糖，或尺寸縮小不超過x10倍。於進一步之實施態樣中，各腦膜炎球菌莢膜糖為天然多糖。於進一步之實施態樣中，至少一、二、三或四種腦膜炎球菌莢膜糖係藉由微流體化縮小尺寸。於進一步之實施態樣中，各腦膜炎球菌莢膜糖之尺寸縮小不超過x10倍。於進一步之實施態樣中，該腦膜炎球菌軛合物係從天然多糖和尺寸縮小不超過x10倍之糖的混合物製成。於進一步之實施態樣中，該來自血清群Y之莢膜糖之尺寸縮小不超過x10倍。於進一步之實施態樣中，該來自血清群A和C之莢膜糖為天然多糖且來自血清群W135和Y之糖之尺寸縮小不超過x10倍。於進一步之實施態樣中，各腦膜炎球菌莢膜糖之平均大小係在50kDa至300kDa之間或50kDa至200kDa之間。於進一步之實施態樣中，該免疫原性組成物包含平均大小超過50kDa、75kDa、100kDa或平均大小在50至100kDa或55至90kDa或60至80kDa之間的MenA莢膜糖。於進一步之實施態樣中，該免疫原性組成物包含平均大小超過50kDa、75kDa、100kDa或平均大小在100至200kDa、100至150kDa、80至120kDa、90至110kDa、150至200kDa、120至240kDa、140至220kDa、160至200kDa或190至200kDa之間的MenC莢膜糖。於進一步之實施態樣中，該免疫原性組成物包含平均大小超過50kDa、75kDa、100kDa或平均大小在60至190kDa、或70至180kDa、或80至170kDa、或90至160kDa、或100至150kDa、110至145kDa或120至140kDa之間的MenY莢膜糖。於進一步之實施態樣中，該免疫原性組成物包含平均大小超過50kDa、75kDa、100kDa或平均大小在60至190kDa、或70至180kDa、或80至170kDa、或90至160kDa、或100至150kDa、140至180kDa、150至170kDa或110至140kDa之間的MenW莢膜糖。
於本發明之實施態樣中，各該至少二、三、四種腦膜炎球菌糖之個糖劑量或各腦膜炎球菌糖之糖劑量可選擇地為相同或近似相同。
於一實施態樣中，本發明之免疫原性組成物係經調整或緩衝或調節至介於pH7.0至8.0、pH7.2至7.6、或約為pH7.4、或確切為pH7.4。
本發明之免疫原性組成物或疫苗可選擇地在穩定劑，例如多元醇(諸如蔗糖或海藥糖)之存在下凍乾。
在上文中所討論之腦膜炎球菌糖組合物方面，完全不使用任何鋁鹽佐劑或任何佐劑可能是有利的。
活性劑可以各種不同濃度存在於本發明之醫藥組成物或疫苗中。通常，該物質之最小濃度為實現其預期用途必要之量，而最大濃度為將保持在溶液中或均勻懸浮在初始混合物內之最大量。例如，治療劑之最小量可選擇地為將提供單一治療有效劑量之量。在生物活性物質方面，最低濃度為重構時用於生物活性所需之量，而最大濃度為無法維持均勻懸浮液之點。
於另一實施態樣中，該組成物包括腦膜炎球菌血清群X莢膜多糖與載體分子之軛合物。血清群X莢膜多糖之結構係由不含O-乙醯基之N-乙醯葡糖胺-4-磷酸殘基組成，該N-乙醯葡糖胺-4-磷酸殘基係藉由al-4磷酸二酯鍵保持在一起。載體分子可為白喉或破傷風類毒素、CRM197或蛋白D。如實施例中所示例者，於一較佳之實施態樣中，該組成物不包括腦膜炎球菌血清群X莢膜多糖之軛合物。 穩定性
術語“穩定”和“穩定性”係指抗原在一段期間內保持免疫原性之能力。穩定性可在隨著時間推移之效力中測量。術語“穩定”和“穩定性”進一步指免疫原性組成物之物理、化學和構形穩定性。蛋白質組成物之不穩定性可由下列因素造成：蛋白質分子化學降解或聚集以形成更高階之聚合物、異二聚體分解成單體、去糖基化、糖基化修飾或任何其他降低本發明所包抬之蛋白質組成物之至少一種生物學活性的結構修飾。穩定性可藉由本技藝中熟知之方法評估，包括測量樣品之光散射、光(吸光度或光密度)之明顯衰減、尺寸(例如藉由尺寸排阻色層分析法)、玻管內或體內生物學活性及/或差示掃描量熱法(DSC)測量之性質。其他用於評估穩定性之方法為本技藝所已知且亦可根據本發明使用。
於一些實施態樣中，與參考標準相比較，本發明之穩定調製劑中之抗原可維持至少50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%效力至少1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、9個月、12個月、18個月、24個月、30個月、36個月、42個月、48個月、54個月或60個月。於一些實施態樣中，與參考標準相比較，本發明之穩定調製劑中之抗原可維持至少50%效力至少1年、2年、3年、4年或5年。術語“穩定”和“穩定性” 亦指抗原在一段時間內維持抗原決定部位或免疫反應性之能力。例如，與參考標準相比較，本發明之穩定調製劑中之抗原可維持至少50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%之其抗原決定部位或免疫反應性至少1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、9個月、12個月、18個月、24個月、30個月、36個月、42個月、48個月、54個月或60個月。於一些實施態樣中，穩定性係相對於環境條件測量。環境條件之非限制性實例包括光、溫度、冷凍/解凍循環、攪動和pH值。本技藝之技術熟習人士將能使用本文揭示之方法或本技藝中已知之其他方法測定是否存有抗原性抗原決定部位或免疫反應性。於一些實施態樣中，抗原之穩定性係從其配製日期開始測量。於一些實施態樣中，抗原之穩定性係從其儲存條件改變之日期開始測量。儲存條件之變化的非限制性實例包括從冷凍變成冷藏、從冷凍變成室溫、從冷藏變成室溫、從冷藏變成冷凍、從室溫變成冷凍、從室溫變成冷藏、從光亮變成黑暗或引入攪動。
於一實施態樣中，術語“穩定”和“穩定性”包括抗原與鋁結合之能力。例如，與參考標準相比較，本發明之穩定調製劑包含至少50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%之蛋白質與調製劑中之鋁(例如磷酸鋁)結合至少1小時、6小時、12小時、18小時、24小時、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、9個月、12個月、18個月、24個月、30個月、36個月、42個月、48個月、54個月或60個月。參見，例如實施例13。於一較佳之實施態樣中，至少90%，更佳為至少95%，且最佳為至少99%之總亞族A rLP2086多肽(例如，包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的多肽)與組成物中之鋁結合。於一較佳之實施態樣中，至少90%，更佳為至少95%，且最佳為至少99%之總亞族B rLP2086多肽(例如，包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的多肽)與組成物中之鋁結合。 鋁結合作用之測定. 將包含鋁和至少一種蛋白質抗原之組成物離心從而使鋁沉澱成小丸。將吸附鋁之蛋白質離心為本技藝所已知。參見，例如Egan et al., Vaccine, Vol. 27(24): 3175-3180(2009)。亦將與鋁結合之蛋白沉澱成小丸，而非與鋁結合之蛋白質則保留在上清液中。上清液和沈澱小丸中之總蛋白質係藉由Lowry分析測定。經結合之蛋白的百分比係經由將上清液中之總蛋白除以加入該組成物中之總蛋白再乘以100%來計算。類似地，未經結合之蛋白質的百分比係經由將上清液中之總蛋白除以加入該組成物中之總蛋白再乘以100%來計算。在同時包含亞族A和亞族B抗原之組成物方面，上清液中之個別亞族A和B蛋白濃度係藉由離子交換色層分析法測定。亞族A和B蛋白之分離和洗提係使用強陰離子柱和高鹽濃度洗提液進行。亞族A和B蛋白二者之檢測和定量係使用螢光檢測器進行，該螢光檢測器之設定為激發=280run且發射=310run。亞族A和亞族B蛋白在不同之滯留時間洗提出並使用針對rLP2086蛋白質參考物產生之標準曲線定量。未經結合之蛋白質的百分比係藉由將上清液中之總蛋白除以加入該組成物中之總蛋白再乘以100%來計算。經結合之蛋白質的百分比係藉由從100%減去未經結合之蛋白質的百分比來計算。 聚山梨醇酯80
聚山梨醇酯80(PS80)為非離子性表面活性劑。基於效力分析之使用玻管內單株抗體的加速穩定性研究證明在具有較高莫耳比之PS80對MnB rLP2086蛋白之最終調製劑中的亞族B蛋白不穩定。以各種不同比例之PS80進行之進一步實驗已證明用於保持效力之PS80對MnB rLP2086蛋白的最佳莫耳比為約2.8±1.4。
該組成物中之PS80的濃度取決於PS80對多肽之莫耳比。於一實施態樣中，該組成物包括之PS80對第一多肽和PS80對第二多肽之莫耳比為2.8±1.4。於一實施態樣中，該組成物包括之PS80對第一多肽和PS80對第二多肽之莫耳比為2.8±1.1。於一實施態樣中，該組成物包括之PS80對多肽之莫耳比至少為1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2或3.3。於一實施態樣中，該組成物包括之PS80對多肽之莫耳比至多為4.0、3.9、3.8、3.7、3.6、3.5、3.4、3.3、3.2、3.1、3.0或2.9。本發明描述之任何最小值可與任何最大值組合以定義一個範圍。較佳地，該組成物包括之PS80對多肽的莫耳比為2.8。
PS80對多肽之莫耳比係從測得之PS80濃度和測得之總多肽濃度進行計算來測定，其中二個數值均以莫耳表示。例如PS80對蛋白質之莫耳比的測定係藉由計算在最終藥品物質中測得之PS80濃度(例如藉由逆相高壓液相色層分析法(RP-HPLC))對該測得之總蛋白質濃度(例如藉由離子交換高壓液相色層分析法(IEX-HPLC))之莫耳比來進行，其中二個數值均以莫耳表示。
使用RP-HPLC來定量疫苗調製劑中之聚山梨醇酯80的濃度。清潔劑之濃度係藉由皂化脂肪酸部分來測定；聚山梨酸酯80藉由在40℃下之鹼性水解來轉化成游離油酸。該樣品係使用C18柱藉由RP-HPLC分離並使用UV檢測器，在波長200nm下定量。
第一和第二多肽係藉由陰離子交換HPLC解析。rLP2086(fHBP)亞族A和B蛋白在不同之滯留時間洗提出並使用針對各別rLP2086蛋白質參考物質產生之標準曲線定量。
術語“莫耳比”和包括fHBP和PS80之免疫原性組成物的描述進一步揭示於WO2012025873和美國專利刊物US 2013/0171194中，其全部內容各自以引用方式併入本文。
如本文所使用之術語“莫耳比”係指組成物中之二種不同元素的莫耳數之比例。於一些實施態樣中，該莫耳比為清潔劑之莫耳數對多肽之莫耳數的比例。於一些實施態樣中，該莫耳比為PS80之莫耳數對蛋白質之莫耳數的比例。於一實施態樣中，基於蛋白質和聚山梨醇酯80濃度，該莫耳比可使用下列等式計算：
於一實施態樣中，該組成物包括之PS80對MnB rLP2086蛋白之莫耳比在1.4至4.2之間以保持效力。於一實施態樣中，該組成義物包括至少為1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7或2.8之PS80對MnB rLP2086蛋白之莫耳比。於一實施態樣中，該組成物包含至多4.2、4.1、4.0、3.9、3.8、3.7、3.7、3.6、3.5、3.4、3.3、3.2、3.1、3.0、2.9或2.8。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。
於一實施態樣中，該組成物包含約0.0015、0.0017、0.0019、0.0021、0.0023、0.0025、0.0027、0.0029、0.0031、0.0033、0.0035、0.0037、0.0039、0.0041、0.0043、0.0045、0.0047、0.0049、0.0051mg/ml之PS80。較佳地，該組成物包含約0.0035mg/ml之PS80。
於另一實施態樣中，該組成物包含至少10μg、11μg、12μg、13μg、14μg、15μg、16μg、17μg、18μg、19μg、20μg、21μg、22μg、23μg、24μg或25μg之PS80。於另一實施態樣中，該組成物包含至多30μg、29μg、28μg、27μg、26μg、25μg、24μg、23μg、22μg、21μg、20μg、19μg或18μg之PS80。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。於一較佳之實施態樣中，該組成物包含至少10μg及至多20μg之PS80。於最佳之實施態樣中，該組成物包含約18μgPS80。
於另一實施態樣中，該組成物包括範圍在0.0005%至1%之PS80濃度。例如，該組成物中之PS80濃度可為至少0.0005%、0.005%、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.10%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%或1.1%之PS80。於一實施態樣中，該組成物中之PS80濃度可為至多2.0%、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1.4%、1.3%、1.2%、1.1%、1.0%、0.9 %、0.8%或0.7%之PS80。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括約0.07%之PS80。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。
本發明者意外發現與第一組成物中之聚山梨醇酯80對MnB rLP2086多肽的莫耳比相比較，雖然包含第一組成物和第二組成物之組合的組成物可具有不同之聚山梨醇酯80對MnB rLP2086多肽莫耳比，用於該組合組成物之額外的表面活性劑對於維持該組合組成物中之MnB rLP2086多肽的溶解度和穩定性不是必需的。因此，於一實施態樣中，該套組不包含多於0.02mg之聚山梨醇酯80。 鋁
該組成物包括呈磷酸鋁形式之鋁。添加之AlPO4
係作為穩定劑以提供增強之可製造性和穩定性。用於製造磷酸鋁之方法描述於美國專利刊物US 2009/0016946 (其全部內容以引用方式併入本文)中。於一實施態樣中，該組成物不進一步包括除了鋁之外的多價陽離子。於一實施態樣中，該組成物不進一步包括Al(OH)3
或Al(SO4
)3
。
於一實施態樣中，該組成物包括至少50μg、60μg、70μg、80μg、90μg、100μg、110μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg或250μg之鋁。於一實施態樣中，該組成物包括至多500μg、490μg、480μg、470μg、460μg、450μg、440μg、430μg、420μg、410μg、400μg、390μg、380μg、370μg、360μg、350μg、340μg、330μg、320μg、310μg、300μg、290μg、280μg、270μg、260μg或250μg之鋁。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。於最佳之實施態樣中，該組成物包含250μg之鋁。
於一實施態樣中，該組成物包括至少0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml、0.06mg/ml、0.07mg/ml、0.08mg/ml、0.09mg/ml、0.10mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml或0.5mg/ml之磷酸鋁。於一實施態樣中、該組成物包括至多2.0mg/ml、1.9mg/ml、1.8mg/ml、1.7mg/ml、1.6mg/ml、1.5mg/ml、1.4mg/ml、1.3mg/ml、1.2mg/ml、1.1mg/ml、1.0mg/ml、0.9mg/ml、0.8mg/ml或0.7mg/ml之PS80。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括約0.07mg/ml之PS80。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。於較佳之實施態樣中，該組成物包括0.5mg/ml之磷酸鋁。於最佳之實施態樣中，該組成物包括為磷酸鋁(AlPO4
)形式之0.5mg鋁/ml。該濃度維持該亞族A和B蛋白與鋁結合(至少90%結合或更佳)。
本發明者意料外地發現，當與第一組成物中與鋁結合之MnB rLP2086多肽的百分比相比較，雖然組成物中第一組成物和第二組成物組合可改變與鋁結合之MnB rLP2086多肽的百分比，令人驚訝地，第一和第二組成物組合可保持至少90%之總MnBrLP2086多肽與鋁結合。因此，於一實施態樣中，該組合組成物中與鋁結合之總MnB rLP2086多肽的百分比為至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88% 89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%。較佳地，該組合組成物中與鋁結合之總MnB rLP2086多肽的百分比為至少90%，更佳為至少95%，最佳為至少100%。
於另一實施態樣中，與重構該凍乾組成物之前在液體組成物中之與鋁結合之多肽的濃度相比較，該免疫原性組成物中與鋁結合之多肽的濃度在24小時後並未降低。於另一實施態樣中，與該凍乾組成物中之MenAAH
-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenAAH
-TT軛合物的濃度在24小時後並未降低。於一實施態樣中，與重構之前在液體組成物中之相應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%。
於另一實施態樣中，與於凍乾組成物中之MenCAH
-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenCAH
-TT軛合物的濃度在24小時後並未降低。於另一實施態樣中，與該凍乾組成物中之MenW-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenW-TT軛合物的濃度在24小時後並未降低。於另一實施態樣中，與該凍乾組成物中之MenY-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenY-TT軛合物的濃度在24小時後並未降低。於一實施態樣中，與重構之前在該液體組成物中之相應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%。 賦形劑
於一實施態樣中，該組成物包括組胺酸。於一實施態樣中，該組成物包括至少650μg、660μg、670μg、680μg、690μg、700μg、710μg、720μg、730μg、740μg、750μg、760μg、770μg、780μg、790μg、800μg、810μg、820μg、830μg、840μg或850μg之組胺酸。於一實施態樣中，該組成物包括至多1560μg、1500μg、1400μg、1300μg、1200μg、1100μg、1000μg、950μg、900μg、890μg、880μg、870μg、860μg、850μg、840μg、830μg、820μg、810μg、800μg、790μg或780μg之組胺酸。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。較佳地，該組成物包括780μg之組胺酸。
於一實施態樣中，該組成物包括tris、磷酸鹽或琥珀酸鹽緩衡劑。於一較佳之實施態樣中，該組成物不包括tris緩衝劑。於一較佳之實施態樣中，於組成物不包括磷酸鹽緩衝劑。於一較佳之實施態樣中，該組成物不包括琥珀酸鹽緩衝劑。於一較佳之實施態樣中，該組成物包括組胺酸緩衝劑。
於一實施態樣中，該組成物包括氯化鈉。MenABCWY組成物中之氯化鈉濃度可在160.5-161.1mM之間變化。
於一實施態樣中，該組成物之之pH值係在5.5至7.5之間。於一較佳之實施態樣中，該組成物之pH值係在5.8至7.0之間，最佳為pH 5.8至pH 6.0之間。於一實施態樣中，該組成物之pH值至多為6.1。於一實施態樣中，該組成物之pH值為5.8。 套組
本發明之進一步態樣為用於投予組成物之劑量的套組以在哺乳動物中引發針對腦膜炎球菌之殺菌抗體。
於一態樣中，該套組包括第一組成物，該第一組成物包括如上述之第一多肽和如上述之第二多肽。於一較佳之實施態樣中，該第一多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列。於另一較佳之實施態樣中，該第二多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。該套組進一步包括第二組成物，該第二組成物包括MenAAH
-TT軛合物、MenCAH
-TT軛合物、MenW-TT軛合物和MenY-TT軛合物。於一實施態樣中，該套組包括至少二個容器，其中第一容器包括該第一組成物，第二容器包括該第二組成物。
於一實施態樣中，該套組包含液態第一組成物和凍乾之第二組成物。較佳地，該套組包括液態MnB二價rLP2086組成物和凍乾之MenACWY-TT組成物。
本發明者意料外地發現，雖然包括第一組成物和第二組成物之組合的組成物改變第一組成物中MnB rLP2086多肽相對於聚山梨醇酯80之莫耳比，但令人驚訝地，用於該組合組成物之額外的表面活性劑對保持該組合組成物中之MnB rLP2086多肽的溶解度和穩定性而言並非必要的。因此，於一實施態樣中，該套組不包含多於0.02mg之聚山梨醇酯80。
於本發明之一實施態樣中，該套組並未進一步包含任一下列市售之免疫原性組成物：MENACTRA(R)、MENVEO(R)、ADACEL(R)、HAVRIX(R)、GARDASIL(R)、REPEVAX或彼等之任何組合。例如，較佳地，該套組並未進一步包括腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖軛合物(MCV4)組成物，其中該載體蛋白為白喉類毒素。於一實施態樣中，該套組並未進一步包括腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖軛合物(MCV4)組成物，其中該載體蛋白為CRM197
。於一實施態樣中，該套組並未進一步包含NIMENRIX疫苗，其中NIMENRIX包含由氯化鈉和水組成之稀釋劑。 殺菌活性
MnB之發病率約為10萬分之一，意指需要極多數之個體(40萬至6百萬以上)來支持統計學上有意義之效力評估。因此，採用使用人補體之血清殺菌分析(hSBA) (其為保護和疫苗效力之替代物)來評估臨床試驗中之免疫原性。
輝瑞已建立包含2000年至2006年引起IMD之分離株的廣泛MnB菌株集合(N=至少1263)。MnB分離株係從美國疾病管制和預防中心(CDC)及歐洲國家健康和參考實驗室系統性也收集。
於一實施態樣中，藉由對人投予該組成物所誘導之免疫反應係利用人補體，採用血清殺菌分析(hSBA)針對四種腦膜炎球菌血清群B(MnB)菌株測定。用於hSBA之MnB菌株係選自菌株庫。該菌株庫代表系統性收集之臨床相關腦膜炎球菌菌株的集合庫。
對所有測試菌株(尤其是表現具有與第一多肽和第二多肽異源之序列的脂蛋白2086變體之菌株)之高比例的hSBA反應表明該組成物為廣泛保護性疫苗，其足以提供針對表現至少來自血清群B，包括額外之血清群(諸如血清群X)之rLP2086(FHBP)的腦膜炎球菌菌株之高度血清保護作用。 亞族A菌株
於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現 LP2086(fHBP)亞族A蛋白之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現脂蛋白2086變體之LP2086 (fHBP)亞族A菌株，其與表現A05之腦膜炎球菌菌株異源。例如，於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現脂蛋白2086變體之LP2086(fHBP)亞族A菌株，其與菌株M98250771異源。
於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現fHBP A10之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現LP2086(fHBP)A22之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現LP2086(fHBP)A56之腦膜炎球菌菌株。於進一步之實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086(fHBP) A22和LP2086(fHBP)A56菌株。於另一實施態樣中，該hSBA菌株為表現LP2086 A04之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現LP2086 A05之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現LP2086 A12之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 A22之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 A12之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 A04之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 A19之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 A07之腦膜炎球菌菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株包括任一下列菌株：表現A22、A12、A19、A05和A07之菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株包括任一下列菌株：表現A06、A15和A29之菌株。
於一實施態樣中，該免疫反應對與表現A05之腦膜炎球菌菌株異源之腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族A菌株具殺菌性。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B A22菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B A56菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B A06菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B A15菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B A29菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B A62菌株。於一實施態樣中，該免疫反應對與腦膜炎球菌菌株M98250771異源之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性。
於一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與第一多肽具有至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於另一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株M98250771表現之因子H結合蛋白具有至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株M98250771表現之因子H結合蛋白具有至少80%，更佳為至少84%同一性之胺基酸序列。
於另一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與第一多肽具有至多81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於另一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株M98250771表現之因子H結合蛋白具有至多81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株M98250771表現之因子H結合蛋白具有至多85%，更佳為至多99%同一性之胺基酸序列。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。
於一實施態樣中，由該組成物引發之免疫反應不僅對腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族A菌株具殺菌性，亦對表現fHBP亞族A多肽之腦膜炎球菌菌株具殺菌性，其中該血清群並非血清群B。例如，於一較佳之實施態樣中，由該組成物引發之免疫反應對腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株具殺菌性且對表現與fHBP A05異源之fHBP亞族A多肽之腦膜炎球菌血清群C菌株具殺菌性。例如，於一實施態樣中，該免疫反應係針對表現fHBP A10之腦膜炎球菌血清群C菌株。於另一實施態樣中，該免疫反應係針對表現fHBP A19之腦膜炎球菌血清群W菌株。於一實施態樣中，該免疫反應對表現fHBP亞族A多肽之腦膜炎球菌菌株具殺菌性，其中該菌株與腦膜炎球菌菌株M98250771異源。 亞族B菌株
於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 (fHBP)亞族B菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現脂蛋白2086變體之LP2086(fHBP)亞族B菌株，其與表現B01之腦膜炎球菌菌株異源。例如，於一實施態樣中，該hSBA菌株為表現脂蛋白2086變體之LP2086(fHBP)亞族B菌株，其與菌株CDC1127異源。於一較佳之實施態樣中，該hSBA菌株為表現脂蛋白2086變體之LP2086(fHBP)亞族B菌株，其與菌株CDC1573異源。
於一實施態樣中，該免疫反應對腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族B菌株具殺菌性，該腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族B菌株與表現B01之腦膜炎球菌菌株異源。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B24菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B44菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B16菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B03菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B09菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B15菌株。於一實施態樣中，該免疫反應係針對腦膜炎球菌血清群B B153菌株。於一實施態樣中，該免疫反應對與腦膜炎球菌血清群CDC1573異源之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性。
於一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與第二多肽具有至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於另一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株CDC1573表現之因子H結合蛋白具有至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株CDC1573表現之因子H結合蛋白具有至少80%，更佳為至少87%同一性之胺基酸序列。於另一較佳之實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株CDC1573表現之因子H結合蛋白具有至少100%同一性之胺基酸序列。
於一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與第二多肽具有至多81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於另一實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株CDC1573表現之因子H結合蛋白具有至多81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性之胺基酸序列。於一較佳之實施態樣中，該免疫反應對表現因子H結合蛋白之腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性，該因子H結合蛋白包括與腦膜炎球菌菌株CDC1573表現之因子H結合蛋白具有至多88%，更佳為至多99%同一性之胺基酸序列。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。
於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 (fHBP)B24菌株。於另一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 (fHBP)B44菌株。於進一步之實施態樣中，該hSBA菌株包括LP2086(fHBP)B24和LP2086(fHBP)B44菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株包括LP2086(fHBP)A22、LP2086 (fHBP)A56、LP2086(fHBP)B24和LP2086(fHBP)B44菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株包括B15。於一實施態樣中，該hSBA菌株包括B153。於另一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 B16菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 B03菌株。於一實施態樣中，該hSBA菌株為LP2086 B09菌株。於進一步之實施態樣中，該hSBA菌株包括B24、B16、B44、B03和B09或彼等之任何組合。於另一實施態樣中，該hSBA菌株包括B24、B16、B44、A22、B03、B09、A12、A19、A05和A07或彼等之任何組合。於另一實施態樣中，該hSBA菌株包括A06、A07、A12、A15、A19、A29、B03、B09、B15和B16或彼等之任何組合。
於一實施態樣中，該方法誘導針對腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族A菌株和針對腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族B菌株之免疫反應。較佳地，該免疫反應對腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族A菌株和腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族B菌株具殺菌性。
於一實施態樣中，該由組成物引發之免疫反應不僅對腦膜炎球菌血清群B fHPB亞族B菌株具殺菌性，亦對表現fHBP亞族B多肽之腦膜炎球菌菌株具殺菌性，其中該血清群並非血清群B。例如，於一較佳之實施態樣中，該由組成物引發之免疫反應對腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株具殺菌性且對表現與fHBP B01異源之fHBP亞族B多肽之腦膜炎球菌血清群Y菌株具殺菌性。例如，於一實施態樣中，該免疫反應係針對表現fHBP B16之腦膜炎球菌血清群A菌株。於另一實施態樣中，該免疫反應係針對表現fHBP B47之腦膜炎球菌血清群Y菌株。於另一實施態樣中，該免疫反應係針對表現fHBP B49之腦膜炎球菌血清群X菌株。於一實施態樣中，該免疫反應對表現fHBP亞族B多肽之腦膜炎球菌菌株具殺菌性，其中該菌株與腦膜炎球菌血清群B菌株CDC1573異源。 效價
於一實施態樣中，與投予組成物劑量之前人體內之殺菌效價相比較，當在相同條件下，在hSBA中測量時該組成物誘導人體內之殺菌效價增加。於一實施態樣中，與投予該組成物之第一劑量之前人體內的殺菌效價相比較，當在相同條件下，在hSBA中測量時該殺菌效價較投予該組成物之第一劑量之前人體內的殺菌效價增加。於一實施態樣中，與投予該組成物之第二劑量之前人體內之殺菌效價相比較，當在相同條件下，在hSBA中測量時可觀察到該殺菌效價較投予該組成物之第二劑量之前增加。於另一實施態樣中，與投予該組成物之第三劑量之前人體內之殺菌效價相比較，當在相同條件下，在hSBA中測量時可觀察到該殺菌效價較投予該組成物之第三劑量之前增加。
於一實施態樣中，在投予組成物之劑量後，該組成物在人體中誘導殺菌效價，其中當在相同條件下在hSBA中測量時，該殺菌效價較投予該劑量之前人體內之殺菌效價高至少1倍。例如，當在相同條件下在hSBA中測量時，接受該組成物之劑量後人體內之殺菌效價可較投予該劑量之前人體內之殺菌效價高至少1.01倍、1.1倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍或16倍。
於一實施態樣中，“反應者”係指人類，其中在投予組成物劑量後，該組成物在人體內誘導殺菌效價，其中該殺菌效價較投予該劑量之前人體內之殺菌效價高至少1倍。於一較佳之實施態樣中，當與投予該劑量之前人體內之殺菌效價相比較，該反應者之hSBA效價達到增加至少≥4倍。該等反應者可被稱為具有保護效價。於一些實施態樣中，保護效價為大於1：4之效價。
於一實施態樣中，該hSBA效價為產生可測量效果之血清樣品的最高稀釋度之倒數。例如，於一實施態樣中，該hSBA效價為與T30 CFU值(即，在含有除測試血清外之所有分析組分的分析孔中培育後之存活細菌數；100%細菌存活率)相比較，導致MnB細菌減少至少50%(50%細菌存活)之測試血清的最高2倍稀釋度之倒數。
於一實施態樣中，當在相同條件下在hSBA中測量時，在接受組成物之第一劑量後，該組成物在人體內誘導之殺菌效價較接受該第一劑量之前的殺菌效價高至少2倍(例如高於無第一劑量存在時人體內之殺菌效價)。於一實施態樣中，當在相同條件下在使用人補體之人血清殺菌分析(hSBA)中測量時，在接受組成物之第一劑量後，該組成物在人體內誘導之殺菌效價較接受該第一劑量之前的殺菌效價高至少4倍。於一實施態樣中，當在相同條件下在使用人補體之人血清殺菌分析(hSBA)中測量時，該在接受組成物之第一劑量後，該組成物在人體內誘導之殺菌效價較接受該第一劑量之前的殺菌效價高至少8倍。
於一較佳之實施態樣中，該人血清補體係源自對指定之hSBA測試菌株具有低固有殺菌活性之人。低固有殺菌活性係指，例如針對指定之hSBA測試菌株之殺菌效價至少低於1：4稀釋度。於一實施態樣中，該人補體係源自對指定之hSBA測試菌株之hSBA效價至少低於1：4稀釋度(諸如1：2稀釋度)的人，其中未對該人投予該組成物。
在投予組成物(言官如二價rLP2086組成物)之前，人類可能顯現出低於1：4之hSBA效價，或者在投予該組成物之前，人類可能顯現出≥1：4之hSBA效價。因此，於較佳之實施態樣和實施例中，將至少一個組成物劑量投予人可導致人體內之hSBA效價較投予組成物之前的效價高至少4倍。於一些實施態樣中，將至少一個組成物劑量投予人可導致hSBA效價至少高於1：4，例如hSBA效價≥1：8、hSBA效價≥1：16、hSBA效價≥1：32。本文描述之各別實施例包括評估具有hSBA效價≥1：8及/或≥1：16之人個體的比例，其中係將該二價rLP2086組成物投予人。於一些實施態樣中，與投予組成物之前相比較，投予組成物後人體內之效價增加4倍顯示出該保護作用與該組成物有關。於一些實施態樣中，該等高於1：4之hSBA效價的較佳評估顯示出在人體內被誘導出之保護作用(即，殺菌免疫反應)與組成物有關。
於一實施態樣中，在投予該組成物之第一劑量後，該人具有等於或大於hSBA之定量下限(LLOQ)的hSBA效價。於另一實施態樣中，在投予該組成物之第二劑量後，該人具有等於或大於hSBA之LLOQ的hSBA效價。於另一實施態樣中，在投予該組成物之第三劑量後，該人具有等於或大於hSBA之LLOQ的hSBA效價。 方法和投予
於一態樣中，本發明關於誘導針對人之腦膜炎球菌之免疫反應的方法。於另一態樣中，本發明關於為人接種疫苗之方法。於一實施態樣中，該方法包括對人投予至少一個上述組成物之劑量。於一較佳之實施態樣中，該方法包括對人投予最多一個上述組成物之劑量。於另一實施態樣中，該方法包括對人投予至少一個上述組成物之第一劑量和第二劑量。
於一實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後至少20、30、50、60、100、120、160、170或180天及第一劑量後至多250、210、200或190天投予。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。
於另一實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後約30天投予。於另一實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後約60天投予投予，諸如例如在第0、2個月之免疫化計劃表中投予。於另一實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後約180天投予，諸如例如在第0、6個月免疫化計劃表中投予。再於另一實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後約120天投予，例如在第2、6個月免疫化計劃表中投予。
於一實施態樣中，該方法包括對人投予二個該組成物之劑量且至多二個劑量。於一實施態樣中，該二個劑量係在第一劑量後約6個月內投予。於一實施態樣中，該方法不包括對人進一步投予加強劑。如本文所使用之“加強劑” 係指對人額外投予該組成物。對人投予至多二個該組成物之劑量可能是有利的。該等利益包括，例如促進人遵從完整之投予計劃表及促進該計劃表之成本效益。
於一實施態樣中，該第一劑量和第二劑量係在約25、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190或200天之期間內投予且在第一劑量後至多400、390、380、370、365、350、340、330、320、310、300、290、280、270、260、250、240、230、220、210或200天投予人。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。較佳地，第一劑量和第二劑量將間隔至少4週投予，例如間隔≥8週、間隔≥2個月、間隔≥3個月、間隔≥6個月，等。
於一實施態樣中，該第一劑量和第二劑量係在約30天之期間內投予人。於另一實施態樣中，該第一劑量和第二劑量係在約60天之期間內投予人。於另一實施態樣中，該第一劑量和第二劑量係在約180天之期間內投予人。
方便的是，第一劑量可與另一疫苗在基本上相同之時間投予(例如，在同一醫療諮詢或訪視保健專業人員之期間或在腦膜炎球菌疫苗第一劑量之24小時內)，例如與B型肝炎病毒疫苗、白喉疫苗、破傷風疫苗、百日咳疫苗(細胞型，或較佳地，無細胞型)、B型流感嗜血桿菌疫苗、肺炎鏈球菌疫苗及/或脊髓灰質炎疫苗(較佳為經滅活之脊髓灰質炎病毒疫苗)在基本上相同之時間投予。這些可選擇地共同投予之疫苗各自可為單價疫苗或可為組合疫苗之一部分(例如為DTP疫苗之一部分)。
方便的是，第二劑量可與另一疫苗在基本上相同之時間投予(例如，在同一醫療諮詢或訪視保健專業人員之期間或在腦膜炎球菌疫苗第二劑量之24小時內)，例如與B型肝炎病毒疫苗、白喉疫苗、破傷風疫苗、百日咳疫苗(細胞型，或較佳地，無細胞型)、B型流感嗜血桿菌疫苗、肺炎鏈球菌疫苗、脊髓灰質炎疫苗(較佳為經滅活之脊髓灰質炎病毒疫苗)、流感疫苗、水痘疫苗、麻疹疫苗、腮腺炎疫苗及/或德國麻疹疫苗在基本上相同之時間投予。這些可選擇地共同投予之疫苗各自可為單價疫苗或可為組合疫苗之一部分(例如為MMR疫苗之一部分)。
方便的是，第三劑量可與另一疫苗在基本上相同之時間投予(例如，在同一醫療諮詢或訪視保健專業人員之期間或在腦膜炎球菌疫苗第三劑量之24小時內)，例如與B型肝炎病毒疫苗、白喉疫苗、破傷風疫苗、百日咳疫苗(細胞型，或較佳地，無細胞型)、B型流感嗜血桿菌疫苗、肺炎鏈球菌疫苗、脊髓灰質炎疫苗(較佳為經滅活之脊髓灰質炎病毒疫苗)、流感疫苗、水痘疫苗、麻疹疫苗、腮腺炎疫苗及/或德國麻疹疫苗在基本上相同之時間投予。這些可選擇地共同投予之疫苗各自可為單價疫苗或可為組合疫苗之一部分(例如為MMR疫苗之一部分)。 三個劑量
於一實施態樣中，相較於二劑量計劃表，該組成物之三劑量計劃表在較高比例之人體內誘導殺菌效價，該殺菌效價係針對多種表現與第一及/或第二多肽異源之LP2086(fHBP)的菌株。
於一實施態樣中，該方法包括對人投予三個該組成物之劑量。於另一實施態樣中，該方法包括投予至多三個該組成物之劑量。於一實施態樣中，該三個劑量係在第一劑量後約6個月之期間內投予。於一實施態樣中，該方法包括在第三個劑量後對人投予加強劑量。於另一實施態樣中，該方法不包括在第三個劑量後對人投予加強劑量。於另一實施態樣中，該方法不進一步包括對人投予該組成物之第四劑或加強劑量。於進一步之實施態樣中，在約6個月之期間內對人投予至多三個劑量。
於一示例性實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後約30天投予，第三劑量係在第二劑量後約150天投予，諸如例如在第0、1、6個月免疫計劃表中。於另一示例性實施態樣中，該第二劑量係在第一劑量後約60天投予，該第三劑量係在第二劑量後約120天投予，諸如例如在第0、2、6個月免疫計劃表中。
於一實施態樣中，該第一劑量、第二劑量和第三劑量係在約150、160、170或180天之期間內，且至多為240、210、200或190天之期間內投予人。任何最小值均可與本發明描述之任何最大值組合以定義一個範圍。較佳地，第一劑量、第二劑量和第三劑量係在約180天或6個月之期間內投予人。例如，第二劑量可在第一劑量後約60天投予人，且第三劑量可在第二劑量後約120天投予人。因此，示例性之投予計劃表包括在約第0、2和6個月對人投予劑量。
如上述，可對人投予多個該免疫原性組成物之劑量且可改變介於各劑量之間的天數。例如，該方法的優點之一包括，例如提供人類遵循投予計劃表之靈活性。
於一實施態樣中，該方法包括對人投予至多三個劑量之同一免疫原性組成物。例如，於較佳之實施態樣中，該方法不包括對人投予第一組成物之第一劑量、對人投予第二組成物之第二劑量及對人投予第三組成物之第三劑量，其中第一、第二和第三組成物非為同一組成物。於另一實施態樣中，該方法包括對人投予最多四個劑量之同一免疫原性組成物。 實施例
下列實施例說明本發明之實施態樣。除非本文他處另外指出，下列實施例中提及之為120μg二價rLP2086劑量水準之MnB二價rLP2086組成物(此為組成物之較佳實施態樣)包括：每0.5mL劑量中包含60μg之第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)、每0.5mL劑量中包含60μg之第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)、聚山梨醇酯80對第一多肽之莫耳比為2.8、聚山梨醇酯80對第二多肽之莫耳比為2.8、每ml組成物包括0.5mg Al3+
、10mM組胺酸和150mM氯化鈉。
更具體地說，在120μg二價rLP2086之劑量水準下，所調查之二價重組rLP2086疫苗包括(a)60μg之第一脂化多肽(其包括SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列)；(b)60μg之第二脂化多肽(其包括SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列)；(c)18μg之聚山梨醇酯80；(d)250μg之鋁；(e)780μg之組胺酸，和(f)4380μg之氯化鈉。每一劑量為0.5mL。
除非本文另外指明，下列實施例中提及之MenACWY-TT組成物(其為四價腦膜炎球菌多糖軛合組成物之較佳示例性實施態樣)包括各自與作為載體蛋白之破傷風類毒素耦合之腦膜炎球菌莢膜多糖A、C、W-135和Y。腦膜炎球菌血清群A和C多糖與己二酸二醯肼(AH)間隔子軛合，並間接與破傷風類毒素軛合，而W-135和Y多糖係直接與破傷風類毒素軛合。該組成物不含任何防腐劑或佐劑。
更具體地說，下列實施例中描述之凍乾的MenACWY-TT組成物的每一劑量(0.5mL)包含與破傷風類毒素載體蛋白軛合之5μg之腦膜炎球菌血清群A多糖；與破傷風類毒素載體蛋白軛合之5μg之腦膜炎球菌血清群C多糖；與破傷風類毒素載體蛋白軛合之5μg之腦膜炎球菌血清群W-135多糖；與破傷風類毒素載體蛋白軛合之5μg之腦膜炎球菌血清群Y多糖；28mg之蔗糖；97μg之胺丁三醇。 實施例1：MenABCWY組成物
為了抽取0.5mL劑量之MenABCWY疫苗以用於肌肉內注射，以0.67mL之MnB二價rLP2086藥物產品(描述於下列實施例3中)將該凍乾之MenACWY-TT藥物產品(描述於下列實施例2中)的小瓶重構以製備該最終MenABCWY組成物。下列表1中提供用於製備MenABCWY疫苗之所有組分及彼等之功能。
實施例2：MnB二價rLP2086藥物產品之描述和組成
MnB二價rLP2086藥物產品為無菌液體調製劑，其係由120μg/mL/亞族之rLP2086亞族A和B蛋白組成，該rLP2086亞族A和B蛋白係配製在10mM組胺酸緩衝液、150mM氯化鈉(NaCl)pH 6.0，加0.5mg/ml鋁(為鋁磷酸(AlPO4
)形式)中。在藥物中添加聚山梨醇酯80(PS80)以獲得目標之PS80對蛋白質莫耳比。因此，在藥物產品調製期間不添加PS80，但以相同比例存在於最終之藥物產品中。將該藥物產品填入1mL注射器中。不含防腐劑之單一疫苗劑量為0.5mL。
聚山梨醇酯80濃度之影響 聚山梨醇酯80(PS80)為非離子性表面活性劑。其藉由防止可能由溫度、過濾器、管道、容器、密合接觸和加工混合導致之聚集和吸附來穩定和助溶該調製劑中之MnB rLP2086亞族A和B蛋白。使用基於體外單株抗體之效力分析的穩定性研究證明在最終調製劑中PS80對MnB rLP2086蛋白之莫耳比較高時亞族B蛋白不穩定。改變PS80對蛋白質之莫耳比進行之實驗已證明PS80對MnB rLP2086蛋白之最佳莫耳比約介於1.4至4.2之間以保持效力。 實施例3：MenACWY-TT組成物之描述和組成
MenACWY-TT藥物產品係由純化之腦膜炎球菌血清群A、C、W和Y多糖組成，其分別以~3、~3、~1.5和~1.3之破傷風類毒素(TT)對多糖比各自與破傷風類毒素(TT)軛合。
MenACWY-TT藥物產品係呈凍乾粉末形式，提供於3mL玻璃小瓶中，該玻璃小瓶具有適合用於凍乾之溴化丁基橡膠瓶蓋和鋁製藥蓋。表3中提供用於製造MenACWY-TT藥物產品之所有組分及彼等之功能。
實施例4：MenABCWY組成物之製備方法
最終之MenABCWY組成物係在診所中經由以0.67mL之MnB二價rLP2086將該凍乾之MenACWY-TT藥物產品小瓶重構來製備。所產生之MenABCWY組成物(疫苗液體藥物產品)含有120mcg/mL/亞族之rLP2086亞族A和B蛋白，濃度為10mcg/mL/型之純化的腦膜炎球菌類型A、C、W和Y多糖，該腦膜炎球菌類型A、C、W和Y多糖分別以~3、~3、~1.5、~3之比例與破傷風類毒素軛合，該組成物係配製在含有下列群組之10mM組胺酸和1.6mM tris緩衝液，pH值6.05中以用於肌肉內注射：160.5至161.1 mM氯化鈉、0.5mg/ml鋁(為鋁磷酸(AlPO4
)形式)、0.035mg/ml之聚山梨醇酯80和56mg/ml之蔗糖。
MenABCWY疫苗係經由將二種藥物產品MenACWY-TT和MnB二價rLP2086混合來製備。緩衝之組分和賦形劑係根據各組分之個別發展來選擇且顯示出提供用於延長之保存期限所需的穩定性。
進行劑量驗證研究以證明當MenACWY-TT藥物產品和MnB二價rLP2086藥物產品被混合在一起時以用於投予MenABCWY疫苗時二者是相容的且所有藥物產品和給藥溶液均與投予組分相容，且該給藥溶液在投予組分中可穩定一段足夠之時間以製備劑量和操作投予。該在重構小瓶和定量注射器中之經由以0.67mL MnB二價rLP2086藥物產品重構MenACWY-TT藥物產品所製備之MenABCWY疫苗在環境溫度和光照條件下，在保持時間內之穩定性被確認。
使用諸如下列者之穩定性指示方法測試代表MenABCWY疫苗之給藥溶液的樣品：用於抗原結合和純度之RP-HPLC、Bioplex活性分析、ELISA和具有預定之驗收標準的ICP-MS。此研究之結果顯示MenABCWY疫苗在室溫和光照條件下24小時具可接受之穩定性。這些數據顯示並描述於下列實施例5至15中。 實施例5：MenABCWY疫苗之評估
進行研究以評估當以MnB二價rLP2086組成物將經凍乾之MenACWY-TT組成物重構時是否具有可接受之物理相容性和短期穩定性。將凍乾之MenACWY-TT組成物和液態MnB二價rLP2086組成物組合並在未經控制之室溫環境中儲存長達24小時以接近現實生活條件。結果證明該經凍乾之MenACWY-TT組成物可使用液態MnB二價rLP2086組成物藉由輕輕手動混合來重構且該組合之pH和滲透壓係在注射劑之典型範圍內。該軛合物和蛋白質在未經控制之室溫環境中長達24小時後其所有關鍵屬性與對照組相似。
透過評估該組合之藥物產品的pH、外觀、重建之容易性和滲透壓來評估物理相容性。該抗原之穩定性係藉由ELISA，透過評估該rLP2086亞族A和亞族B蛋白之濃度、純度和玻管內相對抗原性(IVRA)及該軛合之腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖的濃度來評估。
實施例5至實施例15證明該經凍乾之MenACWY-TT組成物和液態MnB二價rLP2086組成物的組合物(即，MenABCWY組成物)可相容且在室溫下穩定至少24小時。 用於測定MenABCWY組成物中之Mening A、C、Y和W-135多糖濃度的ELISA發展Mening A、C、Y和W-135 ELISA＆篩選用於檢測之pAb
選擇六種用於篩選之抗體以用於ELISA分析中。使用Men A、C、Y或W-135多糖TT軛合物將每組10隻之四組兔子中的每一隻免化疫，在發展出抗體後接著將兔子放血。使用與載體蛋白CRM197
軛合之Men A、C、Y或W-135多糖個別篩選每隻兔子之結合和特異性。篩選兔子血清之陽性結合信號，該陽性結合信號相當於較背景吸光度高出三倍的吸光度讀數。此外，篩選非特異性結合低(此為高於空白組吸光度讀數的任何無抗原、次級或檢測血清組合之吸光度讀數)及交叉反應性低(此為高於背景吸光度之任何異源血清群吸光度讀數)之兔子血清。集中該符合篩選標準之兔子。使用CRM軛合物建立標準曲線範圍並藉由重構該凍乾之MenACWY-TT組成物確認。
建立量化該組合之藥物產品(MenABCWY組成物)中之A、C、Y和W軛合物的可行性。確定在該分析中未檢測到單獨之MnB二價rLP2086組成物。此外，當在MenABCWY組成物樣品中之磷酸鋁溶解時可完全回收軛合物。因此，確定該MnB二價rLP2086組成物不會干擾藉由ELISA定量MenACWY-TT軛合物。 實施例6：評估用於在MenACWY-TT組成物之存在下評估MnB二價rLP2086組成物之方法的適用性
評估藉由IEX-HPLC測定在MenACWY-TT組成物之存在下的MnB二價rLP2086組成物亞族A和B蛋白強度之適用性。評估在存有MenACWY-TT組成物和不存有MenACWY-TT組成物之情況下MnB二價rLP2086組成物之總蛋白質和結合蛋白質結果。該疊加之色譜顯示於第1圖中。
實施例7：在MenACWY-TT組成物之存在下評估MnB二價rLP2086組成物純度和峰比率
評估在MenACWY-TT組成物之存在下使用RP-HPLC測定MnB二價rLP2086組成物之純度的適合性。比較存有MenACWY-TT組成物和不存有MenACWY-TT組成物時MnB二價rLP2086組成物之純度結果。疊加之色譜顯示於第2圖中。雜質峰之積分的實例以插圖形式顯示於第2圖中。評估結果顯示存有MenACWY-TT組成物時不會干擾使用RP-HPLC方法評估MnB二價rLP2086組成物純度。 實施例8：在MenACWY-TT組成物之存在下評估MnB二價rLP2086組成物IVRA
評估在MenACWY-TT之存在下使用IVRA方法測定MnB二價rLP2086組成物亞族A(SEQ ID NO：1)和亞族B(SEQ ID NO：2)蛋白之玻管內相對抗原性的適合性。
比較存有和不存有MenACWY-TT組成物時MMnB二價rLP2086組成物亞族A和亞族B蛋白之IVRA結果。可行性評估結果顯示在分析變異性內，二種結果相當且存有MenACWY-TT組成物時不會干擾玻管內相對抗原性之測定。 實施例9：以MnB二價rLP2086組成物重構MenACWY-TT組成物小瓶
使用MenACWY-TT組成物小瓶和MnB二價rLP2086組成物進行以MnB二價rLP2086組成物藥物產品重構MenACWY-TT組成物。根據該方法，使用以生理鹽水或MenACWY-TT組成物基質安慰劑重構之MenACWY-TT組成物小瓶作為對照組。
測定用於MenACWY-TT組成物之生理鹽水重建體積
NIMENRIX®商品包裝同時包含一含有經凍乾之MenACWY-TT組成物的小瓶和一含有用於重構之0.9%生性生理鹽水的注射器。為了在使用MnB二價rLP2086組成物重構時重現該疫苗商品中之最終NIMENRIX®濃度，必須測定使用該來自商品之注射器所分配之生理鹽水量。然後使用該相同體積之MnB二價rLP2086組成物進行所有重構研究。 使用MnB二價rLP2086組成物重構該MenACWY-TT組成物小瓶
將MnB二價rLP2086組成物匯集在10mL玻璃小瓶中。將大約800μL之溶液抽入1mL注射器中。將經調整之注射器內容物注入含有MenACWY-TT組成物之小瓶中。旋轉該小瓶以溶解內容物。
在MenABCWY組成物之一式二份的樣品上測定pH值和外觀。在使用生理鹽水重構之MenACWY-TT組成物和使用MnB二價rLP2086組成物重構之MenACWY-TT組成物上以一式三份測量滲透壓。 實施例10：藉由SEC-MALLS評估在DP基質中之Mening A、C、Y和W-135多糖的穩定性。
使用Mening A、C、Y和W-135多糖作為替代物以評估在該組合之藥物產品(MenABCWY組成物)中之軛合的腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖是否可預期有任何不穩定性。 Mening A、C、Y和W-135多糖之處理 試劑製備方法(“全MenABCWY組成物緩衝基質”)
將2.24g之蔗糖和7.8mg之Tris(胺丁三醇(trometamol))加入20ml具有MnB rLP2086蛋白(組胺酸20mM pH6.0、NaCl 300mM、PS 80 0.07mg/ml、AlPO4 1mg/ml(8mM)、各為240μg/mL之rLP2086亞族A蛋白(SEQ ID NO：1)和亞族B(SEQ ID NO：2)蛋白)之2X MnB二價rLP2086組成物緩衝基質中。 樣品製備方法
使用全MenABCWY組成物緩衝基質將各Mening多糖做1：1稀釋，並在5℃、25℃和37℃下培育0、6和24小時。培育後，將樣品懸浮液在14,000rpm離心1分鐘。藉由SEC-MALLS分析上清液。 實施例11：MenABCWY組成物之穩定性-評估該組合之MnB二價rLP2086和MenACWY-TT組成物之pH、外觀和滲透壓
在重構後立即評估該組合三MnB二價rLP2086組成物和MenACWY-TT組成物(即MenABCWY組成物)之pH和外觀並在24小時後再次評估。 所有結果均如預期(表6)。
使用MnB二價rLP2086組成物重構之MenACWY-TT組成物之平均滲透壓係在使用生理鹽水重構之MenACWY-TT組成物的平均滲透壓之3%以內。
實施例12：組合之藥物產品中之Mening A、C、Y和W-135多糖軛合物濃度
在開始時評估MenABCWY組成物中之Mening A、C、Y和W-135-TT軛合物之濃度並在24小時後再次評估。該4個軛合物之濃度在24小時之期間內保持穩定(表8)。
實施例13：評估MenABCWY組成物中之MnB二價rLP2086蛋白之穩定性 組合之藥物產品中之總rLP2086亞族A(SEQ ID NO：1)蛋白和結合蛋白及總亞族B(SEQ ID NO：2)蛋白和結合蛋白之濃度
藉由IEX-HPLC分析MenABCWY組成物樣品以測定蛋白質濃度。如表9中所示，MnB二價rLP2086亞族A(SEQ ID NO：1)和亞族B(SEQ ID NO：2)蛋白(與鋁結合)二者之總蛋白、結合蛋白(與鋁結合)及%結合蛋白(與鋁結合)在24小時內沒有改變，表明rLP2086亞族A和亞族B蛋白在24小時之期間內保持穩定。
實施例14：組合之MenABCWY組成物中之rLP2086蛋白純度和峰比率
藉由RP-HPLC分析MenABCWY組成物樣品以測定rLP2086蛋白質之純度和峰比率。參見第3圖。11.9分鐘處之峰值從純度計算中排除。 組合之藥物產品中之rLP2086亞族A和亞族B蛋白IVRA
混合後評估MenABCWY組成物樣品之IVRA長達24小時。結果確定該MenABCWY組成物中之rLP2086亞族A(SEQ ID NO：1)和亞族B(SEQ ID NO：2)蛋白之相對抗原性在24小時之期間內保持穩定。 實施例15：藉由SEC-MALS評估MeningA、C、Y和W-135多糖在全MenABCWY組成物緩衝基質中之穩定性 在各種溫度下培育6和24小時後藉由SEC-MALS評估全MenABCWY組成物緩衝基質中之Mening A PS之穩定性
將Mening A、C、W和Y多糖與全MenABCWY組成物緩衝基質混合，並在5℃、25℃和37℃下培育長達24小時後藉由SEC-MALS評估穩定性。所有四種多糖在5℃和25℃下長達24小時似乎均可保持穩定。Mening A和Y在37℃下可觀察到有些降解。由於Mening Y多糖除開始之外在所有測試條件下均形成高Mw聚集物，因而無法測定Mening Y多糖之降解度。
實施例16：評估由MnB二價rLP2086組成物誘導之針對MenACWXY的hSBA活性抗交叉保護作用
TRUMENBA MnB二價rLP2086組成物含有二種脂化之因子H結合蛋白(fHBP)，該脂化之因子H結合蛋白(fHBP)各自來自一個亞族並提供針對腦膜炎球菌血清群B之保護作用。fHBP已被發現以不同表現水準表現在血清群A、C、W、Y和X中，表明MnB二價rLP2086組成物可為這些血清群提供保護。我們使用來自研究B1971015之血清以調查TRUMENBA MnB二價rLP2086組成物可提供針對血清群A、C、W、Y和X之保護的概念之證據。在全球收集菌株(包括從英國最近之爆發收集的MnW菌株和新近在非洲冒出之MnX)。描述選擇用於研發hSBA之候選菌株的方法和來自以MnB二價rLP2086組成物免疫化之個體子集的免疫反應，及作為比較之來自以四價腦膜炎球菌莢膜多糖結合型疫苗(MCV4)免疫化之子集的免疫反應。 用於測定免疫原性之血清
使用來自研究B1971015(第2期、隨機分配、活性對照、觀察者盲法研究，其中二組個體或是接受MENACTRA(腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖結合型疫苗[MCV4])和ADACEL(破傷風類毒素、減低之白喉類毒素、無細胞百日咳疫苗[Tdap])或是接受二價rLP2086 (TRUMENBA[腦膜炎球菌血清群B疫苗]，由美國核准)之血清子集在hSBA中，使用依下述選擇之MnACWYX菌株來評估免疫原性。 基線血清陽性率
使用來自研究B1971015之從青少年獲得之非免疫或免疫接種前血清來估計基於小菌落之hSBA中的基線血清陽性率。為此，將血清陽性定義為hSBA效價≥1：8，此為預期之分析LLOQ。為了分析研發之考量，該菌株必須顯示出為低基線血清陽性(即，使用基線血清之hSBA效價≥1：8的比率＜~40%)。 用於測定免疫原性之血清
使用來自研究B1971015(第2期、隨機分配、活性對照、觀察者盲法研究，其中二組個體或是接受MENACTRA(腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖結合型疫苗[MCV4])和ADACEL(破傷風類毒素、減低之白喉類毒素、無細胞百日咳疫苗[Tdap])或是接受二價rLP2086 (TRUMENBA [腦膜炎球菌血清群B疫苗]，由美國核准)之血清子集在hSBA中，使用依下述選擇之MnACWYX菌株來評估免疫原性。 結果及討論 血清群A
血清群A SBA菌株匯集庫中有17個來自南非之菌株、4個來自美國之菌株及1個來自荷蘭之菌株。該集合中之血清群A菌株有73%表現B16並有23%表現B22。此血清群A菌株之集合中之盛行的株落複合物為ST-1和ST-5。選擇其fHBP表現水準高於1100 MFI的二個表現B16之菌株和一個表現B22之菌株以用於進一步測試。使用36個批次之C’以用於C’T30/T0比篩選。由於無法根據C'合格率鑑定出不會非特異性殺死菌株PMB1546之適當的人血清補體來源，所以將PMB1546排除(表11)。由於使用青少年免疫前血清時PMB3143之基線血清陽性率高(52%)因而將PMB3143排除。PMB3257符合選擇標準：鑑定出適當之補體來源，使用青少年免疫前血清時基線血清陽性率低(例如0%)且hSBA在技術上可行。
血清群C
血清群C SBA菌株匯集庫中有49個來自美國之菌株和10個來自荷蘭之菌株。血清群C中之fHBP序列更加不均一。該菌株匯集庫中含有至少17%，即，19%之MenC菌株為fHBP A10表現菌株和10% A15表現菌株。該血清群C菌株之集合中之盛行的株落複合物為ST11/ET-37複合物和ST-103。選擇四個fHBP表現水準高於1100 MFI之菌株(其中一個菌株表現A10和三個菌株表現A15)以用於進一步測試。使用36個批次之C’以用於C’T30/T0比篩選。由於無法根據C’合格率鑑定出不會非特異性殺死表現fHBP A15之PMB5180和PMB5196菌株的適當之人血清補體來源，所以將表現fHBP A15之PMB5180和PMB5196排除(表12)。在PMB5043方面，C’通過初始篩選，但在SBA分析中由於T30/T0比率的原因而失敗。PMB5208符合選擇標準：鑑定出適當之補體來源，青少年免疫前血清之基線血清陽性率低(確認為17%)且hSBA在技術上可行。
血清群W
血清群W SBA菌株匯集庫中有14個來自美國之菌株、9個來自荷蘭之菌株和6個來自英國之最近爆發盛行的菌株。此血清群W菌株之集合中的fHBP序列較均勻。此匯集庫中之菌株有45%表現fHBP A19變體且有45%表現fHBP A10。此血清群W匯集庫中之fHBP A19變異株之盛行的株落複合物為ST-22，而fHBP A10變異株之盛行的株落複合物為ST-11/ET-37複合物。選擇二個來自美國之菌株，一個表現A19且一個表現A10。選擇二個fHBP表現水準高於1100MFI之表現A10的英國暴發菌株以用於進一步測試。使用36個批次之C’以用於C’T30/T0比篩選。四個菌株均通過此最初之C'篩選測試。根據免疫前之比率將PMB5524和PMB5163排除，因為青少年免疫前血清之血清陽性率分別為74%和48%。PMB5248和PMB5523符合選擇標準：鑑定出適當之補體來源，青少年免疫前血清之基線血清陽性率低，分別為26%和28%且hSBA在技術上可行(表13)。
血清群X
血清群X SBA菌株匯集庫中有8個來自非洲之菌株和1個來自荷蘭之菌株。五個來自非洲之菌株表現fHBP B49變體，三個菌株具有新fHBP類型且一個來自荷蘭之菌株表現fHBP B09。所有9個菌株之fHBP表現均超過1100 MFI。選擇三個非洲爆發盛行之菌株和一個來自荷蘭之菌株進行進一步測試。使用36個批次之C’以用於C'T30/T0比篩選。四株菌株均通過C’初始篩選試驗。根據免疫前比率將PMB5467排除，因為青少年免疫前血清中血清陽性率為68%。PMB5537、PMB5540和PMB5539符合選擇標準：鑑定出適當之補體來源、青少年免疫前血清中基線血清陽性率低(例如0)且hSBA在技術上可行(表14)。選擇PMB5540進行評估。
血清群Y
血清群Y SBA菌株匯集庫中有87個來自美國之菌株和30個來自荷蘭之菌株。此血清群Y菌株之集合中的fHBP序列較均勻。此匯集庫中之血清群Y菌株有66%表現fHBP A15。此血清群Y菌株之集合中表現fHBP A15變體之菌株的常見株落複合物為ST-23/集群A3。此集合中之血清群Y菌株僅15%之fHBP表現水準超過1100 MFI。選擇三個其fHBP表現水準高於1100 MFI之來自A15變體組之菌株以用於進一步測試。使用36個批次之C’以用於C'T30/T0比篩選。由於無法根據C’合格率鑑定出不會非特異性殺死PMB5122、PMB5053和PMB5050之適當之人血清補體來源，所以將PMB5122、PMB5053和PMB5050排除(表15)。選擇具有fHBP B47之PMB5187用於C’T30/T0篩選，並可鑑定不會非特異性殺死該菌株之C’來源(表15)。儘管PMB5187不表現血清群Y之盛行的fHBP變體，但該菌株符合其他選擇標準：鑑定出適當之補體來源、青少年免疫前血清之基線血清陽性率低(例如4%)且hSBA在技術上可行。
基於各別血清群之盛行的fHBP變體、fHBP表現超過1100 MFI和分析可行性(例如人補體之鑑定和基線血清陽性)選擇用於發展hSBA之MnACYWX菌株。表16中總結六種選定之MnACYWX菌株之特徵及每種變體組之中位數fHBP表現。
免疫原性分析
在hSBA中使用MnACYWX測試菌株以評估在第2期伴隨研究B1971015中登記之10歲至＜13歲的健康青少年亞群中引發之免疫反應。將針對該6個選定之菌株之由TRUMENBA引發之hSBA反應與由MENACTRA(腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖結合型疫苗[MCV4])引發之hSBA反應進行比較(表17)。
在高比例之經接種疫苗的個體中可觀察到基於hSBA效價≥1：8之實質性殺菌抗體反應，hSBA效價≥1：8為較針對MenCWYX菌株(除MenA以外)之公認的保護相關性(即，hSBA效價≥1：4)更嚴格的標準，相較於以MCV4免疫化之個體為97%，以TRUMENBA免疫化之個體為28%。針對2個血清群W菌株之TRUMENBA反應係在第2個劑量後1個月達到高峰(PMB5248為100%，PMB5523為97%)，而針對血清群C、Y、X菌株之反應係在第3個劑量後1個月達到高峰(反應率為83%-100%)。MCV4反應係在第1個劑量後1個月達到高峰，但對MenX沒有反應。TRUMENBA引發之抗體顯示出對MenX之防護潛力，此為MCV4未涵蓋者。TRUMENBA在3個劑量後，針對MnC、W或Y菌株之反應率(即，%≥1：8)與MCV4在1個劑量後之反應率相當。從MnACYWX hSBA測試菌株獲得之免疫原性數據提供針對除血清群B之外之血清群的防護概念之證據。
結論 基於各別血清群之fHBP盛行變體、fHBP-表現高於MnB之fHBP表現閾值和分析可行性(例如人補體之鑑定和基線血清陽性)來選擇用於發展hSBA之MnACYWX菌株。在使用MnACYWX菌株之hSBA中使用來自以Trumenba免疫化之個體的血清可證明由Trumenba引發之抗體可提供針對除B以外之血清群的防護作用之概念。由二價rLP2086引發之反應在第3個劑量後(例如效價≥1：8之個體的百分比)對來自血清群C、W和Y之菌株的反應與由MCV4在第1個劑量後引發之反應相當，但對血清群A菌株之反應較低。再者，二價rLP2086在高比例之個體中引發表示針對MenX之防護作用之hSBA效價≥1：8，此為MCV4未提供之防護作用。 實施例17：Trumenba引發針對非血清群B腦膜炎球菌之殺菌性抗體
引言.腦膜炎球菌(Men)為嬰兒、青少年和年輕人之細菌性腦膜炎和敗血症的主要原因。主要之致病性腦膜炎球菌血清群有5種：A、B、C、Y和W，在非洲出現第六種血清群X。在世界各地係使用四價腦膜炎球菌結合型疫苗(MCV4)來防護由腦膜炎球菌血清群A、C、Y和W引起之疾病。最近核准之意圖提供針對血清群B疾病之防護作用的疫苗TRUMENBA(MenB-FHbp，二價rLP2086，輝瑞公司，賓州Collegeville)係由2種重組脂蛋白組成，每一重組脂蛋白各自來自2種因子H結合蛋白(FHbp)系統發生(phylogenetic)亞族。編碼FHbp之基因可在幾乎所有侵襲性Men菌株中找到，與血清群分類無關。臨床前研究已證明MenB-FHbp防護其他致病血清群之潛力。在主要研究中，包括單一FHbp變體抗原之Men B疫苗BEXSERO® (MenB-4C；Novartis Inc，Cambridge，MA)能夠引發針對MenX和MenW菌株之殺菌免疫反應。本研究之目的係使用探索性分析來擴展這些觀察結果，以研究由MenB-FHbp在青少年中引發之抗體對MenA、C、W、Y和X菌株是否具殺菌效果(第7圖)，從而提供針對各血清群間之腦膜炎球菌疾病的防護潛力。 實驗概述. 從候選菌株(第8圖)中選擇如下述之菌株 •對單獨之人補體殺傷不敏感 •在使用顯示出具有針對由MenB菌株表現之FHbp的殺菌性抗體之血清的hSBA中被殺死 •接種疫苗前之血清的基線效價低(25個接種疫苗前血清；參見第9圖) 在選定之菌株方面(表18，第10圖)：發展探索性hSBA分析。參見第9圖之在hSBA中測試之血清。反應率=hSBA效價≥1：8(高於已建立之防護相關性(≥1：4))之個體的百分比(第11至16圖)。
參考第9圖. 使用25個來自A組第0個月之血清研究免疫前。使用來自30名個體之血清用於hSBA測試，該30名個體之血清係在第0和第1個月從A組抽取及在第0、1、3和7個月從B組抽取。反應率之試驗指標為效價＞1：8之血清的百分比。 第10圖-從使用FHbp反應性mAb MN 994-11之流式細胞術實驗測定之FHbp表面表現水準(MFI)的分佈。血清群內各菌株之FHbp表面表現係以黑點註記，而各血清群內之選定之測試菌株的FHbp表面表現水準係以彩色星星註記。 第11圖-MenA PMB3257(B16)之hSBA反應率(hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。獲得之幾何平均效價(GMT)分別為 2、3、4和5。在接種疫苗前陽性對照組中之個體的反應率為3%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為2和95。 第12圖-MenC PMB5208(A10)之hSBA反應率(hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所獲得之GMT分別為4、8、12和29。在接種疫苗前陽性對照組中之個體的反應率為20%，在接受MCV4後1個月之反應率為90%。陽性對照組之GMT分別為3和119。 第13圖-MenW PMB5248(A19)之hSBA反應率(hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所獲得之GMT分別為4、18、47和77。在接種疫苗前陽性對照組中之個體的反應率為40%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為5和88。 第14圖-MenW PMB5523(A10)之hSBA反應率(hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所獲得之GMT分別為7、15、21和42。在接種疫苗前陽性對照組中之個體的反應率為55%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為8和60。 第15圖-MenY PMB5187(B47)之hSBA反應率(hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所獲得之GMT分別為3、7、31和58。在接種疫苗前陽性對照組中之個體的反應率為13%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為3和79。 第16圖-MenX PMB5540(B49)之hSBA反應率(hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所獲得之GMT分別為2、3、7和20。在接種疫苗前陽性對照組中之個體的反應率為0%，在接受MCV4後1個月之反應率為0%。陽性對照組之GMT分別為2和2。
總結. 在MenW菌株，PMB5248方面，由MenB-FHbp引發之反應率在給予第2個劑量後1個月(第3個月)達到高峰(100%)，在MenC、MenY和MenX菌株，及第二個MenW菌株方面，由MenB-FHbp引發之反應率在給予第3個劑量後1個月(第7個月)達到高峰(反應率之範圍在83%至100%)。 藉由hSBA測量之針對MenA測試菌株的反應率實質上較低，在3個MenB-FHbp劑量後達到峰值28%。 公認之針對腦膜炎球菌病的防護相關性為hSBA效價≥1：4。MenB-FHbp引出至少1：8之hSBA效價的能力證明MenB-FHbp可防護由除了血清群B以外之腦膜炎球菌血清群(包括MenX)所引起之疾病的概念，該等疾病不在MCV4之防護範圍內。
實施例18：在年齡在≧24個月至＜10歲之健康個體中進行第2期，隨機化，對照，觀查者遮盲研究以描述腦膜炎球菌血清群B二價重組脂蛋白2086疫苗(二價rLP2086，即現在TRUMENBA®疫苗)之免疫原性、安全性和耐受性(B1971017-syn)。
研究設計：此為第2期，隨機化，對照，觀查者遮盲，多中心研究，其係設計用來評估當將120μg劑量水準之二價rLP2086投予年齡在≧24個月至＜10歲之健康個體以作為第0、2和6個月計劃表的一部分時，該二價rLP2086之免疫原性、安全性和耐受性(表19)。計劃將約400名個體以3：1之比例隨機分配至二個組別的其中一者。第1組在第0個月(第1次訪視)接受二價rLP2086，隨後在第2和第6個月接種疫苗。第2組在第0個月(第1次訪視)和第6個月接受經核准之小兒A型肝炎病毒(HAV)疫苗並在第2個月接受生理鹽水注射以保持研究遮盲。在每次接種疫苗後1個月和第三次接種疫苗後6個月進行追蹤訪視以收集安全性數據及/或獲得血液樣品。個體參與研究長達13個月。
投予之疫苗：在第0、2和6個月經由肌肉內注射將二價rLP2086投予在第1組中之個體手臂的上三角肌中。在第0、2和6個月分別將HAV疫苗/生理鹽水/HAV疫苗組投予在第2組中之個體手臂的上三角肌中。
免疫原性評估：為促進免疫原性分析，就在第1次疫苗接種前不久、在第2次疫苗接種後1個月及第3次疫苗接種後1和6個月從個體收集約5至10mL血液(取決於年齡)。為了評估對二價rLP2086之免疫反應，在經驗證之hSBA中以4種來自輝瑞之MnB血清殺菌分析(SBA)菌株匯集庫之主要MnB測試菌株分析功能性抗體，該4種主要MnB測試菌株係使用無偏倚算法並基於調節輸入調整流行病學盛行率從輝瑞之MnB血清殺菌分析(SBA)菌株匯集庫中選出。hSBA測量人血清中能起始補體依賴性破壞該靶的腦膜炎球菌菌株之抗體。在hSBA中使用四(4)種主要MnB測試菌株，PMB80(A22)、PMB2001(A56)、PMB2948 (B24)和PMB2707(B44)(其各自表現與該疫苗組分抗原異源之因子H結合蛋白(fHBP)變體)來測定本研究中之免疫原性試驗指標。這些分析中係使用在第一次研究疫苗接種之前、第二次研究疫苗接種後1個月及第三次研究疫苗接種後1和6個月從所有個體取得之血清。
在主要分析方面，在每個採血時間點對一半之個體(在二個組中)測試二種主要測試菌株(PMB80[A22]和PMB2948[B24])並在每個採血時間點對剩餘之另一半個體測試另外二種主要測試菌株(PMB2001[A56]和PMB2707 [B44])。
主要免疫原性試驗指標為：以二價rLP2086在年齡為≧24個月至＜4歲(在研究開始時)之個體中進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧定量下限(LLOQ)的比例；及以二價rLP2086在年齡為≧4歲至＜10歲(在研究開始時)之個體中進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ的比例。
次要免疫原性試驗指標為： •在研究開始時年齡為≧24個月至＜10歲之健康個體中： •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 •在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體、年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體、及在合併之年齡層中： •以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1和6個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ的個體之比例。 •在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月和6個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月和6個月，針對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT。
總結該可評估之免疫原性群體和mITT群體二者之次要免疫原性試驗指標。 使用下列探索性試驗指標來描述在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體、年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體、及在合併之年齡層中的健康個體之反應： •在每個適用之血液採樣時間點，其hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在每個適用之血液採樣時間點，針對該4種主要菌株的每一種菌株之hSBA GMT。 •從基線開始到以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價增加至少4倍的個體之比例： •對具有基線hSBA效價低於檢測限制(LOD)或hSBA效價＜1：4之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價達到≧1：16或LLOQ(視何者效價較高而定)。 •對具有基線hSBA效價≧LOD(即，hSBA效價達到≧1：4)及＜LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍LLOQ。 •對具有基線hSBA效價≧LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍基線效價。
結果 個體：本研究中將共400名年齡為≤24個月至＜10歲之個體隨機分組。在隨機分配之個體中，第1組中有294位個體(二價rLP2086)，第2組中有106位個體(HAV/生理鹽水)。共有200名個體被隨機分配在年齡為≧24個月至＜4歲及年齡為≧4歲至＜10歲之各年齡層中。 在400名隨機分配之個體中，390位(97.5%)個體完成研究之疫苗接種階段(直到最後一次研究疫苗接種後1個月)。共有387位(96.8%)個體完成6個月之追蹤電話聯絡。只有完成疫苗接種期和6個月追蹤電話聯絡之個體被認為已經完成這項研究。整體而言，共有375名(93.8%)個體完成所有研究程序且各年齡層完成的情況類似。 可評估之免疫原性群體共包括371位(92.8%)個體，且有29位(7.3%)個體被排除在可評估之免疫原性群體之外。所有400位被隨機分配之個體均包括在mITT群中。
免疫原性結果：本研究之主要目標為藉由hSBA，針對4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行測量來描述個體對二價rLP2086之免疫反應，該測量係在第三次疫苗接種後1個月，在年齡為≧24個月至＜4歲和≧4歲至＜10歲之健康個體中進行。對合併之年齡層(≧24個月至＜10歲)的免疫反應之描述為次要目標。主要目標之試驗指標為在第三次疫苗接種後1個月，各年齡層中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。
在投予第三個二價rLP2086劑量後一個月可在年齡為≧24個月至＜10歲之兒童中觀察到強大之免疫反應，此可藉由針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ(在A56、B24和B44方面為1：8；在A22方面為1：16)之個體的比例確認，在3個劑量後，年齡為≧24個月至＜4歲之個體對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ的比例為80.0%至100.0%，年齡為≧4歲至＜10歲之個體針對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ的比例為78.3%至100.0%。在第三次疫苗接種後1個月，合併之年齡層中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例為79.1%至100.0%。這些發現可藉由與跨越二種年齡層之基線相比較，在接受三個二價rLP2086劑量後針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之實質性GMT(範圍在19.1至191)及hSBA效價達到≧1：4(81.5%至100%)或≧1：16(75.4%至100%)之個體的比例進一步得到支持。另外，在合併之年齡層中，第三次疫苗接種後1個月針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體的比例係在76.9%至93.5%之範圍內。
該研究之次要目標為描述在投予第二個二價rLP2086劑量後一個月之免疫反應，此係藉由評估2個年齡層及合併之年齡層之≧LLOQ反應、界定之hSBA效價和hHSBA GMT來完成。在合併之年齡層方面，達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例係在48.5%至100.0%之範圍內，較年輕和年長之年齡層之間未觀察到有意義之差異。這些發現進一步藉由合併之年齡層在接受二個二價rLP2086劑量後與基線相比較，針對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT增加(範圍在11.1至96.6)或hSBA效價達到≧1：4(57.7%至100%)或≧1：16(43.1%至100%)之個體的比例得到支持。二個年齡層之間的GMT類似。另外，在合併之年齡層中，在第二次疫苗接種後1個月，針對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體的比例係在42.3%至91.0%之範圍內。
亦在投予第三個二價rLP2086劑量後6個月評估免疫持久性，該合併之年齡層中hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從第三次疫苗接種後1個月之79.1%至100%下降到第三次疫苗接種後6個月變成10.4%至82.4%。除了在A22方面，較年長之兒童中達到hSBA效價≧LLOQ之個體比例高於較年幼之兒童(46%，95%CI 33.4，59.1對19%，95%CI 10.2，30.9)外，2個年齡層之間未觀察到差異。然而，在A22方面，較年長之年齡層中，接種疫苗前之基線效價≧LLOQ的比率較高(13.6%對4.4%)。在合併之年齡層中亦觀察到類似之趨勢，在第三次接種疫苗後6個月具有保護性hSBA效價達到≧1：4之個體的比例在13.3%至84.0%，GMT為5.1至31.3。
總結，在0、2和6個月計劃表中以3個劑量給予之二價rLP2086在年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童中引發強大之免疫反應，藉由hSBA測量時，有高比例之個體在第三個劑量後取得保護性抗體效價。年齡為≧24個月至＜4歲之幼兒和年齡為≧4歲至＜10歲之兒童之間未觀察到臨床上有意義之差異。在第三個劑量後6個月抗體反應下降，但仍高於接種疫苗前基線之比率。
結論：總之，在0、2和6個月計劃表中以3劑量系列投予年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童的二價rLP2086在第二和第三個劑量後在大部分的個體中引發強大之免疫反應，藉由hSBA測量時在第三個劑量後取得保護性抗體效價。hSBA效價在3劑量系列後6個月降低。如本研究中投予之疫苗對年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童而言安全且耐受性良好，具有可接受之安全性變化形廓。
實施例19：在年齡為24個月至＜10歲之健康個體中進行第2期，隨機化，對照，觀查者遮盲研究以描述腦膜炎球菌血清群B二價重組脂蛋白2086疫苗(二價rLP2086，即現在之TRUMENBA®疫苗)之免疫原性、安全性和耐受性(B1971017-CSR)
二價rLP2086之初始製劑(其不包含聚山梨醇酯80)已在成人、青少年、兒童和幼兒之第一期研究中評估，該二價rLP2086之初始製劑在這些群體中被證實具有令人滿意之安全性、耐受性和免疫原性變化形廓。該初始製劑已顯示出在高達200μg之劑量具有可接受之安全性略圖且如藉由hSBA測量時為免疫原性的。劑量水準為20μg、60μg和200μg之初始製劑已在年齡為18至36個月之幼兒中進行研究(計劃編號6108A1-502-AU)。在6108A1-502-AU研究中，各劑量組之局部反應頻率一般高於A型肝炎病毒(HAV)疫苗/安慰劑組，但在大多數情況下，該反應為輕度或中度嚴重。發燒之發生率趨向隨著劑量水準增加而增加。在任何劑量後報告任何發燒之個體比例在該20μg組中為36.4%、在60μg組中為39.1%且在200μg組中為54.5%。各疫苗組中之其他全身性事件的頻率大致上與HAV/安慰劑組之頻率相當。大多數個體在第三次疫苗接種後具有針對MnB菌株之hSBA反應。
與該初始製劑相比較，藥物製造過程和藥物製劑已經過改進(包括加入聚山梨醇酯80)，該改進之設計是增加製造之可擴充性並確保該疫苗之最終製劑的長期穩定性。參與以二價rLP2086之最終製劑進行之研究的成人和青少年的安全性數據與最初製劑之安全性相一致。所有年齡組中之局部反應和全身性事件通常為輕度或中度嚴重。嚴重事件相對罕見。此外，在免疫持久性研究6108A1-1002-AU、6108A1-2001及B1971033中，在二價rLP2086之第三個劑量後之6個月至48個月的後續不良事件(AE)數據並無安全性問題。嚴重不良事件(SAE)很少發生且大多數被認為與該研究疫苗無關。由於不良事件而從研究中撤出的人數很少。
以該疫苗之最終製劑進行二個(2)第2期研究(B1971017和B1971035)以探討該疫苗在兒童(12個月至＜10歲)中之免疫原性和安全性。研究B1971035持續進行並經過設計以評估2種不同劑量水準(60μg和120μg)在12個月至＜24個月之健康幼兒中之安全性、耐受性和免疫原性。該研究(B1971017)對年齡為≧24個月至＜10歲之健康個體投予120μg劑量水準之二價rLP2086(最終製劑)作為第0、2和6個月計劃表之一部分以評估免疫原性、安全性和耐受性。計劃將約400名個體以3：1之比例隨機分配在2組的其中一組。第1組在第0個月(第1次訪視)接受二價rLP2086，隨後在第2和第6個月接種疫苗。第2組在第0個月(第1次訪視)和第6個月接受HAV疫苗，並在第2個月接受生理鹽水注射。根據年齡層隨機分配以確保在≧24個月至＜4歲和≧4歲月至＜10歲之年齡層中包括相等之個體數。
該研究(B1971017)為第2期，隨機化，對照，觀查者遮盲，多中心研究，其中計劃將約400名個體以3：1之比例隨機分配在2組的其中一組。第1組在第0個月(第1次訪視)接受二價rLP2086，隨後在第2和第6個月接種疫苗。第2組在第0個月(第1次訪視)和第6個月接受經核准之兒科HAV疫苗，並且在第2個月時注射生理鹽水以維持研究遮盲。根據年齡層隨機分配以確保在≧24個月至＜4歲和≧4歲月至＜10歲之年齡層中包括相等之個體數。該研究計劃登記約200名年齡為≧24個月至＜4歲之個體和約200名年齡為≧4歲至＜10歲之個體。
該研究對年齡為≧24個月至＜10歲之健康個體投予120μg劑量水準之二價rLP2086作為第0、2和6個月計劃表之一部分以評估免疫原性、安全性和耐受性。在每次疫苗接種後1個月和第三次疫苗接種後6個月進行追蹤訪視，以收集安全性數據及/或獲得血液樣品。個體參與該研究達13個月。二價rLP2086(含有各為60μg之純化之亞族A和亞族B rLP2086蛋白，其係吸附至在無菌之緩衝等張懸浮液中的鋁)係提供在用於注射之0.5mL劑量中。
經核准之兒科HAV疫苗係提供在用於注射之0.5mL劑量中。 在第一組方面，59.31%之年齡為≥24個月至＜4歲的個體和57.05%之年齡為≥4歲至＜10歲之個體接受伴隨治療。在第二組方面，58.18%之年齡為≥24個月至＜4歲的個體和52.94%之年齡為≥4歲至＜10歲的個體接受伴隨治療。研究期間最常見之伴隨治療為布洛芬、撲熱息痛和阿莫西林。
二價rLP2086血清殺菌分析-主要測試菌株 為了評估對二價rLP2086之免疫反應，在經驗證之hSBA中以4種主要MnB測試菌株來分析功能性抗體，該4種主要MnB測試菌株係使用無偏倚算法並基於調節輸入調整流行病學盛行率從輝瑞之MnB血清殺菌分析(SBA)菌株匯集庫中選出。hSBA測量人血清中能起始補體依賴性破壞該靶的腦膜炎球菌菌株之抗體。在hSBA中使用四(4)種主要MnB測試菌株，PMB80(A22)、PMB2001(A56)、PMB2948(B24)和PMB2707(B44)(其各自表現與該疫苗組分抗原異源之fHBP變體)來測定本研究中之免疫原性試驗指標。這些分析中係使用在第一次研究疫苗接種之前、第二次研究疫苗接種後1個月及第三次研究疫苗接種後1和6個月從所有個體取得之血清。
在主要分析方面，在每個採血時間點對一半之個體(在二個組中)測試二種主要測試菌株(PMB80 [A22]和PMB2948 [B24])並在每個採血時間點對剩餘之另一半個體測試另外二種主要測試菌株(PMB2001[A56]和PMB2707 [B44])。
免疫原性分析 免疫原性分析並無假設測試。使用評估方法來評估主要、次要和探索性目標。 在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1和6個月計算每個年齡層和合併之年齡層之各組中對各試驗菌株之hSBA效價達到定量(LLOQ)下限的個體之比例及雙邊95%準確置信區間(CI)。 主要免疫原性試驗指標
主要免疫原性試驗指標為： •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之年齡為≧24個月至＜4歲(在研究開始時)之個體的比例。•以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ的年齡為≧4歲至＜10歲(在研究開始時)之個體的比例。 次要免疫原性試驗指標
次要免疫原性試驗指標為： •在研究開始時年齡為≧24個月至＜10歲之健康個體中： •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 •在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體、年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體、及在合併之年齡層中： •以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1和6個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ的個體之比例。 •在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月和6個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月和6個月，對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT。 探索性免疫原性試驗指標
在探索性試驗指標方面，不對所有4種主要MnB測試菌株進行測試。相反地，使用菌株PMB2001(A56)和PMB2707(B44)，但不使用PMB80(A22)或PMB2948(B24)在50%個體中進行測試。使用菌株PMB80(A22)或PMB2948 (B24)，但不使用PMB2001(A56)或PMB2707(B44)在剩餘之50%個體中進行測試。下文中具體指明之所有探索性試驗指標可能已應用於來自所有接受二價rLP2086之個體的hSBA結果且可能已在指定之時間點對適當之菌株進行測試。 使用下列探索性試驗指標來描述在研究開始時年齡為≧24個月至＜4歲之健康個體、年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體、及在合併之年齡層中的健康個體之反應： •在每個適用之血液採樣時間點，其hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在每個適用之血液採樣時間點之針對該4種主要菌株的每一種菌株之hSBA GMT。 •從基線開始到以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價增加至少4倍的個體之比例： •對具有基線hSBA效價低於檢測限制(LOD)或其hSBA效價＜1：4之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價達到≧1：16或LLOQ(視何者效價較高而定)。 •對具有基線hSBA效價≧LOD(即，hSBA效價達到≧1：4)及＜LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍LLOQ。 •對具有基線hSBA效價≧LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍基線效價。 分析方法
免疫原性之主要分析包括估計在各年齡層及合併之年齡層的每一組中在第三次疫苗接種後1個月針對各試驗菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例，連同雙邊95%準確置信區間CI。 所有二元試驗指標(包括主要試驗指標)均以使用精確方法之雙邊95%CI總結。hSBA之GMT結果亦以95%CI總結。 PMB80(A22)之LLOQ為1：16，PMB2001(A56)之LLOQ為1：8，PMB2707(B44)之LLOQ為1：8且PMB2948 (B24)之LLOQ為1：8。 在GMT之計算方面，低於LLOQ之hSBA結果設為主要分析之0.5×LLOQ。 主要試驗指標分析
主要目標之主要分析係基於可評估之免疫原性群體。以雙邊95%精確CI計算在第三次疫苗接種後1個月，各組中對各測試菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。為了滿足這2個主要目標，呈現之這些數據為2個年齡層之數據：≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲。 所有二元試驗指標(包括主要試驗指標)均以使用精確方法之雙邊95%CI總結。hSBA之GMT結果亦以95%CI總結。 為了支持對該主要分析之解釋，進行基於mITT群體之同一分析。 次要和探索性試驗指標分析
下列分析滿足次級和探索性免疫原性目標： 在可評估之免疫原性和mITT群體的個別二個年齡層及合併之年齡層中分析在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後6個月，對該4種主要菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。 在可評估之免疫原性和mITT群體的個別二個年齡層及合併之年齡層中分析在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月和6個月，對該4種主要菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 在可評估之免疫原性和mITT群體的個別二個年齡層及合併之年齡層中分析在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月和6個月，對該4種主要菌株的每一種菌株之基線hSBA GMT。 總結在可評估之免疫原性和mITT群體的個別二個年齡層及合併之年齡層中各適用之時間點的探索性終點。 反向累積分佈曲線
藉由圖表評估該可評估之免疫原性群體在每個採樣時間點對該4種主要菌株的每一種菌株之經驗性反向累積分佈曲線(RCDC)。 免疫原性評估分析之群體
該可評估之免疫原性群體為用於免疫原性分析之主要分析群體。該mITT群體係作為免疫原性分析之支持性免疫原性群體。 可評估之免疫原性群體中共包括371名(92.8%)個體並有29名(7.3%)個體被排除在該可評估之免疫原性群體外。個體被排除在該可評估之免疫原性群體外的原因可能超過1個。共21名(5.3%)個體因為缺乏在第一個疫苗劑量之前或第三次疫苗接種後之基線抽血而被排除在該可評估之免疫原性群體外，15名(3.8%)個體在任一次訪視中均無有效和確定之分析結果，11名(2.8%)個體不合格或在疫苗接種之前或第三次疫苗接種訪視後1個月失去資格，11名(2.8%)個體在所有疫苗接種訪視中因被隨機分配而未接受任何疫苗接種並有4名(1.0%)個體被醫療監測員鑑定為具有重大方案偏差。總體而言，在被排除在該可評估之免疫原性群體外之個體的百分比方面，該2個研究組和2個年齡層彼此相當。 全部400名被隨機分配之個體均包括在該mITT群中。 免疫原性結果
下列章節提供主要免疫原性試驗指標、次要免疫原性試驗指標和探索性免疫原性試驗指標之分析結果。 主要和次要試驗指標 達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例
主要免疫原性試驗指標為年齡為以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，年齡為≧24個月至＜4歲(在研究開始時)及≧4歲至＜10歲(在研究開始時)之健康個體中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。次要試驗指標為以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月，在個別年齡層及合併之年齡層中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 表20中呈現該可評估之免疫原性群體之各個年齡層中，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。
在第1組中，年齡為≧24個月至＜4歲及年齡為≧4歲至＜10歲之群體的基線hSBA效價≧LLOQ的個體比例在PMB80(A22)方面分別為4.4%和13.6%；在PMB2001 (A56)方面分別為1.5%和15.4%；在PMB2948(B24)方面分別為3.0%和7.5%；且在PMB2707(B44)方面二個年齡層均為0.0%。 總體而言，在合併之年齡層中，第1組中具有基線hSBA效價≧LLOQ之個體的比例在PMB80(A22)方面為9.02%，在PMB2001(A56)方面為8.3%，在PMB2948(B24)方面為5.2%，且在PMB2707(B44)方面為0.0%。 在第二次疫苗接種後1個月，第1組中具有hSBA效價≧LLOQ之年齡為≧24個月至＜4歲及年齡為≧4歲至＜10歲之個體的比例在PMB80(A22)方面分別為59.4%和78.8%；在PMB2001(A56)方面二個年齡層均為100.0%；在PMB2948 (B24)方面分別為49.2%和65.1%；且在PMB2707(B44)方面分別為57.1%和40.3%。 總體而言，在合併之年齡層中，在第二次疫苗接種後1個月，第1組中具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例在PMB80(A22)方面為69.2%，在PMB2001(A56)方面為100.0 %，在PMB2948(B24)方面為57%且在PMB2707(B44)方面為48.5%。
在第三次疫苗接種後1個月，第1組中具有hSBA效價≧LLOQ之年齡為≧24個月至＜4歲及年齡為≧4歲至＜10歲之個體的比例在PMB80(A22)方面分別為83.8%和91.0%；在PMB2001(A56)方面二個年齡層均為100.0%；在PMB2948(B24)方面分別為85.7%和92.1%；且在PMB2707 (B44)方面分別為80.0%和78.3%。 總體而言，在合併之年齡層中，在第三次疫苗接種後1個月，第1組中具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例在PMB80(A22)方面為87.4%，在PMB2001(A56)方面為100.0%，在PMB2948(B24)方面為88.9%，且在PMB2707 (B44)方面為79.1%。 一般而言，與基線相比較，第2組中具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例並未隨時間變化。在合併之年齡層中，在任何時間點具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例在PMB80(A22)方面為4.4%至8.5%；在PMB2001(A56)方面為14.9%至20.9%；在PMB2948(B24)方面為0.0%至8.9%；且在PMB2707(B44)方面每個時間點均為0.0%。 mITT群體之結果類似於該可評估之免疫原性群體的結果。 該可評估之免疫原性群體中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體比例的亞群分析按性別、種族和國家呈現。在進行分析之亞群分析中未觀察到臨床上重要的差異。 免疫持久性：第三次疫苗接種後6個月達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例
以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後6個月，在年齡為≧24個月至＜4歲、年齡為≧4歲至＜10歲及合併之年齡層(≧24個月至＜10歲)中對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ的個體之比例為次要免疫原性試驗指標。表20中呈現該可評估之免疫原性群體之每個年齡層中對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 大致上，在第三次疫苗接種後6個月，該二個年齡層中第一組個體中觀察到的該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例均有減少。
在年齡為≧24個月至＜4歲之個體方面，從第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，對PMB80(A22)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從83.8%降至19.0%；對PMB2001(A56)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從100.0%降至80.3%；對PMB2948(B24)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從85.7%降至9.2%；對PMB2707(B44)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從80.0%降至12.1%。
在年齡為≧4歲至＜10歲之個體方面，從第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，對PMB80 (A22)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從91.0%降至46.0%；對PMB2001(A56)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從100.0%降至84.3%；對PMB2948(B24)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從92.1%降至21.9%；對PMB2707(B44)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例分別從78.3%降至8.7%。
整體而言，在合併之年齡層方面，從第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，對PMB80 (A22)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從87.4%降至32.5%；對PMB2001(A56)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從100.0%降至82.4%；對PMB2948(B24)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從88.9%降至15.5%；對PMB2707(B44)具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從79.1%降至10.4%。 一般而言，與基線相比較，具有hSBA效價≧LLOQ之第2組個體的比例並未隨時間變化。
hSBA GMT。在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月和第三次疫苗接種後1個月對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT為次要試驗指標。表21提供該可評估之免疫原性群體針對該4種主要MnB測試菌株之hSBA GMT。
在年齡為≧24個月至＜4歲和年齡為≧4歲至＜10歲之第1組個體方面，針對PMB80(A22)之基線hSBA GMT分別為8.3和9.1；針對PMB2001(A56)之基線hSBA GMT分別為4.1和5.8；針對PMB2948(B24)之基線hSBA GMT分別為4.3和4.6；針對PMB2707(B44)之基線hSBA GMT均為4.0。
在年齡為≧24個月至＜10歲之第1組個體方面，針對PMB80(A22)之基線hSBA GMT為8.7；針對PMB2001(A56)之基線hSBA GMT為4.9；針對PMB2948(B24)之基線hSBA GMT為4.5；針對PMB2707(B44)之基線hSBA GMT為4.0。
在年齡為≧24個月至＜4歲和年齡為≧4歲至＜10歲之第1組個體方面，在第2次疫苗接種後1個月針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為17.4和23.1；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為103.8和90.0；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為9.1和13.7；針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為17.1和8.2。
在年齡為≧24個月至＜10歲之第1組個體方面，在第2次疫苗接種後1個月針對PMB80(A22)之hSBA GMT為20.1；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT為96.6；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT為hSBA GMT為11.1；針對PMB2707(B44)之hSBA GMT為11.7。
在年齡為≧24個月至＜4歲和年齡為≧4歲至＜10歲之第1組個體方面，在第3次疫苗接種後1個月針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為33.7和38.2；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為175.6和191.0；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為19.1和26.8；針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為43.6和36.5。
在年齡在≧24個月至＜10歲之第1組個體方面，在第3次疫苗接種後1個月，針對PMB80(A22)之hSBA GMT為35.8；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT為183.3；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT為22.6；針對PMB2707 (B44)之hSBA GMT為39.8。
一般而言，與基線相比較，第2組中之個體的hSBA GMT並未隨時間變化。在合併之年齡層方面，在任何時間點針對PMB80(A22)之hSBA GMT係在8.6至8.9之範圍內；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT係在5.6至6.0之範圍內；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT係在4.0至4.8之範圍內；針對PMB2707(B44)方面均為4.0。
該可評估之免疫原性群體和mITT群體中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT的亞群分析按性別、種族和國家呈現。在進行分析之亞群分析中未觀察到臨床上重要的差異。 免疫持久性：hSBA GMT
次要試驗指標為以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後6個月針對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT。表21提供該可評估之免疫原性群體之針對該4種主要MnB測試菌株之hSBA GMT。
總體而言，第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月可在二個年齡層之第1組個體中觀察到對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株的hSBA GMT下降。
在年齡為≧24個月至＜4歲之第1組個體方面，第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月針對PMB80(A22)之hSBA GMT從33.7降至10.9，針對PMB2001(A56)之hSBA GMT從175.6降至27.0，針對PMB2948(B24)之hSBA GMT從19.1降至5.1，針對PMB2707(B44)之hSBA GMT從43.6降至5.2。
在年齡為≧4歲至＜10歲之第1組個體方面，第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，針對PMB80(A22)之hSBA GMT從38.2降至14.2，針對PMB2001 (A56)之hSBA GMT從191.0降至35.7，針對PMB2948(B24)之hSBA GMT從26.8降至6.2，針對PMB2707(B44)之hSBA GMT從36.5降至5.0。
在年齡在≧24個月至＜10歲之第1組個體方面，第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，針對PMB80(A22)之hSBA GMT從35.8降至12.4，針對PMB2001(A56)之hSBA GMT從183.3降至31.3，針對PMB2948(B24)之hSBA GMT從22.6降至5.6，針對PMB2707(B44)之hSBA GMT從39.8降至5.1。 一般而言，與基線相比較，第2組中之個體的hSBA GMT未隨時間變化。 界定之hSBA效價
年齡為≧24個月至＜4歲、≧4歲至＜10歲及合併之年齡層中之個體在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月達到對4種主要測試菌株之hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128的個體比例為次要免疫原性試驗指標。 評估該可評估之免疫原性群體中針對該4種主要MnB菌株之hSBA效價達到界定之hSBA效價的個體比例。
下文中描述達到hSBA效價≥1：4和≥1：16之個體。hSBA效價≥1：4被廣泛承認為與防護IMD相關；然而，更保守之hSBA效價≥1：16已被視為表示在接種疫苗前為血清陰性之個體的4倍疫苗效果之水準。
在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在基線時具有針對PMB80(A22)之hBSA效價≥1：4的個體比例分別為5.9%和19.7%；針對PMB2001 (A56)之hBSA效價≥1：4的個體比例分別為3.0%和18.5%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價≥1：4的個體比例分別為4.5%和9.0%；針對PMB2707(B44)之hBSA效價≥1：4的個體比例分別為0.0%和1.4%。在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在基線時具有針對PMB80 (A22)之hBSA效價≥1：16的個體比例分別為4.4%和13.6%；針對PMB2001(A56)之hBSA效價≥1：16的個體比例分別為1.5%和15.4%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價≥1：16的個體比例分別為3.0%和6.0%；針對PMB2707 (B44)之hBSA效價≥1：16的個體比例均為0.0%。
在合併之年齡層之第1組個體中，在基線時具有針對PMB80(A22)之hBSA效價≥1：4和≥1：16之個體的比例分別為12.7%和9.0%；針對PMB2001(A56)之hBSA效價≥1：4和≥1：16之個體的比例分別為10.6%和8.3%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價≥1：4和≥1：16之個體的比例分別為6.7%和4.5%；針對PMB2707(B44)之hBSA效價≥1：4和≥1：16之個體的比例分別為0.7%和0.0%。
在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在第二次疫苗接種後1個月具有針對PMB80 (A22)之hBSA效價≥1：4之個體的比例分別為65.6%和83.3%；針對PMB2001(A56)之hBSA效價≥1：4均為100.0%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價≥1：4之個體的比例分別為53.8%和68.3%；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價≥1：4之個體的比例分別為49.3%和66.7%。在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在第二次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價≥1：16之個體的比例分別為59.4%和78.8%；針對PMB2001 (A56)之hBSA效價≥1：16之個體的比例分別為98.5%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價≥1：16之個體的比例分別為43.1%和58.7%；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價≥1：16之個體的比例分別為31.3%和55.6%。
在合併之年齡層之第1組個體中，在第二次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為74.6%和69.2%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為100.0%和99.2%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為60.9%和50.8%；針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為57.7%和43.1%。
在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在第三次疫苗接種後1個月具有針對PMB80 (A22)之hBSA效價≥1：4之個體的比例分別86.8%和98.5%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例在二個年齡層均為100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為90.5%和95.2%；針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為81.5%和82.6%。在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在第三次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價≥1：16之個體的比例分別83.8和91.0%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例在二個年齡層均為100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為81.0%和88.9%；針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為81.5%至82.6%和80.0至75.4%。
在合併之年齡層之第1組個體中，在第二次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為92.6%和87.4%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為92.9%和84.9%；及針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4和≥1：16之個體的比例分別為82.1%和77.6%。
一般而言，與基線相比較，第2組中達到界定之hSBA效價之個體的比例並未隨時間改變。 mITT群體之結果與可評估之免疫原性群體之結果相似。 免疫持久性：界定之hSBA效價
以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後6個月，年齡為≧24個月至＜4歲、≧4歲至＜10歲及合併之年齡層中對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例為次要免疫原性試驗指標。評定該可評估之免疫原性群體中達到對該4種主要MnB測試菌株之界定之hSBA效價的個體之比例。
整體而言，從第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月在二個年齡層中所觀察到之達到界定之hSBA效價的第1組個體之比例下降。
在年齡為≧24個月至＜4歲和年齡為≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，具有針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別從86.8%下降至25.4%和從98.5%下降至55.6%；具有針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別從100.0%下降至82.0%和從100.0%下降至85.7%；具有針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別從90.5%下降至13.8%和從95.2%下降至26.6%；且具有針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別從81.5%下降至13.6%和從82.6%下降至13.0%。
在合併之年齡層之第1組個體中，在第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，具有針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例從92.6%下降至40.5%；具有針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例從100.0%下降至84.0%；具有針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例從92.9%下降至20.2%；且具有針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例82.1%下降至13.3%。
在年齡為≧24個月至＜4歲和年齡為≧4歲至＜10歲之第1組個體中，在第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，具有針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別從83.8%下降至19.0%和從91.0%下降至46.0%；具有針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別從100.0%下降至77.0%和從100.0%下降至82.9%；具有針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別從81.0%下降至9.2%和從88.9%下降至20.3%；且具有針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別從80.0%下降至9.1%和從75.4%下降至7.2%。
在合併之年齡層之第1組個體中，在第三次疫苗接種後1個月至第三次疫苗接種後6個月，具有針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例從87.4%下降至32.5%；具有針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例從100.0%下降至80.2%；具有針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例從84.9%下降至14.7%；且具有針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例從77.6%下降至8.1%。
一般來說，與基線相比較，第2組中達到界定之hSBA效價之個體的比例並未隨時間改變。 探索性免疫原性試驗指標
一些探索性免疫原性試驗指標之分析係基於半數個體針對菌株PMB2001(A56)和PMB2707(B44)之hSBA結果及剩餘之半數個體針對菌株PMB80(A22)和PMB2948 (B24)之hSBA結果。分析之探索性試驗指標為從基線開始hSBA效價增加≧4倍。 從基線開始hSBA效價增加4倍
表22呈現具有針對該4種主要測試菌株之hSBA效價從基線開始增加≥4倍之個體的比例。
在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，從基線開始到第二次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為56.3%和63.6%；針對PMB2001(A56)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為100.0%和82.1%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為43.1%和54.0%；針對PMB2707(B44)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為54.0%和31.3%。
在合併之年齡層之第1組個體中，從基線開始到第二次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為60.0%；針對PMB2001 (A56)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為91.01%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為48.4 %；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為42.3%。
年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，從基線開始到第三次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為79.4%和77.6%；針對PMB2001(A56)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為98.5%和88.7%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為77.8%和82.5%；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為78.5%和75.4%。
在合併之年齡層之第1組個體中，從基線開始到第三次疫苗接種後1個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為78.5%；針對PMB2001 (A56)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為93.5%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為80.2%；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為76.9%。
在年齡為≧24個月至＜4歲及≧4歲至＜10歲之第1組個體中，從基線開始到第三次疫苗接種後6個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為19.0%和36.5%；針對PMB2001(A56)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為75.4%和64.3%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為6.2%和17.2%；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例分別為7.6%和7.2%。
在合併之年齡層之第1組個體中，從基線開始到第三次疫苗接種後6個月具有針對PMB80(A22)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為27.8%；針對PMB2001 (A56)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為69.5%；針對PMB2948(B24)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為11.6 %；且針對PMB2707(B44)之hBSA效價增加≥4倍之個體比例為7.4%。 mITT群體可觀察到類似之結果。
額外之免疫原性分析 主要MnB試驗菌株之缺失hSBA數據的評估
在所有免疫原性分析中僅包括有效和確定之hSBA結果。 hSBA之結果由於下列原因而被排除在免疫原性分析之外(或認為缺失)： ．該個體退出研究。 ．該個體無用於檢測之血液樣本，但未從該研究中退出。 ．血液量不足以進行該分析。此在分析結果中係輸入為“數量不足”。 ．樣本接受測試，但不能可靠地測定數值效價。此在分析結果中係輸入為“不確定”。 反向累積分佈曲線
評估在組合之年齡層中對該4種主要菌株的每一種菌株及在每個採樣時間點顯現出hSBA反應(≧LLOQ)之個體比例的RCDC。亦評估年齡為≧24個月至＜4歲之個體對該4種主要菌株的每一種菌株及在每個採樣時間點之RCDC。評估年齡為≧4歲至＜10歲之個體對該4種主要菌株的每一種菌株及在每個採樣時間點之RCDC。 RCDC顯示出在二個年齡層中之大多數個體在接受第二和第三個二價rLP2086劑量後1個月對該主要MnB測試菌株的每一種菌株顯現出可測量之hSBA反應。 免疫原性結論
本研究之主要目標為藉由在第三次疫苗接種後1個月測量年齡為≧24個月至＜4歲和年齡為≧4歲至＜10歲之健康個體針對4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白且2種表現LP2086亞族B蛋白)之hSBA來描述個體對二價rLP2086之免疫反應。對合併之年齡層(≧24個月至＜10歲)之免疫反應的描述為次要目標。主要目標之試驗指標為在第三次疫苗接種後1個月各年齡層中對該4種主要MnB菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。
在第三個二價rLP2086劑量後1個月可在年齡為≧24個月至＜10歲之兒童中觀察到強大之免疫反應，此係藉由在三個劑量後年齡為≧24個月至＜4歲之個體對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ(在A56、B24和B44方面為1：8；且在A22方面為1：16)之個體比例(範圍在80.0%至100.0%)及年齡為≧4歲至＜10歲之個體對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體比例(範圍在78.3%至100.0%)獲得確認。在合併之年齡層中，在第三次疫苗接種後1個月，對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例係在79.1%至100.0%之範圍內。這些發現可進一步由實質性GMT(範圍在19.1至191)及在接受三個二價rLP2086劑量後，與基線相比較，跨二個年齡層之個體中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧1：4(81.5%至100%)或1：16(75.4%至100%)之個體比例得到支持。另外，在合併之年齡層中，在第三次疫苗接種後1個月針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體的比例係在76.9%至93.5%之範圍內。
該研究之次要目標係藉由評估2個年齡層及合併之年齡層之≧LLOQ反應、界定之hSBA效價和hHSBA GMT來描述在第二個二價rLP2086劑量後一個月之免疫反應。在合併之年齡層方面，達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例係在48.5%至100.0%，在較年輕和較年長之年齡層之間並未觀察到有意義之差異。這些發現進一步由合併之年齡層在接受二個二價rLP2086劑量後與基線相比較，對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT增加(範圍在11.1至96.6)及達到hSBA效價達到≧1：4(57.7%至100%)或≧1：16(43.1%至100%)之個體的比例得到支持。二個年齡層之間的GMT類似。另外，在第二次疫苗接種後1個月，在合併之年齡層中對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體比例係在42.3%至91.0%之範圍內。
亦在第三個二價rLP2086劑量後6個月評估免疫持久性，該合併之年齡層中具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從第三次疫苗接種後1個月之79.1%至100%下降到第三次疫苗接種後6個月為10.4%至82.4%。除了A22之外，2個年齡層之間未觀察到差異，在A22方面，較年長之兒童中hSBA效價≧LLOQ之個體的比例高於較年幼之兒童(46%，95%CI 33.4，59.1對19%，95%CI 10.2，30.9)。然而，在A22方面，較長之年齡層中接種疫苗前基線效價≧LLOQ的比率較高(13.6%對4.4%)。在合併之年齡層中亦觀察到類似趨勢，在第三次疫苗接種後6個月具有保護性hSBA效價達到≧1：4之個體比例的範圍係在13.3%至84.0 %，而GMT之範圍係在5.1至31.3。
總結，在0、2和6個月計劃表中以3個劑量給予之二價rLP2086在年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童中引發強大之免疫反應，藉由hSBA測量時，在第三個劑量後有高比例之個體取得保護性抗體效價。年齡為≧24個月至＜4歲之幼兒和年齡為≧4歲至＜10歲之兒童之間未觀察到臨床上有意義之差異。抗體反應在第三個劑量後6個月下降，但保持高於疫苗接種前之基線比率。 討論和總體結論 免疫原性討論
來自該給予年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童之3劑量二價rLP2086方案(第0、2和6個月計劃表)的第2期研究結果與先前在青少年和年輕人身上進行之研究相一致。對二價rLP2086疫苗接種之免疫原性反應係利用4種主要之MnB測試菌株(各自表現與該疫苗組分抗原異源之fHBP變體)在經驗證之hSBA中，採用較公認之保護相關性(即，hSBA效價≥1：4)更嚴格之標準測量。基於在第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株之hSBA效價≧LLOQ，與參與研究B1971009之青少年(10歲至＜19歲)相比較，參與本研究之幼兒和兒童具有類似之免疫反應，在第三次疫苗接種(第0、2和6個月計劃表)後本研究中達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為79.1%至100%，而研究B1971009中達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為87.1%至99.5%。在這2個研究之間，在第三次疫苗接種後1個月對該4種主要測試菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例並沒有明顯之有意義的差異，儘管事實上與本研究中之幼兒和兒童相比較，在研究B1971009中，在疫苗接種前hSBA效價達到≧LLOQ之青少年個體的比例高出許多，尤其是針對A22(分別為27.5%和8.3%)和A56(分別為33.2%和9%)測試菌株時。二價rLP2086顯示出在≧24個月至＜10歲的群體中具有高度免疫原性且可能提供針對MnB感染之防護作用，類似於基於hSBA保護相關性之對青少年的預期保護。
關於次要目標，本研究中在第二個二價rLP2086劑量後1個月在合併之年齡層(≧24個月至＜10歲)中對該4種主要MnB測試菌株之免疫反應相當強，達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例係在48.5%至100%之範圍內。除了菌株A56外，這些反應較在參與研究B1971009之青少年(10歲至＜19歲)中所觀察到之免疫反應低，研究B1971009係相隔2個月接受2個二價rLP2086劑量，範圍係在64%至99.1%內。本研究中藉由在第三次疫苗接種後6個月測量hSBA效價來評估幼兒和兒童之免疫持久性。達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例從第三次疫苗接種後1個月之79.1%至100%下降到第三次疫苗接種後6個月為10.4%至82.4%。在第三次疫苗接種後6個月，GMT和具有界定之hSBA效價之個體的比例亦下降。雖然本研究中在第三次疫苗接種後6個月達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例(10.4%至82.4%)低於參與研究6108A1-2001之青少年(11歲至＜19歲)的比例(36.7%至89.4%)，該比例仍然較年齡為≧24個月至＜10歲之個體在基線時具有hSBA效價≧LLOQ之比例(0%至9%)高。腦膜炎球菌定殖率直到成年早期你隨著年齡增加而增加已是被充分確定的。年齡為≧24個月至＜10歲之個體與較年長組之個體之間的差異可能部分歸因於具有基線效價≧LLOQ之個體的比例，在研究B1971009中該比例高達27.5%(A56)和33.2%(A22)，在研究6108A1-2001中針對亞族A菌株之基線效價≧LLOQ之個體的比例為7.4%至13.4%。此外，最近之研究顯示具有防護性hSBA效價(接種疫苗前)之個體中攜帶較多疾病相關之血清群B菌株且疫苗接種並不影響這些疾病相關菌株之後續攜帶量。這表明，攜帶量可能會影響基線hSBA效價且接種疫苗後之持久性或再定殖可能促成在接種疫苗後6個月在青少年中觀察到具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例較本研究中之幼兒和兒童的比例來得高，吾人推測幼兒和兒童較不可能被定殖且在基線時具有hSBA效價≧LLOQ之比例較低。在嬰兒和兒童中使用單價軛合腦膜炎球菌血清群C疫苗進行免疫持久性研究同樣顯示出保護性免疫迅速減弱。然而，即使在完成初次劑量4年後針對血清群C之hSBA效價＞1：8的百分比僅為46.9%的兒童組中，後續之加強劑量可在加強劑後之1個月和1年在100%個體中提供效價＞1：8。這表明即使是那些在加強劑量之前被認為是血清陰性之患者亦在加強疫苗接種後具有持續長達一年之強烈的回憶性反應。因此，在那些在幼兒和兒童時接受他們初步之二價rLP2086系列的個人中，加強劑後之反應和持久性研究保證更深入了解加強劑量於青少年到成年早期提供針對IMD之防護的用途。
總結，在第0、2和6個月計劃表中投予之二價rLP2086在年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童中為高度免疫原性，藉由hSBA測量時有高比例之個體在第三個劑量後取得保護性免疫反應。如本研究中所測量之免疫反應似乎與先前研究中在第二和第三個劑量後1個月在青少年中所觀察到者類似。該3-劑量方案似乎在年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童中提供高比例之保護性免疫。 總體結論
總之，在第0、2和6個月計劃表中在3劑量系列中投予年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童的二價rLP2086在第二和第三個劑量後在大部分之個體中引發強大之免疫反應，藉由hSBA測量時，在第三個劑量後取得保護性抗體效價。hSBA效價在3劑量系列後6個月降低。如本研究中投予之疫苗對年齡為≧24個月至＜10歲之幼兒和兒童而言是安全且耐受性良好，具有可接受之安全性變化形廓。
實施例20：進行第2期、隨機分配、對照、觀察者遮盲研究以描述當將腦膜炎球菌血清群B之二價重組脂蛋白2086疫苗(二價rLP2086)投予年齡為12至＜18個月或18至24個月之健康幼兒時的免疫原性、安全性和耐受性(B1971035-syn)。 目標 主要免疫原性目標：
．藉由使用人補體之血清殺菌分析法(hSBA)之測量結果來描述在研究開始時年齡為12至＜18個月之健康幼兒中的免疫反應，該血清殺菌分析法係在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，使用4種主要腦膜炎球菌血清群B(MnB)菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白且2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 ．藉由hSBA之測量結果來描述在研究開始時年齡為18至＜24個月之健康幼兒中二免疫反應，該hSBA係在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，使用4種主要MnB菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 主要安全目標：
藉由局部反應、全身性事件、不良事件(AE)、嚴重不良事件(SAE)、新近診斷之慢性醫療病況(NDCMC)、醫療照護事件(MAE)和立即AE之測量結果評估與對照組(A型肝炎病毒[HAV]疫苗)相比較，二價rLP2086在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中之安全性變化形廓。 次要免疫原性目標：
藉由hSBA之測量結果來描述在研究開始時年齡為12至＜24個月(即，二個年齡層合併)之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，使用4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 藉由hSBA之測量結果來描述在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後6、12、24、36和48個月使用4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 探索性免疫原性目標：
藉由hSBA之測量結果進一步描述在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係使用4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)，在以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1、6、12、24、36和48個月進行測量。 •藉由hSBA之測量結果進一步描述在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1、6、12、24、36和48個月針對表現LP2086亞族A和B蛋白之次要MnB測試菌株進行。 方法 研究設計：
該研究為第2期、隨機分配、活性對照、觀察者遮盲、申辦者末遮盲、多中心之研究，其中約將396名之健康幼兒按12至18個月或18至＜24個月之年齡，以2：1之比例隨機分配以接受二價rLP2086(2種劑量水準其中一者[60μg或120μg])或經核准之兒科HAV疫苗(0.5mL)/注射用無菌生理鹽水溶液(0.5mL之0.85%氯化鈉)。
該研究分二個階段進行。第一階段橫跨二期(前哨註冊期和擴大註冊期)評估疫苗之免疫原性、安全性和耐受性。第二階段評估對二價rLP2086之免疫反應的持續時間。
在免疫原性方面，呈現從第三次疫苗接種後到1個月(訪視7)之所有數據，除了支持探索性目標之次要MnB試驗菌株數據以外。最終報告包括直到第二階段結束的所有免疫原性數據和第8次訪視後直至研究結束期間之安全性數據(第13次訪視，第三次疫苗接種後48個月)。
第一階段之前哨註冊期計劃共包括4個前哨群組：每個二價rLP2086劑量水準(60μg或120μg)包含2個年齡層。較年幼之前哨群組係由年齡為12至＜15個月之個體組成，而較年長之前哨群組係由年齡為18至＜24個月之個體組成。該4個前哨群組的各小組計劃登記約33名個體。前哨註冊期在預先指定之點與IRC審查錯開並適用終止規則。直到由IRC評估60μg之劑量水準在相同年齡之前哨群組中為安全且可耐受的才評估該前哨群組之120μg劑量水準。直到由IRC評估120μg劑量水準在年長之前哨群組中為安全且可耐受的才在較年幼之前哨群組中進行120μg劑量水準之評估。
在第一階段擴大註冊期之前，IRC審查所有從前哨個體取得之第一次疫苗接種後，7天電子日記和SAE數據。基於該審查，IRC選擇120μg劑量水準之二價rLP2086在二個年齡層之第一階段擴大註冊期中進行研究。較年幼之擴大註冊群組(登記另外之132名個體)擴展至年齡為12至＜18個月之個體並根據年齡分成2個子集：12至＜15個月和15至＜18個月。在擴大註冊期間，較年長之擴大註冊群組(另外登記132名個體)登記年齡為18至＜24個月之個體。僅完成第一階段之個體的總研究期間將約為18個月。表23中呈現第一階段之訪視計劃表。##
第二階段僅包括那些被隨機分配接受二價rLP2086(不考慮劑量水準)之個體。完成第二階段之個體的總研究期間將為約4.5年(54個月)。第二階段之訪視計劃表呈現於表24中。 二價rLP2086係在第0、2和6個月(訪視1、4和6)投予。兒科HAV疫苗係在第0和6個月(訪視1和6)投予並在第2個月(訪視4)投予生理鹽水以維持研究遮盲。
投予之疫苗：在該研究過程中投予3次二價rLP2086(60μg或120μg)：在訪視1(第0個月)第一次接種疫苗、在訪視4(第2個月)第二次接種疫苗且在訪視6(第6個月)第三次接種疫苗。以肌肉內注射液之形式將二價rLP2086投予在三角肌或前外側大腿肌肉。在該研究過程中投予二次HAV疫苗：在訪視1(第0個月)第一次接種疫苗和在訪視6(第6個月)第三次接種疫苗。在第二次接種疫苗(第2個月)之時點投予生理鹽水。HAV疫苗/生理鹽水係以肌肉內注射液之形式投予在三角肌或前外側大腿肌肉。僅由一名第三方非遮盲之醫學合格研究人員投予該研究產品。若三角肌中之肌肉量不適合進行肌肉注射，則大腿為較佳之注射部位。
免疫原性評估：為了協助免疫原性分析，個體在第一階段期間的下列時間點收集約5mL之血液：第1次接種疫苗(訪視1)之前、第2次接種疫苗後1個月(訪視5)、第3次接種疫苗後1個月(訪視7)、第3次接種疫苗後6個月(訪視8)、第3次接種疫苗後12個月(訪視9)。在18個月之期間內共收集25mL。在抽血前可使用局部(local)/局部(topical)麻醉劑。
為了測定免疫反應之持續時間，在下列時間點自第二階段個體收集約5mL血液：第3次接種疫苗後2年、第3次接種疫苗後3年和第3次接種疫苗後4年。在約2.5年之期間內共收集15mL。
為了評估對二價rLP2086之免疫反應，在hSBA中使用腦膜炎球菌血清群B菌株分析功能性抗體。hSBA測量人血清中導致補體依賴性滅殺靶的腦膜炎球菌菌株之抗體。在hSBA中使用四種(4)主要MnB測試菌株PMB80(A22)、PMB2001(A56)、PMB2948(B24)和PMB2707 (B44)以測定本研究中之免疫原性試驗指標，該四種(4)主要MnB測試菌株PMB80(A22)、PMB2001(A56)、PMB2948 (B24)和PMB2707(B44)各自表現與疫苗組分抗原異源之因子H結合蛋白(fHBP)變體。
由於血清體積限制，在每個血液採樣時間點對一半個體(二個年齡層中之個體)測試該主要菌株的其中二種菌株(PMB80[A22]和PMB2948[B24])，並在每個採血時間點對其餘一半個體測試另外二種主要菌株(PMB2001 [A56]和PMB2707[B44])。
一旦所有個體完成註冊(訪視1)，獨立之統計中心(ISC)(未參與進行該研究之統計團隊)提供2份個體列表(隨機選擇的，50%之個體將接受PMB80 [A22]/PMB2948[B24]測試，而剩餘之50%個體將接受PMB2001[A56]/PMB2707[B44]測試)給申辦者之樣品管理團隊。二份列表均遵循與研究設計中相同之隨機分配比例(2：1)和年齡層分佈。在相同個體之所有訪視中測試相同之菌株對(PMB80[A22]和PMB2948[B24]或PMB2001 [A56]/PMB2707[B44])。
一旦完成主要分析之測試且若有足夠量之血清可用，則可考慮依下述進行額外測試以評估針對二價rLP2086之免疫反應：PMB80(A22)和PMB2948(B24)之測試可在來自接受二價rLP208且其血清樣品最初係接受PMB2001(A56)和PMB2707(B44)測試之50%個體的血清樣品中進行。相反地，PMB2001(A56)和PMB2707(B44)之測試可在來自接受二價rLP2086且其血清樣品最初係接受PMB80(A22)和PMB2948(B24)測試之50%個體的血清樣品中進行。可進行次要菌株之測試。 統計方法：
主要免疫原性試驗指標為： •在第三次疫苗接種後1個月，年齡為12至＜18個月(在研究開始時)之健康幼兒中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧定量下限(LLOQ)之個體的比例。 •在第三次疫苗接種後1個月，年齡為18至＜24個月(在研究開始時)之健康幼兒針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 此處描述整個研究的所有次要免疫原性試驗指標，但本實施例提供僅適用於訪視1至訪視7之免疫原性試驗指標之結果。將分析後續之試驗指標。 下列試驗指標適用於在研究開始時年齡為12個月至＜24個月(即，二個年齡層合併)之健康個體的結果： •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月及以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後6、12、24、36和48個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 下列試驗指標適用於在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康個體的結果： •以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 •在每一適用之血液採樣訪視時具有針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價≧LLOQ、≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在每一適用之血液採樣訪視時，對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA幾何平均效價(GMT)。 所有下列具體指定之探索性試驗指標適用於來自研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康個體的hSBA結果，該健康個體接受二價rLP2086並在適當之時間點針對適當之菌株進行測試： •在每一適用之血液採樣時間點，具有hSBA效價≧LLOQ、≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在每一適用之血液採樣訪視時，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT。 •針對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價從基線開始到以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月增加至少4倍之個體的比例： •對具有基線hSBA效價低於檢測限制(LOD)或hSBA效價＜1：4之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價達到≧1：16。 •對具有基線hSBA效價≧LOD(即，hSBA效價達到≧1：4)及＜ LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍LLOQ。 •對具有基線hSBA效價≧LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍基線效價。
若有足夠之血清可用於測試每個個體對所有4種主要菌株之反應及/或測試個體對次要菌株之反應，則計劃下列試驗指標。 •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，具有對組合之所有4種主要測試菌株(PMB80[A22]、PMB2948[B24]、PMB2001[A56]及PMB2707[B44])之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。這只適用於已測試所有4種主要菌株之個體。 •測試針對次要MnB菌株之hSBA的其他探索性分析如下： •在第二次和第三次疫苗接種後1個月及/或其後之每一血液採樣時間點針對每一測試之次要MnB菌株的hSBA GMT。 •在第二次和第三次疫苗接種後1個月及/或其後之每一血液採樣時間點針對每一次要MnB菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 主要試驗指標之分析
用於主要目標之主要分析為在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月之健康幼兒在第3次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株分別具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。該總述係使用可評估之免疫原性群體並顯示百分比和置信區間(CI)。 次要試驗指標之分析
所有在mITT群體進行之分析均視為次要分析。 次要分析亦包括該可評估之免疫原性群體和mITT群體二者在第三次接種疫苗後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。
在該實施例中，同時使用可評估之免疫原性群體和mITT群體分析在第二次接種疫苗後1個月和第三次接種疫苗後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。在最終分析方面，同時使用可評估之免疫原性群體和mITT群體分析在第三次疫苗接種後6、12、24、36和48個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。
在每一適用之血液採樣訪視時，同時使用可評估之免疫原性群體和mITT群體分析對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ、≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 在每一適用之血液採樣訪視時總結該可評估之免疫原性群體和mITT群體對該主要MnB測試菌株的每一種菌株之GMT。 探索性試驗指標之分析
總結該可評估之免疫原性群體和mITT群體從以二價rLP2086進行第二次和第三次接種後1個月達到hSBA效價從基線開始增加至少4倍之個體的比例。 亞群分析
按性別、國家和年齡層描述性地總結一些免疫原性和安全性試驗指標。 結果 個體配置和人口統計學：
將共396名年齡為12至＜24個月之個體隨機分配在這項研究中。在隨機分配之個體中，共有44名個體接受60μg之二價rLP2086，220名個體接受120μg之二價rLP2086和132名個體接受HAV疫苗/生理鹽水。共有198名個體被隨機分配在各年齡層(12至＜18個月和18至＜24個月)中。
在396名隨機分配之個體中，385名(97.2%)個體完成該研究之疫苗接種階段(從第一次研究疫苗接種[訪視1]至第三次疫苗接種後1個月[訪視7])。共有386名(97.5%)個體完成追蹤階段(從訪視7至第三次疫苗接種後6個月[訪視8])。總體而言，共有381名(96.2%)個體完成長達6個月追蹤訪視(訪視8)的所有訪視且每個年齡層的完成狀態類似(在12至＜18個月和18至＜24個月之年齡層中分別有189名[95.5%]個體和192名[97.0%]個體)。
總體而言，52.8%個體為女性，大多數個體為白人(94.4%)和非西班牙裔/非拉丁裔(99.5%)。第一次疫苗接種之平均年齡(SD)為17.3(3.61)個月(在12至23個月之範圍內)。疫苗組之間的人口統計學特徵大致類似。 ITT和mITT群體之特徵類似於該安全性群體之特徵。 免疫原性結果：
該研究之主要目標為描述個體對二價rLP2086之免疫反應，該免疫反應係藉由hSBA測量年齡為12至＜18個月和18至＜24個月之健康個體在第三次疫苗接種後1個月針對該4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白且2種表現LP2086亞族B蛋白)之反應。該次要目標為對合併之年齡層(12至＜24個月)之免疫反應的描述。該主要目標之主要試驗指標為各年齡層在第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。
在第三個二價rLP2086劑量後一個月可在年齡為12至＜18個月之幼兒和18至＜24個月之幼兒，及合併之年齡層(12 到＜24個月)中觀察到在二個劑量水準下之強大的免疫反應，此可由對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株達成hSBA效價≧LLOQ(A56、B24和B44為1：8；A22為1：16)之個體的比例確認。在60μg組方面，在較年幼之幼兒( 12至＜18個月)方面，在3個劑量後達成hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為88.9%至100.0%，在較年長之幼兒(18至＜24個月)方面該比例為81.8%至100.0%。在120μg組方面，在12至＜18個月之幼兒方面，在3個劑量後達成hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為71.1%至100.0%，在18至＜24個月之幼兒方面該比例為72.0%至100.0%。在合併之年齡層中，在第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例在60μg組方面為85.0%至100.0%，在120μg組方面為71.6%至100.0%。這些發現可進一步藉由與跨越二個年齡層和劑量水準之基線相比較，在接受三個二價rLP2086劑量後針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之GMT增加(從基線範圍4.0至8.5到第三次接種疫苗後15.1至171.4)及hSBA效價達到≧1：4(71.1%至100%)或1：16 (63.6%至100%)之個體的比例得到支持。另外，在合併之年齡層中，在二種劑量水準下，在第三次疫苗接種後1個月，針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體的比例係在67.4%至100.0%之範圍內。總結，在第0、2和6個月計劃表中之3個60μg或120μg二價rLP2086劑量在年齡為12至＜24個月(單獨及合併之年齡層)之幼兒中誘導強大的免疫反應。
該研究之次要目標係藉由評估2個年齡層及合併之年齡層之≧LLOQ反應、界定之hSBA效價和hHSBA GMT來描述在第二個二價rLP2086劑量後一個月之免疫反應。在合併之年齡層方面，在第二個二價rLP2086劑量(投予第一個劑量後2個月投予)後達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例在60μg組中為57.9%至94.7%，在120μg組中為33.7%至100.0%。二個個別年齡層之結果類似且較年幼和較年長之年齡層間沒有臨床上有意義之差異。這些發現進一步藉由與合併之年齡層之跨二種劑量水準之基線相比較，接受二個二價rLP2086劑量後對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之GMT較基線增加(範圍在7.2至110.6)且hSBA效價達到≧1：4(36.0%至100.0%)或≧1：16(32.6%至100%)之個體的比例增加得到支持。二個個別年齡層獲得類似之結果。另外，在合併之年齡層中，在第二次疫苗接種後1個月，對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體比例係在30.2%至98.9%之範圍內。總結，相隔2個月投予之2個60μg或120μg二價rLP2086在年齡為12至＜24個月(個別及合併之年齡層)之幼兒中引發免疫反應。總之，在二個60μg和120 μg劑量水準下，在第0、2和6個月計劃表中以3個劑量投予之二價rLP2086在年齡為12至＜24個月之幼兒中引發強大之免疫反應，在第三個劑量後，藉由hSBA測得在高比例之個體中取得保護性抗體效價。 結論：
總結，當在第0、2和6個月計劃表中將60μg或120μg劑量水準之二價rLP2086投予年齡為12至＜24個月之幼兒時，藉由hSBA測得在第三個劑量後引發保護性抗體效價。如本研究中投予之疫苗對年齡為12至＜24個月之幼兒而言為安全且耐受性良好，具有可接受之安全性變化形廓。 實施例21：進行第2期，隨機化，對照，觀查者遮盲研究以描述對年齡為12至＜18個月或18至＜24個月之健康幼兒投予之腦膜炎球菌血清群B二價重組脂蛋白2086疫苗(二價rLP2086)的免疫原性、安全性和耐受性(B1971035-CSR)
分二個階段進行此第二期研究。第一階段之設計和進行係用來評估在最後一次接種疫苗後12個月(訪視10)，二價rLP2086在年齡為12至＜24個月之健康幼兒中之安全性、耐受性和免疫原性。第一階段係由具有四個前哨群組之前哨註冊期和一個擴大註冊期組成。在前哨群組中，以二種劑量水準(60μg和120μg)對二個年齡層(12至＜15個月及18至＜24個月)投予二價rLP2086。擴大註冊期之劑量水準的選擇係基於內部審查委員會(IRC)對該二種劑量水準之安全性變化形廓之審查。計劃之第二階段係用於在最後一次研究疫苗接種後評估該免疫反應之持續時間長達4年。 主要免疫原性目標
•藉由hSBA之測量來描述在研究開始時年齡為12至＜18個月之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，使用4種主要MnB菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 •藉由hSBA之測量來描述在研究開始時年齡為18至＜24個月之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，使用4種主要MnB菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 次要免疫原性目標：
藉由hSBA之測量來描述在研究開始時年齡為12至＜24個月(即，二個年齡層合併)之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，使用4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 •藉由hSBA之測量來描述在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後6、12、24、36和48個月使用4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 探索性免疫原性目標：
藉由hSBA之測量來進一步描述在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中的免疫反應，該hSBA係在以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1、6、12、24、36和48個月，使用4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行。 •藉由hSBA之測量來進一步描述在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒對表現LP2086亞族A和B蛋白之次要MnB測試菌株之免疫反應，該hSBA係在第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1、6、12、24、36和48個月進行。 調查計劃 總體研究設計和計劃
該研究為第2期、隨機分配、活性對照、觀察者遮盲、申辦者末遮盲、多中心之研究，其中約將396名之健康幼兒按12至18個月或18至＜24個月之年齡，以2：1之比例隨機分配以接受二價rLP2086(2種劑量水準其中一者[60μg或120μg])或經核准之兒科HAV疫苗(0.5 mL)/注射用無菌生理鹽水溶液(0.5 mL之0.85%氯化鈉)。 該研究分二個階段進行。第一階段橫跨二期(前哨註冊期和擴大註冊期)評估疫苗之免疫原性、安全性和耐受性。第二階段評估對二價rLP2086之免疫反應的持續時間。 第一階段之前哨註冊期計劃共包括4個前哨群組：每個二價rLP2086劑量水準(60μg或120μg)包含2個年齡層。較年幼之前哨群組係由年齡為12至＜15個月之個體組成，而較年長之前哨群組係由年齡為18至＜24個月之個體組成。該4個前哨群組的各小組計劃登記約33名個體。前哨註冊期在預先指定之點與IRC審查錯開並適用終止規則。直到由IRC評估60μg之劑量水準在相同年齡之前哨群組中為安全且可耐受的才評估該前哨群組之120μg劑量水準。直到由IRC評估120μg劑量水準在年長之前哨群組中為安全且可耐受的才在較年幼之前哨群組中進行120μg劑量水準之評估。
在第一階段擴大註冊期之前，IRC審查所有從前哨個體取得之第一次疫苗接種後，7天電子日記和SAE數據。基於該審查，IRC選擇120μg劑量水準之二價rLP2086在二個年齡層之第一階段擴大註冊期中進行研究。較年幼之擴大註冊群組(登記另外之132名個體)擴展至年齡為12至＜18個月之個體並根據年齡分成2個子集：12至＜15個月和15至＜18個月。在擴大註冊期間，較年長之擴大註冊群組(另外登記132名個體)登記年齡為18至＜24個月之個體。僅完成第一階段之個體的總研究期間將約為18個月。
第二階段僅包括那些被隨機分配接受二價rLP2086(不考慮劑量水準)之個體。完成第二階段之個體的總研究期間將為約4.5年(54個月)。 二價rLP2086係在第0、2和6個月(訪視1、4和6)投予。兒科HAV疫苗係在第0和6個月(訪視1和6)投予並在第2個月(訪視4)投予生理鹽水以維持研究遮盲。研究設計
之討論，包括對照組之選擇
此二階段研究評估2種劑量水準(60μg和120μg)之二價rLP2086在年齡為12至＜24個月之健康幼兒中的安全性、耐受性和免疫原性。 本研究中選擇HAV疫苗(在第0個月和6個月)作為對照組。相較於被推薦用於此年齡組之其他疫苗，HAV疫苗具有較佳之耐受性變化形廓。此外，HAV疫苗可為那些在未來旅行期間或其他暴露期間可能處於增加A型肝炎病毒感染之風險中的個體提供益處。一般推薦之HAV疫苗方案係在第0個月和第6個月投予2個劑量。本研究中在第2個月給予生理鹽水以維持研究遮盲。 投予之疫苗
在研究過程中投予3次二價rLP2086(60μg或120μg)：在訪視1(第0個月)第一次接種疫苗、在訪視4(第2個月)第二次接種疫苗並在訪視6(第6個月)第三次接種疫苗。以肌肉內注射液之形式將二價rLP2086投予在三角肌或前外側大腿肌肉。在研究過程中投予二次HAV疫苗：在訪視1(第0個月)第一次接種疫苗並在訪視6(第6個月)第三次接種疫苗。在第二次接種疫苗(第2個月)之時點投予生理鹽水。HAV疫苗/生理鹽水係以肌肉內注射液之形式投予在三角肌或前外側大腿肌肉。僅由一名第三方未遮盲之醫學合格的研究人員投予該研究產品。若三角肌中之肌肉量不適合用於肌肉注射，則大腿為較佳之注射部位。將投予位點(例如左/右臂/大腿)註明在來源備註和CRF上。 試驗用藥品之特性
二價rLP2086(在無菌緩衝之等張懸浮液中，含有吸附在鋁上之各為30μg[60μg劑量水準]或60μg[120μg劑量水準]之純化的亞族A和亞族B rLP2086蛋白質)係提供在注射用之0.5mL劑量中。經核准之兒科HAV疫苗係提供在注射用之0.5mL劑量中。 該安慰劑為以0.5mL劑量提供之注射用的無菌生理鹽水(0.85%氯化鈉)。 該試驗用藥品(二價rLP2086、HAV疫苗和生理鹽水)係由申辦者提供給各研究地點。研究疫苗係根據現行指導方針及適用之當地和法律法規要求包裝並標記為試驗用藥品。各試驗用藥品均以獨特之套組編號標示。 疫苗接種方案之選擇
在第0、2和6個月之計劃表投予二價rLP2086 (60μg或120μg)。對照組個體在第0個月和第6個月接受HAV疫苗並在第2個月時注射生理鹽水以維持研究遮盲。 二價rLP2086血清殺菌分析-主要測試菌株
為了評估對二價rLP2086之免疫反應，在hSBA中使用腦膜炎球菌血清群B菌株分析功能性抗體。hSBA測量人血清中介導補體依賴性滅殺靶的腦膜炎球菌菌株之抗體。在hSBA中使用四種(4)主要MnB測試菌株PMB80(A22)、PMB2001(A56)、PMB2948(B24)和PMB2707(B44) 以用於測定本研究中之免疫原性試驗指標，該四種(4)主要MnB測試菌株PMB80(A22)、PMB2001(A56)、PMB2948 (B24)和PMB2707(B44)各自表現與疫苗組分抗原異源之因子H結合蛋白(fHBP)變體。
由於血清體積限制，在每個血液採樣時間點對一半個體(二個年齡層中之個體)測試該主要菌株的其中二種菌株(PMB80[A22]和PMB2948[B24])，並在每個採血時間點對其餘一半個體測試另外二種主要菌株(PMB2001 [A56]和PMB2707[B44])。
一旦所有個體完成註冊(訪視1)，獨立之統計中心(ISC)(未參與進行該研究之統計團隊)提供2份個體列表(隨機選擇的，50%之個體將接受PMB80[A22] /PMB2948[B24]測試，而剩餘之50%個體將接受PMB2001 [A56]/PMB2707[B44]測試)給申辦者之樣品管理團隊。二份列表均遵循與研究設計中相同之隨機分配比例(2：1)和年齡層分佈。在相同個體之所有訪視中測試相同之菌株對(PMB80[A22]和PMB2948[B24]或PMB2001[A56]/ PMB2707[B44])。 額外分析
一旦完成主要分析之測試且若有足夠量之血清可用，則可考慮依下述進行額外測試以評估針對二價rLP2086之免疫反應：PMB80(A22)和PMB2948(B24)之測試可在來自接受二價rLP208且其血清樣品最初係接受PMB2001(A56)和PMB2707(B44)測試之50%個體的血清樣品中進行。相反地，PMB2001(A56)和PMB2707(B44)之測試可在來自接受二價rLP2086且其血清樣品最初係接受PMB80(A22)和PMB2948(B24)測試之50%個體的血清樣品中進行。可進行次要菌株之測試。 免疫原性分析
關注標的和試驗指標之比較-主要免疫原性試驗指標 主要免疫原性試驗指標為： •在研究開始時年齡為12至＜18個月之健康幼兒在第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株的hSBA效價達到≧定量下限(LLOQ)之個體的比例。 •在研究開始時年齡為18至＜24個月之健康幼兒在第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株的hSBA效價達到≧定量下限(LLOQ)之個體的比例。
關注標的和試驗指標之比較-次要免疫原性試驗指標 此處描述整個研究之所有次要免疫原性試驗指標，但本實施例將僅呈現適用於訪視1至7(第一次疫苗接種至第三次疫苗接種後3個月)之免疫原性試驗指標的結果。 下列試驗指標適用於在研究開始時年齡為12個月至＜24個月(即，二個年齡層合併)之健康個體的結果： •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月至以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後6、12、24、36和48個月對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 下列試驗指標適用於在研究開始時年齡為12個月至＜18個月和年齡為18個月至＜24個月及二個年齡層合併之健康個體的結果 •以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 •在每一適用之採血訪視時對該4種主要MnB菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在每一適用之採血訪視時對該4種主要MnB菌株的每一種菌株之hSBA幾何平均效價(GMT)。探索性免疫原性 試驗指標
下文中具體指明之所有探索性試驗指標適用於來自所有在研究開始時年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及二個年齡層合併之健康幼兒中的hSBA結果，該健康個體接受二價rLP2086並在適當之時間點對適當之菌株進行測試： •在每一適用之採血時點具有hSBA效價≧LLOQ≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 •在每一適用之採血訪視對該4種主要MnB菌株的每一種菌株之hSBA GMT。 •在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，對該4種主要測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加至少4倍之個體的比例： •對具有基線hSBA效價低於檢測限制(LOD)或hSBA效價＜1：4之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧1：16。 •對具有基線hSBA效價≧LOD(即，hSBA效價達到≧1：4)及＜LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧4倍LLOQ。 •對具有基線hSBA效價≧LLOQ之個體而言，4倍反應被定義為hSBA效價≧基線效價之4倍。
若有足夠之血清可用於測試每個個體對所有4種主要菌株之反應及/或測試個體對次要菌株之反應，則考慮下列試驗指標。 •以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月，具有對組合之所有4種主要測試菌株(PMB80[A22]、PMB2948[B24]、PMB2001[A56]及PMB2707[B44])之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。這只適用於已測試所有4種主要菌株之個體。 •測試針對次要MnB菌株之hSBA的其他探索性分析如下： •在第二次和第三次疫苗接種後1個月及/或其後之每一血液採樣時間點針對每一測試之次要MnB菌株的hSBA GMT。 •在第二次和第三次疫苗接種後1個月及/或其後之每一血液採樣時間點針對每一次要MnB菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 分析群體 改良式意圖治療群體
所有具有至少1個與所提出之分析相關的有效且確定之分析結果的經隨機分配之個體均包括在改良式意圖治療(mITT)群體中。此分析設定係用於免疫原性分析。根據個體在mITT分析中被隨機分配之試驗產品來分析個體。 分析方法
匯集對照組和來自同一年齡層之不同群組的各個劑量水準組以用於分析。分別總結各年齡層及整個群體之所有免疫原性分析。 這並非假設試驗研究；因此，本研究中使用估計法來評估主要、次要和探索性目標。 PMB80(A22)之LLOQ為1：16，PMB2001(A56)之LLOQ為1：8，PMB2707(B44)之LLOQ為1：8，PMB2948 (B24)之LLOQ為1：8。 為了計算GMT，在主要分析方面，低於LLOQ之hSBA結果設為0.5×LLOQ。 主要試驗指標之分析
在主要目標方面之主要分析為在研究開始時年齡分別為12至＜18個月和18至＜24個月之健康幼兒在第三次接種疫苗後1個月對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。該總結係使用可評估之免疫原性群體並同時顯示百分比和置信區間(CI)。 次要試驗指標之分析
所有在mITT群體進行之分析都被認為是次要分析。 對次要試驗指標之分析亦包括可評估之免疫原性群體及mITT群體在第三次接種疫苗後1個月對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例。 在該實施例中，在第二次接種疫苗後1個月及第三次接種疫苗後1個月對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ之個體的比例係使用可評估之免疫原性群體及mITT群體分析並呈現在本報告中。隨後之時間點(第三次接種疫苗後6、12、24、36和48個月)計劃使用相同分析。 在第二次接種疫苗後1個月及第三次接種疫苗後1個月對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株具有hSBA效價≧LLOQ、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64和1：128之個體的比例係使用可評估之免疫原性群體及mITT群體分析並呈現在本報告中。隨後之時間點(第三次接種疫苗後6、12、24、36和48個月)計劃使用相同分析。 總結該可評估之免疫原性群體及mITT群體在第二次接種疫苗後1個月及第三次接種疫苗後1個月對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之GMT。隨後之時間點(第三次接種疫苗後6、12、24、36和48個月)計劃使用相同分析。 探索性試驗指標之分析
總結該可評估之免疫原性群體和mITT群體在以二價rLP2086進行第二次和第三次疫苗接種後1個月達到hSBA效價從基線開始增加≧4倍之個體的比例。 反向累積分佈曲線
亦評定該可評估之免疫原性群體在第二次接種疫苗後1個月及第三次接種疫苗後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之經驗反向累積分佈曲線(RCDC)。 免疫原性評估分析之 群體
該可評估之免疫原性群體為用於免疫原性分析之主要分析群體。使用mITT群體作為用於免疫原性分析之支持性免疫原性群體。 該可評估之免疫原性群體中共包括348名(87.9%)個體，並有48名(12.1%)個體被排除在該可評估之免疫原性群體外。個體被排除在該可評估之免疫原性群體外的原因可能超過1個。共31名(7.8%)個體被排除在該可評估之免疫原性群體之外，因為他們沒有排定疫苗接種前或疫苗接種後之抽血計劃(包括沒有採集樣品之個體和在方案指定之窗口採集樣品之個體)，有13名(3.3%)個體不合格或在第三次疫苗接種訪視之前或第三次疫苗接種訪視後1個月失去資格，11名(2.8%)個體在所有疫苗接種訪視中被隨機分配而未接受任何疫苗接種並有16名(4.0%)個體接受禁用之疫苗或治療。共有84.3%之年齡為12至＜18個月之個體和91.4%之年齡為18至＜24個月之個體被包括在該可評估之免疫原性群體中。免疫原性結果
下列章節中提供包括直到第三次疫苗接種後1個月(訪視7)之所有免疫原性數據的主要分析結果。免疫原性試驗指標之分析係基於一半個體對菌株PMB2001 (A56)和PMB2707(B44)之hSBA結果，及剩餘之一半個體對菌株PMB80(A22)和PMB2948(B24)之hSBA結果。 主要和次要試驗指標 達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例
該主要免疫原性試驗指標為年齡為12至＜18個月(在研究開始時)和年齡為18至＜24個月(在研究開始時)之個體在以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。次要試驗指標為合併之年齡層中以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之所有個體的比例，連同個別之年齡層及合併之年齡層中以二價rLP2086進行第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。 每個年齡層中對該4種主要MnB測試菌株之每一種菌株的hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例呈現於用於該可評估之免疫原性群體的表中。
在合併之年齡層方面，在60μg組和120μg組中在基線時針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為0.0%和3.1%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為0.0%和1.1%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為4.8%和2.1%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為0.0%和1.1%。 在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡層為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為90.0%和64.4%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為70.0%和23.8%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為77.8%和72.3%。在60μg和120μg組中年齡層為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為66.7%和84.0%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為90.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為44.4%和43.2%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為60.0%和63.8%。總體而言，在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧LLOQ的個體之比例分別為78.9%和74.7%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為94.7%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為57.9%和33.7%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為68.4%和68.1%。
在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡層為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為88.9%和91.1%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為88.9%和71.1 %；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為88.9%和87.2%。在60μg和120μg組中年齡層為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為90.9%和88.2%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為81.8%和72.0%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為90.0%和85.1%。總體而言，在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80 (A22)之hSBA效價達到≧LLOQ的個體之比例分別為90.0%和89.6%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為85.0%和71.6%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例分別為89.5%和86.2%。 一般而言，與基線相比較，HAV/生理鹽水組中達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例並未隨時間變化(表25)。
mITT群體之結果與該可評估之免疫原性群體的結果相似。 按性別和國家評定該可評估之免疫原性群體中對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體比例的亞群分析。在進行之亞群分析中未觀察到臨床上重要的差異。
hSBA GMT
次要試驗指標為年齡為12至＜18個月、18至＜24個月及合併之年齡層的個體在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月和第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT。表26 提供該可評估之免疫原性群體對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT。
在合併之年齡層方面，在60μg和120μg組中針對PMB80(A22)之基線hSBA GMT分別為8.0和8.4；針對PMB2001(A56)之基線hSBA GMT分別為4.0和4.1；針對PMB2948(B24)之基線hSBA GMT分別為4.4和4.1；且針對PMB2707(B44)之基線hSBA GMT分別為4.0和4.0。
在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡層為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為42.2和24.6；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為101.6和117.2；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為10.6和6.0；且針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為23.5和22.1。在60μg和120μg組中年齡層為18至24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為23.5和36.8；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為68.6和104.6；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為6.9和8.5；且針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為21.1和17.0。總體而言，在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層的個體針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為32.0和30.4；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為82.6和110.6；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為8.6和7.2；且針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為22.2和19.4。
在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡層為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為80.6和63.0；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為109.7和190.6；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為20.2和15.8；且針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為29.6和46.3。在60μg和120μg組中，年齡層為18至24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為82.3和71.4；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為181.0和154.4；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為17.0和14.5；且針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為34.3和44.9。總體而言，在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層的個體針對PMB80(A22)之hSBA GMT分別為81.6和67.3；針對PMB2001(A56)之hSBA GMT分別為142.8和171.4；針對PMB2948(B24)之hSBA GMT分別為18.4和15.1；且針對PMB2707(B44)之hSBA GMT分別為32.0和45.6。 一般來說，與基線相比較，HAV/生理鹽水組中之個體的hSBA GMT並未隨時間變化。
mITT群體之結果與該可評估之免疫原性群體的結果相似。 按性別和國家評估該可評估之免疫原性群體中對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA GMT的亞群分析。在進行之亞群分析中未觀察到臨床上重要的差異。
界定之hSBA效價 次要免疫原性試驗指標為年齡為12至＜18個月和18至＜24個月及合併之年齡層之個體在基線、以二價rLP2086進行第二次疫苗接種後1個月及第三次疫苗接種後1個月針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧1：4、≧1：8、≧1：16、≧1：32、≧1：64和≧1：128之個體的比例。 該可評估之免疫原性群體中對該4種主要MnB測試菌株達到界定之hSBA效價之個體的比例呈現於表27中。 接受二價rLP2086且達到hSBA效價達到≧1：4和≧1：16之個體的結果描述於下。hSBA效價≥1：4被廣泛承認為與防護IMD相關；然而，更保守之hSBA效價≥1：16已被視為表示在接種疫苗前為血清陰性之個體的4倍疫苗效果之水準。 一般而言，與基線相比較，HAV/生理鹽水組中達到界定之hSBA效價的個體比例不隨時間變化。 mITT群體之結果與該可評估之免疫原性群體的結果相似。 hSBA效價≥1：4
在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為90.0%和64.4%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為70.0%和28.6%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為77.8%和72.3%。在60μg和120μg組中年齡為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為66.7%和86.0%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為44.4%和43.2%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為70.0%和63.8%。總體而言，在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為78.9%和75.8%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為57.9%和36.0%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為73.7%和68.1%。 第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為88.9%和91.1%；針對PMB2001 (A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為88.9%和71.1%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為88.9%和87.2%。在60μg和120μg組中年齡為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為90.9%和88.2%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為81.8%和72.0%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為90.0%和87.2%。總體而言，在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為90.0%和89.6%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為85.0%和71.6%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：4之個體的比例分別為89.5%和87.2%。 hSBA效價≥1：16
第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為90.0%和64.4%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為60.0%和21.4%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為77.8%和72.3%。在60μg和120μg組中年齡為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為66.7%和86.0%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為90.0%和100.0 %；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為33.3%和43.2%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為60.0%和61.7%。總體而言，在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為78.9%和74.7%；針對PMB2001 (A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為94.7%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為47.4%和32.6%；且針對PMB2707 (B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為68.4%和67.0%。 第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為88.9%和91.1%；針對PMB2001 (A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為100.0%和97.9%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為88.9%和66.7%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為77.8%和87.2%。在60μg和120μg組中年齡為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為90.9%和88.2%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為63.6%和68.0%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為90.0%和85.1%。總體而言，在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為90.0%和89.6%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為100.0%和98.9%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為75.0%和67.4%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到≧1：16之個體的比例分別為84.2%和86.2%。
探索性免疫原性試驗指標 hSBA效價從基線開始增加≥4倍
表28呈現對該4種主要MnB測試菌株之hSBA效價從基線開始增加≥4倍之個體的比例。 在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為80.0%和62.2%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為100.0%和97.9%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為60.0%和19.0%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為77.8%和70.2%。在60μg和120μg組中年齡層為18至＜24個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為66.7%和80.0%；針對PMB2001 (A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為90.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為33.3%和40.9%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為60.0%和61.7%。總體而言，在第二次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為73.7%和71.6%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為94.7%和98.9%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為47.4%和30.2%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為68.4%和66.0%。 第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中年齡為12至＜18個月之個體針對PMB80(A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為77.8%和86.7%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為100.0%和95.7%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為88.9%和66.7%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為77.8%和85.1%。在60μg和120μg組中年齡為18至＜24個月之個體針對PMB80 (A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為90.9%和88.2%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為100.0%和100.0%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為63.6%和68.0%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為90.0%和85.1%。總體而言，在第三次疫苗接種後1個月，在60μg和120μg組中之合併之年齡層中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為85.0%和87.5%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為100.0%和97.9%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為75.0%和67.4%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例分別為84.2%和85.1%。 在第三次疫苗接種後1個月，HAV/生理鹽水組(合併之年齡層)中針對PMB80(A22)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例為5.0%；針對PMB2001(A56)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例為1.9%；針對PMB2948(B24)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例為3.3%；且針對PMB2707(B44)之hSBA效價達到從基線開始增加≥4倍之個體的比例為0.0%。
mITT群體觀察到類似之結果。 按性別和國家評估該可評估之免疫原性群體中對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到增加≧4倍之個體比例的亞群分析。在進行之亞群分析中未觀察到臨床上重要的差異。 主要MnB試驗菌株之反向累積分佈曲線
評估該合併之年齡層中之個體在各採樣時點對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株(PMB80[A22]、PMB2001[A56]、PMB2948[B24]和PMB2707[B44])顯示出hSBA反應(≧LLOQ)之個體比例的RCDC。RCDC顯示出相對於HAV/生理鹽水組，二價rLP2086組在第二次疫苗接種和第三次疫苗接種後之免疫反應較高。該二價rLP2086組之免疫反應隨著每一次之疫苗接種而增加。 免疫原性結論
本研究之主要目標為藉由hSBA，針對4種主要MnB測試菌株(2種表現LP2086亞族A蛋白，2種表現LP2086亞族B蛋白)進行測量來描述個體之免疫反應，該測量係在第三次疫苗接種後1個月，在年齡為12至＜18個月和年齡為18至＜24個月之健康個體中進行。對合併之年齡層(12至＜24個月)的免疫反應之描述為次要目標。主要目標之主要試驗指標為在第三次疫苗接種後1個月，各年齡層中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例。
在投予第三個二價rLP2086劑量後一個月可在年齡為12至＜18個月之幼兒和年齡為18至＜24個月之之幼兒，及合併之年齡層(12至＜24個月)中觀察到強大之免疫反應，此可藉由針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ(在A56、B24和B44方面為1：8；在A22方面為1：16)之個體的比例確認。對60μg組，在3個劑量後，較年小幼兒(12至＜18個月大)和較年長幼兒(18至＜24個月大)之達成hSBA效價≧LLOQ的個體比例分別為自88.9%至100.0%和自81.8%至100.0%。對120μg組，在3個劑量後，年齡為12至＜18個月大之幼兒和年齡為18至＜24個月大之幼兒達成hSBA效價≧LLOQ的個體比例分別為自71.1%至100.0%和自72.0%至100.0%。在第三次疫苗接種後1個月，合併之年齡層中針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體比例為自85.0%至100.0%(60μg組)和自71.6%至100.0%(120μg組)。這些發現可藉由與跨越二種年齡層和劑量水準之基線相比較，在接受三個二價rLP2086劑量後針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之GMT增加(從基線之4.0至8.5至第三次疫苗接種後1個月之15.1至171.4)及hSBA效價達到≧1：4之個體比例(71.1%至100%)或≥1：16之個體比例(63.6%至100%)進一步得到支持。另外，在合併之年齡層中，在二種劑量下，第三次疫苗接種後1個月針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體比例係自67.4%至100.0%。總結，在第0、2和6個月計劃表中投予之3個二價rLP2086劑量(無論是60μg或120μg)可在年齡為12至＜24個月之幼兒(個別及合併之年齡層)中引發強大之免疫反應。
該研究之次要目標係在投予第二個二價rLP2086劑量後一個月藉由評估2個年齡層及合併之年齡層之≧LLOQ反應、界定之hSBA效價和hHSBA GMT來描述免疫反應。在合併之年齡層方面，在第二個二價rLP2086劑量後一個月(投予第一個劑量後2個月)，在60μg組中達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為57.9%至94.7%，在120μg組中達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為33.7%至100.0%。二個個別年齡層所得之結果類似，在較年輕和年長之年齡層之間未觀察到有意義之差異。這些發現可藉由與跨越二種年齡層和劑量水準之基線相比較，在接受二個二價rLP2086劑量後針對該4種主要MnB測試菌株的每一種菌株之GMT增加(7.2至110.6)且hSBA效價達到≧1：4(36.0%至100%)或≥1：16(32.6%至100%)之個體的比例得到支持。二種個別年齡層得到之結果類似。另外，在第二次疫苗接種後1個月，在合併之年齡層中對該4種主要之MnB測試菌株的每一種菌株之hSBA效價達到從基線開始增加≧4倍之個體比例係在30.2%至98.9%之範圍內。結論，藉由相隔二個月投予之二個60μg或120μg劑量的二價rLP2086在年齡為12至＜24個月之幼兒(個別及合併之年齡層)中引出強大之免疫反應。 總結，在60μg和120μg二種劑量水準下，在第0、2和6個月計劃表中以3個劑量投予之二價rLP2086在年齡為12至＜24個月之幼兒(個別及合併之年齡層)中引出強大之免疫反應，藉由hSBA測量時，有高比例之個體在第三個劑量後取得保護性抗體效價。 討論和整體結論
免疫原性討論.來自該給予年齡為12至＜24個月之幼兒的二價rLP2086(二種劑量水準)之3劑量方案(第0、2和6個月計劃表)的第2期研究之免疫原性結果與先前在青少年和年輕人身上進行之120μg劑量水準的研究相一致。
對二價rLP2086疫苗接種之免疫原性反應係在經驗證之hSBA中，採用較公認之保護相關性(即，hSBA效價≥1：4)更嚴格之標準，使用4種主要之MnB測試菌株(各自表現與該疫苗組分抗原異源之fHBP變體)測量。基於在第三次疫苗接種後1個月，對該4種主要MnB測試菌株之hSBA效價≧LLOQ，參與本研究之幼兒(任一種劑量水準)與參與研究B1971009之青少年(10歲至＜19歲)和參與研究B1971017之幼兒和兒童(≧24個月至＜10歲)相較下具有類似之免疫反應，在120μg組(年齡12至＜24個月)方面，本研究中在第三次疫苗接種(第0、2和6個月計劃表)後達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為71.6%至100%，而研究B1971009中為87.1%至99.5%，研究B1971017中為79.1%至100.0%。在第三次疫苗接種後1個月對該4種主要MnB測試菌株之hSBA效價達到≧LLOQ之個體的比例在這3個研究之間並沒有臨床上有意義的差異，儘管研究B1971009中具有疫苗接種前hSBA效價≧LLOQ之青少年個體的比例較本研究中之幼兒的比例高出許多。二價rLP2086顯示出在年齡為12至＜24個月之群體中為高度免疫原性且基於hSBA保護相關性似乎能提供類似於預期對青少年之針對MnB感染的防護。對個別年齡層及合併之二個年齡層投予3個劑量後，60μg劑量水準之反應與120μg劑量水準之反應並無有意義之差別。
關於次要目標(本研究中合併之年齡層(12至＜24個月)在第二個二價rLP2086劑量(任一劑量水準)後1個月對之免疫反應)，相較於參與研究B1971009之青少年(10歲至＜19歲)(彼等接受相隔2個月投予之2個二價rLP2086劑量)達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為64.2%至99.1%及參與研究B1971017之幼兒和兒童(≧24個月至＜10歲)達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為48.5%至100.0%，本研究中達到hSBA效價≧LLOQ之個體的比例為33.7%至100%。對於二個年齡層及合併之年齡層，投予二個60μg二價rLP2086劑量後之免疫反應與投予二個120μg二價rLP2086劑量後之免疫反應並無有意義之差別。應注意的是，當比較60μg和120μg劑量水準之間的反應率時，60μg組中較小之樣品尺寸較難做確定性結論。
總結，在第0、2和6個月計劃表中投予之60μg和120μg二種劑量水準之二價rLP2086在年齡為12至＜24個月之幼兒中為高度免疫原性，藉由hSBA測量時，有高比例之個體在第三個劑量後取得保護性抗體效價。在投予第三個劑量後一個月，在本研究中測量之免疫反應似乎與先前在青少年和兒童中進行之研究中所觀察到者類似。該3劑量方案似乎在年齡為12至＜24個月之幼兒中提供高比例之保護性免疫。
總體結論。總結，當在第0、2和6個月計劃表中投予年齡為12至＜24個月之幼兒時，藉由hSBA可測得60μg和120μg劑量水準之二價rLP2086在第三個劑量後可引發保護性抗體效價。如本研究中投予之疫苗對年齡為12至＜24個月之幼兒是安全且良好耐受，具有可接受之安全性變化形廓。 實施例22：在CBA/J小鼠中評估Mn五價和Trumenba®
疫苗之腦膜炎球菌血清群B免疫原性
在CBA/J小鼠中評估以二價MnB fHBP疫苗、Trumenba或與四價ACWY多糖結合型疫苗一起配製之二價MnB fHBP疫苗(Mn五價ABCWY)進行疫苗接種後對腦膜炎球菌血清群B fHBP之免疫反應。以三種不同疫苗將各組CBA/J小鼠免疫化：五價(ABCYW)、Trumenba®(MnB)和Nimenrix®(ACYW)(表29)。
在每一治療臂方面， 使用各別疫苗之2倍稀釋劑量水準(表29)經由皮下途徑在頸部之頸背部將CBA/J小鼠(25隻/組)免疫化。在時間0使用疫苗起動小鼠之免疫反應並在第2週給予加強劑。在第3週PD2收集血清以利用二種不同的血清殺菌分析法進行測試，該二種不同的血清殺菌分析法係利用人補體(hSBA)進行。一種hSBA係利用表現fHBP亞族A之菌株(M98250771)，另一種hSBA係利用表現fHBP亞族B之菌株(CDC1127)。
hSBA測量針對腦膜炎球菌血清群B菌株之抗體依賴性，補體介導之殺菌活性。簡單地說，將經適當稀釋之測試血清在96孔微量滴定分析盤中與新製備之腦膜炎球菌B菌株(亞族A或B)之細菌培養物和人補體混合。將分析盤置於迴轉式振盪器(orbital shaker)上並在加濕培養箱(37℃/5%CO2
)中混合30分鐘。隨後，將來自各個孔之分析反應物的等分試樣轉移至96孔過濾盤以計算存活細菌數。
對疫苗接種之反應率係以各給藥組(n=25)中在hSBA中反應之小鼠的百分比計算出。當以預定之稀釋水準測試時，殺死≥50%之T30
對照腦膜炎球菌的小鼠血清樣品被視為反應者。該T30
對照孔含有細菌和補體但無測試血清並在30分鐘分析培育結束時進行計數。
表30和表31顯示由TRUMENBA®或Mn五價疫苗誘導之對腦膜炎球菌血清群B菌株亞族A和亞族B的劑量依賴性反應率，該二者彼此相當。如所預期者，NIMENRIXTM
不會誘導對Mn B菌株之功能性免疫反應。
下列各項描述本發明之另外的實施態樣： C1. 一種組成物，其包含多肽和腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖軛合物；腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖軛合物；腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖軛合物；和腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖軛合物。 C2. 如第C1項之組成物，其中該MenA莢膜糖與載體蛋白軛合；該MenC莢膜糖與載體蛋白軛合；該MenW莢膜糖與載體蛋白軛合；且該MenY莢膜糖與載體蛋白軛合。 C3. 如第C1項之組成物，其中該組成物進一步包括腦膜炎球菌血清群X(MenX)莢膜糖軛合物。 C4. 如第C1項之組成物，其中該多肽為因子H結合蛋白(fHBP)。 C5. 如第C1項之組成物，其中該多肽包含與下列群組中任一者所示之胺基酸序列具有至少70%同一性之胺基酸序列：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：33、SEQ SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、SEQ ID NO：38、SEQ ID NO：39、SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：49、SEQ ID NO：50、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：53、SEQ ID NO：54、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：56、SEQ ID NO：57、SEQ ID NO：58、SEQ ID NO：59、SEQ ID NO：60、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：62。 C6. 一種組成物，其包含： a.第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列； b.第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 c.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖。 C7. 一種組成物，其包含： a.第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列； b.第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 c.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖。 C8. 一種組成物，其包含： a.第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列； b.第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 c.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群W-135(MenW)莢膜糖。 C9. 一種組成物，其包含： a.第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列； b.第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 c.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。 C10. 一種組成物，其包含： a.第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列； b.第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列； c.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖； d.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖； e.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖；和 f.與載體蛋白軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。 C11. 一種組成物，其包含： a.第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列； b.第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 c.與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖； d.與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖； e.與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖；和 f.與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。 C12. 如第C1項之組成物，其中該MenA莢膜糖藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合且其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)。 C13. 如第C1項之組成物，其中該MenC莢膜糖藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，且其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)。 C14. 如第C1項之組成物，其中該MenW莢膜糖在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)。 C15. 如第C1項之組成物，其中該MenY莢膜糖在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)。 C16. 如第C1項之組成物，其進一步包含Tris-HCl。 C17. 如第C1項之組成物，其進一步包含氯化鈉。 C18. 如第C1項之組成物，其進一步包含蔗糖。 C19. 如第C1項之組成物，其進一步包含組胺酸。 C20. 如第C1項之組成物，其進一步包含聚山梨醇酯80。 C21. 如第C1項之組成物，其進一步包含鋁。 C22. 如第C1項之組成物，其進一步包含磷酸鋁。 C23. 如第C1項之組成物，其中該組成物包含約120 μg/ml之第一多肽；約120μg/ml之第二多肽；約0.5mg/ml之呈磷酸鋁形式之鋁；約0.02mg之聚山梨醇酯80；約10mM之組胺酸；和約150mM之氯化鈉。 C24. 如第C1項之組成物，其中該組成物每劑量包含約60μg之第一多肽；約60μg之第二多肽；與約7.5μg破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之約5μg之MenA莢膜糖；與約7.5μg TT軛合之約5μg之MenC莢膜糖；與約3.75μg TT軛合之約5μg之MenW莢膜糖；與約3.25μg TT軛合之約5μg之MenY莢膜糖；約97μg之Tris-HCl，pH 6.8±0.3；4.69至4.71mg之氯化鈉；約28mg之蔗糖；約0.78mg之L-組胺酸；約0.02mg之聚山梨醇酯80；約0.25mg之鋁；且進一步包含0.5mL水。 C25. 如第C1項之組成物，其中該組成物適合用於年齡為12至＜18個月或18至＜24個月之患者。 C26. 如第C1項之組成物，其中該組成物適合用於年齡為18至＜24個月之患者。 C27. 如第C1項之組成物，其中該組成物適合用於年齡為≧24個月至＜10歲之患者。 C28. 如第C20項之組成物，其中該組成物包含至少0.010mg之聚山梨醇酯80和至多0.018mg之聚山梨醇酯80。 C29. 如第C20項之組成物，其中該組成物包含至少0.01mg之聚山梨醇酯80和至多0.02mg之聚山梨醇酯80。 C30. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含與SEQ ID NO：1之序列同一性小於100%之多肽。 C31. 如第C1項之組成物，其中該第一多肽共具有258個胺基酸。 C32. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含與SEQ ID NO：2之序列同一性小於100%之多肽。 C33. 如第C1項之組成物，其中該第二多肽共具有261個胺基酸。 C34. 如第C1項之組成物，其中該組成物包含至多二種脂化多肽。 C35. 如第C1項之組成物，其中該組成物不包含雜合蛋白。 C36. 如第C1項之組成物，其中該組成物不包含嵌合蛋白。 C37. 如第C1項之組成物，其中該組成物不包含融合蛋白。 C38. 如第C1項之組成物，其中該組成物未經凍乾。 C39. 如第C1項之組成物，其中該組成物不包含甲醛。 C40. 如第C1項之組成物，其中該組成物不包含白喉類毒素或CRM。 C41. 如第C1項之組成物，其中該組成物在無己二酸二醯肼(ADH)連接子存在之情況下不包含MenA莢膜糖。 C42. 如第C1項之組成物，其中該組成物在無己二酸二醯肼(ADH)連接子存在之情況下不包含MenC莢膜糖。 C43. 如第C1項之組成物，其中該組成物為液體組成物。 C44. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含任一下列免疫原性組成物：MENACTRA(R)、MENVEO(R)、ADACEL(R)、HAVRIX(R)、GARDASIL(R)、REPEVAX或彼等之任何組合。 C45. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖軛合物(MCV4)組成物，其中該載體蛋白為白喉類毒素。 C46. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖軛合物(MCV4)組成物，其中該載體蛋白為CRM197
。 C47. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含NIMENRIX疫苗。 C48. 如第C1項之組成物，其中該組成物未進一步包含NIMENRIX疫苗，其中NIMENRIX包含由氯化鈉和水組成之稀釋劑。 C49. 一種套組，其包含(a)第一組成物，其包含脂化之MenB rLP2086亞族A多肽和脂化之MenB rLP2086亞族B多肽；和(b)第二組成物，其包含與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖；與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖；和與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖。 C50. 如第C49項之套組，其中該第一組成物為液體組成物且該第二組成物為凍乾組成物。 C51. 如第C49項之套組，其中該凍乾組成物不包含聚山梨醇酯80。 C52. 如第C49項之套組，其中該套組未進一步包含任一下列免疫原性組成物：MENACTRA(R)、MENVEO(R)、ADACEL(R)、HAVRIX(R)、GARDASIL(R)、REPEVAX或彼等之任何組合。 C53. 如第C49項之套組，其中該套組未進一步包含腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖軛合物(MCV4)組成物，其中該載體蛋白為白喉類毒素。 C54. 如第C49項之套組，其中該套組未進一步包含腦膜炎球菌A、C、Y和W-135多糖軛合物(MCV4)組成物，其中該載體蛋白為CRM197
。 C55. 如第C49項之套組，其中該套組未進一步包含NIMENRIX疫苗。 C56. 如第C49項之套組，其中該套組未進一步包含NIMENRIX(R)疫苗，其中NIMENRIX(R)包含由氯化鈉和水組成之稀釋劑。 C57.一種套組，其包含： a.一種液體組成物，其包含 i. 第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；和 ii. 第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 b.一種凍乾組成物，其包含 i.腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)； ii.腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)； iii.腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)；和 iv.腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)。 C58. 如第C57項之套組，其中該液體組成物進一步包含氯化鈉。 C59. 如第C57項之套組，其中該液體組成物進一步包含L-組胺酸。 C60. 如第C57項之套組，其中該液體組成物進一步包含聚山梨醇酯80。 C61. 如第C57項之套組，其中該液體組成物進一步包含磷酸鋁。 C62. 如第C57項之套組，其中該液體組成物未進一步包含Tris-HCl。 C63. 如第C57項之套組，其中該液體組成物未進一步包含蔗糖。 C64. 如第C57項之套組，其中該凍乾組成物進一步包含氯化鈉。 C65. 如第C57項之套組，其中該凍乾組成物不包含聚山梨醇酯80。 C66. 如第C60項之套組，其中該液體組成物包含至少0.010mg之聚山梨醇酯80和至多0.018mg之聚山梨醇酯80。 C67. 如第C60項之套組，其中該液體組成物包含至少0.010mg之聚山梨醇酯80和至多0.02mg之聚山梨醇酯80。 C68. 一種免疫原性組成物，其包含： a.一種液體組成物，其包含(i)第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；和(ii)第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；及 b.一種凍乾組成物，其包含 i.腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)； ii.腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)； iii.腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)；和 iv.腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)。 C69. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該凍乾組成物係以該液體組成物重構。 C70. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該液體組成物進一步包含組胺酸。 C71. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該液體組成物進一步包含聚山梨醇酯80。 C72. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該液體組成物進一步包含磷酸鋁。 C73. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該液體組成物進一步包含氯化鈉。 C74. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該組成物適合用於年齡為12至＜18個月或18至＜24個月之患者。 C75. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該組成物適合用於年齡為18至＜24個月之患者。 C76. 如第C68項之免疫原性組成物，其中該組成物適合用於年齡為≧24個月至＜10歲之患者。 C77. 一種免疫原性組成物，其包含： a.一種液體組成物，其包含(i). 第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；和(ii). 第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和 b.一種凍乾組成物，其包含 i.腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH
-TT軛合物)； ii.腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH
-TT軛合物)； iii.腦膜炎球菌血清群W135
(MenW)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenW-TT軛合物)；和 iv.腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖，其在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合(MenY-TT軛合物)； 其中該凍乾組成物與該液體組成物的重構以生成該免疫原性組成物。 C78. 如第C77項之免疫原性組成物，其中該液體組成物進一步包含鋁。 C79. 如第C77項之免疫原性組成物，其中該液體組成物進一步包含磷酸鋁。 C80. 如第C77項之免疫原性組成物，其中該凍乾組成物進一步包含氯化鈉。 C81. 如第C77項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物包含至少0.010mg之聚山梨醇酯80和至多0.018mg之聚山梨醇酯80。 C82. 如第C77項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物包含至少0.01mg之聚山梨醇酯80和至多0.02mg之聚山梨醇酯80。 C83. 如第C77項之免疫原性組成物，其中該凍乾組成物不含有鋁。 C84. 如第C78項之免疫原性組成物，其中該第一多肽和第二多肽與鋁結合。 C85. 如第C78項之免疫原性組成物，其中於免疫原性組成物中該第一多肽和第二多肽與鋁結合。 C86. 如第C78項之免疫原性組成物，其中與重構該凍乾組成物之前該液體組成物中與鋁結合之多肽的濃度相比較，該免疫原性組成物中與鋁結合之多肽的濃度在24小時後未降低。 C87. 如第C77項之免疫原性組成物，其中與該凍乾組成物中之MenAAH
-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenAAH
-TT軛合物之濃度在24小時後未降低。 C88. 如第C77項之免疫原性組成物，其中與該凍乾組成物中之MenCAH
-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenCAH
-TT軛合物之濃度在24小時後未降低。 C89. 如第C77項之免疫原性組成物，其中與該凍乾組成物中之MenW-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenW-TT軛合物之濃度在24小時後未降低。 C90. 如第C77項之免疫原性組成物，其中與該凍乾組成物中之MenY-TT軛合物之濃度相比較，該免疫原性組成物中之MenY-TT軛合物之濃度在24小時後未降低。 C91. 如第C86項之免疫原性組成物，其中與重構之前液體組成物中之對應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多1%。 C92. 如第C86項之免疫原性組成物，其中該與重構之前液體組成物中的相應濃度相比，該濃度在24小時後降低至多5%。 C93. 如第C86項之免疫原性組成物，其中與重構之前該液體組成物中之對應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多10%。 C94. 如第C87至C90項之免疫原性組成物，其中與重構之前該凍乾組成物中之對應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多1%。 C95. 如第C87至C90項之免疫原性組成物，其中與重構之前該凍乾組成物中之對應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多5%。 C96. 如第C87至C90項之免疫原性組成物，其中與重構之前該凍乾組成物中之對應濃度相比較，該濃度在24小時後降低至多10%。 C97. 如第C68項或C77項之免疫原性組成物，其中當以氯化鈉重構時，該重構之免疫原性組成物之pH值小於該凍乾組成物之pH值。 C98. 一種組成物，其包含a)第一脂化多肽，其包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列，和b)第二脂化多肽，其包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C99. 如第C98項之組成物，其中該組成物進一步包含聚山梨醇酯80、鋁、組胺酸和氯化鈉。 C100. 如第C98項之組成物，其中該組成物包含60μg之第一脂化多肽和60μg之第二脂化多肽。 C101. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株和針對腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C1項之組成物。 C102. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株和針對腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C68項之組成物。 C103. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株和針對腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C77項之組成物。 C104. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C1項之組成物。 C105. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C68項之組成物。 C106. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C77項之組成物。 C107. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C1項之組成物。 C108. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C68項之組成物。 C109. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C77項之組成物。 C110. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W、腦膜炎球菌血清群Y菌株和腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C1項之組成物。 C111. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W、腦膜炎球菌血清群Y菌株和腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C68項之組成物。 C112. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W、腦膜炎球菌血清群Y菌株和腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C77項之組成物。 C113. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W、腦膜炎球菌血清群Y菌株和腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，其包含對該人投予有效量之如第C98項之組成物。 C114. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白A10之腦膜炎球菌血清群C菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C115. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白A10之腦膜炎球菌血清群W菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含含有SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的多肽之組成物。 C116. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白A19之腦膜炎球菌血清群W菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含含有SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列的多肽之組成物。 C117. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白B16之腦膜炎球菌血清群A菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含含有SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的多肽之組成物。 C118. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白B47之腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含含有SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列的多肽之組成物。 C119. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白A10之腦膜炎球菌血清群C菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C120. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白A10之腦膜炎球菌血清群W菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C121. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白A19之腦膜炎球菌血清群W菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C122. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白B16之腦膜炎球菌血清群A菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C123. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白B47之腦膜炎球菌血清群Y菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C124. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予有效量之與選自由下列所組成之群組的胺基酸序列具有至少70%同一性之多肽：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：33、SEQ SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、SEQ ID NO：38、SEQ ID NO：39、SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：49、SEQ ID NO：50、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：53、SEQ ID NO：54、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：56、SEQ ID NO：57、SEQ ID NO：58、SEQ ID NO：59、SEQ ID NO：60、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：62。 C125. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予有效量之如第C1項之組成物。 C126. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予有效量之如第C68項之組成物。 C127. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予有效量之如第C77項之組成物。 C128. 一種在人體中誘導針對腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予有效量之如第C98項之組成物。 C129. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白B49之腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予如第C98項之組成物。 C130. 一種在人體中誘導針對表現因子H結合蛋白B49之腦膜炎球菌血清群X菌株之殺菌免疫反應的方法，該方法包含對該人投予包含第一脂化多肽和第二脂化多肽之組成物，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C131. 如第C101至C130項中任一項之方法，其中該人類在接受第一劑量後，當在血清殺菌分析中使用人補體在相同條件下測量時，該組成物在人體中誘導較接受該第一劑量前之血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少2倍之血清免疫球蛋白的殺菌效價。 C132. 如第C101至C130項中任一項之方法，其中該人類在接受第一劑量後，當在血清殺菌分析中使用人補體在相同條件下測量時，該組成物在人體中誘導較接受該第一劑量前之血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少4倍之血清免疫球蛋白的殺菌效價。 C133. 如第C101至C132項中任一項之方法，其中該人類在接受第一劑量後，當在血清殺菌分析中使用人補體在相同條件下測量時，該組成物在人體中誘導較接受該第一劑量前之血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少8倍之血清免疫球蛋白的殺菌效價。 C134. 如第C101至C132項中任一項之方法，其中該患者之年齡為12至＜18個月或18至＜24個月。 C135. 如第C101至C132項中任一項之方法，其中該患者之年齡為18至＜24個月。 C136. 如第C101至C132項中任一項之方法，其中該患者之年齡為≧24個月至＜10歲。 C137. 一種用於引發患者之免疫反應的方法，該方法包含：(a)當該患者之年齡在12至18個月之間時，對患者投予免疫原性組成物；其中該免疫原性組成物包含第一脂化多肽和第二脂化多肽，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C138. 一種引發患者之免疫反應的方法，該方法包含：(a)當該患者之年齡為18至24個月之間時，對患者投予免疫原性組成物；其中該免疫原性組成物包含第一脂化多肽和第二脂化多肽，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C139. 一種引發患者之免疫反應的方法，該方法包含：(a)當該患者之年齡為24至10歲之間時，對患者投予免疫原性組成物；其中該免疫原性組成物包含第一脂化多肽和第二脂化多肽，該第一脂化多肽包含SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列；該第二脂化多肽包含SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列。 C140. 如第C137至C139項中任一項之方法，其中該組成物進一步包含聚山梨醇酯80、鋁、組胺酸和氯化鈉。
第1圖實施例6中描述之MnB二價rLP2086組成物在無或有MenACWY-TT組成物之存在下的疊加IEX-HPC色譜圖。
第2圖疊加之RP-HPLC色譜圖，其顯示如實施例7中所描述者，存有MenACWY-TT組成物不會干擾MnB二價rLP2086組成物純度之評估。
第3圖疊加之RP-HPLC色譜圖，其顯示如實施例14中所描述之組合的MenABCWY組成物中之rLP2086蛋白質的純度和峰值比。
第4A圖MnB rLP2086亞族A A05蛋白之一級胺基酸序列和
第4B圖MnB rLP2086亞族A A05蛋白之一級結構
第5A圖MnB rLP2086亞族B B01蛋白之一級胺基酸序列和
第5B圖MnB rLP2086亞族B B01蛋白之 一級結構
第6A圖來自腦膜炎球菌血清群A菌株(fHBP變體B16(PMB3257，MenA)之因子H結合蛋白(fHBP)B16 (SEQ ID NO：26)的胺基酸序列；
第6B圖來自腦膜炎球菌血清群C菌株(fHBP變體A10(PMB5208，MenC和PMB5523，MenW)之fHBP A10(SEQ ID NO：27)；
第6C圖來自腦膜炎球菌血清群W菌株(fHBP變體A19(PMB5248，MenW)之fHBP A19(SEQ ID NO：28)；
第6D圖來自腦膜炎球菌血清群W菌株(fHBP變體A10(PMB5523，MenW)之fHBP A10(SEQ ID NO：27)；
第6E圖來自腦膜炎球菌血清群Y菌株(fHBP變體B47(PMB5187，MenY)之fHBP B47(SEQ ID NO：29)；
第6F圖來自腦膜炎球菌血清群X菌株(fHBP變體B49(PMB5540，MenX)之fHBP B49(SEQ ID NO：30)。
第7圖血清殺菌活性，對腦膜炎球菌病之防護相關性。使用人補體之血清殺菌分析(hSBA)中效價≥1：4為已建立之對腦膜炎球菌病之防護相關性。
第8圖MenA、C、W、Y和X測試菌株選擇。
第9圖自其中隨機選擇測試血清子集之臨床試驗相關群組的圖示。
第10圖從使用FHbp反應性mAb MN 994-11之流式細胞術實驗測定之FHbp表面表現水準(MFI)的分佈。血清群內各菌株之FHbp表面表現係以黑點註記，而各血清群內該選定之測試菌株之FHbp表面表現水準係以彩色星星註記。
第11圖對MenA PMB3257(B16)之hSBA反應率(具有hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所得之幾何平均效價(GMT)分別為2、3、4和5。陽性對照組中之個體在疫苗接種前之反應率為3%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為2和95。
第12圖對MenC PMB5208(A10)之hSBA反應率(具有hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所得之GMT分別為4、8、12和29。陽性對照組中之個體在疫苗接種前之反應率為20%，在接受MCV4後1個月之反應率為90%。陽性對照組之GMT分別為3和119。
第13圖對MenW PMB5248(A19)之hSBA反應率(具有hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所得之GMT分別為4、18、47和77。陽性對照組中之個體在疫苗接種前之反應率為40%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為5和88。
第14圖對MenW PMB5523(A10)之hSBA反應率(具有hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所得之GMT分別為7、15、21和42。陽性對照組中之個體在疫苗接種前之反應率為55%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為8和60。
第15圖對MenY PMB5187(B47)之hSBA反應率(具有hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所得之GMT分別為3、7、31和58。陽性對照組中之個體在疫苗接種前之反應率為13%，在接受MCV4後1個月之反應率為97%。陽性對照組之GMT分別為3和79。
第16圖對MenX PMB5540(B49)之hSBA反應率(具有hSBA效價≥1：8之個體的百分比)。圖中顯示在免疫化前(第0個月)和給予第1、2和3個MenBFHbp劑量後1個月收集之血清的反應率和95%置信區間。所得之GMT分別為2、3、7和20。陽性對照組中之個體在疫苗接種前之反應率為0%，在接受MCV4後1個月之反應率為0%。陽性對照組之GMT分別為2和2。 序列識別說明
SEQ ID NO：1列出重組腦膜炎球菌血清群B 2086變體A05多肽抗原之胺基酸序列。
SEQ ID NO：2列出重組腦膜炎球菌血清群B 2086變體B01多肽抗原之胺基酸序列。
SEQ ID NO：3列出SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2之位置1至4處的胺基酸殘基。
SEQ ID NO：4 列出重組奈瑟氏球菌亞族 A LP2086多肽(rLP2086)(A05)多肽N端之胺基酸序列。
SEQ ID NO：5列出奈瑟氏球菌亞族 A LP2086 M98250771多肽(A05)多肽N端之胺基酸序列。
SEQ ID NO：6列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B153之胺基酸序列。
SEQ ID NO：7列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A04之胺基酸序列。
SEQ ID NO：8列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A05之胺基酸序列。
SEQ ID NO：9列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A12之胺基酸序列。
SEQ ID NO：10列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A22之胺基酸序列。
SEQ ID NO：11列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B02之胺基酸序列。
SEQ ID NO：12列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B03之胺基酸序列。
SEQ ID NO：13列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B09之胺基酸序列。
SEQ ID NO：14列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B22之胺基酸序列。
SEQ ID NO：15列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B24之胺基酸序列。
SEQ ID NO：16列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B44之胺基酸序列。
SEQ ID NO：17列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B16之胺基酸序列。
SEQ ID NO：18列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A07之胺基酸序列。
SEQ ID NO：19列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A19之胺基酸序列。
SEQ ID NO：20列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A06之胺基酸序列。
SEQ ID NO：21列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A15之胺基酸序列。
SEQ ID NO：22列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A29之胺基酸序列。
SEQ ID NO：23列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B15之胺基酸序列。
SEQ ID NO：24列出重組奈瑟氏球菌亞族B LP2086多肽(rLP2086)(B01)多肽N端之胺基酸序列。
SEQ ID NO：25列出奈瑟氏球菌亞族B LP2086 CDC-1573多肽(B01)多肽N端之胺基酸序列。
SEQ ID NO：26列出表現因子H結合蛋白(fHBP)B16之腦膜炎球菌血清群A菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：27列出表現fHBP A10之腦膜炎球菌血清群C菌株之胺基酸序列。SEQ ID NO：27亦列出表現fHBP A10之腦膜炎球菌血清群W菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：28列出表現fHBP A19之腦膜炎球菌血清群W菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：29列出表現fHBP B47之腦膜炎球菌血清群Y菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：30列出表現fHBP B49之腦膜炎球菌血清群X菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：31列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體B16之胺基酸序列。
SEQ ID NO：32列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A07之胺基酸序列。
SEQ ID NO：33列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A19之胺基酸序列。
SEQ ID NO：34列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A06之胺基酸序列。
SEQ ID NO：35列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A15之胺基酸序列。
SEQ ID NO：36列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A29之胺基酸序列。
SEQ ID NO：37列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體B15之胺基酸序列。
SEQ ID NO：38列出表現因子H結合蛋白(fHBP)B16之非脂化之腦膜炎球菌血清群A菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：39列出表現因子H結合蛋白(fHBP)A10之非脂化之腦膜炎球菌血清群C菌株之胺基酸序列。SEQ ID NO：39亦列出表fHBP A10之非脂化之腦膜炎球菌血清群W菌株的胺基酸序列。
SEQ ID NO：40列出表現fHBP A19之非脂化之腦膜炎球菌血清群W菌株之胺基酸序列。
SEQ ID NO：41列出表現fHBP B47之非脂化之腦膜炎球菌血清群Y菌株的胺基酸序列。
SEQ ID NO：42列出表現fHBP B49之非脂化之腦膜炎球菌血清群X菌株的胺基酸序列。
SEQ ID NO：43列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體B44之胺基酸序列。
SEQ ID NO：44列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體B09之胺基酸序列。
SEQ ID NO：45列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B09之胺基酸序列。
SEQ ID NO：46列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A05之胺基酸序列。
SEQ ID NO：47列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體B01之胺基酸序列。
SEQ ID NO：48列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B01之胺基酸序列，其包括在胺基酸位置1之N端Cys。
SEQ ID NO：49列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B15之胺基酸序列，其包括在胺基酸位置1之N端Cys。
SEQ ID NO：50列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B16之胺基酸序列，其包括在胺基酸位置1之N端Cys。
SEQ ID NO：51列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B22之胺基酸序列。
SEQ ID NO：52列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A22之胺基酸序列。
SEQ ID NO：53列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A12之胺基酸序列。
SEQ ID NO：54列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A22之胺基酸序列。
SEQ ID NO：55列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A62之胺基酸序列，其包括在胺基酸位置1之N端Cys。
SEQ ID NO：56列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A62之胺基酸序列。
SEQ ID NO：57列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A29之胺基酸序列，其包括在胺基酸位置1之N端Cys。
SEQ ID NO：58列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體B22之胺基酸序列。
SEQ ID NO：59列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體A05之胺基酸序列。
SEQ ID NO：60列出非脂化之腦膜炎球菌血清群B 2086變體A05之胺基酸序列。
SEQ ID NO：61列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B24之胺基酸序列。
SEQ ID NO：62列出腦膜炎球菌血清群B 2086變體B24之胺基酸序列。
<110> 美商輝瑞股份有限公司(Pfizer Inc.)
<120> 腦膜炎球菌組成物和使用彼之方法
<140> TW 107103415
<141> 2018-01-31
<150> US 62/452,963
<151> 2017-01-31
<150> US 62/503,295
<151> 2017-05-08
<150> US 62/613,945
<151> 2018-01-05
<150> US 62/623,233
<151> 2018-01-29
<160> 62
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 258
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成之胺基酸序列
<400> 1
<210> 2
<211> 261
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成之胺基酸序列
<400> 2
Claims (14)
- 一種免疫原性組成物，其包含：(1)第一組成物，其包含第一因子H結合蛋白(fHBP)和第二fHBP，該第一fHBP具有SEQ ID NO：1所示之胺基酸序列且該第二fHBP具有SEQ ID NO：2所示之胺基酸序列；和(2)第二組成物，其包含：(i)藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與己二酸二醯肼(ADH)連接子軛合之腦膜炎球菌血清群A(MenA)莢膜糖，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenAAH-TT軛合物)；(ii)藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與ADH連接子軛合之腦膜炎球菌血清群C(MenC)莢膜糖，其中該連接子藉由碳二亞胺化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合(MenCAH-TT軛合物)；(iii)在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合之腦膜炎球菌血清群W135(MenW)莢膜糖(MenW-TT軛合物)；及(iv)在無連接子之存在下藉由四氟硼酸1-氰基-4-二甲胺基吡啶鎓化學與破傷風類毒素載體蛋白(TT)直接軛合之腦膜炎球菌血清群Y(MenY)莢膜糖(MenY-TT軛合物)， 其中該第二組成物係以該第一組成物重構。
- 如申請專利範圍第1項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物進一步包含磷酸鋁。
- 如申請專利範圍第1項之免疫原性組成物，其中該第一fHBP和第二fHBP之量的至少90%與鋁結合。
- 如申請專利範圍第1項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物進一步包含聚山梨醇酯80。
- 如申請專利範圍第1項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物進一步包含Tris-HCl；氯化鈉；蔗糖；L-組胺酸；聚山梨醇酯80；及磷酸鋁。
- 如申請專利範圍第5項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物包含120μg/ml之第一fHBP；120μg/ml之第二fHBP；0.5mg/ml呈磷酸鋁形式之鋁；0.02mg之聚山梨醇酯80；10mM之L-組胺酸；及150mM之氯化鈉。
- 如申請專利範圍第5項之免疫原性組成物，其中該免疫原性組成物每劑量包含60μg之第一fHBP；60μg之第二fHBP；與7.5μg破傷風類毒素載體蛋白(TT)軛合之5μg之MenA莢膜糖；與7.5μg TT軛合之5μg之MenC莢膜糖；與 3.75μg TT軛合之5μg之MenW莢膜糖；與3.25μg TT軛合之5μg之MenY莢膜糖；97μg之Tris-HCl，pH 6.8±0.3；4.69至4.71mg之氯化鈉；28mg之蔗糖；0.78mg之L-組胺酸；0.02mg之聚山梨醇酯80；0.25mg之鋁；及進一步0.5mL水。
- 一種如申請專利範圍第1至7項中任一項之免疫原性組成物於製備疫苗之用途，該疫苗係用於人體內誘導針對腦膜炎球菌血清群B亞族A菌株和腦膜炎球菌血清群B亞族B菌株之免疫反應。
- 一種如申請專利範圍第1至7項中任一項之免疫原性組成物於製備疫苗之用途，該疫苗係用於人體內誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之免疫反應。
- 一種如申請專利範圍第1至7項中任一項之免疫原性組成物於製備疫苗之用途，該疫苗係用於人體內誘導針對腦膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W及/或腦膜炎球菌血清群Y菌株之免疫反應。
- 一種如申請專利範圍第1至7項中任一項之免疫原性組成物於製備疫苗之用途，該疫苗係用於人體內誘導針對腦 膜炎球菌血清群A、腦膜炎球菌血清群B、腦膜炎球菌血清群C、腦膜炎球菌血清群W、腦膜炎球菌血清群Y菌株及/或腦膜炎球菌血清群X菌株之免疫反應。
- 如申請專利範圍第8至11項中任一項之用途，其中該人之年齡為12至<18個月或18至<24個月。
- 如申請專利範圍第8至11項中任一項之用途，其中該人之年齡為18至<24個月。
- 如申請專利範圍第8至11項中任一項之用途，其中該人之年齡為24個月至<10歲。
Applications Claiming Priority (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762452963P | 2017-01-31 | 2017-01-31 | |
| US62/452,963 | 2017-01-31 | ||
| US201762503295P | 2017-05-08 | 2017-05-08 | |
| US62/503,295 | 2017-05-08 | ||
| US201862613945P | 2018-01-05 | 2018-01-05 | |
| US62/613,945 | 2018-01-05 | ||
| US201862623233P | 2018-01-29 | 2018-01-29 | |
| US62/623,233 | 2018-01-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW201840325A TW201840325A (zh) | 2018-11-16 |
| TWI686200B true TWI686200B (zh) | 2020-03-01 |
Family
ID=62713032
Family Applications (4)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW109105184A TW202023571A (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
| TW112118117A TW202400225A (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
| TW107103415A TWI686200B (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
| TW110120941A TWI802904B (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
Family Applications Before (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW109105184A TW202023571A (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
| TW112118117A TW202400225A (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW110120941A TWI802904B (zh) | 2017-01-31 | 2018-01-31 | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US10183070B2 (zh) |
| EP (1) | EP3577130A2 (zh) |
| JP (3) | JP7010961B2 (zh) |
| KR (2) | KR20220011796A (zh) |
| CN (2) | CN110234658B (zh) |
| AU (3) | AU2018215585B2 (zh) |
| BR (1) | BR112019014397A2 (zh) |
| CA (1) | CA3051801A1 (zh) |
| CO (1) | CO2019007982A2 (zh) |
| IL (2) | IL267733B2 (zh) |
| MX (2) | MX2019009011A (zh) |
| PE (1) | PE20191107A1 (zh) |
| PH (1) | PH12019501727A1 (zh) |
| SA (1) | SA519402336B1 (zh) |
| SG (2) | SG11201906519RA (zh) |
| TW (4) | TW202023571A (zh) |
| WO (1) | WO2018142280A2 (zh) |
| ZA (1) | ZA201905543B (zh) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| MX2007016403A (es) * | 2005-06-27 | 2008-03-07 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Composicion inmunogenica. |
| PE20140173A1 (es) | 2010-09-10 | 2014-02-20 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antigenos orf2086 de neisseria meningitidis |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| MX369534B (es) | 2013-09-08 | 2019-11-11 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y sus metodos. |
| CN107249626A (zh) | 2015-02-19 | 2017-10-13 | 辉瑞大药厂 | 脑膜炎奈瑟球菌组合物及其方法 |
| SG11201906519RA (en) | 2017-01-31 | 2019-08-27 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| US20220118072A1 (en) * | 2019-02-11 | 2022-04-21 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| CN115605222A (zh) * | 2019-09-27 | 2023-01-13 | 辉瑞公司（Us） | 脑膜炎奈瑟氏菌组合物及其方法 |
| CN110818779B (zh) * | 2019-12-20 | 2021-10-08 | 北京民海生物科技有限公司 | 一种B群流脑fHbp-V2重组蛋白及其制备方法，疫苗组合物，用途 |
| WO2021146681A1 (en) * | 2020-01-17 | 2021-07-22 | Inventprise, Llc | Multivalent streptococcus vaccines |
| CN114681601A (zh) * | 2020-12-31 | 2022-07-01 | 基础治疗有限公司 | 脑膜炎奈瑟氏球菌疫苗及其应用 |
| CN115779079A (zh) * | 2022-10-01 | 2023-03-14 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种可增强与佐剂协同免疫效力的电荷调控型抗原蛋白 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW201600109A (zh) * | 2012-03-09 | 2016-01-01 | 輝瑞大藥廠 | 腦膜炎雙球菌（ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組合物及其方法 |
Family Cites Families (266)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4057685A (en) | 1972-02-02 | 1977-11-08 | Abbott Laboratories | Chemically modified endotoxin immunizing agent |
| EP0027888B1 (en) | 1979-09-21 | 1986-04-16 | Hitachi, Ltd. | Semiconductor switch |
| US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
| US4554101A (en) | 1981-01-09 | 1985-11-19 | New York Blood Center, Inc. | Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity |
| US4673574A (en) | 1981-08-31 | 1987-06-16 | Anderson Porter W | Immunogenic conjugates |
| US4459286A (en) | 1983-01-31 | 1984-07-10 | Merck & Co., Inc. | Coupled H. influenzae type B vaccine |
| CH660375A5 (it) | 1983-02-08 | 1987-04-15 | Sclavo Spa | Procedimento per la produzione di proteine correlate alla tossina difterica. |
| US4708871A (en) | 1983-03-08 | 1987-11-24 | Commonwealth Serum Laboratories Commission | Antigenically active amino acid sequences |
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| US4650764A (en) | 1983-04-12 | 1987-03-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Helper cell |
| US4695624A (en) | 1984-05-10 | 1987-09-22 | Merck & Co., Inc. | Covalently-modified polyanionic bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers, and methods of preparing such polysaccharides and conjugates and of confirming covalency |
| US4808700A (en) | 1984-07-09 | 1989-02-28 | Praxis Biologics, Inc. | Immunogenic conjugates of non-toxic E. coli LT-B enterotoxin subunit and capsular polymers |
| JPS6147500A (ja) | 1984-08-15 | 1986-03-07 | Res Dev Corp Of Japan | キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法 |
| EP0173494A3 (en) | 1984-08-27 | 1987-11-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Chimeric receptors by dna splicing and expression |
| GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
| GB8424757D0 (en) | 1984-10-01 | 1984-11-07 | Pasteur Institut | Retroviral vector |
| SE8405493D0 (sv) | 1984-11-01 | 1984-11-01 | Bror Morein | Immunogent komplex samt sett for framstellning derav och anvendning derav som immunstimulerande medel |
| FR2573436B1 (fr) | 1984-11-20 | 1989-02-17 | Pasteur Institut | Adn recombinant comportant une sequence nucleotidique codant pour un polypeptide determine sous le controle d'un promoteur d'adenovirus, vecteurs contenant cet adn recombinant, cellules eucaryotes transformees par cet adn recombinant, produits d'excretion de ces cellules transformees et leurs applications, notamment a la constitution de vaccins |
| JPS61134325A (ja) | 1984-12-04 | 1986-06-21 | Teijin Ltd | ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法 |
| US4797368A (en) | 1985-03-15 | 1989-01-10 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Adeno-associated virus as eukaryotic expression vector |
| US4666829A (en) | 1985-05-15 | 1987-05-19 | University Of California | Polypeptide marker for Alzheimer's disease and its use for diagnosis |
| US4709017A (en) | 1985-06-07 | 1987-11-24 | President And Fellows Of Harvard College | Modified toxic vaccines |
| IT1187753B (it) | 1985-07-05 | 1987-12-23 | Sclavo Spa | Coniugati glicoproteici ad attivita' immunogenica trivalente |
| EP0232262A4 (en) | 1985-08-15 | 1989-09-19 | Stauffer Chemical Co | MICROORGANISM PRODUCING TRYPTOPHANE. |
| US5078996A (en) | 1985-08-16 | 1992-01-07 | Immunex Corporation | Activation of macrophage tumoricidal activity by granulocyte-macrophage colony stimulating factor |
| US5139941A (en) | 1985-10-31 | 1992-08-18 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV transduction vectors |
| EP0247091B1 (en) | 1985-11-01 | 1993-09-29 | Xoma Corporation | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
| US4861719A (en) | 1986-04-25 | 1989-08-29 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | DNA constructs for retrovirus packaging cell lines |
| US5514581A (en) | 1986-11-04 | 1996-05-07 | Protein Polymer Technologies, Inc. | Functional recombinantly prepared synthetic protein polymer |
| US4950740A (en) | 1987-03-17 | 1990-08-21 | Cetus Corporation | Recombinant diphtheria vaccines |
| US4980289A (en) | 1987-04-27 | 1990-12-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Promoter deficient retroviral vector |
| US5057540A (en) | 1987-05-29 | 1991-10-15 | Cambridge Biotech Corporation | Saponin adjuvant |
| JPH01125328A (ja) | 1987-07-30 | 1989-05-17 | Centro Natl De Biopreparados | 髄膜炎菌ワクチン |
| JPH01144977A (ja) | 1987-11-30 | 1989-06-07 | Agency Of Ind Science & Technol | 新規組換えプラスミドｐＴＰＧＩＦ２ |
| AU3069189A (en) | 1988-02-05 | 1989-08-25 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The | Retroviral packaging cell lines and processes of using same |
| US4912094B1 (en) | 1988-06-29 | 1994-02-15 | Ribi Immunochem Research Inc. | Modified lipopolysaccharides and process of preparation |
| EP0432216A1 (en) | 1988-09-01 | 1991-06-19 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Recombinant retroviruses with amphotropic and ecotropic host ranges |
| DE3841091A1 (de) | 1988-12-07 | 1990-06-13 | Behringwerke Ag | Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| US7118757B1 (en) | 1988-12-19 | 2006-10-10 | Wyeth Holdings Corporation | Meningococcal class 1 outer-membrane protein vaccine |
| US5124263A (en) | 1989-01-12 | 1992-06-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Recombination resistant retroviral helper cell and products produced thereby |
| CA2006700A1 (en) | 1989-01-17 | 1990-07-17 | Antonello Pessi | Synthetic peptides and their use as universal carriers for the preparation of immunogenic conjugates suitable for the development of synthetic vaccines |
| CA2047681C (en) | 1989-03-09 | 2000-02-01 | Bruce A. Green | Vaccines for nontypable haemophilus influenzae |
| US5354844A (en) | 1989-03-16 | 1994-10-11 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Protein-polycation conjugates |
| US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
| JPH0832638B2 (ja) | 1989-05-25 | 1996-03-29 | カイロン コーポレイション | サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤 |
| US5399346A (en) | 1989-06-14 | 1995-03-21 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Gene therapy |
| JPH04506662A (ja) | 1989-07-14 | 1992-11-19 | アメリカン・サイアナミド・カンパニー | 接合体ワクチンのためのサイトカイニンおよびホルモンのキヤリヤー |
| US5585362A (en) | 1989-08-22 | 1996-12-17 | The Regents Of The University Of Michigan | Adenovirus vectors for gene therapy |
| IT1237764B (it) | 1989-11-10 | 1993-06-17 | Eniricerche Spa | Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici. |
| RO111416B1 (ro) * | 1989-12-14 | 1996-10-31 | Ca Nat Research Council | Polizaharide modificate de neisseria meningitidis si e coli, combinatii antigenice si metoda de imunizare |
| CA2039921A1 (en) | 1990-04-16 | 1991-10-17 | Xandra O. Breakefield | Transfer and expression of gene sequences into central nervous system cells using herpes simplex virus mutants with deletions in genes for viral replication |
| US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
| WO1991018088A1 (en) | 1990-05-23 | 1991-11-28 | The United States Of America, Represented By The Secretary, United States Department Of Commerce | Adeno-associated virus (aav)-based eucaryotic vectors |
| SE466259B (sv) | 1990-05-31 | 1992-01-20 | Arne Forsgren | Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal |
| IE912559A1 (en) | 1990-07-19 | 1992-01-29 | Merck & Co Inc | The class ii protein of the outer membrane of neisseria¹meningitidis, and vaccines containing same |
| ATE128628T1 (de) | 1990-08-13 | 1995-10-15 | American Cyanamid Co | Faser-hemagglutinin von bordetella pertussis als träger für konjugierten impfstoff. |
| KR100372934B1 (ko) | 1990-09-25 | 2003-12-24 | 캔탑 파마슈티칼스 리서취 리미티드 | 형질 상보성 세포주에 의해 생성된 바이러스 결손 백신 |
| US5153312A (en) | 1990-09-28 | 1992-10-06 | American Cyanamid Company | Oligosaccharide conjugate vaccines |
| US5173414A (en) | 1990-10-30 | 1992-12-22 | Applied Immune Sciences, Inc. | Production of recombinant adeno-associated virus vectors |
| IL101715A (en) | 1991-05-02 | 2005-06-19 | Amgen Inc | Recombinant dna-derived cholera toxin subunit analogs |
| AU681572B2 (en) | 1991-10-21 | 1997-09-04 | Med Immune, Inc. | Bacterial expression vectors containing DNA encoding secretion signals of lipoproteins |
| US5252479A (en) | 1991-11-08 | 1993-10-12 | Research Corporation Technologies, Inc. | Safe vector for gene therapy |
| IT1253009B (it) | 1991-12-31 | 1995-07-10 | Sclavo Ricerca S R L | Mutanti immunogenici detossificati della tossina colerica e della tossina lt, loro preparazione ed uso per la preparazione di vaccini |
| WO1993015115A1 (en) | 1992-01-24 | 1993-08-05 | Cornell Research Foundation, Inc. | E. coli dna polymerase iii holoenzyme and subunits |
| NZ249704A (en) | 1992-02-11 | 1996-11-26 | Jackson H M Found Military Med | A two carrier immunogenic construct comprising a 70+ kd molecule conjugated to at least 1 t-dependent antigen, preparation, compositions containing the construct |
| IT1262896B (it) | 1992-03-06 | 1996-07-22 | Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini. | |
| WO1993021769A1 (en) | 1992-05-06 | 1993-11-11 | President And Fellows Of Harvard College | Diphtheria toxin receptor-binding region |
| IL102687A (en) | 1992-07-30 | 1997-06-10 | Yeda Res & Dev | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them |
| CA2592997A1 (en) | 1992-12-03 | 1994-06-09 | Genzyme Corporation | Pseudo-adenovirus vectors |
| EP0616034B1 (en) | 1993-03-05 | 2004-10-20 | Wyeth Holdings Corporation | Plasmid for production of CRM protein and diphtheria toxin |
| AU696336B2 (en) | 1993-03-19 | 1998-09-10 | Cantab Pharmaceuticals Research Limited | Defective mutant non-retroviral virus (e.g. HSV) as vaccine |
| DE69423383T2 (de) | 1993-05-13 | 2000-08-24 | American Cyanamid Co | Herstellung und Verwendungen von LOS-verminderten Aussenmembran-Proteinen von Gram-negativen Kokken |
| FR2705361B1 (fr) | 1993-05-18 | 1995-08-04 | Centre Nat Rech Scient | Vecteurs viraux et utilisation en thérapie génique. |
| FR2705686B1 (fr) | 1993-05-28 | 1995-08-18 | Transgene Sa | Nouveaux adénovirus défectifs et lignées de complémentation correspondantes. |
| HU216871B (hu) | 1993-07-13 | 1999-09-28 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Defektív adenovírusvektorok és génterápiai alkalmazásuk |
| CA2168202A1 (en) | 1993-07-30 | 1995-03-16 | Joseph Dougherty | Efficient gene transfer into primary lymphocytes |
| FR2708622B1 (fr) | 1993-08-02 | 1997-04-18 | Raymond Hamers | Vecteur recombinant contenant une séquence d'un gène de lipoprotéine de structure pour l'expression de séquences de nucléotides. |
| KR100376361B1 (ko) | 1993-09-22 | 2003-07-18 | 헨리 엠. 잭슨 파운데이션 포 더 어드벤스먼트 오브 밀리터리 메디신 | 면역원성구조체의제조를위하여신규한시아닐레이팅시약을사용하여용해성탄수화물을활성화하는방법 |
| US5550213A (en) | 1993-12-27 | 1996-08-27 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Inhibitors of urokinase plasminogen activator |
| FR2714830B1 (fr) | 1994-01-10 | 1996-03-22 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Composition contenant des acides nucléiques, préparation et utilisations. |
| FR2715847B1 (fr) | 1994-02-08 | 1996-04-12 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Composition contenant des acides nucléiques, préparation et utilisations. |
| FR2716459B1 (fr) | 1994-02-22 | 1996-05-10 | Univ Paris Curie | Système hôte-vecteur utilisable en thérapie génique. |
| WO1995026411A2 (en) | 1994-03-25 | 1995-10-05 | The Uab Research Foundation | Composition and methods for creating syngeneic recombinant virus-producing cells |
| US5739118A (en) | 1994-04-01 | 1998-04-14 | Apollon, Inc. | Compositions and methods for delivery of genetic material |
| WO1995028494A1 (en) | 1994-04-15 | 1995-10-26 | Targeted Genetics Corporation | Gene delivery fusion proteins |
| US5571515A (en) | 1994-04-18 | 1996-11-05 | The Wistar Institute Of Anatomy & Biology | Compositions and methods for use of IL-12 as an adjuvant |
| US6455673B1 (en) | 1994-06-08 | 2002-09-24 | President And Fellows Of Harvard College | Multi-mutant diphtheria toxin vaccines |
| US5917017A (en) | 1994-06-08 | 1999-06-29 | President And Fellows Of Harvard College | Diphtheria toxin vaccines bearing a mutated R domain |
| US6207646B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
| US5565204A (en) | 1994-08-24 | 1996-10-15 | American Cyanamid Company | Pneumococcal polysaccharide-recombinant pneumolysin conjugate vaccines for immunization against pneumococcal infections |
| US5837533A (en) | 1994-09-28 | 1998-11-17 | American Home Products Corporation | Complexes comprising a nucleic acid bound to a cationic polyamine having an endosome disruption agent |
| GB9422096D0 (en) | 1994-11-02 | 1994-12-21 | Biocine Spa | Combined meningitis vaccine |
| FR2727679B1 (fr) | 1994-12-05 | 1997-01-03 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux agents de transfection et leurs applications pharmaceutiques |
| BE1008978A5 (fr) | 1994-12-27 | 1996-10-01 | Solvay | Adjuvants pour vaccins. |
| IL116816A (en) | 1995-01-20 | 2003-05-29 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Cell for the production of a defective recombinant adenovirus or an adeno-associated virus and the various uses thereof |
| FR2730637B1 (fr) | 1995-02-17 | 1997-03-28 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Composition pharmaceutique contenant des acides nucleiques, et ses utilisations |
| IL117483A (en) | 1995-03-17 | 2008-03-20 | Bernard Brodeur | MENINGITIDIS NEISSERIA shell protein is resistant to proteinase K. |
| ATE241384T1 (de) | 1995-03-22 | 2003-06-15 | Jackson H M Found Military Med | Herstellung von immunogenen konstrukten unter verwendung von löslichen kohlehydraten, die durch organische cyanylierungs-reagenzien aktiviert wurden |
| WO1996039036A1 (en) | 1995-06-05 | 1996-12-12 | The University Of Alabama At Birmingham Research Foundation | Composition and methods for creating syngeneic recombinant virus-producing cells |
| WO1996040718A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Connaught Laboratories, Inc. | Expression of lipoproteins |
| FR2741358B1 (fr) | 1995-11-17 | 1998-01-02 | Centre Nat Rech Scient | Production de vecteurs retroviraux par l'intermediaire de vecteurs viraux a base de virus a adn |
| US6355255B1 (en) | 1998-12-07 | 2002-03-12 | Regents Of The University Of Minnesota | Streptococcal C5a peptidase vaccine |
| US5846547A (en) | 1996-01-22 | 1998-12-08 | Regents Of The University Of Minnesota | Streptococcal C5a peptidase vaccine |
| JP4150082B2 (ja) | 1996-08-27 | 2008-09-17 | カイロン コーポレイション | 独特の髄膜炎菌性ｂエピトープを規定するモノクローナル抗体およびワクチン組成物の調製におけるそれらの使用 |
| DE69708318T3 (de) | 1996-08-27 | 2006-11-16 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc., Emeryville | Neisseria meningitidis serogruppe b glykokonjugate und verfahren zu deren verwendung |
| US6472518B1 (en) | 1996-10-24 | 2002-10-29 | Centers For Disease Control And Prevention, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Invasion associated genes from Neisseria meningitidis serogroup B |
| GB9622159D0 (en) | 1996-10-24 | 1996-12-18 | Solvay Sociutu Anonyme | Polyanionic polymers as adjuvants for mucosal immunization |
| GB9622660D0 (en) | 1996-10-31 | 1997-01-08 | Biocine Spa | Immunogenic detoxified mutant toxin |
| US6299881B1 (en) | 1997-03-24 | 2001-10-09 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Uronium salts for activating hydroxyls, carboxyls, and polysaccharides, and conjugate vaccines, immunogens, and other useful immunological reagents produced using uronium salts |
| US6113918A (en) | 1997-05-08 | 2000-09-05 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Aminoalkyl glucosamine phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors |
| GB9713156D0 (en) | 1997-06-20 | 1997-08-27 | Microbiological Res Authority | Vaccines |
| KR20010020571A (ko) | 1997-06-30 | 2001-03-15 | 자끄 사비나 | 횡문근중으로 개선된 핵산 전달방법 및 이를 위한콤비네이션 |
| WO1999001175A1 (en) | 1997-06-30 | 1999-01-14 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Device for optimized electrotransfer of nucleic acid vectors to tissues in vivo |
| CZ299638B6 (cs) | 1997-06-30 | 2008-10-01 | Rhone-Poulenc Rorer S. A. | Lécivo pro genovou terapii, které se vnáší do nádoru za aplikace slabého elektrického pole, a kombinovaný produkt pro genovou terapii |
| AU9120898A (en) | 1997-08-27 | 1999-03-16 | Chiron Corporation | Molecular mimetics of meningococcal b epitopes |
| AU9363798A (en) | 1997-11-06 | 1999-05-31 | Chiron S.P.A. | Neisserial antigens |
| TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
| CA2317815A1 (en) | 1998-01-14 | 1999-07-22 | Chiron S.P.A. | Neisseria meningitidis antigens |
| US7635486B1 (en) | 1998-02-03 | 2009-12-22 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Recombinant lipidated PsaA protein, methods of preparation and use |
| GB9806456D0 (en) | 1998-03-25 | 1998-05-27 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
| GB9808734D0 (en) | 1998-04-23 | 1998-06-24 | Smithkline Beecham Biolog | Novel compounds |
| GB9808932D0 (en) | 1998-04-27 | 1998-06-24 | Chiron Spa | Polyepitope carrier protein |
| ES2304065T3 (es) | 1998-05-01 | 2008-09-01 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Antigenos y composiciones de neisseria meningitidis. |
| ES2278446T3 (es) | 1998-05-29 | 2007-08-01 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Vacunas combinadas b/c contra la meningitis. |
| EP1109576B1 (en) | 1998-08-19 | 2009-10-21 | Baxter Healthcare SA | Immunogenic beta-propionamido-linked polysaccharide protein conjugate useful as a vaccine produced using an n-acryloylated polysaccharide |
| EP1198245B1 (en) | 1998-09-30 | 2004-08-25 | Walter Reed Army Institute of Research | Use of purified invaplex from gram negative bacteria as a vaccine |
| JP4673974B2 (ja) | 1998-09-30 | 2011-04-20 | ワイス・ホールディングズ・コーポレイション | アジュバントとしての変異コレラホロトキシン |
| AU1202200A (en) | 1998-10-09 | 2000-05-01 | Chiron Corporation | Neisseria genomic sequences and methods of their use |
| US6660843B1 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
| US6281337B1 (en) | 1998-11-12 | 2001-08-28 | Schering Corporation | Methods for conversion of protein isoforms |
| EP1144645A1 (en) | 1999-01-15 | 2001-10-17 | SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS s.a. | Neisseria meningitidis polypeptide basb052 |
| EP1147194A1 (en) | 1999-01-22 | 2001-10-24 | SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS s.a. | Neisseria meningitidis antigenic polypeptides, corresponding polynucleotides and protective antibodies |
| GB9902084D0 (en) | 1999-01-29 | 1999-03-24 | Smithkline Beecham Biolog | Novel compounds |
| JP4841726B2 (ja) | 1999-02-05 | 2011-12-21 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | ヒトパピローマウイルスワクチン製剤 |
| ES2228454T3 (es) | 1999-02-26 | 2005-04-16 | Chiron S.R.L. | Mejora de la actividad bacteriana de antigenos de neisseria con oligonucleotidos que contienen motivos cg. |
| EP1880735A3 (en) | 1999-03-19 | 2008-03-12 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Vaccine |
| US6245568B1 (en) | 1999-03-26 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Human papilloma virus vaccine with disassembled and reassembled virus-like particles |
| JP2002541808A (ja) | 1999-04-09 | 2002-12-10 | テクラブ， インコーポレイテッド | ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア |
| US7115730B1 (en) | 1999-04-27 | 2006-10-03 | Chiron Srl | Immunogenic detoxified mutant E. coli LT-A-toxin |
| NZ581940A (en) | 1999-04-30 | 2011-07-29 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Conserved neisserial antigens |
| BR0010361A (pt) | 1999-04-30 | 2003-06-10 | Chiron Corp | Seq ências genÈmicas de neisseria e uso destas |
| AU783894B2 (en) | 1999-05-19 | 2005-12-22 | Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. | Combination neisserial compositions |
| GB9911683D0 (en) | 1999-05-19 | 1999-07-21 | Chiron Spa | Antigenic peptides |
| GB9916529D0 (en) | 1999-07-14 | 1999-09-15 | Chiron Spa | Antigenic peptides |
| US7384640B1 (en) | 1999-09-30 | 2008-06-10 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant |
| RU2281956C2 (ru) | 1999-10-29 | 2006-08-20 | Чирон С.Р.Л. | Антигенные пептиды neisseria |
| GB9928196D0 (en) | 1999-11-29 | 2000-01-26 | Chiron Spa | Combinations of B, C and other antigens |
| RU2002117308A (ru) | 1999-11-29 | 2004-03-10 | Чирон Спа (It) | 85 кДа АНТИГЕН NEISSERIA |
| PT1233784E (pt) | 1999-12-02 | 2008-11-03 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Composições e métodos para a estabilização de moléculas biológicas após a liofilização |
| DK2289545T3 (en) | 2000-01-17 | 2016-09-05 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Supplemented OMV vaccine against meningococcus |
| CN100473663C (zh) | 2000-02-28 | 2009-04-01 | 启龙股份公司 | 奈瑟球菌蛋白质的异源表达 |
| GB0007432D0 (en) | 2000-03-27 | 2000-05-17 | Microbiological Res Authority | Proteins for use as carriers in conjugate vaccines |
| WO2001093905A1 (en) | 2000-06-08 | 2001-12-13 | Intercell Biomedizinische Forschungs- Und Entwicklungs Ag | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides |
| AT410635B (de) | 2000-10-18 | 2003-06-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Vakzin-zusammensetzung |
| JP2005504718A (ja) | 2001-01-23 | 2005-02-17 | アヴェンティス パストゥール | 多価髄膜炎菌多糖−タンパク質複合ワクチン |
| GB0103424D0 (en) | 2001-02-12 | 2001-03-28 | Chiron Spa | Gonococcus proteins |
| EP1373314A2 (en) | 2001-03-30 | 2004-01-02 | Geneprot, Inc. | Human arginine-rich protein-related compositions |
| US6942802B2 (en) | 2001-04-13 | 2005-09-13 | Wyeth Holdings Corporation | Removal of bacterial endotoxin in a protein solution by immobilized metal affinity chromatography |
| ATE455793T1 (de) | 2001-04-17 | 2010-02-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Monoklonale antikörper gegen molekulare mimetika von meningokokken-b-epitopen |
| AU2002309706A1 (en) | 2001-05-11 | 2002-11-25 | Aventis Pasteur, Inc. | Novel meningitis conjugate vaccine |
| WO2002098369A2 (en) | 2001-06-07 | 2002-12-12 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant forms of cholera holotoxin as an adjuvant |
| JP2004535187A (ja) | 2001-06-07 | 2004-11-25 | ワイス・ホールデイングス・コーポレーシヨン | アジュバントとしてのコレラホロトキシンの突然変異形 |
| GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
| EP1409013B1 (en) | 2001-07-26 | 2009-11-18 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Vaccines comprising aluminium adjuvants and histidine |
| GB0121591D0 (en) | 2001-09-06 | 2001-10-24 | Chiron Spa | Hybrid and tandem expression of neisserial proteins |
| US20070020622A1 (en) | 2001-09-14 | 2007-01-25 | Invitrogen Corporation | DNA Polymerases and mutants thereof |
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| GB0129007D0 (en) | 2001-12-04 | 2002-01-23 | Chiron Spa | Adjuvanted antigenic meningococcal compositions |
| MXPA04009339A (es) | 2002-03-26 | 2005-01-25 | Chiron Srl | Sacaridos modificados que tienen estabilidad mejorada en agua. |
| RU2378008C2 (ru) | 2002-05-14 | 2010-01-10 | Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс С.Р.Л. | Комбинированные вакцины против бактериального менингита для введения через слизистую оболочку |
| GB0302218D0 (en) | 2003-01-30 | 2003-03-05 | Chiron Sri | Vaccine formulation & Mucosal delivery |
| MXPA04011249A (es) | 2002-05-14 | 2005-06-06 | Chiron Srl | Vacunas mucosales con adyuvante de quitosano y antigenos meningococicos. |
| GB0220194D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Improved vesicles |
| US7785608B2 (en) | 2002-08-30 | 2010-08-31 | Wyeth Holdings Corporation | Immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
| GB0220198D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Modified saccharides,conjugates thereof and their manufacture |
| AU2003274511B2 (en) | 2002-10-11 | 2009-06-04 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages |
| DK2279746T3 (da) | 2002-11-15 | 2013-11-25 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Overfladeproteiner i neisseria meningitidis |
| GB0227346D0 (en) | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
| WO2004065603A2 (en) | 2003-01-15 | 2004-08-05 | Wyeth Holdings Corporation | Methods for increasing neisseria protein expression |
| WO2004067030A2 (en) | 2003-01-30 | 2004-08-12 | Chiron Srl | Injectable vaccines against multiple meningococcal serogroups |
| US20060251675A1 (en) | 2003-03-17 | 2006-11-09 | Michael Hagen | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant and an antigen carrier protein |
| US20070253964A1 (en) | 2003-04-16 | 2007-11-01 | Zlotnick Gary W | Novel Immunogenic Compositions for the Prevention and Treatment of Meningococcal Disease |
| ES2328697T5 (es) | 2003-06-02 | 2017-07-25 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Composiciones inmunogénicas basadas en micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido |
| AU2004251742A1 (en) | 2003-06-23 | 2005-01-06 | Sanofi Pasteur, Inc. | Immunization method against Neisseria meningitidis serogroups A and C |
| GB0316560D0 (en) | 2003-07-15 | 2003-08-20 | Chiron Srl | Vesicle filtration |
| ES2397923T3 (es) | 2003-10-02 | 2013-03-12 | Novartis Ag | Vacunas líquidas para múltiples serogrupos meningocócicos |
| GB0323103D0 (en) | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
| CA2551896A1 (en) | 2003-12-30 | 2005-07-21 | Wyeth | Formulations of hydrophobic proteins in an immunogenic composition having improved tolerability |
| GB0406013D0 (en) | 2004-03-17 | 2004-04-21 | Chiron Srl | Analysis of saccharide vaccines without interference |
| GB0408978D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Meningococcal fermentation for preparing conjugate vaccines |
| GB0408977D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins |
| DK1740217T3 (da) | 2004-04-30 | 2011-09-26 | Novartis Ag | Meningokok-konjugat-vaccination |
| GB0500787D0 (en) | 2005-01-14 | 2005-02-23 | Chiron Srl | Integration of meningococcal conjugate vaccination |
| GB0409745D0 (en) | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Chiron Srl | Compositions including unconjugated carrier proteins |
| GB0410220D0 (en) | 2004-05-07 | 2004-06-09 | Kirkham Lea Ann | Mutant pneumolysin proteins |
| GB0411387D0 (en) | 2004-05-21 | 2004-06-23 | Chiron Srl | Analysis of saccharide length |
| GB0413868D0 (en) | 2004-06-21 | 2004-07-21 | Chiron Srl | Dimensional anlaysis of saccharide conjugates |
| EP1778725B1 (en) | 2004-07-23 | 2010-12-29 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Polypeptides for oligomeric assembly of antigens |
| GB0419408D0 (en) | 2004-09-01 | 2004-10-06 | Chiron Srl | 741 chimeric polypeptides |
| GB0419846D0 (en) | 2004-09-07 | 2004-10-13 | Chiron Srl | Vaccine adjuvants for saccharides |
| GB0424092D0 (en) | 2004-10-29 | 2004-12-01 | Chiron Srl | Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins |
| GB0428394D0 (en) | 2004-12-24 | 2005-02-02 | Chiron Srl | Saccharide conjugate vaccines |
| EP2682126B1 (en) | 2005-01-27 | 2016-11-23 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | GNA1870-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis |
| EP1855595A2 (en) | 2005-03-07 | 2007-11-21 | ID Biomedical Corporation of Quebec c.o.b. as Glaxosmithkline Biologicals North America | Pharmaceutical liposomal compositions |
| ES2533248T3 (es) | 2005-05-06 | 2015-04-08 | Novartis Ag | Inmunógenos para vacunas contra Meningitidis A |
| MX2007016403A (es) | 2005-06-27 | 2008-03-07 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Composicion inmunogenica. |
| JP5135220B2 (ja) | 2005-09-01 | 2013-02-06 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス ゲーエムベーハー アンド カンパニー カーゲー | 血清群ｃ髄膜炎菌を含む複数ワクチン接種 |
| US8679770B2 (en) | 2005-09-05 | 2014-03-25 | Glaxo Smith Kline Biologicals S.A. | Serum bactericidal assay for N. meningitidis specific antisera |
| GB0524066D0 (en) | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
| EA200801368A1 (ru) | 2005-12-23 | 2008-12-30 | Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. | Конъюгатные вакцины |
| NZ572054A (en) | 2006-03-22 | 2011-12-22 | Novartis Ag | Regimens for immunisation with meningococcal conjugates |
| TW200806315A (en) | 2006-04-26 | 2008-02-01 | Wyeth Corp | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
| US20070253985A1 (en) | 2006-04-26 | 2007-11-01 | Wyeth | Novel processes for coating container means which inhibit precipitation of polysaccharide-protein conjugate formulations |
| ATE450271T1 (de) | 2006-06-12 | 2009-12-15 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Impfstoff |
| GB0612854D0 (en) | 2006-06-28 | 2006-08-09 | Novartis Ag | Saccharide analysis |
| NZ573931A (en) | 2006-06-29 | 2012-03-30 | Craig J Venter Inst Inc | Polypeptides from neisseria meningitidis |
| EP3705579A1 (en) | 2006-07-27 | 2020-09-09 | Wyeth LLC | High-cell density fed-batch fermentation process for producing recombinant protein |
| AR064642A1 (es) | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
| GB0700562D0 (en) | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Modified Saccharides |
| CA2688268A1 (en) | 2007-06-04 | 2008-12-11 | Novartis Ag | Formulation of meningitis vaccines |
| US8540955B2 (en) | 2007-07-10 | 2013-09-24 | Wyeth Llc | Process for producing aluminum phosphate |
| GB0713880D0 (en) | 2007-07-17 | 2007-08-29 | Novartis Ag | Conjugate purification |
| GB0714963D0 (en) | 2007-08-01 | 2007-09-12 | Novartis Ag | Compositions comprising antigens |
| CA2695467A1 (en) | 2007-08-02 | 2009-03-26 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Fhbp- and lpxl1-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by neisseria meningitidis |
| PT2200642E (pt) | 2007-10-19 | 2012-05-30 | Novartis Ag | Formulações de vacinas meningocócicas |
| CA2716212A1 (en) | 2008-02-21 | 2009-08-27 | Novartis Ag | Meningococcal fhbp polypeptides |
| WO2009109550A1 (en) | 2008-03-05 | 2009-09-11 | Sanofi Pasteur | Process for stabilizing an adjuvant containing vaccine composition |
| US9511131B2 (en) | 2008-03-10 | 2016-12-06 | Children's Hospital & Research Center Oakland | Chimeric factor H binding proteins (fHBP) containing a heterologous B domain and methods of use |
| WO2009143168A2 (en) | 2008-05-19 | 2009-11-26 | Novartis Ag | Vaccine assays |
| NZ589812A (en) | 2008-05-30 | 2012-08-31 | U S A As Represented By The Secretary Of The Army On Behalf Of Walter Reed Army Inst Of Res | Meningococcal multivalent native outer membrane vesicle vaccine, methods of making and use thereof |
| CN102203276A (zh) | 2008-08-27 | 2011-09-28 | 奥克兰儿童医院及研究中心 | 基于补体因子h对脑膜炎奈瑟球菌血清杀菌活性的鉴定 |
| EP2331562A4 (en) | 2008-09-03 | 2012-07-04 | Childrens Hosp & Res Ct Oak | PEPTIDES WITH AN EPITOPE OF A DOMAIN OF THE FACTOR H-BINDING PROTEIN AND METHOD OF USE |
| IT1394288B1 (it) | 2008-09-12 | 2012-06-06 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Immunogeni di proteine che legano il fattore h. |
| BR122018013284B1 (pt) | 2008-10-29 | 2022-03-03 | Ablynx N.V | Formulações de moléculas de ligação ao antígeno de domínio único, seu método de formulação e seu uso, kit ou artigo de fabricação, bem como método para preparar uma formulação reconstituída contendo uma molécula de sdab |
| GB0822634D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Meningitis vaccines |
| US20100189737A1 (en) | 2008-12-17 | 2010-07-29 | Arico Beatrice | Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor |
| CA2756522C (en) | 2009-03-24 | 2018-06-26 | Novartis Ag | Adjuvanting meningococcal factor h binding protein |
| JP5668049B2 (ja) | 2009-03-24 | 2015-02-12 | ノバルティス アーゲー | 髄膜炎菌ｈ因子結合タンパク質および肺炎球菌糖結合体の組み合わせ |
| CN102711814A (zh) | 2009-04-30 | 2012-10-03 | 奥克兰儿童医院及研究中心 | 一种嵌合h因子结合蛋白(fhbp)及其使用方法 |
| US9365885B2 (en) | 2009-06-16 | 2016-06-14 | Puiying Annie Mak | High-throughput complement-mediated antibody-dependent and opsonic bactericidal assays |
| JP2013502918A (ja) | 2009-08-27 | 2013-01-31 | ノバルティス アーゲー | 髄膜炎菌ｆＨＢＰ配列を含むハイブリッドポリペプチド |
| US20130022639A1 (en) | 2009-09-30 | 2013-01-24 | Novartis Ag | Expression of meningococcal fhbp polypeptides |
| GB0917647D0 (en) | 2009-10-08 | 2009-11-25 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Expression system |
| EP2493499A1 (en) | 2009-10-27 | 2012-09-05 | Novartis AG | Modified meningococcal fhbp polypeptides |
| US9173954B2 (en) | 2009-12-30 | 2015-11-03 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Polysaccharide immunogens conjugated to E. coli carrier proteins |
| GB201003922D0 (en) | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Conjugation process |
| JP2013521770A (ja) | 2010-03-10 | 2013-06-13 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | ワクチン組成物 |
| JP2013522287A (ja) | 2010-03-18 | 2013-06-13 | ノバルティス アーゲー | 血清群ｂ髄膜炎菌のためのアジュバント添加ワクチン |
| EP3327028B1 (en) | 2010-03-30 | 2022-03-16 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | Factor h binding proteins (fhbp) with altered properties and methods of use thereof |
| US10478483B2 (en) | 2010-06-25 | 2019-11-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Combinations of meningococcal factor H binding proteins |
| RU2580620C2 (ru) | 2010-08-23 | 2016-04-10 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | СТАБИЛЬНЫЕ КОМПОЗИЦИИ АНТИГЕНОВ Neisseria meningitidis rLP2086 |
| ES2744471T3 (es) | 2010-09-04 | 2020-02-25 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Ensayos de anticuerpos bactericidas para evaluar la inmunogenia y la potencia de vacunas de sacárido capsular meningocócico |
| AU2011300418B2 (en) | 2010-09-10 | 2016-05-12 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Meningococcus overexpressing NadA and/or NHBA and outer membrane vesicles derived therefrom |
| GB201015132D0 (en) | 2010-09-10 | 2010-10-27 | Univ Bristol | Vaccine composition |
| US20120070457A1 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-22 | J. Craig Venter Institute, Inc. | Polypeptides from neisseria meningitidis |
| PE20140173A1 (es) | 2010-09-10 | 2014-02-20 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antigenos orf2086 de neisseria meningitidis |
| GB201101665D0 (en) | 2011-01-31 | 2011-03-16 | Novartis Ag | Immunogenic compositions |
| BR112013022397A2 (pt) | 2011-03-02 | 2017-09-26 | Derek OHagan | vacinas combinadas com doses menores de antígeno e/ou adjuvante |
| WO2012134975A1 (en) | 2011-03-28 | 2012-10-04 | St. Jude Children's Research Hospital | Methods and compositions employing immunogenic fusion proteins |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| EP2964665B1 (en) | 2013-03-08 | 2018-08-01 | Pfizer Inc | Immunogenic fusion polypeptides |
| US9965924B2 (en) | 2013-07-15 | 2018-05-08 | Ahmnon D. Moskowitz | Methods, systems, and apparatus for playing multi-zone 21 |
| MX369534B (es) * | 2013-09-08 | 2019-11-11 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y sus metodos. |
| SG11201606478YA (en) * | 2014-02-28 | 2016-09-29 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Modified meningococcal fhbp polypeptides |
| CN107249626A (zh) | 2015-02-19 | 2017-10-13 | 辉瑞大药厂 | 脑膜炎奈瑟球菌组合物及其方法 |
| SG11201906519RA (en) | 2017-01-31 | 2019-08-27 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
-
2018
- 2018-01-30 SG SG11201906519RA patent/SG11201906519RA/en unknown
- 2018-01-30 KR KR1020227001201A patent/KR20220011796A/ko active IP Right Grant
- 2018-01-30 AU AU2018215585A patent/AU2018215585B2/en active Active
- 2018-01-30 MX MX2019009011A patent/MX2019009011A/es active IP Right Grant
- 2018-01-30 IL IL267733A patent/IL267733B2/en unknown
- 2018-01-30 BR BR112019014397-1A patent/BR112019014397A2/pt unknown
- 2018-01-30 CN CN201880009417.0A patent/CN110234658B/zh active Active
- 2018-01-30 US US15/883,334 patent/US10183070B2/en active Active
- 2018-01-30 JP JP2019541143A patent/JP7010961B2/ja active Active
- 2018-01-30 SG SG10202111092UA patent/SG10202111092UA/en unknown
- 2018-01-30 KR KR1020197025245A patent/KR102567845B1/ko active IP Right Grant
- 2018-01-30 WO PCT/IB2018/050563 patent/WO2018142280A2/en active Application Filing
- 2018-01-30 PE PE2019001479A patent/PE20191107A1/es unknown
- 2018-01-30 CA CA3051801A patent/CA3051801A1/en active Pending
- 2018-01-30 EP EP18733670.6A patent/EP3577130A2/en active Pending
- 2018-01-30 CN CN202410180111.9A patent/CN118021947A/zh active Pending
- 2018-01-31 TW TW109105184A patent/TW202023571A/zh unknown
- 2018-01-31 TW TW112118117A patent/TW202400225A/zh unknown
- 2018-01-31 TW TW107103415A patent/TWI686200B/zh active
- 2018-01-31 TW TW110120941A patent/TWI802904B/zh active
- 2018-11-20 US US16/196,150 patent/US10543267B2/en active Active
-
2019
- 2019-07-24 CO CONC2019/0007982A patent/CO2019007982A2/es unknown
- 2019-07-26 PH PH12019501727A patent/PH12019501727A1/en unknown
- 2019-07-28 SA SA519402336A patent/SA519402336B1/ar unknown
- 2019-07-30 MX MX2020003355A patent/MX2020003355A/es unknown
- 2019-08-22 ZA ZA2019/05543A patent/ZA201905543B/en unknown
- 2019-12-05 US US16/704,701 patent/US10813989B2/en active Active
-
2020
- 2020-09-17 US US17/024,618 patent/US11730800B2/en active Active
-
2022
- 2022-01-13 JP JP2022003486A patent/JP7119245B2/ja active Active
- 2022-05-31 AU AU2022203720A patent/AU2022203720B2/en active Active
- 2022-08-03 JP JP2022123771A patent/JP2022163123A/ja active Pending
-
2023
- 2023-05-21 IL IL303108A patent/IL303108B2/en unknown
- 2023-06-29 US US18/343,968 patent/US20230414737A1/en active Pending
-
2024
- 2024-03-13 AU AU2024201623A patent/AU2024201623A1/en active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW201600109A (zh) * | 2012-03-09 | 2016-01-01 | 輝瑞大藥廠 | 腦膜炎雙球菌（ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組合物及其方法 |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI686200B (zh) | 腦膜炎球菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）組成物和使用彼之方法 | |
| JP2020128372A (ja) | 髄膜炎菌組成物およびその方法 | |
| US20220401544A1 (en) | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof | |
| RU2780425C2 (ru) | Композиции neisseria meningitidis и способы | |
| NZ796387A (en) | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |