TW434242B - 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)methoxy-1,3-propanediol derivative - Google Patents

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434 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 五、發明説明（l ) 本發明關於一種新穎抗病毒藥劑’特別地係一種嘌呤衍 生物之胺基酸酯，且最特別地係關於一種由甘希可羅威 (ganciclovir)與L-纈胺酸之酯衍生物及其藥學上可接受 鹽類》本發明亦關於用以製造該抗病毒藥劑之中間化合物 ，合成方法，其藥學組合物及其用於抗病毒與相關疾病治 療之用途3 更特別地’本發明關於由2 - ( 2 -胺基-1，6 _二氫_ 6 ·氧-嗓 呤-9·基）甲氧基-1，3_丙二醇衍生得單纈胺酸酯，及 其藥學上可接受鹽類α 英國專利1 5 23 865號描述於9-位置具有一非環鏈之抗病 毒性嘌呤针生物。於該等具有I ν Ν名爲非環可羅威 (acyCl〇Vir)之衍生物2_(2_胺基-丨，6_二氮_6_氧· 156_二氫 嘌呤-9-基）甲氧基-乙醇之中業經發現有良好抗疱疹病毒如 單純疱疹病毒之活性。雖然非環可羅威已發現於局部或非 經腸道施藥上非常有致’然而其於口服拖藥上僅有限地被 吸收。 美國專利4，3 5 5，0 3 2號揭示化合物9 - [(2 -經基 1 -輕基甲 基-乙氧.基）甲基]胍或INN名爲甘希可羅威之2-(2 -胺基-1，6 -二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1,3 -丙二醇。甘希可羅 威對抗癌療病毒家族（例如’對抗單純疱療病毒與細胞巨大 病毒）高度有效。當其以口服施藥時具有相對低之吸收率， 且當以該途徑施藥時必須使高劑量。甘希可羅威最常經甴 靜脈内注射施藥。此種施藥型式具有對病患非常不方便之 缺點’當需要醫生，護士或其它專業護理人員的服務。對 -4- (請先閲讀背面之注意Ϋ項再填寫本頁) 装- 訂 本紙張尺度適用中國囤家棲準（〇^)六4規/格（210父297公釐） 434242 A7 B7 五、發明説明（2 於接受甘希可羅威治療且可能對感染具少抗性之免疫受傷 害病患，亦特別有懷疑遭受感染之危險。因此，很希望提 供具有經改善之口服吸收型之甘希可羅威。 英國專利申請案GB 2 1 22 6 1 8揭示具下列通式之9-(2-經乙氧基甲基）胍之衍生物

Rl Μ H2N* 、N- CH2XCHCH2OR3 R2 (请先(¾讀背面之ΪΪ意事項再嗔寫本頁) 經 濟 部 中 央 橾 準 局 員 工 消 費 杜 印 製 其中X代表氧或硫原子，R1代表羥基或胺基，R2代表氫原 子或具式-CH2〇R3a之基且R3與尺、可能相同或不同，各 代表胺基酸醯基自由基，及其藥學上可接受鹽類。此等化 合物可用於治療病毒感染，且具有高水溶度以使其有價値 用於調配水性醫藥製劑。雖然該英國專利申請案之通式包 括其中R2爲-CH2〇R3a基之化合物，然而具此基團之特定 化合物並未揭示。該專利申請案亦揭示使用此等具經改善 之水溶度之化合物之配方，包括口服，經苫腸，經鼻，局 部Λ陰道内或非經腸道配方。 英國專利申請案GB 2 104 070揭示具下式之抗病毒化 合物 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ，va 434242 _B7 五、發明説明（3 )

R

I

CH2OH 其中R爲羥基或胺基且X爲氧或硫原子，及其藥學上可接 受鹽類與酯類。該通式包括甘希可羅威及生理上可接受鹽 類與酯類。酯類包括於具通式化合物之一或二個9-支鏠終 端位置上含有甲醯基’ (例如’ Ci—6)烷醯氧基（如乙 醯氧基或丙醯氧基），視需要經取代之芳烷醯氧基（如苯基_ (^•4烷醯氧基如笨基乙醯氧基）或視需經取代之芳醯氧基（ 如笨甲醯氧基或苔甲醯氧基）酯類基團者。上述芳烷醯氧基 或芳醯氧基酯類基團可經（例如）一或多個画素（如氣或溴原 子）或胺基’腈或磺醯二胺基取代，基團之芳基部分有利地 含有6至10個碳原子。 歐洲專利申請案，公開號3 7 5 3 2 9號揭示具下式之前藥 化合物

B

I

C ch2or 其中R與R1個別選自氫原子與胺基酸醯基殘基，其條件爲 R與R1其中至少一者代表胺基酸醯基殘基，且B代表具下 式之基團 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準（〇奶）八4說格{210乂297公釐） 五、發明説明（4 Α7 Β7

ΝΗ,

-6直鍵

其中R2代表ci-6il鏈，匕+ ,, 經基或胺基或一氫原子二或C3-6環坑氧基，或爲 等前藥經描述其於口服 ：了接-L此 ，以使母體化合物於體内具有高濃度3 ]用歐洲專利申請案，公開鈐"\ 、g ^ a ' 2 9號之實施例3 b)揭 主白色泡k甘希可羅威雙(L，異白 例4 b)揭示呈白斧闭触士从土 貫跑 & 色固"〈甘希可羅威雙（甘胺酸）醋之製備 3實施例5 b)揭示呈固#之廿Λ 1. (甘布可維威雙（纈胺酸）酯之製 備1施例6 b)揭示呈含有㈣雙酿與㈣單社糖衆之 甘希可羅威雙（L-丙胺酸）醋之製備。該等經描述之雙酯 非結晶形物質，其難以處理製成口服醫藥劑型。 英國專利申請案8 8295 7 1號揭示具下式化合物之胺基酸 酯類 性 示· 袍 備 製 之 Λ 馬

Jt n^i ^^^1 ^^^1 iff ^^^1 - t - !1 i^i^i 1^1 TJ 3, ,τ f靖先閲讀背面之注##-項再填寫本耳} 經 濟 部 中 央 標 準 局 負 JL 消 t -合 杜 印 製

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(其中R代表羥基或胺基或一氫原子）及其生理學上可接 鹽類3較佳胺基酸之實例包括脂昉疾酸類，如，含有至 受 多 本紙張尺度適用中國囤家標準（CNS ) Α4规格（2[ 〇 X 297公釐） c A7 B7 五、發明説明（5 ) 6個碳原子者如甘胺酸，丙胺酸’纈胺酸與異白胺酸。胺 基酸酯包括單與二酯類。然而’此專利申請案以及歐洲專 利申請案，公開號375 329 ’與美國專利第5,(M3,3 3 9號 並未揭示單酯類之製備，更何況任何數據敎示其可利用性 傑生（Jensen)等人，Acta Pharm, Nord· 3(4) 243-247 (199 1)揭示具下式甘希可羅威之N -經取代4-(胺基甲基）笨 甲酸二酯前藥之合成，酵素水解與物理化學性質

H2N I T/〇^ ^CH.OR CH/ CH〔 * ' ch2or

-袈------訂 f請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁J 其中R可爲 o IIc CH2—N(CH3)2 onmc

CH2—N(C2H5)2 - 經濟部中央標準局員工消費j作社印裝 CH2—N(C3H7>2 n0° 此等酿類之合成與評價有助於改善甘希可羅威之遞送特 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） A7 B7 經濟部中央標準局員工消費^作社印製 五、發明説明（ 性。醋類經人類血漿酵素水解成母體藥劑，於水解過程形 成相對應之單酯。該文獻作者根據此等酯類之酵素水解速 率’親脂性進行評估，並結論：此等酯類使甘希可羅威二 酯類成爲用以增進其遞送特性（如用於非經腸道施藥）之前 藥型式。 馬 n*(Martin)等人，j. Pharm. Sci. 76(2), 180- 1 84 (1 9 8 7)揭示甘希可羅威之單-與二醯基酯類，其經測試於 口服施藥後之生物可利用性。該文獻作者指出，二丙酸酯 較甘希可羅威本身具有超出約4 2。/〇之生物可利用性。 歐洲專利申請案，公開號1 5 8 847號尤其揭示6-去氣-非 環可羅威與6 -去氧-甘希可羅威可於活體内立即以酵素作 用分別轉換成非環可羅威與甘希可羅威。研究者從鼠類中 之實驗發現此等6 -去氧前藥之口服施藥可使母體藥劑從胃 腸道有效吸收且具有高血漿濃度。 毛果（Maudgal)等人 ’ Arch. Ophthalmol. 1〇2，140-142 (1 9 8 4)揭示非環可羅威之甘胺酸酯當以1 %眼部滴劑配方 施用於兔子時，有效局部治療上皮與基質—之單純疱疹性角 膜炎及相關之虹膜炎。該文獻作者揭示非環可羅威之甘胺 5¾，丙胺8¾ ,丙胺酸與琥泊，並指出甘胺酸酿之可 落度較非環可羅威本身之可溶度高大约3 〇倍，其使得甘胺 酸酯可以至多6 %之濃度用於眼部滴劑，而非環可羅威本身 係以軟膏形式使用，難以對基質疾病或虹膜炎具有功效。 柯拉（C〇Ua)等人，j. Med. Chem. 98，602-604 (1 983 ) 揭示數種作爲非環可羅威之前藥之水溶性非環可羅威酷衍 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 裝------訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 43 42 A 2 A7 B7 五、發明説明（7 ) 生物及其鹽類。作者指示，非環可羅威無法提供作爲眼部 滴劑或肌肉内注射劑，因爲其於水中具有限之溶解度，並 因而合成較母體化合物更可溶於水之非環可羅威衍生物。 作者揭示甘胺醯酯之氣化氫鹽，丙胺醯酯之氣化氫鹽， 丙胺醯酯之氣化氫鹽，琥珀醯酯之鈉鹽，及疊氮基乙酸 酯。根據作者，當於初生兔子腎臟細胞培養中進行對抗各 種單純疱疹第〖型與第2型菌株之分析時，前四種酯類經澄 實具有幾乎與非環可羅威相同之活性。作者暗示，此等非 環可羅威酯類應較母體化合物更可應用於作爲眼部滴劑之 局部治療及對靜脈内非環可羅威治療具良好反應之系統性 治療疱疹病毒感染之臨床用途上。與環可羅威成對比，此 等醋類可以更小的體積使用，並因而藉由肌肉内注射施藥 包漢普（Beauchamp)等人，抗病毒化學與化學療法3， 經 濟 部 中 A 標 隼 局 員 工 消 費 合 作 杜 印 製 1 57- 1 64( 1 992)揭示十八種抗疱疹性藥劑非環可羅威之胺 基酸Sb ’以及其作爲非環可羅威前藥之功效（以於鼠類中測 量非環可羅威之尿液回收量進行評估）=於尿液中，十種前 藥所產生之母體藥劑含量大於非環可羅威本身之含量：甘 胺縫基’ DL -丙胺醯基，L -丙胺醯基，L-2 -胺基丁酸酯， D ’ L -绳胺醯基，l -纈胺酿基，d L -異白胺-酿基，l -異白 胺醯基’ L·甲硫胺醯基，與L_脯胺醯基酯。L_胺基酸酯類 比相對應之D -或D，L -異構物爲較佳之前藥，表示有立體 選擇性轉移劑参與。由該公開文獻之表1，其提供該十八 種胺基酸醋之化學數據與口服生物可利用性，顯示D·胺基 本紙張尺度適用中國國家梯準{ CNS ) A4規格（210X297公着：） 434242 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費1作社印製 五、發明説明（8 ) 酸酯較非環可羅咸本身具有較低之口服生物可利用性。因 此，因爲D-胺基酸酯不具有超越非環可羅咸之助益，故其 不可用作爲非環可羅威之前藥。然而，非環可羅威之無對 掌性甘胺醯酯具有較非環可羅威高之口服生物可利用性（於 尿液回收分析中，以甘胺酿酯劑量,回收得3 〇 %非環可羅 威，而以非環可羅威劑量時回收得丨9 %非環可羅威）。根 據作者，非環可羅威之L_纈胺醯酯爲所研究酯類中最佳之 前藥。 歐洲專利申請案，公開號3 08 065號揭示非環可羅威之 顯胺酸與異白胺酸酯（較佳地以L_型存在），其顯示當與其 它酯類及非環可羅威相較時，大大増加於口服施藥後從腸 之吸收作用。 最近，用於治療細胞巨大病毒感染之前導藥劑爲甘希可 羅威。然而由於其非常有限之口服生物可利用性及該藥劑 需要長期每日.靜脈内注射（或破璃體内注射或移植），故急 需一種具有經改善之生物可利用性之口服劑型。 本發明提供一種安定之甘希可羅威前藥_配方，其具有經 改善之口服吸收及低毒性3此等特徵對於壓制免疫受傷害 病姜、（口服施藥治療爲其較佳選擇）中之疱疹性感染，特別 有價値。此外’該等活性成分具有使其經改善之特徵與藥 V上處理可行之藥典性質。令人驚訐地，經發現甘希可羅 威（L -單纈胺酸酯及其藥學上可接受鹽類具有此等所希望 之特徵。 於第一方面’本發明提供具下式之化合物： *11- - -.«--I I - i . I - - -I »^衣-- i ______I I - _ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) M規格（2】〇x；；97公釐） % A7 B7 五 、發明説明（9

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'N 0) V HO- U2uf° 經濟部中央標準局員工消費>作社印製 =其藥學上可接受之鹽類。該化合物此後命名爲2_(2_胺 土 _1,6·二氫_6_氧-嘌呤*9-基）曱氧基-3-羥基-丙基_L· 纈胺酸酯或單-L-纈胺酸甘希可羅威3 毛第—方面，本發明提供一種含有甘希可羅 胺酸醋或其藥學上可接受之鹽類或非鏡像異構物，較佳地 與一或多種適宜之賦形劑或載體摻和，用以治療病毒性或 相關疾病之醫藥组合物。 於第三方面，本發明提供一種治療或預防病毒感染或相 關疾病之方法’其包含將甘希可羅威之單-L _纈胺酸酷或 其藥學上可接受鹽類’或含有該等相同藥劑之組合物抱用 於需要此項治療或預防之動物。 於第四方面’本發明提供可用以製備單-L-纈胺酸甘希 可羅威及其藥學上可接受鹽類之具下式中間物： -12 - 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） t -- -- . . --_3. 、ve - - (請先s讀背而之注意事項再填寫本買) 4342A2 A7 B7 五 、發明説明（10

OH

(II)

其中Pl爲羥基-保護基且p2爲胺基-保護基。 —本發明i第五方面係一種製備本發明之前藥化合物及其 藥孥上可接受鹽類之方法。此方法包含甘希可羅威及其奸 生物之酯化作用，將保護基從以L_纈胺酸酯化之甘希可羅 威去除之作用，甘希可羅威雙[纈胺基形成具式〖單-^纈 胺酸酯t郅份水解作用，胍與經取代甘油之縮合作用，具 式I化合物之光學解析，及具式丨前藥之鹽類形成。該方法 之細節描述於下。 除非另有指示，下列説明書與申請專利範圍中所使用之 術語，具有以下所給予之意義： ”規基’’意爲一具有一個至所設定碳數之直或支鏈飽和烴 基例如’ C i 烷基爲具有至少—個但不多於七個碳原子 之烷基，如甲基，乙基，異-丙基，正-丙基，正-丁基，正 -戊基，正-庚基及類似物。 ”低碳烷基"'意義一具有一至六個碳原子之烷基。 "芳基”意爲由芳族烴類經去除一氫原子而衍生得之有機 自由基。較佳之芳基具有六至十二個破原子作爲芳族烴中 -13 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2!OX297公釐） A7 B7 經濟部中央標率局貝工消費>作社印製 五、發明説明（11 ) 之環碳原子。 ”芳烷基”意爲由一其t之烷基氫原子經如上定義之芳基 取代之芳烷類衍生得之有機自由基。 醯基意爲由有機酸經去除羥基而衍生得之有機自由基 :例如，CH3CO-爲CH3C00H之醯基，或乙醯基。其它 此類酿基之實例爲丙酿基’或苄酿基，等。，，酿基,，包括 "烷醯基"（其爲其中之R係如上定義之垸基之有機自由基 RCO〇。 ”低碳烷氧基” 低碳烷基）胺基"，’，二（低碳烷基）胺基，， ’"（低碳烷醯基）胺基”，及相似術語意指烷氧基，烷胺基 ’二烷胺基，烷醯基胺基’等，其中該或各烷基爲如上所 敌述之”低碳烷基”。 ”鹵素"意爲氟，氯，溴或碘3 根據哈克斯化學辭典（Hackh's Chemical Dictionary) ’麥葛羅-希爾（McGraw-Hill)圖書公司，1969，一化合 物之”衍生物”意指可藉一單純化學方法從原始化合物獲得 之化合物3 一化合物之”經活化之衍生物”意爲原始化合物之反應形 式，其使化合物於所希望之化學反應中具活性，其中該原 始化合物僅具適度反應性或無反應性。活化作用係藉形成 —種於分子中具有較原始化合物高之自由能含量之衍生物 或化學基團，使經活化之形式更能夠與其它試劑反應。就 本發明而言，羧基之活化作用尤其重要，且活化羧基之相 關活化劑或基團更詳述於下。一種經活化之L-纈胺酸衍生 -].4 - ----- --I-- 装--------訂 - - {請先閲靖背vg之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 4 A7 B7 五、發明説明（12 物之實例爲具下式之化合物：\/ 1 P2HN ή

Ο、IU (III) 經濟部中央梯準局員工消费合作社印製 其中P2爲胺基-保護基且a爲羧基-保護基’例如，鹵素或 低碳醯氧基。另一種實例爲胺基酸酐，其爲使胺基酸（特別 係L -绳胺酸）易於酯化之經活化形式。其它實例爲u N C A，s ，更詳述於下。 "保護基"意爲（a)保持一反應性基團免其參與不希望化學 反應；及（b)於反應性基團之保護作用不再需時，可被容 易去除之化學基團=例如，苄基爲用於初級羥基官能之保 護基。 胺基-保έ蔓基意指保持反應性胺基（其否則會被特定化 學反應修飾）之保護基《此定義包括甲醯基或具有2至4碳 原子之燒酿基’特別係乙縫基或丙酿基，三苯甲基或經取 代之三苯甲基，如單曱氧基三苯甲基，二曱氧基三苯甲基 如4，4·-二甲氧基三苯甲基或4,二甲氧基三苯基甲基， 三氟乙醯基，及Ν-(9-苐基甲氧基羰基）或〜FMOC”基團， 烯丙基氧羰基或其它由鹵竣酸酯衍生得之保護基，如（c 6 _ c12)芳基低碳烷基碳酸酯類（如衍生自苄基氣瑞酸酯之N_ 芊基氧羰基）’或由雙笨基烷基由碳酸酯，或第三級烷基函 碳酸酯（如第三-丁基鹵碳酸酯’尤其係第三丁基氣_碳酸酯 )，或二（低碳）虎基-二竣酸酯（尤其係二_(第三_丁基）_二 碳_酸酷）衍生得之基團，及S太S备基。 -15 - 本紙張尺度適用中國國家標率{ CNS ) A4规格（210X297公釐） "1 , 装 訂 I- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 434242 Α7 Β7 五、發明説明（13 ) "經基-保護基•'意指保持經基（其否則會被特定化學反應 修飾）之保護基。適宜之羥基-保護基包括醚-形成基團，其 可於所有其它反應步驟完成後容易地被去除，例如視需要 於其苯環經取代之苄基或三苯甲基。其它適宜之羥基_保護 基包括烷基酸基’回氫喊喃基，矽坑基，三坡基矽烷基醚 基及烯丙基。 ”脱離基"意指於化學反應中被其它基團置換之不穩基團 3脱離基之實例爲鹵素，視需要經取代之苄氧基，異丙氧 基’甲磺醯氧基，芴磺醯氧基或醯氧基。 所有用於製備式I化合物之活化劑與保護劑必須符合下列 條件：（1)其送入應定量地進行且不會發生L -绳胺酸组成 之消旋作用；（2)於所希望反應中存在之保護基應對所使 用之反應條件安定；及（3)該基團必須於其中酯鍵爲安定 之條件下且於不使酯類中L-纈胺酸組成發生消旋作用之條 件下立即被去除。 經濟部中央標準局員工消費1作社印製 ί . * 訂 • 擎 (請先閲讀背&之注意事項再填寫本頁) "對掌性”意指由於描述分子之對稱元素（或不存在對稱元 表）而給予之分子對掌特性。缺之對稱元意之分子爲"非對 掌（不對稱）"。缺乏所有對稱元素，甚至包括單—軸，之分 子貝i稱爲，，不對稱"。 u非對掌”意爲於分子中存在至少—個對稱元素，如單一 Μ ° "異構現象”意指具有相同原子量與原子數但有—或多項 物理或化學性質不同之化合物3各類型異構物包括如下： ”立體異構物η意指一化合物與另—者具有相同分子量， -16- 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210X297公董） 43 4? *> 經濟部中央標準局員工消費j作社印装 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4说格（210X297公釐） A7 B7 五 '發明説明（14 ) 化學组合，及組成，但所分別成群之原子不同。即，其於 芏間中特定相同化學部分位於不同位向，且因此（當爲純時 )具有使極光板轉動之能力。然而，某些純立體異構物可能 具有之光學旋轉性很低，以致於無法以現有儀器技術偵測 J'J 〇 光學異構物”描述一類立體異構物，其藉由異構物（爲純 或於溶液中）使極光板旋轉而顯示出來。於許多情形中，其 係由於分子中有四個不同化學原子或基團接到至少一個碳 原子而產生’或另外以上述之分子對掌性表現。 互體異構物或光學異構物之中彼此成鏡像者，稱之爲"鏡 像異構物”且可稱其爲具鏡像異構性的。彼此爲鏡像之對 掌基團稱爲鏡像異構基。 其絕對組態未知之鏡像異構物可視其使極光板旋轉之方 向（於特定實驗條件下），而以右旋性（冠以+)或左旋性（冠 以一）來區別3 當相同量之鏡像異構分子一起存在時，產物稱爲外消旋 性，不管其爲結晶形，液態，或氣態。由等莫耳量之鏡像 異構分子组成之均勻固相稱爲消旋化合物。具有等莫耳量 呈福別分開固相存在之鏡像異構分子之混合物稱爲消旋混 合物。任何含有等莫耳量鏡像異構分子之均勻相稱爲消旋 物。 具有兩個不對稱碳原子（對掌中心）之化合物擁有四個形 成兩對鏡像異構物之立體異構物。其中一對鏡像異構物爲 彼此之鏡像’而兩分開對之鏡像異構物非彼此之鏡像則稱 -17- ----- I— I ί· - I —i i —4ϋ * vf—t iti 一 ^ - - (诸先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央樣準局員工消費_合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（15 ) ' 之爲"非鏡像異構物"。非鏡像異構物具有相似但不相同之 化學性質’ JL具有相異之物理性質，例如融點，溶解度， 等。 於此’光學活性化合物可以多種慣用記號標示；即，康 與普雷格（Cahn and Prelog)之R-及S-定序規則：赤蘚糖 型與蘇糖型異構物；D與L-異構物：d與1-異構物：以及 (+ )與（-)異構物’其指示極光板被化學結構（不論爲純或於 各液中）旋轉之方向。此等慣用記號爲該技藝所熟知，且經 詳述於E.L.艾利爾（Eliel)之碳化合物之立體化學中，由麥 葛羅希爾圖書公司，紐約有限公司於1 9 6 2年發行，及其中 引用之參考文獻。因此，此等異構物可描述成扣，卜或 d，l-對；或 D-，L-或-D，L-對：或 R-，S-或-R，S-對；視 所使用之命名系統而定。通常’本申請案使用（D )，（ L)與 (D，L)標示胺基酸（纈胺酸），而#)，（5)與（11，5)標示甘希 可羅威部分中之不對稱碳，以區別兩者。 式I化合物與式II化合物具有兩個不對稱中心（2礙原子） 個位於绳胺酸组成中而另一個位於甘希可羅威组成之 脂族側鏈中。後者爲丙基之碳原子2。因此，式I化合物與 式ΙΪ化合物以鏡像異構物及鏡像異構物混合物存在3關於 本發明之化合物’可使用任何非鏡像異構物或非鏡像異構 物混合物，且除非另有限制，申請專利範圍意欲涵蓋個別 之非鏡像并構物及其昆合物3式I包括式I之兩種非鏡像異 構物’及其混合物。 "視需要之”或"視需要地"意指一所述之事件或環境條件 -18 - 衣紙張尺度適用中國圃定嫂魂f A/iiSk / 甚Ί ^^1' - 1^1^1 , n - 1^1 n I^il 1 ' 5 、-" * I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ^34242 A7 B7 玉、發明说明（κ ) --------[Ϊ i n n - - - * l C請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 可以或可不必發生’且該敘述包括所迷事件或環境條件發 生之實例及其中其不發生之實例3例如，”視需要經取代 之笨基"意指苯基可能或可能不經取代，且該敘述包括未 經取代之苯基與其中有取代作用之笨基："視需要地接著 將游離酸轉換成酸加成鹽’，意指該轉換作用可能或可能不 被完成’以使所述之方法落於本發明中，立本發明包括其 中游離鹼經轉換成酸加成鹽以及其中不被轉換之方法。 ，，藥學上可接受之"意指其可用於製備一般爲安全且無毒 性之醫藥组合物，且包括其對脊椎動物用途以及人類醫療 用途而言爲可接受的。 ”藥學上可接受之鹽類"意指具有所希望之藥學活性且不 爲生物學上或其它不含需要之鹽類。此等鹽類包括與無機 經 濟 部 中 央 樣 準 η 工 消 費 -合 作 印 製 •如氫氣故，氫 >臭，硫酸，硝酸，鱗酸，及類似酸：或 與有機酸如醋酸，丙酸，己酸，庚酸，環戊烷_丙酸，羥乙 酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，蘋果酸，順丁烯二 酸，反丁埽二酸，酒石酸，檸檬酸，苯甲酸，〇_(4_經基_ 奉·甲酿基）苯甲酸’桂皮酸，苯乙醇酸，曱績酸，乙項酸， (，之-乙-一命酸，2·搜基乙績酸’苯續酸，對-氣笨確酸， 2 -苔磺酸’對-芴磺酸’幛腦磺酸，4_甲基_雙環[222]辛 -2 -烯-卜羧酸，葡庚酸，4ί4，_伸甲基雙_(3-羥基-2-莕甲） 酸，3-苯基丙酸，三甲基-乙酸，第三_丁基乙酸，月桂基 硫酸’葡萄糖酸，麩胺酸，巍基-萘曱酸，柳酸，硬脂酸， 黏康酸’及類似酸所形成之酸加成鹽類。較佳之藥學上可 接受鹽類爲與氫氣酸’硫酸，磷酸，醋酸或甲磺酸，乙磺 -19 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇乂297公| ) 434 434 經濟部中夬標隼局員工消費一合作杜印裂 Λ7 B7 五、發明説明（17 ) 酸’ 1,2-乙二績酸，2-羥基乙磺酸，笨磺酸，對-氣苯磺 酸，及2 -莕磺酸，對•芴磺酸’樟腦磺酸形成者。 "動物”包括人類，非人類哺乳動物（如狗，貓，兔子，牛 ，馬，綿羊，山羊，豬與鹿）及非哺乳動物，如烏類，魚及 類似者。 疾病”特別包括動物或其部分之任何不健康狀況a因此 ，”疾病"在此包括任何可以單-L _纈胺酸甘希可羅威或其 藥學上可接受鹽類治療之病毒性或相關疾病。 ’治療”意指任何動物疾病之治療，包括： (1) 預防疾病於易罹患疾病，但未經歷或表現疾病徵狀之 動物中發生：例如，防止臨床徵狀之發生3 (2) 抑制疾病，例如，遏止其發雇；或 (3 )減輕疾病’例如’使疾病之徵狀消退。 用以治療疾病之"有效量”意指當施用於需要治療之動物 時，足以達成有效治療（如上定義）該疾病之量。 除非經相瓦指定，所希望之反應在此於大氣壓力下於5 °C 至1 7 0°C (較佳地從〖0°c至5 (TC :最佳地許，，室•，或，，包園” 溫度’如20-30。〇之溫度範圍下進行。然而，明顯地有某 些反應其化學反應中所使用之溫度範圍會高於或低於此等 溫度範園。進而，除非另有指定，反應時間與條件傾向大 约爲’例如，於約大氣壓力下於約至约丨00X；(較佳地 從約1 (TC至5 ο X；;最佳地約2 Ο Ό )之溫度範圍内，經過一 段約1至I 0 〇小時（較佳地約5至6 0小時）之時間進行a實施 例中所給予之參數爲特定値，而非概約値3 ___ -20- 本紙張尺度適用中關家縣（CNS ) A4規格（2似297公褒） --I-------裝------訂 -* (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 434242 A7 B7 五、發明説明（丨8 ) 本文所述化合物及中間物之分離與純化，若希望，可藉 任何適宜之分離或純化方法來完成，例如，過淚法，萃取 作用，結晶作用，管柱層析術，薄層色層分析術或厚層色 層分析術，或此等方法之組合。適宜分開與分離方法特別 説明引用於以下之實施例中。然而，當然亦可使用其它相 當之分開或分離方法。 式I化合物或其藥學上可接受鹽類係藉各種方法製備得。 合成途徑以下圖式丨中所標示之虛線[(a)至（f)]來表現。虛 線以圖式指出個別之反應部位，且隨後之附表給予各種= 法之簡述’其將更詳細描述於下文。圖式中之字母標記係 指方法敘述/申請專利範圍中之個別步驟：

0H (请先閱讀背面之，"意事項#填'寫本頁) ----- 裝 經 中 央 標 準 局 員 工 消 費 -合 作 杜 印 % 途徑 (a) (b) (c) (d) (a ),( e )、、

:a )，（ b )------- H，N

-N 'H,N N^^N' γ Her (c) 方法 去一保護作用 鹽類形成作用 酯化作用 縮合作用 (d) -、1Γ -21 本紙張尺度適用中國國家棲準（CNS > A4規格（2丨Ο X 297公釐） 4342 A7 B7 五、發明説明（I9 ) (e) 部分水解作用 (f) 光學解析/非鏡像異構物分斑 勺^此’用以製備W化合物或其藥學上可接受鹽類之方^ G含下列步驟之一或多項： (a)將胺基·及/或羥基保護基從具下式化合物去除以產与 式1化合物： '

0H -Ν P3HN* >Γ (IV) Ρ2ΗΝ ή C' ^^^1 ^i»—— —^^1 I - I I mi ft^i ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 I - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其中Ρ1爲起基保護基或氫，Ρ2爲胺基保護基，且Ρ3爲氫或 Ρ2 ;或 (b) 將式I化合物轉換成其藥學上可接'受之鹽類；或 (c) 2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1,3-丙亡醇（甘希可羅威）或其鹽類，與經活化之L -纈胺酸衍生 物之酯化作用：或 (d) 將具下式之視需要經取代之胍（視需要以過烷化形式 存在）： -22 本紙法尺度通用中國國家搮準（CNS)A4規格（210X 297公釐） 434242 Α7 Β7 五、發明説明（2〇 )

X

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 - 其中P3爲氫或胺基保護基，與具下式之2 _經取代甘油： Y1- Υ2 其中Υ1與Υ2個別爲自素’低碳醯氧基，低碳烷氧基，或 芳烷氧基，且Ζ爲選自低碳醯氧基，甲氧基，異丙氧基， 爷氧基’自素，甲磺醯氧基或芴磺醯氧基之脱離基：視需 要地於路易斯（L e w i s)酸觸媒存在下，縮合以得到式〖化合 物；或 (Ο將雙（L-纈胺酸）2-(2-胺基-丨，6-二氫_6_氧_嘴呤_9_ 基）甲氧基· 1，3 -丙二酯雙酯或其鹽類部分水解以得到具式j 之單酯；或 (f)具式（ί)化合物之光學解析或非鏡像異構物分離。 化合物I及其藥學上可接受之鹽類具有藥學活性，且尤其 具有抗病毒活性。照此，該化合物及其藥專上可接受鹽類 可用於治療廣泛範圍之動物狀況，尤其係人類。 可由使用本發之化合物與鹽類治療之狀況實例包括疮療 性感染，如第I ’ 2與6型疱疹病毒，水痘帶狀疱瘡，艾佰 斯坦-巴病毒（Eppstein-Barr virus)，且尤其係細胞巨大 病毒’反癌疹B與相關之病毒，於人類或非-人類（特別指 人類）中之狀況。由此等病毒引起之臨床狀況實例爲癌療性 角膜炎，疱疹性腦炎，腎疱疹，生殖器感染（由單純疱疹引 -23 - 丫、 ,Ζ (VI) ^^^1 m^i - 1 - I · : . I - - - - ----eJ '* (請先閲讀背面之注意事項再填寫本I〕 本紙張尺度適用中國國家棵準（CNS ) A4規格（210 x 297公釐） 434242 經濟部中央橾孳局員工消費合作社印裝 A7 B7 五、發明説明（21 ) 起）’水痘，帶狀癌療（由水痘帶狀疱疹引起），CM V-肺炎 及CMV-視網膜灸，特別地係存在免疫-受傷害病患包括移 植接受者（例如，心臟，腎臟，與骨髓移植）及具有後天免 疫缺之症候群（AID S )，艾佰斯坦巴病毒引起之感染性單 核血球病患者中之狀況。本發明之化合物亦用於治療因病 毒感染引起（或相關）之特定癌症或淋巴瘤，例如鼻咽癌， 免疫突發性淋巴瘤，布奇特氏淋巴瘤，及毛樣白斑。 總之’本發明之另一方面係—種治療表現出由上述病毒 感染引發之狀況之動物（較佳爲人類），或預防性治療其中 此類病毒感染預先由治療醫師或獸醫處理之動物之方法a 該方法包含將一治療上有效量之單-L _纈胺酸甘希可羅咸 或其藥學上可接受鹽類施用於此等動物。該化合物或其藥 學上可接受鹽類之治療上有效量係有效用以治療該狀況（即 ’疾病）之量。所施藥之確切量可視受治療特別狀況之護理 程度，個體之年齡與體重’個體相關之健康情形及其它因 素（如配方之型式）而有廣泛之變化。對於口服配方，治療 上有效量可爲约1至2 5 0毫克每公斤體重每天，較佳地約7 至1 0 0毫克/公斤體重每天。最佳地治療上有效量爲約1 〇至 5 0裳克/公斤/天’特別係用於治療c μ V視網膜炎與肺灸。 因此，對於一名7 0公斤人類，治療有效量爲約7 〇毫克/天 至約7克/天’較佳地約5 〇 〇毫克/天至約5克/天，最佳地爲 700毫克/天至3_5克/天3但對於活體内植入，前藥之劑量 將爲0,5¾克至25毫克’較佳地爲5至1〇毫克每次植入。 習於該技藝者均了解本發明前藥之不同劑型將支配不同 劑量範圍3 -24- 本紙張尺度適用中國國家橾隼（CNS ) A4規格（210Y297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂 434 434 經濟部中央橾隼局負工消費~合作杜印裂 A7 ----------B7 五、發明説明（22 ) ΐ希威馬—種經發f之抗病毒藥劑。本發明之甘希 可羅威Μ藥用途已藉由測定甘希可羅威於口服施用前藥 (後’其在受測試動物（老藏與猴子）中之血液濃度來確定 。=漿;辰度係根據實施例9與10中所述之方法，以及由索 瑪得希（Sommadossi)等人於感染疾病之回顧（REVIEWs OF INFECTIOUS DISEASES) 10(3)，S507 ( 1988)與層析 術生物醫學應用期刊（Journal of Chromatography， Biomedical Appilcati〇ns) 4 14 429·43 3 ( 1987)中所 述之經修飾方法測定得。 本發明t化合物或其藥學上可接受鹽類，可藉由任何該 項技藝中可使用且可接受之已知型式，單獨地或與其它治 療劑組合施導。通常，本發明之化合物及其鹽類係以具有 藥學上可接受賦形劑之醫藥組合物施用，且經口服，系統 性（如穿皮地或藉栓劑）或非經腸道（如肌肉[im],靜脈内 [iv]，皮下[sc])或玻璃體内植入之方式施藥3於是本發明 之化合物可以呈半固體，粉末，噴霧劑，溶液，懸浮液之 组合物或其它適當组合物（如下所討論者）施藥。以口服醫 藥组合物爲較佳。 醫藥組合物包含式I化合物或其藥學上可接受鹽類，其較 佳地與藥學上可接受賦形劑組合。此類賦形劑爲不具毒性 。此類賦形劑可爲任何習於該項技藝者一般可利用且不會 有菩地影響活性試劑活性之固態，液態，半固態，氣態（用 於噴霧劑中）賦形劑= 通常，本發明之醫藥组合物含有治療有效量之與至少一 種賦形劑组合之該化合物或其藥學上可接受鹽類3視配方 -25 - 本紙蒗尺度適用中國國家標孳（CNS ) A4规格(210X297公釐） 袈-------訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 434242 A7 B7 經濟部中央標準局員工消费j作社印策 五、發明説明（23 ) 之類型，單位劑量之大小，賦形劑之種類及其它習於醫藥 科學技藝者所已知之因素而定，本發明化合物於組合物中 之含量可有廣泛之變化。一般，最終組合物將包含約1 %至 約9 9 5 %之本發明化合物，而剩餘部分爲賦形劑。較佳地 ，活性化合物之含量爲約10 〇%重量至約99 %重量，且最 佳爲約50%重量至約99%重量，而剩餘部分爲一或多種適 宜之賦形劑。適用於製備本發明醫藥組合物之醫藥賦形劑 可爲固禮，半固體，液體或氣體。因此，組合物可採用鍵 劑，丸劑，膠囊，粉末，栓劑，穿皮貼藥，持續釋放配方 ，玻璃體内植入，溶液（尤其係靜脈内注射溶液），懸浮液 ，酏劑，噴霧劑，及類似物之形式。固態醫藥賦形劑包括 澱粉’如榖類澱粉’纖維素，滑石，葡萄糖，乳糖，蔗糖 ，明膠，麥芽，稻米，小麥粉，白堊，矽石凝膠，硬脂酸 鎂，硬脂酸鈉，硬脂酸，甘油單硬脂酸酯，氣化鈉，脱脂 奶粉’及類似物。液態與半固態賦形劑可選自水，乙醇， 甘油，丙二醉’各種油類（包括以石蠟，動物’植物或合成 爲來源者）例如花生油，大豆油，礦物油，芝蔴油，及類似 物。以水，食鹽水，含水右旋糖，及甘油爲較佳之液態載 體，特別係用於可注射溶液。其它適宜之醫藥賦形劑與載 體與其配方係敘述於”雷明頓醫藥科學"，麥克（M a c k)出 版公司’依斯頓（Easton)，賓州（1 980)由E.W.馬丁 (Mar tin)編著’併入本文作爲參考文獻。 較佳地’醫藥组合物係以用於持續治療之單一單位劑量 形式（更佳地爲口服劑量形式），或以當特別需要減輕徵狀 時無限制使用之單一單位劑量形式施藥。 -26 - 本紙張尺度逋用中國®家橾擎(CMS ) A4規格（210X297公慶） n ^^^^1 I— I ^TOJ - - 1请先閱请背面之注意事項真填寫本莧) 43 A7 B7 經濟部中夬標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（24 ) 雖然本發明之最廣泛定義係如上所敘之式I化合物及其藥 學上可接受鹽類’然以（R，S):'昆合物與特定之鹽類爲較佳 a 下列酸類較佳用於與式I化合物形成藥學上可接受鹽類： 氫氣酸，硫酸，磷酸，醋酸，甲磺酸，乙磺酸，1，2 -乙二 磺酸，2-羥基乙磺酸，笨磺酸，對-氣笨磺酸，2-萘確酸， 對-萌績酸與樟腦續酸3最佳爲強機酸類，如氫氣酸，疏酸 或鱗酸。 最佳化合物爲L-纈胺酸2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嗓呤· 9-基）甲氧基-3-羥基-丨-丙酯氫氣化物與醋酸鹽。此等化合 物可製備成結晶物質，且因此可容易地製成安定之口服配 方3以口服與靜脈内配方爲較佳。口服配方具有高生物可 利用性之好處：靜脈内配方之優點爲其不像靜脈内甘希可 羅威配方’本發明之前藥配方可使用生理上更可接受之pH 値（4-6)製備得。甘希可羅威之靜脈内配方需要pH値爲11 ，其會導致剌激性。 經了解此等化合物尤其可用於本發明之醫藥組合物與治 療方法中。 於本發明所述最後步驟方法中，所引述之式I，I丨，Π j ，ΪΛ/ ’ V或VI意指其中p 1，p 2與p 3，a，Y 1，Y 2及z係 如上所定義具最廣義者，及特別實施於本發明較佳具體實 施例之方法s 本發明之較佳醫藥组合物含有式I前藥之藥學上可接受鹽 類。因此，若醫藥配方之製造包含將醫藥賦形劑與以其鹽 類形式存在之活性成份親密混合，則意指係使用本質爲非 -27- 本紙張尺及遑用中國國家榡準（CNS ) A4规格（2)0X29"?公釐） {請先閱讀背面之?iJ*.$項再填寫本頁) 裝' 丁 43424 2 經濟部中央橾隼局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（25 ) 鹼性（即’酸性或中性）之醫藥賦形劑。 一般用以製造式I化合物之較佳方法包括步驟（a)，較佳 地伴隨形成式I化合物之鹽類而完成，或步驟（c),或步驟 (a)與（c)之組合。（參見以下步驟111與丨¥之敘述）。根據步 驟（a)單酯之製備需要選擇性保護甘希可羅威或其衍生物之 一或二個初級羥基官能基β此通常可或可不包括胍鹼基之 位置2中胺基之保護（參見以下步驟I至ΙΠ中用以具經保護 胺基完成之方法之詳述）。此外，在酯化作用（步驟H Ϊ)完 成前，胺基酸試劑之胺基必須被保護，以避免其干擾（形成 醯胺）酯化反應。該胺基之保護作用敘述於下。 通常’於進行本發明之方法時’該等未參與合成反應之 胺基，羥基或羧基必須受保護直到去-保護作用產生最 終產物；或（2) —特定之經保護基涉及於次項合成步驟中 ’或（3 )未受保護基團於後續產生終產物之步驟中存在， 將不會改變反應之預定順序。爲符合需要（1 )之實例爲用 於製備本發明單酯類之芊基，其保護甘希可羅威之初級羥 基^此性直到其於去-保護作用步驟中被去除。符合需要 (2)之實例爲保護甘希可羅威之第二初級羥基官能性之第 一卞基，其於酯化步驟之前始被去除。符合需要（3)之實 例爲保謾甘希可羅威胍環系之胺基之乙醯基，或三苯甲基 或單曱氧基三苯甲基’至未受保護之胺基不干擾酯化作用（ 步驟ΠΙ)時。 通常’具有可能作爲使其適用於製備式;[化合物之阻斷劑 之條件包括： (1)其引入應定量地且緩和地進行’不造成L_纈胺酸消 -28- 本紙張尺度適用中國國家橒準（CNS ) A4規格（210X297公釐） {1 >IJa { ^^^1 I - J ^nr · - I in TJ 牙 i • - (請先閱讀背16之注意事項再填寫本頁) A7 B7 經 部 t 標 準 局 員 工 消 費 一合 作 社 印 製 五、發明説明（26 ) 旋： (2)經封阻之中間物必須對所使用之反應條件安定，直到 需要將保護基去除： (3 )阻斷基必須容易於不改變分子其餘部位之化學性質， 或造成L -纈胺酸组成消旋之條件下立即被去除。 所有用以製造式I化合物之起始物質（甘希可羅威與1_織 胺及保護與幾基-活化試劑爲已知。亦已知有各種胺基_ 經保護之L-绳胺酸衍生物’如N_芊氧羰基_L_纈胺酸， BOC-L -绳胺酸與FMOC-L -網胺酸，N -甲酿基_L -顯胺酸 及氣凝基-N-複基-L-绳胺酸奸，其皆爲可市佳得之令 間物，或敘述於文獻中者’如Ν-烯丙氧羰基_L_纈胺酸。 用於製備本發明較佳化合物之較佳經保護之甘希可羅 威起始物質爲N2 -乙酷基-雙-〇-节基-甘希可羅威（ν 2 -乙 醯基-2-(2-胺基-1,6 -二氫-6 -氧-嗓呤-9-基）甲氧基1,3-雙 (芊氧基）丙烷），其敘述於美國專利4,355,032號。其它較 佳之經保護甘希可羅威起始物質爲N2-三笨曱基-9-[(3·經 基-2-丙氧基-1-三苯甲基氧基）曱基]胍[N2-三苯甲基-2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1-三苯曱基氧 基-丙-3-醇]與N2-單甲氧基三苯甲基- 9- [(3 -經基-2-丙氧 基-I-單甲氧基三苯甲氧基）甲基]-胍，其製備敘述於J. Pharm. Sci. 76(2)，180-184 (1987)，併入本文作爲麥 考文獻。雙（L-纈胺酸）2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1，3 -丙二酯爲用於部分水解作用之起始物質， 其係敘述於歐洲專利申請案，公開號3 7 5 3 2 9中= 於完成步驟ΠΙ(酯化步驟）之前，必須將L-纈胺酸之胺基 -29 - 本紙張尺度適用中國國家椟準（CNS M4规格（210X 297公釐） ^^^1 HH ^^^^1 - n^l —^^^1 - 1! 1*I ^^^^1 ^^^^1 m ~ *· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 434242 Α7 Β7 經濟部中央標隼局員工消費合作社印裝 五、發明説明（27 ) 保護，以免其藉由不希望之醯胺形成而干擾酯化作用s可 使用下列胺基-保護基：鹵碳酸酯類，例如（C6_C12)芳基 低碳烷基碳酸酯（如由氣碳酸苄酯衍生得之苄氧羰基），或 雙苯基烷基鹵碳酸醋類，或第三烷基鹵碳酸酯，如第三丁 基鹵碳酸醋類，尤其係氣碳酸第三丁酯，或二（低碳）烷基 二碳酸酯類’尤其係二碳酸二（第三丁）酯，三苯基甲基鹵 化物如氣三苯基曱烷’及三氟乙酸酐a保護步驟係藉將L _ 纈胺酸溶.解於或懸浮於鹼水溶液（可包括低碳醇類）中而完 成。當諸如(I碳酸酯之保護劑（較佳地存於水或低碳醇溶液 中）以小部分同時加入時，將反應混合物冷卻。於此添加期 間，反應混合物係維持於〇至3 (TC，較佳地〇 _ 5。(：下數小時 ，直到其達到室溫。將反應混合物濃縮至乾，且殘餘物置 於有機相與水之間進行分配。水層經酸化並以有機溶劑萃 取經保護之胺基酸。有機相以水接著以鹽水洗劑萃洗，並 通過硫酸鎂乾燥，再蒸發至乾，且以習用之分離與純化技 術將N-受保護之胺基酸分離及純化3 早-L-顯胺酸甘希可羅威之製備 步-驟1 將甘希可羅威（具有視需要受保護之2 -胺基且其 兩個初級羥基官能性均受保護）藉由，例如_，將其氫化成具 有胺基維持於受保護形式’及一個經保護之初級經基官 能性之甘希可羅威，而進行部分去-保護作用。適宜之胺基 -保護基爲具有2至4個後原子之低碳烷醯基，尤其係乙醯 基或丙醯基。其它適宜之胺基保護基爲三笨甲基或經取代 之二苯甲基，如單甲氧基三笨甲基，與4,4，_二甲氧基三笨 甲基。 -30- 本紙伕尺度適用中國國家橾準（CNS ) Α4規格（210x297公釐） (背先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 装· 434 434 經濟部中央標隼局員工消費j作社印製 A7 B7 五、發明説明（28 ) 適且之羥基-保護基爲可於所有其它反應步驟完成後，容 易被去除（醚-形成基團。此等羥基-保護性醚基包括苄基 或一苯甲基。此等基團可於笨環中經取代。其它適宜之羥 基保護基包括烯丙基醚，四氫哌喃基’矽烷基，三烷基矽 烷基醚類，其可以氟化氫藉由習於該項技藝者所熟知之方 法去除。 用以去除氫基-保護基之氫化作用，較佳地係藉將經保護 之甘希可羅威，溶於觸媒（如鈀化合物，尤其係氫氧化鈀） 存在下釋放氫之溶劑系統中，經由轉氫化作用或其它習用 之氫化方法而冗成。其它適宜之氫化作用觸媒包括一般之 氫化作用觸媒如p d，碳上p d及均質氫化作用觸媒。溶劑系 統包括低碳烷醇’如甲醇或乙醇及環己晞。通常該反應係 方；Μ方；主im至/谷劑系統之迴流溫度間，例如於迴流中之乙 醇與環己晞内，於惰性大氣及排除氧氣或空氣下，較佳地 於氮氣壓下芫成。觸媒係藉由過濾回收。濾液可藉蒸發過 量之溶劑以減少體積。所形成之粗反應混合物通常包括未 經改變之起始物質及具有一個脂族羥基受保護之2 _胺基經 保護之甘希可羅威爲主.要產物^此二種產物之分離通常保 以枝藝中已知之方法執行’常使用色層分析方法，較佳地 於妙石凝膠上，接著以適當之溶析劑如含低碳烷醇與經鹵 化之低唆坑類（較佳爲乙醇與二氣甲’坑）溶析，以得到具有 一個脂族羥基受保護之2-胺基經保護之甘希可羅威3 步驟11 :將具有受保護2 -胺基且一個脂族羥基受保護之 甘希可羅威行胺基之去-保護作用。此步驟中若胺基保護基 -31 - 本纸張尺度適用争國國家橾舉（〇呢>八4規格（210父297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 装· 434242 A7 B7 五、發明説明（29 ) 經 濟 部 央 橾 準 局 貝 工 消 费 一合 作 社 印 % 爲低碳烷醯基’則使用鹼性條件（pH介於9至丨4)以去除該 保護基。例如，N2-乙醯基-單.〇_笮基_甘希可羅威係以鹼 性試劑如氫氧化銨，'碳酸鈉或鉀或氫氧化鈉或鉀處理，直 到乙醯基完全去除。通常，此反應係於適宜溶劑如低碳醇 類存在下進行3較佳地係將起始物質溶於甲醇中，並將計 量過量之氫氧化銨加入。反應溫度維持於〇至5 〇 ，較佳 地於室溫下。待反應完成（其可由TLC測定得）之後，可恭 加其i /谷劑’以繁助去•保護產物之分離，例如乙基酸使去 -保護產物沈澱，則可使用習用之分離方法將其濾出並分離 〇 步驟ΠΙ :此步驟中，將經活化之具式111胺基受保護之 L -纈胺酸衍生物與步驟Π中所得受保護之甘希可羅威衍生 物酯化。對於L-纈胺酸之適宜胺基保護基爲N-苄氧羰基， 酞醯基，第三丁氧羰基與N-(9-第基甲氧基羰基）或 "FMOC"基。 應使用至少丨當量受保護胺基酸與1當量適宜偶合劑或脱 水劑’例如1，3 -二環己基羰二亞胺或此類具鹼基之二亞胺 之鹽類。亦可使用其它羰二亞胺類，如Ν，Ν'-羰基二咪唑 。進一步可使用之脱水劑爲三氟乙酸肝，混合酸奸，酸性 氣化物，六氟碑酸1-苯幷三唑基氧基-參（二甲基胺基）鱗， ΡΥΒΟΡ ’ 1-經基苯幷三吐，1·經基-4-氮笨幷三吐，1-藉 基-7-氬笨幷三唑，氫氣化Ν -乙基-Ν'-(3 -二甲胺基）_丙基） 羰二亞胺，3-羥基-3,4-二氫-4-氧-1,2,3-笨幷三畊，六氟 鱗酸0-(笨幷三咬-1-基）-1，1，3,3-四基錄（\11"〇11丨11111)，六 -32 - 本紙浪尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210Χ29·7公釐} I - ϋ^— I- I- ^^1 j —I— I — -I I m I I .^n _ I'* {請先閲讀背面之注意事項再填寫本瓦) 434242 A7 B7 五、發明説明p〇 ) ?磷酸0氮笨弁三唑，N基)-1丄3,3_四甲基錁，四氟石 酸〇 (I氮苯幷二唑_1_基卜1，1，3,3·四甲基錄，六氟磷酸〇-(iH苯幷—,哇_ 基η，13 3_雙（四伸甲基）錄或六氣鱗酸 〇-(7_氮笨幷三m)_113,3雙（四伸甲基）錁。此等偶 合劑經描述於 J Am. Chem, S〇C. 115, 4397.4398 (1 9 9 )亦可用於此目的者爲受烏粒坦保護之胺基酸n ·叛 基肝（UNCA_S) ’其由佛勒（Fuller)等人描述於j. Am.

Chem· Soc，112, 7414_7416 ( 199〇)中，併入本文作爲 參考文獻。總之，任何其它可於溫和條件下，產生受保護 胺基酸〈_或5 —種經活化衍生物之賴，皆可用作爲偶 合劑。 將胺基-受保護之胺基酸於惰性大氣下（例如氮氣下），溶 於惰性溶劑，如經南化之低碳烷類’較佳地爲二氣甲烷中 ，並將偶合劑（較佳地爲1>3_二環己基羰二亞胺）加入。反 應混合物於0°C至5(TC之溫度（較佳於室溫）下攪拌。將反 應;昆合物過濾，並將反應產物（受保護胺基酸之酐）分離。 將形成之產物溶解於諸如乾燥二甲基甲醯释（DMF)之乾燥 惰性溶劑中，並置放於氮氣下^將含1當量步驟〗丨產物存於 惰，fi溶劑中之溶液加至上述酐溶液中。該反應於。至”^ 間’較佳地於約室溫下，經過5至90小時完成。反應產物可 使用習知方法（如層析術）分離及純化=產物通常含有未反 應之反應之N-受保護胺基酸，其可藉將產物之水-不可混 合溶液（有機相），以鹼水溶液如碳酸氫鈉，碳酸鈉，鹽水 及其混合物處理而去除。可使用習知之分離與純化技術， -33 - 本紙張尺度逍用中國國家揉準（CNS ) A4规格UlOXW7公釐） 43 A7 B7 經濟部中央標隼局員工消費_合作杜印繁 五 '發明説明（31 ) 從該有機相分離與純化得具有經保護脂族羥基之甘希可羅 威L-纈胺酸酯及N-受保護之胺基酸a 步驟ί V (得到具式I產物之最終去-保謹作用、：步骤III產 物之兩個保護基係以去-保護反應，較佳地於酸性介質或溶 劑中，最佳地以氫化作用去除。以於酸性條件下之去保護 作用爲較佳，因其可確保於去保護反應中釋放之胺基，將 會被子化，即具式I之驗’當其於去-保護作用反應中形 成時，將可被至少一化學計量之存在酸補獲。將呈酸加成 鹽形式之式ί化合物分離，可保護式I化合物之所希望立體 組態。因此，以下所給予列示去保護步驟（a)之實施例， 亦列示伴隨之鹽形成步驟（b)。 去-保護反應係藉將酯化步驟之產物溶於惰性溶劑中，較 佳地溶於酸性溶劑中，使用氫化作用觸媒（如碳上鈀，鉑） ’使用提高之氫氣壓力介於1至2000psi，較佳地20至 2〇〇psi而完成。反應之完成可使用習知之薄層色層分析術 (T L C )分析來偵測。氫化作用係持續進行至轉換作用完全 爲止’若需要則再添加氫化作用觸媒D將_觸媒去除並沖洗 。將經由過濾與沖洗組合得之.遽液濃縮並冷凍乾燥，以分 離甘希可羅威L -纈胺酸酯。藉由再結晶作用或其它純化技 術（如液態色層分析技術），完成產物之純化與結晶形酯類 之分離。 若使用第三丁氧羰基作爲胺基-保護基，則以酸（如HC1) 與作爲溶劑之異丙醇，或以純三氟乙酸將其去除3 又，若酯化步驟已以三苯甲基或經取代之三笨甲基受保 -34- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 丁 本紙張尺度通用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 434242 A7 B7 經 濟 部 中 央 標 準 員 工 消 費 -合 作 社 印 装 五、發明説明（32 護之甘希可羅威衍生物完成，則可藉由用含水烷酸類或三 氟乙酸或氫氣酸，於-2 0 °C至1 〇 〇 °C之溫度下，例如以含水 乙酸處理，而將此類保護基去除。 烯丙基係藉將其以铑或鈀觸媒異構化成乙烯基醚類，接 著以酸之水溶液水解而去除。 其它製備方法丨步囅（b)，（d)與（e)] —般習於該項技藝者亦將了解，式Γ化合物可製備成一種 酸加成鹽或相對應之游離鹼。若經製備成酸加成鹽，則可 藉由以適宜之鹼如氩氧化銨溶液，氫氧化鈉，氫氧化鉀或 類似物處理，而將該化合物轉換成游離鹼。然而，重點係 具式I之淋離驗之特性較其酸加成鹽難以確定。當將游離驗 轉換爲酸加成鹽時，係將化合物與適宜之有機或無機酸（如 如所述）反應。此等反應係藉以一至少化學計量之適當酸（ 用於製備酸加成鹽）或鹼（用於釋出游離之式丨化合物）處理 而完成。代表性地於本發明之鹽_形成步驟中，游離鹼係溶 於極性溶劑如水或低碳烷醇（較佳爲異丙醇）及其混合物中 ，並酸以所需要之量加入水或低碳烷醇_中。反應溫度通 常乡隹持於約0至5 0 C，較佳係於約室溫下。相對應之鹽類 自i地沈澱出，或可藉添加較不極性之溶劑，將溶劑以^ 發或於眞空中去除，或藉將溶液冷卻而形成。 … 縮合步驟（d)之反應條件係敘述於歐洲專利申請案，公土 號1 87 297中。此縮合步骤爲製備單酯之非鏡像異構 較佳方法之一。於此縮合步驟中，較佳地將具有受保護之 2-胺基之胍，與甘油衍生物反應3該甘油衍生物（如丨_鹵- -35 本紙張尺度速用中圉國家標李（CNS〉A4規格（210X297公釐 ^1 - - - ί - I !- I -- - ^^^1 II 1 1---!--5J * < (請先閱讀背面之注意事項再填寫本筲) 434242 A7 B7 __ 五、發明説明（33 ) 3 -芊氧基-2 -醯氧基甲氧基甘油）係於非質子性烴類溶劑（如 笨或曱基，或茬）中，或具有六-低碳烷基矽烷（例如，六四 基矽烷，六乙基矽烷及類似物）之DMF中，及觸媒存在下 於30°C至迴流溫度下，與胍或經取代之胍反應。觸媒爲一 種路易斯酸鹽，如三烷基矽烷基鹽，如硫酸或三氟烷磺酸 鹽’氣化矽烷，或硫酸銨及吡啶=爲得縮合步驟（d)之反 應條件之更詳細揭示，參見歐洲專利申請案，公告號第 187 297之揭示’其併入本文作爲參考文獻。通常，γΐ與 Υ2需要以此方式選擇，以確保獲得式I之單-L -纈胺酸酯。 Υ1可爲胺基'受保護之L -纈胺醯基，或一可轉換成L -纈胺 SS基之基團。 經濟部中央標隼局貝工消費_合作社印策 I 浪 訂 (请先^讀背面之注^^項再填寫表！) 本發明化合物亦可由2-(2 -胺基-1,6 -二氫-6-氧-嘌呤- 9-基）甲氧基-1,3 -丙二基雙（l -纈胺酸）酯製備得，其經描敘 於歐洲專利申請案，公開號3 7 5 3 2 9中。形成2 - (2 -胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9·基）甲氧基_3_羥基，i-丙基_L_纈胺 酸酿之轉換作用’係藉將一個L -纈胺酸酯基，於使僅有一 個胺基8¾基殘基優先雙裂解之受控條件下部分水解[步驟 (e)]而達成。將2-(2-胺基，丨，6•二氫_6_氧—_9H_嘌呤_9•基 )甲氧基-1，j -丙—基雙-绳胺酸酯，較佳爲雙醋酸鹽，溶 解於去離子水中，並以弱酸（如氫氧化銨稀釋溶液）部分中 和。將混合物維持於室溫下一至數天，較佳地48至72小時 〇 又，亦可使用酯酶（如豬酯酶）或肽酶（如羧基太酶）進行 酵素水解’來達成部分水解作用3 -36- 本紙張尺度速用中围國豕樣準（CNS )从坑格（210 X 297公着） t= A7 B7 五 '發明説明（34 ) 可藉於弱驗條件下（pH 3至5，較佳爲pH 4)之製備用色 層分析術’將單酯與雙酯中分離3將用於層析分離中之溶 劑去除，且2-(2 -胺基-1，6·二氫-6.氧-9H·嘌呤-9-基）-甲 氧基-3 -羥基-1 _丙基L-纈胺酸酯之鹽類，經分離呈含二種 非鏡像異構物之混合物。 立體異構物之分龅 由式（I)得知，本發明之化合物於丙基鏈中具有—個不對 稱碳原子（對掌中心），另外之不對稱碳原子於乙_纈胺酸中 。因此，有兩種非鏡像異構形式存在，即由康（Cahn)等人 之規則決定之（R)-與（S )-型。 可使用許多適合分離非鏡像異構物之方法，然而較佳之 方法係利用該二種非鏡像異構物之不同物理性質，而採行 之技術。一般，非鏡像異構物係藉色層分析術分離，但較 佳者爲視溶解度差異而定之分離/解析技術，如分結晶。 可應用於製備式I之非鏡像異構物之分離技術特性，係敘 述於珍傑克斯（Jean jacques) ’安卓柯雷特（Andre Collet) ’山繆（Samuel) Η.威廉（Wilen)，鏡像異構物 ’消旋物與解析’約翰威利父子公司（J〇hn WiUy & Sons，Inc.)(1981)，其併入本文作爲參考文獻。 經 濟 部 t 央 橾 隼 局 員 JL 消 -I 合 作 社 印 製 I---------'策-- r t (請先閱讀背面之注意事項再嗔寫本頁) 此外’本發明之化合物可使用具光學活性之反應物製備 得。s製備得單-L -纈胺酸甘希可羅威之非鏡像異構物時 ’則縮合步驟（d)爲較佳之合成方法。然而，若使用光學 活性試劑，則須注意避^pH値範圍超過6，因爲在較高 範圍時，會發生游離式I化合物之相互轉換。例如，於 p Η 7及4 0 C下，式I之鏡像異構甚合物具有少於】時之半 -37- 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS } A4規格（210X297公釐） ^342 4 2 Α7 Β7 五、發明説明（35 ) 衰期3 於式I化合物第二個對掌中心上之立體组態，可以圓偏光 二色性決定（較佳地藉由重原子衍生物之單晶X-射線分析） ’或以總合成所製備得之物質與具已知組態之單一甘油鏡 像異構物之相關性決定。 基·1，6 -二氫-6-氧-嗓呤-9-基）甲氮基_3_經 搜胺酸酯之製造 本發明之化合物可以（且已經）製造成結晶形式。此爲一 項超越揭不於先前技藝之化合物（其經描述爲非晶形物質） 之決定性優點。該項優點屬於醫藥配方可較容易由結晶物 質製得之事實。結晶物質可有效率地受處理，且較非結晶 物貝各易可重覆實施地特性化，而且本發明結晶物質之品 员更可較非結晶物質之品質更快速被確定出來。 經濟部中央橾隼局員工消費合作社印製 ---------批衣！ - (诗先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 爲氣造結晶物質’較佳地使用L _纈胺酸2 - (2 -胺基-1，6 -二氮-6-氧·嘌呤_9_基）甲氧基·3_羥基-丨_丙酯之鹽類。較 佳之結晶鹽類爲醋酸鹽與氫氯酸鹽。較佳地藉將氫氣酸鹽 或醋酸鹽溶於水中，且添加一種可與水相译之有機溶劑， 如甲醇’乙醇，異丙醇，四氫呋喃或乙腈，來引發鹽類之 .结晶化作用。又，氫氣酸鹽可由無水低碳烷醇溶液，如甲 醇’乙醇’藉由添加其它有機溶劑如乙酸乙酯，異丙醇， 四氫呋喃或曱笨，而結晶得。 以下所給予之製備及實施例，可使習於該項技藝者更清 楚地了醉本發明，並具體實施3然其不應考慮爲限定本發 明之範園’而僅係用以説明並代表本發明者。 -38 - 本紙張尺度適用中國國家梂準（CNS ) Α4規格（2丨0Χ297公釐） 4342 4 A7 _________B7_______ 五、發明説明（36 ) 實施例1 (S)-2-(2 -胺基-1,6-二氫-6-氧·嗓呤_9_基）甲氧基-3 -爷蔔. 基-丙-1 -醇之製備 A. (R)-(1-氣-2-乙醯氧基甲氧基-3-芊氧基）丙烷 將HC1氣體（已通過濃H2S04乾燥）於〇X下通入經攪拌含 經 t 央 樣 率 員 X 消 费 -合 作 社 印 裂 ---------- ^-1----—- J 1 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 有（S)-( + >-芊氧基甲基-環氧乙烷（5〇〇毫克，3.06毫莫耳） 與三聚甲醛（201毫克，6.71毫莫耳）存於二氯甲烷（8毫升） 之混合物中，直到所有固體溶解爲止（約4 5分鐘）。將所形 成之溶液貯放於0 °C下1 6小時。待以硫酸鎂乾燥後，將溶 劑蒸發以得到（R)-(l-氣-2·氣-甲氧基-3-芊氧基）丙烷。將 此氣甲基醚中間物溶於丙酮（3毫升）中，並逐滴將其加入 醋酸鉀（2.1克，21.4毫莫耳）存於丙酮（7毫升）之混合物中 。該混合物於包圍溫度下攪拌16小時。將固體濾除並將濾 液濃縮。將殘餘物吸收於20毫升甲苯中，並以飽和碳酸氫 鈉溶液（10毫升）與水（2 X 20毫升）萃洗。有機層通過硫酸 鈉乾燥。待過濾後，將濾液濃縮，並將殘餘物以通過矽石 凝膠之急驟色層分析術（己娱/乙酸乙酷=7 /1)純化，得到 (R)-(l -氣-2-乙酷氧基甲乳基-3-爷氧基）丙嫁（81〇毫克， 2.97毫莫耳），產率爲97%(異構物比例爲12:1)，呈無色 油。 B. (R)2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氡-嘌呤-9-基）甲氧基-i-氯- 3 -节氧基-丙坑 將經過矽烷基化之胍（1.09克，2.95毫莫耳）存於DMF (3.2毫升）之溶液加入8 1 0毫克（R) - (1 -氣-2 -乙醯氧基甲氧 -39- 本纸張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 434242 經濟部中央標準局員工消費_合作社印製 A7 B7 五、發明説明（37 ) 基-3-芊氧基）丙烷中。該溶液於13CTC下檀拌1小時後，再 將二氟甲績酸三甲基ί夕規酷引入。再於相同溫度下持續擾 拌4小時=將混合物冷卻至室溫，並於水與乙酸乙酯間進 行分配。水層以乙酸乙酯徹底萃取。將所組合之有機層通 過硫酸鎂乾燥’過濾並濃縮。殘餘物通過矽石凝膠進行色 層分析術純化’得到（R) 2 - (2 -胺基-1，6 -二氫-6 -氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1-氣-3- +氧基-丙規及其Ν-7異構物。Ν-9 對Ν - 7異構物之比例爲約2.3 : 1。 <：.(11)-2-(2-胺基-1，6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1-乙 酿氧基-3 -苄氧基-丙燒 將含有先前步驟所得產物，醋酸鉀（大過量）與D M F之混 合物加熱至迴流5，丨、時。將所形成之棕色混合物冷卻至室 溫*並通過一層希來特（C e 1 i t e)過濾。以甲醇沖洗過濾層 。將濾液蒸發並殘餘之D M F於眞空中去除。粗產物以通過 矽石凝膠之急驟色層分析術（CH2C〗2_甲醇：10: 1)純化， 而得到呈黃色固體之（R)-2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9 -基）甲氧基-1-乙醯氧基-3-芊氧基-丙烷已 D.(S )-2-( 2-胺基-1,6-二氫·6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1-芊 氧基·丙-3 -每 將（R)-2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1-乙醯氧基-3 -芊氡基-丙烷存於3 0。/。氨/甲醇（1 : 2)之混合物 ’於包圍溫度下攪拌1 8小時。將溶劑蒸發，並將殘留物與 少量甲醇研磨。將淡黃色固體收集而得到（S ) - 2 - (2 -胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）曱氧基-1-芊氧基·丙-3-醇3將 -40- 本纸張尺度逋用中國國家標隼（CMS)八4規格（210X297公釐> I I 装 I I ,tT • ^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 434^4 經濟部中央樣準局員工消費合作杜印製 A7 B7 五、發明説明（38 ) 母液濃縮，並將殘餘物從熱甲醇再結晶’而得到第二部分 產物。 實施例2 2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-1-笮氧基-丙-j -醉 A. 將N2 -乙酿基- 2- (2 -胺基-1,6 -二氮-6-氧-鳴冷-9-基） 曱氧基-1,3-雙（芊氧基）丙烷，54.2克（114毫莫耳）溶於迴 流中之乙醇（815毫升），並將環己烯（6 10毫升）於氮大氣下 加入。將氫氧化紅（16克）存於乙醇（50毫升）之漿狀物加入 反應混合物中，並將混合物於氮氣下迴流1 . 5小時。該熱 混合物通過希來特過濾，且濾液於旋轉蒸發器中濃縮。將 所得之粗反應混合物於矽石凝膠上進行層析術。以8 %甲醇 /92%二氣甲烷，再接著以1 0%甲醇/90%二氣曱烷溶析後 ’得到N2 -乙酷基·2-(2 -胺基-1,6-二氮-6-氧-嘴吟*-9 -基） 曱氧基-1，3-雙（苄氧基）丙烷（起始物質）（18.6克，16%)， 與N2 -乙酿基-2-(2 -胺基-1,6-二氮-6-氧-嗓吟-9-基）甲氧 基-1-辛氧基丙-3-醇（17.6克，40%) 3 B. 將N2 -乙酿基- 2- (2 -胺基-1,6 -二氮-6-乳-蜂吟-9-基） 甲氣基-1-苄氧基-丙-3-醇，21.9克（56.5毫莫耳），溶於 甲醇（200毫升）中，並將氫氧化按（1〇1毫升）加入。將混合 物於室溫下攪拌過夜3將乙醚（400毫升）加入該白色漿狀 物中，並將該混合物過濾。將沈澱依序連續以乙醇（1 〇 〇毫 升）’水（100毫升）及乙醚（100毫升）沖洗，並於高度眞空 下乾燥過夜，得到15.9克（46. 13毫莫耳，82%)2-(2-胺基 -41 - 本紙張尺度適用中困國家橾準（CNS > A4规格（210X297公釐） , 衮------·玎 (请先聞讀背面之注意事項鼻填寫本貢) 434242 A7 B7 五、發明説明（39 ) -1，6-二氫-6-氧-嘌呤_9-基）甲氧基_卜苄氧基丙-3_醇。 將濾液蒸發，並將所形成之懸浮液於乙醚（2〇〇毫升）中沈 澱，接著將其過濾並於高度眞空下乾燥，而得到額外之 2.3克（6.7毫莫耳’ 12°/。）產物》 C16H19N5〇4(345.36)之分析計算値：C，55.65; Η 5-55; Ν，20.28。實驗値：C，55.25; Η，5.60; Ν，20.12。 實施例3 胺基-丄，二氫-6-氩-嘌呤-9-基）甲氧某-3-幾基· 丙基-L -纈胺醢醅s举j備 ^ !^3^1^羞羰基）-1-纈胺酸2-((2-胺基-1，6-二氫-6-氣 _ϋ-9-基）曱氧基）-3-芏i臬-1-丙酯 經濟部中央標隼局員工消費i作杜印装 I 装 訂 {碕先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 將N-苄氧羰基-L-纈胺酸，43.66克（0.174莫耳，3當量 )’懸浮於二氣甲烷（72毫升）中，並將丨，3-二環己基羰二 亞胺，14.34克（69.5毫莫耳，1.2當量），加入。混合物於 氮氣下攪拌48小時。將混合物通過燒結玻璃濾器過濾，並 將白色固體殘餘物以二氣曱燒（7 5毫升）沖洗。將所組合得 之濾液於氮氣下攪拌，並將含2-(2-胺基-1,6-二氫-6·氧-喝呤-9-基）曱氧基苄氧基-丙-丨_醇，20克（5 7.91毫莫 耳’ 1當量）’存於90毫升二甲基甲醯胺之懸浮液加入，接 著再將1.77克（14.4毫莫耳，0.25當量）4-二甲胺基吡啶加 入。該混合物於氮氣下攪掉1 8小時，接著將其倒入1 2 0 0 毫升水中，並以含乙酸乙酯（3 5 0毫升）及曱苯（3 5 0毫升）之 混合物萃取。將水層分離，且有機層以6 0 0毫升半飽和碳 酸氫鈉，接著以水（200毫升）萃洗》將有機層通過硫酸鎂 -42- 本紙張尺度連用中围國家橾窣（CMS ) A4規格（210X 297公釐） 4^4242 A7 B7 五、發明説明（40 ) 乾燥，並於減壓下濃縮。殘餘物以含乙酸乙酯與環己烷之 混合物沈澱，而得到呈非晶形固體之N-(芊氧羰基）-L-纈 胺酸2-((2-胺基-1,6-二氫-6-氧，嘌呤-9-基）甲氧基）-3-苄 氧基-1-丙酯= B_费,氣化2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基^ 3-羥基-1-丙基-L-纈胺酸酯 經濟部中央橾隼局員工消-"合作杜印製 I 裝 "訂 f請先閲讀背面之注意事項再填MM4頁) 將224.8克1^-(苄氧羰基）-：1-纈胺酸2_(2-胺基-1，6-二氫 -6 -氧-嗓吟-9-基）甲乳基）-3- +氧基-1-丙S旨（0.39莫耳）落 於2升甲醇中，並將濃鹽酸（32.4毫升，0.39莫耳）逐滴加 入°將混合物置於氮氣下，並將67_4克碳上鈀加入。將現 合物於氫氣壓·力（40-100psi，平均80psi塵力）下進行氫化 作用4 8小時。將5克額外之碳上鈀加入，並且將混合物於 I 0 0 p s i下氫化2 4小時。混合物通過一層希來特過;慮，而且 殘餘物以1升甲醇沖洗。將濾液於減壓下蒸發至乾。將殘 餘物溶於150毫升水中，並加熱至60 3C。伴隨揽拌，將異 丙醇（8 3 0毫升）缓慢地逐滴加入，同時溫度維持於6 〇 - 7 〇 。將溶液緩慢冷卻至包圍溫度超過1 6小時_。將所形成之結 晶溶液加熱至30°C，並將另外220毫升異丙醇加入。令混 合4緩慢冷卻至最終溫度爲-U °C超過4小時。結晶以過慮 法分離’並以2 0 0毫升冰的2 %水/異丙醇沖洗，以得到氯 氣化2-(2-胺基-1,6-二氩-6-氧-嘌呤-9-基）曱氧基-3-經基 -1-丙基-L·纈胺酸酯（120.5克’產率79%) »該化合物之 相變化點爲142X：，並於175°C分解。 -43 - 本紙張尺度速用中國國家揉率（CNS ) A妨t格（2i〇X297公釐） 414242 A7 B7 五、發明説明（4l 經 濟 中 央 標 隼 員 消-I 作 社 印 製 胺碁+氧llL·氧-嘌呤-9-基）甲氣基-3-羥 基_-1 ·丙基 L -纈胺酸酯鹽類 將150克氫氣化2-(2-胺基- ΐ,6·二氫_6_氧·嘌呤·9_基） 甲氧基-3·羥基-1-丙基-L-纈胺酸酯溶於水中，並加熱至 5 0 - 6 0 °C。伴隨攪拌將異丙醇（8 3 〇毫升）緩慢逐滴加入，同 時溫度稍微上升至6 0 - 7 0°C。將溶液緩慢冷卻至2 5°C超過 2 〇小時。將所形成之結晶溶液加熱至3 〇 °c，並將另外2 2 0 毫升異丙醇加入。令混合物緩慢冷卻至最終溫度爲-irC 超過6小時。結晶以過濾法分離，並以2 〇 〇毫升冰的2 %水/ 異丙醇沖洗以得到氫氣化2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9 -基）曱氧基-3 -羥基-1 ·丙基-乙-纈胺酸酯結晶（1 3 5克， 9 0 %產率）。該化合物之相變化點爲丨4 2。匚，並jl於i 7 5 Ό 下分解。 以相同方法’可製備得2-(2,胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9 -基）甲氧基-3 -羥基-1 -丙基_ L -纈胺酸酯醋酸鹽結晶。 實施例5 氫氣化（S)-2-(2 -胺基-1,6 -二1-6 -氣-嗓呤-9-基）甲氧基- * 3 -起基-1-丙基-L-绳胺酸醋之製備 A. N·(芊氧羰基）-L -纈胺酸〇ι2-(2 -胺基-1,6 -二氫- 6-氧-嗓呤基）甲氧基-3-辛氣基-1-丙g| 將437毫克（1.74毫莫耳，3當量）N -苄氧基羰基-L-纈胺 酸，懸浮於I毫升二氣曱垸中，並將1 4 3毫克（0.7毫莫耳， 1 . 2當量）1，3 -二環己基羰二亞胺加入。該混合物於氮氣下 -44- 本紙張尺度適用中國圉家標车（CNS } A4規格（210X297公$ ) 經 濟 部 中 標 隼 局 貝 X 消 費 -合 作 杜 印 製 434242 A7 B7 五、發明説明（42 ) 槐拌4 8小時。將混合物通過燒結玻璃濾器過濾，並將白色 固體殘餘物以二氣甲烷（1毫升）沖洗。將组合得之濾液於 氮氣下撥掉，並將含（R) - 2 - (2 -胺基-丨，6 -二風-6 -氧·嗓吟_ 9-基）甲氧基-3-笮氧基-丙-卜醇，2 00毫克（0.58毫莫耳， 1當量），存於1 . 5毫升二甲基甲醯胺之懸浮液加入，接著 將18毫克（14.4毫莫耳，0.2 5當量）4-二甲胺基吡啶加入。 該混合物於氮氣下攪拌丨8小時，然後倒入12毫升水中，並 以含乙酸乙酯（3.5毫升）與甲苯（3.5毫升）之混合物萃取。 將水看分開，並將有機層以6毫升半飽和碳酸氫納，接著 以2毫升水萃洗。將有機層通過硫酸錢乾澡，並於減壓下 濃縮。將殘餘物以含乙酸乙酯與環己烷之混合物沈澱，而 得到呈固體之N-(苄氧羰基）-L-纈胺酸（S)-2-(2-胺基. 1,6 -二氫-6 -氧-漂吟-9 -基）甲氧基）-3 -罕氧基-1-丙酷。 B_氫氣化（S)-2-(2 -胺基-1,6-二盡.-6-氧-嘌呤-9-基）甲_ 氧基-3 -經基-1 -丙基-L -纈胺酸酯 將225毫克（3.9莫耳）N-(苄氧羰基）-L-纈胺酸（S)-2-(；2-胺基-l，6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基）：3-苄氧基-l-丙 酯溶解於1 2毫升甲醇中，並將〇. 3毫升（3.9毫莫耳）濃鹽酸 加又。該混合物置於氮氣下並將6 7 4毫克碳上鈀加入3將 混合物於氫氣壓力下（40-l〇〇psi ,平均8〇psi壓力）進行氩 化作用4 8小時。將另外5 0毫克碳上把加入，並將混合物於 .1 〇〇pSi下氫化24小時。將混合物通過一層希來特過濾，且 殘餘物以1 0毫升甲醇沖洗。將濾液於減壓下蒸發至乾。將 殘餘物溶於水（1 .5毫升）中，並加熱至6。將異丙醇（8 -45 - 本紙張尺度通用中國圉家標準（CNS ) A4規格（21〇χ297公羡） (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ，-° 經濟部中央捸準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（43 ) 毫升）伴隨揽拌緩慢加入，同時將溫度維持於6 0 - 7 0 °C。將 i液緩’1¾冷卻至包圍溫度超過1 6小時。將所形成之溶液加 熱至3〇C ’並將另外2毫升異丙醇加入。令混合物緩丨艾冷 卻至-11°C超過4小時。結晶以過濾法分離並以2毫升冰的 2/ό水/異丙醇沖洗，而得到氫氣化（s)_2_(2_胺基-1,6 -二 氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3-羥基-i-丙基_L_纈胺酸酯。 實施例6 二網胺酸）2-(2-胺基-1.6-二 f.-6-1-嘌 + -9-基）甲 丙二醇雙醋酸鹽製備2_(2_胺某-Ί 6_二氪·6-氧_ 嘍吟-9-基）甲1基-3羥基-1-丙基-1_纈胺酸酯醋酸鹽 將雙-L-纈胺酸2-((2-胺基-1,6-二氫-6·氧-嘌呤-9-基） 甲氧基）-1,3 -丙二酯雙醋酸鹽，100毫克（含有0.6當量過 量之醋酸之冷凍乾燥樣本，〇」64毫莫耳（=總共含0.426 毫莫耳醋fe));.客於去離子水（0.4毫升）中，並添加24毫升 0.0 I5IVI氫氧化鈉溶液卜〇 36毫莫耳）將其部分中和。將混 合物置於室溫下67小時。將樣本以兩等量份注入製備用逆 相 HPLC管柱上（YMC-Pack, ODS-AM_DM-33-5, 2x 2 5 0毫米；Y M C公司）。以含1 0 %曱醇/ 9 0 % 0 . 1 Μ經酯酸 緩衝至pH 4之醋酸銨之溶劑系統，流速：9.5毫.升/分鐘及 偵測儀設定於2 56毫微米，來完成分離。將代表單酯產物 二種非鏡像異構物之兩高峰收集。將溶劑於高眞空下去除 至約2毫升’並將殘餘物由含有醋酸（〇 . 1 %)之水冷凍乾燥 兩次以去除緩衝液。分離得45毫升克（0.1 12毫莫耳=68%) 呈具有兩種鏡像異構物之混合物之L-纈胺酸2-((2-胺基- -46 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210'乂297公麓了 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 五、發明説明（44 ) A7 B7 經 濟 部 中 央 標 準 局 員 工 消 費 _合 作 杜 印 % 1,6-二氫-6-氧-9H-嘌呤-9-基）-乙氧基）-3-羥基-1-丙酯 醋酸鹽，其具有下列NMR光譜之特性高峰：iHNMR (300 Mhz) DMSO-d6 溶液· 7.78 (1H，s, H C-8), 6.48#6.45(2br.s.,2H，NH2)，5.44(mAB，J=llHz) 與 5.43 (s)共 2H, CH2; 1.91 (s，3H, CH3C00-)， 0.83+ 0.82 (2d, J = 7 Hz, 3H, CH3 ), 0.75 + 0.76 (2 d, J = 7 Hz, 3H, CH3) » 實施例7 (R,S) 2-(2-胺基-1，6-二氣-6-氧基-嘌呤-9-基）甲氧基-3-羥基-1-丙基-L-纈胺酸酯之分離 將含（R,S)2-(2-胺基-1,6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基 -3-羥基-1-丙基-L-纈胺酸酯（1.66克），存於90% 0. 1M醋 酸銨（經醋酸酸化至p Η 4)及1 0 %甲醇（9.6 0毫升）之溶液， 裝載於YMC-Pack ODS-AM HPLC管柱（目綠編號DM-33-5 :尺寸，250X20毫米内徑；顆粒，S-5毫米，120 埃），分成48次注射，每次200微升，使用移動相之90%經 醋酸酸化至pH 4之醋酸銨及10%甲醇，以9.5毫升/分鐘進 行溶析》吸收高峰係使用卡那爾可變式波長偵測器（設定於 2 5 €毫微米）測定，並以手動方式收集流分。收集得三組流 分，高峰1 (滯留時間24.4分鐘），介於高峰1，2間之重疊區 ，以及高峰2(滯留時間27.8分鐘）=將各组流分組合，於 減壓下蒸發去除甲醇，然後經冷凍乾燥以去除剩餘之揮發 性組成。將殘餘物溶於水，以醋酸酸化至p Η 4並再次冷凍 乾燥，產生高峰1(1.57克）與高峰2(0.91克）=將產物使用 -47- 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) Α4現格（2丨0X2H公釐） fc經濟部中央標準局員工消費_合作社印製 4 A7 B7 五、發明説明（45 ) YMC-Pack ODS-ΑΜ管柱（目錄編號RM_33_5 ;尺寸， 25“4.6毫米内徑；顆粒，弘5毫米，12〇埃），以移動相 之90% 0.1M醋酸銨（經醋酸酸化至pH 4)及1〇%甲醇，* 速爲0.5毫升/分鐘溶析，進行Hp LC分析，結果指示言 峰1(於製備用管柱上之滯留時間爲24 4分鏠）含有由 70.8%高峰1(滯留時間211分鐘），26 4%高峰2(滯留時 間2 4.6分鐘），以及2.8%完全水解產物（滯留時間12 4分 鐘）組成之混合物；而高峰2(於製備管柱上之滞留時間爲 2 2‘0分鐘）含有由68.5%高峰2(滯留時間2〇2分鐘）’275 高峰1 (滯留時間2 〇 . 2分鐘）及4%完全水解產物（滞留時間 11，6分鐘）组成之混合物。將高峰2(〇 91克）與高峰丨（〗57 克）分別溶於3.6 0毫升含9 〇 % 〇 , 1 Μ經醋酸酸化至p H 4之 醋酸銨及10%甲醇之溶液中，並再次使用上述所列示之 統以每次200毫升分1 8次注射純化。收集得對應於高峰 與2之兩组流分，各別组合後，經於減壓下部分蒸發以 除曱醇’並將殘餘物冷凍乾燥以去除剩餘之揮發性組成 將各組流分得到之殘餘物溶於水，小心地0醋酸酸化至p H 4 ’並再次冷凍乾燥。對應於高峰1之流分產生白色蓬鬆狀 固體（0.70克），其曝露於空氣時呈現易吸濕性；以hPlc 分析（如前所述進行）指出：此物質爲含有94 9%高峰丨（滯 留時間2 K 1分），4.6 %高峰2 (滞留時間2 6.7分）及〇 5 %完 全水解產物（滯留時間1 I 8分）之混合物：1 Η N M R分析 (d6DMSO’所引用之d値相對於四甲基石夕燒爲内標準） 示特性高峰：d 5.43 (mAB, 2Η, JAB=ii.iHz, 系 去 顯 d ^^1 - (H - 1 ml _ I I! - 1^1 n^i - - - (請先閱讀背面之注意i項再填窝本頁) -48 - 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS )八4说格（210X297公釐） 43L42 42 · A7 __87 ......... 五、發明説明（46 ) 5.44,dB 5.43 ), 3.02 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 〇·82 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.75 (d, 3H，J = 6.8 Hz)。對應於高峰2 之流 分產生白色蓬鬆狀固體（0.81克），其曝露於空氣時呈現易 吸濕性：以HPLC分析（如前所述進行）指出：此物質爲含 有9 1.0%高峰2(滞留時間29.8分），8.4%高峰U滯留時間 2 8.4分）及0.6 %完全水解產物（滞留時間1 4 · 4分）之混合物 ;1H NMR分析（d6DMSO，所引用之d値相對於四曱基矽 烷爲内標準）顯示特性高峰：d 5,43 (s，2H)，2.99 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 0.83 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.76 (d, 3H, J = 6.8 Hz) 0 實施例8 (N-芊氧基羰基）-L-纈胺酸（R) 2-(2-胳某-1,6-二氫· 6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3-芊氣基-1-丙酯之製備 經濟部中央標準局員工消費合作杜印繁 ---------装 —-----訂 >- (請先閲讀背面之法意事項再嗔寫本頁)

於氮氣下將1,3 -二環己基羰二亞胺（134毫克，0.65毫莫 耳’ 1.5當量）加至N-笮氧基羰基-L-纈胺酸（327毫克， 1.30毫莫耳’ 3當量）溶於二氣甲烷（25毫升）之溶液中，並 將反應混合物於室溫下攪拌1 3.5小時。將所形成之混合物 過濾去除不可溶物質，並於減壓下使用旋轉蒸發器將溶劑 蒸發掉°將所形成之白色泡涞溶於乾燥DMF(10毫升）中， 並將其直接加入（S)-2-(2 -胺基-1，6 -二氫-6 -氧-嗓吟-9-基 )甲氧基-3-爷氧基-1-丙-1-醇（150毫克，0.43毫莫耳，1 當量）亦存於乾燥DMF(10毫升）之溶液中。將4,4 -二甲胺 基^比啶（13毫克’ 0. 1 I毫莫耳，0.25當量）加至該DMF溶 液中’並將反應混合物於室溫下攪拌2 7小時，即經由T L C -49- 本紙伕尺度適用中國國家搮準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 _ B7 五、發明説明（47 ) 分析指示起始物已消耗完時。將反應混合物於減壓下蒸發 ，並將粗產物以急驟層析術（使用移動相之9 5 %二氣曱烷 ，5%甲醇）純化，而得到呈非晶形固體之標題化合物（ι58 毫克，63%)。 經濟部中失標準局員工消费合作社印製 ------- n , 裝-1* It---訂 >* (請先閎讀背面之注意事項再填寫本頁) B -風鼠化（R)-2-(2 -胺基-1,6 -二氮-6-氧-喝吟-9 -基）甲 氧基-3-羥基-1-丙基-L-纈胺酸酯之製備 將（N-苄氧基羰基）-L-纈胺酸（R)-2-(2-胺基-l，6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3-苄氧基-1-丙酯（158毫克， 0.27毫莫耳）溶於甲醇（15毫升）中，並將濃鹽酸（24毫升， 0.27毫莫耳）加入。將混合物置於氮氣下，並將%碳上 鈀（48毫克）加入。將混合物於巴爾（pa rr)搖動器中，於氫 氣（壓力爲50psi)下進行氫化作用5小時。將混合物通過一 層希來特過濾，並以甲醇（2 5毫升）沖洗殘餘物。將所組合 得之濾液與沖洗物於減壓下蒸發，產生標題化合物（1 〇 7毫 克，95°/〇)。該產物經使用YMC-Pack ODS-AM管柱（目 錄編號尺1^-33-5:尺寸，250乂4.6毫米内徑；顆粒，5-5 毫米，120埃）之HPLC分析（以移動相之9Q% (KIM經醋酸 酸化至pH 4之醋酸銨，及10°/。甲醇，流速〇5毫升/分溶析 )指示，其爲85:15含（R)與（S)非鏡像異構物之混合物。 實施例9 鼠類中口服吸收（生物可利用性）之測定 下列分析係用以測定式I化合物（甘希可羅威之L -單纈胺 酸酯）及其它甘希可羅威胺基酸酯，其它甘希可羅威酯與醚 類之口服吸收（口服生物可利用性），以作爲對照比較。 -50- 本紙張尺度遺用中國國家標準（CNS ) A4规格（210x 297公釐） 434242 經濟部中央檫隼局員工消費合作杜印裝 A7 ____B7_ 五、發明説明（48 ) 爲測量一化合物之口服生物可利用性，首先要測定該化 合物於單一口服（po)劑量之後，其於雄性鼠類中之血漿濃 度。爲測量一前藥之口服生物可利用性，首先要測定在前 藥之單一 口服劑量之後’活性化合物（於本發明係指甘希 可羅威）於雄性鼠類中之血漿濃度。然後測定活性化合物（ 甘希可羅威）於單一靜脈内（iv)劑量之後，其於雄性鼠類中 之血衆濃度。對於於甘希可羅威而言，各方法中（口服與靜 脈内）之單一劑量爲10毫克/公斤：對於前藥酯類（包括甘 希可羅威之-L-單纈胺酸酯）而言，各方法中（口服與靜脈内 )之單一劑量爲與1 0毫克/公斤甘希可羅威等莫耳之劑量。 由此一項於口服與i v施藥後之測量，一化合物之口服生物 可利用性，係藉將於口服施藥後濃度對時間曲線下之總面 積’除以靜脈内施藥後濃度對時間曲線下之總面積，而計 算得’其適當地依劑量校正，計算公式如下： Ρ(ρ.0·)(%) = [Αυ(：(ρ.ο·)/Αυ(：(Ιν·)】χ [劑量（i.v 劑量（p. 0 ) ] X 1 〇 〇 Α ϋ C (曲線下之總面積）値係經過〇 - 2 4小J争分析完整時間 而計算得。 用於口服與靜脈内劑量之劑量賦形劑，由含有2 %醋酸之 生理鹽水組成。於二種方法中，化合物濃度相當於4 〇毫 克/$升甘希可羅威’其劑量率相當於1〇毫克/公斤（2 5毫 升/公斤）甘希可羅威。一隻200克重之老鼠，以餵給方式 接受0.5毫升口服藥劑溶液，或以注入尾靜脈之方式接受 〇 5毫升溶液3 -51 - 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（2[0X297公釐） '~~~' ------- I Hi In - I ^^1 i I - -- 1 !i In ^^^1 i rll9J (請先閎讀背面之注意事項再填寫本頁) 434242 A7 B7 五、發明説明（49 ) 令老鼠適應實驗室環境三天，並於開始實驗之前先予 斷食過夜，直到接受劑量後4小時爲止。各於下列時間， 從4隻老鼠收集血液：〇分（劑量-前）’ 5分（僅靜脈内），15 分’ 3 0分，Ϊ小時，2小時，3小時’ 5小時’ 7小時，1 〇小 時與2 4小時。將血液立即離心而得到血聚，並將血漿冷東 於-2 0 C下，直到分析時a 血漿中甘希可羅威之分析 將一部分血漿（0,50毫升）與0.020毫升内標準物（非環可 羅威，15微克/毫升存於1〇。/0曱醇/水），及3.0毫升乙腈混 合。將混合物渦動，並將形成之沈澱以離心法（4，0 0 0 g， 10分鐘）去除。將上清液於氮氣下蒸發至乾，並於200微升 HPLC移動相中重建。取〇.〇5毫升之量以使用凱斯頓 (Keystone) Hypersil BDS，2 5 0 x 4.6 毫米 C ΐ 8 管柱之 HPLC分析°該移動相含有2%乙腈，存於30mM含5mM庚 磺酸之磷酸鈉緩衝液，pH 2.0，並以1.0毫升/分之速率打 入》藉由於2 5 4毫微米之U V吸收，偵測並測量甘希可羅威 與内標準物之量。 . (请先閱讀背&之注意事項再填寫本莧) 經洗部中央樣準局貝工消1合作杜印製 -52- 本紙張尺度適用中國國家搮率（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 434242 A7 B7 五、發明説明（50 ) 口月良生物可利用性 化合物 口服生物可利用性 參考資料 σ岛） 甘希可羅威(G) {2-(2-胺基-1，6-二鼠·6-氧-嗓吟-9-基 )-甲氧基-1，3-丙二醇} 7.9 美國專利4,355,032 G-雙(丙酸)醋 17.7 J. Pham. Sci. 76, 180-184(1987) G-雙(I:纈胺酸)醋 52.0 歐洲專利375 329 G-L-纈胺酸酯笮基醚 無法測得 — G-雙(苯基甘胺酸酯)醚二醋酸鹽 8.18 — G-二芊基醚 本發明之胺基酸酯 無法測得 G-L-纈胺酸酯醋酸鹽 84.0 氫氣化G-L-纈胺酸酯 98.1 實施例1 0 ^^^1 ^^^^1 —m nn 1 ^^^^1 w ftc^^i flmf I 『 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 於獼猴中口服吸收（生物可利用性）之測定 以下分析係用以測定式I化合物於獼猴中之口服吸收（口 服生物可利用性）。 - 動妙，劑量與樣品收集 使用體重爲5至7公斤之雄性镧猴。餵給動物猴飼料，水 果與水，並維持於1 2小時光照週期。將測試化合物調配於 食鹽水中，濃度與1 0毫克/毫升甘希可羅威食鹽水溶液等 莫耳。口服配方以餵給率爲1.0毫升/公斤，最終劑量等莫 耳於10毫克/公斤甘希可羅威劑量，之方式施藥。甘希可 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS)A4規格（210X 297公釐） 經濟部中央橾窣局貝工消費合作杜印裝 A7 B7 五、發明説明（η ) 羅威之靜脈内注射配方’係以含有0 2 〇/〇HC 1之鹽水調配成 濃度爲20毫克/毫升’並以〇.5毫升/公斤之比率施藥。 動物於施予劑量f的傍晚開始禁食，直到施予劑量之後 4小時爲止。從每隻猴子，於施予劑量後〇 (劑量前），5分 鐘（僅靜脈内），1 5分，3 0分，1小時，2小時，3小時，5 小時，7小時’ 10小時與24小時，抽取再血液樣本。將血 液樣本收集於含肝素之注射器中，並立即以離心分離血漿 ，再冷康於·20〇下直至分析。 血漿中甘希可羅威之分析 將一部分（0.5毫升）血漿與0.020毫升内標準物（非環可 羅威，15微克/毫升存於1〇%甲醇/水），及3 〇毫升乙腈混 合°將混合物渦動，並將形成之沈澱以離心法（4, 〇 〇 〇 g， 10分鐘）去除。將上清液於氮氣下蒸發至乾，並於200微升 HPLC移動相中重建。取〇.〇5毫升之量以使用凱斯頓

Hypersil BDS，250X 4.6 毫米 C18 管柱之 HPLC分析。 該移動相含有2%乙腈，存於30mM含5mM庚磺酸之嶙酸 鈉緩衝液中’ pH 2.0 ’並以1‘0毫升/分鐘_之速率打入。藉 由於2 5 4毫微米之U V吸收，偵測並測量甘希可羅威與内標 準物之量。 生物可利用性（F)係依照實施例9中所給予之方程式計算 得。 該如藥2-(2 -胺基-1,6 -二鼠-6-礼-嗓吟-9 -基）-甲氧基· 3 -獲基-1 -丙基-L -纈胺酸酯，具有之口服生物可利用性爲 ：>5.7/ί»。2-(2 -胺基-1,6 -二氬-6-乳-嗓吟-9-基）-甲氧基_ -54 - 本紙張尺度適用中國國家棣準（CNS ) A4规格（2丨0X 297公釐） 裝 訂 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 434242 A7 B7 五、發明説明（52 ) 1,3 -丙二基-雙-L-纈胺酸酯，具有之口服生物可利用性爲 2 3.5 %。甘希可羅威具有之生物可利用性爲9 · 9 %。以口服 給予相同猴子相同前藥，及以靜脈内注射甘希可羅威，得 到該前藥之平均口服生物可利用性爲4丨.6% a 實施例11 以下實施例爲推荐之甘希可羅威L-纈胺酸單酯膠囊，其 含有作爲賦形劑之聚乙烯基吡咯烷酮，黏合劑；榖類澱粉 ’崩解劑；與硬脂酸，潤滑劑及助流劑；其被充填於兩片 硬明膠膠囊殼中。水爲使粒化液體，其實質上於製作過程 中去除。 甘希可羅威L-纈胺酸單酯之定量組合物 膠囊 (每日三次，每次一顆膠囊） 成份 每顆膠囊 ％ __重宜(毫克）（W/W) 氫氧化甘希可羅威L-纈胺酸單酯 390.00 92.75 聚乙烯基吡咯烷酮 12.61 3.00 榖類澱粉 16.81 " 4.00 硬胝酸1 1.05 0.25 總充填重量(理論値)3 420.47 100.00 將粉末摻和物充填於兩片硬明膠膠囊殼中。 1硬脂酸之含量可於〇. 1 %至5.0 %(重量）之間變化。 經 濟 部 中 標 準 為 Ά 工 消 _費 合 作 社 印 製 2水之含量可變化而產生可接受之顆粒化作用，並將其 乾燥去除》 ' -55 - 本紙張尺度遴用中國國家搮率（CNS } A4規格（210X 297公疫） 434 434 經濟部中央橾隼局員工消i合作社印製 (每天三次， 膠囊 每次二顆膠囊） % (W/W) 成份 每顆膠囊之 重量(毫克） 氩氧化甘希可羅威L-纈胺酸單酯 312.00 92.75 聚乙烯基吡咯烷酮 10.09 3.00 榖類澱粉. 13.45 4.00 硬脂酸1 0.84 0.25 水2 總充填重量(理論値)3 336.38 100.00 將粉末摻和物充填於兩片 硬明膠膠囊殼中。 A7 B7 五、發明説明（53 ) 3總充塡重量（理論値）不包括出現於最終產物中之殘餘 濕度。 甘希可羅威L -纈胺酸單酯之定量組合物 1硬脂酸含量可於0· 1 %至5.0%(重量）之間變化3 2水之含量可變化而產生可接受之顆粒化作用，並將其 乾燥去除。 3總充填重量（理論値）不包括出現於最終產物中之殘餘 濕度。 製作甘希可羅威l-纈胺酸單酯膠囊之方法m 1.將甘希可羅威L -纈胺酸單酯與一部分榖類澱粉，於適 宜之混合機中掺合。 2 .將聚乙缔基吡咯烷酮伴隨攪拌，溶解於水中。 3 .將（2)加入（1)中，同時繼續混合以形成顆粒化。 -56- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐} (請先閎讀背面之注意事項再填寫本頁}

T 43^242 A7 ___B7____ 五、發明説明（54 ) 4 .將濕顆粒研磨（若需要）。 5 將濕顆粒於乾燥器中乾燥。 6. 將乾燥顆粒，剩餘之榖類澱粉，以及硬脂酸通過粉碎機。 7. 將（6)置於適宜之混合機中摻合。 8. 將適當量之（7)，封膠於兩片硬明膠膠囊殼中。 1 ] I 訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中夹標準局員工消費合作社印製 和 -57- 本紙張尺度適用中國國家標準{ CNS ) Α4*ϊ格（210X297公釐）

Claims (1)

1. Λ3424.2 第841〇7779號專利申請案 ί| 中文申請專利蓺闺修正本（89年8月、品 申請專利範圍 1- 一種2-(2 -胺基-1，6 -二氫·6 -氧-嘌呤一9 -基）甲氧基-3-超 基-1-丙基-L-绳胺酸醋化合物，或其藥學上可接受之鹽 類’以其（R)-或（S)-非鏡像異構物之形式，或以此二種 非鏡像異構物混合物之形式存在。 2 .根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該混合物含有等 量之（R)-或（S)-非鏡像異構物。 3. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該藥學上可接受 之鹽類為氫氣化物或醋酸鹽- 4. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其為結晶形a 5. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其為（r)-2_(2-胺基 -1，6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3-羥基-1-丙基-乙_ 纈胺酸酯，及其藥學上可接受之鹽類》 6·根據申請專利範圍第1項之化合物，其為（S)-2-(2-胺基 -1，6 -二氩-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3 -羥基-1-丙基_L-纈胺酸酯，及其藥學上可接受之鹽類。 7. 根據中請專利範圍第5或第6項之化合物，其中該鹽類為 氩.氣化物。 8. 根據申請專利範圍第5或6項之化合物，其中該鹽類為醋 酸鹽。 9. 一種用於抗病毒治療之醫藥組合物，包含根據申請專利範 圍第1至8項中任一項之化合物，視需要地包括一種藥學 上可接受之賦形劑或載體物質》 10. 根據中請專利範園第9項之醫藥組合物，其係用於靜脈内 施藥》 本纸浪尺度逋用中國gj家揉芈（CNS > A4规格< 210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) t 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印装

   Λ3424.2 第841〇7779號專利申請案 ί| 中文申請專利蓺闺修正本（89年8月、品 申請專利範圍 1- 一種2-(2 -胺基-1，6 -二氫·6 -氧-嘌呤一9 -基）甲氧基-3-超 基-1-丙基-L-绳胺酸醋化合物，或其藥學上可接受之鹽 類’以其（R)-或（S)-非鏡像異構物之形式，或以此二種 非鏡像異構物混合物之形式存在。 2 .根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該混合物含有等 量之（R)-或（S)-非鏡像異構物。 3. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該藥學上可接受 之鹽類為氫氣化物或醋酸鹽- 4. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其為結晶形a 5. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其為（r)-2_(2-胺基 -1，6-二氫-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3-羥基-1-丙基-乙_ 纈胺酸酯，及其藥學上可接受之鹽類》 6·根據申請專利範圍第1項之化合物，其為（S)-2-(2-胺基 -1，6 -二氩-6-氧-嘌呤-9-基）甲氧基-3 -羥基-1-丙基_L-纈胺酸酯，及其藥學上可接受之鹽類。 7. 根據中請專利範圍第5或第6項之化合物，其中該鹽類為 氩.氣化物。 8. 根據申請專利範圍第5或6項之化合物，其中該鹽類為醋 酸鹽。 9. 一種用於抗病毒治療之醫藥組合物，包含根據申請專利範 圍第1至8項中任一項之化合物，視需要地包括一種藥學 上可接受之賦形劑或載體物質》 10. 根據中請專利範園第9項之醫藥組合物，其係用於靜脈内 施藥》 本纸浪尺度逋用中國gj家揉芈（CNS > A4规格< 210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) t 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印装