KR960002849B1

KR960002849B1 - 아사이클로비르의 발린 에스테르 및 이를 함유하는 약학 조성물

Info

Publication number: KR960002849B1
Application number: KR1019880010298A
Authority: KR
Inventors: 안토니 크레니트스키 토마스; 마리 비이쳄프 리리아
Original assignee: 더 웰컴 파운데이숀 리미티드; 엠. 피. 잭슨
Priority date: 1987-08-15
Filing date: 1988-08-12
Publication date: 1996-02-27
Also published as: DK170803B1; DK170045B1; LU88746I2; DE3855333D1; AP55A; IL87434A0; AU612393C; SG26346G; KR890003761A; PT88261A; PT88261B; IE882463L; IL87434A; CS276903B6; SU1634138A3; NO167805C; JPH03115284A; PL274215A1; EP0308065A3; JPS6468373A

Abstract

내용 없음.

Description

아사이클로비르의 발린 에스테르 및 이를 함유하는 약학 조성물

본 발명은 항비루성을 가지는 9-(2-히드록시에톡시메틸)구아닌의 신규의 에스테르에 관한 것이다.

아사이클로비르로서도 공지되어 있는 9-(2-히드록시에톡시메틸)구아닌은 항비루스 활성, 특히 헤르페스비루스에 대한 활성을 가진다. 이에 대해서는 문헌[H.J. Schaeffer외 다수, "Nature", 272 583-585(1978)], 영국 특허 제1523865호 및 미합중국 특허 제4199574호를 참조할 수 있다. 그러나, 아사이클로비르는 물에 대하여 극히 난용성이므로, 수용성이 요구되는 수성 약학 제제로 약물을 처방할때 한계가 있다.

또한 아사이클로비르는 경구 투여후 위장관으로부터 소량만이 흡수된다(쥐를 사용하여 테스트했을때 뇨중의 회수율 15%, 인체 테스트 20%). 이러한 낮은 생체내효율로 말미암아 혈장중에서 유효한 항비루스 농도를 취득하고 유지하기 위해서는 다량의 약물을 투여해야 한다.

유럽 특허 제99493호는 아사이클로비르보다 수용성이 큰 아사이클로비르의 아미노산 에스테르, 구체적으로 글리신과 알라닌 에스테르를 기술하고 있다.

본원 발명자들은 α-탄소원자에 인접한 측쇄 분지를 특징으로 하고, 유럽 특허 제99493호에는 개시되어 있지 않으며, 상기 특허에 기술된 알라닌과 글리신 에스테르에 비해, 경구 투여후 향상된 생체내 효율을 나타내는 아사이클로비르의 발린 에스테르와 이소로이신 에스테르를 발견하였다.

본 발명에 의해, 하기 일반식(I)의 화합물 및 이의 약학적 허용 염이 제공된다 :

상기 식에서 R₁은 일반식 -CH(CH₃)₂또는 -CH(CH₃)CH₂CH₃으로 표시되는 기이다. 상기 일반식(I)의 화합물은 2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시)-에틸-L-발리네이트 및 2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시)에틸 L-이소로이시네이트로 명명될 수 있다. 발린과 이소로이신 부분은 D, L 또는 라세미체 DL 입체 배열 상태로 존재할 수 있으며, L-형태가 바람직하다.

쥐를 이용한 테스트에서, 경구투여후, 아사이클로비르(투여 용량%)로서 뇨중 회수율을 측정한 결과 본 발명의 화합물이 기타의 에스테르 및 아사이클로비르에 비해 식도로부터의 흡수율이 큰 것으로 나타났다. 이것은 소량의 약제를 투여하여 경구 흡수후 혈장내에서 여전히 동일한 약물의 농도를 제공할 수 있음을 보여준다. 발리네이트 화합물은 식도로부터의 흡수성이 매우 우수하므로 특히 바람직하다.

비교적 높아 생체네 효율을 갖는 것 이외에도, 본 발명의 화합물은 시험관내에서 아사이클로비르와 동일한 항비루스 효능을 가진다. 따라서, 본 발명의 화합물의 생체내효율 증가는 항비루스성 효능을 감소시키면서 얻어지는 것이 아니다. 실제로 특정의 임상 적용예에서, 예를 들면 기질 각막염의 치료시에, 특정의 아미노산 에스테르는 아사이클로비르보다 탁월한 치료 효능을 나타내는 것으로 밝혀졌다(유럽 특허 제99493호).

일반식(I)의 화합물의 약학적 허용 염은 적합한 산, 예를 들면 염산, 황산, 인산, 말레산, 푸마르산, 시트르산, 주석산, 젖산, 아세트산 또는 P-톨루엔설폰산으로부터 유도된 산 첨가염인 것이 바람직하다. 일반식(I)의 화합물의 염산염이 특히 바람직하다.

동물 시험에서, 일반식(I)의 화합물을 경구 투여함으로써 혈장내에 측정 가능한 농도의 아사이클로비르가 생성되는 것으로 밝혀졌다. 그러므로 본 발명은 또한 상기 일반식(I)의 화합물 또는 이의 약학적 허용염을 포유동물에게 투여함으로써 생체내에서 아사이클로비르를 생성시키는 방법을 제공한다.

본 발명의 화합물은 통상적인 방법. 예를 들면 후술되는 방법에 의해 제조할 수 있다.

따라서, 본 발명은 또한 상기 일반식(I)의 화합물 및 이의 약학적 허용 염의 제조방법을 제공하며, 본 발명의 방법은

a) 하기 일반식(II)의 화합물을 임의로 보호된 발린 또는 이소로이신 또는 그것의 기능성의 등가물의 함께 반응시키거나 ;

b) 하기 일반식(III)의 화합물을 상기 일반식(I)의 화합물 또는 이의 약학적 허용 염으로 전환시키거나 ;

c) 하기 일반식(IV)의 화합물을 하기 일반식(V)의 화합물과 반응시키고, 그 후에 필요한 순서대로 i) 보호기를 제거하는 단계 ; 및 ii) 수득한 생성물이 일반식(I)의 화합물일 경우, 이것을 약학적 허용 염으로 전환시키는 단계 ; 및 iii) 수득한 생성물의 일반식(I)의 화합물의 약학적 허용 염일 경우, 이것을 모체 화합물로 전환시키는 단계중 하나 또는 그 이상의 전환단계를 수행하는 것을 포함한다 :

ACH₂OCH₂CH₂OCOCH(R₁)R_{2 (Ⅴ)}

상기 식들중, X는 임의로 보호된 히드록시기이고, Y는 임의로 보호된 아미노기이며, R₁은 -CH(CH₃)₂기 또는 -CH(CH₃)CH₂CH₃

기이며, M은 히드록시기이고, G는 아미노기에 의해 치환될 수 있거나 또는 아미노기로 전환될 수 있는 원자 또는 기이거나, 또는 G는 아미노기이며, M은 히드록시기에 의해 치환될 수 있거나 또는 히드록시기로 전환될 수 있는 원자 또는 기이고, Q 및 A는 이탈기 또는 이탈 원자이며, R²는 임의로 보호된 아미노기이다.

상기 방법 a)에서, 에스테로화 반응은 통상적인 방식으로, 예를 들면 피리딘 또는 디메틸포름아미드와 같은 용매중에서, N,N-디사이클로헥실카르보디아미드와 같은 결합제의 존재하에서, 임으로 4-디메틸아미노피리딘과 같은 촉매성 염기의 존재하에 수행할 수 있다.

반응중에 형성된 물은 필요에 따라 통상적인 방법으로, 예를 들면 물과 결합하는 물질을 첨가함으로써 또는 증류시킴으로써 제거할 수 있다. 차후에, 반응 생성물로서 얻은 에스테르는 통상적인 방법으로 유리시킬 수 있다.

발린 또는 이소로이신 자체를 사용하는 대신에, 이러한 산의 기능성 등가물, 예를 들면 산 염화물과 같은 산 할라이드 또는 산 무수물을 사용할 수 있다. 이러한 경우에는 바람직하지 않은 부-반응을 피하기 위하여, 아미노-보호 유도체를 사용하는 것이 유리하다. 바람직한 아미노-보호기의 예로는 아실(예 : 아세틸과 같은 C_1-4알카노일) 및 아릴옥시카르보닐(예 : 벤질옥시카르보닐)을 들 수 있다. 적합한 아미노 보호 유도체의 예를 들면 아미노산의 아미노기가 아지도기로 치환된 유도체이다.

방법 b)에 의해 일반식(III)의 화합물을 일반식(I)의 화합물로 전환시키는 단계는 다양한 방법으로 수행할 수 있다. 예를 들면 G는 탄소/팔라듐과 같은 적합한 촉매를 사용하는 접촉 수소첨가 반응에 의해 아미노기로 환원될 수 있는 아지드기일 수 있다. 또한 G는 예컨대 탄소/팔라듐의 존재하에 수소를 사용하는 접촉 수소첨가 반응에 의해 차후에 아미노기로 전환될 수 있는 아지드기로 전환될 수 있는 할로겐 원자 또는 알킬티오 또는 알킬설포닐기일 수 있다. 일반식(I)의 화합물을 제조하기 위해, M이 아미노기인 일반식(III)의 화합물은 예를 들면 아데노신 디아미나제와 같은 탈아민과 효소로 처리함으로써 수산기로 전화시킬 수 있다.

이 방법은 기타의 통상적인 방법과 함께 문헌[Fused Pyrimidines, Part II, Purines, D. J. Brown 편집(1971), 윌리-인터사이언스]에 기술되어 있다.

방법 (c)에서, 일반식(IV)중의 기 Q는 예를 들면 수소원자 ; 아실기, 예를 들면 아세틸기와 같은 C_1-4알카노일기 또는 벤조일기와 같은 아로일기 ; 또는 트리메틸실릴기와 같은 트리 C_1-4알킬실릴기일 수 있다. 일반식(V)에서 A는 예를 들면 할로겐원자(예, 염소) 또는 아실옥시기(이때 아실기는 아세틸과 같은 C_1-4알카노일기 또는 벤조일과 같은 아로일기임)일 수 있다. 기 R²는 아미노보호기, 예를 들면 C_1-4알카노일(예 : 아세틸) 또는 아릴옥시카르보닐(예 : 벤질옥시카르보닐)일 수 있으며, 또한 R²는 아지도기일 수도 있다. 이 반응은 디메틸포름아미드 또는 헥사메틸포스포르아미드와 같은 강한 극성용매중에서 바람직하게는 트리에틸아민 또는 탄산 칼륨과 같은 염기의 존재하에 수행하는 것이 용이하다. 대안으로서, 촉매량의 강산, 예를 들면 황산의 존재하에 일반식(IV) 및 (V)의 화합물들을 가열함으로써 열 축합 반응을 수행할 수 있다.

일반식(I)의 화합물의 합성시 중간체로 사용되는 식(II)-(V)의 화합물들은 통상적인 방식으로, 예를 들면 영국 특허 1523865호에서 기술된 절차에 따라 제조할 수 있다. 이 방법은 단순 치환된 푸린으로부터 제조된 중간체에 의존하며, 이들은 시판제품으로 입수하거나 또는 전술한 문헌들에 기술된 방법 및 공지된 방법등의 자체 공지된 기법에 의해 제조할 수 있다. 따라서, 예를 들면, 일반식(III)의 화합물들은 방법(c)의 절차와 유사한 절차에 의해, 예를 들면 적당한 푸린을 일반식(V)의 화합물과 함께 반응시킴으로써 제조할 수 있다.

임의의 전환 단계(i),(ii) 및 (iii)은 통상적인 방식으로 수행할 수 있다. 예컨데 전환단계(i)에서 보호기의 제거는 가수분해, 가용매 분해 또는 가수소분해에 의해 수행할 수 있다. 아미노산 아실 라디칼상에서 보호기를 제거함에 있어서는, 예컨데 아릴옥시카르보닐 보호기의 가수소분해, 및 팔라듐 촉매를 이용하는 접촉 수소첨가 반응에 의한 아지도기의 전환이 바람직하다. 푸린 핵의 2- 및/또는 6-위치에 있는 기의 보호에 관하여, 보호기는 예를 들면 벤질과 같은 아릴메틸기 또는 트리메틸실릴과 같은 트리-C_1-4알킬실릴기 중에서 선택될 수 있다. 아릴메틸 보호기는 가수소분해에 의해, 예를 들면 라니 니켈 또는 팔라듐 촉매의 존재하에서 수소첨가에 의해 제거할 수 있다. 트리알킬실릴 보호기는 가용매분해, 예를 들면 가알콜 분해에 의해 제거할 수 있다.

일반식(I)의 화합물을 약학적 허용 염으로 전환시키는 단계는 통상적인 방식으로 수행할 수 있다. 예를 들면 모체 화합물의 메탄올성 용액을 산 용액에 의해 동결 건조시키는 방법과 같이, 화합물을 적합한 산으로 처리함으로써 산 첨가염을 형성시킨다.

마찬가지로, 염을 일반식(I)의 모체 화합물로 전환시키는 것도 통상적인 방식으로 수행할 수 있다.

본 발명은 또한 의약 요법, 예를 들면 인체를 비롯한 포유동물에 있어서의 비루스성 질병을 치료 또는 예방하는데 유용한 일반식(I)의 화합물 및 이의 약학적 허용 염(이하, "활성 화합물"로 정의함)을 제공한다. 이 화합물은 헤르페스 감염증, 예를 들면 헤르페스 심플렉스, 바리셀라 또는 조스터, 시토메갈로비루스와 같은 다양한 DNA 비루스에 의한 질병과 B형 간염 또는 에프스타인-바르(Epstein-Barr) 비루스 또는 인체 헤르페스 비루스-6(HHV-6)에 의해 야기되는 질병의 치료 및 예방에 특히 유용하다. 활성 화합물은 또한 HIV 감염증 및 유두종과 같은 레트로비루스 감염증 또는 사마귀 비루스 감염증등의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 인체 의학적 치료 용도외에, 일반식(I)의 화합물을 다른 포유동물에 있어서의 비루스 질병을 치료 또는 예방하기 위해 투여할 수 있다. 예를 들면, 활성 화합물은 에킨 비폐렴의 치료에 특히 유용하다.

본 발명은 또한 동물, 예를 들면 사람과 같은 포유동물에게 유효량의 일반식(I)의 화합물 또는 이의 약학적 허용 염을 투여하는 것을 포함하여 비루스성 질병을 치료하거나 예방하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 비루스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 약제를 제조하는데 일반식(I)의 화합물을 사용하는 방법을 제공한다.

활성 화합물은 치료하고자 하는 증상에 적합한 경로를 통해, 예를 들면, 경구, 직장, 비강내, 국소(구강 및 설하), 질내 및 비경구(피하, 근육내, 점막내, 피부내, 포막내, 표피내) 투여 경로를 비롯한 적합한 경로를 통해 투여할 수 있다. 바람직한 경로는 예를 들면 수용자의 상태에 따라 달라진다.

전술한 사용 방법 및 증상에 있어서, (상기 정의한) 활성 성분의 필요량은 치료하고자 하는 증상의 정도 및 수용자의 신원을 비롯한 몇가지 인자에 좌우되며 담당 의사 또는 수의사에 의해 궁극적으로 결정된다. 그러나, 일반적으로, 이러한 사용 방법 및 증상에 적합한 유효 용량은 매일 수용자의 체중 1㎏당 0.1 내지 250mg, 바람직하게는 매일 체중 1㎏ 당 1 내지 100mg, 가장 바람직하게는 매일 체중 1㎏당 5 내지 20mg이며 ; 최적 투여량은 매일 체중 1㎏당 10mg이다(특별한 언급이 없는 한 활성성분의 지시된 모든 중량은 일반식(I)의 모체 화합물에 대해 산정한 것이다). 소정의 용량을 1일 동안 적합한 간격으로 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 분할 용량으로 투여한다. 이러한 분할 용량은 예를 들면 활성 성분 10 내지 1000mg, 바람직하게는 20 내지 500mg, 가장 바람직하게는 100 내지 400mg을 포함하는 단위 투여제형으로 투여할 수 있다.

본 발명의 화합물은 단독으로 또는 다른 치료제, 예를 들면 헤르페스 비루스 감염, 특히 HSV(I) 감염을 치료하는데 유용한 9-(2-히드록시에톡시메틸)구아닌(아사이클로비르), 및 레트로비루스 감염증, 특히 HIV 감염증을 치료하기 위한 지도부딘과 함께 투여할 수 있다.

활성 성분은 단독으로 투여할 수 있지만, 약학제제로서 투여하는 것이 바람직하다. 동물 및 인체에 사용함에 있어서, 본 발명의 제제는 전술한 바와 같은 하나 이상의 활성 성분과 하나 이상의 허용 가능한 담체 및 임의로 다른 치료제를 함유한다. 담체(들)은 제제내의 다른 성분들과 혼화될 수 있고 수용자에게 유해하지 않다는 견지에서 "허용가능한"것이어야 한다.

본 발명의 제제는 경구, 직장, 비강내, 국소(구강 및 설하 포함), 질내 또는 비경구(예 : 피하, 근육내, 정맥내, 피부내, 포막내 및 표피내) 투여하기에 적합한 것들을 포함한다. 제제는 단위 투여제형으로 용이하게 제공될 수 있고 제약 분야에 공지된 임의의 방법으로 제조할 수 있다. 이러한 방법은 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 활성 성분을 혼합하는 단계를 포함한다. 일반적으로 미세하게 분쇄된 고형 담체 또는 액상 담체 또는 2가지 모두의 담체와 활성 성분을 균일하고 친밀하게 혼합한후 필요에 따라 생성물을 성형하여 제제를 제조한다.

경구 투여하기에 적합한 본 발명의 제제는 소정량의 활성 성분을 포함하는 캡슐, 카세 또는 정제; 분말 또는 과립 ; 용액 또는 수성액 또는 비수성액중의 현탁액 ; 또는 수중유 액체 에멀젼 또는 유중수 액체 에멀젼으로 제공할 수 있다. 또한 활성 성분은 환괴, 연약 또는 페이스트의 형태로 제공될 수 있다.

정제는 임의로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압착 또는 성형하여 제조할 수 있다. 압착된 정제는 임의로 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 방부제, 계면활성제또는 분산제와 함께 분말 또는 과립 형태의 활성 성분을 적합한 기기내에서 압착시킴으로써 제조할 수 있다. 성형된 정제는 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말상 화합물의 혼합물을 적합한 기기내에서의 성형하여 제조할 수 있다. 정제는 임의로 코팅하거나 또는 금을 새기고 활성 성분의 서방형 제제로 제조될 수 있다.

눈 또는 다른 외부조직, 예를 들면 입과 피부의 감염증에 사용할 경우, 제제는 0.075 내지 20%(W/W), 바람직하게는 0.2 내지 15%(W/W), 가장 바람직하게는 0.5 내지 10%(W/W)의 양의 활성 성분을 포함하는 국소용 연고 또는 크림으로 사용하는 것이 바람직하다. 연고로 처방할때, 활성 성분을 파라핀계 또는 수-혼화성 연고 주약과 함께 사용할 수 있다. 또한 활성 성분은 수중유 크림 주약을 사용하여 크림으로 처방할 수 있다. 국소 도포는 이온삼투요법 장치의 수단에 의해 경피적으로 수행할 수도 있다.

필요에 따라, 크림 주약의 수성 상은 예컨대 30%(w/w) 이상의 다가 알콜, 즉, 프로필렌글리콜, 부탄 1,3-디올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤과 폴리에틸렌글리콜 및 이들의 혼합물과 같은 2개 이상의 히드록시기를 가진 알콜을 포함할 수 있다. 국소제제는 피부 또는 다른 감염된 부분을 통한 활성 성분의 흡수 또는 침투를 증강시키는 화합물을 포함하는 것이 바람직할 수 있다. 이러한 피부 침투 증강제의 예를 들면 디메틸설폭사이드 및 관련 동족체이다.

또한 눈에 국소적으로 투여하기에 적합한 제제로는 안약을 들 수 있으며, 이때 활성 성분은 적합한 담체, 구체적으로 활성 성분에 대한 수성 용매에 용해되거나 또는 현탁된다. 활성 성분은 제제중에 0.5 내지 20%, 유리하게는 0.5 내지 10%, 특히 약 1.5%(W/W)의 농도로 존재하는 것이 바람직하다.

구강내 국소 투여하기에 적합한 제제로는 향이 첨가된 주약, 특히 수크로오즈와 아카시아 또는 트라가칸스중에 활성 성분을 포함하는 마름모형 정제; 젤라틴과 글리세린 또는 수크로오즈 및 아카시아와 같은 불활성 주약중에 활성 성분을 함유하는 향정 ; 및 적합한 액체 담체중의 활성 성분을 포함하는 구강청정제를 들 수 있다.

직장내 투여하기에 적합한 제제는 예를 들면 코코아 버터 또는 살리실산염을 포함하는 적당한 주약과 함께 좌약 형태로 제공될 수 있다.

담체가 고체인 비강내 투여 제제는 20 내지 500미크론의 입자크기를 가진 거친 분말을 포함하며 냄새를 맡듯이, 즉 코 가까이에서 분말 용기로부터 코를 통해 빠르게 흡입하는 방식으로 투여한다. 담체가 액체인 제제, 예를 들면 비강용 분무제, 비강 점적제는 활성 성분의 수성 또는 유성 용액을 포함하나.

질내 투여하기에 적합한 제제는 활성 성분외에 당분야에 공지된 담체를 함유하는 페사리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 포옴 또는 스프레이 형태로 제공할 수 있다.

비경구 투여하기에 적합한 제제는 항산화제, 완충제, 정균제및 수용자의 혈액과 제제가 등장성이 되도록 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사용액 ; 현탁제와 증점제를 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 제제는 단위투여 또는 수회 투여 용기, 예를 들면 밀봉된 앰플과 바이알 형태로 제공할 수 있고 사용하기 직전에 멸균 액체 담체, 예를 들면 주사용수를 첨가할 필요가 있는 냉동건조(동결건조) 조건하에 저장할 수 있다. 주사 용액과 현탁액을 멸균 분말, 과립 및 전술한 유형의 정제로부터 제조할 수 있다. 근육내 투여용 제제인 것이 특히 바람직하다.

바람직한 단위 투여 제제는 전술한 바와 같은 일일용량 또는 분할된 단위용량 또는 적합한 분량의 활성성분을 포함한다.

본 발명의 제제는 상기 특별히 언급한 성분외에도 제형에 따라 당분야에 통용되는 다른 작용제가 함유될 수 있는데, 예를 들면 구강 투여에 적합한 제제의 경우 향료를 포함할 수 있다.

또한 본 발명은, 전술한 바와 같은 하나 이상의 활성 성분과 수의학적 허용 담체를 포함하는 수의학적 조성물을 제공한다.

수의학적 담체는 조성물을 투여하는데 유용한 물질이며, 불활성이거나 수의학 분야에서 허용 가능하며 활성 성분과 혼화될 수 있는 고체, 액체 또는 기체 물질이다. 이러한 수의학적 조성물은 경구, 비경구 또는 기타 소정의 경로로 투여할 수 있다.

경구투여용 조성물은 정제, 과립 드렌치, 페이스트, 카세, 캡슐 또는 사료 형태일 수 있다. 과립은 습식 과립화, 예비압착 또는 슬러깅에 의해 제조할 수 있다. 이들은 불활성 액체 담체중의 드렌치 형태로 또는 물 또는 오일 주약에 의한 현탁액 형태로 동물에게 투여할 수 있다. 투약제(dispensing agent)와 같은 보조 성분을 포함하는 것이 바람직하다. 이러한 제제는 15 내지 85%의 활성 성분을 포함하는 것이 바람직하다.

이하에서는 실시예에 의거하여 본 발명을 설명하고자 한다.

[실시예 1a]

2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시) L-발리네이트

a) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] L-발리네이트

무수 디메틸포름아미드(DMF)(150㎖)중의 아사이클로비트(2.000g : 부룩스 웰컴 컴패니 제품)의 현탁액을 60℃로 가온시켜 무색 용액을 얻었다. CBZ-L-발린(3.012g:미주리, 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼스 제품, 및 문헌[J. Am. Chem. Soc. 79, 5697(1957)]), 4-디메틸아미노피리딘(154mg ; DMAP, Chem. Ber. 89 2921-33[1956]) 및 디사이클로헥실카르보디이미드(2.998g, DCC, 미합중국 특허 제2526383호)를 가온된 용액에 첨가했다. 담황색 오일을 실온으로 냉각시키고 밤새 교반시켰다. 30분 후 백색 침전물이 관찰되었다. 반응 혼합물에 전술한 양의 CBZ-L-발린과 DMAP 및 DCC를 첨가하고 혼탁한 현탁액을 2일동안 실온에서 교반시켰다. 현탁액을 여과하여 1.418g의 백색 고형물을 제거했다. 무색 여과액을 농축하여 오일을 얻었다. 오일을 디클로로메탄 구배(0-15%)중의 메탄올을 용출제로 하는 실리카상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 백색 고형물인 상기 표제의 화합물 3.751(92.1%)을 수득했다.

b) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 L-발리네이트

2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] L-발리네이트(5.0g), 5% 탄소/팔라듐 촉매 -50% 물(2g) 및 디메틸포름아미드(50㎖)의 혼합물을 3시간 동안 40psi H₂하에서 Parr 장치를 이용하여 흔들어 섞었다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 진공중에서 증발시켜 오일을 얻었다. 물/에탄올(1:3 v/v)로부터 고형물을 결정화하고 재결정화하여 1.5g의 표제화합물을 수득했다:

원소 분석 :

이론치 :C; 48.14, H; 6.22, N; 25.91

실측치 :C; 47.84, H; 6.26, N; 25.75

[실시예 1b]

2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-(푸린-9-일)메톡시)에틸 L-발리네이트 염산염 1수화물

a) 2-[(아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] L-발리네이트

무수 디메틸포름아미드(DMF)(150㎖)중의 아사이클로비르(2.000g ; 부룩스 웰컴 컴패니 제품)의 현탁액을 60℃로 가온시켜 무색 용액을 얻었다. CBZ-L-발린(3.012g : 미주리, 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼스 제품, 및 문헌[J. Am. Chem. Soc. 79, 5697(1957)], 4-디메틸아미노피리딘(154mg ; DMAP, Chem. Ber. 89 2921-33[1956] 및 디사이클로헥실카르보디이미드(2.998g ; DCC, 미합중국 특허 2656383호)를 가온된 용액에 첨가했다. 담황색 용액을 실온으로 냉각시킨 후 밤새 교반시켰다. 30분 후 백색 침전물이 관찰되었다. 반응 혼합물에 전술한 양의 CBZ-L-발린과 DMAP 및 DCC를 재차 장입시키고 혼탁한 현탁액을 2일동안 실온에서 교반시켰다. 현탁액을 여과하여 1.41g의 백색 고형물을 얻었다. 무색 여과액을 농축하여 담황색 오일을 얻었다. 오일을 디클로메탄 구배(0-15%)중의 메탄올을 용출제로 하는 실리카겔상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물인 표제화합물 3.751g(92.1%)을 수득했다.

b) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 L-발리네이트 염산염 1수화물

2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] L-발리네이트(3.730g), 5% 탄소/팔라듐 촉매(377mg), 메탄올(100㎖), 테트라하이드로푸란(THF)(100㎖) 및 0.5M의 염산 수용액(18㎖)의 혼합물을 1일동안 50psi H₂하에 Parr장치상에서 흔들어 섞었다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과한 후 농축시켜 백색 고형물을 얻었다. 이 고형물을 물/에탄올로부터 재결정화하여 1.762g(60.0%)의 백색 분말을 수득했다 : mp 150℃(고형 수축물). 이는 점차 오일로 변화되며 195℃에서 발포되면서 분해된다.

원소 분석 :

이론치 : C ; 41.22, H ; 6.12, N ; 22.19, Cl : 9.36

실측치 : C ; 41.09, H ; 6.10, N ; 22.12, Cl ; 9.28

[실시예 1c]

2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시)에틸 D-발리네이트 염산염 1수화물

a) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] D-발리네이트

무수 디메틸포름아미드(DMF)(80㎖)중의 아사이클로비르(1.00g ; 부룩스 웰컴 컴패니 제품)의 현탁액을 60℃로 가온시켜 무색 용액을 얻었다. CBZ-D-발린(1.70g ; 미합중국 특허 제4411925호), 4-디메틸아미노피리딘(74mg ; DMAP, Chem. Ber. 89 2921-33(1956)) 및 디사이클로헥실카르보디이미드(1.60g; DCC, 미합중국 특허 제2656383호)를 가온된 용액에 첨가했다. 투명한 용액을 실온으로 냉각시킨 후 2일동안 질소하에 교반시켰다. 반응 혼합물에 전술한 양의 CBZ-L-발린과 DMAP 및 DCC를 재차 가하고 혼탁한 현탁액을 2일동안 실온에서 교반시켰다. 현탁액을 여과하여 백색 고형물을 제거했다. 무색 여과액을 농축하여 여과액으로부터 얻은 잔류물을 메탄올/디클로로메탄에 용해시키고 10% 메탄올/디클로로메탄을 용출제로 하는 실리카겔상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물인 표제화합물 1.10g(52%)을 수득했다.

mp 155-158℃

원소 분석 :

이론치 : C ; 52.05, H ; 6.01, N ; 17.34

실측치 : C ; 52.02, H ; 5.98, N ; 17.32

b) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 D-발리네이트 염산염 1수화물

2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] D-발리네이트(0.94g), 5% 탄소/팔라듐 촉매(200mg), 메탄올(25㎖), 테트라하이드로푸란(THF)(25㎖) 및 0.5M 염산수용액(4.5㎖)의 혼합물을 4시간동안 44psi H₂하에 Parr장치상에서 흔들어 섞었다. 반응 혼합물을 밀리포어 멤브레인으로 여과한 후 여과액을 농축하여 회백색 고형물을 수득했다.

mp 185-188℃

원소 분석:

이론치 : C ; 40.47, H ; 6.18, N ; 21.37, Cl : 10.82

실측치 : C ; 40.62, H ; 5.98, N ; 21.20, Cl ; 10.91

[실시예 1d]

2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시)에틸 DL-발리네이트 염산염 1수화물

a) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] DL-발리네이트

무수 디메틸포름아미드(DMF)(150㎖)중의 아사이클로비르(2.000g ; 부룩스 웰컴 컴패니 제품)의 현탁액을 60℃로 가온시켜 무색 용액을 얻었다. CBZ-DL-발린(3.012g ; 미주리, 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼스 제품, 및 문헌 Chemical Abstracts, Vol 101(5), 38799j), 4-디메틸아미노피리딘(154mg ; DMAP, Chem. Ber. 89 2921-33[1956]) 및 디사이클로헥실카르보디이미드(2.998g; DCC, 미합중국 특허 제2656383호)를 가온된 용액에 첨가했다. 이 용액을 실온으로 냉각시키고 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물에 전술한 양의 CBZ/DL-발린과 DMAP 및 DCC를 첨가하고 현탁액을 2일동안 실온에서 교반시켰다. 현탁액을 여과하여 백색 고형물을 제거했다. 여과액을 농축시킨 후 오일을 디클로로메탄 구배(0-15%)중의 메탄올을 용출제로 하는 실리카겔상의 플래쉬 크로마트그래피로 정제하여 표제화합물을 수득했다.

b) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-9-일)메톡시]에틸 DL-발리네이트 염산염 1수화물

2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] DL-발리네이트(3.730g), 5% 탄소/팔라듐 촉매(377mg), 메탄올(100mg), 테트라하이드로푸란(THF)(100㎖) 및 0.5M의 염산 수용액(18㎖)의 혼합물을 1일동안 50psi H₂하에 Parr장치상에서 흔들어 섞었다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과한 후 농축시켜 고형물을 수득했다. 이 고형물을 물/에탄올로부터 재결정화하여 표제화합물을 수득했다.

[실시예 2]

2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시)에틸 L-이소로이시네이트 염산염

a) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 N-[(벤질옥시)카르보닐] L-이소로이시네이트

무수 N,N-디메틸포름아미드(80㎖)중의 아사이클로비르(1.0g, 4.4mmol ; 부룩스 웰컴 컴패니 제품), 4-디메틸아미노피리딘(74mg, 0.6mmol) ; 알드리치 케미칼 컴패니 제품, 및 Chem Ber. 89 2921-22(1956)), 1, 3-디사이클로헥실카르보디이미드(1.6g, 8.0mmol ; 알드리치 케미칼 컴패니 제품 및 미합중국 특허 제2656383호), N-카르보벤즈옥시-L-이소로이신(1.8g, 6.6mmol) 시그나 케미칼 컴패니 제품, 및 Bull. Chem. Soc. Jap(1966) 39 947 또는 Tetrahedron 40(24) 5207-11(1984)와 분자체(0.3g, Davison 타입 3A ; 피셔 사이언티픽 컴패니 제품)의 혼합물을 질소하에 실온에서 교반시켰다. 4일 후, 추가량의 1,3-디사이클로헥실카르보디이미드(1.6g, 8.0mmol)와 N-카르보벤즈옥시-L-이소로이신(1.8g, 6.6mmol)을 첨가했다. 실온에서 7일간 계속 교반시켰다. 수득한 혼합물을 여과하고 투명한 여과액을 진공중에서 농축시켜 반고형 잔류물을 얻었다. 실리카겔 60(EM 230-400메쉬 ; 8.5×14cm)으로부터 2.5-5% 메탄올/염화메틸렌에 의해 잔류물을 용출하여 백색 고형물인 2-[2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸-N-[(벤질옥시)카르보닐]-L-이소로이시네이트 0.8g(45%)을 수득했다 ;

mp 155-157℃

UV(MeOH) ; λmax 255nm(ε17700) λsh 279(9800), λmin 230(6100)

NMR(200MHz, ME₂SO-d₆) : 0.73-0.80ppm(m,6H), 1.13-1.33(m,2h), 1.66-1.70(m,1H), 3.64(t,2H), 3.92(t,1H), 4.16(m,2H), 5.00(s,2H), 5.32(s,2H), 6.47(br s,2H), 7.33s,5H), (7.65(d,j=8Hz,1H), 7.78(s,1H), 10.59(br s, 1H) ;

MS(Cl/CH₄; 70℃) ; m/z 473(1.0%, M+1), 347(23.2, M-125), 225(100.0, M-247) ;

-3.07°(c 0.488, 6N HCl).

TLC : 10% MeOH/CH₂Cl₂를 사용했을때 실리카상에 하나의 반점이 나타남.

R_f=0.38

HPLC : 50% MeOH/H₂O를 사용했을때 Supelco LC₈상에서 하나의 피이크가 나타남 ; 100% k'=7.02

C₂₂H₂₈N₆O₆·H₂O에 대한 원소 분석 :

이론치 : C ; 53.87, H ; 6.16, N ; 17.13

실측치 : C ; 53.94, H ; 6.20, N ; 17.04

b) 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]에틸 L-이소로이시네이트 염산염

메탄올-테트라하이드로푸란(1 : 1, 50㎖)중에 용해된 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]-에틸-N-[(벤질옥시)카르보닐]-L-이소로이시네이트(1.11g, 2.2mmol)의 용액을 0.5N의 염산(5㎖)와 5% 팔라듐/목탄(0.30g ; MCB 시약)으로 처리했다. 혼합물 50psi에서 11시간동안 Parr 수소첨가 반응기상에서 수소첨가시킨후 셀라이트 패드를 통해 여과하고 여과액을 진공하에 농축시켜 회백색 고형물인 2-[(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-푸린-9-일)메톡시]-에틸-L-이소로이시네이트 염산염(0.86g, 92%)을 수득했다 ;

mp 180-182℃(비등 연화점 약 150℃)

UV(MeOH) ; λmax 254nm(ε13400), λsh 272(9000), λmin 224(3600) ;

NMR(200MHz, Me₂SO-d₆) : 0.77-0.84ppm(m,6H), 1.13-1.37(m,2H), 1.82(m,1H), 3.73(t,2H), 3.87(br t,1H), 4.14-4.40(m,2H), 5.36(s,2H), 6.70br(s,2H), 7.97(s,1H), 8.46(br s,3H), 10.87(s, 1H) ;

MS(Cl/CH₄; 150℃) ; m/z 367(6.9%, M+29), 339(100, M+1), 225(92.9, M-113) ;

+11.15°(c 2.0, HOAc).

TLC : 10% MeOH/CH₂Cl₂를 사용했을때 실리카겔상에 하나의 반점이 나타남.

R_t=0.12

HPLC : 10% MeOH/H₂O/0.1% F₃CCOOH를 사용했을때 Versapack C₁₈상에서 하나의 피이크가 나타남 ; 100% k'=3.74

C₁₄H₂₂N₆O₄·1.25HCl·1.1OMeOH·0.25H₂O에 대한 원소 분석 :

이론치 : C ; 42.81, H ; 6.70, N ; 19.84, Cl ; 10.46

실측치 : C ; 42.82, H ; 6.50, N ; 19.64, Cl ; 10.46

[실시예 3]

[정제제제]

하기 약학 제제A,B 및 C는 포비돈의 용액을 사용하여 성분들을 습식 과립화한 후에 마그네슘 스테아레이트를 첨가하고 압착시켜 제조했다.

하기 제제D 및 E는 혼합된 성분들을 직접 압착시켜 제조했다. 제제E중의 락토오즈는 압착 유형의 것이다.

제제F(서방형 제제)

하기 성분들을 포비돈 용액을 사용하여 습십 과립화한 후 마그네슘 스테아레이트를 첨가하고 압축시켜 제제를 제조했다.

[실시예 4]

[캡슐제제]

제제A

캡슐 제제는 상기 실시에 3중의 제제D의 성분을 혼합하고 두 부분으로 된 경질 젤라틴 캡슐에 충전시켜 제조했다. 하기의 제제B는 이와 유사한 방법으로 제조했다.

캡슐은 마크로골 4000B.P.를 용융시킨 후, 용융물에 활성 성분을 분산시키고, 그 용융물을 두 부분으로 된 경질 젤라틴 캡슐에 충전시켜 제조했다.

활성 성분을 레시틴과 아라키스 오일중에 분산시키고 분산물을 연질의 탄성 젤라틴 캡슐에 충전시켜 캡슐제제를 제조했다.

제제E(서방형 캡슐)

하기 서방형 캡슐 제제는 성분 a,b 및 c를 압출기를 사용하여 압출한 후, 압출물을 구형화하고 건조시켜 제조했다. 이어서 건조된 펠릿을 서방성 막(d)으로 피복한 후 두 부분으로 된 경질 젤라틴 캡슐에 충전시켰다.

[실시예 5]

안용액

활성 성분 0.5

프로필렌 글리콜 0.2g

티오메르살 0.001g

pH를 7.5로 조정하는 정제수 100㎖

[실시예 6]

주사 제제

활성 성분 0.200g

피로겐이 없는 멸균된 시트르산염 완충액 (pH 7.0) 10㎖까지

활성 성분을 대부분의 시트르산염 완충액(35-40℃)에 용해시킨 후 나머지 부피를 채우고 멸균 마이크로 포어 필터를 통해 멸균된 10㎖ 황갈색 유리 바이얼(타입 1)속으로 여과하고 멸균 마개로 밀봉한 후 다시 겉포장을 했다.

[실시예 7]

근육내 주사제

활성 성분 0.20g

벤질 알콜 0.10g

글리코푸롤 75 1.45g

주사수 3.00㎖까지

활성 성분을 글리코푸롤에 용해시켰다. 이어서 벤질 알콜을 첨가하고 용해시키면서 물을 3㎖가 될때까지 첨가했다. 혼합물을 멸균 마이크로포어 필터를 통해 여과하고 멸균된 3㎖ 황갈색 유리 바이얼(타입 1)내에 밀봉했다.

[실시예 8]

시럽 현탁액

활성 성분 0.25g

소르비톨 용액 1.50g

글리세롤 2.00g

나트륨 벤조에이트 0.005g

향료 0.0125㎖

정제수 5.00㎖까지

나트륨 벤조에이트를 일부분의 정제수에 용해시키고 소르비톨 용액을 첨가했다. 활성 성분을 첨가하여 용해시켰다. 글리세롤과 향료를 첨가하고 혼합했다. 물을 최종 부피 5㎖가 될때까지 첨가했다.

[실시예 9]

좌약

* 활성 성분은 적어도 90%의 입자가 63㎛ 이하의 직경을 갖는 분말 형태의 것을 사용함.

Witepsol H15의 1/5분량을 45℃에서 스팀-자켓 팬내에서 용융시켰다. 활성 성분을 200㎛ 체를 통해 거르고 절단 헤드가 장착된 실버존(silverson)을 사용하여, 균질의 분산물이 얻어질 때까지 혼합하면서 용융된 주약에 첨가했다. 혼합물을 45℃로 유지시키면서 나머지 Witepsol H15를 현탁액에 첨가하고 교반시켜 균질한 혼합물을 얻었다. 현탁액을 전부 250㎛의 스테인레스 스틸 스크린에 통과시키고 연속해서 교반 하면서, 40℃로 냉각시켰다. 38℃ 내지 40℃의 온도에서, 2.02g의 혼합물을 적합한 플라스틱 금형에 충전시켰다. 좌약을 실온으로 냉각시켰다.

[실시예 10]

페사리

상기 성분들을 직접 혼합하고 수득한 혼합물을 직접 압축시켜 페사리를 제조했다.

[실시예 11]

a) 항비루스 활성

헤르페스 심플렉스 비루스(HSV 1)을 멀티웰 트레이에서 Vero 세포의 단층에서 분석 평가했다. 화합물의 활성을 반점 감소 분석으로 측정하는데, 이때 세포 단층을 HSV 1의 현탁액으로 감염시키고 겔의 형태로 영양 아가로즈를 적층시켜 배양물 전체에 비루스가 전착되지 않도록 하였다. 기지의 물 농도의 화합물을 영양 아가로즈 상층에 첨가했다. 각 농도하의 반전 수를 대조군에 대한 백분율로 표시하고, 용량 응답 곡선을 도시했다. 이 곡선으로부터 50% 억제농도(IC₅₀)를 산정했다.

b) 경구 생체내 효율의 측정

롱 에반스 래트(Long Evans Rats)에 25mg/㎏ 아사이클로비르와 동등한 용량으로 섭식에 의해 화합물을 투여했다. 투여 후 24시간 및 48시간 동안 뇨를 수집하고 한외여과한 후, 역상 고압 액체 크로마토그래피로 분석했다. 화합물의 경구 생체내 효율을 뇨증에 아시클로비르로서 배출된 양의 백분율로 표시했다.

c) 독성 데이타

비감염된 포유동물 세포의 생장 억제성의 측정

D 98 세포(인체)와 L 세포(쥐)의 생장을 억제하는 화합물의 특성을 다양한 비율로 희석된 화합물에 표준수의 세포를 3일 동안 노출시킨 후 세포수를 측정함으로써 평가했다(문헌[Rideout, J.L. Krenitsky, T.A., Koszalka, G.W., Cohn, N.K., Chao, E.Y, Elion, G.B., Latter, V.S., 및 Williams, R.B.(1982) J. Med Chem. 25 : 1040-1044]참조). 세포수를 화합물이 없을 경우 얻어진 수와 비교했다. 단층을 트립신으로 처리한 후, 직접 소립자를 계수하거나 또는 세포에 의해 흡수된 염색량을 분광학적으로 측정하여 세포 목록표를 만들었다. 두가지 방법에 의해 대등한 결과를 얻었다.

데이타 분석

대조값의 50%를 제공하는 화합물의 농도(IC₅₀)를, 대조값의 백분율에 대한 피검 화합물 농도의 log의 그래프로부터 직접 내삽하거나 또는 동일한 연산으로 데이타를 분석하는 컴퓨터 프로그램으로부터 계산했다. 대조군에 대한 20% 내지 80%의 범위내의 데이타를 이러한 계산에 사용하였다.

Claims

하기 일반식(I)으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적 어용 염 :

상기 식에서, R₁은 일반식 -CH(CH₃)₂로 표시되는 기이며, 에스테르기 -OCOCH(R₁)NH₂는 L-원자 배열을 가진다.
제1항에 있어서, 2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H-(푸린-9-일)메톡시)에틸 L-발리네이트인 화합물.
제1항에 있어서, 약학적 허용 염의 형태인 화합물.
제3항에 있어서, 상기 염이 염산염인 화합물.
제1항에 있어서 정의한 일반식(I)의 화합물 또는 이의 약학적 허용 염을 활성 성분으로 포함하여 비루스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 약학 조성물.
제5항에 있어서, 헤르페스 비루스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 조성물.
제5항에 있어서, 헤르페스 조스터 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 조성물.
제5항에 있어서, 시토메갈로 비루스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 조성물.
제5항에 있어서, 경구 투여용 제형으로 된 조성물.
제9항에 있어서, 정제또는 캡슐 제형인 조성물.
제5항에 있어서, 헤르페스 심플렉스 타입 1 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 조성물.
제5항에 있어서, 에프스타인-바르 비루스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 조성물.
제5항에 있어서, 상기 활성 성분이 2-(2-아미노-1,6-디하이드로-6-옥소-9H(푸린-9-일)메톡시)에틸 L-발리네이트의 산 부가염인 조성물.
제13항에 있어서, 상기 염이 염산염인 조성물.
제14항에 있어서, 상기 염산염 10 내지 1000mg을 함유하는 조성물.
제15항에 있어서, 상기 염산염 20 내지 500mg을 함유하는 조성물.