DK170045B1

DK170045B1 - 2-((2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)methoxy)ethyl-L-valinat og salte heraf, disse forbindelsers anvendelse inden for medicinsk terapi, farmaceutisk komposition indeholdende en sådan forbindelse, samt fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne

Info

Publication number: DK170045B1
Application number: DK451388A
Authority: DK
Inventors: Thomas Anthony Krenitsky; Lilia Marie Beauchamp
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1987-08-15
Filing date: 1988-08-12
Publication date: 1995-05-08
Also published as: AP55A; AP160A; AU612393B2; EP0596542A1; IE882463L; IL87434A; AU2097888A; NO167805B; NO1996015I1; NO883612L; MY103760A; NL960001I2; SG26346G; DK82694A; PL274215A1; MX9203418A; FI89713C; SU1634138A3; KR960004940B1; CS8805594A2

Description

DK 170045 B1

Opfindelsen angår en hidtil ukendt ester af 9-(2-hydroxyethoxymethyl)guanin med værdifulde anti-virale egenskaber.

9-(2-Hydroxyethoxymethyl)guanin, også kendt 5 som acyclovir, har en kraftig antiviral aktivitet, navnlig over for herpes-vira (H.J. Schaeffer et al., Nature, 272, 583-585 (1978), UK patentskrift nr. 1.523.865 og US patentskrift nr. 4.199.574).

Acyclovir er imidlertid kun dårligt opløseligt i 10 vand, hvilket begrænser tilvejebringelsen af vandige farmaceutiske præparater, hvor opløselighed er påkrævet.

Acyclovir absorberes også kun dårligt af fra mave-tarmkanalen efter oral indgift (15% genvinding i urinen ved test på rotter og 20% hos menne-15 sker). Sådan lav biotilgængelighed kræver indgift af store doser lægemiddel for at opnå og opretholde effektive anti-virale niveauer i plasmaet.

Europæisk patentskrift nr. 99493 og Journal of Medicinal Chemistry, vol. 26, nr. 4, 04/83, side 602-20 604 beskriver aminosyreestre af acyclovir,·specifikt glycin- og alanin-estrene, der viser forbedret vand-opløselighed sammenlignet med acyclovir.

Det har nu vist sig, at L-valinesteren af acyclovir, karakteriseret ved sidekædeforgrening nabostillet 25 til α-carbonatomet, og som ikke findes omtalt i europæisk patentskrift nr. 99493 og Journal of Medicinal Chemistry referencen, overraskende har forbedret biotilgængelighe efter oral indgift sammenlignet med alanin- og glycinestrene omtalt deri.

30 Ifølge opfindelsen er der således tilvejebragt en aminosyreester af 9-(2-hydroxyethoxymethylJguanin med den almene formel (I):

OH

- fV> fy. N./ ''i

CH7OCH2CH2OCOCH(R )NH

2 DK 170045 B1 hvor R.] er en gruppe med formlen -CHiCH^^/· hvor estergruppen -0C0CH(R^)NH2 er i L-konfiguration, og farmaceutisk acceptable salte deraf. Forbindelsen med formlen (I) kan også betegnes 2-((2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-5 purin-9-yl)methoxy)ethyl-L-valinat.

Opfindelsen angår også de omhandlede forbindelser til anvendelse inden for medicinsk terapi, nærmere angivet til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af en viral infektion, specielt som angivet i krav 8-15.

10 Opfindelsen angår endvidere anvendelse af en for bindelse ifølge opfindelsen ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en viral infektion, specielt anvendelser som angivet i krav 17- 25.

15 Opfindelsen angår yderligere en farmaceutisk kompo sition, der som aktiv bestanddel indeholder en forbindelse ifølge opfindelsen sammen med en farmaceutisk bærer, specielt farmaceutiske kompositioner som angivet i krav 26-33.

20 Opfindelsen angår ydermere anvendelse af forbin delserne ifølge opfindelsen i kombination med zidovudine ved fremstillingen af et lægemiddel til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af HIV-infektion.

Ved tests på rotter, hvor der måles den urinære 25 genvinding som acyclovir (% indgivet dosis) efter oral indgift, viser de omhandlede forbindelser en stor stigning i absorption fra tarmen sammenlignet med de andre estre og sammenlignet med acyclovir.

Dette muliggør anvendelse af mindre lægemiddel under ^ tilvejebringelse af ækvivalente lægemiddelniveauer i plasmaet efter oral absorption. L-Valinat-forbindelsen er navnlig foretrukket som følge af dens særligt * gode absorption fra tarmen.

Foruden den relativt høje biotilgængelighed har den omhandlede forbindelse i det væsentlige den samme antivirale effekt som acyclovir in vitro.

Den fordelagtige stigning i forbindelsens biotilgængelighed er således ikke opnået på bekostning 3 DK 170045 B1 af antiviral styrke. Det har således vist sig, at visse aminosyreestre ved visse kliniske anvendelser, f.eks. behandling af stromal keratitis, tilvejebringer en bedre terapeutisk effekt end acyclovir (EP 99493).

5 De farmaceutisk acceptable salte af forbindel sen med formlen (I) er fortrinsvis syreadditionssalte afledt af en passende syre, f.eks. salt-, svovl-, phosphor-, malein-, fumar-, citron-, vin-, mælke-, eddike- eller p-toluensulfonsyre. Et særlig 10 foretrukket, salt er hydrochloridsaltet af forbindelsen med formlen (I).

Ved dyreforsøg har det vist sig, at den orale indgift af forbindelsen med formlen (I) frembragte målelige niveauer af acyclovir i plasmaet. Ifølge 15 en anden udførelsesform for opfindelsen er der således tilvejebragt et middel til udvikling af acyclovir in vivo ved indgift af en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf på et pattedyr.

20 De omhandlede forbindelser kan fremstilles på konventionel måde, f.eks. ved en fremgangsmåde som beskrevet nedenfor.

Ifølge endnu et aspekt af opfindelsen er der således tilvejebragt en fremgangsmåde til 25 fremstilling af forbindelserne med formlen (I) og farmaceutisk acceptable salte deraf, hvilke fremgangsmåde er ejendommelig ved, at a) en forbindelse med formlen (II) x 30 ,xx> I (II)

CH^OCH^CH^OH

hvor X er en eventuelt beskyttet hydroxygruppe, 35 og Y er en eventuelt beskyttet aminogruppe, omsættes med en eventuelt beskyttet L-valin eller en funktionel ækvivalent deraf, 4 DK 170045 B1 b) en forbindelse med formlen (III)

M

Α-λ LI/ (III) CH2OCH2CH2OCOCH(Ri )NH2 10 (hvor er som ovenfor defineret, M er en hydroxygrup-pe, og G er et atom eller en gruppe, der kan udskiftes med eller omdannes til en aminogruppe, eller G er en aminogruppe, og M er et atom eller en gruppe, der kan udskiftes med eller omdannes til en hydroxy-15 gruppe), omdannes til en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, eller c) en forbindelse med formlen (IV)

X

20 I

*rY'\ I x> (IV) 25

Q

(hvor X og Y er som ovenfor defineret, og Q er et eliminerbart atom eller en eliminerbar gruppe), omsættes med en forbindelse med formlen (Vf) 30 ach2och2ch2ococh(R1)r2 (V) (hvori R- er som ovenfor defineret, A er en elimi- 2 nerbar gruppe eller et eliminerbart atom, og R 35 er en eventuelt beskyttet aminogruppe), og at der, om ønsket, gennemføres én eller flere af følgende omdannelser i vilkårlig ønsket rækkefølge: 5 DK 170045 B1 i) fjernelse af en hvilken som helst beskyttelsesgruppe, ii) når det resulterende produkt er en forbindelse med formlen (I), omdannelse af denne forbindel-5 se til et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, og iii) når det resulterende produkt er et farmaceutisk acceptabelt salt af en forbindelse med formlen (I), omdannelse af dette salt til Ί0 stamforbindelsen.

Med hensyn til fremgangsmåden a) kan esterifi-ceringsreaktionen gennemføres på konventionel måde, f.eks. i et opløsningsmiddel, såsom pyridin eller dimethylformamid, i nærværelse af et koblingsmiddel, såsom N^’-dicyclohexylcarbodiimid, eventuelt i nærværelse af en katalytisk base, såsom 4-dimethyl-aminopyridin. Det under reaktionen dannede vand, kan, om ønsket, fjernes på konventionel måde, for eksempel ved destillation eller ved tilsætning af et vandbindende stof. Derefter kan den som reaktionsprodukt vundne ester isoleres på konventionel måde.

Som et alternativ til anvendelsen af L-valin per se kan der anvendes en funktionel ækvivalent af syren, f.eks. et syrehalogenid, såsom 25 syrechloridet eller et syreanhydrid. I et sådant tilfælde er det fordelagtigt, med henblik på at undgå uønskede bireaktioner, at anvende et amino-beskyttet derivat. Eksempler på foretrukne amino-beskyttende grupper omfatter acyl, f.eks. (C^-C^)al-30 kanoyl, såsom acetyl, og aryloxycarbonyl, f.eks.

benzyloxycarbonyl. Et egnet amino-beskyttet derivat er for eksempel et sådant, hvor aminogruppen af aminosyren er erstattet med en azidogruppe.

Omdannelse af en forbindelse med formlen 35 (III) til en forbindelse med formlen (I) ved fremgangsmåde b) kan opnås på forskellige måder. For eksempel kan G repræsentere en azidgruppe, der kan reduceres til en aminogruppe ved katalytisk hydrogenering 6 DK 170045 B1 under anvendelse af en passende katalysator, såsom palladium på kul. Alternativt kan G være et halogenatom eller en alkylthio- eller alkylsulfonylgruppe, der kan omdannes til en azidgruppe, som på sin side 5 kan omdannes til en aminogruppe ved katalytisk hydrogenering under anvendelse af for eksempel hydrogen i nærværelse af palladium på kul. Til fremstilling * af forbindelsen med formlen (I) kan i en forbindelse med formlen (III), hvor M er en aminogruppe, denne 10 omdannes til en hydroxygruppe, for eksempel ved behandling med et deaminerende enzym, såsom adenosin-deaminase.

Disse processer sammen med andre konventionelle processer er beskrevet i Fused Pyrimidines, del 15 il, Purines, Ed. D.J. Brown (1971), Wiley-Interscience.

Ved fremgangsmåde c) kan gruppen Q i formlen (IV) for eksempel være et hydrogenatom, en acylgruppe, f.eks. en (C^-C^)alkanoylgruppe, såsom en acetylgruppe, eller en aroylgruppe, såsom en benzoylgruppe, 20 eller en tri-iC^-C^Jalkylsilylgruppe, såsom en tri-methylsilylgruppe. Gruppen A i formlen (V) kan for eksempel være et halogenatom (f.eks. chlor) eller en acyloxygruppe, hvor acyldelen for eksempel kan være en (C.j-C4)alkanoylgruppe, såsom acetyl, eller 25 en aroylgruppe, såsom benzoyl. Gruppen R2 kan være en amino-beskyttende gruppe, såsom (C^-C^)alkanoyl (f.eks. acetyl) eller aryloxycarbonyl (f.eks. ben-zyloxycarbonyl), men den kan også være en azidogruppe.

Reaktionen kan hensigtsmæssigt gennemføres i et 30 stærkt polært opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid eller hexamethylphosphoramid, fortrinsvis i nærværelse af en base, såsom triethylamin eller kalium- _ carbonat. Alternativt kan der gennemføres en termisk kondensation ved at opvarme forbindelserne med 35 formlerne (IV) og (V) i nærværelse af en katalytisk mængde af en stærk syre, såsom svovlsyre.

Forbindelser med formlerne (II) til (V), anvendt som mellemprodukter ved syntesen af forbind- 7 DK 170045 B1 elsen med formlen (I), kan fremstilles på konventionel måde, f.eks. ved fremgangsmåder beskrevet i UK patentskrift nr. 1.523.865. Disse metoder er baseret på mellemprodukter fremstillet ud fra simpelt 5 substituerede puriner, der kan være kommercielt tilgængelige eller kan fremstilles ved velkendt teknik, som findes omtalt i litteraturen, såsom i ovennævnte håndbog. Således kan for eksempel forbindelser med formlen (III) i almindelighed frem-10 stilles ved anvendelse af en fremgangsmåde analog med fremgangsmåde (c), dvs. ved at omsætte en passende purin med en forbindelse med formlen (V).

De eventuelle omdannelse i), ii) og iii) kan gennemføres på konventionel måde. For eksempel 15 kan fjernelse af beskyttelsesgrupper i omdannelse i) gennemføres ved hydrolyse, solvolyse eller hydro-genolyse, som egnet. Med hensyn til fjernelse af beskyttelsesgrupper på aminosyre-acylgrupperne foretrækkes hydrogenolyse, f.eks. af aryloxycarbonyl-20 beskyttelsegrupper, og omdannelse af azidogruppe, f.eks. ved katalytisk hydrogenering, f.eks. ved anvendelse af en palladium-katalysator. Med hensyn til beskyttelse af grupperne i 2- og/eller 6-stilling-erne af purinkernen kan disse vælges for eksempel 25 fra arylmethylgrupper, såsom benzyl, eller tri-(C^-)alkylsilyl, f.eks. trimethylsilyl. Arylmethyl-blokeringsgrupper kan for eksempel fjernes ved hydrogenolyse, såsom ved hydrogenering i nærværelse af Raney-nikkel eller en palladium-katalysator. Trialkyl-30 silyl-blokeringsgrupper kan fjernes for eksempel ved solvolyse, såsom ved alkoholyse.

Omdannelsen af en forbindelse med formlen (I) til et farmaceutisk acceptabelt salt kan foregå på konventionel måde, f.eks. ved behandling af 35 forbindelsen med en passende syre til dannelse af et syreadditionssalt, f.eks. ved lyofilisering af en methanolisk opløsning af stamesteren med en syreopløsning.

8 DK 170045 B1

Tilsvarende kan omdannelse af et salt til stamforbindelsen med formlen (I) foregå på konventionel måde.

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer 5 også forbindelsen med formlen (I) og farmaceutisk acceptable salte deraf (i det følgende identificeret som de "aktive forbindelser") til anvendelse i medi- ' cinsk terapi, f.eks. ved behandling eller forebyggelse af en viral sygdom hos et dyr, f.eks. et pattedyr, 10 såsom mennesker. Forbindelserne er særligt anvendelige til behandling eller forebyggelse af sygdomme forårsaget af forskellige DNA-vira, såsom herpes-infektioner, for eksempel herpes simplex, varicella zoster, . cytomegalovirus samt sygdomme forår-15 saget af hepatitis B eller Epstein-Barr-Virus eller human herpes-virus-6 (HHV-6). De aktive forbindelser kan også anvendes til behandling eller forebyggelse af retrovirus-infektioner, såsom HIV-infektioner og papilloma- eller vortevirus-infektioner. Forbind-20 eiserne med formlen (I) kan, foruden anvendelse inden for human medicinsk terapi, anvendes 'til andre dyr til behandling eller forebyggelse af virale sygdomme, f.eks. hos andre pattedyr. For eksempel er de aktive forbindelser særligt anvendelige til 25 behandling af heste-rhinopneumonitis.

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer også en fremgangsmåde til behandling eller forebyggelse af en viral sygdom hos et dyr, f.eks. et pattedyr, såsom et menneske, hvilken fremgangsmåde indebærer 30 anvendelse til dyret af en effektiv antiviral mængde af en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer også anvendelse af en forbindelse med formlen (I) 35 ved fremstilling af et medikament til behandling eller forebyggelse af en - .viral infektion.

De aktive forbindelser kan anvendes ad enhver vej, der er egnet til den tilstand, der skal behandles, 9 DK 170045 B1 idet egnede veje omfatter oral, rektal, nasal, topisk (omfattende buccal og sublingual), vaginal og parenteral (inkluderende subcutan, intramuskulasr, intravenøs, intradermal, intrathecal og epidural) anvend-5 else. Det vil forstås, at den foretrukne vej kan variere med for eksempel recipientens tilstand.

For hver af de ovennævnte anvendelser og indikationer vil den nødvendige mængde af en aktiv bestanddel (som ovenfor defineret) afhænge af en 10 række faktorer inkluderende alvoren af den tilstand, der behandles, og recipientens identitet og vil blive fastlagt af lægen eller dyrlægen. I almindelighed vil imidlertid for hver af nævnte anvendelser og indikationer en passende effektiv dosis ligge inden 15 for området 0,1 til 250 mg pr. kg legemsvægt pr. dag, fortrinsvis inden for området 1 til 100 mg pr. kg legemsvægt pr. dag og navnlig inden for området 5 til 20 mg pr. kg legemsvægt pr. dag. En optimal dosis ligger på ca. 10 mg pr. kg legemsvægt pr.

20 dag. (Med mindre andet er angivet, er alle vægte af aktiv bestanddel beregnet som stamforbindelsen med formlen (I), og for salte deraf vil tallene blev forøget proportionalt). Den ønskede dosis foreligger fortrinsvis som to, tre, fire eller flere 25 subdoser givet med passende mellemrum i dagens løb.

Disse subdoser kan gives i enhedsdosisformer, for eksempel indeholdende 10 til 1000 mg, fortrinsvis 20 til 500 mg og navnlig 100 til 400 mg aktiv bestanddel pr. enhedsdosisform.

30 De omhandlede forbindelser kan gives alene eller i kombination med andre terapeutiske midler, for eksempel med 9-(2-hydroxyethoxymethyl)guanin (acyclovir) anvendt til at behandle herpes virusinfektioner, navnlig HSV (I), og med zidovudin anvendt 35 til at behandle retrovirale infektioner, navnlig HIV-infektioner.

Selvom det er muligt, at anvende de aktive bestanddele alene, foretrækkes det at benytte dem 10 DK 170045 B1 som farmaceutiske kompositioner. De omhandlede kompositioner, både til veterinær og human anvendelse, indeholder mindst én aktiv bestanddel, som ovenfor defineret, sammen med én eller flere acceptable 5 bærere og eventuelt andre terapeutiske bestanddele.

Bæreren eller bærerne skal være "acceptable" i den forstand, at de skal være kompatible med de andre * bestanddele i kompositionen og uskadelige for recipienten.

10 Kompositionerne omfatter dem, der er egnede til oral, rectal, nasal, topisk (inkluderende buccal og sublingual), vaginal eller parenteral (inkluderende subcutan, intramuskulær, intravenøs, intradermal, intrathecal og epidural) anvendelse. Kompositionerne 15 kan hensigtsmæssigt foreligge i enhedsdosisform og kan fremstilles ved en hvilken som helst af de inden for farmacien velkendte metoder. Sådanne metoder omfatter det trin, at den aktive bestanddel bringes sammen med bæreren, der udgør én eller flere hjælpe-20 bestanddele. I almindelighed fremstilles kompositionerne ved ensartet og grundigt at sammenbringe den aktive bestanddel med flydende bærere eller findelte faste bærere eller begge dele og derefter, om ønsket, forme produktet.

25 De omhandlede kompositioner, der er egnede til oral anvendelse, kan foreligge som separate enheder, såsom kapsler, oblatkapsler eller tabletter, hver indeholdende en forud fastlagt mængde af den aktive bestanddel, eller som et pulver eller granuler, 30 eller som en opløsning eller suspension i en vandig væske eller en ikke-vandig væske, eller som en flydende olie-i-vand-emulsion eller en flydende vand-i-olie-emulsion. Den aktive bestanddel kan også foreligge som en bolus, latværge eller pasta.

35 En tablet kan laves ved kompression eller formning, eventuelt med én eller flere hjælpebestand-dele. Komprimerede tabletter kan fremstilles ved 11 DK 170045 B1 i en egnet maskine at komprimere den aktive bestanddel i en frit-strømmende tilstand, såsom et pulver eller granuler, eventuelt blandet med et bindemiddel, smøremiddel, indifferent fortyndingsmiddel, præser-5 veringsmiddel, overfladeaktivt middel eller disper-geringsmiddel. Formede tabletter kan laves ved formning i en egnet maskine af en blanding af den pulverformede forbindelse befugtet med et inert flydende fortyndingsmiddel. Tabletterne kan eventuelt være 10 belagt eller forsynet med kærv og kan være sammensat således, at der tilvejebringes langsom eller styret frigivelse af den aktive bestanddel deri.

Til infektioner af øjnene eller andre eksterne væv, f.eks. mund og hud, anvendes kompositionerne 15 fortrinsvis som en topisk salve eller creme indeholdende den aktive bestanddel i en mængde på for eksempel 0,075 til 20 vægt%, fortrinsvis 0,2 til 15 vægt% og navnlig 0,5 til 10 vægt%. Når der foreligger en salve, kan de aktive bestanddele være anvendt 20 med enten paraffinisk eller vandblandbar salvebasis. Alternativt kan de aktive bestanddele være oparbejdet til en creme med en olie-i-vand-cremebasis. Yderligere kan topiske anvendelser foregå transdermalt ved hjælp af en iontophoretisk anordning.

25 Om ønsket kan den vandige fase i cremebasen for eksempel omfatte mindst 30 vægt% af en polyvalent alkohol, dvs. en alkohol med to eller flere hydroxy-grupper, såsom propylenglycol, butan-1,3-diol, mannitol, sorbitol, glycerol og polyethylenglycol og blandinger 30 deraf. De topiske kompositioner kan passende inkludere en forbindelse, der fremmer absorption eller penetration af den aktive bestanddel gennem huden eller andre angrebne arealer. Eksempler på sådanne midler, der fremmer dermal penetration, omfatter dimethyl-35 sulfoxid og beslægtede analoger.

Kompositioner, der er egnede til topisk anvendelse til øjet, omfatter også øjendråber, hvori den aktive bestanddel er opløst eller suspenderet i en passende 12 DK 170045 B1 bærer, navnlig et vandigt opløsningsmiddel for den aktive bestanddel. Den aktive bestanddel er fortrinsvis til stede i sådanne kompositioner i en koncentration på 0,5 til 20%, navnlig 0,5 til 10% og især 5 ca. 1,5 vægt%.

Kompositioner, der er egnede til topisk anvendelse i munden, omfatter pastiller indeholdende den aktive bestanddel i en smagsstofholdig basis, sædvanligvis sucrose og acacia eller tragacanth, 10 pastiller indeholdende den aktive bestanddel i en inert basis, såsom gelatine og glycerol, eller sucrose og acacia, og mundskyllemidler indeholdende den aktive bestanddel i en passende flydende bærer.

Kompositioner til rectal anvendelse kan fore-15 ligge som en suppositorie med en passende basis indeholdende for eksempel kakaosmør eller et salicylat .

Kompositioner egnede til nasal anvendelse, hvori bæreren er et fast stof, omfatter et groft 20 pulver med en partikkelstørrelse for eksempel inden for området 20 til 500 mikron, og som anvendes på samme måde som snus, dvs. ved hurtig inhalation gennem næsepassagen fra en beholder med pulveret holdt tæt op til næsen. Egnede kompositioner, hvori 25 bæreren er en væske, til anvendelse for eksempel som nasalt sprayprodukt eller næsedråber, omfatter vandige opløsninger eller olieopløsninger af den aktive bestanddel.

Kompositioner egnede til vaginal anvendelse 30 kan foreligge som pessarer, tamponer, cremer, geler, pastaer, skumprodukter eller sprayprodukter indeholdende foruden den aktive bestanddel sådanne bærere, ; der er velkendte til formålet.

Kompositioner egnede til parenteral anvendelse 35 omfatter vandige og ikke-vandige sterile injektionsopløsninger, der kan indeholde antioxidanter, pufferstoffer, bakteriostater og opløste stoffer, der gør kompositionen isotonisk med recipientens blod, DK 170045 Bl 13 og vandige og ikke-vandige sterile suspensioner, der kan indeholde: suspenderingsmidler og fortykningsmidler. Kompositionerne kan foreligge i enhedsdosiseller multidosis-beholdere, for eksempel forseglede 5 ampuller og medicinflasker, og kan lagres i en frysetørret (lyofiliseret) tilstand, der kun kræver tilsætning af den sterile flydende bærer, for eksempel injektionsvand, umiddelbart før anvendelse. Injektionsopløsninger og suspensioner, der skal fremstilles 10 umiddelbart før brug, kan fremstilles ud fra sterile pulvere, granuler og tabletter af den ovenfor beskrevne type. Kompositioner til intramuskulær anvendelse er særligt foretrukne.

Foretrukne enhedsdosis-kompositioner er dem, 15 der indeholder en daglig dosis eller daglig subdosis-enhed, som heri omtalt, eller en passende fraktion deraf, af en aktiv bestanddel.

Det skal forstås, at de omhandlede kompositioner foruden de ovenfor særligt nævnte bestanddele 20 kan indeholde andre midler, der er almindeligt anvendt til den foreliggende kompositionstype, for eksempel smagsstoffer til kompositioner egnede til oral anvendelse.

Opfindelsen tilvejebringer endvidere veteri-25 nære kompositioner indeholdende mindst én aktiv bestanddel som ovenfor defineret sammen med en veterinær bærer.

Veterinære bærere er materialer, der er nyttige med henblik på kompositionens indgift, og kan 30 være faste, flydende eller luftformige materialer, der iøvrigt er inerte eller acceptable på det veterinære område og er kompatible med den aktive bestanddel. Disse veterinære kompositioner kan anvendes oralt, parenteralt eller ad anden ønsket vej.

35 Til oral anvendelse kan kompositionerne fore ligge i form af tablet, granul, stor kreaturmedicin-dosis, pasta, oblatkapsel, kapsel eller fodersupple- DK 170045 B1

H

ment. Granuler kan laves ved velkendt teknik med vådgranulation, prækompression eller slåning. De kan gives til dyr i et inert flydende vehikel, således at der fremkomner en stor kreaturmedicindosis, eller 5 i en suspension med vand- eller olie-basis. Yderligere hjælpebestanddele, såsom et dispenseringsmiddel, er fortrinsvis inkluderet. Disse kompositioner inde- * holder fortrinsvis fra 15 til 85% af den aktive bestanddel.

10 Opfindelsen beskrives nærmere gennem følgende eksempler.

DK 170045 B1 15

Eksempel 1A

2-(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H(purin-9-yl)methoxy)-ethyl-L-valinat.

a) 2-[(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)-methoxy ]ethyl-N- [ (benzyloxy /carbonyl ] -L-valinat.

5 En suspension af acyclovir (2,000 g, Burroughs

Wellcome Co.) i tørt dimethylformamid (DMF) (150 ml) blev opvarmet til 60°C, hvorved fremkom en farveløs opløsning. CBZ-L-Valin (3,012 g, Sigma Chemicals,

St. Louis MO og J.Am.Chem. Soc. 79, 5697 (1957)), 10 4-dimethylaminopyridin (154 mg, DMAP, Chem. Ber.

89, 2921-2933 [1956]) og dicyclohexylcarbodiimid (2,998 g, DCC, US patentskrift nr. 2.656.383) blev sat til den varme opløsning. Den svagt gule opløsning blev henstillet til afkøling til rumtemperatur og 15 omrørt natten over. Et hvidt bundfald blev observeret efter 30 minutter. Reaktionsblandingen fik igen tilsat de ovennævnte mængder af CBZ-L-valin, DMAP og DCC, og den uklare suspension blev omrørt ved rumtemperatur i 2 dage. Suspensionen blev filtreret 20 for at fjerne 1,418 g af et hvidt fast stof. Det farveløse filtrat blev koncentreret, hvorved fremkom en lysegul olie. Olien blev renset ved flash-chroma- . tografi på silicagel, idet der blev elueret med en methanol-i-dichlormethan-gradient (0-15%), hvorved 25 titelforbindelsen fremkom som 3,751 g (92,1%) af et hvidt fast stof.

b) 2-[(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)me-thoxy]ethy1-L-vali nat.

30 En blanding af 2-[(2-amino~1,6-dihydro-6- oxo-9H-purin-9-yl)methoxy]ethyl-N-[benzyloxy)carbonyl]-L-valinat (5,0 g), 5% palladium-på-kul-katalysator-50% vand (2 g) og dimethylformamid (50 ml) blev rystet på et Parr-apparat ved 40 psi i 3 timer.

35 Reaktionsblandingen blev filtreret gennem en pude af Celite og inddampet i vakuum, hvorved fremkom en olie. En fast stof blev krystalliseret af vand/ 16 DK 170045 B1 ethanol (1:3 vol/vol) og omkrystalliseret, hvorved fremkom 1,5 g af titelforbindelsen.

Analyse:

Beregnet: C: 48,14 H: 6,22 N: 25,91

Fundet : C: 47,84 H: 6,26 N: 25,75 5 c

Eksempel 1B

2- [ 2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H (purin-9-yl)methoxyj-ethyl-L-valinat-hydrochlorid-monohydrat.

a) 2-[ (2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)- 10 methoxy]ethyl-N-[(benzyloxy)carbonyl]-L-valinat.

En suspension af acyclovir (2,000 g, Burroughs Wellcome Co.) i tørt dimethylformamid (DMF) (150 ml) blev opvarmet til 60°c,hvorved fremkom en farveløs opløsning. CBZ-L-Valin (3,012 g, Sigma Chemicals, 15 st. Louis MO og J. Am. Chem. Soc. 79, 5697 (1957)), 4-dimethylaminopyridin (154 mg, DMAP, Chem. Ber.

89, 2921-2933 [1956]) og dicyclohexylcarbodiimid (2,998 g, DCC, US 2.656.383) blev sat til den varme opløsning. Den svagt gule opløsning blev henstillet 20 til afkøling til rumtemperatur og omrørt natten over. Et hvidt bundfald blev observeret efter 30 minutter. Til reaktionsblandingen blev der igen sat de ovennævnte mængder af CBZ-L-valin, DMAP og DCC, og den uklare suspension blev omrørt ved rum-25 temperatur i 2 dage. Suspensionen blev filtreret for at fjerne 1,418 g af et hvidt fast stof. Det farveløse filtrat blev koncentreret, hvorved fremkom en lysegul olie. Olien blev renset ved flash-chroma-tografi på silicagel, idet der blev elueret med 30 en methanol-i-dichlormethan-gradien (0-15%), hvorved fremkom titelforbindelsen som 3,751 g (92,1%) af et hvidt fast stof.

b) 2-[(2-Amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)- 35 methoxy]ethyl-L-valinat-hydrochlorid-monohydrat.

En blanding af 2-[(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)methoxy]ethyl-N-[benzyloxy) car- 17 DK 170045 B1 bonyl]-L-valinat (3,730 g), 5% palladium-på-kul-katalysator (377 mg), methanol (100 ml), tetrahydro-furan (THF) (100 ml) og en 0,5 M vandig HCl-opløsning (18 ml) blev rystet på et Parr-apparat ved 50 psi H2 i én dag. Reaktionsblandingen blev filtreret 5 gennem en pude af Celite og derefter koncentreret, hvorved vandtes et hvidt fast stof. Dette faste stof blev omkrystalliseret af vand/ethanol, hvorved fremkom titelforbindelsen som 1,762 g (60,0%) af et hvidt pulver, smp. 150°C (fast stof krymper), ^0 ændres gradvis til olie og dekomponerer med skumning ved 195°C.

Analyse:

Beregnet: C: 41,22 H: 6,12 N: 22,19 Cl: 9,36

Fundet : C: 41,09 H: 6,10 N: 22,12 Cl: 9,28 15

Eksempel 2

Tabletkompositioner

De følgende kompositioner A, B og C blev 20 fremstillet ved vådgranulation af bestanddelene med en povidonopløsning efterfulgt af tilsætning af magnesiumstearat og kompression.

Komposition A

18 DK 170045 B1 mg/tablet mg/tablet Aktiv bestanddel 250 250

Lactose B.P. 210 26

Povidon B.P. 15 9 5 Natriumstivelseglycollat 20 12

Magnesiumstearat j> _3 500 300

Komposition B

10 mg/tablet mg/tablet

Aktiv bestanddel 250 250

Lactose 150 -

Avicel PH 101 60 26

Povidon B.P. 15 9 15 Natriumstivelseglycollat 20 12

Magnesiumstearat _5 _3 500 300

Komposition C

20 mg/tablet

Aktiv bestanddel 100

Lactose 200

Stivélse: 50

Povidon B.P. 5 25 Magnesiumstearat £ 359

De følgende kompositioner D og E blev fremstillet ved direkte kompression af de blandede bestanddele. Lactosen i komposition E er af kompressions-30 typen.

Komposition D

19 DK 170045 B1 mg/tablet

Aktiv bestanddel 250

Avicel 150

Magnesiumstearat _A_ 5 404

Komposition E

mg/tablet

Aktiv bestanddel 250 10 Lactose 150

Avicel 100

Magnesiumstearat 5 505 15 Komposition F (komposition med styret frigivelse)

Kompositionen blev fremstillet ved vådgranulation af bestanddelene (nedenfor) med en povidonop-løsning efterfulgt af tilsætning af magnesiumstearat og kompression.

20 mg/tablet

Aktiv bestanddel 500

Hydroxypropylmethylcellulose 112 (Methocel K4M Premium)

Lactose B.P. 53 25 Povidon B.P. 28

Magnesiumstearat 7 700

Eksempel 3 30 Kapselkompositioner

Komposition A

En kapselkomposition blev fremstillet ved at blande bestanddelene fra komposition D i Eksempel ‘2 ovenfor og fylde blandingen i todelte hårde gela-35 tinekapsler. Komposition B (nedenfor) blev fremstillet på tilsvarende måde.

Komposition B

20 DK 170045 B1 mg/kapsel

Aktiv bestanddel 250

Lactose B.P. 143

Natriumstivelseglycollat 25 5 Magnesiumstearat 2 420

Komposition C

mg/kapsel 10 Aktiv bestanddel 250

Macrogol 4000 B.P. 350 600

Kapsler blev fremstillet ved at smelte Macro-15 gol 4000 BP, dispergere den aktive bestanddel i smelten og fylde smelten i en todelt hård gelatine-kapsel .

Komposition D

20 mg/kapsel

Aktiv bestanddel 250

Lecithin 100

Arachisolie 100 450 25

Kapsler blev fremstillet ved at dispergere den aktive bestanddel i lecithin og arachisolie og fylde dispersionen i bløde elastiske gelatinekapsler .

30

Komposition E (kapsel med styret frigivelse) 1

Den følgende kapselkomposition med styret frigivelse blev fremstillet ved at ekstrudere bestand- t delene a, b og c med et ekstruderingsapparat efter-35 fulgt af sfæronisering af ekstrudatet og tørring.

De tørrede pellets blev derefter belagt med frigivelsesstyrende membran (d) og fyldt i en todelt hård 21 DK 170045 B1 gelatinekapsel.

mg/kapsel

Aktiv bestanddel 250

Mikrokrystallinsk cellulose 125

Lactose B.P. 125 5 Ethylcellulose 13 513

Eksempel 4

Ophthalmisk opløsning 10 Aktiv bestanddel 0,5 g

Propylenglycol 0,2 g

Thiomersal 0,001 g

Renset vand til 100 ml pH indstillet til 7,5 15

Eksempel 5

Injicerbar komposition

Aktiv bestanddel 0,200 g

Steril, pyrogen-fri citrat-20 puffer (pH 7,0) til 10 ml

Den aktive bestanddel blev opløst i det meste af citratpufferen (35-40°c), derefter fyldt op til volumen og filtreret gennem et sterilt micropore-filter ind i en steril 10 ml's ravfarvet glasmedi-25 cinflaske (type 1) og forseglet med sterile propper og forseglinger.

Eksempel g

Intramuskulær injektion 30 Aktiv bestanddel 0,20 g

Benzylalkohol 0,10 g

Glycofurol 75 1,45 g

Injektionsvand til 3,00 ml

Den aktive bestanddel blev opløst i glycofurol.

35 Benzylalkoholen blev derefter tilsat og opløst, og vand blev tilsat til 3 ml. Blandingen blev derefter filtreret gennem et sterilt micropore-filter og 22 DK 170045 B1 forseglet i sterile 3 ml's ravfarvede glasmedicinflasker (type 1).

Eksempel 7

Sirupsuspension 5 Aktiv bestanddel 0,25 g ^

Sorbitol-opløsning 1,50 g

Glycerol 2,00 g

Natriumbenzoat 0,005 g

Smagsstof 0,0125 ml 10 Renset vand til 5,00 ml

Natriumbenzoatet blev opløst i en portion af det rensede vand, og sorbitolopløsningen blev tilsat. Den aktive bestanddel blev tilsat og opløst.

Glycerolen og smagsstofferne blev tilsat og iblandet 15 Vand blev tilsat til et slutvolumen på 5 ml.

Eksempel 8

Suppositorie mg/suppositorie 20 Aktiv bestanddel (63 ym) 250 Hårdfedt;' BP (Witepsol H15 -Dynamit NoBel) 1700 1950 k

Den aktive bestanddel anvendtes som et pulver, 25 hvori mindst 90% af partiklerne var på 63 ym i diameter eller mindre.

En femtedel af Witepsol H15 blev smeltet i en med vanddampkappe udstyret pande ved 45°C maksimalt. Den aktive bestanddel blev sigtet gennem en 50 200 ym sigte og sat til den smeltede basis under blanding, idet der anvendtes en silverson udstyret med et skærehoved, indtil der var opnået en glat dispersion. Mens blandingen holdtes ved 45°C blev det resterende Witepsol H15 sat til suspensionen, 55 0g der blev omrørt for at sikre en homogen blanding.

Hele suspensionen blev ledt gennem en 250 ym rustfri stålsigte og blev under kontinuerlig omrøring henstillet 23 DK 170045 B1 til afkøling til 40°C. Ved en temperatur på 38-40°C blev 2,02 g af blandingen fyldt i egnede formstofforme. Suppositorierne blev henstillet til afkøling til rumtemperatur.

Eksempel 9

Pessar mg/pessar

Aktiv bestanddel 63 pm 250

Vandfri dextrose 543 ^ Stivelse 200

Magnesiumstearat 7 1000

Ovennævnte bestanddele blev blandet direkte, og der blev fremstillet pessarer ved direkte kompres-^ sion af den resulterende blanding.

Eksempel 10 a) Antiviral aktivitet

Herpes Simplex-virus (HSV 1) blev underkastet 20 bestemmelse i monolag af Vero-celler i multirumsbakker. Aktivitet af forbindelser blev bestemt ved plaque-reduktionsbestemmelsen, hvor et celle-monolag blev inficeret med en suspension af HSV 1 og derefter overlejret med næringsagarose i form af en gel for 25 at sikre, at der ikke var nogen spredning af virus gennem hele kulturen. Et forbindelses-koncentrationsområde af kendt molaritet blev inkorporeret i nærings-agarose-overlaget. Plaque-antal ved hver koncentration blev udtrykt som procenter af kontrollen, og der blev optegnet en dosis-respons-kurve. Ud fra denne kurve blev den 50% inhibitoriske koncentration (IC^q) vurderet.

24 DK 170045 B1

Forbindelse IC50 μΜ

Eksempel 1 B 0,84

Acyclovir 0,08 - 0,1 5 b) Bestemmelse af oral biotilgængelighed

Long Evans-rotter fik testforbindeisen ved sondefodring i en dosis ækvivalent med 25 mg/kg acyclovir. Urinen blev opsamlet for 24 og 48 timer post-dosis, ultrafiltreret og analyseret ved revers-10 fase-HPLC. Den orale biotilgængelighed af forbindelsen blev udtrykt som den procent af dosen, der var udskilt i urinen som acyclovir.

Forbindelse Urinær genvinding (% af dosis) som 15 acyclovir

Eksempel 1 63

Acyclovir (ACV) 15

Glycylester af ACV 30 L-alanylester af ACV 34 20 d) Toxicitetsdata

Bestemmelse af vækstinhibition af ikke-inficerede pattedyrceller

De undersøgte forbindelsers evne til at inhibere 23 væksten af D98-celler (humane) og L-celler (murine) måltes ved bestemmelse af celleantal efter tre dages udsættelse af et standard-celleantal for forskellige forbindelsesfortyndinger (Rideout, J.L., Krenitsky, T.A., Koszalka, G.W., Cohn, N.K., Chao, E.Y., Elion, 30 G.B. Latter, V.S. og Williams, R.B. (1982), J.Med.Chem. 25^:1040-1044). Celleantallet blev derefter sammenlignet med det antal, der var opnået i fravær af forbindelse. Celletælling foregik enten ved direkte partikeltællinger efter trypsinering af monolaget eller 35 ved spektrofotometrisk bestemmelse af mængden af vital farve, der var optaget af cellerne. Sammen- 25 DK 170045 B1 lignelige resultater blev opnået ved de to metoder. Dataanalyse

Den forbindelseskoncentration, der resulterede i 50% af .kontrolværdier (IC50), blev beregnet 5 enten ved direkte interpolation ud fra kurver over log af forbindelseskoncenrationen versus procenten af kontrolværdien, eller ud fra et computerprogram, der analyserer dataene ifølge samme algoritme. Data i området 20% til 80% af kontrol anvendtes i disse bereg-^0 ninger.

Eksempel Celle toxicitet (% af kontrol ved 100 ym) D-98 celler L-celler 15 ACV (acyclovir) 99 72 1B 91 85

Claims

2. Salt af forbindelsen ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er et syreadditionssalt. *
3. Salt ifølge krav 2, kendetegnet ved, at det er afledt af saltsyre, svovlsyre, phosphorsyre, maleinsyre, fumarsyre, citronsyre, vinsyre, mælkesyre, 10 eddikesyre eller p-toluensulfonsyre. 4. 2-((2-Amino-l,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl) -methoxy)ethyl-L-valinat-hydrochlorid ifølge krav 3. 5. 2-((2-Amino-l,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl)-methoxy)ethyl-L-valinat ifølge krav 1.
6. Forbindelse ifølge et vilkårligt af de foregående krav til anvendelse inden for medicinsk terapi.
7. Forbindelse ifølge krav 6 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af en virusinfektion.
8. Forbindelse ifølge krav 7 til anvendelse ved 20 behandling eller forebyggelse af en herpes simplex virus infektion.
9. Forbindelse ifølge krav 8 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af en herpes simplex virus type 1 infektion.
10. Forbindelse ifølge krav 7 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af en varicella zoster virus infektion.
11. Forbindelse ifølge krav 10 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af varicella.
12. Forbindelse ifølge krav 10 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af zoster.
13. Forbindelse ifølge krav 9 til anvendelse ved * behandling eller forebyggelse af en cytomegalovirus-infektion. 5
14. Forbindelse ifølge krav 7 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af en Epstein-Barr-virus-infektion. DK 170045 B1
15. Forbindelse ifølge krav 7 til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af en hepatitis B virus infektion.
16. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt 5 af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en virusinfektion.
17. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en herpes virus infektion.
18. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en herpes simplex virus infektion.
19. Anvendelse af en forbindelse ifølge krav 18 ved 15 fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en herpes simplex virus type 1 infektion.
20. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en varicella zoster virus 20 infektion.
21. Anvendelse af en forbindelse ifølge krav 20 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af varicella.
22. Anvendelse af en forbindelse ifølge krav 20 ved 25 fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af zoster.
23. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en cytomegalovirus- 30 infektion.
24. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en Epstein-Barr-virus-infektion.
25. Anvendelse af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 ved fremstillingen af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af en hepatitis B virus DK 170045 B1 infektion.
26. Farmaceutisk komposition, der som aktiv bestanddel indeholder en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5 sammen med en farmaceutisk acceptabel bærer.
27. Farmaceutisk komposition ifølge krav 26, som er tilpasset til anvendelse ved behandling eller forebyggelse * af herpes simplex virus infektion.
28. Farmaceutisk komposition ifølge krav 26, som er tilpasset til anvendelse ved behandling eller forebyggelse 10 af varicella zoster virus infektion.
29. Farmaceutisk komposition ifølge krav 26, som er tilpasset til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af cytomegalovirus-infektion.
30. Farmaceutisk komposition ifølge et vilkårligt af 15 kravene 26-29, som er tilpasset til oral administrering.
31. Farmaceutisk komposition ifølge krav 30, i form af en tablet eller kapsel.
32. Farmaceutisk komposition ifølge krav 31, hvor tabletten eller kapslen indeholder fra 10 til 1000 mg af en 20 forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5.
33. Farmaceutisk komposition ifølge krav 31, hvor tabletten eller kapslen indeholder fra 20 til 500 mg af en forbindelse ifølge et vilkårligt af kravene 1-5.
34. Anvendelse af forbindelserne ifølge krav 1-5 i 25 kombination med zidovudine ved fremstillingen af et lægemiddel til anvendelse ved behandling eller forebyggelse af HIV-infektion.
35. Fremgangsmåde til fremstilling af 2-((2-amino- 1,6-dihydro-6-oxo-9H-purin-9-yl )methoxy)ethyl-L-valinat med 30 formlen I OH 1¾ ·» : 35 CH20CH2CH20C0CH(Ri)NH2 DK 170045 B1 hvori R1 er en gruppe med formlen -CH( CH^ hvor estergruppen (0C0CH(R^)NH2 er * L-konfiguration, eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, kendetegnet ved, at 5 a) en forbindelse med den almene formel (II) V\ . 1 / (II) 10 CH OCH CH OH 2 2 2 hvor X er en eventuelt beskyttet hydroxygruppe, og Y er en eventuelt beskyttet aminogruppe, 15 omsættes med en eventuelt beskyttet L-valin eller en funktionel ækvivalent deraf, b) en forbindelse med den almene formel (III) XjO G M ^|N CH^OCH^CH^OCOCH(R^)NH^ 25 hvor R1 er som ovenfor defineret, M er en hydroxygruppe, og G er et atom eller en gruppe, der kan udskiftes med eller omdannes til en aminogruppe, eller G er en aminogruppe, og M er et atom eller en gruppe, der kan udskiftes med eller omdannes til en hydroxygruppe, 30 omdannes til en forbindelse med formlen (I) eller et . farmaceutisk acceptabelt salt deraf, eller c) en forbindelse med den almene formel (IV) x „ /V\ ,Α,Λγ (IV) Q DK 170045 B1 hvor X og Y er som ovenfor defineret, og Q er et eliminerbart atom eller en eliminerbar gruppe, omsættes med en forbindelse med den almene formel (V)
5 ACH2OCH2CH2OCOCH(R)R2 (v) « hvor er som ovenfor defineret, A er en eliminerbar gruppe eller et eliminerbart atom, og R2 er en eventuelt beskyttet aminogruppe, 10 og at der, om ønsket, gennemføres én eller flere af følgende omdannelser i vilkårlig ønsket rækkefølge: i) fjernelse af en hvilken som helst beskyttelsesgruppe, ii) når det resulterende produkt er en forbindelse med 15 formlen (I), omdannelse af nævnte forbindelse til et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, og iii) når det resulterende produkt er et farmaceutisk acceptabelt salt af en forbindelse med formlen 20 (I), omdannelse af nævnte salt til stamforbin- delsen. ψ