FR2723093A1

FR2723093A1 - Esters d'acyle d'acides amines achiraux du glanciclovir

Info

Publication number: FR2723093A1
Application number: FR9509077A
Authority: FR
Inventors: John H Nestor; Scott W Wromble; Hans Maag
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1994-07-28
Filing date: 1995-07-26
Publication date: 1996-02-02
Anticipated expiration: 2015-07-26
Also published as: JPH0853452A; US5543414A; IT1279045B1; FR2723093B1; DE19526163A1; ITMI951450A1; ITMI951450A0

Abstract

L'invention concerne des composés de formule (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle X est un hydrogène ou un radical chloro, amino ou hydroxy ; R**1 est un résidu acyle d'acide aminé achiral ayant un atome de carbone alpha-tertiaire. On préfère les résidus acyle d'acides aminés achiraux ceux qui ont la formule (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle chaque radical R**2 est un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone ou benzyle ; ou deux groupes R**2 se lient l'un à l'autre pour former un groupe polyméthylène ayant de 3 à 9 atomes de carbone, et leurs sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique sont des agents antiviraux présentant une absorption accrue. L'invention décrit aussi des intermédiaires pour la préparation des composés de formule I.

Description

ESTERS D'ACYLE D'ACIDES AMINES ACHIRAUX DU GANCICLOVIR

ET LEURS DERIVES

La présente invention concerne de nouveaux médica-

ments antiviraux, en particulier des esters d'acides aminés de dérivés de la purine, et plus particulièrement les esters qui dérivent du ganciclovir et d'un acide aminé achiral, caractérisé par un atome de carbone a tertiaire, et leurs dérivés. L'invention concerne aussi des composés intermédiaires, des procédés pour préparer

les médicaments antiviraux, des compositions pharmaceu-

tiques correspondantes, et leur utilisation dans le trai-

tement des maladies à virus et des maladies apparentées.

Le brevet britannique N 1 523 865 décrit des déri-

vés antiviraux de purine présentant une chaîne acyclique

en position 9. Parmi ces dérivés, le 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-l,6-dihydropurine-9-yl)méthoxy-éthanol,

dont la dénomination commune internationale est "acy-

clovir", s'est révélé présenter une bonne activité con-

tre les herpèsvirus tels que l'herpès simplex. Bien que

l'acyclovir se soit révélé très efficace en administra-

tion locale ou parentérale, il n'est que modérément

absorbé après administration orale.

Le brevet US N 4 355 032 décrit le composé 9-[(2-

hydroxy-l-hydroxyméthyl-éthoxy)méthyl]-guanine, ou 2-(2-

amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propane-

diol, dont la dénomination commune internationale est "ganciclovir". Le ganciclovir est extrêmement efficace contre les virus de la famille herpès, par exemple

contre l'herpès simplex et le cytomégalovirus. Il pré-

sente une vitesse d'absorption relativement petite quand on l'administre par voie orale, et il faut l'utiliser à de fortes posologies si l'on fait appel à cette voie. Le ganciclovir est le plus souvent administré par perfusion

intraveineuse. Ce mode d'administration présente l'incon-

vénient d'être très malcommode pour le patient, en exi-

geant souvent les services d'un médecin, d'une infirmière

ou d'autres personnels de soins. Il existe aussi un cer-

tain risque d'infection, qui est particulièrement grave chez les patients immuno-compromis, qui subissent un

traitement au ganciclovir et peuvent présenter une fai-

ble résistance aux infections. Il est donc extrêmement souhaitable de disposer d'un ganciclovir présentant un

meilleur profil d'absorption par voie orale.

La demande de brevet britannique GB-2 122 618 décrit des dérivés de la 9(2-hydroxyéthoxyméthyl)guanine ayant la formule générale suivante: I xi N X a

C 2C;< CH20

F2

dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de sou-

fre, Rl est un groupe hydroxy ou amino, R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe de formule -CH20R3a, et R3 et

R3a peuvent être identiques ou différents, chacun repré-

sentant un radical acyle d'acide aminé, et leurs sels

acceptables d'un point de vue physiologique. Ces compo-

sés peuvent être utilisés dans le traitement des infec-

tions virales et présentent une grande hydrosolubilité,

qui les rend intéressants pour la formulation de prépa-

rations pharmaceutiques aqueuses. Bien que la formule générale donnée dans la demande de brevet britannique ci-dessus englobe les composés dans lesquels R2 est le groupe -CH20R3a, des composés spécifiques de ce groupe ne sont pas décrits. La demande de brevet ci-dessus dit aussi que les formulations utilisées avec ces composés présentant une meilleure hydrosolubilité comprennent des

formulations orales, rectales, nasales, locales, vagina-

les ou parentérales.

La demande de brevet britannique GB-2 104 070 décrit des composés antiviraux de formule P M N

H2N [

CH2XCHCH20H

CH20H dans laquelle R est un groupe hydroxy ou amino, et X est un atome d'oxygène ou de soufre, et leurs sels et esters acceptables d'un point de vue physiologique. La formule générale englobe le ganciclovir et ses sels et esters acceptables d'un point de vue physiologique. Les esters

comprennent ceux qui contiennent, en chacune des posi-

tions terminales de la chaîne latérale en position 9 des

composés de la formule générale, ou sur les deux posi-

tions terminales, un groupe formyloxy, un groupement ester de type alcanoyloxy en Cl-16 (par exemple en C1-6) (par exemple acétoxy ou propionyloxy), aralcanoyloxy éventuellement substitué (par exemple phényl-(alcanoyle

en Cl-4)oxy, tel que phényolacétoxy) ou aroyloxy éven-

tuellement substitué (par exemple benzoyloxy ou naphtoyl-

oxy). Les groupes aralcanoyloxy ou aroyloxy-ester men-

tionnés ci-dessus peuvent être substitués par exemple par un ou plusieurs halogènes (par exemple des atomes de chlore ou de brome) ou par des groupes amino, nitrile ou sulfamido, le fragment aryle du groupement contenant

avantageusement de 6 à 10 atomes de carbone.

La demande de brevet européen EP-O 375 329 décrit des prodrogues ayant la formule suivante B I

CH20CHCH20R1

I

CH20R

dans laquelle R et Rl, indépendamment l'un de l'autre, sont chacun choisis parmi l'atome d'hydrogène et les résidus aminoacyle, pourvu qu'au moins l'un des radicaux R et Rl représente un résidu acyle d'acide aminé et B représente un groupe ayant les formules suivantes

NH2 R2

N N N

0 H2N N" N

I I dans lesquelles R2 représente un groupe alcoxy à chaîne droite en C16, à chaîne ramifiée en C3-6 ou cyclique en C3-6, ou encore un groupe hydroxy ou amino, ou un atome d'hydrogène, et leurs sels acceptables d'un point de vue

physiologique. Ces prodrogues sont décrites comme présen-

tant une biodisponibilité avantageuse après administra-

tion par voie orale, ce qui conduit à des quantités éle-

vées du composé précurseur dans l'organisme.

L'Exemple 3 b) de la demande de brevet européen EP-

0 375 329 décrit la préparation de l'ester bis(L-isoleu-

cinate) du ganciclovir, qui se présente sous forme d'une mousse blanche. L'Exemple 4 b) décrit la préparation de l'ester bis(glycinate) du ganciclovir, sous forme d'un solide blanc. L'Exemple 5 b) décrit la préparation de l'ester bis(L-valinate) du ganciclovir, sous forme d'un solide. L'Exemple 6 b) décrit la préparation de l'ester bis(L-alaninate) du ganciclovir sous forme d'un sirop contenant 90 % du bis-ester et 10 % du monoester. Les bis-esters décrits sont des substances non cristallines, qui sont difficiles à mettre en oeuvre pour fabriquer

les formes posologiques pharmaceutiques orales.

Jensen et al., Acta Pharm. Nord. 3(4), 243-247 (1991), décrivent la synthèse, l'hydrolyse enzymatique

et les propriétés physico-chimiques de prodrogues dies-

ters 4-(aminométhyl)benzoates N-substitués du ganciclo- vir, ayant la formule suivante tI" ?

I 0 CH20

CH2 -CH-O

dans laquelle R peut être

C X CX2_C CH,) 2

on O -c4 H2--NC 2.C2Hs5)2

--OCH2-NC CJH7) 2

O,, C v CHN /l

"

Ces esters peuvent être synthétisés et évalués avec comme objectif l'amélioration des caractéristiques de libération du ganciclovir. Les esters sont soumis à une hydrolyse enzymatique par le plasma humain pour donner le médicament précurseur, l'hydrolyse s'effectuant par la formation du monoester correspondant. Les auteurs évaluent ces esters pour ce qui est de leur vitesse d'hydrolyse enzymatique et de leur lipophilie, et en concluent que les propriétés de ces esters font des diesters un type de prodrogue prometteur du ganciclovir, pour améliorer ses caractéristiques de libération, par

exemple en administration parentérale.

Martin et al., J. Pharm. Sci. 76(2), 180-184 (1987) décrivent des esters mono- et diacyliques du ganciclovir, qui ont fait l'objet d'essais pour déterminer leur bio- disponibilité après administration orale. Les auteurs

indiquent que l'ester dipropionate présente une biodis-

ponibilité d'environ 42 % supérieure à celle du ganciclo-

vir proprement dit.

La demande de brevet européen N 0O 158 847 dit entre

autres que le 6-désoxy-acyclovir et le 6-désoxy-ganci-

clovir peuvent être facilement convertis in vivo sous l'action d'enzymes, respectivement en acyclovir et en ganciclovir. A partir d'expériences effectuées sur le rat, les inventeurs ont constaté que l'administration orale de ces prodrogues contenant un groupe 6-désoxy

conduit à une absorption efficace par le tractus gastro-

intestinal, avec des taux plasmatiques élevés des médi-

caments précurseurs.

Maudgal et al., Arch. Ophthalmol. 102, 140-142 (1984), décrivent l'ester de glycine de l'acyclovir comme

étant efficace dans le traitement de la kératite épithé-

liale et du stroma à herpès simplex et de l'iritis asso-

ciée, après administration sous forme d'un collyre à 1 %

à des lapins. Les auteurs décrivent les esters de gly-

cine, d'alanine, de P-alanine et succinyliques de l'acy-

clovir, et disent que la solubilité de l'ester de glycine

est environ 30 fois supérieure à la solubilité de l'acy-

clovir proprement dit, ce qui permet d'utiliser l'ester de glycine en collyre à des concentrations allant jusqu'à 6 %, tandis que l'acyclovir par lui-même est utilisé comme pommade, ce qui est peu efficace dans l'iritis ou

dans les maladies du stroma.

Colla et al., J. Med. Chem. 98, 602-604 (1983), disent que plusieurs dérivés esters hydrosolubles de l'acyclovir et leurs sels peuvent être utilisés comme

prodrogues de l'acyclovir. Les auteurs disent que l'acy-

clovir ne peut être administré en collyre ou en injection intramusculaire, en raison de sa solubilité limitée dans l'eau, et ils ont donc synthétisé des dérivés de l'acy-

clovir, qui sont plus hydrosolubles que le composé pré-

curseur. Les auteurs décrivent le chlorhydrate de l'ester de glycine, le chlorhydrate de l'ester d'alanine le chlorhydrate de l'ester de palanine, le sel de sodium de l'ester succinylique et l'ester azidoacétate. Selon

les auteurs, les quatre premiers esters se révèlent pres-

que aussi actifs que l'acyclovir proprement dit dans le

cadre d'une analyse effectuée dans des cultures de splé-

nocytes primaires de lapin contre différentes souches de l'herpès simplex virus de type 1 et de type 2. Les auteurs donnent à penser que ces esters de l'acyclovir devraient être plus pratiques, en utilisation clinique, que le composé précurseur en traitement local sous forme de collyre, et en traitement systémique des infections à herpès virus, qui sont bien sensibles à un traitement à l'acyclovir par voie intraveineuse. Par contraste avec l'acyclovir, ces esters devraient être administrés en des volumes beaucoup plus petits, et donc par injection intramusculaire. Beauchamp et al., Antiviral Chemistry & Chemotherapy 3, 157-164 (1992) décrivent 18 esters d'acides aminés du médicament antiherpétique acyclovir, et leur efficacité comme prodrogues de l'acyclovir, évaluée sur le rat par

une mesure de la récupération urinaire de l'acyclovir.

Dix prodrogues donnent dans l'urine des quantités du

médicament précurseur plus grandes que l'acyclovir pro-

prement dit: les esters glycylique, D,L-alanylique, L-

alanylique, L-2-aminobutyrate, D,L-valylique, L-valyli-

que, DL-isoleucylique, L-isoleucylique, L-méthionylique et L- prolylique. Les esters d'acides L-aminés sont de

meilleurs prodrogues que les isomères D ou D,L correspon-

dants, et on peut donc en déduire la mise en jeu d'un transporteur stéréosélectif. I1 ressort du Tableau 1 de cette publication, qui présente des données chimiques et la biodisponibilité orale des 18 esters d'acides aminés,

que les esters des acides D-aminés ont une biodisponibi-

lité orale plus faible que l'acyclovir proprement dit. En

conséquence, comme les esters d'acides D-aminés ne pré-

sentent aucun avantage sur l'acyclovir, on ne les utilise pas comme prodrogues de l'acyclovir. Cependant, l'ester

glycylique achiral de l'acyclovir présente une biodispo-

nibilité par voie orale de 58 % supérieure à celle de l'acyclovir (dans l'analyse de récupération urinaire, on récupère 30 % de l'acyclovir administré sous la forme de

l'ester glycylique, tandis que l'on récupère avec l'acy-

clovir proprement dit 19 % de l'acyclovir). Selon les auteurs, l'ester Lvalylique de l'acyclovir représente

la prodrogue la meilleure parmi les esters étudiés.

Le brevet européen 308 065 dit que les esters de valine et d'isoleucine de l'acyclovir, de préférence sous

forme L, présentent une forte augmentation de l'absorp-

tion par l'intestin après administration orale, par com-

paraison avec d'autres esters et l'acyclovir proprement dit. La demande de brevet japonais 05 097 887 (Derwent

93-164474/20) décrit entre autres certains esters de 2-

méthylalanine [(CH3)2-C(NH2)-COOH] de dérivés de la 2'-

désoxy-5-fluoro-uridine, comme agents antinéoplasiques

utiles à faible toxicité.

Actuellement, le médicament le plus important pour le traitement des infections à cytomégalovirus est le ganciclovir. Cependant, sa biodisponibilité orale très limitée, ainsi que la nécessité d'une lente perfusion intraveineuse journalière du médicament (ou d'injections ou d'implants dans l'humeur vitrée) montrent qu'il est

urgent de disposer d'une forme posologique orale présen-

tant une meilleure biodisponibilité.

La présente invention met à disposition une formu-

lation stable de prodrogue du ganciclovir, présentant une meilleure absorption orale et une faible toxicité. Ces caractéristiques sont particulièrement intéressantes pour ce qui est de supprimer les infections herpétiques chez les patients immuno-compromis, chez lesquels une

administration orale représente du point de vue théra-

peutique le choix le meilleur. En outre, les principes actifs présentent des propriétés pharmacologiques, qui

en autorisent une meilleure caractérisation et une meil-

leure transformation pharmaceutique. D'une manière sur-

prenante, on constate que certains esters d'acides aminés achiraux non naturels comportant un atome a-tertiaire

présentent ces caractéristiques souhaitées.

Dans un premier aspect, la présente invention met à disposition un composé de formule X N2N (I)

H12N N N<1

R 'ODR O O

HO dans laquelle X est un hydrogène ou un radical chloro, amino ou hydroxy; et Ri est un résidu acyle d'acide aminé achiral comportant un atome de carbone a tertiaire;

ou l'un de ses sels acceptables d'un point de vue phar-

maceutique. Les acides aminés achiraux appropriés ont de

4 à 16 atomes de carbone.

On préfère les composés de formule I dans laquelle

le résidu acyle d'acide aminé achiral a la formule sui-

vante:

Ré R2

H2N X CO-

dans laquelle chacun des radicaux R2 est un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone ou benzyle; ou encore les deux groupes R2 sont liés l'un à l'autre pour former un groupe polyméthylène ayant de 3 à 9 atomes de carbone; ou leurs

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

Selon un deuxième aspect, la présente invention met à disposition une composition pharmaceutique qui contient un composé de formule I, de préférence en mélange avec un

ou plusieurs excipients appropriés, pour traiter ou pré-

venir les infections virales ou les maladies apparentées.

Selon un troisième aspect, la présente invention met à disposition des composés de formule X

N N

YH2N N N (II)

p10 / 0 dans laquelle X a les significations ci-dessus, pl est un groupe hydroxy-protecteur, et Rl* est un résidu acyle d'acide aminé achiral comportant un atome de carbone a tertiaire, ayant la formule suivante: il R2 p2

P2HN / 0-

dans laquelle chacun des radicaux R2 a les significations ci-dessus, et p2 est un groupe amino-protecteur, qui sont des intermédiaires pouvant être utilisés pour préparer les composés de formule I. Selon un quatrième aspect, la présente invention met à disposition des composés de formule x N

H2N N N

il0 / P 0

dans laquelle X et Ri ont les significations données ci-

dessus. Les composés de formule III sont eux aussi des intermédiaires utiles pour la préparation des composés de formule I.

Un cinquième aspect de la présente invention con-

cerne un procédé de préparation des prodrogues de for-

mule I. Ce procédé met en jeu l'estérification du ganci-

clovir et de ses dérivés, l'élimination des groupes pro-

tecteurs à partir des dérivés estérifiés du ganciclovir, l'hydrolyse partielle des bis-esters du ganciclovir en les monoesters de formule I, la condensation de guanine avec un glycérol substitué, le dédoublement optique des

composés de formule I, et la formation de sels des pro-

drogues de formule I. Des détails de ce procédé sont

donnés ci-après.

Sauf mention contraire, les termes et expressions

suivants, utilisés dans la description et dans les reven-

dications, ont les significations données: On entend par "alkyle" un radical hydrocarboné à chaine droite ou ramifiée, et en général saturé, ayant

un nombre de carbone compris entre 1 et le nombre indi-

qué. Par exemple, "alkyle en C1-7" désigne un radical alkyle ayant au moins 1 atome de carbone mais pas plus de 7 atomes de carbone, par exemple les radicaux méthyle,

éthyle, isopropyle, n-propyle, n-butyle, n-pentyle, n-

heptyle et analogues. Cependant, les composés de formule I comprennent les esters d'acides aminés achiraux, dont

le groupe alkyle peut comprendre une liaison C=C ou C...C.

"Alkyle inférieur" désigne un radical alkyle ayant

de 1 à 6 atomes de carbone.

"Cycloalkyle" désigne un radical hydrocarboné cycli-

que, et en général saturé, ayant un nombre de carbones compris entre 3 et le nombre indiqué. Par exemple, un radical "cycloalkyle en C3-7" est un radical cycloalkyle ayant au moins 3 atomes de carbone mais au plus 7, par

exemple les groupes cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopen-

tyle, cyclohexyle ou cycloheptyle.

On entend par "cycloalkyle inférieur" un groupe

cycloalkyle ayant de 3 à 6 atomes de carbone.

On entend par "polyméthylène" un groupe divalent de formule -(CH2)n-, o n est un entier de 3 à 9, et qui comprend éventuellement les groupes polyméthylène ayant

une liaison C=C.

Le terme "aryle" désigne un radical organique qui dérive d'un hydrocarbure aromatique par élimination d'un atome d'hydrogène. Les radicaux aryle préférés ont de 6 à 12 atomes de carbone sous forme d'atomes de carbone

nucléaires dans l'hydrocarbure aromatique.

Le terme "aralkyle" désigne un radical organique

qui dérive d'un aralcane, dans lequel un atome d'hydro-

gène d'alkyle est remplacé par l'un des groupes aryle

définis ci-dessus.

On entend par "acyle" un radical organique qui dérive d'un acide organique par élimination du groupe hydroxyle, par exemple RCO- est le radical acyle de RCOOH, R étant, comme on l'a dit ci-dessus, un groupe alkyle, cycloalkyle, aryle ou aralkyle, pouvant être éventuellement substitué par un ou deux substituants

tels que les radicaux amino, alkyle inférieur, cyclo-

alkyle, alcoxy inférieur ou benzyle. On peut citer à

titre d'exemples de groupes acyle de ce type les radi-

caux acétyle, propionyle, benzoyle ou 1-aminocyclohexane-

carbonyle, etc. Le terme "acyle" englobe les radicaux

"alcanoyle", qui correspondent au radical organique RCO-

o R est un groupe alkyle ou cycloalkyle tel que défini ci-dessus. Les expressions "alcoxy inférieur" ou "RO-", "(alkyle inférieur)amino" ou "(R)NH-", "di(alkyle inférieur)amino" ou "(R)2NH-", "(alcanoyl inférieur)amino" ou "RCO)NH-", et les expressions analogues, représentent respectivement

des groupes alcoxy, alkylamino, dialkylamino, alcanoyl-

amino, dans lesquels le ou chaque radical (R) est un

groupe "alkyle inférieur" tel que défini ci-dessus.

On entend par "halogène" le fluor, le chlore, le

brome ou l'iode.

Selon le Chemical Dictionary de Hackh, McGraw-Hill Book Company, 1969, le "dérivé" d'un composé représente un composé que l'on peut obtenir à partir du composé original par un procédé chimique simple. On peut citer à

titre d'exemples de dérivés de la guanine la 2-amino-

purine et la 2,6-diaminopurine, ainsi que la 2-amino-6-

chloropurine, que l'on peut obtenir à partir de la gua-

nine respectivement par réduction et chloration, et substitution par un groupe amino. Ces conversions sont décrites dans "Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry", vol; 1 et 2, W.W. Zorbach et R.S. Tipson éds. , Wiley Interscience, N.Y. 1968, 1973; Chemistry of Nucleosides and Nucleotides, vol. 1 et 2, L.B. Townsend éd., Plenum Press, N.Y. 1988 et 1991; et Nucleic Acid Chemistry, 3ème partie et 4ème partie, L.B. Townsend et R.S. Tipson éds., J. Wiley & Sons, New York, 1986 et 1991, toutes ces publications étant incorporées ici à titre de référence. Ces conversions sur la position 6 du

système nucléaire de la purine peuvent aussi être utili-

sées pour convertir un composé de formule I en un autre composé de formule I. Le "dérivé activé" d'un composé désigne une forme réactive du composé original, qui rend le composé actif dans le cadre d'une réaction chimique souhaitée, dans

laquelle le composé original n'est que modérément réac-

tif, ou n'est pas réactif. L'activation est réalisée par la formation d'un dérivé ou d'un groupement chimique au sein de la molécule, ayant une enthalpie libre supérieure à celle du composé original, ce qui rend la forme activée

plus à même de réagir avec un autre réactif. Dans le con-

texte de la présente invention, l'activation du groupe

carboxy présente une importance particulière, et on trou-

vera ci-après une description plus détaillée d'agents

d'activation ou de groupements correspondants qui activent le groupe carboxy. Par exemple, un anhydride d'un acide aminé représente une forme activée d'un acide aminé, ce

dernier étant rendu apte à subir une estérification.

On entend par "groupe protecteur" un groupe chimi-

que (a) qui empêche un groupe réactif de participer à une

réaction chimique indésirable; et (b) qui peut être faci-

lement éliminé quand la protection du groupe réactif n'est plus nécessaire. Par exemple, le groupe benzyle est un

groupe protecteur d'une fonction hydroxyle primaire.

Un "groupe amino-protecteur" représente un groupe protecteur qui protège un groupe amino réactif, qui

* autrement serait modifié par certaines réactions chimi-

ques. La définition englobe le groupe formyle ou les groupes alcanoyle inférieurs ayant de 2 à 4 atomes de carbone, en particulier le groupe acétyle ou propionyle, les groupes trityle ou trityle substitué, tels que le groupe monométhoxytrityle, les groupes diméthoxytrityle

tels que le groupe 4,4'-diméthoxytrityle ou 4,4'-diméthoxy-

triphénylméthyle, le groupe trifluoracétyle et le groupe N-(9fluoénylméthoxycarbonyle) ou "FMOC", le groupe allyloxycarbonyle ou d'autres groupes protecteurs qui

dérivent d'halogénocarbonates tels que les (alkyle infé-

rieur)carbonates d'aryle en C6-C12 (tels que le groupe Nbenzyloxycarbonyle, qui dérive du chloroformiate de benzyle), ou qui dérivent d'halogénocarbonates de

biphénylalkyle ou d'halogénocarbonates d'alkyle ter-

tiaire, tels que les halogénocarbonates de tert-butyle, en particulier le chlorocarbonate de tert-butyle, ou

encore les dicarbonates de di(alkyle inférieur), notam-

ment le dicarbonate de di(tert-butyle) et le groupe

phtalyle.

Un "groupe hydroxy-protecteur" est un groupe pro-

tecteur qui protège un groupe hydroxy qui autrement serait modifié par certaines réactions chimiques. Parmi les groupes hydroxy-protecteurs appropriés, on peut citer

les groupes éthérifiables pouvant être facilement élimi-

nés après la fin de toutes les autres étapes de la réac-

tion, tels que le groupe benzyle ou le groupe trityle, éventuellement substitué dans leur noyau phényle. Parmi

les autres groupes hydroxy-protecteurs pouvant être uti-

lisés, on peut citer les groupes oxyde d'alkyle, les groupes tétrahydropyrannyle, silyle, oxyde de trialkyle

et de silyle, et le groupe allyle.

Un "groupe éliminable" est un groupe labile qui est remplacé par un autre groupe au cours d'une réaction chimique. On peut citer à titre d'exemples de groupes

éliminables les halogènes, le groupe benzyloxy éventuel-

lement substitué, le groupe isopropyloxy, le groupe

mésyloxy, le groupe tosyloxy ou le groupe acyloxy.

La "chiralité" est la propriété selon laquelle une molécule n'est pas superposable à son image prise dans un miroir plan, propriété qui décrit les éléments de symétrie de la molécule (ou l'absence d'éléments de symétrie). Les molécules ne possédant pas d'éléments de

symétrie sont "chirales". Une molécule chirale ne conte-

nant aucun des éléments de symétrie, même et y compris

un axe simple, est appelée "asymétrique".

Le terme "achiral" désigne la présence d'au moins un élément de symétrie dans une molécule, tel qu'un axe simple. Les composés de formule I et les ceux de formule II existent sous forme d'isomères optiques ou de mélanges de ces isomères. Dans les composés de l'invention, on peut utiliser n'importe quel isomère ou mélange d'isomères, et

les revendications veulent couvrir chaque isomère indivi-

duel et chacun de leurs mélanges, sauf mention contraire.

L'invention englobe tous les isomères optiques de tout

composé asymétrique de formule I, et de leurs mélanges.

Le terme "isomérie" s'applique à des composés ayant la même masse atomique et le même numéro atomique, mais se distinguant par une ou plusieurs propriétés physiques ou chimiques. Parmi les différents types d'isomères, on peut citer les suivants: Un "stéréo-isomère" désigne un composé chimique ayant la même masse moléculaire, la même composition chimique et la même constitution qu'un autre, mais dont les atomes sont groupés différemment. Plus précisément,

certains fragments chimiques identiques présentent dif-

férentes orientations dans l'espace, de sorte que, quand ils sont purs, ils peuvent faire tourner le plan de la lumière polarisée. Cependant, certains stéréoisomères purs peuvent présenter une rotation optique tellement faible qu'elle n'est pas décelable avec les instruments

dont on dispose actuellement.

Un "isomère optique" correspond à un type de stéréo-

isomérie, qui se manifeste par la rotation que l'isomère,

pur ou en solution, confère au plan de la lumière pola-

risée. Elle est dans de nombreux cas provoquée par la fixation de quatre atomes ou groupes chimiques différents à au moins l'un des atomes de carbone de la molécule, ou encore, autrement dit, par la chiralité, décrite ci-dessus,

de la molécule.

Les stéréoisomères ou isomères optiques qui sont des

images spéculaires l'un de l'autre sont appelés "énantio- mères", et on peut dire qu'ils sont énantiomères. Les groupes chiraux qui

sont les images spéculaires d'un

autre sont appelés groupes énantiomères.

Les énantiomères dont la configuration absolue n'est pas connue peuvent être distingués les uns des autres comme étant dextrogyres (préfixe +) ou lévogyres (préfixe -), selon la direction dans laquelle, dans des conditions expérimentales spécifiées, ils font tourner le plan de la

lumière polarisée.

Quand on a simultanément ensemble des quantités égales de molécules énantiomères, le produit est appelé racémique, qu'il soit cristallin, liquide ou gazeux. On appellera composé racémique une phase solide homogène

constituée de quantités équimolaires de molécules énan-

tiomères. On appellera mélange racémique un mélange de

quantités équimolaires de molécules énantiomères pré-

sentes sous forme de phases solides distinctes. On appellera racémate toute phase homogène contenant des

quantités équimolaires de molécules énantiomères.

Les composés optiquement actifs selon l'invention peuvent être désignés par différentes conventions, à

savoir: les règles de séquençage R et S de Cahn et Pre-

log; les isomères érythro et thréo; les isomères D et L; les isomères d et 1, qui indiquent la direction dans laquelle le plan de la lumière polarisée tourne sous

l'effet de la structure chimique, pure ou en solution.

Ces conventions sont bien connues dans l'art et sont décrites en détail par E.L. Eliel dans Stereochemistry of Carbon Compounds, publié par McGraw Hill Book Company, Inc., New York, 1962, et dans les références qui y sont citées. ainsi, ces isomères peuvent être décrits par les expressions suivantes: paire d, 1 ou d,l; paire D, L ou D,L; ou encore paire R, S ou R,S, selon le système de nomenclature utilisé. Sauf mention contraire, la présente

demande utilisera les désignations (R), (S) et (R,S).

Les expressions "éventuel" ou "éventuellement" signifient que l'événement ou la circonstance qui suit

peut se produire, ou non, et que la description englobe

les cas dans lesquels cet événement ou cette circonstance

a lieu, ainsi que les cas dans lesquels il n'a pas lieu.

Par exemple "phényle éventuellement substitué" signifie que le radical phényle peut, ou non, être substitué, et

que la description englobe tant les radicaux phényle non

substitués que les phényles portant une substitution;

"faire réagir un composé éventuellement protégé en posi-

tion 2" signifie que le composé subissant cette réaction peut, ou non, comporter un groupe protecteur en position 2, et l'invention englobe les procédés dans lesquels la position 2 est protégée, ainsi que les procédés dans

lesquels elle ne l'est pas.

On entend par "acceptable d'un point de vue pharma-

ceutique" que l'objet considéré peut être utilisé pour préparer une composition pharmaceutique généralement inoffensive et non toxique, et comprend ce qui est acceptable en utilisation vétérinaire, tout comme en

utilisation pharmaceutique humaine.

On entend par "sels acceptables d'un point de vue

pharmaceutique" les sels présentant l'activité pharmaco-

logique souhaitée, et qui ne sont indésirables ni d'un

point de vue biologique, ni autrement. Ces sels compren-

nent les sels d'addition avec un acide, formés avec des acides minéraux tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique, et analogues; ou avec des acides

organiques tels que l'acide acétique, l'acide propioni-

que, l'acide hexanoique, l'acide heptanoïque, l'acide cyclopentanepropionique, l'acide glycolique, l'acide pyruvique, l'acide lactique, l'acide malonique, l'acide succinique, l'acide malique, l'acide maléique, l'acide fumarique, l'acide tartrique, l'acide citrique, l'acide benzoïque, l'acide o-(4-hydroxybenzoyl)-benzoïque,

l'acide cinnamique, l'acide mandélique, l'acide méthane-

sulfonique, l'acide éthanesulfonique, l'acide 1,2-éthane-

disulfonique, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l'acide benzènesulfonique, l'acide p-chlorobenzènesulfonique,

l'acide 2-naphtalènesulfonique, l'acide p-toluènesulfo-

nique, l'acide camphosulfonique, l'acide 4-méthyl-bicyclo-

[2.2.2]oct-2-ène-l-carboxylique, l'acide glucoheptonique, l'acide 4,4'méthylènebis-(3-hydroxy-2-naphtoïque), l'acide 3-phénylpropionique, l'acide triméthylacétique, l'acide tert-butylacétique, l'acide laurylsulfurique,

l'acide gluconique, l'acide glutamique, les acides hydro-

xynaphtoïques, l'acide salicylique, l'acide stéarique, l'acide muconique et analogues. Les sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique qui sont préférés sont ceux formés avec l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique,

l'acide phosphorique, l'acide acétique ou méthanesulfo-

nique, l'acide éthanesulfonique, l'acide 1,2-éthanedi-

sulfonique, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l'acide benzènesulfonique, l'acide p-chlorobenzènesulfonique et

l'acide 2-naphtalènesulfonique, l'acide p-toluènesulfo-

nique et l'acide camphosulfonique.

"Animal" englobe l'homme, les mammifères autres que l'homme (tels que le chien, le chat, le lapin, les bovins, le cheval, le mouton, la chèvre, le porc et le cerf) et les animaux non mammifères tels que les oiseaux, les poissons, etc. Une "maladie" englobe d'une manière spécifique tout

état pathologique d'un animal ou d'une partie de ce der-

nier. Ainsi, au sens de l'invention, une "maladie" englobe toute maladie virale ou apparentée pouvant être traitée avec un composé de formule I ou ses sels acceptables d'un

point de vue pharmaceutique.

"Traitement" désigne tout traitement d'une maladie chez un animal, et consiste: (1) à empêcher que la maladie n'apparaisse chez un animal pouvant être prédisposé à la maladie, mais qui ne

présente ou ne subit pas encore les symptômes de la mala-

die; par exemple la prévention de l'apparition des symp-

tômes cliniques; (2) à inhiber la maladie, c'est-à-dire à bloquer son développement; ou (3) à soulager la maladie, c'est-à-dire à provoquer

la régression des symptômes.

"Quantité à effet thérapeutique", pour ce qui est du traitement d'une maladie, désigne la quantité qui, quand elle est administrée à un animal qui en a besoin, est suffisante pour mettre en oeuvre le traitement, tel

que défini ci-dessus, pour cette maladie.

Sauf mention contraire, les réactions décrites dans l'invention ont lieu sous la pression atmosphérique, sur un intervalle de températures de 5 à 170 C (de préférence de 10 à 50 C et tout spécialement à la température ambiante, par exemple à 20-30 C). Cependant, il existe manifestement certaines réactions pour lesquelles l'intervalle de températures utilisé pour la réaction chimique va se trouver au-dessus ou au-dessous de ces

intervalles de températures. En outre, sauf mention con-

traire, les durées et les conditions de réaction veulent être approximatives, c'est-à-dire qu'elles ont lieu approximativement sous la pression atmosphérique, sur un intervalle de températures d'environ 5 à 100 C (de pré-

férence d'environ 10 à 50 C et tout spécialement d'envi-

ron 20 C), sur un laps de temps d'environ 1 à environ heures (de préférence d'environ 5 à 60 heures). Les

paramètres donnés dans les Exemples se veulent spécifi-

ques et non approximatifs.

L'isolement et la purification des composés et des intermédiaires décrits dans l'invention peuvent, si on le souhaite, être réalisés par tout procédé approprié de séparation et de purification, tel par exemple qu'une filtration, une extraction, une cristallisation, une chromatographie sur colonne, une chromatographie sur couche mince ou une chromatographie sur couche épaisse, ou encore une combinaison de ces techniques. On pourra,

par référence aux Exemple ci-après, obtenir des illus-

trations spécifiques de procédés appropriés de sépara-

tion et d'isolement. Cependant, on peut bien évidemment

aussi utiliser d'autres techniques équivalentes de sépa-

ration ou d'isolement.

Les composés de Formule I, II et III sont nommés

selon les règles de nomenclature généralement acceptées.

Le composé de formule OH N

HN N N

H

H2N HO O

Il

0

porte le nom 1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-(2-

amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-

propanyle. Son énantiomère (R) porte la dénomination 1-

amino-cyclohexanecarboxylate de (R)-2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle. Le composé de formule [JE:

M N

H2N l N N 8z0 O

H C

- il

BZOCNH 0

Il

est appelé N-benzyloxycarbonyl-l-aminocyclohexanecarbo-

xylate de 2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)-

méthoxy-l-benzyloxy-3-propanyle. Le composé de formule OH

N N

Ha N \ 2N >

H2N 0

est appelé bis(1-amino-cyclohexanecarboxylate) de 2-(2-

amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propane-

diyle. Le composé de formule OH

HN N ô

H2N HO 0,/0

H3C-C /0

H3C II

est appelé (2-amino-2-méthyl-propionate) de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-

propanyle.

Le composé de formule OH N N

11 ' >

H3C-CN N N

SzO 0 8 ZO_

est appelé N2-acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-1,3-bis(benzyloxy)-propane ou N2-

acétyl-bis-0-benzyl-ganciclovir.

Les composés de formule I sont préparés par de nom-

breux procédés. Les voies de synthèse ressortent des

lignes en tirets [(a) à (i)] dans la formule ci-après.

Les lignes en tirets indiquent schématiquement les dif-

férents sites de réaction, et le tableau qui suit pré-

sente une brève description des différents procédés, qui

vont être décrits plus en détail ci-après. Les lettres entre parenthèses se rapportent à l'étape correspondante

dans la description et la ou les revendications des pro-

cédés: x -..------... C. Cg).) N N

(2)-----------. H2N" N

-- Cd) ,,?c) --------C, r O Ca) C(e)------.HO (Ci) Etape Méthode (a) Déprotection (b) Salification (c) Estérification (d) Condensation (e) Hydrolyse partielle (f), (g), (h) Conversion du substituant en position 6 (i) Dédoublement optique

En conséquence, le procédé de préparation des com-

posés de formule I (dans laquelle X, R1 et R2 ont les

significations ci-dessus), ou d'un de leurs sels accep-

tables d'un point de vue pharmaceutique, comprend une ou plusieurs des étapes suivantes:

(a) élimination d'un groupe amino- et/ou hydroxy-

protecteur à partir d'un composé ayant la formule sui-

vante X

R -Y N

PJHN 1 f N ploXy l (IIA) R10 dans laquelle X a le significations ci-dessus; pl est un hydrogène ou un groupe hydroxy- protecteur; P3 est un hydrogène ou un groupe amino-protecteur; Ri* est un résidu acyle d'acide aminé achiral ayant un atome de carbone a tertiaire, ayant la formule suivante P. dans laquelle chacun des radicaux R2 a les significations ci-dessus, et p2 est un groupe amino- protecteur; (b) conversion d'un composé de formule I en l'un de ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique; (c) estérification d'un composé de formule X N.. N

<(*)

HO- HO ou d'un de ses sels, o X a les significations ci-dessus, et P3 est un hydrogène ou un groupe amino-protecteur, avec un dérivé d'un acide aminé de formule

R2 2

(Iv)

P2HIN COOH

dans laquelle chaque radical R2 a les significations ci-

dessus, et p2 est un groupe amino-protecteur;

(d) condensation d'une guanine éventuellement subs-

tituée, de formule X

N X >N(V)

P3HN N N

PI

H éventuellement sous forme persilylée, o X a les significations cidessus, et p3 est un

hydrogène ou un groupe amino-protecteur, avec un glycé-

rol substitué en position 2, ayant la formule VI dans laquelle Yl et y2, indépendamment l'un de l'autre, représentent des groupes halogéno, acyloxy inférieur ou alcoxy inférieur, ou aryle (alcoxy inférieur), et Z est un groupe éliminable choisi parmi les groupes acyloxy inférieur, méthoxy, isopropyloxy, benzyloxy, halogéno, mésyloxy ou tosyloxy, et analogues; éventuellement en présence d'un catalyseur du type acide de Lewis, pour donner un composé de formule I; (e) hydrolyse partielle d'un composé de formule X

H2N 1\1N(III)

Rlo o r O dans laquelle X et Ri ont les significations ci-dessus; (f) conversion d'un composé de formule I dans laquelle X est un hydrogène en un composé de formule I dans laquelle X est un groupe hydroxy ou chloro; ou (g) conversion d'un composé de formule I dans laquelle X est un substituant chloro, en un composé de formule I dans laquelle X est un hydrogène; ou bien (h) conversion d'un composé de formule I dans

laquelle X est un groupe hydroxy en un composé de for-

mule I dans laquelle X est le chlore; et (i) dédoublement optique, en ses énantiomères, d'un composé de formule I. Les composés de la présente invention, tels que

définis par la formule I, présentent une activité phar-

maceutique et en particulier une activité antivirale. En

tant que tels, ces composés sont utiles dans le traite-

ment d'une large gamme d'états chez l'animal, en parti-

culier l'homme.

On peut citer à titre d'exemples d'états pouvant être traités avec les composés de la présente invention les infections du type herpès telles que l'herpès de

type 1, 2 et 6, le virus herpétique, le virus d'Eppstein-

Barr, en particulier le cytomégalovirus, et le virus de l'hépatite B et les virus apparentés, chez l'homme et les animaux autres que l'homme, en particulier chez

l'homme. On peut citer à titre d'exemples d'états clini-

ques provoqués par ces virus la kératite herpétique,

l'encéphalite herpétique, le bouton de fièvre, les infec-

tions génitales (provoquées par l'herpès simplex), la

vérole du poulet, le zona (provoqué par le virus herpé-

tique), la pneumonie et la rétinite à CMV, en particulier

chez les patients immuno-compromis, comprenant les rece-

veurs de transplants (par exemple des transplantations du coeur, des reins et de la moelle osseuse), et les patients présentant un syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA), et la mononucléose infectieuse provoquée par le virus d'Eppstein-Barr. Les composés de l'invention peuvent

aussi être utilisés dans le traitement de certains car-

cinomes ou lymphomes provoqués par des infections vira-

les ou apparentés à ces dernières, comme le cancer rhi-

nopharyngien, le lymphome immunoblastique, le lymphome

de Burkitt et la leucoplasie hyperkératosique.

En résumé, un autre aspect de la présente invention concerne un procédé pour traiter un animal (de préférence un homme) présentant un état dans lequel joue un rôle une infection virale ou apparentée telle que décrite ci-dessus, ou encore pour traiter un animal dans lequel une telle infection virale est prévue par le médecin traitant ou le vétérinaire. Le procédé consiste à administrer à cet animal une quantité à effet thérapeutique d'un composé de formule I. La quantité exacte administrée peut varier entre de larges limites, selon le degré de gravité de l'état particulier faisant l'objet du traitement, l'âge du sujet, la santé relative du sujet et d'autres facteurs (tels que le type de formulation). Pour une formulation orale, une quantité à effet thérapeutique peut varier entre environ 1 et 250 mg/kg de poids corporel par jour,

de préférence entre environ 7 et 100 mg/kg de poids cor-

porel par jour. Plus particulièrement, la quantité à effet thérapeutique est d'environ 10 à 50 mg/kg.jour, en particulier pour le traitement de la rétinite et de la pneumonie à CMV. Ainsi, pour un patient humain de 70 kg, la quantité à effet thérapeutique peut être d'environ 70 mg/jour à environ 7 g/jour, de préférence d'environ 500 mg/jour à environ 5 g/jour et tout spécialement de 700 mg/jour à 3,5 g/jour. Cependant, pour un implant dans l'humeur vitrée, la dose de la prodrogue est comprise entre 0,5 et 25 mg, de préférence entre 5 et 10 mg par implant. L'homme de métier comprendra que différentes

formes posologiques des prodrogues de l'invention con-

duisent à différents intervalles posologiques.

Certains des composés de formule III possèdent aussi une activité antivirale. Il s'est avéré que les monoesters de formule I sont des composés nettement plus actifs que les bis-esters correspondants de formule III. Cependant, tous les composés de formule III sont des intermédiaires utiles pour la préparation des composés de formule I.

Le ganciclovir est un médicament antiviral avéré.

L'utilité des prodrogues du ganciclovir de la présente invention a été établie par une détermination du taux sanguin du ganciclovir dans des animaux d'essai (le rat

et le singe) après administration orale de ces prodro-

gues. Le taux plasmatique est déterminé par les méthodes

décrites dans les Exemples 8 et 9, et il s'agit de pro-

cédures qui sont des variantes des modes opératoires décrits par JeanPierre Sommadossi et al. dans REVIEWS OF INFECTIOUS DISEASES, Vol. 10, Supplément 3, p. S507

(1988) et Journal of Chromatography, Biomedical Applica-

tions, 414, 429-433 (1987).

Les composés de la présente invention peuvent être administrés par l'un quelconque des modes usuels et acceptables connus dans l'art, seule ou en combinaison avec un autre composé de la présente invention ou avec un autre agent thérapeutique. D'une manière générale, un composé de la présente invention est administré sous forme d'une composition pharmaceutique avec un excipient

acceptable d'un point de vue pharmaceutique et est admi-

nistré par voie orale, systémique (par exemple transder-

mique ou par suppositoire) ou parentérale (par exemple

intramusculaire (i.m.), intraveineuse (i.v.), sous-

cutanée (s.c.)) ou à l'aide d'un implant dans l'humeur vitrée. Les composés de l'invention conviennent tout

particulièrement à une administration orale. Les compo-

sés de l'invention peuvent ainsi être administrés dans une composition qui est un semi-solide, une poudre, un

aérosol, un soluté, une suspension ou une autre composi-

tion appropriée, comme on va le dire ci-après.

Une composition pharmaceutique comprend un composé de formule I ou III, o chaque substituant est tel que défini ci-dessus, de préférence en combinaison avec un

excipient acceptable d'un point de vue pharmaceutique.

Cet excipient est un excipient non toxique dans le cadre

de l'administration du composé de la présente invention.

* Cet excipient peut être un excipient quelconque, solide, liquide, semisolide, gazeux (dans le cas d'un aérosol), qui soit d'une manière générale disponible pour l'homme de l'art et qui n'affecte pas d'une manière indésirable

l'activité du principe actif.

En général, la composition pharmaceutique de la

présente invention contient une quantité à effet théra-

peutique d'un composé, en combinaison avec au moins un excipient. Selon le type de formulation, la taille de la forme posologique unitaire, la nature des excipients et les autres facteurs connus de l'homme de l'art spécialisé dans les sciences pharmaceutiques, la quantité du composé de la présente invention peut varier dans la composition

entre de larges limites. D'une manière générale, la com-

position finale comprend d'environ 1 à environ 99,5 % en

poids d'un composé de l'invention, le reste étant cons-

titué du ou des excipients. De préférence, la quantité du principe actif est d'environ 10 à environ 99 % en poids et tout spécialement d'environ 50 à environ 99 % en poids, le reste étant constitué d'un ou plusieurs excipients appropriés. Les excipients pharmaceutiques pouvant être utilisés pour préparer les compositions pharmaceutiques de l'invention peuvent être solides, semi-solides, liquides ou gazeux. Ainsi, les compositions peuvent prendre la forme de comprimés, de pilules, de

gélules, de poudres, de suppositoires, de timbres trans-

dermiques, d'implants dans l'humeur vitrée, de formula-

tions retard, de solutés, de suspensions, d'élixirs,

d'aérosols et analogues. Parmi les excipients pharmaceu-

tiques solides, on peut citer les amidons, tels que l'amidon de maïs, la cellulose, le talc, le glucose, le lactose, le saccharose, la gélatine, le malt, le riz, la

farine, la craie, le gel de silice, le stéarate de magné-

sium, le stéarate de sodium, l'acide stéarique, le mono-

stéarate de glycérol, le chlorure de sodium, le lait écrémé séché et analogues. Les excipients liquides ou semi-solides peuvent être choisis parmi l'eau, l'éthanol, le glycérol, le propylèneglycol, différentes huiles, notamment les huiles de pétrole, les huiles animales,

végétales ou synthétiques, par exemple l'huile d'ara-

chide, l'huile de soja, l'huile minérale, l'huile de

sésame et analogues. Parmi les excipients liquides pré-

férés, en particulier pour les solutés injectables, on peut citer l'eau, une solution salée, le dextrose en solution aqueuse et les glycols. D'autres excipients et

supports pharmaceutiques appropriés, et leurs formula-

tions, sont décrits dans "Remington's Pharmaceutical Sciences", Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvanie (1980) par E.W. Martin, ce document étant incorporé ici

à titre de référence.

De préférence, la composition pharmaceutique est administrée sous une forme posologique unitaire unique, plus particulièrement sous une forme posologique par voie orale, pour traitement continu, ou dans le cadre d'une forme pharmaceutique unitaire unique, ad libitum, quand

on a spécifiquement besoin d'un soulagement des symptômes.

Quand on utilise pour le composé de formule I dans laquelle chacun des radicaux X, R1 et R2 est défini selon son aspect le plus large, la définition la plus large de

la présente invention, il y a certains composés de l'in-

vention qui sont préférés.

On préfère les composés de formule I dans laquelle chacun des radicaux R2 est un groupe méthyle, éthyle, propyle ou cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone; ou encore les deux groupes R2 liés l'un à l'autre forment un groupe polyméthylène ayant de 3 à 9 atomes de carbone;

ou leurs sels acceptables d'un point de vue pharmaceuti-

que. Parmi ces derniers, on préfère les composés de for-

mule I dans laquelle X est le groupe hydroxy; et les deux groupes R2 liés à l'un à l'autre forment un groupe polyméthylène ayant de 3 à 9 atomes de carbone; ou leurs sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique. Parmi

ces derniers, on préfère plus particulièrement les com-

posés de formule I dans laquelle X est le groupe hydroxy.

On préfère tout spécialement les composés de formule I

dans laquelle X est le groupe hydroxy, et les deux grou-

pes R2 liés l'un à l'autre forment un groupe polyméthy-

lène ayant 4 ou 5 atomes de carbone; ou leurs sels

acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

Les acides ci-après sont préférés pour ce qui est

de former des sels acceptables d'un point de vue pharma-

ceutique avec les composés de formule I: les acides chlorhydrique, sulfurique, phosphorique, acétique,

méthanesulfonique, éthanesulfonique, 1,2-éthanedisulfo-

nique, 2-hydroxyéthanesulfonique, benzènesulfonique, p-

chlorobenzènesulfonique, 2-naphtalènesulfonique, p-

toluènesulfonique et camphosulfonique. On préfère tout

spécialement les acides minéraux forts.

À. 2723093

On préfère les composés spécifiques ci-après:

1-amino-cyclooctanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'.un point de vue pharmaceutique; 1-aminocycloheptanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6- dihydro-6-oxo-purine-9yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique;

1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique;

1-amino-cyclopentanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6-

l-amino-cyclobutanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6-

2-amino-2-méthylpropionate de 2-(2-amino -1,6-

2-amino-2-éthylbutyrate de 2-(2-amino -1,6-dihydro-

6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique;

2-amino-2-n-propylvalérate de 2-(2-amino -1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique; Les composés tout spécialement préférés sont les suivants:

1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, en particulier le chlorhydrate;

1-amino-cyclopentanecarboxylate de 2-(2-amino -1,6-

: 2723093

1-amino-cyclobutanecarboxylate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, en particulier le chlorhydrate; 2-amino-2-méthylpropionate de 2-(2-amino--l,6dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, en particulier le chlorhydrate;

2-amino-2-éthylbutyrate de 2-(2-amino -1,6-dihydro-

6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, en particulier le chlorhydrate; et

2-amino-2-n-propylvalérate de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique,

en particulier le chlorhydrate.

Il est bien entendu que ces sous-groupes particu-

lièrement intéressants, et ces composés spécifiques, sont

particulièrement utiles dans les compositions pharmaceu-

tiques et modes de traitement de la présente invention.

Dans l'un quelconque des procédés de la dernière étape ci-dessus décrits dans l'invention, une référence à la formule I, I*, II, III, IV, V et VI se rapportent à ces formules dans lesquelles Rl, Rl* et R2, pl, p2, et p3 et X, Yl, y2 et Z, sont tels que définis dans leurs

définitions les plus larges données ci-dessus, les pro-

cédés s'appliquant en particulier aux formes de réalisa-

tion actuellement préférées.

Les compositions pharmaceutiques préférées de la présente inventioncontiennent un sel, acceptable d'un point de vue pharmaceutique, des prodrogues de formule I. En conséquence, si la fabrication de formulations pharmaceutiques met en jeu le mélange intime d'excipients pharmaceutiques et du principe actif sous sa forme sel, on préfère alors utiliser des excipients pharmaceutiques

de nature non basique, c'est-à-dire acides ou neutres.

Détails des procédés de synthèse Le procédé actuellement préféré pour produire un

composé de formule I met en jeu l'étape (a), qui de pré-

férence est mise en oeuvre avec formation concomitante d'un sel d'un composé de formule I, ou l'étape (c), ou

une combinaison des étapes (a) et (c). (Voir la descrip-

tion des Etapes III et IV ci-après). La préparation des

monoesters selon l'étape (a) exige la protection sélec-

tive de l'une des deux fonctions hydroxyle primaire du ganciclovir ou de son dérivé. Cette protection peut, ou non, mettre d'une manière générale en jeu la protection du groupe amino sur la position 2 de la guanine base

(voir la description détaillée ci-après des Etapes I à

III pour le cas dans lequel le procédé est mis en oeuvre avec un groupe amino protégé). De plus, avant de mettre en oeuvre l'estérification (Etape III), il faut protéger le groupe amino du réactif acide aminé, pour éviter qu'il n'interfère (formation d'un amide) dans la réaction d'estérification. La protection du groupe amino est

décrite au paragraphe "Préparation de l'Acide Aminé N-

Protégé" ci-après.

D'une manière générale, quand on met en oeuvre un procédé de la présente invention, les groupes amino ou hydroxy qui ne doivent pas participer à la réaction de synthèse doivent être protégés jusqu'à ce que (1) la déprotection donne le produit final; ou bien (2) un groupe protégé spécifique soit mis en jeu dans l'étape de synthèse suivante; ou bien (3) la présence du groupe non protégé dans les étapes suivantes de la réaction, conduisant au produit final, ne modifie pas la séquence prévue des réactions. Un exemple, pour ce qui est de

satisfaire à l'exigence (1), réside dans le groupe ben-

zyle lors de la préparation des monoesters de la présente invention, lequel groupe protège une fonction hydroxyle primaire du ganciclovir jusqu'à ce qu'elle soit éliminée lors de la déprotection. Un exemple pour ce qui est de satisfaire à l'exigence (2) concerne le deuxième groupe

benzyle qui protège la deuxième fonction hydroxyle pri-

maire du ganciclovir, groupe qui est éliminé juste avant l'étape d'estérification. Un exemple pour ce qui est de satisfaire à l'exigence (3) porte sur le groupe acétyle,

ou encore le groupe trityle ou monométhoxytrityle proté-

geant le groupe amino du système cyclique guanine du ganciclovir, car le groupe amino non protégé n'interfère

pas avec l'estérification (Etape III).

D'une manière générale, les opérations permettant aux agents de blocage potentiels de pouvoir être utilisés

pour préparer les composés de formule I sont les suivan-

tes: (1) Leur introduction doit se faire d'une manière quantitative et sans à-coups;

(2) L'intermédiaire bloqué doit être stable vis-à-

vis des conditions de réaction utilisées jusqu'à ce que soit nécessaire l'élimination du groupe protecteur; (3) Le groupe bloquant doit pouvoir être facilement éliminé dans des conditions qui ne modifient pas la

nature chimique du reste de la molécule.

Matières de départ Les acides aminés achiraux acycliques utilisés pour préparer les mono- et les diesters de formules I et III sont des composés connus ou peuvent être préparés par des procédés connus. Voir Chem. Commun. 1966 (1), 12-13; Int. J. Pept. Protein Res., 21(4), 406-418, 1983; et ibid. 21(4), 392-405, 1983); Pept., Proc. Eur. Pept. Symp.,

th, Meeting Date 1988, 13-15; J. Org. Chem. 22, 799-

802 (1957); Pept. 1990, Proc. Eur. Pept. Symp., 21st, Meeting Date 1990, 41-42, Can. J. Chem. 37, 1309-1320 (1961); J. Med. Pharm. Chem. 3, 1-23 (1961). Toutes ces

publications sont incorporées ici à titre de référence.

Le choix de l'acide aminé achiral permettant de

préparer les esters d'acides aminés de formule I présen-

tent un caractère critique, car le constituant acide aminé confère aux composés de l'invention une meilleure biodisponibilité, en particulier une meilleure biodispo- nibilité orale. Parmi les acides aminés achiraux pouvant être utilisés pour préparer les composés de formule I, on peut citer les acides suivants: Acide 1-amino-cyclohexanecarboxylique; Acide 1-amino-cyclopentanecarboxylique; Acide 1-amino- cyclobutanecarboxylique; Acide 1-amino-cycloheptanecarboxylique; Acide 1amino-cyclooctanecarboxylique; Acide 1-amino-cyclononanecarboxylique; Acide 1-amino-cyclodécanecarboxylique; Acide 2-amino-2- méthylpropionique; Acide 2-amino-2-éthylbutyrique; Acide 2-amino-2-n- propylvalérique; Acide 2-amino-2-isopropyl-3-méthylbutyrique; Acide 2-amino-2-isobutyl-4-méthylvalérique; Acide 2-amino-2-n- butylhexanoïque; Acide 2-amino-2,2-biscyclopropylacétique; Acide 2-amino2,2-biscyclobutylacétique; et

Acide 2-amino-2,2-bisbenzylacétique.

On peut utiliser comme matière de départ préférée, de type ganciclovir protégé, pour préparer les composés

préférés de l'invention, le N2-acétyl-bis-0-benzyl-

ganciclovir (N2-acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-1,3-bis(benzyloxy)propane), qui est décrit dans le brevet US N 4 355 032. Parmi les autres matières de départ préférées de type ganciclovir protégé,

on peut citer la N2-trityl-9-[(3-hydroxy-2-propoxy-1-

trityloxy)méthyl]guanine [N2-trityl-2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l-trityloxy-propane-3-

ol] et la N2-monométhoxytrityl-9-[(3-hydroxy-2-propoxy-

l-monométhoxytrityloxy)-méthyl]guanine, dont la prépara-

tion est décrite dans J. Pharm. Sci. 76(2), 180-184 (1987),

cet article étant incorporé ici à titre de référence.

On peut préparer les intermédiaires de formule III en estérifiant le ganciclovir (éventuellement comportant un groupe 6-amino protégé) avec au moins deux équivalents, de préférence 3 équivalents du composé de formule IV, dans les conditions décrites dans la présente invention

pour la préparation des monoesters de formule I, c'est-

à-dire en présence d'un agent d'activation à des tempé-

ratures comprises entre O et 50 et de préférence entre et 40 C. Un mode opératoire détaillé est décrit dans l'Exemple 6. Ou bien encore, les composés de formule III

peuvent être préparés par le procédé décrit dans le bre-

vet européen 0 375 329. Les matières de départ préférées de formule III sont les suivantes:

bis-(l1-amino-cyclohexanecarboxylate) de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propanediyle et ses sels;

bis-(l1-amino-cyclopentanecarboxylate) de 2-(2-

amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propane-

diyle et ses sels;

bis-(l-amino-cyclobutanecarboxylate) de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propanediyle et ses sels;

bis-(2-amino-2-méthylpropionate) de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propanediyle et ses sels;

bis-(2-amino-2-éthylbutyrate) de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propanediyle et ses sels;

bis-(2-amino-2-n-propylvalérate) de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propanediyle et ses sels.

Il est bien entendu que les intermédiaires de for-

mule III peuvent être utilisés sous forme de bases libres ou sous forme d'un sel quelconque (et pas seulement-sous

la forme d'un sel acceptable d'un point de vue pharma-

ceutique), pouvant être utilisé pour réaliser l'hydro-

lyse partielle souhaitée donnant les monoesters de for-

mule I. Cependant, on préfère utiliser des sels accepta-

bles d'un point de vue pharmaceutique des composés de

formule III.

Préparation de l'acide aminé N-protégé de formule IV Avant de mettre en oeuvre l'étape d'estérification, il faut, pour éviter la formation indésirable d'un amide,

protéger le groupe amino de l'acide aminé. On peut uti-

liser les groupes amino-protecteurs suivants: les halo-

génocarbonates tels que les (alkyle inférieur)-carbonates d'aryle en C6-C12 (tels que le groupe carbobenzyloxy qui

dérive du chlorocarbonate de benzyle), ou les halogéno-

carbonates de biphénylalkyle ou les halogénocarbonates

de tert-alkyle tels que les halogénocarbonates de tert-

butyle, en particulier le chlorocarbonate de tert-butyle, ou encore les dicarbonates de di(alkyle inférieur), en

particulier le dicarbonate de di(tert-butyle), les halo-

génures de triphénylméthyle tels que le chlorure de tri-

phénylméthyle, et l'anhydride trifluoracétique. L'étape de protection est mise en oeuvre par dissolution ou mise en suspension de l'acide aminé dans une solution alcaline aqueuse pouvant comprendre un alcanol inférieur. On

refroidit le mélange réactionnel tout en ajoutant simul-

tanément, par petites portions, le réactif protecteur tel que l'halogénocarbonate, de préférence en solution

aqueuse ou dans un alcanol inférieur. Pendant cette addi-

tion, le mélange réactionnel est maintenu à une tempéra-

ture de O à 30 C et de préférence de O à 5 C, à l'aide d'un bain de glace pendant plusieurs heures. Puis on retire le bain de glace, et on maintient le mélange à la

température ambiante jusqu'à ce qu'il arrive à la tempé-

rature ambiante. On concentre le mélange réactionnel à

siccité, et on partage le résidu entre une phase organi-

que et de l'eau. La phase aqueuse est acidifiée et extraite avec un solvant organique de l'acide aminé protégé. La phase organique est lavée à l'eau, puis avec des saumures, et on la sèche sur du sulfate de magnésium avant de l'évaporer à siccité, et l'acide aminé N-protégé de formule IV est isolé et purifié par des techniques classiques. Préparation des monoesters de formule I

Etape I: Le ganciclovir, qui comporte un groupe 2-

amino éventuellement protégé et les deux fonctions hydroxyle primaire protégées, subit une déprotection

partielle. Une matière de départ préférée est représen-

tée par le N2-acétyl-bis-0-benzyl-ganciclovir (selon la

nomenclature utilisée dans l'invention, il s'agit du N2-

acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-

1,3-bis(benzyloxy)propane), pour l'étape d'hydrogénation

dans le but de donner un ganciclovir dont le groupe 2-

amino conserve sa forme protégée, et comportant une fonc-

tion hydroxyle primaire protégée. On peut citer à titre d'exemples appropriés de groupes amino-protecteurs les groupes alcanoyle inférieur ayant de 2 à 4 atomes de

carbone, en particulier le groupe acétyle ou propionyle.

Parmi les autres groupes amino-protecteurs pouvant être utilisés, on peut citer les groupes trityle ou trityle substitué, tels que le groupe monométhoxytrityle et le groupe 4,4'-diméthoxytrityle. Cependant, une protection du groupe 2-amino du système cyclique purine n'est pas

exigée.

Les groupes hydroxy-protecteurs pouvant être utili-

sés sont des groupes éthérifiables pouvant être facile-

ment éliminés après que sont terminées toutes les autres

étapes de la réaction. Ces groupes éther hydroxy-protec-

teurs comprennent le groupe benzyle ou le groupe trityle.

Ces groupes peuvent être substitués sur le noyau phényle.

Parmi d'autres groupes hydroxy-protecteurs pouvant être

utilisés, on peut citer l'oxyde d'allyle, le tétrahydro-

pyrannyle, l'oxyde de silyle, les oxydes de trialkyle et de silyle, qui peuvent être éliminés avec du fluorure

d'hydrogène d'une manière connue de l'homme de métier.

Les groupes trityle peuvent aussi être éliminés après l'étape d'estérification, par traitement du produit de l'estérification avec un acide alcanoïque tel que l'acide

acétique ou l'acide trifluoracétique ou l'acide chlorhy-

drique. Les groupes benzyle sont éliminés par hydrogéna-

tion; les groupes allyle sont éliminés par isomérisation

en les oxydes de vinyle, à l'aide de catalyseurs au rho-

dium ou au palladium, suivie d'une hydrolyse aqueuse-

acide.

L'hydrogénation destinée à éliminer un groupe hydroxy-protecteur est de préférence mise en oeuvre par

dissolution du ganciclovir protégé dans un système sol-

vant qui libère l'hydrogène en présence d'un catalyseur

tel qu'un composé du palladium, en particulier l'hydro-

xyde de palladium, par hydrogénation par transfert ou par d'autres techniques classiques d'hydrogénation. Parmi

d'autres catalyseurs d'hydrogénation pouvant être utili-

sés, on peut citer les catalyseurs d'hydrogénation en

général tels que le Pd, le Pd sur charbon, et les cata-

lyseurs d'hydrogénation homogènes. Le système solvant comprend un alcanol inférieur, tel que le méthanol ou l'éthanol et le cyclohexène. D'une manière générale, la réaction est mise en oeuvre à des températures comprises entre la température ambiante et la température de reflux du système solvant, par exemple dans de l'éthanol et du cyclohexène au reflux, sous une atmosphère inerte et à l'abri de l'oxygène ou de l'air, de préférence dans une

atmosphère d'azote. Le catalyseur est récupéré par fil-

tration. On réduit le volume du filtrat par évaporation du solvant en excès. Le mélange réactionnel brut obtenu comprend comme produits principaux la matière de départ intacte et un ganciclovir 2-amino protégé, dont un groupe hydroxy aliphatique est protégé. La séparation de ces deux produits est habituellement effectuée par des tech- niques d'isolement connues dans l'art, souvent par des techniques chromatographiques, de préférence sur gel de silice, suivies d'une élution avec des éluants appropriés tels que des mélanges d'un alcanol inférieur et d'un alcane inférieur halogéné (de préférence l'éthanol et le

dichlorométhane), pour donner un ganciclovir 2-amino-

protégé, dont un groupe hydroxy aliphatique est protégé.

Etape II: On soumet à une déprotection du groupe amino un ganciclovir comportant un groupe 2-amino protégé et un groupe hydroxy aliphatique protégé. Dans cette

étape, si le groupe amino-protecteur est un groupe alca-

noyle inférieur, on utilise des conditions basiques (pH

compris entre 9 et 14) pour éliminer le groupe protec-

teur. Par exemple, le N2-acétyl-mono-O-benzyl-ganciclovir est traité avec un réactif alcalin tel que l'hydroxyde d'ammonium, le carbonate de sodium ou de potassium ou l'hydroxyde de sodium ou de potassium, jusqu'à ce que l'élimination du groupe acétyle soit terminée. D'une manière générale, cette réaction est mise en oeuvre en

présence d'un solvant approprié, tel qu'un alcanol infé-

rieur. De préférence, la matière de départ est dissoute dans le méthanol, et on ajoute un excès stoechiométrique d'hydroxyde d'ammonium. La température de la réaction

est maintenue entre 0 et 50 C, de préférence à la tempé-

rature ambiante. Quand la réaction est terminée (ce que l'on peut déterminer par CCM), on peut ajouter un autre

solvant, tel que l'oxyde d'éthyle, pour obtenir un gan-

ciclovir comportant un groupe hydroxy aliphatique pro-

tégé, qui peut être séparé par filtration et isolé par

des techniques classiques de séparation.

Etape III: Dans cette étape, on estérifie avec le dérivé de ganciclovir protégé obtenu dans l'Etape II un dérivé activé d'un acide aminé aminoprotégé de formule

IV. On peut citer à titre d'exemples appropriés de grou-

pes amino-protecteurs de cet acide aminé le groupe N-

benzyloxycarbonyle, le groupe phtalyle, le groupe tert-

butyloxycarbonyle et le groupe N-(9-fluorénylméthoxy-

carbonyle), ou "FMOC".

Il faut utiliser dès le départ au moins un équiva-

lent de l'acide aminé protégé et 1 équivalent d'un agent de couplage ou d'un agent de déshydratation approprié, par exemple le l,3-dicyclohexylcarbodiimide ou les sels de ces diimides avec des groupes basiques. On peut aussi

utiliser d'autres carbodiimides, tels que le N,N'-carbonyl-

diimidazole. On peut citer à titre d'autres exemples

d'agents de déshydratation pouvant être utilisés, l'anhy-

dride trifluoracétique, les anhydrides mixtes, les chlo-

* rures d'acide, l'hexafluorophosphate de 1-benzotriazolyl-

oxytris(diméthylamino)-phosphonium, le PYBOP, le 1-

hydroxybenzotriazole, le 1-hydroxy-4-azabenzotriazole,

le 1-hydroxy-7-aza-benzotriazole, le chlorhydrate de N-

éthyl-N'-(3-(diméthylamino)propyl)-carbodiimide, la 3-

hydroxy-3,4-dihydro-4-oxo-1,2,3-benzotriazine, l'hexa-

fluorophosphate de O-(benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tétra-

méthyluronium, l'hexafluorophosphate d'O-(7-aza-benzo-

triazole-l-yl)-l,1,3,3-tétraméthyluronium, le tétra-

fluoroborate d'O-(7-azabenzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tétra-

méthyluronium, l'hexafluorophosphate d'O-(lH-benzotri-

azole-l-yl)-l,1,3,3-bis(tétraméthylène)uronium ou

l'hexafluorophosphate d'O-(7-azabenzotriazole-1-yl)-

1,1,3,3-bis(tétraméthylène)uronium. On pourra trouver

une description de ces agents de couplage, donnée par

L.A. Carpino, dans J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 4397-

4398. On peut aussi utiliser à cette fin des N-carboxy anhydrides d'acides aminés uréthanne-protégés, qui sont décrits par William D. Fuller et al., J. Am. Chem. Soc. 1990, 112, 7414-7416, cet article étant incorporé ici à titre de référence. En résumé, on peut utiliser comme agent de couplage tout autre réactif qui produise un anhydride ou un autre dérivé activé de l'acide aminé

protégé, dans des conditions ménagées.

On dissout l'acide aminé amino-protégé dans un sol-

vant inerte tel qu'un alcane inférieur halogéné, de pré-

férence le dichlorométhane sous atmosphère inerte, par exemple l'azote, et on ajoute l'agent de couplage (de préférence le 1,3dicyclohexylcarbodiimide). On agite le mélange réactionnel à des températures comprises entre 0 et 50 C, de préférence approximativement à la température ambiante, pendant environ 10 à 24 heures. On filtre le mélange réactionnel et on isole le produit de la réaction (l'anhydride de l'acide aminé protégé). Le produit obtenu est dissous dans un solvant inerte sec tel que le DMF sec, et on le place sous atmosphère d'azote. On ajoute à la solution ci-dessus de l'anhydride une solution d'une quantité équivalente du produit de l'Etape II dans un solvant inerte. La réaction est mise en oeuvre entre 0 et 50 C, de préférence à la température ambiante, en un

laps de temps de 5 à 90 heures. Le produit de la réac-

tion peut être isolé et purifié par des procédés clas-

siques, tels qu'une chromatographie. Le produit contient habituellement l'acide aminé N-protégé intact, qui peut être éliminé par traitement d'une solution non miscible à l'eau (phase organique) du produit avec un alcali en solution aqueuse, tel que le bicarbonate de sodium, le carbonate de sodium, une saumure ou leurs mélanges. On peut isoler de la phase organique, et purifier par des techniques classiques d'isolement et de purification, l'ester d'acide aminé du ganciclovir, dont le groupe hydroxy aliphatique est protégé et dont l'acide aminé

est N-protégé.

Etape IV (déprotection finale pour donner le produit de formule I): Les deux groupes protecteurs du produit

de l'Etape III sont éliminés par des réactions de dépro-

tection, de préférence dans un milieu acide ou un sol-

vant, plus particulièrement par hydrogénation. On préfère une déprotection dans des conditions acides, car cette façon de faire garantit que le groupe amino libéré lors

de la réaction de déprotection va être protoné, c'est-à-

dire que la base de formule I, telle que formée lors de la réaction de déprotection, va être capturée par une

quantité au moins stoechiométrique de l'acide présent.

L'isolement du composé de formule I sous forme d'un sel

d'addition avec un acide va protéger la stéréoconfigura-

tion souhaitée du composé de formule I. En conséquence, les exemples donnés ci-après, qui présentent l'étape de déprotection (a), présentent aussi l'étape concomitante

(b) de formation du sel.

On procède à la déprotection en dissolvant le pro-

duit de l'étape d'estérification dans un solvant inerte, de préférence dans un solvant acide, en utilisant un catalyseur d'hydrogénation, tel que le charbon palladié,

le platine, et en faisant appel à des pressions d'hydro-

gène élevées, comprises entre 6,9 kPa et 13,8 MPa (entre 1 et 2000 psi), de préférence entre 138 kPa et 1,38 MPa

(entre 20 et 200 psi). On peut suivre la fin de la réac-

tion en utilisant une analyse classique par CCM. L'hydro-

génation se poursuit jusqu'à la fin de la conversion, si

nécessaire avec addition d'une nouvelle quantité du cata-

lyseur d'hydrogénation. On enlève le catalyseur et on le lave. Les filtrats provenant de la filtration, combinés aux eaux de lavage, sont concentrés et lyophilisés pour isoler l'ester d'acide aminés du ganciclovir souhaité, de formule I. La purification du produit et l'isolement d'un ester cristallin sont réalisés par recristallisation

ou par d'autres techniques classiques de purification.

Si l'on utilise comme groupe amino-protecteur le

groupe tert-butyloxycarbonyle, son élimination est réa-

lisée avec un acide, tel que HC1, et de i'isopropanol servant de solvant, ou avec de l'acide trifluoracétique sans solvant. Ou bien encore, si l'étape d'estérification a été réalisée avec un dérivé du ganciclovir protégé par un

groupe trityle ou trityle substitué, ces groupes protec-

teurs peuvent être éliminés par traitement avec un acide

alcanoïque en solution aqueuse à des températures compri-

ses entre -20 et 100 C, par exemple l'acide acétique en

solution aqueuse.

Autres procédés de préparation (Etapes (b), (c), (d) et (e) L'homme de métier reconnaîtra aussi que l'on peut préparer un composé de formule I sous forme d'un sel d'addition avec un acide, ou sous forme de la base libre correspondante. Si on le prépare sous forme d'un sel d'addition avec un acide, le composé est converti en la base libre par traitement avec une base appropriée, telle qu'une solution d'hydroxyde d'ammonium, l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium ou analogues. Cependant, il faut veiller à ce que les composés de formule I ne soient pas racémisés à pH élevé. Quand on convertit une base libre en un sel d'addition avec un acide, on fait réagir le composé avec un acide organique ou minéral approprié (tel que décrit ci-dessus). Ces réactions sont mises en oeuvre par traitement avec au moins une quantité

stoechiométrique d'un acide approprié (pour la prépara-

tion d'un sel d'addition avec un acide) ou d'une base appropriée (dans le cas de la libération du composé libre de formule I). Dans l'étape de salification de la présente invention, la base libre est habituellement dissoute dans un solvant polaire, tel que l'eau ou un alcanol

inférieur (de préférence l'isopropanol) et leurs mélan-

ges, et l'acide est ajouté en la quantité requise à l'eau ou à l'alcanol inférieur. La température de la réaction est habituellement maintenue dans l'intervalle d'environ 0 à 50 C, de préférence à la température ambiante. Le sel correspondant précipite d'une manière spontanée ou

peut être extrait de la solution par addition d'un sol-

vant moins polaire, élimination du solvant par évapora-

tion ou sous vide, ou encore par refroidissement de la solution.

L'étape (c) est réalisée par estérification du gan-

ciclovir (qui comporte éventuellement un groupe 2-amino protégé) dans des conditions régulées, avec moins de deux équivalents, de préférence de 1,3 à 1,6 équivalents, du

composé de formule IV dans les conditions décrites ci-

dessus pour la préparation des monoesters de formule I, c'est-à-dire en présence d'un agent de couplage à des

températures comprises entre 0 et 50 C.

Les conditions de réaction de l'étape de condensa-

tion (d) sont décrites dans le brevet européen N 187 297. L'étape de condensation est la voie préférée si l'on

veut préparer les énantiomères purs des composés de for-

mule I. Le dérivé glycérol de la formule VI, tel que le

1,3-diacyloxy-2-acyloxyméthoxy-glycérol, est mis à réa-

gir avec la guanine ou un dérivé substitué de la guanine

dans un solvant hydrocarboné aprotique (tel que le ben-

zène ou le toluène, ou les xylènes) ou dans le DMF, avec

un hexa(alkyle inférieur)silazane (par exemple l'hexa-

méthylsilazane, l'hexaéthylsilazane ou analogues) et un catalyseur à des températures comprises entre 30 C et la température de reflux. Le catalyseur est un sel d'un acide de Lewis, tel qu'un sel de trialkylsilyle, par exemple le sulfate ou un trifluoralkylsulfonate, un

chlorosilane ou un sulfate d'ammonium et la pyridine.

Pour une description plus détaillée des conditions de

réaction de l'étape de condensation (e), voir le brevet

européen N 187 297, incorporé ici à titre de référence.

D'une manière générale, les substituants Yl et y2 sont choisis de façon à donner les composés de formule I. Par exemple, Yl va être le radical benzyloxy, et y2 va être le radical acyle d'acide aminé achiral aminoprotégé, comportant un atome de carbone a tertiaire tel que

décrit ci-dessus, ou encore un groupe pouvant être con-

verti en le radical d'acide aminé achiral, avec l'atome

de carbone a tertiaire décrit ci-dessus.

L'étape (e), l'hydrolyse partielle d'un bis-ester de formule III pour donner les monoesters de formule I, est mise en oeuvre dans des conditions qui conduisent au clivage préférentiel d'un seul résidu acyle d'acide

aminé. Pour effectuer cette hydrolyse partielle, on dis-

sout dans de l'eau déminéralisée un sel d'un composé de

formule III, de préférence le bis-acétate ou le chlorhy-

drate, et on le neutralise partiellement avec une base

faible, telle qu'une solution diluée d'hydroxyde d'ammo-

nium. Puis on maintient le mélange à la température ambiante pendant 1 à 7 jours, de préférence pendant 48 à 72 heures. Le monoester peut être séparé du bis-ester

par chromatographie préparative dans des conditions aci-

des faibles (pH 3 à 5, de préférence pH 4). Le solvant utilisé pour la séparation par chromatographie doit être éliminé, et on isole sous forme d'un mélange racémique le sel recherché du composé de formule I.

Ou bien encore, on peut aussi utiliser pour provo-

quer l'hydrolyse partielle une hydrolyse enzymatique avec

une estérase telle que l'estérase du porc, ou une pepti-

dase, telle qu'une carboxypeptidase.

Isolement des isomères Il ressort de la formule (I) que les composés de l'invention peuvent avoir au moins un atome de carbone asymétrique (centrechiral). Les composés de formule I qui sont des monoesters possèdent un atome de carbone asymétrique dans la chaine latérale aliphatique. Pour les composés de formule I comportant un atome de carbone asymétrique, il existe deux formes énantiomères, la forme (R) et la forme (S), telles que déterminées par les règles de Cahn et al. On peut utiliser un certain nombre de procédés convenant au dédoublement des énantiomères, mais les

procédés préférés dépendent de la préparation des compo-

sés diastéréoisomères qui dérivent des énantiomères. Bien que le dédoublement puisse être réalisé avec des composés diastéréoisomères covalents qui dérivent des composés de formule I et de complexes diastéréoisomères, les composés diastéréoisomères préférés sont dissociables. En général,

les diastéréoisomères covalents sont séparés par chroma-

tographie, mais on préfère des techniques de séparation/

dédoublement, qui se fondent sur des différences de solu-

bilité. Dans un procédé préféré, les composés de formule I, ayant un atome de carbone asymétrique, sont séparés par la formation de sels diastéréoisomères cristallins entre le substrat racémique (R, S) et un acide optiquement actif. On peut citer à titre d'exemples d'agents de

dédoublement appropriés pouvant former des sels dissocia-

bles avec les énantiomères de formule I l'acide tartri-

que, l'acide o-nitroantranilique, l'acide mandélique, l'acide malique, l'acide 2-phénoxypropionique, l'acide

hydratropique et les acides 2-arylpropioniques en géné-

ral, ou encore l'acide camphosulfonique. Ou bien encore,

on peut utiliser une technique de cristallisation sélec-

tive, de cristallisation directe ou de chromatographie.

Les détails des techniques de dédoublement pouvant s'appliquer à la préparation d'énantiomères de formule I sont décrits dans Jean Jacques, André Collet, Samuel H. Wilen, Enantiomers, Racemates and Resolutions, John Wiley

& Sons, Inc. (1981), incorporé ici à titre de référence.

Ou bien encore, on peut préparer les composés de

l'invention en utilisant des réactifs optiquement actifs.

Quand on prépare des composés chiraux de formule I, c'est l'étape de condensation (e) qui est la voie de synthèse préférée. On peut aussi préparer les énantiomères des composés de formule I par des procédés chromatographiques, tels que des procédés de chromatographie en phase liquide,

sur un support chiral.

La stéréoconfiguration, au niveau du centre chiral des composés de formule I, peut être définie par dichroïsme circulaire, de préférence par analyse aux rayons X sur

monocristal d'un dérivé d'un atome lourd, ou par corrél-

ation avec un produit préparé par synthèse totale à par-

tir d'un énantiomère glycérol unique ayant une configu-

ration connue.

Préparation de composés cristallins Les composés de l'invention peuvent être préparés sous forme cristalline. Cette façon de faire présente un

avantage par rapport aux composés décrits dans la tech-

nique antérieure, qui sont décrits comme étant des subs-

tances non cristallines. L'avantage réside dans le fait

que des formulations pharmaceutiques peuvent être pro-

duites plus facilement avec une substance cristalline.

Une substance cristalline peut être mise en oeuvre d'une manière efficace, et peut être caractérisée d'une manière plus reproductible qu'une substance non cristalline, et

de même la qualité des substances cristallines de l'in-

vention peut être beaucoup plus facilement garantie que

celle d'une substance non cristalline.

Pour produire des substances cristallines, on pré-

fère produire un sel du composé de formule I. Les sels

cristallins préférés sont l'acétate et le chlorhydrate.

On préfère déclencher la cristallisation du sel en dis-

solvant le chlorhydrate ou l'acétate dans de l'eau et en ajoutant un solvant organique miscible à l'eau, tel que

le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, le tétrahydrofu-

ranne ou l'acétonitrile. Ou bien encore, on peut cristal-

liser le chlorhydrate à partir d'une solution d'un alca-

nol inférieur anhydre, tel que le méthanol ou l'éthanol,

par addition d'autres solvants organiques tels que l'acé-

tate d'éthyle, l'isopropanol, le tétrahydrofuranne ou le toluène.

L'invention sera mieux comprise en regard des pré-

parations et Exemples ci-après.

Exemple 1

Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl-1-amino-

cyclohexanecarboxylique A. (Formule IV, dans laquelle les deux groupes R2 sont liés l'un à l'autre et forment un noyau cyclohexane avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés; p2 est un radical benzyloxycarbonyle) On dissout dans 25 ml d'éthanol 5 g (35 mmoles) d'acide 1-amino-cyclohexanecarboxylique, et on ajoute une solution de 1,68 g (42 mmoles) d'hydroxyde de sodium

dans 25 ml d'eau. Tout en refroidissant le mélange réac-

tionnel sur un bain d'eau glacée, on ajoute goutte à goutte 5,96 ml (42 mmoles) de chloroformiate de benzyle dans 20 ml d'éthanol et 42 ml (42 mmoles) d'hydroxyde de

sodium 1 N. Pendant cette addition, le mélange réaction-

nel est soumis à une vigoureuse agitation. On poursuit l'agitation à 02 C pendant 2 heures, et on agite la masse réactionnelle à la température ambiante jusqu'au lendemain. On concentre le mélange réactionnel jusqu'à siccité, et on partage le résidu entre de l'oxyde de diéthyle et de l'eau. La phase aqueuse est acidifiée à pH 2 par addition de HCl 1 N et extraite à l'acétate d'éthyle. La phase dans l'acétate d'éthyle est lavée à l'eau puis avec une saumure, et séchée sur du sulfate de magnésium avant évaporation jusqu'à siccité. L'huile obtenue est cristallisée dans des mélanges d'acétate d'éthyle et d'hexane, pour donner avec un rendement. de

71 % 6,85 g (24,7 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl-1-

amino-cyclohexanecarboxylique, PF 153,4-153,9 C. Analyse: calculé pour C15H19N04 (277,325): C 64,97; H 6,91; N ,05. Trouvé: C 64,86; H 6,91; N 4,94. B. (Formule IV dans laquelle les deux groupes R2 sont liés l'un à l'autre et forment un noyau cycloalcane ayant 4-5 et 7-10 atomes de carbone nucléaires avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés, ou bien chaque

groupe R2 est le groupe méthyle, éthyle, n-propyle, iso-

propyle, isobutyle, n-butyle, cyclopropyle, cyclobutyle ou benzyle); p2 est le radical benzyloxy)

D'une manière analogue, en utilisant l'acide 1-

amino-cyclobutanecarboxylique, l'acide 1-amino-cyclo-

pentanecarboxylique, l'acide 1-amino-cycloheptanecarbo-

xylique, l'acide 1-amino-cyclooctanecarboxylique, l'acide

1-amino-cyclononanecarboxylique, l'acide 1-amino-cyclo-

décanecarboxylique, l'acide 2-amino-2-méthylpropionique,

l'acide 2-amino-2-éthylbutyrique, l'acide 2-amino-2-n-

propylvalérique, l'acide 2-amino-2-isopropyl-3-méthyl-

butyrique, l'acide 2-amino-2-isobutyl-4-méthylvalérique,

l'acide 2-amino-2-n-butylhexanoïque, l'acide 2-amino-

2,2-biscyclopropylacétique, l'acide 2-amino-2,2-biscyclo-

butylacétique ou l'acide 2-amino-2,2-bisbenzylacétique au lieu de l'acide 1-amino-cyclohexanecarboxylique, on prépare les matières de départ suivantes:

Acide N-benzyloxycarbonyl-l-amino-cyclobutanecar-

boxylique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-1-amino-cyclopentanecar-

boxylique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-1-amino-cycloheptanecar-

boxylique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-1-amino-cyclooctanecar-

boxylique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-l-amino-cyclononanecar-

boxylique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-1-amino-cyclodécanecar-

boxylique; Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2-méthyl- propionique; Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2-éthylbutyrique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2-isopropyl-3-

méthylbutyrique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2-isobutyl-4-

méthylvalérique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2-n-butyl-

hexanoïque;

Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2,2-biscyclo-

propylacétique;

Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2,2-biscyclo-

butylacétique; et

Acide N-benzyloxycarbonyl-2-amino-2,2-bisbenzyl-

acétique. C. (Formule IV dans laquelle les deux groupes R2 sont liés l'un à l'autre et forment un noyau cycloalcane ayant 4-10 atomes de carbone nucléaire, avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés, ou encore chaque groupe R2 est le radical méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle,

isobutyle, n-butyle, cyclopropyle, cyclobutyle ou ben-

zyle; p2 est le radical benzyloxy, tert-butyloxycarbo-

nyle)

En utilisant du chlorocarbonate de tert-butyle (t-

BOC) comme réactif en remplacement du chloroformiate de benzyle, on prépare d'une manière analogue les matières de départ suivantes: Acide Nt-BOC-l-amino-cyclobutanecarboxylique; Acide N-t-BOC-l-aminocyclopentanecarboxylique; Acide N-t-BOC-l-amino-cycloheptanecarboxylique; Acide N-t-BOC-l-amino-cyclooctanecarboxylique; Acide N-t-BOC-lamino-cyclononanecarboxylique; Acide N-t-BOC-1-aminocyclodécanecarboxylique; Acide N-t-BOC-2-amino-2-méthylpropionique; Acide N-t-BOC-2-amino-2-éthylbutyrique; Acide N-t-BOC-2-amino-2isopropyl-3-méthylbutyrique; Acide N-t-BOC-2-amino-2-isobutyl-4méthylvalérique; Acide N-t-BOC-2-amino-2-n-butylhexanoïque; Acide N-tBOC-2-amino-2,2-biscyclopropylacétique; Acide N-t-BOC-2-amino-2,2biscyclobutylacétique; et

Acide N-t-BOC-2-amino-2,2-bisbenzylacétique.

Exemple 2

Préparation du 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-vY)méthoxy-1-benzyloxy-propane-3-ol A. On dissout dans 815 ml d'éthanol au reflux 54,2

g (114 mmoles) de N2-acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-

oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-bis(benzyloxy)-propane, et,

sous atmosphère d'azote, on ajoute 610 ml de cyclohexène.

On ajoute au mélange réactionnel une suspension de 16 g d'hydroxyde de palladium dans 50 ml d'éthanol, et on

porte le mélange au reflux sous atmosphère d'azote pen-

dant 1,5 h. Le mélange chaud est filtré sur de la Célite, et le filtrat est concentré à l'évaporateur rotatif. Le mélange réactionnel brut obtenu est chromatographié sur gel de silice. Une élution avec 8 % de méthanol/92 % de

dichlorométhane, suivie d'une élution avec 10 % de métha-

nol/90 % de dichlorométhane, donne avec un rendement de

16 % sous forme de matière première intacte 18,6 g de N2-

acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-

1,3-bis(benzyloxy)propane, et avec un rendement de 40 %

17,6 g de N2-acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-yl)méthoxy-1-benzyloxypropane-3-ol. B. On dissout dans 200 ml de méthanol 21,9 g (56,5

mmoles) de N2-acétyl-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-yl)méthoxy-1-benzyloxy-propane-3-ol, et on ajoute 101

ml d'hydroxyde d'ammonium. On agite le mélange à la tem-

pérature ambiante jusqu'au lendemain. On ajoute 400 ml

d'oxyde de diéthyle à la suspension blanche, et on fil-

tre le mélange. On lave le précipité successivement avec ml d'oxyde de diéthyle, 100 ml d'eau et 100 ml d'oxyde de diéthyle, et on sèche sous vide poussé jusqu'au len- demain pour obtenir avec un rendement de 82 % 15,9 g

(46,13 mmoles) de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-1-benzyloxy-propane-3-ol. Une évaporation du filtrat et une suspension du précipité obtenu dans 200 ml d'oxyde de diéthyle, suivies d'une filtration et d'un séchage sous vide poussé, donnent avec un rendement de

12 % encore 2,3 g (6,7 mmoles) du produit.

Analyse: calculé pour C16H19N504 (345,36): C ,65; H 5,55; N 20,28. Trouvé: C 55,25; H 5,60; N

20,12.

Exemple 3

Préparation du (S)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-l-benzyloxy-propane-3-ol

A. (R)-(1-chloro-2-acétoxyméthoxy-3-benzyloxy)-

propane On fait barboter du HC1 gazeux (séché par passage à

travers du H2S04 concentré) dans un mélange, sous agita-

tion, de 500 mg (3,06 mmoles) de (S)-(+)-benzyloxyméthyl-

oxiranne et de 201 mg (6,71 mmoles) de paraformaldéhyde dans 8 ml de dichlorométhane à 0 C jusqu'à dissolution

de la totalité des matières solides (environ 45 minutes).

On stocke à 0 C pendant 16 heures la solution obtenue.

Après séchage sur du sulfate de magnésium, on évapore le

solvant pour obtenir l'intermédiaire oxyde de chloromé-

thyle (R)-(l-chloro-2-chlorométhoxy-3-benzyloxy)propane.

On dissout cet intermédiaire dans 3 ml d'acé-tone, et on l'ajoute goutte à goutte à un mélange de 2,1 g (21,4 mmoles) d'acétate de potassium dans 7 ml d'acétone. On agite le mélange à la température ambiante pendant 16

heures. On isole le solide par filtration, et on con-

centre le filtrat. Le résidu est repris dans 20 ml de toluène, puis lavé avec 10 ml d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et 2 x 20 ml d'eau. On sèche la

phase organique sur du sulfate de sodium. Après filtra-

tion, on concentre le filtrat, et on purifie le résidu par chromatographie éclair sur gel de silice (hexanes/ acétate d'éthyle = 7/1) pour obtenir avec un rendement de 97 %, sous forme d'une huile incolore, 810 mg (2,97

mmoles) de (R)-(l-chloro-2-acétoxyméthoxy-3-benzyloxy)-

propane (le rapport entre isomères est de 12:1).

* B. (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)-

méthoxy-l-chloro-3-benzyloxy-propane On ajoute une solution de 1,09 g (2, 95 mmoles) de

guanine persilylée dans 3,2 ml de DMF à 810 mg de (R)-

(1-chloro-2-acétoxyméthoxy-3-benzyloxy)propane. On agite la solution à 130 C pendant 1 heure avant d'introduire du trifluorométhanesulfonate de triméthylsilyle. On poursuit l'agitation à cette même température pendant 4 heures. On refroidit le mélange à la température ambiante,

et on le partage entre de l'eau et de l'acétate d'éthyle.

La phase aqueuse est entièrement extraite à l'acétate d'éthyle. La phase organique, après combinaison, est

séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et concen-

trée. On purifie le résidu par chromatographie sur gel

de silice pour obtenir, en même temps que son isomère N-

7, le (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)-

méthoxy-l-chloro-3-benzyloxy-propane. Le rapport de

l'isomère N-9 à l'isomère N-7 est d'environ 2,3:1.

C. (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-l-acétoxy-3-benzyloxy-propane On chauffe au reflux pendant 5 heures un mélange du produit de l'étape précédente, un large excès d'acétate de potassium et du DMF. Le mélange brun obtenu est

refroidi à la température ambiante et filtré sur un tam-

pon de Célite. Le lit de filtration est rincé au métha-

nol. On évapore le filtrat, et on chasse sous vide le

DMF résiduel. On purifie le produit brut par chromato-

graphie éclair sur gel de silice (CH2Cl2-méthanol:10:1)

pour obtenir sous forme d'un solide jaune pâle le (R)-2-

(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1- acétoxy-3-benzyloxypropane.

D. (S)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)-

méthoxy-l-benzyloxy-propane-3-ol

On agite à la température ambiante pendant 18 heu-

res un mélange de (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-yl)méthoxy-l-acétoxy-3-benzyloxy-propane dans un

mélange 1:2 d'ammoniaque à 30 % et de méthanol. On éva-

pore le solvant, et on triture le résidu avec une petite quantité de méthanol. On recueille le solide jaune pâle

pour obtenir le (S)-2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-yl)méthoxy-l-benzyloxy-propane-3-ol. On concentre la liqueur-mère, et on recristallise le résidu dans du méthanol chaud pour obtenir une deuxième récolte du produit.

Exemple 4

Préparation du 1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-

(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-

hydroxy- 1 -Propanyle (Formule I: X est le radical hydroxy; les deux groupes R2, avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés, forment un noyau cyclohexyle)

A. On dissout dans 240 ml sous atmosphère d'hydro-

gène 6,02 g (21,7 mmoles, 1,5 équivalents) d'acide N-

benzyloxycarbonyl-l-amino-cyclohexanecarboxylique, et on

ajoute sous agitation 3,88 g (18,8 mmoles, 1,3 équi-

valents) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 6,5 heures. On filtre le mélange, et on concentre le

filtrat à l'évaporateur rotatif. La mousse blanche obte-

nue est dissoute dans 90 ml de DMF sec et placée sous atmosphère d'azote. On dissout dans 90 ml de DMF 5 g

(14,5 mmoles) de 2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-l-benzyloxy-propane-3-ol, et on les ajoute à la solution cidessus de l'anhydride dans le DMF. Après avoir ajouté 0,27 g (2,2 mmoles, 0,15 équivalent) de 4- diméthylamino-pyridine, on agite le mélange réactionnel

à la température ambiante jusqu'au lendemain. Une ana-

lyse CCM montre que la réaction n'est pas terminée.

On ajoute 1,2 g (4,3 mmoles, 0,3 équivalent) d'acide Nbenzyloxycarbonyl-l-amino-cyclohexanecarboxylique, et

0,9 g (4,3 mmoles, 0,3 équivalent) de 1,3-dicyclohexyl-

carbodiimide, et on agite le mélange réactionnel pendant 3 jours à la température ambiante. On filtre le mélange,

et on évapore le filtrat jusqu'à siccité. Une chromato-

graphie sur gel de silice, utilisant le système solvant 7,5 % de méthanol/92,5 % de dichlorométhane conduit à la production de 7,6 g d'un produit impur. Une nouvelle chromatographie sur gel de silice avec le système solvant constitué de 2 1 de dichlorométhane, de 2 1 d'acétone et de 30 ml d'acide acétique, donne un produit brut. On dissout ce produit dans 150 ml de chloroforme et on le lave avec 300 ml de bicarbonate de sodium puis avec 200 ml d'eau et 200 ml d'une saumure pour éliminer l'acide

N-benzyloxycarbonyl-l-amino-cyclohexanecarboxylique res-

tant. On sèche la phase organique sur du sulfate de magnésium et on l'évapore jusqu'à siccité pour obtenir

avec un rendement de 74 % sous forme d'une mousse blan-

che 6,49 g (10,7 mmoles) du produit N-benzyloxycarbonyl-

1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-(2-amino-l,6-dihydro-

6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1-benzyloxy-propane-3-ol.

On parachève la réaction en utilisant dès le départ

2 équivalents de l'acide aminé et 1 équivalent de 1,3-

dicyclohexyl-carbodiimide.

B. Préparation de l'acétate du 1-amino-cyclohexane-

carboxylate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle

On dissout 6,16 g (10,19 mmoles) de l'oxyde de ben-

zyle de l'étape précédente dans 280 ml d'acide acétique

glacial. On ajoute 3 g de charbon palladié et on hydro-

gène le mélange sur un agitateur Parr jusqu'au lendemain sous 276 kPa (40 psi). Une analyse par CCM indique un taux de conversion d'environ 90 %. On hydrogène le

mélange pendant encore 5 heures dans les mêmes condi-

tions. La conversion n'est pas encore complète. On ajoute 3 g de charbon palladié et on poursuit l'hydrogénation jusqu'au lendemain. On filtre le mélange réactionnel sur un tampon de Célite, et le catalyseur au charbon est lavé avec 200 ml d'acide acétique puis avec 150 ml d'eau. On filtre le filtrat sur une fritte de verre (porosité moyenne), et on le concentre jusqu'à un volume d'environ ml. On ajoute 500 ml d'eau, et on subdivise le mélange en quatre parties égales, chaque partie étant lyophilisée (dans un ballon à fond rond de 1 litre) pour donner une poudre lyophilisée blanche, ce qui permet d'obtenir avec un rendement de 64 % 3,1 g (6,6 mmoles) de l'acétate du

1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-

6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, PF 141,5-151,5 C. Analyse après combustion: C16H24N605 + CH3COOH + 1,75 H20 (471,98). Calculé: C 45,81; H 6,72;

N 17,81. Trouvé: C 45,82; H 6,38; N 17,93.

C. Préparation du N-benzyloxycarbonyl-1-aminocyclo-

hexanecarboxylate de (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-3-benzyloxy-1-propanyle A une solution de 2,41 g (8, 7 mmoles, 2 équivalents) de 1-aminocyclohexanecarboxylate de Nbenzyloxycarbonyle

dans 12 ml de diméthylformamide anhydre à 0 C sous atmos-

phère d'azote, on ajoute 1,79 g (8,7 mmoles, 2 équiva-

lents) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide, puis 53 mg (0,44 mmole) de 4diméthylaminopyridine. On ajoute goutte à goutte sous agitation à 0 C une solution de 1,5 g (4,35

mmoles) de (S)-2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-3-benzyloxy-propane-l-ol dans 20 ml de dimé-

thylformamide. On poursuit l'agitation à la température ambiante pendant 20 heures. On isole le solide blanc par filtration et on le rince au dichlorométhane. Le filtrat est évaporé jusqu'à la siccité sous vide, on ajoute du dichlorométhane au résidu et on filtre de nouveau le mélange pour éliminer la dicyclohexylurée. Le filtrat est chromatographié sur une colonne de gel de silice, avec le système solvant dichlorométhane/méthanol = 15:1 assurant l'élution. On obtient avec un rendement de 73 %

1,9 g (3,15 mmoles) de (N-benzyloxycarbonyl)-l-amino-

cyclohexanecarboxylate de (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-

oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-benzyloxy-l-propanyle, PF 116-

118 C (à partir d'une cristallisation dans l'acétate

d'éthyle/éther); [a]D = -6,79 (c = 0,75, CHCl3).

D. Préparation de l'acétate du 1-amino-cyclohexane-

carboxylate de (R,S)-2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle On dissout dans 70 ml d'acide acétique glacial 1,58

g (2,55 mmoles) de l'oxyde de benzyle de l'étape précé-

dente. On ajoute 1 g de charbon palladié, et on hydrogène le mélange sur un agitateur Parr sous 276 kPa jusqu'au

lendemain. Une analyse par CCM indique un taux de conver-

sion d'environ 90 %. Dans les mêmes conditions, on hydro-

gène le mélange pendant encore 5 heures. La conversion

n'est pas encore complète. On ajoute 1 g de charbon pal-

ladié, et on poursuit l'hydrogénation jusqu'au lendemain.

On filtre le mélange réactionnel sur un tampon de Célite, et le catalyseur au charbon est lavé avec 50 ml d'acide acétique puis avec 40 ml d'eau. On filtre le filtrat sur

une fritte de verre de porosité moyenne, et on le con-

centre à un volume d'environ 20 ml. On ajoute 125 ml

d'eau, et on subdivise le mélange en quatre parties éga-

les, chaque partie étant lyophilisée pour donner une

poudre lyophilisée blanche, et l'on obtient avec un ren-

dement de 64 % 0,75 g (3,25 mmoles) de l'acétate du 1-

aminocyclohexanecarboxylate de (R,S)-2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle, ce qui montre que la racémisation a eu lieu lors de l'étape d'hydrogénation. Analyse après combustion: C16H24N605 + CH3COOH + 1,75 H20 (471,98). Calculé: C , 81; H 6,72; N 17,81. Trouvé: C 45,82; H 6,38; N

17,93.

E. Préparation du chlorhydrate du 1-aminocyclohexane-

carboxylate de (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-

9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propany1e On dissout dans 45 ml de méthanol 0,8 g (1,3 mmoles) de (N-benzyloxycarbonyl)-l-aminocyclohexanecarboxylate

de (R)-2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-

3-benzyloxy-l-propanyle, et on ajoute 0,118 ml (1,3 mmoles) d'acide chlorhydrique concentré. On place le mélange sous atmosphère d'azote, et on ajoute 250 mg de charbon palladié à 10 %. On hydrogène le mélange sur un agitateur Parr sous une pression d'hydrogène de 345 kPa (50 psi) pendant 5 heures. On filtre le mélange sur un tampon de Célite, et on lave le résidu avec 50 ml de méthanol. Une évaporation du filtrat et des eaux de

lavage combinés sous pression réduite, suivie d'une lyo-

philisation dans 80 ml d'eau, donne avec un rendement de

% 515 mg du composé de l'intitulé.

Exemple 5

(Formule I: X est le radical hydroxy; les deux groupes R2, avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés, forment un noyau cycloalkyle contenant de 4 à 10 atomes de carbone nucléaires; ou encore chaque groupe R2 est le radical méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle,

isobutyle, n-butyle, cyclopropyle, cyclobutyle ou ben-

zyle) En utilisant les modes opératoires des Exemples 1

et 2 et des modes opératoires analogues à ceux de l'Exem-

pie 3, mais en utilisant au lieu de l'acide 1-aminocyclo-

hexanecarboxylique l'acide 1-aminocyclobutanecarboxyli-

que, l'acide 1-aminocyclopentanecarboxylique, l'acide 1-

aminocycloheptanecarboxylique, l'acide l-aminocyclo-

octancarboxylique, l'acide 1-aminocyclononanecarboxyli-

que, l'acide 1-aminocyclodécanecarboxylique, l'acide 2-

amino-2-méthylprionique, l'acide 2-amino-2-éthyl-

butyrique, l'acide 2-amino-2-n-propylvalérique, l'acide

2-amino-2-isopropyl-3-méthylbutyrique, l'acide 2-amino-

2-isobutyl-4-méthylvalérique, l'acide 2-amino-2-n-butyl-

hexanoïque, l'acide 2-amino-2,2-biscyclopropylacétique,

l'acide 2-amino-2,2-biscyclobutylacétique ou l'acide 2-

amino-2,2-bisbenzylacétique, on prépare les composés suivants de formule I:

1-amino-cyclobutanecarboxylate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et son acétate: C14H20N605.C2H402 (masse moléculaire

352 + 60): SM (EI): 353 (M+);

1-amino-cyclopentanecarboxylate de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle et son acétate: CS15H22N6O5.C2H402 (masse moléculaire

366 + 60): SM (LIMS): 367 (M+H)+;

1-amino-cycloheptanecarboxylate de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle et son acétate: C17H26N605.C2H402 (masse moléculaire

394 + 60); SM (EI): 394 (M+);

1-amino-cyclooctanecarboxylate de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle et son chlorhydrate;

1-amino-cyclononanecarboxylate de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle et son chlorhydrate;

1-amino-cyclodécanecarboxylate de 2-(2-amino-l,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle et son chlorhydrate:

2-amino-2-méthylpropionate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et son acétate [rendement d'estérification: 70,6 % de la théorie. Rendement d'hydrogénation: 100 % de la théo- rie. C13H20N605.C2H402 (masse moléculaire 340 + 60): SM (LSIMS, matrice glycérol): 341 (M+H)+];

2-amino-2-éthylbutyrate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-

6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et son chlorhydrate;

2-amino-2-n-propylvalérate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et son chlorhydrate;

2-amino-2-isopropyl-3-méthylbutyrate de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-

propanyle et son chlorhydrate;

2-amino-2-isobutyl-4-méthylvalérate de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-

propanyle et son chlorhydrate;

2-amino-2-n-butylhexanoate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et son chlorhydrate;

2-amino-2,2-biscyclopropylacétate de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-propanyle et son chlorhydrate;

2-amino-2,2-biscyclobutylacétate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et son chlorhydrate; et

2-amino-2,2-bisbenzylacétate de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle

et son chlorhydrate.

Exemple 6

Préparation du bis(l1-amino-cyclohexanecarboxylate

de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-

propanediYle (Formule III: X est le radical hydroxy; les deux groupes R2, avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés, forment un noyau cyclohexyle)

A. Bis(N-benzyloxycarbonyl-1-amino-cyclohexane-

carboxylate) de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9- yl)méthoxy-l,3propanediyle On met en suspension sous atmosphère d'azote dans

ml de DMF sec 2,0 g (7,8 mmoles) de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propanediol, et

8,68 g (31,2 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl-l-amino-

cyclohexanecarboxylique. On ajoute sous agitation 381 mg (3,12 mmoles) de 4-diméthylaminopyridine, puis 6,43 g (31,2 mmoles) de 1,3dicyclohexylcarbodiimide. On agite

le mélange à la température ambiante pendant 2 heures.

On chasse le solvant sous pression réduite, et on chro-

matographie le résidu sur une colonne de gel de silice en utilisant comme éluant du dichlorométhane contenant 5 % de méthanol, pour obtenir sous forme d'un solide blanc le bis(N-benzyloxycarbonyl-1aminocyclohexanecarboxylate)

de 2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-

propanediyle.

B. Bis(l1-amino-cyclohexanecarboxylate) de 2-(2-

amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propane-

diyle On ajoute 0,5 g de charbon palladié à 10 % à une

solution de 2,0 g (2,58 mmoles) de bis(N-benzyloxy-

carbonyl-l-amino-cyclohexanecarboxylate) de 2-(2-amino-

1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propanediyle dans 30 ml d'acide acétique glacial, et on hydrogène le mélange sous une pression d'hydrogène de 101 kPa (1

atmosphère) à la température ambiante jusqu'au lendemain.

On filtre le mélange sur de la Célite, et on concentre le filtrat sous pression réduite pour obtenir une huile épaisse. On ajoute de l'eau au résidu, et on lyophilise le mélange pour obtenir sous forme d'un solide blanc

l'acétate du bis(1-amino-cyclohexanecarboxylate) de 2-

(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-

propanediyle. Spectre de masse: MA+ 506; masse molécu-

laire 505. Analyse élémentaire: C29H47012N7.1HOAc.lH20.

Calculé: C 49,49; H 7,02; N 13,93. Trouvé: C 49,32;

H 6,97; N 13,89.

C. Bis(l-amino-cyclopentanecarboxylate) et autres

bis(l-amino-cycloalkylcarboxylates) de 2-(2-amino-1,6-

dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propanediyle (Formule III: X est le radical hydroxy; les deux groupes R2, avec l'atome de carbone a auquel ils sont liés, forment un noyau cyclopentyle) On utilise le procédé des paragraphe A et B de cet Exemple pour préparer les composés suivants: Bisacétate du bis(1-amino-cyclopentanecarboxylate)

de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-

propanediyle: C21H31N706.2(C2H402) (masse moléculaire

477 + 120): SM (LIMS): 478 (M+H)+;

Bisacétate du bis(1-amino-cycloheptanecarboxylate)

de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-

propanediyle: C25H39N706.2(C2H402) (masse moléculaire 533 + 120). SM (LSIMS, matrice glycérol): 534 (M+H)+; et Bisacétate du bis(1-aminocyclobutanecarboxylate)

de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-

propanediyle: C19H27N706.2(C2H402) (masse moléculaire

449 + 120). SM (LSIMS, matrice glycérol): 450 (M+H)+.

Exemple 7

Acétate du 1-amino-cyclohexanecarboxylate de 2-((2-

amino-1,6-dihydro-6-oxo-9H-purine-9-yl)méthoxy)-3-

hydroxy-l-propanyle On dissout dans 0,4 ml d'eau déminéralisée 98 mg du tris-acétate de bis-(1-amino-cyclohexanecarboxylate) de

2-((2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy)-1,3-

propanediyle (échantillon lyophilisé contenant, d'après une RMN, 3,0 équivalents d'acide acétique), c'est-à-dire

0,143 mmole (soit un total de 0,43 mmole d'acide acéti-

que), et on ajoute 38 pl d'une solution d'hydroxyde d'ammonium 0,015 M (= 0,57 mmole). On abandonne le mélange à la température ambiante pendant 7 heures, on place le flacon dans un bain d'huile maintenu à 48- 50 C

et on l'abandonne dans le bain d'huile pendant 22 heures.

On injecte l'échantillon, en deux lots identiques, dans

une colonne de CLHP préparative en phase inversée (YMC-

Pack, ODS-AM DM-33-5, 20 x 250 mm; YMC Inc.). On procède à la séparation avec un système solvant constitué de 15

% de méthanol et de 85 % d'acétate d'ammonium 0,1 M tam-

ponné à pH 4 avec de l'acide acétique, débit 9,5 ml/min, le détecteur étant réglé à 256 nm. On recueille le pic représentant le monoester. On chasse le solvant sous vide poussé jusqu'à environ 2 ml, et on lyophilise le résidu à trois reprises à partir d'eau contenant 0,1 % d'acide acétique, pour extraire le tampon. Puis l'acide acétique en excès est éliminé par séchage à la température ambiante sous vide poussé pendant 42 heures. On obtient

mg (0,068 mmole = 48 %) de l'acétate du 1-amino-

cyclohexanecarboxylate de 2-((2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy)-3-hydroxy-l-propanyle, dont une CLHP et une RMN montrent qu'il est identique au produit

de l'Exemple 4B.

Exemple 8

Détermination de l'absorption orale (biodisponibi-

lité) chez le rat On utilise le dosage suivant pour déterminer l'absorption orale (biodisponibilité orale) des composés de formule I et d'esters d'acides aminés du ganciclovir et d'autres esters et éthers du ganciclovir, étudiés à

titre de comparaison.

Pour mesurer la biodisponibilité orale d'un composé, on détermine d'abord le taux plasmatique du composé chez des rats mâles, après administration d'une dose orale unique (po) du composé. Pour mesurer la biodisponibilité

orale d'une prodrogue, on détermine d'abord le taux plas-

matique du principe actif, ici le ganciclovir, chez des rats mâles après une dose unique po de la prodrogue. Puis

on détermine le taux plasmatique du principe actif gan-

ciclovir chez des rats mâles après administration d'une dose unique du composé par voie intraveineuse (iv). Pour le ganciclovir, la dose unique dans chaque cas, po et iv, est de 10 mg/kg; pour un ester de prodrogue, la dose

unique dans chaque cas, orale et iv, est une dose équi-

molaire de 10 mg/kg de ganciclovir. A partir des deux

mesures qui suivent l'administration po et l'administra-

tion iv, on calcule la biodisponibilité orale d'un com-

posé en divisant l'aire totale sous la courbe donnant les variations de la concentration en fonction du temps, après administration po, par l'aire totale située sous la courbe donnant les variations de la concentration en fonction du temps après administration iv, après avoir convenablement fait une correction pour tenir compte de la dose, selon l'équation suivante: F(po) (%) = [SSC(po) / SSC(iv)] x [Dose(iv) / Dose(po)] x 100 La SSC (surface sous la courbe) est calculée sur tout l'intervalle de temps correspondant à l'analyse, de

0 à 24 heures.

Le véhicule pour posologie orale et intraveineuse est constitué d'une solution salée normale contenant 2 % d'acide acétique. Dans les deux cas, la concentration du composé est équivalente à 4,0 mg/ml de ganciclovir avec un débit de dose équivalent à 10 mg/kg (2,5 ml/kg) de

ganciclovir. Un rat de 200 g reçoit 0,5 ml de la solu-

tion orale du médicament, par gavage ou par injection

dans la veine caudale.

Les rats sont acclimatés aux conditions ambiantes du laboratoire pendant 3 jours, et on les met à jeun jusqu'au lendemain avant de commencer l'expérience, et jusqu'à 4 jours après administration. On prélève le sang de 4 rats, à chacun des instants suivants: 0 min (avant administration), 5 min (iv seulement), 15 min, 30 min, 1

* h, 2 hg, 3 h, 5 h, 7 h, 10 h et 24 h. Le sang est immé-

diatement centrifugé pour permettre d'obtenir le plasma,

et on congèle le plasma à -20 C jusqu'à analyse.

Dosaqe du qanciclovir dans le plasma On mélange à des aliquotes de 0,50 ml de plasma 0,020 ml d'un étalon interne (acyclovir, 15 pg/ml dans

un mélange de méthanol à 10 % et d'eau) et 3,0 ml d'acé-

tonitrile. On fait tourbillonner le mélange au vortex, et le précipité obtenu est extrait par centrifugation

(4000 g, 10 min). On évapore le surnageant jusqu'à sic-

cité sous atmosphère d'azote, et on le reconstitue dans pl de la phase mobile d'une CLHP. On analyse des aliquotes de 0,05 ml par CLHP à l'aide d'une colonne Keystone Hypersil BDS, 250 x 4,6 mm C 18. La phase mobile contient 2 % d'acétonitrile dans un tampon phosphate de sodium 30 mM contenant de l'acide heptanesulfonique 5 mM à pH 2,0, et on la pompe à 1, 0 ml/min. On détecte le ganciclovir et l'étalon interne, et on effectue la mesure

par l'intermédiaire de l'absorbance UV à 254 nm.

Avec cette technique d'analyse, les monoesters de formule I présentent une biodisponibilité nettement supérieure à celle du ganciclovir, et les bis-esters de formule III présentent une biodisponibilité supérieure à

celle du ganciclovir.

Exemple 9

Détermination de l'absorption orale (biodisponibi-

lité) chez le singe macaque Cynomolqus On utilise le dosage ci-après pour déterminer l'absorption orale (biodisponibilité orale) des composés

de formule I chez le singe macaque Cynomolgus.

Animaux, posologie et prélèvement d'échantillons On utilise des macaques Cynomolgus mâles de 5 à 7 kg. Les animaux reçoivent une alimentation pour singes, des fruits et de l'eau, selon un cycle circadien de 12 heures de lumière. Les composés de formule I sont formu-

lés à une concentration équimolaire de celle d'une solu-

tion à 10 mg/ml de ganciclovir dans une solution salée.

La formulation orale est administrée par gavage à raison de 1,0 ml/kg pour une dose finale équimolaire d'une dose

de 10 mg/kg de ganciclovir. La formulation iv du ganci-

clovir est formulée dans une solution salée contenant du HC1 à 0,2 % à une concentration de 20 mg/ml, et on

l'administre à raison de 0,5 ml/kg.

Les animaux sont mis à jeun à compter de la veille de l'administration, et jusqu'à 4 heures après cette administration. Des échantillons sanguins sont prélevés pour chaque singe à l'instant O (avant administration), et 5 min (iv seulement), 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, h, 7 h, 10 h et 24 h après administration. Les échan-

tillons de sang sont recueillis dans des seringues hépa-

rinisées, et le plasma est immédiatement isolé par cen-

trifugation et congelé à -20 C jusqu'à analyse.

Dosage du qanciclovir dans le plasma On mélange à des aliquotes de 0,50 ml de plasma 0,020 ml d'un étalon interne (acyclovir, 15 pg/ml dans

un mélange de méthanol à 10 % et d'eau) et 3,0 ml d'acé-

(4000 g, 10 min). On évapore le surnageant jusqu'à sic-

cité sous atmosphère d'azote, et on le reconstitue dans p1 de la phase mobile d'une CLHP. On analyse des aliquotes de 0,05 ml par CLHP à l'aide d'une colonne Keystone Hypersil BDS, 250 x 4,6 mm C 18. La phase mobile contient 2 % d'acétonitrile dans un tampon phosphate de sodium 30 mM contenant de l'acide heptanesulfonique 5 mM à pH 2,0, et on la pompe à 1, 0 ml/min. On détecte le ganciclovir et l'étalon interne, et on effectue la mesure

par l'intermédiaire de l'absorbance UV à 254 nm.

La biodisponibilité (F) est calculée selon l'équa-

tion donnée dans l'Exemple 8.

Avec ce dosage, les monoesters de formule I présen-

tent une biodisponibilité nettement supérieure à celle

du ganciclovir.

Exemple 10

Formulations pharmaceutiques Cet exemple illustre la préparation de formulations pharmaceutiques représentatives pour administration orale, contenant un monoester du ganciclovir de formule

I, à par exemple l'acétate du 1-amino-cyclohexane-

carboxylate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-3-hydroxy-l-propanyle. Les gélules ci-après de monoester du ganciclovir contiennent comme excipients de la polyvinylpyrrolidone comme liant; de l'amidon de maïs comme des intégrants; et de l'acide stéarique comme lubrifiant, ces substances étant placées dans la coque d'une gélule en gélatine dure en deux parties. Le liquide de granulation est l'eau, qui

est essentiellement éliminée pendant la fabrication.

Composition quantitative des gélules du monoester du qanciclovir (Une capsule trois fois par jour) Ingrédient Masse par gélule % m/m (mû) Chlorhydrate du monoester du ganciclovir 390,00 92,75 Polyvinylpyrrolidone 12,61 3,00 Amidon de maïs 16,81 4,00 Acide stéariquel 1,05 0,25 Eau2 Masse totale de remplissage (théorique)3 420,47 100,00 Le mélange en poudre est introduit dans les coques

d'une gélule en gélatine dure en deux morceaux.

1 - La quantité d'acide stéarique varie de 0,1 à 5,0 %

en poids.

2 - La quantité d'eau peut varier pour donner une granu-

lation acceptable, et on l'élimine par séchage.

3 - La masse totale de remplissage (théorique) ne com-

prend pas l'humidité résiduelle qui va être présente

dans le produit fini.

Composition quantitative de gélules du monoester du qanciclovir (Deux capsules trois fois par jour Inqrédient Masse par gélule % m/m (mq) Chlorhydrate du monoester du ganciclovir 312,00 92,75 Polyvinylpyrrolidone 10,09 3,00 Amidon de maïs 13,45 4,00 Acide stéariquel 0,84 0,25 Eau2 Masse totale de remplissage (théorique)3 336,38 100,00 Le mélange en poudre est introduit dans les coques

d'une gélule en gélatine dure en deux morceaux.

1 - La quantité d'acide stéarique varie de 0,1 à 5,0 %

en poids.

2 - La quantité d'eau peut varier pour donner une granu-

lation acceptable, et on l'élimine par séchage.

3 - La masse totale de remplissage (théorique) ne com-

prend pas l'humidité résiduelle qui va être présente dans

le produit fini.

Exemple de mode opératoire de fabrication de gélules du monoester du qanciclovir

1. Dans un mélangeur approprié, mélanger le mono-

ester du ganciclovir et une partie de l'amidon de maïs.

2. Sous agitation, dissoudre la polyvinylpyrrolidone

dans l'eau.

3. Ajouter la solution (2) au mélange (1), tout en poursuivant l'opération de mélange pour former une gra- nulation.

4. Si nécessaire, broyer la granulation humide.

5. Dans un sécheur, sécher la granulation humide.

6. Faire passer dans un broyeur la granulation

sèche, le reste de l'amidon de maïs et l'acide stéarique.

7. Mélanger la masse (6) dans un mélangeur approprié.

8. Encapsuler la quantité appropriée du mélange (7)

dans les coques de gélules en gélatine dure en deux mor-

ceaux. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux

exemples de réalisation ci-dessus décrits et représen-

tés, à partir desquels on pourra prévoir d'autres modes

et d'autres formes de réalisation, sans pour autant sor-

tir du cadre de l'invention.

Claims

Revendications

1. Composé de formule X HN

H 2N> é N

lRo0

RHO

caractérisé en ce que X est un hydrogène ou un radical chloro, amino ou hydroxy; et R1 est un résidu acyle

d'acide aminé achiral ayant un atome de carbone a ter-

tiaire, ou l'un de ses sels acceptables d'un point de

vue pharmaceutique.

2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le résidu acyle d'acide aminé achiral R1 a la formule 2 Pz

2Ny CO--

dans laquelle chaque radical R2 est un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone ou benzyle; ou les deux groupes R2 liés l'un à l'autre forment un groupe méthylène ayant

de 3 à 9 atomes de carbone; ou l'un de ses sels accep-

tables d'un point de vue pharmaceutique.

3. Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R2 est le radical méthyle, éthyle, propyle ou butyle ou un radical cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone; ou les deux groupes R2 liés l'un à l'autre forment un groupe polyméthylène ayant de 3 à 9 atomes de carbone; ou l'un de ses sels acceptables d'un point de

vue pharmaceutique.

4. Composé selon la revendication 3, caractérisé en ce que les deux groupes R2 liés l'un à l'autre forment

un groupe polyméthylène ayant de 3 à 9 atomes de car-

bone, ou l'un de ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

5. Composé selon la revendication 4, caractérisé en

ce que X est le radical hydroxy.

6. Composé selon la revendication 5, caractérisé en ce que les deux groupes R2 liés l'un à l'autre forment un groupe polyméthylène ayant 4 ou 5 atomes de carbone, ou

l'un de ses sels acceptables d'un point de vue pharma-

ceutique.

7. Composé selon la revendication 6 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 liés l'un à l'autre

forment le groupe -(CH2)5-, c'est-à-dire le 1-amino-

cyclohexanecarboxylate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et ses sels

acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

8. Composé selon la revendication 6 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 liés l'un à l'autre

forment le groupe -(CH2)4-, c'est-à-dire le 1-amino-

cyclopentanecarboxylate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1- propanyle et ses sels

acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

9. Composé selon la revendication 6 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 liés l'un à l'autre

forment le groupe -(CH2)3-, c'est-à-dire le 1-amino-

cyclobutanecarboxylate de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle et ses sels

acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

10. Composé selon la revendication 3 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 sont des radicaux méthyle, c'est-àdire le 2-amino-2-méthylpropionate de

2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-

hydroxy-l-propanyle, et ses sels acceptables d'un point

de vue pharmaceutique.

11. Composé selon la revendication 3 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 sont des radicaux

éthyle, c'est-à-dire le 2-amino-2-éthylbutyrate de 2-(2-

amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-hydroxy-1-

propanyle, et ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique.

12. Composé selon la revendication 3 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 sont des radicaux

isopropyle, c'est-à-dire le 2-amino-2-isopropyl-3-méthyl-

butyrate de 2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)-

méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables

d'un point de vue pharmaceutique.

13. Composé selon la revendication 3 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 sont des radicaux

isobutyle, c'est-à-dire le 2-amino-2-isobutyl-3-méthyl-

valérate de 2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)-

méthoxy-3-hydroxy-1-propanyle, et ses sels acceptables

d'un point de vue pharmaceutique.

14. Composé selon la revendication 3 ou l'un de ses

sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique, carac-

térisé en ce que les deux groupes R2 sont des radicaux n-butyle, c'est-àdire le 2-amino-2-n-butylhexanoate de

2-(2-amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-3-

hydroxy-l-propanyle, et ses sels acceptables d'un point

de vue pharmaceutique.

15. Composé de formule x N HN. H2 R1.0 caractérisé en ce que X est un hydrogène ou un radical

chloro, amino ou hydroxy; pl est un groupe hydroxy-

protecteur, et Rl* est un résidu acyle d'acide aminé achiral ayant un atome de carbone a-tertiaire, ayant la formule suivante

P2 R2

P2HN CO-

dans laquelle chacun des radicaux R2 est un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone ou benzyle; ou les deux groupes

R2 se lient l'un à l'autre pour former un groupe polymé-

thylène ayant de 3 à 9 atomes de carbone, et p2 est un

groupe amino-protecteur.

16. Composé de formule X k tl '>

N

":,N N

N q'o 0 RO 0 caractérisé en ce que X est un hydrogène ou un radical chloro, amino ou hydroxy, et Rl a la formule

P2 R2

H2N>CO

dans laquelle chaque radical R2 est un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, cycloalkyle ayant de 3 à 5 atomes de carbone ou benzyle; ou les deux groupes R2, liés l'un à l'autre, forment un groupe polyméthylène

ayant de 3 à 9 atomes de carbone, ou l'un de ses sels.

17. Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que X est le radical hydroxy, et les deux groupes

R2 liés l'un à l'autre forment le groupe -(CH2)5-, c'est-

a-dire le bis(1-amino-cyclohexanecarboxylate) de 2-(2-

amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-1,3-propane-

diyle, et ses sels.

18. Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que X est le radical hydroxy, et les deux groupes

R2 liés l'un à l'autre forment le groupe -(CH2)4-, c'est-

à-dire le bis(l-amino-cyclopentanecarboxylate) de 2-(2-

amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propane-

diyle, et ses sels.

19. Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que X est le radical hydroxy, et les deux groupes

R2 liés l'un à l'autre forment le groupe -(CH2)3-, c'est-

à-dire le bis(1-amino-cyclobutanecarboxylate) de 2-(2-

amino-l,6-dihydro-6-oxo-purine-9-yl)méthoxy-l,3-propane-

diyle, et ses sels.

20. Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que X est le groupe hydroxy et les deux groupes R2

sont des radicaux méthyle, c'est-à-dire le bis(2-amino-

2-méthylpropionate) de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-l,3-propanediyle.

21. Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que X est le groupe hydroxy et les deux groupes R2

sont des radicaux éthyle, c'est-à-dire le bis(2-amino-2-

éthylbutyrate) de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purine-9-

yl)méthoxy-l,3-propanediyle.

22. Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que X est le groupe hydroxy et les deux groupes R2

sont des radicaux n-propyle, c'est-à-dire le bis(2-amino-

2-n-propylvalérate) de 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-

purine-9-yl)méthoxy-l,3-propanediyle.

23. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce

qu'elle comprend un composé selon les revendications 1 à

14, contenant éventuellement un excipient acceptable

d'un point de vue pharmaceutique.

24. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce

qu'elle comprend un composé selon les revendications 16

à 22, et contenant éventuellement un excipient accepta-

ble d'un point de vue pharmaceutique.

25. Composition pharmaceutique selon la revendica-

tion 23 ou 24, caractérisée en ce qu'elle est adaptée à

une administration intraveineuse.

26. Procédé pour préparer un composé de formule X N \

H2 /N N(

R'O 0

HO dans laquelle X est un hydrogène ou un radical chloro, amino ou hydroxy; et R1 est un résidu acyle d'acide aminé achiral ayant un atome de carbone a-tertiaire, ou

l'un de ses sels acceptables d'un point de vue pharma-

ceutique, procédé caractérisé en ce qu'il comprend:

(a) l'élimination d'un groupe amino- et/ou hydroxy-

protecteur à partir d'un composé de formule X

C PN" M N

?0 cr o N1'1 dans laquelle X a les significations ci-dessus; Pl est un hydrogène ou un groupe hydroxy-protecteur, P3 est un hydrogène ou un groupe amino-protecteur, Rl* est un résidu acyle d'acide aminé achiral ayant un atome de carbone a-tertiaire ayant la formule suivante: p2 p2

P2HN P2

dans laquelle chaque radical R2 a les significations données dans la revendication 2, et p2 est un groupe amino-protecteur; (b) la conversion d'un composé de formule I en l'un de ses sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique; (c) l'estérification d'un composé de formule X N N

P3HN N N

HO O

HO- ou d'un de ses sels, o X et p3 ont les significations données cidessus, à l'aide d'un dérivé d'un acide aminé de formule Rz R2

\/

p2 HN C O OH

dans laquelle chacun des radicaux R2 et p2 a les signi-

fications ci-dessus; (d) la condensation d'une guanine éventuellement substituée, de formule X N 2 5 pu S a i> N P aHN N H éventuellement sous forme persilylée, o X et P3 ont les significations données ci-dessus,

avec un glycérol substitué en position 2, ayant la for-

mule suivante: Yi 2r2 y1 dans laquelle Yl et y2, indépendamment l'un de l'autre, sont des groupes halogéno, acyloxy, alcoxy inférieur ou aryle (alcoxy inférieur), et Z est un groupe éliminable

choisi parmi les groupes acyloxy inférieur, méthoxy, iso-

propyloxy, benzyloxy, halogéno, mésyloxy ou tosyloxy; éventuellement en présence d'un acide de Lewis; (e) l'hydrolyse partielle d'un composé de formule X

N N

2N Rlo

RP -

dans laquelle X et Rl ont les significations données ci-

dessus; (f) la conversion d'un composé de formule I dans laquelle X est un hydrogène, en un composé de formule I dans laquelle X est le groupe hydroxy ou chloro; ou (g) la conversion d'un composé de formule I dans laquelle X est le radical chloro en un composé de formule I dans laquelle X est un hydrogène; ou (h) la conversion d'un composé de formule I dans laquelle X est un groupe hydroxy en un composé de formule I dans laquelle X est le chlore; et (i) le dédoublement optique d'un composé de formule

I en ses énantiomères.

27. Composé selon l'une des revendications 1 à 14,

caractérisé en ce qu'il est préparé par un procédé selon

la revendication 26.

28. Composé selon l'une des revendications 1 à 14,

caractérisé en ce qu'on l'utilise comme principe théra-

peutiquement actif.

29. Composé selon l'une des revendications 16 à 22,

caractérisé en ce qu'on l'utilise comme principe théra-

peutiquement actif.

30. Composé selon l'une des revendications 1 à 14

et 16 à 22, caractérisé en ce qu'on l'utilise comme prin-

cipe thérapeutiquement actif pour le traitement de mala-

dies virales ou apparentées.

31. Utilisation d'un composé selon l'une des reven-

dications 1 à 14 et 16 à 22 pour préparer des composi-

tions pharmaceutiques.

32. Utilisation d'un composé selon l'une des reven-

dications 1 à 14 et 16 à 22 pour préparer des composi-

tions pharmaceutiques destinées au traitement de maladies

virales ou apparentées.

33. Utilisation d'un composé selon l'une des reven-

dications 15 à 22 pour préparer un composé selon l'une

des revendications 1 à 14.