BE827479A - Nouveaux tripeptides utiles comme medicaments et leur procede de preparation - Google Patents

Description

  Nouveaux tripeptides utiles comme �édica-ments et leur procédé de préparation. 

  
La présente invention concerne certains tripeptides et leur application comme anti-dépressifs et/ou comme stimu-

  
 <EMI ID=1.1> 

  
procédés pour leur préparation.

  
L'hormone libérant la thyréotrophine qu'on trouve dans la nature (TRH) est le triptide L-pyroglutamyl-L-histidyl-Lproline amide. Des procédés pour la synthèse de ce peptide sont connus. Des procédés particuliers sont décrits dans les brevets des Etats-Unis d'Amérique Nos 3 753 569, 3 746 697, 3 757 003

  
et 3 752 800. Des analogues, dérivés et isomères de la TRH sont également décrits dans "Vitamins and Hormones, Advances in Research and Applications" volume 29, pages 1-39, Académie Press, New York et Londres (1971) ; "Chemistry and Biology of Peptides, Proceedings of the Third American Peptide Symposium", pages
601-608, Ann Arbor Science Publ.ishers Inc., Ann Arbor, Michigan

  
 <EMI ID=2.1> 

  
95001 v (1970).

  
En plus de son activité de stimulation de libération des hormones thyroïdiennes, on a trouvé que la TRH a aussi un

  
 <EMI ID=3.1> 

  
On a préparé de nouveaux tripeptides ayant une activité anti-dépressive et une activité de libération de l'hormone thyréotrope du type TRH.

  
Un mode de réalisation de la présente invention est un tripeptide ayant la formule

  

 <EMI ID=4.1> 


  
dans laquelle <EMI ID=5.1>  <EMI ID=6.1>  <EMI ID=7.1>   <EMI ID=8.1> 

  
his et L-pro ne doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide quand E est -OR.

  
Pour abréger, les amino-acides sont désignés ici comme suit :

  

 <EMI ID=9.1> 


  
Le préfixe L- uu D,L- est utilisé pour désigner respectivement un stéréoisomère individuel d'amino-acide ou des mélanges de stéréoisomères. Quand on n'utilise pas de préfice, l'amino-acide comprend à la fois le stéréoisomère L et les mélanges D,L. Par exemple, pca englobe des mélanges de-L-pca et de D,L-pca, y compris des mélanges racémiques. En général, les

  
 <EMI ID=10.1> 

  
 <EMI ID=11.1> 

  
En plus des abréviations concernant les amino-acides, on donne ci-après une liste d'abréviations qui sont utilisées ici pour d'autres constituants, corps en réaction, solvants, groupes protecteurs, etc.. qui sont impliqués dans la préparation des peptides. 

  

 <EMI ID=12.1> 


  
Les présents tripeptides englobent deux groupes généraux de composés : les amides,. dont le groupe terminal E dans

  
 <EMI ID=13.1> 

  
est -OR. R, dans le groupe ester, est un :groupe alcoyle approprié quelconque. Des groupes alcoyle préférés sont ceux ayant de 1 à 10 atomes de carbone. Ils comprennent des groupes alcoyle substitués ou non, linéaires, ramifiés et cycliques. Des exemples de groupes R appropriés préférés sont les groupes t-butyle,

  
 <EMI ID=14.1> 

  
des groupes alcoyle d'hydrocarbures sont particulièrement préférés, et le groupe méthyle est un groupe R tout particulièrement t préf éré.

  
Un groupe de tripeptides préférés est constitué par

  
 <EMI ID=15.1> 

  
ces tripeptides sont les suivants : 

  

 <EMI ID=16.1> 
 

  
 <EMI ID=17.1> 

  
la formule I est un noyau hétérocyclique hexagonal contenant un résidu d'amino-acide. Un tripeptide particulièrement préfé-

  
 <EMI ID=18.1> 

  

 <EMI ID=19.1> 


  
Un autre groupe de tripeptides préférés est constitué

  
 <EMI ID=20.1> 

  
Des exemples de ces tripeptides préférés sont les suivants :

  

 <EMI ID=21.1> 


  
etc... Des peptides particulièrement préférés sont pca-histca-E et pca-his-L-pip-E. Des tripeptides tout spécialement

  
 <EMI ID=22.1> 

  
ayant les formules respectives 
 <EMI ID=23.1> 
 Un autre groupe de tripeptides préférés est constitué

  
 <EMI ID=24.1> 

  
dans la formule suivante

  

 <EMI ID=25.1> 


  
Des groupes substituants préférés sont des groupes

  
 <EMI ID=26.1> 

  
groupes substituants particulièrement préférés. Des exemples  <EMI ID=27.1> 

  
sont : 

  

 <EMI ID=28.1> 


  
etc... Les tripeptides particulièrement préférés du groupe sont illustrés par :

  

 <EMI ID=29.1> 


  
etc... Un autre groupe de tripeptides préférés ayant la formule

  
 <EMI ID=30.1> 

  
tca ou L-pip. Des exemples de ces tripeptides sont :

  

 <EMI ID=31.1> 


  
etc... Des peptides particulièrement préférés de ce groupe sont L-kpc-L-his-L-pip-E ayant la formule : 

  

 <EMI ID=32.1> 


  
*Un autre groupe de tripeptides préférés est constitué

  
 <EMI ID=33.1> 

  
dessus. Des exemples de ces tripeptides sont :

  

 <EMI ID=34.1> 


  
etc.. 

  
Un autre mode de réalisation de l'invention est constitué par les tripeptides ayant la formule

  

 <EMI ID=35.1> 


  
 <EMI ID=36.1> 

  
tripeptides sont :

  

 <EMI ID=37.1> 
 

  

 <EMI ID=38.1> 


  
etc.*. un tripeptide particulièrement préféré de formule II est

  
 <EMI ID=39.1> 

  
Un autre mode de réalisation de la présente invention est constitué par les tripeptides ayant la formule

  

 <EMI ID=40.1> 


  
 <EMI ID=41.1>  et -CH2-COOH. Des exemples de tripeptides de formule II sont

  

 <EMI ID=42.1> 


  
etc.., et des tripeptides tout particulièrement préférés sont

  

 <EMI ID=43.1> 


  
En plus des tripeptides décrits, des sels de ces tripeptides sont aussi un mode de réalisation de la présente invention. Ces sels comprennent des sels phûrmaceutiquement

  
 <EMI ID=44.1> 

  
HBr, H3P04, etc.. ainsi que d'acides organiques, par exemple des acides cyclohexylcarboxylique, tartrique, oxalique, fumarique, citrique, malique, ascorbique, acétique, lactique, des acides gras, par exemple les acides oléique, pamoique, palmiti- <EMI ID=45.1> 

  
que les sels sont sensiblement non-toxiques et ont une activité

  
 <EMI ID=46.1> 

  
Les tripeptides de la présente invention peuvent être préparés en utilisant divers procédés et diverses techniques. La préparation fait généralement intervenir un couplage des constituants amino-acides appropriés par la liaison peptide, 0 H

  
" 
-C-N-. Quand le peptide préparé est linéaire, le couplage implique une réaction entre un groupe a-amino et un groupe carboxyle de constituants mino-acides différents. La pratique générale pour régler ou diriger ce couplage consiste à protéger ou à bloquer, dans les constituants amino-acides, les groupes fonctionnels qui ne doivent pas participer à la formation de la liaison peptide. Des exigences fonctionnelles importantes concernant les groupes de blocage sont que (1) ils ne doivent pas avoir une influence défavorable sur la réaction de couplage et (2) ils doivent pouvoir être éliminés commodément suivant le besoin durant la préparation des peptides.

  
Divers types de groupes de blocage ou protecteurs sont disponibles et peuvent être utilisés. Des groupes utilisables pour protéger les groupes amino comprennent des groupes du type acyle ayant les formules

  

 <EMI ID=47.1> 


  
où Ra est un groupe alcoyle, aryle, aralcoyle, arkaryle ou alcoyle ou aryle substitués ; des groupes du type uréthane ayant les formules

  

 <EMI ID=48.1> 


  
où Rb est un groupe alcoyle, aryle, alcaryle, alcoyle ou aryle à substitution aralcoyle, alcoylamino, hétérocyclique, etc...; des groupes alcoyle, aryle et alcoyle ou aryle substitués ; et

  
 <EMI ID=49.1> 

  
est un groupe aryle ou aryle substitué.

  
Des exemples représentatifs des groupes du type acyle sont les groupes formyle, p-toluènesulfonyle, chloroacétyle, trifluoroacétyle, phtaloyle, phosphoryle, benzènesulfonyle, o-

  
 <EMI ID=50.1> 

  
ryle, etc...; Des exemples de groupes de blocage pour les groupes alcoyle et aryle sont les groupes triphénylméthyle, benzyle, trialcoylsilyle, benzylthiométhyle, dinitrophényle, diphényle, etc... Des exemples de groupes arylidène utiles sont les groupes benzylidène, 2-hydroxy-5-chloro-benzylidène, etc...

  
Des groupes particulièrement utiles pour bloquer les groupes amino sont ceux du type uréthane ayant la formule

  
0

  
 <EMI ID=51.1> 

  
R -0-C-. Des exemples des groupes protecteurs du type uréthane spécialement utiles sont ceux dans lesquels Rb, est un groupe benzyle, benzyle substitué, par exemple p-méthoxybenzyle, pnitrobenzyle, p-phénylazobenzyle, p-bromobenzyle, 2-nitrobenzyle, etc..., des groupes cycloalcoyle, par exemple méthylcyclohexyle,cyclopentyle, etc.., cycloalcoyle substitué, par exemple méthylcyclohexyle, dodécylcyclohexyle, isobutylcyclopentyle, etc...

  
 <EMI ID=52.1> 

  
par exemple n-propyle, t-butyle, t-amyle, octyle, dodécyle, etc..

  
En plus des groupes de blocage décrits ci-dessus, la fonction amino peut aussi être protégée par formation d'un sel du moment que le groupe amino est suffisamment basique.

  
La protection des groupes carboxyle du constituant amino-acide est généralement effectuée par esrérification, formation d'amide ou d'hydrazide et formation de sels.

  
Des esters utiles pour protéger les groupes carboxyle comprennent les esters d'alcoyle comme de méthyle, d'éthyle, de t-butyle, de décyle, etc...., des esters d'aryle comme ceux de benzyle, de phényle, de benzhydryle, etc.., des esters d'alcoyle substitué et des esters de phényle substitué comme de pentamé-

  
 <EMI ID=53.1> 

  
Des hydrazides qui sont utiles pour protéger les groupes carboxyle sont en général, des hydrazides substitués. Des exemples de ces hydrazides sont le benzyloxyhydrazide, le tert-

  
 <EMI ID=54.1> 

  
de, etc... 

  
La protection du groupe carboxyle par formation d'un amide est de peu d'utilité en général car le groupe amide est difficile à éliminer sans rupture de la liaison peptide ellemême. Toutefois, quand comme ici, le groupe terminal du tripeptide peut être un amide, ce moyen de protection des groupes carboxyle peut être avantageusement utilisé.

  
Dans le cas de certains des groupes ester utilisés pour protéger les groupes carboxyle, ces groupes ont aussi ce qu'on appelle un effet activant. Cette activation concerne une amélioration de la réactivité de couplage. Le degré d'activation dépend de la configuration chimique de l'ester particulier, la règle générale étant que l'activation est déterminée par la mesure dans laquelle le groupe protecteur rend la fonction carboxyle plus sensible à l'attaque nucléophile. Des exemples de groupes ester activant les groupes carboxyle sont les groupes p-nitro-

  
 <EMI ID=55.1> 

  
phényle, cyanométhyle, perchlorophényle, 2,4,5-trichlorophényle, 4-méthylthiophényle, 8-hydroxyquinolyle, 1-hydroxybenzotriazole, des thioesters, par exemple p-nitrobenzylthio, p-nitrophénylthio, phénylthio, etc...

  
Le couplage des constituants amino-acides peut être effectué par -diverses réactions. Parmi ces réactions, sont incluses les suivantes :
a) condensation directe d'un constituant amino-acide <EMI ID=56.1> 

  
bloqué ; b) transformation d'un constituant amino-acide bloqué <EMI ID=57.1> 

  
amino-acide à groupe carboxyle bloqué ; c) réaction d'un halogénure d'amino-acide bloqué en na ou d'un anhydride mixte avec un constituant amin-oacide à groupe carboxyle bloqué ;  d) réaction d'un ester actif d'amino-acide bloqué en avec un amino-acide à groupe carboxyle bloqué ; e) couplage direct d'un constituant amino-acide bloqué <EMI ID=58.1> 

  
en utilisant un agent de couplage, par exemple un carbodiimide ; 

  
un carbodiimide plus un hydroxybenzotriazole ; un carbodiimide

  
 <EMI ID=59.1> 

  
Parmi les réactions de couplage, sont spécialement utiles la technique (b) passant par l'azide et la technique (e) utilisant un carbodiimide.

  
On peut utiliser divers schémas de préparation pour obtenir les présents peptides. Un schéma commode utilise le

  
 <EMI ID=60.1> 

  
d'abord un produit intermédiaire dipeptide et ensuite le tripeptide final.

  
Dans l'exécution des étapes de couplage, le constituant réagissant à son groupe carboxyle est généralement protégé à

  
 <EMI ID=61.1> 

  
groupe a-amino est généralement protégé à son groupe carboxyle. Quand le constituant a aussi un groupe fonctionnel secondaire, par exemple le groupe imidazole dans l'histidine, il peut aussi être protégé. Les équations suivantes illustrent une telle séquence échelonnée. La séquence montre une préparation d'amide ; on utilise une séquence analogue pour préparer les tripeptides du type ester. Y, dans les équations, est un groupe protecteur de groupe carboxyle.

  

 <EMI ID=62.1> 


  
Si y dans l'étape (a) est un groupe activant, les étapes (b) et (c) peuvent être combinées- De plus, bien que L-pca ne soit pas représenté comme protégé à son groupe amino, il peut être protégé si on le désire. Dans ce cas, une étape supplémentaire serait nécessaire pour éliminer le groupe protecteur ainf de

  
 <EMI ID=63.1> 

  
La séquence de réactions représentée dans les équations
(a) à (c) est illustrative et ne doit pas être considérée comme limitative. Ainsi, la séquence utilisée peut comporter le cou-

  
 <EMI ID=64.1> 

  
Un autre schéma pour préparer les présents tripeptides utilise une matrice de résine sur laquelle le peptide est édifié suivant une séquence. Ce schéma peut comporter un système de résine soluble ou un système insoluble. Le système de résine insoluble est préféré et on en parle de manière classique comme

  
de la synthèee en phase solide (ou de Merrifield). La résine insoluble est généralement une résine qui comporte des sites où

  
on peut trouver des groupes carboxyle. Un exemple d'une telle résine est celle couramment appelée résine de Merrifield. Une forme de cette résine est un copolymère de styrène et de divinylbenzène qui est chlorométhylé pour donner des sites réactifs avec les groupes carboxyle. Le perfide est formé à partir d'un amino-acide à la fois jusqu'à ce que le tripeptide désiré soit formé.

  
Ce mode opératoire est illustré dans la séquence d'équations de réaction présentée ci-dessous. Dans les équations,

  
 <EMI ID=65.1> 

  
des groupes de blocage de groupes amino

  

 <EMI ID=66.1> 


  
Dans l'étape ou les étapes suivantes de la séquence,

  
 <EMI ID=67.1> 

  
réaction utilisé, le tripeptide libéré peut avoir un g'oupe terminal acide, ester ou amide- Quand, après clivage de la résine, le troupe terminal est le groupe acide , ce tripeptide peut être transformé en l'ester ou 1* amide correspondant par des modes

  
 <EMI ID=68.1> 

  
un groupe terminal ester, le groupe amide peut éventuellement lui est substitué par des techniques classiques.

  
Une manière très commode de séparer le tripeptide de la résine@ est la transestérification avec un alcool approprié. Un avantage de cette technique est que l'ester est obtenu directement et que l'ester peut être facilement transformé en l'amide si on le désire. Ces réactions sont illustrées ci-

  
dessous

  

 <EMI ID=69.1> 


  

 <EMI ID=70.1> 


  
Bien que ce ne soit pas représenté dans l'équation de réaction ci-dessus, les azotes du groupe imidazole du kic et de l'histidine peuvent être bloqués durant la réaction si on le désire, les groupes de blocage étant éliminés à un stade approprié dans la préparation des peptiàas. Des tripeptides

  
 <EMI ID=71.1> 

  
 <EMI ID=72.1> 

  
étant ajouté avant ou au cours de la synthèse.

  
Dans les deux schémas décrits ci-dessus et dans la préparation de peptides d'une façon générale, les groupes de blocage et/ou activants sont ajoutés et enlevés. On effectue

  
 <EMI ID=73.1> 

  
lisant des techniques et des systèmes de réaction connus de l'homme de l'art et disponibles. Des exemples de certaines réactions par lesquelles les groupes protecteurs ou ce blocage sont

  
 <EMI ID=74.1> 

  
l'hydrogénolyse (par exemple en utilisant Pd/C comme catalyseur) le traitement avec un acide halogénhydrique (HC1, HBr, etc) dans de l'acide acétique ou le traitement par TFA. Le sustème de réaction particulier utilisé pour le déblocage, c'est-àdire pour l'élimination d'un groupe de blocage, aussi bien que pour bloquer un groupe dans un constituant amino-acide est choisi de manière que (1) si nécessaire l'élimination des groupes de blocage soit sélective et (2) elle n'ait pas d'influence défavorable sur le procédé de préparation des peptides.

  
Les exemples non limitatifs suivants illustrent la préparation de tripeptides de formule I et de certains composés intermédiaires. Toutes les parties sont en poids, à moins d'indication contraire.

  
- EXEMPLE 1 -
(A) Préparation d'acide L-2-cétoimidazolidine-5-carboxylique

  
Une solution de 25 g de NaOH dans 60 cm<3> d'eau est préparée dans un récipient et placée dans un bain de refroidis-

  
 <EMI ID=75.1> 

  
température pendant 45 minutes. La solution est ensuite refroidie

  
 <EMI ID=76.1> 

  
de méthylène chaque fois. La solution extraite est évaporée à sec et la matière solide restante est séchée pendant toute une nuit dans une étuve à vide. La matière solide séchée est traitée par extraction à l'éthanol. L'extrait est évaporé jusqu'à précipitation du produit,

  
acide L-2-cétoimidazolidine-5-carboxylique

  
1

  

 <EMI ID=77.1> 


  
Après filtration du produit, il est séché sous vide.

  
On obtient environ 4,20 grammes de produit acide. Le point de fusion est de 166-170[deg.]C. L'analyse élémentaire du produit indique

  
 <EMI ID=78.1>  

  
 <EMI ID=79.1> 

  
équivalents de dicyclohexylcarbodiimide et 1,3 g de 1-hydro&#65533;-  benzotiiazole sont mélangés dans du DMF et on les laisse réagir

  
 <EMI ID=80.1> 

  
de ce temps, la réaction est sensiblement complète et le rende-

  
 <EMI ID=81.1> 

  
est agité à la température ambiante pendant 5 jours et ensuite abandonné à la température ambiante pendant 6 jours environ.

  
Le mélange est ensuite filtré, évaporé à sec et purifié par élut*[pound]on à travers une colonne de silice (rapport 200:1). L'éluant est un mélange de 70 parties en volume de CHC13, de 30 par-

  
 <EMI ID=82.1> 

  
produit L-kic-L-his-L-pro-OCH;, est isolé par lyophilisation. La production est de 1,54 gramme.

  
 <EMI ID=83.1> 

  
ture ambiante pendant 7 jours. On dissout ce mélange de réaction dans du méthanol. Après évaporation sous vide, le résidu est séché par liquéfaction-congélation Le principal produit

  
 <EMI ID=84.1> 

  
En substituant de l'acide D,L-2-cétopipéridine-6-carboxylique à l'acide L-2-cétoimidazolidine-5-carboxylique et en utilisant sensiblement les menés modes opératoires que dans

  
 <EMI ID=85.1> 

  
Des exemples d'autres tripeptides qui sont préparés en utilisant le mode opératoire général de l'Exemple 1B sont

  

 <EMI ID=86.1> 


  
etc.., et ces esters sont transformés en amides correspondants

  
 <EMI ID=87.1>  <EMI ID=88.1> 

  
Un récipient, équipé pour agitation et refroidissement, est chargé de dichlorhydrate d'ester de méthyle de L-

  
 <EMI ID=89.1> 

  
une période de 10 minutes, en maintenant la température à 0[deg.]C. Ce mélange est ensuite mis à vieillir pendant 15 minutes. Une

  
 <EMI ID=90.1> 

  
d'acétonitrile est ensuite ajoutée progressivement en une période de 5 à 10 minutes. On fait vieillir le mélange résultant à 0[deg.]C pendant 30 minutes, puis on le laisse réchauffer à la température ambiante et ensuite on l'agite pendant 24 heures à la température ambiante.

  
Le mélange est ensuite filtré et le gâteau de filtra-

  
 <EMI ID=91.1> 

  
fois). On se débarrasse de ce filtrat.

  
Le gâteau lavé est ensuite mis en bouillie dans l'en- <EMI ID=92.1> 

  
ment de 30 minutes est suffisant) et il est ensuite filtré. Le gâteau de filtration est lavé deux fois avec un mélange 9:1

  
 <EMI ID=93.1> 

  
gâteau de filtration lavé est ensuite mis en bouillie avec 500

  
 <EMI ID=94.1> 

  
et le gâteau de filtration est lavé quatre fois avec du chloroforme (45 cm<3>) chaque fois.

  
 <EMI ID=95.1> 

  
nol et chauffé rapidement à l'ébullition. Ce mélange chaud est filtré. On laisse refroidir le filtrat à la température ambiante et on le fait vieillir à la température ambiante pendant 3 heures. Il se forme un produit cristallin blanc, du L-pyroglutamyl-

  
 <EMI ID=96.1> 

  
Le point de fusion du produit est de 208-210[deg.]C. L'analyse par chromatographie sur couches minces (TLC) indique que le produit

  
 <EMI ID=97.1> 

  
 <EMI ID=98.1> 

  
Dans un récipient équipé d'un thermomètre et d'un agitateur, et placé dans un bain de glace, on dissout 33,6 g

  
 <EMI ID=99.1> 

  
en maintenant la température au-dessous de 20[deg.]C. Le mélanre de réaction est agité pendant 6 minutes supplémentaires à 18-20[deg.]C et il est ensuite transféré dans un deuxième récipient et soumis à une extraction sous vide.

  
La matière solide blanche résultante est redispersée

  
 <EMI ID=100.1>  

  
La matière solide blanche résultante est ensuite dis-

  
 <EMI ID=101.1> 

  
 <EMI ID=102.1> 

  
 <EMI ID=103.1> 

  
dant 45 minutes à la température ambiante et filtrée. Le gâteau de filtration est lavé deux fois avec de l'éthanol-2BA

  
 <EMI ID=104.1> 

  
 <EMI ID=105.1> 

  
refroidir le mélange à la température ambiante, en l'agitant, on le filtre et le gâteau de filtration est lavé deux fois

  
 <EMI ID=106.1> 

  
sous vide. La produiction de L-pyroglutamyl-L-histidine-hydrazide est de 25,69 g (rendement 76,5%). L'analyse par TLC indique que ce produit est sensiblement pur.

  
 <EMI ID=107.1> 

  
On met en suspension 800 mg (3 mm) de L-pyroglutamyl-

  
 <EMI ID=108.1> 

  
refroidie à -20[deg.]C et portée à un pH de 1,5 par addition de

  
HCl 5,9M dans THF.

  
On ajoute 4 cm<3> de nitrite d'isoamyle à 10% dans DMF. Le mélange est agité pendant 25 minutes tandis qu'on maintient la température à -20[deg.]C. On ajoute ensuite 500 mg (3 mm) d'acide L-thiazolidine-5-carboxylique et le pH est réglé à 8,5 par

  
 <EMI ID=109.1> 

  
à -15[deg.]C pendant sept jours*

  
 <EMI ID=110.1> 

  
 <EMI ID=111.1> 

  
et la solution est traitée par extraction quatre fois avec un

  
 <EMI ID=112.1> 

  
La couche aqueuse est évaporée et le résidu est traité par extraction avec 50, 25 et 25 cm<3> de méthanol. Les solutions méthanoliques sont combinées et évaporées sous vide. Le résidu restant est de l'acide L-pyroglutamyl-L-histidyl-Lthiazolidine-5-carboxylique.

  
On dissout l'acide L-pyroglutamyl-L-histidyl-L-thiazo- <EMI ID=113.1> 

  
ajoute à la solution 260-mg (1,7 mm) de HBT et on règle le pH à 4 avec de la triéthylamine. On ajoute 180 mg (3,4 mm) de

  
 <EMI ID=114.1> 

  
réactionnel est agité pendant toute une nuit à la température ambiante.

  
On filtre ensuite le mélange de réaction. On évapore

  
 <EMI ID=115.1> 

  
chloroforme:méthanol:eau) et on charge la solution sur une colonne de 200 g de gel de silice.

  
Les fractions contenant le produit amide d'acide Lpyroglutamyl-L-histidyl-L-thiazolidine-carboxylique sont combinées et évaporées ; la production est de 370 mg du produit sensiblement pur par TLC.

  
D'autres tripeptides qui peuvent être préparés en utilisant le mode opératoire général de l'Exemple 3 sont :

  

 <EMI ID=116.1> 


  
 <EMI ID=117.1> 

  
 <EMI ID=118.1> 

  
 <EMI ID=119.1> 

  
lange réactionnel est agité pendant 18 heures environ et la solution est évaporée à sec. Le résidu séché est chromatographié sur

  
 <EMI ID=120.1> 

  
 <EMI ID=121.1>   <EMI ID=122.1> 

  
tué L-his peut être élue sous la forme d'un sel iodure. Ce sel peut être neutralisé par exemple avec du Dowex 1 (hydroxyde) pour donner le produit tripeptide libre.

  
 <EMI ID=123.1> 

  
qui sont préparés à partir du tripeptide approprié en utilisant le mode opératoire général de l'Exemple 4 sont : 
 <EMI ID=124.1> 
 <EMI ID=125.1> 

  
en une période de 40 minutes environ, on ajoute 0,77 cm de nitrite d'isoamyle (charge initiale de 0,65 cm<3> suivie de trois

  
 <EMI ID=126.1> 

  
ajoute 965 mg (5,37 mm) d'ester de méthyle d'acide L-pipéridine-

  
 <EMI ID=127.1> 

  
 <EMI ID=128.1> 

  
 <EMI ID=129.1> 

  
toute une nuit. (Durant cette période, on ajoute trois portions  <EMI ID=130.1> 

  
de manière à maintenir le pH à ?,2 environ).

  
Au bout de ce temps, on sépare par filtration le

  
 <EMI ID=131.1> 

  
filtrat. On répète encore deux fois cette séquence de filtration/lavage" Le filtrat et les liquides de lavage finals sont ensuite évaporés sous vide pour donner 2,87 g de produit tripeptide brut. Ce produit brut est purifié par élution à travers une colonne de gel de silice avec un mélange 90/10/1 chloroforme/méthanol/eau. Les produits recueillis sont L-pca-L-his-

  
 <EMI ID=132.1> 

  
D'autres tripeptides qui sont préparés en utilisant le mode opératoire général de l'Exemple 5 sont :

  

 <EMI ID=133.1> 


  
En plus des procédés de préparation illustrés par les exemples et décrits ci-dessus, les présents tripeptides peuvent aussi être préparés en utilisant des procédés de préparation de tripeptides du type TRH décrits dans la technique antérieure citée ci-dessus. Dans la mesure où la description de la technique antérieure est nécessaire, elle est incorporée ici par référence. 

  
On a trouvé que les tripeptides de la présente invention possèdent une activité anti-dépressive et une activité d'hormone libérant la thyréotrophine. Leur activité comme anti-dépressifs est une activité de stimulants du système nerveux central (CNS) et on l'a déterminée en essayant des tripeptides représentatifs de la présente invention en utilisant des essais in vivo basés sur le rétablissement de l'action anticonvulsivante du méthazolamide chez des souris traitées à l'acide picolinique. L'activité d'hormone libérant le thyréotrophine des présents polypeptides a été déterminée en utilisant l'essai

  
in vivo sensiblement comme décrit dans "Vitamins and Hormone" R.S. Harris et autres, 29, 3-4 (1971).

  
 <EMI ID=134.1> 

  
sents tripeptides font montre d'une séparation d'activité, c'est-à-dire que leur activité anti-dépressive est plus grande que leur activité d'hormone libérant la thyréotrophine. Ce type d'activité séparée offre l'avantage de rendre le tripeptide spécialement utile à des doses appropriées pour traiter une dépression sans causer de libération importante de thyréotrophine quand on ne le désire pas ou que ce n'est pas nécessaire.

  
Le tableau suivant contient des résultats d'activité pour un certain nombre de peptides représentatifs de la présente invention. Les protocoles utilisés pour obtenir les résultats sont ceux décrits ci-dessus. Les résultats sont exprimés numériquement en multiples de l'activité TS (stimulation de thyréotrophine) et AD (anti-dépressive) par rapport aux activités TS et

  
 <EMI ID=135.1> 

  
tion S.N. est utilisée pour indiquer qu'il n'y a sensiblement pas d'activité détectable au niveau de dosage essayé. 

  

 <EMI ID=136.1> 


  

 <EMI ID=137.1> 
 

  

 <EMI ID=138.1> 


  

 <EMI ID=139.1> 
 

  
Les résultats donnés dans le Tableau I illustrent clairement l'efficacité pharmacologique et la séparation inattendue des activités TS et AD des présents peptides.

  
D'après l'efficacité in vivo des présents peptides comme activateurs de libération de la thyréotrophine et comme stimulants du système nerveux central (activité anti-dépressive), ces peptides peuvent être utilisés efficacement pour traiter

  
des mammifères soufrant d'une dépression du système nerveux central et/ou ayant besoin d'une activation de la libération

  
de thyréotrophine.

  
Les peptides peuvent être administrés d'une manière commode quelconque, par exemple par voie orale, parentérale, intraveineuse, sublinguale, par insufflation, par suppositoires, etc..

  
On utilise des niveaux de dosage suffisants pour produire l'effet désiré. Généralement, les doses seront comprises entre 0,05 et 100 ng par dose, suivant le mode d'administration. Les intervalles de dosage dépendront du degré de soulagement désiré. Les tripeptides peuvent être administrés isolément,

  
dans des véhicules pharmaceutiquement acceptables ou dans des compositions avec d'autres substances phnrmaceutiquement actives, comme on le désire. 

REVENDICATIONS

  
1) Un tripeptide ayant la formule

  

 <EMI ID=140.1> 


  
dans laquelle <EMI ID=141.1>  avec les conditions que (1) quand E est -NH2, pca et L-pro ne doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide et (2) quand E est -OR, his et L-pro ne doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide.

Claims (1)

1. 2) Un tripeptide selon la revendication 1, caractérisé en ce que M2 est his.

   3) Un Tripeptide selon la revendication 1, caractérisé <EMI ID=142.1>

   COOH-his..

   4) Un tripeptide selon la revendication 1, caractérisé

   <EMI ID=143.1>

   <EMI ID=144.1>

   <EMI ID=145.1>

   7) Un tripeptide selon la revendication 4, caractérisé en ce que M2 est L-his.

   8) Un tripeptide selon la revendication 7, caractérisé

   <EMI ID=146.1> <EMI ID=147.1>

   risé en ce que E est -OR.

   11) Un tripeptide selon la revendication 10, caracté-

   <EMI ID=148.1>

   12) Un tripeptide selon la revendication 10, caractérisé en ce que M2 est L-his.

   13) Un tripeptide selon la revendication 11, caracté-

   <EMI ID=149.1>

   L-tca.

   14) Un tripeptide selon la revendication 10, caractérisé en ce que R est -CH3.

   15) Un tripeptide selon la revendication 13, caractérisé en ce que R est -CH3.

   16) Un procédé pour préparer un tripeptide ayant la

   <EMI ID=150.1>

   1 à 4, <EMI ID=151.1> <EMI ID=152.1>

   tripeptide et (2) quand E est -OR, his et L-pro ne doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide, qui comprend le cou-

   <EMI ID=153.1> <EMI ID=154.1>

   <EMI ID=155.1> <EMI ID=156.1> <EMI ID=157.1> <EMI ID=158.1>

   doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide et (2) quend E est -OR, his et L-pro ne doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide, qui comprend le couplage successif

   <EMI ID=159.1>

   18) Un procédé selon la revendication 17, caractérisé

   <EMI ID=160.1>

   <EMI ID=161.1>

   amino qui sont éliminés suivant le besoin durant la réaction de couplage pour produire le tripeptide.

   20) Un procédé pour préparer le tripeptide L-pca-L-

   <EMI ID=162.1>

   (1) la préparation de L-pca-L-his-N3, et

   <EMI ID=163.1>

   21) Un procédé pour préparer un tripeptide ayant la

   <EMI ID=164.1> <EMI ID=165.1>

   <EMI ID=166.1>

   <EMI ID=167.1>

   doivent pas être présents ensemble dans le tripeptide et (2) quand E est -OR, his et L-pro ne doivent pas être présents en-semble dans le tripeptide,

   selon lequel on fait réagir un tripeptide ayant la formule

   <EMI ID=168.1>

   22) Un procédé selon la revendication 21, caractérisé en ce qu'on fait réagir L-pca-L-his-L-pro-KHp ou L-kpc-L-his-

   <EMI ID=169.1>

   pca et L-pro ne doivent pas être présents en même temps dans le tripeptide et (2) quand E est -OR, his et L-pro ne doivent pas être présents en même temps dans le tripeptide, qui comprend :

   <EMI ID=170.1>

   <EMI ID=171.1>

   X est un groupe de blocage de groupe amino, de manière à pro- <EMI ID=172.1>

   25) Un procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que le groupe de blocage X est du type uréthane.

   26) A titre de médicament nouveau, un tripeptide

   <EMI ID=173.1>

   27) Les compositions pharmaceutiques contenant à titre de substance active un tripeptide selon l'une des revendications 1 à 15, ainsi qu'un véhicule pharmaceutiquement acceptable*