Dérivés de la proline et procédés pour'les préparer.
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de l'aminoacide et choisi entre les radicaux cyclopropanecarbonyle, cyclohexanecarbonyle et adamantanecarbonyle; A représente un reste de glycine, de sarcosine ou d'�-D-aminoacide et porte un radical "-carbonyle formant une liaison ester de thiol avec un atome de soufre) et ses sels pharmaceutiquement acceptables.
Des composés similaires aux composés de formule (I), par exemple des composés où R représente un radical benzoyle, acétyle ou t-butyloxycarbonyle et A
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la demande de brevet anglais n[deg.] 2.050.359-A. La demande de brevet européen (EP) 9.898-Al décrit des composés où R représente un radical benzoyle, acétyle, t-butyloxycarbonyle, cyclopentanecarbonyle etc. et A représente
un reste de L-�-aminoacide. La demande de brevet européen EP 35.383-Al décrit des composés où R représente
un radical benzoyle et A représente un radical D-phénylalanyle. Toutefois, les composés de formule (I) n'ont jusqu'à présent pas été décrits spécifiquement. Ce sont donc des composés nouveaux qui sont d'intéressants agents pharmaceutiques dont la description sera donnée ci-après.
Le. reste d'aminoacide représenté par A dans la formule (I) est un reste de glycine, de sarcosine ou
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notamment les aminoacides neutres, acides ou basiques ou les aminoacides aliphatiques, aromatiques, hétérocycliques ou alicycliques,comme la D-alanine, la D-leucine la D-asparagine. la D-méthionine, la D-glutamine, la D-phénylalanine, le D-tryptophane, la D-ornithine, la D-phénylglycine, la D-thréonine, l'acide D-glutamique, la D-arginine, la D-cystéine, l'acide D-asparti- que, la D-histidine, la D-isoleucine, la D-proline, la D-lysine, la D-sérine, la D-tyrosine et la D-valine. Les radicaux fonctionnels de ces aminoacides. comme les radicaux hydroxyle, mercapto, amino et carboxyle, peuvent être substitués par des radicaux alcoyle inférieurs, benzyle ou alcanoyle inférieurs.
Des exemples préférés d'acides dont le reste est représenté par A sont la glycine, la sarcosine, la D-alanine, la D-leucine, la D-méthionine, la D-glutamine, la D-phénylalanine, le D-tryptophane et la D-phénylglycine.
Dans la formule de structure (I),le radical
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comprend un atome de carbone asymétrique, de sorte que ce radical peut exister sous la forme D, la forme L ou la forme DL, laquelle est un mélange des formes D et L . L'une et l'autre formes font l'objet de l'invention, mais les formes D et DL sont préférées pour leur activité biologique.
Dans la formule (I), le radical de proline
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peut se trouver sous la forme D, la forme L ou la forme DL qui font toutes l'objet de l'invention, la forme L et la forme DL étant préférées pour leur activité biologique.
Des exemples de sels pharmaceutiquement accep-
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sels formés avec les métaux alcalins,comme le sodium ou le potassium, les sels formés avec les métaux alcalinoterreux.comme le calcium ou le magnésium, et les sels formés avec les aminoacides basiques,comme l'arginine et la lysine. Les sels de calcium et les sels de lysine sont préférés.
L'invention a en outre pour objet un procédé de préparation des dérivés de la proline de formule (I) et de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Les composés de formule (I) sont préparés par le procédé décrit ci-après.
Un composé de formule (II):
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(où A' représente un reste de glycine ou de sarcosine
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R a la signification qui lui a été attribuée ci-dessus) ou un dérivé réactif correspondant est mis à réagir avec un composé de formule (III):
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(où R' représente un atome d'hydrogène ou un radical protecteur de la fonction carboxyle) ou un dérivé réactif correspondant, le radical protecteur éventuel est éliminé du produit de réaction et'le produit ainsi obtenu est éventuellement converti en un sel pharmaceutiquement acceptable.
Si dans la formule (I),A comprend un radical fonctionnel libre qui ne devrait pas entrer en réaction, comme un radical mercapto, hydroxyle, amino ou carboxyle, le composé de formule (II) est un dérivé dans lequel un tel radical peut être protégé.
Un radical fonctionnel de A'qui ne devrait pas entrer en réaction peut être protégé par des radicaux d'usage courant en synthèse des peptides qui peuvent être éliminésdans des conditions relativement modérées. Par exemple, un radical mercapto peut être protégé par un radical aralcoyle comme trityle, benzyle ou p-méthoxybenzyle ; un radical hydroxyle peut être protégé par un radical benzyle; un radical amino peut être protégé par un radical t-butyloxycarbonyle et un radical carboxyle peut être protégé par un radical t-butyle. Ces radicaux protecteurs peuvent être éliminés par réaction
avec le fluorure d'hydrogène, l'acide trifluoroacétique ou le chlorure d'hydrogène. En variante, un radical\ carboxyle est protégé par un radical silyle portant'des radicaux alcoyle inférieurs, par exemple un radical triméthylsilyle qui peut être éliminé ensuite par réaction avec de l'eau. Lorsque dans la formule (III) R' représente un radical protecteur de la fonction carboxyle, celui-ci peut être un radical t-butyle ou un radical silyle portant des radicaux alcoyle inférieurs qui peut être éliminé par réaction avec le fluorure d'hydrogène, l'acide trifluoroacétique, le chlorure d'hydrogène ou l'eau.
Le dérivé réactif du composé de formule (II) est tel que le radical carboxyle participant à la réaction se trouve activé. Le radical carboxyle peut être activé sous l'une quelconque des formes d'usage courant en synthèse des peptides,par exemple sous forme d'amide activé., d'halogénure d'acide, d'ester activé . ou d'anhydride d'acide mixte. Parmi ces différentes formes, les esters activés avec le N-hydroxysuccinimide, les anhydrides mixtes avec les monoesters de l'acide carbonique et les amides activés avec le carbonyldiimidazole sont préfé-
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conviennent comme agents de condensation pour former une liaison amide entre le radical carboxyle et le radical imino.
Le dérivé réactif du composé de formule (III) est tel que le radical imino de ce composé se trouve activé. Le radical imino peut être activé suivant tout procédé d'usage classique en synthèse des peptides, par exemple le procédé d'introduction d'un radical silyle tel que triméthylsilyle, le"procédé phosphazo" au moyen d'un composé du phosphore tel que le trichlorure de phosphore
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phoreux au moyen d'un ester d'acide phosphoreux comme l'ester tétraéthylique d'acide pyrophosphoreux,ou le procédé au "N-carboxyanhydride" (procédé NCA).
La réaction peut être exécutée dans un solvant organique inerte comme le tétrahydrofuranne, le dioxanne, le diméthylformamide, l'hexaméthylphosphorotriamide, le chloroforme, le dichlorométhane ou l'acétonitrile. La réaction est exécutée en général sous refroidissement
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férence de -30 à +10[deg.]C. La durée de réaction varie avec la température de réaction, la nature des composés qui réagissent et la nature du solvant et est généralement de 30 minutes à 48 heures, mais de préférence de 1 à 6 heures.
Après la réaction formant l'amide, le radical protecteur éventuel du produit de réaction est éliminé suivant l'un quelconque des procédés mentionnés cidessus pour les radicaux protecteurs respectifs.
Le composé final peut être isolé du mélange
de réaction et purifié suivant tout procédé classique par exemple les différentes fermes de chromatographie sur gel de silice,polymère de dextrane réticulé ou polymère poreux comme les polymères de styrène-divinylbenzène ou d'esters acryliques. Un solvant de développement approprié peut être choisi entre le chloroforme, l'acétate d'éthyle, le méthanol, l'éthanol, le tétrahydrofuranne, le benzène, l'eau et l'acétonitrile. En variante, le composé final peut être obtenu par isolement du produit de réaction sous forme d'un sel organique,comme un sel de dicyclohexylamine,lequel est alors mis à réagir avec un acide,comme l'acide chlorhydrique ou l'hydrogénosulfate de potassium.
Le composé de formule (I) ainsi obtenu comprend un radical carboxyle sur le site de proline,de sorte qu'il est capable de former des sels avec diverses substances alcalines si la chose est désirée. Les sels
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tables sont particulièrement importants. Ces sels peuvent être préparés par un procède classique,c'est-àdire par réaction du radical carboxyle avec une quan-
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mérées ci-dessus (par exemple métaux alcalins, métaux alcalino-terreux et aminoacides basiques).
Le composé de formule (II) qui est un composé de départ pour le procédé de l'invention peut être préparé aisément comme décrit ci-après.
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(où R a la signification qui lui a été attribuée cidessus) ou un dérivé réactif correspondant au niveau du radical carboxyle est mis à réagir avec un aminoacide de formule (VII):
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1-où A" est un reste d'aminoacide équivalent à A' diminué du radical NH ou C=O et R" est un atome d'hydrogène ou un radical protecteur de la fonction carboxyle) eu un dérivé réactif correspondant, après quoi le radical R" est éliminé s'il est un radical protecteur,pour la formation d'un composé de formule (VIII):
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(où R et A" ont les significations qui leur ont été attribuées ci-dessus),après quoi le composé de fcrmule
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réagir avec un composé de formule (IX):
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protecteur de la fonction carboxyle), après quoi le radical R"' est éliminé s'il est un radical protecteur.
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radical carboxyle du composé de formule (VI) sont notam- * ment ceux d'usage courant en synthèse des peptides,comme les amides activés, halogénures d'acides,esters activés
et anhydrides d'acides mixtes.
Si dans l'aminoacide de formule (VII), le radical R" est un radical protecteur, des exemples intéressants en sont un radical t-butyle (qui peut être éliminé au moyen de fluorure d'hydrogène, d'acide trifluoroacétique ou de chlorure d'hydrogène), un radical benzyle
(qui peut être éliminé par réduction catalytique au moyen de palladium etc.), ou des radicaux alcoyle inférieurs comme méthyle ou éthyle (qui peuvent être éliminés par, hydrolyse alcaline).
Le dérivé réactif de l'aminoacide de formule
(VII) est tel que le radical amino se trouve activé et
ce dérivé est obtenu suivant l'un quelconque des procédés d'activation d'usage courant en synthèse des peptides. par exemple par introduction d'un radical silyle
(par exemple triméthylsilyle), le "procédé phosphazo",
le procédé à l'ester d'acide phosphoreux et Te procédé
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Un carbodiimide comme le dicyclohexylcarbodiimide peut être utilisé comme agent de condensation pour la formation d'une liaison amide entre le composé de formule (VI) et l'aminoacide de formule (VII).,,
La réaction peut être exécutée dans un solvant organique inerte,comme le tétrahydrofuranne, le dioxanne, le diméthylformamide, l'hexaméthylphosphorotriamide, le chloroforme, le dichlorométhane ou l'acétonitrile. La réaction est exécutée en général sous refroidissement' ou à la température ambiante (de -50 à +20[deg.]C) et de préférence de -30 à +10[deg.]C. La durée de réaction varie avec
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réagissent et la nature du solvant et est généralement de
30 minutes à 48 heures et de préférence de 1 à 6 heures.
Si dans la formule (VII), le radical R" est un radical protecteur, il peut être éliminé du produit de réaction suivant l'un quelconque des procédés classiques précités.
Le composé de formule (VIII) peut être isolé du mélange de réaction et purifié de manière classique, par exemple par recristallisation dans l'acétate d'éthyle, le n-hexane, l'acétone et l'eau,ou les différentes fermes de chromatographie comme décrit à propos de l'isolement de la purification du composé de formule
(I),ou encore par décomposition d'un sel organique du produit de réaction avec un acide.
Le composé de formule (VIII) peut être mis à réagir avec le composé de formule (IX) par réaction du radical carboxyle du premier composé avec le radical mercapto du second en présence d'un agent de condensation (par exemple un carbodiimide comme le dicyclohexylcarbodiimide). Un dérivé réactif du composé de formule
(VIII) peut être mis à réagir avec le composé de formule
(IX). Des exemples de dérivés réactifs du composé de formule (VIII) sont notamment les amides activés, les halogénures d'acides, les esters activés et les anhydrides d'acides mixtes. Les amides activés avec le carbonyldiimidazole sont préférés.
Le radical carboxyle du composé de formule
(IX) peut être protégé ou non. Les radicaux protecteurs préférés sont les radicaux t-butyle et autres qui peuvent être éliminés en milieu acide.
La réaction formant l'ester de thiol est exécutée dans un solvant organique inerte comme le tétrahydrofuranne, le dioxanne,le diméthylformamide, l'hexaméthylphosphorotriamide, le chloroforme, le dichlorométhane ou l'acétonitrile. La réaction est généralement exécutée sous refroidissement ou à la température ambiante (de -50 à +20[deg.]C) et de préférence de -30
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lisé sous la forme d'un amide activé ou d'un halogénure d'acide et de -10 à +10[deg.]C lorsque ce même composé est utilisé sous la forme d'un anhydride d'acide. La durée de réaction varie avec la température de réaction et avec la nature des composés qui réagissent et celle du solvant et est généralement de 30 minutes à 48 heures et
de préférence de 1 à 6 heures. Après la réaction formant l'ester de thiol, le radical R"'est éliminé du produit de réaction s'il est un radical protecteur. Si le radical protecteur est un radical t-butyle, celuici peut être éliminé de manière classique, c'est-àdire par réaction avec le fluorure d'hydrogène, l'acide trifluoroacétique ou le chlorure d'hydrogène.
Le composé final peut être isolé du mélange de réaction et purifié de toute manière appropriée par exemple par recristallisation dans un solvant organique,c omme l'acétate d'éthyle ou le n-hexane, par les différentes formes de chrcmatographie comme décrit à propos de l'isolement et de la purification du composé de formule (I) ou par décomposition d'un sel organique du produit de réaction avec un acide.
Un autre procédé de préparation du composé final de l'invention comprend la réaction d'un composé de formule (IV):
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ou d'un dérivé réactif correspondant, avec un composé de formule (V ):
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mination du radical protecteur éventuel du produit de réaction et éventuellement la conversion du produit en un sel pharmaceutiquement acceptable.
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dans lequel un tel radical peut être protégé.
Un radical fonctionnel éventuel du reste A' qui ne devrait pas entrer en réaction est protégé à l'aide des radicaux d'usage courant en synthèse des peptides et qui peuvent être éliminés dans des conditions relativement modérées. Par exemple, un radical
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dical hydroxyle peut être protégé au moyen d'un radical benzyle; un radical araino peut être protégé au moyen d'un radical t-butyloxycaxbonyle et un radical carboxyle peut être protégé au moyen d'un radical t-butyleCes radicaux peuvent être éliminés par réaction avec le fluorure d'hydrogène ou le chlorure d'hydrogène. En variante, un radical carboxyle est protégé par un radical silyle portant des radicaux alcoyle inférieurs.comme triméthylsilyle,qui est alors éliminé par réaction avec
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est un radical protecteur de la fonction carboxyle, il peut être un radical t-butyle ou un radical silyle portant des radicaux alcoyle inférieurs et peut être éliminé par réaction avec le fluorure d'hydrogène, l'acide trifluoroacétique, le chlorure d'hydrogène ou l'eau-
Le dérivé réactif du composé de formule (IV) est tel que le radical carboxyle qui entre en réaction se trouve activé. Le radical carboxyle peut être activé sous une forme appropriée, par exemple sous forme d'ami-de activé, d'halogénure d'acide, . d'ester 'activé;
ou d'anhydride d'acide mixte . Les amides activés avec le carbonyldiimidazole sont préférés. Les carbodiimides comme le dicyclohexylcarbodiimide conviennent comme agents de condensation pour former une liaison amide entre le radical carboxyle et le radical mercaptc;.
La réaction entre le composé de formule (IV)' ou son dérivé réactif et le composé: de formule (V) est exécutée dans un solvant organique inerte,comme le tétrahydrofuranne, le dioxanne, le diméthylformamide, l' hexaméthylphospho rotriamide, le chloroforme, le dichlorométhane ou l'acétonitrile. La réaction est exécutée en général sous refroidissement ou à la température
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+10[deg.]C lorsque le composé de formule (IV) est utilisé sous la forme d'un amide activé ou d'un halogénure d'acide,ou de -10 à +10[deg.]C lorsque ce même composé est utilisé sous la forme d'un anhydride d'acide. La durée de réaction varie avec la température de réaction et avec
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vant et est généralement de 30 minutes à 48 heures et de préférence de 1 à 6 heures. Après la réaction formant l'ester de thiol, un radical protecteur éventuel est éliminé du produit de réaction suivant les procédés mentionnés à propos des radicaux protecteurs respectifs.
Le composé final peut être isolé du mélange de réaction et purifié de toute manière appropriée décrite ci-dessus,comme les différents types de chromatographies sur gel de silice, polymère réticulé de dextrane ou polymères poreux comme des polymères de styrène-divinylbenzène ou d'esters acryliques. Un solvant de développement approprié peut être choisi entre le chloroforme, l'acétate d'éthyle, le méthanol, l'éthanol, le tétrahydrofuranne, le benzène, l'eau et l'acétonitrile. En variante, le composé final peut être obtenu par iso-lement du produit de réaction sous la forme d'un sel
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alors mis à réagir avec un acide,comme l'acide chlorhydrique ou l'hydrogénosulfate de ptoassium.
Les composés finals de l'invention,à savoir les dérivés de la proline de formule (I) et leurs sels pharmaceutiquement acceptables,empêchent la formation
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inhibition de l'activité de l'enzyme qui convertit l'angiotensine. Par conséquent, ils sont utiles pour le traitement de l'hypertension due à l'angiotensine II,
de même que comme agentspour le traitement des insuffisances cardiaques.
L'activité que manifestent certains composés finals de l'invention en inhibant l'enzyme de conversion de l'angiotensine a fait l'objet d'une mesure.
(1) Technique de mesure
On extrait du poumon de lapin une enzyme con-. vertisant l'angiotensine. On introduit dans des tubes
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finals de l'invention indiqués au tableau ci-après).
On ajoute ensuite dans chaque tube à essai 0,1 ml d'une solution de l'enzyme (acétone,poudre) et on met chaque mélange à incuber pendant 30 minutes à 37[deg.]C. On extrait dans de l'acétate d'éthyle,en présence d'acide chlorhydrique,la benzoylglycine produite sous l'action de l'enzyme et on détermine sa quantité par mesure de l'absorption UV. à 228 nm. On détermine l'activité de l'enzyme en présence des composés examinés par rapport à la même activité en l'absence des composés à exami- <EMI ID=38.1> ner (100). La concentration de chacun des composés à examiner à laquelle l'activité relative de l'enzyme est de 50% est dite activité de chacun de ces composés sous l'inhibition de l'activité de l'enzyme et est indi-
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(2) Résultats
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Composé n[deg.] 1 : N-C3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-
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D-méthylpropanoyl]-L-proline
n[deg.] 4 : N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-N-méthylglycyl-
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L'activité des composés finals de l'invention est plus durable que celle des composés connus dont l'activité est analogue, par exemple la 3-mercapto-2-D-méthylpropanoyl-L-proline (couramment appelée Captopril)
de sorte que la maîtrise désirée de la tension artérielle peut être obtenue avec de moins nombreuses administrations au cours de la journée. Le Captopril et d'autres composés connus provoquent une baisse soudaine de la tension artérielle peu après l'administration et peuvent ainsi induire une asthénie hypotensive orthostatique [Lancet, volume 1, n* 8. 115, page 557 (10 mars
1979)J, tandis que les composés finals faisant l'objet de l'invention n'ont qu'un effet hypotenseur modéré peu après l'administration et n'exposent guère au risque d'une asthénie hypotensive orthostatique. Les principes actifs tels que le Captopril qui portent un radical aercapto libre exercent un certain nombre d'effets secon-daires attribuables à ce radical mercapto.
Ce sont notamment des troubles du goût, une production d'albumine dans l'urine, de l'agranulocytose et des troubles cutanés accompagnés de fièvre qui ont été mentionnés dans
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Lancet, volume 2, n[deg.] 8186, page 129 (19 juillet 1980)
et South African Médical Journal, volume 58, 172 (1980). D'autre part, la liaison ester de thiol dans les composés finals de l'invention n'est pas susceptible d'hydrolyse in vivo et ne tend donc guère à libérer un radical mer-
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tion ne sont guère susceptibles de provoquer les effets secondaires précités attribuables au radical mercapto.
Le dérivé de la proline de formule (I) et .ses sels pharmaceutiquement acceptables peuvent être présentés sous forme de compositions pour l'administration par voie orale,comme des comprimés, capsules, granules, poudres, sirops et élixirs,ou sous forme de solutions ou suspensions stériles pour l'administration par voie parentérale. A cette fin, des compositions pharmaceutiques peuvent être préparées au départ d'un ou plusieurs des composés finals de l'invention (comme principe actif-) et d'adjuvants pharmaceutiquement acceptables comme,des excipients, véhicules, liants, stabilisants et aromati-
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vention chez l'adulte est de 0,5 mg à 2 g et de préférence d'environ 1 à 500 mg en administration par voie orale et de 0,1 à 600 mg et de préférence d'environ 0,3 à 300 mg en administration par voie parentérale.
Le procédé de préparation des composés finals de l'invention est décrit avec référence aux exemples non limitatifs ci-après.
EXEMPLE 1-
Préparation d'aminoacides N-substitués
(a) On dissout de la D-alanine (4,5 g) sous agi- <EMI ID=47.1>
cette solution, goutte à goutte ,100 ml de tétrahydrofuranne contenant 9,0 g de chlorure de cyclohexanecarbony-
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agite le mélange pendant 30 minutes, après quoi on poursuit l'agitation pendant 90 minutes à la température ambiante. On ajoute ensuite du HC1 2N au mélange de réaction pour ajuster son pH entre 1 et 2. On extrait le mélange de réaction avec de l'acétate d'éthyle et on lave la couche organique avec une solution saturée de NaCl, puis on la sèche sur du sulfate de magnésium. On évapore le filtrat sous vide pour obtenir le composé brut. Par recristallisation dans l'acétate d'éthyle/nhexane, on obtient 4,65 g de N-cyclohexanecarbonyl-D-
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(b) On dissout dans 30 ml de tétrahydrofuranne un ester d'acide adamantanecarboxylique et de N-hydroxysuccinimide (3,0 g). On ajoute à cette solution 5 ml d'eau contenant 0,89 g de D-alanine et 1,1 g de triéthylamine et on agite le mélange à 5[deg.]C jusqu'au lendemain. Après avoir chassé le tétrahydrofuranne, <EMI ID=50.1>
au nouveau mélange pour ajuster son pH entre 1 et 2. On traite le mélange ensuite comme en (a) ci-dessus pour obtenir 0,38 g de N-adamantanecarbonyl-D-alanine.
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On prépare les composés énumérés ci-après suivant l'un des procédés décrits en (a) et (b).
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EXEMPLE 2 -
(a) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)2-D-méthylpropanoique
On dissout de la N-cyclohexanecarbonyl-D-alanine (5,97 g) dans du tétrahydrofuranne sec (100 ml).
On ajoute du carbonyldimidazole (5.84 g) à la solution
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pérature pendant 1 heure. On ajoute ensuite de l'acide 3-mercapto-2-D-méthylpropanoique (3,60 g) et on agite le mélange entre -15 et -10[deg.]C pendant 1 heure, puis à la température ambiante pendant encore 1 heure. On évapore le mélange sous vide pour chasser le solvant. On ajoute de l'eau (40 ml) au résidu, puis on ajoute du
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et 2. On extrait le mélange à l'acétate d'éthyle et on lave la couche organique deux fois avec une solution saturée de NaCl, puis on la sèche sur du sulfate de magnésium. On évapore le filtrat sous vide pour obtenir le composé brut. Par recristallisation dans l'acétate d'éthyle/n-hexane, on obtient des cristaux prismatiques, in-
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(b) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylglycylthio)-2-D-méthylpropanoique
On répète le mode opératoire (a) ci-dessus au moyen de N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylglycine (2,61 g), de carbonyldiimidazole (1,95 g) et d'acide 3-mercapto-2D-méthylpropanoïque (1,20 g). On recueille une huile jaune formée par le composé recherché (2,07 g, 57%).
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(c) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-leucylthio)-2-
D-méthylpropanoïque
On répète le mode opératoire (a) au moyen de N-cyclohexanecarbonyl-D-leucine (2,41 g), de carbonyldiimidazole (1,95 g) et d'acide 3-mercapto-2-D-méthylpropanoïque (1,20 g). On recueille une huile constituée par le composé recherché (2,40 g, 70%).
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(d) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-glutaminylthio)-2-D-méthylpropanoique
On répète le mode opératoire (a) au moyen de N-cyclohexanecarbonyl-D-glutamine (2,56 g), de carbonyldiimidazole (1,95 g) et d'acide 3-mercapto-2-D-méthylpropanoique (1,20 g). On recueille un échantillon de 0,70 g du composé rechercné (20%).
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(e) Acide 3-(N-cyclopropanecarbonyl-glycylthio)-2-
D-méthylpropanoique
On répète le mode opératoire (a) au moyen de N-cyclopropanecarbonylglycine (0,78 g), de carbonyldiimidazole (1,06 g) et d'acide 3-mercapto-2-D-méthylpropanoïque (0,66 g). On recueille une huile constituée par le composé recherché (0,70 g, 52%).
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On répète le mode opératoire (a) au moyen de N-cyclohexanecarbonyl-D-tryptophane (0,157 g), de carbonyldiimidazole (0,1 g) et d'acide 3-mercapto-2-Dméthylpropanoique (0,06 g). On recueille un échantillon gommeux du composé recherché (0,17 g, 82%).
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EXEMPLE 3 -
(a) N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-2-D-:
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On dissout de l'acide 3-(N-cyclohexanecarbonylD-alanylthio)-2-D-méthylpropanoique (1,51 g) dans du té-
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on ajoute de la triéthylamine (0,61 g) et du chloroformiate d'éthyle (0,65 g) à la solution. Après 5 minutes, on ajoute une solution de L-proline (0,58 g) et de triéthylamine (0,61 g) dans de l'eau (5 ml) et on agite le
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biante pendant 30 minutes. On évapore lé mélange sous vide pour chasser le solvant. Après addition d'eau au résidu, on ajoute du HC1 2N au mélange pour ajuster son pH entre 1 et 2. On extrait le mélange de réaction à l'acétate d'éthyle et on lave la couche organique deux fois avec une solution saturée de NaCl, puis on la sèche sur du sulfate de magnésium. On concentre le filtrat sous vide gour chasser l'acétate d'éthyle et on soumet le résidu à la chromatographie sur gel de silice qu'on élue avec un mélange de chloroforme et de méthanol
(100:1 jusqu'à 100:2). On recueille les fractions contenant le composé final et on les évapore sous vide pour obtenir un échantillon gommeux du composé recherché
(0.3 g).
(b) Le même composé peut être obtenu de la manière suivante.
On dissout de l'acide 3-(N-cyclohexanecarbonylD-alanylthio)-2-D-méthylpropanoïque (6,03 g) et du N-hydroxysuccinimide (2,3 g) dans du tétrahydrofuranne sec
(50 ml). On ajoute du dicyclohexylcarbodiimide (4,3 g)
<EMI ID=67.1>
jusqu'au lendemain à cette température. Après la réaction, on sépare le précipité par filtration et on lave les insolubles avec un peu de tétrahydrofuranne. On mélange le filtrat et les liqueurs de lavage et on évapore le tout sous vide. On ajoute de l'acétate d'éthyle au résidu et on filtre le mélange. On lave la solution
<EMI ID=68.1>
Na2Co3 aqueux et du NaCl en solution saturée, dans l'ordre indiqué.On sèche la solution sur du sulfate de magnésium, on l'évapore sous vide et on fait se solidifier le résidu par addition d'un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane (1:10). On obtient ainsi 6,90 g (87%) du produit solide.
<EMI ID=69.1>
<EMI ID=70.1>
On dissout l'ester activé (3,98 g) dans du tétrahydrofuranne (40 ml)- On ajoute à la solution
de la L-proline (1,15 g) en solution dans 5 ml d'eau et de la N-éthy lmorphol ine (1,26 ml) et on agite le mélange jusqu'au lendemain. On évapore le mélange sous vide pour chasser les solvants, puis on ajoute de l'eau au résidu. On ajuste le pH du nouveau mélange entre 1 et 2 par addition de HC1 2N. On extrait le mélange de réaction à l'acétate d'éthyle et on lave l'extrait organique avec une solution saturée de NaCl, puis on le sèche sur du sulfate de magnésium. On évapore le filtrat sous vide. On soumet le résidu à la chromatographie sur une colonne de gel de silice qu'on élue avec un mélange de chloroforme et de méthanol (100:1 jusqu'à 100:2). Le produit obtenu (1,45 g) par évaporation de l'éluat sous vide se révèle à l'analyse RMN identique au composé recherché.
(c) Le composé recherché peut être obtenu aussi de la manière suivante.
On dissout de l'acide 3-(N-cyclohexanecarbonylD-alanylthio)-2-D-méthylpropanoique (4,52 g) dans du chlorure de thionyle (5 ml). On ajoute une goutte de diméthylformamide à la solution et on agite le mélange à la température ambiante jusqu'au lendemain. On évapore le mélange sous vide pour chasser les solvants et on ajoute du toluène sec (2 ml) au résidu, puis on évapore le nouveau mélange sous vide pour chasser le solvant. On ajoute du tétrahydrofuranne sec (10 ml) sous agitation au résidu. On ajoute la solution dans le tétrahydrofuranne contenant le chlorure d'acide goutte à
<EMI ID=71.1>
cette température pendant 1 heure, puis à la température ambiante pendant 2 heures encore. On extrait le mélange de réaction au chloroforme. On ajoute du HC1 2N à la couche aqueuse pour'ajuster son pH entre 1 et 2. Après l'extraction au chloroforme, on lave la couche chloroformique deux fois avec une solution saturée de NaCl, puis on la sèche sur du sulfate de magnésium. Après avoir chassé le chloroforme, on chromatographie
le résidu sur une colonne de gel de silice qu'on élue avec un mélange de chloroforme et de méthanol (100:1
<EMI ID=72.1>
une substance gommeuse (1,6 g). Celle-ci se révèle iden-tique à l'analyse RMN au composé recherché.
(d) Le composé recherché pourrait être obtenu aussi par le procédé suivant.
On dissout de l'acide 3-(N-cyclohexanecarbonylD-alanylthio)-2-D-méthylpropanoique (3,01 g) et de l'ester t-butylique de L-proline (1,71 g) dans du'dichlorométhane sec (50 ml) et on ajoute,sous agitation et refoidissement dans de la glace.du dicyclohexylcarbodiimide
(2,15 g) à la solution. On agite le mélange à cette
<EMI ID=73.1>
et on lave les insolubles au dichlorométhane. On combine le filtrat et les liqueurs de lavage et on lave cette
<EMI ID=74.1>
obtenir un échantillon gommeux d'ester t-butylique de N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-2-D-méthylpro-
<EMI ID=75.1>
4,0 g de cet ester dans de l'anisole (30 ml) et on ajoute de l'acide trifluoroacétique (10 ml) à la solution. On agite le mélange à la température ambiante pendant
1 heure, puis on l'évapore sous vide pour chasser l'acide trifluoro acétique en excès. On soumet le résidu à la chromatographie sur une colonne de gel de silice (2 cm x
35 cm) qu'on élue avec un mélange de méthanol et de chloroforme (1:100 jusqu'à 3:100). On recueille les fractions contenant le composé final et on les évapore sous vide pour obtenir une substance gommeuse (3,4 g). A l'analyse RMN et à. la chromatographie en couche mince, cette substance se révèle identique. au composé recherché.
Les réactifs, les solvants de réaction et les procédés appliqués à la préparation du composé faisant l'objet de l'exemple 3 sont énumérés au tableau ci-après précisant également ses propriétés physiques. On prépare d'autres composés suivant l'un des procédés décrits dans les exemples 3 (a) à (d), les détails du mode opératoire spécifique étant mentionnés au tableau ci-après avec les propriété.% physiques des composés finals. Dans le tableau, les valeurs numériques apposées à (1) et à (2)
<EMI ID=76.1>
(4:1:1) respectivement.
<EMI ID=77.1>
<EMI ID=78.1>
<EMI ID=79.1>
<EMI ID=80.1>
<EMI ID=81.1>
<EMI ID=82.1>
EXEMPLE 4
Préparation de sels
On prépare différents sels à partir des échantillons de N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-2D-méthylpropanoyl]-L-proline préparée dans les exemples 3 et 5.
(a) Sel de calcium
On dissout un échantillon de 3,98 g du composé préparé dans l'exemple 3 ou 5 dans du méthanol (40 ml). On ajoute de l'acétate de calcium hydraté (0,84 g) à la solution et on chauffe le mélange au reflux pendant 1 h�uré: On sépare les insolubles par filtration et on évapore le filtrat sous vide. On ajoute du chloroforme au résidu et on filtre le mélange, puis on évapore le filtrat sous vide. On ajoute de l'éther diéthylique au résidu et on filtre le mélange, puis on le sèche à l'air pour obtenir le sel de calcium du composé de l'exemple 3
<EMI ID=83.1>
On répète le mode opératoire (a) au moyen de 3,09 g du composé de l'exemple 3 ou 5 et de 0,772 g d'acétate de magnésium tétrahydraté. On obtient le sel de magnésium du composé de l'exemple 3 ou 5 (2,42 g).
<EMI ID=84.1>
(c) Sel de lysine
On dissout 1,19 g du composé préparé dans l'exemple 3 ou 5 dans du méthanol (22 ml). On ajoute de la lysine (0,416 g) à la solution et on agite le mélange à la température ambiante pendant 1 heure, puis on l'évapore sous vide. On ajoute du chloroforme au résidu et on filtre le mélange, puis on l'évapore sous vide. On ajoute de l'éther diméthylique au résidu et on filtre le produit par dépression pour obtenir le sel de lysine du
<EMI ID=85.1>
<EMI ID=86.1> 2-D-méthylpropanoique
On répète le mode opératoire (a) au moyen de N-adamantanecarbonylglycine (2,38 g), de carbonyldii-
<EMI ID=87.1>
panoique (1,20 g). On recueille un échantillon de 1,08 g du composé recherché (32%).
4
P.F. 132[deg.]C (décomposition)
<EMI ID=88.1>
(g) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylala-
<EMI ID=89.1>
bonyldiimidazole (1,0 g) et d'acide 3-mercapto-2-D-méthylpropanoique (0,60 g). On* recueille une huile constituée par le composé recherché (1.5 g. 79%).
<EMI ID=90.1>
(h) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-méthionylthio)
2-D-méthylpropanoique
On répète le mode opératoire (a) au moyen de N-cyclohexanecarbonyl-D-méthionine (0,325 g), de car-
<EMI ID=91.1>
méthylpropanoique (0,15 g). On recueille une huile constituée par le composé recherché (0,29 g, 64%).
<EMI ID=92.1>
(i) Acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-tryptophyl-
<EMI ID=93.1> (d) Sel de sodium
On dissout un échantillon de 2,27 g du composé préparé dans l'exemple 3 ou 5 dans du méthanol
(25 ml). On ajoute de l'acétate de sodium (0,514 g)
à la solution et on agite le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes, puis on l'évapore sous vide. On ajoute au résidu 200 ml d'un mélange de méthanol et de chloroforme (3:100 v/v) et on filtre le mélange résultant, puis on l'évapore sous vide. On dissout le résidu dans du méthanol et on filtre la solution, puis on l'évapore sous vide. On ajoute de l'acétate d'éthyle au résidu et on filtre le produit sous vide pour obtenir le sel de sodium du composé de
<EMI ID=94.1>
MeOH).
(e) Sel de dicyclohexylamine
On dissout un échantillon de 13,1 g du composé de l'exemple 3 ou 5 dans 120 d'acétonitrile. On ajoute sous agitation de la dicyclohexylamine (6 ml) à
la solution. On poursuit l'agitation pendant 30 minutes, puis on laisse reposer jusqu'au lendemain. On filtre le précipité sous vide et on le sèche à l'air.
On met les cristaux bruts résultants en suspension
dans 300 ml d'acétonitrile et on chauffe la suspension au reflux pendant 30 minutes. On refroidit la suspension et on sépare les cristaux par filtration sous vide, après quoi on les sèche à l'air pour obtenir un sel de dicyclohexylamine du composé de l'exemple 3 ou 5 (12,2 g)
<EMI ID=95.1>
EXEMPLE 5 -
N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-2-Dalanylthio)-2-D-méthylpropanoyl]-L-proline On dissout de la N-cyclohexanecarbonyl-D-alanine (5,98 g) dans du tétrahydrofuranne sec (80 ml). On ajoute du carbonyldiimidazole (5,84 g) à la solution à <EMI ID=96.1> ge dans de la glace. On agite le mélange à cette température pendant 1 heure, puis on y ajoute de la N-(3mercapto-2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (6.29 g), après quoi on poursuit l'agitation à -18[deg.]C pendant 30 minutes et ensuite à la température ambiante pendant 1 heure. Au terme de la réaction, on évapore le mélange sous vide pour chasser le solvant. On ajoute de l'eau
(50 ml) au résidu et on ajoute du HCl 2N au nouveau mélange pour ajuster son pH entre 1 et 2. On extrait le mélange à l'acétate d'éthyle et on lave la couche d'acétate d'éthyle avec du NaCl en solution saturée,
<EMI ID=97.1>
vide. On ajoute au résidu de l'acétonitrile (120 ml), puis de la dicyclohexylamine (6 ml). On agite le mélange à la température ambiante pendant 1 heure. Après repos jusqu'au lendemain, on sépare le précipité par filtration et en le sèche à l'air pour obtenir un sel de dicyclohexylamine brut (14,35 g). On met le sel brut en suspension dans de l'acétonitrile (300 ml) et on chauffe la suspension au reflux pendant 30 minutes. Après refroidissement, on recueille le précipité par filtration sous vide et on le sèche à l'air pour obtenir un sel de dicyclohexylamine blanc (12,20 g). On met le sel de dicyclohexylamine (12,20 g) en suspension dans l'acétate d'éthyle (90 ml) et on ajoute du KHS04 aqueux 0,5N (60 ml) à la suspension, puis on agite le mélange. On lave la couche organique à l'eau distil-
<EMI ID=98.1>
vide pour obtenir une substance gommeuse (8,64 g). A l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince, cette substance se révèle identique au composé recherché.
EXEMPLE 6 -
<EMI ID=99.1> <EMI ID=100.1>
de tétrahydrofuranne sec contenant 1,07 g de carbonyldiimidazole, tandis qu'en refroidit le mélange dans de la glace. On agite le mélange à cette température pendant 1 heure, puis on y ajoute 6 ml de tétrahydrofuranne sec contenant 1,09 g de N-(3-mercapto-2-D-mé-
<EMI ID=101.1>
tation à -20[deg.]C per-dant 30 minutes et enfin à la température ambiante pendant 1 heure. Au terme de la réaction, on évapore le mélange sous vide peur chasser le solvant. On soumet le résidu à la chromatographie sur une colonne de gel de silice (2 cm x 35 cm) qu'on élue avec un mélange de méthanol et de chloroforme (1:100 jusqu'à 3:100). On recombine les fractions contenant le composé final et on les évapore sous vide pour obtenir une substance gommeuse (1,16 g). A l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince, cette substance se révèle identique au composé recherché. EXEMPLE 7 -
N-[-3-(N-cyclopropanecarbonyl-D-alanylthio)-
<EMI ID=102.1>
On dissout de la N-cyclopropanecarbonyl-Dalanine (635 mg) et de la triéthylamine (0,70 ml) dans du tétrahydrofuranne sec (14 ml). On ajoute du chloro-
<EMI ID=103.1>
cette solution tandis qu'on refroidit le mélange dans de la glace. On agite le mélange à cette température pendant 15 minutes, puis on ajoute de la N-(3-mercapto2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (1,09 g) et du tétrahydrofuranne sec (10 ml) contenant de la triéthylamine
<EMI ID=104.1> terme de la réaction, on évapore le mélange sous vide
à 30-35[deg.]C pour chasser le solvant. On ajoute de l'eau
(10 ml) au résidu, puis on ajoute du HCl 2N au mélange pour ajuster son pH entre 1 et 2. On extrait le mélange au chloroforme et on lave la couche chloroformique avec du NaCl en solution saturée, puis on la sèche sur du
<EMI ID=105.1>
le résidu sur une colonne de gel de silice (2 cm x 35 cm) qu'on élue avec un mélange de méthanol et de chloroforme
(1:100 jusqu'à 3:100). On recombine les fractions contenant le composé final et on les évapore sous vide pour obtenir une substance gommeuse (395 mg). A l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince, cette substance se révèle identique au composé recherché. EXEMPLE 8 -
<EMI ID=106.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6, mais en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclohexanecarbonyl-N-méthylglycine (1,09 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (1,09 g) et de la N-
<EMI ID=107.1>
On obtient une substance gommeuse (0,76 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 9 -
<EMI ID=108.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6, mais en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclopropanecarbonylglycine (0,96 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (1,09 g) et de la N-(3-mer-
<EMI ID=109.1>
tient une substance gommeuse (0,4 g) qui se révèle à l'analyse RMN et .par chromatographie en couche mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 10 -
<EMI ID=110.1>
méthylpropanoyll-L-proline
On répète le mode opératoire de l'exemple 6, mais en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-adamantanecarbonylglycine (1,42 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (1,09 g) et de la N-(3-mercapto- <EMI ID=111.1> une substance gommeuse (1,7 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche.identique au composé recherché.
EXEMPLE 11 -
N-C3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylalanyl-
<EMI ID=112.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6 en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylalanine (1,54 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (1,09 g) et de la N-
(3-mercapto-2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (1,09 g).
On obtient une substance gommeuse (0,97 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 12 -
N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-leucylthio)-2-
<EMI ID=113.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6
en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclohexanecarbonyl-D-leucine (1,20 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (0,97 g) et de la N-(3-mercapto2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (0,98 g). On obtient une substance gommeuse (1,17 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en coucne mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 13 -
<EMI ID=114.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6 en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par le N-cyclohexanecarbonyl-D-tryptophane (1,75 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (1,09 g) et de la
<EMI ID=115.1>
On obtient une substance gommeuse (0,8 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 14 -
N-[ 3- (N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylglycylthio)-2-D-méthylpropanoyl3-L-proline
On répète le mode opératoire de l'exemple 6 en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclohexanecarbonyl-D-phénylglycine (1,30 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (0,97 g) et de la N-(3-mercapto-2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (0,98 g). On obtient une substance gommeuse.(0,35 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 15 -
<EMI ID=116.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6 en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclohexanecarbonyl-D-méthionine (1,30 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (1,09 g) et de la N-(3mercapto-2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (1,09 g). On obtient une substance gommeuse (0,59 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince identique au composé recherché .
EXEMPLE 16 -
<EMI ID=117.1> <EMI ID=118.1>
-On répète le mode opératoire de l'exemple 6 en remplaçant le N-cyclohexanecarbonylglycine par la N-cyclohéxanecarbonyl-D-glutamine (0,5 g) et en uti- <EMI ID=119.1>
obtient une substance gommeuse (0,3 g) qui se révèle
à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince identique au composé recherché.
EXEMPLE 17 -
N-[3-(N-adamantanecarbonyl-D-alanylthio)-2-
<EMI ID=120.1>
On répète le mode opératoire de l'exemple 6 en remplaçant la N-cyclohexanecarbonylglycine par la
N-adamantanecarbonyl-D-alanine (1,2 g) et en utilisant du carbonyldiimidazole (0,97 g) et de la N-(3-mercapto-2-D-méthylpropanoyl)-L-proline (0,98 g). On obtient une substance gommeuse (1,02 g) qui se révèle à l'analyse RMN et par chromatographie en couche mince iden-
<EMI ID=121.1>
EXEMPLE 18 -
Sel de dicyclohexylamine de la N-E3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-2-D-méthylpropanoyl]-L-proline
(1) On met de l'acide 3-(N-cyclohexanecarbonyl-Dalanylthio)-2-D-méthylpropanoique (241 g) en suspension dans du dichlorométhane sec (1300 ml). On ajoute de la
<EMI ID=122.1>
sous agitation, après quoi on poursuit l'agitation pendant 30 minutes.
(2) On met de la L-proline (101 g) en suspension dans du dichlorométhane.sec (1200 ml).On ajoute du chlo, rure de triméthylsilyle (112 ml) goutte à goutte à -15[deg.]C sous agitation à la suspension, puis on ajoute de la triéthylamine (122 ml) goutte à goutte au-dessous de <EMI ID=123.1> tion du mélange à -15[deg.]C pendant 30 minutes. On ajoute au mélange résultant la solution préparée en (1) et on agite le nouveau mélange sous refroidissement pendant
15 minutes, puis à la température ambiante pendant 1 heure. Au terme de la réaction, on ajoute de l'eau distillée froide (1000 ml) au mélange de réaction sous refroidissement, après quoi on y ajoute goutte à goutte de l'acide chlorhydrique concentré (90 ml).
On agite le mélange pendant 10 minutes et on en sépare la couche organique qu'on lave deux fois avec du NaCl en solution saturée et qu'on sèche sur du sulfate de magnésium.
On ajoute de la dicyclohexylamine (326 ml) et de l'acétonitrile (800 ml) au filtrat, après quoi on agite le nouveau mélange pendant 30 minutes. On ajoute ensuite quatre aliquotes de 800 ml d'acétonitrile à intervalles de 10 minutes, après quoi on laisse reposer le mélange
<EMI ID=124.1>
vide et on le sèche à l'air pour obtenir un échantillon brut du composé recherché. On dissout celui-ci dans du dichlorométhane (3000 ml) à chaud et on filtre le tout. On agite le fitrat pendant 30 minutes à la température ambiante, puis on y ajoute quatre aliquotes de 750 ml d'acétonitrile à intervalles de 10 minutes, après quoi on laisse reposer le mélange résultant jusqu'au lendemain à 5[deg.]C. On recueille le précipité par filtration et on le sèche à l'air pour obtenir un échantillon
<EMI ID=125.1>
EXEMPLE 19 -
Sel de calcium de la N-[3-(N-cyclohexanecarbonyl-D-alanylthio)-2-D-méthylpropanoyl]-L-proline <EMI ID=126.1>
on agite le mélange pendant 10 minutes. On sépare la couche organique, on la lave à l'eau distillée et on la sèche sur du sulfate de magnésium. On évapore le filtrat sous vide et on dissout le résidu dans de l'acétone (1200 ml). On ajoute de l'eau distillée
(1200 ml), ainsi que du carbonate de calcium (36,6 g) à la solution acétonique et on agite le mélange vivement à 40 *C pendant 1 heure. Après refroidissement. on filtre le mélange et on évapore le filtrat sous vide. On met le sirop résultant en suspension
<EMI ID=127.1>
pendant 5 heures- On sépare le précipité par filtration et on le sèche à l'air, puis sous vide pour obtenir une poudre blanche formée par le composé recherché
<EMI ID=128.1>
REVENDICATIONS
1 - Dérivé de la proline de formule (I):
<EMI ID=129.1>
<EMI ID=130.1>
no de l'aminoacide et choisi entre les radicaux cyclopropanecarbonyle, cyclohexanecarbonyle et adamantanecarbonyle; A représente un reste de glycine, de
<EMI ID=131.1>
bonyle qui forme une liaison ester de thiol avec un atome de soufre) ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.
2 - Dérivé de la proline ou un de ses sels