SK55799A3

SK55799A3 - Naphthyridine derivatives, process for the preparation thereof, pharmaceutical compositions containing the same and their use

Info

Publication number: SK55799A3
Application number: SK557-99A
Authority: SK
Inventors: Rene Hersperger
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1996-10-28
Filing date: 1997-10-24
Publication date: 1999-10-08
Also published as: PE10899A1; US6136821A; CN1103773C; WO1998018796A1; SK283562B6; GB9622386D0; EP0934320A1; KR100524329B1; CN1234800A; JP2001502717A; NO991903D0; ID18623A; AR009128A1; ZA979593B; HK1022305A1; IL129502A0; TW399052B; AU6908498A; HUP9904204A2; PL189280B1

Description

Naftyridínové deriváty, spôsob ich prípravy, farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú a ich použitie

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka nových 8-aryl-l, 7-naftyridínov, spôsobu ich prípravy, ich použitia ako liečiv, a farmaceutických prostriedkov, ktoré ich obsahujú.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález poskytuje 8-aryl-l, 7-naftyridíny vo volnej forme alebo vo forme farmaceutický prijatelných solí. Termín „arylová skupina znamená monocyklickú alebo bicyklickú aromatickú alebo heteroaromatickú skupinu obsahujúcu 10 aromatických nevodí kových atómov a je pripojená k 1,7-naftyridínu buď priamo (napríklad fenylová skupina, pyridylová skupina, tetrazolylová skupina, benzofurazanylová skupina alebo benzotiofurazanylová skupina) alebo cez metylénový mostík (napríklad benzylová skupina alebo pyridylmetylová skupina) ; výhodne monocyklická aromatická skupina obsahuje až 6 aromatických atómov uhlíka, z ktorých až dva môžu byť nahradené' atómom dusíka (napríklad fenylová skupina, benzylová skupina, 4-pyridylová skupina alebo 4-pyridylmetylová skupina) , prípadne nesie karboxylovú skupinu, karboxyesterovú skupinu alebo hydroxylovú skupinu. 8-Arylová skupina môže byť prípadne ďalej substituovaná najmä skupinami priťahujúcimi elektróny, napríklad nitroskupinou, nitriloskupinou, iminoskupinou, atómom halogénu alebo substituentom obsahujúcim halogén (napríklad trifluórmetylovou skupinou) alebo kyanoskupinou, výhodne v polohe metá. Napríklad 8-arylovou skupinou môže byť kyanofenylová skupina, nitrofenylová skupina, tetrazolylfenylová skupina (napríklad tetrazol-l-ylfenylová skupina) alebo chlórfenylová skupina. Dvojitý kruh naftyridínovej časti molekuly môže byť prípadne ďalej substituovaný alebo disubstituovaný, najmä substituovaný v polohe 6, hydroxylovou skupinou, alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou, alkinylovou skupinou, alkoxyskupinou, arylovou skupinou, aryloxyskupinou, aminoskupinou, arylaminoskupinou, diarylaminoskupinou, alkaminoskupinou, dialkaminoskupinou, arylamidoskupinou alebo alkamidoskupinou, kde „alk znamená alifatickú skupinu obsahujúcu až 8 atómov uhlíka, ktorá prípadne nesie karboxylovú skupinu alebo karboxyesterovú skupinu alebo hydroxylovú skupinu a/alebo prípadne obsahuje éterovú spojku alebo esterovú spojku.

Predkladaný vynález poskytuje najmä 8-fenyl- a 8-benzyl-1, 7-naftyridíny, kde 1,7-naftyridínový dvojitý kruh je prípadne substituovaný v polohe 6, napríklad ako sa uvádza ďalej, a fenylový kruh je prípadne substituovaný substituentom priťahujúcim elektróny, ako je nitroskupina; napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca I

R2 (I) kde

R¹ je fenylová skupina, benzylová skupina, 3-nitrofenylová skupina, 3-chlórfenylová skupina, 3-kyanofenylová skupina, 3-(tetrazolyl)fenylová skupina, benzofurazanylová skupina alebo benzotiofurazanylová skupina;

R² je hydroxylová skupina, aminoskupina, trifluórmetánsulfony• lová skupina, alylová skupina, alkylová skupina, alkenylová ,4 skupina, alkinylová skupina, alkoxyskupina, arylová skupina, arylalkylová skupina, aryloxyskupina, aminoskupina, arylaminoskupina, diarylaminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina, alkylarylová skupina, arylamidoskupina alebo alkylamidoskupina;

a ich estery a amidy;

vo volnej forme alebo vo forme farmaceutický prijateľných solí.

Vo všeobecnom vzorci I a kdekoľvek v predkladanom vynáleze má termín „alkylová skupina a „arylová skupina rovnaký význam ako sa uvádza v súvislosti s 8-aryl-l, 7-na-ftyridínmi podlá vynálezu .

R² je výhodne vybrané zo skupiny, ktorú tvorí hydroxylová '· skupina, aminoskupina, arylaminoskupina (napríklad fenylaminoskupina), arylová skupina (napríklad fenylová skupina) , alkylarylová skupina (napríklad nižšia alkylfenylová skupina) , * alkenylová skupina (napríklad vinylová skupina), alkinylová skupina (napríklad etinylová skupina), alkoxyskupina obsahujúca éterovú spojku a/alebo esterovú spojku (napríklad metoxykarbonylmetoxyskupina) a alkylamidoskupina (napríklad acetamidoskupina) .

Najmä sa prekvapivo zistilo, že celá nová trieda 6,8-aryl-1,7-naftyridínov je využiteľná ako liečivá, najmä ako orálne aktívne inhibítory PDE 4, napríklad na liečenie astmy.

Predkladaný vynález teda vo výhodnom uskutočnení poskytuje

6-(karboxyfenyl alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridíny, a ich estery a amidy, vo voľnej forme alebo vo forme farmaceutický prijateľných solí.

Výhodnejšie predkladaný vynález poskytuje 6-(4-karboxyfenyl alebo 4-karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, 4-benzo[c]tiadiazolyl alebo 4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridíny, a ich estery a amidy, vo voľnej forme alebo vo forme farmaceutický prijateľných solí.

u Benzo[c]tiadiazolylovou skupinou a benzo[c]furazanylovou skupinou sa rozumie zvyšok všeobecného vzorca A a B v tomto poradí

\

Predkladaný vynález teda v zvlášť poskytuje zlúčeninu všeobecného vzorca II výhodnom uskutočnení

di:

kde n je nula alebo jedna;

R⁷ je hydroxylová skupina, aminoskupina, alkylaminoskupina obsahujúca 1 až 4 atómy uhlíka alebo alkoxyskupina obsahujúca 1 až 4 atómy uhlíka, výhodne hydroxylová skupina alebo aminoskupina; a buď

R³ je atóm vodíka, R⁴ je nitroskupina, atóm halogénu (napríklad atóm chlóru), kyanoskupina alebo tetrazolylová skupina (napríklad 1-tetrazolylová skupina), a R⁵ a R⁶ spoločne tvoria ďalšiu väzbu; alebo

R³, R⁴, R⁵ a R⁶ sú spoločne skupina =N-O-N= alebo =N-S-N=;

a jej estery alebo amidy;

vo volnej forme alebo vo forme farmaceutický prijatelnej soli.

Vhodné farmaceutický prijatélné formy solí 8-aryl-l, 7-naftyridínov, napríklad všeobecného vzorca I alebo II, na farmaceutické použitie sa pripravia bežnými' spôsobmi. Napríklad zlúčeniny obsahujúce volné karboxylové skupiny, napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca II, kde R⁷ je hydroxylová skupina, môžu reagovať s volnou bázou, napríklad s aminocukrom, ako je N-metylglukamín, čím sa získa zodpovedajúca bázická adičná sol. Zvyčajne je takáto bázická adičná sol rozpustná vo vode.

8-Aryl-l,7-naftyridíny podía predkladaného vynálezu, napríklad všeobecného vzorca I, sa môžu pripraviť pomocou reakcie 2-kyano-3-pyridylacetonitrilu

a) s kyselinou, napríklad H-A, kde A je atóm halogénu, napríklad atóm brómu, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca III

NH₂ (III) ktorá sa môže ďalej derivatizovať, čím sa získajú zlúčeniny, podľa predkladaného vynálezu, napríklad pomocou skríženej kondenzácie (cross-coupling) použitím kovových činidiel v prítomnosti paládiového alebo niklového katalyzátora, pričom vznikne väzba uhlík-uhlík, napríklad pomocou Stilleho, Suzukiho alebo Hečkovej reakcie, t. j. reakcie zlúčeniny vzorca III so zlúčeninou Y-R⁸, kde Y je kovová odstupujúca skupina, napríklad B (OH) 2-, (CH₃)₃Sn-, (CH₃ (CH₂) ₃) ₃Sn-, a R⁸ je 8-arylová skupina, ako sa už definovala, napríklad benzylová skupina alebo 3-nitrofenylová skupina, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca IV

b) s Grignardovým činidlom, napríklad R⁸-MgBr, kde R⁸ je 8-arylová skupina, ako sa už definovala, napríklad benzylová skupina alebo 3-nitrofenylová skupina, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca IV; alebo

c) s alkanolátom alkalického kovu, napríklad s metanolátom sodným, čím sa získa zlúčenina vzorca III'

kde Alk je alkylová skupina obsahujúca 1 až 8 atómov uhlíka, napríklad metyiová skupina. Substituent -O-Alk sa môže previesť na atóm halogénu A a zlúčenina sa potom môže derivatizovať v polohe 8 tak, ako sa opisuje pre zlúčeninu III.

Aminoskupina vo vzorci III, III' alebo IV podlieha ďalšej reakcii, napríklad (i) aktivácii vhodným aktivačným činidlom, napríklad kyselinou trifluórmetánsulfónovou a NaNO₂, čím sa získa triflát vzorca V

kde Q je buď atóm halogénu A, ako sa už definoval, substituent -O-Alk, ako sa už definoval u zlúčeniny vzorca III' alebo 8-arylový zvyšok R⁸, ako sa už definoval, čo je nový a vysoko užitočný medziprodukt na prípravu zlúčenín podlá predkladaného vynálezu. Napríklad ak je R² vo vzorci I pripojený k zvyšku molekuly väzbou uhlík-uhlík, dá sa substitúcia uskutočniť skríženou kondenzáciou použitím kovového činidla v prítomnosti paládiového alebo niklového katalyzátora, pričom vznikne väzba uhlík-uhlík, napríklad Stilleho, Suzukiho alebo Hečkovou reakciou, napríklad reakciou zlúčeniny vzorca V, kde Q je R⁸ so zlúčeninou vzorca Y-R², kde Y je kovová odstupujúca skupina, ako sa už definovala, a R² je požadovaný substituent uhlíka, napríklad alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, arylová skupina alebo alkylarylová skupina, ako sa už definovala v prípade vzorca I, prípadne v chránenej forme s následným odstránením ochrannej skupiny;

(ii) substitúciou alkylovou skupinou alebo arylovou skupinou (napríklad reakciou so zodpovedajúcim alkylhalogenidom alebo organokovovým činidlom), čím sa získa požadovaný sekundárny alebo terciárny amín; alebo (iii) acyláciou (napríklad reakciou s karboxylovou kyselinou alebo jej anhydridom) použitím konvenčných postupov, čím sa získa zodpovedajúci amid; alebo (iv) konverziou na hydroxyskupinu napríklad reakciou s NaN02 v prítomnosti zriedenej kyseliny, napríklad kyseliny sírovej, a prípadne ďalšou derivatizáciou, napríklad O-alkyláciou, napríklad reakciou s alkylhalogenidom, pričom sa použijú vhodné reakčné podmienky.

Výhodné 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridíny alebo ich estery alebo amidy, napríklad vzorca II, sa konvenčné pripravia nasledovným spôsobom:

(A) pri príprave 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridínov alebo ich esteru alebo amidu sa nechá reagovať

6-X-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridín s X'-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl) alebo jeho esterom alebo amidom, alebo sa nechá reagovať 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-X-l,7-naftyridín alebo jeho ester alebo amid s X'-(fenyl, benzo[c]tiadiazo8 lyl alebo benzo [c] furazanyl) , kde X a X' sú odstupujúce skupiny schopné účasti v skríženej kondenzácii; napríklad kde X je trifluórmetánsulfonylová skupina alebo atóm halogénu, napríklad brómu alebo chlóru, a X' je kovová odstupujúca skupina, napríklad substituovaný bór (napríklad -B (OH) 2, -B(OAlk)2 alebo -BAlk₂, kde Alk je alkylová skupina, napríklad metylová skupina alebo etylová skupina) alebo trialkylstannylová skupina (napríklad (CH₃ (CH₂) 3) 3Sn- alebo (CH₃)₃Sn-) alebo zvyšok Grignardovej zlúčeniny (napríklad MgBr); a/alebo (3) prípadne reakciou 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridínu s vhodným amínom, napríklad s amoniakom alebo s alkylamínom obsahujúcim 1 až 4 atómy uhlíka, čím sa získa zodpovedajúci amid; a/alebo (C) prípadne reakciou 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridínu s vhodným alkoholom, napríklad s alkoholom obsahujúcim 1 až 4 atómy uhlíka, čím sa získa zodpovedajúci ester; a získanie výsledného 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridínu alebo jeho esteru, buď voiného alebo vo forme soli.

Reakčné podmienky pre krok (A) sú normálne podmienky skríženej kondenzácie v tejto oblasti, pri ktorej sa používajú kovové činidlá napríklad v prítomnosti paládiového alebo niklového katalyzátora, pričom vznikne väzba uhlík-uhlík; napríklad Stilleho, Suzukiho alebo Hečkovou reakciou. Reakčné podmienky pre kroky (B) a (C) sú normálne podmienky používané na prípravu amidov reakciou karboxylovej kyseliny a amínu na prípravu esterov z karboxylových kyselín a alkoholov, napríklad v kyslom alebo bázickom prostredí. Izolácia a čistenie sa uskutočňuje bežnými metódami, napríklad chromatograficky alebo kryštalizáciou .

Uskutočnenie podlá vynálezu tak poskytuje postup na prípravu zlúčeniny uvedeného všeobecného vzorca II, ktorý zahŕňa reakciu zlúčeniny vzorca VI

(VI) kde R³, R⁴, R⁵, R⁶ a X sa už definovali, so zlúčeninou vzorca VII

(VII) kde R⁷ a X' sa už definovali, a izoláciu zlúčeniny vzorca II, ktorá sa tak získa voľná alebo vo forme soli.

6-X-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridíny a 6-karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-X-l,7-naftyridíny alebo ich estery alebo amidy na použitie v uvedených reakciách sa výhodne pripravia reakciou 2-kyano-3-pyridylacetonitrilu s kyselinou, napríklad H-A, kde A je atóm halogénu, napríklad brómu, čím sa získa zlúčenina vzorca III, ktorá sa podľa potreby ďalej derivatizuje, ako sa už uviedlo.

Uvedené postupy prípravy 8-aryl-l,7-naftyridínov podľa predkladaného vynálezu, najmä výhodných 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl) -8- (fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl) -1, 7-naftyridínov a ich esterov a amidov sú nové, rovnako ako intermediáty vzorcov IV, V a VI a tieto nové postupy a intermediáty patria do rámca predkladaného vynálezu. Je potrebné poznamenať, že zlúčeniny vzorca V, kde Q je R⁸ a zlúčeniny vzorca IV, sú zahrnuté medzi 8-aryl-l,7-naftyridíny podlá predkladaného vynálezu.

Preto z ďalšieho hľadiska poskytuje vynález medziprodukty vzorca V'

(V') kde Q' je atóm halogénu alebo substituent -O-Alk, kde Alk je alkylová skupina obsahujúca 1 až 8 atómov uhlíka, a vzorca VI

(VI) kde R³, R⁴, R⁵, R⁶ a X sa už definovali.

Vynález ilustrujú nasledovné príklady.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

6-Amino-8- (3-nitrofenyl) -1,7-naftyridín

A. 2-Kyano-3-pyridylacetonitril

K miešanej suspenzii 3-kyanometylpyridín-N-oxidu (30 g, 0,22 mol; syntéza pozri Shigenobu Okuda, Michael M. Robinson, J. Am. Chem. Soc. 81, 740 (1959)) v dichlórmetáne (200 ml) sa pridá trimetylsilánkarbonitril (26 g, 0,26 mol). K tejto suspenzii sa pridá dimetylkarbamoylchlorid (28 g, 0,26 mol). Zmes sa mieša počas 45 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte. Roztok sa premyje IN roztokom hydroxidu sodného a vodou a zahustí sa vo vákuu. Produkt sa prečistí velmi rýchlou kolónovou chromatografiou na silikagéli (15 : 2 toluén/acetón), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve. Molekulový pík M + H 144,1. Teplota topenia 62 - 63° C.

B. 6-Amino-8-bróm-l,7-naftyridín

Miešaný roztok 2-kyano-3-pyridylacetonitrilu (3,6 g, 0,025 mol) v toluéne (80 ml) sa prebubláva počas 5 hodín bromovodíkom. Potom sa opatrne pridá 4N roztok hydroxidu sodného a suspenzia sa intenzívne mieša. Zmes sa prefiltruje a produkt sa premyje vodou a vysuší. Kryštalizácia z toluénu poskytne zlúčeninu uvedenú v názve. Molekulový pík M + H 225. Teplota topenia 188° C ('rozklad) .

C. 6-Amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín

K miešanému roztoku 6-amino-8-bróm-l,7-naftyridínu (4 g, 0,018 mol) v zmesi tetrahydrofuránu (80 ml) a vodného uhličitanu sodného (34 ml, 2N roztok) sa pridá bis(dibenzylidénacetón)-paládium (0,40 g, 0,0007 mol), trifenylfosfín (0,37 g, 0,0014 mol) a kyselina 3-nitrofenylboritá (3,7 g, 0,022 mol). Zmes sa mieša pri teplote 80° C počas 16 hodín. Zmes sa prefiltruje, pridá sa etylacetát a zmes sa premyje 2N roztokom hydroxidu sodného a vodou. Organické rozpúšťadlo sa odparí a zvyšok sa rozsuspenduje v éteri. Filtrácia poskytne zlúčeninu uvedenú v názve. Molekulový pík M + H 267, teplota topenia 221 - 223° C.

Príklad 2

6-Amino-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridín

K miešanému roztoku 6-amino-8-bróm-l,7-naftyridínu (3,0 g, 13,4 mmol) v dimetylformamide (50 ml) sa pridá bis(dibenzylidénacetón) paládium (308 mg, 0,54 mmol), trifenylfosfín (565 mg,

2,15 mmol) a 4-trimetylstannylbenzo [c] furazanyl (4,92 g, 16,0 mmol) . Zmes sa udržiava pri teplote 125° C počas 4 hodín. Potom sa pridá etylacetát (500 ml) a 40 % vodný roztok fluoridu draselného (100 ml) . Zmes sa intenzívne mieša počas 45 minút a prefiltruje sa. Organická vrstva sa oddelí, premyje sa vodou a zahustí. Zvyšok sa prevedie do éteru (20 ml), mieša sa počas 30 minút (0° C) a potom sa prefiltruje, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (2,8 g). Molekulový pík M + H 264, . teplota topenia 244 - 50° C.

Príklad 3

6-Hydroxy-8- (3-nitrofenyl) -1,7-naftyridín

K roztoku 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (500 mg, 1,87 mmol; pripraví sa podía príkladu 1) v koncentrovanej kyseline sírovej a vode (3 ml, 2 : 1) sa pridá pri teplote 4° C dusičnan sodný (155 mg, 2,25 mmol). Po 30 minútach sa odstráni ladový kúpeľ a zmes sa zohrieva na teplotu 70° C počas 30 minút. Reakčná zmes sa vyleje na ľad a roztok sa neutralizuje pridaním hydrogenuhličitanu sodného. Zrazenina sa prefiltruje a premyje vodou, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve. Teplota topenia' 262 - 265° C.

Príklad 4

6-Metoxykarbonylmetoxy-8- (3-nitrofenyl) -1, 7-naftyridín

Suspenzia 6-hydroxy-8- (3-nitrofenyl) -1,7-naftyridínu (107 mg, 0,40 mmol; pripraví sa podía predchádzajúceho príkladu prípadne bez ďalšieho čistenia) , uhličitanu draselného (55 mg, 0,40 mmol) a metylesteru kyseliny brómoctovej (37 μΐ, 0,4 mmol) sa mieša počas 2 hodín v zmesi acetón-dimetylformamid (2 ml, 1:1) pri teplote miestnosti. Potom sa pridá etylacetát a organická fáza sa premyje 2N roztokom hydroxidu sodného. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu a produkt sa prečistí preparatívnou tenkovrstvovou chromatografiou, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve. Molekulový pík M + H 340, teplota topenia 160 - 162° C.

Príklad 5

Hydrochlorid 6-acetamido-8- (3-nitrofenyl) -1,7-naftyridínu

Suspenzia 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (300 mg, 1,1 mmol; , pripraví sa podlá príkladu 1) a acetanhydridu (0,12 ml, 1,2 mmol) v pyridíne (1 ml) a dymetylformamide (3 ml) sa zohrieva na teplotu 80° C počas 3 hodín. Potom sa pridá voda a zrazenina sa odfiltruje a dôkladne premyje vodou. Filtrácia poskytne zlúčeninu uvedenú v názve. Molekulový pík M + H 308, teplota topenia 235 - 238° C.

Príklad 6

6-Amino-8-benzyl-l, 7-naftyridín

K roztoku 2-kyano-3-pyridylacetonitrilu (2 g, 0,014 mol) v toluéne (20 ml) sa pri teplote miestnosti pridá 2M roztok benzylmagnéziumbromidu v tetrahydrofuráne (8,4 ml, 0,17 mol). Po 1 hodine sa reakčná zmes rozloží nasýteným roztokom chloridu amónneho. Produkt sa extrahuje etylacetátom a organická vrstva sa premyje 2N roztokom hydroxidu sodného a vodou. Produkt sa prečistí tlakovou kolónovou chromatografiou na silikagéli (10 : 3 toluén/acetón), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve. Molekulový pík M + H 23, teplota topenia 113 - 116° C.

Príklad 7

6-Fenylamino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín

K roztoku trifenylbizmutu (182 mg, 0,41 mmol) v dichlórmetáne (0,5 ml) a tetrahydrofuráne (0,5 ml) sa pridá kyselina peroctová (0,083 ml, 40 % roztok). Zmes sa mieša počas 1 hodiny a potom sa pridá roztok 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (100 mg, 0,37 mmol; pripraví sa podlá príkladu 1) v zmesi dichlórmetánu (0,5 ml) a tetrahydrofuránu (0,5 ml). Potom sa pridá meď (30 mg, 0,47 mmol) a suspenzia sa mieša počas 40 hodín. Suspenzia sa zriedi etylacetátom a prefiltruje sa. Filtrát sa premyje 2N roztokom uhličitanu sodného a vodou a organická vrstva sa zahustí vo vákuu. Preparatívna tenkovrstvová chromatografia (8 : 2 dichlórmetán/n-hexán) poskytne zlúčeninu uvedenú v názve. Molekulový pík M+H 343,1, teplota topenia 158 - 160° C.

Príklad 8

6-Trifluórmetánsulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín

K roztoku 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (1,24 g, 0,0047 mol; pripraví sa podlá príkladu 1) v kyseline trifluórmetánsulfónovej (12 ml) sa v niekoľkých častiach pridá dusitan sodný (0,64 g, 0,0093 mmol). Roztok sa zohrieva na teplotu 62° C a mieša sa cez noc. Roztok sa vyleje do zmesi etylacetátu a ľadu a potom sa pridá 2N roztok hydroxidu sodného, až kým reakcia vodnej fázy nie je alkalická. Organická fáza sa premyje vodou a zahustí sa vo vákuu. Produkt sa prečistí tlakovou kolónovou chromatografiou na silikagéli (7 :

získa zlúčenina uvedená v názve, teplota topenia 106 - 108° C.

hexán/etylacetát), čím sa Molekulový pík M+H 400,

Príklad 9

6-Fenyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín

K roztoku 6-trifluórmetánsulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (300 mg, 0,75 mmol; pripraví sa podľa príkladu 8) v tetrahydrofuráne (5 ml) sa pridá kyselina fenylboritá (118 mg, 0,97 mmol), bis(dibenzylidénacetón)paládium (18 mg, 0,03 mmol), trifenylfosfín (16 mg, 0,06 mmol) a vodný roztok uhličitanu sodného (1,44 ml, 2N roztok). Roztok sa zohrieva na teplotu 60° C počas 20 hodín, zriedi sa etylacetátom, prefiltruje sa a premyje sa IN roztokom hydroxidu sodného a vodou. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu, čím sa získa čistý produkt. Molekulový pík M + H 328, teplota topenia 172 - 175° C.

Príklad 10

6-Vinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín

K roztoku 6-trifluórmetánsulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (250 mg, 0,62 mmol; pripraví sa podlá príkladu 13) v tetrahydrofuráne (3 ml) sa pridá vinyltributylstannán (218 mg, 0,68 mmol), bis(dibenzylidénacetón)paládium (14 mg, 0,025 mmol), trifenylfosfín (13 mg, 0,049 mmol) a chlorid lítny (78 mg, 1,86 mmol). Zmes sa zohrieva cez noc na teplotu 70° C. Roztok sa zriedi etylacetátom, prefiltruje a premyje vodou. Preparatívna tenkovrstvová chromatografia (8:2 dichlórmetán/n-hexán) poskytne zlúčeninu uvedenú v názve. Molekulový pík M + H 278, teplota topenia 145 - 151° C.

Príklad 11

6-Etinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín

A. 6-Trimetylsilyletinyl-8-(3-nitrofenyl) -1,7-naftyridín sa pripraví nasledovne:

K roztoku 6-trifluórmetánsulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (200 mg, 0,50 mmol; pripraví sa podlá príkladu 13) v dimetylformamide (1 ml) a trietylamíne (0,5 ml) sa pridá etinyltrimetylsilán (0,078 ml, 0,56 mmol), bis(dibenzylidénacetón)paládium (5,8 mg, 0,020 mmol), trifenylfosfin (5,3 mg, 0,020 mmol·) a jodid meďný (3,8 mg, 0,020 mmol). Zmes sa mieša pri teplote 60° C počas 2 hodín. Roztok sa zriedi etylacetátom a premyje sa vodou. Produkt sa prečistí tlakovou kolónovou chromatografiou na silikagéli (20 : 0,2 toluén/acetón), čím sa získa 6-trimetylsilyietinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín. Molekulový pík M + H 348, teplota topenia 160 - 163° C.

B. K roztoku 6-trimetylsilyletinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridínu (77 mg, 0,22 mmol) v zmesi metanolu (0,5 ml) a toluénu (0,5 ml) sa pridá IN roztok hydroxidu draselného (0,22 ml). Zmes sa mieša počas 2 hodín a suspenzia sa potom prefiltruje a produkt sa premyje vodou a éterom, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve. Molekulový pík M + H 276, teplota topenia

215° C (za rozkladu).

Príklad 12

6-(Karboxyfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridín

K roztoku 6-trifluórmetánsulfonyl-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridínu (2,15 g, 5,67 mmol) v dimetylformamide (21,5 ml) sa pridá kyselina 4-karboxyfenyiboritá (1,13 g, 6,81 mmol), bis(dibenzylidénacetón)paládium (131 mg, 0,23 mmol), trifenylfosfin (95 mg, 0,36 mmol) a 2N vodný roztok uhličitanu draselného (17 ml) . Reakčná zmes sa mieša pri teplote 80° C počas 2,5 hodiny. Horúci roztok sa prefiltruje cez kremelinu a surový produkt sa opatrne vyzráža pridaním vody (10 ml) a vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej (8 ml, 2N roztok). Suspenzia sa prefiltruje a surový produkt sa mieša v horúcom tetrahydrofuráne (30 ml) . Ochladená suspenzia sa opäť prefiltruje, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (1,12 g). Molekulový pík M + H 352, teplota topenia > 300° C, retenčný čas HPLC = 7,58 min (kolóna: LiChroCart 125-4, Supersphere 60 RP-Select B, 40° C; eluent: acetonitril/voda (0,1 % TFA) = 45 : 55; 1 ml/min; detekcia pri

254 nm).

Príklad 13

6-(4-Karbamoylfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridín

K suspenzii 6-(4-karboxyfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridínu (100 mg, 0,28 mmol) v toluéne (2 ml) sa pridá tionylchlorid (0,1 ml, 1,37 mmol). Reakčná zmes sa zohrieva na teplotu varu počas 3 hodín. Potom sa odparí rozpúšťadlo a zvyšok sa prevedie do tetrahydrofuránu (2 ml) . Potom sa pridá vodný roztok amoniaku a roztok sa mieša počas 2 hodín pri teplote miestnosti. Potom sa pridá etylacetát a organická vrstva sa premyje vodou, čím sa získa čistá zlúčenina uvedená v názve s teplotou topenia 237 - 240° C.

Príklad 14

6-(4-Karboxyfenyl)-8-(benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridín

A. 6-Amino-8-metoxy-l,7-naftyridín

K roztoku sodíka (3,2 g, 0,139 mol) v metanole (1400 ml) sa pridá 2-kyano-3-pyridylacetonitril (20 g, 0,139 mol) a reakčná zmes sa mieša počas 17 hodín pri teplote miestnosti. Potom sa pridá voda (700 ml) a po odparení väčšiny metanolu vykryštalizuje Zlúčenina uvedená v názve. Teplota topenia 178 - 180° C.

B. 6-Trifluórmetánsulfonyl-8-metoxy-1,7-naftyridín

K roztoku 6-amino-8-metoxy-l,7-naftyridínu (19 g,

0,108 mol) v zmesi vody a kyseliny trifluórmetánsulfónovej (1:1, 380 ml) sa opatrne pri teplote 0° C pridá roztok dusitanu sodného (11,2 g, 0,162 mol) vo vode (40 ml). Po 1 hodine sa chladiaci kúpel odstráni a reakčná zmes sa mieša počas ďalšej hodiny pri teplote miestnosti. Potom sa pridá etylacetát (500 ml) a roztok sa neutralizuje pridaním hydrogenuhličitanu sodného (1 1, 4N roztok) . Vodná fáza sa opäť extrahuje etylacetátom (3 x 500 ml) . Organické rozpúšťadlo sa odparí a surový produkt sa prečistí tlakovou kolónovou chromatografiou na silikagéli (20 : 3 toluén/acetón), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve. Molekulový pík M⁺ 308, teplota topenia 99 - 101° C.

C. 6-(4-Karboxyfenyl)-8-metoxy-l, 7-naftyridín)

K roztoku 6-trifluórmetánsulfonyl-8-metoxy-l, 7-naftyridínu (1,5 g, 4,86 mmol) v dimetylformamide (40 ml) sa pridá kyselina

4-karboxyfenylboritá (0,866 g, 5,34 mmol), bis(dibenzylidénacetón)paládium (112 mg, 0,167 mmol), tri-o-tolylfosfín (96 mg, 0,32 mmol) a vodný uhličitan sodný (14,6 ml, 2N roztok). Reakčná zmes sa mieša počas 3 hodín pri teplote 110° C. Horúci roztok sa prefiltruje cez kremelinu a odparí sadosucha. Surový produkt sa rozpustí v horúcej vode (60 ml) a vodná fáza sa premyje etylacetátom (3 x 50 ml) . Produkt sa z vodnej fázy vyzráža opatrným pridaním 2N vodnej kyseliny chlorovodíkovej (6 ml, 2N roztok). Suspenzia sa prefiltruje a surový produkt sa opäť rozmieša v horúcom etylacetáte (50 ml) . Ochladená suspenzia sa prefiltruje, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (1,10 g). Molekulový pík M⁺ 280, teplota topenia > 300° C.

D. 6-(4-Karboxyfenyl)-8-bróm-l,7-naftyridín

K roztoku 6-(4-karboxyfenyl)-8-metoxy-l,7-naftyridínu (250 mg, 0,892 mmol) v dimetylformamide (10 ml) sa pridá bromid fosforitý (0,63 ml, 6,63 mmol). Reakčná zmes sa zohrieva na teplotu 100° C počas 30 minút. Potom sa suspenzia vyleje do vody (50 ml) a roztok sa premyje etylacetátom (2 x 50 ml) . Organické rozpúšťadlo sa odstráni a surový produkt sa rozmieša v éteri. Suspenzia sa prefiltruje, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve' (215 mg). Teplota topenia 248 - 250° C, rozklad.

E. Kyselina 4-benzo[c]furazanylboritá

K roztoku 4-benzo[c]furazanylbromidu (4 g, 0,020 mol) v (20 ml) sa pridá tritetraetyléndiamín (3 ml, C prikvapká 2,5N roztok a roztok sa mieša počas tetrahydrofuráne (80 ml) a n-pentáne etylborát (3,8 ml, 0,022 mol) a N,N,N,N-t 0,02 mol). Potom sa pri teplote - 100° butyllítia v hexáne (8,8 ml, 0,022 mol) ďalších 5 minút. Reakčná zmes sa vyleje do nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom. Organické rozpúšťadlo sa odstráni a surový produkt sa prevedie do zmesi dichlórmetán/n-hexán (5 : 6) . Suspenzia sa prefiltruje, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (1,05 g), ktorá sa použije bez ďalšieho čistenia.

F. 6-(4-Karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridín

K roztoku 6-(4-karboxyfenyl)-8-bróm-l,7-naftyridínu (100 mg, 0,304 mmol) v dimetylformamide (2,5 ml) sa pridá kyselina 4-benzo[c]furazanylboritá (60 mg, 0,36 mmol), bis(dibenzylidénacetón)paládium (7 mg, 0,0122 mmol), tri-o-tolylfosfín (7,4 mg, 0,024 mmol) a vodný uhličitan sodný (0,9 ml, 2N roztok). Reakčná zmes sa mieša počas 2 hodín pri teplote 80° C. Horúci roztok sa prefiltruje cez kremelinu a filtrát sa odparí dosucha. Zvyšok sa rozmieša v etylacetáte (20 ml), suspenzia sa prefiltruje a organické rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí v horúcom dimetylformamide (7 ml) a surový produkt sa vyzráža opatrným pridaním vodnej kyseliny chlorovodíkovej (1 ml, 2N roztok). Surový produkt sa prekryštalizuj e z horúceho dimetylformamidu, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (68 mg). Molekulový pík MH⁺ 369, teplota topenia 300° C, retenčný čas HPLC = 10,40 min (kolóna: LiChroCart 125-4, Supersphere 60 RP-Select B, 40° C; eluent: acetonitril/voda (0,1 % TFA) = 45 : 55; 1 ml/min; detekcia pri 254 nm).

Opakovaním postupov uvedených v príslušných príkladoch a použitím príslušných východiskových látok sa získajú zlúčeniny vzorca I uvedené v nasledovnej tabuľke 1.

Tabulka 1

Pr. č	R¹	R²	tepl. topenia °C
15	Q Cl		-nh₂	141-143
16	Q CN		zz	173-176
17	02,	tt
18	_CH2£J		95-98
19	tt	αΌ 1	60

Pr. č	R¹	R²	tepl. topenia °C
20	tr	F 1 /F TY cŕ ^F	92-95
21	Q Cl		tt	94-96
22	c CN		tr	102-104
23		\ 0	tr	95-98
24		rr	155-158
25	_CH2^	7)
26	tr	H 1 H
27	tr	—C=C-H

Pr. č	R¹	R²	tepl. topenia °C
28	Q Cl	r	' OH	265-267
29	-M no₂	rt	260 rozkl.
30	Q Cl		T2h ^===7 nh₂	234-236
31	no₂	tr	295 rozkl.
32	v Cl		och₃	225-227
33	no₂	rr	214-216

Bázické adičné soli zlúčenín, ktoré majú voľné karboxylové skupiny, napríklad zlúčeniny opísané v príkladoch, sa dajú pripraviť reakciou zlúčeniny s príslušným aminosacharidom, napríklad s N-metyl-D-glukamínom. Príprava takýchto bázických adičných solí sa opisuje v nasledovných príkladoch.

Príklad 34

6-(Karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridin: sol s N-metyl-D-glukamínom

K horúcemu roztoku 6-(karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl ) -1 , 7-naftyridínu (1 g, 2,72 mmol) (100 ml) sa pridá N-metyl-D-glukamín v dimetylformamide (0,53 g, 2,72 mmol) tlaku a zvyšok sa

Rozpúšťadlo sa prekryštáližuje čistý produkt Retenčný čas odstráni pri zníženom z horúceho metanolu (asi 50 ml) , čím sa získa (1,11 g). Teplota topenia 230° C, rozklad. HPLC = 6,65 min (kolóna: LiChroCart 125-4,

Supersphere 60 RP-Select B, 50°; eluent: gradient od 0 % B/100 % A do 70 % B/30 % A počas 15 minút; A: 2,7 g KHPO₄/0,027 g Na2HPO₄ v 900 ml vody a 100 ml acetonitrilu a B: 100 ml vody a 900 ml acetonitrilu; detekcia pri 220 nm) . Produkt je rozpustný vo vode.

8-Aryl-l,7-naftyridíny podlá predkladaného vynálezu, napríklad vzorca I, a najmä výhodné 6-(karboxy- alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]furazanyl) -1, 7-naftyridíny a ich estery alebo amidy volné alebo vo forme soli (tu uvádzané ako činidlá podlá predkladaného vynálezu) sa vyznačujú farmakologickou aktivitou a sú užitočné ako liečivá, napríklad na liečenie chorôb uvedených ďalej.

Činidlá podľa predkladaného vynálezu sa vyznačujú najmä inhibičnou aktivitou voči cyklickej nukleotidovej fosfodiesteráze (PDE) a to selektívne pre izoenzým typu 4.

Činidlá podľa predkladaného vynálezu majú protizápalové a bronchodilatačné účinky a pôsobia proti hyperaktivite dýchacích ciest. Ďalej majú imunosupresívne účinky, inhibujú sekréciu TNF-α a sú aj inak farmakologicky aktívne, čo sa dá dokázať štandardnými testovacími metódami, napríklad nasledovnými:

A. Inhibícia PDE4: testovanie inhibície rekombinovaných izoenzýmov PDE4A, PDE4B, PDE4C a PDE4D

Klonovanie a expresia: PDE4 cDNA kódujúca štyri izoenzýmy, ľudský PDE4A (opísaný Sullivanom a ďalšími, Celí Signál 6, 793-812 (1994)), potkaní PDE4B (opísaný Colicellim a ďalšími,

Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, 35SS-3S03 (1989)), iudský PDE4C (opísaný Engelsom a ďalšími, FEBS Lett. 358, 305-310 (1995)) a ľudský PDE4D (opísaný Baeckerom a ďalšími, Gene 138, 253-256 (1994)) sa klonuje buď do extrachromozomálneho kvasinkového expresného vektora (PDE4C, PDE4D) alebo integruje (PDE4A, PDE4B; jednoduchá kópia) v pep4 mieste kmeňa Saccharomyces cerevisiae chýbajúcom v oboch typoch PDE génov prírodného typu kvasiniek. Kmene kvasiniek s expresiou PDE4 izoenzýmov sa kultivujú vil kultúry pri teplote 30° C, sedimentujú sa a zmrazia do homogenizácie.

Homogenizácia: Sedimentované kvasinky (5 ml) sa suspendujú v 50 ml pufra (10 mM trishydroxymetylaminometánu, 1 mM kyseliny etyléndiamíntetraoctovej, 1 mg/ml ieupeptínu a pepstatínu A, 175 mg/ml fenylmetylsulfonylfluoridu, 1 mM ditiotreitolu, pH 7,4 s HCl) . Po odstredení sa k sedimentom pridá 15 g sklenených guľôčok premytých pufrom (425-600 mm, premyté kyselinou, Sigma Chemical Co.). K tejto kaši sa pridá 1 ml pufra a 60 mg kyseliny cholamidopropánsulfónovej a kaša sa intenzívne mieša počas 4 hodín pri teplote 4° C. Bunky kvasiniek sa rozmelía, čo sa pod mikroskopom (fázovo kontrastná optika) pozoruje ako tmavé bunky > 30 % (zvyčajne 50 %) . Kaša sa prevedie do skleneného lievika a homogénny podiel sa oddelí odsatím a premytím sklenených guľôčok celkove 15 ml pufra. Fragmenty buniek sa od roztoku oddelia odstredením (2000 x g, 10 minút, teplota 4° C) . Sedimenty sa suspendujú v 15 ml pufra a testujú sa na PDE aktivitu spolu s roztokom.

Izoenzýmové prostriedky sa inak odvodia z ľudských zdrojov. Prostriedky typu 3 a 4 sa získajú využitím predominancie izoenzýmov typu 3 v krvných doštičkách a prostriedky izoenzýmu 4 v neutrofiloch použitím nasledovnej techniky.

Bunky a tkanivá sa homogenizujú na ľade v Tris-HCl 10 mM pH 7,4 obsahujúcom sacharózu (250 mM) , EDTA (1 mM) , ditiotreitol (1 mM) , leupeptín a pepsatín A (každého 1 pg/ml) a fenylmetylsulfonylfluorid (PMSF, 0,17 mg/ml, pridá sa tesne pred homogenizáciou) . Neutrofily (typ 4) a krvné doštičky (typ 2 a 3) sa získajú z ľudskej krvi a podrobia sa pôsobeniu ultrazvuku (Bransonova sonda, 4 x 15 sekúnd). Ľudské pľúcne tkanivo sa získa od pacientov (typy 1 a 5) , ktorí sa podrobili operácii a homogenizuje sa použitím polytrónového homogenizátora (dva impulzy po 30 sekundách) .

Izoenzýmové prostriedky: PDE 3 a 4 (substrátová cAMP 1 μΜ) prostriedky pozostávajú z roztoku vzniknutého pomalým odstredením krvných doštičiek respektíve z roztoku z homogenizácie neutrofilu. Typy 1 (substrátová cAMP 100 μΜ, Ca²⁺ 0,5 mM, calmodulín 125 nM) , 2 (cAMP 100 μΜ) a 5 (cGMP 1 μΜ) sa oddelia, iónovo výmennou chromatografiou (Q-sefaróza) použitím gradientu NaCl v homogenizačnom pufri bez sacharózy a PMSF (0 až 0,1 M NaCl v 2,5 objemoch kolóny, 0,1 až 0,45 M v 24 objemoch kolóny). PDE 1: frakcie, kde sa dá stimulovať hydrolýza 1 μΜ cAMP pomocou Ca²⁺ + calmodulín (0,5 mM respektíve 125 nM) ; elúcia 0,17 až 0,18 M NaCl. PDE 2: frakcie vyznačujúce sa značnou cAMP hydrolytíckou aktivitou pri 100 μΜ ale nie pri 1 μΜ; elúcia 0,31 až 0,32 M NaCl. PDE 5: frakcie selektívne hydrolyzujúce cGMP 1 μΜ pri cAMP 1 μΜ; elúcia 0,20 až 0,24 M roztokom NaCl.

Testovanie PDE: Testovací postup je založený na dvoj krokovej metóde opísanej Thompsonom a ďalšími (Adv. Second Messenger Phosphoprotein Res. 10, 69-92 (1979)) modifikovanej na

96-jamkovú mikrotitračnú dosku. Enzým sa zriedi homogenizačným pufrom (pozri časť Homogenizácia) s cieľom dosiahnuť 10 % až % hydrolýzu celkového množstva substrátu počas testu. Na zahájenie reakcie sa k 25 ml substrátu ([³H]-cAMP, 1,25 mM, 740 Bq) a 75 ml roztoku inhibítora (pozri časť Inhibítory) pridá 25 ml zriedeného enzýmu. Po 30 minútach pri teplote 37° C sa reakcia zastaví v kúpeli s horúcou vodou (teplota 65° C, minút). Dosky sa ochladia na ľade a inkubujú sa počas 10 minút pri teplote 37° C s 25 ml roztoku 5'-nukleotidázy (hadí jed Oiofaghus hannah, Sigma Chemical Co., 0,1 mg/ml vo vode). Nezreagovaný substrát sa oddelí od [³H]-adenozínu postupným pridaním alikvotov (100 + 50 + 50 ml v 5 minútových intervaloch) 30 % (objemovo) Dowexu 1x2 ako kaše (acetátová forma) v 0,2 % (objemovo) kyseline octovej . Dowex sa zbalí odstredením (150 x g, 5 minút) . Alikvoty roztoku sa prevedú na 96-jamkovú scintilačnú dosku pre tuhú fázu (LumaPlate, Canberra Packard) použitím automatického pipetovacieho zariadenia (Hamilton MicroLab 2200),· vysušia sa (aspoň počas 4 hodín pri teplote 50° C) a zmerajú sa (Canberra Packard TopCount).

Inhibítory: Zásobné roztoky inhibítorov sa pripravia v dimetylsulfoxide (DMSO) a zriedia sa zmesou voda/DMSO, čím sa získa sedem koncentrácií v rozsahu inhibície 30 % až 70 %. Počas testu sa koncentrácia DMSO udržiava konštantné na 50 ml/ml.

Stanovenie inhibičných parametrov: Koncentrácia, pri ktorej sa dosiahne polovica maximálnej inhibície (IC₅₀) , a strmosť krivky závislosti od dávky (Hillov koeficient) sa stanovia z krivky koncentrácia-inhibícia pomocou nelineárnej metódy najmenších štvorcov, čím sa získa rovnica s dvoma parametrami. Výsledky sa vyjadria ako záporný dekadický logaritmus koncentrácie inhibítora, pri ktorej sa dosiahne polovica maximálnej inhibície (IC₅₀v mol/1; pIC₅o) . Potom sa odhadne interval 95 % spoľahlivosti a vyjadrí sa ako pL a pU (záporný dekadický logaritmus horného a dolného limitu spoľahlivosti). Z analýzy sa vylúčia koncentrácie, ktoré spôsobia viditeľnú tvorbu zrazeniny.

V tejto testovacej metóde inhibujú činidlá podľa predkladaného vynálezu PDE izoenzýmy typu 4, ktoré majú pomerne malý vplyv v porovnaní s typmi 1, 2, 3 a 7. V rámci skupiny izoenzýmov PDE typu 4 (t. j. PDE typy 4A až D) sa činidlá podlá predkladaného vynálezu vo všeobecnosti vyznačujú v porovnaní s PDE typu 4A, 4B a 4C selektívnou inhibíciou izoenzýmu PDE typu 4D.

Protizápalové účinky: Inhibícia eozinofilnej aktivácie pomocou formyl-MetLeuFe (fML?)

Čistené ludské eozinofily (104/jamku v 0,2 ml HBSS) sa stimulujú pomocou fMLP (1 μΜ) v prítomnosti lucigenínu (25 μΜ). Inhibícia stupňa oxidácie (meria sa ako zmena chemiluminiscencie) sa stanoví z krivky odpovedi dávky, pričom sa použije logistická rovnica.

Činidlá podľa predkladaného vynálezu sú aktívne v uvedenej testovacej metóde pri koncentráciách rádovo 0,001 až 5 μΜ, vo všeobecnosti v 'nízkom nM rozsahu. Zlúčenina z príkladu 2 má napríklad hodnotu IC50 v tomto teste 0,006 μΜ.

S ohľadom na ich protizápalové účinky, ich vplyv na hyperaktivitu dýchacích ciest a ich profil v súvislosti s inhibíciou PDE izoenzýmov, najmä ako selektívnych inhibítorov, typu 4, sú činidlá podľa predkladaného vynálezu užitočné na liečenie (najmä profylaktické) obštruktívnych alebo zápalových chorôb dýchacích ciest. Pri kontinuálnom a pravidelnom podávaní počas dlhšej doby sú činidlá podľa predkladaného vynálezu užitočné ako spôsob zlepšenej ochrany proti opakovaniu stiahnutia bronchozvieračov alebo iných symptomatických atakov súvisiacich s obštruktívnymi alebo zápalovými ochoreniami dýchacích ciest, alebo na zvládanie, zlepšenie alebo vyliečenie bazálneho stavu takýchto chorôb.

S ohľadom na ich bronchodilatačné účinky sú činidlá podlá predkladaného vynálezu užitočné ako bronchodilatačné látky, napríklad pri liečení chronického alebo akútneho stiahnutia priedušiek napríklad pri symptomatickom liečení obštruktívnych alebo zápalových chorôb dýchacích ciest.

Výraz „liečenie v opise a' v nárokoch použitý v súvislosti s obštruktívnymi alebo zápalovými chorobami dýchacích ciest sa rozumie tak pre profylaktický ako aj symptomatický spôsob liečby.

V súlade s uvedeným predkladaný vynález ďalej poskytuje:

A. spôsob

a) liečenia hyperaktivity dýchacích ciest,

b) bronchodilatácie, alebo najmä

c) liečenia obštruktívnych alebo zápalových chorôb dýchacích ciest, v prípade pacientov, ktorí takéto liečenie potrebujú, a tento spôsob pozostáva z podávania účinného množstva činidla podlá predkladaného vynálezu uvedenému pacientovi.

Obštruktívne alebo zápalové choroby dýchacích ciest, ku ktorým sa vynález vzťahuje, zahŕňajú astmu, pneumokoniózu, chronické obštruktívne choroby dýchacích ciest alebo plúc (COAD alebo COPD) a syndróm dýchacieho stresu dospelých (ARDS), a ďalej dráždenie hyperreaktivity dýchacích ciest v súvislosti s inými liekmi, napríklad aspirínom alebo β-antagonistami.

Predkladaný vynález sa dá použiť pri liečení astmy všetkých typov a štádií vrátane vnútornej a najmä vonkajšej astmy. Ďalej sa dá použiť na liečenie alergickej (atopickej IgE) astmy a na liečenie nonatopickej astmy vrátane napríklad bronchitickej astmy, cvičením indukovanej astmy a astmy z povolania, astmy indukovanej po bakteriálnej infekcii a ďalších nealergických typov astmy. Ďalej je použitelný na liečenie syndrómu sípavých detí (začínajúca astma u detí).

Vynález je použitelný na liečenie pneumokinózy všetkých typov a štádií, vrátane napríklad aluminózy, antrakózy, azbestózy, chalikózy, ptilózy, siderózy, silikózy, tobakózy a byssinózy.

Vynález je použiteľný na liečenie COPD alebo COAD, vrátane chronickej bronchitídy, pľúcneho emfyzému alebo spojeného dyspnea.

Vynález je použiteľný aj na liečenie bronchitídy všetkých typov a štádií, napríklad akútnej, arachidickej, katarovej, chronickej, záškrtovej tuberkulózovej bronchitídy a pod..

S ohľadom na ich aktivitu ako selektívnych inhibítorov uvoľňovania TNF-α sú činidlá podľa predkladaného vynálezu užitočné aj na zníženie alebo inhibíciu uvoľňovania TNF-a, napríklad na liečenie chorôb, kedy je implikované uvoľňovanie TNF-α alebo zohráva sprostredkujúcu úlohu napríklad pri chorobách, ktoré majú etiológiu zahŕňajúcu alebo obsahujúcu alebo neriadené kachexie alebo chorobné, napríklad nežiaduce, nadmerné uvoľňovanie TNF-α, najmä na liečenie endotoxínového šoku a pri liečení AIDS (porovnaj Sharief a ďalší, Mediators of Inflammation 1, 323-338 (1992)).

Spôsob podľa predkladaného vynálezu sa dá použiť na liečenie kachexie spojenej s chorobným uvolňovaním TNF-a alebo hladinou TNF-a v krvnom sére akéhokolvek pôvodu vrátane kachexie následkom napríklad bakteriálnej, vírusovej alebo parazitickej infekcie alebo na zbavenie alebo následkom zhoršenia alebo zničenia humorálnej alebo inej organickej, napríklad renálnej, funkcie. Napríklad je použiteľný pri liečení rakovinovej, maláriovej a vermálnej kachexie, kachexie spôsobenej dysfunkciou hypofýzy, štítnej žľazy alebo týmusu a uremickej kachexie. Najmä je spôsob podľa predkladaného vynálezu použiteľný na liečenie kachexie spojenej s AIDS, t.j. kachexie následkom alebo spojenej s HIV infekciou.

Spôsob podľa predkladaného vynálezu sa môže taktiež použiť na liečenie septického šoku, napríklad šoku následkom bakteriálnej infekcie. V tomto ohlade je treba poznamenať, že predkladaný vynález poskytuje spôsob liečenia septického šoku aj stavu po šeku alebo symptómov septického šoku napríklad ARDS (syndróm ýchacieho stresu dospelých).

Spôsob podlá predkladaného vynálezu je ďalej použiteľný na lešenie chorôb následkom HIV infekcie, napríklad AIDS, apríklad na zlepšenie alebo zvládnutie postupu takejto choroby.

S ohľadom na ich profil vo vzťahu k inhibícii uvoľňovania “Xľ-a a/alebo PDE izoenzýmov a na ich imunosupresívnu aktivitu, =ú činidlá podlá predkladaného vynálezu užitočné aj ako imunosupresívne činidlá, napríklad na liečenie autoimúnnych chorôb, nejmä na liečenie autoimúnnych chorôb s implikáciou zápalových procesov alebo zápalovej časti alebo etiológie, alebo ako or otizápalové činidlá na liečenie zápalových chorôb s implikáciou autoimúnnej reakcie alebo s podielom autoimúnnej zložky alebo etiológie.

Príklady takýchto chorôb, na ktoré sa dajú použiť činidlá cedia predkladaného vynálezu, zahŕňajú autoimúnne hematologické poruchy (napríklad hemolytická anémia, aplastická anémia, anémia červených krviniek a idiopatická trombocytopénia) a ďalšie, ako je systematická lupus erythematosus, polychondritída, skleroder-, ma, Wegenerova granuiomatóza, dermatomyozitída, chronická aktívna hepatitída, ťažká myasténia, Steven-Johnsonov syndróm, idiopatický maladsorpčný syndróm, autoimúnny zápal vnútorností (napríklad hnisavá lolitída a Crohnova choroba), endokrinná cftalmopatia, Graveova choroba, sarkoidóza, alveolitída, chronická hypersenzitívna pneumonitída, skleróza multiplex, primárna žlčová cirhóza, mladícka cukrovka (diabetes mellitus -ypj , uveitída (anteriórna a posteriórna), suchá keratokonjunkrivitída a jarná keratokonjunktivitída, intersticiálna fibróza plúc, psoriatická artritída a glomerulonefritída (vrátane r.eírotického syndrómu alebo nefropatie minimálnej zmeny) , zápalové a/alebo hyperproliferatívne poruchy kože, ako je psoriatická atopická dermatitída, pľuzgier a najmä kontaktná dermatitída, napríklad alergická kontaktná dermatitída.

Činidlá podlá predkladaného vynálezu sú najmä užitočné na liečenie artritídy a ďalších reumatických alebo zápalových chorôb, najmä na liečenie reumatoidnej artritídy.

Ako imunosupresívne činidlá sú činidlá podľa predkladaného vynálezu ďalej indikované na použitie pri prevencii odmietnutia transplantátu, napríklad pri udržaní alogenického orgánového transplantátu a pod., napríklad obličiek, pečene, pľúc, srdca, vnútorností, kostnej drene, kože alebo rohovky.

S ohľadom na ich protizápalové účinky, najmä inhibíciu aktivácie eozinofilov, sú činidlá podľa predkladaného vynálezu užitočné aj pri liečení chorôb spojených s eozinofilmi, napríklad eozinofílie, najmä chorôb dýchacích ciest spojených s eozinofilmi (napríklad chorobná eozinofilná infiltrácia pľúcneho tkaniva) vrátane hypereozinofílie, ktorá ovplyvňuje dýchacie cesty a/alebo pľúca, ako napríklad s eozinofilmi spojené poruchy dýchacích ciest následkom alebo sprievodcom Lofflerovho syndrómu, eozinofilná pneumónia, parazitická (najmä metazoálna) infestácia (vrátane tropickej eozinofílie), bronchopulmonárna aspergilóza, polyarteritis nodosa (vrátane Churg-Straussovho syndrómu), eozinofilný granulóm a s eozinofilmi súvisiace choroby pôsobiace na dýchacie cesty s liekovou reakciou.

S ohľadom na ich profil vzhladom na inhibíciu PDE izoenzýmov, najmä ako selektívnych inhibítorov typu 4, sú činidlá podľa predkladaného vynálezu ďalej užitočné ako inhibítory PDE typu 4, napríklad na liečenie chorôb zahŕňajúcich tkanivové kalciové vyčerpanie, najmä degeneratívnych chorôb kostí a spojov zahŕňajúcich nedostatok vápnika, najmä osteoporózu. Z tohto hľadiska sú ďalej užitočné na liečenie alergických zápalových chorôb ako je rinitída, konjunktivitída, atopická dermatitída, žihlavka a gastrointestinálne alergie; a užitočné ako vazodilatátory, napríklad na liečenie angíny, hypertenzie, kongestívnych porúch srdca a multiinfarktovej demencie; a na liečenie ďalších stavov, kedy je indikovaná inhibícia PDE 4, napríklad depresie, poruchy kongitívnej funkcie, vrátane Alzheimerovej choroby, Parkinsonovej choroby a mŕtvice.

S ohľadom na ich schopnosti synergicky interagovať s imunosupresívami a/alebo protizápalovými liečivami sú činidlá podľa predkladaného vynálezu užitočné aj pri použití v spojení s týmito liečivami, napríklad ako potenciátory terapeutickej aktivity týchto liečiv alebo ako prostriedky zníženia nutnej dávky alebo obmedzenia vedlajších účinkov týchto liečiv.

dajú vhodne podávať činidlá podlá zahŕňajú napríklad cyklopeptidové, makrolidové imunosupresívne alebo protizápalové činidlá, napríklad liečivá patriace do skupiny cyklosporínov, napríklad cyklosporíny A alebo G, liekové formy takrolímu (známy aj ako FK 506), askomycín a rapamycín a ich rôzne známe deriváty a ďalej glukokortikosteroidové liečivá. Choroby, na ktoré sa dá použiť táto kombinovaná liečba, zahŕňajú napríklad všetky choroby a stavy vyžadujúce imunosupresívnu alebo protizápaľovú liekovú terapiu, napríklad tie, ktoré sa už uviedli.

Liečivá, s ktorými sa predkladaného vynálezu, cyklopeptolidové alebo

Činidlá podľa predkladaného vynálezu sú vhodné na kombinovanú liečbu, ako sa už uviedlo, a to napríklad na účely ímunosupresivnej, napríklad na cyklosporínu A, účinku.

protizápalovej dosiahnutie makrolidového alebo antiastmatickej liečby, cyklosporínového, napríklad alebo steroidového šetrného

V súlade s uvedenými skutočnosťami predkladaný vynález poskytuje aj:

B. spôsob

a) obmedzenia alebo inhibície uvoľňovania TNF-a,

b) inhibície aktivity izoenzýmu PDE 4,

c) ovplyvnenia imunosupresie,

d) liečenia zápalových chorôb, alebo

e) liečenia akýchkoľvek uvedených stavov alebo chorôb, v prípade pacientov, ktorí takéto liečenie potrebujú. Tento spôsob zahŕňa podávanie účinného množstva činidla podľa predkladaného vynálezu uvedenému pacientovi.

Predkladaný vynález poskytuje aj :

C. činidlo podlá predkladaného vynálezu na použitie ako liečivo, napríklad na použitie pri všetkých spôsoboch alebo pri liečení všetkých uvedených chorôb alebo stavov, napríklad ako sa uvádza v bodoch A alebo B.

Dávkovanie použité pri aplikácii činidla podľa predkladaného vynálezu sa samozrejme líši napríklad v závislosti od konkrétnej choroby alebo liečeného stavu, konkrétneho použitého činidla podľa predkladaného vynálezu, spôsobu podávania a požadovanej terapie. Vo všeobecnosti sa ale dostatočné výsledky, napríklad pri liečení uvedených chorôb, dosahujú orálnym podávaním dávok rádovo 0,01 až 2,0 mg/kg. V prípade väčších cicavcov, napríklad človeka, sa indikuje denná dávka na orálne podávanie v rozsahu 0,75 až 150 mg, výhodne podávaná jednorázovo alebo rozdelene dva- až štyrikrát denne alebo vo forme s riadením uvolňovaním. Jednotková dávka na orálne podávanie tak výhodne obsahuje 0,2 až 75 alebo 150, napríklad od 0,2 alebo 2,0 do 50, 75 alebo 100 mg činidla podľa predkladaného vynálezu spolu s farmaceutický vhodným riedidlom alebo nosičom.

Pri liečení chronických alebo obštruktívnych chorôb dýchacích ciest, napríklad astmy, sa dajú činidlá podľa predkladaného vynálezu podávať aj inhalačné. Použitá dávka sa opäť líši napríklad v závislosti od konkrétnej choroby, konkrétneho použitého činidla podľa predkladaného vynálezu, spôsobu podávania (napríklad suchý inhalačný prášok alebo inak) a požadovaného účinku. Vo všeobecnosti sa ale indikuje inhalačná denná dávka rádovo 2,5 až 130,0 μς^ς/άβή, napríklad 13,0 až

60,0 μg/kg/deň. V prípade väčších cicavcov, napríklad človeka, sa indikuje denná inhalačná dávka, napríklad pri liečení astmy, 0,2 až 10 mg, napríklad 1 až 5 mg, výhodne podaná naraz alebo v dvoch alebo troch.oddelených dávkach počas dňa. Vhodná dávka na podávanie je tak 200 μg až 3,3 mg, podávaná až v troch dávkach počas dňa, výhodne podávaná zo zariadenia na inhaláciu suchého prášku v sérii dvoch až ôsmich fúknutí pri každom podávaní.

Činidlá podlá predkladaného vynálezu sa dajú podávať aj akýmkoľvek iným vhodným spôsobom, napríklad infúziou,' napríklad pri liečení endotoxínového šoku; nazálne, napríklad pri liečení rinitídy; do očí, napríklad pri liečení autoimúnnych chorôb očí; dermálne, t.j. topicky kožou, napríklad pri liečení dermatóz alebo psoriáz; alebo rektálne, napríklad čapíkmi, napríklad pri liečení zápalov čriev, takomto podávaní je vo všeobecnosti 10 až 100-krát nižšia než pri orálnom podávaní.

klystírom alebo Vhodná dávka pri

Farmaceutické prostriedky obsahujúce činidlá podlá predkladaného vynálezu sa dajú pripraviť použitím konvenčných riedidiel alebo excipientov a techník známych v tejto oblasti. Formy na orálne podávanie tak zahŕňajú tablety, kapsule a pod. Prostriedky na kožné podávanie sú vo forme krémov, mastí, gélov alebo transdermálnych podávacích systémov, napríklad náplastí, a okrem inertných riedidiel alebo nosičov výhodne obsahujú činidlá uľahčujúce prenikanie do kože opäť v tejto oblasti známe.

Prostriedky na inhaláciu zahŕňajú aerosólové alebo iné rozprašovacie prostriedky ako aj inhalačné suché prášky s riedidlom alebo bez neho na podávanie akýmikoľvek vhodnými inhalačnými systémami na podávanie suchých práškov, ktoré sú v tejto oblasti známe. Pri príprave suchých inhalačných práškových foriem sa činidlá podľa predkladaného vynálezu používajú vo forme farmaceutický vhodnej kyslej adičnej soli. Uvedená sol sa vhodným spôsobom zomelie, napríklad použitím vzduchovej trysky alebo keramického mlynu, čím sa získa jemný vdychovatelný prášok, napríklad s priemerom častíc 2 až 3 μ. Aspoň 90 % materiálu má priemer častíc menší než 7,8 μ, výhodne menší než 4,8 μ. S cieľom získať produkt s vhodnými a rovnomernými časticami na podávanie ako suchý inhalačný prášok môže byť vhodné mletie aktívnej zložky, ktorá sa najskôr zmieša s vhodným vdychovatelným nosičom, napríklad laktózou, pri zníženej teplote.

V súlade s uvedenými skutočnosťami predkladaný vynález zahŕňa aj:

farmaceutický prostriedok obsahujúci činidlo podľa predkladaného vynálezu spolu s farmaceutický vhodným riedidlom alebo nosičom, napríklad na použitie akoukoľvek uvedenou metódou.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 8-Aryl-l,7-naftyridín alebo jeho N-oxid vo voľnej forme alebo vo forme soli.

2. 9 « Zlúčenina podľa nároku 1 všeobecného vzorca I X\/V^R2 [ 1 (I) R¹

kde

R¹ je fenylová skupina, benzylová skupina, 3-nitrofenylová skupina, 3-chlórfenylová skupina, 3-kyanofenylová skupina, 3-(tetrazolyl)fenylová skupina, benzofurazanylová skupina alebo benzotiofurazanylová skupina; R² je hydroxylové skupina, aminoskupina, trifluórmetánsulfony- loxy skupina, alylová skupina, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, alkoxyskupina, arylová skupina, arylalkylová skupina, aryloxyskupina, aminoskupina, arylaminoskupina, diarylaminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina, alkylarylová skupina, arylamidoskupina alebo alkylamidoskupina;

a ich estery a amidy;

vo voľnej forme alebo vo forme farmaceutický prijatelných solí.

3. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je 6-(karboxyfenyl alebo karboxymetylfenyl)-8-(fenyl, benzo[c]tiadiazolyl alebo benzo[c]-furazanyl)-1,7-naftyridín alebo jej ester alebo amid vo voľnej forme alebo vo forme farmaceutický prijateľnej soli.

4. Zlúčenina podľa nároku 3 všeobecného vzorca II kde n je nula alebo jedna;

R³ je atóm vodíka a R⁴ je nitroskupina, atóm halogénu (napríklad atóm chlóru), kyanoskupina alebo tetrazolylová skupina (napríklad 1-tetrazolylová skupina), a

R⁵ a R⁶ spoločne tvoria ďalšiu väzbu; alebo

R³, R⁴, R⁵ a R⁶ sú spoločne skupina =N-O-N= alebo =N-S-N=; alebo jej ester alebo amid;

vo voľnej forme alebo vo forme farmaceutický prijateľnej soli.

5.

5. Zlúčenina podía nároku 1, ktorou je

• 6. Zlúčenina podľa ktoréhokolvek z nárokov 1 až 5 na použitie ako liečivo.

&

w

6-(4-karboxyfenyl)-8- (4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridín, N-metyl-D-glukamínová sol 6-(4-karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl) -1,7-naftyridínu, alebo zlúčenina všeobecného vzorca I, kde

R¹ je 3-chlórfenylová skupina a R² je aminoskupina,

R¹ je 3-kyanofenylová skupina a R² je aminoskupina,

R¹ je 4-(5-tetrazolyl)fenylová skupina a R² je aminoskupina,

R¹ je benzylová skupina a R² je fenylaminoskupina,

R¹ je benzylová skupina a R² je difenylaminoskupina,

R¹ je benzylová skupina a R² je trifluórmetánsulfonyloxyskupina,

R¹ je 3-chlórfenylová skupina a R² je trifluórmetánsulfonyloxyskupina,

R¹ je 3-kyanofenylová skupina a R² je trifluórmetánsulfonyioxyskupina,

R¹ je 4-benzo[c]furazanylová skupina a R² je trifluórmetánsulfonyloxyskupina,

R¹ je 4-(5-tetrazolyl)fenylová skupina a R² je trifluórmetánsulfonyloxyskupina,

R¹ je benzylová skupina a R² je fenylová skupina,

R¹ je benzylová skupina a R² je vinylová skupina,

R¹ je benzylová skupina a R² je etinylová skupina,

R¹ je 3-chlórfenylová skupina a R² je 4-karboxyfenylová skupina,

R¹ je 3-nitrofenylová skupina a R² je 4-karboxyfenylová skupina,

R¹ je 3-chlórfenylová skupina a R² je 4-aminokarbonylfenylová skupina,

R¹ je 3-nitrofenylová skupina a R² je 4-aminokarbonylfenylová skupina,

R¹ je 3-chlórfenylová skupina a R² je 4-metoxykarbonyifenylová skupina, alebo

R¹ je 3-nitrofenylová skupina a R² je 4-metoxykarbonylfenylová skupina.

6-(4-karbamoylfenyl)-8- (3-kyanofenyl)-1,7-naftyridín,

6-(4-karboxyfenyl)-8- (3-kyanofenyl)-1,7-naftyridín,

6-etinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín,

6-vinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín,

6-trifluórmetánsulfonyloxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín, 6-fenyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín,

6-fenylamino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín,

6-amino-8-benzyl-1,7-naftyridín,

6-metoxykarbonylmetoxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín, hydrochlorid 6-acetamido-8-(3-nitrofenyl) -1,7-naftyridínu,

6-hydroxy-8-(3-nitrofenyl)-1, 7-naftyridín,

6-amino-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridín,

6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridín,

7. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa

- tým, že obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokolvek z nárokov 1 až

8. Použitie zlúčeniny podlá ktoréhokolvek z nárokov 1 až 5 na prípravu liečiva na liečenie zápalov, najmä zápalových a obštrukčných ochorení dýchacích ciest, napríklad astmy.

9. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca II podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca VI skupina, so zlúčeninou všeobecného vzorca VII (VI)

X' (VII) kde R⁷ je definované v nároku 4 a X' je odstupujúca skupina, a tým získanie zlúčeniny všeobecného vzorca II vo volnej forme alebo vo forme soli.

10. Zlúčenina všeobecného vzorca V' (V') kde Q' je atóm halogénu alebo skupina -O-Alk, kde Alk znamená alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 8 atómov uhlíka.

11. Zlúčenina všeobecného vzorca VI (VI) kde R³, R⁴, R⁵, R⁶ sú definované v nároku 4 a X je odstupujúca skupina.