SK283724B6 - Inhibítory adhézie buniek, farmaceutická kompozícia, ktorá ich obsahuje, a ich použitie - Google Patents

Inhibítory adhézie buniek, farmaceutická kompozícia, ktorá ich obsahuje, a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK283724B6
SK283724B6 SK987-97A SK98797A SK283724B6 SK 283724 B6 SK283724 B6 SK 283724B6 SK 98797 A SK98797 A SK 98797A SK 283724 B6 SK283724 B6 SK 283724B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
phenylmethyl
group
substituted
phenyl
amino
Prior art date
Application number
SK987-97A
Other languages
English (en)
Other versions
SK98797A3 (en
Inventor
Steven P. Adams
Ko-Chung Lin
Wen-Cherng Lee
Alfredo C. Castro
Craig N. Zimmerman
Charles E. Hammond
Yu-Sheng Liao
Julio Hernan Cuervo
Juswinder Singh
Original Assignee
Biogen, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biogen, Inc. filed Critical Biogen, Inc.
Publication of SK98797A3 publication Critical patent/SK98797A3/sk
Publication of SK283724B6 publication Critical patent/SK283724B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/19—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms containing cyano groups and carboxyl groups, other than cyano groups, bound to the same saturated acyclic carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/28—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/28—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C275/38—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton being further substituted by doubly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/28—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C275/42—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/46—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. acylureas
    • C07C275/48—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C07C275/54—Y being a carbon atom of a six-membered aromatic ring, e.g. benzoylureas
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C311/03—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C311/06—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to acyclic carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/21—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/44—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/48—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C317/50—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups at least one of the nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/55—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
    • C07D277/48—Acylated amino or imino radicals by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbonylguanidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/60—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Opisujú sa zlúčeniny, ktoré sú vhodné na inhibíciu a prevenciu adhézie buniek a patologických stavov, sprostredkovaných touto adhéziou, farmaceutické prípravky obsahujúce tieto zlúčeniny a metódy ich použitia na inhibíciu a prevenciu adhézie buniek a patologických stavov, sprostredkovaných touto adhéziou. Uvedené zlúčeniny a farmaceutické prípravky sú vhodné na liečbu zápalových a autoimunitných ochorení. ŕ

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka nových zlúčenín na inhibíciu a prevenciu adhézie buniek a patologických stavov sprostredkovaných touto adhéziou. Vynález sa taktiež týka farmaceutických prípravkov obsahujúcich tieto látky a metód ich použitia na inhibíciu a prevenciu adhézie buniek a patologických stavov sprostredkovaných touto adhéziou. Zlúčeniny a farmaceutické prípravky podľa tohto vynálezu sa môžu použiť na terapiu alebo na profylaxiu. Obzvlášť vhodné sú na liečenie mnohých zápalových a autoimunitných ochorení.
Doterajší stav techniky
Adhézia buniek je proces, pri ktorom sa bunky navzájom spájajú, migrujú k špecifickému cieľu alebo sa lokalizujú v extracelulámej hmote. Sama osebe je adhézia buniek jedným zo základných mechanizmov spojených s mnohými biologickými javmi. Ako príklad možno uviesť adhéziu hematopoietických buniek na endoteliálne bunky a následnú migráciu týchto hematopoietických buniek z ciev k miestu zranenia. Adhézia buniek má svoju rolu pri patologických stavoch ako sú zápaly a imunitné reakcie pri cicavcoch.
Výskumom adhézie buniek na molekulárnej úrovni sa zistilo, že rôzne makromolekuly bunkového povrchu, súhrnne známe ako molekuly alebo receptory bunkovej adhézie, sprostredkujú interakcie bunka-bunka a bunka-bunková hmota. Napríklad proteíny supcrrodiny nazývané „integríny“ sú kľúčovými mediátormi pri adhezívnych interakciách medzi hematopoietickými bunkami a ich mikrookolím (M. E. Hemler, „VLA Proteins in the Integrin Family: Structures, Functions, and Their Role on Leukocytes“, Ann. Rev. Immunol. 8, 365 (1990)). Integríny sú nekovalentnc hetcrodimérne komplexy pozostávajúce z dvoch podjednotiek, nazvaných a a β. Existuje najmenej 12 rôznych a-podjednotiek (al-a6, a-L, a-M, a-X, a-IIB, a-V a a-E) a aspoň 9 rôznych podjednotiek β (β1-β9). Každá molekula integrínu je kategorizovaná do podrodín podľa typu jeho a a β podjednotiek.
Integrin α4β1, známy aj ako veľmi neskorý antigén-4 („VLA-4“), CD49d/CD29, je povrchový receptor leukocytových buniek, ktorý’ participuje pri mnohých adhezívnych interakciách bunka-bunka a bunka-bunková hmota (M. E. Hemler, „Ann. Rev. Immunol. 8, 365 (1990)). Slúži ako receptor pre cytokínom indukovateľný proteín na povrchu endoteliálnych buniek, „vascular celí adhesion molecule-l“ („VCAM-l“), práve tak ako pre proteín extracelulárnej bunkovej štruktúry fibronektín („FN“) (Ruegg a spol., J. Celí. Biol. 177, 179 (1991); E. A. Wayner a spol., J. Celí Biol. 105, 1873 (1987); Kramer a spol., J. Biol. Chem. 264, 4684 (1989); Gehlsen a spol., Science 24, 1228 (1988)). Zistilo sa, že anti-VLA-4 monoklonálne protilátky („mAb“) inhibujú VLA-4-dependentné adhezívne interakcie in vitro aj in vivo (T. A. Ferguson a spol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 8072-76 (1991); T. A. Ferguson a spol., J. Immunol. 150, 1172 (1993)). Výsledky pokusov in vivo naznačujú, že táto inhibícia VLA-4-dependentnej bunkovej adhézie môže predchádzať niektorým zápalovým a autoimunitným patologickým stavom alebo ich inhibovať (R. L. Lobb a spol., „The Pathophysiologic Role of a-4 Integrins in Vivo“, J. Clin. Invest. 94, 1722-28 (1994)).
Aby sa zistila minimálna aktívna aminokyselinová sekvencia, potrebná na väzbu VLA-4, Komoriya a spolupracovníci („The Minima! Essential Sequence for a Major Celí Typc-Specific Adhesion Site (CSI) within the Alternatively Sliced Type III Connecting Segment Domain of Fibronectin Is Leucine-Aspartic Acid-Valine“, J. Biol.
Chem. 266(23), 15075-79 (1991)) syntetizovali množstvo rôznych prekrývajúcich sa peptidov na báze aminokyselinovej sekvencie v CSI oblasti (VLA-4 väzbová doména) určitého druhu fibronektínu. Identifikovali oktapeptid Glu-Ile-Leu-Asp-Val-Pro-Ser-Thr (SEQ ID No. 1) a dva kratšie prekrývajúce sa pentapeptidy Glu-Ile-Leu-Asp-Val (SEQ ID No. 2) a Leu-Asp-Val-Pro-Ser (SEQ ID No. 3), ktoré sa vyznačovali inhibičnou aktivitou proti FN-dependentnej adhézii buniek. Podľa týchto výsledkov by tripeptid Leu-Asp-Val ma) byť minimálnou sekvenciou aktívnou pre adhéziu buniek. Neskôr sa však ukázalo, že Leu-Asp-Val sa viaže iba na lymfocyty, exprimujúce aktivovanú formu VLA-4, čím bola spochybnená užitočnosť takéhoto peptidu in vivo (E. A. Wayner a spol., „ActivationDependent Recognition by Hematopoietic Celíš of the LDV Sequence in the V Región of Fibronectin“, J. Celí. Biol. 116(2), 489-497 (1992)). Neskôr sa však zistilo, že niektoré väčšie peptidy s LDV sekvenciou sú aktívne in vivo (T. A. Ferguson a spol., „Two Integrin Binding Peptides Abrogate T-Cell-Mediated Immune Responses In Vivo“, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 8072-76 (1991); S. M. Wahl a spol., „Synthetic Fibronectin Peptides Suppress Arthritis in Rats by Interrupting Leukocyte Adhesion and Recruitment“, J. Clin. Invest. 94, 655-62 (1994)).
Taktiež je opísaný cyklický pentapeptid
Arg-Cys-Asp—Tpro-Cys (kde Tpro značí 4-tioprolín), ktorý môže inhibovať adhéziu VLA-4 i VLA-5 k FN (D. M. Nowlin a spol., „A Novel Cyclic Pentapeptide Inhibits α4β1 and a51 Integrin-Mediated Celí Adhesion“, L Biol. Chem. 268 (27), 20352-59 (1993) a PCT publikácia PCT/US91/04862). Tento peptid je založený na tripeptidovej sekvencii Arg-Gly-Asp z FN, známej ako všeobecná sekvencia, ktorá je súčasťou väzbového miesta pre niektoré extraceluláme proteíny.
Napriek tomuto pokroku stále pretrváva potreba malých špecifických inhibítorov VLA-4-dcpcndentnej adhézie buniek. V ideálnom prípade by mali byť takéto inhibítory semipeptidickej alebo nepeptidickej povahy, aby sa dali aplikovať perorálne. Takéto látky by boli užitočné na liečenie, prevenciu alebo potlačenie rôznych patologických stavov sprostredkovaných adhéziou buniek a väzbou s VLA-4.
Podstata vynálezu
Tieto nové zlúčeniny, liečebné prípravky a metódy podľa vynálezu sú výhodne používané na liečenie zápalových a imunitných ochorení. Vynález taktiež zahŕňa metódy prípravy zlúčenín podľa vynálezu a medziprodukty použité pri týchto metódach.
Definície
Termín „alkyl“, použitý sám osebe alebo v kombinácii s iným slovom, v ďalšom znamená alkylový radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúci 1 až 10 atómov uhlíka, hlavne 1 až 6 atómov uhlíka a najlepšie 1 až 4 atómy uhlíka. Bez toho, aby sa obmedzil rozsah vynálezu, príkladom takýchto radikálov môžu byť metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, izoamylová skupina, hexylová skupina, decylová skupina a podobne.
Termín „alkenyl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená alkenylový radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúci 2 až 10 atómov uhlíka, hlavne 2 až 6 atómov uhlíka a najlepšie 2 až 4 atómy uhlíka. Bez toho, aby sa obmedzil rozsah vynálezu, príkladom takýchto ra dikálov môžu byť etenylová skupina, E- a Z-propcnylová skupina, izopropenylová skupina, E- a Z-butenylová skupina, E- a Z-izobutenylová skupina, E- a Z-pentenylová skupina, decenylová skupina a podobne.
Termín „alkinyl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená alkinylový radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúci 2 až 10 atómov uhlíka, hlavne 2 až 6 atómov uhlíka a najlepšie 2 až 4 atómy uhlíka. Bez toho aby sa obmedzil rozsah vynálezu, príkladom takýchto radikálov môžu byť etinylová (acetylénylová) skupina, propinylová skupina, propargylová skupina, butinylová skupina, hexinylová skupina, decinylová skupina a podobne.
Termín „cykloalkyl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená cyklický alkylový radikál obsahujúci 3 až 8 atómov uhlíka, hlavne 3 až 6 atómov uhlíka. Bez toho, aby sa obmedzil rozsah vynálezu, príkladom takýchto radikálov môžu byť cyklopropylová skupina, cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina a podobne.
Termín „cykloalkenyl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená cyklický uhlíkatý kruh obsahujúci 4 až 8 atómov uhlíka, hlavne 5 alebo 6 atómov uhlíka, a jednu alebo viac dvojitých väzieb. Bez toho, aby sa obmedzil rozsah vynálezu, príkladom takýchto radikálov môžu byť cyklopentenylová skupina, cyklohcxcnylová skupina, cyklopentadienylová skupina a podobne.
Termín „aryl“ znamená karbocyklickú aromatickú skupinu zo série fenylová skupina, naftylová skupina, indenylová skupina, indanylová skupina, azulenylová skupina, fluorenylová skupina alebo antracenylová skupina; alebo heterocyklickú aromatickú skupinu zo série furylová skupina, tienylová skupina, pyridylová skupina, pyrolylová skupina, oxazolylová skupina, tiazolylová skupina, imidazolylová skupina, pyrazolylová skupina, 2-pyrazolinylová skupina, pyrazolidinylová skupina, izoxazolylová skupina, izotiazolylová skupina, 1,2,3-oxadiazolylová skupina, 1,2,3-triazolylová skupina, 1,3,4-tiadiazolylová skupina, pyridazinylová skupina, pyrimidinylová skupina, pyrazinylová skupina, 1,3,5-triazinylová skupina, 1,3,5-tritianylová skupina, indolicinylová skupina, indolylová skupina, izoindolylová skupina, 3H-indolylová skupina, indolinylová skupina, benzo[b]furanylová skupina, 2,3-dihydrobenzofuranylová skupina, benzo[b]tiofenylová skupina, lH-indazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, benzotiazolylová skupina, purinylová skupina, 4H-chinolicinylová skupina, chinolylová skupina, izochinolylová skupina, cinolylová skupina, ftalazinylová skupina, chinazolinylová skupina, chinoxalinylová skupina, 1,8-naftyridinylová skupina, pteridinylová skupina, karbazolylová skupina, akridinylová skupina, fenazinylová skupina, fenotiazolinylová skupina a fenoxazinylová skupina.
„Arylové“ skupiny, definované v tejto prihláške, môžu nezávisle od seba obsahovať jeden až štyri substitucnty, ktoré sú nezávisle od seba zvolené zo skupiny obsahujúcej nasledujúce atómy alebo skupiny: atóm vodíka, atóm halogénu, hydroxylová skupina, amínová skupina, nitroskupina, trifluórmetylová skupina, trifluórmetoxylová skupina, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, kyanoskupina, karboxylová skupina, karboalkoxylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkenylová alebo alkinylová skupina, 1,2-dioxymetylénová skupina, 1,2-dioxyetylénová skupina, alkoxylová skupina, alkénoxylová skupina alebo alkínoxylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkoxylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkénoxylová skupina alebo alkínoxylová skupina, alkylamínová skupina, alkenylamínová skupina alebo alkinylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkenylamínová skupina alebo alkinylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná karbonyloxylová skupina, alkylkarbonyloxylová skupina, alifatická alebo aromatická acylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná acylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkylkarbonyloxylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná karbonylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná amínová skupina, Ar'-substituovaná oxyskupina, Ar'-substituovaná karbonylová skupina, alkylkarbonylaminoskupina, Ar'-skupinou substituovaná alkylkarbonylamínová skupina, alkoxykarbonylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkoxykarbonylaminoskupina, Ar'-skupinou substituovaná oxykarbonylamínová skupina, alkylsulfonylamínová skupina, mono- alebo bis-(Ar'-sulfonyljamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkylsulfonylamínová skupina, morfolinokarbonylamínová skupina, tiomorfolinokarbonylamínová skupina, N-alkylguanidínová skupina, N-Ar'-guanidínová skupina, N,N-(Ar',alkyl)guanidínová skupina, N,N-(Ar',Ar')guanidínová skupina, Ν,Ν-dialkylguanidínová skupina, Ν,Ν,Ν-trialkylguanidínová skupina, N-alkylureidová skupina, Ν,Ν-dialkylureidová skupina, N-Ar'-ureidová skupina, N,N-(Ar',alkyl)ureidová skupina a N,N-(Ar',Ar')-uTeidová skupina, acylkarbonylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná arylová skupina, aromatická alebo alifatická acylová skupina substituovaná aromatickou acylovou skupinou, Ar'-skupinou substituovaná heterocyklylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná cykloalkylová alebo cykloalkenylová skupina, heterocyklylalkoxylová skupina, N,N-(Ar',hydroxyl)ureidová skupina, Ar'-skupinou substituovaná cykloalkylová a cykloalkenylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná biarylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminokarbonylamínová skupina, Ar'-merkaptoskupinou substituovaná alkylová skupina, Ar'-aminoskupinou substituovaná arylová skupina, Ar'-oxyskupinou substituovaná alkylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminocykloalkylová a cykloalkenylová skupina, aralkylaminosulfonylová skupina, aralkoxyalkylová skupina, N-Ar'-skupinou substituovaná tioureidová skupina, N-aralkoxyureidová skupina, N-hydroxyureidová skupina, N-alkenylureidová skupina, N,N-(alkyl,hydroxyljureidová skupina, heterocyklylová skupina, tioaryloxylovou skupinou substituovaná arylová skupina, N,N-(aryl,alkyl)-substituovaná hydrazínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná sulfonylheterocyklylová skupina, aralkylovou skupinou substituovaná heterocyklylová skupina, cykloalkylovou alebo cykloalkenylovou skupinou substituovaná heterocyklylová skupina, arylová skupina s prikondenzovaným cykloalkylom, aryloxyskupinou substituovaná alkylová skupina, heterocyklylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná arylaminosulfonylová skupina, tioarylovou skupinou substituovaná tioxyskupina, Ar'-skupinou substituovaná alkenoylová skupina, alifatická alebo aromatická acylaminokarbonylová skupina, alifatickou alebo aromatickou acylskupinou substituovaná alkenylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminokarbonyloxylová skupina, arylová skupina substituovaná dvomi Ar'-skupinami, alifatickou alebo aromatickou acylskupinou substituovaná acylová skupina, heterocyklylkarbonylamínová skupina s benzénovým jadrom prikondenzovaným k heterocyklickému kruhu, Ar'-skupinou substituovaná hydrazínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminosulfonylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná alkylimínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná heterocyklylová skupina, acylaminoskupina substituovaná dvomi Ar'-skupinami, Ar'-skupinou substituovaná cykloalkeno ylamínová skupina, heterocyklylalkoxylová skupina, N,N-(Ar',hydroxy)ureidová skupina, heterocyklylkarbonylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminokarbonylheterocyklylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminokarbonylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná karbonylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná aminosulfonylamínová skupina, Ar'-skupinou substituovaná merkaptoalkylová skupina, Ar'-amínovou skupinou substituovaná biarylová skupina, aralkylaminoalkoxylová skupina, alkoxylová skupina substituovaná alkylovou a aryloxylovou skupinou, heterocykiylkarbonylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná sulfonylalkylová skupina, Ar'-aminoskupinou substituovaná karbocyklylová skupina, aralkylsulfonylová skupina, alkcnylová skupina substituovaná arylovou skupinou, heterocyklylalkylamínová skupina, heterocyklylalkylaminokarbonylová skupina, Ar'-skupinou substituovaná cykloalkylová skupina, tioaryloxyalkylová skupina, tioaryloxymerkaptoskupina, cykloalkylkarbonylalkylová skupina, amínová skupina substituovaná cykloalkylom, Ar'-skupinou substituovaná arylamínová skupina, aryloxykarbonylalkylová skupina, fosfordiamidylová kyselina alebo ester, aryloxydimetylsiloxylová skupina, 1,3-indándionylkarbonylalkylová skupina, 1,3-indándionylkarbonylová skupina, oxamidylová skupina, heterocyklylalkylidénylová skupina, formamidinylová skupina, benzalazinylová skupina, benzalhydrazínová skupina, arylsulfonylureidová skupina, benzilamínová skupina, 4-(N-2-karboxyalkyl-l-(l,3-benzodioxol-5-yl) amino-N-leucinylalkylamidyllaurylureidová skupina, ureidová skupina substituovaná Ar'-karbamoyloxylovou skupinou, alkylovou alebo aryloxylovou skupinou, kde ,,Ar'“ je karbocyklická alebo heterocyklická arylová skupina ako je definované, ktorá má jeden až tri substituenty zo skupiny obsahujúcej atóm vodíka, atóm halogénu, hydroxylovú skupinu, aminoskupinu, nitroskupinu, trifluórmetylovú skupinu, trifluórmetoxylovú skupinu, alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinilovú skupinu, 1,2-dioxymetylénovú skupinu, 1,2-dioxyetylénovú skupinu, alkoxylovú skupinu, alkénoxylovú skupinu, alkínoxylovú skupinu, alkylamínovú skupinu, alkenylamínovú skupinu alebo alkinylamínovú skupinu, alkylkarbonyloxyskupinu, alifatickú alebo aromatickú acylovú skupinu, alkylkarbonylamínovú skupinu, alkoxykarbonylamínovú skupinu, alkylsulfonylamínovú skupinu, N-alkylureidovú skupinu alebo N,N-dialkylureidovú skupinu.
Termín „alkoxy“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená alkyléterový radikál, pričom termín „alkyl“ je definovaný. Príklady vhodných alkyléterových radikálov zahŕňajú metoxylovú skupinu, etoxylovú skupinu, n-proproxylovú skupinu, izopropoxylovú skupinu, n-butoxylovú skupinu, izobutoxylovú skupinu, sek-butoxylovú skupinu, terc-butoxylovú skupinu a podobne, bez toho, aby tieto príklady obmedzovali rozsah vynálezu.
Termín „alkenyloxy“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkenyl-O, pričom termín „alkenyl“ jc definovaný, za predpokladu, že radikál nie je enoléter. Ako príklady vhodných alkénoxylových radikálov možno uviesť alyloxylovú skupinu, E- a Z-3-metyl-2-propénoxylovú skupinu a podobne, bez toho, aby tieto príklady obmedzovali rozsah vynálezu.
Termín „alkinyloxy“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkinyl-Ο-, pričom termín „alkinyl“ je definovaný, za predpokladu, že tento radikál nie je inoléter. Ako príklady alkinylnoxylových radikálov možno uviesť, bez toho, aby sa tým obmedzoval rozsah vynálezu, propargyloxylovú skupinu, 2-butinyloxylovú skupinu a iné.
Termín „tioalkoxy“ znamená radikál tioéteru vzorca alkyl-S-, pričom alkyl je definovaný.
Termín „alkylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená amínovú skupinu, substituovanú jednou alebo dvomi alkylovými skupinami (t. j. radikál vzorca alkyl-NH- alebo (alkyl^N-), pričom termín „alkyl“ je definovaný. Ako príklady vhodných alkylamínových radikálov možno uviesť metylamínovú skupinu, etylaminovú skupinu, propylamínovú skupinu, izopropylamínovú skupinu, terc-butylamínovú skupinu, Ν,Ν-dietylamínovú skupinu a iné, bez toho, aby sa tým obmedzoval rozsah vynálezu.
Termín „alkenylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkenyl-NH alebo (alkenylj^N-, pričom termín „alkenyl“ je definovaný, za predpokladu, že tento radikál nie je enamín. Ako príklad možno uviesť alylamínovú skupinu.
Termín „alkinylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkinyl-NH- alebo (alkiny 1) N-, pričom termín „alkinyl“ je definovaný, za predpokladu, že tento radikál nie je inamín. Ako príklad takejto alkinylamínovej skupiny možno uviesť propargylamínovú skupinu.
Termín „aryloxy“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca ary 1-0-, pričom termín „aryl“ je definovaný. Ako príklady možno uviesť fenoxylovú skupinu, naftoxylovú skupinu, pyridyloxylovú skupinu a podobne, bez toho, aby sa tým obmedzoval rozsah vynálezu.
Termín „biaryl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca aryl-aryl-, pričom termín aryl je definovaný.
Termín „tioaryl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca aryl-S-, pričom termín „aryl“ je definovaný. Ako príklad tioarylového radikálu možno uviesť tiofenylovú skupinu.
Termín „cykloalkyl s prikondenzovaným arylom“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená cykloalkylovú skupinu, ktorá má spoločné dva uhlíkové atómy s arylovou skupinou, pričom termíny „cykloalkyl“ a „aryl“ sú definované. Príkladom cykloalkylovej skupiny s prikondenzovaným arylom je cyklobutylová skupina s prikondenzovaným benzénovým jadrom.
Termín „alifatický acyl“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkyl-CO-, alkenyl-CO- a alkinyl-CO-, odvodený od alkánkarboxylovej, alkénkarboxylovej alebo alkínkarboxylovej kyseliny, pričom termíny „alkyl“, „alkenyl“ a „alkinyl“ sú definované. Ako príklad alifatických acylových radikálov možno uviesť acetylovú skupinu, propionylovú skupinu, butyrylovú skupinu, valerylovú skupinu, 4-metylvalerylovú skupinu, akryloylovú skupinu, krotylovú skupinu, propiolylovú skupinu, metylpropiolylovú skupinu a podobne, bez toho, aby sa tým obmedzoval rozsah vynálezu.
Termín „aromatický acyl“, samotný alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca aryl-CO-, pričom termín „aryl“ je definovaný. Ako príklad vhodných aromatických acylových radikálov možno uviesť benzoylovú skupinu, 4-halogénbenzoylovú skupinu, 4-karboxybenzoylovú skupinu, naftoylovú skupinu, pyridylkarbonylovú skupinu a podobne, bez toho, aby sa tým obmedzoval rozsah vynálezu.
Termíny „morfolinokarbonyl“ a „tiomorfolinokarbonyl“, samé osebe alebo v kombinácii s inými termínmi, znamenajú N-karbonylovaný morfoiínový a N-karbonylovaný tiomorfolínový radikál.
SK 283724 Β6
Termín „alkylkarbonylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkyl-CONH-, pričom termín „alkyl“ je definovaný.
Termín „alkoxykarbonylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkyl-OCONH-, pričom termín „alkyl“ je definovaný.
Termín „alkylsulfonylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkyl-SO;NH-, pričom termín „alkyl“ je definovaný.
Termín „arylsulfonylamino“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca aryl-SO2NH-, pričom termín „aryl“ je definovaný.
Termín „N-alkylureido“, sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca alkyl-NH-CO-NH-, pričom termín „alkyl“ je definovaný.
„Termín „N-arylureido“ sám osebe alebo v kombinácii, znamená radikál vzorca aryl-NH-CO-ΝΉ-, pričom termín „aryl“ je definovaný.
Termín „halogén“ znamená atóm fluóru, atóm chlóru, atóm brómu alebo atóm jódu.
Termín „heterocyklus“ (a zodpovedajúca radikálová forma „heterocyklyl“), pokiaľ nie je definovaný inak, znamená stabilný 3 až 7 členný monocyklický heterocyklický systém, ktorý je nenasýtený a ku ktorému eventuálne môže byť prikondenzovaný benzénový kruh. Každý heterocyklus pozostáva z jedného alebo viacerých uhlíkových atómov a z jedného až štyroch heteroatómov zo skupiny obsahujúcej atóm dusíka, atóm kyslíka a atóm síry. Termíny „heteroatómy dusíka a síry“ zahŕňajú akúkoľvek oxidačnú formu dusíka a síry a taktiež kvartemizovanú formu akéhokoľvek bázického dusíkového atómu. Navyše, ktorýkoľvek atóm dusíka v kruhu môže byť eventuálne substituovaný substituentom R4, ako je definované pre látky vzorca (I). Heterocyklus môže byť pripojený ktorýmkoľvek endocyklickým atómom uhlíka alebo heteroatómu, ak tým vznikne stabilná štruktúra. Vhodnými heterocyklami sú najmä 5 až 7 členné monocyklické heterocykly a 8 až 10 členné bicyklické heterocykly. Heterocykly môžu mať eventuálne oxosubstituent v polohách 1 až 3 na kruhu a môžu byť eventuálne nezávisle substituované jedným až štyrmi substituentmi zo skupiny opísaných „arylových“ substituentov.
„Termín „odstupujúca skupina“ znamená vo všeobecnosti skupinu, ktorá je ľahko vymeniteľná pôsobením nukleofilných skupín ako je amínová skupina, hydroxylová skupina alebo tiolová skupina. Takéto odstupujúce skupiny sú dobre známe a patria k nim karboxylátové skupiny, N-hydroxysukcínimidová skupina, N-hydroxybenzotriazolová skupina, atómy halogénov (halogenidy), triflátová skupina, tozylátová skupina, mezylátová skupina, alkoxylové skupiny, tioalkoxylové skupiny a iné.
Termíny „aktivovaný derivát vhodne chránenej a-aminokyseliny“ a „aktivovaný derivát substituovanej fenyloctovej kyseliny“ sa vzťahujú na zodpovedajúce acylhalogenidy (napríklad acylfluorid, acylchlorid alebo acylbromid), zodpovedajúce aktivované estery (napr. nitrofenylester, ester 1 -hydroxybenzotriazolu (HOBt) alebo ester hydroxysukcínimidu (HOSu)) a iné obvyklé deriváty používané pri súčasnom stave techniky.
Na základe uvedených definícií sú ostatné chemické termíny použité v tejto patentovej prihláške ľahko zrozumiteľné. Definované termíny môžu byť použité samotné alebo v akejkoľvek kombinácii. Výhodné a preferované dĺžky reťazca v uvedených skupinách platia na všetky kombinácie.
Vynález sa týka zlúčenín, schopných inhibovať adhéziu buniek, sprostredkovanú VLA-4 tým, že inhibujú väzbu ligandov k tomuto receptoru, ktoré majú všeobecný vzorec (I)
a ich farmaceutický prijateľných derivátov:
kde X je zvolené zo skupiny substituentov -CO2H, -PO 3H, -SO2R5, -SO3H, -OPO }H, -CO2R4 a -C(O)N(R4)2;
v ktorých R5 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou a alkenylovú alebo alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
Y je substituent zo skupiny obsahujúcej skupiny -CO-, -SO - a -PO -;
2
R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu s prikondenzovaným arylom, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou („aralkylovú skupinu“), alkenylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú cykloalkylovou skupinou, cykloalkylovú skupinu substituovanú cykloalkenylovou skupinou, biarylovú skupinu, alkoxylovú skupinu, alkénoxylovú skupinu, alkínoxylovú skupinu, alkoxylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou („aralkoxylovú skupinu“), alkénoxylovú alebo alkínoxylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylamínovú skupinu, alkenylamínovú skupinu, alkinylamínovú skupinu, alkylamínovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkenylamínovú alebo alkinylamínovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, aryloxylovú skupinu, arylamínovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú N-alkylureidovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N-arylureidovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylkarbonylamínovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aminokarbonylovou skupinou, heterocyklylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú heterocyklylovou skupinou, amínovú skupinu substituovanú heterocyklylovou skupinou, aralkylovú skupinu substituovanú karboxyalkylovou skupinou, arylovú skupinu s prikondenzovaným oxokarbocyklom a heterocyklylalkylovú skupinu;
R2 je substituent zo skupiny obsahujúcej atóm vodíka, arylovú skupinu, alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu alebo alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou a skupiny R2 a R3 spolu s atómami, ku ktorým sú pripojené môžu tvoriť heterocyklický kruh;
R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, aralkylovú skupinu, alkenylovú skupinu substituovanú arylskupinou, alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aralkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsubstituovanou alkyloxykarbonylamínovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiolovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxysubstituovanou alkyltioskupinou, alkylovú skupinu substituovanú tioalkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú acylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsulfonylaminoskupinou, morfolinoalkylovú skupinu, tiomorfolinoalkylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú morfolinkarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiomorfolínkarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú [N-(alkyl, alkenyl alebo alkinyl)-, alebo N,N-[(dialkyl, dialkenyl, dialkinyl)- alebo (alkyl, alkenyl)-amino]-karbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú karboxylovou skupinou, acylaminoalkylovú skupinu substituovanú dialkylaminoskupinou a postranné reťazce aminokyselín arginínu, asparagínu, glutamínu, S-metylcysteínu, metionínu a jeho zodpovedajúceho sulfoxidového a sulfónového derivátu, glycínu, leucínu, izoleucínu, allo-izoleucínu, terc-leucínu, norleucínu, fenylalanínu, tyrozínu, tryptofánu, prolínu, alaninu, ornitinu, histidínu, glutamínu, valínu, treonínu, serínu, asparágovej kyseliny, beta-kyanoalanínu a allo-treonínu, pričom R2 a R3 spolu s atómami, ku ktorým sú pripojené, môžu tvoriť heterocyklus;
R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej arylovú skupinu, alkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, alkénylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, atóm vodíka, heterocyklylovú skupinu, heterocyklylkarbonylovú skupinu, aminokarbonylovú skupinu, amidovú skupinu, mono- alebo dialkylaminokarbonylovú skupinu, mono- alebo diarylaminokarbonylovú skupinu, alkylarylaminokarbonylovú skupinu, diarylaminokarbonylovú skupinu, mono- alebo diacylaminokarbonylovú skupinu, aromatickú alebo alifatickú acylskupinu, alkylovú skupinu podmienene substituovanú substituentmi zo skupiny obsahujúcej aminoskupinu, hydroxylovú skupinu, merkaptoskupinu, mono- alebo dialkylaminoskupinu, mono- alebo diarylaminoskupinu, alkylarylaminoskupinu, diarylamino skupinu, mono- alebo diacylaminoskupinu, alkoxylovú skupinu, alkénoxylovú skupinu, aryloxylovú skupinu, tioalkoxylovú skupinu, tioalkénoxylovú skupinu, tioalkínoxylovú skupinu, tioaryloxylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu a n je 0, 1 alebo 2.
„Farmaceutický prijateľný derivát“ je akákoľvek farmaceutický prijateľná soľ, ester alebo soľ takéhoto esteru zlúčeniny podľa vynálezu. Vynález taktiež zahŕňa akékoľvek iné látky, ktoré pri podaní pacientovi sú schopné generovať (či už priamo alebo nepriamo) látky podľa vynálezu (napríklad profarmaká). Vynález taktiež zahŕňa metabolity alebo zvyšky zlúčenín podľa vynálezu, charakterizované schopnosťou inhibovať, predchádzať alebo potláčať adhéziu buniek a ňou sprostredkovaných patologických stavov.
V inom výhodnom uskutočnení tohto patentu je substituent R1 zvolený zo skupiny obsahujúcej benzyloxylovú skupinu, kyanometylovú skupinu, cyklohexylmetylovú skupinu, metylovú skupinu, n-hexylovú skupinu, N-fenylamínovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylkarbonylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, terc-butoxylovú skupinu, terc-butylamínovú skupinu, 1-indanylovú skupinu, 1-naftylmetylovú skupinu, 1-fenylcyklopropylovú skupinu, 2-(4-hydroxyfenyl)etylovú skupinu, 2-(benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 2-[bis(fenylsulfonyl)aminojfenylmetylovú skupinu, 2-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 2-aminofenylmetylovú skupinu, 2-benzamidofenylmetylovú skupinu, 2-bróm-4-hydroxy-5-metoxyfenylmetylovú skupinu, 2-hydroxyfenylmetylovú skupi nu, 2-naftylmetylovú skupinu, 2-fenyletylovú skupinu, 2-pyridylmetylovú skupinu, 2-chinolinylovú skupinu, 2-[4-(N'-fenylureido)fenyljetylovú skupinu, 3-(benzyloxykarbonylaminojfenylmetylovú skupinu, 3-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-(N'-fenylurcido)propylovú skupinu, 3-(fenylsulfónamido)fenylmetylovú skupinu, 3-acetamidofeylmetylovú skupinu, 3-aminofenylmetylovú skupinu, 3-benzamidofenylmetylovú skupinu, 3-hydroxy-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 3-indolylovú skupinu, 3-metoxy-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 3-metyl-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-nitrofenylmetylovú skupinu, 3-fenylpropylovú skupinu, 3-pyridylmetylovú skupinu, 4-(2-aminobenzamido)fenylmetylovú skupinu, 4-(benzamido)fenylmetylovú skupinu, 4-(benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(morfolinokarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-chlórfenyl)ureidojfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-chlórfenyl)ureido]-3-metoxyfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-etylfenyl)ureidojfenylmetylovú skupinu, 4-|N'-(2-izopropylfenyl)ureidojfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metoxyfenyl)ureidoJfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metyl-3-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-nitrofcnyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N’-(2-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-tert-butylfenyl)ureido]íénylmetylovú skupinu, 4-[N’-(2-tiazolyl)ureido]fenyl metylovú skupinu, 4-[N'-(3-chlórfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-metoxyfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-pyridyljureidojfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(4-pyridyl)ureidojfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-metylfenyl)ureidojfenylmetylovú skupinu, 4-[N’-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-benzylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-cyklohexylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N’-etylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-izopropylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-metylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-p-tolylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylovú skupinu, 4-(N'-fenylureidojfenylamínovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-terc-butylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(fenylaminokarbonylaminometyl)fenylovú skupinu, 4-(terc-butoxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-acetamidofenylmetylovú skupinu, 4-aminofenylamínovú skupinu, 4-aminofenylmetylovú skupinu, 4-benzamidofenylmetylovú skupinu, 4-chlórfenylmetylovú skupinu, 4-hydroxy-3-nitrofenylmetylovú skupinu, 4-hydroxy-3-nitro fenylmetylovú skupinu, 4-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 4-metoxyfenyletylovú skupinu, 4-nitrofenylamínovú skupinu, 4-nitrofenylmetylovú skupinu, 4-fenacetamidofenylmetylovú skupinu, 4-fenylíénylmetylovú skupinu, 4-pyridylmetylovú skupinu, 4-trifluórmetylfenylmetylovú skupinu, 4-[(2-N'-metylureido)benzamido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fcnylmetylovú skupinu, 4-(N'-fenyl-N-metylguanidino)fenylmetylovú skupinu, 5-(N'-fenylureido)pentylovú skupinu, 5-(N'-terc-butylureido)pentylovú skupinu, 2,2-dimetylpropylovú skupinu, 2,2-difenylmetylovú skupinu, 2,3-benzocyklobutylovú skupinu, 3,4-dihydroxyfenylmetylovú skupinu, 3,5-dimetoxy-4-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 4-(l-indolkarboxyamino)fenylmetylovú skupinu, 6-metoxy-5-[N'-(2-metylfenyl)ureido]-2-pyridylmetylovú skupinu, 4-(l,3-benzoxazol-2-ylamino)fenylmetylovú skupinu, a 4-(l,3-imidazol-2-yIamino)fenyImetylovú skupinu, 3-karboxy-l-fenylpropylovú skupinu, 3-hydroxy-4-(2-metylfenyl)ureidofenylmetylovú skupinu, 3-hydroxy-4-(2-chlórfenyl)ureidofenylmetylovú skupinu, 6-(fenylureido)heptylovú skupinu, 4-(fenylureido)butylovú skupinu, 2-tienyl metylovú skupinu, 4-(2,6-dimetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-hydroxyfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-butoxy-4-(2-metylfenyl)ureidofenylmetylovú skupinu, 3-butoxy-4-(fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N-2-pyrazinylureido)fenylmetylovú skupinu, 2-fenylctinylovú skupinu, 5-fenylureido-2-pyridylmetylovú skupinu, 5-(2-metylfenylureido)-2-pyridylmetylovú skupinu, 4-(3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-nitro-4-(fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-acylamino-4-(fenylureidofenylmetylovú skupinu, 4-(N-fenyl-N-metylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-hydroxyfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-acetylaminofenylureido) fenylmetylovú skupinu, 4-(2-propionylaminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-benzyloxy-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(indolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 2-[4-(fenylureido)fenyl]oxiranylovú skupinu, 4-(N-fenyl-N-metylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-dimetylaminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(benzimidazolylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(benzoxazolylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(benzotiazolylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(tetrahydrochinolinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, l,3-dimetyl-3-(fenylureido)butylovú skupinu, hydroxyetyltiometylovú skupinu, 4-(fenylureido)fenyletenylovú skupinu, 3-amino-4-(fenylureidojfenylmetylovú skupinu, 4-(4-hydroxyfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(aminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-[(2-metylureido)fenylureido]fenylovú skupinu, 4-(2-hydroxyfenylureido)-3-metoxyfenylmetylovú skupinu, 4-(2-metylsulfonylmetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-metylfenylureido)tetrahydro-2-pyrimidinylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-(fenylureido)-2-pyridylmetylovú skupinu, 4-(2-trifluórmetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,4-( 1 H,3H)-chinazolíndionyl]fenylmetylovú skupinu, 4-tioureidofenylmetylovú skupinu, 4-(fenyltioureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(pyrolidínkarbonylaminojfcnylmetylovú skupinu, 4-(2-benzoxazolínonylkarbonylamino) fenylmetylovú skupinu, 4-(benzyloxyureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(tiazolidinylkarbonyIamino)fenylmetylovú skupinu, 4-benzoylureidofenylmetylovú skupinu, hydroxyureidofenylmetylovú skupinu, N'-metyl-N'-hydroxyureidofenylmetylovú skupinu, 4-(N'-alylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-pyrolidinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(l-pyrolidinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-pyrolidinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(propylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(metoxyureido)fcnylmetylovú skupinu, 4-(dimetylureidojfenylmetylovú skupinu, 4-(2-chinazolinylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-furanoylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-hydroxy-6-metylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(4-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-chinolinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(izochinolinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,3-dimetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,5-dimetylfenylureido)fenylmctylovú skupinu, 4-(2-metyl-4-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-metyl-3-fluórfenyl)fenylmetylovú skupinu, 3-karboxy-3-fenylpropylovú skupinu, 4-(5-hydroxy-2-metylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(4-hydroxy-2-metylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,4-difluórfenylureido)fcnylmetylovú skupinu, 3-dibenzofuranylkarbonylovú skupinu, 4-(fenoxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 3-fenylureidopropylovú skupinu, 4-(fenylaminokarbonyloxy)fenylmetylovú skupinu, 4-cinamoylfenylmetylovú skupinu, dibenzofuranylmetylovú skupinu, 4-(2-metylfenylaminokarbonyloxy)fenyImetylovú skupinu, (metylfenylureido)fenylamínovú skupinu, 4-(3-indolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(fenylaminokarbonyl)fenylmetylovú skupinu, 4-fenylalkinylfenylmetylovú skupinu, 4-(3-pyrolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 5-nitrobenzofuran-2-ylovú skupinu, 5-(2-metylfenylureido)benzofuran-2-ylovú skupinu, 3-karboxy-3-fenylpropylovú skupinu, 2-(3-pyridyl)tiazol-4-ylovú skupinu, 2-(4-pyridyl)tiazol-4-ylovú skupinu, 2-oxo-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]fúran-3-ylovú skupinu, 4-oxo-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]íuran-3-ylovú skupinu, 3-metoxy-4-(fenylkarbamoyloxy)fenylmetylovú skupinu, 5-aminobenzofúran-2-ylovú skupinu, benzilylaminofenylmetylovú skupinu a 4-[N-2-karboxyetyl-l-(l,3-benzodioxolán-5-yl)amino-N-leucinylacetamidylfenylureido]fenylmetylovú skupinu.
Substituent R1 je najvýhodnejšie zvolený zo skupiny obsahujúcej 4-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-(N'-fenylureido (fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-fenylureidojfenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metylfenyl)ureidojfenylmetylovú skupinu, 4-(N'-(2-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 6-metoxy-5-[N'-(2-metylfenyl(ureido]-2-pyridylmetylovú skupinu, 4-(N'-3-metyl-2-pyridylureidojfenylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-(N'-3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu a 3-metoxy-4-[N'-(2-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu.
V alternatívnom výhodnom uskutočnení podľa vynálezu je substituent R1 alkylová skupina s 1 až 4 atómami uhlíka, substituovaná arylovou skupinou. Výhodne R1 je arylalkylová skupina, v para polohe substituovaná N-Ar'-ureidovou skupinou, a najlepšie fenylmetylová skupina v para polohe substituovaná N-Ar'-ureidovou skupinou.
Podľa iného výhodného uskutočnenia podľa vynálezu je substituent R2 zvolený zo skupiny obsahujúcej atóm vodíka, metylovú skupinu alebo fenacetylovú skupinu, najvýhodnejšie atóm vodíka.
Podľa iného výhodného uskutočnenia vynálezu je substituent R3 zvolený zo skupiny obsahujúcej 2-(metylsulfonyljetylovú skupinu, 3-(hydroxypropyltio)metylovú skupinu, 4-(metylsulfonylamino)butylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu, aminometylovú skupinu, benzylovú skupinu, butylovú skupinu, hydroxymetylovú skupinu, izobutylovú skupinu, metylovú skupinu, metyltiometylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, propylovú skupinu, 4-(benzyloxykarbonylamino)butylovú skupinu, N-metyl-N-propargylamínovú skupinu, 2-(metyltio)ctylovú skupinu, 2-(morfolino-N-karbonyl)etylovú skupinu, 2-(N-morfolinojetylovú skupinu, 2-(N,N-dimetylamino)etylovú skupinu, 4-aminobutylovú skupinu, 4-benzyloxyfenylmetylovú skupinu, 2-benzyltiometylovú skupinu, terc-butoxykarbonylamino metylovú skupinu, sek-butylovú skupinu, terc-butylovú skupinu, N,N-dimetylaminokarbonylmetylovú skupinu, 1,1-etánové premostenie (v aminokyselinovom bočnom reťazci 1-aminocyklopropylkarboxylovej kyseliny), 4-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 1-hydroxyetylovú skupinu, 1-metoxyetylovú skupinu, 4-metoxyfenylmetylovú skupinu, benzyloxymetylovú skupinu, benzyltiometylovú skupinu, karbonylmetylovú skupinu, 2-metylsulfinyletylovú skupinu, morfolino-N-karbonylmetylovú skupinu, tiomorfolino-N-karbonylmetylovú skupinu, 2-fenyletylovú skupinu, bočný reťazec asparagínu, bočný reťazec prolínu, 2-tiazolylmetylovú skupinu, 4-(fenylureido)butylovú skupinu, 4-(metylureido)butylovú skupinu, morfolinokarbonylmetyltiometylovú skupinu, morfolinoetyltiometylovú skupinu, 3-pyridylmetylovú skupinu, 4-metylsulfonylaminobutylovú skupinu, hydroxymetyltio metylovú skupinu, 2-metylsulfonyletylovú skupinu, 4-propionylaminobutylovú skupinu, 4-etoxykarbonylaminobutylovú skupinu, metoxykarbonylaminobutylovú skupinu, karbometoxymetyltiometylovú skupinu, 4-terc-butylureidobutylovú skupinu, karboxymetyltiometylovú skupinu, dimetylamidometyltiometylovú skupinu, acetylaminopropylovú skupinu, 3-metylureidopropylovú skupinu, 4-biotinoylaminobutylovú skupinu, 2-tienylmetylovú skupinu, 3-pyridylmetylovú skupinu, 4-trifluóracetylaminobutylovú skupinu, dimetylaminometyltiometylovú skupinu, dimetylaminoetyltiometylovú skupinu, 4-(dimetylaminoacetylamino)butylovú skupinu alebo v kombinácii s R2 tvorí prolínový, azetidínový alebo pipekolínový kruh.
Najvýhodnejšie je substituent R3 zvolený zo skupiny zahŕňajúcej izobutylovú skupinu, 2-(metyltio)etylovú skupinu, 3-(hydroxypropyltio)metylovú skupinu, 2-(metylsulfonyljetylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu, 4-(metylsulfonylamino)butylovú skupinu a 4-(etoxykarbonylaminojbutylovú skupinu.
Podľa ešte iného uskutočnenia vynálezu je substituent R4 zvolený zo skupiny substituentov obsahujúcej 4-karbometoxyfenylovú skupinu, 4-karboxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, benzylovú skupinu, metylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, fenyletylovú skupinu, 4-chlórfenylovú skupinu, 3,4-difluórfenylovú skupinu, 3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 2-metoxyfenylovú skupinu, 3-metoxyfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, 2-nitrofenylovú skupinu, 3-pyridylovú skupinu, 4-fenoxyfenylovú skupinu, 4-etoxyfenylovú skupinu, 4-nitrofenylovú skupinu, 4-acetylaminofenylovú skupinu, 4-metylureidofenylovú skupinu, 2-fluórfenylovú skupinu, naftylovú skupinu, 3-fluórfenylovú skupinu, 3-nitrofenylovú skupinu, atóm vodíka, 4-kyanofenylovú skupinu, 3-metoxyfenylovú skupinu, 4-metylsulfonylaminovú skupinu, 3-kyanofenylovú skupinu, 4-propionylamínovú skupinu, 4-aminofenylovú skupinu, 3-aminofenylovú skupinu, 4-trifluórmetoxyfenylovú skupinu, 4-metylfenylovú skupinu, 4-amino-3-nitrofenylovú skupinu, 4-hydroxy-3-metoxyfenylovú skupinu, 4-hexyloxyfenylovú skupinu, 4-metoxytiofenylovú skupinu, 3-furanylovú skupinu, 4-dimetylaminofenylovú skupinu, 3-hydroxy-4-nitrofenylovú skupinu, n-pentylovú skupinu, karboxymetylovú skupinu, 2-karboxyetylovú skupinu, etinylovú skupinu, 2-tienylovú skupinu, 2-propenylovú skupinu, 2-propinylovú skupinu a propylovú skupinu.
Výhodne je R4 zvolené zo skupiny obsahujúcej 4-metoxyfenylovú skupinu, 3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu, 4-karboxyfenylovú skupinu, 4-karbometoxyfenylovú skupinu, fenyletylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, alylovú skupinu, etinylovú skupinu a 3,4-metyléndioxyfenylovú skupinu.
V inom výhodnom uskutočnení podľa vynálezu je Y skupina CO, skupina CH2 alebo skupina SOť najmä skupina CO.
Podľa iného uskutočnenia je X vo vzorci (I) skupina COOH.
Podľa ešte iného výhodného uskutočnenia n je 1.
Príklady obzvlášť výhodných zlúčenín podľa vynálezu, kde X je karboxylová skupina a n je 1, sú uvedené v tabuľke 1.
Tabuľka 1
Tabulka 1
Bio# B1 R2 R3 R* Y
1002 kyanometyl H izobutyl fenyl CO
1003 cyklohexylmetyl H izcbutyl fenyl CO
1004 2-pyridylnietyl H izobutyl fenyl CO
1005 3-pyridylmetyl H izobutyl fenyl CO
1006 4-hydroxyfenylmetyl H izobutyl 1,3-benzo- CO
1007 4-pyridylmetyl H izobutyl dioxol-5-yl fenyl CO
1008 fenyl H Izobutyl fenyl CO
1009 4-fenyl£enylmetyl H izobutyl fenyl CO
1010 4-chlórfenylmetyl H izobutyl fenyl CO
1011 4-trifluómetyl- H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1013 fenylmetyl H izobutyl fenyl SO2
1014 3-indolyl H izobutyl fenyl CO
1015 4-ber.zamidoíenyl- H izobutyl fanyl CO
metyl
1016 4-aminofenylmetyl H izobutyl fenyl CO
1017 1-fenylcyklopropyl H izobutyl fenyl CO
1018 3-acetamidofenyl- H izobutyl fenyl CC
metyl
102C 3-ben2amidofenyl- H izobutyl fenyl CO
metyl
1021 1-naftylmetyl H ižobutyl fenyl CO
1022 2-naftylmetyl H izobutyl fenyl CO
1023 4-fenacetamidofenyl H izobutyl fenyl CO
metyl
1024 2-anlnofenylítietyl H izobutyl ťenyl CO
1025 2-(bis(fenylsulfo- H izobutyl fenyl CO
nyl}amino|fenylmetyl
1026 2-benzamidofenyl- H izobutyl fenyl CO
metyl
1027 2-(henzyloxykarbo- H izobutyl fenyl CO
nylaminc)fenylmetyl
1023 4-(2-aminobenzamido)- H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1029 4-[2-(N‘-metylureido)- H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1030 3-aminofenylmetyl K izobutyl fenyl CO
1031 3-(benzyloxykarbonyl- H izobutyl fenyl CO
amino)fenylmetyl
1032 3-(fenylsulfónanido)- H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1036 fenylmetyl H izobutyl 1,3-benzo- CO
1037 4-(N'fenylureldo)- H 2-tiazo- dioxol-5-yl fenyl CO
fenylmetyl 1036 fenylmetyl H lylnetyl propyl fenyl CO
1039 fenylmetyl H butyl fenyl CO
1040 fenylmetyl H sek-butyl fenyl CO
1041 terc-butoxy H hydroxy- fenyl CO
1042 terc-butcxy H metyl fenyl- fenyl CO
1043 terc-butoxy H metyl 1,1-etano fenyL CO
1044 terc-butoxy ch3 izobutyl fenyl CO
104S fenylmetyl H hydroxy- metyl fenyl· CO
1046 fenylmetyl H fenyl- fenyl CO
metyl
1047 fenylmetyl H prolín fenyl CO
(vedlajši
reťazec)
1043 fenyLmetyl H 1,1-etano fenyl CO
1049B fenylmetyl H asparagín fenyl CO ·
tvediajSi
reťazec)
1050 4-(N‘-fenyiureido)- H izobutyl 1,3-benzo- CC
dioxol-5-yl
1051 4-(N'-fenyiureido)fenyl H izobutyl fenyl CO
1C52 2-[4-(N'-fenylureidofenyljetyl H izobutyl fenyl CO
1053 4-(Ν'-fenyiureido)- CH3 izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1C54 3-(N'-fenyiureido)fenylmetyl K izobutyl fenyl CO
1055 4-(N'-fenylureido)- CH3 izobutyl lt3-ben.za- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1056 3-metoxy-4-(N'-fenyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido)fenylmetyl dioxol-5-yl
1057 3-hydroxy-4-(N‘-fenyi- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido) fenylmetyl dioxol-5-yl
1058 3-metyl-l-(N'-fenyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido) fenylmetyl dioxol-5-yl
1060 4-(N'-fenylureido)fenylmetyl H izobutyl fenyl CO
1063 4-(Ν'fenyiureido) - H izobutyl benzyl CO
íenyLmetyl
10 64 4-lN'metyIureido)- H izobutyl lf3-benzo- CO
fenylmetyl dicxol-5-yl
1065 4-(Ν’-izopropyl- H Izobutyl 1,3-benzo- CO
uxeido)fenylmetyl dioxol-5-yl
1066 4-(Ν'-fenyiureido)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1067 4-(N'-p-tclylureido)- H izobutyl 1,3-benzo- CO.
fenylmetyl dioxol-5-yl
1068 4-(N'-cyklchexyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido)fenylmetyl dioxcl-5-yl
1069 4-(N'-fenylureido) - H izobutyl 2-metoxy- CO
fenylmetyl fenyl
1070 4-hyďroxyfenyljiietyl H izobutyl 2-metoxy- CO
fenyl
1072 4-(N'-fenylureido) - H izobutyl 3-metcxy- CO
fenylmetyl fenyl
1073 4-(benzyloxykarbonyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
amino)fenylmetyl dloxol-5-yl
1074 4-(fenylsulfônamido)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1075 4-(benzamido)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1076 4-(N'-terc-butyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido)fenylmetyl dioxol-5-yl
1077 4-iN'-etylureido)- H izobutyl 1,3-banzo- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1078 4-(N'-(3-metoxyťenyl)- H izobutyl l,3-ben2o- CO
ureidoIfenylmetyl dioxol-S-yl
1079 4-(N'-(2-Betoxyfenyi)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido1fenylmetyl· dioxol-5-yl
1080 4-[Ν'-(3-pyridyl)-,. ureido1fenylmetyl 1081 fenylmetyl E H izobutyl 1,3-benzo- CO CO
dioxol-5-yl
izobutyl fenyl
1082 3-íenylpropyl H Izobutyl fenyl CO
1083 metyl H izobutyl fenyl CO
1084 2-14-hyďzoxyfenyl)- H izobutyl fenyl CO
etyl
1085 benzyloxy H izobutyl fenyl CO
1086 N-fenylamino H izobutyl fenyl co·.
1087 2-<4-hydroxyfenyl)- ch3 izobutyl fenyl CO
etyl
1088 4-(Ν’fenyiureido)-. fenylmetyl K izstouty L 4-metoxyfenyl CO
1089 4-(N'fenyiureido)fenylmetyl H 2-(metyl- 4-metoxytioíetyl fenyl CO
1090 4-(N'fenyiureido)- H izobutyl 1,3-benzo- dicxol-5-yl CO
1091 4~hydnaxyf«inyUaetyl H izobutyl· fenyl O
1092 4-metoxyfenylmetyl H izobutyl fenyl CO
1093 4-nitrofenylmetyl H izobutyl fenyl CO
1094 n-hexyl H izobutyl fenyl CO
1096 2-hydrcxyfenylmetyl H izobutyl· fenyl CO
1097 3-hydroxyfenylmetyl H izobutyl· fenyl CO
1090 3,4-dihydroxy- H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1099 2,2-difenyletyl H Izobutyl fenyl CO
1100 2-brón.-4-hydraxy-5- H izobutyl fenyl· CO
metoxyťenylmetyl
11C1 4-(benzyíoxykarbonyl- H izobutyl fenyl CO
aminc)fenylmetyl
1102 2-(N'-fenylureido)- H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1103 4-aminofenylmetyl H Izobutyl fenyl CO
1104 4-(fenylsulfônamido)- H izobutyl fenyl· CO
fenylmetyl
1105 4-(benzamído) - H izobutyl fenyl CO
fenylmetyl
1106 5-(N'-fenylureido)- H izobutyl fenyl CO
per.tyl
1107 5-(N'-terc-butyl- H izobutyl fenyl CO
ureidojpentyl
1103 4-nitrofenylamino H izobutyl fenyl CO
1109 4-aminofenylajnino H izobutyl fenyl
1110 4-(N'-fenyiureido)- H izobutyl fenyl
fenylamino
illl 3,t-d.imetQxy-4- H izobutyl fenyl
hydroxyfenylmetyl
1112 4-nydroxy-3-nitro H izobutyl fenyl
fenylmetyl
1113 3-nitrofenylmetyl H izobutyl fenyl
1114 fenylmetyl CH3 izobutyl fenyl CO
1115 fenylmetyl H izobutyl 4-chlóĽfenyi CC
1116 fenylmetyl H 1-hydroxy- fenyl etyl CO
1117 fenylmetyl H 1-a.etoxy- fenyl etyl CO
1119 fenylmetyl H metyl fenyl CO
1120 fenylmetyl metyl metyl fenyl CO
1122 fenylmetyl H 4-metoxy- fenyl fenylmetyl CO
1123 fenylmetyl H 2-fenyl- fenyl etyl CO
1124 fenylmetyl H 4-benzyl- fenyl CO 1163 4-(N'-fenylureido)- H 2-metyl- 1,3-benzo- CO
oxyfenyl- fenylmetyl tio)etyl dioxol-S-yl
metyl 1164 fenylmetyl H 2-metyl- 1»3-benzo- CO
1125 fenylmetyl H 4-hydroxy- fenyl CO tio)etyl dioxol-5-yl
1168 4-[N'-(m-tOluyD- H izobutyl 1,3-benzc- CO
fenylmetyl
ureido]fenylmetyl dioxol-5-yl
1126 fenylmetyl H benzyloxy- fenyl CO
1169 4-(N'-benzylureido)- H izobutyl 1,3-benzc- CO
me y fenylmetyl dioxol-5-yl
1127 fenylmetyl H benzyltio- fenyl CO
1170 4-(Ν’-fenylureido)- H morfolino- 1,3-benzo- CO
metyl fenylmetyl -N-karbonyl- dioxol-5-yl
1128 4-(N'-fenylureido)- H izobutyl 1 ,3-benzo- CO nietyl
fenylmetyl dioxol-5-yl 1173 4-hydroxyfenylmetyl H izobutyl 4-metoxy- CO
1129 4-(N'-fenylureido)- H benzyl 1 ,3-benzo- CO fenyl
fenylmetyl dioxol-5-yl 1174 4-hydroxyfenylmetyl H 2-(metyl- 4-metoxy- CO
1130 4-(N'-fenylureido)- H benzyl fenyl CO tio)etyl fenyl
fenylmetyl 1175 fenylmetyl H 2-(metyl- 4-metoxy- CO
1131 4-(N'-fenylureido) - H sek-butyl fenyl CO tío)etyl fenyl
fenylmetyl 1175 4-(N'-fenylureido)- H tiomorfo- 1,3-benzo- CO
1132 4-(N'-fenylureido) - H 4-(benzyl- fenyl CO fenylmetyl lino-N-kar- dioxol-5-yl
fenylmetyl oxykarbonyl - bonylmetyl
amino)butyl 1177 4-(N'-fenylureido)- H N,N-(metyl- 1,3-benzo- CO
1133 4-(N'-fenylureido)- H sek-butyl 1/3-benzo- CO fenylmetyl propargyl)- dioxol-5-yl
fenylmetyl dioxol-5-yl aminokarbo-
nylmetyi
1134 4-(N'-fenylureido) - H terc-butoxy fenyl CO 1179 fenylmetyl H izobutyl 4-metoxy- CC
fenylmetyl karbonyl- fenyl
1179 4-(Ν'-(o-toltiyl) - H izobutyl 1,3-benzo- CO
aminometyl
ureido]fenylmetyl dioxol-5-yl
1135 4-(N'-fenylureido) - H 2-(metyl- fenyl CO
1180 4-{N'-(2-tiazolyl)- H Izobutyl 4-metoxy- CO
fenylmetyl tiojetyl
ureido]fenylmetyl fenyl
1136 4-(N'-fenylureido)- H 2-(benzyl- fenyl CO 1181 4-[N'-(3-chlôrfenyl)- E izobutyl 1,3-benzo- CO
fenylmetyl tic)metyl ureído]fenylmetyl dioxol-5-yl
1137 fenylmetyl H i2obutyL 2-nitro- CO
fenyl 1182 4-(N'-(4-pyridyl)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido]fenylmetyl dioxol-5-yl
1138 4-(N'-fenylureido)- H aminometyl fenyl CO 1185 4—[N'-(2—chlórfenyl)— H izobutyl L,3-benzo- CO
fenylmetyl ureido)fenylmetyl diexol-5-yl
1139 4-(N'-fenylureido)- H 4-aminobutyl fenyl CO 1196 4-(Ν’-fenylureido) - H izobutyl izobutyl- CO
fenylmetyl fenylmetyl amino-
1140 ferylkarbonyl H izobutyl fenyl CH2 karbonyl
1141 fenylkarbonyl fen- izobutyl fenyl ch2 1187 3-(Ν’-fenylureido) - H izobutyl fenyl CO
acyl fenylmetyl
1142 2,3-benzocyklobutyl H izobutyl fenyl CO 1188 1-fenylcyklopropyl H izobutyl 1,3-benzo- CO
1143 4-hydroxyfenylmetyl H izobutyl benzyl CO dioxol-5-yl
1144 4-hydroKyfenylmetyl H izobutyl fenyl CO 1189 1-indanyl H Izobutyl fenyl CO
1190 4-[N’-(o-toluyl)- H izobutyl 4-metoxy- CO
1L45 4-(terc-butoxy- H izobutyl fenyl CO
ureido]fenylmetyl
karbonylamino)-
1191 4-(Ν'-fenylureido)- H 2- IN-morfo- 1,3-benzo- CO
fenylmetyl fenylmetyl lino)etyL dioxol-5-yl
1146 4-hydroxyfenylmetyl H izobutyl 3-metoxy· - CO 1192 4-[N'-(2-metoxyfe- H izobutyl 4-metoxy- CO
fenyl nyl)ureido]fenylmetyl fenyl
1147 4-acetamidofenylmetyl H izobutyl fenyl CO 1193 4-(N'-fenylureido)- metyl izobutyl 4-raetoxy- CO
1149 4-hydroxyfenylmetyl H izobutyl 3-pyridyl CO íenylmetyl fenyl
1149 2-chinolinyl H izobutyl fenyl CO 1194 4-EN'-í2-pyridyl) - H izobutyl 4-metoxy- CO
1150 2-fenyletyl H izobutyl fenyl CO ureido]fenylmetyl fenyl
1152 2,2-dimetylpropyl H izobutyl fenyl CO 1195 4-(N'-fenylureido)- H izobutyl 3,4-di- CO
1153 benzyloxy H izobutyl 3-pyridyl CO fenylmetyl fluórfenyl
1154 terc-butylamino H izobutyl fenyl CO 1196 4-(N'-fenylureido)- H izobutyl 3,4-di- CO
1155 fenylmetyl E terc-butyl fenyl CO fenylmetyl metoxyfenyl
1156 metyl E terc-butyl fenyl CO 1197 4-[N'-(o-toluyl)- H izobutyl fenyl CO
1157 fenylmetyl H izobutyl benzyl CO ureido]fenylmetyl
1159 fenylmetyl H izobutyl 1,3-benzo - CO 1198 4- (morfolinokarbonyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
dioxol-5- yl amino)fenylmetyl dioxol-5-yl
1199 4-(N'-fenylureido)- H 2-metyl- 4-metoxy- CO
1159 fenylmetyl H izobutyl 2-metoxy ·- CO
fenyl fenylmetyl fenyl
1160 fenylmetyl H izobutyl 3-metoxy - CO
fenyl
1162 benzyloxy H izobutyl metyl CO
1200 4-(N'-(2-etylfenyl)- H ureido]fenylmetyl izobutyl 1,3-benzo- CO dicxol-S-yl
1201 4-[N'-(2-nitrofenyl)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido] fenylmetyl dioxol-5-yl
1206 4-(N'-(2-izopropylfe- M izobutyl 1,3-benzo- CO
nyl)ureido] f enylmetyl dioxo-5-yl
1207 4-[N'-(2-lzopropylfe- H izobutyl 4-metoxy- CO
nyl1ureido]fenylmetyl fenyl
1208 4-[Ν'-(2-atylfenyl)- H izobutyl 4-metoxy- CO
ureido]fenylmetyl fenyl
1209 4-[N'-(2-terc-butyl- H izobutyL 1,3-benzo- CO
fenyl)ureido]fenylmetyl dioxo-5-yl
1210 4-(N’-(o-toluyl)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureidoj fenylmetyl dioxo-5-yl
1212 4-[N'-(a-toluyL)- H izobutyl 3,4-dimeto- CO
ureido]fenylmetyl xyfenyl
1214 4- W - fenylureido)- H N/N-dlae- 1,3-benzo- CO
fenylmetyl tylaminokarbonylmetyl dioxol-5-yl
1215 4-IN‘-fenylureido) - H 2-(H,N-di- 1, 3-ber.2o- CO
fenylmetyl metylami- dioxol-5-yl
no>etyl
1216 4-(N'-fenylureido)- H 2-(morfo- 1,3-ber.zo- CO
fenylmetyl linokarbo- dioxol-5-yl
nyl)etyl
1217 4-[K'-(o-toluyl)- H 4- (benzyl- 3,4-dimeto- CO
ureido]fenylmetyl oxykarbcnylamino)etyl xyíenyl
1218 4-(Ν' -(2-pyridyl)- H izobutyl 3,4-dimeto- CO
ureidolfenylmetyl xyfenyl
1219 4-[N' - (3-pyridyl) - 1 H Izobutyl 3,4-d.imeto- CO
ureido]fenylmetyl xyfenyl
1220 4-[N'-(2-netyl-3-py- 1 H izobutyL 4-metoxy— CO
ridyl)ureido]fenylmetyl fenyl
1221 3-metoxy-4-[N'-(o-to- H Izobutyl 1,3-benzo- CO
luyDureidol fenylmetyl dioxol-5-yl
1222 4-[N'-(2-chlôrfenyL)- H Izobutyl 1,3-benzc- CO
ureido]-3-metoxyfenylmetyl dloxol-5-yl
122 3 4-(fenylaminokarbonyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
aminometyl)fenyl dloxol-5-yl
1224 4-[N'-(o-toluyl)- H 2-(metyl- 3,4-dimeto- CO
ureido]fenylmetyl tio)etyl xyfenyl
1225 4-[Ν'-(o-toluyl) - H 4-benzyl- 1,3-benzo- CO
ureido]fenylmetyl oxykarbonylamino)butyl dioxo-5-yl
122 7 4-[N'-(o-toluyll- H metyltio- 1,3-benzo- CO
ureido]fenylmetyl metyl dioxo-5-yl
1238 4-[Ν'-(o-toluyll - H 2-(metyl- 4-metcxy- CO
ureido]fenylmetyl tio)etyl fenyl
1245 4-(N'-(o-toluyll- H 2-(metyl- 1,3-henzo- CO
ureido]fenylmetyl sulfonyl)etyl dioxo-5-yl
1246 4-(Ν'-(o-toluyl) - H 3-(hydroxy- 1,3-benzo- CO
ureido]fenylmetyl propyltio)- metyl dioxo-5-yl
1248 4-{N'-(o-toluyl)- H izobutyl 4-fluór- CO
ureido]fenylmetyl fer,yl
1270 4-[Ν'-(o-toluyl) - H 4-acetyl- 1,3-benzo- CO
ureido]fenylmetyl aminobutyl dioxo-5-yl
1272 4-[N'-(2-metylfenyl)- H 4- (metoxy- l<3-ben.zo- CO
ureido]fenylmetyl karbonylaminolbutyL dioxo-5-yl
1282 4-[Ν'-(c-toluyl)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ureido]pyrid-5-yl- dioxo-5-yl
1294 4-[N'-(o-toluyl)- H 4-(metyl- 1,3-benzo- CO
ureldo]fenylmetyl· sulfonylamino)butyl dioxo-5-yl
1311 4-[N'-(3-metyl-2-pyri- H 4-(aetoxy- 3,4-dime- CO
dyl)ureido]fenylmetyl karbonylamino)butyl toxyfenyl
1319 4-(indolylkarbonyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
amíno)fenylmetyl dioxo-5-yl
1321 4-[Ν'-(c-toluyl)- H izobutyl 4-karboxy- CO
ureido]fenylmetyl fenyl
1327 4-(1-indolkarboxyL- H izobutyl 1,3-benzo- CO
amino)fenylmetyl dioxol-5-yl
1336 6-metoxy-5-(N' - (o- H ižobutyl 1,3-benzo- CO
-toluyl)ureido]-2-pyridylmetyl dioxol-5-yl
1345 4-(N'-(o-toluyl)- H dimetyl- 1,3-benzo- co
ureido]fenylmetyl aminoetyl- dioxo-5-yl
tiometyl
1347 4-(N'-(2-pyridyl)~ H 2-(metyl- 3,4-dimeto- CO
ureidc]fenylmetyl troletyl- xyfenyl
1358 4-(N'-fenyltioureido)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1360 4-[N'-(o-toluyl) - H izobutyl 2,3-dihy- co
ureidc]fenylmetyl drobenzo-
furán-5-yl
1361 4-[N'-(o-toluyi)- H metyl- 4-karbome- CO
ureido]fenylmetyl tioetyl toxyfenyl
1380 4-(N'-fenyl-N''-metyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
guanidino) fenylmetyl dioxol-5-yl
1382 4-[N'-(o-toluyl)- H 4-(metyl- 4-karbo- CO
ureido]fenylmetyl sulfonyl- raetoxyfenyl
amino) butyl
1388 4-(fenylureido) - H izobutyl 4-karbo- CO
fenylmetyl metoxyfenyi
1390 4-(1,3-imrdAzol-2-yl- H izobutyl 1,3-benzo-
anino) fenylmetyl dioxol-5-yl
1393 4-[Ν'-(2-pyridyl)- H 2-(metyl- 1,3-benzo- CO
ureido]fenylmetyl tioetyl dloxo-5-yl
1396 4-(1,3-benzoxazol- H izobutyl 1,3-benzo- CO
-2-ylaminoj fenyletyl dioxol-5-yl
1400 4-[N'-(2-metylfenyl)- H izobutyl fenyl- CO
ureido]fenylmetyl etyl
1429 4-(N'-(3-metyl-2-pyri- H 2-(metyl- 1,3-benzo- CO
dyl)ureido]fenylmetyl tioetyl dioxo-5-yl
1444 4-(benzoxazolinonyl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
karbonylamiau) fenyl- dioxol-5-yl
1474 4-(2-pyrolylkarbor.yl- H izobutyl 1,3-benzo- CO
ami.no) fenylmetyl dioxol-5-yl
1475 4-(N'-alylureido)- H izobutyl 1,3-benzo- CO
fenylmetyl dioxol-5-yl
1490 4-[N'-(2-metylfenyl)- H izobutyl etinyl CO
ureido]fenylmetyl
1515 4-[N'-(2-metylfenyl)- H izobutyl alyl CO
ureido]fenylmetyl
1525 4-[N'-(2-fluárfenyl)- H izobutyl 3,4-dimeto- CO
ureido)fenylmetyl xyfenyl
1526 4-(4-fluórfenyl- H izobutyl 3,4-dimeto- CO
ureido)fenylmetyl xyfenyl
1536 i 4-[N'-(2-metylfanyl)ureido] fenylmetyl R lzobutyl metyl CO
1594 4-[N'-(2-metylfenyi)- ureido1 fenylmetyl H izobutyl H CO
1648 4-(2-indolylkarbonylanúno) fenylnetyl H izobutyl H CO
1655 4-(3-indolylkarbonyl- H lzobutyl 1,3-benzo- CO
ami.no) fenylmetyl dioxol-5-yl
1721 4-[Ν'-(2-metylfenyl)- H lzobutyl morfolino- CO
ureido}fenylmetyl metyl
1725 3-metoxy-4- IN'-fenyl- H 2-(metyl- 1,3-benzo- CO
ureido)fenylmetyl tio)etyl dloxol-5-yl
1726 3-metoxy-4- (N'-fenyl- H izobutyl 3,4-dimeto- CO
ureido)fenylmetyl xyíenyl
1727 3-metoxy-4-(N'-fenyl- E 2-(metyl- 3,4-dimeto- CO
ureido)fenylmetyl tiojetyl xyfenyl
1728 3-metoxy-4-(N'-2-py- H izobutyl 3(4-dimezo- CO
ridylureido)fenylmetyl xyfenyl
1729 3-netoxy-4 -(N'-3-oe- H izobutyl 3,4-dimezo- CO
tyl-2-pyridylureido)fenylmetyl xyfenyl
1730 3-metoxy-4-(N'-3-me- H 2-(metyl- 3/4-dimeto- CC
tyl-2-pyridylureido)fenylmetyl tio)etyl xyfenyl
1731 3-metoxy-4- (N'-3-me- H 2-(metyl- 1, 3-ben.zo- CC
tyl-2-pyridylureido)fenylmetyl tioíetyL dioxol-5-yl
1732 '4-[Ν'-(3-metyl- H 2- (jnetyl- 3,4-dimeto- CO
-2-pyridyl)ureido]- tio)etyl xyfenyl
fenylmetyl
Vhodné zlúčeniny vzorca (I) podľa vynálezu sú nasledujúce zlúčeniny: BIO-1006, BIO-1056, BIO-1089, BIO-1179, BIO-1194, BIO-1221, BIO-1224, BIO-1238, BIO-1245, BIO-1246, BIO-1248, BIO-1270, BIO-1282, BIO-1294, BIO-1321, BIO-1336, BIO-1382 a BIO-1400.
Ešte vhodnejšie sú zlúčeniny: BIO-1218, BIO-1272,
BIO-1311,
BIO-1361,
BIO-1429,
BIO-1515,
BIO-1648,
BIO-1319,
BIO-1388,
BIO-1444,
BIO-1525,
BIO-1655,
BIO-1345,
BIO-1390,
BIO-1474,
B1O-1526,
BIO-1721,
BIO-1347,
BIO-1393,
BIO-1475,
BIO-1536,
BIO-1725,
BIO-1358,
BIO-1396,
BIO-1490,
BIO-1594,
BIO-1726,
BIO-1727, BIO-1728, BIO-1729, BIO-1730, BIO-1731 a
BIO-1732.
Najvýhodnejšie zlúčeniny sú: BIO-1218, BIO-1272, BIO-1311, BIO-1347, BIO-1393, BIO-1429, BIO-1515, BIO-1725, , BIO-1726, BIO-1727, BIO-1728, BIO-1729, ΒΙΟ-1730, ΒΙΟ-1731 a BIO-1732.
Zlúčeniny podľa vynálezu možno syntetizovať bežnými technikami. Výhodne sa pripravujú s ľahko dostupných východiskových materiálov ako sú α-aminokyseliny. Výhodné sú taktiež modulárne a konvergentné metódy syntézy. Napríklad pri konvergentnom prístupe sa väčšie časti konečného produktu spájajú v záverečných stupňoch syntézy, miesto toho, aby sa postupne pridávali malé časti k rastúcemu molekulovému reťazcu.
Podľa jedného z možných uskutočnení sa môžu látky podľa vynálezu syntetizovať nasledovným spôsobom. Chránený chirálny amín sa aduje na a, β-nenasýtený ester za vzniku chráneného esteru β-aminokyseliny. Po vhodnom odstránení ochrannej skupiny sa ester β-aminokyseliny kondenzuje s vhodným aktivovaným esterom. Kondenzačný produkt, pokiaľ je vhodne substituovaný, môže ďalej reagovať s iným aktivovaným esterom. Tento materiál sa môže ďalej použiť na prípravu žiadaných látok podľa vynálezu.
Alternatívne sa môžu zvyšky, obsahujúce aktivované estery, kondenzovať navzájom a až vzniknutá zlúčenina sa môže pripojiť k β-aminoesterovému zvyšku. Pritom sa môžu uskutočniť aj konečné manipulácie a/alebo nevyhnutné deprotekčné kroky.
Pri vhodných podmienkach sa môžu žiadané funkčné skupiny inkorporovať (v chránenej alebo nechránenej forme) do jedného z aktivovaných esterových zvyškov. Ten sa potom kondenzuje s esterom β-aminokyseliny alebo so zvyškom vzniknutým predošlou kondenzáciou esteru β-aminokyseliny s aktivovaným esterom. Pokiaľ je nutné, výsledný produkt sa potom podrobí deprotekčným procedúram a získajú sa tak látky podľa vynálezu.
Alternatívne sa môžu estery chirálnych β-aminokyselín, použité pri príprave zlúčenín podľa tohto vynálezu, syntetizovať známymi technikami, aké sú napríklad opísané v patentovom spise US 5 344 957.
Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu taktiež modifikovať pripojením vhodných funkčných skupín, aby sa zvýšili ich selektívne biologické vlastnosti. Tieto modifikácie sú pri súčasnom stave poznatkov známe a zahŕňajú také modifikácie, ktoré spôsobujú zvýšenie biologickej priestupnosti do daného biologického systému (ako napríklad do krvi, lymfatického systému alebo do centrálnej nervovej sústavy), zvýšenie orálnej dostupnosti, zvýšenie rozpustnosti na injekčnú aplikáciu, zmenu metabolizmu alebo zmenu vylučovania.
Termín „pacient“ v tejto patentovej prihláške sa vzťahuje na cicavca, vrátane človeka a termín „bunka“ zámená bunky cicavcov, vrátane ľudských buniek.
Zlúčeniny, získané podľa vynálezu, sa môžu testovať na aktivitu a špecifitu proti VLA-4 tak in vitro ako aj in vivo.
Tak napríklad aktivita inhibície bunkovej adhézie sa môže pri týchto zlúčeninách merať určovaním koncentrácie inhibítora nutnej na blokovanie väzby buniek, exprimujúcich VLA-4 k doskám, pokrytých fibrionektínom alebo CS1. V tomto teste sú mikrotitračné jamky potiahnuté buď fibronektínom (obsahujúcim sekvenciu CS1) alebo CS1. Ak sa použije CS1, musí byť konjugovaný s nosným proteínom, ako je hovädzí sérumalbumín, aby sa zaistila väzba v jamkách. Len čo sú jamky potiahnuté, nanesú sa v rôznych koncentráciách skúmané zlúčeniny spolu s bunkami, exprimujúcimi VLA-4. V alternatívnom usporiadaní sa môžu skúmané látky naniesť ako prvé a inkubovať v potiahnutých jamkách pred pridaním buniek, exprimujúcich VLA-4. Bunky sa potom inkubujú v jamkách aspoň 30 minút. Po inkubácii sa jamky vyprázdnia a premyjú. Inhibícia väzby sa pre každú z koncentrácií meranej látky určuje kvantitatívne podľa fluorescencie alebo rádioaktivity, ktorá zostala na doske a porovnáva sa z kontrolami, ktoré neobsahujú žiadnu látku.
Bunky exprimujúce VLA-4, použiteľné v tomto teste, môžu byť bunky Ramos, bunky Jurkat, bunky A375 melanómu alebo periferálne lymfocyty ľudskej krvi (PBL). Použité bunky sa môžu fluorescenčné alebo rádioaktívne označiť.
Inhibičná aktivita zlúčenín podľa vynálezu sa môže kvantitatívne určiť taktiež testom priamej väzby. Pri tomto teste sa VCAM-IgG-fúzovaný proteín, ktorý má prvé dve imunologické sekvencie VCAM (D1D2) pripojené nad pántovou oblasťou molekuly IgGl („VCAM 2D-IgG“), konjuguje k markerovému enzýmu, napríklad k alkalickej fosfatáze („AP“). Syntéza tohto VCAM-IgG-fúzovaného proteínu je opísaná v PCT spise WO 90/13300 a jeho konjugácia s markerovým enzýmom sa dosiahne pomocou dobre známych metód („cross linking“).
Konjugát VCAM-IgG s enzýmom sa potom umiestni do jamky vo viacjamkovej filtračnej doske, ktoráje naprí12 klad súčasťou „Millipore Multiscreen Assay“ systému (Millipore Corp., Bedford, Ma). Do jamiek sa potom vnesie testovaná látka v rôznych koncentráciách a potom sa pridajú bunky, exprimujúce VLA-4. Bunky, skúmaná látka a konjugát VCAM-IgG s enzýmom sa spolu zmiešajú a inkubujú sa pri laboratórnej teplote.
Po inkubácii sa kvapalina z jamiek odsaje vo vákuu a zostanú v nej bunky spolu s viazaným VCAM. Kvantitatívne stanovenie viazaného VCAM sa uskutoční pridaním vhodného kolorimetricklého substrátu na enzým konjugovaný s VCAM-IgG a určením množstva reakčného produktu. Úbytok reakčného produktu znamená zvýšenú inhibíciu adhézie buniek.
Na vyhodnotenie inhibičnej špecifity látok podľa vynálezu proti VLA-4 sa uskutočňujú aj testy pre iné významné skupiny integrínov, t. j. β2 a β3 integríny, ako sú VLA 5, VLA-6 a α4β7. Tieto testy sa môžu podobať testom inhibície adhézie a testom priamej väzby, uvedeným skôr, v ktorých sa použijú príslušné integrín exprimujúce bunky a zodpovedajúce ligandy. Tak napríklad, polymorfonukleárne bunky (PMN) tvoria na svojom povrchu β2 integríny a viažu sa na ICAM. Integríny β3 sa zúčastňujú na agregácii krvných doštičiek a inhibícia sa môže merať štandardným testom agregácie doštičiek. VLA-5 sa špecificky viaže na sekvencie Arg-Gly-Asp, zatiaľ čo VLA-6 na laminín. Integrín α4β7 je novoobjaveným homológom VLA-4 a taktiež sa viaže na fíbronektín a VCAM. Špecifita proti α4β7 sa určí testom väzby, v ktorom sa používa uvedený konjugát VCAM-IgG s markerovým enzýmom a bunky, exprimujúce α4β7, ale nie VLA-4, napríklad bunky RPMI-8866.
Len čo sa VLA-4-špecifické inhibítor}' identifikujú, možno ich ďalej charakterizovať testami in vivo. Jeden takýto test stanovuje inhibíciu kontaktnej hypersenzitivity pri zvieratách (opísaný v publikáciách P.L. Chisholm a spol., „Monoclonal Antibodies to the Integrín a-4 Subunit Inhibit the Murine Contact Hypersensitivity Response“, Eur. J. Immunol. 23, 682-688 (1993) a „Current Protocol in Immunology“, J. E. Coligan a spol. Eds., John Wiley & Sons, New York, 1, odd. 4.2.1. - 4.2.5. (1991). Pri tomto teste sa koža pokusného zvieraťa senzibilizuje pôsobením nejakého iritantu, napríklad dinitrofluórbenzénu, a následným miernym mechanickým podráždením, napríklad ľahkým poškrabaním ostrým predmetom. Počas hojenia sa zviera opäť senzibilizuje rovnakým spôsobom. Niekoľko dní po senzibilizácii sa jedno ucho zvieraťa vystaví pôsobeniu chemického iritantu, zatiaľ čo druhé ucho sa potrie iba nedráždivým kontrolným roztokom. Krátko nato sa zvieraťu aplikujú rôzne dávky inhibítoru VLA-4 podkožnou injekciou, [n vivo inhibícia zápalu, spojeného s adhéziou buniek, sa vyhodnotí zmeraním opuchu na uchu s iritantom a porovnaním s uchom bez iritantu. Opuch sa meria posuvným meradlom alebo iným nástrojom, vhodným na meranie hrúbky ucha. Týmto spôsobom možno medzi látkami podľa vynálezu nájsť tie zlúčeniny, ktoré sú najvhodnejšie na inhibíciu zápalov.
Iný in vivo test, ktorý možno použiť na testovanie inhibítorov podľa tohto vynálezu, je test ovčej astmy. Tento test sa v podstate uskutočňuje tak, ako je opísaný v publikácii W. M. Abraham a spol., „α-Integrins Mediate Antigen-induced Late Bronchial Responses and Prolonged Airway Hyperresponsives in Sheep“, J. Clin. Invest. 93, 776-787 (1994). Tento test meria inhibíciu neskorej fázy odpovede dýchacích ciest, indukovanej antigénom Ascaris, pri astmatických ovciach.
Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa môžu použiť vo forme farmaceutický prijateľných solí, odvodených od an organických alebo organických kyselin a báz. Medzi takéto soli kyselín patria: acetát, adipát, alginát, aspartát, benzoát, benzénsulfonát, bisulfát, butyrát, citrát, gafrát, gáforsulfonát, cyklopentánpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, etánsulfonát, fumarát, glukoheptanoát, glycerolfosfát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxyetánsulfonát, laktát, maleát, metánsulfonát, 2-naňalénsulfonát, nikotinát, oxalát, pamoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, pikrát, pivalát, propionát, sukcinát, tartarát, tiokyanát, tozylát a undekanoát. Soli s bázami zahŕňajú: amóniové soli, soli alkalických kovov, ako sodné soli, draselné soli, soli kovov alkalických zemín, ako vápenaté soli a horečnaté soli, soli s organickými bázami, ako soli s dicyklohexylamínom, N-metyl-D-glukamínom, a soli s aminokyselinami ako s arginínom, lyzínom atď. Taktiež možno kvartemizovať skupiny obsahujúce dusík pôsobením činidiel ako sú nižšie alkylhalogenidy, napríklad metyl-, etyl-, propyl- a butylchloridy, bromidy alebo jodidy; dialkylsulfáty, napríklad dimetylsulfát, dietylsulfát, dibutylsulfát a diamylsulfát; halogenidy s dlhým reťazcom, napríklad decyl-, lauryl-, myristyla stearylchloridy, bromidy alebo jodidy; aralkylhalogenidy, napríklad benzylbromid alebo fenetylbromid a iné. Získané produkty možno rozpustiť alebo dispergovať vo vode alebo v olejoch.
Zlúčeniny podľa tohto vynálezu môžu byť súčasťou farmaceutických prípravkov, ktoré sa môžu podávať orálne, parenterálne, vo forme inhalačných sprejov, vo forme prípravkov na vonkajšie použitie, rektálne, nasálne, bukálne, vaginálne alebo vo forme implantovaného rezervoáru. Termín ..parenterálny“ v tomto prípade zahŕňa subkutánnu, intravenóznu, intramuskulámu, intraartikulámu, intrasynoviálnu, intrastemálnu, intratckälnu, intraheptálnu, intraléznu a intrakraniálnu injekčnú alebo infúznu techniku.
Farmaceutické prípravky podľa tohto vynálezu zahŕňajú akúkoľvek zlúčeninu podľa vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, spolu s akýmkoľvek farmaceutický prijateľným nosičom. Použitý termín „nosič“ zahŕňa prijateľné pomocné látky a vehikulá. Farmaceutický prijateľné nosiče, použiteľné vo farmaceutických prípravkoch podľa tohto vynálezu, zahŕňajú (bez toho, aby sa vynález obmedzoval iba na vymenované látky): meniče iónov, oxid hlinitý, alumíniumstearát, lecitín, sérumproteíny ako napríklad ľudský sérumalbumin, pufre ako napríklad fosfáty, glycín, kyselinu sorbovú, sorbát draselný, zmesi parciálnych glyceridov nasýtených rastlinných mastných kyselin, vodu, soli alebo elektrolyty ako napríklad protamínsulfát, hydrogenfosfát sodný, hydrogenfosfát draselný, chlorid sodný, zinočnaté soli, koloidný silikagél, trisilikát horečnatý, polyvinylpyrolidón, látky na báze celulózy, polyetylénglykol, sodnú soľ karboxymetylcelulózy, polyakryláty, vosky, blokové polyméry, polyetylén-polyoxypropylén, polyetylénglykol a lanolín.
Podľa vynálezu môžu byť farmaceutické prípravky vo forme sterilných prípravkov pre injekcie, napríklad ako sterilné injikovateľné vodné alebo olejové suspenzie. Tieto suspenzie možno pripraviť známymi technikami, pričom sa používajú vhodné dispergenty alebo zmáčadlá. Sterilný injikovateľný prípravok môže byť aj sterilný injikovateľný roztok alebo suspenzia v netoxickom parenterálne prijateľnom riedidle alebo rozpúšťadle, napríklad roztok v 1,3-butándiole. K prijateľným vehikulám a rozpúšťadlám patrí voda, Ringerov roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Ako rozpúšťadlá alebo suspenzné činidlá možno taktiež bežne použiť sterilné netuhnúce oleje. Na tento účel sa môže použiť akýkoľvek nedráždivý netuhnúci olej vrátane syntetických monoglyceridov a diglyceridov. Na prí pravú injekčných prípravkov sú taktiež vhodné mastné kyseliny, ako napríklad kyselina olejová a jej glyceridové deriváty, rovnako ako farmaceutický prijateľné prírodné olejc, ako napríklad olivový alebo ricínový olej, hlavne v ich polyoxyetylovanej forme. Tieto olejové roztoky alebo suspenzie môžu ako riedidlo alebo disperzné činidlo taktiež obsahovať alkohol s dlhým reťazcom.
Farmakologické prípravky podľa vynálezu sa môžu podávať orálne v akejkoľvek orálne prijateľnej liekovej forme vrátane toboliek, tabliet, vodných suspenzií alebo roztokov, pričom tento výpočet nevyčerpáva rozsah vynálezu. V prípade tabliet na orálnu aplikáciu sa ako nosič zvyčajne používa laktóza a kukuričný škrob. Typicky sa pridávajú lubrikanty ako je magnéziumstearát. Pri orálnej aplikácii v tobolkách sa ako vhodné riedidlá môžu použiť laktóza a kukuričný škrob. Ak sa na orálnu aplikáciu používajú vodné suspenzie, aktívna zložka sa zmieša s emulgačnými a disperznými činidlami. Podľa potreby možno pridať sladidlá, látky upravujúce chuť a farbivá.
Farmaceutické prípravky podľa tohto vynálezu možno podávať taktiež vo forme čapíkov na rektálnu aplikáciu. Capíky sa môžu pripravovať zmiešaním účinnej látky s vhodným nedráždivým vehikulom, ktoré je tuhé pri teplote miestnosti, ale tekuté pri rektálnej teplote, takže sa v konečníku roztopí a uvoľní liečivo. Takýmito materiálmi sú kakaové maslo, včelí vosk a polyetylénglykoly.
Farmaceutické prípravky podľa vynálezu sa môžu podávať aj vo forme prípravkov na vonkajšie použitie, hlavne keď aplikačným cieľom sú oblasti alebo orgány dobre dostupné vonkajšej aplikácii, ako je to pri ochoreniach očí, kože alebo dolnej časti zažívacieho traktu. Na uvedené oblasti alebo orgány sa môžu ľahko pripraviť vhodné prípravky na vonkajšie použitie.
Pri topických aplikáciách pre dolný zažívací trakt sa môže použiť forma čapíkov (pozri skôr) alebo forma vhodných výplachových formulácií. Látky sa taktiež môžu použiť vo forme náplastí.
Pri topických aplikáciách môžu byť farmaceutické prípravky formulované ako vhodné masti, obsahujúce aktívnu zložku suspendovanú alebo rozpustenú v jednom alebo viacerých nosičoch. Nosiče na topickú aplikáciu látok podľa vynálezu zahŕňajú, bez toho, aby sa tým obmedzil rozsah vynálezu, minerálne oleje, vazelínový olej, bielu vazelínu, propylénglykol, polyoxyetylén, polyoxypropylénovú pastu, emulgačný vosk a vodu. Alternatívne sa môžu farmaceutické prípravky formulovať tak, že sa pripraví tekutá lieková forma na omývanie alebo krém, obsahujúci aktívnu zlúčeninu suspendovanú alebo rozpustenú v jednom alebo viacerých farmaceutický prijateľných nosičoch. Medzi vhodné nosiče patria minerálny olej, sorbitanmonostearát, polysorbát 60, cetylesterový vosk, stearylalkohol, 2oktyldodekanol, benzylalkohol a voda, pričom tento výpočet nevyčerpáva rozsah vynálezu.
Na využitie v očnom lekárstve môžu byť farmaceutické prípravky formulované ako mikrosuspenzie v izotonickom sterilnom soľnom roztoku s definovaným pH alebo, výhodnejšie, ako roztoky v izotonickom sterilnom soľnom roztokom s definovaným pH, bez konzervačných prísad alebo s konzervačnými prísadami, ako sú napríklad benzylalkóniumchloridy. Na použitie v očnom lekárstve môžu byť farmaceutické prípravky formulované ako masti, napríklad vazelínové masti.
Farmaceutické prípravky podľa vynálezu sa môžu taktiež aplikovať vo forme nasálnych aerosólov alebo sa môžu inhalovať s použitím rozprašovača kvapalných alebo pevných častíc, alebo dávkovacieho inhalátora. Takéto prípravky sa pripravia dobre známymi technikami a môžu to byť roztoky v soľnom roztoku s použitím benzylalkoholu alebo iných vhodných konzervačných prísad, promótorov absorpcie zabezpečujúcich lepšiu biologickú dostupnosť, fluorouhľovodíkov a/alebo iných konvenčných solubilizačných prísad alebo dispergentov.
Množstvo aktívnej zložky, zmiešanej s nosičmi v aplikačnej forme, bude závisieť od pacienta a od formy aplikácie. Je potrebné uvedomiť si, že dávka a liečebný režim budú pre každého pacienta iné a budú závisieť od mnohých faktorov, napríklad od aktivity danej látky, od veku pacienta, jeho váhy, zdravotného stavu, pohlavia, diéty, dĺžky aplikácie lieku, rýchlosti vylučovania, kombinácii liekov, od úvahy ošetrujúceho lekára a od toho, ako ťažko je pacient chorobou zasiahnutý. Množstvo účinnej látky môže taktiež závisieť od terapeutického alebo profylaktického činidla, ak je takéto činidlo spolu s účinnou látkou podávané.
Množstvo a frekvencia podávania zlúčenín podľa tohto vynálezu, potrebné na prevenciu, potlačenie alebo inhibíciu adhézie buniek bude závisieť od mnohých faktorov, ako je povaha inhibítora, veľkosť pacienta, cieľ liečby, povaha liečenej choroby, zloženie farmaceutického prípravku a úvaha ošetrujúceho lekára. IJčinné dávky sa pohybujú medzi cca 0,001 až cca 100 mg/kg telesnej hmotnosti za deň, najmä cca 0,1 až 10 mg/kg telesnej hmotnosti.
Podľa iného uskutočnenia môžu prípravky, obsahujúce zlúčeniny podľa vynálezu, zahŕňať ďalšie účinné látky, zvolené zo skupiny obsahujúcej kortikosteroidy, bronchodilatanty, antiastmatiká (stabilizátory žírnych buniek), protizápalové látky, antireumatiká, imunosupresanty, antimetabolity, imunomodulátory, antipsoriatiká a antidiabetiká. Konkrétne zlúčeniny z každej z uvedených tried možno zvoliť z látok uvedených pod príslušným nadpisom v „Comprehensive Medicinaí Chemistry“, Pergamon Press, Oxford 1990, str. 970 - 986. Do tejto skupiny patria aj látky ako teofilín, sulfasalazín a aminosalicyláty (protizápalové látky), cyklosporín, FK-506 a rapamycín (imunosupresanty), cyklofosfamid a metotrexát (antimetaboliká) a interferóny (imunomodulátory).
Podľa iného uskutočnenia vynález ponúka metódy prevencie, inhibície alebo potlačenia zápalov, spojených s adhéziou buniek a imunitných alebo autoimunitných odoziev spojených s adhéziou buniek. Adhézia buniek, spojená s VLA-4, zohráva kľúčovú rolu pri mnohých zápaloch a chorobách, spojených s imunitou a autoímunitou. Inhibícia adhézie buniek látkami podľa vynálezu sa preto môže využiť pri metódach liečby alebo prevencie zápalových ochorení a chorôb spojených s poruchami imunity a autoimunity. Takýmito chorobami, vhodnými na liečenie metódami podľa vynálezu, sú najmä astma, artritída, psoriáza, odmietanie cudzích tkanív pri transplantáciách, roztrúsená skleróza, cukrovka a zápal čriev.
Pri týchto metódach sa zlúčeniny podľa vynálezu môžu používať buď samotné, alebo v kombinácii s inými protizápalovými alebo imunosupresívnymi látkami. Takéto kombinované terapie zahŕňajú aplikáciu liečiv v jedinej spoločnej liekovej forme alebo v niekoľkých liekových formách, podávaných súčasne alebo každá inokedy.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Nasledujúce príklady uskutočnenia vynálezu slúžia na ilustráciu a úplné pochopenie predmetu vynálezu a neobmedzujú v žiadnom smere jeho rozsah.
Postup A - Syntéza esterov kyseliny škoricovej
Metóda A
K 1,0 mmol kyseliny škoricovej alebo substituovanej kyseliny škoricovej v 10 ml dichlórmetánu sa pomaly pridá 1,5 mmol oxalylchloridu. Reakčná zmes sa mieša 4 hodiny pri teplote miestnosti, rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu a k zvyšnému chloridu kyseliny sa pridá 5 ml metanolu alebo terc-butylalkoholu. Po odparení nadbytočného alkoholu sa získa metylester alebo terc-butylester v kvantitatívnom výťažku.
Metóda B
K 1,0 mmol zodpovedajúceho aldehydu v 10 ml tetrahydrofuránu sa pridá 1,0 mmol terc-butoxykarbonylmetyléntrifenylfosforánu (Aldrich) a vzninutá zmes sa mieša 16 hodín pri teplote miestnosti. Potom sa zriedi 10 ml petroléteru a prefiltruje sa cez stĺpec Celitu. Filtrát po zakoncentrovaní vo vákuu poskytne požadovaný produkt.
E-l:
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 95 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,57 (d, 1H, J = = 16 Hz), 7,47 (m, 2H), 7,34 (m, 3H), 6,35 (d, 1H, J = 16 Hz), 1,52 (s, 9H).
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 88 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 8,62 (br s, 1H), 8,51 (m, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,48 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 7,22 (m, 1H), 6,36 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 1,49 (s, 9H).
E-7:
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 90 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 8,60 (br s, 1H), 7,66 (t, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 7,36 (d, 1H), 7.21 (m, 1H), 6,78 (d, 1 H, J = 15,9 Hz), 1,52 (s, 9H).
E-8:
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 91 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,52 (d, 1H, J = = 15,9 Hz), 7,44 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,85 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,21 (d, 1H, J= 15,9 Hz), 3,81 (s, 3H), 1,52 (s, 9H).
E-9:
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 90 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,48 (d, 1H), 7,28 - 7,18 (m, 5H), 5,69 (d, 2H), 3,44 (d, 2H), 1,42 (s, 9H).
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 94 %. H-NMR spektrum (CDC1, 300 MHz, ppm): 7,95 (d, 1H, J = = 16 Hz), 7,49 (d, 1H), 7,42 (t, 1H), 6,94 (dd, 2H), 6,51 (d, 2H, J = 16 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E-4:
03t8u
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 92 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,52 (d, 1H, J = = 15,9 Hz), 7,28 (t, 1H), 7,09 (d, 1H), 7,02 (br s, 1H), 6,89 (d, 1 H), 6,34 (d, 1 H, J = 15,9), 3,82 (s, 3H), 1,54 (s, 9H).
E-5:
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 98 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,64 (d, 1H, J = = 16 Hz), 7,29 (t, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,06 (br s, 1H), 6,94 (d, 1 H, J = 16 Hz), 3,82 (s, 3H), 3,80 (s, 3H).
E-6:
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 90 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,61 (d, 1H, J = = 16 Hz), 7,42 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 6,28 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,78 (s, 3H), 3,74 (s, 3H).
E-10:
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 91 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,56 (d, 1 H, J = = 16 Hz), 7,46 (t, 2H), 7,02 (t, 2H), 6,26 (d, 2H, J = 16 Hz), 1,54 (s, 9H).
E-ll:
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 89 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,47 (d, 1H, J = = 15,9 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,98 (br s, 1H), 6,78 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,84 (s, 6H), 1,48 (s, 9H).
E-12:
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 91 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,61 (d, 1H, J = = 15,9 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,02 (br s, 1H), 6,83 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,28 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 3,88 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 92 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,46 (d, 1 H, J = = 16,1 Hz), 6,99 (s, 1H), 6,97 (d, 1H), 6,76 (d, 1H), 6,18 (d, 1 H, J = 16,1 Hz), 5,96 (s, 2H), 1,50 (s, 9H).
E-14;
Zlúčenina sa pripraví metódou A vo výťažku 88 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,55 (d, 1H, J = = 15,9 Hz), 6,98 - 6,75 (m, 2H), 6,22 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 5,96 (s, 2H), 3,75 (s,3H)
E-15:
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 89 %. H-NMR spektrum (CDC13 300 MHz, ppm): 7,45 (d, 1H, J = = 15,8 Hz), 6,99 (s, 1H), 6,98 (d, 1H), 6,80 (d, 1H), 6,18 (d, 1H, J = 15,8 Hz), 4,21 (br s, 4H), 1,49 (s, 9H).
E-16:
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 88 %.
E-17:
Zlúčenina sa pripraví metódou B vo výťažku 93 %. H-NMR spektrum (CDCip δ: 8,00 (d, 2H, J = 5,5 Hz), 7,53 (d, 2H, J = 5,5), 7,58 (d, 1H, J = 10,7 Hz), 6,42 (d, 1H, J = = 10,7 Hz), 3,90 (s, 3H), 1,51 (s, 9H).
Postup B - Syntéza β-aminokyselín
Do dvojlitrovej banky s guľatým dnom, opatrenej magnetickým miešadlom, sa vnesie 1000 ml metanolu a banka sa i s obsahom vytáruje. Z bomby sa zavedie 11 g (0,29 mol) suchého chlorovodíka. K tomuto roztoku sa naraz pridá 0,29 g príslušnej kyseliny škoricovej. Výsledná zmes sa refluxuje dovtedy, kým TLC analýza neukáže, žc reakcia je skončená. Zmes sa ochladí na laboratórnu teplotu a nechá sa cez noc v chladničke. Kryštalický produkt sa odsaje na stredne hustej frite, premyje sa studeným metanolom a vysuší sa na filtri. Získa sa biely alebo takmer biely produkt.
Prekurzor látky β-3
Získa sa vo výťažku 94 %. TLC (3 : 1 hexán/etylacetát; UV): R = 0,48; teplota topenia 134 - 136 °C; H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz): 7,58 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 7,00-6,97 (m, 3H), 6,79 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 6,24 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 5,98 (s, 2H), 3,77 (s, 3H). Hmotnostné spektrum (FAB): 206.
Prekurzor látky β-5
Získa sa vo výťažku 94 %. TLC (3 : 1 hexán/etylacetát; UV): Rf = 0,48; teplota topenia 89 - 90 °C; H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz): 7,63 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 7,46 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,89 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,29 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 3,82 (s, 3H), 3,77 (s, 3H). Hmotnostné spektrum (FAB): 192.
Michaelova adícia (R)-(+)-N-benzyl-l-fenyletylamínu na metyl-4-metoxycinamát
Do jednolitrovej trojhrdlej banky s guľatým dnom, vybavenej zátkou, teplomerom a 250 ml prikvapkávacím lievikom s prívodom argónu, sa vnesie 32,6 g (0,132 mol, 1,1 ekvivalentu počítané na cinamát) (R)-(+)-N-benzyl-l-fenyletylamínhydrochloridu a aparatúra sa preplachuje argónom počas 30 minút. Soľ sa suspenduje v 200 ml suchého tetrahydrofuránu a zmes sa ochladí na vnútornú teplotu -70 °C v kúpeli s acetónom a suchým ľadom. K suspenzii sa prikvapkávacím lievikom prikvapká 103 ml
2,5 M roztoku n-butyllítia v hexáne (0,257 mol, 1,95 ekvivalentu počítané na hydrochlorid aminu) takou rýchlosťou, aby vnútorná teplota nepresiahla -65 °C. Pridávanie trvá 90 minút. Po skončení pridávania sa zmes mieša ešte 1 hodinu pri -70 “C.Potom sa prikvapká z prikvapkávacieho lievika roztok 23 g (0,120 mol, 1 ekvivalent) metyl 4-metoxycinamátu v 125 ml tetrahydrofuránu počas 90 minút tak, aby vnútorná teplota neprestúpila -65 °C. Po pridaní sa zmes mieša ešte 2 hodiny pri -70 °C. Podľa TLC analýzy je po tomto čase reakcia ukončená. Studená reakčná zmes sa rozloží pridaním 250 ml 5 % roztoku kyseliny citrónovej a mieša sa cez noc pri laboratórnej teplote. Vrstvy sa oddelia v dvojlitrovom oddeľovacom lieviku a organická fáza sa premyje 5 % roztokom kyseliny citrónovej (1 x 125 ml). Spojené vodné vrstvy sa extrahujú ctylacetátom (1 x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa potom premyjú 5 % roztokom NaHCO3 (1 x 150 ml) a soľankou (1 x 150 ml) a vysušia sa nad síranom horečnatým. Po filtrácii a odparení do konštantnej hmotnosti sa získa 50,04 g (103 % teórie) surového produktu vo forme viskózneho oleja, ktorý státím stuhne. Čistý materiál sa získa rozotretím a miešaním s heptánom (1,5-2 ml/g, celkový objem 75 100 ml) pri laboratórnej teplote cez noc. Tuhá látka sa odsaje na stredne hustej frite a filtračný koláč sa premyje studeným heptánom (2 x 50 ml). Vy sušenie na filtri poskytne 28,93 g (60 %) čistého produktu vo forme bieleho prášku.
TLC (4 : 1 hexán/etylacetát): R = 0,50 (12, UV); teplota topenia 87 - 88 °C; H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz): 1,20 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 2,51 (dd, 1H, J = 9,4 Hz a 14,8 Hz), 2,66 (dd, 1H, J = 5,7 Hz a 14,8 Hz), 3,45 (s, 3H), 3,67 (ABq, 2H, J = 14,7 Hz), 3,79 (s, 3H), 3,98 (q, 1H, J = = 6,8 Hz), 4,37 (dd, 1H, J = 5,7 Hz a 9,3 Hz), 6,86 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,16 - 7,33 (m, 10 H), 7,40 (d, 2H, J = 7,3 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB): 404.
Hydrogenolýza benzylových skupín
Adukt, získaný v predošlom pokuse (28 g, 0,071 mol), sa suspenduje v 300 ml metanolu a k suspenzii sa za miešania prileje 8,25 g (6,8 ml, 0,179 mol, 2,5 ekvivalentu 96 % kyseliny mravčej. Ďalej sa naraz pridá 3,81 g 10 % Pd/C (Degussa E101 NEAV, 50 % vlhkosti, 0,00179 mol, 0,025 ekvivalentu). Zmes sa refluxuje 1 - 2 hodiny, až kým podľa TLC nie je reakcia ukončená. Zmes sa ochladí na laboratórnu teplotu a prefiltruje cez Celit. Banka i Celit sa premyjú 150 ml metanolu. Spojené filtráty sa odparia a získa sa 15,42 g (102 %) surového produktu vo forme o16 leja. Ten sa rozpustí v 250 ml izopropylalkoholu a zahreje sa do mierneho varu. Naraz sa pridá 10,76 g (0,071 mol, 1 ekvivalent) tuhej kyseliny D-vínnej. V zahrievaní sa pokračuje 15 minút, pričom sa vylúči soľ vo forme jemnej bielej látky. Zmes sa ochladí na laboratórnu teplotu a nechá sa stáť cez noc v chladničke. Kryštalická soľ sa odsaje na frite strednej hustoty, premyje sa 50 - 75 ml studeného izopropylalkoholu a vysuší sa na filtri. Výťažok produktu je 23 g (79 %). Zo získanej soli sa uvoľní voľná báza rozpustením v minimálnom množstve vody (125 ml) a pridaním tuhého NaHCO3 do nasýtenia vodného roztoku. Báza sa extrahuje do etylacetátu (3 x 100 ml), spojené organické vrstvy sa premyjú soľankou (1 x 100 ml) a vysušia sa nad síranom horečnatým. Po fdtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa 11,75 g (78 %) čistého produktu vo forme takmer bezfarebného oleja, ktorý ochladením tuhne.
TLC, CHCL/MeOH (9:1): R = 0,30 (I UV); HPLC (reverzná fáza; gradient MeCN/H^O/TFA): čistota 96 %, R( = 17,9 min. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz): 1,87 (br s, 2H), 2,62 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 3,64 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 4,35 (t, 1H, J = 6,9 Hz), 3,64 (s, 3H), 3,76 (s, 3H),
4,35 (t, 1H, J = 6,9 Hz), 6,84 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,25 (d, 2H, J = 8,6 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB): 210.
ÍJ-1:
u
H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,41 - 7,28 (m, 5H), 4,18 (q, 2H), 2,65 (d. 2H), 2,12 (br, 2H), 1,16 (t, 3H).
H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 6,81 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,72 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 6,66 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 5,85 (s, 2H), 4,22 (dd, 1H, J = 7,5 Hz a 7,3 Hz), 2,47 (dd, 2H, J = 7,5 Hz a 5,6 Hz), 2,21 (s, 2H), 1,35 (s, 9H).
¢-3:
'H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 6,82 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,72 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 6,73 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 5,89 (s, 2H), 4,29 (dd, 1H, J = 6,9 Hz a 6,8 Hz), 3,63 (s, 3H), 2,57 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 1,75 (s, 2H) β-4:
¢-5:
H-NMR spektrum (CDCl3> 300 MHz, ppm): 7,20 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,80 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 4,30 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 3,71 (s, 3H), 3,60 (s, 3H), 2,57 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 1,91 (s, 2H).
β-6:
OMe
H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,24 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 6,82 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 4,26 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 3,66 (s, 3H), 2,47 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 1,41 (s, 9H).
β-7:
H-NMR spektrum (CDC13> 300 MHz, ppm): 7,21 (dd, 1H, J = 8,2 Hz a 8,1 Hz), 6,95 - 6,93 (m, 2H), 6,78 (d, 1H, J = = 6,8 Hz), 4,34 (t, 1H, J = 6,7 Hz), 3,79 (s, 3H), 2,54 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 1,74 (s, 2H), 1,40 (s, 9H).
M:
H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,34 - 7,08 (m, 2H), 6,82 - 6,68 (m, 2H), 4,45 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 2,58 (d, 2H), 1,68 (br s, 2H).
¢-9:
H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,28 - 7,25 (m, 2H), 7,01 (d, 1H), 4,31 (t, 1H), 2,50 (d, 2H), 2,01 (br 2H), 1,41 (s, 9H).
β-10
H-NMR spektrum (CDC1 , 300 MHz, ppm): 6,84 (s, 1H), 6,79 - 6,76 (m, 1H), 4,24 - 4,19 (m, 1H), 4,19 (s, 4H), 2,50 (d, 2H), 1,63 (br, 2H), 1,41 (s, 9H).
¢-11:
' H-NMR spektrum (CDCl^ 300 MHz, ppm): 6,79 - 6,78 (m, 3H), 4,32 (t, 1H, J = 6,7 Hz), 3,75 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 2,52 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 1,82 (br, 2H), 1,42 (s, 9H)
CC^tBu
H2N^
H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 3,34 - 3,05 (m, 1H), 2,65 - 2,58 (m, 2H), 1,65 (d, 2H).
β-12:
H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,34 - 7,28 (m, 3H), 7,26 - 7,15 (m, 3H), 3,42 - 3,15 (m, 1H), 2,71 (dd, 1H, J = 5,5 Hz a 13,3 Hz), 2,54 (dd, 1H, J = 8,1 Hz a 13,3 Hz), 2,36 (dd, 1H, J = 4,2 Hz a 15,7 Hz), 2,20 (dd, 2H, J = 8,6 Hz a 15,7 Hz), 1,42 (s, 9H).
Zlúčenina β-13 sa pripraví nasledujúcim spôsobom.
K zmesi 3,4 g (28 mmol) (R)-a-metylbenzylamínu, 4 g (40 mmol) trietylamínu a 10 ml tetrahydrofuránu sa pridá 33 ml (33 mmol) IM roztoku TMSC1 v dichlórmetáne a zmes sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Tuhý podiel sa odfiltruje a filtrát sa zahustí. Takto získaný kvapalný silylamín (2,4 g (12,5 mmol) sa rozpustí v 35 ml tetrahydrofuránu a roztok sa ochladí na -78° C. K roztoku sa pri tejto teplote pomaly pridá 7,8 ml (12,5 mmol) 1,6 M roztoku n-butyllítia v hexáne. Zmes sa mieša 30 minút pri tejto teplote a potom sa k nej pridá roztok 2,56 g (12,4 mmol) terc-butyl-trans-3-(3-pyridyl)akrylátu v 10 ml tetrahydrofuránu. V miešaní sa pokračuje počas ďalších 30 minút a potom sa zmes rozloží 20 ml nasýteného roztoku NH4C1, nechá sa zohriať na teplotu miestnosti a extrahuje sa éterom. Spojené éterové extrakty sa vysušia nad K>CO3 a rozpúšťadlo sa odparí. Získaný olej (500 mg) sa rozpustí v zmesi 1,5 ml etanolu, 15 ml terc-butylalkoholu a 1,5 g mravčanu amónneho. Pridá sa 1,2 g 10 % Pd/C a zmes sa refluxuje 3 hodiny. Zvyčajné kyslé a bázické spracovanie poskytne 300 mg amínu β-13. Hmotnostné spektrum (FAB): 223.
0-14:
H-NMR spektrum (CDCy 8: 7,97 (d, 2H, J = 5,4 Hz), 7,41 (d, 2H, J = 5,4 Hz), 4,40 (t, 1H, J = 4,5 Hz), 3,88 (s, 3H), 2,55 (d, 2H, J = 4,5 Hz), 1,71 (br, 2H), 1,39 (s, 9H).
Všeobecný postup na syntézu zlúčenín M-l, M-2 a M-3
K roztoku 1,5 mmol komerčne dostupnej aminokyseliny v 4 ml dichlórmetánu a 1 ml metanolu sa pri 0 °C pridá 0,125 ml (1,65 mmol) tionylchloridu. Zmes sa 2 hodiny zahrieva na 40 °C a potom sa odparí dosucha vo vákuu. Zvyšok je požadovaný hydrochlorid aminoesteru.
M-l:
Získa sa vo výťažku 89 %. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 9,00 - 8,75 (bm, 3H), 7,71 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,58 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 4,71 (bs, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,40 - 3,06 (m, 2H).
M-2 :
Získa sa vo výťažku 85 % ako svetlohnedá tuhá látka. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,55 - 7,05 (bm, 6H), 3,66 (s, 3H), 3,65 - 3,45 (bm, 2H), 3,10 - 2,77 (bm, 5H), 2,17-1,95 (bm, 2H).
M-3:
Získa sa vo výťažku 84 % ako svetlohnedá tuhá látka. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,10 - 7,80 (bm, 4H), 7,65 - 7,45 (bm, 3H), 5,45 (br, 1H), 3,80 - 3,30 (bm, 2H), 3,55 (s, 3H).
Postup C - Syntéza kondenzovaných aminokyselín
K roztoku 0,50 g (5,25 mmol) etyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoátu (alebo iného esteru β-aminokyseliny, pripraveného podľa postupu B) v 5 ml dichlórmetánu sa za chladenia pridá 1,5 g (4,67 mmol) BocLeuOSu (na prípravu Cbz-chráneného analógu sa použije CbzLeuOSu) a 5 kvapiek trietylamínu. Zmes sa mieša 1 hodinu pri teplote miestnosti. Potom sa zriedi 10 ml dichlórmetánu a roztok sa premyje 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2x5 ml), 5 % roztokom NaHCO> (5 ml) a nasýteným roztokom NaCl (5 ml). Organická vrstva sa vysuší nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Výťažok bieleho tuhého produktu je 1,26 g (66%).
Postup D - Syntéza voľných aminokyselín
K miešanému roztoku 41,5 mg (0,102 mmol) produktu, získaného postupom C (esteru Boc-Leu-0-aminokyseliny), v 2 ml dichlórmetánu sa pri 0 - 5 °C pridajú 4 ml TFA. Zmes sa za stáleho miešania nechá zohriať na teplotu miestnosti a v miešaní sa pokračuje počas 1 hodiny. Potom rozpúšťadlo odparí vo vákuu a zvyšok sa znovu rozpustí v dichlórmetáne a rozpúšťadlo sa odparí. Tento cyklus sa opakuje ešte dvakrát a nakoniec sa vo vysokom vákuu odstránia posledné stopy TFA. HPLC ukazuje úplnú premenu na dva nové piky s kratším retenčným časom. Odparok sa rozpustí v DMF, za miešania sa pridá trietylamín až do bázickej reakcie na lakmus a produkt sa môže použiť na ďalšiu reakciu.
Skupina Cbz sa odstráni nasledovne:
Metanolický roztok 110 mg (0,23 mmol) produktu, získaného postupom C (použije sa pritom terc-butyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoát a CbzLeuOSu) sa hydrogenuje na katalytickom množstve 10 % Pd/C cez noc pri tlaku 40 psi. Filtráciou cez Celit a zakoncentrovanim vo vákuu sa získa 87 mg (kvantitatívny výťažok) voľnej bázy Leu Boe β-aminokyseliny vo forme číreho oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,30 (m, 5H), 5,33 (dd, 1H, J = 6 Hz a 8,82 Hz), 4,00 (m, 1H), 2,77 (dd, 1 H, J = 9 Hz a 15
Hz), 2,90 (dd, 1H, J = 6 Hz a 15 Hz), 1,69 (m, 2H), 1,45 (m, 1H), 1,29 (s, 9H), 0,90 (d, 6H, J = 6 Hz).
Príklad 1
Syntéza BIO-1002
A. Roztok 13 mg (0,15 mmol) kyseliny kyanooctovej, 30 mg (0,16 mmol) EDC a 30 mg (0,20 mmol) HOBt v 0,5 ml dimetylformamidu sa za miešania pri teplote miestnosti podrobí reakcii s roztokom 52 mg (0,105 mmol) amínu, pripraveného postupom D, a 0,30 ml (1,7 mmol) diizopropyletyl amínu v 1,0 ml DMF. Reakčná zmes sa mieša 18 hodín a potom sa vytrepe medzi 15 ml etyklacetátu a 10 ml 60 % nasýteného vodného roztoku NaHCO3. Organická fáza sa premyje 60 % nasýteným roztokom NaHCO3 (2 x 10 ml), vodou (5 ml), 5 % roztokom kyseliny citrónovej (3 x 10 ml), vodou (5 ml) a nasýteným roztokom NaCl (10 ml), vysuší sa nad síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu. Získa sa 27 mg (69 %) BIO-1002-OEt vo forme peny. H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 7,58 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,40 - 7,20 (m, 5H), 5,28 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,05 (m, 2H), 3,23 (m, 2H), 2,79 (m, 2H), 1,78 - 1,53 (m, 3H), 1,23 (m, 3H), 0,90 (m, 6H).
B. Roztok 27 mg (0,072 mmol) BIO-1002-OEt v 3 ml metanolu sa zmieša s 0,25 ml (0,25 mmol) 1,0 M vodného LiOH a mieša sa 22 hodín pri laboratórnej teplote. Po okyslení kyselinou trifluóroctovou sa zmes zakoncentruje vo vákuu. Surové produkty sa prečistia HPLC, ktorá poskytne 2,5 mg (10 %) BIO-1002A a 4,4 mg (18 %) BIO-1002B ako biele tuhé látky.
BIO-1002A: H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,08 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,30 - 7,16 (m, 5H), 5,25 (m, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,36 (s, 2H), 2,75 (m, 2H), 1,70 - 1,45 (m, 3H), 0,90 (m, 6H). HPLC (gradient A): 16,7 min. Hmotnostné spektrum, m/z 346.
BIO-1002B: H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 8,00 - 7,70 (m, 2H), 7,40 - 7,20 (m, 5H), 5,28 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,45 (s, 2H), 2,78 (m, 2H), 1,65 - 1,40 (m, 3H), 0,90 m, 6H). HPLC (gradient A): 20, 6 min. Hmotnostné spektrum, m/z 346.
Príklad 2
Syntéza BIO-1003
A. Postupom, opísaným v príklade IA, sa nechá zreagovať 22 mg (0,15 mmol) kyseliny cyklohexyloctovej, 30 mg (0,16 mmol) EDC a 30 mg (0,20 mmol) HOBt s 52 mg (0,105 mmol) amínu, pripraveného postupom D, a 0,30 ml (1,7 mmol) diizopropyletylamínu v 1 ml dimetylformamidu. Získa sa 32 mg (71 %) BIO-1003-OEt vo forme peny.
H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 7,42 - 7,18 (m, 6H), 6,08 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,05 (m, 2H), 2,81 (m, 2H), 2,11 - 0,80 (m, 25 H).
B. Podľa postupu, opísaného v príklade 1B, sa z 32 mg (0,074 mmol) BIO-1003-OEt a 0,25 ml (0,25 mmol) 1,0 m vodného LiOH v 3,0 ml metanolu pripraví 3,5 mg (11 %) BIO-1003A a 5,3 mg (18 %) BIO-1003B vo forme bielych tuhých látok.
BIO-1003A: H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm):
7,35 - 7,16 (m, 5H), 5,23 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 2,28 (d, 2H), 2,03 (m, 2H), 1,75 - 0,80 (m, 22H). HPLC (gradient A): 34,1 min. a 35,3 min. (4 : 1). Hmotnostné spektrum, m/z: 403.
BIO-1003B: H-NMR spektrum (CDCi3, 300 MHz, ppm):
7,35 - 7,16 (m, 5H), 5,23 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 2,28 (m, 2H), 2,03 (m, 2H), 1,75 - 0,80 (m, 22H). HPLC (gradient
A): 34,1 min. a 35,3 min. (1 : 10). Hmotnostné spektrum, m/z 403.
Príklad 3
Syntéza ΒΙΟ-1014
A. Metyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoát sa nechá zreagovať s BocLeuOSu podľa metódy opísanej v postupe C. Získaný materiál sa prevedie na žiadanú TFA-amínovú soľ podľa postupu Dl.
B. Postupom opísaným v príklade IA sa nechá zreagovať 19 mg (0,12 mmol) kyseliny indol-3-karboxylovej, 26 mg (0,14 mmol) EDC a 26 mg (0,17 mmol) HOBt so 44 mg (0,11 mmol) amínu pripraveného podľa príkladu 3A, a 0,10 ml (0,56 mmol) diizopropyletylamínu v 5,0 ml dichlórmetánu. Získa sa 25 mg (52 %) BIO-1014-OMe vo forme peny.
C. Podľa rovnakého postupu, aký je opísaný v príklade 1B, zreaguje 25 mg (0,057 mmol) BIO-1014-OMe s 0,115 ml (0,115 mmol) vodného 1,0 M LiOH v 5 ml metanolu. Získa sa 5,1 mg (21 %) BIO-1014A a 4,7 mg (20 %) BIO-1014B vo forme bielych tuhých látok.
BIO-1014A: H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 8,52 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,46
- 7,03 (m, 9H), 5,20 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 2,69 (m, 2H), 1,75 - 1,45 (m, 3H), 0,90 (m, 6H). HPLC (gradient A): 28,1 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 422.
BIO-1014B: H-NMR spektrum (CDCI3, 300 MHz, ppm):
8.55 (d, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,79 (d, IH), 7,46 -
- 7,03 (m, 9H), 5,20 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 2,70 (m, 2H),
1.55 - 1,40 (m, 3H), 0,90 (m, 6H). HPLC (gradient A):
29,5 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 422.
Príklad 4
Syntéza BIO-1017
A. Postupom, opísaným v príklade IA, sa nechá zreagovať 21 mg (0,13 mmol) kyseliny 1 -fenyl- 1-cyklopropánkarboxylovej, 26 mg (0,14 mmol) EDC a 26 mg (0,17 mmol) HOBt so 44 mg (0,11 mmol) amínu pripraveného podľa príkladu 3A, a 0,10 ml (0,56 mmol) diizopropyletylamínu v 5,0 ml dichlórmetánu. Získa sa 39 mg (68 %) BIO-1017-OMe vo forme peny.
B. Podľa rovnakého postupu, aký je opísaný v príklade 1B, zreaguje 39 mg (0,089 mmol) BIO-1017-OMe s 0,27 ml (0,27 mmol) vodného 1,0 M LiOH v 2 ml metanolu. Získa sa 10,3 mg (27 %) BIO-1017A a 12,2 mg (32 %) BIO-1017B vo forme bielych tuhých látok.
BIO-1017A: H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 8,46 (d, 1H), 7,40 - 7,20 (m, 10H), 6,30 (d, 1H), 5,09 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 2,62 (m, 2H), 1,50 - 1,20 (m, 5H), 0,98 (m, 2H), 0,82 (m, 6H). HPLC (gradient A): 33,9 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 423.
BIO-1017B: H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 8,55 (d, 1H), 7,48 - 7,15 (m, 10H), 6,30 (d, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 2,63 (m, 2H), 1,48 - 1,15 (m, 5H), 1,10 - 0,88 (m, 2H), 0,85 - 0,64 (m, 6H). HPLC (gradient A): 33,9 min. a 34,5 min. (1 : 9). Hmotnostné spektrum, m/z: 423.
Príklad 5
Syntéza BIO-1022
A. Postupom, opísaným v príklade IA, sa nechá zreagovať 20 mg (0,11 mmol) kyseliny 2-naftyloctovej, 25 mg (0,13 mmol) EDC a 25 mg (0,16 mmol) HOBt so 42 mg (0,10 mmol) amínu pripraveného podľa príkladu 3A, a 0,10 ml (0,56 mmol) diizopropyletylamínu v 2,0 ml di19 metylformamidu. Získa sa 36 mg (70 %) BIO-I022-OMe vo forme peny.
B. Podľa rovnakého postupu, aký je opísaný v príklade 1B, zreaguje 36 mg (0,078 mmol) BIO-1022-OMe s 0,50 ml (0,50 mmol) vodného 1,0 M LiOH v 3 ml metanolu. Získa sa 1,7 mg (4,8 %) BIO-1022A a 6,8 mg (19 %) BIO-1022B vo forme bielych tuhých látok.
B1O-1022A: H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm):
7,90 - 7,17 (m, 12H), 5,30 (t, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,79 (m, 2H), 1,68 - 1,33 (m, 3H), 0,87 (d, 6H). HPLC (gradient A): 25,7 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 447.
BIO-1022B: H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm):
7,90 - 7,17 (m, 12H), 5,35 (t, 1H), 4,49 (m, 1H), 2,79 (d, 2H), 1,58 - 1,33 (m, 3H), 0,82 (m, 6H). HPLC (gradient A): 25,7 min. a 26,4 min. (1 : 9). Hmotnostné spektrum, m/z: 447.
Príklad 6
Syntéza BIO-1029
A. terc-Butyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoát sa nechá zreagovať s BocLeuOSu podľa metódy opísanej v postupe
C. Získaný materiál sa prevedie na žiadanú amínovú soľ podľa postupu D2.
B. Metódou opísanou v príklade 1A sa nechá zreagovať 18 mg (0,067 mmol) kyseliny 4-(2-aminobenzamido) fenyl-octovej, 13 mg (0,067 mmol) EDC a 13 mg (0,085 mmol) HOBt s 18 mg (0,054 mmol) amínu pripraveného podľa príkladu 6A, a 0,048 ml (0,27 mmol) diizopropyletylamínu v 0,5 ml dimetylformamidu. Získa sa 32 mg (100 %) NH;-BlO-1029-OtBu vo forme oleja. H-NMR spektrum (CDCL 300 MHz, ppm): 7,65 - 7,43 (m, 4H), 7,40
-7,10 (m, 9H), 6,72 (m, 2H), 6,49 (d, 1H), 5,28 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,52 (s, 2H), 2,68 (m, 2H), 2,00 (bs, 2H), 1,65-1,15 (m, 13H), 0,85 (m, 6H).
C. Roztok 16 mg (0,025 mmol) ΝΗ.,-ΒΙΟ-1029-OtBu v 1 ml kyseliny trifluóroctovej sa mieša 45 minút pri laboratórnej teplote a potom sa zakoncentruje. Prečistenie získaného surového produktu HPLC poskytne 3,4 mg (26 %) NH^-BIO-1029 vo forme bielej tuhej látky, Hmotnostné spektrum, m/z: 531.
D. Zmes 3,4 mg (0,0064 mmol) NH^-BIO-1029, 3 kvapiek metylizokyanátu a 1 kvapky diizopropyletylaminu v 0,30 ml dichlórmetánu sa mieša pri laboratórnej teplote 18 hodín a potom sa zahusti vo vákuu. Prečistenie surového produktu HPLC poskytne 2,6 mg (69 %) BJO-1029 ako bielu tuhú látku. H-NMR spektrum (DMSO-d , 300 MHz, ppm): v súlade so štruktúrou. HPLC (gradient A): 28,2 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 588.
Príklad 7
Syntéza BIO-1032
A. Metódou, opísanou v príklade 1A, sa nechá zreagovať 29 mg (0,19 mmol) kyseliny 3-aminofenyloctovej, 44 mg (0,23 mmol) EDC a 44 mg (0,29 mmol) HOBt so 49 mg (0,15 mmol) amínu pripraveného podľa príkladu 6A, a 0,17 ml (0,95 mmol) diizopropyletylaminu v 1,0 ml dimetylformamidu. Po flash-chromatografii (SiO2> 60 % etylacetát-hexán) sa získa 22 mg (31 %) NH^-BIO-1032-OtBu vo forme peny. H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm): 7,45 - 7,05 (m, 7H), 6,75 - 6,50 (m, 3H), 5,97 (d, 1H), 5,30 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 3,50 (s, 2H), 2,71 (m, 2H), 1,70 - 1,39 (m, 3H), 1,33 (s, 9H), 0,84 (m, 6H).
B. Zmes 7,0 mg (0,015 mmol) ΝΗ.,-ΒΙΟ-1032-OtBu, 1,7 μΐ (0,014 mmol) fenylsulfonylchloridu a 5,4 μ! (0,030 mmol) diizopropyletylaminu v dichlórmetáne sa mieša 18 hodín pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu a zvyšok sa zriedi etylacetátom. Roztok sa premyje dvakrát 60 % nasýteným vodným roztokom NaHCO^, vodou, trikrát 5 % roztokom kyseliny citrónovej, vodou a nasýteným roztokom NaCl, vysuší sa nad síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparí. Odparok (9 mg) sa mieša 30 minút s 1 ml trifluóroctovej kyseliny pri laboratórnej teplote. Po odparení vo vákuu sa odparok prečistí HPLC a získa sa 3,9 mg (47 %) BIO-1032 ako biela tuhá látka. H-NMR spektrum (CD^OCD^ 300 MHz, ppm): 8,52 (d, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,61 - 7,45 (m, 3H), 7,35 -
- 6,85 (m, 9H), 5,13 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,40 (m, 2H), 2,65 (bs, 2H), 1,50 - 1,12 (m, 3H), 0,79 (d, 3H), 0,71 (d, 311). HPLC (gradient B): 18,7 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 552.
Príklad 8 Syntéza BIO-1093
A. K roztoku 41,5 mg (0,102 mmol) Boc-chráneného amínového produktu, pripraveného postupom C, v 2 ml dichlórmetánu sa pri 0 - 5° C pridajú 4 ml trifluóroctovej kyseliny. Zmes sa nechá zohriať na laboratórnu teplotu a mieša sa 1 hodinu. Po odparení sa odparok znovu rozpustí v dichlórmetáne, dvakrát za sebou odparí a vysuší sa vo vysokom vákuu, aby sa odstránili stopy kyseliny trifluóroctovej. HPLC analýza ukazuje úplnú konverziu a produkt sa prejavuje ako dva nové piky s kratším retenčným časom.
B. Materiál z príkladu 8A sa znovu rozpustí v 0,75 ml dimetylformamidu, roztok sa ochladí na 0 - 5 °C, pridá sa DIPEA až do alkalickej reakcii zmesi na lakmus, a ľadový kúpeľ sa odstráni. Reakciou tohto materiálu so 16,5 mg (0,091 mmol) kyseliny 4-nitrofenyloctovej, 20,4 mg (0,151 mmol) HOBt a 19,4 mg (0,101 mmol) EDC v podmienkach, uvedených v príklade 1A, poskytne 21,4 mg (50 %) BIO-1093-OEt vo forme číreho oleja.
C. Roztok 21,4 mg (0,053 mmol) BIO-1093-OEt v 1 ml metanolu sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote so 130 μΐ (0,13 mmol) IN LiOH. Zmes sa okyslí na lakmus trifluóroctovou kyselinou a odparí vo vákuu. Čisté izoméry sa získajú preparatívnou HPLC a následnou lyofilizáciou. Opakované rozpustenie v 50/50 MeOH/CH^Cl^, následné odparenie vo vákuu a konečné sušenie 24 hodín vo vysokom vákuu poskytne po 3 mg (13 %) každého z izomérov BIO-1093 vo forme bielej amorfnej tuhej látky.
Izomér A: H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm): 8,09 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,38 (d, 2H, J = 8,21 Hz), 7,15 (s, 5H), 5,21 (m, 1 H), 4,32 (m, 1 H), 3,28 (s, 1 H), 2,67 (m, 2H), 1,40 (m, 3H), 0,75 (dd, 6H, J = 6,9 Hz a 7,6 Hz), Hmotnostné spektrum (FAB): 442 (M + H) , 464 (M +
- Na) ; mol. hmotnosť 441,43. HPLC (gradient 1): jediný pík > 99 %, 19,5 min. TLC (10 % MeOH/CH2Cl2): Rf = = 0,25; EtOAc + 1 % HOAc: R = 0,35.
Izomér B: H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm): 8,0 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 7,56 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 7,07 (s, 5H), 5,15 (t, 1H, J = 5,5 Hz), 4,29 (m, 1H), 3,45 (s, 2H), 2,65 (m, 2H), 1,45 (m, 3H), 0,78 (dd, 6H, J = 6,9 Hz a 4,8 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB): 442 (M + H) , 464 (M + Na) ; mol. hmotnosť 441,43. HPLC: jediný pík > 99 %, 19,3 min.
TLC (10 % MeOH/CH2Cl2): R = 0,29; EtOAc + 1 % HOAc: R =0,55.
Príklad 9
Syntéza B1O-1099
A. Amín z príkladu 3A (50,0 mg, 0,127 mmol) sa nechá zreagovať v podmienkach, opísaných v príklade 8B, s
25,6 mg (0,121 mmol) kyseliny difenyloctovej, 26 mg (0,19 mmol) HOBt a 27 mg (0,14 mmol) EDC v dimetylformamide. Získa sa 49,2 mg (83 %) BIO-1099-OMe vo forme číreho viskózneho oleja.
B. BIO-1099-OMe (49 mg, 0,1 mmol) sa zmydelní a prečistí ako jc opísané v príklade 8C. Získa sa 7 mg (15 %) BIO-1099A a 5 mg (11 %) BIO-1099B vo forme bielych amorfných tuhých látok.
Izomér A: H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,95 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,19 (m, 15H), 6,95 (d, 1H, J = = 8 Hz), 5,25 (t, 1H, J = 3,2 Hz), 4,84 (s, 1H), 4,41 (m, 1H), 2,70 (dd, 2H, J = 2,5 Hz a 1,3 Hz), 1,41 (m, 3H), 0,79 (dd, 6H, J = 6 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB): 474 (M + H) , 496 (M + Na) ; mol. hmotnosť 472,54. HPLC: 1 pík 100 %, 30,074 min. TLC (10 % MeOH/CH Cl ): R = = 0,33; 50/50 EtOAc/Hex + 1 % HOAc: R = 0,45.
Izomér B: H-NMR spektrum (CDC1., 300 MHz, ppm): 7,72 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7,22 (m, 15H), 6,70 (d, 1H, J = = 8 Hz), 5,31 (t, 1H, J = 1,2 Hz), 4,93 (s, 1H), 4,60 (m, 1H), 2,68 (s, 1H), 2,65 (m, 1H), 1,35 (m, 3H), 0,61 (dd, 6H, J = 2,5 Hz a 1,3 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB): 473 (M - H) , 495 (M + Na) ; mol. hmotnosť 472,54. HPLC: 1 pík, čistota 100 %, 30,38 min. TLC (10 % MeOH/CH Cl ): R = 0,33; 50/50 EtOAc/Hex + 1 % HO2 2 f
Ac: R =0,38.
Príklad 10
Syntéza BIO-1100
A. Soľ amínu, opísaná v príklade 6A (pripravená zo
40.5 mg (0,093 mmol) Boc-chráneného materiálu) sa rozpustí v 1,0 ml dimetylformamidu a za miešania sa pridá trietylamín do bázickej reakcie na lakmus.
B. Metódou, opísanou v príklade 1A, sa nechá zreagovať 23,1 mg (0,089 mmol) kyseliny 2-bróm-5-metoxy-4-hydroxyfenyloctovej, 18,9 mg (0,14 mmol) HOBt a
19.6 mg (0,10 mmol) EDC v 1,0 ml dimetylformamidu s voľným amínom, pripraveným v príklade 10A. Získa sa 49 mg (kvantitatívny výťažok) bielej tuhej látky. Vyčistenie malej časti preparatívnou HPLC na reverznej fáze (gradient 2), lyofilizácia a vysušenie opakovaným rozpúšťaním v 50/50 MeOH/CH Cl a odparovaním za zníženého tlaku sa získa BIO-1100 (1,8 mg)vo forme bielej amorfnej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 7,25 (s, 5H), 7,05 (s, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,28 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,59 (s, 2H), 2,77 (m, 2H), 1,45 (m, 3H), 0,82 (dd, 6H, J = 2,5 Hz a 1,2 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB): 521, 523 (M + H) , 543, 545 (M + Naf; mol. hmotnosť 521,44. HPLC: hlavný pík 29,1 min, čistota > 97 %. TLC (10 % MeOH/CH Cl ): R = 0,16; 50/50 EtOAc/Hex + 1 % v 2 2' f ’ ’
HOAc: R =0,28.
Príklad 11
Syntéza ΒΙΟ-1106
A. K roztoku 1,0 g (7,6 mmol) kyseliny 6-aminohexánovej v 6 ml dioxánu a 6 ml vody, obsahujúcemu 1,7 ml (11,25 mmol) trietylamínu, sa pridá 2,1 g (8,4 mmol) Boc-ON (Aldrich). Zmes sa mieša 3 hodiny pri laboratórnej teplote a potom sa zriedi 20 ml vody a premyje etylacetátom (2 x 10 ml). Vodná vrstva sa okyslí IN HC1 na pH 1 -
- 2 a extrahuje sa päťkrát etylacetátom. Po vysušení nad síranom sodným a odparení rozpúšťadla sa získa 842 mg (51 %) produktu 1106-1. H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 4,61 (bs, 1H), 3,15 - 2,95 (bm, 4H), 2,55 -
- 2,23 (m, 4H), 1,65 - 1,50 (4H), 1,46 (9H), 1,45 - 1,30 (m, 2H).
B. Terc-butyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoát kondenzuje s CbzLeuOSu, ako je opísané v postupe C. Z tohto materiálu sa pripraví požadovaný voľný amín, ako je opísané v postupe D2.
C. 17,3 mg (0,075 mmol) kyseliny N-Boc-6-aminohexánovej (pripravenej v príklade HA), 15,2 mg (0,11 mmol) HOBt a 17,3 mg (0,09 mmol) EDC v 0,5 ml dimetylformamidu sa mieša pri laboratórnej teplote 1,5 hodiny. K miešanému roztoku aktivovaného esteru sa pridá 25 mg (0,075 mmol) voľného amínu z príkladu 11B, rozpusteného v 0,5 ml dimetylformamidu, a dve kvapky trietylamínu tak, aby bola zmes alkalická na lakmus. Po niekoľkých hodinách nie je reakcia podľa HPLC stále dokončená. Na jej dokončenie sa pridajú malé množstvá kyseliny N-Boc-6-aminohexánovej, HOBt a EDC. Produkt sa čistí ako je opísané v príklade 8C. Získa sa 26 mg (63 %) terc-butylesteru ΒΙΟ-1106-Boc vo forme číreho viskózneho oleja. H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 7,40 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,32 - 7,25 (m, 5H), 6,30 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,30 (q, 1H, J = 7 Hz), 4,49 (m, 1H), 3,09 (bs, 2H), 2,79 (dd, 1 H, J = 8 Hz a 15 Hz), 2,69 (dd, 1 H, J = 7 Hz a 15 Hz), 2,20 (t, 2H, J = 8 Hz), 1,69 - 1,39 (m, 9H), 1,42 (s, 9H), 1,29 (s, 9H), 0,88 (m, 6H). HPLC: 1 pík 28,3 min, čistota 100 %.
D. Obe terc-butylové chrániace skupiny v terc-butylesteri BIO-1106-Boc sa odstránia ako je opísané v príklade 10A. Výsledný odparok sa mieša s 0,5 ml dimetylformamidu. roztok sa zalkalizuje na lakmus pridaním dvoch kvapiek trietylamínu, pridá sa 13,6 mg (0,3 mmol) fenylizokyanátu a reakčná zmes sa mieša cez noc. Po spracovaní, opísanom v príklade 10 B, sa získa 3,5 mg (29 %) BIO-1106 vo forme béžovosfarbenej amorfnej tuhej látky.
H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 7,97 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,22 (m, 11H), 6,91 (t, 1H, J = 8 Hz), 5,30 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 3,12 (/m, 6H), 2,63 (m, 2H), 2,13 (t, 2H, J = 6 Hz), 1,41 (bm, 9H), 0,80 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB): 511 (M + H) , 533 (M + Na) ; mol. hmotnosť 510,59. HPLC: 1 pík 19,4 min, čistota 100 %. TLC (15 % MeOH/CH Cl): R = 0,32; 10 % MeOH/EtOAc + 1 % HOAc: R = 0,31.
f
Príklad 12
Syntéza BIO-1142
Zmes 16,3 mg (0,11 mmol) kyseliny (+/-)-1-benzocyklobuténkarboxylovej, 22,4 mg (0,165 mmol) HOBt,
23,7 mg (0,121 mmol) EDC a 0,5 ml dimetylformamidu sa mieša 45 minút pri laboratórnej teplote, čím sa pripraví aktivovaný ester. K nemu sa pridá 15,3 mg (0,055 mmol) produktu, pripraveného v príklade 10A, a zmes sa mieša 2 hodiny. Po filtrácii a čistení preparatívnou HPLC, ako je opísané v príklade 10B, sa získa 4,4 mg (70 %) A-izoméru BIO-1142 a 4,9 mg (22 %) B-izoméru BIO-1142 vo forme bielych amorfných tuhých látok.
Izomér A: H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,79 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,31 - 7,05 (m, 9H), 6,81 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,24 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,50 - 3,00 (bm, 11Η), 2,70 (m, 2H), 1,43 (m, 3H), 0,70 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB): 409 (M + H), 431 (M + Na) ; mol. hmotnosť 408,46. HPLC: hlavný pík 20,2 min, čistota > 99 %. TLC (10 % MeOH/CH Cl ): R = ’ v 2 2' f = 0,46; EtOAc + 1 % HOAc: Rf = 0,53.
Izomér B: H-NMR spektrum (CDCI3, 300 MHz, ppm): 7,92 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,31 - 7,05 (m, 9H), 6,91 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,25 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,14 (m, 1H),
3,28 (m, 2H), 2,72 (m, 2H), 1,42 (m, 3H), 0,77 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB): 409 (M + H) , 431 (M + + Na) ; mol. hmotnosť 408,46. HPLC: hlavný pík 20,62 min, čistota > 96 %. TLC (10 % MeOH/CH Cl ): R = ’ v 2 Ύ f = 0,52; EtOAc + 1 % HOAc: R = 0,54.
Príklad 13
Syntéza ΒΙΟ-1189
Zmes 6,2 mg (0,038 mmol) kyseliny (+/-)-1-indánkarboxylovej, 7,7 mg (0,057 mmol) HOBt, 8,0 mg (0,042 mmol) EDC a 0,5 ml dimetylformamidu sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Voľný amín, pripravený v príklade 11B sa nechá reagovať s TFA a 10 mg (0,038 mmol) tohto materiálu sa pridá k uvedenej zmesi a mieša sa cez noc. Reakčná zmes sa prefíltruje a produkt sa prečistí preparatívnou HPLC ako je opísané v príklade 10B. Získa sa A-izomér látky BIO-1189 (menej než 1 mg) a 2 mg (12 %) B-izoméru vo forme bielych amorfných tuhých látok.
Izomér A: H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,30 - 7,10 (m, 12H), 5,32 (m, 1H), 4,48 (m, 1H),
3,91 (t, 1H), J = 6,6 Hz), 3,10 - 2,70 (m, 3H), 2,50 - 2,20 (m, 1H), 1,60 - 1,40 (m, 3H), 0,85 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB): 423 (M + H) , 445 (M + Na) ; mol. hmotnosť 422,50. HPLC: hlavný pík 21,2 min, čistota > 97 %. TLC (5 % MeOH/CH Cl ): R = 0,19; EtOAc + 1 %
2 f
HOAc: R =0,73.
Izomér B: H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,70 (d, J = 8 Hz), 7,45 - 7,10 (m, 9H), 6,65 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,33 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 3,90 (t, 1H, J = 6,6 Hz), 3,10 - 2,80 (m, 3H), 1,48 (m, 3H), 0,80 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB): 423 (M + H) , 445 (M + + Na) ; mol. hmotnosť 422,50. HPLC: hlavný pík 21,5 min, čistota > 94 %. TLC (5 % MeOH/CH Cl ): R = 0,12;
2 f
EtOAc + 1 % HOAc: R = 0,60.
f
Príklad 14
Syntéza BIO-1006
A. Amín β-3 kondenzuje s BocLeuOSu podľa postupu C (produkt sa prekryštalizuje z dietyléteru) a zbaví sa ochranných skupín podľa postupu D. Získa sa soľ požadovaného amínu s TFA.
H-NMR spektrum (CDCI(, 300 MHz, ppm) pre Boc-amín: 0,90 (m, 6H), 1,42 (9H), 1,55 - 1,75 (m, 3H), 2,80 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 4,05 (m, 1H), 4,83 (m, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,92 (s, 2H), 6,68 - 6,78 (m, 3H), 7,06 (d, 1H).
H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm)pre TFA-amín: 0,83 (d, 3H), 0,87 (d, 3H), 1,50 (m, 1H), 1,63 (bt, 2H), 2,73 - 2,92 (m, 2H), 3,63 (s, 3H), 4,27 (bs, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,95 (s, 2H), 6,66 - 6,78 (m, 3H), 7,58 (bs, 3H), 8,02 (d, 1H).
B. Roztok 24 mg soli amínu s TFA, pripravenej v príklade 14A v dichlórmetáne sa pridá k 14 mg (1,1 ekvivalentu) sukcinimidylového esteru kyseliny 4-hydroxyfenyloctovej a mieša sa asi 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa potom premyje 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2 x), nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x) a soľankou (1 x), vysuší sa nad síranom sodným, prefiltruje sa a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 28 mg surového metylesteru BIO-1006. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 0,82 (6H), 1,35 - 1,58 (3H), 2,62 - 2,82 (2H), 3,48 (2H), 3,57 (3H), 4,41 (1H), 5,70 (1H), 5,89 (2H), 6,08 (1H), 6,65 - 6,75 (5H), 7,04 (2H), 7,22 (1H).
C. Roztok surového metylesteru BIO-1006 v metanole sa pridá k IN LiOH a mieša sa asi 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zneutralizuje kyselinou trifluóroctovou a prečistí HPLC. Frakcia s čistým produk- i tom po odparení poskytne látku BIO-1006. H-NMR spektrum (CDCI,, 300 MHz, ppm): 0,73 (d, 3H, J = 6 Hz), 0,80 (d, 3H, J = 6 Hz), 1,35 (bt, 2H), 1,45 (m, 1H), 2,40 (m, 2H), 3,22 - 3,38 (m, 2H), 4,23 (bq, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,93 (s, 2H), 6,65 (d, 2H, J = 8 Hz), 6,68 - 6,80 (m, 2H), 6,83 (s, 1H), 7,03 (d, 2H), 8,11 (bd, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 457.
Príklad 15
Syntéza BIO-1050
A. K suspenzii 9 g (60 mmol) kyseliny 4-aminofenyloctovcj a 15 g (60 mmol) N-(benzyloxykarbonyloxy)sukcínimidu v dichlórmetáne sa pridá také množstvo trictylamínu, aby vznikol homogénny roztok. Zmes sa mieša 30 minút pri laboratórnej teplote a potom sa dichlórmetán odparí na rotačnej odparke. Odparok sa rozpustí vo vode a okyslí sa 5 % HC1, Vylúčená tuhá látka sa odfiltruje a premyje 5 % HC1, vodou a dietyléterom. Získa sa 12 g (70 %) kyseliny Cbz-aminoíenyloctovej vo forme svetlohnedého prášku. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 3,48 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,14 (d, 2H), 7,29 - 7,45 (m, 7H), 9,73 (s, 1H).
B. Podľa metódy opísanej v príklade 1A sa nechá zreagovať 342 mg (1,2 mmol) kyseliny Cbz-aminofenyloctovej v dimetylformamide (pripravenej v príklade 15A), 275 mg (1,8 mmol) HOBt a 276 mg (1,44 mmol) EDC, so 432 mg (0,94 mmol) voľného amínu, pripraveného v príklade 14A, v dimetylformamide a získaný kondenzačný produkt sa použije bez čistenia v ďalšej reakcii.
C. Produkt z príkladu 15B sa hydrogenuje na 10 % Pd/C vo vodnom metanole pri tlaku 50 psi cez noc. Reakčná zmes sa prefiultruje cez Celit a po odparení rozpúšťadla sa získa 0,4 g (90 %) voľného amínu vo forme hnedého prášku. H-NMR spektrum (CDCI3, 300 MHz, ppm) pre látku F: 0,82 (m, 6H), 1,30 - 1,62 (m, 3H), 2,62 - 2,82 (m, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,57 (s, 3H), 4,37 (m, 1H), 5,18 (m,
H), 5,91 (s, 2H), 6,65 - 6,80 (m, 5H), 7,02 (d, 2H).
D. K roztoku 22 mg voľného amínu z príkladu 15C v dichlórmetáne sa pridá 8 mg (1,5 ekvivalentu) fenylizokyanátu a jedna kvapka trietylamínu a roztok sa potom mieša hodiny pri laboratórnej teplote. Zmes sa zriedi 15 ml etylacetátu a premyje sa 5 % kyselinou citrónovou (2 x), nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x) a soľankou (1 x). Po vysušení nad síranom sodným, filtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa surový metylester fenylureidokyseliny.
E. Surový mctylester fenylureidokyseliny sa rozpustí v metanole, pridá sa IN LiOH pri 0° C a zmes sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Po neutralizácii kyselinou trifluóroctovou sa reakčná zmes prečistí HPLC. Čisté fraki cie po vysušení poskytnú BIO-1050. H-NMR spektrum (DMSO-ds, 300 MHz, ppm): 0,76 (d, 3H), 0,80 (d, 3H), 1,30 - 1,50 (m, 3H), 2,52 - 2,72 (m, 2H), 3,28 - 3,50 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 5,06 (m, 1H), 5,97 (s, 2H), 6,70 (d, 1H), 6,79 - 6,87 (m, 2H), 6,95 (t, 1H), 7,13 (d, 2H), 7,25 (t, 2H), 7,43 (d, 2H), 7,85 (d, 2H), 8,12 (d, 1H), 8,40 (d, 1H),
8,60 (s, 1H), 8,66 (s, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 575.
Príklad 16
Syntéza BIO-1068
Uskutoční sa reakcia, opísaná v príklade 15D, s tým rozdielom, že sa miesto fenylizokyanátu použije cyklohexylizokyanát. Získaný produkt sa hydrolyzuje postupom, opísaným v príklade 15E, a produkt sa prečistí HPLC. . i
Čisté frakcie poskytnú BIO-1068. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 0,73 (d, 3H, J = 6 Hz), 0,80 (d, 3H, J = 6 Hz), 1,05 - 1,85 (m, 13H, 2,50 - 2,75 (m, 2H), 3,23 - 3,50 (m, 3H), 4,28 (bq, 1H), 5,05 (bq, 1H), 5,95 (bs, 2H), 6,02 (d, 1H, J = 8 Hz), 6,72 (bd, 1H), 6,71 (d, 1H, J = = 8 Hz), 6,84 (bs, 1H), 7,08 (d, 2H, J = 8 Hz), 7,25 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,20 (s, 1H), 8,40 (d, 1H, J - 8 Hz). Hmotnostné spektrum, m/z: 581.
Príklad 17
Syntéza BIO-1079
Uskutoční sa reakcia, opísaná v príklade 15D, s tým rozdielom, že sa miesto fenylizokyanátu použije 2-metoxyfenylizokyanát. Získaný produkt sa hydrolyzuje postupom, opísaným v príklade 15E, a produkt sa prečisti HPLC. Čisté frakcie po vysušení poskytnú BIO-1079. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 0,75 (d, 3H, J = 6 Hz), 0,80 (d, 3H), 1,30 - 1,50 (m, 3H), 2,50 - 2,72 (m, 2H), 3,30 - 3,45 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 4,28 (m, 1H), 5,06 (m, 1H), 5,96 (bs, 2H), 6,69 - 7,02 )m, 8H), 7,13 (d, 2H), 7,34 (d, 2H), 8,05 - 8,15 (m, 3H), 8,42 (bd, 1H), 8,87 (s, 1H), 89,13 (s, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 605.
Príklad 18
Syntéza B1O-1082
A. K dichlórmetánovému roztoku 43 mg trifluóracetátu amínu, pripraveného postupom D, sa pri 0 °C pridáva trietylamín, až kým pH nedosiahne hodnotu 9. Potom sa pridá 26 mg 4-fenylbutyryl chloridu. Zmes sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote, zriedi sa 20 ml etylacetátu a premyje sa 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2 x), nasýteným vodným roztokom NalICO, (2 x) a soľankou (1 x). Po vysušení nad síranom sodným, filtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa požadovaný produkt ako etylester.
B. Surový etylester sa rozpustí v metanole, pri 0 °C sa pridá IN LiOH a zmes sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Po neutralizácii kyselinou trifluóroctovou sa reakčná zmes podrobí HPLC. Príslušné frakcie poskytnú dva diastereoizoméry, ΒΙΟ-1082A a ΒΙΟ-1082B.
BIO-1082A: H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 0,79 (d, 3H), 0,83 (d, 3H), 1,29 - 1,37 (m, 2H), 1,47 (m, 1H), 1,70 - 1,83 (m, 2H), 2,08 - 2,17 (m, 2H), 2,48 - 2,58 (m, 2H), 2,67 (bt, 2H), 4,31 (m, 1H), 5,03 (m, 1H),
7,12 - 7,32 (m, 10H), 7,90 (d, 1H), 8,45 (d, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 425.
Príklad 19
Syntéza ΒΙΟ-1148
A. Amín β-13 kondenzuje s BocLeuOSu metódou opísanou v postupe C. Získaný materiál sa prevedie na soľ amínu 1148-1 za podmienok, opísaných v postupe Dl.
B. K roztoku 3,0 g (20 mmol) kyseliny 4-hydroxyfenyloctovej v dimetylformamide sa pridá 3,7 g (24 mmol) HOBt a potom 4,2 g (22 mmol) EDC a zmes sa mieša 30 minút pri laboratórnej teplote. Pridá sa 2,3 g (20 mmol) N-hydroxysukcínimidu a v miešaní sa pokračuje ccz noc. Zmes sa potom zriedi 150 ml etylacetátu, roztok sa extrahuje 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2 x), nasýteným roztokom NaHCO? (2 x) a soľankou (1 x) a vysuší sa nad síranom sodným. Po odparení rozpúšťadla vo vákuu sa produkt rozpustí v dichlórmetáne a vyzráža sa hexánom. Získa sa 3,9 g (78 %) sukcínimidylesteru kyseliny 4-hydroxyfenyloctovej. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 2,79 (s, 4H), 3,93 (s, 2H), 6,72 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,12 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 9,41 (s, 1H).
C. Amínová soľ 1148-1 sa hydrolyzuje s LiOH vo vodnom metanole na kyselinu. Roztok tejto kyseliny, trietylamínu a sukcínimidylesteru kyseliny 4-hydroxyfenyloctovej (pripraveného v príklade 19B) v dichlórmetáne sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa potom prečistí HPLC. Získa sa BIO-1148 ako zmes dvoch i
diastereoizomérov. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 0,70 - 0,90 (m, 6H), 1,29 - 1,63 (m, 3H), 2,73
- 2,85 (m, 2H), 3,17 - 3,40 (m, 2H), 4,15 - 4,30 (m, 1H),
5,12 - 5,28 (m, 1H), 6,58 - 6,68 (m, 2H), 6,94 - 7,06 (m, 2H), 7,54 - 7,67 (m, 1H), 7,93 - 8,16 (m, 2H), 8,53 - 8,75 (m, 3H). Hmotnostné spektrum, m/z: 414.
Príklad 20
Syntéza ΒΙΟ-1168
Uskutoční sa reakcia, opísaná v príklade 15D, s tým rozdielom, že sa miesto fenylizokyanátu použije 3-metylfenylizokyanát. Získaný produkt sa hydrolyzuje postupom, opísaným v príklade 15E, a produkt sa prečistí HPLC. Frakcie, obsahujúce čistý produkt, po vysušení poskytnú BIO-1168. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 0,76 (d, 3H), 0,82 (d, 3H), 1,30 - 1,52 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,54 - 2,70 (m, 2H), 3,35 - 3,48 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 5,07 (m, 1H), 5,96 (m, 2H), 6,68 - 6,86 (m, 4H), 7,10 -
- 7,25 (m, 4H), 7,30 (s, 1H), 7,35 (d, 2H), 8,11 (d, 1H),
8,44 (d, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,67 (s, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 589.
Príklad 21
Syntéza BIO-1179
Uskutoční sa reakcia, opísaná v príklade 15D, s tým rozdielom, že sa miesto fenylizokyanátu použije 2-metylfenylizokyanát. Získaný produkt sa hydrolyzuje postupom, opísaným v príklade 15E, a produkt sa prečistí HPLC. Frakcie s čistým produktom po vysušení poskytnú zlúčeninu ΒΙΟ-1179. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 0,75 (d, 3H), 0,80 (d, 3H), 1,27 (- 1,51 (m, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,62 (m, 2H), 3,40 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 5,06 (m, 1H), 5,98 (bs, 2H), 6,71 (bd, 1H), 6,80 (d, 1H), 6,83 (bs, 1H), 6,92 (bt, 1H), 7,05 - 7,20 (m, 4H), 7,38 (d, 2H), 7,82 (d, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,42 (d, 1H), 8,93 (s, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 589.
Príklad 22
Syntéza BIO-1195
A. Amín β-9 kondenzuje s BocLeuOSu metódou opísanou v postupe C. H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 0,90 (m, 6H), 1,32 (s, 9H), 1,42 (s, 9H), 1,58 - 1,90 (m, 3H), 2,61 - 2,80 (m, 2H), 4,08 (m, 1H), 4,89 (bd, 1H), 5,37 (bq, 1H), 6,95 - 7,15 (m, 3H), 7,45 (bd, 1H).
B. Produkt, pripravený v príklade 22A, sa prevedie kyselinou trifluóroctovou na zodpovedajúcu trifluóroctovú soľ 1195-2, ako sa opisuje v postupe D.
C. Zmes 10,0 g (66,1 mmol) kyseliny 4-aminofenyloctovej, 8,27 g (68,0 mmol) 98 % fenylizokyanátu a 100 ml etylacetátu sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote a potom sa 1,5 hodiny varí pod spätným chladičom. Po ochladení na laboratórnu teplotu sa produkt odfiltruje, premyje etylacetátom, metanolom a éterom. Získa sa 17,5 g (98 %) fenylureidofenyloctovej kyseliny 1195-3 vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 8,72 - 8,64 (m, 2H), 7,44 (d, 2H), 7,36 (d, 2H), 7,28 (d, 2H), 7,16 (d, 2H), 6,69 (t, 1H), 3,52 (s, 2H). Hmotnostné spektrum (FAB): 272.
D. Roztok kyseliny fenylureidofenyloctovej 1195-3, HOBt a EDC v dimetylformamide sa mieša 30 minút pri laboratórnej teplote. Potom sa pridá voľný amín, uvoľnený trietylamínom z produktu, pripraveného v príklade 22b. Zmes sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote a produkt sa čistí HPLC. Frakcie obsahujúce čistý produkt, po odparení i
poskytnú zlúčeninu BIO-1195. H-NMR spektrum (DMSO-ds, 300 MHz, ppm): 0,71 (d, 3H), 0,78 (d, 3H),
1,25 - 1,46 (m, 3H), 2,56 - 2,72 (m, 2H), 3,26 - 3,41 (m, 2H), 4,21 (bq, 1H), 5,07 (bq, 1H), 6,90 (bt, 1H), 7,02 - 7,14 (m, 3H), 7,17 - 7,42 (m, 8H), 8,10 (d, 1H), 8,47 (d, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,63 (s, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 567.
Príklad 23
Syntéza BIO-1198
A. K roztoku fosgénu v dichlórmetáne sa pri 0 “C prikvapká roztok morfolínu a trietylamínu v dichlórmetáne. Zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 30 minút a potom sa rozpúšťadlo odparí vo vákuu. Biely tuhý odparok sa rozpustí v dichlórmetáne a pridá sa terc-butylester kyseliny 4-aminofcnyloctovej. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc, zriedi sa 20 ml etylacetátu, premyje sa 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2 x), nasýteným vodným roztokom NaHCO, (2 x) a soľankou (1 x). Po vysušení nad síranom sodným, filtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa i morfolinoureidový terc-butylester 1198-1. H-NMR spektrum (C'DC(, 300 MHz, ppm) pre terc-butylester: 1,40 (s, 9H), 3,38 - 3,46 (m, 4H), 3,60 - 3,70 (m, 6H), 6,67 (s, 1H),
7,13 (d, 2H), 7,27 (d, 2H).
B. Morfolinoureidový terc-butylester 1198-1 sa rozpustí v dichlórmetáne, pridá sa trifluóroctová kyselina a roztok sa mieša 3 hodiny pri teplote miestnosti. Získa sa 26 mg zodpovedajúcej karboxylovej kyseliny 1198-2.
C. Podľa metódy opísanej v príklade IA, sa 26 mg karboxylovej kyseliny 1198-2 nechá reagovat v dimetylformamide s HOBt, EDC a aminom, pripraveným v príklade 1 A. Získa sa 27 mg surového metylesteru 1198-3.
D. Roztok surového metylesteru 1198-3 sa prevedie na zlúčeninu BIO-1198 ako sa opisuje v príklade 14C. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 0,75 (d, 3H), 0,82 (d, 3H), 1,27 - 1,50 (m, 3H), 2,53 - 2,70 (m, 2H),
3,28 - 3,45 (m, 6H), 3,55 - 3,60 (m, 4H), 4,27 (m, 1H), 5,07 (bq, 1H), 5,96 (bs, 2H), 6,72 (bd, 1H), 6,82 (d, 1H),
6,85 (bs, 1H), 7,09 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 8,08 (d, 1H), 8,42 (d, 1H), 8,47 (s, 1H). Hmotnostné spektrum, m/z: 569.
Príklad 24
Syntéza ΒΙΟ-1190
A. Amín β-5 kondenzuje s BocLeuOSu ako sa opisuje v postupe C. Získaný materiál sa prevedie na požadovanú amínovú soľ podľa postupu Dl.
B. Podľa metódy, opísanej v príklade IA, sa nechá zreagovať 135 mg (0,47 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej v 2,5 ml dimetylformamidu, 135 mg (0,88 mmol) HOBt a 0,71 mmol EDC s 200 mg (0,46 mmol) amínovej soli z príkladu 29A (ku ktorej sa pridalo toľko trietylamínu, aby pH roztoku bolo 10). Získa sa 235 mg (89 %) zlúčeniny 1190-1 vo forme bielej tuhej látky .
C. K miešanému roztoku 20 mg (0,034 mmol) zlúčeniny 1190-1 v 3 ml metanolu sa pridajú 3 ml vodného 2N LÍOH. Zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc, ochladí sa na 0 °C a okyslí sa pridaním kyseliny trifluóroctovej na pH 3 - 4 (merané pH papierikom). Prečistenie produktu kvapalinovou chromatografiou (kolóna Vydac C , gradient 8) poskytne 10 mg (0,017 mmol; 50 %) produktu BIO-1190 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 8,95 (s, 1H), 8,39 (d, 1H, J = 9 Hz), 8,11 (d, J = 9 Hz), 7,88 (s, 1H), 7,83 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,36 (d, 2H, J= 8,4 Hz), 7,20 - 7,10 (kômp., 6H), 6,92 (m, 1H), 6,83 (d, 2H, J = 9 Hz), 5,08 (m, 1H),
4,28 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,39 (d, 1H, J = 8 Hz), 3,31 (d, 1H, J = 7 Hz), 2,63 (m, 1H), 2,23 (s, 3H), 1,50 - 1,25 (kômp., 3H), 0,81 (d, 3H, J = 6 Hz), 0,75 (d, 3H, J = 6 Hz). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 575 (pre (M + 1) vypočítané 575).
Príklad 25
Syntéza BIO-1197
A. 0,884 g (4,0 mmol) amínu β-l kondenzuje s 1,32 g (4 mmol) BocLeuOSU, ako sa opisuje v postupe C. Získaný materiál sa prevedie na požadovanú soľ amínu (1,42 g, 85 %), ako sa opisuje v postupe Dl. Produkt je biela tuhá látka. H-NMR spektrum (CDC1}, 300 MHz, ppm): 7,31 - 7,22 (m, 5H), 7,14 (d, 1H), 5,37 - 5,30 (m, 1H), 4,84 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 2,85 - 2,66 (m, 2H), 1,72 - 1,58 (m, 2H), 1,51-1,49 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,29 (s, 9H), 0,91 (m, 9H).
B. Podľa metódy, opísanej v príklade IA, sa nechá zreagovať 34 mg (0,12 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej, 20 mg (0,14 mmol) HOBt a 26 mg (0,134 mmol) EDC s 30 mg (0,079 mmol) amínovej soli z príkladu 25A v prítomnosti trietylamínu. Získa sa 15 mg (0,028 mmol; 35 %) zlúčeniny BIO-1197 vo forme bielej peny. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 545 (pre C3]H3sN4O5(M+l) vypočítané 545).
Príklad 26
Syntéza BIO-1201
A. 40 mg (0,086 mmol) voľného amínu pripraveného v príklade 15C sa podľa procedúry opísanej v príklade 15D nechá zreagovať s 28 mg (0,172 mmol) 2-nitrofenylizokyanátu. Získa sa 50 mg (92 %) zlúčeniny 1217-1 vo forme svetložltého oleja. H-NMR spektrum (DMSO-d , 300 MHz, ppm): 8,55 (d, 1H), 8,50 (d, 1H), 8,15 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,60 - 6,70 (m, 11H), 5,85 (bs, 2H), 5,25 (m, 1H), 4,6 (m, 1H), 3,80 - 3,55 (kômp.), 3,50 (s, 3H), 2,75 (m, 2H), 1,70-1,40 (kômp. 3H), 0,85 (m, 6H).
B. Podľa procedúry, opísanej v príklade 24C sa 50 mg (0,079 mmol) zlúčeniny 1201-1 prevedie na 17 mg (0,027 mmol; 35 %) produktu BIO-1201, ktorý sa získa ako svetložltá tuhá látka. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 620 (pre C3]H N O (M+l) vypočítané 620).
Príklad 27
Syntéza BIO-1217
A. 30 mg (0,1 mmol) amínu -4 kondenzuje s 50 mg (0,1 mmol) N-terc-Boc-N-Cbz-L-lyzín-N-hydroxysukcínimidu podľa postupu, opísaného v príklade 25A. Získa sa 60 mg (93 %) produktu 1217-1 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm): 7,35 - 7,25 (kômp., 5H), 6,80 - 6,70 (kômp., 3H), 5,30 - 5,10 (kômp., 2H), 4,95 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H),
3.10 (m, 2H), 2,70 (m, 2H), 1,90 - 1,40 (kômp.), 1,35 (s, 9H), 1,30 (s, 9H).
B. Zlúčenina 1217-1 (60 mg, 0,09 mmol) v 5 ml dichlórmetánu sa deblokuje pôsobením 0,5 ml kyseliny trifluóroctovej, ako sa opisuje v postupe Dl. Získa sa 56 i mg (100 %) zlúčeniny 1217-2 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm): 8,75 (bs, 7,35 -
- 7,15 (kômp.), 6,85 - 6,65 (kômp.), 5,40 (m), 5,20 - 4,90 (bs), 4,15 (m), 3,75 (bs), 3,15 - 2,60 (kômp.), 1,80 (m),
1,40 - 1,00 (kômp.).
C. Podľa procedúry, opísanej v príklade 1A, sa nechá zreagovať 40 mg (0,14 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej, 23 mg (0,167 mmol) HOBt a 30 mg (0,158 mmol) EDC s 56 mg (0,093 mmol) amínu 1217-2 v prítomnosti trietylamínu. Získa sa 21 mg (30 %) zlúčeniny i
BIO-1217 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 9,05 (m, 1H(, 8,40 (m, 1H),
8.10 (m, 1H), 8,00 (m, 1H), 7,40 - 6,70 (kômp.), 5,10 (m,
1H), 5,00 (bs, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,70 (bs, 6H), 2,90 - 2,60 (kômp.), 2,20 (s, 3H), 1,60 - 1,10 (kômp ). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 754 (pre (M+l) vypočítané 754).
Príklad 28
Syntéza BIO-1225
A. 90 mg (0,4 mmol) amínu β-3 kondenzuje so 193 mg (0,4 mmol) N-terc-Boc-N-Cbz-L-lyzín-N-hydroxysukcínimidu podľa metódy, opísanej v príklade 25A. Získa sa 220 mg (94 %) produktu 1225-1 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,40 - 7,25 (m, 5H), 7,10 (m, 1H), 6,80 - 6,65 (m, 3H), 5,90 (s, 2H), 5,25 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 4,85 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,15 (m, 2H), 2,80 (m, 2H), 1,90 - 1,20 (m, 6H), 1,40 (s, 9H).
B. Ochranná skupina Boe v látke 1225-1 (170 mg, 0,29 mmol) sa odstráni spôsobom, opísaným v postupe Dl. Získa sa 100 mg (71 %) voľného amínu 1225-2 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,07 (d, 1H, J = 9 Hz), 7,40 - 7,20 (kômp., 5H), 6,80
- 6,65 (kômp., 3H), 5,90 (s, 2H), 5,25 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 4,98 (bs, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,32 (m, 1H), 3,16 (m, 2H), 2,27 (m, 2H), 1,90 - 1,70 (kômp., 3H), 1,60 - 1,25 (kômp., 5H).
C. Podľa metódy, opísanej v príklade 1A, sa nechá zreagovať 44 mg (0,155 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej, 36 mg (0,264 mmol) HOBt a 47 mg (0,248 mmol) EDC s 50 mg (0,103 mmol) voľného amínu 1225-2. Získa sa 46 mg (80 %) látky BIO-1225-3 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (DMSO-d6> 300 MHz, ppm): 9,00 - 6,70 (kômp., 21H), 5,96 (s, 2H), 5,10 (m, 2H), 4,98 (s, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 3,48 - 3,40 (kômp., 2H), 2,88 (m, 2H), 2,71 (m, 2H), 2,24 (s, 3H),
1,60 - 1,00 (kômp., 6H). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 752 (pre C^H^N O (M+l) vypočítané 752).
D. 25 mg (0,033 mmol) látky BIO-1225-3 sa spracuje tak, ako je opísané v príklade 24C, a poskytne 15 mg (62 %) látky BIO-1225 vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 738 (pre C^H^N^O^ (M+l) vypočítané 738).
Príklad 29
Syntéza BIO-1036
A. Metódou, opísanou v postupe C, sa 85 mg (0,33 mmol) metyl 3-amino-5-indanyl-l-propanoátu (ester M-l; jeho príprava sa opisuje v postupe B) prevedie na zlúčeninu 1036-1 (96 mg, 0,22 mmol, 67 %), ktorá sa získa ako žltá pena, Produkt sa bez ďalšieho čistenia použije v ďal- šom reakčnom stupni. H-NMR spektrum (CDC^): δ 7,15 (3H), 6,95 (1H), 5,30 (1H), 4,95 (1H), 4,15 (1H), 3,55 (3H), 2,90 - 2,80 (6H), 2,05 (3H), 1,70 (2H), 1,35 (9H), 0,85 (6H).
B. 98 mg (0,22 mmol) zlúčeniny 1036-1 sa prevedie na zodpovedajúcu amínovú soľ, ako sa opisuje v postupe
D. Potom sa podľa príkladu 1A táto amínová soľ nechá zreagovať v prítomnosti trietylamínu s kyselinou fenyloctovou, pričom vznikne 75 mg (0,17 mmol, 77 %) zlúčeniny 1036-2 vo forme svetložltej tuhej látky. Tento produkt sa použije bez čistenia v ďalšom reakčnom stupni. H-NMR spektrum (CDC1 ): δ7,35 - 6,80 (9H), 6,25 (1H),
5,25 (1H), 4,45 (1H), 3,60 (1,5H), 3,50 (1,5H), 2,80 - 2,60 (6H), 2,00 (2H), 1,70 - 1,30 (5H), 0,85 (6H).
C. Malé množstvo zlúčeniny 1036-2, získané v predošlej reakcii, sa hydrolyzovalo tak, ako sa opisuje v príklade 1B. Produkt sa prečistil a rozdelil HPLC na BIO-1036A (asi 2 mg), m/z 437, čistota podľa HPLC 98 %, a ΒΙΟΙ 036B (asi 2 mg), m/z 437, čistota podľa HPLC 98 %, οδέ vo forme bielych tuhých látok.
BIO-1036A: 'h-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz): δ
8,45 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 8,21 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 7,37 -
- 7,05 (m, 8H), 5,20 (m, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,57 - 3,43 (m, 2H), 2,86 (m, 4H), 2,69 (m, 2H), 2,03 (m, 2H), 1,60 (m, 1H), 1,49 (m, 2H), 0,91 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 0,84 (d, 3H, J = 6,3 Hz).
BIO-1036B: H-NMR spektrum (DMSO-d&, 300 MHz): δ
8.45 (d, 1 H, J - 8,4 Hz), 8,22 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,40 -
- 7,00 (m, 8H), 5,18 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,55 (m, 2H),
2,85 (m, 4H), 2,57 (m, 2H), 2,05 (m, 2H), 1,55 (m, 1H),
1,40 (m, 2H), 0,90 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 0,75 (d, 3H, J = 6,3 Hz).
Príklad 30
Syntéza BIO-1137
A. Metódou opísanou v postupe C sa 58 mg (0,22 mmol) metyl 3-amino-3-(2-nitrofenyl)-l-propanoátu (ester M-3; jeho príprava je opísaná v postupe B) prevedie na zlúčeninu 1137-1 (106 mg, 0,22 mmol, 100 %), ktorá sa získa ako svetložltý hustý olej. H-NMR spektrum (CDCy: δ 7,95 (1H), 7,85 - 7,35 (5H), 5,85 (1H), 4,95 (1H), 4,15 (1H), 3,55 (1,5H), 3,50 (1,5H), 2,90 (2H), 1,70 - 1,60 (2H),
1.45 (9H), 0,90 (6H).
B. 106 mg (0,22 mmol) zlúčeniny 1137-1 sa previedlo na 69 mg (0,16 mmol, 73 %) derivátu 1137-2 postupom οι písaným v príklade 29B. Produkt je žltá polotuhá látka. H-NMR spektrum (CDC1J: δ 7,90 - 7,15 (10H), 6,35 (0,5H),
6,20 (0,5H), 5,75 (1H), 4,45 (1H), 3,55 (1,5H), 3,50 (1,5H),
2,85 (4H), 1,70 - 1,30 (3H), 0,70 (6H).
C. Malé množstvo zlúčeniny 1137-1 sa hydrolyzuje, ako je opísané v príklade IB, produkt sa prečistí HPLC a zo zodpovedajúcich frakcií sa získajú izoméry BIO-1037A (cca lmg), m/z 442 (čistota 97 % podľa HPLC) a B1O-1037B (cca 2 mg), m/z 442 (čistota 100 % podľa HPLC).
Príklad 31
Syntéza BIO-1043
A. Komerčná kyselina N-Boc-l-aminocyklopropánkarboxylová (80 mg, 0,40 mmol) v 3 ml dimetylformamidu sa aktivuje pri laboratórnej teplote pôsobením 221 mg (0,50 mmol) BOP. Po 15 minutách sa pridá 86 mg (0,40 mmol) hydrochloridu metyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoátu (neutralizovaného nadbytkom (0,15 ml, 0,80 mmol) Hunigovej bázy) v 1 ml dimetylformamidu a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Po zriedení etylacetátom (10 ml) sa zmes premyje 60 % nasýteným roztokom NaHCO3 (2 x 10 ml), 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2x5 ml) a soľankou (10 ml) a vysuší sa nad síranom sodným. Odparením rozpúšťadla sa získa 143 mg (0,40 mmol, 100 %) de- rivátu 1043-1 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDClj): δ 7,60 (1H), 7,20 (5H), 5,40 - 5,30 (2H), 3,55 (3H), 2,85 - 2,70 (2H), 1,55 (2H), 1,40 (9H), 0,90 (2H).
B. Malé množstvo zlúčeniny 1043-1 sa hydrolyzuje, ako je opísané v príklade IB a produkt sa prečistí HPLC. Získajú sa 3 mg produktu BIO-1043, m/z 349 (čistota 100 % podľa HPLC), vo forme bielej tuhej látky, ktorá sa pou- i
žila na biologické testy. H-NMR spektrum (DMSO-d^): δ 8,55 - 8,05 (bm, 2H), 7,50 - 7,15 (m, 5H), 5,40 (bm, 2H), 3,00 - 2,65 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,43-1,10 (m, 2H), 0,97 (bm, 1H), 0,85 (bm, 1H).
Príklad 32
Syntéza BIO-1115
A. Metódou opísanou v postupe C sa 68 mg (0,27 mmol) hydrochloridu metyl 3-amino-3-(4-chlórfenyl)-l-propanoátu (ester M-l; jeho príprava je opísaná v postupe B) prevedie na 94 mg (0,22 mmol, 82 %) zlúčeniny 1115-1, i
ktorá sa získa ako biela pena. H-NMR spektrum (CDCip: δ 7,35 (1H), 7,25 - 7,10 (4H), 5,35 (1H), 4,95 (1H), 4,05 (1 H), 3,60 (1,5H), 3,55 (1,5H), 2,80 -2,65 (2H), 1,65 (2H),
1.40 (1 OH), 0,80 (6H).
B. Metódou opísanou v príklade 29 B sa 68 mg (0,27 mmol) zlúčeniny 1115-1 prevedie na 67 mg (0,15mmol, 68 %) surového produktu 1115-2, ktorý sa získa vo forme svetložltej tuhej látky. H-NMR spektrum: δ 7,50 (1H),
7.40 - 7,00 (9H), 6,20 (1H), 5,25 (1H), 4,45 (1H), 3,60 (1,5H), 3,55 (1,5H), 2,70 - 2,55 (4H), 1,65 - 1,40 (3H), 0,80 (6H).
C. Malé množstvo surovej zlúčeniny 1115-1 sa hydrolyzuje, produkt sa prečistí kvapalinovou chromatografíou a zo zodpovedajúcich čistých frakcií sa získajú izoméry ΒΙΟΙ 115A (cca lmg), m/z 431 (čistota 100 % podľa HPLC) a BIO-1115B (cca 2 mg), m/z 442 (čistota 100 % podľa HPLC).
BIO-1115A: H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz): δ
8,46 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 8,27 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,46 - 7,18 (m, 9H), 5,20 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,60 - 3,45 (m,
2H), 2,71 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 1,63 (m, 1H), 1,48 (m, 2H), 0,91 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,84 (d, 3H, J = 6,4 Hz).
BIO-1115B: H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz): δ
8,60 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,26 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,45 - 7,15 (m, 9H), 5,18 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,50 (m, 2H), 2,70 (d, 2H), 1,50 (m, 1H), 1,42 (m, 2H), 0,85 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 0,75 (d, 3H, J = 6,4 Hz).
Príklad 33
Syntéza ΒΙΟ-1129
A. K roztoku 540 mg (2,0 mmol) kyseliny 4-(fenylureido)fenyloctovej (pripravenej v príklade 22C) v 5 ml dimetylformamidu sa pridá 460 mg (2,4 mmol) EDC. Po 15 minútovom státí pri laboratórnej teplote sa pridá 515 mg (2,0 mmol) hydrochloridu terc-butylesteru fenylalanínu (neutralizovaného nadbytkom (0,7 ml, 4,0 mmol) Hunigovej bázy) v 3 ml dimetylformamidu a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Po zriedení 20 ml etylacetátu sa zmes premyje 60 % nasýteným roztokom NaHCO (2x10 ml), roztokom kyseliny citrónovej (2x10 ml) a soľankou (2 x 10 ml) a vysuší sa nad síranom sodným. Odparením rozpúšťadla sa získa 662 mg (1,4 mmol, 70 %) surového derivátu 1129-1 vo forme viskózneho svetložltého oleja. H-NMR spektrum (CDCIJ δ 7,45 - 6,90 (16H), 6,45 (1H), 4,70 (1H), 3,40 (2H), 3,15 - 2,90 (2H), 1,35 (9H).
B. K 662 mg (1,40 mmol) surového produktu 1129-1 sa pridá 5 ml dichlórmetánu a 1 ml kyseliny trifluóroctovej. Reakčná zmes sa mieša cez noc, potom sa odparí rozpúšťadlo a odparok sa vysuší vo vákuu. Malá časť (21 mg, 0,05 mmol) sa rozpustí v 1 ml dimetylformamidu, pridá sa 11 mg (0,07 mmol) HOBt a 14 mg (0,06 mmol) EDC a reakčná zmes sa mieša 15 minút pri laboreatórnej teplote. Potom sa pridá roztok 13 mg (0,05 mmol) amínu β-3 v 0,5 ml dimetylformamidu. Zmes sa mieša cez noc, zriedi sa 20 ml etylacetátu a premyje sa nasýteným roztokom NaHCO3 (2x10 ml), roztokom kyseliny citrónovej (10 ml) a soľankou (10 ml), vysuší sa nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 26 mg (0,04 mmol, 80 %) surového i produktu 1129-2 ako svetlohnedej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDCI ) δ 8,40 (1H), 7,40 - 6,50 (19H), 5,95 (2H), 5,70 (1H), 5,25 (1H), 4,70 (1H), 3,65 - 3,50 (5H), 3,10-2,65 (4H).
C. Malé množstvo surovej zlúčeniny 1129-2 sa hydrolyzuje postupom, opísaným v príklade IB a produkt sa prečistí HPLC. Získa sa BIO-1129A (cca 1,5 mg), m/z 609 (80 : : 20 ds), čistota podľa HPLC 100 %, a BIO-1129B (cca 2 mg), m/z 609 (9:91 ds), čistota podľa HPLC 100 %. Oba produkty sú biele tuhé látky.
BIO-1129A, H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz) δ
8,18 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,50 (bd, 1H), 8,23 (bd, 1H), 7,50 (d, 2H, J = 8,10 Hz), 7,40 - 7,10 (m, 9H), 7,08 - 6,72 (m, 6H), 6,04 (s, 2H). 5,15 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,38 (m, 2H), 3,05 - 2,70 (m, 2H), 2,62 (s, 2H).
Príklad 34
Syntéza BIO-1131
A. Metódou opísanou v príklade 1A kondenzuje kyselina fenylureidofenyloctová (pripravená v príklade 22C) s hydrochloridom metylesteru izoleucínu (362 mg, 2,0 mmol) (po predošlom zmiešaní s trietylamínom) za vzniku surového produktu 1131-1 (344 mg, 1,0 mmol, 51 %) vo forme číreho viskózneho oleja. H-NMR spektrum (CDCI j δ 7,70 (1H), 7,35 - 6,95 (10H), 6,60 (1H), 4,55 (1H), 3,65 (3H), 3,45 (2H), 1,90 (1H), 1,45 - 1,20 (3H), 0,85 (5H).
B. K roztoku 344 mg (0,95 mmol) surovej zlúčeniny 1131-1 v 5 ml metanolu sa pridajú 2 ml 2N LiOH. Zmes sa mieša cez noc, metanol sa odparí, pridá sa 5 ml vody a pi I zmesi sa nastaví na hodnotu 1-2. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (5 x 20 ml), organický extrakt sa vysuší nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 365 mg (0,95 mmol, 100 %) produktu 1131-2 vo forme svetlohnedej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDClp δ 8,70 (2H), 8,30 (1H), 7,60 - 7,20 (8H), 7,00 (1H), 4,25 (1H), 3,55 (2H), 1,90 (1H), 1,55 (1H), 1,30 (2H), 0,85 (5H).
C. Z 27 mg (0,07 mmol) zlúčeniny 1131-2 a 11 mg (0,07 mmol) amínu β-3 sa podľa predpisu v príklade 1A pripraví 34 mg (89 %) surového produktu 1131-3, ktorý sa i
získa ako svetlohnedá tuhá látka. H-NMR spektrum (CDCip δ 8,03 (2H), 7,45 - 6,65 (16 H), 5,45 (1H), 4,45 - 4,30 (1H), 3,55 (2H), 3,20 - 2,90 (2H), 2,00 - 0,70 (9H).
D. Malé množstvo surovej zlúčeniny 1131-3 sa hydrolyzuje postupom opísaným v príklade IB a produkt sa prečistí HPLC. Získa sa zlúčenina ΒΙΟ-1131A (cca 2 mg), m/z 531 (100 : 0 ds), čistota podľa HPLC 100 %, a BIO-1131B (cca 3 mg), m/z 531 (0 : 100 ds), čistota podľa HPLC 100 %. Oba produkty sú biele tuhé látky.
BIO-1131A, H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz) δ . 8,69 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,50 (d, 2H, J = 7,8 Hz), 7,44 - 7,22 (m, 8H), 7,19 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,00 (m, 1H), 5,27 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 3,52 (m, 2H), 3,00 (bm, 2H), 2,71 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 1,70 (bm, 1H), 1,44 - 1,26 (m, 1H), 1,22 - 1,00 (m, 3H), 0,95 - 0,78 (m, 5H).
BIO-1131B, H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz) δ . 8,73 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,60 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,15 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7,50 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,42 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,37 - 7,23 (m, 5H), 7,20 (d, 2H, J - 8,4 Hz), 7,00 (m, 1H), 5,35 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,50 (m, 2H), 3,05 (bm, 2H), 2,71 (m, 2H), 1,72 (bm, 1H), 1,20 (m, 3H), 0,72 - 0,60 (m, 5H).
Príklad 35
Syntéza BIO-1136
A. Podľa metódy, opísanej v príklade 1A, sa uskutoční reakcia 25 mg (0,08 mmol) komerčného N-Boc-S-benzylcysteínu so 17 mg (0,09 mmol) metyl 3-amino-3-fenyl-l-propanoátu. Získa sa 42 mg (0,08 mmol, 100 %) surového chráneného amínu 1136-1. H-NMR spektrum (CDCI^): δ 7,35 (10H), 5,40 - 5,20 (2H), 4,20 (1H), 3,65 (1,5H), 3,55 (1,5H), 3,54 (1,5H), 3,25 - 2,65 (6H), 1,45 - 1,30 (9H).
B. Chránený amín 1136-1 sa prevedie na trifluoroacetát 1136-2 metódou, opísanou v postupe D.
C. Metóda, opísaná v príklade 22D, sa uskutoční so 42 mg (0,08 mmol) voľného amínu 1136-2 (po predošlom uvoľnení pôsobením trietylamínu). Získa sa tak surový produkt 1136-3, ktorý sa bez čistenia použije v nasledujúcom hydrolytickom kroku.
D. Malé množstvo surovej zlúčeniny 1136 sa hydrolyzuje metódou, opísanou v príklade IB, a produkt sa prečistí HPLC. Získajú sa cca 4 mg BIO-1136, m/z 611 (čistota podľa HPLC 100 %) vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz) δ 9,05 (bm, 2H), 8,90 (br, 1H), 8,37 (br, 1H), 7,50 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,45 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,40 - 7,20 (m, 9H), 7,00 (m, 1H), 5,25 (br, 1H), 4,65 (br, 1H), 3,50 - 3,20 (m, 4H), 2,70 (bm, 2H).
Príklad 36
Syntéza BIO-1176
A. K roztoku 500 mg (1,55 mmol) komerčného a-benzylesteru N-Boc-asparágovej kyseliny v 5 ml dimetylformamidu sa pridá 283 mg (2,10 mmol) HOBt a potom 343 mg (1,80 mmol) EDC. Zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 15 minút a potom sa pridá 500 mg (1,54 mmol) tiomorfolínu a následne 0,7 ml (92 mmol Hunigovej bázy. Reakčná zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc a zriedi sa 25 ml etylacetátu. Organický extrakt sa premyje 5 ml 60 % nasýteného NaHCO3, 5 ml 5 % kyseliny citrónovej a 5 ml soľanky, vysuší sa nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 421 mg (1,03 mmol, 69 %) esteru 1176-1 i
vo forme hustého oranžového oleja. H-NMR spektrum (CDC1 ): δ 7,13 (m, 5H), 5,69 (bd, 1H, J = 9,4 Hz), 5,03 (d, 1H, J = 12,6 Hz), 4,42 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,60 - 3,40 (m, 4H), 2,96 (bm, 1H), 2,58 (bm, 1H), 2,35 (m, 4H), 1,22 (s, 9H).
B. Reakcia 100 mg (0,25 mmol) esteru 1176-1, uskutočnená podľa príkladu IB, poskytne 76 mg (0,24 mmol, 96 i %) kyseliny 1176-2 vo forme číreho hustého oleja. H-NMR spektrum (CDC1 ): δ 7,39 - 7,28 (m, 5H), 7,15 - 6,70 (br, 1H), 5,70 (bs, 1H, J = 6,3 Hz), 4,55 (br, IH), 4,40 -
- 3,40 (m, 4H), 3,15 (m, 1H), 2,80 - 2,52 (m, 5H), 1,43 (s, 9H).
C. Podľa metódy, opísanej v príklade 1A, sa nechá zreagovať 32 mg (0,10 mmol) kyseliny 1176-2 v dimetylformamide s HOBt, EDC a amínom β-3. Získa sa 36 mg (0,07 mmol, 70 %) zlúčeniny 1176-3. Produkt je hustý svetložltý olej. H-NMR spektrum (CDCl^: δ 7,71 (br, 1H), 6,61 (m, 3H), 6,00 (br, 0,5H), 5,90 (s, 1H), 5,77 (br, 0,5H), 5,21 (m, 1H), 4,51 (bm, 1H), 3,90 - 3,40 (m, 4H), 3,39 (s, 3H), 3,12 -
- 3,00 (m, 1H), 2,85 - 2,65 (m, 3H), 2,63 - 2,45 (m, 4H), 1,43 (s, 4,5H), 1,43 (s, 4,5H).
D. Metódou, opísanou v príklade 22D, sa z 36 mg (0,07 mmol) chráneného amínu 1176-3 pripraví 51 mg (0,07 mmol, 100 %) trifluoroacetátu 1176-4 vo forme svetložltej tuhej látky.
E. Metódou, opísanou v príklade 22D, sa zo 42 mg (0,08 mmol) voľného amínu 1176-4 (po reakcii s trietylamínom) pripraví surový produkt 1176-5, ktorý sa bez ďalšieho čistenia použije v nasledujúcom hydrolytickom kroku. 'H-NMR spektrum (CDC1): δ 7,95 - 6,90 (m, 13H),
6,61 (s, 3H), 5,85 (s, 2H), 5,23 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 3,89 3,60 (s, 4H), 3,55 (s, 3H), 3,43 (br, 2H), 3,11 - 2,96 (m, 2H), 2,71 (m, 2H), 2,46 (m, 4H).
F. Surová zlúčenina 1176-5 sa hydrolyzuje postupom, opísaným v príklade IB. Prečistenie malej vzorky HPLC poskytne 4 mg BIO-1176, m/z 662 (čistota podľa HPLC >
i > 99 %) vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-d6): δ 8,69 (d, 2H, J = 9,8 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 8,26 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,61 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,34 (m, 2H), 7,21 (d, 2H, J = 8,0 Hz),
7,10 - 6,95 (m, 4H), 6,11 (s, 2H), 5,13 (m, 1H), 4,68 (m, 1H), 3,71 (br, 4H), 3,56 - 3,18 (m, 2H), 2,73 - 2,46 (m, 8H).
Príklad 37
Syntéza BIO-1177
A. Postup, opísaný v príklade 36A, sa uskutoční s tým rozdielom, že miesto tiomorfolínu sa použije metylpropargylamín. Získa sa 374 mg (0,99 mmol, 66 %) surového i produktu 1177-1 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCip: δ 7,20 (5H), 5,25 (1H), 5,10 (2H), 4,45 (1H), 4,15 - 3,80 (2H), 3,15 - 2,65 (5H), 2,20 - 2,15 (1H), 1,30 (9H).
B. Surová zlúčenina 1177-1 sa nechá reagovať ako je opísané v príklade 1B. Získaná kyselina 1177-2 (76 mg, 0,26 mmol, 96 %) je číry olej. H-NMR spektrum (CDCIp: δ 5,35 (1H), 4,55 (1H), 4,35 - 3,80 (2H), 3,30 - 2,65 (5H), 2,40-2,25 (1H), 1,45 (9H).
C. 76 mg (0,26 mmol) kyseliny 1177-2 sa nechá reagovať v dimetylformamide s HOBt, EDC a amínom β-3 metódou, opísanou v príklade 1A. Získa sa 78 mg (0,15 mmol, 57,7 %) surového produktu 1177-3 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCip: δ 7,70 (1H), 7,35 (3H), 6,65 (2H), 5,80 (1H), 5,30 - 5,00 (2H), 4,60 (1H), 4,45 - 3,80 (2H), 3,60 (3H), 3,30 - 2,70 (5H), 2,30 (1H), 1,45 (4,5H),
1,40 (4,5H).
D. Podľa postupu D sa 78 mg (0,15 mmol) chráneného amínu 1177-3 prevedie na soľ s kyselinou trifluóroctovou 1177-4.
E. Metóda, opísaná v príklade 22D, sa uskutoční s použitím voľného amínu 1177-4. Získa sa 52 mg (0,08 mmol, 77 %) produktu 1177-5 vo forme svetlohnedej tuhej látky. 'η-NMR spektrum (CDC1): β 7,50 - 6,90 (14H), 6,65 (3H), 5,85 (2H), 5,25 - 5,00 (2H), 4,85 (1H), 4,25 - 3,70 (2H), 3,60 (3H), 3,55 (2H), 3,30 - 2,65 (5H), 2,22 (1H).
F. Malé množstvo zlúčeniny 1177-5 sa hydrolyzuje metódou opísanou v príklade 1B. Získa sa BIO-1177 (cca 2 mg) vo forme bielej tuhej látky, m/z 628 (čistota podľa HPLC 100 %). H-NMR spektrum (DMSO-d ): δ 8,64 (bd, 2H), 8,27 (bm, 2H), 7,55 - 7,13 (m, 7H), 7,11 - 6,75 (m, 3H), 6,15 (s, 2H), 5,12 (bm, 1H), 4,65 (bm, 1H), 4,25 (bm, 2H), 3,25 (m, 2H), 3,05 (br, 2H), 2,88 (bm, 1H), 2,62 (m, 2H).
Príklad 38
Syntéza BIO-1244
A. 1,60 g (4,9 mmol) α-benzylesteru kyseliny N-Boc-asparágovej sa nechá zreagovať podľa procedúry opísanej v príklade 36A s tým rozdielom, že sa miesto tiomorfolínu použije dimetylamín. Získa sa ester 1214-1 (1,43 g, 4,1 i
mmol, 83 %) ako hustý bezfarebný olej. H-NMR spektrum (CDCls): δ 7,32 (m, 5H), 5,85 (br, 1H), 5,15 (m, 2H), 4,55 (br, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 2,73 (m, 1H), 1,40 (s, 9H).
B. Ester 1214-1 (124 mg, 0,33 mmol) sa rozpustí v 2 ml etylacetátu a pridá sa cca 50 mg 10 % Pd/C. Zmes sa hydrogenuje 2 hodiny pri tlaku 40 psi. Reakčná zmes sa prefiltruje cez Celit. Odparenie rozpúšťadla poskytne 95 mg (0,33 mmol, 100 %) kyseliny 1214-2 vo forme bezfarebného oleja. H-NMR spektrum (CDC1(): δ. 5,81 (bm, 1H), 4,48 (bs, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,93 (s, 3H), 2,59 (m, 1H), 1,39 (s, 9H).
C. Reakcia 28 mg (0,10 mmol) kyseliny 1214-2 a 17 mg (0,80 mmol) amínu β-3 sa uskutoční podľa metódy, opisanej v príklade 1A. Získa sa 55 mg (0,10 mmol, 100 %) chráneného amínu 1214-3 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCl^: δ 7,77 (bd, 1H), 6,71 (m, 3H), 6,11 (bd, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,25 (m, 1H), 4,51 (br, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,12 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 2,88 - 2,68 (m, 2H), 2,48 (m, 1H), 1,43 (s, 9H).
D. 55 mg (0,10 mmol) chráneného amínu 1214-3 sa prevedie na trifluóracetátovú soľ 1214 metódou, opísanou v postupe D.
E. Metódou, opísanou v príklade 22D, sa voľný amín 1214-4 prevedie na produkt 1214-5 (31 mg, 0,05 mmol, 50 i
%). Produkt je svetlohnedá tuhá látka. H-NMR spektrum (CDCip: δ 7,45 - 6,90 (m, 13H), 6,61 (m, 3H), 5,85 (s, 2H), 5,24 (m, 1H), 4,82 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,47 (m, 2H), 3,08 - 2,94 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 2,77 -2,50 (m, 2H), 2,45 (m, 1H).
F. Malé množstvo zlúčeniny 1214-5 sa hydrolyzuje ako je opísané v príklade 1B. Získa sa BIO-1214 (cca 2 mg) ako biela tuhá látka, m/z 604 (čistota podľa HPLC 100 %).
Príklad 39
Syntéza BIO-1215
A. K roztoku 671 mg (1,9 mmol) amidu 1214-1 (pripraveného v príklade 38 A) v 5 ml suchého tetrahydrofuránu, ochladeného na 0 °C sa prikvapká 4,1 ml (3,8 mmol) 1N roztoku BH} v tetrahydrofuráne. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote, potom sa rozloží 2 ml metanolu a odparí sa dosucha. Pridá sa 5 ml metanolu a trikrát sa odparí, aby sa odstránil všetok vzniknutý (MeOj^B. Sušenie vo vysokom vákuu poskytne 623 mg (1,7 mmol, 90 %) amínu 1215-1 vo forme hustého bezfarebného oleja. H-NMR spektrum (CDCip: δ 7,38 (m, 5H), 5,48 (bm, 1H), 2,65 - 2,35 (m, 8H), 1,95 (m, 2H), 1,42 (s, 9H).
B. 124 mg (0,34 mmol) amínu 1215-1 sa katalytický hydrogenuje v zmesi metanolu, etylacetátu a kyseliny octovej nad cca 50 mg 10 % Pd/C. Po dvoch hodinách sa reakčná zmes prefiltruje a rozpúšťadlá sa odparia. Získa sa 90 mg (0,33 mmol, 97 %) kyseliny 1215-2 vo forme hustého bezfarebného oleja. H-NMR spektrum (CDCIJ: δ 5,91 (br, 1H), 3,95 (br, 1H), 3,54 (bm, 1H), 2,71 - 2,42 (m, 8H), 2,15 (br, 2H), 1,33 (s, 9H).
C. Reakcia 55 mg (0,12 mmol) kyseliny 1215-2 s 22 mg (0,10 mmol) amínu β-3 sa uskutoční podľa metódy opísanej v príklade 1A. Získa sa 44 mg (0,09 mmol, 90 %) i chráneného amínu 1215-3 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCy: δ 6,75 (m, 3H), 6,51 (bd, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,30 (m, 1H), 4,37 - 4,12 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 2,90 - 2,65 (m, 2H), 2,55 - 2,00 (m, 10H), 1,42 (s, 9H).
D. Chránený amín 1215-3 (44 mg, 0,09 mmol) sa nechá reagovať ako je opísané v postupe D, čim sa získa soľ amínu 1215-4 s kyselinou trifluóroctovou.
E. Voľný amín 1215-4 sa nechá zreagovať podľa metódy, opísanej v príklade 22D, čím sa získa 38 mg (0,06 mmol, 70 %) produktu 1215-5 vo forme bielej tuhej látky.
H-NMR spektrum (CDC1 ): δ 7,41 - 6,90 (m, 13H), 6,71 (m, 3H), 5,91 (s, 2H), 5,29 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,45 (m, 2H), 2,90 - 2,70 (m, 2H), 2,40 - 1,95 (m, 10H).
F. Malá časť zlúčeniny 1214-5 sa hydrolyzuje metódou, opísanou v príklade 1B, čím sa získa produkt BIO-1215 (cca 3 mg) vo forme bielej tuhej látky, m/z 590 (čistota podľa HPLC 100%).
Príklad 40
Syntéza BIO-1227
A. Podľa metódy, opísanej v príklade 1B, sa 28 mg (0,12 mmol) komerčného N-Boc-S-metylcysteínu nechá zreagovať s 21 mg (0,10 mmol) amínu β-3, čím sa získa 32 mg (0,07 mmol, 70 %) chráneného amínu 1227-1 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDCl^): δ 7,38 (bd, 1H), 6,81 - 6,67 (m, 3H), 5,90 (s, 2H), 5,40 (bd, 1H), 5,37 (m,
1H), 4,20 (m, 1H), 3,59 (s, 3H), 2,95 - 2,68 (m, 4H), 2,10 (s, 3H), 1,43 (s, 9H).
B. Podľa metódy, opísanej v postupe D, sa 32 mg (0,07 mmol) chráneného amínu 1227-1 prevedie na soľ amínu 1227-2 s kyselinou trifluóroctovou.
C. Voľný amín 1227-2 sa nechá reagovať s 28 mg (0,10 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej metódou, opísanou v príklade 22D. Získa sa 29 mg (0,047 mmol, 67 %) surového esteru 1227-3 vo forme svetlohnedej tuhej látky. ’h-NMR spektrum (CDCl j: δ 7,62 (bd, 1H), 7,40 -
- 6,90 (m, 12H), 6,80 (m, 3H), 5,90 (s, 2H), 5,15 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,63 - 3,45 (m, 5H), 3,15 - 2,61 (m, 4H), 2,21 (s, 3H), 2,190 (s, 3H).
D. Malé množstvo surového esteru 1227-3 sa hydrolyzuje ako je opísané v príklade 1B. Získa sa cca 4 mg produktu BIO-1227 vo forme bielej tuhej látky, m/z 593 (čistota podľa HPLC > 99 %). H-NMR spektrum (DMSO-d^): δ 9,01 (s, 1H), 8,67 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,31 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,97 (s, 1H), 7,90 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,44 (d, 2H, J = = 8,3 Hz), 7,23 (m, 4H), 6,99 (m, 2H), 6,85 (m, 2H), 6,03 (s, 2H), 5,16 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 3,39 (m, 2H), 2,81 -
- 2,58 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
Príklad 41
Syntéza BIO-1149
A. K roztoku 272 mg (0,67 mmol) produktu, pripraveného postupom C, v 2,5 ml dichlórmetánu sa pomaly pridá
2.5 ml trifluóroctovej kyseliny a zmes sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Po odparení rozpúšťadla sa olejovitý odparok rozpustí v 2,5 ml dichlórmetánu. pH roztoku sa upraví trietylamínom na 9 a potom sa pridá 170 mg (0,63 mmol) sukcínimidylesteru kyseliny 2-chinolinkarboxylovej. Zmes sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote a potom sa spracuje obvyklým spôsobom (5 % kyselina citrónová, 5 % NaHCO3 a nasýtený roztok NaCl). Získa sa 200 mg (76 %) esteru 1149-1 vo forme bielej tuhej látky.
B. 200 mg (0,43 mmol) kyseliny 1149-1 sa rozpustí v
1.5 ml metanolu a k roztoku sa pridá 0,5 ml IM vodného LiOH. Zmes sa mieša 3 hodiny pri laboratórnej teplote, neutralizuje sa 5 % kyselinou citrónovou na pH 3 a extrahuje sa etylacetátom (3x5 ml). Spojené extrakty sa vysušia nad síranom sodným a odparením rozpúšťadla sa získa 155 mg (82,5 %) zlúčeniny 1149. Malé množstvo surového produktu (30 mg) sa prečistí HPLC, čím sa taktiež oddelia diastereoizoméry zlúčeniny BIO-1149. HPLC (pri laboratórnej teplote), izomér A: 36 min., izomér B: 38 min.
i Hmotnostné spektrum (FAB): 434. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): δ 8,72 (m, III), 8,30 - 7,98 (m, 3H), 7,82 - 7,64 )M, 2H), 7,60 - 7,51 (m, 1H), 7,30 - 7,09 (m, 5H), 5,46 - 5,38 (m, 1H), 4,86 - 4,72 (m, 1H), 2,92 -
- 2,74 (m, 2H), 1,88-1,61 (m, 3H), 0,96 - 0,83 (m, 6H).
Príklad 42
Syntéza BIO-1152
A. K roztoku 33 mg (0,10 mmol) produktu, pripraveného podľa postupu D2, v 0,5 ml dichlórmetánu sa pridá 14 mg (0,10 mmol) chloridu kyseliny 2,2-dimetylmaslovej a 50 μΐ trietylamínu. Reakčná zmes sa mieša 16 hodín pri laboratórnej teplote a potom sa spracuje obvyklým spôsobom (5 % NaHCCK 5 % kyselina citrónová a nasýtený roztok NaCl.) Získa sa 37 mg (76 %) produktu 1152-2 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,32 - 7,19 (m, 5H), 6,08 (s, 1 H), 5,36 - 5,27 (m,
1H), 4,53 - 4,44 (m, 1H), 2,86 - 2,61 (m, 2H), 2,05 (s, 2H),
1.26 (s, 9H), 1,01 (s, 9H), 0,99 - 0,84 (s, 9H).
B. Ester 1152-2 sa rozpustí v 2,5 ml dichlórmetánu a
2,5 ml kyseliny trifluóroctovej a zmes sa mieša 3 hodiny pri laboratórnej teplote. Získaný olej sa prečistí HPLC a i získa sa tak čistý produkt BIO-1152. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,29 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,34 - 7,18 (m, 5H), 5,44 - 5,32 (m, 1H), 4,78 - 4,69 (m, 1H),
3.21 - 3,14 (m, 2H), 2,98 - 2,77 (dd, 2H), 1,59 - 1,38 (m, 3H), 0,96 (s, 9H), 0,84 (d, 3H), 0,73 (d, 3H).
Príklad 43
Syntéza BIO-1089
A. K roztoku 2,2 g (8,76 mmol) amínu β-6 v 25 ml dichlórmetánu sa pridá 2,77 g (8,0 mmol) sukcín-imidylesteru N-Boc-metionínu a 5 kvapiek trietylamínu a zmes sa mieša 1,5 hodiny pri laboratórnej teplote. Potom sa zmes premyje 5 % kyselinou citrónovou (2x10 ml), 5 % NaHCO} (2 x 10 ml) a nasýteným roztokom NaCl (15 ml), vysuší sa nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 3,2 g (83 %) produktu 1089-1 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm):
7.27 (d, 2H), 6,81 (d, 2H), 5,31 - 5,20 (m, 2H), 4,38 - 4,28 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 2,82 - 2,64 (m, 2H), 2,12 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,30 (s, 9H).
B. K roztoku 3,2 g (6,64 mmol) zlúčeniny 1089-1 v 15 ml etylacetátu sa pridá 40 ml IM HCl v etylacetáte a zmes sa mieša 4,5 hodiny pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa rozloží 60 ml vody a ďalej sa spracováva vodná vrstva. Neutralizuje sa pevným NaHCO3 na pH 8 a produkt sa extrahuje do etylacetátu (2 x 45 ml). Spojené etylacetátové extrakty sa premyjú 20 ml nasýteného roztoku NaCl, vysušia sa nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 1,7 g (67 %) produktu 1089-2 vo forme oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,98 (d, 1H), 7,19 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 6,81 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 5,32 - 5,18 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,48 - 3,44 (m, 1H), 2,82 - 2,62 (m, 2H), 2,53 (t, 2H), 2,18 - 2,06 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,80 - 1,66 (m, 1H), 1,31 (s, 9H).
C. Podľa metódy opísanej v príklade 22D, sa 1,7 g (4,45 mmol) zlúčeniny 1089-2 prevedie na 2,3 g (81,6 %) zlúčeniny 1089-3, získanej ako tuhá látka. Tento materiál sa použije bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom reakčnom kroku. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,60 (d, 2H), 8,41 (d, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,44 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 7,26 (t, 2H), 7,13 (t, 2H), 6,91 (t, 1H), 6,79 (d, 2H),
5,10 - 5,01 (m, 1H), 4,36 - 4,33 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,29 (s, 2H), 2,61 - 2,58 (m, 2H), 1,89 (s, 3H), 1,26 (s, 9H).
D. 2,3 g (3,63 mmol) zlúčeniny 1089-3 sa rozpustí v 8 ml 4N HCl v dioxáne a roztok sa mieša 16 hodín pri laboratórnej teplote. Dioxán sa odparí, pridá sa 15 ml éteru a zmes sa mieša 10 minút. Vylúčená zrazenina sa odsaje a prekryštalizuje z metanolu. Získa sa čistý produkt ΒΙΟΙ 089 ako svetlohnedá tuhá látka. Hmotnostné spektrum (FAB): 579. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 8,76 (d, 2H), 8,52 (d, 1H), 7,54 (d, 2H), 7,46 (d, 2H), 7,36 (t, 1H), 7,34 - 7,26 (m, 4H), 7,04 (t, 1H), 6,95 (d, 2H),
5.22 - 5,20 (m, 1H), 4,46 - 4,35 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,50 (s, 2H), 3,20 (m, 2H), 2,79 - 2,73 (m, 2H), 2,35 (t, 2H), 2,03 (s, 3H), 1,87- 1,80 (m, 2H).
Príklad 44
Syntéza BIO-1090
A. Metóda, opísaná v postupe C, sa uskutoční s 28 mg (1,0 mmol) amínu β-10, čím sa získa 38 mg (84 %) pro- i
duktu 1090-1 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,08 (m, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,74 - 6,70 (m, 2H), 5,24 - 5,15 (m, 1H), 4,98 - 4,93 (m, 1H), 4,16 - 4,13 (m, 4H), 2,74 - 2,53 (m, 2H), 1,62 - 1,42 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,40 (s, 9H), 0,89 (m, 6H).
B. 38 mg (0,77 mmol) bielej tuhej látky 1090-1 sa nechá reagovať podľa metódy, opísanej v postupe Dl. Získa sa olejovitý produkt 1090-2, ktorý sa bez ďalšieho čistenia i
použije v nasledujúcom kroku. H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 7,24 - 7,15 (m, 2H), 6,84 - 6,61 (m, 3H), 5,81 - 5,78 (m, 1H), 4,23 (s, 4H), 4,19 - 4,08 (m, 1H), 2,88 - 2,62 (m, 2H), 1,70 - 1,46 (m, 3H), 0,90 - 0,81 (m, 6H).
C. Amín 1090-2 sa prevedie na 27 mg (59 %) surového produktu 1090 metódou, opísanou v príklade 22D. Prečistenie HPLC poskytne čistý produkt BIO-1090 vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB): 603.
Príklad 45
Syntéza ΒΙΟ-1194
A. K dobre miešanému studenému roztoku 9,8 g (59,4 mmol) metyl p-aminofenylacetátu v 200 ml dichlórmetánu a 25 ml (18 g, 178,2 mmol) trietylamínu sa pridá prikvapkávacím lievikom počas 1 hodiny 96 ml 1,9 M roztoku fosgénu v toluéne. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C ďalšiu 1 hodinu. Potom sa zmes zahustí a pridá sa 125 ml zmesi cter-petroléter (3 : 1). Vylúčená tuhá látka sa odfiltruje a filtrát po odparení poskytne surový produkt 1194-1 ako hnedú kvapalinu. Prečistenie destiláciou pri 118 - 120 °C/10 mm poskytne 8,5 g (75 %) čistej zlúčeniny 1194-1 vo forme bezfarebného oleja. H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 7,20 (d, J = 8,4 Hz), 7,02 (d, J = 8,4 Hz), 3,69 (s, 3H), 3,48 (s, 2H).
B. K roztoku 5,73 g (30 mmol) zlúčeniny 1194-1 v 60 ml dichlórmetánu sa po častiach pridá 2,82 g (30 mmol) 2-aminopyridínu. Reakčná zmes sa mieša 0,5 hodiny pri laboratórnej teplote a potom 0,5 hodiny pri 35 °C. Vzniknutá zmes sa zriedi 60 ml petroléteru a vypadnutá biela tuhá látka sa odsaje. Získa sa tak 8,35 g (98 %) čistého produktu i
1194-2 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 8,20 (s, 2H), 7,62 - 7,51 (m, 3H), 7,33 (d, 2H), 7,01 (d, 2H), 6,89 - 6,85 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,59 (s, 2H).
C. 5,7 g (20,0 mmol) zlúčeniny 1194-2 sa rozpustí v 20 ml metanolu a k tomuto roztoku sa pridá 40 ml IN NaOH. Zmes sa zohrieva tak dlho, až sa vytvorí číry roztok a potom sa mieša pri laboratórnej teplote 16 hodín. Po opatrnom zneutralizovaní IN HC1 na pH 7 a následnej úprave pH kyselinou octovou na 3 sa vylúčená biela tuhá látka odfiltruje a premyje metanolom (15 ml) a éterom (2 x 30 ml). Získa sa 4,7 g (87 %) produktu 1194-3 vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 10,62 (br s, 1H), 9,53 (br s, 1H), 8,39 (d, 1H), 7,82 (t, 1H), 7,63 - 7,55 (m, 1H), 7,33 - 7,27 (d, 2H), 7,14 - 7,08 (m, 1 H), 3,62 (s,3H).
D. Podľa metódy, opísanej v postupe C, sa pripraví zlúčenina 1194-4 štandardnou kondenzáciou 2,65 g (10,56 mmol) amínu β-6 s 3,28 g (10 mmol) BocLeuOSu v 25 ml dichlórmetánu s prídavkom 5 kvapiek trietylamínu a následnou deprotekciou kyselinou trifluóroctovou v dichlórmetáne. V dvoch krokoch sa tak získa 4,5 g (83,6 %) zlúčeniny 1194-4.
1194-4-Boc: H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm):
7,18 (d, 2H), 6,36 (d, 2H), 5,13 - 5,10 (m, 1H), 4,12 - 4,01 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 2,79 - 2,60 (m, 2H), 1,62 - 1,40 (m, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,26 (s, 9H), 0,85 - 0,80 (m, 6H).
1194-4: 'H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 7,10 (d, 2H), 6,78 (d, 2H), 5,43 - 5,27 (m, 1H), 4,21 - 4,06 (m. 1H), 3,71 (s, 3H), 2,95 - 2,76 (m, 1H), 2,75 - 2,56 (m, 1H), 1,62- 1,32 (m, 6H).
E. Podľa metódy, opísanej v príklade 1 A, sa nechá zreagovať 1,36 g (5,0 mmol) kyseliny 1194-3 s amínom 1194-4, čím sa získa 2,1 g (78 %) surového produktu BIO-1194 vo forme bielej tuhej látky. Čistý produkt (čistota > 97,5 %) i sa získa prekryštalizovaním z metanolu. H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 8,03 - 7,97 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7,51 (d, 2H), 7,18 - 7,07 (m, 4H), 6,27 (d, 2H), 5,24 (m, 1H), 4,39 - 4,36 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,43 (s, 2H),
2,69 - 2,66 (m, 2H), 1,54 - 1,33 (m, 2H), 0,86 - 0,75 (m, 6H).
Príklad 46
Syntéza BIO-1180
A. Metódou, opísanou v príklade 45A, sa z terc-butyl p-aminofenylacetátu pripraví zlúčenina 1180-1 vo výťažku 94 %. Hmotnostné spektrum (FAB): 234. H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 7,18 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 6,98 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 3,49 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).
B. K roztoku 233 mg (1,0 mmol) izokyanátu 1180-1 v 5 ml dichlórmetánu sa pridá 100 mg (1,0 mmol) 2-aminotiazolu, zmes sa zohrieva, až kým sa nevytvorí číry roztok a potom sa mieša 1 hodinu pri laborratómej teplote. Odparením rozpúšťadla sa získa 335 mg produktu 1180-2 vo forme hnedožltej tuhej látky. Tá sa rozpustí v 2,5 ml dichlórmetánu a k roztoku sa pridá 2,5 ml kyseliny trifluóroctovej. Zmes sa mieša 1,5 hodiny pri laboratórnej teplote a po odparení rozpúšťadla poskytne 300 mg produktu 1180-3 vo forme žltej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB): 278.
C. K roztoku 28 mg (0,1 mmol) zlúčeniny 1180-3 v 0,25 ml dimetylformamidu sa pridá 60 mg (0,31 mmol) EDC a 55 mg DMAP a zmes sa mieša 10 minút pri laboratórnej teplote. K tejto zmesi sa pridá 23 mg (0,051 mmol) soli amínu β-3 s kyselinou trifluóroctovou. Výsledná reakčná zmes sa mieša 16 hodín pri laboratórnej teplote a potom sa spracuje zvyčajným spôsobom (5 % kyselina citrónová, 5 % NaHCOj, nasýtený roztok NaCl, vysušenie nad síranom sodným a odparenie). Získa sa 22 mg (72 %) surovej zlúčeniny 1180-4. Hmotnostné spektrum (FAB): 596.
D. Surová zlúčenina 1180-4 sa hydrolyzuje na surovú zlúčeninu BIO-1180 metódou, opísanou v príklade 1B. Prečistením HPLC sa získa čistá zlúčenina BIO-1180. HPLC (laboratórna teplota): 26,3 min., čistota > 99 %.
i
Hmotnostné spektrum (FAB): 582. H-NMR spektrum (CDClj, 300 MHz, ppm): 9,00 (br s, 1H), 8,52 (d, 2H, J = = 8,3 Hz), 8,24 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,50 - 7,47 (m, 3H),
7,28 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,20 (d, 1H, J = 3,5 Hz), 6,95 - 6,81 (m, 3H), 6,08 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 5,19 - 5,16 (m, 1H), 4,40 -4,20 (m, 1 H), 3,51 (dd, J =14,1 Hz a 23,8 Hz), 2,76 - 2,65 (m, 2H), 1,57 - 1,50 (m, 1H), 1,50 - 1,44 (m, 2H), 0,92 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 0,86 (d, J = 6,3 Hz).
Príklad 47
Syntéza ΒΙΟ-1199
K roztoku 15 mg zlúčeniny BIO-1089 v zmesi s 1,0 ml dimetylsulfoxidu a 2 ml vody sa pridá 20 mg Oxonu a re akčná zmes sa mieša pri laboratórnej teplote. Sledovanie reakcie HPLC ukazuje, že východisková zlúčenina (retenčný čas pri laboratórnej teplote 20 min.) postupne mizne a objavuje sa nový pík (retenčný čas 16,9 min.). Po 16 hodinovom miešaní východisková zlúčenina BIO-1089 takmer úplne vymizne a produkt ΒΙΟ-1199 (retenčný čas 16,9 min. pri laboratórnej teplote) v čistote > 99 % sa vyizoluje HPLC. Hmotnostné spektrum (FAB): 595.
Príklad 48
Syntéza BIO-1207
A. Amín β-5 (220 mg, 1,053 mmol) sa nechá reagovať metódou opísanou v postupe C a ďalšia reakcia získaného produktu sa uskutoční ako je opísané v postupe Dl. Výťažok zlúčeniny 1207-1 je 383 mg (88 % pre dva stupne).
B. Podľa metódy, opísanej v príklade 1A, sa uskutoční reakcia 260 mg (0,91 mmol) kyseliny p-Cbz-aminofenyloctovej s 375 mg (0,86 mmol) amínu 1207-1 (pred reakciou vystavený pôsobeniu trietylamínu). Získa sa 415 mg (82 %) produktu 1207-2 vo forme svetlohnedej tuhej látky.
C. 390 mg (0,66 mmol) zlúčeniny 1207-2 sa zbaví ochranných skupín ako je opísané v postupe D2, čím sa získa 140 mg (47 %) produktu 1207-3 vo forme svetlohnedej tuhej látky.
D. K roztoku 135 mg (1,0 mmol) 2-izopropylanilínu v 2 ml dichlórmetánu a 0,5 ml trietylamínu sa pri 0 °C pomaly pridá 1,6 ml (3 mmol) 1,9M roztoku fosgénu v toluéne. Reakčná zmes sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote a potom sa zriedi 15 ml éteru. Vytvorená zrazenina sa odstráni a odparením rozpúšťadla sa získa 165 mg zlúčeni- i
ny 1207-4 vo forme hnedej kvapaliny. H-NMR spektrum (CDCy 300 MHz, ppm): 7,87 - 7,64 (m, 4H), 3,83 - 3,74 (m, 1H), 1,81 (d, 6H).
E. K roztoku 12 mg (0,074 mmol) zlúčeniny 1207-4 v 0,12 ml dimetylformamidu sa pridá 1 kvapka trietylamínu a 28 mg (0,062 mmol) zlúčeniny 1207-3. Reakčná zmes sa mieša 1 hodinu (hmotnostné spektrum (FAB) má ión 617) a potom sa k zmesi pridajú 2 ml metanolu a 0,25 ml 2M LiOH. Zmes sa mieša 16 hodín pri laboratórnej teplote a potom sa prečistí HPLC. Frakcie obsahujúce čistý produkt sa spoja a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa BIO-1207 vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB): 603. HPLC (laboratórna teplota): retenčný čas 31,2 min., čistota > 98,5 %.
Príklad 49
Syntéza BIO-1210
Podľa metódy opísanej v príklade 22D sa nechá reagovať kyselina 2-metylfenylureidofenyloctová s voľným amínom, získaným z trifluóracetátovej soli, ktorá sa pripraví v príklade 44B (65 mg), a produkt sa vyčistí HPLC. Frakcie čistého produktu sa spoja a po odparení rozpúšťadla poskytnú produkt BIO-1210 vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB): 603. HPLC (laboratórna teplota): retenčný čas 28,6 min., čistota > 99 %.
Príklad 50
Syntéza BIO-1224
A. Zo 48 mg (0,2 mmol) amínu β-4 sa metódou, opísanou v postupe C, pripraví 82 mg (91 %) zlúčeniny 1224-1 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,49 - 7,39 (m, 1H), 6,73 - 6,62 (m, 3H), 5,35 - 5,28 (m, 1H), 5,19 - 5,06 (m, 1H), 4,16 - 4,08 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 2,72 - 2,51 (m, 2H), 2,40 - 2,36 (m, 2H), 1,98 - 1,75 (m, 2H), 1,90 (s, 3H), 1,28 (s, 9H),
1,19 (s, 9H).
B. 60 mg (0,13 mmol) zlúčeniny 1224-1 sa rozpustí v
1,5 ml dichlórmetánu a pridá sa 1,5 ml kyseliny trifluóroctovej. Zmes sa mieša 5 hodín pri laboratórnej teplote a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa zlúčenina 1224-2 vo forme soli s kyselinou trifluóroctovou, ktorá sa bez ďalšieho čistenia i
použije v nasledujúcom stupni. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,92 (br, 1H), 6,82 - 6,78 (m, 3H), 5,44 - 5,26 (m, 1H), 4,40 - 4,28 (m, 1H), 3,84 - 3,72 (m, 6H),
2,92 - 2,70 (m, 4H), 2,60 - 2,25 (m, 2H), 1,92 (s, 3H).
C. Metódou, opísanou v príklade 22D, sa uskutoční reakcia 37 mg (0,13 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej a 60 mg (0,13 mmol) amínu 1224-2. Výsledný produkt sa podrobí HPLC. Frakcie s čistým produktom sa spoja a odparia a získa sa tak 22 mg (22 %) produktu BIO-1224 vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB): 623. HPLC (laboratórna teplota): retenčný čas 23,8 min., čistota > 99 %. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,38 (d, 1H), 6,98 (d, 2H), 6,74 (d, 2H), 6,72 (m, 2H), 6,51 (t, 1H), 6,43 - 6,40 (m, 1H), 6,35 - 6,31 (m, 1H),
4,84 - 4,76 (m, 1H), 4,04 - 3,97 (m, 1H), 3,39 (s, 6H), 3,33 (s, 2H), 2,36 - 2,18 (m, 2H), 1,91 - 1,75 (m, 2H), 1,72 (s, 3H), 1,19 - 0,99 (m, 2H), 0,46 - 0,37 (m, 6H).
Príklad 51
Syntéza zlúčeniny BIO-1056
A. Zmes 2,01 g (10,2 mmol) kyseliny 3-metoxy-4-nitrobenzoovej a 2,3 ml (31,5 mmol) tionylchloridu sa mieša 1,5 hodiny pri 80 - 90 °C. Po odparení sa zvyšok rozpustí v éteri a roztok sa premyje nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x), vodou a nasýteným vodným roztokom NaCl a vysuší sa nad síranom horečnatým. Po odparení sa získa 1,92 g (87 %) 3-metoxy-4-nitrobenzoylchloridu vo forme bielej tuhej látky. ’H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,95 - 7,70 (m, 3H), 4,06 (s, 3H).
B. K studenému (0° C) 2M roztoku TMSCHNj v hexáne (1,5 ml, 3,0 mmol) sa pridá 420 μΐ trietylamínu a potom roztok 0,52 g (2,4 mmol) 3-metoxy-4-nitrobenzoylchloridu v 8,5 ml acetonitrilu. Reakčná zmes sa mieša 24 hodín pri 0 °C a potom sa oddestiluje rozpúšťadlo. Odparok sa suspenduje v nasýtenom vodnom roztoku NaHCO3 a zmes sa trikrát extrahuje éterom. Spojené éterické extrakty sa premyjú vodou, nasýteným vodným roztokom NaCl, vysušia sa nad síranom horečnatým a odparí sa rozpúšťadlo. Získa sa 0,53 g (100 %) omega-diazo-3-metoxy-4-nitroacetofenónu vo forme žltej peny. 'H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,88 (d, 1H, J = 10 Hz), 7,61 (s, 1H), 7,27 (d, 1H, J = = 10 Hz), 5,97 (s, 1H), 4,02 (s, 3H).
C. K refluxujúcemu roztoku 7,95 g (35,9 mmol) omega-diazo-3-metoxy-4-nitroacetofenónu v 100 ml terc-butylalkoholu sa počas 1 hodiny prikvapká prefiltrovaný roztok 2,50 g (10,9 mmol) benzoanu strieborného v 15 ml trietylamínu. Zmes sa refluxuje 45 minút, odfarbí sa prídavkom aktívneho uhlia a za tepla sa prefiltruje cez Celit. Filtrát sa zahustí a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte. Roztok sa premyje 5 % vodným roztokom NaHCO3 (2 x), vodou, 5 % vodným roztokom kyseliny citrónovej, vodou a nasýteným roztokom NaCl. Po vysušení nad síranom horečnatým a odparení rozpúšťadla sa získa 8,92 g (93 %) terc-butvl 3-
-metoxy-4-nitrofenylacetátu vo forme hnedého oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,83 (d, 1H, J = = 8,3 Hz), 7,03 (s, 1H), 6,93 (d, 1H, J = 8m,3 Hz), 3,97 (s, 3H), 3,58 (s, 2H), 1,45 (s, 9H).
D. Zmes 0,144 g (0,539 mmol) terc-butyl 3-metoxy-4-nitrofenylacetátu a 0,155 g 10 % Pd/C v 8 ml etylacetátu a 2 ml metanolu sa hydrogenuje 2 hodiny pri tlaku 40 - 60 psi. Reakčná zmes sa prefiltruje cez Celit a filtrát sa odparí. Získa sa 0,123 g (96 %) terc-butyl 4-amino-3-metoxyfenyl1 acetátu vo forme svetložltého oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 6,70 (m, 3H), 4,04 (bs, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,42 (s, 2H), 1,43 (s, 9H).
E. K roztoku 0,123 g (0,52 mmol) terc-butyl 4-amino-3-metoxyfenylacetátu v 2,0 ml dichlórmetánu sa pridá 60 μΐ (0,55 mmol) fenylizokyanátu. Reakčná zmes sa mieša 45 minút a potom sa odparí rozpúšťadlo. Získa sa tak 0,190 g (100 %) terc-butyl 3-metoxy-4-fenylureidofenylacetátu vo i
forme svetložltej peny. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,00 (d, 1H, J = 11 Hz), 7,65 - 6,94 (m, 7H), 6,80 (d, 1H, J = 9 Hz), 6,74 (s, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,45 (s, 2H), 1,44 (s, 9H).
F. Roztok 0,108 g (0,303 mmol) terc-butyl 3-metoxy-4-fenylureidofenylacetátu v 5 ml kyseliny trifluóroctovej sa mieša 30 minút. Z reakčnej zmesi sa odparí rozpúšťadlo a zvyšok sa dvakrát odparí s dichlórmetánom a potom s éterom. Získa sa 0,090 g (99 %) kyseliny 3-metoxy-4-fenyl- i ureidofenyloctovej vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 9,28 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,02 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 7,58 - 7,15 (m, 5H), 6,91 (bm, 2H), 6,77 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 3,85 (s, 3H), 3,49 (s, 2H).
G. Roztok 0,33 g (0,88 mmol) kyseliny 3-metoxy-4-fenylureidofenyloctovej, 0,27 g (0,90 mmol) zlúčeniny Leu-P-2, pripravenej postupmi C a D, 0,39 g (0,90 mmol) BOP a 0,77 ml (4,4 mmol) DIPEA v 5 ml dimetylformamidu sa mieša 18 hodín. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a roztok sa premyje 60 % nasýteným vodným roztokom NaHCO (3 x), vodou, 5 % vodným roztokom kyseliny citrónovej (3 x), vodou a nasýteným vodným roztokom NaCI. Vysušenie nad síranom horečnatým a odparenie rozpúšťadla poskytne 0,49 g surového produktu, ktorý sa prečistí „flash“ chromatografiou na silikagéli zmesou hexán-etylacetát (1 : 4). Získa sa 0,35 g (60 %) terc-butylesteru BIO-1056 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDC1 , 300 MHz, ppm): 8,00 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,55 - 7,20 (m, 8H), 7,05 (m, 1H), 6,70 (m, 5H), 5,89 (s, 2H),
5,18 (m, 1H), 4,50 (s, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,47 (s, 2H), 2,67 (m, 2H), 1,68 - 1,40 (bm, 3H), 1,33 (s, 9H).
H. K chladnému (0° C) roztoku 0,35 g (0,53 mmol) terc-butylesteru BIO-1056 v 5,0 ml dichlórmetánu sa pridá 5,0 ml kyseliny trifluóroctovej. Reakčná zmes sa nechá zohriať na laboratórnu teplotu a mieša sa 1 hodinu. Odparenie rozpúšťadiel poskytne 0,315 g surového produktu ΒΙΟΙ 056, ktorý sa po rozdelení na dve časti prečistí HPLC. Získa sa tak 0,16 g (50 %) produktu BIO-1056 vo forme bielej tuhej látky. ’H-NMR spektrum (DMSO-dó, 300 MHz, ppm): 9,25 (s, 1H), 8,43 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 8,15 (m, 2H), 8,01 (d, 1H, J = 8,2 Hz),7,50 - 6,55 (m, 10H), 5,97 (s, 2H), 5,08 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,41 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 1,55 - 1,22 (bm, 3H), 0,80 (m, 6H). HPLC, gradient A: 35,2 min., gradient B: 19,4 min. Hmotnostné spektrum m/z: 605.
Príklad 52
Syntéza zlúčeniny BIO-1221
A. K roztoku 24 mg (0,10 mmol) terc-butyl 4-amino-3-metoxyfenylacctátu v 2,0 ml dichlórmetánu sa pridá 15 μΐ (0,12 mmol) o-tolylizokyanátu. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny a potom sa odparí rozpúšťadlo. Získa sa 36 mg (97 %) terc-butyl 3-metoxy-4-(o-tolylureido)fenylacetátu vo forme svetlohnedej peny. H-NMR spektrum (CDC13, 300
MHz, ppm): 8,05 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,55 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,45 - 7,05 (m, 5H), 6,78 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,48 (s, 2H), 2,23 (s, 3H), 1,44 (s, 9H).
B. Roztok 16 mg (0,043 mmol) terc-butyl 3-metoxy-4-(o-tolylureido)fenylacetátu v 1,0 ml kyseliny trifluóroctovej sa mieša 1 hodinu. Reakčná zmes sa odparí a zvyšok sa dvakrát odparí s dichlórmetánom a potom s éterom. Získa sa 13,5 mg (100 %) kyseliny 3-metoxy-4-(o-tolylureido)fenyloctovej vo forme bielej látky.
C. Metódou, opísanou v príklade 51 G, sa nechá reagovať kyselina 3-metoxy-4-(o-tolylureido)fenyloctová (13,5 mg, 0,043 mmol) s amínovou soľou (18,5 mg, 0,041 mmol) pripravenou zo zlúčeniny β-3 postupmi C a D. Získa sa 16 mg (60 %) metylesteru zlúčeniny BIO-1221 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,10 (d, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,45 - 7,00 (m, 7H), 6,85 - 6,65 (m, 5H),
5.93 (s, 2H), 5,20 (m, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,52 (s, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,65 - 1,10 (bm, 3H), 0,86 (m, 6H).
D. 16 mg (0,025 mmol) metylesteru zlúčeniny ΒΙΟΙ 221 sa hydrolyzuje metódou, opísanou v príklade 1B. Získa sa 8,7 mg (56 %) zlúčeniny BIO-1221 vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm):
7.93 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,37 - 6,92 (m, 6H), 6,78 - 6,55 (m, 5H), 5,81 (s, 2H), 5,09 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,40 (s, 2H), 2,58 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 1,48 - 1,25 (bm, 3H), 0,76 (m, 6H). HPLC (gradient A): 35,2 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 619.
Príklad 53
Syntéza zlúčeniny BIO-1238
A. Podľa procedúry, opísanej v príklade 43A, sa prevedie amín β-5 na zlúčeninu 1238-1 vo výťažku 92 %. H-NMR spektrum (CDC1 , 300 MHz, ppm): 7,19 (d, 2H, J = = 8,6 Hz), 6,82 (d, 2H), 5,36 - 5,28 (m, 2H), 4,25 - 4,22 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 2,72 - 2,66 (m, 2H), 2,49 -
- 2,41 (m, 2H), 2,10 (s, 3H), 1,92 - 1,78 (m, 1H), 1,48 (s, 9H). Skupina Boe sa odstráni pôsobením kyseliny trifluóroctovej v dichlórmetáne a získa sa tak trifluóracetát zlúčeniny 1238-1. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,12 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 6,74 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,32 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,51 (s, 3H), 2,77 - 2,69 (m, 2H), 2,55 - 2,38 (m, 1H), 2,36 - 2,31 (m, 1H), 2,16 -2,02 (m, 2H), 1,91 (s, 3H).
B. Postupom, opísaným v príklade IA, sa reakciou 20 mg (0,70 mmol) 2-metylfenylureidofenyloctovej kyseliny a 30 mg (0,70 mmol) trifluóracetátu zlúčeniny 1238-1 pripraví 35 mg (83 %) produktu 1238-2 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-dĎ, 300 MHz, ppm): 7,91 (d, 1H), 7,52 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,35 - 7,30 (m, 4H), 7,02 (d, 1H), 6,80 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,79 - 5,68 (m, 1H), 4,40 -
- 4,28 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,35 - 3,38 (m, 2H), 2,49 (br s, 2H), 2,00 (s, 3H).
C. Roztok 20 mg (0,033 mmol) zlúčeniny 1238-2 v 3 ml metanolu a 3 ml 2N vodného roztoku LiOH sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote, reakčná zmes sa ochladí na 0 °C a okyslí sa kyselinou trifluóroctovou na pH 3 - 4 (merané indikátorovým papierikom). Požadovaný produkt sa vyizoluje a prečisti kvapalinovou chromatografiou (kolóna Vydac C , gradient 8). Výťažok 12 mg (0,017 mmol, 61 %) produktu BIO-1238 vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum (FAB): 595.
Príklad 54
Syntéza zlúčeniny BIO-1245
A. Metódou, opísanou v príklade 1A, sa z 562 mg (2,0 mmol) komerčného N-Boc-metionínsulfónu a 470 mg (2,10 mmol) amínu β-3 pripraví 962 mg (1,90 mmol, 95 %) surovej zlúčeniny 1245-1 vo forme bielej peny, ktorá sa bez i
čistenia použije v ďalšej reakcii. H-NMR spektrum (CDC13): δ 7,31 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,77 - 6,70 (m, 3H),
5.91 (s, 2H), 5,04 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,27 (m, 1H), 4,30 (br, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,15 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,89 (s, 3H), 2,85 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 1,42 (s, 9H).
B. Na 962 mg (1,90 mmol) zlúčeniny 1245-1 sa pôsobí 4N HC1 v dioxáne. Odparenie rozpúšťadla poskytne 800 mg (1,89 mmol, 99 %) hydrochloridu 1245-2 ako bielej tu- i hej látky, ktorá sa bez čistenia použila v ďalšej reakcii. H-NMR spektrum (CDC1 ): δ 8,75 (br, III), 8,20 (br, 2H),
6.91 - 6,55 (m, 3H), 5,90 (bs, 2H), 5,42 (br, 1H), 4,55 (br, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,45 - 3,00 (bm, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,85 - 2,40 (bm, 4H).
C. Reakcia 800 mg (1,89 mmol) zlúčeniny 1245-2 s 543 mg (1,89 mmol) kyseliny o-metylfenylureidofenyloctovej sa uskutoční metódou, opísanou v príklade 22D a poskytne 1,15 g (1,76 mmol, 93 %) surového produktu 1245-3 vo forme bielej tuhej látky, ktorá sa bez čistenia i
použije v ďalšom reakčnom kroku. H-NMR spektrum (DMSO-d6): δ 7,95 (s, 1H), 7,89 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,20 (m, 4H), 7,00 - 6,78 (m, 4H), 6,03 (s, 2H), 5,18 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,39 (br, 2H), 2,90 - 2,49 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,00 (m, 2H).
D. 1,1 g (1,70 mmol) zlúčeniny 1245-3 sa hydrolyzuje metódou, opísanou v príklade 1B, a poskytne 490 mg (0,77 mmol, 45 %) surového produktu BIO-1245 vo forme bielej tuhej látky (čistota podlá HPLC > 90 %). Malé množstvo (cca 150 mg) produktu sa prečistí HPLC, čím sa získa čistý produkt BIO-1245 (81 mg, regenerácia 54 %) vo forme bielej tuhej látky (HPLC čistota 100 %). Hmotnostné spektrum, m/z: 639. H-NMR spektrum (DMSO-d_l: δ 8,60 (bs, 0,5H), 8,57 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,37 (d, 1H, J = 8,1 Hz),
8,18 (s, 1H), 8,05 (s, 0,5H), 7,89 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,21 (m, 4H), 6,97 - 6,81 (m, 4H), 6,03 (s, 2H), 5,13 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 3,80 (br, 1H), 3,49 (s, 3H), 2,93 (m, 2H), 2,45 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,01 (m, 2H).
Príklad 55
Syntéza BIO-1246
A. K suspenzii 1,5 (12,4 mmol) L-cysteínu v 8 ml metanolu sa pridá nadbytok metoxidu sodného (2,0 g, 37,2 mmol) a potom katalytické množstvo (cca 100 mg) jodidu sodného. Zmes sa mieša 30 min. pri laboratórnej teplote. Potom sa pridá 1,7 g (12,4 mmol) l-bróm-2-propanolu a v miešaní sa pokračuje cez noc. Reakčná zmes sa zneutralizuje na pH cca 7, zriedi sa 20 ml vody a odparí sa metanol. Zvyšok sa zriedi 20 ml dioxánu a pridá sa 7,0 ml (50 mmol) trietylamínu. Ďalej sa pridá 3,1 g (12,4 mmol) BOCON a reakčná zmes sa mieša 3 hodiny pri laboratórnej teplote. Potom sa zriedi vodou (20 ml) a extrahuje sa etylacetátom (3 x 25 ml). Organické extrakty sa zlikvidujú a vodný roztok sa okyslí na pH 1 pridaním IN HC1. Produkt sa extrahuje do etylacetátu (4 x 30 ml), extrakt sa vysuší síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 2,87 g (10,4 mmol, 83 %, počítané na dva stupne) produktu 1246-1 vo forme hustého svetložltého oleja. 'H-NMR spektrum (CDC1 ): δ 5,60 - 5,50 (br, 1H), 4,60 - 4,50 (br, 1H), 4,44 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3,02 (bm, 2H), 2,65 (br, 2H), 2,03 (m, 2H), 1,45 (s, 9H).
B. Metódou, opísanou v príklade 1A, sa uskutoční reakcia 33 mg (0,11 mmol) zlúčeniny 1246-1 s 22 mg (0,10 mmol) amínu β-3, čím sa získa 39 mg (0,08 mmol, 80 %) produktu 1246-2 vo forme svetložltej peny, ktorá sa bez i čistenia použije v nasledujúcom reakčnom stupni. H-NMR spektrum (CDC^): δ 6,80 - 6,60 (m, 3H), 5,91 (s, 2H), 5,50 (bm, 1H), 4,35 (bm, 1H), 3,71 (bt, 2H), 3,61 (s, 3H), 3,15 -
- 2,65 (m, 6H), 1,85 (m, 2H), 1,46 (s, 9H).
C. Reakciou s kyselinou trifluóroctovou sa 39 mg (0,08 mmol) zlúčeniny 1246-2 prevedie na zodpovedajúcu trifluóracetátovú soľ, ktorá sa podrobí reakcii, opísanej v príklade 54C. Získaná biela tuhá látka sa priamo hydrolyzuje na voľnú kyselinu metódou, opísanou v príklade 1B. Malé množstvo sa prečistí HPLC, frakcie s čistým produktom sa spoja a získa sa tak zlúčenina BIO-1246 (cca 3 mg) vo forme bielej tuhej látky. Hmotnostné spektrum, m/z: 637. Čistota podľa HPLC 100 %. H-NMR spektrum (DMSO-d6): δ 9,01 (s, 1H), 8,66 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 7,42 (d, 2H, J = 5,5 Hz), 7,20 - 7,15 (m, 4H), 7,00 - 6,94 (m, 2H), 6,88 -
- 6,79 (m, 2H), 6,02 (s, 2H), 5,12 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 2,90 - 2,45 (m, 6H), 2,28 (s, 3H), 1,65 (m, 2H).
Príklad 56
Syntéza BIO-1248
A. Zmes 2,48 g (20 mmol) 4-fluórbenzaldehydu, 2,5 g (24 mmol) kyseliny malónovej, 2,16 g (28 mmol) octanu amónneho a 100 ml etanolu sa refluxuje v argónovej atmosfére cez noc. Po ochladení na teplotu miestnosti sa vylúčená zrazenina odfiltruje a premyje sa etanolom 3 x 30 ml). Vysušenie vo vákuu poskytne 1,0 g (27 %) bielej tuhej látky, ktorá sa bez ďalšieho čistenia použije v nasledujúcom reakčnom kroku.
K suspenzii 1,0 g (9,4 mmol) tohto produktu v metanole sa pridá 5,2 ml (6,01 mmol) 2M roztoku tionylchloridu v dichlórmetáne. Výsledný roztok sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlo sa odparí a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte, premyje sa nasýteným roztokom NaHCO a vysuší sa nad síranom sodným. Odparenie rozpúšťadla za zníženého tlaku poskytne 900 mg (84 %) amínu 1248-1 vo forme svetložltého oleja. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 7,28 (m, 2H), 6,96 (m, 2H), 4,46 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 3,62 (s, 3H), 2,58 (d, 2H, J = 6,8 Hz),
1,69 (s, 2H). TLC (10 % MeOH/CH2Cl2): Rf= 0,50.
B. 300 mg (1,52 mmol) amínu 1248-1 kondenzuje s α ε
300 mg (1,52 mmol) N -Boc-N -Leu-N-hydroxysukcínimidu podľa metódy, opísanej v postupe C. Vzniknutý adukt sa zbaví ochranných skupín reakciou s kyselinou trifluóroctovou a potom sa zalkalizuje trietylamínom, ako je opísané v postupe DL Získa sa amín 1248-2 vo výťažku 84 %. 'H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,20 (d, 1H, J = = 7,1). 7,24 (m, 2H), 6,97 (m, 2H), 5,33 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 2,82 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 1,30 (m, 1H), 1,22 (s, 2H), 0,91 (m, 6H). TLC (10 % MeOH/CH Cl ): R =0,47 a 0,38.
2' f ’
C. Kondenzácia 77 mg (0,27 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej so 70 mg (0,23 mmol) amínu 1248-2 sa uskutoční metódou, opísanou v príklade 22D. Získa sa produkt 1248-3 vo výťažku 61 %. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 9,15 (d, 1 H, J = 5,9 Hz), 8,53 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 8,17 (d, 1H, J = 8,2), 8,00 (s, 1H),
7,84 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,35 (m, 4H), 7,13 (m, 6H), 6,92 (t, 1H, J = 8,2 Hz), 5,20 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 3,52 (s, 2 piky, 3H), 3,45 - 3,24 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,24 (s, 3H), 1,57 - 1,33 (m, 3H), 0,82 (m, 6H). HPLC (gradient 1**): 21,2 min a 21,5 min (1 : 24). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 577 (pre C^H^N^O^F vypočítané M+l: 577).
D. Roztok 22 mg (0,038 mmol) zlúčeniny 1248-3 v 1 ml dimetylsulfoxidu a 2 ml metanolu sa hydrolyzuje vodným roztokom LiOH metódou, opísanou v príklade IB. Produkt sa prečistí na kolóne Vydac s reverznou fázou C (22 mm x 25 cm) s použitím lineárneho gradientu od 15 % CH3CN/H2O (0,1 % TFA) do 40 % OfCN/H.0 (0,1 % TFA); prietok 10 ml/min. Zlúčenina B1O-1248 sa vyizoluje vo výťažku 29 %. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 8,93 (s, 1H), 8,46 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,25 (d, 1H, J = 8,2), 7,87 (s, 1H), 7,82 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,33 (m, 5H), 7,12 (m, 5H), 6,93 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,35 (m,2H), 2,65 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 2,22 (s, 3H), 1,55 (m, 1H), 1,43 (m, 2H), 0,83 (m, 6H). HPLC (gradient 1): 18,7 min a 19,3 min (1 : 24). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 563 (pre C^ vypočítané M+l: 563).
Príklad 57
Syntéza BIO-1270
A. Kondenzácia 500 mg (2,24 mmol) amínu β-3 s 1,0 g a e (2,1 mmol) N-Cbz-N-Boc-L-Lys-N-hydroxysukcínimidu sa uskutoční metódou, opísanou v postupe C. Získa sa 1,1 g (82 %) kondenzačného produktu 1270-1. Tento produkt sa zbaví ochranných skupín pôsobením kyseliny trifluóroctovej a alkalizuje sa trietylamínom ako je opísané v postupe i
D, čím sa získa zlúčenina 1270-2 vo výťažku 54 %. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,31 (m, 6H), 6,72 (m, 3H), 5,90 (s, 2H), 5,58 (d, 1H, J = 9 Hz), 5,26 (m, 1H), 5,07 (s, 2H), 4,15 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 2,77 (m, 2H), 2,61 (m, 2H), 1,79 (m, 1H), 1,59 (m, 1 H), 1,41 - 1,30 (m, 6H). TLC (10% MeOH/CH2Cl2): Rf = 0,11.
B. K miešanému roztoku 15,5 mg (0,032 mmol) zlúčeniny 1270-2 a 10,1 mg (0,128 mmol) pyridínu v dichlórmetáne sa pri laboratórnej teplote pridá 7,5 mg (0,96 mmol) acetylchloridu. Zmes sa mieša 3 hodiny a potom sa rozpúšťadlo odparí a zvyšok sa chromatografuje na reverznej fáze. Získa sa 16,3 mg (95 %) zlúčeniny 1270-3 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,32 (s, 5H), 6,70 (m, 3H), 5,91 (s, 2H), 5,82 (m, 1H), 5,55 (m, 1H), 5,25 (m, IH), 5,09 (s, 1H), 4,13 (m, 1H), 3,60 (s, 3H),
3,28 (m, 2H), 2,90 - 2,40 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 1,90 - 1,76 (m, 1H), 1,70 - 1,58 (m, 1H), 1,52 - 1,42 (m, 2H), 1,36 - 1,22 (m, 2H).
C. Látka 1270-3 sa nechá reagovať ako je opísané v postupe D2 (postup reakcie je monitorovaný HPLC), čím sa získa v kvantitatívnom výťažku (14,1 mg) zlúčenina 1270-4 ako číry olej, ktorý sa bez čistenia použije v ďalšom stupni.
D. Surová zlúčenina 1270-4 (14,1 mg, 0,036 mmol) z predošlej reakcie sa nechá reagovať spôsobom, opísaným v príklade 54C. Produkt sa prečistí prcparatívnou HPLC a získa sa tak BIO-1270-OMe (9,1 mg, 38 %) vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 8,13 (d, 1H, J = 10,35 Hz), 8,03 (s, 1H), 7,93 (d, 1H, J = 10,35), 7,83 (m, 1H), 7,49 (d, 2H, J = 10,35 Hz), 7,28 (m, 5H), 7,10 - 6,81 (m, 5H), 6,08 (s, 2H), 5,20 (dd, 1H, J = = 9,66 Hz a 17,25 Hz), 4,33 (dd, 1H, J = 8,87 Hz a 15,18 Hz), 3,63 (s, 3H), 3,50 (s, 2H), 3,10 - 2,95 (m, 2H), 2,85 -
- 2,74 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 1,86 (s, 3H), 1,72 - 1,49 (m, 2H), 1,50 - 1,32 (m, 3H), 1,31-1,09 (m, 2H).
E. K 9,1 mg (0,016 mmol) zlúčeniny BIO-1270-OMe v 1 ml DMSO-d^ (vzorka pre NMR) sa pridá 20 μΐ 2N LiOH (0,041 mmol) a reakčná zmes sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote. Potom sa okyslí na lakmus (do červeného sfarbenia) tromi kvapkami kyseliny trifluóroctovej a produkt sa prečistí preparatívnou HPLC. Získa sa 6,2 mg (60 %) BIO-1270 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): 8,50 (d, 12H, J = 10,35 Hz), 8,19 (d, 1H, J = 10,35 Hz), 7,82 (m, 1H), 7,45 (d, 2H, J = 10,35 Hz), 7,28 (m, 4H), 7,05 (m, 1H), 6,98 - 6,89 (m, 2H), 6,86 (m, 1H), 6,09 (s, 2H), 5,66 (dd, 1H, J = 8,28 Hz a 16,56 Hz), 4,32 (dd, 1H, J = 7,59 Hz a 13,8 Hz), 3,27 (s, 2H), 2,98 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 1,87 (s, 3H),
1,69 - 1,48 (m, 2H), 1,46 - 1,32 (m, 3H), 1,28 - 1,12 (m, 2H). Hmotnostné spektrum, m/z: 646. HPLC (gradient 1): 19,73 min.; čistota 100 %. Gradient 3: 15 % B - 65 % B. 50 min, gradient 1: 20 % B - 70 % B, 50 min.
Príklad 58
Syntéza BIO-1282
A. Roztok 1,65 g (9,90 mmol) etyl 3-pyridylacetátu v 10 ml 32 % peroctovej kyseliny sa mieša 2 hodiny pri 80 -
- 90° C. Reakčná zmes sa zahustí a zvyšok sa dvakrát odparí s metanolom a potom s dichlórmetánom. Získa sa 1,80 g (100 %) N-oxidu etyl 3-pyridylacetátu vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,38 (s, 1H), 8,22 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 4,20 (q, 2H), 3,62 (s, 2H), 1,26 (t, 3H).
B. Roztok 4,14 g (30,2 mmol) salicylamidu a troch kvapiek koncentrovanej kyseliny sírovej v 40 ml acetónu sa refluxuje 5 hodín. Rozpúšťadlo sa potom odparí a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte. Získaný roztok sa premyje IN NaOH (2 x), IN HC1 (2 x), vodou, nasýteným vodným roztokom NaCl, vysuší sa nad síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 2,50 g (47 %) 2,2-dimetyl-4-keto-l,3-benzoxazínu vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,92 (d, 1H), 7,60 (bs, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 6,92 (d, 1H), 1,65 (s, 6H).
C. Roztok 1,77 g (10,0 mmol) 2,2-dimetyl-4-keto-l,3-benzoxazínu a 2,09 g (10 mmol) PC<5 v 3 ml POC13 sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote a potom 2 hodiny pri teplote 50 - 60 °C. Reakčná zmes sa zahustí a produkt sa predestiluje pri 90 - 95 °C/2 - 3 mm Hg, čím sa získa 0,496 g (25 %) 4-chlór-2,2-dimetyl-3H-l,3-benzoxazínu vo forme číreho oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,58 (d, 1H), 7,48 (m, 1H), 6,97 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 1,63 (s, 6H).
D. Zmes 0,145 g (0,741 mmol) 4-chlór-2,2-dimetyl-3H-l,3-benzoxazínu, 0,270 g (1,49 mmol) N-oxidu etyl 3-pyridylacetátu a 5 ml dichlórmetánu sa refluxuje 20 hodín. Po odparení rozpúšťadla sa zvyšok rozpusti v etylacetáte, získaný roztok sa premyje 60 % nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x), vodou, nasýteným vodným roztokom NaCl a vysuší sa nad síranom horečnatým. Odparenie rozpúšťadla poskytne 0,148 g olejovitého odparku. Tento sa refluxuje v 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej 18 hodín. Reakčná zmes sa zahustí a odparok sa vytrepe medzi vodu a dichlórmetán. Vodná vrstva sa premyje dvakrát dichlórmetánom a potom sa odparí. Získa sa 0,105 g bielej tuhej látky. Tá sa rozpustí v 5 ml metanolu a k roztoku sa počas 30 min. prikvapká 0,5 ml (7 mmol) tionylchlo
SK 283724 Β6 ridu. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny a potom sa odparí rozpúšťadlo. Zvyšok sa rozpustí v 5 % vodnom NIWH a extrahuje sa dichlórmetánom (3 x). Spojené oragnické extrakty sa vysušia nad síranom horečnatým a po odparení rozpúšťadla sa získa 12 mg (10 % počítané na tri kroky) metyl 5-(2-aminopyridyl)acetátu vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDCl^, 300 MHz, ppm): 7,93 (s, 1H), 7,40 (d, 1H), 6,50 (d, 1H), 4,52 (bs, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,49 (s, 2H). Hmotnostné spektrum, M/z: 167.
E. K roztoku 12 mg (0,072 mmol) metyl 5-(2-aminopyridyl)acetátu v 1 ml dichlórmetánu sa pridá 10 μΐ (0,081 mmol) o-tolylizokyanátu. Reakčná zmes sa mieša 1 hodinu a potom sa odparí rozpúšťadlo. Biely odparok (20 mg) obsahuje metyl 5-[2-(o-tolyl)ureidopyridyl]acetát.
F. K roztoku 20 mg surového metyl 5-[2-(o-tolyl)ureidopyridyljacetátu v 1 ml metanolu sa pridá 100 μΐ (0,20 mmol) 2M LiOH. Reakčná zmes sa mieša 18 hodín, rozpúšťadlo sa odparí a surový produkt sa prečistí HPLC. Získa sa 13 mg (65 %) kyseliny 5-[2-(o-tolyl)ureidopyridyl]- octovej vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 8,10 (s, 1H), 7,87 (bd, 1H), 7,75 (bd, 1H), 7,21 (m, 1H), 7,08 (m, 1H), 3,62 (s, 2H), 2,38 (s, 3H). Hmotnostné spektrum, m/z: 286.
G. Podľa metódy, opísanej v príklade IA, sa 13 mg (0,049 mmol) kyseliny 5-[2-(o-tolyl)ureidopyridyl]octovej nechá zreagovať s 22 mg (0,049 mmol) amínu, pripraveného v príklade 14A. Získa sa 20 mg (60 %) metylesteru BIO-1282. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm):
8,18 - 7,73 (m, 4H), 7,55 (d, 1H), 7,35 - 6,65 (m, 10H),
5,93 (s, 1H), 5,28 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,69 - 3,45 (m, 5H), 2,81 (bm, 2H), 2,20 (s, 3H), 1,54 (bm, 3H), 0,92 (m, 6H).
H. K. zmesi 20 mg (0,033 mmol) metylesteru BIO-1282 v 2 ml metanolu sa pridá 200 μΐ (0,40 mmol) 2M LiOH. Reakčná zmes sa mieša 20 hodín a potom sa odparí rozpúšťadlo. Odparok, obsahujúci zmes BIO-1282 a východiskového esteru (4 : 5), sa rozpustí v zmesi 0,5 ml dimetylformamidu a 0,5 ml metanolu a mieša sa ďalších 28 hodín. Reakčná zmes sa okyslí kyselinou trifluóroctovou a zahustí sa. Surový odparok sa prečistí HPLC a poskytne 5,6 mg (24 %) produktu BIO-1282 vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 8,44 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,26 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,15 (s, 1H), 8,04 (d, 1H, J = = 8,0 Hz), 7,66 (d, 1H, J = 8m7 Hz), 7,32 - 7,13 (m, 3H), 7,05 - 6,94 (m, 1H), 6,85 - 6,65 (m, 3H), 5,96 (s, 2H), 5,06 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 3,45 (m, 2H), 2,63 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,57 - 1,20 (m, 3H), 0,78 (m, 6H). HPLC (gradient A): 27,0 min. Hmotnostné spektrum, m/z: 590.
Príklad 59
Syntéza BIO-1294
A. K miešanému roztoku 102 mg (0,21 mmol) amínu, pripraveného v príklade 57A, v 20 ml dichlórmetánu sa pridá 48 mg (32 1, 0,42 mmol) metánsulfonylchloridu a 50 l trietylamínu. Výsledná zmes sa mieša 18 hodín za laboratórnej teploty, potom sa zriedi 40 ml dichlórmetánu, premyje sa 20 ml 5 % roztoku kyseliny citrónovej, 10 ml vody, 20 ml nasýteného roztoku NaHCO3, 20 ml nasýteného roztoku NaCl a vysuší sa nad síranom sodným. Odparením rozpúšťadla za zníženého tlaku sa získa 110 mg (92 %) i produktu 1294-1 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,30 (m, 6H), 6,74 (m, 3H), 5,90 (s, 2H), 5,70 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 5,07 (s, 3H), 4,16 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,02 (m, 2H), 2,88 (s, 3H), 2,75 (m, 2H), 1,76 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 1,50 (m, 2H), 1,32 (m, 2H). TLC (10 % MeOH/CH2Cl2): R = 0,67.
B. K roztoku 110 mg (0,195 mmol) zlúčeniny 1294-1 v 10 ml metanolu sa pridá 0,2 ml kyseliny octovej a 110 mg Pd(OH)2. Zmes sa hydrogenuje 48 pri laboratórnej teplote a pri tlaku vodíka 50 psi. Štandardné spracovanie poskytne 35 mg (42 %) produktu 1294-2 vo forme bezfarebného oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,06 (m, 1H), 6,75 (m, 3H), 5,92 (s, 2H), 5,25 (m, 1H, 5,02 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 3,35 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,80 (m, 2H), 1,87 - 1,30 (m, 8H). HPLC (gradient 8): 12 min.
C. Kondenzácia 35 mg (0,12 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej s 35 mg (0,08 mmol) amínu 1294-2 sa uskutoční spôsobom, opísaným v príklade IA. Získa i
sa zlúčenina 1294-3 vo výťažku 88 %. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,50 (m, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,16 (m, 1H), 7,82 (m, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,22 - 7,05 (m, 5H), 7,00 - 6,70 (m, 5H), 5,98 (s, 2H), 5,11 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,36 (m, 2H), 2,91 - 2,62 (m, 7H), 2,25 (s, 3H), 1,60 - 1,05 (m, 6H). HPLC (gradient 8): 31 min. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 696 (pre C^H^N^O^S (M+l) vypočítané 696).
D. Roztok 50 mg (0,07 mmol) zlúčeniny 1294-3 v 3 ml metanolu sa hydrolyzuje vodným roztokom LiOH ako sa opísalo. Produkt sa prečistí na kolóne s reverznou fázou C (Vydac, 22 mm x 25 cm), lineárny gradient od 15 % CH3CN/H2O (0,1 % TFA) do 40 % CH^NTW (0,1 % TFA), prietok 10 ml/min. Vyizoluje sa zlúčenina BIO-1294 vo výťažku 41 %. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,95 (m, 1H), 8,42 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 8,08 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,88 (s, 1H), 7,83 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,36 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,15 (m, 4H), 7,10 - 6,71 (m, 5H), 5,97 (s, 2H), 5,04 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,41 - 3,25 (m, 2H), 2,83 - 2,80 (m, 6H), 2,23 (s, 3H), 1,70 - 1,04 (m, 6H). HPLC (gradient 8): 27 min. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 682 (pre C} H N O^S (M+l) vypočítané 682).
Príklad 60
Syntéza BIO-1321
A. Zmes 3,48 g (20 mmol) metyl 4-formylbenzoátu, 2,5 g (24 mmol) kyseliny malónovej, 2,16 g (28 mmol) octanu amónneho a 100 ml etanolu sa refluxuje cez noc v atmosfére argónu. Po ochaldení na laboratórnu teplotu sa vylúčená zrazenina odsaje, premyje etanolom (3 x 30 ml) a vysuší vo vákuu cez noc. Získa sa 2,8 g (63 %) zlúčeniny 1321-1
B. K suspenzii 1,0 g (4,48 mmol) zlúčeniny 1321-1 v 50 ml metanolu sa pridá 2,7 ml (5,4 mmol) 2M roztoku tionylchloridu v dichlórmetáne. Výsledný roztok sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc. Po odparení rozpúšťadla sa zvyšok rozpustí v etylacetáte, zalkalizuje sa nasýteným roztokom NaHCO3 a vysuší sa nad síranom sodným. Etylacetát sa odparí za zníženého tlaku, čím sa získa 780 mg (53 i
%) amínu 1321-2 vo forme svetložltého oleja. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 7,99 (m, 2H), 7,56 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,42 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,46 (t, 1H, J = = 6,7 Hz), 3,85 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 2,65 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 1,88 (s, 2H).
C. Kondenzácia 500 mg (1,11 mmol) amínu 1321-2 s α ε
380 mg (1,0 mmol) N -Boc-N -Leu-N-hydroxysukcínimidu sa uskutoční metódou, opísanou v postupe C. Získaný materiál sa zbaví ochranných skupín pôsobením kyseliny trifluóroctovej a produkt sa potom zalkalizuje trietylamínom, ako je opísané v postupe DL Získa sa amín 1321-3 v 70 % výťažku. H-NMR spektrum (CDCfy 300 MHz, ppm): 8,32 (t, 1H, J = 9,1 Hz), 8,20 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,34 (m, 2H), 5,40 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,41 (m, 1H), 2,85 (m, 2H), 1,67 (m, 2H), 1,53 (s, 2H), 1,30 (m, 1H), 0,90 (m, 6H).
D. Metódou, opísanou v príklade 22D, kondenzuje 54 mg (0,19 mmol) kyseliny 2-metylfenylureidofenyloctovej so 70 mg (0,23 mmol) amínu 1321-3. Získa sa zlúčenina 1321-4 vo výťažku 87 %. H-NMR spektrum (CDC1 , 300 MHz, ppm): 8,62 (m, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 8,1), 8,10 (m, 1H), 7,94 - 7,82 (m, 4H), 7,48 - 7,34 (m, 4H), 7,17 - 7, 13 (m, 4H), 6,91 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 5,24 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 3,53 (s, dva piky, 3H), 3,39 - 3,34 (m, 2H), 3,05 (m, 2H), 2,24 (s, 3H), 1,60 - 1,36 (m, 3H), 0,83 (m, 6H). HPLC (gradient 8): 40 min (1 : 1). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 617 (pre C H N O (M+l) vypočítané 617).
E. Roztok 70 mg (0,11 mmol) zlúčeniny 1321-4 v 1 ml dimetylsulfoxidu a 2 ml metanolu sa hydrolyzuje vodným roztokom LÍOH metódou, opísanou v príklade IB. Produkt sa prečistí na kolóne s reverznou fázou C]8 (Vydac, 22 mm x 25 cm), lineárny gradient od 15 % CH^CN/fyO (0,1 % TFA) do 40 % CH3CN/H2O (0,1 % TFA), prietok 10 ml/min. Vyizoluje sa 22 mg (34 %) zlúčeniny BIO-1321. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): 8,95 (d, 1H, J = 4,6 Hz), 8,57 (m, 1H), 8,13 (d, 1H, J = 8,3 Hz). 7,88 - 7,81 (m, 4H), 7,44 - 7,32 (m, 4H), 7,17 - 7,10 (m, 4H), 6,92 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 5,20 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 3,46 - 3,27 (m, 2H), 2,70 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 1,59 - 1,32 (m, 3H), 0,81 (m, 6H). HPLC (gradient 8): 27,8 min a 28,1 min (1 : 1). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 589 (pre C H36N O (M+l) vypočítané 589).
Príklad 61
Syntéza zlúčeniny BIO-1336
A. Suspenzia 9,9 g (47 mmol) 2,6-dichlór-3-nitropyridínu a 6,5 g (47 mmol) práškového uhličitanu draselného v 100 ml metanolu sa mieša týždeň pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa prefiltruje a rozpúšťadlo sa odparí. Odparok sa vytrepe medzi etylacetát a 60 % nasýtený vodný roztok \aHCO_. Organická vrstva sa premyje 60 % nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x), vodou a nasýteným vodným roztokom NaCl a vysuší sa nad síranom horečnatým. Odparenie rozpúšťadla poskytne 8,9 g (100 %) zmesi 2-chlór-6-metoxy-5-nitropyridínu a 2-chlór-6-meto- i xy-3-nitropyridínu vo forme svetložltej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,31 (d, 1H, J = = 8,3 Hz), 8,28 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 7,10 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,82 (d, 1H, J= 8,9 Hz), 4,15 (s, 3H), 4,06 (s, 3H).
B. 8,9 g (47 mmol) zmesi 2-chlór-6-metoxy-5-nitropyridínu a 2-chlór-6-metoxy-3-nitropyridínu, 10 ml (60 mmol) terc-butylmetylmalonátu a 3,1 g (120 mmol) 95 % hydridu sodného v 250 ml tetrahydrofuránu sa mieša 24 hodín pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlo sa odparí a zvyšok sa nechá stáť 2 hodiny s kyselinou trifluóroctovou. Po odparení sa produkt oddelí „flash“ chromatografiou na silikagéli zmesou hexán - etylacetát (95 : 5). Získa sa 3,3 g (62 %) metyl 6-(2-metoxy-3-nitro)pyridylacetátu vo forme žltého oleja. H-NMR spektrum (CDC13> 300 MHz, ppm): 8,27 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,04 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,09 (s, 3H), 3,85 (s, 2H), 3,75 (s, 3H).
C. Zmes 47 mg (0,21 mmol) metyl 6-(2-metoxy-3-nitro)pyridylacetátu, 2 ml etylacetátu, 1 ml etanolu a 63 mg Pd/C sa mieša 6 hodín pri tlaku vodíka 40 - 50 psi. Zmes sa potom prefiltruje cez Celit a filtrát sa odparí. Získa sa 41 mg (100 %) metyl 6-(3-amino-2-metoxy)pyridyl1 acetátu vo forme svetložltého oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 6,82 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 6,65 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 3,94 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,65 (s, 2H).
D. K roztoku 78 mg (0,33 mmol) metyl 6-(3-amino-2-metoxy)pyridylacetátu a 50 μΐ (0,36 mmol) trietylamínu v 1 ml dichlórmetánu sa pridá 41 μΐ (0,36 mmol) o-tolylizokyanátu a reakčná zmes sa mieša 4 hodiny. Po odparení rozpúšťadla sa surový produkt prečistí „flash“ chromatografiou na silikagéli zmesou hexán-etylacetát 3 : 2. Získa sa 60 mg (55 %) metyl 6-[2-metoxy-3-(o-tolyl-ureido)]pyri- dylacetátu vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 8,33 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,51 )d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,41 (s, 1H), 7,17 (m, 2H), 7,08 (m, 2H), 6,77 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 3,81 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3, 67 (s, 2H), 2,20 (s, 3H).
E. K roztoku 23 mg (0,07 mmol) metyl 6-[2-metoxy-3-(o-tolylureido)]pyridylacetátu v 1 ml metanolu sa pridá 90 μΐ (0,18 mmol) 2M roztoku LÍOH a reakčná zmes sa mieša 18 hodín. Potom sa zriedi 5 ml vody, dvakrát sa premyje éterom a vodná vrstva sa okyslí 5 % roztokom kyseliny citrónovej. Produkt sa odfiltruje, premyje vodou a potom éterom. Získa sa 14 mg (64 %) kyseliny 6-[2-metoxy-3-(o-
-tolylureido)]pyridyloctovej vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CD3OD, 300 MHz, ppm): 8,50 - 8,25 (m, 3H), 7,60 (bd, 1H), 7,28 - 7,00 (m, 3H), 4,01 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 2,30 (s, 3H). Hmotnostné spektrum, m/z: 316.
F. Amín β-2 sa spracoval metódou, opísanou v postupe
C. Výsledný produkt sa ďalej spracoval podľa postupu Dl a poskytol trifluóracetátovú soľ amínu 1336-1.
G. Podľa postupu opísaného v príklade IA sa nechá reagovať 14 mg (0,044 mmol) kyseliny 6-[2-metoxy-3-(o-tolylureido)]pyridyloctovej so 17 mg (0,045 mmol) trifluóracetátovej soli amínu 1336-1, pripravenej v predošlom stupni. Získa sa 24 mg (79 %) terc-butylesteru zlúčeniny i
BIO-1336 vo forme bielej peny. H-NMR spektrum (CDC1 300 MHz, ppm): 8,40 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,50 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,43 - 7,06 (m, 6H), 6,80 - 6,67 (m, 4H), 5,92 (s, 2H), 5,19 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 2,65 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,58 (m, 3H), 1,31 (s, 9H).
H. K roztoku 24 mg (0,035 mmol) tcrc-butylesteru zlúčeniny BIO-1336 v 3 ml dichlórmetánu sa pridajú 3 ml kyseliny trifluóroctovej. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny a odparí sa. Surový produkt sa prečistí HPLC a získa sa 11 mg (50 %) zlúčeniny BIO-1336 vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (DMSO-d. 300 MHz, ppm): 8,73 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,47 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,31 (d, 1H, J = = 7,9 Hz), 8,11 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,21 - 7,09 (m, 2H), 7,00 - 6,70 (m, 5H), 5,98 (s, 2H), 5,08 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,52 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,55 - 1,25 (m, 3H), 0,81 (m, 6H). HPLC (gradient B): 20,0 min. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 620.
Príklad 62 Syntéza ΒΙΟ-13 82
A. K zmesi 200 mg (0,60 mmol) hydrochloridu metyl-6-amino-2(S)-N-Boc-aminohexanoátu a trimetylamínu (pridaný v takom množstve, aby zmes mala alkalickú reakciu na lakmus) v 5 ml dichlórmetánu sa prikvapká počas 2 minút pri laboratórnej teplote 76,2 mg (0,67 mmol) metán sulfonylchloridu. Zmes sa mieša 1 hodinu, zriedi sa 10 ml dichlórmetánu a roztok sa premyje 5 % roztokom kyseliny citrónovej (3 x 0,5 ml), vodou (1 x lml), soľankou (1 x x lml) a vysuší sa nad síranom horečnatým. Rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu a získa sa 230 mg (100 %) zlúčeniny 1382-1 vo forme číreho oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,26 (s,5H), 5,58 (d, IH, J = 8 Hz), 5,02 (s, 2H), 4,27 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,02 (m, 2H), 2,78 (s, 3H), 1,85 - 1,20 (m, 6H). HPLC (gradient 3): 24,26 min. Čistota 98 %. Hmotnostné spektrum, m/z: 373.
B. K roztoku 225 mg (0,60 mmol) zlúčeniny 1382-1 v 10 ml metanolu sa za miešania pri laboratórnej teplote prikvapká počas 2 minút 0,91 ml (1,8 mmol) 2N LiOH a v miešaní sa pokračuje cez noc. Reakčná zmes sa okyslí kyselinou trifluóroctovou na lakmus (červené sfarbenie) a rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu. Číry gumovitý odparok sa rozpustí v 20 ml etylacetátu a spracuje sa podľa metódy, opísanej v príklade 62A. Získa sa 122 mg (57 %) produktu i
1382-2 vo forme čírej gumovitej hmoty. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,33 (s, 4H), 5,54 (d, 1H, J = = 7,89Hz), 4,39 (m, 1H), 3,47 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 1,92 -
- 1,28 (m, 6H). HPLC (gradient 3): 19,23 min. Čistota 100 %. Hmotnostné spektrum, m/z: 359.
C. Reakcia 48 mg (0,13 mmol) zlúčeniny 1382-2 a 25 mg (0,09 mmol) amínu β-14 sa uskutoční podľa metódy, opísanej v príklade IA a poskytne 51 mg (62 %) produktu 1382-3. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,97 (d, 2H, J = 7,38 Hz), 7,35 (m, 7H), 5,51 (m, 1H), 5,35 (dd, 1H, J = 5,77 Hz a 13,50 Hz), 5,09 (s, 2H), 4,75 (m, 1H), 4,14 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 2,73 (m, 2H), 1,92 - 1,77 (m, 1H), 1,70 - 1,55 (m, 1H), 1,55 -1,49 (m, 2H), 1,49-1,15 (m, 13 H).
D. Ochranná skupina Cbz v zlúčenine 1382-3 sa odstráni katalytickou hydrogenáciou za podmienok, opísaných v postupe D2 a získa sa tak 13,2 mg (35 %) produktu 1382-4. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,23 -
- 8,12 (m, 2H), 8,02 - 7,82 (m, 2H), 7,49 - 7,38 (m, 2H), 5,50 - 5,31 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,20 - 2,65 (m, 4H), 1,89- 1,72 (m, 1H), 1,50- 1,10 (m, 14 H).
E. Podľa metódy, opísanej v príklade 49, sa z 15,5 mg (0,05 mmol) zlúčeniny 1382-4 pripraví 22,6 mg (111 %) terc-butylesteru zlúčeniny BIO-1382 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,02 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,87 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,59 (d, 1H, J = = 8,1), 7,29 - 7,19 (m, 5H), 7,11 - 7,02 (m, 4H), 6,92 (t, 1H, J = 7,19 Hz), 5,25-5,16 (m, 1H), 4,20-4,30 (m, 1H), 3, 80 (s, 3H), 3,39 (s, 2H), 2,86 - 2,73 (m, 5H), 2,68 - 2,58 (m, 2H), 2,17 (s, 3H), 1,65 - 1,18 (m, 15H). Hmotnostné spektrum, m/z: 752.
F. 27,6 mg (0,027 mmol) terc-butylesteru zlúčeniny BIO-1382 sa mieša v 1 ml dichlórmetánu pri 5 °C. Potom sa naraz pridá 1 ml kyseliny trifluóroctovej, odstráni sa ľadový chladiaci kúpeľ a v miešaní sa pokračuje ešte 2 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu a odparok sa prečistí prepratívnou HPLC, čím sa získa 14 mg (75 %) produktu BIO-1382 vo forme bielej tuhej látky. H-NMR spektrum (DMSO-dč, 300 MHz, ppm): 8,71 (d, 1H, J = 7,82 Hz), 8,21 (d, 1H, J = 8,01 Hz), 8,04 - 7,91 (m, 3H), 7,59 - 7,44 (m, 3H), 7,32 - 7,20 (m, 3H), 7,01 - 6,98 (m, 2H), 5,30 (dd, 1H, J = 7,50 Hz a 14,93 Hz), 4,35 (m, 1H), 3,93 (s, 3H),
3,84 - 3,62 (m, 2H), 3,09 - 3,45 (m, 2H), 2,99 - 2,78 (m, 6H), 2,32 (s, 3H), 1,75-1,15 (m, 6H). HPLC (gradient 3): 27,8 min. Čistota 95 %. Hmotnostné spektrum, m/z: 696.
Príklad 63
Syntéza BIO-1400
A. K 3,47 g (3,94 ml, 26 mmol) 4-fenyl-l-buténu sa pri laboratórnej teplote v argónovej atmosfére pridá 3,54 g (2,17 ml, 25 mmol) chlórsulfonylizokyanátu. Výsledná zmes sa mieša cez noc a potom sa pri teplote 0° C prikvapká k intenzívne miešanej zmesi NaHCO (5 g), NaHSO (1,5 g), vody (15 ml) a dichlórmetánu (10 ml). Po 1 hodine sa roztok zahustí za zníženého tlaku a zvyšok sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml. Organická vrstva sa oddelí a premyje nasýteným roztokom NaCl (30 ml), vysuší nad síranom sodným a zahustí za zníženého tlaku. Získa sa 600 mg (14 %) beta-laktámu 1400-1 vo forme svetložltého oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): δ 7,30 - 7,13 (m, 5H), 6,45 (s, 1H), 3,00 (ddd, 1H, J = 14,8 Hz, 4,7 Hz a 1,7 Hz), 2,64 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 2,52 (d, 1H, J = 14,8 Hz),
1,92 (m, 2H). TLC (50 % Hex/EtOAc): Rf = 0,27.
B. Roztok 500 mg beta-laktámu 1400-1 v 35 ml metanolu sa mieša s 1 ml 33 % HC1 18 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zriedi 100 ml etylacetátu a zalkalizuje sa trietylamínom na pH 9 - 10 (merané pH papierikom). Výsledný roztok sa premyje 10 ml vody, 30 ml nasýteného roztoku NaHCO3, 30 ml nasýteného roztoku NaCl, vysuší sa nad síranom sodným a zahustí za zníženého tlaku. Získa sa 270 mg (52 %) amínu 1400-2 vo forme žltého oleja. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): δ
7,28 - 7,15 (m, 5H), 3,66 (s, 3H, 2,66 (m, 2H), 2,48 (dd, 1H, J = 15,7 Hz a 4,0 Hz), 2,29 (dd, 1H, J = 15,7 Hz a 8,8 Hz), 1,70 (m, 2H, 1,54 (s, 2H). TLC (10 % MeOH/CH2Cl2): Rf = 0,35. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 207 (pre Ci2H|?NO2(M =1) vypočítané 207).
C. 100 mg (0,55 mmol) voľného amínu 1400-2 kon- α ε denzuje so 163 mg (1,52 mmol) N -Boc-N -Leu-N-hydroxysukcínimidu metódou, opísanou v postupe C. produkt sa deblokuje pôsobením 0,5 ml kyseliny trifluóroctovej a potom sa zalkalizuje trietylamínom spôsobom, opísaným v i postupe Dl. Získa sa amín 1400-3 vo výťažku 95 %. H-NMR spektrum (CDC1, 300 MHz, ppm): δ 9,02 (d, 1H, J = - 9,0 Hz), 7,27 - 7,14 (m, 5H), 4,26 (m, IH), 3,64 (s, dva Piky, 3H), 3,44 (m, 1H), 2,79 (s, 2H), 2,62 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 2,54 (d, IH, J = 4,9 Hz), 1,87 (m, 2H), 1,68 (m, 2H), 1,36 (m, IH), 0,92 (m, 6H). TLC (10 % MeOH/C^CH Rf = = 0,47 a 0,18. HPLC (gradient 1): 12,2 min. a 1 š,6 min. (1 : : 1). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 321 (pre
C H N O3 (M+1) vypočítané 321).
D. Kyselina 2-metylfenylureidofenyloctová (64 mg, 0,24 mmol) kondenzuje s voľným aminom 1400-3 (64 mg, 0,20 mmol) podľa metódy, opísanej v príklade 49, čím sa i
získa zlúčenina 1400-4 vo výťažku 60 %. H-NMR spektrum (DMSO-d6, 300 MHz, ppm): δ 9,50 (d, IH, J = 6,8 Hz), 8,26 - 8,17 (m, 2H), 7,97 (d, IH, J = 6,1 Hz), 7,84 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,38 (m, 4H), 7,27 - 7,09 (m, 9H), 6,91 (t, IH, J = 7,3 Hz), 4,26 (m, IH), 4,03 (m, IH), 3,52 (s, dva piky, 3H), 3,38 (m, 2H), 2,57 (- 2,40 (m, 4H), 2,25 (s, 3H),
1,70 - 1,41 (m, 5H), 0,86 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 587 (pre C H N (M +1) vypočítané 587).
E. 70 mg (0,119 mmol) zlúčeniny 1400-4 v 1 ml dimctylsulfoxidu a 2 ml metanolu sa hydrolyzuje vodným roztokom LiOH podľa metódy, opísanej v príklade 1B. Produkt sa čistí na kolóne s reverznou fázou C (Vydac, 22 mm x 25 cm) s použitím lineárneho gradientu od 20 %
CH3CN/H2O (0,1 % TFA) do 50 % CH^NríW (0,1 % TFA), s prietokom 10 ml/min. Vyizoluje sa zlúčenina BIO-1400 vo výťažku 22 %. H-NMR spektrum (DMSO-d^, 300 MHz, ppm): δ 8,93 (m, 1H), 8,14 (m, 1H), 7,91 - 7,81 (m, 3H), 7,34 (m, 2H), 7,27 - 7, 09 (m, 9H), 6,92 (t, 1H, J = = 7,4 Hz), 4,27 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,43 (d, 1H, J = 14,2 Hz), 3,36 (d, 1H, J = 14,2 Hz), 2,60 - 2,30 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 1,68 - 1,55 (m, 3H), 1,45 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 0,86 (m, 6H). HPLC (gradient 1): 20 min a 20,5 min (1 : 2,45). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 573 (pre C^H^ N^
4(M +1) vypočítané 573).
Podmienky pre analytickú HPLC:
Gradient 1: Lineárny gradient od 20 % CH3CN/H2O (0,1 % TFA) do 70 % CH3CN/H2O (0,1 % TFA). Gradient 8: Lineárny gradient od 15 % CI^CN/'H^O (0,1 % TFA) do 40 % CH3CN/H2O (0,1 % TFA).
Príklad 64
Syntéza BIO-1051
A. K roztoku 420 mg (3,1 mmol) kyseliny 4-aminobenzoovej v dichlórmetáne sa pri laboratórnej teplote pridá 340 μΐ (3,1 mmol) fenylizokyanátu. Reakčná zmes sa mieša 20 minút a potom sa zahustí. Zvyšok sa premyje IN HCl a potom veľkým množstvom éteru. Získa sa 98 mg (12 %) i
produktu vo forme bieleho prášku. H-NMR spektrum (CDC1,300 MHz, ppm): δ 9,08 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 7,90 (d, 2H), 7,58 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,30 (m, 2H), 7,00 (m, 1H). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 257 (M+H) , molekulová hmotnosť 256,26.
B. Roztok 15 mg (0,045 mmol) amínu, pripraveného v príklade 6A, a 12 mg (0,047 mmol) produktu, pripraveného v príklade 64A, v dimetylformamide sa pri laboratórnej teplote podrobí reakcii so 40 μΐ (0,22 mmol) DIPEA a 20 mg (0,045 mmol) BOP. Reakčná zmes sa mieša cez noc a potom sa sparacuje spôsobom, uvedeným v príklade 1A. Získa sa 18 mg (69 %) zlúčeniny BIO-1051-OBu-t vo forme peny.
C. Na 19 mg (0,031 mmol) zlúčeniny BIO-1051-OBu-t sa pri laboratórnej teplote pôsobí 2 ml kyseliny trifluóroctovej počas 30 minút. Potom sa reakčná zmes zahustí a surový produkt sa prečistí HPLC. Získa sa 6,3 mg (39 %) zlúčeniny BIO-1051 vo forme bieleho prášku. HPLC (gradient A): 19,2 min. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 517 (M+H) , molekulová hmotnosť 516,3.
Príklad 65
Syntéza BIO-1110
A. K dichlórmetánovému roztoku 49 mg (0,15 mmol) amínu, pripraveného v príklade 6A, sa pri laboratórnej teplote pridá 10 ml kyseliny trifluóroctovej. Reakčná zmes sa mieša 3 hodiny a potom sa zahustí. Zvyšok sa rozpustí v dimetylformamide a neutralizuje sa pri laboratórnej teplote trietylamínom. Potom sa pridá 26,5 mg (0,16 mmol) 4-nitrofenylizokyanátu a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 1 hodinu. Prečistenie HPLC poskytne 62 mg béžovo sfarbenej tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 8,05 (d, 2H, 7,25 (m, 5H), 5,35 (m, 1H), 4,34 (m, 1H), 2,22 (m, 2H), 1,59 (m, 3H), 0,84 (m, 6H). Hmôt- + nostné spektrum (FAB), m/z: 442,9 (M+H) , molekulová hmotnosť 442,41. HPLC (gradientA): 21,05 min.
B. 55 mg (0,12 mmol) produktu, získaného v príklade 65A, sa za miešania hydrogenuje na 10 % Pd/C v metanole pri tlaku vodíka 40 psi. Reakčná zmes sa prefiltruje cez
Celit 545 a po zahustení poskytne 49 mg béžovosfarbcncj tuhej látky. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm):
7,19 (m, 5H), 7,03 (d, 2H), 6,94 (d, 2H), 5,27 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 2,72 (m, 2H), 1,52 (m, 3H), 0,78 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 413,3 (M+H) , molekulová hmotnosť 412,45. HPLC (gradientA): 11,93 min.
C. K zmesi 5 mg (0,012 mmol) produktu, pripraveného v príklade 65B, dimetylformamidu a trietylamínu sa pridá 1,4 mg (0,012 mmol) fenylizokyanátu. Zmes sa mieša cez i noc a produkt sa prečistí HPLC. H-NMR spektrum (CDC13, 300 MHz, ppm): 7,55 (d, 2H(, 7,36 (m, 12H), 7,04 (m, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,36 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 2,78 (m, 2H), 1,39 (m, 3H), 0,91 (m, 6H). Hmotnostné spektrum (FAB): m/z: 532 (M+H) , molekulová hmotnosť 531,36. HPLC (gradientA): 20,31 min.
Príklad 66
Syntéza BIO-1527
A. K roztoku amínu β-3 (1 ekvivalent) v dichlórmetáne sa pridá Boc-Pro-OSu (1 ekvivalent). Reakčná zmes sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote a potom sa zriedi etylacetátom. Tento roztok sa premyje 5 % kyselinou citrónovou (2 x), nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x) a soľankou (1 x), vysuší sa nad síranom sodným a prefiltruje. Odparenie rozpúšťadla poskytne surový produkt vo forme bielej peny. Tento surový produkt sa rozpustí v dichlórmetáne a pri teplote 0 °C sa pridá kyselina trifluóroctová. Zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 1 hodinu a po zahustení poskytne amín vo forme trifluóracetátu.
B. K roztoku 2-metylfenylureidofenyloctovej kyseliny v dimetylformamide sa pridá HOBt (1,5 ekvivalentu) a EDC (1,2 ekvivalentu). Potom sa pridá voľný amín, pripravený v príklade 66A, a zmes sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote. Výsledná zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa 5 % roztokom kyseliny citrónovej (2 x), nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (2 x) a soľankou. Po vysušení nad síranom sodným, filtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa metylester. Ten sa rozpustí v metanole a podrobí sa reakcii s IN vodným roztokom LiOH. Konečným produktom je karboxylová kyselina, ktorá sa prečistí HPLC. Frakcie, obsahujúce čistý produkt, poskytnú zlúčeninu BIO-1527. Hmotnostné spektrum (FAB), m/z: 573 (M+H), 595 (M+Na).
Príklad 67
Inhibícia adhézie k BSA-CS1, závislej od VLA-4
Tento test sa používa na určenie inhibičnej účinnosti zlúčenín podľa tohto vynálezu proti adhézii, závislej od VLA-4
1. Konjugácia CS1 a BSA
BSA-SMCC (Pierce Chemical, Rockford, II, č. kat. 77115) sa rozpustí vo vode na koncentráciu 10 mg/ml. Peptid [SEQ ID No. 4]: Cys-Tyr-Asp-Glu-Leu-Pro-Gln-Leu-Val-Thr-Leu-Pro-His-Pro-Asn-Leu-His-Gly-Pro-Glu-Ile-Leu-Asp-Val-Pro-ser-Thr („peptid Cys-Tyr-CSl“), ktorý sa syntetizoval konvenčným postupom v tuhej fáze a prečistil HPLC, sa rozpustí v 10 mM HEPES, pH 5, 50 mM NaCl a 0,1 mM EDTA, taktiež na koncentráciu 10 mg/ml. Potom sa zmieša 500 μΐ BSA-SMCC, 250 μΐ peptidu Cys-Tyr-CSl a 75 μΐ lmM HEPES, pH 7,5 a konjugačná reakcia sa nechá prebiehať 30 minút. Reakcia sa zastaví prídavkom 1 μΐ β-merkaptoetanolu a vzorky sa zanalyzujú. Konjugácia sa určuje pomocou SDS-PAGE. Táto reakcia pos kytuje konjugát niekoľkých molekúl peptidu Cys-Tyr-CSl s jednou molekulou BSA.
2. Príprava dosiek na adhézny test
Použije sa polystyrénová doska Linbro titertek s 96 jamkami s plochým dnom (Flow Laboratories, Maclean, Va, č. kat. 76-231-05). Jamky sa pokryjú 100 μΐ opísaného roztoku BSA-CS1, zriedeného na koncentráciu 1 pg/ml v 0,05 M NaHCO (15 mM NaHCO3, 35 mM Na2CO3), pH 9,2. Niektoré jamky sa nepokryjú CS1, aby sa určila nešpecifická väzba buniek (NSB). Doska sa potom inkubuje cez noc pri 4° C.
Po tejto inkubácii sa obsah jamiek odstráni tak, že sa doska obráti a blotuje sa. Všetky jamky sa potom blokujú 100 μΐ 1 % BSA v PBS, 0,02 % NaN} aspoň jednu hodinu pri laboratórnej teplote.
3. Príprava fluorescenčné značených buniek Ramos
Bunky Ramos sa kultivujú, uchovávajú a značia v živom prostredí RPMI 1640, obsahujúcom 1 % BSA. Tesne 6 pred testom sa ku kultúre buniek Ramos (4 x 10 buniek/ml) pridá acetoxymetylester 2',7'-bis-(2-karboxyetyl)-5-(a-6-)-karboxyfluoresceínu („BCECF-AM“; Molecular -Probes Inc., Eugene, Oregon, č. kat. B-1150), aby jeho konečná koncentrácia bola 2 μΜ. Bunky sa potom inkubujú 20 minút pri 37° C.
Po označení sa bunky premyjú dvakrát pufrom, v ktorom sa test uskutočňuje (24 mM TRIS, 137 mM NaCl, 2,7 mM K.C1, pH 7,4, obsahujúci 0,1 % BSA a 2 mM glukózy), aby sa odstránili katióny, eventuálne prítomné v živom prostredí. Bunky sa potom znovu suspendujú v uvedenom 6 testovacom pufri na koncentráciu 4x10 buniek/ml a pridajú sa 2 mM MnCU aby sa zvýšila koncentrácia VLA-4 na povrchu buniek.
4. Vlastné uskutočnenie testu
Tesne pred začiatkom testu sa odstráni blokovací roztok BSA z 96 jamkovej dosky a jamky sa premyjú 100 μΙ testovacieho pufra. Potom sa pridá do každej jamky 25 μΐ roztoku testovanej zlúčeniny v dvojnásobnej koncentrácii, než je požadovaná konečná koncentrácia, a 25 μΐ značených buniek Ramos. Konečná koncentrácia zlúčeniny sa volí v rozsahu predpokladaných hodnôt IC , zvyčajne medzi 0,01 nM a 10 μΜ. Pre každú koncentráciu zlúčeniny sa uskutoční test trikrát. Zlúčenina a bunky sa inkubujú 30 minút pri laboratórnej teplote.
Potom sa obsah jamiek vyprázdni a jamky sa štyrikrát premyjú testovacím pufrom. Svetelným mikroskopom sa potom prezrú jamky na určenie NSB. Ak je v nich viazaných viac než niekoľko buniek, doska sa ešte raz premyje, aby sa odstránili nadbytočné nešpecifický viazané bunky.
Väzba buniek Ramos v jamkách, pokrytých peptidom CS1, sa meria pridaním 100 μΐ testovacieho pufra do každej jamky a vyhodnotením fluorescencie na prístroji Millipore Cytofluor 2300 Systém Platereader Set pri 485 nm excitácie a 530 nm emisie. Väzba sa vyjadruje ako IC , t. j. koncentrácia inhibítora, pri ktorej sa väzba zmenší na 50 % kontrolného pokusu. Percentá väzby sa vypočítajú podľa vzorca:
[(F -F ) - (F-F )1/[(F -F )]x 100 = % väzby, kde F.]b je celková fluorescencia v jamkách obsahujúcich CS1 bez pridania inhibítora, Fns je fluorescencia v jamkách bez CS1 a F je fluorescencia v jamkách, obsahujúcich inhibítor podľa vynálezu.
Uvedeným spôsobom sa testovali zlúčeniny podľa vynálezu. Hodnoty IC pre každú z týchto zlúčenín sú uvedené v nasledujúcej tabuľke.
Tabuľka
Bio r 1C« BIO t C» BIO IC„ 610 i ICW
1002 nd 1064 B 1122 c 1185 -
1003 nd 1065 B 1123 C 1186 8
BIO t BIO/ IC» BIO t IC» BIO f ic»
1004. c 1066 nd 1124 nd 1187 c
1005 c 1067 B 1125 nd 118B C |
loce B 1068 a 1126 C 1189 c |
1007 C 1069 A 1127 B 1190 A
IOO8 C 1070 B 1128 B 1191 8
1009 c 1072 A 1129 B 1192 A
1010 B 1073 B 1130 B 1193 8 I
1011 C 1074 B 1131 B 1194 A
1Π13 nd 1075 B 1132 B 1196 -
1014 C 1078 B 1133 B 1188 A
1015 B 1077 e 1134 B 1197 A
1018 C 1078 B 1135 A 1198 C
1017 C 107» A 1138 B 1199 e
i ci a C 1080 B 1137 nd 1200 8
1020 c 1081 B 1138 B 1201 8
1021 B 1082 C 1139 B 1206 A
1022 C 1083 nd 1140 nd 1207 c
1023 8 1084 nd 1141 nd 1208 B
•1024 C 1085 C 1142 nd 1209 e
1O2S nd 1086 B 1143 C 1210 A
1 1026 C 1087 C 1144 B 1212 A
1027 C 1088 A 1145 B 1214 8
1028 B 1089 A 1 >46 6 1215 C
1029 C 1090 A 1147 8 1216 B
1030 C 1091 8 1148 C 1217 A
1031 C 1082 C 1149 C 1218 8
1032 C 1093 C 1150 c 1219 9
103« 8 1094 C 1152 nd 1220 B
1037 B 1096 c 1153 C 1221 A
1038 C 1097 B 1154 nd 1222 A
1039 B 1038 C 1155 nd 1223
ao t IC» BIO r £» BIO/ tc» bio r ic»
1040 a 1099 C 1186 nd 1224 A
1041 nd 1100 B 1157 C 1225 rd
1042 rd iioi C 1168 6 1217 nd
1043 nd 1102 nd 1159 C 1228 A i
1044 nd 1103 C 1160 8 1246 A I
1045 nd 1104 8 1162 nd 1246 A
1O4B C 1105 8 1163 a 1248 A I
1047 nd 1108 C 1 164 B 1270 A j
1048 nd 1107 C 1168 B 1282 A |
1049 B - 110« e 1169 B 1294 *
1050 A 1109 c 1170 e 1321 A
1081 nd 1110 B 1173 B 1327 B
10B2 B 1111 c 1174 B 1336 A
1063 B 1112 c 1175 B 1380 A
1054 B 1113 c 1176 B 1380 B
1055 A 1114 c 1177 B 1382 A
,0« A 1115 B 1178 B 1390 6
1057 nd 1118 nd 1179 A 1396 e
1058 nd 1117 C 1180 B 1400 A
1080 B 1119 nd 1181 B 1272 A
1063 B 1120 nd 1162 B 1311 B
1319 B 1345 A 1347 A 1358 a I
1381 A 1388 A 1393 A 1429 β I!
1444 B 1474 B 1476 B 1490 a y
1515 A 1525 8 1526 B 1536 A
1594 8 1648 8 1655 B 1721 e ·
1725 nd 1728 nd 1727 nd 1728 nd
1 1729 nd 1730 nd 1731 nd I732 na
Použité skratky: A - < 50 nM, B - 50 nM - 10 μΜ, C - > 10 μΜ, nd - neurčené. Všetky testované zlúčeniny v tejto tabuľke majú IC5q < 1 mM.
Príklad 68
Priama väzba buniek, nesúcich VLA-4, na VCAM-IgG
Ďalej sa testuje schopnosť zlúčenín podľa vynálezu inhibovať väzbu medzi VCAM a VLA-4, pričom sa použije konjugát VCAM-IgG s alkalickou fosfatázou (AP). V teste sa používa Millipore Multiscreen Assay Systém (Millipore Corp., Bedford, Ma), aby sa dosiahlo dôkladné premytie buniek.
1. Príprava konjugátov VCAM-IgG-AP
Zostavenie expresného vektora VCAM 2D-IgG, transfekcia CHO buniek s týmito konštruktami a čistenie výsledných produktov expresie sa opisuje v PCT publikácii WO 90/13300.
Na 1,2 ml čisteného VCAM 2D-IgG (5 mg/ml v 10 mM HEPES, pH 7,5) sa pôsobí 44 μί Trautovho činidla (2-iminotiolán, 20 mg/ml vo vode, Pierce Chemical, Rockford, II.) 30 minút pri laboratórnej teplote. Vzorka sa odsoli na kolóne Sephadexu G-25 (15 ml), ekvilibrovaného 100 mM NaCl a 10 mM MES, pH 5,0. Zberajú sa 1 ml frakcie a meria sa ich absorbancia pri 280 nm. Dve frakcie s najvyššou absorbanciou sa spoja.
ml roztoku alkalickej fosfatázy z teľacích čriev (19 mg/ml, Pierce Chemical, Rockford, II.) sa nechá reagovať 35 minút pri laboratórnej teplote so 100 μί sulfo-SMCC (30 mg/ml vo vode) a 100 μί IM HEPES, ph 7,5. Reakčná zmes sa odsolí na kolóne Sephadexu G-25 (12 ml), ekvilibrovaného 150 mM NaCl a 10 mM HEPES, pH 6,0. Zberajú sa 1 ml frakcie a meria sa ich absorbancia pri 280 nm. Dve frakcie s najvyššou absorbanciou sa spoja a uchovávajú v ľade.
Adukt alkalická fosfatáza-SMCC a adukt VCAM 2D-lgG-iminotiolán sa spoja v molámom pomere 2 : 1 v Tris-HCI, pH 7,5, inkubáciou 30 minút pri laboratórnej teplote. Rozsah tejto konjugácie sa určí pomocou SDS-PAGE. Konjugáty sa stabilizujú prídavkom 2 mM MgCl a 0,25 nM ZnCl2 a uchovávajú sa pri 4 °C.
2. Vlastný test
Filtračná doska s 96 jamkami sa najskôr blokuje pridaním 275 μί PBS, obsahujúceho 0,1 % Tweenu 20 a 2 % BSA („blokovací pufor“) do každej jamky a následnou inkubáciou 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Doska sa potom pripojí k zdroju vákua a blokovací pufer sa odsaje spodnou časťou poréznych jamiek do odpadu. Jamky sa potom trikrát premyjú 200 - 250 μί pufrovaného (Tris) soľného roztoku, obsahujúceho 0,1 % BSA, 2 mM glukózu a 1 mM IIEPES, pH 7,5 („testovací pufer“), aby sa vymyl všetok zvyšný blokovací pufer. Znovu sa všetko odsaje a doska sa zospodu vysuší papierovým obrúskom, aby sa odstránil pufer zo spodnej časti dosky.
Potom sa pripraví zásobný roztok VCAM-IgG-AP (4 μί/ml v testovacom pufri) a prefiltruje sa cez 0,2 μ filter s malou zádržou proteínov, spojený s injekčnou striekačkou (Gelman Sciences, Ann Arbor, Mi., č. 4454). Roztok sa zriedi testovacím pufrom v pomere 1 : 10 a 25 μί takto pripraveného roztoku sa pridá do každej jamky na premytej doske.
Zlúčenina testovaná na inhibíciu adhézie sa rozpustí v testovacom pufri na roztok s dvojnásobnou koncentráciou než je požadovaná koncentrácia a 25 μί tohto roztoku sa pridá do jamky. Pre každú zvolenú koncentráciu zlúčeniny sa test uskutočňuje súbežne v troch jamkách. Konečné kon centrácie sa pohybujú od 0,01 nM do 10 μΜ. Do kontrolných jamiek na určenie celkovej väzby a nešpecifickej väzby sa nakvapká 25 μί testovacieho pufra bez testovaného inhibítora. Jamky na určenie celkovej väzby obsahujú bunky VCAM-IgG-AP v testovacom pufri, jamky na nešpecifickú väzbu obsahujú iba VCAM-IgG-AP v testovacom pufri.
Bunky Jurkat sa premyjú jedenkrát v testovacom pufri, aby sa odstránilo živné prostredie a znovu sa suspendujú na 6 koncentráciu 8 x 10 /ml v testovacom pufri, ktorý obsahuje 2 mM MnCfy 50 μί tejto suspenzie buniek Jurkat sa pridá do všetkých jamiek, okrem jamiek na určenie nešpecifickej väzby, do ktorých sa pridá 50 μί testovacieho pufra, aby konečný objem bol 100 μί vo všetkých jamkách. Obsah jamiek sa jemne premieša poklepaním na strany dosky. Doska sa potom nechá v pokoji inkubovať 60 minút pri laboratórnej teplote.
Po tomto čase sa doska pripojí k zdroju vákua a obsah jamiek sa odsaje. Do každej jamky sa opatrne pridá 100 μί testovacieho pufra, obsahujúceho 1 mM MnCl (premývací pufer) tak, aby sa nerozvírili bunky na dne. Pufer sa odsaje a jamky sa znovu premyjú 150 μί premývacieho pufra. Ten sa znovu odsaje a spodok dosky sa vysuší papierovým obrúskom.
Ďalej sa pripraví roztok 4-nitrofenylfosfátu (10 mg/ml v 0,1 M glycíne a 1 mM ZnCl2, pH 10,5 (substrátový pufer) a 100 μί tohto roztoku sa okamžite pridá do každej jamky. Doska sa inkubuje 30 minút pri laboratórnej teplote, aby prebehla kolorimetrická reakcia. Potom sa reakcia zastaví pridaním 100 μί 3N NaOH do každej jamky.
Obsah 96 jamkovej filtračnej dosky sa potom odsaje priamo do 96 jamkovej dosky, ktorej jamky majú ploché dno. Množstvo VCAM-konjugátu viazaného na bunky v jednotlivých jamkách sa potom určí odčítaním absorbancií pri 405 nm. Percentá väzby sa vypočítajú podľa vzorca:
[(A -A )-(A-A )]/[(A -A )] x 100 = % väzby, TR NS' y 1 NS7J Ly TB NS'j j kde A je absorbancia pri 405 nm v jamkách obsahujúcich CS1 bez pridania inhibítora, Ans je absorbancia pri 405 nm v jamkách bez CS1 a A( je absorbancia pri 405 nm v jamkách, obsahujúcich inhibítor podľa vynálezu.
Uvedeným spôsobom sa testovali zlúčeniny podľa vynálezu. Hodnoty IC sú porovnateľné s hodnotami, získanými v teste väzby CS1, opísanom v predošlom príklade, aj keď niektoré zlúčeniny sa vyznačovali až desaťkrát vyššou väzbou než v predošlom teste.
Príklad 69
Inhibícia kontaktnej hypersenzitivity pri myšiach
Myšie samice Balb/c (váha 20 g, Jackson Laboratories, Bar Harbour, Me.) sa anestetizujú pentobarbitalom sodným (90 mg/kg, i.p.). Na bruchu sa hladko vyholí pruh s veľkosťou 3 cm a do kože sa vtrie 70 % etanol. Potom sa na holú brušnú kožu aplikuje 25 μί 0,5 % DNFB v zmesi acetónu a olivového oleja v pomere 4 : I (objemové diely). Koža sa zľahka poškriabe hrotom aplikačnej pipety, aby sa vyvolal mierny zápal. Dvadsať štyri hodín po tejto počiatočnej senzitizácii sa uskutoční nová senzitizácia aplikáciou 25 μί 0,5 % DNFB na to isté miesto na bruchu, ktoré sa opäť zľahka poškriabe hrotom pipety. Táto druhá senzitizácia sa uskutoční na znehybnenej neanestetizovanej myši.
Piaty deň (120 hodín po počiatočnej senzitizácii) sa myš anestetizuje i.p. podaním zmesi 90 mg/kg ketamínu a 10 mg/kg xylazínu a aplikuje sa subiritantná dávka (10 μί)
0,2 % DNFB na dorsálny povrch ľavého ucha. Na pravé ucho sa aplikuje podobným spôsobom zmes acetónu a olivového oleja v pomere 4 : 1 (objemové diely).
Štyri hodiny po tomto zásahu, vyvolávajúcom imunitnú reakciu, sa subkutánnou injekciou aplikujú v rôznych koncentráciách testované inhibítory podľa vynálezu, a to v 100 μΐ 0,5 % nátriumfosfátového pufra, pH 8,8, s tromi objemovými percentami DMSO. Pri najvyšších testovaných koncentráciách niektoré menej rozpustné inhibítory niekedy vyžadujú prídavok až 30 % DMSO. Na každý test sa použije osem myší. Ako súčasť testov zlúčenín podľa vynálezu sa na porovnanie testujú skupiny pozitívnych kontrol (PS2 protilátky proti myšiemu VLA-4, 8 mg/kg, i.v.) a negatívnych kontrol (fyziologický roztok s fosfitovým pufrom, PBS, 100 μΐ i.v.; DMSO v PBS, 100 μΐ s.c.).
Dvadsaťštyri hodín po zásahu sa myši znovu anestetizujú zmesou ketaminu a xylazínu a mikrometrom sa zmeria -4 hrúbka oboch uší s presnosťou na 10 inchu. Pre každú myš sa ako veľkosť odozvy berie rozdiel medzi hrúbkou kontrolného ucha a ucha, na ktoré sa aplikoval DNFB. Ty-4 pické odozvy sú 65 - 75 x 10 inchov. Veľkosť inhibície odozvy sa vyhodnotí porovnaním skupín, ktorým sa aplikovala testovaná zlúčenina, s ich negatívnymi kontrolnými skupinami. Percentá inhibície sa vypočítajú podľa vzorca:
(priemerný opuch ucha - (priemerný opuch ucha v negat. kontr. skupine) v testovanej skupine) _______________________________________________x 100 priemerný opuch ucha v negat. kontrolnej skupine
Štatistická významnosť rozdielu medzi testovanými skupinami sa vyhodnotí použitím jednostrannej analýzy rozptylu a následným výpočtom „Tukey-Kramer Honestly Significant Difference“ (JMP, SAS Inštitúte), pričom p < < 0,05.
Inhibítory podľa tohto vynálezu spôsobujú štatisticky významné zmenšenie opuchu ucha pri myšiach, ktorým sa aplikoval DNFB, v porovnaní s kontrolnými zvieratami.
Príklad 70
Inhibícia neskorej fázy citlivosti dýchacích ciest, vyvolanej antigénom Ascaris pri alergických ovciach
V týchto štúdiách sa používajú ovce, pri ktorých sa predtým pozorovala raná alebo neskorá bronchiálna odozva na antigén Ascaris suum. Experimentálne uskutočnenie je opísané v práci W. M. Abrahama a spol., J. Clin. Invest., 93, 776 - 787 (1994), s tým rozdielom, že VLA-4-inhibítory podľa tohto vynálezu sa podávajú zvieratám rozpustené v 3 - 4 ml 50 % vodného etanolu a aplikujú sa vo forme aerosólového spreja.
Výsledky ukazujú, že všetky VLA-4-inhibítory podľa tohto vynálezu inhibujú odozvu dýchacích ciest spojenú s podaním antigénu Ascaris suum.
V tejto patentovej prihláške je ukázaných veľa príkladov uskutočnenia tohto vynálezu a je zrejmé, že uvedená základná schéma sa môže meniť tak, aby poskytla ďalšie zlúčeniny a metódy, ktoré využívajú zlúčeniny podľa vynálezu. Rozsah tohto vynálezu je preto definovaný uvedenými nárokmi a nie iba špeciálnymi prípadmi, uvedenými ako príklady.
Charakteristika sekvencií (2) Informácia pre SEQ ID No. 1:
(i) Sekvenčné charakteristiky:
A. Dĺžka: 8 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
C. Počet reťazcov: jeden
D. Topológia: lineárna
(ii) Typ molekuly: peptid
(iii) Hypotetický: nie
(iv) Retro: nie
(xi) Opis sekvencie: SEQ ID No. 1: Glu íle Leu Asp Val Pro Ser Thr 1 5
(2) Informácia pre SEQ ID No. 2:
(i) Sekvenčné charakteristiky: A. Dĺžka: 5 aminokyselín B. Typ: aminokyselina C. Počet reťazcov: jeden D. Topológia: lineárna
(ii) Typ molekuly: peptid
(iii) Hypotetický: nie
(iv) Retro: nie
(xi) Opis sekvencie: SEQ ID No. 2: Glu íle Leu Asp Val 1 5
(2) Informácia pre SEQ ID No. 3:
(i) Sekvenčné charakteristiky: A. Dĺžka: 5 aminokyselín B. Typ: aminokyselina C. Počet reťazcov: jeden D. Topológia: lineárna
(ii) Typ molekuly: peptid
(iii) Hypotetický: nie
(iv) Retro: nie
(xi) Opis sekvencie: SEQ ID No. 3 Leu Asp Val Pro Ser 1 5
(2) Informácia pre SEQ ID No. 4:
(i) Sekvenčné charakteristiky
A. Dĺžka: 27 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
C. Počet reťazcov: jeden
D. Topológia: lineárna (ii) Typ molekuly: peptid (iii) Hypotetický: nie (xi) Opis sekvencie: SEQ ID No. 4:
Cys Tyr Asp Glu Leu Pro Gin Leu Val Thr Leu Pro 1 5 10
His Pro Asn Leu His Gly Pro Glu íle Leu Asp Val 15 20
Pro Ser Thr

Claims (48)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Inhibítory adhézie buniek všeobecného vzorca (I) kde
    X je zvolené zo skupiny substituentov -CO^H, -PO^H, -SO R5, -SO H, -OPO' H a-CO R4;
  2. 2’3’ 3 2 ’ v ktorých R5 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou a alkenylovú alebo alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
    Y je zvolené zo skupiny obsahujúcej skupiny -CO-, -SO,a-PO -;
    R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu s prikondenzovaným arylom, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, substituovanú aralkylovú skupinu, alkenylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú cykloalkylovou skupinou, cykloalkylovú skupinu substituovanú cykloalkenylovou skupinou, biarylovú skupinu, alkoxylovú skupinu, alkénoxylovú skupinu, alkínoxylovú skupinu, aralkoxylovú skupinu, alkénoxylovú alebo alkínoxylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylamínovú skupinu, alkenylamínovú skupinu, alkinylamínovú skupinu, alkylamínovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkenylamínovú alebo alkinylamínovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, aryloxylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú N-alkylureidovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N-arylureidovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aminokarbonylovou skupinou, heterocyklylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú heterocyklylovou skupinou, amínovú skupinu substituovanú heterocyklylovou skupinou, aralkylovú skupinu substituovanú karboxyalkylovou skupinou, arylovú skupinu s prikondenzovaným oxokarbocyklom a heterocyklylalkylovú skupinu; s podmienkou, že R1 nie je terc-butoxyskupina, benzyloxyskupina alebo arylalkylová skupina, kde je aryl substituovaný alkylovou skupinou, atómom halogénu alebo hydroxyskupinou;
    R2 je substituent zo skupiny obsahujúcej atóm vodíka, arylovú skupinu, alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu a alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
    R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, aralkylovú skupinu, alkenylovú skupinu substituovanú arylskupinou, alkinylovú skupinu substituovanú arylskupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aralkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsubstituovanou alkyloxykarbonylamínovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiolovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxysubstituovanou alkyltioskupinou, alkylovú skupinu substituovanú tioalkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú acylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsulfonylaminoskupinou, morfolinoalkylovú skupinu, tiomorfolinoalkylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú morfolínkarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiomorfolínkarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N-(alkyl, alkenyl alebo alkinyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N,N-(dialkyl, dialkenyl, dialkinyl aminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N,N-(alkyl, alkenyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu sub stituovanú karboxylovou skupinou, acylaminoalkylovú skupinu substituovanú dialkylaminoskupinou a postranné reťazce aminokyselín arginínu, asparagínu, glutamínu, S-metylcysteínu, metionínu a jeho zodpovedajúceho sulfoxidového a sulfónového derivátu, glycínu, leucínu, izoleucínu, allo-izoleucínu, terc-leucínu, norleucínu, fenylalanínu, tyrozínu, tryptofánu, prolínu, alanínu, omitínu, histidínu, glutamínu, valínu, treonínu, serinu, asparágovej kyseliny, beta-kyanoalanínu a allo-treonínu, alebo R2 a R3 spolu s atómami, ku ktorým sú pripojené, môžu tvoriť heterocyklus; R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej arylovú skupinu, alkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, atóm vodíka, heterocyklylovú skupinu, heterocyklylkarbonylovú skupinu, aminokarbonylovú skupinu, amidovú skupinu, mono- alebo dialkylaminokarbonylovú skupinu, mono- alebo diarylaminokarbonylovú skupinu, alkylarylaminokarbonylovú skupinu, diarylaminokarbonylovú skupinu, mono- alebo diacylaminokarbonylovú skupinu, aromatickú alebo alifatickú acylskupinu a alkylovú skupinu prípadne substituovanú substituentmi zo skupiny obsahujúcej aminoskupinu, karboxylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, merkaptoskupinu, mono- alebo dialkylaminoskupinu, mono- alebo diarylaminoskupinu, alkylarylaminoskupinu, diarylaminoskupinu, mono- alebo diacylaminoskupinu, alkoxylovú skupinu, alkénoxylovú skupinu, aryloxylovú skupinu, tioalkoxylovú skupinu, tioalkénoxylovú skupinu, tioalkínoxylovú skupinu, tioaryloxylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu;
    n jeO, 1 alebo 2 a s ďalšou podmienkou, že keď R1 je alkylová skupina substituovaná N-alkylureidovou skupinou alebo alkylová skupina substituovaná N-arylureidovou skupinou a keď Y je skupina -CO-, potom R4 nie je indolylmetyl, a ich farmaceutický prijateľné deriváty.
    2. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 všeobecného vzorca (I) kde
    X je zvolené zo skupiny substituentov -CO H, -PO H, SO R5, -SO H, -OPO' H,
    2 3 3 v ktorých R5 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou a alkenylovú alebo alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
    Y je zvolené zo skupiny obsahujúcej skupiny -CO-, -SO2a -PO -;
    R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu s prikondenzovaným arylom, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, substituovanú aralkylovú skupinu, alkenylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkinylovú skupinu substiuovanú arylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú cykloalkylovou skupinou, cykloalkylovú skupinu substituovanú cykloalkenylovou skupinou, biarylovú skupinu, alkoxylovú skupinu, alkénoxylovú skupinu, alkínoxylovú skupinu, alkoxylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkénoxylovú alebo alkínoxylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylamínovú skupinu, alkenylamínovú skupinu, alkinylamínovú skupinu, alkylamínovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkenylamínovú alebo alkinylamínovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, aryloxylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú N-alkylureidovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N-arylureidovou skupinou a alkylovú skupinu substituovanú aminokarbonylovou skupinou; s podmienkou, že R1 nie je terc-butoxyskupina, benzyloxyskupina alebo arylalkylová skupina, kde je aryl substituovaný len alkylovou skupinou, halogénom alebo hydroxyskupinou;
    R2 je substituent zo skupiny obsahujúcej atóm vodíka, arylovú skupinu, alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu alebo alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu a alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
    R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, aralkylovú skupinu, alkenylovú skupinu substituovanú arylskupinou, alkinylovú skupinu substituovanú arylskupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aralkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsubstituovanou alkyloxykarbonylaminovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiolovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxysubstituovanou alkyltioskupinou, alkylovú skupinu substituovanú tioalkoxylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú acylamínovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylamínovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsulfonylamínovou skupinou, morfolinoalkylovú skupinu, tiomorfolinoalkylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú morfolínkarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiomorfolínkarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N-(alkyl, alkenyl alebo alkinyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N,N-(dialkyl, dialkenyl, dialkinyl aminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N,N-(-alkyl, alkenyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú sku-pinu substituovanú karboxylovou skupinou, a postranné reťazce aminokyselín arginínu, asparaginu, glutamínu, S-metylcysteínu, metionínu a jeho zodpovedajúceho sulfoxidového a sulfónového derivátu, glycínu, leucínu, izoleucínu, allo-izoleucínu, tert-leucínu, norleucínu, fenylalanínu, tyrozínu, tryptofánu, prolínu, alanínu, ornitínu, histidínu, glutamínu, valínu, treonínu, serínu, asparágovej kyseliny, beta-kyanoalanínu a allo-treonínu;
    R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej arylovú skupinu, alkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu a alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou a n je 0, 1 alebo 2.
  3. 3. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kdeXje-CO^H.
  4. 4. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R1 je alkylová skupina s 1 až 4 atómami uhlíka substituovaná arylovou skupinou.
  5. 5. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R1 je arylalkylová skupina para-substituovaná N-Ar'-ureidovou skupinou.
  6. 6. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 5, kde R1 je fenylmetylová skupina para-substituovaná N-Ar'-ureidovou skupinou.
  7. 7. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej kyanometylovú skupinu, cyklohexylmetylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylkarbonylovú skupinu, terc-butylamínovú skupinu,
    1-indanylovú skupinu,
    1- fenylcyklopropylovú skupinu,
    2- (benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    2-[bis(fenylsulfonyl)amino]fenylmetylovú skupinu,
    2-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    2-aminofenylmetylovú skupinu,
    2-benzamidofenylmetylovú skupinu,
    2-bróm-4-hydroxy-5-metoxyfenylmetylovú skupinu,
    2-chinolylovú skupinu,
    2- [4-(N '-fenylureido)fenyl]etylovú skupinu,
    3- (benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    2- (N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3- (N'-fenylureido)propylovú skupinu,
    3-(fenylsulfónamido)fenylmetylovú skupinu,
    3-acetamidofenylmetylovú skupinu, 3-aminofenylmetylovú skupinu,
    3-benzamidofenylmetylovú skupinu,
    3-hydroxy-4-(N '-fcnylureidojfcny lmetylovú skupinu,
    3-indolylovú skupinu,
    3-metoxy-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3-metoxy-4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    3-metyl-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3- nitrofenylmetylovú skupinu,
    4- (benzamido)fenylmetylovú skupinu,
    4-(benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    4-(morfolinokarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-chlórfenyl)ureido]-3-metoxyfenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-etylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-metoxyfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-metyl-3-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-nitrofenyl)ureidoJfenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-pyridyl)-ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-terc-butylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-tiazolyl)urcido]-fcnylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-chlórfenyl)ureido]-fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-metoxyfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(4-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-benzylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-cyklohexylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-etylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-izopropylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-metylureidojfenylmety 1 ovú skupinu, 4-(N'-p-toluylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylamínovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N '-terc-butylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(fenylaminokarbonylaminometyl)fenylovú skupinu, 4-(fenylsulfónamido)fenylmetylovú skupinu 4-(terc-butoxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-acetamidofenylmetylovú skupinu, 4-aminofenylamínovú skupinu,
    4-aminofenylmetylovú skupinu, 4-benzamidofenylmetylovú skupinu,
    4-hydroxy-3 -nitrofenylmetylovú skupinu,
    4-metoxyfenyl-metylovú skupinu,
    4-nitrofenylamínovú skupinu, 4-nitrofenylmetylovú skupinu,
    4-fenacetamidofenylmetylovú skupinu, 4-fenylfenylmetylovú skupinu, 4-trifluórmetylfenylmetylovú skupinu, 4-[(2-N'-metylureido)benzamido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4- (N'-fenyl-N-metylguanidino)fenylmetylovú skupinu,
    5- (N'-fenylureido)pentylovú skupinu,
    5- (N'-terc-butylureido)pentylovú skupinu,
    2.2- difenylmetylovú skupinu,
    2.3- benzocyklobutylovú skupinu, 3,5-dimetoxy-4-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 4-( 1 -indolkarboxyamino)fenylmetylovú skupinu,
    6- metoxy-5-rN'-(2-metylfenyl)ureido]-2-pyridylmetylovú skupinu,
    4-( 1,3 -benzoxazol-2-ylamino)fenylmetylovú skupinu,
    4-( 1 ,3-imidazol-2-ylamino)fenylmetylovú skupinu,
    3-karboxy-1 -fenylpropylovú skupinu, 3-hydroxy-4-(2-metylfenyl)ureidofenylmetylovú skupinu,
    3- hydroxy-4-(2-chlórfenyl)ureidofenylmetylovú skupinu,
    6-(fenylureido)heptylovú skupinu,
    4- (fenylureido)butylovú skupinu,
    2- tienylmetylovú skupinu, 4-(2,6-dimetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-hydroxyfenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3- butoxy-4-(2-metylfenyl)urcidofenylmetylovú skupinu,
    3- butoxy-4-(fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    4- (N-2-pyrazinylureido)fenylmetylovú skupinu,
    2- fenyletinylovú skupinu,
    5- fenylureido-2-pyridylmetylovú skupinu,
    5-(2-metylfenylureido)-2-pyridylmetylovú skupinu, 4-(3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3- nitro-4-(fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3- acylamino-4-(fenylureidofenylmetylovú skupinu,
    4- (N,N-fenyl, metylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-hydroxyfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-acetylaminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-propionylaminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-benzyloxy-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(indolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    2- [4-(fenylureido)fenyl]oxiranylovú skupinu, 4-(N,N'-fenyl, metylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-dimetylaminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-benzimidazolylamino)fenylmctylovú skupinu, 4-(2-benzoxazolylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-benzothiazolylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(tetrahydrochinolinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    1.3- dimetyl-3-(fenylureido)butylovú skupinu, hydroxyetyltiometylovú skupinu, 4-(fenylureido)fenyletenylovú skupinu,
    3- amino-4-(fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    4- (4-hydroxyfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-aminofenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-[(2-metylureido)fenylureido]fenylovú skupinu, 4-(2-hydroxyfenylureido)-3-metoxyfenylmetylovú skupinu, 4-(2-metylsulfonylmetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-metylfenylureido)tetrahydro-2-pyrimidinylmetylovú skupinu,
    3- metoxy-4-(fenylureido)-2-pyridylmetylovú skupinu,
    4- (2-trifluórmetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-[2,4( 1 H,3H)-chinazolíndionyl]fenylmetylovú skupinu,
    4-tioureidofenylmetylovú skupinu, 4-(fenyltioureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(pyrolidinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-benzoxazolinonylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    4-(benzyloxyureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(tiazolidinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-benzoylureidofenylmetylovú skupinu, hydroxyureidofenylmetylovú skupinu,
    N ',N '-metyl,hydroxyureidofenylmetylovú skupinu,
    4-(N' -alylureidojfenylmety lo vú skupinu, 4-(3-pyrolidinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(l-pyrolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-pyrolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(propylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(metoxyureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(dimetylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-chinazolinylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-pyridylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-hydroxy-2-metylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(3-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(4-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-chinolinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(izochinolinylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,3-dimetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,5-dimetylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-metyl-4-fluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2-metyl-3-fluórfenyl)fenylmetylovú skupinu,
    3- karboxy-3-fenylpropylovú skupinu,
    4- (5-hydroxy-2-metylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(4-hydroxy-2-metylfenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(2,4-difluórfenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3 -dibenzofuranylkarbonylovú skupinu, 4-(fenoxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    3- fenylureidopropylovú skupinu,
    4- (fenylaminokarbonyloxy)fenylmetylovú skupinu, 4-cinamoylfenylmctyíovú skupinu, dibenzofuranylmetylovú skupinu, 4-(2-metylfenylaminokarbonyloxy)fenylmetylovú skupinu, (metylfenylureido)fenylamínovú skupinu, 4-(3-indolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu, 4-(fenylaminokarbonyl)fenylmctylovú skupinu, 4-fenylalkinylfenylmetylovú skupinu,
    4- (3-pyrolylkarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    5- nitrobenzofurán-2-ylovú skupinu,
    5-(2-metylfenylureido)benzofurán-2-ylovú skupinu,
    3- karboxy-3-fenylpropylovú skupinu,
    2-(3-pyridyl)tiazol-4-ylovú skupinu,
    2-(4-pyridyl)tiazol-4-ylovú skupinu,
    2- oxo-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]furán-3-ylovú skupinu,
    4- oxo-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]furán-3-ylovú skupinu,
    3- metoxy-4-(fenylkarbamoyloxy)fenylmetylovú skupinu,
    5- aminobenzofurán-2-ylovú skupinu, benzilylaminofenylmetylovú skupinu a
    4- [N-2-karboxyetyl-l-(l,3-benzodioxol-5-yl)amino-N-leucinylacetamidylfenylureidojfenylmetylovú skupinu.
  8. 8. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej kyanometylovú skupinu, cyklohexylmetylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylkarbonylovú skupinu, terc-butylamínovú skupinu,
    1- indanylovú skupinu,
    1 -fenyicyklopropylovú skupinu,
    2- (benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    2-[bis(fenylsulfonyl)amino]fenylmetylovú skupinu,
    2-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    2-aminofenylmetylovú skupinu,
    2-benzamidofenylmetylovú skupinu,
    2-bróm-4-hydroxy-5-metoxyfenylmetylovú skupinu,
    2-chinolinylovú skupinu,
    2- [4-(N'-fenylureido)fenyl]etylovú skupinu,
    3- (benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    3-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3-(N'-fenylureido)propylovú skupinu,
    3 -(fénylsulfónamido)fenylmetylovú skupinu,
    3 -acetamidofenylmetylovú skupinu,
    3-aminofenylmetylovú skupinu,
    3-benzamidofenylmetylovú skupinu,
    3-hydroxy-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3-indolylovú skupinu,
    3-metoxy-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3-mctoxy-4-[N'-(2-metylfcnyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    3-metyl-4-(N'fenylureido)fenylmetylovú skupinu,
    3- nitrofenylmetylovú skupinu,
    4- (2-aminobenzamido)fenylmetylovú skupinu,
    4-(benzamido)fenylmetylovú skupinu,
    4-(benzyloxykarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    4-(morfolinokarbonylamino)fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-chlórfenyl)ureido]-3-metoxyfenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-etylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N-(2-izopropylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-metoxyfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-metyl-3-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4-[N'-(2-nitrofenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-pyridyl)-ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-terc-butylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-tiazolyl)ureido]-fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(3-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N '-(2-mety lfenyljureido] fenylmetylovú skúp inu, 4-(N '-benzylureidojfeny lmetylovú skupinu, 4-(N'-cyklohexylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-etylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-izopropylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-metylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-p-tolylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylovú skupinu, 4-(fenylaminokarbonylaminometyl)fenylovú skupinu, 4-(fenylsulfónamido)fenylmetylovú skupinu 4-(terc-butoxykarbonylamino)fenylmelylovú skupinu, 4-acetamidofenylmetylovú skupinu, 4-aminofenylamínovú skupinu, 4-aminofenylmetylovú skupinu, 4-benzamidofenylmetylovú skupinu, 4-hydroxy-3-nitrofenylmetylovú skupinu, 4-metoxyfenylmetylovú skupinu, 4-nitrofenylamínovú skupinu, 4-nitrofenylmetylovú skupinu, 4-fenacctamidofenylmetylovú skupinu, 4-fenylfenylmetylovú skupinu, 4-trifluórmetylfenylmetylovú skupinu, 4-[(2-N'-metylureido)benzamido]fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    4- (N'-fenyl-N-metylguanidino)fenylmetylovú skupinu,
    5- (N'-fenylureido)pentylovú skupinu,
    5- (N'-tercbutylureido)pentylovú skupinu,
    2.2- difenylmetylovú skupinu,
    2.3- benzocyklobutylovú skupinu, 3,5-dimetoxy-4-hydroxyfenylmetylovú skupinu, 4-(l-indolkarboxyamino)fenylmetylovú skupinu,
    6- metoxy-5-[N'-(2-metylfenyl)ureido]-2-pyridylmetylovú skupinu, 4-(l,3-benzoxazol-2-ylamino)fenylmetylovú skupinu a
    4-( 1,3-imidazol-2-ylamino)fenylmetylovú skupinu.
  9. 9. Inhibitory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej 3-metoxy-4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-(2-metylfenyl)ureido)fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    3- metoxy-4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu,
    6-metoxy-5-[N'-(2-metylfenyl)ureido]-2-pyridylmetylovú skupinu,
    4- (N'-3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-(N'-3-metyl-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu a 3-metoxy-4-(N'-2-pyridylureido)fenylmetylovú skupinu.
  10. 10. Inhibitory adhézie buniek podľa nároku 9, kde R1 je substituent zo skupiny obsahujúcej 3-metoxy-4-(N'-fenylureido) fenyl metylovú skupinu, 4-(N'-fenylureido)fenylmetylovú skupinu, 4-(N'-(2-metylfenyl)ureido)fenylmetylovú skupinu, 4-[N'-(2-pyridyl)ureido]fenylmetylovú skupinu, 3-metoxy-4-[N'-(2-metylfenyl)ureido]fenylmetylovú skupinu a
    6-metoxy-5-[N'-(2-metylfenyl)ureido]-2-pyridylmetylovú skupinu.
  11. 11. Inhibitory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde Y je skupina -CO-.
  12. 12. Inhibitory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R2 je atóm vodíka, metylová skupina alebo fenacylová skupina.
  13. 13. Inhibitory adhézie buniek podľa nároku 12, kde R2 je atóm vodíka.
  14. 14. Inhibitory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej
    2- (metylsulfonyl)etylovú skupinu,
    3- (hydroxypropyltio)metylovú skupinu,
    4- (metylsulfonylamino)butylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu, aminometylovú skupinu, benzylovú skupinu, butylovú skupinu, hydroxymetylovú skupinu, izobutylovú skupinu, metylovú skupinu, metyltiometylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, propylovú skupinu, 4-(benzyloxykarbonylamino)butylovú skupinu, N,N-(metylpropargylamínovú skupinu,
    2-(metyltio)etylovú skupinu,
    2-(morfolino-N-karbonyl)etylovú skupinu,
    2-(N-morfolino)etylovú skupinu,
    2-(N,N-dimetylamino)etylovú skupinu,
    4-aminobutylovú skupinu, 4-benzyloxyfenylmetylovú skupinu,
    2-benzyltiometylovú skupinu, terc-butoxykarbonylaminometylovú skupinu, sek-butylovú skupinu, terc-butylovú skupinu, Ν,Ν-dimetylaminokarbonylmetylovú skupinu, 1,1-etanoskupinu,
    4-hydroxyfenylmetylovú skupinu,
    1- hydroxyetylovú skupinu,
    1 -metoxyetylovú skupinu, 4-metoxyfenylmetylovú skupinu, benzyloxymetylovú skupinu, benzyltiometylovú skupinu, karbonylmetylovú skupinu,
    2- metylsulfinyletylovú skupinu, morfolino-N-karbonylmetylovú skupinu, tiomorfolino-N-karbonylmetylovú skupinu,
    2-fenyletylovú skupinu, bočný reťazec asparagínu, bočný reťazec prolínu,
    2-tiazolylmetylovú skupinu, 4-(fenylureido)butylovú skupinu,
    4-(metylureido)butylovú skupinu, morfolinokarbonylmetyltiometylovú skupinu, morfolinoetyltiometylovú skupinu, 3-pyridylmetylovú skupinu,
    4-metylsulfonylaminobutylovú skupinu, hydroxymetyltiometylovú skupinu, 2-metylsulfonyletylovú skupinu, 4-propionylaminobutylovú skupinu, 4-etoxykarbonylaminobutylovú skupinu, metoxykarbonylaminobutylovú skupinu, karbometoxymetyltiometylovú skupinu, 4-terc-butylureidobutylovú skupinu, karboxymetyltiomctylovú skupinu, dimetylamidometyltiometylovú skupinu, acetylaminopropylovú skupinu, 3-metylureidopropylovú skupinu,
    4-biotinoylaminobutylovú skupinu, 2-tienylmetylovú skupinu,
    3- pyridylmetylovú skupinu, 4-trifluóracetylaminobutylovú skupinu, dimetylaminometyltiometylovú skupinu, dimetylaminoetyltiometylovú skupinu a 4-(dimetylaminoacetylamino)butylovú skupinu alebo v kombinácii s R* tvorí prolínový, azetidínový alebo pipekolínový kruh.
  15. 15. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 14, kde R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej 2-(metylsulfonyl)etylovú skupinu, 3-(hydroxypropyltio)metylovú skupinu, 4-(metylsulfonylamino)butylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu, aminometylovú skupinu, benzylovú skupinu, butylovú skupinu, hydroxymetylovú skupinu, izobutylovú skupinu, metylovú skupinu, metyltiometylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, propylovú skupinu, 4-(benzyloxykarbonylaminojbutylovú skupinu, N,N-(metylpropargyljamínovú skupinu, 2-(metyltio)etylovú skupinu, 2-(morfolino-N-karbonyl)etylovú skupinu, 2-(N-morfolino)etylovú skupinu, 2-(N,N-dimetylamino)etylovú skupinu, 4-aminobutylovú skupinu, 4-benzyloxyfenylmetylovú skupinu, 2-benzyltiometylovú skupinu, terc-butoxykarbonylamino metylovú skupinu, sek-butylovú skupinu, terc-butylovú skupinu, N,N-dimetylaminokarbonylmetylovú skupinu, 1,1-etanoskupinu, 4-hydroxyfenylmetylovú skupinu,
    1- hydroxyetylovú skupinu, 1-metoxyetylovú skupinu, 4-metoxyfenylmetylovú skupinu, benzyloxymetylovú skupinu, benzyltiometylovú skupinu, karbonylmetylovú skupinu,
    2- metylsulfinyletylovú skupinu, morfoIino-N-karbonylmetylovú skupinu, tiomorfolino-N-karbonylmetylovú skupinu, 2-fenyletylovú skupinu, bočný reťazec asparagínu, bočný reťazec prolínu a 2-tiazolylmetylovú skupinu.
  16. 16. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 14, kde R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej izobutylovú skupinu,
    2-(metyltio)etylovú skupinu, 3-(hydroxypropyltio)metylovú skupinu, 2-(metylsulfonyl)etylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu, 4-(metylsulfonylamino)butylovú skupinu a 4-(etoxykarbonylamino)butylovú skupinu.
  17. 17. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 16, kde R3 je substituent zo skupiny obsahujúcej izobutylovú skupinu,
    2- (metyltio)etylovú skupinu, 3-(hydroxypropyltio)metylovú skupinu, 2-(metylsulfonyl)etylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu a 4-(metylsulfonylamino)butylovú skupinu.
  18. 18. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej 4-karbometoxyfenylovú skupinu, 4-karboxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu,
    4- metoxyfenylovú skupinu, benzylovú skupinu, metylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, fenyletylovú skupinu,
    4-chlórfenylovú skupinu, 3,4-difluórfenylovú skupinu,
    3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 2-metoxyfenylovú skupinu,
    3- metoxyfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, 2-nitrofenylovú skupinu, 3-pyridylovú skupinu,
    4-fenoxyfenylovú skupinu, 4-etoxyfenylovú skupinu, 4-nitrofenylovú skupinu, 4-acetylaminofenylovú skupinu, 4-metylureidofenvlovú skupinu, 2-fluórfenyIovú skupinu, naftylovú skupinu, 3-fluórfenylovú skupinu, 3-nitrofenylovú skupinu, atóm vodíka, 2-nitrofenylovú skupinu, 4-kyanofenylovú skupinu,
    3-metoxyfenylovú skupinu, 4-metylsulfonylaminofenylovú skupinu,
    3- kyanofenylovú skupinu, 4-propionylaminofenylovú skupinu,
    4- aminofenylovú skupinu, 3-aminofenylovú skupinu,
    4-trifluórmetoxyfenylovú skupinu, 4-metylfenylovú skupinu,
    4-amino-3-nitrofenylovú skupinu, 4-hydroxy-3-metoxyfenylovú skupinu, 4-hexyloxyfenylovú skupinu, 4-metyltiofenylovú skupinu,
    3-furanylovú skupinu, 4-dimetylaminofenylovú skupinu,
    3- hydroxy-4-nitrofcnylovú skupinu, n-pentylovú skupinu, karboxymetylovú skupinu, 2-karboxyetylovú skupinu, etinylovú skupinu, 2-tienylovú skupinu, 2-propenylovú skupinu,
    2- propinylovú skupinu, metylovú skupinu a propylovú skupinu.
  19. 19. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 18, kde R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej 4-karbometoxyfenylovú skupinu,
    4- karboxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu,
    4-metoxyfenylovú skupinu, benzylovú skupinu, metylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, fenyletylovú skupinu,
    4-chlórfenylovú skupinu, 3,4-difluórfenylovú skupinu,
    3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 2-metoxyfenylovú skupinu,
    3- metoxyfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, 2-nitrofenylovú skupinu a 3-pyridylovú skupinu.
  20. 20. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 18, kde R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej 4-metoxyfenylovú skupinu,
    3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu,
    4- karboxyfenylovú skupinu, 4-karbometoxyfenylovú skupinu, fenyletylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, alylovú skupinu, etinylovú skupinu a 3,4-metyléndioxyfenylovú skupinu.
  21. 21. Inhibítor}' adhézie buniek podľa nároku 20, kde R4 je substituent zo skupiny obsahujúcej 4-metoxyfenylovú skupinu,
    3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu, 4-karboxyfenylovú skupinu, 4-karbometoxyfenylovú skupinu, fenyletylovú skupinu a fenylmetylovú skupinu.
  22. 22. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde Y je skupina -CO- alebo skupina -SO2-·
  23. 23. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 22. kde Y je skupina -CO-.
  24. 24. Inhibítory adhézie buniek podľa nároku 1 alebo 2, kde n je 1.
  25. 25. Inhibítory adhézie buniek zvolené zo skupiny obsahujúcej zlúčeniny:
    (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino(3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanin, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(4-metoxyfenyl-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(etylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(4-metoxyfenyl)-fl-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-rnetylfenylamino)karbonyl]amino](3-rnetoxyfenyl)]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-mctionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-ylj-fl-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyI]-L-metionyl-3-(4-metoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionínsulfonyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-(l-hydroxypropyl)cysteinyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-β-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucinyl-3-(4-fluórfenyl)-p-alanín, (S)-N6-acetyl-N2-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-lysyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino](3-pyridyl)]acetyl]-L-leucinyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N6-(metánsulfonyl)-N2-[[4-[[(2-metylfenyl)amino)karbonyl]amino]karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-lysyl-3-( 1,3-benzodioxol-5-yl}-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(4-karboxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino](3-metoxy-2-pyridyl)]acetyl]-L-leucinyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-β-alanín, (S)-N6-(metánsulfonyl)-N2-[[4-[[(2-metylfenyl)ainino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-lysyl-3-(4-karbometoxyfenyl)-β-alanín a (S)-N-[[4-[[(2metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(4-( l-fenetyl)-p-alanín.
  26. 26. Inhibítory adhézie buniek zvolené zo skupiny obsahujúcej zlúčeniny: (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetylj-L-leucyl-2-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N6-(metoxykarbonyl)-N2-[[4-[[(2metylfenyl)amino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-lysyl-3-(1,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyljacety 1] -L-leucyl-3 -(3,4-dimctoxy fény 1 )-fl-alanín, (S)-N-[[4-[[(l-dihydroindol)karbonyl]amino]fenyl]acetylj-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yľ)-p-alanín, (S)-N2-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-[(N,N-dimetylaminoetyl)-(cisteinyl)-3-( 1,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetylj-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)tiokarbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(4-karbometoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(4-karbometoxyfenylyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(l,3-benzimidazol)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-( 1,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanin, (S)-N-[[4-[[(l,3-benzoxazol)karbony1]amino]fenyl]acetylj-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-acetoxyfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyrolo)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(l ,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[alylkarbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(1,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acctyl]-L-leucyl-3-(etinyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(alyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-fluórfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfcnyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(4-fluórfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanin, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(metyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-p-alanín, (S)-N-[[4-[ 1 H-indol-2-yl-karbonylamino] fenyl] acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanin, (S)-N-[[4-[lH-indol-3-yl-karbonylamino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanin, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(4-metylmorfolinyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylarnino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanin, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín.
  27. 27. Inhibítory' adhézie buniek zvolené zo skupiny obsahujúcej zlúčeniny: (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N6-(metoxykarbonyl)-N2-[Í4-[[((2-metylfenyl)amino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-lysyl-3-( 1,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanin, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3 -(1,3 -benzodioxol-5-y l)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-metionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-metylfenylamino)karbonyl]amino]fenyl]acetyl]-L-lcucyl-3-(alyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(fenylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-P-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-leucyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-p-alanín, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-β-alanin, (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino](3-metoxyfenyl)]acetyl]-L-metionyl-3-(l,3-benzodioxol-5-yl)-β-alanín a (S)-N-[[4-[[(5-metyl-2-pyridylamino)karbonyl]amino]fenyl] acetyl]-L-metionyl-3 -(3,4-dimetoxy fény l)-p-alaní n.
  28. 28. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 27 v množstve, ktoré je účinné na prevenciu, inhibíciu alebo potlačenie adhézie buniek, a farmaceutický prijateľný nosič.
  29. 29. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 28, vyznačujúca sa tým, že navyše obsahuje účinnú látku zo skupiny obsahujúcej kortikosteroidy, bronchodilatanty, antiastmatiká, protizápalové zlúčeniny, antireumatiká, imunosupresanty, antimetabolity, imunomodulátory, antipsoriatiká a antidiabetiká.
  30. 30. Použitie zlúčeniny na prípravu liečiva na použitie pri prevencii, inhibícii alebo potlačení adhézie buniek pri cicavcoch, ktoré zahŕňa podávanie farmaceutického prípravku podľa nároku 28 alebo 29 uvedenému cicavcovi.
  31. 31. Použitie podľa nároku 30 na prevenciu, inhibíciu alebo potlačenie zápalov, spojených s adhéziou buniek.
  32. 32. Použitie podľa nároku 31 na prevenciu, inhibíciu alebo potlačenie imunitnej alebo autoimunitnej odozvy, spojenej s adhéziou buniek.
  33. 33. Použitie podľa nároku 30 na liečenie alebo prevenciu ochorení zo skupiny obsahujúcej astmu, artritídu, psoriázu, odmietanie cudzích tkanív pri transplantácii, roztrúsenú sklerózu, cukrovku a črevné zápaly.
  34. 34. Inhibítory adhézie buniek všeobecného vzorca (I)
    X je zvolené zo skupiny obsahujúcej skupinu -CO2H, -PO 2H, -SO2R5, -SO3H, -OPO’jH a -CO2R4, pričom R5 je zvolené zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, arylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou a alkenylovú alebo alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
    Y je skupina -CO-;
    R1 je arylová skupina alebo substituovaná aralkylová skupina;
    R2 je zvolené zo skupiny obsahujúcej atóm vodíka, arylovú skupinu, alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou;
    R3 je zvolené zo skupiny obsahujúcej alkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, cykloalkenylovú skupinu, aralkylovú skupinu, alkenylovú alebo alkinylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxyskupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkoxyskupinou, alkylovú skupinu substituovanú aralkoxy skupinou, alkylovú skupinu substituovanú aminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsubslituovanou alkyloxykarbonylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiolom, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú hydroxysubstituovanou alkyltioskupinou, alkylovú skupinu substituovanú tioalkoxyskupinou, alkylovú skupinu substituovanú acylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú alkylsulfonylaminoskupinou, alkylovú skupinu substituovanú arylsulfonylaminoskupinou, morfolinoalkylovú skupinu, tiomorfolinoalkylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú morfolinokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú tiomorfolinokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N-(alkyl, alkenyl alebo alkinyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N,N-(dialkyl, dialkenyl, dialkinyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú N,N-(alkyl, alkenyljaminokarbonylovou skupinou, alkylovú skupinu substituovanú karboxyskupinou, acylaminoalkylovú skupinu substituovanú dialkylamino skupinou a bočné reťazce aminokyselín zvolených z arginínu, asparagínu, glutamínu, S-metylcysteínu, metioninu a jeho sulfoxidového a sulfónového derivátu, glycínu, leucínu, izoleucínu, alo-izoleucínu, terc-leucínu, norleucínu, fenylalanínu. tyrozínu, tryptofánu, prolinu, alanínu, omitínu, histidínu, glutamínu, valínu, treonínu, serínu, beta-kyanoalanínu a alotreonínu; alebo R2 a R3 môžu spoločne s atómomami, ku ktorým sa viažu, tvoriť heterocyklus;
    R4 je zvolené zo skupiny obsahujúcej arylovú skupinu, alkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, alkenylovú skupinu, cyklolkenylovú skupinu, alkinylovú skupinu, alkylovú skupinu substituovanú arylovou skupinou, atóm vodíka, heterocyklylovú skupinu, heterocyklylkarbonylovú skupinu, amidoskupinu, mono- alebo dialkylaminokarbonylovú skupinu, mono- alebo diarylaminokarbonylovú skupinu, alkylarylaminokarbonylovú skupinu, diarylaminokarbonylovú skupinu, mono- alebo diacylaminokarbonylovú skupinu, aromatickú acylovú skupinu a alkylovú skupinu prípadne substituovanú substituentmi zvolenými zo skupiny obsahujúcej aminoskupinu, karboxyskupinu, hydroxyskupinu, merkaptoskupinu, mono- alebo dialkylaminoskupinu, mono- alebo diarylaminoskupinu, alkylarylaminoskupinu, mono- alebo diacylaminoskupinu, alkoxyskupinu, alkénoxyskupinu, aryloxyskupinu, tioalkoxyskupinu, tioalkénoxyskupinu, tioalkínoxyskupinu, tioaryloxy skupinu a heterocyklylovú skupinu a n je 1.
  35. 35. Zlúčenina podľa nároku 34, kde X je -CO2H.
  36. 36. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R1 je arylová skupina.
  37. 37. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R1 je aralkylová skupina para-substituovaná N-Ar’-ureidovou skupinou.
  38. 38. Zlúčenina podľa nároku 37, kde R1 je fenylmctylová skupina para-substituovaná N-Ar’-ureidovou skupinou.
  39. 39. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R2 je atóm vodíka, metylová skupina alebo fenylacylová skupina.
  40. 40. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R3 je zvolené zo skupiny obsahujúcej
    2-(metylsulfonyl)etylovú skupinu,
    3 -(hydroxypropyltio)metylovú skupinu, 4-(metylsulfonylamino)butylovú skupinu, 4-acetylaminobutylovú skupinu, aminometylovú skupinu, benzylovú skupinu, butylovú skupinu, hydroxymetylovú skupinu, izobutylovú skupinu, metylovú skupinu, metyltiometylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, propylovú skupinu,
    4-(benzyloxykarbonylamino)butylovú skupinu, N,N-(metylpropargylamínovú skupinu, 2-(metyItio)etylovú skupinu, 2-(N,N-dimetylamino)etylovú skupinu, 4-aminobutylovú skupinu, 4-benzyloxyfenylmetylovú skupinu,
    2-benzyltiometylovú skupinu, terc-butoxykarbonylaminometylovú skupinu, sek-butylovú skupinu, terc-butylovú skupinu,
    Ν,Ν-dimetylaminokarbonylmetylovú skupinu, 1,1-etanoskupinu,
    4-hydroxyfenylmetylovú skupinu,
    1-hydroxyetylovú skupinu,
    1- metoxyetylovú skupinu,
    4-metoxyfenylmetylovú skupinu, benzyloxymetylovú skupinu, benzyltiometylovú skupinu, karbonylmetylovú skupinu,
    2- metylsulfinyletylovú skupinu, morfolino-N-karbonylmetylovú skupinu, tiomorfolino-N-karbonylmetylovú skupinu, 2-fenyletylovú skupinu, bočný reťazec asparagínu, bočný reťazec prolínu,
    2- tiazolylmetyIovú skupinu, 4-(fenylureido)butylovú skupinu,
    4-(metylureido)butylovú skupinu, morfolinokarbonylmetyltiometylovú skupinu, morfolinoetyltiometylovú skupinu, 3-pyridylmetylovú skupinu,
    4-metylsulfonylaminobutylovú skupinu, hydroxymetyltiometylovú skupinu, 2-metylsulfonyletylovú skupinu, 4-propionylaminobutylovú skupinu, 4-etoxykarbonylaminobutylovú skupinu, metoxykarbonylaminobutylovú skupinu, karbometoxymetyltiometylovú skupinu, dietylamidometyltiometylovú skupinu, acetylaminopropylovú skupinu, 3-metylureidopropylovú skupinu,
    4-biotinoylaminobutylovú skupinu, 2-tienylmetylovú skupinu,
    3- pyridylmetylovú skupinu, 4-trifluóracetylaminobutylovú skupinu, dimetylaminometyltiometylovú skupinu, dimetylaminoetyltiometylovú skupinu a 4-(dimetylaminoacetylaminojbutylovú skupinu alebo v kombinácii s R2 tvorí prolínový, azetidínový alebo pipekolínový kruh.
  41. 41. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R4 je zvolené zo skupiny obsahujúcej 4-karbometoxyfenylovú skupinu,
    4- karboxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, benzylovú skupinu, metylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, fenyletylovú skupinu,
    4-chlórfenylovú skupinu, 3,4-difluórfenylovú skupinu,
    3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 2-metoxyfenylovú skupinu,
    3- metoxyfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu,
    2- nitrofenylovú skupinu, 3-pyridylovú skupinu,
    4- fenoxyfenylovú skupinu, 4-etoxyfenylovú skupinu, 4-nitrofenylovú skupinu, 4-acetylaminofenylovú skupinu, 4-metylureidofenylovú skupinu, 2-fluórfenylovú skupinu, naftylovú skupinu, 3-fluórfenylovú skupinu, 3-nitrofenylovú skupinu, atóm vodíka, 2-nitrofenylovú skupinu, 4-kyanofenylovú skupinu,
    3- metoxyfenylovú skupinu, 4-metylsulfonylaminofenylovú skupinu,
    3- kyanofenylovú skupinu, 4-propionylaminoskupinu,
    4- aminofenylovú skupinu, 3-aminofenylovú skupinu,
    4-trifluórmetoxyfenylovú skupinu, 4-metylfenylovú skupinu,
    4-amino-3-nitrofenylovú skupinu, 4-hydroxy-3-metoxyfenylovú skupinu, 4-hexyloxyfenylovú skupinu, 4-metyltiofenylovú skupinu,
    3-íúranylovú skupinu, 4-dimetylaminofenylovú skupinu, 3-hydroxy-4-nitrofenylovú skupinu, n-pentylovú skupinu, karboxymetylovú skupinu, 2-karboxyetylovú skupinu, etinylovú skupinu, 2-tienylovú skupinu, 2-propenylovú skupinu,
    2-propinylovú skupinu, metylovú skupinu a propylovú skupinu.
  42. 42. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R2 je atóm vodíka; R3 je zvolené zo skupiny obsahujúcej izobutylovú skupinu, 2-(metyltio)-etylovú skupinu, 3-(hydroxypropyltio)-metylovú skupinu, 2-(metylsulfonyl)-etylovú skupinu, 4-acetylamino-butylovú skupinu, 4-(metylsulfonylamino)-butylovú skupinu a 4-(etoxykarbonylamino)butylovú skupinu; a R4 je zvolené zo skupiny obsahujúcej 4-karbometoxyfenylovú skupinu, 4-karboxyfenylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, benzylovú skupinu, metylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, fenyletylovú skupinu, 4-chlórfenylovú skupinu, 3,4-difluórfenylovú skupinu, 3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 2-metoxyfenylovú skupinu, 3-metoxyfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, 2-nitrofenylovú skupinu a 3-pyridylovú skupinu.
  43. 43. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R1 je substituovaná arylalkylová skupina.
  44. 44. Zlúčenina podľa nároku 43, kde R1 je fenylmetylová skupina para-substituovaná N-Ar’-ureidovou skupinou.
  45. 45. Zlúčenina podľa nároku 34, kde R* je arylalkylová skupina para-substituovaná N-Ar’-ureidovou skupinou; R2 a R3 môžu spoločne s atómami, ku ktorým sa viažu, tvoriť heterocyklus; a R4 je zvolené zo skupiny obsahujúcej 4-karboxymctylfcnylovú skupinu, 4-karboxyfcnylovú skupinu, 4-fluórfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, benzylovú skupinu, metylovú skupinu, fenylovú skupinu, fenylmetylovú skupinu, fenyletylovú skupinu, 4-chlórfenylovú skupinu, 3,4-difluórfenylovú skupinu, 3,4-dimetoxyfenylovú skupinu, 2-metoxyfenylovú skupinu, 3-metoxyfenylovú skupinu, 4-metoxyfenylovú skupinu, 2-nitrofenylovú skupinu a 3-pyridylovú skupinu.
  46. 46. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 34 až 45 a farmaceutický prijateľný nosič.
  47. 47. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 34 až 46 a činidla zvoleného zo skupiny obsahujúcej kortikosteroidy, bronchodilatátory, anti-astmatické činidlá, protizápalové činidlá, protireumatické činidlá, imunosupresíva, antimetabolity, imunomodulátory, anti-psoriatické činidlá a anti-diabetiká na prípravu farmaceutickej kompozície na prevenciu, inhibíciu alebo potlačenie bunkovej adhézie u cicavcov.
  48. 48. Farmaceutická kompozícia účinná na prevenciu, inhibíciu alebo potlačenie adhézie buniek, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa nárokov 34 až 46 ako účinnú látku a farmaceutický prijateľný nosič.
SK987-97A 1995-01-23 1996-01-18 Inhibítory adhézie buniek, farmaceutická kompozícia, ktorá ich obsahuje, a ich použitie SK283724B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/376,372 US6306840B1 (en) 1995-01-23 1995-01-23 Cell adhesion inhibitors
PCT/US1996/001349 WO1996022966A1 (en) 1995-01-23 1996-01-18 Cell adhesion inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK98797A3 SK98797A3 (en) 1998-02-04
SK283724B6 true SK283724B6 (sk) 2003-12-02

Family

ID=23484763

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK987-97A SK283724B6 (sk) 1995-01-23 1996-01-18 Inhibítory adhézie buniek, farmaceutická kompozícia, ktorá ich obsahuje, a ich použitie

Country Status (29)

Country Link
US (5) US6306840B1 (sk)
EP (2) EP0805796B1 (sk)
JP (2) JP4129293B2 (sk)
KR (1) KR100413328B1 (sk)
CN (1) CN1192015C (sk)
AT (1) ATE229498T1 (sk)
AU (1) AU718926B2 (sk)
BG (1) BG63383B1 (sk)
BR (1) BR9606778A (sk)
CA (1) CA2211181A1 (sk)
CZ (1) CZ291556B6 (sk)
DE (1) DE69625332T2 (sk)
DK (1) DK0805796T3 (sk)
EA (2) EA003320B1 (sk)
EE (1) EE04111B1 (sk)
ES (1) ES2183937T3 (sk)
FI (1) FI973087A (sk)
HK (2) HK1005241A1 (sk)
HU (1) HU223350B1 (sk)
IL (1) IL116846A (sk)
MX (1) MX9705569A (sk)
NO (1) NO320914B1 (sk)
NZ (1) NZ336104A (sk)
PL (1) PL187313B1 (sk)
PT (1) PT805796E (sk)
RO (1) RO119885B1 (sk)
SK (1) SK283724B6 (sk)
TW (1) TW500714B (sk)
WO (1) WO1996022966A1 (sk)

Families Citing this family (196)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6306840B1 (en) * 1995-01-23 2001-10-23 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
US5849711A (en) * 1995-06-06 1998-12-15 Athena Neurosciences, Inc. Cathepsin and methods and compositions for inhibition thereof
JPH11506923A (ja) * 1995-06-06 1999-06-22 アセナ ニューロサイエンシーズ，インコーポレイテッド 新しいカテプシンならびにその阻害のための方法および組成物
US6312893B1 (en) 1996-01-23 2001-11-06 Qiagen Genomics, Inc. Methods and compositions for determining the sequence of nucleic acid molecules
US6027890A (en) 1996-01-23 2000-02-22 Rapigene, Inc. Methods and compositions for enhancing sensitivity in the analysis of biological-based assays
US6613508B1 (en) 1996-01-23 2003-09-02 Qiagen Genomics, Inc. Methods and compositions for analyzing nucleic acid molecules utilizing sizing techniques
DK0914605T3 (da) 1996-07-25 2007-09-10 Biogen Idec Inc Molekylemodel for VLA-4-inhibitorer
US6686350B1 (en) 1996-07-25 2004-02-03 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
DE19647380A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag 5-Ring-Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
DE19647382A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
DE19647381A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Neue Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
US6117901A (en) 1996-11-22 2000-09-12 Athena Neurosciences, Inc. N-(aryl/heteroarylacetyl) amino acid esters, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for use
US6642261B2 (en) 1997-11-21 2003-11-04 Athena Neurosciences, Inc. N-(aryl/heteroarylacety) amino acid esters, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6211235B1 (en) 1996-11-22 2001-04-03 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis
US6096782A (en) * 1996-11-22 2000-08-01 Athena Neurosciences, Inc. N-(aryl/heteroaryl) amino acid derivatives pharmaceutical compositions comprising same and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6191166B1 (en) 1997-11-21 2001-02-20 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods and compounds for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis
US6207710B1 (en) 1996-11-22 2001-03-27 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis
US6635632B1 (en) 1996-12-23 2003-10-21 Athena Neurosciences, Inc. Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6683075B1 (en) 1996-12-23 2004-01-27 Athena Neurosciences, Inc. Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use
US6291511B1 (en) 1997-05-29 2001-09-18 Merck & Co., Inc. Biarylalkanoic acids as cell adhesion inhibitors
WO1998053817A1 (en) * 1997-05-29 1998-12-03 Merck & Co., Inc. Biarylalkanoic acids as cell adhesion inhibitors
CA2291708A1 (en) * 1997-05-29 1998-12-03 Merck & Co., Inc. Sulfonamides as cell adhesion inhibitors
US6903075B1 (en) 1997-05-29 2005-06-07 Merck & Co., Inc. Heterocyclic amide compounds as cell adhesion inhibitors
US6221888B1 (en) 1997-05-29 2001-04-24 Merck & Co., Inc. Sulfonamides as cell adhesion inhibitors
JP2002501518A (ja) * 1997-05-30 2002-01-15 セルテック セラピューティックス リミテッド 抗炎症性チロシン誘導体
ES2206953T3 (es) 1997-06-23 2004-05-16 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Inhibidores de la adherencia celular mediada por alfa 4-beta 1.
CN1265669A (zh) * 1997-07-31 2000-09-06 伊兰药品公司 抑制由vla－4介导的白细胞粘着的化合物
US6291453B1 (en) 1997-07-31 2001-09-18 Athena Neurosciences, Inc. 4-amino-phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6939855B2 (en) * 1997-07-31 2005-09-06 Elan Pharmaceuticals, Inc. Anti-inflammatory compositions and method
US6559127B1 (en) 1997-07-31 2003-05-06 Athena Neurosciences, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
WO1999006436A1 (en) * 1997-07-31 1999-02-11 Elan Pharmaceuticals, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
PL338413A1 (en) * 1997-07-31 2000-11-06 Elan Pharm Inc Compound of 4-amino phenylalanine type inhibiting adhesion of leucocytes through the meditation of vla-4
US6362341B1 (en) 1997-07-31 2002-03-26 Athena Neurosciences, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US7030114B1 (en) 1997-07-31 2006-04-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6423688B1 (en) 1997-07-31 2002-07-23 Athena Neurosciences, Inc. Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6489300B1 (en) 1997-07-31 2002-12-03 Eugene D. Thorsett Carbamyloxy compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
CN1265672A (zh) * 1997-07-31 2000-09-06 伊兰药品公司 能抑制由vla－4介导的白细胞粘连的磺酰化二肽化合物
US6583139B1 (en) 1997-07-31 2003-06-24 Eugene D. Thorsett Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
CN1265670A (zh) * 1997-07-31 2000-09-06 伊兰药品公司 抑制vla－4介导的白细胞粘附的二肽和相关的化合物
EP0994895A1 (en) * 1997-07-31 2000-04-26 Elan Pharmaceuticals, Inc. Dipeptide compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
CN1133648C (zh) * 1997-07-31 2004-01-07 伊兰药品公司 抑制vla-4介导的白细胞粘附的取代的苯丙氨酸型化合物
US6492421B1 (en) 1997-07-31 2002-12-10 Athena Neurosciences, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
NZ502813A (en) * 1997-08-22 2002-10-25 F N-aroylphenylalanine derivatives as inhibitors of the interaction between a4 containing integrins and VCAM-1
US6229011B1 (en) 1997-08-22 2001-05-08 Hoffman-La Roche Inc. N-aroylphenylalanine derivative VCAM-1 inhibitors
US6455550B1 (en) 1997-08-22 2002-09-24 Hoffmann-La Roche Inc. N-alkanoylphenylalanine derivatives
EP1403247A1 (en) * 1997-08-22 2004-03-31 F.Hoffmann-La Roche Ag N-Alkanoylphenylalanine derivatives
DE19741235A1 (de) 1997-09-18 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19741873A1 (de) * 1997-09-23 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
US6069163A (en) * 1997-10-21 2000-05-30 Merck & Co., Inc. Azapeptide acids as cell adhesion inhibitors
CA2303848C (en) * 1997-10-31 2008-09-30 Rhone-Poulenc Rorer Limited Substituted anilides
GB9723789D0 (en) * 1997-11-12 1998-01-07 Zeneca Ltd Chemical compounds
US6020347A (en) * 1997-11-18 2000-02-01 Merck & Co., Inc. 4-substituted-4-piperidine carboxamide derivatives
DE19751251A1 (de) 1997-11-19 1999-05-20 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmezeutische Präparate
US6191171B1 (en) 1997-11-20 2001-02-20 Merck & Co., Inc. Para-aminomethylaryl carboxamide derivatives
US6090841A (en) * 1997-11-21 2000-07-18 Merck & Co., Inc. Substituted pyrrole derivatives as cell adhesion inhibitors
US6645939B1 (en) 1997-11-24 2003-11-11 Merck & Co., Inc. Substituted β-alanine derivatives as cell adhesion inhibitors
DE69824037T2 (de) * 1997-11-24 2005-06-02 Merck & Co., Inc. Beta-alanin-derivate als zell-adhäsions-inhibitoren
US6423689B1 (en) 1997-12-22 2002-07-23 Warner-Lambert Company Peptidyl calcium channel blockers
WO1999033789A1 (en) * 1997-12-23 1999-07-08 Aventis Pharma Limited SUBSTITUTED β-ALANINES
SI0928790T1 (en) * 1998-01-02 2003-06-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Thiazole derivatives
US6100282A (en) * 1998-01-02 2000-08-08 Hoffman-La Roche Inc. Thiazole derivatives
US6197794B1 (en) * 1998-01-08 2001-03-06 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
MY153569A (en) * 1998-01-20 2015-02-27 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Inhibitors of ?4 mediated cell adhesion
US6407065B1 (en) 1998-01-23 2002-06-18 Novartis Ag VLA-4 antagonists
IL137329A0 (en) * 1998-01-23 2001-07-24 Novartis Ag Vla-4 antagonists
US6329372B1 (en) 1998-01-27 2001-12-11 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
GB9805655D0 (en) * 1998-03-16 1998-05-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6521626B1 (en) 1998-03-24 2003-02-18 Celltech R&D Limited Thiocarboxamide derivatives
AU3563799A (en) * 1998-04-16 1999-11-01 Texas Biotechnology Corporation Compounds that inhibit the binding of integrins to their receptors
DE19821483A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
GB9811159D0 (en) 1998-05-22 1998-07-22 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
DE69913687T2 (de) 1998-05-28 2004-10-07 Biogen Inc Ein VLA-4-Inhibitor: oMePUPA-V
GB9811969D0 (en) * 1998-06-03 1998-07-29 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6958330B1 (en) 1998-06-22 2005-10-25 Elan Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic α-amino-ε-caprolactams and related compounds
US6774125B2 (en) 1998-06-22 2004-08-10 Elan Pharmaceuticals, Inc. Deoxyamino acid compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6569851B1 (en) 1998-06-22 2003-05-27 Elan Pharmaceutials, Inc. Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6552013B1 (en) 1998-06-22 2003-04-22 Elan Pharmaceuticals, Inc. Deoxyamino acid compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6509331B1 (en) 1998-06-22 2003-01-21 Elan Pharmaceuticals, Inc. Deoxyamino acid compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6528505B1 (en) 1998-06-22 2003-03-04 Elan Pharmaceuticals, Inc. Cyclic amino acid compounds pharmaceutical compositions comprising same and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
TW591026B (en) * 1998-06-23 2004-06-11 Upjohn Co Inhibitors of alpha4beta1 mediated cell adhesion
US6685617B1 (en) 1998-06-23 2004-02-03 Pharmacia & Upjohn Company Inhibitors of α4β1 mediated cell adhesion
SK20052000A3 (sk) * 1998-06-30 2002-08-06 Pfizer Products Inc. Nepeptidové inhibítory VLA-4 dependentnej bunkovej väzby použiteľné pri liečení zápalových, autoimunitných a respiračných chorôb
GB9814414D0 (en) 1998-07-03 1998-09-02 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6352977B1 (en) 1998-07-13 2002-03-05 Aventis Pharma Limited Substituted β-alanines
GB9916374D0 (en) 1998-07-23 1999-09-15 Zeneca Ltd Chemical compounds
EP1133484A2 (en) * 1998-07-23 2001-09-19 AstraZeneca AB Heterocyclic derivatives and their use as integrin inhibitors
GB9821061D0 (en) 1998-09-28 1998-11-18 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9821222D0 (en) 1998-09-30 1998-11-25 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
CN1211375C (zh) * 1998-10-22 2005-07-20 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 噻唑衍生物
GB9825652D0 (en) 1998-11-23 1999-01-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9826174D0 (en) 1998-11-30 1999-01-20 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
EP1144365B1 (en) * 1998-12-22 2004-03-17 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Inhibitors of alpha-4 beta-1 mediated cell adhesion
JP2002535314A (ja) 1999-01-22 2002-10-22 エラン ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド Ｖｌａ−４により媒介される白血球接着を阻害する化合物
CA2359112A1 (en) 1999-01-22 2000-07-27 Elan Pharmaceuticals, Inc. Fused ring heteroaryl and heterocyclic compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
US6436904B1 (en) 1999-01-25 2002-08-20 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
MXPA01007394A (es) * 1999-01-25 2002-04-09 Wyeth Corp Compuestos que inhiben la adhesion de leucocitos mediada mediante alfa4 beta1 integrina y cd49d/cd29 (vla-4).
US6407066B1 (en) 1999-01-26 2002-06-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Pyroglutamic acid derivatives and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
DE60027700T2 (de) 1999-02-16 2007-05-03 Aventis Pharma Ltd., West Malling Bicyclische verbindungen und ihre verwendung als integrinrezeptorliganden
ID30057A (id) 1999-02-18 2001-11-01 Hoffmann La Roche Turunan fenilalaninol
HUP0200155A3 (en) 1999-02-18 2005-04-28 Hoffmann La Roche Thioamide derivatives, pharmaceutical compositions containing them and their use
DE60023853T2 (de) * 1999-03-12 2006-05-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Aromatische heterozyklische verbindungen als antientzündungwirkstoffe
GB9909409D0 (en) * 1999-04-24 1999-06-23 Zeneca Ltd Chemical compounds
US6972296B2 (en) 1999-05-07 2005-12-06 Encysive Pharmaceuticals Inc. Carboxylic acid derivatives that inhibit the binding of integrins to their receptors
US6723711B2 (en) 1999-05-07 2004-04-20 Texas Biotechnology Corporation Propanoic acid derivatives that inhibit the binding of integrins to their receptors
DK1176956T3 (da) * 1999-05-07 2008-05-26 Encysive Pharmaceuticals Inc Carboxylsyrederivater, som inhiberer bindingen af integriner til deres receptorer
US6518283B1 (en) 1999-05-28 2003-02-11 Celltech R&D Limited Squaric acid derivatives
US6756378B2 (en) 1999-06-30 2004-06-29 Pharmacopeia Drug Discovery, Inc. VLA-4 inhibitor compounds
BR0012068A (pt) * 1999-06-30 2002-05-14 Daiichi Seiyaku Co Compostos inibidores de vla-4
CN1376143A (zh) * 1999-07-26 2002-10-23 东丽株式会社 羧酸衍生物及以其作为有效成分的粘连分子抑制剂
PL354063A1 (en) 1999-08-13 2003-12-15 Biogen, Inc.Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
US6534513B1 (en) 1999-09-29 2003-03-18 Celltech R&D Limited Phenylalkanoic acid derivatives
US6849639B2 (en) * 1999-12-14 2005-02-01 Amgen Inc. Integrin inhibitors and their methods of use
DE60043308D1 (de) 1999-12-16 2009-12-24 Biogen Idec Inc Verfahren zur behandlung der schädigung des zentralnervensystems durch ischämie oder durch hämorrhagie mit antagonisten von alpha4 integrin
US6455539B2 (en) 1999-12-23 2002-09-24 Celltech R&D Limited Squaric acid derivates
DE60018213T2 (de) * 1999-12-27 2005-12-29 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Substituierte aminoalkylamid-derivate als antagonisten des follikel-stimulierenden hormons
KR20020067050A (ko) * 1999-12-28 2002-08-21 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 염증성, 자기면역 및 호흡기 질환의 치료에 유용한브이엘에이-4 의존성 세포 결합의 비펩티드계 억제제
WO2001079173A2 (en) 2000-04-17 2001-10-25 Celltech R & D Limited Enamine derivatives as cell adhesion molecules
DE10019755A1 (de) * 2000-04-20 2001-11-08 Bayer Ag Neue Aminoaryl/cycloalkylcarbonsäuren als Integrinantagonisten
CA2781858C (en) * 2000-05-12 2015-03-31 Genzyme Corporation Modulators of tnf-.alpha. signaling
US6545013B2 (en) 2000-05-30 2003-04-08 Celltech R&D Limited 2,7-naphthyridine derivatives
US6403608B1 (en) 2000-05-30 2002-06-11 Celltech R&D, Ltd. 3-Substituted isoquinolin-1-yl derivatives
EP1301488A1 (en) 2000-07-07 2003-04-16 Celltech R&amp;D Limited Squaric acid derivatives containing a bicyclic heteroaromatic ring as integrin antagonists
CA2417059A1 (en) 2000-08-02 2002-02-07 Celltech R&D Limited 3-substituted isoquinolin-1-yl derivatives
BRPI0113331B8 (pt) 2000-08-18 2021-05-25 Ajinomoto Kk derivados de fenilalanina ou seus sais parmaceuticamente aceitáveis, antagonista de integrina alfa 4, agente terapêutico ou agente preventivo para doenças inflamatórias, e, composição farmacêutica
MY129000A (en) 2000-08-31 2007-03-30 Tanabe Seiyaku Co INHIBITORS OF a4 MEDIATED CELL ADHESION
DE10063173A1 (de) * 2000-12-18 2002-06-20 Merck Patent Gmbh Harnstoff- und Urethanderivate
EP1343751A2 (en) 2000-12-20 2003-09-17 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
JP2005506949A (ja) 2000-12-20 2005-03-10 ブリストル−マイヤーズ・スクイブ・ファーマ・カンパニー ケモカイン受容体の調節剤としてのジアミン
IL156064A0 (en) 2000-12-28 2003-12-23 Daiichi Seiyaku Co Vla-4 inhibitors
DE10105077A1 (de) * 2001-02-05 2002-08-08 Febit Ferrarius Biotech Gmbh Hybrid-Schutzgruppe
DE10111877A1 (de) 2001-03-10 2002-09-12 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE10112771A1 (de) * 2001-03-16 2002-09-26 Merck Patent Gmbh Inhibitoren des Integrins alpha¶v¶beta¶6¶
DE10127041A1 (de) * 2001-06-02 2002-12-05 Merck Patent Gmbh Integrinantagonisten
US6844028B2 (en) 2001-06-26 2005-01-18 Accelr8 Technology Corporation Functional surface coating
US7501157B2 (en) 2001-06-26 2009-03-10 Accelr8 Technology Corporation Hydroxyl functional surface coating
GB2377933A (en) 2001-07-06 2003-01-29 Bayer Ag Succinic acid derivatives useful as integrin antagonists
DE10137595A1 (de) 2001-08-01 2003-02-13 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
CA2494870A1 (en) * 2001-08-06 2003-03-06 The Regents Of The University Of California Methods for inhibiting angiogenesis
US20040191926A1 (en) * 2001-09-26 2004-09-30 Zhong-Yin Zhang Ptp1b inhibitors and ligands
EP1297830A1 (en) * 2001-09-28 2003-04-02 Flamma Fabbrica Lombarda Ammino Acidi S.p.a. Use of alpha- or beta-amino acids, of the corresponding esters or of dipeptides of these amino acids with histidine derivatives in the prevention or treatment of tissue damage caused by a atmospheric ozone
DE10154280A1 (de) * 2001-11-05 2003-05-15 Wilex Ag Antagonisten für alpha¶4¶-Integrine
AR038136A1 (es) 2002-01-24 2004-12-29 Merck Frosst Canada Inc Cicloalcanindoles con sustitucion con fluor composiciones que contienen estos compuestos y metodos de tratamiento
DE10204789A1 (de) * 2002-02-06 2003-08-14 Merck Patent Gmbh Inhibitoren des Integrins alpha¶v¶beta6
MY140707A (en) * 2002-02-28 2010-01-15 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Process for preparing a phenylalanine derivative and intermediates thereof
TW200307671A (en) 2002-05-24 2003-12-16 Elan Pharm Inc Heteroaryl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by α 4 integrins
TWI281470B (en) 2002-05-24 2007-05-21 Elan Pharm Inc Heterocyclic compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by alpha4 integrins
AU2003265398A1 (en) * 2002-08-09 2004-02-25 Transtech Pharma, Inc. Aryl and heteroaryl compounds and methods to modulate coagulation
AU2003284984B2 (en) 2002-10-30 2008-10-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Gamma-aminoamide modulators of chemokine receptor activity
DK1562571T3 (da) * 2002-11-21 2011-12-05 Genzyme Corp Kombination af et diamidderivat og immunsuppressive midler til hæmning af transplantatafstødning
WO2004047825A1 (en) * 2002-11-21 2004-06-10 Genzyme Corporation Use of diamide derivatives for inhibiting chronic tissue transplant rejection
AU2004251750A1 (en) * 2003-06-25 2005-01-06 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis
US7626985B2 (en) * 2003-06-27 2009-12-01 Broadcom Corporation Datagram replication in internet protocol multicast switching in a network device
WO2005009992A1 (ja) 2003-07-24 2005-02-03 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. シクロヘキサンカルボン酸類
US7208601B2 (en) * 2003-08-08 2007-04-24 Mjalli Adnan M M Aryl and heteroaryl compounds, compositions, and methods of use
US7501538B2 (en) * 2003-08-08 2009-03-10 Transtech Pharma, Inc. Aryl and heteroaryl compounds, compositions and methods of use
AU2004278748B2 (en) 2003-09-29 2008-09-11 The Regents Of The University Of California Methods for altering hematopoietic progenitor cell adhesion, differentiation, and migration
MXPA06009099A (es) * 2004-02-10 2007-02-02 Johnson & Johnson Piridazinona ureas como antagonistas de las integrinas alfa-4.
CA2555594A1 (en) * 2004-02-10 2005-08-25 Janssen Pharmaceutica N.V. Pyridazinones as antagonists of a4 integrins
US7419666B1 (en) 2004-02-23 2008-09-02 Massachusetts Eye And Ear Infirmary Treatment of ocular disorders
US20050234261A1 (en) * 2004-04-14 2005-10-20 Honeywell International Inc. Process for preparing cinnamic acids and alkyl esters thereof
WO2005114197A2 (en) * 2004-04-15 2005-12-01 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Activity-based probes for protein tyrosine phosphatases
US7196112B2 (en) 2004-07-16 2007-03-27 Biogen Idec Ma Inc. Cell adhesion inhibitors
PE20070505A1 (es) * 2005-07-11 2007-05-15 Wyeth Corp Inhibidores de glutamato de metaloproteinasas de matriz y agrecanasas
NZ567270A (en) 2005-09-29 2011-06-30 Elan Pharm Inc Pyrimidinyl amide compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
CN101273035A (zh) 2005-09-29 2008-09-24 伊兰制药公司 抑制由vla-4介导的白细胞粘附的氨基甲酸酯化合物
GT200600305A (es) * 2005-10-13 2007-02-26 Métodos para preparar derivados de acido glutamico
WO2007092471A2 (en) 2006-02-03 2007-08-16 The Regents Of The University Of California Methods for inhibition of lymphangiogenesis and tumor metastasis
EA017110B1 (ru) 2006-02-27 2012-09-28 Элан Фамэсьютикэлс, Инк. ПИРИМИДИНИЛСУЛЬФОНАМИДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ (ВАРИАНТЫ), СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПИРИМИДИНИЛСУЛЬФОНАМИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ (ВАРИАНТЫ), ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ, ОПОСРЕДОВАННОГО ИНТЕГРИНОМ α4, СПОСОБ СНИЖЕНИЯ И/ИЛИ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО КОМПОНЕНТА ЗАБОЛЕВАНИЯ ИЛИ АУТОИММУННОГО ОТВЕТА
AU2008219007A1 (en) 2007-02-20 2008-08-28 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating multiple sclerosis by administration of alpha-fetoprotein in combination with an integrin antagonist
US20090180951A1 (en) * 2007-12-12 2009-07-16 Molecular Insight Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of integrin vla-4
PL2288715T3 (pl) 2008-04-11 2015-03-31 Merrimack Pharmaceuticals Inc Łączniki będące albuminą surowicy ludzkiej i ich koniugaty
JP2012502927A (ja) 2008-09-22 2012-02-02 メルク カナダ インコーポレイテッド Ｃｒｔｈ２受容体拮抗薬としてのインドール誘導体
KR20110112301A (ko) 2008-11-18 2011-10-12 메리맥 파마슈티컬즈, 인크. 인간 혈청 알부민 링커 및 그 콘쥬게이트
SI2370442T1 (sl) 2008-11-26 2013-06-28 Pfizer Inc. 3-aminociklopentankarboksiamidi kot modulatorji kemokinskega receptorja
US20100204221A1 (en) 2009-02-09 2010-08-12 Hariprasad Vankayalapati Pyrrolopyrimidinyl axl kinase inhibitors
EP2401269B1 (en) 2009-02-24 2014-01-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Indole derivatives as crth2 receptor antagonists
MX2011011326A (es) 2009-04-27 2012-02-13 Elan Pharm Inc Antagonistas de piridinona de las integrinas alfa-4.
WO2011020874A1 (en) 2009-08-20 2011-02-24 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Vla-4 as a biomarker for prognosis and target for therapy in duchenne muscular dystrophy
KR20120115262A (ko) * 2009-11-11 2012-10-17 쓰리엠 이노베이티브 프로퍼티즈 캄파니 중합체 조성물 및 그의 제조 방법 및 물품
GB0922014D0 (en) * 2009-12-17 2010-02-03 Ge Healthcare Ltd Novel integrin binders
EP2627178B1 (en) 2010-10-11 2018-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Quinazolinone-type compounds as crth2 antagonists
KR20130133219A (ko) 2010-12-23 2013-12-06 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Crth₂ 수용체 조절제로서의 퀴녹살린 및 아자-퀴녹살린
CN103619170B (zh) 2011-05-04 2016-07-06 默沙东公司 含有氨基-吡啶的脾酪氨酸激酶(syk)抑制剂
AR086931A1 (es) 2011-06-17 2014-01-29 Merck Sharp & Dohme Tetrahidroquinolinas condensadas con cicloalquilo como moduladores de receptores de crth
EP2763975B1 (en) 2011-10-05 2016-04-06 Merck Sharp & Dohme Corp. 3-pyridyl carboxamide-containing spleen tyrosine kinase (syk) inhibitors
MX2014004025A (es) 2011-10-17 2014-08-01 Univ Muenster Wilhelms Metodos de valoracion de riesgo de lmp y aparatos relacionados.
CN104302630A (zh) 2012-04-16 2015-01-21 阿勒根公司 作为甲酰肽受体2调节剂的(2-脲基乙酰氨基)烷基衍生物
WO2014036520A1 (en) 2012-08-30 2014-03-06 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies comprising anti-erbb3 agents
WO2015136468A1 (en) 2014-03-13 2015-09-17 Prothena Biosciences Limited Combination treatment for multiple sclerosis
WO2018140510A1 (en) 2017-01-25 2018-08-02 Biogen Ma Inc. Compositions and methods for treatment of stroke and other cns disorders
US10875875B2 (en) 2017-04-26 2020-12-29 Aviara Pharmaceuticals, Inc. Propionic acid derivatives and methods of use thereof
EP3681882A1 (en) 2017-09-13 2020-07-22 Amgen Inc. Bisamide sarcomere activating compounds and uses thereof
US20190330141A1 (en) * 2018-04-30 2019-10-31 The Procter & Gamble Company Compositions With A Cooling Effect
EP3877085A1 (en) * 2018-11-08 2021-09-15 Katholieke Universiteit Leuven Screening and sorting of single cells
CN113330013B (zh) 2019-01-10 2022-12-27 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 杂环化合物盐及其应用
EP4284947A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods of assessing the risk of developing progressive multifocal leukoencephalopathy in patients treated with vla-4 antagonists

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4725583A (en) * 1985-01-23 1988-02-16 Abbott Laboratories Functionalized peptidylaminoalcohols
US4826815A (en) * 1985-05-17 1989-05-02 Abbott Laboratories Renin inhibiting compounds
CA2043741C (en) 1990-06-07 2003-04-01 Kiyofumi Ishikawa Endothelin antagonistic peptide derivatives
US5192746A (en) 1990-07-09 1993-03-09 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Cyclic cell adhesion modulation compounds
US5260277A (en) 1990-09-10 1993-11-09 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
WO1992008464A1 (en) 1990-11-15 1992-05-29 Tanabe Seiyaku Co. Ltd. Substituted urea and related cell adhesion modulation compounds
DE69226820T2 (de) 1991-06-21 1999-05-12 Merck & Co., Inc., Rahway, N.J. Peptidylderivate als Inhibitoren von Interleukin-1B-konvertierenden Enzymen
WO1993008823A1 (en) 1991-11-06 1993-05-13 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
AU3141693A (en) 1991-11-22 1993-06-15 Friedman, Mark M. Non-peptidic surrogates of the arg-gly-asp sequence and pharmaceutical compositions comprising them
WO1993012809A1 (en) * 1991-12-24 1993-07-08 Fred Hutchinson Cancer Research Center Competitive inhibition of high-avidity alpha4-beta1 receptor using tripeptide ldv
DE4212304A1 (de) 1992-04-13 1993-10-14 Cassella Ag Asparaginsäurederivate, ihre Herstellung und Verwendung
IL102646A (en) 1992-07-26 1996-05-14 Yeda Res & Dev Non-peptidic surrogates of the ldv sequence and pharmaceutical compositions comprising them
WO1994015958A2 (en) 1993-01-08 1994-07-21 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Peptide inhibitors of cell adhesion
US5314902A (en) * 1993-01-27 1994-05-24 Monsanto Company Urea derivatives useful as platelet aggregation inhibitors
US6268380B1 (en) * 1993-02-19 2001-07-31 G. D. Searle & Co. Urea derivatives useful as platelet aggregation inhibitors
KR960701633A (ko) 1993-04-09 1996-03-28 가쯔히꼬 나까노 면역조절제, 세포 접착 억제제, 및 자기면역 질병의 치료 및 예방제(immunomo-dulator, cell adhesion inhibitor, and agent for treating and preventing autoimmune diseases)
IT1270882B (it) * 1993-10-05 1997-05-13 Isagro Srl Oligopeptidi ad attivita' fungicida
WO1995015973A1 (en) 1993-12-06 1995-06-15 Cytel Corporation Cs-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
US5434188A (en) 1994-03-07 1995-07-18 Warner-Lambert Company 1-ether and 1-thioether-naphthalene-2-carboxamides as inhibitors of cell adhesion and as inhibitors of the activation of HIV
IT1271026B (it) * 1994-10-21 1997-05-26 Isagro Ricerca Srl Derivati dell'acido b-amminopropionico ad attivita' fungicida
US6306840B1 (en) * 1995-01-23 2001-10-23 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
US7001921B1 (en) * 1995-01-23 2006-02-21 Biogen Idec Ma Inc. Cell adhesion inhibitors
DK0914605T3 (da) * 1996-07-25 2007-09-10 Biogen Idec Inc Molekylemodel for VLA-4-inhibitorer

Also Published As

Publication number Publication date
TW500714B (en) 2002-09-01
EP0805796B1 (en) 2002-12-11
DE69625332T2 (de) 2003-10-16
JP4129293B2 (ja) 2008-08-06
AU718926B2 (en) 2000-05-04
KR19980701672A (ko) 1998-06-25
IL116846A0 (en) 1996-07-23
CA2211181A1 (en) 1996-08-01
HU223350B1 (hu) 2004-06-28
NO973384L (no) 1997-09-19
EA003320B1 (ru) 2003-04-24
US20060166866A1 (en) 2006-07-27
EA200200844A1 (ru) 2002-12-26
US6376538B1 (en) 2002-04-23
DK0805796T3 (da) 2003-03-31
EP0805796A1 (en) 1997-11-12
EA199700135A1 (ru) 1997-12-30
PL321848A1 (en) 1997-12-22
US20030018016A1 (en) 2003-01-23
CN1192015C (zh) 2005-03-09
EP1142867A2 (en) 2001-10-10
CN1177343A (zh) 1998-03-25
AU4911596A (en) 1996-08-14
IL116846A (en) 2002-11-10
CZ291556B6 (cs) 2003-04-16
NO320914B1 (no) 2006-02-13
EE04111B1 (et) 2003-08-15
RO119885B1 (ro) 2005-05-30
FI973087A (fi) 1997-09-22
EE9700172A (et) 1998-02-16
HUP9702461A3 (en) 1999-08-30
NO973384D0 (no) 1997-07-22
PL187313B1 (pl) 2004-06-30
FI973087A0 (fi) 1997-07-22
US6624152B2 (en) 2003-09-23
JPH10513160A (ja) 1998-12-15
PT805796E (pt) 2003-04-30
DE69625332D1 (de) 2003-01-23
BR9606778A (pt) 1998-01-06
US6306840B1 (en) 2001-10-23
BG63383B1 (bg) 2001-12-29
HUP9702461A2 (hu) 1998-04-28
US6630512B2 (en) 2003-10-07
ES2183937T3 (es) 2003-04-01
ATE229498T1 (de) 2002-12-15
HK1041477A1 (zh) 2002-07-12
NZ336104A (en) 2001-01-26
CZ234097A3 (cs) 1998-03-18
US20030083267A1 (en) 2003-05-01
JP2008013574A (ja) 2008-01-24
MX9705569A (es) 1997-11-29
SK98797A3 (en) 1998-02-04
WO1996022966A1 (en) 1996-08-01
HK1005241A1 (en) 1998-12-31
BG101841A (en) 1998-04-30
KR100413328B1 (ko) 2004-06-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK283724B6 (sk) Inhibítory adhézie buniek, farmaceutická kompozícia, ktorá ich obsahuje, a ich použitie
EP0917462B1 (en) Cell adhesion inhibitors
US6949534B2 (en) Cell adhesion inhibitors
KR20010034317A (ko) Ｖｌａ-4 길항제
US7001921B1 (en) Cell adhesion inhibitors
AU766538B2 (en) Cell adhesion inhibitors
AU9133001A (en) Cell adhesion inhibitors