ES2206953T3 - Inhibidores de la adherencia celular mediada por alfa 4-beta 1. - Google Patents

Inhibidores de la adherencia celular mediada por alfa 4-beta 1.

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Thomas J. Coulter Pharmaceutical Lobl
Gil Rishton
Bradley Teegarden
Alex Polinsky
Masafumi Yamagishi
Steven P. Tanis
Jed F. Fisher
Edward W. Thomas
Robert A. Chrusciel
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Tanabe Seiyaku Co Ltd
Pharmacia and Upjohn Co
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Tanabe Seiyaku Co Ltd
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Upjohn Co
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Abstract

La presente invención se refiere a pequeñas moléculas que tienen la fórmula (I), que son potentes inhibidores de la adhesión inducida por {al}4{be}1 bien a VCAM o a CS-1 y que se pueden usar para tratamiento o prevención de los trastornos inducidos por la adhesión de {al}4{be}1en mamíferos tales como los humanos.

Description

Inhibidores de la adherencia celular mediada por \alpha_{4}-\beta_{1}.
Antecedentes de la invención Campo de la invención
La presente invención se refiere a pequeñas moléculas que son potentes inhibidores de la adhesión mediada por \alpha_{4}\beta_{1} bien VCAM o a CS-1 y que podrían ser útiles para el tratamiento de las enfermedades inflamatorias.
Descripción de la técnica relacionada
La matriz extracelular (ECM) es el componente principal del tejido conectivo que proporciona integridad estructural, y promueve la migración celular y la diferenciación. Como parte de estas funciones, se ha mostrado que las moléculas de la matriz extracelular tales como fibronectina, colágeno, laminina, factor de von Willebrand, trombospondina, fibrinógeno, y tenascina mantienen la adhesión de las células in vitro. Esta interacción adhesiva es crítica para diversos procesos biológicos que incluyen hemóstasis, trombosis, cicatrización de heridas, metástasis tumoral, inmunidad e inflamación.
La fibronectina (FN) constituye la molécula ECM prototipo. El sitio de unión de la célula más importante en la molécula de fibronectina se ha reproducido sintéticamente con la secuencia aminoácida arginina-glicina-ácido aspártico o RGD utilizando nomenclatura de letras únicas. Los péptidos conteniendo la secuencia RGD que inhiben o promueven la adhesión celular se han descrito (patentes USA Nos 4.589.881; 4.661.111: 4.517.686; 4.683.291; 4.578.079; 4.614.517: y 4.792.525). Cambios en el péptido tan pequeños como el intercambio de alanina por glicina o del ácido glutámico por el ácido aspártico, que constituyen la adición de un único grupo metilo o metileno al tripéptido, elimina estas actividades (Pierschbacher y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:5985 (1984)). Recientemente, se ha identificado un segundo dominio de unión celular de la fibronectina ("FN") en el interior de la región alternativamente empalmada de la cadena A de la molécula, conocida como el segmento 1 (CS-1). El sitio de unión celular más activo en el interior de esta región empalmada alternativamente se compone de 25 aminoácidos donde el extremo carboxi contiene la secuencia EILDVPST. La secuencia aminoácida EILDVPST forma un motivo de reconocimiento en la FN para los receptores superficiales celulares. (Wayner y otros, J. Cell Biol. 109: 1321 (1989); Guan y otros, Cell 60:53 (1990)).
Los receptores que reconocen estos sitios sobre FN pertenecen a una superfamilia de genes denominada integrinas que están formadas por complejos heterodiméricos de subunidades alfa y beta asociadas no covalentemente. Una subunidad \beta habitual se combina con subunidades \alpha únicas para formar un receptor de adhesión de especificidad definida. Hasta la fecha, se han identificado 8 subunidades \beta que pueden dimerizarse con 16 subunidades \alpha formando 22 integrinas distintas. La subfamilia \beta_{1}, también conocida como la familia VLA (Antígenos de activación muy tardíos), se une a las moléculas ECM tales como FN, colágeno y laminina. Para hacer revisiones, véase Hynes, Cell 48:549 (1987); Hemler, Annu. Rev.Immunol, 8:365 (1990). La interacción de leucocitos con FN en los dos dominios de unión separados espacialmente está mediada por dos integrinas distintas. El sitio RGD es reconocido por la integrina \alpha_{5}\beta_{1}, mientras que EILDV es reconocido por \alpha_{4}\beta_{1} (Pytela y otros, Cell 40:191 (1985); Wayner y otros, J.Cell Biol. 109: 1321 (1989); Guan y otros, Cell 60:53 (1990)).
Las células endoteliales vasculares forman la superficie de contacto entre la sangre y los tejidos y controlan el paso de leucocitos, así como el del líquido plasmático a los tejidos. Distintas señalas generadas en el sitio de inflamación pueden activar tanto las células endoteliales como los leucocitos circulatorios, de forma que se convierten en más adhesivas entre ellas. Siguiendo esta adhesión inicial, los leucocitos migran a los tejidos para llevar a cabo funciones de defensa del huésped. Se han identificado varias moléculas de adhesión que están implicadas en las interacciones leucocito-endoteliales.
En la subfamilia \beta_{1}, además de unirse a la fibronectina, \alpha_{4}\beta_{1} interacciona con una proteína citoquina inducible sobre las células endoteliales denominada molécula de adhesión celular vascular (VCAM). Además, en el proceso de adhesión leucocito-endotelial está implicada la subfamilia de la integrina \beta_{2}. Las integrinas \beta_{2} incluyen CD11a/CD18, CD11b/CD18, y CD11c/CD18. Además, la subunidad \beta_{7} se asocia con \alpha_{4} para formar un único heterodímero \alpha_{4}\beta_{7} que se une a FN, a VCAM, y a la Molécula-1 de Adhesión Celular Adresina Mucosal (MAdCAM) (Ruegg y otros, J.Cell. Biology. 117:179 (1992); Andrew y otros, J.Immunol. 153:3847 (1994); Briskin y otros, Nature 363:461 (1993); Shyjan y otros, J.Immunol. 156:2851 (1996)). Las integrinas \alpha_{4} están expresadas ampliamente en distintos tipos celulares que incluyen progenitores hematopoyéticos, linfocitos, células asesinas naturales, monocitos, eosinófilos, basófilos, y células cebadas (Helmer, M.E., Annu. Rev. Immunol. 8:365 (1990)). Otras moléculas sobre las células endoteliales que se unen a los leucocitos incluyen ICAM-1, ICAM-2, E-selectina y P-selectina (Carlos y Harlan, Inmunol Rev. 114:1 (1990); Osborn, L., Cell 62:3 (1990); Springer T., Nature 346:425 (1990); Geng y otros, Nature 347:757 (1990); Stoolman, Cell 56:907 (1989)).
Diversos estudios in vitro e in vivo indican que \alpha_{4}\beta_{1} juega un papel crítico en la patogénesis de diversas enfermedades. Anticuerpos monoclonales dirigidos contra \alpha_{4} se han ensayado en diversos modelos patológicos. Los anticuerpos anti-\alpha_{4} bloquean la adhesión de los linfocitos a las células endoteliales sinoviales; esta adhesión juega un papel potencial en la artritis reumatoide (van Dinther-Janssen y otros, J. Immunol. 147:4207 (1991)). \alpha_{4} se ha implicado también respecto a la artritis reumatoide en estudios separados (Laffon y otros, J. Clin. Invest. 88: 546 (1991); Morales-Ducret y otros, J. Immunol. 149: 1424 (1992)). Un número significativo de estudios han evaluado el papel de \alpha_{4} en la alergia y en el asma. Por ejemplo, anticuerpos monoclonales para \alpha_{4} bloquean la adhesión de los basófilos y eosinófilos a las células endoteliales activadas por las citoquinas (Walsh y otros, J. Immunol. 146: 3419 (1991); Bochner y otros, J. Exp. Med. 173:1553 (1991)). Anticuerpos monoclonales para \alpha_{4} también fueron efectivos en diversos modelos de estimulación antigénica pulmonar (Abraham y otros, J. Clin. Invest. 93:776 (1994); Weg y otros, J. Exp. Med. 177:561 (1993)). El tití con mechón de pelo ("cotton-top tamarin"), que experimenta colitis crónica espontánea, mostró una atenuación significativa de su colitis cuando se administró el anticuerpo anti-\alpha_{4} (Podolsky y otros, J. Clin. Invest. 92:372 (1993); Bell y otros, J. Immunol. 151: 4790 (1993)). En un modelo de rata y ratón, la encefalomielitis autoinmune se bloqueó por el anticuerpo anti-\alpha_{4} (Yednock y otros, Nature 356:63 (1992); Baron y otros, J. Exp. Med. 177:57 (1993)). Los anticuerpos monoclonales anti-\alpha_{4} también inhiben la insulitis y retrasan el comienzo de la diabetes en el ratón diabético no obeso (Baron y otros, J. Clin. Invest. 93:1700 (1994); Yang y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:10494 (1993); Burkly y otros, Diabetes 43:529 (1994)). \alpha_{4} está también implicada en la arteriosclerosis debido a su expresión endotelial durante la aterogénesis (Cybulsky y otros, Science 251:788 (1991)). La migración de los leucocitos a un sitio inflamatorio puede también ser bloqueada por los anticuerpo anti-\alpha_{4}. Además de bloquear la migración, los inhibidores de la adhesión endotelial de los leucocitos pueden bloquear las señales coestimuladoras mediadas por las integrinas y de este modo, inhibir la superproducción de citoquinas inflamatorias. En un conjunto separado de experimentos que no utilizan los anticuerpos anti-\alpha_{4}, los péptidos GRDGSP O EILDV se ensayaron contra la respuesta de hipersensibilidad de contacto. Se encontró que ésta estaba bloqueada por GRDGSP O EILDV sugiriendo que tanto \alpha_{4}\beta_{1} como \alpha_{5}\beta_{1} están implicados en esta respuesta inflamatoria.
Otras indisposiciones que pueden implicar situaciones mediadas por \alpha_{4}\beta_{1} incluyen las alteraciones inflamatorias artritis reumatoide, alteraciones alérgicas, asma, colitis crónica espontánea, insulitis, respuesta de hipersensibilidad de contacto, ateroesclerosis y encefalomielitis autoinmune. Estos estudios ilustran que las pequeñas moléculas que son inhibidores potentes de la adhesión mediada por \alpha_{4}\beta_{1} a VCAM-1 ó bien a CS-1, pueden utilizarse como una forma de tratamiento en numerosas enfermedades inflamatorias. Sin embargo, estas situaciones inflamatorias podrían ampliarse para incluir el síndrome del distrés respiratorio agudo, SIDA, enfermedades cardiovasculares, trombosis o agregación plaquetaria nociva, reoclusión después de trombolisis, rechazo de aloinjertos, lesiones de revascularización, psoriasis, eczema, dermatitis de contacto y otras enfermedades inflamatorias dérmicas, osteoporosis, osteoartritis, arterioesclerosis, enfermedades neoplásicas que incluyen metástasis de crecimiento canceroso o neoplásico, aumento de la cicatrización de las heridas, tratamiento de ciertas enfermedades oculares tales como desprendimiento de retina, diabetes de tipo I, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico (SLE), situaciones inflamatorias e inmunoinflamatorias que incluyen situaciones inflamatorias oftálmicas y enfermedades intestinales inflamatorias, colitis ulcerativa, enteritis regional y otras enfermedades autoinmunes. De acuerdo con esto, es deseable un compuesto que pudiera inhibir estas situaciones.
Resumen de la invención
La presente invención se refiere a un compuesto de fórmula [I]:
1
En la fórmula anterior [I], n es un entero de 0 ó 1, R^{1} es un átomo de hidrógeno o un grupo metilo, y R^{2} puede ser seleccionado a partir de los siguientes grupos: un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -(C_{1-6} alquileno)OH, preferentemente un grupo -(C_{1-3} alquileno)OH; un grupo CH_{2}O(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -CH_{2}O(C_{1-3} alquilo); un grupo -(C_{1-3} alquileno)COOH, preferentemente un grupo -(C_{1-3} alquileno)COOH; un grupo -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo); preferentemente un grupo -CH_{2}O(C_{1-3} alquileno)O(C_{1-6} alquilo) o un grupo -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-3} alquilo), más preferentemente un grupo -CH_{2}O(C_{1-3} alquileno)O(C_{1-3} alquilo), un grupo -CH_{2}O(C_{1-6}
alquileno)COOH, preferentemente un grupo -CH_{2}O(C_{1-3} alquileno)COOH; un grupo -(C_{2-7} alquenileno)COOH, preferentemente un grupo -(C_{2-4} alquenileno)COOH, un grupo -CO(C_{1-6} alquileno)COOH, preferentemente un grupo -CO(C_{1-3} alquileno)COOH, un grupo -CO(C_{2-7} alquenileno)COOH, preferentemente un grupo -CO(C_{2-4} alquenileno)COOH, un grupo -CO(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -CO(C_{1-3} alquileno)O(C_{1-6} alquilo) o un grupo -CO(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-3} alquilo), más preferentemente un grupo -CO(C_{1-3} alquileno)O(C_{1-3} alquilo); un grupo -CO(C1_{1-6} alquileno) CO(C_{1-6} alquilo), preferentemente un -CO(C_{1-3} alquileno)CO(C_{1-6} alquilo) ó un grupo -CO(C_{1-6} alquileno)CO(C_{1-3} alquilo), más preferentemente un grupo -CO(C_{1-3} alquileno)CO(C_{1-3} alquilo); un grupo -CONH(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -CONH(C_{1-3} alquilo); un grupo -CONHO(C_{1-6}), preferentemente un grupo -CONHO(C_{1-3} alquilo); un grupo -CONH(C_{1-6} alquileno)COOH, preferentemente un grupo -CONH(C_{1-3} alquileno)COOH, un grupo -CONH_{2}, un grupo -CONH(C_{3-7} cicloalquilo), preferentemente un grupo -CONH(C_{3-6} cicloalquilo); un grupo como a continuación se da:
2
un grupo -CONHOCH_{2}Ph; un grupo -CONH(C_{1-6} alquileno)CN, preferentemente un grupo -CONH(C_{1-3} alquileno)CN; un grupo -COO(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -COO(C_{1-3}alquilo); un grupo -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno) CONH_{2}; preferentemente un grupo -CH_{2}O(C_{1-3} alquileno)CONH_{2}, un grupo -CONH(C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, preferentemente un grupo –CONH (C_{1-3} alquileno)CONH_{2}; un grupo -CONHOH; un grupo -NHCOOCH_{2}PH;, o un grupo seleccionado de entre las fórmulas siguientes:
3
En la fórmula anterior, (I), en R^{2}, el alquileno C_{1-6} es preferentemente C_{1-3} alquileno, el alquenileno C_{2-7} es preferentemente C_{2-4} alquenileno, el alquilo C_{1-6} es preferentemente C_{1-3} alquilo y el C_{3-7} cicloalquilo es preferentemente C_{3-6} cicloalquilo.
En la fórmula anterior [I], R^{3} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo metilo, X puede ser un grupo metileno o un grupo -CO-, y R^{4} puede ser seleccionado a partir de los siguientes: un átomo de hidrógeno; o un grupo C_{1-6} alquilo, preferentemente un grupo C_{1-3} alquilo.
En la fórmula anterior [I], R^{5} puede ser un grupo seleccionado a partir de los siguientes: un grupo -COOH o un éster o su amida; un grupo -(C_{1-6} alquileno)COOH, preferentemente un grupo -(C_{1-3} alquileno)COOH, o un éster o una amida suya; un -(C_{1-7} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -(C_{1-4} alquileno)O(C_{1-6} alquilo) ó un -(C_{1-7} alquileno)O(C_{1-3} alquilo), más preferentemente un grupo -(C_{1-4} alquileno) O(C_{1-3} alquilo); un grupo -(C_{1-7} alquileno)OH, preferentemente un grupo -(C_{1-4} alquileno)OH; un grupo -COO(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -COO (C_{1-3} alquilo; un grupo -CONH (C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -CONH(C_{1-3} alquilo) ó un grupo -CONH_{2}.
En la fórmula anterior [I], R^{6} puede ser un grupo arilo bicíclico o monocíclico no substituido o substituido, un grupo heteroarilo bicíclico o monocíclico no substituido o substituido, un grupo arilcarbonilamino-C_{1-6} alquilo bicíclico o monocíclico no substituido o substituido, un grupo carbonilo heterocíclico alifático bicíclico o monocíclico no substituido o substituido, un grupo alquilo 9-fluorenilmetiloxicarbonilamino-C_{1-6}, un grupo alquilo 3-tosilguanidino-C_{1-6},
4
a condición de que R^{1} y R^{3} deben ser diferentes y que cuando R^{2} ó R^{6} sean un grupo -COOH o contengan un grupo
-COOH, entonces un éster farmacéuticamente aceptable o su amida farmacéuticamente aceptable se incluyen y también con la condición de que el éster metílico del ácido [1S-[1\alpha, (R^{*}), 3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-pirazinebutanoico o el éster metílico del ácido [1S-[1\alpha, (R^{*}), 3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-pirazinebutanoico están excluidos.
En la fórmula anterior [I], en R^{6}, un grupo arilo o fracción arilo en el grupo arilcarbonilamino es un anillo pentagonal o hexagonal hidrocarburo aromático; e incluyendo cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos anteriores se fusiona en otro anillo anterior; substituyéndose por cero (0) a tres (3) substituyentes.
Ejemplos de arilo pueden incluir fenilo, un grupo C_{1-6} alcoxifenil y un grupo naftilo. Cada una de estas fracciones puede ser substituida como apropiada.
En R^{6}, un heteroarilo es un anillo pentagonal o hexagonal no saturado o saturado parcialmente que contiene de uno (1) a cuatro (4) heteroátomos seleccionados a partir del grupo formado por nitrógeno, oxígeno y azufre; y que incluye cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriores se fusione con un anillo bencénico, C_{3}-C_{8} cicloalquilo, u otro heterociclo; y si es químicamente factible, los átomos de nitrógeno y azufre pueden estar en las formas oxidadas; y substituidas por cero (0) a tres (3) substituyentes.
Ejemplos de heteroarilo pueden incluir 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo, 3-piridazinilo, 4-piridazinilo, 3-pirazinilo, 2-quinolilo, 3-quinolilo, 1-isoquinolilo, 3-isoquinolilo, 4-isoquinolilo, 2-quinazolinilo, 4-quinazolinilo, 2-quinoxalinilo, 1-ftalazinilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 3-pirazolilo, 4-pirazolilo, 5-pirazolilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, 2-indolinilo, 3-indolilo, 3-indazolilo, 2-benzoazolilo, 2-benzotiazolilo, 2-benzimidazolilo, 2-benzofurilo, 3-benzofurilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 1,2,4-oxadiazolil-3-il, 1,2,4-oxadiazol-5-il, 1,2,4-tiadiazol-3-il, 1,2,4-tiadiazol-5-il, 1,2,4-triazol-3-il, 1,2,4-triazol-5-il, 1,2,3,4-tetrazol-5-il, 5-oxazolil, 1-pirrolil, 1-pirazolil, 1,2,3-triazol-1-il, 1,2,4-triazol-1-il, 1-tetrazolil, 1-indolinil, 1-indazolil, 2-isoindolil, 1-purinil, 3-isotiazolil, 4-isotiazolil y 5-isotiazolil. Cada una de estas fracciones puede ser substituida como apropiada.
En R^{6}, una fracción heterocíclica alifática en el grupo carbonilo heterocíclico alifático es un anillo saturado penta o hexagonal que contiene desde uno (1) a cuatro (4) heteroátomos seleccionados a partir del grupo formado por nitrógeno, oxígeno y azufre; y que incluye cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriores se fusiona con un anillo bencénico, C_{3}-C_{8} cicloalquilo, u otro heterocíclico; y si es químicamente factible, los átomos de nitrógeno y azufre pueden estar en las formas oxidadas; y substituidas por cero (0) a tres (3) substituyentes.
Ejemplos de heterocíclicos alifáticos pueden incluir el grupo piperazinilo, grupo pirrolidinilo, grupo piperidilo, grupo homopiperidilo, grupo tiomorfolino, y grupo morfolino. Cada una de estas fracciones puede substituirse como apropiada.
Según la presente invención, el término "C_{1-6} alquilo" representa un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Este grupo puede ser ramificado o no. Ejemplos ilustrativos pero no limitantes de un grupo C_{1-6} alquilo son metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, tert-butilo, sec-butilo, n-pentilo, isopentilo y n-hexilo. Se entiende que este tipo de nomenclatura se extienda a términos tales como "C_{1-6} metoxi", abarcando por tanto grupos metoxi ramificados o no, con 1 a 6 átomos de carbono.
Asimismo, en la fórmula anterior [I] con todos los substituyentes, tal como se describieron anteriormente, se incluye una sal suya farmacéuticamente aceptable.
Los compuestos deseados de la presente invención tienen configuraciones estéricas preferentes. De acuerdo con esto, una configuración estérica preferente se representa mediante compuestos de fórmula [I-1]:
5
en la que n, R^{1} a R^{6} y X son tal como se han definido anteriormente.
Una configuración estérica más preferente está representada por los compuestos según la fórmula [I-2]:
6
en donde n, R^{1} hasta R^{4}, R^{6} y X son tal como se han definido anteriormente y R^{5} puede seleccionarse a partir de: un grupo -COOH, un grupo -(C_{1-6} alquileno)COOH, preferentemente un grupo -(C_{1-3} alquileno)COOH; un grupo -(C_{1-7} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -(C_{1-4} alquileno)O(C_{1-6} alquilo) ó un grupo (C_{1-7} alquileno)O(C_{1-3}) alquilo, más preferentemente un grupo -(C_{1-4} alquileno)O(C_{1-3} alquilo); un grupo -(C_{1-7} alquileno)OH, preferentemente un grupo -(C_{1-4} alquileno)OH; un grupo -COO(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -COO(C_{1-3} alquilo); un grupo -CONH(C_{1-6}alquilo), preferentemente un grupo -CONH(C_{1-3} alquilo) o un grupo -CONH_{2}.
En una forma de realización preferente de la presente invención, R^{6} puede seleccionarse a partir de las fórmulas siguientes:
7
En la fórmula anterior, R^{7}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -OH; un grupo -NO_{2}; un grupo -NH_{2}; un grupo -C_{1-5} alquilo, preferentemente un grupo -C_{1-3} alquilo; un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo Br-; un grupo -I; un grupo -COOH; un grupo -COO(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -COO(C_{1-3} alquilo); un grupo -O(C_{1}-C_{8} alquilo, preferentemente un grupo -O(C_{1-4} alquilo); un grupo -CONH(C_{1-6} alquileno)COOH, preferentemente un grupo -CONH(C_{1-3} alquileno)COOH; un grupo -OCH_{2}(C_{3-7} cicloalquilo), preferentemente un grupo -OCH_{2}(C_{3-6} cicloalquilo); o un substituyente seleccionado a partir de las fórmulas siguientes:
8
En las fórmulas anteriores, R^{8} que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -OH; un grupo -NH_{2}; un grupo -NO_{2}; un grupo C_{1-7} alquilo, preferentemente un grupo -C_{1-4} alquilo; un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo Br-; un grupo -I; un grupo -CF_{3}; un grupo fenilo, o un grupo -O(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -O(C_{1-3} alquilo).
En las fórmulas anteriores, R^{9} puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo C_{1-5} alquilo, preferentemente un grupo -C_{1-3} alquilo; un grupo -C_{3-7} cicloalquilo, preferentemente un grupo cicloalquilo -C_{3-6}; un grupo -(C_{1-6} alquileno)arilo, preferentemente un grupo -(C_{1-3} alquileno)arilo; un grupo arilo; o un grupo seleccionado a partir de las fórmulas siguientes:
9
En las fórmulas anteriores, R^{10} que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo Br-; un grupo -I; un grupo -NO_{2}, un grupo -C_{1-6} alquilo, preferentemente un grupo -C_{1-3} alquilo; un grupo -O(C_{1-6} alquilo), preferentemente un grupo -O(C_{1-3} alquilo).
En las fórmulas anteriores, R^{11} puede seleccionarse a partir de:
10
En las fórmulas anteriores, R^{12} que se encuentra una o más veces y puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -CF_{3}; un grupo -OCH_{3}; un grupo -F; un grupo -Br; un grupo Cl-; o un grupo -I;
Las formas de realización recién mencionadas cumpliendo la condición de que cuando R^{7} es la fórmula
11
entonces, R^{9} es distinto que hidrógeno.
En una forma de realización más preferente de la presente invención, R^{6} se selecciona a partir de:
12
En las fórmulas anteriores, Y es seleccionado a partir de un átomo de hidrógeno o de un átomo de cloro.
En una forma de realización más preferente de la presente invención, R^{2} se selecciona a partir de: un grupo -COOH o de un éster o de su amida; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo -CONHOCH_{2}Ph; o un -CONHCH_{2}CONH_{2.}
En otra forma de realización preferente de la presente invención, R^{1} es un grupo -CH_{3}, y R^{2} es un grupo -COOH; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo CONHOCH_{2}Ph ó un grupo -CONHCH_{2}CONH_{2}, y R^{3} y R^{4} son átomos de hidrógeno. Asimismo, X es -CO-, R^{5} es -COOH, n es 1, y
R^{6} está representado por la fórmula siguiente
13
en la que R^{7} es
14
y R^{8} se encuentra 2 ó 3 veces y es un átomo de cloro.
Otros compuestos incluidos en el alcance de la presente invención son compuestos de fórmula [I-3]:
15
En la fórmula anterior [I-3], R^{1} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo metilo. También, en la fórmula anterior [I-3], R^{2} puede ser seleccionado de entre: un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -CONH_{2}; un grupo -CONHOH; un grupo -CON(CH_{3})_{2}; un grupo -CH_{2}OCH_{2}COOH; un grupo -CH=CHCOOH; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}COOH; un grupo -CONHCH_{2}CONH_{2}; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}CN; un grupo seleccionado a partir de:
16
En la fórmula anterior [I-3], R^{3} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo metilo y R^{5} puede ser un grupo -COOH o un grupo COOMe.
En la fórmula anterior [I-3], R^{6} puede ser seleccionado a partir de:
17
En las fórmulas anteriores, Z^{1} puede ser seleccionada a partir de: un grupo -O-; un grupo -NHCO-; un grupo -NHCH_{2}-; un grupo -OCH_{2}-; un grupo -CONH-; un grupo -NHSO_{2}-; un grupo -NHCOCH_{2}; ó un grupo -N(CH_{3})CH_{2}-.
En la fórmula anterior, R^{13} puede ser seleccionado a partir de: un grupo -H; un grupo -iBuO; un grupo -CH_{3}; un grupo i-Bu; ó un grupo seleccionado de entre las siguientes fórmulas:
18
En las fórmulas anteriores, R^{14} que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo -Br; un grupo -I; un grupo -CH_{3}; un grupo -OCH_{3}; un grupo -CF_{3}; un grupo -NO_{2}; un grupo -NH_{2}; o un grupo -n-C_{7}H_{15}.
En la fórmula anterior, R^{15} puede ser seleccionado a partir de: un grupo -H; un grupo -OH; un grupo -NO_{2}; o un grupo seleccionado a partir de la fórmula siguiente:
19
En la fórmula anterior, R^{16} puede ser seleccionado a partir de:
20
En las fórmulas anteriores, R^{17} que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -Cl; un grupo -CF_{3}; un grupo -OCH_{3}; con la condición de que R^{1} y R^{3} sean diferentes.
En otra forma de realización de los compuestos según la fórmula [1-3], R^{1} es un átomo de hidrógeno o un grupo metilo, y R^{2} es seleccionado a partir de: un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -COOMe; un grupo -CONH_{2}; un grupo -CONHOH; un grupo -CON(CH_{3})_{2}; un grupo -CH_{2}OCH_{2}COOH; un grupo -CH=CHCOOH; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}COOH; un grupo -CONHCH_{2}CONH_{2}; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}CN; o un grupo seleccionado a partir de las fórmulas:
21
y R^{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo metilo.
En otra forma de realización de la fórmula [I-3], R^{5} es un grupo -COOH o un grupo -COOMe y R^{6} es seleccionado a partir de las siguientes fórmulas:
22
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], Z^{1} puede ser seleccionada a partir de: un grupo -O-; un grupo -NHCO-; un grupo -NHCH_{2}-; un grupo -OCH_{2}-; un grupo -CONH-; un grupo -NHSO_{2}-; o un grupo -NHCOCH_{2}-.
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{13} puede ser seleccionado a partir de: un grupo -H; un grupo -iBuO; un grupo -i-Bu, o un grupo seleccionado de:
23
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{14}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo -Br; un grupo -I; un grupo -CH_{3}; un grupo -OCH_{3}; un grupo -CF_{3}; un grupo -NO_{2}; un grupo -NH_{2}; ó un grupo -n-C_{7}H_{15}.
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{15}, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -OH; un grupo -NO_{2}; ó un grupo seleccionado a partir de:
24
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{16} puede ser seleccionado a partir de:
25
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{17}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, es un átomo de cloro, con la condición de que R^{1} y R^{3} deben ser diferentes.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{1} es un grupo metilo y R^{2} puede ser seleccionado entre: un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -CONH_{2}; un grupo -CONHOH; un grupo -CH_{2}OCH_{2}COOH; un grupo -CH=CHCOOH; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}COOH; un grupo CONHCH_{2}CONH_{2}; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}CN; o un grupo seleccionado a partir de las fórmulas:
26
Antes, R_{3} es un átomo de hidrógeno, R^{5} es un grupo -COOH ó un grupo -COOMe y R^{6} puede ser seleccionado a partir de:
27
En la fórmula de realización anterior de fórmula [I-3], Z^{1} puede ser seleccionada a partir de: un grupo -NHCO-; un grupo -OCH_{2}-; un grupo -NHCH_{2}-; un grupo -CONH-; o un grupo -NHSO_{2}-.
En la forma de realización anterior de la fórmula [I-3], R^{13} puede ser seleccionado a partir de las siguientes fórmulas:
28
En otra forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{14}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo -Br; un grupo -I; un grupo -CH_{3}; un grupo -OCH_{3}; un grupo -CF_{3}; o un grupo -NO_{2}.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{15} puede ser un grupo -H o un grupo -OH.
En otra forma de realización de los compuestos según la fórmula [1-3], R^{1} es un átomo de hidrógeno o un grupo metilo, y R^{2} puede ser seleccionado a partir de: un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -CONH_{2}; un grupo
-CONHOH; un grupo CONHOCH_{3}; un grupo -CH_{2}OCH_{2}COOH; un grupo -CH=CHCOOH; un grupo -CONHCH_{2}
COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}COOH; un grupo -CONHCH_{2}CONH_{2}; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}CN; o un grupo seleccionado a partir de las fórmulas:
29
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo metilo, R^{5} es un grupo -COOH o un grupo -COOMe y R^{6} puede ser seleccionado a partir de las siguientes fórmulas:
30
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], Z^{1} puede ser seleccionada a partir de: un grupo -O-; un grupo -NHCO-; un grupo -NHCH_{2}-; un grupo -OCH_{2}-; un grupo -CONH-; ó un grupo -NHSO_{2}-.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{13} puede ser seleccionado a partir de: un grupo -H; un grupo -iBuO; o un grupo seleccionado de:
31
En otra forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{14}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un -OH; un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo -Br; un grupo -I; un grupo -CH_{3}; un grupo -OCH_{3}; un grupo -CF_{3}; un grupo -NO_{2}; o un grupo -NH_{2}.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{15} puede seleccionarse a partir de: un grupo -H; un grupo -OH; un grupo -NO_{2}; ó un grupo seleccionado a partir de:
32
En otra forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{16} puede ser seleccionado a partir de:
33
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{17}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede ser un grupo -Cl o un grupo -CF_{3}; teniendo en cuenta que R^{1} y R^{3} deben ser diferentes.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{1} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo metilo, y R^{2} puede ser seleccionado a partir de un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -CONH_{2}; un grupo -CONHOH; un grupo -CH_{2}OCH_{2}COOH; un grupo -CH=CHCOOH; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}COOH; un grupo -CONHCH_{2}CONH_{2}; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}CN; o un grupo seleccionado a partir de las fórmulas:
34
y R^{3} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo metilo.
En otra forma de realización de la fórmula [I-3], R^{5} es un grupo -COOH o un grupo -COOMe y R^{6} es seleccionado a partir de las siguientes fórmulas:
35
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], Z^{1} puede ser seleccionada a partir de: un grupo -O-; un grupo -NHCO-; un grupo -NHCH_{2}-; un grupo -OCH_{2}; un grupo -CONH-; o un grupo -NHSO_{2}.
En la forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{13} puede ser seleccionado a partir de un grupo -H o un grupo seleccionado de:
36
En otra realización de la fórmula [I-3], R^{14}, que se presenta una o varias veces y que puede ser igual o distinta en cada caso, se puede seleccionar entre los siguientes grupos: grupo -H; grupo -F; grupo -Cl; grupo -Br; grupo -I; grupo -CH_{3}; grupo -OCH_{3}; grupo -CF_{3}; grupo -NO_{2}; o grupo -NH_{2}.
En otra realización de la fórmula [I-3], R^{15} se puede seleccionar entre los siguientes: grupo -H; grupo -OH, grupo -NO_{2}; o bien un grupo seleccionado entre los siguientes:
37
En otra realización de la fórmula [I-3], R^{16} se puede seleccionar entre los siguientes grupos:
38
En otra realización de la fórmula [I-3], R^{17}, que se presenta una o varias veces y que puede ser igual o distinta en cada caso, puede ser un grupo -H o un grupo -Cl, a condición de que R^{1} y R^{3} deben ser distintos.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{1} es un grupo metilo y R^{2} puede ser seleccionado entre: un grupo -CN; un grupo -COOH; un grupo -CONH_{2}; un grupo -CONHOH; un grupo -CH_{2}OCH_{2}COOH; un grupo -CH=CHCOOH; un grupo -CONHCH_{2}COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}COOH; un grupo -CONH(CH_{2})_{2}CN; un grupo CONHCH_{2}CONH_{2}; o un grupo seleccionado a partir de las fórmulas:
39
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R_{3} es un átomo de hidrógeno, R^{5} es un grupo -COOH ó un grupo -COOMe, y R^{6} puede ser seleccionado a partir de:
40
En otra forma de realización de fórmula [I-3], Z^{1} puede ser seleccionada a partir de: un grupo -NHCO-; un grupo -NHCH_{2}-; un grupo -NAcCH_{2}-; un grupo -OCH_{2}-o un grupo -CONH-.
En otra forma de realización anterior de la fórmula [I-3], R^{13} puede ser seleccionado a partir de las fórmulas siguientes:
41
En otra forma de realización anterior de fórmula [I-3], R^{14}, que se encuentra una o más veces y que puede ser el mismo o distinto cada vez, puede seleccionarse a partir de: un grupo -F; un grupo -Cl; un grupo -Br; un grupo -I; un grupo -OCH_{3}; un grupo -CF_{3}; o un grupo -NO_{2}.
En otra forma de realización de fórmula [I-3], R^{15} es un grupo -H o un grupo -NO_{2}.
Los compuestos preferentes según la fórmula [I] pueden ser seleccionados a partir del grupo formado por (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)-carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-histidina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6,-diclorofenil)metil]-L-tirosina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)-carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-3-nitro-L-tirosina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)-carbonil]-4-[[(2,4,6,-triclorofenil)carbonil]-amino]-L-fenilalanina,(1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, (1S-cis)-N-[[3[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, y (1S-cis)-N-[(3-ciano-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina.
Los compuestos deseados de la presente invención puede existir en forma de isómeros ópticos basados en sus átomos de carbono asimétrico, y la presente invención incluye también estos isómeros ópticos y sus mezclas.
En una forma de realización de la presente invención, la configuración estérica de un enlace no necesita ser fijada. Un enlace puede ser de cualquier configuración aceptable. Además, un compuesto puede ser una mezcla con varias configuraciones diferentes del mismo enlace.
Los compuestos deseados de la presente invención pueden utilizarse en forma de un éster o de su amida. Como su éster, pueden mencionarse un éster C_{1-6} alquilo, un éster C_{2-7} alquenilo, un éster C_{2-7} alquinilo, un éster C_{2-7} alcanoiloxi-C_{1-6} alquilo, un éster aril-C_{1-6} alquilo ó un éster arilo. Como su amida, pueden mencionarse una amida (-CONH_{2}), una mono o di N-C_{1-6} alquil amida, una N-C_{3-8} cicloalquil amida, una N-aril amida o una N-aril-C_{1-6} alquil amida.
El compuesto deseado de la presente invención puede utilizarse clínicamente bien en forma libre o en forma de las sales suyas farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición ácida con ácidos inorgánicos u orgánicos (por ejemplo, clorhidrato, sulfato, nitrato, bromhidrato, metanosulfonato, p-toluensulfonato, acetato), sales con bases inorgánicas, base orgánica o aminoácido (por ejemplo, sal de trietilamina, una sal con lisina, una sal metálica alcalina, una sal metálica de tierra alcalina y similares).
El compuesto también puede formularse en una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto tal como se define anteriormente y un transportador o diluyente farmacéuticamente aceptable.
El compuesto puede también utilizarse para tratar o evitar las condiciones mediadas por la adhesión de \alpha_{4}\beta_{1} en un mamífero tal como el hombre. Este procedimiento puede incluir la administración a un mamífero o a un paciente humano de una cantidad efectiva del compuesto o composición, tal como se explicó anteriormente.
Este procedimiento puede utilizarse para tratar condiciones inflamatorias tales como artritis reumatoide, asma, condiciones alérgicas, síndrome del estrés respiratorio adulto, SIDA, enfermedades cardiovasculares, trombosos o agregación plaquetaria perjudicial, reoclusión después de trombolisis, rechazo de aloinjertos, lesión de reperfusión, psoriasis, eczema, dermatitis de contacto y otras enfermedades inflamatorias dérmicas, osteoporosis, osteoartritis, arterioesclerosis, enfermedades neoplásicas incluyendo metástasis de crecimiento canceroso o neoplásico, potenciación de la curación de heridas, tratamiento de ciertas enfermedades oculares tales como desprendimiento de retina, diabetes de tipo I, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico (SLE), situaciones inflamatorias e inmunoinflamatorias que incluyen las de inflamación oftálmica y del intestino, colitis ulcerosa, arterioesclerosis, enteriris regional y otros enfermedades autoinmunes.
El compuesto deseado de la presente invención o de sus sales farmacéuticamente aceptables puede ser administrado oral o parenteralmente, y puede utilizarse como una preparación farmacéutica apropiada, por ejemplo, un comprimido, un gránulo, una cápsula, polvo, una inyección, y una inhalación mediante un procedimiento convencional.
La dosis del compuesto deseado de la presente invención o de su sal farmacéuticamente aceptable varía, dependiendo de un procedimiento de administración, edad, peso corporal, y situación del paciente, pero, en general, la dosis diaria es preferentemente de 0,1 a 100 mg/kg/día aproximadamente, y particularmente preferente de 1 a 100 mg/kg/día.
Vías preferentes de administración para el asma
Es preferible que el compuesto de la presente invención sea administrado en forma de un aerosol. Sin embargo, otras vías de administración incluyen la intravenosa, oral, intramuscular y subcutánea.
En el caso de la administración aerosólica, las composiciones que contienen los compuestos de la presente invención pueden prepararse para proporcionar excelentes medios para que los compuestos se administren en forma aerosólica para la terapia de inhalación. De acuerdo con esto, la presente invención proporcionará composiciones autopropelentes que contengan los compuestos de la presente invención.
Los propelentes utilizados no serán tóxicos y tendrán una presión de vapor apropiada para las condiciones bajo las cuales tiene lugar la administración. Estos propelentes pueden ser hidrocarburos alifáticos inferiores saturados fluorados o fluoroclorados. Los propelentes preferentes de este tipo son los alcanos halogenados que no contienen más de dos átomos de carbono y por lo menos un átomo de flúor. Ejemplos de éstos son el tricloromonofluorometano, diclorodifluorometano, monoclorotrifluorometano, dicloromonofluorometano y 1,2-dicloro-1,1,2,2-tetrafluoroetano. Estos compuestos están disponibles en E.I. duPont de Nemours y compañía, con la marca de fábrica "Freon". Estos propelentes pueden utilizarse solos o mezclados.
Además del propelente, puede utilizarse también un disolvente orgánico. Éste no debe ser tóxico y no tener efectos indeseables una vez se inhale la cantidad que se encuentra en el aerosol producido. Además, el disolvente debe ser sustancialmente anhidro, completamente miscible con el propelente o mezcla de propelentes utilizada y tener una temperatura de ebullición apropiada. Ejemplos de tales disolventes incluyen alcoholes alifáticos no tóxicos tales como etanol; éteres tales como éter etílico y éter vinilo; cetonas tal como acetona; y alcanos inferiores halogenados apropiados.
Además del disolvente orgánico, la composición puede también contener opcionalmente un glicol higroscópico no tóxico. El glicol debe ser sustancialmente miscible con el disolvente orgánico y el propelente utilizado. Glicoles satisfactorios incluyen propilenglicol, trietilén glicol, glicerol, butilén glicol y hexilén glicol.
Los procedimientos anteriormente indicados de administración y formulación de las composiciones aerosólicas no deben considerarse como limitantes. Los compuestos de la presente invención pueden formularse de cualquier forma que se considere apropiada por los expertos en la materia, de modo que se obtengan de este modo los efectos deseados.
Composiciones farmacéuticas
Tal como se ha indicado previamente, los compuestos de la fórmula (I) pueden formularse en composiciones farmacéuticas. Para determinar cuando un compuesto de fórmula (I) está indicado para el tratamiento de una enfermedad dada, ésta, su gravedad, así como la edad, sexo, peso, y condiciones del individuo que va a ser tratado, deben tomarse en consideración y este examen debe realizarse por el médico experto asistente.
Para utilización médica, la cantidad de un compuesto de fórmula (I) que es necesaria para conseguir un efecto terapéutico variará, por supuesto, tanto con el compuesto en particular, como con la vía de administración, el paciente bajo tratamiento y la patología o enfermedad particular que se vaya a tratar. Una dosis diaria aceptable de un compuesto de la fórmula (I), o de su sal farmacéuticamente aceptable, para un individuo mamífero que sufra cualquiera de las situaciones anteriormente descritas en la presente memoria, o que es probable que vaya a sufrir dicha situación, es de 0,1 mg a 100 mg del compuesto de fórmula I, por kilo de peso corporal del mamífero. En el caso de administración sistémica, la dosis puede ser del orden de 0,5 a 500 mg del compuesto por kilogramo de peso corporal, siendo la dosis más preferente de 0,5 a 50 mg/kg de peso corporal del mamífero al que se le administró de dos a tres veces diarias. En el caso de administración tópica, por ejemplo, en la piel o en el ojo, una dosis apropiada puede ser del orden de 0,1 \mug a 100 \mug del compuesto por kilogramo, de 0,1 \mug/kg típicamente.
En el caso de la dosificación por vía oral, una dosis apropiada de un compuesto de fórmula (I), o de su sal fisiológicamente aceptable, puede estar especificada en el párrafo anterior, pero más preferentemente está entre 1 mg y 10 mg del compuesto por kilogramo, siendo la dosis más preferente la de entre 1 mg y 5 mg/kg del peso corporal del mamífero, por ejemplo, de 1 a 2 mg/kg. Más preferentemente, una dosis unitaria de una composición administrable oralmente que la presente invención abarca, contiene menos de 1,0 g aproximadamente de un compuesto de 
\hbox{fórmula (I).}
Se entiende que la formulación de la presente invención, tanto para utilización humana como veterinaria, puede ser presentada al mamífero mediante inhalación. Para lograr un efecto terapéutico, la dosis puede ser del orden de 0,5 a 500 mg del compuesto, por kg de peso corporal, siendo la dosis más preferente la de 0,5 a 50 mg/kg de peso corporal del mamífero, administrada de dos a tres veces diariamente.
Se entiende que el médico o veterinario experto determinarán fácilmente y prescribirán la cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I, para evitar o detener el progreso de la situación para la que se administra el tratamiento. Al proceder de este modo, el médico o veterinario podrán utilizar al principio dosis relativamente bajas, aumentado éstas hasta que se obtenga una máxima respuesta.
Los compuestos y composiciones de la presente invención pueden administrarse a pacientes que sufran una situación de las listadas en la presente memoria, en una cantidad que sea efectiva para aliviar total o parcialmente los síntomas indeseados de aquélla. Los síntomas pueden estar causados por la adhesión celular inapropiada mediada por las integrinas \alpha_{4}\beta_{1}. Se esperaría típicamente que dicha adhesión celular inapropiada tuviera lugar como resultado del aumento de la expresión de CS-1 y/o de VCAM-1 sobre la superficie de las células endoteliales. El aumento de la expresión de CS-1 y/o de VCAM-1 puede ser debido a una respuesta inflamatoria normal o a estados inflamatorios anormales. En cualquier caso, una dosis efectiva de un compuesto de la invención puede reducir la adhesión celular aumentada debida al aumento de la expresión de VCAM-1 por las células endoteliales. La reducción en un 50% de la adhesión observada en el estado patológico puede considerarse como una reducción efectiva en la adhesión. Más preferentemente, se consigue una reducción en la adhesión del 90%. Preferentemente, la mayoría de la adhesión mediada por la interacción de VCAM-1/\alpha_{4}\beta_{1} y/o CS-1 es abolida por una dosis efectiva. Clínicamente, en algunos casos, puede observarse el efecto del compuesto o una disminución en la infiltración hística de los leucocitos o un lugar lesional. Para conseguir un efecto terapéutico, a continuación, los compuestos o composiciones de la presente invención se administran para proporcionar una dosis efectiva que reduzca o elimine la adhesión celular inapropiada, o que alivie los síntomas no deseables.
Aunque es posible que un ingrediente activo se administre solo, es preferible presentarlo como una formulación farmacéutica que incluya un compuesto de fórmula (I) y un transportador suyo farmacéuticamente aceptable. Dichas formulaciones constituyen otra característica de la presente invención.
Las formulaciones de la presente invención, tanto las dedicadas a la utilización humana como a la veterinaria, comprenden un ingrediente activo de la fórmula (I), asociado con un transportador suyo farmacéuticamente aceptable y opcionalmente otro ingrediente o ingredientes terapéuticos, que se sabe son efectivos para el tratamiento de la patología o situación a la que se hace frente. El transportador o transportadores deben ser "aceptables" en el sentido de que sean compatibles con los otros ingredientes de las formulaciones y no sean tóxicos para su receptor.
Las formulaciones incluyen las que se encuentran en una forma apropiada para la administración oral, pulmonar, oftálmica, rectal, parenteral (incluyendo la subcutánea, intramuscular, e intravenosa), intraarticular, tópica, la inhalación nasal (por ejemplo, con un aerosol) o la bucal. Se entiende que en dichas formulaciones se incluyan las formulaciones conocidas en la técnica que actúan a largo plazo.
Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en formas de dosificación unitaria y pueden prepararse mediante cualquiera de los procedimientos bien conocidos en la técnica farmacéutica. Todos los procedimientos pueden incluir la etapa de asociar el ingrediente activo con el transportador, que está constituido por uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando el ingrediente activo uniforme e íntimamente con un transportador líquido o con un transportador sólido finamente dividido o ambos, y entonces, si es necesario, dando la forma deseada al producto.
Las formulaciones de la presente invención que son apropiadas para la administración oral pueden tener forma de unidades discretas tales como cápsulas, saquitos, comprimidos, o pastillas, conteniendo cada una cantidad predeterminada del ingrediente activo en forma de un polvo o de gránulos; en forma de una solución o suspensión en un líquido acuoso. Las formulaciones para otros usos podrían implicar un líquido no acuoso; en forma de una emulsión de aceite en agua o de agua en aceite; en forma de un aerosol; o en forma de una crema o pomada o impregnada en un parche transdérmico para administrar del ingrediente activo transdérmicamente, a un paciente que lo necesite. El ingrediente activo de estas composiciones de la invención puede también administrarse a un paciente que lo necesite en forma de bolo electuario o pasta.
Al médico se le desvía a "Remington: The Science and practice of Pharmacy", edición 19ª, c. 1995, editado por el Philadelphia College of Pharmacy and Science, como un tratado que incluye las preparaciones farmacéuticas.
Abreviaturas
Ac_{2}O: anhídrido acético.
AcOEt: cetato de etilo.
BCECF-AM: éster 2',7'-bis-(2-carboxietil)-5-(y 6-)carboxifluoresceína acetoximetilo.
BOP-Cl: cloruro bis (2-oxo-3-oxazolidinil)fosfínico.
reactivo BOP: Benzotriazol-1-iloxi-tris (dimetilamino)-fosfonio hexafluorofosfato.
DMEM: Medio mínimo de Eagle de Dulbecco
DMF: Dimetil formamida.
DIEA: Diisopropiletilamina.
EDC: clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida.
Et: Etilo
EtOH: Etanol
HATU: N-[(Dimetilamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]-piridín-1-ilmetileno]-N-metilmetanaminio
hexafluorofosfato N-óxido.
HBSS: Solución salina equilibrada de Hank.
HBTU: O-Benzotriazol-1-il-N, N, N', N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato.
HOBT: 1-Hidroxibenzotriazol.
HSA: albúmina sérica humana.
LDA: diisopropilamida de litio.
Me: Metilo
meq: miliequivalente
MeOH: Metanol
n-Bu: n-Butilo
NMP: 1-metil-2-pirrolidinona
PBS: solución salina tampón de fosfato
Pd-C: paladio sobre carbón vegetal
Ph: Fenilo
SPDP: éster del ácido 3-(2-piridilditio)propiónicoy la N-hidroxisuccinimida.
t-Bu: t-Butilo
THF: Tetrahidrofurano
TFA: Ácido trifluoroacético
Según la presente invención, el compuesto deseado [I] puede prepararse mediante los procedimientos siguientes:
Esquema 1 (Procedimiento A)
42
en el que R^{5a} es un grupo de fórmula: -COOR^{22}, -(C_{1-6} alquileno)COOR^{22}, -(C_{1-7} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -(C_{1-7} alquileno)OH, -COO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquilo) o -CONH_{2},
R^{22} es un grupo protector para el grupo carboxilo, y los otros símbolos son los mismos que los definidos anteriormente.
Procedimiento A
El compuesto de la fórmula [I] en el que R^{2} es un grupo de la fórmula: -COOH y X es un grupo de la fórmula: -CO-, un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable, es decir, el compuesto de la fórmula [I-a]:
43
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable, puede prepararse:
(1)
haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula [II]:
44
en la que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, con un compuesto de la fórmula [III-a]:
45
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, o una sal suya, y
(2)
eliminando el grupo protector para el grupo carboxilo, si se desea, y
(3)
convirtiendo el compuesto resultante en un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable mediante un procedimiento convencional, si se desea posteriormente.
R^{22} puede ser seleccionado a partir de un grupo protector convencional para un grupo carboxilo, por ejemplo, un grupo C_{1-6} alquilo, un grupo C_{2-7} alquenilo, un grupo C_{2-7} alquinilo, un grupo C_{2-7} alcanoiloxi-C_{1-6} alquilo, un grupo arilo-C_{1-6} alquilo (por ejemplo, un grupo bencilo), o un grupo arilo (por ejemplo, un grupo fenilo) y similares.
Una sal del compuesto [III-a] incluye, por ejemplo, una sal con un ácido inorgánico (por ejemplo, clorhidrato, sulfato) y una sal con una base inorgánica (por ejemplo, una sal metálica alcalina, tal como la sal sódica o la sal potásica, una sal metálica alcalinotérrea tal como la sal de magnesio o de calcio).
La reacción del compuesto [II] y del compuesto [III-a] o de una sal suya se lleva a cabo en presencia de una base en un disolvente apropiado o sin el disolvente. La base puede ser seleccionada a partir de una base orgánica (por ejemplo, DIEA, DMAP, Et_{3}N, DBU), un hidruro metálico alcalino (por ejemplo, NaH, LiH), un carbonato metálico alcalino (por ejemplo, Na_{2}CO_{3}, Na_{2}KO_{3}), un carbonato de hidrógeno de metal alcalino (por ejemplo, NaHCO_{3}, KHCO_{3}), una amida metálica alcalina (por ejemplo, NaNH_{2}), un alcóxido metálico alcalino (por ejemplo, NaOMe, KOMe), un metal alquil-alcalino (n-BuLi, t-BuLi), un hidróxido metálico alcalino (por ejemplo, NaOH, KOH), un hidróxido metálico alcalinotérreo (por ejemplo, Ba(OH)_{2}), y similares. El disolvente puede ser seleccionado a partir de cualquiera que no altere la reacción, por ejemplo, DMF, THF, benceno, tolueno, DMSO, CH_{3}CN o una mezcla de ellos. La reacción se lleva a cabo preferentemente a una temperatura entre 0ºC y 100ºC, más preferentemente a una temperatura de entre 40 y 80ºC.
La eliminación de dicho grupo protector de los productos puede realizarse mediante un procedimiento convencional, que es seleccionado según los tipos de los grupos protectores que van a eliminarse, por ejemplo, hidrólisis, tratamiento ácido, reducción catalítica, y similares.
Un procedimiento más preferente que el procedimiento A es el:
Esquema 2 (Procedimiento B)
46
R^{2a} es un grupo de fórmula: -CN, -COOR^{23}, -COOH, -(C_{1-6} alquileno)OH, -CH_{2}O(C_{1-6} alquilo), -(C_{1-6} alquileno)COOH, -(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)COOH, -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -(C_{2-7} alquenileno)COOH, -(C_{2-7} alquenileno)COOR^{23}, -CO(C_{1-6} alquileno)COOH, -CO(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CO(C_{2-7} alquenileno)COOH, -CO(C_{2-7} alquenileno)COOR^{23}, -CO(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -CO(C_{1-6} alquileno)CO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquilo), -CONHO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquileno)COOH, -CONH(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CONH(C_{3-7} cicloalquilo), -CONH_{2}, -CONH(C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, -CONHOH, -NHCO_{2}CH_{2}Ph, -CONHOCH_{2}Ph, -CONH(C_{1-6}alquileno)CN, -COO(C_{1-6}alquilo), -CH_{2}O (C_{1-6}alquileno)CONH_{2},
47
R^{2b} es un grupo de fórmula: -CN, -COOR^{23}, -(C_{1-6} alquileno)OH, -CH_{2}O(C_{1-6} alquilo), -(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -(C_{2-7} alquenileno)COOR^{23}, -CO(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CO(C_{2-7} alquenileno)COOR^{23}, -CO(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), CO(C_{1-6} alquileno)CO (C^{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquilo), -CONHO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CONH(C_{3-7} cicloalquilo), -CONH_{2}, -CONH(C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, -CONHOH, -NHCO_{2}CH_{2}Ph, -CONHOCH_{2}Ph, -CONH(C_{1-6}alquileno)CN, -COO(C_{1-6}alquilo), -CH_{2}O (C_{1-6}alquileno)CONH_{2},
48
R^{23} es un grupo protector para el grupo carboxilo, y los otros símbolos son los mismos que los definidos anteriormente.
Procedimiento B
El compuesto de la fórmula [I], un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable,
en el que R^{2} es un grupo de fórmula: -CN, -COOR^{23}, -COOH, -(C_{1-6} alquileno)OH, -CH_{2}O(C_{1-6} alquilo), -(C_{1-6} alquileno)COOH, -(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)COOH, -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -(C_{2-7} alquenileno)COOH, -(C_{2-7} alquenileno)COOR^{23}, -CO(C_{1-6} alquileno)COOH, -CO(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CO(C_{2-7} alquenileno)COOH, -CO(C_{2-7} alquenileno)COOR^{23}, -CO(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -CO(C_{1-6} alquileno)CO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquilo), -CONHO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquileno)COOH, -CONH(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CONH(C_{3-7} cicloalquilo), -CONH_{2}, -CONH(C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, -CONHOH, -NHCO_{2}CH_{2}Ph, CONHOCH_{2}Ph, -CONH(C_{1-6} alquileno)CN, -COO(C_{1-6}alquilo), -CH_{2}O (C_{1-6}alquileno)CONH_{2} ó
49
X es un grupo de fórmula: -CO-, es decir, el compuesto de fórmula [I-c]:
50
en el que
los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, puede prepararse mediante
(1)
condensación de un compuesto de fórmula [IV]
51
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, o una sal suya, con un compuesto de fórmula [III-a]:
52
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, o una sal suya,
(2)
eliminación del grupo protector para el grupo carboxilo y el grupo hidroxilo, si se desea, y
(3)
conversión del compuesto resultante en un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable mediante un procedimiento convencional, si se desea ulteriormente.
R^{22} y R^{23} son los mismos o distintos grupos protectores convencionales para un grupo carboxilo, por ejemplo, un grupo C_{1-6} alquilo, un grupo C_{2-7} alquenilo, un grupo C_{2-7} alquinilo, un grupo C_{2-7} alcanoiloxi-C_{1-6} alquilo, un grupo arilo-C_{1-6} alquilo (por ejemplo, un grupo benzilo) o un grupo arilo (por ejemplo, grupo fenilo) y similares.
Una sal del compuesto [III-a] y/o del [IV] incluye, por ejemplo, una sal con un ácido inorgánico (por ejemplo, clorhidrato, sulfato) y una sal con una base inorgánica (por ejemplo, una sal metálica alcalina tal como sodio, potasio y calcio, una sal metálica alcalinotérrea tal como el bario).
La reacción de condensación del compuesto [IV] o de una sal suya con el compuesto [III-a] o una sal suya se lleva a cabo en presencia de un reactivo de condensación en un disolvente apropiado o sin éste. El reactivo de condensación puede ser seleccionado de cualquiera que pueda utilizarse para una síntesis peptídica convencional, por ejemplo, BOP-Cl, reactivo BOP, DCC y WSCI.
El disolvente puede estar seleccionado de cualquiera que no altere la reacción de condensación, por ejemplo, CH_{2}Cl_{2}, DMF o una mezcla suya. La reacción se lleva a cabo preferentemente a temperatura ambiente.
La eliminación de dicho grupo protector de los productos puede realizarse mediante un procedimiento convencional, que se selecciona de acuerdo con los tipos de grupos de protección que van a eliminarse, por ejemplo, hidrólisis, tratamiento ácido, reducción catalítica y similares.
Esquema 3 (Procedimiento C)
53
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente.
Procedimiento C
El compuesto de la fórmula [I], en el que X es un grupo metileno, un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable, es decir, el compuesto de fórmula [I-e]:
54
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable, puede prepararse
(1)
haciendo reaccionar un compuesto de fórmula [V]
55
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, o una sal suya, en presencia de un agente reductor con un compuesto de fórmula [III-b]
56
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente,
(2)
eliminando el grupo protector para el grupo carboxilo, si se desea, y
(3)
convirtiendo el compuesto resultante en un éster suyo, una amida suya o una sal suya farmacéuticamente aceptable mediante un procedimiento convencional, si se desea ulteriormente.
Una sal del compuesto [V] y/o del [III-b] incluye, por ejemplo, una sal con un ácido inorgánico (por ejemplo, clorhidrato, sulfato) y una sal con una base inorgánica (por ejemplo, una sal metálica alcalina, una sal metálica alcalinotérrea).
La alquilación reductora del compuesto [V] o de una sal suya con el compuesto [III-b] o una sal suya se lleva a cabo mediante un procedimiento convencional en presencia de un agente reductor en un disolvente apropiado o sin éste. El agente reductor es preferentemente borohidruro sódico, cianoborohidruro sódico, y similares. El disolvente puede ser seleccionado a partir de cualquiera que no altere la reacción, por ejemplo, un alcanol tal como metanol, ácido alcanoico tal como AcOH, THF o una mezcla suya. La reacción se lleva a cabo preferentemente a una temperatura entre 0ºC y la ambiental.
La reacción del compuesto [I-f] o de una sal suya y el compuesto [VII] se lleva a cabo en presencia de un aceptor ácido en un disolvente apropiado o sin éste. El aceptor ácido y el disolvente pueden seleccionarse a partir de la base o del disolvente utilizados en el Procedimiento A. La reacción se realiza preferentemente a temperatura ambiente.
La eliminación de dicho grupo protector de los productos puede llevarse a cabo mediante un procedimiento convencional, que se selecciona según los tipos de grupos protectores que van a eliminarse, por ejemplo, hidrólisis, tratamiento ácido, reducción catalítica, y similares.
El compuesto deseado [I] de la presente invención puede convertirse uno a otro. Dicha conversión de este compuesto [I] al otro [I] puede llevarse a cabo seleccionando uno de los procedimientos siguientes de (a) a (e), según el tipo de su substituyente, y si se desea, seguido por la eliminación del grupo protector para el grupo carboxilo mediante un procedimiento convencional.
Procedimiento (a)
El compuesto [I] en el que R^{6} es un grupo arilo amino substituido, puede prepararse mediante la reducción del compuesto [I], en el que el R^{6} correspondiente es un grupo aralclioxicarbonilo amino o un grupo arilo nitro substituido. La reducción puede consistir, por ejemplo, en una reducción catalítica utilizando un catalizador de paladio tal como el paladio sobre un carbón activado, un catalizador de platino tal como el óxido de platino y similares. La reducción catalítica se lleva a cabo preferentemente a temperatura ambiente.
Procedimiento (b)
El compuesto [I] en el que R^{2} es un grupo de fórmula: -CONH_{2}, -CONH(C_{1-6} alquilo), -CONHO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, -CONH(C_{3-7} cicloalquilo), -CONH(C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, -CONHOCH_{2}Ph,
-CONH(C_{1-6}alquileno)CN, CONHOH,
57
puede prepararse haciendo reaccionar el compuesto [I] en el que el R^{2} correspondiente es un grupo de fórmula: -COOH con una amina substituida o no, seleccionada a partir de un grupo de fórmula: NH_{3}, NH_{2}(C_{1-6} alquilo), NH_{2}O(C_{1-6}alquilo), NH_{2}(C_{1-6} alquileno)COOR^{23}, NH_{2}(C_{3-7} cicloalquilo), NH_{2} (C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, NH_{2}OH, NH_{2}OCH_{2}Ph, NH_{2}(C_{1-6} alquileno)CN,
58
en la que R^{23} se define como anteriormente, en presencia de un reactivo de condensación (por ejemplo, el reactivo BOP) que puede utilizarse para una síntesis peptídica convencional, y eliminando el grupo protector para el grupo carboxilo, si se desea. La reacción se lleva a cabo preferentemente a una temperatura de entre 0ºC y la ambiental.
Procedimiento (c)
El compuesto [I] en el que R^{4} es un grupo C_{1-6} alquilo, puede prepararse haciendo reaccionar el compuesto [I] en el que el R^{4} correspondiente es un átomo de hidrógeno con un haluro C_{1-6} alquilo (por ejemplo, yoduro de metilo, yoduro de butilo) en presencia de hidruro metálico (por ejemplo, NaH). La reacción es preferentemente llevada a cabo a una temperatura entre 0ºC y la ambiente.
Procedimiento (d)
El compuesto [I] en el que R^{6} es un grupo C_{2-6} alcanoilamino-, C_{3-7} cicloalquilcarbonilamino-, arilo C_{2-7} alcanoilamino-, arilcarbonilamino-, C_{1-5} alquiloxicarbonilamino-, C_{3-7} cicloalquiloxicarbonilamino-, arilo C_{1-6} alquiloxicarbonilamino-, arilureído, o un grupo arilo arilsulfonilamino-substituido, puede prepararse haciendo reaccionar el compuesto [I] en el que el R^{6} correspondiente es un grupo arilo amino o un grupo arilo (C_{1-6} alquil)-amino-substituido con un ácido C_{2-6} alcanoico, un anhídrido del ácido C_{2-6} alcanoico, haluro de C_{2-6} alcanoilo, ácido C_{3-7} cicloalcanocarboxílico, anhídrido del ácido C_{3-7} cicloalcanocarboxílico, haluro C_{3-7} cicloalcanoilo, ácido arilo C_{2-7} alcanoico, anhídrido del ácido aril C_{2-7} alcanoico, haluro arilo C_{2-7} alcanoilo, ácido arilcarboxílico, anhídrido del ácido arilcarboxílico, haluro arilcarbonilo, C_{1-5} alquil halogenoformato, arilisocianato, o haluro de arilsulfonilo en presencia o ausencia de un aceptor ácido (por ejemplo, DIEA) y en presencia o ausencia de un reactivo de condensación (por ejemplo, BOP-Cl) que puede utilizarse para una síntesis peptídica convencional. La reacción se lleva a cabo preferentemente a una temperatura de entre 0ºC a la ambiental.
Procedimiento (e)
59
60
en el que R^{24} es un grupo protector para el grupo amino, y los otros símbolos son los mismos que los definidos anteriormente.
El compuesto de fórmula [I-i]:
305
puede prepararse condensando el compuesto [I] en el que el R^{2} correspondiente es un grupo de fórmula: -COOH, con un grupo de fórmula [VIII]:
61
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, mediante una síntesis peptídica convencional en fase sólida también conocida como el procedimiento Merrifield (Journal of American Chemical Society 85, 2149-2154 (1963)), seguido por la desprotección del grupo amino y del grupo carboxilo mediante un procedimiento convencional.
R^{24} puede ser seleccionado a partir de un grupo protector convencional para un grupo amino, por ejemplo, el grupo tert-butoxi-carbonilo (BOC), el grupo benciloxicarbonilo (Cbz) y similares.
El disolvente utilizado para los Procedimientos (a) a (e) pueden ser seleccionados a partir de cualquiera que no altere los procedimientos, por ejemplo, THF, metanol, DMF, CH_{2}Cl, o una mezcla suya.
Descripción general para la síntesis de intermediarios
El compuesto [II] puede prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula [VI]:
62
en el que los símbolos son los mismos que los definidos anteriormente, en presencia del haluro C_{1-6} alcanoilo (por ejemplo, AcCl) y/o el anhídrido C_{1-6} alcanoico (por ejemplo, Ac_{2}O).
El compuesto [III-a] puede prepararse mediante un procedimiento convencional, que es seleccionado según los tipos de substituyentes, por ejemplo, mediante los esquemas siguientes:
63
64
65
66
67
68
69
en los que R es (1), un grupo arilo bicíclico o monocíclico no substituido o substituido o (2), un grupo heteroarilo bicíclico o monocíclico no substituido o substituido, Hal es un átomo halógeno y los otros símbolos son los mismos que se definieron anteriormente.
El compuesto [IV] puede prepararse tal como se muestra en varios lugares de la presente solicitud, por ejemplo, en los Esquemas 7, 8, 9, 10 y 11.
El compuesto deseado [I] de la presente invención puede también prepararse mediante los procedimientos tal que se muestran en los Esquemas siguientes.
Esquema 5a
70
(L)-p-nitroPhe-OH (5a-A) disponible comercialmente (50,6 g, 240,6 mmol)se disolvió en MeOH (250 mL) y HCl seco se hizo burbujear a través de la solución durante 45 minutos a 0ºC. La mezcla se sometió a reflujo durante 15 minutos y se dejó que reposara durante la noche. La sal de HCl precipitó y el material sólido se recuperó por filtración y se lavó con Et_{2}O (3 x 50mL). El éster metílico sólido (5a-B) así obtenido era de color amarillo pálido (55,3 g, 88%): p.f. = 215-218ºC (d).
La sal HCl del (L)-p-nitroPhe-OMe (5a-B) (5,2 g, 19,8 mmol) se disolvió en THF (30 mL) que contenía DIEA (10,3mL, 59,4 mmol). A esta solución se añadió el éster 1-(1,1-dimetiletil) del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (15-D)(5,1 g, 19, 8 mmol) y reactivo BOP (10,6 g, 23,9 mmol), agitándose la solución bajo N_{2} seco durante 72 horas. La consecución de la reacción de acoplamiento se llevó a cabo mediante la adición de 1N HCl (60 mL) y la extracción con EtOAc (2 x 20 ml). La fase orgánica combinada se lavó con NaHCO_{3} saturado (20 mL), y entonces con LiCl saturado (15 mL) y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. La solución se filtró, se evaporó el disolvente y el residuo se sometió a cromatografía (SiO_{2}, elución del gradiente: 100% de hexanos -> 50% EtOAc/hexanos) para proporcionar el intermediario totalmente protegido éster metílico de (1S-cis)-N-[3-[(1,1-dimetiletoxi)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-nitro-L-fenilalanina (5a-C) (7,1g, 77%): ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 8,14(2H), 7,35(2H), 6,18(1H), 4,99(1H), 3,76(3H), 3,34(1H), 3,20(1H), 2,62(1H), 2,5-2,6(2H), 2,1-2,2(1H), 1,6-1,8(1H), 1,4-1,5(1H), 1,45(9H), 1,25(3H), 1,16(3H), 0,81(3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CDCl_{3}), \delta 174,57, 172,44, 171,30, 146,69, 144,01, 129,87, 123,31, 79,89, 56,35, 53,98, 52,52, 52,24, 46,10, 37,38, 32,08, 27,72, 22,64, 22,27, 21,62, 20,40; ESMS (m/z) 463 (MH^{+}).
El compuesto anterior, (5a-C) (2,7 g 5,77 mmol), se disolvió en MeOH (40 mL) y se desgasificó con N_{2}. A esta solución se añadió Pd-C al 10% (250 mg) y el gas H_{2} se hizo burbujear a través de la emulsión resultante durante 15 minutos y la reacción se agitó 3 horas más bajo una atmósfera de H_{2}. La mezcla se filtró a través de celita, lavándose ésta con CH_{3}OH. El disolvente se evaporó para proporcionar el Ejemplo 56 (5a-D) (2,49g, 100%): ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 6,88(2H), 6,64(2H), 5,71(1H), 4,82(1H), 3,72(3H), 3,0-3,1(2H), 2,5-2,6(2H), 2,1-2,2(1H), 1,6-1,8(1H), 1,4-1,5(1H), 1,43(9H), 1,21(3H), 1,14(3H), 0,80(3H); ESMS (m/z) 433 (MH^{+}).
Esquema 5b
71
El Boc-(L)-Phe(4-N-Cbz)-OH comercialmente disponible, (5b-A) (6,2g, 14,9 mmol) se disolvió en MeOH (20 mL) y el HCl seco se hizo burbujear a través de la solución durante 10 minutos. Esta mezcla se agitó durante 1 hora. El disolvente se evaporó y el material sólido (5b-B) así obtenido se lavó con Et_{2}O frío (3 x 20 mL). Este material sólido se disolvió en THF (25 mL) que contenía DIEA (7,8 mL, 44,8 mmol). A esta solución se añadió (15-D) (4,2 g, 16,4 mmol) y reactivo BOP (7,9, 17,9 mmol) y la solución se agitó bajo N_{2} seco durante la noche. La consecución de la reacción de acoplamiento se llevó a cabo mediante la adición de 1N HCl (60 mL) y la extracción con EtOAc (2 x 50 mL). La fase orgánica combinada se lavó con LiCl saturado (35 mL), y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. La solución se filtró, se evaporó el disolvente y el residuo se sometió a cromatografía (SiO_{2}, elución del gradiente: 100% de hexanos -> 50% EtOAc/hexanos) para proporcionar el intermediario totalmente protegido éster metílico de 4-benciloxicarbonilamino-N-[[(1S,3R)-3-(tert-butoxicarbonil-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (5b-C) (6,5 g, 77%): ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 7,3-7,4(6H), 7,17(1H), 7,01(2H), 5,80(1H), 5,17(2H), 4,86(1H), 3,70(3H), 3,06(2H), 2, 5-2,6(2H), 2,1-2,2(1H), 1,6-1,8(1H), 1,4-1,5(1H), 1,43(9H), 1,21(3H), 1,13(3H), 0,80(3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CDCl_{3}), \delta 174,88, 172,43, 172,06, 153,32, 136,98, 135,95, 130,55, 129,58, 128,46, 128,19, 128,15, 118,71, 80,05, 66,80, 56,54, 54,26, 52,98, 52,17, 46,25, 36,94, 32,21, 27,92, 22,81, 22,32, 21,82, 20,46; ESMS (m/z) 567 (MH^{+}).
El compuesto anterior, (5b-C) (5,74 g, 10,13 mmol), se disolvió en MeOH/THF (4:1, 50 mL) y se desgasificó con N_{2}. A esta solución se añadió Pd-C al 10% (500 mg) y el gas H_{2} se hizo burbujear a través de la lechada resultante durante 1 hora. La reacción se agitó 3 horas más bajo una atmósfera de H_{2}. La mezcla se filtró a través de celita, lavándose ésta con CH_{3}OH. El disolvente se evaporó para proporcionar el Ejemplo 56 (5a-D) (4,38 g, 100%): ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 6,90(2H), 6,68(2H), 5,73(1H), 4,82(1H), 3,72(3H), 3,0-3,1(2H), 2,5-2,6(2H), 2,1-2,2(1H), 1,6-1,8(1H), 1,4-1,5(1H), 1,43(9H), 1,21(3H), 1,14(3H), 0,80(3H); ESMS (m/z) 433 (MH^{+}).
Esquema 6
72
El anhídrido (1R)-canfórico (243 mg, 1,33 mmol) se disolvió en THF (10 mL) que contenía DIEA (1,2 mL, 6,67 mmol). A esta solución se añadió éster metílico de la 0-2,6-diclorobencil-L-tirosina (6-A) (618 mg, 1,58 mmol), agitándose la solución a 45ºC durante 1 hora. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió 1 N HCl (20 mL). Éste se extrajo con EtOAc (2 x 20 mL) y las sustancias orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}), se filtraron, y el disolvente se eliminó in vacuo. El residuo se cromatografió (SiO_{2}, MeOH al 10% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar (6-B) (668 mg, 93%) como un aceite decolorado: ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), (isómero principal) \delta 7,34(d, 2H), 7,23(dd, 1H), 7,04(d, 2H), 6,9-7,0(m, 2H), 5,85(d, 1H), 5,23(s, 2H), 4,88(q, 1H), 3,73(s, 3H), 3,0-3,2(m, 2H), 2,5-2,6(m, 2H), 2,2-2,3(m, 1H), 1,7-1,8(m, 1H), 1,4-1,5(m, 1H), 1,23(s, 3H), 1,22(s, 3H), 0,84(s, 3H); ESMS (m/z) 536 (MH^{+}).
(6-B) (570 mg, 1,06 mmol) se disolvió en THF (2mL). A esta solución se añadió LiOH (89 mg, 3,72 mmol) en agua (2 mL) y la mezcla se agitó durante 12 horas a RT. La reacción se acidificó con 1 N HCl (10 mL), extrayéndose entonces con EtOAc (2 x 20 mL). Las sustancias orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}), se filtraron, y el disolvente se eliminó in vacuo("al vacío") para proporcionar el Ejemplo 12 (6-C) (525 mg, 95%) como una espuma amarillenta pálida: ^{1}H NMR (300 MHz, acetona-d_{6}), (isómero principal) \delta 7,4-7,5(m, 3H), 7,23(d, 2H), 6,99(d, 2H), 5,30(d, 1H), 5,28(s, 2H), 4,6-4,7(m, 1H), 3,13(dd, 1H), 2,97(dd, 1H), 2,81(t, 1H), 2,5-2,6(m, 1H), 2,0-2,1(m, 1H), 1,6-1,7(m, 1H), 1,3-1,4(m, 1H), 1,27(s, 3H), 1,19(s, 3H), 0,80 (s, 3H); ^{13}C NMR (75 MHz, acetona-d_{6}), (isómero principal) \delta 177,79, 173,99, 172,94, 158,53, 137,39, 133,18, 132,01, 131,23, 129,52, 115,24, 65,78, 56,75, 54,47, 53,67, 46,91, 37,19, 33,30, 23,44, 23,01, 22,38, 21,64; ESMS (m/z) 520 (M-H)^{-}.
(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 7
73
Preparación 7-A
Esquema 7, 7-A
Estereoquímica = 1S-cis
(Intermediario para los Ejemplos 181, 185, y 188).
Éster del (1R,3S) ácido canfórico 1-(1,1-dimetiletil)-3-fenilmetilo (C_{21} H_{30}O_{4})
El bromuro de bencilo se eluyó a través de la alúmina neutra (10 mL en un embudo de vidrio de 30 mL sinterizado) para dar lugar a un líquido decolorado (15 mL, 126 mmol) que se añade a una solución sometida a agitación del éster del (1R,3S)-ácido canfórico 1-(1,1-dimetiletilo (15-D) (30 g, 117 mmol), N,N-diisopropiletil amina (24 mL, 138 mmol), y acetonitrilo (90 ml). Después de siete días, la mezcla se filtró para dar lugar a un sólido blanco (bromhidrato de diisopropiletil amina) y un líquido amarillento que se coloca en el congelador. Después de 2 días, la mezcla se filtra (dos aclarados con 50 mL de dietil éter) para dar lugar a un sólido blanco (24 g, rendimiento del 59%).
^{1}H NMR: (300MHz, CDCl_{3}): \delta 7,37-7,29(5H), 5,15(1H), 5,09(1H), 2,85-2,79(1H), 2,54-2,46(1H), 2,24-2,15(1H), 1,86-1,74(1H), 1,49-1,36(1H), 1,43(9H), 1,23(3H), 1,15(3H), 0,78(3H); IR (nujol) 1737, 1724, 1717, 1346, 1272, 1259, 1219, 1210, 1162, 1124, 1116, 1084, 852, 737, 696cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 347 (M+H, 35), 348 (8), 347 (35), 292 (8), 291 (43), 273 (12), 109 (13), 92 (9), 91 (99), 57 (30), 41 (9); HRMS (FAB) calculado para C_{21}H_{30}O_{4} +H^{+} 347,2222, hallado 347,2232; análisis calculado para C_{21}H_{30}O_{4}: C, 72,80; H, 8,73; hallado: C, 72,79; H, 8,90.
Éster del (1R,3S) ácido canfórico 3-fenilmetilo (7-A) (C_{17} H_{22}O_{4})
Al éster (1R,3S)-ácido canfórico 1-(1,1-dimetiletil)-3-fenilmetilo (24 g, 69 mmol) se añade ácido trifluoroacético (15 mL). Después de agitar durante dos días, la solución se evapora in vacuo para dar lugar a un aceite amarillento pálido que se disuelve en tolueno (250 mL) y se agita con agua (6 X 100mL). La evaporación del tolueno dio lugar a un aceite decolorado que cristaliza lentamente para dar lugar al compuesto 7-A, sólido blanco y aceitoso (16,4 g, rendimiento del 81%).
^{1}H-NMR: (300MHz, CDCl_{3}): \delta 7,38-7,16(5H), 5,17(1H), 5,11(1H), 2,87(1H), 2,60-2,49(1H), 2,30-2,21(1H), 1,91-1,80(1H), 1,57-1,48(1H), 1,27(3H), 1,25(3H), 0,84(3H); IR (liq.) 3067, 3034, 2972, 2888, 1732, 1696, 1457, 1378, 1285, 1231, 1212, 1166, 1124, 752, 698 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 291 (M+H, 44), 391 (5), 292 (8), 291 (44), 273 (6), 245 (4), 155 (3), 109 (10), 92 (9), 91 (99), 41 (3); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{17}H_{22}O_{4} +H^{+} 291,1596, hallado 291,1603; análisis calculado para C_{17}H_{22}O_{4}: C, 70,32; H, 7,64; hallado: C, 70,21; H, 7,89.
Preparación 7-C-1
Esquema 7, 7-C: en el que R^{7-1}=H
Estereoquímica = 1S-cis
Éster del (1R-cis)-N-[[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]glicina(1,1-dimetiletil) (7-C-1) (C_{23}H_{33}NO_{5})
Al éster 3-fenilmetilo del (1R,3S) ácido canfórico (7-A) (0,736 g, 2,53 mm) en DMF seco (5 mL) se añadió diisopropiletil amina (3 mL, 17,2 mmol) y HATU (1,05 g, 2,76 mmol). Treinta minutos después, se añadió clorhidrato de 7-B (R^{7-1}= H) (0,855 g, 5,10 mm). Después de agitación nocturna, la mezcla se evaporó hasta sequedad (in vacuo/flujo de N_{2}), mezclándose entonces con tolueno (50 mL) y THF (50 mL) y lavándose con agua (2 x 50 mL), 1N HCl (50 mL), y agua (4 x 50 mL). La capa orgánica se evaporó entonces hasta sequedad, dando lugar a 7-C (R^{7-1} = H) como un sólido blancuzco (0,9 g, 90%).
^{1}H NMR(300MHz, CDCl_{3}): \delta 7,37-7,15(5H), 6,05(1H), 5, 17-5,08(2H), 3,99-3,82(2H), 2,89-2,83(1H), 2,51-2,40(1H), 2,29-2,22(1H), 1,94-1,80(1H), 1,59-1,51(1H), 1,47(9H), 1,31(3H), 1,21(3H), 0,78(3H). MS (ES+) m/z 404,1 (origen).
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Preparación 7-D
Esquema 7, 7-D: en el que R^{7-1}=H
Estereoquímica = 1S-cis
Éster del (1R-cis)-N-[[3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]glicina(1,1-dimetiletil) (7-D-1) (C_{16}H_{27}NO_{5})
El éster de 7-C (R^{7-1}=H, 0,97 g, 2,4 mmol) en THF (12 mL) y etanol (6 mL) se agitó con 10%Pd/C (0,115 g) en un recipiente Parr bajo una atmósfera de H_{2} (38 psi). Después de 8 horas, el recipiente se quitó del agitador y se filtró a través de celita (con enjuagues 3 X 30 ml de etanol). El filtrado se evaporó hasta sequedad, dando lugar a 7-D (R^{7-1} = H) como un aceite espeso decolorado (0,6 g, rendimiento del 79%).
^{1}H-NMR(300MHz, CDCl_{3}) \delta 6,13(1H), 4,0-3,84(2H), 2,86-2,80(1H), 2,49-2,39(1H), 2,27-2,17(1H), 1,94-1,80(1H), 1,60-1,52(1H), 1,46(9H), 1,34(3H), 1,22(3H), 0,88(3H); IR (liq.) 3385, 2976, 2940, 2887, 1732, 1644, 1528, 1478, 1459, 1405, 1394, 1369, 1277, 1227, 1158 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 314 (M+H, 99), 315 (18), 314 (99), 258 (51), 109 (22), 95 (9), 76 (20), 69 (12), 57 (28), 55 (12), 41 (14). HRMS (FAB) m/z calculado para C_{16}H_{27}NO_{5} +H1 314,1967, hallado 314,1974; análisis calculado para C_{16}H_{27}NO_{5}: C, 61,32; H, 8,68; N, 4,47; hallado: C, 61,70; H, 8,86; N, 4,14; solvato en fusión: 3,9% etanol.
Preparación 7-F-1
Esquema 7, 7-F: en el que R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo
Estereoquímica = 1S-cis=-L
Éster metílico del (1S-cis)-N-[[3-[[(1,1-dimetiletoxicarbonilmetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (7-F-1) (C_{33}H_{41}Cl_{2}N_{3}O_{7})
El éster de (1R-cis)-N-[[3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]glicina (1,1-dimetiletil), 7-D (R^{7-1}=H, 0,356g, 1,14 mmol) se disuelve en cloruro de metileno (6 mL), bajo N_{2} en un matraz de fondo redondo, y se enfría en un baño de agua helada. A esta solución sometida a agitación se añade N,N-diisopropiletilamina (1 mL, 5,7 mmol), EDC (0,242 g, 1,26 mmol), HOBt (0,181 g, 1,34 mmol), y 4-N,N-dimetilaminopiridina (0,016g, 0,13 mmol) seguido 30 minutos después por el clorhidrato del éster metílico de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (7-E-1)\cdotHCl (7E: R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3,} R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil, Estereoquímica = S)(0,487 g, 1,2 mmol). Después de dos días de agitación (el baño de hielo se deja derretir), la mezcla reactiva se evapora hasta sequedad y se reparte entonces entre THF (100 mL), dietil éter (50 mL), y agua (50 mL). La capa orgánica se lava con agua (3 X 50 mL), HCl acuoso (0,5N, se enfría, 3 X 30 mL), bicarbonato sódico acuoso (1 X 50 mL), agua (3 X 30 mL, a pH 7), y se evapora entonces hasta sequedad, dando lugar a 7-F (R^{7-1} = H, R^{4}=H, R^{5}= CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L) como un sólido blanco (0,63 g, rendimiento del 80%).
^{1}H NMR(300MHz, CDCl_{3}) \delta 7,57(2H), 7,38-7,26(3H), 7,10(2H), 6,07(1H), 5,80(1H), 4,89(1H), 3,97-3,74(2H), 3,21-3,05(2H), 2,58-2,52(1H), 2, 45-2,35(1H), 2,30-2,18(1H), 1,90-1,75(1H), 1,58-1,50(1H), 1,46(9H), 1,30(3H), 1,20(3H), 0,79(3H); IR (nujol) 1739, 1668, 1643, 1609, 1560, 1538, 1516, 1431, 1414, 1327, 1288, 1256, 1235, 1195, 1161 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 662 (M+H, 84), 664 (58), 663 (39), 662 (84), 533 (39), 531 (55), 240 (58), 194 (37), 173 (41), 109 (99), 57 (44); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{33}H_{41}Cl_{2}N_{3}O_{7} +H^{+} 662,2399, hallado 662,2410.
Preparación 7-G-1
Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
Éster metílico del (1S-cis)-N-[[3-[[carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (7-G-1) (C_{29}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{7})
El éster metílico de (1S-cis)-N-[[3-[[(1,1-dimetiletiloxicarbonilmetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (7-F), (R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenil, Estereoquímica = (1S-cis)-L, 0,802 g, 1,21 mmol), se somete a agitación durante la noche en ácido trifluoroacético (3 mL). La solución se diluye entonces con tolueno (5 mL) y se evapora hasta sequedad in vacuo para dar lugar a un sólido blancuzco que se recristalizó a partir de cloroformo/éter dietílico para dar 7-G (R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}= CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenil, Estereoquímica = (1S-cis)-L como un sólido blanco (0,7 g, rendimiento del 90%).
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^{1}H-NMR(300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 10,68(1H), 7,92(2H), 7,58-7,44(3H), 7,19(2H), 4,53-4,45(1H), 3,75-3,62(2H), 3,58(3H), 3,03-2,85(2H), 2,68-2,62(1H), 2,40-2,28(1H), 1,98-1,81(1H), 1,70-1,50(1H), 1,30-1,25(1H), 1,17(3H), 1,09(3H).
Preparación del Ejemplo 181
Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
(1S-cis)-N-[[3-[[carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3,-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 181) (C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7})
El éster metílico de (1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (7-G-1), (0,7 g, 1,15 mmol) se disuelve en metanol (12 mL). A esto ser añade una mezcla de LiOH\cdotH_{2}O (0,243g, 5,8 mmol), H_{2}O_{2} acuosa (30%, 2 mL), y H_{2}O (2 mL). Después de agitación durante la noche, la mezcla reactiva se diluye con agua (50 mL), y se evapora (temperatura ambiente, in vacuo/flujo de N_{2}) hasta que el metanol queda eliminado. La solución acuosa se transfiere entonces a un embudo de separación y se agita con éter dietilo (2 X 20 mL). La capa acuosa se evapora entonces, para eliminar el éter dietilo residual, y se enfría en un baño de agua helada. La solución agitada se lleva entonces a un pH de 3-4 utilizando HCl acuoso (1N). El precipitado resultante se aísla mediante filtración de succión (con lavados acuosos) para dar lugar al Ejemplo 181 como un sólido blanco (0,4 g, rendimiento del 58%).
^{1}H-NMR:(300MHz, DMSO-d_{6}): \delta12,45(1H), 10,6(1H), 7,74(2H), 7,57-7,44(3H), 7,20(2H), 4,48-4,40(1H), 3,65(2H), 2,94(2H), 2,64(1H), 2,35(1H), 1,90(1H), 1,58(1H), 1,29(1H), 1,18(3H), 1,08(3H), 0,60(3H); IR (nujol) 3124, 3088, 3078, 1738, 1666, 1628, 1612, 1588, 1563, 1552, 1521, 1429, 1334, 1197, 1170 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 592 (M+H, 99), 595 (20), 594 (69), 593 (41), 592 (99), 519 (25), 517 (38), 240 (55), 175 (23), 173 (33), 109 (64); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7} +H^{+} 592,1617, hallado 592,1606; análisis calculado para C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7}: C, 56,76; H, 5,27; N, 7,09; hallado: C, 54,92; H, 5,41; N, 6,91; KF agua: 3,05% H_{2}O.
Preparación 7-F-2
Esquema 7, 7-F: en el que R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
Éster metílico del (1S-cis)-O-[((2,6-diclorofenil)metil]-N-[[3-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonilmetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (7-F-2) (C_{33}H_{42}Cl_{2}N_{2}O_{7}) se prepara a partir de 7-D (R^{7-1} =H y 7-E-2 éster metílico de O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (7-E:R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil, Estereoquímica = S) tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H-NMR:(CDCl_{3}) \delta 7,39-6,94(7H), 6,09(1H), 5,78(1H), 5,25(2H), 4,87(1H), 3,90(2H), 3,74(3H), 3,09(2H), 2,59-2,20(3H), 1,80(1H), 1,56(1H), 1,47(9H), 1,30(3H), 1,26(3H), 0,81(3H); IR (mull) 3327, 1762, 1741, 1664, 1637, 1538, 1512, 1440, 1241, 1229, 1206, 1198, 1174, 1156, 1022 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 649 (M+H, 50), 651 (34), 649 (50), 518 (21), 296 (23), 240 (44), 194 (28), 161 (26), 159 (41), 109 (99), 57 (37).
Preparación 7-G-2
Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
Éster metílico del (1S-cis)-O-[((2,6-diclorofenil)metil)]-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (7-G-2) (C_{29}H_{34}Cl_{2}N_{2}O_{7}) se prepara a partir de 7-F-2 tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H-NMR:(CDCl_{3}) \delta 8,14(1H), 7,37-6,93(7H), 6,51(1H), 6,02(1H), 5,24(2H), 4,85(1H), 4,02(2H), 3,73(3H), 3,09(2H), 2,57(1H), 2,41(1H),2,25(1H), 1,84(1H), 1,56(1H), 1,26(3H), 1,20(3H), 0,79(3H); MS (ES+) m/z 592,9.
Preparación del Ejemplo 185
Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
El (1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3,-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil-L-tirosina (Ejemplo 185) (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7}) se prepara a partir de 7-G-2 (R^{7-1}= H, R^{4}=H,R^{5} =CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo, Estereoquímica =S), tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H NMR(300MHz, DMSO-d_{6}) 7,8-6,9(9H), 5,18(2H), 4,42(1H), 3,8-3,6(2H), 3,02-2,82(2H), 2,65(1H), 2,38(1H), 1,91(1H), 1,58(1H), 1,30(1H),1,19(3H), 1,10(3H), 0,61(3H); IR (nujol) 3409, 1733, 1645, 1612, 1585,1564, 1511, 1439, 1297, 1239, 1197, 1179, 1018, 786, 770 cm^{-1}; MS(FAB) m/z (intensidad relativa) 579 (M+H, 99), 582 (22), 581 (67), 580(44), 579 (99), 578 (21), 240 (34), 161 (21), 159 (34), 109 (46), 91(37); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7} +H^{+} 579,1664, hallado 579,1667.
Preparación 7-C-2
Esquema 7, 7-C: en el que R^{7-1}=CH_{3},
Estereoquímica = [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]]
El éster [fenil(metil)] del ácido [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-3-[[[1-(1,1-dimetiletoxicarbonil)etil]amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentanocarboxílico (7-C-2) (C_{24}H_{35}NO_{5}) se prepara a partir de 7-A y 7-B (R^{7-1}=CH_{3}, Estereoquímica = S), tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H NMR(300MHz, CDCl_{3}) \delta 7,37-7,16(5H), 6,18(1H), 5,12(2H), 4,41(1H), 2,84(1H), 2,46(1H), 2,28(1H), 1,87(1H), 1,52(1H), 1,51(9H), 1,35(3H), 1,28(3H), 1,20(3H), 0,78(3H). MS(ES+) m/z 455,1
Preparación 7-D-2
Esquema 7, 7-D: en el que R^{7-1}=CH_{3},
Estereoquímica = [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]]
El ácido (1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-3-[[[1-(1,1-dimetiletoxicarbonil)etil]amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentanocarboxílico (7-D-2) (C_{17}H_{29}NO_{5}) se prepara a partir de 7-C-2, tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H NMR(300MHz, CDCl_{3}) \delta 6,28(1H), 4,44(1H), 2,86(1H), 2,43(1H), 2,23(1H), 1,93(1H), 1,56(1H), 1,47(9H), 1,36(3H), 1,31(3H), 1,22(3H), 0,90(3H); MS(ES-) m/z 326,1.
Preparación 7-F-3
Esquema 7, 7-F: en el que R^{7-1}=CH_{3}, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]]
El éster metílico de la [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-[[3-[[[1-(1,1-dimetiletoxicarbonil)etil]amino]carbonil]-2,2,3,-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (7-F-3) (C_{34}H_{44}Cl_{2}N_{2}O_{7}) se prepara a partir de 7-D-2 y 7-E-2 (7E: R^{4}= H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil) metoxi]fenil), tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H NMR(300MHz, CDCl_{3}) \delta 7,38-6,93(7H), 6,20(1H), 5,77(1H), 5,25(2H), 4,87(1H), 4,42(1H), 3,73(3H), 3,09(2H), 2,44(2H), 1,76(2H), 1,52(1H), 1,46(9H), 1,35(3H), 1,27(3H), 1,20(3H), 0,80(3H). IR (nujol) 1739, 1654, 1612, 1585, 1565, 1511, 1439, 1344, 1300, 1240, 1198, 1177, 1154, 1017, 768 cm^{-1}. MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 663 (M+H, 82), 665 (60), 664 (37), 663 (82), 518 (27), 254 (51), 208 (24), 161 (28), 159 (45), 109 (99), 57 (33).
Preparación 7-G-3
Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}=CH_{3}, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]]-L
El éster metílico de la (1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (7-G-3)(C_{30}H_{36}Cl_{2}N_{2}O_{7}) se prepara a partir de 7-F-3, tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H NMR(300MHz, CDCl_{3}) \delta 10,55(1H), 7,38-6,94(7H), 6,47(1H), 6,12(1H), 5,25(2H), 4,87(2H), 4,55(1H), 3,75(3H), 3,10(2H), 2,60(1H), 2,41(1H), 2,25(1H), 1,87(1H), 1,58(1H), 1,46(3H), 1,24(3H), 1,21(3H), 0,78(3H); MS(ES+) m/z 606,8
Preparación del Ejemplo 188
Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}=CH_{3}, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]
La (1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{29}H_{34}Cl_{2}N_{2}O_{7}) se prepara a partir de 7-G-3, tal como se indica en el Esquema 7.
^{1}H NMR(300MHz, DMSO-d_{6}) 7,71(1H), 7,54-7,43(3H), 7,28(1H), 7,16(2H), 6,93(2H), 5,16(2H), 4,40(1H), 4,16(1H), 3,02-2,80(2H), 2,63(1H),2,35(1H), 1,86(1H), 1,54(1H), 1,35-1,23(4H), 1,14(3H), 1,08(3H), 0,59(3H); IR (nujol) 3427, 3031, 1731, 1645, 1612, 1585, 1565, 1512, 1439, 1297, 1239, 1230, 1197, 1179, 1017 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 593 (M+H, 99), 596 (22), 595 (69), 594 (43), 593 (99), 592 (17), 504 (22), 254 (63), 161 (44), 159 (40), 109 (72).
Esquema 8
R^{8-1} se define de la misma forma que R^{7-1} para incluir aminoácidos que están incluidos en la definición de R^{2}; R^{8-2} es protón o junto con R^{8-1} un amino ácido cíclico.
74 
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Preparación de 8-C-1
Esquema 8, 8-C: en el que R^{8-1}=H, R^{8-2}=H,
Estereoquímica = 1S-cis
(1S-cis)-N-[[1-[(fenilmetoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]glicina amida (8-C-1) (C_{19}H_{26}N_{2}O_{4})
Una solución de ácido (1R-cis)-[3-fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentanocarboxílico (7-A) (1 g, 3,44 mmol) en DMF seco, se enfrió en un baño de agua helada y diisopropiletilamina (1,77 g, 13,76 mmol, 2,39 mL), HATU (1,35, 3,55 mmol), y 8-B (R^{8-1}= H, R^{8-2}= H) (0,38g, 3, 44 mmol), se añaden en orden. Se deja que la mezcla se agite durante 48 horas, por lo que el hielo se funde y la solución se calienta hasta la temperatura ambiente. La solución se vierte en cloruro de metileno (0,25 L) y 1N de NaOH acuoso (0,25 L). La fase orgánica se separa y se lava en orden con 1 N de HCl acuoso (0,25 L), agua (5 X 0,25 L) y salmuera (0,25 L). La fase orgánica se seca y se concentra in vacuo ("al vacío") para dar lugar a la amida en bruto como un polvo de color marfil. La amida en bruto se recristaliza a partir de hexanos-cloroformo para proporcionar la amida diana 8-C (R^{8-1}=H, R^{8-2}=H) como un polvo fino, blanco y que circula libremente.
P.F.: 163-164ºC; ^{1}H-NMR (300MHz, CDCl_{3}): \delta 7,25-7,40(5H), 6,36(1H), 6,08(1H), 5,33(3H), 5,15(1H), 5,10(1H), 3,93(2H), 2,85(1H), 2,43(1H), 2,27(1H), 1,40-1,65(2H), 1,30(3H), 1,21(3H), 0,76(3H); IR (nujol) 3383, 3361, 3184, 2924, 1766, 1710, 1684, 1626, 1527, 1402, 1253, 1166, 753 cm^{-1}; MS (EI) m/z (intensidad relativa) 346 (M+, 4), 329 (2), 273 (3), 255 (3), 239 (3), 211 (6), 153 (11), 109 (17), 91 (base); análisis calculado para C_{19}H_{26}N_{2}O_{4}: C, 65,88; H, 7,56; N, 8,09; hallado: C, 65,94; H, 7,65; N, 8,09.
Preparación de 8-D-1
Esquema 8, 8-D: en el que R^{8-1}=H, R^{8-2}=H,
Estereoquímica = 1S-cis
(1R-cis)-N-[[3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]glicina amida (8-D-1) (C_{12}H_{20}N_{2}O_{4})
Una solución de 8-C (R^{8-1} = H, R^{8-2}= H) (3,46 g, 100 mmol) en THF (225 mL), que contenía Pd/C al 10% (1,14 g), se hidrogenó bajo una presión de 50psi de hidrógeno durante 12 horas. Se eliminó el catalizador mediante filtración a través de una estructura de celita, rociándose la estructura del filtro con THF (100 mL) y concentrándose los filtrados combinados in vacuo para dar lugar al producto en bruto como una espuma blanca. El material en bruto se recristalizó a partir de hexanos-THF para conseguir el compuesto 8-D diana (R^{8-1}= H, R^{8-2}= H) (2,4 g, 94%) como agujas blancas finas.
P.F.: 86-87ºC; ^{1}H-NMR (300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 12,00(1H), 7,28(1H), 7,13(1H), 6,92(1H), 3,56(2H), 2,67(1H), 2,34(1H), 1,97(1H), 1,72(1H), 1,36(1H), 1,19(3H), 1,09(3H), 0,68(3H); IR (nujol) 3496, 3391, 3189, 2924, 1729, 1705, 1686, 1623, 1519, 1401, 1280, 1245, 1200, 665 cm^{-1}; MS (EI) m/z (intensidad relativa) 238 (2), 221 (6), 195 (base), 138 (26), 109 (81), 95 (67); análisis calculado para C_{12}H_{20}N_{2}O_{4}: C, 56,24; H, 7,86; N, 10,93; hallado: C, 55,90; H, 8,05; N, 10,50.
Preparación de 8-F-1
Esquema 8, 8-F: en el que R^{8-1}=H, R^{8-2}=H, R^{4} = H, R^{5}= CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo,
Estereoquímica = 1S-cis-L
Ester metílico de la (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{29}H_{34}Cl_{2}N_{4}O_{6})
A 8-D (R^{8-1}=H, R^{8-2} = H)) (1,03 g, 4 mmol) en DMF seco (25 mL), enfriado en un baño de agua helada, se añade en orden diisopropiletilamina (2,07 g, 16 mmol, 2,8 mL), metil éster de 4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina, sal clorhidrato, y 7-E-1\cdotHCl (7-E:R^{4}= H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil (1,48 g, 4 mmol) y HATU (1,49g, 4,2 mmol). Se agita la mezcla durante 48 horas, por lo que el hielo se funde y la solución se calienta hasta la temperatura ambiente. La solución se vierte en acetato de etilo (1 L) y esta solución se lava sucesivamente con 1 N de HCl acuoso (1 L), agua (4 X 1 L),1N de NaOH acuosa (1 L) y salmuera (1 L). La fase orgánica se separa, se seca (Na_{2}SO_{4}), y se concentra in vacuo ("al vacío") para dar lugar al producto deseado 8-F (R^{8-1} = H, R^{8-2} = H, R^{4} = H, R^{5}= CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (1,12 g, 42%) como un polvo fino y blanco.
P.F.: 232-233ºC; ^{1}H-NMR (300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 10,75(1H), 7,94(1H), 7,45-7,70(5H), 7,35(1H), 7,19(2H), 7,13(1H), 6,92(1H), 4,81(1H), 3,57(3H), 3,55(2H), 2,92(2H), 2,64(1H), 2,34(1H), 1,88(1H), 1,62(1H), 1,30(1H), 1,16(3H), 1,07(3H), 0,58(3H); IR (nujol): 3344, 3251, 3194, 3126, 3072, 2924, 1743, 1699, 1669, 1652, 1623, 1528, 1432, 1328, 799 cm^{-1}; MS (FAB): m/z (intensidad relativa) 605 (M+2H), base), 531 (28), 503 (2), 367 (7), 349 (17), 256 (10), 239 (66), 194 (31), 173 (37), 137 (12), 109 (83); análisis calculado para C_{29}H_{34}Cl_{2}N_{4}O_{6}-0,3H_{2}O: C, 57,02; H, 5,71; N, 9,17; hallado: C, 57,01; H, 5,86; N, 8,89.
Preparación del Ejemplo 180
Esquema 8, 8-G: en el que R^{8-1}=H, R^{8-2}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo,
Estereoquímica = [1S-cis)-L
La (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]-carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 180) (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{6})
A 8-F (R^{8-1}=H, R^{8-2} = H, R^{4}= H, R^{5}= CO_{2}H_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenil) (1,05 g, 1,7 mmol) disuelto en metanol (30 mL), se añade una solución de LiOH\cdot2H_{2}O (0,32g, 7,65 mmol) en agua (10 mL), gota a gota durante 15 minutos. La mezcla se agita durante 18 horas a temperatura ambiente y el pH se ajusta entonces a 7 añadiendo cuidadosamente 1N HCl acuoso. La mayor parte del metanol se elimina in vacuo ("al vacío") y el pH de la solución resultante se ajusta a 2, con 1 N de HCl acuoso. El precipitado blanco resultante floculante se aísla mediante filtración y se seca. El sólido se tritura y se lava con agua (2X10mL) y se seca in vacuo a 50ºC, para dar lugar a 0,97 g (97%) de 8-G (R^{8-1}=H, R^{8-2}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo) como un sólido blanco en polvo.
P.F.: 203-205ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}): 12,51(1H), 10,70(1H), 7,75(1H), 7,45-7,57(3H), 7,33(1H), 7,20(2H), 7,11(1H), 6,92(1H), 4,43(1H), 3,63(1H), 3,47(2H), 3,30(2H), 3,01(1H), 2,84(1H), 2,31(1H), 1,87(1H), 1,55(1H), 1,31(1H), 1,17(3H), 1,08(3H), 0,59(3H); IR (nujol): 3511, 3325, 3128, 3082, 2868, 1722, 1697, 1664, 1614, 1555, 1537, 1417, 1337, 1246, 799 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 591 (M+ H, base), 517 (32), 335 (26), 239 (32), 173 (39), 109 (63), 57 (80); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{6} +H^{+} 591,1777, hallado 591,1747.
Preparación de 8-F-2
Esquema 8, 8-F: en el que R^{8-1}=H, R^{8-2}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = [1S-cis)-L
El éster metílico de la (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3,-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (8-F-2) (C_{29}H_{35}Cl_{2}N_{3}O_{6}) se prepara a partir de 8-D (R^{8-1}= H, R^{8-2} = H) y 7-E-2 (R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo) tal como se indica en el Esquema 8.
^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,37-6,93(7H), 6,54(1H), 6,40(1H), 5,82(1H), 5,60(1H), 5,24(2H), 4,85(1H), 3,93(2H), 3,73(3H), 3,09(2H), 2,54(1H), 2,40(1H), 2,23(1H), 1,78(1H), 1,52(1H), 1,27(3H), 1,20(3H), 0,78(3H); MS(ES+) m/z 591,9.
Preparación del Ejemplo 187
Esquema 8, 8-G: en el que R^{8-1}=H, R^{8-2}=H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = [1S-cis)-L
La (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]2,2,3,-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (Ejemplo 187) (C_{28}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{6}) se prepara a partir de 8-F (R^{8-1}=H, R^{8-2} = H, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo) tal como se indica en el Esquema 8.
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}) 7,74(2H), 7,55-7,40(4H), 7,15(3H), 6,94(3H), 5,16(2H), 4,41(1H), 3,75-3,48(2H), 3,1-2,8(2H), 2,63(1H), 2,33(1H), 1,87(1H), 1,54(1H), 1,32(1H), 1,17(3H), 1,08(3H), 0,58(3H); MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 578 (M+H, 99), 581 (30), 580 (72), 579 (57), 578 (99), 577 (19), 504 (17), 322 (18), 239 (35), 161 (29), 159 (34); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{28}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{6} +H^{+} 578,1824, hallado 578,1836.
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Esquema 9
Ejemplo 183
75
Preparación del Ejemplo 183
Esquema 9, 9-G: en el que R^{4}=H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo
Estereoquímica = [1S-cis)-L
La (1S-cis)-N-[[3-(carboximetoximetil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 183) 7-A (1,15 g, 3,96 mmol) se disolvió en THF seco (5 mL). El matraz de reacción se sumergió en un baño a -15ºC (etilenglicol/CO_{2}), añadiendo entonces lentamente diborano-tetrahidrofurano (1M, 1 equiv, 3,96 mmol, 3,96 mL). La solución reactiva se agitó a -15ºC bajo N_{2} durante el día, y se equilibró a la temperatura ambiente por la noche. La solución reactiva se trató con carbonato potásico (1,2 g) en H_{2}O (25 mL). La capa de THF se separó y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con NaCl saturado (20 mL) y se secaron (MgSO_{4}). Se eliminó el disolvente in vacuo a partir de la mezcla, para obtener 0,83 g (76%) de 9-B. El producto en bruto se cromatografió, utilizando inicialmente CH_{2}Cl_{2} como eluyente, seguido por CH_{2}Cl_{2}\MeOH (5%). Producto deseado recuperado, 9-B, (0,76 g, 69%) de la columna: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,80(3H), 1,00(3H), 1,11(3H), 1,32-1,47(1H), 1,62-1,91(2H), 2,09-2,22(1H), 2,86(1H), 3,48-3,59(2H), 5,08-5,18(2H), 7, 28-7,41(5H).
Una solución de éster bencílico de 9-B (0,76 g, 2,75 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) se trató a 0ºC y bajo N_{2} con diazoacetato de etilo (5 equiv, 13,75 mmol, 1,4 mL) y una cantidad catalítica de HBF_{4} (0,1 equiv, 0,03 mL). La solución reactiva se agitó bajo N_{2} durante la noche mientras la temperatura del baño se equilibraba a la temperatura ambiente. El disolvente se eliminó bajo presión reducida para dar lugar a 1,8 g del producto. El producto en bruto se sometió a una cromatografía instantánea en columna de gel silíceo (35 mm x 15,2 cm), que eluyó con EtOAc/hexanos al 2-10%, para proporcionar 0,64 g (64%) de 9-C: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,81(3H), 1,05(3H), 1,12(3H), 1,22-1,31(3H), 1,32-1,43(1H), 1,54-1,62(2H), 1,65-1,92(2H), 2,08-2,23(1H), 2,85(1H), 3,28(1H), 3,47(1H), 3,96-4,08(2H), 4,14-4,25(2H), 5,07-5,18(2H), 7,28-7,40(5H).
El éster bencílico de 9-C (0,3 g, 0,83 mmol) se disolvió en EtOH absoluto (10 mL). La solución se trató con una cantidad catalítica de Pd/C al 10% (0,2 gramos) y se hidrogenó a 20 psi durante 1 hora en un dispositivo de hidrogenación Parr. La suspensión se filtró a través de una célula de celita, lavándose ésta con EtOH. El disolvente se eliminó del filtrado bajo presión reducida para obtener 0,19 g (84%) de 9-D: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,90(3H), 1,06(3H), 1,16(3H), 1,19-1,32(3H), 1,33-1,45(1H), 1,65-1,92(2H), 2,03-2,18(1H), 2,83(1H), 3,29(1H), 3,49(1H), 3,95-4,11(2H), 4,19(2H).
9-D (0,18 g, 0,66 mmol) ácido, HOBT (1,2 equiv, 0,18 mmol, 0,11 g), DMAP (0,11 equiv, 0,074 mmol, 0,009 g), EDCl (1,2 equiv, 0,78 mmol, 0,15 g) y Et_{3}N (3,8 equiv, 2,5 mmol, 0,35 mL) se disolvieron en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) a 0ºC. La mezcla reactiva se agitó durante varios minutos y se añadió entonces 7-E-1 (1,0 equiv, 0,69 mmol, 0,28 g). La mezcla se agitó durante la noche mientras que la temperatura del baño se equilibraba con la temperatura ambiente. La mezcla reactiva se concentró hasta sequedad bajo presión reducida. El residuo se extinguió con H_{2}O ácida (30 mL) y se extrajo con CHCl_{3} (3 x 15 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con NaHCO_{3} (30 mL), se sacaron (MgSO_{4}) y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía instantánea de gel silíceo (20 mm x 22,9 cm) utilizando como eluyente CH_{2}Cl_{2} al 90%/EtOAc.
Las fracciones que contenían el compuesto se combinaron y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El producto se disolvió en CH_{3}CN:H_{2}O, se congeló y se liofilizó para dar lugar a 0,18 g (44%) de 9-F (en donde R^{4}= H, R^{5}= CO_{2}CH_{3} y R^{6}=C_{6}H_{4}OCH_{2}C_{6}H_{3}Cl_{2}): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,82 (3 H), 1,05 (3 H), 1,12 (3 H), 1,27 (2 H), 1,31-1,43 (1 H), 1,59-1,84 (2 H), 2,05-2,21 (1 H), 2,55 (1 H), 3,03-3,23 (2 H), 3,30 (1 H), 3,47 (1 H), 3,74 (3 H), 3,93-4,09 (2 H), 4,19 (2 H), 4,90 (2 H), 5,76 (1 H), 7,11 (2 H), 7,24-7,39 (3 H), 7,47 (1 H), 7,57 (2 H); IR (mull aceite mineral) 3292, 3193, 3123, 3064, 3033, 2951, 2922, 2870, 2855, 2854, 1748, 1657, 1656, 1606, 1579, 1562, 1537, 1515, 1461, 1431, 1414, 1376, 1348, 1324, 1271, 1207, 1196, 1153, 1129, 1023, 800, 781 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{31}H_{38}Cl_{2}N_{2}O_{7}, m/z (intensidad relativa) 623 (([M + H]^{+}, 49), 622 ([M + H]^{+}, 29), 621 ([M + H]^{+}, 71), 620 (M^{+}, 71, 517 (12), 351 (16), 349 (22), 175 (16), 173 (26), 151 (27), 123 (100). Análisis calculado para C_{31}H_{38}Cl_{2}N_{2}O_{7}: C, 59,91; H, 6,16; N, 4,51; Cl, 11,41; hallado: C, 59,67; H, 6,09; N, 4,63; Cl, 11,50. Corregido para el 0,40% de H_{2}O encontrada mediante el análisis Karl Fischer.
A una solución de éster metilo de 9-F (R^{4}=H, R^{5}= CO_{2}CH_{3}, R^{6} = C_{6}H_{4}OCH_{2}C_{6}H_{3}Cl_{2}) (0,11 g, 0,18 mmol) en MeOH (5 mL) se añadió LiOH\cdotH_{2}O (5 equivalentes, 0,88 mmol, 0,04 g) en H_{2}O (1 mL). Se dejó que la solución reactiva fuera agitara durante 2 horas aproximadamente. El disolvente se eliminó in vacuo. El residuo se disolvió en H_{2}O (30 mL), y se acidificó con HCl. El precipitado resultante se filtró y lavó con H_{2}O. El precipitado se disolvió en CH_{3}CN:H_{2}O (10 mL), se congeló y se liofilizó para dar lugar a 0,083 g (80%) del Ejemplo 183 (9-G: donde R^{4}= H y R^{6}=C_{6}H_{4}OCH_{2}C_{6}H_{3}Cl_{2}): ^{1}H NMR (MeOD) \delta 0,79 (3 H), 1,00 (3 H), 1,05 (3 H), 1,23-1,41 (1 H), 1,60-1,78 (2 H), 1,91-2,05 (1 H), 2,72 (1 H), 2,98 (1 H), 3,20 (1 H), 3,46 (1 H), 3,93-4,08 (2 H), 4,66-4,78 (1 H), 7,24 (2 H), 7,38-7,51 (3 H), 7,57 (2 H), 7,73 (1 H); IR (mull aceite mineral) 3270, 3193, 3123, 3056, 3034, 2954, 2928, 2854, 1731, 1657, 1607, 1562, 1537, 1516, 1461, 1459, 1432, 1414, 1376, 1326, 1272, 1220, 1195, 1126, 800, 781 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7}, m/z (intensidad relativa) 581 (([M + H]^{+}, 51), 580 ([M + H]^{+}, 29), 579 ([M + H]^{+}, 76), 578 (M^{+}, 8), 337 (12), 335 (18), 175 (19), 173 (29), 161 (18), 151 (18), 123 (100). Análisis calculado para C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7}: C, 58,04; H, 5,57; N, 4,84; Cl, 12,24; hallado: C, 57,87; H, 5,44; N, 4,97; C1, 12,29. Corregido para el 2,17 % de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
Esquema 10
R^{10-1} se define como metilo o CH_{2}-OCH_{3}
76 
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Preparación del Ejemplo 192
Esquema 10, 10-G: en el que R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo
Estereoquímica = [1S-cis)-L
(1S-cis)-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-[(3-hidroxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (Ejemplo 192)
En un matraz de fondo redondo de 100 mL, secado en una estufa, se dispuso el éster metílico del ácido (1S-cis)-[3-carboxi-2,2,3trimetil]ciclopentano carboxílico (10-A) (5,0 g, 23 mmol, 1 equivalente), seguido por THF seco (20 mL). El matraz de reacción se sumergió en un baño a -15ºC (de etilenglicol/hielo seco), añadiéndose entonces lentamente trifluoruro de boro-tetrahidrofurano (1 equiv, 1 M, 23 mmol, 23 mL). [Nota: se observó una evolución suave del gas H_{2}]. La solución de reacción fue sometida a agitación durante 24 horas bajo atmósfera de N_{2}. Se dejó que la solución se agitase en el baño a -15ºC durante el día, permitiéndose que durante la noche alcanzara éste la temperatura ambiente. La cromatografía en capa fina de gel silíceo, utilizando como eluyente 1:1 hexanos/acetato de etilo, mostró que el material inicial había desaparecido. En consecuencia, la solución reactiva se extinguió con H_{2}O (100 mL) y se trató entonces con carbonato potásico (6 g). La fase THF se separó mientras la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 80 mL). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con NaCl saturado (100 mL) y se secaron (MgSO_{4}). El disolvente se eliminó mediante un evaporador rotatorio y entonces, durante la noche se sometió a alto vacío para conseguir 4,7 g del producto en bruto. Éste se sometió a una columna de cromatografía instantánea (35 mm x 25,4 cm) de gel de sílice. La elución con EtOAc al 5%/hexanos condujo a la obtención de 4,0 g (87%) de 10-B como un aceite claro: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,79 (3 H), 0,99 (3 H), 1,10 (3 H), 1,32-1,43 (1 H), 1,48 (H), 1,63-1,88 (2 H), 2,04-2,15 (1 H), 2,8 (1 H), 3,52 (2 H), 3,66 (3 H); IR (mull aceite mineral) 3445, 2968, 2878, 1734, 1719, 1456, 1436, 1372, 1358, 1270, 1218, 1203, 1173, 1031, 1006 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{11}H_{20}O_{3}, m/z (intensidad relativa) 202 ([M + 2H]+, 11), 201 ([M + H]^{+}, 100), 200 (M^{+}, 0,9), 183 (11), 169 (8), 151 (8), 123 (29). Análisis calculado para C_{11}H_{20}O_{3}: C, 65,97; H, 10,07; hallado: C, 65,94; H, 9,91. Corregido para el 0,85% de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
El éster metílico del ácido (1S-cis)-[3-hidroximetil-2,2,3-trimetil]-ciclopentano carboxílico 10B (1,5 g, 7,5 mmol) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (35 mL). Al matraz enfriado a 0ºC, se añadió lentamente éter clorometil metílico (3,3 equiv, 25 mmol, 1,9 mL) y a continuación se añadió DIEA (5,87 mL, 4,5 equiv. 3,4 mmol). Se dejó que la temperatura del baño se equilibrara con la temperatura ambiente, agitándose durante cuatro días la mezcla reactiva. El disolvente se eliminó mediante un evaporador rotatorio. El producto en bruto se disolvió en tolueno, y el precipitado insoluble se filtró y el filtrado concentrado se cromatografió instantáneamente sobre gel de sílice (35 mm x 5,2 cm) utilizando EtOAc al 2%/hexanos como eluyente para obtener 1,37 g (75%) de 10-C (donde R^{10-1} = metoximetil): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,80 (3 H), 1,02 (3 H), 1,12 (3 H), 1,34-1,45 (1 H), 1,57 (H), 1,67-1,87 (2 H), 2,07-2,18 (1 H), 2,82 (1 H), 3,31 (1 H), 3,36 (3 H), 3,45 (1 H), 3,67 (3 H), 4,56-4,61 (2 H).
El compuesto 10-C (1,57 g, 6,4 mmol) se disolvió en THF (20 mL) y se trató con LiOH.H_{2}O (10 equiv, 64 mmol, 2,7 g) en H_{2}O (30 mL), H_{2}O_{2} (6 mL), H_{2}O (16 mL) y MeOH (16 mL). La mezcla se sometió a reflujo durante la noche. El disolvente se eliminó in vacuo, el residuo bruto se extinguió con H_{2}O (35 mL) y el pH se disminuyó hasta 5 con 10%, 6N ó 12 N de ácido clorhídrico. La porción acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL) y entonces con CHCl_{3} (3 x 20 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron (MgSO_{4}) y el disolvente se eliminó en el evaporador
rotatorio.
El producto en bruto se sometió a una cromatografía instantánea en columna de gel silíceo (35 mm x 15,2 cm) utilizando como eluyente hexanos al 80%/EtOAc, para obtener 1,1 g (75%) de 10-D (donde R^{10-1} = metoxi metil): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,89 (3 H), 1,03 (3 H), 1,16 (3 H), 1,36-1,46, 1,68-1,89, 2,04-2,18 (1 H), 2,85 (1 H), 3,32 (1 H), 3,36 (3 H), 3,47 (1H), 4,57-4,62 (2 H).
Compuesto 10-D (0,83 g, 3,6 mmol), HOBT (1,13 equiv, 4,1 mmol, 0,55 g), DMAP (0,11 equiv, 0,4 mmol, 0,048 g), EDCl (1,1 equiv, 4,0 mmol, 0,76 g) y Et_{3}N (3,6 equiv, 13 mmol, 1,8 mL) se mezclaron en CH_{2}Cl_{2} (30 mL) a 0ºC. La mezcla reactiva se agitó durante varios minutos, y entonces se añadió el clorhidrato del éster metílico de la O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina 7-E-2.HCl (en el que R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil) (1 equiv, 3,6 mmol, 1,4 g). La mezcla se agitó por la noche mientras se equilibraba la temperatura del baño a la temperatura ambiental. La mezcla reactiva se concentró hasta sequedad bajo presión reducida. El residuo se extinguió con H_{2}O ácida (70 mL), y se extrajo con CHCl_{3} (3 x 35 mL). Se combinaron las capas orgánicas, se lavaron con NaHCO_{3} saturado (40 mL), se secaron (MgSO_{4}) y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El producto en bruto se sometió a una cromatografía instantánea en columna de gel silíceo (35 mm x 15,2 cm) utilizando como eluyente EtOAc al 10%/hexanos, para obtener 1,6 g (78%) de 10-F-1 (10-F (donde R^{10-1} = metoximetil), R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3} y R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil-): ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 400 MHz) \delta 0,82 (3 H), 1,03 (3 H), 1,11 (3 H), 1,33-1,42 (1 H), 1,61 (2 H), 1,63-1,82 (2 H), 2,08-2,21 (1 H), 2,56 (1 H), 3,03-3,16 (2 H), 3,31 (1 H), 3,36 (3 H), 3,46 (1 H), 3,75 (3 H), 4,57-4,61 (2 H), 4,85-4,93 (1 H), 5,26 (2 H), 5,72 (1 H), 6,96 (2 H), 8,6 (2 H), 7,22-7,28 (1 H), 7,37 (2 H); IR (mull aceite mineral) 2951, 2879, 1746, 1668, 1657, 1565, 1511, 1468, 1439, 1382, 1371, 1241, 1216, 1197, 1179, 1148, 1108, 1096, 1047, 1019, 780, 768 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{29}H_{37}Cl_{2}N_{1}O_{6}, m/z (intensidad relativa) 568 
\hbox{(([M + H] ^{+} ,}
69), 566 ([M + H]^{+}, 100), 565 (M^{+}, 12), 506 (41), 504 (61), 336 (41), 161 (40), 159 (62), 123 (83), 45 (53). Análisis calculado para C_{29}H_{37}Cl_{2}H_{1}O_{6}: C, 61,48; H, 6,58; N, 2,47; Cl, 12,52; hallado: C, 61,30; H, 6,55; N, 2,80; Cl, 12,57. Corregido para el 0,11% de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
El compuesto 10-F (0,74 g, 1,3 mmol) se disolvió en MeOH (30 mL) y se trató con HCl concentrado (5 mL), sometiéndose a agitación a la temperatura ambiental durante 24 horas. El disolvente se eliminó in vacuo, para dar un residuo que se llevó a CHCl_{3} y se lavó con NaHCO_{3} saturado. [Nota: después del tratamiento con NaHCO_{3}, se formó un precipitado que se filtró y lavó con CHCl_{3}]. El volumen del filtrado se redujo in vacuo y se sometió a una cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (35 mm x 16,5 cm) utilizando hexanos al 50%/EtOAc como eluyente. Las fracciones que contenían el compuesto puro se combinaron y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en CH_{3}CN al 50%:H_{2}O (10 mL), se congeló y liofilizó para dar lugar a 0,23 g (34%) de 10-G (en el que R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3} y R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil-: ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 400 MHz) \delta 0,84 (3 H), 1,00 (3 H), 1,10 (3 H), 1,37-1,48 (1 H), 1,69-1,82 (2 H), 2,09-2,21 (1 H), 2,55 (1 H), 3,02-3,18 (2 H), 3,51-3,59 (2 H), 3,75 (3 H), 4,84-4,91 (1 H), 5,26 (2 H), 5,75 (1 H), 6,96 (2 H), 7,05 (2 H), 7,22-7,29 (1 H), 7,37 (2 H); IR (mull aceite mineral) 3428, 3322, 2923, 2870, 2854, 1743, 1654, 1565, 1511, 1466, 1439, 1377, 1298, 1278, 1240, 1197, 1179, 1018, 1003, 780, 768 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{27}H_{33}Cl_{2}N_{1}O_{5}, m/z (intensidad relativa) 524 ([M + H]^{+}, 65), 523 ([M + H]^{+}, 41), 522 ([M + H]^{+}, 100), 521 (M^{+}, 19), 354 (21), 338 (21), 336 (29), 161 (21), 159 (34), 123 (38). Análisis calculado para C_{27}H_{33}Cl_{2}N_{1}O_{5}: C, 62,07; H, 6,37; N, 2,68; Cl, 13,57; hallado: C, 61,85; H, 6,27; N, 2,85; Cl, 13,50. Corregido para el 0,44% de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
El compuesto 10-G (0,19 g, 0,36 mmol) se disolvió en CH_{3}OH (4 mL) y se trató con LiOH.H_{2}O (10 equiv, 0,15 g, 3,6 mmol) en H_{2}O (4 mL). Se añadió MeOH adicional (2 mL) para asegurar la solubilidad. La solución se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. El disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en H_{2}O caliente (20 mL). (Nota: El agua a temperatura ambiente provocó la disolución acuosa del gel). El pH de la solución disminuyó hasta 2 con 1,0 N HCl y el precipitado resultante se filtró, se lavó con H_{2}O y se secó para obtener 0,17 g (93%) del Ejemplo 192 (10-G: en el que R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H y R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil-): incapaz de determinar la temperatura de fusión debido a la contracción del compuesto a 80ºC; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,81 (3 H), 0,97 (3 H), 1,06 (3 H), 1,35-1,48 (1 H), 1,65-1,88 (2 H), 2,03-2,18 (1 H), 2,55 (1 H), 3,04-3,27 (2 H), 3,48-3,58 (2 H), 4,81-4,89 (1 H), 5,24 (2 H), 5,85 (1 H), 6,96 (2 H), 7,12 (2 H), 7,19-7,29 (1 H), 7,32-7,38 (2 H); IR (mull aceite mineral) 3421, 3332, 3058, 3030, 2954, 2920, 2871, 2855, 1729, 1653, 1612, 1585, 1565, 1511, 1466, 1439, 1377, 1299, 1241, 1196, 1179, 1018, 1003, 779, 769 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{26}H_{31}Cl_{2}N_{1}O_{5} m/z (intensidad relativa) 510 
\hbox{([M +  H] ^{+} ,}
66), 509, ([M + H]^{+}, 37), 508 ([M + H]^{+}, 100), 507 (M^{+}, 15), 340 (12), 324 (15), 322 (22), 161 (23), 159 (36), 123 (45). Análisis calculado para C_{26}H_{31}Cl_{2}N_{1}O_{5}: C, 61,42; H,6,15; N, 2,76; Cl, 13,95; hallado: C, 61,33; H, 6,16; N, 2,93; Cl, 13,74. Corregido para el 1,61% de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
Preparación del Ejemplo 198
Esquema 10, 10-F: en el que R^{10-1}=metilo, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo
Estereoquímica = [1S-cis)-L
(1S-cis)-O-[(2,6,diclorofenil)metil]-N-[(3-metoximetil-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (Ejemplo 198)
El alcohol 10-B (1,0 g, 4,8 mmol), en Et_{2}O (20 mL), se trató con eterato dimetil trifluoruro de boro (0,1 equiv, 0,48 mmol, 0,06 mL) y una cantidad en exceso de CH_{2}N_{2}\cdotEt_{2}O. La mezcla reactiva se agitó durante la noche. La mezcla se filtró y el disolvente se eliminó en un evaporador rotatorio. El producto en bruto se sometió a una cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (35 mm x 16,5 cm) utilizando como eluyente EtOAc al 1%/pentano, para obtener 0,69 g (67%) de 10C (donde R^{10-1} = metilo): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,79 (3 H), 1,00 (3 H), 1,10 (3 H), 1,32-1,43 (1 H), 1,60-1,89 (2 H), 2,04-2,20 (1 H), 2,80 (1 H), 3,16 (1 H), 3,28 (1 H), 3,31 (3 H), 3,68 (3 H).
El éster 10-C (0,37 g, 1,7 mmol) se disolvió en THF (40 mL) y se trató con LiOH\cdotH_{2}O (10 equiv, 17 mmol, 0,71 g) en H_{2}O (20 mL), MeOH (10 mL) y H_{2}O_{2} (10 mL). La mezcla se calentó a reflujo durante 8 horas aproximadamente. El disolvente se eliminó mediante un evaporador rotatorio. El residuo se disolvió en H_{2}O (50 mL), disminuyendo el pH a 5 con ácido clorhídrico, y extrayendo una porción acuosa con EtOAc (3 x 25 mL) seguido por CHCl_{3} (3 x 25 mL). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron (MgSO_{4}), y el disolvente se eliminó bajo presión reducida para dar lugar a 0,44 g de 10-D (en el que R^{10-1} =Me): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,86 (3 H), 1,00 (3 H),1,14 (3 H), 1,34-1,44 (1 H), 1,62-1,89 (2 H), 2,01-2,15 (1 H), 2,83 (1 H), 3,16 (1 H), 3,29 (1H), 3,30 (3 H).
El compuesto 10-D (0,25 g, 1,2 mmol) HOBT (1,13 equiv, 1,41 mmol, 0,19 g), DMAP (0,11 equiv, 0,14 mmol, 0,017 g), EDC (1,1 equiv, 1,37 mmol, 0,25 g) y Et_{3}N (3,6 equiv, 4,49 mmol, 0,6 mL) se mezclaron en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) a 0ºC. La mezcla reactiva se agitó durante varios minutos, y entonces se añadió 7-E-2\cdotHCl (0,8 equiv, 1,0 mmol, 0,4 g). La mezcla se agitó por la noche mientras se equilibraba la temperatura del baño a la temperatura ambiental. La mezcla reactiva se concentró hasta sequedad bajo presión reducida. El residuo se trató con H_{2}O ácida (30 mL), y se extrajo con CHCl_{3} (3 x 15 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con NaHCO_{3} saturado (20 mL), y se secaron con (MgSO_{4}), eliminándose el disolvente bajo presión reducida. El producto en bruto se purificó sometiéndolo a una cromatografía instantánea en columna de gel silíceo (20 mm x 16,5 cm) utilizando como eluyente EtOAc al 10-15%/hexanos. Las fracciones que contenían el compuesto se combinaron y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en CH_{2}CN al 50%:H_{2}O (50 mL), se congeló y se liofilizó para obtener 0,24 g (45%) de 10-F (donde R^{10-1} = metilo, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}CH_{3} y R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil-): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,79 (3 H), 0,99 (3 H), 1,09 (3 H), 1,32-1,43 (1 H), 1,61 (2 H), 1,65-1,85 (2 H), 2,08-2,23 (1 H), 2,53 (1 H), 3,01-3,18 (2 H), 3,16 (1 H), 3,28 (1 H), 3,30 (3 H), 3,74 (3 H), 4,83-4,91 (1 H), 5,25 (2 H), 5,74 (1 H), 6,96 (2 H), 7,05 (2 H), 7,23-7,29 (1 H), 7,35-7,40 (2 H): IR (mull aceite mineral) 3317, 2956, 2924, 2871, 2857, 2855, 1745, 1652, 1612, 1565, 1511, 1466, 1439, 1378, 1298, 1278, 1240, 1197, 1178, 1106, 1096, 1017, 1000, 779, 768 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{28}H_{35}Cl_{2}N_{1}O_{5}, m/z (intensidad relativa) 538 (([M + H]^{+}, 65), 537 ([M + H]^{+}, 40), 536 ([M + H]^{+}, 100), 535 (M^{+}, 16), 338 (16), 336 (24), 161 (18), 159 (28), 123 (69). Análisis calculado para C_{28}H_{35}Cl_{2}N_{2}O_{5} nH_{2}O: C, 62,69; H, 6,58; N, 2,61; Cl, 13,22; hallado: C, 62,44; H, 6,35; N, 2,88; Cl, 13,11. Corregido para el 0,37 % de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
El éster 10-F (0,27 g, 0,5 mmol) se trató con LiOH\cdotH_{2}O (10 equiv, 5,0 mmol, 0,21 g) en H_{2}O (8 mL). La mezcla reactiva se agitó durante 1 h. THF (3 mL) se añadió para completar la disolución del material inicial y se añadió MeOH (3 mL) para convertir la mezcla reactiva a la solución homogénea. El volumen se redujo bajo vacío. Se añadió H_{2}O (40 mL) y la mezcla se acidificó con HCl. El precipitado resultante se filtró, se lavó con H_{2}O, y se secó bajo campana de vacío para dar lugar a 0,26 g (99%) del Ejemplo 198 (10-F:donde R^{10-1} = metilo, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H y R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil-; Estereoquímica = (1S-cis)-L): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,77 (3 H), 0,98 (3 H), 1,05 (3 H), 1,31-1,42 (1 H), 1,61-1,85 (2 H), 2,01-2,16 (1 H), 2,53 (1 H), 3,07-3,28 (2 H), 3,15 (1 H), 3,27 (1 H), 3,29 (3 H), 4,79-4,87 (1 H), 5,24 (2 H), 5,77 (1 H), 6,97 (2 H), 7,12 (2 H), 7,21-7,29 (1 H), 7,32-7,39 (2 H); IR (mull aceite mineral) 3424, 3335, 3032, 2955, 2924, 2855, 1734, 1644, 1612, 1586, 1565, 1512, 1466, 1439, 1377, 1299, 1241, 1197, 1179, 1107, 1096, 1018, 873, 779, 769 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{27}H_{33}Cl_{2}N_{1}O_{5}, m/z (intensidad relativa) 524 (([M + H]^{+}, 62), 523 ([M + H]^{+}, 36), 522 ([M + H]^{+}, 96), 521 (M^{+}, 13), 324 (14), 322 (22), 161 (31), 159 (42), 123 (100). Análisis calculado para C_{27}H_{33}C_{12}N_{1}O_{5}nH_{2}O: C, 62,07; H, 6,37; N, 2,68; Cl, 13,57; hallado: C, 62,04; H, 6,24; N, 2,90; Cl, 13,91. Corregido para el 2,18% de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
Preparación del Ejemplo 203
Esquema 10, 10-F; en el que R^{10-1}=metoximetilo, R^{4}=H, R^{5}=CO_{2}H, y R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo-,
Estereoquímica = [1S-cis)-L
(1S-cis)-O-[(2,6,diclorofenil)metil]-N-[(3-metoximetoximetil-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-L-tirosina (Ejemplo 203)
El compuesto 10-F-1 (10-F: (en el que R^{10-1} = metoximetil, R^{4}= H, R^{5}=CO_{2}CH_{3} y R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil) metoxi]fenil-) (0,25 g, 0,44 mmol, se disolvió en MeOH (3 mL). La solución reactiva se trató con LiOH.H_{2}O (10 equiv, 4,4 mmol, 0,18 g) en H_{2}O (5 mL). Se añadió MeOH adicional (2 mL) para asegurar la solubilidad. [Nota: la mezcla reactiva se volvió clara en la 1ª hora del tiempo de reacción]. Se dejó que la solución se agitara por la noche a temperatura ambiente bajo N_{2}. El volumen del disolvente se redujo en un evaporador rotatorio, diluyéndose el material restante con H_{2}O (10 mL) y acidificándose con ácido clorhídrico. El precipitado resultante se filtró, se lavó con H_{2}O y se secó bajo una campana de vacío para dar lugar a 0,23 g (95%) del Ejemplo 203. Temperatura de fusión: incapaz de determinarse debido a la contracción del compuesto a 60ºC; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,79 (3 H), 1,01 (3 H), 1,07 (3 H), 1,32-1,46 (1 H), 1,62-1,84 (2 H), 2,01-2,18 (1 H), 2,55 (1 H), 3,02-3,24 (2 H), 3,30 (1 H), 3,35 (3 H), 3,45 (1 H), 4,55-4,61 (2 H), 4,81-4,89 (1 H), 5,24 (2 H), 5,76 (1 H), 6,97 (2 H), 7,12 (2 H), 7,18-7,27 (1 H), 7,31-7,37 (2 H); IR (mull aceite mineral) 2930, 2872, 2855, 1736, 1638, 1612, 1511, 1466, 1439, 1377, 1241, 1196, 1179, 1147, 1108, 1045, 1020 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{28}H_{35}Cl_{2}N_{1}O_{6}nH_{2}O, m/z (intensidad relativa) 554 (([M + H]^{+}, 67), 552 ([M + H]^{+}, 100), 551 (M^{+}, 16), 492 (38), 490 (56), 322 (33), 161 (40), 159 (64), 123 (73), 45 (61). Análisis calculado para C_{28}H_{35}Cl_{2}N_{1}O_{6}: C, 60,87; H, 6,39; N, 2,54; Cl, 12,83; hallado: C, 60,73; H, 6,41; N, 2,69; Cl, 12,86. Corregido para el 0,11% de H_{2}O encontrada mediante el análisis de Karl Fischer.
(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 11
77
Preparación 11-B
Esquema 11, 11-B
Estereoquímica = 1S-cis
Ester metílico del ácido (1S-cis)3-formil-2,2,3-trimetilciclopentanocarboxílico (11-B) (C_{11}H_{20}O_{3})
A una solución de 10-B (2,57 g, 12,8 mmol) en cloruro de metileno (50 mL), se añadió una mezcla de clorocromato de piridinio (3,05 g, 14,15 mmol), sulfato magnésico (4 g, 33 mmol) y Celita. Después de agitación nocturna, la mezcla se eluyó a través de una corta columna de gel de sílice (80 g), utilizando cloruro de metileno (500 mL) como eluyente. La evaporación in vacuo dio lugar a 11-B como un líquido decolorado (2,09 g, rendimiento del 82%).
^{1}H NMR(CDCl_{3}) \delta 9,65(1H), 3,67(3H), 2,81(1H), 2,40(1H), 2,23(1H), 1,94(1H), 1,42(1H), 1,16(3H), 1,05(3H), 0,88(3H).
Preparación 11-C
Esquema 11, 11-C
Estereoquímica = 1S-cis, (E)
Ester metílico del ácido (1S-cis)-3-[2-[1,1-dimetiletoxi)carbonil]etenil]-2,2,3-trimetilciclopentanocarboxílico (11-C) (C_{17}H_{28}O_{4})
A un matraz seco de 100 mL inundado con N_{2} se añadió t-butil dietil fosfonoacetato (5 mL, 21,3 mmol) y THF (seco, 20 mL). El matraz se sumergió en un baño de agua helada y, cinco minutos después, se añadió en porciones NaH/aceite (60% NaH, 0,5 g, 12,5 mmol). Después de 30 minutos, 11-B (2,08 g, 10,5 mmol) se mezcló con THF (seco, 15 mL) y se añadió mediante la jeringa durante un período de cinco minutos.
Cuatro horas después, la solución fría todavía se diluyó con tolueno (200 mL), se agitó con agua helada (4 X 100 mL) y se evaporó in vacuo hasta sequedad la capa orgánica, dando lugar a un aceite decolorado que se sometió a cromatografía en gel silíceo (80 g) utilizando un gradiente de 0 a 4% de etilacetato/hexano. Se obtuvo un aceite decolorado 11-C (1,99 g, rendimiento del 63%).
^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 6,92 (1H), 5,68 (1H), 3,67 (3H), 2,84 (1H), 2,23 (1H), 1,99 (1H), 1,90 (1H), 1,49 (1H), 1,48 (9H), 1,06 (3H), 1,01 (3H), 0,71 (3H); IR (nujol) 1728, 1712, 1651, 1438, 1358, 1316, 1288, 1270, 1228, 1220, 1191, 1171, 1151, 1132, 1001 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 297 (M+H, 44), 297 (44), 242 (12) 241 (87), 224 (14), 223 (99), 195 (14), 191 (14), 135 (12), 57 (34), 41 (12); HRMS (FAB) calculado para C_{17}H_{28}O_{4} + H1 297,2065, hallado 297,2067; análisis calculado para C_{17}H_{28}O_{4}: C, 68,89; H, 9,52; N; hallado: C, 69,03; H, 9,18.
Preparación 11-D
Esquema 11, 11-D
Estereoquímica = 1S-cis, (E)
Ácido (1S-cis)-3-[2-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]etenil]-2,2,3-trimetilciclopentancarboxílico (11-D) (C_{16}H_{26}O_{4})
Una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,65g, 15,4mmol) en H_{2}O (15mL) y H_{2}O_{2} en solución acuosa (5mL, 30%) se añade a una solución de 11-C (1,52g, 5,13mmol) en metanol (30mL). Después de agitación durante dos días, la mezcla es diluida con agua (100mL) y evaporada en vacío hasta que la totalidad del metanol desaparece. El resto acuoso es agitado a continuación con dietil éter (3X40mL) y a continuación es enfriado en un baño de agua con hielo y llevado a pH 5 utilizando HCl 1N en solución acuosa. El precipitado resultante de color blanco 11-D es aislado por filtrado en succión (0,385g, rendimiento 26%)
^{1}H NMR(CDCl_{3}): \delta 6,94 (1H), 5,69 (1H), 2,88 (1H), 2,27-1,84 (3H), 1,53 (1H), 1,49 (9H), 1,11 (3H), 1,02 (3H), 0,81 (3H); IR (nujol) 2729, 2669, 1707, 1647, 1418, 1393, 1316, 1305, 1242, 1154, 999, 976, 960, 944, 856cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 283 (M+H, 34), 566 (13), 283 (34), 228 (13), 227 (99), 210 (13), 209 (96), 191 (14), 181 (14), 57 (51), 41 (16); análisis calculado para C_{16}H_{26}O_{4}: C, 68,06; H, 9,28; hallado: C, 67,84; H, 9,10.
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Preparación 11-F-1
Esquema 11, 11-F: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha (E)]]-L
[1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-N-[[3-[2-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]etenil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster (11-F-1)(C_{33}H_{38}Cl_{2}N_{2}O_{6})
Una solución de 11-D (0,45g, 1,59mmol) en cloruro de metileno (15mL) es enfriada en un baño de agua helada. A esta solución en agitación se añadieron N,N-diisopropiletil amina (2mL, 11,48mmol), EDC (0,335g, 1,75mmol), HOBt (0,25g, 1,85mmol), y 4-N,N-dimetilaminopiridina (0,02g, 0,16mmol), seguido treinta minutos más tarde por el clorhidrato de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster 7-E-1\cdotHCl (7-E: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenil) (0,67g, 1,66mmol). Después de dos días, la mezcla de reacción es evaporada hasta estado seco, mezclada con tolueno (200mL), y agitada con solución acuosa de HCl 0,5N (50mL) seguido de agua (4X50mL). La capa orgánica es evaporada a continuación hasta estado seco en vacío para conseguir un sólido de color blancuzco que es recristalizado a partir de acetato de etilo proporcionando un sólido de color blanco (11-F-1) (0,59g, rendimiento 58%).
^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,84 (1H), 7,56 (2H), 7,35-7,25(3H), 7,08(2H), 6,90(1H), 5,77(1H), 5,65(1H), 4,87(1H), 3,73(3H), 3,12(2H), 2,59(1H), 2,21(1H), 2,05(1H), 1,85(1H), 1,49(1H), 1,47(9H), 1,03(3H), 0,99(3H), 0,69(3H); MS(ES+) m/z 631.
Preparación 11-G-1
Esquema 11, 11-G: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha (E)]]
[1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-N-[[3-[2-carboxietenil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster (11-G-1) (C_{29}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6})
Una solución de 11-F-1 (0,5g, 0,8mmol) en ácido trifluoroacético (3mL) es agitado durante una noche en atmósfera de nitrógeno. La solución es evaporada a continuación hasta estado seco en vacío, es diluida con tolueno (50 mL) y evaporada nuevamente hasta estado seco, proporcionando 11-G-1 en forma de aceite (0,45g, 97% rendimiento).
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}) 10,75(1H), 10,60(1H), 7,96(1H), 7,64-7,44(4H), 7,23-7,14(3H), 6,88(1H), 5,63(1H), 4,9(1H), 4,8(1H), 4,50(1H), 3,58(3H), 3,03-2,70(2H), 2,50(1H), 2,1-1,2(4H), 0,92(3H), 0,83(3H), 0,55(3H).
Preparación de Ejemplo 182
Esquema 11, 11-G: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha (E)]]
Sal disódica de [1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-N-[[3-[2-carboxietenil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 182) (C_{28}H_{28}Cl_{2}Na_{2}N_{2}O_{6})
A una solución de 11-G-1 (0,45g, 0,78mmol) en metanol (5 mL), en un recipiente enfriado con un baño de agua helada, se añade una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,127g, 3mmol) en H_{2}O (5mL). Después de dos días, la mezcla es diluida con agua (50mL), y evaporada en vacío hasta que el metanol ha desparecido y a continuación es enfriada a -10ºC y llevada a pH 2 utilizando una solución acuosa de HCl 1N. El precipitado resultante de color blanco es aislado por filtrado por succión proporcionando un sólido de color blanco que es agitado con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2mL) y a continuación transferida a una columna de HPLC de fase inversa C-18 y eluida con un gradiente de solución acuosa a 0,01% de NaHCO_{3} a 10% acetonitrilo/0,01% solución acuosa NaHCO_{3}. La evaporación se lleva a cabo en vacío dando lugar al producto del Ejemplo 182 en forma de un sólido de color blanco (0,25 g, rendimiento 51%).
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 7,51-7,42(5H), 7,06(2H), 6,39(1H), 5,49(1H), 4,10(1H), 2,99(1H), 2,86(1H), 2,56(1H), 1,85(2H), 1,61(1H), 1,29(1H), 0,90(3H), 0,85(3H), 0,51(3H); IR (nujol) 3393, 3257, 3124, 3035, 1654, 1604, 1562, 1544, 1515, 1431, 1398, 1325, 799, 778, 722cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 605 (M+H, 44), 629 (9), 627 (14), 608 (8), 607 (30), 606 (14), 605 (44), 585 (14), 583 (21), 73 (45), 23 (99); agua KF: 7,09%.
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Esquema 12
78
Preparación del Ejemplo 184
Esquema 12, 12-E: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
[1S-cis)-N-[[3-ciano-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
Se disolvió éster 10-A (5,0 g, 23,3 mmol) en piridina seca (100 mL). A 0ºC, la solución de reacción fue tratada con cloruro de metansulfonilo (MsCl) (1 equivalente, 23,3 mmol, 1,8 mL). La mezcla fue agitada durante dos días, mientras que la temperatura del baño se equilibró a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue saturada con gas amoníaco (NH_{3}). El exceso de NH_{3} fue eliminado mediante un evaporador rotativo. La mezcla de reacción fue tratada con MsCl (10 equivalentes 18 mL, 0,23 mol) y se dejó en agitación durante una noche. El disolvente fue retirado a presión reducida dando como resultado un material crudo que fue purificado por columna de cromatografía flash de gel de sílice (35 mm x 15,2 cm) utilizando como eluyente 90% hexanos:EtOAc dando lugar a 3,5 g de 12-B: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 1,08 (3 H), 1,19 (3 H), 1,32 (3 H), 1,73-2,01 (2 H), 2,25-2,41 (2 H), 2,71 (1 H), 3,70 (3 H).
Se disolvió 12-B (0,7 g, 3,6 mmol) en THF (20 mL) y se trató con LiOH\cdotH_{2}O (10 equivalentes, 1,5 g, 35,8 mmol) en H_{2}O (20 mL) y MeOH (10 mL): después de 2 horas, el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue disuelto en H_{2}O ácida (50 mL), por ejemplo, HCl 1N, 10%H_{2}SO_{4}, o bien AcOH 1N, y fue extraído con CHCl_{3} (3 x 20 mL), dando lugar después de una manipulación habitual a 0,6 g (92%) de 12-C: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 1,17 (3 H), 1,25 (3 H), 1,34 (3H), 1,77-2,00 (2 H), 2,19-2,41 (2 H), 2,69-2,81 (1H).
Ácido 12-C (0,6 g, 3,3 mmol), HOBT (1,13 equivalentes, 0,5 g) DMAP (0,11 equivalentes, 0,04 g), EDC (1,1 equivalentes, 0,7 g) Et_{3}N (3,6 equivalentes, 1,6 mL) y CH_{2}Cl_{2} (20 mL) se combinaron y la mezcla de reacción fue agitada durante un par de minutos. A continuación se añadió 7-E-1\cdotHCl (0,75 equivalentes, 1,0 g) y la mezcla de reacción fue agitada durante una noche a temperatura ambiente. El disolvente fue eliminado a presión reducida y el residuo fue triturado con THF. El precipitado fue filtrado, disuelto en una mezcla de CH_{3}CH:H_{2}O, congelado y liofilizado proporcionando 12-E (en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3} y R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo): punto fusión 170-174ºC; ^{1}H NMR (MeOD) \delta 1,01 (3H), 1,17 (3 H), 1,32 (3 H), 1,72-1,87 (2 H), 2,02-2,32 (2 H), 2,67 (1H), 2,97 (1H), 3,18 (1H), 3,71 (3 H), 4,73 (1H), 7,22 (2,H), 7,38-7,50 (3H), 7,59 (2H); IR (mull de aceite mineral) 3282, 3252, 3314, 3192, 3125, 3075, 2954, 2925, 2870, 2855, 2235, 1750, 1738, 1653, 1610, 1562, 1541, 1516, 1458, 1431, 1415, 1379, 1332, 1274, 1260, 1243, 1231, 1214, 1195, 799 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{27}H_{29}Cl_{2}N_{3}O_{4}, m/z (intensidad relativa) 532 ([M + H]^{+}, 68), 531 ([M + H]^{+}, 35), 530 ([M + H]^{+}, 100), 529 (M^{+}, 7), 351 (26), 349 (40), 175 (21), 173 (33), 136 (35), 109 (20). Análisis calculado para C_{27}H_{29}Cl_{2}N_{3}O_{4}nH_{2}O: C, 61,14; H, 5,51; N, 7,92; Cl, 13,37; hallado: C, 61,32: H, 5,53; N, 7,94; Cl, 13,04. Corregido para 0,66% H_{2}O hallado por análisis de Karl Fischer.
A una solución del producto obtenido 12-E (1,0 g, 1,9 mmol), en MeOH (25 mL) se añadió LiOH\cdotH_{2}O (5 equivalentes, 9,4 mmol, 0,4 g) en H_{2}O (10 mL). La solución de reacción fue sometida a agitación durante 4 horas. La solución de reacción fue reducida en vacío a estado seco. El residuo fue tratado con H_{2}O ácida (25 mL). El precipitado resultante fue filtrado y sometido a columna de cromatografía flash de gel de sílice (35 mm x 15,2 cm) utilizando CH_{3}CN salpicado con ácido acético al 0,1% como eluyente. Las fracciones que contenían el compuesto fueron combinadas y el disolvente fue eliminado a presión reducida. El residuo fue disuelto a continuación en CH_{3}CN:H_{2}O, congelado y liofilizado proporcionando 0,62 g (63%) del Ejemplo 184 (12-E: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H y R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil): punto de fusión: no se pudo determinar por la retracción del compuesto a 50ºC; ^{1}H NMR (MeOD) \delta 1,02 (3 H), 1,18 (3 H), 1,31 (3 H), 1,72-1,87 (2 H), 2,01-2,33 (2 H), 2,69 (1 H), 2,97 (1 H) 3,23 (1 H), 4,68-4,78 (1 H), 7,24 (2 H), 7,38-7,49 (3 H), 7,58 (2 H), 7,96 (1 H); IR (mull de aceite mineral) 3338, 3291, 3260, 3200, 3132, 3079, 3039, 2954, 2914, 2854, 2253, 1746, 1672, 1657, 1611, 1579, 1560, 1544, 1516, 1466, 1457, 1431, 1416, 1397, 1379, 1328, 1282, 1271, 1222, 1210, 1196, 1125, 812, 782, 800 cm^{-1}; MS (FAB) para C_{26}H_{27}CI_{2}N_{3}O_{4}, m/z (intensidad relativa) 518 ([M + H]^{+}, 68), 517 ([M + H]^{+}, 35), 516 ([M + H]^{+}, 100), 515 (M^{+}, 7), 337 (16), 335 (24), 175 (18), 173 (27), 136 (23), 109 (12). Análisis calculado para C_{26}H_{27}Cl_{2}N_{3}O_{4}nH_{2}O: C, 60,47; H, 5,27; N, 8,14; Cl, 13,73; hallado: C, 60,33; H, 5,25; N, 8,03; Cl, 13,62. Corregido para 4,58% H_{2}O hallado por análisis Karl Fischer
Esquema 13
Ejemplos 58, 92 y 93
79 
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La amina intermediaria según el Ejemplo 56 (619 mg, 1,43 mmol) fue disuelta en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) conteniendo piridina (0,3 mL, 3,58 mmol). A esta solución se añadió cloruro de 2,4,6-triclorobenzoílo (246 mg, 1,58 mmol) y la solución fue agitada a temperatura ambiente durante 6 horas. La reacción fue acidificada con HCl 1 N (20 mL) y extraída con CH_{2}Cl_{2} (3 x 20 mL). Los productos orgánicos combinados fueron secados (Na_{2}SO_{4}), filtrados, y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 50% EtOAc/hexanos) proporcionando el Ejemplo 58 (866 mg, 95 %) en forma de material esponjoso incoloro: ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 7,56 (2H), 7,33 (2H), 7,08 (2H), 5,84 (1H), 4,8-4,9 (1H), 3,74 (3H), 3,0-3,2 (3H), 2,4-2,6 (2H), 2,0-2,2 (1H), 1,6-1,8 (1H), 1,43 (9H), 1,21 (3H), 1,14 (3H), 0,76 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CDCl_{3}), \delta 174,92, 172,55, 172,00, 161,81, 136,29, 135,91, 134,46, 133,00, 132,69, 129,75, 128,08, 120,51, 80,19, 56,60, 54,33, 53,04, 52,35, 46,32, 37,14, 32,26, 27,99, 22,90, 22,39, 21,90, 20,50; ESMS (m/z) 639 (MH^{+}).
Ejemplo 58 (810 mg, 1,27 mmol) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5mL) conteniendo TFA (5 mL). Esta mezcla de reacción fue agitada durante 6 horas a temperatura ambiente. La evaporación del disolvente a presión reducida proporcionó un aceite en crudo. El residuo fue cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 50% EtOAc/hexanos) proporcionando el Ejemplo 92 (703 mg, 95%) en forma de un producto esponjoso incoloro: ^{1}H NMR (300 MHz, acetona-d_{6}), \delta 9,68 (1H), 7,66 (2H), 7,44 (2H), 7,17 (2H), 6,93 (1H), 4,88 (1H), 3,72 (3H), 3,17 (1H), 3,05 (1H), 2,79 (1H), 2,5-2,6 (1H), 2,1-2,2 (1H), 1,7-1,8 (1H), 1,4-1,5 (1H), 1,25 (3H), 1,21 (3H), 0,84 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, acetona-d_{6}), \delta 176,92, 172,14, 171,14, 160,87, 136,16, 134,58, 134,48, 132,16, 132,12, 128,93, 127,08, 119,23, 59,24, 55,25, 52,60, 51,06, 45,64, 36,03, 31,71, 21,92, 21,63, 20,83, 20,06; ESMS (m/z) 583 (MH^{+}).
Se disolvió el producto del Ejemplo 92 (684 mg, 1,17 mmol) en H_{2}O (8mL) conteniendo LiOH (127 mg, 5,27 mmol). Después de 6 horas a temperatura ambiente, la mezcla fue acidificada con HCl 3 N (3 mL) y el precipitado fue filtrado y lavado con H_{2}O fría (3 mL). Con secado por alto vacío se consiguió el producto del Ejemplo 93 (547 mg, 82%) en forma de sólido incoloro: ^{1}H NMR (300 MHz, acetona-d_{6}), \delta 9,96 (1H), 7,70 (2H), 7,58 (2H), 7,30 (2H), 4,8-4,9 (1H), 3,23 (1H), 3,07 (1H), 2,89 (1H), 2,5-2,6 (1H), 2,0-2,2 (1H), 1,6-1,7 (1H), 1,4-1,5 (1H), 1,26 (3H), 1,19 (3H), 0,81 (3H), ^{13}C NMR (75 MHz, acetona-d_{6}), \delta 178,52, 174,10, 173,62, 162,22, 138,12, 136,08, 134,47, 133,69, 130,77, 128,90, 120,54, 56,92, 54,56, 53,89, 47,24, 37,48, 33,37, 23,52, 23,04, 22,31, 21,73; ESMS (m/z) 569 
\hbox{([M-H] ^{-} ).}
Esquema 14
Ejemplos 101 y 102
80
El compuesto según el Ejemplo 56 (810mg, 1,87mmol) fue disuelto en Pir/CH_{2}Cl_{2} (5mL de cada uno de ellos) y se añadió cloruro de O-nitrobenzoílo (383mg, 2,06mmol) en atmósfera de N_{2} seco. La reacción fue sometida a agitación durante 4 horas a temperatura ambiente. El disolvente fue evaporado en alto vacío y se añadió HCl 1N (20 mL) al residuo. Éste fue extraído con CH_{2}Cl_{2} (3 x 25mL) y las fases orgánicas combinadas fueron secadas sobre Na_{2}SO_{4}. La solución fue filtrada, el disolvente fue evaporado y el residuo cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 50% EtOAc/hexanos) proporcionando el producto intermedio (14-A) (808mg, 74%): ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 8,4-8,6 (1H), 8,03 (1H), 7,6-7,7 (3H), 7,49 (2H), 7,04 (2H), 5,86 (1H), 4,7-4,8 (1H), 3,71 (3H), 3,0-3,2 (2H), 2,4-2,6 (2H), 2,0-2,1 (1H), 1,6-1,7 (1H), 1,4-1,5 (1H), 1,42 (9H), 1,20 (3H), 1,12 (3H), 0,73 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CDCl_{3}), \delta 174,94, 172,61, 171,97, 164,57, 146,15, 136,64, 133,77, 132,76, 132,38, 130,56, 129,62, 128,63, 124,47, 120,56, 80,16, 56,58, 54,23, 53,05, 52,28, 46,31, 37,07, 32,23, 27,96, 22,83, 22,31, 21,85, 20,50; FABMS (m/z) 582 (MH^{+}).
El compuesto anterior, (14-A) (706mg, 1,21mmol), fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (5mL) y se añadió TFA (5mL) con agitación a temperatura ambiente. Después de 4 horas, el disolvente fue evaporado y el residuo fue cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 100% EtOAc) proporcionando el monometil éster del Ejemplo 101 (623mg, 98%): ^{1}H NMR (300 MHz, acetona-d_{6}), \delta 9,79 (1H), 8,11 (1H), 7,7-7,9 (6H), 7,22 (2H), 4,81 (1H), 3,68 (3H), 3,15 (1H), 3,02 (1H), 2,86 (1H), 2,53 (1H), 2,0-2,2 (2H), 1,6-1,8 (1H), 1,43 (1H) 1,26 (3H), 1,20 (3H), 0,81 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, acetona-d_{6}), \delta 177,64, 173,39, 172,92, 165,03, 147,96, 138,68, 134,68, 134,11, 133,81, 131,70, 130,52, 129,97, 125,18, 120,62, 120,54, 56,90, 54,55, 53,88, 52,31, 47,16, 37,56, 33,40, 23,48, 23,00, 22,30, 21,66; ESMS (m/z) 526 (MH^{+}).
El producto del Ejemplo 101 (605 mg, 1,15 mmol) fue disuelto en H_{2}O (5mL) conteniendo LiOH (138 mg, 5,76 mmol). Éste fue agitado durante 4 horas. La solución obtenida de este modo fue acidificada con 2 N HCl (10 mL) y el precipitado fue filtrado. La torta de filtrado fue lavada con H_{2}O fría (3 mL) y a continuación secada en alto vacío para proporcionar el producto del Ejemplo 102 (539 mg, 92%) en forma de material en polvo amorfo de color blanco: ^{1}H NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}), \delta 10,66 (1H), 8,14 (1H), 7,85 (2H), 7,76 (2H), 7,57 (2H), 7,22 (2H), 4,4-4,5 (1H), 3,02 (1H), 2,88 (1H), 2,70 (1H), 2,3-2,4 (1H), 1,8-2,0 (1H), 1,5-1,6 (1H), 1,2-1,4 (1H), 1,17 (3H), 1,12 (3H), 0,67 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, DMSO-d_{6}), \delta 177,00, 173,17, 172,03, 163,90, 146,50, 137,19, 134,04, 133,35, 132,69, 130,92, 129,38, 129,28, 124,23, 119,44, 55,50, 53,59, 51,90, 45,95, 36,10, 32,23, 22,30, 22,23, 21,72, 21,00; ESMS (m/z) 512 (MH^{+}).
Esquema 15
81
Preparación 10-A
Esquema 15, 10-A
Estereoquímica = (1R-cis)
3-metil éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico 10-A (C_{11}H_{18}O_{4})
Se añade a metanol (0,5L), enfriado en un baño de hielo y agua en atmósfera de nitrógeno, cloruro de acetilo (50mL, 0,703mol) a lo largo de 30 minutos. Después de agitar durante 30 minutos, se añadió ácido (1R, 3S)-canfórico 15-A (100g, 0,5mol) en una porción única. El ácido canfórico se disuelve en unos 10 minutos y la solución se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente y se agitó durante 72 horas. La concentración en vacío proporcionó un aceite de color amarillo pálido, transparente que fue disuelto en acetato de etilo (0,6L). La solución fue extraída en solución acuosa de NaOH 0,5N (4X0,35L). Las fases acuosas combinadas fueron lavadas con pentano (0,35L) y el pH de la capa acuosa se ajustó aproximadamente a 4 con HCl 1N. La capa acuosa fue extraída con éter (4X0,35L) y las fases orgánicas combinadas fueron concentradas en vacío dando lugar a un aceite incoloro que se solidificaba lentamente proporcionando 96g (90%) de 10-A como sólido cristalino de color blanco. Una muestra analítica puede ser obtenida por recristalización de 10-A a partir de éter-pentano (1:1) proporcionando 10-A en forma de placas hexagonales transparentes. Punto de fusión: 76-77ºC; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta 3,69(s, 3H), 2,79(m, 1H), 2,54(m, 1H), 2,20(m, 1H), 1,84(m, 1H), 1,54(m, 1H), 1,45(m, 1H), 1,27(s, 3H), 1,26(s, 3H), 0,86(s, 3H); IR(nujol): 3201, 2925, 1730, 1700, 1237, 1210, 1150, y 1110cm-1; análisis: calculado para C_{11}H_{18}O_{4}: C, 61,66; H, 8,47; hallado: C,61,63; H, 8,75.
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Preparación 15-C
Esquema 15, 15-C
Estereoquímica = (1R-cis)
1-(1,1-dimetiletil)-3-metil diéster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico 15-C (C_{15}H_{26}O_{4})
Al producto 10-A (25g, 0,117mol) en una botella Parr de 500mL, enfriada con un baño de hielo seco-iPrOH en atmósfera de nitrógeno, se condensó isobutileno hasta que la botella quedó llena aproximadamente hasta la mitad. En un recipiente Erlenmeyer separado, se enfrió éter (6mL) (baño de hielo seco-iPrOH) y se añadió ácido sulfúrico concentrado (3mL). La mezcla se dejó enfriar durante unos 5 minutos, y a continuación se añadió lentamente mediante una pipeta eliminable a la mezcla de isobutileno-15-B. La botella Parr fue pasada a un aparato de agitación y sometida a agitación durante 12 horas (presión aproximada 35psi al cabo de 12 horas). La botella fue envuelta con una lámina de aluminio, se añadió hielo seco para enfriar la botella y su contenido, y la botella fue eliminada del dispositivo agitador cuando la indicación de presión era de aproximadamente 0 psi. El isobutileno fue condensado a partir del recipiente de reacción mediante un condensador frío de brazo durante unas 2 horas. El aceite diluido resultante fue disuelto en pentano (0,5L), la fase orgánica fue lavada con agua (2X0,25L), solución acuosa de NaOH 0,5N (2x50mL), y agua (2X0,25L). La fase orgánica fue concentrada en vacío dando lugar a 15-C en forma de aceite incoloro transparente que se solidificó lentamente a temperatura ambiente. La recristalización partiendo de éter de petróleo proporcionó 15-C en forma de fino sólido cristalino de color blanco (26,86g, 89%).
p.f.: 36-37,6ºC; ^{1}H-NMR: (300MHz, CDCl_{3}): \delta 3,68 (s, 3H), 2,78(m, 1H), 2,52(m, 1H), 2,16(m, 1H), 1,78(m, 1H), 1,45(m, 1H), 1,45(s, 9H), 1,24(s, 3H), 1,17(s, 3H), 0,81(s, 3H).
Preparación 15-D
Esquema 15, 15-D
Estereoquímica = (1R-cis)
1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico 15-D (C_{14}H_{24}O_{4})
A 15-C (10,25g, 0,38mol) en metanol (0,1L) se añadieron por este orden: agua (0,1L, ver considerable precipitación), di-hidrato de LiOH (10g, 2,38mol), y solución al 30% de peróxido de hidrógeno (0,1L). La mezcla fue calentada en un baño de aceite a 90ºC y se sometió a agitación durante 20 horas. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y concentrada en vacío para eliminar el metanol y el material sólido residual de color blanco fue retirado por filtrado. La solución transparente fue lavada con pentano (3X0,15L), la capa acuosa fue enfriada en un baño de agua y hielo, y acidificada cuidadosamente a pH 4 aproximadamente con solución acuosa de HCl 1N. El precipitado blanco resultante fue aislado por filtrado, lavado con agua (3X0,1L) y secado al aire facilitando 15-D (9,6g, 96%) en forma de sólido fino de color blanco.
p.f.: 98-98,6ºC; ^{1}H-NMR: (300MHz, CDCl_{3}): \delta 2,82(1H), 2,50(1H), 2,13(1H), 1,79(1H), 1,46(9H) 1,45(1H), 1,28 (3H), 1,18(3H), 0,89(3H); IR(nujol): 3075, 3025, 3006, 1719, 1689, 1270, 1249, 1164, y 851cm^{-1}; EI/MS: 200(3,8), 183(7,3), 164(7,1), 154(20,3), 136(14,6), 109(32,8), 57(base); análisis: calculado para C_{14}H_{24}O_{4}-0,18H_{2}O: C, 64,77; H, 9,46; hallado: C, 64,79; H, 9,44; K.F.-agua: 0,86%.
Esquema 16
Síntesis del intermedio 16-A
82 
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Boc-piperacina (1,9 gm, 10,4 mmol) se disolvieron en THF (10 mL) y CH_{2}Cl_{2} (1 mL) conteniendo DIEA (5,6 mL, 32,2 mmol). A esta solución se añadieron (1,6 mL, 11,4 mmol) de cloruro de 2,6-diclorobenzoílo a 0ºC. Después de agitación de la mezcla de reacción durante 1 hora a 0ºC, se añadió HCl 1N (30 mL). La mezcla fue extraída con CH_{2}Cl_{2} (2 x 20 mL) y los productos orgánicos combinados fueron secados (Na_{2}SO_{4}), filtrados y el disolvente eliminado en vacío. La cromatografía del residuo (SiO_{2}, gradiente de elución, hexanos \rightarrow 30% EtOAc/hexanos) proporcionó el producto intermedio (16-A) en forma de sólido de color blancuzco (3,6 gm, 98%): p.f.= 157-159ºC; ESMS (m/z) 359 (MH^{+}).
Esquema 17
Ejemplos 176 y 177
83
El producto intermedio 16-A (553 mg, 1,54 mmol) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) y se trató con TFA (5 mL). Después de 2 horas, el disolvente fue eliminado a presión reducida. El residuo fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (20 mL) conteniendo DIEA (0,8 mL, 4,6 mmol). Se añadió \alpha t-butil éter (534 mg, 1,85 mmol) de ácido boc-aspártico con BOP-Cl (470 mg, 1,85 mmol). Después de agitación a temperatura ambiente durante 24 horas, la reacción fue interrumpida con HCl 1N (25 mL). La mezcla fue extraída con CH_{2}Cl_{2} (3 x 25 mL). Los productos orgánicos combinados fueron secados (Na_{2}SO_{4}), filtrados y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna (SiO_{2}, gradiente de elución, hexanos \rightarrow 50% EtOAc/hexanos) para conseguir el aspartato intermedio (17-A) (405 mg, 50%): ESMS (m/z) 530 (MH^{+}).
A una solución de metanol del intermedio antes mencionado 17-A (0,2 g, 0,378 mmol), se hizo burbujear gas HCl durante 5 minutos y la mezcla de reacción se dejó reposar durante una noche a temperatura ambiente. El metanol fue evaporado y el producto gomoso residual fue triturado con éter. El sólido resultante fue lavado con éter y secado en vacío elevado. El sólido fue suspendido en THF (5 mL), y se añadió ácido 17-B (1R, 3S)-1-(tert-butoxicarbonil)-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico (102 mg, 0,397 mmol), BOP (176 mg, 0,397 mmol), seguido de DIEA (0,207 mL, 1,19 mmol). La mezcla fue agitada durante una noche a temperatura ambiente. El disolvente fue evaporado y el residuo fue dividido entre 1N HCl (5 mL) y EtOAc (15 mL). La capa orgánica fue separada y lavada sucesivamente con HCl 1N (5 mL), salmuera (5 mL), solución saturada de NaHCO_{3} (2 x 5 mL), solución saturada de LiCl (2 x 5mL), y secada sobre MgSO_{4}. La evaporación de EtOAc produjo un sólido incoloro que fue purificado sobre sílice (Cromatotrón, hexano:EtOAc (1:1) como eluyente) produciendo el producto del Ejemplo 176 (206 mg, 87%) en forma de sólido incoloro. ESMS: (m/z) 626 (MH^{+}).
El producto del Ejemplo 176 (0,18 g, 0,287 mmol) fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (1,0 mL) y TFA (1,0 mL). Después de agitación a temperatura ambiente durante 1 hora, el disolvente fue evaporado y el producto gomoso resultante fue triturado con éter. El sólido fue lavado con éter y secado en vacío proporcionando el metil éster del ácido [1S-[1\alpha(R^{*}),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-piperacinbutanoico en forma de sólido incoloro (0,14 g, 87%). ESMS (m/z) 570 (MH^{+}).
A una solución del metil éster obtenida anteriormente (0,1 g, 0,18 mmol) en THF/CH_{3}OH (5 mL/1 mL) se añadió una solución acuosa (1 mL) de LiOH monohidratado (19 mg, 0,378 mmol) y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. Los productos orgánicos fueron evaporados y el residuo fue absorbido en 2 ml de agua y acidificado con ácido cítrico. El sólido fue filtrado, lavado con agua y secado al vacío para conseguir el material del Ejemplo 177 (90 mg, 92%). ESMS (m/z) 556 (MH^{+}).
Esquema 18
Ejemplos 178 y 195
84
El producto intermedio 16-A (593 mg, 1,54 mmol) fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (6 mL) y tratado con TFA (6 mL). Después de 2 horas el disolvente fue eliminado a presión reducida. El residuo fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (20 mL) conteniendo DIEA (0,9 mL, 4,95 mmol). Se añadió a \beta t-butil éster del ácido boc aspártico (573 mg, 1,98 mmol) BOP-Cl (504 mg, 1,98 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 24 horas la reacción fue interrumpida con HCl 1N (15 mL). La mezcla fue extraída con CH_{2}Cl_{2} (3 x 20 mL). Los productos orgánicos combinados fueron secados (Na_{2}SO_{4}), filtrados y el disolvente se eliminó en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna (SiO_{2}, gradiente de elución, hexanos \rightarrow 50% EtOAc/hexanos) dando lugar al aspartato intermediario (18-A) (360 mg, 41%): ESMS (m/z) 530 (MH^{+}).
A una solución en metanol del intermediario antes mencionado (18-A) (0,25 g, 0,47 mmol), se hizo burbujear gas HCl durante 5 minutos y la mezcla de reacción se dejó reposar durante una noche a temperatura ambiente. El metanol fue evaporado y el producto gomoso residual fue triturado con éter. El sólido resultante fue lavado con éter y secado a alto vacío. El sólido fue suspendido en THF (5 mL), y a 15-D ácido (1R, 3S)-1-(tert-butoxicarbonil)-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico (127 mg, 0,495 mmol) se añadieron BOP (219 mg, 0,495 mmol), seguido de DIEA (0,259 mL, 1,485 mmol). La mezcla fue agitada durante una noche a temperatura ambiente. El disolvente fue evaporado y el residuo fue dividido entre 1N HCl (5 ml) y EtOAc (15 ml). La capa orgánica fue separada y lavada sucesivamente con 1N HCl (5 ml), salmuera (5 ml), solución saturada de NaHCO_{3} (2 x 5 ml), solución saturada de LiCl (2 x 5ml), y secada sobre MgSO_{4}. La evaporación de EtOAc produjo un sólido incoloro, que fue purificado sobre sílice (Cromatotrón, hexano:EtOAc (1:1) como eluyente) proporcionando el producto del Ejemplo 178 (249 mg, 77%) en forma de sólido incoloro. ESMS: (m/z) 626 (MH^{+}).
Se disolvió el producto del Ejemplo 178 (0,19 g, 0,303 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (1,0 mL) y TFA (1,0 mL). Después de agitación a temperatura ambiente durante 1 hora, el disolvente fue evaporado y el producto gomoso resultante fue triturado con éter. El sólido fue lavado con éter y secado en vacío proporcionando el metil éster del ácido [1S-[1\alpha(R^{*}),3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonilamino]-4-[2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-piperacinbutanoico en forma de sólido incoloro (98 mg, 58%). ESMS (m/z) 570 (MH^{+})
A una solución del éster metílico obtenido anteriormente (60 mg, 0,105 mmol) en THF/CH_{3}OH (5 mL/1 mL) se añadió una solución acuosa (1 mL) de LiOH mono hidratado (9,5 mg, 0,221 mmol) y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. Los productos orgánicos fueron evaporados y el residuo fue recogido en 2 ml de agua y acidificado con ácido cítrico. El sólido fue filtrado, lavado con agua y secado en vacío consiguiendo el producto del Ejemplo 195 (48 mg, 83%). ESMS (m/z) 556 (MH^{+}).
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Esquema 19
Ejemplos 211, 212, 213, 214 y 215
R^{19-1} se define de la misma manera que R^{7-1} para incluir aminoácidos incluidos en la definición de R^{2}; R^{19-2} es un protón o junto R^{19-1} un aminoácido cíclico; R^{19-3} es C_{1-6} alquilo -NH-, NH_{2} ó C_{1-6}alquil-O- u OH.
85
Preparación 19-C-1
Esquema 19, 19-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{19-2} = H, R^{19-1} = CH_{3}, R^{19-3} = OC(CH_{3})_{3}, m = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]
[1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]N-3-[[(1-(1,1-dimetiletioxi)-carboniletil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster (19-C-1) (C_{34}H_{43}Cl_{2}N_{3}O_{7})
Una solución de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster 19-A-1 (19-A: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} =4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (0,468g, 0,85 mmol), HATU (0,36g, 0,95 mmol), y diisopropiletil amina (seca, 2 mL, 11,5 mmol) es agitada junto con DMF (seco, 5 mL) en un matraz en seco de fondo redondo en una atmósfera de nitrógeno. Después de 30 minutos, se añade clorhidrato de tbutil éster de D-alanina (19-B, (R^{19-1} = CH_{3}, R^{19-2} = H, R^{19-3} = t-BuO, Estereoquímica D) se añade (0,34g, 1,87 mmol). Después de tres días, la mezcla es evaporada hasta estado seco en vacío proporcionando un aceite de color amarillo que es mezclado con cloruro de metileno (100 mL) y sometido a agitación con agua (5 X 50 mL). La capa orgánica es evaporada a continuación hasta estado seco, proporcionando un sólido blancuzco. La recristalización a partir de acetato de etilo/dietil éter proporciona el producto 19-C-1, en forma de sólido de color blanco (0,428g, rendimiento 74%).
^{1}H NMR(300MHz), DMS-d_{6}) \delta 10,70(1H), 7,90(1H), 7,60-7,18 (8H), 4,48(1H), 4,15(1H), 3,57(3H), 2,95 (2H), 2,75(1H), 2,37(1H), 1,87(1H), 1,55(1H), 1,36(9H), 1,30 (1H), 1,22(3H), 1,18 (3H), 1,09 (3H), 0,57 (3H).
Preparación 19-C-2
Esquema 19, 19-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{19-2} = H, R^{19-1} = CH_{3}, R^{19-3} = OH, m = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]
Metil éster de [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (19-C-2) (C_{30}H_{35}Cl_{2}N_{3}O_{7})
Se agita di-éster 19-C-1 durante una noche con ácido trifluoro acético (5 mL) y a continuación la mezcla es diluida con tolueno (100mL) seguido de evaporación hasta estado seco en vacío, proporcionando el ácido 19-C-2 en forma de aceite marrón pálido (0,34g, rendimiento 90%).
\newpage
^{1}H NMR(300MHz), DMS-d_{6}) \delta 10,70(1H), 7,96(1H), 7,57-7,10 (8H), 4,47 (1H), 4,22 (1H), 3,57(3H), 2,95 (2H), 2,65(1H), 2,37(1H), 1,89(1H), 1,55(1H), 1,30(1H), 1,25(3H), 1,18(3H), 1,09 (3H), 0,57(3H); MS(ES+) m/z 619,8.
Preparación del Ejemplo 211
Esquema 19, 19-D: en el que R^{4} = H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{19-2} = H, R^{19-1} = CH_{3}, R^{19-3} = OH, m = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]
Ejemplo 211 de [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{29}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{7}).
Una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,15g, 3,57mm) en H_{2}O (5 mL)es añadida a una solución de 19-C-2 en metanol (5mL). Después de agitación durante una noche, la solución es llevada a pH7 con solución acuosa de HCl 1,2N (2 mL), es evaporada en vacío hasta la desaparición del metanol y sometida a agitación con dietil éter (3x30mL). La capa acuosa es filtrada, enfriada en un baño de hielo y llevada a pH2 utilizando solución acuosa de HCl 1,2N. El precipitado resultante de color blanco es filtrado, lavado con agua (100mL) y secado al aire consiguiendo el producto del Ejemplo 211 en forma de sólido de color blanco (0,277g, rendimiento 78%).
^{1}H NMR(DMSO-d_{6}) \delta 10,67(1H), 7,76(1H), 7,57-7,44 (5H), 7,31 (1H), 7,20 (2H), 4,42(1H), 4,22(1H), 3,03-2,82(2H), 2,64(1H), 2,36(1H), 1,89(1H), 1,54(1H)1,32-1,26(4H), 1,19(3H), 1,09(3H), 0,58(3H); IR (nujol) 3293, 3261, 3078, 1740, 1672, 1612, 1562, 1551, 1527, 1518, 1429, 1415, 1334, 1276, 1197cm^{-1}; MS(ES-) m/z 606,3, 604,3; KF agua 7,76%.
Preparación 19-C-3
Esquema 19, 19-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{19-2}, R^{19-1} = 
\hbox{(CH _{2} ) _{3} ,}
R^{19-3} = NH_{2}, m = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]
[1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster (19-C-3) (C_{32}H_{37}Cl_{2}N_{4}O_{6})
De manera similar a la indicada para la síntesis de 19-C-1, se acopla 19-A-1 (19-A: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo)) (0,55g, 1,00 mmol) a D-prolinamida (0,3g, 2,63 mmol) utilizando HATU (0,40 g, 1,05 mmol) y diisopropiletilamina (3 mL, 17,2 mmol) en DMF seco. Después de agitación durante una noche, la mezcla de reacción es sometida a evaporación en vacío hasta estado seco, proporcionando un aceite de color amarillo pálido que es agitado con acetato de etilo (50 mL). Se forma un precipitado y es aislado por filtrado con succión proporcionando el producto 19-C-3 en forma de sólido de color blanco (0,632g, rendimiento 90%).
^{1}H NMR(DMSO-d_{6}) \delta 10,67(1H), 7,95(1H), 7,58-7,48 (5H), 7,19 (2H), 7,10 (1H), 6,65(1H), 4,45(1H), 4,18(1H), 3,70-3,30(1H), 3,57(3H), 2,90(2H), 2,58(1H), 2,28-1,40(9H), 1,25(3H), 1,12(3H), 0,73(3H).
Preparación del Ejemplo 212
Esquema 19, 19-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}Li, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{19-2}, R^{19-1} = (CH_{2})_{3},
R^{19-3} = NH_{2}, m = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]
Ejemplo 212 de sal monolítica de [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{31}H_{35}Cl_{2}N_{4}O_{6}Li).
Una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,2g, 4,8mmol) en H_{2}O (4mL) es añadida a una solución sometida a agitación del metil éster 19-C-3 (0,58g, 0,89mmol) en metanol (10mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla es sometida a evaporación en vacío hasta la desaparición del metanol. La mezcla de reacción es llevada a continuación a pH 7 con una solución acuosa de HCl 1N, es filtrada y el filtrado es transferido a una columna HPLC de fase inversa C-18 y eluida con un gradiente 0-10% de acetonitrilo/agua. La evaporación se lleva a cabo en vacío proporcionando el compuesto objetivo en forma de sólido de color blanco (0,445g, rendimiento 78%).
^{1}H NMR(300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 10,55(1H), 7,56-7,43(5H), 7,04(3H), 6,79 (1H), 6,62(1H), 4,18(1H), 3,92(1H), 3,62(1H), 3,43(1H), 2,96(2H), 2,44(1H), 2,25-1,5(8H), 1,23(3H), 1,1(3H), 0,75(3H); IR (nujol) 3392, 3288, 3194, 3124, 3068, 1660, 1604, 1562, 1539, 1515, 1431, 1403, 1325, 799, 686cm^{-1}; MS(FAB) m/z (intensidad relativa) 631 (M+H, 1), 659 (29), 653 (24), 643 (26), 639 (34), 637 (50), 279 (33), 133 (26), 109 (61), 70 (35), 23 (99); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{31}H_{36}Cl_{2}N_{4}O_{6} +H^{+} 631,2090, hallado 631,2086; KF agua: 9,90%.
Preparación 19-C-4
Esquema 19, 19-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo, R^{19-2}, R^{19-1} = (CH_{2})_{3}, R^{19-3} = NH_{2}, m = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]
[1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenil alanina metil éster (19-C-4) (C_{32}H_{37}Cl_{2}N_{4}O_{6})
De manera similar a la indicada para la síntesis de 19-C-3, se acopla 19-A-1 (19-A: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo)) (0,50g, 0,91 mmol) a L-prolinamida (0,2g, 1,75 mmol) utilizando HATU (0,41 g, 1,08 mmol) y diisopropiletil amina (1 mL, 5,74 mmol) en DMF seco (5mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla es evaporada a estado seco en vacío proporcionando un aceite de color amarillo que es sometido a agitación con cloruro de metileno (100 mL) y agua (50 mL); lo cual proporciona un precipitado de color blanco que es filtrado y el sólido aislado es lavado con agua (3X50mL). La recristalización a partir de acetato de etilo proporciona 19-C-4 en forma de sólido blanco (0,31g, rendimiento 53%).
^{1}H NMR(DMSO-d_{6}): \delta 10,70(1H), 7,92(1H), 7,50(5H), 7,19 (2H), 7,04(1H), 6,74(1H), 4,48(1H), 4,11(1H), 3,58(3H), 3,47(1H), 2,92(2H), 2,56(1H), 2,35(1H), 2,10-1,45(8H), 1,24(3H), 1,09(3H), 0,71(3H); MS(ES+, m/z) 644,9.
Preparación del Ejemplo 213
Esquema 19, 19-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}Na, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo, R^{19-2}, R^{19-1} = (CH_{2})_{3},
R^{19-3} = NH_{2}, n = 0
Estereoquímica = [1S-[1\alpha (S*),3\alpha(S*)]]
Ejemplo 213 de sal monosódica de [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{31}H_{35}Cl_{2}N_{4}O_{6}Na).
El éster 19-C-4 (0,258g, 0,4mmol) es hidrolizado de manera similar a la descrita anteriormente para el Ejemplo 212. La mezcla de reacción es llevada a continuación a pH 7, es filtrada y el filtrado es transferido a una columna de HPLC de fase inversa C-18 y es eluida con 0-10% acetonitrilo/0,01% solución acuosa de Na_{2}CO_{3} como gradiente. La evaporación es conseguida en vacío consiguiendo el compuesto objetivo en forma de sólido de color blanco (0,2g, rendimiento 76%).
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 10,57(1H), 7,56-7,44(4H), 7,02(3H), 6,77(2H), 4,10(1H), 3,91(1H), 3,6(1H), 3,50(1H), 3,95(1H), 2,44(1H), 2, 10-1,50(7H), 1,23(3H), 1,07(3H), 0,73(3H); IR (nujol) 3392, 3288, 3194, 3124, 3068, 1660, 1604, 1562, 1539, 1515, 1431, 1403, 1325, 799, 686cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 631 (M+H, 1), 659 (29), 653 (24), 643 (26), 639 (34), 637 (50), 279 (33), 133 (26), 109 (61), 70 (35), 23 (99); HRMS (FAB) calculado para C_{31}H_{36}Cl_{2}N_{4}O_{6} +H^{+} 631,2090, hallado 631,2086; KF agua: 9,90%.
Preparación 19-C-5
Esquema 19, 19-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil, R^{19-2} = H, R^{19-1} = H,
R^{19-3} = OCH_{3}, m = 1
Estereoquímica = (1S-cis)-L
Metil éster de (1S-cis)-N-[[3[[[2-(metiloxicarbonil)etil]amino]-carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)-amino]-L-fenilalanina (19-C-5) (C_{31}H_{37}Cl_{2}N_{3}O_{7})
Una solución de 19-A-1 (19-A: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (0,6g, 1,09 mmol), HATU (0,5g, 1,32 mmol), y diisopropiletil amina (en seco, 2mL, 11,5 mmol) es agitada conjuntamente con DMF (en seco, 5 mL) en un recipiente de fondo redondo seco en atmósfera de nitrógeno. Después de 30 minutos, se añade clorhidrato de \beta-alanina metil éster (19-B, R^{19-1} = H, R^{19-2} = H, R^{19-3} = CH_{3}O) (0,3g, 2,15 mmol). Después de 18 horas, la mezcla es evaporada a estado seco en vacío consiguiendo un aceite de color amarillo que es mezclado con acetato de etilo (150 mL) y agitando con agua (50 mL). La capa orgánica es lavada con agua y salmuera (2X60mL, 5:1), solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (50mL), agua y salmuera (60mL, 5:1), la capa orgánica es mezclada con pentano (30mL) y es enfriada a -20ºC (3 días). El sólido resultante es aislado por filtrado, lavado con dietil éter (2X50mL), y secado al aire consiguiendo el producto 19-C-5 en forma de sólido de color blanco (0,63g, 91%).
^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,62(1H), 7,57(2H), 7,32(3H), 7,10(2H), 6,26(1H), 5,81(1H), 4,88(1H), 3,75(3H), 3,68(3H), 3,48(2H), 3,12(2H), 2,51(3H), 2,28(2H), 1,80(1H), 1,49(1H), 1,26(3H), 1,15(3H), 0,74(3H); MS(ES+) m/z 633,8.
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Peparación del Ejemplo 214
Esquema 19, 19-D: en el que R^{4} = H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil, R^{19-2} = H, R^{19-1} = H, R^{19-3} = OH, m = 1
Estereoquímica = (1S-cis)-L
(1S-cis)-N-[[3-[[(2-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 214)(C_{29}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{7})
A una solución del dimetil éster 19-C-5 (19-C: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenil, R^{19-2} = H, R^{19-1} = H, R^{19-3} = OCH_{3}, n = 1, Estereoquímica = (1S-cis)-L) (0,52g, 0,82 mmol) en metanol (10mL) se añadió una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,18g, 4,29 mmol) en agua (4mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla de reacción es llevada a pH 8 utilizando una solución acuosa de HCl 1N y a continuación es evaporada a estado seco en vacío. La mezcla es cromatografiada en una columna HPLC (C-18) de fase inversa utilizando un gradiente (0 a 10% acetonitrilo/(3% metanol en H_{2}O)). El eluyente seleccionado es evaporado hasta estado seco y disuelto en agua (50mL), enfriado en un baño de hielo y agua, y llevado a pH3 utilizando solución acuosa de HCl 1N. El precipitado resultante de color blanco es aislado por filtrado con succión consiguiendo el producto del Ejemplo 214 en forma de sólido de color blanco (0,43g, rendimiento 85%).
^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 10,6(1H), 7,91(1H), 7,55-7,42(5H), 7,08(2H), 6,78(1H), 4,02(1H), 3,10(2H), 2,90(2H), 2,48(1H), 2,25(1H), 1,93(3H), 1,56(1H), 1,24(1H), 0,99(3H), 0,93(3H), 0,46(3H); IR (nujol) 3327, 3080, 1726, 1672, 1622, 1614, 1595, 1558, 1515, 1429, 1338, 1279, 1262, 1197, 783cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 606 (M+H, 99), 609 (24), 608 (69), 607 (42), 606 (99), 605 (15), 517 (16), 254 (69), 175 (16), 173 (25), 109 (51); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{29}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{7} +H1 606,1774, hallado 606,1758.
Preparación 19-C-6
Esquema 19, 19-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil, R^{19-2}, R^{19-1} = (CH_{2})_{3},
R^{19-3} = NHCH_{3}, m = 0
Estereoquímica = (1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]
Metil éster de (1S-[1\alpha, 3\alpha(R*)]]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[3-[[2-[(metilamino)carbonil]-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetil-ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (19-C-6) (C_{33}H_{40}Cl_{2}N_{4}O_{6})
De manera similar a la indicada para la síntesis de 19-C-1, 19-A-1 (19-A: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenil) (0,53g, 0,96 mmol), HATU (0,4g, 1,05 mmol), y diisopropiletil amina (en seco, 1,5 mL, 8,6 mmol) se agitan conjuntamente con DMF (en seco, 5 mL) en un recipiente de fondo redondo, en seco, en atmósfera de nitrógeno. Después de 30 minutos, se añade clorhidrato de N-metilprolinamida (19-B: R^{19-1}, R^{19-2}=CH_{2} CH_{2}CH_{2}, R^{19-3} = HCH_{3}, n=0, Estereoquímica L) (0,5g, 3,04 mmol). Después de dos días, la mezcla es evaporada hasta estado seco en vacío consiguiendo un aceite de color marrón pálido que es transferido a una columna de gel de sílice (20g) y eluida con un gradiente de 0% a 10% metanol/cloroformo consiguiendo, después de la evaporación del disolvente, el producto 19-C-6 en forma de aceite de color pálido (0,55g, 86%)
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 10,68(1H), 7,95(1H), 7,58-7,44(7H), 7,19(2H), 4,48(1H), 4,11(2H), 3,57(3H), 3,06(4H), 2,63(3H), 2,46-1,69(11H), 1,31(3H), 1,12(3H), 0,79(3H).
Preparación del Ejemplo 215
Esquema 19, 19-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}Na, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil, R^{19-1}, R^{19-2} = CH_{2}CH_{2}CH_{2}, R^{19-3} =NHCH_{3}, m=0
Estereoquímica = (1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]
Sal monosódica de (1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[3-[[2-[(metil-amino)carbonil]-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]-carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina Ejemplo 215 (C_{32}H_{37}Cl_{2}NaN_{4}O_{6})
Una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,2g, 4,8mmol) en H_{2}O (6mL) se añade a una solución sometida a agitación del metil éster 19-C-6 (19-C: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (0,53g, 0,8mmol) en metanol (10mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla es diluida con H_{2}O (50mL), evaporada en vacío hasta la eliminación del metanol. La mezcla de reacción es llevada a continuación a pH 8 utilizando solución acuosa de HCl 1N, es filtrada y el filtrado es transferido a una columna de HPLC de fase inversa C-18 y eluida con 10%-18% acetonitrilo/0,02% de gradiente de solución acuosa de bicarbonato sódico. El eluyente es evaporado hasta estado seco, es agitado con isopropanol (3X10mL) y filtrado a través de un embudo de cristal sinterizado. Los filtrados combinados de isopropanol son evaporados hasta estado seco, mezclados con agua y evaporados hasta estado seco nuevamente (2X10mL H_{2}O) consiguiendo el producto del Ejemplo 215 en forma de sólido de color blanco (0,4g, rendimiento 74%)
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 10,57(1H), 7,51(6H), 7,04(2H), 6,80(1H), 4,18(1H), 3,90(1H), 3,55(2H), 3,00(2H), 2,53(3H), 2,47(1H), 2, 12-1,50(8H), 1,24(3H), 1,09(3H), 0,72(3H).
HRMS (FAB) m/z calculado para C_{32}H_{37}Cl_{2}N_{4}O_{6}Na_{1} +H_{1} 667,2066; hallado 667,2056.
Esquema 20
Ejemplo 205
86
Preparación 20-B
Esquema 20, 20-B
1-metil éster (20-B) del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-ácido dicarboxílico
Una solución de anhídrido (1R) canfórico, preparada por el método de Bell, K.H. Aust. J. Chem. 1981, 34, 665-670, (5g, 27,44 mmol) en tolueno (400 mL) en un recipiente de fondo redondo es sometido a la acción de N_{2} y a continuación enfriada en un baño de hielo seco/etanol. A esta solución enfriada se añade (adición gota a gota) una solución uno molar de t-butóxido potásico (30mL, 30 mmol) durante un período de veinte minutos. Después de agitación durante una noche, la mezcla de reacción a temperatura ambiente es enfriada nuevamente sobre un baño de hielo seco/etanol. A la solución enfriada se añade metil trifluorometansulfonato (3,5mL, 30,9 mmol). Después de un período adicional de 12 horas de agitación, la mezcla de reacción es acidificada con ácido trifluoroacético (50mL, 649 mmol), y se continúa la agitación durante otras 16 horas. La mezcla es diluida a continuación con tolueno (200mL), agitada con agua (4 X 120 mL), y evaporada hasta estado seco, proporcionando el producto 20-B en forma de sólido de color marrón pálido (2,35g, 10,97 mmol, rendimiento 40%).
^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 3,60(s, 3H), 2,75(m, 1H), 2,40(m, 1H), 2,00(m, 1H), 1,74(m, 1H), 1,41(m, 1H), 1,19(s, 3H), 1,15(s, 3H), 0,70(s, 3H).
Preparación 20-D
Esquema 20, 20-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH3, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenil
Estereoquímica = [1S-cis]-L
Metil éster de (1S-cis)-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-[[3-(metoxi-carbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]-carbonil]-L-tirosina (20-D)
Una solución de metil éster de ácido canfórico 20-B (0,35g, 1,63 mmol), EDC (0,35g, 1,83mmol), HOBT (0,25g, 1,85 mmol), 4-dimetilaminopiridina (0,05g, 0,41 mmol), en cloruro de metileno (10 mL) es sometida a agitación en un matraz de 2 cuellos de 25 mL, enfriado en un baño de hielo y agua. A esta mezcla se añade el clorhidrato de metil éster de (2,6-diclorofenil)metil)-L-tirosina (0,65g, 1,83 mmol), creando una mezcla espesa y heterogénea que se hace homogénea después de la adición de trietilamina (0,3mL, 2,15 mmol). Después de tres días, la mezcla de reacción es diluida con cloruro de metileno (150 mL) y sometida a agitación con agua (2X100mL), HCl en solución acuosa (0,5N, 2X100mL), agua (3X100mL), NaHCO_{3} en solución acuosa (2X100mL), y agua (1X100mL). La capa orgánica es evaporada a continuación hasta estado seco, proporcionando el producto 20-D en forma de material esponjoso blancuzco (0,7g, rendimiento 78%).
^{1}H NMR (300MHz, CDCl_{3}) \delta 7,38(m, 2H), 7,26 (m, 1H), 7,05(m, 2H), 6,96(m, 2H), 5,76(m, 1H), 5,25(s, 2H), 4,88(m, 1H), 3,75(s, 3H), 3,67(s, 3H), 3,17-3,03(m, 2H), 2,61-2,50(m, 2H), 2,26-2,13(m, 1H), 1,84-1,70(m, 1H), 1,54-1,45(m, 1H), 1,22(s, 3H), 1,19(s, 3H), 0,76(s, 3H). MS(ES+) m/z 549,8
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Esquema 21
Ejemplo 200
87
1,1-dimetiletil éster de (1R-cis)-N-[[3-metoxicarbonil-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil-L-prolina 21-A
El mono éster de ácido canfórico 10-A (1,41g, 6,58mmol) en DMF (seco, 5mL) en un matraz en seco en atmósfera de N_{2} es enfriado en un baño de agua y hielo. Se añade diisopropiletil amina (4,6mL, 26,41mmol) seguido de HATU (2,6g, 6,83mmol). Después de treinta minutos, se añade t-butil éster de L-prolina (1,3mL, 7,44mmol). Después de agitación durante una noche, la mezcla es sometida a evaporación hasta estado seco proporcionando el aceite de color amarillo pálido. La recristalización de CHCl_{3} para conseguir 21-A proporciona un sólido de color blanco (1,6g, rendimiento 66%).
^{1}H NMR (300MHz, CDCl_{3}) \delta 4,32(1H), 3,67(3H), 3,59(2H), 2,71(1H), 2,39(1H), 2,20(2H), 2,10-1,70(5H), 1,43(9H), 1,38(3H), 1,20(3H), 0,93 (3H); IR (nujol) 1741, 1733, 1617, 1430, 1396, 1359, 1343, 1218, 1202, 1185, 1174, 1157, 1127, 1014, 771cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 368 (M+H, 99), 369 (22), 368 (99), 312 (15), 280 (12), 197 (72), 169 (23), 137 (29), 109 (38), 70 (11), 57 (14). Análisis calculado para C_{20}H_{33}NO_{5}: C, 65,37; H, 9,05; N, 3,81. hallado: C, 65,53; H, 8,88; N, 3,83.
1,1-dimetiletil éster de (1R-cis)-[3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil-L-prolina 21-B
A una solución del diéster 21-A (0,74g, 2,01mmol) en metanol (5mL) se añade una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,15g, 3,62mmol) en solución acuosa de H_{2}O_{2} (30%, 2mL) y agua (5mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla es evaporada hasta la desaparición de todo el metanol y a continuación se enfría en un baño de agua y hielo y se lleva a pH5 utilizando una solución acuosa de HCl 1N. El precipitado resultante de color blanco es aislado por filtrado con succión (con lavados con agua, 3X30mL) proporcionando el producto 21-B en forma de sólido de color blanco (0,45g, rendimiento 63%).
^{1}H NMR (300MHz, CDCl_{3}) \delta 4,34(1H), 3,60(2H), 2,75(1H), 2,41(1H), 2,18(1H), 2,00-1,70(5H), 1,44(9H), 1,43(3H), 1,22(3H), 1,02(3H).
1,1-dimetiletil éster de [1R-[1\alpha, 3\alpha(S*)]]-N-[[3-[[[1-carbometoxi-2-[4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil]etil]amino]carbonil]1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]-L-prolina 21-C
Una solución del ácido 21-B (0,41g, 1,16mmol) en cloruro de metileno (20mL) en atmósfera de N_{2} es enfriada en un baño de agua y hielo. Se añade a ésta diisopropiletil amina (2mL), EDC (0,26g, 1,36mmol), HOBT (0,19g, 1,41mmol) y dimetilaminopiridina (0,02g, 0,16mmol). Cuarenta minutos más tarde, se añade en una sola porción 7-E-2 (7-E: R^{4} = H, R^{5} = O_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi)fenil) (0,45g, 1,27mmol). Después de tres días, la mezcla es sometida a evaporación hasta estado seco, proporcionando un aceite incoloro que es mezclado con THF (100mL) y agua (50mL) y a continuación es agitada secuencialmente con agua (2X50mL), solución acuosa de HCl (0,5N, 4X30mL), solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2X50mL), y agua (2X50mL). La capa orgánica es sometida a evaporación hasta estado seco, proporcionando un aceite incoloro (0,91g) que es cromatografiado sobre gel de sílice con 10% de metanol/cloroformo proporcionando el producto 21-C en forma de sólido esponjoso de color blanco (0,57g, rendimiento 70%).
^{1}H NMR (300MHz, CDCl_{3}) \delta 7,31-6,87(7H), 5,80(1H), 5,18(2H), 4,81(1H), 4,25(1H), 3,67(3H), 3,53(2H), 3,04(2H), 2,44-1,58(9H), 1,37(9H), 1,33(3H), 1,13(3H), 0,90(3H). IR (nujol) 1739, 1658, 1622, 1612, 1585, 1511, 1439, 1298, 1241, 1204, 1177, 1153, 1122, 1017, 768cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 689 (M+H, 24), 689 (24), 520 (69), 519 (32), 518 (99), 336 (44), 280 (21), 161 (24), 159 (40), 109 (75), 57 (22).
Preparación del Ejemplo 200
1,1-dimetiletiléster de [1R-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[[3-[[[1-carboxi-2-[4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil]etil]amino]carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]-L-prolina, sal monosódica (Ejemplo 200)
A una solución de 21-C (0,43g, 0,62mmol) en metanol se añade una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,083g, 1,98mmol) en solución acuosa de H_{2}O_{2} (30%, 3mL) más H_{2}O (3mL). Después de agitar durante una noche, la mezcla es diluida con agua (50mL) y sometida a evaporación en vacío hasta que desaparece el metanol. La capa acuosa es lavada a continuación con dietil éter (3X30mL) y llevada a pH6 utilizando solución acuosa de HCl 1N. El precipitado resultante de color blanco se aisla por filtrado con succión proporcionando un sólido de color blanco (0,4g). Éste es agitado durante una noche con NaHCO_{3} (0,1g, 1,2mmol) en H_{2}O (5mL). La solución acuosa es llevada a pH7-8 utilizando HCl 1 N y a continuación es transferida a una columna de C-18.HPLC y eluida con un gradiente de 0-12% acetonitrilo/solución acuosa Na_{2}CO_{3} (0,02%). La evaporación se consigue en vacío consiguiendo 1,1-dimetiletiléster de [1R-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[[3-[[[1-carboxi-2-[4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil]etil]amino]carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]-L-prolina, sal monosódica en forma de sólido de color blanco (0,2g, 46%)
^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 7,55-7,41(3H), 7,01(2H), 6,82(2H), 6,80(1H), 5,13(2H), 4,08(1H), 3,90(1H), 3,65(1H), 3,40(1H), 3,31(3H), 2,95(2H), 2,44(1H), 2,25-1,5(8H), 1,34(9H), 1,23(3H), 1,08(3H), 0,76(3H). IR (nujol) 3405, 1735, 1610, 1565, 1511, 1439, 1299, 1240, 1195, 1175, 1153, 1093, 1018, 779, 769cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 675 (M+H, 0), 720 (27), 701 (25), 700 (67), 699 (39), 698 (99), 336 (32), 280 (23), 159 (20), 109 (53), 23 (28); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{35}H_{44}Cl_{2}N_{2}O_{7} +Na 697,2424, hallado 697,2418.
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Esquema 22
Ejemplo 216
88
Preparación 22-C-1
Esquema 22, 22-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil,
Estereoquímica = (1S-cis)-L
Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[[(2-cianoetil)amino]-carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (22-C-1) (C_{30}H_{34}Cl_{2}N_{4}O_{5})
Una solución de 19-A-1 (19-A: R^{4} =H, R^{5} =CO_{2}CH_{3,} R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (0,5g, 0,91 mmol), HOBT (0,12g, 0,91 mmol) y DCC (0,18g, 0,91 mmol) se mezcla en CH_{2}Cl_{2} (en seco, 10 mL) en un matraz de fondo redondo en seco bajo atmósfera de nitrógeno. Después de 30 minutos, se añade 2-cianoetil amina 22-B (0,064g, 0,91 mmol). Después de 24 horas se observa un precipitado y se añade metanol (5ml) para conseguir una solución homogénea y se añade una parte adicional de 2-cianoetil amina 22-B(0,064g, 0,91mmol). Después de 8 días de agitación, el disolvente es retirado en vacío y el residuo es disuelto en THF y purificado por cromatografía en una columna de gel de sílice, proporcionando 22-C-1 (0,42g, 78%) en forma de sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (300 MHz, MeOH-d_{4}): \delta 7,58(2H), 7,43(3H), 7,22(2H), 5,48(1H), 4,72(1H), 3,69(3H), 3,58(2H), 3,29(1H), 3,02(1H), 2,65-2,77(3H), 2,40(1H), 2,04(1H), 1,76(1H), 1,47(1H), 1,27(3H), 1,20(3H), 0,74(3H); análisis calculado para C_{30}H_{34}Cl_{2}N_{4}O_{7}-0,54H_{2}O:C, 58,95; H, 5,78; N, 9,17; hallado C, 59,04; H, 5,75; N, 9,22; KF agua: 1,59%.
Preparación del Ejemplo 216
Esquema 22, 22-D: en el que R^{4} = H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil,
Estereoquímica = (1S-cis)-L
(1S-cis)-N-[[3-[[(2-cianoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclo-pentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 216) (C_{29}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{5})
Al metil éster de L-fenilalanina 22-C-1 (22-C: R^{4} =H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (0,16g, 0,266mmol), en metanol (10mL) se añade una mezcla de LiOH\cdotH_{2}O (0,056g, 1,33mmol), en H_{2}O (3mL). La mezcla se somete a agitación a temperatura ambiente durante 2 horas, a continuación el disolvente es eliminado en vacío. El sólido resultante es disuelto en agua (10mL) y el pH se ajusta a un valor aproximado 2 con solución acuosa HCl 1N para conseguir un precipitado de color blanco. El precipitado es aislado por filtrado, lavado con agua (10mL) y a continuación disuelto en acetonitrilo (25mL). La fase orgánica es secada (Na_{2}SO_{4}) y el disolvente es eliminado en vacío consiguiendo un sólido pegajoso que se disuelve en acetonitrilo/agua (25mL, 1:3) y que es liofilizado para conseguir 0,104g (67%) del compuesto buscado en forma de sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (300 MHz, MeOH-d_{4}): \delta 7,82(1H), 7,57(2H), 7,46(3H), 7,24(2H), 4,72(1H), 3,40(2H), 3,30(1H), 2,99(1H), 2,63-2,77(3H), 2,40(1H), 2,03(1H), 1,74(1H), 1,48(1H), 1,27(3H), 1,20(3H), 0,75(3H); IR (nujol): 3317, 3262, 1762, 1673, 1638, 1608, 1540, 1515, 1432, 1325, 1203, 811, 801, 780cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 587(M^{+}, base), 517 (12,4), 335 (9,8), 252 (8,5), 235 (80), análisis calculado para C_{29}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{7}-2,14H_{2}O:C, 55,64; H, 5,84; N, 8,95; hallado: C, 55,74; H, 5,72; N, 8,99; KF agua: 6,16%.
Esquema 23
Ejemplos 217, 218 y 219
89
Preparación 23-C-1
Esquema 23, 23-C: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil,
Estereoquímica = (1S-cis)-L
Metil éster de (1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[[(fenilmetoxi)amino]carbonil]ciclopentil]-carbonil]-L-fenilalanina (23-C-1) (C_{34}H_{37}Cl_{2}N_{3}O_{6})
Una solución de 19-A-1 (19-A: R^{4} = H, R^{5}= CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil) (0,5g, 0,91 mmol), HOBT (0,14g, 1,04 mmol), EDC (0,19g, 1,0mmol), trietilamina (0,46mL, 3,28mmol), y DMAP (0,012g, 0,1mmol) es sometida a agitación en CH_{2}Cl_{2} (en seco, 15mL) en un matraz de fondo redondo en seco en atmósfera de nitrógeno. Se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente y se añade benciloxiamina-HCl 23-B (0,26 g, 1,64 mmol) en una sola porción. La mezcla resultante se somete a agitación durante 72 horas a temperatura ambiente y el disolvente es eliminado en vacío. El residuo es disuelto en CHCl_{3} (50mL) y la solución es lavada con solución acuosa de CHl 1N(50mL), solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (50mL), y la capa orgánica es secada (MgSO_{4}). La concentración en vacío proporciona el producto en crudo en forma de aceite pegajoso que es purificado por cromatografía flash en una columna de gel de sílice (5% MeOH, 95% CH_{2}Cl_{2}) consiguiendo 0,27g (45%) de 23-C-1 (23-C: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl) amino]fenil) en forma de sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (300MHz, CDCl_{3}): \delta 8,13(1H), 7,57(2H), 7,49(1H), 7,35(6H), 7,10(2H), 5,78(1H), 4,89(2H), 3,76(3H), 3,14(2H), 2,47(1H), 2,18(2H), 1,30-1,90(4H), 1,27(3H), 1,15(3H), 0,80(3H); análisis calculado para C_{34}H_{37}Cl_{2}N_{3}O_{6}-0,24H_{2}O:C, 61,97; H, 5,73; N, 6,38; hallado: C, 62,02; H, 5,75; N, 6,39; KF agua: 0,66%.
Preparación del Ejemplo 217
Esquema 23, 23-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenil, R^{23} = fenilmetilo
Estereoquímica = (1S-cis)-L
(1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[[(fenilmetoxi)amino]carbonil]ciclopentil]carbonil-L-fenilalanina (Ejemplo 217) (C_{33}H_{35}Cl_{2}N_{3}O_{6})
Una solución de 23-C-1 (23-C: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo) (0,075g, 0,11 mmol) en metanol (10mL) es tratada con una solución de LiOH-H_{2}O (0,024g, 0,57mmol) en agua (5mL) sobre 5 minutos. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 4 horas, y a continuación el disolvente es eliminado en vacío. El residuo crudo es disuelto en agua (10mL), filtrado a través de un embudo de vidrio sinterizado y a continuación la solución se lleva aproximadamente a pH 4 por la adición de HCl 1N en solución acuosa. El sólido resultante es aislado por filtrado con succión, lavado con agua (2X10mL), y a continuación es disuelto en acetonitrilo-agua (25mL, 1:3). La solución es congelada y liofilizada proporcionando el producto del Ejemplo 217 (23-D: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{23} = fenilmetilo) (0,048g, 68%) en forma de sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (300 MHz, MeOH-d_{4}): \delta 7,85(1H), 7,57(2H), 7, 32-7,49(8H), 7,24(2H), 4,81(2H), 4,70(1H), 3,21(1H), 2,98(1H), 2,69(1H), 2,24(1H), 1,98(1H), 1,72(1H), 1,40(1H), 1,25(3H), 1,15(3H), 0,71(3H); IR(nujol): 3264, 3195, 3063, 3032, 1731, 1658, 1607, 1562, 1538, 1516, 1432, 1326, 1195, 800 cm^{-1}; MS (ES+) m/z 640(M+H^{+}); análisis calculado para C_{33}H_{35}Cl_{2}N_{3}O_{6}-1,19H_{2}O:C, 59,87; H, 5,69; N, 6,35; hallado: C, 59,70; H, 5,78; N, 6,37; KF agua 3,24%.
Preparación del Ejemplo 218
Esquema 23, 23-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{23} = H
Estereoquímica = (1S-cis)-L
(1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[3-[(hidroxiamino)carbonil]-2,2,3-trimetil-ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina metil éster (Ejemplo 218) (C_{27}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{6})
Una solución de 23-C-1 (23-C: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino)fenilo) (0,7g, 1,07mmol) en THF (120mL) es hidrogenada sobre Pd(OH)_{2} (0,42g) a una presión de 46psi de hidrógeno durante 2,75 horas. El catalizador es eliminado por filtrado a través de una placa de Celite®, se lava la torta de filtrado con THF (75mL) y el disolvente es eliminado en vacío proporcionando el producto en crudo en forma de sólido pegajoso. El material en crudo es purificado por cromatografía flash en una columna de gel de sílice (EtOAc/HOAc, 99,9:0,1) consiguiendo el producto del Ejemplo 218 (23-D: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{23} = H) (0,34g, 56%) en forma de sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (300 MHz, MeOH-d_{4}): \delta 7,58(2H), 7,31-7,49(3H), 7,22(2H), 4,72(1H), 3,69(3H), 3,18(1H), 2,99(1H), 2,73(1H), 2,29(1H), 2,02(1H), 1,75(1H), 1,42(1H), 1,27(3H), 1,18(3H), 0,75(3H); IR(nujol): 3313, 3292, 3245, 3194, 3129, 3073, 1749, 1668, 1653, 1606, 1547, 1517, 1459, 1434, 1336, 1211, 1021, 801, 779cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa): 564 (M^{+}+H, 71), 548(3), 531(base), 109(95).
Preparación del Ejemplo 219
Esquema 23, 23-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo, R^{23} = H
Estereoquímica = (1S-cis)-L
(1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[3-[(hidroxiamino)carbonil]-2,2,3-trimetil-ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (Ejemplo 219) (C_{26}H_{29}Cl_{2}N_{3}O_{6})
Una solución del producto del Ejemplo 218 (0,14g, 0,25mmol) en metanol (8mL) es tratada con una solución LiOH-H_{2}O (0,053g, 1,27mmol) en agua (4mL) en 15 minutos. La mezcla se somete a agitación durante 1,5 horas a temperatura ambiente, y a continuación el disolvente es eliminado en vacío. El residuo es disuelto en agua (25mL), el pH es ajustado aproximadamente a 4 con HCl 1N en solución acuosa, y la mezcla es extraída con acetato de etilo (3X25mL). Los extractos orgánicos combinados son secados (MgSO_{4}), y concentrados en vacío para seguir el material en crudo en forma de sólido pegajoso. El producto crudo es disuelto en acetonitrilo/agua (25mL, 1:3), y la solución es congelada y liofilizada dando lugar al producto del Ejemplo 219 (23-D: R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6 diclorobenzoíl) amino]-fenilo, R^{23} = H) (0,098g, 71%), en forma de un sólido de color beige.
^{1}H-NMR (300 MHz, MeOH-d_{4}): \delta 7,57(2H), 7,40-7,47(3H), 7,24(2H), 4,71(1H), 3,20(1H), 2,99(1H), 2,69(1H), 2,29(1H), 2,03(1H), 1,75(1H), 1,43(1H), 1,28(3H), 1,18(3H), 0,76(3H); IR(nujol): 3262, 3197, 3127, 3070, 1725, 1657, 1607, 1584, 1562, 1535, 1516, 1432, 1326, 1234, 1194, 800, 781cm^{-1}; MS(FAB) m/z (intensidad relativa): 550 (M^{+}+H, 70), 517(75), 198(base); análisis calculado para C_{26}H_{29}Cl_{2}N_{3}O_{6}-0,95H_{2}O:C, 55,02; H, 5,49; N, 7,40; hallado: C, 55,29; H, 5,93; N, 7,26; KF agua 3,02%.
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Esquema 24
Ejemplo 196
90
Boc-triptofán-O-metil éster 24-A (636 mg, 2,00 mmol, 1 eq) fue disuelto en DMF seco. A esta solución se añadió NaH (88 mg, 2,20 mmol, 1,1 eq) con generación de H_{2}. A esta mezcla se añadió bromuro de bencilo (285 \muL, 2,40 mmol, 1,2 eq) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. La reacción fue interrumpida con salmuera (15 mL) y extraída con Et_{2}O (3 x 15 mL). La combinación de productos orgánicos fue secada (Na_{2}SO_{4}), filtrada y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna (SiO_{2}, gradiente de elución de hexanos a 30%EtOAc/hexanos) consiguiendo 426 mg (52%) del bencil indol 24-B.
91
El compuesto final del Ejemplo 196 fue producido tal como se describe en el Ejemplo 2. ESMS (m/z): 475 
\hbox{(M-H) ^{-} .}
(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 25
Ejemplo 190
92
La preparación del Ejemplo 190 tiene lugar del modo siguiente. Se disolvieron Boc Tyr (2,6-diclorobencil)-OH (25-A) (1,31 gm, 2,97 mmol) en THF (5 mL) y se enfrió a -78ºC en atmósfera de N_{2} seco. Se añadió BH_{3} THF (5,9 mL, 5,9 mmol, 1N) y la mezcla de reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente con agitación durante 3 horas. La mezcla de reacción fue enfriada a 0ºC y fue interrumpida con H_{2}O (1 mL) y calentada a temperatura ambiente. Después de la adición de 1 N HCl (25 mL), la mezcla fue extraída con EtOAc (3 x 25 ml) y las fases orgánicas combinadas fueron secadas sobre Na_{2}SO_{4}. La solución fue filtrada, el disolvente fue evaporado y el residuo cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 50% EtO Ac/hexanos) proporcionando el producto intermedio 25-B (665 mg, 53%): ESMS (m/z) 448 (M+Na)^{+}.
El compuesto anteriormente mencionado, (25-B) (270 mg, 0,634 mmol), fue disuelto en DMF seco (5 mL) conteniendo yoduro de metilo (51 \mul, 0,824 mmol). A esta solución se añadió NaH (28 mg, 0,697 mmol: en 60% aceite) y la mezcla fue agitada durante 5 minutos. La reacción fue interrumpida por la adición de H_{2}O (1 mL) seguido de 1N HCl (10 mL). La mezcla fue extraída con EtOAc (3 x 15 mL) y los productos orgánicos combinados fueron secados sobre Na_{2}SO_{4}. La solución fue filtrada, el disolvente fue evaporado y el residuo cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 25% EtOAc/hexanos) proporcionando el producto intermedio 25-C (130 mg, 47%): ESMS (m/z)462(M+Na)^{+}.
Se disolvió 25-C (115 mg, 0261 mmol) en 3 N HCl/EtOAc (3 mL) y se agitó durante 1 hora. El disolvente fue eliminado a presión reducida y secado por completo en alto vacío. El residuo fue disuelto en THF (5 mL) y DIEA (228 \muL, 1,31 mmol) y se añadió (1R)-anhídrido canfórico (57 mg, 0,314 mmol). La mezcla de reacción fue calentada a 60ºC con agitación durante 48 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió 1N HCl (15 mL) y la mezcla fue extraída con EtOAc (3 x 15 mL). Los productos orgánicos combinados fueron secados sobre Na_{2}SO_{4}, filtrados y el disolvente fue eliminado a presión reducida. El residuo fue cromatografiado a continuación (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 100% EtOAc) proporcionando el producto del Ejemplo 190 (113 mg. 83%): ESMS (m/z) 422 (MH^{+}).
Esquema 26
Ejemplos 227-229
93
El producto del Ejemplo 56 (0,27 gm, 0,62 mmol) fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) y se añadieron 2,6-diclorofenilisocianato (0,18 gm, 0,94 mmol) y DIEA (327 \muL, 1,86 mmol) y la mezcla de reacción fue agitada durante una noche. Después de la adición de 1 N HCl (20 mL), la mezcla fue extraída con EtOAc (3 x 25 mL) y las fases orgánicas combinadas fueron secadas sobre Na_{2}SO_{4}. La solución fue filtrada, el disolvente fue evaporado y el residuo cromatografiado (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 33% EtOAc/hexanos) dando lugar al producto del Ejemplo 227 (310 mg, 82%): ESMS (m/z) 620 (MH^{+}).
El producto del Ejemplo 227 (250 mg, 0,40 mmol) fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (1,5 mL) y TFA (1,5 mL). Después de 1 hora, el disolvente fue eliminado y el residuo fue triturado con Et_{2}O (3 x 5 mL) formando una substancia de consistencia gomosa. El residuo fue purificado por cromatografía de columna (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexano \rightarrow 25% acetona/hexanos) proporcionando el producto del Ejemplo 228 (170 mg, 73%): ESMS (m/z) 564 (MH^{+}).
Se disolvió el producto del Ejemplo 228 (130 mg, 0,23 mmol) en THF/CH_{3}OH (5 mL/1mL, respectivamente) y se añadió LiOH (22 mg, 0,53 mmol) en H_{2}O (1 mL). Después de 2 horas, el disolvente fue evaporado y el residuo fue disuelto en H_{2}O (3 mL). La solución fue precipitada con adición de 1 H NCl (2 mL). El disolvente fue recogido por filtrado en vacío y lavado con H_{2}O fría (2x2 mL). El material sólido fue secado a continuación de modo completo en alto vacío dando lugar al producto del Ejemplo 229 (80 mg, 64%) en forma de sólido de color blanco: ESMS (m/z) 550 (MH^{+}).
Esquema 27
Ejemplos 225 y 226
94
El Esquema 27 tiene lugar del modo siguiente:
Se disolvieron el producto del Ejemplo 54 (387 mg, 0,704 mmol) y morfolina (0,14 mL, 1,55 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (15 mL). Esta solución fue tratada con BOP-Cl (215 mg, 0,845 mmol) y se agitó con atmósfera de N_{2} seco a temperatura ambiente. Después de 18 horas, la reacción fue tratada con 1 N HCl (10 mL) y extraída con CH_{2}Cl_{2} (3 x 15 mL). Los productos orgánicos combinados fueron secados sobre Na_{2}SO_{4}, filtrados y el disolvente fue evaporado. El residuo fue purificado a continuación por cromatografía de columna (SiO_{2}, gradiente de elución: 100% hexanos \rightarrow 100% EtOAc) consiguiendo el producto del Ejemplo 226 (160 mg, 37%) en forma de aceite incoloro: ESMS (m/z) 618 (M+Na)^{+}.
El metil éster (Ejemplo 226) (160 mg, 0,258 mmol), fue disuelto en THF (5 mL) y se añadieron LiOH (12 mg, 0,52 mmol) en H_{2}O (5 mL). Después de 4 horas, se añadió 1 N HCl (3 mL) y el precipitado fue recogido por filtrado en vacío lavando con H_{2}O fría (3 x 3 mL). El producto fue secado de modo completo en vacío elevado para conseguir el Ejemplo 225 (148 mg, 95%) en forma de polvo amorfo: ESMS (m/z) 602 (M-H).
Esquema 28
Ejemplo 236
95
El producto intermedio fue utilizado en síntesis de fase sólida
Urea intermedia. Se disolvió metil éster de ácido canfórico (10-A) (2,15 g, 11,65 mmol) en THF (25 mL). A esta solución se añadió DPPA (acida de difenilfosforilo) (3,33 g, 12,1 mmol) y DIEA (1,73 g, 13,4 mmol). La reacción fue calentada a 45ºC con agitación. Después de 2,5 horas se añadió alcohol tert-butílico y se calentó a 85ºC durante otras 2,5 horas. La mezcla de reacción fue elaborada eliminando los componentes volátiles a presión reducida. El residuo fue purificado a continuación mediante cromatografía flash (SiO_{2}, gradiente de elución: 2% EtOAc/hexanos \rightarrow 20% EtOAc/hexanos) para proporcionar el diéster de urea simétrico (28-A) (2,0 g, 43%): ESMS (m/z) 397 (MH^{+}).
El éster intermedio (28-A) (2 g, 5,0 mmol) fue disuelto en THF/CH_{3}OH (5 mL/2 mL, respectivamente) y se añadió LiOH (490 mg, 11,6 mmol) en H_{2}O (1 mL). Después de 2 horas el disolvente fue evaporado, y el residuo disuelto en H_{2}O (5 mL). La solución fue precipitada con añadidura de 1 N HCl (15 mL). El disolvente fue recogido por filtrado en vacío y lavado con H_{2}O fría (2 x 2 mL). El material sólido fue secado por completo a continuación con alto vacío consiguiendo el diácido de urea simétrico intermedio (28-B) (1,6 g, 89%) en forma de sólido de color blanco: ESMS (m/z) 369 (MH^{+}).
(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 29
96
A una solución de N-(tert-butoxicarbonil)-4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina (29-A) (9,25g, 20,3 mmol) en DMF (100 mL) se añadió resina Merrifield (10,0g, 10,0 meq/g) y fluoro potásico anhidro (1,57g, 20,0 mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 1 día a 80ºC y la resina resultante unida a aminoácido fue recogida por filtrado, lavada secuencialmente con DMF (2 x 200 mL), DMF en solución acuosa al 50% (3 x 200 mL), CH_{3}OH (3 x 300 mL), CH_{2}Cl_{2} (3 x 300 mL) y CH_{3}OH (3 x 100 mL) y a continuación fue secada en vacío para conseguir la N-(tert-butoxicarbonil)-4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina (29-B) (0,53 meq/g) unida a la resina. La substitución del Boc(L)Fe[4-(2,6-diclorobenzamido)]-OH en la resina se estimó por utilización del método de ácido pícrico.
A la resina obtenida (29-B) (150 mg, 0,107 mmol) se añadió 50% TFA/CH_{2}Cl_{2} (3 mL) y la mezcla fue sometida a filtración durante 30 minutos. La resina fue recogida por filtrado, lavada a continuación con CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 mL), CH_{3}OH (2 x 10 mL), y CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 mL). A la resina lavada se añadió el diácido de urea simétrico (28-B) (118 mg, 0,320 mmol), una solución en 0,5 M DMF de HBTU-HOBT (0,70 mL, 0,320 mmol), DIEA (0,139 mL, 0,799 mmol) y DMF (3,0 mL) y la mezcla se sometió a torbellino durante 2 horas a temperatura ambiente. La resina fue recogida por filtrado, lavada a continuación con DMF (2 x 10 mL), CH_{2}Cl_{2} (2 10 mL), CH_{3}OH (2 x 10 mL), CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 mL). Al substrato unido a la resina se añadió THF (1,6 mL), CH_{3}OH (0,5 mL) y 2N LiOH (0,310 mL) y la mezcla fue sometida a agitación durante 15 minutos. El sobrenadante fue recogido por filtrado y el residuo fue lavado con THF/5% CH_{3}OH (2 x 2 mL) y el filtrado combinado fue evaporado sobre un evaporador bloque Pierce. El concentrado fue diluido con H_{2}O (1 mL) y la solución acuosa fue acidificada con 1N HCl (1,5 mL). El precipitado fue recogido por centrifugación y el sólido fue lavado con H_{2}O (3 x 3 mL). El material sólido fue secado en vacío elevado dando lugar al producto del Ejemplo 236 (25 mg, 33%): ESMS (m/z) 701 (M-H)^{-}.
Esquema 30
97
Esquema 2, III-a: en el que R^{4} = H, R^{5a} = -CH_{2}CO_{2}Et, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenil-
Estereoquímica = (S)
(Producto intermedio para los Ejemplos 201 y 204)
Etil éster del ácido (S)-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-\beta-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]bencenbutanoico (30-A) (C_{24}H_{29}Cl_{2}NO_{5})
A una mezcla de Boc-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (25-A) (5,0 g, 11,36 mmol) y N-metilmorfolina en Et_{2}O seco a -10ºC en atmósfera de Ar se añade isobutil cloroformato (1,49 mL, 11,36 mmol). La reacción es calentada a temperatura ambiente, agitada durante 1 hora, y filtrada. El filtrado se hace reaccionar a 0ºC con un exceso de CH_{2}N_{2} en éter. La solución es agitada durante 1 hora a 0ºC, y a continuación es concentrada. El residuo es disuelto en EtOH absoluto, y se añade lentamente una solución de C_{6}H_{5}CO_{2}Ag (2,86 g, 12,38 mmol) en Et_{3}N (14 mL). La mezcla resultante es agitada durante 1 hora a temperatura ambiente en atmósfera de Ar y filtrada. El filtrado es concentrado hasta conseguir una pasta de color marrón oscuro. El producto es purificado por cromatografía flash de sílice (9:1 y 8:2 hexanos/EtOAc), a partir de la cual se aislan 2,95 g (6,09 mmol, 54%) de producto de 30-A: TLC R_{f}= 0,32 (7:3 hexanos/EtOAc); [\alpha]_{D} (c = 0,9, CHCl_{3}) = -2º; IR (mull) 3360, 2984, 2954, 2925, 2869, 2855, 1721, 1678, 1585, 1524, 1510, 1467, 1447, 1441, 1378, 1373, 1299, 1263, 1251, 1236, 1197, 1177, 1163, 1020, 1016, 783 cm^{-1}; ^{1}H NMR \delta 1,27 (3 H), 1,41 (9 H), 2,38-2,57 (2 H), 2,73-2,96 (2 H), 4,10-4,20 (3 H), 7,22-7,26 (1 H), 7,37 (2 H); MS (FAB) m/z 482, 426, 382, 364, 348, 338, 319, 294, 268, 216, 159, 133, 116, 107, 57; análisis C 59,67, H 6,09, Cl 14,59, N 3,03 (calculado C 59,75, H 6,06, Cl 14,70, N 2,90).
Etil éster del ácido (S)-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-\beta-aminobencenbutanoico (C_{19}H_{21}Cl_{2}NO_{3}). Una solución del Boc-aminoéster (30-A) (0,74 g, 1,53 mmol) en 1:1 CH_{2}Cl_{2}/TFA a 0ºC en atmósfera de Ar es agitada durante 30 minutos a 0ºC y durante 1,5 horas a temperatura ambiente. Se concentra, se hace aceotrópica tres veces con tolueno, y se seca para conseguir el aminoéster (30-B) en forma sólida: TLC R_{f} = 0,15 (EtOAc); ^{1}H NMR (CHCl_{3}) \delta 1,24 (3 H), 2,63-2,73 (2 H), 2,77-2,92 (1 H), 3,07-3,23 (1 H), 3,64-3,82 (1 H), 4,15 (2 H), 5,23 (2 H), 6,97 (2 H), 7,13 (2 H), 7,16-7,25 (1 H), 7,36 (2 H), 8,16 (2 H); MS (FAB) m/z 382, 365, 348, 294, 268, 224, 159, 133, 116, 70.
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Esquema 31
98
Esquema 2, III-a: en el que R^{4} = [(CH_{3})_{3}CO]C(O)-, R^{5a} = -CO_{2}Me, R^{6} = 4-aminofenil-,
Estereoquímica = L
(Producto intermedio para los Ejemplos 208, 209, 210)
N-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-4-nitro-L-fenilalanina metil éster (31-B) (C_{15}H_{20}N_{2}O_{6}). Una solución de N-Boc-4-nitrofenilalanina (31-A) (25,2g, 81,28 mmol) y DMAP (0,82 g, 6,7 mmol) en DMF seco se enfría a 0ºC en atmósfera de Ar, y se trata con MeOH (7,55 mL, 186 mmol) y DCC(18,975 g, 91,04 mmol). La mezcla de reacción es agitada durante una noche a temperatura ambiente y filtrada. El filtrado es lavado con NaHCO_{3} saturado y salmuera. Las soluciones acuosas de lavado son extraídas nuevamente con CH_{2}Cl_{2}. Los productos orgánicos son secados, filtrados y concentrados en forma de sólido de color amarillo. Este producto es purificado por cromatografía flash de sílice (3:1 hexanos/EtOAc) proporcionando 24,6 g (75,85 mmol, 93%) de 31-B: TLC = 0,36 (7:3 hexanos/EtOAc); ^{1}H NMR (CHCl_{3}) \delta 1,41 (9 H), 3,12 (1 H), 3,28 (1 H), 3,73 (3 H), 4,63 (1 H), 5,05 (1 H), 7,31 (2 H), 8,16(2 H); ^{13}C NMR \delta 28,25, 38,38, 52,56, 54,08, 80,35, 123,67, 130,25, 144,03, 147,12, 154,90, 171,64.
4-amino-N-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-L-fenilalanina metil éster (31-C) (C_{15}H_{22}N_{2}O_{4}). Una solución del producto indicado (2,87 g, 8,85 mmol) en MeOH es tratada a temperatura ambiente bajo atmósfera de N_{2} con 10% Pd/C (0,190 g), e hidrogenada a una presión de 40 psi durante 3,5 horas. La mezcla de reacción es filtrada, y el filtrado es concentrado consiguiendo el producto (31-C) en forma de un producto esponjoso de color oscuro: TLC R_{f} = 0,34 (1:1 EtOAc/hexano); ^{1}H NMR (CHCl_{3}) \delta 1,42 (9 H), 2,97 (2 H), 3,48 (2 H), 3,70 (3 H), 4,51 (1 H), 4,93 (1 H), 5,05 (1 H), 6,61 (2 H), 6,90 (2 H), MS (EI) m/z 294, 238, 221, 207, 193, 177, 161, 135, 118, 106, 91, 77, 57.
Esquema 32
99
Esquema 2, III-a: en el que R^{4} = H\cdotHCl, R^{5a} = -CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-benzoílfenil-
Estereoquímica = L
(Producto intermedio para los Ejemplos 40, 191 y 197)
Sal de HCl de 4-benzoíl-L-fenilalanina metil éster, (32-B) (C_{17}H_{17}NO_{3}\cdotHCl). Se añade a MeOH frío (100 mL) en atmósfera de N_{2} AcCl (10 mL). La solución es agitada a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se trata 4-benzoíl-L-fenilalanina (32-A) (0,99 g, 3,7 mmol) con una solución en metanol de HCl (60 mL) a temperatura ambiente durante 26 horas. La mezcla de reacción es concentrada para conseguir 1,05 gramos de la sal de aminoéster\cdotHCl (32-B) en forma de un sólido: TLC (UV) R_{f} = 0,40 (95:5 CHCl_{3}MeOH); HPLC t_{R} = 3,0 min (isocrático 650:350:1 CH_{3}CN/H_{2}O/TFA); ^{1}H NMR (CD_{3}OD) \delta 7,80-7,70 (4 H), 7,68-7,60 (1 H), 7,55-7,41 (4 H), 4,84 (2 H), 4,44 (1 H), 3,82 (3 H), 3,44-3,27 (2 H); ^{13}C NMR (CD_{3}OD) \delta 196,66, 168,86, 139,22, 137,29, 136,91, 132,59, 130,34, 129,62, 129,35, 128,23, 53,56, 52,39, 35,83.
Esquema 33
100
Se calentaron (1S)-1,8,8-trimetil-3-oxabiciclo[3.2.1]octano-2,4-diona [(1S)-anhídrido canfórico] (33-A), ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico), [ácido canfórico (1S,3R)] (1,0 g, 5 mmol) y anhídrido acético (10 mL) en reflujo durante 3 horas. La reacción fue enfriada y el disolvente fue eliminado en un rotovap (temperatura del baño 60ºC). Al resto del material se añadió NaHCO_{3} saturado (2 mL). La parte acuosa fue extraida con CH_{2}Cl_{2} (3 x 5 mL), secado y concentrado en vacío consiguiendo 1,08 g. Este producto fue triturado con metil-t-butil éter para conseguir, después de filtrado 0,94 g (103%) de (1S)-anhídrido canfórico (33-A): punto de fusión 222-223ºC; [\alpha]_{D} +3,8^{O} (c = 0,8, tolueno); ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 1,01, 1,10, 1,27, 1,89-2,35, 2,84; ^{13}C NMR (CDCl_{3}) ppm 172,7, 170,0, 54,33, 53,8, 43,7, 33,5, 24,5, 20,8, 20,2, 14,1; IR (mull aceite mineral) 2925, 1804, 1763, 1180, 1128, 1043, 983, 943, cm^{-1}; MS para C_{10}H_{14}0_{3}, m/z (intensidad relativa) 169 (1), 138 (37), 123 (17), 110 (16), 95 (100); análisis calculado para C_{10}H_{14}O_{3}: C, 65,92; H, 7,75. Hallado: C, 65,86; H, 7,74.
(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 34
Ejemplo 194
101
102
Preparación del producto intermedio (34-B) (C_{5}H_{3}Cl INO)
A una solución de 2-cloro-3-hidroxipiridina (34-A) (10,2 g, 78,7 mmol) y K_{2}CO_{3} (38,87 g, 0,27 mol) en H_{2}O (120 mL) a temperatura ambiente se añade I_{2} (24,33 g, 95,8 mmol). La solución es agitada a temperatura ambiente durante 4 horas, y la reacción es interrumpida a continuación con solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{5}\cdot5H_{2}O. El pH de la mezcla de reacción se ajusta a pH 2 con solución acuosa de HCl 12 M. La mezcla es extraída con EtOAc (3 x 100 mL), y las partes combinadas de EtOAc secadas (MgSO_{4}), filtradas y concentradas en forma de sólido de color amarillo. La recristalización de este sólido a partir de 120:25 heptano/EtOAc (145 mL) proporciona 11,2 g (43,8 mmol, 56%) del producto intermedio (34-B): IR 3113, 3068, 3056, 3021, 2991, 2955, 2925, 2871, 2855, 2832, 2808, 2749, 2668, 2601, 2530, 1554, 1457, 1398, 1304, 1289, 1226, 1086, 828, 711, 617 cm^{-1}; ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 7,06 (1 H), 7,59 (1 H), 11,06 (1 H); ^{13}C NMR (DMSO-d_{6}) \delta 101,18, 127,02, 134,98, 138,07, 150,68; análisis C 23,32, H 1,23, Cl 13,73, N 5,42, (calculado C 23,51, H 1,18, Cl 13,88, N 5,48).
Preparación del producto intermedio 34-C (C_{12}H_{7}Cl_{3}INO)
A una mezcla de (34-B) (5,11 g, 20,0 mmol), Ph_{3}P (5,30 g, 20,0 mmol)y 2,6-diclorobencil alcohol (3,54 g, 20,0 mmol) en THF seco (100 mL) a 0ºC se añade gota a gota DEAD (3,15 mmol, 20,0 mmol). La mezcla de reacción es agitada durante un tiempo adicional de 1,5 horas a 0ºC y 1,5 horas a temperatura ambiente y, a continuación, se concentra. El producto de la reacción es purificado por cromatografía flash de sílice (85:15 hexanos/EtOAc) proporcionando 7,61 g (18,36 mmol, 92%) de (34-C) en forma de sólido de color blanco: TLC R_{f} = 0,57 (7:3 hexanos/EtOAc); ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 5,34 (2 H), 7,48 (1 H), 7,55-7,63 (3 H), 7,85 (1 H); MS (ES) m/z 413,8, 327,9, 288,0, 255,9, 183,0, 150,9, 136,9.
Preparación del producto intermedio (34-E) (C_{16}H_{23}NO_{7}S)
A una solución de N-Boc-L-serina metil éster (34-D) (10,0 g, 45,6 mmol) en piridina anhidra (78 mL) a -10ºC en atmósfera de Ar se añade TsCl (10,0 g, 52,4 mmol). La mezcla de la reaccion es agitada durante 3 horas a -10ºC, y se mantiene a continuación a -15ºC durante 66 horas. La reacción es interrumpida con hielo, agitada durante 2 horas, y a continuación extraída con EtOAc (4 x 300 mL). Las partes de EtOAc combinadas son lavadas con KHSO_{4} 0,2 M acuoso (3 x 300 mL), H_{2}0 (300 mL), NaHCO_{3} en solución acuosa saturada (300 mL), y H_{2}0 (300 mL); y a continuación son secadas (Na_{2}SO_{4}), filtradas y concentradas hasta conseguir un aceite de color amarillo pálido. El producto de reacción es purificado por cromatografía flash de sílice (3:1 hexanos/EtOAc) proporcionando 13,0 g (34,8 mmol, 76%) de (34-E) en forma de sólido de color blancuzco: TLC R_{f} = 0,25 (7:3 hexanos/EtOAc); IR 3400, 2407, 2313, 2291, 1928, 1741, 1708, 1513, 1350, 1245, 1174, 1159, 1060, 995, 941 cm^{-1}; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 1,41 (9 H), 2,44 (3 H), 3,69 (3 H), 4,28 (1 H), 4,39 (1 H), 4,49 (1 H), 5,29 (1 H), 7,34 (2 H), 7,75 (2 H); MS (FAB) m/z 747, 527, 374, 319, 318, 274, 146, 102, 57, 41, 29; análisis C 51,41, H 6,32, N 3,87, S 8,27 (calculado C 51,46, H 6,21, N 3,75, S 8,59).
Preparación del producto intermedio (34-F) (C_{9}H_{16}INO_{4})
A una solución de (34-E) (12,82 g, 34,3 mmol) en acetona seca (40 mL), en un matraz de reacción ámbar a temperatura ambiente en atmósfera de Ar, se añade gota a gota una solución de NaI (7,73 g, 51,5 mmol) en acetona seca (40 mL). La mezcla de reacción es agitada a temperatura ambiente durante 42 horas, y a continuación se concentra. El residuo se disuelve en CHCl_{3} (300 mL). Esta solución de CHCl_{3} es extraída con H_{2}O (2 X 300 mL), solución acuosa de 1 M Na_{2}S_{2}O_{3}\cdot5H_{2}O (300 mL), y H_{2}O (3 X 300 mL); y a continuación se seca (Na_{2}SO_{4}), se filtra, y se concentra para conseguir un aceite de color amarillo. El producto es purificado por cromatografía flash de sílice (4:1 hexanos/EtOAc) proporcionando 9,49 g (28,8 mmol, 84%) de (34-F) en forma de sólido de color blanco: TLC R_{f} = 0,52 (7:3 hexanos/EtOAc); ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 1,45 (9 H), 3,56 (2 H), 3,79 (3 H), 4,51 (1 H); MS (FAB) m/z 330, 274, 230, 211, 170, 146, 102, 57, 41.
Preparación del producto intermedio (34-G) (C_{21}H_{23}Cl_{3}N_{2}O_{5})
A un recipiente de reacción de color ámbar en seco en atmósfera de Ar, conteniendo Zn en polvo activado (0,777 g, 11,89 mmol) y (34-F) (3,91 g, 11,9 mmol), se añade THF seco (11,8 mL) y CH_{3}C(O)N(Me)_{2} (11,8 mL). El O_{2} residual se elimina por burbujeo de Ar a través de la suspensión durante 5 minutos. La mezcla de reacción es agitada a 65 \pm 5ºC durante 2 horas, y a continuación es enfriada a 0ºC. Se añade el catalizador PdCl_{2}[P(Ph)_{3}]_{2} (0,41 g), seguido inmediatamente de una solución libre de O_{2} de (34-C) (2,46 g, 5,94 mmol) en 1:1 THF/CH_{3}C(O)N(Me)_{2} (17,8 mL) seco. La mezcla de reacción resultante es agitada a 65 \pm 5ºC en atmósfera de Ar durante 5 horas. Se interrumpe con una solución acuosa saturada de NH_{4}Cl (150 mL). La mezcla resultante es extraída con EtOAc (3 x 300 mL). Las partes combinadas de EtOAc son lavadas con salmuera (300 mL), secadas (Na_{2}SO_{4}), filtradas y concentradas hasta conseguir un aceite de color amarillo verdoso. El producto es purificado por cromatografía de gel de sílice (3:1 hexanos/EtOAc) consiguiendo 1,90 g (3,88 mmol, 65%) de (34-G): TLC R_{f} = 0,32 (7:3 hexanos/EtOAc; IR 3391, 1734, 1702, 1567, 1561, 1508, 1439, 1287, 1256, 1225, 1214, 1198, 1179, 1167, 1152, 1099, 1087, 1070, 1022, 992, 989, 846, 784, 772, 718 cm^{-1}; ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 1,31 (9 H), 2,94-3,03 (2 H), 3,60 (3 H), 4,32 (1 H), 5,30 (2 H); 7,28 (2 H); 7,45-7,58 (3 H), 7,76 (1 H); MS (ES) m/z 490,8, 434,8, 388,9.
Preparación de producto intermedio (34-H) (C_{16}H_{15}Cl_{3}N_{2}O_{3}\cdotHCl)
Una solución de (34-G) (1,90 g, 3,88 mmol) en 4 M HCl en 1,4-dioxano (35 mL) es sometida a agitación a temperatura ambiente bajo atmósfera de Ar durante 20 horas. La mezcla de reacción es concentrada, diluida con H_{2}0 (40 mL), y extraída con Et_{2}O (3 x 40 mL). Las partes de Et_{2}O son eliminadas. La solución acuosa es liofilizada para conseguir 1,39 g (3,26 mmol, 84%) de (34-H) en forma de sólido de color beige: ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 3,27 (2 H), 3,72 (3 H), 4,37 (1 H), 5,32 (2 H), 7,37 (1 H), 7,48 (1 H), 7,58 (1 H), 7,81 (1 H), 8,62 (3 H); ^{13}C NMR (DMSO-d_{6}) \delta 36,29, 51,98, 53,14, 66,74, 123,33, 125,04, 129,38, 131,21, 132,50, 136,63, 138,99, 147,02, 149,88, 169,75.
Preparación del producto intermedio (34-I) (C_{30}H_{37}Cl_{3}N_{2}O_{6})
A una mezcla de reacción que contiene ácido (15-D) (0,513 g, 2,0 mmol), EDC (0,403 g, 2,06 mmol), HOBt (0,284 g, 2,10 mmol), DMAP (0,076 g, 0,62 mmol) y (34-H) (0,878 g, 2,06 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (20,4 mL) a 0ºC se añade Et_{3}N (1,02 mL, 7,24 mmol). La mezcla es agitada durante 2 horas a 0ºC y 44 horas a temperatura ambiente. Es diluida con CH_{2}Cl_{2} (200 mL). La mezcla de CH_{2}Cl_{2} es lavada con H_{2}O (3 x 200 mL), HCl en solución acuosa 0,5 M (2 x 200 mL), solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 200 mL), y H_{2}O (2 x 200 mL). Los lavados acuosos combinados son extraídos con una parte de CH_{2}Cl_{2} (200 mL). Las partes combinadas de CH_{2}Cl_{2} son secadas (Na_{2}SO_{4}), filtradas, y concentradas consiguiendo un aceite de color amarillo. El producto es purificado por cromatografía de sílice flash (3:2 hexanos/EtOAc) proporcionando 0,919 g (1,46 mmol, 73%) de (34-I): TLC R_{f} = 0,15 (7:3 hexanos/EtOAc); ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,82 (3 H), 1,18 (3 H), 1,31 (3 H), 1,38-1,48 (1 H), 1,44 (9 H), 1,58-1,81 (1 H), 2,14-2,27 (1 H), 2,49-2,70 (2 H), 3,17 (1 H), 3,29 (1 H), 3,69 (3 H), 4,93 (1 H), 5,33 (2 H), 7,06 (2 H), 7,26-7,39 (4 H); ^{13}C NMR (CDCl_{3}) \delta 14,19, 20,40, 21,93, 22,19, 22,91, 28,07, 32,36, 37,04, 46,41, 51,76, 52,28, 54,50, 56,78, 60,38, 61,17, 66,73, 80,07, 123,08, 123,23, 128,60, 130,92, 130,96, 137,08, 140,97, 149,43, 149,77, 171,71, 172,70, 175,11.
Preparación del producto intermedio (34-J) (C_{26}H_{29}Cl_{3}N_{2}O_{6})
Al producto sólido (34-I) (0,910 g, 1,45 mmol) a 0ºC en atmósfera de Ar se añade lentamente TFA (9 mL). La solución resultante es agitada durante 30 minutos a 0ºC y 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es concentrada en vacío, es transformada en aceotrópica con PhCH_{3}, y secada en vacío para conserguir el producto (34-J) en forma de producto esponjoso de color ámbar: TLC R_{f} = 0,37 (750:250:5 hexanos/EtOAc/HCO_{2}H; IR 3321, 3061, 1746, 1728, 1696, 1655, 1584, 1565, 1523, 1497, 1440, 1355, 1286, 1209, 1200, 1171, 1119, 1094, 1088, 995, 781, 769, 731, 717, 695 cm^{-1}; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,87 (3 H), 1,26 (3 H), 1,33 (3 H), 1,46-1,58 (1 H), 1,73-1,87 (1 H), 2,14-2,30 (1 H), 2,53-2,65 (2 H), 2,69 (1 H), 3,19 (1 H), 3,29 (1 H), 3,69 (3 H), 4,93 (1 H), 5,33 (2 H), 7,07 (1 H), 7,23-7,40 (4 H), 10,18 (1 H).
Preparación del producto del Ejemplo 194 (C_{26}H_{29}Cl_{3}N_{2}O_{6})
A una solución de (34-J) (0,908 g, 1,41 mmol) en THF (28,9 mL) se añade una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,291 g, 6,94 mmol) en H_{2}O (14,4 mL). La mezcla de reacción es agitada durante 5 horas y a continuación es diluida con H_{2}O (70 mL). Se enfría a 0ºC, se acidifica con HCl 1M en solución acuosa, y se extrae con EtOAc (3 x 200 mL). Las partes combinadas de EtOAc se lavan con salmuera (200 mL), se secan (NaSO_{4}), se filtran y se concentran hasta conseguir un aceite viscoso e incoloro. El producto es purificado por cromatografía flash de sílice (200:50:1 hexanos/EtOAc/HCO_{2}H), se hace aceotrópica tres veces a partir de PhCH_{3}, se disuelve en 1:1 CH_{3}CN/H_{2}O (4O mL), y se liofiliza proporcionando 0,752 g (1,35 mmol, 96%) del producto del Ejemplo 194 en forma de sólido de color blanco: punto de fusión 120-122 ºC; TLC R_{f} = 0,28 (200:1 EtOAc/HCO_{2}H); IR 3323, 3064, 2730, 2668, 1714, 1700, 1648, 1584, 1564, 1522, 1440, 1354, 1284, 1235, 1198, 1162, 1118, 1096, 1089, 995, 962, 828, 780, 769, 716 cm^{-1}; ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 0,63 (3 H), 1,09 (3 H), 1,12 (3 H), 1,24-1,37 (1 H), 1,46-1,58 (1 H), 1,78-1,94 (1 H), 2,27-2,43 (2 H), 2,62 (1 H), 2,96-3,14 (2 H), 3,31 (1 H), 4,57 (1 H), 5,30 (2 H), 7,29 (1 H), 7,45-7,58 (3 H), 7,75 (1 H), 7,85 (1 H); MS (EI) m/z 556, 538, 379, 353, 335, 301, 159, 142, 123, 109, 95.
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Esquema 35
Ejemplos 220-224
103
Preparación 35-B
Esquema 35
Una mezcla enfriada (0-5ºC) de una resina poliestireno Wang 35-A (Advanced Chemtech, 2,0 g, ca. 1,5 mmol), N-Boc-4-yodo-L-fenilalanina (4,00 g, 10 mmol), y PPh_{3} (1,30 g, 5,0 mmol) en THF (20 mL) recibió la adición de dietil azodicarboxilato (0,80 mL, 5,0 mmol) en 4 partes aproximadamente iguales a intervalos de 5 minutos. Una vez desvanecido el color naranja, la mezcla fue calentada a temperatura ambiente y sometida a agitación durante 5 horas. La mezcla fue diluida con THF (30 mL) y filtrada. La resina fue lavada con DMF (5 x 50 mL), THF (5 x 50 mL), y MeOH (3 x 50 mL), y a continuación secada en vacío para conseguir la resina esterificada 35-B (2,68 g) como material en polvo incoloro: ^{13}C NMR (100 MHz, CD_{2}Cl_{2}, sonda 4mm MAS) \delta 171,86, 155,33, 137,85, 136,40, 131,87, 128,00, 92,74, 80,09, 54,05, 38,05, 28,51.
Preparación 35-C-1
Esquema 35 en el que R^{35} es 2,4,6-triclorofenilo
Se hizo burbujear N_{2} en una mezcla de resina Wang (35-B) (500 mg, aprox. 0,3 mmol) funcionalizada con N-Boc-4-yodo-L-fenilalanina, PPh_{3} (105 mg, 0,4 mmol), 2,4,6-tricloroanilina (490 mg, 2,5 mmol) y DIEA (1,74 mL, 10 mmol) en NMP (10 mL) durante 10 minutos. Se añadió Pd_{2}dba_{3} (92 mg, 0,1 mmol) y la mezcla de reacción fue colocada bajo atmósfera de CO y calentada (temperatura del baño 70ºC) durante 18 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla fue diluida con 3% (peso/volumen) de dietilditiocarbamato sódico en 95:5 NMP:DIEA (10 mL). Después de otros 10 minutos, la mezcla fue filtrada y la resina lavada con NMP (5 x 10 mL), THF (3 x 10 mL), y MeOH (3 x 10 mL) y secada en vacío consiguiendo el producto 35-C-1 en forma de polvo incoloro.
Preparación 35-D-1
Esquema 35 en el que R^{35} es 2,4,6-triclorofenilo
Se empapó la resina 35-C-1 con cloruro de metileno (0,5 mL) y se diluyó con 95:5 TFA:H_{2}O (10 mL). Después de 90 minutos, la mezcla fue filtrada y la resina fue lavada con TFA (3 x 5 mL), CH_{2}Cl_{2} (3 x 5 mL) y MeOH (3 x 5 mL). Los filtrados combinados fueron concentrados en vacío y el residuo fue liofilizado a partir de ácido acético glacial para conseguir el aminoácido 35-D-1 (152 mg, 91%) en forma de material en polvo utilizado sin purificación: MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 387 (M+H, 42), 427 (26), 426 (80), 389 (46), 387 (42), 366 (33), 279 (99), 177 (54), 146 (18), 119 (26), 23 (26); HRMS (FAB) calculado para C_{16}H_{13}Cl_{3}N_{2}O_{3}+H_{1} 387,0070, hallado 387,0084.
Preparación 35-E-1
Esquema 35 en el que R^{35} es 2,4,6-triclorofenilo
El aminoácido 35-D-1 fue disuelto en HCl metanólico (20 mL) y calentado a 55ºC durante 18 horas. La concentración en vacío facilitó el metil éster 35-E-1 que fue utilizado sin purificación: MS (ES+) para C_{17}H_{15}Cl_{3}N_{2}O_{3} m/z 400,9 (M+H)^{+}.
Preparación 35-F-1
Esquema 35 en el que R^{35} es 2,4,6-triclorofenilo
A una solución enfriada (0-5ºC) del metil éster 35-E-1, 15-D (97 mg, 0,38 mmol), y 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (52 mg, 0,38 mmol) en CH_{2}Cl_{2}/DMF (1:2, 6 mL) se añadió EDC (73 mg, 0,38 mmol) seguido de DIEA (0,23 ml, 1,14 mmol). La solución se dejó calentar gradualmente a temperatura ambiente y se sometió a agitación otras 16 horas. Los volátiles fueron eliminados en vacío, y el residuo fue dividido entre acetato de etilo y solución acuosa de HCL 0,25N. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de NaHCO_{3} y salmuera, secada (MgSO_{4}), filtrada y purificada en vacío. La purificación del residuo por cromatografía flash, utilizando eluyente de acetato de etilo/CH_{2}Cl_{2}/hexano (1:1:6) proporcionó 35-F-1 (115 mg) en forma de polvo amorfo: ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,96 (1 H), 7,86 (2 H), 7,20 (2 H), 5,86 (1 H), 4,92 (1 H), 3,72 (3 H), 3,17 (2 H), 2,49 (2 H), 2,10 (1 H), 1,69 (1 H), 1,41 (10 H), 1,25 (3 H), 1,19 (3 H), 0,76 (3 H); ^{13}C NMR (75 MHz, CDCl_{3}) \delta 174,90, 172,66, 171,88, 165,41, 140,88, 134,42, 133,50, 132,08, 131,27, 129,58, 128,44, 127,97, 80,25, 60,39, 56,64, 54,43, 52,91, 52,47, 46,38, 37,71, 32,33, 28,03, 22,99, 22,51, 21,93, 20,59, 14,17; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 639 (M+H, 17), 641 (17), 639 (17), 583 (16), 403 (27), 401 (28), 189 (23), 137 (18), 109 (99), 57 (59), 41 (20); HRMS (FAB) calculado para C_{31}H_{37}Cl_{3}N_{2}O_{6}+H_{1} 639,1795, hallado 639,1779.
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Preparación del Ejemplo 220
(1S-cis)-N-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]-carbonil]-4-[[[(1,1'-bifenil)-4-il)amino]-carbonil]-L-fenilalanina
El Ejemplo 220 fue preparado tal como se ha descrito en los Esquemas 35 y 2 partiendo de 4-aminobifenilo y 35-B:
propiedades físicas siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,87 (1 H), 7,76 (2 H), 7,62 (4 H), 7,44 (4 H), 7,30 (1 H), 4,79 (1 H), 3,30 (1 H), 3,01 (1 H), 2,72 (1 H), 2,54 (1 H), 2,02 (1 H), 1,62 (1 H), 1,58 (1 H), 1,28 (3 H), 1,20 (3 H), 0,78 (3 H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 179,75, 175,49, 174,98, 168,82, 143,38, 142,03, 139,42, 138,75, 134,74, 130,70, 130,01, 128,86, 128,38, 128,31, 127,87, 122,68, 57,56, 54,69, 47,81, 38,43, 33,87, 23,94, 23,25, 22,57, 21,99; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 543 (M^{+}, 17), 109 (41), 83 (43), 81 (37), 71 (45), 69 (82), 67 (35), 57 (81), 55 (99), 43 (80); HRMS (EI) calculado para C_{32}H_{34}N_{2}O_{6} 542,2416, hallado 542,2429. Análisis calculado para C_{32}H_{34}N_{2}O_{6}\cdot0,5 H_{2}O: C, 69,67; H, 6,39; N, 5,08. Hallado: C, 69,72; H, 6,65; N, 4,75.
Preparación del Ejemplo 221
(1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(4-clorofenil)amino]-carbonil]-L-fenilalanina
El Ejemplo 221 fue preparado tal como se ha descrito en los Esquemas 35 y 2, empezando de 4-cloroanilina y 35-B:
propiedades físicas siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,85 (2 H), 7,68 (2 H), 7,40 (2 H), 7,36 (2 H), 4,82 (1 H), 3,29 (1 H), 3,05 (1 H), 2,81 (1 H), 2,54 (1 H), 1,96 (1 H), 1,70 (1 H), 1,24 (1 H), 0,91 (3 H), 0,86 (3 H), 0,77 (3 H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 179,74, 175,55, 174,65, 168,73, 143,39, 138,93, 134,55, 130,66, 130,55, 128,86, 123,68, 57,54, 54,62, 47,81, 38,33, 35,92, 33,86, 30,30, 29,00, 26,34, 23,21, 22,51, 21,98, 21,16; HRMS (FAB) calculado para C_{26}H_{29}ClN_{2}O_{6}+H_{1} 501,1792, hallado 501,1790.
Preparación del Ejemplo 222
(1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]-carbonil]-4-[[(2-trifluorometilfenil)amino]-carbonil]-L-fenilalanina
El Ejemplo 222 fue preparado tal como se describe en los Esquemas 35 y 2 partiendo de 2-(trifluorometil)anilina y 35-B. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,86 (2 H), 7,66 (4 H), 7,40 (2 H), 4,78 (1 H), 3,30 (1 H), 3,10 (1 H), 2,72 (1 H), 2,49 (1 H), 1,98 (1 H), 1,62 (1 H), 1,48 (1 H), 1,28 (3 H), 1,20 (3 H), 0,78 (3 H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 179,70, 175,77, 173,54, 169,59, 143,34, 136,74, 124,18, 133,85, 131,74, 130,73, 128,89, 128,30, 127,13, 123,51, 57,56, 55,05, 62,54, 57,56, 55,05, 54,58, 50,06, 47,80, 38,21, 33,84, 23,89, 23,19, 22,52, 22,30, 21,85; IR (mull) 3302, 1708, 1656, 1613, 1592, 1530, 1508, 1320, 1294, 1260, 1206, 1173, 1123, 1059, 767 cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 535 (M^{+}, 99), 536 (32), 535 (99), 517 (25), 353 (46), 109 (57), 69 (14), 57 (13), 55 (14), 43 (13); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{27}H_{29}F_{3}N_{2}O_{6}+H_{1} 535,2056, hallado 535,204 9. Análisis calculado para C_{27}H_{29}F_{3}N_{2}O_{6}\cdot0,5 H_{2}O: C, 59,66; H, 5,56; N, 5,15. Hallado: C, 59,75; H, 5,73; N, 4,72.
Preparación del Ejemplo 223
(1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(2,4,6-triclorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
35-F-1 (110 mg, 0,16 mmol) se desprotegió tal como se describe en el Esquema 2 para conseguir el Ejemplo 223 (90 mg) en forma de polvo amorfo: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,90 (2 H), 7,60 (1 H), 7,41 (2 H), 4,82 (1 H), 3,29 (1 H), 3,10 (1 H), 2,72 (1 H), 2,63 (1 H), 1,92 (1 H), 1,68 (1 H), 1,44 (1 H), 0,88 (6 H), 0,77 (3 H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 179,72, 175,52, 174,72, 168,90, 143,97, 136,86, 135,15, 133,59, 133,02, 130,82, 129,66, 129,09, 62,70, 57,53, 54,65, 38,41, 33,85, 23,91, 23,20, 22,53, 21,97; IR (mull) 3263, 3079, 1709, 1657, 1614, 1573, 1556, 1524, 1495, 1287, 1246, 1205, 1190, 869, 857 cm^{-1}; MS (ES+) para C_{26}H_{27} Cl_{3}N_{2}O_{6} m/z 568,9 (M+H)^{+}; análisis calculado para C_{26}H_{27}Cl_{3}N_{2}O_{6}: C, 54,80; H, 4,78; N, 4,92. Hallado: C, 55,00; H, 5,08; N, 4,64.
Preparación del Ejemplo 224
[1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-4-[[[(1-carboxi-3-metilbutil]-amino]carbonil]-N-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
El Ejemplo 224 se preparó tal como se describe en los Esquemas 35 y 2 partiendo de metil L-leucinato y 35-B:
propiedades físicas siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,78 (2 H), 7,34 (2 H), 4,87 (1 H), 4,72 (1 H), 3,30 (1 H), 3,02 (1 H), 2,82 (1 H), 2,68 (1 H), 1,98 (1H), 1,74 (5 H), 1,23 (3 H), 0,97 (9 H), 0,77 (3 H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 179,73, 176,33, 175,23, 174,66, 170,35, 143,05, 133,87, 130,52, 128,72, 62,41, 57,53, 54,63, 52,77, 47,79, 41,51, 38,30, 26,42, 23,90, 23,56, 23,18, 22,51, 21,93; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 505 (M^{+}, 99), 506 (27), 505 (99), 487 (20), 109 (29), 71 (20), 69 (34), 57 (34), 55 (33), 43 (36); HRMS (FAB) calculado para C_{26}H_{36}N_{2} O_{8}+H_{1} 505,2549, hallado 505,2570.
Esquema 36
104
En el que R^{36-1} y R^{36-2} se definen independientemente como -CH_{3}, t-Bu, o -CH_{2}C_{6}H_{5} y la configuración correspondiente se ha mostrado con líneas continuas y de trazos.
El Esquema 36 indica un método general (eterificación, epimerización y desprotección de éster) para la preparación de isómeros de ácido canfórico 36-B, 36-D, 36-G y 36-F protegido selectivamente.
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Esquema 37
105
En el que R^{37-1} y R^{37-2} se definen independientemente como -H o -CH_{3} y R^{37-3} y R^{37-4} son independientemente definidos como -H, -CH_{3}, t-Bu, o -CH_{2}C_{6}H_{5}.
El Esquema 37 indica métodos para el acoplamiento de los isómeros del monoéster de ácido camfórico a los isómeros de 37-B y desprotección de éster para la preparación de isómeros del Ejemplo 54. 37-C-1 a 37-C-15.
Preparación del Ejemplo 237
Esquema 37: 37-C-1 en la que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1S-cis) y D-fenilalanina(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), 37-C-1 fue preparado del modo siguiente:
A una solución de ácido (1S-cis)-1, 2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico, 1-(1, 1-dimetiletil)-3-metil diéster (502,7 mg), 15-C, en cloruro de metileno (8 mL) a 0ºC se añadió DIEA (1 mL), EDC (413,1 mg), HOBT (291,1 mg), y dimetilaminopiridina (26,4 mg). La mezcla de reacción fue agitada a 0ºC durante 15 minutos y a continuación 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato (803 mg), 37-B-2, se añadió y se agitó a temperatura ambiente durante 50 horas. La mezcla de reacción fue diluida con agua y extraída con cloruro de metileno. Los extractos concentrados en vacío y el material crudo purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice. El material crudo fue aplicado a la columna por concentración del mismo sobre un tapón de gel de sílice y añadiendo este tapón a la parte superior de la columna. La columna fue eluida con metanol en cloruro de metileno obteniendo (1S-cis)-N-[(3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina metil éster (890 mg). Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 265-270ºC; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,63 (2 H), 7,35 (3 H), 7,19 (2 H), 4,84 (1 H), 3,76 (3 H), 3,18 (1 H), 3,01 (1 H), 2,61 (1 H), 2,47 (1 H), 2,06 (1 H), 1,74 (1 H), 1,44 (10 H), 1,14 (3 H), 1,03 (3 H), 0,66 (3 H); MS-ESI (m/z): 603 ([M-H^{-}]; MS-ESI (m/z): 605 ([M+H^{+}]).
La desprotección del ácido carboxílico sigue la de los Ejemplos 53 y 54 obteniendo (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina. Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 263-267ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 10,6 (1H), 7,83 (1H), 7,52 (5H), 7,2 (2H), 4,45 (1H), 3,1 (1H), 2,82 (1H), 2,62 (1H), 2,3 (1H), 1,94 (1H), 1,55 (1H), 1,3 (1H), 1,05 (3H), 0,83 (3H), 0,45 (3H); MS-ESI (m/z): 533 ([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535 ([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 238
Esquema 37: 37-C-2 en el que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1S-trans) y D-fenilalanina(1S-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-2 del modo siguiente:
La preparación sigue la de la Preparación 37-C-1. Los materiales de partida son ácido (1S-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico, 1-(1,1-dimetiletil)-éster, 36-G-1, y 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato, 37-B-2. Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 158-168ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3 (1H),10,5 (1H), 7,95 (1H), 7,5 (5H), 7,19 (2H), 4,43 (1H), 3,04 (1H), 2,80 (1H), 2,66 (1H), 1,97 (2H), 1,66 (1H), 1,42 (1H), 0,96 (3H), 0,70 (3H), 0,44 (3H); MS-ESI (m/z); 533 ([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535 ([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 239
Esquema 37: 37-C-3 en el que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1S-trans) y L-fenilalanina (1S-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}0_{6}), 37-C-3 fue preparado del modo siguiente:
La preparación sigue la de la Preparación 37-C-1. Los materiales iniciales son (1S-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,1-(1,1-dimetiletil)-éster de ácido 3-dicarboxílico, 36-G-1, y 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato, 37-B-1. Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 172-178ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 10,6 (1H), 7,93 (1H), 7,5 (5H), 7,19 (2H), 4,43 (1H), 2,98 (1H), 2,86 (1H), 2,68 (1H), 2,01 (2H), 1,89 (1H), 1,63 (1H), 1,43 (1H), 1,02 (3H), 0,99 (3H), 0,72 (3H); MS-ESI (m/z): 533 ([M-H^{-}]).
Preparación del Ejemplo 240
Esquema 37: 37-C-4 en el que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1R-trans) y L-fenilalanina (1R-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), 37-C-4 fue preparado del modo siguiente:
La preparación sigue la de la Preparación 37-C-1. Los materiales de partida son (1R-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,1-(1,1-dimetiletil)-éster del ácido 3-dicarboxílico, 36-G-2, y 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato, 37-B-1. Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 168-170ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3 (2H), 10,6 (1H), 7,96 (1H), 7,51 (5H), 7,20 (2H), 4,43 (1H), 3,05 (1H), 2,80 (1H), 1,97 (2H), 1,66 (1H), 1,42 (1H), 0,96 (3H), 0,70 (3H), 0,44 (3H); MS-ESI (m/z): 533 ([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535 ([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 241
Esquema 37: 37-C-5 en el que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1R-trans) y D-fenilalanina(1R-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), 37-C-5 fue preparado de la manera siguiente:
La preparación sigue la de la Preparación 37-C-1. Los materiales iniciales son (1R-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,1-(1, 1-dimetiletil)-éster del ácido 3-dicarboxílico, 36-G-2, y 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato, 37-B-2. Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 158-165ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6})\cdot \delta 10,6 (1H), 7,93 (1H), 7,51 (5H), 7,19 (2H), 4,43 (1H), 2,98 (1H), 2,86 (1H), 2,68 (1H), 2,02 (1H), 1,88 (1H), 1,62 (1H), 1,43 (1H), 1,02 (3H), 0,99 (3H), 0,73 (3H); MS-ESI (m/z): 533 ([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535 ([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 242
Esquema 37: 37-C-6 en la que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1R-cis) y D-fenilalanina (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}0_{6}), 37-C-6 fue preparado del modo siguiente:
La preparación sigue la de la Preparación 37-C-1. Los materiales de partida son (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1, 1-(1, 1-dimetiletil)-éster del ácido 3-dicarboxílico, 36-D, y 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato, 37-B-2. Las propiedades físicas son las siguientes: punto de fusión 166-170ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 10,65 (1H), 7,81 (1H), 7,51 (5H), 7,20 (2H), 4,44 (1H), 2,99 (1H), 2,85 (1H), 2,68 (1H), 2,34 (1H), 1,88 (1H), 1,52 (1H), 1,30 (1H), 1,15 (3H), 1,10 (3H), 0,65 (3H); MS-ESI (m/z): 533 ([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z):535 [M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 243
Esquema 37: 37-C-7 en el que R^{3} es H, R^{1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1R-cis) y L-fenilalanina (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), el 37-C-7 fue preparado de la manera siguiente:
La preparación se basa en la preparación de 37-C-1. Los materiales iniciales son (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,1-(1,1-dimetiletil)-éster del ácido 3-dicarboxílico, 36-D, y 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato, 37-B-1. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 171-172ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 10,6(1H), 7,82(1H), 7,51(5H), 7,18(2H), 4,45 (1H), 3,1(1H), 2,82(1H), 2,62(1H), 2,32(1H), 1,93(1H), 1,58(1H), 1,34 (1H), 1,06(3H), 0,83(3H), 0,45(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 244
Esquema 37: 37-C-8 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1S-cis) y L-fenilalanina (1S-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), el 37-C-8 fue preparado del modo siguiente:
A una solución de 3-metil éster del ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico, 36-B (501,3 mg) en DMF(5mL) y DIEA(3 mL) se añadió hexafluorofosfato (1,0445 g) de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. A la mezcla de reacción se añadió 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina metil éster, sal clorhidrato (1,0093 g), 37-B-1, y la mezcla de reacción fue sometida a agitación durante 3 días. La mezcla de reacción fue diluida a continuación con agua y extraída con AcOEt. El extracto concentrado fue purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice eluyendo con metanol en cloruro de metileno obteniendo metil éster (2,272 g) de (1S-cis)-N-[(3-metoxicarbonil)-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina. Una solución de LiOH(552 mg) en H_{2}O(20 mL) y 4 mL de peróxido de hidrógeno al 30% fue añadida a la solución del producto anteriormente indicado metil éster de (1S-cis)-N-[((3-metoxicarbonil)-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{6}) (2,272 g) en 15 mL de metanol. La solución fue agitada durante 6 días. El metanol es eliminado a continuación en vacío. La capa acuosa es diluida adicionalmente con agua y extraída con dietil éter y el extracto es eliminado. La capa acuosa es acidificada a pH = 3-4 con HCl 0,6N resultando en un precipitado. El precipitado es filtrado con lavado con agua obteniendo (1S-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina(1,1265 g). Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 152-157ºC. ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3(1H), 10,63(1H), 7,50(5H), 7,27(1H), 7,18(2H), 4,45(1H), 2,29(2H), 2,63(1H), 2,25(1H), 1,93(1H), 1,69(1H), 1,28(1H), 1,16(3H), 1,05(3H), 0,50(3H); MS-ESI (m/z): 533 ([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z):535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 245
Esquema 37: 37-C-9 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1S-cis) y D-fenilalanina (1S-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), el 37-C-9 fue preparado del modo siguiente:
La preparación se basa en la preparación de 37-C-8. Los materiales iniciales son (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-metil éster del ácido 3-dicarboxílico, 36-B, y metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina, sal clorhidrato, 37-B-2. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 155-163ºC. ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3(1H), 10,6 (1H), 7,51(5H), 7,29(1H), 7,18(2H), 4,44(1H), 3,07(1H), 2,94(1H), 2,25(1H), 2,62(1H), 1,94(1H), 1,67(1H), 1,28(1H), 1,04(3H), 0,99(3H), 0,48(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 246
Esquema 37: 37-C-10 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1S-trans) y D-fenilalanina (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-10 del modo siguiente:
A una solución de ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico, 36-F-1, (503,7 mg) en DMF(5 mL) y DIEA(3 mL) se añadió O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato (731,7 mg), y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. A la mezcla de reacción se añadió metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina, sal clorhidrato (698,6 mg), 37-B-2, y la mezcla de reacción fue agitada durante 5 días. La reacción fue diluida a continuación con agua y extraída con AcOEt. El extracto concentrado fue purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice eluyendo con metanol en cloruro de metileno, obteniendo metil éster de (1S-trans)-N-[(3-(fenilmetoxi)carbonil)-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (1,1024 g). Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,82(1H), 7,58 (2H), 7,28(8H), 7,05(2H), 6,07(1H), 5,06(2H), 4,74(1H), 3,66(3H), 3,07(3H), 2,05(3H), 1,53(1H), 1,21(3H), 0,90(3H), 0,75(3H); MS-ESI (m/z): 637([M^{-}H^{-}]); MS-ESI (m/z): 661([M+Na]^{+}).
El producto indicado fue disuelto en THF(10 mL) y se añadió 10% de paladio sobre carbón (75 mg), y la mezcla fue hidrogenada a presión atmosférica durante 26 horas. La mezcla de reacción fue filtrada a continuación y el filtrado fue concentrado obteniendo metil éster de (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (896,3 mg). Las características físicas son las siguientes: MS-ESI (m/z): 547([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 571([M+Na]^{+}). Una solución de LiOH(213,2 mg) en H_{2}O (10 mL) y 2 mL de peróxido de hidrógeno al 30% fue añadido a la solución de metil éster de (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (896,3 mg) en 10 mL de metanol. La solución fue agitada durante 26 horas. El metanol es eliminado a continuación en vacío. La capa acuosa fue diluida adicionalmente con agua y extraída con dietil éter y los extractos fueron eliminados. La capa acuosa es acidificada a pH = 3-4 con HCl 0,6N dando como resultado un precipitado. El precipitado es filtrado con lavado con agua obteniendo (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (692,2 mg). Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 145-150ºC. ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3(1H), 10,6 (1H), 7,51(5H), 7,29(1H), 7,18(2H), 4,44(1H), 3,07(1H), 2,94(1H), 2,25(1H), 2,62(1H), 1,94(1H), 1,67(1H), 1,28(1H), 1,04(3H), 0,99(3H), 0,48(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 247
Esquema 37: 37-C-11 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1S-trans) y L-fenilalanina (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-11 del modo siguiente:
La preparación se basa en la preparación de 37-C-10. Los materiales iniciales son ácido (1S-trans)-[3-fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico, 36-F-1, y metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, sal clorhidrato, 37-B-1. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 145-153ºC. ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3(1H), 10,6 (1H), 7,51(5H), 7,29(1H), 7,18(2H), 4,42(1H), 3,01(2H), 2,70(1H), 1,88(2H), 1,73(1H), 1,36(1H), 1,04(3H), 0,94(3H), 0,78(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 248
Esquema 37: 37-C-12 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1R-cis) y L-fenilalanina (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-12 del modo siguiente:
La preparación se basa en la preparación de 37-C-8. Los materiales iniciales son: 3-metil éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico, 10-A, y metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, sal clorhidrato, 37-B-1. Las características físicas son las siguientes: p.f. 154-160ºC. ^{1}H NMR (300MHz, MeOH-d_{4}). \delta 7,58(2H), 7,42(3H), 7,24(3H), 4,74(1H), 3,3(1H), 3,03(1H), 2,75(1H), 2,41(1H), 2,12(1H), 1,80(1H), 1,43(1H), 1,14(3H), 1,11(3H), 0,63(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 249
Esquema 37: 37-C-13 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1R-cis) y D-fenilalanina (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-13 del modo siguiente:
La preparación se basa en la preparación 37-C-8. Los materiales iniciales son (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1, 3-metil éster del ácido 3-dicarboxílico, 10-A, y metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina, sal clorhidrato, 37-B-2. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 155-159ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,4(1H), 10,6(1H), 7,51(5H), 7,19(3H), 4,42(1H), 2,99(2H), 2,64(1H), 2,26(1H), 1,94(1H), 1,68(1H), 1,29(1H), 1,17(3H), 1,05(3H), 0,51(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]).
Preparación del Ejemplo 250
Esquema 37: 37-C-14 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1R-trans) y L-fenilalanina (1R-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-14 del modo siguiente:
La preparación se basa en la preparación 37-C-10. Los materiales iniciales son ácido (1R-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico, 36-F-2, y metil éster 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, sal clorhidrato, 37-B-1. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 148-155ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3(2H), 10,6(1H), 7,53(5H), 7,27(1H), 7,21(2H), 4,38 2(1H), 3,03(2H), 2,73(1H), 1,92(2H), 1,79(1H), 1,43(1H), 1,04(3H), 0,75(3H), 0,71(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 251
Esquema 37: 37-C-15 en el que R^{3} es CH_{3}, R^{1} es H, y la estereoquímica es (1R-trans) y D-fenilalanina (1R-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), se preparó 37-C-15 del modo siguiente:
La preparación se basa en la Preparación 37-C-10. Los materiales iniciales son ácido (1R-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico, 36-F-2, y metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina, sal clorhidrato, 37-B-2. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 134-140ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}). \delta 12,3(1H), 10,6(1H), 7,50(5H), 7,43(1H), 7,21(2H), 4,43(1H), 3,03(2H), 2,73(1H), 1,92(2H), 1,78(1H), 1,41(1H), 1,06(3H), 0,96(3H), 0,80(3H); MS-ESI (m/z): 533([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 535([M+H^{+}]).
Preparación del Ejemplo 252
La síntesis para el Ejemplo 252, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-bromo-4[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}), es la indicada por el Esquema 2 (Método B) tal como se indica a continuación:
A una solución de 1-(1, 1-dimetiletil) éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (153,9 mg), 15-D, en cloruro de metileno (6 mL) a 0ºC se añadió DIEA (1 mL), EDC (113,2 mg), HOBT(80,3 mg), y dimetilaminopiridina (20,1 mg). La reacción fue agitada a 0ºC durante 20 minutos y a continuación se añadió sal de clorhidrato de metil éster de 3-bromo-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (259,4 mg) como solución en cloruro de metileno (4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 50 horas. La mezcla de reacción fue diluida con agua y extraída con cloruro de metileno. Los extractos fueron lavados con HCl 0,5N, secados sobre sulfato sódico y concentrados en vacío. El material crudo fue purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice eluyendo con AcOEt en hexano, obteniendo el metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1, 1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-3-bromo-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (153,8 mg). Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 8,33(1H), 7,82(1H), 7,31(4H), 7,08(1H), 5,87(1H), 4,85(1H), 3,74(3H), 3,10(2H), 2,52(2H), 2,14(1H), 1,73(1H), 4,42(10H), 1,23(3H), 1,14(3H), 0,79(3H). MS-ESI (m/z): 681([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 683([M+H^{+}]).
La desprotección de los ácidos carboxílicos tiene lugar según los Ejemplos 53 y 54, obteniendo (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-bromo-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. 150-152ºC; ^{1}H NMR (CD_{3}OD) \delta 7,95(1H), 7,67(1H), 7,57(1H), 7,45(3H), 7,35(1H), 4,73(1H), 3,25(1H), 2,99(1H), 2,75(1H), 2,52(1H), 2,00(1H), 1,70(1H), 1,44(1H), 1,24(3H), 1,21(3H), 0,79 (3H); MS-ESI (m/z): 611([M-H^{-}]); MS-ESI (m/z): 613([M+H^{+}]).
Esquema 38
Preparación del Ejemplo 253
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Preparación del Ejemplo 253
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-(2,6-dicloro-4-[(1,1-dimetil)etil]benzoíl)amino-L-fenilalanina (C_{30}H_{37}Cl_{1}N_{2}O_{6})
4-[(1,1-dimetil)etil]acetanilida (C_{12}H_{17}NO, 38-B). A una solución de 4-tert-butilanilina 38-A (14,9 g, 99,8 mmol) y piridina (11 mL, 0,14 mol) en CH_{2}Cl_{2} (50 mL), en atmósfera de N_{2} y a 0ºC, se añade gota a gota anhídrido acético (12 mL, 0,13 mmol). La mezcla de reacción es agitada a temperatura ambiente durante 20 horas, y a continuación es interrumpida con solución acuosa de HCl 0,5 M (100 mL). La mezcla de reacción es extraída con CH_{2}Cl_{2}. Los extractos de CH_{2}Cl_{2} combinados son lavados con NaOH 0,5 M y salmuera, y a continuación son secados, filtrados y concentrados consiguiendo 38-B en forma de sólido de color naranja (18,5 g). El sólido es recristalizado a partir de MeOH/heptano consiguiendo un sólido de color blanco (10,3 g, 54%): p.f. 172-173ºC; TLC (85:15 hexano/acetona) R_{f} = 0,19; ^{13}C NMR (CD_{3}OD) \delta 171,48, 148,15, 137,19, 126,52, 121,03, 35,14, 31,81, 23,74; MS (-ESI) m/z 190.
N,2-dicloro-4-[(1,1-dimetil)etil]acetanilida (C_{12}H_{15} Cl_{2}NO, 38-C). A una suspensión de 38-B (17,5 g, 91,5 mmol) y NaOAc anhidro (19g, 0,23 mmol) en HOAc (100 mL) en atmósfera de N_{2} a 10ºC se añade en porciones una solución de Cl_{2} (7g) en HOAc (100ml). Al terminar la adición (aproximadamente 15 minutos), la mezcla de reacción se deja calentar a temperatura ambiente y se agita durante 1 hora. Una segunda porción de Cl_{2} (aproximadamente 8 g) en HOAc (100 mL) se añade a la mezcla resultante que es agitada a temperatura ambiente durante 4,5 horas. Finalmente, se hace burbujear gas Cl_{2} directamente en la mezcla sometida a agitación durante 30 minutos. Esta mezcla es agitada a temperatura ambiente durante 17 horas. Es concentrada a presión reducida, eliminando el HOAc residual con dos partes de tolueno. El sólido es disuelto en EtOAc. La solución es filtrada proporcionando, después de la evaporación, un aceite de color naranja (24,7 g). El aceite es purificado por cromatografía de gel de sílice (90:10 heptano/EtOAc) proporcionando un aceite de color naranja (18,4 g) que es recristalizado a partir de pentano proporcionando 38-C en forma de sólido de color blanco (12,8 g, 54%): p.f. 64-65ºC; TLC (90:10 heptano/EtOAc) R_{f} = 0,21; ^{13}C NMR (CDCl_{3}) \delta 167,84, 155,65, 137,57, 133,57, 130,23, 127,91, 125,61, 35,11, 31,03, 21,52; MS (FAB) m/z 228, 226.
2-Cloro-4-[1,1-dimetil)etil]acetanilida (C_{12}H_{16}Cl_{1}NO, 38-D). A un solución de 18,6 g (71,5 mmol) de 38-C en EtOH absoluto (100 mL) se añade 10 M NaOH (7,1 mL). Se produce una reacción exotérmica. Después de moderarse la temperatura la mezcla es calentada en reflujo durante 1 hora. El pH de la mezcla enfriada es ajustada a pH 7-8 con HCl concentrado. La mezcla resultante es concentrada parcialmente (para eliminar EtOH), y continuación se diluye con CH_{2}Cl_{2} y salmuera. La capa de CH_{2}Cl_{2} es separada. La solución acuosa es extraída dos veces adicionalmente con CH_{2}Cl_{2}. Los extractos combinados de CH_{2}Cl_{2} son secados, filtrados y concentrados hasta conseguir un aceite de color marrón. El aceite es purificado por cromatografía de gel de sílice (etapas de 90:10 y 85:15 heptano/acetona) consiguiendo un sólido (12,6 g), que es recristalizado a partir de MeOH/pentano proporcionando 38-D (7,49 g, 47%) en forma de sólido de color blanco: p.f. 152-153ºC; TLC (85:15 heptano/acetona) R_{f} = 0,33; ^{13}C NMR (CDCl_{3}) \delta 168,23, 148,25, 131,92, 125,89, 124,70, 122,59, 121,64, 34,49, 31,17, 24,70; MS (FAB) m/z, 226,0995.
2-Cloro-4-[(1,1-dimetil)etil]anilina (C_{10}H_{14}ClN,38-E). A una suspensión de 38-D (6,0 g, 26 mmol) en EtOH (90 mL) se añade NaOH 10 N (10 mL). La mezcla resultante es calentada en reflujo. El sólido en suspensión se disuelve gradualmente. Después de 17 horas en reflujo, la solución es enfriada a 0ºC y neutralizada a pH 7 con HCl concentrado. La mezcla es concentrada parcialmente (para eliminar EtOH). La mezcla acuosa resultante es diluida con salmuera y es extraída con cinco porciones de CH_{2}Cl_{2}. Los extractos combinados de CH_{2}Cl_{2} son secados, filtrados y concentrados para conseguir 38-E en forma de aceite de color naranja (5:5 g): TLC (85:15 heptano/acetona) R_{f} = 0,53; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,25 (1H), 7,09 (1H), 6,72 (1H), 3,82 (2H), 1,27 (9H); MS (+ESI; MeOH) m/z 186, 184.
2-cloro-4-[(1,1-dimetil)etil]benzonitrilo (C_{11}H_{12}ClN, 38-F). A una solución de anilina 38-E (5,5 g, 30 mmol) en 10:6 HOAc/H_{2}O (32 mL) se añade H_{2}SO_{4} concentrado (4,7 mL, 85 mmol). La solución de color marrón es enfriada a 10ºC y es tratada gota a gota con una solución de NaNO_{2} (2,3 g, 33 mmol) en H_{2}O (5 mL). Después de haber terminado esta adición, la mezcla de reacción es agitada a 10ºC durante 1 hora, dando lugar a una solución de color amarillo. Durante este tiempo, se añade una solución de KCN (9,8 g, 150 mmoles) en H_{2}O (25 mL), se añade a una solución agitada mecánicamente en frío (baño de hielo) de CuSO_{4}\cdot5H_{2}O (9,0 g, 36 mmol) en H_{2}O (25 mL). Se añade a esta mezcla NaHCO_{3} (20 g, 0,24 mmol) y benceno (30 mL), y la mezcla en su conjunto es calentada a 50-55ºC para disolver todos los sólidos. A esta solución se añade gota a gota la solución de la sal de diazonio en 20 minutos en atmósfera de N_{2} y a una temperatura de 50-55ºC. La mezcla de reacción se mantiene durante 30 minutos a una temperatura de 50-55ºC durante 0,5 horas después de la adición. La mezcla es enfriada y extraída tres veces con benceno. Los extractos de benceno combinados son lavados con NaOH 1N y salmuera, y a continuación, son secados, filtrados y concentrados, consiguiendo un aceite de color rojizo-marrón (6,8 g). El aceite es purificado por cromatografía flash de gel de sílice (etapas de 95:5 y 90:10 heptano/CH_{2}Cl_{2}) proporcionando 38-F (2,4 g, 41%): TLC (75:25 heptano/CH_{2}Cl_{2}) R_{f} = 0,31; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,58 (1H), 7,49 (1H), 7,37 (1H), 1,31 (9H); ^{13}C NMR (CDCl_{3}) \delta 158,53, 136,59, 133,64, 127,22, 124,49, 116,29, 110,21, 35,49, 30,80.
Ácido 2-cloro-4-[(1,1-dimetil)etil]benzoico (C_{11}H_{13}ClO_{2}, 38-G). Una solución de 38-F (2,28 g, 11,8 mmol), H_{2}O (7,4 mL), 10 N NaOH (5,9 mL), y 30% H_{2}O_{2} (6,7 mL) en EtOH (80 mL) se somete a reflujo durante 28 horas. La solución es enfriada a 0ºC y neutralizada a pH 7 con HCl concentrado. Una solución de NaHSO_{3} (7 g), disuelta en la cantidad mínima de agua, es añadida a continuación. La mezcla de reacción es concentrada parcialmente (para eliminar la mayor parte de EtOH), se hace básica a pH 12 con NaOH 1N, y es extraída dos veces con CH_{2}Cl_{2}. Los extractos combinados de CH_{2}Cl_{2} son eliminados. La solución acuosa es acidificada con HCl a pH 3, y a continuación es extraída con CH_{2}Cl_{2}. Los extractos combinados de CH_{2}Cl_{2} son secados, filtrados y concentrados consiguiendo 38-G (2,07 g, 83%) en forma de sólido cristalino de color blanco: ^{1}H NMR 11,62 (1H), 8,02 (1H), 7,51 (1H), 7,39 (1H), 1,36 (9H); ^{13}C NMR (CDCl_{3}) \delta 171,17, 158,05, 134,84, 132,58, 128,75, 125,25, 123,96, 35,18, 30,91; MS (+ESI) m/z 237, 235 [M+Na]^{+}; MS (-ESI; MeOH) m/z 213, 211.
Metil éster de (1S-cis)-N-[[(3-(tert-butoxicarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-dicloro-4-tert-butilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{35}H_{47}ClN_{2}O_{6}, 38-H). Una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[[3-(tert-butoxicarbonil))-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-nitro-L-fenilalanina (406 mg, 0,88 mmol) y 10% Pd/C (39 mg) en 1:1 MeOH:THF (10 mL) es hidrogenada (30 psi H_{2}) durante 1 hora. La mezcla de reacción es filtrada y concentrada proporcionando la anilina en forma de aceite incoloro. Esta anilina es acoplada directamente con ácido 15-D (190 mg, 0,89 mmol), tal como se describe en el procedimiento general para la síntesis de los intermedios 7-F, para conseguir después de cromatografía flash de sílice (etapas de 99:1, 98:2, y 98:3 CHCl_{3}/acetona) para conseguir 38-H (224 mg, 41%): TLC (95:5 CHCl_{3}/acetona) R_{f} = 0,52; ^{13}C NMR (CDCl_{3}) \delta 175,02, 172,53, 172,14, 164,53, 155,92, 136,86, 132,21, 131,96, 130,38, 130,31, 129,84, 127,48, 124,52, 120,26, 80,19, 56,69, 54,44, 53,11, 52,36, 46,39, 37,20, 35,03, 32,36, 31,00, 28,07, 22,98, 22,48, 21,98, 20,61; MS (FAB) m/z 627,3201.
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-dicloro-4-[(1,1-dimetil)etil]benzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{30}H_{37}Cl_{1}N_{2}O_{6}, Ejemplo 253). Una solución de 38-H (101 mg, 0,16 mmol) en TFA (2 mL) es agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución es diluida con CH_{2}Cl_{2} y concentrada tres veces a presión reducida. El residuo es diluido con tolueno y concentrado nuevamente a presión reducida, adoptando consistencia de aceite. El aceite es disuelto en MeOH (1,0 mL) y tratado a continuación con H_{2}O (0,65 mL) y 1,00 M LiOH (0,35 mL). Después de 16 horas, una segunda parte de 1,00 M LiOH es añadida y se continúa con la hidrólisis durante un tiempo adicional de 4 horas. La solución fue diluida con H_{2}O y el pH ajustado aproximadamente a 8-9. La solución neutralizada es diluida con MeOH y a continuación es concentrada. El concentrado acuoso es diluido con una cantidad adicional de H_{2}O, se hace básico a pH 13 (NaOH 1N), y es extraído con Et_{2}O. El extracto de Et_{2}O es eliminado. La fase acuosa es acidificada a pH 2 (HCl concentrado) y es extraída con EtOAc. Los extractos combinados de EtOAc son secados, filtrados y concentrados consiguiendo el producto del Ejemplo 253 (93 mg) en forma de aceite incoloro: ^{1}H NMR (CD_{3}OD) \delta 7,61 (2H), 7,55-7,44 (3H), 7,25 (2H), 4,69-4,78 (1H), 3,23 (1H), 3,00 (1H), 2,80-2,70 (1H), 2,60-2,46 (1H), 2,10-1,94 (1H), 1,78-1,61 (1H), 1,52-1,39 (1H), 1,36 (9H); 1,27 (3H), 1,23 (3H), 0,81 (3H); MS (-ESI) m/z 557, 555.
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Esquema 39
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Preparación del Ejemplo 254
Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-3-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-6-piridinpropanoico (C_{25}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
(\pm)-2-cloro-3-[(2-tetrahidropiranil)oxi]-6-yodopiridina (C_{10}H_{11}ClINO_{2}, 39-A): A una solución de cloroiodopiridinol 34-B (1,00 g, 3,91 mmol) y dihidropirano (1,0 mL, 10,6 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) bajo atmósfera de Ar a temperatura ambiente se añade cloruro de piridinio (0,050 g). La mezcla de reacción es agitada durante 72 horas. Se diluye con CH_{2}Cl_{2}, y se lava con solución acuosa saturada de NaHCO_{3} y salmuera. La solución de CH_{2}Cl_{2} es secada, filtrada y concentrada hasta adquirir consistencia de aceite que se purifica por cromatografía flash de gel de sílice (19:1 hexanos/EtOAc) proporcionando 1,06 g (3,12 mmol, 80%) de 39-A: TLC (19:1 hexanos/EtOAc) R_{f} 0,24; ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,55 (1H), 7,17 (1H), 5,50 (1H), 3,77 (1H), 3,61 (1H), 2,07-1,57 (6H); MS (+ESI) m/z 361,9, 339,9.
Metil éster del ácido (2S)-2-cloro-\alpha-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-3-[(2-tetrahidropiranil)-oxi]-6-piridinpropanoico (C_{19}H_{27}ClN_{2}O_{6}, 39-B): A un recipiente ámbar que contiene el Ejemplo de referencia 57 (1,81 g, 5,52 mmol) y polvo de Zn activado (0,349 g, 5,51 mmol) bajo atmósfera de Ar, se añade THF (2 mL) y 1,2-dibromoetano (0,018 mL, 0,21 mmol). La suspensión se lleva a reflujo durante varios minutos enfriada aproximadamente a 30ºC, y se añade TMSCl (0,17 mL de una solución 1M en THF). La mezcla de reacción es agitada a 40\pm5ºC durante 30 minutos, se enfria en un baño de hielo y se añade PdCl_{2} (PPh_{3})_{2} (0,192 g) sólido. A continuación se añade una solución desgasificada del yoduro 39-A (0,936 g, 2,76 mmol) en 1:1 THF/dimetilacetamida (5,6 mL). Esta mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a 45\pm5ºC. A continuación es enfriada a 0ºC, interrumpida con solución acuosa saturada de NH_{4}Cl, y extraída con EtOAc. Las porciones combinadas de EtOAc son lavadas con solución acuosa saturada de NH_{4}Cl y salmuera, y a continuación son secadas, filtradas y concentradas hasta adquirir consistencia esponjosa con un color verde-amarillo. Este material esponjoso es purificado por cromatografía flash de sílice (7:3 hexanos/EtOAc) proporcionando 0,879 g (1,85 mmol, 60%) de 39-B: TLC (7:3 hexanos/EtOAc) R_{f} 0,21; ^{1}H NMR (CDCl_{3}), 300 Mhz) \delta 7,39 (1H), 7,00 (1H), 5,46 (1H), 4,61 (1H), 4,13 (1H), 3,80 (3H), 3,62 (1H), 3,20 (1H), 2,13-1,53 (6H), 1,42 (9H); MS (+ESI) m/z 474,0.
Metil éster del ácido (S)-\alpha-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-3-[(2-tetrahidropiranil)oxi]-6-piridinpropanoico (C_{19}H_{28}N_{2}O_{6}, 39-C): Una suspensión de Pd/CaCO_{3} (3,5 g) pre-reducido y 39-B (1,15 g, 2,77 mmol) en EtOH (40 mL) es hidrogenada (30 psi H_{2}) durante 19 horas a temperatura ambiente. La mezcla es filtrada y el filtrado es evaporado proporcionando un material esponjoso de color amarillo que es purificado por cromatografía flash de sílice (600:400:1 hexanos/EtOAc/iPrOH) proporcionando 0,367 g (0,96 mmol, 35%) de 39-C: TLC (1:1 hexanos/EtOAc) R_{f} 0,27; ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,30 (1H), 7,29 (1H), 7,03 (1H), 5,81 (1H), 5,39 (1H), 4,65 (1H), 3,86 (1H), 3,73 (3H), 3,62 (1H), 3,21 (2H), 1,96-1,53 (6H), 1,42 (9H); MS (+ESI) m/z 381,1.
Metil éster del ácido (S)-\alpha-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-5-hidroxi-2-piridinpropanoico (C_{14}H_{20}N_{2}O_{5}, 39-D): Una solución de 39-C (0,346 g, 0,91 mmol) y p-toluensulfonato de piridinio (0,031 g, 0,12 mmol) en EtOH (8 mL) es agitada a 55\pm5ºC durante 20 horas. La mezcla de reacción es enfriada a temperatura ambiente y concentrada en vacío. El residuo es tomado en EtOAc (150 mL). Esta solución es lavada con salmuera, secada, filtrada y concentrada hasta conseguir un aceite de color amarillo pálido, que es purificado por cromatografía flash de sílice (500:500:1 hexanos/EtOAc/iPrOH). La evaporación de las fracciones de la columna proporciona 39-C (0,27 mmol) y 0,132 g (0,45 mmol, 49%) de 39-D: TLC (1:1 hexanos/EtOAc) R_{f} 0,18; ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,13 (1H), 7,13 (1H), 7,03 (1H), 5,71 (1H), 4,65 (1H), 3,70 (3H), 3,20 (2H), 1,39 (9H); MS (+ESI) m/z 297,1.
Metil éster del ácido (S)-5-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-\alpha-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-2-piridinpropanoico (C_{21}H_{24}Cl_{2}N_{2}O_{5}, 39-E): A una solución de 39-D (0,126 g, 0,43 mmol), 2,6-diclorobencilalcohol (0,075 g, 0,43 mmol) y PPh_{3} (0,113 g, 0,43 mmol) en THF seco (4 mL) a 0ºC en atmósfera de Ar, se añade DEAD (0,068 mL). La mezcla de reacción se deja calentar a temperatura ambiente y es sometida a agitación durante 18 horas. Se concentra. El residuo es purificado por cromatografía flash de sílice (700:300:1 hexanos/EtOAc/iPrOH) consiguiendo 0,149 g (0,33 mmol, 76%) de 39-E: TLC (7:3 hexanos/EtOAc) R_{f} 0,34; ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,31 (1H), 7,37 (2H), 7,25 (2H), 7,08 (1H), 5,81 (1H), 5,29 (2H), 4,65 (1H), 3,70 (3H), 3,24 (2H), 1,63 (1H), 1,43 (9H); ^{13}C NMR (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 172,47, 155,50, 153,82, 149,71, 137,33, 137,00, 131,51, 130,72, 128,56, 123,99, 122,78, 79,74, 65,64, 53,25, 52,27, 38,43, 28,33; MS (+ESI) m/z 454,9.
Metil éster del ácido (S)-\alpha-amino-5-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-2-piridinpropanoico sal diclorhidrato (C_{16}H_{16}Cl_{2}N_{2}O_{3}\cdot2HCl, 39-F): Una solución de carbamato 39-E (0,546 g, 1,20 mmol) en 4 M HCl en dioxano (12 mL) es sometida a agitación a temperatura ambiente en atmósfera de Ar durante 16 horas. La mezcla de reacción es concentrada en vacío. El residuo es disuelto en H_{2}O (40 mL), y esta solución es extraída con Et_{2}O. La solución acuosa es congelada y liofilizada proporcionando 0,485 g (1,13 mmol, 94%) de 39-F en forma de sólido de color amarillo pálido: ^{1}H NMR (CD_{3}SOCD_{3}, 300 MHz) \delta 8,75 (3H), 8,47 (1H), 7,81 (1H), 7,57 (3H), 7,48 (1H), 5,35 (2H), 4,49 (1H), 3,67 (3H), 3,42 (2H); ^{13}C NMR (CD_{3}SOCD_{3}, 75 MHz) \delta 169,42, 154,95, 146,54, 136,57, 134,35, 132,50, 131,30, 129,36, 126,72, 126,52, 66,40, 53,32, 51,79, 34,81.
Metil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-3-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-\alpha-[[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]amino]-6-piridinpropanoico (C_{30}H_{38}Cl_{2}N_{2}O_{6}, 39-G): A una mezcla de 15-D (0,141 g, 0,55 mmol), EDC (0,108 g, 0,57 mmol), HOBt (0,079 g, 0,58 mmol), DMAP (0,020 g, 0,16 mmol) y amina 39-F (0,246 g, 0,57 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (6 mL) a 0ºC en atmósfera de Ar, se añade Et_{3}N (0,18 mL, 1,26 mmol). La mezcla de reacción de color amarillo es agitada a temperatura ambiente durante 90 horas. Se diluye con CH_{2}Cl_{2}, y se lava con H_{2}O, solución acuosa de HCl 0,5 M, H_{2}O, solución acuosa saturada de NaHCO_{3}, y H_{2}O. La solución de CH_{2}Cl_{2} es secada, filtrada y concentrada consiguiendo un producto con consistencia esponjosa de color amarillo pálido, que es purificado por cromatografía flash de sílice (600:400:1 hexanos/EtOAc\cdotiPrOH) proporcionando 0,195 g (0,33 mmol, 60%) de 39-G: TLC (3:2 hexanos/EtOAc) R_{f} 0,49; ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,28 (1H), 7, 40-7,28 (4H), 7,13 (1H), 5,31 (2H), 4,92 (1H), 3,68 (3H), 3,33 (1H), 3,25 (1H), 2,65 (1H), 2,53 (1H), 2,21 (1H), 1,67 (1H), 1,44 (9H), 1,31 (3H), 1,18 (3H), 0,83 (3H).
Metil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-3-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-6-piridinpropanoico (C_{26}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6}, 39-H): Una solución de diéster 39-G (0,195 g, 0,33 mmol) en TFA (4 mL) en atmósfera de Ar es agitada a 0ºC durante 1 hora y a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución es concentrada, se forma aceótropo tres veces a partir de tolueno y se seca en vacío, consiguiendo el producto 39-H en forma de un cristal de color amarillo: TLC (400:600:5 hexanos/EtOAc/HCO_{2}H) R_{f} 0,29; ^{1}H NMR (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,46 (1H), 7,87 (1H), 7,74 (1H), 7,51 (1H), 7, 42-7,26 (2H), 5,42 (2H), 5,01 (1H), 3,80 (3H), 3,62 (1H), 3,45 (1H), 2,70 (1H), 2,48 (1H), 1,97 (1H), 1,65 (1H), 1,49 (1H), 1,28 (3H), 1,24 (3H), 0,76 (3H).
Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-3-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-6-piridinpropanoico (C_{25}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}, Ejemplo 254): Una solución de 39-H (0,33 mmol) y LiOH\cdotH_{2}O (0,068 g, 1,62 mmol) en 2:1 THF/H_{2}O (10,5 mL) es agitada en atmósfera de Ar durante 5 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es diluida con H_{2}O fría, acidificada con solución acuosa de HCl 1M y extraída con EtOAc. Los extractos combinados de EtOAc son lavados con salmuera y son secados, filtrados y concentrados hasta consistencia esponjosa de color amarillo pálido que se purifica por cromatografía flash de sílice (600:400:2 hexanos/EtOAc/HCO_{2}H). El producto purificado se hace aceotrópico tres veces a partir de tolueno para eliminar el HCO_{2}H. Se disuelve en MeCN (10 mL) y la solución se diluye con H_{2}O (10 mL). La solución es congelada y liofilizada consiguiendo un sólido de color beige, 0,170 g (0,32 mmol, 98%) del Ejemplo 254: punto de fusión 118-122ºC; TLC (150:50:1 EtOAc/hexanos/HCO_{2}H) R_{f} 0,41; ^{1}H NMR (CD_{3}SOCD_{3}, 300 MHz) \delta 8,43 (1H), 7,86 (2H), 7,58-7,47 (3H), 7,32 (1H), 5,28 (2H), 4,64 (1H), 3,24-2,99 (2H), 2,61 (1H), 2,32 (1H), 1,83 (1H), 1,51 (1H), 1,30 (1H), 1,12 (3H), 1,09 (3H), 0,63 (3H).
Ejemplos Ejemplo 1 Metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{27}H_{33}NO_{6})
110
Se añade DIEA (0,65 g) gota a gota a una mezcla de anhídrido canfórico-(1R) (0,18 g) y metil éster de O-bencil-L-tirosina en forma de clorhidrato (0,33 g) en DMF (2 ml) a 0ºC. La mezcla fue agitada a 40ºC durante 15 horas, enfriada, diluida con AcOEt, y acidificada con HCl 1N a pH 5. La capa orgánica fue lavada con H_{2}O, salmuera, secada sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo es purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 98:2, CHCl_{3}/MeOH) proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{27}H_{33}NO_{6}) (0,45 g) en forma de una goma. MS 
\hbox{(m/z):468 (MH ^{+} ).}
Ejemplo 2 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{26}H_{31}NO_{6})
111
Se añadió LiOH (72 mg) a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{27}H_{33}NO_{6}) (403 mg), THF (3 ml), y H_{2}O (3 ml). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 4 horas, acidificada con HCl 1N, y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío, consiguiendo (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (391 mg), punto de fusión 146-149ºC, MS (m/z):452 ([M-H]^{-}).
Ejemplo 3 Metil éster de (1S-cis-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-histidina (C_{24} H_{29}Cl_{2}N_{3}O_{5})
112
Se añadió DIEA (4,48 g) a una mezcla de metil éster de 1-(3,4-diclorobencil)-L-histidina (5,56 g) y anhídrido (1R)-canfórico (2,53 g) en DMF (50 ml). La mezcla fue agitada a 40ºC durante 17 horas, enfriada, diluida con H_{2}O, acidificada con HCl al 5% a pH 5, y extraída con CHCl_{3}. El extracto fue lavado con H_{2}O, salmuera y secado sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice (eluyente: 100:1, CHCl_{3}/MeOH), seguido de recristalización a partir de AcOEt/MeOH proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-histidina (5,90 g), punto de fusión 174-175ºC (dec), MS (m/z):510 (MH^{+}).
Ejemplo 4 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-histidina (C_{23}H_{27}Cl_{2}N_{3}O_{5})
113
Se añadió 1N NaOH (7,3 ml) gota a gota a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(3,4-dicloro-fenil)metil]-L-histidina (C_{24}H_{29}Cl_{2}N_{3}O_{5}) (1,50 g) en MeOH (20 ml) a 0ºC. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 15 horas, concentrada en vacío, diluida con H_{2}O, y acidificada con HCl 1N a pH 5-6. El precipitado resultante fue recogido por filtrado, lavado con H_{2}O, secado y recristalizado a partir de DMF/H_{2}O proporcionando (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(3,4-dicloro-fenil)metil]-L-histidina (0,87 g), p.f. 148-149ºC (dec), MS (m/z):496 (MH^{+}).
Ejemplo 5 Fenilmetil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-2-naftalenpropanoico (C_{30}H_{33}NO_{5})
114
Se dividió bencil (S)-2-amino-3-(2-naftil) propionato tosilato (0,20 g) entre AcOH y solución saturada de NaHCO_{3}. La capa orgánica fue lavada con H_{2}O, salmuera, secada sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente fue eliminado en vacío. Se añadieron DMF (5 ml) y anhídrido (1R)-canfórico (0,20 g) al residuo. La mezcla fue agitada a 30-40ºC durante 17 horas, enfriada y vertida en H_{2}O. La mezcla resultante fue extraída con AcOH. El extracto fue lavado con H_{2}O, salmuera, secado sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 9:1, CHCl_{3}/AcOEt) consiguiendo el fenilmetil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino-2-naftalenpropanoico (0,51 g) en forma de aceite. MS (m/z):488(MH^{+}).
Ejemplo 6 Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-2-naftalenpropanoico (C_{23}H_{27} NO_{5})
115
Se añadió 10% Pd-C (0,05 g) a una solución de fenilmetil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-2-naftalenpropanoico (C_{30}H_{33}NO_{5}) (0,20g) en MeOH (10ml) y la mezcla fue sometida a hidrogenólisis a una presión de hidrógeno de 50 psi. El catalizador fue separado por filtrado y el filtrado fue evaporado en vacío proporcionando ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-2-naftalenpropanoico (0,18 g), MS (m/z):398 (MH^{+}).
Se prepararon los Ejemplos 7 a 51 de manera similar a la descrita en los Ejemplos 1-6, mostrándose en las Tablas 1, 2 y 3.
TABLA 1
Ejemplos 7 a 20
116
117
TABLA 1 (continuación)
118 
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TABLA 1 (continuación)
119
TABLA 2
Ejemplos 21 a 38
120
121 
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TABLA 2 (continuación)
122 
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TABLA 2 (continuación)
123 
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TABLA 2 (continuación)
124
Ejemplo 39 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-D-tirosina (C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6})
125
El Ejemplo 39 es un isómero del Ejemplo 12 y por lo tanto se sintetiza de manera similar al Ejemplo 12.
(Tabla pasa a página siguiente)
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TABLA 3
Ejemplos 40 a 51
126
127
TABLA 3 (continuación)
128
TABLA 3 (continuación)
129
Ejemplo 52 Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{27}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6})
130
Se hizo burbujear gas HCl a través de una solución de N-(tert-butoxicarbonil)-4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina (800 mg) en MeOH (15 ml) durante 5 minutos y la mezcla fue agitada durante 3 horas a temperatura ambiente. El exceso de HCl fue eliminado por burbujeo de N_{2} en la mezcla y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue lavado con éter y secado. Al sólido resultante se añadieron THF (10 ml) conteniendo DIEA (1,3 ml), reactivo BOP (938 mg) y ácido (1S,3R)-3-(tert-butoxicarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentancarboxílico (480 mg), que fue preparado por la saponificación de metil (1S,3R)-3-(tert-butoxicarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentancarboxilato derivado de metil (1S,3R)-3-carboxi (o clorocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentancarboxilato y t-BuOH. La mezcla fue agitada durante una noche en atmósfera de N_{2} y el disolvente fue eliminado en vacío.
Se añadió HCl 1N (10 ml) al residuo y la mezcla fue extraída con AcOEt. El extracto fue lavado con HCl 1N, salmuera, NaHCO_{3} saturado, salmuera, LiCl saturado, y salmuera, secado sobre MgSO_{4}, y evaporado en vacío.
El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 3:2, hexano/AcOEt) proporcionando metil éster de (1S-cis-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{27}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6}) (1,05 g) en forma de sólido incoloro.
^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}), \delta 7,58 (2H), 7,3-7,4 (3H), 7,11 (2H), 5,78 (1H), 4,8-5,0 (1H), 3,75 (3H), 3,10 (2H), 2,50 (1H), 2,0-2,2 (1H), 1,6-1,8 (1H), 1,44 (9H), 1,23 (3H), 1,16 (3H), 0,80 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CDCl_{3}), \delta 175,07, 172,59, 172,17, 162,54, 136,32, 132,83, 132,48, 131,11, 130,01, 128,28, 120,56, 80,28, 56,76, 54,53, 53,12, 52,48, 46,46, 37,26, 32,41, 28,14, 23,06, 22,55, 22,06, 20,68; ESMS (m/z) 605 (MH^{+}); análisis calculado para C_{31}H_{38}Cl_{2}N_{2}O_{6} 1/2 H_{2}O: C, 60,53; H, 6,35; N, 4,56; hallado: C, 60,71; H, 6,31; N, 4,52. MS (m/z):605 (MH^{+}).
Ejemplo 53 Metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{27}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6})
131
Se añadió TFA (1,5 ml) a una solución de metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{27}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6}) (290 mg) en CH_{2}Cl_{2} (1,5 ml) y la mezcla fue agitada durante 3 horas. El disolvente fue eliminado en vacío, y el residuo fue triturado con éter/CHCl_{3} proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (180 mg) en forma de material en polvo incoloro.
^{1}H NMR (300 MHz, acetona-d_{6}), \delta 9,75 (1H), 7,71 (2H), 7,4-7,6 (3H), 7,25 (2H), 7,12 (1H), 4,7-4,85 (1H), 3,68 (3H), 3,08 (2H), 2,85 (1H), 2, 5-2,6 (1H), 1,6-1,8 (1H), 1,4-1,5 (1H), 1,26 (3H), 1,19 (3H), 0,80 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, acetona-d_{6}), \delta 176,29, 172,20, 172,11, 162,00, 137,49, 133,12, 131,85, 131,12, 129,71, 128,16, 119,59, 55,98, 53,63, 52,89, 51,37, 46,14, 36,67, 32,47, 22,57, 22,04, 21,41, 20,74; ESMS (m/z) 549 (MH^{+}); análisis calculado para C_{27}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6} 1/2 H_{2}O: C, 58,02; H, 5,55; N, 5,01; hallado: C, 58,70; H, 5,53; N, 5,01. MS (m/z):549 (MH^{+}).
Ejemplo 54 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
132
Se añadió una solución de LiOH (19 mg) en H_{2}O (1 ml) a una solución de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{27}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6}) (108 mg) en THF (4 ml)/MeOH (1 ml). La mezcla fue agitada durante 2 horas, acidificada con HCl 1N (15 ml) y extraída con AcOEt. El extracto fue lavado con salmuera, secado sobre MgSO_{4}, y evaporado en vacío proporcionando el producto (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (80 mg), p.f. 231-233ºC.
^{1}H NMR (300 MHz, acetona-d_{6}). \delta 9,72 (1H), 7,71 (2H), 7,47-7,48 (3H), 7,27 (2H), 7,07 (1H), 4,78-4,85 (1H), 3,15 (2H), 2,85 (1H), 2,5-2,6 (1H), 1,6-1,8 (1H), 1,4-1,5 (1H), 1,26 (3H), 1,19 (3H), 0,81 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, acetona-d_{6}), \delta 177,67, 173,83, 173,62, 163,32, 138,74, 134,64, 133,17, 132,42, 131,10, 129,47, 120,88, 57,29, 54,69, 54,28, 47,47, 37,93, 3,81, 23,91, 23,39, 22,73, 22,08; ESMS (m/z) 535 (MH^{+}), 533 (M-H)^{-}; análisis calculado para C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6} 1/2 H_{2}O: C, 57,46; H, 5,34; N, 5,15; hallado: C, 57,48; H, 5,38; N, 5,15. MS (m/z):533 ([M-H^{-}]); MS (m/z):578 (MH^{+}).
Ejemplo 55 (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
133
Se añadió LiOH (177 mg) en H_{2}O (10 ml) a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (2,18 g) en THF (10 ml)/MeOH (5 ml) y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 3 horas, acidificada con HCl 1N (20 ml), y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío proporcionando (1S-cis)-N-[(3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (2,07 g). MS (m/z):578 (MH^{+}).
Ejemplo 56 Metil éster de (1S-cis)-4-amino-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
134
Se indican dos métodos para la preparación del Ejemplo 56 según los Esquemas 5a y 5b.
Ejemplo 57 Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,5-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
135
Se añadieron BOP-Cl (425 mg) y ácido 2,5-diclorobenzoico (319 mg) a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-4-amino-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi) carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (433 mg) y DIEA (0,7 ml) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml). La mezcla fue agitada durante 3 horas a temperatura ambiente, acidificada con HCl 1N (50 ml) y extraída con CH_{2}Cl_{2}. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y evaporado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; hexano \rightarrow 50% hexano/AcOEt) proporcionando el metil éster (1S-cis)-N-[[3-[(1,1dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,5-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (804 mg). MS (m/z):605 (MH^{+}).
Ejemplo 58 Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,4,6-triclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
136
La preparación del Ejemplo 58 se indica mediante el Esquema 13.
Ejemplo 59 Metil éster de (1S-cis)-4-acetilamino-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
137
Se añadió anhídrido acético (1 ml) a una mezcla del metil éster de (1S-cis)-4-amino-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (710 mg) y DIEA (4 ml) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml). La mezcla fue agitada durante 30 minutos a temperatura ambiente y se dividió entre NaHCO_{3} saturado y AcOEt. La capa orgánica fue secada sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; hexano \rightarrow EtOH/AcOEt(1:1)) proporcionando el metil éster de (1S-cis)-4-acetilamino-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (669 mg). MS (m/z): 475(MH^{+}).
Se prepararon los Ejemplos 60-153 de manera similar, tal como se ha descrito en los Ejemplos 52-59, mostrándose en la Tabla 4.
TABLA 4
Ejemplos 60 a 153
138
140
TABLA 4 (continuación)
141
TABLA 4 (continuación)
142
TABLA 4 (continuación)
143
TABLA 4 (continuación)
144
TABLA 4 (continuación)
145
TABLA 4 (continuación)
146
TABLA 4 (continuación)
147
TABLA 4 (continuación)
148
TABLA 4 (continuación)
149
TABLA 4 (continuación)
150
TABLA 4 (continuación)
151
TABLA 4 (continuación)
152
TABLA 4 (continuación)
153
TABLA 4 (continuación)
154
TABLA 4 (continuación)
155
TABLA 4 (continuación)
156
Ejemplo 154 Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-(aminocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
157
Se añadió reactivo BOP (674 mg) a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (743 mg) y solución acuosa de NH_{4}OH (0,5 ml) en THF (10 ml). La mezcla fue agitada durante 24 horas y se añadió solución saturada de LiCl (15 ml). La mezcla resultante fue extraída con AcOEt y el extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; hexano \rightarrow 90% AcOEt/hexano) proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[[3-(aminocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (533 mg). MS (m/z):535 (MH^{+}).
Ejemplo 155 (1S-cis)-N-[[3-(aminocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil] -O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
158
Una solución de LiOH (119 mg) en H_{2}O (5 ml) fue añadida a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[[3-(aminocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (533 mg) en THF (5 ml)/MeOH (3 ml). La mezcla fue agitada durante 3 horas a temperatura ambiente, acidificada con HCl 1N (20 ml), y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y evaporada en vacío proporcionando el producto (1S-cis)-N-[[3-(aminocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (466 mg), p.f. 102-104ºC, MS (m/z): 519 ([M-H]^{-}).
Los Ejemplos 156-166 fueron preparados de manera similar a la descrita para los Ejemplos 154 y 155 y se muestran en la Tabla 5.
TABLA 5
Ejemplos 156 a 166
159
160
TABLA 5 (continuación)
161
TABLA 5 (continuación)
162
Ejemplo 167 Metil éster de (1R-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina
163
El Ejemplo 167 fue preparado a partir de clorhidrato de metil éster de O-bencil-L-tirosina y ácido (1R,3S)-3-(tert-butoxicarbonil)-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico de manera similar a la descrita por el Ejemplo 52. Propiedades fisicoquímicas: goma, MS (m/z): 524 (MH^{+}).
Ejemplo 168 Metil éster de (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{27}H_{33}NO_{6})
164
El Ejemplo 168 fue preparado de manera similar a la descrita para el Ejemplo 53. Características fisicoquímicas: goma; MS (m/z): 468 (MH^{+}); P.F. 191-192ºC (d).
Ejemplo 169 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{26}H_{31}NO_{6})
165
El Ejemplo 169 fue preparado de manera similar a lo descrito en el Ejemplo 54, MS (m/z): 454 (MH^{+}).
Ejemplo 170 Metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[N-acetil-N-[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina
166
Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[N-[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina (0,29 g), derivado de 4-[[N-(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina metil éster, de manera similar a la descrita en el Ejemplo 52, se disolvió en piridina (3 ml) y se añadieron (2,5 ml) de Ac_{2}O. La mezcla fue sometida a agitación durante una noche, evaporada en vacío y extraída con AcOEt. El extracto fue lavado con solución acuosa de HCl, salmuera, solución saturada de NaHCO_{3}, salmuera, y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente es eliminado en vacío proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[N-acetil-N-[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina (0,24 g). El diéster obtenido fue tratado de manera similar tal como se describe en los Ejemplos 53 y 54 proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[N-acetil-N-[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina en forma de sólido incoloro, p.f. 241-244ºC, MS (m/z):561 ([M-H]^{-}).
Ejemplo 171 Metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]metil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{27}H_{33}Cl_{2}NO_{5})
167
Se añadió NaCNBH_{3} (104 mg) a una mezcla de metil éster de O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (490 mg), ácido (1R, cis)-3-formil-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico, (1R,5S)-4-hidroxi-1,8,8-trimetil-3-oxabiciclo[3,2,1]-octano-2-ona (153 mg), AcOH (0,5 ml), y MeOH (25 ml) bajo atmósfera de argón. La mezcla fue sometida a agitación durante 72 horas a temperatura ambiente. El disolvente fue eliminado en vacío y se añadió HCl al 10% (20 ml). La mezcla resultante fue agitada durante 2 horas y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y evaporado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 10% AcOEt/hexano) proporcionando el metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)metil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (75 mg), MS(m/z): 522(MH^{+}).
Ejemplo 172 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]metil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{26}H_{31}Cl_{2}NO_{5})
168
Una solución de LiOH (33 mg) en H_{2}O (2 ml) fue añadida a una mezcla de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]metil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{27}H_{33}Cl_{2}NO_{5}) (71 mg) en THF (2 ml). La mezcla fue agitada durante 5 horas a temperatura ambiente, neutralizada con HCl 1N, y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y evaporado en vacío consiguiendo el producto (1S-cis)-N-[[3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]metil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (40 mg), p.f. 135-138ºC, MS(m/z): 508 (MH^{+}).
Ejemplo 173 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-N-metil-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{27}H_{33}NO_{6})
169
Se añadió (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina (C_{26}H_{31}NO_{6}) (52 mg) a una suspensión de NaH (20,5 mg, 60% en aceite) en DMF (5 ml) y la mezcla fue agitada durante 10 minutos a temperatura ambiente. Después de adición de MeI (43 ml), la mezcla fue agitada durante 14 horas e interrumpida con H_{2}O. La mezcla resultante fue extraída con éter. El extracto fue evaporado en vacío y el residuo fue sometido a saponificación utilizando solución acuosa de LiOH en THF de manera similar a la descrita en el Ejemplo 54. La saponificación fue llevada a cabo durante 2 horas y la mezcla fue acidificada con HCl 1N (10 ml) y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4}, evaporado en vacío, y el residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 10% MeOH/CH_{2}Cl_{2}) consiguiendo el producto (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-N-metil-O-(fenilmetil)-L-tirosina (40 mg), MS(m/z): 466 ([M-H]^{-}).
Ejemplo 174 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-metil-L-tirosina (C_{27}H_{31}Cl_{2}NO_{6})
170
El Ejemplo 174 fue preparado a partir de N-(tert-butoxicarbonil)-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-metil-L-tirosina y ácido (1S,3R)-3-(tert-butoxicarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentancarboxílico de manera similar a la descrita en los Ejemplos 52, 53 y 54, p.f.108-110ºC, MS (m/z): 536 (MH^{+}).
Ejemplo 175 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosinamida (C_{26}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{5})
171
Se añadió NaCN (10 mg) a una solución de metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (306 mg) en MeOH (10 ml) en un tubo de paredes gruesas. Se condensaron 15-20 ml de NH_{3} en la mezcla a -78ºC. El tubo fue cerrado de forma estanca y calentado a temperatura ambiente. Después de 48 horas de agitación, la mezcla fue enfriada a -78ºC y se abrió el tubo cerrado de forma estanca. La mezcla fue calentada a temperatura ambiente y el exceso de NH_{3} fue eliminado por burbujeo de N_{2}. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente); AcOEt \rightarrow 10% MeOH/AcOEt) para proporcionar (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosinamida (258 mg), p.f. 120-122ºC, MS (m/z): 519 ([M-H]^{-}).
Ejemplo 176 Metil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*), 3\alpha]]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\alpha-[[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]amino]-\gamma-oxo-1-piperacinbutanoico
172
La síntesis del Ejemplo 176 queda indicada por el Esquema 17.
Ejemplo 177 Ácido [1S-[1\alpha(R*), 3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-piperacinbutanoico
173
La síntesis del Ejemplo 177 se indica en el Esquema 17.
Ejemplo 178 Metil éster del ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\beta-[[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]amino]-\gamma-oxo-1-piperacinbutanoico
174
La síntesis del Ejemplo 178 queda indicada por el Esquema 18.
Ejemplo 179 [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]-N-[[3-[[(5-amino-1-carboxipentil)amino]carboxil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobencil)amino]-L-fenilalanina
175
(1) A una solución de N-(tert-butoxicarbonil)-4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina (9,25 g) en DMF (80-100 ml) se añadió resina Merrifield (10,0 g, 10,0 meq/g, Novabiochem) y fluoruro potásico anhidro (1,57 g). La mezcla de reacción fue agitada durante 1 día a 80ºC y el derivado de aminoácido resultante unido a la resina fue recogido por filtrado, lavado de manera completa con DMF, succión acuosa al 50% de DMF, CH_{3}OH, CH_{2}Cl_{2}, CH_{3}OH, y a continuación se secó en vacío consiguiendo la N-(tert-butoxicarbonil)-4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina (0,53 meq/g) unida a la resina. La substitución del derivado de aminoácido en la resina fue estimada utilizando el método de ácido pícrico.
(2) A la resina obtenida (1,0 g, 0,53 meq/g) se añadió 50% TFA/CH_{2}Cl_{2} (10-15ml) y la mezcla fue agitada durante 30 minutos. La resina fue recogida por filtrado, lavada con CH_{2}Cl_{2}, CH_{3}OH, y CH_{2}Cl_{2}. A la 4-(2,6-diclorobenzamido)-L-fenilalanina unida a la resina se añadió una mezcla de ácido (1S, 3H)-3-(tert-butoxicarbonil)-2,2, 3-trimetilciclopentancarboxílico (408 mg), 0,5M HBTU-HOBT (3,3 ml) en DMF, DIEA (0,694 ml), DMF (10-15 ml) y la mezcla fue sometida a torbellino durante 2 horas a temperatura ambiente. La resina fue recogida por filtrado, lavada con DMF, CH_{2}Cl_{2}, CH_{3}OH, CH_{2}Cl_{2} proporcionando (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (0,990 g) unida a la resina.
(3) A la resina (0,390 g, 0,21 meq/g) se añadió 50% TFA/CH_{2}Cl_{2} (4-5 ml) y la mezcla fue agitada durante 2 horas. La resina fue recogida por filtrado y lavada con CH_{2}Cl_{2}, CH_{3}OH, y CH_{2}Cl_{2}. A la (1S-cis)-N-[[3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina unida a la resina se añadió una mezcla de N^{6}-(tert-butoxicarbonil)-L-lisina trert-butil éster (0,210 g), 0,5M HBTU-HOBT (1,5 ml) en DMF, DIEA (0,270 ml) y la mezcla fue sometida a torbellino durante 2 horas. La resina fue recogida por filtrado, lavada con DMF, CH_{2}Cl_{2}, CH_{3}OH, y CH_{2}Cl_{2}. A la resina obtenida se añadió 50% TFA/CH2Cl2 (4-5 ml) y la mezcla fue agitada durante 30 minutos. La resina fue recogida por filtrado, lavada con CH_{2}Cl_{2}, CH_{3}OH, y CH_{2}Cl_{2}. A la resina se añadió THF (3 ml), CH_{3}OH (0,9 ml) y 2N LiOH (0,3 ml). La mezcla fue agitada durante 15 minutos y fue filtrada en un tubo de ensayo (13 x 100 mm). La resina fue lavada con THF/5% CH_{3}OH y el filtrado combinado fue evaporado. El residuo fue diluido con H_{2}O (1ml) y acidificado con HCl 1N. El precipitado fue centrifugado. El sobrenadante fue decantado, y la pastilla fue lavada con H_{2}O. El residuo fue liofilizado consiguiendo un sólido incoloro (100 mg).
(4) El sólido (80 mg) fue purificado mediante un sistema Water Delta Prep 3000 (Waters, Milford, Massachusetts) dotado de columna C18 de sílice de fase inversa (4,7 cm x 30,0 cm), utilizando un gradiente lineal de acetonitrilo creciente en una solución acuosa de fosfato de trietilamonio (TEAP) (preparado diluyendo ácido fosfórico (25 ml) y trietilamina (50 ml) a 6000 ml de agua desionizada, pH 5,5). Las fracciones que contienen el compuesto deseado fueron desaladas con ácido acético 0,1% utilizando el sistema mencionado. Las fracciones recogidas fueron liofilizadas consiguiendo [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]-N-[[3-[[(5-amino-1-carboxipentil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (Ejemplo 179) en forma de sólido incoloro (10 mg), ESMS:661 
\hbox{(M-H)) ^{-} .}
Ejemplo 180 (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{6})
176
La síntesis del Ejemplo 180 queda indicada por el Esquema 8, 8-G: en el que R^{8-1} = H, R^{8-2} = H, R^{4} = H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, la síntesis de (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{6}) es tal como sigue.
Al producto 8-F-1 (8-F: R^{8-1} = H, R^{8-2} = H, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L) (1,05g, 1,7mmol), disuelto en metanol (30mL), se añade una solución de LiOH\cdot2H_{2}O (0,32g, 7,65mmol) en agua (10mL), gota a gota en 15 minutos. Se somete a agitación la mezcla durante 18 horas a temperatura ambiente y el pH se ajusta a continuación aproximadamente a 7 por adición cuidadosa de solución acuosa de HCl 1N. La mayor parte del metanol es eliminado en vacío y el pH de la solución resultante se ajusta a un valor de aproximadamente 2 con solución acuosa de HCl 1N. El precipitado blanco floculento resultante es aislado por filtrado y secado. El sólido es triturado y lavado con agua (2X10mL) y secado en vacío a 50ºC proporcionando 0,97g (97%) del Ejemplo 180 (8-G: R^{8-1} = H, R^{8-2} = H, R^{4} = H, R^{6} = 4-[2, 6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo) en forma de un sólido pulverulento de color blanco.
p.f.: 203-205ºC; ^{1}H NMR (300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 12,51(brs, 1H), 10,70(s, 1H), 7,75(m, 1H), 7,45-7,57(3H), 7,33(m, 1H), 7,20(m, 2H), 7,11(brs, 1H), 6,92(brs, 1H), 4,43(m, 1H), 3,63(m, 1H), 3,47m 2H), 3,30(s, 2H), 3,01(m, 1H), 2,84(m, 1H), 2,31(m, 1H), 1,87(m, 1H), 1,55(m, 1H), 1,31(m, 1H), 1,17(s, 3H), 1,08(s, 3H), 0,59(s, 3H), IR (Mull): 3511, 3325, 3128, 3082, 2868, 1722, 1697, 1664, 1614, 1555, 1537, 1417, 1337, 1246, 799; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 591(M+H, base) 517(32), 335(26), 239(32), 173(39), 109(63), 57(80); HRMS (FAB) calculado para C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{4}O_{6} +H^{+} 591,1777, hallado 591,1747.
Ejemplo 181 (1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7})
177
La síntesis del Ejemplo 181 está indicada por el Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1} = H, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]fenilo y Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, se sintetizó (1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7}) del modo siguiente:
se disuelve metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (0,7g, 1,15mmol) en metanol (12mL). Se añade a ello una mezcla de LiOH\cdotH_{2}O (0,243g, 5,8mmol), solución acuosa de H_{2}O_{2} (30%, 2mL), y H_{2}O (2mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla de reacción es diluida con agua (50mL), y evaporada (temperatura ambiente, en vacío/corriente N_{2}) hasta la desaparición del metanol. La solución acuosa es transferida a continuación a un embudo de separación y es sometida a agitación con dietil éter (2X20mL). La capa acuosa es evaporada a continuación para eliminar el dietil éter residual, y se enfría en un baño de agua helada. La solución sometida a agitación es llevada a continuación a pH3-4 utilizando solución acuosa de HCl (1N). El precipitado resultante es aislado por filtrado con succión (con lavados con agua) para conseguir el compuesto objetivo en forma de sólido de color blanco (0,4g, rendimiento 58%).
^{1}HNMR: (300MHz, DMSO-d_{6}): \delta 12,45(br.s, 1H), 10,6(s, 1H), 7,74(m, 2H), 7,57-7,44(m, 3H), 7,20(m, 2H), 4,48-4,40(m, 1H), 3,65(m, 2H), 2,94(m, 2H), 2,64(m, 1H), 2,35(m, 1H), 1,90(m, 1H), 1,58(m, 1H), 1,29(m, 1H), 1,18(s, 3H), 1,08(s, 3H), 0,60(s, 3H); IR (mull) 3124, 3088, 3078, 1738, 1666, 1628, 1612, 1588, 1563, 1552, 1521, 1429, 1334, 1197, 1170cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 592 (M+H, 99) 595 (20), 594 (69), 593 (41), 592 (99), 519 (25), 517 (38), 240 (55), 175 (23), 173 (33), 109 (64); HRMS (FAB) m/z calculado para C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7} +H^{+} 592,1617, hallado 592,1606; análisis calculado para C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7}: C, 56,76; H, 5,27; N, 7,09; hallado: C, 54,92; H, 5,41; N, 6,91; KF agua: 3,05% H_{2}O.
Ejemplo 182 Sal disódica de [1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-N-[[3-(2-carboxietenil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{28}Cl_{2}N_{2}Na_{2}O_{6})
178
La síntesis del Ejemplo 182 está indicada por el Esquema 11, 11-G: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-fenilo y Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-L. De acuerdo con ello, se sintetizó del modo siguiente la sal disódica de [1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-N-[[3-(2-carboxietenil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{28}Cl_{2}Na_{2}N_{2}O_{6}) de 11-G: a una solución de 11-F (R^{4} = H,R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-iclorobenzoíl)amino]-fenilo, Estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha(E)]]-L) (0,45g, 0,78mmol) en metanol (5 mL) en un recipiente enfriado con un baño de agua hielo se añade una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,127g, 3mmol) en H_{2}O (5mL). Después de dos días, la mezcla es diluida con agua (50mL), y evaporada en vacío hasta que el metanol desaparece y a continuación se enfría a -10ºC y se lleva a pH 2 utilizando HCl 1N. El precipitado resultante de color blanco es aislado por filtrado con succión consiguiendo un sólido de color blanco que es agitado con solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2mL) y a continuación es transferido a una columna de HPLC de fase inversa C-18 y eluido con un gradiente a partir de solución acuosa NaHCO_{3} a 0,01% a 10% acetonitrilo/solución acuosa NaHCO_{3} 0,01%. La evaporación en vacío suministró el Ejemplo 182 en forma de sólido blanco (0,25 g, rendimiento 51%).
^{1}H NMR(300MHz), DMSO-d_{6}) \delta 7,51-7,42(m, 5H), 7,06(m, 2H), 6,39(m, 1H), 5,49(m, 1H), 4,10(m, 1H), 2,99(m, 1H), 2,86(m, 1H), 2,56(m, 1H), 1,85(m, 2H), 1,61(m, 1H), 1,29(m, 1H), 0,90(s, 3H), 0,85(s, 3H), 0,51(s, 3H); IR (mull) 3393, 3257, 3124, 3035, 1654, 1604, 1562, 1544, 1515, 1431, 1398, 1325, 799, 778, 722cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 605 (M+H, 44), 629 (9), 627 (14), 608 (8), 607 (30), 606 (14), 605 (44), 585 (14), 583 (21), 73 (45), 23 (99); KF agua: 7,09%H_{2}O.
Ejemplo 183 (1S-cis)-N-[[3-[(carboximetoxi)metil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{28}H_{31}Cl_{2}N_{3}O_{7})
179
La síntesis del Ejemplo 183 está indicada por el Esquema 9 y el Esquema explicativo adjunto 9.
Ejemplo 184 (1S-cis)-N-[(3-(2-ciano-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{27}Cl_{2}N_{3}O_{4})
180
La síntesis del Ejemplo 184 está indicada por el Esquema 12 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 184.
Ejemplo 185 [1S-cis)-N-[[3-[[(Carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7})
181
La síntesis del Ejemplo 185 está indicada por el Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1}= H, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo y Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, se prepara (1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7}) a partir de 7-G-2 (7-G:R^{7-1} = H, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L igual que Ejemplo 181. ^{1}H MR(300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 7,8-6,9(m, 9H), 5,18(s, 2H), 4,42(m, 1H), 3,8-3,6(m, 2H), 3,02-2,82(m, 2H), 2,65(m, 1H), 2,38(m, 1H), 1,91(m, 1H), 1,58(m, 1H), 1,30(m, 1H), 1,19(s, 3H), 1,10(s, 3H), 0,61(s, 3H); IR (mull) 3409, 1733, 1645, 1612, 1585, 1564, 1511, 1439, 1297, 1239, 1197, 1179, 1018, 786, 770cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 579 (M+H, 99), 582 (22), 581 (67), 580 (44), 579 (99), 578 (21), 240 (34), 161 (21), 159 (34), 109 (46), 91 (37); HRMS (FAB) calculado para C_{28}H_{32}Cl_{2}N_{2}O_{7} +H^{+} 579,1664, hallado 579,1667.
Ejemplo 186 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina(C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6})
182
Compuesto III-a (en el que R^{4} = H, R^{5a} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, n = 1, Estereoquímica S) y anhídrido (1R)-canfórico fueron calentados en diisopropiletil amina. La mezcla cruda fue concentrada en vacío proporcionando I-b crudo (en la que R^{1} = H, R^{3} = CH_{3}, R^{4} = H, R^{5a} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, n=1, Estereoquímica = (1R-cis)-L). Se hidrolizó I-b con LiOH dando lugar al producto del Ejemplo 186 (I-a; en la que R^{1} = H, R^{3} = CH_{3}, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, y R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, n=1, Estereoquímica (1R-cis)-L: ^{13}C NMR \delta 175,9, 175,4, 173,0, 158,6, 137,3, 133,0, 132,0, 131,3, 130,9, 129,7, 115,5, 65,9, 56,5, 54,2, 53,0, 47,0, 36,8, 33,1, 23,2, 22,8, 22,0, 21,0.
Ejemplo 187 (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina(C_{28}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{6})
183
La síntesis del Ejemplo 187 está indicada en el Esquema 8, 8-G: en la que R^{8-1} = H, R^{8-2} = H, R^{4} = H, R^{6} = 4-[(2,6-2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, se preparó (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{28}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{6}) a partir de 8-F-2 (R^{8-1} = H, R^{8-2} = H, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L) tal como se indica en el Esquema 8. ^{1}H NMR(300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 7,74 (m, 2H), 7,55-7,40(m, 4H), 7,15(m, 3H), 6,94(m, 3H), 5,16(s, 2H), 4,41(m, 1H), 3,75-3,48(m, 2H), 3,1-2,8(m, 2H), 2,63(m, 1H), 2,33(m, 1H), 1,87(m, 1H), 1,54(m, 1H), 1,32(m, 1H), 1,17(s, 3H), 1,08(s, 3H), 0,58(s, 3H); MS (FAB) m/z intensidad relativa) 578 (M+H, 99), 581 (30), 580 (72), 579 (57), 578 (99), 577 (19), 504 (17), 322 (18), 239 (35), 161 (29), 159 (34); HRMS (FAB) calculado para C_{28}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{6} +H^{+} 578,1824, hallado 578,1836.
Ejemplo 188 [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina(C_{29}H_{34}Cl_{2}N_{2}O_{7})
184
La síntesis para el Ejemplo 188 queda indicado por el Esquema 7, 7-G: en el que R^{7-1} = CH_{3}, R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo y estereoquímica = [1S-[1\alpha,3\alpha)R*)]-L. De acuerdo con ello, se preparó [1S-[1\alpha,3\alpha)R*)]]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{29}H_{34}Cl_{2}N_{2}O_{7}) a partir de 7-G-3 tal como se indica por el Esquema 7. ^{1}H NMR(300MHz, DMSO-d_{6}) \delta 7,71 (m, 1H), 7,54-7,43(m, 3H), 7,28(m, 1H), 7,16(m, 2H), 6,93(m, 2H),5,16(s, 2H), 4,40(m, 1H), 4,16(m, 1H), 3,02-2,80(m, 2H), 2,63(m, 1H), 2,35(m, 1H), 1,86(m, 1H), 1,54(m, 1H), 1,35-1,23(m, 4H), 1,14(s, 3H), 1,08(s, 3H), 0,59(s, 3H); IR (mull) 3427, 3031, 1731, 1645, 1612, 1585, 1565, 1512, 1439, 1297, 1239, 1230, 1197, 1179, 1017cm^{-1}; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 593 (M+H, 99), 596 (22), 595(69), 594 (43), 593 (99), 592 (17), 504 (22), 254 (63), 161 (44), 159 (40), 109 (72).
Ejemplo 189 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina(C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6})
185
El éster III-a (R^{4} = H, R^{5a} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, n = 1, Estereoquímica = R) (391 mg, 1 mmol), THF (3 mL), y diisopropiletil amina (880 \muL, 5 mmol) se combinaron. Se añadió anhídrido (1S)-canfórico (33-A) (182 mg, 1 mmol) y la mezcla de reacción fue calentada en reflujo durante 18 horas. La mezcla de reacción fue enfriada a continuación y concentrada en vacío. El material fue tratado con HCl 1 N (1 mL) y extraído con EtOAc (3 x 5 mL). La parte orgánica fue secada y concentrada en vacío dando lugar a 590 mg de metil éster I-a en crudo como mezcla de regioisómeros y diastereisómeros. Solamente los protones característicos y fácilmente discernibles se relacionan para el producto principal (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina metil éster (I-a): ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 0,75 (s, H), 1,00 (s, H), 1,19 (s, H), 3,75 (s, H), 4,84-5,00 (m, H), 5,23 (s, H).
El metil éster en crudo I-a (560 mg, 1 mmol) fue combinado con LiOH\cdotH_{2}O (420 mg, 10 mmol) que fue disuelto en 6 mL de H_{2}O. Después de 4,5 horas de agitación en el rotovap, se añadió HCl 1 N (12 mL) a la mezcla de reacción y se formó un precipitado de color blanco. La mezcla fue extraída con EtOAc (3 x 20 mL). La parte orgánica fue secada y concentrada en vacío dando lugar a 480 mg del diácido en crudo del Ejemplo 189. El material fue purificado mediante cromatografía de fase inversa C_{18} (en el Delta Prep utilizando una columna Delta-Pak C_{18}, con tamaño de partículas 15 \muM acondicionada con CH_{3}CN/H_{2}O/TFA (40:60:0,1)). El material fue eluido con CH_{3}CN/H_{2}O (38:62) produciendo 190 mg (36% del total a partir del anhídrido) del producto del Ejemplo 189: [\alpha]_{D} -4,5º (c = 0,6, EtOH), [\alpha]_{D} -2,8º (c = 0,8, EtOH); ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 0,21 (s), 0,59 (s), 0,86 (s), 1,05-1,18 (m), 1,28-1,45 (m), 1,64-1,82 (m), 2,05-2,20 (m), 2,41 (m), 2,57 (m), 2,87 (m), 4,22-4,32 (m), 4,95 (s), 6,73 (m), 6,97 (m), 7,20-7,30 (m), 7,34 (m), 7,61 (m); ^{13}C NMR (DMSO-d_{6}) \delta 176,9 (s), 173,4 (s), 172,0 (s), 157,1 (s), 136,0 (s), 131,8 (s), 131,5 (d), 130,3 (s), 130,1 (d), 128,7 (d), 114,3 (d), 64,9 (t), 55,4 (s), 53,5 (d), 52,2 (d), 45,5 (s), 35,9 (t), 32,3 (t), 22,4 (t), 22,0 (q), 21,5 (q), 20,8 (q); IR (mull de aceite mineral) 3296, 2925, 1712, 1698, 1651, 1512, 1438, 1242, cm^{-1}; MS para C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6}, m/z (intensidad relativa) 523 (M^{+}, 1), 521 (M^{+}, 1), 503 (1), 477 (1), 324 (29), 322 (45), 267 (19), 265 (28), 161 (64), 159 (100). Análisis calculado para C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6}: C, 59,78; H, 5,60; Cl, 13,57, N, 2,68. Hallado: C, 59,41; H, 5,55; Cl, 13,43, N, 2,52. Corregido para 1,14% H_{2}O hallado por análisis Karl Fischer.
Ejemplo 190 [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-N-[[3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-\alpha-metoximetil-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]benceno-etanamina
186
La síntesis del Ejemplo 190 está indicada por el Esquema 25.
Ejemplo 191 (1S-cis]-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-(hidroxifenilmetil)-L-fenilalanina(C_{26}H_{31}NO_{6})
187
La síntesis del Ejemplo 191 está indicado por el Esquema 2, I-c: en el que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = Me, R^{3} = R^{4} = H, R^{5} = -CO_{2}H, R^{6} = 4-(hidroxifenilmetil)-fenilo, X = -C(O)- y Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, se sintetiza (1S-cis]-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-(hidroxifenilmetil)-L-fenilalanina (C_{26}H_{31}NO_{6}) de la manera siguiente:
A una solución del Ejemplo 40 (0,59 g, 1,3 mmol) en EtOH absoluto bajo atmósfera de N_{2} a 0ºC se añade NaBH_{4} (100 mg, 2,7 mmol). La mezcla de reacción es agitada durante 17 horas a temperatura ambiente, diluida con H_{2}O, e interrumpida con HCl 1 N. La solución es tratada con solución saturada de NH_{4}Cl y se ajusta aproximadamente a pH 3 con HCl 1N. La mezcla es extraída con EtOAc. Los extractos combinados son secados, filtrados y concentrados para conseguir un aceite incoloro (0,60 g). El producto es purificado por cromatografía de fase inversa C18 (isocrático 35:65 CH_{3}CN/H_{2}O). El producto (0,29 g) es diluido con MeOH/H_{2}O, congelado y liofilizado proporcionando el producto del Ejemplo 191 en forma de polvo de color blanco: TLC R_{f} = 0,18 (650:350:1 CHCl_{3}/acetona/HCO_{2}H); HPLC t_{R} = 7,3 min (isocrático 650:350:1 CH_{3}CN/H_{2}O/TFA); [\alpha]_{D}^{25} +26º (c 0,48, MeOH); IR (mull) 3327, 1709, 1653, 1514, 1242, 1207, 1118, 1017, 950, 700 cm^{-1}; ^{1}H NMR (CD_{3}OD) \delta 7,37-7,14 (9 H), 5,73 (1 H), 4,90 (2 H), 4,66 (1 H), 3,20 (1 H), 2,96 (1 H), 2,70-2,62 (1 H), 2,48 (1 H), 1,92 (1 H), 1,59 (1 H), 1,40 (1 H), 1,19 (3 H), 1,18 (3 H), 0,74 (3 H); ^{13}C NMR (CD_{3}OD) \delta 178,28, 173,84, 144,56, 142,97, 136,31, 128,84, 127,86, 126,79, 126,33, 126,31, 75,37, 56,00, 53,16, 46,19, 39,04, 36,69, 32,33, 22,43, 21,72, 21,04, 20,43; MS (FAB, HR) m/z 454,2234 (calculado [M + H]^{+} 454,2229);MS (FAB) m/z 493, 454, 476, 436, 237, 226, 208, 109; análisis C 65,54, H 6,74, N 3,12 (calculado C 68,86, H 6,89, N 3,09.
Ejemplo 192 (1S-cis)-N-[[3-(hidroximetil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{26}H_{31}Cl_{2}NO_{5})
188
La síntesis del Ejemplo 192 se indica en el Esquema 10 con el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 192.
Ejemplo 193 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(2,6-diclorofenil)metil]-D-tirosina (C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6})
189
Se enfrió MeOH (10 mL) a 0ºC y se añadió lentamente cloruro de acetilo (2,14 mL, 30 mmol). Después de 20 minutos, se añadió el derivado III-a de t-BOC-D-tirosina (en el que R^{4} = H, R^{5a} = CO_{2}CH_{3}, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, n=1, Estereoquímica = R), (2,64 g, 6 mmol). La mezcla de reacción fue sometida a agitación a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla fue concentrada en vacío para conseguir un producto sólido de color blanco. El producto sólido de color blanco fue triturado con Et_{2}O y filtrado. El sólido fue devuelto al matraz y se combinó con THF (15 mL), diisopropiletil amina (4,4 mL, 25 mmol), y anhídrido (1R)-canfórico (1,0 g, 5 mmol). La mezcla de reacción fue calentada en reflujo durante 18 horas. La mezcla fue enfriada a continuación y concentrada en vacío. El material fue tratado con HCl 1 N (40 mL) y extraído con EtOAc (3 x 20 mL). La parte orgánica fue secada y concentrada en vacío proporcionando 3,30 g del metil éster I-a en crudo como mezcla de regioisómeros y diastereisómeros.
El metil éster en crudo I-a (2,79 g, 5 mmol) fue combinado con LiOH\cdotH_{2}O (2,1 g, 50 mmol) que se disolvió en 30 mL de H_{2}O. Después de 4,0 horas de agitación en el rotovap, se añadió HCl 1 N (60 mL) a la reacción y se formó un precipitado de color blanco. La mezcla fue extraída con EtOAc (3 x 40 mL). La parte orgánica fue secada y concentrada en vacío para conseguir 3,05 g de diácido en crudo. El material fue cromatografiado sobre 150 g de gel de sílice eluyendo con CHCl_{2}/EtOAc/HCO_{2}H (50:50:0,1), proporcionando (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil) carbonil]-O-(2,6-diclorofenil)metil]-D-tirosina en estado puro (Ejemplo 193). Este material fue disuelto en 20 mL de CH_{3}CN/H_{2}O (1:1). La mezcla fue concentrada en vacío hasta que el líquido adquirió un aspecto lechoso. La solución fue congelada y liofilizada consiguiendo el producto del Ejemplo 193: ^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 0,55 (H), 1,13 (H), 1,25 (H), 1,30-1,45 (1 H), 1,68-1,86 (1 H), 1,95-2,122 (1 H), 2,25-2,41 (1H), 2,73, 2,95-3,20, 4,49-4,62, 5,23, 7,01, 7,25, 7,30-7,40, 7,45-7,70; ^{13}C NMR (DMSO-d_{6}) \delta 175,3 (s), 174,5 (s), 173,5 (s), 157,3 (s), 136,3 (s), 132,0 (d), 131,7 (s), 130,9 (s), 130,5 (d), 129,0 (d), 114,4 (d), 65,1 (t), 55,3 (s), 53,6 (d), 52,2 (d), 46,3 (s), 35,6 (t), 32,1 (t), 23,2 (q), 22,2 (t), 21,4 (q), 20,6 (q); IR (mull de aceite mineral) 3436, 2922, 1722, 1707, 1634, 1612, 1512, 1438, 1242, cm^{-1}; MS para C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6}, m/z (intensidad relativa) 523 (M^{+}, 0,4), 521 (M^{+}, 0,5), 505 (2), 503 (2), 324 (33), 322 (50), 267 (21), 265 (32), 161 (69), 159 (100). Análisis calculado para C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6}: C, 59,78; H, 5,60; Cl, 13,57, N, 2,68. Hallado: C, 59,52; H, 5,29; Cl, 13,60, N, 2,52. Corregido para 0,9% H_{2}O hallado por análisis Karl Fischer.
Ejemplo 194 [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-6-cloro-5-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-2-piridinpropanoico
190
La síntesis del Ejemplo 194 está indicada en el Esquema 34.
Ejemplo 195 Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-piperacinbutanoico
191
La síntesis del Ejemplo 195 está indicada por el Esquema 18.
Ejemplo 196 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-(fenilmetil)-L-triptofano (C_{28}H_{32}N_{2}O_{5})
192
El Ejemplo 196 fue sintetizado tal como se describe en el Esquema 24.
Ejemplo 197 [1R-cis]-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-(hidroxifenilmetil)-L-fenilalanina (C_{26}H_{31}NO_{6})
193
La síntesis del Ejemplo 197 está indicada por el Esquema 2, I-c: en el que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = R^{4} = H, R^{3} = Me, R^{5} = -CO_{2}H, R^{6} = 4-(hidroxifenilmetil)-fenil, X = -C(O)- y Estereoquímica = (1R-cis)-L. De acuerdo con ello, se prepara [1R-cis]-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-(hidroxifenilmetil)-L-fenilalanina (C_{26}H_{31}NO_{6}) a partir de 32-B y anhídrido (1R)-canfórico por los procedimientos indicados en el Esquema 2 y la síntesis de los Ejemplos 40, 186, y 191: TLC gel de sílice R_{f} = 0,31 (900:100:1 CHCl_{3}/MeOH/HCO_{2}H); HPLC t_{R} = 5,6 minutos (isocrático 650:350:1 CH_{3}CN/H_{2}O/TFA); [\alpha]_{D}^{25} +24º (c 0,38, MeOH); UV (MeOH) \lambda_{max} (\epsilon) 223 (14200), 254 (425 sh), 258 (493), 263 (481), 268 (364 sh), 272 (257 sh); IR (mull) 3379, 1712, 1642, 1514, 1417, 1377, 1342, 1274, 1179, 1133, 1017, 700 cm^{-1}; ^{1}H NMR (CD_{3}OD) \delta 7,35-7,15 (m 9H), 5,73 (1 H), 4,91 (3 H), 4,72 (1 H), 3,26 (1 H), 2,99 (1 H), 2,72 (1 H), 2,44-2,30 (1 H), 2,15-2,00 (1 H), 1,82-1,67 (1 H), 1,40-1,27 (1 H), 1,05 (3 H), 1,03 (3 H), 0,54 (3 H), 0,53 (3 H); ^{13}C NMR (CD_{3}OD) \delta 176,29, 176,24, 173,56, 144,56, 143,17, 136,26, 136,23, 128,82, 127,88, 126,85, 126,39, 126,31, 75,33, 55,77, 53,34, 52,47, 46,20, 36,09, 32,03, 22,11, 21,98, 20,17, 20,07; MS (HR FAB) m/z 454,2230 (calculado [M+H]^{+} 454,2229); MS (FAB) m/z 454, 436, 237, 226, 208, 109; H_{2}O (Karl Fischer) 1,44%; análisis C 67,68, H 6,98, N 3,06 (calculado ajustado para H_{2}O: C 68,86, H 6,89, N 3,09).
Ejemplo 198 (1S-cis)-N-[[(3-metoximetil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{27}H_{33}Cl_{2}NO_{5})
194
La síntesis del Ejemplo 198 está indicado por el Esquema 10 con el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 198.
Ejemplo 199 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-D-tirosina (C_{26}H_{29}Cl_{2}NO_{6})
195
De igual manera que en la síntesis de 189, se sintetizó y se purificó 199 (0,5 g, rendimiento global 49%) = [\alpha]_{D} = -31º.
Ejemplo 200 1,1-dimetiletil éster de [1R-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[[3-[[[1-carboxi-2-[4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil]etil]amino]carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentil]carbonil]-L-prolina, sal monosódica (C_{35}H_{43}Cl_{2}N_{2}NaO_{7})
196
La síntesis del Ejemplo 200 está indicada por el Esquema 21.
Ejemplo 201 Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]bencenbutanoico (C_{27}H_{31}Cl_{2}NO_{6})
197
La síntesis del Ejemplo 201 está indicada por el Esquema 2, I-c: en el que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = Me, R^{3} = R^{4} = H, R^{5} = -CH_{2}CO_{2}H, R^{6} =4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenil-, n = 1, Estereoquímica = [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]. De acuerdo con ello, se prepara ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-2,2, 3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-[(2,6-di-clorofenil)metoxi]-bencenbutanoico (C_{27}H_{31}Cl_{2}NO_{6}) a partir de 30-B y 15-D tal como se indica por el Esquema 2: TLC: R_{f} = 0,22 (50:50:0,2 hexanos/EtOAc/HCO_{2}H); [\alpha]_{D} = +3 (MeOH); IR 3320, 3057, 3026, 2953, 2924, 2868, 2855, 1703, 1641, 1612, 1585, 1565, 1511, 1465, 1439, 1403, 1378, 1297, 1283, 1241, 1197, 1179, 1158, 1017, 768 cm^{-1}; ^{1}H NMR \delta 0,71 (3 H), 1,22 (3 H), 1,23 (3 H), 1,41-1,53 (1 H), 1,67-1,86 (1 H), 2,26-2,60 (4 H), 2,71-2,87 (2 H), 2,96-3,08 (1 H), 4,46-4,62 (1 H), 5,26 (2 H), 5,43 (1 H), 6,98 (2 H), 7,13 (2 H), 7,23-7,28 (1 H), 7,37 (2 H); ^{13}C NMR \delta 20,22, 21,66, 22,29, 22,91, 31,91, 37,19, 39,64, 46,44, 48,57, 54,26, 56,48, 65,14, 115,09, 128,37, 129,62, 130,23, 130,33, 131,98, 136,90, 157,72, 171,75, 178,54, 182,19; MS (FAB) m/z 536, 495, 464, 449, 431, 418, 386, 353, 336, 287, 236; H_{2}O (Karl Fischer) 0,70%; análisis c 60,08, H 5,86, Cl 13,05, N 2,70 (calculado corregido para H_{2}O: C 60,03, H 5,86, Cl 13,13, N 2,59).
Ejemplo 202 (1S-cis)-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-histidina (C_{27}H_{35}Cl_{2}N_{3}O_{5})
198
Al metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil)]-L-histidina (0,5 g, 0,88 mmol) en H_{2}O (10 mL) se añadió LiOH\cdotH_{2}O (10 equivalentes, 8,8 mmol, 0,37 g) en H_{2}0 fría (10 mL). La reacción se agitó durante la noche. Se redujo el pH de la solución de reacción a 5 con HCl 1N. El precipitado resultante fue filtrado lavado con H_{2}O y secado en condiciones alto vacío dando lugar al producto 0,46 g (95%) de (1S-cis)-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-histidina Ejemplo 202 (I-c; en el que R^{2a} = (1,1-dimetiletoxi)carbonilo, R^{1} = CH_{3}, R^{3}= H R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, y R^{6} = 1-[(3,4-diclorofenil)metil]-4-imidazolilo, n = 1, Estereoquímica = (1S-cis)-L): p.f. 234-235ºC.
Ejemplo 203 (1S-cis)-N-[[(3-metoximetoximetil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina (C_{27}H_{33}Cl_{2}NO_{5})
199
La síntesis del Ejemplo 203 está indicada por el Esquema 10 con el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 203.
Ejemplo 204 Ácido [1R-[1\alpha(S*),3\alpha]]-\beta-[[(3-Carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-bencenbutanoico (C_{27}H_{31}Cl_{2}NO_{6})
200 
\newpage
La síntesis del Ejemplo 204 está indicada por el Esquema 2, I-c: en el que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = R^{4} = H, R^{3} = Me, R^{5} = -CH_{2}CO_{2}H, R^{6}= 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenil-, n = 1, Estereoquímica = [1R-[1\alpha(S*),3\alpha]]. De acuerdo con ello, se obtuvo ácido [1R-[1\alpha(S*),3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]bencenbutanoico (C_{27}H_{31}Cl_{2}NO_{6}) a partir de 30-B y anhídrido (1S)-canfórico (33-A) por el procedimiento del Esquema 1: p.f. 106-108ºC; TLC R_{f} = 0,24 (250:250:1 hexanos/EtOAc/HCO_{2}H); [\alpha]_{D} = +13 (MeOH); IR 3144, 3057, 3030, 2954, 2924, 2870, 2855, 1706, 1627, 1612, 1585, 1565, 1511, 1466, 1439, 1377, 1299, 1241, 1197, 1178, 1017, 1000, 778, 768 cm^{-1}; ^{1}H NMR \delta 0,70 (3 H), 1,16 (3 H), 1,16 (3 H), 1,30 (3 H), 1,43-1,61 (1 H), 1,77-1,97 (1 H), 2,09-2,32 (2 H), 2,36-2,49 (1 H), 2,57-2,68 (1 H), 2,69-2,83 (2 H), 2,90-3,02 (1 H), 4,44-4,59 (1 H), 5,25 (2 H), 5,73 (1 H), 6,97 (2 H), 7,11 (2 H), 7,22-7,26 (3 H), 7,37 (2 H); ^{13}C NMR \delta 20,88, 21,16, 22,04, 23,15, 32,57, 37,76, 39,59, 47,39, 48,16, 52,44, 55,73, 65,17, 86,13, 115,02, 128,37, 129,56, 130,34, 132,00, 136,89, 157,72, 174,53, 178,42, 181,12; MS (FAB) m/z 536, 518, 490, 378, 354, 336, 294, 159, 137, 109, 88, 69, 55; H_{2}O (Karl Fischer) 0,52%; análisis C 60,07, H 5,84, Cl 13,03, N 2,71 (calculado corregido para H_{2}O: C 60,14, H 5,85, Cl 13,15, N 2,60).
Ejemplo 205 (1S-cis)-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-N-[[3-(metoxicarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-tirosina (C_{27}H_{31}Cl_{2}NO_{6})
201
El Ejemplo 205 está indicado por el Esquema 20, 20-D: en el que R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}H, R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-fenilo y Estereoquímica = [1S-cis]-L]].
A una solución del diéster 20-D (R^{4} = H, R^{5} = CO_{2}CH_{3}; R^{6} = 4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]fenilo, Estereoquímica = (1S-cis)-L (0,32 g, 0,58mmol) en metanol (5mL) se añade una solución de LiOH\cdotH_{2}O (0,31 g, 7,4mmol) en H_{2}O (5mL). Después de agitación durante una noche, la mezcla es diluida con agua (50mL) y evaporada en vacío hasta la desaparición del metanol. La solución acuosa es enfriada en un baño de hielo y llevada a pH4 utilizando HCl 1N, resultando en un precepitado de color blanco que es cromatografiado sobre gel de sílice (10% metanol/cloroformo) proporcionando un sólido de color blanco (0,25g, rendimiento 80%).
^{1}H NMR(D_{6}DMSO) 7,85(m, 1H), 7,58-7,44(m, 3H), 7,19(m, 2H), 6,96(m, 2H), 5,18(s, 2H), 4,43(m, 1H), 3,59(s, 3H), 3,03-2,81(m, 2H), 2,69(m, 1H), 2,40(m, 1H), 1,91(m, 1H), 1,56(m, 1H), 1,39(m, 1H), 1,16(s, 3H), 1,31(s, 3H), 0,59(s, 3H); IR (mull) 1727, 1639, 1612, 1585, 1565, 1511, 1439, 1298, 1241, 1197, 1179, 1160, 1119, 779, 768; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 536 (M+H, 99), 538 (66), 537 (39), 536 (99), 322(22), 197 (27), 169 (21), 159 (29), 137 (31), 109 (66), 107 (22).
Ejemplo 206 Metil éster de (1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[[(fenilmetoxi)amino]-carbonil]ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (C_{34}H_{37}Cl_{2}N_{3}O_{6})
202
La síntesis del Ejemplo 206 está indicada por el Esquema 23 bajo el encabezamiento: Preparación 23-C.
Ejemplo 207 Metil éster (1S-cis)-N-[[3-[[(2-cianoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
203
La síntesis del Ejemplo 207 está indicada por el Esquema 22 bajo el encabezamiento: Preparación de 22-C.
Ejemplo 208 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2-cloro-3-piridinil)carbonil]amino]-L-fenilalanina (C_{25}H_{28}ClN_{3}O_{6})
204
La síntesis del Ejemplo 208 está indicada por el Esquema 2, I-c: en el que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = Me, R^{3} = R^{4} = H, R^{5} = -CO_{2}H, R^{6} = 4-[[(2-cloro-3-piridil)carbonil]amino]fenilo, n = 1, Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, se preparó (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2-cloro-3-piridinil)carbonil]amino]-L-fenilalanina (C_{25}H_{28}ClN_{3}O_{6}) a partir de 31-C, 15-D y ácido 2-cloro-3-nicotínico por los procedimientos indicados por el Esquema 2: p.f. 172-174ºC; TLC gel de sílice R_{f} = 0,17 (750:250:3 EtOAc/hexanos/HCO_{2}H); IR (mull de aceite mineral) 3410, 3289, 3193, 3124, 3050, 2955, 2924, 2868, 2855, 1714, 1655, 1606, 1582, 1537, 1516, 1461, 1415, 1401, 1377, 1329, 1279, 1257, 1242, 1207, 1187, 1152 cm^{-1}; ^{1}H NMR \delta 0,80 (3 H), 1,13-1,28 (1 H), 1,16 (3 H), 1,19 (3 H), 1,38-1,50 (1 H), 1,67-1,83 (1 H), 2,08-2,23 (1 H), 2,45-2,58 (2 H), 3,04-3,24 (2 H), 4,75-4,87 (1 H), 5,96 (1 H), 7,12 (2 H), 7,32 (1 H), 7,56 (2 H), 7,96 (1 H), 8,43 (1 H), 9,32 (1 H); MS (FAB) m/z 504, 502,484, 468, 456, 371, 320, 302, 274, 140, 109; análisis C 57,54, H 5,84, Cl 6,79, N 8,05 (calculado corregido para H_{2}O: C 57,55, H 5,83, Cl 6,79, N, 8,08).
Ejemplo 209 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,6-dicloro-3-piridinil)carbonil]amino]-L-fenilalanina (C_{25}H_{27}Cl_{2}N_{3}O_{6})
205
La síntesis del Ejemplo 209 está indicada por el Esquema 2, I-c: en el que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = Me, R^{3} = R^{4} = H, R^{5} = -CO_{2}H, R^{6} = 4-[[(2,6-dicloro-3-piridil)-carbonil]amino]fenilo, n = 1, Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, se preparó (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,6-dicloro-3-piridinil)carbonil]amino]-L-fenilalanina (C_{25}H_{27}Cl_{2}N_{3}O_{6}) a partir de 31-C, 15-D y ácido 2,6-dicloro-3-nicotínico, tal como se indica en el Esquema 2 y por la síntesis del Ejemplo 208: p.f. 246-247ºC; TLC gel de sílice R_{f} = 0,28 (750:250:2 EtOAc/hexanos/HCO_{2}H); IR (mull aceite mineral) 3292, 3196, 3125, 3059, 2954, 2923, 2855, 1712, 1656, 1607, 1575, 1544, 1515, 1461, 1426, 1414, 1377, 1343, 1329, 1272, 1244, 1206, 1186, 1160, 1144 cm^{-1}; ^{1}H NMR \delta 0,65(3H), 1,10(3H), 1,15(3H), 1,24-1,37(1H), 1,43-1,62(1H), 1,83-1,97(1H), 2, 26-2,45(1H), 2,67(1H), 2,82-3,04(2H), 3,30(3H), 4,38-4,49(1H), 7,21(2H), 7,55(2H), 7,71(1H), 7,80(1H), 8,14 (1H), 10,63(1H); MS (FAB) m/z 538, 536, 538, 518, 490, 371, 354, 336, 281, 200, 174, 137, 109.
Ejemplo 210 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2-metoxi-6-cloropiridín-3-il)carbonil]amino]-L-fenilalanina
206
La síntesis del Ejemplo 210 está indicada en el Esquema 2, I-c: en la que R^{2a} = -CO_{2}H, R^{1} = Me, R^{3} = R^{4} = H, R^{5} = -CO_{2}H, R^{6} = 4-[[(6-cloro-2-metoxi-3-piridil)carbonil]amino]fenilo, n = 1, Estereoquímica = (1S-cis)-L. De acuerdo con ello, el Ejemplo 210 es sintetizado del modo siguiente:
Una solución del dimetil éster del Ejemplo 209 (0,098 g, 0,18 mmol) en 4:1 THF/MeOH se hace reaccionar a temperatura ambiente en atmósfera de argón con una solución acuosa de LiOH\cdotH_{2}O (0,042 g, 1,0 mmol). La mezcla de reacción es agitada durante 2,5 horas. Se diluye con H_{2}O, se acidifica con solución acuosa de HCl, y se extrae con EtOAc. Los extractos combinados son lavados con salmuera, secados, filtrados y concentrados hasta consistencia de aceite, que es purificado por cromatografía flash de gel de sílice (650:350:4 EtOAc/hexanos/HCO_{2}H). El producto se hace aceotrópico tres veces a partir de tolueno, diluido con CH_{3}CN/H_{2}O, y liofilizado para conseguir 0,043 g (0,081 mmol, 45%) del producto del Ejemplo 210 en forma de sólido de color blanco: p.f. 128-131ºC; TLC gel de sílice R_{f} = 0,13 (500:500:2 EtOAc/hexanos/HCO_{2}H); ^{1}H NMR \delta 0,64(3H), 1,10(3H), 1,15(3H), 1,23-1,38(1H), 1,44-1,53(m, 1H), 1,78-1,97(m, 1H), 2,66(t, 2H, J = 9,4), 2,78-3,07(m, 2H), 3,67-3,84(1H), 3,96(3H), 4,37-4,46(1H), 7,19(2H), 7,57(2H), 7,78(2H), 8,05(1H), 10,18 (1H); MS (FAB) m/z 534, 532, 514, 486, 371, 360, 350, 332, 304, 275, 190, 127, 109.
Ejemplo 211 [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
207
La síntesis del Ejemplo 211 está indicada en el Esquema 19 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 211.
Ejemplo 212 Sal de monolitio de [1S-[1\alpha,3\alpha(S*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
208
La síntesis del Ejemplo 212 está indicada por el Esquema 19 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 212.
Ejemplo 213 Sal monosódica de [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[3-[[2-aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
209
La síntesis del Ejemplo 213 está indicada por el Esquema 19 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 213.
Ejemplo 214 (1S-cis)-N-[[3-[[(2-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{29}H_{33}Cl_{2}N_{3}O_{7})
210
La síntesis para el Ejemplo 214 está indicada por el Esquema 19 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 214.
Ejemplo 215 Sal monosódica de [1S-[1\alpha,3\alpha(R*)]]-N-[3-[[2-[(metilamino)carbonil]-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
211
La síntesis para el Ejemplo 215 está indicada con el Esquema 19 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 215.
Ejemplo 216 (1S-cis)-N-[[3-[[(2-cianoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
212
La síntesis del Ejemplo 216 está indicada por el Esquema 22 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 216.
Ejemplo 217 (1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[[(fenilmetoxi)amino]carbonil]-ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina (C_{33}H_{35}Cl_{2}N_{3}O_{6})
213
La síntesis para el Ejemplo 217 está indicada por el Esquema 23 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 217.
Ejemplo 218 Metil éster de (1S-cis)-4-[2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[3-[(hidroxiamino)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
214
La síntesis para el Ejemplo 218 está indicada por el Esquema 23 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 218.
Ejemplo 219 (1S-cis)-4-[2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[3-[(hidroxiamino)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
215
La síntesis para el Ejemplo 219 está indicada por el Esquema 22 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 219.
Ejemplo 220 (1S-cis)-N-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[[(1,1'-bifenil)-4-il]amino]carbonil]-L-fenilalanina
216
La síntesis para el Ejemplo 220 está indicada por los Esquemas 35 y 2 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 220.
Ejemplo 221 (1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(4-clorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
217
La síntesis para el Ejemplo 221 está indicada por los Esquemas 35 y 2 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 221.
Ejemplo 222 (1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(2-trifluorometilfenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
218
La síntesis para el Ejemplo 222 está indicada por los Esquemas 35 y 2 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 222.
Ejemplo 223 (1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(2,4,6-triclorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
219
La síntesis para el Ejemplo 223 está indicada por los Esquemas 35 y 2 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 223.
Ejemplo 224 [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-4-[[[(1-carboxi-3-metilbutil]amino]carbonil]-N-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil-L-fenilalanina
220
La síntesis para el Ejemplo 224 está indicada por los Esquemas 35 y 2 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 224.
Ejemplo 225 (1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[(4-morfolinil)carbonil]ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
221
La preparación del Ejemplo 225 está indicada por el Esquema 27.
Ejemplo 226 Metil éster de (1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[(4-morfolinil)carbonil]ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
222
La preparación del Ejemplo 226 está indicada por el Esquema 27.
Ejemplo 227 Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[[(2,6-diclorofenil)amino]carbonil]amino]-L-fenilalanina
223
La síntesis del Ejemplo 227 está indicada por el Esquema 26.
Ejemplo 228 Metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[[(2,6-diclorofenil)amino]carbonil]amino]-L-fenilalanina
224
La síntesis del Ejemplo 228 está indicada por el Esquema 26.
Ejemplo 229 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[[(2,6-diclorofenil)amino]carbonil]amino]-L-fenilalanina
225
La síntesis del Ejemplo 229 está indicada por el Esquema 26.
Ejemplo 230 Metil éster de (1S-cis)-N-[[3-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2-cloro-5-trifluorometilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
226
El Ejemplo 230 es sintetizado de la misma manera que el Ejemplo 54.
Ejemplo 231 Metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-cloro-5-trifluorometilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
227
El Ejemplo 231 es sintetizado de la misma manera que el Ejemplo 54.
Ejemplo 232 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2-cloro-5-trifluorometilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
228
El Ejemplo 232 es sintetizado de la misma manera que el Ejemplo 54.
Ejemplo 233 Metil éster de (1S-cis)-N-[[(3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
229
La síntesis para el Ejemplo 233 está indicada por el Esquema 8 bajo el encabezamiento: Preparación de 8-F.
Ejemplo 234 Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-2-[[[3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]amino]-6-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]hexanoico
230 
\newpage
El Ejemplo 234 fue preparado de acuerdo con el Esquema 2. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,36(3H), 4,29(1H), 3,24(2H), 2,71(1H), 2,45(1H), 2,04(1H), 1,71(8H), 1,23(3H), 1,13(3H), 0,75(3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 176,74, 173,06, 164,47, 137,20, 131,64, 130,84, 128,05, 55,91, 52,87, 46,16, 38,50, 32,31, 30,44, 28,43, 22,64, 22,32, 21,92, 21,07, 20,57; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 501 (M^{+}, 22), 504 (20), 503 (32), 502 (26), 501 (22), 109 (17), 73 (99), 69 (25), 57 (27), 55 (23); MS (ES-) para C_{23}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6} m/z 499,3 (M-H)^{-}; análisis calculado para C_{23}H_{30}Cl_{2}N_{2}O_{6} \cdot 0,25 H_{2}O: C, 54,60; H, 6,07; N, 5,53. Hallado: C, 54,58; H, 6,14; N, 5,45.
Ejemplo 235 Ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-2-[[[3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]amino]-5-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]pentanoico
231
El Ejemplo 235 fue preparado de acuerdo con el Esquema 2. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,38(3H), 4,41(1H), 3,40(2H), 2,83(1H), 2,53(1H), 2,08(1H), 1,79(3H), 1,47(1H), 1,30(3H), 1,24(3H), 0,83 (3H); ^{13}C NMR (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 178,23, 174,24, 173,83, 165,84, 136,07, 131,79, 130,67, 127,80, 56,06, 52,92, 52,10, 38,84, 32,35, 28,57, 25,43, 22,33, 21,61, 20,95, 20,50; MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 487 (M^{+}, 99), 490 (14), 489 (67), 488 (25), 487 (99), 305 (19), 242 (16), 175 (12), 173 (18); análisis calculado para C_{22}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6}: C, 54,22; H, 5,79; N, 5,75. Hallado: C, 53,91; H, 5,93; N, 5,43.
Ejemplo 236 [1S-[1\alpha,3\alpha(1S*,3R*)]]-N-[[3-[[[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)amino]carbonil]amino-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)-amino]-L-fenilalanina
232
La síntesis del Ejemplo 236 está indicada por los Esquemas 28 y 29.
Ejemplo 237 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
233
La síntesis para el Ejemplo 237 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 237.
Ejemplo 238 (1S-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
234
La síntesis para el Ejemplo 238 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 238.
Ejemplo 239 (1S-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
235 
\newpage
La síntesis para el Ejemplo 239 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 239.
Ejemplo 240 (1R-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
236
La síntesis del Ejemplo 240 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 240.
Ejemplo 241 (1R-trans)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
237
La síntesis del Ejemplo 241 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 241.
Ejemplo 242 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
238
La síntesis del Ejemplo 242 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 242.
Ejemplo 243 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
239
La síntesis del Ejemplo 243 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 243.
Ejemplo 244 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
240
La síntesis del Ejemplo 244 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 244.
Ejemplo 245 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
241
La síntesis del Ejemplo 245 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 245.
Ejemplo 246 (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
242
La síntesis del Ejemplo 246 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 246.
Ejemplo 247 (1S-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
243
La síntesis del Ejemplo 247 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 247.
Ejemplo 248 (1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
244
La síntesis del Ejemplo 248 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 248.
Ejemplo 249 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
245
La síntesis del Ejemplo 249 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 249.
Ejemplo 250 (1R-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
246
La síntesis del Ejemplo 250 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 250.
Ejemplo 251 (1R-trans)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-D-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
247
La síntesis del Ejemplo 251 está indicada por el Esquema 37 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 251.
Ejemplo 252 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-bromo-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina (C_{26}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
248
La síntesis para el Ejemplo 252 está indicada por el Esquema 2 (Método B) y está explicada bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 252.
Ejemplo 253 (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[2-cloro-4-[(1,1-dimetil)etil]benzoíl]amino]-L-fenilalanina (C_{30}H_{37}Cl_{1}N_{2}O_{6})
249
La síntesis del Ejemplo 253 está indicada por el Esquema 38 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 253.
Ejemplo 254 ácido [1S-[1\alpha(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-3-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-6-piridinpropanoico (C_{25}H_{28}Cl_{2}N_{2}O_{6})
250
La síntesis del Ejemplo 254 está indicada por el Esquema 39 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo 254.
Ejemplos de referencia (Ejemplos R.)
Ejemplo R.1
(1R)-1,8,8-trimetil-3-oxabiciclo [3.2.1]octano-2,4-diona [(1R)-anhídrido canfórico]
251
Método A
Una mezcla de ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico) [ácido (1R,3S)-canfórico](40,0 g), AcCl (23,5 g), y Ac_{2}O (81,6 g) fue calentado en reflujo durante 3 horas. La mezcla fue concentrada en vacío, disuelta en CHCl_{3}, lavada con solución saturada de NaHCO_{3}, salmuera, y secada sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue triturado con i-Pr_{2}O proporcionando (1R)-1,8,8-trimetil-3-oxabiciclo[3.2.1]octano-2,4-diona]anhídrido (1R) canfórico (34,0 g) en forma de cristales.
Método B
Se añadió DIEA (8,0 g) a una suspensión de ácido (1R,3S)-canfórico (5,0 g) y reactivo BOP (11,1 g) en THF (50 ml) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 4 horas y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue extraído con AcOEt y el extracto fue lavado con HCl al 5%, solución saturada de NaHCO_{3} y solución saturada de LiCl, y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice (eluyente; CHCl_{3}) proporcionando anhídrido (1R)-canfórico (4,1 g) en forma de polvo incoloro.
Ejemplo R.2
3-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-rimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico
252
A una solución de anhídrido (1R)-canfórico (0,18 g) en THF (2 ml) se añadió 1M t-BuOK en THF (1 ml) a una temperatura de -78ºC bajo una atmósfera de N_{2} y la mezcla fue agitada durante 10 horas a la misma temperatura. La mezcla fue concentrada en vacío, se disolvió en H_{2}O, y se extrajo con AcOEt. La capa acuosa fue acidificada con HCl 1N a pH 3 y extraída con CH_{2}Cl_{2}. El extracto fue lavado con salmuera y secado sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente fue eliminado en vacío proporcionando 3-dimetiletil éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentán-1,3-dicarboxílico (0,24 g).
Ejemplo R.3
ácido (1R-cis)-3-formil-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico
253
Una mezcla de anhídrido (1R)-canfórico (1,76 g) clorhidrato de N, O-dimetilhidroxilamina (1,13 g), DIEA (8,4 ml) en THF (15 ml) fue calentada durante 3 horas a 85ºC en un tubo cerrado. Después de enfriamiento, el tubo fue abierto y se añadió HCl 1N (75 ml). La mezcla resultante fue extraída con AcOEt.
El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice para proporcionar ácido (1R,3S)-3-(N-metoxi-N-metilcarbamoíl)-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico (800 mg).
A una solución del compuesto obtenido (215 mg) en THF (5 ml) se añadió una solución 1M de LiAlH_{4} en THF (1,5 ml) a -78ºC. La mezcla fue agitada durante 1 hora a -78ºC, calentada a 0ºC e interrumpida con HCl 1N. La mezcla resultante fue extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío proporcionando una mezcla 3:1 de ácido (1R-cis)-3-formil-1,2,2-trimetilciclopentancarboxílico (forma de aldehído) y (1R-5S)-4-hidroxi-1,8,8-trimetil-3-oxabiciclo [3.2.1]-octano-2-ona (forma de acetal) (153 mg). Ambas formas son intercambiables entre sí en solución.
\newpage
Ejemplo R.4
O-(ciclohexilmetil)-L-tirosina metil éster, sal clorhidrato
254
A una mezcla de N-(tert-butoxicarbonil)-L-tirosina metil éster (356 mg), K_{2}CO_{3} (830 mg), n-Bu_{4}NI (89 mg) en DMF (5 ml) se añadió bromuro de ciclohexilmetilo (202 \mul) y la mezcla fue agitada durante 1 día a temperatura ambiente. Después de la adición de salmuera (40 ml), la mezcla resultante fue extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente; 9:1, hexano/AcOEt \rightarrow 1:1, hexano/AcOEt) proporcionando el metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-O-ciclohexilmetil-L-tirosina (470 mg). El compuesto obtenido (347 mg) se disolvió en 3N HCl/AcOEt (5 ml) y la mezcla fue agitada durante unanoche. El disolvente y el HCl en exceso se retiraron en vacío, consiguiendo el metil éster de O-(ciclohexilmetil)-L-tirosina, sal clorhidrato.
Ejemplo R.5
Metil éster de 1-[(2,4-diclorofenil)metil]-L-histidina, sal diclorhidrato
255
Se añadió metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-L-histidina (1,0 g) a una solución de cloruro de 2,4-diclorobencilo (0,73 g) y Et_{3}N (0,27 g) en benceno (10 ml) y la mezcla fue calentada en reflujo durante 1 hora. La mezcla fue enfriada y el precipitado fue retirado por filtración. El filtrado fue lavado con H_{2}O, secado sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 95:5; CHCl_{3}/MeOH) consiguiendo el metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-1-[(2,4-diclorofenil)metil]-L-histidina. El compuesto obtenido fue tratado de manera similar a la descrita en el Ejemplo 4 R. proporcionando el metil éster de 1-[(2,4-diclorofenil)metil]-L-histidina, sal diclorhidrato.
Ejemplo R.6
Metil éster de 1-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-histidina, sal diclorhidrato
256
Se añadió L-histidina (3,13 g) a una solución de NaNH_{2} en amoníaco líquido preparada a partir de Na (0,93 g) y FeCl_{3} (cantidad catalítica) en amoníaco líquido (50 ml). Después de 15 minutos, se añadió una solución de 2,6-diclorobencilcloruro (3,96 g) en THF (5 ml), y la mezcla fue agitada durante 3 horas. La mezcla de reacción fue interrumpida con H_{2}O y éter. El pH de la capa acuosa fue ajustado a pH 8 con solución de HCl al 5% seguido por enfriamiento. El precipitado resultante fue recogido por filtrado, lavado con H_{2}O y secado consiguiendo 1-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-histidina (3,58 g). El compuesto obtenido (0,80 g) fue disuelto en MeOH (30 ml) y se hizo burbujear gas HCl durante 10 minutos a 0ºC. La mezcla de reacción fue sometida a agitación durante 15 horas a temperatura ambiente, y el disolvente fue eliminado en vacío, consiguiendo el metil éster de 1-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-histidina, sal diclorhidrato.
Ejemplo R.7
Metil éster de 3-nitro-L-tirosina, sal clorhidrato
257
A una solución de metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-L-tirosina (5,64 g) en THF (10 ml) se añadió NH_{4}NO_{3} (3 g) y se concentró con HNO_{3} (3 ml). Después de 30 segundos, la mezcla de reacción adquirió un color rojo oscuro, produciéndose reflujo. La mezcla de reacción fue interrumpida con NaHCO_{3} sólido y H_{2}O, y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; hexano \rightarrow 1:1, hexano/AcOEt) proporcionando metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-3-nitro-L-tirosina (3,42 g). El compuesto obtenido fue tratado de manera similar a la descrita en el Ejemplo R.4 consiguiendo el metil éster de 3-nitro-L-tirosina, sal clorhidrato.
Ejemplo R.8
Metil éster de 3-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-tirosina, sal clorhidrato
258
Una mezcla de metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-3-nitro-L-tirosina (2,0 g) y 10% Pd-C (1,0 g) en MeOH (10 ml) fue sometida a hidrogenólisis catalítica a presión atmosférica. El catalizador fue separado por filtrado, y el filtrado fue evaporado en vacío. El residuo fue triturado con éter, proporcionando el metil éster de 3-amino-N-(tert-butoxicarbonil)-L-tirosina (1,5 g) en forma sólida. A una solución del compuesto obtenido (1,0 g) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) se añadió cloruro de 2,6-diclorobenzoílo (0,74 g) y DIEA (1,1 g), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 2:1, hexano/AcOEt) proporcionando metil éster de N-(tert-butoxicarbonil)-3-(2,6-diclorobenzamido)-L-tirosina (1,2 g). El compuesto obtenido fue tratado de manera similar a la descrita en el Ejemplo 4.R proporcionando metil éster de 3-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-tirosina, sal clorhidrato.
\newpage
Ejemplo R.9
Metil éster de 4-[[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina, sal clorhidrato
259
A una mezcla de metil éster de 4-amino-N-(tert-butoxicarbonil)-L-fenilalanina (0,59 g) y 2,6-diclorobenzaldehído (0,35 g) en MeOH (9 ml) se añadió NaCNBH_{3} (0,38 g), AcOH (1 ml), y cribas moleculares 4A (cantidad catalítica), y la mezcla fue agitada durante una noche a temperatura ambiente.
La mezcla de reacción fue interrumpida con salmuera y HCl 1N. El disolvente fue eliminado en vacío y el residuo fue extraído con AcOEt. El extracto fue lavado con HCl 1N, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente; 10% EtOH/CH_{2}Cl_{2}) consiguiendo N-(tert-butoxicarbonil)-4-[[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina (0,36 g) en forma de sólido incoloro. El compuesto obtenido (0,5 g) fue disuelto en MeOH (5 ml) y se hizo burbujear gas HCl durante 5 minutos a 0ºC. La mezcla fue agitada durante 2 horas y el disolvente fue eliminado en vacío consiguiendo 4-[[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina metil éster, en forma de sal clorhidrato.
Ejemplo R.10
Fenilmetil éster de ácido (S)-\alpha-amino-2-naftalenpropanoico, sal del ácido 4-metilfenilsulfónico
260
Una mezcla de ácido (S)-2-amino-3-(2-naftil)-propanoico (0,40 g), alcohol bencílico (2 ml), y ácido p-toluensolfónico monohidratado (0,42 g) en tolueno (5 ml) fue calentado durante 6 horas en reflujo.
La mezcla de reacción fue enfriada y diluida con éter (10 ml)/hexano (10 ml). El precipitado resultante fue recogido por filtrado y recristalizado a partir de EtOH/éter proporcionando el fenilmetil éster del ácido (S)-\alpha-amino-2-naftalenpropanoico, sal del ácido 4-metilfenilsulfónico (0,73 g), p.f. 174-176ºC.
Ejemplo R.11
Metil éster de 4-[[(2,6-diclorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina, sal clorhidrato
261
Se añadió una solución de 4-bromo-N-(tert-butoxicarbonil)-L-fenilalanina (359 mg) en THF a una solución en THF de una solución de n-BuLi (2,7 ml de solución 1,6 M en hexano) a -78ºC. La mezcla fue agitada durante 2 horas a temperatura ambiente, la reacción fue interrumpida con HCl 1N (15 ml) y extraída con AcOEt. El extracto fue secado sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente fue eliminado en vacío. El residuo fue purificado por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente: hexano \rightarrow AcOEt) consiguiendo N-(tert-butoxicarbonil)-4-[(2,6-diclorofenil)-carbamoil]-L-fenilalanina (95 mg). El compuesto obtenido fue tratado de manera similar a la descrita en el Ejemplo R.4 dando lugar al metil éster de 4-[[(2,6-diclorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina, sal clorhidrato.
Los Ejemplos R.12-46 fueron preparados de manera similar a la descrita en los Ejemplos R. 4-11, y se muestran en las Tablas 6-8.
TABLA 6
Ejemplos R.12 a 26
262
263
TABLA 6 (continuación)
264
TABLA 6 (continuación)
265
TABLA 7
Ejemplos R.27 a 35
266
267
TABLA 7 (continuación)
268 
\newpage
TABLA 8
Ejemplos R.36 a 46
270
271
TABLA 8 (continuación)
272
Ejemplo R.47
3-metil éster del ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (C_{11}H_{18}O_{4}), 36-B
274 
\newpage
El Ejemplo de referencia 47 fue preparado de acuerdo con el Esquema 36: 36-B en el que R^{36-1} es CH_{3}, y la estereoquímica es (1S-cis) del modo siguiente:
La preparación sigue la Preparación 10-A utilizando ácido (1S, 3R)-(-)-canfórico como material inicial. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 11,45 (1 H), 3,69 (3 H), 2,82 (1 H), 2,54 (1 H), 2,24 (1 H), 1,82 (1 H), 1,52 (1 H), 1,27 (3 H), 1,25 (3 H), 0,86 (3 H); análisis calculado para C_{11}H_{18}O_{4}: C, 61,66; H, 8,47; hallado: C, 61,60; H, 8,30.
Ejemplo R.48
1-(1,1-dimetiletil)-3-metil diéster del ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (C_{15}H_{26}O_{4}), 36-C
275
Se preparó el Ejemplo de referencia 48 según el Esquema 36: 36-C en el que R^{36-1} es CH_{3}, R^{36-2} es t-Bu, y la estereoquímica es (1S-cis) del modo siguiente:
A una solución de 3-metil éster de ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (9,69 g), 36-B, en 3 mL de CH_{2}Cl_{2} y 80 mL de ciclohexano se añadió t-butil-2,2,2-tricloroacetimidato (16,18 mL) y 35 \mul de BF_{3}\cdotEt_{2}O. La reacción fue sometida a agitación a temperatura ambiente durante 18 horas y a continuación fue filtrada. El filtrado fue purificado por cromatografía flash de gel de sílice eluyendo con AcOEt-hexano para obtener (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,1-(1,1-dimetiletil)-3-metil diéster del ácido 3-dicarboxílico (12,89 g), 36-C.
Las Propiedades físicas son las siguientes: p.f. = 35-37ºC; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 3,68 (3 H), 2,79 (1 H), 2,53 (1 H), 2,17 (1 H), 1,76 (1 H), 1,24 (3 H), 1,17 (3 H), 0,81 (3 H); análisis calculado para C_{15}H_{26}O_{4}: C, 66,64; H, 9,67; hallado: C, 66,61; H, 9,64.
Ejemplo R.49
1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (C_{14}H_{24}O_{4}), 36-D
276
El Ejemplo de referencia 49 fue preparado de acuerdo con el Esquema 36 en la Preparación de 36-D en el que R^{36-2} es t-Bu y la estereoquímica es (1S-cis) del modo siguiente:
La preparación sigue la de la Preparación 15-D utilizando 36-C, 1-(1,1-dimetiletil)-3-metil diéster del ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico, como material inicial. Las propiedades físicas son las siguientes: p.f. = 95,7-97,5ºC; ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 2,82 (1 H), 2,53 (1 H), 2,13 (1 H), 1,82 (1 H), 1,45 (10 H), 1,29 (3 H), 1,17 (3 H), 0,88 (3 H); análisis calculado para C_{15}H_{26}O_{4}: C, 65,60; H, 9,44; hallado: C, 65,60; H, 9,44.
Ejemplo R.50
1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (C_{21}H_{30}O_{4}), 36-E-1
277
Se preparó el Ejemplo de referencia 50 de acuerdo con el Esquema 36: Preparación de 36-E-1 en la que R^{36-1} es -CH_{2}C_{6}H_{5}, R^{36-2} es t-Bu, y la estereoquímica es (1S-trans) del modo siguiente:
A una solución de 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico 36-D (20,0 g) en 300 mL de CH_{3}CN se añadió bromuro de bencilo (16,01 g) y DIEA (12,1 g). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 22 horas, concentrada en vacío, y diluida con CH_{2}Cl_{2}. La solución fue lavada a continuación con agua, HCl al 10%, agua y salmuera. La capa orgánica fue secada (Na_{2}SO_{4}) y concentrada en vacío. El concentrado fue purificado por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con AcOEt-hexano para obtener 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-cis)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (18,94 g).
Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,34 (5 H), 5,12 (2 H), 2,82 (1 H), 2,51 (1 H), 2,19 (1 H), 1,82 (1 H), 1,44 (10 H), 1,23 (3 H), 1,15 (3 H), 0,78 (3 H); MS (EI) m/z (intensidad relativa) O (M+, O), 181 (64), 180 (64), 179 (17), 166 (22), 155 (16), 153 (15), 109 (18), 92 (15), 91 (99), 57 (40); análisis calculado para C_{21}H_{30}O_{4}: C, 72,80; H, 8,73; hallado: C, 70,76; H, 8,38; N, 0,36.
El producto de la reacción anterior fue combinado con THF (44 mL) y NaH (634 mg) y sometido a reflujo durante 0,5 horas, a continuación fue enfriado, diluido con NaHCO_{3} en solución saturada, y extraído con AcOEt. La capa orgánica fue concentrada obteniendo una mezcla del material inicial y 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico. Estos fueron separados por HPLC sobre una columna (R, R)Whelk-O, 5 x 25 cm, eluyendo con isopropanol al 2% en hexano a 50 mL/minuto. El detector controló 215 nm. El primer pico a los 19 minutos contenía 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-[1-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico 36-E-1 (3,88 g). Las características físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,34 (5 H), 5,12 (2 H), 3,02 (1 H), 2,18 (2 H), 1,98 (1 H), 1,58 (1 H), 1,44 (9 H), 1,08 (3 H), 1,06 (3 H), 0,79 (3 H); MS (FAB) m/z 347 (MH+), 501, 292, 291, 245, 183, 109, 92, 91, 57, 41; HPLC 0,46x25 cm (R, R) columna Whelk-O eluida a 0,5 mL/minuto con 2% isopropanol en hexano, controlando 215 nm, temperatura ambiente = 13,65 minutos.
Ejemplo R.51
1-(1,1,-dimetiletil) éster del ácido (1R-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (C_{21}H_{30}O_{4}), 36-E-2
278
El Ejemplo de referencia 51 fue preparado de acuerdo con el Esquema 36: Preparación de 36-E-2 en la que R^{36-1} es -CH_{2}C_{6}H_{5}, R^{36-2} es t-Bu, y la estereoquímica es (1R-trans) del modo siguiente:
La preparación se basa en la Preparación 36-E-1 utilizando 15-D, 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1R-cis)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico, como material inicial. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,35 (5 H), 5,12 (2 H), 3,02 (1 H), 2,13 (2 H), 1,98 (1 H), 1,58 (1H), 1,44 (9 H), 1,08 (3 H), 1,05 (3 H), 0,78 (3 H); HPLC 0,46x25 cm (R, R) columna Whelk-O eluida a 1,0 mL/minuto con 2% de isopropanol en hexano, controlando 254 nm, temperatura ambiente = 5,54 minutos.
Ejemplo R.52
Ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (C_{17}H_{22}O_{4}), 36-F-1
279
El Ejemplo de referencia 52 fue preparado según el Esquema 36: Preparación de 36-F-1 en la que R^{36-1} es
-CH_{2}C_{6}H_{5}, y la estereoquímica es (1S-trans) del modo siguiente:
Una muestra 36-E-1, del 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (2,95 g), fue disuelta en TFA a 0ºC y a continuación se dejó volver a temperatura ambiente. La solución fue agitada durante 19 horas y a continuación fue concentrada, redisuelta en t-butil metil éter y lavada con una solución saturada de NaHCO_{3}. La capa orgánica fue concentrada en vacío, obteniendo ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico 36-F-1 (2,44 g).
Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,34 (, 5 H), 5,13 (, 2 H), 3,08 (, 1 H), 2,16 (, 2 H), 2,02 (, 1 H), 1,64 (, 1 H), 1,16 (, 3 H), 1,10 (, 3 H), 0,83 (, 3 H); análisis calculado para C17H22O4: C, 70,32; H, 7,64. Hallado: C, 70,94; H, 7,63; N, 0,04.
Ejemplo R.53
Ácido (1R-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (C_{17}H_{22}O_{4}), 36-F-2
280
El Ejemplo de referencia 53 fue preparado de acuerdo con el Esquema 36: Preparación de 36-F-2 en la que R^{36-1} es -CH_{2}C_{6}H_{5}, y la estereoquímica es (1R-trans) del modo siguiente:
La preparación se basa en la Preparación 36-F-1 utilizando 36-E-2, 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1R-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico, como material inicial. Las propiedades físicas son las siguientes:
MS (EI) m/z (intensidad relativa) 290 (M+, 5), 183 (15), 182 (9), 164 (8), 153 (22), 136 (10), 109 (22), 92 (24), 91 (99), 65 (9), 55 (9); análisis calculado para C_{17}H_{22}O_{4}: C, 70,32; H, 7,64. Hallado: C, 70,66; H, 7,74; N, 0,22.
Ejemplo R.54
1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (C_{14}H_{24}O_{4}), 36-G-1
281
El Ejemplo de referencia 54 fue preparado de acuerdo con el Esquema 36: Preparación de 36-G-1 en la que R^{36-2} es t-Bu y la estereoquímica es (1S-trans) del modo siguiente:
Una muestra de 36-E-1, 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (3,27 g), fue disuelta en EtOH (100 mL) y recibió la adición de 5% de paladio sobre carbón (1,0 g) y ciclohexeno (50 mL). La mezcla fue sometida a reflujo durante 4 horas, y a continuación fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La reacción fue filtrada a continuación, y el filtrado fue concentrado en vacío, obteniendo 36-G-1, 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1S-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico (2,45 g). Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 3,05 (1 H), 2,11 (2 H), 1,99 (1 H), 1,60 (1 H), 1,45 (9 H), 1,11 (3 H), 1,10 (3 H), 0,89 (3 H); MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 257 (MH+, 43), 411 (23), 257 (43), 201 (99), 183 (20), 177 (14), 155 (26), 109 (36), 57 (81), 41 (22), 29 (15); análisis calculado para C_{14}H_{24}O_{4}: C, 65,60; H, 9,44. Hallado: C, 65,62; H, 9,42; N, 0,03.
Ejemplo R.55
1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1R-trans)-1,2,2-trimetilciclopentano-1,3-dicarboxílico (C_{14}H_{24}O_{4}), 36-G-2
282
El Ejemplo de referencia 55 fue preparado de acuerdo con el Esquema 36: Preparación de 36-G-2 en la que R^{36-2} es t-Bu y la estereoquímica es (1R-trans), del modo siguiente:
La preparación se basa en la de la Preparación 36-G-1 utilizando 36-E-2, 1-(1,1-dimetiletil) éster del ácido (1R-trans)-[3-(fenilmetoxi)carbonil]-1,2,2-trimetilciclopentano-1-carboxílico, como material inicial. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 3,03 (, 1 H), 2,13 (, 2 H), 1,98 (, 1 H), 1,59 (, 1 H), 1,45 (, 9 H), 1,11 (, 3 H), 1,10 (, 3 H), 0,89 (, 3 H); MS (FAB) m/z (intensidad relativa) 257 (MH+, 35), 411 (19), 279 (14), 257 (35), 201 (99), 183 (18), 155 (26), 109 (35), 57 (74), 41 (19), 29 (12); análisis calculado para C_{14}H_{24}O_{4}: C, 65,60; H, 9,44. Hallado: C, 65,56; H, 9,44; N, 0,18.
\newpage
Ejemplo R.56
Metil éster de 3-bromo-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, sal clorhidrato (C_{17}H_{15}BrCl_{2}N_{2}O_{3}\cdotHCl)
283
El Ejemplo de referencia 56 fue preparado de la manera siguiente:
A una solución de metil éster de 4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina en forma de sal clorhidrato, 37-B-1, (205,7 mg) en ácido acético (5 mL) se añadió un exceso de bromo (5,55 g) en ácido acético (5 mL) y hierro en polvo (416,2 mg). La reacción fue sometida a agitación a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción fue concentrada en vacío y el ácido acético remanente fue eliminado como aceótropo con tolueno. El material crudo fue diluido con agua, se hizo básico con bicarbonato sódico en solución saturada y extraído con AcOEt. El extracto fue purificado por cromatografía flash sobre gel de sílice eluyendo con metanol-cloruro de metileno. El material purificado fue disuelto en metanol saturado con cloruro de hidrógeno y concentrado en vacío, y a continuación fue cristalizado a partir de metanol con AcOEt obteniendo metil éster de 3-bromo-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina en forma de sal clorhidrato (540,4 mg). Las características físicas son las siguientes:
p.f. 200-205; ^{1}H NMR (CD_{3}OD) \delta 7.76 (1 H), 7,64 (1 H), 7,46 (3 H), 7,34 (1 H), 4,38 (1 H), 3,85 (3 H), 3,30 (1 H), 3,15 (1 H); HRMS (FAB) calculado para C_{17}H_{15}BRCL_{2}N_{2}O_{3}+H_{1} 444,9722, hallado 444,9724.
Ejemplo R.57
Metil éster de N-[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-3-yodo-L-alanina (C_{9}H_{16}INO_{4})
284
La Preparación del Ejemplo de referencia 57 está indicada por el Esquema 39 bajo el encabezamiento: Preparación del Ejemplo de referencia 57.
Ejemplo R.58
285 
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El producto aminoéster del Ejemplo de referencia 58 es útil como intermedio sintético (por ejemplo, reactivo 37-B del Esquema 37). El Ejemplo de referencia 58 se prepara del modo siguiente:
A una solución en frío (0-5ºC) de anhídrido metanólico HCl se añadieron 100 g de L-4-nitrofenilalanina (Advanced ChemTech) en porciones a lo largo de unos 15 minutos. La mezcla agitada mecánicamente fue calentada a reflujo suave durante 48 horas. La mezcla se dejó enfriar y luego se filtró a través de un embudo de filtro de vidrio sinterizado, lavando los sólidos recogidos con MeOH caliente hasta que quedaron solamente residuos insolubles. El filtrado fue concentrado en vacío para conseguir el metil éster (120 g) en forma de sólido blancuzco de cera, que se utilizó sin otra purificación.
A la suspensión de metil éster que se ha descrito (87 g, 0,33 moles) en CH_{2}Cl_{2} (1500 mL) a temperatura ambiente, se añadió di-t-butildicarbonato (109 g, 0,50 moles) seguido de la adición gota a gota de Et_{3}N (51 mL, 0,37 moles). Después de 15 minutos, se añadieron de manera adicional Et_{3}N (40mL, 0,29 mol) manteniendo la mezcla ligeramente básica (aproximadamente pH 8). La mezcla de reacción fue agitada 18 horas y se añadió adicionalmente CH_{2}Cl_{2} (1400 mL) y Et_{3}N (15 mL, 0,11 mol). Después de otras 2 horas, la mezcla de reacción fue interrumpida por la adición lenta de MeOH (100 mL), se agitó durante 1 hora, y a continuación se dividió entre CH_{2}Cl_{2} y solución acuosa en frío al 10% de KHSO_{4}. La capa orgánica fue lavada con NaHCO_{3} saturado y salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró en vacío. La cromatografía flash del residuo, utilizando hexano y un gradiente de una mezcla 1:1 de EtOA_{c}/CH_{2}Cl_{2} (25-33%) proporcionó el Boc-metil éster (69 g) en forma de sólido de color blanco. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz; CDCl_{3}) \delta 8,16 (2H), 7,31 (2H), 5,04 (1H), 4,63 (1H), 3,73 (3H), 3,18 (2H), 1,41 (9H); MS (ES+) para C_{15}H_{20}N_{2}O_{6} m/z 325,2 (M+H)^{+}.
Se añadió paladio sobre carbón (10% peso/peso, 1,25 g) a un matraz de hidrogenación Parr en atmósfera de N_{2} y se humedeció cuidadosamente con 100 mL de MeOH/THF (1:1). Se añadió una solución del Boc-metil éster antes descrita (25 g, 77 mmoles) en 400 mL de MeOH/THF (1:1) y la mezcla fue sometida a agitación en un aparato de hidrogenación en atmósfera de hidrógeno (20 psi) durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue filtrada a través de una base de Celite, y los sólidos fueron lavados varias veces con MeOH. Los filtrados combinados fueron concentrados en vacío, consiguiendo el derivado de 4-aminofenilalanina (22,7 g) que se utilizó sin otra purificación. Las propiedades físicas son las siguientes: ^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,89 (2H), 6,61 (2H), 4,96 (1H), 4,50 (1H), 3,69 (3H), 2,95 (2H), 1,41 (9H); MS (ES+) para C_{15}H_{22}N_{2}O_{4} m/z 295,2 (M+H)^{+}.
Una solución en frío (0-5ºC) de cloruro de 2,6-diclorobenzoílo (11,1 mL, 77,5 mmoles) en 125 mL de THF se trató gota a gota con una solución del derivado de 4-aminofenilalanina descrito anteriormente (22,7 g, 77,1 mmoles) y Et_{3}N (16 mL, 115 mmoles) en 125 mL de THF. La mezcla de reacción se calentó a temperatura y se sometió a agitación otras 18 horas adicionales. La mezcla fue diluida con EtOAc (2 L) y a continuación se lavó con HCl 1N, H_{2}O, NaOH 1N y salmuera. El extracto orgánico fue secado (Na_{2}SO_{4}), filtrado, y concentrado en vacío, consiguiendo el producto en crudo en forma de un sólido de color amarillo pálido. Este material fue recristalizado a partir de acetona/hexanos (aproximadamente 1:1) para conseguir la amida (30,8 g) en forma de sólido cristalino. Las características físicas son las siguientes: p.f. 192,2-193,1ºC; IR (mull) 3305, 1747, 1736, 1690, 1665, 1609, 1548, 1512, 1433, 1414, 1325, 1277, 1219, 1171, 781 cm^{-1}; ^{1}H NMR (300 MHz; CDCl_{3}) \delta 7,57 (2H), 7,34 (4H), 7,14 (2H), 4,98 (1H), 4,60 (1H), 3,74 (3H), 3,11 (2H), 1,42 (9H); MS (ES+) para C_{22}H_{24}Cl_{2}N_{2}O_{5} m/z 467,0 (M+H)^{+}.
A 650 mL de HCl 4N anhidro en dioxano a temperatura ambiente se añadió la amida antes descrita (30,6 g, 65,5 mmoles) en porciones, y la mezcla resultante fue agitada hasta que todos los sólidos se disolvieron (aproximadamente 1 hora). Los volátiles fueron eliminados en vacío consiguiendo un sólido de color amarillo pálido que fue dividido entre agua (500 mL) y éter (1 L). La capa de agua fue separada y concentrada en vacío aproximadamente a 200 mL. La solución acuosa fue congelada y liofilizada consiguiendo el producto aminoéster del Ejemplo de referencia 58 (25,6 g) en forma de sólido de color amarillo pálido. Las características física son las siguientes: [\alpha]^{25}_{D} = +5 (c 1, MeOH); IR (mull) 3244, 3186, 3112, 1747, 1660, 1604, 1562, 1539, 1516, 1431, 1416, 1327, 1273, 1243, 799 cm^{-1}; ^{1}H NMR (300 MHz; CD_{3}OD) \delta 7,69 (2H), 7,45 (3H), 7,29 (2H), 4,34 (1H), 3,83 (3H), 3,21 (2H); ^{13}C NMR (300 MHz; CD_{3}OD) \delta 169,0, 163,9, 137,8, 136,08, 131,8, 131,0, 130,3, 129,7, 127,9, 120,6, 53,8, 52,3, 35,4; MS (ES+) para C_{17}H_{16}Cl_{2}N_{2}O_{3} m/z 367,1 (M+H)^{+}.
Ensayos biológicos Ensayo de adherencia celular endotelial Jurkat
El siguiente ensayo estableció la actividad de los presentes compuestos en la inhibición de la adhesión de células mediada por \beta_{1} en un sistema in vitro representativo. Este ensayo mide las interacciones adhesivas de una línea de células T, Jurkat, que se conoce que expresa la integrina \alpha_{4}\beta_{1}, a monocapas endoteliales en presencia de compuestos de prueba. Los compuestos de prueba fueron añadidos en concentraciones crecientes a células T y a continuación la mezcla de compuesto de células T fue añadida a monocapas de células endoteliales simuladas IL-1. Las placas fueron incubadas, lavadas y el porcentaje de células adheridas fue cuantificado. El presente ensayo demuestra de manera directa la actividad inhibitoria de adhesión de las células y la actividad modulatoria de la adhesión de los compuestos. Se adquirieron células endoteliales de vena umbilical humana de la firma Clonetics (San Diego, CA.) con el número de paso 2. Las células fueron cultivadas en recipientes previamente recubiertos con gelatina de piel porcina al 0,5% (Sigma, St. Louis MO.) en medio EGM-UV (Clonetics, San Diego, CA) suplementado con suero bovino fetal al 10%. Las células son realimentadas cada 2-3 días, alcanzando confluencia en los días 4 a 6. Las células son controladas para el antígeno factor VIII y los resultados muestran que, en el paso 12, las células son positivas para este antígeno. Las células endoteliales no se utilizan después del paso 6. La línea de células T Jurkat fue obtenida de la American Type Tissue Culture Collection (Rockville, MD) y las células fueron cultivadas en RPMI conteniendo 10% de suero fetal de vaca. Las células fueron lavadas dos veces en Solución Salina Equilibrada de Hank (HBSS) y resuspendidas en Medio de Eagle Mínimo de Dulbecco (DMEM) conteniendo 2,5 mg/ml de Albúmina de Suero Humano (HSA). Las células Jurkat (1x10^{6} células/ml) fueron sometidas a tinción con 10 ng/ml BCECF-AM (Molecular Probes, Eugene, OR) en HBSS sin rojo fenol. Las células fueron cargadas con BCECF durante 60 minutos en la oscuridad a 37ºC, lavadas 2 veces, y resuspendidas en una solución de DMEM-HSA.
Monocapas endoteliales confluentes, cultivadas en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos, fueron estimuladas durante 4 horas a 37ºC con 0,1 ng/ml (\sim50 U/ml) recombinante IL-1 (Amgen, Thousand Oaks, CA). Después de esta incubación, las monocapas fueron lavadas dos veces con HBSS y se añadieron 0,1 ml de solución DMEM-HSA. Las células Jurkat (5 x 10^{5} células) fueron combinadas con la concentración apropiada del compuesto de prueba y se añadieron 0,1 ml de la mezcla de compuesto de células Jurkat a las monocapas de células endoteliales. De modo general, se comprobaron concentraciones 100, 20, 5 y 1,25 \muM del compuesto. Estas concentraciones son ajustadas de modo descendente para análogos hallados o que se suponen de mayor potencia. Las placas fueron colocadas sobre hielo durante 5 minutos, permitiendo que las células Jurkat se depositaran, y las placas fueran incubadas a 37ºC durante 20 minutos. Después de esta incubación, las monocapas fueron lavadas dos veces con PBS conteniendo 1 mM de cloruro cálcico y 1 mM de cloruro magnésico y las placas fueron leídas utilizando Millipore Cytofluor 2300 (Marlboro, MA.). Se midió la fluorescencia en cada pocillo en forma de Unidades de Fluorescencia Arbitrarias y se ajustó el porcentaje de adherencia en ausencia de compuesto a 100% y se calculó el % de adherencia en presencia del compuesto. También se fijaron monocapas en paraformaldehído al 3% y se evaluaron microscópicamente para verificar la adherencia. Este procedimiento es una modificación de un método anteriormente publicado (Cardarelli y otros, J. Biol. Chem. 269:18668-18673 (1994)).
Ensayo Jurkat-CS-1
El péptido derivado de CS-1, CLHPGEILDVPST, y el péptido de control entremezclado, CLHGPIELVSDPT, se sintetizaron en un sintetizador Beckman 990 utilizando metodología t-Boc. Los péptidos fueron inmovilizados sobre placas de microtitulación utilizando el enlazador heterobifuncional de éster de ácido 3-(2-piridilditio)propiónico N-hidroxisuccinimida (SPDP) según informe de Pierschbacher y otros, Proc. Natl. Acad. USA, 80:1224-1227 (1983). Las placas de microtitulación fueron dotadas de un recubrimiento de 20 \mug/ml HSA durante 2 horas a temperatura ambiente, fueron lavadas una vez con PBS y derivatizadas con 10 \mug/ml SPDP durante 1 hora. Después del lavado, se añadieron 100 \mul de una solución de péptido que contenía 100 \mug/ml de cisteína que había sido disuelta recientemente a los pocillos, y se dejó reticular en las placas durante una noche a 4ºC. El péptido no unido fue eliminado de las placas por lavado con PBS. Para bloquear los lugares sin reacción, las placas son dotadas de recubrimiento de 100 \mul de una solución de 2,5 mg/ml BSA en PBS durante 1 hora a 37ºC. Se mezclaron 100 \mul de células Jurkat (2,5 x 10^{6} células/ml) en DMEM plus BSA (2,5 mg/ml) con una concentración apropiada del compuesto a comprobar y la mezcla fue añadida a platillos con recubrimiento de péptido y se incubaron durante 1 hora a 37ºC. De modo general, las concentraciones de 100, 20, 5 y 125 \muM del compuesto fueron sometidas a prueba. Las concentraciones del compuesto fueron ajustadas en sentido descendente para compuestos que se creía o se había observado que eran más potentes.
Después de esta incubación, las placas fueron lavadas una vez con PBS y las células pegadas fueron fijadas con paraformaldehído al 3% en PBS y tintadas con azul de toluidina al 0,5% en formaldehído al 3,7%. Las células fueron tintadas durante una noche a temperatura ambiente y la densidad óptica de 590 nm de las células tintadas con azul de toluidina fue determinada utilizando espectrofotómetro de trayectoria vertical para cuantificar el pegado (VMAX Kinetic Microplate Reader, Molecular Devices, Menlo Park, CA). Este procedimiento es una modificación de un método previamente publicado (Cardarelli y otros, J. Biol. Chem., 269:18668-18673 (1994) y Cardarelli y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83:2647-2651 (1986)).
Los compuestos preferentes son los que tienen valores IC_{50} bajos en el ensayo Jurkat EC o en el ensayo Jurkat-CS-1 descritos anteriormente o que tienen, como mínimo, actividad moderada en ambos ensayos. Todos los compuestos de la presente invención tienen una actividad menor de 50\muM en el ensayo Jurkat CS-1 o menos de 500\mum en el ensayo Jurkat EC. Los compuestos con actividad en el ensayo Jurkat CS-1 tienen preferentemente valores IC_{50} menores de 1\muM, más preferentemente menos de 0,5\muM, y de manera más preferente menos de o igual a 0,08\muM. Los compuestos con actividad en el ensayo de Jurkat EC tienen preferentemente valores IC_{50} menores de 10\muM, más preferentemente menores de 5\muM, de modo más preferente menos que o igual a 0,8\muM.
En el ensayo Jurkat EC, las gamas de valores IC_{50}(\muM) se han indicado A, B, y C y en el ensayo Jurkat CS-1, las gamas de valores IC_{50} se han indicado D, E, y F. Estas gamas son las siguientes:
Jurkat EC: 5 \leq A < 10, 0,8 < B < 5, y C \leq 0,8
Jurkat CS-1: 0,5 \leq D < 1, 0,08 < E < 0,5, y F \leq 0,08
La tabla siguiente muestra los valores IC_{50} para compuestos seleccionados de la presente invención en el ensayo de Jurkat EC y el ensayo Jurkat CS-1. Las gamas son las que se han descrito anteriormente.
Datos biológicos adicionales in vitro
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Actividad de los ácidos canfóricos en un modelo de pleuresía en dextrano
Ciertos compuestos de la presente invención fueron sometidos a prueba con un modelo de pleuresía Dextran®.
Justificación para el desarrollo de un antagonista \alpha_{4}\beta_{1} de integrina para tratar enfermedades inflamatorias
El VLA-4, miembro de la familia de integrina \beta1 de moléculas de adhesión, se cree que juega un papel crítico en varios tipos de procesos de enfermedades inflamatorias al ayudar la adherencia de leucocitos a la molécula de adherencia de célula vascular (VCAM-4), y el dominio CS-1 de fribronectina en matriz de tejidos extracelular (Elices MJ, Osborn L, Takada Y, Crouse C, Luhowskyj S, Hemler M, Lobb RR.
El VCAM-1 sobre endotelio activado interacciona con la integrina VLA-4 de leucocitos en lugar que se diferencia del lugar de unión de VLA-4-fibronectina. Cell; 60: 577-584, 1990, Humphries MJ, Akiyama SK, Komoriya A, Olden K, Yamada KM. Identification of an alternatively-spliced site in human plasma fibronectin that mediates cell type-specific adhesion. J Cell Biol; 103: 2637-2647, 1986, Wayner EA, Garcia-Pardo A, Humphries MJ, McDonald JA, Carter WG. Identification and characterization of the T lymphocyte adhesion receptor for an alternative cell attachment domain (CS-1) in plasma fibronectin. J Cell Biol; 109: 1321-1330, 1989, Guan J-L, Hynes RO. Lymphoid cells recognize an alternatively-spliced segment of fibronectin via the integrin \alpha_{4}\beta_{1}. Cell; 60: 53-61, 1990). De los tipos de células que expresan VLA-4, el mayor énfasis se ha aplicado a eosinófilos, linfocitos, y monocitos. La validación del papel de VLA-4 se ha basado predominantemente en la utilización de anticuerpos anti-VLA-4 que se ha observado que suprimen las respuestas de hipersensibilidad de tipo retardado (Issekutz TB. Dual inhibition of VLA-4 and LFA-1 maximally inhibits cutaneous delayed-type hypersensitivity-induced inflammation. Am J Pathol; 143: 1286-1293, 1993, Scheynius A, Camp RL, Puré E. Reduced contact sensitivity reactions in mice treated with monoclonal antibodies to leukocyte function-associated molecule-1 and intercellular adhesion molecule-1. J Immunol; 150: 655-663, 1993, Ferguson TA, Kupper TS. Antigen-independent processes in antigen-specific immunity. J Immunol; 150: 1172-1182, 1993, Chisholm PL, Williams CA, Lobb RR. Monoclonal antibodies to the integrin \alpha-4 subunit inhibit the murine contact hypersensitivity response. Eur J
Immunol; 23: 682-688, 1993, Elices MJ, Tamraz S, Tollefson V, Vollger LW. The integrin VLA-4 mediates leukocyte recruitment to skin inflammatory sites in vivo . Clin Exp Rheumatol; 11 (Suppl 8) S77-80), 1993, experimental allergic encephalomyelitis (Yednock TA, Cannon C, Fritz LC, Sanchez-Madrid F, Steinman LM, Karin N. Prevention of experimental autoimmune encephalomyelitis by antibodies against \alpha_{4}\beta_{1} integrin. Nature; 356: 63-66, 1992, Canella B, Raine CS. The VCAM-1/VLA-4 pathway is involved in chronic lesion expression in multiple sclerosis (MS). J Neuropathol Exp Neurol; 52: 311, 1993), HIV-induced encephalitis (Sasseville VG, Newman W, Brodie SJ, Hesterberg P, Pauley D, Ringler DJ. Monocyte adhesion to endothelium in simian immunodefi-ciency virus-induced AIDS encephalitis is mediatedby vascular cell adhesion molecule-1/\alpha_{4}\beta_{1} integrin reactions. Am
J Pathol; 144: 27-40, 1994), pulmonary inflammation and airway hyperreactivity in asthma (Abraham WM, Sielczak MW, Ahmed A, Cortes A, Lauredo IT, Kim J. Pepinsky, B, y otros. \alpha_{4}-integrinsmediate antigen-
induced late bronchial responses and prolonged airway hyperresponsiveness in sheep. J Clin Invest; 93: 776-787, 1994, Pretolani M, Ruffié C, Roberto LapaeSilva J, Joseph D, Lobb RR, Vargaftig BB. Antibody to very late activation antigen 4 prevents antigen-induced bronchial hyperreactivity and cellular infiltration in the guinea-pig airways. J Exp Med; 180: 795-805, 1994), experimental models of autoimmune-mediated diabetes (Yang X-D, Karin N, Tisch R, Steinman L, McDevitt HO. Inhibition of insulitis and prevention of diabetes in non-obese diabetic mice by blocking L-selectin and very late antigen 4 adhesion receptors. Proc Natl Acad Sci USA; 90: 10494-10498, 1993, Burkly LC, Jakubowski A, Hattori M. Protection against adoptive transfer of autoimmune diabetes medicated through very late antigen-4 integrin. Diabetes; 43: 529-534, 1994), and experimental colitis (Podolsky DK, Lobb R, King N, Benjamin CD, Pepinsky B, Sehgal P, y otros. Attentuation of colitis in the cotton-top Tamarin by anti-\alpha4 integrin monoclonal antibody. J Clin Invest; 92: 372-380 1993). Dado que los eosinófilos representan un componente importante del influjo de células inflamatorias en tejidos de pulmón asmático, los inventores han desarrollado un modelo inflamatorio agudo simple de infiltración de eosinófilos dependientes de integrina VLA-4 que se puede utilizar para identificar los antagonistas de VLA-4; dichos compuestos deben tener un valor potencial en el tratamiento de asma y también otras enfermedades en las que tiene un papel el VLA-4.
Materiales y Métodos Animales, alojamientos y pruebas virales
Ratones C57BL/6 (Jackson,Bar Harbor, ME;), de 6-8 semanas, con pesos de 20-25g fueron utilizados en toda la prueba. Todos los ratones fueron aclimatados durante un mínimo de 7-14 días después de llegada y se mantuvieron bajo temperatura controlada (20-22ºC) y un ciclo de luz diaria de 12 horas (desde las 6 de la mañana a las 6 de la tarde). Los ratones fueron alojados en estanterías con flujo laminar y se compararon cada dos semanas en cuanto a infecciones virales (virus de hepatitis de ratón, virus mínimo de ratón, parvovirus huérfano de roedor, Sendai) con equipos de la firma Oreganon Teknika (Durham, NC) utilizando ensayos inmunoabsorbentes establecidos relacionados con enzimas establecidas. Los ratones con resultados positivos de la prueba de cualquiera de los anteriormente citados se retiraron del estudio. Todos los ratones fueron alimentados con pienso estándar de laboratorio (Upjohn Lab Rodent Irradiated Mouse Chow, #5011-3, PMI Feeds, St. Louis, MO) y con agua de beber acidificada, en la cantidad deseada (pH 5,0).
Inducción de inflamación por inyección intrapleural de dextrano
Se llevaron a cabo inyecciones intrapleurales utilizando una aguja 27G cortada a 3-4 mm que se transformó en roma por medio de lima. Las inyecciones se realizaron insertando la aguja entre las costillas medio-intercostales del lado derecho de la cavidad torácica.
Se inyectó dextrán (Peso molecular 5-40x10^{6}, St Louis, MO.) en forma de solución salina al 10% en un volumen de 100\mul/ratón. Se tuvo cuidado en evitar el sangrado en el lugar de la inyección en el que se cortaron los músculos intercostales para facilitar una inserción suave de la aguja.
Cuantificación de respuestas de leucocitos a inflamación pleural
Se recogieron leucocitos pleurales del modo siguiente: 4 horas después de inducción, se retiró exudado pleural inflamatorio por lavado con 2 x 1,0 ml HBSS (Gibco, Grand Island, NY) libre de Ca^{++}/Mg^{++} conteniendo 45 mg EDTA/100 ml HBSS, 4ºC. Los contajes de leucocitos totales fueron realizados por medio de hemocitómetro después de lisis de eritrocitos en ácido acético 2% en tampón PBS; se resuspendieron pastillas de exudado de leucocitos en suero para preparaciones de citospina y se sometieron a tinción (Diff Quik, Baxter Healthcare, McGraw Park, IL) para contajes diferenciales de leucocitos (neutrófilos, eosinófilos, y leucocitos mononucleares).
Las cavidades pleurales de ratones que no recibieron inyección intrapleural, ni inyección salina fueron lavadas y se contaron las células de igual manera para estimar la línea base o contajes de leucocitos pleurales inducidos por solución salina respectivamente.
Administración de medicamentos
Todos los medicamentos fueron disueltos en PBS y se ajustó al pH 7,5 con NaOH. Cada uno de los medicamentos fue administrado por vía intravenosa a través del seno retroorbital y a intervalos de horarios (0-3 horas) empezando desde el tiempo "0" tal como se ha indicado. Los ratones fueron controlados cuidadosamente en cuanto a efectos secundarios; no se observó ninguno para la serie de compuestos que se indican.
Se comprobaron los siguientes análogos de ácido canfórico en cuanto a sus efectos inhibitorios sobre infiltración de leucocitos inducido por dextrán: Ejemplos 4, 12, 54, 63, 166, 93, 180, 181, 183, 184, 217, se administró ácido calfórico o PBS (solución salina) por vía intravenosa como control. Se utilizó la inhibición de infiltración de eosinófilos, que se había suprimido por anti-alfa-4 Mab (PS/2, 50%), como representativo de actividad antagonista de VLA-4 de los ácidos canfóricos sometidos a prueba. También se han indicado los datos para los neutrófilos.
Resultados
Respuesta de leucocitos pleurales al dextrán. Los contajes de leucocitos pleurales totales fueron 255x10^{4}(+/-16 SEM) células en la cavidad pleural normal; de la población de leucocitos pleurales normales, todas las células fueron mononucleares (se observó una respuesta similar después de inyección intrapleural salina). Cuatro horas después de la inyección intrapleural de dextrán, los contajes de leucocitos pleurales totales aumentaron a 719x10^{4}(+/-67 SEM) y comprendían 36,8x10^{4}(+/-4,1 SEM) eosinófilos, 292x10^{4}(+/-25 SEM) neutrófilos y 391x10^{4}(+/-48 SEM) leucocitos mononucleares.
La inhibición de neutrófilos y eosinófilos (%\Delta) se indican por A, B y C de acuerdo con las siguientes gamas de valores: A \leq -50, -50 < B \leq -10, -10 < C \leq 0
Inhibición de la infiltración de leucocitos pleurales por dextrán mediante ácidos canfóricos
290
# Compuestos a las 0h, +1h (x2 iv) ó 0h, +1h, +2h, +3h (x4 iv) con respecto a dextrán.
P< 0,05 * Control tratado con medicamentos en relación con ácido canfórico o PBS.

Claims (12)

1. Compuesto de fórmula [I]:
291
en el que
n es un entero de valor 0 ó 1,
R^{1} es un átomo de hidrógeno o grupo metilo,
R^{2} es un grupo de fórmula: -CN, -COOH,
-(C_{1-6} alquileno)OH, -CH_{2}O(C_{1-6} alquilo),
-(C_{1-6} alquileno)COOH,
-CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo),
-CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)COOH, -(C_{2-7} alquenileno)COOH,
-CO(C_{1-6} alquileno)COOH, -CO(C_{2-7} alquenileno)COOH,
-CO(C_{1-6} alquileno)O(C_{1-6} alquilo),
-CO(C_{1-6} alquileno)CO(C_{1-6} alquilo),
-CONH(C_{1-6} alquilo), -CONHO(C_{1-6} alquilo),
-CONH(C_{1-6} alquileno)COOH, -CONH_{2},
-CONH(C_{3-7} cicloalquilo),
292
-CONHOCH_{2}Ph, -CONH(C_{1-6}alquileno)CN,
-COO(C_{1-6} alquilo), -CH_{2}O(C_{1-6} alquileno)CONH_{2},
-CONH(C_{1-6} alquileno)CONH_{2}, -CONHOH,
-NHCOOCH_{2}Ph,
2930
293
R^{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo metilo,
X es un grupo metileno o un grupo de fórmula: -CO-,
R^{4} es un átomo de hidrógeno o un grupo C_{1-6} alquilo,
R^{5} es un grupo de fórmula: -COOH o un éster o amida del mismo, -(C_{1-6}alquileno)COOH o un éster o una amida del mismo, -(C_{1-7} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -(C_{1-7} alquileno)OH, -COO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquilo), o -CONH_{2},
R^{6} es un grupo arilo monocíclico o bicíclico substituido o no substituido, un grupo heteroarilo monocíclico o bicíclico substituido o no substituido, un grupo alquil arilcarbonilamino-C_{1-6} monocíclico o bicíclico substituido o no substituido, un grupo carbonilo heterocíclico alifático monocíclico o bicíclico substituido o no substituido, un grupo 9-fluorenilmetiloxicarbonilamino-C_{1-6} alquilo, un grupo 3-tosilguanidino-C_{1-6} alquilo,
294
con la condición de que R^{1} y R^{3} deben ser distintos y también con la condición de que cuando R^{2} o R^{6} son una fracción de la fórmula -COOH o contienen una fracción de la fórmula -COOH, entonces se incluyen un éster o una amida farmacéuticamente aceptables del mismo, y asimismo con la condición de que se excluyen el metil éster del ácido [1S-[1\alpha,(R*),3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-piracinebutanoico o el metil éster del ácido [1S-[1\alpha,(R*),3\alpha]]-\beta-[[(3-carboxi-2,2,3-trimeticiclopentil)carbonil]amino]-4-(2,6-diclorobenzoíl)-\gamma-oxo-1-piracinebutanoico; o bien
una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
2. Compuesto, según la reivindicación 1, que es un compuesto de fórmula [I-1]:
295
en la que n, R^{1} a R^{6} y X son los definidos anteriormente.
3. Compuesto, según la reivindicación 1 ó 2, que es un compuesto de fórmula [I-2]:
296
en el que n, R^{1} a R^{4}, R^{6} y X son los definidos anteriormente y R^{5} es un grupo de fórmula: -COOH, -(C_{1-6} alquileno)COOH, -(C_{1-7} alquileno)O(C_{1-6} alquilo), -(C_{1-7} alquileno)OH, -COO(C_{1-6} alquilo), -CONH(C_{1-6} alquilo), o
-CONH_{2}.
4. Compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 y 3, en el que R^{6} es un substituyente de fórmula:
297
en la que,
R^{7}, que se presenta una o varias veces y que puede ser igual o distinto en cada caso, es -H, -OH, -NO_{2}, -NH_{2}, -C_{1}-C_{5} alquilo, -F, -Cl, -Br, -I, -COOH, -COO(C_{1-6}alquilo), -O(C_{1}-C_{8} alquilo), CONH(C_{1-6} alquileno)COOH, -OCH_{2}(C_{3}-C_{7} cicloalquilo) o un substituyente de fórmula
298
R^{8}, que se presenta una o varias veces y que puede ser igual o distinto en cada caso, es -H, -OH, -NH_{2}, -NO_{2}, -C_{1}-C_{7} alquilo, -F, -Cl, -Br, -I, -CF_{3}, fenilo, o -O(C_{1-6} alquilo);
R^{9} es seleccionado del grupo de fórmula: -H, -C_{1}-C_{5} alquilo, -C_{3}-C_{7} cicloalquilo, -(C_{1}-C_{6} alquileno)arilo, arilo, o un substituyente de la fórmula:
299
en la que R^{10} se presenta una o varias veces y que puede ser igual o distinto en cada caso, siendo -H, -F, -Cl, -Br, -I, -NO_{2}, -C_{1-6} alquilo o -O(C_{1-6} alquilo);
R^{11} se selecciona de un grupo de fórmula:
300
R^{12}, que se presenta una o varias veces y que puede ser igual o distinto en cada caso, es -H, -CF_{3}, -OCH_{3}, -F, -Br, -Cl o -I;
a condición de que
R^{7} es la fórmula
301
R^{9} es distinto de hidrógeno.
5. Compuesto, según las reivindicaciones 1, 2, 3 ó 4, en el que R^{6} es
302
en el que
Y es un átomo de hidrógeno o un átomo de cloro.
6. Compuesto, según las reivindicaciones 1, 2, 3, 4 ó 5, en el R^{2} es un grupo de fórmula: -COOH o bien un éster o una amida del mismo, -CONHCH_{2}COOH, -CONHOCH_{2}Ph o -CONHCH_{2}CONH_{2}.
7. Compuesto, según la reivindicación 1, 2 ó 3, en el que
R^{1} es -CH_{3},
R^{2} es -COOH, -CONHCH_{2}COOH, CONHOCH_{2}Ph o -CONHCH_{2}CONH_{2},
R^{3} es hidrógeno,
X es -CO-
R^{4} es hidrógeno,
R^{5} es -COOH,
n es 1, y
R^{6} es
303
en el que R^{7} es
304
en la que R^{8} está substituido 2 ó 3 veces y es -Cl.
8. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto se selecciona entre:
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-(fenilmetil)-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2-naftil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(ciclohexil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2-etil)hexil]-L-tirosina
1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(2,4-diclorofenil)metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(4-clorofenil)metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-benzil-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(4-metoxifenil)metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-1-[(2-naftil)metil]-L-histidina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-benciloxi-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino)]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-hidroxi-3-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-nitro-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-nitro-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-3-hidroxi-4-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(ciclohexil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2-piridil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-acetilamino-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-dimetilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-difluorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-benzoílamino-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,5-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,5-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(3-benzoilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(3-nitrobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,4,6-triclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,4,6-triclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-metoxibenzoíl)amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,5-dibromobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,5-dibromobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(1-metil-2-indenil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-nitrobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[2,5-bis(trifluorometil)benzoíl]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[2,5-bis(trifluorometil)benzoíl]amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-cloro-6-metilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-cloro-6-metilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[2-(trifluorometil)benzoíl]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-yodobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-bromobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(3,4-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(3,4-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(4-fenilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(1-naftoil)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-clorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(fenilacetil)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(4-heptilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-naftoil)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(3-clorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(4-clorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-furoil)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-fluorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-isovalerilamino-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(1-fluorenil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-metilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(i-butiloxi)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-metilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-hidroxibenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-aminobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,3-dihidro-3-isoquinolil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,6-diclorofenil)sulfonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(4-metilfenil)sulfonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,6-diclorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[3-(aminocarbonil)-2,2,3-trimetilciclopentil]-carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-(dimetilaminocarbonil-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-metoxiaminocarbonil-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[(3-aminocarbonil-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[N-acetil-N-[(2,6-diclorofenil)metil]amino]-L-fenilalanina
(1S-[1\alpha, 3\alpha(R*)]-N-[[(3-[[(5-amino-1-carboxipentil)amino]-carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobencil)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
\newpage
(1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
sal disódica de (1S-[1\alpha, 3\alpha(E)]]-N-[[3-(2-carboxietenil)-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[3-[(carboximetoxi)metil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-ciano-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1R-cis)-N-[(3-carboxi-1,2,2-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
(1S-[1\alpha, 3\alpha(R*)]-N-[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)-metil]-L-tirosina
(1R-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina
[1S-[1\alpha(R*), 3\alpha]]-\alpha-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)-arbonil]amino]-6-cloro-5-[(2,6-diclorofenil)metoxi]-2-ácido piridinpropanoico
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2-cloro-3-piridinil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,6-dicloro-3-piridinil)carbonil]amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2-metoxi-6-cloropiridin-3-il)carbonil]amino]-L-fenilalanina
[1S-[1\alpha, 3\alpha](R*)]]-N-[[[3-[[(1-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)-amino]-L-fenilalanina
sal de monolitio de [1S-[1\alpha, 3\alpha](S*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
sal monosódica de [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]]-N-[3-[[2-(aminocarbonil)-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[3-[[(2-carboxietil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
sal monosódica de [1S-[1\alpha, 3\alpha (R*)]]-N-[3-[[2-[(metilamino)carbonil]-1-pirrolidinil]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[3-[[(2-cianoetil)-amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[[(fenilmetoxi)amino]carbonil]ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
(1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[3-[(hidroxiamino)-carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[[(1,1-bifenil)-4-il]amino]carbonil]-L-fenilalanina
(1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(4-clorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
(1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(2-trifluorometilfenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
(1S-cis)-[[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[[(2,4,6-triclorofenil)amino]carbonil]-L-fenilalanina
\newpage
(1S-cis)-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-N-[[2,2,3-trimetil-3-[(4-morfolinil)carbonil]ciclopentil]carbonil]-L-fenilalanina
metil éster de (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-cloro-5-trifluorometilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2-cloro-5-trifluorometilbenzoíl)amino]-L-fenilalanina
[1S-[1\alpha, 3\alpha (1S*, 3R*)]]-N-[[3-[[[(3-carboxi-1, 2,2-trimetilciclopentil)amino]carbonil]amino]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina.
9. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es seleccionado entre el grupo que consiste en (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)-carbonil]-1-[(3,4-diclorofenil)metil]-L-histidina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-L-tirosina,(1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-O-[(2,6-diclorofenil)metil]-3-nitro-L-tirosina, (1S-cis)-N-[(3-carboxi-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil]-4-[[(2,4,6-triclorofenil)carbonil]-amino]-L-fenilalanina, (1S-cis)-N-[[3-[[(2-amino-2-oxoetil)amino]carboni]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]L-fenilalanina,(1S-cis)-N-[[3-[[(carboximetil)amino]carbonil]-2,2,3-trimetilciclopentil]carbonil]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina, y (1S-cis)-N-[(3-ciano-2,2,3-trimetilciclopentil)carbonil)]-4-[(2,6-diclorobenzoíl)amino]-L-fenilalanina.
10. Compuesto farmacéutico, que comprende: un compuesto, tal como se ha indicado en las reivindicaciones 1 a 9, y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.
11. Utilización de un compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para la preparación de un compuesto farmacéutico para el tratamiento o prevención de estados mediados por adherencia \alpha_{4}\beta_{1} en humanos.
12. Utilización, según la reivindicación 11, en la que dicho estado se selecciona entre el grupo que consiste en artritis reumatoide, asma, estados alérgicos, rechazo de aloinjertos, psoriasis, eccema, dermatitis de contacto y otras enfermedades inflamatorias de la piel, estados inflamatorios e inmunoinflamatorios incluyendo estados inflamatorios oftálmicos, enfermedades inflamatorias del vientre, ateroesclerosis, y colitis ulcerante.
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Families Citing this family (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6093696A (en) * 1997-05-30 2000-07-25 Celltech Therapeutics, Limited Tyrosine derivatives
US6583139B1 (en) 1997-07-31 2003-06-24 Eugene D. Thorsett Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6939855B2 (en) 1997-07-31 2005-09-06 Elan Pharmaceuticals, Inc. Anti-inflammatory compositions and method
US6559127B1 (en) 1997-07-31 2003-05-06 Athena Neurosciences, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6492421B1 (en) 1997-07-31 2002-12-10 Athena Neurosciences, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6423688B1 (en) 1997-07-31 2002-07-23 Athena Neurosciences, Inc. Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6362341B1 (en) 1997-07-31 2002-03-26 Athena Neurosciences, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6489300B1 (en) 1997-07-31 2002-12-03 Eugene D. Thorsett Carbamyloxy compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US7030114B1 (en) 1997-07-31 2006-04-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6291453B1 (en) 1997-07-31 2001-09-18 Athena Neurosciences, Inc. 4-amino-phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
MY153569A (en) 1998-01-20 2015-02-27 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Inhibitors of ?4 mediated cell adhesion
US6329372B1 (en) 1998-01-27 2001-12-11 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
ES2226413T3 (es) 1998-02-26 2005-03-16 Celltech Therapeutics Limited Derivados de fenilalanina como inhibidores de alfa-4 integrinas.
US6521626B1 (en) 1998-03-24 2003-02-18 Celltech R&D Limited Thiocarboxamide derivatives
GB9811159D0 (en) 1998-05-22 1998-07-22 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9811969D0 (en) * 1998-06-03 1998-07-29 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9812088D0 (en) * 1998-06-05 1998-08-05 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9814414D0 (en) 1998-07-03 1998-09-02 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9821061D0 (en) 1998-09-28 1998-11-18 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9821222D0 (en) 1998-09-30 1998-11-25 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9825652D0 (en) 1998-11-23 1999-01-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9826174D0 (en) 1998-11-30 1999-01-20 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
ES2220140T3 (es) * 1998-12-22 2004-12-01 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Inhibidores de la adhesion mediada de celulas por alfa 4 beta 1 (a4b1).
US6407066B1 (en) 1999-01-26 2002-06-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Pyroglutamic acid derivatives and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
PT1154993E (pt) * 1999-02-18 2005-01-31 Hoffmann La Roche Derivados de tioamida
ATE299861T1 (de) * 1999-04-19 2005-08-15 Coelacanth Corp Ppar-(gamma) agonisten zur behandlung von type ii diabetes
US6518283B1 (en) 1999-05-28 2003-02-11 Celltech R&D Limited Squaric acid derivatives
PL354063A1 (en) * 1999-08-13 2003-12-15 Biogen, Inc.Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
US6534513B1 (en) 1999-09-29 2003-03-18 Celltech R&D Limited Phenylalkanoic acid derivatives
US6455539B2 (en) 1999-12-23 2002-09-24 Celltech R&D Limited Squaric acid derivates
EP1243577A4 (en) 1999-12-28 2005-06-08 Ajinomoto Kk NEW PHENYLALANINE DERIVATIVES
WO2001051487A1 (en) 1999-12-28 2001-07-19 Pfizer Products Inc. Non-peptidyl inhibitors of vla-4 dependent cell binding useful in treating inflammatory, autoimmune, and respiratory diseases
JP4039856B2 (ja) * 2000-02-03 2008-01-30 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 インテグリン発現阻害剤
ES2295150T3 (es) 2000-04-17 2008-04-16 Ucb Pharma, S.A. Derivados de enamina como moleculas de adhesion celular.
US6403608B1 (en) 2000-05-30 2002-06-11 Celltech R&D, Ltd. 3-Substituted isoquinolin-1-yl derivatives
US6545013B2 (en) 2000-05-30 2003-04-08 Celltech R&D Limited 2,7-naphthyridine derivatives
JP2004502762A (ja) 2000-07-07 2004-01-29 セルテック　アール　アンド　ディ　リミテッド 二環性ヘテロ芳香環を含有するインテグリンアンタゴニストとしてのスクエア酸誘導体
CA2417059A1 (en) 2000-08-02 2002-02-07 Celltech R&D Limited 3-substituted isoquinolin-1-yl derivatives
MY129000A (en) 2000-08-31 2007-03-30 Tanabe Seiyaku Co INHIBITORS OF a4 MEDIATED CELL ADHESION
ES2200617B1 (es) 2001-01-19 2005-05-01 Almirall Prodesfarma, S.A. Derivados de urea como antagonistas de integrinas alfa 4.
MY140707A (en) * 2002-02-28 2010-01-15 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Process for preparing a phenylalanine derivative and intermediates thereof
EP1558250A4 (en) 2002-10-30 2006-11-02 Merck & Co Inc GAMMA AMINOAMIDE MODULATORS OF THE CHEMOKIN RECEPTOR ACTIVITY
GEP20094680B (en) 2004-04-13 2009-05-10 Incyte Corp Piperazinylpiperidine derivatives as chemokine receptor antagonists
EP1735000A2 (en) * 2004-04-16 2006-12-27 Genentech, Inc. Method for augmenting b cell depletion
US8267905B2 (en) * 2006-05-01 2012-09-18 Neurosystec Corporation Apparatus and method for delivery of therapeutic and other types of agents
US7803148B2 (en) * 2006-06-09 2010-09-28 Neurosystec Corporation Flow-induced delivery from a drug mass
CA2659330A1 (en) * 2006-07-31 2008-02-07 Neurosystec Corporation Nanoparticle drug formulations
US20100150915A1 (en) 2007-02-20 2010-06-17 Stewart Edward J Methods of treating multiple sclerosis by administration of alpha-fetoprotein in combination with an integrin antagonist
EP2170306A1 (en) * 2007-06-26 2010-04-07 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating serotonin-mediated diseases and disorders
CA2693400A1 (en) 2007-07-11 2009-01-15 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating pulmonary hypertension and related diseases and disorders
CN102057054B (zh) 2008-04-11 2015-06-10 梅里麦克制药股份有限公司 人血清白蛋白接头以及其结合物
KR20110112301A (ko) 2008-11-18 2011-10-12 메리맥 파마슈티컬즈, 인크. 인간 혈청 알부민 링커 및 그 콘쥬게이트
BRPI0920936A2 (pt) 2008-11-26 2020-08-11 Pfizer Inc 3-aminociclopentanocarboxamidas como moduladores de receptores de quimiocinas
WO2010062829A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-03 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Tryptophan hydroxylase inhibitors for treating osteoporosis
KR101750420B1 (ko) * 2009-01-09 2017-06-26 오키드 파마 리미티드 디펩티딜 펩티다제 ｉｖ 억제제
CN102307875A (zh) 2009-02-09 2012-01-04 苏伯俭股份有限公司 吡咯并嘧啶基axl激酶抑制剂
WO2011094890A1 (en) * 2010-02-02 2011-08-11 Argusina Inc. Phenylalanine derivatives and their use as non-peptide glp-1 receptor modulators
CA2848587A1 (en) 2011-10-17 2013-04-25 Westfaelische Wilhelms-Universitaet Muenster Methods of risk assessment of pml and related apparatus
WO2014036520A1 (en) 2012-08-30 2014-03-06 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies comprising anti-erbb3 agents
US20150045435A1 (en) * 2013-08-06 2015-02-12 Indiana University Research And Technology Corporation Compounds and methods for treating diabetes
WO2018134836A1 (en) * 2017-01-23 2018-07-26 Synven Shree Life Sciences Pvt. Ltd. A novel, feasible and cost effective process for the manufacture of d – penicillamine
EP3749638B1 (en) * 2018-02-09 2023-04-05 Vistagen Therapeutics, Inc. Synthesis of 4-chlorokynurenines and intermediates
JP7189368B2 (ja) 2018-10-30 2022-12-13 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド アルファ４ベータ７インテグリンの阻害のための化合物
US11179383B2 (en) 2018-10-30 2021-11-23 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of α4β7 integrin
JP7214882B2 (ja) 2018-10-30 2023-01-30 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド アルファ４ベータ７インテグリン阻害剤としてのイミダゾピリジン誘導体
SG11202103484RA (en) 2018-10-30 2021-05-28 Gilead Sciences Inc Quinoline derivatives as alpha4beta7 integrin inhibitors
CN110305034B (zh) * 2019-06-24 2022-06-07 佛山市顺德区香江精细化工实业有限公司 包含樟脑酸衍生物的组合物及其在化妆品中的应用
US11578069B2 (en) 2019-08-14 2023-02-14 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of α4 β7 integrin

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4661111A (en) 1982-08-04 1987-04-28 La Jolla Cancer Research Foundation Polypeptide
US4578079A (en) 1982-08-04 1986-03-25 La Jolla Cancer Research Foundation Tetrapeptide
US4614517A (en) 1982-08-04 1986-09-30 La Jolla Cancer Research Foundation Tetrapeptide
US4792525A (en) 1982-08-04 1988-12-20 La Jolla Cancer Research Foundation Tetrapeptide
US4589881A (en) 1982-08-04 1986-05-20 La Jolla Cancer Research Foundation Polypeptide
US4517686A (en) 1982-08-04 1985-05-21 La Jolla Cancer Research Foundation Polypeptide
JPS6354321A (ja) 1985-03-27 1988-03-08 Ajinomoto Co Inc 血糖降下剤
US4683291A (en) 1985-10-28 1987-07-28 Scripps Clinic And Research Foundation Platelet binding inhibitors
US6221367B1 (en) * 1992-06-15 2001-04-24 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US6306840B1 (en) 1995-01-23 2001-10-23 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
JP2002512625A (ja) 1997-05-29 2002-04-23 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害薬としての複素環アミド化合物
JP2002501537A (ja) 1997-05-29 2002-01-15 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害薬としてのスルホンアミド類
DE69833654T2 (de) 1997-05-29 2006-12-14 Merck & Co., Inc. (A New Jersey Corp.) Biarylalkansäuren in der verwendung als zelladhäsionsinhibitoren
US6093696A (en) 1997-05-30 2000-07-25 Celltech Therapeutics, Limited Tyrosine derivatives
WO1999006435A1 (en) 1997-07-31 1999-02-11 Elan Pharmaceuticals, Inc. Dipeptide compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
EP1001975A1 (en) 1997-07-31 2000-05-24 Elan Pharmaceuticals, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
CA2290747A1 (en) 1997-07-31 1999-02-11 Elan Pharmaceuticals, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
AU8585098A (en) 1997-07-31 1999-02-22 American Home Products Corporation Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
AR016133A1 (es) 1997-07-31 2001-06-20 Wyeth Corp Compuesto de carbamiloxi que inhiben la adhesion de leucocitos mediada por vla-4, compuestos que son prodrogas de dichos compuestos, composicionfarmaceutica, metodo para fijar vla-4 a una muestra biologica, metodo para el tratamiento de una condicion inflamatoria
EP1001973A1 (en) 1997-07-31 2000-05-24 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
BR9812118A (pt) 1997-07-31 2000-07-18 Elan Pharm Inc Compostos do tipo 4-amino-fenilalanina que inibem adesão de leucócito mediada por vla-4
JP2001512139A (ja) 1997-07-31 2001-08-21 エラン・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド Ｖｌａ−４が介在する白血球接着を阻害するスルホニル化ジペプチド化合物
JP3555876B2 (ja) 1997-08-22 2004-08-18 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー Ｎ−アロイルフェニルアラニン誘導体
WO1999010313A1 (en) 1997-08-22 1999-03-04 F.Hoffmann-La Roche Ag N-aroylphenylalanine derivatives
AU1463499A (en) 1997-11-21 1999-06-15 Merck & Co., Inc. Substituted pyrrole derivatives as cell adhesion inhibitors
DE69824037T2 (de) 1997-11-24 2005-06-02 Merck & Co., Inc. Beta-alanin-derivate als zell-adhäsions-inhibitoren
JP2001523711A (ja) 1997-11-24 2001-11-27 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害薬としての環状アミノ酸誘導体
US6197794B1 (en) 1998-01-08 2001-03-06 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
US6329372B1 (en) 1998-01-27 2001-12-11 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
ES2226413T3 (es) 1998-02-26 2005-03-16 Celltech Therapeutics Limited Derivados de fenilalanina como inhibidores de alfa-4 integrinas.
US6521626B1 (en) 1998-03-24 2003-02-18 Celltech R&D Limited Thiocarboxamide derivatives
GB9811159D0 (en) 1998-05-22 1998-07-22 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9812088D0 (en) 1998-06-05 1998-08-05 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
WO1999064395A1 (en) 1998-06-11 1999-12-16 Merck & Co., Inc. Heterocyclic amide compounds as cell adhesion inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
PT991619E (pt) 2004-02-27
US6596752B1 (en) 2003-07-22
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US6482849B1 (en) 2002-11-19
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EP0991619A1 (en) 2000-04-12
DE69818049D1 (de) 2003-10-16
DK0991619T3 (da) 2003-12-29
JP2001517246A (ja) 2001-10-02
AU8163398A (en) 1999-01-04
EP0991619B1 (en) 2003-09-10
DE69818049T2 (de) 2004-07-15
WO1998058902A1 (en) 1998-12-30

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