PT100563A

PT100563A - Ligandos tri-tetra- e pentapeptidicos do receptor da anafilatoxina, terminalmente modificados, composicoes farmaceuticas e uso

Info

Publication number: PT100563A
Application number: PT100563A
Authority: PT
Inventors: Megumi Kawai; Jay R Luly; Paul E Wiedeman
Original assignee: Abbott Lab
Priority date: 1991-06-04
Filing date: 1992-06-03
Publication date: 1993-09-30
Also published as: US5190922A; WO1992021361A1; IE921689A1

Description

74017 4993.PG.01

-2- MEMÓRIA DESCRITIVA Campo Técnico

Este invento refere-se a compostos orgânicos que modulam a actividade da anafilotoxina. Também se refere a métodos e a composições para modular a actividade da anafilotoxina em hospedeiros humanos e animais que necessitem de tal tratamento.

Antecedentes do Invento

Uma larga variedade de condições, incluindo infecção por bactérias, vírus ou fungos, infiltração por células cancerosas, doenças alérgicas ou auto-imunes e trauma induzido física ou quimicamente, provocam uma resposta inflamatória nos seres humanos. Em todas estas doenças e condições no Homem e na maioria dos mamíferos, a activação do sistema do complemento (um conjunto de proteínas, factores de regulação e enzimas proteolíticas), quer pela via clássica quer pela alternativa, resulta na produção de péptidos biologicamente activos que servem para amplificar e exacerbar a inflamação resultante. 0 péptido mais activo, a anaf ilotoxina C5a, um polipéptido com 74 aminoácidos, é produzida por clivagem da cadeia alfa da C5 nativa, num local específico, pelas convertases (enzimas proteolíticas) do sistema do complemento do sangue bem como pelas enzimas do sistema de coagulação. A Ç5a existe in vivo em duas formas biologicamente activas. Uma vez libertada da C5, a arginina do terminal carboxilo da C5a é rapidamente removida pela carboxipeptidase-N, deixando o derivado des-Arg. Embora a des-Arg C5a seja menos activa do que a C5a, ambas são potentes mediadores da inflamação em concentrações provavelmente produzidas in vivo (Fernandez, Η. N.; Henson, P. M.; Otani, A.; Hugli, T. E. J. Immunol.. 1978, 120. 109). Em conjunto, estes péptidos, juntamente com a C3a, C4a e seu produtos de degradação des-Arg, colectivamente descritos aqui como anafilotoxina, são capazes de despoletar diversas reacções inflamatórias.

Entre os vários tipos de células, a resposta dos neutrófilos à C5a é a melhor definida. Os receptores da ο

74017 4993.PG.01 -3- superfície das células, específicos para a C5a, forám demonstrados nos neutrófilos (Chenoweth, D. E.; Hugli, T. E. Proc. Natl Acad. Sei. U.S.A.. 1978, J5_, 3943-3947. Huey, R. ; Hugli, T. E. J. Immunol.. 1985, 135. 2063-2068. Rollins, T. E.? Springer, M. S. J. Biol. Chem.. 1985, 260, 7157-7160) e a interaeção receptor-ligando promove a migração do leucócito polimorfonuclear (PMN) de uma maneira directa (quimiotaxia), aderência, rebentamento oxidativo e libertação da enzima granular destas células (Hugli, T. E. Sorincrer Semin. Immunopathol.f 1984, 2/ 193-219). A interaeção da C5a com PMN e com outras células e tecidos alvo resulta num aumento da libertação de histamina, da permeabilidade vascular, da contracção do músculo liso e num influxo de células inflamatórias nos tecidos, incluindo neutrófilos, eosinófilos e basófilos (Hugli, T. E. Springer Semin. Immunopathol.. 1984, 2/ 193-219). A C5a também pode ser importante na mediação dos efeitos inflamatórios de células mononucleares fagocíticas que se acumulam nos locais cronicamente inflamados (Allison, A. C.; Ferluga, J.; Prydz, H.; Scherlemmer, H. U. Aaents and Actions. 1978, 8., 27). A C5a e a des-Arg C5a podem induzir quimiotaxia nos monócitos (Ward, P. A. J. Exp. Med. . 1968, 128, 1201. Snyderman, R.; Shin, H. S.? Dannenberg, A. C. J. Immunol.. 1972, 109. 896) e podem levá-los a libertar enzimas lisossómicas (McCarthy, K.; Henson, P. S. J. Immunol.. 1979, 123. 2511) de modo análogo às respostas dos neutrófilos provocadas por estes agentes. Estudos recentes sugerem que a C5a pode ter um papel imuno-regulador por melhoramento dos anticorpos, particularmente nos locais de inflamação (Morgan, E. L.; Weigle, W. 0.; Hugli, T. E. J. Exp. Med.. 1982, 155. 1412. Weigle, W. O.; Morgan, E. L.; Goodman, M. G.? Chenoweth, D. E.; Hugli, T. E. Federation Proc., 1982, 41, 3099. Morgan, E. L.; Weigle, W. O.; Hugli T. E. Federation Proc.. 1984, 43., 2543). A C5a e a des-Arg C5a desempenham importantes papéis nas defesas dos hospedeiros contra infecções bacterianas e possivelmente na mediação de algumas lesões patológicas tais como a infiltração de leucócitos observada nos pulmões durante o síndroma da dificuldade respiratória aguda. Este mecanismo

parece desempenhar um papel em diferentes situações patológicas, como sofrimento pulmonar durante a hemodiálise, leucoforese, bypass cardiopulmonar e no enfarte agudo do miocárdio. Tem-se postulado que a activação do complemento tem um papel patológico importante na artrite reumatóide, doença do soro, lúpus eritematoso disseminado, colite ulcerosa e formas de cirrose hepática, hepatite crónica e glomerulonefrites, em certos estados de choque durante a hemodiálise e bypass cardiopulmonar, pancreatite aguda, enfarte do miocárdio (o qual pode ser agravado pela leuco-embolização induzida por C5a, após a interacção do complemento com placas ateromatosas), asma, broncoconstrição, algumas doenças auto-alérgicas, rejeição de transplantes e encefalopatias pós-virais.

Servindo como antagonistas, pela ligação e bloqueamento do receptor da anafilotoxina, certos compostos do presente invento podem reduzir ou impedir a inflamação mediada pela anafilotoxina. Outros compostos do presente invento são agonistas que mimetizam a actividade da anafilotoxina e ajudam o corpo a construir os seus mecanismos de defesa contra a invasão por agentes infecciosos e malignos. Estes compostos podem influenciar, adicionalmente, os efeitos imuno-reguladores da anafilotoxina. 0 envolvimento possível da anafilotoxina numa larga gama de doenças, como indicado por estes exemplos, sugere que os ligandos dos receptores da anafilotoxina poderão ter aplicações clínicas no tratamento e prevenção das situações patológicas acima mencionadas.

Sumário do invento

De acordo com a principal concretização do presente invento, proporcionam-se compostos modificadores da actividade da anafilotoxina de fórmula A-B-D-E-G-J-L e os seus sais, ésteres ou amidas farmaceuticamente aceitáveis.

Na fórmula genérica dada acima, os grupos A a L têm os seguintes valores: A e 1¾.-¾-¾' 74017 4993.PG.01 -5-

--’53®

r35 e R37; B é R4—Rg—Rgj D é seleccionado de entre R7-R8-Rg, R35 e R37; E é seleccionado de entre rior11r12' R35 e R37; G, se presente, é seleccionado de entre Ri3_Ri4”Ri5/ J é r16“r17_r18; L é R^g R-L é seleccionado a partir de alquilo inferior, alcoxi, arilo, ariloxi, arilalcenilo, arilalcoxi, carboxialquilo, ciano, cianoalquilo, amino, aminoalquilo, alquilamino, arilalquilo, aroílo, haloalquilo, hidroxialquilo e hidrogénio. R2 é seleccionado a partir do grupo consistindo em >CRg9Rio0 e oxigénio, com a condição de que quando R2 é oxigénio, R·^ é arilo, alquilo inferior ou arilalquilo. R3 é seleccionado a partir de >C=0, >CH2 e -CH2C(0)-, com a condição de que quando R3 é >CH2 então R2 não pode ser oxigénio. R4, R7, R10 e R13 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre >CH2 e >NR50 ©m gue Rso © hidrogénio, alquilo inferior ou arilalquilo. r5 © >CR201R202’ R6, Rg, R12 / Ri5 e Ri8 são seleccionados independentemente uns dos outros do grupo consistindo em >C=0, >CH2 e -CH2C(0). R8 é >Cr2ioR211’ R11 © >cr220R221* r14 © >cr230R231* R16 é seleccionado de entre o grupo consistindo em oxigénio, >NR5g e CH2, com a condição de que quando R15 é >C=0 e R16 é oxigénio, então R17, R18 e Rig tomado em conjunto representam hidrogénio, alquilo inferior, arilo ou arilalquilo.

74017 4993.PG.01 -6 r17 é >CR301R302* R19 é seleccionado a partir do grupo consistindo nos grupos -OH e -CN, com as condições de (i) quando R18 é >0=0, então R19 é -OH; (ii) quando Rlg é >ch2, então R19 é -OH ou -CN. R35 é um grupo possuindo a estrutura

R 4 I

j\ru\r em que f é um número inteiro de 0 a 2, X é seleccionado de entre >C=0 e -CH2-. R é seleccionado de entre hidrogénio e alquilo inferior, com as condições de que (i) quando f é 0, X está em C-2 e R está em C-3 ou C-4; (ii) quando f é 1, X está em C-2 e R está em C-3, C-4 ou C-5 e C-3,4 estão saturados ou insaturados; e (iii) quando f é 2, X está em C-2, C-3 ou C-4 e R está em C-2, C-3, C-4, C-5 ou C—6 quando a posição não está ocupada por X e C-3,4 ou C-4,5 estão saturados ou insaturados. R37 é um grupo possuindo a estrutura

O

em que h é l e j é 0 ou 1.

Rl e R2 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo seleccionado de entre arilo, arilalquilo ou arilalcenilo. R^, R2 e R3 tomados em conjunto representam opcionalmente ma grupo protector do N terminal. r17' r18 e Rl9 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo seleccionado de entre hidrogénio. 74017 4993.PG.01 -7- - " y ~~~ JL:> hidroxialquilo, arilo, arilalquilo, amidinoalquilo, aminoalquilo, cianoalquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, (heterocíclico)alquilo e guanidinoalquilo em que o cicloalquilo pode estar substituído com arilo, amino, amidino e guanidino.

Ri6, Rj.7 # Ri8 e r19 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo seleccionado de entre os seguintes (i) quando R16 é NR50 então R17~R18-R1g/ tomado em conjunto, é aminoalquilo, guanidinoalquilo, arilalquilo ou (cicloalquil ) alquilo e (ii) quando R16 é NR50 e R17 é arilalquilo ou (cicloalquil)alquilo, então Ri8-Rig é arilalquilo, guanidinoalquilo ou hidroxialquilo. r16, r17, Ris e r19 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo com as seguintes estruturas R2o/ R21' r22' r24 ou r25 *

em que m é um número inteiro dela3enéum número inteiro de 1 a 3, com a condição de gue ou m ou n tem de ser 2; p é um número inteiro de 0 a 3; X é carbono ou azoto,

R21 é R K30

-N N R31 r30 e R3i s^o seleccionados independentemente um do outro de entre arilalquilo, aminoalquilo, alquilo inferior, guanidinoalquilo ou (cicloalquil)alquilo, 74017 4993.PG.01

-8- R22 é

— NH

X nh-r3. R32 ® seleccionado de entre hidrogénio ou amidina, e os substituintes no anel ciclo-hexilo podem estar na forma cis ou trans, r24 ®

NH em que R27, R23/ R37 e R38 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre hidrogénio ou oxigénio, com as condições de que (i) quando R27 e R28 tomados em conjunto são oxigénio, então R37 e R38 são hidrogénio e (ii) quando R37 e R3g tomados em conjunto são oxigénio, então R27 e R28 são hidrogénio,

em que R2g é hidrogénio, arilo ou arilalquilo, com a condição de que quando um de R2g é arilo ou arilalquilo, os R2g restantes têm de ser hidrogénio. r18 e r19 tomados em conjunto representam opcionalmente hidrogénio ou R23 74017 4993.PG.01

em que R33 e R34 são seleccionados, independentemente um do outro, a partir de alquilo inferior, arilalquilo, (cicloalquil)alquilo e cicloalquilo.

Rgg é seleccionado independentemente a partir do grupo consistindo em hidrogénio, arilalquilo, arilo, arilalcenilo, alquilo inferior, carboxilo, alcoxi, hidroxialquilo e hidroxi. R10o ® seleccionado a partir do grupo consistindo em hidrogénio, alquilo inferior e arilalquilo. r201 ® seleccionado a partir do grupo consistindo em hidrogénio, alquilo inferior, arilalquilo, alcenilo, arilo, (cicloalquil)alquilo, aminoalquilo, amidoalquilo, hidroxialquilo, carboxialquilo, (carboxamido)alquilo, (carboxi-hidrazino)alquilo, ureídoalquilo, (heterocíclico)alquilo e guanidinoalquilo. R202' R211* R221/ R231 ® R302 são seleccionados, independentemente uns dos outros, a partir de hidrogénio, arilalquilo, em que o arilalquilo em R231 é benzilo quando J-L representam um resíduo L-arginilo; alcenilo e alquilo inferior. R2io é seleccionado a partir de hidrogénio, alquilo inferior, aminoalquilo, amidoalquilo, arilo, arilalquilo, (cicloalquil)alquilo, hidroxialquilo, carboxialquilo, (carboxamido)alquilo, ureídoalquilo, (carboxi-hidrazino)alquilo, (heterocíclico)alquilo e guanidinoalquilo. R22o · r230 e r301 são seleccionados independentemente uns dos outros a partir do grupo consistindo em hidrogénio; alquilo

74017 4993.PG.01 inferior; alcenilo, arilo; arilalquilo, em que o arilalguilo em r230 ® benzilo quando J-L representam um resíduo L-arginilo; (cicloalquil)alquilo; aminoalquilo, em que as aril e arilalquilaminas estão excluídas de R230 quando J-L representam um resíduo L-arginilo; amidoalquilo, em que as benzoilamidas e as suas variantes heterocíclicas estão excluídas de R230 quan<ío J-L representa um resíduo L-arginilo; hidroxialquilo; guanidinoalquilo; carboxialquilo, (carobixamido)alquilo, em que as anilina-amidas e as suas variantes heterocíclicas estão excluídas de R230 quando J-L representa um resíduo L-arginilo; (carboxi-hidrazino)alquilo; ureídoalquilo e (heterocí-clico)alquilo, em que quando J-L representa um resíduo L-arginilo então o heterociclo em R230 só pode estar separado por tuna unidade metileno do carbono alfa).

Todas as definições anteriores são feitas com as condições de que, nos compostos do presente invento, (i) quando A é um a-aminoácido, então Ri8“R19 n^° P0(^e ser ~C02H e (ii) quando R1S-R19 é -C02H, então A é não pode ser um α-aminoácido. 0 presente invento também se refere a um processo de modulação da actividade da anafilotoxina num mamífero em necessidade de tal tratamento, que compreende administrar a um mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1. 0 invento refere-se ainda a composições moduladoras da anafilotoxina compreendendo um veículo farmacêutico e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1.

Descricão detalhada

Tal como anteriormente discutido, a C5a é a mais activa de uma classe de péptidos biologicamente activos, que servem para amplificar e exarcebar a inflamação. Embora a C5a contenha 74 resíduos de aminoácido, verificou-se de acordo com o presente invento que os oligopéptidos contendo somente quatro resíduos de 74017 4993.PG.01 -11-

aminoácido também são activamente ligados pelos receptores da C5a. Além disto, verificou-se que os compostos péptido-miméticos (i.e. compostos que mimetizam a actividade dos péptidos) nos quais certos grupos substituem o carbono a, grupo carbonilo, e o grupo amida-azoto dos aminoácidos individuais em oligopéptidos também são activamente ligados pelos receptores da C5a.

As estruturas químicas dos compostos do presente invento são melhor compreendidas fazendo referência à seguinte fórmula estrutural na qual se entende que os segmentos são unidos seriadamente nas ligações com valências livres para formar o composto A-B-D-E-G-J-L.

Ri Rj r5 R99 R1 00 1 0 II O ._1 >nr50 R >ch2 . >ch2 >ch2co » · R '201 >0=0 >CH2 CH2C(0).

Rj Rg R2io R9 >NRso >CH2 R211 >c=o >ch2 -CH2C(0)- ->K- R10 R11 R12 R13 Ru Ris Ru Ri7 Ri·

Rl9

-CN -OH

L

74017 4993.PG.01 -12-

Os termos seguintes têm, ao longo desta especificação e das reivindicações anexas, os significados especificados. 0 termo "alquilo", como aqui usado, refere-se a grupos de cadeia linear ou ramificada, monovalentes, com 1 a 12 átomos de carbono incluindo, mas não estando a eles limitados, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, terc-butilo, e semelhantes. O termo "alquilo inferior", como aqui usado, refere-se a grupos alquilo de cadeia linear ou ramificada, contendo de 1 a 8 átomos de carbono incluindo, mas não estando a eles limitados, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, 2-metil-hexilo, n-pentilo, 1-metilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 2-metilpentilo, 2,2-dimetilpropilo, n-hexilo, e semelhantes. 0 termo "alquileno", como aqui usado, refere-se a grupos divalentes, com um a doze átomos de carbono derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio dos hidrocarbonetos saturados lineares ou ramificados. Exemplos incluem -CH2-, -CH(CH3)-, -C(CH3)2-/ -ch(c2h5)-, -ch2ch2-, -CH2CH(CH3)-, -C(CH3)2C(CH3)2-, -CH2CH2CH2- e semelhantes. O termo "alcenilo", como aqui usado, refere-se a grupos de cadeia linear ou ramificada, com 2 a 12 átomos de carbono contendo uma dupla ligação carbono-carbono, incluindo, mas não estando a eles limitados, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-metil-l-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, e semelhantes, em o grupo alcenilo pode ser substituído por ciano, carboxi hidroxilaquilo e semelhantes. 0 termo "amidinoalquilo", como aqui usado, refere-se a um grupopossuindo a estrutura -alquil-C(=NH)NH2 em que o alquilo é como acima definido. 0 termo "cicloalquilo", como aqui usado, refere-se a grupos cíclicos, de 3 a 8 átomos de carbono incluindo, mas não estando 74017 4993.PG.01 -13-

a eles limitados, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, e semelhantes, em que o grupo cicloalquilo pode ser subsittuído com 1, 2 ou 3 substituintes, seleccionados independentemente uns dos outros de entre amino, arilo, halo, nitro, carboxi, ciano, alquilo a C12, alcoxi, aroílo, guanidino, sulfonamido e alquilo substituído com halo. O termo "(cicloalquil)alquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo cicloalquilo ligado a um grupo alquilo inferior incluindo, mas não estando a eles limitados, ciclo-hexilmetilo e ciclo-hexiletilo. O termo "alcoxi”, como aqui usado, refere-se a um grupo alquilo, como anteriormente definido, ligado ao resto da molécula por um átomo de oxigénio. Os grupos alcoxi incluem por exemplo metoxi, etoxi, isopropoxi, n-butoxi, sec-butoxi, isobutoxi, terc-butoxi, e semelhantes. O termo "arilo", como aqui usado, refere-se a grupos aromáticos carbocíclicos, substituídos ou não substituídos, incluindo mas não estando a eles limitados, fenilo, 1 ou 2-naftilo, fluorenilo, (l,2)-di-hidronaftilo, (l,2,3,4)-tetra-hidronaftilo, indenilo, indanilo e semelhantes, em que o grupo arilo pode estar substituído por 1, 2 ou 3 substituintes seleccionados independentemente uns dos outros de entre amino, halo, nitro, carboxi, ciano, alquilo a C12, alcoxi, aroílo, hidroxi, sulfonamido e alquilo substituído com halo. 0 termo "arilalcenilo", como aqui usado, refere-se a um grupo arilo, como anteriormente definido, ligado a um grupo alcenilo, como anteriormente definido, incluindo, mas não estando a eles limitados, 2-fenil-eten-l-ilo, 2-fenil-l-ciano-eten-l-ilo, e semelhantes. O termo "arilalquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo arilo, como anteriormente definido, ligado a um grupo alquilo, incluindo, mas não estando a eles limitados, benzilo, 1 e 2-naftilmetilo, halobenzilo, alcoxibenzilo, hidroxibenzilo,

74017 4993.PG.01 aminobenzilo, nitrobenzilo, guanidinobenzilo, fenilme-til(benzil), 1-feniletilo, 2-feniletilo, 1-naftiletilo e semelhantes. O termo "benzilo", como aqui usado, refere-se especifi-camente a metilo substituído com fenilo, em que o grupo fenilo pode estar substituído por 1, 2 ou 3 substituintes seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre halo, nitro, ciano, alquilo de um a doze átomos de carbono, alcoxi, aroílo e alquilo substituído com halo e semelhantes. O termo "ariloxi", como aqui usado, refere-se a um grupo arilo, como anteriormente definido, ligado à porção molecular parente por um átomo de oxigénio. Ariloxi inclui, mas não se lhe limita, fenoxi, 1-naftiloxi, 2-naftiloxi e semelhantes. 0 termo "arilalcoxi", como aqui usado, refere-se a um grupo arilalquilo, como anteriormente definido, ligado à porção molecular parente por um átomo de oxigénio. Arilalcoxi inclui, mas não se lhe limita, benziloxi, 2-fenetiloxi, 1-naftilmetiloxi e semelhantes. 0 termo "aroílo", como aqui usado, refere-se a um grupo arilo, como anteriormente definido, ligado à porção molecular parente por um grupo carbonilo. Exemplos incluem benzoílo e benzoílo substituído. O termo "alquilamino", como aqui usado, refere-se a um grupo com a estrutura -NH(alquilo), em que a porção alquilo é como anteriormente definida. Os grupos alquilamino incluem por exemplo metilamino, etilamino, isopropilamino e semelhantes. O termo "dialquilamino", como aqui usado, refere-se a um grupo com a estrutura -N(alquilo) (alquilo), em que os dois grupos alquilo podem ser iguais ou diferentes e são como anteriormente definidos. 0 termo "aminoalquilo", como aqui usado, refere-se a um 74017

4993.PG.01 -15-grupo com a estrutura “^342^343/ ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. Os grupos R342 e R343 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre hidrogénio, alquilo inferior, arilo e arilalquilo. Adicionalmente, R342 © £343 tomados em conjunto podem ser, opcionalmente, -(CH?em que mm é um número inteiro de 2 a 6. 0 termo "amidoalquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo com a estrutura -NR344C(0)R345, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. Os grupos R344 e R345 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre hidrogénio, alquilo inferior, arilo, arilalquilo e alquilo substituído com halo. Adicionalmente, R344 e R345 tomados em conjunto podem ser, opcionalmente, -(0Η2)]ς]ζ- em que fcfc é um número inteiro de 2 a 6. 0 termo "carboxialquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo carboxilo, -C02H, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. O termo n(carboxiamido)alquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo com a fórmula -C(0)NR34qR341, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. Os grupos R340 e R341 são seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre hidrogénio, alquilo inferior, arilo e arilalquilo. Alternativamente, R340 © R341 tomados em conjunto podem ser, opcionalmente, -(CH2)pp“ em que pp é um número inteiro de 2 a 6. 0 termo "cianoalquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo ciano, -C^n, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. 0 termo "guanidinoalquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo com a estrutura ”NR34gC(=NR347)NHR34g, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. R346, R347 e R348 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre hidrogénio, alquilo inferior e arilo.

74017 4993.PG.01 O termo "hidroxialquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo hidroxi, -OH, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. 0 termo "ureídoalquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo com a estrutura -NHC(0)NH2, ligado a um grupo alquilo inferior, como anteriormente definido. 0 termo "heterocíclico", como aqui usado, refere-se a qualquer anel de 5 ou 6 membros contendo de um a três heteroátomos seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre o grupo consistindo num azoto, oxigénio ou enxofre; um oxigénio e um azoto; um enxofre e um azoto; um, dois ou três azotos; em que o anel de 5 membros tem 0 a 2 ligações duplas e o anel de 6 membros tem 0 a 3 ligações duplas, em que os heteroátomos enxofre e azoto podem estar opcionalmente oxidados, em que o heteroátomo azoto pode estar opcionalmente quaternizado, e incluindo qualquer grupo bicíclico no qual qualquer dos anéis heterocíclicos anteriores podem estar fundidos com um anel benzeno. Heterociclos representativos incluem, mas não lhe estão limitados, pirrolilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazolilo, imidazo-linilo, imidazolidinilo, piridilo, piperidinilo, pirazinilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazoilo, oxazolidi-nilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, indolilo, quinolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazoli-dinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, benzo-xazolilo, furilo, tienilo e benzotienilo, em que o grupo heterocíclico pode ser substituído com 1, 2 ou 3 substituintes, seleccionados independentemente uns dos outros de entre amino, halo, nitro, carboxi, ciano, alquilo C± a C12, alcoxi, aroílo, sulfonamido e alquilo substituído com halo. O termo "(heterocíclico)alquilo", como aqui usado, refere-se a um grupo heterocíclico, como previamente definido, ligado a um grupo alquilo, como anteriormente definido. O termo "hidroxialquilo", como aqui usado, refere-se a -OH, 74017

4993.PG.01 -17- ligado a um grupo alquilo inferior. 0 termo "aminoácido de ocorrência natural", refere-se a um aminoácido seleccionado de entre o grupo consistindo em alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, glutamina, ácido glutâmico, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina e valina. O termo "grupo protector do terminal N", refere-se aos grupos destinados a proteger os terminais N contra reacções indesejáveis durante os procedimentos de síntese ou a evitar o ataque dos compostos finais por exopeptidases ou o aumento da solubilidade dos compostos finais e incluem, mas não se lhe limitam, grupos acilo, acetilo, pivaloílo, terc-butilacetilo, terc-butiloxicarbonilo (Boc), carbobenziloxicarbonilo (Cbz), benzoílo ou um resíduo de aminoacilo D ou L, que de modo semelhante pode estar, ele próprio, N-protegido. Podem ser encontrados outros grupos no volume 3 de The Peptides. E. Gross e J. Meienhofer, Academic Press, 1981. 0 termo "anafilotoxina" é aqui usado para significar C5a, C4a, C3a ou os produtos de degradação des-Arg correspondentes. * 0 termo "sal farmaceuticamente aceitável", refere-se a sais de adição de ácido não tóxicos tais como sais formados com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico ou com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malónico. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem nitrato, sulfato, acetato, malato, formato, lactato, tartarato, succinato, citrato, p-toluenosulfonato, inorgânicos, e semelhantes, incluindo, mas não se lhes limitando, catiões com base em metais alcalinos e alcalino-terrosos, tais como sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio e semelhantes, bem como catiões não tóxicos de amónio, amónio quaternário e amina, incluindo, mas não se lhes limitando,

metilamina, etilamina e 74017 4993.PG.01 -18- amónio, tetrametilamónio, tetraetilamónio, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, semelhantes.

Exemplos de ésteres não tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis de compostos deste invento incluem ésteres de alquilo C-l a C6 em que o grupo alquilo tem cadeia linear ou ramificada. Ésteres aceitáveis também incluem ésteres de cicloalquilo C5 a C7, bem como ésteres de arilalquilo tal como o benzilo, mas não a ele limitados. Preferem-se os ésteres de alquilo C·^ a C4. Os ésteres do composto de fórmula I podem ser preparados de acordo com métodos convencionais.

Exemplos de amidas não tóxicas, farmaceuticamentente aceitáveis de compostos deste invento incluem amidas derivadas de amoníaco, de alquilaminas C-l a c6, primárias, e de dialquilaminas a Cg, secundárias, em que os grupos alquilo têm cadeia linear ou ramificada. No caso de aminas secundárias, a amina pode estar também na forma de um heterociclo com 5 ou 6 membros contendo um átomo de azoto. Preferem-se as amidas derivadas de amoníaco, as alquilamidas C^ a C3 primárias, e as dialquilamidas C1 a C2, secundárias. As amidas do composto de fórmula I podem ser preparadas de acordo com métodos convencionais .

Pode haver numerosos centros assimétricos nos compostos do presente invento. O presente invento contempla os vários estereoisómeros e suas misturas. Em particular, podem existir centros quirais em R2, R5, Rg, Rllf R14 e R1?. Verificou-se que os compostos do presente invento contendo até três resíduos de α-aminoácidos de configuração não natural também eram eficazes como moduladores da actividade da anafilotoxina.

Os estereoisómeros particulares são preparados seleccionando os aminoácidos de partida, ou análogos de aminoácido, possuindo a estereoquímica desejada e reagindo estes materiais de partida pelos métodos abaixo descritos. Os compostos de partida de estereoquímica particular ou estão 74017

/<;'/ /? - - /*: - J^siaSHEBggE 4993.PG.01 tl-i! comercialmente disponíveis ou são feitos pelos métodos pormenorizados abaixo e resolvidos por técnicas bem conhecidas nas artes da química orgânica.

Uma classe de compostos preferidos do presente invento é aquela em que os grupos R4, R7, R10# R13 e R16 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre >NH, >N-(alquilo inferior) e >N(arilalquilo).

Noutra classe de compostos preferidos do presente invento os grupos R6, Rg, R12, R15 e R18 s^° seleccionados independentemente uns dos outros de entre >C=0 e >CH2. 0 grupo R5 é, preferivelmente, >CR201R2q2; em 3ue R201 ® seleccionado a partir do grupo consistindo em aminoalquilo, alquilo inferior, (cicloalquil)alquilo, arilalquilo e guanidinoalquilo.

Uma classe de compostos preferidos do presente invento é aquela em que Rg9 é seleccionado de entre arilalquilo ou arilalcenilo.

Outra classe de compostos preferidos do presente invento são aqueles em que D ou E, mas não ambos, são L-prolina, ácido N-alquilamino ou {(3R/S)-1,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-3-carbonil).

Outra classe de compostos preferidos do presente invento são aqueles em que R230 ® guanidinoalquilo; arilalquilo; em que o arilalquilo em R230 ® benzilo quando J-L representam um resíduo L-arginilo; ou (cicloalquil)alquilo.

Outra classe de compostos preferidos do presente invento são aqueles em que R301 é (cicloalquil)alquilo, guanidinoalquilo ou arilalquilo.

Outra classe de compostos preferidos do presente invento são aqueles em que a quiralidade preferida, se presente, de R^

'LA <jS 74017 4993.PG.01 -20- e R17 é a configuração D ou não natural na posição alfa dos resíduos de aminoácido E e J.

Numa concretização do presente invento A-B-D-E tomado em conjunto é (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}. Exemplos específicos de compostos que estão dentro desta classe incluem, mas não estão necessariamente a eles limitados, os seguintes: (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1RS)-1-(ciclo-hexilmetil)-3-(guanidino)pro-pil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(3--fenilpropil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil)-fenilalanil-N-(3-nitrobenzil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-[N-(4-guanidino-butiril)amido]etil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil>-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1--naftil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(5-gua-nidino-pentil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(2-naf-til)-metilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-gua-nidino-propil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-{(1RS)--(l-benzil)-4-fenilbutil)amida ? (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- {(1-f e-nil)-ciclopropilmetil}amida ? -21- 74017 4993.PG.01 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-- {(1R/S) -l-benzil-4-guanidinobutil} amida ? (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(4--N,N-dimetilamino)benzi1}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- (4-gua nidino-butil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-benzil amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-guanidinoetil}-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-N-{ (1-fenil )ciclopropilmetil> amida (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil>-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-dife nil-metilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-N-(2-amidinoetil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-fe-netil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2,2 -dimetil-2-fenetil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N--{(1RS)-l-benzil-3-fenilpropil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3 -nitrobenzil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2 -picolil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-

74017 4993.PG.01

-22-

-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoi1}-N-{2-(4--hidroxifenil)etil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-pi-colil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil} -fenilalanil-N-benzilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{2-(in-dol-3-il)etil}amida; f (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(benzi loxi) -amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- (4-pi-colil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-N-{(1RS)-l-benzil-4-guanidinobutil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1--fluoreno)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(N,-fe-nil)-hidrazida;

(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(S)-l--fenetil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-gua-nidinoetil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1-ci-clo-hexil-l-ciclopropilmetil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-N-(2-(4-aminofenil)etil}amida; l-Benzil-4-[(N-metilJfenilalanil-lisil-prolil-{(2R)--2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}]-piperazina;

74017 4993.PG.01 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-N-{(IS)-l-fenetil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(2--ciclo-hexil-2-metil)propil}amida; e (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-ami-dinoetil)-amida.

Noutra concretização do presente invento B-D-E tomado como um grupo é lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil) e J é D-arginil-OH. Exemplos específicos de compostos que estão dentro desta classe incluem, mas não estão necessariamente a eles limitados, os seguintes: (S)-(+)-2-fenilbutiril-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Dargi-nil-OH; {(R)-(-)-2-fenilbutiril-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Dargi-nil-OH;

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {R(-)-3-fenilbutiril}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Dargi-nil-OH; {(2-Benzil-2-ciano-3-fenil)propionil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-Darginil-OH; {(R/S)-3-amino-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {S(+)-3-fenilbutiril}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil--OH? [2-{(S)-(+)-metoxi}-2-fenilacetil]-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-f enilalanil-Darginil-OH; N-fenilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -Darginil-OH;

74017 4993.PG.01 -24-

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoi1}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoi1}-Dargini1-OH; {(3S)-fenil-lactil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH;

Fenoxilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil -propanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {(l-fenil-l-ciclopentano)carbonil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {(2RS)-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-fenilalanil-Darginil-OH; {(R/S)-(2-carboxil)-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-Darginil-OH; e {(R/S)-2-ciano-3-fenilpropionil)-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoil}-Darginil-OH.

Noutra concretização do presente invento A é hidrocinamoil e E é {(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil). Exemplos específicos de compostos que estão dentro desta classe incluem, mas não estão necessariamente a eles limitados, os seguintes:

Hidrocinamoil-lisil-{(3R/S)-1,2,3,4-tetra-hidro-isoqui-nolin-3-carbonil}-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH;

Hidrocinamoil-norleucil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH;

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Dfenilalanil--0H;

Hidrocinamoil-fenilalanil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil--0H;

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-guanidinoetil}-amida;

Hidrocinamoil-arginil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH;

Hidrocinamoil-lisil-(N-metil)alanil-{(2R)-2-amino-3-ciclo- c'

G> 74017 4993.PG.01 -25- -hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil--OH; e

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-(N-fenetil)-Darginil-OH. Método de tratamento

Os compostos do presente invento servem para modular a actividade da anafilotoxina. Certos compostos do presente invento funcionam como antagonistas da anafilotoxina, enquanto que outros funcionam como agonistas. Os compostos antagonistas do presente invento bloqueiam o receptor da anafilotoxina e impedem a actividade da anafilotoxina, o que torna estes compostos úteis no tratamento e prevenção de condições lesivas ou doenças em que a anafilotoxina possa estar envolvida. Os estados de doença em que a anafilotoxina está envolvida incluem asma, alergia brônquica, inflamação crónica, lúpus eritematoso disseminado, vasculites, doença do soro, angioedema, artrite reumatóide, osteoartrite, gota, doenças bolhosas da pele, pneumonite por hipersensiblidade, fibrose pulmonar idiopática, glomerulonefrite mediada por imuno-complexos, psoríase, rinite alérgica, síndroma da dificuldade respiratória do adulto, perturbações pulmonares agudas, choque endotóxico, cirrose hepática, pancreatite, doenças inflamatórias do intestino (incluindo doença de Crohn e colite ulcerosa), lesões térmicas, sépsis por gram-negativos, necrose no enfarte do miocárdio, leucoforese, exposição a dispositivos médicos (incluindo mas não se limitando a membranas de hemodiálise e equipamento de circulação extracorporal), hepatite crónica, rejeição de transplantes, encefalopatias pós-virais, e/ou lesão do miocárdio ou do cérebro induzidas por isquemia. Estes compostos também podem ser usados como profiláticos em condições tais como o choque associado à febre de Dengue. Adicionalmente, pode ser empregue uma combinação de antibiótico e de agente anti-inflamatório tal como corticoesteróides (p.e. metilpredniso-lona) e um ou mais dos compostos acima mencionados. -26- ' // 74017 4993.PG.01

Certos compostos do invento são agentes terapêuticos úteis devido à sua capacidade de mimetizar ou promover a actividade da anafilotoxina e são portanto úteis na estimulação da resposta inflamatória e da resposta imunitária de mamíferos que são deficientes em relação a elas. Estes compostos agonistas podem ser usados para auxiliar o corpo a constituir o seu mecanismo de defesa contra a invasão de microorganismos infecciosos ou outras agressões. A interacção destes agonistas no receptor da anafilotoxina torna-os úteis no tratamento de condições ou doenças incluindo mas não se limitando a cancros (tal como carcinoma do pulmão), doenças por imunodeficiência e infecções graves.

Em alguns casos isto envolverá a prevenção da causa subjacente ao estado de doença e noutros casos, embora a doença subjacente não seja afectada, os compostos deste invento trarão o benefício de melhorar os sintomas ou de evitar as manifestações da doença.

Os compostos do presente invento podem ser administrados oralmente, parentericamente, por spray para inalação, por via rectal ou topicamente em formulações de unidades de dosagem contendo, se desejado, transportadores, adjuvantes e veículos farmaceuticamente aceitáveis, não tóxicos, convencionais. 0 termo "parentérico" como aqui usado inclui técnicas de infusão ou injecção subcutânea, endovenosa, intramuscular, intra-esternal, intra-arterial, sem limitação. 0 termo "topicamente" abranje a administração rectal e por spray para inalação, bem como pelas outras vias vulgares da pele e das membranas mucosas de boca e nariz.

Os níveis de dosagem de facto, dos ingredientes activos nas composições farmacêuticas deste invento, podem ser variados de modo a conseguir a resposta terapêutica desejada para um paciente, composições e modo de administração particulares, o nível de dosagem seleccionado dependerá da actividade do composto particular, da via de administração, da gravidade da

74017 4993.PG.01 -27- situação a tratar e da situação e história médica anterior do paciente a ser tratado. Contudo, é prática na arte começar com doses do composto inferiores às necessárias para conseguir o efeito terapêutico desejado e aumentar, gradualmente, a dosagem até conseguir o efeito terapêutico desejado.

Geralmente, administram-se diariamente a um hospedeiro mamífero níveis de dosagem de cerca de 0,001 mg a cerca de 100 mg, mais tipicamente de cerca de 0,1 mg a cerca de 20 mg, do composto activo por quilograma de peso corporal, por dia. Se desejado, a dose diária eficaz pode ser dividida, para fins de administração, em doses múltiplas, p.e. duas a quatro doses separadas por dia.

Formulação de composição farmacêutica

As composições farmacêuticas deste invento para injecção parentérica compreendem soluções, dispersões, suspensões ou emulsões, aquosas ou não aquosas, estéreis, farmaceuticamente aceitáveis, bem como pós estéreis para reconstituição, em soluções ou dispersões injectáveis estéreis, imediatamente antes de serem usadas. Constituem exemplos de transportadores, diluentes, solventes ou veículos, aquosos ou não aquosos, adequados, a água, etanol, polióis (tais como glicerol, propileno glicol, polietileno glicol, e semelhantes), e suas misturas adequadas, óleos vegetais (tal como azeite), e ésteres orgânicos injectáveis tais como oleato de etilo. Consegue-se manter uma fluidez adequada utilizando por exemplo materiais de revestimento, tais como a lecitina, no caso de dispersões mantendo um tamanho de partículas necessário, e pelo uso de surfactantes.

Estas composições podem também conter adjuvantes tais como conservantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes e agentes dispersantes. A prevenção da acção de microorganismos pode ser assegurada através da inclusão de diversos agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo parabeno, clorobutanol, fenol, ácido sórbico e semelhantes. Pode ser -28- 74017 4993.PG.01 também desejável incluir agentes isotónicos tais como açúcares, cloreto de sódio e semelhantes. Pode ser conseguida a absorção prolongada da forma farmacêutica injectável pela inclusão de agentes que atrasam a absorção, tais como monoestearato de alumínio e gelatina.

Se desejado, e para uma distribuição mais eficaz, os compostos podem ser incorporados em sistemas de distribuição de libertação lenta ou marcados, tais como em matrizes poliméricas, lipossomas e microesferas.

As formulações injectáveis podem ser esterilizadas, por exemplo por filtração através de um filtro de retenção de bactérias, ou por incorporação de agentes esterilizantes sob a forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água esterilizada ou noutro meio estéril injectável, imediatamente antes da utilização.

As formas de dosagem sólida para administração oral incluem cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos. Em tais formas de dosagem sólida, o composto activo está misturado com pelo menos um excipiente ou transportador inerte, farmaceuticamente aceitável, tal como citrato de sódio ou fosfato de dicálcio e/ou a) agentes de enchimento ou diluentes, tais como amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol e ácido silícico, b) ligantes, tais como, por exemplo, carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarose e goma arábica, c) humectantes, tais como glicerol, d) agentes de desintegração, tais como agar-agar, carbonato de cálcio, amido de batata ou de tapioca, ácido algínico, alguns silicatos e carbonato de sódio, e) agentes retardadores da dissolução, tais como parafina, f) aceleradores da absorção, tais como compostos de amónio quaternário, g) agentes humectantes, tais como, por exemplo, álcool cetílico e monoestearato de glicerol, h) absorventes, tais como caulino e argila bentonite, e i) lubrificantes, tais como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietileno glicóis sólidos, laurilsulfato de sódio e suas misturas. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a 74017

4993.PG.01 forma de dosagem pode também compreender agentes tamponantes.

Podem também utilizar-se, como agentes de enchimento, composições sólidas do mesmo tipo em cápsulas de gelatina mole e dura, cheias, usando excipientes tais como lactose ou açúcar do leite, bem como polietileno glicóis de elevado peso molecular, e semelhantes.

As formas de dosagem sólida em comprimidos, drageias, cápsulas, pílulas e grânulos, podem ser preparadas com revestimentos e cascas, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na arte da formulação farmacêutica. Podem conter, opcionalmente, agentes opacificantes e podem também ter uma composição tal que liberte somente o(s) ingrediente(s) activo(s), ou de preferência numa certa parte do tubo digestivo, opcionalmente de uma forma retardada. Constituem exemplos de composições para inserção que podem ser usadas as que incluem substâncias poliméricas e ceras.

Os compostos activos também podem estar numa forma microencapsulada, se adequado, com um ou mais dos excipientes acima mencionados.

As formas de dosagem líquidas para administração oral incluem emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Em adição aos compostos activos, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes comummente usados na arte tais como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubilização e emulsionantes, tais como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, álcool benzilico, benzoato de benzilo, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, dimetilformamida, óleos (em particular óleo de sementes de algodão, óleo de amendoim, óleo de milho, óleo de germe, azeite, óleo de rícino e óleo de sésamo), glicerol, álcool tetra-hidrofurfurilico, polietileno glicóis e ésteres de ácidos gordos de sorbitano e suas misturas.

Além dos diluentes inertes, as composições orais podem

74017 4993.PG.01 -30 também incluir adjuvantes tais como agentes humectantes, agentes emulsionantes e de suspensão, agentes adoçantes, agentes aromati z: antes e agentes per fumantes.

As suspensões, adicionalmente aos compostos activos, podem conter agentes de suspensão tais como, por exemplo, álcoois isoestearílicos etoxilados, polioxietileno sorbitol e ésteres de sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonite, agar-agar e tragacanto e suas misturas .

As composições para administração rectal ou vaginal são de preferência supositórios que podem ser preparados misturando os compostos deste invento com excipientes ou veículos, não irritantes, adequados, tais como manteiga de cacau, polietileno glicol ou uma cera para supositórios que é sólida à temperatura ambiente mas líquida à temperatura do corpo e se derreterá, portanto, no recto ou na cavidade vaginal e libertará o composto activo.

As formas de dosagem para administração tópica de um composto deste invento incluem pós, sprays, unguentos e inalantes. 0 composto activo é misturado sob condições estéreis com um veículo farmaceuticamente aceitável e quaisquer conservantes, tampões ou propulsores necessários que possam ser úteis. As formulações oftálmicas, unguentos, pós e soluções para o olho são também contempladas pelo âmbito deste invento.

Determinação da Ki da ligação do receptor da anafilotoxina

Mediu-se a inibição específica da actividade de ligação de C5a dos compostos representativos do presente invento usando 125j_c5a 0,03-1 nM com 2,5-25 /ug/ml de fragmentos de membrana PMNL purificados (Borregaard, N.; Heiple, J. M.; Simons, E. R.; e Clark, R. A. J. Cell. Biol. 1983, 97., 52-61). Separam-se por filtração os ligandos livres e os ligados à membrana. As potências de ligação dos compostos representativos deste invento estão listados na tabela 1. í·'^ 74017 -r- ,;V . /' aii m Cl» 4993.PG.01 -31-

Tabela 1

Potência de ligação do receptor C5a in vitro dos compostos deste invento

Exemplo * H- 1 Exemplo Ki μΜ 2 0,014 8 6,2 28 O H O 30 2,2 55 0,007 57 0,027 78 0,68 82 24,0 84 0,062 88 0,67 96 0,090 99 0,12 100 0,091 104 17,0 114 0,13 117 110,0 119 0,78 149 0,022 159 0,98 163 0,14 177 38,7 199 8,4 201 0,69 202 52,0 223 1,2 225 46,0

Sintese dos compostos

Os novos compostos do invento e os seus sais podem ser utilizados com eficácia como agentes terapêuticos. Consequentemente, o presente invento refere-se ainda a composições terapêuticas compreendendo um novo composto possuindo a fórmula geral I, ou os seus sais, como um componente activo.

Os compostos do invento podem ser preparados através de um processo de síntese de alongamento de uma cadeia peptídica por condensação de aminoácidos um a um, ou por processo de ligação de fragmentos consistindo em dois ou vários aminoácidos, ou por combinação destes processos de acordo com processos de síntese de péptidos convencionais.

74017 4993.PG.01

-32- A condensação de dois aminoácidos, a condensação de um aminoácido com um péptido ou a condensação de um péptido com outro péptido podem ser efectuadas de acordo com processos de condensação convencionais tais como o processo azida, o processo de anidrido ácido misto, o processo de anidrido simétrico, o processo DCC (diciclo-hexilcarbodiimida), o processo de éster activo (processo de éster p-nitrofenílico, processo de éster N-hidroxisuccinímidico, processo de éster cianometílico e semelhantes), o processo do reagente K de Woodward, o processo DCC-HOBT (1-hidroxibenzotriazolo) e semelhantes. Estas reacções de condensação podem ser efectuadas quer por processos em solução quer por processos de síntese em fase sólida. Quando a cadeia peptídica é alongada pelo processo em fase sólida, o aminoácido do terminal C está ligado a um transportador insolúvel. Como transportador insóluvel pode-se usar qualquer um que produza uma ligação libertável, por reacção com um grupo carboxilo num aminoácido do terminal C, e exemplos destes incluem, por exemplo, resinas de halometilo, tais como resina de clorometilo, resina de bromometilo e semelhantes, resina de hidroximetilo, resina de benzidrilamina e resina de hidrazida de t-alquiloxicarbonilo.

Na síntese de polipéptidos convencional podem-se proteger/desproteger, se necessário, grupos carboxilo e amino de cadeia ramificada nas posições alfa e omega dos aminoácidos. Constituem exemplos de grupos protectores para os grupos amino, que podem ser usados, benziloxicarbonilo (Z), o-clorobenziloxi-carbonilo ((2-C1)Z), p-nitrobenziloxicarbonilo (Z(N02)), p-meto-xi-benziloxicarbonilo (Z(OMe)), t-butoxicarbonilo (Boc), t-ami-loxicarbonilo (Aoc), isoburniloxicarbonilo, adamantiloxicarbo-nilo, 2-(4-bifenil)-2-propiloxicarbonilo (Bpoc), 9-fluorenil-metoxicarbonilo (Fmoc), metilsulfoniletoxicarbonilo (Msc), tri-fluoroacetilo, ftalilo, formilo, 2-nitrofenilsulfenilo (Nps), difenilfosfinotioilo (Ppt), e dimetilfosfinotioilo (Mpt).

Constituem exemplos de grupos protectores de grupos carboxilo, por exemplo o éster benzílico (OBn), éster ciclo-hexílico, éster 4-nitro-benzílico (0BnN02), éster t-butílico

74017 4993.PG.01 -33- (OtBu), éster 4-picolílico (OPic) e semelhantes.

No decurso da síntese destes novos compostos podem-se proteger, se necessário, aminoácidos específicos possuindo grupos funcionais que não grupos amino e carboxilo na cadeia ramificada, tais como arginina, cisteína, serina e semelhantes, com um grupo protector adequado. Prefere-se que, por exemplo, o grupo guanidino (NG) na arginina possa ser protegido com nitro, p-toluenosulfonilo (Tos), benziloxicarbonilo (Z), adamantil-oxicarbonilo (Adoc), p-metoxibenzenosulfonilo, 4-metoxi-2,6-di-metilbenzenosulfonilo (Mds), 1,3,5-trimetilfenilsulfonilo (Mts) e semelhantes e o grupo tiol na cisteína pode ser protegido com benzilo, p-metoxibenzilo, trifenilmetilo, acetamidometilo, etilcarbamilo, 4-metilbenzilo (4-MeBn), 2,4,6-trimetilbenzilo (Tmb) e semelhantes, e o grupo hidroxilo na serina pode ser protegido com benzilo (Bn), t-butilo, acetilo, tetra-hidro-piranilo e semelhantes.

Os compostos do invento são preparados em condições de síntese de péptidos em fase sólida Standard como descritas em "Solid Phase Peptide Synthesis" por J. M. Stewart J. D. Young, 2* edição (1984) e como ilustradas nos exemplos 1 e 2 na secção experimental.

Os compostos do invento podem ser também preparados por síntese parcialmente em fase sólida, por métodos de condensação de fragmentos e pelos métodos em solução clássicos como exemplificados pelos descritos em "Peptide Synthesis", segunda edição, M. Bodanszky, Y.S. Klausner e Μ. A. Ondetti (1976).

Os termos gerais de quiralidade, "R" e "S", Standard, são usados para indicar um centro isomericamente puro, "RS" para indicar uma mistura e "R/S" para indicar um único isómero puro com configuração indeterminada. 0 termo geral {X} indica o grupo, x, que é um substituto da ligação peptídica Standard, -C(0)NH-. 0 que se disse anteriormente pode ser melhor compreendido 74017 '· .. 4993.PG.01 ,. ··'.._ . -34- com referência aos exemplos seguintes que são dados como ilustrativos e não limitativos do invento. A menos que se indique de outro modo, os métodos peptidicos Standard anteriormente descritos e nos exemplos 1 e 2 são usados para montar os diferentes produtos, usando os precursores indicados na sequência peptídica específica. O produto da síntese tinha uma pureza de pelo menos 95% e deu espectros de massa e de RMN consistentes com a estrutura proposta.

Exemplo 1 (S)-(+)-2-fenilbutiril-lisil(N-epsilon-Cbz)-prolil-{(2R) -2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil)-Darginil(N-guanidino-Tos)-resina de Merrifield

Colocou-se Boc-DArg(N-guanidino-Tos)-resina de Merrifield (0,4-1,0 g) num vaso de síntese de péptidos em fase sólida e ligaram-se os aminoácidos à resina sequencialmente na ordem seguinte: ácido Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico, ácido Boc-(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico, Boc-prolina, N-alfa-Boc-lisina(N-epsilon-Cbz) e ácido S-(+)-2-fenilbutírico comercialmente disponível. Depois de se ter realizado o último acoplamento, a sequência foi parada na Agenda A-3 para dar (S) — (+)-2-fenilbutiril-lisil(N-epsilon-Cbz)-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}--Darginil(N-guanidino-Tos)-resina de Merrifield.

Após a síntese, o péptido protegido-resina foi removido do vaso de reacção por lavagem da resina três vezes com 20 ml de DMF num funil de vidro sinterizado de 30-60 ml, seguida por lavagem da resina três vezes com 20 ml de cloreto de metileno. A resina foi seca durante pelo menos cinco horas e depois pesada.

Agenda A 1. Desbloquear: 45% de ácido trifluoroacético (TFA) em cloreto de metileno contendo 2,5% de anisolo (v/v/v). 2. Neutralização: 10% de diisopropiletilamina (DIEA) em cloreto de metileno (v/v). 74017 4993.PG.01

-35-

3. Acoplamento simples: Boc-derivado de aminoácido 0,2-0,4 M em Ν,Ν-dimetilformamida (DMF), di-isopropilcarbodi-imida (DIC) 0,2-0,4 M em cloreto de metileno, tempo de reacção, 60 minutos. 4. Lavagem da base de resina: 10% de DIEA em cloreto de metileno (v/v). 5. Acoplamento simples repetido: igual ao passo 3. 6. Vai para o resíduo de aminoácido seguinte (volta ao passo 1). 7. Após ligação do aminoácido final à cadeia peptídica em crescimento, o grupo protector (t-Boc) é removido como no passo 1.

Exemplo 2

(S)-(+)-2-fenilbutiril—lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-he-xil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil--0H 0 péptido protegido-resina do exemplo 1 (0,5 g) foi tratado com 1,0 ml de anisolo e 10 ml de fluoreto de hidrogénio (HF) durante 60 minutos a 0 aC. 0 HF e o anisolo foram removidos in vacuo a 0 BC e a mistura do péptido e da resina foi lavada com éter dietílico (2 x 25 ml). 0 péptido em bruto foi extractado da mistura por tratamento com porções de ácido acético aquoso a 20% (4 x 25 ml), liofilizado num pó amorfo seco (148,3 mg) e purificado por cromatografia líquida de elevado rendimento (HPLC) {coluna: 21,4 mm de d.i. x 25 cm ou 41,4 mm de d.i. x 25 cm, Dynamax (Rainin), 8 /zm de sílica, coluna de fase invertida C18). A amostra (70 mg) foi purificada por eluição em gradiente {de 20 a 60% (80% de acetonitrilo em água com ácido trifluoroacético a 0,1%)} a um caudal de 15-45 ml/min., produção: 27,7 mg. EM FAB+: (M+H)+=852 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,08), Cha (1,94), Arg (1,03) 74017

Exemplo 3 4993.PG.01

N-Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OH O hidrocloreto do éster metílico do ácido (2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanóico foi preparado a partir do ácido Boc-(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico (30 g, 0,11 mole) em 500 ml de metanol e 250 ml de ácido clorídrico 4N em dioxano durante a noite, à temperatura ambiente, com um rendimento de 93%. Este (22,58 g, 0,101 mole) foi acoplado a Boc-prolina (25,89 g, 0,11 mole) na presença de hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3--etil-carbodiimida (EDC) (21,31 g, 0,11 mole), mono-hidreto de 1-hidroxibenzotriazolo (HOBT) (15,0 g, 0,11 mole) e N--metilmorfolina (NMM) (12,2 ml, 0,11 mole) (método EDC e HOBT) em cloreto de metileno. A reacção realizou-se à temperatura ambiente, durante a noite. Adicionou-se acetato de etilo e a camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio saturado, salmoura, ácido fosfórico 0,2 M, salmoura e seca sobre sulfato de sódio. A evaporação do solvente deu 35,03 g de dipéptido com um rendimento de 91% (EM: (M+H)+=383). A isto seguiu-se a desprotecção do grupo Boc, seguida do acoplamento com N-alfa-Cbz-N-epsilon-Boc-lisina para dar N-alfa-Cbz-lisil-(N--epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OMe (EM: (M+H)+=645) com um rendimento de 89% usando as condições acima mencionadas (método EDC e HOBT). O grupo Cbz foi clivado por hidrogenólise para obter H--lisil-(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-0Me (EM: (M+H)+-511) e em seguida acoplado a N-Boc-(N--metil)fenilalanina pelo método acima (método EDC e HOBT) num rendimento quantitativo, para obter N-Boc-(N-metil)fenilalanil--lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-0Me (EM: (M+H)+=772). O éster metílico obtido (7,33 g, 9,5 mmole) foi dissolvido em 90 ml de metanol e 25 ml de água num banho de gelo. Adicionou-se lentamente hidróxido de lítio (0,6 g, 14,3 mmole) 74017 4993.PG.01 -37-

em 25 ml de água e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. 0 metanol foi removido e adicionaram-se 50 ml de água. A camada aquosa foi lavada com éter (2x) e acidificada usando ácido fosfórico 1M. O composto foi extractado com acetato de etilo e a camada de acetato de etilo foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de sódio. A evaporação do solvente deu 5,94 g (83%) do composto de titulo. (EM: (M+H)+=758)

Este composto foi usado para preparar os seguintes exemplos: 10, 16, 18, 22, 35, 46, 59, 66, 73, 74, 78, 79, 85, 95, 98, 107, 110, 115, 117, 118, 119, 121, 122, 130, 134, 135, 136, 137, 143, 144, 145, 155, 156, 157, 167, 180, 179, 190, 196, 200, 212, 220 e 221.

Exemplo 4

N-Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-fenilalanil-OH 0 acoplamento de [N-Boc-(N-metil)-fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OH] do exemplo 3 (5 g, 6,6 mmole) e do hidrocloreto do éster metílico de H-fenilalanina (1,57 g, 7,3 mmole) foi realizado usando EDC (1,52 g, 7,9 mmole), HOBT (1,1 g, 7,9 mmole) e NMM (0,78 ml, 7,9 mmole) em 60 ml de cloreto de metileno. 0 éster metílico de N-Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanina foi obtido com um rendimento quantitativo. 0 produto obtido foi dissolvido em 50 ml de metanol e 10 ml de água. Adicionou-se hidróxido de lítio (0,42 g, 9,9 mmole) em 10 ml de água para hidrolisar o éster. Após tratamento através do procedimento descrito no exemplo 3, obteve-se o composto de título (5,9 g) com um rendimento de 99%. (EM: (M+H)+=905) -38- 74017 4993.PG.01 0 composto foi usado para preparar os seguintes exemplos: 13, 14, 21, 24, 25, 38, 50, 58, 72, 97, 100, 125, 129, 130, 131, 140, 142, 151, 152, 154, 164, 165, 166, 170, 177, 178, 184, 185, 187, 189, 194, 197, 198, 201, 203, 204, 205, 208, 210, 211 e 219.

Exemplo 5

N-Boc-(N-métil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-pro-panoil}-0H 0 N-Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OEt foi preparado a partir do hidrocloreto do éster etílico do ácido (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico. Os métodos de acoplamento, as condições de reacção e modos de trabalho foram análogos aos procedimentos descritos no exemplo 3 para dar os seguintes intermediários:

Boc-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OEt (EM: (M+H)+=453) com um rendimento de 72%. Boc-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino--3-ciclo-hexilpropanoil}-OEt (EM: (M+H)+*=550) com um rendimento quantitativo.

Cbz-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-0Et (EM: (M+H)+= 812) com um rendimento de 97%. e N-Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)~ -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil--propanoil}-OEt (EM: (M+H)+= 939) com um rendimento de 96%. 0 éster etílico acima (7,08 g, 7,54 mmole) foi dissolvido em 70 ml de metanol e 19 ml de água e foi adicionado 1,7 equivalentes de hidróxido de lítio (0,54 g, 12,8 mmole) em 29 ml de água. 0 modo de realização foi como descrito no exemplo 3 para dar o composto do título (6,5 g, 95%). (EM: (M+H)+= 911) O composto foi usado para preparar os seguintes exemplos: -39- 74017 4993.PG.01 11, 12, 19, 20, 23, 29, 30, 34, 36 , 37, 40, 42, 43, 48 , 49 , 53 55, 56, 60, 61 , 62 , 63, 75, 76, 77, 83, 87 , 89 , 90, 96, 101 102, 103 , 108, 109, 112, 113, 114, 116, 120, 126, 127, 128, 132 138, 139 , 141, 145, 146, 150, 158, 162, 163, 169, 175, 176, 182 183, 186 , 188, 191, 193, 195, 206, 207, 214, 215, 216, 217, 218 223, 222 e 224.

Exemplo 6

Hidrocinamoil-lisil-{(3R/S)-1,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-3-carbonil}-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino--3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH

Este composto foi preparado usando as técnicas descritas nos exemplos 1 e 2.

Exemplo 7 {(R)-(-)-2-fenilbutiril)-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-he-xil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=852 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,18), Cha (2,03), Arg (1,05)

Exemplo 8

{(2R/S)-2-hidroximetil-2-fenilacetil}-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH 0 composto do título foi preparado a partir de cloreto de (2R/S)-2-hidroximetil-2-fenilacetilo e os diastereoisómeros foram separados por RP-HPLC. EM FAB+: (M+H)+=848 Anal. Aminoácidos: Arg (1,06), Lys (0,96), Pro (0,96), Cha (1,03), Phe (1,02)

Exemplo 9

{(2R/S)-2-hidroximetil-2-fenilacetil}-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil)-fenilalanil-Darginil-OH

Este composto era um dos isómeros descritos no exemplo 8 e foi isolado por RP-HPLC. -40- /.-7 74017 4993.PG.01 EM FAB+: (M+H)+=848 Anal. Aminoácidos: Arg (1,02), Lys (0,98), Pro (0,98), Cha (0,99), Phe (1,02)

Exemplo 10 3-{(3R)-benzil}-6-{(6R)-(3-guanidino)propil)}-4-[(N-metil)fenil-alanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-pi-perazina-2-ona

Preparou-se N-alfa-Boc-Darginina(guanidino-Tõs)-N,O-dime-til-hidroxamato a partir de N-alfa-Boc-Darginina(guanidino-Tos) (2,14 g, 5 mmole) e de hidrocloreto de Ν,Ο-dimetil-hidroxilamina (0,536 g, 5,5 mmole) em 25 ml de cloreto de metileno na presença de N-metilmorfolina (NMM) (0,605 g, 5,5 mmole) e de hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC) (1,05 g, 5,5 mmole) com rendimento quantitativo, de acordo com a literatura Nahms, S.; Weinreb, S.M. Tetrahedron Lett. . 1981, 22., 3815. O hidroxamato obtido (2,358 g, 5 mmole) foi tratado com hidreto de lítio e alumínio (LAH) (15 ml, 15 mmole) em 70 ml de tetra-hidrofurano (THF) de acordo com a referência citada, para obter a forma amínica cíclica de N-alfa-Boc-Arginal(guanidino-Tos) com rendimento quantitativo.

Ao hidrocloreto do éster metílico de D-fenilalanina comercialmente disponível (1,078 g, 5 mmole), dissolvido em 10 ml de álcool metílico e arrefecido num banho de gelo, foi adicionado trietilamina (TEA) (0,697 ml, 5 mmole). Em seguida, adicionou-se o derivado Arginal acima (5 mmole) em 20 ml de ácido acético a 1% em metanol seguido por 100 μΐ de ácido acético, removeu-se o banho de gelo e a mistura reaccional foi agitada durante 30 minutos. Adiciona-se gota a gota durante um período de 40 minutos cianoboro-hidreto de sódio (NaCNBH3) (943 mg, 15 mmole) em 20 ml de metanol e a mistura reaccional foi deixada em agitação à temperatura ambiente durante a noite. A mistura reaccional foi deitada em solução de bicarbonato de sódio a 10%, fria, e o composto foi extractado com acetato de etilo. A camada de acetato de etilo foi lavada com bicarbonato de sódio a 10%, salmoura e seca sobre sulfato de magnésio

S;j ' — > 74017 4993.PG.01 -41-anidro. A evaporação do solvente deu 2,508 g de produto bruto, que foi em seguida purificado por cromatografia numa coluna de sílica gel, eluindo com metanol a 1,5% em clorofórmio para dar 1,854 g (64,4%) de N-alfa-Boc-Darginil(guanidino-Tos)-Y(CH2NH)-Dfenilalanil-OMe. O péptido obtido (575,6 mg, 1 mmole) foi tratado com 10 ml de ácido clorídrico 4N em dioxano durante 1 hora à temperatura ambiente e evaporado até à secura. O material obtido foi dissolvido em 30 ml de metanol seco e adicionou-se di-isopropiletilamina (0,348 ml, 2 mmole). A mistura reaccional foi submetida a refluxo suave durante 4 dias. Removeu-se o metanol e adicionou-se cloreto de metileno. A fase orgânica foi lavada com água (4x), seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido dando 220 mg de 3-{(3R)-benzil)-6-[(6R)-(3'-guanidino-Tos)propil]-piperazina-2-ona.

Este análogo piperazina-2-ona (66,5 mg, 0,15 mmole) foi feito reagir com o N-Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon--Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OH do exemplo 3, (113,7 mg, 0,15 mmole) usando hidrocloreto de l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-carbodiimida (EDC) (31,7 mg, 0,165 mmole) em 2,5 ml de cloreto de metileno. 0 produto bruto (152 mg) foi tratado com HF-anisolo como exemplificado no exemplo 2. Purificou-se 2/3 do péptido bruto para dar 30,5 mg do composto do título. EM FAB+: (M+H)+=829 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,08), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,00)

Exemplo 11 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-{4-(amidi-no)butil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 105. EM FAB+: (M+H)+=808 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,98), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (1,88) 74017

4993.PG.01 -42-

Exemplo 12 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-trans-dl--fenilciclopropil)amida EM FAB+: (M+H)+=826 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,94), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,81)

Exemplo 13 4-Benzil-l-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil]-piperazina EM FAB+: (M+H)+=863 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (0,99), Cha (0,97), Phe (1,04), MePhe (0,98)

Exemplo 14 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(4-nitrobenzil)amida EM FAB+: (M+H)+=839 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,00), Cha (0,99), Phe (1,04), MePhe (0,71)

Exemplo 15 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-Darginil-fenilalanil-N-(4--picolil)amida EM FAB+: (M+H)+=798 Anal. Aminoácidos: Lys (presente), Pro (1,02), Phe (0,99), MePhe (0,99), Arg (1,01)

Exemplo 16 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-NH2 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 107. EM FAB+: (M+H)+=710 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,83), Lys (0,96), Pro (1,03), Cha (1,99) ϋ 74017 4993.PG.01 / -43-

Exemplo 17

Cinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fe-

nilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=830 Anal. Aminoácidos: Lys (0,99), Pro (0,97), Cha (0,90), Phe (0,98), Arg (1,03)

Exemplo 18 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(6-guanidino-hexil)-N-(2-fenetil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=802 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,97), Pro (1,03), cha (0,87)

Exemplo 19 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(4-aminobu-til)amida

Preparou-se Boc-l,4-diaminobutano por analogia com os métodos da literatura: Itoh, M.; Hagiwara, D.; Kamiya, T.; Tetrahedron Lett.. 1975, 4393. Itoh, M.; Hagiwara, D.; Kamiya, T.; Buli Chem. Soc. Jpn. . 1977, 50., 718. Acoplou-se Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-OH (exemplo 5) (100 mg, 0,11 mmole) com Boc-l,4-diaminobutano (24 mg, 0,11 mmole) via o método do anidrido misto como exemplificado no exemplo 116. A clivagem dos grupos protectores usando ácido trifluoroacético em cloreto de metileno e purificação deu o composto do título (78 mg) com um rendimento de 63,5%. EM FAB+: (M+H)+=781 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,89), Cha (1,86), Lys (0,98), Pro (1,02) -44- 74017 4993.PG.01

Exemplo 20

Hidrocinamoil-norleucil-prolil-{(2R) -2-amino-3-ciclo-hexil-pro-panoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH

Este composto foi preparado usando as técnicas descritas nos exemplos 1 e 2.

Exemplo 21 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(2R/S)-2-fenilbutil} amida

Hidrogenou-se {i-(i-fenil)ciclopropil}metilamina (125 mg, 0,7 mmole) na presença de paládio-negro (200 mg) em 20 ml de ácido acético sob 4,05xl05Pa (4 atm) de hidrogénio à temperatura ambiente para dar (2R/S)-2-etil-2-fenetilamida como um sal acetato com rendimento quantitativo. Este (27,7 mg, 0,12 mmole) foi acoplado ao composto (exemplo 4) (100 mg, 0,1 mmole) via o método EDC e HOBT. Isolaram-se 81,4 mg (70%) do composto do título. EM FAB+: (M+H)+=836 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,05), Lys (1,00), Pro (1,04), Cha (0,97), Phe (0,99)

Exemplo 22 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R) -2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(1RS)-1-(ciclo-hexilmetil)-3-(guanidino)propil>-amida

Fez-se reagir Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanol (1,1 g, 4,3 mmole) com cloreto de metano-sulfonilo (cloreto de mesilo) (0,4 ml, 5,2 mmole) e TEA (0,71 ml, 5,2 mmole) em 10 ml de cloreto de metileno. Metade do produto 0-mesilado obtido foi tratado com cianeto de potássio (1,36 g, 21 mmole) em 5 ml de dimetilsulfóxido (DMSO) a 40°c durante uma noite para dar 3-Boc--amino-{(2S)-2-ciclo-hexilmetil}propionitrilo (470 mg, 85%). Este material (440 mg, 1,7 mmole) foi hidrogenado (1,7 g de níquel de Raney em 80 ml de metanol e 20 ml de amoníaco) e a 74017 : ,. 4993.PG.01 -45- amina obtida (0,9 mmole) foi guanidinada, desprotegida do seu grupo Boc e, em seguida, acoplada ao composto do exemplo 3 para dar o composto do título. EM FAB+: (M+H)+=752 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,96), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (0,86)

Exemplo 23 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil- propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-fenilpro- pil)amida EM FAB+: (M+H)+=828 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,95), Lys (1,02), Pro (0,98), Cha (1,88)

Exemplo 24 4-Benzil-l-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoi1)-fenilalani1]-piperidina EM FAB+: (M+H)+=862 Anal. Aminoácidos: Lys (0,91), Pro (0,96), Cha (0,91), Phe (1,13), MePhe (1,11)

Exemplo 25 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-(3-nitrobenzil)amida EM FAB+: (M+H)+=839 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,01), Cha (0,97), Phe (1,05), MePhe (0,69)

Exemplo 26 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-Darginil-fenilalanil-N-benzil- amida EM FAB+: (M+H)+=797 Anal. Aminoácidos: Lys (presente), Pro (1,05), Phe (0,99), MePhe (0,98), Arg (1,01) 74017

4993.PG.01 -46-

Exemplo 27 3-aminopropionil-fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo -hexilpropanoil}-{ (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-benzil amida EM FAB+: (M+H)+=857 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,04) Cha (1,93), Phe (1,01)

Exemplo 28

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil)-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=8 3 2

Exemplo 29 (N-metil) f enilalanil-lisil-prolil-{ (2R) -2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N-metil-N-ben-zilamida EM FAB+: (M+H)^=814 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,78), Lys (0,96) Pro (1,04), Cha (1,88)

Exemplo 30 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2 S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(5-aminopentil)-amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 19. EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos; MePhe (0,90), Cha (1,86) Lys (0,99), Pro (1,01)

Exemplo 31 (4-f enilbutiril) -lisil-prolil-{ (2R) -2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=852 Anal. Aminoácidos; Lys (0,96), Pro (0,92) Cha (1,91), Arg (1,04) Ύ /

74017 4993.PG.01 -47-

Exemplo 32

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Dfenilalanil-OH

Este composto foi preparado usando as técnicas descritas nos exemplos l e 2. Usa-se Boc-Dfenilalanil-Oresina em lugar de Boc-Darginil(N-guanidino-Tos)-Oresina.

Exemplo 33

3—(4-hidroxifenil)propionil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=848 Anal. Aminoácidos: Arg (0,99), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,96), Phe (1,02)

Exemplo 34 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(2R/S)-2--(feni1)buti1}amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 21. EM FAB+: (M+H)+=842 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,02), Lys (0,99), Pro (1,07), Cha (1,92)

Exemplo 35 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-[N-(4-guanidinobuti-ril)amido]eti1> amida

Fez-se reagir N-Boc-(lS)-ciclo-hexilmetil-etilenodiamina (100 mg, 0,4 mmole) preparada no exemplo 98 com ácido N-Cbz-4-aminobutírico (92 mg, 0,4 mmole) via o método EDC e HOBT como exemplificado no exemplo 3 para obter (l-N-Boc-amino)-N#-Cbz--aminobutiril-3-ciclo-hexilpropilamida (EM FAB+: (M+H)+=823) com rendimento quantitativo. 0 grupo Boc foi removido, seguido do acoplamento com o composto do exemplo 3 (295 mg, 0,4 mmole) usando o método EDC e HOBT e, em seguida, hidrogenou-se para dar

74017 4993.PG.01 a amina correspondente com 91% de rendimento. Esta foi, em seguida, guanidinada e tratada da mesma maneira descrita no exemplo 42 para dar o composto do título (145 mg, 32 %). EM FAB+: (M+H)+=823 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,06), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (0,96)

Exemplo 36 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(1-naftil)-amida EM FAB+: (M+H)+=836 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,91), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,82)

Exemplo 37 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1-naftilmetil)-amida EM FAB+: (M+H)+=850 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,89), Lys (0,92), Pro (1,08), Cha (1,80)

Exemplo 38 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoi 1} -f enilalanil-N- {(3 -carboxi) benzil} amida EM FAB+: (M+H)+=838 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,01), Cha (0,90), Phe (1,05), MePhe (0,73)

Exemplo 39

[N-{3-fenilpropil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoil)-fenilalanil-Darginil-OH

Tratou-se H-lisil(N-epsilon-Cbz)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)--Darginil(guanidino-Tos)-Oresina, preparada no exemplo 70 (0,5 g, 0,52 meq./g, 0,26 mmole) com hidrocinamaldeído (34,2 μΐ, 0,26 -49- 74017 4993.PG.01 mmole) e NaCNBH3 (49 mg, 0,78 mmole) em 10 ml de ácido acético a 1% em DMF. A reacção realizou-se em 3 horas e o péptido-resina obtido foi tratado pelos procedimentos descritos no exemplo 70 para dar o composto do titulo (27,8 mg). EM FAB+: (M+H)+=818 Anal. Aminoácidos: Pro (0,99), Cha (0,97), Phe (0,99), Arg (1,03)

Exemplo 40 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-cíclo-hexil-propanoil)-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-guanidino-propil)-N-(2-fenetil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+s=913 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,74), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,84)

Exemplo 41

(l-naftil)acetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=868 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,94), Phe (0,98), Arg (1,04)

Exemplo 42 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil) -N- (5-guanidino-pentil)-amida

Preparou-se monoamida de Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N--epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}--{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-l,5-diaminopentano por analogia com o exemplo 19. A guanidinação do composto acima (220 mg, 0,22 mmole) realizou-se de acordo com o método da literatura: Salvadori, S.; Sarto, G. P.? Tomatis, R.; Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther.. 1983, 18, 489. 0 péptido completamente protegido foi tratado com ácido trifluoroacético a 50% em cloreto de metileno e, em seguida, purificado por RP-HPLC para 74017 4993.PG.01 ; -50- dar o composto do titulo (39 mg) com um rendimento global de 21%. EM FAB+: (M+H)+=837 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (1,80)

Exemplo 43 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(6-amino--hexil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 19. EM FAB+: (M+H)+=809 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,78), Cha (1,84), Lys (0,98), Pro (1,02)

Exemplo 44 (R(-)-3-fenilbutiril}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=852 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (1,15), Cha (1,90), Arg (1,02)

Exemplo 45

4-hidroxifenilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=834 Anal. Aminoácidos: Arg (0,99), Lys (0,98), Pro (1,00), Cha (0,95), Phe (1,02)

Exemplo 46 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-N-[(l/S)-l-{(5RS)-5-etil-5-ciclo-hexiloxazolin-2-il}--2-fenetil]amida 0 composto (18 mg) foi isolado como um subproduto do exemplo 184. EM FAB+: (M+H)+=840 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,00), Lys (0,99), Pro (0,99), Cha (0,98), Phe (1,02) -53.- . 74017 4993.PG.01

Exemplo 47

{(2-Benzil-2-ciano-3-fenil)propionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-Darginil-OH

Dialquilou-se cianoacetato de etilo (15,0 g, 0,133 mol) com brometo de benzilo empregando l,8-diaza-biciclo[5.4.0]undeceno-7 como descrito em: Ono, N.? Yoshimura, T.; Tanikaga, R.; Kaji, A. Chem. Lett.. 1977, 871-872. 0 2-benzil-2-ciano-3-fenilpropionato de etilo obtido (80%) era idêntico ao material descrito no exemplo 88. O éster foi saponificado no ácido carboxílico correspondente como descrito no exemplo 88. o péptido do título foi preparado sob as condições de fase sólida padrão exemplificadas nos exemplos 1 e 2. EM FAB+: (M+H)+=953

Exemplo 48 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(R)—(—)—2— -amino-3-fenil-l-propanol} O composto foi preparado por analogia com o exemplo 119. EM FAB+: (M+H)+=844 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,92), Lys (0,95), Pro (1,05), Cha (1,80)

Exemplo 49 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(2-naftil)-metilamida EM FAB+: (M+H)+=850 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,92), Lys (0,91), Pro (1,09), Cha (1,80)

Exemplo 50 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil propanoil) -f enilalanil-N- (4-benzenosulf onamida )metilamida -52- 74017 4993.PG.01 EM FAB+: (M+H)+=873 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,00), Cha (0,99), Phe (1,04), MePhe (0,74)

Exemplo 51

{(R/S)-3-amino-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil} -f enilalanil-Darginil-OH

Reagiu-se ácido DL-3-amino-3-fenilpropiónico (5,0 g, 30,3 mmole), disponível no mercado, com Boc-ON[2-(terc-butoxicarbo-niloxiimino)-2-fenilacetonitrilo] (8,94 g, 36,36 mmole) em 50 ml de dioxano/água (1:1) e trietilamina (6,33 ml, 45,45 mmole) para obter o ácido N-Boc-DL-3-amino-3-fenilpropiónco (5,61 g) com um rendimento de 69,9%. Este foi usado para construir o péptido usando a resina de Merrifield descrita no Exemplo 1 para obter o composto do título. Os isómeros foram separados por RP-HPLC. EM FAB+: (M+H)+=847 Anal. Aminoácidos: Lys (0,94), Pro (1,02), Cha (1,00), Phe (1,00), Arg (1,04)

Exemplo 52

{(R/S)-3-amino-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH

Este composto era um dos isómeros do exemplo 51. EM FAB+: (M+H)+=847 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,01), Cha (0,99), Phe (1,00), Arg (1,02)

Exemplo 53 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-guanidino-propil)-N-(2-fenetil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=913 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,95), Pro (1,05), Cha (1,92)

74017 4993.PG.01 -53-

Exemplo 54

2-naftilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB*: (M+H)+=868 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (0,98), Cha (0,97), Phe (1,05), Arg (i#oi)

Exemplo 55 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{ (2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-guanidino-propil)-amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=809 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,73)

Exemplo 56 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(7-amino--heptil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 19. EM FAB*: (M+H)*=823 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,80), Cha (1,84), Lys (0,99), Pro (1,01)

Exemplo 57 (S(+)-3-fenilbutiril}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH EM FAB*: (M+H)*=852 Anal. Aminoácidos: Lys (0,93), Pro (1,14), Cha (1,99), Arg (1,07)

Exemplo 58 Éster (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexi lpropano i 1} -f enilalanil- (2-metil) benzi lico EM FAB*: (M+H)*=809 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,01), Lys (0,92), Pro (1,06), Cha (0,93), Phe (1,02)

74017 4993.PG.01 -54-

Exemplo 59 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-[(1·S)-l-{(5RS)-5-etil-5-ciclo-hexiloxazolin-2-il}--2-ciclo-hexiletil]amida 0 composto (32 mg) foi isolado como um subproduto do exemplo 184. EM FAB+: (M+H)+=846 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,00), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,91)

Exemplo 60 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1RS) - (1--benzil)-4-fenilbutil)amida

Oxidou-se álcool 4-fenilbutílico (5,0 g, 33,3 mmole) pelo método descrito na literatura; Parikh, J. R.; Diering, W. E.; J. Am. Chem. Soc.. 1967, £9, 5505. O aldeído obtido foi reagido com cloreto de benzilmagnésio (35 ml de solução de éter 1M, 35 mmole) a -12°C durante 20 minutos com agitação. A reacção foi parada com solução de ácido fosfórico 1M e adicionou-se éter. A solução etérea foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, salmoura, seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a pressão reduzida para dar (dl)-2-hidroxi-l,5-difenilpentano (600 mg, 8%). (EM: (M+H)+=258). Este material (588 mg, 2,4 mmole) foi mesilado, tratado com azida de sódio (636 mg, 9,6 mmole) e em seguida reduzido para obter a amina correspondente (500 mg) com rendimento de 94% de acordo com o método descrito no exemplo 98 (EM: (M+H)+=240). Usou-se o composto do exemplo 5 (63 mg, 0,1 mmole) para reagir com a amina anterior (20 mg, 0,1 mmole) usando o método de acoplamento EDC e HOBT.

Após desprotecção e purificação, obteve-se o composto do título (37 mg) com um rendimento de 38%. EM FAB+: (M+H)+=932 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,96), Lys (1,01), Pro (0,99), Cha (1,86) 74017 jr*> t ·/ c=-

4993.PG.01 -55-

Exemplo 61 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-hidroxi-butil)-amida EM FAB+: (M+H)+=782 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,94), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (1,83)

Exemplo 62 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1R/S)-1--benz i1-4-guanidinobutil)amida

Dissolveu-se ácido N-Cbz-n-aminovalérico (8,0 g, 31,8 mmole) em 120 ml de dioxano e 125 ml de isobutileno e adicionou--se 5 ml de ácido sulfúrico concentrado como catalisador para dar éster t-butílico do ácido N-Cbz-n-aminovalérico (8,5 g, 87%). O éster t-butílico (2,0 g, 6,5 mmole) foi tratado com bis(trimetilsilil)amida de lítio (16,3 ml, 16,3 mmole, solução de THF 1M) em 40 ml de THF a -78°C. Após deixar a mistura reaccional aquecer até 0°C, a mistura reaccional foi agitada durante 40 minutos e, em seguida, adicionou-se brometo de benzilo (0,77 ml, 6,5 mmole) em 2 ml de THF. Após agitação a 0°C, durante 1 hora, a mistura foi parada pela adição de ácido fosfórico 1M e adicionou-se acetato de etilo. Após o processamento normal, a evaporação do solvente deu 832 mg (32%) de 2-benzil-5-Cbz-aminovalerato de butilo (EM: (M+H)+=398). 0 éster t-butílico do composto (1,0 g, 2,5 mmole) foi clivado e convertido na amina pelo método da literatura: Plattner, J. J. et. al., J. Med. Chem.. 1988, 31. 2277. A amina correspondente foi isolada como um trimetilsililetilcarbamato (350 mg) (EM: (M+H)+=457) com 35% de rendimento. 0 grupo trimetilsililo foi clivado com fluoreto de tetra-n-butilamónium com rendimento quantitativo. 0 l-benzil-4-Cbz-diaminobutano (EM: (M+H)+=313) foi isolado

/V -56- 74017 4993.PG.01

<> como uma mistura dl.

Este foi acoplado com o exemplo 5, seguido por desprotecção do grupo Cbz e guanidinação como previamente descrito no exemplo 42. Os isómeros foram separados RP-HPLC. EM FAB+: (M+H)+=913 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,75), Lys (1,01), Pro (0,99), Cha (1,84)

Exemplo 63 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(4-benzeno-sulfonamida)metil)amida EM FAB+: (M+H)+=879 Anal. Aminoácidos: Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,96), MePhe (0,73)

Exemplo 64

{(R/S)-3-N-metilamino-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-0H 0 exemplo 51, ácido (N-Boc-DL-3-amino-3-fenilpropiónico) (1,325 g, 5 mmole) foi N-metilado com iodeto de metilo e hidreto de sódio como descrito nas literaturas: Lovett, J. A.; Portoghese, P. J. Med. Chem. . 1987, 30., 1144; Cheung, S. T. ; Benoiton, N. L. Can. J. Chem. 1977, 55, 906. RMN protões (CDC13) δ 1,48 (s, 9H), 2,65 (s largo, 3H), 2,88-3,04 (m, 2H), 5,73 (largo, 1H), 7,26-7,37 (m, 5H). Este foi usado para preparar o composto do título de acordo com os métodos descritos nos exemplos 1 e 2. Os isómeros foram separados RP-HPLC. EM FAB+: (M+H)+=861 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (0,91), Cha (1,03), Phe (0,98), Arg (1,06)

Exemplo 65 {(R/S)-3-N-metilamino-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-0H 0 composto era um dos isómeros do exemplo 64. 74017 4993. PG. 01 .: / -- -57- EM FAB+: (M+H)+=861 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,10), Cha (0,99), Phe (1,00), Arg (1,03)

Exemplo 66 N-(4-guanidinobutiril)-N-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil--{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}]-N-(2-fenetil)amina

Acoplou-se ácido Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico (1,0 g, 3,7 iranole) a 2-fenetilamina (0,51 g, 4,1 mmole), usando EDC (1,06 g, 5,6 mmole) e HOBT (0,55 g, 4,1 mmole) em cloreto de metileno para dar Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil-2-fenetilamida (EM: (M+H)+=375) com rendimento quantitativo. Todo o material obtido dissolvido em 20 ml de THF e arrefecido num banho de gelo. Adicionou-se então, cuidadosamente, borano-THF (11,1 ml de solução 1M, 11,1 mmole) à mistura reaccional. Depois de se ter terminado a adição, o banho de arrefecimento foi removido e a reacção foi mantida à temperatura ambiente durante uma noite com agitação. Adicionou-se metanol à mistura reaccional e removeu-se o solvente. O resíduo foi dissolvido em éter dietílico e o pH foi ajustado a 6,0 usando ácido clorídrico 1M. A solução éterea foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada in vacuo. O sólido obtido (1,5 g) foi recristalizado de éter/n-hexano para dar 240 mg (18%) de sal hidrocloreto de N-[Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N--(2-fenetil)amina (HC1)(EM: (M+H)+=361) o produto obtido (228 mg, 0,6 mmole) foi reagido com ácido N-Cbz-4-aminobutírico (158 mg, 0,6 mmole) na presença de EDC (182 mg, 0,9 mmole), HOBT (94 mg, 0,7 mmole) e NMM (80 μΐ, 0,7 mmole) em cloreto de metileno para obter N-[Boc-(2S)-2-amino-3--ciclo-hexilpropil]-N-(N-Cbz-4-aminobutiril)-N-(2-fenetil)amina com rendimento quantitativo. Metade do composto acima (0,3 mmole) foi tratado com ácido clorídrico 4N em dioxano, seguido por acoplamento com Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon--Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OH (exemplo 3), via o método de acoplamento EDC e HOBT como descrito 74017

4993.PG.01 -58-(exemplo 3) com um rendimento de 75% (270 mg) (EM: (M+H)+=1219). O grupo Cbz do composto (250 mg) foi clivado por hidrogenólise catalítica pelo método da literatura: Ram, S.; Ehrenkaufer, R. E. ; Svnthesis. 1988, 2., 91, e, em seguida, realizou-se a guanidinação. Obteve-se o composto do título (54,5 mg, 21%) após desprotecção e purificação. EM FAB+: (M+H)+=927 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,87), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (0,85)

Exemplo 67

l-naftoxiacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil)-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=884 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (0,95), Cha (0,96), Phe (0,99), Arg (1,03)

Exemplo 68

[2-{(R)-(-)-metoxi)-2-fenilacetil]-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=s848 Anal. Aminoácidos: Lys (0,99), Pro (0,85), Cha (0,92), Phe (1,00), Arg (1,02)

Exemplo 69

[2-{(S)-(+)-metoxi}-2-fenilacetil]-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=848 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,07), Cha (0,89), Phe (1,03), Arg (1,01)

Exemplo 70

N-fenilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-0H O sal do ácido trifluoroacético de lisil(N-epsilon-Cbz)--prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil)-Darginil(guanidino-Tos)-Oresina (0,60 g) 74017 ^ 4993.PG.01 5-7 -59- .-5---7: foi preparado de acordo com o procedimento descrito no exemplo 1. Após a sequência ter sido parada no passo 2 da Agenda A, introduziu-se DIPEA a 10% em cloreto de metileno (15 ml) no vaso de reacção, seguido por cloreto de fenilacetilo (0,5 ml, 3,8 mmole). A reacção foi deixada prosseguir à temperatura ambiente durante 30 min. Após a resina obtida ter sido lavada com cloreto de metileno (5 x 10 ml), o péptido protegido-resina foi tratado com HF, liofilizado (83,9 mg) e purificado (60,0 mg) de acordo com o procedimento descrito no exemplo 2 para dar 16,8 mg do composto do título. EM FAB+: (M+H)+=824 Anal. Aminoácidos: Lys (1,02), Pro (0,82), Cha (1,99), Arg (1,03)

Exemplo 71

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=838 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,12), Cha (1,89), Arg (1,04)

Exemplo 72 Éster (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-benzílico EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,05), Lys (0,95), Pro (1,00), Cha (0,96), Phe (1,04)

Exemplo 73 3-{(3S)-benzil}“6-{(6R)-(3/_guanidino)propil}-4-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil- { (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-pipe-razina-2-ona 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 10. EM FAB+: (M+H)+=829 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,03), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,94)

74017 4993.PG.01 -60-

Exemplo 74 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(1RS)-(1-benzil)-4-fenilbutil}amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 60. EM FAB+: (M+H)+=779 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,01), Lys (0,98) Pro (1,02), Cha (0,88)

Exemplo 75 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-{(l-fenil) ciclopropilmetil}amida EM FAB+: (M+H)+=836 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,96), Lys (0,97) Pro (1,03), Cha (1,83)

Exemplo 76 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-{(1R/S)-1--ben z i1-4-guanidinobuti1)amida 0 composto era um dos isómeros do exemplo 62. EM FAB+: (M+H)+=913 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,75), Lys (0,98) Pro (1,02), Cha (1,68)

Exemplo 77 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{ (4-N,N-dime tilamino)benzil}amida EM FAB+: (M+H)+=843 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,04) Cha (1,90), MePhe (0,85)

Exemplo 78 N-(4-guanidinobutil)-N-[(N-metil)fenilalanil-lisil-propil· -{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo--hexilpropil}]-N-fenilacetamina

74017 4993.PG.01 -61-

Converteu-se Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanol (1/16 g, 4,4 mmole) no seu aldeído pelo método da literatura: (Mancuso, A. J.; Huang, S-L.; Swern, D., J. Ora. Chem.. 1978, 43, 2480) com 97% de rendimento. 0 aldeído (1,11 g, 4,4 mmole) foi submetido a aminação redutora com mono-Cbz-l,4-diaminobutano (1,0 g, 4,4 mmole) usando cianoboro-hidreto de sódio (NaCNBH3, 350 mg, 5,5 mmole) em ácido acético (0,54 ml, 9,2 mmole), metanol (20 ml) e isopropanol.

Obteve-se N-{Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropil)-N-{4--(Cbz-amino)butil)amina'(700 mg) com 35% de rendimento. (EM: (M+H)+=462). Este material (400 mg, 0,9 mmole) foi reagido com cloreto de fenilacetilo (0,14 ml, 1,1 mmole) na presença de N,N-dimetilaminopiridina (DMAP, 11 mg, 0,09 mmole) e trietilamina (TEA) (0,15 ml, 1,1 mmole) em cloreto de metileno para obter N--{Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropil}-N-fenilacetil-N-{(N-4--Cbz-amino)butil}amina com rendimento quantitativo. Realizaram--se pelos métodos descritos no exemplo 66 os seguintes procedimentos: desprotecção do grupo Boc; acoplamento com o tetrapéptido (exemplo 3); desprotecção do grupo Cbz; e guanidinação. EM FAB+: (M+H)+=927 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,78), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (0,85)

Exemplo 79 N-(4-guanidinobutil)-N-[(N-metil)fenilalanil-lisil-propil--{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo--hexilpropil}]-N-2-fenetilamina

Preparou-se N-(N-Cbz-4-aminobutil)-2-fenetilamida por analogia com o exemplo 66 (i.e. acoplamento EDC e HOBT e redução com borano). O sal hidrocloreto de N-(N-Cbz-4-aminobutil)-2-fenetilamida (800 mg, 2,2 imole) foi reagido com Boc-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-0H (600 mg, 2,2 mmole), seguida por redução com borano-THF como descrita no exemplo 66 para dar N-[Boc-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-N-{(N-Cbz-4-ami-no)butil)-N-2-fenetilamina (320 mg, 26%) (EM: (M+H)+=566). 0 74017 - 4993.PG.01 ·' t · -62- composto do título foi obtido pelo método descrito no exemplo 66. EM FAB+: (M+H)+=913 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,75), Lys (0,96), Pro (1,04), cha (0,77)

Exemplo 80

2-naftoxiacetil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH EM fab*: (M+H)*—884 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,01), Cha (0,97), Phe (0,99), Arg (1,04)

Exemplo 81

{(l-fenilciclopropil)carbonil)-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ci-clo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=844 Anal. Aminoácidos: Lys (.0,94), Pro (1,09), Cha (0,90), Phe (1,03), Arg (1,03)

Exemplo 82 N-benzoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil>--{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil—OH EM FAB+: (M+H)*=810 Anal. Aminoácidos: Lys (1,01), Pro (0,97), Cha (1,99), Arg (1,03)

Exemplo 83 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-guanidi-nobutil)amida

Tratou-se Boc-agmatina(guanidino-Tos) (187,8 mg, 0,49 mmole) com 2,5 ml de ácido clorídrico 4N em dioxano durante 1 hora à temperatura ambiente. 0 sal hidrocloreto obtido foi reagido com Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-pro-lil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-OH (exemplo 5) (446 mg, 0,49 mmole), na -63- 74017 4993.PG.01 presença de hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etil--carbodiimida (EDC) (ÍOO mg, 0,5 mmole), mono-hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (HOBT) (70 mg, 0,5 mmole) e N- metilmorfolina (NMM) (60 μΐ, 0,5 mmole) em cloreto de metileno. Após tratamento como descrito no exemplo 116, o péptido completamente protegido (com rendimento quantitativo) foi tratado com ácido trifluorometanossulfónico (ácido triflico) (3 ml) e anisolo (0,15 ml). 0 sal triflato foi deslocado por um sal acetato usando uma resina de permuta iónica (Amberlite IRA-410) e foi, em seguida, purificado por RP-HPLC. 0 composto do título foi obtido com um rendimento de 38%. EM FAB+: (M+H)+=823 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,78), Cha (1,80), Lys (0,97), Pro (1,03)

Exemplo 84

{(3S)-fenil-lactil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-Darginil-OH

Suspendeu-se ácido L-3-fenil-láctico (24,9 mg, 0,15 mmole) comercialmente disponível em 5 ml de cloreto de metileno num banho de gelo. Adicionou-se N-hidroxisuccinimida (17,3 mg, 0,15 mmole), seguida por Ν,Ν-diciclo-hexilcarbodiimida (DCC) (30,9 mg, 0,15 mmole). Após agitação a 0°C durante 1 hora, o material insolúvel foi removido por filtração. 0 filtrado foi adicionado a 2 ml de cloreto de metileno contendo lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Dargi-nil(guanidino-Tos)-Obenzil (121 mg, 0,1 mmole) e NMM (11 μΐ, 0,1 mmole). A reacção foi agitada a 0'C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 2 dias. Adicionou-se acetato de etilo (30 ml)e a solução foi lavada com salmoura, hidrogenossulfato de potássio a 10%, salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida para dar o péptido em bruto que foi tratado pelo mesmo método descrito no exemplo 116. De metade do péptido em bruto, obteve-se 22,5 mg do composto do título puro. EM FAB+: (M+H)+-848 Anal. Aminoácidos: Arg (1,00), Lys (0,97), Pro (1,01), Cha (0,96), Phe (0,99) 74017

4993.PG.01 -64-

Exemplo 85 3-{ (3R)-benzil}~6-{ (6R)-(3-guanidino)propil}-4-[ (N-metil)fenil-alanil-lisil-prolil-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-pi-perazina-2-ona 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 10. EM FAB+: (M+H)+=829 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,06), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,96)

Exemplo 86

2-Cianocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH O composto foi preparado sob as condições de fase sólida padrão descritas nos exemplos 1 e 2, usando ácido alfa--cianocinâmico comercialmente disponível. EM FAB+: (M+H)+=861

Exemplo 87 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil) -N- (2-indan) -amida EM FAB+: (M+H)+=826 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,86), Lys (0,96), Pro (1,03), Cha (1,93)

Exemplo 88

{2-Benzil-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino--3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH

Preparou-se etóxido de sódio por adição lenta de sódio (1,17 g, 50,8 mmol) a etanol (200 ml). Após arrefecimento à temperatura ambiente, adicionou-se cianoacetato de etilo (5,00 g, 44,2 mmol) e a mistura foi agitada durante 1 hora. Subseguentemente, introduziu-se brometo de benzilo (6,30 ml, 53,0 mmol) e a agitação da mistura reaccional continuou durante a noite. A mistura foi parada com solução aquosa de cloreto de 74017 4993.PG.01 ,ν:

65-amónio saturada e os voláteis foram removidos sob pressão reduzida. 0 resíduo foi repartido entre água (500 ml) e acetato de etilo (250 ml). A camada aguoda foi ainda extractada com acetato de etilo (2 x 250 ml) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e libertas de solvente. Separou-se 2-benzil-2-ciano-3-fenilpropionato de etilo do material de partida recuperado e do material monoalquilado com uma HPLC Waters Prep 500A empregando dois cartuchos de sílica gel e acetato de etilo a 10%/hexano como eluente. Produção: 5,80 g (19,8 mmol, 45%). 1H RMN (CDC13, 300 MHz) <5 7,32 (s largo, 10 H), 4,00 (qd, J=l, 7,5 Hz, 2H), 3,22 (dd, J= 13,5, 64,5 Hz, 4H), 0,98 (td, J= 1, 7,5 Hz, 3H). O 2-benzil-2-ciano-3-fenilpropionato de etilo (3,20 g, 11 mmol) foi saponifiçado à temperatura ambiente durante a noite com hidróxido de potássio (6,17 g, 0,11 imole) em 10% água/etanol. A mistura foi diluída com água (200 ml) e extractada com hexano (2 x 50 ml). A camada aquosa foi acidificada com ácido fosfórico 1M e extractada com cloreto de metileno (4 x 100 ml). Os extractos orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio e libertos de solvente para dar ácido 2- -benzil-2-ciano-3-fenilpropiónico (2,94 g, 11 mmol) como um sólido incolor: % RMN (CDC13, 300 MHz) δ 7,34 (s largo, 10H) , 3,24 (dd, J=13,5, 57 Hz); espectro de massa m/e 283 (M+NH4+). O péptido do título foi preparado sob o protocolo padrão descrito nos exemplos 1 e 2, excepto que se incorporou ácido 2--benzil-2-ciano-3-fenilpropiónico com o auxílio de um peso equivalente de 1-hidroxibenzotriazolo. EM FAB+: (M+H)+=947 Anal. Aminoácidos: Phe (0,94), Cha (0,95), Lys (1,04), Arg (1,01), Pro (1,00)

Exemplo 89 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(benzimi dazol)metil)amida

74017 4993.PG.01 -66- EM FAB+: (M+H)+=840 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,04) Cha (1,87), MePhe (0,85)

Exemplo 90 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(4-guanidino butil)-N-(2-fenetil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 212. EM FAB+: (M+H)+=927 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,76), Lys (0,99) Pro (1,01), Cha (1,79)

Exemplo 91

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa noil}-fenilalanil- (CH2NH)-Darginil-OH 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 192. EM FAB+: (M+H)+=818

Exemplo 92

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa noil)-Dfenilalanil- (CH2NH)-Darginil-OH 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 192. EM FAB+: (M+H)+=818 Anal. Aminoácidos; Lys (1,02), Pro (0,98) Cha (0,98)

Exemplo 93

Fenoxilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH EM FAB+; (M+H)+=834 Anal. Aminoácidos; Lys (1,00), Pro (0,91) Cha (0,94), Phe (0,99), Arg (1,02)

Exemplo 94

{(1-fenil-l-ciclopentano)carbonil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3 -ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH -67- / / í"' ' 74017 4993.PG.01 EM FAB+: (M+H)+=872 Anal. Aminoácidos: Lys (0,93), Pro (1,14), Cha (0,96), Phe (1,06), Arg (1,01)

Exemplo 95 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(2-fenetil)amida EM FAB+: (M+H)+=661 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Cha (0,96), Lys (0,99), Pro (1,01)

Exemplo 96 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-benzilamida EM FAB*: (M+H)+=800 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Cha (1,84), Lys (0,97), Pro (1,03)

Exemplo 97 (N-metil)£enilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(2,2-dimetil-2-fenetil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 109. EM FAB+: (M+H)+=836 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,94), Lys (0,96), Pro (0,98), Cha (1,00), Phe (1,07)

Exemplo 98 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -N- {(is) -l-ciclo-hexilmetil-2-guanidinoetil) amida O produto o-mesilo do exemplo 22 foi tratado com azida de sódio (542 mg, 8,4 mmole) em 5 ml de DMF. A azida (550 mg, 2 mmole) foi reduzida na amina (EM: (M+H)+=257) com rendimento quantitativo. A amina (160 mg, 0,6 mmole) foi guanidinada, o grupo Boc foi removido e, em seguida, realizaram-se o acoplamento e desprotecção finais. EM FAB+: (M+H)+=738 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,41), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (1,22) 74017 4993.PG.01 -68- Exemplo 99

Λ·. V r· y

{(2RS)-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH 0 ácido (2RS)-ciano-3-fenilpropiónico foi preparado como descrito no exemplo 173. O péptido do título foi preparado sob as condições de fase sólida padrão descritas no exemplo 1. Não se conseguiu separar o par diastereoisomérico por HPLC. EM FAB*: (M+H)+=857

Exemplo 100 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(l-fenil)ciclopropilmetil}amida EM FAB+: (M+H)+=834 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,83), Lys (1,00), Pro (0,96), Cha (0,98), Phe (1,05) A amina (EM: (M+H)+=257)

Exemplo 101 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-difenil-metilamida EM FAB+: (M+H)+=876 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,89), Lys (0,92), Pro (1,08), Cha (1,78)

Exemplo 102 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-nitro-benzil)amida EM FAB+: (M+H)+=845 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,89), MePhe (0,87)

Exemplo 103 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-guanidino- 74017 4993. PG. 01 ‘J-r -69- c..... .v- ' butil)-N-(2-fenetil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 212, excepto que se usou ácido Boc-(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanóico em lugar de ácido Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanóico. EM FAB+: (M+H)+=927 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,72), Lys (1,03), Pro (0,97), Cha (1,70)

Exemplo 104

Hidrocinamoil-lisil(N-epsilon-nicotil)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil-OH

Depois de se ter sintetizado hidrocinamoil-lisil(N-epsilon-Fmoc)-prolil-{ (2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-Darginil(guanidino-Tos)-Oresina de acordo com o método descrito no exemplo 1, a péptido-resina (0,6 g) foi tratada com 15 ml de piperidina a 20% em DMF durante 8 horas. Depois da resina ter sido lavada com DMF (4 x 15 ml), foi, em seguida, reagida com ácido nicotínico (10 equivalentes) na presença de N,N'-diisopropilcarbodiimida (DIC) (10 equivalentes) em 15 ml de DMF durante 1 hora. O péptido em bruto (99,4 mg) foi isolado e purificado de acordo com o procedimento descrito no exemplo 2 para dar 31,7 mg do composto do título. EM fab+: (M+H)+=937 Anal. Aminoácidos: Lys (0,99), Pro (0,95), Cha (0,98), Phe (0,96), Arg (1,04)

Exemplo 105 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propano il}-fenilalanil-N-(2 -amidinoe ti 1) amida 0 composto (130 mg, 0,14 mmole) sintetizado como um precursor para o exemplo 154, foi convertido no seu análogo amidina pelo método da literatura: Lee, M.; Coulter, D. M.; Lown, J. W.; J. Oro. Chem. f 1988, 53., 1858. O composto obtido foi desprotegido e purificado para obter o composto do título (27 mg) com um rendimento de 18%. 74017 4993.PG.01 EM FAB+: (M+H)+=774 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,86), Lys (0,91), Pro (1,02), Cha (0,95), Phe (1,12)

Exemplo 106

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=684

Exemplo 107 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-NH2

Fez-se reagir Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon--Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OH (exemplo 3) (100 mg, 0,13 mmole) com hidrocloreto de H-fenilalanilamida comercialmente disponível (30 mg, 0,15 mmole) via o método do anidrido misto como exemplificado no exemplo 116. A desprotecção e purificação deu 91 mg do composto do título com um rendimento de 74%. EM FAB+: (M+H)+-704 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,81), Cha (0,98), Lys (1,02), Pro (1,04), Phe (0,95)

Exemplo 108 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-fene-til )amida EM FAB+: (M+H)+=814 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Cha (1,88), Lys (0,98), Pro (1,02)

Exemplo 109 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(2,2-dimetil 2-fenetil)amida 74017

4993.PG.01

Preparou-se dietil(alfa,alfa-dimetilbenzil)malonató de acordo com a literatura: Holmberg, C.; Liebigs. Ann. Chem., 1981, 748. Este (4,0 g, 14,4 mmole) foi refluxado em 30 ml de ácido propiónico/ácido clorídrico 12N 1:1 durante 2 dias para dar 1,84 g (72%) de ácido 3-fenil-3,3-dimetilpropiónico. Este ácido (1,0 g, 5,6 mmole) foi convertido em N-Boc-2-fenil-2,2--dimetiletilamina (EM: (M+H)+=250) (250 mg, 18%) pelo método descrito na literatura: Plattner, J. J. et. al., J. Med. Chem. . 1988, 31, 2277. O composto do título foi preparado a partir da amina desprotegida e do composto do exemplo 5 via o método EDC e HOBT seguido por desprotecção e purificação. EM FAB+: (M+H)+=842 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,86), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,92)

Exemplo 110 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-N-((is)-l-fenil-2-guanidino)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=732 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,23), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (1,15)

Exemplo 111

Cis-1-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil>-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}]amido-4--aminociclo-hexano

Este composto numa forma bis protegida com Boc foi preparado como um intermediário na síntese do exemplo 123. A desprotecção deu o composto do título. EM FAB+: (M+H)+=807 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,97), Lys (1,00), Pro (1,07), Cha (1,94)

Exemplo 112 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo**hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(lRS)-l--benzil-3-fenilpropil}amida EM FAB+: (M+H)+=918 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,83), Lys (0,97), 74017 /*/·' 4993.PG.01 V -72- ν'1,'·, Pro (1,03), Cha (1,80)

Exemplo 113 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2~amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(dl)-1-fe-nil-3-fenilpropil}amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 60. EM FAB+: (M+H)+=904 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,92), Lys (0,91), Pro (1,09), Cha (1,80)

Exemplo 114 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-nitro-benzil)amida EM FAB+: (M+H)+=845 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,89), MePhe (0,87)

Exemplo 115 N-(4-guanidinobutil)-N-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)--2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpro-panoil}]amina

Tratou-se N-[Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropil]-N-[(4--Cbz-amino)butil]amina (231 mg, 0.5 mmole), preparado no exemplo 78, com ácido clorídrico 4N em dioxano para remover o grupo Boc, seguido por acoplamento ao composto do exemplo 3 (381 mg, 0,5 mmole) para obter N-[Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon--Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropano i1]-N-[4-(N-Cbz-amino)butil]amina (350 mg, EM: (M+H)+=1101) com rendimento de 64%. Este produto foi hidrogenado, guanidinado e, em seguida, tratado como descrito no exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=809 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,81), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,89)

74017 4993.PG.01 -73-

Exemplo 116 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-picolil)-amida

Dissolveu-se N-Boc-fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil--{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-he-xilpropanoil}-OH (exemplo 5), (230 mg, 0,3 mmole) em 10 ml de cloreto de metileno e arrefeceu-se a -20°C (banho de gelo seco/tetracloreto de carbono), adicionando-se isobutilcloro-formato (IBCF) (49 μΐ, 0,36 mmole), seguido de N-metilmorfolina (NMM) (40 μΐ, 0,36 mmole). Após 5 minutos a -20°C, adicionou-se 2-(aminometil)piridina (62 μΐ, 0,6 mmole); a mistura reaccional foi agitada a -20°C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e adicionou-se acetato de etilo (30 ml) ao resíduo. A camada de acetato de etilo foi lavada com solução de bicarbonato de sódio a 10%, salmoura, hidrogenossulfato de potássio a 10%, e salmoura e, em seguida, seca sobre sulfato de magnésio anidro. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi tratado com ácido clorídrico 4N em dioxano (10 ml) durante 45 minutos. Depois do solvente ter sido evaporado, o péptido obtido (185 mg) foi purificado como descrito no exemplo 2. A partir do produto em bruto (95 mg), obtiveram-se 60,0 mg de composto do título puro. EM FAB+: (M+H)+=801 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,84), MePhe (1,14)

Exemplo 117 l-Benzil-4-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil)]-piperazina EM FAB+: (M+H)+=716 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,87), Lys (0,97), Pro (1,06), Cha (0,98) 74017 4993.PG.01 -74-

Exemplo 118 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{N-2-aminoetil-N-2-fenetil) amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 156. EM FAB+: (M+H)+=704 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,83), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,97)

Exemplo 119 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(S) - (-) -2-amino-3-f enil-l-propanol) O composto foi preparado por analogia com o exemplo 107, excepto que se usou (S)-(-)-2-amino-3-fenil-l-propanol (fenilalaninol) para dar o composto do título com um rendimento de 63%. EM FAB+: (M+H)+=691 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Cha (0,96), Lys (1,00), Pro (1,00)

Exemplo 120 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2~amino-3-ciclo-hexilpropanoil) -N- {(3-aminopro-pil)amida)

Fez-se reagir Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon--Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil)-0H (exemplo 5), (0,2 g, 0,22 mmole) com 1,3-diaminopropano (0,46 ml, 5,5 mmole) via o método do anidrido misto como exemplificado no exemplo 116 com um rendimento de 30%. 0 tratamento com ácido trifluoroacético em cloreto de metileno, seguido por RP-HPLC deu o composto do título com um rendimento de 83%. EM FAB+: (M+H)+=767 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,92), Cha (1,91), Lys (1,01), Pro (0,99) 74017 4993.PG.01 -75-

Exemplo 121

(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(2-ciclo-hexiletil)amida EM FAB+: (M+H)+=667 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,08), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (0,97)

Exemplo 122

(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(IS)-1-fenil-3-guanidinopropil)amida EM FAB+: (M+H)+=746 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,29), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (1,13)

Exemplo 123

Cis-l-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil})-4-guani-dinilciclo-hexano A uma solução agitada de Cbz-trans-4-aminociclo-hexanol (4 g, 16,1 mmol), preparada como descrito no exemplo 133, em diclorometano (60 ml) e arrefecida a -78°C, adicionou-se anidrido trifluorometanosulfónico (3,24 ml, 19,3 mmol), seguido, após 5 minutos, por 2,6-lutidina (2,43 ml, 20,9 mmol) adicionada gota a gota. Depois de se ter completado a adição, a reacção foi agitada durante 30 min., antes da adição gota a gota de uma solução de azida de tetrametilguanídinium (Papa, J., J. Ora. Chem.. 1966, 11, 1426) (7,04 g, 48,2 mmol) em diclorometano (20 ml). A mistura foi agitada a -78°C durante 15 minutos, em seguida deixada aquecer a 0eC e agitada durante 2 horas. Foi passada através de um tampão de sílica (25 g, 70-230 mesh) e eluída com diclorometano seguido por acetato de etilo. As fracções contendo o produto desejado foram concentradas in vacuo para dar um óleo. O resíduo oleoso foi repartido entre acetato de etilo (50 ml) e ácido clorídrico IN (50 ml) e a camada aquosa ácida foi extractada com uma porção adicional de acetato de etilo. Os extractos orgânicos foram combinados, lavados com

74017 4993.PG.01 -76- salmoura (50 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e o solvente removido in vacuo para dar o produto em bruto como um óleo (4,50 g). 0 material foi purificado por cromatografia líquida de média pressão (MPLC) sobre sílica gel (70-230 mesh, coluna de 1,5 x 45 cm) usando hexano/acetato de etilo 6:1, hexano/acetato de etilo 4:1, gradiente de passos com acetato de etilo. As fracções contendo o produto puro foram reunidas e concentradas in vacuo para dar azida de N-Cbz-cis-4-aminociclo-hexilo (1,68 g, 38% de rendimento) como um sólido amarelo: p.f. 42-460 C; RMN (300 MHz) δ 7,36 (m, 5H), 5,09 (s, 2H), 4,70 (largo, 1H), 3,71 (largo, 1H), 3,60 (largo, 1H), 1,48-1,84 (comp., 8H). Continuou-se com este composto usando os procedimentos descritos no exemplo 133 para dar a amina: (1,03 g, rendimento de 86%) como um óleo claro: ^-H RMN (300 MHz) δ 7,35 (m, 5H), 5,10 (s, 2H), 4,84 (largo, 1H), 3,73 (largo, 1H), 2,87 (m, 1H), 1,25-1,76 (comp., 10H). A amina foi acoplada ao péptido por analogia com o exemplo 133 para dar o produto acoplado (72 mg, 40%). EM: (M+H)+= 1114. A guanidinação e desprotecção foram realizadas por analogia com o exemplo 133 para dar o composto do título (15 mg, 23% de rendimento) como o sal trifluoroacetato na forma de um pó branco. EM FAB+: (M+H)+=849 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,97), Lys (1,00), Pro (1,04), Cha (1,90)

Exemplo 124 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil) -N- {(1RS) -l-benzil-3-f enilpropil} amida EM FAB+: (M+H)+=765 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,81), Lys (1,01), Pro (0,99), Cha (0,86)

Exemplo 125 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -f enilalanil-N-{ 2- (indol-3-il) etil) amida EM FAB+: (M+H)+=847 Anal. Aminoácidos: Lys (1,00), Pro (0,99), Cha (0,98), Phe (1,01), MePhe (0,85) 74017

4993.PG.01 -77-

Exemplo 126 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(3-carboxi)-benzil}amida EM FAB+: (M+H)+=844 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,75), MePhe (0,86)

Exemplo 127 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{2-(4-hidro-xifenil)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=830 Anal. Aminoácidos: Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,95), MePhe (1,11)

Exemplo 128 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-picolil)-amida EM FAB+í (M+H)+=80l Anal. Aminoácidos: Lys (1,04), Pro (0,96), Cha (1,97), MePhe (1,09)

Exemplo 129 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-(ciclo-hexilmetil)amida EM FAB+: (M+H)+=800 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,95), Lys (0,95), Pro (1,02), Cha (0,97), Phe (1,05)

Exemplo 130 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-cÍcl0-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-benzilamida EM FAB+: (M+H)+=794 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,97), Cha (0,97), Lys (1,04), Pro (1,07), Phe (0,92) 74017 4993.PG.01

-78-

Exemplo 131 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-metil-N-benzilamida EM FAB+: (M+H)+=808 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,09), Lys (0,97), Pro (0,97), Cha (1,00), Phe (1,06)

Exemplo 132 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-benzil-N--{(3RS)-3-fenil-4-guanidinobutil)amida

Fez-se reagir cianeto de benzilo (0,97 ml, 8,4 mmole) com bis(trimetilsilil)amida de litio (LHMDSA) (8,4 ml, 8,4 mmole) em 5 ml de THF a -78°C durante 1 hora. Após ter sido adicionada uma outra alíguota de LHMDSA (4,2 ml, 4,2 mmole), adicionou-se em seguida hidrocloreto de N-(2-cloroetil)dibenzilamina (1,0 g, 3,4 mmole). A reacção foi deixada repousar à temperatura ambiente e em seguida foi aquecida a 50°C durante 3,5 horas. A mistura foi vertida em gelo/água e o produto foi extractado com acetato de etilo. A camada de acetato de etilo foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para dar cianeto de alfa-(Ν,Ν-dibenzilaminoetil)benzilo (1,05 g), isolado com rendimento de 94%. (EM: (M+H)+=341).

Após hidrogenólise (exemplo 146), a amina obtida (237 mg, 0,7 mmole) foi feita reagir com N-etoxicarbonilftalimida (302 mg, 1,4 mmole) de acordo com o método da literatura: Nefkens, G. H.; Tesser, G. I.; Nivard, R. J.: Rec. Trav. Chim. Pavs-Bas. 1960, 79, 688 para dar (N,N-dibenzilaminoetil)-l-feniletil-ftalimida (210 mg, 64%). (EM: (M+H)+=475). O grupo mono N--benzilo do produto acima foi removido por hidrogenólise e o produto obtido foi acoplado ao composto do exemplo 5 para dar o análogo pentapéptido completamente protegido com rendimento quantitativo.

Este pentapéptido (260 mg, 0,2 mmole) foi tratado com -79- -79- // 74017 4993.PG.01 hidrato de hidrazina (10 ml) em 5 ml de etanol à temperatura ambiente durante 5 horas com agitação. Depois do solvente ter sido removido, realizaram-se a guanidinação, desprotecção e purificação finais, para obter o composto do título (30 mg). EM FAB+: (M+H)+=989 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,95), Lys (0,99), Pro (1,01), cha (1,95)

Exemplo 133

Trans-1-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ci-clo-hexilpropanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}]-4--guanidinilciclo-hexano O hidrocloreto de trans-4-aminociclo-hexanol comercialmente disponível (50 g, 0,33 mol) foi tratado com cloroformato de benzilo (Cbz-Cl) (51,8 ml, 0,36 mole) sob condições de Schotten-Baumann padrão para dar N-Cbz-trans-4-aminociclo-hexanol (62,33 g, rendimento de 88%) como um sólido branco: p.f. 160-162°C; RMN (300 MHz) δ 7,36 (m, 5H), 5,10 (s, 2H), 4,58 (largo, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 2,01 (t largo, 4H, J=13,5 Hz), 1,40 (m, 2H), 1,20 (m, 2H)? EM: (M+H)+=250, (M+H+NH3)+= 267. A uma solução do composto acima (5 g, 20 mmol) e trietilamina (8,4 ml, 60 mmol) em diclorometano (60 ml), arrefecida a -10°C, foi adicionada uma solução de piridina-complexo de trióxido de enxofre (9,58 g, 60 mmol) em DMSO (60 ml) numa única porção. A mistura foi agitada a -10°C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 2 horas. Adicionou-se piridina-complexo de trióxido de enxofre adicional (3,2 g, 20 mmol) e a reacção foi agitada durante mais 15 min. A mistura foi vertida para salmoura gelada (180 ml) e o produto extractado em éter gelado (160 ml). A emulsão resultante foi filtrada por um leito de Celite e as duas fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com ácido cítrico aquoso a 10% gelado (180 ml) seguido por salmoura gelada (180 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e o solvente removido in vacuo para dar um sólido ceroso em bruto (2,86 g) que foi purificado por MPLC sobre sílica gel (70-230 mesh, -80- 74017 4993.PG.01 coluna de 1,5 x 45 cm) usando hexano/acetato de etilo 4:1, hexano/acetato de etilo 2:1 e gradiente de passos com acetato de etilo. As fracções contendo o produto puro foram reunidas e concentradas in vacuo para dar azida de N-Cbz-4-aminociclo-hexanona (2,36 g, 48% de rendimento) como um sólido branco: p.f. 82-84"C; 1H RMN (300 MHz) δ 7,37 (m, 5H), 5,11 (S, 2H), 4,75 (largo, 1H), 4,00 (m, 1H), 2,41 (m, 4H), 2,25 (m, 2H), 1,71 (m, 2H). .

Esta cetona (2,36 g, 9,55 mmol) em THF (5 ml) foi adicionada gota a gota a uma solução agitada de L-selectrida em THF (1M, 19,1 ml, 9,55 mmol) sob N2 a -78°C. A mistura reaccional foi agitada a -78°C durante 3 horas, adicionou-se metanol (0,5 ml) e a mistura reaccional foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. Adicionou-se ácido clorídrico IN (5 ml) à mistura agitada durante a noite. A mistura reaccional foi extractada com acetato de etilo (2 x 20 ml) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2 x 20 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e o solvente removido in vacuo para dar 2,73 g de óleo em bruto. 0 produto em bruto foi purificado por MPLC sobre sílica gel (70-230 mesh, coluna de 1,5 x 45 cm) usando hexano/acetato de etilo 1:1, hexano/acetato de etilo 2:1, e gradiente de passos com acetato de etilo. As fracções contendo o produto puro foram reunidas e concentradas in vacuo para dar como um óleo claro (cis-N-Cbz-4-aminociclo-hexanol) (1,35 g, 57% de rendimento): -*-H RMN (300 MHz) δ 7,35 (m, 5H), 5,10 (s, 2H), 4,74 (largo, 1H), 3,91 (largo, 1H), 3,62 (largo, 1H), 1,18 (m, 8H); EM: (M+H)+=250, (M+H+NH3)+= 267.

A uma solução agitada de N-Cbz-cis-4-aminociclo-hexanol (1,03 g, 4,1 mmol) em diclorometano (20 ml) arrefecida a 0eC foi adicionada trietilamina (0,86 ml, 6,2 mmol) seguida por cloreto de metanossulfonilo (0,32 ml, 4,1 mmol). A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi agitada durante 2 horas, diluída com diclorometano (20 ml) e a solução foi lavada com ácido fosfórico IN (2 x 20 ml), solução de bicarbonato de sódio saturada (2 x 20 ml), seguida por salmoura (2 x 20 ml). A -81- 74017 v . - ... / 4993.PG.01 camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada in vacuo. O mesilato resultante foi dissolvido em DMF (20 ml), adicionou-se azida de sódio (0,54 g, 8,3 mmol) e a solução foi agitada a 55 “C durante 20 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e repartida entre acetato de etilo (40 ml) e água (20 ml). A camada orgânica foi lavada com salmoura (2 x 20 ml), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e reduzida in vacuo para dar 1,08 g de azida em bruto. A purificação sobre um tampão de sílica (25 g, 70-230 mesh) com eluição por um gradiente de passos hexano/acetato de etilo 6:1, hexano/acetato de etilo 4:1, hexano/acetato de etilo 2:1, deu a azida pura (trans-N-Cbz-4-aminociclo-hexilazida) (0,68 g, rendimento de 60%) como um sólido branco: p.f. 69-73“C 1H KMN (300 MHz) S 7,35 (m, 5H), 5,09 (s, 2H), 4,59 (largo, 1H), 3,51 (largo, 1H), 3,28 (dddd, 1H, J = 10,8, 10,8, 3,9, 3,9), 2,05 (m, 4H), 1,46 (m, 2H), 1,21 (m, 2H), ; EM: (M+H+NH3)+= 292.

Uma solução da azida acima (0,68 g, 2,5 mmol), de trietilamina (1,73 ml, 12,5 mmol) e de 1,3-propanoditiol (1,24 ml, 12,5 mmol) em metanol (12,5 ml) foi agitada a 55°C durante 48 horas. 0 metanol foi removido in vacuo e o resíduo oleoso repartido entre éter (15 ml) e HC1 IN (15 ml). A camada aquosa foi lavada com uma porção adicional de éter e em seguida o pH foi ajustado a pH 9 com hidróxido de sódio 7N. A solução aquosa básica foi em seguida extractada com éter (3 x 15 ml). Os extractos foram combinados, secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados in vacuo para dar trans-N-Cbz-4--aminociclo-hexilamina (0,48 g, rendimento de 77%) como um sólido ceroso amarelo claro: p.f. 155-160°C (decomp.) -*-Η RMN (300 MHz) δ 7,36 (m, 5H), 5,08 (s, 2H), 4,55 (largo, 1H), 3,47 (largo, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,02 (m, 2H), 1,86 (m, 2H), 1,51 (largo, 2H), 1,21 (m, 4H). 0 péptido Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-OH foi preparado sob as condições de fase sólida padrão exemplificadas no exemplo 1, removido da resina com HF anidro e reprotegido no terminal N e na epsilon-amina da -82- 74017 Γ' / .· &* 4993.PG.01 lisina coxn dicarbonato de di-terc-butilo. A uma solução agitada do péptido anterior (0,15 g, 0,16 mmol), de trans-N-Cbz-4-aminociclo-hexilamina (0,12 g, 0,48 mmol) e de hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (HOBT) (0,02 g, 0,16 mmol) em diclorometano (1,5 ml) arrefecida a 0°C adicionou-se hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-carbodiimida (EDC) (0,03 g, 0,18 mmol).A solução foi agitada à temperatura ambiente durante uma noite. Adicionou-se diclorometano (4 ml) e a solução foi lavada com ácido clorídrico IN (2 x 2 ml), sulfato de cobre (II) aquoso a 0,5% (2 x 2 ml), e salmoura (2 x 2 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e o solvente removido in vacuo para dar o produto em bruto (0,14 g) que foi purificado por MPLC sobre sílica gel (70-230 mesh, coluna de 1,5 x 45 cm) usando hexano/acetato de etilo 1:4 como fase móvel. As fracções contendo o produto puro foram retinidas e concentradas in vacuo para dar o produto acoplado (72 mg, rendimento de 40%): EM: (M+H)+=1141.

Fez-se borbulhar, num vaso apropriado, azoto e, em seguida, equipou-se com uma entrada de azoto. Adicionou-se o Cbz-péptido protegido anterior (72 mg, 0,06 mmol), Pd/C a 10% (8 mg, 10% em peso) e formato de amónio (40 mg, 0,6 mmol), seguidos por metanol (1 ml). A mistura foi agitada durante 1 noite e o catalisador foi removido por filtração e lavado com metanol. Os filtrados foram combinados e o solvente removido in vacuo para dar um resíduo oleoso. Aqueceu-se uma solução deste óleo, de trietilamina (0,03 ml, 0,21 mmol) e de nitrato de 3,5-dimetilpirazole-l-carboxamidina (0,038 g, 0,18 mmol), em dimetilformamida (1 ml), sob azoto, a 40°C durante 2 dias e em seguida agitada à temperatura ambiente durante 5 dias. 0 solvente foi removido in vacuo e o resíduo agitado com ácido clorídrico 4,8 M em dioxano (2 ml) durante 3 horas. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo triturado com clorofórmio (3 x 10 ml). O péptido em bruto resultante foi purificado pelo método descrito no exemplo 2. As fracções contendo o produto foram reunidas e liofilizadas para dar o composto guanidinado (10 mg, rendimento de 15%) como o sal trifluoroacetato na forma de um pó

74017 4993.PG.01

-83- branco. MS: (M+H+NH3)+= 849. Análise de aminoácidos, NMePhe (0,97), Lys (1,00), Pro (1,04), Cha (1,90)

Exemplo 134 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexil-2-(5-guanidinopentil)-propanoil}-N-(2-fenetil)amida

G O composto (2-amino-2-ciclo-hexilmetil-6-ciano)hexanoil-2--fenetilamida (290 mg, 0,8 mmole) foi reagido com dicarbonato de di-terc-butilo (0,18 g, 0,8 mmole) e trietilamina (TEA) (0,11 ml, 0,8 mmole) a 45°C durante uma noite. Adicionou-se acetato de etilo à mistura reaccional que foi em seguida lavada com ácido fosfórico 0,2 M, salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. Após cromatografia em coluna de sílica gel, eluindo com metanol a 2-5% em cloreto de metileno, obtiveram-se 170 mg de (2-Boc-amino-2-ciclo-hexil-metil-6-ciano)hexanoil-N-(2-fenetil)amida com rendimento de 47%. Esta (160 mg, 0,4 mmole) foi reagida com cloreto de cobalto (91,3 mg, 0,8 mmole) e boro-hidreto de sódio (133 mg, 4,0 mmole) em 5 ml de metanol durante 2 horas para obter 2-Boc-amino-2--ciclo-hexilmetil-7-amino-heptanoil-2-fenetilamida (EM: (M+H)+= 460) com rendimento quantitativo.

G

Toda a amina anterior foi protegida com um grupo Cbz, seguida por desprotecção do grupo Boc e acoplamento com o composto do exemplo 3 via o método EDC e HOBT. A reacção de acoplamento realizou-se à temperatura ambiente durante 6 dias. Isolou-se Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-prolil--{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2R/S)-2-amino-3-ci-clo-hexil-2-(5-N-Cbz-aminopentil)propanoil}-N-(2-fenetil)amida (EM: (M+H)+= 1234). Depois do grupo Cbz ter sido clivado por hidrogenólise o composto foi tratado por analogia com o exemplo 42. Durante o acoplamento do péptido, o resíduo 2R-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil racemizou, contudo os quatro diastereo-isómeros eram separáveis por RP-HPLC. EM FAB*: (M+H)+=941 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,74), Lys (1,00), -84- 74017 4993.PG.01

Pro (1,00), Cha (0,92)

Exemplo 135 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexil-2-(5-guanidinopentil)-propanoil)-N-(2-fenetil)amida O composto era um dos diastereoisómeros do exemplo 134. EM FAB+: (M+H)+=941 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,78), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,92)

Exemplo 136 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2S/R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexil-2-(5-guanidinopentil)-propanoil}-N-(2-fenetil)amida O composto era um dos diastereoisómeros do exemplo 134. EM FAB+: (M+H)+=941 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,95), Pro (1,05), Cha (0,91)

Exemplo 137 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2S/R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexil-2-(5-guanidinopentil)-propanoil}-N-(2-fenetil)amida O composto era um dos diastereoisómeros do exemplo 134. EM FAB+: (M+H)+=941 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,94), Pro (1,06), Cha (0,91)

Exemplo 138 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{2-(indol-3-il)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=853 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,97), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,87) 74017 4993.PG.01 -85-

Exemplo 139

(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- (benziloxi) -amida

Fez-se reagir Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-OH (exemplo 5), (141,8 g, 0,15 mmole) com hidrocloreto de O-benzil-hidroxilamina (48 mg, 0,3 mmole) na presença de isobutilcloroformato (IBCF) (25 μΐ, 0,18 mmole) e trietilamina (TEA) (67 μΐ, 0,48 mmole) em 5 ml de cloreto de metileno e tratou-se pelo método descrito no exemplo 116. 2/3 do produto em bruto foi purificado para dar 50,0 mg do composto do título. EM FAB+: (M+H)+=816 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,90), MePhe (0,96)

Exemplo 140 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(2-fenetil)amida EM FAB+: (M+H)+=808 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (0,95), Phe (1,25)

Exemplo 141 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-picolil)-amida EM FAB+: (M+H)+=801 Anal. Aminoácidos: Lys (1,09), Pro (0,91), Cha (1,77), MePhe (1,02)

Exemplo 142 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(IR)-1-fenetil}amida EM FAB+: (M+H)+=808 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Lys (0,94),

74017 4993.PG.01 -86-

Pro (1,04), Cha (0,97), Phe (1,04)

Exemplo 143 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-N-(5-aminopentil)-N-(2-fenetil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 156. EM FAB+: (M+H)+=746 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,84), Lys (0,98), Pro (1,03), Cha (0,90)

Exemplo 144 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil--propanoil}-fenilalanil-N-(4-guanidinobutil)amida

Acoplou-se Boc-fenilalanina (1,16 g, 4,38 mmole) com sulfato de agmatina (1,00 g, 4,38 mmole) usando hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-carbodiimida (EDC) (0,84 g, 4,38 mole), HOBT (0,6 g, 4,38 mmole) e NMM (0,5 ml, 4,38 mmole) em 10 ml de DMF/água 8:2. Após agitação durante uma noite, mistura foi diluída com clorofórmio e a camada orgânica foi lavada com bicabornato de sódio saturado e salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O análogo de dipéptido obtido (com rendimento de 55%, EM:(M+H)+=378) (50 mg, 0,13 mmole) foi tratado com ácido clorídrico 4N em dioxano e em seguida feito reagir com Boc-(N-Metil)-fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-OH (composto 3) (100 mg, 0,13 mmole) pelo processo descrito no Exemplo 116. A desprotecção foi realizada usando ácido trifluoroacético a 50% em cloreto de metileno e em seguida efectuou-se a purificação para se obter o composto do título com um rendimento de 12%. EM FAB+: (M+H)+=817 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,75), Lys (1,08), Pro (1,06), Cha (0,96), Phe (0,89) 74017

4993.PG.01 -87-

Exemplo 145 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-{(R)-1-£enetil}amida EM FAB+: (M+H)+=814 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,04), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,98)

Exemplo 146 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R) -2-amino-3-ciclo-hexil--propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(2RS)-2-fe-nil-4-guanidinobutil}amida o grupo ciano de cianeto de alfa-(N,N-dibenzilaminoetil)benzilo (1,0 g, 2,9 mmole) como descrito no Exemplo 132 foi reduzido por hidrogenólise; e a amina obtida (56 mg, 0,2 mmole) foi feita reagir com o composto (150 mg, 0,2 mmole) do Exemplo 5 pelo método EDC e HOBT como descrito no Exemplo 3. O péptido obtido (220 mg, 0,2 mmole) foi hidrogenado com 10% de paládio em carvão (220 mg) em 50 ml de ácido acético sob 4,05xl05Pa (4 atm) de hidrogénio para remover o grupo bis-benzilo. O grupo amino livre obtido foi guanidinado e obteve-se o composto do título (42 mg, isolado como uma mistura de diastereoisómeros) pelo método descrito no exemplo 116. EM FAB+: (M+H)+=899 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,98), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,92)

Exemplo 147

Trans-l-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ci-clo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-4-aminociclo-hexano

Este composto numa forma bis protegida com Boc foi preparado como um intermediário na síntese do exemplo 133. A desprotecção deu o composto do título. EM FAB+: (M+H)+=807 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,97), Lys (lf00), Pro (1,06), Cha (1,91) 74017 4993.PG.01

Exemplo 148

{(R/S)-(2~carboxil)-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-Darginil-OH

Fez-se reagir éster monoetílico de (dl)-benzilmalonato (1,11 g, 5 mmole) com álcool terc-butílico (0,707 ml, 7,5 mmole) em presença de diciclo-hexilcarbodiimida (DCC) (1,135 g, 5,5 mmole) e dimetilaminopiridina (DMAP) (0,611 g, 5 mmole) em 10 ml de cloreto de metileno. A reacção realizou-se a 0°C durante 4 horas e à temperatura ambiente durante uma noite. Após o processamento normal, obteve-se o éster mono-terc-butil monoetílico de (dl)-benzilmalonato (1,191 g, 85,6%). Este (1,150 g, 4,1 mmole) foi dissolvido em 7 ml de álcool etílico e adicionou-se 3 ml de hidróxido de lítio 2N (6 mmole) e a mistura reaccional foi agitada durante 45 minutos. Isolou-se éster mono-terc-butil de (dl)-benzilmalonato (0,986) com rendimento de 96,1%. 0 éster mono-terc-butil obtido foi usado para reagir com a péptido-resina [H-lisil(N-epsilon-Cbz)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil(guanidino-Tos)-Oresina e tratou-se de mesma maneira descrita no exemplo 2.

Os isómeros foram separados por RP-HPLC. Obtiveram-se 14,6 mg do isómero do título. EM FAB+: (M+H)+=882 Anal. Aminoácidos: Lys (0,94), Pro (0,88), Cha (2,07), Arg (1,17)

Exemplo 149

{(R/S)-(2-carboxil)-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-Darginil-OH

Este composto (8,6 mg) era outro dos isómeros obtidos no exemplo 148. EM FAB+: (M+H)+=882 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (0,99), Cha (1,98), Arg (1,05) -89- 74017 4993.PG.01

Exemplo 150 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1-fenil-2--fenetil)amida EM FAB+: (M+H)+=890 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,94), Lys (0,91), Pro (1,09), Cha (1,81)

Exemplo 151 (N-metil )fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-{2-(piperidin-l-il)etil)amida EM FAB+: (M+H)+=815 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,01), Cha (0,98), Phe (1,04), MePhe (1,04)

Exemplo 152 (N-metil) f enilalanil-lisil-prolil-{ (2R) -2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-{2-(4-hidroxifenil)etil)amida EM FAB+: (M+H)+=824 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,00), Cha (0,99), Phe (1,04), MePhe (0,75)

Exemplo 153

N-Cbz-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenil-alanil-Darginil-OH

Preparou-se Boc-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo~hexilpropa-noil}-fenilalanil-Darginil(guanidino-Tos)-Oresina (2,48 g) a partir de Boc-Darginil(guanidino-Tos)-Oresina (2,0 g, 0,44 mmole/g) de acordo com o método descrito no em seguida 1. A péptido-resina (0,5 g) foi tratada com HF-anisolo (exemplo 2) e o péptido extractado com 50 ml de metanol. 0 metanol foi removido por evaporação e o resíduo obtido foi triturado com éter dietílico para dar um sólido (158,5 mg) como o sal di--hidrogenofluoreto de prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil)-fenilalanil-Darginil-OH. Este foi reagido com N-alfa--Cbz-N-epsilon-Boc-lisina via o método do anidrido misto como ?}Ϋ 74017 4993.PG.01 -90-descrito no exemplo 116. Metade do produto em bruto (87,6 mg) foi tratada com 5 ml de ácido clorídrico 4N em dioxano durante 1 hora e purificado pelo método descrito no exemplo 2 para dar 23,2 mg do composto do título. EM FAB+: (M+H)+=834 Anal. Aminoácidos: Lys (1,02), Pro (0,95), Cha (1,05), Phe (1,05), Arg (0,99)

Exemplo 154 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(3-cianoetil) amida O composto (Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil-(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-fenilalanil-OH) do exemplo 4 (200 mg, 0,22 mmole) foi reagido com 3- aminopropanonitrilo (15,5 mg, 0,22 mmole) em THF via o método do anidrido misto como descrito no exemplo 116. Uma porção do composto obtido (35 mg) foi desprotegida e purificada para dar o composto do título (16 mg, 43%). EM FAB+: (M+H)+=757 Anal. Aminoácidosί MePhe (0,65), Lys (0,85), Pro (0,66), Cha (0,72), Phe (0,64)

Exemplo 155 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(2-guanidinoetil)-N-(2-fenetil) amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=746 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,85), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,84)

Exemplo 156 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(4-aminobutil)-N-(2-fenetil)amida

Reduziu-se N-fenilacetil-N'-Cbz-l,4-butanodiamina com borano-tetra-hidrofurano (THF) como descrito no exemplo 66. A -91- 74017 4993.PG.01 amina obtida (96 mg, 2,6 mmole) foi acoplada com Boc-(N--metil)fenilalanil-lisil-(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-OH (exemplo 3) (200 mg, 2,6 mmole) via o método EDC e HOBT (exemplo 3) para obter Boc-(N-metil)-fenilalanil-lisil-(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-N-(4-Cbz-aminobutil)-N-(2-fenetil)amida com rendimento quantitativo. A hidrogenação deu a amina correspondente com 83% de rendimento. O tratamento do composto (60 mg) com ácido trifluoroacético a 50% em cloreto de metileno e, em seguida, purificação deu o composto do título (26 mg, 37%). EM FAB+: (M+H)+=732 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,89), Cha (0,84), Lys (1,00), Pro (1,00)

Exemplo 157 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{ (1RS) -l-benzil-4-guanidinobutil) amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 62, excepto que se usou o composto do exemplo 3 em vez do composto do exemplo 5. EM FAB+: (M+H)+=760 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,09), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (i,oo)

Exemplo 158 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-0-benzil

Fez-se reagir Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon--Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(2R/S) -2--amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-0H (exemplo 5), (91,1 mg, 0,1 mmole) com álcool benzilico (12,4 μΐ, 0,12 mmole) na presença de EDC (23 mg, 0,12 mmole) e Ν,Ν-dimetilaminopiridina (DMAP) (1,2 mg, 0,01 mmole) em 3 ml de cloreto de metileno. O péptido obtido foi tratado com 3 ml de ácido clorídrico 4N em dioxano e, em seguida, purificado por RP-HPLC. Durante o procedimento de acoplamento, o resíduo (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil racemizou. Os diastereoisómeros eram separáveis por RP-HPLC. -92- 74017 4993.PG.01 EM FAB+: (M+H)+=801 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,46), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,94)

Exemplo 159 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2R/S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -O-benzil 0 composto era um dos isómeros descritos no exemplo 158. EM FAB+: (M+H)+=801 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,42), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (1,87)

Exemplo 160 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2R) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N-benzilamida O composto foi sintetizado da mesma maneira descrita no exemplo 5, excepto que se usou ácido Boc-(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico em lugar de ácido Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico. EM FAB+: (M+H)+—800 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,08), Lys (0,94), Pro (1,06), Cha (1,83)

Exemplo 161

2-Cianocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino~3-ciclo-hexil-propa-noil}fenilalanil-Darginil-OH O composto do título foi preparado sob as condições de fase sólida padrão descritas nos exemplos 1 e 2, usando ácido alfa--cianocinâmico comercialmente disponível. EM FAB+: (M+H)+=855

Exemplo 162 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- (1-f luoreno) -amida EM FAB+: (M+H)+=874 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,93), Lys (0,91), Pro (1,09), Cha (1,79) 74017 4993.PG.01

-93-

Exemplo 163 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(Ν'-fenil)-hidrazida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 139. EM FAB+: (M+H)+=801 Anal. Aminoácidos: Lys (0,97), Pro (1,02), Cha (2,00), MePhe (0,95)

Exemplo 164 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -f enilalanil-N- {2- (4-aminof enil) etil} amida EM FAB+: (M+H)+=823 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,01), Cha (0,96), Phe (1,03), MePhe (0,76)

Exemplo 165 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -f enilalanil-N- (2-picolil) -amida EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (0,99), Cha (0,92), Phe (1,04), MePhe (1,09)

Exemplo 166 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-anilida O composto do título foi preparado a partir do exemplo 4 (100 mg, 0,11 mmole) e anilina (10 jul, 0,11 mmole) em THF via o processo do anidrido misto descrito no exemplo 139. 0 composto do título puro (57 mg, 57%) foi isolado após RP-HPLC. EM FAB+: (M+H)+=780 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,89), Lys (1,00), Pro (0,98), Cha (1,00), Phe (1,02)

Exemplo 167 (N-metil) f enilalanil-lisil-prolil-{ (2R) -2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -N- (3-guanidinopropil) -N- (2-f enetil) amida -94- 74017 4993.PG.01 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=760 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,84), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,87)

Exemplo 168

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-fenilalanil-Y[CH2N (hidrocinamoil)]Darginil-OH

Fez-se reagir o sal do ácido trifluoroacético de H-lisil(N-epsilon-Cbz)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-fenil-alanil-Y[CH2NH]-Darginil(N-guanidino-Tos)-resina de Merrifield (exemplo 192) (0,54 g) com cloreto de hidrocinamoilo (0,27 ml) em 15 ml de diisopropiletilamina (DIPEA) em cloreto de metileno. Após tratamento com HF e liofilização, obteve-se 94,8 mg do produto em bruto. Este foi purificado por RP-HPLC para dar 15,3 mg de composto do título puro. EM FAB+: (M+H)+=950 Anal. Aminoácidos: Lys (1,00), Pro (1,02), Cha (0,92)

Exemplo 169 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(2-naftil)amida EM FAB+: (M+H)+=642 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,20), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,96)

Exemplo 170 Éster (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-{(RS)-fenilalanilJbenzílico 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 158.

Os dois diastereoisómeros não eram separáveis. EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,07), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (0,97), Phe (1,01) 74017

4993.PG.01 -95-

Exemplo 171 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2R) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N-benzilamida o composto foi preparado pelo método descrito no exemplo 5, excepto por se ter invertido a ordem das quiralidades dos dois resíduos {2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}. EM FAB+: (M+H)+=800 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,99), Lys (0,94), Pro (1,06), cha (1,77)

Exemplo 172 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-benzilamida 0 composto foi sintetizado pelo método descrito no exemplo 5, excepto que se usou (ácido Boc-(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico} em lugar de (ácido Boc-(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanóico). EM FAB+: (M+H)+=800 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,89)

Exemplo 173

((R/S)-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-((2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)--Darginil-OH

Preparou-se ácido (2RS)-2-ciano-3-fenilpropiónico por hidrogenação (4,05xl05Pa (4 atm), t.a.) de ácido alfa-cianocinâmico (10,0 g, 57,7 mmol) em acetato de etilo (150 ml) sobre paládio sobre carbono a 5% (0,5 g). O catalisador foi removido por filtração e enxaguado com acetato de etilo adicional. Após concentração sob pressão reduzida, obteve-se o produto como um sólido branco sujo (9,46 g, 54,0 mmol): p.f. 193-194 °C; ^ RMN (CDCI3 300 MHz) δ 7,45-7,20 (m, 5H), 5,17 (largo, 1H), 3,79 (dd, J = 6, 9 Hz, 1H), 3,28 (ddd, J = 6, 9, 31 Hz, 2H); EM m/e 193 (M+NH4)+. 74017 4993.PG.01 O péptido do título foi preparado sob as condições de síntese em fase sólida padrão descritas nos exemplos 1 e 2. Os produtos diastereoisoméricos foram separados corte do pico em HPLC de fase invertida. EM FAB+: (M+H)+=863

Exemplo 174

{(R/S)-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}--Darginil-OH

Este produto era um dos diastereoisómeros do composto descrito no exemplo 173. Este diastereoisómero foi obtido por separação por HPLC como acima descrito. EM FAB+: (M+H)+=863

Exemplo 175 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil>-N-(2,2-difenil-etil)amida EM FAB+: (M+H)+=890 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,92), Lys (0,91), Pro (1,09), Cha (1,80)

Exemplo 176 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(Ν'-benzil)-hidrazida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 139. EM FAB+: (M+H)+=815 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,96), MePhe (1,00)

Exemplo 177 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil- propanoil} -f enilalanil-N- (4-carboxibenzil) amida EM FAB*: (M+H)+=838 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,00), f jê*'

Phe (1,04), MePhe (0,76) 74017 4993.PG.01 -97-

Cha e ácido aminometilbenzóico (1,90),

Exemplo 178 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(3-picolil)amida EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: Lys (1,24), Pro (0,97), Cha (1,40), Phe (1,03), MePhe (1,06)

Exemplo 179 4-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-he-xil-propanoil}]-1-fenilpiperazina EM FAB+: (M+H)+=702 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,91), Lys (0,99), Pro (1,02), Cha (1,00)

Exemplo 180 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -N- (5-guanidinopentil) -N- (2-f enetil) amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=788 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,83), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (0,81)

Exemplo 181 (S)-(+)-2-fenilbutiril-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-Darginil-OH EM FAB+: (M+H)+=698

Exemplo 182 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(S)-1-fe-netil)amida EM FAB+: (M+H)+=814 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,08), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (2,03) 74017 ;Ή'

4993.PG.01 -98-

Exemplo 183 Éster (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-2-fenetí-lico EM FAB+: (M+H)+=815 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,06), Lys (0,95), Pro (1,05), Cha (1,93)

Exemplo 184 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino--3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(1-ciclo-hexil-l-ciclopropilmetil)-amida

Hidrogenou-se 1,1-fenilciclopropilmetilamina (0,11 g, 0,6 mmole) com negro de platina (0,11 g) em 12 ml de ácido acético sob 4,05xl05Pa (4 atm) de hidrogénio para dar 1-ciclo-hexil-l--ciclopropilmetilamina como um sal do ácido acético com rendimento quantitativo. Fez-se reagir Boc-(N-metil)fenilalanil--lisil(N-epsilon-Boc)-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa-noil)-fenilalanil-OH (exemplo 4), (100 mg, 0,1 mmole) com a amina anterior (35 mg, 0,2 mmole) pelo método EDC e HOBT previamente descrito. A desprotecção e purificação deu o 24 mg do composto do titulo. EM FAB+: (M+H)+=840 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,03), Lys (0,97), Pro (1,01), Cha (1,02), Phe (1,02)

Exemplo 185 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -f enilalanil-N- (4-amidinoetil) amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 105. EM FAB+: (M+H)+=802 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,85), Lys (0,95), Pro (1,09), Cha (0,90), Phe (0,96) -99- -99- 74017 4993.PG.01 f' '· // / )' . ·. - ._;-jsísssí^osí á‘ ^

Exemplo 186 _y ?' f|fe ^f’’" (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(l-benzil-2--fenetil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 60. EM FAB+: (M+H)+=904 Anal. Aminoácidosϊ MePhe (0,96), Lys (0,91), Pro (1,09), Cha (1,80)

Exemplo 187 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-^ propanoil} -f enilalanil-N- (N ’-f enil )hidrazida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 139. EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: Lys (0,95), Pro (1,00), Cha (0,96), Phe (1,05), MePhe (1,04)

Exemplo 188 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-carboxi-benzil)amida EM FAB+: (M+H)+=844 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (1,02), Cha e ácido aminometilbenzóico (2,87), Phe (1,04), MePhe (0,80)

Exemplo 189 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(4-picolil)-amida EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: Lys (1,02), Pro (1,00), Cha (0,94), Phe (0,97), MePhe (1,00)

Exemplo 190 l-Benzil-4-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil)-piperidina EM FAB+: (M+H)+=715 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Lys (1,00), Pro (1,03), Cha (0,98)

74017 4993.PG.01 -100-

Exemplo 191 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil> — {(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-guanidi-noetil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 156. EM FAB+: (M+H)+=795 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,80), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,75)

Exemplo 192

(S(+)-2-fenilbutiril}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-Y( CH2NH)-Darginil-OH

Colocou-se Boc-DArg(N-guanidino-Tos)-resina de Merrifield (0,44 mmole/g 1,5 g) num vaso de síntese de péptidos em fase sólida e os aminoácidos foram ligados pela ordem seguinte: Boc-ácido (2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanóico, Boc-prolina e (N-alfa-Boc,N-epsilon-Cbz)lisina. 0 N-Boc-fenilalanol comercialmente disponível (1,34 g, 5,34 mmole) foi convertido em N-Boc-fenilalanal de acordo com a literatura: Anhoury, M. L.; Crooy, P.; DeNeys, R.; Eliaers, J. J. Chem. Soc. Perkin. 1. 1974, 191; Hamada, Y.; Shioiri, T. Chem. Pharm. Buli. 1982, 30., 1921. Depois da sequência ter sido parada no passo 2 da agenda A, adicionou-se N-Boc-fenilalanal (2,67 mmole) em 10 ml de DMF contendo ácido acético glacial a 0,1%, seguido por cianoboro-hidreto de sódio (0,503 g, 8,01 mmole). A reacção foi deixada prosseguir à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois da péptido-resina obtida ter sido lavada com DMF (3 x 10 ml) e com cloreto de metileno (3 x 10 ml), iniciou-se o protocolo sintético seguinte (agenda A passo 2) para dar o péptido protegido-resina: sal do ácido trifluoroacético de H-lisil(N-epsilon-Cbz)-prolil-{(2R)-2-amino--3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-V(CH2NH)-Arginil(N-guanidi-no-Tos)-resina de Merrifield. Após a síntese, o péptido protegido-resina foi removido do vaso de reacção por lavagem da resina com DMF (3 x 20 ml) num funil de vidro sinterizado de 30- 74017 4993.PG.01 60 ml, seguida por lavagem da resina com cloreto de metileno (3 x 20 ml). A resina foi seca durante pelo menos cinco horas e depois pesada (obteve-se 2,21 g do péptido-resina). 0 péptido-resina anterior (0,54 g) foi feito reagir com ácido S(+)-2-fenilbutírico usando o método da carbodiimida como descrito no exemplo 1 e, finalmente, o péptido-resina foi tratado pelo método descrito no exemplo 2 para dar 21,6 mg do composto a partir de 72,4 mg de produto em bruto. EM FAB+: (M+H)+=832 Anal. Aminoácidos: Lys (0,93), Pro (1,07), Cha (0,93)

Exemplo 193 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-anilida EM FAB+: (M+H)+=786 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,09), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,98)

Exemplo 194 Éster (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-2-fenetílico EM FAB+: (M+H)+=809 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,08), Lys (0,97), Pro (1,02), Cha (0,98), Phe (1,01)

Exemplo 195 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(1-ciclo--hexil-l-ciclopropilmetil)amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 184. A realização da reacção à mesma escala deu 21 mg do composto do título. EM FAB+: (M+H)+=846 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,05), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (1,95) -102- 74017 4993.PG.01

Exemplo 196 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(difenilmetil)amida EM FAB+: (M+H)+=723 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,97), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (0,87)

Exemplo 197 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-(N'-benzil)hidrazida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 139. EM FAB+: (M+H)+=809 Anal. Aminoácidos; Lys (0,95), Pro (0,99), Cha (0,96), Phe (1,06), MePhe (0,94)

Exemplo 198 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -fenilalanil-N-(4-N, N-dimetilaminobenzil) amida EM FAB+: (M+H)+=837 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,01), Cha (0,96), Phe (1,03), MePhe (0,71)

Exemplo 199 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-Darginil-fenilalanil-N-(2-pi-colil)amida EM FAB+: (M+H)+=798 Anal. Aminoácidos; Lys (1,00), Pro (0,92), Phe (0,99), MePhe (0,95), Arg (1,01)

Exemplo 200 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-N-{2-(1-piperidinil)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=668 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,99) -103- 74017 4993.PG.01

Exemplo 201 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(3-guanidinopropil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 42. EM FAB+: (M+H)+=803 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,90), Phe (0,84)

Exemplo 202

{5-fenilvaleril)-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil- Ψ( CH2NH)-Darginil-OH 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 192. EM FAB+: (M+H)+=846 Anal. Aminoácidos: Lys (0,94), Pro (1,18), Cha (1,00)

Exemplo 203 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-{2-(4-aminofenil)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=829 Anal. Aminoácidos: Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,93), MePhe (1,06)

Exemplo 204 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-((R)-(+)-2-amino-3-fenil-l-propanol} EM FAB+: (M+H)+=838 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,88), Lys (0,97), Pro (1,02), Cha (0,97), Phe (1,01)

Exemplo 205 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(2-ciclo-hexil-2-metil)propil)amida

Hidrogenou-se {l-(l-fenil)ciclopropil}metilamina (205 mg, 1,1 mmole) usando negro de platina (410 mg) em 20 ml de ácido acético sob 4,05xl05Pa (4 atm) de hidrogénio durante 3 dias. 74017 4993.PG.01 -V' / ... -104- ..... reacção. Isolou-se 2-ciclo-hexil-2-metilpropilamina como um sal do ácido acético com rendimento quantitativo. Este material (28,5 mg, 0,12 mmole) foi acoplado ao exemplo 4 (100 mg, 0,1 mmole) via o método EDC e HOBT, seguido por desprotecção e purificação para dar o composto do título puro (51 mg, 47%). EM FAB+: (M+H)+=842 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,02), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,99), Phe (1,00)

Exemplo 206 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(2-naftil)--amida EM FAB*: (M+H)*=836 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,94), Lys (0,93), Pro (1,07), Cha (1,84)

Exemplo 207 l-Benzil-4-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)]-piperazina EM FAB*: (M+H)*=869 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (1,95), MePhe (0,87)

Exemplo 208 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(1-benzimidazol )metil}amida EM FAB*: (M+H)*=834 Anal. Aminoácidos: Lys (0,96), Pro (1,00), Cha (0,98), Phe (1,04), MePhe (0,73)

Exemplo 209 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-Darginil-fenilalanil-N-(3-pi-colil)amida EM FAB*: (M+H)*=798 Anal. Aminoácidos: Lys (presente), Pro (0,88), Phe (0,99), MePhe (0,94), Arg (1,01)

74017 4993.PG.01 -105-

Exemplo 210 Éster (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo--hexilpropanoil}-fenilalanil-metílico 0 éster Boc-(N-metil)fenilalanil-lisil(N-epsilon-Boc)-pro-lil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-fenilalanil-metílico obtido como um precursor do exemplo 4 foi desprotegido usando ácido trifluoroacético em cloreto de metileno e purificado para obter o composto do título com 55% de rendimento. EM FAB+: (M+H)+=719 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,90), Lys (0,99), Pro (1,03), Cha (0,98), Phe (0,99)

Exemplo 211 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(IS)-l-fenetil}amida EM FAB+: (M+H)+=808 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,84), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (0,90), Phe (0,90)

Exemplo 212 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(4-guanidinobutil)-N-(2-fenetil)amida A amina (140 mg, 1,5 mmole), isolada como um intermediário do exemplo 156, foi guanidinada e tratada pelo procedimento descrito no exemplo 42 para dar o composto do título puro (40mg, 25%). EM FAB+: (M+H)+=774 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,86), Lys (1,01), Pro (0,99), Cha (0,88)

Exemplo 213

Hidrocinamoil-fenilalanil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH β

74017 4993.PG.01 -106-

Este composto foi preparado usando as técnicas descritas nos exemplos 1 e 2.

Exemplo 214

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-N-{(IS)-1-ciclo-hexilmetil-(2-guanidino)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=709 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,90)

Exemplo 215 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(2-ciclo--hexi1-2-meti1)propi1}amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 205. EM FAB+: (M+H)+=848 Anal. Aminoácidos: MePhe (1,05), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,87)

Exemplo 216 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(2-naftil)amida EM FAB+: (M+H)+=737 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,95), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,94)

Exemplo 217 4-Benzil-l-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3--ciclo-hexilpropanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}]-piperidina EM FAB*: (M+H)+=868 Anal. Aminoácidos: Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (2,03), MePhe (1,34)

Exemplo 218 74017 4993.PG.01 .<U- -107- (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-amidino-etil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 105. EM FAB+: (M+H)+=780 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,75), Lys (0,96), Pro (1,04), Cha (1,82)

Exemplo 219 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-ciclo-hexilamida EM FAB+: (M+H)+=786 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,85), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,90), Phe (0,89)

Exemplo 220 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -N- (6-amino-hexil) -N- (2-f enetil) amida 0 composto foi preparado por analogia com o exemplo 156. EM FAB+: (M+H)+=760 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,70), Lys (1,00), Pro (1,00), Cha (0,84)

Exemplo 221

Hidrocinamoil-arginil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH

Este composto foi preparado usando as técnicas descritas nos exemplos 1 e 2.

Exemplo 222 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{2-(1-pipe-ridina)etil}amida EM FAB+: (M+H)+=821 Anal. Aminoácidos: Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (1,98), MePhe (0,99)

Exemplo 223 -108- 74017 4993.PG.01 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-(2-ciano-etil)amida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 154. EM FAB+: (M+H)+=763 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,77), Lys (0,97), Pro (1,03), Cha (1,93)

Exemplo 224 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1-indan)-amida EM FAB+: (M+H)+=826 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,82), Lys (0,99), Pro (1,01), Cha (1,83)

Exemplo 225 (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -N-3-aminopropil-N-2-f enetilamida O composto foi preparado por analogia com o exemplo 156. EM FAB+: (M+H)+=718 Anal. Aminoácidos: MePhe (0,83), Lys (0,98), Pro (1,02), Cha (0,91)

Exemplo 226

Hidrocinamoil-lisil-(N-metil)alanil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH

Este composto foi preparado usando as técnicas descritas nos exemplos 1 e 2.

Exemplo 227

Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-no-3-ciclo-hexil-propa-noil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-(N-fenetil)Darginil--0H.

Depois da sequência ter sido parada no passo 2 da agenda A, adicionou-se fenilacetaldeído comercialmente disponível (3,5 74017 4993.PG.01 equivalentes mole) em dimetilformamida contendo o ácido acético glacial a 0,1%, seguido de cianoboro-hidreto de sódio (10 equivalentes mole). A reacção foi deixada prosseguir à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois do péptido-resina obtido ter sido lavado com dimetilformamida (3x) e cloreto de metileno (3x), iniciou-se o protocolo sintético seguinte (exemplo 1, agenda A passo 2). 0 péptido-resina foi, em seguida, tratado como descrito no exemplo 2.

Os exemplos anteriores são apenas ilustrativos do invento e não pretendem limitar o invento aos compostos divulgados. Entende-se que estão incluídas no âmbito e natureza do invento, que é definido pelas reivindicações anexas, variações e alterações que são óbvias para um perito na arte.

Claims

74017 4993.PG.01 REIVINDICAÇÕES . v3 <í' 1 - Composto caracterizado por possuir a fórmula: A-B-D-E-G-J-L e os seus sais, ésteres ou amidas farmaceuticamente aceitáveis, em que os grupos A a L têm os valores: A e ’ B é R^~R^-Rgí D é seleccionado de entre R7-R8-R9, R35 e R37; E é seleccionado de entre RioRnRl2' R35 e R37; G, se presente, é Ri3“Ri4“Ri5? J é R16~R17“R18; L e R^g em que (a) R^ é seleccionado a partir do grupo consistindo em alquilo inferior, alcoxi, arilo, ariloxi, arilalcenilo, arilalcoxi, carboxialquilo, ciano, cianoalquilo, amino, aminoalquilo, alquilamino, arilalquilo, aroilo, haloalquilo, hidroxialquilo e hidrogénio; (b) R2 é seleccionado a partir do grupo consistindo em >CR99R100 e oxigénio, com a condição de que quando R2 é oxigénio, R-l é arilo, alquilo inferior ou arilalquilo; (c) R3 é seleccionado a partir do grupo consistindo em >C=0, >CH2 e -CH2C(0)-, com a condição de que quando R3 é >CH2 então R2 não pode ser oxigénio; (d) R4, R7, R10 e R13 são seleccionados independentemente uns dos outros de entre >CH2 e >NR50 em que R50 é hidrogénio, alquilo inferior ou arilalquilo; (e) R5 é >CR201R2q2; (f) Rg, R9, R12/ ri5 e Ri8 são seleccionados independentemente uns dos outros do grupo consistindo em >c=o, >CH2 e -CH2C(0)-; (9) R8 ® >CR210R211; (h) R1X é >CR220R221; (Ϊ) R14 é >CR23gR231; (j) R^g é seleccionado de entre o grupo consistindo em oxigénio, >NR50 e CH2,, com a condição de que quando R15 é C=0 e R16 é oxigénio , então R17, R^g e Rig tomado em conjunto -111- 74017 / 4993.PG.01 representam hidrogénio, alquilo inferior, arilo ou arilalquilo? (k) r17 é >cr301r302; (l) Rig é seleccionado a partir do grupo consistindo nos grupos OH e CN, com as condições de (i) quando Rlg é C=0, Rlg é OH; (ii) quando R^g é CH2, R^g é OH ou CN; R 4 I

X .ΛΛΛΛ (m) R35 é em que f é um número inteiro de 0 a 2, X é seleccionado de entre >C=0 e -CH2_ e R é seleccionado de entre hidrogénio e alquilo inferior; com as condições de (i) quando f é 0, X está em C-2 e R está em C-3 ou c-4; (ii) quando f é 1, X está em C-2 e R está em C-3, C-4 ou C-5 e C-3,4 estão saturados ou insaturados; e (iii) quando f é 2, X está em C-2, C-3 ou C-4 e R está em C-2, C-3, C-4, C-5 ou C-6 quando a posição não está ocupada por X e c-3,4 ou c-4,5 estão saturados ou insaturados; (n) R37 é

em que hélej éOoul; (o) R^ e R2 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo seleccionado de entre arilo, arilalquilo ou arilalcenilo; (p) R-l , R2 e R3 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo protector do N terminal; (q) R17, Rlg e R19 tomados em conjunto representam 74017 4993.PG.01 112-

opcionalmente um grupo seleccionado de entre o grupo consistindo em hidrogénio, hidroxialquilo, arilo, arilalquilo, amidinoalquilo, aminoalquilo, cianoalquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, (heterociclíco)alquilo, aminoalquilo, guanidinoalquilo, e amidinoalquilo, em que o cicloalquilo pode estar substituído com arilo, amino, amidino e guanidino; (r) R16, Ri7f Ris e Ri9 tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo seleccionado de entre os seguintes: (i) quando R16 é NR50 então Ri7”Ri8”Ri9/ tomado em conjunto, é aminoalquilo, guanidinoalquilo, arilalquilo ou (cicloalquil)alquilo; (ii) quando R16 é NR50 e R17 é arilalquilo ou (cicloalquil)alquilo, então Rie“Ri9 © arilalquilo, guanidinoalquilo ou hidroxialquilo; (s) R16, R17, R18 e Rig tomados em conjunto representam opcionalmente um grupo com as seguintes estruturas R20' R2l' R22' r24 ou r25^ em ^ue

em que m é um número inteiro dela3enéum número inteiro de 1 a 3, com a condição de ou m ou n terem de ser 2; p é um número inteiro de 0 a 3; X é carbono ou azoto

N N

R30 e r31 são seleccionados independentemente um do outro de entre arilalquilo, guanidinoalquilo ou

74017 4993.PG.01 -113- (cicloalquil)alquilo R22 é — NH X NH-R32 em que R32 é seleccionado de entre hidrogénio ou amidina, e o anel ciclo-hexilo pode existir na forma cis ou trans

NH em que 1*27' R28' R37 e R38 s^° seleccionados independentemente uns dos outros de entre hidrogénio ou oxigénio, com as condições de (i) quando R27 e R28 tomados em conjunto são oxigénio, então R37 e R38 são hidrogénio e (ii) quando R37 e R38 tomados em conjunto são oxigénio, então R27 e R28 são hidrogénio?

R2e R2b em que R29 é hidrogénio, arilo ou arilalquilo, com a condição de que quando um de R29 é arilo ou arilalquilo, os R29 restantes têm de ser hidrogénio; (t) R18 e R19 tomados em conjunto representam opcionalmente hidrogénio ou R23, em que R23 é 74017

4993.PG.01 -114-

em que R33 e R34 são seleccionados, independentemente um do outro, do grupo consistindo em alquilo inferior, arilalquilo, (cicloalquil)alquilo e cicloalquilo; (u) R99 é seleccionado independentemente a partir do grupo consistindo em hidrogénio, arilalquilo, arilo, arilalcenilo, alquilo inferior, carboxilo, alcoxi, hidroxialquilo e hidroxi; (v) R10o ® seleccionado a partir do grupo consistindo em hidrogénio, arilalquilo e alquilo inferior; (w) R2oi ® seleccionado a partir do grupo consistindo em alquilo inferior, arilalquilo, aminoalquilo, (heterocíclico)-aminoalquilo e guanidinoalquilo; (x) R202' r211' r221' r23i e R302 são seleccionados, independentemente uns dos outros, a partir do grupo consistindo em hidrogénio, arilalquilo, com a condição de que o arilalquilo em R231 ® benzilo quando J-L representam um residuo L-arginilo; alcenilo; e alquilo inferior? (y) r210 ® seleccionado a partir do grupo consistindo em hidrogénio, alquilo inferior, aminoalquilo, arilalquilo, (cicloalquil)alquilo e guanidinoalquilo; (z) R220 ® seleccionado a partir do grupo consistindo em hidrogénio, alquilo inferior, arilalquilo e (cicloalquil)-alquilo; (aa) R230 ® seleccionado a partir do grupo consistindo em alquilo inferior, arilalquilo, com a condição de que o arilalquilo em R230 é benzilo quando J-L representam um resíduo L-arginilo? guanidinialquilo e (cicloalquil)alquilo7 (ab) R301 é seleccionado a partir do grupo consistindo em alquilo inferior, arilo, arilalquilo, heterocíclicoalquilo, (cicloalquil)alquilo e guanidinoalquilo; tudo o que atrás se disse com as condições de (i) quando A é um α-aminoácido, Ri8"Ri9 n^° P0<^em ser -C02H; e -115- 74017 4993.PG.01 (ii) quando Ri8"R19 ® -C02H, A não pode ser um a-amlnoácido.
2 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R4, R7, R10, Ri3 e Ri6 serem seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre >NH, >N(alquilo inferior) e >N(arilalquilo) e R3, R6, Rg/ R12, R15 e R18 serem seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre >C=0 ou >CH2.
3 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por D ser um ácido N-alquilamino, L-prolina ou {(3R/S)-1,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-3-carbonil).
4 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R23o ser guanidinoalquilo, arilalquilo com a condição de o arilalquilo em R230 ser benzilo quando J-L representam um resíduo L-arginilo ou (cicloalquil)alquilo.
5 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a quiralidade preferida, se presente, de R-^j e R17 ser a configuração D ou não natural na posição alfa dos resíduos de aminoácido E e J.
6 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por A-B-D-E tomado em conjunto ser (N-metil)fenilalanil-lisil--prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil).
7 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser seleccionado a partir do grupo consistindo em: (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(1RS)-1-(ciclo-hexilmetil)-3-(guanidino)propil}-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil) - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil) -N- (3-f enilpro-pil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-fenilalanil-N-(3-nitrobenzil)amida ? 74017

4993.PG.01 -116-(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3~ciclo-hexil propanoil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-[N-(4-guanidino-butiril)amido]etil}amida ? (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- (1-naf til) amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N-( 5-guanidino pentil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propano il}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoi1}-N-(2-nafti1) metilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-guanidino propil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexi1-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1RS)-(1-benzil)-4-fenilbutil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1-fenil) ciclopropilmetil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1R/S)-1-benzil-4-guanidinobutil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(4-N#N-dimetilamino)benzil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil>-N-(4-guanidino butil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil>-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil>-N-benzilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-guanidinoetil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -f enilalanil-N- {(1-fenil) ciclopropilmetil} amida ; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-difenil-

74017 4993.PG.01 -117-

metilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-(2-amidinoetil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-fene-til) amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-(2,2-dimetil-2-fenetil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(1RS)-1-benz il-3-fenilpropil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-nitro-benzil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2 S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-( 2-picolil) -amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{ (2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{2-(4-hidro-xifenil)etil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(3-picolil)-amida; L (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-benzilamida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-N-{2-(indol-3-il)etil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil- propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(benziloxi)- amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(4-picolil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-N-{(1RS)-l-benzil-4-guanidinobutil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil- 74017 4993.PG.01 ‘ _ "-''tf/ -118- * propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -N- (l-fluoreno) -amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(N'-fenil)-hidrazida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(S)-l-fe-netil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-guanidi-noetil)-amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(1-ciclo-hexil-l-ciclopropilmetil)amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{2-(4-aminofenil)etil}amida; l-Benzil-4-[(N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}]-piperazina; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-N-{(IS)-l-fenetil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-{(2-ciclo-hexil-2-metil)propil}amida; (N-metil)fenilalanil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-N-(2-amidino-etil)-amida? (S)-(+)-2-fenilbutiril-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} - {(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -Darginil-OH; {(R)-(-)-2-fenilbutiril-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-he-xil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH; Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH; (R(-)-3-fenilbutiril}-lisil-prolil-((2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil} -{(2S) -2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil} -Darginil-OH; {(2-Benzil-2-ciano-3-fenil)propionil)-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropa- 74017 4993.PG.01 noil}-Darginil-OH; {(R/S)-3-amino-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {S(+)-3-fenilbutiril}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH; [2-{(S)-(+)-metoxi}-2-fenilacetil]-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; N-fenilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH; Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH; {(3S)-feni-lactil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-pro-panoil}-fenilalanil-Darginil-OH; Fenoxilacetil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-fenilalanil-Darginil-OH; {(l-fenil-l-ciclopentano)carbonil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {(2RS)-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-fenilalanil-Darginil-OH; {(R/S)-(2-carboxil)-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-ami-no-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-Darginil-OH; {(R/S)-2-ciano-3-fenilpropionil}-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-Darginil-OH; Hidrocinamoil-lisil-{(3R/S)-1,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-3-carbonil}-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil)-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH; Hidrocinamoil-norleucil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-pro-panoil}-((2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH; Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Dfenilalanil-OH; Hidrocinamoil-fenilalanil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH; Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-N-{(IS)-l-ciclo-hexilmetil-2-guanidinoetil}-amida; Hidrocinamoil-arginil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil)-Darginil-OH; -120- -120-

74017 4993.PG.01 Hidrocinamoil-lisil-(N-metil)alanil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil propanoil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-Darginil-OH; e Hidrocinamoil-lisil-prolil-{(2R)-2-amino-3-ciclo-hexil-propa-noil}-{(2S)-2-amino-3-ciclo-hexilpropanoil}-(N-fenetil)Darginil OH.
8 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por B-D-E tomado como um grupo ser lisil-prolil-{(2R)-2-amino--3-ciclo-hexilpropanoil} e J ser D-arginil-OH.
9 - Composto de acordo com a reivindicação 1 para uso na preparação de um medicamento para uso na modulação da actividade da anafilotoxina num mamífero.
10 - Composição moduladora da anafilotoxina, caracterizada por compreender um transportador farmacêutico e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1. Lisboa, -1M ^92 Por ABBOTT LABORATORIES =*0 AGENTE OFICIAL=