RU2683861C2 - Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул - Google Patents
Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул Download PDFInfo
- Publication number
- RU2683861C2 RU2683861C2 RU2013104181A RU2013104181A RU2683861C2 RU 2683861 C2 RU2683861 C2 RU 2683861C2 RU 2013104181 A RU2013104181 A RU 2013104181A RU 2013104181 A RU2013104181 A RU 2013104181A RU 2683861 C2 RU2683861 C2 RU 2683861C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- preparation
- molecule
- binding
- concentration
- tnf
- Prior art date
Links
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims abstract description 256
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 40
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 130
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 118
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 98
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 64
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 49
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 49
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 37
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 37
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 357
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 109
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 96
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 96
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 46
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 28
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 23
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 14
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 6
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 6
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims description 2
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 2
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 claims 2
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 19
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 13
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 abstract description 6
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 abstract description 6
- 230000009615 deamination Effects 0.000 abstract description 5
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 4
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 abstract description 3
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 226
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 226
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 94
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 93
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 84
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 82
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 78
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 78
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 78
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 71
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 66
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 62
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 56
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 56
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 53
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 49
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 46
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 44
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 43
- 239000000047 product Substances 0.000 description 40
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 31
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 28
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 27
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 24
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 24
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 21
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 21
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 20
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 19
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 19
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 19
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- 230000008569 process Effects 0.000 description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 16
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 16
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 16
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 16
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 16
- KWTQSFXGGICVPE-WCCKRBBISA-N Arginine hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N KWTQSFXGGICVPE-WCCKRBBISA-N 0.000 description 15
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 15
- 229960003589 arginine hydrochloride Drugs 0.000 description 15
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 14
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 14
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 14
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 14
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 14
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 13
- 229920000089 Cyclic olefin copolymer Polymers 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 12
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 12
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- -1 e.g. Proteins 0.000 description 11
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 11
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 11
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 11
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 11
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 11
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 11
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 11
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 11
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 10
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 10
- 239000012929 tonicity agent Substances 0.000 description 10
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 9
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 9
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 9
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 8
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 8
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 8
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 8
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 8
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 8
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 7
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 7
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 7
- 238000001565 modulated differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 7
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 7
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 6
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 6
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 6
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 6
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 6
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 6
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 6
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 5
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 5
- 239000004713 Cyclic olefin copolymer Substances 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 5
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 5
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 5
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 5
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 5
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 5
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 5
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N (4s,4as,5ar,12ar)-4,7-bis(dimethylamino)-1,10,11,12a-tetrahydroxy-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1C2=C(N(C)C)C=CC(O)=C2C(O)=C2[C@@H]1C[C@H]1[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]1(O)C2=O FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N 0.000 description 4
- 101710117290 Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 4
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 4
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 4
- 108700021006 Interleukin-1 receptor antagonist Proteins 0.000 description 4
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 4
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 4
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 4
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 4
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 4
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 4
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 4
- 239000002988 disease modifying antirheumatic drug Substances 0.000 description 4
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 230000009477 glass transition Effects 0.000 description 4
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 4
- 108010094020 polyglycine Proteins 0.000 description 4
- 229920000232 polyglycine polymer Polymers 0.000 description 4
- 108010000222 polyserine Proteins 0.000 description 4
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 4
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 3
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 3
- 241000282842 Lama glama Species 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Chemical group 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 3
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 229940048921 humira Drugs 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 3
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 3
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 3
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 3
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 3
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 3
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 3
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 description 2
- HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N (7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2,2-dimethylpropanoyloxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C=C)CSC21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OCOC(=O)C(C)(C)C)C1=CSC(N)=N1 HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N 0.000 description 2
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150016901 ALB1 gene Proteins 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 101100274294 Arabidopsis thaliana CHLD gene Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 2
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 2
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical group NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 2
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 2
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 2
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 2
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241000282852 Lama guanicoe Species 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100434646 Mus musculus Alb gene Proteins 0.000 description 2
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 2
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 2
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 2
- 229920002642 Polysorbate 65 Polymers 0.000 description 2
- 229920002651 Polysorbate 85 Polymers 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001416177 Vicugna pacos Species 0.000 description 2
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 2
- 229960004238 anakinra Drugs 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 229940059756 arava Drugs 0.000 description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 2
- 239000008228 bacteriostatic water for injection Substances 0.000 description 2
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 2
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 2
- 230000000959 cryoprotective effect Effects 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 2
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 229940112141 dry powder inhaler Drugs 0.000 description 2
- 229940073621 enbrel Drugs 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940125532 enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 229920000370 gamma-poly(glutamate) polymer Polymers 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 2
- 229960004171 hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 2
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 229940054136 kineret Drugs 0.000 description 2
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 2
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 229940110254 minocin Drugs 0.000 description 2
- 229960004023 minocycline Drugs 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 125000000913 palmityl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229940090048 pen injector Drugs 0.000 description 2
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 229940072689 plaquenil Drugs 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 2
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 2
- 108010057904 polyisoleucine Proteins 0.000 description 2
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 2
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 2
- 235000010988 polyoxyethylene sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001816 polyoxyethylene sorbitan tristearate Substances 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 2
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 2
- 229940099511 polysorbate 65 Drugs 0.000 description 2
- 229940113171 polysorbate 85 Drugs 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000009516 primary packaging Methods 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 2
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 2
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- GFNANZIMVAIWHM-OBYCQNJPSA-N triamcinolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@@]3(F)[C@@H](O)C[C@](C)([C@@]([C@H](O)C4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 GFNANZIMVAIWHM-OBYCQNJPSA-N 0.000 description 2
- 229960005294 triamcinolone Drugs 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- 229940046728 tumor necrosis factor alpha inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000002451 tumor necrosis factor inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 2-(N-morpholiniumyl)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CC[NH+]1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKMIHKCGXQMFEU-UHFFFAOYSA-N 2-[dimethyl(tetradecyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O KKMIHKCGXQMFEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIHXSRXTECMMJY-MURFETPASA-N 2-[dimethyl-[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O DIHXSRXTECMMJY-MURFETPASA-N 0.000 description 1
- LMVGXBRDRZOPHA-UHFFFAOYSA-N 2-[dimethyl-[3-(16-methylheptadecanoylamino)propyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O LMVGXBRDRZOPHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVSBNLWNNVOIGX-MURFETPASA-N 2-[dimethyl-[3-[[(9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoyl]amino]propyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O LVSBNLWNNVOIGX-MURFETPASA-N 0.000 description 1
- BMYCCWYAFNPAQC-UHFFFAOYSA-N 2-[dodecyl(methyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCN(C)CC(O)=O BMYCCWYAFNPAQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNQVCAOGQHOSEN-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl(octadecyl)amino]acetic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(C)CC(O)=O SNQVCAOGQHOSEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFJVDSDGRBUNKZ-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl(tetradecyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCN(C)CC(O)=O QFJVDSDGRBUNKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIROHOMJLWMERM-UHFFFAOYSA-N 3-[dimethyl(octadecyl)azaniumyl]propane-1-sulfonate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O DIROHOMJLWMERM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n,2-n-diethylpyrimidine-2,4-diamine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(N)=CC(Cl)=N1 XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 239000004135 Bone phosphate Substances 0.000 description 1
- 206010006542 Bulbar palsy Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- VPAXJOUATWLOPR-UHFFFAOYSA-N Conferone Chemical compound C1=CC(=O)OC2=CC(OCC3C4(C)CCC(=O)C(C)(C)C4CC=C3C)=CC=C21 VPAXJOUATWLOPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 238000011993 High Performance Size Exclusion Chromatography Methods 0.000 description 1
- 101000801228 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 1
- 101000801232 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical group O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 238000003109 Karl Fischer titration Methods 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- QGCUAFIULMNFPJ-UHFFFAOYSA-N Myristamidopropyl betaine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O QGCUAFIULMNFPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical group CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Chemical group 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- IYFATESGLOUGBX-YVNJGZBMSA-N Sorbitan monopalmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O IYFATESGLOUGBX-YVNJGZBMSA-N 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHATUINFZWUDIX-UHFFFAOYSA-N Zwittergent 3-14 Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O BHATUINFZWUDIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJCWFDPJFXGQBN-RYNSOKOISA-N [(2R)-2-[(2R,3R,4S)-4-hydroxy-3-octadecanoyloxyoxolan-2-yl]-2-octadecanoyloxyethyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IJCWFDPJFXGQBN-RYNSOKOISA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007068 beta-elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 230000035071 co-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 1
- JECGPMYZUFFYJW-UHFFFAOYSA-N conferone Natural products CC1=CCC2C(C)(C)C(=O)CCC2(C)C1COc3cccc4C=CC(=O)Oc34 JECGPMYZUFFYJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011082 depyrogenation Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-M dimethylarsinate Chemical compound C[As](C)([O-])=O OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000009513 drug distribution Methods 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 102000056549 human Fv Human genes 0.000 description 1
- 108700005872 human Fv Proteins 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N lauryl sulfobetaine Chemical compound CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 230000002535 lyotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940127554 medical product Drugs 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229940071648 metered dose inhaler Drugs 0.000 description 1
- TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N methamphetamine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- NZXVYLJKFYSEPO-UHFFFAOYSA-N n-[3-(dimethylamino)propyl]-16-methylheptadecanamide Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCCN(C)C NZXVYLJKFYSEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127285 new chemical entity Drugs 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010494 opalescence Effects 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N ornithyl group Chemical group N[C@@H](CCCN)C(=O)O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 229940021222 peritoneal dialysis isotonic solution Drugs 0.000 description 1
- ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M phenethicillin potassium Chemical compound [K+].N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920005606 polypropylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 201000002241 progressive bulbar palsy Diseases 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000006318 protein oxidation Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 229960001755 resorcinol Drugs 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940100515 sorbitan Drugs 0.000 description 1
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 1
- 235000011071 sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001570 sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 229940031953 sorbitan monopalmitate Drugs 0.000 description 1
- 235000011076 sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001587 sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 229940035048 sorbitan monostearate Drugs 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 235000011078 sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001589 sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- 229960004129 sorbitan tristearate Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940117986 sulfobetaine Drugs 0.000 description 1
- 229940104261 taurate Drugs 0.000 description 1
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000957 temperature-modulated differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
- A61K9/1623—Sugars or sugar alcohols, e.g. lactose; Derivatives thereof; Homeopathic globules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06Q—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR ADMINISTRATIVE, COMMERCIAL, FINANCIAL, MANAGERIAL OR SUPERVISORY PURPOSES; SYSTEMS OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR ADMINISTRATIVE, COMMERCIAL, FINANCIAL, MANAGERIAL OR SUPERVISORY PURPOSES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- G06Q99/00—Subject matter not provided for in other groups of this subclass
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16Z—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- G16Z99/00—Subject matter not provided for in other main groups of this subclass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
- A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Business, Economics & Management (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Business, Economics & Management (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
Abstract
Данное изобретение относится к фармацевтике. Предложены способы получения стабильного фармацевтического препарата однодоменной антигенсвязывающей молекулы (SDAB), содержащего лиопротектор, гистидиновый буфер и SDAB, содержащую по меньшей мере две однодоменных молекулы, где одна однодоменная молекула связывается с человеческим сывороточным альбумином (HSA) и по меньшей мере одна другая однодоменная молекула связывается с другим антигеном-мишенью человека или его эпитопом. Получаемый препарат, в том числе восстановленный после лиофилизации, не склонен к агрегации, фрагментации, дезаминированию, окислению или изменению биологической активности в течение продолжительного периода времени. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 32 ил., 2 табл., 12 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
В данной заявке заявлен приоритет согласно U.S. серийный №61/109474, поданной 29 октября 2008 г., полное содержание которой включено в данную заявку посредством ссылки во всей ее полноте.
Перечень последовательностей
Настоящая заявка содержит перечень последовательностей, который был представлен через EFS-Web и таким образом включен в данную заявку посредством ссылки во всей своей полноте. Указанная копия ASCII, созданная 27 октября 2009 г., названа W22373WO.txt и имеет размер 8343 байта.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Достижения в биотехнологии сделали возможным получение целого ряда белков для фармацевтических применений с использованием методов рекомбинантных ДНК. Вследствие того, что белки обычно больше и сложнее, чем традиционные органические и неорганические лекарственные средства, изготовление лекарственных форм таких белков создает специальные проблемы. Для того чтобы белок оставался биологически активным, препарат должен сохранять конформационную целостность по меньшей мере коровой последовательности аминокислот белка, в то же время защищая многочисленные функциональные группы белка от деградации. Пути деградации белков могут включать химическую нестабильность (т.е. любой процесс, который включает модификацию белка путем образования или разрыва связей, что приводит к новой химической сущности) или физическую нестабильность (т.е. изменения в структуре белка более высокого порядка). Химическая нестабильность может быть следствием, например, дезаминирования, рацемизации, гидролиза, окисления, бета-элиминирования или дисульфидного обмена. Физическая нестабильность может быть следствием, например, денатурации, агрегации, осаждения или адсорбции. Тремя распространенными путями деградации белка являются агрегация белка, дезаминирование и окисление (Cleland et al. Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 10 (4): 307-377 (1993)).
Сушка при температуре ниже нуля градусов является обычно применяемой методикой сохранения белков, которая служит для удаления воды из интересующего белкового препарата. Сушка при температуре ниже нуля градусов, или лиофилизация, представляет собой процесс, в ходе которого вещество, предназначенное для сушки, сначала замораживают, а затем лед или замороженный растворитель удаляют посредством сублимации в вакуумной среде. Эксципиент может быть включен в предварительно лиофилизированные препараты для увеличения стабильности во время процесса лиофилизации и/или для увеличения стабильности лиофилизированного продукта при хранении (Pikal, M. Biopharm. 3 (9) 26-30 (1990) и Arakawa et al. Pharm. Res. 8 (3): 285-291 (1991)).
Таким образом, все еще существует потребность в создании белковых препаратов, в частности, для подкожного введения, которые стабильны при длительном хранении и доставке.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к препаратам однодоменных антигенсвязывающих молекул (также именуемых в данной заявке "SDAB молекулами" (от англ. single domain antigen binding molecules) (например, молекулы нанотел, в частности, препараты TNF-связывающих молекул нанотел). SDAB молекула может включать один или более единичных антигенсвязывающих доменов, которые взаимодействуют, например связываются, с одним или более белками-мишенями. Данные препараты являются полезными, например, в качестве фармацевтических препаратов для введения субъекту, например, человеку. Также раскрыты способ получения и применение препаратов, описанных в данной заявке, для лечения или предупреждения, например, TNF-ассоциированных расстройств.
[Примечание: Нанотело™ и Нанотела™ являются зарегистрированными товарными знаками Ablynx N.V.]
Соответственно, в одном аспекте в изобретении предложен препарат, который включает: (а) SDAB молекулу, например молекулу нанотела (например, TNF-связывающую молекулу нанотела); (б) лиопротектор; (в) (возможно) поверхностно-активное вещество; (г) (возможно) наполнитель; (д) (возможно) агент, регулирующий тоничность; (е) (возможно) стабилизатор; (ж) (возможно) консервант, и (з) такой буфер, чтобы рН препарата составлял примерно 5,0-7,5. В некоторых воплощениях препарат представляет собой жидкий препарат, лиофилизированный препарат, восстановленный лиофилизированный препарат, аэрозольный препарат или нефасованный препарат (например, замороженный нефасованный препарат). В некоторых воплощениях препарат вводят субъекту посредством инъекции (например, подкожной, внутрисосудистой, внутримышечной или интраперитонеальной) или посредством ингаляции.
В некоторых воплощениях SDAB молекула, например молекула нанотела (например молекула TNF-связывающего нанотела), в препарате находится в концентрации от примерно 0,5 мг/мл до примерно 350 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 300 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 250 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 150 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 130 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 130 мг/мл, от примерно 50 мг/мл до примерно 120 мг/мл, от примерно 80 мг/мл до примерно 120 мг/мл, от примерно 88 мг/мл до примерно 100 мг/мл, или примерно 10 мг/мл, примерно 25 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 100 мг/мл, примерно 130 мг/мл, примерно 150 мг/мл, примерно 200 мг/мл, примерно 250 мг/мл или примерно 300 мг/мл.
В других воплощениях лиопротектор препарата представляет собой сахар, например сахарозу, сорбит или трегалозу. Например, лиопротектор может представлять собой сахарозу, сорбит или трегалозу в концентрации от примерно 2,5% до примерно 10%, от примерно 5% до примерно 10%, от примерно 5% до примерно 8%, или примерно 4%, примерно 4,5%, примерно 5%, примерно 5,5%, примерно 6%, примерно 6,5%, примерно 7%, примерно 7,5%, примерно 8%, примерно 8,5%, или примерно 9% (масса/объем).
В других воплощениях буфер в препарате представляет собой гистидиновый буфер в концентрации от примерно 5 мМ до примерно 50 мМ, от примерно 5 мМ до примерно 40 мМ, от примерно 5 мМ до примерно 30 мМ, от примерно 10 мМ до примерно 20 мМ, или примерно 10 мМ, примерно 20 мМ или примерно 30 мМ. В других воплощениях буфер в препарате представляет собой Трио-буфер, присутствующий в концентрации менее чем от примерно 5 мМ до примерно 50 мМ, от примерно 5 мМ до примерно 40 мМ, от примерно 5 мМ до примерно 30 мМ, от примерно 10 мМ до примерно 20 мМ, или примерно 10 мМ, примерно 20 мМ или примерно 30 мМ. рН буферов препарата обычно составляет от примерно 5 до 7. В некоторых конкретных воплощениях рН буфера препарата от примерно 5 до примерно 7,5, от примерно 5,5 до примерно 7,2. Например, рН буфера может составлять примерно 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7.
В некоторых воплощениях препарат (возможно) включает поверхностно-активное вещество в концентрации от примерно 0,001% до 0,6%, например, от примерно 0,01% до 0,6%, от примерно 0,1% до 0,6%, от примерно 0,1% до 0,5%, от примерно 0,1% до 0,4%, от примерно 0,1% до 0,3%, от примерно 0,1% до 0,2%, или от примерно 0,01% до 0,02%. В некоторых случаях препарат содержит более чем 0% и вплоть до примерно 0,6% (например, примерно от 0,1% до 0,2% полисорбата-20, полисорбата-40, полисорбата-60, полисорбата-65, полисорбата-80, полисорбата-85, полоксамера-188, сорбитанмонолаурата, сорбитанмонопальмитата, сорбитанмоностеарата, сорбитанмоноолеата, сорбитантрилаурата, сорбитантристеарата, сорбитантриолеата или их комбинации. В конкретных воплощениях препарат содержит примерно 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, от 0,01% до 0,02%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, от 0,1% до 0,2%, 0,11%, 0,12%, 0,13%, 0,14%, 0,15%, 0,16%, 0,17%, 0,18%, 0,19% или 0,2% полисорбата-80. Альтернативно, препарат может включать полоксамер-188 на уровне от примерно 0,01% до 0,6%, от примерно 0,1% до 0,6%, от примерно 0,1% до 0,5%, от примерно 0,1% до 0,4%, от примерно 0,1% до 0,3% или от примерно 0,1% до 0,2%.
В некоторых воплощениях препарат (возможно) включает наполнитель, например глицин, в концентрации от примерно 10 до примерно 200 мМ, от примерно 25 до примерно 175 мМ, от примерно 50 до примерно 150 мМ, от примерно 75 до примерно 125 мМ, или примерно 100 мМ.
В других воплощениях препарат (возможно) также включает агент, регулирующий тоничность, например молекулу, которая делает препарат по существу изотоничным или изоосмотичным человеческой крови. Примерные агенты, регулирующие тоничность, включают сахарозу, сорбит, глицин, метионин, маннит, декстрозу, инозит, хлорид натрия, аргинин и гидрохлорид аргинина.
В других воплощениях препарат (возможно) дополнительно включает стабилизатор, например молекулу, которая при объединении с интересующим белком (например SDAB молекулой) по существу предотвращает или уменьшает химическую и/или физическую нестабильность интересующего белка в лиофилизированной, жидкой или предназначенной для хранения форме. Примерные стабилизаторы включают сахарозу, сорбит, глицин, инозит, хлорид натрия, метионин, аргинин, и гидрохлорид аргинина. В некоторых воплощениях препарат включает стабилизатор в одном или более из следующих диапазонов: сахароза от примерно 1% до примерно 12% (например, примерно 5%, примерно 7,5%, примерно 8% или примерно 10%); сорбит от примерно 1% до примерно 7% (например, примерно 3%, примерно 4%, примерно 5%); инозит от примерно 1% до примерно 5%; глицин от примерно 10 мМ до примерно 125 мМ (например, от примерно 25 мМ до 100 мМ, примерно 80 мМ, примерно 90 мМ или примерно 100 мМ); хлорид натрия от примерно 10 мМ до 150 мМ (например, от примерно 25 мМ до 100 мМ, примерно 55 мМ); метионин от примерно 10 мМ до примерно 100 мМ (например, примерно 10 мМ, примерно 20 мМ, примерно 100 мМ); аргинин от примерно 10 мМ до примерно 125 мМ (например, от примерно 25 мМ до примерно 120 мМ, или примерно 100 мМ); гидрохлорид аргинина от примерно 10 мМ до примерно 70 мМ (например, от примерно 10 мМ до примерно 65 мМ, или примерно 55 мМ).
В других воплощениях препарат также может включать метионин в концентрации от примерно 10 до примерно 200 мМ, от примерно 25 до примерно 175 мМ, от примерно 50 до примерно 150 мМ, от примерно 75 до примерно 125 мМ, или примерно 100 мМ.
В одном из воплощений компонент препарата может функционировать в качестве одного или более чем одного лиопротектора, агента, регулирующего тоничность, и/или стабилизатора. Например, в зависимости от концентрации компонента, например, сахарозы, он может служить в качестве одного или более чем одного лиопротектора, агента, регулирующего тоничность, и/или стабилизатора. В других воплощениях, где в препарате необходимы несколько компонентов, используют различные компоненты. Например, когда в препарате требуется лиопротектор, агент, регулирующий тоничность, и стабилизатор, используют различные компоненты (например, сахароза, глицин и инозит могут быть использованы в комбинации, приводящей к комбинации лиопротектора, агента, регулирующего тоничность, и стабилизатора соответственно).
В одном из воплощений препарат включает: (a) SDAB молекулу, например молекулу нанотела (например, молекулу TNF-связывающего нанотела), в концентрации от примерно 0,5 до примерно 300 мг/мл, например, примерно 1 мг/мл, примерно 10 мг/мл, примерно 25 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 88 мг/мл, примерно 100 мг/мл, примерно 118 мг/мл, примерно 130 мг/мл, примерно 150 мг/мл или примерно 250 мг/мл; (б) сахарозу в концентрации от примерно 5% до примерно 10%, например, примерно 5%, примерно 6%, примерно 6,5%, примерно 7%, примерно 7,5%, примерно 8%, примерно 10%; (в) полисорбат-80 в концентрации от примерно 0 до примерно 0,6%, например, 0,01%, 0,02%, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5% или 0,6%; (г) (возможно) глицин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; (д) (возможно) метионин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; и (е) гистидиновый буфер (в концентрации от примерно 10 мМ до примерно 20 мМ) или Трио-буфер (в концентрации примерно 20 мМ), так что рН препарата составляет от примерно 5,0 до 7,5, например, 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7.
В одном из воплощений препарат представляет собой жидкий препарат. В одном из типичных воплощений жидкий препарат включает: а) SDAB молекулу, например молекулу нанотела {например, молекулу TNF-связывающего нанотела), в концентрации от примерно 10 до примерно 150 мг/мл, например, примерно 25 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 88 мг/мл, примерно 100 мг/мл, примерно 118 мг/мл, примерно 130 мг/мл; (б) сахарозу в концентрации от примерно 5% до примерно 10%, т.е. от примерно 7% до примерно 8%, например, 7,5%; или сорбит от примерно 1% до примерно 7% (например, примерно 3%, примерно 4%, примерно 5%) (в) полисорбат-80 в концентрации, например, от примерно 0,01% до 0,02% (например, 0,01%); (г) (возможно) глицин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; (д) (возможно) метионин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; и (е) гистидиновый буфер (в концентрации от примерно 10 мМ до примерно 20 мМ), или Трис-буфер (в концентрации примерно 20 мМ), так что рН препарата составляет от примерно 5 до 7,5, например, 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7. Жидкий препарат может присутствовать в изделии промышленного производства, таком как устройство, шприц или флакон с инструкциями по применению. В некоторых воплощениях шприц или флакон изготовлен из стекла, пластмассы или полимерного материала, такого как циклический олефиновый полимер или сополимер. В других воплощениях препарат может присутствовать в устройстве для инъекции (например, шприце для инъекции, например, предварительно заполненном шприце для инъекции). Шприц может быть адаптирован для индивидуального введения, например, в виде системы с одним флаконом, включающей автоинжектор (например, устройство шприц-ручку) и/или инструкции по применению. Препарат можно вводить субъекту, например пациенту, посредством инъекции, например периферического введения (например, подкожного, внутрисосудистого, внутримышечного или интраперитонеального введения).
В других воплощениях препарат представляет собой лиофилизированный препарат. В одном из типичных воплощений лиофилизированный препарат включает: a) SDAB молекулу, например молекулу нанотела (например, молекулу TNF-связывающего нанотела), в концентрации от примерно 10 до примерно 150 мг/мл, например, примерно 25 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 88 мг/мл, примерно 100 мг/мл, примерно 118 мг/мл, примерно 130 мг/мл; (б) сахарозу в концентрации от примерно 5% до примерно 10%, например, от примерно 4% до примерно 7%, например, 5%; (в) полисорбат-80 в концентрации, например, от примерно 0,01% до 0,02% (например, 0,01%); (г) (возможно) глицин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; (д) (возможно) метионин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; и (е) гистидиновый буфер (в концентрации от примерно 10 мМ до примерно 20 мМ, например, примерно 20 мМ), или Трис-буфер (в концентрации примерно 20 мМ), так что рН препарата составляет от примерно 5 до 7,5, например, 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7. Лиофилизированный препарат может быть восстановлен путем смешивания лиофилизата с подходящей водной композицией.
В других воплощениях препарат представляет собой нефасованный препарат. В одном из типичных воплощений нефасованный препарат включает: а) SDAB молекулу, например молекулу нанотела (например, молекулу TNF-связывающего нанотела), в концентрации от примерно 80 мг/мл до 300 мг/мл, например, примерно 150 мг/мл, примерно 175 мг/мл, примерно 200 мг/мл, примерно 250 мг/мл, примерно 275 мг/мл или примерно 300 мг/мл; (б) сахарозу в концентрации от примерно 5% до примерно 10%, например, от примерно 4% до примерно 8%, например, 5% или 7,5%; (в) полисорбат-80 в концентрации, например, от примерно 0,01% до 0,02%; (г) (возможно) глицин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; (д) (возможно) метионин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; и (е) гистидиновый буфер (в концентрации от примерно 10 мМ до примерно 20 мМ) или Трио-буфер (в концентрации примерно 20 мМ), так что рН препарата составляет от примерно 5 до 7,5, например, 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7. Нефасованный препарат может быть заморожен. В некоторых воплощениях нефасованный препарат может быть получен в большом масштабе, например, более чем 10 литров, 50 литров, 100, 150, 200 или более литров.
В некоторых воплощениях SDAB молекула, например молекула нанотела {например, молекула TNF-связывающего нанотела) препарата включает один или более единичных связывающих доменов {например, одно или более нанотел). Например, молекула нанотела может содержать полипептид, например, одноцепочечный полипептид, содержащий по меньшей мере один иммуноглобулиновый вариабельный домен (включающий одну, две или три определяющие комплементарность области (CDR)), или состоять из такого полипептида. Примеры SDAB молекул включают молекулы, естественно лишенные легких цепей {например, VHH, нанотела или антитела верблюдовых). Такие SDAB молекулы могут происходить или могут быть получены от животных семейства верблюдовых, таких как верблюд, лама, дромадер, альпака и гуанако. В других воплощениях SDAB молекула может включать однодоменные молекулы, включающие, но не ограничивающиеся этим, другие природные однодоменные молекулы, такие как однодоменные полипептиды акулы (IgNAR); и однодоменные каркасы {например, фибронектиновые каркасы). Однодоменные молекулы могут происходить из акулы.
В одном из воплощений SDAB молекула препарата представляет собой одноцепочечный полипептид, состоящий из одной или более однодоменных молекул. В воплощениях молекула нанотела является одновалентной или поливалентной {например, двухвалентной, трехвалентной или четырехвалентной). В других воплощениях молекула нанотела является моноспецифической или полиспецифической (например, биспецифической, триспецифической или тетраспецифической). SDAB молекула может содержать одну или более однодоменных молекул, которые являются рекомбинантными, CDR-привитыми, гуманизированными, верблюдизированными, деиммунизированными и/или полученными in vitro {например, выбранными посредством фагового дисплея). Например, SDAB молекула может представлять собой одноцепочечный слитый полипептид, содержащий одну или более однодоменных молекул, которые связываются с одним или более антигенами-мишенями. Типично, антиген-мишень представляет собой белок млекопитающего, например, человека. В некоторых воплощениях SDAB молекула связывается с сывороточным белком, например, с человеческими сывороточными белками, выбранными из одного или более чем одного сывороточного альбумина (человеческого сывороточного альбумина (HSA)), фибрина, фибриногена или трансферрина.
В одном типичном воплощении SDAB молекула препарата представляет собой трехвалентную, биспецифическую молекулу, состоящую из слияния одноцепочечных полипептидов двух однодоменных молекул (например, двух вариабельных областей верблюдовых), которые связываются с антигеном-мишенью, например, фактором некроза опухолей a (TNFα), и одной однодоменной молекулы (например, вариабельной области верблюдовых), которая связывается с сывороточным белком, например, HSA. Однодоменные молекулы SDAB молекулы могут быть расположены в следующем порядке от N- к С-концу: TNFα-связывающая однодоменная молекула - HSA-связывающая однодоменная молекула - TNFα-связывающая однодоменная молекула. Следует понимать, что любой порядок или комбинация однодоменных молекул против одной или более мишеней могут быть получены, как описано в данной заявке.
В одном из воплощений SDAB молекула препарата названа в данной заявке как "ATN-103," содержит аминокислотную последовательность, представленную на Фиг.30 (SEQ ID NO: 1), или аминокислотную последовательность, по существу идентичную ей (например, аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или более идентичную, или имеющую вплоть до 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2, 1 аминокислотных изменений (например, делеций, вставок или замен (например, консервативных замен) относительно аминокислотной последовательности, представленной на Фиг.30), или состоит из нее. Примеры дополнительных молекул трехвалентного, биспецифического нанотела, которые могут быть получены, как описано в данной заявке, включают TNF24, TNF25, TNF26, TNF27, TNF28, TNF60 и TNF62, раскрытые в Таблице 29 из WO 2006/122786.
В некоторых воплощениях по меньшей мере одна однодоменная молекула SDAB молекулы препарата, которая связывается с TNFα, включает одну, две или три CDR, имеющих аминокислотную последовательность: DYWMY (SEQ ID NO: 2) (CDR1), EINTNGLITKYPDSVKG (SEQ ID NO: 3) (CDR2) и/или SPSGFN (SEQ ID NO: 4) (CDR3), или имеющих CDR, которая отличается менее чем 3, 2 или 1 аминокислотными заменами (например, консервативными заменами) из одной из указанных CDR. В других воплощениях однодоменная молекула содержит вариабельную область, имеющую аминокислотную последовательность из аминокислот от примерно 1 до 115 на Фиг.30, или аминокислотную последовательность, по существу идентичную ей (например, аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или более идентичную ей, или имеющую вплоть до 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2, 1 аминокислотных изменений (например делеций, вставок или замен (например, консервативных замен) относительно аминокислотной последовательности, представленной на Фиг.30). В воплощениях TNFα-связывающая однодоменная молекула имеет одну или более биологических активностей молекулы TNFα-связывающего однодоменного антитела, показанной на Фиг.30. Например, TNFα-связывающая однодоменная молекула связывается с таким же или сходным эпитопом, что и эпитоп, распознаваемый TNFα-связывающей однодоменной молекулой, показанной на Фиг.30 (например, связывается с TNFα в его тримерной форме; связывается с сайтом TNFα, взаимодействующим с рецептором TNF; связывается с эпитопом в тримере TNFα, содержащем Gin в положении 88 и Lys в положении 90 на первом мономере TNF (мономер А), и Glu в положении 146 на втором мономере TNF (мономер В), или эпитопом, описанным в WO 06/122786). В другом воплощении TNFα-связывающая однодоменная молекула имеет активность (например, аффинность связывания, константу диссоциации, специфичность связывания, TNF-ингибиторную активность), сходную с любой из TNFα-связывающих однодоменных молекул, раскрытых в WO 06/122786.
В других воплощениях молекула TNFα-связывающего нанотела содержит одно или более нанотел, раскрытых в WO 2006/122786. Например, молекула TNFα-связывающего нанотела может представлять собой одновалентную, двухвалентную, трехвалентную молекулу TNFα-связывающего нанотела, раскрытую в WO 2006/122786. Примерные TNFα-связывающие нанотела включают, но не ограничиваются этим, TNF1, TNF2, TNF3, его гуманизированные формы (например, TNF29, TNF30, TNF31, TNF32, TNF33). Дополнительные примеры одновалентных TNFα-связывающих нанотел раскрыты в Таблице 8 из WO 2006/122786. Примерные двухвалентные молекулы TNFα-связывающего нанотела включают, но не ограничиваются этим, TNF55 и TNF56, которые содержат два нанотела TNF30, связанных через пептидный линкер с образованием единичного слитого полипептида (раскрытого в WO 2006/122786). Дополнительные примеры двухвалентных молекул TNFα-связывающего нанотела раскрыты в Таблице 19 из WO 2006/122786 как TNF4, TNF5, TNF6, TNF7, TNF8).
В других воплощениях по меньшей мере одна однодоменная молекула SDAB молекулы препарата, которая связывается с HSA, включает одну, две или три CDR, имеющих аминокислотную последовательность: SFGMS (SEQ ID NO: 5) (CDR1), SISGSGSDTLYADSVKG (SEQ ID NO: 6) (CDR2) и/или GGSLSR (SEQ ID NO: 7) (CDR3), или имеющих CDR, которая отличается менее чем 3, 2 или 1 аминокислотными заменами (например, консервативными заменами) из одной из указанных CDR. В других воплощениях однодоменная молекула содержит вариабельную область, имеющую аминокислотную последовательность из аминокислот от примерно 125 до 239 на Фиг.30 (SEQ ID NO: 1), или аминокислотную последовательность, по существу идентичную ей (например, аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или более идентичную, или имеющую вплоть до 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2, 1 аминокислотных изменений (например делеций, вставок или замен (например, консервативных замен) относительно аминокислотной последовательности, представленной на Фиг.30 (SEQ ID NO: 1)). В воплощениях HSA-связывающая однодоменная молекула имеет одну или более биологических активностей HSA-связывающей однодоменной молекулы, показанной на Фиг.30 (SEQ ID NO: 1). Например, HSA-связывающая однодоменная молекула связывается с таким же или сходным эпитопом, что и эпитоп, распознаваемый HSA-связывающей однодоменной молекулой, показанной на Фиг.30 (SEQ ID NO: 1). В другом воплощении HSA-связывающая однодоменная молекула имеет активность (например, аффинность связывания, константу диссоциации, специфичность связывания), сходную с любой из HSA-связывающей однодоменной молекулы, раскрытой в WO 06/122786.
В других воплощениях HSA-связывающая SDAB молекула содержит одно или более нанотел, раскрытых в WO 2006/122786. Например, HSA-связывающая SDAB молекула может представлять собой одновалентную, двухвалентную, трехвалентную молекулу HSA-связывающего нанотела, раскрытую в WO 2006/122786. В других воплощениях HSA-связывающая SDAB молекула может представлять собой моноспецифическую или полиспецифическую молекулу, имеющую по меньшей мере одну из специфичностей связывания, которая связывается с HSA. Примерные TNFα-связывающие нанотела включают, но не ограничиваются этим, ALB1, его гуманизированные формы (например, ALB6, ALB7, ALB8, ALB9, ALB10), раскрытые в WO 06/122786.
В других воплощениях две или более однодоменных молекул SDAB молекулы являются слитыми, со связывающей группой или без нее, в виде генетического или полипептидного слияния. Связывающая группа может представлять собой любую связывающую группу, очевидную специалистам в данной области. Например, связывающая группа может представлять собой биосовместимый полимер длиной от 1 до 100 атомов. В одном из воплощений связывающая группа включает или состоит из остатков полиглициновых, полисериновых, полилизиновых, полиглутаматных, полиизолейциновых или полиаргининовых остатков или их комбинации. Например, полиглициновые или полисериновые линкеры могут включать по меньшей мере пять, семь, восемь, девять, десять, двенадцать, пятнадцать, двадцать, тридцать, тридцать пять и сорок остатков глицина и серина. Примерные линкеры, которые могут быть использованы, включают Gly-Ser повторы, например, (Gly)4-Ser (SEQ ID NO: 8) повторы в одном, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи или более повторах. В воплощениях линкер имеет следующие последовательности: (Gly)4-Ser-(Gly)3-Ser (SEQ ID NO: 9) или ((Gly)4-Ser)n (SEQ ID NO: 10), где n равно 4, 5 или 6.
Препараты по изобретению могут включать SDAB молекулу, которая модифицирована путем присоединения, например, ковалентного или нековалентного, второй группировки. Например, молекула нанотела может быть ковалентно присоединена к подходящему фармакологически приемлемому полимеру, такому как поли(этиленгликоль) (PEG) или его производное (такое как метоксиполи(этиленгликоль) или mPEG). Примеры пэгилированных молекул нанотел раскрыты как TNF55-PEG40, TNF55-PEG60, TNF56-PEG40 и TNF56-PEG60 в WO 06/122786.
В другом воплощении препараты по изобретению являются стабильными в течение по меньшей мере 3, 6, 9, 12 месяцев (например, по меньшей мере 24, 30, 36 месяцев), при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). В некоторых воплощениях целостность SDAB молекулы поддерживается после хранения в препарате в течение по меньшей мере 3, 6, 9, 12 месяцев (например, по меньшей мере 24, 30, 36 месяцев) при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). Например, SDAB молекула в препарате сохраняет по меньшей мере 50%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или вплоть до 100% биологической активности, например связывающей активности, SDAB молекулы после хранения при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). В некоторых воплощениях препарат включает менее 10%, 9%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% или меньше высокомолекулярных (HMW) компонентов после хранения в препарате в течение по меньшей мере 3, 6, 9, 12 месяцев (например, по меньшей мере 24, 30, 36 месяцев) при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). В других воплощениях препарат включает менее 10%, 9%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% или меньше низкомолекулярных (HMW) компонентов после хранения в препарате в течение по меньшей мере 3, 6, 9, 12 месяцев (например, по меньшей мере 24, 30, 36 месяцев) при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). В других воплощениях препарат включает менее 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% или меньше кислотных компонентов после хранения в препарате в течение по меньшей мере 3, 6, 9, 12 месяцев (например, по меньшей мере 24, 30, 36 месяцев) при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). В других воплощениях препарат включает менее 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% или меньше щелочных компонентов после хранения в препарате в течение по меньшей мере 3, 6, 9, 12 месяцев (например, по меньшей мере 24, 30, 36 месяцев) при температуре от примерно 2°C до примерно 25°C (например, примерно 4°C или 25°C). HMW, LMW, кислотные и щелочные компоненты могут быть определены в препаратах с использованием стандартных методик, таких как эксклюзионная-высокоэффективная жидкостная хроматография (BTOR-HPLC) и тому подобное, как описано в данной заявке.
В некоторых воплощениях после восстановления влагосодержания лиофилизированного SDAB препарата, данный препарат сохраняет по меньшей мере 80%, 90%, 95% или больше SDAB структуры, по сравнению с препаратом до лиофилизации. SDAB структуру определяют, например, с помощью анализ связывания, биоанализа, или соотношения HMW компонентов и LMW компонентов.
Препараты по изобретению также могут включать второй агент, например, второй терапевтически или фармакологически активный агент, который является полезным в лечении TNFα-ассоциированного расстройства, например, воспалительных или аутоиммунных расстройств, включая, но не ограничиваясь этим, ревматоидный артрит (RA) (например, ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого), артритические состояния (например, псориатический артрит, ювенильный идиопатический полиартрит (JIA), анкилозирующий спондилоартрит (AS), псориаз, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, воспалительное заболевание кишечника и/или рассеянный склероз. Например, второй агент может представлять собой антитело против TNF или его TNF-связывающий фрагмент, где второе TNF антитело связывается с другим эпитопом, чем TNF-связывающая SDAB молекула препарата. Другие неограничивающие примеры агентов, которые могут быть приготовлены в виде препарата с TNF-связывающей SDAB молекулой, включают, но не ограничиваются этим, ингибитор цитокина, ингибитор фактора роста, иммунодепрессант, противовоспалительный агент, метаболический ингибитор, ферментный ингибитор, цитотоксический агент и цитостатический агент. В одном из воплощений дополнительный агент представляет собой стандартное лечение артрита, включая, но не ограничиваясь этим, нестероидные противовоспалительные средства (NSAIDs); кортикостероиды, включая преднизолон, преднизон, кортизон и триамцинолон; и противоревматические лекарственные средства, модифицирующие заболевание (DMARDs), такие как метотрексат, гидроксихлорохин (Plaquenil) и сульфасалазин, лефлуномид (Arava®), ингибиторы фактора некроза опухолей, включая этанерцепт (Enbrel®), инфликсимаб (Remicade®) (с метотрексатом или без него) и адалимумаб (Humira®), антитело против CD20 (например, Rituxan®), растворимый рецептор интерлейкина-1, такой как анакинра (Kineret®), золото, миноциклин (Minocin®), пеницилламин и цитотоксические агенты, включая азатиоприн, циклофосфамид и циклоспорин. В таких комбинированных терапиях можно преимущественно использовать более низкие дозировки вводимых терапевтических агентов, что позволит избежать возможных токсических эффектов или осложнений, ассоциированных с различными монотерапиями.
Альтернативную комбинацию эксципиентов и/или вторых терапевтических агентов можно идентифицировать и протестировать, следуя руководству, предложенному в данной заявке.
В еще одном воплощении препараты, описанные в данной заявке, являются подходящими для введения субъекту, например, субъекту-человеку (например, пациенту с TNFα-ассоциированным расстройством). Препарат может быть введен указанному субъекту посредством инъекции (например, подкожной, внутрисосудистой, внутримышечной или интраперитонеальной) или посредством ингаляции.
В другом аспекте в изобретении предложен способ или процесс получения препаратов, описанных в данной заявке. Способ или процесс включает: экспрессирование SDAB молекулы в клеточной культуре; очистку SDAB молекулы, например, путем пропускания SDAB молекулы через по меньшей мере одну стадию хроматографической очистки, стадии ультрафильтрации/диафильтрации; корректирование концентрации SDAB молекулы, например, до примерно 10 до 250 мг/мл в препарате, содержащем лиопротектор, поверхностно-активное вещество и буфер, как описано в данной заявке, например, сахарозу в концентрации от примерно 5% до примерно 10%, например, примерно 5%, примерно 10%; полисорбат-80 в концентрации от примерно 0 до примерно 0,02%, например, 0,01%, 0,02%; (возможно) глицин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; (возможно) метионин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; и (е) гистидин (в концентрации от примерно 10 до примерно 20 мМ) или Трис-буфер (в концентрации примерно 20 мМ), так что рН препарата составляет от примерно 5 до 7,5, например, 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7.
В другом аспекте в изобретении предложен способ или процесс получения восстановленного препарата, содержащего SDAB молекулу, например TNF-связывающую SDAB молекулу, как описано в данной заявке. Способ включает: лиофилизацию смеси SDAB молекулы, лиопротектора, поверхностно-активного вещества и буфера, посредством этого образование лиофилизированной смеси; и восстановление влагосодержания лиофилизированной смеси в разбавителе, посредством этого получение препарата, как описано в данной заявке. В одном из воплощений препарат включает: (а) SDAB молекулу, например молекулу TNF-связывающего нанотела, в концентрации от примерно 0,5 до примерно 200 мг/мл, например, примерно 1 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 88 мг/мл, примерно 100 мг/мл, примерно 118 мг/мл; (б) сахарозу в концентрации от примерно 5% до примерно 10%, например, примерно 5%, примерно 10%; (в) полисорбат-80 в концентрации от примерно 0 до примерно 0,02%, например, 0,01%, 0,02%; (г) (возможно) глицин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; (д) (возможно) метионин в концентрации от примерно 0 до примерно 100 мМ, например, 100 мМ; и (е) гистидин (в концентрации от примерно 10 до примерно 20 мМ) или Трис-буфер (в концентрации примерно 20 мМ), так что рН препарата составляет примерно 5 до 7,5, например, 5, 5,5, 5,8-6,1, 6, 6,1, 6,5 или 7.
В другом аспекте изобретение относится к способу лечения или предупреждения у субъекта (например, субъекта-человека) TNFα-ассоциированного расстройства, например, воспалительных или аутоиммунных расстройств, включая, но не ограничиваясь этим, ревматоидный артрит (RA) {например, ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого), артритические состояния (например, псориатический артрит, ювенильный идиопатический полиартрит (JIA), анкилозирующий спондилоартрит (AS), псориаз, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, воспалительное заболевание кишечника и/или рассеянный склероз. Способ включает введение субъекту, например, пациенту-человеку, фармацевтической композиции, включающей TNF-связывающий SDAB препарат, как описано в данной заявке, например, препарат, содержащий TNF-связывающую SDAB молекулу, отдельно или в комбинации с любой из комбинированных терапий, описанных в данной заявке, в количестве, таком что один или более симптомов TNFα-ассоциированного расстройства уменьшаются.
В другом аспекте в изобретении предложен набор или изделие, которые включает устройство, шприц или флакон, содержащие препараты, описанные в данной заявке. Набор или изделие возможно может включать инструкции по применению. В некоторых воплощениях шприц или флакон изготовлен из стекла, пластмассы или полимерного вещества, такого как циклический олефиновый полимер или сополимер. В других воплощениях препарат может присутствовать в устройстве для инъекции (например, шприце для инъекции, например, предварительно заполненном шприце для инъекции). Шприц может быть адаптирован для индивидуального введения, например, в виде системы с одним флаконом, включающей автоинжектор (например, устройство шприц-ручку) и/или инструкции по применению. В одном из воплощений устройство для инъекции представляет собой предварительно заполненную ручку или другое подходящее устройство для автоинъекции, возможно с инструкцией по применению и введению.
В некоторых воплощениях набор или изделие (например, предварительно заполненные ручка или шприц с однократной или многократной дозой) предложены субъекту, например, пациенту или медицинскому работнику, предварительно упакованные с инструкциями по введению (например, самостоятельному введению) посредством инъекции (например, подкожной, внутрисосудистой, внутримышечной или интраперитонеальной).
В других воплощениях в изобретении предложено устройство для интраназального, трансдермального, внутривенного введения препаратов, описанных в данной заявке. Например, предложен трансдермальный пластырь для введения препаратов, описанных в данной заявке. В других случаях предложен пакет для внутривенного введения препаратов, описанных в данной заявке. В воплощениях пакет для внутривенного введения предложен с нормальным физиологическим раствором или 5%-ной декстрозой.
В другом аспекте в изобретении предложен способ инструктирования пациента (например пациента-человека), нуждающегося в SDAB молекуле, например молекуле TNFα нанотела, о том, как вводить препарат, описанный в данной заявке. Способ включает: (1) обеспечение пациента по меньшей мере однократной дозой препарата SDAB молекулы, описанной в данной заявке; и (2) инструктирование пациента относительно самостоятельного введения по меньшей мере однократной дозы, например, посредством инъекции (например, подкожной, внутрисосудистой, внутримышечной или интраперитонеальной). В одном из воплощений пациент имеет TNFα-ассоциированное расстройство, например, воспалительные или аутоиммунные расстройства, как описано в данной заявке.
В другом аспекте в изобретении предложен способ инструктирования реципиента относительно введения препарата молекулы TNFα нанотела, описанной в данной заявке. Способ включает инструктирование реципиента (например, конечного пользователя, пациента, врача, розничной или оптовой аптеки, дистрибьютора или аптечного отдела в больнице, частной лечебницы или НМО (организация по оказанию медицинских услуг)) о том, как следует вводить пациенту данный препарат.
В другом аспекте предложен способ распределения препарата SDAB молекулы, например молекулы TNFα нанотела, описанной в данной заявке. Способ включает обеспечение реципиента (например, конечного пользователя, пациента, врача, розничной или оптовой аптеки, дистрибьютора или аптечного отдела в больнице, частной лечебницы или НМО) упаковкой, содержащей достаточные стандарные дозировки SDAB молекулы, например молекулы TNFα нанотела, для лечения пациента в течение по меньшей мере 6, 12, 24 или 36 месяцев.
В другом аспекте в изобретении предложен способ или процесс оценки качества упаковки или множества упаковок (например, для того чтобы определить, не является ли она просроченной) препарата, описанного в данной заявке, содержащего SDAB молекулу, например молекулу TNFα нанотела. Способ включает оценку того, не является ли упаковка просроченной. Срок годности составляет по меньшей мере 6, 12, 24, 36 или 48 месяцев, например более 24 или 36 месяцев, от предварительно выбранного события, такого как изготовление, анализ или упаковка. В некоторых воплощениях решение или стадия взяты в результате анализа, например, SDAB молекулу в упаковке используют или бракуют, классифицируют, отбирают, отпускают или приостанавливают, транспортируют, доставляют в новое место, выпускают на рынок, в продажу или предлагают для продажи, изымают из оборота или больше не предлагают для продажи, в зависимости от того, не является ли продукт просроченным.
В другом аспекте в изобретении предложен способ хранения, распределения или использования препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, описанной в данной заявке. Способ включает:
хранение препарата в течение периода времени при заданной температуре, например менее 25°C, например, ниже точки замерзания или ниже 15°C, 10°C или 4°C. В воплощениях способ дополнительно включает обеспечение препарата для реципиента, например конечного пользователя, например, пациента или медицинского работника, для хранения в аналогичных или различных условиях (например, при более высокой температуре, чем первый период хранения). Препарат может представлять собой жидкий, лиофилизированный или восстановленный препарат.
В другом аспекте в изобретении предложен способ анализа продукта или процесса, например, процесса изготовления. Способ включает обеспечение препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, как описано в данной заявке, и оценивание параметра препарата, такого как цвет (например, от бесцветного до слегка желтого или от бесцветного до желтого), прозрачность (например, от прозрачного до слегка опалесцирующего или от прозрачного до опалесцирующего) или вязкость (например, от приблизительно 1 до 5 сП, когда измерено при температуре окружающей среды, такой как при 20°C-30°C, например, 25°C), количества одного или более из HMW, LMW, кислотных и/или щелочных компонентов, как описано в данной заявке. Анализ может включать оценку одного или более параметров. Возможно, определяют, удовлетворяет ли параметр предварительно выбранным критериям, например, определяют, присутствуют ли предварительно выбранные критерии, или присутствуют ли они в предварительно выбранном диапазоне, таким образом анализируя процесс.
В одном из воплощений анализ процесса включает измерение стабильности препарата SDAB молекулы. Стабильность препарата антител может быть измерена, например, по образованию агрегатов, которое анализируют, например, посредством эксклюзионной жидкостной хроматографии высокого давления (SE-HPLC), по цвету прозрачности или вязкости, как описано в данной заявке. Препарат может быть определен как являющийся стабильным и поэтому приемлемым для дальнейшей обработки или распределения, если изменение в анализируемом параметре составляет менее примерно 10%, 5%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,05% или 0,005% или меньше относительно заданного периода времени и возможно при заданной температуре.
В одном из воплощений способ дополнительно включает сравнение определенного значения с эталонным значением для анализа таким образом процесса изготовления.
В одном из воплощений способ дополнительно включает поддержание процесса изготовления, основанное, по меньшей мере частично, на анализе. В одном из воплощений способ дополнительно включает изменение процесса изготовления на основании анализа.
В другом воплощении способ включает оценку процесса, например, процесса изготовления препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, полученной посредством выбранного процесса, который включает вынесение заключения о процессе, основанного на способе или анализе, описанном в данной заявке. В одном из воплощений способ дополнительно включает поддержание или изменение процесса изготовления, основанного, по меньшей мере частично, на указанном способе или анализе. Таким образом, в другом воплощении оценивающая сторона не практикует способ или анализ, описанный в данной заявке, но лишь учитывают результаты, которые получены с помощью способа или анализа, описанного в данной заявке.
В другом воплощении способ включает сравнение двух или более препаратов в способе мониторинга или контролирования различия между партиями или для сравнения препарата с эталонным стандартом.
В еще одном воплощении способ может дополнительно включать вынесение решение, например, для классификации, отбора, приема или отбраковки, выпуска или приостановки, переработки в лекарственный продукт, транспортировки, перемещения в другое место, приготовления в виде препарата, маркировки, упаковки, выпуска в торговый оборот, продажи или предложения для продажи препарата, основанных, по меньшей мере частично, на заключении.
В другом аспекте в изобретении предложен способ оценки качества препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, как описано в данной заявке, например, в анализе контроля качества или спецификации для выпуска. Способ включает обеспечение анализа препарата SDAB молекулы в отношении параметра, такого как цвет (например, от бесцветного до слегка желтого или от бесцветного до желтого), прозрачность (например, от прозрачного до слегка опалесцирующего или от прозрачного до опалесцирующего) или вязкость (например, от приблизительно 1 до 5 сП, когда измерено при температуре окружающей среды, такой как при 20°C-30°C, например, 25°C). Анализ может включать оценку одного или более из вышеуказанных параметров. Способ также включает возможно определение, удовлетворяет ли разрешающий параметр предварительно выбранным критериям, например, присутствуют ли предварительно выбранные критерии, или присутствуют ли они в предварительно выбранном диапазоне. Если наблюдаемый разрешающий параметр находится в пределах предварительно выбранного диапазона значений или удовлетворяет предварительно выбранным стандартным критериям, то препарат отбирают, например, для упаковки, применения, продажи, выпуска в оборот, отбраковки и т.д.
В другом аспекте в изобретении предложен способ соблюдения обязательного требования, например, пострегистрационного требования регулирующего органа, например FDA (Управление США по надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств). Способ включает обеспечение оценки препарата антител относительно параметра, как описано в данной заявке. Пострегистрационное требование может включать измерение одного или более из вышеуказанных параметров. Способ также включает, возможно, определение того, удовлетворяет ли наблюдаемый разрешающий параметр предварительно выбранным критериям, или находится ли параметр в предварительно выбранном диапазоне; возможно, документальное фиксирование значения или результата анализа или установление связи с органом, например, посредством передачи значения или результата в регулирующий орган.
В другом аспекте в изобретении предложен способ изготовления партии препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, имеющего предварительно выбранное свойство, например, удовлетворяющего спецификации для выпуска, требованию маркировки или фармакопейному требованию, например свойству, описанному в данной заявке. Способ включает обеспечение тестируемого препарата; анализ тестируемого препарата согласно способу, описанному в данной заявке; определение, удовлетворяет ли тестируемый препарат предварительно выбранным критериям, например, имеет ли он предварительно установленную взаимосвязь с эталонным значением, например, одним или более эталонными значениями, раскрытыми в данной заявке, и отбор тестируемого препарата антитела для изготовления партии продукта.
В другом аспекте в изобретении предложены множественные партии препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, где один или более параметров (например, значение или разрешающий параметр, определенные способом, описанным в данной заявке) для каждой партии варьируют меньше чем предварительно выбранный диапазон от предварительно выбранного желаемого эталонного значения или критериев, например, диапазона или критериев, описанных в данной заявке. В некоторых воплощениях определяют один или более параметров для одной или более партий препарата, и партию или партии, выбранные в результате данного определения. Некоторые воплощения включают сравнение результатов определения с предварительно выбранным значением или критериями, например, стандартом сравнения. Другие воплощения включают корректировку дозы из партии, подлежащей введению, например, на основании результата определения данного значения или параметра.
В другом аспекте в изобретении предложен способ одного или более из: предоставления отчета органу, принимающему отчет, оценки образца препарата SDAB молекулы, например молекулы TNF нанотела, в отношении соответствия эталонному стандарту, например требованию FDA, поиска указания от другой стороны, что препарат SDAB молекулы удовлетворяет некоторому предписанному требованию, или предоставления информации о препарате SDAB молекулы другой стороне. Типичные получающие организации или другие стороны включают правительство, например, федеральное правительство США, например, государственный орган, например, FDA. Способ включает одну или более (или все) из следующих стадий: изготовление и/или тестирование водного препарата SDAB молекулы в первой стране, например, США; отправку по меньшей мере аликвоты образца за пределы первой страны, например, отправку ее из Соединенных Штатов во вторую страну; приготовление или прием отчета, который включает данные о структуре препарата SDAB молекулы, например, данные, относящиеся к структуре и/или цепи, описанной в данной заявке, например, данные, полученные с помощью одного или более способов, описанных в данной заявке; и предоставление указанного отчета организации, получающей отчет.
В одном из воплощений организация, получающая отчет, может определить, удовлетворяют ли эти данные установленному требованию или стандартному значению, и, возможно, получают ли ответ из организации, получающей отчет, например, производитель, дистрибьютор или продавец препарата SDAB молекулы. В одном из воплощений после получения одобрения из организации, получающей отчет, препарат SDAB молекулы отбирают, упаковывают или помещают в торговый оборот.
В другом аспекте в изобретении предложен способ оценки препарата SDAB молекулы. Способ включает получение данные относительно присутствия или уровня SDAB молекулы, например, где данные получали одним или более способами, описанными в данной заявке; предоставление документа, который включает указанные данные и возможно включает идентификатор партии SDAB молекулы; предоставление указанного документа лицу принимающему решение, например, государственному органу, например, FDA; возможно, получение отчета от указанного лица, принимающего решение; возможно, принятие решения о выпуске или продаже партии SDAB молекулы на основании отчета от лица, принимающего решение. В одном из воплощений способ дополнительно включает выпуск образца.
Все публикации, заявки на патент, патенты и другие ссылки, упомянутые в данной заявке, включены посредством ссылки во всей их полноте.
Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в данной заявке, имеют такое же значение, что и обычно понятные среднему специалисту в данной области, к которой относится это изобретение. Хотя способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в данной заявке, могут быть использованы на практике или при тестировании настоящего изобретения, подходящие способы и материалы описаны ниже. Кроме того, материалы, способы и примеры являются лишь иллюстративными и не предназначены быть ограничивающими.
Другие признаки и преимущества изобретения будут очевидны из подробного описания, графических материалов и из формулы изобретения.
ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
На Фиг.1 представлены результаты биологической активности лиофилизированного препарата 106 ед./мг TNF-связывающего нанотела (ATN-103), хранящегося в виде высушенного порошкового (DP) препарата в течение вплоть до шести месяцев. Препарат хранили при указанных температурах.
На Фиг.2 представлены результаты связывающей активности в отношении человеческого сывороточного альбумина (HSA) лиофилизированного препарата TNF-связывающего нанотела (ATN-103). Результаты показаны в виде процента (%) от эталонного стандарта TNF-связывающего нанотела.
На Фиг.3 представлены результаты эксклюзионной-HPLC (SE-HPLC) в отношении % высокомолекулярных (HMW) компонентов для лиофилизированного препарата.
На Фиг.4 представлены результаты для SDS (додецилсульфат натрия)-капиллярного электрофореза (SDS-CE) в отношении % TNF-связывающего нанотела для лиофилизированного препарата.
На Фиг.5 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов для препарата, подвергнутого контрольному циклу лиофилизации и циклу лиофилизации на устойчивость.
На Фиг.6 представлены результаты биологической активности 106 ед./мг TNF-связывающего нанотела после хранения в течение вплоть до шести месяцев в высококонцентрированном жидком препарате.
На Фиг.7 представлены результаты связывающей активности в отношении человеческого сывороточного альбумина (HSA) (процент эталонного стандарта TNF-связывающего нанотела) высококонцентрированного жидкого препарата, хранящегося в течение вплоть до шести месяцев при указанных температурах.
На Фиг.8 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов высококонцентрированного жидкого препарата после хранения в течение вплоть до шести месяцев при указанных температурах.
На Фиг.9 представлены результаты SE-HPLC для % LMW компонентов высококонцентрированного жидкого препарата после хранения в течение вплоть до шести месяцев при указанных температурах.
На Фиг.10 представлены результаты SDS-CE для % ATN-103 высококонцентрированного жидкого препарата после хранения в течение вплоть до шести месяцев при указанных температурах.
На Фиг.11 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов высококонцентрированного жидкого препарата в предварительно заполненном шприце.
На Фиг.12 представлены результаты SE-HPLC для % LMW компонентов высококонцентрированного жидкого препарата в предварительно заполненном шприце.
На Фиг.13 представлены результаты CEX-HPLC для % кислотных компонентов высококонцентрированного жидкого препарата в предварительно заполненном шприце.
На Фиг.14 представлены результаты CEX-HPLC для % щелочных компонентов высококонцентрированного жидкого препарата в предварительно заполненном шприце.
На Фиг.15 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов высококонцентрированных жидких препаратов - других препаратов (идентификация других стабилизирующих и дестабилизирующих эксципиентов).
На Фиг.16 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела.
На Фиг.17 представлены результаты SE-HPLC для % LMW компонентов для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела.
На Фиг.18 представлены результаты CEX-HPLC для % кислотных компонентов для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела.
На Фиг.19 представлены результаты CEX-HPLC для % щелочных компонентов для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела.
На Фиг.20 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела после 10X циклов замораживания-оттаивания.
На Фиг.21 представлены результаты SE-HPLC для % LMW компонентов для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела после 10X циклов замораживания-оттаивания.
На Фиг.22 представлены результаты мутности (поглощение при 455 нм) для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела после 10X циклов замораживания-оттаивания.
На Фиг.23 представлены результаты концентрации (по УФ поглощению при 280 нм) для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела после 10X циклов замораживания-оттаивания.
На Фиг.24 представлен высококонцентрированный жидкий препарат TNF-связывающего нанотела: % HMW согласно SE-HPLC после кратковременных термических воздействий, возможно встречающихся в процессах изготовления.
На Фиг.25 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов низкоконцентрированного жидкого препарата в зависимости от рН и препарата (40°C).
На Фиг.26 представлены результаты SE-HPLC для % LMW компонентов низкоконцентрированного жидкого препарата в зависимости от рН и препарата (40°C).
На Фиг.27 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов низкоконцентрированного жидкого препарата в зависимости от рН и препарата (4°C).
На Фиг.28 представлены результаты SE-HPLC для % HMW компонентов низкоконцентрированного жидкого препарата в зависимости от рН и препарата после встряхивания.
На Фиг.29 представлена схема предсказанной структуры ATN-103.
На Фиг.30 представлена аминокислотная последовательность полипептидной цепи ATN-103 (SEQ ID NO: 1).
На Фиг.31 представлены гистограммы, демонстрирующие % HMW компонентов, определенных посредством SE-HPLC, указанных препаратов, содержащих приблизительно 100 мг/мл ATN-103 (HST, HSGT, HSGMT, HSorb и контроль), хранящихся в указанных условиях.
На Фиг.32 представлены гистограммы, демонстрирующие % LMW компонентов, определенных посредством SE-HPLC, указанных препаратов, содержащих приблизительно 100 мг/мл ATN-103 (HST, HSGT, HSGMT, HSorb и контроль), хранящихся в указанных условиях. Никаких LMW компонентов не было определено в начальной временной точке или после двух недель при 4°C.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Были идентифицированы стабильные препараты, которые включают SDAB молекулу, например молекулу нанотела (например, молекулу TNF-связывающего нанотела), которые являются подходящими для хранения высоких и низких концентраций SDAB молекулы ("препарат"). SDAB молекула, которую готовят в виде препарата, является предпочтительно по существу чистой и желательно по существу гомогенной (т.е. свободной от загрязняющих белков и т.д.). "По существу чистый" белок означает композицию, содержащую по меньшей мере примерно 90% по массе белка, исходя из общей массы композиции, предпочтительно по меньшей мере примерно 95% по массе. "По существу гомогенный" белок означает композицию, содержащую по меньшей мере примерно 99% по массе белка, исходя из общей массы композиции.
Целостность SDAB молекулы в препарате обычно поддерживается после долговременного хранения в виде жидкости или в виде лиофилизированного продукта в различных условиях. Например, целостность SDAB молекулы удовлетворительно поддерживается после воздействия широкого диапазона температур хранения (например, от -80°C до 40°C), напряжения сдвига (например, встряхивания) и напряжения на поверхности раздела (циклов замораживания-оттаивания).
Дополнительно, для лиофилизированного материала, целостность SDAB молекулы удовлетворительно поддерживается во время процесса восстановления влагосодержания. Кроме того, целостность SDAB молекулы в достаточной степени поддерживается для применения в качестве лекарственного средства, как продемонстрировано относительно низкими накоплениями LMW компонентов и HMW компонентов, биоактивностью in vitro, связывающей активностью in vitro, после длительного хранения (например, вплоть до 12 месяцев) при различных температурах (например, от -80°C до 40°C).
Для того чтобы настоящее изобретение можно было легче понять, сначала определяют некоторые термины. Дополнительные определения изложены в подробном описании.
Как использовано в данной заявке, единственное число относится к одному или более чем одному (например, к по меньшей мере одному) грамматическому объекту.
Термин "или" используют в данной заявке для обозначения термина "и/или" и используют взаимозаменяемо с ним, если контекст ясно не указывает иное.
Термины "белки" и "полипептиды" используются взаимозаменяемо в данной заявке.
"Примерно" и "приблизительно" должны, как правило, обозначать приемлемый уровень ошибки для измеренного количества с учетом характера или точности измерений. Примерные уровни ошибки находятся в пределах 20 процентов (%), типично в пределах 10%, и более типично в пределах 5% от заданного значения или диапазона значений.
"Стабильный" препарат SDAB молекулы демонстрирует небольшую или не демонстрирует никаких признаков одного или более из следующего: агрегация, фрагментация, дезаминирование, окисление или изменение биологической активности в течение продолжительного периода времени, например, 6, 12 месяцев, 24 месяцев, 36 месяцев или дольше. Например, в одном из воплощений менее 10% SDAB молекулы подвергается агрегации, фрагментации или окислению. Агрегацию, осаждение и/или денатурацию можно оценить известными способами, такими как визуальный контроль цвета и/или прозрачности, или посредством рассеяния УФ света или эксклюзионной хроматографии. Способность белка сохранять свою биологическую активность можно оценить посредством обнаружения и количественного определения химически измененных форм антитела. Модификацию размера (например, усечение) можно оценить с использованием эксклюзионной хроматографии и/или SDS-PAGE (полиакриламидный гель с додецилсульфатом натрия), например. Другие типы химического изменения включают изменение заряда (например, происходящее в результате дезаминирования), которое можно оценить посредством ионобменной хроматографии, например.
Молекула SDAB "сохраняет свою биологическую активность" в фармацевтическом препарате, если биологическая активность молекулы в определенное время находится в пределах примерно 50% или выше биологической активности, продемонстрированной во время получения фармацевтического препарата, как определено в антигенсвязывающем анализе, например.
"Восстановленный" препарат представляет собой препарат, который был получен путем растворения лиофилизированного белкового препарата в разбавителе, так что белок распределяется в восстановленном препарате. Восстановленный препарат является подходящим для введения (например, парентерального или периферического введения) пациенту, которого лечат интересующим белком, и в некоторых воплощениях изобретения может представлять собой препарат, который является подходящим для подкожного введения.
Под "изотоническим" или "изоосмотическим" подразумевают, что интересующий препарат имеет сходное или по существу такое же осмотическое давление, как кровь человека. Изотонические или изоосмотические препараты будут обычно иметь осмотическое давление от примерно 250 до 350 мОсм. Изотоничность может быть измерена с использованием давления насыщенного пара или осмометра с охлаждением льдом, например.
"Агент, регулирующий тоничность" относится к соединению, которое делает препарат по существу изотоническим или изоосмотическим человеческой крови. Примерные агенты, регулирующие тоничность, представляют собой: сахарозу, сорбит, глицин, метионин, маннит, декстрозу, инозит, хлорид натрия, аргинин или гидрохлорид аргинина. Обычно агенты, регулирующие тоничность, добавляют в таком количестве, что весь препарат оказывает осмотическое сопротивление, аналогичное осмотическому сопротивлению человеческой крови. Например, человеческая кровь содержит приблизительно 300 мМ растворенных веществ. Как правило, фармацевтические продукты приводят к общей молярности 300 мМ. Это соответствует осмотическому давлению от приблизительно 300 до 310 мОсм, с типичным диапазоном от 250 мОсм до 350 мОсм. Количество необходимого агента, регулирующего тоничность, можно оценить первоначально путем вычисления. Вклад в общую молярность можно оценить на основании молекулярной массы молекулы эксципиента и известных свойств молекулы, например, диссоциирует ли молекула на два ионных компонента или молекула является неионной (не диссоциирует). Дополнительно, необходимо понимать осмотический вклад конкретной белковой молекулы в зависимости от концентрации белка. Этот параметр может быть определен экспериментально.
Например, исходя из препарата (тоничность не скорректирована) 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, с концентрацией белка анти-TNF нанотела 100 мг/мл, в качестве первой стадии, предполагаемая молярность исходного препарата может быть вычислена следующим образом:
10 мМ гистидина = 10 мМ
5% сахарозы соответствует приблизительно 146 мМ
5%=5 г/100 мл=50 г/л→(50 г/л)/(342,3 г/моль)=0,146 моль/л=146 мМ
0,01% полисорбата 80 создает по существу нулевую молярность и может не приниматься во внимание.
100 мг/мл белка: Определили посредством экспериментирования, что 100 мг/мл белка анти-TNF нанотела создает осмотическое давление, которое соответствует приблизительно 48 мМ.
Поэтому, суммируя все вклады в молярность в первоначальном препарате:
10 мМ+146 мМ+48 мМ=204 мМ
Если целевая молярность составляет 310 мМ, то соответствующая количественная молярность для формирования целевого остатка составляет:
310 мМ-204 мМ=106 мМ
Таким образом, рекомендованное количество агента, регулирующего тоничность, составляет 106 мМ неионного агента, регулирующего тоничность, или 53 мМ ионного агента, регулирующего тоничность, который полностью диссоциирует на два ионных компонента.
После проведения первоначальной оценки агента, регулирующего тоничность, рекомендуется протестировать препарат экспериментально. Таким образом, в предложенном примере в первоначальный препарат добавляли 100 мМ глицина. (Рекомендованные 106 мМ округляли до 100 мМ для простоты). Ожидаемая осмолярность будет составлять:
10 мМ гистидина + 146 мМ сахарозы + 48 мМ белка + 100 мМ глицина = 304 мМ
Значение экспериментального осмотического давления препарата = 305 мОсм.
"Лиопротектор" представляет собой молекулу, которая, при объединении с интересующим белком, в значительной степени предупреждает или уменьшает химическую и/или физическую нестабильность белка при лиофилизации и последующем хранении. Примерные лиопротекторы включают сахара, такие как сахароза, сорбит или трегалоза; аминокислоту, такую как мононатрия глутамат или гистидин; метиламин, такой как бетаин; лиотропную соль, такую как сульфат магния; полиол, такой как трехосновные или высшие сахарные спирты, например глицерин, эритрит, глицерол, арабит, ксилит, сорбит и маннит; пропиленгликоль; полиэтиленгликоль; Pluronics и их комбинации. Обычно лиопротектор представляет собой нередуцирующий сахар, такой как трегалоза или сахароза. Лиопротектор добавляют к предварительно лиофилизированному препарату в "лиопротектирующем количестве", что означает, что после лиофилизации белка в присутствии лиопротектирующего количества лиопротектора белок по существу сохраняет свою физическую и химическую стабильность и целостность при лиофилизации и хранении.
"Стабилизатор" относится к молекуле, которая, при объединении с интересующим белком {например, SDAB молекулой), по существу предупреждает или уменьшает химическую и/или физическую нестабильность интересующего белка в лиофилизированной, восстановленной, жидкой форме или форме для хранения. Примерные стабилизаторы включают сахарозу, сорбит, глицин, инозит, хлорид натрия, метионин, аргинин и гидрохлорид аргинина.
"Разбавитель", представляющий интерес в данной заявке, представляет собой разбавитель, который является фармацевтически приемлемым (безопасным и нетоксичным для введения человеку) и является полезным для получения восстановленного препарата. Примерные разбавители включают стерильную воду, бактериостатическую воду для инъекции (BWFI), pH-забуференный раствор (например, забуференный фосфатами физиологический раствор), стерильный физиологический раствор, раствор Рингера или раствор декстрозы.
"Консервант" представляет собой соединение, которое может быть добавлено к разбавителю для существенного уменьшения бактериального действия в восстановленном препарате, облегчая таким образом производство восстановленного препарата многоразового использования, например. Примеры потенциальных консервантов включают октадецилдиметилбензиламмония хлорид, гексаметония хлорид, бензалкония хлорид (смесь алкилбензилдиметиламмония хлоридов, в которых алкильные группы представляют собой соединения с длинной цепью), и бензэтония хлорид. Другие типы консервантов включают ароматические спирты, такие как феноловый, бутиловый и бензиловый спирт, алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехин, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол. Наиболее предпочтительным консервантом в данной заявке является бензиловый спирт.
"Наполнитель" представляет собой соединение, который добавляет массу в лиофилизированную смесь и вносит вклад в физическую структуру лиофилизированной таблетки (например, облегчает производство по существу однородной лиофилизированной таблетки, которая сохраняет открытую пористую структуру). Примерные наполнители включают маннит, глицин, полиэтиленгликоль и сорбит.
Способы и композиции по настоящему изобретению охватывают полипептиды и нуклеиновые кислоты, имеющие указанные последовательности, или последовательности, по существу идентичные или аналогичные им, например, последовательности, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% идентичные или больше указанной последовательности. В контексте аминокислотной последовательности термин "по существу идентичный" используют в данной заявке для ссылки на первую аминокислоту, которая содержит достаточное или минимальное число аминокислотных остатков, которые являются: 1) идентичными, или 2) консервативными заменами выровненных аминокислотных остатков во второй аминокислотной последовательности, так что первая и вторая аминокислотные последовательности могут иметь общий структурный домен и/или общую функциональную активность. Например, аминокислотные последовательности, содержащие общий структурный домен, имеющий по меньшей мере примерно 85%-ную, 90%-ную, 91%-ную, 92%-ную, 93%-ную, 94%-ную, 95%-ную, 96%-ную, 97%-ную, 98%-ную или 99%-ную идентичность эталонной последовательности. В других воплощениях аминокислотная последовательность может содержать одну или более аминокислотных вставок, делеций или замен (например, консервативных замен) для достижения процента идентичности по меньшей мере примерно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности эталонной последовательности.
В контексте нуклеотидной последовательности термин "по существу идентичный" используют в данной заявке в отношении первой последовательности нуклеиновой кислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество нуклеотидов, которые идентичны выровненным нуклеотидам во второй последовательности нуклеиновой кислоты, так что первая и вторая нуклеотидные последовательности кодируют полипептид, имеющий общую функциональная активность, или кодируют общий структурный полипептидный домен или общую функциональную полипептидную активность. Например, нуклеотидные последовательности, имеющие по меньшей мере примерно 85%-ную, 90%-ную, 91%-ную, 92%-ную, 93%-ную, 94%-ную, 95%-ную, 96%-ную, 97%-ную, 98%-ную или 99%-ную идентичность эталонной последовательности.
Также в качестве полипептидов по настоящему изобретению включены фрагменты, производные, аналоги или варианты вышеуказанных полипептидов и любая их комбинация. Термины "фрагмент", "вариант", "производное" и "аналог", когда ссылаются на белки по настоящему изобретению, включают любые полипептиды, которые сохраняют по меньшей мере некоторые из функциональных свойств соответствующего нативного антитела или полипептида. Фрагменты полипептидов по настоящему изобретению включают протеолитические фрагменты, а также делеционные фрагменты, в дополнение к специфическим фрагментам антител, обсуждавшимся в данной заявке в другом месте. Варианты полипептидов по настоящему изобретению включают фрагменты, описанные выше, а также полипептиды с измененными аминокислотными последовательностями вследствие аминокислотных замен, делеций или вставок. Варианты могут встречаться в природе или не встречаться в природе. Не встречающиеся в природе варианты могут быть получены с использованием известных в области техники методов мутагенеза. Вариантные полипептиды могут содержать консервативные или неконсервативные аминокислотные замены, делеций или добавления. Производные фрагментов по настоящему изобретению представляют собой полипептиды, которые были изменены так, чтобы демонстрировать дополнительные признаки, не обнаруженные в нативном полипептиде. Примеры включают слитые белки. Вариантные полипептиды также могут быть упомянуты в данной заявке как "полипептидные аналоги". Как использовано в данной заявке, "производное" полипептида относится к рассматриваемому полипептиду, имеющему один или более остатков, химически модифицированных путем взаимодействия функциональной боковой группы. Также в качестве "производных" включены такие полипептиды, которые содержат одно или более встречающихся в природе аминокислотных производных двадцати стандартных аминокислот. Например, пролин может быть замещен 4-гидроксипролином; лизин может быть замещен 5-гидроксилизином; гистидин может быть замещен 3-метилгистидином; серин может быть замещен гомосерином; и лизин может быть замещен орнитином.
Термин "функциональный вариант" относится к полипептидам, которые имеют аминокислотную последовательность, по существу идентичную природной последовательности, или кодируются по существу идентичной нуклеотидной последовательностью и способны иметь одну или более активностей природной последовательности.
Расчеты гомологии или идентичности между последовательностями (термины используются взаимозаменяемо в данной заявке) осуществляют следующим образом.
Для определения процента идентичности двух аминокислотных последовательностей, или двух последовательностей нуклеиновой кислоты, последовательности выравнивают для целей оптимального сравнения (например, могут быть введены бреши в одну или обе первую и вторую аминокислотную последовательность или последовательность нуклеиновой кислоты для оптимального выравнивания, и негомологичные последовательности могут не приниматься во внимание для целей сравнения). В предпочтительном воплощении длина эталонной последовательности, выровненной для целей сравнения, составляет по меньшей мере 30%, предпочтительно по меньшей мере 40%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, 60%, и еще более предпочтительно по меньшей мере 70%, 80%, 90%, 100% от длины эталонной последовательности. Аминокислотные остатки или нуклеотиды в соответствующих положениях аминокислот или нуклеотидов затем сравнивают. Когда положение в первой последовательности занято таким же аминокислотным остатком или нуклеотидом, что и соответствующее положение во второй последовательности, тогда молекулы идентичны по этому положению (как использовано в данной заявке, "идентичность" аминокислоты или нуклеиновой кислоты эквивалентна "гомологии" аминокислоты или нуклеиновой кислоты).
Процент идентичности между двумя последовательностями зависит от количества идентичных положений, общих для данных последовательностей, с учетом количества брешей и длины каждой бреши, которые должны быть введена для оптимального выравнивания этих двух последовательностей.
Сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями может быть осуществлено с использованием математического алгоритма. В предпочтительном воплощении процент идентичности между двумя аминокислотными последовательностями определяют с использованием алгоритма Needleman и Wunsch ((1970) J. Mot. Biol. 48: 444-453), который был включен в программу GAP в пакете программ GCG (доступен на http://www.gcg.com), используя либо матрицу Blossum 62, либо матрицу PAM250, и массу бреши 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4 и массу длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В еще одном предпочтительном воплощении процент идентичности между двумя нуклеотидными последовательностями определяют с использованием программы GAP в пакете программ GCG (доступен на http://www.gcg.com), используя матрицу NWSgapdna. CMP и массу бреши 40, 50, 60, 70 или 80 и массу длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Особенно предпочтительным набором параметров (и который следует использовать, если не определено иначе) является балльная матрица Blossum 62 со штрафом за брешь 12, штрафом за удлинение бреши 4 и штрафом за брешь со сдвигом рамки считывания 5.
Процент идентичности между двумя аминокислотными или нуклеотидными последовательностями может быть определена с использованием алгоритма Е. Meyers и W. Miller ((1989) CABIOS, 4: 11-17), который был включен в программу ALIGN (версия 2.0), с использованием таблицы массы остатков РАМ 120, штрафа за длину бреши 12 и штрафа за брешь 4.
Последовательности нуклеиновой кислоты и белковые последовательности, описанные в данной заявке, могут быть использованы в качестве "запросной последовательности" для проведения поиска по общедоступным базам данных, например, для идентификации других членов семейства или родственных последовательностей. Такие поиски могут быть осуществлены с использованием программ NBLAST и XBLAST (версия 2.0) из Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-10. Поиски нуклеотидов в BLAST могут быть осуществлены с помощью программы NBLAST, шкала = 100, длина слова = 12, для получения нуклеотидных последовательностей, гомологичных молекулам нуклеиновой кислоты (SEQ ID NO: 1) по изобретению. Поиски белков в BLAST могут быть осуществлены с помощью программы XBLAST, шкала = 50, длина слова = 3, для получения аминокислотных последовательностей, гомологичных белковым молекулам (SEQ ID NO: 1) по изобретению. Для получения выравниваний с брешами для целей сравнения может быть использована Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402. При использовании программ BLAST и Gapped BLAST могут быть использованы значения параметров по умолчанию из соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST).
"Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену, при которой аминокислотный остаток заменен аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, определены в данной области. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).
Различные аспекты изобретения описаны более подробно ниже. Однодоменные антигенсвязывающие (SDAB) молекулы
Однодоменные антигенсвязывающие (SDAB) молекулы включают молекулы, определяющие комплементарность области которых являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают, но не ограничиваются этим, вариабельные домены тяжелой цепи, связывающие молекулы, естественно лишенные легкой цепи, единичные домены, происходящие из традиционных 4-цепочечных антител, сконструированные домены и однодоменные каркасы, отличные от происходящих из антител. SDAB молекулы могут быть любыми из уровня техники или любыми будущими однодоменными молекулами. SDAB молекулы могут происходить из любых видов, включая, но не ограничиваясь этим, мышь, человека, верблюда, ламу, рыбу, акулу, козу, кролика и быка. Этот термин также включает природные однодоменные антительные молекулы из видов, отличных от Camelidae и акул.
В одном аспекте изобретения SDAB молекула может происходить из вариабельной области иммуноглобулина, обнаруженного у рыбы, такого как, например, который происходит из иммуноглобулинового изотипа, известного как новый антигенный рецептор (NAR от англ. Novel Antigen Receptor), обнаруженный в сыворотке акулы. Способы продукции однодоменных молекул, происходящих из вариабельной области NAR ("IgNARs"), описаны в WO 03/014161 и Streltsov (2005) Protein Sci. 14: 2901-2909.
Согласно другому аспекту изобретения, SDAB молекула представляет собой природную однодоменную антигенсвязывающую молекулу, известную как тяжелая цепь, лишенная легких цепей. Такие однодоменные молекулы раскрыты в WO 9404678 и Hamers-Casterman, С. et al. (1993) Nature 363:446-448, например. Для ясности, этот вариабельный домен, происходящий из молекулы тяжелой цепи, естественно лишенной легкой цепи, известен в данной заявке как VHH или нанотело, для того чтобы отличать его от традиционного VH четырехцепочечных иммуноглобулинов. Такая молекула VHH может происходить из видов Camelidae, например верблюда, ламы, дромадера, альпака и гуанако. Другие виды, кроме Camelidae, могут продуцировать молекулы тяжелой цепи, естественно лишенные легкой цепи; такие VHHs находятся в пределах объема изобретения.
SDAB молекулы могут быть рекомбинантными, CDR-привитыми, гуманизированными, верблюдизированными, деиммунизированными и/или полученными in vitro (например, выбранными посредством фагового дисплея), как описано более подробно ниже.
Термин "антигенсвязывающий" предназначен для включения части полипептида, например однодоменной молекулы, описанной в данной заявке, которая содержит детерминанты, образующие область контакта, которая связывается с антигеном-мишенью или его эпитопом. Что касается белков (или белков-миметиков), то антигенсвязывающий участок обычно включает одну или более петель (из по меньшей мере четырех аминокислот или аминокислотных миметиков), которые образуют область контакта, которая связывается с антигеном-мишенью. Типично, антигенсвязывающий участок полипептида, например, молекула однодоменного антитела, включает по меньшей мере одну или две CDR, или более типично по меньшей мере три, четыре, пять или шесть CDR.
Термин "иммуноглобулиновый вариабельный домен" часто понимают в данной области как являющийся идентичным или по существу идентичным VL-или VH-домену человеческого или животного происхождения. Следует понимать, что иммуноглобулиновый вариабельный домен, возможно, эволюционировал у некоторых видов, например акул и ламы, чтобы отличаться по аминокислотной последовательности от VL или VH человека или млекопитающего. Однако эти домены первично вовлечены в связывание антигена. Термин "иммуноглобулиновый вариабельный домен" типично включает по меньшей мере одну или две CDR или более типично по меньшей мере три CDR.
"Константный домен иммуноглобулина" или "константная область" предназначены для включения иммуноглобулинового домена, который является идентичным или по существу аналогичным CL-, CH1-, CH2-, CH3- или CH4-домену человеческого или животного происхождения. См., например, Charles A Hasemann and J. Donald Capra, Immunoglobulins: Structure and Function, in William E. Paul, ed., Fundamental Immunology, Second Edition, 209, 210-218 (1989). Термин "Fc-область" относится к Fc-участку константного иммуноглобулинового домена, который включает иммуноглобулиновые домены CH2 и CH3 или иммуноглобулиновые домены, по существу аналогичные им.
В некоторых воплощениях SDAB молекула представляет собой одновалентную или полиспецифическую молекулу {например, двухвалентную, трехвалентную или четырехвалентную молекулу). В других воплощениях SDAB молекула представляет собой моноспецифическую, биспецифическую, триспецифическую или тетраспецифическую молекулу. Является ли молекула "моноспецифической" или "полиспецифической", например "биспецифической", относится к количеству различных эпитопов, с которыми реагирует связывающий полипептид. Полиспецифические молекулы могут быть специфическими в отношении различных эпитопов полипептида-мишени, описанного в данной заявке, или могут быть специфическими в отношении полипептида-мишени, а также в отношении гетерологичного эпитопа, такого как гетерологичный полипептид или твердый материал-подложка.
Как использовано в данной заявке, термин "валентность" относится к числу потенциальных связывающих доменов, например антигенсвязывающих доменов, присутствующих в SDAB молекуле. Каждый связывающий домен специфически связывает один эпитоп. Когда SDAB молекула содержит более чем один связывающий домен, тогда каждый связывающий домен может специфически связываться с одним и тем же эпитопом, для антитела с двумя связывающими доменами, названного "двухвалентным моноспецифическим", или с различными эпитопами, для SDAB молекулы с двумя связывающими доменами, названной "двухвалентной биспецифической". SDAB молекула может быть также биспецифической и двухвалентной для каждой специфичности (названной "биспецифической четырехвалентной молекулой"). Биспецифические двухвалентные молекулы и способы их получения описаны, например, в пат. США №№5731168; 5807706; 5821333; и пат. публ. США №№2003/020734 и 2002/0155537, описания которых включены посредством ссылки в данную заявку. Биспецифические четырехвалентные молекулы и способы их получения описаны, например, в WO 02/096948 и WO 00/44788, описания которых включены посредством ссылки в данную заявку. См., как правило, публикации РСТ WO 93/17715; WO 92/08802; WO 91/00360; WO 92/05793; Tutt et al., J, Immunol. 147: 60-69 (1991); пат. США №№4474893; 4714681; 4925648; 5573920; 5601819; Kostelny et al., J. Immunol. 148: 1547-1553 (1992).
В некоторых воплощениях SDAB молекула представляет собой одноцепочечный слитый полипептид, содержащий одну или более однодоменных молекул (например нанотел), лишенных комплементарного вариабельного домена или иммуноглобулиновой константной, например Fc, области, который связывается с одним или более антигенами-мишенями. Примерный антиген-мишень, распознаваемый антигенсвязывающими полипептидами, включает фактор некроза опухолей α (TNFα). В некоторых воплощениях антигенсвязывающая однодоменная молекула связывается с сывороточным белком, например, человеческими сывороточными белками, выбранными из одного или более из сывороточного альбумина (человеческого сывороточного альбумина (HSA)) или трансферина.
TNFα
Фактор некроза опухолей альфа, как известно в данной области, ассоциирован с воспалительными расстройствами, такими как ревматоидный артрит, болезнь Крона, неспецифический язвенный колит и рассеянный склероз. Как TNFα, так и рецепторы (CD120a и CD120b) были исследованы очень подробно. TNFα в своей биоактивной форме представляет собой тример. Несколько стратегий антагонизации действия TNFα с использованием антител против TNFα были разработаны и в настоящее время коммерчески доступны, такие как Remicade® и Humira®. Молекулы антител против TNFα известны. Многочисленные примеры TNFa-связывающих однодоменных антигенсвязывающих молекул (например нанотел) раскрыты в WO 2004/041862, WO 2004/041865, WO 2006/122786, содержание которых включено посредством ссылки в данную заявку во всей их полноте. Дополнительные примеры однодоменных антигенсвязывающих молекул раскрыты в US 2006/286066, US 2008/0260757, WO 06/003388, US 05/0271663, US 06/0106203, содержание которых включено посредством ссылки в данную заявку во всей их полноте. В других воплощениях моно-, би-, три- и другие полиспецифические однодоменные антитела против TNFα и сывороточного белка, например HSA, раскрыты в этих ссылках.
В конкретных воплощениях молекула TNFα-связывающего нанотела содержит одно или более нанотел, раскрытых в WO 2006/122786. Например, молекула TNFα-связывающего нанотела может быть одновалентной, двухвалентной, трехвалентной молекулой TNFα-связывающего нанотела, раскрытой в WO 2006/122786. Примерные TNFα-связывающие нанотела включают, но не ограничиваются этим, TNF1, TNF2, TNF3, их гуманизированные формы (например, TNF29, TNF30, TNF31, TNF32, TNF33). Дополнительные примеры одновалентных TNFa-связывающих нанотел раскрыты в Таблице 8 из WO 2006/122786. Примерные двухвалентные молекулы TNFa-связывающего нанотела включают, но не ограничиваются этим, TNF55 и TNF56, которые содержат два нанотела TNF30, связанных через пептидный линкер с образованием единого слитого полипептида (раскрытого в WO 2006/122786). Дополнительные примеры двухвалентных молекул TNFα-связывающего нанотела раскрыты в Таблице 19 из WO 2006/122786 как TNF4, TNF5, TNF6, TNF7, TNF8.
В других воплощениях молекула HSA-связывающего нанотела содержит одно или более нанотел, раскрытых в WO 2006/122786. Например, молекула HSA-связывающего нанотела может быть одновалентной, двухвалентной, трехвалентной молекулой HSA-связывающего нанотела, раскрытой в WO 2006/122786. В других воплощениях молекула HSA-связывающего нанотела может быть моноспецифической или полиспецифической молекулой, имеющей по меньшей мере одну из связывающих специфичностей, которая связывается с HSA. Примерные TNFa-связывающие нанотела включают, но не ограничиваются этим, ALB1, его гуманизированные формы (например, ALB6, ALB7, ALB8, ALB9, ALB10), раскрытые в WO 06/122786.
В других воплощениях две или более однодоменных молекул нанотела слиты, со связывающей группой или без нее, в виде генетического или полипептидного слияния. Связывающая группа может представлять собой любую связывающую группу, известную специалистам в данной области. Например, связывающая группа может представлять собой биосовместимый полимер длиной от 1 до 100 атомов. В одном из воплощений связывающая группа включает или состоит из остатков полиглицина, полисерина, полилизина, полиглутамата, полиизолейцина или полиаргинина или их комбинации. Например, полиглициновые или полисериновые линкеры могут включать по меньшей мере пять, семь, восемь, девять, десять, двенадцать, пятнадцать, двадцать, тридцать, тридцать пять и сорок остатков глицина и серина. Примерные линкеры, которые могут быть использованы, включают Gly-Ser повторы, например, (Gly)4-Ser (SEQ ID NO: 8) повторы в одном, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи или более повторах. В воплощениях линкер имеет следующие последовательности: (Gly)4-Ser-(Gly)3-Ser (SEQ ID NO: 9) или ((Gly)4-Ser)n (SEQ ID NO: 10), где n равно 4, 5 или 6.
В одном примерном воплощении антигенсвязывающий полипептид, состоящий из одноцепочечного полипептидного слияния двух однодоменных антительных молекул (например, двух вариабельных областей верблюдовых), которые связываются с антигеном-мишенью, например, фактором некроза опухолей альфа (TNFα), и одной однодоменной антительной молекулы (например, вариабельной области верблюдовых), которая связывается с сывороточным белком, например, HSA, названный в данной заявке "ATN-103", как показано, связывается с белком А или его функциональным вариантом. ATN-103 представляет собой гуманизированный, трехвалентный, биспецифический, TNFα-ингибирующий слитый белок. Антигеном для этого белка является фактор некроза опухолей альфа (TNF). На Фиг.29 представлено схематическое изображение предсказанной структуры ATN-103. Этот слитый белок имеет верблюжье происхождение и высокую степень гомологии последовательностей и структурной гомологии с VH-доменами человеческих иммуноглобулинов. Его единичная полипептидная цепь состоит из двух связывающих доменов для TNFα и одного для человеческого сывороточного альбумина (HSA), с двумя состоящими из девяти аминокислот G-S линкерами, соединяющими данные домены. Подробное описание ATN-103 представлено в WO 06/122786.
Полная аминокислотная последовательность полипептидной цепи ATN-103, предсказанной на основании ДНК последовательности соответствующего экспрессирующего вектора, показана на Фиг.30 (остатки пронумерованы, начиная с NH2-конца как Остаток номер 1 из SEQ ID NO: 1). Последний аминокислотный остаток, кодируемый последовательностью ДНК, представляет собой S363 и образует COOH-конец белка. Предсказанная молекулярная масса дисульфид-связанного ATN-103 (без каких-либо посттрансляционных модификаций) составляет 38434,7 Да. ATN-103 не содержит N-связанную консенсусную последовательность для гликозилирования. Молекулярная масса, наблюдаемая для основной изоформы посредством квадрупольной времяпролетной масс-спектрометрии с ионизацией наноэлектрораспылением, соответствует 38433,9 Да, что подтверждает отсутствие посттрансляционных модификаций.
На Фиг.30, области, определяющие комплементарность (CDR), подчеркнуты. Предсказанные внутримолекулярные дисульфидные связи проиллюстрированы посредством соединений вовлеченных цистеиновых остатков. Домены, связывающиеся с TNF, выделены жирным шрифтом, а домен, связывающийся с HSA, выделен жирным курсивом. Аминокислотные линкеры, соединяющие эти связывающие домены, выделены курсивом. Для данной полипептидной цепи также показан сигнальный пептид (-19MGW…VHS-1).
Получение SDAB молекул
SDAB молекулы могут состоять из одной или более однодоменных молекул (например, нанотел), которые являются рекомбинантными, CDR-привитыми, гуманизированными, верблюдизированными, деиммунизированными и/или полученными in vitro (например, выбранными посредством фагового дисплея). Методы получения антител и SDAB молекул и их рекомбинантная модификация известны в данной области и описаны подробно ниже.
Для получения антител доступны многочисленные способы, известные специалистам в данной области. Например, моноклональные антитела могут быть получены путем создания гибридом в соответствии с известными способами. Гибридомы, созданные таким образом, затем подвергают скринингу с использованием стандартных способов, таких как твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) и анализ методом поверхностного плазменного резонанса (BIACORE™), для идентификации одной или более гибридом, которые продуцируют нанотело, которое специфически связывается с заданным антигеном. Любая форма заданного антигена может быть использована в качестве иммуногена, например, рекомбинантный антиген, природные формы, любые его варианты или фрагменты, а также его антигенный пептид.
Один примерный способ создания антител и SDAB молекул включает скрининг белковых экспрессиющих библиотек, например, фаговых или рибосомных дисплейных библиотек. Фаговый дисплей описан, например, в Ladner et al., патенте США №5223409; Smith (1985) Science 228: 1315-1317; WO 92/18619; WO 91/17271; WO 92/20791; WO 92/15679; WO 93/01288; WO 92/01047; WO 92/09690 и WO 90/02809.
В дополнение к применению дисплейных библиотек, заданный антиген может быть использован для иммунизации животного, не являющегося человеком, например грызуна, например мыши, хомяка или крысы. В одном из воплощений животное, не являющееся человеком, включает по меньшей мере часть человеческого иммуноглобулинового гена. Например, можно сконструировать мышиные линии, дефектные по продукции мышиных антител, с большими фрагментами человеческих Ig локусов. С использованием гибридомной технологии могут быть получены и выбраны антиген-специфические моноклональные антитела, происходящие из генов с желаемой специфичностью. См., например, XENOMOUSE™, Green et al. (1994) Nature Genetics 7: 13-21, US 2003-0070185, WO 96/34096, опубликованную 31 октября 1996 г., и заявку РСТ №PCT/US96/05928, поданную 29 апреля 1996 г.
В другом воплощении SDAB молекула, полученная из животного, не являющегося человеком, и затем модифицированная, например гуманизированная, деиммунизированная, химерная, может быть получена с использованием методов рекомбинантной ДНК, известных в данной области. Были описаны различные подходы для создания химерных антител и SDAB молекул. См., например, Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81: 6851, 1985; Takeda et al., Nature 314:452, 1985, Cabilly et al., патент США №4816567;
Boss et al., патент США №4816397; Tanaguchi et al., Европейскую патентную публикацию ЕР 171496; Европейскую патентную публикацию 0173494, патент Великобритании GB 2177096 В. Гуманизированные антитела и SDAB молекулы могут быть также получены, например, с использованием трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческие гены тяжелой и легкой цепи, но не способны экспрессировать эндогенные мышиные гены тяжелой и легкой цепи иммуноглобулинов. Winter описывает примерный способ CDR-прививки, который может быть использован для получения гуманизированных антител и SDAB молекулы, описанной в данной заявке (патент США №5225539). Все CDR из конкретного человеческого антитела могут быть заменены по меньшей мере частью нечеловеческого CDR, или только некоторые из CDR могут быть заменены нечеловеческими CDR. Необходимо заменить только номер CDR, необходимый для связывания гуманизированного антитела и SDAB молекулы с заранее определенным антигеном.
Гуманизированные антитела могут быть получены путем замены последовательностей Fv-вариабельного домена, которые не вовлечены непосредственно в связывание антигена с эквивалентными последовательностями из человеческих Fv-вариабельных доменов. Примерные способы получения гуманизированных антител или их фрагментов предложены в Morrison (1985) Science 229: 1202-1207; в Oi et al. (1986) Bio Techniques 4:214; и в US 5585089; US 5693761; US 5693762; US 5859205 и US 6407213. Такие способы включают выделение, манипулирование и экспрессирование последовательностей нуклеиновых кислот, которые кодируют все или часть Fv-вариабельных доменов иммуноглобулина по меньшей мере из одной тяжелой или легкой цепи. Такие нуклеиновые кислоты могут быть получены из гибридомы, продуцирующей нанотело против заранее определенной мишени, как описано выше, а также из других источников. Рекомбинантная ДНК, кодирующая гуманизированную SDAB молекулу, например молекулу нанотела, затем может быть клонирована в подходящий экспрессирующий вектор.
В некоторых воплощениях гуманизированная SDAB молекула, например молекула нанотела, оптимизирована путем введения консервативных замен, замен из консенсусных последовательностей, замен из зародышевой линии и/или обратных мутаций. Такие измененные иммуноглобулиновые молекулы могут быть созданы посредством любого из нескольких методов, известных в данной области (например, Teng et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 80: 7308-7312, 1983; Kozbor et al., Immunology Today, 4: 7279, 1983; Olsson et al., Meth. Enzymol., 92: 3-16, 1982), и могут быть созданы согласно идеям публикации PCT WO92/06193 или ЕР 0239400).
Методы гуманизации SDAB молекул, например молекул нанотел, раскрыты в WO 06/122786.
SDAB молекула, например молекула нанотела, может быть также модифицирована посредством специфической делеции человеческих T-клеточных эпитопов или "деиммунизации" с помощью способов, раскрытых в WO 98/52976 и WO 00/34317. Кратко, вариабельные домены тяжелой и легкой цепи, например нанотела, могут быть проанализированы в отношении пептидов, которые связываются с МЫС класса II; эти пептиды представляют потенциальные T-клеточные эпитопы (как определено в WO 98/52976 и WO 00/34317). Для выявления потенциальных T-клеточных эпитопов может быть использован подход компьютерного моделирования, названный "пептидным протягиванием" ("peptide threading"), и, кроме того, база данных человеческих связывающих пептидов MHC класса II может быть исследована в отношении мотивов, присутствующих в последовательностях VH и VL, как описано в WO 98/52976 и WO 00/34317. Эти мотивы связываются с любым из 18 основных аллотипов DR MHC класса II и, таким образом, представляют потенциальные T-клеточные эпитопы. Обнаруженные потенциальные T-клеточные эпитопы могут быть устранены посредством замещения небольшого числа аминокислотных остатков в вариабельных доменах, или предпочтительно, посредством единичных аминокислотных замен. Как правило, делают консервативные замены. Часто, но не исключительно, может быть использована аминокислота, характерная для положения в последовательностях человеческих антител эмбрионального типа. Человеческие последовательности эмбрионального типа, например, раскрыты в Tomlinson, et al. (1992) J. Mol. Biol. 227: 776-798; Cook, G.P. etal. (1995) Immunol. Today Vol. 16(5): 237-242; Chothia, D, et al. (1992) J. Mol. Biol. 227: 799-817; и Tomlinson et al. (1995) EMBO J. 14: 4628-4638. Каталог V BASE представляет всеобъемлющий справочник последовательностей вариабельных областей иммуноглобулинов человека (составленное Tomlinson, I.A. et al. MRC Centre for Protein Engineering, Cambridge, UK). Эти последовательности могут быть использованы в качестве источника человеческой последовательности, например, для каркасных областей и CDR. Консенсусные человеческие каркасные области также могут быть использованы, например, как описано в US 6300064.
SDAB молекулы, например, молекулы нанотел, могут продуцироваться живыми клетками-хозяевами, которые были генетически сконструированы для продуцирования белка. Способы генетического конструирования клеток для продуцирования белков хорошо известны в данной области. См., например, Ausabel et al., eds. (1990), Current Protocols in Molecular Biology (Wiley, New York). Такие способы включают введение нуклеиновых кислот, которые кодируют и делают возможной экспрессию белка в живых клетках-хозяевах. Эти клетки-хозяева могут представлять собой бактериальные клетки, грибковые клетки, или предпочтительно животные клетки, растущие в культуре. Бактериальные клетки-хозяева включают, но не ограничиваются этим, клетки Escherichia coli. Примеры подходящих штаммов Е. coli включают: HB101, DH5a, GM2929, JM109, KW251, NM538, NM539 и любой штамм Е. coli, который не может расщеплять чужеродную ДНК. Грибковые клетки-хозяева, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются этим, клетки Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris и Aspergillus. Некоторые примеры животных клеточных линий, которые могут быть использованы, представляют собой CHO, VERO, BHK, HeLa, Cos, MDCK, 293, ЗТЗ и WI38. Новые животные клеточные линии могут быть установлены с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области (например, посредством трансформации, вирусной инфекции и/или селекции). Возможно, белок может секретироваться клетками-хозяевами в среду.
Модифицированные SDAB молекулы
Препараты по изобретению могут содержать по меньшей мере одну SDAB молекулу, например молекулу нанотела, имеющую аминокислотную последовательность, которая отличается по меньшей мере одним аминокислотным положением в одной из каркасных областей от аминокислотной последовательности природного домена, например VH-домена.
Следует понимать, что аминокислотные последовательности некоторых SDAB молекул по изобретению, таких как гуманизированные SDAB молекулы, могут отличаться по меньшей мере одним аминокислотным положением по меньшей мере в одной из каркасных областей от аминокислотных последовательностей природного домена, например, природных доменов VHI-I.
Изобретение также включает препараты производных SDAB молекул. Такие производные обычно могут быть получены посредством модификации и, в частности, посредством химической и/или биологической (например, ферментативной) модификации, SDAB молекул и/или одного или более аминокислотных остатков, которые образуют SDAB молекулы, раскрытые в данной заявке.
Примеры таких модификаций, а также примеры аминокислотных остатков в пределах последовательности SDAB молекулы, которая может быть модифицирована таким способом (т.е. либо на белковом скелете, но предпочтительно на боковой цепи), способы и методы, которые могут быть использованы для введения таких модификаций, и возможные применения и преимущества таких модификаций будут понятны специалисту.
Например, такая модификация может включать введение (например, посредством ковалентного связывания или другим подходящим способом) одной или более функциональных групп, остатков или группировок в SDAB молекулу или на SDAB молекуле и, в частности, одной или более функциональных групп, остатков или группировок, которые придают одно или более желаемых свойств или функциональных активностей SDAB молекулам. Пример таких функциональных групп будут понятны специалисту.
Например, такая модификация может включать введение (например, посредством ковалентного связывания или любым другим подходящим способом) одной или более функциональных групп, которые увеличивают период полувыведения, растворимость и/или абсорбцию SDAB молекулы, которые уменьшают иммуногенность и/или токсичность SDAB молекулы, которые устраняют или ослабляют любые нежелательные побочные эффекты SDAB молекулы и/или которые придают другие благоприятные свойства и/или уменьшают нежелательные свойства SDAB молекулы; или любую комбинацию двух или более из вышеуказанных. Примеры таких функциональных групп и способов их введения будут очевидны специалисту и обычно могут включать все функциональные группы и способы, упомянутые в общем уровне техники, процитированном в данной заявке выше, а также функциональные группы и способы, известные сами по себе для модификации фармацевтических белков и, в частности, для модификации антител или фрагментов антител (включая ScFv’s и -148-однодоменные антитела), на которые сделана ссылка, например, в Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16th ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1980). Такие функциональные группы могут быть связаны, например, непосредственно (например ковалентно) с нанотелом по изобретению или возможно через подходящий линкер или спейсер, что также будет понятно специалисту.
Один из широко используемых способов увеличения периода полувыведения и/или уменьшения иммуногенности фармацевтических белков включает присоединение подходящего фармакологически приемлемого полимера, такого как поли(этиленгликоль) (PEG) или его производных (таких как метоксиполи(этиленгликоль) или mPEG). Обычно можно использовать любую подходящую форму пэгилирования, такую как пэгилирование, используемое в данной области для антител и фрагментов антител (включая, но не ограничиваясь этим, (одно)доменные антитела и ScFv’s); ссылка сделана, например, на Chapman, Nat. Biotechnol., 54, 531-545 (2002); Veronese and Harris, Adv. Drug Deliv. Rev. 54, 453-456 (2003), Harris and Chess, Nat. Rev. Drug. Discov., 2, (2003) и WO 04/060965. Различные реагенты для пэгилирования белков также имеются в продаже, например, от Nektar Therapeutics, USA.
Предпочтительно, используют сайт-направленное пэгилирование, в частности, через цистеиновый остаток (см., например, Yang et al., Protein Engineering, 16, 10, 761-770 (2003). Например, для этой цели PEG может быть присоединен к цистеиновому остатку, который естественно встречается в SDAB молекуле, SDAB молекула может быть модифицирована так, чтобы соответствующим образом ввести один или более цистеиновых остатков для присоединения PEG, или аминокислотная последовательность, содержащая один или более цистеиновых остатков для присоединения PEG, может быть слита с N-и/или С-концом нанотела по изобретению, где все используемые способы конструирования белков известны специалисту сами по себе.
Предпочтительно, для SDAB молекулы используют PEG с молекулярной массой более 5000, такой как более 10000, и менее 200000, такой как менее 100000; например, в диапазоне 20000-80000.
Что касается пэгилирования, то следует отметить, что обычно изобретение также охватывает любую SDAB молекулу, которая была пэгилирована в одном или более аминокислотных положениях, предпочтительно таким способом, что указанное пэгилирование или (1) увеличивает период полувыведения in vivo; (2) уменьшает иммуногенность; (3) обеспечивает одно или более дополнительных полезных свойств, известных для пэгилирования как такового; (4) по существу не оказывает влияния на аффинность SDAB молекулы (например, не уменьшает указанную аффинность более чем на 90%, предпочтительно более чем на 50% и более чем на 10%, как определено подходящим анализом, таким как описанные в Примерах ниже); и/или (4) не влияет на любое из других желаемых свойств SDAB молекулы. Подходящие PEG-группы и способы их присоединения, либо специфического, либо неспецифического, будут понятны специалисту.
Другая, обычно менее предпочтительная модификация включает N-связанное или O-связанное гликозилирование, обычно как часть котрансляционной и/или посттрансляционной модификации, в зависимости от клетки-хозяина, используемого для экспрессирования SDAB молекулы.
Препараты
Препарат SDAB молекулы, например молекулы нанотела, включает SDAB молекулу, соединение, которое может служить в качестве криопротектора, и буфер. РН препарата составляет обычно рН 5,5-7,0. В некоторых воплощениях препарат хранят в виде жидкости. В других воплощениях препарат готовят в виде жидкости и затем сушат, например, посредством лиофилизации или сушки распылением, перед хранением. Высушенный препарат может быть использован в виде сухого соединения, например, в виде аэрозоля или порошка, или восстановлен до его первоначальной или другой концентрации, например, с использованием воды, буфера или другой подходящей жидкости.
Процесс очистки SDAB молекулы предназначен для обеспечения переноса SDAB молекулы в препарат, подходящий для долговременного хранения в виде замороженной жидкости и затем для лиофилизации (например, с использованием гистидин/сахарозного препарата). Препарат лиофилизируют с белком в определенной концентрации. Лиофилизированный препарат затем может быть восстановлен, при необходимости, подходящим разбавителем {например, водой) для повторного растворения первоначальных компонентов препарата до желаемой концентрации, обычно такой же или более высокой концентрации по сравнению с концентрацией до лиофилизации.
Лиофилизированный препарат может быть восстановлен для получения препарата, который имеет концентрацию, отличную от первоначальной концентрации (т.е. до лиофилизации), в зависимости от количества воды или разбавителя, добавленных к лиофилизату относительно объема жидкости, который первоначально лиофилизировали. Подходящие препараты могут быть идентифицированы посредством анализа одного или более параметров целостности антитела. Анализируемые параметры представляют собой обычно процентное содержание HMW компонентов или процентное содержание LMW компонентов.
Процентное содержание HMW компонентов или LMW компонентов определяют либо в виде процентного содержания общего белка в препарате, либо в виде изменения процентного увеличения в течение периода времени (т.е. во время хранения). Общее процентное содержание HMW компонентов в приемлемом препарате составляет не более 10% HMW компонентов после хранения в виде лиофилизата или жидкости в диапазоне от -20°C до 40°C (например, от -20°C до 25°C, от -20°C до 15°C, от 2°C до 8°C, при примерно 2°C, или при примерно 25°C) в течение по меньшей мере одного года, или не более примерно 10% LMW компонентов после хранения в виде лиофилизата или жидкости в диапазоне от -20°C до 40°C в течение по меньшей мере одного года. Под "примерно" подразумевают ±20% от процитированного числового значения. Таким образом, "примерно 20°C" означает от 16°C до 24°C.
Обычно профиль стабильности составляет менее 10% HMW/LMW в диапазоне от 2° до 8°C для охлажденного продукта, и 25°C для продукта при комнатной температуре. HMW компоненты или LMW компоненты анализируют в препарате, хранящемся в виде лиофилизата, после того как лиофилизат восстановлен. 40°C представляет собой ускоренное условие, которое обычно используют для тестирования стабильности и определения стабильности для кратковременных воздействий в условиях нехранения, например, которые могут встречаться в процессе переноса продукта во время транспортировки.
Когда анализируемый параметр представляет собой процентное изменение HMW компонентов или LMW компонентов, тогда процентное содержание общего белка в одном или обоих компонентах после хранения сравнивают с процентным содержанием общего белка в одном или обоих компонентах перед хранением (например, при получении препарата). Определяют разницу в процентных содержаниях. В общем, изменение в процентном содержании белка в HMW компонентах или LMW компонентах в жидких препаратах составляет не более 10%, например, не более чем примерно 8%, не более чем примерно 7%, не более чем примерно 6%, не более чем примерно 5%, не более чем примерно 4%, или не более чем примерно 3% после хранения при 2°C-8°C или 25°C в течение от примерно восемнадцати до двадцати четырех месяцев. Под "примерно" подразумевают ±20% от процитированного числового значения, типично, в пределах 10%, и более типично, в пределах 5% от заданного значения или диапазона значений. Таким образом, примерно 10% означает от 8% до 12%. Препараты, хранящиеся в виде лиофилизированного продукта, обычно имеют менее примерно 5%, менее примерно 4%, менее примерно 3%, менее примерно 2%, или менее примерно 1% HMW компонентов или менее примерно 5%, менее примерно 4%, менее примерно 3%, или менее примерно 2%, или менее примерно 1% LMW компонентов после восстановления влагосодержания, или в жидком препарате, после хранения в диапазоне от -30°C до 8°C (например, при 4°C или -20°C) в течение примерно шести, девяти, десяти, двенадцати, пятнадцати, восемнадцати до двадцати четырех месяцев.
Препараты SDAB молекул (например, молекул TNF-связывающего нанотела) можно хранить в виде замороженного жидкого препарата или лиофилизата в течение, например, по меньшей мере шести, девяти, десяти, двенадцати месяцев или по меньшей мере двух лет, по меньшей мере трех лет, по меньшей мере четырех лет или по меньшей мере пяти лет. В одном примере препарат молекулы TNF-связывающего нанотела содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 50 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат молекулы TNF-связывающего нанотела содержит 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 50 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат содержит 20 мМ гистидина, 10% сахарозы, 0,02% полисорбата 80, 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 50 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В еще одном примере препарат содержит 20 мМ гистидина, 10% сахарозы, 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, приблизительно 80 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6.0. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 100 мМ аргинина (основания), от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 5,8. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 55 мМ NaCl, от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6.1. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 55 мМ аргинин HCl, от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,1. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 100 мМ глицина, от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 100 мМ метионина, от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 8% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, от 88 до 100 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат содержит 20 мМ гистидина, 5% сахарозы, 118 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В еще одном примере препарат содержит 20 мМ Трис, 5% сахарозы, 117 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 7,2. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, приблизительно 80 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, приблизительно 50 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 5,5. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 150 мМ аргинин HCl, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 5,5. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 75 мМ хлорида натрия, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 5,5. В одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 150 мМ аргинин HCl, приблизительно 1 мг/мл TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 75 мМ хлорида натрия, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0. В одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,5. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 150 мМ аргинин HCl, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,5. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 75 мМ хлорида натрия, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,5. В одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 7,0. В другом примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 150 мМ аргинин HCl, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 7,0. В еще одном примере препарат содержит 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 75 мМ хлорида натрия, приблизительно 1 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 7,0. В еще одном примере препарат молекулы TNF-связывающего нанотела содержит 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 250 мг/мл молекулы TNF-связывающего нанотела и имеет рН 6,0.
Дополнительные детали, относящиеся к компонентам препаратов и способов анализа целостности SDAB молекулы, например молекулы TNF-связывающего нанотела, в препарате предложены ниже.
Концентрации SDAB молекулы в препаратах составляют обычно от примерно 0,1 мг/мл до примерно 350 мг/мл, например, от 0,5 мг/мл до примерно 350 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 300 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 250 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 150 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 130 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 130 мг/мл, от примерно 50 мг/мл до примерно 120 мг/мл, от примерно 80 мг/мл до примерно 120 мг/мл, от примерно 88 мг/мл до примерно 100 мг/мл, или примерно 10 мг/мл, примерно 25 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 100 мг/мл, примерно 130 мг/мл, примерно 150 мг/мл, примерно 200 мг/мл, примерно 250 мг/мл или примерно 300 мг/мл. В контексте диапазонов, "примерно" означает -20% от нижнего процитированного числового значения данного диапазона и +20% от верхнего процитированного числового значения данного диапазона. В контексте диапазонов, например, от примерно 10 мг/мл до примерно 100 мг/мл, это означает от 8 мг/мл до 120 мг/мл. В некоторых случаях концентрации SDAB молекулы в препаратах могут составлять, например, от 0,1 мг/мл до 200 мг/мл, например, от 0,5 мг/мл до 100 мг/мл, от 0,5 мг/мл до 1,0 мг/мл, от 0,5 мг/мл до 45 мг/мл, от 1 мг/мл до 10 мг/мл, от 10 мг/мл до 40 мг/мл, от 10 мг/мл до 50 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 100 мг/мл до 200 мг/мл. Такие препараты SDAB молекулы могут быть использованы в качестве терапевтических агентов. Соответственно, концентрация SDAB молекулы в препарате является достаточной для обеспечения таких дозировок в объеме препарата, который переносится субъектом, которого лечат, и является подходящим для способа введения. В одном неограничивающем примере для того, чтобы обеспечить подкожно высокую дозировку, в которой ограничение объема является небольшим (например, от примерно 1 мл до 1,2 мл на инъекцию), концентрация SDAB молекулы составляет обычно по меньшей мере 100 мг/мл или больше, например, от 100 мг/мл до 500 мг/мл, от 100 мг/мл до 250 мг/мл или от 100 мг/мл до 150 мг/мл. Такие высокие концентрации могут быть достигнуты, например, путем восстановления влагосодержания лиофилизированного препарата в подходящем объеме разбавителя (например, стерильной воды для инъекции, забуференного физиологического раствора). В некоторых случаях восстановленный препарат имеет концентрацию от примерно 100 мг/мл до 300 мг/мл (например, 100 мг/мл, 125 мг/мл, 150 мг/мл, 175 мг/мл, 200 мг/мл, 250 мг/мл, 275 мг/мл, 300 мг/мл). Высокие концентрации, например, вплоть до 250 мг/мл, могут быть использованы для длительного хранения, например, хранения в замороженном состоянии крупных препаратов SDAB молекулы.
Для доставки посредством ингаляции, препарат обычно до некоторой степени концентрируют (например, от примерно 100 мг/мл до 500 мг/мл) для обеспечения достаточной дозы в ограниченном объеме аэрозоля для вдыхания. В некоторых случаях используют низкие концентрации (например, от примерно 0,05 мг/мл до 1 мг/мл). В данной области известны способы адаптации доставляемой дозировки к способу доставки, например, струйный небулайзер или дозированный аэрозоль.
Буферы и криопротекторы
рН препарата, как описано в данной заявке, составляет обычно от примерно рН 5,0 до примерно 7,0, например, от примерно рН 5,5 до примерно 6,5, от примерно рН 5,5 до примерно 6,0, от примерно рН 6,0 до примерно 6,5, рН 5,5, рН 6,0 или рН 6,5. В общем, для получения препарата используют буфер, который может поддерживать раствор при рН от 5,5 до 6,5, например, буфер, имеющий pKA примерно 6,0. Подходящие буферы включают, без ограничения, гистидиновый буфер, ТРИС, 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту (MES), какодилат, фосфат, ацетат, сукцинат и цитрат. Концентрация буфера составляет от примерно 4 мМ до примерно 60 мМ, например, от примерно 5 мМ до примерно 25 мМ, например, гистидин обычно используют в концентрации вплоть до 60 мМ. В некоторых случаях гистидиновый буфер используют в концентрации примерно 5 мМ, примерно 10 мМ или примерно 20 мМ. В других случаях ацетатный или сукцинатный буфер используют в концентрации примерно 5 мМ или примерно 10 мМ.
Криопротекторы известны в данной области и включают, например, сахарозу, трегалозу и глицерин. Обычно используют криопротектор, демонстрирующий низкую токсичность в биологических системах. Криопротектор включают в препарат в концентрации от примерно 0,5% до 15%, от примерно 0,5% до 2%, от примерно 2% до 5%, от примерно 5% до 10%, от примерно 10% до 15%, и примерно 5% (масса/объем).
Гистидиновый буфер, который может быть использован в качестве буфера в препарате TNF-связывающего нанотела, может иметь криопротекторные свойства. В некоторых воплощениях изобретения гистидиновый буфер используют вместе с таким криопротектором, как сахар, например, сахароза. Препарат по изобретению может специально исключать применение гистидина в любом значительном количестве, например, ни буферный, ни криопротекторный компонент препарата не является гистидином.
Вязкость препарата представляет собой обычно вязкость, которая совместима с путем введения препарата. В некоторых воплощениях вязкость препарата составляет от 1 сП до 4 сП, например, от примерно 2 сП до 3,5 сП. В других воплощениях вязкость препарата составляет от примерно 5 сП до примерно 40 сП. В конкретных воплощениях вязкость препарата составляет примерно 1 сП, 2 сП, от 2,4 сП до 2,8 сП, 3 сП, от 3,1 сП до 3,2 сП, 4 сП, 5 сП, 10 сП, 15 сП, 20 сП, 25 сП, 30 сП, 35 сП или 40 сП.
Поверхностно-активные вещества
В некоторых воплощениях в препарат включено поверхностно-активное вещество. Примеры поверхностно-активных веществ включают, без ограничения, неионные поверхностно-активные вещества, такие как полисорбаты (например, полисорбат-20, полисорбат-40, полисорбат-60, полисорбат-65, полисорбат-80 или полисорбат-85); Triton™; додецилсульфат натрия (SDS); лаурилсульфат натрия; октилгликозид натрия; лаурил-сульфобетаин, миристил-сульфобетаин, линолеил-сульфобетаин, стеарил-сульфобетаин, лаурил-саркозин, миристил-саркозин, линолеил-саркозин, стеарил-саркозин, линолеил-бетаин, миристил-бетаин, цетил-бетаин, лауроамидопропил-бетаин, кокамидопропил-бетаин, линолеамидопропил-бетаин, миристамидопропил-бетаин, пальмидопропил-бетаин, изостеарамидопропил-бетаин (например лауроамидопропил), миристамидопропил-, пальмидопропил- или изостеарамидопропил-диметиламин; натрия метилкокоил- или динатрия метилолеил-таурат; и серию Monaquat™ (Mona Industries, Inc., Paterson, N.J.), полиэтилгликоль, полипропилгликоль и сополимеры этилен- и пропиленгликоля, например полоксамеры (например, полоксамер 188).
Количество добавленного поверхностно-активного вещества является таким, что оно уменьшает агрегацию восстановленного белка до приемлемого уровня, как проанализировано с использованием, например, SEC-HPLC HMW компонентов или LMW компонентов, и минимизирует образование частиц после восстановления влагосодержания лиофилизата препарата TNF-связывающего нанотела. Также было показано, что добавление поверхностно-активного вещества уменьшает время восстановления влагосодержания лиофилизированного препарата TNF-связывающих антител и способствует дегазации раствора. Например, поверхностно-активное вещество может присутствовать в препарате (жидком или до лиофилизации) в количестве от примерно 0,001% до 0,6%, например, от примерно 0,005% до 0,05%, от примерно 0,005% до примерно 0,2%, и от примерно 0,01% до 0,2%.
Добавления в препараты
Препараты хранят в виде стерильных растворов или стерильных лиофилизатов. Предотвращение действия микроорганизмов в препаратах также может быть достигнуто путем включения в препарат по меньшей мере одного антибактериального и/или противогрибкового агента, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тимеросала и тому подобного. В некоторых случаях лиофилизат разбавляют бактериостатической водой (например, водой, содержащей 0,9% бензилового спирта). Соображения для включения консерванта в препарат известны в данной области, так же как и способы определения консервантов, которые совместимы с конкретным препаратом и способом доставки (например, см. Gupta, et al. (2003), AAPS Pharm. Sci. 5: article 8, p.1-9).
В некоторых случаях препарат является изотоническим. В общем, в препарат может быть добавлен любой компонент, известный в данной области, который вносит вклад в осмолярность/тоничность раствора (например, соли, сахара, полиспирты или их комбинация). Изотоничность обычно достигается с использованием либо компонента щелочного препарата (такого как сахароза) в изотонической концентрации, либо путем добавления дополнительного компонента, такого как сахар, полиспирт, такой как маннит или сорбит, или соль, такая как хлорид натрия.
В некоторых случаях соль используют в препарате TNF-связывающего нанотела, например, для достижения изотоничности или для повышения целостности препарата TNF-связывающего нанотела. Соли, подходящие для применения, обсуждаются выше. Концентрация соли может составлять от 0 мМ до примерно 300 мМ.
В некоторых случаях препарат получают с Tween (например, Tween® 20, Tween® 80) для уменьшения деградации поверхности. Концентрация Tween может составлять от примерно 0,001% до примерно 0,05%. В одном примере Tween 80 используют в препарате в концентрации 0,01%.
В некоторых других случаях препарат получают с аргинином. Концентрация аргинина в препарате может составлять от примерно 0,01% до примерно 5%. В одном примере аргинин используют в препарате в концентрации 2%. В некоторых случаях в TNF-связывающие препараты, описанные в данной заявке, добавляют как Tween, так и аргинин.
В других случаях препарат может быть получен с по меньшей мере одним из: сорбита, глицина, метионина или хлорида натрия. Если в препарат включен сорбит, то он может быть добавлен до концентрации от примерно 1% до примерно 10%. В одном примере сорбит находится в препарате в концентрации 5%. Если в препарат включен глицин, то он может быть добавлен до концентрации от примерно 0,1% до примерно 2%. В одном примере глицин находится в препарате в концентрации 1%. Если в препарат включен метионин, то он может быть добавлен до концентрации от примерно 5 мМ до примерно 150 мМ. В одном примере метионин добавляют к препарату в концентрации 100 мМ. В другом примере метионин добавляют к препарату в концентрации примерно 10 мМ, примерно 20 мМ или примерно 70 мМ. Если в препарат включен хлорид натрия, то он может быть добавлен до концентрации от примерно 5 мМ до примерно 100 мМ. В одном примере хлорид натрия добавляют к препарату в концентрации 55 мМ.
Способы хранения и получения
Замораживание
В некоторых случаях препараты, содержащие антитела, замораживают для хранения. Соответственно, желательно, чтобы препарат был относительно стабильным в таких условиях, в том числе в циклах замораживания-оттаивания. Один из способов определения пригодности препарата состоит в том, чтобы подвергнуть образец препарата по меньшей мере двум, например, трем, четырем, пяти, восьми, десяти или более циклам замораживания (например, при -20°C или -80°C) и оттаивания (например, быстрого оттаивания в водяной бане при 37°C или медленного оттаивания при 2°-8°C), определение количества LMW компонентов и/или HMW компонентов, которые накапливаются после циклов замораживания-оттаивания, и сравнение его с количеством LMW компонентов или HMW компонентов, присутствующих в образце перед процедурой замораживания-оттаивания. Увеличение LMW или HMW компонентов указывает на пониженную стабильность.
Лиофилизация
Препараты можно хранить после лиофилизации. Поэтому тестирование препарата в отношении стабильности белкового компонента препарата после лиофилизации является полезным для определения пригодности препарата. Способ аналогичен способу, описанному выше для замораживания, за исключением того, что образец препарата лиофилизируют вместо замораживания, восстанавливают до его первоначального объема и тестируют на наличие LMW компонентов и/или HMW компонентов. Лиофилизированный образец препарата сравнивают с соответствующим образцом препарата, который не был лиофилизирован. Увеличение LMW или HMW компонентов в лиофилизированном образце по сравнению с соответствующим образцом указывает на пониженную стабильность в лиофилизированном образце.
В общем, протокол лиофилизации включает загрузку образца в лиофилизатор, период предварительного охлаждения, замораживание, вакуумное инициирование, постепенное увеличение до температуры первичной сушки, первичная сушка, постепенное увеличение до температуры вторичной сушки, вторичная сушка и закупоривание образца. Дополнительные параметры, которые могут быть выбраны для протокола лиофилизации, включают вакуум (например, в микронах) и температуру конденсатора. Подходящие скорости изменения температуры составляют от примерно 0,1°C/мин до 2°C/мин, например, от 0,1°C/мин до 1,0°C/мин, от 0,1°C/мин до 0,5°C/мин, от 0,2°C/мин до 0,5°C/мин, 0,1°C/мин, 0,2°C/мин, 0,3°C/мин, 0,4°C/мин, 0,5°C/мин, 0,6°C/мин, 0,7°C/мин, 0,8°C/мин, 0,9°C/мин и 1,0°C/мин. Подходящие температуры полки во время замораживания для цикла лиофилизации составляют обычно от примерно -55°C до -5°C, от -25°C до -5°C, от -20°C до -5°C, от -15°C до -5°C, от -10 C до -5°C, -10°C, -11°C, -12°C, -13°C, -14°C, -15°C, -16°C, -17°C, -18°C, -19°C, -20°C, -21°C, -22°C, -23°C, -24°C или -25°C. Температуры полки могут различаться для первичной сушки и вторичной сушки, например, первичная сушка может осуществляться при более низкой температуре, чем вторичная сушка. В неограничивающем примере первичная сушка может проводиться при 0°C, а вторичная сушка при 25°C.
В некоторых случаях во время замораживания и перед вакуумным инициированием используют протокол отжига. В таких случаях должно быть выбрано время отжига, и температура обычно является выше температуры стеклования композиции. В общем, время отжига составляет от примерно 2 до 15 часов, от примерно 3 до 12 часов, от примерно 2 до 10 часов, от примерно 3 до 5 часов, от примерно 3 до 4 часов, примерно 2 часа, примерно 3 часа, примерно 5 часов, примерно 8 часов, примерно 10 часов, примерно 12 часов или примерно 15 часов. Температура отжига составляет обычно от примерно -35°C до примерно -5°C, например, от примерно -25°C до примерно -8°C, от примерно -20°C до примерно -10°C, примерно -25°C, примерно -20°C, примерно -15°C, примерно 0°C или примерно -5°C. В некоторых случаях температура отжига составляет обычно от -35°C до 0°C, например, от -25°C до -8°C, от -20°C до -10°C, -25°C, -20°C, -15°C, 0°C.
Стабильность препаратов, описанных в данной заявке, можно протестировать с использованием различных параметров лиофилизации, включающих: температуры полки для первичной сушки от -25°C до 30°C, и продолжительность вторичной сушки от 2 часов до 9 часов в диапазоне от 0° до 30°C.
В одном неограничивающем примере препарат 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, рН 6,0, с концентрацией белка 50 мг/мл TNF-связывающего нанотела, готовили в виде нефасованного препарата и лиофилизировали. После лиофилизации продукт восстанавливали приблизительно до половины объема для заполнения для обеспечения концентрации белка 100 мг/мл. TNF антитело продемонстрировало, что является устойчивым после лиофилизации для крайних значений температуры продукта. Профиль стабильности при хранении при 50°C в течение четырех недель был идентичен для материала, который был получен с использованием различных циклов лиофилизации (например, см. Фиг.16-20), некоторые из которых имели различия почти 10°C в температуре продукта во время первичной сушки (например, Фиг.13). В общем, цикл лиофилизации может идти от 10 часов до 100 часов, например, от 20 часов до 80 часов, от 30 часов до 60 часов, от 40 часов до 60 часов, от 45 часов до 50 часов, от 50 часов до 65 часов.
Неограничивающие примеры температурного диапазона для хранения препарата антител составляют от примерно -20°C до примерно 50°C, например, от примерно -15°C до примерно 30°C, от примерно -15°C до примерно 20°C, от примерно 5°C до примерно 25°C, от примерно 5°C до примерно 20°C, от примерно 5°C до примерно 15°C, от примерно 2°C до примерно 12°C, от примерно 2°C до примерно 10°C, от примерно 2°C до примерно 8°C, от примерно 2°C до примерно 6°C, или примерно 2°C, 3°C, 4°C, 5°C, 6°C, 7°C, 8°C, 10°C, 15°C, 25°C или 30°C. Несмотря на указанные температуры хранения, в некоторых случаях образцы являются стабильными при изменениях температуры, которые могут временно встречаться во время хранения и условий транспортировки, которые могут ожидаться для таких композиций.
Сушка распылением
В некоторых случаях препарат сушат распылением и затем хранят. Сушку распылением проводят с использованием способов, известных в данной области, и можно модифицировать для применения сушки распылением жидкого или замороженного продукта (например, с использованием способов, таких как способы из Niro Inc. (Madison, WI), Upper-ton Particle Technologies (Nottingham, England), или Buchi (Brinkman Instruments Inc., Westbury, NY), или патентные публ. США №№20030072718 и 20030082276).
Определение целостности SDAB молекулы
Накопление LMW компонентов и HMW компонентов являются полезными критериями стабильности антитела. Накопление либо LMW, либо HMW в препарате является показателем нестабильности белка, хранящегося в виде части препарата. Эксклюзионная хроматография с HPLC может быть использована для определения присутствия LMW и HMW компонентов. Подходящие системы для таких измерений известны в данной области, например, HPLC системы (Waters, Milford, MA). Для оценки целостности антитела в препарате могут быть использованы и другие системы, известные в данной области, например, SDS-PAGE (для контроля HMW и LMW компонентов), биоанализы активности антитела, твердофазный иммуноферментный анализ, способность связывать очищенный белок-мишень (например, TNFα), и катионообменная-HPLC (CEX-HPLC; для обнаружения вариантов и контроля поверхностного заряда). В одном примере биоанализ представляет собой анализ на основе клеток, в котором ингибирование TNFα-зависимой активности исследуют в присутствии различных концентраций приготовленной в виде препарата молекулы нанотела для демонстрации биологической активности.
Изделия
В настоящей заявке также предложено изделие, которое включает препарат, как описано в данной заявке, и предложены инструкции для применения препарата.
Препараты, используемые для введения субъекту, например, в виде фармацевтического препарата, должны быть стерильными. Это осуществляют с использованием способов, известных в данной области, например, путем фильтрации через стерильные фильтрационные мембраны до или после приготовления жидкости или лиофилизации и восстановления влагосодержания. Альтернативно, если это не будет разрушать структуру, то компоненты препарата могут быть простерилизованы путем автоклавирования и затем объединены с компонентами, простерилизованными на фильтре или посредством облучения, с получением препарата.
Фармацевтический препарат можно вводить с помощью устройства для чрескожной доставки, такого как шприц, включая шприц для подкожных инъекций или многокамерный шприц. В одном из воплощений устройство представляет собой предварительно заполненный шприц с надетой или съемной иглой. В других воплощениях устройство представляет собой предварительно заполненный шприц, не имеющий надетой иглы. Игла может быть упакована вместе с предварительно заполненным шприцом. В одном из воплощений устройство представляет собой устройство для автоинъекции, например, автоинжекторный шприц. В другом воплощении устройство для инъекции представляет собой ручку-инжектор. В еще одном воплощении шприц представляет собой шприц с несъемной иглой, шприц Луер Лок (luer lock) или шприц Луер Слип (luer slip). Другие подходящие устройства для доставки включают стенты, катетеры, микроиглы и имплантируемые устройства для контролируемого высвобождения. Композицию можно вводить внутривенно с помощью стандартного в/в оборудования, включая, например, в/в трубки, со встроенными фильтрами или без них.
В некоторых воплощениях шприц является подходящим для применения вместе с автоинжекторным устройством. Например, автоинжекторное устройство может включать систему с одним флаконом, такую как устройство ручка-инжектор для доставки раствора. Такие устройства имеются в продаже от производителей, таких как BD Pens, BD Autojector®, Humaject®, NovoPen®, B-D®Pen, AutoPen® и OptiPen®, GenotropinPen®, Genotronorm Pen®, Humatro Pen®, Reco-Pen®, Roferon Pen®, Biojector®, Iject®, J-tip Needle-Free Injector®, DosePro®, Medi-Ject®, например, изготовленные или разработанные фирмой Becton Dickensen (Franklin Lakes, N.J.), Ypsomed (Burgdorf, Switzerland, www.ypsomed.com; Bioject, Portland, Oreg.; National Medical Products, Weston Medical (Peterborough, UK), Medi-Ject Corp (Minneapolis, Minn.) и Zogenix, Inc, Emeryville, CA. Признанные устройства, содержащие двухфлаконную систему, включают такие системы ручка-инжектор для восстановления влагосодержания лиофилизированного лекарственного средства в картридже для доставки восстановленного раствора, как HumatroPen®.
Изделие может включать контейнер, подходящий для содержания в нем препарата. Подходящий контейнер может представлять собой, без ограничения, устройство, баллон, флакон, шприц, пробирку, небулайзер (например, ультразвуковые небулайзеры или небулайзеры с вибрирующей сеткой (vibrating mesh)), пакет для в/в раствора или ингалятор (например, дозирующий ингалятор (MDI) или сухой порошковый ингалятор (DPI)). Контейнер может быть изготовлен из любого подходящего материала, такого как стекло, металл или пластик, такой как поликарбонат, полистирол или полипропилен. Например, контейнер (например, шприц или флакон) может быть изготовлен из стекла, пластика, циклического олефинового сополимера или циклического олефинового полимера. Возможно, контейнер (например, шприц или флакон) имеет пробку, например, резинову пробку. Конкретные воплощения контейнеров для хранения препаратов по настоящему изобретению включают: (1) жидкость в стеклянном флаконе с резиновой пробкой; (2) жидкость в стеклянном предварительно заполняемом шприце с резиновой пробкой; и (3) жидкость в предварительно заполняемом полимерном шприце, например, из циклического олефинового сополимера (COC) или циклического олефинового полимера (COP), с резиновой пробкой.
В общем, контейнер изготовлен из материала, которые не адсорбирует значительных количеств белка из препарата и не реагирует с компонентами препарата.
В некоторых воплощениях контейнер представляет собой прозрачный стеклянный флакон с пробкой, например, силиконизированной серой пробкой West 4432/50 1319 или пробкой West 4023 Durafluor. В некоторых воплощениях контейнер представляет собой шприц. В конкретных воплощениях препарат содержит 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, рН 6,0, в предварительно заполненном шприце. В другом воплощении препарат содержит примерно 10 мг/мл, примерно 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, рН 6, в предварительно заполняемом шприце из циклического олефина с силиконизированным серым резиновым плунжером West 4432/50. В других воплощениях препараты включают примерно 10 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, рН 6, в предварительно заполняемом стеклянном шприце с силиконизированным серым резиновым плунжером West 4432/50 или покрытым резиной плунжером West 4023/50 Daikyo Flourotec/B2.
Изделия, описанные в данной заявке, могут дополнительно включать упаковочный материал. Упаковочный материал обеспечивает, в дополнение к информация для применения или введения, например, информацию, требуемую регулирующим органом, относительно условий, при которых данный продукт может быть использован. Например, упаковочный материал может обеспечить инструкции для пациента о том, как вводить предварительно заполненный шприц, содержащий препараты, описанные в данной заявке, или как растворить лиофилизированный препарат в водном разбавителе с образованием раствора в пределах заданного периода времени, например, в течение 2-24 часов или более. Заявленные в настоящем изобретении препараты полезны для применения фармацевтических продуктов у человека.
В некоторых воплощениях препараты можно вводить с помощью небулайзеров. Примеры небулайзеров включают, в неограничивающих примерах, струйные небулайзеры, ультразвуковые небулайзеры и небулайзеры с вибрирующей сеткой. Эти классы используют различные способы создания аэрозоля из жидкости. В общем, любое аэрозоль-генерирующее устройство, которое может поддерживать целостность белка в этих препаратах, является подходящим для доставки препаратов, как описано в данной заявке.
В других воплощениях фармацевтические композиции можно вводить с помощью медицинских устройств. Например, фармацевтические композиции можно вводить с помощью бузыгольного устройства для подкожной инъекции, такого как устройства, раскрытые в пат. США №№5399163, 5383851, 5312335, 5064413, 4941880, 4790824 или 4596556. Примеры хорошо известных имплантатов и модулей включают: пат. США №4487603, в котором раскрыт имплантируемый микроинфузионный насос для распределения лекарственного средства с контролируемой скоростью; пат. США №4486194, в котором раскрыто терапевтическое устройство для введения лекарственных средств через кожу; пат. США №4447233, в котором раскрыт насос для инфузии лекарственного средства с целью доставки лекарственного средства с определеннной скоростью инфузии; пат. США №4447224, в котором раскрыт имплантируемый инфузионный аппарат с переменным потоком для постоянной доставки лекарственного средства; пат. США №4439196, в котором раскрыта осмотическая система для доставки лекарственного средства, имеющая многокамерные отсеки; и пат. США №4475196, в котором раскрыта осмотическая система для доставки лекарственного средства. Терапевтическая композиция также может находиться в форме биодеградируемого или небиодеградируемого препарата с замедленным высвобождением для подкожного или внутримышечного введения. См., например, пат. США №№3773919 и 4767628 и РСТ заявка №WO 94/15587. Непрерывное введение также может быть достигнуто с использованием имплантируемого или внешнего насоса. Введение также можно осуществлять с перерывами, например, посредством единичной суточной инъекции, или непрерывно при низкой дозе, например, с помощью препарата с замедленным высвобождением. Устройство для доставки может быть модифицировано для оптимально подходящего введения SDAB молекулы. Например, шприц может быть силиконизирован в той степени, которая является оптимальной для хранения и доставки SDAB молекулы. Конечно, также известны и многие другие такие имплантаты, системы для доставки и модули.
В изобретении также предложено устройство для введения первого и второго агента. Устройство может включать, например, один или более кожухов для хранения фармацевтических препаратов и может быть сконфигурировано для доставки единичных доз первого и второго агента. Первый и второй агенты можно хранить в одном и том же или отдельных отсеках. Например, устройство может объединять агенты перед введением. Для введения первого и второго агента также можно использовать различные устройства.
Способ введения и лечения
Препараты по изобретению вводят субъекту (например, субъекту-человеку) отдельно или в комбинации со вторым агентом, например, вторым терапевтически или фармакологически активным агентом, для лечения или предупреждения (например, уменьшения или облегчения одного или более симптомов, ассоциированных с) TNFα-ассоциированного расстройства, например, воспалительных или аутоиммунных расстройств. Термин "лечение" относится к применению терапии в количестве, методом и/или способом, эффективным для улучшения состояния, симптома или параметра, ассоциированного с расстройством, или для предупреждения развития расстройства, либо в статистически значимой степени, либо в степени, обнаружимой специалистом в данной области. Эффективное количество, метод или способ могут варьировать в зависимости от субъекта и могут быть адаптированы к субъекту.
Неограничивающие примеры иммунных расстройств, которые можно лечить, включают, но не ограничиваются этим, аутоиммунные расстройства, например артрит (включая ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, остеоартрит, псориатический артрит, артрит, ассоциированный с волчанкой, или анкилозирующий спондилоартрит), склеродермию, системную красную волчанку, синдром Шегрена, васкулит, рассеянный склероз, аутоиммунный тиреоидит, дерматит (включая атопический дерматит и экзематозный дерматит), астенический бульбарный паралич, воспалительное заболевание кишечника (IBD), болезнь Крона, колит, сахарный диабет (I типа); воспалительные состояния, например, кожи (например, псориаз); острые воспалительные состояния (например, эндотоксикоз, сепсис и септицемию, синдром токсического шока и инфекционное заболевание); отторжение трансплантата и аллергия. В одном из воплощений TNFa-ассоциированное расстройство представляет собой артритическое расстройство, например, расстройство, выбранное из одного или более из ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита (RA) (например, ревматоидного артрита от умеренного до тяжелого), остеоартрита, псориатического артрита или анкилозирующего спондилоартрита, ювенильного идиопатического полиартрита (JIA); или псориаз, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, воспалительное заболевание кишечника и/или рассеянный склероз.
В некоторых воплощениях препараты включают второй терапевтический агент. Например, для TNF-нанотел, второй агент может представлять собой анти-TNF антитело или его TNF-связывающий фрагмент, где второе TNF антитело имеет другую эпитопную специфичность, чем TNF-связывающая SDAB молекула препарата. Другие неограничивающие примеры агентов, которые могут быть приготовлены вместе с TNF-связывающей SDAB, включают, например, ингибитор цитокина, ингибитор фактора роста, иммунодепрессант, противовоспалительный агент, метаболический ингибитор, ингибитор фермента, цитотоксический агент и цитостатический агент. В одном из воплощений дополнительный агент представляет собой стандартное лечение артрита, включая, но не ограничиваясь этим, нестероидные противовоспалительные агенты (NSAIDs); кортикостероиды, включая преднизолон, преднизон, кортизон и триамцинолон; и модифицирующие заболевание противоревматические препараты (DMARDs), такие как метотрексат, гидроксихлорохин (Plaquenil) и сульфасалазин, лефлуномид (Arava®), ингибиторы фактора некроза опухолей, включая этанерцепт (Enbrel®), инфликсимаб (Remicade®) (с метотрексатом или без него) и адалимумаб (Humira®), анти-CD20 антитело (например, Rituxan®), растворимый рецептор интерлейкина-1, такой как анакинра (Kineret), золото, миноциклин (Minocin®), пеницилламин, и цитотоксические агенты, включая азатиоприн, циклофосфамид и циклоспорин. В таких комбинированных терапиях можно преимущественно использовать более низкие дозы вводимых терапевтических агентов, что позволит избежать возможных токсических эффектов или осложнений, связанных с различными монотерапиями.
Препараты по изобретению могут находиться в форме жидкого раствора (например, растворов для инъекции и инфузии). Такие композиции можно вводить парентеральным способом (например, подкожной, интраперитонеальной или внутримышечной инъекцией), или посредством ингаляции. Фразы "парентеральное введение" и "вводимый парентерально", как использовано в данной заявке, означают иные способы введения, чем энтеральное и местное введение, обычно посредством инъекции, и включают подкожное или внутримышечное введение, а также внутривенную, внутрисуставную, внутриглазничную, внутрисердечную, интрадермальную, интраперитонеалычую, транстрахеальную, подкожную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную, эпидуральную и интрастернальную инъекцию и инфузию. В одном из воплощений препараты, описанные в данной заявке, вводят подкожно.
Фармацевтические препараты являются стерильными и стабильными в условиях изготовления и хранения. Фармацевтическая композиция также может быть протестирована для гарантии того, что она удовлетворяет регулятивным и промышленным нормам введения.
Фармацевтический препарат может быть приготовлен в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы или другой организованной структуры, подходящей для высокой концентрации белка. Стерильные растворы для инъекции могут быть получены посредством включения агента, описанного в данной заявке, в необходимом количестве в подходящем растворителе с одним или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, при необходимости, с последующей стерилизацией путем фильтрования. Обычно дисперсии получают посредством включения агента, описанного в данной заявке, в стерильный носитель, который содержит щелочную среду для дисперсии и другие необходимые ингредиенты из тех, что перечислены выше. Надлежащую текучесть раствора можно поддерживать, например, путем применения покрытия, такого как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсии и путем применения поверхностно-активных веществ. Длительная абсорбция инъецируемых композиций может быть обусловлена включением в композицию агента, который замедляет абсорбцию, например, моностеаратных солей и желатина.
В некоторых воплощениях охарактеризованы параметры, которые описывают препараты, например параметры, которые могут появляться на маркировке продукта. Такие параметры включают, например, цвет (типично от бесцветного до слегка желтого или от бесцветного до желтого), прозрачность (типично от прозрачного до слегка опалесцирующего или от прозрачного до опалесцирующего) и вязкость (типично от примерно 1 до 5 сП, когда измерено при температуре окружающей среды, такой как при 20°C-30°C). Такие параметры могут быть измерены способами, известными в данной области. Например, прозрачность может быть измерена с использованием имеющихся в продаже стандартов опалесценции (доступных, например, от Hach Company, Loveland, CO 80539).
ПРИМЕРЫ
Изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими примерами. Примеры предложены только для иллюстративных целей. Они не предназначены ограничивать объем или содержание изобретения каким-либо образом.
Пример 1: Стабильность высококонцентрированного лиофилизированного препарата ATN-103 (продолжительность 6 месяцев)
Один способ хранения антитела, используемого, например, для терапевтических применений, состоит в высушенном порошке, полученном путем лиофилизации. Соответственно, исследовали долговременную стабильность лиофилизированного TNF-связывающего препарата.
Кратко, препарат, содержащий гуманизированное TNF-связывающее нанотело (50 мг/мл), 10 мМ гистидина, 5% сахарозы (масса/объем), 0,01% полисорбата 80, рН 6,0, получали посредством стерильной фильтрации и переносили в 5 мл апирогенный стеклянный трубчатый флакон, и затем лиофилизировали. Препарат хранили при 4°C, 25°C или 40°C в течение одного месяца, трех месяцев и шести месяцев, затем восстанавливали в стерильной воде (USP) с получением восстановленного препарата, так что препарат содержал 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 10% сахарозы, 0,02% полисорбата 80, рН 6,0.
Стабильность высококонцентрированной жидкости оценивали по биологической активности, связыванию человеческого сывороточного альбумина (HSA), процентному содержанию HMW и процентному содержанию LMW посредством SE-HPLC, процентному содержанию TNF-связывающего нанотела и процентному содержанию примеси непродукта посредством SDS-СЕ, и определению посредством CEX-HPLC относительного времени удерживания и сравнимости профиля элюции с эталонным стандартом TNF-связывающего нанотела.
Лиофилизированные препараты TNF-связывающего нанотела анализировали в отношении биологической активности, используя анализ, описанный в WO 2006/122786. Фиг.1 иллюстрирует данные из такой совокупности биоанализов. Данные выражали в виде единиц на миллиграмм. Образцы содержали примерно 5-5,5×106 ед./мг до хранения и примерно 4,5-5,5×106 ед./мг после инкубации. В общем, не наблюдалось никакого значительного изменения в количестве биоактивности после шести месяцев хранения в любом из образцов. Таким образом, препарат, как определено по биологической активности, является подходящим для хранения лиофилизированного препарата в течение по меньшей мере шести месяцев.
Лиофилизированные препараты TNF-связывающего нанотела также анализировали в отношении связывающей активности человеческого сывороточного альбумина (HSA). Фиг.2 иллюстрирует данные из такой совокупности анализов связывания. Первоначальная связывающая активность препарата составляла примерно 100% эталонного образца и по существу не изменялась для любого из образцов в течение шестимесячного периода тестирования. Таким образом, препарат, как определено по HSA-связывающей активности, является подходящим для хранения лиофилизированного препарата в течение по меньшей мере шести месяцев.
Процентное содержание HMW компонентов анализировали с использованием SE-HPLC. Процентное содержание HMW компонентов в препарате до лиофилизации и восстановления влагосодержания составляло примерно 0,1% общего белка в препарате, а также от примерно 0,1% до 0,2% во всех образцах, хранившихся при 4°C и 25°C (Фиг.3). После шести месяцев хранения при 40°C препараты содержали примерно 0,35% HMW компонентов (Фиг.3). Таким образом, не наблюдалось никакого значительного увеличения в уровне HMW компонентов в образцах, хранившихся при 4°C и 25°C в течение шести месяцев.
Процентное содержание LMW компонентов анализировали с использованием SE-HPLC. Процентное содержание LMW компонентов в препарате было ниже предела обнаружения (т.е. 0,0%) при температурах 4°C, 25°C и 40°C в течение вплоть до шести месяцев.
Процентное содержание TNF-связывающего нанотела анализировали с использованием SDS-CE. Первоначальное процентное содержание TNF-связывающего нанотела в препарате составляло примерно 100% и по существу не изменялось для любого из образцов в течение шестимесячного периода тестирования (Фиг.4).
Процентное содержание примеси непродукта анализировали с использованием SDS-СЕ. Незначительную примесь непродукта наблюдали посредством SDS-CE для препарата при температурах 4°C, 25°C и 40°C в течение вплоть до шести месяцев.
Лиофилизированные препараты TNF-связывающего нанотела также тестировали в отношении идентичности с использованием CEX-HPLC. Профиль элюции для препарата сравнивали с эталонным стандартом при температурах 4°C, 25°C и 40°C в течение вплоть до шести месяцев. Относительное время удерживания предполагаемого пика не изменялось по 1,00 стандарту при температурах 4°C, 25°C и 40°C в течение вплоть до шести месяцев.
Также тестировали эффект добавления полисорбата-80 на свойства восстановления влагосодержания лиофилизированного препарата TNF-связывающего нанотела. Добавление полисорбата 80 к лиофилизированному продукту улучшает качество продукта посредством улучшения внешнего вида и растворения лиофилизированного порошка, как можно видеть в Таблице ниже.
Таблица 1 | ||
С полисорбатом-80 | Без полисорбата-80 | |
Время восстановления | 2 мин, 39 с | 3 мин, 16 с |
Время возврата в исходное состояние | Сразу | <5 мин |
Вспенивание | Мало пены | Слегка больше пены |
Исчезновение пузырьков | Сразу | <3 мин |
Данные, описанные в данной заявке, демонстрируют ограниченные изменения в продуктах деградации в зависимости от времени хранения при различных температурах.
Пример 2: Устойчивость препарата TNF-связывающего нанотела к лиофилизации
В дополнение к препарату, лиофилизированному путем применения целевого цикла лиофилизации (Пример 1), получали две дополнительные партии лекарственного продукта путем применения к одному и тому же препарату двух дополнительных циклов лиофилизации на "устойчивость". Два цикла лиофилизации на "устойчивость" имитируют значительные отклонения в процессе, которые могут наблюдаться в промышленной установке. Один и тот же препарат лекарственного продукта использовали в исследовании устойчивости и в исследовании целевого (контрольного) цикла лиофилизации: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, 50 мг/мл TNF-связывающего нанотела, при рН 6,0. При восстановлении влагосодержания (с использованием объема разбавителя для восстановления, составляющего приблизительно половину объема заполненного продукта перед лиофилизацией) препарат ATN-103 представляет собой следующее: 20 мМ гистидина, 10% сахарозы, 0,02% полисорбата 80, 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, при рН 6,0.
Два цикла лиофилизации на устойчивость, которые имитируют значительные отклонения в процессе, называются "высокая влажность" и "агрессивный". На Фиг.5 показано, что препарат, подвергнутый циклам лиофилизации на устойчивость, демонстрирует сравнимую стабильность со стабильностью в целевом (контрольном) цикле. Флаконы с препаратом для лиофилизации на устойчивость помещали на ускоренную стабильность параллельно с контрольным циклом лиофилизации и анализировали посредством SE-HPLC.
Эти данные демонстрируют, что лиофилизированный препарат ATN-103 является устойчивым к значительным отклонениям в процессе без влияния на продукт.
Процентное содержание LMW компонентов для препарата, подвергнутого контрольному циклу лиофилизации и циклам лиофилизации на устойчивость, анализировали с использованием SE-HPLC. Процентное содержание LMW компонентов согласно SE-HPLC для лиофилизированного TNF-связывающего нанотела было ниже предела обнаружения (т.е. 0,0%) при t0 и 50°C в течение вплоть до одного месяца в течение всех трех циклов.
Инструкции по лиофилизации
Во всех прогонах использовали экран из алюминиевой фольги перед дверью и высоту полки 63 мм для минимизации излучения внутри лиофилизатора. Во всех прогонах один поддон полностью заполняли для поддержания согласованной нагрузки на лиофилизатор. Пробки автоклавировали и сушили для всех флаконов для белка. Все флаконы для образцов белка промывали деионизированной водой и подвергали депирогенизации. Флаконы и пробки, которые использовали для заполнения оставшейся части поддона, не обрабатывали.
Флаконы, заполненные препаратом TNF-связывающего нанотела, получали в асептических условиях в боксе с биозащитой с концентрацией 160 мг/флакон. Флаконы для исследований стабильности заполняли 3,2 мл свежего препарата перед каждым прогоном (материал, который не был предварительно лиофилизирован). Во время лиофилизации дополнительные флаконы заполняли подходящими буферами, которые были совместимы с целевым циклом лиофилизации, для поддержания согласованной нагрузки на лиофилизатор. Лиофилизацию контролировали путем применения термопар в пределах белкового ряда.
Модулированная дифференциальная сканирующая калориметрия (mDSC)
Все образцы для mDSC вводили в модулированном режиме с амплитудой 0,5°C и периодом 100 секунд. Для порошков после лиофилизации, образцы нагревали при 2°C/мин до 150°C. Все образцы порошков получали с использованием продуваемой азотом перчаточной камеры. Для жидких образцов все температурные повышения проводили при 0,5°C/мин и температуры подгоняли к температурам, используемые в циклах лиофилизации. Конечное линейное изменение нагревания осуществляли при 2°C/мин для увеличения стеклования. Жидкие образцы получали на лабораторном столе.
Анализ влажности
Для анализа влажности в лиофилизированных образцах использовали титрование по Карлу Фишеру. Лиофилизированные образцы разбавляли 3 мл метанола.
Осуществляли двойные или тройные инжекции по 500 мкл. 1% водный стандарт инжектировали после применения в качестве контроля пригодности.
Инфракрасная спектроскопия с Фурье-преобразованием (FTIR)
Посредством FTIR измеряли вторичную структуру антитела в сухом порошковом состоянии. Осадок, содержащий приблизительно 1 мг приготовленного в виде препарата, высушенного белка, диспергированного в 300 мг KBr, уплотняли и сканировали 200 раз. После сбора данных анализ включал спектральное вычитание сахарозного плацебо, корректировку базовой линии, сглаживание, вторую производную и нормализацию по площади.
Стабильность
Стабильность лиофилизированного антитела в препаратах оценивали в зависимости от времени хранения и температуры. Образцы лиофилизированного TNF-связывающего нанотела анализировали после лиофилизации, после четырех недель хранения при 2°C-8°C и после двух недель и четырех недель хранения при 50°C. Охлажденные образцы хранили в малой холодильной комнате. Высокотемпературные образцы хранили в термостате Lab Line Imperial, установленном на 50°C. В соответствующие временные точки образцы извлекали из хранения и оставляли нагреваться или охлаждаться до комнатной температуры перед анализом.
Восстановление влагосодержания и внешний вид
Флаконы с лиофилизированными препаратами из постлиофилизационного анализа и анализа стабильности при хранении тщательно осматривали до, во время и после восстановления с 1,3 мл стерильной воды для инъекции. Флаконы осматривали в световом коробе против как черного, так и белого фона в отношении цвета таблетки, целостности, влажности, частиц и дефектов перед восстановлением влагосодержания. После визуального осмотра лиофилизированной таблетки колпачок и обжимное укупорочное средство удаляли из флакона с помощью разжимных щипцов. Пробку удаляли и стерильную воду для инъекции медленно переносили во флакон, используя подходящую пипетку. Разбавитель добавляли, используя вихревое движение для обеспечения полного смачивания таблетки. Как только разбавитель был полностью добавлен, время восстановления влагосодержания запускали стандартным лабораторным таймером и флакон снова закрывали пробкой. Восстановление влагосодержания было полным, когда растворялся последний кусок твердого вещества. Вращая флакон между руками, облегчали восстановление влагосодержания. Когда лиофилизированная таблетка подвергалась процессу восстановления влагосодержания, записывали наблюдения о состоянии растворяющего раствора, таком как прозрачность, образование пузырьков и образование пены. После завершения восстановления влагосодержания записывали время восстановления влагосодержания и флаконы оставляли на столе на несколько минут для того, чтобы полученный раствор мог отстояться и большая часть пузырьков, образовавшихся во время восстановления влагосодержания, смогла исчезнуть. Восстановленной раствор затем осматривали в световом коробе против как черного, так и белого фона в отношении цвета, прозрачности и частиц.
Высокоэффективная эксклюзионная хроматография (SEC-HPLC)
Два микролитра неразведенных образцов препарата TNF-связывающего нанотела впрыскивали в колонку G3000swxl с предколонкой (TosoHaas Part №№08541 и 08543). Подвижная фаза представляла собой забуференный фосфатами физиологический раствор (PBS) с добавлением 250 мМ хлорида натрия. Скорость потока составляла 0,75 мл/мин и время прогона составляло 30 минут. Ультрафиолетовое поглощение контролировали при длине волны 280 нм. Хроматограмму интегрировали для отделения основного пика TNF-связывающего нанотела от высоко- и низкомолекулярных компонентов с использованием программного обеспечения Waters Empower™.
Спектроскопия поглощения в ультрафиолетовой и видимой области для определения концентрации (A280)
Образцы препарата, имеющего антитело в концентрации 100 мг/мл, разбавляли до приблизительно 0,5 мг/мл и 0,25 мг/мл путем добавления 10 мкл образца до 1990 мкл и 3990 мкл 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, рН 6,0, соответственно. Двести микролитров полученных растворов помещали в отдельные лунки на 96-луночном микропланшете вместе с пробой в буфере. Планшет считывали в планшет-ридере Spectramax® Plus на ультрафиолетовое поглощение при длинах волн 280 нм и 320 нм. Вычитание поглощения при 320 нм из поглощения при 280 нм и деление на коэффициент поглощения (1,405 мл/мг-см), умноженное на длину пути (1 см), определяло концентрации белка в растворе в каждой лунке. Использовали подходящий фактор разведения и определяли среднюю концентрацию белка.
Спектроскопия поглощения в ультрафиолетовой и видимой области для светорассеяния (A420)
Двести микролитров каждого образца TNF-связывающего нанотела, подлежащего анализу, вносили в отдельные лунки на 96-луночном микропланшете. Проба с буфером служила в качестве контроля. Планшет считывали в планшет-ридере Spectramax Plus на видимое поглощение при длине волны 420 нм.
Стратегия развития цикла
Ряд последовательных стадий (описанных ниже) использовали для развития цикла лиофилизации.
Идентификация критической температуры продукта
Критическую температуру продукта TNF-связывающего нанотела идентифицировали посредством модулированной дифференциальной сканирующей калориметрии (mDSC). Этот способ используют для идентификации температуры стеклования замороженного продукта (mDSC). Цикл лиофилизации, который поддерживает продукт ниже этой температуры во время первичной сушки, должен давать интактную структуру таблетки. Предположили, что самая низкая подходящая температура составляет -25°C, и поэтому эту температуру обычно включают в процедуры, предназначенные для тестирования условий и препаратов при разработке препарата и способов лиофилизации антитела, как описано в данной заявке.
Проведение цикла лиофилизации
Основываясь на результатах описанных выше исследований, проводили три различных цикла лиофилизации для изучения трех интересующих параметров в развитии подходящей процедуры лиофилизации для получения лиофилизированного препарата, подходящего для хранения или других процедур. Первый исследуемый параметр представлял собой контрольный цикл, который повторяет циклы из предыдущих исследований стабильности. Этот цикл использовали во всех предшествующих экспериментальных циклах на стабильность, поэтому он служил в качестве исходной точки для этого анализа.
Второй тестируемый параметр представлял собой влияние непроведения стадии вторичной сушки с целью получения лиофилизированных таблеток с высоким содержанием остаточной влажности. Этот цикл лиофилизации служит для оценки чувствительности препарата TNF-связывающего нанотела к высокому содержанию остаточной влажности и может быть использован в оценке производственных отклонений в начальных клинических партиях перед проведением формальных исследований устойчивости к лиофилизации.
Третий тестируемый параметр представлял собой агрессивный цикл. Увеличение температуры первичной сушки существенно выше заданной величины контрольного цикла может значительно увеличить температуру продукта препарата TNF-связывающего нанотела во время первичной сушки. Этот цикл лиофилизации служит для оценки чувствительности препарата TNF-связывающего нанотела к температуре продукта во время лиофилизации и может быть использован в оценке производственных отклонений в начальных клинических партиях перед проведением формальных исследований устойчивости к лиофилизации.
Оценка циклов лиофилизации
Оценка выбранных циклов лиофилизации в отношении препаратов TNF-связывающего нанотела разделилась на два аспекта: непосредственное сравнение на основе тестов, проводимых после лиофилизации, и возможное длительное влияние, вызванное инкубацией в ускоренных условиях.
Идентификация критической температуры продукта
Продукт препарат TNF-связывающего нанотела содержал почти 50% белка. Ожидается, что сам белок влияет на физические свойства замороженного и лиофилизированного состояний. Перед лиофилизацией низкотемпературная модулированная дифференциальная сканирующая калориметрия (mDSC) выявила температуру стеклования концентрированной вымораживанием аморфной фазы препарата. Основываясь на данных агрессивного цикла лиофилизации, выбрали температуру продукта -12°C в качестве критической температуры, которая должна быть ниже во время лиофилизации.
Пример 3: Стабильность высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела (продолжительность 6 месяцев)
В некоторых случаях желательно хранить препарат TNF-связывающего нанотела в жидком формате. Соответственно, исследовали долговременную стабильность жидкого TNF-связывающего препарата, содержащего относительно высокую концентрацию TNF-связывающего нанотела. Кратко, препарат, содержащий гуманизированное TNF-связывающее нанотело (приблизительно 80 мг/мл), 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, рН 6,0, получали для хранения посредством стерильной фильтрации препарата в апирогенных сосудах из нержавеющей стали. Препарат хранили при -20°C или 4°C в течение примерно трех месяцев и шести месяцев. Стабильность высококонцентрированной жидкости оценивали по биологической активности, связыванию человеческого сывороточного альбумина (HSA), процентному содержанию HMW и процентному содержанию LMW посредством SE-HPLC, процентному содержанию ATN-103 и процентному содержанию примеси непродукта посредством SDS-CE и определению посредством СЕХ-HPLC относительного времени удерживания и сравнимости профиля элюции с эталонным стандартом TNF-связывающего нанотела.
Анализ биологической активности использовали в качестве параметра стабильности для высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела. Анализ проводили, как описано выше в Примере 1. Образцы хранили при -20°C и 4°C в течение примерно трех месяцев и шести месяцев. Данные выражали в виде единиц на миллиграмм (Фиг.6). Образцы содержали примерно 6×106 ед./мг до хранения и примерно 4,5-5×106 ед./мг после инкубации. Это отражает по существу отсутствие изменений в биоактивности образцов во время хранения. Вариабельность в значениях отражает вариабельность, характерную для анализа. Поскольку не наблюдается уменьшения количества биологической активности в образцах, эти данные обеспечивают дополнительное подтверждение пригодности препарата для хранения TNF-связывающего нанотела.
Еще один параметр стабильности исследовали с использованием высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела: связывающую активность. В этих экспериментах процент связывающей активности препарата определяли, сравнивая с контролем после хранения при -20° и 4°C в течение шести месяцев. Анализ специфически контролирует аффинность связывания TNF-связывающего с человеческим сывороточным альбумином (HSA). Первоначальная связывающая активность препарата составляла примерно 100% от эталонного образца и по существу не изменялась для любого из образцов во время шестимесячного периода тестирования (Фиг.7). Измеренная связывающая активность составляла вплоть до примерно 110% от эталона, который, с учетом ошибки, обычно наблюдающейся в этом анализе, отражает по существу отсутствие изменений в связывающей активности образцов с течением времени и отсутствие зависимости от температуры в результатах связывания.
Процентное содержание HMW компонентов анализировали с использованием SEC-HPLC, Процентное содержание высокомолекулярных компонентов в высококонцентрированном жидком препарате до хранения составляло от 0,1% до 0,15% общего белка в препарате и составляло примерно 0,1% в образцах, хранившихся при -20°C, и примерно 0,2% в образцах, хранившихся при 4°C, вплоть до шести месяцев хранения (Фиг.8). Таким образом, не наблюдалось никакого значительного увеличения в уровне HMW компонентов в образцах, хранившихся при -20°C и 4°C в течение по меньшей мере шести месяцев.
Процентное содержание LMW компонентов в высококонцентрированном жидком препарате TNF-связывающего нанотела также анализировали в жидком препарате TNF-связывающего нанотела. Процентное содержание LMW компонентов в препарате было ниже предела обнаружения (т.е. 0,0%) при температуре -20°C и составляло примерно 0,1% в образцах, хранившихся при 4°C в течение вплоть до шести месяцев (Фиг, 9). Таким образом, не наблюдалось никакого значительного увеличения в уровне LMW компонентов в образцах, хранившихся при -20°C и 4°C в течение по меньшей мере шести месяцев.
Процентное содержание LMW компонентов анализировали с использованием SE-HPLC. Процентное содержание LMW компонентов в высококонцентрированном жидком препарате было ниже предела обнаружения (т.е. 0,0%) при температурах 4°C, 25°C и 40°C в течение вплоть до шести месяцев.
Процентное содержание TNF-связывающего нанотела анализировали с использованием SDS-CE. Первоначальные процентное содержание TNF-связывающего нанотела в высококонцентрированном жидком препарате составляло примерно 100% и по существу не изменялось для любого из образцов в течение шестимесячного периода тестирования (Фиг.10).
Процентное содержание примеси непродукта анализировали с использованием SDS-CE. Незначительную примесь непродукта наблюдали посредством SDS-CE для жидкого высококонцентрированного препарата TNF-связывающего нанотела при температурах -20°C и 4°C в течение вплоть до шести месяцев.
Высококонцентрированные жидкие препараты также тестировали на идентичность с использованием CEX-HPLC. CEX-HPLC используют в качестве теста на идентичность. Профиль элюции для TNF-связывания высококонцентрированного жидкого препарата был сравним с эталонным стандартом при температурах -20°C и 4°C в течение вплоть до шести месяцев. Относительное время удерживания предполагаемого пика не изменялось по 1,00 стандарту при температурах -20°C и 4°C в течение вплоть до шести месяцев.
Данные, описанные в данной заявке, демонстрируют ограниченные изменения в продуктах деградации в зависимости от времени хранения при различных температурах.
Пример 4: Стабильность высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела в шприце, предварительно заполненном жидкостью (продолжительность 12 месяцев)
Стабильность высококонцентрированного жидкого TNF-связывающего нанотела, загружаемого в предварительно заполняемый шприц в следующем препарате: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, приблизительно 80 мг/мл TNF-связывающего нанотела, при рН 6,0, оценивали по процентному содержанию HMW и процентному содержанию LMW посредством SE-HPLC и процентному содержанию кислотных и щелочных компонентов посредством CEX-HPLC, и определению относительного времени удерживания и сравнимости профиля элюции с эталонным стандартом TNF-связывающего нанотела. Препарат хранили при 4°C в течение двенадцати месяцев, при 25°C в течение трех месяцев и при 40°C в течение двух месяцев.
В первоначальной временной точке наблюдалось примерно 0,7% HMW компонентов. Через двенадцать месяцев при 4°C наблюдалось минимальное увеличение до примерно 0,8% HMW компонентов. Через три месяца при 25°C HMW компоненты увеличивались до примерно 1,8%. Через два месяца при 40°C HMW компоненты увеличивались с течением времени до примерно 27% (Фиг.11).
В первоначальной временной точке наблюдалось примерно 0,1% LMW компонентов. Через двенадцать месяцев при 4°C наблюдалось минимальное увеличение до 0,25% LMW компонентов. Через три месяца при 25°C наблюдалось небольшое увеличение до примерно 0,5% LMW. Через два месяца при 40°C деградация увеличивалась с течением времени до примерно 1,4% LMW компонентов (Фиг.12).
В первоначальной временной точке наблюдалось примерно 6% кислотных компонентов. Через двенадцать месяцев при 4°C наблюдалось примерно 7,5% кислотных компонентов. Через три месяца при 25°C наблюдалось примерно 7,3% кислотных компонентов, с увеличением кислотных компонентов с течением времени. Через два месяца при 40°C кислотные компоненты увеличивались с течением времени до примерно 8,3% (Фиг.13).
В первоначальной временной точке наблюдалось примерно 1,7% щелочных компонентов. Через двенадцать месяцев при 4°C наблюдалось примерно 2,9% щелочных компонентов. Через три месяца при 25°C наблюдалось примерно 2,9% щелочных компонентов, с увеличением щелочных компонентов с течением времени. Через два месяца при 40°C щелочные компоненты увеличивались с течением времени до примерно 27% (Фиг.14).
Относительные времена удерживания и профили элюции для всех образцов сравнивали с эталонным стандартом TNF-связывающего нанотела.
Данные демонстрируют ограниченные изменения в продуктах деградации в зависимости от времени хранения при 4°C и 25°C, что указывает на то, что препарат является подходящим в виде жидкости в предварительно заполненном шприце. Некоторые заметные изменения в продуктах деградации наблюдали при 40°C, что является напряженным состоянием для жидкости.
Пример 5: Стабильность высококонцентрированных жидкостей ATN-103-других препаратов (идентификация других стабилизирующих и дестабилизирующих эксципиентов)
С целью скрининга возможных эксципиентов для жидкого препарата TNF-связывающего нанотела исследовали стабильность других высококонцентрированных жидких препаратов TNF-связывающего нанотела. Дополнительную работу осуществляли, используя различные эксципиенты для обеспечения дополнительной стабильности и для изготовления изотонического препарата (подходящего для инъекции субъектам-людям). Концентрация TNF-связывающего нанотела находится в диапазоне от 88 мг/мл до 100 мг/мл.
Исследуемые препараты представляли собой:
1. 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, 100 мМ аргинина (основание), рН 5,8
2. 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, 55 мМ NaCl, рН 6,1
3. 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, 55 мМ аргинина HCl, pH 6,1
4. 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, 100 мМ глицина, pH 6,0
5. 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, 100 мМ метионина, рН 6,0
6. 10 мМ гистидина, 8% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, рН 6,0
CTL: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, рН 6,0
Первоначальные свойства раствора анализировали в отношении рН, осмотической концентрации раствора, концентрации, мутности и вязкости. Все препараты давали в результате изотонические растворы и демонстрировали приемлемую прозрачность при измерении A455 и низкую вязкость (от 2,4 сП до 3,1 сП), демонстрируя пригодность предварительно заполненного шприца и автоинжектора.
Таблица 2 | |||||
Первоначальные свойства раствора | |||||
Препарат | мОсм | рН | МГ/МЛ | Мутность | Вязкость (сП) |
1 | 356 | 5,82 | 98 | <III | 3,1 |
2 | 312 | 6,13 | 88 | <III | 2,6 |
3 | 303 | 6,12 | 89 | <III | 2,6 |
4 | 305 | 6,05 | 88 | <III | 2,4 |
5 | 309 | 5,97 | 99 | <III | 2,8 |
6 | 306 | 6,03 | 88 | <III | 2,6 |
CTL/0 | 197 | 6,01 | 100 | <III | 2,8 |
Стабильность высококонцентрированной жидкости оценивали по процентному содержанию HMW и процентному содержанию LMW посредством SE-HPLC. Эти вещества исследовали на стабильность при 5°C, 25°C и 40°C в течение 3 месяцев. Данные для 40°C в течение 2 недель показаны на Фиг.15.
Некоторые заметные изменения в продуктах деградации наблюдали при 40°C, что является напряженным состоянием для жидкости. Краткая ускоренная стабильность (2 недели при 40°C) показывает, что препараты 4, 5 и 6 обеспечивают сравнимую или улучшенную стабильность по сравнению с контролем (10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата-80, рН 6,0). Препараты 1, 2 и 3, по-видимому, оказывают негативное влияние на стабильность.
Данные показывают, что глицин, метионин и повышенная сахароза являются стабилизирующими для высококонцентрированных жидких препаратов TNF-связывающего нанотела. Данные показывают, что основание аргинина, гидрохлорид аргинина и хлорид натрия могут быть дестабилизирующими для высококонцентрированных жидких препаратов TNF-связывающего нанотела в некоторых условиях.
Пример 6: Стабильность TNF-связывающего нанотела из высококонцентрированного жидкого препарата, кратковременная (продолжительность 2 недели), гистидин и Трис-буферы
Стабильность TNF-связывающего нанотела в виде жидкости проиллюстрирована на следующих Фиг.16-19. Исследовали два препарата: ATN-103 при 118 мг/мл в 20 мМ гистидина, 5% сахарозы, рН 6,0; и ATN-103 при 117 мг/мл в 20 мМ Трис, 5% сахарозы, рН 7,2. Стабильность препаратов оценивали по процентному содержанию HMW и процентному содержанию LMW посредством SE-HPLC, и процентному содержанию кислотных и процентному содержанию щелочных компонентов посредством CEX-HPLC. Данные демонстрируют ограниченные изменения в продуктах деградации в зависимости от времени хранения при 4°C. Некоторые заметные изменения в продуктах деградации наблюдали при 40°C, что является напряженным состоянием для жидкости. Данные показывают, что стабильность TNF-связывающего нанотела в гистидиновом и Трис-буферах является по существу сходной в этих условиях приготовления, где использование гистидина несколько более предпочтительно (несколько меньше LMW). Активности предварительного препарата позже показали, что повышенный рН (7 или больше) в большей степени приводит к образованию LMW, объясняя наблюдаемое ниже преимущество.
Пример 7: Стабильность высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела: Оценка напряжений на поверхности раздела (замораживание/оттаивание)
На Фиг.20-23 продемонстрирована стабильность жидкого препарата TNF-связывающего нанотела при приблизительно 80 мг/мл в 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, рН 6,0. Оценка основана на эксклюзионной-HPLC, мутности и оценке концентрации после многократных циклов замораживания-оттаивания от -80°C до 37°C.
Данные демонстрируют ограниченное изменение в стабильности в зависимости от многократных циклов замораживания-оттаивания от -80°C до 37°C.
Пример 8: Стабильность высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела: оценка кратковременных термических воздействий, потенциально встречающихся в процессах изготовления
На Фиг.24 продемонстрировано, что жидкое TNF-связывающее нанотело является устойчивым к кратковременным термическим воздействиям, которые могли бы потенциально встретиться во время процессов изготовления лекарственного вещества и лекарственного продукта. Высококонцентрированную жидкость исследовали в 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80, рН 6,0, при приблизительно 80 мг/мл и 50 мг/мл. Оценка основана на процентном содержании HMW и процентном содержании LMW посредством эксклюзионной-HPLC после воздействия в течение 8 часов при 40°C, 7 суток при 25°C и 29 суток при 5°C. Данные демонстрируют ограниченные изменения в агрегатах в зависимости от времени хранения при 5°C и 25°C. Некоторые изменения в агрегатах наблюдали при 40°C, что является напряженным состоянием для жидкости.
Процентное содержание LMW компонентов согласно SE-HPLC для высококонцентрированного жидкого TNF-связывающего нанотела была ниже предела обнаружения (т.е. 0,0%) при указанных температурах и продолжительностях.
Пример 9: Стабильность низкоконцентрированного жидкого препарата ATN-103: оценка оптимального рН и препарата
На Фиг.25-28 продемонстрирована стабильность жидких препаратов TNF-связывающего нанотела при низкой концентрации (приблизительно 1 мг/мл), забуференных при рН 5,5, 6,0, 6,5 и 7,0. Стабильность низкоконцентрированного жидкого TNF-связывающего нанотела исследовали в зависимости от препарата и рН, в ответ на напряжение, такое как воздействие температуры 40°C (Фиг.25 и 26), встряхивание (Фиг.28) и замораживание/оттаивание. Четыре значения рН оценивали для каждого из трех следующих препаратов: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80; 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 150 мМ аргинина HCl; и 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 75 мМ хлорида натрия. В этой совокупности данных Tween-80 используют в качестве синонима полисорбата-80. Образцы для исследования оценивали, используя SE-HPLC и УФ (в отношении и концентрации, и мутности - измеряя при A455).
Коды для графических материалов:
HST: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80
HSTA: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 150 мМ аргинина HCl
HSTS: 10 мМ гистидина, 5% сахарозы, 0,01% Tween-80, 75 мМ хлорида натрия
Результаты показывают, что диапазон рН от 5,5 до 7,0 является подходящим для препарата. Данные показывают, что в некоторых условиях рН 7,0 может продемонстрировать некоторые нежелательные эффекты (повышенное количество низкомолекулярных компонентов). Данные показывают, что нет значительной пользы от добавления аргинина HCl или хлорида натрия в препарат лекарственного вещества, а в некоторых случаях это может быть дестабилизирующим.
На Фиг.27 показано процентное содержание HMW компонентов согласно SE-HPLC для TNF-связывающего нанотела после хранения при 4°C, где через 4 недели по существу не наблюдалось никакого изменения. Процентное содержание LMW компонентов согласно SE-HPLC для низкой концентрации TNF-связывающего нанотела было ниже предела обнаружения (т.е. 0,0%) при 4°C для всех тестируемых состояний раствора. В результате многократных циклов замораживания-оттаивания не наблюдалось никаких значительных изменений в HMW или LMW компонентах согласно SE-HPLC, или УФ A280, или A455.
Пример 10: Низкоконцентрированное жидкое TNF-связывающее нанотело: оценка эффекта встряхивания в зависимости от рН и препарата
Представлены данные, которые также показывают, что TNF-связывающее нанотело является чувствительным к встряхиванию при 300 об/мин в течение 4 часов (при 15°C) в пределах этого рН диапазона (Фиг.28). Препараты, содержащие хлорид натрия и аргинин, являются особенно чувствительными к встряхиванию. Препарат, содержащий гистидин, сахарозу, tween-80, показал наименьшую деградацию высокомолекулярных компонентов в пределах каждой рН группы. Препарат, содержащий гистидин, сахарозу, tween-80, при рН 6,0 и 7,0 показал наименьшую деградацию.
УФ поглощение низкоконцентрированного TNF-связывающего нанотела после встряхивания контролировали при 280 нм (для контроля концентрации) и 455 нм (для контроля мутности). В результате встряхивания не наблюдалось никаких значительных изменений.
Низкоконцентрированные растворы TNF-связывающего нанотела исследовали после многократных циклов замораживания-оттаивания посредством SE-HPLC и УФ анализа при 280 нм (для контроля концентрации) и 455 нм (для контроля мутности). В результате многократных циклов замораживания-оттаивания не наблюдалось никаких значительных изменений при SE-HPLC или УФ A280 или A455.
Пример 11: Стабильность высококонцентрированного жидкого препарата TNF-связывающего нанотела, кратковременная (продолжительность 2 недели), исследование агентов, регулирующих тоничность
Стабильность TNF-связывающего нанотела в виде жидкости проиллюстрирована в следующем:
Пять препаратов исследовали, как показано на Фиг.31 и 32, названных в данной заявке как HST, HSGT, HSGMT, HSorb и Контроль. Каждый из исследуемых препаратов описан ниже.
Фиг.31 и 32 | Препараты |
HST | 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 8% сахарозы, 0,01% полисорбата 80 |
HSGT | 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 5% сахарозы, 80 мМ глицина, 0,01% полисорбата 80 |
HSGMT | 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 5% сахарозы, 80 мМ глицина, 10 мМ метионина, 0,01% полисорбата 80 |
HSorb | 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 5% сорбита |
Контроль | 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 5% сахарозы |
Препараты хранили в виде жидкости в течение двух недель при 4°C и 40°C (состояние напряжения) в полипропиленовых пробирках и в предварительно заполненном шприце из циклического олефинового сополимера с резиновой пробкой.
Стабильность препаратов оценивали по процентному содержанию HMW и процентному содержанию LMW посредством SE-HPLC, как изображено на Фиг.31 и 32. Данные демонстрируют ограниченные изменения в продуктах деградации в зависимости от времени хранения при 4°C. Для образцов, показанных на Фиг.32, никаких LMW не определено ни в начальной временной точке, ни после двух недель при 4°C. LMW определялись только в образцах при 40°C (подвергнутых напряжению). Данные показывают, что все пять препаратов демонстрируют сравнимые изменения в продуктах деградации в зависимости от времени хранения в напряженном состоянии при 40°C. Таким образом, данные показывают, что все препараты являются подходящими для жидкой лекарственной формы.
Пример 12: Стабильность TNF-связывающего нанотела в низкоконцентрированном и высококонцентрированном жидком препарате, подтверждающая целевой препарат, и анализ контейнеров для первичной упаковки
Стабильность TNF-связывающего нанотела в виде жидкости проиллюстрирована в следующем:
Исследовали три препарата:
(а) 10 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80;
(б) 50 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80;
(в) 100 мг/мл TNF-связывающего нанотела, 20 мМ гистидина, 7,5% сахарозы, 0,01% полисорбата 80.
Препарат получали в следующих контейнерах первичной упаковки:
(а) предварительно заполняемый стеклянный шприц I типа фармацевтической категории от одного поставщика и силиконизированная серая резиновая пробка West 4432,
(б) предварительно заполняемый стеклянный шприц I типа фармацевтической категории от второго поставщика и силиконизированная серая резиновая пробка West 4432,
(в) предварительно заполняемый циклический олефиновый сополимер и силиконизированная серая резиновая пробка West 4432.
Препараты анализировали при t=0 и нашли, что они являются удовлетворительными. Препарат хранили при 4°C, 25°C и 40°C в течение трех месяцев.
Эквиваленты
Все ссылки, процитированные в данной заявке, включены в данную заявку посредством ссылки во всей их полноте и для всех целей в такой же степени, как если бы каждая отдельная публикация, или патент, или заявка на патент были специально и индивидуально указаны для включения посредством ссылки во всей их полноте для всех целей.
Объем настоящего изобретения не следует ограничивать конкретными воплощениями, описанными в данной заявке. Действительно, различные модификации изобретения в дополнение к модификациям, описанным в данной заявке, станут очевидными специалистам в данной области из вышеуказанного описания и сопровождающих графических материалов. Такие модификации будут находиться в пределах объема прилагаемой формулы изобретения.
Claims (14)
1. Способ получения стабильного фармацевтического препарата SDAB молекулы, содержащего:
(а) указанную однодоменную антигенсвязывающую молекулу (SDAB) в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 250 мг/мл, содержащую по меньшей мере две однодоменных молекулы, где одна однодоменная молекула связывается с человеческим сывороточным альбумином (HSA) и по меньшей мере одна другая однодоменная молекула связывается с другим антигеном-мишенью человека или его эпитопом;
(б) лиопротектор, выбранный из сахара и полиола, в концентрации от 5% до 10% (масса/объем); и
(в) гистидиновый буфер в концентрации от 10 до 20 мМ, так что рН препарата составляет от примерно 5,5 до 7,2,
где по меньшей мере одна однодоменная молекула, которая связывается с HSA содержит три CDR, имеющие аминокислотные последовательности: SFGMS (SEQ ID NO: 5) (CDR1), SISGSGSDTLYADSVKG (SEQ ID NO: 6) (CDR2) и GGSLSR (SEQ ID NO: 7) (CDR3), или имеет CDR, которая отличается менее чем 3, 2 или 1 аминокислотными заменами (например консервативными заменами) от одной из указанных CDR, например 1 консервативной аминокислотной заменой от одной из указанных CDR,
включающий: экспрессирование SDAB молекулы в клеточной культуре; очистку SDAB молекулы путем пропускания SDAB молекулы через по меньшей мере одну стадию хроматографической очистки или стадии ультрафильтрации/диафильтрации; корректирование концентрации SDAB молекулы до 1-250 мг/мл в препарате, содержащем лиопротектор, выбранный из сахара и полиола, в концентрации от 5% до 10%; и гистидиновый буфер в концентрации от 10 до 20 мМ, так что рН препарата составляет от 5,5 до 7,2.
2. Способ по п. 1, где сахар представляет собой сахарозу.
3. Способ получения стабильного фармацевтического препарата SDAB молекулы, восстановленного после лиофилизации, содержащего:
(а) указанную однодоменную антигенсвязывающую молекулу (SDAB) в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 250 мг/мл, содержащую по меньшей мере две однодоменных молекулы, где одна однодоменная молекула связывается с человеческим сывороточным альбумином (HSA) и по меньшей мере одна другая однодоменная молекула связывается с другим антигеном-мишенью человека или его эпитопом;
(б) лиопротектор, выбранный из сахара и полиола, в концентрации от 5% до 10% (масса/объем); и
(в) гистидиновый буфер в концентрации от 10 до 20 мМ, так что рН препарата составляет от примерно 5,5 до 7,2,
где по меньшей мере одна однодоменная молекула, которая связывается с HSA содержит три CDR, имеющие аминокислотные последовательности: SFGMS (SEQ ID NO: 5) (CDR1), SISGSGSDTLYADSVKG (SEQ ID NO: 6) (CDR2) и GGSLSR (SEQ ID NO: 7) (CDR3), или имеет CDR, которая отличается менее чем 3, 2 или 1 аминокислотными заменами (например консервативными заменами) от одной из указанных CDR, например 1 консервативной аминокислотной заменой от одной из указанных CDR,
включающий: лиофилизацию смеси SDAB молекулы, лиопротектора, выбранного из сахара и полиола, и гистидинового буфера, посредством этого образование лиофилизированной смеси; и восстановление влагосодержания лиофилизированной смеси в разбавителе с получением препарата, содержащего: (a) SDAB молекулу в концентрации от 1 мг/мл до 250 мг/мл; (б) лиопротектор, выбранный из сахара и полиола в концентрации от 5% до 10%; (в) гистидиновый буфер в концентрации от 10 до 20 мМ, так что рН препарата составляет от 5,5 до 7,2.
4. Способ по п. 3, где сахар представляет собой сахарозу или трегалозу.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US10947408P | 2008-10-29 | 2008-10-29 | |
US61/109,474 | 2008-10-29 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011113438/10A Division RU2481824C2 (ru) | 2008-10-29 | 2009-10-29 | Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2013104181A RU2013104181A (ru) | 2014-08-10 |
RU2683861C2 true RU2683861C2 (ru) | 2019-04-02 |
Family
ID=41467056
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011113438/10A RU2481824C2 (ru) | 2008-10-29 | 2009-10-29 | Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул |
RU2013104181A RU2683861C2 (ru) | 2008-10-29 | 2013-02-01 | Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011113438/10A RU2481824C2 (ru) | 2008-10-29 | 2009-10-29 | Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9393304B2 (ru) |
EP (3) | EP3011953A1 (ru) |
JP (3) | JP5823867B2 (ru) |
KR (2) | KR101593285B1 (ru) |
CN (2) | CN104740631B (ru) |
AR (1) | AR073997A1 (ru) |
AU (1) | AU2009333791B2 (ru) |
BR (2) | BR122018013284B1 (ru) |
CA (1) | CA2738243C (ru) |
HK (2) | HK1210431A1 (ru) |
IL (2) | IL211932A (ru) |
MX (1) | MX345226B (ru) |
RU (2) | RU2481824C2 (ru) |
WO (1) | WO2010077422A2 (ru) |
Families Citing this family (64)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
KR20080031684A (ko) | 2005-06-14 | 2008-04-10 | 암젠 인코포레이티드 | 자가 - 완충성 단백질 제형 |
EP2346900A1 (en) | 2008-10-29 | 2011-07-27 | Wyeth LLC | Methods for purification of single domain antigen binding molecules |
CN104740631B (zh) | 2008-10-29 | 2019-04-16 | 阿布林克斯公司 | 单域抗原结合性分子的制剂 |
US9265834B2 (en) * | 2009-03-05 | 2016-02-23 | Ablynx N.V. | Stable formulations of polypeptides and uses thereof |
EP2403873A1 (en) | 2009-03-05 | 2012-01-11 | Ablynx N.V. | Novel antigen binding dimer-complexes, methods of making/avoiding and uses thereof |
PL3438126T3 (pl) * | 2009-09-03 | 2021-03-08 | Ablynx N.V. | Stabilne formulacje polipeptydów i ich zastosowanie |
WO2011098518A2 (en) * | 2010-02-11 | 2011-08-18 | Ablynx Nv | Delivery of immunoglobulin variable domains and constructs thereof |
CN102946858B (zh) * | 2010-05-10 | 2015-09-30 | 英塔斯制药有限公司 | 含有免疫球蛋白Fc的多肽的液体制剂 |
CN108314733A (zh) * | 2010-07-16 | 2018-07-24 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 修饰的单结构域抗原结合分子及其应用 |
EP3246044B2 (en) * | 2010-08-23 | 2024-04-10 | Wyeth LLC | Stable formulations of neisseria meningitidis rlp2086 antigens |
ES2864635T3 (es) | 2010-09-10 | 2021-10-14 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis |
AU2012237287B2 (en) * | 2011-03-30 | 2016-09-08 | Ablynx Nv | Methods of treating immune disorders with single domain antibodies against TNF-alpha |
HUE039209T2 (hu) * | 2011-03-31 | 2018-12-28 | Merck Sharp & Dohme | Antitestek stabil formulációi emberi programozott halálreceptor PD-1 ellen és ezzel kapcsolatos kezelések |
JOP20200043A1 (ar) * | 2011-05-10 | 2017-06-16 | Amgen Inc | طرق معالجة أو منع الاضطرابات المختصة بالكوليسترول |
GB201112429D0 (en) * | 2011-07-19 | 2011-08-31 | Glaxo Group Ltd | Antigen-binding proteins with increased FcRn binding |
MX2014001883A (es) | 2011-08-17 | 2014-05-27 | Glaxo Group Ltd | Proteinas y peptidos modificados. |
US9399678B2 (en) | 2011-09-23 | 2016-07-26 | Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa | Anti-tumor necrosis factor-alpha agents and uses thereof |
CA2849705A1 (en) * | 2011-09-23 | 2013-03-28 | Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa | Modified albumin-binding domains and uses thereof to improve pharmacokinetics |
CN102512384B (zh) * | 2011-12-29 | 2014-11-26 | 嘉和生物药业有限公司 | 一种冻干剂型蛋白组合物及其制备方法 |
US10093728B2 (en) | 2012-03-07 | 2018-10-09 | Cadila Healthcare Limited | Pharmaceutical formulations of TNF-alpha antibodies |
SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
MY167723A (en) | 2012-03-09 | 2018-09-21 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
NL1040254C2 (en) | 2013-05-17 | 2014-11-24 | Ablynx Nv | Stable formulations of immunoglobulin single variable domains and uses thereof. |
WO2015033251A2 (en) | 2013-09-08 | 2015-03-12 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
CA2926588C (en) | 2013-10-16 | 2020-07-21 | Oncobiologics, Inc. | Buffer formulations for enhanced antibody stability |
SG11201608583YA (en) | 2014-04-28 | 2016-11-29 | Eisai R&D Man Co Ltd | Lyophilized formulation of hgf |
CN105012949A (zh) * | 2014-04-28 | 2015-11-04 | 上海药明康德新药开发有限公司 | 重组人抗人TNFα单克隆抗体的制剂 |
CA2946230A1 (en) * | 2014-05-07 | 2015-11-12 | Takeda Gmbh | Liquid formulation comprising gm-csf neutralizing compound |
DK2946765T3 (en) | 2014-05-23 | 2016-10-31 | Ares Trading Sa | Liquid pharmaceutical composition |
EP2946767B1 (en) * | 2014-05-23 | 2016-10-05 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
ES2572919T3 (es) | 2014-05-23 | 2016-06-03 | Ares Trading S.A. | Composición farmacéutica líquida |
CN105267960A (zh) * | 2014-06-13 | 2016-01-27 | 亚宝药业太原制药有限公司 | 一种重组腺病毒疫苗制剂及其制备方法 |
NL2013007B1 (en) | 2014-06-16 | 2016-07-05 | Ablynx Nv | Methods of treating TTP with immunoglobulin single variable domains and uses thereof. |
EP3247718B1 (en) | 2015-01-21 | 2021-09-01 | Outlook Therapeutics, Inc. | Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition |
KR20190049940A (ko) | 2015-02-19 | 2019-05-09 | 화이자 인코포레이티드 | 나이세리아 메닌지티디스 조성물 및 그의 방법 |
AU2016239948B2 (en) | 2015-03-31 | 2022-03-17 | Sorriso Pharmaceuticals, Inc. | Polypeptides |
AR104847A1 (es) | 2015-06-17 | 2017-08-16 | Lilly Co Eli | Formulación de anticuerpo anti-cgrp |
US20170059561A1 (en) * | 2015-08-28 | 2017-03-02 | The Florida International University Board Of Trustees | Thermally Stable Electrochemical Sensor With Long Shelf-Life |
AU2017213775A1 (en) | 2016-02-03 | 2018-08-16 | Outlook Therapeutics, Inc. | Buffer formulations for enhanced antibody stability |
KR102275262B1 (ko) | 2016-03-17 | 2021-07-12 | 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 | 활성 간세포 성장 인자(hgf)를 생성하는 방법 |
AU2017240190A1 (en) | 2016-03-31 | 2018-09-20 | Sorriso Pharmaceuticals, Inc. | Compositions |
GB201612043D0 (en) * | 2016-07-11 | 2016-08-24 | Crescendo Biologics Ltd | Composition for treatment of disorders |
CN106265480A (zh) * | 2016-09-03 | 2017-01-04 | 山西纳安生物科技有限公司 | 纳米抗体阴道给药系统及制备方法和应用 |
CN106267191A (zh) * | 2016-09-03 | 2017-01-04 | 山西纳安生物科技有限公司 | 纳米抗体生物药透皮给药制剂系统及制备方法和应用 |
WO2018060453A1 (en) | 2016-09-30 | 2018-04-05 | Vhsquared Limited | Compositions |
BR112019007858A2 (pt) * | 2016-10-21 | 2019-07-02 | Amgen Inc | formulações farmacêuticas e métodos para produzir as mesmas |
AU2017386888B2 (en) * | 2016-12-28 | 2024-08-08 | Jcr Pharmaceuticals Co., Ltd. | Lyophilized preparation |
CN107674122A (zh) * | 2016-12-28 | 2018-02-09 | 天津天锐生物科技有限公司 | 一种识别人血清白蛋白的单域抗体 |
AU2018215585B2 (en) | 2017-01-31 | 2022-03-17 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
JOP20190260A1 (ar) | 2017-05-02 | 2019-10-31 | Merck Sharp & Dohme | صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها |
CN110913906A (zh) | 2017-05-02 | 2020-03-24 | 默沙东公司 | 抗lag3抗体的制剂和抗lag3抗体与抗pd-1抗体的共制剂 |
MX2020008294A (es) | 2018-02-06 | 2020-11-18 | Ablynx Nv | Metodos de tratamiento de episodio inicial de ttp con dominios variables simples de inmunoglobulina. |
BR112021004126A2 (pt) * | 2018-09-05 | 2021-05-25 | Ventria Bioscience Inc. | formulação profilática e/ou terapêutica estabilizada e método profilático ou terapêutico |
WO2020060192A1 (ko) * | 2018-09-18 | 2020-03-26 | 삼성바이오에피스 주식회사 | 고농도의 계면활성제를 포함하는 트라스투주맙 안정화 액체 제제 |
CN111228225B (zh) * | 2018-11-28 | 2022-08-26 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白冻干制剂 |
CA3144566A1 (en) | 2019-06-21 | 2020-12-24 | Sorriso Pharmaceuticals, Inc. | Polypeptides |
WO2020254827A1 (en) | 2019-06-21 | 2020-12-24 | Vhsquared Limited | Polypeptides |
CN111349159A (zh) * | 2020-03-17 | 2020-06-30 | 暨南大学 | 一种抗人血清白蛋白的纳米抗体及其应用 |
WO2023186174A1 (en) * | 2022-04-01 | 2023-10-05 | Zai Lab (Shanghai) Co., Ltd. | Topical formulation comprising an il-17a binding molecule and uses thereof |
CN114957467B (zh) * | 2022-06-21 | 2023-04-18 | 天津大学 | 特异性结合TNF-α的纳米抗体及其用途 |
WO2024038112A1 (en) * | 2022-08-17 | 2024-02-22 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | Improved anti-albumin nanobodies and their uses |
WO2024153195A1 (en) * | 2023-01-18 | 2024-07-25 | Beijing Ql Biopharmaceutical Co., Ltd. | Liquid pharmaceutical compositions of fusion polypeptides and methods of uses thereof |
WO2024180511A1 (en) * | 2023-03-02 | 2024-09-06 | Novetide Ltd. | Process for preparation of glp-1 peptides having controlled particle size |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2229288C2 (ru) * | 1995-07-27 | 2004-05-27 | Джинентех, Инк. | Стабильная изотоническая лиофилизированная протеиновая композиция |
RU2005134236A (ru) * | 2003-04-04 | 2006-06-10 | Дженентек, Инк. (Us) | Высококонцентрированные композиции антител и белков |
WO2006122786A2 (en) * | 2005-05-18 | 2006-11-23 | Ablynx Nv | Improved nanobodies™ against tumor necrosis factor-alpha |
WO2007095337A2 (en) * | 2006-02-15 | 2007-08-23 | Imclone Systems Incorporated | Antibody formulation |
WO2008071394A1 (en) * | 2006-12-11 | 2008-06-19 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Abeta antibody parenteral formulation |
Family Cites Families (163)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2073403A (en) | 1935-11-23 | 1937-03-09 | Abraham G Goldberg | Display device |
SE307996B (ru) | 1965-11-30 | 1969-01-27 | Asea Ab | |
US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
CU22545A1 (es) | 1994-11-18 | 1999-03-31 | Centro Inmunologia Molecular | Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico |
IE52535B1 (en) | 1981-02-16 | 1987-12-09 | Ici Plc | Continuous release pharmaceutical compositions |
US4475196A (en) | 1981-03-06 | 1984-10-02 | Zor Clair G | Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system |
US4447233A (en) | 1981-04-10 | 1984-05-08 | Parker-Hannifin Corporation | Medication infusion pump |
US4474893A (en) | 1981-07-01 | 1984-10-02 | The University of Texas System Cancer Center | Recombinant monoclonal antibodies |
US4714681A (en) | 1981-07-01 | 1987-12-22 | The Board Of Reagents, The University Of Texas System Cancer Center | Quadroma cells and trioma cells and methods for the production of same |
US4439196A (en) | 1982-03-18 | 1984-03-27 | Merck & Co., Inc. | Osmotic drug delivery system |
US4447224A (en) | 1982-09-20 | 1984-05-08 | Infusaid Corporation | Variable flow implantable infusion apparatus |
US4487603A (en) | 1982-11-26 | 1984-12-11 | Cordis Corporation | Implantable microinfusion pump system |
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4486194A (en) | 1983-06-08 | 1984-12-04 | James Ferrara | Therapeutic device for administering medicaments through the skin |
JPS6147500A (ja) | 1984-08-15 | 1986-03-07 | Res Dev Corp Of Japan | キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法 |
EP0173494A3 (en) | 1984-08-27 | 1987-11-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Chimeric receptors by dna splicing and expression |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US5770198A (en) | 1988-05-18 | 1998-06-23 | The Research Foundation Of The State Of New York | Platelet-specific chimeric 7E3 immunoglobulin |
US4925648A (en) | 1988-07-29 | 1990-05-15 | Immunomedics, Inc. | Detection and treatment of infectious and inflammatory lesions |
US5601819A (en) | 1988-08-11 | 1997-02-11 | The General Hospital Corporation | Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
DE68927933T2 (de) | 1988-09-02 | 1997-08-14 | Dyax Corp | Herstellung und auswahl von rekombinantproteinen mit verschiedenen bindestellen |
WO1990005144A1 (en) | 1988-11-11 | 1990-05-17 | Medical Research Council | Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
GB8905400D0 (en) | 1989-03-09 | 1989-04-19 | Jonker Margreet | Medicaments |
WO1991000360A1 (en) | 1989-06-29 | 1991-01-10 | Medarex, Inc. | Bispecific reagents for aids therapy |
SE509359C2 (sv) | 1989-08-01 | 1999-01-18 | Cemu Bioteknik Ab | Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel |
JP3443119B2 (ja) | 1989-08-07 | 2003-09-02 | ペプテック リミテッド | 腫瘍壊死因子結合リガンド |
US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
JPH06508511A (ja) | 1990-07-10 | 1994-09-29 | ケンブリッジ アンティボディー テクノロジー リミティド | 特異的な結合ペアーの構成員の製造方法 |
GB9016299D0 (en) | 1990-07-25 | 1990-09-12 | Brien Caroline J O | Binding substances |
US5612034A (en) | 1990-10-03 | 1997-03-18 | Redcell, Inc. | Super-globuling for in vivo extended lifetimes |
US5843440A (en) | 1990-10-03 | 1998-12-01 | Redcell Canada, Inc. | Cellular and serum protein anchors for modulating pharmacokinetics |
EP0553244B8 (en) | 1990-10-05 | 2005-06-08 | Celldex Therapeutics, Inc. | Targeted immunostimulation with bispecific reagents |
GB9021679D0 (en) | 1990-10-05 | 1990-11-21 | Gorman Scott David | Antibody preparation |
EP0557300B1 (en) | 1990-10-29 | 1997-11-19 | Chiron Corporation | Bispecific antibodies, method of production, and uses thereof |
DE69129154T2 (de) | 1990-12-03 | 1998-08-20 | Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. | Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften |
EP0575485A1 (en) | 1991-03-01 | 1993-12-29 | Dyax Corp. | Process for the development of binding mini-proteins |
ATE192302T1 (de) | 1991-03-21 | 2000-05-15 | Masimo Corp | Rauscharmer optischer wandler |
JP3672306B2 (ja) | 1991-04-10 | 2005-07-20 | ザ スクリップス リサーチ インスティテュート | ファージミドを使用するヘテロ二量体受容体ライブラリー |
US5573920A (en) | 1991-04-26 | 1996-11-12 | Surface Active Limited | Antibodies, and methods for their use |
AU675916B2 (en) | 1991-06-14 | 1997-02-27 | Genentech Inc. | Method for making humanized antibodies |
DE4122599C2 (de) | 1991-07-08 | 1993-11-11 | Deutsches Krebsforsch | Phagemid zum Screenen von Antikörpern |
US5728536A (en) | 1993-07-29 | 1998-03-17 | St. Jude Children's Research Hospital | Jak kinases and regulation of Cytokine signal transduction |
EP1306095A3 (en) | 1992-03-05 | 2003-06-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for targeting the vasculature of solid tumors |
US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
EP1621554B2 (en) | 1992-08-21 | 2012-08-29 | Vrije Universiteit Brussel | Immunoglobulins devoid of light chains |
EP0584421A1 (en) | 1992-08-21 | 1994-03-02 | Cécile Casterman | Immunoglobulins devoid of light chains |
ATE264388T1 (de) | 1992-09-24 | 2004-04-15 | Tanox Biosystems Inc | Umgestaltete monoklonale antikörper gegen ein immunglobulinisotyp |
CA2150574A1 (en) | 1993-01-06 | 1994-07-21 | Shalaby W. Shalaby | Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides |
GB9403857D0 (en) | 1994-03-01 | 1994-04-20 | Scotia Holdings Plc | Fatty acid derivatives |
ES2245780T3 (es) | 1994-05-18 | 2006-01-16 | Nektar Therapeutics | Metodos y composiciones para la formulacion de interferones como un polvo seco. |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
EP0739981A1 (en) | 1995-04-25 | 1996-10-30 | Vrije Universiteit Brussel | Variable fragments of immunoglobulins - use for therapeutic or veterinary purposes |
ATE390933T1 (de) | 1995-04-27 | 2008-04-15 | Amgen Fremont Inc | Aus immunisierten xenomäusen stammende menschliche antikörper gegen il-8 |
AU2466895A (en) | 1995-04-28 | 1996-11-18 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
GB2302024B (en) | 1995-06-09 | 1998-10-07 | Malix Polymer Engineering Limi | Obstetric vacuum extractor |
AU716785B2 (en) | 1995-07-27 | 2000-03-09 | Genentech Inc. | Stabile isotonic lyophilized protein formulation |
US5697151A (en) | 1995-08-07 | 1997-12-16 | General Electric Company | Method for repairing partitions of a turbine diaphragm |
CA2229043C (en) | 1995-08-18 | 2016-06-07 | Morphosys Gesellschaft Fur Proteinoptimierung Mbh | Protein/(poly)peptide libraries |
US7368111B2 (en) | 1995-10-06 | 2008-05-06 | Cambridge Antibody Technology Limited | Human antibodies specific for TGFβ2 |
BRPI9715219B8 (pt) | 1996-02-09 | 2015-07-07 | Abbvie Biotechnology Ltd | Vetor recombinante de expressão, e célula hospedeira procariótica. |
US6417337B1 (en) | 1996-10-31 | 2002-07-09 | The Dow Chemical Company | High affinity humanized anti-CEA monoclonal antibodies |
AU5702298A (en) | 1996-12-03 | 1998-06-29 | Abgenix, Inc. | Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and VK regions nd antibodies produced therefrom |
DE69833755T2 (de) | 1997-05-21 | 2006-12-28 | Biovation Ltd. | Verfahren zur herstellung von nicht-immunogenen proteinen |
US5994511A (en) | 1997-07-02 | 1999-11-30 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides |
US6350860B1 (en) | 1997-08-18 | 2002-02-26 | Innogenetics N.V. | Interferon-gamma-binding molecules for treating septic shock, cachexia, immune diseases and skin disorders |
EP1027439B1 (en) | 1997-10-27 | 2010-03-17 | Bac Ip B.V. | Multivalent antigen-binding proteins |
EP0954978B1 (en) | 1998-03-12 | 2011-11-30 | VHsquared Limited | New products comprising inactivated yeasts or moulds provided with active antibodies |
HUP9900956A2 (hu) | 1998-04-09 | 2002-04-29 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh. | Egyláncú, több antigéntkötőhely kialakítására képes molekulák, előállításuk és alkalmazásuk |
WO1999064069A1 (en) | 1998-06-10 | 1999-12-16 | Ophidian Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies to cytokines in the prevention and treatment of inflammatory bowel disease |
EP1002861A1 (en) | 1998-10-26 | 2000-05-24 | Unilever Plc | Antigen-binding proteins comprising a linker which confers restricted conformational flexibility |
IL127127A0 (en) | 1998-11-18 | 1999-09-22 | Peptor Ltd | Small functional units of antibody heavy chain variable regions |
CN1202128C (zh) | 1998-12-08 | 2005-05-18 | 拜奥威神有限公司 | 修饰蛋白的免疫原性 |
US6897044B1 (en) | 1999-01-28 | 2005-05-24 | Biogen Idec, Inc. | Production of tetravalent antibodies |
US6419934B1 (en) | 1999-02-24 | 2002-07-16 | Edward L. Tobinick | TNF modulators for treating neurological disorders associated with viral infection |
CA2796140A1 (en) | 1999-03-25 | 2000-09-28 | Jochen Salfeld | Human antibodies that bind human il-12 and methods for producing |
ATE400296T1 (de) | 1999-12-02 | 2008-07-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Zusammensetzungen und methoden zur stabilisierung von biologischen molekülen nach lyophilisierung |
EP1118669A3 (en) | 1999-12-17 | 2001-08-29 | Unilever Plc | Production of camelid antibodies in plants |
WO2001045746A2 (en) | 1999-12-24 | 2001-06-28 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for prolonging elimination half-times of bioactive compounds |
TWI335336B (ru) | 2000-02-10 | 2011-01-01 | Abbott Gmbh & Co Kg | |
US7097840B2 (en) | 2000-03-16 | 2006-08-29 | Genentech, Inc. | Methods of treatment using anti-ErbB antibody-maytansinoid conjugates |
CA2441903C (en) | 2000-05-26 | 2012-07-31 | National Research Council Of Canada | Single-domain brain-targeting antibody fragments derived from llama antibodies |
SE0002898L (sv) | 2000-08-14 | 2002-02-15 | Telia Ab | Kommunikationstjänst |
JP2004529610A (ja) | 2000-10-13 | 2004-09-30 | ユーエイビー リサーチ ファンデーション | ヒト抗上皮増殖因子受容体一本鎖抗体 |
JP2004529315A (ja) | 2000-11-03 | 2004-09-24 | ボード オブ リージェンツ, ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム | 抗癌処置の効力を検出するための方法 |
ES2368623T3 (es) | 2000-12-13 | 2011-11-18 | Bac Ip B.V. | Matrices de proteína de dominios variables de inmunoglobulina de cadena pesada de camilidae. |
GB0031448D0 (en) | 2000-12-22 | 2001-02-07 | Leuven K U Res & Dev | Inhibition of the vWF-collagen interaction by anti-human vWF monoclonal antibody (82D6A3) results in abolition of in vivo arterial platelet thrombus formation |
AU2002327164A1 (en) | 2001-01-29 | 2002-12-09 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Engineered tetravalent antibodies and methods of use |
CN1496250A (zh) | 2001-03-07 | 2004-05-12 | 宝洁公司 | 包括基于重氮盐的化妆品键合剂的局部组合物 |
PT1384075E (pt) | 2001-03-28 | 2010-03-23 | Heska Corp | Métodos de detecção de doença renal inicial em animais |
US20050271663A1 (en) | 2001-06-28 | 2005-12-08 | Domantis Limited | Compositions and methods for treating inflammatory disorders |
US20060073141A1 (en) | 2001-06-28 | 2006-04-06 | Domantis Limited | Compositions and methods for treating inflammatory disorders |
WO2003002609A2 (en) | 2001-06-28 | 2003-01-09 | Domantis Limited | Dual-specific ligand and its use |
US20030020733A1 (en) | 2001-07-24 | 2003-01-30 | Yin Memphis Zhihong | Computer display having selective area magnification |
CA2763913C (en) | 2001-08-10 | 2014-10-28 | Aberdeen University | Antigen binding domains |
DK1421213T3 (da) | 2001-08-29 | 2010-06-07 | Ge Healthcare Bio Sciences | Mærkede nukleosidpolyphosphater |
US7084257B2 (en) | 2001-10-05 | 2006-08-01 | Amgen Inc. | Fully human antibody Fab fragments with human interferon-gamma neutralizing activity |
US6723359B2 (en) | 2001-10-18 | 2004-04-20 | Firmenich Sa | Spray-dried compositions and method for their preparation |
JP2005289809A (ja) | 2001-10-24 | 2005-10-20 | Vlaams Interuniversitair Inst Voor Biotechnologie Vzw (Vib Vzw) | 突然変異重鎖抗体 |
AU2003210060B2 (en) | 2002-03-22 | 2010-02-25 | Aprogen, Inc. | Humanized antibody and process for preparing same |
CN1678634A (zh) | 2002-06-28 | 2005-10-05 | 多曼蒂斯有限公司 | 免疫球蛋白单个变体抗原结合区及其特异性构建体 |
AU2003248982B2 (en) | 2002-08-01 | 2009-12-10 | Immunomedics, Inc. | Alpha-fetoprotein immu31 antibodies and fusion proteins and methods of use thereof |
EP1558645B1 (en) | 2002-11-08 | 2011-07-27 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies in pharmaceutical composition adapted for inhalation |
US20100003253A1 (en) | 2002-11-08 | 2010-01-07 | Ablynx N.V. | Single domain antibodies directed against epidermal growth factor receptor and uses therefor |
US20060034833A1 (en) | 2002-11-08 | 2006-02-16 | Els Beirnaert | Single domain antibodies directed against interferron-gamma and uses therefor |
CA2505326A1 (en) | 2002-11-08 | 2004-05-21 | Ablynx N.V. | Camelidae antibodies against immunoglobulin e and use thereof for the treatment of allergic disorders |
PT2316852E (pt) | 2002-11-08 | 2014-06-23 | Ablynx Nv | Anticorpos de domínio único estáveis |
US20060034845A1 (en) | 2002-11-08 | 2006-02-16 | Karen Silence | Single domain antibodies directed against tumor necrosis factor alpha and uses therefor |
US8003117B2 (en) | 2002-11-20 | 2011-08-23 | Nof Corporation | Polyalkylene glycol derivative and modified bio-related substance |
WO2004060966A2 (en) | 2002-12-31 | 2004-07-22 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Maleamic acid polymer derivatives and their bioconjugates |
EP1578842B1 (en) | 2002-12-31 | 2009-10-07 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Hydrolytically stable maleimide-terminated polymers |
ES2315664T3 (es) | 2003-06-30 | 2009-04-01 | Domantis Limited | Anticuerpos de dominio unico (dab) pegilados. |
US7026432B2 (en) | 2003-08-12 | 2006-04-11 | General Electric Company | Electrically conductive compositions and method of manufacture thereof |
US7605120B2 (en) | 2003-10-22 | 2009-10-20 | Amgen Inc. | Antagonists of the brandykinin B1 receptor |
PT1678208E (pt) | 2003-10-27 | 2013-07-10 | Wyeth Llc | Remoção de agregados de elevado peso molecular utilizando cromatografia de hidroxiapatite |
ATE485307T1 (de) | 2003-11-07 | 2010-11-15 | Ablynx Nv | Camelidae schwere ketten antikörper vhhs gegen epidermalen wachstumfaktor rezeptor (egfr) und ihre verwendung |
US7785903B2 (en) | 2004-04-09 | 2010-08-31 | Genentech, Inc. | Variable domain library and uses |
EP1784427A2 (en) | 2004-06-01 | 2007-05-16 | Domantis Limited | Bispecific fusion antibodies with enhanced serum half-life |
CN102603895B (zh) | 2004-06-18 | 2016-09-28 | Ambrx公司 | 新颖抗原结合多肽和其用途 |
EP1814917A2 (en) | 2004-10-13 | 2007-08-08 | Ablynx N.V. | Single domain camelide anti-amyloid beta antibodies and polypeptides comprising the same for the treatment and diagnosis of degenerative neural diseases such as alzheimer's disease |
CN101133084A (zh) | 2004-12-02 | 2008-02-27 | 多曼蒂斯有限公司 | 采用白细胞介素-1ⅰ型受体拮抗剂治疗呼吸道疾病的方法 |
NZ560844A (en) | 2005-03-08 | 2008-08-29 | Pharmacia & Upjohn Co Llc | Anti-MAdCAM antibody compositions |
DK1869065T3 (da) | 2005-03-11 | 2020-06-08 | Wyeth Llc | Fremgangsmåde til kromatografi med svag opdeling |
DE102005023617A1 (de) * | 2005-05-21 | 2006-11-23 | Aspre Ag | Verfahren zum Mischen von Farben in einem Display |
EA201100177A1 (ru) | 2005-06-17 | 2011-06-30 | Элан Фарма Интернэшнл Лимитед | СПОСОБЫ ОЧИСТКИ АНТИТЕЛ К β-АМИЛОИДУ |
DE602006010072D1 (de) * | 2005-06-21 | 2009-12-10 | Chen Gang | Il-1 bindende antikörper und fragmente davon |
ES2390354T3 (es) * | 2005-07-22 | 2012-11-12 | Amgen, Inc | Liofilizados de proteínas concentrados, procedimientos y usos |
ES2626610T3 (es) * | 2005-08-30 | 2017-07-25 | Intrexon Actobiotics Nv | Bacterias de ácido láctico productoras del anti-TNF alfa para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal |
CN101389648B (zh) | 2006-02-22 | 2013-07-17 | 默沙东公司 | 肽胃泌酸调节素衍生物 |
WO2007104529A2 (en) | 2006-03-13 | 2007-09-20 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against il-6 and polypeptides comprising the same for the treatment of diseases and disorders associated with il-6-mediated signalling |
AU2007280929B2 (en) | 2006-07-26 | 2012-03-22 | Abbott Rapid Diagnostics International Unlimited Company | Analysis device for biological sample |
WO2008075356A2 (en) | 2006-12-19 | 2008-06-26 | Shay Bushinsky | Interactive broadcast system and method |
EP2101801A1 (en) * | 2006-12-20 | 2009-09-23 | Ablynx N.V. | Oral delivery of polypeptides |
EP2094306A2 (en) * | 2006-12-20 | 2009-09-02 | XOMA Technology Ltd. | Treatment of il-1-beta related diseases |
EP2129401B8 (en) * | 2006-12-21 | 2020-01-15 | Amgen Inc. | Stable buffered formulations containing polypeptides |
AU2007337983A1 (en) | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Ablynx N.V. | Anti-chemokine (CCL2, CCL3, CCL5, CXCL11, CXCL12) single-domain antibodies |
US7691980B2 (en) | 2007-01-09 | 2010-04-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Enhanced capacity and purification of antibodies by mixed mode chromatography in the presence of aqueous-soluble nonionic organic polymers |
BRPI0809112A2 (pt) * | 2007-03-22 | 2014-08-26 | Imclone Llc | Formulações estáveis de anticorpos |
US8359965B2 (en) | 2007-09-17 | 2013-01-29 | Oxford J Craig | Apparatus and method for broad spectrum radiation attenuation |
AU2008328785A1 (en) | 2007-11-27 | 2009-06-04 | Ablynx N.V. | Method for obtaining polypeptide constructs comprising two or more single domain antibodies |
JP5373823B2 (ja) | 2008-01-29 | 2013-12-18 | アブリンクス エン.ヴェー. | タンパク質及びポリペプチドを安定化する方法 |
LT3050576T (lt) | 2008-04-29 | 2021-07-12 | Ascendis Pharma Endocrinology Division A/S | Pegiliuoti rekombinantinio žmogaus augimo hormono junginiai |
EP2346900A1 (en) | 2008-10-29 | 2011-07-27 | Wyeth LLC | Methods for purification of single domain antigen binding molecules |
CN104740631B (zh) | 2008-10-29 | 2019-04-16 | 阿布林克斯公司 | 单域抗原结合性分子的制剂 |
EP2359852A4 (en) | 2008-11-17 | 2015-05-20 | Nat Cancer Ct | NEW CANCERED THERAPY WITH A SUBSTANCE COMPLEX SPECIFICALLY BINDING TO A TUMOR STREAM FACTOR AND ANTITUMIR COMPOUND |
WO2010060212A1 (en) | 2008-11-26 | 2010-06-03 | National Research Council Of Canada | Single-domain antibody targeted formulations with superparamagnetic nanoparticles |
US20110097302A1 (en) | 2009-07-16 | 2011-04-28 | Ta Tung Yuan | Il-1ra-polymer conjugates |
PL3438126T3 (pl) | 2009-09-03 | 2021-03-08 | Ablynx N.V. | Stabilne formulacje polipeptydów i ich zastosowanie |
CN108314733A (zh) | 2010-07-16 | 2018-07-24 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 修饰的单结构域抗原结合分子及其应用 |
CN102786590A (zh) | 2011-05-19 | 2012-11-21 | 江苏豪森药业股份有限公司 | 分枝型peg修饰的glp-1类似物及其可药用盐 |
CN106414100B (zh) | 2014-01-24 | 2020-11-13 | 塞拉洛克创新股份有限公司 | 使用水基油墨在板块表面上数字印刷 |
KR102578824B1 (ko) | 2016-11-30 | 2023-09-15 | 삼성전자주식회사 | 3차원 정보를 제공하는 차량용 레이더 장치 |
-
2009
- 2009-10-29 CN CN201510098158.1A patent/CN104740631B/zh active Active
- 2009-10-29 CA CA2738243A patent/CA2738243C/en active Active
- 2009-10-29 KR KR1020137022657A patent/KR101593285B1/ko active IP Right Grant
- 2009-10-29 BR BR122018013284-1A patent/BR122018013284B1/pt active IP Right Grant
- 2009-10-29 JP JP2011534779A patent/JP5823867B2/ja active Active
- 2009-10-29 BR BRPI0919979A patent/BRPI0919979A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2009-10-29 EP EP15189934.1A patent/EP3011953A1/en not_active Ceased
- 2009-10-29 WO PCT/US2009/062611 patent/WO2010077422A2/en active Application Filing
- 2009-10-29 AU AU2009333791A patent/AU2009333791B2/en not_active Ceased
- 2009-10-29 US US12/608,553 patent/US9393304B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-10-29 RU RU2011113438/10A patent/RU2481824C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-10-29 EP EP22174073.1A patent/EP4104821A1/en active Pending
- 2009-10-29 MX MX2011004557A patent/MX345226B/es active IP Right Grant
- 2009-10-29 KR KR1020117009665A patent/KR101581986B1/ko active IP Right Grant
- 2009-10-29 CN CN200980153163.0A patent/CN102271707B/zh active Active
- 2009-10-29 EP EP09748625.2A patent/EP2362767B1/en active Active
- 2009-10-29 AR ARP090104169A patent/AR073997A1/es not_active Application Discontinuation
-
2011
- 2011-03-24 IL IL211932A patent/IL211932A/en not_active IP Right Cessation
- 2011-12-19 HK HK15111290.7A patent/HK1210431A1/xx unknown
- 2011-12-19 HK HK11113681.4A patent/HK1160376A1/xx unknown
-
2013
- 2013-02-01 RU RU2013104181A patent/RU2683861C2/ru active
-
2014
- 2014-12-25 JP JP2014262998A patent/JP6421031B2/ja active Active
-
2015
- 2015-07-16 IL IL239992A patent/IL239992B/en active IP Right Grant
-
2016
- 2016-02-11 US US15/041,690 patent/US9993552B2/en active Active
-
2017
- 2017-02-01 JP JP2017017004A patent/JP2017105807A/ja active Pending
-
2018
- 2018-05-03 US US15/969,896 patent/US20180353604A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-11-22 US US17/531,916 patent/US20220175923A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2229288C2 (ru) * | 1995-07-27 | 2004-05-27 | Джинентех, Инк. | Стабильная изотоническая лиофилизированная протеиновая композиция |
RU2005134236A (ru) * | 2003-04-04 | 2006-06-10 | Дженентек, Инк. (Us) | Высококонцентрированные композиции антител и белков |
WO2006122786A2 (en) * | 2005-05-18 | 2006-11-23 | Ablynx Nv | Improved nanobodies™ against tumor necrosis factor-alpha |
WO2007095337A2 (en) * | 2006-02-15 | 2007-08-23 | Imclone Systems Incorporated | Antibody formulation |
WO2008071394A1 (en) * | 2006-12-11 | 2008-06-19 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Abeta antibody parenteral formulation |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
AKERS M.J., "Excipient-Drug Interactions in Parenteral Formulations", Journal of Pharmaceutical Sciences (2002); 91(11): 2283-2300. * |
CHEN B. et al., "Influence of Histidine on the Stability and Physical Properties of a Fully Human Antibody in Aqueous and Solid Forms", Pharmaceutical Research (2003); 20(12): 1952-1960. * |
CHEN B. et al., "Influence of Histidine on the Stability and Physical Properties of a Fully Human Antibody in Aqueous and Solid Forms", Pharmaceutical Research (2003); 20(12): 1952-1960. AKERS M.J., "Excipient-Drug Interactions in Parenteral Formulations", Journal of Pharmaceutical Sciences (2002); 91(11): 2283-2300. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2683861C2 (ru) | Препараты однодоменных антигенсвязывающих молекул | |
JP7404256B2 (ja) | 汎発性膿疱性乾癬の処置のための抗il-36r抗体の使用 | |
KR101994809B1 (ko) | 항체 제제 | |
TW201043263A (en) | Stable high protein concentration formulations of human anti-TNF-alpha-antibodies | |
TW201601756A (zh) | 抗體調配物 | |
JP7420827B2 (ja) | 抗il-36r抗体製剤 | |
US20200369760A1 (en) | Stabilized formulations containing anti-angptl3 antibodies | |
JP2022512704A (ja) | 抗rsv抗体の製剤及びその使用方法 | |
AU2013202856B2 (en) | Formulations of single domain antigen binding molecules | |
WO2021150829A1 (en) | Stable antibody formulation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HC9A | Changing information about inventors |