ES2572919T3 - Composición farmacéutica líquida - Google Patents

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    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Abstract

Una composición farmacéutica líquida que comprende: - adalimumab de 45 a 55 mg/ml; - histidina de 5 a 14 mM (o un sistema de tampón de histidina); - trehalosa de 190 a 210 mM; - cloruro de sodio de 40 a 60 mM; - agua (para inyección); en la que la composición: · tiene un pH entre 6,3 y 6,5; · no comprende arginina o comprende arginina en una concentración máxima de 0,001 mM; · no comprende aminoácidos distintos de la histidina o comprende uno o más aminoácidos distintos de la histidina en una concentración (colectiva) máxima de 0,001 mM; · no comprende tensioactivos o comprende uno o más tensioactivos en una concentración (colectiva) máxima de 0,0001 mM; y/o · no comprende agentes tamponantes de fosfato o comprende un sistema de tampón fosfato en una concentración máxima de 0,001 mM.

Description

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DESCRIPCION
Composicion farmaceutica Uquida Introduccion
La presente invencion se refiere a una nueva formulacion de protemas. En particular, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica lfquida de adalimumab, a un metodo para fabricar la composicion, a un kit que incluye la composicion, a un envase que incluye la composicion, a un metodo de fabricacion del envase, y a metodos de tratamiento que emplean la composicion y/o el envase.
Antecedentes
El tratamiento de enfermedades autoinmunologicas relacionadas con el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-a), tales como la artritis reumatoide, la psoriasis y otras enfermedades autoinmunologicas, se ha logrado empleando farmacos aprobados por la FDA, tal como adalimumab (HUMIRA®, Abbott Corporation). El adalimumab es un anticuerpo monoclonal humano que inhibe la actividad del TNF-a humano evitando que active los receptores de TNF y, con ello, infrarregula las respuestas inflamatorias asociadas con las enfermedades autoinmunologicas. Las indicaciones medicas aprobadas para el adalimumab incluyen la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave, y la artritis idiopatica juvenil.
El adalimumab en general se administra a un paciente a traves de una inyeccion subcutanea y, asf, se proporciona en forma lfquida, generalmente en envases tales como viales, jeringas precargadas o “dispositivos de pluma” precargados. Los dispositivos de pluma disponibles en el mercado (pluma HUMIRA®) incluyen en general una jeringa de vidrio precargada de 1 ml, precargada con 0,8 ml de una formulacion esteril de 40 mg de adalimumab (vease a continuacion), con una aguja fijada (de goma natural gris o la version sin latex) y una cubierta para la aguja. Las formulaciones comerciales (HUMIRA®) de adalimumab contienen los siguientes ingredientes:
Ingrediente
Cantidad por recipiente (mg) (volumen de carga = 0,8 ml) Cantidad (mg/ml)
Adalimumab
40 50
Acido cttrico monohidrato
1,04 1,3
Fosfato de sodio dibasico dihidrato
1,22 1,53
Manitol
9,6 12
Fosfato de sodio monobasico dihidrato
0,69 0,86
Polisorbato 80
0,8 1
Cloruro de sodio
4,93 6,16
Citrato de sodio
0,24 0,3
Agua para inyeccion e hidroxido de sodio
c.s. para ajustar el pH a 5,2 c.s. para ajustar el pH a 5,2
El adalimumab, y su metodo de fabricacion, se describe en el documento WO97/29131 (BASF) como D2E7, y en otras partes en la tecnica.
Aunque la formulacion comercial de adalimumab mencionada anteriormente es estable (al menos hasta cierto punto), el anticuerpo pertinente puede ser inestable en periodos de tiempo prolongados o bajo condiciones de estres, impidiendo la conservacion prolongada de dichas formulaciones. Esta degradacion de la formulacion puede ser debida a una diversidad de factores, que incluyen:
■ Efectos ffsicos, tales como:
- una inhibicion inadecuada de la agregacion de las moleculas de protema pertinentes (una funcion que supuestamente cumple el Tween-80);
- una inhibicion inadecuada de la precipitacion;
- una inhibicion inadecuada de la adsorcion de las moleculas de protema pertinentes en la interfase del agua y aire o en las superficies de contacto de cualquier material de envasado (una funcion que supuestamente cumple el Tween-
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- una regulacion inadecuada de la presion osmotica (una funcion que supuestamente cumple el manitol).
■ Efectos qmmicos, tales como:
- una regulacion inadecuada de la oxidacion (una funcion que supuestamente cumple el manitol y que puede ser potencialmente socavada por Tween-80, que puede estimular la oxidacion de los dobles enlaces);
- una inhibicion inadecuada de la fotooxidacion;
- una inhibicion inadecuada de la hidrolisis de los enlaces ester que conduce a la formacion de productos de acidos, aldehndos y peroxidos, afectando as^ a la estabilidad del anticuerpo;
- una estabilizacion y mantenimiento inadecuados del pH;
- una inhibicion inadecuada de la fragmentacion de las protemas;
- una inhibicion inadecuada del desplegamiento de las protemas.
Cualquiera, algunos o todos los anteriores factores pueden conducir a un producto de farmaco inviable (que puede no ser seguro para su uso en tratamientos medicos) o a un producto de farmaco cuya viabilidad es variable e impredecible, en especial a la vista de los distintos tipos de estres (agitacion, calor, luz) a los que pueden estar expuestos los diferentes lotes del producto de farmaco durante la fabricacion, el transporte y la conservacion.
En terminos de la estabilizacion ffsica y qmmica del adalimumab, el complejo conjunto de componentes dentro de las formulaciones comerciales mencionadas anteriormente parece que tiene una actuacion por debajo de las expectativas, en especial a la vista del gran numero de componentes. Aunque esta combinacion concreta de excipientes representa sin duda un “equilibrio delicado” (debido a la interaccion entre diversos factores tecnicos) y ha sido el resultado de intensas investigaciones y desarrollos, debido al riesgo aparente de mala actuacion resulta cuestionable que ese gran numero de excipiente diferentes este justificado, en especial debido a que esta situacion aumenta inevitablemente el procesamiento y el coste, los riesgos de toxicidad y los riesgos de interacciones perjudiciales entre los componentes, lo cual podna comprometer la formulacion. Incluso aunque la actuacion global de las formulaciones comerciales no pueda aumentarse, una formulacion alternativa que tuviera una actuacion comparable pero que contuviese menos componentes representana un sustituto altamente deseable para las formulaciones comerciales, por al menos las razones mencionadas.
Para garantizar una actuacion clmica reproducible de un producto farmaceutico basado en protemas, estos productos deben permanecer en una forma estable y constante a lo largo del tiempo. Se sabe que pueden producirse alteraciones moleculares durante cada etapa del proceso de fabricacion, que incluye durante la produccion de la formulacion final y durante la conservacion. Las alteraciones moleculares pueden modificar un atributo de calidad de un producto biofarmaceutico, dando como resultado un cambio no deseado en la identidad, la potencia o la pureza del producto. Algunos de estos problemas se han comentado anteriormente.
El principal objetivo del desarrollo de formulaciones es proporcionar una composicion farmaceutica que mantenga la estabilidad de una protema biofarmaceutica durante todas las etapas de su produccion, conservacion, transporte y uso. El desarrollo de formulaciones para una protema biofarmaceutica innovadora, o un anticuerpo monoclonal (mAb) biosimilar, resulta fundamental para su seguridad, eficacia clmica y exito comercial.
Por tanto, son necesarias unas formulaciones lfquidas de adalimumab alternativas o mejoradas. De modo deseable, cualquier formulacion nueva debena resolver al menos uno de los problemas mencionados anteriormente y/o al menos un problema inherente en la tecnica anterior, y de modo adecuado debena resolver dos o mas de dichos problemas. De modo deseable, el problema o problemas de la tecnica anterior pueden resolverse al mismo tiempo que se reduce la complejidad de la formulacion.
El documento WO 2001/104381 (Novo Nordisk) se refiere a composiciones lfquidas estables de baja viscosidad que contienen protemas, en particular, pero no exclusivamente anticuerpos estables, y al uso de dichas composiciones en terapia.
El documento WO 2014/039903 (Coherus Biosciences Inc.) describe composiciones farmaceuticas acuosas adecuadas para la conservacion a largo plazo del adalimumab.
El documento WO 2013/186230 (Boehringer Ingelheim) se refiere a formulaciones farmaceuticas para un anticuerpo terapeutico.
Sumario de la invencion
Segun un primer aspecto de la presente invencion, se proporciona una composicion farmaceutica lfquida segun se define en las reivindicaciones adjuntas.
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En la presente tambien se describe un envase (por ejemplo, una jeringa precargada, una pluma, una bolsa intravenosa o un envase/recipiente que contenga cualquiera de los anteriores) que comprende una composicion farmaceutica Uquida segun se define en la presente.
Segun otro aspecto de la presente invencion, se proporciona un dispositivo de transporte de farmaco (por ejemplo, una jeringa precargada, una pluma, o una bolsa intravenosa) que comprende una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente.
En la presente tambien se describe un kit de partes que comprende un dispositivo de transporte de farmacos, una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente (opcionalmente contenida en un envase o recipiente), y opcionalmente un conjunto de instrucciones con indicaciones referidas a la administracion (por ejemplo, subcutanea) de la composicion farmaceutica lfquida.
En la presente tambien se describe un metodo para fabricar una composicion farmaceutica lfquida, comprendiendo dicho metodo mezclar juntos adalimumab; un agente tamponante de histidina (o un sistema de tampon de histidina); un estabilizante de azucar; y opcionalmente cualquiera o mas de un componente adicional definido en la presente con relacion a una composicion farmaceutica lfquida, opcionalmente en cualquier cantidad, concentracion o forma estipulada; y opcionalmente ajustar cualquiera de uno o mas parametros indicados en la presente con relacion a una composicion farmaceutica lfquida (por ejemplo, pH, osmolalidad).
En la presente tambien se describe una composicion farmaceutica lfquida que puede obtenerse, que se obtiene a traves o que se obtiene directamente de un metodo de fabricacion de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente.
En la presente tambien se define un metodo de fabricacion de un envase o un dispositivo de transporte de farmacos, comprendiendo dicho metodo incorporar una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente, dentro de un envase o de un dispositivo de transporte de farmacos.
En la presente tambien se describe un envase o un dispositivo de transporte de farmacos que puede obtenerse, que se obtiene a traves o que se obtiene directamente de un metodo de fabricacion de un envase o un dispositivo de transporte de farmacos segun se define en la presente.
En la presente tambien se describe un metodo para tratar una enfermedad o un trastorno medico en un paciente que necesite dicho tratamiento, comprendiendo dicho metodo administrar a dicho paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente.
En la presente tambien se describe una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente para su uso en terapia.
En la presente tambien se describe un uso de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o un trastorno.
En la presente tambien se describe un metodo para tratar una enfermedad autoinmunologica relacionada con el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-a) en un paciente que necesite dicho tratamiento, comprendiendo dicho metodo administrar a dicho paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente.
En la presente tambien se describe una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente para su uso en el tratamiento de una enfermedad autoinmunologica relacionada con el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF- a).
En la presente tambien se describe un uso de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad autoinmunologica relacionada con el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-a).
En la presente tambien se describe un metodo para tratar la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil en un paciente que necesite dicho tratamiento, comprendiendo dicho metodo administrar a dicho paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente.
Segun otro aspecto de la presente invencion, se proporciona una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente para su uso en el tratamiento de la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil.
En la presente tambien se describe un uso de una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la
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espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil.
Cualquier caractenstica, incluyendo las caractensticas opcionales, adecuadas y preferidas, descrita en relacion con cualquier aspecto concreto de la invencion tambien puede ser una caractenstica, incluyendo las caractensticas opcionales, adecuadas y preferidas, de cualquier otro aspecto de la presente invencion.
Breve descripcion de los dibujos
Para comprender mejor la invencion y para demostrar la forma en que se realizan sus realizaciones, a continuacion se remite, a modo de ejemplo, a los siguientes diagramas, en los que:
La figura 1 es un diagrama de barras que muestra el contenido en protemas (mg/ml), determinado mediante OD, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 4 semanas (barras rojas) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 2 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras verdes) y 4 semanas (barras naranjas) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 3 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rosas) y 4 semanas (barras azul claro) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 4 es un diagrama de barras que muestra la temperatura de desplegamiento (°C), determinada mediante DSF, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas).
La figura 5 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras rojas, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras verdes) y 4 semanas (barras moradas) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 6 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 7 es un diagrama de barras que muestra el perfil de isoformas del pico principal, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 8 es un diagrama de barras que muestra el perfil de las isoformas del pico o picos de la agrupacion acida, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 9 es un diagrama de barras que muestra la turbidez, determinada mediante nefelometna, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 10 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 24 horas (barras rojas) y 48 horas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han agitado de modo mecanico.
La figura 11 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 24 horas (barras rojas) y 48 horas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han agitado de modo mecanico.
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La figura 12 es un diagrama de barras que muestra la turbidez, determinada mediante nefelometna, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 24 horas (barras rojas) y 48 horas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han agitado de modo mecanico.
La figura 13 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
La figura 14 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
La figura 15 es un diagrama de barras que muestra el perfil de isoformas del pico principal, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
La figura 16 es un diagrama de barras que muestra el perfil de las isoformas del pico o picos de la agrupacion acida, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
La figura 17 es un diagrama de barras que muestra la turbidez, determinada mediante nefelometna, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
La figura 18 es un diagrama de barras que muestra el perfil de isoformas del pico principal, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (FT) (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 19 es un diagrama de barras que muestra el perfil de las isoformas del pico o picos de la agrupacion acida, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 20 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 21 es un diagrama de barras que muestra la concentracion del numero (n.°/mg) de partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 10 micrometros, segun se determina mediante un analisis de recuento de partfculas subvisibles, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 22 es un diagrama de barras que muestra la concentracion del numero (n.°/mg) de partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 25 micrometros, segun se determina mediante un analisis de recuento de partfculas subvisibles, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
Descripcion detallada de la invencion
Definiciones
A menos que se indique lo contrario, los siguientes terminos empleados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones tienen los siguientes significados.
En la presente, la referencia a “adalimumab” incluye la sustancia farmaco del originador (segun esta disponible en el mercado), el adalimumab definido en el documento WO97/29131 (BASF) (en particular D2E7) y en otras partes de la tecnica, y tambien los biosimilares a el. El D2E7 del documento WO97/29131 “tiene un dominio CDR3 de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:3, y un dominio CDR3 de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:4”. Preferiblemente, el anticuerpo D2E7 tiene una region variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:1, y una region variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:2. El documento WO97/29131 incluye detalles de cada uno de estos listados de secuencias. La referencia en la presente al “adalimumab” puede incluir biosimilares que, por ejemplo, comparten al menos 75%, de modo adecuado al menos 80%, de modo adecuado al menos 85%, de modo adecuado al menos 90%, de modo adecuado al menos 95%, de
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modo adecuado al menos 96%, de modo adecuado al menos 97%, de modo adecuado al menos 98% o lo mas adecuado al menos 99% de identidad de secuencia de protemas con cualquiera de las secuencias de protemas descritas en el documento WO97/29131 (en especial con relacion a D2E7) o en otras partes con relacion al “adalimumab”. Como alternativa o ademas, la referencia en la presente al “adalimumab” puede incluir biosimilares que muestran al menos 75%, de modo adecuado al menos 80%, de modo adecuado al menos 85%, de modo adecuado al menos 90%, de modo adecuado al menos 95%, de modo adecuado al menos 96%, de modo adecuado al menos 97%, de modo adecuado al menos 98%, o del modo mas adecuado al menos 99% de homologfa de secuencia de protemas con cualquiera de las secuencias de protemas descritas en el documento WO97/29131 (en especial con relacion a D2E7) o en otras partes con relacion al “adalimumab”. Como alternativa o ademas, un biosimilar puede tener un perfil de glicosilacion (ligeramente) diferente, aunque la secuencia de protema sea sustancialmente la misma o sea diferente en el grado especificado anteriormente.
El termino “biosimilar” (tambien conocido como sustancia biologica de desarrollo) es muy conocido en la tecnica, y los expertos en la tecnica sabran con facilidad cuando una sustancia farmaco se considera un biosimilar del adalimumab. Ademas, estos “biosimilares” deben ser oficialmente aprobados como “biosimilar” antes de comercializar dicho “biosimilar” en el mercado. El termino “biosimilar” se emplea en general para describir versiones posteriores (en general procedentes de una fuente diferente) de “productos biofarmaceuticos innovadores” (“productos biologicos”, cuya sustancia farmaco esta fabricada por un organismo vivo o se obtiene de un organismo vivo o mediante metodologfas de ADN recombinante o de expresion de genes controlada) cuya autorizacion de comercializacion ha sido previamente concedida de modo oficial. Puesto que los productos biologicos tienen un alto grado de complejidad molecular y, en general, son sensibles a los cambios en los procesos de fabricacion (por ejemplo, si se emplean distintas lmeas celulares para su produccion), y puesto que los posteriores fabricantes desarrolladores en general no tienen acceso al clon molecular de originador, al banco de celulas, al conocimiento con relacion al proceso de fermentacion y purificacion ni a la propia sustancia farmaco activa (solo al producto de farmaco comercializado por el innovador), es probable que cualquier “biosimilar” no sea exactamente el mismo que el producto de farmaco del innovador.
Para los fines de diversos calculos molares (por ejemplo, para las proporciones molares entre el adalimumab y otro componente de la composicion farmaceutica ftquida de la invencion), se puede considerar que el peso molecular del adalimumab es de 144190,3 g/ml (peso molecular de referencia), basandose en los detalles descritos en la base de datos CAS para CAS n.° 331731-18-1, adalimumab, en el que se considera que la formula molecular es C6428H9912N1694O1987S46. Como tal, puede considerarse que una composicion farmaceutica ftquida que contenga adalimumab 50 mg/ml sea una disolucion de adalimumab 0,347 mM (o 347 |iM). No se pretende de ninguna forma limitar la naturaleza de cualquiera de los biosimilares del adalimumab incluidos en el alcance de la presente invencion, ni el nivel de glicosilacion, cualquiera de los cuales puede afectar al peso molecular real. Sin embargo, cuando un biosimilar sf tiene un peso molecular diferente, el peso molecular de referencia mencionado anteriormente puede utilizarse de modo adecuado para evaluar si este biosimilar se encuentra o no dentro del alcance de cualquiera de las definiciones molares estipuladas en esta memoria descriptiva. Asf, debe calcularse el numero de moles en un peso conocido de dicho biosimilar, solo para los fines de esta invencion, empleando el peso molecular de referencia anterior.
En la presente, el termino “tampon” o la expresion “disolucion tampon” se refiere a una disolucion en general acuosa que comprende una mezcla de un acido (habitualmente un acido debil, por ejemplo, acido acetico, acido cftrico, una forma de imidazolio de la histidina) y su base conjugada (por ejemplo, una sal acetato o citrato, por ejemplo, acetato de sodio, citrato de sodio o histidina) o, como alternativa, una mezcla de una base (habitualmente una base debil, por ejemplo, histidina) y su acido conjugado (por ejemplo, sal de histidina protonada). El pH de una “disolucion tampon” cambia solo ligeramente despues de la adicion de una pequena cantidad de una base o acido fuerte, debido al “efecto tamponante” impartido por el “agente tamponante”.
En la presente, un “sistema de tampon” comprende uno o mas agentes tamponantes y/o uno de sus conjugados de acido/base, y de modo mas adecuado comprende uno o mas agentes tamponantes y/o uno de sus conjugados de acido/base, y del modo mas adecuado comprende solo un agente tamponante y/o uno de sus conjugados de acido/base. A menos que se indique lo contrario, cualquier concentracion estipulada en la presente con relacion a un “sistema de tampon” (es decir, una concentracion de tampon) se refiere, de modo adecuado, a la concentracion combinada del agente o agentes tamponantes y/o su conjugado o conjugados de acido/base. En otras palabras, las concentraciones estipuladas en la presente con relacion a un “sistema de tampon” se refieren, de modo adecuado, a la concentracion combinada de todas las especies tamponantes pertinentes (es decir, las especies en equilibrio dinamico entre sf, por ejemplo, citrato/acido cftrico). Como tal, una concentracion concreta de un sistema de tampon de histidina en general se refiere a la concentracion combinada de histidina y la forma de imidazolio de la histidina. Sin embargo, en el caso de la histidina, estas concentraciones habitualmente son faciles de calcular, remitiendose a las cantidades de entrada de la histidina o su sal. El pH global de la composicion que comprende el sistema de tampon pertinente en general es un reflejo de la concentracion de equilibrio de cada una de las especies tamponantes pertinentes (es decir, el equilibrio del agente o agentes tamponantes a su conjugado o conjugados de acido/base).
En la presente, la expresion “agente tamponante” se refiere a un componente de acido o de base (habitualmente un
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acido debil o una base debil) de un tampon o una disolucion tampon. Un agente tamponante ayuda a mantener el pH de una disolucion concreta en un valor predeterminado, o cercano a este, y los agentes tamponantes en general se eligen para complementar el valor predeterminado. Un agente tamponante es, de forma adecuada, un unico compuesto que genera un efecto tamponante deseado, en especial cuando dicho agente tamponante se mezcla (y, de forma adecuada, es capaz de realizar un intercambio de protones) con una cantidad apropiada (que depende del pH predeterminado deseado) de su correspondiente "conjugado de acido/base”, o la cantidad requerida de su correspondiente "conjugado de acido/base” formada in situ (esto se puede lograr anadiendo un acido o una base fuerte hasta que se alcanza el pH requerido). Como ejemplo:
- Un "agente tamponante” de histidina es la histidina en forma de aminoacido libre. Puesto que los aminoacidos, tal como la histidina, son anfoteros y, por tanto, son capaces de comportarse como un acido y una base, el "agente tamponante” es simplemente el propio compuesto anfotero (de manera adecuada, en forma bipolar). Sin embargo, un sistema de tampon o una disolucion tampon de histidina puede comprender opcionalmente, ademas de la histidina, una cantidad de un acido (de forma adecuada un acido fuerte, tal como acido clorhidrico) o una base (de forma adecuada una base fuerte, tal como hidroxido de sodio) hasta que se alcanza el pH deseado. Como tal, una parte de la histidina presente puede mostrar un estado de protonacion diferente que el aminoacido bipolar. En la presente, a menos que se indique lo contrario, cualquier concentration indicada con relation a un sistema de tampon de histidina se refiere, de modo adecuado, a la concentracion combinada del agente tamponante (por ejemplo, histidina) y/o su conjugado o conjugados de acido/base (por ejemplo, la forma de imidazolio de la histidina). Los expertos en la tecnica podran calcular con facilidad esta concentracion, y pueden hacerlo remitiendose simplemente a las cantidades de entrada de la histidina o su conjugado de acido/base (por ejemplo, hidrocloruro de histidina). Estas concentraciones pueden calcularse remitiendose a las concentraciones combinadas de agente o agentes tamponantes y conjugado o conjugados de acido/base, cuando se forma un sistema de tampon simplemente mezclando un agente o agentes tamponantes y un conjugado o conjugados de acido/base. Como alternativa, cuando un sistema de tampon se forma mezclando el agente o agentes tamponantes o un conjugado o conjugados de acido/base con un ajustador de pH (por ejemplo, un acido fuerte o una base fuerte) para producir una mezcla de cada, estas concentraciones pueden calcularse, de modo adecuado, remitiendose a las cantidades/concentraciones de partida del agente o agentes tamponantes o del conjugado o conjugados de acido/base, respectivamente. Por ejemplo, cuando un sistema de tampon se forma utilizando una cantidad/concentracion conocida de histidina que se mezcla con un ajustador de pH (por ejemplo, hidroxido de sodio) hasta que se alcanza el pH deseado, la concentracion del sistema de tampon puede calcularse remitiendose a la cantidad inicial de histidina. De modo similar, esto mismo se aplica cuando un sistema de tampon se forma empleando una cantidad/concentracion conocida de la sal imidazolio de histidina (por ejemplo, hidrocloruro de histidina) mezclada con un ajustador de pH (por ejemplo, hidroxido de sodio) hasta que se alcanza el pH deseado (en este caso la concentracion del sistema de tampon puede calcularse remitiendose a la cantidad inicial de sal imidazolio de histidina).
En la presente, un "conjugado de acido/base” se refiere al acido conjugado o a la base conjugada (lo que sea pertinente a un pH concreto, generalmente el acido conjugado en el contexto de la presente invention) de un "agente tamponante” concreto. El conjugado de acido/base de un agente tamponante de histidina (por ejemplo, histidina es, de modo adecuado, la forma de imidazolio de la histidina, de modo adecuado una sal imidazolio de histidina. La forma de imidazolio de la histidina puede denominarse en la presente "imidazolio-histidina”, y tiene la estructura:
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Una sal imidazolio de la histidina puede denominarse sal de imidazolio-histidina, y tiene fundamentalmente la misma estructura que la mostrada anteriormente, excepto por un contraion asociado.
En la presente, la expresion "especie tamponante” se refiere a la especie concreta (excluyendo cualquier contraanion o contracation asociado, es decir, no se toman en cuenta los contraiones cloruro o hidroxido para los sistema de histidina/imidazolio-histidina) de un sistema de tampon concreto que estan en equilibrio dinamico entre si (e intercambian protones entre si). Por ejemplo, la histidina e imidazolio-histidina juntos pueden constituir la "especie tamponante de histidina” de un "sistema de tampon de histidina”.
Puesto que a veces es dificil definir cantidades (absolutas o relativas) de un sistema de tampon remitiendose al peso (puesto que el peso total depende del pH deseado, que afecta a la cantidad de contraiones presentes), en la
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presente las cantidades basadas en el peso pueden determinar remitiendose a un peso teorico de la “especie tamponante” pertinente. En general estan presentes al menos dos especies en cualquier conjunto concreto de “especies tamponantes” (en cantidad relativas que solo pueden ser determinadas remitiendose al pH), cada una con un peso molecular diferente (que habitualmente se diferencia solo en 1). Por tanto, para poder obtener referencias y calculos del peso viables, para los fines de esta memoria descriptiva, el peso de cualquier conjunto concreto de “especies tamponantes” se indica como un valor teorico basado solo en una de las especies tamponantes, concretamente la especie tamponante mas basica (es decir, la forma menos protonada en cualquier pH concreto). Asf, el peso de un conjunto concreto de “especies tamponantes” se indica como el peso de los equivalentes de la especie basica. Como ejemplo, en un sistema de tampon de histidina, la especie tamponante de histidina puede consistir en histidina y cationes de imidazolio-histidina. El peso de la “especie tamponante” se calcula, por tanto, como si la histidina fuera la unica especie presente en el sistema de tampon (aunque tambien este presente el imidazolio-histidina, junto con la histidina). Asf, cualquier referencia a un peso o a una proporcion de peso que incluya a una “especie tamponante de histidina” se refiere, de modo adecuado, al peso teorico de los equivalentes de histidina dentro del sistema de tampon. Asf, cuando una composicion se forma anadiendo un ajustador de pH (por ejemplo, hidroxido de sodio) a una cantidad fijada de imidazolio-histidina, o a una cantidad fijada de histidina (que, de manera adecuada, puede formar alguna cantidad de imidazolio-histidina tras la disolucion en el diluyente), el peso original de la histidina puede considerarse como el peso de la “especie tamponante”, independientemente del pH final. Como alternativa, si se conoce la concentracion (es decir, la molaridad) de un sistema de tampon, esta puede convertirse en el peso de la “especie tamponante” remitiendose al peso molecular de la forma mas basica de la especie tamponante pertinente (por ejemplo, histidina), y no tomando en cuenta el hecho de que tambien estan presentes cationes imidazolio-histidina.
A menos que se indique lo contrario, las referencias en la presente a un “aminoacido” o “aminoacidos”, tanto de modo espedfico (por ejemplo, arginina, histidina) o general (por ejemplo, cualquier aminoacido), en el contexto de su presencia o de otra forma dentro de composiciones (en especial, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion), se refieren al correspondiente aminoacido libre (independientemente de su estado de protonacion y/o forma salina, aunque, por coherencia, las cantidades se calculan de modo adecuado remitiendose al aminoacido libre per se). Esto puede incluir, de modo adecuado, aminoacidos naturales y/o artificiales. A menos que se indique lo contrario, estas referencias no pretenden referirse al resto o restos aminoacidos incorporados covalentemente como parte de un compuesto mayor (en oposicion a una composicion que comprende multiples compuestos), tal como un peptido o una protema (en los que dichos restos aminoacidos estan unidos a traves de enlaces peptfdicos). Asf, aunque el adalimumab, siendo una protema, contiene restos aminoacidos, no se considera que comprenda ningun “aminoacido libre”. Como ejemplo, una composicion que se define como “sin arginina” no contiene arginina libre, pero sf puede incluir una o mas protemas (por ejemplo, adalimumab) que en sf mismas sf comprenden restos arginina.
A menos que se indique lo contrario, las referencias en la presente a uno cualquiera o mas “aminoacidos”, tanto de modo espedfico como general, se refieren de modo adecuado a los L-estereoisomeros o a sus racematos, de modo mas adecuado a L-aminoacidos.
La expresion “sustancialmente exento”, cuando se emplea con relacion a un componente concreto de una composicion (por ejemplo, “una composicion farmaceutica lfquida sustancialmente exenta de arginina”), se refiere a una composicion a la cual no se ha anadido fundamentalmente ninguna cantidad de dicho componentes. Tal como se explico anteriormente, esta referencia no tiene relacion con la presencia de un resto o restos aminoacidos dentro de la estructura de una protema. Cuando una composicion esta “sustancialmente exenta” de un componente concreto, dicha composicion comprende de modo adecuado no mas del 0,001% en peso de dicho componente, de modo adecuado no mas del 0,0001% en peso de dicho componente, de modo adecuado no mas del 0,00001% en peso de dicho componente, de modo adecuado no mas del 0,000001% en peso de dicho componente, de modo adecuado no mas del 0,0000001% en peso de dicho componente, del modo mas adecuado no mas del 0,0001 partes por mil millones (en peso).
La expresion “totalmente exento”, cuando se emplea con relacion a un componente concreto de una composicion (por ejemplo, “una composicion farmaceutica lfquida sustancialmente exenta de arginina”), se refiere a una composicion que no contiene dicho componente. Tal como explico anteriormente, esta referencia no tiene relacion con la presencia de un resto o restos aminoacidos dentro de la estructura de una protema.
En la presente, en el contexto de la presente memoria descriptiva, un “acido fuerte” es, de forma adecuada, un acido que tiene un pKa de -1,0 o menor, mientras que un “acido debil” es, de forma adecuada, un acido que tiene un pKa de 2,0 o mayor. En la presente, en el contexto de la presente memoria descriptiva, una “base fuerte” es, de forma adecuada, una base cuyo acido conjugado tiene un pKa de 12 o mayor (de modo adecuado, 14 o mayor), mientras que una “base debil” es, de forma adecuada, una base cuyo acido conjugado tiene un pKa de 10 o menor.
En la presente, un “estabilizante” se refiere a un componente que facilita el mantenimiento de la integridad estructural del farmaco biofarmaceutico, en particular durante la congelacion y/o la liofilizacion y/o la conservacion (en especial cuando se expone a un estres). Este efecto estabilizante puede surgir por una diversidad de razones, aunque generalmente dichas estabilizantes pueden actuar como osmolitos que mitigan la desnaturalizacion de las protemas. Los estabilizantes tfpicos incluyen aminoacidos (por ejemplo, aminoacidos libres que no son parte de un
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peptido o de una protema, por ejemplo, glicina, arginina, histidina, acido aspartico, lisina) y estabilizantes de azucar, tal como un poliol de azucar (por ejemplo, manitol, sorbitol) y/o un disacarido (por ejemplo, trehalosa, sacarosa, maltosa, lactosa), aunque las composiciones farmaceuticas Kquidas de la invencion incluyen un estabilizante, y al menos uno de los cuales es un estabilizante de azucar (es decir, un poliol de azucar o un disacarido). De forma mas adecuada, dicho al menos un estabilizante de azucar es un azucar no reductor (tanto si es un poliol de azucar como si es un disacarido).
En la presente, un “azucar no reductor” es, en general, un azucar sin restos aldehudo o sin la capacidad de formar un resto aldehudo (por ejemplo, mediante isomena).
En la presente, un “modificador de la tonicidad” o “tonificante” se refiere a un reactivo cuya inclusion dentro de una composicion contribuye de forma adecuada (o aumenta) la osmolaridad y la osmolalidad global de la composicion. De forma adecuada, un tonificante, tal como se emplea en la presente, incluye un agente que actua para hacer que una disolucion tenga caractensticas osmoticas similares a los fluidos fisiologicos.
En la presente, las referencias a cantidades espedficas de un componente concreto de una composicion, en especial un agente tamponante, un estabilizante, un aminoacido, un tensioactivo, o un tonificante, se refieren, de modo adecuado, a las cantidades de la forma anhidra pura del componente pertinente (o las composiciones formadas empleando dichas cantidades de la forma anhidra pura), aunque dicho componente puede utilizarse en una forma no anhidra cuando se forma la composicion. Las cantidades de cualquiera de las correspondientes formas no anhidras (por ejemplo, monohidratos, dihidratos, etc.) pueden calcularse con facilidad simplemente empleando el multiplicador apropiado. Por ejemplo, a menos que se indique lo contrario (como en los ejemplos, en los que las cantidades se refieren a la trehalosa dihidrato), las cantidades estipuladas con relacion a la trehalosa se refieren a la forma anhidra de la trehalosa (o las composiciones formadas empleando las cantidades/concentraciones estipuladas de la trehalosa anhidra), que tiene un peso molecular de 342,206 g/mol, y para calcular la correspondiente cantidad de trehalosa dihidrato necesaria para formar la misma composicion (habna que anadir menos agua), es necesario multiplicar la cantidad estipulada por 378,33/342,296, puesto que el peso molecular de la trehalosa dihidrato es 378,33. Los expertos en la tecnica comprenderan con facilidad como ajustar juiciosamente la cantidad de diluyente/agua, dependiendo de la forma de los componentes utilizados para obtener las concentraciones diana.
En la presente, la expresion “composicion farmaceutica” se refiere a una formulacion de un principio activo farmaceutico que hace que la actividad biologica del ingrediente activo sea terapeuticamente eficaz, pero no incluye otros ingredientes que sean obviamente toxicos para un sujeto al cual se tiene previsto administrar la formulacion.
En la presente, el termino “estable” en general se refiere a la estabilidad ffsica y/o la estabilidad qrnmica y/o la estabilidad biologica de un componente, generalmente un principio activo o una composicion de este, durante la conservacion/almacenamiento.
Se apreciara que las referencias a “tratar” o “tratamiento” incluyen la profilaxis, asf como el alivio de smtomas establecidos de un trastorno. Por tanto, “tratar” o “tratamiento” de un estado, trastorno o afeccion incluye: (1) prevenir o retrasar la aparicion de smtomas clmicos del estado, trastorno o afeccion que se desarrollan en un ser humano que puede padecer o esta predispuesto a ese estado, trastorno o afeccion, pero que aun no sufre ni muestra smtomas clmicos o subclmicos del estado, trastorno o afeccion, (2) inhibir el estado, trastorno o afeccion, es decir, detener, reducir o retrasar el desarrollo de la enfermedad o una recafda de la misma (en el caso de un tratamiento de mantenimiento) o al menos uno de sus smtomas clmicos o subclmicos, o (3) aliviar o atenuar la enfermedad, es decir, provocar la regresion del estado, trastorno o afeccion o al menos uno de sus smtomas clmicos o subclmicos.
En el contexto de la presente invencion, una “cantidad terapeuticamente eficaz” o una “cantidad eficaz” del anticuerpo significa una cantidad que es eficaz, cuando se administra a un marnffero para tratar una enfermedad o un trastorno, en un aspecto profilactico y terapeutico, y el anticuerpo es eficaz para el tratamiento de las enfermedades implicadas.
La “cantidad terapeuticamente eficaz” puede variar dependiendo del compuesto, la enfermedad y su gravedad, y de la edad, peso, etc., del mamffero que se esta tratando.
La expresion “TNF-a humano” se refiere a la citoquina humana que existe en una forma segregada de 17 kD y una forma asociada a membranas de 26 kDa y, en una forma biologicamente activa, el TNF-a puede observarse como un tnmero de una molecula de 17 kD unida covalentemente. Su estructura espedfica puede encontrarse en Pennica, D. et al. (1984), Nature, 312:724-729; Davis, J. M. et al. (1987), Biochemistry, 26, 1322-1326; y Jones, E. Y. et al. (1989), Nature, 338:225- 228.
La expresion “anticuerpo recombinante humano” pretende incluir un anticuerpo humano preparado, expresado, producido o aislado utilizando un metodo recombinante.
En la presente, las cantidades estipuladas para los componentes e ingredientes, especificadas en terminos de “partes”, ppm (partes por millon), porcentajes (%, por ejemplo, % en peso) o proporciones, pretender ser en peso, a
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menos que se indique lo contrario.
Cuando la cantidad o la concentracion de un componente particular de una composicion concreta se especifica como un porcentaje en peso (% en peso o % en p/p), dicho porcentaje en peso se refiere al porcentaje de dicho componente en peso con relacion al peso total de la composicion como un todo. Los expertos en la tecnica entenderan que la suma de los porcentajes en peso de todos los componentes de una composicion (tanto si se espedfican como si no) sumaran un total del 100% en peso. Sin embargo, cuando no se listan todos los componentes (por ejemplo, cuando se dice que las composiciones “comprenden” uno o mas componentes particulares), el resto del porcentaje en peso opcionalmente puede llevarse al 100% en peso con ingredientes no especificados (por ejemplo, un diluyente, tal como agua, u otros aditivos adecuados aunque no fundamentales).
En la presente, a menos que se indique lo contrario, el termino “partes” (por ejemplo, partes en peso, pep), cuando se emplea con relacion a multiples ingredientes/componentes, se refiere a las proporciones relativas entre dichos multiples ingredientes/componentes. La expresion de las proporciones molares o en peso de dos, tres o mas componentes produce el mismo efecto (por ejemplo, una proporcion molar de x, y e z es xiiyiizi, respectivamente, o un intervalo xi-x^yi-yzziz). Aunque, en muchas realizaciones, las cantidades de los componentes individuales dentro de una composicion pueden indicarse como un valor de “% en peso”, en realizaciones alternativas, cualquiera o todos estos valores de porcentaje en peso pueden convertirse en partes en peso (o proporciones relativas) para definir una composicion de multiples componentes. Esto es asf debido a que las proporciones relativas entre los componentes a menudo son mas importantes que sus concentraciones absolutas en las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion. Cuando una composicion que comprende multiples ingredientes se describe en terminos de partes en peso solamente (es decir, para indicar solo las proporciones relativas de los ingredientes), no es necesario estipular las cantidades o concentraciones absolutas de dichos ingredientes (tanto in toto como individualmente), porque las ventajas de la invencion pueden surgir de las proporciones relativas de los respectivos ingredientes, y no de sus cantidades o concentraciones absolutas. Sin embargo, en ciertas realizaciones, estas composiciones consisten fundamentalmente o consisten en los ingredientes estipulados y un diluyente (por ejemplo, agua).
Cuando se dice que una composicion comprende una pluralidad de ingredientes estipulados (opcionalmente en cantidades estipuladas de concentraciones), dicha composicion puede incluir opcionalmente otros ingredientes ademas de los estipulados. Sin embargo, en ciertas realizaciones, una composicion que se dice que comprende una pluralidad de ingredientes estipulados puede, de hecho, consistir fundamentalmente o consistir en todos los ingredientes estipulados.
En la presente, cuando se dice que una composicion “consiste fundamentalmente” en un componente particular, dicha composicion comprende, de forma adecuada, al menos 70% en peso de dicho componente, de forma adecuada al menos 90% en peso de este, de forma adecuada al menos 95% en peso de este, de la forma mas adecuada al menos 99% en peso de este. De forma adecuada, una composicion que se dice que “consiste fundamentalmente” en un componente particular consiste en dicho componente, excepto por una o mas impurezas traza.
En la presente, la expresion “tamano de partfcula” o “tamano de poro” se refiere, respectivamente, a la longitud de la dimension mas larga de una partfcula o poro concreto. Ambos tamanos pueden medirse empleando un analizador del tamano de partfcula por laser y/o un microscopio electronico (por ejemplo, un microscopio electronico de efecto tunel, TEM, o un microscopio de barrido electronico, SEM). El recuento de las partfculas (para cualquier tamano concreto) puede obtenerse empleando los protocolos y el equipo indicado en los ejemplos, que se refieren al recuento de partfculas subvisibles.
Composicion farmaceutica lfquida
La presente invencion proporciona una composicion farmaceutica lfquida, segun se define en las reivindicaciones adjuntas. De forma ventajosa, la presente invencion proporciona composiciones farmaceuticas lfquidas alternativas y mejoradas, que en general muestran mejor estabilidad y viabilidad que las de la tecnica anterior. Tal como se ilustra en la presente (veanse los ejemplos), las formulaciones farmaceuticas lfquida de la presente invencion tienen unas caractensticas comparables o mejoradas, cuando se comparan con las formulaciones convencionales de adalimumab, por ejemplo, la formulacion disponible en el mercado Humira®, cuando se someten a diferentes condiciones de estres (termico, mecanico y lummico). Su actuacion tambien es en general comparable o mejor que muchas otras formulaciones comparativas que se sometieron a los mismos ensayos de estres. Puesto que estas condiciones de estres son muy representativas del tipo de estres al que se someten estas formulaciones durante la fabricacion, el transporte y la conservacion, proporcionan una excelente indicacion de las ventajas de la invencion. El hecho de que esta buena actuacion de estabilidad puede lograrse utilizando formulaciones menos complejas con menos excipientes se considera sorprendente, a la vista de las indicaciones generales de la tecnica anterior.
Adalimumab
El adalimumab, que esta disponible en el mercado en las formulaciones HUMIRA®, y su metodo de fabricacion, se describe en el documento WO97/29131 (BASF) como D2E7, y en otras partes en la tecnica. Se describe como que
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presenta “un dominio CDR3 de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:3, y un dominio CDR3 de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:4” (documento WO97/29131). Ademas, el anticuerpo D2E7 se describe como que presenta una region variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:1, y una region variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO:2 (documento WO97/29131).
Las indicaciones medicas y la funcion del adalimumab se aclararon en la presente anteriormente.
En el contexto de la invencion, “adalimumab” incluye los biosimilares, segun se definio anteriormente en la presente, y los expertos en la tecnica apreciaran con facilidad el alcance del termino “adalimumab” en el contexto de la invencion.
El adalimumab esta presente a una concentracion de aproximadamente 45 a aproximadamente 55 mg/ml. En una realizacion, el adalimumab esta presente a una concentracion de aproximadamente 50 mg/ml.
Tampon, agente tamponante y pH
De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida es una disolucion tamponada cuyo pH es estabilizado por un agente tamponante (o sistema de tampon), de forma adecuada en combinacion con un conjugado de acido/base del agente tamponante. Asf, la composicion farmaceutica lfquida comprende, de modo adecuado, un agente tamponante tal como se define en la presente. Preferiblemente, la composicion farmaceutica lfquida comprende ademas un conjugado de acido/base, en el que dicho conjugado de acido/base se corresponde con el acido conjugado o la base conjugada del agente tamponante, dependiendo de que el agente tamponante sea, en sf mismo, una base o un acido, respectivamente. De manera colectiva, el agente tamponante y su conjugado de acido/base pueden considerarse un “sistema de tampon”. Asf, la composicion farmaceutica lfquida comprende, de forma adecuada, un “sistema de tampon” (que comprende, de forma adecuada, un agente o agentes tamponantes y un conjugado o conjugados de acido/base de estos), y cualquier concentracion estipulada con relacion al sistema de tampon en general se refiere a las concentraciones combinadas del agente o agentes tamponantes y cualquiera de sus conjugados de acido/base. Cualquier “sistema de tampon” comprende, de forma adecuada, un acido debil y una base debil (veanse las anteriores definiciones).
El agente tamponante es un agente tamponante de histidina. De modo adecuado, el agente tamponante de histidina es la histidina (o una de sus sales), de la forma mas adecuada histidina libre (por ejemplo, histidina bipolar).
La composicion farmaceutica lfquida comprende un conjugado de acido/base del agente tamponante. Esto es menos sencillo para agentes tamponantes de histidina que para muchos otros sistemas de tampon de acido carboxflico/carboxilato habituales, puesto que el resto imidazol de la histidina significa que la histidina en general existe en una disolucion acuosa como una mezcla en equilibrio de formas protonadas (imidazolio) y desprotonadas (imidazol libre) a unos pH entre 6-7. La forma protonada (imidazolio) de la histidina puede asociarse con uno o mas aniones farmaceuticamente aceptables, que incluyen aniones tales como hidroxido o cloruro, aunque la forma de imidazolio puede existir ademas, o como alternativa, en un diluyente (por ejemplo, agua) como un cation solvatado. Asf, la forma protonada (imidazolio) de la histidina puede considerarse un conjugado de acido/base de la histidina, puesto que representa el acido conjugado de la histidina. Este acido conjugado de la histidina tiene, de forma adecuado, ambos grupos amino e imidazolio protonados, pero el grupo carboxilato esta desprotonado, y esto produce una carga neta positiva de +1. La combinacion del agente tamponante y su conjugado de acido/base constituye un sistema de tampon. De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende el agente tamponante y su correspondiente conjugado de acido/base, de manera adecuada de tal forma que el agente tamponante y su conjugado de acido/base juntos estan presentes a un nivel (es decir, concentracion o cantidad absoluta) y en una cantidad relativa (o concentracion) suficiente para proporcionar el pH deseado a la composicion. El sistema de tampon puede formarse simplemente mezclando el agente tamponante (por ejemplo, histidina) con su conjugado de acido/base (por ejemplo, la forma de sal imidazolio de la histidina, por ejemplo, monohidrocloruro de histidina), de modo adecuado en cantidades apropiadas para lograr una composicion con el pH deseado. Como alternativa, el sistema de tampon puede formarse mezclando un acido o una base con el agente tamponante o con su conjugado de acido/base para formar in situ la mezcla deseada de agente tamponante y conjugado de acido/base. Por ejemplo, el sistema de tampon puede formarse anadiendo una base (por ejemplo, hidroxido de sodio) al agente tamponante (por ejemplo, histidina, que puede autoequilibrarse inmediatamente cuando se disuelve en agua para producir histidina y su acido conjugado), de forma adecuada en una cantidad apropiada para lograr el pH deseado y la mezcla del agente tamponante (por ejemplo, histidina) y el correspondiente conjugado de acido/base (es decir, la forma de sal de imidazolio de la histidina). Como alternativa, puede emplearse cualquier metodo para formar el sistema de tampon, y el pH puede ajustarse juiciosamente anadiendo mas acido (de modo adecuado, un acido fuerte, tal como HCl) o mas base (de modo adecuado, una base fuerte, tal como hidroxido de sodio) hasta que se alcanza el pH requerido.
Tal como se indico anteriormente, puede utilizarse un “ajustador de pH” junto con la histidina (o una sal de imidazolio de la histidina, por ejemplo, hidrocloruro de histidina) para obtener un pH deseado. El ajustador de pH puede ser un acido fuerte o una base fuerte, aunque preferiblemente es una base fuerte, tal como hidroxido de sodio.
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El sistema de tampon es un sistema de tampon de histidina, que de forma adecuada comprende histidina en equilibrio con su forma de imidazolio.
De forma adecuada, la composicion farmaceutica Uquida comprende como maximo un agente tamponante. De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende como maximo un sistema de tampon.
La composicion farmaceutica lfquida tiene un pH entre 6,3 y 6,5. En una realizacion concreta, la composicion farmaceutica lfquida tiene un pH de aproximadamente 6,4.
El sistema de tampon esta presente a una concentracion de entre 5 y 14 mM, de forma mas adecuada a aproximadamente 10 mM. En una realizacion, el sistema de tampon/agente o agentes tamponantes estan presentes a una concentracion de 10 mM. Esto incluye, de modo adecuado, cuando el “agente o agentes tamponantes” (por ejemplo, histidina) se forman mediante la adicion de una base fuerte (por ejemplo, hidroxido de sodio) al acido conjugado del agente o agentes tamponantes (por ejemplo, la forma de imidazolio de la histidina).
De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende la especie tamponante (de modo adecuado, la especie tamponante de histidina, por ejemplo, la propia histidina) a una concentracion de aproximadamente 0,31 mg/ml a aproximadamente 7,8 mg/ml. En una realizacion, la especie tamponante esta presente a una concentracion de entre 0,77 mg/l y 2,2 mg/ml, del modo mas adecuado a aproximadamente 1,55 mg/ml. En una realizacion, el sistema de tampon/agente tamponante esta presente a una concentracion de 1,55 mg/ml. Esto incluye el caso en el que el “agente tamponante” (por ejemplo, histidina) se forma mediante la adicion de una base fuerte (por ejemplo, hidroxido de sodio) al acido conjugado del agente tamponante (por ejemplo, la forma de imidazolio de la histidina).
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida comprende el sistema de tampon (de modo adecuado, el sistema de tampon de histidina) en una proporcion molar de sistema de tampon a adalimumab de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 145:1. En una realizacion, el sistema de tampon esta presente en una proporcion molar de sistema de tampon a adalimumab de aproximadamente 14:1 a aproximadamente 40:1, de la forma mas adecuada de aproximadamente 29:1. En una realizacion, el sistema de tampon/agente o agentes tamponantes estan presentes a una concentracion de 29:1. Esto incluye el caso en el que el “agente o agentes tamponantes” (por ejemplo, histidina) se forman mediante la adicion de una base fuerte (por ejemplo, hidroxido de sodio) al acido conjugado del agente tamponante (por ejemplo, la forma de imidazolio de la histidina).
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplos, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion que incluyen un agente tamponante de histidina/sistema de tampon de histidina tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la fragmentacion y el desplegamiento de protemas, que pueden ser indicadores importantes de la estabilidad y la viabilidad del producto de farmaco. Ademas, las composiciones farmaceuticas lfquidas cuyo sistema de tampon de histidina mantiene un pH constante de 6,4 tienen una actuacion particularmente buena.
Estabilizante de azucar
La composicion farmaceutica lfquida comprende un estabilizante, en particular un estabilizante de azucar. De modo adecuado, dicho componente facilita el mantenimiento de la integridad estructural del farmaco biofarmaceutico, en particular durante la congelacion y/o la liofilizacion y/o la conservacion (en especial cuando se expone a un estres).
La composicion farmaceutica lfquida puede comprender uno o mas estabilizantes de azucar, aunque en las realizaciones preferidas solo esta presente un unico estabilizante de azucar.
El estabilizante de azucar es la trehalosa. La trehalosa es un estabilizante de azucar particularmente ventajoso para su uso junto con un agente tamponante de histidina/sistema de tampon de histidina en formulaciones de adalimumab lfquidas.
De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende como maximo un estabilizante de azucar, de modo adecuado como maximo un poliol de azucar y/o un disacarido. De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida comprende trehalosa como el unico estabilizante de azucar.
De modo adecuado, la trehalosa utilizada para formar la composicion farmaceutica lfquida es la trehalosa dihidrato, aunque, de modo adecuado, cualquier cantidad estipulada con relacion a la trehalosa (a menos que se indique lo contrario, tal como sucede en los ejemplos) se refiere a la trehalosa anhidra pura. Esta cantidad puede convertirse en una cantidad de trehalosa dihidrato aplicando un multiplicador apropiado. Ademas, para evaluar si una formulacion concreta esta dentro del alcance de cualquiera de las definiciones de la cantidad de trehalosa ofrecidas en la presente, una cantidad de trehalosa dihidrato puede convertirse con facilidad en la correspondiente cantidad de trehalosa anhidra pura (con un numero igual de moles) aplicando dicho multiplicador a la inversa. Este principio puede adoptarse para cualquier componente de estabilizante de azucar. Por supuesto, las concentraciones, cuando se indican como concentracion molar, seran las mismas independientemente del estado de hidratacion del estabilizante de azucar.
El estabilizante o estabilizantes de azucar estan presentes a una concentracion de entre 190 y 210 mM, de la forma
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mas adecuada a aproximadamente 200 mM. En una realizacion, la trehalosa esta presente a una concentracion de 200 mM.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica Kquida comprende el estabilizante o estabilizantes de azucar (de forma mas adecuada la trehalosa) a una concentracion de aproximadamente 15 mg/ml a aproximadamente 140 mg/ml, de forma mas adecuada de aproximadamente 35 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml, de forma mas adecuada de aproximadamente 45 mg/ml a aproximadamente 80 mg/ml. En una realizacion, el estabilizante o estabilizantes de azucar estan presentes a una concentracion de aproximadamente 65 mg/ml a 72 mg/ml, de la forma mas adecuada a aproximadamente 68 mg/ml. En una realizacion particular, la trehalosa esta presente a una concentracion de aproximadamente 68 mg/ml (que es igual a aproximadamente 75,7 mg/ml de trehalosa dihidrato).
De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende el estabilizante o estabilizantes de azucar (de forma mas adecuada la trehalosa) en una proporcion molar de estabilizante o estabilizantes de azucar a adalimumab de aproximadamente 145:1 a aproximadamente 1150:1, de modo mas adecuado de aproximadamente 290:1 a aproximadamente 860:1, de modo mas adecuado de aproximadamente 430:1 a aproximadamente 720:1. En una realizacion, el estabilizante o estabilizantes de azucar estan presentes en una proporcion molar de estabilizante o estabilizantes de azucar a adalimumab de aproximadamente 550:1 a aproximadamente 605:1, de modo mas adecuado a aproximadamente 576:1. En una realizacion, la trehalosa esta presente a una proporcion molar de trehalosa a adalimumab de aproximadamente 576:1.
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplos, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion que incluyen un estabilizante de azucar segun se define en la presente tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la agregacion, la fragmentacion y el desplegamiento de protemas, que pueden ser indicadores importantes de la estabilidad y la viabilidad del producto de farmaco. Ademas, las composiciones farmaceuticas lfquidas que comprenden trehalosa como estabilizante de azucar actuacion particularmente buena.
Diluyente
Las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion pueden incluir uno cualquiera o mas diluyentes farmaceuticamente aceptables, o sus mezclas. Sin embargo, de modo mas adecuado, la composicion farmaceutica lfquida es una composicion farmaceutica acuosa. De la forma mas adecuada, el diluyente es agua, y de modo adecuado, solo agua. El agua es, de modo adecuado, agua para inyeccion (WFI).
De modo adecuado, el diluyente puede constituir el resto de los ingredientes en cualquiera composicion farmaceutica lfquida, por ejemplo, de modo que el porcentaje en peso equivalga al 100%. De modo adecuado, cualquier concentracion indicada en la presente con relacion a cualquier componente de la composicion farmaceutica lfquida representa la concentracion de dicho componente en el diluyente (y, de modo adecuado, disuelto en el) mezclado con cualquier otro componente.
La composicion farmaceutica lfquida de la invencion es, de modo adecuado, una disolucion, y esta, de modo adecuado, sustancial o totalmente exenta de partfculas o precipitados.
Componentes ausentes o presente a un nivel bajo
Arginina ausente o presente a un nivel bajo
La composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de arginina (de modo adecuado, L-arginina) o comprende arginina a una concentracion maxima de 0,001 mM.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de arginina o comprende arginina en una proporcion molar de arginina a agente tamponante (o sistema de tampon) como maximo de 1:150 (es decir, menor o igual a un mol de arginina por cada 150 moles de agente tamponante o sistema de tampon), de forma mas adecuada como maximo de 1:1500, de la forma mas adecuada como maximo de 1:15.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de arginina o comprende arginina en una proporcion en peso de arginina a adalimumab como maximo de 1:3000 (es decir, menor o igual a una parte en peso de arginina por cada 3000 partes en peso de adalimumab), de forma mas adecuada como maximo de 1:30.00, de la forma mas adecuada como maximo de 1:300.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de arginina o comprende arginina en una proporcion molar de arginina a adalimumab como maximo de 1:3,75 (es decir, menor o igual a un mol de arginina por cada 3,75 moles de adalimumab), de forma mas adecuada como maximo de 1:37,5, de la forma mas adecuada como maximo de 1:375.
Tal como se explica en la presente, la referencia a “arginina” en el contexto de su presencia o de otra forma dentro de composiciones farmaceuticas lfquidas se refiere al correspondiente aminoacido o aminoacidos libres, no al resto o restos aminoacidos incorporados covalentemente como parte de un compuesto mayor, tal como un peptido o una
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protema.
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplos, las composiciones farmaceuticas Kquidas de la invencion que excluyen sustancial o totalmente a la arginina tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la agregacion, la fragmentacion y el desplegamiento de protemas.
Aminoacidos ausentes o presentes a un nivel bajo
La composicion farmaceutica Kquida esta sustancial o totalmente exenta de aminoacidos distintos de la histidina (que, de modo adecuado, es el agente tamponante) o comprende uno o mas aminoacidos distintos de la histidina en una concentracion (colectiva) como maximo de 0,001 mM.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de aminoacidos distintos de la histidina o comprende uno o mas aminoacidos distintos de la histidina en una proporcion molar (colectiva) de aminoacidos a agente tamponante (o sistema de tampon) como maximo de 1:150 (es decir, menor o igual a un mol de aminoacidos distintos de la histidina por cada 150 moles de agente tamponante o sistema de tampon), de forma mas adecuada como maximo de 1:1500, de la forma mas adecuada como maximo de 1:15.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de aminoacidos distintos de la histidina o comprende uno o mas aminoacidos distintos de la histidina en una proporcion en peso (colectiva) de aminoacidos a adalimumab como maximo de 1:3000 (es decir, menor o igual a una parte en peso de aminoacidos distintos de la histidina por cada 3000 partes en peso de adalimumab), de forma mas adecuada como maximo de 1:30.000, de la forma mas adecuada como maximo de 1:300.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de aminoacidos distintos de la histidina o comprende uno o mas aminoacidos distintos de la histidina en una proporcion molar (colectiva) de aminoacidos a adalimumab como maximo de 1:3,75 (es decir, menor o igual a un mol de aminoacidos distintos de la histidina por cada 3,75 moles de adalimumab), de forma mas adecuada como maximo de 1:37,5, de la forma mas adecuada como maximo de 1:375.
Tal como se explica en la presente, la referencia a “aminoacidos” en el contexto de su presencia o de otra forma dentro de composiciones farmaceuticas lfquidas se refiere al correspondiente aminoacido o aminoacidos libres, no al resto o restos aminoacidos incorporados covalentemente como parte de un compuesto mayor, tal como un peptido o una protema.
De forma adecuada, los aminoacidos indicados en esta seccion (y que se considera que estan ausentes o estan presentes en baja cantidad) pueden ser aminoacidos naturales y/o artificiales, aunque preferiblemente son aminoacidos naturales. En particular, las composiciones farmaceuticas lfquidas estan sustancial o totalmente exentas de cualquier aminoacido seleccionado del grupo que incluye: arginina, lisina y acido aspartico; o comprenden uno o mas de los anteriores aminoacidos en una cantidad, concentracion, proporcion molar o proporcion en peso tal como se definio anteriormente en la presente con relacion al “aminoacido o aminoacidos distintos de la histidina”.
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplo, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion que estan sustancial o totalmente exentas de aminoacidos distintos de la histidina o de ciertos aminoacidos, tal como se definio anteriormente, tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la agregacion, la fragmentacion y el desplegamiento de protemas.
Tensioactivos ausentes o presentes a un nivel bajo
La composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de tensioactivos (cationicos, anionicos, anfoteros o no ionicos) o comprende uno o mas de dichos tensioactivos en una concentracion (colectiva) como maximo de 0,0001 mM. De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de tensioactivos (cationicos, anionicos, anfoteros o no ionicos) o comprende uno o mas de dichos tensioactivos en una proporcion molar (colectiva) de tensioactivo o tensioactivos a agente tamponante (o sistema de tampon) como maximo de 1:10, de modo mas adecuado como maximo de 1:100, de modo mas adecuado como maximo de 1:1000, de modo mas adecuado como maximo de 1:10.000, de modo adecuado como maximo de 1:100.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de tensioactivos (cationicos, anionicos, anfoteros o no ionicos) o comprende uno o mas de dichos tensioactivos en una proporcion en peso (colectiva) de tensioactivo o tensioactivos a adalimumab como maximo de 1:50 (es decir, menor o igual a una parte en peso de tensioactivo o tensioactivos por cada 50 partes en peso de adalimumab), de modo mas adecuado como maximo de 1:500, de modo mas adecuado como maximo de 1:5000, de modo mas adecuado como maximo de 1:50.000, de modo adecuado como maximo de 1:500.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de tensioactivos (cationicos, anionicos, anfoteros o no ionicos) o comprende uno o mas de dichos tensioactivos en una proporcion molar (colectiva) de tensioactivo o tensioactivos a adalimumab como maximo de 3:1, de modo mas adecuado como
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maximo de 0,3:1, de modo mas adecuado como maximo de 0,003:1, de modo mas adecuado como maximo de 0,0003:1, de modo adecuado de 0,00003:1.
De modo adecuado, los tensioactivos indicados en esta seccion (y que se considera que estan ausentes o estan presentes en baja cantidad) pueden ser tensioactivos cationicos, anionicos, anfoteros o no ionicos.
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplo, las composiciones farmaceuticas Ifquidas de la invencion que estan sustancial o totalmente exentas de tensioactivo o de ciertos tensioactivos, tal como se definio anteriormente, tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la agregacion, la fragmentacion y el desplegamiento de protemas.
Fosfato ausente o presente a un nivel bajo
La composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de agentes tamponantes de fosfato (por ejemplo, dibifosfato de sodio, bifosfato de disodio) o comprende un sistema de tampon fosfato en una concentracion como maximo de 0,001 mM.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de agentes tamponantes de fosfato (por ejemplo, dibifosfato de sodio, bifosfato de disodio) o comprende un sistema de tampon fosfato en una proporcion molar de sistema de tampon fosfato a cualquiera de los sistemas de tampon que no son fosfato presentes como maximo de 1:150 (es decir, menor o igual a un mol de sistema de tampon fosfato por cada 150 moles del sistema de tampon que no es fosfato presente), de forma mas adecuada como maximo de 1:1500, de la forma mas adecuada como maximo de 1:15.000.
De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida esta sustancial o totalmente exenta de agentes tamponantes de fosfato o comprende un sistema de tampon fosfato en una proporcion molar de sistema de tampon fosfato a adalimumab como maximo de 1:3,75 (es decir, menor o igual a un mol de sistema de tampon fosfato por cada 3,75 moles de adalimumab), de forma mas adecuada como maximo de 1:37,5, de la forma mas adecuada como maximo de 1:375.
Las referencias a “agentes tamponantes de fosfato” en el contexto de su presencia o de otra forma dentro de composiciones farmaceuticas lfquidas se refieren a cualquier sal fosfato en cualquier forma o estado de protonacion, que incluye fosfato, monobifosfato y dibifosfato. Sin embargo, se excluyen, de modo adecuado, cualquier resto o restos fosfato que puedan estar incorporados covalentemente como parte de un compuesto mayor, tal como una protema o un peptido fosforilados o glicosilados.
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplo, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion que estan sustancial o totalmente exentas de agentes tamponantes de fosfato tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la agregacion, la fragmentacion y el desplegamiento de protemas.
Componentes adicionales opcionales
Tonificante
La composicion farmaceutica lfquida de la invencion comprende un “modificador de la tonicidad” (o “tonificante”) o uno o mas tonificantes, de modo adecuado tal como se definen en la presente.
La inclusion de un tonificante contribuye de modo adecuado (o aumenta) la osmolalidad y la osmolaridad global de la composicion. De forma adecuada, un tonificante esta presente dentro de la composicion en una cantidad o una concentracion suficiente para que la composicion sea (sustancialmente) isotonica con los fluidos corporales. De modo adecuado, un tonificante esta presente dentro de la composicion en una cantidad o una concentracion suficiente para que la composicion tenga una osmolaridad o una osmolalidad dentro de un intervalo definido en la presente.
De modo adecuado, el tonificante o tonificantes son no tamponantes (es decir, no produce o produce poco efecto tamponante). Asf, cualquier tonificante de sal metalica es, de modo adecuado, un agente no tamponante.
La composicion farmaceutica lfquida puede comprender uno o mas tonificantes, aunque preferiblemente solo esta presente un unico “tonificante” (no obstante de cualquier efecto tonificante impartido a la composicion por componentes previstos para que tengan otra funcion, segun se define en la presente).
El tonificante es o comprende cloruro de sodio. En una realizacion particular, el tonificante es cloruro de sodio. El cloruro de sodio es un estabilizante particularmente ventajoso para su uso junto con un agente tamponante de histidina/sistema de tampon de histidina en formulaciones de adalimumab lfquidas.
El tonificante o tonificantes estan presentes a una concentracion de entre 40 y 60 mM, de la forma mas adecuada de aproximadamente 50 mM. En una realizacion, el cloruro de sodio esta presente a una concentracion de 50 mM.
De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende el tonificante o tonificantes (de la forma mas
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adecuada, cloruro de sodio) a una concentracion de aproximadamente 0,5 mg/ml a aproximadamente 12 mg/ml, de forma mas adecuada de aproximadamente 1,2 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml, de forma mas adecuada de aproximadamente 1,5 mg/ml a aproximadamente 4,4 mg/ml. En una realizacion, el tonificante o tonificantes estan presentes a una concentracion entre 2,7 mg/ml y 3,1 mg/ml, de la forma mas adecuada a aproximadamente 2,9 mg/ml. En una realizacion concreta, el cloruro de sodio esta presente a una concentracion de aproximadamente 2,9 mg/ml.
De forma adecuada, la composicion farmaceutica lfquida comprende el tonificante o tonificantes (de la forma mas adecuada, cloruro de sodio) en una proporcion molar de tonificante a adalimumab de aproximadamente 30:1 a aproximadamente 580:1, de forma mas adecuada de aproximadamente 60:1 a aproximadamente 290:1, de forma mas adecuada de aproximadamente 70:1 a aproximadamente 220:1. En una realizacion, el tonificante o tonificantes estan presentes a una proporcion molar de tonificante a adalimumab de aproximadamente 115:1 a aproximadamente 175:1, de la forma mas adecuada a aproximadamente 145:1. En una realizacion, el cloruro de sodio esta presente a una proporcion molar de cloruro de sodio a adalimumab de aproximadamente 145:1.
Tal como se ilustra en la seccion de los ejemplos, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion que incluyen un tonificante tal como se define en la presente tienen una actuacion particularmente buena en los ensayos de estres, en especial con relacion a la agregacion, la fragmentacion y el desplegamiento de protemas, que pueden ser indicadores importantes de la estabilidad y la viabilidad del producto de farmaco. Ademas, las composiciones farmaceuticas lfquidas que comprenden cloruro de sodio, en particular en el intervalo de cantidad estipulado, tienen una actuacion particularmente buena.
Otros parametros relacionados con la invencion
Osmolalidad
De modo adecuado, la osmolalidad de la composicion farmaceutica lfquida esta entre 200 y 400 mOsm/kg, de modo mas adecuado entre 220 y 390 mOsm/kg, de modo mas adecuado entre 230 y 350 mOsm/kg, de modo mas adecuado entre 240 y 340 mOsm/kg, de modo mas adecuado entre 260 y 320 mOsm/kg, del modo mas adecuado entre 280 y 310 mOsm/kg. De forma adecuada, las concentraciones y cantidades relativas de los diversos componentes de la composicion pueden ajustarse juiciosamente para lograr la osmolalidad deseada, y la nueva combinacion concreta de componentes permite lograrlo en gran medida sin socavar otros parametros importantes. Sin embargo, de modo adecuado, las concentraciones y cantidades relativas de los diversos componentes de la composicion pueden seleccionarse para optimizar otros parametros; la presente descripcion, incluyendo los ejemplos y los protocolos indicados en ellos, permite a los expertos en la tecnica lograr este objetivo y realizar algunos o todos los beneficios de la presente invencion.
Temperatura de desplegamiento de las protemas
De modo adecuado, la temperatura de desplegamiento de las protemas (medida, de modo adecuado, mediante los protocolos de DSF definidos en la presente) del adalimumab en la composicion farmaceutica lfquida de la invencion es mayor o igual a 65 °C, de modo mas adecuado mayor o igual a 70 °C. La nueva combinacion de componentes presente en la composicion de la invencion permite a los expertos en la tecnica lograr unas temperaturas de desplegamiento altas, que pueden considerarse deseables desde el punto de vista de la estabilidad termica.
Parametros cuando se produce un estres termico
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de agregados (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y determinados, de modo adecuado, mediante los protocolos de SE-HPLC definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres termico a 40 °C (es decir, la composicion se mantiene a una temperatura de 40 °C) a lo largo de un periodo de 28 dfas, de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,2.
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de fragmentos (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y medidos, de modo adecuado, mediante los protocolos de Bioanalyzer definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres termico a 40 °C (es decir, la composicion se mantiene a una temperatura de 40 °C) a lo largo de un periodo de 28 dfas, de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,2.
De modo adecuado, la turbidez (medida, de modo adecuado, mediante nefelometna segun los protocolos definidos en la presente) de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 2 (es decir, 2 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres termico a 40 °C (es decir, la composicion se mantiene a una temperatura de 40 °C) a lo largo de un periodo de 28 dfas, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,2, y de modo adecuado la
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turbidez no aumenta en absoluto.
De modo adecuado, el pH de la composicion farmaceutica Kquida cambia (aumenta o disminuye, aunque en general disminuye) en no mas de un 0,5 unidades de pH cuando la composicion se somete a un estres termico a 40 °C (es decir, la composicion se mantiene a una temperatura de 40 °C) a lo largo de un periodo de 28 dfas, de modo adecuado en no mas de 0,2 unidades de pH, de modo adecuado en no mas de 0,1 unidades de pH, y del modo mas adecuado el pH no cambia en absoluto (hasta un decimal).
Parametros cuando se produce un estres mecanico
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de agregados (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y determinados, de modo adecuado, mediante los protocolos de SE-HPLC definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 2 (es decir, 2 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres mecanico (es decir, se agita segun los protocolos indicados en la presente) a lo largo de un periodo de 48 horas, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,2, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,1.
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de fragmentos (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y medidos, de modo adecuado, mediante los protocolos de Bioanalyzer definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 2 (es decir, 2 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres mecanico (es decir, se agita segun los protocolos indicados en la presente) a lo largo de un periodo de 48 horas, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,2, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,1.
De modo adecuado, la turbidez (medida, de modo adecuado, mediante nefelometna segun los protocolos definidos en la presente) de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 2 (es decir, 2 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres mecanico (es decir, se agita segun los protocolos indicados en la presente) a lo largo de un periodo de 48 horas, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,2, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,1, y de modo adecuado la turbidez no aumenta en absoluto.
De modo adecuado, el pH de la composicion farmaceutica lfquida cambia (aumenta o disminuye, aunque en general disminuye) en no mas de un 0,5 unidades de pH cuando la composicion se somete a un estres mecanico (es decir, se agita segun los protocolos indicados en la presente) a lo largo de un periodo de 48 horas, de modo adecuado en no mas de 0,2 unidades de pH, de modo adecuado en no mas de 0,1 unidades de pH, y del modo mas adecuado el pH no cambia en absoluto (hasta un decimal).
Parametros cuando se produce un estres lummico
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de agregados (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y determinados, de modo adecuado, mediante los protocolos de SE-HPLC definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 50 (es decir, 50 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres lummico (es decir, la composicion se expone a la luz segun los protocolos indicados en la presente, es decir, 7 horas a 765 W/m2), de modo adecuado en no mas de un factor de 45, de modo adecuado en no mas de un factor de 35, de modo adecuado en no mas de un factor de 30.
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de fragmentos (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y medidos, de modo adecuado, mediante los protocolos de Bioanalyzer definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres lummico (es decir, la composicion se expone a la luz segun los protocolos indicados en la presente, es decir, 7 horas a 765 W/m2), de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2.
De modo adecuado, la turbidez (medida, de modo adecuado, mediante nefelometna segun los protocolos definidos en la presente) de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 2 (es decir, 2 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a un estres lummico (es decir, la composicion se expone a la luz segun los protocolos indicados en la presente, es decir, 7 horas a 765 W/m2), de modo adecuado en no mas de un factor de 1,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,2, y de modo adecuado la turbidez no aumenta en absoluto.
De modo adecuado, el pH de la composicion farmaceutica lfquida cambia (aumenta o disminuye, aunque en general disminuye) en no mas de un 0,5 unidades de pH cuando la composicion se somete a un estres lummico (es decir, la composicion se expone a la luz segun los protocolos indicados en la presente, es decir, 7 horas a 765 W/m2), de modo adecuado en no mas de 0,2 unidades de pH, de modo adecuado en no mas de 0,1 unidades de pH, y del modo mas adecuado el pH no cambia en absoluto (hasta un decimal).
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Parametros cuando se realizan ciclos de congelacion/descongelacion
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de agregados (derivados, de modo adecuado, del adalimumab y determinados, de modo adecuado, mediante los protocolos de SE-HPLC definidos en la presente) presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 1,5 (es decir, 1,5 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a cinco ciclos de congelacion/descongelacion (es decir, la composicion se congela y se descongela cinco veces segun los protocolos indicados en la presente, es decir, de -80 °C a 20 °C cinco veces), de modo adecuado en no mas de un factor de 1,2, de modo adecuado en no mas de un factor de 1,1, de modo adecuado no se produce (sustancialmente) ningun aumento en la cantidad (o concentracion) de los agregados.
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de precipitados o partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 25 micrometros presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a cinco ciclos de congelacion/descongelacion (es decir, la composicion se congela y se descongela cinco veces segun los protocolos indicados en la presente, es decir, de -80 °C a 20 °C cinco veces), de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,2. De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de precipitados o partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 10 micrometros presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a cinco ciclos de congelacion/descongelacion (es decir, la composicion se congela y se descongela cinco veces segun los protocolos indicados en la presente, es decir, de -80 °C a 20 °C cinco veces), de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,2.
De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de precipitados o partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 25 micrometros presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a cinco ciclos de congelacion/descongelacion, de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,2. De modo adecuado, la cantidad (o concentracion) de precipitados o partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 10 micrometros presentes dentro de la composicion farmaceutica lfquida aumenta en no mas de un factor de 4 (es decir, 4 veces la cantidad con relacion a un momento de inicio arbitrario) cuando la composicion se somete a cinco ciclos de congelacion/descongelacion, de modo adecuado en no mas de un factor de 3, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,5, de modo adecuado en no mas de un factor de 2,2.
Metodos para estabilizar el anticuerpo
A la vista de los puntos mencionados anteriormente en esta subseccion y de los datos presentados en los ejemplos, en la presente se describe ademas un metodo para estabilizar composiciones de adalimumab lfquidas (de forma qrnmica y/o ffsica opcionalmente con relacion a cualquiera o mas de uno de los parametros/propiedades mencionados anteriormente), que comprende mezclar con adalimumab cualquiera de los componentes pertinentes necesarios para formar una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente. Las diferentes realizaciones requeriran, de modo adecuado, mezclar diferentes combinaciones de componentes, potencialmente en diferentes cantidades, y los expertos en la tecnica pueden deducir con facilidad dichas combinaciones y cantidades remitiendose a la anterior descripcion referida a la composicion farmaceutica lfquida. Estas diferentes combinaciones de componentes pueden estabilizar las composiciones de adalimumab lfquidas en diferentes aspectos. Por ejemplo, la mezcla del adalimumab con los componentes mencionados anteriormente para formar una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente puede estabilizar al adalimumab mediante:
i) el aumento de la temperatura de desplegamiento de las protemas del adalimumab;
ii) la inhibicion de la formacion de agregados;
iii) la inhibicion de la formacion de fragmentos;
iv) la inhibicion de la formacion de partfculas subvisibles (<25 micrometros o <10 micrometros);
v) la inhibicion de la formacion de turbidez;
vi) la inhibicion de los cambios en el pH;
vii) la inhibicion de la fotooxidacion, y/o
viii) la reduccion de la inestabilidad tras someterse a ciclos de congelacion/descongelacion.
Asf, en la presente tambien se describe un metodo para lograr uno, algunos o todos los siguientes beneficios:
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i) el aumento de la temperatura de desplegamiento de las protemas del adalimumab;
ii) la inhibicion de la formacion de agregados;
iii) la inhibicion de la formacion de fragmentos;
iv) la inhibicion de la formacion de partteulas subvisibles (<25 micrometros o <10 micrometros);
v) la inhibicion de la formacion de turbidez;
vi) la inhibicion de los cambios en el pH;
vii) la inhibicion de la fotooxidacion, y/o
viii) la reduccion de la inestabilidad tras someterse a ciclos de congelacion/descongelacion:
comprendiendo dicho metodo la fabricacion de una composicion farmaceutica lfquida de adalimumab segun se define en la presente.
De forma adecuada, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion tienen una caducidad de al menos 6 meses, de forma adecuada de al menos 12 meses, de forma adecuada de al menos 18 meses, de forma mas adecuada de al menos 24 meses. De forma adecuada, las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion tienen una caducidad de al menos 6 meses, de forma adecuada de al menos 12 meses, de forma adecuada de al menos 18 meses, de forma mas adecuada de al menos 24 meses, a una temperatura de 2-8 °C.
Como pueden los expertos en la tecnica optimizar las propiedades de estabilidad clave
La nueva combinacion de componentes descrita para su uso en las composiciones farmaceuticas lfquidas de la invencion permite a los expertos en la tecnica producir (y juiciosamente afinar) composiciones que muestran unas propiedades comparables o potenciadas con relacion a composiciones de la tecnica anterior. En particular, la presente descripcion proporciona a los expertos en la tecnica las herramientas necesarias para optimizar la estabilidad de la formulacion y, en particular, para optimizar uno o mas de: la inhibicion de la agregacion, la fragmentacion, el desplegamiento de protemas, la precipitacion, la perdida del pH y la oxidacion (en especial la fotooxidacion). Ademas, los expertos en la tecnica reciben indicaciones para lograr dichas optimizaciones (variando juiciosamente las composiciones) y para minimizar, durante el proceso, cualquier efecto secundario perjudicial. La presente descripcion permite a los expertos en la tecnica trabajar a traves del alcance de la invencion para producir una diversidad de composiciones espedficas que muestran unas propiedades comparables o mejoradas con relacion a composiciones de la tecnica anterior, y esto puede lograrse empleando menos componentes.
Realizaciones concretas
La composicion farmaceutica lfquida comprende:
- adalimumab de 45 a aproximadamente 55 mg/ml;
- histidina de 5 a 14 mM (o un sistema de tampon de histidina);
- trehalosa de 190 a 210 mM;
- cloruro de sodio de 40 a 60 mM; y
- agua (para inyeccion); en la que la composicion:
■ tiene un pH entre 6,3 y 6,5;
■ esta sustancial o totalmente exenta de arginina (de modo adecuado, L-arginina) o comprende arginina en una concentracion como maximo de 0,001 mM;
■ esta sustancial o totalmente exenta de aminoacidos libres distintos de histidina o comprende uno o mas aminoacidos distintos de la histidina en una concentracion (colectiva) como maximo de 0,001 mM;
■ esta sustancial o totalmente exenta de tensioactivos o comprende uno o mas tensioactivos en una concentracion (colectiva) como maximo de 0,0001 mM; y/o
■ esta sustancial o totalmente exenta de agentes tamponantes de fosfato (por ejemplo, dibifosfato de sodio, bifosfato de disodio) o comprende un sistema de tampon fosfato en una concentracion como maximo de 0,001 mM.
En una realizacion, la composicion farmaceutica lfquida comprende:
- adalimumab 50 mg/ml;
- histidina 10 mM (o un sistema de tampon de histidina);
- trehalosa 200 mM;
- cloruro de sodio 50 mM;
5 - polisorbato 80 1,0 mg/ml; y
- agua (para inyeccion); en la que la composicion:
■ tiene un pH de 6,4;
■ esta exenta de arginina;
10 ■ esta exenta de aminoacidos libres distintos de histidina;
■ esta exenta de tensioactivos; y
■ esta exenta de agentes tamponantes de fosfato/sistemas de tampon fosfato.
Preferiblemente, la composicion farmaceutica lfquida consiste fundamentalmente en:
- adalimumab 50 mg/ml;
15 - histidina 10 mM (o un sistema de tampon de histidina);
- trehalosa 200 mM;
- cloruro de sodio 50 mM; y
- agua (para inyeccion);
en la que la composicion tiene un pH de 6,4.
20 De modo adecuado, la composicion farmaceutica lfquida puede ser como se indica en cualquiera de las realizaciones anteriores, excepto que la ausencia o los bajos niveles de un componente o componentes, tales como arginina, aminoacidos, tensioactivos (opcionalmente con la excepcion del polisorbato 80), y sistemas/agentes tamponantes de fosfato, en lugar de ser definidos refiriendose a la concentracion o concentracion (es decir, molaridad) pueden definirse remitiendose a las correspondiente proporciones molares del componente al 25 adalimumab; a las correspondientes proporciones en peso del componente al adalimumab; o a las correspondientes proporciones molares del componente al adalimumab. Los expertos en la tecnica deduciran con facilidad para cada componente, a partir de la seccion pertinente de esta memoria descriptiva que se relaciona con ese componente espedfico, cuales son las proporciones molares y en peso se corresponden con determinadas concentraciones, puesto que en la presente se listan las proporciones molares y en peso pertinentes para que se correspondan, 30 respectivamente, con concentraciones concretas. Por ejemplo, en el caso de la arginina, las concentraciones opcionales “como maximo de 0,1 mM, de forma mas adecuada como maximo de 0,01 mM, de la forma mas adecuada como maximo de 0,001 mM” se corresponden respectivamente con una proporcion molar de arginina a agente tamponante “como maximo de 1:150... de forma mas adecuada como maximo de 1:1500, de la forma mas adecuada como maximo de 1:15.000”, con una “proporcion en peso de arginina a adalimumab como maximo de 35 1:3000. de forma mas adecuada como maximo de 1:30.000, de la forma mas adecuada como maximo de
1.300.000”, y con una proporcion molar de arginina a adalimumab “como maximo de 1:3,75. de forma mas adecuada como maximo de 1:37,5, y de la forma mas adecuada como maximo de 1:375”. Las mismas correspondencias se aplican a los aminoacidos, tensioactivos y sistemas/agentes tamponantes de fosfato.
Metodo de fabricacion de una composicion farmaceutica lfquida
40 En la presente se describe un metodo para fabricar una composicion farmaceutica lfquida, de forma adecuada segun se define en la presente. El metodo comprende, de forma adecuada, mezclar juntos, en cualquier orden concreto que se considere apropiado, cualquiera de los componentes pertinentes requeridos para formar una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente. Los expertos en la tecnica pueden remitirse a los ejemplos o a las tecnicas conocidas en la tecnica para formar composiciones farmaceuticas lfquidas (en especial las 45 composiciones para inyeccion mediante jeringa). Las diferentes realizaciones requeriran, de modo adecuado, diferentes combinaciones de componentes para ser mezclados, potencialmente en diferentes cantidades. Los expertos en la tecnica pueden deducir con facilidad estas combinaciones y cantidades remitiendose a la anterior descripcion que se refiere a la composicion farmaceutica lfquida.
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De modo adecuado, el metodo implica mezclar juntos los componentes pertinentes, de forma adecuada en un diluyente (por ejemplo, agua), de forma adecuada de manera que todos los componentes se disuelvan sustancial o totalmente en el diluyente.
El metodo puede implicar preparar primero una premezcla (o predisolucion) de algunos o todos los componentes (opcionalmente con parte o todo el diluyente) menos el adalimumab, y despues el adalimumab puede mezclarse (opcionalmente con parte del diluyente o predisuelto en el diluyente) con la premezcla (o la predisolucion) para producir la composicion farmaceutica lfquida, o una composicion a la cual se le anaden despues los componentes finales para producir la composicion farmaceutica lfquida final. De la forma mas adecuada, la premezcla contiene todos los componentes, excepto el adalimumab, y opcionalmente tambien una parte del diluyente (que puede utilizarse para predisolver el adalimumab), de forma adecuada de tal manera que el adalimumab se anade a una mezcla que ofrece una estabilizacion optima del adalimumab. De forma adecuada, la premezcla mencionada anteriormente se prepara con el pH deseado para la formulacion farmaceutica lfquida final.
De modo adecuado, el metodo implica formar un sistema de tampon, de forma adecuada un sistema de tampon que comprende un agente tamponante segun se define en la presente. El sistema de tampon puede formarse de modo adecuado en una premezla antes de la adicion del adalimumab, aunque el sistema de tampon puede formarse opcionalmente estan el adalimumab presente. El sistema de tampon puede formarse simplemente mezclando el agente tamponante (suministrado listo para utilizar) con su conjugado de acido/base (de modo adecuado en cantidades relativas apropiadas para proporcionar el pH deseado; esto puede ser determinado por los expertos de forma teorica o experimental). En el caso de un sistema de tampon de histidina, esto significa mezclar la histidina con una forma de imidazolio de la histidina (por ejemplo, hidrocloruro de histidina). Como alternativa, el sistema de tampon puede formarse anadiendo un acido fuerte (por ejemplo, HCl) al agente tamponante (por ejemplo, histidina) para formar in situ el conjugado de acido/base (por ejemplo, la forma de imidazolio de la histidina) al agente tamponante (de nuevo, de modo adecuado en cantidades relativas apropiadas para proporcionar el pH deseado). Como alternativa, el sistema de tampon puede formarse anadiendo una base fuerte (por ejemplo, hidroxido de sodio) al conjugado de acido/base del agente tamponante (o al propio agente tamponante, en donde forma dicho conjugado de acido/base en un equilibrio dinamico, tal como tras su disolucion) para formar in situ el agente tamponante (de nuevo, de modo adecuado en cantidades relativas apropiadas para proporcionar el pH deseado). El pH de la premezcla de la composicion farmaceutica lfquida final puede ajustarse juiciosamente anadiendo la cantidad requerida de base fuerte o de acido fuerte, o incluso una cantidad de agente tamponante o conjugado de acido/base.
En ciertas realizaciones, el agente tamponante y/o sistema de tampon se preforma como una mezcla por separado, y el sistema de tampon se traslada a un precursor de la composicion farmaceutica lfquida (que comprende algunos o todos los componentes, excepto el agente tamponante y/o el sistema de tampon, de modo adecuado comprende adalimumab y potencialmente solo adalimumab) mediante un intercambio de tampon (por ejemplo, empleando una diafiltracion hasta que se alcancen las concentraciones o la osmolalidad pertinentes). Despues pueden anadirse otros excipientes si es necesario para producir la composicion farmaceutica lfquida final. El pH puede ajustarse una vez o antes de que todos los componentes esten presentes.
Cualquiera, algunos o todos los componentes pueden predisolverse o premezclarse con un diluyente antes de mezclar con otros componentes.
La composicion farmaceutica lfquida final puede filtrarse, de forma adecuada para eliminar la materia en partfculas. De forma adecuada, la filtracion se realiza a traves de filtros con un tamano igual o menor que 1 |im, de modo adecuado de 0,22 |im. De modo adecuado, la filtracion se realiza a traves de filtros de PES o de filtros de PVDF, de modo adecuado con filtros de PES de 0,22 |im.
En la presente tambien se describe una composicion farmaceutica lfquida que puede obtenerse mediante, obtenerse con u obtenerse directamente a traves del metodo de fabricacion descrito en la presente.
Dispositivo de transporte de farmacos
La presente invencion proporciona un dispositivo de transporte de farmacos que comprende una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente. De forma adecuada, el dispositivo de transporte de farmacos comprende una camara dentro de la cual reside la composicion farmaceutica. De modo adecuado, el dispositivo de transporte de farmacos es esteril.
El dispositivo de transporte de farmacos puede ser un vial, una ampolla, una jeringa, una pluma de inyeccion (por ejemplo, que incorpora fundamentalmente una jeringa) o una bolsa intravenosa. De la forma mas adecuada, el dispositivo de transporte de farmacos es una jeringa, de modo adecuado una pluma de inyeccion. De forma adecuada, la jeringa es una jeringa de vidrio. De forma adecuada, la jeringa comprende una aguja, de forma adecuada una aguja 29G de 1,27 cm.
En la presente tambien se describe un metodo para fabricar un dispositivo de transporte de farmacos, de modo adecuado tal como se define en la presente, comprendiendo dicho metodo incorporar una composicion farmaceutica
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Kquida segun se define en la presente dentro de un dispositivo de transporte de farmacos. Esta fabricacion generalmente implica cargar la composicion farmaceutica Ifquida segun se define en la presente en una jeringa, de forma adecuada a traves de una aguja fijada a ella. La aguja despues puede retirarse, reemplazarse o puede permanecer.
En la presente tambien se describe un dispositivo de transporte de farmacos que puede obtenerse mediante, obtenerse con u obtenerse directamente a traves de un metodo de fabricacion descrito en la presente.
Envase
En la presente tambien se describe un envase que comprende una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente. De modo adecuado, el envase comprende un dispositivo de transporte de farmacos segun se define en la presente, de modo adecuado una pluralidad de dispositivos de transporte de farmacos. El envase puede comprender cualquier recipiente adecuado para contener uno o mas dispositivos de transporte de farmacos.
En la presente tambien se describe un metodo para fabricar un envase, comprendiendo dicho metodo incorporar una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente, dentro de un envase. De modo adecuado, esto se consigue incorporando dicha composicion farmaceutica lfquida dentro de uno o mas dispositivos de transporte de farmacos y despues incorporando dicho uno o mas dispositivos de transporte de farmacos precargados en un recipiente presente dentro del envase.
En la presente tambien se describe un envase que puede obtenerse mediante, obtenerse con u obtenerse directamente a traves de un metodo de fabricacion descrito en la presente.
Kit de partes
En la presente tambien se describe un kit de partes que comprende un dispositivo de transporte de farmacos (sin la composicion farmaceutica lfquida incorporada en el), una composicion farmaceutica lfquida segun se define en la presente (opcionalmente contenida en un envase o recipiente distinto), y opcionalmente un conjunto de instrucciones con directrices sobre la administracion (por ejemplo, subcutanea) de la composicion farmaceutica lfquida. El usuario despues puede rellenar el dispositivo de transporte de farmacos con la composicion farmaceutica lfquida (que puede proporcionarse en un vial o una ampolla o similares) antes de la administracion.
Usos de la composicion farmaceutica lfquida y metodos de tratamiento
En la presente tambien se describe un metodo para tratar una enfermedad o un trastorno medico; una composicion farmaceutica lfquida para su uso en terapia; un uso de una composicion farmaceutica lfquida para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno; un metodo para tratar una enfermedad autoinmunologica relacionada con el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-a); una composicion farmaceutica lfquida para su uso en el tratamiento de una enfermedad autoinmunologica relacionada con el factor de necrosis tumoral- alfa (TNF-a); un uso de una composicion farmaceutica lfquida para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad autoinmunologica relacionada con el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-a); un metodo para tratar la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil; una composicion farmaceutica lfquida para su uso en el tratamiento de la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil; y un uso de una composicion farmaceutica lfquida para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil; segun se define en la presente.
Las composiciones farmaceuticas lfquidas definidas en la presente pueden utilizarse para tratar una cualquiera o mas de las enfermedades o trastornos medicos mencionados anteriormente. En una realizacion concreta, las composiciones farmaceuticas lfquidas se emplean para tratar la artritis reumatoide, de forma adecuada la enfermedad de Crohn y la psoriasis.
Las composiciones farmaceuticas lfquidas se administran de forma adecuada por via parenteral, de forma adecuada mediante una inyeccion subcutanea.
Ejemplos
Se selecciono una diversidad de formulaciones (dentro y fuera del alcance de las formulaciones reivindicadas en la presente) segun se describe a continuacion para que la invencion pueda comprenderse mejor. Los expertos en la tecnica sabran cuales son las formulaciones que se encuentran dentro de las formulaciones reivindicadas en la presente, y cuales son las formulaciones que actuan como comparacion eficaz.
Materiales y equipo
Se emplearon los siguientes materiales para la preparacion de las formulaciones descritas en los siguientes ejemplos:
Ingrediente
Adalimumab DS Monohidrocloruro de arginina Acido aspartico Acido cftrico monohidrato Fosfato de sodio dibasico dihidrato Histidina
Hidrocloruro de lisina Manitol
Fosfato de sodio monobasico dihidrato Poloxamero 188 Polisorbato 80 Cloruro de sodio Citrato de sodio
Disolucion de hidroxido de sodio al 30%
Trehalosa dihidrato
WFl
5 Se emplearon los siguientes materiales y equipo desechable en los ejemplos y en los experimented de seleccion posteriores.
Articulo
Codigo Suministrador
Tubos Eppendorf (0,5 ml, 1,5 ml, 2,0 ml)
NA Eppendorf
Falcon
tubos de polipropileno 352096 (15 ml), 352070 (50 ml) Becton Dickinson
Unidad de filtro de membrana de PES (0,22 |im)
membrana de PES MillexGP Express REF SLGP033RS Millipore
Botellas de PETG
3420-1000, 3420-0500, 2019-0250, 3420-0125, 3420-0060, 2019-0030 Nalgene
Se emplearon los siguientes envases en los ejemplos y en los experimentos de seleccion posteriores.
Articulo
Codigo Suministrador
Vial de vidrio de tipo I DIN2R
0212060.6112 11200000A Nuova Ompi
Tapon de 1 ml
S2-F451 RSV; D 21-7S RB2-40 Daikyo Seiko, LTD
Caperuza abatible de 13 mm
12000350 MS-A
Se empleo el siguiente equipo en los ejemplos y en los experimented de seleccion posteriores.
Artfculo
Mod. Fabricante
Balanza analftica
AX205, PG2002-S Mettler Toledo
Instrumento Xenon de sobremesa
Suntest CPS+ Atlas
Pipetas calibradas
P20, P100, P200, P1000 Gilson
HPLC
Alliance Waters
iCE280
Fast IEF Analyzer Convergent Bioscience
Osmometro
Osmomat 303/D Gonotec
PCR
7500 Fast Real-Time AB Applied Biosystem
pH-metro
Seven Multi Mettler Toledo
Refrigeradores
+2-8 °C Angelantoni
Software Design Expert
ver. 7.1.5 Stat-Ease, Inc.
Cabinas termostaticas
+25 °C, +40 °C Angelantoni
Turbidfmetro
2100AN IS Hack Lange
Espectrofotometro de UV
Lambda 35 Perkin Elmer
Tecnicas analWcas y protocolos
Se emplearon los siguientes metodos de protocolos analfticos en los ejemplos y en los experimented de seleccion 5 posteriores, por las razones indicadas en la siguiente tabla:
Metodo n.°
Metodo analftico Alcance del ensayo
1
Bioanalyzer pureza
2
DSF temperatura de desplegamiento
3
iCE280 perfil de isoformas
4
OD contenido en protemas
5
SE-HPLC determinacion de agregados
6
nefelometna turbidez
7
osmolalidad osmolalidad de la disolucion
8
pH determinacion del pH
9
partteulas subvisibles recuento de partteulas
Los protocolos individuales para cada uno de los anteriores metodos analfticos se describen a su vez a continuacion, y las referencias en los ejemplos y los experimented de seleccion a cualquiera de estos metodos analfticos emplean estos protocolos.
10 1. Pureza - Bioanalyzer
Se empleo un Bioanalyzer 2100. Los protocolos pueden encontrarse en el manual de instrucciones pertinente. Sin embargo, los protocolos se han refinado aun mas como se indica a continuacion.
5
10
15
20
25
30
35
Disoluciones:
Mezcla de tinte-gel (disolucion de tincion):
Se anaden 25 il de concentrado de tinte 230plus a un tubo de matriz de gel de protemas 230plus. Se agita en vortice y se centrifuga el tubo durante 15 segundos. Se traslada a un filtro de centnfuga y se centrifuga a 2500 rpm durante al menos 20 min. La disolucion esta lista para utilizar. Se conserva la disolucion a +5 °C + 3 °C durante no mas de 4 semanas.
Disolucion de destincion:
Se pipetean 650 il de matriz de gel en un filtro de centrifuga. Se centrifuga a 2500 rpm durante al menos 25 min. Se conserva la disolucion a +5 °C + 3 °C durante no mas de 4 semanas.
Tampon de muestra:
Se recomienda dividir los 200 il del tampon de muestra en partes alfcuotas de 25 il y descongelar las partes alfcuotas para cada chip. Se conserva la disolucion madre del tampon de muestra y las partes alfcuotas a -20 °C durante un periodo no mas largo que la fecha de caducidad proporcionada por el suministrador.
Disolucion madre de maleimida:
Se disuelven 23,4 g de maleimida en 1 ml de agua MilliQ (0,24 M). Se agita en vortice la disolucion. Despues se diluye la disolucion 1:4 con agua MilliQ (por ejemplo, 50 il de disolucion madre + 150 il de MilliQ). La concentracion final de la disolucion de maleimida diluida es de 60 mM (puesto que no aun existen datos disponibles acerca de la estabilidad de esta disolucion, esta debe prepararse en fresco ante de comenzar cada sesion analftica).
Disolucion de OTf:
Para el analisis de las muestras de adalimumab, la disolucion reductora debe prepararse con DTT 1 M; por tanto, se disuelven 154,0 mg de DTT en 1 ml de agua MilliQ.
Disolucion no reductora:
Se anade 1 il de agua MilliQ a una parte alfcuota del tampon de muestra (25 il) y se agita en vortice durante 5 segundos. Se emplea la disolucion no reductora dentro del dfa de su preparacion.
Disolucion reductora:
Se anade 1 il de la correspondiente disolucion de DTf a una parte alfcuota del tampon de muestra (25 il) y se agita en vortice durante 5 segundos. Se emplea la disolucion reductora dentro del dfa de su preparacion.
Preparacion de las muestras:
- Las muestras se analizan a una concentracion que vana entre 2,4-3 mg/ml.
- Si es necesario, las muestras pueden diluirse hasta la concentracion diana empleando agua MilliQ.
Las muestras se preparan segun la grna del kit de reactivos empleando los tampones de muestra reductor y no reductor segun las instrucciones de la grna del kit de reactivos y que tambien se mencionaron anteriormente. Se recomienda fervientemente emplear, de modo diferente al indicado en la grna, unos volumenes mas grandes para lograr unos resultados reproducibles y precisos. A continuacion se indica un ejemplo para preparar la escalera y las muestras:
Disolucion de preparacion de muestras en condiciones reductoras y no reductoras
Reactivo
Volumen (il) Volumen total (il)
Muestra diluida a 3 mg/ml
3 |il 6 il
Tampon de muestra (reductor o no reductor)
2 |il
Disolucion de maleimida
1 |il
Las muestras deben mezclarse (mediante vortice) y centrifugarse. Todas las muestras y la escalera se calientan durante 5 minutos a 70 °C.
Agua MilliQ
84 |il
90 |il
Se mezcla en vortice y se centrifuga. Se cargan 6 |il de la muestra y de la escalera.
Nota 1: Para las IPC cuya concentracion este entre 2,4 mg/ml y 3,0 mg/ml, la preparacion de las muestras sigue la tabla anterior, pero se calcula el volumen de agua MilliQ anadida despues del calentamiento de la muestra para alcanzar una concentracion final de protemas de 0,1 mg/ml.
5 A continuacion se indica un ejemplo de la preparacion de la muestra para una muestra que tenga una concentracion de entre 2,4 y 3,0 mg/ml:
Disolucion de preparacion de muestras en condiciones reductoras y no reductoras
Reactivo
Volumen (il) Volumen total (il)
Muestra (2,6 mg/ml)
3 il 6 il
Tampon de muestra (reductor o no reductor)
2 il
Disolucion de maleimida
1 il
Las muestras deben mezclarse (mediante vortice) y centrifugarse. Todas las muestras y la escalera se calientan durante 5 minutos a 70 °C.
Agua MilliQ
72 il 78 il
Se mezcla en vortice y se centrifuga. Se cargan 6 il de la muestra y de la escalera.
Nota 2: Deben cargarse todos los pocillos. Si el numero de muestras es menor que los pocillos disponibles, los 10 pocillos vacms pueden emplearse para otros duplicados o muestras en blanco.
Preparacion del sistema y del chip:
- Para limpiar la disolucion antes y despues de un analisis, se rellena el “limpiador de electrodos” con agua MilliQ 600IIL y se coloca en el Bioanalyzer Agilent 2100, se cierra la tapa y se deja que el sistema termine. No son necesarias mas medidas.
15 - Se ajusta la placa base de la estacion de cebado del chip en la posicion “A" y la jeringa se fija en su posicion
intermedia.
Preparacion del chip
Preparacion del sistema
Se inserta un nuevo chip de protemas en la estacion de cebado.
Se pipetean 12 il de la mezcla del gel-tinte en el pocillo marcado como G (arriba a la derecha).
Se ajusta el embolo a 1 ml y se cierra la estacion de cebado del chip.
Se presiona el embolo hasta que el clip lo sujete.
Se esperan 60 segundos y despues se libera el clip.
Se esperan 5 segundos y se extrae lentamente el embolo hasta la marca de 1 ml.
Se abre la estacion de cebado del chip.
Se retira la disolucion en este pocillo.
Se pipetean 12 il de la mezcla del gel-tinte en el pocillo marcado como G (arriba a la derecha) y en todos los
pocillos restantes marcados como G.
Se pipetean 12 il de la disolucion de destincion en el pocillo marcado como DS.
5
10
15
20
25
Carga de la escalera y la muestra:
- Se trasladan 6 |il de cada muestra a un pocillo de muestras y tambien 6 |il de la escalera al pocillo correspondiente, que se indica claramente con el s^bolo de una escalera.
Se coloca el chip en el Bioanalyzer Agilent 2100 y se comienza el analisis en 5 minutos.
Ejemplo de un conjunto de muestras
Pocillo
Muestra Cantidad (^l)
1
Blanco 6
2
Blanco 6
3
Muestra desconocida 1 rep 1 6
4
Muestra desconocida 1 rep 2 6
5
Muestra desconocida 2 rep 1 6
6
Muestra desconocida 2 rep 2
6
7
Muestra desconocida 3 rep 1 6
8
Muestra desconocida 3 rep 2 6
9
Material de referencia actual rep 1 6
10
Material de referencia actual rep 2 6
Escalera
Escalera
6
Analisis de los datos y evaluacion de los resultados:
Para obtener los resultados deben ejecutarse las siguientes operaciones mmimas.
- Colocar el chip en el punto espedfico y cerrar la tapa.
- En el contexto del instrumento seleccionar Ensayo-Electroforesis-Protema-Protema 230 Plus.
- Pinchar INICIAR para comenzar el analisis, que se completa en 30 minutos.
- Los datos brutos se muestran pinchando en “Analisis de los datos”, en donde se listan todos los experimentos realizados ese dfa. Se pincha en el experimento de interes y se selecciona.
- El gel generado en el experimento elegido se abre automaticamente.
- Los datos pueden mostrarse como un electroferograma o una imagen de tipo gel.
Se incluye informacion detallada con respecto a la integracion de los picos en el electroferograma (para obtener los datos de pureza) en el manual del programa informatico. El sistema genera automaticamente la pureza de una muestra mediante integracion automatica pero, si es necesario, puede aplicarse la integracion manual.
Resultados:
En la condicion no reductora, los resultados se indican como porcentaje de pureza, y porcentaje de LMW (suma de los picos antes del monomero).
En la condicion reductora, los resultados se indican como porcentaje de pureza, como la suma de la cadena pesada y la cadena ligera.
Los valores de peso molecular indicativo se ofrecen en la siguiente tabla:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Peso molecular indicativo del adalimumab
Condicion
Resultados KDa
no reductora
monomero 151
reductora
LC 27
HC
58
2. Temperatura de desplegamiento - DSF
La DSF (fluorimetna de barrido diferencial) se realizo como sigue.
Se anadieron 2 microlitros de Sypro Orange (tinte de gel de protemas Orange, cod. S6650, Life Technologies) previamente diluidos en 500 veces con agua para inyeccion, a 20 microlitros de disolucion del producto de farmaco. Despues de la adicion de Sypro Orange, las disoluciones de DP (preparacion por triplicado) se introdujeron en placas de 96 pocillos (MicroAmp Fast 96-W Reaction Plate 0,1 ml, cod. 4346907). Las placas despues se sellaron con una cubierta protectora transparente (MicroAmp Optical Adhesive Film, cod. 4311971) y despues se sometieron a una centrifugacion para eliminar las burbujas de aire. Las placas despues se insertan en el sistema de PCR 7500 Fast Real-Time AB Applied Biosystem y se realiza un barrido para los perfiles de emision a unas temperaturas desde la temperatura ambiente hasta 90-100 °C. La dependencia de la intensidad de la emision de fluorescencia de la temperatura es una curva que generalmente muestra un punto de inversion/discontinuidad en la temperatura de desnaturalizacion, un parametro que se emplea para comparar las diferentes composiciones.
3. Perfil de isoformas - iCE280
clEF por iCE280 (perfil de isoformas): Despues de la purificacion y la eliminacion de las sales con una centrifugacion en dispositivos de centrifugacion Amicon Ultra-4 (punto de corte 10 kDa), las muestras se prediluyeron hasta la concentracion de 5,0 mg/ml con agua purificada. Entonces se realizo una segunda dilucion hasta 1,0 mg/ml con una disolucion compuesta de: metilcelulosa, Pharmalyte 5-8 (GE Healthcare), Pharmalyte 8-10,5 (GE Healthcare), marcador de bajo pl 7.05 (Protein Simple), marcador de alto pl 9,50 (Protein Simple) y agua purificada. Tras la dilucion, las muestras se centrifugaron a 10000 rpm durante 3 minutos. Despues se realizo una etapa de centrifugacion adicional (2 minutos a 7000 rpm) en 150 microlitros de cada muestra trasladada en insertos de vidrio. El clEF (enfoque isoelectrico capilar) se realizo con el sistema iCE280 en Protein Simple, empleando cartuchos capilares Fc con un revestimiento ID de 100 micrometros y una longitud total de 50 nm (n.° de catalogo 101700/101701 de Protein Simple). La separacion de las diversas isoformas se realiza empleando hidroxido de sodio 100 mM (en metilcelulosa al 0,1%) como disolucion catodica y acido o-fosforico 80 mM (en metilcelulosa al 0,1%) como disolucion anodica. El electroferograma se adquiere a 280 nm a lo largo de unos tiempos de preenfoque y de enfoque de 1 y 6 minutos, respectivamente, a un voltaje de 1500 V (preenfoque) y 3000 V (enfoque).
4. Contenido en protemas - OD
Las mediciones de OD (contenido en protemas) se realizaron en muestras que inicialmente se habfan diluido gravimetricamente (se realizaron diluciones independientes por triplicado) con el tampon pertinente o placebo a partir de una concentracion de partida de aproximadamente 10 mg/ml. Las disoluciones diluidas se ensayaron para la absorbancia a 280 y 320 en cubeta de cuarzo de longitud de paso de 0,1 cm, a la temperatura ambiente, con un espectrofotometro de doble haz (Lambda35 de Perkin Elmer). Se empleo el valor de 1,35 como el coeficiente de extincion molar del adalimumab.
5. Determinacion de los agregados - SE-HPLC
Las muestras se diluyeron con DPBS 1X hasta una concentracion de 0,5 ml y se inyectaron (volumen de inyeccion de 20 microlitros) en una columna con gel Column TSK Super SW3000 4,6 mm ID X30,0 cm, cod. 18675 de Tosho, manteniendo unas condiciones isocraticas (fase movil: fosfato de sodio 50 mM + perclorato de sodio 0,4 M, pH 6,3 + 0,1). La deteccion con UV se realizo a 214 nm con un caudal de 0,35 ml. La duracion de cada ensayo analttico fue de 15 minutos. Antes de los analisis, las muestras se mantuvieron a 2-8 °C en el automuestreador del sistema HPLC de Waters Alliance empleado para este ensayo.
6. Turbidez - nefelometna
La turbidez se analizo mediante mediciones nefelometricas (efectos basado en el efecto de difusion de la luz provocado por las partmulas con unas dimensiones generalmente < 1 micrometro) realizadas con un turbidfmetro 2100AN IS Turbidimeter de Hach a temperatura ambiente. Se colocaron cantidades mmimas de 3 ml de disolucion en cubetas de vidrio de volumen reducido y se ensayo el efecto difusor despues de la calibracion anterior del instrumento con una serie de disoluciones patron (0,1-7500 NTU).
7. Determinacion de la osmolalidad - osmolalidad
La osmolalidad se midio basandose en las caractensticas crioscopicas de las disoluciones. Los ensayos se realizaron con un Osmomat 030-D de Gonotech sometiendo 50 microlitros de la muestra a una congelacion. La temperature de congelacion depende de la osmolalidad de la disolucion (es decir, de la presencia de agentes 5 disueltos, tales como sales, azucares, otras especies ionicas y no ionicas, etc.).
8. Determinacion del pH - pH
El pH se determino empleando mediciones potenciometricas realizadas a temperatura ambiente con pH-metros Mettler Toledo Seven Multi.
9. Recuento de partfculas - partfculas subvisibles
10 Las muestras se diluyeron en 5 veces con agua purificada hasta un volumen final de 25 ml. Se determino el numero de partfculas a temperatura ambiente mediante PAMAS SVSS de Aminstruments recogiendo cuatro pruebas independientes y promediando los resultados para cada respectiva fraccion dimensional de interes.
Ejemplo 1: Formulaciones para la primera seleccion de formulaciones
En la siguiente tabla 1 se muestra el primer conjunto de formulaciones (a menudo indicadas en la presente como 15 formulaciones DoE1).
Tabla 1 - Lista de formulaciones DoE1 para posteriores experimentos de seleccion 1
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) PH Estabilizante
18
25 histidina 6,0 trehalosa dihidrato (200 mM)
19
50 histidina 6,0 hidrocloruro de lisina (100 mM)
20
100 histidina 6,0 manitol (200 mM)
21
50 histidina 6,2 hidrocloruro de lisina (100 mM)
22
50 histidina 6,2 monohidrocloruro de arginina + acido aspartico (80 mM + 20 mM)
23
75 histidina 6,2 trehalosa dihidrato (200 mM)
24
25 histidina 6,4 manitol (200 mM)
25
100 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM)
Las formulaciones de la tabla 1 se fabricaron comenzando a partir de un material de DS sin tensioactivos preformulado.
20 Una parte alfcuota del DS se diafiltro con tampon histidina 10 mM a pH 6,0 hasta que se obtuvo un intercambio de volumen en tres veces con el tampon. Despues se anadieron los excipientes necesarios a los materiales de DS con intercambio de tampon y el pH se ajusto hasta el pH diana mediante la adicion de una disolucion diluida de hidroxido de sodio. Cada formulacion se filtro a traves de filtros de PES de 0,22 |im.
En la tabla 2 se indican los resultados en terminos de recuperacion del material y osmolalidad para los tres 25 materiales de DS con intercambio de tampon.
Tabla 2 - Recuperacion y osmolalidad de los materiales de DS despues del intercambio de tampon
Despues del intercambio
Tampon
Volumen de inicio de DS (ml) Conc. de inicio de DS (mg/ml) Proteina tratada (mg) Volumen final (ml) Conc. final (mg/ml) Proteina recuperada (mg) Recuperacion (%) Osmolalidad (mOsm/kg)
histidina
200 63,3 12660 200 56,9 11380 90 23
Se produjo una buena recuperacion para el sistema de tampon de histidina (< 90%). Los valores de osmolalidad indican el grado satisfactorio de intercambio de tampon alcanzado con un mrnimo residual de especies que
proceden del DS originario.
Ejemplo 2: Formulaciones para la segunda seleccion de formulaciones
En la siguiente tabla 3 se muestra el segundo conjunto de formulaciones (a menudo indicadas en la presente como formulaciones DoE2) (derivadas de la tabla 4 que aparece despues de esta).
5 Tabla 1 - Lista de formulaciones DoE2 para los posteriores experimented de seleccion 2 (las formulaciones se derivan de las presentadas en la tabla 4 con el tensioactivo extra indicado)
Formulaciones
Concentracion de polisorbato 80 (mg/ml)
0
0,5 1
forma 7 (derivada de la forma C, tabla 4)
X - -
forma 8 (derivada de la forma C, tabla 4)
- X -
forma 9 (derivada de la forma C, tabla 4)
- - X
Tabla 4 - Prototipo de formulacion que deriva de la seleccion de DoE1
Forma
Sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante
C
100 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM)
10 Las formulaciones DoE2 (tabla 3) se fabricaron comenzando a partir de un material de DS sin tensioactivos preformulado.
Tres partes alteuotas del DS se diafiltraron hasta que se obtuvo un intercambio de volumen en tres veces. Despues se anadieron los excipientes necesarios a los materiales de DS con intercambio de tampon y el pH se ajusto hasta el pH diana mediante la adicion de una disolucion diluida de hidroxido de sodio. Cada formulacion se filtro a traves de 15 filtros de PES de 0,22 |im.
En la tabla 5 se indican los resultados en terminos de osmolalidad y turbidez para los materiales de DS con intercambio de tampon.
Los valores de la osmolalidad (< 40 mOsm/kg) indican el grado satisfactorio de intercambio de tampon alcanzado con un mmimo residual de especies que proceden del DS originario.
20 Tabla 5 - Osmolalidad y turbidez de los materiales de DS despues del intercambio de tampon
Tampon
Turbidez (NTU) Osmolalidad (mOsm/kg)
histidina
50 26
Ejemplo 3: Formulaciones comparativas para la primera y la segunda seleccion
Para fines de comparacion y de control, se prepararon u obtuvieron tres formulaciones de referencia, que incluyen Ref-1 (composicion de Humira® fabricada por el solicitante); Ref-2 (RMP US - producto de farmaco comercial de 25 Humira® de EEUU); y Ref-3 (RMP UE - producto de farmaco comercial de Humira® de la Union Europea). Todas
estas formulaciones de referencia presentan la composicion que se indica en la tabla 6.
Tabla 6 - Composicion de Humira DP
Ingrediente
Cantidad por recipiente (mg) (volumen de llenado = 0,8 ml) Cantidad (mg/ml)
Adalimumab
40 50
Acido cttrico monohidrato
1,04 1,3
Fosfato de sodio dibasico deshidrato
1,22 1,53
5
10
15
20
25
30
Manitol
9,6 12
Fosfato de sodio monobasico deshidrato
0,69 0,86
Polisorbato 80
0,8 1
Cloruro de sodio
4,93 6,16
Citrato de sodio
0,24 0,3
WFI e hidroxido de sodio
c.s. hasta ajustar el pH a 5,2 c.s. hasta ajustar el pH a 5,2
Seleccion
Una primera seleccion de formulaciones (DoE1) condujo a la identificacion de diversos factores (por ejemplo, pH, presencia de NaCl, tipo de excipiente) responsables de la estabilidad de las protemas y, en ultimo termino, a la seleccion de formulaciones que van a ser buscadas en una segunda seleccion (DoE2), que busca afinar las formulaciones y evaluar la forma en que los tensioactivos, tales como polisorbato 80, afectan a la estabilidad de la protema.
Cada una de las dos selecciones implica diversos ensayos analfticos, tal como se definio en la presente anteriormente e indicado en la presente a continuacion, sobre una gama de formulaciones diferentes que fueron expuestas a cantidades variables de estres termico, mecanico y lummico a lo largo de periodos de tiempo prolongados (por ejemplo, 1 mes). Estas selecciones de formulaciones permitieron recolectar una cantidad significativa de datos, que proporcionaron unos conocimientos sorprendentes y valiosos que permiten el desarrollo de nuevas formulaciones ventajosas.
Los resultados de las dos selecciones de formulaciones se presentan a continuacion.
Experimento de seleccion 1: Analisis y seleccion de las formulaciones del ejemplo 1 frente a las formulaciones comparativas del ejemplo 3
Una seleccion de DoE preliminar (etapa 1) evaluo el efecto que ejerce la fuerza ionica (proporcionada por NaCl), el pH y diferentes estabilizantes sobre la protema en el desarrollo de los estudios de estabilidad a corto plazo.
Se aplico un diseno estadfstico D-Optimal de superficie de respuesta. Se consideraron tres factores:
- fuerza ionica (determinada por la concentracion de NaCl, que vana en el intervalo de 25 mM-100 mM y se ajusto como un factor numerico),
- se investigo el pH (intervalo 4,6-6,4) tamponado por histidina;
- estabilizante/excipiente (factor categorico que comprende varios niveles: hidrocloruro de lisina, arginina + acido aspartico, manitol, trehalosa dihidrato).
Estas formulaciones se fabricaron, tal como se describio en el anterior ejemplo 1, comenzando a partir de DS sin polisorbato 80 y, por tanto, sin tensioactivo.
La siguiente tabla 7 resume las formulaciones ensayadas dentro de esta seleccion. Ademas de las 8 formulaciones propuestas, tambien se han analizado dos controles como comparadores:
- producto de farmaco comercial Humira DP (formulado como en el anterior ejemplo 3)
- sustancia farmaco de MS DS formulada como Humira comercial DP (formulada como en el anterior ejemplo 3)
Tabla 7 - Lista de formulaciones DoE1 (etapa 1) seleccionadas a traves de condiciones de estres termico (estabilidad a 40 °C) y determinacion de alta capacidad de procesamiento de la temperatura de desplegamiento de las protemas (DSF)
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante
18
25 histidina 6,0 trehalosa dihidrato (200 mM)
19
50 histidina 6,0 hidrocloruro de lisina (100 mM)
20
100 histidina 6,0 manitol (200 mM)
21
50 histidina 6,2 hidrocloruro de lisina (100 mM)
22
50 histidina 6,2 monohidrocloruro de arginina + acido aspartico (80 mM + 20 mM)
23
75 histidina 6,2 trehalosa dihidrato (200 mM)
24
25 histidina 6,4 manitol (200 mM)
25
100 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM)
Ref-1 (MS)
Composicion de Humira (formulacion fabricada con la sustancia farmaco de MS) - ejemplo 3
Ref-2 (RMP MS)
Humira comercial DP (EEUU) - ejemplo 3
Ref-3 (RMP UE)
Humira comercial DP (UE) - ejemplo 3
Las formulaciones se ensayaron segun el plan indicado en la tabla 8. Se considero un estres termico de hasta un mes a 40 °C. La evaluacion de alta capacidad de procesamiento realizada con la tecnica DSF (dirigida a una seleccion rapida basada en la determinacion de la temperatura de desplegamiento de las protemas) se realizo en 5 T0.
Tabla 8 - Panel de ensayos analtticos realizados en formulaciones DoE preliminares (etapa 1): condiciones de estres termico de un mes a 40 °C
Acelerado (40 °C)
Tiempo de estabilidad (semanas)
Metodos
Ensayo 0 2 semanas 4 semanas
OD
contenido x - x
SE-HPLC
agregados x x x
Bioanalyzer
pureza x x x
pH
pH
x x x
Osmolalidad
osmolalidad x - -
DSF
temp. de desplegamiento x - -
1.1 Seleccion de la osmolalidad
10 En la tabla 9 se indica la osmolalidad de las formulaciones DoE1 compuestas comenzando a partir de los materiales de DS con intercambio de tampon (par. 5.1.1).
La mayona de las formulaciones presentaron una osmolalidad en el intervalo de 250-400 mOsm/kg, mientras que se observaron unos valores ligeramente mayores en las concentraciones mayores de cloruro de sodio.
Tabla 9 - Osmolalidad (mOsm/kg) registrada en el momento 0 para las formulaciones de seleccion DoE1
Forma n.°
Conc. de sal (NaCI) (mM) Tipo de tampon (10 mM) PH Estabilizante Tiempo 0
18
25 histidina 6,0 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,324
19
50 histidina 6,0 hidrocloruro de lisina (100 mM) 0,317
20
100 histidina 6,0 manitol (200 mM) 0,458
21
50 histidina 6,2 hidrocloruro de lisina (100 mM) 0,317
22
50 histidina 6,2 monohidrocloruro de arginina + acido aspartico (80 mM + 20 mM) 0,307
5
10
15
20
25
30
35
23
75 histidina 6,2 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,434
24
25 histidina 6,4 manitol (200 mM) 0,307
25
100 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,496
0,374
NA
0,310
1.2 Contenido en protenas (OD)
Se determino el contenido en protemas de las formulaciones DoE1 en el momento 0 y despues de un mes a 40 °C.
La figura 1 es un diagrama de barras que muestra el contenido en protemas (mg/ml) de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un momento de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 4 semanas (barras rojas) de la formulacion o formulaciones calentadas a 40 °C.
Los resultados presentados en la figura 1 indican que no se produjeron cambios significativos a lo largo del tiempo. Se descubrio que todas las concentraciones estaban en lmea con la diana de 50 mg/ml.
1.3 Agregacion (SE-HPLC)
La figura 2 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un momento de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras verdes) y de 4 semanas (barras naranjas) de la formulacion o formulaciones calentadas a 40 °C. Los agregados totales observados mediante SE-HPLC frente a la estabilidad a 40 °C se representan graficamente en la figura 2. Se observaron unos aumentos mmimos en la agregacion en todas las formulaciones. Sin embargo, incluso despues de un mes, todos los niveles de agregacion sumaron menos del 1%.
1.4 Fragmentacion (Bioanalyzer)
La figura 3 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un momento de inicio arbitrario (barras azul oscuro, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rosas) y de 4 semanas (barras azul claro) de la formulacion o formulaciones calentadas a 40 °C.
En la figura 3 se indica la variacion de los fragmentos a lo largo del tiempo, segun se determina mediante un Bioanalyzer. Las formulaciones con un pH mas acido tienden a presentar unas velocidades de fragmentacion mas rapidas. Ademas, la presencia de aminoacidos en este intervalo de pH puede empeorar considerablemente el perfil de estabilidad.
A pH > 6,0 y en presencia de azucar/poliol, todas las formulas, incluyendo las referencias, son comparables (fragmentacion menor que 1% despues de un mes a 40 °C).
Se descubrio que el cloruro de sodio no era un factor cntico para la estabilidad en el intervalo de 25-100 mM.
1.5 Seleccion de pH
La tabla 10 muestra el pH de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un momento de inicio arbitrario (tiempo = 0) y despues de 2 semanas y de 4 semanas de la formulacion o formulaciones calentadas a 40 °C.
Como puede observarse en la tabla 10, no se observaron desviaciones del pH diana.
5
10
15
20
25
30
Tabla 10 - pH de las formulaciones de seleccion DoE1 determinado con respecto a la estabilidad a 40 °C
Tiempo de estabilidad
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante Tiempo 0 2 semanas 40 °C 4 semanas 40 °C
18
25 histidina 6,0 trehalosa dihidrato (200 mM) 6,0 5,9 6,0
19
50 histidina 6,0 hidrocloruro de lisina (100 mM) 6,0 6,0 6,0
20
100 histidina 6,0 manitol (200 mM) 6,0 6,0 6,0
21
50 histidina 6,2 hidrocloruro de lisina (100 mM) 6,2 6,2 6,2
22
50 histidina 6,2 monohidrocloruro de arginina + acido aspartico (80 mM + 20 mM) 6,2 6,2 6,2
23
75 histidina 6,2 trehalosa dihidrato (200 mM) 6,3 6,2 6,2
24
25 histidina 6,4 manitol (200 mM) 6,4 6,4 6,4
25
100 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 6,4 6,4 6,4
5,2 5,2 5,2
5,3
5,3
5,3
5,3
5,3
5,3
1.6 Temperatura de desplegamiento (DSF)
El DSF es un metodo de alta capacidad de procesamiento que se dirige a la determinacion de la temperatura de desplegamiento de protemas en virtud de aumentar las interacciones con sondas fluorescentes a medida que se aplican temperatures crecientes a las muestras. Cuando la protema comienza a desplegarse expondra progresivamente zonas hidrofobas al disolvente que atraen a las sondas fluorescentes que pasan de un estado libre en disolucion (no fluorescente) al estado unido (a traves de interacciones hidrofobas) con la protema, aumentando con ello el grado de la senal fluorescente.
A partir de la evaluacion de la senal fluorescente es posible determinar el punto medio de las curvas sigmoideas, que indica el punto de transicion de cada formulacion. Se supone que cuanto mas alto sea el punto de transicion, mas alta sera la resistencia de la formula al estres termico.
Los resultados de la evaluacion realizada en las formulaciones de seleccion DoE1 se indican en la figura 4. La figura 4 es un diagrama de barras que muestra la temperatura de desplegamiento (°C), determinada mediante DSF, de las formulaciones DoE1 (del ejemplo 1), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas).
La temperatura de desplegamiento de las tres formulaciones de referencia es 71-72 °C. Pocas formulaciones, aparte de las referencias, mostraron unas temperaturas de desplegamiento mayores que 70 °C, pero aquellas que sf las mostraron incluyen las formulaciones 23, 24 y 25 (formulaciones en tampon de histidina a pH 6,2-6,4 en presencia de trehalosa dihidrato o D-manitol a concentraciones variables de cloruro de sodio).
Por tanto, este ensayo confirma los resultados previamente obtenidos para la fragmentacion mediante el Bioanalyzer: los polioles/azucares pueden afectar positivamente a la estabilidad termica de la protema, en especial a pH > 6,2, mientras que el cloruro de sodio no parece afectar significativamente a su comportamiento.
1.7 Cambio en el perfil de isoformas frente a RMP
Se ensayo el perfil de isoformas de la formula de seleccion DoE 25 despues de 10-11 semanas a 40 °C y se comparo con muestras de referencia.
Los datos, en terminos de pico principal y variaciones de la agrupacion acida, se indican en la tabla 11.
Se obtuvieron variaciones comparables para las cuatro muestras ensayadas, aunque la formulacion 25 (en histidina) mostro una actuacion ligeramente mejor.
Tabla 11 - Perfil de isoformas mediante iCE280 de las formulaciones mas prometedoras procedentes de la seleccion de DoE 1 y referencias
Principal
ID
Tiempo 0 10 semanas (40 °C) 11 semanas (40 °C)
DoE1-25
56,5 - 42,2
Ref-1 (MS)
55,8 38,5 -
Ref-3 RMP (UE)
56,5 40,7 -
Ref-2 RMP (EEUU)
56,8 40,6 -
Agrupacion acida
ID
Tiempo 0 10 semanas (40 °C) 11 semanas (40 °C)
DoE1-25
19,5 - 36,9
Ref-1 (MS)
19,8 40,5 -
Ref-3 RMP (UE)
19,5 38,9 -
Ref-2 RMP (EEUU)
20,2 39,8 -
5 Conclusion del experimento de seleccion 1
Los resultados obtenidos de los ensayos con el Bioanalyzer y DSF se evaluaron de forma combinada mediante el modelo ANOVA para superficies de respuesta para determinar las mejores composiciones que probablemente puedan garantizar la mayor estabilidad termica para la protefna.
La lista de las composiciones recomendadas se indica en la tabla 12, que tambien compara las actuaciones de las 10 formulaciones de prototipos resultantes con Humira RMP, en terminos de cambio en la temperatura de desplegamiento y en la fragmentacion a lo largo de un mes a 40 °C.
La formulacion C se corresponde con la formulacion DoE1 25 y se indican los datos reales.
Comparando estas formulas con RMP puede concluirse que el comportamiento de estas formulaciones de prototipos en respuesta al estres termico es comparable con el observado para el RMP.
15 Tabal 12 - Resultado de los experimentos de DoE1: composiciones recomendadas para la segunda seleccion
Forma
Sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante
C
100 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM)
De forma algo inesperada, las formulaciones que contenfan trehalosa dihidrato como el unico estabilizante tuvieron una actuacion extremadamente buena, en especial en terminos de inhibicion de la fragmentacion, inhibicion del desplegamiento y mantenimiento del pH. Estas formulaciones basadas en trehalosa tambien mostraron una buena 20 actuacion en terminos de agregacion y precipitacion. El hecho de que la trehalosa sea un candidato tan fuerte como estabilizante, en especial utilizada por si sola, es extremadamente prometedor a la vista de sus propiedades antioxidantes, que podrfan impartir una mayor estabilidad qufmica a largo plazo (en especial frente a la oxidacion y/o la fotooxidacion) a las formulaciones de adalimumab. Ademas, el hecho de que la trehalosa pueda utilizarse por si sola y, aun asf, siga mostrando una excelente actuacion, se considera especialmente alentador y abre el camino a 25 formulaciones menos complejas que emplean menos componentes; esto, a su vez, reducirfa el procesamiento y los costes asociados con la produccion del farmaco de adalimumab pertinente. Asf, estas formulaciones basadas en trehalosa se llevaron a una segunda ronda de experimentos de seleccion para ajustar aun mas las formulaciones.
Experimento de seleccion 2: Analisis y seleccion de las formulaciones del ejemplo 2 frente a las formulaciones comparativas del ejemplo 3
30 Se identifico un prototipo de formulacion procedente de la seleccion previa (tabla 12). Puesto que la etapa previa se
36
realizo sin ningun tensioactivo anadido, la segunda etapa se dirigio a seleccionar una serie de niveles de tensioactivo de polisorbato 80 mezclado (intervalo: 0-1 mg/ml) para evaluar si la adicion de un tensioactivo resulta necesaria para favorecer la estabilidad de la protema.
La tabla 3 (ejemplo 2) resume el diseno de esta segunda etapa del estudio y lista las formulaciones (formulaciones 5 DeE2) ensayadas en este segundo ejercicio de seleccion.
Generalmente, se ha observado que los tensioactivos contrastan la agregacion inducida por un estres mecanico y, por tanto, se realizaron ensayos de estres por agitacion para evaluar como afecta el polisorbato 80 a la estabilidad de las protemas y su respuesta a la agitacion.
Al igual que en la etapa 1, tambien se evaluaron las composiciones de referencia descritas en el ejemplo 3 para 10 proporcionar una lmea de base para el desarrollo de una nueva formulacion.
La lista completa de analisis realizados en este bloque de formulaciones se indica en la tabla 13. En esta segunda seleccion, las respectivas formulaciones fueron expuestas a tres tipos diferentes de estres, termico, mecanico y lummico.
Tabla 13 - Panel de ensayos analtticos realizados en formulaciones DoE2 (etapa 2): condiciones de estres termico 15 durante un mes a 40 °C (A), estres por agitacion a 200 rpm (B) y exposicion a la luz segun ICH Q1B (C)
A. Estres termico a 40 °C
Acelerado (40 °C)
Tiempo de estabilidad (semanas)
Metodos
Ensayo 0 2 semanas 4 semanas
OD
contenido x - x
iCE280
isoformas x x x
SE-HPLC
agregados x x x
Bioanalyzer
pureza x x x
pH
pH
x x x
Osmolalidad
osmolalidad x - -
Nefelometna
turbidez x x x
DSF
temp. de desplegamiento x
B. Condiciones de estres por agitacion
Estres de agitacion (200 rpm)
Tiempo de estabilidad (semanas)
Metodos
Ensayo 0 2 semanas 4 semanas
OD
contenido x - -
SE-HPLC
agregados x x x
Bioanalyzer
pureza x x x
pH
pH
x x x
Nefelometna
turbidez x x x
C. Exposicion a la luz, 7 horas de exposicion a 765 W/m2 (ICH Q1B)
Exposicion a la luz
Muestra
Metodos
Ensayo Tiempo 0 Expuesta
OD
contenido x -
iCE280
isoformas x x
SE-HPLC
agregados x x
Bioanalyzar
pureza x x
pH
pH
x x
Nefelometna
turbidez x x
Los ensayos de estres termico se realizaron simplemente calentando una muestra de las formulaciones pertinentes a la temperatura estipulada durante la cantidad de tiempo estipulado (generalmente 2 semanas o 4 semanas/1 mes).
5 Los ensayos de estres mecanico se realizaron simplemente agitando de modo mecanico una muestra de las formulaciones pertinentes a temperatura ambiente a 200 rpm durante el periodo de tiempo estipulado (generalmente 24 horas o 48 horas).
Los ensayos de estres lummico se realizaron simplemente exponiendo una muestra de las formulaciones pertinentes a una luz de 765 W/m2 (segun las directrices de ICH Q1B de la Agencia Europea del Medicamento con relacion a los 10 ensayos de fotoestabilidad de nuevas sustancias activas y productos medicinales) durante 7 horas.
2.1 Osmolalidad
La osmolalidad de las formulaciones de seleccion DoE2 se indica en la tabla 14. Los valores, incluidos en el intervalo de 378-401 mOsm/kg, estan probablemente sobreestimados debido a la presencia de trehalosa dihidrato, que puede conducir a un pequeno aumento en la viscosidad que afecta al punto crioscopico de las disoluciones y, por tanto, a 15 la osmolalidad. Esto se confirmo por medio de mediciones con relacion a otras formulaciones de ensayo, que fueron diluidas en 3 veces con WFI antes del ensayo de la osmolalidad para disminuir la viscosidad: la verdadera osmolalidad de todas estas formulaciones es < 350 mOsm/kg.
Tabla 14 - Osmolalidad de las formulaciones de seleccion DoE2 (ensayadas sin diluir)
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante Conc. de tensioactivo (polisorbato 80) (mg/ml) Tiempo 0
DoE2-7
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0 381
DoE2-8
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,5 381
DoE2-9
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 1 378
20 2.2 Contenido en protemas (OD)
El contenido en protemas de todas las formulaciones DoE2 en el momento 0 se encontraba en lmea con la concentracion diana de protemas de 50 mg/ml (tabla 15).
5
10
15
20
25
30
35
40
Tabla 15 - Contenido en protemas (OD) de las formulaciones de seleccion DoE2 (ensayadas sin diluir)
Forma n.°
Conc. de sal (NaCI) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante Conc. de tensioactivo (polisorbato 80) (mg/ml) Tiempo 0
DoE2-7
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0 49,9
DoE2-8
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,5 50,2
DoE2-9
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 1 50,4
2.3 Agregados con estres termico (SE-HPLC)
Las variaciones en los agregados totales mediante SE-HPLC se presentan en la figura 5. La figura 5 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras rojas, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras verdes) y 4 semanas (barras moradas) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
Se observaron cambios mmimos en todas las formulaciones, siendo la cantidad total de agregados despues de un mes a 40 °C menor que 1%.
Las actuaciones de las formulaciones de seleccion DoE2 fueron comparables/ligeramente mejores que las de los materiales de RMP.
2.4 Fragmentacion con estres termico (Bioanalyzer)
Las variaciones en los fragmentos determinadas mediante un Bioanalyzer se presentan en la figura 6. La figura 6 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La formulacion DoE2-7 (sin polisorbato 80) sufre un aumento coherente en los fragmentos, mientras que las otras dos, en presencia de tensioactivo, resultaron comparables a los materiales de RMP. Considerando los datos disponibles de los experimentos DoE1 sobre la formulacion n.° 25 (comparable a la forma 7 de DoE2), puede concluirse que la mayor degradacion de DoE2-7 puede atribuirse a una posible contaminacion de la muestra.
2.5 Perfil de isoformas con estres termico (iCE280)
El pico principal y los cambios en la agrupacion acida de las tres formulaciones a lo largo de un mes a 40 °C se indican en las figuras 7 y 8, respectivamente.
La figura 7 es un diagrama de barras que muestra el perfil de isoformas del pico principal, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La figura 8 es un diagrama de barras que muestra el perfil de las isoformas del pico o picos de la agrupacion acida, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
Los mayores cambios se observan en DoE2-7 (aproximadamente 15% en el pico principal), pero esto puede derivarse de una posible contaminacion de la muestra, tal como se indico previamente.
Estos resultados confirman las pruebas experimentales que ya fueron indicadas por iCE280 sobre las formulaciones de prototipos (que resultan de la primera seleccion): las formulaciones en histidina presentan unas velocidades de degradacion comparables, en terminos de perfil de isoformas, a RMP.
Los resultados, en terminos de la agrupacion acida, estan en lmea con las observaciones realizadas para el pico principal.
2.6 Seleccion de pH con estres termico
La variacion en el pH de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) a lo largo de un periodo de tiempo durante el cual
5
10
15
20
25
30
35
las formulaciones se calientan a 40 °C se muestra en la tabla 16.
Se observaron disminuciones en el pH en DoE2-7, tal como se muestra en la tabla 16. Esto puede derivarse de posibles contaminaciones/proliferacion de bacterias en las muestras.
Tabla 16 - Seleccion DoE2: pH (estres termico a 40 °C)
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante Conc. de tensioactivo (polisorbato 80) (mg/ml) Tiempo 0 2 semanas (40 °C) 4 semanas (40 °C)
DoE2-7
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0 6,4 4,3 4,3
DoE2-8
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,5 6,4 6,4 6,4
DoE2-9
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 1 6,4 6,4 6,4
2.7 Turbidez con estres termico (nefelometria)
La figura 9 es un diagrama de barras que muestra la turbidez, determinada mediante nefelometna, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 2 semanas (barras rojas) y 4 semanas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han calentado a 40 °C.
La turbidez de las tres formulaciones, en el momento 0, esta en el intervalo de las disoluciones generalmente opalescentes (6-18 NTU). Con respecto a los materiales de DS originarios, con una turbidez tfpica de 19-52 NTU, las disoluciones DP, despues de una filtracion aseptica, fueron considerablemente aclaradas.
De manera importante, los valores de turbidez de Humira RMP normalmente son de aproximadamente 10 NTU, en lmea con las formulas de los inventores.
2.8 Agregados con estres mecanico (SE-HPLC)
La figura 10 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 24 horas (barras rojas) y 48 horas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han agitado de modo mecanico.
Las variaciones en los agregados totales mediante SE-HPLC se presentan en la figura 10.
Se observaron cambios mmimos (+0,1%) para todas las formulaciones en tampon de histidina.
2.9 Fragmentacion con estres mecanico (Bioanalyzer)
La figura 11 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 24 horas (barras rojas) y 48 horas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han agitado de modo mecanico.
Las variaciones en los fragmentos determinadas por un Bioanalyzer se presentan en la figura 11. Se observaron cambios mmimos, siendo todos los valores registrados igual o menores que 0,5%.
Despues de 48 horas de agitacion a temperatura ambiente, todas las muestras presentaron una fragmentacion en el intervalo de 0,2-0,4%. No se observo ninguna tendencia hacia un aumento en la fragmentacion despues de la agitacion mecanica.
2.10 Seleccion de pH con estres mecanico
La variacion en el pH de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) a lo largo de un periodo de tiempo durante el cual las formulaciones se agitan de modo mecanico se muestra en la tabla 17. No se observaron cambios.
5
10
15
20
25
30
35
40
Tabla 17 - Seleccion DoE2: pH (agitacion mecanica)
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante Conc. de tensioactivo (polisorbato 80) (mg/ml) Tiempo 0 2 semanas (40 °C) 4 semanas (40 °C)
DoE2-7
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0 6,4 6,5 6,5
DoE2-8
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,5 6,4 6,4 6,4
DoE2-9
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 1 6,4 6,4 6,4
2.11 Turbidez con estres mecanico (nefelometria)
La figura 12 es un diagrama de barras que muestra la turbidez, determinada mediante nefelometna, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) en un punto de inicio arbitrario (barras azules, tiempo = 0) y despues de 24 horas (barras rojas) y 48 horas (barras verdes) de la formulacion o formulaciones que se han agitado de modo mecanico. No se observaron cambios.
2.12 Agregados con estres lumnico (SE-HPLC)
La figura 13 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
Tambien se realizaron comparaciones con muestras de Humira (de EEUU y UE) tratadas bajo las mismas condiciones. En el RMP, la agregacion aumenta hasta 9-15% tras la exposicion a la luz (en el momento 0, los agregados son menores que 1%). Todas las formulaciones DoE2 presentan unos aumentos menores o comparables y, por tanto, una resistencia mejor/similar al estres termico. Dicho con mas detalle:
formulaciones en tampon de histidina: 5,8^9,2% de agregados totales tras la exposicion a la luz
2.13 Fragmentacion con estres lumnico (Bioanalyzer)
La figura 14 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de fragmentacion, determinado mediante un Bioanalyzer, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
Se indican unos aumentos mmimos (+0,3% como maximo, despues de la exposicion). Todas las cantidades de fragmentacion estan muy por debajo de 1% despues de una exposicion durante 7 horas (figura 14).
2.14 Perfil de isoformas con estres lum^nico (iCE280)
La figura 15 es un diagrama de barras que muestra el perfil de isoformas del pico principal, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
La figura 16 es un diagrama de barras que muestra el perfil de las isoformas del pico o picos de la agrupacion acida, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas), antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas).
En el Humira RMP, la exposicion a la luz determina unos efectos significativos: de forma importante, se observan unas disminuciones en la abundancia del pico principal (aproximadamente -9%) y un aumento concurrente en la agrupacion acida (hasta +15%), relacionados con el fenomeno de la fotooxidacion.
Se descubrio que las formulas en histidina fueron mas susceptibles a la degradacion que resulta de la exposicion a la luz que el RMP: las disminuciones en la abundancia del pico principal son -11,4% (DoE2-7) o incluso mayor (aproximadamente -18% para los otros), y los aumentos en la agrupacion acida llegaron a +27%.
La histidina es susceptible a la oxidacion, que deriva de una intensa exposicion a la luz, y los productos de la degradacion (generalmente peroxidasas) liberados por los polisorbatos bajo condiciones de estres. Por tanto, polisorbato 80 + histidina es una combinacion que puede crear una mayor inestabilidad bajo un estres lummico.
Para aclarar aun mas el impacto del tensioactivo y determinar si es necesario a evitar la degradacion de las protemas/formacion de partmulas tras los ciclos de congelacion-descongelacion, se realizaron experimentos
41
5
10
15
20
25
30
35
40
especializados que indicaron que el polisorbato 80 no aporta ningun valor anadido. Esto podna conducir, en ultimo termino, a una formulacion de apoyo sin tensioactivo en histidina.
2.15 Turbidez con estres lumnico (nefelometria)
La figura 17 es un diagrama de barras que muestra la turbidez, determinada mediante nefelometna, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes de la exposicion a la luz (barras azules, tiempo = 0) y despues de una exposicion durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 (barras rojas). Fundamentalmente no se observaron cambios.
2.16 Seleccion de pH con estres lumnico
La variacion en el pH de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), a lo largo de un periodo de tiempo en el que las formulaciones se exponen durante 7 horas a una luz de 765 W/m2 se muestra en la tabla 18. No se observaron cambios.
Tabla 18 - Seleccion DoE2: pH (exposicion a la luz)
Forma n.°
Conc. de sal (NaCl) (mM) Tipo de tampon (10 mM) pH Estabilizante Conc. de tensioactivo (polisorbato 80) (mg/ml) Tiempo 0 Despues de la exposicion
DoE2-7
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0 6,4 6,5
DoE2-8
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 0,5 6,4 6,5
DoE2-9
50 histidina 6,4 trehalosa dihidrato (200 mM) 1 6,4 6,5
2.17 Efecto del tensioactivo sobre los ciclos de congelacion-descongelacion
Los perfiles de isoformas, los agregados y las partfculas subvisibles de las tres formulaciones DoE2 se determinaron ante y despues de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente) para evaluar si el tensioactivo ejerce algun impacto.
La figura 18 es un diagrama de barras que muestra el perfil de isoformas del pico principal, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 19 es un diagrama de barras que muestra el perfil de las isoformas del pico o picos de la agrupacion acida, determinado mediante analisis de iCE280, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 20 es un diagrama de barras que muestra el porcentaje de agregacion, determinado mediante SE-HPLC, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2), junto con patrones de referencia (que representan formulaciones de HUMIRA® comparativas) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) cinco ciclos de congelacion- descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 21 es un diagrama de barras que muestra la concentracion del numero (n.°/mg) de partfculas subvisibles con un tamano de partfcula menor o igual a 10 micrometres, segun se determina mediante un analisis de recuento de partfculas subvisibles, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
La figura 22 es un diagrama de barras que muestra la concentracion del numero (n.°/mg) de partreulas subvisibles con un tamano de partreula menor o igual a 25 micrometros, segun se determina mediante un analisis de recuento de partreulas subvisibles, de las formulaciones DoE2 (del ejemplo 2) antes (barras azules, tiempo = 0) y despues m2 (barras rojas) cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente).
No se observaron cambios en las isoformas y los agregados (figuras 18-20) tras la congelacion-descongelacion, mientras que se indican cambios mrnimos, no cnticos (figuras 21-22) en las partreulas subvisibles, que se descubrio que no estaban relacionados con la presencia del tensioactivo. Es muy probable que el mayor recuento de partreulas en DoE2-8 este relacionado con la preparacion de las muestras.
Por tanto, la adicion del tensioactivo no aporta ningun valor anadido si se desea prevenir la formacion de partreulas y agregados/degradacion de las proternas durante los ciclos de congelacion-descongelacion. Esto indica la eficacia de las nuevas formulaciones, independientemente del tensioactivo.
Conclusion del experimento de seleccion 2
Basandose en los datos recogidos, con respecto al estres termico, mecanico y lummico, puede llegarse a la siguiente conclusion:
En las formulaciones en tampon de histidina 10 mM a pH 6,4 (DoE2-7, DoE2-8, DoE2-9):
-tras un estres termico, se indican actuaciones comparables a Humira.
5 - se produce un aumento mmimo en la agregacion tras la agitacion mecanica.
- aumenta la degradacion y el cambio en el perfil de isoformas con respecto a Humira, debido a la susceptibilidad de la histidina a la luz y a los productos de la degradacion procedentes del polisorbato 80. La formulacion sin polisorbato 80 en este grupo (DoE2-7) aun es ligeramente peor que RMP, pero es considerablemente mejor que las otras en histidina + polisorbato 80 (0,5 o 1,0 mg/ml).
10 Se ha evaluado la presencia de polisorbato 80 para evaluar su eficacia y funcion como protector para la protema (proteccion frente a la congelacion-descongelacion). Despues de cinco ciclos de congelacion-descongelacion (-80 °C ^ temperatura ambiente), se observo que el tensioactivo no aporta ningun valor anadido, y la recomendacion es avanzar a DoE2-7, que no lleva tensioactivo (adalimumab 50 mg/ml, trehalosa dihidrato 200 mM, cloruro de sodio 50 mM en histidina 10 mM, pH 6,4).
15 Basandose en el trabajo de seleccion realizado con diferentes formulaciones que vanan en tampon/pH, estabilizante, cantidad de agente de isotonicidad (NaCl) y nivel de tensioactivo (polisorbato 80), se ha concluido que la mejor composicion, que muestra unas caractensticas comparables e incluso mejores con respecto a Humira bajo diferentes condiciones de estres (termico, mecanico, lummico) es:
Ingrediente
Cantidad (mg/ml)
Adalimumab
50
Histidina (anhidra)
1,55*
Trehalosa dihidrato
75,67**
Cloruro de sodio
2 92***
WFI e hidroxido de sodio
c.s hasta ajustar el pH a 6,4
* se corresponde con histidina 10 mM; ** se corresponde con 200 mM; *** se corresponde con 50 mM
20 Estas formulaciones pueden incorporarse con facilidad dentro de jeringas de vidrio precargadas con agujas 29G de 1,27 cm.
Abreviaturas
DoE: diseno de experimento DP: producto de farmaco 25 DS: sustancia farmaco
DSF: fluorimetna de barrido diferencial OD: densidad optica PES: polietersulfona rpm: rondas por minuto 30 TA: temperatura ambiente
SE-HPLC: cromatograffa lfquida de alta resolucion de exclusion molecular SMI: resumen de las instrucciones de fabricacion SOP: procedimiento de ejecucion convencional WI: instrucciones de trabajo 35

Claims (6)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    REIVINDICACIONES
    1. - Una composicion farmaceutica Kquida que comprende:
    - adalimumab de 45 a 55 mg/ml;
    - histidina de 5 a 14 mM (o un sistema de tampon de histidina);
    - trehalosa de 190 a 210 mM;
    - cloruro de sodio de 40 a 60 mM;
    - agua (para inyeccion); en la que la composicion:
    ■ tiene un pH entre 6,3 y 6,5;
    ■ no comprende arginina o comprende arginina en una concentracion maxima de 0,001 mM;
    ■ no comprende aminoacidos distintos de la histidina o comprende uno o mas aminoacidos distintos de la histidina en una concentracion (colectiva) maxima de 0,001 mM;
    ■ no comprende tensioactivos o comprende uno o mas tensioactivos en una concentracion (colectiva) maxima de 0,0001 mM; y/o
    ■ no comprende agentes tamponantes de fosfato o comprende un sistema de tampon fosfato en una concentracion maxima de 0,001 mM.
  2. 2. - La composicion farmaceutica lfquida de la reivindicacion 1, en la que la composicion comprende:
    - adalimumab 50 mg/ml;
    - histidina 10 mM (o un sistema de tampon de histidina);
    - trehalosa 200 mM;
    - cloruro de sodio 50 mM;
    - polisorbato 80 1,0 mg/ml; y
    - agua (para inyeccion); en la que la composicion:
    ■ tiene un pH de 6,4;
    ■ no comprende arginina;
    ■ no comprende aminoacidos distintos de la histidina;
    ■ no comprende tensioactivos; y
    ■ no comprende agente tamponantes de fosfato/sistemas de tampon fosfato.
  3. 3. - La composicion farmaceutica lfquida de la reivindicacion 1, en la que la composicion comprende:
    - adalimumab 50 mg/ml;
    - histidina 10 mM (o un sistema de tampon de histidina);
    - trehalosa 200 mM;
    - cloruro de sodio 50 mM; y
    - agua (para inyeccion); en la que la composicion:
    ■ tiene un pH de 6,4.
  4. 4.- La composicion farmaceutica lfquida segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la osmolalidad
    44
    de la composicion esta entre 220 y 390 mOsm/kg.
  5. 5.- La composicion farmaceutica Ifquida segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la temperature de desplegamiento de las protemas del adalimumab en una composicion farmaceutica lfquida es mayor o igual a 70 °C.
    5 6.- Un dispositivo de transporte de farmacos que comprende una composicion farmaceutica lfquida segun cualquiera
    de las reivindicaciones anteriores.
  6. 7.- El dispositivo de transporte de farmacos de la reivindicacion 6, en el que el dispositivo de transporte de farmacos es un vial, una ampolla, una jeringa, una pluma de inyeccion o una bolsa intravenosa que comprende la composicion farmaceutica lfquida.
    10 8.- Una composicion farmaceutica lfquida segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para su uso en el
    tratamiento de la artritis reumatoide, la artritis psoriatica, la espondilitis anquilosante, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la psoriasis cronica de moderada a grave y/o la artritis idiopatica juvenil.
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