WO2020145789A1

WO2020145789A1 - 항체를 포함하는 약학적 조성물, 이를 포함하는 디바이스, 및 이의 용도

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Publication number: WO2020145789A1
Application number: PCT/KR2020/000611
Authority: WO
Inventors: 김미경; 이승하; 정영석; 홍자혜; 정소윤; 주경희; 남명주; 장하라; 오인영; 김인애; 이헌주; 김용국; 김한수; 정우진; 이나영; 이경진; 박재우
Original assignee: 삼성바이오에피스 주식회사
Priority date: 2019-01-11
Filing date: 2020-01-13
Publication date: 2020-07-16
Also published as: BR112021013497A2; TW202042840A; IL284587A; EP3909607A4; US20220081478A1; CA3125927A1; AU2020207124A1; KR20210102954A; EP3909607A1; US20210347877A1; US20210347878A1

Abstract

단백질의 안정성이 증진된 액상의 약학적 조성물, 보다 구체적으로, 항체를 포함하는 안정한 액상의 약학적 조성물, 및 이의 용도가 제공된다.

Description

항체를 포함하는 약학적 조성물, 이를 포함하는 디바이스, 및 이의 용도

단백질의 안정성이 증진된 액상의 약학적 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 항체를 포함하는 안정한 액상의 약학적 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.

항체 약물은 다른 일반 단백질 약물에 비해 분자량이 크고 구조가 복잡해서, 물리적, 화학적으로 불안정하다는 문제가 있다. 항체의 불안정성은 온도, pH, 완충제 유형, 농도, 부형제 등 다양한 요인에 기인할 수 있다. 항체의 불안정성은 인체에 투여할 때 항체 약물의 활성을 감소시키거나 항원 면역성을 증가시킬 수 있다. 항체 약물의 불안정성을 줄이고 품질을 개선한 제형을 개발하기 위하여, 완충액 변조, pH 최적화, 안정제 첨가 등 다양한 방법이 사용되어 왔다.

일 예로 류머티스 관절염 치료제인 Humira® (adalimumab)는 100mg/mL 아달리무맙, 4.2% 만니톨, 및 0.1% 폴리소르베이트 80를 포함하고 완충제를 포함하지 않는 pH 5.2의 액상 항체 약물이다.

최소한의 부작용을 가지면서 안정적인 항체 제형의 개발이 지속적으로 요구되고 있다.

이에, 본 명세서에서는 단백질 약물의 안정성을 증진시키기 위한 수성(aqueous) 액상 조성물, 구체적으로는 단백질 약물을 포함하는 약학적 조성물 및 이의 용도가 제공된다.

일 예는

아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml,

포스페이트를 포함하는 완충제 및

히스티딘을 포함하고,

pH 5 내지 7인, 약학적 조성물을 제공한다.

상기 약학적 조성물은 시트레이트, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들 모두를 포함하지 않는 것일 수 있다.

또한, 상기 약학적 조성물은 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은 포함하지 않는 것일 수 있다.

상기 약학적 조성물은 히스티딘을 제외한 아미노산을 포함하지 않는 것일 수 있다.

상기 약학적 조성물은 EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid)를 포함하지 않는 것일 수 있다.

상기 완충제는 숙시네이트 및 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함하는 것일 수 있다.

또한, 상기 약학적 조성물은 광 노출시 다음 중 하나 이상의 특징을 갖는 것일 수 있다:

아달리무맙의 256번째 아미노산 잔기인 메티오닌의 산화율(%Met_{256/light-exposured}) 변화량(Δ%Met₂₅₆=%Met_{256/Light-exposured} ^-%Met_256/Base)이 68% 이하,

SE-HPLC로 측정된 단백질 응집률 (%HMW； % High Molecular Weight) 변화량 (Δ%HMW =%HMW_{Light-exposured} ^-%HMW_Base)이 16% 이하, 및

SE-HPLC로 측정된 단백질 분해율 (%LMW; % Low Molecular Weight) 변화량 (Δ%LMW =%LMW_{Light-exposured} ^-%LMW_Base)이 1.6% 이하.

상기 약학적 조성물은 폴리올을 추가로 포함할 수 있다.

상기 약학적 조성물은 계면활성제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 계면활성제는 폴리소르베이트류, 예컨대, 폴리소르베이트 20일 수 있다.

다른 예는 상기 약학적 조성물을 포함하는, 질병 치료를 위한 약학적 조성물을 제공한다. 상기 질병은 항-TNFα 항체인 아달리무맙이 치료, 개선, 및/또는 예방 효과를 갖는 질병일 수 있다.

다른 예는 상기 약학적 조성물을 포함하는 디바이스를 제공한다.

다른 예는 아달리무맙의 투여를 필요로 하는 대상에게 상기 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 질병의 치료 방법을 제공한다.

본 발명에서는 단백질 약물의 안정성을 증진시키기 위한 수성(aqueous) 액상 조성물, 구체적으로는 항체를 포함하는 액상 약학적 조성물을 제공한다. 상기 수성 액상 조성물(액상 약학적 조성물)은 하기 기재된 성분 및 잔량의 수성 매질 (물 (정제수), 생리식염수, 주사 용수 등)을 포함하는 것일 수 있다.

용어의 정의

용어 "약(about)" 또는 "대략(approximately)"은 일반적으로 주어진 값 또는 범위의 상하 20% 이내, 10% 이내, 5% 이내, 4% 이내, 3% 이내, 2% 이내 또는 1% 이내의 값 또는 범위를 포함하는 의미로 해석될 수 있다.

용어 "장기간 저장 안정성" 또는 "장기간 안정성"은 약학적 조성물이 3개월 이상 동안, 6개월 이상 동안, 1년 이상 동안, 2년 이상 동안 안정한 상태로 저장할 수 있음을 의미할 수 있다. 일 예에서, 상기 "저장"은 약학적 조성물을 액체로서 2 내지 8℃에서 저장하거나, -20℃에서 또는 더 낮은 온도로 냉동시키거나, 1회 이상 냉동되고 해동되는 등의 가혹조건에서 수행되는 경우를 모두 포함하는 개념으로 이해될 수 있다.

용어 "안정한 상태"는, 저장 기간 동안의 약학적 조성물에 함유된 항체(예컨대, 아달리무맙)의 생물학적 활성의 손실 및/또는 구조적 안정성의 손실 (예, 응집, 분해, 변성 (산성 또는 염기성), 산화 등) 정도가, 저장 초기와 비교하여, 20% 이하, 15% 이하, 10% 이하, 또는 5% 이하인 것을 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

용어 "A를 포함하지 않는(free)" 또는 "A를 실질적으로 포함하지 않는(substantially free)"은 물질 A가 전혀 존재하지 않나, 조성물의 특성에 실질적으로 어떠한 영향을 미치지 않으면서 미량으로 존재하는 것을 의미하는 것일 수 있다. 물질 A의 함량의 언급이 없는 경우, "검출 불가능한 양"을 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

용어 "약학적 조성물(pharmaceutical composition)" 은 활성 성분의 생물학적 활성이 유효하게 작용할 수 있도록 하고, 상기 조성물이 투여될 대상에 대하여 심각한 독성을 갖는 추가의 성분을 포함하지 않는 제제(preparation)를 의미한다. 상기 조성물은 멸균된 것일 수 있다.

용어 "약학적으로 허용 가능한" 은 대상에게 투여하기에 적합한 부형제(excipients), 담체(carriers), 비히클(vehicles), 희석제(diluents), 첨가제(additives), 염(salts) 등을 의미할 수 있다.

용어 "약학적 제형(pharmaceutical formulation)" 또는 "제형(formulation)" 은 활성 약물을 화학 물질과 조합하여 최종 의약품을 생산하는 공정의 생성물을 말하며, 최종 제형은 의약품, 예컨대, 주사제, 캡슐, 환제, 정제, 에멀젼 등을 의미할 수 있다.

(1) 항체

본 명세서에서 항체는 항-TNFα 항체를 의미하는 것일 수 있으며, 상기 항-TNFα 항체는, TNFα에 결합하여 이의 생물학적 활성을 조절하는 모든 항체를 의미할 수 있다.

종양괴사인자-알파 (TNF alpha, TNFα)는 엔도톡신 등의 자극에 의해 단핵백혈구 및 대식세포 등의 다양한 종류의 세포에 의해 만들어지는 사이토카인이다. TNFα 는 TNF 수용체를 활성화시켜 T-세포 활성화, 흉선세포 증식 등의 반응을 유도하는 역할을 하는 주요 염증성, 면역성, 병리생리학적 반응의 주요 매개체이다.

상기 항-TNFα 항체는 전장 항체 또는 이의 항원 결합 부위를 포함하는 항체 단편의 형태일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. 구체적으로 상기 항-TNFα 항체는, 인간 면역글로불린 G1(hIgG1) 단일클론성 항체일 수 있으며, 보다 구체적으로는 아달리무맙(adalimumab)일 수 있다.

아달리무맙은 의약품으로 개발된 최초의 완전 인간항체로 파아지 디스플레이 기술을 적용하여 개발되었고 CDR에 돌연변이를 일으켜 친화력이 증강되었다. 아달리무맙은 D2E7이라고도 불리며, 1330개의 아미노산으로 이루어진 약 148kD의 분자량을 가지고 있다. 아달리무맙은 휴미라라는 상품명으로 판매되고 있으며, 휴미라는 류마티스 관절염 치료제로 판매허가를 받은 후 크론병, 강직성 척추염, 건선성 관절염, 궤양성 대장염, 판상형 건선(plaque psoriasis), 류마티스 관절염, 다관절 및 소아 특발성 관절염 등의 치료에 사용되고 있으며, 상기 아달리무맙에 대한 더 자세한 정보는 공지의 데이터베이스에서 당업자가 용이하게 입수할 수 있다.

본 명세서에 사용된 바로서, 용어 "아달리무맙"은 또한, 폴리펩타이드 기능에 영향을 주지 않는 범위에서, 아미노산 구조가 변형되거나 (아미노산의 결실, 첨가, 및/또는 치환), 및/또는 당화 특성이 변형된 아달리무맙을 포함하는 의미로 해석될 수 있다.

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물 내의 항-TNFα 항체는 치료학적 유효량으로 포함될 수 있다. 구체적으로, 약 25 내지 약 200 mg/ml, 약 25 내지 약 175 mg /ml, 약 25 내지 약 150 mg/ml, 약 25 내지 약 125 mg/ml, 약 25 내지 약 100 mg/ml, 약 25 내지 약 75 mg/ml, 약 25 내지 약 50 mg/ml, 약 30 내지 약 200 mg/ml, 약 30 내지 약 175 mg /ml, 약 30 내지 약 150 mg/ml, 약 30 내지 약 125 mg/ml, 약 30 내지 약 100 mg/ml, 약 30 내지 약 75 mg/ml, 약 30 내지 약 50 mg/ml, 약 40 내지 약 200 mg/ml, 약 40 내지 약 175 mg /ml, 약 40 내지 약 150 mg/ml, 약 40 내지 약 125 mg/ml, 약 40 내지 약 100 mg/ml, 약 40 내지 약 75 mg/ml, 약 40 내지 약 50 mg/ml, 약 50 내지 약 200 mg/ml, 약 50 내지 약 175 mg /ml, 약 50 내지 약 150 mg/ml, 약 50 내지 약 125 mg/ml, 약 50 내지 약 100 mg/ml, 약 75 내지 약 200 mg/ml, 약 75 내지 약 175 mg/ml, 약 75 내지 약 150 mg/ml, 약 75 내지 약 125 mg/ml, 약 75 내지 약 100 mg/ml, 약 100 내지 약 200 mg/ml, 약 100 내지 약 175 mg/ml, 약 100 내지 150 mg/ml, 약 100 내지 약 125 mg/ml, 약 150 내지 약 200 mg/ml, 약 150 내지 약 175 mg/ml, 약 50 mg/ml, 약 100 mg/ml, 또는 약 200 mg/ml일 수 있다.

(2) 완충제

본 명세서에서 완충제는, 제형의 pH를 조절하는 기능을 하는 것으로, 포스페이트를 포함하거나, 이에 더하여, 아세테이트, 숙시네이트, 또는 이들 모두를 추가로 포함하는 수용액일 수 있다.

본 명세서에서 포스페이트, 아세테이트, 및 숙시네이트는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 및/또는 수화물(예컨대, monohydrate 등) 형태를 포함하는 의미로 해석될 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 염은 나트륨염, 칼륨염, 숙신산염, 인산염 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 명세서에서 별도의 언급이 없는 한, 용어 "포스페이트"는 포스페이트, 이의 약학적으로 허용 가능한 염(예컨대, 나트륨염), 및 이의 수화물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 의미하는 것으로 해석될 수 있다.

본 명세서에서 별도의 언급이 없는 한, 용어 "숙시네이트"는 숙시네이트, 이의 약학적으로 허용 가능한 염(예컨대, 나트륨염), 및 이의 수화물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 의미하는 것으로 해석될 수 있다.

본 명세서에서 별도의 언급이 없는 한, 용어 "아세테이트"는 아세테이트, 이의 약학적으로 허용 가능한 염(예컨대, 나트륨염), 및 이의 수화물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 의미하는 것으로 해석될 수 있다.

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에 포함되는 항-TNF 알파 항체 단백질의 안정성을 증진시키기 위하여, 상기 완충제는 pH가 약 4.0 내지 약 8.0인 것일 수 있으며, pH가 약 4.0 내지 약 7.5, 약 4.0 내지 약 7, 약 4.0 내지 약 6.5, 약 4.0 내지 약 6, 약 4.0 내지 약 5.5, 약 4.5 내지 약 7.5, 약 4.5 내지 약 7, 약 4.5 내지 약 6.5, 약 4.5 내지 약 6, 약 4.5 내지 약 5.5, 약 4.8 내지 약 7.5, 약 4.8 내지 약 7, 약 4.8 내지 약 6.5, 약 4.8 내지 약 6, 약 4.8 내지 약 5.6, 약 5.0 내지 약 7.5, 약 5.0 내지 약 7, 약 5.0 내지 약 6.5, 약 5.0 내지 약 6, 약 5.0 내지 약 5.5, 약 5.2 내지 약 7.5, 약 5.2 내지 약 7.2, 약 5.2 내지 약 7, 약 5.2 내지 약 6.8, 약 5.2 내지 약 6.6, 약 5.2 내지 약 6.5, 약 5.5 내지 약 7.5, 약 5.5 내지 약 7.2, 약 5.5 내지 약 7, 약 5.5 내지 약 6.8, 약 5.5 내지 약 6.6, 약 5.5 내지 약 6.5, 약 6.0 내지 약 7.5, 약 6.0 내지 약 7.2, 약 6.0 내지 약 7, 약 6.0 내지 약 6.8, 약 6.0 내지 약 6.6, 약 6.0 내지 약 6.5, 약 6.4 내지 약 7.5, 약 6.4 내지 약 7.2, 약 6.4 내지 약 7, 약 6.4 내지 약 6.8, 약 6.4 내지 약 6.6, 약 6.4 내지 약 6.5, 약 5.2, 약 5.3, 약 5.4, 또는 약 6.5인 것일 수 있다.

상기 완충제는, 전체 약학적 조성물 기준으로, 약 0.1 mM 내지 약 50 mM, 약 0.1 mM 내지 약 40 mM, 약 0.1 mM 내지 약 30 mM, 약 0.1 mM 내지 약 20 mM, 약 0.1 ml 내지 약 13 mM, 약 0.1 mM 내지 약 10 mM, 약 0.1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 0.1 mM 내지 약 6 mM, 약 0.1 mM 내지 약 4 mM, 약 0.1 mM 내지 약 3 mM, 약 0.1 mM 내지 약 2.7 mM, 약 0.5 mM 내지 약 50 mM, 약 0.5 mM 내지 약 40 mM, 약 0.5 mM 내지 약 30 mM, 약 0.5 mM 내지 약 20 mM, 약 0.5 mM 내지 약 13 mM, 약 0.5 mM 내지 약 10 mM, 약 0.5 mM 내지 약 7.8 mM, 약 0.5 mM 내지 약 6 mM, 약 0.5 mM 내지 약 4 mM, 약 0.5 mM 내지 약 3 mM, 약 0.5 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1 mM 내지 약 50 mM, 약 1 mM 내지 약 40 mM, 약 1 mM 내지 약 30 mM, 약 1 mM 내지 약 20 mM, 약 1 mM 내지 약 13 mM, 약 1 mM 내지 약 10 mM, 약 1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1 mM 내지 약 6 mM, 약 1 mM 내지 약 5mM, 약 1 mM 내지 약 4 mM, 약 1 mM 내지 약 3 mM, 약 1 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1.7 mM 내지 약 50 mM, 약 1.7 mM 내지 약 40 mM, 약 1.7 mM 내지 약 30 mM, 약 1.7 mM 내지 약 20 mM, 약 1.7 mM 내지 약 13 mM, 약 1.7 mM 내지 약 10 mM, 약 1.7 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1.7 mM 내지 약 6 mM, 약 1.7 mM 내지 약 5mM, 약 1.7 mM 내지 약 4 mM, 약 1.7 mM 내지 약 3 mM, 약 1.7 mM 내지 약 2.7 mM, 약 2 mM 내지 약 50 mM, 약 2 mM 내지 약 40 mM, 약 2 mM 내지 약 30 mM, 약 2 mM 내지 약 20 mM, 약 2 mM 내지 약 13 mM, 약 2 mM 내지 약 10 mM, 약 2 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2 mM 내지 약 6 mM, 약 2 mM 내지 약 3mM, 약 2 mM 내지 약 2.7 mM, 약 2.5 mM 내지 약 50 mM, 약 2.5 mM 내지 약 40 mM, 약 2.5 mM 내지 약 30 mM, 약 2.5 mM 내지 약 20 mM, 약 2.5 mM 내지 약 13 mM, 약 2.5 mM 내지 약 10 mM, 약 2.5 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2.5 mM 내지 약 6 mM, 약 2.7 mM 내지 약 50 mM, 약 2.7 mM 내지 약 40 mM, 약 2.7 mM 내지 약 30 mM, 약 2.7 mM 내지 약 20 mM, 약 2.7 mM 내지 약 13 mM, 약 2.7 mM 내지 약 10 mM, 약 2.7 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2.7 mM 내지 약 6 mM, 약 2.7 mM 내지 약 5.4 mM, 약 3 mM 내지 약 50 mM, 약 3 mM 내지 약 40 mM, 약 3 mM 내지 약 30 mM, 약 3 mM 내지 약 20 mM, 약 3 mM 내지 약 12 mM, 약 3 mM 내지 약 10 mM, 약 3 mM 내지 약 7.8 mM, 약 3 mM 내지 약 6 mM, 약 3 mM 내지 약 5.4 mM, 약 4.1 mM 내지 약 50 mM, 약 4.1 mM 내지 약 40 mM, 약 4.1 mM 내지 약 30 mM, 약 4.1 mM 내지 약 20 mM, 약 4.1 mM 내지 약 12 mM, 약 4.1 mM 내지 약 10 mM, 약 4.1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 4.1 mM 내지 약 6 mM, 약 4.1 mM 내지 약 5.4 mM, 약 1 mM, 약 2.5 mM, 약 2.6 mM, 약 2.7 mM, 약 2.8 mM, 약 2.9 mM, 약 4.8 mM, 약 4.9 mM, 약 5 mM, 약 5.1 mM, 약 5.2 mM, 약 5.3 mM, 약 5.4 mM, 약 7.2 mM, 약 7.3 mM, 약 7.4 mM, 약 7.5 mM, 약 7.6 mM, 약 7.7 mM, 약 7.8 mM, 약 9.8 mM, 또는 약 10 mM의 농도로 포함될 수 있다.

상기 완충제는 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 1종, 2종 또는 3종)을 포함할 수 있다.

일 예에서, 상기 완충제는 포스페이트를 포함할 수 있다. 다른 예에서, 상기 완충제는 포스페이트를 포함하고 시트레이트를 포함하지 않는 것일 수 있다. 다른 예에서, 상기 완충제는 (1) 포스페이트 및, (2) 숙시네이트 및/또는 아세테이트를 포함하고, 시트레이트를 포함하지 않는 것일 수 있다.

상기 포스페이트 함량은, 전체 약학적 조성물 기준으로, 약 0.1 mM 내지 약 10 mM, 약 0.1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 0.1 mM 내지 약 6 mM, 약 0.1 mM 내지 약 4 mM, 약 0.1 mM 내지 약 3.3mM, 약 0.1 mM 내지 약 3 mM, 약 0.1 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1 mM 내지 약 10 mM, 약 1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1 mM 내지 약 6 mM, 약 1 mM 내지 약 5mM, 1 mM 내지 약 4 mM, 약 1 mM 내지 약 3.3mM, 약 1 mM 내지 약 3 mM, 약 1 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1.7 mM 내지 약 10 mM, 약 1.7 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1.7 mM 내지 약 6 mM, 약 1.7 mM 내지 약 4 mM, 약 1.7 mM 내지 약 3.3mM, 약 1.7 mM 내지 약 3 mM, 약 1.7 mM 내지 약 2.7 mM, 약 2 mM 내지 약 10 mM, 약 2 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2 mM 내지 약 6 mM, 약 2 mM 내지 약 4 mM, 약 2 mM 내지 약 3.3 mM, 약 2 mM 내지 약 3 mM, 약 2 mM 내지 약 2.7 mM, 약 2.5 mM 내지 약 10 mM, 약 2.5 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2.5 mM 내지 약 6 mM, 약 2.5 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1 mM, 약 2.5 mM, 약 2.6 mM, 약 2.7 mM, 약 2.8 mM, 또는 약 2.9 mM일 수 있다.

상기 숙시네이트 함량은, 전체 약학적 조성물 기준으로, 약 0.1 mM 내지 약 20 mM, 약 0.1 mM 내지 약 12 mM, 약 0.1 mM 내지 약 10 mM, 약 0.1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 0.1 mM 내지 약 6.2 mM, 약 0.1 mM 내지 약 5.4 mM, 약 0.1 mM 내지 약 3 mM, 약 1 mM 내지 약 20 mM, 약 1 mM 내지 약 12 mM, 약 1 mM 내지 약 10 mM, 약 1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1 mM 내지 약 6.2 mM, 약 1 mM 내지 약 5.4 mM, 약 1 mM 내지 약 3 mM, 약 2 mM 내지 약 20 mM, 약 2 mM 내지 약 12 mM, 약 2 mM 내지 약 10 mM, 약 2 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2 mM 내지 약 6.2 mM, 약 2 mM 내지 약 5.4 mM, 약 2 mM 내지 약 3 mM, 약 2.5 mM 내지 약 20 mM, 약 2.5 mM 내지 약 12 mM, 약 2.5 mM 내지 약 10 mM, 약 2.5 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2.5 mM 내지 약 6.2 mM, 약 2.5 mM 내지 약 5.4 mM, 약 2.5 mM 내지 약 3 mM, 약 3 mM 내지 약 20 mM, 약 3 mM 내지 약 12 mM, 약 3 mM 내지 약 10 mM, 약 3 mM 내지 약 7.8 mM, 약 3 mM 내지 약 6.2 mM, 약 3 mM 내지 약 5.4 mM, 약 4.1 mM 내지 약 20 mM, 약 4.1 mM 내지 약 12 mM, 약 4.1 mM 내지 약 10 mM, 약 4.1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 4.1 mM 내지 약 6.2 mM, 약 4.1 mM 내지 약 5.4 mM, 약 4.8 mM, 약 4.9 mM, 약 5 mM, 약 5.1 mM, 약 5.2 mM, 약 5.3 mM, 또는 약 5.4 mM일 수 있다.

상기 아세테이트의 함량은, 전체 약학적 조성물 기준으로, 약 0.1 mM 내지 약 10 mM, 약 0.1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 0.1 mM 내지 약 6 mM, 약 0.1 mM 내지 약 4 mM, 약 0.1 mM 내지 약 3.3mM, 약 0.1 mM 내지 약 3 mM, 약 0.1 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1 mM 내지 약 10 mM, 약 1 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1 mM 내지 약 6 mM, 약 1 mM 내지 약 5mM, 1 mM 내지 약 4 mM, 약 1 mM 내지 약 3.3mM, 약 1 mM 내지 약 3 mM, 약 1 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1.7 mM 내지 약 10 mM, 약 1.7 mM 내지 약 7.8 mM, 약 1.7 mM 내지 약 6 mM, 약 1.7 mM 내지 약 4 mM, 약 1.7 mM 내지 약 3.3mM, 약 1.7 mM 내지 약 3 mM, 약 1.7 mM 내지 약 2.7 mM, 약 2 mM 내지 약 10 mM, 약 2 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2 mM 내지 약 6 mM, 약 2 mM 내지 약 4 mM, 약 2 mM 내지 약 3.3 mM, 약 2 mM 내지 약 3 mM, 약 2 mM 내지 약 2.7 mM, 약 2.5 mM 내지 약 10 mM, 약 2.5 mM 내지 약 7.8 mM, 약 2.5 mM 내지 약 6 mM, 약 2.5 mM 내지 약 2.7 mM, 약 1 mM, 약 2.5 mM, 약 2.6 mM, 약 2.7 mM, 약 2.8 mM, 또는 약 2.9 mM일 수 있다.

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 완충제로서 시트레이트, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이들 모두를 포함하지 않는 것일 수 있다.

(3) 히스티딘

본 발명에서 히스티딘은, 전체 약학적 조성물 기준으로, 약 10 mM 이상, 약 20 mM 이상, 약 30 mM 이상, 약 40 mM 이상, 약 50 mM 이상, 약 51 mM 이상, 또는 약 52 mM 이상의 농도, 예컨대, 약 10 mM 내지 약 100 mM, 약 10 mM 내지 약 90 mM, 약 10 mM 내지 약 80 mM, 약 10 mM 내지 약 70 mM, 약 20 mM 내지 약 100 mM, 약 20 mM 내지 약 90 mM, 약 20 mM 내지 약 80 mM, 약 20 mM 내지 약 70 mM, 약 30 mM 내지 약 100 mM, 약 30 mM 내지 약 90 mM, 약 30 mM 내지 약 80 mM, 약 30 mM 내지 약 70 mM, 약 40 mM 내지 약 100 mM, 약 40 mM 내지 약 90 mM, 약 40 mM 내지 약 80 mM, 약 40 mM 내지 약 70 mM, 약 50 mM 내지 약 100 mM, 약 50 mM 내지 약 90 mM, 약 50 mM 내지 약 80 mM, 약 50 mM 내지 약 70 mM, 또는 약 59 mM의 농도로 포함될 수 있다.

상기 히스티딘은 히스티딘 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 형태 (예컨대, 염산염 등) 및/또는 수화물 형태 (예컨대, 모노하이드레이트 등) (예컨대, Histidine hydrochloride monohydrate 등)로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 명세서에서, 별도의 언급이 없는 한, 용어 "히스티딘"은 히스티딘, 이의 약학적으로 허용가능한 염 형태(예컨대, 염산염 등), 및 이의 수화물 형태 (예컨대, 모노하이드레이트 등) (예컨대, Histidine hydrochloride monohydrate 등)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 것으로 해석될 수 있다.

(4) 폴리올

본 발명에서 폴리올은, 당 및 당알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며, 예컨대, 만니톨, 솔비톨, 메글루민, 트레할로오스, 수크로오스, 말토오스, 락토오스, 글루코오스, 자일리톨, 아라비톨, 에리트리톨, 락티톨, 말티톨, 이노시톨 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 일 예에서, 상기 폴리올은 만니톨일 수 있다.

일 예에서, 상기 폴리올은 만니톨을 포함하고 만니톨을 제외한 당 및 당알코올 중 선택된 하나 이상 또는 이들 모두를 포함하지 않는 것, 예컨대, 솔비톨, 트레할로오스, 및 슈크로오스로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상 또는 이들 모두를 포함하지 않는 것일 수 있다.

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에서 단백질의 안정성을 보다 증진시키기 위하여, 상기 폴리올, 예컨대, 만니톨의 함량은, 전체 약학적 조성물 기준으로, 약 1 내지 약 10 %(w/v), 약 1 내지 약 8 %(w/v), 약 1 내지 약 6 %(w/v), 약 1 내지 약 5 %(w/v), 약 1 내지 약 4.7 %(w/v), 약 1 내지 약 4 %(w/v), 약 1 내지 약 3.5 %(w/v), 약 1 내지 약 3.3 %(w/v), 약 1 내지 약 3 %(w/v), 약 2 내지 약 10 %(w/v), 약 2 내지 약 8 %(w/v), 약 2 내지 약 6 %(w/v), 약 2 내지 약 5 %(w/v), 약 2 내지 약 4.7 %(w/v), 약 2 내지 약 4 %(w/v), 약 2 내지 약 3.5 %(w/v), 약 2 내지 약 3.3 %(w/v), 약 2 내지 약 3 %(w/v), 약 2.5 내지 약 10 %(w/v), 약 2.5 내지 약 8 %(w/v), 약 2.5 내지 약 6 %(w/v), 약 2.5 내지 약 5 %(w/v), 약 2.5 내지 약 4.7 %(w/v), 약 2.5 내지 약 4 %(w/v), 약 2.5 내지 약 3.5 %(w/v), 약 2.5 내지 약 3.3 %(w/v), 약 2.5 내지 약 3 %(w/v), 또는 약 3 %(w/v)일 수 있다.

(5) 계면활성제

본 발명에서 계면활성제는, 단백질을 액상 조성물 매질에 고르게 분산시킬 수 있는 약학적으로 허용 가능한 모든 계면활성제들로부터 선택된 것일 수 있다. 상기 계면활성제는 비이온성 계면활성제일 수 있으며, 구체적으로, 폴리소르베이트류(예컨대, polysorbate 20(polyoxyethylene 20 sorbitan monolaurate), polysorbate 40(polyethylene 20 sorbitan monopalmitate), polysorbate 60(polyethylene 20 sorbitan monostearate), polysorbate 65(polyethylene 20 sorbitan tristearate), polysorbate 80(polyethylene 20 sorbitan monooleate), polysorbate 85(polyethylene 20 sorbitan trioleate)(상기 폴리옥시에틸렌 뒤의 수치 (20)은 옥시에틸렌기(-(CH2CH2O)-)의 총 개수를 의미함), 폴록사머(PEO-PPO-PEO 공중합체; PEO: poly(ethylene oxide), PPO: poly(propylene oxide)), 소르비탄 에스테르(예컨대, 소르비탄 폴리에톡시레이트(sorbitan polyethoxylates) 등), 폴리에틸렌-폴리프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 화합물(예컨대 , 폴리옥시에틸렌-스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르(알킬: C1-C30), 폴리옥시에틸렌 모노라이릴 에테르, 알킬페닐 폴리옥시에틸렌 코폴리머(알킬 : C1-C30) 등), 소듐 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulphate, SDS) 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 보다 구체적으로, 보다 우수한 제형 안정성을 달성하기 위하여, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 20일 수 있다. 일 예에서, 본 발명의 제형은 폴리소르베이트 20을 포함하고, 폴리소르베이트 80을 포함하지 않는 것일 수 있다.

본 발명의 제형에서의 단백질의 안정성을 보다 증진시키기 위하여, 상기 약학적 조성물에 포함된 계면활성제, 예컨대 폴리소르베이트 20의 함량은, 전체 약학적 조성물 기준으로, 0.01 내지 0.2%(w/v), 0.01 내지 0.1%(w/v), 0.01 내지 0.08%(w/v), 0.03 내지 0.2%(w/v), 0.03 내지 0.1%(w/v), 0.03 내지 0.08%(w/v), 0.05 내지 0.2%(w/v), 0.05 내지 0.1%(w/v), 0.05 내지 0.08%(w/v), 약 0.01%(w/v), 약 0.03%(w/v), 약 0.05%(w/v), 또는 약 0.08%(w/v)일 수 있다.

(6) 아미노산

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 히스티딘을 제외한 아미노산 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상 (예컨대, 이들 모두)을 포함하지 않는 것 (예컨대, 히스티딘을 제외한 아미노산 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상 (예컨대, 이들 모두)의 농도가 약 0mM)일 수 있다. 일 예에서, 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글라이신, 메티오닌, 글루타민, 및 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 (예컨대, 염산염, 수화물 등)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 이들 모두)을 포함하지 않는 것(예컨대, 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글라이신, 메티오닌, 글루타민, 및 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 (예컨대, 염산염, 수화물 등)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 이들 모두)의 농도가 약 0mM)일 수 있다.

(7) 염

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염을 포함하지 않는 것일 수 있다. 상기 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에 포함되지 않는 약학적으로 허용 가능한 염은 염화나트륨, 황산나트륨, 및 염화칼륨으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다. 일 예에서, 상기 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에 포함되지 않는 염은 시트레이트의 약학적으로 허용 가능한 염, 염화나트륨염, 황산나트륨염, 및 염화칼륨염으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상, 또는 이들 모두일 수 있다.

(8) pH

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물의 pH는 약 4 내지 약 8인 것일 수 있으며, 구체적으로, pH가 약 4.0 내지 약 7.5, 약 4.0 내지 약 7, 약 4.0 내지 약 6.5, 약 4.0 내지 약 6, 약 4.0 내지 약 5.5, 약 4.5 내지 약 7.5, 약 4.5 내지 약 7, 약 4.5 내지 약 6.5, 약 4.5 내지 약 6, 약 4.5 내지 약 5.5, 약 4.8 내지 약 7.5, 약 4.8 내지 약 7, 약 4.8 내지 약 6.5, 약 4.8 내지 약 6, 약 4.8 내지 약 5.6, 약 5.0 내지 약 7.5, 약 5.0 내지 약 7, 약 5.0 내지 약 6.5, 약 5.0 내지 약 6, 약 5.0 내지 약 5.5, 약 5.2 내지 약 7.5, 약 5.2 내지 약 7.2, 약 5.2 내지 약 7, 약 5.2 내지 약 6.8, 약 5.2 내지 약 6.6, 약 5.2 내지 약 6.5, 약 5.5 내지 약 7.5, 약 5.5 내지 약 7.2, 약 5.5 내지 약 7, 약 5.5 내지 약 6.8, 약 5.5 내지 약 6.6, 약 5.5 내지 약 6.5, 약 6.0 내지 약 7.5, 약 6.0 내지 약 7.2, 약 6.0 내지 약 7, 약 6.0 내지 약 6.8, 약 6.0 내지 약 6.6, 약 6.0 내지 약 6.5,약 6.4 내지 약 7.5, 약 6.4 내지 약 7.2, 약 6.4 내지 약 7, 약 6.4 내지 약 6.8, 약 6.4 내지 약 6.6, 약 6.4 내지 약 6.5, 약 5.2, 약 5.3, 약 5.4, 또는 약 6.5인 것일 수 있다.

(9) 기타 첨가제

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 암모늄염, 예컨대, 염화암모늄, 황산암모늄, 탄산암모늄, 질산암모늄 등으로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하지 않는 것일 수 있다. 다른 예에서, 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 염화나트륨, 황산나트륨, 염화칼륨, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 에틸렌다이아민테트라아세트산(ethylenediaminetetraacetic acid, EDTA), 또는 이들 모두를 포함하지 않는 것일 수 있다.

(10) 제형

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은

1) 아달리무맙, 포스페이트 및 히스티딘을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

2) 아달리무맙, 포스페이트, 숙시네이트 및 히스티딘을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

3) 아달리무맙, 포스페이트, 아세테이트 및 히스티딘을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

4) 아달리무맙, 포스페이트, 히스티딘, 및 만니톨을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

5) 아달리무맙, 포스페이트, 숙시네이트, 히스티딘, 및 만니톨을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

6) 아달리무맙, 포스페이트, 아세테이트, 히스티딘, 및 만니톨을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

7) 아달리무맙, 포스페이트, 히스티딘, 및 폴리소르베이트 20을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

8) 아달리무맙, 포스페이트, 숙시네이트, 히스티딘, 및 폴리소르베이트 20을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

9) 아달리무맙, 포스페이트, 아세테이트, 히스티딘, 및 폴리소르베이트 20을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

10) 아달리무맙, 포스페이트, 히스티딘, 만니톨, 및 폴리소르베이트 20을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

11) 아달리무맙, 포스페이트, 숙시네이트, 히스티딘, 만니톨, 및 폴리소르베이트 20을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

12) 아달리무맙, 포스페이트, 아세테이트, 히스티딘, 만니톨, 및 폴리소르베이트 20을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

13) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 및 히스티딘 40mM 내지 80mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

14) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 숙시네이트 4.1mM 내지 12mM, 및 히스티딘 40mM 내지 80mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

15) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 아세테이트 1.7mM 내지 10mM, 및 히스티딘 40mM 내지 80mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

16) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 및 만니톨 2 내지 5 %(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

17) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 숙시네이트 4.1mM 내지 12mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 및 만니톨 2 내지 5 %(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

18) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 아세테이트 1.7mM 내지 10mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 및 만니톨 2 내지 5 %(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

19) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 및 폴리소르베이트 20 0.01 내지 0.9 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

20) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 숙시네이트 4.1mM 내지 12mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 및 폴리소르베이트 20 0.01 내지 0.9 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

21) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 아세테이트 1.7mM 내지 10mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 및 폴리소르베이트 20 0.01 내지 0.9 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

22) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 만니톨 2 내지 5 %(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.01 내지 0.9 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

23) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 숙시네이트 4.1mM 내지 12mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 만니톨 2 내지 5 %(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.01 내지 0.9 % (w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

24) 아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml, 포스페이트 1.7mM 내지 10mM, 아세테이트 1.7mM 내지 10mM, 히스티딘 40mM 내지 80mM, 만니톨 2 내지 5 %(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.01 내지 0.9 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

25) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 및 히스티딘 59mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

26) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 및 히스티딘 59mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

27) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 및 히스티딘 59mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

28) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 히스티딘 59mM, 및 만니톨 3%(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

29) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 히스티딘 59mM, 및 만니톨 3%(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

30) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 히스티딘 59mM, 및 만니톨 3%(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

31) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 히스티딘 59mM, 및 폴리소르베이트 20 0.08 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

32) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 히스티딘 59mM, 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

33) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 히스티딘 59mM, 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

34) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 히스티딘 59mM, 만니톨 3%(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

35) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 히스티딘 59mM, 만니톨 3%(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

36) 아달리무맙 100mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 히스티딘 59mM, 만니톨 2 내지 5 %(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.08 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

37) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 및 히스티딘 59mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

38) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 및 히스티딘 59mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

39) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 및 히스티딘 59mM을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

40) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 히스티딘 59mM, 및 만니톨 3%(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

41) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 히스티딘 59mM, 및 만니톨 3%(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

42) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 히스티딘 59mM, 및 만니톨 3%(w/v)을 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

43) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 히스티딘 59mM, 및 폴리소르베이트 20 0.08 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

44) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 히스티딘 59mM, 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

45) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 히스티딘 59mM, 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

46) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 히스티딘 59mM, 만니톨 3%(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물;

47) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 숙시네이트 5mM, 히스티딘 59mM, 만니톨 3%(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.08%(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물; 또는

48) 아달리무맙 50mg/ml, 포스페이트 2.6mM, 아세테이트 2.8mM, 히스티딘 59mM, 만니톨 2 내지 5 %(w/v), 및 폴리소르베이트 20 0.08 %(w/v)를 포함하고, pH 5 내지 7 인 약학적 조성물

일 수 있다.

또한, 본 명세서에서 제공되는 상기 1) 내지 48)의 약학적 조성물은,

i) 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은 포함하지 않거나, 및/또는

ii) 히스티딘을 제외한 아미노산은 포함하지 않는 것일 수 있다.

한편, 상기 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은, 염화나트륨, 황산나트륨, 및 염화칼륨으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다.

(11) 안정성

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 안정성이 우수한 것을 특징으로 한다. 상기 약학적 조성물은 단백질을 비교적 고농도(구체적으로, 40 mg/ml 이상, 50mg/ml 이상, 75 mg/ml 이상, 100 mg/ml 이상, 또는 150 mg/ml 이상)로 함유하는 경우에도 안정성이 우수한 것을 특징으로 한다.

본 명세서에서 "안정성이 우수하다" 또는 "안정하게 유지된다" 함은 보관 시에 조성물 내의 단백질의 구조, 및/또는 물리적, 화학적, 및/또는 생물학적 특성이 유지됨을 의미할 수 있다(예컨대, 보관 중의 낮은 단백질 중합체 형성률, 낮은 단백질 응집률, 낮은 단백질 분해율, 높은 단백질(약물) 함유율, 낮은 변성률, 낮은 아미노산(예컨대, 메티오닌 잔기) 산화율 등).

본 명세서에 사용된 바로서, 용어 '응집물(aggregate)'은 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에 포함된 항-TNFα 항체 단백질이 응집되어 형성된 고분자 생성물(High Molecular Weight； HMW)을 의미하고, 다른 말로 응집체라고도 할 수 있다. 본 발명에서 단백질 응집률은 어느 시점의 조성물 내 응집물의 함량비 (%HMW 또는 HMW%)로 표현될 수 있고, 단백질 응집률의 변화량은 보관(또는 저장) 개시 시의 조성물 내 응집물(고분자 생성물)의 함량비 (%HMW 또는 HMW%)와 소정의 기간 보관(또는 저장) 후의 조성물 내 응집물의 함량비 (%HMW 또는 HMW%)의 변화량 또는 차이 또는 (Δ%HMW 또는 ΔHMW% = [보관 (또는 저장) 개시 시의 조성물 내 응집물 함량비(%HMW 또는 HMW%)]-[소정 기간 보관 (또는 저장) 후의 조성물 내 응집물 함량비(%HMW 또는 HMW%)])로 표현될 수 있다.

본 명세서에 사용된 바로서, 용어 '분해물'은 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에 포함된 항-TNFα 항체 단백질이 분해되어 형성된 저분자 생성물(Low Molecular Weight)을 의미할 수 있다. 본 발명에서 단백질 분해율은 어느 시점의 조성물 내 분해물 함량비 (%LMW 또는 LMW%)로 표현될 수 있고, 단백질 분해율의 변화량은 보관(또는 저장) 개시 시의 조성물 내 분해물(저분자 생성물)의 함량비 (%LMW 또는 LMW%)와 소정의 기간 보관 (또는 저장) 후의 조성물 내 분해물 함량비 (%LMW 또는 LMW%)의 변화량 또는 차이 (Δ%LMW 또는 ΔLMW% = [보관 (또는 저장) 개시 시의 조성물 내 저분자 생성물 함량비(%LMW 또는 LMW%)]-[소정 기간 보관 (또는 저장) 후의 조성물 내 저분자 생성물 함량비(%LMW 또는 LMW%])로 표현될 수 있다.

본 명세서에 사용된 바로서, 용어 '아미노산 산화율'은 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물에 포함된 항-TNFα 항체 단백질의 아미노산 중 산화된 아미노산의 비율(예컨대, 산화된 메티오닌의 비율)을 의미하고, '아미노산 산화율의 변화량'은 그 변화량을 의미할 수 있다. 이와 같은 아미노산 (예컨대, 메티오닌)의 산화는 광노출과 같은 광부하(photostess) 조건에서 일어나는 것일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 아미노산 산화율은 항-TNFα 항체인 아달리무맙의 256 번째 아미노산 잔기인 메티오닌(Met₂₅₆)의 산화 비율 (%Met₂₅₆； 산화된 메티오닌(Met₂₅₆)의 비율)을 의미하고, 아미노산 산화율의 변화량은 상기 Met₂₅₆ 의 산화율의 변화량 (Δ%Met₂₅₆)을 의미할 수 있다. 아미노산 산화가 광부하(photostress, 광노출)에 의한 것인 경우, 상기 아미노산 산화율의 변화량 (예컨대, Δ%Met₂₅₆)은 광부하 조건에서의 광노출군(Light-exposured)의 아미노산 산화율 (%Met₂₅)과 기저군 (Base: 광노출 없이 5±3℃에서 저장) 및/또는 암대조군 (Dark-control: 호일에 싼 후 광노출군과 동일한 조건(25±2℃ / 60±5% RH)에서 광노출) 간의 산화율 차이([Light-exposured %Met₂₅₆] - [Base %Met₂₅₆], 또는 [Light-exposured %Met₂₅₆] - [Dark-control %Met₂₅₆])로 표현될 수 있다.

일 예에서, 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은, 하기하는 참고예 2 의 표 1 에 기재된 광부하 조건에서의 아달리무맙의 응집율이 약 15% 이하, 약 14% 이하, 약 13% 이하, 약 12% 이하, 약 11% 이하, 약 10% 이하, 약 9% 이하 또는 약 9% 이하일 수 있다.

또한, 일 예에서, 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은, 하기하는 참고예 2 의 표 1 에 기재된 광부하 조건에서의 아달리무맙의 응집률의 변화량 (Δ%HMW: [Light-exposured %HMW] - [Base %HMW], 또는 [Light-exposured %HMW] - [Dark-control %HMW])이 약 17% 이하, 약 16% 이하, 약 15% 이하, 약 14% 이하, 약 13% 이하, 약 12% 이하, 약 10% 이하, 약 9.5 이하, 약 9% 이하, 또는 약 8.5% 이하, 예컨대, 약 1% 내지 약 17%, 약 1% 내지 약 16%, 약 1% 내지 약 15%, 약 1% 내지 약 14%, 약 1% 내지 약 13%, 약 1% 내지 약 12%, 약 1% 내지 약 10%, 약 1% 내지 약 9.5, 약 1% 내지 약 9%, 약 1% 내지 약 8.5% 이하, 약 3% 내지 약 17%, 약 3% 내지 약 16%, 약 3% 내지 약 15%, 약 3% 내지 약 14%, 약 3% 내지 약 13%, 약 3% 내지 약 12%, 약 3% 내지 약 10%, 약 3% 내지 약 9.5, 약 3% 내지 약 9%, 또는 약 3% 내지 약 8.5%인 것일 수 있다.

다른 예에서, 본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은, 하기하는 참고예 2 의 표 1 에 기재된 광부하 조건에서의 아달리무맙의 분해율의 변화량 (Δ%LMW: [Light-exposured %LMW] - [Base %LMW], 또는 [Light-exposured %LMW] - [Dark-control %LMW])이 약 1.6% 이하, 약 1.5% 이하, 약 1.4% 이하, 또는 약 1.3% 이하, 예컨대, 약 0.1 내지 약 1.6%, 약 0.1 내지 약 1.5%, 약 0.1 내지 약 1.4%, 약 0.1 내지 약 1.3%, 약 0.5 내지 약 1.6%, 약 0.5 내지 약 1.5%, 약 0.5 내지 약 1.4%, 또는 약 0.5 내지 약 1.3%인 것일 수 있다.

다른 예에서, 상기 약학적 조성물은, 하기하는 참고예 2 의 표 1 에 기재된 광부하 조건에서의 아미노산 산화율의 변화량 (Δ%Met₂₅₆: [Light-exposured %Met₂₅₆] - [Base %Met₂₅₆], 또는 [Light-exposured %Met₂₅₆] - [Dark-control %Met₂₅₆])이 약 68% 이하, 약 67% 이하, 약 66% 이하, 약 65% 이하, 약 63% 이하, 약 60% 이하, 약 58% 이하, 약 55% 이하, 약 54% 이하, 또는 약 53% 이하, 예컨대, 약 10% 내지 약 68%, 약 10% 내지 약 67%, 약 10% 내지 약 66%, 약 10% 내지 약 65%, 약 10% 내지 약 63%, 약 10% 내지 약 60%, 약 10% 내지 약 58%, 약 10% 내지 약 55%, 약 10% 내지 약 54%, 약 10% 내지 약 53%, 약 20% 내지 약 68%, 약 20% 내지 약 67%, 약 20% 내지 약 66%, 약 20% 내지 약 65%, 약 20% 내지 약 63%, 약 20% 내지 약 60%, 약 20% 내지 약 58%, 약 20% 내지 약 55%, 약 20% 내지 약 54%, 약 20% 내지 약 53%, 약 30% 내지 약 68%, 약 30% 내지 약 67%, 약 30% 내지 약 66%, 약 30% 내지 약 65%, 약 30% 내지 약 63%, 약 30% 내지 약 60%, 약 30% 내지 약 58%, 약 30% 내지 약 55%, 약 30% 내지 약 54%, 약 30% 내지 약 53%, 약 40% 내지 약 68%, 약 40% 내지 약 67%, 약 40% 내지 약 66%, 약 40% 내지 약 65%, 약 40% 내지 약 63%, 약 40% 내지 약 60%, 약 40% 내지 약 58%, 약 40% 내지 약 55%, 약 40% 내지 약 54%, 또는 약 40% 내지 약 53%인 것일 수 있다.

(12) 디바이스

일 예에서, 본 발명 명세서에서 제공되는 약학적 조성물을 포함하는 디바이스, 키트, 또는 용기가 제공된다. 예컨대, 상기 디바이스는 상기 약학적 조성물을 시린지(syringe), 프리필드시린지(pre-filled syringe), 오토인젝터, 보틀, 바이알, 및 튜브로 이루어진 군에서 선택된 용기에 포함하는 것일 수 있다.

상기 디바이스는, 주로 비경구 투여(예컨대, 피하, 근육내, 정맥내, 복강내, 뇌척수내, 관절내, 활액내, 및/또는 수막강내 투여)를 위한 용도로 사용되며, 바이알, 팩(pack) 주사기 (예컨대, 미리 충전된 주사기; 바늘 사이즈: 20 내지 40G, 예컨대, 25G, 26G, 27G, 28G, 29G, 또는 30G) 등의 형태이거나, 또는 항-TNFα 항체 (예컨대, 아달리무맙)을 함유하는 하나 이상의 단위 투여형태를 포함하는 것일 수 있다. 상기 단위투여 형태는 약학적 조성물의 단위 투여량(1회 투여량)을 포함하는 주사기를 포함하는 주입 준비가 된 주사기를 포함할 수 있다. 상기 디바이스는 투여를 위한 지시서(지침서)를 동반할 수 있다.

(13) 질병의 치료

일 예에서, 상기 약학적 조성물 또는 이를 포함하는 디바이스를 포함하는 질병 치료를 위한 약학 조성물이 제공된다. 다른 예에서, 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 투여를 필요로 하는 대상에게 상기 약학적 조성물의 약학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 질병의 치료 방법을 제공한다. 상기 치료 방법은, 상기 투여하는 단계 이전에, 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 투여를 필요로 하는 대상을 확인하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.

상기 질병은 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 투여에 의하여 치료 효과를 볼 수 있는 질병 중에서 선택된 것일 수 있다. 상기 질병은 면역 관련 질병일 수 있으며, 예를 들어, 관절염 (예컨대, 류마티스 관절염, 건선성 관절염, 특발성 관절염, 소아 특발성 관절염(Juvenile Idiopathic Arthritis), 골부착부위염 관련 관절염 등), 축성 척추관절염 (예컨대, 강직성 척추염, 강직성 척추염 이외의 중증 축성 척추관절염 등), 크론병 (예컨대, 성인(18세 이상) 크론병, 소아 (6~17세) 크론병 등), 건선 (예컨대, 성인 (18세 이상) 또는 소아 (4~17세) 판상 건선), 화농성 한선염(Hidradenitis Suppurativa), 궤양성 대장염(Ulcerative Colitis) 등으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.

상기 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 투여를 필요로 하는 대상은 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 투여에 의하여 유의미하게 치료 (증상의 제거, 감경, 완화, 또는 개선 등)될 수 있는 질환 또는 장애를 갖는 인간을 포함하는 포유류 중에서 선택될 수 있다. 상기 질병 또는 장애는 앞서 설명한 질병 중에서 선택될 수 있다.

(14) 투여경로, 투여량, 제형화

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 비경구적 경로로 투여되는 것일 수 있다. 비경구 투여 (예컨대, 주사)인 경우에는 정맥내 투여, 또는 피하 투여로 투여할 수 있다. 비경구 투여는 볼루스(bolus) 주사 또는 연속 주입에 의한 것일 수 있다.

본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물은 상기 투여 경로에 적합한 제형으로 제형화된 것일 수 있다. 일 예에서, 상기 약학적 조성물은 주사제, 주사 가능한 즉시사용형 (ready-to-use) 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

다른 예에서, 상기 약학적 조성물은 포함된 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 전량 또는 약학적 유효량이 하나의 제형에 포함되도록 제형화되거나, 2개 이상 (예컨대, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 또는 10개)의 제형에 나누어 포함되도록 제형화된 것일 수 있다. 상기 제형화된 조성물은 앞서 설명한 디바이스의 단위 투여형태에 포함될 수 있다.

다른 예에서, 상기 약학적 조성물은 하나의 제형에 포함된 항-TNFα 항체, 예컨대, 아달리무맙의 전량이 일시(예컨대, 1분 이내, 30초 이내, 20초 이내, 또는 10초 이내)에 체내 투여되거나; 5분 이상, 10분 이상, 30분 이상, 60분 이상, 90분 이상, 120분 이상, 150분 이상, 180분 이상, 210분 이상, 또는 240분 이상 동안 서서히 체내에 투여되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 약학적 조성물의 투여 대상은 영장류 (인간 등), 설치류 (마우스, 래트, 기니아 피그, 햄스터, 토끼 등), 고양이, 개, 돼지, 소, 말 등을 포함하는 포유동물 중에서 선택될 수 있다.

본 명세서에서 제공된 약학적 조성물 또는 여기에 포함된 항-TNFα 항체 (예컨대, 아달리무맙)의 약학적 유효량은 소망하는 약리적 효과, 예컨대, 증상의 제거, 감경, 완화, 또는 개선에 효과를 타나낼 수 있는 조성물 내 함량 또는 투여량을 의미할 수 있으며, 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태(상태의 중증도), 음식, 투여 시간, 투여 간격, 투여 경로, 배설 속도, 반응 감응성, 이전 요법, 임상 이력 등과 같은 요인들에 의해 다양하게 정해질 수 있다. 용량은 담당 의사의 판단에 따라 조절될 수 있다. 상기 약학적 유효량은 1회에 투여되거나, 분량하여 2 이상 다회에 걸쳐 투여될 수 있다.

일 예에서, 상기 약학적 조성물은, 항-TNFα 항체 (예컨대, 아달리무맙)의 농도가 약 200mg 이하, 약 150mg 이하, 약 100mg, 약 50mg, 또는 40mg이 되도록 하는 용량으로 3주 이상의 기간에 걸쳐 1주당 1회 내지 3회 투여될 수 있다. 다른 예에서, 상기 약제학적 제형은 일반적인 벌크제형으로 제조될 수 있고, 약학적 조성물의 성분은 투여에 요구되는 농도보다 고농도로 조절되고, 투여 전에 적합하게 희석되어 사용될 수 있다.

본 발명은 단백질, 예컨대, 항-TNFα 항체가 물리적, 화학적, 및/또는 생물학적 효능을 안정적으로 유지할 수 있도록 하는 수성 액상 조성물, 구체적으로 약학적 조성물을 제공함으로써, 단백질의 보관 중 발생할 수 있는 아미노산 잔기의 산화를 방지하고, 중합체 및/또는 응집체(Aggregate) 생성, 분해물(Fragment)의 생성 등을 억제하여 단백질의 약리 효과를 안정적으로 유지시킬 수 있다.

도 1a는 일 실시예에 따른 항체 제형의 완충제 종류 및 히스티딘 포함 여부/농도에 따른 열 가혹 조건 (40℃에서 4주간 저장)에서의 제형 내 단백질의 %HMW (High molecular weight%)를 보여주는 그래프이다.

도 1b는 일 실시예에 따른 항체 제형의 완충제 종류 및 히스티딘 포함 여부/농도에 따른 열 가혹 조건 (40℃에서 4주간 저장)에서의 제형 내 단백질의 %Monomer (Monomer weight %)를 보여주는 그래프이다.

도 1c는 일 실시예에 따른 항체 제형의 완충제 종류 및 히스티딘 포함 여부/농도에 따른 열 가혹 조건 (40℃에서 4주간 저장)에서의 제형 내 단백질의 %LMW(Low molecular weight%)를 보여주는 그래프이다.

도 2a는 일 실시예에 따른 항체 제형의 완충제 종류 및 히스티딘 포함 여부/농도에 따른 동결 용융 조건에서의 제형 내 단백질의 %HMW를 보여주는 그래프이다.

도 2b는 일 실시예에 따른 항체 제형의 완충제 종류 및 히스티딘 포함 여부/농도에 따른 동결 용융 조건에서의 제형 내 단백질의 %Monomer를 보여주는 그래프이다.

도 2c는 일 실시예에 따른 항체 제형의 완충제 종류 및 히스티딘 포함 여부/농도에 따른 동결 용융 조건에서의 제형 내 단백질의 %LMW를 보여주는 그래프이다.

도 3a는 일 실시예에 따른 항체 제형의 히스티딘 포함 여부 및 농도에 따른 광부하 조건에서의 제형 내 단백질의 %HMW를 보여주는 그래프이다.

도 3b는 일 실시예에 따른 항체 제형의 히스티딘 포함 여부 및 농도에 따른 광부하 조건에서의 제형 내 단백질의 %Monomer를 보여주는 그래프이다.

도 3c는 일 실시예에 따른 항체 제형의 히스티딘 포함 여부 및 농도에 따른 광부하 조건에서의 제형 내 단백질의 %LMW를 보여주는 그래프이다.

도 4는 일 실시예에 따른 항체 제형의 히스티딘 포함 여부 및 농도에 따른 광부하 조건에서의 아미노산 (Met₂₅₆) 산화율 (%Met_{256/light-exposured})을 보여주는 그래프이다.

도 5a는 일 실시예에 따른 항체 제형의 폴리올 종류에 따른 열 가혹 조건 (40℃ 에서 4주간 저장)에서의 제형 내 단백질의 %HMW를 보여주는 그래프이다.

도 5b는 일 실시예에 따른 항체 제형의 폴리올 종류에 따른 열 가혹 조건 (40℃에서 4주간 저장)에서의 제형 내 단백질의 %Monomer를 보여주는 그래프이다.

도 5c는 일 실시예에 따른 항체 제형의 폴리올 종류에 따른 열 가혹 조건 (40℃에서 4주간 저장)에서의 제형 내 단백질의 %LMW를 보여주는 그래프이다.

이하 본 발명을 실시예 및 시험예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나, 이들 실시예 및 시험예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명을 제한하는 것으로 해석되어서는 아니된다.

참고예

참고예 1. SE-HPLC 분석

SE-HPLC(Size exclusion-High Performance Liquid Chromatography) 분석법은 Waters社의 HPLC system을 사용하여 제조사 매뉴얼에 따라서 수행하였다. Retention time (단백질의 분자량)에 따라 총 3개의 peak로 분리 되며, 이 3 개의 peak는 Retention time이 짧은 (단백질의 분자량이 큰) 순서대로 HMW peak (단백질 응집), Monomer peak, 및 LMW peak (단백질 분해)에 해당된다.

- %HMW (High molecular weight%) = {area of HMW/area of (HMW + monomer + LMW)}*100)

- %Monomer (Monomer Weight%) = {area of monomer/area of (HMW + monomer + LMW)}*100)

- %LMW(Low molecular weight%) = {area of LMW/area of (HMW + monomer + LMW)}*100)

참고예 2: 광부하 (Photostress)

제형을 다음의 표 1의 조건으로 광노출시켜 광부하를 부여하였다 (광노출군):

광노출 군을 제외한 대조군의 조건은 다음과 같다:

기저군 (Base): 광노출 없이 5±3℃에서 저장;

암대조군 (Dark control): 호일에 싼 후 광노출군과 동일한 조건(25±2℃ / 60±5% RH)에서 광노출 수행

참고예 3: 아미노산 잔기 %산화율(%oxidation level) 측정

%산화율의 경우, Waters社의 liquid-chromatography-mass spectrometry (LC-MS)를 사용하여 Adalimumab 256번째 methionine 아미노산 잔기의 mass를 측정하였다. LC-MS 실험 수행 후 MassLynx™ 프로그램을 이용하여 relative %Oxidation 값을 분석하였다.

- Relative %Oxidation = (Control intensity of oxidized peptide*100)/{(Control intensity of non-oxidized peptide)+(Control intensity of oxidized peptide)

실시예 1. 완충제 및 아미노산 스크리닝

1.1. 제형의 준비

항체 투여시 통증 유발을 감소시키기 위하여 제형 내 시트레이트 함량을 낮추기 위한 노력의 일환으로, 시트레이트를 포함하지 않는(citrate-free) 제형을 개발하기 위하여, 적합한 제형 성분의 선별을 수행하였다.

본 실시예에서는 적합한 완충제 및 아미노산의 선별을 수행하였다. 이를 위하여, 단백질로서 항-TNFα 항체 (아달리무맙(Adalimumab); anti-TNFα monoclonal antibody； CAS Registry Number: 331731-18-1)을 사용하여, 다음의 표 2의 조성을 갖는 수성 액상 제형을 준비하였다:

(^*: Humira®의 100 mg/mL 아달리무맙을 포함하는 제형 성분과 동일 제형 성분 함유하는 샘플;

N/A: not applicable；

%: %(w/v), 이하, 제형 성분의 함량을 표시하는 %는 모두 %(w/v임)

1.2. 열 가혹 조건 (Heat stress Condition)에서의 안정성

상기 실시예 1.1에서 준비된 제형들을 40℃에서 4주간 저장 후, 제형 내 단백질의 %HMW (High molecular weight%), %Monomer (monomer weight%), 및 %LMW(Low molecular weight%)를 참고예 1 에 따라서 SE-HPLC 분석법으로 측정하였다. 또한, 4주 동안의 변화량 (각각 Δ%HMW, Δ%Monomer 및 Δ%LMW로 표시)을 측정하였다. 상기 Δ%HMW, Δ%Monomer 및 Δ%LMW는 4주(week)의 %HMW, %Monomer, 및 %LMW 값에서 0주(Initial)의 %HMW, %Monomer, 및 %LMW 값을 뺀 차이값으로 구하였다. 상기 시험을 3회 반복(n=3)하여 얻어진 결과의 평균값을 하기의 표 3 내지 표 5 및 도 1a-1c에 나타내었다.

1.3. 동결 용융 조건 (Freeze/thaw condition)에서의 제형 안정성

상기 실시예 1.1에서 준비된 제형들에 대하여, 동결 용융 조건(Freeze/thaw, 5 cycle; FT5； 각 cycle: '-70℃±10℃에서 18시간 이상 냉동(Freeze)' + '상온(25℃) 에서 1시간 이상 해동 (thaw)')에서의 단백질의 %HMW (High molecular weight%), %monomer (monomer weight%), 및 %LMW(Low molecular weight%)를 참고예 1 에 따라서 SE-HPLC 분석법으로 측정하였다. 상기 시험을 3회 반복(n=3)하여 얻어진 결과의 평균값을 하기의 표 6 및 도 2a-2c에 나타내었다.

상기 실시예 1.2 및 1.3의 결과를 통하여, 완충제로서 포스페이트, 포스페이트+숙시네이트, 또는 포스페이트+아세테이트를 포함하는 제형이 아세테이트(단독)를 포함하거나 시판되는 Humira® 100 mg/mL (pH 5.2, 4.2% mannitol, 0.1% PS 80)와 동일한 조성을 갖는 완충제를 포함하지 않는(buffer-free) 제형과 비교하여 안정성이 우수함을 확인하였다. 또한, 아미노산으로서 히스티딘을 포함하는 제형이, 다른 종류의 아미노산을 포함하거나 아미노산을 포함하지 않는 제형과 비교하여, 안정성이 우수함을 확인하였다.

실시예 2. 광부하 (Photostress) 조건에서의 안정성

2.1. 제형의 준비

항체 제형에 있어서, 히스티딘의 광안정성 효과를 시험하기 위하여, 단백질로서 항-TNFα 항체 (아달리무맙(Adalimumab); anti-TNFα monoclonal antibody; CAS Registry Number: 331731-18-1)을 사용하여, 다음의 표 7의 조성을 갖는 수성 액상 제형을 준비하였다:

(^*: Humira®의 100 mg/mL 아달리무맙을 포함하는 제형성분과 동일한 제형성분을 포함하는 샘플;

N/A: not applicable)

2.2. 광부하 (Photostress) 조건에서의 제형 안정성 (%HMW, %Monomer, 및 %LMW)

상기 실시예 2.1에서 준비된 제형들에 대하여, 참고예 2의 광부하 조건에서의 단백질의 %HMW, %monomer, 및 %LMW를 참고예 1에 따라서 SE-HPLC 분석법으로 측정하였다. 상기 시험을 3회 반복(n=3)하여 얻어진 결과의 평균값을 하기의 표 8 내지 표 10 및 도 3a-3c에 나타내었다.

상기 결과에서 확인되는 바와 같이, 광부하 조건에서의 %HMW 및 %HMW 변화량 크기가 Arg-HCl > Amino acid-free > His 순서로 나타나, 제형의 광 안정성에 있어서 아미노산 불포함 제형 또는 Arg-HCl 포함 제형보다 히스티딘 포함 제형이 적합한 것으로 확인되었다. 히스티딘을 포함하는 제형은 시판되는 Humira® 100 mg/mL (pH 5.2, 4.2% mannitol, 0.1% PS 80)와 동일한 조성을 갖는 Amino acid-free 제형에 비해 현저히 우수한 광 안정성을 나타내었다. 또한, His 농도 별 광부하 조건에서의 %HMW 및 %HMW 변화량 크기가 10 mM His > 59 mM His = 80 mM His 순서로 나타나, 59 mM 내지 80 mM His 함유 제형이 10 mM His 함유 제형보다 광 안정성이 우수함이 확인되었으며, 이는 His 농도가 59 mM 이상인 경우 보다 우수한 광 안정성을 가짐을 보여준다. 또한, %Monomer 및 %LMW 결과 역시 히스티딘을 포함하는 제형 (샘플 번호 1, 2, 5, 및 6)이 아미노산을 포함하지 않거나 히스티딘 이외의 아미노산 (예, 아르기닌)을 포함하는 제형과 비교하여, 광 안정성이 우수함을 보여준다.

2.3. 광부하 (Photostress) 조건에서의 아미노산 산화율

상기 실시예 2.1에서 준비된 제형들에 대하여, 참고예 2의 광노출(light-exposured) 조건에서의 단백질의 내 Met₂₅₆ (256번째 메티오닌 잔기)의 산화율(%Met_{256/light-exposured})을 참고예 3을 참조하여 측정하였다. 상기 시험을 3회 반복(n=3)하여 얻어진 결과의 평균값을 하기의 표 11 및 도 4에 나타내었다:

상기 결과에서 확인되는 바와 같이, 광노출 조건에서의 Met₂₅₆ 산화율 변화량이 Arg-HCl > Amino acid-free > His 순서로 나타나, 제형의 광 안정성에는 아미노산 불포함 제형 또는 Arg-HCl 포함 제형보다 히스티딘 포함 제형이 더 적합한 것으로 확인되었다. 히스티딘 포함 제형은 시판되는 Humira® 100 mg/mL (pH 5.2, 4.2% mannitol, 0.1% PS 80)과 동일한 조성을 갖는 Amino acid-free 제형과 비교하여 아미노산 (Met₂₅₆) 산화율 및 그 변화량이 현저히 낮아 광 안정성이 현저히 우수한 것을 확인하였다.

또한, 히스티딘의 농도 별 분석 결과, 아미노산 산화율 변화량이 10 mM His > 59 mM His = 80 mM His 순서로 확인되었으며, 이는 His이 59 mM 이상의 농도로 포함된 제형에서 우수한 광 안정성을 달성할 수 있음을 보여준다.

위와 같이, 히스티딘이 항산화제로서의 활성을 가지는 것을 확인하였다. 특히, 항체 제형 내 히스티딘 함량이 10mM 이상이고 80mM 이하인 경우(예컨대, 약 59mM)에 안정성 및 항산화 활성이 가장 우수한 것으로 나타났다.

실시예 3. 폴리올 종류에 따른 안정성

본 발명의 항체 제형에 있어서, 폴리올 종류에 따른 안정성을 시험하여 최적의 폴리올을 선별하기 위하여, 단백질로서 항-TNFα 항체 (아달리무맙(Adalimumab); anti-TNFα monoclonal antibody； CAS Registry Number: 331731-18-1)을 사용하여, 다음의 표 12의 조성을 갖는 수성 액상 제형을 준비하였다:

상기 준비된 제형들을 heat stress 조건인 40±2℃ 및 75±5% RH 조건에서 4주간 저장 후, 제형 내 단백질의 %HMW (High molecular weight%), %monomer (monomer weight%), 및 %LMW(Low molecular weight%)를 참고예 1에 따라서 SE-HPLC 분석법으로 측정하였다. 상기 시험을 3회 반복(n=3)하여 얻어진 결과의 평균값을 하기의 표 13 내지 표 15 및 도 5a-5c에 나타내었다.

상기 결과에 나타난 바와 같이, 완충제로서 포스페이트 포함하는 경우와 포스페이트+숙시네이트 포함하는 경우 모두에 있어서, 폴리올로서 만니톨 포함 제형은 Polyol-free 제형, sucrose 포함 제형, 및 NaCl 포함 제형 대비, heat stress 조건에서의 4주 차의 %HMW 및 4주 동안의 %HMW 변화량이 현저하게 낮게 나타나 안정성이 우수한 것을 확인할 수 있었다. 만니톨의 함량에 따른 유의미한 안정성 차이는 관찰되지 않았다.

Claims

아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml,

포스페이트를 포함하는 완충제 및

히스티딘을 포함하고,

pH 5 내지 7이며,

시트레이트, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이들 모두를 포함하지 않고,

포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은 포함하지 않는, 약학적 조성물.
제1항에 있어서,

상기 조성물은 히스티딘을 제외한 아미노산을 포함하지 않는 것인, 약학적 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서,

상기 조성물은 EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid)를 포함하지 않는 것인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은 염화나트륨, 황산나트륨, 및 염화칼륨으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완충제는 숙시네이트 및 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완충제 농도는 0.5mM 내지 50mM인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완충제는

(1) 1.7mM 내지 10mM 포스페이트 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는,

(2) (i) 1.7mM 내지 10mM 포스페이트 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 (ii) 4.1mM 내지 12mM 숙시네이트, 1.7mM 내지 10mM 아세테이트, 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 중에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 히스티딘의 농도는 40mM 내지 80mM인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리올을 추가로 포함하는, 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 폴리올은 만니톨, 소르비톨, 수크로오스, 트레할로오스, 말토오스, 락토오스, 자일리톨, 아라비톨, 메글루민, 에리트리톨, 락티톨, 말티톨, 및 이노시톨로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제9항 또는 제10항에 있어서, 상기 폴리올의 농도는 2 내지 10 %(w/v)인, 약학적 조성물.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항 있어서, 상기 폴리올은 만니톨인 것인, 약학적 조성물.
제12항 있어서, 상기 만니톨의 농도는 2 내지 5 %(w/v)인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 계면활성제를 추가로 포함하는, 약학적 조성물.
제14항에 있어서, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 또는 이들의 조합을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제15항에 있어서, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 20인, 약학적 조성물.
제16항에 있어서, 상기 폴리소르베이트 20의 농도는 0.01 내지 0.9 %(w/v)인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아달리무맙의 농도는 40mg/ml 내지 100mg/ml인, 약학적 조성물.
아달리무맙 40mg/ml 내지 200mg/ml,

포스페이트를 포함하는 완충제 및

히스티딘을 포함하고,

pH 5 내지 7이며,

시트레이트, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이들 모두를 포함하지 않고,

포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은 포함하지 않으며,

광 노출 조건에서 상기 아달리무맙의 응집율이 약 15% 이하인 약학적 조성 물
제19항에 있어서, 광 노출 조건에서 상기 아달리무맙 중의 메티오닌 잔기의 산화율(%Met_{256/light-exposured}) 변화량(Δ%Met₂₅₆)이 68% 이하인, 약학적 조성물.
제19항 또는 제20항에 있어서,

상기 조성물은 히스티딘을 제외한 아미노산을 포함하지 않는 것인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물은 EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid)를 포함하지 않는 것인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포스페이트, 숙시네이트, 및 아세테이트의 약학적으로 허용 가능한 염을 제외한 염은 염화나트륨, 황산나트륨, 및 염화칼륨으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완충제는 숙시네이트 및 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완충제 농도는 0.5mM 내지 50mM인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완충제는

(1) 1.7mM 내지 10mM 포스페이트 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는,

(2) (i) 1.7mM 내지 10mM 포스페이트 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 (ii) 4.1mM 내지 12mM 숙시네이트, 1.7mM 내지 10mM 아세테이트, 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 중에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 히스티딘의 농도는 40mM 내지 80mM인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리올을 추가로 포함하는, 약학 조성물.
제28항에 있어서, 상기 폴리올은 만니톨, 소르비톨, 수크로오스, 트레할로오스, 말토오스, 락토오스, 자일리톨, 아라비톨, 메글루민, 에리트리톨, 락티톨, 말티톨, 및 이노시톨로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제28항 또는 제29항에 있어서, 상기 폴리올의 농도는 2 내지 10 %(w/v)인, 약학적 조성물.
제28항 내지 제30항 중 어느 한 항 있어서, 상기 폴리올은 만니톨인, 약학적 조성물.
제31항 있어서, 상기 만니톨의 농도는 2 내지 5 %(w/v)인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 계면활성제를 추가로 포함하는, 약학적 조성물.
제33항에 있어서, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 또는 이들의 조합을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
제33항에 있어서, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 20인 것인, 약학적 조성물.
제35항에 있어서, 상기 폴리소르베이트 20의 농도는 0.01 내지 0.9 %(w/v)인, 약학적 조성물.
제19항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아달리무맙의 농도는 50mg/ml 내지 100mg/ml인, 약학적 조성물.
제1항 내지 제37항 중 어느 한 항의 약학적 조성물을 포함하는 디바이스.
제38항에 있어서, 상기 약학적 조성물의 정맥 투여 또는 피하 투여를 위한 것인, 디바이스.
제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 약학적 조성물을 시린지(syringe), 프리필드시린지(pre-filled syringe), 오토인젝터, 보틀, 바이알, 및 튜브로 이루어진 군에서 선택된 용기에 포함하는, 디바이스.
제1항 내지 제37항 중 어느 한 항의 약학적 조성물을 상기 항체의 투여를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자의 치료방법.